FI65082B - Foerfarande foer framstaellning av nya antibiotiskt aktiva foereningar - Google Patents
Foerfarande foer framstaellning av nya antibiotiskt aktiva foereningar Download PDFInfo
- Publication number
- FI65082B FI65082B FI791733A FI791733A FI65082B FI 65082 B FI65082 B FI 65082B FI 791733 A FI791733 A FI 791733A FI 791733 A FI791733 A FI 791733A FI 65082 B FI65082 B FI 65082B
- Authority
- FI
- Finland
- Prior art keywords
- see
- log
- spectrum
- acetonitrile
- amino acid
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P21/00—Preparation of peptides or proteins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23K—FODDER
- A23K20/00—Accessory food factors for animal feeding-stuffs
- A23K20/10—Organic substances
- A23K20/195—Antibiotics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/04—Antibacterial agents
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
- C12N1/205—Bacterial isolates
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P1/00—Preparation of compounds or compositions, not provided for in groups C12P3/00 - C12P39/00, by using microorganisms or enzymes
- C12P1/06—Preparation of compounds or compositions, not provided for in groups C12P3/00 - C12P39/00, by using microorganisms or enzymes by using actinomycetales
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
- C12R2001/29—Micromonospora
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Zoology (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Mycology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Animal Husbandry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Oncology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Virology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Compounds Of Unknown Constitution (AREA)
- Fodder In General (AREA)
Description
ΓβΊ /^v^UULUTUSJULKAISU /rnoo lBJ 11) utlAggnIngsskrift obUÖ^! c (45) Γ?-ί:·:-··*.ι r : :3 :::i (51) Kv.ik.^/int.ci 3 C 12 P 1/06 // C 12 H 1/29 SUOMI—FI N LAN D (21) P»t#nttiKik*mu* — P»t*nt*n»öknln| 791733 (22) H»kuml*pllvt — Arw5knlnpd*g 30.09-79 (23) Alkuptlvt—GHtl(hutsdag 30.05.79 (41) Tullut {ulklMkil — Blivit offuntllg 09.12.79 j* rekl*t*rlh»llltu* ^ Nlhtlvikiiptnon J» kuuLJulkil*in pvm.— TOMit· och regicterst/rvlMn ' AnrtkM uttajd och utl.*krtfMn puMfcurad 30.11.Ö3 (32)(33)(31) Pyyd·»/ «uolkuu* —Buglrd prtorttvt 08.06.78
Sveitsi-Schweiz(CH) 6282/78 (71) Sandoz A.G., Basel, Sveitsi-Schweiz(CH) (72) Camilla Keller-Juslen, Basel, Max Kuhn, Basel, Hamilton DeLisle King, Basel, Sveitsi-Schveiz(CH) (7^) Oy Kolster Ab (54) Menetelmä uusien, antibioottisesta aktiivisten yhdisteiden valmistamiseksi - Förfarande för framställning av nya, antibiotiskt aktiva föreningar
Keksintö koskee menetelmää uusien, antibiottisesti aktiivisten yhdisteiden S 54832/A-I, S 54832/A-II, S 54832/A-III ja S 54832/A-IV valmistamiseksi.
Keksinnön mukaisesti yhdisteitä S 54832/A-I, S 54832/A-II, S 5^832/A-III ja/tai S 54832/A-IV saadaan viljelemällä tavanomaisella tavalla viljelyväliaineen läsnäollessa yhdisteitä S 54832/ A-I, S 54832/A-II, S 5^832/A-III ja/tai S 54832/A-IV tuottavaa kantaa Micromonospora globosa NRRL 11299 (ATCC 31465).
Yhdisteillä S 54832/A-I, S 54832/A-II, S 54832/A-III ja S 54832/A-IV on seuraavat ominaisuudet: S 3^832/A-i
Vaaleankeltainen amorfinen jauhe Sp. >310°C
= + 118,7° (c = 1,140, pyridiini)
Analyysi, saatu: C 50,2 H 4,2 N 13sl 0 21,7 S 11,3 % UV-spektri asetonitriilissä, katso kuvio 1.
2 65082 2maks 219 nm logi'= χ’86 287 nm log£’ = 1,41 3 64 nm log 6' = 1,13 IR-spektri KBr:ssä, katso kuvio 2.
^H-NMR-spektri DMS0:ssa, 90 MHz, sisäisenä standardina tetrametyylisilaani, katso kuvio 3.
"^C-NMR-spektri DMSO:ssawBruker HX-90E-spektrometrillä 22,63 MHz:llä (sisäinen standardi TMS = 0 ppm), katso taulukko I sivulla 3.
v n 3 65082
Taulukko I
S SM 8 3 2/A-1:n 13C-NMR-spektri 100 mg 1,2 ml:ssa DMS0:ta + TMS:ää_ 171.18 112,23 168.25 111,06 167,73 103,78 167,21 9 S,5 3 167,02 79,67 165 ,,07 74,93 163.77 73,56 160.91 69,40 160,07 67,39 159,94 65,25 159,42 63,10 158,31 62,52 153,89 57,45 150.97 55,95 149,67 49,52 149,41 25,80 148,56 17,80 147.39 13,58 142,65 134.91 134.39 129.78 129,20 128,16 127.25 126,47 125,36 124.19 123,09 119.97 119,38 “ 65082
Liukoisuus: S 54832/A-I liukenee hyvin dimetyyliformamidiin, pyridiniin, asetonitriiliin, dioksaaniin, dimetyylisulfoksi-diin, liukenee kohtalaisen hyvin kloroformiin ja huonosti metano-liin, ja etanoliin, ja on liukenematon veteen ja heksaaniin. Aminohappoanalyysi
Aminohappoanalyysissä löydettiin identifioimattomien aminohappojen lisäksi aminohappo, jolla oli sama retentioaika kuin treoniinilla.
Titrimetrinen pK- ja ekvivalenttimääritys 6,403 mg S 54832/A-I:ä liuotettiin 2 ml:aan metyylisello-solv-vesiseosta (84:16) ja tiirattiin 0,1-n tetrametyyliammonium-hydroksidin vesiliuoksella. ρΚχ = 7,65 pK2 (it 10,6 9
Ekvivalenttipaino: 1521 S 54832/A-II
Vaaleankeltainen amorfinen jauhe Sp. > 310°C
Analyysi, 1. saatu: C 48,5 H 3,8 N 12,4 % 2. saatu: C 50,3 H 4,3 N 12,4 0 21,7 S 12,0 % UV-spektri asetonitriilissä, katso kuvio 4.
*maks 218 nm log f = 1>90 293 nm log £ 1 = 1,40 362 nm log = 1,16 IR-spektri KBr:ssä, katso kuvio 5.
1H-NMR-spektri DHS0:ssa, 90 MHz, sisäisenä standardina tetrametyylisilaani, katso kuvio 6.
