FI79328C - Foerfarande foer framstaellning av oligogalaktosderivat och mellanprodukter anvaendbara vid deras framstaellning - Google Patents
Foerfarande foer framstaellning av oligogalaktosderivat och mellanprodukter anvaendbara vid deras framstaellning Download PDFInfo
- Publication number
- FI79328C FI79328C FI823555A FI823555A FI79328C FI 79328 C FI79328 C FI 79328C FI 823555 A FI823555 A FI 823555A FI 823555 A FI823555 A FI 823555A FI 79328 C FI79328 C FI 79328C
- Authority
- FI
- Finland
- Prior art keywords
- compound
- formula
- acid
- hydrogen
- scheme
- Prior art date
Links
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 58
- WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N Acetic anhydride Chemical compound CC(=O)OC(C)=O WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 36
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 24
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 20
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 16
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 14
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 13
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims description 13
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 claims description 13
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 claims description 10
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 claims description 7
- 150000002431 hydrogen Chemical group 0.000 claims description 7
- 239000012279 sodium borohydride Substances 0.000 claims description 7
- 229910000033 sodium borohydride Inorganic materials 0.000 claims description 7
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 claims description 6
- YZCKVEUIGOORGS-NJFSPNSNSA-N Tritium Chemical group [3H] YZCKVEUIGOORGS-NJFSPNSNSA-N 0.000 claims description 5
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims description 5
- 125000001589 carboacyl group Chemical group 0.000 claims description 5
- YZCKVEUIGOORGS-OUBTZVSYSA-N Deuterium Chemical group [2H] YZCKVEUIGOORGS-OUBTZVSYSA-N 0.000 claims description 4
- 229920002230 Pectic acid Polymers 0.000 claims description 4
- 229910052805 deuterium Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 claims description 4
- 239000010318 polygalacturonic acid Substances 0.000 claims description 4
- 230000009467 reduction Effects 0.000 claims description 4
- 229910052722 tritium Chemical group 0.000 claims description 3
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 125000004185 ester group Chemical group 0.000 claims description 2
- BEOOHQFXGBMRKU-UHFFFAOYSA-N sodium cyanoborohydride Chemical compound [Na+].[B-]C#N BEOOHQFXGBMRKU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 33
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 13
- 229940125904 compound 1 Drugs 0.000 description 11
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 11
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 229930182470 glycoside Natural products 0.000 description 10
- -1 lithium aluminum hydride Chemical compound 0.000 description 10
- 229960003082 galactose Drugs 0.000 description 9
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 9
- ONBQEOIKXPHGMB-VBSBHUPXSA-N 1-[2-[(2s,3r,4s,5r)-3,4-dihydroxy-5-(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]oxy-4,6-dihydroxyphenyl]-3-(4-hydroxyphenyl)propan-1-one Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC1=CC(O)=CC(O)=C1C(=O)CCC1=CC=C(O)C=C1 ONBQEOIKXPHGMB-VBSBHUPXSA-N 0.000 description 8
- 229940126142 compound 16 Drugs 0.000 description 8
- OJRUSAPKCPIVBY-KQYNXXCUSA-N C1=NC2=C(N=C(N=C2N1[C@H]3[C@@H]([C@@H]([C@H](O3)COP(=O)(CP(=O)(O)O)O)O)O)I)N Chemical compound C1=NC2=C(N=C(N=C2N1[C@H]3[C@@H]([C@@H]([C@H](O3)COP(=O)(CP(=O)(O)O)O)O)O)I)N OJRUSAPKCPIVBY-KQYNXXCUSA-N 0.000 description 7
- 229940125758 compound 15 Drugs 0.000 description 7
- 229940125898 compound 5 Drugs 0.000 description 7
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 7
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 7
- 229920001277 pectin Polymers 0.000 description 7
- 239000001814 pectin Substances 0.000 description 7
- 235000010987 pectin Nutrition 0.000 description 7
- IGSYEZFZPOZFNC-UHFFFAOYSA-N 4-O-alpha-D-Galactopyranuronosyl-D-galacturonic acid Natural products OC1C(O)C(O)OC(C(O)=O)C1OC1C(O)C(O)C(O)C(C(O)=O)O1 IGSYEZFZPOZFNC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 229910004298 SiO 2 Inorganic materials 0.000 description 6
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 6
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 6
- SZUVGFMDDVSKSI-WIFOCOSTSA-N (1s,2s,3s,5r)-1-(carboxymethyl)-3,5-bis[(4-phenoxyphenyl)methyl-propylcarbamoyl]cyclopentane-1,2-dicarboxylic acid Chemical compound O=C([C@@H]1[C@@H]([C@](CC(O)=O)([C@H](C(=O)N(CCC)CC=2C=CC(OC=3C=CC=CC=3)=CC=2)C1)C(O)=O)C(O)=O)N(CCC)CC(C=C1)=CC=C1OC1=CC=CC=C1 SZUVGFMDDVSKSI-WIFOCOSTSA-N 0.000 description 5
- IAYPIBMASNFSPL-UHFFFAOYSA-N Ethylene oxide Chemical compound C1CO1 IAYPIBMASNFSPL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- IAJILQKETJEXLJ-RSJOWCBRSA-N aldehydo-D-galacturonic acid Chemical compound O=C[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)C(O)=O IAJILQKETJEXLJ-RSJOWCBRSA-N 0.000 description 5
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 5
- 229940126543 compound 14 Drugs 0.000 description 5
- 150000002338 glycosides Chemical class 0.000 description 5
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 5
- SHAHPWSYJFYMRX-GDLCADMTSA-N (2S)-2-(4-{[(1R,2S)-2-hydroxycyclopentyl]methyl}phenyl)propanoic acid Chemical compound C1=CC([C@@H](C(O)=O)C)=CC=C1C[C@@H]1[C@@H](O)CCC1 SHAHPWSYJFYMRX-GDLCADMTSA-N 0.000 description 4
- QFLWZFQWSBQYPS-AWRAUJHKSA-N (3S)-3-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[5-[(3aS,6aR)-2-oxo-1,3,3a,4,6,6a-hexahydrothieno[3,4-d]imidazol-4-yl]pentanoylamino]-3-methylbutanoyl]amino]-3-(4-hydroxyphenyl)propanoyl]amino]-4-[1-bis(4-chlorophenoxy)phosphorylbutylamino]-4-oxobutanoic acid Chemical compound CCCC(NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](Cc1ccc(O)cc1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CCCCC1SC[C@@H]2NC(=O)N[C@H]12)C(C)C)P(=O)(Oc1ccc(Cl)cc1)Oc1ccc(Cl)cc1 QFLWZFQWSBQYPS-AWRAUJHKSA-N 0.000 description 4
- FMNDXLWVYMQMHF-UHFFFAOYSA-N 6-[2-carboxy-6-(1-carboxy-1,3,4-trihydroxy-5-oxopentan-2-yl)oxy-4,5-dihydroxyoxan-3-yl]oxy-3,4,5-trihydroxyoxane-2-carboxylic acid Chemical compound OC1C(O)C(OC(C(O)C(C=O)O)C(O)C(O)=O)OC(C(O)=O)C1OC1C(O)C(O)C(O)C(C(O)=O)O1 FMNDXLWVYMQMHF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 4
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- WQDUMFSSJAZKTM-UHFFFAOYSA-N Sodium methoxide Chemical compound [Na+].[O-]C WQDUMFSSJAZKTM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000010933 acylation Effects 0.000 description 4
- 238000005917 acylation reaction Methods 0.000 description 4
- LCLHHZYHLXDRQG-UHFFFAOYSA-N alpha-D-Galacturono-tri-saccharide Natural products OC1C(O)C(O)OC(C(O)=O)C1OC1C(O)C(O)C(OC2C(C(O)C(O)C(O2)C(O)=O)O)C(C(O)=O)O1 LCLHHZYHLXDRQG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 4
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 4
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 4
- 235000019439 ethyl acetate Nutrition 0.000 description 4
- 239000000543 intermediate Substances 0.000 description 4
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N methanoic acid Natural products OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 125000000896 monocarboxylic acid group Chemical group 0.000 description 4
- GHYOCDFICYLMRF-UTIIJYGPSA-N (2S,3R)-N-[(2S)-3-(cyclopenten-1-yl)-1-[(2R)-2-methyloxiran-2-yl]-1-oxopropan-2-yl]-3-hydroxy-3-(4-methoxyphenyl)-2-[[(2S)-2-[(2-morpholin-4-ylacetyl)amino]propanoyl]amino]propanamide Chemical compound C1(=CCCC1)C[C@@H](C(=O)[C@@]1(OC1)C)NC([C@H]([C@@H](C1=CC=C(C=C1)OC)O)NC([C@H](C)NC(CN1CCOCC1)=O)=O)=O GHYOCDFICYLMRF-UTIIJYGPSA-N 0.000 description 3
- DKXNBNKWCZZMJT-ZYAMEUKBSA-N (2r,3r,4s,5r)-2,3,5,6-tetrahydroxy-4-[(2r,3r,4s,5r,6r)-3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxyhexanal Chemical compound O=C[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]([C@H](O)CO)O[C@H]1O[C@H](CO)[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O DKXNBNKWCZZMJT-ZYAMEUKBSA-N 0.000 description 3
- 238000001644 13C nuclear magnetic resonance spectroscopy Methods 0.000 description 3
- AEMOLEFTQBMNLQ-DTEWXJGMSA-N D-Galacturonic acid Natural products O[C@@H]1O[C@H](C(O)=O)[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O AEMOLEFTQBMNLQ-DTEWXJGMSA-N 0.000 description 3
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical compound OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- IAJILQKETJEXLJ-UHFFFAOYSA-N Galacturonsaeure Natural products O=CC(O)C(O)C(O)C(O)C(O)=O IAJILQKETJEXLJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- NHTMVDHEPJAVLT-UHFFFAOYSA-N Isooctane Chemical compound CC(C)CC(C)(C)C NHTMVDHEPJAVLT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 238000006640 acetylation reaction Methods 0.000 description 3
