FR2904927A1 - Utilisation d'un systeme d'imagerie par fluorescence confocale fibre in vivo in situ, systeme et procede d'imagerie par fluorescence confocale fibres in vivo in situ - Google Patents
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Abstract
La présente invention concerne une nouvelle utilisation d'un système d'imagerie par fluorescence confocale fibré in vivo in situ comprenant une sonde fibrée, pour imager un tissu ou une alvéole située à distance de la vision distale d'un endoscope bronchique.La présente invention concerne aussi un système d'imagerie par fluorescence in vivo comprenant un endoscope muni d'un canal opérateur comprenant une sonde fibrée (20) déplaçable longitudinalement entre une position rétractée et au moins une position étendue à l'extérieur de l'endoscope. La sonde (20) comprend également des graduations d'évaluation de l'extrémité distale (21) de la sonde (20).Le système d'imagerie selon l'invention peut aussi être pourvu d'un cathéter intermédiaire recevant la sonde optique fibrée et inséré dans un endoscope. Ce cathéter intermédiaire permet d'assurer à la fois une fonction d'ancrage sur un tissu biologique et une fonction d'aspiration de matériau biologique.
Description
1 Utilisation d'un système d'imagerie par fluorescence confocale fibré
in vivo in situ, système et procédé d'imagerie par fluorescence confocale fibrés in vivo in situ La présente invention concerne une utilisation d'un système d'imagerie par fluorescence confocale fibré in vivo in situ. Elle vise également un système et un procédé d'imagerie par fluorescence confocale fibrés in vivo in situ. Actuellement il existe des systèmes d'imagerie basés sur la technologie de microscopie de fluorescence comprenant une sonde fibrée. Ces systèmes, commercialisés d'abord pour une utilisation sur l'animal ont ensuite été appliqués à la recherche clinique. Le premier domaine d'application a été l'imagerie in vivo dans le domaine de la gastro-entérologie. Ces systèmes, utilisés en combinaison avec un endoscope, permettent à l'utilisateur d'obtenir une information microscopique complétant les données macroscopiques fournies par l'endoscope. Le champ d'application clinique s'est alors élargi au domaine de la pneumologie. Par rapport à la gastro-entérologie, ce domaine d'application présente l'avantage d'être déjà familier de l'imagerie de fluorescence, et particulièrement d'autofluorescence en raison des propriétés optiques des tissus de l'arbre bronchique. Cependant, les systèmes fibrés d'imagerie in vivo par fluorescence existants ont une faible résolution. Ces systèmes sont utilisés pour imager un tissu in vivo in situ à l'aide d'un endoscope en introduisant la sonde fibrée au travers du conduit opérateur de l'endoscope et en mettant l'extrémité distale de la sonde en contact avec ce tissu sous contrôle de la vue. Ces systèmes ne sont donc pas utilisés pour observer un tissu ou une alvéole situés à distance, c'est à dire en dehors de la vision directe de l'endoscope.
D'autres systèmes d'imagerie in vivo tels que les endoscopes bronchiques, permettent aujourd'hui l'exploration de l'arbre bronchique jusqu'à la cinquième division sous segmentaire. Cependant, ces systèmes d'imagerie ne permettent pas de prolonger la visualisation au-delà. Les alvéoles, présentes en bout de l'arbre bronchique, sont donc inaccessibles.
2904927 2 Or, certaines pathologies, par exemple les pathologies alvéolaires ou interstitielles qu'elles soient diffuses ou focales ainsi que les nodules périphériques, ne peuvent être caractérisés que par une description anatomique des territoires alvéolaires et bronchio-alvéolaires. Pour obtenir 5 une visualisation de la microarchitecture de ces régions, il est nécessaire de pratiquer des biopsies pulmonaires distales par endoscopie ou par chirurgie, ces méthodes étant particulièrement invasives. Un but de l'invention est de proposer une nouvelle utilisation d'un système d'imagerie par fluorescence confocale fibré pour observer et 10 imager in vivo in situ le contenu et les parois des alvéoles pulmonaires situées à distance de la vision des endoscopes bronchiques. Un autre but de l'invention est de proposer un système d'imagerie par fluorescence confocale fibré permettant d'imager in vivo in situ le contenu et les parois alvéolaires pulmonaires situées à distance de la vision 15 endoscopique directe. Enfin un but de l'invention est de proposer un procédé d'imagerie par fluorescence confocale fibré permettant d'imager in vivo in situ le contenu et les parois alvéolaires pulmonaires situées à distance de la vision endoscopique.
