FR2961399A1 - Compositions a base de flavones et d'anthelminthiques - Google Patents

Abstract

Compositions à base de flavones et d'anthelminthiques, et leurs utilisations pour le traitement de parasitoses dues à des nématodes.

Description

COMPOSITIONS À BASE DE FLAVONES ET D'ANTHELMINTHIQUES La présente invention a pour objet des compositions à base de flavones et d' anthelminthiques et leurs utilisations pour le traitement de parasitoses.

Le polyparasitisme est fréquent chez la plupart des organismes eucaryotes supérieurs, sans qu'il ne soit toujours possible de combattre avec efficacité les parasites responsables. Malgré l'existence d'agents thérapeutiques appartenant à différentes familles chimiques, la mise en évidence et l'éradication d'un parasite chez un organisme supérieur reste très difficile. En effet, d'une part les pathologies résultantes (carences en vitamines et minéraux, anémie, hématopoïèse anormale, déficience du système immunitaire, etc.) ne sont pas toujours spécifiques d'une parasitose ou d'un type de parasite, d'autre part l'intensité des troubles observés chez l'hôte dépend de nombreux facteurs, tels que sa résistance aux parasites (elle-même fonction de son âge, son sexe, son état général, son environnement et son mode de vie), mais aussi du nombre et des différents types de parasites qu'il alimente à son insu. La prévention des parasitoses est possible par une modification de l'écosystème (par exemple par destruction des mousses sur les pâturages qui constituent un abri pour les stades libres de parasites), et surtout par traitement chimique. Cette dernière méthode de prophylaxie est contraignante et parfois toxique pour l'hôte à soigner et pour l'environnement dans lequel des résidus sont libérés. De plus, des parasites résistants sont petit à petit sélectionnés dans la population de parasites. L'apparition de parasites résistants à une famille d'antiparasitaires est particulièrement dommageable dans les élevages où les éleveurs administrent alors des antiparasitaires à leurs animaux à des doses souvent très supérieures à celles recommandées, pensant de cette façon augmenter leur efficacité. La toxicité des traitements devient dès lors importante pour les animaux soignés, et ne permet généralement pas l'élimination des parasites les plus résistants, qui se trouvent être en outre avantagés par la disparition des parasites dits sensibles. Aucune de ces solutions n'est donc sans conséquence pour l'hôte infesté ou pour l'environnement. Les parasites sont aussi capables de devenir résistants à plusieurs familles chimiques d'antiparasitaires selon le mécanisme de la résistance multiple aux médicaments (MDR, «multi-drug resistance »), connue pour d'autres classes d'agents thérapeutiques et qui concerne également les antiparasitaires. Dans ce cas, la chimiorésistance implique principalement la présence de pompes membranaires d'efflux, qui permettent aux parasites d'empêcher la pénétration des composés toxiques dans leur cytoplasme et de les renvoyer dans le milieu extracellulaire. La plus connue des pompes d'efflux est la glycoprotéine P (P-gp ou Pgp), qui appartient à la famille des transporteurs ABC (ATP Binding Cassette) (Xu, M., Molento, M., Blackhall, W., Ribeiro, P., Beech, R., Prichard, R. Ivermectin resistance in nematodes may be caused by alteration of P-glycoprotein homolog. Mol. Biochem. Parasitol. (1998), 91(2): 327-35) ; Kerboeuf, D., Blackhall, W., Kaminsky, R., von Samson-Himmelstjerna, G. P-glycoprotein in helminths: function and perspectives for anthelmintic treatment and reversal of resistance. Int. J. Antimicrob. Agents. (2003), 22(3): 332-46). Deux publications mentionnent l'utilisation d'inhibiteurs de cette pompe protéique pour renforcer l'action de deux antiparasitaires : la moxidectine (MOX) et l'ivermectine (IVM). La première publication de Dupuy et al. décrit la co-administration sous-cutanée de quercétine (un composé naturel de la famille des flavonoïdes) et de moxidectine, la quercétine permettant d'accroître in vivo la biodisponibilité de la moxidectine chez l'agneau (Dupuy, J., Larrieu, G., Sutra, J. F., Lespine, A. and Alvinerie, M.

Enhancement of moxidectin bioavailability in lamb by a natural flavonoid: quercetin. Veterinary Parasitology (2003), 112(4): 337-347). La deuxième publication de Bartley et al. décrit quant à elle l'effet in vitro de la quercétine de potentialisation de l'action de l'ivermectine contre le nématode Teladorsagia circumcincta. Néanmoins, pour obtenir un effet identique à celui observé pour l'inhibiteur de référence le valspodar, la dose de quercétine doit être 12 fois plus élevée chez les nématodes sensibles et 27 fois chez les nématodes résistants (Bartley, D., J., McAllister, H., Bartley, Y., Dupuy, J.

Ménez, C., Alvinerie, M., Jackson, F., Lespine, A. P-glycoprotein interfering agents potentiate ivermectin susceptibility in ivermectin sensitive and resistant isolates of Teladorsagia circumcincta and Haemonchus contortus. Parasitology (2009), 136: 1081-1088, Cambridge University Press).

Cependant, si la quercétine semble dans ces deux cas renforcer l'action des antiparasitaires (MOX et IVM), celle-ci inhibe aussi de façon inévitable les pompes P-gp des vertébrés (voir Dupuy et al., précédemment cité), les privant de ce fait d'un système de détoxification vital. Il existe par conséquent un besoin important en nouveaux traitements antiparasitaires, qui soient efficaces à la fois contre les parasites sensibles et résistants, et qui préservent d'autre part la santé de l'hôte infesté ainsi que son environnement. Parmi les inhibiteurs de pompes P-gp figurent des composés naturels appartenant à la famille des flavonoïdes. WO2009/018326 décrit des modalités de formulation de divers flavonoïdes en vue d'applications thérapeutiques variées et, entre autres, un effet accru vis-à-vis de P-gp humaines résultant d'une meilleure solubilisation de la fisétine. Kitagawa et al. décrivent pour leur part l'action inhibitrice de flavonoïdes tels que le kaempférol, la baicaleine, la myricétine, la fisétine, et la morine sur les pompes P-gp de cellules humaines KB-C2, et ce par le contrôle de l'accumulation d'un anticancéreux à l'intérieur de celles-ci (Kitagawa, S., Nabekura, T., Takahashi, T., Nakamura, Y., Sakamoto, H., Tano, H., Hirai, M., Tsukahara, G. Structure-activity relationships of the inhibitory effects of flavonoids on P-glycoprotein-mediated transport in KB-C2 cells. Biol. Pharm. Bull. (2005), 28(12): 2274-8).

