FR2970651A1

FR2970651A1 - UROTENSIN II AND UROTENSIN II RECEPTOR AGONISTS FOR USE IN THE SYMPTOMATIC TREATMENT OF SEPTIC SHOCK

Info

Publication number: FR2970651A1
Application number: FR1150568A
Authority: FR
Inventors: Vincent Compere; Helene Castel; Caroline Marguerite; Pierrick Gandolfo; Sebastien Arthaud; Laurence Desrues; Marie Jarry
Original assignee: Universite de Rouen; Centre Hospitalier Universitaire de Rouen
Current assignee: Universite de Rouen; Centre Hospitalier Universitaire de Rouen
Priority date: 2011-01-25
Filing date: 2011-01-25
Publication date: 2012-07-27
Anticipated expiration: 2031-01-25
Also published as: FR2970651B1; WO2012101185A1

Abstract

Urotensine II humaine, peptides dérivés de l'urotensine II, analogues de l'urotensine II et agonistes du récepteur de l'urotensine II humaine pour utilisation dans le traitement du sepsis.Human urotensin II, urotensin II-derived peptides, urotensin II analogs, and human urotensin II receptor agonists for use in the treatment of sepsis.

Description

Urotensine II et agonistes du récepteur de l'urotensine II pour utilisation dans le traitement symptomatique du choc septique Urotensin II and urotensin II receptor agonists for use in the symptomatic treatment of septic shock

Le sepsis représente un problème majeur de santé publique car son incidence est en constante augmentation et représente environ 20% des admissions en Urgence-Réanimation. Cette pathologie est associée à un pronostic sombre puisque la mortalité est de 18% pour les patients non infectés, de 30% pour les patients présentant un sepsis sévère, et atteint 50% en cas de choc septique. Enfin, le coût estimé de cette pathologie est de 22 000 dollars par an et par patient. Sepsis represents a major public health problem because its incidence is constantly increasing and represents approximately 20% of emergency-resuscitation admissions. This pathology is associated with a poor prognosis since mortality is 18% for uninfected patients, 30% for patients with severe sepsis, and 50% for septic shock. Finally, the estimated cost of this pathology is $ 22,000 per year per patient.

L'évolution la plus péjorative du sepsis est représentée par le syndrome de défaillance multi-viscérale. Celui ci est multifactoriel et secondaire à des anomalies de la macro et de la microcirculation. En effet, l'atteinte cardiocirculatoire liée au sepsis résulte d'une interaction complexe entre l'agression bactérienne, des altérations de l'oxygénation tissulaire et une réponse inflammatoire exacerbée. Cette atteinte cardiocirculatoire se caractérise par une dysfonction vasculaire périphérique associée à une dysfonction myocardique qui réalise une insuffisance circulatoire distributive. Au niveau du site de l'infection, l'agression bactérienne provoque des altérations cellulaires, en particulier au niveau des cellules endothéliales, avec en réponse une activation des différents médiateurs de l'inflammation responsable d'un syndrome inflammatoire systémique, source d'élévation de la consommation d'oxygène. Très rapidement, le sepsis provoque des modifications de l'endothélium au niveau des veinules post-capillaires. Sous l'influence de l'endotoxine bactérienne, l'endothélium exprime à sa surface des molécules d'adhésion leucocytaires (E-sélectine, ICAM-1, VCAM-1) et des molécules au caractère anticoagulant ou profibrinolytique (protéine C, protéine S, antithrombine III et l'activateur tissulaire du plasminogéne). Les polynucléaires stimulés par les cytokines pro-inflammatoires vont adhérer aux cellules endothéliales et produirent des radicaux libres oxygénés responsables d'une part d'une destruction bactérienne, et d'autre part, de lésions endothéliales. Ces phénomènes micro-circulatoires d'adhésion cellulaire et de micro-thromboses vont favoriser, par le biais d'occlusions vasculaires, l'hypoperfusion tissulaire. La forte augmentation de la synthèse endothéliale de médiateurs vasodilatateurs, tels le monoxyde d'azote (NO) et la prostacycline (PGI2), semble également participer aux altérations micro-circulatoires initiales liées au sepsis. Cette production de médiateurs vasodilatateurs contribue à une vasodilatation systémique et à une diminution de la réactivité vasculaire à la stimulation sympathique qui sont caractéristiques de la phase hyperdynamique du choc septique. Le remplissage vasculaire est l'étape initiale primordiale et obligatoire de la prise en charge des syndromes infectieux sévères. Après restauration de la volémie, la persistance d'une hypotension artérielle (PAM inférieure à 65 mm Hg) justifie le recours à des agents vasoconstricteurs de type agonistes des récepteurs a adrénergiques, comme la noradrénaline. Mais dans un certain nombre de cas, ces traitements conduits de façon adaptée, ne permettent pas de restaurer un état hémodynamique satisfaisant aboutissant à une défaillance multiviscérale et au décès du patient. The most pejorative evolution of sepsis is represented by the multi-visceral failure syndrome. This one is multifactorial and secondary to anomalies of the macro and microcirculation. Indeed, cardiocirculatory impairment related to sepsis results from a complex interaction between bacterial aggression, alterations in tissue oxygenation and an exacerbated inflammatory response. This cardiocirculatory impairment is characterized by peripheral vascular dysfunction associated with myocardial dysfunction that achieves circulatory circulatory insufficiency. At the site of infection, bacterial aggression induces cellular alterations, particularly at the level of endothelial cells, with in response activation of the various mediators of inflammation responsible for a systemic inflammatory syndrome, a source of elevation. of oxygen consumption. Very quickly, sepsis causes changes in the endothelium in the postcapillary venules. Under the influence of bacterial endotoxin, the endothelium expresses on its surface leukocyte adhesion molecules (E-selectin, ICAM-1, VCAM-1) and molecules with anticoagulant or profibrinolytic character (protein C, protein S antithrombin III and tissue plasminogen activator). The polynuclear cells stimulated by pro-inflammatory cytokines will adhere to the endothelial cells and produce oxygenated free radicals responsible for bacterial destruction and endothelial damage. These micro-circulatory phenomena of cellular adhesion and micro-thromboses will favor, by means of vascular occlusions, the tissue hypoperfusion. The strong increase in endothelial synthesis of vasodilator mediators, such as nitric oxide (NO) and prostacyclin (PGI2), also appears to be involved in the initial micro-circulatory disorders associated with sepsis. This production of vasodilator mediators contributes to systemic vasodilation and a decrease in vascular reactivity to sympathetic stimulation that are characteristic of the hyperdynamic phase of septic shock. Vascular filling is the primordial and obligatory initial step in the management of severe infectious syndromes. After restoration of the blood volume, the persistence of arterial hypotension (MAP less than 65 mm Hg) justifies the use of vasoconstrictor agents such as adrenergic receptor agonists, such as norepinephrine. But in a number of cases, these treatments conducted in an appropriate manner, do not restore a satisfactory hemodynamic state resulting in a multi-organ failure and the patient's death.

L'Un est un neuropeptide découvert dans les années 80 par une équipe californienne dans l'urophyse d'un poisson téléostéen, le gobie Gillichthys mirabilis. L'absence de système neurosécréteur caudal chez les mammifères a longtemps laissé supposer que EUH était spécifique des poissons. Il faudra attendre le début des années 1990 pour mettre en évidence, par des techniques d'immunohistochimie, la présence d'Un au niveau du cerveau et de la corne antérieure de la moelle épinière des poissons. Quelques années plus tard, l'Ull est isolée et identifiée dans le cerveau de Grenouille laissant envisager sa présence chez tous les vertébrés supérieurs. Plus récemment le gène de EUH a été cloné chez le Rat, la Souris, le Porc, le Singe et l'Homme. Les effets cardiovasculaires de EUH ont d'abord été mis en évidence grâce à des travaux menés sur les poissons, effets retrouvés plus tard chez les mammifères. L'Ull a une activité vasoconstrictrice qui varie en fonction du lit vasculaire et de l'espèce étudiée (Douglas and Ohlstein, 2000). L'effet vasoconstricteur varie considérablement d'une espèce à l'autre, il existe au sein d'une même espèce une hétérogénéité régionale marquée. L'Un a une action vasoconstrictrice sur les artères pulmonaires et l'aorte thoracique de Rat, par contre elle est sans effet sur l'aorte abdominale, les artères fémorales et rénales (Ames, Sarau et al., 1999). Les études in vitro portant sur les vaisseaux de Chat et de Porc montrent que l'Ull provoque une vasoconstriction au niveau de l'aorte, des artères pulmonaires, mésentériques et fémorales. En revanche, chez le Lapin et le Chien, l'effet vasoconstricteur du neuropeptide est restreint aux artères coronaires (Douglas and Ohlstein 2000; Saetrum Opgaard, Nothacker et al., 2000). En ce qui concerne les primates, la variabilité des effets de l'Ull est aussi prouvée. En effet, l'Ull exerce une action vasoconstrictrice intense sur les artères de macaque, mais n'a quasiment aucun effet sur les vaisseaux de marmouset (Douglas and Ohlstein 2000; Douglas, Sulpizio et al., 2000). Chez l'Homme, l'effet vasoconstricteur de l'UII sur les artères coronaires et pulmonaires est 12 fois moins important que chez le macaque (Douglas and Ohlstein 2000; Douglas, Sulpizio et al., 2000; Camarda, Guerrini et al., 2002). Une étude in vitro réalisée sur du tissus cardiaque de patients présentant une cardiopathie ischémique, hypertrophique ou dilatée met en évidence une augmentation de l'inotropisme atrial et ventriculaire droit en réponse à l'administration d'Un (Russell, Molenaar et al., 2001). Cet effet inotrope positif est plus important au niveau de l'oreillette droite qu'au niveau ventriculaire, ce qui pourrait s'expliquer par une densité atriale plus importante en récepteur de l'Un, le récepteur UT. The One is a neuropeptide discovered in the 1980s by a Californian team in the urophysis of a teleost fish, the goby Gillichthys mirabilis. The absence of a caudal neurosecretory system in mammals has long suggested that EUH was fish specific. It will be necessary to wait until the beginning of the 1990s to highlight, by immunohistochemistry techniques, the presence of A in the brain and the anterior horn of the fish's spinal cord. A few years later, the Ull is isolated and identified in the Frog brain, suggesting its presence in all higher vertebrates. More recently, the EUH gene has been cloned in rats, mice, pigs, monkeys and humans. The cardiovascular effects of EUH were first highlighted through work on fish, which was later found in mammals. Ull has a vasoconstrictor activity that varies according to the vascular bed and the species studied (Douglas and Ohlstein, 2000). The vasoconstrictor effect varies considerably from one species to another, and within the same species there is a marked regional heterogeneity. The one has a vasoconstrictor action on the pulmonary arteries and the rat thoracic aorta, but it has no effect on the abdominal aorta, the femoral and renal arteries (Ames, Sarau et al., 1999). In vitro studies of Cat and Pork vessels show that Ull causes vasoconstriction in the aorta, pulmonary, mesenteric and femoral arteries. On the other hand, in rabbits and dogs, the vasoconstrictor effect of the neuropeptide is restricted to the coronary arteries (Douglas and Ohlstein 2000, Saetrum Opgaard, Nothacker et al., 2000). With regard to primates, the variability of the effects of Ull is also proven. Indeed, Ull exerts an intense vasoconstrictor action on macaque arteries, but has virtually no effect on marmoset vessels (Douglas and Ohlstein 2000, Douglas, Sulpizio et al., 2000). In humans, the vasoconstrictor effect of UII on the coronary and pulmonary arteries is 12-fold less than in the macaque (Douglas and Ohlstein 2000, Douglas, Sulpizio et al., 2000, Camarda, Guerrini et al. 2002). An in vitro cardiac tissue study in patients with ischemic, hypertrophic or dilated cardiac disease demonstrates an increase in right atrial and ventricular inotropism in response to A administration (Russell, Molenaar et al., 2001). ). This positive inotropic effect is greater at the level of the right atrium than at the ventricular level, which could be explained by a higher atrial density in the receiver of the UT receptor.

