FI78180C - REAKTIONSKAERL FOER IMMUNOLOGISKA BESTAEMNINGAR. - Google Patents
REAKTIONSKAERL FOER IMMUNOLOGISKA BESTAEMNINGAR. Download PDFInfo
- Publication number
- FI78180C FI78180C FI843426A FI843426A FI78180C FI 78180 C FI78180 C FI 78180C FI 843426 A FI843426 A FI 843426A FI 843426 A FI843426 A FI 843426A FI 78180 C FI78180 C FI 78180C
- Authority
- FI
- Finland
- Prior art keywords
- vessel
- wall
- reaction vessel
- partitions
- antibody
- Prior art date
Links
Landscapes
- Automatic Analysis And Handling Materials Therefor (AREA)
Description
781 80781 80
Reaktioastia immunologisia määrityksiä varten Reaktionskärl för immunologiska bestämningarReaction vessel for immunological determinations Reaktionskärl för immunologiska bestämningar
Keksinnön kohteena on immunologisissa määrityksissä käytettävä putkimainen reaktioastia, jonka astian suljetun tai alapään sisäseinään on kiinnitetty vasta-aine, johon mitattava aine (antigeeni) ja merkkiaine (merkitty antigeeni) sitoutuvat.The invention relates to a tubular reaction vessel for use in immunological assays, to which an antibody to which the substance to be measured (antigen) and the tracer (labeled antigen) bind is attached to the inner wall of the closed or lower end of the vessel.
Ennestään tunnetaan reaktioastioita, jotka on tehty koeputkesta päällystämällä putken sisäseinä vasta-aineella. Tunnetaan myös systeemejä, joissa tavanomaiseen käsittelemättömään koeputkeen pudotetaan vasta-aineella päällystetty pallo tai muun muotoinen kappale, johon tutkittava aine ja merkkiaine sitoutuvat (US 4,320,087, 4,225,575).Reaction vessels made of a test tube by coating the inner wall of the tube with an antibody are already known. Systems are also known in which an antibody-coated sphere or other shaped body to which a test substance and label binds is dropped into a conventional untreated test tube (US 4,320,087, 4,225,575).
Edellä mainittujen reaktioastioiden epäkohtana on pitkä sitoutumisaika joka kuluu tutkittavan antigeenin ja merkkiaineen sitoutumiseen vasta-aineeseen tai koeputkessa olevaan, vasta-aineella päällystettyyn palloon tai muuhun kappaleeseen. Tämä johtuu siitä, että sitoutumisreaktion nopeuden määrää mitattavan aineen (antigeenin) ja merkkiaineen (merkityn antigeenin) diffuusio putkessa olevassa liuoksessa putken seinämille. Tavallisessa koeputkessa diffuusiomatkat ovat pitkät ja sitoutuminen hidasta. Molekyylin koon kasvaessa sen diffuusionopeus pienenee, joten esim. suurimolekyylis-ten proteiinihormoonien määritys on hidasta. Vasta-aineella päällystettyä palloa käytettäessä sitoutumis-nopeus ei merkittävästi lisäänny päällystettyyn putkeen verrattuna. Pallon tai muun kappaleen pudottaminen koeputkeen aiheuttaa määrityksen tekijälle yhden työvaiheen lisää. Samaa reaktioastiasysteemiä varten tarkoitettujen erillisten osien käsittely ja varastoin 2 781 80 ti on myös hankalaa, ja putkeen pudotettavan kappaleen vasta-aineella päällystetty pinta voi helposti vaurioitua mikä voi aiheuttaa epätarkkuuksia testituloksissa.The disadvantage of the above reaction vessels is the long binding time required for the binding of the test antigen and marker to the antibody or to the antibody-coated bead or other body in the test tube. This is because the rate of the binding reaction is determined by the diffusion of the substance to be measured (antigen) and the tracer (labeled antigen) in solution in the tube to the walls of the tube. In a standard test tube, diffusion distances are long and binding is slow. As the size of a molecule increases, its diffusion rate decreases, so that, for example, the determination of high molecular weight protein hormones is slow. When using an antibody-coated bead, the rate of binding does not significantly increase compared to the coated tube. Dropping a sphere or other object into a test tube causes the assay performer one more step. The handling and storage of separate parts for the same reaction vessel system at 2,781,80 ti is also cumbersome, and the antibody-coated surface of the body to be dropped into the tube can be easily damaged, which can cause inaccuracies in the test results.