Liukoisuus: S 54832/A-II liukenee hyvin dimetyyliformamidiin, asetonitriiliin, dioksaaniin, pyridiiniin, dimetyylisulfok-sidiin, kohtalaisen hyvin kloroformiin, niukasti metanoliin ja etanoliin, ja on liukenematon veteen ja heksaaniin. Aminohappoanalyysi:
Aminohappoanalyysissä löydettiin identifioimattomien aminohappojen lisäksi aminohappo, jolla oli sama retentioaika kuin treoniinilla.
S 54832/A-III
Vaaleankeltainen amorfinen jauhe Sp. > 310°C
li 65082 5
Analyysi: saatu: C 48,1 H 4,1 N 12,3 % UV-spektri asetonitriilissä, katso kuvio 7.
Amaks 218 nm l08f = ^86 292 nm log £’ = 1,36 362 nm log £' = 1,14 IR-spektri KBr:ssä, katso kuvio 8.
Liukoisuus: S 54832/A-III liukenee hyvin dimetyylisulfoksi-diin, dimetyyliformamidiin, asetonitriiliin, dioksaaniin, pyridii-niin, kohtalaisen hyvin kloroformiin, niukasti metanoliin ja etanoliin, ja on liukenematon veteen ja heksaaniin.
Aminohappoanalyys i:
Aminohappoanalyysissä löydettiin identifioimattomien aminohappojen lisäksi aminohappoa, jolla oli sama retentioaika kuin treoniinilla.
S 54832/A-IV
Vaaleankeltainen amorfinen jauhe
Sp. >310°C
+ 153,2° (c = 0,7 52 , pyridiini)
Analyysi, saatu: C 49,0 H 4,0 N 12,7 0 21,8 S 11,6 % UV-spektri asetonitriilissä, katso kuvio 9.
Amaks 218 nm 1o« V ^88 292 nm log ζ ' = 1,41 360 nm log £' = 1,15 IR-spektri KBr:ssä, katso kuvio 10.
'"H-NMR-spektri DMS0:ssa, 90 MHz, sisäisenä standardina tetrametyylisilaani, katso kuvio 11.
^3C-NMR-spektri DMS0 : ssa ,lBruker HX-90E-spektrometrillä 22,63 MHz:llä (sisäinen standardi TMS = 0 ppm), katso taulukko II sivulla 6.
6 5 O 8 2
Taulukko II
S 5*4 8 3 2/A-IV : n ^C-NMR- spektri 10 Ci mg 1,2 ml: ssa DMS0:ta + TMS : ää_ 17 4,9 5 96 , 57 172,22 80,65 169.36 75,90 168,84 74,60 168,38 70,51 168.06 68,43 164.81 66,28 161,95 65,80 161.17 64,80 160,46 64,14 154,87 61,93 151.68 58,55 151.36 57,06 150,45 50,88 149,54 49,39 148.50 46,53 143.82 26,84 136.02 19,10 135.69 14,55 131.02 130.30 129,20 128,61 127.51 126,40 125.30 124,13 121.07 I. L 9 *4 i.
lij , 34 112.17 7 65082
Liukoisuus: S 54832/A-IV liukenee hyvin dimetyyliformami-diin, pyridiiniin, asetonitriiliin, dioksaaniin, dimetyy1isulfok-sidiin, kohtalaisen hyvin kloroformiin, niukasti metanoliin ja etanoliin, ja on liukenematon veteen ja heksaaniin.
Aminohappoanalyys i:
Aminohappoanalyysissä löydettiin identifioimattomien aminohappojen lisäksi kaksi aminohappoa, joilla oli samat retentioajat kuin treoniinilla ja alaniinilla.
Titrimetrinen pK- ja ekvivalenttimääritys 6,406 mg S 54832/A-IV:ää liuotettiin 2 ml:aan metyylisello-solv-vesiseosta (84:16) ja titrattiin 0,1-n tetrametyyliammonium-hydroksidin vesiliuoksella.
pK;L = 7,31 pK2 ^10,70
Ekvivalenttipaino: 1554
Seuraavassa taulukossa on yhdisteiden S 54832/A-I, S 54832/A-II, S 54832/A-III ja S 54832/A-IV ohutkerroskromatogram-mit (silikageeli Merck 60-levyt, kerroksen paksuus 0,25 mm, kul-keutumismatka 14,7 cm).
Af-arvot (vertailuaineena nosiheptidi)_
Liuotin_A-I A-II A-III A-IV Nosiheptidi
Metyleenikloridi-metanoli-vesi 0,40 0,28 0,32 0,27 0,32 (88 : 11 : 1)
Metyleenikloridi-metanoli-vesi 0,54 0,44 0,49 0,44 0,49 (80 : 17,5 : 2)
Nosiheptidillä on samat R^-arvot kuin S 54832/A-III:11a. Sen analyysiarvot ja UV- ja IR-spektrit ovat kuitenkin erilaiset kuin S 54832/A-III:11a.
Ilmaisemisreagenssina voidaan käyttää jodia. Sumutettaes-sa 0,2-%:ista Ce(SO^)^-liuosta 50-%:isessa rikkihapossa ja kuumentamalla 130°C:ssa saadaan kaikilla neljällä yhdisteellä harmaanruskea väri. Kaikilla yhdisteillä S 54832/A-I - A-IV on aaltopituudella 366 nm näkyvä tyypillinen keltainen fluoresenssiväri, ja yhdisteet voidaan havaita ohutkerroskromatogrammissa ilman sumu-tusreagenssia.
Keksinnön mukaisessa menetelmässä sinänsä tunnetulla tavalla viljeltävän 3 5 ^ 8 32/A-l: t ä , 3 ';>4832/Α-ΙΙ: ta , S 5^832/A-Il I: a ja 3 U832/A-1V: ää tuottavan kannan näyte on talletettu 26.
8 65082 huhtikuuta 1978 laitokseen United States Department of Agriculture (Northern Utilization Research and Development Division, Peoria, III., USA, mistä se on yleisesti saatavana merkinnällä NRRL 11299. Toinen näyte talletettiin 8. joulukuuta 1978 laitokseen American Type Culture Collection (ATCC), Rockville, Maryland, USA, josta sitä on saatavana merkinnällä ATCC 31465. Tätä viljelmää on saatavana myös Sandoz AG:Itä, Basel, Sveitsi.
