FR2580150A1 - Process for producing polysaccharides which makes it possible especially to prepare a fermented sweet beverage or sweet kefir. - Google Patents

Process for producing polysaccharides which makes it possible especially to prepare a fermented sweet beverage or sweet kefir. Download PDF

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    • A23V2400/321Mesenteroides

Abstract

The present invention relates to a process for producing polysaccharides which makes it possible especially to prepare a fermented sweet beverage or sweet kefir. According to the process, a medium containing an excessivly large amount of sucrose is inoculated with solutions containing DOLLAR *06<BHNT]Lactobacillus brevis, Leuconostoc mesenteroides and, optionally Lactobacillus casei. After formation of a gel, Saccharomyces florentinus and Koecklera apiculata are introduced into an aqueous solution of unrefined cane sugar. The neo-crystals formed can be used to prepare either polysaccharides or a fermented beverage. Application in the food industry and, more generally, in any industry using polysaccharides.

Description

La présente invention concerne un procédé pour produire des polysaccharides permettant notamment de préparer une boisson sucrée fermentée ou kéfir sucré qui peut être aromatisée selon le goût des consommateurs. The present invention relates to a process for producing polysaccharides making it possible in particular to prepare a fermented sugary drink or sweet kefir which can be flavored according to the taste of consumers.

A l'origine le kéfir est une boisson lactée fermentée à partir du lait de jument, comme cela est encore le cas chez les nomades de l'Asie centrale, mais actuellement est fabriqué à partir du lait de vache ou de chèvre. Mais en
Occident on désigne également par ce terme "kéfir" une boisson sucrée aromatisée généralement appelée kéfir sucré ou kéfir aux fruits.
Originally kefir is a milk drink fermented from horse milk, as is still the case among nomads in Central Asia, but currently is made from cow or goat milk. But in
Occident is also designated by this term "kefir" a flavored sweet drink generally called sweet kefir or fruit kefir.

La fermentation, qu'il s'agisse de celle du lait ou d'une eau sucrée, est provoquée par une "gelée" ou matricepolysaccharidique, englobant des bactéries et des levures ou grains de kéfir. Fermentation, whether that of milk or sugar water, is caused by a "jelly" or polysaccharide matrix, including bacteria and yeasts or kefir grains.

Un grand nombre d'auteurs a étudié la flore de kéfir ; celle-ci comprend trois groupes principaux de micro-organismes
a) les Streptococcacae, avec les genres
Streptococcus et Leuconostoc
b) les Lactobacillacae avec le genre Lactobacillus dont certains représentants sont susceptibles de produire des polysaccharides de type dextranes
c) les levures surtout représentées par le genre Saccharomyces, et fréquemment lactose &commat;
Chacun de ces groupes comprend un grand nombre de représentants comme cela est mentionné dans un article du Demandeur, paru dans la revue Techniciens du lait (avril 1984).
A large number of authors have studied the flora of kefir; this includes three main groups of microorganisms
a) Streptococcacae, with the genera
Streptococcus and Leuconostoc
b) Lactobacillacae with the genus Lactobacillus, some representatives of which are capable of producing dextran-type polysaccharides
c) yeasts mainly represented by the genus Saccharomyces, and frequently lactose &commat;
Each of these groups includes a large number of representatives as mentioned in an article by the Applicant, which appeared in the review Technicians du lait (April 1984).

De plus, d'autres microorganismes ou contaminants tels que des moisissures, des bactéries acétiques, ont également été mis en évidence dans les grains de kéfir. In addition, other microorganisms or contaminants such as molds, acetic bacteria, have also been highlighted in kefir grains.

Ces contaminants présents dans les grains de kéfir ménager présentent néanmoins de nombreux inconvénients
- ils peuvent perturber la croissance des microorganismes utiles et par conséquent freiner la croissance du grain entier
- ils peuvent apporter des flaveurs désagréables lorsque ces grains seront utilisés pour produire une boisson
- ils peuvent même rendre la boisson obtenue impropre à la consommation en fonction des normes d'hygiène bactériologique.
These contaminants present in household kefir grains nevertheless have many disadvantages
- they can disturb the growth of useful microorganisms and consequently slow down the growth of the whole grain
- they can bring unpleasant flavors when these grains are used to produce a drink
- they can even make the drink obtained unfit for consumption according to bacteriological hygiene standards.

