FR2727415A1

FR2727415A1 - New bi:functional ruthenium complexes

Info

Publication number: FR2727415A1
Application number: FR9414359A
Authority: FR
Inventors: Fabrice Balavoine; Laurent Besse; Jean Paul Lellouche; Charles Mioskowski
Original assignee: Commissariat a lEnergie Atomique CEA
Current assignee: Commissariat a lEnergie Atomique et aux Energies Alternatives CEA
Priority date: 1994-11-30
Filing date: 1994-11-30
Publication date: 1996-05-31

Abstract

New bifunctional ruthenium (II) or ruthenium (III) complexes comprise: (i) a gp. capable of recognising a peptide sequence contg. at least one histidine residue, consisting of a central Ru atom bonded to a CO3 ligand or to two ligands selected from Cl, Br, I or H2O; and (ii) ligands, at least one of which bears at least one functional gp. with intrinsic reactivity towards other opt. modified amino acids. 5 cpds (I) are specifically claimed e.g.: cis-dichloro-bis-(4,4'-bis4-(4-benzoylbenzoyloxy)butoxycarbonyl- 2,2'-bipyridine) ruthenium (II); (Ia); and cis-carbonato-bis(4,4'-bis-4-(4-benzoylbenzoyloxy)butoxycarbonyl- 2,2'-bipyridine) ruthenium (II).

Description

COMPLEXES DU RUTHENlUN UTILISABLES EN PARTICULIER POUR
DETERMINER LA TOPOLOGIE DES PROTEINES, ET LEUR PROCEDE
DE PREPARATION.RUTHENlUN COMPLEXES ESPECIALLY USEFUL FOR
DETERMINING THE PROTEIN TOPOLOGY AND THEIR PROCESS
OF PREPARATION.

La présente invention a pour objet de nouveaux complexes du ruthénium, utilisables en particulier pour déterminer la topologie des protéines. The subject of the present invention is new ruthenium complexes, which can be used in particular for determining the topology of proteins.

Ces complexes du ruthénium peuvent aussi trouver d'autres utilisations, par exemple comme agents anticancéreux, comme réactifs en vue d'étudier le transfert de fluorescence sur des protéines et comme agents de stabilisation des protéines. These ruthenium complexes can also find other uses, for example as anticancer agents, as reagents for studying the transfer of fluorescence on proteins and as stabilizers of proteins.

On connait de nombreux complexes du ruthénium (II) et (III), portant des ligands variés, comme des groupes carbonyle, phosphine, alkylamine et/ou amine hétérocyclique. Numerous ruthenium (II) and (III) complexes are known, carrying various ligands, such as carbonyl, phosphine, alkylamine and / or heterocyclic amine groups.

Jusqu'à présent ces complexes ont été synthétisés en vue d'utilisations telles que la catalyse, les études cinétiques et mécanistiques des réactions de substitution de ligands et les études photochimiques, en particulier pour le stockage chimique de l'énergie lumineuse. So far these complexes have been synthesized for uses such as catalysis, kinetic and mechanistic studies of ligand substitution reactions and photochemical studies, in particular for the chemical storage of light energy.

Plus récemment, les complexes du ruthénium ont trouvé de nouvelles applications, en particulier dans le domaine des macromolécules biologiques. More recently, ruthenium complexes have found new applications, in particular in the field of biological macromolecules.

Ainsi, Clarke et al, dans Inorganica
Chimica Acta, vol. 124, 1986, p. 13-28, ont décrit des complexes du ruthénium de formule! < H2O) (NH3)5 Ru1112+ comme agents anticancéreux et comme inhibiteurs de la synthèse d'ADN. Ils ont montré que ces complexes avaient une affinité pour les résidus guanine.Thus, Clarke et al, in Inorganica
Chimica Acta, vol. 124, 1986, p. 13-28, described ruthenium complexes of the formula! <H2O) (NH3) 5 Ru1112 + as anticancer agents and as inhibitors of DNA synthesis. They have shown that these complexes have an affinity for guanine residues.

Bannwarth et al dans Helvetica Chimica
Acta, vol. 71, 1988, p. 2085-2099, ont décrit des complexes du Ru(II) comme marqueurs fluorescents utilisables dans des sondes biologiques. Bannwarth et al in Helvetica Chimica
Acta, vol. 71, 1988, p. 2085-2099, described Ru (II) complexes as fluorescent markers usable in biological probes.

Plus récemment, Casimiro et al dans J. More recently, Casimiro et al in J.

Phys. Chem., vol. 97, 1993, p. 13073-13077, ont montré que le complexe neutre Ru(bipy)2 C03 réagissait de manière spécifique avec les histidines présentes à la surface de protéines telles que les cytochromes c.Phys. Chem., Vol. 97, 1993, p. 13073-13077, showed that the neutral complex Ru (bipy) 2 C03 reacted in a specific way with the histidines present on the surface of proteins such as cytochromes c.

Muheim et al dans J. Am. Chem. Soc., vol. Muheim et al in J. Am. Chem. Soc., Vol.

115, 1993, p. 5312-5313, ont montré que l'on pouvait utiliser le complexe du ruthénium RuII(bpy)2CO3 pour lier deux histidines sur des brins opposés d'un feuillet ss du cytochrome c afin de stabiliser cette protéine.115, 1993, p. 5312-5313, showed that the RuII rII (bpy) 2CO3 complex could be used to bind two histidines on opposite strands of a cytochrome c ss sheet to stabilize this protein.

Selon la présente invention, on utilise cette propriété d'affinité pour l'histidine de certains complexes du ruthénium, mais on les modifie de plus en termes de structures pour les rendre bifonctionnels, en vue de déterminer la topologie de protéines. Ainsi, l'invention a pour objet des complexes du ruthénium bifonctionnels possédant, d'une part, la propriété de reconnaltre spécifiquement une séquence d'aminoacides présente b la surface d'une des sous-unites composant la protéine étudiée et, d'autre part, la propriété de présenter une interaction avec une deuxième sous-unite de la protéine considérée, gracie à la présence d'un groupe fonctionnel porté par l'un des ligands du complexe. According to the present invention, this affinity property is used for the histidine of certain ruthenium complexes, but they are further modified in terms of structures to make them bifunctional, in order to determine the protein topology. Thus, the subject of the invention is bifunctional ruthenium complexes having, on the one hand, the property of specifically recognizing an amino acid sequence present on the surface of one of the subunits composing the protein studied and, on the other hand on the other hand, the property of exhibiting an interaction with a second subunit of the protein considered, thanks to the presence of a functional group carried by one of the ligands of the complex.

En effet, la détermination de la topologie de protéines à l'aide de complexes doit utiliser des relations de proximité / contact entre les différentes sous-unités protéiques constituant une protéine donnée. Indeed, the determination of the topology of proteins using complexes must use proximity / contact relationships between the different protein subunits constituting a given protein.

Aussi, la présente invention a pour objet de nouveaux complexes de ruthénium bifonctionnels possédant ces deux propriétés. Also, the present invention relates to new bifunctional ruthenium complexes having these two properties.

Selon l'invention, le complexe bifonctionnel du ruthénium (II) ou (ICI) porteur de plusieurs ligands, comprend
- un groupement capable de reconnaltre une séquence peptidique incorporant au moins une histidine, ledit groupement étant formé par l'atome central de ruthénium du complexe lié au ligand CO3 ou à deux ligands identiques ou différents, choisis parmi Cl, Br,
I et H2O ; et
- au moins un groupe fonctionnel ayant une réactivité intrinsèque vis-a-vis d'autres acides aminés éventuellement modifiés, ce groupe fonctionnel étant porté par au moins l'un des autres ligands du complexe.According to the invention, the bifunctional complex of ruthenium (II) or (ICI) carrying several ligands, comprises
a group capable of recognizing a peptide sequence incorporating at least one histidine, said group being formed by the central ruthenium atom of the complex linked to the CO3 ligand or to two identical or different ligands, chosen from Cl, Br,
I and H2O; and
- At least one functional group having intrinsic reactivity vis-à-vis other amino acids possibly modified, this functional group being carried by at least one of the other ligands of the complex.

Selon un mode de réalisaiton de l'invention, le complexe de ruthénium répond à la formule

dans laquelle
a) X1 et X2 qui peuvent être identiques ou différents, représentent Br, I, C1 ou H2O, ou X1 et X2 forment ensemble CO3 ;
b) Y est une simple liaison ou un groupe bivalent choisi parmi -C (O) O-, -CONH-, -O-, -S-, -CH2O-, -CH=CH-,-CH2-CH=CH-, -CH2S- et -'C- ;;
d) R1 est un groupe monovalent choisi parmi les groupes photosensibles, les groupes fluorescents, les groupes luminescents, les groupes complexants, les enzymes, l'avidine, la biotine, les chromophores fluorescents, les chromophores absorbant la lumière, les groupes marqués par un élément radioactif, les anticorps et les fragments d'anticorps, et
e) m est tel que 1 S m s 5 ; et
f) R2 représente ~(CH2)n- avec 0 S n 5 2 ou
R2 est un cycle benzénique condensé avec les deux cycles pyridines pour former le cycle orthophénanthroline.According to one embodiment of the invention, the ruthenium complex corresponds to the formula

in which
a) X1 and X2 which may be the same or different, represent Br, I, C1 or H2O, or X1 and X2 together form CO3;
b) Y is a single bond or a bivalent group chosen from -C (O) O-, -CONH-, -O-, -S-, -CH2O-, -CH = CH -, - CH2-CH = CH- , -CH2S- and -'C- ;;
d) R1 is a monovalent group chosen from photosensitive groups, fluorescent groups, luminescent groups, complexing groups, enzymes, avidin, biotin, fluorescent chromophores, light absorbing chromophores, groups marked with a radioactive element, antibodies and antibody fragments, and
e) m is such that 1 S ms 5; and
f) R2 represents ~ (CH2) n- with 0 S n 5 2 or
R2 is a benzene ring condensed with the two pyridine rings to form the orthophenanthroline ring.

Dans ces complexes de ruthénium le groupement chimique RuX1X2 confère au complexe la propriété de réactivité/reconnaissance spécifique de peptides donnés incorporant des histidines, et la présence des ligands bipyridine ou phénanthroline fonctionnalisés avec le groupe R1 confère au complexe la propriété de pouvoir interagir avec la chalne peptidique d'une deuxième sous-unité d'une protéine considérée. In these ruthenium complexes the chemical group RuX1X2 gives the complex the specific reactivity / recognition property of given peptides incorporating histidines, and the presence of the bipyridine or phenanthroline ligands functionalized with the R1 group gives the complex the property of being able to interact with the chalne peptide of a second subunit of a protein under consideration.

Cette interaction peut etre de différents types. This interaction can be of different types.

Ainsi, lorsque R1 est un groupe photosensible ou photoactivable, l'irradiation de R1 permettra la formation d'une liaison covalente stable avec la channe peptidique d'une deuxième sous-unité de la protéine considérée. Thus, when R1 is a photosensitive or photoactivable group, the irradiation of R1 will allow the formation of a stable covalent bond with the peptide chain of a second subunit of the protein considered.

Lorsque R1 est un groupe fluorescent, un groupe luminescent ou un chromophore, l'interaction pourra etre obtenue après une modification appropriée de la deuxième sous-unité protéique, par transfert de fluorescence. When R1 is a fluorescent group, a luminescent group or a chromophore, the interaction may be obtained after an appropriate modification of the second protein subunit, by fluorescence transfer.

Lorsque R1 est une protéine, par exemple une enzyme, un anticorps ou un fragment d'anticorps, l'interaction sera obtenue après modification éventuelle de la sous-unité protéique par des réactions du type enzyme-substrat d'enzyme, et antigène-anticorps. When R1 is a protein, for example an enzyme, an antibody or an antibody fragment, the interaction will be obtained after possible modification of the protein subunit by reactions of the enzyme-enzyme substrate type, and antigen-antibody type. .