Kannan NRRL 11299_(ATCC 31465) ominaisuudet
Uusi, keksinnön mukaisesti käytettävä kanta NRRL 11299 ( ATCC 31465 ) eristettiin 1976 Cullera'sta, Espanjasta erään riisipellon tuoreesta maanäytteestä. Tämä kanta kuuluu teoksen Bergey's Manual, 8. painos, s, 846 mukaan sukuun Micromonospora ja on myös Bergey's Manual'in sivuilla 847-848 esitetyn Micromonospora globosa-lajin kuvauksen mukainen. Sillä oli seuraa-vat tunnusmerkit:
Viljelmä ei muodosta ilmahuovastoa ja se kasvaa substraatti-tai vegetatiivisena huovastomassana yksittäisinä, korkeina oranssinvärisinä pesäkkeinä, joilla on epäsäännöllinen muoto. Sienirihmat, joiden läpimitta on 0,5 - 0,7 ^um, ovat suoria tai jonkin verran aaltomaisia, ja niissä on sekä sivu- että pääteiti-öitä. Sivuitiöt ovat usein yksittäisinä, niitä on kuitenkin myös kaksinkertaisina toistensa päälle järjestyneinä, jolloin alemmat niistä ovat suurempia. Joskus itiönkantajän päässä on myös samanaikaisesti kaksi itiötä. Itiöt ovat ellipsinmuotoisesta soikeaan tai pyöreitä, ja niiden läpimitta on 1,0-1,3 yum. Useimmilla agarväliaineilla vegetatiiviset sienirihmat ovat väriltään keskinkertaisen kellertävänruusunpunaisia tai vaaleanfiprikoosinväri-siä ja pehmeitä, ja niillä on taipumus pilkkoutua, vaikkei kuitenkaan siinä määrin kuin Nocardia-lajilla. Joillakin elatusalustoilla havaitaan säännöttömiä paisuneita, sipulimaisia rakenteita, jotka voivat saavuttaa 2-3 kertaisesti itiöiden koon, joista rakenteista oletetaan, että ne ovat sellaisia epätavallisia muotoja, joita tavataan muissa Actinomycetes-lajeissa. Sakkaroosiväliaineella li 9 65082 itiöt esiintyvät rypälemäisinä kimppuina, kun sen sijaan kaikilla muilla väliaineilla itiöt ovat joko yksittäisinä tai kaksinkertaisina ja suhteellisen pitkissä itiönkantajissa (2-3 yUm).
Kanta NRRL 11299 ( ATCC 31465) kasvaa vain heikosti synteettisillä väliaineilla, se hajoittaa kuitenkin kolmeakokeilluista sokereista ja kasvaa erittäin hyvin väliaineilla, jotka sisältävät kompleksisia proteiinipitoisia aineita.
Kannan NRRL 11299 ( ATCC 31465) kasvuominaisuudet ja hiili- assimilaatio normaaleilla biologisilla väliaineilla on esitetty seuraavassa taulukossa:
Kasvuominaisuudet
Vil j elyväliaine_V il j elyominaisuudet_Huovastomuoto - LM
Mallas-hiivauute- W: hyvä, oranssi £ agar R: oranssi (R3ea) LM: ei ole LP: ei ole
Kaurajauho-agar W: keskinkertainen, oranssi £ R: vaaleanorassi (R3ea) LM: ei ole LP: ei ole Tärkkelys-epäorgaani- W: heikko, vaaleanoranssi set-suolat-agar R: beige (R3ea)* LM: ei ole LP: ei ole
Glyseroli-asparagiini- W: heikko, vaaleanoranssi agar R: beige (R3ea)* LM: ei ole LP: ei ole W. kasvu ^Viitataan teokseen "Color-wheels R: alapuoli System" (Tresner and Bachus, 1963) LM: ilmahuovasto LP: liukoinen pigmentti 10 65082
Hiiliyhdisteiden assimilaatio
Kasvu__Hiililähde_ + D-sellobioosi, selluloosa, D-sakkaroosi D- ja L-arabinoosi, dekstriini, dulsitoli, D-fruktoosi, D-glukoosi, D-galaktoosi, glyseroli, m-inositoli, inuliini, ϋ-laktoosi, D-maltoosi, D-mannitoli, D-mannoosi, D-mellibioosi, D-meletsitoosi, D-raffinoosi, D-riboosi, L-ramnoosi, D-salisiini, D-sorbitoli, D-ksyloosi, tärkkelys +: käyttää heikosti hyväksi hiiltä ei käytä hyväksi hiiltä
Uudella kannalla NRRL 11299 ( ATCC 31465)on seuraavat fysiologi set ominaisuudet:
Nitnaattipelkistys negatiivinen Tärkkelyshydrolyysi positiivinen (heikosti)
Selluloosan pilkkominen positiivinen (heikosti)
Tyrosiinireaktio negatiivinen (vaaleanpunainen liukoinen pigmentti)
Maidon koaguloiminen positiivinen
Maidon peptonisoiminen positiivinen (hitaasti)
Gelatiinin nesteyttäminen negatiivinen
Melaniinimuodostus negatiivinen (kasvaa väliaineella)
Uutta kantaa NRRL 11299 ( ATCC 31465) voidaan kasvattaa erilaisilla tavallisia ravinteita sisältävillä elatusalustoilla, esim. sellaisilla, joita on kuvattu jäljempänä olevissa esimerkeissä.
Kannan NRRL 11299 ( ATCC 31465)viljely voidaan suorittaa aerobisena pintaviljelynä tai pinnanalaisena viljelynä.
Kun viljelyssä on saatu maksimimäärä uusia yhdisteitä S 54832/A-I, S 54832/A-II, S 54832/A-III ja/tai S 54832/A-IV, mikä voidaan osoittaa esim. määrittämällä aktiivisuus Staphylococcus aureus-bakteeria vastaan, niin huovasto erotetaan viljelyliemestä ja uutetaan. Viljelysuodoksessa olevat yhdisteet voidaan uuttaa veden kanssa sekoittumattomalla orgaanisella liuottimena, kuten 'ulin. e i.yy J. i a:; etua I il .1 a , bu tyy 1 i ase1 aa l. i 1 1 a tai n-bu tanol IJ la. luinen.i muhdo I J iS^utona on homogenoidu v i L j elyi iemen huovu:; Lo-osu uniin, ui trat urrax-lait tee.Lla ja uuttaa yhdisteet edellä mainituilla liuottimilla.
I; il 6 5082
Edullisessa suoritusmuodossa liemi lingotaan ja/tai suodatetaan, jolloin huovasto saadaan erotettua viljelyliemestä.
Huovasto homogenoidaan ja uutetaan sitten yhdessä metanolin tai asetonin kanssa Turrax^Laitteessa, soluaines erotetaan linkoamalla ja orgaaniseen faasiin lisätään vettä ja liuos väkevöidään.
