FI86191C - Foerfarande foer framstaellning av terapeutiskt aktiva 6,6-etylen-15,16-metylen-3-oxo-17a-pregn-4-en-21,17 -karbolaktoner. - Google Patents

Description

1 86191

Menetelmä terapeuttisesti aktiivisten 6,6-etyleeni-15,16-metyleeni-3-okso-17a-pregn-4-eeni-21,17-karbolaktonien valmistamiseksi 5 Jakamalla erotettu hakemuksesta 850151

Keksintö koskee menetelmää uusien 6,6-etyleeni-15,16-metyleeni-3-okso-17a-pregn-4-eeni-2l,17-karbolaktonien valmistamiseksi, joilla on yleinen kaava I

10 /\>\ 16 15 1 R1 11 I 15 (I)' 20 jossa 2r tarkoittaa yksinkertaista CC-sidosta tai CC-kaksoissidosta;

Ri tarkoittaa vetyatomia tai metyyliryhmää; R2 tarkoittaa metyyli- tai etyyliryhmää ja ’ :25 : X16 tarkoittaa ^ . \ _]15 ryhmää _\y> tai JX, ; 30

Uusilla yleisen kaavan I mukaisilla yhdisteillä on .·. : voimakkaan aldosteroniantagonistisen vaikutuksen lisäksi voimakas gestageeninen teho. Aldosteroniantagonistisen ja gestageenisen tehon yhdistelmää ei havaita millään tun-·. -:35 netulla synteettisellä etinyylinortesto- tai hydroksipro- 2 86191 gesteronisarjan gestageenilla mutta kylläkin luonnon ges-tageenilla, progesteronilla. Koska uusilla yhdisteillä on progesteronin kaltainen vaikutusprofiili, ei muuten esiintyviä sivuvaikutuksia kuten verenpaineen nousua ja tur-5 votuksia ilmaannu kun näitä yhdisteitä käytetään hedelmöitystä ehkäisevinä aineina.

Jos 6-asemassa oleva etyleeniryhmä korvataan 66,78-metyleeniryhmällä, päästään yhdisteisiin, joilla samoin on aldosteroniantagonistinen ja gestageeninen teho mutta 10 joiden gestageeninen teho ei ole niin voimakkaan selväpiirteinen (DOS 3 022 337).

US-patenttijulkaisusta 3 422 097 tunnetaan 6,6-ety-leeni-21,17-karbolaktoneita, joiden 15,16-asemassa ei ole metyleeniryhmää. Näiden yhdisteiden ilmoitetaan olevan 15 androgeenisesti ja anabolisesti vaikuttavia ja omaavan natrium-ureettisia sekä veren sokeria kohottavia ominaisuuksia.

Kokeessa, jossa tutkitaan aldosteronille vastakkaista tehoa, osoittautuvat uudet yleisen kaavan I mukai-20 set yhdisteet teholtaan jopa 5 kertaa vahvemmiksi kuin spironolaktoni.

Modifioidussa Clauberg-kokeessa gestageenisen tehon selvittämiseksi saadaan keksinnön mukaisilla yhdisteillä positiivisia tuloksia, kun yhdisteitä annetaan sub-. . 25 kutaanisesti määrinä 0,03 mg.

/ / Raskauden pysyvyyskokeessa rotilla ja hiirillä on positiivisen tehon saavuttamiseen tarvittava vähimmäismää-' - " rä 0,1 mg.

Uusia yleisen kaavan I mukaisia yhdisteitä voidaan 30 käyttää hedelmöitymisen ehkäisyyn yksin tai yhdessä estrogeenien kanssa ehkäisyvalmisteissa. Näitä yhdisteitä voidaan antaa varsinkin naisille, jotka toivovat hedelmöity-misen ehkäisyä ja joilla verenpaineen kohoaminen on toden-_· näköinen olemassa olevien riskitekijöiden kuten korkeahkon "· 35 iän, ylipainon tai tupakoinnin vuoksi. Näiden aineiden 3 86191 vaikutusprofiilin vuoksi, joka on verrattavissa luonnon progesteronin vaikutusprofiiliin, on myös odotettavissa, että myös naisilla, joita ei voida luokitella riskipoti-laiksi, subjektiivinen hyvinvointi ja sietokyky on parempi 5 kuin tunnettuja valmisteita käytettäessä.

Keksinnön mukaisesti valmistettujen yhdisteiden annostus ehkäisyvalmisteissa on edullisesti 0,5-5 mg vuorokaudessa .

Gestageenisia ja estrogeenisiä tehoainekomponentte-10 ja annetaan ehkäisyvalmisteissa edullisesti yhdessä oraalisesti. Vuorokausiannos annetaan edullisesti yhdellä kerralla.

Estrogeenia annetaan määrä, joka vastaa 0,03-0,05 mg etinyyliestradiolia.

15 Uusia yleisen kaavan I mukaisia yhdisteitä voidaan käyttää gynekologisten häiriöiden käsittelyyn tarkoitetuissa valmisteissa. Edullisen vaikutusprofiilinsa vuoksi nämä yhdisteet soveltuvat erityisen hyvin kuukautisia edeltävien vaivojen kuten päänsäryn, depressiivisen mie-20 lentilan, turvotuksen ja mastodynian hoitoon. Premenstru-ellien vaivojen hoidossa on vuorokausiannos noin 1-20 mg.

