ES3073540T3

ES3073540T3 - Compositions and methods for treating hemorrhagic shock

Info

Publication number: ES3073540T3
Application number: ES21830096T
Authority: ES
Inventors: William Light
Original assignee: Virtech Bio Inc
Current assignee: Virtech Bio Inc
Priority date: 2020-06-23
Filing date: 2021-06-23
Publication date: 2026-07-13
Anticipated expiration: 2041-06-23
Also published as: EP4167961B1; EP4167961A4; EP4167961C0; US20230241184A1; AU2021297879A1; CA3183555A1; EP4782058A2; WO2021262803A1; EP4167961A1; JP2023531508A

Abstract

Se proporcionan formulaciones farmacéuticas para prevenir o tratar el choque hemorrágico. Estas formulaciones comprenden un complemento de oxigenación compuesto por un transportador de oxígeno a base de hemoglobina (HBOC) y plasma sanguíneo. También se proporcionan métodos para la preparación de dichas formulaciones. Asimismo, se proporcionan métodos para prevenir o tratar el choque hemorrágico. (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)

Description

[0001] DESCRIPCIÓN

[0002] Composiciones y métodos para tratar el choque hemorrágico

[0003] SOLICITUD RELACIONADA

[0004] Esta solicitud reivindica el beneficio de la Solicitud de Patente Provisional de los Estados Unidos N.º 63/042,668, presentada el 23 de junio de 2020.

[0005] CAMPO DE LA DIVULGACIÓN

[0006] La presente divulgación se relaciona generalmente con el campo del choque hemorrágico, y en particular, con composiciones y su uso en métodos para tratar el choque hemorrágico.

[0007] ANTECEDENTES

[0008] Los siguientes párrafos se proporcionan a modo de antecedentes de la presente divulgación.

[0009] El choque hemorrágico es un síndrome clínico que puede ocurrir cuando los órganos vitales dejan de funcionar como resultado de una pérdida sustancial de sangre de vasos sanguíneos dañados. Así, el choque hemorrágico puede ocurrir, por ejemplo, tras una lesión traumática, como cuando se sufren cortes profundos corporales o quemaduras, o en el curso de la realización de procedimientos quirúrgicos, o como resultado de cualquier hemorragia interna, como una hemorragia gastrointestinal. El flujo sanguíneo disminuido hacia los órganos vitales da lugar a un suministro inadecuado de oxígeno, y cuando la demanda de oxígeno supera el suministro, los órganos, así como el organismo, pueden entrar en un estado de choque. Los síntomas del choque hemorrágico son generalmente potencialmente mortales y se tratan como una emergencia médica.

[0010] El proceso corporal innato para detener la pérdida de sangre de vasos sanguíneos dañados se conoce como hemostasia e implica el estrechamiento de los vasos sanguíneos y la coagulación de la sangre para formar un coágulo sanguíneo que funciona como un tapón. Las técnicas médicas bien conocidas para facilitar la hemostasia y tratar o prevenir el choque hemorrágico incluyen técnicas para detener el flujo de sangre, incluida la aplicación de torniquetes y la aplicación de vendajes de presión y apósitos para heridas o técnicas para intervenir en hemorragias internas. Sin embargo, especialmente en casos de daño severo de vasos sanguíneos, estas técnicas a menudo no logran detener adecuadamente la pérdida de sangre.

[0011] Otras terapias conocidas para el tratamiento del choque hemorrágico incluyen terapias de transfusión de sangre. Estas terapias pueden ser muy efectivas, sin embargo dependen críticamente de la disponibilidad de sangre adecuadamente almacenada, y pueden no ser una opción de tratamiento en caso de escasez de sangre donada. Además, la terapia de transfusión de sangre puede no ser viable cuando un paciente ha sufrido una lesión en un lugar distante de una instalación de atención médica, por ejemplo, en un campo de batalla. Además, los tipos de sangre del donante de sangre y del receptor deben ser compatibles, y la sangre transfundida debe estar libre de agentes patógenos transmitidos por la sangre.

[0012] Otras terapias conocidas en la técnica para tratar el choque hemorrágico implican el uso de otros líquidos terapéuticos, incluyendo plasma sanguíneo y los llamados expansores de volumen plasmático, que se administran por vía intravenosa.