20 L'invention propose ainsi une utilisation d'un système d'imagerie par fluorescence confocale fibré in vivo in situ comprenant une sonde fibrée pour observer le contenu et les parois alvéolaires situées à distance de l'extrémité distale de l'endoscope. L'utilisation selon l'invention permet d'imager un tissu ou une alvéole situé à distance de l'extrémité distale de 25 l'endoscope. Dans la présente description, une alvéole désigne le système alvéolaire pulmonaire comprenant la bronchiole respiratoire, le canal alvéolaire et les sacs alvéolaires pulmonaires proprement dits. En effet, les systèmes actuels d'imagerie par fluorescence fibrés in 30 vivo sont utilisés pour réaliser une imagerie d'un tissu avec lequel l'extrémité distale de la sonde est en contact. Ces systèmes sont actuellement utilisés pour réaliser l'imagerie d'un tissu, avec lequel la sonde est en contact, avec une résolution axiale de 15 à 20 Etm. Autrement dit, les systèmes actuels permettent de réaliser une imagerie d'un tissu, 2904927 -3- avec lequel la sonde est en contact, sur une profondeur de 0 à 15 m. Il est nécessaire dans l'utilisation actuelle des systèmes d'imagerie par fluorescence confocale fibrés que l'extrémité de la sonde soit en contact avec le tissu à imager.
5 Cependant, lors d'une imagerie in vivo in situ d'un système alvéolaire pulmonaire à l'aide du système confocal fibré en fluorescence, il a été constaté de façon très surprenante que les images prises permettent une observation des tissus et d'objets situés jusqu'à environ 300 m de l'extrémité distale de la sonde fibrée. Ce résultat inattendu et inexplicable à 10 ce jour, à montré, d'une part qu'il n'est pas nécessaire de mettre l'extrémité distale de la sonde fibrée en contact avec l'ensemble d'un tissu pour prendre une image de ce tissu, d'autre part qu'il existe une possibilité de réaliser une imagerie de l'intérieur d'une alvéole d'un corps. Il suffit de mettre l'extrémité distale de la sonde en contact avec un tissu situé à 15 proximité ou en contact avec le tissu que l'on veut imager. D'une manière similaire, pour imager une alvéole, il suffit de mettre l'extrémité distale de la sonde en contact avec un tissu situé à proximité ou en contact avec l'alvéole que l'on veut imager. Le tissu en question peut par exemple être la paroi d'une alvéole située à proximité ou en contact avec l'alvéole ou le 20 tissu que l'on veut imager. Dans une application particulière de l'utilisation selon l'invention, il est possible de réaliser l'imagerie du contenu et des parois d'une alvéole pulmonaire. Une telle imagerie peut en outre bénéficier des propriétés d'autofluorescence des poumons et, plus particulièrement des alvéoles.