Reaktioastioina käytetyt koeputket tai pallot ja muut kappaleet on valmistettu yleensä polystyreenistä tai polypropeenista. Vasta-aine on kiinnitetty näiden pintaan adsorboimalla tai usean vaiheen kautta kemiallisesti. Tämä kiinnitystäpä on mutkikas ja satojen tuhansien putkien päällystäminen yhtäläisiksi samassa tai useammassa erässä on erittäin vaikeaa.The test tubes or spheres and other bodies used as reaction vessels are generally made of polystyrene or polypropylene. The antibody is attached to their surface by adsorption or chemically through several steps. This type of fastening is complicated and it is very difficult to coat hundreds of thousands of tubes in equal parts in one or more batches.
Keksinnön mukaisella reaktioastiällä vältytään edellä mainituista epäkohdista ja sille on ominaista että sisäseinän pintaa reaktioastiän suljetussa päässä tai sen läheisyydessä on suurennettu yhdellä tai useammalla, astian pituusakselin kanssa yhdensuuntaisella pinnalla, jotka yhtenä kappaleena astian seinämän kanssa ulkonevat astian sisään sallien nesteen vapaan virtauksen putken sisällä.The reaction vessel according to the invention avoids the above-mentioned drawbacks and is characterized in that the surface of the inner wall at or near the closed end of the reaction vessel is enlarged by one or more surfaces parallel to the longitudinal axis of the vessel.
Keksinnön erään suoritusmuodon mukaan astia on poimutettu. Vaihtoehtoisesti on astia väliseinillä jaettu useaan osaan siten että neste pääsee vapaasti virtaamaan osasta toiseen. Keksinnön mukainen reaktioastia voi käsittää myös putken jonka sisällä on toinen, pohjasta ylöspäin suunnattu pienempisäteinen sama-akselinen putki.According to one embodiment of the invention, the container is corrugated. Alternatively, the vessel is divided into several parts by partitions so that the liquid can flow freely from one part to another. The reaction vessel according to the invention may also comprise a tube inside which there is another smaller radius coaxial tube directed upwards from the bottom.
Keksinnön mukaisesti on reaktioastian alempi tai suljettu osa varustettu ainakin yhdellä ja sopivasti enintään kahdeksalla poimulla, jotka mieluimmin on symmetrisesti sijoitettu putken kehää pitkin. Erään edullisen 3 78180 suoritusmuodon mukaan astia on varustettu 4-6:11a symmetrisesti sijoitetulla poimulla. Kukin poimu voi ulottua seinästä reaktioastian sisään matkan verran joka on noin 1/8 - jonkin verran alle puolen välillä, kuten 1/8 noin 5/12, edullisesti noin 1/5 -1/3 astian poikkileikkauksen sisähalkaisijasta diffuusiomatkojen pienentämiseksi riittävästi mutta edelleen nesteen vapaan virtauksen sallimiseksi astian sisällä. Poimujen pitkittäinen muoto taas edistää astian helppoa ja tarkkaa tyhjentämistä. Poimut kulkevat pituussuunnassa reaktio-astiaa pitkin matkan verran joka on riittävä ulottumaan astiassa olevan näytteen pinnan yläpuolelle. Tämä pituus vastaa esimerkiksi yleensä noin 1/4 - 1/2, erityisesti noin 1/3 astian pituudesta kun astia on mikrokoe-putken muotoinen.According to the invention, the lower or closed part of the reaction vessel is provided with at least one and suitably at most eight corrugations, which are preferably arranged symmetrically along the circumference of the tube. According to a preferred embodiment 3 78180, the container is provided with 4-6 symmetrically arranged corrugations. Each crimp may extend from the wall of the reaction vessel in a distance of about 1/8 - somewhat less than the half, such as 1/8 to about 5/12, preferably about 1/5 -1/3 of the container cross-section to reduce the inner diameter of the diffuusiomatkojen but still sufficient free liquid to allow flow inside the vessel. The longitudinal shape of the folds, on the other hand, facilitates easy and accurate emptying of the container. The corrugations run longitudinally along the reaction vessel for a distance sufficient to extend above the surface of the sample in the vessel. For example, this length generally corresponds to about 1/4 to 1/2, especially about 1/3 of the length of the vessel when the vessel is in the form of a microtest tube.