Cependant, si la fisétine est citée dans ces deux publications, Kitagawa et al. démontrent qu'elle inhibe de façon peu importante les P-gp humaines, contrairement à la quercétine. L'action inhibitrice de la quercétine vis-à-vis des P-gp de nématodes s'est montrée comparable à celle constatée par Kitagawa et al. vis-à-vis des P-gp humaines. Rien ne laissait donc à penser que l'action inhibitrice d'autres flavonoïdes de la même famille chimique serait supérieure sur les P-gp des nématodes par rapport aux P-gp de vertébrés.

La présente invention découle donc de la découverte surprenante réalisée par les inventeurs, que certains flavonoïdes inhibiteurs de P-gp des vertébrés ne possèdent pas la même efficacité inhibitrice vis-à-vis des P-gp de parasites. La présente invention offre de ce fait de nouveaux traitements antiparasitaires à base de flavones, ciblant plus spécifiquement les P-gp de parasites, contrairement à ceux à base de quercétine décrits par Dupuy et al., et par Bartley et al. précédemment cités. Un objectif de la présente invention est donc de fournir de nouveaux traitements préventifs et curatifs antiparasitaires, lesdits traitements ayant une innocuité importante pour l'hôte à soigner et pour son environnement, présentant de plus une efficacité importante contre les nématodes sensibles et/ou les nématodes résistants, y compris avec une dose d'antiparasitaire inférieure à la normale. Cette invention présente par conséquent trois avantages considérables. Elle permet tout d'abord d'augmenter la biodisponibilité des antiparasitaires chez les parasites, et de réduire ainsi la quantité à utiliser et à administrer à l'hôte du fait d'une efficacité accrue vis-à-vis des parasites. Elle concerne ensuite des inhibiteurs plus spécifiques des P-gp de parasites, ayant pour certains une efficacité au moins aussi importante que la quercétine, et sans les inconvénients de cette molécule pour le vertébré traité (l'inconvénient étant l'inhibition de son propre système de détoxification par P-gp). Enfin, elle offre de nouvelles compositions antiparasitaires efficaces contre les parasites sensibles et/ou résistants, en abaissant le niveau de résistance de ces derniers.

La présente invention concerne tout d'abord une composition à usage pharmaceutique ou vétérinaire comprenant au moins un composé anthelminthique et au moins un composé d'une des familles de flavonoïdes, les flavones de formule (I) suivante : R5 O R3 dans laquelle R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7 et R8 représentent indépendamment les uns des autres un atome ou un groupement choisi dans le groupe constitué d'un atome d'hydrogène, d'un groupement OH, d'un groupement précurseur d'hydroxy et d'un sucre lié à l'un des noyaux aromatiques de la flavone de formule (I) par son carbone anomérique via une liaison glycosidique, ladite flavone de formule (I) étant sous forme libre ou sous forme de sel pharmaceutiquement acceptable, et présente dans une quantité permettant d'augmenter la biodisponibilité de l'au moins un composé anthelminthique par inhibition de la glycoprotéine P chez les nématodes, sous réserve que, la flavone de formule (I) ne soit pas la quercétine. Par « composé anthelminthique » (ou composé antihelminthique), on entend un composé antiparasitaire permettant de tuer (action vermicide) au moins un type de vers appartenant à l'embranchement des Métazoaires Helminthes ou permettant de provoquer son expulsion (action vermifuge) hors de l'hôte. L'activité anthelminthique d'un composé peut par exemple être mesurée par un test d'éclosion des oeufs des parasites (EHT, «Egg Hatch Test ») pour les composés appartenant à la famille des benzimidazoles, ou par un test de développement larvaire (LDT, « Larval Development Test ») pour les lactones macrocycliques, et par tout autre type de test équivalent.

Par « sucre », on entend aussi bien des holosides, que des diholosides et des triholosides ; on peut citer à titre d'exemples non limitatifs l'apioglucose, le galactose, le glucose, le glucopyranose, l'acide glucuronique, le laminaribiose, le néohespéridose, le primeverose, le rhamnose, le robinose, le rutinose et le sambubiose. 5 Par « liaison glycosidique », on entend une liaison 0-glycosidique ou C-glycosidique, de préférence 0-glycosidique. Par « glycoprotéine P » (P-gp), on entend la glycoprotéine connue de l'homme du métier pour son implication dans la multirésistance aux médicaments. Il s'agit d'un récepteur transmembranaire de la membrane plasmique, existant sous différentes formes chez de nombreux eucaryotes, et capable d'expulser certains xénobiotiques présents dans le cytoplasme vers le milieu extracellulaire grâce à l'énergie fournie par la consommation d'ATP. Par « inhibition de la glycoprotéine P », on entend un abaissement de l'activité antixénobiotique de la P-gp. Cet abaissement se traduit par une diminution de la DL50 (dose létale tuant 50% de la population) pour un xénobiotique (notamment un anthelminthique) et un organisme considéré. Cet abaissement de la DL50 peut être visualisé par un test de développement larvaire (LDT, Larval Development test) et ce quel que soit le composé utilisé.

L'inhibition peut aussi être démontrée par une mesure in vitro de l'activité d'efflux de la pompe (« Rhodamine 123 assay »). Par « nématode », on entend tout type de vers rond appartenant au phylum des Métazoaires Helminthes. Des exemples de genres de nématodes majeurs en biologie et en pathologie parasitaire sont donnés ci-dessous.

