FR2867189A1 - New compound comprising protein kinase regulator and photoactivatable molecule, useful for treating protein kinase-related diseases, e.g. tumors and inflammation - Google Patents
New compound comprising protein kinase regulator and photoactivatable molecule, useful for treating protein kinase-related diseases, e.g. tumors and inflammation Download PDFInfo
- Publication number
- FR2867189A1 FR2867189A1 FR0402408A FR0402408A FR2867189A1 FR 2867189 A1 FR2867189 A1 FR 2867189A1 FR 0402408 A FR0402408 A FR 0402408A FR 0402408 A FR0402408 A FR 0402408A FR 2867189 A1 FR2867189 A1 FR 2867189A1
- Authority
- FR
- France
- Prior art keywords
- poly
- protein kinase
- compound according
- molecules
- inhibitors
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
- C07D487/22—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains four or more hetero rings
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K41/00—Medicinal preparations obtained by treating materials with wave energy or particle radiation ; Therapies using these preparations
- A61K41/0057—Photodynamic therapy with a photosensitizer, i.e. agent able to produce reactive oxygen species upon exposure to light or radiation, e.g. UV or visible light; photocleavage of nucleic acids with an agent
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K41/00—Medicinal preparations obtained by treating materials with wave energy or particle radiation ; Therapies using these preparations
- A61K41/0057—Photodynamic therapy with a photosensitizer, i.e. agent able to produce reactive oxygen species upon exposure to light or radiation, e.g. UV or visible light; photocleavage of nucleic acids with an agent
- A61K41/0071—PDT with porphyrins having exactly 20 ring atoms, i.e. based on the non-expanded tetrapyrrolic ring system, e.g. bacteriochlorin, chlorin-e6, or phthalocyanines
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/54—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic compound
- A61K47/55—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic compound the modifying agent being also a pharmacologically or therapeutically active agent, i.e. the entire conjugate being a codrug, i.e. a dimer, oligomer or polymer of pharmacologically or therapeutically active compounds
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
- A61P7/12—Antidiuretics, e.g. drugs for diabetes insipidus
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Pain & Pain Management (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
Description
s Nouveaux composés médicamenteux destinés au traitement des pathologiess New drug compounds for the treatment of pathologies
dépendantes de l'activité protéine kinase dependent on protein kinase activity
La présente invention concerne de nouveaux composés ayant une action d'inhibition, de régulation et/ou de modulation de l'activité de protéine kinase io ainsi que les médicaments et compositions pharmaceutiques destinés au traitement des pathologies dépendantes de l'activité protéine kinase. The present invention relates to novel compounds having an action of inhibiting, regulating and / or modulating protein kinase activity as well as drugs and pharmaceutical compositions for the treatment of pathologies dependent on protein kinase activity.
Les protéines kinases (PK) occupent une place centrale dans la transmission des signaux intracellulaires telles que: le métabolisme, la différenciation, la ls prolifération cellulaire et tissulaire, et l'apoptose. Il est estimé qu'il existe environ 2000 protéines kinases distinctes chez l'homme. Elles produisent grâce à la phosphorylation spécifique de protéines une modification stable de l'activité biologique qui ne sera annulée que sous l'action de protéines phosphatases. L'équilibre entre phosphorylation par des protéines kinases et déphosphorylation par des protéines phosphatases assure la régulation de nombreux processus cellulaires importants. Un grand nombre de produits proto-oncongènes fait partie des protéines kinases. Protein kinases (PK) play a central role in the transmission of intracellular signals such as: metabolism, differentiation, cell and tissue proliferation, and apoptosis. It is estimated that there are approximately 2000 distinct protein kinases in humans. They produce, thanks to the specific phosphorylation of proteins, a stable modification of the biological activity which will be canceled only under the action of protein phosphatases. The balance between phosphorylation by protein kinases and dephosphorylation by protein phosphatases regulates many important cellular processes. A large number of proto-oncongene products are part of protein kinases.
On peut subdiviser la grande famille des protéines kinases selon le type d'activation et le type de substrat. Les protéines kinases A sont activées par l'AMPc, les protéines kinases G par le GMPc, les protéines kinases C par le diacylglycérol (DAG), et les kinases Cal+/calmoduline dépendantes par le Cal+. La classification est basée sur la nature du résidu acide aminé phosphorylé. II existe des tyrosines kinases et des sérines/thréonines kinases. Les kinases peuvent avoir une large spécificité de substrat ou bien être spécialisées pour quelques protéines. The large family of protein kinases can be subdivided according to the type of activation and the type of substrate. Protein kinases A are activated by cAMP, protein kinases G by cGMP, protein kinases C by diacylglycerol (DAG), and Cal + dependent Cal + / calmodulin kinases. The classification is based on the nature of the phosphorylated amino acid residue. There are tyrosine kinases and serine / threonine kinases. Kinases can have a broad substrate specificity or be specialized for some proteins.
Le développement d'inhibiteurs sélectifs de PK pouvant bloquer ou moduler des pathologies dans lesquelles cette voie de signalisation est défectueuse, est une approche prometteuse pour le développement de nouveaux anti- cancéreux. The development of selective PK inhibitors that can block or modulate pathologies in which this signaling pathway is defective is a promising approach for the development of new anti-cancer drugs.