Ainsi, les complexes bifonctionnels de l'invention sont appropriés à la détermination de la topologie des protéines. Toutefois, ils présentent également des propriétés intéressantes pour une utilisation comme agents anticancéreux, comme agents pour stabiliser la structure de protéines, par exemple par établissement d'une liaison entre groupes histidines, ou comme réactifs permettant d'étudier des transferts de fluorescence sur des protéines, dans le cas où le groupe fonctionnel est un groupe fluorescent. Thus, the bifunctional complexes of the invention are suitable for determining the topology of proteins. However, they also have advantageous properties for use as anticancer agents, as agents for stabilizing the structure of proteins, for example by establishing a bond between histidine groups, or as reagents for studying fluorescence transfers on proteins. , in the case where the functional group is a fluorescent group.

Dans le complexe de ruthénium de l'invention, R1 peut aussi représenter un groupe marqué par un élément radioactif tel que l'iode, le tritium, le carbone 14, l'indium. In the ruthenium complex of the invention, R1 can also represent a group marked by a radioactive element such as iodine, tritium, carbon-14, indium.

Dans ce cas, l'élément radioactif peut être introduit juste au moment de l'utilisation. In this case, the radioactive element can be introduced just at the time of use.

De préférence, selon l'invention, on utilise pour R1 un groupe photosensible tel que les groupes benzophénone, bromobenzophénone et azoture d'aryle, car ces groupes peuvent etre activés par irradiation å une longueur d'onde supérieure a 280-300 nanomètres, qui ne dénature pas les protéines. Preferably, according to the invention, a photosensitive group such as the benzophenone, bromobenzophenone and aryl azide groups is used for R1, because these groups can be activated by irradiation at a wavelength greater than 280-300 nanometers, which does not denature proteins.

Ainsi, R1 répond de préférence à la formule (II)

dans laquelle R3 représente H, 3H ou Br. Thus, R1 preferably corresponds to formula (II)

in which R3 represents H, 3H or Br.

Dans les complexes de l'invention, Y et Z peuvent être de divers types. On obtient en particulier des résultats satisfaisants avec les complexes dans lesquels Y représente -C(O) z et Z représente -OC(O)-. In the complexes of the invention, Y and Z can be of various types. In particular, satisfactory results are obtained with the complexes in which Y represents -C (O) z and Z represents -OC (O) -.

De préférence, dans ces complexes, les bipyridines sont des bipyridines sans channe hydrocarbonée intermédiaire, c'est-à-dire que R2 représente -(CH2)n- avec n égal à 0. Preferably, in these complexes, the bipyridines are bipyridines without an intermediate hydrocarbon chain, that is to say that R2 represents - (CH2) n- with n equal to 0.

Les complexes de ruthénium de l'invention peuvent étre préparés par des procédés classiques à partir des dérivés appropriés de bipyridine ou de phénanthroline. The ruthenium complexes of the invention can be prepared by conventional methods from the appropriate derivatives of bipyridine or phenanthroline.

Ainsi, on peut préparer les complexes de ruthénium de formule (I) dans laquelle Y, Z, R1, R2 et m ont les significations données ci-desus, et X1 et X2 représentent Cl, par réaction d'un dérivé de bipyridine ou de phénanthroline de formule

dans laquelle R11 R2, Z, Y, et m sont tels que définis ci-dessus, avec un sel de ruthénium de formule RuCl3, pH2O dans laquelle p est un nombre entier allant de 1 a 3.Thus, it is possible to prepare the ruthenium complexes of formula (I) in which Y, Z, R1, R2 and m have the meanings given above, and X1 and X2 represent Cl, by reaction of a bipyridine derivative or phenanthroline of formula

in which R11 R2, Z, Y, and m are as defined above, with a ruthenium salt of formula RuCl3, pH2O in which p is an integer ranging from 1 to 3.

Pour effectuer cette réaction, on peut utiliser la technique décrite par Sullivan et al dans
Inorganic Chemistry, vol. 17, n 12, 1978, p. 3335, qui consiste à chauffer au reflux le sel de ruthénium, par exemple RuC13, 3H2O avec la bipyridine et Licol dans un solvant organique tel que le diméthylformamide.To carry out this reaction, the technique described by Sullivan et al in
Inorganic Chemistry, vol. 17, no 12, 1978, p. 3335, which consists in refluxing the ruthenium salt, for example RuC13, 3H2O with bipyridine and Licol in an organic solvent such as dimethylformamide.

Lorsqu'on veut préparer les complexes du ruthénium de formule (I) dans laquelle X1 et X2 forment CO3, on peut opérer de la façon suivante
a) préparer tout d'abord le complexe de ruthénium de formule (I) dans lequel X1 et X2 représentent C1 par le procédé décrit ci-dessus, puis
b) mettre en contact le complexe de ruthénium ainsi obtenu avec Na2CO3 pour échanger les atomes de C1 du complexe par CO3. When we want to prepare the ruthenium complexes of formula (I) in which X1 and X2 form CO3, we can operate as follows
a) first of all prepare the ruthenium complex of formula (I) in which X1 and X2 represent C1 by the process described above, then
b) bringing the ruthenium complex thus obtained into contact with Na2CO3 to exchange the C1 atoms of the complex for CO3.

Cette mise en contact peut etre effectuée notamment en utilisant la technique décrite par Johson et al dans Inorganic Chemistry, vol. 17, n 8, 1978, p. This contacting can be carried out in particular using the technique described by Johson et al in Inorganic Chemistry, vol. 17, no 8, 1978, p.

2212.2212.

Lorsque l'on veut préparer un complexe de ruthénium de formule (I) dans laquelle au moins un des Xl représente Br, I ou H2O, on peut opérer de la façon suivante : préparer tout d'abord un complexe du ruthénium de formule (I) dans laquelle X1 et X2 représentent C1, par le procédé décrit ci-dessus, puis soumettre ce complexe à une réaction d'échange en une ou plusieurs étapes afin de remplacer au moins l'un des C1 par Br, I ou H2O. When we want to prepare a ruthenium complex of formula (I) in which at least one of the Xl represents Br, I or H2O, we can operate as follows: first prepare a ruthenium complex of formula (I ) in which X1 and X2 represent C1, by the method described above, then subject this complex to an exchange reaction in one or more stages in order to replace at least one of the C1s with Br, I or H2O.

Des réactions d'échange de ce type sont decrites en particulier dans Inorganic Chemistry, vol. Exchange reactions of this type are described in particular in Inorganic Chemistry, vol.

17, n 12, 1978, p. 3336.17, no 12, 1978, p. 3336.

Les bipyridines ou phénanthrolines de formule (III) utilisées comme produit de départ dans ces procédés peuvent etre préparées par des techniques classiques à partir des bipyridines ou phenanthrolines méthvlées correspondantes de formule

The bipyridines or phenanthrolines of formula (III) used as starting material in these processes can be prepared by conventional techniques from the corresponding bipyridines or phenanthrolines of formula

dans laquelle R2 est tel que défini cidessus. where R2 is as defined above.

Ainsi, dans le cas où Y est une simple liaison, on fait réagir le dérivé diméthylé avec du lithium pour transformer les groupes méthyles en groupes CH2Li que l'on fait réagir ensuite avec un dérivé halogéné de formule X-(CHZ)m-1-OP où X représente un atome d'halogène tel que Br ou I, et
P un groupement protecteur d'alcool, pour former, après déprotection de l'alcool, le dérivé de formule

Thus, in the case where Y is a single bond, the dimethylated derivative is reacted with lithium to transform the methyl groups into CH2Li groups which are then reacted with a halogenated derivative of formula X- (CHZ) m-1 -OP where X represents a halogen atom such as Br or I, and
P an alcohol protecting group, to form, after deprotection of the alcohol, the derivative of formula

Par réaction ultérieure des groupes OH avec un composé de formule R1ZH, on obtient le dérivé de bipyridine ou de phénanthroline souhaité. By subsequent reaction of the OH groups with a compound of formula R1ZH, the desired bipyridine or phenanthroline derivative is obtained.

Dans le cas où Y représente -C(O)O- on peut oxyder le dérivé diméthylé de formule (IV) au moyen d'oxyde de chrome pour remplacer les deux CH3 par COOH. In the case where Y represents -C (O) O-, the dimethylated derivative of formula (IV) can be oxidized by means of chromium oxide to replace the two CH3s with COOH.

Par réaction de ces groupes COOH avec un dialcool approprie dont l'une des fonctions est convenablement protégée puis déprotégée, on peut former le bras -C(O)O-(CH2)m-OH. By reaction of these COOH groups with an appropriate dialcohol, one of the functions of which is suitably protected and then deprotected, the -C (O) O- (CH2) m-OH arm can be formed.

La réaction ultérieure de ce groupe OH avec un composé de formule R1ZH conduira au dérivé de bipyridine ou de phénanthroline souhaité. The subsequent reaction of this OH group with a compound of formula R1ZH will lead to the desired bipyridine or phenanthroline derivative.

Dans le cas où Y représente -CONH-, on peut oxyder le dérivé diméthylé de formule (IV) comme précédemment pour remplacer les deux CH3 par COOH, puis faire réagir les groupes CH avec un amino alcool dont la fonction alcool est protégée puis déprotégée pour obtenir le bras -CO-NH-(CH2)s-OH. In the case where Y represents -CONH-, the dimethylated derivative of formula (IV) can be oxidized as before to replace the two CH3s with COOH, then react the CH groups with an amino alcohol whose alcohol function is protected then deprotected for obtain the -CO-NH- (CH2) s-OH arm.

La réaction de OH avec R1ZH conduira comme précédemment au dérivé souhaité. The reaction of OH with R1ZH will lead, as before, to the desired derivative.

Dans le cas où Y représente -O-, on peut partir du dinitro-N,N'-dioxyde de formule

que lton fait réagir avec l'alcoolate de sodium de formule NaO(CH2)mR4 où R4 est un atome d'halogène ou un groupe hydroxyle protégé, pour obtenir le composé de formule

qui peut etre réduit ensuite, par exemple par PC13, pour donner le dérivé de formule

In the case where Y represents -O-, we can start from dinitro-N, N'-dioxide of formula

which is reacted with the sodium alcoholate of formula NaO (CH2) mR4 where R4 is a halogen atom or a protected hydroxyl group, to obtain the compound of formula

which can then be reduced, for example by PC13, to give the derivative of formula

Par réaction avec R1ZH, après déprotection du groupe OH lorsque R4 est un groupe hydroxyle protégé, ce dérivé conduira au dérivé de bipyridine ou de phénanthroline voulu. By reaction with R1ZH, after deprotection of the OH group when R4 is a protected hydroxyl group, this derivative will lead to the desired bipyridine or phenanthroline derivative.

Le meme procédé peut être utilisé dans le cas où Y représente S en utilisant le thiolate de Na au lieu de l'alcoolate. The same process can be used in the case where Y represents S using the thiolate of Na instead of the alcoholate.

Dans le cas où Y représente -CH2O-, on peut partir du diacide de formule

que l'on réduit par l'hydrure double de lithium et d'aluminium, pour former le diol correspondant de formule

In the case where Y represents -CH2O-, it is possible to start from the diacid of formula

which are reduced by the double hydride of lithium and aluminum, to form the corresponding diol of formula

Par réaction de ce diol avec un halogénure approprié puis avec un composé de formule R1ZH, on obtiendra comme précédemment le dérivé de bipyridine ou de phénanthroline souhaité. By reaction of this diol with an appropriate halide and then with a compound of formula R1ZH, the desired bipyridine or phenanthroline derivative will be obtained as before.

Dans le cas où Y représente -CH2S- on peut partir de la 4,4'-diméthyl-2,2'-bipyridine qui, bromée par voie radicalaire, est mise en réaction avec le thiolate correspondant. In the case where Y represents -CH2S-, it is possible to start from 4,4'-dimethyl-2,2'-bipyridine which, radically brominated, is reacted with the corresponding thiolate.

