- 1 - La présente invention concerne le domaine des maladies cardio-vasculaires et plus spécifiquement l'athérosclérose. En particulier, la présente invention a pour objet de proposer de nouveaux composés dérivés du D,D- murarr.yldipeptide (N-acetylmuramyl-D-alanyl-D-isoglutamine) ainsi que des compositions permettant un traitement des plaques athéromateuses conduisant à l'athérosclérose et à d'autres maladies résultant du rétrécissement du diamètre de la lumière artérielle ou de l'occlusion d'artères (infarctus du myocarde, angine de poitrine, accident vasculaire céréoral, artériopathie des membres inférieurs, etc.,. Les taux élevés de cholestérol dans le sang chez les patients, et plus particulièrement du cholestérol de type LDL, c'est-à-dire constitué par des lipoprotéines de faib=_e densité, provoquent des accumulations de dépôts lipidiques au niveau des artères sous la forme d'athéromes qui conduisent à l'athérosclérose. Cette dernière entraîne un rétrécissement du diamètre de la lumière artérielle et s'accompagne donc d'un risque majeur de formation de caillots sanguins (thrombus) pouvant conduire à l'occlusion des artères concernées ou d'autres territoires vasculaires si le thrombus est transporté par la circulation sanguine. The present invention relates to the field of cardiovascular diseases and more specifically to atherosclerosis. In particular, the object of the present invention is to propose novel compounds derived from D, D-murarr.yldipeptide (N-acetylmuramyl-D-alanyl-D-isoglutamine) as well as compositions allowing a treatment of the atheromatous plaques leading to the atherosclerosis and other diseases resulting from narrowing of the arterial lumen diameter or occlusion of arteries (myocardial infarction, angina pectoris, stroke, lower extremity arteriopathy, etc.). cholesterol in the blood in patients, and more particularly LDL-type cholesterol, that is to say constituted by lipoproteins of low density, cause accumulations of lipid deposits in the arteries in the form of atheromas leading to atherosclerosis, which leads to a narrowing of the arterial lumen diameter and is therefore associated with a major risk of Blood clots (thrombi) that may lead to occlusion of the affected arteries or other vascular territories if the thrombus is transported through the bloodstream.
Dans la lutte contre l'hypercholestérolémie, l'utilisation des statines (ou inhibiteurs de la HMG-CoA réductase) est bien connue. Toutefois, si ces molécules ont démontré leur efficacité dans la diminution du taux de cholestérol dans le sang et dans la diminution du risque de la survenue ou de récidive de maladies résultant du rétrécissement ou de l'occlusion d'artères, en limitant la progression de la plaque athéromateuse, elles n'ont a priori pas d'effet démontré contre l'installation desdites plaques d'athérome. De surcroît, certaines statines se sont UBG001-FR-22 TEXTE DEPOSE JS/CD - 2 - avérées engendrer des effets secondaires suffisamment graves pour entraîner leur retrait du marché. En outre, cette classe de molécules constitue aujourd'hui la principale option de traitement de ce type de symptômes sans aucune autre alternative clairement disponible. La présente invention a donc pour but d'obvier aux inconvénients susmentionnés en proposant de nouvelles compositions pharmaceutiques susceptibles d'être utilisées dans le traitement de plaques athéromateuses, non seulement en inhibant le développement desdites plaques mais aussi en empêchant l'installation de celles-ci. Ces nouvelles compositions pharmaceutiques permettent de proposer des alternatives thérapeutiques à l'utilisation des statines ou de nouvelles combinaisons thérapeutiques avec ces mêmes molécules. La Demanderesse a ainsi déjà soumis dans la demande FR 08.00517 (non publiée) la possibilité d'utiliser le peptide inhibiteur de caspase-1 Acétyle-Tyrosine-Valyle- Alanyle-Aspartyle-Chlorométhylcétone (Ac-YVAD-CMK) pour inhiber le développement des plaques athéromateuses. Les