Dans la classe des Secernentasida : - Ordre des Rhabditorida : Famille des Rhabditidae, le nématode libre modèle biologique Caenorhabditis ; - Ordre des Strongylorida : Famille des Strongyloididae : Strongyloides ; Famille des Ancylostomatidae Ancylostoma, Bunostomum, Necator, Uncinaria ; Famille des Strongylidae : Strongylus, Chabertia, Oesophagostomum ; Famille des Syngamidae : Syngamus ; Famille des Tricostrongylidae : Cooperia, Haemonchus, Hyostrongylus, Ostertagia, Teladorsagia, 30 Trichostrongylus, Graphidium, Nematodirus, Heligmosomoides, Nippostrongylus, Ornithostrongylus, Amidostomum ; Famille des Metastrongylidae : Dictyocaulus, Metastrongylus, Angiostrongylus, Cystocaulus, Muellerius, Protostrongylus ; - Ordre des Ascaridorida : Famille des Heterakidae : Heterakis ; Famille des Ascarididae : Ascaris, Parascaris, Toxocara; Famille des Oxyuridae : Aspiculuris, Enterobius, Oxyuris, Syphacia ; - Ordre des Spirurorida : Famille des Filariidae : Filaria ; Famille des Onchocercidae : Brugia, Litomosoides, Wuchereria, Dirofilaria, Loa, Onchocerca ; Famille des Stephanofilaridae : Setaria ; Dans la classe des Adenophorasida : - Ordre des Dorilaimorida : Famille des Trichuridae Trichuris, Capillaria ; Famille des Trichinellidae Trichinella ; Des exemples de flavones représentées par la formule générale (I) sont : l'acacétine, l'apigénine, la chrysine, le chrysoériol, la diosmétine, l'eupatiline, la galangine, la lutéoline, l'oroxyline A, la scutellaréine, la tricine, la wogonine, et notamment la baicaléine, la fisétine, le kaempférol, la myricétine, ainsi que la silybine. Par « groupement précurseur d'hydroxy », on entend tout groupe qui peut être métabolisé in vivo pour donner un groupement OH, par exemple un groupe ester, un groupe éther, un groupe alcoxy, notamment méthoxy (comme dans la formule du géraldol), un groupe sulfonate, une cétone ou un aldéhyde.

Dans un mode de réalisation avantageux, seul le groupement R7 de la formule générale (I) est un sucre tel que défini précédemment.

Dans un mode de réalisation avantageux, ladite composition à usage 5 pharmaceutique ou vétérinaire est une composition dans laquelle la au moins une flavone de formule (I) répond à la formule (II) suivante : R5 O R6 R7 R1 R2 R3 dans laquelle R1, R2, R3, R4, R5, R6 et R7 sont tels que définis précédemment.

10 Dans un mode de réalisation avantageux de l'invention, ladite composition à usage pharmaceutique ou vétérinaire est une composition dans laquelle la au moins une flavone de formule (I) est un flavonol répondant à la formule (III) suivante : R5 O R7 R1 R2 R3 dans laquelle R1, R2, R3, R5 et R7 sont tels que définis précédemment, 15 ledit flavonol de formule (III) étant choisi notamment dans le groupe comprenant la fisétine et la myricétine. Par « fisétine », on entend la flavone de formule (III) dans laquelle R1, R2 et R7 représentent un groupement OH et R3 et R5 représentent un atome d'hydrogène.

Par « myricétine », on entend la flavone de formule (III) dans laquelle R1, R2, R3, R5 et R7 représentent un groupement OH.

Dans un autre mode de réalisation encore plus avantageux, la présente 5 invention concerne une composition à usage pharmaceutique ou vétérinaire, dans laquelle le au moins un anthelminthique est choisi dans le groupe comprenant : le lévamisole ; les lactones macrocycliques choisies dans le groupe comprenant les avermectines telles que l'ivermectine (IVM), l'éprinomectine (EPR), l'abamectine (ABA), la doramectine (DOR), ou dans le groupe comprenant les milbémycines telle que la moxidectine (MOX) ; les dérivés du benzimidazole choisis parmi l'albendazole (ABZ), le thiabenzole (TBZ), le mébendazole, le fenbendazole, l'oxfendazole, le fébantel, et l'oxibendazole.

Un autre objet de la présente invention est une composition à usage pharmaceutique ou vétérinaire selon l'une quelconque des définitions précédentes, pour son utilisation dans le traitement ou la prévention d'une 20 parasitose chez un vertébré. Par « parasitose », on entend notamment une helminthiase.

Dans un mode de réalisation avantageux de l'invention, la parasitose est une nématodose. 25 Par «nématodose », on entend une parasitose due à un nématode, en particulier une trichostrongylose, par exemple une haemonchose. Par « haemonchose », on entend une parasitose par le nématode Haemonchus contortus, modèle d'étude pour les trichostrongyloses.

30 Dans un mode de réalisation particulièrement avantageux de l'invention, la parasitose implique au moins un parasite dit résistant. 10 15 Par « parasite », on entend un animal ou un végétal eucaryote qui vit une partie au moins de son existence aux dépends d'un autre organisme. Par «résistant », on entend un parasite chimio-résistant. Cette chimiorésistance « est présente quand la fréquence des parasites capables de tolérer des doses de composés antiparasitaires usuels est plus importante au sein d'une population que dans une population normale de parasites de la même espèce. Elle est de plus transmissible à la descendance. » (PRICHARD R.K. et al. The problem of anthelmintic resistance in nematodes. Australian Veterinary Journal. (1980), 56: 239-51). Les différents types de résistances sont : la résistance simple (résistance à une seule molécule), la résistance de famille (résistance à deux composés au moins d'une même famille d'antiparasitaires), la résistance multiple (résistance à aux moins deux composés appartenant à des familles d' antiparasitaires différentes) et la résistance croisée (résistance à plusieurs antiparasitaires conférée par une ou plusieurs mutations survenue(s) sur un gène). Chaque résistance peut de plus être primaire (apparue avant le début du traitement antiparasitaire) ou secondaire (apparue au cours dudit traitement). Le terme « résistant » employé dans le cadre de la présente invention fait référence à une résistance simple au moins mais l'invention s'applique aux cas de résistance croisée, de famille ou multiple, qu'ils soient de type primaire ou secondaire. D'autre part, cette résistance peut être induite par de nombreux facteurs. Par exemple, il a été montré que des souches résistantes de H. contortus possèdent un nombre de pompes d'efflux P-gp supérieur à la normale, éliminant par conséquent plus facilement les doses d'antiparasitaires (KERBOEUF, D. P-glycoprotein in helminths: function and perspectives for anthelmintic treatment and reversal of resistance. Int J Antimicrob Agents. (2003), 22(3): 332-46).

Dans un autre mode de réalisation avantageux de l'invention, le vertébré est choisi dans le groupe comprenant les bovinés, les caprinés (ovins et caprins), les équidés, les oiseaux et l'humain.

Le dosage de l'anthelminthique et des flavones de formule (I) dépend particulièrement du mode d'administration, et est aisément déterminé par l'homme de métier. De même, le choix d'un véhicule pharmaceutique ou vétérinaire acceptable est déterminé par l'homme du métier. Les composés de formule (I) peuvent en outre être administrés sous une forme encapsulée, en particulier nanoencapsulée, dans des liposomes pégylés, ou sous formes à libération prolongée ou à relarguage séquentiel ou sous formes incluant des agents solubilisants (par exemple des cyclodextrines tel que décrit dans WO2009/018326) de manière à augmenter leur biodisponibilité.