Dans le cas où Y représente -HC = CH-, on peut partir du diacide de formule (IX) que l'on réduit en dialdéhyde de formule

In the case where Y represents -HC = CH-, it is possible to start from the diacid of formula (IX) which is reduced to dialdehyde of formula

En effectuant une réaction de Wittig entre ce dialdéhyde et Ph3P=CH-R, on obtient le dérivé de formule

By carrying out a Wittig reaction between this dialdehyde and Ph3P = CH-R, the derivative of formula is obtained

Dans le cas où Y représente -CH2-CH=CH-, on peut partir du dérivé diméthylé (IV) que 1'on transforme en dérivé CH2Li. Ce composé peut alors réagir sur un composé de type formule

pour donner le composé de

In the case where Y represents -CH2-CH = CH-, it is possible to start from the dimethylated derivative (IV) which is transformed into the CH2Li derivative. This compound can then react on a compound of the formula type

to give the compound of

Dans le cas où Y représente - C t C-, on part de la 4,4' dibrométhyl-bipyridine que l'on condense avec l'alcynure lithium approprié. In the case where Y represents - C t C-, one starts from 4,4 'dibromethyl-bipyridine which is condensed with the appropriate lithium alkynide.

Les bipyridines de départ de formule (IV) sont des produits du commerce ou peuvent être préparées par couplage avec du palladium ou du cuivre, d'une bromopyridine de formule

avec une bromopyridine de formule

avec n=l ou 2
D'autres caractéristiques et avantages de l'invention apparaltront mieux a la lecture des exemples suivants, donnés bien entendu à titre illustratif et non limitatif, en référence aux figures annexées.The starting bipyridines of formula (IV) are commercial products or can be prepared by coupling with palladium or copper, a bromopyridine of formula

with a bromopyridine of formula

with n = l or 2
Other characteristics and advantages of the invention will appear better on reading the following examples, given of course by way of illustration and not limitation, with reference to the appended figures.

Les propriétés fonctionnelles en particulier de reconnaissance des complexes du ruthénium du type de ceux décrits dans la présente invention sont démontrées par la complexation des dérivés bifonctionnels carbonatés avec un peptide approprié. Cette complexation met en évidence l'affinité du complexe 11 pour le résidu histidine incorporé dans une séquence peptidique donnée. The functional properties, in particular of recognition of ruthenium complexes of the type of those described in the present invention are demonstrated by the complexation of the carbonated bifunctional derivatives with an appropriate peptide. This complexation demonstrates the affinity of complex 11 for the histidine residue incorporated in a given peptide sequence.

La figure 1 est un schéma correspondant à la synthèse des complexes décrits dans les exemples. FIG. 1 is a diagram corresponding to the synthesis of the complexes described in the examples.

La figure 2 illustre la formule des complexes obtenus. Figure 2 illustrates the formula of the complexes obtained.

Dans les exemples qui suivent, les composés ont été identifiés par spectrométrie, chromatographie, microanalyse et détermination des points de fusion, dans les conditions suivantes. In the examples which follow, the compounds were identified by spectrometry, chromatography, microanalysis and determination of the melting points, under the following conditions.

Les spectres RMN 1H et 13C ont été obtenus sur un spectromètre à onde pulsée BRUCKER AC 300, opérant à 300 MHz pour la RMN du proton et 75,47 MHz pour le carbone, et équipé d'un calculateur
ASPECT 3000. Les valeurs des déplacements chimiques sont exprimées en parties par million (ppm) et les constantes de couplage en Hertz (Hz). La référence utilisée est le tétraméthylsilane (TMS, 0,00 ppm). Dans la description des spectres, les multiplicités des signaux sont indiquées à l'aide des abréviations suivantes s, d, t, q, m, M signifiant respectivement singulet, doublet, triplet, quadruplet, multiplet et massif.The 1H and 13C NMR spectra were obtained on a BRUCKER AC 300 pulsed wave spectrometer, operating at 300 MHz for proton NMR and 75.47 MHz for carbon, and equipped with a computer.
ASPECT 3000. The values of the chemical shifts are expressed in parts per million (ppm) and the coupling constants in Hertz (Hz). The reference used is tetramethylsilane (TMS, 0.00 ppm). In the description of the spectra, the multiplicities of the signals are indicated using the following abbreviations s, d, t, q, m, M meaning respectively singlet, doublet, triplet, quadruplet, multiplet and solid.

Les spectres infra-rouge IR ont été réalisés sur un appareil PERKIN ELMER System 2000 FT
I.R., le traitement des spectres est effectué avec le programme IR Data Manager sur un ordinateur DIGITAL
DECpc 450D2LP (domaine 4000-450 cm~l, les nombres d'onde des bandes d'absorption sont exprimés en cm-i). The infrared IR spectra were performed on a PERKIN ELMER System 2000 FT device
IR, spectral processing is carried out with the IR Data Manager program on a DIGITAL computer
DECpc 450D2LP (range 4000-450 cm ~ l, the wave numbers of the absorption bands are expressed in cm-i).

Les spectres ultra-violet UV ont été effectués sur un spectrophotomètre XONTRON modèle
UVIKON 860 avec système d'acquisition Victor VPC IIc.UV ultraviolet spectra were performed on a model XONTRON spectrophotometer
UVIKON 860 with Victor VPC IIc acquisition system.

Les points de fusion ont été obtenus sur un appareil Boche 535. The melting points were obtained on a Boche 535 device.

Les spectres de masse basse résolution ont été obtenus sur un appareil FINNIGAN-MAT 4600 quadruple couplé et piloté par un système informatique
INCOS, tandis que les spectres haute résolution ont été réalisés sur un spectromètre VARIAN MAT 311. Les spectres de masse en F.A.B. sont effectués sur un spectromètre NERMAG R3010. Low resolution mass spectra were obtained on a FINNIGAN-MAT 4600 quadruple device coupled and controlled by a computer system
INCOS, while the high resolution spectra were carried out on a VARIAN MAT 311 spectrometer. The mass spectra in FAB are carried out on a NERMAG R3010 spectrometer.

Les chromatographies sur couche mince CCM sont réalisées sur des plaques de silice MERCK Si 60
F254 sur support verre ou plastique. Les révélations sont effectuées soit par illumination ultra-violette
(254 nm), soit à l'iode bisublimé, soit par pulvérisation de l'un des révélateurs suivants : la vanilline, le panisaldéhyde, la ninhydrine, le permanganate de potassium.TLC thin layer chromatographies are performed on MERCK Si 60 silica plates
F254 on glass or plastic support. The revelations are carried out either by ultraviolet illumination
(254 nm), either with bisublimated iodine, or by spraying one of the following developers: vanillin, panisaldehyde, ninhydrin, potassium permanganate.

Exemple 1 : Préparation du cis-Dichloro-bis (4,4'-bis[4-
(4-benzoylbenzoyloxy) butoxycarbonyl] -2,2'
bipyridine) ruthénium (II) 9.Example 1: Preparation of cis-Dichloro-bis (4,4'-bis [4-
(4-benzoylbenzoyloxy) butoxycarbonyl] -2.2 '
bipyridine) ruthenium (II) 9.

a) préparation de la 4,4'-dicarboxy-2,2'-bipyridine
2.a) preparation of 4,4'-dicarboxy-2,2'-bipyridine
2.

La 4.4'-diméthyl-2,2' -bipyridine
(64,0 mmol ; 12,0 g) est dissoute dans 100 ml d'acide sulfurique concentré. La solution est refroidie à OOC et l'oxyde de chrome (39,0 g ; 6 éq.) est ajouté par petites portions durant 1 heure. Le mélange bleu-vert est chauffé à 75 C pendant 4 heures, puis agite une nuit a température ambiante. La solution est versee dans un mélange eau-glace (100 ml), puis filtrée sur verre fritté. Après un lavage a l'eau (SxS0 ml), le précipité jaune clair est dissous dans 50 ml d'une solution de KOH 1N jusqu'à ce que la solution devienne basique (formation du dicarboxylate de potassium).4.4'-dimethyl-2,2 '-bipyridine
(64.0 mmol; 12.0 g) is dissolved in 100 ml of concentrated sulfuric acid. The solution is cooled to OOC and the chromium oxide (39.0 g; 6 eq.) Is added in small portions over 1 hour. The blue-green mixture is heated at 75 ° C. for 4 hours, then stirred overnight at room temperature. The solution is poured into a water-ice mixture (100 ml), then filtered through a sintered glass. After washing with water (SxS0 ml), the light yellow precipitate is dissolved in 50 ml of a 1N KOH solution until the solution becomes basic (formation of potassium dicarboxylate).

Après filtration sur célite, le filtrat est acidifié par une solution d'HCl 1N (50 mi). Le diacide précipité est lavé à l'eau (3x50 ml) : obtient ainsi 14,5 g de 2
(Rdt : 92,7%).After filtration through celite, the filtrate is acidified with a 1N HCl solution (50 ml). The precipitated diacid is washed with water (3x50 ml): thus obtains 14.5 g of 2
(YId: 92.7%).

CCM : Rf 0.08 (CH2Cl2-EtOAc : 9-1) ; Rf 0,75 (CHCl3
MeOH-AcOH : 14-6-2) ;
RMN 1H (300 MHz, CF3COOD) : # 9,17 (s, 2 H, H3, H3), 9, 07 (d, 2 H, J5-6=J5'-6'= 5,3 Hz, H6, H62), 8,49 (d, 2 H, J5-6=J5i-6'= 5,3 Hz, Hs, H5')
RMN 13C (75,47 MHz, CF3COOD+D2O) : 145,96 (2C, C7,
C7'), 125,89 (2C, C2, C2'), 121,65 (2C, C6, C6'), 119,25
(2C, C4, C4'), 111, 72 (2C, C5, C5,), 107,92 (2C, C3, C3') ;
IR (KBr) : 3114 #(C-H) arom, 2457 u(O-H) acide, 1722 #
(C=O) acide arom, 1604-1563 #(C=N) et #(C=C) bipy, 766 #(C-H) arom ;
W (NaOH 0,1 N, 0,0171g/l) : 216 (19736), 293 (11782)
SM (70eV/DCI/NH3/ intensité %) : m/z : 245 (100 ;
[M+1]+), 201 (25,76 ; [M-CO2]+)
SMHR : masse théorique : 244,04840 masse trouvée 244,0474 ;
Microanalyse pour C12H8N2O4.1/2H2O : Calc. : C, 56,92 ;
H, 3,58 ; N, 11,04 ; Exp. : C, 57,26 ; H, 3,77 ; N, 11,20.TLC: Rf 0.08 (CH2Cl2-EtOAc: 9-1); Rf 0.75 (CHCl3
MeOH-AcOH: 14-6-2);
1 H NMR (300 MHz, CF3COOD): # 9.17 (s, 2 H, H3, H3), 9.07 (d, 2 H, J5-6 = J5'-6 '= 5.3 Hz, H6, H62), 8.49 (d, 2 H, J5-6 = J5i-6 '= 5.3 Hz, Hs, H5')
13C NMR (75.47 MHz, CF3COOD + D2O): 145.96 (2C, C7,
C7 '), 125.89 (2C, C2, C2'), 121.65 (2C, C6, C6 '), 119.25
(2C, C4, C4 '), 111, 72 (2C, C5, C5,), 107.92 (2C, C3, C3');
IR (KBr): 3114 # (CH) arom, 2457 u (OH) acid, 1722 #
(C = O) acid arom, 1604-1563 # (C = N) and # (C = C) bipy, 766 # (CH) arom;
W (0.1 N NaOH, 0.0171g / l): 216 (19736), 293 (11782)
SM (70eV / DCI / NH3 / intensity%): m / z: 245 (100;
[M + 1] +), 201 (25.76; [M-CO2] +)
SMHR: theoretical mass: 244.04840 mass found 244.0474;
Microanalysis for C12H8N2O4.1 / 2H2O: Calc. : C, 56.92;
H, 3.58; N, 11.04; Exp. : C, 57.26; H, 3.77; N, 11.20.

b) préparation du 4-t-butyldiméthylsilyloxybutanol
3 .b) preparation of 4-t-butyldimethylsilyloxybutanol
3.