Erään toisen suoritusmuodon mukaan voi keksinnön mukainen reaktioastia olla varustettu väliseinillä jotka ulkonevat astian sisään ja jotka sallivat nesteen vapaan virtauksen astian eri osien välillä. Väliseinät voivat muodostaa esimerkiksi pääasiassa suoran kulman astian seinämään nähden tai ne voivat olla muodoltaan harjamaisia. Edellä poimutetun astian yhteydessä esitetty mitä tulee väliseinien tai harjojen lukumäärään, niiden pituuteen pitkittäisuunnassa sekä niiden ulkone-miseen astian sisään, pätee myös tämän suoritusmuodon yhteydessä.According to another embodiment, the reaction vessel according to the invention may be provided with partitions projecting inside the vessel and allowing the free flow of liquid between different parts of the vessel. For example, the partitions may form a substantially right angle to the wall of the container or may be brush-shaped. The above in connection with the corrugated container with respect to the number of partitions or ridges, their length in the longitudinal direction and their projection inside the container also applies in connection with this embodiment.
Erittäin edulliseksi reaktioastiaksi on osoittautunut koeputki, jonka alempi tai suljettu pää on varustettu viidellä symmetrisesti putken sisäseinään tehdyllä harjalla, jotka ulkonevat seinästä putken sisään matkan 4 78180 verran joka vastaa noin 1/3 putken poikkileikkauksen halkaisijasta.A very advantageous reaction vessel has proven to be a test tube with a lower or closed end provided with five brushes made symmetrically in the inner wall of the tube, projecting from the wall into the tube by a distance of 4,781,180 corresponding to about 1/3 of the cross-sectional diameter of the tube.
Keksinnön kolmannen suoritusmuodon mukaan reaktioastia käsittää kaksi erisäteistä sama-akselista putkea, jolloin sisempi putki ulkonee ulomman putken pohjasta ylöspäin rajoittaen näin putkien väliin rengasmaisen välitilan. Sisempi putki voidaan muodostaa puristamalla ulomman putken pohjaa ylöspäin aukkoa kohti. Vaihtoehtoisesti sisempi putki voidaan kiinnittää ulomman putken pohjan sisäpintaan. Rengasmaisen tilan leveys voi vaihdella, mutta on sopivasti noin 1/5 - 1/3 ulomman putken sisähalkaisijasta. Toinen tai molemmat sama-akseliset putket voivat myös olla varustetut rengasmaiseen tilaan ulkonevilla poimuilla tai harjoilla tai väliseinillä, edellä esitettyä vastaavasti. Tällöin sisempi ja ulompi putki on mieluimmin varustettu esim. samalla lukumäärällä keskenään lomittuvia poimuja (kuv. 4) .According to a third embodiment of the invention, the reaction vessel comprises two coaxial tubes of different radii, the inner tube projecting upwards from the bottom of the outer tube, thus limiting the annular space between the tubes. The inner tube can be formed by pressing the bottom of the outer tube upwards towards the opening. Alternatively, the inner tube may be attached to the inner surface of the bottom of the outer tube. The width of the annular space may vary, but is suitably about 1/5 to 1/3 of the inner diameter of the outer tube. One or both of the coaxial tubes may also be provided with corrugations or ridges or partitions projecting into the annular space, as described above. In this case, the inner and outer tubes are preferably provided, e.g., with the same number of interlocking corrugations (Fig. 4).
