FI106043B - Method for selecting L-lysine producing microorganisms - Google Patents

Method for selecting L-lysine producing microorganisms Download PDF

Info

Publication number
FI106043B
FI106043B FI925887A FI925887A FI106043B FI 106043 B FI106043 B FI 106043B FI 925887 A FI925887 A FI 925887A FI 925887 A FI925887 A FI 925887A FI 106043 B FI106043 B FI 106043B
Authority
FI
Finland
Prior art keywords
microorganisms
caprolactam
selecting
resistant
brevibacterium
Prior art date
Application number
FI925887A
Other languages
Finnish (fi)
Swedish (sv)
Other versions
FI925887A (en
FI925887A0 (en
Inventor
Wolfgang Siegel
Wolfgang Ladner
Uwe Pressler
Original Assignee
Basf Ag
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Basf Ag filed Critical Basf Ag
Publication of FI925887A publication Critical patent/FI925887A/en
Publication of FI925887A0 publication Critical patent/FI925887A0/en
Application granted granted Critical
Publication of FI106043B publication Critical patent/FI106043B/en

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P13/00—Preparation of nitrogen-containing organic compounds
    • C12P13/04—Alpha- or beta- amino acids
    • C12P13/08—Lysine; Diaminopimelic acid; Threonine; Valine

Landscapes

  • Organic Chemistry (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Description

106043106043

Menetelmä L-lys±±n±ä tuottavien mikro-organismien selek-toimiseksi Tämä keksintö koskee menetelmää mikro-organismien 5 selektoimiseksi, joilla on voimistunut L-lysiinin tuotantokyky .The present invention relates to a method for the selection of microorganisms having enhanced L-lysine production capacity.

L-lysiini on välttämätön aminohappo, ja sitä käytetään laajasti elintarvikkeisiin ja eläinten rehuihin lisättävänä aineena. Sitä käytetään myös lääketieteessä in-10 fuusioiiuosten aineosana.L-lysine is an essential amino acid and is widely used as a substance in food and animal feeds. It is also used in medicine as an ingredient in in-10 fusion solutions.

L-lysiiniä saadaan hydrolysoimalla proteiineja hapolla, syntetisoimalla D,L-lysiiniä ja jakamalla sitten rasemaatti optisiksi isomeereiksi samoin kuin syntetisoimalla mikro-organismien avulla. Mikrobiologisia menetelmiä 15 L-lysiinin valmistamiseksi kuvataan esimerkiksi julkaisus sa Trends in Biotechnology 1 (1983) 70 - 74.L-lysine is obtained by hydrolyzing proteins with acid, synthesizing D, L-lysine and then dividing the racemate into optical isomers as well as by microorganisms synthesis. Microbiological methods for preparing L-lysine are described, for example, in Trends in Biotechnology 1, 70-74 (1983).

Nyt on löydetty parannettu menetelmä L-lysiiniä tuottavien mikro-organismien selektoimiseksi.An improved method for selecting L-lysine-producing microorganisms has now been found.

Keksintö koskee menetelmää mikro-organismien se-20 lektoimiseksi, joilla on voimistunut L-lysiinin tuotanto kyky. Menetelmälle on tunnusomaista, että sen jälkeen kun on aiheutettu mutaatioita sukuihin Corynebacterium ja Bre- : 1·· vibacterium kuuluviin mikro-organismeihin tunnetuilla mu- • · tageeneilla sinänsä tunnetulla tavalla, selektoidaan jou-:V: 25 kosta sellaiset mikro-organsimikannat, jotka ovat resis- • tenttejä 2-atsido-e-kaprolaktaamin aiheuttamalle takaisin- ··» · : kytkennän estolle.The invention relates to a method for the selection of microorganisms which have enhanced L-lysine production capacity. The method is characterized in that after mutations in microorganisms belonging to the microorganisms belonging to the genus Corynebacterium and Bre-: 1 ·· vibacterium are known, microorganisms strains which are: resistance to 2 · azido-ε-caprolactam-induced · ·· »·: inhibition of coupling.

* · 2-atsido-e-kaprolaktaamilla on yllättävästi olen- • · · naisesti suurempi teho mutanttien valikoinnissa mutagenee- ... 30 . sin jälkeen kuin JP-patenttijulkaisussa 51-19 186 ja EP- • · *“·’ julkaisussa 175 309 kuvatuilla yhdisteillä, kuten esimer- • · ···1 kiksi fluori- ja kloorikaprolaktaamilla.* · 2-azido-ε-caprolactam surprisingly has significantly higher potency in selecting mutants for mutagenesis ... 30. followed by the compounds described in JP-A-51-19186 and EP-A-175,309, such as, for example, fluorine and chlorocaprolactam.