Näihin uusiin yhdisteisiin perustuvia koostumuksia formuloidaan sinänsä tunnetulla tavalla käsittelemällä . . 25 tehoainetta, mahdollisesti yhdessä estrogeenin kanssa, yhdessä galeenisella alalla tavallisten kantoaineiden, laimentimien, mahdollisesti mausteaineiden jne. kanssa ja saattamalla se halutuksi antomuodoksi.

Suositeltavaa oraalista antoa varten tulevat kysy-30 mykseen varsinkin tabletit, rakeet, kapselit, pillerit, suspensiot tai liuokset.

-'· f Parenteraaliseen antoon sopivat varsinkin öljypi- toiset liuokset kuten esimerkiksi seesamöljy-, risiiniöljy- ja puuvillansiemenöljyliuokset. Liukoisuuden paran 4 86191 tamiseksi voidaan käyttää liuotusapuaineita kuten esimerkiksi bentsyylibentsoaattia tai bentsyylialkoholia.

Yleisen kaavan I mukaisia yhdisteitä valmistetaan keksinnön mukaisesti siten, että 15,16-metyleeni-3-okso-5 17a-pregn-4-eeni-21,17-karbolaktoniin, jolla on yleinen kaava II

0 10 16 15

jossa |16/ Rx ja R2 tarkoittavat samaa kuin kaavan I

_115 yhteydessä on esitetty, sinänsä tunnetulla tavalla liite-20 tään 6a-hydroksimetyyliryhmä 3,5-dieeni-3-amiinin kautta formaliinin avulla, jolloin muodostuu uudelleen 4-eeni-3-oksosysteemi, muodostetaan 6a-hydroksimetyyliyhdisteestä 6-metyleeniyhdiste ja tämä metylenoidaan 6,6-etyleeniyh-disteeksi ja haluttaessa muodostetaan Ax-kaksoissidos.

. . 25 Ensin muutetaan A4-3-ketoni sekundäärisen emäksen kanssa vastaavaksi A3,5-3-amiiniksi.

Sekundäärisinä emäksinä sopivat käytettäviksi esimerkiksi dietyyliamiini, aniliini, pyrrolidiini ja mor-foliini.

30 6a-hydroksimetyyliryhmän liittämiseksi A3-5-3-amii- nia käsitellään alkoholiliuoksessa formaliinilla.

6a-hydroksimetyyliyhdisteestä lohkaistaan vettä suolahapolla dioksaanissa, jolloin päästään vastaavaan 6-• ^ metyleeniyhdisteeseen. Veden lohkaisu voi tapahtua myös 5 86191 siten, että ensin liitetään suojaryhmä, joka sitten poistetaan.

Suojaryhmiksi soveltuvat esimerkiksi mesylaatti, tosylaatti ja bentsoaatti.

5 6-metyleeniyhdisteen metylenointi 6,6-etyleeniyh- disteeksi tapahtuu dimetyylisulfoksoniummetylidillä. Tätä varten 6-metyleenisteroidi lisätään suspensioon, jonka muodostaa trimetyylisulfoksoniumjodidi natriumhydridin kanssa mineraaliöljyssä ja dimetyylisulfoksidissa, tai 10 liuokseen, jonka muodostaa trimetyylisulfoksoniumjodidi ja natriumhydroksidi dimetyylisulfoksidissa. Reaktio on päättynyt 15-60 minuutin kuluttua 20-40 °C:ssa.

Tämän jälkeen mahdollisesti suoritettava A1-kaksois-sidoksen muodostaminen tapahtuu sinänsä tunnetuilla mene-15 telmillä ja se voidaan toteuttaa kemiallista tai mikrobiologista tietä.

Sopivia kemiallisia dehydrausaineita ovat esimerkiksi seleenidioksidi, 2,3-dikloori-5,6-disyaanibentsoki-noni, kloraniili, talliumtriasetaatti tai lyijytetra-ase-20 taatti.

Sopivia mikro-organismeja 1,2-dehydraukseen ovat esimerkiksi schizomyceetit, varsinkin ne, jotka kuuluvat sukuihin Arthrobacter kuten esimerkiksi A.simplex (ATCC 6946); Bacillus kuten esimerkiksi B.lentus (ATCC 13805) ja * 25 B.sphaericus (ATCC 7055); Pseudomonas kuten esimerkiksi P.aeruginosa (IFO 3505); Flavobacterium kuten esimerkiksi F.flavescens (IFO 3058); Lactobacillus kuten esimerkiksi L.brevis (IFO 3345) ja Nocardia kuten esimerkiksi N.opaca (ATCC 4276).

. 30 1,2-dehydraus suoritetaan edullisesti kemiallises ti. Tätä varten 1,2-dihydrosteroidia kuumennetaan dehyd-. rausaineen kanssa sopivassa liuottimessa pitkähkö aika.

Sopivia liuottimia ovat esimerkiksi dioksaani, tert-buta-noli, tetrahydrofuraani, tolueeni, bentseeni tai näiden 35 liuottimien seokset.

6 86191

Reaktio on mennyt loppuun useiden tuntien kuluttua. On suositeltavaa, että reaktiota seurataan ohutkerroskro-matografiällä. Reaktioseosta jatkokäsitellään, kun lähtöaine on reagoinut.

