FR2733237A1

FR2733237A1 - New antibacterial and antifungal peptide(s) from Podisus

Info

Publication number: FR2733237A1
Application number: FR9505094A
Authority: FR
Inventors: Philippe Bulet; Jules Hoffman; Pascale Fehlbaum; Charles Hetru; Serguey Tchernych
Original assignee: Rhone Poulenc Agrochimie SA
Current assignee: Bayer CropScience SA
Priority date: 1995-04-24
Filing date: 1995-04-24
Publication date: 1996-10-25
Anticipated expiration: 2015-04-24
Also published as: FR2733237B1

Abstract

Peptides of formula (I) are new: a-c-b (I) a = 0-10 amino acids; b = 0-5 amino acids and c = IIYCNRRTGLC, with the two C residues forming an intramolecular disulphide bridge. Insects of the genus Podisus (Hemiptera), pref. P. maculiventris, are exposed to at least one bacterial inducer of (I) synthesis, either a Gram positive or negative species but pref. a mixt. of both sorts. (I) synthesised are then extracted from the haemolymph or crushed insects by stirring with an acid to neutral medium (pH 2-7) and centrifuged. The supernatant is applied to a sepn. column, hydrophilic cpds. removed by washing, e.g. with trifluoroacetic acid (TFA), and hydrophobic cpds. recovered by elution, e.g. with an increasing gradient of MeCN in dil. acid. The extracted cpds. are then purified and sequenced. Chemical synthesis of (I) is also contemplated.

Description

Peptide antibactérien et antifongique
La présente invention a pour objet un nouveau peptide ayant des propriétés
antibactériennes et antifongiques, des compositions utilisables en agriculture et en thérapie
humaine ou animale contenant ce peptide comme matière active. L'invention concerne
également un procédé de préparation de ce peptide.Antibacterial and antifungal peptide
The subject of the present invention is a new peptide having properties
antibacterial and antifungal agents, compositions which can be used in agriculture and in
human or animal containing this peptide as an active ingredient. The invention relates to
also a process for preparing this peptide.

On sait de longue date que les insectes présentent une résistance efficace contre les
bactéries et les champignons. Cette défense est pour une large part basée sur la synthèse
rapide de plusieurs familles de peptides à large spectre d'activité. Cette synthèse est induite
par une blessure septique ou par l'injection d'une faible dose de bactéries ou de
champignons. a noter que les champignons sont l'un des pathogènes les plus fréquents chez
les insectes.It has long been known that insects exhibit effective resistance against
bacteria and fungi. This defense is largely based on the synthesis
of several peptide families with a broad spectrum of activity. This synthesis is induced
septic injury or the injection of a low dose of bacteria or
mushrooms. It should be noted that fungi are one of the most common pathogens in
the insects.

n a maintenant été isolé, à partir d'une induction chez 1' hémiptère Podisus sp. de préférence maculiventris., un peptide, qui présente des caractéristiques remarquables ainsi que des propriétés bactéricides et fongicides notamment contre les champignons responsables des maladies des plantes et les champignons de la pathologie humaine et animale. Au sens de l'invention on entend par propriétés antibactériennes et antifongiques respectivement aussi bien les propriétés bactéricides que les propriétés bactériostatiques et aussi bien les propriétés fongicides que les propriétés fongistatiques. It has now been isolated from induction in the Podisus sp. preferably maculiventris, a peptide, which has outstanding characteristics as well as bactericidal and fungicidal properties especially against fungi responsible for plant diseases and fungi of human and animal pathology. For the purposes of the invention, antibacterial and antifungal properties are understood to mean bactericidal properties as well as bacteriostatic properties, as well as fungicidal properties and fungistatic properties.

Plus particulièrement un premier aspect de l'invention concerne le peptide de formule générale:
a- ne Ile Tyr Cys Asn Arg Arg Thr Gly Lys Cys- b
dans laquelle:
- Ile Ile Tyr Cys Asn Arg Arg Thr Gly Lys Cys est le maillon central, de taille
réduite, qui comporte 2 résidus cystéines formant un pont disulfure
intramoléculaire.More particularly, a first aspect of the invention relates to the peptide of general formula:
Isle Tyr Cys Asn Arg Arg Thr Gly Lys Cys- b
in which:
- Isle Ile Tyr Cys Asn Arg Arg Thr Gly Lys Cys is the central link, size
reduced, which has 2 cysteine residues forming a disulfide bridge
intramolecular.

- a est un reste variable de séquence comprenant de 0 à 10 acides aminés,
- b est un reste variable de séquence comprenant de 0 à 5 acides aminés,
chaque groupe de trois lettres constitutif du maillon central et des groupes a et b étant le symbole à trois lettres d'un des 20 acides aminés de base.a is a variable residue of sequence comprising from 0 to 10 amino acids,
b is a variable residue of sequence comprising from 0 to 5 amino acids,
each group of three letters constituting the central link and groups a and b being the three-letter symbol of one of the 20 basic amino acids.

De préférence, lorsque "a" comprend au moins un acide aminé, celui-ci est l'un
des 20 acides aminés de base et plus particulièrement choisi dans le groupe
comprenant Gly, Ser, Lys, Pro et Val. De préférence, lorsque "b" comprend au
moins un acide aminé, celui-ci est l'un des 20 acides aminés de base et plus
particulièrement choisi dans le groupe comprenant Gln, Arg et Met.Preferably, when "a" comprises at least one amino acid, this is one
of the 20 basic amino acids and more particularly chosen in the group
including Gly, Ser, Lys, Pro and Val. Preferably, when "b" comprises at
minus one amino acid, this one is one of 20 base amino acids and more
particularly selected from the group consisting of Gln, Arg and Met.

Ce peptide est appelé dans la suite "thanatine". This peptide is called in the following "thanatin".

Un autre aspect de l'invention concerne un procédé pour l'obtention et l'isolement du peptide ci-dessus, qui est caractérisé en ce que successivement:
a) on fait agir sur des Podisus sp de préférence maculiventris au moins un inducteur
bactérien de la synthèse biologique de la molécule;
b) on effectue l'extraction par mise en contact d'un broyat de Podisus obtenues
précédemment avec un milieu acide sous agitation, puis par centrifugation;
c) on fractionne le surnageant avec séparation par lavage des molécules hydrophiles et
élution des molécules hydrophobes par des éléments appropriés sur colonne séparatrice
d) on purifie les extraits.Another aspect of the invention relates to a method for obtaining and isolating the above peptide, which is characterized in that successively:
a) is carried out on Podisus sp preferably maculiventris at least one inducer
bacterial biologic synthesis of the molecule;
b) the extraction is carried out by placing in contact with a crushed Podisus obtained
previously with an acid medium with stirring, then by centrifugation;
c) the supernatant is fractionated by washing off the hydrophilic molecules and
elution of the hydrophobic molecules by appropriate elements on a separating column
d) the extracts are purified.

e) on caractérise le peptide. e) the peptide is characterized.

La première étape (induction bactérienne), est réalisée par simple agression
physique telle qu'une blessure par exemple une piqûre, ou bien, et de préférence, à partir
de Podisus sp.sp de préférence maculiventris adultes en les anesthésiant à l'aide d'un gaz
anesthésiant, par exemple du gaz carbonique ou tout gaz ayant des effets similaires, et en
les immunisant par piqûre thoracique à l'aide d'une aiguille de préférence plongée avant
chaque inoculation dans une suspension bactérienne. De préférence, l'inoculation est
effectuée avec au moins une bactérie choisie dans le groupe comprenant les bactéries
(Gram positif) et les bactéries (Gram négatif). Comme exemple représentatif préféré de
bactérie (Gram positif), on peut citer Micrococcus luteus. Comme exemple représentatif
préféré de bactérie (Gram négatif), on peut citer Escherichia coli.De manière plus
préférée on peut utiliser simultanément au moins une bactérie choisie dans le groupe
comprenant les bactéries (Gram positif) et au moins une bactérie choisie dans le groupe
comprenant les bactéries (Gram négatif).The first step (bacterial induction), is carried out by simple aggression
such as an injury, for example a sting, or, preferably, from
of Podisus sp.sp preferably adult maculiventris by anesthetizing them with a gas
anesthetic, for example carbon dioxide or any gas having similar effects, and
chest stab immunizing with a needle preferably dive forward
each inoculation into a bacterial suspension. Preferably, the inoculation is
with at least one bacterium selected from the group consisting of bacteria
(Gram positive) and bacteria (Gram negative). As a preferred representative example of
bacterium (Gram positive), mention may be made of Micrococcus luteus. As a representative example
preferred bacterium (Gram negative), Escherichia coli.More
preferred one can simultaneously use at least one bacterium chosen from the group
comprising the bacteria (Gram-positive) and at least one bacterium selected from the group
including bacteria (Gram negative).

De manière préférée la seconde étape (extraction) on met en contact le broyat de
Podisus ou l'hémolymphe de Podisus avec un mileu acide constitué d'une solution acide
d'un acide ou neutre (de pH de 2 à 7). La solution peut être une solution d'un acide minéral
ou organique comme par exemple d'acide trifluoroacétique. L'extrait obtenu est ensuite
centrifugé à froid à une vitesse de 5000 à 20000 tpm, pendant 15 à 60 mn.Preferably, the second step (extraction) is brought into contact with the ground material.
Podisus or Podisus haemolymph with an acidic acid medium consisting of an acidic solution
of an acid or neutral (pH of 2 to 7). The solution can be a solution of a mineral acid
or organic such as trifluoroacetic acid. The extract obtained is then
centrifuged at a speed of 5000 to 20000 rpm for 15 to 60 minutes.