L'industrie agro-alimentaire utilise pour la production de kéfir , des levains constitués de bactéries et de levures. Mais ces levains, tel que celui mis au point par Y. VAYSSIER (Revue lait FR nO 362, 1978, 131-134), ont des populations de micro-organismes qui varient au cours des repiquages successifs : ainsi les levures ont tendance à se multiplier plus rapidement que les bactéries lactiques et au sein des bactéries, certaines souches se multiplient plus vite que d'autres. De plus ces levains ne sont pas récupérables. The food industry uses for the production of kefir, sourdoughs made up of bacteria and yeasts. But these sourdoughs, such as that developed by Y. VAYSSIER (Revue lait FR nO 362, 1978, 131-134), have populations of microorganisms which vary during successive subcultures: thus yeasts tend to multiply faster than lactic acid bacteria and within bacteria, some strains multiply faster than others. In addition, these leavens are not recoverable.

Aussi la présente invention a-t-elle pour but de fournir un procédé pour préparer une boisson sucrée fermentée ou kéfir sucré, à partir de microorganismes exempts de tout contaminant. The object of the present invention is therefore to provide a process for preparing a fermented sugary drink or sweet kefir from microorganisms free from any contaminant.

Un autre but de l'invention est un procédé de ce type qui permet de n'utiliser que peu de souches de microorganismes par rapport au nombre présent dans le kéfir menager. Another object of the invention is a method of this type which makes it possible to use only a few strains of microorganisms compared to the number present in household kefir.

Un but supplémentaire de l'invention est de fournir un tel procédé qui permet de récupérer les microorganismes. A further object of the invention is to provide such a method which makes it possible to recover the microorganisms.

Ces buts ainsi que d'autres qui apparaitront par la suite sont atteints par un procédé pour produire des polysaccharides permettant notamment de préparer une boisson sucrée ferme tée ou kéfir sucré qui peut être aromatisée selon le goût des consommateurs, lequel procédé comprend, selon la présente invention, les étapes suivantes
a) on ensemence un milieu liquide hypersaccharosé pour la culture de microorganismes producteurs de polysaccharides, avec des quantités égales de-Lactobacillus brevis et Leuconostoc mesenteroides, isolées à partir d'un kéfir sucré ménager
b) on élimine le surnageant pour le remplacer par un volume équivalent de ce milieu hypersaccharosé, jusqu'à l'obtention d'un gel ferme
c) on ajoute à ce gel, le surnageant ayant été éliminé, au moins deux souches de levures résistantes à l'actidione et on recouvre d'un liquide comprenant en parties égales ce milieu hypersaccharosé et un jus naturel sucre
d) périodiquement, on maintient le niveau du surnageant au-dessus des grains de kéfir en formation en ajoutant ce liquide dont la proportion en jus naturel sucré augmente progressivement
e) quand le surnageant n'est plus visqueux, on ensemence un milieu aqueux comprenant un jus naturel sucré avec les grains de kéfir ainsiobtenus, et on recueille les néo-grains formés.
These aims as well as others which will appear subsequently are achieved by a process for producing polysaccharides making it possible in particular to prepare a firm sweetened drink or sweet kefir which can be flavored according to the taste of the consumers, which process comprises, according to the present invention, the following steps
a) a liquid hypersaccharose medium is inoculated for the culture of polysaccharide-producing microorganisms, with equal amounts of Lactobacillus brevis and Leuconostoc mesenteroides, isolated from a sweet household kefir
b) eliminating the supernatant to replace it with an equivalent volume of this hypersaccharose medium, until a firm gel is obtained
c) at least two strains of yeast resistant to actidione are added to this gel, the supernatant having been removed, and a hypersaccharose medium and a natural sugar juice are covered with a liquid comprising equal parts
d) periodically, the level of the supernatant is maintained above the kefir grains in formation by adding this liquid, the proportion of which in sweet natural juice gradually increases
e) when the supernatant is no longer viscous, an aqueous medium is seeded comprising a natural juice sweetened with the kefir grains thus obtained, and the neo-grains formed are collected.