Cependant, l'activité de ces inhibiteurs étant enzymatique cela impose un blocage constant du site et donc une prise constante de médicament. s Le but de la présente invention est de proposer d'associer un inhibiteur de protéines kinases à un composé photoactivable dans le but d'utiliser l'inhibiteur pour la reconnaissance du site à traiter, et le composé photoactivable pour la destruction du site récepteur par une action photochimique lo (photochimiothérapie) en vue d'un blocage plus durable et/ou plus efficace de l'activité kinasique visée. However, since the activity of these inhibitors is enzymatic, this imposes a constant blocking of the site and therefore constant drug intake. The object of the present invention is to propose associating a protein kinase inhibitor with a photoactivatable compound for the purpose of using the inhibitor for the recognition of the site to be treated, and the photoactivatable compound for the destruction of the receptor site by a photochemical action lo (photochemotherapy) for a more durable and / or more effective blocking of the targeted kinase activity.
La photochimiothérapie repose sur l'activation à l'aide d'une radiation lumineuse de longueur d'onde adaptée au spectre d'absorption d'un composé is photoactivable. Les radiations lumineuses absorbées par le composé photoactivable entraînent des réactions de type 1 (production de radicaux hydroxyles) ou de type 2 (production d'oxygène singulet) par un mécanisme de conversion intersystème. Ces espèces radicalaires entraînent des réactions d'oxydation et de peroxydation conduisant à la destruction ou l'inactivation du site traité. Photochemotherapy is based on activation using a light radiation of wavelength adapted to the absorption spectrum of a photoactivatable compound. The light radiation absorbed by the photoactivatable compound causes reactions of type 1 (production of hydroxyl radicals) or type 2 (production of singlet oxygen) by an intersystem conversion mechanism. These radical species lead to oxidation and peroxidation reactions leading to the destruction or inactivation of the treated site.
A cet effet, le composé selon la présente invention associe une ou plusieurs molécules (I) photoactivables et une ou plusieurs molécules (Il) ayant une action d'inhibition, de régulation et/ou de modulation de l'activité d'une protéine kinase. For this purpose, the compound according to the present invention associates one or more photoactivatable molecules (I) and one or more molecules (II) having an action of inhibition, regulation and / or modulation of the activity of a protein kinase. .
Nous avons ainsi découvert que l'on pouvait conférer à ces composés renfermant au moins une molécule photosensible la possibilité de reconnaître spécifiquement des sites récepteurs des protéines kinases pour les inhiber à l'aide d'une réaction photochimique. Cette inhibition s'est révélée plus durable que celle obtenue avec les inhibiteurs de protéine kinase, seuls, c'est-à-dire non associés à des molécules photosensibles. We thus discovered that these compounds containing at least one photosensitive molecule could be given the possibility of specifically recognizing protein kinase receptor sites to inhibit them by means of a photochemical reaction. This inhibition proved to be more durable than that obtained with the protein kinase inhibitors, alone, that is to say, not associated with photosensitive molecules.
De manière avantageuse, la molécule photoactivable (I), c'est-à-dire présentant une activité photochimique sous irradiation lumineuse, est un agent photosensibilisant choisi parmi: les porphyrines ou leurs dérivés, telles que l'hématoporphyrine, les éthers de dihématoporphyrine, les dimères d'hématoporphyrine, les trimères d'hématoporphyrine, la benzoporphyrine, les porphyrines vertes, les mérocyanines, les porphycènes, le porfimère de sodium, la verteporfine, les chlorines, de préférence choisies parmi les familles de molécules diphényles chlorine (SIM), les tétrahydroporphyrines, telles que la m-THPC, les bactériochlorines, la phthalocyanine de zinc, les purpurines et leurs dérivés, tels que l'éthyle étiopurpurine d'étain, les phéophorbides ou une association de plusieurs de ces molécules. Advantageously, the photoactivatable molecule (I), that is to say having a photochemical activity under light irradiation, is a photosensitizing agent chosen from: porphyrins or their derivatives, such as hematoporphyrin, dihematoporphyrin ethers, hematoporphyrin dimers, hematoporphyrin trimers, benzoporphyrin, green porphyrins, merocyanines, porphycenes, sodium porphimers, verteporfin, chlorins, preferably chosen from families of diphenyl chlorine molecules (SIM), tetrahydroporphyrins, such as m-THPC, bacterioclorins, zinc phthalocyanine, purpurins and their derivatives, such as ethyl etopurpurin tin, pheophorbides or a combination of several of these molecules.
La molécule photoactivable (I) peut également être un colorant de préférence choisi parmi: l'acridine orange, le rose de Bengale, le bleu de méthylène, le vert d'indocyanine, la fluorescéine et le rubrène, ou un de leurs polymères réagissant à la lumière, ou la chlorophylle a, la riboflavine, la phénaléone ou une association de plusieurs de ces molécules. The photoactivatable molecule (I) may also be a dye preferably chosen from: acridine orange, bengal rose, methylene blue, indocyanine green, fluorescein and rubrene, or one of their polymers reacting to light, or chlorophyll a, riboflavin, phenaleone or a combination of several of these molecules.
De même, de manière avantageuse, la molécule (Il) du composé selon la présente invention, est choisie parmi les inhibiteurs suivants des kinases cibles ci-après: - STI 571 (inhibiteurs de Bcr-Abl) - ZD-1839, OSI-774, PKI 166, EKB-569, GW 57 2016 (inhibiteurs de EGF-R) 25 - CEP 2563 (inhibiteur de PKC/Trk) - UCN-01, GCP 41251 (STI 412), le safingol, la perifosine (inhibiteurs de PKC) - SU 5416, CGP 79787, CP-564959, ZD 6474, ZD 2171, SU-11248 (inhibiteurs de VEGF-R) - le flavopiridol, CI-202 (inhibiteurs de CDKs). Similarly, advantageously, the molecule (II) of the compound according to the present invention is chosen from the following inhibitors of the following target kinases: STI 571 (Bcr-Abl inhibitors) - ZD-1839, OSI-774 , PKI 166, EKB-569, GW 57 2016 (EGF-R inhibitors) 25 - CEP 2563 (PKC / Trk inhibitor) - UCN-01, GCP 41251 (STI 412), safingol, perifosine (PKC inhibitors SU 5416, CGP 79787, CP-564959, ZD 6474, ZD 2171, SU-11248 (VEGF-R inhibitors) - flavopiridol, CI-202 (CDK inhibitors).