De manière préférée la troisième étape (fractionnement), le lavage des molécules
solubles dans l'eau est effectué avec une solution acide diluée et l'élution des molécules
hydrophobes avec un éluant approprié. On obtient de bons résultats avec de l'acide
trifluoroacétique pour le lavage et un éluant contenant des quantités croissantes
d'acétonitrile en solution acide diluée. Preferably the third step (fractionation), the washing of the molecules
soluble in water is performed with a dilute acidic solution and the elution of the molecules
hydrophobic with a suitable eluent. Good results are obtained with acid
trifluoroacetic for washing and an eluent containing increasing amounts
of acetonitrile in dilute acid solution.

De manière préférée la quatrième étape (purification) est effectuée avec un éluant convenable qui peut être différent ou identique à celui de la phase précédente. Preferably the fourth step (purification) is carried out with a suitable eluent which may be different or identical to that of the previous phase.

De manière préférée, dans la dernière étape (caractérisation), la nature du peptide est analysée selon la méthode de séquençage par dégradation d' Edman (Acta Chemica
Scandinavia 10 (1956) p; 761-768). Selon cette méthode on obtient par exemple la structure suivante:
Gly Ser Lys Lys Pro Val Pro - Ile Ile Tyr X Asn Arg Arg Thr Gly Lys Xs - Gln Arg
Met dans laquelle X est un chaînon non identifiable. La molécule a alors été soumise à une réduction suivie d' une alkylation pour ensuite soumettre la molécule au séquençage par la dégradation d'Edman. On a obtenu la séquence suivante:
Gly Ser Lys Lys Pro Val Pro - Ile Ile Tyr Cys Asn Arg Arg Thr Gly Lys Cys - Gln Arg
Met
composé G21M (composé 1)
La masse mesurée de la thanatine est de 2431 + 1 Da.Or la masse calculée sur la base des données de séquences est de 2434 Da; il y a donc un défaut de masse, qui en tenant compte de l'incertitude sur la mesure, correspond à la formation d'un pont dissulfure intramoléculaire.Preferably, in the last step (characterization), the nature of the peptide is analyzed according to the method of degradation sequencing of Edman (Acta Chemica
Scandinavia 10 (1956) p; 761-768). According to this method, for example, the following structure is obtained:
Gly Ser Lys Pro Pro Pro - Isle Tyr X Asn Arg Arg Thr Gly Lys Xs - Gln Arg
Met in which X is an unidentifiable link. The molecule was then reduced followed by alkylation to subsequently subject the molecule to sequencing by Edman degradation. We obtained the following sequence:
Gly Ser Lys Pro Pro Val - Tyr Island Cys Asn Arg Arg Thr Gly Lys Cys - Gln Arg
Met
compound G21M (compound 1)
The measured mass of thanatin is 2431 ± 1 Da. The mass calculated on the basis of the sequence data is 2434 Da; there is therefore a mass defect, which taking into account the uncertainty of the measurement, corresponds to the formation of an intramolecular dissulphide bridge.

De la même manière on a caractérisé les thanatines suivantes:
- Lys Pro Val Pro - Ile Ile Tyr Cys Asn Mg Arg Thr Gly Lys Cys - Gln Arg
Met: composé K18M (composé 3)
- Val Pro - Ile Ile Tyr Cvs Asn Mg Mg Thr Gly Lys Cys - Gln Arg Met:
composé V16M (composé 4)
- Ile Ile Tyr Cys Asn Mg Arg Thr Gly Lys Cys - Gln Arg Met:
composé I14M (composé 5)
- Gly Ser Lys Lys Pro Val Pro - Ile Ile Tvr Cys Asn Mg Mg Thr Glv Lys Cys
Gln Arg : : composé G20R (composé 6)
- Gly Ser Lys Lys Pro Val Pro - Ile Ile Tyr Cys Asn Mg Mg Thr Gly Lys Cys
Gln: composé G19Q (composé 7)
- Gly Ser Lys Lys Pro Val Pro - Ile Ile Tvr Cys Asn Mg Mg Thr Gly Lys Cys -:
composé G 1 8C (native) (composé 8)
L'invention concerne ce peptide sous forme de ses isomères optiques L et D, seuls ou en combinaison. La forme L est celle qu'on trouve à l'état natif.In the same way, the following thanatines have been characterized:
- Lys Pro Val Pro - Ile Isle Tyr Cys Asn Mg Arg Thr Gly Lily Cys - Gln Arg
Met: compound K18M (compound 3)
- Pro Val - Ile Tire Island Cvs Asn Mg Mg Gly Lys Cys - Gln Arg Met:
compound V16M (compound 4)
- Tyr Island Cys Asn Mg Arg Thr Gly Lys Cys - Gln Arg Met:
compound I14M (compound 5)
- Gly Ser Lys Pro Pro Valys - Isle Ile Tvr Cys Asn Mg Mg Thr Glv Lys Cys
Gln Arg:: compound G20R (compound 6)
- Gly Ser Lys Lys Pro Val Pro - Ile Isle Tyr Cys Asn Mg Mg Thr Gly Lys Cys
Gln: compound G19Q (compound 7)
- Gly Ser Lys Pro Pro Valys - Ile Ile Tvr Asg Cys Mg Mg Thr Gly Lys Cys -:
compound G 1 8C (native) (compound 8)
The invention relates to this peptide in the form of its optical isomers L and D, alone or in combination. The form L is the one found in the native state.

Selon un autre aspect l'invention a pour objet un procédé pour l'obtention du peptide ci-dessus, qui est caractérisé en ce qu'on procède par synthèse chimique BOC ou
FMOC , à partir des formes L ou D des acides aminés de base selon la forme du dérivé final recherchée, (J. Am. Chem. Soc 85 (1963), 2149-2154 et Tetrahedron Letters 32 (1979), 3041-3042 ) suivie d'une renaturation (reformation du pont cystéine) dans une solution à 100mM d'acétate d'ammonium à pH 8,5 pendant 24 h sous agitation à température ambiante. La thanatine ainsi obtenue présente les mêmes propriétés chromatographiques que la molécule native. Le dérivé D correspondant est obtenu selon les mêmes méthodes à partir des dérivés D des acide aminés correspondants (composé 2).According to another aspect, the subject of the invention is a process for obtaining the above peptide, which is characterized in that it is carried out by BOC chemical synthesis or
FMOC, from L or D forms of the basic amino acids according to the form of the desired end-product, (J. Am Chem Chem Soc 85 (1963), 2149-2154 and Tetrahedron Letters 32 (1979), 3041-3042) followed by renaturation (reforming the cysteine bridge) in a 100mM solution of ammonium acetate at pH 8.5 for 24 h with stirring at room temperature. The thanatin thus obtained has the same chromatographic properties as the native molecule. The corresponding derivative D is obtained according to the same methods from the D derivatives of the corresponding amino acids (compound 2).

Selon un autre aspect l'invention a pour objet une composition antibactérienne et/ou antifongique utilisable pour la protection des plantes contre les maladies bactériennes et les maladies fongiques. According to another aspect, the subject of the invention is an antibacterial and / or antifungal composition that can be used for protecting plants against bacterial diseases and fungal diseases.

Selon un autre aspect l'invention a pour objet un procédé de protection des plantes contre les maladies fongiques, caractérisé en ce qu'on applique le peptide sur les plantes. According to another aspect the invention relates to a method for protecting plants against fungal diseases, characterized in that the peptide is applied to the plants.

Selon un autre aspect l'invention a pour objet une composition antibactérienne et antifongique utilisable pour la lutte contre les maladies fongiques de l'homme et des animaux. En effet la thanatine présente une activité antibactérienne contre toute une variété de germes à Gram négatif et à Gram positif, aussi bien en milieu de culture riche (LB) qu'en milieu pauvre (PB). Elle provoque en outre l'agrégation des bactéries. Par ailleurs la thanatine ne présente aucun effet lytique sur des hématies de porc. According to another aspect, the subject of the invention is an antibacterial and antifungal composition that can be used for the fight against fungal diseases of man and animals. Indeed thanatine has antibacterial activity against a variety of gram-negative and gram-positive organisms, both in rich culture medium (LB) and in poor medium (PB). It also causes the aggregation of bacteria. In addition, thanatin has no lytic effect on pork red cells.

Les exemples suivants illustrent l'obtention et les propriétés antibactériennes et antifongiques du peptide et des compositions selon l'invention. The following examples illustrate the obtaining and the antibacterial and antifungal properties of the peptide and compositions according to the invention.

Exemple 1: Isolement et caractérisation du peptide
on procède selon les étapes suivantes:
- induction naturelle de la synthèse biologique:
Des Podisus maculiventris sont immunisées par piqûre au niveau thoracique à proximité de l'insertion alaire à l'aide d'une fine aiguille plongée avant chaque inoculation dans une suspension bactérienne d'Escherischia coli 1106 (Gram négatif) tué à la chaleur pendant 2 mn à 100"C. Les insectes sont conservés à 20"C durant 24 heures. Example 1 Isolation and Characterization of the Peptide
we proceed according to the following steps:
- natural induction of biological synthesis:
Podisus maculiventris are immunized by thoracic puncture near the wing insertion with a fine dive needle prior to each inoculation into a bacterial suspension of Escherichia coli 1106 (Gram negative) killed by heat for 2 minutes. at 100 ° C. The insects are kept at 20 ° C. for 24 hours.

- extraction et de purification:
L'hémolymphe (1,2ml) est prélevée par incision de la cuticule. Elle est transférée dasn un tube maintenu au froid en présence d'un inhibiteur de protéases (aprotinine) puis centrifugée à 2000 G(10.000 tpm) pendant 25 minutes à 4"C. Le surnageant ainsi obtenu est immédiatement soumis aux différentes étapes de la purification.- extraction and purification:
The hemolymph (1.2 ml) is removed by incision of the cuticle. It is transferred to a cold-maintained tube in the presence of a protease inhibitor (aprotinin) and then centrifuged at 2000 G (10,000 rpm) for 25 minutes at 4 ° C. The supernatant thus obtained is immediately subjected to the various purification steps. .