25 Dans ce cas, contrairement à une utilisation dans le tube digestif, il n'est pas nécessaire d'appliquer un fluorophore exogène sur le tissu pour recueillir un signal de fluorescence. Une telle utilisation peut donc bénéficier des fluorophores endogènes des poumons et des alvéoles. Selon un autre aspect de l'invention, il est proposé un système 30 d'imagerie par fluorescence in vivo comprenant un endoscope muni d'un canal opérateur au sein duquel est insérée une sonde fibrée comportant une pluralité de fibres caractérisé en ce que la sonde fibrée est déplaçable longitudinalement entre une position rétractée et au moins une position étendue à l'extérieur de l'endoscope. 2904927 -4- Un tel système permet d'atteindre des parties d'un corps que les systèmes actuels tels que des endoscopes bronchiques ne peuvent pas imager compte tenu de leur encombrement. En effet, le système selon l'invention met en oeuvre une sonde fibrée miniaturisée placée dans le 5 canal opérateur d'un endoscope. Cette sonde présente une section plus petite que la section de l'endoscope. L'endoscope est introduit dans le corps d'un sujet aussi loin que la section de l'endoscope le permet. Ensuite, la sonde fibrée présente dans le canal opérateur de l'endoscope est déplacée longitudinalement pour atteindre une position d'imagerie au-delà de la 10 vision distale de l'endoscope. Ce qui permet au système selon l'invention de réaliser une imagerie d'une partie d'un corps d'un sujet que les systèmes actuels ne peuvent pas atteindre et par conséquent imager. Avantageusement, le système selon l'invention peut comprendre des moyens d'évaluation d'au moins une position de l'extrémité distale de la 15 sonde. La sonde fibrée étant déplaçable longitudinalement vers une position étendue située à l'extérieur de l'endoscope, l'extrémité distale de cette sonde n'est plus visualisable par l'endoscope. Sa position ne peut donc pas être évaluée par la vision endoscopique. Dans ce cas l'opérateur n'a pas de contrôle de la longueur d'insertion de la sonde dans le poumon 20 au delà de l'extrémité distale de l'endoscope ce qui peut présenter des dangers pour le sujet recevant l'endoscope et la sonde. Il est important alors d'évaluer la position de l'extrémité distale de la sonde pour diminuer les risques de blessures du sujet. Les moyens d'évaluation peuvent comprendre au moins une 25 graduation portée par la sonde du côté de son extrémité distale, cette graduation étant visible par l'endoscopiste et indiquant une position étendue. Ainsi l'opérateur peut avoir un contrôle sur la longueur d'insertion de l'extrémité distale de la sonde. Cette graduation peut être réalisée à une distance connue de l'extrémité distale de la fibre déterminée en fonction 30 de la partie du corps à imager. Cette méthode de repérage n'est pas exclusive de tout autre procédé qui permettrait de connaître la position de l'extrémité distale de la sonde dans l'arbre bronchique, soit à partir de données obtenues en temps réel, soit à partir d'un modèle 3D ajusté au cas particulier du sujet observé. 2904927 -5- Avantageusement, au moins une position étendue peut être choisie pour correspondre à une position maximale à ne pas dépasser. Cette position étendue peut être déterminée en fonction de l'imagerie effectuée et de la partie du corps imagé. Cette graduation peut être réalisée à une 5 distance de connue de l'extrémité distale de la fibre déterminée en fonction de la partie du corps dont l'imagerie est réalisée. D'une manière similaire, au moins une position étendue peut être choisie pour correspondre à une position de début de prise d'image, en fonction de la partie du corps imagé et de l'imagerie effectuée.
10 Avantageusement, le système selon l'invention peut être couplé à une unité spectroscopique réalisant une analyse spectrale du signal de fluorescence capté par au moins une fibre. L'unité de spectroscopie fournit des données spectrales concernant le signal de fluorescence capté par la sonde fibrée. Ces données spectrales peuvent compléter l'image réalisée, 15 par des informations concernant la nature des objets imagés. L'analyse spectrale permet de connaître le type de fluorophore à l'origine du signal détecté (donc à quel type de tissu il est relié). Dans d'autres cas, cette analyse permet de donner des renseignements sur l'environnement immédiat du fluorophore (pH, activité enzymatique, présence de lipides, 20 présence d'ions...). Dans une configuration particulière de l'invention, le système fibré d'imagerie confocale peut en outre comprendre un conduit creux introduit à l'intérieur de l'endoscope et agencé pour recevoir la sonde optique fibrée, ce conduit creux pouvant être poussé au-delà de l'extrémité distale de 25 l'endoscope. Ce conduit creux, qui fait fonction de cathéter intermédiaire, et la sonde optique fibrée, peuvent avantageusement coopérer pour procurer un effet de piston d'aspiration à l'extrémité distale du conduit creux, lorsque ladite sonde optique fibrée est rétractée à l'intérieur dudit conduit creux.