5 Esimerkki 1 a) Liuosta, jossa on 4,1 g 153,163-metyleeni-3-ok-so-17a-pregn-4-eeni-21,17-karbolaktonia 31 ml:ssa metano-lia, kuumennetaan yhdessä 2,05 ml:n kanssa pyrrolidiinia 15 minuuttia palautusjäähdyttäen. Kun seos on jäähdytetty 10 jäähauteessa, muodostunut sakka erotetaan imusuodattamal-la, pestään pienellä määrällä metanolia ja kuivataan. Saadaan 4, 5 g 153,16B-metyleeni-3-pyrrolidino-17a-pregna-3,5-dieeni-21,17-karbolaktonia, jonka sp on 234-237 °C (hajoaa) .

15 UV: €276 = 22 900.

b) Liuokseen, jonka muodostaa 4,5 g 153,163-mety-leeni-3-pyrrolidino-17a-pregna-3,5-dieeni-21,17-karbolaktonia 90 ml:ssa etanolia ja 45 ml:ssa bentseeniä, lisätään tipoittain 5 minuutin kuluessa huoneenlämmössä 4,5 ml 37- 20 prosenttista formaliiniliuosta. 30 minuutin reaktioajan jälkeen reaktioliuos haihdutetaan kuiviin tyhjiössä. Jäännös kromatografoidaan silikageelillä ja saadaan 3,15 g 6a-hydroksimetyyli-153,163-metyleeni-3-okso-17a-pregn-4-eeni- 21,17-karbolaktonia öljynä.

25 UV: 6241 = 14 500.

c) 3,15 g 6a-hydroksimetyyli-153,163-metyleeni-3-okso-17a-pregn-4-eeni-21,17-karbolaktonia sekoitetaan 77 ml:ssa dioksaania 9,1 ml:n kanssa 5N suolahappoa 2 tuntia huoneenlämmössä. Reaktioliuokseen lisätään sitten ylimää- 30 rin natriumbikarbonaattia, poistetaan saostuneet epäorgaaniset suolat suodattamalla, suodos laimennetaan eetterillä ; ja pestään vedellä. Kuivaamisen ja haihdutuksen jälkeen jäännös kromatografoidaan silikageelillä. Uudelleenkiteyt-tämällä di-isopropyylieetteri/asetonista saadaan 1,2 g • « • · · > 86191 6;153,163-dimetyleeni-3-okso-17a-pregn-4-eeni-21,17-karbolaktonia, jonka sulamispiste on 173,1 °C.

UV: 6261 = 11 300.

d) 1,41 g trimetyylisulfoksoniumjodidia sekoitetaan 5 239 mg:n kanssa natriumhydridiä (55-prosenttinen öljysus- pensio) 21,5 ml:ssa dimetyylisulfoksidia (DMSO) 1,5 tuntia huoneenlämmössä. Tähän liuokseen lisätään argonissa 1,14 g 6;153, 163-dimetyleeni-3-okso-17a-pregn-4-eeni-21,17-kar-bolaktonia ja sitä sekoitetaan vielä 50 minuuttia huoneen-10 lämmössä. Reaktioliuos sekoitetaan sitten jääveteen, tehdään heikosti happamaksi 2N rikkihapolla, muodostunut sakka erotetaan suodattamalla ja otetaan metyleenikloridiin. Kuivaamisen ja haihdutuksen jälkeen jäännös kromatografoi-daan silikageelillä. Uudelleenkiteyttämällä di-isopropyy-15 lieetteri/asetonista saadaan 725 mg 6,6-etyleeni-153,163 -metyleeni-3-okso-17a-pregn-4-eeni-21,17-karbolaktonia, jonka sulamispiste on 184,2 °C.

UV: e248 = 14 150.

Esimerkki 2 20 Liuosta, jonka muodostavat 670 mg 6,6-etyleeni-153, 163-metyleeni-3-okso-17a-pregn-4-eeni-21,17-karbolaktonia ja 670 mg 2,3-dikloori-5,6-disyaani-p-bentsokinonia 13,4 ml:ssa tolueenia, sekoitetaan 5 tuntia 100 °C:ssa. Reak tioliuos laimennetaan sitten eetterillä, pestään vedellä, 25 natriumbikarbonaattiliuoksella ja vedellä, kuivataan ja haihdutetaan. Jäännös kromatografoidaan sitten silikageelillä. Uudelleenkiteyttämällä di-isopropyylieetteri/ase- tonista saadaan 445 mg 6,6-etyleeni-153,163-metyleeni-3-okso-17a-pregna-l,4-dieeni-21,17-karbolaktonia, jonka su-30 lamispiste on 199,7 °C.

UV: €243 = 15 1 50.

Esimerkki 3 a) 5,9 g 15a,16a-metyleeni-3-okso-17a-pregn-4 eeni- 21,17-karbolaktonia saatetaan reagoimaan 40 ml:ssa meta-35 nolia 2,95 ml:n kanssa pyrrolidiinia ja jatkokäsitellään 8 86191 kuten esimerkissä 1 on kuvattu. Saadaan 5,9 g 15a,16a-me-tyleeni-3-pyrrolidino-17o-pregna-3,5-dieeni-21,17-karbo-laktonia, jonka sp on 235-237,5 °C (hajoaa).

UV: e276 = 23 300.