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 3
- 238000007792 addition Methods 0.000 description 3
- AEMOLEFTQBMNLQ-UHFFFAOYSA-N beta-D-galactopyranuronic acid Natural products OC1OC(C(O)=O)C(O)C(O)C1O AEMOLEFTQBMNLQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 3
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 3
- 229940125797 compound 12 Drugs 0.000 description 3
- JVSWJIKNEAIKJW-UHFFFAOYSA-N dimethyl-hexane Natural products CCCCCC(C)C JVSWJIKNEAIKJW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 3
- 210000002919 epithelial cell Anatomy 0.000 description 3
- 230000032050 esterification Effects 0.000 description 3
- 238000005886 esterification reaction Methods 0.000 description 3
- 229920001467 poly(styrenesulfonates) Polymers 0.000 description 3
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 3
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 3
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 3
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 3
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 3
- WQZGKKKJIJFFOK-SVZMEOIVSA-N (+)-Galactose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-SVZMEOIVSA-N 0.000 description 2
- NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 1,2-bis(ethenyl)benzene;1-ethenyl-2-ethylbenzene;styrene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1.CCC1=CC=CC=C1C=C.C=CC1=CC=CC=C1C=C NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UNILWMWFPHPYOR-KXEYIPSPSA-M 1-[6-[2-[3-[3-[3-[2-[2-[3-[[2-[2-[[(2r)-1-[[2-[[(2r)-1-[3-[2-[2-[3-[[2-(2-amino-2-oxoethoxy)acetyl]amino]propoxy]ethoxy]ethoxy]propylamino]-3-hydroxy-1-oxopropan-2-yl]amino]-2-oxoethyl]amino]-3-[(2r)-2,3-di(hexadecanoyloxy)propyl]sulfanyl-1-oxopropan-2-yl Chemical compound O=C1C(SCCC(=O)NCCCOCCOCCOCCCNC(=O)COCC(=O)N[C@@H](CSC[C@@H](COC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC)C(=O)NCC(=O)N[C@H](CO)C(=O)NCCCOCCOCCOCCCNC(=O)COCC(N)=O)CC(=O)N1CCNC(=O)CCCCCN\1C2=CC=C(S([O-])(=O)=O)C=C2CC/1=C/C=C/C=C/C1=[N+](CC)C2=CC=C(S([O-])(=O)=O)C=C2C1 UNILWMWFPHPYOR-KXEYIPSPSA-M 0.000 description 2
- 238000005160 1H NMR spectroscopy Methods 0.000 description 2
- OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 4-(3-methoxyphenyl)aniline Chemical compound COC1=CC=CC(C=2C=CC(N)=CC=2)=C1 OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N N-Butanol Chemical compound CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 2
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical class [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000002777 acetyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)=O 0.000 description 2
- 238000005903 acid hydrolysis reaction Methods 0.000 description 2
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 2
- 125000002252 acyl group Chemical group 0.000 description 2
- 239000003638 chemical reducing agent Substances 0.000 description 2
- 230000006196 deacetylation Effects 0.000 description 2
- 238000003381 deacetylation reaction Methods 0.000 description 2
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 2
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 2
- 238000006047 enzymatic hydrolysis reaction Methods 0.000 description 2
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 description 2
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 2
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 2
- 239000005457 ice water Substances 0.000 description 2
- 238000004255 ion exchange chromatography Methods 0.000 description 2
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 2
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000006257 total synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- 150000008135 α-glycosides Chemical class 0.000 description 2
- 150000008136 β-glycosides Chemical class 0.000 description 2
- DKXNBNKWCZZMJT-YPAZOXBYSA-N (2r,3r,4s,5r)-2,3,5,6-tetrahydroxy-4-[(2s,3r,4s,5r,6r)-3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxyhexanal Chemical compound O=C[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]([C@H](O)CO)O[C@@H]1O[C@H](CO)[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O DKXNBNKWCZZMJT-YPAZOXBYSA-N 0.000 description 1
- HVCOBJNICQPDBP-UHFFFAOYSA-N 3-[3-[3,5-dihydroxy-6-methyl-4-(3,4,5-trihydroxy-6-methyloxan-2-yl)oxyoxan-2-yl]oxydecanoyloxy]decanoic acid;hydrate Chemical compound O.OC1C(OC(CC(=O)OC(CCCCCCC)CC(O)=O)CCCCCCC)OC(C)C(O)C1OC1C(O)C(O)C(O)C(C)O1 HVCOBJNICQPDBP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RTKMFQOHBDVEBC-UHFFFAOYSA-N 3-bromo-3-buten-1-ol Chemical compound OCCC(Br)=C RTKMFQOHBDVEBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QJDHDDNUSA-N 4-O-alpha-D-Galactopyranosyl-D-galactose Natural products OC[C@@H]1O[C@H](O[C@@H]2[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O[C@@H]2CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QJDHDDNUSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-MESDJYPDSA-N 4-O-beta-D-Galactopyranosyl-D-galactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@@H]2[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-MESDJYPDSA-N 0.000 description 1
- TWCMVXMQHSVIOJ-UHFFFAOYSA-N Aglycone of yadanzioside D Natural products COC(=O)C12OCC34C(CC5C(=CC(O)C(O)C5(C)C3C(O)C1O)C)OC(=O)C(OC(=O)C)C24 TWCMVXMQHSVIOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PLMKQQMDOMTZGG-UHFFFAOYSA-N Astrantiagenin E-methylester Natural products CC12CCC(O)C(C)(CO)C1CCC1(C)C2CC=C2C3CC(C)(C)CCC3(C(=O)OC)CCC21C PLMKQQMDOMTZGG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YXHKONLOYHBTNS-UHFFFAOYSA-N Diazomethane Chemical compound C=[N+]=[N-] YXHKONLOYHBTNS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VGGSQFUCUMXWEO-UHFFFAOYSA-N Ethene Chemical group C=C VGGSQFUCUMXWEO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930186217 Glycolipid Natural products 0.000 description 1
- 229910004373 HOAc Inorganic materials 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- DKXNBNKWCZZMJT-UHFFFAOYSA-N O4-alpha-D-Mannopyranosyl-D-mannose Natural products O=CC(O)C(O)C(C(O)CO)OC1OC(CO)C(O)C(O)C1O DKXNBNKWCZZMJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010059820 Polygalacturonase Proteins 0.000 description 1
- 229920005654 Sephadex Polymers 0.000 description 1
- 239000012507 Sephadex™ Substances 0.000 description 1
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229920002125 Sokalan® Polymers 0.000 description 1
- GOIKIOHGMNUNBL-UHFFFAOYSA-N Tetragalacturonic acid Natural products OC1C(O)C(O)OC(C(O)=O)C1OC1C(O)C(O)C(OC2C(C(O)C(OC3C(C(O)C(O)C(O3)C(O)=O)O)C(O2)C(O)=O)O)C(C(O)=O)O1 GOIKIOHGMNUNBL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XWBYJILLPFRAKC-FWVHKYNUSA-N [(2R,3S,4S,5R,6S)-3,4,5-triacetyloxy-6-[[(2R,3S,4S,5R,6R)-3-hydroxy-4,5,6-tris[[(2R,3R,4S,5S,6R)-3,4,5-triacetyloxy-6-(acetyloxymethyl)oxan-2-yl]oxy]oxan-2-yl]methoxy]oxan-2-yl]methyl acetate Chemical compound CC(=O)O[C@@H]1[C@@H](OC(C)=O)[C@@H](OC(C)=O)[C@@H](COC(=O)C)O[C@@H]1OC[C@@H]1[C@H](O)[C@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](OC(C)=O)[C@@H](OC(C)=O)[C@@H](COC(C)=O)O2)OC(C)=O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](OC(C)=O)[C@@H](OC(C)=O)[C@@H](COC(C)=O)O2)OC(C)=O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](OC(C)=O)[C@@H](OC(C)=O)[C@@H](COC(C)=O)O2)OC(C)=O)O1 XWBYJILLPFRAKC-FWVHKYNUSA-N 0.000 description 1
- DKXNBNKWCZZMJT-CIWNPBBJSA-N [2H]C([C@H]([C@@H]([C@@H]([C@H](C=O)O)O)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O1)C(O)([2H])[2H])O)(O)[2H] Chemical compound [2H]C([C@H]([C@@H]([C@@H]([C@H](C=O)O)O)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O1)C(O)([2H])[2H])O)(O)[2H] DKXNBNKWCZZMJT-CIWNPBBJSA-N 0.000 description 1
- 230000021736 acetylation Effects 0.000 description 1
- 230000004520 agglutination Effects 0.000 description 1
- 125000003158 alcohol group Chemical group 0.000 description 1
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 1
- FHNIYFZSHCGBPP-OVGWDEKYSA-N alpha-D-Gal-(1->4)-alpha-D-Gal-OMe Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](OC)O[C@H](CO)[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 FHNIYFZSHCGBPP-OVGWDEKYSA-N 0.000 description 1
- GOIKIOHGMNUNBL-XVJVAFNESA-N alpha-D-GalpA-(1->4)-alpha-D-GalpA-(1->4)-alpha-D-GalpA-(1->4)-alpha-D-GalpA Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)O[C@H](C(O)=O)[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O[C@@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O3)C(O)=O)O)[C@H](O2)C(O)=O)O)[C@@H](C(O)=O)O1 GOIKIOHGMNUNBL-XVJVAFNESA-N 0.000 description 1
- 239000003957 anion exchange resin Substances 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 1
- 125000000484 butyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 description 1
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 239000003729 cation exchange resin Substances 0.000 description 1
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 1
- 238000011097 chromatography purification Methods 0.000 description 1
- 238000010549 co-Evaporation Methods 0.000 description 1