30 Selon un autre aspect de l'invention, il est proposé un procédé d'imagerie par un système d'imagerie par fluorescence confocale fibré in vivo in situ comprenant un endoscope muni d'un canal opérateur recevant une sonde fibrée d'imagerie, ce procédé comprenant les étapes suivantes : 2904927 -6- introduction de l'endoscope jusqu'à blocage en distalité. Le blocage est du aux diamètres relatifs des bronches et de l'endoscope ; introduction de la sonde dans l'alvéole par extension à 5 l'extérieur du canal opérateur jusqu'à ce que les images d'alvéoles apparaissent à l'écran, et avant qu'une distance connue graduée sur la sonde ne soit atteinte. Le procédé selon l'invention permet avantageusement de réaliser l'imagerie d'une alvéole par l'utilisation d'une sonde fibrée et ainsi 10 d'obtenir l'image d'une zone que les procédés actuels ne permettent pas de réaliser. Le procédé selon l'invention peut avantageusement comprendre une étape de repérage d'une position d'extension correspondant à un début de zone à imager. Cette position peut correspondre à la position à partir de 15 laquelle l'opérateur peut espérer atteindre les alvéoles à imager. Un tel repérage facilite et accélère la réalisation de l'imagerie. En effet, l'introduction de la sonde dans l'alvéole peut être réalisée relativement rapidement jusqu'à cette position tout en prenant soin à ne pas blesser le sujet sur lequel l'imagerie est réalisée.
20 Avantageusement, le procédé selon l'invention peut comprendre une étape de repérage d'une position d'extension maximale à ne pas dépasser, permettant de minimiser les risques de blessure du sujet sur lequel l'imagerie est réalisée, par une extension abusive de la sonde. Les positions d'extension, décrites ci-dessus, peuvent avoir été 25 déterminées en fonction de l'imagerie à réaliser et de l'alvéole imagée. Elles peuvent être déterminée par une distance relative de l'extrémité distale de la sonde par rapport à l'extrémité distale de l'endoscope. Dans le cadre par exemple d'une alvéole pulmonaire chez l'homme adulte, des expériences ont montré que pour la position correspondant à un début 30 d'imagerie de l'alvéole, l'extrémité distale de la sonde se trouve à une distance de 2.5 cm de l'extrémité distale de l'endoscope. Pour la position d'extension maximale cette distance est de 5,5 cm. Grâce à ces repérages, le procédé selon l'invention permet d'avoir un contrôle sur la position de l'extrémité distale de la sonde. 2904927 -7- Dans un mode de réalisation du procédé selon l'invention, l'alvéole peut être une alvéole pulmonaire humaine de l'adulte ou de l'enfant, en ventilation spontanée ou sous ventilation mécanique. Lorsque le procédé selon l'invention est mis en oeuvre dans un 5 système fibré d'imagerie confocale pourvu d'un cathéter intermédiaire, il comprend alors en outre une étape d'ancrage et de visualisation, au cours de laquelle on déplace un conduit creux inséré dans l'endoscope et faisant fonction de canal opérateur pour une sonde optique fibrée, jusqu'à ce que l'extrémité distale de ce conduit creux entre en contact avec un tissu 10 biologique à examiner, ce conduit creux étant poussé au-delà de l'extrémité distale dudit endoscope. Ce procédé selon l'invention peut en outre comprendre une étape d'aspiration de matériau biologique, à la suite de l'étape d'ancrage et de visualisation, au cours de laquelle on rétracte la sonde optique fibrée à 15 l'intérieur du conduit creux, de façon à procurer un effet de piston d'aspiration à l'extrémité distale dudit conduit creux. D'autres avantages et caractéristiques de l'invention apparaîtront à l'examen de la description détaillée d'un mode de mise en oeuvre nullement limitatif, et des dessins annexés sur lesquels : 20 - la figure 1 est une représentation