Ces exemples d'inhibiteurs sont ATP-compétitifs de protéines kinases de faible poids moléculaire. These examples of inhibitors are ATP-competitive low molecular weight protein kinases.
L'association entre les molécules (I) et les molécules (II) du composé de la présente invention peut être réalisée: - soit par une liaison covalente selon la formule (I)n (II),,,, n et m étant compris entre 1 et 5, - soit au moyen d'un élément de liaison L selon la formule (1), L-(11),, n et m s étant compris entre 1 et 5, et L étant choisi parmi: - un groupement alkyle ou acyle substitué ou non; - un polymère, par exemple l'acide poly-l-glutamique, l'acide poly-d- glutamique, l'acide poly-dl-glutamique, l'acide poly-l-aspartique, l'acide poly-d-aspartique, l'acide poly-dl-aspartique, la polylysine, les polysaccharides, le io polyhydroxypropyl-méthacrylamide, le dextrane, la poly(hydropropylglutamine), la poly(hydroéthylglutamine), l'acide hyaluronique, le carboxyméthyle dextrane, l'acide polyacrylique, le chitosane, la polyglycine, la polytyrosine, la polyphénylalanine, l'oxyde polypropylène (PPO), le polyéthylène glycol (PEG), les copolymères de PEG avec PPO, l'acide polyglycolique, la polyvinyl ls pyrolidone, l'acide polylactique, l'alcool polyvinylique; - un anticorps ou un des ses fragments, un peptide ou une protéine. The association between the molecules (I) and the molecules (II) of the compound of the present invention can be carried out: either by a covalent bond according to the formula (I) n (II) n and m being understood between 1 and 5, or by means of a connecting element L according to formula (1), L- (11) n and ms being between 1 and 5, and L being chosen from: an alkyl group or substituted or unsubstituted acyl; a polymer, for example poly-1-glutamic acid, poly-d-glutamic acid, poly-dl-glutamic acid, poly-1-aspartic acid, poly-d-aspartic acid , poly-dl-aspartic acid, polylysine, polysaccharides, polyhydroxypropylmethacrylamide, dextran, poly (hydropropylglutamine), poly (hydroethylglutamine), hyaluronic acid, carboxymethyl dextran, polyacrylic acid chitosan, polyglycine, polytyrosine, polyphenylalanine, polypropylene oxide (PPO), polyethylene glycol (PEG), copolymers of PEG with PPO, polyglycolic acid, polyvinylpyrrolidone, polylactic acid, polyvinyl alcohol; an antibody or a fragment thereof, a peptide or a protein.
La liaison entre les molécules (I) et (Il) par l'intermédiaire de L peut être clivable par une enzyme, sensible au pH, détruite par la lumière ou tout autre procédé 20 physique ou chimique. The linkage between molecules (I) and (II) through L can be cleavable by an enzyme, sensitive to pH, destroyed by light or any other physical or chemical process.
Le composé selon l'invention trouve une application intéressante en photochimiothérapie. The compound according to the invention finds an interesting application in photochemotherapy.
Dans cette optique, la présente invention porte aussi sur un médicament renfermant, en tant que principe actif, un composé tel que décrit cidessus. Un tel médicament est notamment destiné au traitement des pathologies dépendantes de l'activité protéine kinase, de préférence destiné au traitement de dysrégulation de l'angiogénèse, de la croissance tumorale, des cancers, de l'athérosclérose, de la dégénérescence maculaire liée à l'âge, de la rétinopathie diabétique ou des maladies inflammatoires. In this regard, the present invention also relates to a medicament containing, as active ingredient, a compound as described above. Such a medicament is in particular intended for the treatment of pathologies dependent on the protein kinase activity, preferably intended for the treatment of dysregulation of angiogenesis, tumor growth, cancers, atherosclerosis, macular degeneration linked to the age, diabetic retinopathy or inflammatory diseases.
La présente invention concerne également une composition pharmaceutique, caractérisée en ce qu'elle renferme un composé du type précité associé à un excipient pharmaceutiquement acceptable. The present invention also relates to a pharmaceutical composition, characterized in that it contains a compound of the aforementioned type associated with a pharmaceutically acceptable excipient.
Les composés de l'invention peuvent être présentés sous toute forme de composition administrable au corps humain ou animal et appropriée à l'administration entérale, parentérale ou transdermique, tel que comprimé, dragée, crème dermique, gélule, capsule, suspension ou solution buvable ou injectable, tel que sirop ou ampoule, timbre transdermique, formulation liposomale (nanoparticules) etc. associés à des excipients convenables et dosés pour permettre une ou plusieurs cures comprenant une ou plusieurs io administrations journalières pendant un jour ou plusieurs jours à raison d'une dose comprise par exemple entre 0,1 et 20 mg/kg de poids. The compounds of the invention may be presented in any form of composition administrable to the human or animal body and suitable for enteral, parenteral or transdermal administration, such as tablet, dragee, dermal cream, capsule, capsule, suspension or oral solution or injectable, such as syrup or ampoule, transdermal patch, liposomal formulation (nanoparticles) etc. associated with suitable excipients and dosed to allow one or more courses comprising one or more daily administrations for a day or several days at a dose for example between 0.1 and 20 mg / kg of weight.