5 b) 5,9 g 15a,16a-metyleeni-3-pyrrolidino-17a-preg- na-3,5-dieeni-21,17-karbolaktonia saatetaan reagoimaan 118 mlrssa etanolia ja 59 ml:ssa bentseeniä 5,9 ml:n kanssa 37-%:ista formaliiniliuosta ja jatkokäsitellään kuten esimerkissä 1 on kuvattu. Saadaan 3,7 g 6a-hydroksimetyy-10 li-15a,16a-metyleeni-3-okso-17a-pregn-4-eeni-21,17-karbo laktonia.

c) 3,7 g 6a-hydroksimetyyli-15a,16a-metyleeni-3-okso-17a-pregn-4-eeni-21,17-karbolaktonia sekoitetaan 90,5 ml:ssa dioksaania yhdessä 10,7 ml:n kanssa 5N suolahappoa 15 3,5 tuntia huoneenlämmössä. Senjälkeen työskennellään edelleen ja puhdistetaan tuote esimerkissä 1 kuvatulla tavalla. Kun on uudelleenkiteytetty di-isopropyylieet-teri/asetonista saadaan 2,26 g 6;15a,16a-dimetyleeni-3-okso-17a-pregn 4-eeni-21,17-karbolaktonia, jonka sulamis-20 piste on 162,5 163,5 °C.

UV: e262 = 11 300.

d) 1,87 g 6;15a,16a-dimetyleeni-3-okso-17a-pregn-4-eeni-21,17-karbolaktonia 35 ml:ssa DMS0:ta saatetaan reagoimaan 2,31 g:n kanssa trimetyylisulfoksoniumjodidia ja 25 393 mg:n kanssa natriumhydridiä (55-%:inen öljysuspensio) ja jatkokäsitellään kuten esimerkissä 1 on kuvattu. Kun on uudelleenkiteytetty di-isopropyylieetteri/asetonista saadaan 1,1 g 6,6-etyleeni-15a,16a-metyleeni-3-okso-17a-pregn-4-eeni-21,17-karbolaktonia, jonka sp on 176,6 eC.

• 30 UV: e247 = 13 900.

Esimerkki 4 „·. - 600 mg 6,6-etyleeni-15a, 16a-metyleeni-3-okso-17a- .. pregn-4-eeni-21,17-karbolaktonia sekoitetaan 12 ml:ssa tolueenia yhdessä 600 mg:n kanssa 2,3-dikloori-5,6-disyaa- ' 35 ni-p-bentsokinonia 17 tuntia 80 °C:ssa. Sitten työskennel- ♦ ·· 9 86191 lään edelleen ja puhdistetaan tuote kuten esimerkissä 3 on kuvattu. Saadaan 520 mg 6,6-etyleeni-15a,16a-metyleeni-3-okso-17a-pregna-l,4-dieeni-21,17-karbolaktonia öljynä.

UV: e2i2 = 14 600.

5 Esimerkki 5 a) 5,0 g 18-metyyli-15B,16B-metyleeni-3-okso-19-nor-17a-pregn-4-eeni-21,17-karbolaktonia saatetaan reagoimaan 125 ml:ssa metanolia 2,5 ml:n kanssa pyrrolidiinia ja jatkokäsitellään kuten esimerkissä 1 on kuvattu. Saadaan 10 5,0 g 18-metyyli-15fi,168-metyleeni-3-pyrrolidino-19-nor- 17a-pregna-3,5-dieeni-21,17-karbolaktonia.

b) 5,0 g 18-metyyli-158,16B-metyleeni-3-pyrrolidi-no-19-nor-17a-pregna-3,5-dieeni-21,17-karbolaktonia saatetaan reagoimaan 100 ml:ssa etanolia ja 50 ml:ssa bent- 15 seeniä 5 ml:n kanssa 37-prosenttista formaliiniliuosta ja jatkokäsitellään kuten esimerkissä 1 on kuvattu. Saadaan 2,33 g 6a-hydroksimetyyli-18-metyyli-15B,16B-metyleeni-19-nor-17a-pregn-4-eeni-21,17-karbolaktonia öljynä.

UV: e239 = 13 200.

20 c) 372 mg 6a-hydroksimetyyli-18-metyyli-15B,16B-- metyleeni-19-nor-17a-pregn-4-eeni-21,17-karbolaktonia sekoitetaan 3,7 ml:ssa pyridiiniä yhdessä 572 mg:n kanssa p-tolueenisulfonihappokloridia 17 tuntia huoneenlämmössä. Sen jälkeen lisätään 0,09 ml vettä, sekoitetaan vielä 1 25 tunti huoneenlämmössä ja reaktioliuos sekoitetaan jääve- teen. Muodostunut sakka erotetaan suodattamalla, pestään vedellä ja otetaan metyleenikloridiin. Kuivaamisen ja haihdutuksen jälkeen saadaan 465 mg 18-metyyli-15B,16B-metyleeni-6a-tosyylioksimetyyli-19-nor-17a-pregn-4-eeni 30 21,17-karbolaktonia öljynä.

UV: e226 = 20 600.

. . d) Liuokseen, jonka muodostaa 426 mg trimetyyli- ; / sulfoksoniumjodidia 15 ml:ssa DMS0:ta, lisätään 72 mg natriumhydridiä (55-prosenttinen öljysuspensio) ja sekoi-35 tetaan 1 tunti huoneenlämmössä. Tähän liuokseen lisätään 10 861 91 sitten argonissa 300 mg 18-metyyli-15S,16B-metyleeni-6a-tosyylioksimetyyli-19-nor-17a-pregn-4-eeni-21,17-karbo-laktonia, sekoitetaan vielä 15 minuuttia ja kaadetaan jää-veteen. Sakka erotetaan suodattamalla, otetaan eetteriin, 5 pestään vedellä, kuivataan ja haihdutetaan, Preparatiivi-sen ohutkerroskromatografian jälkeen saadaan 145 mg 6,6-etyleeni-18-metyyli-15Ö, 16S-metyleeni-3-okso-19-nor-17a-pregn-4-eeni-21,17-karbolaktonia, jonka sp on 165,4 eC.