Le traitement peut être continu ou séquentiel, délivrant lesdits composés, compositions pharmaceutiques ou vétérinaires de manière continue et éventuellement constante, ou sous forme discontinue, par une ou plusieurs administrations quotidiennes, éventuellement renouvelées plusieurs jours, soit consécutifs, soit avec une latence sans traitement entre les administrations.

Les composés, ainsi que les compositions pharmaceutiques ou vétérinaires de l'invention peuvent notamment être administrés par voie systémique (générale) entérale ou parentérale, et par voie topique. Par « voie entérale », on entend notamment la voie orale ou per os, la voie perlinguale ainsi que la voie rectale.

Par « voie parentérale », on entend notamment la voie sous-cutanée, la voie intramusculaire et la voie intraveineuse. Par « voie topique », on entend notamment la voie nasale, la voie pulmonaire, la voie cutanée ou percutanée ou trans-dermique. A titre d'exemple, on peut citer une composition dans laquelle le au moins un anthelminthique est présent dans une quantité unitaire : - de 5 à 10 mg/kg de poids vif du vertébré à traiter pour le lévamisole, ou - de 5 à 600 µg/kg de poids vif du vertébré à traiter pour les lactones macrocycliques, ou - de 5 à 300 mg/kg de poids vif du vertébré à traiter pour les dérivés du benzimidazo le, et la au moins une flavone de formule est présente dans une quantité unitaire de 2,5 à 50 mg/kg de poids vif du vertébré à traiter, de préférence de 2,5 à 40 mg/kg de poids vif du vertébré à traiter et encore plus préférablement de 2,5 à 30 mg/kg de poids vif du vertébré à traiter. Ainsi un autre objet de la présente invention est une composition à usage pharmaceutique ou vétérinaire comprenant au moins un composé anthelminthique et au moins une flavone de formule (I) suivante : R5 O R3 dans laquelle R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7 et R8 représentent indépendamment 10 les uns des autres un atome ou un groupement choisi dans le groupe constitué d'un atome d'hydrogène, d'un groupement OH, d'un groupement précurseur d'hydroxy, et d'un sucre lié à l'un des noyaux aromatiques de la flavone de formule (I) par son carbone anomérique via une liaison glycosidique, ladite flavone de formule (I) étant sous forme libre ou sous forme de sel 15 pharmaceutiquement acceptable, et permettant d'augmenter la biodisponibilité du composé anthelminthique par inhibition de la glycoprotéine P chez les nématodes, à condition que, la flavone de formule (I) ne soit pas la quercétine, pour une administration simultanée, séquentielle ou étalée dans le temps. 20 Encore un autre objet de la présente invention est une composition comprenant au moins un agent anthelminthique et au moins une flavone de formule (I) suivante :5 R5 O R3 dans laquelle R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7 et R8 représentent indépendamment les uns des autres un atome ou un groupement choisi dans le groupe constitué d'un atome d'hydrogène, d'un groupement OH, d'un groupement précurseur d'hydroxy et d'un sucre lié à l'un des noyaux aromatiques de la flavone de formule (I) par son carbone anomérique via une liaison glycosidique, ladite flavone de formule (I) étant sous forme libre ou sous forme de sel pharmaceutiquement acceptable, à condition que, la flavone de formule (I) ne soit pas la quercétine, pour abaisser la résistance des nématodes à l'au moins un dit agent anthelminthique.

Dans un mode de réalisation particulier de l'invention, la composition à usage pharmaceutique ou vétérinaire selon l'une quelconque des définitions précédentes, est formulée pour une administration orale, parentérale ou topique.

Encore un autre objet de la présente invention est une combinaison pour augmenter la biodisponibilité d'au moins un composé anthelminthique qui comprend le au moins un dit composé anthelminthique et une quantité suffisante d'au moins une flavone de formule (I) suivante : 13 R5 O R3 dans laquelle R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7 et R8 représentent indépendamment les uns des autres un atome ou un groupement choisi dans le groupe constitué d'un atome d'hydrogène, d'un groupement OH, d'un groupement précurseur d'hydroxy et d'un sucre lié à l'un des noyaux aromatiques de la flavone de formule (I) par son carbone anomérique via une liaison glycosidique, ladite flavone de formule (I) étant sous forme libre ou sous forme de sel pharmaceutiquement acceptable, à condition que, la flavone de formule (I) ne soit pas la quercétine, sous une forme utilisable pour une co-administration.

Encore un autre objet de la présente invention est l'utilisation d'au moins une flavone de formule (I) suivante : R5 O R3 dans laquelle R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7 et R8 représentent indépendamment les uns des autres un atome ou un groupement choisi dans le groupe constitué d'un atome d'hydrogène, d'un groupement OH, d'un groupement précurseur d'hydroxy et d'un sucre lié à l'un des noyaux aromatiques de la flavone de formule (I) par son carbone anomérique via une liaison glycosidique, ladite flavone de formule (I) étant sous forme libre ou sous forme de sel pharmaceutiquement acceptable, 14 à condition que, la flavone de formule (I) ne soit pas la quercétine, pour la préparation d'un médicament apte à inhiber la glycoprotéine P chez les nématodes et à traiter les parasitoses.

Enfin, un autre objet de la présente invention est l'utilisation d'au moins une flavone de formule (I) suivante : R5 O R3 dans laquelle R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7 et R8 représentent indépendamment les uns des autres un atome ou un groupement choisi dans le groupe constitué d'un atome d'hydrogène, d'un groupement OH, d'un groupement précurseur d'hydroxy et d'un sucre lié à l'un des noyaux aromatiques de la flavone de formule (I) par son carbone anomérique via une liaison glycosidique, ladite flavone de formule (I) étant sous forme libre ou sous forme de sel pharmaceutiquement acceptable, à condition que, la flavone de formule (I) ne soit pas la quercétine, pour la préparation d'un médicament apte à augmenter la biodisponibilité des anthelminthiques chez les nématodes.

Les exemples 1 à 3 et les Figures 1 à 7 qui suivent illustrent l'invention.