Tämän jälkeen uutetaan veden kanssa sekoittumattomalla orgaanisella liuottimena, kuten esim. n-butanolilla tai etyyliasetaatilla, ja uutteet haihdutetaan alhaisessa lämpötilassa, edullisesti 40-50°C:ssa tyhjössä. Vilj elysuodoksessa olevat aktiiviset yhdisteet voidaan uuttaa edellä mainituilla liuottimilla. Näin saaduista raakauutteista voidaan yhdisteet S 54832/A-I, S 54832/A-II, S 54832/A-III ja S 54832/A-IV eristää ja puhdistaa sinänsä tunnetuin kromatograafisin menetelmin. Edullisimmaksi on osoittautunut suorittaa ensimmäisenä toimenpiteenä saostus raakauutteesta petrolieetterillä, jolloin saadaan erotetuksi lipofiiliset sivuaineet.
Saostetusta tuotteesta voidaan sitten saada, ensin geelisuo-dattamalla Sephadex Ll^gYllä ja sitten suorittamalla useampikertainen kromatografointi silikageelillä/ puhtaat yhdisteet S 54832/A-I - A-IV. Yhdisteet saadaan vaaleankeltaisina amorfisina jauheina, joilla 15 tunnin kuivatuksen jälkeen suurtyhjössä 20°C:ssa on sp. ·>310°0(hajoaa).
Keksinnön mukaisessa menetelmässä Micromonospora globosa-kantaa viljelemällä syntyneet yhdisteet S 54832/A-I, S 54832/A-II, S 54832/A-III ja S 54832/A-IV sopivat käytettäviksi lääkkeinä.
Yhdisteillä S 54832/A-l, S 54832/A-II, S 54832/A-III ja S 54832/A-IV on estovaikutusta mikro-organismeja vastaan, kuten gram-positiivisia bakteereja, mykoplasmoja ja Neisseria-kantoja vastaan, sensijaan niillä ei ole aktiviteettia hiivoja ja seiniä vastaan.
Gram-positiivisia bakteereja vastaan niiden erittäin laaja aktiviteetti käsittää myös patogeeniset bakteerit, kuten stafylokokit, streptokokit, korynebakteerit ja mykobakteerit. Seuraavassa taulukossa on esitetty yhdisteiden S 54832/A-I - A-IV minimiestovä-kevyydet (MIC-arvot) joidenkin mikro-organismien suhteen. MIC-arvot määritettiin tunnetulla tavalla käyttäen laimennussurjoja. Määritys suoritettiin irikubo ima 11 a t ryp t i kaas i-so i ja 1 i emeissä 37°C : suu 24 tuntia. Ympätty määrä: 10J mikro-organismia/ml.
12 65082 _ :
Organismi MIC /ug/ml - S 54832
/A-I /A-II /A-III /A-IV
Staphylococcus aureus , 0,03 40,01 0,01 -40,01
Staphylococcus aureus, penisilliini- 0,03 0,03 resistentti
Staphylococcus aureus,tetrasykliini- 40,01 -40,01 0,01 0,03 resistentti n
Staphylococcus aureus,rifanp/simiresis - tentti
Staphylococcus aureus 6538P 0,03 ,3
Staphylococcus aureus 40,01 40,01
Streptococcus aronson 0,03 0,08 0,03 0,03
Streptococcus faecalis 0,1 0,15 0,15 0,1
Streptococcus faecalis 0,03 0,03 0,15 0,1
Streptococcus pyogenes 0,1 1
Streptococcus faecalis 0,03 0,3
Streptococcus haanolyticus 0,1 1
Diplococcus pneumoniae 0,1 1
Corynebacterium equi 0,03 1
Sareina lutea, erytrctrysilniresistenttj. 40,01 40,01
Bacillus subtilis 40,01 1
Clostridium sphenoides 0,3 0,3
Clostridium pasteurdanum 40,01 0,03
Mycobacterium thamnophesos 40,01 0,1
Mycobacterium smegmatis 40,01 0,1
Mycoplasma laidlawii 0,03 0,03
Neisseria catbaralis 0,1 0,3
Neisseria pharyngis 40,01 40,01 0,15 0,03
Yhdisteiden S 54832/A-I - A-IV estovaikutus in vivo stafylokokkeja ja streptokokkeja vastaan määritettiin hiirillä annoksilla noin 0,2 - 50 mg/kg.
13 65082
Uusia yhdisteitä S 54832/A-I, S 54832/A-II, S 54832/A-III ja S 54832/A-IV voidaan käyttää lääkkeinä yksinään puhtaassa muodossa tai saatettuina paikalliseen, enteraaliin tai parenteraaliin lääkeantoon sopivaan lääkeaineen annostelumuotoon.
Seuraavissa keksinnön mukaista menetelmää kuvaavissa suo-ritusesimerkeissä kaikki lämpötilatiedot ovat Celsius-asteina.
Esimerkki 1: Kannan NRRL 11299 ( ATCC)31465 viljely ravistusvilje- lynä a) Agar-lähtöviljelmä
Kannan NRRL 11299 ( ATCC 31465)lähtöaineena käytetty agar-viljelmä saadaan ymppäämällä sinänsä tunnetulla tavalla alunperin eristetyistä kannoista NRRL 11299 ( ATCC 31465)valmistettua itiösuspensiota viljelyväliaineeseen (I), jolla on seuraava koostumus: g/ljtra
Glukoosi 10>0
Liukoinen tärkkelys 20,0 N-Z-amiini tyyppi A (kaseiinihydrolysaatti) 5,0
CaC03 1,0
Hiivauute 5,0
Agar (Bacto) 15,0
Tislattu vesi 1 litraksi
Viljelyväliaineen pH säädetään ennen sterilointia Na0H:lla 7,0:ksi ja se on steriloinnin jälkeen (20 min 120¾ssa) 6,8-7,0.
b) Itiösuspensio
Hyvin kasvaneeseen kannan NRRL 11299 ( ATCC 31465)agar- lähtövil jelmään lisätään 5 ml 0,9-%:ista keittosuolaliuosta, jolloin saadaan väkevä itiösuspensio.
c) Esiviljelmä ja väliviljelmä Tätä itiösuspensiota käytetään 5 ml 200 ml:n erlenmeyer-pullossa olevan esiviljelyväliaineen (II) (50 ml) ymppäämiseen, jolla viljelyväliaineella on seuraava koostumus: w 65082 g/litra
Dekstriini 10,0
Glukoosi 10,0
Peptoni 5,0
Hiivauute 5,0
CaC03 1,0
Tislattu vesi 1 litraksi pH säädetään NaOH:lla 7,2:ksi. Esiviljelyväliaine steriloidaan kuumentamalla autoklaavissa 120¾ssa 20 min, minkä jälkeen pH on 7,0-7,2.
Ympättyä esiviljelmää inkuboidaan aerobisesti 4 vrk 27°C:ssa kiertoravistimessa (100 kierr./min), ja saatua viljelmää käytetään väliviljelmän ymppäämiseen lisäämällä 5 ml esiviljelmää 500 ml:n erlenmeyer-pullossa olevaan 100 ml:aan seuraavaa väliainetta (III): g/litra
Lihauute 3,0
Tryptoni 5,0
Glukoosi 1,0
Liukoinen tärkkelys 24,0
Hiivauute 5,0
CaC03 2,0
Tislattu vesi 1 litraksi pH säädetään Na0H:lla 7,2:ksi, ja väliaine steriloidaan autoklaavissa 120°Gssa 20 min, minkä jälkeen pH on 7,0-7,2.