Cette étude suggère également que l'UII serait un agent inotrope positif plus puissant que la noradrénaline et l'endothéline 1 mais moins arythmogène que cette dernière (Russell, Molenaar et al., 2001). L'administration systémique en bolus d'UII entraîne des modifications de la pression artérielle chez toutes les espèces étudiées (Conlon, Yano et al., 1996). Plusieurs études ont mis en évidence une hypotension artérielle associée à une tachycardie réflexe après injection systémique d'Un chez le Rat (Gibson, Wallace et al., 1986). Ces résultats s'expliquent probablement par une libération massive de NO et de différents agents endothéliaux vasorelaxants comme les prostaglandines, la prostacycline et les leucotriènes (Gibson, Wallace et al., 1986; Gardiner, March et al., 2001; Abdelrahman and Pang 2002; Hassan, Chouiali et al., 2003). A l'inverse, l'administration chronique d'Un induit une augmentation de la pression artérielle et de la résistance vasculaire périphérique. Chez le Singe, l'injection iv d'UII provoque une réponse hémodynamique complexe dose dépendante. Une faible dose d'Un augmente le débit cardiaque et réduit les résistances vasculaires périphériques sans modifier la PAM, alors qu'une forte dose aboutit à un collapsus et un arrêt cardiaque par une dysfonction myocardique et vasoconstriction intense notamment coronaire (Ames, Sarau et al., 1999; Zhu, Wang et al., 2004). Chez le mouton, l'injection iv d'Un entraîne une augmentation de la pression artérielle et de la fréquence cardiaque (Watson, Lambert et al., 2003). Ces effets ne sont pas relayés par la stimulation des récepteurs R adrénergiques, car un traitement par R bloquant ne modifie pas l'action vasoactive de l'UII après injection systémique (Hood, Watson et al., 2005). Enfin, chez l'Homme, l'injection intra-dermique d'une faible dose d'Un induit une vasoconstriction locale. Certaines études ont montré que l'injection d'Un dans l'artère brachiale de volontaires sains produit un effet vasoconstricteur puissant (Bohm and Pernow 2002), d'autres auteurs ne confirment pas ces résultats (Wilkinson, Affolter et al., 2002). Le rôle et les effets de l'UII sur le système cardiovasculaire chez l'homme sont donc complexes et restent mal compris. This study also suggests that UII is a more potent positive inotropic agent than norepinephrine and endothelin 1, but less arrhythmogenic than the latter (Russell, Molenaar et al., 2001). Systemic bolus administration of UII results in changes in blood pressure in all studied species (Conlon, Yano et al., 1996). Several studies have demonstrated arterial hypotension associated with reflex tachycardia after systemic injection of Un into rats (Gibson, Wallace et al., 1986). These results are probably due to massive release of NO and various vasorelaxant endothelial agents such as prostaglandins, prostacyclin and leukotrienes (Gibson, Wallace et al., 1986, Gardiner, March et al., 2001, Abdelrahman and Pang 2002). Hassan, Chouiali et al., 2003). Conversely, chronic administration of An induces an increase in arterial pressure and peripheral vascular resistance. In the Monkey, iv injection of UII causes a complex dose-dependent haemodynamic response. A low dose of A increases cardiac output and reduces peripheral vascular resistance without modifying MAP, whereas a high dose results in collapse and cardiac arrest due to myocardial dysfunction and intense coronary vasoconstriction (Ames, Sarau et al. 1999, Zhu, Wang et al., 2004). In sheep, iv injection of Un leads to increased blood pressure and heart rate (Watson, Lambert et al., 2003). These effects are not relayed by the stimulation of the R adrenergic receptors, because a R blocking treatment does not modify the vasoactive action of the UII after systemic injection (Hood, Watson et al., 2005). Finally, in humans, intradermal injection of a low dose of A induces local vasoconstriction. Some studies have shown that the injection of A into the brachial artery of healthy volunteers produces a potent vasoconstrictor effect (Bohm and Pernow 2002), other authors do not confirm these results (Wilkinson, Affolter et al., 2002) . The role and effects of UII on the cardiovascular system in humans are therefore complex and poorly understood.

L'essentiel des études a portée sur les antagonistes du récepteur de l'Un, le récepteur UT, pour le traitement de l'hypertension notamment. Chez différentes espèces de mammifères, l'Un conserve un motif cyclique hexapeptidique de séquence CFWKYC. Ce motif est également retrouvé dans le peptide URP (urotensin II-related peptide) dont certaines activités sont similaires à celles de l'Un (Jarry et al., Biochem.J., 428, 113-124, 2010). Des analogues de l'Un ont également été décrits par Boucard et al. (Biochem.J., 370, 829-838, 2003) et par Crrieco et al. (J.Med.Chem., 45, 4391-4394, 2002). Après le développement d'antagonistes du récepteur de l'UII, des agonistes ont également été décrits par Croston et al. (J.Med.Chem., 45, 4950-4953, 2002) et dans le US2010/0029612. Toutefois, l'utilisation de l'Un dans le traitement du choc septique n'a jamais été décrite ni même envisagée. US 2010/0029612 décrit des ligands du récepteur de l'Un et envisage un grand nombre d'applications thérapeutiques pour ces molécules. Le sepsis fait partie des nombreuses pathologies citées. Cependant, ce document ne décrit pas de façon suffisante et plausible une application thérapeutique de ces molécules pour traiter le sepsis. D'autant plus que Williams et al. (2008) ont analysé la concentration en nociceptine et urotensine II chez des patients atteints de sepsis. Ces auteurs n'ont pas trouvé de modifications significatives de la concentration plasmatique en urotensine II. Ce document conclut également à l'absence de corrélation entre la concentration en UII dans le plasma et la sévérité des symptômes. Il a maintenant été trouvé que les niveaux d'Un sont diminués de 70 % environ dans le plasma de patients hospitalisés pour un choc septique, et que l'Un restaure les paramètres de PA systémique lors d'une inflammation d'origine infectieuse chez la souris. Most of the studies have focused on the receptor antagonists of the A, the UT receptor, for the treatment of hypertension in particular. In different mammalian species, the A maintains a cyclic hexapeptide pattern of CFWKYC sequence. This motif is also found in the URP peptide (urotensin II-related peptide), some of whose activities are similar to those of the A (Jarry et al., Biochem.J., 428, 113-124, 2010). Analogs of the A have also been described by Boucard et al. (Biochem. J., 370, 829-838, 2003) and by Crrieco et al. (J.Med.Chem., 45, 4391-4394, 2002). Following the development of UII receptor antagonists, agonists have also been described by Croston et al. (J.Med.Chem., 45, 4950-4953, 2002) and in US2010 / 0029612. However, the use of A in the treatment of septic shock has never been described or even considered. US 2010/0029612 describes receptor ligands of the A and considers a large number of therapeutic applications for these molecules. Sepsis is one of many pathologies cited. However, this document does not sufficiently and plausibly describe a therapeutic application of these molecules to treat sepsis. Especially since Williams et al. (2008) analyzed the concentration of nociceptin and urotensin II in patients with sepsis. These authors did not find any significant changes in urotensin II plasma concentration. This paper also concludes that there is no correlation between plasma UII concentration and severity of symptoms. It has now been found that levels of A are reduced by about 70% in the plasma of patients hospitalized for septic shock, and that the One restores the systemic BP parameters during infectious inflammation in the mouse.

Au cours du choc septique, il existerait ainsi une défaillance hémodynamique qui pourrait être secondaire à une diminution du taux d'UII. De ce fait, l'administration exogène d'Un permettrait de restaurer un état circulatoire satisfaisant, réduisant ainsi la mortalité. L'Un pourrait être proposé comme une alternative prometteuse dans le traitement du choc septique. En effet, la diminution de la mortalité des souris porteuse d'un choc septique secondaire à l'administration d'Un n'avait jamais été décrite dans la littérature. L'échappement thérapeutique des amines vasopressives (noradrénaline) sur la Pression Artérielle Moyenne est un tournant dans l'évolution du choc septique avec une issue défavorable dans la plupart des cas. Il n'existe actuellement aucune alternative (échec de la vasopressine). L'Un pourrait améliorer la prise en charge hémodynamique du choc septique et donc potentiellement le taux de mortalité associé. During septic shock, there would be a hemodynamic failure that could be secondary to a decrease in the rate of UII. As a result, the exogenous administration of A would restore a satisfactory circulatory state, thus reducing mortality. The One could be offered as a promising alternative in the treatment of septic shock. Indeed, the decrease in the mortality of mice carrying a septic shock secondary to the administration of Un had never been described in the literature. The therapeutic escape of vasopressor amines (noradrenaline) on mean arterial pressure is a turning point in the evolution of septic shock with an unfavorable outcome in most cases. There is currently no alternative (failure of vasopressin). The A could improve the hemodynamic management of septic shock and therefore potentially the associated mortality rate.

RESUME DE L'INVENTION L'invention se rapporte à un agoniste du récepteur de l'urotensine II pour utilisation dans le traitement du sepsis. Dans un premier mode de réalisation, l'agoniste est l'urotensine II humaine ayant la séquence Glu-Thr-Pro-Asp-c[Cys-Phe-Trp-Lys-Tyr-Cys]-Val ou l'agoniste est un peptide dérivé de l'urotensine II répondant à la formule (I) : RI-c[Cys-Phe-Trp-Lys-Tyr-Cys]-R2 (I) dans laquelle Rl représente 1 à 10 acides aminés, R2 représente un acide aminé. SUMMARY OF THE INVENTION The invention relates to a urotensin II receptor agonist for use in the treatment of sepsis. In a first embodiment, the agonist is human urotensin II having the Glu-Thr-Pro-Asp-c [Cys-Phe-Trp-Lys-Tyr-Cys] -Val sequence or the agonist is a peptide derivative of urotensin II corresponding to formula (I): RI-c [Cys-Phe-Trp-Lys-Tyr-Cys] -R2 (I) in which R1 represents 1 to 10 amino acids, R2 represents an amino acid .