travaux des inventeurs ont permis d'identifier d'autres composés ayant une action similaire. A cet égard, la présente invention a pour objet l'utilisation du D,D muramyldipeptide (N-acetylmuramyl-D-alanyl-D-isoglutamine) et des composés selon les formules I et II définies ci-après pour la préparation d'un médicament, et plus spécifiquement pour la préparation d'un médicament pour le traitement des plaques athéromateuses. In the fight against hypercholesterolemia, the use of statins (or HMG-CoA reductase inhibitors) is well known. However, if these molecules have been shown to be effective in lowering cholesterol levels in the blood and reducing the risk of the occurrence or recurrence of diseases resulting from narrowing or occlusion of arteries, by limiting the progression of the atheromatous plaque, they have a priori no demonstrated effect against the installation of said atheroma plaques. In addition, some statins have been shown to cause side effects serious enough to lead to their withdrawal from the market. In addition, this class of molecules is today the main treatment option for this type of symptoms without any other clearly available alternative. The present invention therefore aims to obviate the aforementioned drawbacks by proposing new pharmaceutical compositions that may be used in the treatment of atheromatous plaques, not only by inhibiting the development of said plaques but also by preventing their installation. . These new pharmaceutical compositions make it possible to propose therapeutic alternatives to the use of statins or new therapeutic combinations with these same molecules. The Applicant has already submitted in the application FR 08.00517 (unpublished) the possibility of using the caspase-1 inhibiting peptide Acetyl-Tyrosine-Valyl-Alanyl-Aspartyl-Chloromethylketone (Ac-YVAD-CMK) to inhibit the development of atheromatous plaques. The work of the inventors made it possible to identify other compounds having a similar action. In this regard, the present invention relates to the use of D, D muramyldipeptide (N-acetylmuramyl-D-alanyl-D-isoglutamine) and compounds according to formulas I and II defined below for the preparation of a drug, and more specifically for the preparation of a medicament for the treatment of atheromatous plaques.
L'invention a également pour objet une composition pharmaceutique comprenant le D,D muramyldipeptide (N-acetvlmuramyl-D-alanyl-D-isoglutamine) et/ou des composés selon les formules I et II et un vecteur ou un excipient pharmaceutiquement acceptables de ceux-ci. UBG001-FR-22 TEXTE DEPOSE JSiCD Les inventeurs ont en effet mis en évidence une activité du D,D muramyldipeptide à l'encontre du développement de plaques athéromateuses. L'invention a encore pour objet des composés dérivés 5 ou analogues du D,D muramyldipeptide répondant aux formules générales I ou II suivantes : NHY UBG001-FR 22 TEXTE DEPOSE JS/CD - 4 - dans lesquelles : - R1 et R2 sont chacun indépendamment pris parmi : un atome d'hydrogène, un groupe alkyle linéaire ou ramifié, éventuellement substitué, un groupe aryle, éventuellement substitué, un groupe hétérocyclique ou métallocénique insaturé , éventuellement substitué ; - W1, W2 et W3 sont chacun indépendamment choisi parm_: 0-R3, O-R4, O-R5, O-C (0) -R6, O-C (0) -R7, O--C(0)-R8, où R3, R4, R5, R6, R7 et R8 sont chacun indépendamment comme R1 défini précédemment ; - X est choisi parmi les groupes suivants : R1, comme défini précédemment, C(0)-R9 dans lequel R9 peut être un groupe alkyle linéaire ou ramifié, éventuellement substitué, un groupe aryle, éventuellement substitué, un groupe hétérocyclique ou métallocénique __nsaturé, éventuellement substitué ; - Y est choisi parmi les groupes suivants : R1, comme 20 défini précédemment, un groupement du type CH(R10)COOH (où R10 représente un atome d'hydrogène, un groupe alkyle UBG001-FR-22 TEXTE DEPOSE JS/CD O H3CIII" - II 2933984 - 5 - linéaire ou ramifié, éventuellement substitué, tel que