- 229940125773 compound 10 Drugs 0.000 description 1
- 229940125782 compound 2 Drugs 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 239000013058 crude material Substances 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 125000004431 deuterium atom Chemical group 0.000 description 1
- IJKVHSBPTUYDLN-UHFFFAOYSA-N dihydroxy(oxo)silane Chemical compound O[Si](O)=O IJKVHSBPTUYDLN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000539 dimer Substances 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 210000000981 epithelium Anatomy 0.000 description 1
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 1
- NLFBCYMMUAKCPC-KQQUZDAGSA-N ethyl (e)-3-[3-amino-2-cyano-1-[(e)-3-ethoxy-3-oxoprop-1-enyl]sulfanyl-3-oxoprop-1-enyl]sulfanylprop-2-enoate Chemical compound CCOC(=O)\C=C\SC(=C(C#N)C(N)=O)S\C=C\C(=O)OCC NLFBCYMMUAKCPC-KQQUZDAGSA-N 0.000 description 1
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 108010093305 exopolygalacturonase Proteins 0.000 description 1
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 125000002485 formyl group Chemical group [H]C(*)=O 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- 229930182830 galactose Natural products 0.000 description 1
- 150000002298 globosides Chemical class 0.000 description 1
- 238000005858 glycosidation reaction Methods 0.000 description 1
- PFOARMALXZGCHY-UHFFFAOYSA-N homoegonol Natural products C1=C(OC)C(OC)=CC=C1C1=CC2=CC(CCCO)=CC(OC)=C2O1 PFOARMALXZGCHY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 239000003456 ion exchange resin Substances 0.000 description 1
- 229920003303 ion-exchange polymer Polymers 0.000 description 1
- ZLVXBBHTMQJRSX-VMGNSXQWSA-N jdtic Chemical compound C1([C@]2(C)CCN(C[C@@H]2C)C[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@@H]2NCC3=CC(O)=CC=C3C2)=CC=CC(O)=C1 ZLVXBBHTMQJRSX-VMGNSXQWSA-N 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 239000012280 lithium aluminium hydride Substances 0.000 description 1
- UNYOJUYSNFGNDV-UHFFFAOYSA-M magnesium monohydroxide Chemical compound [Mg]O UNYOJUYSNFGNDV-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 229940075610 mercuric cyanide Drugs 0.000 description 1
- GBMDVOWEEQVZKZ-UHFFFAOYSA-N methanol;hydrate Chemical compound O.OC GBMDVOWEEQVZKZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000001160 methoxycarbonyl group Chemical group [H]C([H])([H])OC(*)=O 0.000 description 1
- GRVDJDISBSALJP-UHFFFAOYSA-N methyloxidanyl Chemical compound [O]C GRVDJDISBSALJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 239000012452 mother liquor Substances 0.000 description 1
- 238000003541 multi-stage reaction Methods 0.000 description 1
- 229920001542 oligosaccharide Polymers 0.000 description 1
- 150000002482 oligosaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 125000000636 p-nitrophenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C(=C([H])C([H])=C1*)[N+]([O-])=O 0.000 description 1
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 1
- 125000001501 propionyl group Chemical group O=C([*])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 230000002285 radioactive effect Effects 0.000 description 1
- 238000001953 recrystallisation Methods 0.000 description 1
- 238000010992 reflux Methods 0.000 description 1
- 210000005084 renal tissue Anatomy 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 1
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 1
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001632 sodium acetate Substances 0.000 description 1
- 235000017281 sodium acetate Nutrition 0.000 description 1
- 239000007974 sodium acetate buffer Substances 0.000 description 1
- 239000012354 sodium borodeuteride Substances 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 238000004611 spectroscopical analysis Methods 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 238000010189 synthetic method Methods 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Natural products C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000004043 trisaccharides Chemical group 0.000 description 1
- 230000002485 urinary effect Effects 0.000 description 1
- HFQKBOPMAOTAIR-TZSVBWBLSA-N α-d-galactosyl-(1->4)-β-d-galactosyl-(1->4)-β-d-glucosylceramide Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](OC[C@@H]([C@H](O)/C=C/CCCCCCCCCCCCC)NC(C)=O)O[C@H](CO)[C@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O2)O)[C@@H](CO)O1 HFQKBOPMAOTAIR-TZSVBWBLSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H3/00—Compounds containing only hydrogen atoms and saccharide radicals having only carbon, hydrogen, and oxygen atoms
- C07H3/04—Disaccharides
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H3/00—Compounds containing only hydrogen atoms and saccharide radicals having only carbon, hydrogen, and oxygen atoms
- C07H3/06—Oligosaccharides, i.e. having three to five saccharide radicals attached to each other by glycosidic linkages
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Description
1 79328
Menetelmä oligogalaktoosijohdannaisten valmistamiseksi ja niiden valmistuksessa käyttökelpoiset välituotteet
Esillä oleva keksintö koskee menetelmää ja välituotteita oligogalaktoosi johdannaisten valmistamiseksi, joita voidaan käyttää terapeuttisiin tai diagnostisiin tarkoituksiin.
Muutamien viime vuosien aikana on kohdistettu erikoista huomiota ilmiöön, että bakteerit kiinnittyvät isäntä-epiteeli-soluihin (viite 1). Kaksi ruotsalaista tutkijaryhmää on esittänyt kantanaan (viitteet 2 ja 3), että kaavan 1 mukainen di-galaktoosi-yhdiste toimisi reseptorina ripsireunaisten uro-patogeenisten Coli-bakteerien kiinnittymisessä urinaarialueen epiteelisolujen pintaan ihmisellä. Di-galaktoosi-puoliskon katsotaan sitäpaitsi olevan läsnä epiteelisolujen pinnalla triheksosyyliseramidin (seuraava kaava 2) ja globosidin muodossa .
Lisäksi di-galaktoosia sisältävä glykolipidi "galabiosyyliser-amidi” (seuraava kaava 3) on läsnä munuaiskudoksessa (viite 4), mutta yhdisteen funktio ei ole tiedossa.
Uft f-OH HO r0H ^V\A^V\/VV\A
·£> ro" ^ Γ0Η ^ OH ^ (D (2) H0 ll°o .-OH HN^vV\/VWV\/|
0H V^WW^AV : V OH
(3) 2 79328
Yhdisteen 1 ja yhdisteen 2 trisakkaridipuoliskon yksinkertaisten (esimerkiksi metyyli- ja p-nitrofenyyli-)glykosi-dien on osoitettu inhiboivan uropatogeenisen Coli-bakteerin agglutinoitumista joihinkin punaisiin verisoluihin (viite 1). Tämä indikoi yhdisteen 1 käyttöä uudentyyppisten diagnostisten reagenssien samoin kuin terapeuttisten yhdisteiden valmistukseen, joilla on uudentyyppinen teho verrattuna traditionaalisiin antibiootteihin, so. ne inhiboivat bakteerien kiinnittymistä epiteliumiin sen sijaan että ne hävittäisivät bakteerit.
Kirjallisuudessa on tehty selkoa 4-O-a-D-galaktopyranosyy-li-D-galaktoosin (1) ja sen johdannaisten valmistamisesta.
Yhdistettä 1 on valmistettu di-galakturonihaposta (4) kaavan 1 mukaan (viite 5).
cooh Γ ~
HO I_ COOH
<m\ (MeO)3CH,H+ HJ-<\ CH2N2 ^—\0 9ooh -> x?H /1 <pOOH -> 0H K?H°> 0H °hW> 0H T/^OMe
(4) H
i_ COOMe
H?;-0 -OH
Vm \ DLiAlH. OHj_ -¾¾ 2>H30* α)
N—"rt OH <QH>- OH
°ijSDMe OH
Kaavio 1 3 79328
Epämiellyttävien reagenssien (esimerkiksi diatsometaani, litiumaluminiumhydridi) käyttö kuitenkin estää yhdisteen 1 valmistamisen suuressa mitassa tätä tietä. Myös tämän reak-tiosekvenssin variaatio on ilmoitettu (viite 6).
yhdisteen 1 täydelleen asetyloitua johdannaista on valmistettu (viitteet 7, 8f 9) monivaihereäktiosekvenssien avulla lähtemällä galaktoosista, kuten on esitetty seuraavassa kaaviossa 2 (viite 7). Myös tässä tapauksessa jotkut käytetyt reagenssit (esimerkiksi merkuurisyanidi) yhdessä alhaisen kokonaistuotoksen kanssa tekevät suuremman mittakaavan valmistuksen epäkäytännölliseksi.
D-galaktoosi 2 vannetta 5 vaihetta / l/He(CN)_
AcO i~0Ac H0J_0 9 ;--;-^ ^ · €7 rs:;:-* OAc OAc -kromatografia .—OAc )—q OAc k0Ac \ __L l/Ac-0/H0Ac/HoS0.
N—Λ ._o _ ^Ac<^T>, _l-2—^ OA^^n| + 2/Si02-kromatografia
Ac0 i—OAc °AC OAc ^ _JoCAc OAc 5a Kaavio 2
Nykyisestä tekniikan tasosta, johon edellä on viitattu, voidaan havaita, että on olemassa erityyppisten oligosakkaridien synteettisten valmistusmenetelmien sekä helposti saatavien lähtömateriaalien tarve. Keksinnön pääkohteena on sen vuoksi saada aikaan menetelmä oligosakkaridi- 4 79328 yhdisteiden valmistamiseksi, joita yhdisteitä voidaan käyttää lääketieteellisiin ja diagnostisiin tarkoituksiin.
Keksinnön toisena kohteena on saada aikaan uusia välituotteita, joita voidaan käyttää tällaisten yhdisteiden valmistamiseen .
Keksintö kohdistuu näin ollen menetelmään yhdisteen valmistamiseksi, jolla on kaava (II) CX„OR2 okJ—o
W V
'-f'C' ex,or2 ; or2 o 1 2 a (1I) 'tX, OR2 0R “n 2 3 jossa R on vety tai alempi alkanoyyli, R merkitsee sa- 2 maa kuin ryhmä R tai se on alkyyliryhmä, ^oka edullisesti sisältää 1-6 hiiliatomia, jolloin ryhmä OR C-atomissa 1 molekyylin pelkistyvässä päässä on jokoa - tai g-konfiguraa-tiossa, X on vety, deuterium tai tritium ja n on kokonaisluku 1-10, lähtien polygalakturonihaposta, joka hydrolysoidaan oligogalakturonihapon muodostamiseksi.