Niinpä atsidokaprolaktaamilla tehdyn valikoinnin kautta voidaan kantojen lysiinin tuotantokykyä suurentaa 35 yli 10 %.Thus, through selection with azidocaprolactam, the lysine production capacity of the strains can be increased by more than 10%.

« · · • · · • Λ · 1 « • · • · • · · 106043 2«· • Λ 1 1 1 1 1 • 60 106043 2

Keksinnön mukaisesti mutantteja voidaan valmistaa tavanomaisella mutageneesilla, esimerkiksi N-metyyli-N'-nitro-N-nitrosoguanidiinilla tai UV-säteilytyksellä.According to the invention, mutants can be prepared by conventional mutagenesis, for example by N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine or by UV irradiation.

Sukujen Corynebacterium (C) ja Brevibacterium (B) 5 mikro-organismeiksi soveltuvat esimerkiksi seuraavat: B. amoniagenis, B. divaricatum, B. flavum, B. ketoglutami-cum, B. lactofezmentum, B. linens, B. sp., C. asetoacido-philum, C. acetoglutamicum, C. glutamicum, C. lilium ja C. sp. Edullisia ovat B. flavum ja C. glutamicum, erityisesti 10 B. flavum ATCC 21474 ja C. glutamicum ATCC 21526. Viimeksi · mainitun erityisetuna on, että se on riippuvainen homose-riinistä ja lisäksi resistentti S-(2-aminoetyyli)-L-kyste-iinille.Examples of microorganisms of the genera Corynebacterium (C) and Brevibacterium (B) 5 include: B. amoniagenis, B. divaricatum, B. flavum, B. ketoglutamycum, B. lactofezmentum, B. Linens, B. sp., C. acetoacid-philum, C. acetoglutamicum, C. glutamicum, C. lilium and C. sp. Preferred are B. flavum and C. glutamicum, in particular B. flavum ATCC 21474 and C. glutamicum ATCC 21526. The latter has the particular advantage of being dependent on homoserine and additionally resistant to S- (2-aminoethyl) -L-. kyste-iinille.

Kuten jo mainittiin, on edullista, että kannat ovat 15 homoseriinistä riippuvaisia. Lisäksi on hyvä, että kannat ovat myös resistenttejä S-(2-aminoetyyli)-L-kysteiinille. Ellei kannoilla ole tätä resistenssiä, voidaan se saada aikaan US-patenttijulkaisun 3 707 441 mukaisesti käsittelemällä kannat N-metyyli-N'-nitro-N-nitrosoguanidiinilla 20 ja tekemällä sen jälkeen valikointi.As already mentioned, it is preferred that the strains are homoserine dependent. Furthermore, it is good that the strains are also resistant to S- (2-aminoethyl) -L-cysteine. If the strains do not have this resistance, they can be obtained according to U.S. Patent 3,707,441 by treating the strains with N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine 20 and subsequent selection.

EsimerkkiExample

Corynebacterium glutamicum ATCC 21526 käsiteltiin iCorynebacterium glutamicum ATCC 21526 was treated i

; ‘·· 3 0 min lämpötilassa 3 0 °C Tris-maleiinihappopuskurissa (pH; '··· for 30 minutes at 30 ° C in Tris-maleic acid buffer (pH 3)

t « ·/·,' 6,0) N-metyyli-N'-nitro-N-nitrosoguanidiinilla :Y: 25 (250 μg/ml) . Sen jälkeen solut pestiin Tris-puskurilla • ·': (0,1 mol/1, pH 7,2), siirrostettiin minimiagarmaljoille ja ··· · j·.^ inkuboitiin sen jälkeen 4-14 vuorokautta lämpötilassa .··/. 28 °C.t (· 6 ·, · 6,0) with N-methyl-N′-nitro-N-nitrosoguanidine: Y: 25 (250 µg / ml). The cells were then washed with Tris buffer (0.1 mol / L, pH 7.2), seeded on minimum agar plates and incubated for 4-14 days at a temperature. 28 ° C.