CH3, (CH3)2CH, (CH3)2CHCH2, CH3CH2CH(CH3), CH2(OH), CH3CH(OH), CH2 (SH) , CH3SCH2CH2, CH2O00H, CH2CH2COOH, NH2COCH2r NH2COCH2CH2, NH2(CH2)3CH2r HNC(NH2)NH(CH2)2CH2r un groupe 5 aryle, éventuellement substitué, un groupe hétérocyclique insaturé ,éventuellement substitué, tel que Rio CH2 /ùr N~NH 10 - Z est choisi parmi les groupes suivants : un groupe ORll (où R11 est défini comme R1), un groupement du type NHCH(R11)C00H (où R11 est défini comme R10) ; à l'exception du D,D muramyldipeptide (N- acetylmuramyl-D-alanyl-D-isoglutamine), composé pour lequel 15 R1,R2,Y représentent un atome d'hydrogène, W1,W2,W3,Z sont un groupe hydroxyle et X est un groupe COCH3. La présente invention a donc pour objet des compositions pharmaceutiques comprenant à titre de substance active le D,D muramyldipeptide et/ou un des composés dérivés selon les formules I ou II en association avec un véhicule ou un excipient acceptables sur le plan pharmaceutique. Quelle que soit la voie d'administration choisie, les compositions selon l'invention se présentent sous une forme favorable à la protection et à l'assimilation optimale du principe actif. Les compositions selon l'invention peuvent être administrées selon différents modes et voies d'administration et sous différentes formes galéniques. The invention also relates to a pharmaceutical composition comprising D, D muramyldipeptide (N-acetylmuramyl-D-alanyl-D-isoglutamine) and / or compounds according to formulas I and II and a pharmaceutically acceptable vector or excipient of those -this. UBG001-EN-22 TEXTE REMOVAL JSiCD The inventors have in fact demonstrated an activity of the D, D muramyldipeptide against the development of atheromatous plaques. The invention also relates to derivatives or analogues of the D, D muramyldipeptide having the following general formulas I or II: NHY UBG001-FR 22 TEXTE REMOVAL JS / CD - 4 - in which: R1 and R2 are each independently selected from: a hydrogen atom, an optionally substituted linear or branched alkyl group, an optionally substituted aryl group, an optionally substituted unsaturated heterocyclic or metallocenic group; - W1, W2 and W3 are each independently selected from: o-R3, O-R4, O-R5, OC (O) -R6, OC (O) -R7, O-C (O) -R8, where R3 R4, R5, R6, R7 and R8 are each independently as R1 defined above; X is chosen from the following groups: R1, as defined above, C (O) -R9 in which R9 may be an optionally substituted linear or branched alkyl group, an optionally substituted aryl group, a heterocyclic or a metallocenic unsaturated group, optionally substituted; Y is selected from the following groups: R1, as defined above, a group of the type CH (R10) COOH (where R10 represents a hydrogen atom, an alkyl group UBG001-FR-22 TEXTE DEPOSE JS / CD O H3CIII Optionally substituted linear or branched, such as CH3, (CH3) 2CH, (CH3) 2CHCH2, CH3CH2CH (CH3), CH2 (OH), CH3CH (OH), CH2 (SH), CH3SCH2CH2, CH2O00H, CH2CH2COOH, NH2COCH2rNH2COCH2CH2, NH2 (CH2) 3CH2rHNC (NH2) NH (CH2) 2CH2r, an optionally substituted aryl group, an optionally substituted unsaturated heterocyclic group, such as Rio CH2 / N-NH 10 -Z is selected from the following groups: an OR11 group (where R11 is defined as R1), an NHCH (R11) group C00H (where R11 is defined as R10), with the exception of D, D muramyldipeptide (N-acetylmuramyl- D-alanyl-D-isoglutamine), wherein R1, R2, Y are hydrogen, W1, W2, W3, Z are hydroxyl and X is COCH3. The subject of the invention is therefore pharmaceutical compositions comprising, as active substance, D, D muramyldipeptide and / or one of the compounds derived according to formulas I or II in association with a pharmaceutically acceptable vehicle or excipient. Whatever the route of administration chosen, the compositions according to the invention are in a form favorable to the optimal protection and assimilation of the active principle. The compositions according to the invention can be administered according to different modes and routes of administration and in different galenic forms.