UV: e247 = 14 650.

10 Kohdan 5a) mukainen lähtöaineyhdiste valmistetaan seuraavasti: Liuokseen, jonka muodostaa 102 g 15a-hydrok-si-18-metyyli-4-estreeni-3,17-dionia 500 ml:ssa pyridii-niä, lisätään 50,9 ml bentsoyylikloridia samalla jäähdyttäen jäillä ja sen jälkeen sekoitetaan 1 tunnin ajan sa-15 maila jäähdyttäen. Sen jälkeen lisätään tipoittain 9 ml vettä ja sekoitetaan vielä tunnin ajan. Reaktioliuos sekoitetaan sitten jääveteen, muodostunut sakka erotetaan imusuodatuksella, pestään vedellä ja kuivataan. Saadaan raakatuotteena 146 g 15a-bentsoyylioksi-18-metyyli-4-est-20 reeni-3,17 dionia.

Liuokseen, jonka muodostaa 146 g 15a-bentsoyyli-oksi-18-metyyli-4-estreeni-3,17-dionia 1,46 l:ssa dikloo-rimetaania, lisätään 441 ml etyleeniglykolia, 294 ml o-muurahaishapon trietyyliesteriä ja 7,3 g p-tolueenisulfo-25 nihappoa ja sekoitetaan 1 tunti 50 °C:ssa. Sitten lisätään 20 ml pyridiiniä, laimennetaan eetterillä ja pestään vedellä. Kuivaamisen ja haihdutuksen jälkeen saadaan raaka-tuotteena 165 g 15a-bentsoyylioksi-3,3-etyleenidioksi-18-metyyli-5- tai 5(10)-estren-17-onia.

30 Liuokseen, jonka muodostaa 320 g trimetyylisulfok- soniumjodidia 1,5 l:ssa DMS0:ta, lisätään 56,3 g jauhe-. . maista natriumhydroksidia ja sekoitetaan 2,5 tuntia huo neenlämmössä. Vedellä jäähdyttäen lisätään sitten 165 g 15a-bentsoyylioksi-3,3-etyleenidioksi-18-metyyli-5- tai 35 5( 10 )-estren-17-onia 300 ml:ssa DMS0:ta ja sekoitetaan 11 86191 vielä 45 minuuttia. Reaktioliuos sekoitetaan sitten jääve-teen, muodostunut sakka erotetaan suodattamalla, otetaan eetteriin, pestään vedellä ja kuivataan. Haihduttamisen jälkeen saatu jäännös kromatografoidaan silikageelillä.

5 Saadaan 79,2 g 3,3-etyleenidioksi-18-metyyli-158,168-me-tyleeni-5- tai 5(10)-estren-178-onia öljynä.

Liuos, jonka muodostaa 62 g 3,3-etyleenidioksi-18-metyyli-15B,16B-metyleeni-5- tai 5(10)-estren-17-onia 60 ml:ssa absoluuttista tetrahydrofuraania (THF), jäähdyte-10 tään -10 °C:seen, sen jälkeen lisätään argonissa 186 g kaliumetylaattia ja sen jälkeen tipoittain 124 ml tislattua propargyylialkoholia. Reaktioliuosta sekoitetaan vielä 45 tuntia samalla jäähdyttäen, sekoitetaan jääveteen, tehdään happamaksi laimealla rikkihapolla ja uutetaan dik-15 loorimetaanilla. Kuivaamisen ja haihdutuksen jälkeen jäännös kromatografoidaan silikageelillä. Saadaan 23 g 3,3-etyleenidioksi-17a-( 3-hydroksi-l-propinyyli ) -18-metyyli-158,168-metyleeni-5- tai 5(10)-estren-178-olia öljynä.

23 g 3,3-etyleenidioksi-17a-(3-hydroksi-l-propi-20 nyyli)-18-metyyli-158,168-metyleeni-5- tai 5(10)-estren-178-olia liuotetaan 150 ml:aan 2-propanolia ja 150 ml:aan THF:ää ja hydrataan vedyllä käyttäen mukana 23 g Raney-nikkelikatalysaattoria. Sitten erotetaan katalysaattori suodattamalla ja suodos haihdutetaan kuiviin. Jäännöksenä 25 saadaan 23 g raakaa 3,3-etyleenidioksi-17a-(3-hydrok-sipropyyli)-18-metyyli-158,168-metyleeni-5- tai 5(10)-est-ren-178-olia öljynä.

23 g 3,3-etyleenidioksi-17a-(3-hydroksipropyyli)-18-metyyli-158,168-metyleeni-5- tai 5(10)-estren-178-30 olia sekoitetaan 230 ml:ssa dimetyyliformamidia (DMF) yhdessä 69 g:n kanssa pyridiniumdikromaattia 24 tuntia huoneenlämmössä. Reaktioliuos sekoitetaan sitten etikkaeste-riin, saostuneet kromisuolat erotetaan imusuodatuksella ja suodos pestään vedellä. Haihdutuksen jälkeen jäännös kro-I 35 matografoidaan silikageelillä. Saadaan 15 g 3,3-etyleeni- i2 86Ί 91 dioksi-18-metyyli-158,166-metyleeni-19-nor-17a-pregn-5-( 5(10)-eeni-21,17-karbolaktonia öljynä.