Keksinnön mukaiselle menetelmälle kaavan (II) mukaisten yhdisteiden valmistamiseksi on tunnusomaista, että a) saatu oligogalakturonihappo esteröidään sinänsä tunnetulla tavalla esterin muodostamiseksi, jolla on kaava (III) 5 79328 COQR4 ν^°\- τ \ f8 /\ COOR4 Ν-( O J— ο (ΙΙ1> V X »0, ί ο _η °Η ν / \ \χ ΟΗ \/Ν/ ΟΗ L η \_/ ΟΗ 4 jossa on R on esteriryhmän alkoholiosa ja n merkitsee samaa kuin edellä, ja saatu kaavan (III) mukainen esteri pelkistetään edullisesti vesiliuoksessa, yhdisteen muodostamiseksi, jolla on kaava (IV): cx2oh OH i—--n y'V 7 \0H Λ N ex oh N—r ° X-o,
p^0H
0HJ VoH /'OH
a V!-/
OH
jossa n ja X merkitsevät samaa kuin edellä, ja sen jälkeen kaavan (IV) mukainen yhdiste hydrolysoidaan kaavan (II) mu- 2 3 kaisen yhdisteen muodostamiseksi, jossa R ja R ovat vetyjä, tai kaavan (IV) mukainen yhdiste asylysoidaan kaavan 2 3
(II) mukaisen yhdisteen muodostamiseksi, jossa R ja R
6 79328 ovat alempia alkanoyylejä, ja sitten mikäli halutaan, hydrolysoidaan saatu yhdiste kaavan (II) mukaisen yhdisteen muo- 2 3 dostamiseksi, jossa R ja R ovat vetyjä, tai b) saatu oligogalakturonihappo esteröidään ja glykosidoidaan sinänsä tunnetulla tavalla yhdisteen muodostamiseksi, jolla on kaava (V):
COOR
Ö, COOR (V) ‘Ka
1-1 OR
L OH j n jossa n merkitsee samaa kuin edellä ja R on alkyyliryhmä, joka edullisesti sisältää 1-6 hiiliatomia, ja saatu kaavan (V) mukainen yhdiste pelkistetään kaavan (II) mukaisen yhdisteen muodostamiseksi, ja sen jälkeen haluttaessa hydrolysoidaan , 2 3
saatu kaavan (II) mukainen yhdiste, jossa R on vety ja R
on alkyyliryhmä, joka edullisesti sisältää 1-6 hiiliatomia , 2 kaavan (II) mukaisen yhdisteen muodostamiseksi, jossa R ja R ovat vetyjä ja n ja X merkitsevät samaa kuin edellä.
2
Kun ryhmä R kaavassa (II) on alkanoyyli, se on edullisesti formyyli, asetyyli tai propionyyli ja erityisesti asetyyli, ja n on edullisesti 2.
3
Kun ryhmä R kaavassa (II) on alkyyliryhmä, se on edullisesti metyyli, etyyli tai butyyli ja erityisesti metyyli.
Keksinnön mukaisilla uusilla yhdisteillä, joita voidaan käyttää välituotteina valmistettaessa kaavan (II) mukaisia yhdisteitä, on kaava (IV) 7 79328
CX2OH
OH U--o V_x CX20H ' N—< ° ο Ρ£ϋ0Η OH \/ /\
_ J \θΗ / OH
n -(
OH
jossa X on vety, deuterium tai tritium ja n on kokonaisluku 1-10.
Menetelmän a) ensimmäinen osa suoritetaan etupäässä jossakin hydroksyyliryhmiä sisältävässä liuottimessa ja täysin este-röityneen yhdisteen III pelkistäminen suoritetaan sopivasti käyttämällä natriumboorihydridiä tai natriumsyanoboorihydri-diä pelkistävänä aineena.
Yhdisteen IV asylyysi suoritetaan etupäässä käyttäen etikka-happoanhydridiä yhdessä jonkin voimakkaan hapon kanssa. Tällaisista voimakkaista hapoista voidaan mainita rikkihappo.
Termi "asylyysi" tässä käytettynä viittaa yhden (tai useiden) glykosidi-sidoksen tai -sidosten katkaisemiseen, jolloin lohkaistut osat korvataan alkanoyyliryhmillä. Hydroksyyliryhmien esteröiminen asyloimalla, so. korvaamalla vetyatomit alkanoyyliryhmillä, voi tapahtua samanaikaisesti asylyysin olosuhteissa.
Eräs edellä esitetyn keksinnön mukaisen menetelmän eduista on se seikka, että pektiiniä voidaan käyttää alkuperäisenä lähtöaineena. Kuten hyvin tiedetään, pektiini on eräs harvoista 8 79328 luonnossa esiintyvistä yhdisteistä, jotka sisältävä halutun oe-1,4-sidoksen ja lisäksi se on halpa ja helposti saatava lähtöaine. Pektiini soveltuu yhdisteiden II suurimittaiseen valmistukseen ja jäljempänä esitetyissä kaavioissa 4 ja 5 on yhteenveto ot- ja β -glykosidien valmistusmenetelmästä kokonaisuudessaan, joita yhdisteitä voidaan käyttää mielenkiintoisiin lääketieteellisiin ja muihin tarkoituksiin. Kaaviossa 4 on pektiinin hydrolyysituotteen (vaihe a) esimerkkinä tri-galakturonihappo, mutta on selvää, että pektiinin hydrolyysi voi johtaa muihin oligomeereihin dimeereistä esimerkiksi aina dekameereihin saakka. Di-galakturonihapon käyttöä esitetään kaaviossa 5.
Lähtöaineena käytetty pektiini hydrolysoidaan entsymaattisen tai happohydrolyysin avulla, jolloin muodostuu polygalakturo-nihappoa (eri,4), joka sen jälkeen joko entsymaattisen tai happohydrolyysin avulla hydrolysoidaan esimerkiksi tri-galak-turonihapoksi, so. yhdisteeksi 9 kaaviossa 4 ja di-galakturo-nihapoksi, so. yhdisteeksi 13 kaaviossa 5.
Tuloksena oleva oligogalakturonihapojen seos voidaan helposti erottaa suuressa mittakaavassa ioninvaihtokromatografian avulla (viite 10).
9 79328
Menetelmä A. Esteröiminen etyleenioksidin avulla.
Saatu tri-galakturonihappo (yhdiste 9 kaaviossa 4) sen jälkeen esteröidään etylöenioksidin avulla ennestään tunnetulla tavalla (vaihe b, viite 11), jolloin saadaan vastaavaa hydroksietyyliesteriä (yhdiste 10 kaaviossa 4).
Sitten hydroksietyyliesteri 10 pelkistetään vettä sisältävän natriumboorihydridin avulla (vaihe c, viite 12), jolloin saadaan galaktitoli-glykosidia (yhdiste 11, kaavio 4), joka on uusi ja ennestään tuntematon yhdiste.
Uusi yhdiste 11 voidaan asetyloida käyttäen asetanhydri-diä, jolloin saadaan per-O-asetaattia (vaihe d; yhdiste 12), joka on uusi yhdiste. Mainittua yhdistettä 12 käsitellään sitten asetanhydridin kanssa, joka sisältää konsentroitua rikkihappoa (vaihe e; viite 11), josta on tuloksena galak-titoli-puoliskon lohkaisu ilman että molekyylin muu osa hajoaisi havaittavasti, ja muodostuu täysin asetyloitu di-galaktoosi (yhdiste 5 kaaviossa 4). Vaihtoehtoisesti voidaan yhdistettä 5 muodostaa yhdessä vaiheessa (d ja e samanaikaisesti) käyttämällä asetanhydridiä ja konsentroitua rikkihappoa.
Täysin asetyloitu di-galaktoosi-yhdiste 5 eristettiin käyttämällä esitettyä menetelmää. Yhdistettä 5 voidaan käyttää vapaan sokerin valmistukseen (yhdiste 1) hydrolysoimalla, glykosidien valmistukseen biologista käyttöä varten ($-glykosidit tai α-glykosidit) ja muiden mahdollisten johdannaisten valmistukseen, jotka sisältävät 4-O-a-D-galaktopy-ranosyyli-D-galaktopyranoosi-yksikön, kuten on esitetty kaaviossa 4. On tietenkin mahdollista valmistaa glykosi-deja yhdisteestä 1, kuten on ilmoitettu kaaviossa 4.
10 79328
COOH
Hr °>
\-COOH
a·. HO iJ—0 h. /°\ H,0
Pektiini ^ > 1 \0H yi ' J=±—? V
f' COOH
9 H0k^-0H
OH
coo A/^n %1 ^0« H\£ IJOL· ^ Mi ΓΟΗ Ac20 “ "·" „
HO k I
\ 0H
11
Ac20/H2S04
AcO r°0Ac Ac0 CqAC >'
Ac20/„2S04 €>1 _0AC + AcOr“C CZ
A^fei ^οΙ£λ '©i rOAg/'0- ^GiE ' ^OAC |@CA<:0--0Ac U Ι4γ\0Αο 5α °AC 5B °A^l>Ac 0A° OAc H0 cT H°i/^”°\ 5 1/glyk-=i-l=^ti_ ^L^j-OJIor ^θΓ« . ^de-asetylointi HO HO (^IH \
\ ~Ah ho°R
de-asetylointi β-glykosidit a-glykosidit muut
johdannaiset Kaavio A
11 79328 HO f 0°H HO f°°Me ... 1/ °\ MeOH/HCl 1/ 0\
Pektimi < OH > -> <QH > \L_/J COOH N-Λ OOOMe »
OH OH
H0 Γ0Η . „ ,-OAc ^-foC.» SädiÄi ,-OAc Mg0H/Me°-^> 13 H0 <=Λ. Ac0 fe .15 0H J 16 Mi«e OAc
AcO r0Ac —1—1-1—' (¾
AcO O r0Ac i£°> 50 N—(OAc OAc
Kaavio 5
Menetelmä B. Samanaikainen esteröiminen ja glykosidointi. Saatu di-galakturonihappo (yhdiste 13 kaaviossa 5) sen jälkeen esteröidään ja glykosidoidaan samanaikaisesti meta-nolilla (tai muilla yksinkertaisilla alkoholeilla) ja hapolla ennestään tunnetulla tavalla kuten muut uronihapot (viite 14), jolloin saadaan vastaavaa uutta ja ennestään tuntematonta metyyliesteriglykosidia (yhdiste 14 kaaviossa 5). Yhdiste 14 on anomeerinen seos (α/β, 3/1).
Metyyliesteriglykosidi 14 sen jälkeen pelkistetään vettä sisältävällä natriumboorihydridillä, jolloin saadaan metyyli-glykosidia (yhdiste 15 kaaviossa 5), joka on uusi ja ennestään tuntematon yhdiste. Tämä uusi yhdiste 15 voidaan 12 79328 asetyloida käyttäen asetanhydridiä, jolloin saadaan per-O-asetyloitu glykosidi (yhdiste 16 kaaviossa 5), joka on jälleen uusi ja ennestään tuntematon yhdiste. Mainittua yhdistettä 16 käsitellään sitten asetanhydridillä, joka sisältää konsentroitua rikkihappoa, minkä tuloksena on metyyli-aglykoniosan lohkaisu ilman havaittavissa olevaa molekyylin muun osan tuhoutumista, ja muodostuu täysin asetyloitu di-galaktoosi (yhdiste 5 kaavioissa 4 ja 5). Vaihtoehtoisesti voidaan yhdistettä 5 muodostaa yhdessä vaiheessa yhdisteestä 15 käyttämällä asetanhydridiä ja konsentroitua rikkihappoa.