• ♦ ·• ♦ ·

Minimiagarin koostumus oli seuraava: ... 3 0 . 20 g/1 agaria 0,1 g/1 MnS04-H20:a • · *·;;* 2 g/1 (NH4) 2S04:a 100 Mg/l biotiinia • · ···’ 0,5 g/1 KH2P04:a 30 mg/1 Met:a, Thr:a ja Leu:a 0,5 g/1 K2HP04:a kutakin .***: 0,4 g/1 MgS04 *7H20:a 4 g/1 laktaattia 35 0,01 g/ι FeS04-7H20:a pH 7,0 • · · • · · « · · • · · * « · • · · 106043 3The composition of the minimum agar was: ... 3 0. 20 g / L agar 0.1 g / L MnSO 4 -H 2 O • · * · ;; * 2 g / L (NH 4) 2 SO 4 100 Mg / L Biotin • · · · · · 0.5 g / L KH 2 PO 4 30 mg / L Met, Thr and Leu 0.5 g / L K 2 HPO 4 ***: 0.4 g / L MgSO 4 * 7H 2 O 4 g / L Lactate 35 0.01 g / ι FeS04-7H20: pH 7.0 · · · · · · · 106043 3

Pesäkkeistä, jotka kasvoivat inkuboinnin jälkeen agarmaljoilla, määritettiin lysiiniä tuottavat. Kannat, jotka muodostivat lysiiniä 10 % enemmän kuin lähtökanta, eristettiin.Colonies that grew after incubation on agar plates were determined to produce lysine. Strains that produced 10% more lysine than the parent strain were isolated.

« · · • · • · · • · • · • · « · · , . . « · · • · • · • « · • · · ··· · • « • · · • · ♦ • * ··· • · « • · · • · · • · • · • · * ♦ ♦♦ , · · ··· m • · · • · · • · · • · · » · « · • · · « « · • · · » * · • · « • · • · • · ·«· · • • • • • •,,. . ·,, · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · ···

Claims (1)

106043 Patenttivaatimus Menetelmä mikro-organismien selektoimiseksi, joilla on voimistunut L-lysiinin tuotantokyky, tunnettu 5 siitä että sen jälkeen kun on aiheutettu mutaatioita sukuihin Coirynebacterium ja Brevibacterium kuuluviin mikro-organismeihin tunnetuilla mutageeneilla·sinänsä tunnetulla tavalla, selektoidaan joukosta sellaiset mikro-organismi-kannat, jotka ovat resistenttejä 2-atsido-e-kaprolaktaamin 10 aiheuttamalle takaisinkytkennän estolle. » * • · · « • · ♦ ♦ 1 * « » • » « · * · · • · » • · « · • · · • · · »·1 · « · » · · • ·· • · • ·· • · · • · · * 1· « 1 • · • · · • · · • · • 1 ··· «·· • · · • · · • 1 · » · • · • · « • · · • « · • k · · Φ • · • · • · 1 106043 Förfarande för selektion av mikroorganismer, vilka har en förhöjd L-lysin-alstringsförmäga, kanne -5 tecknat därav att efter det att man framkallat mutation av mikrooganismer av arterna Corynebacterium och Brevibacterium med kända mutagener pä i sig känt sätt, väljer man ut bland dem s Iidana mikroorganismstammar, som är resistenta mot regenerativ hämning förorsakad av 2-azi-10 do-e-kaprolaktam. « • * * « « · 4 « · « « 4 · • · 4 · · « · · « « • · · • · · • n · • · » · · t · · • · ··· ♦ · * • · · • · · • · • · · • · · « · • · · • · · • « · « · · « • · * 4 · « · 14« « ( < « I « « III 4 « · • I « · 4 4 4106043 Claim A method for selecting microorganisms having enhanced L-lysine production capacity, characterized in that, after mutations in microorganisms belonging to the genera Coirynebacterium and Brevibacterium are known, in a manner known per se, strains of such microorganisms are selected, which are resistant to feedback inhibition by 2-azido-ε-caprolactam 10. »* • · ·« • · ♦ ♦ 1 * «» • »« · * · · • • • • • • • • • • · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · 1 · «1 • · • · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · to English · to · English 1 106043 Förfarande för selekttion av microorganisms, livin haren förhöjd L-lysin-alstringsförmäga, entry -5 tecknat därav att efter det man framkallat mutation av arterna Corynebacterium och Brevibacterium med stump mutagener sun sig stump strain, external man ut bland dem s Iidana microorganismmar, som resistant mot regenerativ hämning förskar av 2-azi-10 do-e-caprolactam. «• * *« «· 4« · «« 4 · • · 4 · «« · · «t · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · III 4 III 4 * * * 4 4 * 4 * * 4 4 4 4 4 4 4 * 4 4 4 4 4 14 4 4 4 4 (4 4 4 4 4 4 14 14 14 ((((14 ((14 14 14 14 14 14 14 14 (14 ((14 ((I I I I I I «· 4 4 4
FI925887A 1990-07-25 1992-12-28 Method for selecting L-lysine producing microorganisms FI106043B (en)