De préférence, on place les néo-grains de kéfir issus de l'étape e) dans un milieu tamponné, le pH étant voisin de la neutralité, pour les fai-r-e--croitre
Avantageusement, le milieu liquide hypersaccharosé pour la culture de microorganisme producteurs de polysaccharides est le milieu de Mayeux, Sandrine et
Elliker (ou milieu M.S.E.) ou le milieu Saccharose - Extraits
Citrates - Sels (ou milieu S.E.C.S.).
Preferably, the neo-grains of kefir from step e) are placed in a buffered medium, the pH being close to neutral, for the weak-grow
Advantageously, the hypersaccharosed liquid medium for the culture of polysaccharide-producing microorganisms is the medium of Mayeux, Sandrine and
Elliker (or MSE medium) or the Sucrose medium - Extracts
Citrates - Salts (or SECS medium).

De préférence, Lactobacillus brevis et
Leuconostoc Mesenteroides étant respectivement cultivés en milieu de Man, Rogosa, et Sharpe additionné de saccharose (ou milieu MRS-saccharose) d'une part, et en milieu M.S.E.
Preferably, Lactobacillus brevis and
Leuconostoc Mesenteroides being respectively cultivated in medium of Man, Rogosa, and Sharpe supplemented with sucrose (or medium MRS-sucrose) on the one hand, and in medium MSE

ou milieu S.E.C.S. d'autres part, on ensemence avec une solution de ceux-ci dont la densité optique est superieure a' 0,3, la longueur d'onde pour la mesure étant de 540 nm. or S.E.C.S. on the other hand, it is inoculated with a solution of these whose optical density is greater than 0.3, the wavelength for the measurement being 540 nm.

Avantageusement, on ajoute à ce milieu liquide hypersaccharosé au moins 0,2 % en volume de chaque solution de Lactobacillus brevis et de Leuconostoc mesenteroldes. Advantageously, at least 0.2% by volume of each solution of Lactobacillus brevis and Leuconostoc mesenteroldes is added to this hypersaccharose liquid medium.

De préférence, on ajoute entre 0,25 et 1 % en volume de chacune de ces solutions. Preferably, between 0.25 and 1% by volume of each of these solutions is added.

Avantageusement, l'étape b) est réalisée à température ambiante pendant au moins trois semaine. Advantageously, step b) is carried out at room temperature for at least three weeks.

De préférence, cette étape b) est réalisée à une température de l'ordre de 250C.  Preferably, this step b) is carried out at a temperature of the order of 250C.

A l'étape c) les levures résistantes à l'actidione sont choisies dans le groupe constitué par Saccharomyces florentinus et Kloeckera apiculata. In step c) the yeasts resistant to actidione are chosen from the group consisting of Saccharomyces florentinus and Kloeckera apiculata.

On peut également ajouter à ces deux levures
Candida lambica et Candida valida.
We can also add to these two yeasts
Candida lambica and Candida valida.

Selon un mode de réalisation préféré de l'invention, les levures étant cultivées dans le milieu liquide de Sabouraud, on ajoute au moins 0,2 % en volume de ce milieu liquide au gel issu de l'étape b). According to a preferred embodiment of the invention, the yeasts being cultured in the Sabouraud liquid medium, at least 0.2% by volume of this liquid medium is added to the gel resulting from step b).

Avantageusement, le jus naturel sucré est une solution aqueuse de sucre de canne non raffiné comprenant un extrait de levure. Advantageously, the sweetened natural juice is an aqueous solution of unrefined cane sugar comprising a yeast extract.

De préférence à l'étape e), le milieu aqueux ensemencé est composé d'une solution de 60 g de sucre de canne non raffiné par litre d'eau potable. Preferably in step e), the aqueous medium seeded is composed of a solution of 60 g of unrefined cane sugar per liter of drinking water.

Selon un mode de réalisation préféré, le sucre de canne non raffiné et l'eau potable ont été pasteurrisés. According to a preferred embodiment, unrefined cane sugar and drinking water have been pasteurized.