De préférence, R2 est choisi parmi Ile et Val. De préférence, Rl est choisi parmi Gln-His-Gly-Thr-Ala-Pro-Glu-, Gln-His-Gly-Ala-Ala-Pro-Glu-, Pro-Glu-Thr-Pro-Asp-, Asp et Ala. Dans des modes de réalisation préférés, l'agoniste du récepteur de l'urotensine II pour utilisation dans le traitement du sepsis est choisi parmi Gln-His-Gly-Thr-Ala-Pro- Glu-c[Cys-Phe-Trp-Lys-Tyr-Cys]-Ile, Gln-His-Gly-Ala-Ala-Pro-Glu-c[Cys-Phe-Trp-Lys-Tyr-Cys]-Ile, Pro-Glu-Thr-Pro-Asp-c[Cys-Phe-Trp-Lys-Tyr-Cys]-Val, Asp-c[Cys-Phe-Trp-Lys-Tyr-Cys]-Val et Ala-c[Cys-Phe-Trp-Lys-Tyr-Cys]-Val. Dans d'autres modes de réalisation, l'agoniste du récepteur de l'urotensine II est un analogue de l'urotensine II répondant à la formule (II) : H-Asp-c[Xaa-Phe-Trp-Lys-Tyr-Yaa]-Val-OH (II) dans laquelle Xaa représente la cystéine (Cys) ou la (3,(3-diméthylcystéine (Pen), Yaa représente la cystéine (Cys) ou la (3,(3-diméthylcystéine (Pen). Preferably, R2 is selected from Ile and Val. Preferably, R1 is selected from Gln-His-Gly-Thr-Ala-Pro-Glu-, Gln-His-Gly-Ala-Ala-Pro-Glu-, Pro-Glu-Thr-Pro-Asp-, Asp and To the. In preferred embodiments, the urotensin II receptor agonist for use in the treatment of sepsis is selected from Gln-His-Gly-Thr-Ala-Pro-Glu-c [Cys-Phe-Trp-Lys]. -Tyr-Cys] -Ile, Gln-His-Gly-Ala-Ala-Pro-Glu-c [Cys-Phe-Trp-Lys-Tyr-Cys] -Isle, Pro-Glu-Thr-Pro-Asp-c [Cys-Phe-Trp-Lys-Tyr-Cys] -Val, Asp-c [Cys-Phe-Trp-Lys-Tyr-Cys] -Val and Ala-c [Cys-Phe-Trp-Lys-Tyr-Cys ] -Val. In other embodiments, the urotensin II receptor agonist is an urotensin II analog of formula (II): H-Asp-c [Xaa-Phe-Trp-Lys-Tyr- Yaa] -Val-OH (II) wherein Xaa represents cysteine (Cys) or (3, (3-dimethylcysteine (Pen), Yaa represents cysteine (Cys) or (3, (3-dimethylcysteine (Pen) .

Dans d'autres modes de réalisation de l'invention, l'agoniste du récepteur de l'urotensine II pour utilisation dans le traitement du sepsis est un analogue de l'urotensine II choisi parmi Glu-Thr-Pro-Asp-c[Cys-Bpa-Trp-Lys-Tyr-Cys]-Val, Glu-Thr-Pro-Aspc[Cys-Phe-Bpa-Lys-Tyr-Cys]-Val et Glu-Thr-Pro-Asp-c[Cys-Phe-Trp-Lys-Tyr-Cys]-Bpa avec Bpa représente la p-benzoyl-L-phenylalanine. Un autre objet de l'invention est un agoniste du récepteur de l'urotensine II pour utilisation dans le traitement du sepsis dans lequel l'agoniste est le 3-(4-chlorophenyl)-3-(2-dimethylaminoethyl)isochroman- l -one. De préférence, l'agoniste du récepteur de l'urotensine II est pour utilisation dans le 10 traitement du sepsis par administration intraveineuse. L'invention se rapporte aussi à une composition pharmaceutique comprenant un agoniste du récepteur de l'urotensine II pour utilisation dans le traitement du sepsis. In other embodiments of the invention, the urotensin II receptor agonist for use in the treatment of sepsis is an urotensin II analog selected from Glu-Thr-Pro-Asp-c [Cys -Bpa-Trp-Lys-Tyr-Cys] -Val, Glu-Thr-Pro-Aspc [Cys-Phe-Bpa-Lys-Tyr-Cys] -Val and Glu-Thr-Pro-Asp-c [Cys-Phe -Trp-Lys-Tyr-Cys] -Bpa with Bpa represents p-benzoyl-L-phenylalanine. Another subject of the invention is a urotensin II receptor agonist for use in the treatment of sepsis in which the agonist is 3- (4-chlorophenyl) -3- (2-dimethylaminoethyl) isochroman-1. one. Preferably, the urotensin II receptor agonist is for use in the treatment of sepsis by intravenous administration. The invention also relates to a pharmaceutical composition comprising a urotensin II receptor agonist for use in the treatment of sepsis.

DESCRIPTION DETAILLEE DE L'INVENTION 15 La présente invention a pour objet des agonistes du récepteur de l'urotensine II pour utilisation dans le traitement symptomatique du sepsis. Les agonistes de l'Un permettent plus particulièrement le traitement symptomatique du sepsis en cas d'échec de la vasopressine et des amines vasopressives 20 (noradrénaline). Par « agoniste du récepteur de l'urotensine II » ou « agoniste de l'urotensine II » on entend une molécule qui a des propriétés activatrices du récepteur de l'UII similaires ou se rapprochant des effets de l'urotensine II. Le récepteur de l'Un est le récepteur heptahélicoïdal GPR14 rebaptisé UT. Il a été décrit chez l'homme par Marchese et al. 25 (Genomics, 29, 335-344, 1995) Ames et al. (Nature, 401, 282-286, 1999), Liu et al. (Biochem. Biophys. Res. Commun. 266, 174-178), Mori et al. (Biochem. Biophys. Res. Commun., 265, 123-129, 1999), Protopopov et al. (Cytogenet. Cell. Genet.; 88, 312-313, 2000) et son numéro GenBank est NM 018949. L'activité agoniste sur le récepteur de l'Un peut par exemple être mesurée selon le 30 test cellulaire R-SAT décrit par Croston et al. (J.Med.Chem., 45, 4950-4953, 2002). Plus généralement, on entend par activité agoniste, la capacité d'un ligand à modifier l'activité des cellules cibles exprimant le récepteur de l'UII. DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION The present invention relates to urotensin II receptor agonists for use in the symptomatic treatment of sepsis. Agonists of the A allow more particularly the symptomatic treatment of sepsis in case of failure of vasopressin and vasopressor amines (norepinephrine). By "urotensin II receptor agonist" or "urotensin II agonist" is meant a molecule that has UII receptor activating properties similar to or similar to the effects of urotensin II. The receiver of the One is the heptaheloidal receptor GPR14 renamed UT. It has been described in humans by Marchese et al. (Genomics, 29, 335-344, 1995) Ames et al. (Nature, 401, 282-286, 1999), Liu et al. (Biochem Biophys Res Commun 266, 174-178), Mori et al. (Biochem Biophys Res Commun, 265, 123-129, 1999), Protopopov et al. (Cytogenet Cell Genet, 88, 312-313, 2000) and its GenBank number is NM 018949. The agonist activity on the A receptor can for example be measured according to the R-SAT cell test described by Croston et al. (J.Med.Chem., 45, 4950-4953, 2002). More generally, agonist activity is defined as the ability of a ligand to modify the activity of target cells expressing the UII receptor.

De façon plus générale, on considère que les agonistes ou molécules capables de lier et moduler l'activité de l'UT sont des molécules qui peuvent réguler l'une des voies de couplage citées ci-dessous. La voie de transduction principalement associée à l'UT est le couplage et l'activation du sous-type Gaq/11 des protéines G hétérotrimériques. L'activation de Gaq/11 conduit à une augmentation des inositols trisphosphates et à la mobilisation de Cal + intracellulaire. En outre, l'UT peut également être couplé aux protéines Gai/o avec des effets sur la mobilisation du Cal + et l'activation des protéines ERK1/2. Dans les astrocytes, l'UT peut être associé à la voie Gs, Gi/o et aux protéines Gaq (Desrues et al, 2008; Jarry et al, 2010). L'activation de l'UT permet une augmentation de RhoA-dépendante de la contraction du muscle lisse des vaisseaux sanguins, l'organisation du cytosquelette et la prolifération des cardiomyocytes, susceptible d'impliquer le couplage Gal2/13. Les canaux Cal+ voltage-dépendants membranaires, les tyrosine kinases, p38MAPK, ERK1/2, RhoA/ROCK, PKC/CPI-17, la tyrosine kinase c-src et enfin la transactivation du récepteur de l'EGF sont également impliqués dans la vasoconstriction induite par l'activation de l'UT. Les deux dernières voies sont également impliquées dans la sensibilisation au calcium et conduisent à phosphosphorylation de la myosin-light chain (MLC). More generally, it is believed that agonists or molecules capable of binding and modulating the activity of UT are molecules that can regulate one of the coupling pathways listed below. The transduction pathway mainly associated with UT is the coupling and activation of the Gaq / 11 subtype of heterotrimeric G proteins. The activation of Gaq / 11 leads to an increase of inositol trisphosphates and the mobilization of intracellular Cal +. In addition, UT can also be coupled to Gai / o proteins with effects on Cal + mobilization and activation of ERK1 / 2 proteins. In astrocytes, UT can be associated with the Gs, Gi / o and Gaq pathways (Desrues et al, 2008, Jarry et al, 2010). Activation of UT allows an increase in RhoA-dependent smooth muscle contraction of blood vessels, cytoskeletal organization and proliferation of cardiomyocytes, likely to involve Gal2 / 13 coupling. Membrane-voltage-gated Cal + channels, tyrosine kinases, p38MAPK, ERK1 / 2, RhoA / ROCK, PKC / CPI-17, c-src tyrosine kinase and finally transactivation of the EGF receptor are also involved in vasoconstriction. induced by the activation of the UT. The last two pathways are also involved in calcium sensitization and lead to phosphosphorylation of the myosin-light chain (MLC).