schématique d'une utilisation d'une unité spectroscopique couplée au système selon l'invention ; - la figure 2 est une représentation schématique d'une sonde fibrée utilisée dans le système selon l'invention ; - la figure 3 est une représentation schématique de l'arbre 25 bronchique d'un sujet ; - la figure 4 est une image d'une alvéole obtenue en autofluorescence avec le système selon l'invention ; -la figure 5 est une représentation des spectres obtenus par une unité spectroscopique couplée au système selon l'invention ; et 30 - la figure 6 illustre une configuration particulière d'un système fibré d'imagerie confocale selon l'invention. On va maintenant décrire, en référence aux figures précitées, un exemple d'un système d'imagerie par fluorescence fibrée confocale. Dans l'exemple décrit le système est composé de trois éléments principaux : une 2904927 8 unité optoélectronique laser, une série de sondes miniaturisées composées de dizaines de milliers de fibres optiques, et un programme informatique de traitement d'image qui contrôle le système et acquiert les signaux de fluorescence captés par la sonde fibrée.
5 Une source laser émettant à une longueur d'onde de 488 nm balaye en temps réel la surface proximale du guide de fibres optiques par l'intermédiaire de miroirs de balayage. Ainsi, le spot lumineux d'excitation est focalisé de fibre en fibre séquentiellement. Ce signal d'excitation véhiculé jusqu'à la partie distale des fibres optiques est alors absorbé en 10 profondeur, par les fluorophores, exogènes ou endogènes suivant les cas présent dans le tissu sondé. Les fluorophores émettent alors en réponse un signal à une autre longueur d'onde (la fluorescence), qui est réinjecté dans les fibres optiques du guide d'image en suivant le chemin inverse. Chaque fibre filtre la lumière spatialement permettant de donner à la sonde fibrée 15 son caractère d'imagerie à haute résolution. Une fois filtrée la lumière retour est focalisée sur un détecteur qui permet via son électronique de convertir les photons de fluorescence en un signal numérique. Les données sont envoyées jusqu'au processeur prévu pour le traitement et la génération des images de cellules. Ce processus est effectué en temps réel 20 si bien que l'opérateur a le résultat de ce qu'il observe sur son écran de visualisation à tout moment de la procédure d'observation du tissu. Le traitement de signal permet de reconstruire l'image du tissu à partir des données brutes correspondant aux signaux lumineux acheminés par les fibres optiques. Afin d'obtenir une image la plus lisible et 25 la plus fidèle à la réalité, il faut effectuer une calibration de l'appareil en deux étapes : 1. mesurer l'émission propre de chaque fibre (autofluorescence ou diffusion Raman) afin de la soustraire au signal reçu, et 2. calculer le niveau de taux d'injection/transmission de chaque fibre 30 afin d'homogénéiser la réponse des fibres sur la totalité du guide d'image. Une fois la calibration effectuée, avantageusement de manière automatique, le système d'imagerie par fluorescence confocale fibré selon l'invention est prêt à être utilisé. L'opérateur peut alors voir les images qu'il 2904927 -9- acquiert en temps réel à raison de 12 images par secondes sur un écran d'ordinateur, avec un contraste accentué et des distorsions spatiales éliminées pour une meilleure qualité d'image. Dans l'exemple décrit ici, le système d'imagerie selon l'invention est 5 utilisé pour l'imagerie bronchopulmonaire in vivo, et plus particulièrement d'alvéoles, et bénéficie des propriétés d'autofluorescence des poumons et donc des fluorophores endogènes des poumons et plus particulièrement des alvéoles. Il n'est donc pas nécessaire d'appliquer un fluorophore exogène pour recueillir un signal de fluorescence.