Keksinnön mukainen reaktioastia on mieluimmin valmistettu muovista tai muusta aineesta joka sisältää hydro-fiilisia funktionaalisia ryhmiä, kuten -COOH, -OH, -CHO, -NH2 jne. Sopivia reaktioastiassa käytettäviä muoveja ovat esim. polyakrylaatti-etyleeni-ko-polymeerit; polystyreenijohdannaiset, kuten polyamino-styreeni, polystyreeniakrylonitriili tai polyvinyyli-bentsyylikloridi; polyhydroksietyylimetakrylaatti, tris-akryyli-NH2·The reaction vessel of the invention is preferably made of a plastic or other material containing hydrophilic functional groups such as -COOH, -OH, -CHO, -NH 2, etc. Suitable plastics for use in the reaction vessel include, e.g., polyacrylate-ethylene copolymers; polystyrene derivatives such as polyaminostyrene, polystyrene acrylonitrile or polyvinyl benzyl chloride; polyhydroxyethyl methacrylate, tris-acrylic-NH2 ·
Kokeet ovat osoittaneet että keksinnön mukaisessa reaktioastiassa olevasta liuoksesta tutkittava aine 5 78180 (antigeeni) ja merkitty aine (merkitty antigeeni) sitoutuvat nopeasti astian seinämään kiinnitettyyn vasta-aineeseen. Keksinnön mukaisella reaktioastialla voidaan immunologinen määritys tehdä nopeasti ja virhemahdollisuus vähenee koska sitoutumisreaktio voidaan viedä lähes loppuun ennen liuoksen kaatamista astiasta ja seinämään sitoutuneen merkkiaineen määrän mittausta. Tästä on huomattava etu käyttäjälle kun yleensä joudutaan tekemään satoja määrityksiä päivässä.Experiments have shown that 5 78180 of the test substance (antigen) and the labeled substance (labeled antigen) from the solution in the reaction vessel of the invention rapidly bind to the antibody attached to the wall of the vessel. With the reaction vessel according to the invention, the immunological assay can be performed quickly and the possibility of error is reduced because the binding reaction can be almost completed before pouring the solution from the vessel and measuring the amount of tracer bound to the wall. This is a significant benefit to the user when you usually have to do hundreds of configurations a day.
Vasta-aineen kiinnittäminen keksinnön mukaiseen reak-tioastiaan tapahtuu yksinkertaisesti ja luotettavasti koska reaktioastian materiaali sisältää funktionaalisia ryhmiä.The attachment of the antibody to the reaction vessel of the invention is simple and reliable because the material of the reaction vessel contains functional groups.
Oheinen piirustus havainnollistaa keksinnön mukaista reaktioastiaa.The accompanying drawing illustrates a reaction vessel according to the invention.
Kuva 1 esittää alapäästä poimutetun reaktioastian pituus- ja poikkileikkausta.Figure 1 shows a longitudinal and cross-sectional view of a corrugated reaction vessel at the lower end.
Kuva 2 esittää pystyseinillä osastoihin jaetun reaktio-astian pituus- ja poikkileikkausta.Figure 2 shows a longitudinal and cross-sectional view of a reaction vessel divided into sections by vertical walls.
Kuva 3 esittää kahdesta erisäteisestä sama-akselisesta putkesta muodostetun reaktioastian pysty- ja poikkileikkausta.Figure 3 shows a vertical and cross-section of a reaction vessel formed of two coaxial tubes of different radii.
Kuva 4 esittää sellaisen reaktioastian poikkileikkausta jossa kuvan 3 mukainen sisä- ja ulkopukti on poimutettu.Figure 4 shows a cross-section of a reaction vessel in which the inner and outer racks of Figure 3 are corrugated.