A l'étape b) on peut également ajouter
Lactobacillus casei de préférence en solution dans le
milieu MRS saccharose : la quantité de solution contenant
Lactobacillus casei est du même ordre que celle de
Lactobacillus brevis.
In step b) we can also add
Lactobacillus casei preferably in solution in the
MRS sucrose medium: the quantity of solution containing
Lactobacillus casei is of the same order as that of
Lactobacillus brevis.

Dans ce cas, le procédé selon l'invention
comporte une étape f), au cours de laquelle on élimine le
surnageant qui constitue la boisson aromatisable et con
sommable.
In this case, the method according to the invention
includes a step f), during which the
supernatant which constitutes the flavorable and con
summable.

La description qui va suivre et qui ne pré
sente aucun caractère limitatif, permettra à l'homme du
métier de réaliser la présente invention et d'en mieux
comprendre les avantages.
The description which follows and which does not pre
feels no limiting character, will allow the
craft of realizing the present invention and better
understand the benefits.

On réalise des cultures pures de Lactobacillus
brevis, d'une part, et de Leuconostoc mesenteroides d'autre
part,à partir d'un kéfir ménager. Les milieux liquides uti
lisés sont le milieu de Man, Rogosa et Sharpe (ou milieu MRS)
enrichi en saccharose pour Lactobacillus brevis, et le
milieu de Mayeux, Sandrine et Elliker (ou milieu MSE) ou le
milieu saccharose - extraits - citrates - sels (ou milieu
S.E.C.S.) pour Leuconostoc mesenteroides. Une composition
type de chacun de ces milieux est donnée dans les trois
tableaux ci-dessous
Milieu M.R.S. - saccharose
Peptone trypsique 10 g
Extrait de levure 5g
Polyoxyéthylène sorbitan mono-Géate 1 ml
Phosphate bi-potassique 2g
Acétate de sodium (CH3-COONa, 3H20) 5 g
Citrate d'ammonium 2g
Sulfate de magnésium (MgS04, 7H20) 0,57 g
Sulfate de manganèse (MnS04, 4H20) 0,14 g
Eau distillée 1000 ml
Extrait de viande . 10 g
Saccharose 60 g
Glucose 1 g pH 6,8
Milieu M.S.E.
We make pure cultures of Lactobacillus
brevis, on the one hand, and Leuconostoc mesenteroides on the other
hand, from a household kefir. Liquid media uti
read are the middle of Man, Rogosa and Sharpe (or middle MRS)
enriched in sucrose for Lactobacillus brevis, and
middle of Mayeux, Sandrine and Elliker (or middle MSE) or the
sucrose medium - extracts - citrates - salts (or medium
SECS) for Leuconostoc mesenteroides. A composition
type of each of these environments is given in the three
tables below
MRS medium - sucrose
Tryptic peptone 10 g
Yeast extract 5g
Polyoxyethylene sorbitan mono-Geate 1 ml
Bi-potassium phosphate 2g
Sodium acetate (CH3-COONa, 3H20) 5 g
Ammonium citrate 2g
Magnesium sulfate (MgS04, 7H20) 0.57 g
Manganese sulphate (MnS04, 4H20) 0.14 g
Distilled water 1000 ml
Meat extract. 10 g
Sucrose 60 g
Glucose 1 g pH 6.8
MSE medium

Pastone 10 g
Extrait de levures 5 g
Saccharose 100 g
Citrate de sodium 1 g
Glucose 5g
Eau distillée 1000 ml pH 6,8
Milieu S.E.C.S.
Pastone 10 g
Yeast extract 5 g
Sucrose 100 g
Sodium citrate 1 g
Glucose 5g
Distilled water 1000 ml pH 6.8
SECS medium