Ainsi, elles peuvent être administrées de manière systémique, par voie orale, par inhalation ou par injection, comme par exemple par voie intraveineuse, intramusculaire, sous-cutanée, trans-dermique, intra- UBG001-FR-22 TEXTE DEPOSE JS/CD - 6 - artérielle, etc., les voies intraveineuse, intramusculaire, sous-cutanée, orale et par inhalation étant préférées. Pour les injections, le D,D muramyldipeptide ou un des composés dérivés selon l'invention est généralement conditionné sous forme de suspensions liquides, qui peuvent être injectées au moyen de seringues ou de perfusions, par exemple. A cet égard, le D,D muramyldipeptide ou un des composés dérivés selon l'invention est généralement dissous dans des solutions salines, physiologiques, isotoniques, tamponnées, etc, compatibles avec un usage pharmaceutique et connues de l'Homme du Métier. Ainsi, les compositions peuvent contenir un ou plusieurs agents ou véhicules choisis parmi les dispersants, solubilisants, stabilisants, conservateurs, etc. Des agents ou véhicules utilisables dans des formulations liquides et/ou injectables sont notamment la méthylcellulose, l'hydroxyméthylcelluLose, la carboxyméthylcellulose, le polysorbate 80, le mannitol, la gélatine, le lactose, des huiles végétales, l'acacia, etc. Le D,D muramyldipeptide ou un des composés dérivés selon l'invention peut également être administré sous forme de gels, huiles, comprimés, suppositoires, poudres, gélules, capsules, aérosols, etc., éventuellement au moyen de formes galéniques ou de dispositifs assurant une libération prolongée et/ou retardée. Pour ce type de formulation, on utilise avantageusement un agent tel que la cellulose, des carbonates ou des amidons. Le D,D muramyldipeptide est disponible dans le commerce. Ce composé et ses dérivés selon les formules I et II peuvent également être synthétisés sans difficultés pour l'Homme de l'Art, selon les techniques classiques de synthèse de composés peptidiques et de réactions chimiques de substitution de groupements réactionnels. L'invention a également pour objet l'utilisation du D,D muramyldipeptide et/ou un des composés dérivés selon UBG001-FR-22 TEXTE DEPOSE JS/CD - 7 - les formules I ou II dans le cadre de la préparation d'une composition pharmaceutique (ou médicament). Plus spécifiquement, l'invention a pour objet l'utilisation du D,D muramyldipeptide et/ou un des composés dérivés selon les formules I ou II pour la préparation d'un médicament destiné au traitement des plaques athéromateuses. Au sens de l'invention, le terme traitement désigne aussi bien un traitement préventif que curatif, qui peut être utilisé seul ou en combinaison avec d'autres agents ou traitements, comme par exemple une association avec des stat.i.nes ou tout autre composé pharmacologique disponible. D'autres aspects et avantages de la présente invention apparaîtront à la lecture de l'exemple qui suit, fourni à titre illustratif et non limitatif. Thus, they can be administered systemically, orally, by inhalation or by injection, such as, for example, intravenously, intramuscularly, subcutaneously, trans-dermally, intra-UBG001-EN-22 TEXT REMOVED JS / CD - 6 - arterial, etc., the intravenous, intramuscular, subcutaneous, oral and inhalation routes being preferred. For injections, the D, D muramyldipeptide or a derivative compounds according to the invention is generally packaged in the form of liquid suspensions, which can be injected by means of syringes or infusions, for example. In this regard, the D, D muramyldipeptide or a derivative compounds according to the invention is generally dissolved in saline, physiological, isotonic, buffered, etc. solutions, compatible with a pharmaceutical use and known to those skilled in the art. Thus, the compositions may contain one or more agents or vehicles chosen from dispersants, solubilizers, stabilizers, preservatives, etc. Agents or vehicles that can be used in liquid and / or injectable formulations include methylcellulose, hydroxymethylcellulose, carboxymethylcellulose, polysorbate 80, mannitol, gelatin, lactose, vegetable oils, acacia, etc. The D, D muramyldipeptide or one of the compounds derived according to the invention can also be administered in the form of gels, oils, tablets, suppositories, powders, capsules, aerosols, etc., possibly by means of galenic forms or devices ensuring prolonged and / or delayed release. For this type of formulation, an agent such as cellulose, carbonates or starches is advantageously used. The D, D muramyldipeptide is commercially available. This compound and its derivatives according to formulas I and II can also be synthesized without difficulty for those skilled in the art, according to conventional techniques for synthesizing peptide compounds and chemical reactions for substitution of reaction groups. The invention also relates to the use of the D, D muramyldipeptide and / or one of the compounds derived according to UBG001-FR-22 TEXTE DEPOSE JS / CD-7 - the formulas I or II in the context of the preparation of a pharmaceutical composition (or drug). More specifically, the subject of the invention is the use of the D, D muramyldipeptide and / or one of the compounds derived according to formula I or II for the preparation of a medicament for the treatment of atheromatous plaques. For the purposes of the invention, the term treatment refers both to a preventive treatment that curative, which can be used alone or in combination with other agents or treatments, such as an association with statics or any other pharmacological compound available. Other aspects and advantages of the present invention will appear on reading the following example, provided for illustrative and non-limiting.