Päävilj elmä Väliviljelmää inkuboidaan aerobisesti 3 vrk 27^333 kiertoravistimessa (220 kierr./min) ja käytetään sitten suoraan pää-yiljelmän ymppinä lisäämällä 5 ml väliviljelmää 500 ml:n erlenmeyer-pullossa olevaan 100 ml:aan seuraavaa väliainetta (IV): g/litra
Liukoinen tärkkelys 20,0
Hiivauute 10,0
Glukoosi 10,0
Kaseiinihydrolysaatti 5,0
CaCl2.2H20 4,0 K o to 1 1.1.1 (11) k Lor 1 d i 0,00013
Tislattu vesi 1 litraksi is 65 082 pH säädetään NaOH:lla 7,2:ksi, ja väliaine steriloidaan autoklaavissa 12 0%: ssa 20 min, minkä jälkeen pH on 6,8-7,0. Ympättyä pääviljelmää inkuboidaan 27°Cssa kiertoravistimessa (220 kierr./min) 5 vrk.
Esimerkki 2: Kannan NRRL 11299 ( ATCC 314 6 5) vil j ely fermentorissa
Esiviljelmän ymppäämiseen käytetty itiö- ja huovastosus-pensio saadaan viljelemällä alunperin eristettyä kantaa NRRL 11299 ( ATCC 31465 ) 21 vrk 27¾ ssa seuraavalla agarväliaineella: g/litra
Liukoinen tärkkelys 20
Agar 15
Glukoosi 10
Hiivauute S
N-Z-amiini tyyppi A 5
CaC03 1
Deionoitu vesi 1 litraksi Tämän viljelmän itiöt ja huovasto lietetään fysiologiseen keittosuolaliuokseen.
Saatua suspensiota käytetään 50 ml kunkin 2 litran erlenmeyer-pullossa olevan 1 litran viljelyväliaine erän ymppäämiseen, jolla on seuraava koostumus: g/litra
Dekstriini 10
Glukoosi 10
Peptoni 5
Hiivauute 5
CaC03 1
Deionoitu vesi 1 litraksi
Viljely suoritetaan kiertoravistimessa (180 kierr./min, r = 5 cm) 4 vrk. 27¾ssa. Väliaineen pH säädetään ennen sterilointia NaOH:11a 7,2:ksi.
5 litralla tätä esiviljelmää ympätään 75 litran teräsfer-menttorissa oleva väliaine (50 1), jolla on seuraava koostumus: 16 65082 g/litra
Liukoinen tärkkelys 24
Tryptoni 5
Hiivauute 5
Lihauute 3
CaC03 2
Glukoosi 1
Deionoitu vesi 1 litraksi Väliviljelmää inkuboidaan 3 vrk 27%:ssa sekoittaen (200 kierr./min. siipisekoittaja) ja ilmastaen (1 litra ilmaa/lit-ra väliainetta/min) ja 0,5 barin ylipaineessa.
750 litran fermenttorissa olevan pääviljelmän viljelyliuok-sella ( 500 1) on seuraava koostumus: g/litra
Liukoinen tärkkelys 20
Hiivauute 10
Glukoosi 10
Kaseiinihydrolysaatti 5
CaCl2.2H20 4
KobolttiCiI)kloridi 0,00013
Deionoitu vesi 1 litraksi
Sitä inkuboidaan sekoittaen (110 kierr./min. siipisekoittaja) ja ilmastaen (1 litra ilmaa/litra väliainetta/min) 4 vrk 27^:ssa 0,5 barin ylipaineessa. Viljelyväliaineen pH säädetään ennen sterilointia Na0H:lla 7,2:ksi.
Esimerkki 3: Yhdisteiden S 54832/A-I, S 54832/A-II, S 54832/A-III ja S 54832/A-IV eristäminen 470 litraa fermentointilientä (valmistettu esimerkissä 2) (r) säädetään 2-n Na0H:lla pH 7,0:aan ja siitä erotetaan Westfalia-separaattorilla 450 1 viljelysuodosta ja 22 kg huovastoa. Vil-jelysuodos uutetaan 3 kertaa 500 litralla etyyliasetaattia.
Uutteet pestään 50 litralla vettä, ja orgaaninen faasi haihdutetaan 20-5 0?.’: csa (konsentraatin lämpötila) kuiviin, jolloin saada a n 117 g öljymäistä raakauu1. et ta .
I; 17 65082
Huovasto homogenoidaan Ultra-Turra^@laitteessa kerran 70 lit- ran kanssa metanolia (tunnin ajan) ja sitten kerran 70 litran kanssa 90-%:ista metanolia (tunnin ajan). Metanoliuutteista poistetaan kiintoaineet suodattamalla ja uutteet yhdistetään, niihin lisätään vettä ja ne väkevöidään noin 150 litraksi. Vesifaasi uutetaan sitten kolme kertaa 200 litralla etyyliasetaattia, ja uutteet pestään 100 litralla vettä. Yhdistetyt uutteet haihdutetaan kuiviin samoin kuin edellä, jolloin saadaan 66 g raakauutetta.
Yhdistetyt raakauutteet (183 g) lisätään sekoittaen 1 litraan petrolieetteriä. Päällä oleva liuos dekantoidaan, ja öljy-mäisestä jäännöksestä haihdutetaan liuotin tyhjössä Soissa.
Jäännös liuotetaan sitten metyleenikloridi-metanoliseokseen (1:1) ja liuos viedään pylvääseen, joka on täytetty 1,5 kg :11a Sephadex® LH2Q-hartsia metyleenikloridi-metanoliseoksessa (1:1). Eluoimalla metyleenikloridi-metanoliseoksella (1:1) saadaan 11,5 g fraktioita, jotka ovat aktiivisia Staphylococcus aureusta vastaan. Tämä materiaali liuotetaan metyleenikloridi-metanoli-vesiseokseen (88:11:11), ja liuos viedään pylvääseen, joka on täytetty 1 kg :11a Merck-silikageeliä (raekoko 0,063-0,2 mm) metyleenikloridimetanoli-vesiseoksessa (88:11:11). Eluoimalla metyleenikloridi-metanoli-vesiseoksella (88:11:11) saadaan ensin 984 mg yhdisteen S 54832/A-I suhteen vahvasti rikastuneita fraktioita. Myöhemmistä eluaateista saadaan tyhjössä haihduttamisen jälkeen yhdisteitä S 54832/A-II, S 54832/A-III ja S 54832/A-IV ja inaktiivisia sivuaineita sisältäviä sekafraktioita.