Saccharose 60 g
Extrait de viande 10 g
Extrait de levure 5g
Citrate de sodium 1 g
Sulfate de-magnésium (Mg S04, 7H2O) 0,2 g Hydrogéna phosphate bipotassique 2 g
Sulfate de manganèse (Mn S04, 4H20) 0,01 g
Sulfate de fer (Fe S04, 7H20) 0,01 g
Carbonate de calcium 20 g
Eau distillée 1000 ml pH 6,8
Quand la densité optique de chacune de ces
cultures est supérieure à 0,3 environ, et de préférence égale
à 0,5,cette densité étant mesurée à une longueur d'onde
de 540 nm, on ajoute au milieu liquide hyper
saccharosé, situé dans un réacteur, au moins 0,2 %
en volume de chaque solution de ces cultures. En général,
on ajoute entre 0,25 et 1 %- en volume de chaque solution au
milieu M.S.E.Ceci constitue l'étape a) du procédé selon
l'invention.
Sucrose 60 g
Meat extract 10 g
Yeast extract 5g
Sodium citrate 1 g
Magnesium sulfate (Mg S04, 7H2O) 0.2 g Bipotassium hydrogen phosphate 2 g
Manganese sulfate (Mn S04, 4H20) 0.01 g
Iron sulfate (Fe S04, 7H20) 0.01 g
Calcium carbonate 20 g
Distilled water 1000 ml pH 6.8
When the optical density of each of these
cultures is greater than about 0.3, and preferably equal
at 0.5, this density being measured at a wavelength
of 540 nm, we add to the hyper liquid medium
sucrose, located in a reactor, at least 0.2%
by volume of each solution of these cultures. In general,
between 0.25 and 1% - by volume of each solution is added to
MSEC medium constitutes step a) of the process according to
the invention.

On observe au bout de quelque temps la for
mation d'un gel mou et d'un surnageant visqueux, du fait de
la présence de polysaccharides solubles. Au cours de cette
étape b) de croissance du gel, on élimine le surnageant et
on le remplace par un volume égal de milieu M.S.E. Ceci peut
être réalisé soit de façon continue, soit de façon discontinue
par exemple tous les sept jours, jusqu'à ce que l'on obtienne
un gel ferme dans le réacteur maintenu à température ambiante.
We observe after some time the forum
mation of a soft gel and a viscous supernatant, due to
the presence of soluble polysaccharides. During this
step b) of growth of the gel, the supernatant is removed and
it is replaced by an equal volume of MSE medium This can
be carried out either continuously or discontinuously
for example every seven days, until you get
a firm gel in the reactor maintained at room temperature.

Celui-ci peut éventuellement être chauffé à 250C.  This can optionally be heated to 250C.

Puis on ajoute au gel ferme ainsi obtenu au moins deux levures résistantes à l'actidione (étape.c)). De telles levures sont choisies dans le groupe constitué par
Saccharomyces florentinus et Kloeckera apiculata.
Then add to the firm gel thus obtained at least two yeasts resistant to actidione (step.c)). Such yeasts are chosen from the group consisting of
Saccharomyces florentinus and Kloeckera apiculata.

Selon un mode de réalisation préféré de l'invention, on choisit Saccharomyces florentinus et Koecklera apiculata cultivées en milieu liquide de Sabouraui : on ajoute au moins 0,2 % en volume de ce milieu liquide dont la densité optique est d'environ 0,5 mesurée comme précédemment au gel issu de l'étape b). According to a preferred embodiment of the invention, Saccharomyces florentinus and Koecklera apiculata cultivated in liquid medium of Sabouraui are chosen: at least 0.2% by volume of this liquid medium is added, the optical density of which is approximately 0.5 measured as above with the gel from step b).

On recouvre d'un liquide comprenant en parties égales le milieu M.S.E. et un jus naturel sucré tel qutune solution aqueuse de sucre de canne non raffiné comprenant 2,5 % en poids d'extrait de levure : la concentration en sucre est de 60 g/l environ, selon cet exemple de réalisation. There is covered with a liquid comprising in equal parts the medium M.S.E. and a natural sweet juice such as an aqueous solution of unrefined cane sugar comprising 2.5% by weight of yeast extract: the sugar concentration is approximately 60 g / l, according to this exemplary embodiment.

Périodiquement, on maintient (étape d)) le niveau du surnageant au-dessus du gel constitué par des grains de kéfir en formation ou néo-grains, en ajoutant le même liquide qu'a' l'étape c) mais en augmentant progressivement la proportion de la solution aqueuse de sucre de canne non raffiné. Ainsi à l'issue de'l'étape d) on n'ajoute uniquement que de la solution aqueuse de sucre de canne non raffiné. Periodically, the level of the supernatant is maintained (step d)) above the gel constituted by grains of kefir in formation or neo-grains, by adding the same liquid as in step c) but by gradually increasing the proportion of the aqueous solution of unrefined cane sugar. Thus at the end of step d) only aqueous solution of unrefined cane sugar is added.