NaH à 60% en dispersion dans l'huile
(44,8 mmol ; 1,792 g) est mis en suspension dans du THF anhydre (88 ml). Le 1,4-butanediol (44,8 mmol ; 4,0 ml) est ajouté goutte à goutte, puis le milieu est agité pendant 45 minutes à température ambiante. Un précipité blanc se forme alors. Après addition du chlorure de tbutyldiméthylsilyle (44,8 mmol ; 6,752 g), le mélange est agité vivement pendant 45 minutes. La solution est versée dans 700 ml d'éther, lavée par 240 ml de K2CO3 à 108 et 240 ml de NaCl. La phase organique décantée est séchée sur Na2SO4, filtrée puis concentrée sous vide.60% NaH dispersed in oil
(44.8 mmol; 1.792 g) is suspended in anhydrous THF (88 ml). 1,4-Butanediol (44.8 mmol; 4.0 ml) is added dropwise, then the medium is stirred for 45 minutes at room temperature. A white precipitate then forms. After addition of tbutyldimethylsilyl chloride (44.8 mmol; 6.752 g), the mixture is stirred vigorously for 45 minutes. The solution is poured into 700 ml of ether, washed with 240 ml of 108 K2CO3 and 240 ml of NaCl. The decanted organic phase is dried over Na2SO4, filtered and then concentrated in vacuo.

L'huile résultante est purifiée par chromatographie sur silice (éluant : EtOAc/Heptane 40/60). On obtient 7,8 g
(38,2 mmol) de 3 (Rdt : 85%).The resulting oil is purified by chromatography on silica (eluent: EtOAc / Heptane 40/60). 7.8 g are obtained.
(38.2 mmol) of 3 (YId: 85%).

CCM : Rf 0,48 (EtOAc/Heptane : 40/60) ;
RMN 1H (300 MHz, CDCl3) : b 0,05 (s, 6 H, 2 CH3), 0,9
(s, 9 H, 3 CH3), 1,60-1,70 (m, 4 H, CH2-CH2), 2,60 (s, 1
H, OH), 3,55-3,70 (m, 4 H, 2 CH2O)
RMN 13C (75,47 MHz, CDCl3) : 0,00 (2C, Me2Si), 18,00
(1C, Si-C(CH3)3), 25,80 (3C, Si-C(CH3)3), 29,40 (1C,
CH2-CH2OH), 29,80 (1C, CH2-CH2OSi), 62,50 (1C, CH2OH), 63,30 (1C, CH2OSi) ;
IR (KBr) : 3350 #(OH), 2931-2859 #(CH2) 1472 #(CH2), 1390 6(t-Bu-Si), 1256 (CH3-Si), 1102 #(Si-O-C), 837 6
(Si-O) ;
SM (70eV/DCI/NH3/inensité %) : m/z : 222 (77,22 ;
[M+18]+), 205 (100 ; [M+1]+) ;
Microanalyse pour C10H24O2Si : Calc. : C, 58,76 ; H, 11,83 ; Exp. : C, 58,52 ; H, 11,68.TLC: Rf 0.48 (EtOAc / Heptane: 40/60);
1 H NMR (300 MHz, CDCl3): b 0.05 (s, 6 H, 2 CH3), 0.9
(s, 9 H, 3 CH3), 1.60-1.70 (m, 4 H, CH2-CH2), 2.60 (s, 1
H, OH), 3.55-3.70 (m, 4H, 2 CH2O)
13C NMR (75.47 MHz, CDCl3): 0.00 (2C, Me2Si), 18.00
(1C, Si-C (CH3) 3), 25.80 (3C, Si-C (CH3) 3), 29.40 (1C,
CH2-CH2OH), 29.80 (1C, CH2-CH2OSi), 62.50 (1C, CH2OH), 63.30 (1C, CH2OSi);
IR (KBr): 3350 # (OH), 2931-2859 # (CH2) 1472 # (CH2), 1390 6 (t-Bu-Si), 1256 (CH3-Si), 1102 # (Si-OC), 837 6
(Si-O);
MS (70eV / DCI / NH3 /% intensity): m / z: 222 (77.22;
[M + 18] +), 205 (100; [M + 1] +);
Microanalysis for C10H24O2Si: Calc. : C, 58.76; H, 11.83; Exp. : C, 58.52; H, 11.68.

c) preparation de la 4,4'-bis-[4-(t-
butyldiméthylsilyloxy)butoxycarbonyl]-2,2'
bipyridine 4.c) preparation of 4,4'-bis- [4- (t-
butyldimethylsilyloxy) butoxycarbonyl] -2.2 '
bipyridine 4.

2 (8,19 mmol ; 2,0 g), la DCC (17,9 mmol ; 3,7 g) et 3 (18,8 mmol ; 3,84 g) sont dissous dans le mélange CH2Cl2/THF (150 ml/20 ml). Après 10 min d'agitation, la DMAP (9,0 mmol ; 1,1 g) est ajoutée et le milieu agité pendant 24 heures à température ambiante. Le mélange reactionnel est filtre afin d'éliminer la dicyclohexylurée formée. Le filtrat est lavé successivement par 2x50 ml d'HCl 1N, 2x50 ml d'une solution de NaHC03 saturée et 2x50 ml d'une solution de NaCl saturée. La phase organique est séchée (Na2SO4), filtrée et évaporée sous vide. 4 est chromatographié sur silice 60H (éluant : Heptane-EtOAc 60-40). On obtient 3,73 g (6,0 mmol) de 4 sous forme d'un solide blanc (Rdt : 74%). 2 (8.19 mmol; 2.0 g), DCC (17.9 mmol; 3.7 g) and 3 (18.8 mmol; 3.84 g) are dissolved in the CH2Cl2 / THF mixture (150 ml / 20 ml). After 10 min of stirring, the DMAP (9.0 mmol; 1.1 g) is added and the medium stirred for 24 hours at room temperature. The reaction mixture is filtered in order to remove the dicyclohexylurea formed. The filtrate is washed successively with 2x50 ml of 1N HCl, 2x50 ml of a saturated NaHCO3 solution and 2x50 ml of a saturated NaCl solution. The organic phase is dried (Na2SO4), filtered and evaporated in vacuo. 4 is chromatographed on silica 60H (eluent: Heptane-EtOAc 60-40). 3.73 g (6.0 mmol) of 4 are obtained in the form of a white solid (yield: 74%).

CCM : Rf 0,8 (EtOAc/Heptane : 40/60) ; Pf : 54,5-55 C ;
RMN 1H (300 MHz, CDCl3) : # 8,94 (s, 2 H, H3, H3'), 8,85 (d, 2 H, J5-6=J5'-6'= 5 Hz, H6, H6'), 7.89 (d, 2 H, J56=J5'-6'= 5 Hz, H5, H5, H5'), 4,42 (t, 4 H, J8-9=J8'-9'= 6,2
Hz, 2 H8, 2 H8'), 3,68 (t, 4 H, J10-11=J10'-11'= 6,0 Hz, 2
H11, 2 H11'), 1,88 (m, 4 H, 2 Hg, 2 H9'), 1,67 (m, 4 H, 2 H10, 2 H10'), 0,89 (s, 18 H, 9 H13, 9 H13'), 0,05 (s, 12 H, 6 Hl2 6 H12') ;
RMN 13C (75,47 MHz, CDCl3) :: 164,98 (2C, C7, (C7'), 156,31 (2C, C2, C2'), 149,80 (2C, C6, C6 ), 138,70 (2C,
C4, C4e), 122,93 (2C, Cs, C5'), 120,31 (2C, C3, C3'), 65,63 (2C, C8, C8'), 62,31 (2C, C11, C11'), 29,05 (2C,
C10, C10'), 25,69 (6C, 3C13, 3C13'), 25,12 (2C, C9, C9'), 18,05 (2C, C14, Ci4'), 0,00 (4C, 2C12, 2C12') ;
IR (KBr) : 2955 #as (C-H) alkyle, 2830 ')s #s(C-H) alkyle, 1730 u(C=O) ester arom, 1580-1558 #(C=N) et #(C=C) bipy, 1463 #(C-H) de CH2 et CH3, 1380-1362 6(C-H) des tBu, 1256 #(CH3-Si), 1110 #(Si-O-C), 1100 6(C-O) ester, 836 #(Si-O), 776 #(C-H) arom ;
UV (MeOH, 0,0672 mg/ml) : 207 (42250), 240 (11879), 298
(12445) ;
SM (70eV/DCI/NH3/intensité %) : m/z : 617 (100 ;
[M]+)
HRMS [M-tBu]+: masse théorique : 559,26594 masse trouvée : 559,2638 ;
Microanalyse pour C32H52N2O6Si2 : Calc. : C, 62,30 ; H, 8,50 ; N, 4,54 ; Exp. : C, 62,20 ; H, 8,46 ; N, 4,54.TLC: Rf 0.8 (EtOAc / Heptane: 40/60); Pf: 54.5-55 C;
1 H NMR (300 MHz, CDCl3): # 8.94 (s, 2 H, H3, H3 '), 8.85 (d, 2 H, J5-6 = J5'-6' = 5 Hz, H6, H6 '), 7.89 (d, 2 H, J56 = J5'-6' = 5 Hz, H5, H5, H5 '), 4.42 (t, 4 H, J8-9 = J8'-9' = 6, 2
Hz, 2 H8, 2 H8 '), 3.68 (t, 4 H, J10-11 = J10'-11' = 6.0 Hz, 2
H11, 2 H11 '), 1.88 (m, 4 H, 2 Hg, 2 H9'), 1.67 (m, 4 H, 2 H10, 2 H10 '), 0.89 (s, 18 H, 9 H13, 9 H13 '), 0.05 (s, 12 H, 6 H12 6 H12');
13C NMR (75.47 MHz, CDCl3) :: 164.98 (2C, C7, (C7 '), 156.31 (2C, C2, C2'), 149.80 (2C, C6, C6), 138, 70 (2C,
C4, C4e), 122.93 (2C, Cs, C5 '), 120.31 (2C, C3, C3'), 65.63 (2C, C8, C8 '), 62.31 (2C, C11, C11 '), 29.05 (2C,
C10, C10 '), 25.69 (6C, 3C13, 3C13'), 25.12 (2C, C9, C9 '), 18.05 (2C, C14, Ci4'), 0.00 (4C, 2C12, 2C12 ');
IR (KBr): 2955 #as (CH) alkyl, 2830 ') s #s (CH) alkyl, 1730 u (C = O) ester arom, 1580-1558 # (C = N) and # (C = C) bipy, 1463 # (CH) of CH2 and CH3, 1380-1362 6 (CH) of tBu, 1256 # (CH3-Si), 1110 # (Si-OC), 1100 6 (CO) ester, 836 # (Si- O), 776 # (CH) arom;
UV (MeOH, 0.0672 mg / ml): 207 (42250), 240 (11879), 298
(12445);
MS (70eV / DCI / NH3 / intensity%): m / z: 617 (100;
[M] +)
HRMS [M-tBu] +: theoretical mass: 559.26594 mass found: 559.2638;
Microanalysis for C32H52N2O6Si2: Calc. : C, 62.30; H, 8.50; N, 4.54; Exp. : C, 62.20; H, 8.46; N, 4.54.

préparation de la 4,4'-bis-[4
(hydroxy)butoxycarbonyl]-2,2'-bipyridine 5.preparation of 4,4'-bis- [4
(hydroxy) butoxycarbonyl] -2,2'-bipyridine 5.

4 (3,48 mmol ; 2,15 g) dissous dans 30 ml de THF anhydre, est additionné de 3 ml d'acide acétique, puis de 12 ml (12,0 mmol ; 3,4 éq.) d'une solution molaire de fluorure de tétrabutylammonium dans le THF anhydre. Le milieu est agité à 200C pendant 24h, puis une solution saturée de NaHCO3 est ajoutée afin de neutraliser le milieu. Après extraction au CH2C12 (3x50 mi), séchage (Na2SO4), et concentration sous vide, S est purifie par chromatographie sur silice 60H (éluant : EtOAc-MeOH : 80-20). On obtient 1,17 g (3,01 mmol) de 5 sous forme d'un solide blanc (Rdt : 86,5%). 4 (3.48 mmol; 2.15 g) dissolved in 30 ml of anhydrous THF, is added 3 ml of acetic acid, then 12 ml (12.0 mmol; 3.4 eq.) Of a solution molar of tetrabutylammonium fluoride in anhydrous THF. The medium is stirred at 200C for 24 h, then a saturated NaHCO3 solution is added in order to neutralize the medium. After extraction with CH2C12 (3x50 mi), drying (Na2SO4), and concentration under vacuum, S is purified by chromatography on silica 60H (eluent: EtOAc-MeOH: 80-20). 1.17 g (3.01 mmol) of 5 are obtained in the form of a white solid (yield: 86.5%).