Fractionnement de l'extrait sur cartouches Sep-Pak C18
Après dépôt de l'extrait sur des cartouches Sep-Pak C18 les molécules à caractère hydrophile sont éliminées par un simple lavage par 5 ml d'eau acidifiée (TFA= acide trifluoacétique) 0,05%).Splitting the extract on Sep-Pak C18 cartridges
After depositing the extract on Sep-Pak C18 cartridges, the hydrophilic molecules are removed by simply washing with 5 ml of acidified water (TFA = trifluoroacetic acid) 0.05%).

L'élution des molécules hydrophobes est réalisée avec des solutions à 20, 50 et 80% d'acétonitrile en eau acidifiée (TFA 0,05%, 5 ml par cartouche). The elution of the hydrophobic molecules is carried out with 20, 50 and 80% acetonitrile solutions in acidified water (0.05% TFA, 5 ml per cartridge).

Les fractions recueillies sont dénommées "Elution 20%", "Elution 50%" et "Elution 80%" et concentrées sous vide. Les fractions sont ensuite reconstituées avec de l'eau qualité HPLC avant l'analyse en HPLC. The collected fractions are named "Elution 20%", "Elution 50%" and "Elution 80%" and concentrated under vacuum. The fractions are then reconstituted with HPLC grade water prior to HPLC analysis.

Purification par HPLC des molécules à activité antibactérienne etlou antifongique
première étape:
Les fractions "Elution 20%" et "Elution 50%" sont analysées séparément sur deux colonnes de tamisage moléculaire montées en série (SEC 2000 + SEC 3000,
Beckman) sous 30% d'acétonitrile en présence de TFA 0,05% à un débit de 0,5 ml/mn.HPLC purification of molecules with antibacterial and / or antifungal activity
first stage:
The fractions "Elution 20%" and "Elution 50%" are analyzed separately on two columns of molecular sieving series (SEC 2000 + SEC 3000,
Beckman) under 30% acetonitrile in the presence of 0.05% TFA at a flow rate of 0.5 ml / min.

Les fractions ayant une activité antibactérienne et/ou antifongique sont ensuite purifiées en chromatographie de phase inverse en HPLC. The fractions having antibacterial and / or antifungal activity are then purified by reversed phase HPLC chromatography.

purification finale: deux étapes sont nécessaires pour la purification des molécules antibactériennes et antifongiques. Final purification: Two steps are necessary for the purification of antibacterial and antifungal molecules.

- a) Les fractions présentant cette activité ont été dans un premier temps purifiées sur une colonne de phase inverse Aquapore OD 300 C18 avec un gradient linéaire d'acétonitrile de 2 à 52% dans l'eau acidifiée (TFA à 0,05%) en 90 minutes (soit une augmentation de 0,44% d'acétonitrile par minute) pour un débit de 1 ml/min. a) Fractions exhibiting this activity were firstly purified on an Aquapore OD 300 C18 reverse phase column with a linear gradient of acetonitrile of 2 to 52% in acidified water (0.05% TFA) in 90 minutes (an increase of 0.44% acetonitrile per minute) for a flow rate of 1 ml / min.

- b) la fraction résultante de a) est ensuite purifiée sur une colonne Aquapore OD300C 18. b) the resulting fraction of a) is then purified on an Aquapore OD300C 18 column.

L'élution est réalisée dans un gradient linéaire biphasique d'acétonitrile de 2 à 17% dans l'eau acidifiée (TFA 0,05%) en 10 minutes et de 17 à 27% en 45 min à un débit de 1 ml/min. Le composé 1 est obtenue pour un pourcentage de 18,6% d'acétonitrile. The elution is carried out in a linear biphasic gradient of acetonitrile of 2 to 17% in acidified water (0.05% TFA) in 10 minutes and 17 to 27% in 45 min at a flow rate of 1 ml / min. . Compound 1 is obtained for a percentage of 18.6% of acetonitrile.

La pureté de la fraction active est contrôlée par électrophorèse capillaire avant la détermination de la séquence par dégradation d'Edman et analyse en spectrométrie de masse. The purity of the active fraction is monitored by capillary electrophoresis prior to sequence determination by Edman degradation and mass spectrometry analysis.

Exemple 2: Test in vitro: Mesure de l'activité antibactérien et antifongique par microspectrophotométrie
Les spores des champignons à tester ( à une concentration finale de 104 spores/ml) sont mises en suspension dans un milieu de culture contenant du bouillon de pomme de terre (Potato Dextrose Broth, DIFCO) à 1/2 force ionique(12g/l). Deux antibiotiques sont rajoutés au milieu de culture: la tétracycline (10pg/ml) et du claforan (10011g/ml). On dépose 20 pi de chaque fraction contenant la thanatine à analyser dans des plaques de microtitration en présence de 80 Cll de milieu de culture contenant les spores.Au bout de 24 heures d'incubation à 25"C dans l'obscurité, on observe sous microscope la croissance des champignons. Au bout de 48 heures on évalue la croissance par mesure de l'absorbance à 600 nm à l'aide d'un lecteur de plaques ELISA.Example 2 In Vitro Test: Measurement of Antibacterial and Antifungal Activity by Microspectrophotometry
The spores of the fungi to be tested (at a final concentration of 104 spores / ml) are suspended in a culture medium containing potato broth (Potato Dextrose Broth, DIFCO) at 1/2 ionic strength (12 g / l ). Two antibiotics are added to the culture medium: tetracycline (10 μg / ml) and claforan (100 μg / ml). 20 μl of each thanatine-containing fraction to be assayed in microtitre plates are added in the presence of 80 μl of culture medium containing the spores. After 24 hours of incubation at 25 ° C. in the dark, After 48 hours the growth was evaluated by measuring the absorbance at 600 nm using an ELISA plate reader.

Dans ces conditions on observe une inhibition totale (sans sels de calcium), à une concentration (C.I. 100) en CLM, indiquée dans les deux tableaux 1 et 2 suivants concernant le premier l'activité fongicide, l'autre l'activité bactéricide des composés 1 à 8:
Tableau 1

composés

Under these conditions, a total inhibition (without calcium salts) is observed, at a concentration (IC 100) in CLM, indicated in the following two Tables 1 and 2 concerning the fungicidal activity, the other the bactericidal activity of the fungicides. compounds 1 to 8:
Table 1

compounds

<tb> <SEP> champignons <SEP> 1 <SEP> 2 <SEP> 3 <SEP> 4 <SEP> 5 <SEP> 6 <SEP> 7 <SEP> 8
<tb> Aspergillusfumigatus <SEP> 40 <SEP> 40 <SEP> > 40 <SEP> > 40 <SEP> > 40 <SEP> > 40 <SEP> > 40 <SEP> > 40
<tb> <SEP> Neurospora <SEP> crassa <SEP> 2 <SEP> 2 <SEP> 5 <SEP> 20 <SEP> 40 <SEP> 10 <SEP> 20 <SEP> 20
<tb> <SEP> Botrytis <SEP> cinerea <SEP> 3 <SEP> 5 <SEP> 3 <SEP> 20 <SEP> > 40 <SEP> 10 <SEP> 10 <SEP> 10
<tb> Nectria <SEP> huematococca <SEP> 3 <SEP> 3 <SEP> 10 <SEP> 10 <SEP> > 40 <SEP> 5 <SEP> 10 <SEP> 10
<tb> <SEP> Trichoderma <SEP> viride <SEP> 3 <SEP> 3 <SEP> 5 <SEP> 40 <SEP> > 40 <SEP> 20 <SEP> 20 <SEP> 40
<tb> Alternariabrassicola <SEP> 5 <SEP> 5 <SEP> 5 <SEP> 10 <SEP> 10 <SEP> 10 <SEP> 10 <SEP> 10
<tb> <SEP> Fusarium <SEP> culmorum <SEP> 5 <SEP> 1 <SEP> 10 <SEP> 20 <SEP> 40 <SEP> 20 <SEP> 20 <SEP> 20
<tb> <SEP> Ascochyta <SEP> pisi <SEP> 10 <SEP> 3 <SEP> 20 <SEP> 40 <SEP> > 40 <SEP> 20 <SEP> 40 <SEP> 40
<tb> Fusarium <SEP> oxysporum <SEP> 20 <SEP> 10 <SEP> 40 <SEP> > 40 <SEP> > 40 <SEP> > 40 <SEP> > 40 <SEP> > 40
<tb>
Tableau 2

composés

<tb><SEP> fungi <SEP> 1 <SEP> 2 <SEP> 3 <SEP> 4 <SEP> 5 <SEP> 6 <SEP> 7 <SEP> 8
<tb> Aspergillusfumigatus <SEP> 40 <SEP> 40 <SEP>> 40 <SEP>> 40 <SEP>> 40 <SEP>> 40 <SEP>> 40 <SEP>> 40
<tb><SEP> Neurospora <SEP> crassa <SEP> 2 <SEP> 2 <SEP> 5 <SEP> 20 <SEP> 40 <SEP> 10 <SEP> 20 <SEP> 20
<tb><SEP> Botrytis <SEP> cinerea <SEP> 3 <SEP> 5 <SEP> 3 <SEP> 20 <SEP>> 40 <SEP> 10 <SEP> 10 <SEP> 10
<tb> Nectria <SEP> huematococca <SEP> 3 <SEP> 3 <SEP> 10 <SEP> 10 <SEP>> 40 <SEP> 5 <SEP> 10 <SEP> 10
<tb><SEP> Trichoderma <SEP> viride <SEP> 3 <SEP> 3 <SEP> 5 <SEP> 40 <SEP>> 40 <SEP> 20 <SEP> 20 <SEP> 40
<tb> Alternariabrassicola <SEP> 5 <SEP> 5 <SEP> 5 <SEP> 10 <SEP> 10 <SEP> 10 <SEP> 10 <SEP> 10
<tb><SEP> Fusarium <SEP> culmorum <SEP> 5 <SEP> 1 <SEP> 10 <SEP> 20 <SEP> 40 <SEP> 20 <SEP> 20 <SEP> 20
<tb><SEP> Ascochyta <SEP> pisi <SEP> 10 <SEP> 3 <SEP> 20 <SEP> 40 <SEP>> 40 <SEP> 20 <SEP> 40 <SEP> 40
<tb> Fusarium <SEP> oxysporum <SEP> 20 <SEP> 10 <SEP> 40 <SEP>> 40 <SEP>> 40 <SEP>> 40 <SEP>> 40 <SEP>> 40
<Tb>
Table 2