S 54832/A-I-fraktio (984 mg) liuotetaan 50 ml:aan metylee-nikloridimetanoliseosta (1:1), ja liuos haihdutetaan huoneen lämpötilassa noin 20 ml:ksi, jolloin S 54832/A-I saostuu. Se suodatetaan ja pestään metanolilla. S 54832/A-I saadaan amorfisena, vaaleankeltaisena jauheena, sp. ^310°C(15 tunnin kuivatuksen jälkeen suurtyhjössä huoneen lämpötilassa).
Yhdisteiden S 54832/A-II, S 54832/A-III ja S 54832/A-IV eristämiseksi puhtaina niitä sisältävä sekafraktio (594 mg) liuotetaan metyleenikloridi-metanoli-vesiseokseen (92:7,5:0,5) ja liuos viedään pylvääseen, joka sisältää 500 g Merck-silikageeliä (raekoko 0,04-0,063 mm) metyleenikloridi-metanoli-vesiseoksessa 65082 18 (92:7,5:0,5), josta ensin eluoituu S 54832/A-II, sitten S S4632/A-III ja lopuksi S 54832/A-IV.
Yhdisteiden lopullinen puhdistus suoritetaan kuitenkin saostamalla metanolista samalla tavalla kuin yhdisteen S 54832/A-I puhdistuksen yhteydessä on kuvattu.
Yhdisteet S 54832/A-II, S 54832/A-III ja S 54832/A-IV ovat amorfisia, vaaleankeltaisia jauheita, joiden kaikkien sp. on >310°C (15 tunnin kuivaamisen jälkeen huoneen lämpötilassa suurtyhjössä).
I;
Claims (1)
19 65082 Patenttivaatimus Menetelmä uusien, antibioottisesti aktiivisten yhdisteiden S 54832/A-I, S 54832/A-II, S 54832/A-III ja S 54832/A-IV valmistamiseksi, joilla on seuraavat ominaisuudet: S 54832/A-I Vaaleankeltainen amorfinen jauhe Sp. )310°C + ll8,7° (c = 1,140, pyridiini) Analyysi, saatu: C 50,2 H 4,2 N 13,1 0 21,7 S 11,3% UV-spektri asetonitriilissä, katso kuvio 1: 219 nm log £ ’ = 1,86 λ. maks 287 nm log £ ' = 1,41 364 nm log £,' = 1,13 IR-spektri KBrrssä, katso kuvio 2. ^H-NMR-spektri DMS0:ssa, 90 MHz, sisäisenä standardina tetrametyylisilaani, katso kuvio 3. ^^C-NMR-spektri DMS0:ssa, 22,63 MHz (sisäinen standardi TMS = 0 ppm), katso taulukko I sivulla 3. Liukoisuus: S 54832/A-I liukenee hyvin dimetyyliformamidiin, pyridiniin, asetonitriiliin, dioksaaniin ja dimetyylisulfoksidiin, liukenee kohtalaisen hyvin kloroformiin, huonosti metanoliin ja etanoliin, ja on liukenematon veteen ja heksaaniin. Aminohappoanalyysi: Aminohappoanalyysissä löydettiin indentifioimattomien aminohappojen lisäksi aminohappo, jolla oli sama retentioaika kuin treoniinilla. Titrimetrinen pK-ja ekvivalenttimääritys: 6,403 mg S 54832/A-I:ä liuotettiin 2 ml:aan metyylisello-solv-vesiseosta (84:16) ja titrattiin 0,1-n tetrametyyliammonium-hydroksidin vesiliuoksella. pKa = 7,65 pK2 > 10,69 Ekvivalenttipaino: 1521 20 65082 S 54832/A-II Vaaleankeltainen amorfinen jauhe Sp. ) 310°C Analyysi, 1. saatu: C 48,5 H 3,8 N 12,*1 % 2. saatu: C 50,3 H 4,3 N 12,4 0 21,7 S 12,0 % UV-spektri asetonitriilissä, katso kuvio 4: ,, . 218 nm log £ f = 1,90 Amaks & * 293 nm log £ ' = 1,40 362 nm log £ · = 1,16 IR-spektri KBr:ssä, katso kuvio 5· 1 . H-NMR-spektn DMS0:ssa, 90 MHz, sisäisenä standardina tetrametyylisilaani, katso kuvio 6. Liukoisuus: S 54832/A-II liukenee hyvin dimetyyliformamidiin, aseto-nitriiliin, dioksaaniin, pyridiiniin ja dimetyylisulfoksidiin, kohtalaisen hyvin kloroformiin, niukasti metanoliin ja etanoliin, ja on liukenematon veteen ja heksaaniin. Aminohappoanalyysi: Aminohappoanalyysissä löydettiin identifioimattomien aminohappojen lisäksi aminohappo, jolla oli sama retentioaika kuin treoniinilla. S 54832/A-III Vaaleankeltainen amorfinen jauhe Sp. ) 310°C Analyysi, saatu: C 48,1 H 4,1 N 12,3 % UV-spektri asetonitriilissä, katso kuvio J: λ maks 218 nm l08 C ' = 1,86 292 nm log £ ’ = 1,36 362 nm log £. » = 1,14 IR-spektri KBr:ssä, katso kuvio 8. Liukoisuus: S 54832/A-III liukenee hyvin dimetyylisulfoksidiin, dimetyyliformamidiin, asetonitriiliin, dioksaaniin ja pyridiiniin, kohtalaisen hyvin kloroformiin, niukasti metanoliin ja etanoliin, ja on liukenematon veteen ja heksaaniin. li 21 65082 Aminohappoanalyysi: Aminohappoanalyysissä löydettiin identifioimattomien aminohappojen lisäksi aminohappo, jolla oli sama retentioaika kuin treoniinilla. S 54832/A-IV Vaaleankeltainen amorfinen jauhe Sp. ) 310°C = + 153 ,2° (c = 0,752, pyridiini) Analyysi, saatu C 49,0 H 4,0 N 12,7 0 21,8 S 11,6 % UV-spektri asetonitriilissä, katso kuvio 9: Amaks 218 ™ loR £ ' 5 1.88 292 nm log £ ' = 1,4l 360 nm log £ ' = 1,15 IR-spektri KBrtssä, katso kuvio 10. H-NMR-spektn DMS0:ssa, 90 MHz, sisäisenä standardina tetrametyylisilaani, katso kuvio 11. ^C-NMR-spektri DMS0:ssa, 22,63 MHz (sisäinen standardi TMS = 0 ppm), katso taulukko II sivulla 6. Liukoisuus: S 54832/A-IV liukenee hyvin dimetyyliformamidiin, pyridii-niin, asetonitriiliin, dioksaaniin ja dimetyylisulfoksidiin, kohtalaisen hyvin kloroformiin, niukasti metanoliin ja etanoliin, ja on liukenematon veteen ja heksaaniin. Aminohappoanalyysi: Aminohappoanalyysissä löydettiin identifioimattomien aminohappojen lisäksi kaksi aminohappoa, joilla oli samat retentioajat kuin treoniinilla ja alaniinilla. Titrimetrinen pK-,ja ekvivalenttimääritys: 6,406 mg S 54832/A-IV-ää liuotettiin 2 ml:aan metyylisello-solv-vesiseosta (84:l6) ja titrattiin 0,1-n tetrametyyliammonium-hydroksidin vesiliuoksella. pKa = 7,31 pK., V 10,70 f- Kkvivalenttipaino: 1664, t u n n e t t u siitä, että uutta Micromonospora globosa-kantaa NRRL 11299 (ATCC 31465) viljellään tavanomaisella tavalla viljelyväliaineen läsnäollessa, jonka jälkeen yhdisteet eristetään ja puhdistetaan sinänsä tunnetuin menetelmin. 