15 g 3,3-etyleenidioksi-18-metyyli-158,168-mety-leeni-19-nor-17a-pregn-5- tai 5(10)-eeni-21,17-karbolak-5 töniä sekoitetaan 150 ml:ssa metanolia yhdessä 15 ml:n kanssa 8-tilavuusprosenttista rikkihappoa 6 tuntia huoneenlämmössä. Reaktioliuos laimennetaan sitten eetterillä, pestään vedellä, kuivataan ja haihdutetaan. Jäännös kroma-tografoidaan silikageelillä ja uudelleenkiteytettynä di-10 isopropyylieetteri/asetonista saadaan 8,5 g 18-metyyli- 158, 168-metyleeni-3-okso-19-nor-17a-pregn-4-eeni-21,17-karbolaktonia, jonka sp on 202,5-205,5 “C.

UV: e240 = 17 400.

Esimerkki 6 15 a) Liuokseen, jonka muodostaa 4,0 g 158,168-mety- leeni-19-nor-3-okso-17a-pregn-4-eeni-21,17-karbolaktonia 35 ml:ssa kiehuvaa metanolia, lisätään 2 ml pyrrolidiinia ja kuumennetaan vielä 20 minuuttia palautusjäähdyttäen. Jäähdyttämisen jälkeen muodostunut sakka erotetaan imusuo-20 datuksella ja pestään vielä pienellä määrällä kylmää metanolia ja kuivataan tyhjiössä. Saadaan 4,3 g 158,168-mety-leeni-19-nor-3-pyrrolidino-17a-pregna-3,5-dieeni-21,17-karbolaktonia .

b) Liuokseen, jonka muodostaa 4,3 g 158,166-mety- 25 leeni-3-pyrrolidino-19-nor-17a-pregna-3,5-dieeni-21,17- karbolaktonia 43,6 mlrssa bentseeniä ja 87,2 ml:ssa etanolia, tiputetaan 4,3 ml formaliiniliuosta, sekoitetaan vie--lä 1 tunti huoneenlämmössä ja haihdutetaan tyhjiössä. Saatu raakatuote kromatografoidaan silikageelillä. Saadaan 30 1,9 g 6a-hydroksimetyyli-158,168-metyleeni-3-okso-19-nor- 17a-pregn-4-eeni-21,17-karbolaktonia, jonka sp. on 246,9 °C.

c) Liuokseen, jonka muodostaa 2,06 g 6a-hydroksi-metyyli-158,16B-metyleeni-3-okso-19-nor-17a-pregn-4-eeni- 35 21,17-karbolaktonia 20 ml:ssa pyridiiniä, lisätään 3,14 g li i3 861 91 p-tolueenisulfonihappokloridia, sekoitetaan sen jälkeen 3 tuntia huoneenlämmössä, lisätään 0,2 ml vettä, sekoitetaan vielä tunti ja kaadetaan reaktioliuos jääveteen. Muodostunut sakka erotetaan suodattamalla, pestään vedellä ja 5 kuivataan. Saadaan 2,39 g 158,16B-metyleeni-3-okso-6a- tosyylioksimetyyli-19-nor-17a-pregn-4-eeni-21,17-karbolak-tonia.

d) Liuokseen, jonka muodostaa 3,84 g trimetyylisul-foksoniumjodidia 75 ml:ssa dimetyylisulfoksidia, lisätään 10 566 mg 55-prosenttista natriumhydridiä ja sekoitetaan sen jälkeen 1 tunti huoneenlämmössä. Tähän liuokseen tiputetaan 2,36 g 158,168-metyleeni-3-okso-6a-tosyylioksimetyy-li-19-nor-17a-pregn-4-eeni-21,17-karbolaktonia 2 mltssa dimetyylisulfoksidia, sekoitetaan sen jälkeen 30 minuut-15 tia ja kaadetaan jääveteen. Saatu raakatuote kromatogra-foidaan silikageelillä. Saadaan 985 mg 6,6-etyleeni-158,1-68-metyleeni-3-okso-19-nor-17a-pregn-4-eeni-21,17-karbolaktonia, jonka sp on 211-214 °C.

Kohdan 6a) mukainen lähtöaineyhdiste valmistetaan 20 seuraavasti: Liuokseen, jonka muodostaa 69,2 g 15a-hydrok-si-4-estreeni-3,17-dionia 408 ml:ssa pyridiiniä, lisätään 46,4 ml bentsoyylikloridia jäähdyttäen samalla jäillä ja sekoitetaan vielä 1 tunti jäähdyttäen. Sen jälkeen lisätään 5,7 ml vettä ja sekoitetaan 3 tuntia huoneenlämmössä • - 25 ja kaadetaan jääveteen. Muodostunut sakka erotetaan suo dattamalla, pestään vedellä ja kuivataan. Saadaan 98,7 g 15a-bentsoyylioksi-4-estreeni-3,17-dionia.

Liuokseen, jonka muodostaa 98,7 g 15a-bentsoyyli-oksi-4-estreeni-3,17-dionia 4,5 l:ssa dikloorimetaania, .· . 30 lisätään 0 °C:ssa 266,7 ml etyleeniglykolia, 177,8 ml 0- muurahaishapon trietyyliesteriä ja 889 mg p-tolueenisul-. . fonihappoa ja sekoitetaan tässä lämpötilassa 2,5 tuntia.