compounds

<tb> <SEP> bactéries <SEP> 1 <SEP> 2 <SEP> 3 <SEP> 4 <SEP> 5 <SEP> 6 <SEP> 7 <SEP> 8
<tb> <SEP> Aerococcus <SEP> viridens <SEP> 2 <SEP> 2 <SEP> 2 <SEP> 3 <SEP> 3 <SEP> 5 <SEP> 5 <SEP> 5
<tb> <SEP> Micrococcusluteus <SEP> 3 <SEP> 5 <SEP> 3 <SEP> 5 <SEP> 10 <SEP> 5 <SEP> 10 <SEP> 10
<tb> <SEP> Bacillus <SEP> megaterium <SEP> 5 <SEP> 2 <SEP> 5 <SEP> 10 <SEP> 20 <SEP> 5 <SEP> 10 <SEP> 10
<tb> <SEP> Badilussubtilis <SEP> 5 <SEP> 40 <SEP> 40 <SEP> 40 <SEP> > 40 <SEP> 40 <SEP> > 40 <SEP> > 40
<tb> Staphylococcus <SEP> aureus <SEP> > 40 <SEP> > 40 <SEP> > 40 <SEP> > 40 <SEP> > 40 <SEP> > 40 <SEP> > 40 <SEP> > 40
<tb> <SEP> Pediococcus <SEP> 40 <SEP> 800 <SEP> 40 <SEP> 40 <SEP> > 40 <SEP> 40 <SEP> 40 <SEP> 40
<tb> <SEP> acidolactici
<tb> <SEP> E.coliD22 <SEP> 1 <SEP> 40 <SEP> 1 <SEP> 2 <SEP> 40 <SEP> 40 <SEP> > 40 <SEP> > 40
<tb> <SEP> E.coli <SEP> D31 <SEP> 1 <SEP> 40 <SEP> 1 <SEP> 2 <SEP> 40 <SEP> 40 <SEP> > 40 <SEP> > 40
<tb> <SEP> E.coli <SEP> 1106 <SEP> 2 <SEP> 800 <SEP> 2 <SEP> > 40 <SEP> > 40 <SEP> > 40 <SEP> > 40 <SEP> > 40
<tb> <SEP> Salmonella <SEP> 2 <SEP> 800 <SEP> 3 <SEP> > 40 <SEP> > 40 <SEP> > 40 <SEP> > 40 <SEP> > 40
<tb> <SEP> typhimunum <SEP>
<tb> Klebsiella <SEP> pneumonie <SEP> 2 <SEP> > 800 <SEP> 3 <SEP> 5 <SEP> 40 <SEP> > 40 <SEP> > 40 <SEP> > 40
<tb> <SEP> Enterobacter <SEP> chlocae <SEP> 3 <SEP> > 800 <SEP> 3 <SEP> 10 <SEP> 40 <SEP> > 40 <SEP> > 40 <SEP> > 40
<tb> <SEP> Envia <SEP> carotovora <SEP> 20 <SEP> 40 <SEP> 40 <SEP> 40 <SEP> > 40 <SEP> > 40 <SEP> > 40
<tb> <SEP> Pseudomonas <SEP> 40 <SEP> 800 <SEP> 40 <SEP> > 40 <SEP> > 40 <SEP> > 40 <SEP> > 40 <SEP> > 40
<tb> <SEP> aeru <SEP> inosa <SEP>
<tb>
Ces résultats montrent l'excellente activité antibactérienne et antifongique du peptide selon l'invention, activité qui est au niveau des meilleurs peptides connus.<tb><SEP> bacteria <SEP> 1 <SEP> 2 <SEP> 3 <SEP> 4 <SEP> 5 <SEP> 6 <SEP> 7 <SEP> 8
<tb><SEP> Aerococcus <SEP> viridens <SEP> 2 <SEP> 2 <SEP> 2 <SEP> 3 <SEP> 3 <SEP> 5 <SEP> 5 <SEP> 5
<tb><SEP> Micrococcusluteus <SEP> 3 <SEP> 5 <SEP> 3 <SEP> 5 <SEP> 10 <SEP> 5 <SEP> 10 <SEP> 10
<tb><SEP> Bacillus <SEP> megaterium <SEP> 5 <SEP> 2 <SEP> 5 <SEP> 10 <SEP> 20 <SEP> 5 <SEP> 10 <SEP> 10
<tb><SEP> Badilussubtilis <SEP> 5 <SEP> 40 <SEP> 40 <SEP> 40 <SEP>> 40 <SEP> 40 <SEP>> 40 <SEP>> 40
<tb> Staphylococcus <SEP> aureus <SEP>> 40 <SEP>> 40 <SEP>> 40 <SEP>> 40 <SEP>> 40 <SEP>> 40 <SEP>> 40 <SEP>> 40
<tb><SEP> Pediococcus <SEP> 40 <SEP> 800 <SEP> 40 <SEP> 40 <SEP>> 40 <SEP> 40 <SEP> 40 <SEP> 40
<tb><SEP> acidolactici
<tb><SEP> E.coliD22 <SEP> 1 <SEP> 40 <SEP> 1 <SEP> 2 <SEP> 40 <SEP> 40 <SEP>> 40 <SEP>> 40
<tb><SEP> E.coli <SEP> D31 <SEP> 1 <SEP> 40 <SEP> 1 <SEP> 2 <SEP> 40 <SEP> 40 <SEP>> 40 <SEP>> 40
<tb><SEP> E.coli <SEP> 1106 <SEP> 2 <SEP> 800 <SEP> 2 <SEP>> 40 <SEP>> 40 <SEP>> 40 <SEP>> 40 <SEP>> 40
<tb><SEP> Salmonella <SEP> 2 <SEP> 800 <SEP> 3 <SEP>> 40 <SEP>> 40 <SEP>> 40 <SEP>> 40 <SEP>> 40
<tb><SEP> typhimunum <SEP>
<tb> Klebsiella <SEP> pneumonia <SEP> 2 <SEP>> 800 <SEP> 3 <SEP> 5 <SEP> 40 <SEP>> 40 <SEP>> 40 <SEP>> 40
<tb><SEP> Enterobacter <SEP> chlocae <SEP> 3 <SEP>> 800 <SEP> 3 <SEP> 10 <SEP> 40 <SEP>> 40 <SEP>> 40 <SEP>> 40
<tb><SEP> Envia <SEP> Carotovora <SEP> 20 <SEP> 40 <SEP> 40 <SEP> 40 <SEP>> 40 <SEP>> 40 <SEP>> 40
<tb><SEP> Pseudomonas <SEP> 40 <SEP> 800 <SEP> 40 <SEP>> 40 <SEP>> 40 <SEP>> 40 <SEP>> 40 <SEP>> 40
<tb><SEP> aeru <SEP> inosa <SEP>
<Tb>
These results show the excellent antibacterial and antifungal activity of the peptide according to the invention, which activity is at the level of the best known peptides.

Exemple 3: test in vitro d'agrégation des bactéries
A une suspension de bactéries Gram négatif (E.coli) ou Gram positif (M. luteus), on ajoute de la thanatine(composé 1) à une concentration de 25ci. On observe la formation d'agrégats de bactéries. Ce phénomène disparaît par addition de Ca++ (lmM) et l'agrégation est à nouveau observée si on ajoute de l'EDTA (lmM).Example 3 In Vitro Bacteria Aggregation Test
To a suspension of Gram negative (E. coli) or Gram positive (M. luteus) bacteria, thanatin (compound 1) is added at a concentration of 25 μC. The formation of aggregates of bacteria is observed. This phenomenon disappears by addition of Ca ++ (lmM) and the aggregation is again observed if EDTA (lmM) is added.

Les résultats obtenus avec le composé 1 sont consignés dans le tableau 3, dans lequel CMI signifie concentration minimum d'inhibition à 100%. The results obtained with compound 1 are shown in Table 3, in which MIC stands for 100% minimum inhibition concentration.