Par exemple le maintien du niveau du surnageant est réalisé tous les cinq jours : au début la proportion
MSE :- solut-ion-de-sucre de canne est de 1 : 1, puis 1 : 3 puis
O : 1 et ce jusqu'à l'obtention d'un surnageant non visqueux.
For example, the level of the supernatant is maintained every five days: at the start, the proportion
MSE: - sugar cane solut-ion is 1: 1, then 1: 3 then
O: 1 and this until a non-viscous supernatant is obtained.

A ce moment, on peut ensemencer un milieu aqueux comprenant un jus naturel sucré (étape e)) tel qu'une solution de sucre de canne non raffiné dans de l'eau potable, avec les grains de kéfir issus de l'étape d) à raison de 1 kgde grains pour 10 1 de solution. La concentration de cette solution en sucre de canne est par exemple d'environ 60 g/l. At this time, an aqueous medium can be seeded comprising a natural sweet juice (step e)) such as a solution of unrefined cane sugar in drinking water, with the kefir grains from step d) at a rate of 1 kg of grains for 10 1 of solution. The concentration of this cane sugar solution is for example around 60 g / l.

L'étape e) peut être réalisée en milieu non stérile si le milieu aqueux utilisé a été préalablement stérilisé.  Step e) can be carried out in a non-sterile medium if the aqueous medium used has been previously sterilized.

Les néo-grains à l'issue de l'étape e) peuvent être placés dans un milieu tamponné ( par exemple phosphate monopotassique - soude) 0,05 M à pH 7 ou dans un milieu normal, le pH étant régulé par de la soude 0,5 N afin d'en obtenir un accroissement. On peut ainsi obtenir en quelques semaines plusieurs kilogrammes de néo-grains. Avec régulation du pH, on a pu observer des rendements en poids de néo-grains par rapport au poids de sucre introduit qui sont de l'ordre de 75 %. The neo-grains at the end of step e) can be placed in a buffered medium (for example monopotassium phosphate - soda) 0.05 M at pH 7 or in a normal medium, the pH being regulated by soda 0.5 N in order to obtain an increase. We can thus obtain in a few weeks several kilograms of neo-grains. With pH regulation, it has been possible to observe yields by weight of neo-grains relative to the weight of sugar introduced, which are of the order of 75%.

Lorsque les néo-grains sont destinés à produire des fermentations, on ajoute environ 0,5 % en volume d'une culture de Lactobacillus caser en milieu MRS saccharose dans le réacteur au cours de l'étape b), en fait la même quantité que de Lactobacillus revis. Et le procédé selon l'invention comporte une étape supplémentaire f), au cours de laquelle le surnageant qui apparait lors de l'éta- pe e) est éliminé au fur et à mesure de sa formation, ou de façon discontinue : il constitue la boisson aromatisable consommable. When the neo-grains are intended to produce fermentations, about 0.5% by volume of a culture of Lactobacillus caser is added in sucrose MRS medium in the reactor during step b), in fact the same amount as of Lactobacillus revisited. And the method according to the invention comprises an additional step f), during which the supernatant which appears during step e) is eliminated as it is formed, or discontinuously: it constitutes the consumable flavorable drink.

Ainsi en utilisant au maximum cinq-souches des microorganismes présentes dans le kéfir ménager, on peut obtenir une boisson à partir d'eau sucrée aromatisée. Thus by using a maximum of five strains of microorganisms present in household kefir, one can obtain a drink from flavored sugar water.

Par ailleurs, la production de néo-grains de kéfir issue de étape e), selon la présente invention, peut conduire à la production de produits épaississants ou gélifiants du fait de leur richesse en polysaccharides (dextranes) : ceux-ci étant produits par Lactobacillus brevis et Leuconostoc menseteroldes.  Furthermore, the production of new kefir grains from step e), according to the present invention, can lead to the production of thickening or gelling products because of their richness in polysaccharides (dextrans): these being produced by Lactobacillus brevis and Leuconostoc menseteroldes.