[0013] En este sentido, la administración de plasma sanguíneo puede aumentar el volumen de líquido de los vasos sanguíneos para así ayudar a los glóbulos rojos restantes a entregar oxígeno a los órganos vitales. Además, la administración de plasma sanguíneo puede ayudar a la hemostasia. Sin embargo, las preparaciones de plasma sanguíneo no incluyen un componente portador de oxígeno. Además, la vida útil de las preparaciones conocidas de plasma sanguíneo es relativamente corta, típicamente del orden de días, a menos que las preparaciones de plasma sanguíneo se almacenen congeladas.

[0014] Los expansores de volumen plasmático, expansores de volumen plasmático basados en cristaloides o coloides, por ejemplo, también se han empleado para aumentar el volumen de líquido de los vasos sanguíneos y ayudar a los glóbulos rojos restantes a entregar oxígeno a los órganos vitales. Es una desventaja de los expansores de volumen plasmático, sin embargo, que su administración puede resultar en una dilución no deseable de los glóbulos rojos, y un retraso en la hemostasia, y puede contribuir a una coagulopatía inducida por trauma u otro tipo de coagulopatía, es decir, un deterioro de la coagulación sanguínea. Además, la ausencia de un componente portador de oxígeno dentro de las preparaciones de expansores de volumen plasmático limita la utilidad de estas preparaciones en el tratamiento del choque hemorrágico.

[0015] [0010]Para superar varias de las deficiencias anteriores, ha evolucionado una clase de compuestos basados en hemoglobina, la proteína natural portadora de oxígeno presente en los glóbulos rojos. Los portadores de oxígeno basados en hemoglobina, también comúnmente denominados HBOCs, se consideran deseables ya que permiten tanto la expansión del volumen de líquido de los vasos sanguíneos como pueden transportar oxígeno. Además, algunas preparaciones de HBOC no requieren refrigeración y no contienen contaminantes de enfermedades transmitidas por la sangre. Sin embargo, una desventaja significativa asociada con las preparaciones conocidas de HBOC es que su administración puede causar presión arterial alta y retraso en la hemostasia debido a la hemodilución de componentes plasmáticos de coagulación. Estas características hacen que las preparaciones conocidas de HBOC no sean suficientemente adecuadas para el tratamiento del choque hemorrágico. De hecho, en los Estados Unidos la Administración de Alimentos y Medicamentos (FDA) no ha aprobado actualmente terapias basadas en HBOC para tratar el choque hemorrágico (Gupta, A.S., 2019, Shock 52(1S): 70-83).

[0016] Por lo tanto, será claro que aunque se conocen técnicas médicas para tratar el choque hemorrágico en la técnica, permanecen muchas desventajas asociadas con las técnicas conocidas. Por lo tanto, existe una necesidad en la técnica de técnicas mejoradas para tratar el choque hemorrágico, y en particular, existe una necesidad de terapias mejoradas basadas en fluidos para el tratamiento del choque hemorrágico.

[0017] RESUMEN

[0018] La invención está definida en las reivindicaciones. Los siguientes párrafos tienen la intención de introducir al lector a la descripción más detallada que sigue y no de definir o limitar el objeto reivindicado de la presente divulgación.

[0019] En un aspecto amplio, la presente divulgación se relaciona generalmente con el choque hemorrágico, y con formulaciones farmacéuticas para la prevención o el tratamiento del choque hemorrágico.

[0020] De acuerdo con un aspecto, conforme a las enseñanzas aquí descritas, la presente divulgación proporciona, en al menos una forma de realización, una formulación farmacéutica líquida que comprende un complemento de oxigenación que comprende un portador de oxígeno basado en hemoglobina (HBOC) y plasma sanguíneo.

[0021] En al menos una forma de realización, en un aspecto, el complemento de oxigenación puede comprender una cantidad de HBOC de aproximadamente 5 % a aproximadamente 95 % en peso, y una cantidad de plasma sanguíneo de aproximadamente 5 % a aproximadamente 95 % en peso, seleccionándose las cantidades de HBOC y plasma sanguíneo de manera que juntas constituyan menos del 100 % en peso del complemento de oxigenación, constituyendo el resto en peso del complemento de oxigenación un diluyente farmacéuticamente aceptable.