10 Cependant, le signal de fluorescence peut être lié à la présence de diverses molécules fluorescentes, listées dans le tableau ci-après. Bien que 488nm ne soit pas la longueur d'onde d'excitation optimale pour ces composants, il est cependant possible de détecter du signal provenant de ces divers fluorophores.
15 Fluorophore Longueur d'onde Longueur d'onde Origine d'absorption du maximum de approx. (nm) fluorescence (nm) Tryptophane 275 350 Protéine Collagène 335 390 Tissu conjonctif Elastine 360 410 Tissu conjonctif NADH 340 470 Chaîne respiratoire Flavine 450 520 Chaîne respiratoire Porphyrine 405 635 Infection bactérienne, synthèse de l'hème Une image seule, correspondant à une unique valeur d'intensité de signal par pixel, ne suffit pas à donner une information sur la nature du composant imagé. Les divers composés présents peuvent en revanche être 20 discriminés par spectroscopie. La figure 1 est une représentation d'une utilisation d'une unité spectroscopique couplée au système selon l'invention. Le signal de fluorescence 10 capté par une fibre optique est 2904927 - 10 - séparé en deux signaux de fluorescence 101 et 102 par un séparateur d'onde (beamsplitter) 11. Le signal de fluorescence 102 est envoyé par le séparateur d'onde 11 vers un détecteur 16 alors que le signal de fluorescence 101 est envoyé vers un module 12 prévu pour collecter les 5 signaux envoyés par chaque fibre optique de la sonde fibrée. La collection de signaux optiques est envoyée ensuite à l'unité spectroscopique 13 connecté à une unité informatique 14 comprenant un logiciel de contrôle de l'unité spectroscopique 13. L'unité spectroscopique permet d'apporter une information sur la nature des molécules fluorescentes en plus de leur 10 localisation dans l'espace, apportée par l'image. L'acquisition de l'image et des spectres peut être synchrone. Une séquence d'images acquises sur une zone imagée est complétée par un spectre acquis sur un volume inclus dans celui utilisé pour réaliser l'image. La synchronisation de l'acquisition des images et des spectres est réalisée 15 par un signal de synchronisation 15. Dans l'exemple décrit ici, le système d'imagerie comprend un endoscope et plus particulièrement un endoscope bronchique comprenant un canal opérateur de section 2 mm. La sonde utilisée, représentée schématiquement en figure 2, est une sonde fibrée 20 de type S de 20 diamètre 1.4 mm ne possédant pas d'élément optique en son extrémité distale 21. Cette sonde 20 comporte en son extrémité distale 21 une férule 22, afin de rendre celle-ci étanche et non agressive pour les tissus. Une telle sonde permet une insertion facile dans le canal opérateur de l'endoscope bronchique, car elle est compatible avec la taille des canaux 25 opérateurs des endoscopes, et présente peu d'encombrement. Le tableau suivant récapitule les propriétés de cette sonde. Longueur 3m Diamètre distal 1.4mm Diamètre de la gaine 1.4mm Longueur de la partie rigide de la férule 3mm Résolution latérale 3.5pm Champ de vue 600x500pm L'appareil respiratoire 30, représenté en figure 3, se divise en deux parties : l'une allant du nez au larynx 31, et l'autre constituée de la trachée 2904927 -I1- 32, se divisant elle-même en deux bronches souches, appelées bronches primaires 33, puis de façon dichotomique en de nombreuses ramifications constituant les bronches secondaires 34 et les bronches tertiaires 35 et aboutissant aux bronchioles respiratoires 36 puis aux systèmes alvéolaires 5 37. Après anesthésie locale ou générale du sujet, le