La liaison de l'Un sur l'UT est également impliquée dans la voie métabolique de 1' acide arachidonique. Il a également été montré que l'UT activé est internalisé dans les compartiments intracellulaires en complexe avec soit 13-arrestinl ou (3-arrestine2. Par « agoniste du récepteur de l'urotensine II » on entend notamment l'urotensine II humaine, des peptides dérivés de l'urotensine II humaine, des analogues de l'urotensine II humaine ainsi que agonistes non peptidiques de l'urotensine II. L'urotensine II humaine est un peptide neurohormonal cyclique se liant au récepteur GPR14/UT. Il a la séquence Glu-Thr-Pro-Asp-Cys-Phe-Trp-Lys-Tyr-Cys-Val comprenant un hexapeptide cyclique par la formation d'un pont disulfure entre les deux acides aminés de cystéine. Il peut donc également être représenté de la manière suivante Glu-Thr-Pro-Asp-cyclique[Cys-Phe-Trp-Lys-Tyr-Cys]-Val. The binding of A to UT is also involved in the metabolic pathway of arachidonic acid. It has also been shown that the activated UT is internalized in the intracellular compartments in complex with either 13-arrestin or (3-arrestin2. "Urotensin II receptor agonist" is understood to mean, in particular, human urotensin II, peptides derived from human urotensin II, human urotensin II analogs, and non-peptide urotensin II agonists Human urotensin II is a cyclic neurohormonal peptide binding to the GPR14 / UT receptor. Glu-Thr-Pro-Asp-Cys-Phe-Trp-Lys-Tyr-Cys-Val comprising a cyclic hexapeptide by the formation of a disulfide bridge between the two amino acids of cysteine, it can therefore also be represented in the manner next Glu-Thr-Pro-Asp-Cyclic [Cys-Phe-Trp-Lys-Tyr-Cys] -Val.

Les agonistes du récepteur de l'Ull comprennent également des peptides dérivés de l'urotensine II. Ces peptides dérivés de l'urotensine II conservent le motif cyclique c[Cys-Phe-Trp-Lys-Tyr-Cys] et répondent à la formule générale (I) : RI-c[Cys-Phe-Trp-Lys-Tyr-Cys]-R2 (I) Rl représente de préférence 1 à 15 acides aminés ou acides aminés modifiés et plus préférentiellement de 1 à 10 acides aminés ou acides aminés modifiés. De préférence, l'acide aminé précédent le cycle comprend une fonction acide et il est choisi parmi Asp et Glu. Avantageusement, Rl est choisi parmi Gln-His-Gly-Thr-Ala-Pro-Glu, Gln-His-Gly-Ala-Ala-Pro-Glu, Pro-Glu-Thr-Pro-Asp, Glu, Asp et Ala. Ull receptor agonists also include peptides derived from urotensin II. These peptides derived from urotensin II retain the cyclic unit c [Cys-Phe-Trp-Lys-Tyr-Cys] and correspond to the general formula (I): RI-c [Cys-Phe-Trp-Lys-Tyr- Cys] -R2 (I) R1 preferably represents 1 to 15 modified amino acids or amino acids and more preferably 1 to 10 amino acids or modified amino acids. Preferably, the amino acid preceding the cycle comprises an acid function and is selected from Asp and Glu. Advantageously, R1 is selected from Gln-His-Gly-Thr-Ala-Pro-Glu, Gln-His-Gly-Ala-Ala-Pro-Glu, Pro-Glu-Thr-Pro-Asp, Glu, Asp and Ala.

R2 représente un acide aminé ou un acide aminé modifié. De préférence, R2 représente un acide aminé neutre ou un acide aminé modifié neutre et plus préférentiellement R2 est choisi parmi Ile et Val. Dans des modes de réalisation préférés, les agonistes du récepteur de l'urotensine II sont des peptides dérivés de l'Un choisis parmi Gln-His-Gly-Thr-Ala-Pro-Glu-c[Cys-Phe- Trp-Lys-Tyr-Cys]-Ile, Gln-His-Gly-Ala-Ala-Pro-Glu-c[Cys-Phe-Trp-Lys-Tyr-Cys]-Ile, Pro-Glu-Thr-Pro-Asp-c[Cys-Phe-Trp-Lys-Tyr-Cys]-Val, Asp-c[Cys-Phe-Trp-Lys-Tyr- Cys]-Val et Ala-[Cys-Phe-Trp-Lys-Tyr-Cys]-Val. Les agonistes du récepteur de l'urotensine II comprennent aussi des analogues de l'urotensine II répondant à la formule (II) : H-Asp-c[Xaa-Phe-Trp-Lys-Tyr-Yaa]-Val-OH (II) dans laquelle Xaa représente la cystéine (Cys) ou la (3,(3-diméthylcystéine (Pen), Yaa représente la cystéine (Cys) ou la (3,(3-diméthylcystéine (Pen). Ces analogues sont choisis parmi H-Asp-c[Pen-Phe-Trp-Lys-Tyr-Cys]-Val-OH, H-25 Asp-c[Cys-Phe-Trp-Lys-Tyr-Pen]-Val-OH et H-Asp-c[Pen-Phe-Trp-Lys-Tyr-Pen]-Val-OH. Les agonistes du récepteur de l'urotensine II comprennent aussi des analogues de l'urotensine II choisis parmi Glu-Thr-Pro-Asp-Cys-Bpa-Trp-Lys-Tyr-Cys-Val, Glu-Thr-Pro-Asp-Cys-Phe-Bpa-Lys-Tyr-Cys-Val et Glu-Thr-Pro-Asp-Cys-Phe-Trp-Lys-Tyr-Cys- 30 Bpa avec Bpa représente la p-benzoyl-L-phenylalanine. Les agonistes du récepteur de l'urotensine II comprennent également de petites molécules non peptidiques comme par exemple le 3-(4-chlorophenyl)-3-(2-dimethylaminoethyl)isochroman- 1 -one. R2 represents an amino acid or a modified amino acid. Preferably, R2 represents a neutral amino acid or a neutral modified amino acid and more preferably R2 is chosen from Ile and Val. In preferred embodiments, the urotensin II receptor agonists are A-derived peptides selected from Gln-His-Gly-Thr-Ala-Pro-Glu-c [Cys-Phe-Trp-Lys- Tyr-Cys] -Ile, Gln-His-Gly-Ala-Ala-Pro-Glu-c [Cys-Phe-Trp-Lys-Tyr-Cys] -Ile, Pro-Glu-Thr-Pro-Asp-c [ Cys-Phe-Trp-Lys-Tyr-Cys] -Val, Asp-c [Cys-Phe-Trp-Lys-Tyr-Cys] -Val and Ala- [Cys-Phe-Trp-Lys-Tyr-Cys] - Val. Urotensin II receptor agonists also include urotensin II analogs of formula (II): H-Asp-c [Xaa-Phe-Trp-Lys-Tyr-Yaa] -Val-OH (II Xaa represents cysteine (Cys) or (3, (3-dimethylcysteine (Pen), Yaa represents cysteine (Cys) or (3, (3-dimethylcysteine (Pen).) These analogs are selected from H- Asp-c [Pen-Phe-Trp-Lys-Tyr-Cys] -Val-OH, H-25 Asp-c [Cys-Phe-Trp-Lys-Tyr-Pen] -Val-OH and H-Asp-c [Pen-Phe-Trp-Lys-Tyr-Pen] -Val-OH The urotensin II receptor agonists also include urotensin II analogs selected from Glu-Thr-Pro-Asp-Cys-Bpa- Trp-Lys-Tyr-Cys-Val, Glu-Thr-Pro-Asp-Cys-Phe-Bpa-Lys-Tyr-Cys-Val and Glu-Thr-Pro-Asp-Cys-Phe-Trp-Lys-Tyr- Cys-Bpa with Bpa represents p-benzoyl-L-phenylalanine Urotensin II receptor agonists also include small non-peptide molecules such as 3- (4-chlorophenyl) -3- (2-dimethylaminoethyl) ) isochroman-1 -one.

La présente invention a pour objet des agonistes du récepteur de l'UII pour la prévention ou le traitement symptomatique du sepsis. De préférence, ces agonistes de l'UII sont administrés par voie intraveineuse. L'invention a aussi pour objet des compositions pharmaceutiques comprenant un antagoniste de l'Un en tant que composé actif dans un véhicule pharmaceutique approprié. L'invention a aussi pour objet des compositions pharmaceutiques comprenant un antagoniste de l'Un en tant que composé actif et des excipients pharmaceutiques appropriés. Ces compositions peuvent être formulées pour l'administration aux mammifères, y compris l'Homme. La posologie varie selon le traitement. Ces compositions sont typiquement réalisées de façon à pouvoir être administrées par la voie entérale ou parentérale. Dans les compositions pharmaceutiques de la présente invention pour l'administration orale, sublinguale, sous-cutanée, intramusculaire, intraveineuse, transdermique, oculaire, locale ou rectale, le composé actif peut être administré sous formes unitaires d'administration, en mélange avec des supports pharmaceutiques classiques, aux animaux ou aux êtres humains. Les formes unitaires d'administration appropriées comprennent les formes par voie orale telles que les comprimés, les gélules, les poudres, les granules et les solutions ou suspensions orales, les formes d'administration sublinguale et buccale, les formes d'administration sous-cutanée, intramusculaire, intraveineuse, intranasale ou intraoculaire et les formes d'administration rectale. Lorsque l'on prépare une composition solide sous forme de comprimés, on mélange le composé actif principal avec un véhicule pharmaceutique tel que la gélatine, l'amidon, le lactose, le stéarate de magnésium, le talc, la gomme arabique ou analogues. On peut enrober les comprimés de saccharose ou d'autres matières appropriées ou encore on peut les traiter de telle sorte qu'ils aient une activité prolongée ou retardée et qu'ils libèrent d'une façon continue une quantité prédéterminée de principe actif. On obtient une préparation en gélules en mélangeant le composé actif avec un diluant et en versant le mélange obtenu dans des gélules molles ou dures. The present invention relates to UII receptor agonists for the prevention or symptomatic treatment of sepsis. Preferably, these UII agonists are administered intravenously. The invention also relates to pharmaceutical compositions comprising an antagonist of the One as an active compound in a suitable pharmaceutical vehicle. The invention also relates to pharmaceutical compositions comprising an antagonist of the A as an active compound and suitable pharmaceutical excipients. These compositions may be formulated for administration to mammals, including humans. The dosage varies according to the treatment. These compositions are typically made so that they can be administered enterally or parenterally. In the pharmaceutical compositions of the present invention for oral, sublingual, subcutaneous, intramuscular, intravenous, transdermal, ocular, local or rectal administration, the active compound can be administered in unit dosage forms, in admixture with carriers. pharmaceuticals, animals or humans. Suitable unit dosage forms include oral forms such as tablets, capsules, powders, granules and oral solutions or suspensions, sublingual and oral forms of administration, subcutaneous forms of administration intramuscular, intravenous, intranasal or intraocular and forms of rectal administration. When a solid composition in tablet form is prepared, the main active compound is mixed with a pharmaceutical vehicle such as gelatin, starch, lactose, magnesium stearate, talc, gum arabic or the like. The tablets can be coated with sucrose or other suitable materials or they can be treated in such a way that they have prolonged or delayed activity and continuously release a predetermined amount of active ingredient. A preparation in capsules is obtained by mixing the active compound with a diluent and pouring the resulting mixture into soft or hard gelatin capsules.