CCM : Rf 0,7 (EtOAc/MeOH : 80/20) ;
Pf : 91,0-91,50C ;
RMN 1H (300 MHz, CDCl3) : d 8,90 (s, 2 H, H3, H3'), 8,83
(d, 2 H, J5-6=J5'6'= 4,94 Hz, H6, H6'), 7,87 (d, 2 H,
J6-5=J6'-5'= 4,94 Hz, H5, H5'), 4,41 (t, 4 H, J8-9=J8'-9'= 6,7 Hz, 2 Hs, 2 H8'), 3,72 (t, 4 H, J10-11=J10'-11'= 5,8
Hz, 2 H11, 2 H11'), 1,90 (m, 4 H, 2 H9, 2 H9'), 1,72 (m, 4 H, 2 H10, 2 H10'), 1,39 (t, 2H, J11-12=J11'-12'= = 5,06
Hz, H12, H12')
RMN 13C (75,47 MHz, CDCl3) : 164,97 (2C, C7, C7'), 156,33 (2C, C2, C2'), 149,88 (2C, C6, C6'), 138,63 (2C,
C4, C4'), 122,97 (2C, C5, C5'), 120,31 (2C, C3, C3'), 65,45 (2C, C8, Ce'), 62,08 (2C, C11, C11'), 28,69 (2C,
C10, C10'), 24,95 (2C, C9, C9') ;
IR (KBr) : 3419 u(O-H) alcool, 2970 #as(C-H) alkyle, 2890 #s(C-H) alkyle, 1713 u(C=O) ester arom, 1593-1558 #(C=H) et #(C=C) bipy, 1474 #(C-H) de CH2, 1131 #(C-O-C) ester, 1059 #(C-O) alcool, 763 6(C-H) arom, 725 #(C-H) alkyle ;
W (CH2Cl2, 0,0526 mg/ml) : 228 (10692), 241 (11496), 299 (12442) ;
SM (70eV/DCI/NH3/intensité %) : m/z : 389 (100 [M+1]+)
Microanalyse pour C20H24N2O6 : Calc. : C, 61,85 ; H, 6,23 ; N, 7,21 ; Exp. : C, 61,85 ; H, 6,19 ; N, 7,06.TLC: Rf 0.7 (EtOAc / MeOH: 80/20);
Pf: 91.0-91.50C;
1 H NMR (300 MHz, CDCl3): d 8.90 (s, 2 H, H3, H3 '), 8.83
(d, 2 H, J5-6 = J5'6 '= 4.94 Hz, H6, H6'), 7.87 (d, 2 H,
J6-5 = J6'-5 '= 4.94 Hz, H5, H5'), 4.41 (t, 4 H, J8-9 = J8'-9 '= 6.7 Hz, 2 Hs, 2 H8 '), 3.72 (t, 4 H, J10-11 = J10'-11' = 5.8
Hz, 2 H11, 2 H11 '), 1.90 (m, 4 H, 2 H9, 2 H9'), 1.72 (m, 4 H, 2 H10, 2 H10 '), 1.39 (t, 2H, J11-12 = J11'-12 '= = 5.06
Hz, H12, H12 ')
13C NMR (75.47 MHz, CDCl3): 164.97 (2C, C7, C7 '), 156.33 (2C, C2, C2'), 149.88 (2C, C6, C6 '), 138.63 (2C,
C4, C4 '), 122.97 (2C, C5, C5'), 120.31 (2C, C3, C3 '), 65.45 (2C, C8, Ce'), 62.08 (2C, C11, C11 '), 28.69 (2C,
C10, C10 '), 24.95 (2C, C9, C9');
IR (KBr): 3419 u (OH) alcohol, 2970 #as (CH) alkyl, 2890 #s (CH) alkyl, 1713 u (C = O) ester arom, 1593-1558 # (C = H) and # ( C = C) bipy, 1474 # (CH) of CH2, 1131 # (COC) ester, 1059 # (CO) alcohol, 763 6 (CH) arom, 725 # (CH) alkyl;
W (CH2Cl2, 0.0526 mg / ml): 228 (10692), 241 (11496), 299 (12442);
SM (70eV / DCI / NH3 / intensity%): m / z: 389 (100 [M + 1] +)
Microanalysis for C20H24N2O6: Calc. : C, 61.85; H, 6.23; N, 7.21; Exp. : C, 61.85; H, 6.19; N, 7.06.

e) préparation de la 4,4'-bis[4-(4
benzoylbenzoyloxy)butoxycarbonyl]-2,2'
bipyridine 7a
Le diol 5 (5,15 mmol ; 2,0 g), la DCC (9,8 mmol 1 2,02 g) et l'acide 4-benzoylbenzoïque 6a (8,95 mmol ; 2,0 g) sont mis en solution dans 150 ml de
CH2C12. Après 10 min d'agitation à 20 C, la DMAP
(0,89 mmol ; 0,11 g) est ajoutée et le milieu agité pendant 24 heures à température ambiante. La solution trouble est chauffée légèrement (400C) afin de solubiliser 7a. Seule la dicyclohexylurée (DCU) formée reste insoluble. Le mélange réactionnel est ensuite filtré. Le filtrat est lavé par 2x50 ml d'HCl 1N, 2x50 ml d'une solution de NaHCO3 saturée et 2x50 ml d'une solution de NaCl saturée.La phase organique est ensuite séchée (Na2SO4), filtrée et concentrée sous vide. 7a est purifié par chromatographie sur silice 60H
(éluant : Heptane-EtOAc 60-40). On obtient 2,9 g (3,6 mmol) de 7a sous forme d'un solide blanc (Rdt : 708).e) preparation of 4,4'-bis [4- (4
benzoylbenzoyloxy) butoxycarbonyl] -2.2 '
bipyridine 7a
Diol 5 (5.15 mmol; 2.0 g), DCC (9.8 mmol 1 2.02 g) and 4-benzoylbenzoic acid 6a (8.95 mmol; 2.0 g) are solution in 150 ml of
CH2C12. After 10 min of agitation at 20 ° C., the DMAP
(0.89 mmol; 0.11 g) is added and the medium stirred for 24 hours at room temperature. The cloudy solution is heated slightly (400C) in order to dissolve 7a. Only the dicyclohexylurea (DCU) formed remains insoluble. The reaction mixture is then filtered. The filtrate is washed with 2x50 ml of 1N HCl, 2x50 ml of a saturated NaHCO3 solution and 2x50 ml of a saturated NaCl solution. The organic phase is then dried (Na2SO4), filtered and concentrated in vacuo. 7a is purified by chromatography on silica 60H
(eluent: Heptane-EtOAc 60-40). 2.9 g (3.6 mmol) of 7a are obtained in the form of a white solid (Yield: 708).

A une solution d'acide 4-benzoylbenzoïque 6a (240 mg , 1,06 mmol) et de 4,4'-bis-[4-
(hydroxy)butoxycarbonyl]-2,2'-bipyridine 5 (200 mg ; 0,52 mmol) dans 10 ml de THF anhydre, on ajoute lentement une solution commerciale de DEAD (177 l ; 1,13 mmol) puis une solution de triphénylphosphine (300 mg ; 1,14 mmol) dans 5 ml de THF anhydre. La solution se décolore rapidement. Le milieu réactionnel est alors évapore et directement purifié par chromatographie sur silice 60H (éluant : THF-Heptane 50-50). On obtient 375 mg (0,47 mmol) de solide blanc (Rdt : 44%).To a solution of 4-benzoylbenzoic acid 6a (240 mg, 1.06 mmol) and 4,4'-bis- [4-
(hydroxy) butoxycarbonyl] -2,2'-bipyridine 5 (200 mg; 0.52 mmol) in 10 ml of anhydrous THF, a commercial solution of DEAD (177 l; 1.13 mmol) is slowly added followed by a solution of triphenylphosphine (300 mg; 1.14 mmol) in 5 ml of anhydrous THF. The solution discolors quickly. The reaction medium is then evaporated and directly purified by chromatography on silica 60H (eluent: THF-Heptane 50-50). 375 mg (0.47 mmol) of white solid are obtained (yield: 44%).

CCM : Rf 0,5 (EtOAc/Heptane : 50/50 ou CHCl3/Et2O 1/1) ;
Pf : 118-119 C ;
RMN 1H (300 MHz, CDCl3) : d 8,94 (s, 2 H, H3, H3'), 8,86
(d, 2 H, J5-6=J5'-6'= 4,94 Hz, H6, H6'), 8,14 (d, 2 H,
J14-15=J14'-15'= 8,2 Hz, H14, H14'), 7,89 (d, 2 H, J56=J5'-6'= 4,94 HZ, H5, H5'), 7.83 (d, 4 h, J=14-15=J14'-15'= 8,2 Hz, H15, H15'), 7,81 (d, 4 H, J19-20=J19'-20'= 7,4 Hz,
H19, H19'), 7.61 (t, 2 H, J20-21=J20'-21'= 7,4 Hz, H21,
H21'), 7,49 (t, 4 H, J19-20=J19'-20'=J20-21=J20'-21'= 7,4
Hz, H20, H20'), 4,44 (m, 8 H, 2 H8, 2 H8', 2 H11, 2 H11'), 2,03-1,98 (m, 8 H, 2 Hg, 2 H9' 2 Hic, 2 H10') ;
RMN 13C (75,47 MHZ, CDCl3) :: # 195,64 (2C, C17, C17'), 165,46 et 164,86 (4C, C7, C7', C12, C12'), 156,29 (2C,
C2, C2'), 149,86 (2C, C6, C6'), 141,11 (2C, C16, C16'), 138,45 (2C, C4, C4'), 136,64 (2C, Cie, C18'), 133,03
(2C, C13, C13'), 132,68 (2C, C21, C21'), 129,85 et 129,49 et 129,21 (12C, 2C14, 2C14', 2C15, 2C15', 2C19, 2C19'), 128,17 (4C, 2C20, 2C20'), 122,93 (2C, C5, C5'), 120,27
(2C, C3, C3'), 65,03 et 64,51 (4C, C8, C8' C11, C11'), 25,18 et 24,66 (4C, C9, Cgw, Cîo, Cio') ;
IR (KBr) : 2928 #as(C-H) alkyle, 2852 #s(C-H) alkyle, 1727 #(C=O) ester arom, 1646 u(C=O) cétone, 1627-1578 u
(C=N) et #(C=C) bipy, 1448 #(C-H) de CH2, 1285 #(C-O) ester, 1127 #(C-O-C) ester, 712 #(C-H) alkyle, 766 6(C
H) arom ;
W (100 l d'une solution 0,4176 mg/ml dans CH2Cl2 dans 2,5 ml de MeOH) : 252 (25895) ;
SM (FAB/thioglycérol) : m/z : 805 ([M+1]+), 595 ((M- 2PhCO]+), 525 ([M-(CH2)4Obzp)]+), 507 ((M {O(CH2)4Obzp}]+), 375 ([M-(COO(CH2)4Obzp)-PhCO}]+), 242
([M-2{(CH2)4Obzp}]+), 209 ([M-2[CO2(CH2)4Obzp}]+) ;
HRMS : : masse théorique : 804,26827 masse trouvée 804,2705.TLC: Rf 0.5 (EtOAc / Heptane: 50/50 or CHCl3 / Et2O 1/1);
Pf: 118-119 C;
1 H NMR (300 MHz, CDCl3): d 8.94 (s, 2 H, H3, H3 '), 8.86
(d, 2 H, J5-6 = J5'-6 '= 4.94 Hz, H6, H6'), 8.14 (d, 2 H,
J14-15 = J14'-15 '= 8.2 Hz, H14, H14'), 7.89 (d, 2 H, J56 = J5'-6 '= 4.94 HZ, H5, H5'), 7.83 (d, 4 h, J = 14-15 = J14'-15 '= 8.2 Hz, H15, H15'), 7.81 (d, 4 H, J19-20 = J19'-20 '= 7, 4 Hz,
H19, H19 '), 7.61 (t, 2 H, J20-21 = J20'-21' = 7.4 Hz, H21,
H21 '), 7.49 (t, 4 H, J19-20 = J19'-20' = J20-21 = J20'-21 '= 7.4
Hz, H20, H20 '), 4.44 (m, 8 H, 2 H8, 2 H8', 2 H11, 2 H11 '), 2.03-1.98 (m, 8 H, 2 Hg, 2 H9 '2 Hic, 2 H10');
13C NMR (75.47 MHZ, CDCl3) :: # 195.64 (2C, C17, C17 '), 165.46 and 164.86 (4C, C7, C7', C12, C12 '), 156.29 ( 2C,
C2, C2 '), 149.86 (2C, C6, C6'), 141.11 (2C, C16, C16 '), 138.45 (2C, C4, C4'), 136.64 (2C, Cie, C18 '), 133.03
(2C, C13, C13 '), 132.68 (2C, C21, C21'), 129.85 and 129.49 and 129.21 (12C, 2C14, 2C14 ', 2C15, 2C15', 2C19, 2C19 ') , 128.17 (4C, 2C20, 2C20 '), 122.93 (2C, C5, C5'), 120.27
(2C, C3, C3 '), 65.03 and 64.51 (4C, C8, C8' C11, C11 '), 25.18 and 24.66 (4C, C9, Cgw, Cio, Cio');
IR (KBr): 2928 #as (CH) alkyl, 2852 #s (CH) alkyl, 1727 # (C = O) ester arom, 1646 u (C = O) ketone, 1627-1578 u
(C = N) and # (C = C) bipy, 1448 # (CH) of CH2, 1285 # (CO) ester, 1127 # (COC) ester, 712 # (CH) alkyl, 766 6 (C
H) arom;
W (100 l of a 0.4176 mg / ml solution in CH2Cl2 in 2.5 ml of MeOH): 252 (25895);
SM (FAB / thioglycerol): m / z: 805 ([M + 1] +), 595 ((M- 2PhCO] +), 525 ([M- (CH2) 4Obzp)] +), 507 ((M { O (CH2) 4Obzp}] +), 375 ([M- (COO (CH2) 4Obzp) -PhCO}] +), 242
([M-2 {(CH2) 4Obzp}] +), 209 ([M-2 [CO2 (CH2) 4Obzp}] +);
HRMS:: theoretical mass: 804.26827 mass found 804.2705.