Sen jälkeen lisätään vähän pyridiiniä ja pestään useita kertoja vedellä. Kun on kuivattu magnesiumsulfaatilla 35 haihdutetaan tyhjiössä. Saatu raakatuote kromatografoidaan i4 861 91 silikageelillä. Saadaan 69,1 g 15a-bentsoyylioksi-3,3-ety-leenidioksi-5- tai 5(10)-estren-17-onia.

Liuokseen, jonka muodostaa 47,0 g trimetyylisulfok-soniumjodidia 1 l:ssa dimetyylisulfoksidia, lisätään 5 18,4 g 55-prosenttista natriumhydridiä ja sekoitetaan 1 tunti argonissa. Siihen tiputetaan liuos, jossa on 69,1 g 15a-bentsoyylioksi-3,3-etyleenidioksi-5- tai 5(10)-estren-17-onia ja sekoitetaan 1 tunti huoneenlämmössä. Sen jälkeen sekoitetaan reaktioliuos jääveteen, muodostunut sakka 10 erotetaan suodattamalla ja kuivataan. Saatu raakatuote kromatografoidaan alumiinioksidilla. Saadaan 41,5 g 3,3-etyleenidioksi-158,168-metyleeni-5- tai 5(10)-estren-17-onia öl-jynä.

Liuokseen, jonka muodostaa 41,5 g 3,3-etyleenidiok-15 si-158,168~metyleeni-5- tai 5(10)-estren-17-onia 800 ml:ssa tetrahydrofuraania, lisätään argonissa 0 eC:ssa 148 g kaliumetylaattia ja sen jälkeen liuos, jossa on 57 ml propargyylialkoholia 57 ml:ssa tetrahydrofuraania ja sekoitetaan vielä 2,5 tuntia huoneenlämmössä. Sitten teh-20 dään happamaksi rikkihapolla, laimennetaan vedellä, uutetaan etikkaesterillä ja pestään neutraaliksi vedellä. Kun on kuivattu ja haihdutettu tyhjiössä, jäännös kromatografoidaan silikageelillä. Saadaan 38,0 g 178-hydroksi-17a-( 3-hydroksi-l-propinyyli)-158,168-metyleeni-4-estren-3-25 onia, jonka sp on 161,3 °C.

Liuos, jossa on 38,0 g 17B-hydroksi-17a-(3-hydrok-si-l-propinyyli)-158,168-metyleeni-4-estren-3-onia 1 litrassa tetrahydrofuraania, hydrataan 5,0 g:11a tris-trife-nyylifosfiinirodium-I-kloridia ja haihdutetaan sen jäl-30 keen tyhjiössä. Saadaan 43,0 g 178-hydroksi-17a-(3 hydrok-sipropyyli)-158,168-metyleeni-4-estren-3-onia.

. . Liuokseen, jossa on 43,0 g 178-hydroksi-17a-(3-hyd- roksipropyyli)-158,168-metyleeni-4-estren-3-onia 1,4 litrassa dimetyyliformamidia, lisätään 160 g pyridiinidikro-35 maattia ja sekoitetaan yli yön huoneenlämmössä. Reaktio- li is 86191 liuos sekoitetaan sitten 7 litraan etikkaesteriä, erotetaan saostuneista kromisuoloista imusuodatuksella ja suo-dos pestään vedellä. Haihdutuksen jälkeen jäännös kromato-grafoidaan silikageelillä. Saadaan 22,5 g 156,16B-metylee-5 ni-19-nor-3-okso-17a-pregn-4-eeni-21,17-karbolaktonia, jonka sp on 191,2 °C.

Esimerkki oraalisesti annettavan, rakeiden muodossa olevan ehkäisyvalmisteen koostumukseksi:

Ydin: 10 2,000 mg 6,6-etyleeni-15B,166-metyleeni-3-okso-17a- pregn-4-eeni-21,17-karbolaktöniä 0,050 mg etinyyliestradiolia 31,100 mg laktoosia 18.000 mg maissitärkkelystä 15 2,100 mg poly-N-vinyylipyrrolidonia 1,650 mg talkkia 0,100 mg magnesiumstearaattia 55.000 mg kokonaispaino, joka täydennetään tavanomaisella sakkaroosiseoksella (kuori) noin 90 mg:ksi.

20 Farmakologinen tarkastelu

Antialdoseronivaikutus todetaan ja mitataan Holl-mannin koemallissa (G. Hollmann et ai., Tubuläre Wirkungen und renale Elimination von Spironolactonen, Naunyn-Schmie-debergs Arch. Exp. Path. Pharmak. 247 (1964), s. 419; P.

25 Marx, Renale Wirkungen des d-Aldosterons und seines An- tagonisten Spironolacton, Diss. Med. Fak. FU Berlin, 1966).

Tulokset gestageenisesta vaikutuksesta saadaan Clauberg-kokeessa, kun tehoaineita on annettu kastroidui- 30 lie naaraskaniineille subkutaanisesti. Kohdun limakalvon sekretorinen muutos määritetään histologisista näytteistä.

. . Määritys tapahtuu McPhail-asteikon mukaan (arvosteluasteikko 1-4; 1 = ei muutosta, 4 = täydellinen muut tuminen ).

ie 86191

Raskauden pysyvyyskokeessa rotilla ilmoitetaan koe-aineiden subkutaanisen antamisen jälkeen raskauden kahdeksannesta kahdenteenkymmenenteenensimmäiseen päivään saakka elävien ja kuolleiden sikiöiden lukumäärä ja lasketaan 5 prosentuaalinen raskauden pysyvyys.