Les excipients peuvent être des solutions aqueuses ou contenant des lipides renfermant éventuellement des agents permettant la suspension, la stabilisation, la préservation et/ou la dispersion. Les composés peuvent aussi se présenter sous une forme lyophilisée tel qu'une poudre qui est additionnée, avant usage, d'un liquide stérile, tel que de l'eau stérile pour préparation injectable. The excipients may be aqueous or lipid-containing solutions optionally containing agents for suspending, stabilizing, preserving and / or dispersing. The compounds may also be in a lyophilized form such as a powder which is added before use with a sterile liquid, such as sterile water for injection.
Les formes administrables préférées sont les formes injectables, en particulier 20 sous forme d'une injection intramusculaire ou intraveineuse ou sous forme d'application transcutanée. Preferred administrable forms are injectable forms, particularly in the form of intramuscular or intravenous injection or in the form of transcutaneous application.
Les composés de l'invention peuvent également être utilisés pour le traitement ex-vivo de cellules par exemple dans le cadre de purges de moelle osseuse dans le traitement des leucémies et plus généralement pour la mise en oeuvre des procédés inclus sous le terme de thérapie cellulaire. The compounds of the invention may also be used for the ex-vivo treatment of cells, for example in the context of bone marrow purges in the treatment of leukemias and more generally for the implementation of the methods included under the term cell therapy. .
L'invention sera mieux comprise à la lecture d'exemples illustratifs de réalisation. The invention will be better understood on reading illustrative embodiments.
Exemple IExample I
Le composé suivant ainsi que les effets qu'il induit avec et sans lumière illustre, à titre d'exemple, la préparation d'un composé selon l'invention constitué d'une fraction de l'inhibiteur de tyrosine kinase STI571 (Gleevec, Imatinib) et d'une porphyrine ainsi que ses effets. The following compound and the effects it induces with and without light illustrate, by way of example, the preparation of a compound according to the invention consisting of a fraction of the STI571 tyrosine kinase inhibitor (Gleevec, Imatinib ) and a porphyrin and its effects.
La synthèse de ce composé, répondant à la formule générale suivante: CH3 CH3 (GP) et qui sera appelé par la suite pour simplifier GP, comporte les étapes suivantes. io The synthesis of this compound, corresponding to the following general formula: CH 3 CH 3 (GP) and which will be called thereafter to simplify GP, comprises the following steps. io
Etape 1: clivage de la liaison amide du ST1571 Hydrolyse Step 1: cleavage of the amide bond of ST1571 Hydrolysis
NH NH2NH NH2
Etape 2: Une porphyrine carboxylée est ensuite utilisée pour reformer la liaison amide régénérant ainsi en partie la structure du STI571. Step 2: A carboxylated porphyrin is then used to reform the amide bond thereby regenerating part of the STI571 structure.
HO CH3 CH3 N H2 CH3 CH3HO CH3 CH3 N H2 CH3 CH3
Les essais décrits ci-dessous portent sur l'activité de la molécule GP comparée à l'activité de STI571 seul. L'activité de cette nouvelle molécule GP a été testée in vitro avec des essais de toxicité et de phototoxicité. The tests described below relate to the activity of the GP molecule compared to the activity of STI571 alone. The activity of this new GP molecule has been tested in vitro with toxicity and phototoxicity tests.
La GP montre, dans une solution d'alcool absolu, 5 pics principaux d'absorption respectivement à 415, 513, 548, 590 et 646 nm. La solution a été obtenue s comme suit: un milligramme de GP a été dissous dans 1 mL d'alcool absolu. GP shows, in an absolute alcohol solution, 5 main absorption peaks respectively at 415, 513, 548, 590 and 646 nm. The solution was obtained as follows: One milligram of GP was dissolved in 1 mL of absolute alcohol.
La molécule ST1571 ne présente pas d'absorption dans le visible. The ST1571 molecule does not show any absorption in the visible.
Pour étudier la toxicité et la phototoxicité de la molécule GP, il a été procédé comme suit: Des cellules K562 (Leucémie myéloïde chronique, CML) ont été utilisées, car elles expriment le chromosome de Philadelphie. En effet le chromosome de Philadelphie trouvé dans les cellules leucémiques des patients atteints de la CML est produit par une translocation entre le chromosome 9 et le 1s chromosome 22, résultant l'expression d'une protéine chimère de Bcr et de la kinase Abl dans le cytoplasme, ce qui rend ce type cellulaire sensible à un traitement par l'antityrosine kinase tel que le STI 571. To study the toxicity and phototoxicity of the GP molecule, it was proceeded as follows: K562 cells (chronic myeloid leukemia, CML) were used, as they express the Philadelphia chromosome. In fact, the Philadelphia chromosome found in the leukemic cells of patients with CML is produced by translocation between chromosome 9 and chromosome 22, resulting in the expression of a Bcr chimeric protein and Abl kinase in the body. cytoplasm, which makes this cell type susceptible to treatment with antityrosine kinase such as STI 571.
Les cellules ont été mises en culture dans des flacons Falcon de 25 cm2 (Polylabo, Strasbourg, France) en milieu RPMI (Roswell Park Memorial Institute medium) supplémenté avec 10 % (VN) de sérum de veau foetal (FCS) , 100 unités de pénicilline 100 mg de streptomycine et 2 mM de glutamine. The cells were cultured in 25 cm 2 Falcon flasks (Polylabo, Strasbourg, France) in RPMI medium (Roswell Park Memorial Institute medium) supplemented with 10% (VN) fetal calf serum (FCS), 100 penicillin 100 mg streptomycin and 2 mM glutamine.
Les cellules ont été repiquées en culture suivant une dilution 1:3, ce qui a 25 maintenu ces cellules dans la phase exponentielle de croissance. L'absence de contamination par les mycoplasmes à été régulièrement contrôlée. Cells were subcultured in culture at a 1: 3 dilution, which maintained these cells in the exponential growth phase. The absence of mycoplasma contamination has been regularly monitored.