Per-O-asetyloitu di-galaktoosi 5 eristetään käyttäen esitettyä menetelmää ja sitä voidaan käyttää inter alia valmistamaan yhdistettä 1 ja sen erilaisia glykosideja (vrt. kaaviota 4) .
Esimerkit;
Keksintöä valaistaan lisää seuraavien spesifisten esimerkkien avulla, joita ei kuitenkaan pidä käsittää rajoittaviksi .
Esimerkki I
Polygalakturonihapon hydrolyysi
Poly-D-galakturonihappoa (50 g; Sigma) suspendoitiin nat-riumasetaattipuskuriin (1000 ml; 20 mM; pH 4,5) ja pH säädettiin natriumhydroksidilla (5 M). Suspensiota sekoitetaan 40°C:ssa ja lisättiin pektinaasia (1,0 g; PV 8, Miles) . Hydrolyysiä jatkettiin 24 h 40°C:ssa ja sen jälkeen se lopetettiin kuumentamalla 100°C:ssa 5 min ajan. Näytteitä otettiin pienin välein ja analysoitiin ohutlevykro-matografian avulla. Piidioksidigeeli 60; Merck. Eluoin-tiaine: butanoli/muurahaishappo/vesi 4/6/1. Tehtiin silmin nähtäviksi: levyt kuivattiin, niihin suihkutettiin rikkihappoa etanolissa (5 %) ja kuumennettiin (105°). Suurin osa hydrolysaatista muodostui di-, tri-, tetra- ja penta-meereistä.
i3 79328
Esimerkki II
Hydrplyysituotteiden puhdistaminen (vert. viite 10)
Osa hydrolysaatista, joka sisälsi D-galakturonihapon 1,4-a-kytkeytyneitä oligomeerejä pantiin valumaan "Zerolite" 225 (H+) kationinvaihtohartsi-pvlvään läpi (600 ml hartsia 1000 ml kohti hydrolysaattia) ja eluaatti lyofilisoitiin. Tuloksena oleva oligomeerien seos (6 g) liuotettiin tislattuun veteen (20 ml) ja liuos pantiin anioninvaihtohartsi-pylvääseen (Dowex 1x2, 50-100 mesh; formaattimuoto, tasapainotettu tislatulla vedellä). Pylväs eluoitiin muura-haishappoliuoksella (pesu: 350 ml; 0,2 M) jota seurasi kovera gradientti (0,2 M, 2000 ml - 0,65 M, 1200 ml), jolloin saatiin fraktioita, jotka sisälsivät di- ja tri-ga-lakturonihappoa. Tetragalakturonihappoa eluoitiin 1 M muu-rahaishappoliuoksella. Pakastekuivaamalla saatiin yhdisteet lähes puhtaassa muodossa (> 90 %). D-galakturonihappo-oligomeerien tuotokset on esitetty taulukossa 1.
Taulukko 1 D-galakturonihappo-oligomeerien tuotokset raa'an hydroly-saatin ioninvaihtokromatografiän jälkeen 6 g:sta poly-D-galakturonihappoa.
n kaavassa: (Oligo- Tuotos Eluointiaineen (1,4-g-D-gal)n meeri) g (%) tilavuus (ml) 1 (mono) 0,2 (3) 200 2 (di) 1,0 (17) 500-1250 3 (tri) 2,0 (34) 1650-3750 4 (tetra) 1,4 (23) 3950-4850
Esimerkki III
1,2,3,6-tetra-O-(2,3,4,6-tetra-O-asetyyli-a-D-galaktopyra-nosyyli) -a-D-galaktopyranoosin (yhdiste 5a kaavioissa 4 ja 5) valmistaminen_
Menetelmä A:
Tri-D-galakturonihappoa (9; 1,65 g) liuotettiin veteen (16,5 ml) ja lisättiin ylimäärä nestemäistä etyleenioksidia 14 79328 (noin 2 g). Reaktioseosta sekoitettiin huoneenlämmössä 6 vrk., jona aikana toistettiin etyleenioksidilisäyksiä 2-6 g 5 kertaa (1, 2, 3, 4 ja 5 päivän kuluttua). Reaktiota monitoroitiin pH:n nousun avulla ja ohutlevykromatogra-fian avulla (Si02: Et0Ac/H0Ac/H20 2/1/1).
6 vrk.:n kuluttua, kun vallitsi etyleenioksidiylimäärä (pH 7), poistettiin jäljellä oleva etyleenioksidi (vesi-imu) ja reaktioseos lisättiin pisaroittaan 5 min kuluessa natriumboorihydridin (2 g) vesiliuokseen (2 ml) ja pidettiin lämpötila 20-25°C:ssa. 12 h sekoittamisen jälkeen huoneenlämmössä reaktioseos tehtiin heikosti happameksi (pH 5,5) etikkahapolla. Reaktioseos suodatettiin ja suodos haihdutettiin (40°C) useita kertoja lisäämällä metanolia. Jäännös (vaalean keltainen öljy) haihdutettiin useita kertoja lisäämällä tolueenia ja kuivattiin (öljypumppupaine), jolloin saatiin 23 g. Etyleeniglykoli, natriumasetaatti ja pieniä määriä suuren molekyylipainon omaavia epäpuhtauksia poistettiin liuottamalla jäännös (23 g) 45 ml:aan vettä ja suodattamalla Sephadex G-15-pylvään (6 x 55 cm) läpi. Erotusta monitoroitiin ohutlevykromatografiän avulla (Si02: Et0Ac/H0Ac/H20 2/1/1). Fraktiot, jotka sisälsivät yhdistettä 11 (R^ 0,2) yhdistettiin ja haihdutettiin, jolloin saatiin 1,5 g amorfista jäännöstä.
Asetanhydridiä (50 ml), joka sisälsi 1 % konsentroitua rikkihappoa, lisättiin kuivaan jäännökseen ja reaktioseosta sekoitettiin 55°C:ssa 8 vrk. ajan. Reaktiota monitoroitiin ohutlevykromatografiän avulla. Reaktioseos jäähdytettiin, laimennettiin eetterillä ja uutettiin vedellä, kyllästetyllä natriumvetykarbonaattiliuoksella ja vedellä. Eetteri-liuos kuivattiin (Na2S04) ja haihdutettiin joitakin kertoja lisäämällä etanolia. Jäännös, (vaalean ruskea "puolittain kiteinen" öljy) kromatografoitiin piidioksidigeeli-pylväässä (4 x 60 cm) etyyliasetaatti/iso-oktaani (3/1) eluointiaineena. Haluttua ainetta sisältävät, kohtalaisen homogeeniset fraktiot yhdistettiin ja haihdutettiin, jolloin is 79328 saatiin yhdistettä 5α (joka sisälsi pienen määrän yhdistettä 5β). Tuotos: 700 mg (35 %). Uudelleenkiteytettiin etanolista ja saatiin puhdasta yhdistettä (5a, 425 mg, 21 % tri-galakturonihaposta).
Menetelmä B:
Di-D-galakturonihappoa (13; 20,0 g) lisättiin kalsiumklo-ridin (20 g) liuokseen metanolissa (1,0 1). Lisättiin Duolite'ä (H+) (15 g) ja seosta kuumennettiin palautusjääh dyttäen 18 h, suodatettiin ja haihdutettiin, jolloin saatiin raakaa yhdistettä 14 (kaavio 5). Jäännös liuotettiin veteen (200 ml) ja lisättiin natriumboorihydridin (6,0 g) liuosta vedessä (30 ml) 3 min kuluessa sekoittaen silloin tällöin. Reaktioseos pidettiin ympäristön lämpötilassa 20 h ajan ja tehtiin sitten happamaksi /Dowex 50 W-X (2)_/, suodatettiin, haihdutettiin yhdessä metanolin kanssa useita kertoja ja kuivattiin lopuksi (0,1 torr.). Jäännös (raaka yhdiste 15, kaavio 5) suspendoitiin asetanhydridin ja pyri-diinin seokseen (1:1, 600 ml), sekoitettiin ympäristön lämpötilassa 24 h ajan ja haihdutettiin sitten yhdessä to-lueenin kanssa useita kertoja paksuksi, puolikiinteäksi jäännökseksi, jossa ei ollut pyridiinin hajua. Jäännös jaettiin eetterin (0,5 1) ja veden (0,2 1) kesken. Vesi-faasi uutettiin eetterillä (2 x 100 ml) ja yhdistetyt eet-terifaasit pestiin vedellä (50 ml), kuivattiin (Na2S04) ja haihdutettiin kuiviin. Kun haihdutettiin yhdessä tolueenin kanssa ja kuivattiin (0,1 torr.) saatiin vaalean keltaista jäännöstä (31,5 g; etupäässä yhdistettä 16, kaavio 5). Lisättiin asetanhydridiä (320 ml) joka sisälsi 1 % konsentroitua rikkihappoa kuivaan jäännökseen ja reaktioseosta sekoitettiin huoneenlämmössä. Reaktiota monitoroitiin ohut-levykromatografiän avulla (Si02 eetteri/tolueeni, 3/1). Kun oli sekoitettu 50 min, reaktioseos kaadettiin eetterin päälle (1 litra) ja eetteriliuos pestiin tämän jälkeen jää-vesiseoksella (150 ml), kyllästetyllä natriumvety-karbonaattiliuoksella (150 ml) ja jää-vesiseoksella (150 ml), ja kuivattiin (Na2SC>4), haihdutettiin yhdessä tolueenin i6 79328 kanssa ja kuivattiin (0,1 torr.), jolloin saatiin amorfista jäännöstä (32 g). Kun kiteytettiin etanolista, saatiin otsakkeen yhdistettä (12,3 g, 33 % di-galakturonihaposta). Emäliuoksen kromatografia (SiC>2, EtoAc/iso-oktaani, 1/1), jota seurasi kiteyttäminen etanolista, lisäsi tuotosta 55 %:iin.
Taulukko 2 a-D-Galp-l-4-a-D-Galp(Ac)g:n (yhdiste 5a) fysikaaliset datat
Sp. (°C) /“a 7^ Lähde Tämä keksintö 151-154 + 1352^ (c 0,5, CHClg)
Totaalisynteesi 157-159 + 13722 (c 1,6, CHClg)
Viite 7 153-154 + 13824 (c 2, CHC1,,) 20
Viite 9 150-151 + 141 (c 1,0, CHClg).