Kuten seuraavasta taulukosta ilmenee, keksinnön mukaisilla yhdisteillä 2 ja 3 on hyvän aldosteroniantagonis-tisen vaikutuksen ohella voimakkaampi gestageeninen teho kuin tunnetulla vertailuyhdisteellä 1.

• · » I 17 861 91 03

^ dP ΙΛ ^ (Ί O O I—I O

>, CO Γ~ VO rP

> >1 03 Γ" α, υ σ

c · |S

0) w ^ Τ3 C0 η 3 03 Π Η ι—I Ο Ο itj Ο - ν ' V C on rP Ο Ο Ο Ο Ο

03 C

03 <d Ρ3 Ο > Ρ 03 ι—icNiHr-t m \ο οι οο -Ρ » ' >· ' ' ' - (OOOCNrH (N (N Η (Ν r 0) (¾ ο υ 2 ι σι · γ--ί-ι υ σ <υ · ιε λ w ^ 3 σ en σ Γ-ΙΟ 00 Γ-Η ΓΟ-ΗΟ οο CJC ~ ~ 1 1 1· 1 ϊ·

Cl—ιοοοοοο < Ο ο —

-1 ι-H

•H II

C

Ο ·γΗ

Ρ C

ο . ο 44 Ο 44 03 < Μ o a ιβ r~

Τ3 ι-H I

ι—ι ο 140 m η σ c •Η ο -Ρ Ρ C ·Ρ < α

03 I

~ Ρ ι ι id ιι I Μ ^ ι -Η

. Ο) I I VO I— I VO <Τι G

’ 1 " 1 t ε O— I ι—I ι—I I ι—I ι—I Ο -Η

Ρ Γ~ <-4 Ρ ' I <Ρ - I Ί) C

; ΌιΗ^ο 10. 0 - <5.0 I Ο I ι rl > LO ¢/3 r—I in 03 -Ρ «CO osj— rl ϋ ο: Η Λ! I ΛΙ

10031 ιοι lOGrtJ

: h m -ρ ·ρ -ρ ι -ρ -p i (jip . , 'OCC G oo G crooo • - - 10. ι m o <u ι a> ο)ιρλ

ιηοοφ-ρ <U -P (D ·Ρ (1) ·Ρ Oi P

rl M Jd rPCIC rPCIfl : -p^rid ipai'S'O >i o ~ri .«CliHr^ -PQJI-P 440)01 ^ φ G O 3 H)H CJi 0) Ή rP r-~ • · - a> r— <u σ.Ω γρ ι >, σ n3 ι >1 ι rp G SP dl ρ·ρ ΙΟ +J 0) H ΙΟ Ρ P s

p tQ->iP<TJ(d vqjpo sd) OH

< VO 44 CUPi 44 VO e ΟιΛ VO g C osl o P rP Osl : z oo I I · « ·

Claims (7)

1. Menetelmä terapeuttisesti aktiivisten 6,6-ety-leeni-15,16-metyleeni-3-okso-17a-pregn-4-eeni-21/ 17-kar-5 bolaktonien valmistamiseksi, joilla on yleinen kaava I ___jtexr io r^PS16 dj, 2 _I 15 15 i jossa 2tarkoittaa yksinkertaista CC-sidosta tai I CC-kaksoissidosta; Rx tarkoittaa vetyatomia tai metyyliryhmää; R2 tarkoittaa metyyli- tai etyyliryhmää ja 20 tarkoittaa fy. . . J15 ryhmää tai _£> ·.: 25 tunnettu siitä, että 15,16-metyleeni-3-okso-17a- pregn-4-eeni-21,17-karbolaktoniin, jolla on yleinen kaava ·’ 11 O i ΓΤ 30 16 ί^Τ~15 II i9 861 91 jossa "\i6 , R: ja R2 tarkoittavat samaa kuin kaavan I —Jl5 yhteydessä on esitetty, sinänsä tunnetulla tavalla liitetään 6a-hydroksimetyyliryhmä 3,5-dieeni-3-amiinin kautta 5 formaliinin avulla, jolloin muodostuu uudelleen 4-eeni-3-oksosysteemi, muodostetaan 6a-hydroksimetyyliyhdisteestä 6-metyleeniyhdiste ja tämä metylenoidaan 6,6-etyleeniyh-disteeksi ja haluttaessa muodostetaan A1-kaksoissidos.

2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, 10 tunnettu siitä, että valmistetaan 6,6-etyleeni- 156.166- metyleeni-3-okso-17a-pregn-4-eeni-21,17-karbolak-toni.

3. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan 6,6-etyleeni- 15 156,l66-metyleeni-3-okso-17a-pregna-l,4-dieeni-21,17-kar- bolaktoni.

4. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan 6,6-etyleeni-15a,16a-metyleeni-3-okso-17a-pregn-4-eeni-21,17-karbolak- 20 töni.

5. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan 6,6-etyleeni-15a,16a-metyleeni-3-okso-17a-pregna-l,4-dieeni-21,17-kar- "'· bolaktoni.

6. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan 6,6-etyleeni-18-metyyli-156,166-metyleeni-3-okso-19-nor-17a-pregn-4-eeni- 21,17-karbolaktoni.

7. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, 30 tunnettu siitä, että valmistetaan 6,6-etyleeni- 156.166- metyleeni-3-okso-19-nor-17a-pregn-4-eeni-21,17-karbolaktoni . 20 861 91