Les cellules ainsi cultivées ont été soumises à un traitement photodynamique. The cells thus cultured were subjected to a photodynamic treatment.
STI571 a été dissoute dans du tampon phosphate. Pour la molécule GP, une solution mère a été réalisé à 1 mg/mL dans un tampon (50% eau, 30% PEG, 20% éthanol), les dilutions successives étant réalisées dans du tampon phosphate. Des quantités aliquotes (11 pL) de la solution photosensibilisante GP ou de STI571 ont été ajoutées à des cellules K562 dans des puits de plaques à 96 puits. La concentration cellulaire était de 5.104 cellules/mL (100 pL par puits). La concentration finale des solutions de GP ou STI571 était comprise dans la plage de 0,5 à 20 pg/ml. Immédiatement après addition du photosensibilisant GP ou STI571, les plaques de cellules ont été maintenues dans une obscurité complète jusqu'au traitement par PDT (Photodynamic therapy ou photochimiothérapie). Des milieux frais contenant du FCS mais exempt de GP ou STI571 ont été préparés et ajoutés après centrifugation à 1800 tours/min pendant 5 minutes, avant irradiation laser. Un laser argon émettant à 514 nm couplé à une fibre optique a été utilisé pour irradier les cellules. La puissance d'émission de la lumière à l'extrémité de la fibre a été réglée, en utilisant un dispositif de mesure de puissance (Coherent, France), à 200 mW. La lumière a été transmise à la cible par une fibre optique à une distance de 20 mm afin d'irradier des cellules dans un puits de 6 mm de diamètre à l'intérieur d'un champ unique fournissant une illumination de la totalité de la zone. Le temps d'exposition a été de 14 secondes par puits à 514 nm fournissant une densité d'énergie de 10 J/cm2. STI571 was dissolved in phosphate buffer. For the GP molecule, a stock solution was made at 1 mg / ml in a buffer (50% water, 30% PEG, 20% ethanol), the successive dilutions being carried out in phosphate buffer. Aliquots (11 μl) of the photosensitizing solution GP or STI571 were added to K562 cells in 96 well plate wells. The cell concentration was 5 × 10 4 cells / ml (100 μl per well). The final concentration of GP or STI571 solutions was in the range of 0.5 to 20 μg / ml. Immediately after addition of GP or STI571 photosensitizer, the cell plaques were kept in complete darkness until PDT (Photodynamic therapy or photochemotherapy) treatment. Fresh media containing FCS but free of GP or STI571 were prepared and added after centrifugation at 1800 rpm for 5 minutes, before laser irradiation. An argon laser emitting at 514 nm coupled to an optical fiber was used to irradiate the cells. The light emission power at the end of the fiber was set using a power meter (Coherent, France) at 200 mW. The light was transmitted to the target by an optical fiber at a distance of 20 mm to irradiate cells in a 6 mm diameter well within a single field providing illumination of the entire area. . The exposure time was 14 seconds per well at 514 nm providing an energy density of 10 J / cm 2.
Les cellules ont été incubées avec GP ou STI571 pendant 2 heures. Pour les essais de phototoxicité, les cellules ont été lavées et le milieu a été remplacé immédiatement avant irradiation laser. The cells were incubated with GP or STI571 for 2 hours. For the phototoxicity assays, the cells were washed and the medium was replaced immediately before laser irradiation.
Les comptages de cellules ont été réalisés 24, 48 et 72 heures après la fin des expériences. Au moment du comptage, 15 pL de solution PBS-MTT (5 mg/mL) ont été ajoutés aux puits. Après 4 heures, 150 pL d'isopropanolHCI 0,04N ont été ajoutés conformément à la méthode décrite par Mosmann (T. Mosmann. The cell counts were performed 24, 48 and 72 hours after the end of the experiments. At the time of counting, 15 μL of PBS-MTT solution (5 mg / mL) was added to the wells. After 4 hours, 150 μl of 0.04 N isopropanol HCI was added according to the method described by Mosmann (T. Mosmann.
Rapid colorimetric assay for cellular growth and survival: application to proliferation and cytotoxicity assay. J. Immunol. Methods, 65, 55-63, 1985). Rapid colorimetric assay for cell growth and survival: application to proliferation and cytotoxicity assay. J. Immunol. Methods, 65, 55-63, 1985).
La densité optique de chaque puits des microplaques a ensuite été lue à 570 nm au moyen d'un appareil Opsys MR (Dynex Technologies, Chantilly, USA). The optical density of each well of the microplates was then read at 570 nm using an Opsys MR apparatus (Dynex Technologies, Chantilly, USA).
Un puits contenant du RPMI sans rouge de phénol et 15 pL d'une solution MU (bromure de 3-(4,5-diméthylthiazol-2-yl)-2,5 diphényl tetrazolium) a été utilisé pour déterminer les blancs pour les mesures d'absorbance. One well containing RPMI without phenol red and 15 μl MU solution (3- (4,5-dimethylthiazol-2-yl) -2,5-diphenyl tetrazolium bromide) was used to determine the blanks for the measurements. absorbance.