6 781806,78180
Kuva 5 esittää tutkittavan aineen (antigeenin ) ja merkkiaineen (merkityn antigeenin) sitoutumisprosenttia ajan funktiona keksinnön mukaisella reaktioastialla mitattuna (kuvaaja A) ja tavallisella koeputkella mitattuna (kuvaaja B).Figure 5 shows the percent binding of test substance (antigen) and tracer (labeled antigen) as a function of time as measured in a reaction vessel according to the invention (Graph A) and as measured in a standard test tube (Graph B).
Kuvan 1 esittämällä tavalla on reaktioastian seinän pinta-alaa lisätty neljän poimun P avulla jotka ulottuvat vähän matkaa putkea pitkin. Tällä tavalla on putken neste-täyttöinen tila V saatu kapeammaksi. Tässä suoritusmuodossa on kahden vastakkain olevan poimun välinen välimatka jonkin verran yli puolet putken halkaisijasta. Samanlaiset ominaisuudet on kuvan 2 mukaisella reaktioastialla, jossa nestetila V on jaettu neljään osastoon väliseinillä tai harjoilla S, jotka ulkonevat putken sisään matkan verran, joka on noin kolmasosa halkaisijasta. Kuvan 3 mukaisesti nestetila V jää kahden sama-akselisen ja erisäteisen putken T^ ja T2 väliin. Kuvan 4 mukaisesti nestetila on kahden sama-akselisen putken välissä, kuten kuvassa 3, mutta ulko-putki X ja sisäputki Y on kumpikin poimutettu kuten kuvassa 1.As shown in Figure 1, the wall area of the reaction vessel has been increased by means of four corrugations P extending a short distance along the tube. In this way, the liquid-filled space V of the tube is made narrower. In this embodiment, the distance between two opposing corrugations is somewhat more than half the diameter of the pipe. The reaction vessel of Figure 2 has similar properties, in which the liquid space V is divided into four compartments by partitions or ridges S projecting into the tube by a distance of about one third of the diameter. According to Figure 3, the liquid space V is left between two coaxial and different radius tubes T1 and T2. As shown in Figure 4, the fluid space is between two coaxial tubes, as in Figure 3, but the outer tube X and the inner tube Y are each corrugated as in Figure 1.
Keksinnön mukaista reaktioastiaa käytetään seuraavalla tavalla. Näyte ja merkkiaine annostellaan reaktioastiaan. Tämän jälkeen näytteen antigeeni ja merkkiaineena toimiva merkitty antigeeni sitoutuvat reaktioastian seinällä olevaan vasta-aineeseen. Sitoutu-misreaktion edettyä tarpeeksi pitkälle kaadetaan liuos pois reaktioastiasta ja reaktioastian seinään tarttunut merkkiainemäärä mitataan. Merkkiainemäärä voidaan mitata myös reaktioastiasta poistetusta liuoksesta. Mit- 7 78180 tausmenetelmä riippuu käytetystä merkkiaineesta. Vasta-aineen kiinnittäminen reaktioastian seinään tapahtuu sitomalla vasta-aine kemiallisesti reaktioastian materiaalin sisältämien funktionaalisten ryhmien kanssa.The reaction vessel according to the invention is used in the following manner. The sample and tracer are dispensed into the reaction vessel. The sample antigen and the labeled antigen then bind to the antibody on the wall of the reaction vessel. After the binding reaction has progressed far enough, the solution is poured out of the reaction vessel and the amount of tracer adhering to the wall of the reaction vessel is measured. The amount of tracer can also be measured from the solution removed from the reaction vessel. The measurement method depends on the tracer used. Attachment of the antibody to the wall of the reaction vessel occurs by chemically binding the antibody to the functional groups contained in the material of the reaction vessel.