f) Préparation du cis-Dichloro-bis
(4,4'-bis[4-(4-benzoylbenzoyloxy)butoxycarbonyl]-2,2'-bipyridine)ruthénium (II) 9.f) Preparation of cis-Dichloro-bis
(4,4'-bis [4- (4-benzoylbenzoyloxy) butoxycarbonyl] -2,2'-bipyridine) ruthenium (II) 9.

RuCl3@nH2O (65,0 mg ; 0,25 mmol) est dissous dans 8 ml de DMF anhydre en présence de 7a (400 mg ; 0,5 mmol) et de LiCl (73,6 mg ; 1,74 mmol). Le milieu est porte à reflux du DMF pendant 8 heures sous atmosphère d'argon. Après refroidissement à 20 C, le milieu homogène violet est additionne de 30 ml d'acétone. La solution est alors mise au congélateur
(-200C) pendant une nuit. Après filtrationdes cristaux noirs obtenus, les solides sont lavés à l'éther éthylique (3x25 ml). On obtient 161 mg du complexe 9 sous la forme d'un solide noir pulvérulent (Rdt : 36,4 %).RuCl3 @ nH2O (65.0 mg; 0.25 mmol) is dissolved in 8 ml of anhydrous DMF in the presence of 7a (400 mg; 0.5 mmol) and LiCl (73.6 mg; 1.74 mmol). The medium is brought to reflux of DMF for 8 hours under an argon atmosphere. After cooling to 20 ° C., the homogeneous purple medium is added with 30 ml of acetone. The solution is then put in the freezer
(-200C) overnight. After filtration of the black crystals obtained, the solids are washed with ethyl ether (3 × 25 ml). 161 mg of complex 9 are obtained in the form of a pulverulent black solid (yield: 36.4%).

IR (KBr):3385 #(O-H)H2O, 1722 u(C=O) ester arom., 1650-1570 u(C=O) cetone et #(C=N) bipy, 1548 #(C=C) bipy, 1264 #(C-O) ester, 1128 #(C-O-C) ester, 787 #(C-H) arom ; UV (MeOH, 0,05915 mg/ml) :389 (12985), 309 (55323), 243 (62087), 210 (85279) , SM
(FAB/thioglycérol):m/z :1500 ([M-R]+), 1465 ([M-R-Cl]+), 1429 ([M-R-2C1]+), 1222 ([M-2R]+), 1185 ([M-2R-Cl]+), 1149([M-R-2C1]+), avec R=(CH2)4O2CBzp.IR (KBr): 3385 # (OH) H2O, 1722 u (C = O) ester arom., 1650-1570 u (C = O) ketone and # (C = N) bipy, 1548 # (C = C) bipy , 1264 # (CO) ester, 1128 # (COC) ester, 787 # (CH) arom; UV (MeOH, 0.05915 mg / ml): 389 (12985), 309 (55323), 243 (62087), 210 (85279), SM
(FAB / thioglycerol): m / z: 1500 ([MR] +), 1465 ([MR-Cl] +), 1429 ([MR-2C1] +), 1222 ([M-2R] +), 1185 ( [M-2R-Cl] +), 1149 ([MR-2C1] +), with R = (CH2) 4O2CBzp.

EXEMPLE 2 : Préparation du cis-Dichloro bis(4,4'-bis[4-(4-(4-bromobenzoyl)benzoyloxy)butoxy- carbonyl]-2,2'-bipyridine)ruthenium(II) 10.EXAMPLE 2 Preparation of cis-Dichloro bis (4,4'-bis [4- (4- (4-bromobenzoyl) benzoyloxy) butoxycarbonyl] -2,2'-bipyridine) ruthenium (II) 10.

On suit le meme mode operatoire que dans l'exemple 1 pour préparer le compos S et l'on fait réagir celui-ci avec l'acide 4-(4-bromobenzoyl)benzoïque 6b qui est préparé de la façon suivante
a) préparation de l'acide 4-(4-bromobenzoyl)benzoïque
6b:
Pour cette preparation, on suit le schema reactionnel suivant

The same operating mode as in Example 1 is followed to prepare compound S and it is reacted with 4- (4-bromobenzoyl) benzoic acid 6b which is prepared as follows
a) preparation of 4- (4-bromobenzoyl) benzoic acid
6b:
For this preparation, the following reaction scheme is followed

L'acide 4-bromobenzotque (2,5 g ; 12,31 mmol) est dissous dans 35 ml de THF anhydre, puis refroidi d -100 C. On ajoute lentement 19 ml (24,89 mmol ; 2,02 éq.) de n-butyllithium (solution 1,31M dans l'hexane anhydre). La temperature du milieu doit rester inférieure à -95 C.La solution est ensuite agitée pendant 2h à -780C. Le 4-bromobenzoate d'éthyle (2,82 g ; 12,3 mmol) dans 15 ml de THF est additionné en conservant la température inférieure à -700C. Après agitation pendant 3h à -200C, le mélange réactionnel est versé dans 50 ml d'une solution d'HCl 5%. Après extraction à l'éther (3x50 ml), la phase éthérée est lavée par 50 ml d'une solution de NaOH 1M. 6b reprécipite de nouveau lors d'une addition lente d'une solution à 10% d'HCl (30 ml) . Après filtration et séchage sous vide, on obtient 1,95 g (6,4 mmol) de 6b sous la forme d'un solide blanc (Rdt : 52%). The 4-bromobenzotque acid (2.5 g; 12.31 mmol) is dissolved in 35 ml of anhydrous THF, then cooled to -100 C. 19 ml (24.89 mmol; 2.02 eq.) Is added slowly. of n-butyllithium (1.31M solution in anhydrous hexane). The temperature of the medium must remain below -95 C. The solution is then stirred for 2 h at -780C. Ethyl 4-bromobenzoate (2.82 g; 12.3 mmol) in 15 ml of THF is added while keeping the temperature below -700C. After stirring for 3 h at -200C, the reaction mixture is poured into 50 ml of a 5% HCl solution. After extraction with ether (3 × 50 ml), the ethereal phase is washed with 50 ml of a 1M NaOH solution. 6b reprecipitates again during a slow addition of a 10% HCl solution (30 ml). After filtration and drying under vacuum, 1.95 g (6.4 mmol) of 6b are obtained in the form of a white solid (yield: 52%).

CCM : Rf 0,4 (Heptane/EtOAc : 1/2) ;
Pf : 269-270 C ;
RMN 1H (300 MHz, DMSO) : 8,09 (6, 2 H, J7-8=8,2 Hz, 2
Hs), 7,82 (d, 2 H, J2-3=7,6 Hz, 2 H3), 7,80 (d, 2 H, J23=7,6 Hz, 2 H2), 7,70 (d, 2 H, 2 H7) ;
RMN 13C (75,47 MHz, DMSO) : # 195,93 (1C, Cs), 168,06
(1C, C10), 141,50 (1C, C6), 137,00 (1C, C4), 135,829
(1C, Cg), 133,22-133,12 (4C, 2C2, 2C3), 131,05-130,85
(4C, 2C7, 2Ce), 128,59 (1C, C1) ;
IR (KBr) : 3002 #(C-H), 1690 u(C=O) acide sous forme de dimère, 1647 #(C=O) cétone, 1548 #(C=C) arom, 732 #(C-
H) arom ;
W (MeOH + 1 goutte de THF, 0,0074 mg/ml) : 263 (17469) ;
SM (70eV/EI/ intensité %) : m/z : 304/306 (68/60 ; [M]+), 259/261 (8,0/7,2 ; [M-COOH]+), 225 (12,08, [M-
Br]+), 183/185 (91,8/86,6 ; [M-PhCOOH]+), 155/157 (30,3/28,3 ; [M-COPhCOOH]+), 149 (100, [M-PhBr]+).TLC: Rf 0.4 (Heptane / EtOAc: 1/2);
Pf: 269-270 C;
1 H NMR (300 MHz, DMSO): 8.09 (6.2 H, J7-8 = 8.2 Hz, 2
Hs), 7.82 (d, 2 H, J2-3 = 7.6 Hz, 2 H3), 7.80 (d, 2 H, J23 = 7.6 Hz, 2 H2), 7.70 (d , 2H, 2H7);
13C NMR (75.47 MHz, DMSO): # 195.93 (1C, Cs), 168.06
(1C, C10), 141.50 (1C, C6), 137.00 (1C, C4), 135.829
(1C, Cg), 133.22-133.12 (4C, 2C2, 2C3), 131.05-130.85
(4C, 2C7, 2Ce), 128.59 (1C, C1);
IR (KBr): 3002 # (CH), 1690 u (C = O) acid as a dimer, 1647 # (C = O) ketone, 1548 # (C = C) arom, 732 # (C-
H) arom;
W (MeOH + 1 drop of THF, 0.0074 mg / ml): 263 (17469);
SM (70eV / EI / intensity%): m / z: 304/306 (68/60; [M] +), 259/261 (8.0 / 7.2; [M-COOH] +), 225 ( 12.08, [M-
Br] +), 183/185 (91.8 / 86.6; [M-PhCOOH] +), 155/157 (30.3 / 28.3; [M-COPhCOOH] +), 149 (100, [ M-PhBr] +).

b) préparation de la 4,4'-bis[4-(4-
bromobenzoyl)benzoyloxy)butoxycarbonyl]-2,2'
bipyridine 7b
A une solution de 6b (1,15 g ; 3,77 mmol) et 4 (732 mg; 1,88 mmol) dans 20 ml de THF anhydre, on ajoute lentement le DEAD (660 Rl ; 4,22 mmol) puis la triphénylphosphine (1,10 g ; 4,20 mmol ; 5 ml de THF anhydre). On observe une décoloration immediate de la solution du jaune au blanc accompagnée de la précipitation de 7b. On obtient 1,30 g (1,35 mmol) de 7b sous forme d'un solide blanc (Rdt : 72%). Après filtration, 230 mg supplémentaires sont extraits du filtrat (Rdt global : 84,5%). b) preparation of 4,4'-bis [4- (4-
bromobenzoyl) benzoyloxy) butoxycarbonyl] -2.2 '
bipyridine 7b
DEAD (660 Rl; 4.22 mmol) is slowly added to a solution of 6b (1.15 g; 3.77 mmol) and 4 (732 mg; 1.88 mmol) in 20 ml of anhydrous THF. triphenylphosphine (1.10 g; 4.20 mmol; 5 ml anhydrous THF). An immediate discoloration of the solution is observed from yellow to white accompanied by the precipitation of 7b. 1.30 g (1.35 mmol) of 7b are obtained in the form of a white solid (yield: 72%). After filtration, an additional 230 mg are extracted from the filtrate (overall yield: 84.5%).