Les résultats sont présentés dans les figures 1 à 3: La figure 1 représente la toxicité de STI571 mesurée à 24, 48 et 72 heures sur les cellules K562 après incubation pendant 2 heures; La figure 2 représente la toxicité de GP mesurée à 24, 48 et 72 heures sur les cellules K562 après incubation pendant 2 heures; La figure 3 représente la toxicité et phototoxicité (irradiation à 514nm et 10 J/cm2) de GP mesurée à 48 heures sur les cellules K562 après incubation 10 pendant 2 heures; Au travers de ces figures, la molécule STI571 seule montre une inhibition de la croissance, dépendante de la concentration, sur les cellules K562. La molécule GP utilisée en absence de lumière entraîne une inhibition de la croissance comparable quoique un peu inférieure à ST1571 seule. Ceci suggère que la fraction de STI571 couplée sur la porphyrine est bien la fraction inhibitrice de l'activité anti-tyrosine kinase, et que la présence de la porphyrine n'empêche pas la reconnaissance du site. The results are shown in FIGS. 1 to 3: FIG. 1 represents the toxicity of STI571 measured at 24, 48 and 72 hours on K562 cells after incubation for 2 hours; Figure 2 shows the toxicity of GP measured at 24, 48 and 72 hours on K562 cells after incubation for 2 hours; Figure 3 shows the toxicity and phototoxicity (irradiation at 514nm and 10 J / cm2) of GP measured at 48 hours on K562 cells after incubation for 2 hours; Through these figures, the STI571 molecule alone shows concentration-dependent growth inhibition on K562 cells. The GP molecule used in the absence of light causes comparable growth inhibition, although it is slightly lower than ST1571 alone. This suggests that the STI571 moiety coupled to porphyrin is indeed the inhibitory fraction of anti-tyrosine kinase activity, and that the presence of porphyrin does not prevent site recognition.
Les cellules K562 incubées avec GP et soumises à une irradiation lumineuse présentent une forte inhibition de la croissance statistiquement plus importante que lorsqu'elles sont incubées avec GP en absence de lumière. The K562 cells incubated with GP and subjected to light irradiation have a statistically stronger inhibition of growth than when they are incubated with GP in the absence of light.
Aucune différence significative n'a été observée entre des cellules irradiées et 25 non irradiées avec STI571 seule, non associée à la porphyrine (résultats non représentés ici). No significant difference was observed between irradiated and non-irradiated cells with STI571 alone, not associated with porphyrin (results not shown here).
Afin de confirmer la présence de la molécule GP au niveau des cellules K562, il a été procédé à une visualisation de la localisation in vitro de la molécule GP, par imagerie de fluorescence afin de confirmer que les composés précités étaient aptes à pénétrer dans les cellules. Ainsi, des cellules K562 ont été ensemencées à 105 cellules/mL sur des lames de verre circulaire. Après 2 heures, des cellules ont été incubées avec GP (20 pg/mL) à 37 C pendant 4 heures et ensuite lavées dans du PBS (Phosphate Buffer Saline solution) (pH 7,2). L'analyse de la fluorescence de GP (émettant à 630 nm) a été réalisée après excitation entre 450 nm et 480 nm produite par une lampe Xénon 150 W en utilisant une caméra vidéo noir et blanc à détection de photons très sensible (Kappa CF 8/4; Fischer Scientific SA, France) reliée à un microscope optique (Olympus BX 40, France) équipé avec un objectif à immersion d'huile grossissant 100 fois. In order to confirm the presence of the GP molecule at the level of the K562 cells, the in vitro location of the GP molecule was visualized by fluorescence imaging in order to confirm that the abovementioned compounds were able to penetrate the cells. . Thus, K562 cells were seeded at 105 cells / ml on circular glass slides. After 2 hours, cells were incubated with GP (20 μg / mL) at 37 ° C for 4 hours and then washed in PBS (Phosphate Buffer Saline Solution) (pH 7.2). The analysis of the GP fluorescence (emitting at 630 nm) was carried out after excitation between 450 nm and 480 nm produced by a 150 W Xenon lamp using a highly sensitive black-and-white photon detection video camera (Kappa CF 8 Fischer Scientific SA, France) connected to an optical microscope (Olympus BX 40, France) equipped with a 100-fold magnifying oil immersion objective.
L'intensité de fluorescence (figure 4) la plus forte a été localisée principalement dans le cytoplasme des cellules K562. Les images produites immédiatement lo après incubation pendant 4 heures avec GP démontrent clairement que les composés sont aptes à pénétrer dans les cellules. Aucune fluorescence résiduelle n'a été détectée chez les cellules K562 seules ou incubées avec du STI571 (résultats non représentés ici). The strongest fluorescence intensity (Figure 4) was localized mainly in the cytoplasm of K562 cells. The images produced immediately after incubation for 4 hours with GP clearly demonstrate that the compounds are able to enter the cells. No residual fluorescence was detected in K562 cells alone or incubated with STI571 (results not shown here).
Exemple IIExample II
Le composé suivant est constitué d'une fraction de l'inhibiteur de tyrosine kinase STI571 (Gleevec, Imatinib) et d'une chlorine SIM01 (décrite dans WO 0210173) 2,3 dihydro 5,15-bis (3,5-dihydroxy-1-phényl) porphyrine. The following compound consists of a STI571 tyrosine kinase inhibitor (Gleevec, Imatinib) fraction and a SIM01 chlorin (described in WO 0210173) 2,3 dihydro 5,15-bis (3,5-dihydroxy) 1-phenyl) porphyrin.
Le procédé de synthèse est identique à celui de l'exemple I. Le composé résultant répond à la formule générale suivante (GC) : et sera appelé par la suite pour simplifier GC. The synthesis method is identical to that of Example I. The resulting compound has the following general formula (GC): and will be called later to simplify GC.
Les essais concernant la toxicité et la phototoxicité de la molécule GC, sont identiques à ceux réalisés dans l'exemple I. La molécule GC montre des résultats comparables à ceux décrits dans l'exemple I, c'est à dire pour la molécule GC utilisée en absence de lumière entraîne une inhibition de la croissance des cellules K562 comparable quoique un peu inférieure à STI571 seule. The tests concerning the toxicity and phototoxicity of the GC molecule are identical to those carried out in Example I. The GC molecule shows results comparable to those described in Example I, that is to say for the GC molecule used. in the absence of light results in a similar growth inhibition of K562 cells although a little lower than STI571 alone.