[0022] En al menos una forma de realización, en un aspecto, la formulación farmacéutica puede comprender:

[0023] hasta aproximadamente 95 % en peso del complemento de oxigenación, comprendiendo el complemento de oxigenación una cantidad de HBOC de aproximadamente 5 % a aproximadamente 95 % en peso, y una cantidad de plasma sanguíneo de aproximadamente 5 % a aproximadamente 95 % en peso, seleccionándose las cantidades de HBOC y plasma sanguíneo de manera que juntas constituyan menos del 100 % en peso del complemento de oxigenación, constituyendo el resto en peso del complemento de oxigenación un diluyente farmacéuticamente aceptable; y

[0024] el resto en peso de la formulación farmacéutica constituido por un vehículo, diluyente o agente auxiliar farmacéuticamente aceptable.

[0025] En al menos una forma de realización, en un aspecto, el complemento de oxigenación puede comprender una cantidad de HBOC de aproximadamente 5 % a aproximadamente 50 % en peso, y una cantidad de plasma sanguíneo de aproximadamente 5 % a aproximadamente 95 % en peso, seleccionándose las cantidades de HBOC y plasma sanguíneo de manera que juntas constituyan menos del 100 % en peso del complemento de oxigenación, constituyendo el resto en peso del complemento de oxigenación un diluyente farmacéuticamente aceptable.

[0026] En al menos una forma de realización, en un aspecto, la formulación farmacéutica puede comprender:

[0027] hasta aproximadamente 95 % en peso del complemento de oxigenación, comprendiendo el complemento de oxigenación una cantidad de HBOC de aproximadamente 5 % a aproximadamente 50 % en peso, y una cantidad de plasma sanguíneo de aproximadamente 5 % a aproximadamente 95 % en peso, seleccionándose las cantidades de HBOC y plasma sanguíneo de manera que juntas constituyan menos del 100 % en peso del complemento de oxigenación, constituyendo el resto en peso del complemento de oxigenación un diluyente farmacéuticamente aceptable; y el resto en peso de la formulación farmacéutica constituido por un vehículo, diluyente o agente auxiliar farmacéuticamente aceptable.

[0028] En al menos una forma de realización, en un aspecto, el HBOC puede ser un HBOC hiperpolimerizado.

[0029] En al menos una forma de realización, en un aspecto, el agente auxiliar puede comprender plaquetas sanguíneas.

[0030] En otro aspecto, la presente divulgación proporciona, en al menos una forma de realización, un método de preparación de una formulación farmacéutica líquida para la prevención o el tratamiento del choque hemorrágico, el método que comprende: mezclar

[0031] (i) una preparación de un portador de oxígeno basado en hemoglobina (HBOC); y

[0032] (ii) una preparación de plasma sanguíneo;

[0033] para así constituir un complemento de oxigenación o formular una formulación farmacéutica líquida.

[0034] En al menos una forma de realización, en un aspecto, al menos una de la preparación de HBOC y la preparación de plasma sanguíneo puede ser una preparación líquida.

[0035] En al menos una forma de realización, en un aspecto, al menos una de la preparación de plasma sanguíneo y la preparación de HBOC puede ser una preparación de plasma sanguíneo seco o una preparación de HBOC seca, respectivamente, que tenga un contenido de humedad de aproximadamente 1 % (p/p) a aproximadamente 10 % (p/p).

[0036] En al menos una forma de realización, en un aspecto, la preparación de plasma sanguíneo puede ser una preparación de plasma sanguíneo seco que tenga un contenido de humedad de aproximadamente 1 % (p/p) a aproximadamente 10 % (p/p), y la preparación de HBOC puede ser una preparación líquida de HBOC de bajo contenido de iones.

[0037] En al menos una forma de realización, en un aspecto, la preparación líquida de HBOC puede ser una preparación de HBOC de bajo contenido de iones que comprende no más de aproximadamente 13,5 mEq/L de iones sodio (Na<+>), no más de aproximadamente 0,35 mEq/L de iones potasio (K<+>), no más de aproximadamente 0,46 mEq/L de iones calcio (Ca<2+>), no más de aproximadamente 0,15 mEq/L de iones magnesio (Mg<2+>), no más de aproximadamente 9,6 mEq/L de iones cloruro (Cl-), no más de 2,4 mEq/L de iones bicarbonato (HCO<3>2-

), y no más de aproximadamente 0,25 mEq/L de iones fosfato de hidrógeno (HPO<4>2-

).