Une préparation sous forme de sirop ou d'élixir peut contenir le composé actif conjointement avec un édulcorant, un antiseptique, ainsi qu'un agent donnant du goût et un colorant approprié. A syrup or elixir preparation may contain the active compound together with a sweetener, an antiseptic, as well as a flavoring agent and a suitable colorant.

Les poudres ou les granules dispersibles dans l'eau peuvent contenir le composé actif en mélange avec des agents de dispersion ou des agents mouillants, ou des agents de mise en suspension, de même qu'avec des correcteurs du goût ou des édulcorants. Dans des modes de réalisation préférés, les compositions pharmaceutiques selon l'invention conviennent à une administration intraveineuse. Les agonistes de l'UII ou leurs mélanges peuvent être employés en thérapie seuls, ou en combinaison avec au moins un autre agent actif. Il peut s'agir d'adjuvants permettant d'améliorer l'activité des composés, ou encore d'autres actifs connus pour leur emploi dans le traitement du sepsis. De tels agents actifs sont bien connus de l'Homme du métier, disponibles dans le commerce ou encore décrits dans des ouvrages de référence comme Le Dictionnaire Vidal. L'invention se rapporte aussi à un produit comprenant un agoniste de l'Un ainsi qu'un autre actif pour le traitement du sepsis comme produit de combinaison pour une utilisation simultanée, séparée ou étalée dans le temps en thérapie, et en particulier dans la prévention et le traitement du sepsis. L'invention a aussi pour objet l'utilisation d'au moins un agoniste de l'UII pour la fabrication d'un médicament pour la prévention ou le traitement symptomatique du sepsis. L'invention se rapporte également à des méthodes thérapeutiques pour le traitement du sepsis chez l'homme dans lesquelles on administre une quantité efficace d'un antagoniste de l'UII à un patient. The water-dispersible powders or granules may contain the active compound in admixture with dispersants or wetting agents, or suspending agents, as well as with taste correctors or sweeteners. In preferred embodiments, the pharmaceutical compositions of the invention are suitable for intravenous administration. The UII agonists or mixtures thereof may be used alone in therapy or in combination with at least one other active agent. They may be adjuvants for improving the activity of the compounds, or else other active agents known for their use in the treatment of sepsis. Such active agents are well known to those skilled in the art, available commercially or described in reference books such as The Vidal Dictionary. The invention also relates to a product comprising an agonist of the One as well as another active agent for the treatment of sepsis as a combination product for simultaneous, separate or spread over time use in therapy, and in particular in the prevention and treatment of sepsis. The invention also relates to the use of at least one UII agonist for the manufacture of a medicament for the prevention or symptomatic treatment of sepsis. The invention also relates to therapeutic methods for the treatment of sepsis in humans in which an effective amount of a UII antagonist is administered to a patient.

FIGURES FIGURES

Figure 1 : Protocole expérimental, chronologie des injections de LPS et d'UII (50 µM) ou sérum physiologique (NaCl 0,9 %). T correspond au temps exprimé en minutes. Figure 2 : Taux plasmatique d'UII (en pg/ml) chez les patients septiques (n = 21), non septiques (n = 8) et chez les volontaires sains (n = 14). Les résultats sont exprimés sous forme de médiane [1 er et 3 éme interquartile], valeurs extrêmes. ***p<0,001 par rapport aux volontaires sains. p<0,05 par rapport au groupe non septique. Figure 1: Experimental protocol, chronology of injections of LPS and UII (50 μM) or physiological saline (NaCl 0.9%). T is the time in minutes. Figure 2: Plasma UII levels (in pg / ml) in septic patients (n = 21), non-septic patients (n = 8) and healthy volunteers (n = 14). The results are expressed as median [1 st and 3 th interquartile], extreme values. *** p <0.001 compared to healthy volunteers. p <0.05 compared with the non-septic group.

Figure 3 : Taux de mortalité observé 90 minutes après la réalisation du sepsis chez les souris anesthésiées non vigiles et opérées. Résultats exprimés sous forme de moyenne et SEM.* p<0.05. Contrôle, n = 5 ; LPS, n = 6. Figure 3: Mortality rate observed 90 minutes after sepsis was performed in anesthetized non-vigorous and operated mice. Results expressed as mean and SEM * p <0.05. Control, n = 5; LPS, n = 6.

Figure 4 : Variation de la pression artérielle moyenne (PAM) dans les deux groupes exprimée sous forme de delta par rapport à une valeur de référence qui est la première mesure de PAM avant toute expérimentation mais après induction de l'anesthésie. Les résultats sont exprimés sous forme de médiane. A partir de T65, il n'y a plus qu'une seule souris survivante dans le groupe contrôle. Contrôle, n = 5 ; LPS, n = 6. Figure 5 : Variation de la PAM dans les deux groupes exprimée sous forme de delta par rapport à une valeur de référence qui est la première mesure de PAM avant toute expérimentation mais après induction de l'anesthésie entre 35 min (injection d'UII) et 70 min. Les résultats sont exprimés en médiane. A partir de T65, il n'y a plus qu'une seule souris survivante dans le groupe contrôle. Contrôle, n = 5 ; LPS, n = 6. Figure 6 : Variation de la fréquence cardiaque (Fc) dans les deux groupes exprimée sous forme de delta par rapport à une valeur de référence qui est la première mesure de Fc avant toute expérimentation mais après induction de l'anesthésie en fonction du temps dans les groupes contrôle et UII. Les résultats sont exprimés en médiane. A partir de T65, il n'y a plus qu'une seule souris survivante dans le groupe contrôle. Contrôle, n = 5 ; LPS, n = 6. Figure 7 : Evolution de la Température (T°) dans les 2 groupes. Les résultats sont exprimés en médiane. Contrôle, n = 5 ; LPS, n = 6. Figure 4: Variation of mean arterial pressure (MAP) in both groups expressed as delta with respect to a reference value which is the first measure of MAP before any experimentation but after induction of anesthesia. The results are expressed as median. From T65, there is only one surviving mouse in the control group. Control, n = 5; LPS, n = 6. Figure 5: Variation of MAP in both groups expressed as a delta with respect to a reference value which is the first measure of MAP before any experiment but after induction of anesthesia between 35 min ( injection of UII) and 70 min. The results are expressed in median. From T65, there is only one surviving mouse in the control group. Control, n = 5; LPS, n = 6. Figure 6: Heart rate variation (Fc) in both groups expressed as a delta with respect to a reference value which is the first measure of Fc before any experimentation but after induction of anesthesia as a function of time in the control and UII groups. The results are expressed in median. From T65, there is only one surviving mouse in the control group. Control, n = 5; LPS, n = 6. Figure 7: Evolution of Temperature (T °) in the 2 groups. The results are expressed in median. Control, n = 5; LPS, n = 6.

EXEMPLES I) MATERIEL ET METHODES A) Etude des variations du taux plasmatique d'urotensine II chez l'Homme 1) Objectif de l'étude L'objectif de cette étude était de doser l'UII dans le plasma de volontaires sains et de 25 patients présentant un syndrome inflammatoire d'origine infectieuse ou non. 2) Critère de jugement principal Le critère de jugement principal était la mesure du taux plasmatique d'Un par un dosage radioimmunologique. 3) Méthodologie 30 a) Type d'étude Les prélèvements analysés sont issus d'une autre étude physiopathologique pour laquelle une plasmathéque avait été constituée (étude endozépine). Il s'agissait d'une étude prospective, monocentrique, de type descriptif sans bénéfice individuel direct réalisée dans le cadre de la loi Huriet-Sérusclat. Cette étude était menée dans le département d'Anesthésie-Réanimation chirurgicale du CHU Charles Nicolle de Rouen sur une période de 24 mois. Les dosages ont été réalisés dans l'U982 Inserm, Laboratoire de Communication et Différenciation Neuronale et Neuroendocrine (DC2N), IFRMP23 (Université de Rouen). Cette étude avait reçu l'avis favorable du Comité Consultatif de Protection des Personnes dans la Recherche Biomédicale de Haute-Normandie, à la date du 3 novembre 2005. Le promoteur de la recherche était le CHU de Rouen. b) Critères d'inclusion et de non inclusion Les critères d'inclusions étaient : - Patient atteint d'un sepsis à point de départ abdominal hospitalisé dans le service de chirurgie digestive. Le sepsis est défini par la Society of Critical Care Medecine. - Age supérieur à 18 ans - Affiliation à un régime de sécurité sociale - Personne ne participant pas à une autre étude clinique - Signature d'un consentement éclairé. Les critères de non inclusion étaient : - Toute personne mineure ou majeure sous tutelle - Les détenus - Toute personne non affiliée à un régime de sécurité sociale - La participation à une autre étude clinique en cours - Les femmes enceintes - Le refus du patient. Les patients étaient inclus dans 3 groupes : - Le groupe contrôle - Le groupe « sepsis » constitué de patients porteurs d'un sepsis ou d'un sepsis grave à point de départ abdominal - Le groupe « inflammatoire non septique » composé de patients atteints d'une pathologie inflammatoire d'origine non infectieuse. EXAMPLES I) MATERIAL AND METHODS A) Study of the variations of the plasma urotensin II level in humans 1) Objective of the study The objective of this study was to determine the UII in the plasma of healthy volunteers and 25 patients with inflammatory syndrome of infectious origin or not. 2) Primary endpoint The primary endpoint was the measurement of plasma A level by radioimmunoassay. 3) Methodology a) Type of study The samples analyzed come from another physiopathological study for which a plasmathéque had been constituted (endozepine study). It was a prospective, monocentric, descriptive study with no direct individual benefit achieved under the Huriet-Sérusclat law. This study was conducted in the Department of Anesthesia-Surgical Resuscitation Hospital CHU Charles Nicolle Rouen over a period of 24 months. The assays were performed in the U982 Inserm, Laboratory of Communication and Neuronal Differentiation and Neuroendocrine (DC2N), IFRMP23 (University of Rouen). This study received the favorable opinion of the Consultative Committee for the Protection of Persons in Upper Normandy Biomedical Research, dated November 3, 2005. The research sponsor was Rouen University Hospital. b) Criteria for inclusion and non inclusion Inclusion criteria were: - Patient with abdominal sepsis hospitalized in the department of digestive surgery. Sepsis is defined by the Society of Critical Care Medicine. - Age greater than 18 years - Affiliation to a social security scheme - Person not participating in another clinical study - Signature of informed consent. The criteria for non-inclusion were: - Any minor or adult under guardianship - Prisoners - Anyone not affiliated to a social security scheme - Participation in another clinical study in progress - Pregnant women - Refusal of the patient. The patients were included in 3 groups: - The control group - The "sepsis" group consisting of patients with sepsis or severe abdominal sepsis - The "non-septic inflammatory" group consisting of patients with an inflammatory pathology of noninfectious origin.