Les Figures la et lb sont des histogrammes représentant les résultats obtenus pour des tests d'accumulation de Rhodamine 123 selon le protocole donné dans l'exemple 1. Ils concernent 14 flavonoïdes et 3 autres composés assimilés (la naphtoflavone, la silybine et la xanthone) testés à des concentrations différentes (20, 50, 100, et 200 µM). Ces Figures ont pour ordonnées le pourcentage d'accumulation de rhodamine 123 par rapport au témoin sans modulateur dans les oeufs du nématode modèle Haemonchus contortus sensible (HcS-Weyb - rectangles pleins) ou résistant (HcR-Guad - rectangles hachurés). L'abscisse donne le nom et la concentration des composés testés qui ont été ajoutés individuellement aux milieux contenant lesdits oeufs : 1 : Témoin ; 2 : Vanadate 500 µM ; 3 : Kaempférol 20 µM ; 4 : Kaempférol 50 µM ; 5 : Kaempférol 100 µM ; 6 : Kaempférol 200 µM ; 7 : Fisétine 20 µM ; 8 : Fisétine 50 µM ; 9 : Fisétine 100 µM ; 10 : Fisétine 200 µM ; 11 : Apigénine 20 µM ; 12 : Apigénine 50 µM ; 13 : Apigénine 100 µM ; 14 : Apigénine 200 µM ; 15 : Génistéine 20 µM ; 16 : Génistéine 50 µM ; 17 : Génistéine 100 µM ; 18 : Génistéine 200 µM ; 19 : Baicaléine 20 µM ; 20 : Baicaléine 50 µM ; 21 : Baicaléine 100 µM ; 22 : Baicaléine 200 µM ; 23 : Biochanine A 20 µM ; 24 : Biochanine A 50 µM ; 25 : Biochanine A 100 µM ; 26 : Biochanine A 200 µM ; 27 : Chrysine 20 µM ; 28 : Chrysine 50 µM ; 29 : Chrysine 100 µM ; 30 : Chrysine 200 µM ; 31 : Flavanone 20 µM ; 32 : Flavanone 50 µM ; 33 : Flavanone 100 µM ; 34 : Flavanone 200 µM ; 35 : Flavone 20 µM ; 36 : Flavone 50 µM ; 37 : Flavone 100 µM ; 38 : Flavone 200 µM ; 39 : Formononétine 20 µM ; 40 : Formononétine 50 µM ; 41 : Formononétine 100 µM ; 42 : Formononétine 200 µM ; 43 : Galangine 20 µM ; 44 : Galangine 50 µM ; 45 : Galangine 100 µM ; 46 : Galangine 200 µM ; 47 : Myricétine 20 µM ; 48 : Myricétine 50 µM ; 49 : Myricétine 100 µM ; 50 : Myricétine 200 µM ; 51 : Naphtoflavone 20 µM ; 52 : Naphtoflavone 50 µM ; 53 : Naphtoflavone 100 µM ; 54 : Naphtoflavone 200 µM ; 55 : Naringénine 20 µM ; 56 : Naringénine 50 µM ; 57 : Naringénine 100 µM ; 58 : Naringénine 200 µM ; 59 : Quercétine 20 µM ; 60 : Quercétine 50 µM ; 61 : Quercétine 100 µM ; 62 : Quercétine 200 µM ; 63 : Silybine 20 µM ; 64 : Silybine 50 µM ; 65 : Silybine 100 µM ; 66 : Silybine 200 µM ; 67 : Xanthone 20 µM ; 68 : Xanthone 50 µM ; 69 : Xanthone 100 µM ; 70 : Xanthone 200 µM. La quantité de R123 s'accumulant dans les oeufs en présence d'un puissant inhibiteur d'ATPase, l'orthovanadate de sodium, correspond environ à la valeur 500 %. L'absence de résultats correspond à des concentrations de produits présentant des problèmes de solubilité.

Les Figures 2a et 2b reprennent les résultats donnés dans la Figure 1 sous forme de courbes. Les abscisses des Figures 2a et 2b indiquent la concentration (en µM) de chaque inhibiteur potentiel. Leurs ordonnées sont identiques à celles des Figures la et lb. Figure la : H. contortus sensibles ; Figure lb : H. contortus résistants.

Les Figures 3a, 3b et 3c représentent les trois meilleurs résultats obtenus pour les tests de développement larvaires (LDT). Chaque figure a pour ordonnée le pourcentage de larves qui se développent en fonction de la quantité d'anthelminthique utilisée, et donnée en abscisse. Les anthelminthiques utilisés sont l'éprinomectine pour la Figure 3a et 3b et la doramectine pour la Figure 3c. Chaque courbe représente une combinaison différente d'un anthelminthique et d'un inhibiteur. La combinaison anthelminthique et de son solvant le DMSO 1% est utilisée comme témoin négatif (absence d'inhibiteur des P-gp).

La Figure 4 représente d'autres résultats obtenus pour les tests de développement larvaires (LDT). Les deux histogrammes (celui de gauche pour les nématodes sensibles et celui de droite pour les résistants) ont pour ordonnées le pourcentage de réduction supplémentaire de parasites par rapport à l' anthelminthique seul pour les différentes combinaisons d' anthelminthique (doramectine ou éprinomectine) et d'inhibiteur (fisétine ou myricétine). Les abscisses des histogrammes indiquent le type d' anthelminthique utilisé.

La Figure 5 illustre des résultats de réduction supplémentaire (%) liée à l'adjonction d'inhibiteur de P-gp à l'anthelminthique pour le nombre de vers et le nombre d' oeufs (OPG, oeufs par gramme de fèces) du nématode H. contortus résistant obtenus pour un essai in vivo chez l'agneau. L'anthelminthique et l'inhibiteur retenus pour cet essai sont parmi ceux qui ont donné les meilleurs résultats lors des tests in vitro, soit la doramectine et la fisétine (respectivement). L'éprinomectine ne bénéficiant pas actuellement d'AMM pour les ovins en France n'a pas été retenue pour cet essai. En ordonnée : le pourcentage de réduction supplémentaire de la charge parasitaire et du nombre d'oeufs ; en abscisse : les résultats OPG (gauche), et les résultats de la charge parasitaire (droite).

Les Figures 6a, 6b, 6c donnent des résultats obtenus pour un nouvel essai in vivo chez l'agneau de réduction de la charge parasitaire et du nombre d'oeufs fécaux de H. contortus résistants. La figure 6a représente les résultats obtenus pour le test OPG. Elle a pour ordonnée le pourcentage de réduction du nombre d'oeufs fécaux. La figure 6b a pour ordonnée la charge parasitaire exprimée en nombre de vers 14 jours après le traitement, et la Figure 6c le pourcentage de réduction de la charge parasitaire (établi à partir des données de la Figure 6b). L'abscisse de ces trois figures représente la quantité d'anthelminthique administrée (exprimée en µg/kg de poids vif du vertébré traité).