Yhdisteen 5a spektroskooppiset datat: ^HNMR (CDClg, TMS):δ 6.40 (d, 1H, J=3,5 Hz, H-l) 5,59 (d/d, 1H, Jx=3,0 Hz, J2 1Hz, H-4'), 5,44 (d/d, 1H, J2=11,0 Hz, J2 3,5 Hz, H-2), 5.40 (d/d, 1H, J1=11,0 Hz, J2 3,0 Hz, H-3'), 5,25 (d/d, 1H, J1=11,0 Hz, J2=3,5 Hz, H-2'), 5,23 (d/d, 1H, J1=11,0 Hz, J2=2,5 Hz, H-3), 5,03 (d, 1H, J=3,5 Hz, H-l'), 4,54 (d/t, 1H, J1=J2=7,0 Hz, J3=1Hz, H-5'), 4,36 (d/d, 1H, J 10 Hz, J2=6 Hz, H-6), 4-23 (t, 1H, J=6 Hz, H-5), 4,21 (d, 2H, J=7 Hz, H-6'), 4,08 (d/d, 1H, J-^10 Hz, J2 = 6 Hz, H-6), 2,15, 2,14, 2,11, 2,10, 2,06, 2,03, 2,02, 1,98.
(s , 3H kukin).
13CNMR (CDC13); 6 170,58, 170,50, 170,32, 170,25, 170,11, 169,84, 169,49, 168,87, 99,15 (d, J=173 Hz, C-l'), 89,81 (d, J=178 Hz, C-l), 77,02, 70,37, 69,26, 68,22, 67,79, 67,29, 67,12, 66,21, 61,74, 60,62, 20,95, 20,90, 20,72 (2c), 20,62 (3c) , 20,51.
Esimerkki IV
Di-galaktoosi 5:n per-O-asetyloitu ga -glykosidi (a-D-Galp-l-4-a-D-Galp-l-3-galaktitoli (Ac) 12; yhdiste 12, kaavio 4_ I7 79328
Yhdistettä 11 esimerkistä III käsiteltiin asetanhydridin avulla, joka sisälsi 1 % konsentroitua rikkihappoa 3 h ajan.
Jatkotyöskentelyä kuten edellä on selostettu seurasi kro-matografia (Si02, etyyliasetaatti/iso-oktaani 3/1), jolloin saatiin dodeka-asetaattia (12) värittömänä amorfisena sakkana.
/“a7p2 + 93° (c 1,2, CHC13) . 1HNMR (CDC13TMS) : δ 5,58 (d/d, 1H, J1= 3,0 Hz, J2=1Hz, H-4"), 5,54-5,10 (8H), 5,01 (d, 1H, J=3,3 Hz, H-l"), 4,54 (t, 1H, J=7 Hz, H-5"), 4,48-4,00 (11H), 2,14, 2,12, 2,11, 2,105, 2,09, 2,09, 2,085, 2,08, 2,07, 2,06, 2,03, 1,99 (s, 3H kukin).
13 CNMR: δ 170,54, 170,43 (3c), 170,30 (2c), 170,18, 170,08, 169,97, 169,93, 169,85, 169,73, 99,23 (d, J=172 Hz), 97,79 (d, J=174 Hz), 77,56, 75,92, 70,59, 70,44, 69,06, 69,01, 68,94, 68,26, 67,78, 67,43, 67,37, 67,01, 67,27, 62,10, 61,79, 60,51, 20,99, 20,83, 20,72 (2c), 20,709 (2c), 20,706 (2c), 20,67 (3c), 20,56.
Esimerkki V
Metyyli-2,3,6-tetra-0-asetyyli-4-0-(2,3,4,6-tetra-O-ase-tyyli-a-D-galaktopyranosyyli)-a-D-galaktopyranosidi (yhdiste 16, kaavio 5)_
Osa raa'asta yhdisteestä 16 (esimerkki III, menetelmä B, vaalean keltainen jäännös) kiteytettiin metanolista ja saatiin otsakkeen yhdistettä 16 neulasina.
Sp. 176-178,5°C; /“Y/^2 + 159,7° (c 0,9, CHCl-j) ·, ^NMR (CDC13, TMS): 6 5,57 (leveä d, 1H, J==3 Hz, H-4') , 5,40 (d/d, 1H, J1=ll Hz, J2=3 Hz, H-3'), 5,30-5,19 (3H, H-3, H-2, H-2'), 5,00 (leveä S, 2H, H-l, H-l'), 4,54 (leveä t, 1H, J=7 Hz, H-5'), 4,36 (d/d, 1H, J-,^13 Hz, J2=9 Hz, H-6) , 4,24- 4,04 (5H), 3,42 (S, 3H, CH30-), 2,15 (S, 6H), 2,11, 2,10, 2,09, 2,05, 2,01 (S, 3H kukin).
13C-NMR (CDC13, TMS): 6 170,54, 170,50, 170,42, 170,30, is 79328 170,17, 169,99, 169,40, 99,03, (d, J=172 Hz, C-l'), 97,19 (d, J=175 Hz, C-l), 77,71, 69,44, 68,28, 67,80 (3C), 67,40, 66,97, 62,37, 60,64, 55,39 (CH30) 20,96, 20,80, 20,78, 20,77, 20,73, 20,66 (2C).
Esimerkki VI
Metyyli-4-O-(a-D-galaktopyranosyyli)-a-D-galaktopyranosidi (yhdiste 15, kaavio 5)_
Otsakkeen yhdistettä 15 (kaavio 5 ja esimerkki III, menetelmä B) valmistettiin puhtaassa muodossa deasetyloimalla yhdistettä 16 (kts. esimerkkiä V) seuraavan menetelmän mukaan:
Yhdiste 16 (2,5 g) liuotettiin lämpimään tetrahydrofuraaniin (10 ml). Metanolia (20 ml) lisättiin ja seos jäähdytettiin ympäristön lämpötilaan. Lisättiin metanolia sisältävää natriummetylaattia (0,1 M, 3 ml) ja reaktioseosta sekoitettiin 24 h, jonka jälkeen otsakkeen yhdiste oli saostunut neulasina. Reaktioseos suodatettiin ja sakka pestiin metanolilla ja kuivattiin (0,1 torr.), jolloin saatiin 1,08 g (79 %) otsakkeen yhdistettä 15.
Sp. 210-211°C; /“oT^2 + 228,3° (c 0,5, H20). 1H-NMR (DMSO-Dg, D20 lisätty, 50°C, TMS) m.m.: 6 4,82 (1H, d, J=3,5 Hz, H-l1) 4,59 (1H, d, J=2,5 Hz, H-l), 3,27 (3H, s, CH30).
13C-NMR (D20, TSP): 6 103,33 (d, J=170 Hz, C-l), 102,33 (d, J=170 Hz, C-l'), 81,73, 73,94, 73,85, 72,07, 72,00, 71,85, 71,47, 71,26, 63,47 (t, 2c, J=144 Hz, C-6, C-6'), 58,05 (q, J=144 Hz, CH30).
Esimerkki VII
Di-galakturonihapon metyyliesteri-glykosidi (yhdiste 14, kaavio 5)_
Otsakkeen yhdistettä 14 (kaavio 5 ja esimerkki III, menetelmä B) valmistettiin puhdistamalla kromatograafisesti raakamateriaalia, joka muodostui ensimmäisessä reaktio- i9 79328 vaiheessa kuten on selostettu esimerkissä III/ menetelmä B. a- ja β-isomeerien suhde oli suunnilleen 3:1 (määrätty NMR:n avulla).
1H-NMR (DMSO-D6, D20 lisätty, 50°C, TMS) m.m.: 6 4,96 (d, J=1,5 Hz, H-5), 4,93* (d, J=l,5 Hz, H-5), 4,72 (d, J=3 Hz, H-l'), 4,69 (d, J=4 Hz, H-l), 4,32 (d, J=lHz, H-5'), 4,29* (d, J=1 Hz, H-5'), 4,18 (d/d, = 3,0 Hz, J2 = 1 Hz, H-4'), 4,10* (d, J=7,5 Hz, H-l) 3,92 (d/d,
Jx = 3,0 Hz, J2 = 1,5 Hz, H-4), 3,69 (S, COOCH3), 3,63 (S, COOCH3), 3,42* (S, CH30), 3,29 (S, CH30).
13C-NMR (D20, TSP): δ 174,28, 173,36, 173*, 106,51*, 106,38, 103,29*, 102,52, 81,83, 81,04*, 74,17, 72,97*, 72,84, 72,75, 71,46, 71,40*, 71,39*, 70,81, 70,57, 70,75, 60,38*, 58,59, 55,85*, 55,78, 55,65.
*
Signaaleja β-isomeeristä Esimerkki VIII
4-0-q-D-galaktopyranosyyli-D-galaktoosi (yhdiste 1, kaavio 4) Yhdiste 5a (5 g) kaaviosta 4 tai 5 edellä liuotettiin lämmittämällä 100 ml:aan metanolia. Jäähdytettiin huoneenlämpöön ja lisättiin 12 ml 0,1 M natriummetoksidin metanoli-liuosta (vrt. viite 14). Pidettiin 4 vrk. huoneenlämmössä ja laimennettiin sitten seosta vedellä ja metanoli haihdutettiin pois. Vesiliuos neutraloitiin happamen ioninvaih-tajahartsin avulla /Dowex 50 W-X2 (H_)_/, käsiteltiin hiilen kanssa, saostettiin ja haihdutettiin. Kun kiteytettiin metanoli-vedestä, saatiin otsakkeen yhdistettä 1 (2 g, 78 %), jota ei voi erottaa kokonaissynteesin avulla valmistetusta yhdisteestä 1.
Sp. 211-213°C; /“α7ρ6 + 171° (C 1, H20), Litt.15: sp. 210-211°C; Γα7*6 + 177°; Litt.7: + 167° (c 1, h2o).