Applications Claiming Priority (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE4023576 1990-07-25
DE4023576A DE4023576A1 (en) 1990-07-25 1990-07-25 METHOD FOR PRODUCING L-LYSINE PRODUCING MICROORGANISMS
PCT/EP1991/001316 WO1992001785A1 (en) 1990-07-25 1991-07-13 Method of preparation of l-lysine-producing microorganismes
EP9101316 1991-07-13

Publications (3)

Publication Number Publication Date
FI925887A FI925887A (en) 1992-12-28
FI925887A0 FI925887A0 (en) 1992-12-28
FI106043B true FI106043B (en) 2000-11-15

Family

ID=6410961

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
FI925887A FI106043B (en) 1990-07-25 1992-12-28 Method for selecting L-lysine producing microorganisms

Country Status (7)

Country Link
EP (1) EP0540556B1 (en)
JP (1) JPH05508543A (en)
CA (1) CA2075044C (en)
DE (2) DE4023576A1 (en)
FI (1) FI106043B (en)
HU (1) HU211056B (en)
WO (1) WO1992001785A1 (en)

Families Citing this family (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE4204361A1 (en) * 1992-02-14 1993-08-19 Degussa METHOD FOR PRODUCING L-LYSINE BY FERMENTATION OF CORYNEFORM BACTERIA
KR100688575B1 (en) * 2004-10-08 2007-03-02 삼성전자주식회사 Non volatile semiconductor memory device

Family Cites Families (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0175309A3 (en) * 1984-09-14 1987-11-11 Toray Industries, Inc. A method for producing l-lysine

Also Published As

Publication number Publication date
WO1992001785A1 (en) 1992-02-06
HU211056B (en) 1995-10-30
JPH05508543A (en) 1993-12-02
DE4023576A1 (en) 1992-01-30
HUT68739A (en) 1995-05-17
EP0540556A1 (en) 1993-05-12
CA2075044A1 (en) 1992-01-26
DE59103718D1 (en) 1995-01-12
FI925887A (en) 1992-12-28
FI925887A0 (en) 1992-12-28
HU9202242D0 (en) 1992-10-28
CA2075044C (en) 2001-07-10
EP0540556B1 (en) 1994-11-30

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US4656135A (en) Process for producing L-isoleucine by fermentation
HU202285B (en) Process for producing l-threonine by fermentation
GB2075056A (en) L-proline-producing Microorganisms
EP0858510A1 (en) Process for preparing o-acetylserine, l-cysteine and l-cysteine-related products
GB2049670A (en) Producing l-threonine by fermentation c2c c6f
US7008786B2 (en) Microorganism producing L-lysine and processes for producing L-lysine using the same
US5521074A (en) Process for producing L-valine
JPS6115695A (en) Preparation of l-isoleucine by fermentation method
FI106043B (en) Method for selecting L-lysine producing microorganisms
DE60210184T2 (en) L-cysteine producing bacterium and method for producing L-cysteine
JPS6115696A (en) Preparation of l-isoleucine by fermentation method
GB2072185A (en) Fermentative production of l-threonine
JP2578492B2 (en) Method for producing L-threonine by fermentation method
JP2578463B2 (en) Production method of L-lysine by fermentation method
AU783498B2 (en) Microorganisms producing L-glutamine and processes for producing L-glutamine using the same
Hadj Sassi et al. Effect of medium composition on L-Lysine production by a variant strain of Corynebacterium clutamicum ATCC 21513
JPH0665314B2 (en) Fermentation method for producing L-valine
JPS63248392A (en) Production of l-leucine by fermentation
GB2084998A (en) Fermentative preparation of l-isoleucine
US4421853A (en) Fermentative preparation of L-leucine
HUT61598A (en) Process for producing l-threonine
US5770412A (en) Azido-caprolactam as inhibitor for selecting microorganisms with high lysine productivity
JP2574786B2 (en) Method for producing L-threonine
HU215248B (en) Process for producing l-lysine
JPH0160236B2 (en)