Recueil des caractéristiques des patients : - Age - Sexe - Poids, taille - Motif de l'hospitalisation - Score de gravité (APACHE II) - Fréquence cardiaque (Fe), pression artérielle (PA), température (T°) - Bilan biologique: numération de plaquettes, leucocytes (formule sanguine), C Reactive Protein, procalcitonine, urée, créatinine recueillis dans le cadre de la surveillance quotidienne. c) Le dosage de l'UII Les prélèvements étaient réalisés lors de l'hospitalisation du patient à heure fixe entre 8 et 9 heures. Le délai entre le prélèvement et le début du sepsis n'était pas connu. Collection of patient characteristics: - Age - Sex - Weight, height - Reason for hospitalization - Severity score (APACHE II) - Heart rate (Fe), blood pressure (BP), temperature (T °) - Biological assessment: Platelet count, leukocyte count, C Reactive Protein, procalcitonin, urea, creatinine collected as part of daily monitoring. c) Assay of the UII Samples were taken during the patient's hospitalization at a fixed time between 8 and 9 o'clock. The delay between collection and the onset of sepsis was not known.

Après ponction veineuse (10 ml), les échantillons étaient centrifugés et le plasma obtenu était conservé à -80°C. L'Un était dosé directement dans le plasma, puis un deuxième dosage était réalisé après purification sur colonne Sep Pack. - Purification sur colonne Sep Pack La purification sur colonne Sep Pack consiste à séparer l'Un des autres protéines présentes dans le plasma. Le plasma est passé sur la colonne Sep Pack pour permettre aux protéines présentes dans l'échantillon de s'y fixer. Puis la colonne est rincée avec de l'acide trifluoroacétique 0.1% qui ne décroche pas l'UII. La manipulation est répétée avec 2 ml d'acétonitril 50% afin de décrocher spécifiquement l'Un qui est alors récupéré dans un tube à essai. Des études ont été réalisées au préalable pour vérifier que l'UII se décroche avec de l'acétonitril 50%. A ce stade, l'UII est dilué dans la solution de rinçage, il faut donc l'évaporer grâce au système Speed Vac. Une fois cette manipulation effectuée, le peptide se retrouve à l'état de poudre. - Dosage radioimmunologique Le dosage radioimmunologique permet une mesure quantitative d'un peptide par l'utilisation d'anticorps liant spécifiquement cette substance. La réaction antigène-anticorps est révélée par une substance radioactivement marquée qui reconnaît ce complexe. L'iode radioactif (iode 125) se fixe sur les résidus tyrosyl du peptide par une réaction l'oxydation. Après la réaction de marquage on sépare l'hormone marquée ou chaude de l'hormone non marquée ou froide par une méthode biochimique appropriée (chromatographie en phase liquide haute performance HPLC). After venipuncture (10 ml), the samples were centrifuged and the resulting plasma was stored at -80 ° C. The A was dosed directly into the plasma, and then a second assay was performed after purification on a Sep Pack column. - Sep Pack Purification The Sep Pack column purification consists of separating one of the other proteins present in the plasma. The plasma is passed on the Sep Pack column to allow the proteins present in the sample to attach to it. Then the column is rinsed with 0.1% trifluoroacetic acid which does not pick up the UII. The manipulation is repeated with 2 ml of 50% acetonitrile in order to specifically unhook the A which is then recovered in a test tube. Studies have been carried out beforehand to verify that the UII is unhooked with acetonitrile 50%. At this stage, the UII is diluted in the rinsing solution, so it must be evaporated using the Speed Vac system. Once this manipulation is performed, the peptide is found in the form of powder. - Radioimmunoassay The radioimmunoassay allows a quantitative measurement of a peptide by the use of antibodies specifically binding this substance. The antigen-antibody reaction is revealed by a radioactively labeled substance that recognizes this complex. The radioactive iodine (iodine 125) binds to the tyrosyl residues of the peptide by an oxidation reaction. After the labeling reaction, the labeled or hot hormone is separated from the unlabeled or cold hormone by an appropriate biochemical method (high performance liquid chromatography HPLC).

B) Etude de l'effet d'une administration d'urotensine II sur le taux de mortalité dans un modèle murin de choc septique 1) Objectif de l'étude L'objectif de cette étude était d'étudier l'effet d'une administration unique d'Un sur la mortalité de souris présentant un choc septique. 2) Critères de jugement Le critère de jugement principal était le taux de mortalité observé 90 minutes après l'induction du sepsis. B) Study of the effect of administration of urotensin II on the mortality rate in a murine model of septic shock 1) Objective of the study The objective of this study was to study the effect of a Single administration of A on mouse mortality with septic shock. 2) Endpoints The primary endpoint was the observed mortality rate 90 minutes after sepsis induction.

Les critères de jugement secondaires étaient la pression artérielle moyenne (PAM) invasive, la T° et la Fc mesurées toutes les 5 minutes. 3) Méthodologie expérimentale Les expérimentations ont été menées au sein du laboratoire DC2N/Inserm, U982, IFRMP 23. Le projet de recherche a été soumis au Comité d'Ethique en Expérimentation Animale de Normandie (CEEAN). Les animaux de ce protocole étaient des souris Swiss mâles, âgées de 10 semaines, pesant entre 20 et 40 grammes. Les animaux étaient hébergés au nombre de 6 par cage dans une animalerie agréée maintenue à une température de 24 f 1°C et une photopériode 12h/12h (lumière/obscurité). La nourriture et la boisson étaient fournies ad libitum. L'expérimentation débutait 2 semaines après l'arrivée des animaux. Secondary endpoints were invasive mean arterial pressure (MAP), T ° and Fc measured every 5 minutes. 3) Experimental methodology Experiments were conducted in the DC2N / Inserm, U982, IFRMP 23 laboratory. The research project was submitted to the Normandy Animal Experiment Ethics Committee (CEEAN). The animals in this protocol were male Swiss mice, 10 weeks old, weighing between 20 and 40 grams. The animals were housed 6 per cage in an approved animal house maintained at a temperature of 24 f 1 ° C and a photoperiod 12h / 12h (light / dark). Food and drink were provided ad libitum. The experiment started 2 weeks after the arrival of the animals.

Les animaux étaient anesthésiés par une injection intrapéritonéale (ip) de 2 mg/Kg d'uréthane. Une incision médiane d'environ 1,5 cm au niveau cervical permettait d'isoler la trachée et de la cathétériser. Les souris trachéotomisées étaient laissées en ventilation spontanée. Le monitorage de la PA invasive était réalisé grâce à un capteur de pression positionné dans l'artère carotide interne. Ce micro capteur était connecté via une fibre optique à un appareil de mesure de PA (système Bioseb-Samba®). La T° était mesurée par une sonde thermique intrarectale. L'hypothermie était prévenue par un matelas chauffant qui s'enclenchait lorsque la T° corporelle de la souris descendait en dessous de 37°C et s'arrêtait au-delà de ce seuil. Le modèle de choc septique était réalisé par une injection ip de 40 mg/Kg de LPS Escherichia coli 0127 :B8 (Sigma-Aldrich, Saint-Quentin-Fallavier, France). Ensuite, deux groupes d'animaux étaient constitués de façon non randomisée : - un groupe contrôle recevant une injection ip de 100 µL de NaCl 0,9% (n=5) - un groupe UII bénéficiant d'une injection ip d'UII à la dose de 50 µmolaire (50 µM) dans un volume de 100 µL (n=6). Les injections d'UII étaient réalisées 35 min après l'administration de LPS. Afin d'obtenir des valeurs de référence de la PAM et de la Fc chez la souris anesthésiée, les mesures étaient débutées 20 minutes avant l'administration le LPS (figure 1). La T° était mesurée toutes les 5 minutes. Les PAS (PA systolique), PAD (PA diastolique) et PAM étaient mesurées à partir d'un enregistrement de 15 secondes du tracé de la PA invasive. La PAM était une valeur calculée par le logiciel à partir de la PAS maximale et de la PAD minimale sur la période de l'enregistrement. La mesure de la PAS et de la PAD se faisait manuellement en déplaçant la ligne curseur. Initialement, la PA était relevée toutes les 5 minutes puis les mesures étaient rapprochées après injection de l'Un (toutes les minutes pendant 20 min puis toutes les deux minutes). Les mesures étaient réalisées pendant 90 min à compter de l'injection du LPS. C) Analyse statistique Les résultats sont exprimés sous forme de médiane [1 er et 3 éme interquartile], valeurs extrêmes pour les valeurs quantitatives et de moyenne de pourcentage (+SEM) pour les variables qualitatives. Les comparaisons de variables quantitatives sont réalisées entre 2 groupes par un test de Mann et Whitney et entre 3 groupes par un test de Kruskal et Wallis (suivi d'un post test de Dunn) et par un test de Fisher pour les variables qualitatives. Animals were anesthetized by intraperitoneal (ip) injection of 2 mg / kg urethane. A median incision of about 1.5 cm at the cervical level was used to isolate the trachea and catheterize it. Tracheotomized mice were left in spontaneous ventilation. Monitoring of invasive PA was performed using a pressure sensor positioned in the internal carotid artery. This micro sensor was connected via an optical fiber to a PA measuring device (Bioseb-Samba® system). T ° was measured by an intrarectal thermal probe. Hypothermia was prevented by a heating mattress that interlocked when the body temperature of the mouse dropped below 37 ° C and stopped above that threshold. The septic shock model was performed by an ip injection of 40 mg / kg LPS Escherichia coli O127: B8 (Sigma-Aldrich, Saint-Quentin-Fallavier, France). Then, two groups of animals were constituted in a non-randomized manner: - a control group receiving an ip injection of 100 μl of NaCl 0.9% (n = 5) - a UII group benefiting from an ip injection of UII to the dose of 50 μmolar (50 μM) in a volume of 100 μL (n = 6). UII injections were performed 35 min after administration of LPS. In order to obtain baseline values of PAM and Fc in the anesthetized mouse, measurements were started 20 minutes prior to LPS administration (Figure 1). T ° was measured every 5 minutes. PAS (systolic BP), PAD (diastolic BP), and PAM were measured from a 15-second record of the invasive PA pattern. The MAP was a software-calculated value based on the maximum SAP and the minimum MAP over the period of registration. The measurement of the PAS and the PAD was done manually by moving the cursor line. Initially, the AP was read every 5 minutes and the measurements were reconciled after injection of the One (every minute for 20 min then every two minutes). The measurements were performed for 90 min from the injection of LPS. C) Statistical analysis The results are expressed as the median [1st and 3rd interquartile], extreme values for the quantitative values and the percentage average (+ SEM) for the qualitative variables. Comparisons of quantitative variables were made between 2 groups using a Mann-Whitney test and between 3 groups using a Kruskal-Wallis test (followed by a Dunn post-test) and a Fisher test for qualitative variables.