Tableau 3

Table 3

<tb> <SEP> Bactérie <SEP> Type <SEP> Gram <SEP> CMI <SEP> (113) <SEP> CMI <SEP> (PB) <SEP> mode <SEP> d'action
<tb> <SEP> +/- <SEP> IsM <SEP> MM <SEP>
<tb> Salmonella <SEP> himurium <SEP> - <SEP> 5 <SEP> 2,4 <SEP> bacte'riostati <SEP> ue <SEP>
<tb> Enterobacter <SEP> cloaca <SEP> p12 <SEP> <SEP> 0,6 <SEP> 2,4 <SEP> bactériolytique <SEP>
<tb> <SEP> Escherichia <SEP> coli <SEP> D31 <SEP> 20 <SEP> 0,6 <SEP> bactériolytique
<tb> <SEP> Escherichia <SEP> coli <SEP> D22 <SEP> - <SEP> 10 <SEP> 0,6 <SEP> bactériolytique
<tb> <SEP> Escherichia <SEP> coli <SEP> 1106 <SEP> - <SEP> 20 <SEP> 1,2 <SEP> bactériolytique
<tb> <SEP> Klebsellia <SEP> pneumonie <SEP> - <SEP> 5 <SEP> 2,4 <SEP> bactériolytique
<tb> <SEP> Erwinia <SEP> carotovora <SEP> - <SEP> 10 <SEP> 20 <SEP>
<tb> Pseudomonas <SEP> aeruginosa <SEP> - <SEP> 40 <SEP> 40 <SEP>
<tb> Xanthomonas <SEP> campestris <SEP> 10 <SEP> - <SEP> bactériolytique
<tb> <SEP> Micrococcus <SEP> luteus <SEP> + <SEP> 10 <SEP> 2,4 <SEP> bactériolytique <SEP>
<tb> <SEP> Bacillus <SEP> megaterium <SEP> + <SEP> - <SEP> 20 <SEP>
<tb> <SEP> Streptococcus <SEP> pyogenes <SEP> + <SEP> 10 <SEP> 40 <SEP>
<tb> <SEP> Stre <SEP> tococcus <SEP> aecalis <SEP> + <SEP> 10 <SEP> - <SEP>
<tb> <SEP> Bacillus <SEP> subtilis <SEP> + <SEP> 10 <SEP> 20 <SEP> bactériolytique
<tb> <SEP> Aerococcus <SEP> viridans <SEP> + <SEP> 10 <SEP> 0,6 <SEP> bactériolytique
<tb> Pediococcus <SEP> acidilactici <SEP> + <SEP> 20 <SEP> - <SEP> bactériostatique
<tb>
Exemple 4:Test in vitro: Mesure de l'activité hémolytique par microspectrophotométrie
Des suspensions d'hématies de porc (1%, 0,5% et 0,1% dans 100 1ll) sont déposées dans des puits de plaques de microtitration en présence de 80 Cll de la fraction à tester.<tb><SEP> Bacteria <SEP> Type <SEP> Gram <SEP> CMI <SEP> (113) <SEP> CMI <SEP> (PB) <SEP> action <SEP> mode
<tb><SEP> +/- <SEP> IsM <SEP> MM <SEP>
<tb> Salmonella <SEP> himurium <SEP> - <SEP> 5 <SEP> 2,4 <SEP>bacte'riostati<SEP> eu <SEP>
<tb> Enterobacter <SEP> cloaca <SEP> p12 <SEP><SEP> 0.6 <SEP> 2,4 <SEP> Bacteriolytic <SEP>
<tb><SEP> Escherichia <SEP> coli <SEP> D31 <SEP> 20 <SEP> 0.6 <SEP> Bacteriolytic
<tb><SEP> Escherichia <SEP> coli <SEP> D22 <SEP> - <SEP> 10 <SEP> 0.6 <SEP> Bacteriolytic
<tb><SEP> Escherichia <SEP> coli <SEP> 1106 <SEP> - <SEP> 20 <SEP> 1,2 <SEP> Bacteriolytic
<tb><SEP> Klebsellia <SEP> Pneumonia <SEP> - <SEP> 5 <SEP> 2,4 <SEP> Bacteriolytic
<tb><SEP> Erwinia <SEP> carotovora <SEP> - <SEP> 10 <SEP> 20 <SEP>
<tb> Pseudomonas <SEP> aeruginosa <SEP> - <SEP> 40 <SEP> 40 <SEP>
<tb> Xanthomonas <SEP> campestris <SEP> 10 <SEP> - <SEP> Bacteriolytic
<tb><SEP> Micrococcus <SEP> luteus <SEP> + <SEP> 10 <SEP> 2,4 <SEP> Bacteriolytic <SEP>
<tb><SEP> Bacillus <SEP> megaterium <SEP> + <SEP> - <SEP> 20 <SEP>
<tb><SEP> Streptococcus <SEP> pyogenes <SEP> + <SEP> 10 <SEP> 40 <SEP>
<tb><SEP> Stre <SEP> tococcus <SEP> aecalis <SEP> + <SEP> 10 <SEP> - <SEP>
<tb><SEP> Bacillus <SEP> subtilis <SEP> + <SEP> 10 <SEP> 20 <SEP> Bacteriolytic
<tb><SEP> Aerococcus <SEP> viridans <SEP> + <SEP> 10 <SEP> 0.6 <SEP> Bacteriolytic
<tb> Pediococcus <SEP> acidilactici <SEP> + <SEP> 20 <SEP> - <SEP> Bacteriostatic
<Tb>
Example 4 In Vitro Test: Measurement of Hemolytic Activity by Microspectrophotometry
Suspensions of porcine red blood cells (1%, 0.5% and 0.1% in 100 μl) are deposited in wells of microtiter plates in the presence of 80 μl of the test fraction.

Après incubation pendant une heure à 37 C, la plaque est centrifugée et la lyse des hématies est mise en évidence par mesure de l'absorbance à 600 nm à l'aide d'un lescteur de plaques ELISA. Les résultats montrent que la thanatine (composé n 1) n'exerce aucune action lytique sur la membrane des hématies de porc. En particulier on n'observe pas d'hémolyse aussi bien dans le témoin tampon qu'avec la thanatine, même à une concentration de 100 pM, alors que dans le même test du Triton X100 à une concentration de 0,01% provoque l'hémolyse des cellules sanguines.After incubation for one hour at 37 [deg.] C., the plate is centrifuged and the lysis of the red blood cells is demonstrated by measuring the absorbance at 600 nm using an ELISA plate erector. The results show that thanatin (compound no. 1) exerts no lytic action on the membrane of pork erythrocytes. In particular, no haemolysis was observed either in the buffer control or with thanatin, even at a concentration of 100 μM, whereas in the same test of Triton X100 at a concentration of 0.01% caused hemolysis of blood cells.

L'invention concerne donc également un procédé de traitement des plantes cultivées atteintes ou susceptibles d'être atteintes par les maladies fongiques, caractérisé en ce que l'on applique sur les parties aériennes de ces plantes une dose efficace d'un composé selon l'invention. Par dose efficace, on entend une quantité suffisante pour permettre le contrôle et la destruction des champignons présents sur ces plantes cultivées. Les doses d'utilisation peuvent toutefois varier dans de larges limites selon le champignon à combattre, le type de culture, les conditions climatiques, et selon le composé utilisé. The invention therefore also relates to a method for treating cultivated plants affected or likely to be affected by fungal diseases, characterized in that an effective dose of a compound according to the invention is applied to the aerial parts of these plants. invention. By effective dose is meant an amount sufficient to allow control and destruction of fungi present on these crops. The doses of use may, however, vary within wide limits depending on the fungus to be fished, the type of culture, the climatic conditions, and the compound used.

En pratique, les composés s'appliquent avantageusement à des doses de 0,002 à 5 kg/ha, et de préférence de 0,005 à 1 kg/ha. In practice, the compounds are advantageously applied at doses of 0.002 to 5 kg / ha, and preferably from 0.005 to 1 kg / ha.

Par maladies fongiques, on entend les maladies causées par les champignons phytopathogènes, notamment ceux de la famille des ascomycètes, adélomycètes. Fungal diseases are diseases caused by phytopathogenic fungi, especially those of the family Ascomycetes, adenomycetes.

Parmi les cultures pouvant faire l'objet d'un traitement antibactérien et antifongique à l'aide d'un composé selon l'invention, on peut citer le riz, les céréales, notamment le blé et l'orge, ainsi que les plantes arboricoles, fruitières, légumières. Among the crops that can be subjected to an antibacterial and antifungal treatment using a compound according to the invention, mention may be made of rice, cereals, in particular wheat and barley, as well as arboreal plants. , fruit trees, vegetables.

La présente invention a également pour objet des compositions, utilisables comme agents antibactériens et antifongiques, contenant comme matière(s) active(s) un (ou plusieurs) composé selon l'invention tel que décrit précédemment, en mélange avec les supports solides ou liquides, acceptables en agriculture et les agents tensio-actifs également acceptables en agriculture. En particulier sont utilisables les supports inertes et usuels et les agents tensio-actifs usuels. Ces compositions recouvrent non seulement les compositions prêtes à être appliquées sur la culture à traiter au moyen d'un dispositif adapté, tel qu'un dispositif de pulvérisation, mais également les compositions concentrées commerciales qui doivent être diluées avant application sur la culture. The subject of the present invention is also compositions which can be used as antibacterial and antifungal agents and which contain, as active material (s), one or more compounds according to the invention as described above, mixed with solid or liquid carriers. , acceptable in agriculture and surfactants also acceptable in agriculture. In particular, the usual inert carriers and surfactants are usable. These compositions cover not only the compositions ready to be applied to the crop to be treated by means of a suitable device, such as a spraying device, but also the commercial concentrated compositions which must be diluted before application to the crop.

Ces compositions peuvent contenir aussi toute sorte d'autres ingrédients tels que, par exemple, des colloides protecteurs, des adhésifs, des épaississants, des agents thixotropes, des agents de pénétration, des stabilisants, des séquestrants, etc... Plus généralement les composés utilisés dans l'invention peuvent être combinés à tous les additifs solides ou liquides correspondant aux techniques habituelles de la mise en formulation. These compositions may also contain any other kind of ingredients such as, for example, protective colloids, adhesives, thickeners, thixotropic agents, penetration agents, stabilizers, sequestering agents, etc. More generally the compounds used in the invention can be combined with all solid or liquid additives corresponding to the usual techniques of formulation.

D'une façon générale, les compositions selon l'invention contiennent habituellement de 0,05 à 95 % environ (en poids) d'un composé selon l'invention (appelé par la suite matière active), un ou plusieurs supports solides ou liquides et, éventuellement, un ou plusieurs agents tensioactifs. In general, the compositions according to the invention usually contain from about 0.05 to about 95% (by weight) of a compound according to the invention (hereinafter referred to as active ingredient), one or more solid or liquid carriers. and, optionally, one or more surfactants.

Par le terme "support", dans le présent exposé, on désigne une matière organique ou minérale, naturelle ou synthétique, avec laquelle le composé est combiné pour faciliter son application sur la plante, sur des graines ou sur le sol. Ce support est donc généralement inerte et il doit être acceptable en agriculture, notamment sur la plante traitée. By the term "carrier" in the present specification is meant an organic or inorganic material, natural or synthetic, with which the compound is combined to facilitate its application on the plant, on seeds or on the ground. This support is therefore generally inert and must be acceptable in agriculture, especially on the treated plant.