Exemple 1: résultats obtenus pour des essais d'accumulation de Rhodamine 123 (« R123 assay ») avec quantification au spectrofluorimètre

Matériels Animal infesté par Haemonchus contortus résistant souche « Guadeloupe » (HcR-Guad) ; Préparation des solutions : solution de Rhodamine 123 (Sigma-Aldrich® - R8004 - conservée depuis sa mise en solution, le 19/10/06, en azote liquide - [R123] = 1000 µg/ml - MW = 380,8 g/mol) : ^ solution fille à 1,5 µM (0,57 µg/mL) : 114 pl de R123 à 1000 µg/mL q.s.p. 200 mL d'E.D. (eau distillée) ; solution d' orthovanadate de sodium (vanadate) : ^ vanadate : Sigma-Aldrich® - 56508 - MW = 183,91 g/mol ; ^ solution de Vanadate à 50 mM : 18,4 mg de Vanadate en poudre q.s.p. 2 mL d'E.D. ; solutions de fisétine : 25 5 10 15 20 30 ^ fisétine : Sigma-Aldrich® - F4043 - MW = 286,24 g/mol ; ^ solution de fisétine - 20 mM : 1,43 mg de fisétine en poudre q.s.p. 250 pl de DMSO ; ^ solution de fisétine - 5 mM : 50 µl de fisétine à 20 mM q.s.p. 200 µl de DMSO ; solutions de quercétine : ^ quercétine : Sigma-Aldrich® - Q0125 - MW = 338,26 g/mol ; ^ solution de quercétine - 20 mM : 1,69 mg de quercétine en poudre q.s.p. 250 pl de DMSO ; ^ solution de quercétine - 5 mM : 50 pl de quercétine à 20 mM q.s.p. 200 pl de DMSO. Protocole : Accumulation de la Rhodamine 123 en présence ou non de modulateurs Accumulation R123 : dans un tube en verre de 5 mL, introduction de 15 000 oeufs d'HcR-Guad. Après centrifugation et retrait du surnageant, ajout de 2 mL d'une solution de R123 à 1,5 µM, et incubation à +20°C pendant 5 min, à l'abri de la lumière ; Accumulation de R123 + modulateur (inhibiteur) : ajout du modulateur ou d'un volume égal de DMSO (détails dans le Tableau 1 ci-dessous), et incubation à +20°C pendant 10 min, à l'abri de la lumière ; Rinçages : après centrifugation et retrait du surnageant, ajout de 5 mL d'eau distillée glacée ; Lecture au spectrofluorimètre QuantaMasterTM, Photon Technology International (PTI), USA. ^ après remise en suspension du culot d'oeufs dans 1 mL d'ED à température du laboratoire (température ambiante), incubation à température du laboratoire, et à l'abri de la lumière pendant 60 min, puis transfert de 900 µl dans une micro cuve et lecture au spectrofluoromètre ; ^ réglages fentes : F l = l t. ; F2 = l t. ; F4 = H. et F3 = 1t ; ^ excitation = 495 nm ; ^ émission = 525 nm. Tableau 1 - Exemples de préparation des solutions pour le test à la R123 Modulateur Nom du modulateur Volume R123 Volume Concentration Témoin 2000 µl 20 µl DMSO Vanadate 500 µM 2000 µl 20 µl 50 mM 20 µM 2000 µl 8µl 5 mM 50 µM 2000 µl 20 µl 5 mM Fisétine 100 µM 2000 µl l0 µl 20 mM 200 µM 2000 µl 20 µl 20 mM 20 µM 2000 µl 8µl 5 mM 50 µM 2000 µl 20 µl 5 mM Quercétine 100 µM 2000 µl l0 µl 20 mM 200 µM 2000 µl 20 µl 20 mM Les inhibiteurs potentiels ont été testés sur des oeufs de H. contortus susceptibles et résistants, et leur effet comparé à celui de l'orthovanadate de sodium (SOV, Sodium Orthovanadate) qui s'est révélé être très efficace tant contre les nématodes sensibles que contre les nématodes résistants (Figure 1).

Ce composé permet d'accroître la quantité de R123 accumulée chez les nématodes de 5 fois (ordonnée de 500%) celle constatée en l'absence d'inhibiteur (ordonnée de 100%). Sur l'ensemble des inhibiteurs potentiels donnés en abscisse, 7 présentent un effet modulateur notable (ordonnée différente de 100%, Tableau 2). La fisétine présente un effet inhibiteur très fort proche de celui de l'orthovanadate de sodium contre les nématodes sensibles et résistants. 21 Tableau 2 - Accumulation de R123 (% par rapport au témoin) Kaempférol Fisétine Apigénine Baicaléine Myricétine Quercétine Silybine Concentrations a) a, a) a, 1) a, en flavonoïdes N N N N N N N o cd o cd o cd o cd o cd o cd o cd 0 µM 100 6 100 6 100 6 100 6 100 6 100 6 100 6 20 µM 136 2 148 4 81 8 131 8 168 4 191 8 103 6 50 µM 132 9 204 10 105 4 154 3 210 6 249 2 115 9 100 µM 152 0 338 35 177 7 283 12 165 10 200 µM 188 34 272 16 149 10 276 7 175 25 0 µM 100 6 100 6 100 6 100 6 100 6 100 6 100 6 20 µM 166 9 217 5 108 10 159 13 164 12 210 9 109 1 L 50 µM 181 13 327 22 163 14 198 2 210 9 281 7 114 4 100 µM 242 8 431 28 215 11 200 17 141 5 200 µM 258 34 376 12 124 23 138 16 Ces résultats (Figures 2a et 2b et Tableau 2) témoignent par conséquent de l'existence d'une différence structurale entre les P-gp de nématodes et de vertébrés. Ces résultats démontrent encore que la fisétine permet d'inhiber les pompes P-gp des nématodes résistants avec plus d'efficacité que la quercétine lorsque celles-ci sont utilisées individuellement à 50 µM. Ces résultats permettent d'envisager des compositions comprenant un inhibiteur de P-gp des nématodes qui n'est pas la quercétine, mais qui possède une efficacité au moins équivalente, c'est-à-dire, des compositions antiparasitaires incluant un inhibiteur des P-gp des nématodes mais qui soit peu spécifique des P-gp du vertébré à traiter.

Exemple 2 : tests de développement larvaires (LDT) chez les nématodes

Les résultats obtenus pour ces tests sont donnés dans les Figures 3a, 3b, 3c et 4. L'utilisation de la DL50 comme indicateur de l'efficacité d'une combinaison inhibiteur/anthelminthique donnée ne rend pas compte de l'effet maximum éventuellement obtenu avec des doses plus élevées d' anthelminthique. Chez les parasites résistants (Figure 4), les combinaisons fisétine/éprinomectine et myricétine/éprinomectine donnent les meilleurs résultats ; la combinaison fisétine/doramectine a un effet comparable à celui observé pour les parasites sensibles.