Les cellules K562 incubées avec GC et soumises à une irradiation lumineuse présentent une forte inhibition de la croissance statistiquement plus importante que lorsqu'elles sont incubées avec GC en absence de lumière, plus importante aussi que GP en présence de lumière à dose équivalente. En effet, SIM est plus puissant que la porphyrine de part un rendement quantique en oxygène singulet plus important produisant ainsi une réaction photochimique plus intense. The K562 cells incubated with GC and subjected to light irradiation have a strong statistically greater inhibition of growth than when they are incubated with GC in the absence of light, more important than GP in the presence of equivalent dose light. In fact, SIM is more powerful than porphyrin because of a greater singlet oxygen quantum yield, thus producing a more intense photochemical reaction.
Exemple IIIExample III
Le composé suivant est constitué d'une fraction de l'inhibiteur ZD1839 (Iressa) 20 et d'une porphyrine. The following compound consists of a fraction of the inhibitor ZD1839 (Iressa) and a porphyrin.
Le ZD1839 est un inhibiteur de la phosphorylation intracellulaire de nombreuses tyrosines kinases associées aux récepteurs transmembranaires de la surface cellulaire, incluant les tyrosines kinases associées au récepteur des facteurs de croissance épidermique (EGFR-TK). L'EGFR est exprimé à la surface cellulaire de nombreuses cellules normales et cancéreuses. Le ZD1839 agit en bloquant le signal de transduction impliqué dans la prolifération des cellules cancéreuses, la survie et les processus hôte-dépendant promouvant la croissance tumorale. ZD1839 is an inhibitor of intracellular phosphorylation of many cell surface transmembrane receptor tyrosine kinases, including epidermal growth factor receptor tyrosine kinases (EGFR-TK). EGFR is expressed on the cell surface of many normal and cancerous cells. ZD1839 works by blocking the transduction signal involved in cancer cell proliferation, survival and host-dependent processes promoting tumor growth.
Le composé préparé répond à la formule générale suivante: 14 CH3 H3C1,,,O CH3 CH3 et sera appelé par la suite pour simplifier IP. The compound prepared corresponds to the following general formula: ## STR2 ## and will be called later to simplify IP.
La synthèse de ce composé, comporte les étapes suivantes. The synthesis of this compound comprises the following steps.
Etape 1: clivage de la liaison amide du ZD1839 H3C.,,,O Step 1: cleavage of the amide bond of ZD1839 H3C.
HNHN
Hydrolyse O/\ NH2 H3C Etape 2: Une porphyrine carboxylée est ensuite utilisée pour reformer la liaison amide régénérant ainsi en partie la structure du ZD1839. CH3 Hydrolysis O / NH2 H3C Step 2: A carboxylated porphyrin is then used to reform the amide bond thus regenerating part of the structure of ZD1839. CH3
HO CH3 CH3 O NH2 H3C,,HO CH3 CH3O NH2 H3C ,,
HN CH3 CH3HN CH3 CH3
Les essais concernant la toxicité et la phototoxicité de la molécule IP, sont identiques à ceux réalisés dans l'exemple I. La molécule IP montre des résultats comparables à ceux décrits dans l'exemple L C'est-à-dire la molécule IP utilisée en absence de lumière entraîne une inhibition de la croissance des cellules K562 comparable quoique un peu inférieure à ZD1839 seule. The tests concerning the toxicity and phototoxicity of the IP molecule are identical to those carried out in Example I. The IP molecule shows results comparable to those described in Example 1, ie the IP molecule used. in the absence of light results in a similar growth inhibition of K562 cells although somewhat less than ZD1839 alone.
Les cellules K562 incubées avec IP et soumises à une irradiation lumineuse présentent une forte inhibition de la croissance statistiquement plus importante que lorsqu'elles sont incubées avec IP en absence de lumière. The K562 cells incubated with IP and subjected to a light irradiation exhibit a strong inhibition of statistically greater growth than when they are incubated with IP in the absence of light.