Le support peut être solide (argiles, silicates naturels ou synthétiques, silice, résines, cires, engrais solides, etc...) ou liquide (eau, alcools, notamment le butanol etc...). The support may be solid (clays, natural or synthetic silicates, silica, resins, waxes, solid fertilizers, etc.) or liquid (water, alcohols, especially butanol, etc.).

L'agent tensioactif peut être un agent émulsionnant, dispersant ou mouillant de type ionique ou non ionique ou un mélange de tels agents tensioactifs. On peut citer par exemple des sels d'acides polyacryliques, des sels d'acides lignosulfoniques, des sels d'acides phénolsulfoniques ou naphtalènesulfoniques, des polycondensats d'oxyde d'éthylène sur des alcools gras ou sur des acides gras ou sur des amines grasses, des phénols substitués (notamment des alkylphénols ou des arylphénols), des sels d'esters d'acides sulfosucciniques, des dérivés de la taurine (notamment des alkyltaurates), des esters phosphoriques d'alcools ou de phénols polyoxyéthylés, des esters d'acides gras et de polyols, les dérivés à fonction sulfates, sulfonates et phosphates des composés précédents. The surfactant may be an emulsifier, dispersant or wetting agent of ionic or nonionic type or a mixture of such surfactants. There may be mentioned, for example, salts of polyacrylic acids, salts of lignosulfonic acids, salts of phenolsulphonic or naphthalenesulphonic acids, polycondensates of ethylene oxide with fatty alcohols or with fatty acids or with fatty amines. substituted phenols (especially alkylphenols or arylphenols), salts of sulfosuccinic acid esters, taurine derivatives (especially alkyltaurates), phosphoric esters of polyoxyethylated alcohols or phenols, acid esters and polyols, sulfates, sulfonates and phosphates-based derivatives of the foregoing compounds.

La présence d'au moins un agent tensioactif est généralement indispensable lorsque le composé et/ou le support inerte ne sont pas solubles dans l'eau et que l'agent vecteur de l'application est l'eau.The presence of at least one surfactant is generally indispensable when the compound and / or the inert carrier are not soluble in water and the application carrier agent is water.

Ainsi donc, les compositions à usage agricole selon l'invention peuvent contenir les matières actives selon l'invention dans de très larges limites, allant de 0,05 % à 95 % (en poids). Leur teneur en agent tensio-actif est avantageusement comprise entre 5 % et 40 % en poids. Thus, the compositions for agricultural use according to the invention can contain the active ingredients according to the invention within very wide limits, ranging from 0.05% to 95% (by weight). Their content of surfactant is advantageously between 5% and 40% by weight.

Ces compositions selon l'invention sont elles-mêmes sous des formes assez diverses, solides ou liquides. These compositions according to the invention are themselves in quite diverse forms, solid or liquid.

Comme formes de compositions solides, on peut citer les poudres pour poudrage (à teneur en composé pouvant aller jusqu'à 100 %) et les granulés, notamment ceux obtenus par extrusion, par compactage, par imprégnation d'un support granulé, par granulation à partir d'une poudre (la teneur en composé dans ces granulés étant entre 0,5 et 80 % pour ces derniers cas), les comprimés ou tablettes effervescents. As forms of solid compositions, mention may be made of dusting powders (with a compound content of up to 100%) and granules, in particular those obtained by extrusion, by compacting, by impregnation of a granulated support, by granulation with from a powder (the content of compound in these granules being between 0.5 and 80% for the latter cases), tablets or effervescent tablets.

Le peptide selon l'invention peuvent encore être utilisés sous forme de poudres pour poudrage ; on peut aussi utiliser une composition comprenant 50 g de matière active et 950 g de talc ; on peut aussi utiliser une composition comprenant 20 g de matière active, 10 g de silice finement divisée et 970 g de talc ; on mélange et broie ces constituants et on applique le mélange par poudrage. The peptide according to the invention can also be used in the form of dusting powders; a composition comprising 50 g of active material and 950 g of talc can also be used; a composition comprising 20 g of active material, 10 g of finely divided silica and 970 g of talc can also be used; these constituents are mixed and milled and the mixture is applied by dusting.

Comme formes de compositions liquides ou destinées à constituer des compositions liquides lors de l'application, on peut citer les solutions, en particulier les concentrés solubles dans l'eau, les concentrés émulsionnables, les émulsions, les suspensions concentrées, les aérosols, les poudres mouillables (ou poudre à pulvériser), les pâtes, les gels. As forms of compositions which are liquid or intended to constitute liquid compositions during application, mention may be made of solutions, in particular water-soluble concentrates, emulsifiable concentrates, emulsions, concentrated suspensions, aerosols and powders. wettable (or powder spray), pasta, gels.

Les concentrés émulsionnables ou solubles comprennent le plus souvent 10 à 80 % de matière active, les émulsions ou solutions prêtes à l'application contenant, quant à elles, 0,001 à 20 % de matière active. The emulsifiable or soluble concentrates most often comprise 10 to 80% of active material, the emulsions or solutions ready for application containing, for their part, 0.001 to 20% of active ingredient.

En plus du solvant, les concentrés émulsionnables peuvent contenir quand c'est nécessaire, 2 à 20 % d'additifs appropriés comme les stabilisants, les agents tensio-actifs, les agents de pénétration, les inhibiteurs de corrosion, les colorants ou les adhésifs précédemment cités. In addition to the solvent, the emulsifiable concentrates may contain, when necessary, 2 to 20% of appropriate additives such as stabilizers, surfactants, penetrating agents, corrosion inhibitors, dyes or adhesives previously cited.

A partir de ces concentrés, on peut obtenir par dilution avec de l'eau des émulsions de toute concentration désirée, qui conviennent particulièrement à l'application sur les cultures. From these concentrates, emulsions of any desired concentration can be obtained by dilution with water, which are particularly suitable for application to crops.

A titre d'exemple, voici la composition de quelques concentrés émulsionnables:
Exemple CE 1:
- matière active 400 g/l
- dodécylbenzène sulfonate alcalin 24 g/I
- nonylphénol oxyéthylé à 10 molécules
d'oxyde d'éthylène 16 g/l
- cyclohexanone 200 g/l
- solvant aromatique q.s.p.1 litre
Selon une autre formule de concentré émulsionnable, on utilise::
Exemple CE 2
- matière active 250 g
- huile végétale époxydée 25 g
- mélange de sulfonate d'alcoylaryle et
d'éther de polyglycol et d'alcools gras 100 g
- diméthylformamide 50 g
- xylène 575 g
Les suspens ions concentrées, également applicables en pulvérisation, sont préparées de manière à obtenir un produit fluide stable ne se déposant pas et elles contiennent habituellement de 10 à 75 % de matière active, de 0,5 à 15 % d'agents tensioactifs, de 0,1 à 10 % d'agents thixotropes, de 0 à 10 % d'additifs appropriés, comme des anti-mousses, des inhibiteurs de corrosion, des stabilisants, des agents de pénétration et des adhésifs et, comme support, de l'eau ou un liquide organique dans lequel la matière active est peu ou pas soluble : certaines matières solides organiques ou des sels minéraux peuvent être dissous dans le support pour aider à empêcher la sédimentation ou comme antigels pour l'eau.As an example, here is the composition of some emulsifiable concentrates:
Example CE 1:
active ingredient 400 g / l
alkaline dodecylbenzene sulphonate 24 g / I
- Nonylphenol oxyethylated to 10 molecules
of ethylene oxide 16 g / l
cyclohexanone 200 g / l
- aromatic solvent qsp1 liter
According to another emulsifiable concentrate formula, use is made of:
Example CE 2
- active ingredient 250 g
- epoxidized vegetable oil 25 g
- Alkylaryl sulfonate mixture and
of polyglycol ether and fatty alcohols 100 g
dimethylformamide 50 g
- xylene 575 g
The concentrated suspensions, also applicable in spraying, are prepared in such a way as to obtain a stable fluid product which does not settle and they usually contain from 10 to 75% of active substance, from 0.5 to 15% of surfactants, from 0.1 to 10% of thixotropic agents, 0 to 10% of suitable additives, such as antifoams, corrosion inhibitors, stabilizers, penetrants and adhesives and, as a carrier, water or an organic liquid in which the active ingredient is little or not soluble: some organic solids or mineral salts may be dissolved in the support to help prevent sedimentation or as antifreezes for water.

A titre d'exemple, voici une composition de suspension concentrée:
Exemple SC 1:
- matière active 500 g
- phosphate de tristyrylphénol polyéthoxylé 50 g
- alkylphénol polyéthoxylé 50 g
- polycarboxylate de sodium 20 g
- éthylène glycol 50 g
- huile organopolysiloxanique (antimousse) 1 g
- polysaccharide 1,5 g
- eau 316,5 g
Les poudres mouillables (ou poudre à pulvériser) sont habituellement préparées de manière qu'elles contiennent 20 à 95 % de matière active, et elles contiennent habituellement, en plus du support solide, de 0 à 30 % d'un agent mouillant, de 3 à 20 % d'un agent dispersant, et, quand c'est nécessaire, de 0,1 à 10 % d'un ou plusieurs stabilisants et/ou autres additifs, comme des agents de pénétration, des adhésifs, ou des agents antimottants, colorants, etc...For example, here is a concentrated suspension composition:
Example SC 1:
active ingredient 500 g
- polyethoxylated tristyrylphenol phosphate 50 g
polyethoxylated alkylphenol 50 g
- sodium polycarboxylate 20 g
- ethylene glycol 50 g
- organopolysiloxane oil (antifoam) 1 g
- polysaccharide 1.5 g
- water 316.5 g
Wettable powders (or spray powder) are usually prepared to contain from 20 to 95% active ingredient, and usually contain, in addition to the solid support, from 0 to 30% of a wetting agent, at 20% of a dispersing agent, and, when necessary, from 0.1 to 10% of one or more stabilizers and / or other additives, such as penetrating agents, adhesives, or anti-caking agents, dyes, etc.