CCM : Rf 0,75 (Et2O-CHCl3; 50-50) ;
Pf : 180-180,60C ;
RMN 1H (300 MHz, CDCl3) : d 8,93 (s, 2 H, H3, H3'), 8,84 (d, 2 H, J5-6=J5'-6'= 4,80 Hz, H6, H6'), 8,14 (d, 4 H,
J14-15=J14'-15'= 8,13 Hz, 2H14, 2H14'), 7,88 (d, 2 H, J56=J5'-6'= 4,80 Hz, H5, H5'), 7,79 (d, 4 H, J14-15=J14'-15'= 8,13 Hz, 2Hîs, 2H15'), 7,70-7,60 (M, 8 H, 2H19, 2H19'.TLC: Rf 0.75 (Et2O-CHCl3; 50-50);
Pf: 180-180.60C;
1 H NMR (300 MHz, CDCl3): d 8.93 (s, 2 H, H3, H3 '), 8.84 (d, 2 H, J5-6 = J5'-6' = 4.80 Hz, H6 , H6 '), 8.14 (d, 4 H,
J14-15 = J14'-15 '= 8.13 Hz, 2H14, 2H14'), 7.88 (d, 2 H, J56 = J5'-6 '= 4.80 Hz, H5, H5'), 7 , 79 (d, 4 H, J14-15 = J14'-15 '= 8.13 Hz, 2Hîs, 2H15'), 7.70-7.60 (M, 8 H, 2H19, 2H19 '.

2H20, 2H20'), 4,47 (m, 8H, 2H8, 2H8', 2H11, 2H11'), 2,00 (m, 8H, 2H9, 2H9', 2H10, 2H10') ;
RMN 13C (75,47 MHz, CDCl3) : # 195,59 (2C, C17, C17'),
165,41 et 164,87 (4C, C7, C7', C12, C12'), 156,31 (2C,
C2, C2'), 149,91 (2C, C6, C6'), 140,66 (2C, C16, C16'),
138,49 (2C, C4, C4e), 135,21 (2C, Cie, C18'), 133,26
(2C, C13, C13'), 131,59 et 131,30 (8C, 2C19, 2C19', 2C20, 2C20'), 129,42 et 129,35 (8C, 2C14, 2C14', 2C15, 2C15'), 127,94 (2C, 2C21, 2C21'), 122,97 (2C, C5, C5'), 120,28
(2C, C3, C3'), 65,06 et 64,61 (4C, C8,C8', C11, C11'), 25,26 et 25,207 (4C, Cg, Csl, C10, C10') ;
IR (KBr) : 2968 #as (C-H) alkyle, 1719 #(C=O) ester arom., 1651 #(C=O) cétone, 1584-1540 u(C=N) et #(C=C) bipy, 1286 #(C-O) ester, 1123 #(C-O-C) ester, 760 6(C-H) arom, 733 #(C-H) squelette (CH2)4, 660 #(C-Br) ;
W (100 l d'une solution 0,1007 mg/ml dans CH2Cl2 dans 2,5 ml de MeOH) : 261 (53232) ;
SM (70eV/IC/NH3/ intensité %) : m/z : 960/962/965
(47,45/100/60,64 ; (M=1]+) ;
Microanalyse pour C48H38Br2N2O10 : Calc. : C, 59,89 ; H, 3,98 ; N, 2,91 ; Br, 16,60 ; Exp. : C, 59,96 ; H, 4,29 ; N, 2,86 ; Br, 16,47.2H20, 2H20 '), 4.47 (m, 8H, 2H8, 2H8', 2H11, 2H11 '), 2.00 (m, 8H, 2H9, 2H9', 2H10, 2H10 ');
13C NMR (75.47 MHz, CDCl3): # 195.59 (2C, C17, C17 '),
165.41 and 164.87 (4C, C7, C7 ', C12, C12'), 156.31 (2C,
C2, C2 '), 149.91 (2C, C6, C6'), 140.66 (2C, C16, C16 '),
138.49 (2C, C4, C4e), 135.21 (2C, Cie, C18 '), 133.26
(2C, C13, C13 '), 131.59 and 131.30 (8C, 2C19, 2C19', 2C20, 2C20 '), 129.42 and 129.35 (8C, 2C14, 2C14', 2C15, 2C15 ') , 127.94 (2C, 2C21, 2C21 '), 122.97 (2C, C5, C5'), 120.28
(2C, C3, C3 '), 65.06 and 64.61 (4C, C8, C8', C11, C11 '), 25.26 and 25.207 (4C, Cg, Csl, C10, C10');
IR (KBr): 2968 #as (CH) alkyl, 1719 # (C = O) aromatic ester, 1651 # (C = O) ketone, 1584-1540 u (C = N) and # (C = C) bipy , 1286 # (CO) ester, 1123 # (COC) ester, 760 6 (CH) arom, 733 # (CH) backbone (CH2) 4, 660 # (C-Br);
W (100 l of a 0.1007 mg / ml solution in CH2Cl2 in 2.5 ml of MeOH): 261 (53232);
SM (70eV / IC / NH3 / intensity%): m / z: 960/962/965
(47.45 / 100 / 60.64; (M = 1] +);
Microanalysis for C48H38Br2N2O10: Calc. : C, 59.89; H, 3.98; N, 2.91; Br, 16.60; Exp. : C, 59.96; H, 4.29; N, 2.86; Br, 16.47.

c) Préparation cis-dichloro-bis(4,4'-bis(4-(4-(4
bromobenzoyl)benzoyloxy)butoxycarbonyl]-2,2'
bipyridine)ruthénium (II) 10.c) Preparation cis-dichloro-bis (4,4'-bis (4- (4- (4
bromobenzoyl) benzoyloxy) butoxycarbonyl] -2.2 '
bipyridine) ruthenium (II) 10.

Le mode opératoire nécessaire a la synthese de 10 est identique a celui dans l'exemple l.f. On obtient 963,0 mg du complexe 10 sous forme d'une poudre noire pulvérulente (Rdt : 44 %). The procedure necessary for the synthesis of 10 is identical to that in Example 1.f. 963.0 mg of complex 10 are obtained in the form of a black powdery powder (yield: 44%).

IR (KBr):3417 u(O-H)H20, 1720 #(C=O) ester arom., 1651 #(C=O) cétone, 1585-1540 #(C=N) bipy et v(C=C) bipy, 1272 #(C-O)ester, 1106 #(C-O-C) ester, 758 #(C-H) arom, 733 #(C-H) squelette (CH2)4 ; UV (MeOH, 0,04865 mg/ml):393 (11824), 310 (40003), 205 (93254).IR (KBr): 3417 u (OH) H20, 1720 # (C = O) aromatic ester, 1651 # (C = O) ketone, 1585-1540 # (C = N) bipy and v (C = C) bipy , 1272 # (CO) ester, 1106 # (COC) ester, 758 # (CH) arom, 733 # (CH) backbone (CH2) 4; UV (MeOH, 0.04865 mg / ml): 393 (11824), 310 (40003), 205 (93254).

EXEMPLE 3 : Preparation du cis-Carbonato-bis(4,4'-bis(4-(4-benzoylbenzoyloxy)butoxycarbonyl]-2,2'-bipyridine)ruthénium(II) 11.EXAMPLE 3 Preparation of cis-Carbonato-bis (4,4'-bis (4- (4-benzoylbenzoyloxy) butoxycarbonyl] -2,2'-bipyridine) ruthenium (II) 11.

9 (28,0 mol ; 50,0 mg) est dissous dans 2 ml d'eau dégazée à l'argon. Après addition d'un large excès de Na2CO3 (46,0 mol ; 46,0 l d'une solution 1M), la solution est agitée à reflux pendant 2 heures. 9 (28.0 mol; 50.0 mg) is dissolved in 2 ml of argon degassed water. After adding a large excess of Na2CO3 (46.0 mol; 46.0 l of a 1M solution), the solution is stirred at reflux for 2 hours.

La solution rouge-bordeaux est refroidie à 20 C puis lyophilisée. On obtient 11 sous forme d'une poudre de couleur pourpre (Rdt : 95%).The red-burgundy solution is cooled to 20 ° C. and then lyophilized. 11 are obtained in the form of a purple powder (yield: 95%).

RMN 1H (300 MHz,D2O): 89,57-8,86 (M, 16H, 2H1, 2H10, 4H18, 4H18', 2H4, 2H7),8,3-8,13 (M,8H, 2H2, 2Hg, 4H19), 8,04 (m,2H,2H25), 7,8-7,4 (M, 20H, 4H19', 4H24' 4H24', 2H25', 4H23, 4H23', 2H25), 3,56 (m, 16H, 4H12, 4H12',4H15, 4H15'), 1,28 (m,16H, 4H13, 4H13w, 4H14, 4H14') ; IR (KBr) : 3430 #(O-H) H20, 1730 u(C=O) ester arom., 1650-1570 u(C=O) cétone et #(C=N)bipy, 1539 u (C=C) bipy, 1265 #(C=O) ester, 1120 #(C-O-C) ester, 787 #(C-H) arom ; W (MeOH, 0,0486 mg/ml):361 (5064), 306
(22152), 247 (20731), 203 (37565).1H NMR (300 MHz, D2O): 89.57-8.86 (M, 16H, 2H1, 2H10, 4H18, 4H18 ', 2H4, 2H7), 8.3-8.13 (M, 8H, 2H2, 2Hg , 4H19), 8.04 (m, 2H, 2H25), 7.8-7.4 (M, 20H, 4H19 ', 4H24' 4H24 ', 2H25', 4H23, 4H23 ', 2H25), 3.56 ( m, 16H, 4H12, 4H12 ', 4H15, 4H15'), 1.28 (m, 16H, 4H13, 4H13w, 4H14, 4H14 '); IR (KBr): 3430 # (OH) H20, 1730 u (C = O) aromatic ester, 1650-1570 u (C = O) ketone and # (C = N) bipy, 1539 u (C = C) bipy , 1265 # (C = O) ester, 1120 # (COC) ester, 787 # (CH) arom; W (MeOH, 0.0486 mg / ml): 361 (5064), 306
(22152), 247 (20731), 203 (37565).

EXEMPLE 4 : Préparation du
cis-Carbonato-bis(4,4'-bis([4-(4-(4
bromobenzoyl)benzoyloxy)butoxycarbonyl]
2,2'-bipyridine)ruthénium(II) 12.EXAMPLE 4: Preparation of the
cis-Carbonato-bis (4,4'-bis ([4- (4- (4
bromobenzoyl) benzoyloxy) butoxycarbonyl]
2,2'-bipyridine) ruthenium (II) 12.