bronchoscope est introduit dans la trachée puis suit son parcours le long de l'arbre bronchique. Le territoire exploré s'étend jusqu'à la troisième ou quatrième division sous-segmentaire. Seules les bronches peuvent être visualisées 10 directement au travers de l'endoscope bronchique. Un bronchoscope le plus fin possible de canal opérateur suffisant pour l'insertion de la sonde est utilisé pour l'imagerie des alvéoles. Il est ainsi possible de limiter la distance d'insertion de la sonde au-delà de l'endoscope et donc d'assurer une meilleure sécurité pour le patient. Un 15 endoscope de 4,3 mm de diamètre extérieur et de longueur 60 cm a été utilisé pour le protocole d'exploration endoalvéolaire. Lorsque celui-ci ne peut plus progresser en raison de son diamètre, la sonde fibrée 20 de type S est alors poussée au-delà de l'endoscope jusqu'à atteindre les alvéoles, tout en réalisant une imagerie en fluorescence confocale fibrée de sa 20 progression, permettant de reconnaître successivement la bronchiole terminale puis respiratoire par l'existence de resserrements concentriques et enfin les sac alvéolaires. Malgré la visualisation de cette progression, quand la sonde est sortie de l'endoscope et poussée jusqu'à atteindre les alvéoles, la distance 25 d'insertion de la sonde doit être connue afin d'estimer les risques d'atteinte de la plèvre en périphérie des poumons, ce qui représente un risque théorique de pneumothorax (perforation de la plèvre). Pour répondre à cette problématique de repérage, des graduations ont été ajoutées au design de la sonde précédemment décrite. Des expériences sur cadavres 30 ont validé les positions des deux graduations : la première est à 2.5cm de l'extrémité et la deuxième à 5cm. La zone située entre les graduations représente la zone pour laquelle le secteur alvéolaire est habituellement atteint et peut être imagé. 2904927 - 12 - Si aucune image d'alvéole n'est obtenue avant la deuxième graduation de la sonde, alors le territoire n'est pas exploré, la sonde est retirée. Lorsque la sonde est dans le territoire alvéolaire, une séquence dynamique et un spectre sont enregistrés.
5 La figure 4 est une représentation d'une alvéole imagée par fluorescence avec le système selon l'invention. Sur la figure 4, on peut constater que plusieurs plans de tissu sont visualisés. Or, le diamètre d'une alvéole étant de l'ordre de 300pm, on en déduit que la sonde fibrée collecte du signal au moins jusqu'à 300pm dans le tissu alvéolaire. Le système 10 selon l'invention permet donc d'imager le contenu et les parois du sac alvéolaire dans lequel la sonde fibrée a été introduite. La figure 5 représente le spectre 51 des signaux de fluorescence captés par la sonde fibrée. On notera que les deux spectres sont décalés en longueur d'onde, ce biais est lié à l'instrumentation et existe pour les deux 15 spectres. La figure 5 représente également le spectre 52 de l'élastine pure. L'exploitation des données issues de l'unité spectroscopique a permis de mettre en évidence qu'une composante majeure du signal de fluorescence était liée à la présence d'élastine. Une analyse plus fine permettra d'identifier les autres fluorophores apportant leur contribution. Il est bien 20 connu que l'élastine est présente dans les parois des alvéoles. Il y a donc concordance entre le type d'objet observé sur les images et la localisation du fluorophore. Un système fibré d'imagerie confocale selon l'invention peut aussi être équipé d'un cathéter intermédiaire, comme l'illustre la figure 6.