II) RESULTATS A) Etude des variations du taux plasmatique d'urotensine II chez l'Homme 1) Caractéristiques des volontaires sains et des patients Nous avons inclus au total 14 volontaires sains et 29 patients (tableau 1). L'âge et le sexe ratio sont comparables dans les groupes témoin et septique. Plus d'hommes sont retrouvés dans le groupe non septique. Dans tous les cas sauf deux, l'origine du sepsis est une péritonite (appendiculaire, biliaire ou d'origine sigmoïdienne). Pour les deux autres patients, une angiocholite a été diagnostiquée. Dans le groupe non septique la pathologie à l'origine du syndrome inflammatoire est une pancréatite. groupe témoin groupe non septique groupe septique (n=14) (n=8) (n=21) Age (années) 33 51,5 32 Sexe ratio 1,33 0,75 1,37 Poids (Kg) 62 75 67 Fc (bpm) 75 85 90 * * PAS (mmHg) 127,5 149 * 130 PAD (mmHg) 74,5 81 75 Température (°C) 36,45 36,8 38,2 *** GB (/mm) - 13950 13500 PNN (/mm) - 11175 10260 CRP (mg/ml) - 122,5 244 7-77-7 PCT (µg/L) - 0,1 1,3 Urée (mmol/L) - 2,55 2,6 Créatinine - 73 73 (gmoFL) 275 268 Plaquettes (/mm) - APACHE II - 4 2 Tableau 1: Caractéristiques des patients des groupes non septique, septique et des volontaires sains. * p<0,05 par rapport au contrôle, E p<0,05 par rapport au groupe non septique La T° et la Fc sont plus élevées chez les patients septiques par rapport aux volontaires sains (tableau 1). Les marqueurs de l'inflammation sont significativement plus élevés dans le groupe des patients septiques. 2) Critère de jugement principal Le taux plasmatique d'Un est significativement plus bas chez les patients septiques par rapport aux volontaires sains (1097 vs 3501 p<0,001) mais également par rapport aux patients non septiques (2109 vs 3501 p<0,05) (figure 2). Il n'y a pas de différence significative entre les patients non septiques et les volontaires sains. II) RESULTS A) Study of the variations of the plasma urotensin II level in humans 1) Characteristics of healthy volunteers and patients We included a total of 14 healthy volunteers and 29 patients (Table 1). The age and sex ratio are comparable in the control and septic groups. More men are found in the non-septic group. In all but two cases, the origin of sepsis is peritonitis (appendiceal, biliary or sigmoidal origin). For the other two patients, cholangitis was diagnosed. In the non-septic group the pathology causing the inflammatory syndrome is pancreatitis. control group non-septic group septic group (n = 14) (n = 8) (n = 21) Age (years) 33 51.5 32 Sex ratio 1.33 0.75 1.37 Weight (Kg) 62 75 67 Fc (bpm) 75 85 90 * * NO (mmHg) 127.5 149 * 130 PAD (mmHg) 74.5 81 75 Temperature (° C) 36.45 36.8 38.2 *** GB (/ mm) - 13950 13500 PNN (/ mm) - 11175 10260 CRP (mg / ml) - 122.5 244 7-77-7 PCT (μg / L) - 0.1 1.3 Urea (mmol / L) - 2.55 2 , 6 Creatinine - 73 73 (gmoFL) 275 268 Platelets (/ mm) - APACHE II - 4 2 Table 1: Characteristics of non-septic, septic and healthy volunteers. * p <0.05 compared to control, E p <0.05 compared to non-septic group T ° and Fc are higher in septic patients compared to healthy volunteers (Table 1). The markers of inflammation are significantly higher in the group of septic patients. 2) Primary endpoint The plasma level of Un is significantly lower in septic patients compared to healthy volunteers (1097 vs 3501 p <0.001) but also compared to non-septic patients (2109 vs 3501 p <0.05 ) (Figure 2). There is no significant difference between non-septic patients and healthy volunteers.

B) Etude de l'effet d'une administration d'urotensine II sur le taux de mortalité dans un modèle murin de choc septique 1) Critère de jugement principal Dans le groupe contrôle, la mortalité observée 90 min après la réalisation du sepsis est de 80% (figure 3). L'administration d'UII diminue significativement ce taux puisque la mortalité atteint 16% dans le groupe UII.20 2) Critères de jugement secondaires a) Variation de la pression artérielle Comme cela est montré dans la figure 4, l'injection de LPS responsable du choc septique, provoque une chute drastique de la PAM (entre TO et T35). B) Study of the effect of administration of urotensin II on the mortality rate in a murine model of septic shock 1) Main judgment criterion In the control group, the mortality observed 90 min after the sepsis is done is 80% (Figure 3). The administration of UII significantly decreases this rate since the mortality reaches 16% in the group UII.20 2) Secondary endpoints a) Variation in blood pressure As shown in Figure 4, the injection of LPS responsible septic shock, causes a drastic drop in MAP (between TO and T35).

Dans le groupe UII, l'injection du peptide provoque une augmentation de la PA avec un retour à la PAM de base 5 minutes après l'administration (figure 5). L'effet est immédiat et perdure dans le temps (approximativement 35 min). b) Variation de la fréquence cardiaque L'induction du sepsis provoque une augmentation de la Fc (figure 6). Dans le groupe 10 UII, l'injection du peptide provoque une augmentation de la Fc (figure 6). c) Evolution de la température. Il n'y a pas de différence de T° corporelle entre les deux groupes (figure 7). In the UII group, injection of the peptide causes an increase in PA with a return to baseline PAM 5 minutes after administration (Figure 5). The effect is immediate and lasting in time (approximately 35 min). b) Variation of heart rate The induction of sepsis causes an increase in Fc (Figure 6). In the UII group, injection of the peptide causes an increase in Fc (Figure 6). c) Evolution of the temperature. There is no difference in body weight between the two groups (Figure 7).

III) Mesure de la Pression artérielle et survie des animaux 15 Sur les souris (C57 B1/6) sham (injection intrapéritonéale de NaCl 0,9%) ou présentant un sepsis léthal (injection intrapéritonéale de LPS), nous rechercherons l'effet de doses croissantes d'Un dont la séquence correspondra à celles exprimée chez différentes espèces (Souris, Rat, Porc, Homme), de son paralogue URP ainsi que de 20 certains agonistes de l'UT (AC-7954, Phen5 UII4-11, BzPhe6 UII4-11) déjà testés sur des modèles cellulaires Humains et de rongeurs. Nous testerons l'ensemble de ces agonistes, en l'absence et en présence d'antagonistes de l'UT de rongeur (SB710411 et [Orn5]URP), sur les paramètres de pression artérielle de souris Sham et de souris présentant un choc septique létal. Ces effets seront comparés aux effets d'une injection ou d'une co-injection 25 de noradrénaline, utilisée en clinique en cas de sepsis sévère. Sur des souris vigiles, nous rechercherons le pourcentage de survie des animaux présentant un choc septique létal (LPS) en absence et en présence des agonistes précédemment cités de l'UT et/ou en présence d'antagoniste de l'UT, ou d'un ligand urotensinergique inactif. Les paramètres de prise de nourriture et boisson seront contrôlés 30 et associés au suivi du poids des animaux. Ces effets seront comparés aux effets d'une injection ou d'une co-injection de noradrénaline, utilisée en clinique en cas de sepsis sévère. III) Measurement of Arterial Pressure and Animal Survival In mice (C57 B1 / 6) sham (intraperitoneal injection of 0.9% NaCl) or with lethal sepsis (intraperitoneal injection of LPS), we will look for the effect of increasing doses of A whose sequence will correspond to those expressed in different species (mice, rats, pigs, humans), its URP paralogue as well as some UT agonists (AC-7954, Phen5 UII4-11, BzPhe6 UII4-11) already tested on human and rodent cellular models. We will test all these agonists, in the absence and in the presence of rodent UT antagonists (SB710411 and [Orn5] URP), on the blood pressure parameters of Sham mice and septic shock mice. lethal. These effects will be compared to the effects of norepinephrine injection or co-injection, used clinically in severe sepsis. In vigorous mice we will look for the percentage survival of animals with lethal septic shock (LPS) in the absence and in the presence of the above-mentioned UT agonists and / or in the presence of UT antagonist, or an inactive urotensinergic ligand. Food and drink intake parameters will be monitored and associated with animal weight tracking. These effects will be compared to the effects of an injection or co-injection of noradrenaline, used clinically in severe sepsis.

18 REFERENCES Abdelrahman, A. M. and C. C. Pang (2002). Involvement of the nitric oxide/L-arginine and sympathetic nervous systems on the vasodepressor action of human urotensin II in anesthetized rats. Life Sci 71:819-25. Ames, R. S., H. M. Sarau, et al. (1999). Human urotensin-II is a potent vasoconstrictor and agonist for the orphan receptor GPR14. Nature 401:282-6. Bohm, F. and J. Pernow (2002). Urotensin II evokes potent vasoconstriction in humans in vivo. Br J Pharmaco1135:25-7. 18 REFERENCES Abdelrahman, A.M. and C.C. Pang (2002). Involvement of the nitric oxide / L-arginine and sympathetic nervous systems on the vasodepressor action of human urotensin II in anesthetized rats. Life Sci 71: 819-25. Ames, R. S., M. M. Sarau, et al. (1999). Human urotensin-II is a potent vasoconstrictor and agonist for the orphan receptor GPR14. Nature 401: 282-6. Bohm, F. and J. Pernow (2002). Urotensin II evokes potent vasoconstriction in humans in vivo. Br J Pharmaco1135: 25-7.

Boucard, A.A., Sauve, S.S., et al. (2003). Photolabelling the rat urotensin II/GPR14 receptor identifies a ligand-binding site in the fourth transmembrane domain. Biochem J 370:829-8383. Camarda, V., R. Guerrini, et al. (2002). A new ligand for the urotensin II receptor. Br J Pharmaco1137: 311-4. Boucard, A.A., Sauve, S.S., et al. (2003). Photolabelling the rat urotensin II / GPR14 receptor identified ligand-binding site in the fourth transmembrane domain. Biochem J 370: 829-8383. Camarda, V., Guerrini, R., et al. (2002). A new ligand for the urotensin II receptor. Br J Pharmaco1137: 311-4.