Le mode opératoire nécessaire à la synthèse de 12 est identique å celui décrit dans l'exemple 3. On obtient 12 sous forme d'une poudre de couleur pourpre
(Rdt : 95%)-
RMN 1H (300 MHz, D2O): #9,35-8,78 (M, 16H, 2H1, 2H10, 4H18, 4H18', 2H4, 2H7), 8,31-8,13 (M,8H, 2H2, 2H9, 4H19), 8,04-7,48 (M, 20H, 4H19', 4H24, 4H24', 4H23, 4H23'), 3,67 (m, 16H, 4H12, 4H12, 4H15, 4H15'), 1,62 (m, 16H, 4H13, 4H13, 4H141 4H14') ; IR (KBr) : 3442 v(O-H) H2O, 1721 v(C=O) ester arom., 1651 v(C=O) cétone1618-1540 v
(C=N) bipy et v(C=C)bipy, 1282 #(C-O) ester, 1105 6
(C-O-C) ester, 786 6(C-H) arom, 735 6(C-H) squelette
(CH2)4, 663 6(C-Br) ;UV (MeOH, 0,05565 mg/ml):369
(10319), 306 (38762), 249 (33359), 203 (56736).The procedure necessary for the synthesis of 12 is identical to that described in Example 3. 12 are obtained in the form of a powder of purple color
(YId: 95%) -
1H NMR (300 MHz, D2O): # 9.35-8.78 (M, 16H, 2H1, 2H10, 4H18, 4H18 ', 2H4, 2H7), 8.31-8.13 (M, 8H, 2H2, 2H9, 4H19), 8.04-7.48 (M, 20H, 4H19 ', 4H24, 4H24', 4H23, 4H23 '), 3.67 (m, 16H, 4H12, 4H12, 4:15, 4H15'), 1 , 62 (m, 16H, 4H13, 4H13, 4H141 4H14 '); IR (KBr): 3442 v (OH) H2O, 1721 v (C = O) aromatic ester, 1651 v (C = O) ketone1618-1540 v
(C = N) bipy and v (C = C) bipy, 1282 # (CO) ester, 1105 6
(COC) ester, 786 6 (CH) arom, 735 6 (CH) skeleton
(CH2) 4, 663 6 (C-Br); UV (MeOH, 0.05565 mg / ml): 369
(10319), 306 (38762), 249 (33359), 203 (56736).

EXEMPLE 5 : Préparation du cis-Carbonato-bis(4,4'-bis[4-(4-(4-3H-benzoyl)benzoyl oxy)butoxycarbonyl]-2,2'-bipyridine)ruthénium(II) 13. EXAMPLE 5 Preparation of cis-Carbonato-bis (4,4'-bis [4- (4- (4-3H-benzoyl) benzoyl oxy) butoxycarbonyl] -2,2'-bipyridine) ruthenium (II) 13.

Le complexe 12 (4,8 mmol ; 10 mg) est dissous dans 1 ml de MeOH. Après addition d'un large exces de Pd/C
(20 mg) et de 2,5 ml de TEA (18 mmol ; 4 éq.), la solution est installée sur une pompe de type Toepler. L'ampoule de tritium gaz est cassée et le ballon saturé en 3H. La solution est agitée à température ambiante pendant 8 heures. Après filtration du catalyseur et lavages par 3x10 ml de MeOH, le solvant est évaporé. Le produit est purifié par reprécipitation dans l'EtOH, puis conservé dans du MeOH.Complex 12 (4.8 mmol; 10 mg) is dissolved in 1 ml of MeOH. After adding a large excess of Pd / C
(20 mg) and 2.5 ml of TEA (18 mmol; 4 eq.), The solution is installed on a Toepler type pump. The tritium gas bulb is broken and the balloon saturated in 3H. The solution is stirred at room temperature for 8 hours. After filtration of the catalyst and washing with 3 × 10 ml of MeOH, the solvent is evaporated. The product is purified by reprecipitation in EtOH, then stored in MeOH.

RMN3H (320,135 MHz, D2O) : 6 8,01 (s, 1 3H, 1 3H25), 7,61
(s, 2 3 H, 2 3 H25') ; UV (MeOH): 367, 306, 247, 203 ;
Activité spécifique déterminée par W å 306 nm : A.S.3 H NMR (320.135 MHz, D2O): 6 8.01 (s, 1 3H, 1 3H25), 7.61
(s, 2 3 H, 2 3 H 25 '); UV (MeOH): 367, 306, 247, 203;
Specific activity determined by W å 306 nm: AS

11 Ci/mmole.11 Ci / mmol.

EXEMPLE 6 : Préparation du complexe 14.EXAMPLE 6 Preparation of the complex 14.

Après dissolution complète de il (2,8 pinol ; 5 mg) dans le tampon phosphate (pH 7), 2 mg du peptide
Ala-His-Ala-Ala-Ala-His-Ala (3,1 Cunol ; 1,1 éq.) en solution dans le tampon sont ajoutés. Le milieu est mis sous argon, et laissé ainsi pendant 24 h. Après addition de 6 équivalents de NH4PF6 (16,8 pmol ; 2,7 mg), la solution est agitée penant 2 h, le tampon évaporé et le tout repris au MeOH. On obtient le composé 14 sous forme de poudre rouge avec des rendements compris entre 30 et 50 %.After complete dissolution of it (2.8 pinol; 5 mg) in the phosphate buffer (pH 7), 2 mg of the peptide
Ala-His-Ala-Ala-Ala-His-Ala (3.1 Cunol; 1.1 eq.) In solution in the buffer are added. The medium is placed under argon, and thus left for 24 h. After addition of 6 equivalents of NH4PF6 (16.8 pmol; 2.7 mg), the solution is stirred for 2 h, the buffer evaporated and the whole taken up in MeOH. Compound 14 is obtained in the form of a red powder with yields of between 30 and 50%.

RMN 1H (300 MHz,D2O); #9, 61-8,78 (M, 16H, 2H1, 2H10, 4H18, 4H18', 2H4, 2H7), 8,35 (s, 1H, Im),8,11 (s, 1H, Im) 7,98-7,48 (M,32H,2H2, 2Hg, 4H191 4H19', 4H241 4H24', 4H231 4H23', 2H25, 2H25'), 7,21(s, 1H, Im), 7,11 (s, 1H, Im), 4,70-4,05 (M, 7H, 7H en a sur les peptides), 3,70 (m, 16H, 4H12, 4H12', 4H15,4H15'), 3,30-3,00 (M, 4H, 2CH2 en des histidines), 1,60 (m, 16H, 4H13, 4H13', 4H14, 4H14w), 1,53-1,35 (M, 15H, 5 Me des alanines); IR (KBr): 3446 et 3378 v(N-H)amide, 3132 v(C-H) arom., 2925v(C-H) alkyle, 2341 v(O-H) acide, 1713-1580v(C=O) amide, cétone et ester arom., v(C=N) et v(C=C) bipy, 1376 #(C-H)CH3, 1262 # (C-O) ester arom,. 1123 #(C-O-C) ester, 996-955 #(C-H), 848 6 (P-F), 830 #(C-H) arom. ; UV (MeOH, 0.1188 mg/ml) : 499 (2229), 370 (5729), 307 (24789), 243 (21624), 203 (50827). 1 H NMR (300 MHz, D2O); # 9, 61-8.78 (M, 16H, 2H1, 2H10, 4H18, 4H18 ', 2H4, 2H7), 8.35 (s, 1H, Im), 8.11 (s, 1H, Im) 7, 98-7.48 (M, 32H, 2H2, 2Hg, 4H191 4H19 ', 4H241 4H24', 4H231 4H23 ', 2H25, 2H25'), 7.21 (s, 1H, Im), 7.11 (s, 1H , Im), 4.70-4.05 (M, 7H, 7H has some on the peptides), 3.70 (m, 16H, 4H12, 4H12 ', 4H15.4H15'), 3.30-3.00 (M, 4H, 2CH2 in histidines), 1.60 (m, 16H, 4H13, 4H13 ', 4H14, 4H14w), 1.53-1.35 (M, 15H, 5 Me of alanines); IR (KBr): 3446 and 3378 v (NH) amide, 3132 v (CH) arom., 2925v (CH) alkyl, 2341 v (OH) acid, 1713-1580v (C = O) amide, ketone and ester arom. , v (C = N) and v (C = C) bipy, 1376 # (CH) CH3, 1262 # (CO) ester arom ,. 1123 # (C-O-C) ester, 996-955 # (C-H), 848 6 (P-F), 830 # (C-H) arom. ; UV (MeOH, 0.1188 mg / ml): 499 (2229), 370 (5729), 307 (24789), 243 (21624), 203 (50827).

Claims

1. Bifunctional complex of ruthenium (II) or (III) carrying several ligands, comprising

a group capable of recognizing a peptide sequence incorporating at least one histidine, said group being formed by the central ruthenium atom of the complex linked to the CO3 ligand or to two ligands, identical or different, chosen from C1,

Br, I and H2O; and

- At least one functional group having an intrinsic reactivity towards other amino acids possibly modified, this functional group being carried by at least one of the other ligands of the complex.

2. Ruthenium complex, corresponding to the formula

in which

a) X1 and x2 which may be identical or different, represent Br, I, C1 or H2O, or X1 and X2 together form CO3

b) Y is a single bond or a bivalent group chosen from -C (O) O-, -CONH-, -O-, -S-, -CH2O-, -CH = CH-, -CH2S, -CH2-CH = CH and -C = C-

c) Z is a single bond or a bivalent group chosen from -OC (O) -, -NHCO-, -O-, -S-; -OCH2 -, - SCH2-, -CH = CH- and -C-C- ;;

d) R1 is a monovalent group chosen from photosensitive groups, fluorescent groups, luminescent groups, complexing groups, enzymes, avidin, biotin, fluorescent chromophores, light absorbing chromophores, groups marked with a radioactive element, antibodies and antibody fragments;

e) m is such that 1 S m 5 5; and

f) R2 represents - (CH2) n- with 0 S n S 2 or

R2 is a benzene ring condensed with the two pyridine rings to form the orthophenanthroline ring.

3. Ruthenium complex according to claim 2, characterized in that R2 represents

(CH2) n with n equal to 0.

4. Ruthenium complex according to any one of claims 2 and 3, characterized in that Y represents -C (O) O-.

5. Ruthenium complex according to any one of claims 2 to 4, characterized in that Z represents -OC -OC (O) -.

6. Ruthenium complex according to any one of claims 2 to 5, characterized in that R1 is a photosensitive group.

7. Ruthenium complex according to claim 6, characterized in that R1 corresponds to the formula

in which R3 represents H, 3H or Br.

8. Ruthenium complex chosen from cis-dichloro-bis (4,4'-bis [4- (4-benzoyl benzOyloxy) butoxycarbonyl] -2,2'-bipyridine) ruthenium

(II), cis-dichloro-bis) 4,4'-bis [4- (4- (4- (4bromobenzoyl) benzoyloxy) butoxycarbonyl] -2,2'bipyridine) ruthenium (II), cis-carbonato-bis (4 , 4 'bis [4- (4-benzoylbenzoyloxy) butoxycarbonyl] -2,2'- bipyridine) ruthenium (II), cis-carbonato-bis (4,4' bis [4- (4 (4-bromobenzoyl) benzoyloxy ) butoxycarbonyl] - 2,2'-bipyridine) ruthenium (II) and cis-carbonato-bis (4,4'-bis [4- (4- (4- (3H) benzoyl) benzoyloxy) butoxycarbonyl) -2, 2'-bipyridine) ruthenium (II).

9. Process for the preparation of a ruthenium complex corresponding to the formula

in which R1, R2S, Z, Y and m are as defined above, with a ruthenium chloride of formula RuC13, p H2O in which p is an integer ranging from 1 to 3.

B 11991.3 MDT in which Y, Z, R1, R2 and m have the meanings given in claim 2, and X1 and X2 represent C1, characterized in that it consists in reacting a bipyridine of formula

10. Process for the preparation of a ruthenium complex corresponding to the formula

in which Y, Z, R1, R2 and m have the meanings given in claim 2, and X1 and X2 together form CO3, characterized in that it comprises the following steps

a) preparing a ruthenium complex of formula (I) in which Y, Z, R1, R2 and m are as defined above, and X1 and X2 represent C1, by implementing the process of claim 9, and

b) bringing the ruthenium complex obtained in step a) into contact with sodium carbonate to replace the two C1s by C03.