EXEMPLE : mesure de la prévention du développement et du traitement de plaques athéromateuses par le D,D muramyldipeptide (N-acetylmuramyl-D-alanyl-D-isoglutamine). EXAMPLE: Measurement of the prevention of development and treatment of atheromatous plaques by D, D muramyldipeptide (N-acetylmuramyl-D-alanyl-D-isoglutamine).
L'action du D,D muramyldipeptide a été mesurée sur des souris transgéniques (KO pour le gène LDLR) qui ont la propriété de développer des plaques athéromateuses lorsqu'elles sont soumises à un régime hypercholestérolémiant. Ces souris développent des plaques athéromateuses au niveau des valves aortiques cardiaques dès trois semaines après le début dudit régime. Les mesures ont porté sur des souris (douze au total) ayant subi six semaines de régime hypercholestérolémiant, au terme duquel elles ont été sacrifiées pour estimer l'étendue des lésions. Après trois semaines, un premier groupe de cinq souris a été traité par des injections intra-péritonéales de D,D muramyldipeptide. Les injections ont été réalisées à fréquence d'une injection quotidienne sauf le dimanche, à UB0001-FR-22 TEXTE DEPOSE )S/CD - 8 - une dose de 10mg/kg (soit six injections hebdomadaire). La mise en solution du D,D muramyldipeptide en vue des injections a été réalisée selon les préconisations du fabriquant (Muramyl Dipeptide control, InvivoGen). The action of D, D muramyldipeptide was measured on transgenic mice (KO for the LDLR gene) which have the property of developing atheromatous plaques when they are subjected to a hypercholesterolemic diet. These mice develop atheromatous plaques in the heart aortic valves as early as three weeks after the start of said regimen. Measurements were carried out on mice (twelve in total) who had undergone six weeks of hypercholesterolemic diet, at the end of which they were sacrificed to estimate the extent of the lesions. After three weeks, a first group of five mice was treated with intraperitoneal injections of D, D muramyldipeptide. The injections were performed at a frequency of one daily injection except on Sunday, at a dose of 10 mg / kg (ie six weekly injections). The dissolution of the D, D muramyldipeptide for injection was performed according to the recommendations of the manufacturer (Muramyl Dipeptide control, InvivoGen).
Au bout des six semaines de régime, l'ensemble des souris a donc été sacrifié. L'étendue des lésions au niveau des valves aortiques cardiaques a été estimée sur des coupes de 5pm d'épaisseur colorées au Red ail, par analyse informatique des images histologiques. After six weeks of diet, all the mice were sacrificed. The extent of cardiac aortic valve lesions was estimated on 5 μm thick sections stained with red garlic by computer analysis of histological images.
Le groupe témoin présente des lésions athéromateuses clairement visibles et de surfaces importantes. Sur le groupe de souris traitées, aucune ne présente de lésions ayant une surface ou un aspect comparable à celles obtenues dans le groupe témoin, le développement des plaques étant significativement inférieur. Le traitement avec le D,D muramyldipeptide a donc permis de diminuer significativement l'installation et la progression des plaques athéromateuses. Il va de soi que les concentrations du D,D muramyldipeptide ou des composés selon les formules I et II, la durée de traitement, ainsi que l'optimisation de la formulation de la composition pharmaceutique pourront être adaptées par l'Homme du Métier en fonction des patients, de la pathologie concernée, du mode d'administration, etc., sans sortir du cadre de la présente invention. UBG001-FR-22 TEXTE DEPOSE JS/CD The control group has clearly visible atheromatous lesions and large areas. Of the group of treated mice, none showed lesions having a surface or appearance comparable to those obtained in the control group, the development of the plates being significantly lower. Treatment with D, D muramyldipeptide has thus significantly reduced the installation and progression of atheromatous plaques. It goes without saying that the concentrations of the D, D muramyldipeptide or compounds according to formulas I and II, the duration of treatment, as well as the optimization of the formulation of the pharmaceutical composition may be adapted by those skilled in the art patients, the pathology concerned, the mode of administration, etc., without departing from the scope of the present invention. UBG001-EN-22 TEXT REMOVES JS / CD