Conlon, J. M., K. Yano, et al. (1996). Distribution and molecular forms of urotensin II and its role in cardiovascular regulation in vertebrates. J Exp Zoo1275:226-38. Croston, G. E., Olsson, R., et al., (2002). Discovery of the first nonpeptide agonist of the GPR14/urotensin-II receptor: 3 -(4 - chlorop henyl) - 3 -(2- (dimethylamino) ethyl)iso c hroman-1-one (AC-7954). J Med Chem 45:4950-4953. Conlon, J.M., K. Yano, et al. (1996). And molecular forms of urotensin II and its role in cardiovascular regulation in vertebrates. J Exp Zoo1275: 226-38. Croston, G.E., Olsson, R., et al., (2002). Discovery of the first agonist of the GPR14 / urotensin-II receptor: 3- (4-chlorophenyl) -3- (2- (dimethylamino) ethyl) iso-hroman-1-one (AC-7954). J Med Chem 45: 4950-4953.

Douglas, S. A. and E. H. Ohlstein (2000). Human urotensin-II, the most potent mammalian vasoconstrictor identified to date, as a therapeutic target for the management of cardiovascular disease. Trends Cardiovasc Med 10:229-37. Gardiner, S. M., J. E. March, et al. (2001). Depressor and regionally-selective vasodilator effects of human and rat urotensin II in conscious rats. Br J Pharmaco1132:1625-9. Douglas, S.A. and E.H. Ohlstein (2000). Human urotensin-II, the most potent mammalian vasoconstrictor identified to date, as a therapeutic target for the management of cardiovascular disease. Trends Cardiovasc Med 10: 229-37. Gardiner, S.M., J.E. March, et al. (2001). Depressor and regionally-selective vasodilator effects of human and rat urotensin II in conscious rats. Br J Pharmaco1132: 1625-9.

Gibson, A., P. Wallace, et al. (1986). Cardiovascular effects of urotensin II in anesthetized and pithed rats. Gen Comp Endocrino164:435-9. Grieco, P., Carotenuto, A., et al. (2002). A new, potent urotensin II receptor peptide agonist containing a Pen residue at the disulfide bridge. J Med Chem 45:4391-4394. Hassan, G. S., F. Chouiali, et al. (2003). Effect of human urotensin-II infusion on 30 hemodynamics and cardiac function. Can J Physiol Pharmaco181:125-8. Hood, S. G., A. M. Watson, et al. (2005). Cardiac actions of central but not peripheral urotensin II are prevented by beta-adrenoceptor blockade. Peptides 26:1248-56. Gibson, A., Wallace, P., et al. (1986). Cardiovascular effects of urotensin II in anesthetized and pithed rats. Gen Comp Endocrino164: 435-9. Grieco, P., Carotenuto, A., et al. (2002). A new, potent urotensin II receptor peptide agonist containing a Pen residue at the disulfide bridge. J Med Chem 45: 4391-4394. Hassan, G. S., F. Chouiali, et al. (2003). Effect of human urotensin-II infusion on hemodynamics and cardiac function. Can J Physiol Pharmaco181: 125-8. Hood, S.G., A.M. Watson, et al. (2005). Cardiac actions of central but not peripheral urotensin are prevented by beta-adrenoceptor blockade. Peptides 26: 1248-56.

Jarry M, Diallo M, et al., (2010). The vasoactive peptides Urotensin II and Urotensin II-related peptide regulate astrocytes activity through common and distinct mechanisms. Involvement in cell proliferation. Biochem J 428:113-124. Liu,Q., Pong,S.S., et al. (1999). Identification of urotensin II as the endogenous ligand for 5 the orphan G-protein-coupled receptor GPR14. Biochem. Biophys. Res. Commun. 266:174-178. Marchese,A., Heiber,M., et al. (1995). Cloning and chromosomal mapping of three novel genes, GPR9, GPR10, and GPR14, encoding receptors related to interleukin 8, neuropeptide Y, and somatostatin receptors. Genomics 29:335-344.Jarry M, Diallo M, et al., (2010). The vasoactive peptides Urotensin II and Urotensin II-related peptide regulates astrocytes activity through common and distinct mechanisms. Involvement in cell proliferation. Biochem J 428: 113-124. Liu, Q., Pong, S.S., et al. (1999). Identification of urotensin II as the endogenous ligand for the orphan G-protein-coupled receptor GPR14. Biochem. Biophys. Res. Common. 266: 174-178. Marchese, A., Heiber, M., et al. (1995). GPR10, GPR10, and GPR14, encoding receptors related to interleukin 8, neuropeptide Y, and somatostatin receptors. Genomics 29: 335-344.

10 Mori, M., T. Sugo, et al. (1999). "Urotensin II is the endogenous ligand of a G-proteincoupled orphan receptor, SENR (GPR14)." Biochem Biophys Res Commun 265:123-129. Protopopov,A., Kashuba,V., et al. (2000). Assignment of the GPR14 gene coding for the G-protein-coupled receptor 14 to human chromosome 17825.3 by fluorescent in situ hybridization. Cytogenet. Cell Genet 88:312-313.Mori, M., T. Sugo, et al. (1999). "Urotensin II is the endogenous ligand of a G-proteincoupled orphan receptor, SENR (GPR14)." Biochem Biophys Res Commun 265: 123-129. Protopopov, A., Kashuba, V., Et al. (2000). Assignment of the GPR14 gene-coding for the G-protein-coupled receptor 14 to human chromosome 17825.3 by fluorescent in situ hybridization. Cytogenet. Cell Genet 88: 312-313.

15 Russell, F. D., P. Molenaar, et al. (2001). Cardiostimulant effects of urotensin-II in human heart in vitro. Br J Pharmacol 132(1): 5-9. Saetrum Opgaard, O., H. Nothacker, et al. (2000). Human urotensin II mediates vasoconstriction via an increase in inositol phosphates. Eur J Pharmaco1406:265-71. Watson, A. M., G. W. Lambert, et al. (2003). Urotensin II acts centrally to increase 20 epinephrine and ACTH release and cause potent inotropic and chronotropic actions. Hypertension 42:373-9. Wilkinson, I. B., J. T. Affolter, et al. (2002). High plasma concentrations of human urotensin II do not alter local or systemic hemodynamics in man. Cardiovasc Res 53:341-7.Russell, F. D., P. Molenaar, et al. (2001). Cardiostimulant effects of urotensin II in human heart in vitro. Br J Pharmacol 132 (1): 5-9. Saetrum Opgaard, O., H. Nothacker, et al. (2000). Human urotensin II mediates vasoconstriction via an increase in inositol phosphates. Eur J Pharmaco1406: 265-71. Watson, A.M., G.W. Lambert, et al. (2003). Urotensin II acts centrally to increase epinephrine and ACTH release and causes potent inotropic and chronotropic actions. Hypertension 42: 373-9. Wilkinson, I. B., J. T. Affolter, et al. (2002). High plasma concentrations of human urotensin II do not alter local or systemic hemodynamics in man. Cardiovasc Res 53: 341-7.

25 Williams J.P., Thompson J.P., et al. (2008). Nociceptin and urotensin-II concentrations in critically ill patients with sepsis. Br J Anaesth 100:810-814. Zhu, Y. Z., Z. J. Wang, et al. (2004). Urotensin II causes fatal circulatory collapse in anesthesized monkeys in vivo: a "vasoconstrictor with a unique hemodynamic profile." Am J Physiol Heart Circ Physio1286(3): H830-6. Williams J.P., Thompson J.P., et al. (2008). Nociceptin and urotensin-II concentrations in critically ill patients with sepsis. Br J Anaesth 100: 810-814. Zhu, Y.Z., Z.J. Wang, et al. (2004). Urotensin II causes fatal circulatory collapse in anesthesized monkeys in vivo: a "vasoconstrictor with a single hemodynamic profile." Am J Physiol Heart Circ Physio1286 (3): H830-6.

Claims

REVENDICATIONS1. A urotensin II receptor agonist for use in the treatment of sepsis selected from: a) human urotensin II having the Glu-Thr-Pro-Asp-c sequence [Cys-Phe-Trp-Lys-Tyr-Cys] -Val; b) a peptide derived from urotensin II corresponding to formula (I): R1-c [Cys-Phe-Trp-Lys-Tyr-Cys] -R2 (I) in which R1 represents 1 to 10 amino acids, R2 represents an amino acid; c) an analogue of urotensin II corresponding to formula (II): H-Asp-c [Xaa-Phe-Trp-Lys-Tyr-Yaa] -Val-OH (II) in which Xaa represents cysteine (Cys ) or (3, (3-dimethylcysteine (Pen), Yaa represents cysteine (Cys) or (3, 3-dimethylcysteine (Pen); d) an urotensin II analog selected from Glu-Thr-Pro -Asp-c [Cys-Bpa-Trp-Lys-Tyr-Cys] -Val, Glu-Thr-Pro-Asp-c [Cys-Phe-Bpa-Lys-Tyr-Cys] -Val and Glu-Thr-Pro -Asp-c [Cys-Phe-Trp-Lys-Tyr-Cys] -Bpa with Bpa represents p-benzoyl-L-phenylalanine.

A urotensin II receptor agonist for use in the treatment of sepsis according to claim 1 wherein the agonist is a peptide derived from urotensin II having the formula (1) wherein R2 is selected from Ile and Val.

A urotensin II receptor agonist for use in the treatment of sepsis according to one of claims 1-2 wherein the agonist is a peptide derived from urotensin II having the formula (1) wherein R1 is selected from Gln-His-Gly-Thr-Ala-Pro-Glu, Gln-His-Gly-Ala-Ala-Pro-Glu, Pro-Glu-Thr-Pro-Asp-, Asp and Ala.

4. The urotensin II receptor agonist for use in the treatment of sepsis according to one of claims 1-3 wherein the agonist is a peptide derived from urotensin II selected from Gln-His-Gly-Thr- Ala-Pro-Glu-c [Cys-Phe-Trp-Lys-Tyr-Cys] -Ile, Gln-His-Gly-Ala-Ala-Pro-Glu-c [Cys-Phe-Trp-Lys-Tyr-Cys ] -Ile, Pro-Glu-Thr-Pro-Asp-c [Cys-Phe-Trp-Lys-Tyr-Cys] -Val, Asp-c [Cys-Phe-Trp-Lys-Tyr-Cys] -Val and Ala-c [Cys-Phe-Trp-Lys-Tyr-Cys] -Val.

The urotensin II receptor agonist according to one of claims 1-4 for use in the treatment of sepsis by intravenous administration.

A pharmaceutical composition comprising a urotensin II receptor agonist according to any of claims 1-5 for use in the treatment of sepsis.