Exemple 3 : essais in vivo chez l'anneau infesté par des H. contortus résistants

ter essai : traitement à la doramectine complémenté par des injections sous-cutanées de fisétine Protocole L'expérimentation a été menée sur des agneaux de 3 mois infestés avec 6000 larves du nématode Haemonchus contortus, isolat résistant aux anthelminthiques au jour 0 (JO). Un traitement à J33 à l'aide de doramectine solution injectable à doses faibles (de 10 à 30 µg/kg selon le lot d'animaux) par rapport à la dose recommandée par le fabriquant (de 200 µg/kg pour des parasites sensibles). Il n'y a par ailleurs aucune recommandation du fabriquant pour les parasites résistants mais, en élevage, les doses sont supérieures à 400 µg/kg, parfois 600 µg/kg. Un animal sur deux est traité à l'aide de fisétine administrée pendant 5 jours (J33 à J37) en injection sous-cutanée et en complément. Trois doses ont été testées : 2,5, 5 ou 10 mg/kg. Le contrôle de l'infestation se fait par examens coproscopiques (numération des oeufs émis par les vers dans les fèces) à J54 et par numération du nombre de vers adultes dans la caillette à J56. Résultats Réduction du nombre d'oeufs : aucune réduction avec la doramectine seule quelle que soit la dose ; réduction de 64 % avec la combinaison de doramectine 20 µg/kg et de fisétine à 30 mg/kg (1600 oeufs / g contre 4400 oeufs / g chez les témoins non traités, Figure 5).

Réduction du nombre de vers : - doramectine seule 20 µg/kg : réduction de 4 % ; - doramectine plus fisétine : combinaison la plus active doramectine 20 µg/kg et fisétine 30 mg/kg, avec une réduction de 35 % par rapport au témoin doramectine seule (Figure 5). Cet essai permet de confirmer qu'in vivo la combinaison anthelminthique plus inhibiteur a un effet, certes faible mais qui va dans le même sens que celui constaté par les deux tests in vitro (accumulation de rhodamine 123 et test « LDT » de développement des larves). Deux hypothèses peuvent expliquer la faible efficacité : - la dose de doramectine est insuffisante pour des parasites résistants, - la fisétine administrée en injection sous-cutanée s'est mal résorbée (observation post-abattage). 2ème essai : traitement à la doramectine complémenté par des prises orales de fisétine Protocole L'expérimentation a été menée sur des agneaux de 3 mois infestés avec 6000 larves du nématode Haemonchus contortus, isolat résistant aux anthelminthiques au jour 0 (JO). Un traitement à J39 à l'aide de doramectine solution injectable à différentes doses incluant la dose recommandée par le fabricant (200 µg/kg de poids vif du vertébré traité), une dose inférieure (100 µg/kg de poids vif du vertébré traité), et une dose actuellement utilisée pour le traitement des agneaux infectés par des nématodes résistants (400 µg/kg de poids vif du vertébré traité) mais non recommandée par le fabriquant. Un animal sur deux est traité à l'aide de fisétine administrée pendant 5 jours (J39 à J43) par voie orale en complément à la dose de 30 mg/kg. Le contrôle de l'infestation se fait par examens coproscopiques (numération des oeufs émis par les vers dans les fèces) à J50 et par numération du nombre de vers adultes dans la caillette à J53. Résultats Réduction du nombre d'oeufs (Figure 6a) : réduction avec doramectine seule : 33 % à 200 µg/kg et 57 % à 400 µg/kg ; réduction avec la combinaison de doramectine et de fisétine : 71 % à 100 µg/kg, 73% à 200 µg/kg et 94% à 400 µg/kg.

Réduction du nombre de vers (Figures 6b et 6c) : - doramectine seule : réduction maximale 66% à la dose de 400 µg / kg ; - doramectine plus fisétine : 32% à 100 µg/kg, 50% à 200 µg/kg et 78% à 400 µg.

Ces résultats indiquent que la présence de fisétine permet d'atteindre une efficacité proche de 100% avec la doramectine à la plus forte dose (400 µg/kg de poids vif du vertébré traité). La charge parasitaire a pu être réduite de près de 40% grâce à la combinaison fisétine (administrée à 30 mg/kg de poids vif du vertébré traité en pré- et post-traitement à la doramectine) et doramectine (administrée à 400 µg/kg de poids vif du vertébré traité).

Cet essai permet de confirmer qu'in vivo la combinaison anthelminthique et inhibiteur de pompe d'efflux (la fisétine) a un effet très significatif à la fois sur l'excrétion d'oeufs et sur le nombre de vers d'un isolat de nématodes très résistant aux anthelminthiques.

Claims (15)