Pour obtenir les poudres à pulvériser ou poudres mouillables, on mélange intimement les matières actives dans les mélangeurs appropriés avec les substances additionnelles et on broie avec des moulins ou autres broyeurs appropriés. On obtient par là des poudres à pulvériser dont la mouillabilité et la mise en suspension sont avantageuses; on peut les mettre en suspension avec de l'eau à toute concentration désirée et ces suspensions sont utilisables trés avantageusement en particulier pour l'application sur les feuilles des végétaux. In order to obtain the spraying powders or wettable powders, the active ingredients in the appropriate mixers are intimately mixed with the additional substances and milled with suitable mills or other mills. Spray powders are thus obtained, the wettability and suspension of which are advantageous; they can be suspended with water at any desired concentration and these suspensions can be used very advantageously especially for application to the leaves of plants.

A la place des poudres mouillables, on peut réaliser des pâtes. Les conditions et modalités de réalisation et d'utilisation de ces pâtes sont semblables à celles des poudres mouillables ou poudres à pulvériser. In place of the wettable powders, pasta can be made. The conditions and methods of production and use of these pastes are similar to those of wettable powders or powders to be sprayed.

A titre d'exemple, voici diverses compositions de poudres mouillables (ou poudres à pulvériser):
Exemple PM 1
- matière active 50%
- alcool gras éthoxylé (agent mouillant) 2,5%
- phényléthylphénol éthoxylé (agent dispersant) 5%
- craie (support inerte) 42,5%
Exemple PM 2:
- matière active 10%
- alcool synthétique oxo de type ramifié, en
C 13 éthoxylé par 8 à 10 oxyde d'éthylène
(agent mouillant) 0,75%
- lignosulfonate de calcium neutre (agent
dispersant) 12%
- carbonate de calcium (charge inerte) q.s.p. 100 %
Exemple PM 3:
Cette poudre mouillable contient les mêmes ingrédients que dans l'exemple précédent, dans les proportions ci-après:
- matière active 75%
- agent mouillant 1,50%
- agent dispersant 8%
- carbonate de calcium (charge inerte) q.s.p. 100%
Exemple PM 4::
- matière active 90%
- alcool gras éthoxylé (agent mouillant) 4%
- phényléthylphénol éthoxylé (agent dispersant) 6%
Exemple PM 5:
- matière active 50%
- mélange de tensio-actifs anioniques et
non ioniques (agent mouillant) 2,5%
- lignosulfonate de sodium (agent dispersant) 5%
- argile kaolinique (support inerte) 42,5%
Les dispersions et émulsions aqueuses, par exemple les compositions obtenues en diluant à l'aide d'eau une poudre mouillable ou un concentré émulsionnable selon l'invention, sont comprises dans le cadre général de la présente invention. Les émulsions peuvent être du type eau-dans-l'huile ou huile-dans-l'eau et elles peuvent avoir une consistance épaisse comme celle d'une "mayonnaise".By way of example, here are various compositions of wettable powders (or powders for spraying):
Example PM 1
- active ingredient 50%
- ethoxylated fatty alcohol (wetting agent) 2.5%
- ethoxylated phenylethylphenol (dispersing agent) 5%
- chalk (inert support) 42.5%
Example PM 2:
- active ingredient 10%
- oxo synthetic alcohol of branched type, in
C 13 ethoxylated with 8 to 10 ethylene oxide
(wetting agent) 0.75%
- neutral calcium lignosulfonate (agent
dispersant) 12%
- calcium carbonate (inert filler) qs 100%
Example PM 3:
This wettable powder contains the same ingredients as in the previous example, in the following proportions:
- active ingredient 75%
- wetting agent 1.50%
- dispersing agent 8%
- calcium carbonate (inert filler) qs 100%
Example PM 4 ::
- active ingredient 90%
- ethoxylated fatty alcohol (wetting agent) 4%
- ethoxylated phenylethylphenol (dispersing agent) 6%
Example PM 5:
- active ingredient 50%
- mixture of anionic surfactants and
nonionic (wetting agent) 2.5%
- sodium lignosulfonate (dispersing agent) 5%
- kaolinic clay (inert support) 42.5%
The aqueous dispersions and emulsions, for example the compositions obtained by diluting with water a wettable powder or an emulsifiable concentrate according to the invention, are included in the general scope of the present invention. The emulsions may be of the water-in-oil or oil-in-water type and may have a thick consistency such as that of a "mayonnaise".

Les composés selon l'invention peuvent être formulés sous la forme de granulés dispersibles dans l'eau également compris dans le cadre de l'invention. The compounds according to the invention may be formulated in the form of water-dispersible granules also included in the scope of the invention.

Ces granulés dispersibles, de densité apparente généralement comprise entre environ 0,3 et 0,6 ont une dimension de particules généralement comprise entre environ 150 et 2000 et de préférence entre 300 et 1500 microns. These dispersible granules, having an apparent density generally of between approximately 0.3 and 0.6, have a particle size generally of between approximately 150 and 2000 and preferably between 300 and 1500 microns.

La teneur en matière active de ces granulés est généralement comprise entre environ 1 % et 90 %, et de préférence entre 25 % et 90 %. The active ingredient content of these granules is generally between about 1% and 90%, and preferably between 25% and 90%.

Le reste du granulé est essentiellement composé d'une charge solide et éventuellement d'adjuvants tensio-actifs conférant au granulé des propriétés de dispersibilité dans l'eau. Ces granulés peuvent être essentiellement de deux types distincts selon que la charge retenue est soluble ou non dans l'eau. Lorsque la charge est hydrosoluble, elle peut être minérale ou, de préférence, organique. On a obtenu d'excellents résultats avec l'urée. Dans le cas d'une charge insoluble, celle-ci est de préférence minérale, comme par exemple le kaolin ou la bentonite.Elle est alors avantageusement accompagnée d'agents tensio-actifs (à raison de 2 à 20. % en poids du granulé) dont plus de la moitié est, par exemple, constituée par au moins un agent dispersant, essentiellement anionique, tel qu'un polynaphtalène sulfonate alcalin ou alcalino terreux ou un lignosulfonate alcalin ou alcalino-terreux, le reste étant constitué par des mouillants non ioniques ou anioniques tel qu'un alcoyl naphtalène sulfonate alcalin ou alcalino-terreux. The rest of the granule is essentially composed of a solid filler and optionally surfactant adjuvants conferring on the granule properties of dispersibility in water. These granules can be essentially of two distinct types depending on whether the charge retained is soluble or not in water. When the filler is water soluble, it may be inorganic or, preferably, organic. Excellent results have been obtained with urea. In the case of an insoluble filler, it is preferably mineral, such as for example kaolin or bentonite. It is then advantageously accompanied by surfactants (in a proportion of 2 to 20% by weight of the granule ) of which more than half is, for example, at least one essentially anionic dispersing agent, such as an alkaline or alkaline earth polynaphthalene sulphonate or an alkaline or alkaline earth lignosulfonate, the remainder being nonionic wetting agents or anionic such as an alkaline or alkaline earth alkyl naphthalene sulfonate.

Par ailleurs, bien que cela ne soit pas indispensable, on peut ajouter d'autres adjuvants tels que des agents anti-mousse. On the other hand, although not essential, other adjuvants such as antifoam agents may be added.

Le granulé selon l'invention peut être préparé par mélange des ingrédients nécessaires puis granulation selon plusieurs techniques en soi connues (drageoir, lit fluide, atomiseur, extrusion, etc...). On termine généralement par un concassage suivi d'un tamisage à la dimension de particule choisie dans les limites mentionnées ci-dessus. On peut encore utilisé des granulés obtenus comme précédemment puis imprégnés avec une composition contenant la matière active. The granulate according to the invention can be prepared by mixing the necessary ingredients and then granulating according to several techniques known per se (dredger, fluid bed, atomizer, extrusion, etc ...). It is generally finished by crushing followed by sieving at the particle size chosen within the limits mentioned above. Granules obtained as above and then impregnated with a composition containing the active ingredient can also be used.

De préférence, il est obtenu par extrusion, en opérant comme indiqué dans les exemples ci-après. Preferably, it is obtained by extrusion, operating as indicated in the examples below.

Exemple GD 1: Granulés dispersibles
Dans un mélangeur, on mélange 90 % en poids de matière active et 10 % d'urée en perles. Le mélange est ensuite broyé dans un broyeur à broches. On obtient une poudre que l'on humidifie avec environ 8 % en poids d'eau. La poudre humide est extrudée dans une extrudeuse à rouleau perforé. On obtient un granulé qui est séché, puis concassé et tamisé, de façon à ne garder respectivement que les granulés d'une dimension comprise entre 150 et 2000 microns.Example GD 1: dispersible granules
In a mixer, 90% by weight of active material and 10% of urea beads are mixed. The mixture is then milled in a pin mill. A powder is obtained which is moistened with about 8% by weight of water. The wet powder is extruded in a perforated roll extruder. A granule is obtained which is dried, then crushed and sieved so as to keep only the granules with a size of between 150 and 2000 microns respectively.

Exemple GD2 : Granulés dispersibles
Dans un mélangeur, on mélange les constituants suivants:
- matière active 75%
- agent mouillant (alkylnaphtalène sulfonate de sodium) 2%
- agent dispersant (polynaphtalène sulfonate de sodium) 8%
- charge inerte insoluble dans l'eau (kaolin) 15%
Ce mélange est granulé en lit fluide, en présence d'eau, puis séché, concassé et tamisé de manière à obtenir des granulés de dimension comprise entre 0,15 et 0,80 mm.Example GD2: Dispersible granules
In a mixer, the following constituents are mixed:
- active ingredient 75%
- wetting agent (sodium alkylnaphthalene sulphonate) 2%
- dispersing agent (sodium polynaphthalene sulphonate) 8%
- inert load insoluble in water (kaolin) 15%
This mixture is granulated in a fluid bed, in the presence of water, then dried, crushed and sieved so as to obtain granules with a size of between 0.15 and 0.80 mm.