Tällä tavalla valmistettuna saadaan samanlaisia reak-tioastioita vaikka valmistuserät ovat suuria ja lisäksi ne säilyvät hyvin varastossa. Reaktioastian muodon ansiosta antigeenin ja merkkiaineen sitoutuminen reaktio-astian seinälle kiinnitettyyn vasta-aineeseen on nopeaa. Reaktioastian avulla voidaan määrittää kaikkia aineita ja aineyhdistelmiä, jotka ovat immunologisesti määritettävissä. Reaktioastian seinään kiinnitetty "vasta-aine" voi olla myös antigeeni.When prepared in this way, similar reaction vessels are obtained even though the batches are large and, in addition, they remain well in stock. Due to the shape of the reaction vessel, the binding of antigen and marker to the antibody attached to the wall of the reaction vessel is rapid. The reaction vessel can be used to determine all substances and combinations of substances that are immunologically detectable. The "antibody" attached to the wall of the reaction vessel may also be an antigen.
Claims (10)
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
FI843426A FI78180C (en) | 1983-09-08 | 1984-08-31 | REAKTIONSKAERL FOER IMMUNOLOGISKA BESTAEMNINGAR. |
Applications Claiming Priority (4)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
FI833207 | 1983-09-08 | ||
FI833207A FI833207A0 (en) | 1983-09-08 | 1983-09-08 | REAKTIONSKAERL FOER IMMUNOLOGISKA BESTAEMNINGAR |
FI843426 | 1984-08-31 | ||
FI843426A FI78180C (en) | 1983-09-08 | 1984-08-31 | REAKTIONSKAERL FOER IMMUNOLOGISKA BESTAEMNINGAR. |
Publications (4)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
FI843426A0 FI843426A0 (en) | 1984-08-31 |
FI843426A FI843426A (en) | 1985-03-09 |
FI78180B FI78180B (en) | 1989-02-28 |
FI78180C true FI78180C (en) | 1989-06-12 |
Family
ID=26157492
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
FI843426A FI78180C (en) | 1983-09-08 | 1984-08-31 | REAKTIONSKAERL FOER IMMUNOLOGISKA BESTAEMNINGAR. |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
FI (1) | FI78180C (en) |
-
1984
- 1984-08-31 FI FI843426A patent/FI78180C/en not_active IP Right Cessation
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
FI843426A0 (en) | 1984-08-31 |
FI843426A (en) | 1985-03-09 |
FI78180B (en) | 1989-02-28 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US5494830A (en) | Methods for performing determinations of immune reactants in biological fluids | |
FI102642B (en) | Plug for a reaction vessel or equivalent | |
US3932141A (en) | Apparatus for determining immunoassays of antigens and their antibodies | |
FI117577B (en) | A solid phase assay comprising at least one washing step | |
US4320087A (en) | Laboratory assay device | |
AU642884B2 (en) | Modular fluid sample preparation assembly | |
EP0267317B1 (en) | Method for the detection of proteins and viruses | |
EP0468672A1 (en) | Urine testing module with cytology cup | |
US4066414A (en) | One piece tube and microscope slide manipulative laboratory device | |
NZ199264A (en) | Autonomous simultaneous analysis apparatus | |
CA2031001A1 (en) | Reaction vessel | |
NL183606C (en) | MEASURING DEVICE FOR DETERMINING THE QUANTITY OF LIQUID FLOWED THROUGH A TUBE. | |
US4981144A (en) | Urine separation and collection device | |
GB2117917A (en) | Apparatus for microscopic examination of a specimen | |
CA2024103A1 (en) | Removal of an antigenic substance from a fluid | |
FI78180C (en) | REAKTIONSKAERL FOER IMMUNOLOGISKA BESTAEMNINGAR. | |
US4877585A (en) | Dilution pipette device | |
EP0245994A2 (en) | Method and apparatus for reaction | |
JPS60155972A (en) | Reactor for immunity test | |
US4043762A (en) | Coupling means for test tubes and the like | |
US20170000099A1 (en) | Device and method of use for measuring fish | |
AU609301B2 (en) | Process for the determination of an immunologically detectable substance and a suitable reaction vessel therefor | |
US4745073A (en) | Manual immunoassays and apparatus therefor | |
JPS6363862B2 (en) | ||
JPWO2016031899A1 (en) | Nozzle cap for specimen test container, specimen test container and specimen test kit using the same |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MM | Patent lapsed |
Owner name: FARMOS-YHTYMAE OY |