1. REVENDICATIONS1. Composition à usage pharmaceutique ou vétérinaire comprenant au moins un composé anthelminthique et au moins une flavone de formule (I) suivante : R5 O R3 dans laquelle R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7 et R8 représentent indépendamment les uns des autres un atome ou un groupement choisi dans le groupe constitué d'un atome d'hydrogène, d'un groupement OH, d'un groupement précurseur d'hydroxy et d'un sucre lié à l'un des noyaux aromatiques de la flavone de formule (I) par son carbone anomérique via une liaison glycosidique, ladite flavone de formule (I) étant sous forme libre ou sous forme de sel pharmaceutiquement acceptable, et présente dans une quantité permettant d'augmenter la biodisponibilité de l'au moins un composé anthelminthique par inhibition de la glycoprotéine P chez les nématodes, sous réserve que, la flavone de formule (I) ne soit pas la quercétine.
2. 2. Composition à usage pharmaceutique ou vétérinaire selon la revendication 1, dans laquelle la au moins une flavone de formule (I) répond à la formule (II) suivante : R5 O R2 R6 R7 R3dans laquelle R1, R2, R3, R4, R5, R6 et R7 représentent indépendamment les uns des autres un atome ou un groupement choisi dans le groupe constitué d'un atome d'hydrogène, d'un groupement OH, d'un groupement précurseur d'hydroxy et d'un sucre lié à l'un des noyaux aromatiques de la flavone de formule (II) par son carbone anomérique via une liaison glycosidique.
3. 3. Composition à usage pharmaceutique ou vétérinaire selon la revendication 2, dans laquelle la au moins une flavone de formule (I) est un flavonol répondant à la formule (III) suivante : R5 O R7 R1 R2 R3 dans laquelle R1, R2, R3, R5 et R7 représentent indépendamment les uns des autres un atome ou un groupement choisi dans le groupe constitué d'un atome d'hydrogène, d'un groupement OH, d'un groupement précurseur d'hydroxy et d'un sucre lié à l'un des noyaux aromatiques de la flavone de formule (III) par son carbone anomérique via une liaison glycosidique, ledit flavonol de formule (III) étant choisi notamment dans le groupe comprenant la fisétine et la myricétine.
4. 4. Composition à usage pharmaceutique ou vétérinaire selon l'une quelconque des revendications 1 à 3, dans laquelle le au moins un anthelminthique est choisi dans le groupe comprenant : - le lévamisole ; - les lactones macrocycliques choisies dans le groupe comprenant les avermectines telles que l'ivermectine, l'éprinomectine, l'abamectine, la doramectine, ou dans le groupe comprenant les milbémycines telle que la moxidectine ;- les dérivés du benzimidazole choisis parmi l'albendazole, le thiabenzole, le mébendazole, le fenbendazole, l'oxfendazole, le fébantel, et l'oxibendazole.
5. 5. Composition à usage pharmaceutique ou vétérinaire selon l'une quelconque des revendications 1 à 4, pour son utilisation dans le traitement ou la prévention d'une parasitose chez un vertébré.
6. 6. Composition à usage pharmaceutique ou vétérinaire selon la revendication 5, dans laquelle la parasitose est une nématodose, en particulier une haemonchose.
7. 7. Composition à usage pharmaceutique ou vétérinaire selon l'une quelconque des revendications 5 ou 6, dans laquelle la parasitose implique au moins un parasite dit résistant.
8. 8. Composition à usage pharmaceutique ou vétérinaire selon l'une quelconque des revendications 5 à 7, dans laquelle le vertébré est choisi dans le groupe comprenant les bovinés, les caprinés (ovins et caprins), les équidés, les oiseaux et l'humain.
9. 9. Composition à usage pharmaceutique ou vétérinaire selon l'une quelconque des revendications 5 à 8, dans laquelle le au moins un anthelminthique est présent dans une quantité unitaire : - de 5 à 10 mg/kg de poids vif du vertébré à traiter pour le lévamisole, ou - de 5 à 600 µg/kg de poids vif du vertébré à traiter pour les lactones macrocycliques, ou - de 5 à 300 mg/kg de poids vif du vertébré à traiter pour les dérivés du benzimidazo le, et la au moins une flavone de formule (I) est présente dans une quantité unitaire de 2,5 à 50 mg/kg de poids vif du vertébré à traiter.
10. 10. Composition à usage pharmaceutique ou vétérinaire comprenant au moins un composé anthelminthique et au moins une flavone de formule (I) suivante : R5 O R3 dans laquelle R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7 et R8 représentent indépendamment les uns des autres un atome ou un groupement choisi dans le groupe constitué d'un atome d'hydrogène, d'un groupement OH, d'un groupement précurseur d'hydroxy et d'un sucre lié à l'un des noyaux aromatiques de la flavone de formule (I) par son carbone anomérique via une liaison glycosidique, ladite flavone de formule (I) étant sous forme libre ou sous forme de sel pharmaceutiquement acceptable, et permettant d'augmenter la biodisponibilité du composé anthelminthique par inhibition de la glycoprotéine P chez les nématodes, à condition que, la flavone de formule (I) ne soit pas la quercétine, pour une administration simultanée, séquentielle ou étalée dans le temps.
11. 11. Composition comprenant au moins un agent anthelminthique et au moins une flavone de formule (I) suivante : R5 O R3 dans laquelle R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7 et R8 représentent indépendamment les uns des autres un atome ou un groupement choisi dans le groupe constituéd'un atome d'hydrogène, d'un groupement OH, d'un groupement précurseur d'hydroxy et d'un sucre lié à l'un des noyaux aromatiques de la flavone de formule (I) par son carbone anomérique via une liaison glycosidique, ladite flavone de formule (I) étant sous forme libre ou sous forme de sel pharmaceutiquement acceptable, à condition que, ladite flavone de formule (I) ne soit pas la quercétine, pour abaisser la résistance des nématodes à l'au moins un dit agent anthelminthique.
12. 12. Composition à usage pharmaceutique ou vétérinaire selon l'une quelconque des revendications 1 à 1l, formulée pour une administration orale, parentérale ou topique.
13. 13. Combinaison pour augmenter la biodisponibilité d'au moins un composé anthelminthique qui comprend le au moins un dit composé anthelminthique et une quantité suffisante d'au moins une flavone de formule (I) suivante : R5 O R3 dans laquelle R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7 et R8 représentent indépendamment les uns des autres un atome ou un groupement choisi dans le groupe constitué d'un atome d'hydrogène, d'un groupement OH, d'un groupement précurseur d'hydroxy et d'un sucre lié à l'un des noyaux aromatiques de la flavone de formule (I) par son carbone anomérique via une liaison glycosidique, ladite flavone de formule (I) étant sous forme libre ou sous forme de sel pharmaceutiquement acceptable, à condition que, la flavone de formule (I) ne soit pas la quercétine,31 sous une forme utilisable pour une co-administration.
14. 14. Utilisation d'au moins une flavone de formule (I) suivante : R5 O R3 dans laquelle R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7 et R8 représentent indépendamment les uns des autres un atome ou un groupement choisi dans le groupe constitué d'un atome d'hydrogène, d'un groupement OH, d'un groupement précurseur d'hydroxy et d'un sucre lié à l'un des noyaux aromatiques de la flavone de formule (I) par son carbone anomérique via une liaison glycosidique, ladite flavone de formule (I) étant sous forme libre ou sous forme de sel pharmaceutiquement acceptable, à condition que, la flavone de formule (I) ne soit pas la quercétine, pour la préparation d'un médicament apte à inhiber la glycoprotéine P chez les nématodes et à traiter les parasitoses.
15. 15. Utilisation d'au moins un composé de formule (I) suivante : R5 O R3 dans laquelle R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7 et R8 représentent indépendamment les uns des autres un atome ou un groupement choisi dans le groupe constitué d'un atome d'hydrogène, d'un groupement OH, d'un groupement précurseurd'hydroxy et d'un sucre lié à l'un des noyaux aromatiques de la flavone de formule (I) par son carbone anomérique via une liaison glycosidique, ladite flavone de formule (I) étant sous forme libre ou sous forme de sel pharmaceutiquement acceptable, à condition que, la flavone de formule (I) ne soit pas la quercétine, pour la préparation d'un médicament apte à augmenter la biodisponibilité des anthelminthiques chez les nématodes.