Ces granulés peuvent être utilisés seuls, en solution ou dispersion dans de l'eau de manière à obtenir la dose cherchée. Ils peuvent aussi être utilisés pour préparer des associations avec d'autres matières actives, notamment antibactérien et antifongiques, ces dernières étant sous la forme de poudres mouillables, ou de granulés ou suspensions aqueuses. These granules can be used alone, in solution or dispersion in water so as to obtain the desired dose. They can also be used to prepare combinations with other active materials, including antibacterial and antifungal, the latter being in the form of wettable powders, or aqueous granules or suspensions.

En ce qui concerne les compositions adaptées au stockage et au transport, elles contiennent plus avantageusement de 0,5 à 95 % (en poids) de substance active. As regards the compositions suitable for storage and transport, they more preferably contain from 0.5 to 95% (by weight) of active substance.

L'invention concerne également un procédé pour le traitement antibactérien et antifongique thérapeutique pour l'homme ou l'animal par administration d'une dose efficace du peptide selon l'invention, sous forme libre ou, le cas échéant, sous forme de sels d'addition avec un acide, de sels métalliques ou de sels d'addition avec une base pharmaceutiquement acceptables, à l'état pur ou sous forme d'une composition dans laquelle il est associé à tout autre produit pharmaceutiquement compatible, pouvant être inerte ou physiologiquement actif. Les médicaments selon l'invention peuvent être administrés par voie orale, parentérale, rectale ou topique. The invention also relates to a method for therapeutic antibacterial and antifungal treatment for humans or animals by administering an effective dose of the peptide according to the invention, in free form or, where appropriate, in the form of sodium salts. acid addition, of metal salts or addition salts with a pharmaceutically acceptable base, in pure form or in the form of a composition in which it is combined with any other pharmaceutically compatible product, which may be inert or physiologically active. The medicaments according to the invention may be administered orally, parenterally, rectally or topically.

Comme compositions solides pour administration orale peuvent être utilisés des comprimés, pilules, poudres (notamment dans des capsules de gélatine ou des cachets) ou granulés. Dans ces compositions, le produit actif selon l'invention est mélangé à un ou plusieurs diluants inertes, tels que amidon, cellulose, saccharose, lactose ou silice. Ces compositions peuvent également comprendre des substances autres , par exemple un ou plusieurs lubrifiants tel que le stéarate de magnésium ou la talc, un colorant, un enrobage(dragées) ou un vernis. As solid compositions for oral administration may be used tablets, pills, powders (especially in gelatin capsules or cachets) or granules. In these compositions, the active product according to the invention is mixed with one or more inert diluents, such as starch, cellulose, sucrose, lactose or silica. These compositions may also comprise other substances, for example one or more lubricants such as magnesium stearate or talc, a dye, a coating (dragees) or a varnish.

Comme compositions liquides pour administration orale, on peut utiliser des solutions, des suspensions, des émulsions, des sirops, et des élixirs pharmaceutiquement acceptable contenant des diluants inertes tels que l'eau, l'éthanol, le glycérol, les huiles végétales ou l'huile de paraffine. Ces compositions peuvent également comprendre des substances autres, par exemple des produits mouillants, édulcorants, épaississants, aromatisants ou stabilisants.. As liquid compositions for oral administration, it is possible to use pharmaceutically acceptable solutions, suspensions, emulsions, syrups and elixirs containing inert diluents such as water, ethanol, glycerol, vegetable oils or the like. paraffin oil. These compositions may also comprise other substances, for example wetting agents, sweeteners, thickeners, flavoring agents or stabilizers.

Les compositions stériles pour administration parentérale peuvent être de préférence des solutions aqueuses ou non aqueuses, des suspensions ou des émulsions. Sterile compositions for parenteral administration may be preferably aqueous or nonaqueous solutions, suspensions or emulsions.

Comme solvant ou véhicule, on peut employer l'eau, le propylèneglycol, un polyéthylène glycol, des huiles végétales, en particulier l'huile d'olive, des esters organiques convenables. Ces compositions peuvent également contenir des adjuvants, en particulier des agents mouillants, isotonisants, émulsifiants, dispersants et stabilisants. La stérilisation peut se faire de différentes façons, par exemple par filtration aseptisante, en incorporant à la composition des agents stérilisants, par irradiation ou par chauffage. Elles peuvent être également préparées sous forme de compositions solides stériles, qui peuvent être dissoutes au moment de l'emploi dans un milieu stérile injectable.As solvent or vehicle, water, propylene glycol, polyethylene glycol, vegetable oils, in particular olive oil, suitable organic esters can be used. These compositions may also contain adjuvants, in particular wetting agents, isotonic agents, emulsifiers, dispersants and stabilizers. Sterilization can be carried out in various ways, for example by aseptic filtration, by incorporating sterilizing agents into the composition, by irradiation or by heating. They can also be prepared as sterile solid compositions, which can be dissolved at the time of use in a sterile injectable medium.

Les compositions pour administration rectale sont les suppositoires ou les capsules rectales, qui contiennent, outre le peptide actif, des excipients tels que le beurre de cacao, des glycérides semi-synthétiques ou des polyéthylène glycols. The compositions for rectal administration are suppositories or rectal capsules, which contain, in addition to the active peptide, excipients such as cocoa butter, semi-synthetic glycerides or polyethylene glycols.

Les compositions stériles pour administration topique peuvent être par exemple des crèmes, pommades, lotions, collyres, collutoires, gouttes nasales ou aérosols. The sterile compositions for topical administration may be, for example, creams, ointments, lotions, eye drops, mouthwashes, nasal drops or aerosols.

En thérapeutique humaine, le peptide selon l'invention est particulièrement utile dans les traitement antibactérien et antifongiques. Les doses dépendent de l'effet recherché et de la durée du traitement; elles sont généralment comprises entre 50 et 1000 mg par jour par voie orale pour un adulte en une ou plusieurs prises. In human therapy, the peptide according to the invention is particularly useful in antibacterial and antifungal treatments. The doses depend on the desired effect and the duration of the treatment; they are usually between 50 and 1000 mg per day orally for an adult in one or more doses.

D'une façon générale, le médecin déterminera la posologie qu'il estime la plus appropriée en fonction de l'âge, du poids et de tous les autres facteurs propres au sujet à traiter. In general, the doctor will determine the dosage he considers the most appropriate based on age, weight and all other factors specific to the subject to be treated.

Les exemples suivants sont donnés à titre non limitatif illustrent les compositions selon l'invention. The following examples are given as non-limiting examples of the compositions according to the invention.

Exemple A:
On prépare, selon la technique habituelle, des comprimés dosés à 50 mg de peptide actif ayant la composition suivante:
- peptide thanatine 50 mg
- amidon 60 mg
- lactose 50 mg
- stéarate de magnésium 2 mg
Exemple B:
On prépare une solution injectable contanant 20 mg de peptide actif ayant la composition suivante:
- peptide thanatine 22,4mu
- eau distillée q.s.p. 2 cm3
Par maladies fongiques, on entend les maladies causées par les champignons pathogènes) notamment ceux de la famille des fungi imperfecti en particulier les moniliales ou encore ceux de la famille des hyprocréales ou de celle des sphaeriales. Example A
50 mg of active peptide having the following composition are prepared according to the usual technique:
- thanatin peptide 50 mg
- starch 60 mg
- lactose 50 mg
- magnesium stearate 2 mg
Example B:
An injectable solution containing 20 mg of active peptide having the following composition is prepared:
- 22.4mu thanatine peptide
- distilled water qs 2 cm3
By fungal diseases, we mean the diseases caused by pathogenic fungi) especially those of the family of fungi imperfecti especially the moniliales or those of the family of hyprocréales or that of sphaeriales.

Claims

1. Peptide of formula:

a- Ile Tyr Cys Asn Arg Arg Thr Gly Lys Cys- b

in which:

-11e Tyr Cys Island Asn Arg Arg Thr Gly Lys Cys is the central link, size

reduced, which has 2 cysteine residues forming a disulfide bridge

intramolecular.

each group of three letters constituting the central link and groups a and b being the three-letter symbol of one of the 20 basic amino acids.

b is a variable residue of sequence comprising from 0 to 5 amino acids,

a is a variable residue of sequence comprising from 0 to 10 amino acids,

Peptide according to claim 1, characterized in that, in the formula, when

comprises at least one amino acid, this one is one of the 20 basic amino acids and

more particularly selected from the group consisting of Gly, Ser, Lys, Pro and Val.

Peptide according to claim 1, characterized in that, in the formula, when b

more particularly selected from the group consisting of Gln, Arg and Met.

4. Antibacterial and / or antifungal composition, characterized in that it contains

as active ingredient a peptide according to one of claims 1 to 3.

Antibacterial and / or antifungal composition according to claim 4, characterized

in that it is usable for the protection of plants.

6. Composition according to claim 4, characterized in that it is usable against

pathogenic fungi and bacteria, human or animal.

7. Process for the preparation of the peptide according to one of claims 1 to 3, characterized in that, successively:

a) it is made to act on insects Hemiptera Podisus sp preferably maculiventris at

less a bacterial inducer of the biological synthesis of the molecule;

b) the extraction is carried out by contacting haemolymph or ground material with

Podisus previously obtained with acidic medium to neutral with stirring, then by

centrifugation;

c) the supernatant is fractionated by washing off the hydrophilic molecules and

elution of the hydrophobic molecules by appropriate elements, on column

separator;

d) the extracts are purified;

e) the sequencing is carried out.

8. Method according to claim 7, characterized in that the inductor 1 is used.

bacterial bacterium (Gram positive).

9. Method according to claim 7, characterized in that the inductor 2 is used.

bacterial a bacterium (Gram negative).

10. Method of protecting plants against fungal and bacterial diseases of

plants, characterized in that a peptide according to one of claims 1 to 3 is used.