Edellä on tehty selkoa kaavojen III ja V mukaisten yhdisteiden pelkistyksestä vastaavasti kaavojen IV tai II ja VI
2o 79328 mukaisiksi yhdisteiksi. Tällaisissa pelkistyksissä voidaan helposti tuoda deuterium- tai tritiumatomeja substituent-ti-hiiliatomeihin, jotka ovat liittyneinä 5-asentoon käyttämällä NaBD^iä tai NaBT^:ä pelkistävinä aineina. Tällaisten raskaampien isotooppien tuominen 5-asennossa liittyneihin hiiliatomeihin tuo analyyttisiä etuja verrattuna vastaaviin yhdisteisiin. Siten esimerkiksi vetyatomien korvaaminen deuteriumatomeilla aikaansaa sen, että interferenssin jonka laktoosin mukanaolo aiheuttaa massaspektrometrimit-tauksiin, eliminoituu pois. Toisaalta tritiumatomien tuominen mainittuihin hiiliatomeihin tekee tuloksena olevat yhdisteet radioaktiivisilla mittauksilla havaittaviksi. Molemmat nämä seikat helpottavat suuresti yhdisteiden seuraamista, kun niitä käytetään testisysteemeissä tai terapeuttisessa tai diagnostisessa tarkoituksessa. Syntyneet yhdisteet ovat tietenkin uusia ja ennestään tuntemattomia ja muodostavat sellaisina kyseessä olevan keksinnön lisä-aspektin.
Esimerkki IX
6,6-di-deuterio-4-O-(6,6-di-deuterio-a-D-galaktopyranosyy- li)-D-galaktoosi_
Otsakkeen yhdistettä valmistettiin di-D-galaktouronihaposta 13 menetelmän mukaan, joka on selostettu esimerkissä III, menetelmä B; ainoana erona on se, että natriumboorihydridi korvattiin natriumboorideuteridilla. Asetyloiminen happamis-sa olosuhteissa antoi tetra-deuteroitua per-O-asetaattia, joka on analoginen yhdisteen 5 kanssa.
1HNMR (CDC13, TMS): δ 6,38 (d, 1H, J=3,5 Hz, H-l), 5,57 (d/d, 1H, ^=3 Hz, J2=l Hz, H-4'), 5,41 (d/d, 1H, = 11 Hz, J2 = 3,5 Hz, H-2), 5,39 (d/d, 1H, J± = 11 Hz, J2 = 3 Hz, H-3'), 5,22 (d/d, 1H, J = 11 Hz, J2 = 3,5 Hz, H-2'), 5,24 (d/d, 1H, J1 = 11 Hz, J2 = 3 Hz, H-3), 5,02 (d, 1H, J = 3,5 Hz, H-l'), 4,52 (leveä s, 1H, H-5'), 4,22 (s, 1H, H-5), 4,21 (d, 1H, J = 3 Hz, H-4), 2,16, 2,14, 2,11, 21 79328 2,07, 2,04, 2,03, 2,00 (s, 3H kukin, CH3CO).
13CNMR (CDC13, TMS): δ 170,57, 170,49, 170,33, 170,28, 170,08, 169,83, 169,44, 168,86, 99,09 (d, J = 171 Hz, OI'), 89,79 (d, J = 178 H2, C-l), 76,93, 70,17, 69,23, 68,19, 67,70, 67,75, 66,95, 66,14, 20,93, 20,89, 20,71 (2c), 20,61 (3c), 20,49.
Deasetyloimisen, jatkovalmistuksen ja kiteyttämisen jälkeen, kuten on selitettu esimerkissä VIII, saatiin otsakkeen yhdistettä.
22 79328
Kirjallisuuslähteet 1. Advances in chemotherapy, III. Symphosium, jonka aiheena bakteereiden kiinnittyminen, Tukholma, Ruotsi, tammikuu 23, 1981.
2. H. Leffler ja C. Svanborg-EdSn, FEMS Microbiol.
Lett. 8, 127 (1980).
3. G. Källenius, R. Möllby, S.B. Svenson, J. Winberg, A. Lundblad, S. Svensson ja B. Cedergren, FEMS Michrobiol. Lett. Ί_, 297 (1980) .
4. E. Märtensson, Acta Chem. Scand. , 3/7, 2356 (1963).
5. J.K.N. Jones ja W.W. Reid, J. Chem. Soc. 1955, 1890.
6. G.O. Aspinall ja R.S. Fanshawe, J. Chem. Soc. 1961, 4215.
7. M.E. Chacon-Fuertes ja M. Martin-Lomas: Carbohyd.
Res. j43, 51 (1975) .
8. P.A. Gent, R. Gigg ja A.A.E. Penglis, J. Chem. Soc.
Perkin Trans. _1, 1395 (1976) .
9. D.D. Cox, E.K. Metzner ja E.J. Reist, Carbohyd.
Res., 62, 245 (1978).
Cf. G.M. Bebault ja G.G.S. Dutton, Carbohyd.
Res. 3_7, 309 (1974) .
M. Dejter-Juszynski ja H.M. Flowers, Carbohyd.
Res., 41, 308 (1975).
10. I. Ashby, J. Brooks ja W.W. Reid, Chem. ja Ind., 26, 360 (1955).
11. W.W. Reid; Meth. Carbohyd. Chem. I, 309 (1962).
12. C.f. B.A. Lewis, F. Smith ja A.M. Stephens, Meth. Carbohyd. Chem. II, 68 (1963).
13. M.L. Wolfrom, A. Thompson ja E. Pacsu, Meth.
Carbohyd. Chem. II, 215 (1963).
14. J.K.N. Jones ja M. Stacey, J. Chem. Soc., 1947, 1340.
15. R.L. Whistler ja H.E. Conrad, J. Am. Chem. Soc., 76, 1673 (1954).
Claims (5)
1. Menetelmä yhdisteen valmistamiseksi, jolla on kaava (II) CX-OR2 okO—o \OR2 \r -] ^-12 ^ CX OR2 ! . , OR2 O I 2 n (II> <5l_X 3 OR2 0R Jn 2 3 jossa R on vety tai alempi alkanoyyli, R merkitsee samaa kuin ryhmä R tai se on alkyyliryhmä, ^oka edullisesti sisältää 1-6 hiiliatomia, jolloin ryhmä OR C-atomissa 1 molekyylin pelkistyvässä päässä on joko a- tai β-konfiguraa-tiossa, X on vety, deuterium tai tritium ja n on kokonaisluku 1-10, lähtien polygalakturonihaposta, joka hydrolysoidaan oligogalakturonihapon muodostamiseksi, tunnettu siitä, että a) saatu oligogalakturonihappo esteröidään sinänsä tunnetulla tavalla esterin muodostamiseksi, jolla on kaava (III) 4 COOR /\| f°°R4 (III) r:; °" \Öh )\ COOR4 0H \ / °\ NX OH \/v oh O-': L n V.-/ OH 24 79328 4 jossa on R on esteriryhmän alkoholiosa ja n merkitsee samaa kuin edellä, ja saatu kaavan (III) mukainen esteri pelkistetään edullisesti vesiliuoksessa, yhdisteen muodostamiseksi, jolla on kaava (IV): cx2oh )-0 (IV) p^oh L 0HIV/» OH jossa n ja X merkitsevät samaa kuin edellä, ja sen jälkeen kaavan (IV) mukainen yhdiste hydrolysoidaan kaavan (II) mu- 2 3 kaisen yhdisteen muodostamiseksi, jossa R ja R ovat vetyjä, tai kaavan (IV) mukainen yhdiste asylysoidaan kaavan 2 3 (II) mukaisen yhdisteen muodostamiseksi, jossa R ja R ovat alempia alkanoyylejä, ja sitten mikäli halutaan, hydrolysoidaan saatu yhdiste kaavan (II) mukaisen yhdisteen muo- 2 3 dostamiseksi, jossa R ja R ovat vetyjä, tai b) saatu oligogalakturonihappo esteröidään ja glykosidoidaan sinänsä tunnetulla tavalla yhdisteen muodostamiseksi, jolla on kaava (V): COOR η _S \ COOR (V) f OR _ CH n 25 7 9 3 2 8 jossa n merkitsee samaa kuin edellä ja R on alkyyliryhmä, joka edullisesti sisältää 1-6 hiiliatomia, ja saatu kaavan (V) mukainen yhdiste pelkistetään kaavan (II) mukaisen yhdisteen muodostamiseksi, ja sen jälkeen haluttaessa hydrolysoidaan 2 3 saatu kaavan (II) mukainen yhdiste, josa R on vety ja R on alkyyliryhmä, joka edullisesti sisältää 1-6 hiiliatomia 2 kaavan (II) mukaisen yhdisteen muodostamiseksi, jossa R ja 3 ... R ovat vetyjä ja n ja X merkitsevät samaa kuin edellä.
2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnet-t u siitä, että kaavan (III) mukaisen yhdisteen pelkistäminen suoritetaan natriumboorihydridin tai natriumsyanoboori-hydridin avulla vesiliuoksessa.
3. Patenttivaatimuksen 1 tai 2 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että kaavan (IV) mukaisen yhdisteen asylyy-si suoritetaan käyttäen etikkahappoanhydridiä yhdessä voimakkaan hapon kanssa, kuten rikkihapon kanssa.
4. Yhdiste, jolla on kaava (IV) : CX OH - 1 r o >— o “ vlA r.« OH °V^~0H L -i VL_Xoh jossa X on vety, deuterium tai tritium ja n on kokonaisluku i-lO.