22 65082 Förfarande för framställning av nya, antibiotiskt aktiva föreningar S 54832/A-I , S 54832/A-II, S 54832/A-III och S 5^832/A-IV med följande egenskaper s 54832/A-1 Ljusgult amorfiskt pulver Sp. ) 310°C M7*° = + ll8>7° (e = 1,140, pyridin) Analys, erhället: C 50,2 H 4,2 N 13,1 0 21,7 S 11,3 % UV-spektrum i acetonitril, se figur 1: Λ max 219 nm loE £ ' = 1.86 287 nm log £' = 1,41 364 nm log £ * = 1,13 IR-spektrum i KBr, se figur 2. H-NMR-spektrum 1 DMSO, 90 MH , tetrametylsilan som z intern standard, se figur 3. 13 C-NMR-spektrum i DMSO, 22, 63 MH (intern standard z TMS=0 ppm), se tabell I pä sida 3. Löslighet: S 54832/A-I är lättlösligt i dimetylformamid, pyridin, acetonitril, dioxan och dimetylsulfoxid, tämligen lättlösligt i kloroform, svärlösligt i metanol och etanol, och olösligt i vatten och hexan. Aminosyra-analys: Vid aminosyra-analysen hittades förutom oindentifierade aminosyror en aminosyra med samma retentionstid som treonin. Titrimetrisk pK- och ekvivalentbestämning: 6,403 mg S 54832/A-I löstes i 2 ml av en metylcellosolv-vattenblandning (84;16) och titrerades med 0,1-n tetrametylam-moniumhydroxid i vatten. pKa = 7,65 pK2 i 10,69 Ekvivalentvikt: 1521 23 65082 S 54832/A-II Ljusgult amorfiskt pulver Sp. ) 310°C Analys, 1. erhället: C 48,5 H 3,8 N 12,4 % 2. erhället: C 50,3 H 4,3 N 12,4 0 21,7 S 12,0 % UV-spektrum i acetonitril, se figur 4: _ 218 nm log C ' = 1,90 p^max * 293 nm log £ ' = 1,40 362 nm log £/ = 1,16 IR-spektrum i KBr, se figur 5- 1H-NMR-spektrum i DMSO, 90 MH^, tetrametylsilan som intern standard, se figur 6. Löslighet: S 54832/A-II är lättlösligt i dimetylformamid, acetonitril, dioxan, pyridin och dimetylsulfoxid, tämligen lättlösligt i kloro-form, svärlösligt i metanol och etanol, och olösligt i vatten och hexan. Aminosyra-analys: Vid aminosyra-analysen hittades förutom oidentifierade aminosyror en aminosyra med samma retentionstid som treenin. S 54832/A-III Ljusgult amorfiskt pulver Sp. ) 310°C Analys, erhället: C 48,1 H 4,1 N 12,3 % UV-spektrum i acetonitril, se figur 7: λ max 218 nm lo« £’ = i·86 292 nm log £' =1,36 362 nm log £.1 = 1,14 IR-spektrum i KBr, se figur 8. Löslighet: S 54832/A-III är lättlösligt i dimetylsulfoxid, dimetylformamid, acetonitril, dioxan och pyridin, tämligen lättlösligt i kloroform, svärlösligt i metanol och etanol och olösligt i vatten och hexan. Aminosyra-analys: Vid aminosyra-analysen hittades förutom oidentifierade aminosyror en aminosyra med samma retentionstid on treonin.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CH628278 | 1978-06-08 | ||
| CH628278A CH634853A5 (de) | 1978-06-08 | 1978-06-08 | Schwefelhaltige metabolite, ihre herstellung und verwendung in arznei- und futtermitteln. |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| FI791733A FI791733A (fi) | 1979-12-09 |
| FI65082B true FI65082B (fi) | 1983-11-30 |
| FI65082C FI65082C (fi) | 1984-03-12 |
Family
ID=4307094
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| FI791733A FI65082C (fi) | 1978-06-08 | 1979-05-30 | Foerfarande foer framstaellning av nya antibiotiskt aktiva foereningar |
Country Status (20)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4478831A (fi) |
| JP (1) | JPS5527172A (fi) |
| AT (1) | AT370438B (fi) |
| AU (1) | AU533536B2 (fi) |
| BE (1) | BE876812A (fi) |
| CA (1) | CA1128442A (fi) |
| CH (1) | CH634853A5 (fi) |
| DE (1) | DE2921148A1 (fi) |
| DK (1) | DK226579A (fi) |
| ES (1) | ES481357A1 (fi) |
| FI (1) | FI65082C (fi) |
| FR (1) | FR2428049A1 (fi) |
| IE (1) | IE50661B1 (fi) |
| IL (1) | IL57501A (fi) |
| IT (1) | IT7949302A0 (fi) |
| NL (1) | NL7904387A (fi) |
| NZ (1) | NZ190650A (fi) |
| PH (1) | PH14758A (fi) |
| PT (1) | PT69740A (fi) |
| ZA (1) | ZA792853B (fi) |
Families Citing this family (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4639467A (en) * | 1984-04-25 | 1987-01-27 | Celino Martin S | Antibiotic Crismaicin A and compositions thereof |
| JPH03193065A (ja) * | 1989-12-22 | 1991-08-22 | Hasu:Kk | 医療用プラスチック布およびその製造方法 |
| US5451581A (en) * | 1993-05-21 | 1995-09-19 | Lee; May D. | Antibiotic LL-14E605β and O-methyl-LL-14E605β |
| US5886096A (en) * | 1996-09-06 | 1999-03-23 | Unitika Ltd. | Polyamide resin composition, and fibers, films and molded articles using the same |
| NZ509306A (en) | 1998-07-16 | 2002-07-26 | Bristol Myers Squibb Co | Nocathiacin antibiotics |
| EP1109820A4 (en) * | 1998-09-04 | 2002-07-03 | Bristol Myers Squibb Co | NOCATHIACIN ANTIBIOTIC DERIVATIVES PREPARED BY MICROBIAL BIOTRANSFORMATION |
| US6287827B1 (en) | 1999-05-05 | 2001-09-11 | Bristol-Myers Squibb Company | Halo- or hydroxy-substituted nocathiacin antibiotics |
| KR100742351B1 (ko) * | 2005-01-28 | 2007-07-24 | 주식회사 경동네트웍 | 풍량센서와 화염감지수단을 통해 이상 연소 상태를감지하는 보일러 및 그 제어방법 |