Claims (17)

REVENDICATIONS 1.- Procédé pour préparer une boisson sucrée fermentée ou kéfir sucré, caractérisé en ce qu'il comprend les étapes suivantes a) on ensemence un milieu liquide hypersaccharosé pour la 1.- Process for preparing a fermented sugary drink or sweet kefir, characterized in that it comprises the following steps a) a hypersaccharose liquid medium is inoculated for the culture de micro-organismes producteurs de polysaccharides, culture of polysaccharide-producing microorganisms, avec des quantités égales de Lactobacillus brevis et with equal amounts of Lactobacillus brevis and Leuconostoc mesenteroides isolés à partir d'un kéfir ménager b) on élimine le surnageant pour le remplacer par un volume Leuconostoc mesenteroides isolated from a household kefir b) the supernatant is eliminated to replace it with a volume équivalent dudit -milieu hypersaccharosé, jusqu'à l'obtention equivalent of said hypersaccharose medium, until obtaining d'un gel ferme c) on ajoute à ce gel, le surnageant ayant été éliminé, au of a firm gel c) to this gel, the supernatant having been removed, is added to the moins deux souches de levures résistantes à l'actidione, at least two strains of yeast resistant to actidione, et on recouvre d'un liquide comprenant en parties égales 1-  and covered with a liquid comprising in equal parts 1- dit milieu hypersaccharosé et un jus naturel sucré d) périodiquement, on maintient le niveau du surnageant au said hypersaccharose medium and a natural sweetened juice d) periodically, the level of the supernatant is maintained at dessus des grains de kéfir en formation en ajoutant ledit above forming kefir grains by adding said liquide dont la proportion en jus naturel sucré augmente liquid whose proportion in sweetened natural juice increases progressivement e) quand le surnageant n'est plus visqueux, on ensemence un progressively e) when the supernatant is no longer viscous, a milieu aqueux comprenant un jus naturel sucré avec les aqueous medium comprising a natural juice sweetened with grains de kéfir ainsi obtenus, et on recueille les néo-grains formés. kefir grains thus obtained, and the neo-grains formed are collected. 2.- Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que lesdits néo-grains de kéfir issus de ladite étape e) dans dans un milieu tamponné dont le pH est voisin de la neutralité, afin de les faire croltre. 2.- Method according to claim 1, characterized in that said neo-kefir grains from said step e) in a buffered medium whose pH is close to neutral, in order to make them croltre. S.E.C.S.).S.E.C.S.). 3 .- Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que ledit milieu liquide hypersaccharosé pour la culture de micro-organismes producteurs de polysaccharides est le milieu de Mayeux, Sandrine et Elliker (ou milieu M.S.E) ou le milieu Saccharose-Extraits-Citrates-Sels (ou milieu 3 .- Method according to claim 1, characterized in that said hypersaccharose liquid medium for the culture of polysaccharide-producing microorganisms is the medium of Mayeux, Sandrine and Elliker (or MSE medium) or the Sucrose-Extracts-Citrates medium- Salts (or medium 4.- Procédé selon la revendication 1 ou la revendication 3, caractérisé en ce que Lactobacillus brevis et Leuconostoc mesenteroides étant respectivement cultivés en milieu de Man, Rogosa et Sharpe addita.anné de saccharose (ou milieu MRS-sacharose) d'une part, et en milieu M.S.E. ou milieu S.E.C.S. d'autre part, on ensemence avec une solution de ceux-ci dont la densité optique est supérieure à 0,3, la longueur d'onde pour la mesure étant de 540 nm.  4.- Method according to claim 1 or claim 3, characterized in that Lactobacillus brevis and Leuconostoc mesenteroides being respectively cultivated in medium of Man, Rogosa and Sharpe addita.anné de sucrose (or medium MRS-sacharose) on the one hand, and in MSE environment or S.E.C.S. on the other hand, it is inoculated with a solution of these whose optical density is greater than 0.3, the wavelength for the measurement being 540 nm. 5 .- Procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 4, caractérisé en ce qu'on ajoute audit milieu liquide hypersaccharosé au moins 0,2 % en volume de chaque solution de Lactobacillus brevis et de Leuconostoc mesen teroides.  5 .