5. Patenttivaatimuksen 4 mukainen yhdiste, tunnettu siitä, että n on 1 tai 2, edullisesti 1. 26 79328
Applications Claiming Priority (4)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SE8106279 | 1981-10-23 | ||
| SE8106279 | 1981-10-23 | ||
| SE8202144 | 1982-04-02 | ||
| SE8202144A SE8202144L (sv) | 1981-10-23 | 1982-04-02 | Nya foreningar for terapeutisk eller diagnostisk anvendning, forfarande och mellanprodukter for deras framstellning |
Publications (4)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| FI823555A0 FI823555A0 (fi) | 1982-10-18 |
| FI823555L FI823555L (fi) | 1983-04-24 |
| FI79328B FI79328B (fi) | 1989-08-31 |
| FI79328C true FI79328C (fi) | 1989-12-11 |
Family
ID=26657988
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| FI823555A FI79328C (fi) | 1981-10-23 | 1982-10-18 | Foerfarande foer framstaellning av oligogalaktosderivat och mellanprodukter anvaendbara vid deras framstaellning |
Country Status (7)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4521592A (fi) |
| EP (2) | EP0176118A3 (fi) |
| AU (2) | AU563787B2 (fi) |
| DE (1) | DE3278474D1 (fi) |
| DK (1) | DK453982A (fi) |
| FI (1) | FI79328C (fi) |
| NO (1) | NO155694C (fi) |
Families Citing this family (17)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE3328616A1 (de) * | 1983-08-08 | 1985-02-28 | Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim | Oligoglucosidderivate |
| AU582758B2 (en) * | 1984-06-28 | 1989-04-13 | Mect Corporation | Sialic acid derivatives, galactose derivatives and method for producing the same |
| GB2168700B (en) * | 1984-10-22 | 1988-08-24 | Nippon Shinyaku Co Ltd | Physiologically active substance and its manufacture |
| SE8406626D0 (sv) * | 1984-12-27 | 1984-12-27 | Bio Carb Ab | Forening och komposition for terapeutisk eller diagnostisk anvendning jemte anvendning av sadan forening och komposition for terapeutisk behandling och isolering av shigatoxin |
| US4745104A (en) * | 1985-04-15 | 1988-05-17 | The Regents Of The University Of California | Pseudopterosin and synthetic derivatives thereof |
| US4849410A (en) * | 1985-04-15 | 1989-07-18 | The Regents Of The University Of California | Pseudopterosin and synthetic derivatives thereof |
| GB2182926B (en) * | 1985-11-19 | 1989-10-04 | Erba Farmitalia | Nitro anthracyclines, process for their preparation and use thereof |
| DE3743908A1 (de) * | 1987-12-23 | 1989-07-06 | Boehringer Mannheim Gmbh | Neue oligoglucoside |
| DE3929355A1 (de) * | 1989-09-04 | 1991-03-07 | Boehringer Mannheim Gmbh | Verfahren zur spezifischen bestimmung von pankreas-(alpha)-amylase |
| JP2886249B2 (ja) * | 1990-03-14 | 1999-04-26 | 日本食品化工株式会社 | ガラクトシル―マルトオリゴ糖誘導体、その製造法およびα―アミラーゼ活性測定方法 |
| DE69118141T2 (de) * | 1990-06-27 | 1996-09-19 | Dainippon Ink & Chemicals | Alkyliertes oligosaccharid und acetylderivate davon |
| JPH09501044A (ja) * | 1993-05-14 | 1997-02-04 | ジ・アップジョン・カンパニー | ＵＤＰ−ＧＡＬＮＡｃ：ポリペプチド、Ｎ−アセチルガラクトサミニルトランスフェラーゼをコードするクローン化されたＤＮＡ |
| DE4330773A1 (de) * | 1993-09-10 | 1995-03-16 | Laevosan Gmbh & Co Kg | Blockierung der Anlagerung von Keimen an menschliche Zellen |
| US5668262A (en) * | 1995-05-22 | 1997-09-16 | Tan; Weitian | Method of tritium labeling oligonucleotides |
| US5910570A (en) * | 1995-11-13 | 1999-06-08 | Pharmacia & Upjohn Company | Cloned DNA encoding a UDP-GalNAc: polypeptide N-acetylgalactosaminy-ltransferase |
| US20020165168A1 (en) * | 1995-12-16 | 2002-11-07 | Joachim Bunger | Use of sugar derivatives as antimicrobial, antimycotic and/or antiviral active substances |
| JP2004509634A (ja) * | 2000-09-27 | 2004-04-02 | ダニスコ エイ／エス | 抗菌剤 |
Family Cites Families (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4147860A (en) * | 1976-07-13 | 1979-04-03 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | Process for preparing nitroaromatic glycosides |
| JPS5395917A (en) * | 1977-02-03 | 1978-08-22 | Tokyo Tanabe Co | Process for preparing nitrosourea derivative of glucopyranose |
| JPS54109960A (en) * | 1978-02-15 | 1979-08-29 | Takuma Sasaki | 1,3-beta-d-glucan derivative, its use and preparation |
| SE8001748L (sv) * | 1980-03-05 | 1981-09-06 | Kaellenius Gunilla | Kompositioner for terapeutisk eller diagnostisk anvendning jemte forfarande for terapeutik |
| IT1141931B (it) * | 1980-04-28 | 1986-10-08 | Grace Italiana Spa | Procedimento di degradazione controllata in suluzione concentrata di sciroppi liquidi di glucosio prodotto cosi' ottenuto e suo impiego come additivo per malte e calcestruzzi |
| US4359458A (en) * | 1981-09-28 | 1982-11-16 | American Cyanamid Company | O-β. -D (and O-α.. -D) Multigalactopyranosyl, xylopyranosyl and glucopyranosyl sulfate salts |
-
1982
- 1982-09-17 US US06/419,314 patent/US4521592A/en not_active Expired - Fee Related
- 1982-09-27 AU AU88731/82A patent/AU563787B2/en not_active Ceased
- 1982-09-28 EP EP85201277A patent/EP0176118A3/en not_active Withdrawn
- 1982-09-28 DE DE8282850190T patent/DE3278474D1/de not_active Expired
- 1982-09-28 EP EP82850190A patent/EP0080442B1/en not_active Expired
- 1982-10-13 DK DK453982A patent/DK453982A/da unknown
- 1982-10-18 FI FI823555A patent/FI79328C/fi not_active IP Right Cessation
- 1982-10-22 NO NO823520A patent/NO155694C/no unknown
-
1987
- 1987-10-20 AU AU79957/87A patent/AU7995787A/en not_active Abandoned
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| FI79328B (fi) | 1989-08-31 |
| NO155694C (no) | 1987-05-13 |
| EP0080442B1 (en) | 1988-05-11 |
| EP0176118A3 (en) | 1987-05-20 |
| EP0080442A3 (en) | 1983-09-07 |
| DE3278474D1 (en) | 1988-06-16 |
| DK453982A (da) | 1983-04-24 |
| AU563787B2 (en) | 1987-07-23 |
| FI823555A0 (fi) | 1982-10-18 |
| FI823555L (fi) | 1983-04-24 |
| AU7995787A (en) | 1988-02-04 |
| EP0080442A2 (en) | 1983-06-01 |
| AU8873182A (en) | 1983-04-28 |
| NO823520L (no) | 1983-04-25 |
| US4521592A (en) | 1985-06-04 |
| NO155694B (no) | 1987-02-02 |
| EP0176118A2 (en) | 1986-04-02 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| FI79328C (fi) | Foerfarande foer framstaellning av oligogalaktosderivat och mellanprodukter anvaendbara vid deras framstaellning | |
| Kitagawa et al. | Saponin and sapogenol. XXXV. Chemical constituents of astragali radix, the root of Astragalus membranaceus Bunge.(2). Astragalosides I, II and IV, acetylastragaloside I and isoastragalosides I and II | |
| ONO et al. | Resin Glycosides. V.: Identification and Characterization of the Component Organic and Glycosidic Acids of the Ether-Soluble Crude Resin Glycosides (" Jalapin") from Rhizoma Jalapae Braziliensis (Roots of Ipomoea Operculata) | |
| Apparu et al. | Stereoselective syntheses of O-and S-nitrophenyl glycosides. Part III. Syntheses in the α-D-galactopyranose and α-maltose series | |
| HIGUCHI et al. | Pericarp saponins of Akebia quinata Decne. II. Arjunolic and norarjunolic acids, and their glycosides | |
| Yoshikawa et al. | Studies on Kochiae fructus. II. On the saponin constituents from the fruit of Chinese Kochia scoparia (Chenopodiaceae): chemical structures of kochianosides I, II, III, and IV | |
| Saito et al. | Preparation of glycyrrhetic acid glycosides having various β (1→ 2)-linked disaccharides and their cytoprotective effects on carbon tetrachloride-induced hepatic injury | |
| NAGAO et al. | Studies on the constituents of Thladiantha dubia BUNGE. I.: The structures of dubiosides A, B and C, the quillaic acid glucuronide saponins isolated from the tuber | |
| SHAO et al. | Saponins from Leaves of Kalopanax pictus (THUNB.) NAKAI, Harigiri: Structures of Kalophanax-Saponins JLa and JLb | |
| Higuchi et al. | Biologically active glycosides from Asteroidea, XXXI. Glycosphingolipids from the starfish Asterias amurensis versicolor Sladen, 2. Structure and biological activity of ganglioside molecular species | |
| Miyamoto et al. | Constituents of Holothuroidea, II. Six newly identified biologically active triterpenoid glycoside sulfates from the sea cucumber Cucumaria echinata | |
| Jeanloz et al. | The degradation of hyaluronic acid by methanolysis | |
| MIZUTANI et al. | Nuclear Magnetic Resonance Study on Glycosyl Esters: Glycosyl Esters of 3-O-Acetyloleanolic Acid and Octanoic Acid | |
| Gigg et al. | The allyl group for protection in carbohydrate chemistry. 17. Synthesis of propyl O-(3, 6-di-O-methyl-β-D-glucopyranosyl)-(1→ 4)-O-(2, 3-di-O-methyl-α-L-rhamnopyranosyl)-(1→ 2)-3-O-methyl-α-L-rhamnopyranoside: the oligosaccharide portion of the major serologically active glycolipid from Mycobacterium leprae | |
| Kim et al. | Thermal degradation of glycosides, VII. Application of hydrothermolysis to the studies on the constituents of the Merck saponin | |
| Fujiwara et al. | Synthesis of 3, 6-di-O-methylglucosyl disaccharides with methyl 3-(p-hydroxyphenyl) propionate as a linker arm and their use in the serodiagnosis of leprosy | |
| Das et al. | Synthesis of the tetrasaccharide repeating unit of the antigen from Klebsiella type 83 | |
| US5837862A (en) | Sialyl Lewis X mimetics incorporating mannopeptides | |
| Abbas et al. | Acetal migration during glycosylations catalyzed by mercuric cyanide: Synthesis of p-nitrophenyl 6-O-β-d-galactopyranosyl-β-d-galactopyranoside | |
| Guo et al. | Structure elucidation and complete NMR spectral assignments of two new oleanane‐type pentacyclic triterpenoid saponins from the husks of Xanthoceras sorbifolia Bunge | |
| Hansson et al. | A disaccharide dibenzoate from Daviesia latifolia | |
| Lloyd et al. | Aminosaccharides: Part V. Koenigs-knorr reaction of the acetobromo derivatives of 2-deoxy-2-(2, 4-dinitroanilino)-d-glucopyranose and its monomethyl ethers | |
| Morishima et al. | Synthesis of glycyrrhizin analogues containing fluorinated β (1→ 2)-linked disaccharides | |
| Howarth et al. | Synthesis of 6-deoxy-3-C-methyl-2-O-methyl-D-allose | |
| NISHIDA et al. | Structure elucidation of glycosidic antibiotics glykenins from Basidiomycetes sp. III. Structure of glykenin IV |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM | Patent lapsed |
Owner name: CARBOHYDRATES INTERNATIONAL AB |