Family Cites Families (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4078056A (en) * | 1974-10-18 | 1978-03-07 | Schering Corporation | Antibiotic complex from micromonospora arborensis |
| US4137224A (en) * | 1977-02-09 | 1979-01-30 | Schering Corporation | Process for the preparation of antibiotic W-10 complex and for the isolation of antibiotic 20561 and antibiotic 20562 therefrom |
| JPS5625197A (en) * | 1979-07-19 | 1981-03-10 | Microbial Chem Res Found | Cleomycin and its preparation |
-
1978
- 1978-06-08 CH CH628278A patent/CH634853A5/de not_active IP Right Cessation
-
1979
- 1979-05-25 DE DE19792921148 patent/DE2921148A1/de not_active Withdrawn
- 1979-05-30 FI FI791733A patent/FI65082C/fi not_active IP Right Cessation
- 1979-05-30 DK DK226579A patent/DK226579A/da not_active Application Discontinuation
- 1979-06-04 IT IT7949302A patent/IT7949302A0/it unknown
- 1979-06-05 NL NL7904387A patent/NL7904387A/xx not_active Application Discontinuation
- 1979-06-06 PT PT69740A patent/PT69740A/pt unknown
- 1979-06-06 NZ NZ190650A patent/NZ190650A/xx unknown
- 1979-06-06 AU AU47814/79A patent/AU533536B2/en not_active Ceased
- 1979-06-06 IL IL57501A patent/IL57501A/xx unknown
- 1979-06-06 BE BE0/195609A patent/BE876812A/xx not_active IP Right Cessation
- 1979-06-07 JP JP7216779A patent/JPS5527172A/ja active Pending
- 1979-06-07 CA CA329,238A patent/CA1128442A/en not_active Expired
- 1979-06-07 AT AT0408579A patent/AT370438B/de not_active IP Right Cessation
- 1979-06-07 PH PH22620A patent/PH14758A/en unknown
- 1979-06-07 ES ES481357A patent/ES481357A1/es not_active Expired
- 1979-06-08 ZA ZA792853A patent/ZA792853B/xx unknown
- 1979-06-08 FR FR7914680A patent/FR2428049A1/fr active Granted
- 1979-08-08 IE IE1111/79A patent/IE50661B1/en unknown
-
1982
- 1982-05-10 US US06/376,904 patent/US4478831A/en not_active Expired - Fee Related
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| IE50661B1 (en) | 1986-06-11 |
| AT370438B (de) | 1983-03-25 |
| IL57501A0 (en) | 1979-10-31 |
| FR2428049B1 (fi) | 1983-05-20 |
| US4478831A (en) | 1984-10-23 |
| FR2428049A1 (fr) | 1980-01-04 |
| ATA408579A (de) | 1982-08-15 |
| CH634853A5 (de) | 1983-02-28 |
| AU4781479A (en) | 1979-12-13 |
| BE876812A (fr) | 1979-12-06 |
| IT7949302A0 (it) | 1979-06-04 |
| IL57501A (en) | 1982-12-31 |
| PH14758A (en) | 1981-11-20 |
| DE2921148A1 (de) | 1979-12-13 |
| CA1128442A (en) | 1982-07-27 |
| ES481357A1 (es) | 1980-02-16 |
| FI791733A (fi) | 1979-12-09 |
| FI65082C (fi) | 1984-03-12 |
| AU533536B2 (en) | 1983-12-01 |
| JPS5527172A (en) | 1980-02-27 |
| NZ190650A (en) | 1982-08-17 |
| IE791111L (en) | 1979-12-08 |
| PT69740A (fr) | 1979-07-01 |
| ZA792853B (en) | 1981-01-28 |
| NL7904387A (nl) | 1979-12-11 |
| DK226579A (da) | 1979-12-09 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Omura et al. | Herbimycin, a new antibiotic produced by a strain of Streptomyces | |
| EP0000991B1 (en) | Antibiotics and pharmaceutical compositions containing them | |
| FI65082B (fi) | Foerfarande foer framstaellning av nya antibiotiskt aktiva foereningar | |
| CA1291054C (en) | Antitumor antibiotics (ll-e33288 complex) | |
| FI94262B (fi) | Menetelmä loiseläinten vastaisen makrolidin valmistamiseksi | |
| US4539203A (en) | CL-1577D And CL-1577E antibiotic/antitumor compounds, their production and use | |
| HU184256B (en) | Process for producing citostatic antibiotic complexes | |
| EP0396378B1 (en) | Antifungal agent | |
| Hori et al. | R1128 substances, novel non-steroidal estrogen-receptor antagonists produced by a streptomyces i. Taxonomy, fermentation, isolation and biological properties | |
| AU605495B2 (en) | Process for the preparation of antibiotics 10381b | |
| US4550159A (en) | Anthracycline compounds | |
| OMURA et al. | Irumamycin, an antifungal 20-membered macrolide produced by a streptomyces taxonomy, fermentation and biological properties | |
| CA2299269A1 (en) | Macrolides with antitumor activity | |
| US4301248A (en) | Fermentation process for making rachelmycin | |
| US4686308A (en) | Novel physiologically active substance MH435 | |
| US4440751A (en) | Broad spectrum antibiotic complex produced by a novel micromonospora | |
| Nishio et al. | Karnamicin, a complex of new antifungal antibiotics I. Taxonomy, fermentation, isolation and physico-chemical and biological properties | |
| US5194371A (en) | Production of pradimicin antibiotics | |
| US4572895A (en) | Process for preparing an antibiotic complex by culturing actinomyces strain ATCC 39417 | |
| US4615975A (en) | Purified culture of Actinomadura verrucaspora subspecies veractimyces | |
| US3954970A (en) | Actinomycin complex from micromonospora | |
| US3577530A (en) | Janiemycin | |
| EP0332080B1 (en) | Bu-3862t antitumor antibiotic | |
| JPH0912550A (ja) | ２， ２’ −ビピリジン誘導体、その製造方法及び該誘導体を含有する抗腫瘍剤 | |
| US5061695A (en) | Antitumor substance be-12406 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM | Patent lapsed |
Owner name: SANDOZ AG |