25 Dans cette configuration, une sonde optique fibrée 52 est disposée dans un conduit creux constituant un cathéter intermédiaire 51 lui-même inséré dans l'endoscope 50. Ce cathéter intermédiaire 51 fait alors en fonction de canal opérateur pour la sonde optique 52. Dans un premier mode (I) d'utilisation, le cathéter intermédiaire 51 30 est déplacé à partir du canal opérateur jusqu'à entrer en contact avec le tissu biologique 53 à examiner. La sonde fibrée 52 affleurant la sortie du cathéter intermédiaire 51 est alors à proximité immédiate ou en contact avec la surface du tissu biologique 53, et une visualisation de ce tissu est réalisée. 2904927 - 13 - Dans un second mode (II) d'utilisation, après visualisation, la sonde optique 52 est rétractée alors que le cathéter intermédiaire 51 est maintenu contre le tissu biologique 53. Cette rétraction procure un effet de piston qui permet une aspiration de matériau biologique issu du tissu 53, à 5 l'intérieur du cathéter intermédiaire 51. Cette fonctionnalité permet ainsi un prélèvement aisé de matériau biologique directement sur le site de visualisation. Il est à noter que le positionnement du cathéter intermédiaire 51 contre le tissu biologique 53 peut être effectué en utilisant une technique 10 de repérage par graduation telle que décrite ci-dessus, ou encore en utilisant des techniques de représentation tridimensionnelle de l'anatomie du corps et des organes examinés mettant en oeuvre des procédés actuels d'imagerie et de tomographie. Bien sûr, l'invention n'est pas limitée à l'exemple qui vient d'être 15 décrit et de nombreux aménagements peuvent être apportés à ces exemples sans sortir du cadre de l'invention, comme par exemple l'imagerie de la bronchiole distale et son contenu, et l'analyse de certaines cellules contenues dans les espaces pulmonaires distaux présentant des propriétés de fluorescence. 20
Claims (13)
1. Procédé pour réaliser une image d'un tissu, notamment d'un tissu d'un corps alvéolaire, caractérisé en ce qu'il comprend une collecte d'un signal lumineux émis par au moins une partie dudit tissu, par une sonde optique fibrée (20) dont une extrémité distale (21) est disposée à distance dudit tissu.
2. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que le signal lumineux comprend un signal de fluorescence émis par au moins un fluorophore exogène.
3. Procédé selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisé en ce que le signal lumineux comprend un signal de fluorescence émis par un fluorophore endogène. 15
4. Procédé selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisé en ce que le tissu est un tissu d'une alvéole pulmonaire.
5. Procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 3, caractérisé en ce que le tissu est un tissu d'une bronchiole distale. 20
6. Système fibré d'imagerie par fluorescence confocale in vivo in situ comprenant un endoscope muni d'un canal opérateur comprenant une sonde optique fibrée (20) comportant une pluralité de fibres optiques, caractérisé en ce que la sonde fibrée (20) est déplaçable 25 longitudinalement entre une position rétractée et au moins une position étendue à l'extérieur du canal opérateur.
7. Système selon la revendication 6, caractérisé en ce qu'il comprend des moyens d'évaluation d'au moins une position de l'extrémité distale (21) 3o de la sonde.
8. Système selon la revendication 7, caractérisé en ce que les moyens d'évaluation comprennent au moins une graduation portée par la sonde 2904927 15 (20) du côté de son extrémité distale (21), ladite graduation étant visible par l'endoscope et indiquant une position étendue.
9. Système selon l'une quelconque des revendications 6 à 8, caractérisé en 5 ce qu'il comprend en outre des moyens de repérage d'au moins une position étendue choisie pour correspondre à une position maximale à ne pas dépasser.
10. Système selon l'une quelconque des revendications 6 à 9, caractérisé 10 en ce qu'il comprend en outre des moyens de repérage d'au moins une position étendue choisie pour correspondre à une position de début de visualisation.
11. Système selon l'une quelconque des revendications 6 à 10, caractérisé en ce qu'il peut être couplé à une unité de spectroscopie (13) réalisant une analyse spectrale du signal de fluorescence capté par au moins une fibre.
12. Système selon l'une quelconque des revendications 6 à 11, caractérisé en ce qu'il comprend en outre un conduit creux (51) introduit à l'intérieur de l'endoscope (50) et agencé pour recevoir la sonde optique fibrée (52), ce conduit creux (51) pouvant être poussé au-delà de l'extrémité distale dudit endoscope (50).
13. Système selon la revendication 12, caractérisé en ce que le conduit creux (51) et la sonde optique fibrée (52) coopèrent pour procurer un effet de piston d'aspiration à l'extrémité distale dudit conduit creux (51), lorsque ladite sonde optique fibrée (52) est rétractée à l'intérieur dudit conduit creux (51).
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