- Method according to any one of claims 1 to 4, characterized in that added to said hypersaccharose liquid medium at least 0.2% by volume of each solution of Lactobacillus brevis and Leuconostoc mesen teroides. 6 .- Procédé selon la revendication 5, carac térisé en ce qu'on ajoute entre 0,25 et 1,0 % en volume de chacune de ces solutions. 6 .- Method according to claim 5, charac terized in that between 0.25 and 1.0% by volume of each of these solutions is added. 7.- Procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 6, caractérisé en ce que ladite étape b) est réalisée à température ambiante pendant au moins trois semaines. 7.- Method according to any one of claims 1 to 6, characterized in that said step b) is carried out at room temperature for at least three weeks. 8.- Procédé selon la revendication 7, carac térisé en ce que ladite étape b) est réalisée à une température de l'ordre de 250C. 8.- Method according to claim 7, charac terized in that said step b) is carried out at a temperature of about 250C. 9.- Procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 8, caractérisé en ce qu'à ladite étape c) les levures résistantes à l'actidione sont choisies dans le groupe constitué par Saccharomyces florentinus et Kloeckera apiculata. 9.- Method according to any one of claims 1 to 8, characterized in that in said step c) the yeasts resistant to actidione are chosen from the group consisting of Saccharomyces florentinus and Kloeckera apiculata. 10.- Procédé selon la revendication 9 r carac terse en ce qu 'on ajoute également Candida lambica et Candida valida. 10.- Method according to claim 9 r charac terse in that we also add Candida lambica and Candida valida. 11.- Procédé selon la revendication 9 ou la revendication iO,caractérisé en ce que lesdites levures étant cultivées dans le milieu liquide de Sabouraud, on ajoute au moins 0,2 % en volume de ce milieu liquide au gel issu de l'étape b). 11.- Method according to claim 9 or claim 10, characterized in that said yeasts being cultured in the liquid medium of Sabouraud, at least 0.2% by volume of this liquid medium is added to the gel resulting from step b ). 12.- Procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 11 , caractérisé en ce que ledit jus naturel sucré de ladite étape d) est une solution aqueuse de sucre de canne non raffiné comprenant un extrait de levure. 12.- Method according to any one of claims 1 to 11, characterized in that said natural sweet juice of said step d) is an aqueous solution of unrefined cane sugar comprising a yeast extract. 13.- Procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 12 , caractérisé en ce qu'à ladite étape e) le milieu aqueux ensemencé est composé d'une solution de 60 g de sucre de canne non raffiné par litre d'eau potable. 13.- Method according to any one of claims 1 to 12, characterized in that in said step e) the aqueous medium seeded is composed of a solution of 60 g of unrefined cane sugar per liter of drinking water . 14.- Procédé selon la revendication 13, carac térisé en ce que ledit sucre de canne non raffiné et ladite eau potable ont été pasteurisés.  14.- Method according to claim 13, charac terized in that said unrefined cane sugar and said potable water have been pasteurized. 15.- Procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 14, caractérisé en ce qu'à ladite étape b) on ajoute Lactobacillus casei en même quantité que Lactobacillus brevis. 15.- Method according to any one of claims 1 to 14, characterized in that in said step b) adding Lactobacillus casei in the same amount as Lactobacillus brevis. 16.- Procédé selon la revendication 15, carac térisé en ce qu'on ajoute Lactobacillus casei en milieu MRSsaccharose. 16.- Method according to claim 15, charac terized in that Lactobacillus casei is added in MRSsaccharose medium. 17.- Procédé selon l'une quelconque des revendications 1 et 3 à 16, caractérisé encre qu'il comporte une étape f) au cours de laquelle on élimine le surnageant produit lors de ladite étape e), qui constitue une boisson aromatisable consommable.  17.- Method according to any one of claims 1 and 3 to 16, characterized in that it comprises a step f) during which the supernatant produced during said step e) is eliminated, which constitutes a consumable aromatizable drink.
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