Claims (10)
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
FR0402408A FR2867189A1 (en) | 2004-03-08 | 2004-03-08 | New compound comprising protein kinase regulator and photoactivatable molecule, useful for treating protein kinase-related diseases, e.g. tumors and inflammation |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
FR0402408A FR2867189A1 (en) | 2004-03-08 | 2004-03-08 | New compound comprising protein kinase regulator and photoactivatable molecule, useful for treating protein kinase-related diseases, e.g. tumors and inflammation |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
FR2867189A1 true FR2867189A1 (en) | 2005-09-09 |
Family
ID=34855135
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
FR0402408A Pending FR2867189A1 (en) | 2004-03-08 | 2004-03-08 | New compound comprising protein kinase regulator and photoactivatable molecule, useful for treating protein kinase-related diseases, e.g. tumors and inflammation |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
FR (1) | FR2867189A1 (en) |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20110293575A1 (en) * | 2008-06-30 | 2011-12-01 | Pci Biotech As | Photochemical internalisation of kinase inhibitors |
CN108685944A (en) * | 2017-04-07 | 2018-10-23 | 成都夸常科技有限公司 | Include pharmaceutical composition and its application of vital stain |
Citations (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO1995020567A1 (en) * | 1994-01-28 | 1995-08-03 | University Of Kentucky Research Foundation | Codrugs as a method of controlled drug delivery |
WO1999043317A1 (en) * | 1998-02-25 | 1999-09-02 | Schering Aktiengesellschaft | Necrosis-affine compounds and the utilization thereof in order to produce preparations for pharmacotherapy |
WO2000066587A2 (en) * | 1999-04-30 | 2000-11-09 | Slil Biomedical Corporation | Polyamines and their use in therapy |
WO2001074389A2 (en) * | 2000-03-24 | 2001-10-11 | Novartis Ag | Improved treatment of neovascularization |
WO2003061626A1 (en) * | 2002-01-18 | 2003-07-31 | Control Delivery Systems, Inc. | Polymeric gel system for the controlled delivery of codrugs |
US20030220313A1 (en) * | 2000-04-12 | 2003-11-27 | Rahul Ray | Selective nuclear receptor-targeted systems for delivery of cytotoxins to cancer cells for targeted photodynamic therapy |
WO2004012774A1 (en) * | 2002-08-02 | 2004-02-12 | Cellgate, Inc. | Conjugates of porphyrin compounds with chemotherapeutic agents |
-
2004
- 2004-03-08 FR FR0402408A patent/FR2867189A1/en active Pending
Patent Citations (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO1995020567A1 (en) * | 1994-01-28 | 1995-08-03 | University Of Kentucky Research Foundation | Codrugs as a method of controlled drug delivery |
WO1999043317A1 (en) * | 1998-02-25 | 1999-09-02 | Schering Aktiengesellschaft | Necrosis-affine compounds and the utilization thereof in order to produce preparations for pharmacotherapy |
WO2000066587A2 (en) * | 1999-04-30 | 2000-11-09 | Slil Biomedical Corporation | Polyamines and their use in therapy |
WO2001074389A2 (en) * | 2000-03-24 | 2001-10-11 | Novartis Ag | Improved treatment of neovascularization |
US20030220313A1 (en) * | 2000-04-12 | 2003-11-27 | Rahul Ray | Selective nuclear receptor-targeted systems for delivery of cytotoxins to cancer cells for targeted photodynamic therapy |
WO2003061626A1 (en) * | 2002-01-18 | 2003-07-31 | Control Delivery Systems, Inc. | Polymeric gel system for the controlled delivery of codrugs |
WO2004012774A1 (en) * | 2002-08-02 | 2004-02-12 | Cellgate, Inc. | Conjugates of porphyrin compounds with chemotherapeutic agents |
Cited By (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20110293575A1 (en) * | 2008-06-30 | 2011-12-01 | Pci Biotech As | Photochemical internalisation of kinase inhibitors |
US9241996B2 (en) | 2008-06-30 | 2016-01-26 | Pci Biotech As | Photochemical internalisation of kinase inhibitors |
CN108685944A (en) * | 2017-04-07 | 2018-10-23 | 成都夸常科技有限公司 | Include pharmaceutical composition and its application of vital stain |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Stockert et al. | Porphycenes: Facts and prospects in photodynamic therapy of cancer | |
Chan et al. | Cell uptake, distribution and response to aluminium chloro sulphonated phthalocyanine, a potential anti-tumour photosensitizer | |
JP5068920B2 (en) | Compound | |
DK167769B1 (en) | FLUORESCING MONO, DI OR POLYAMIDES OF AN AMINODICARBOXYLIC ACID AND A TETRAPYRROL COMPOUND CONTAINING THREE CARBOXYL GROUPS AND PROCEDURES FOR PREPARING THEREOF | |
Kessel et al. | Sites of photodamage in vivo and in vitro by a cationic porphyrin | |
KR100628548B1 (en) | Photosensitiser and method for production thereof | |
JPS625924A (en) | Pharmaceutical composition containing novel tetrapyrrolepolyaminomonocarboxylic acid | |
Calin et al. | Photodynamic therapy in oncology | |
KR20140027096A (en) | Conjugate for photodynamic diagnosis or therapy and method for preparing same | |
US20080014248A1 (en) | Photosensitizer containing indole-3-alkylcarboxylic acid, and kit for photodynamic therapy containing the same | |
NO338966B1 (en) | Novel Porphyrin Derivatives, Preferably Chlorines and / or Bacteriochlorines, Methods of Preparation thereof, and their Use as Anticancer, and / or Antiviral and / or Antimicrobial Drugs in Photodynamic Therapy | |
KR102363327B1 (en) | Composition for photodynamic therapy containing 5-aminolevulinic acid hydrochloride | |
JPH0764728B2 (en) | Novel tetrapyrrole pharmaceutical composition | |
Grin et al. | Novel bacteriochlorophyll-based photosensitizers and their photodynamic activity | |
EP3405217B1 (en) | Novel nanoparticles of mesoporous organosilicium, their manufacturing method and their uses | |
US6770787B2 (en) | Heavier halogen atom substituted squaraine based dyes, process for the preparation thereof and use thereof as sensitizers for photodynamic, therapeutical and industrial applications | |
EP1305317B1 (en) | Dihydroporphyrin derivatives and their uses | |
FR2867189A1 (en) | New compound comprising protein kinase regulator and photoactivatable molecule, useful for treating protein kinase-related diseases, e.g. tumors and inflammation | |
Yawalkar et al. | Fundamentals of photodynamic therapy | |
JP2011518891A (en) | Pharmaceutical composition for treating cancer containing chlorin e6-folate binding compound and chitosan | |
Webber et al. | Effects of photodynamic therapy using a fractionated dosing of mono-l-aspartyl chlorin e6 in a murine tumor | |
Albino de Souza et al. | Photophysical properties of fluorescent self-assembled peptide nanostructures for singlet oxygen generation | |
EP1277470A1 (en) | Injectable galenical formulation for use in photodynamic diagnostic or therapy and process of manufacturing it | |
Cauchon et al. | Structure–activity relationships of mono-substituted trisulfonated porphyrazines for the photodynamic therapy (PDT) of cancer | |
CN1452956A (en) | Application of hypocrellin photosensitizer in pharmacy |