[0038] En al menos una forma de realización, en un aspecto, el método puede comprender además mezclar (iii) un vehículo, diluyente o agente auxiliar farmacéuticamente aceptable junto con el complemento de oxigenación para así formar una formulación farmacéutica líquida.

[0039] En al menos una forma de realización, en un aspecto, el complemento de oxigenación puede constituirse para comprender una cantidad de HBOC de aproximadamente 5 % a aproximadamente 95 % en peso, y una cantidad de plasma sanguíneo de aproximadamente 5 % a aproximadamente 95 % en peso, seleccionándose las cantidades de HBOC y plasma sanguíneo de manera que juntas constituyan menos del 100 % en peso del complemento de oxigenación, constituyendo el resto en peso del complemento de oxigenación un diluyente farmacéuticamente aceptable.

[0040] En al menos una forma de realización, en un aspecto, la formulación líquida puede formularse incorporando hasta 95 % en peso del complemento de oxigenación, comprendiendo el complemento de oxigenación una cantidad de HBOC de aproximadamente 5 % a aproximadamente 95 % en peso, y una cantidad de plasma sanguíneo de aproximadamente 5 % a aproximadamente 95 % en peso, seleccionándose las cantidades de HBOC y plasma sanguíneo de manera que juntas constituyan menos del 100 % en peso del complemento de oxigenación, constituyendo el resto en peso del complemento de oxigenación un diluyente farmacéuticamente aceptable; y el resto en peso de la formulación farmacéutica constituido por el vehículo, diluyente o agente auxiliar farmacéuticamente aceptable.

[0041] En al menos una forma de realización, en un aspecto, el complemento de oxigenación puede constituirse para comprender una cantidad de HBOC de aproximadamente 5 % a aproximadamente 50 % en peso, y una cantidad de plasma sanguíneo de aproximadamente 5 % a aproximadamente 95 % en peso, seleccionándose las cantidades de HBOC y plasma sanguíneo de manera que juntas constituyan menos del 100 % en peso del complemento de oxigenación, constituyendo el resto en peso del complemento de oxigenación un diluyente farmacéuticamente aceptable.

[0042] En al menos una forma de realización, en un aspecto, la formulación líquida puede formularse incorporando hasta 95 % en peso del complemento de oxigenación, comprendiendo el complemento de oxigenación una cantidad de HBOC de aproximadamente 5 % a aproximadamente 50 % en peso, y una cantidad de plasma sanguíneo de aproximadamente 5 % a aproximadamente 95 % en peso, seleccionándose las cantidades de HBOC y plasma sanguíneo de manera que juntas constituyan menos del 100 % en peso del complemento de oxigenación, constituyendo el resto en peso del complemento de oxigenación un diluyente farmacéuticamente aceptable; y el resto en peso de la formulación farmacéutica constituido por el vehículo, diluyente o agente auxiliar farmacéuticamente aceptable.

[0043] En al menos una forma de realización, el agente auxiliar puede comprender plaquetas sanguíneas.

[0044] En al menos una forma de realización, en un aspecto, la preparación de HBOC y la preparación de plasma sanguíneo pueden mezclarse 1 hora o menos antes de la administración a un sujeto que lo necesite.

[0045] En otro aspecto, la presente divulgación proporciona, en al menos una forma de realización, un método para prevenir o tratar el choque hemorrágico, el método que comprende administrar por vía intravenosa a un sujeto que lo necesite una cantidad efectiva de un complemento de oxigenación que comprende un portador de oxígeno basado en hemoglobina (HBOC) y plasma sanguíneo, en una cantidad efectiva para prevenir o tratar el choque hemorrágico en el sujeto.

[0046] En al menos una forma de realización, en un aspecto, el complemento de oxigenación puede administrarse al sujeto mediante administración consecutiva de una formulación líquida de HBOC y una formulación líquida de plasma sanguíneo, en la que la formulación líquida de HBOC está sustancialmente libre de plasma sanguíneo, y en la que la formulación líquida de plasma sanguíneo está sustancialmente libre de HBOC.

[0047] En al menos una forma de realización, en un aspecto, el complemento de oxigenación puede administrarse al sujeto mediante administración consecutiva de la formulación de HBOC y la formulación de plasma sanguíneo, en la que la formulación de HBOC se administra antes que la formulación de plasma sanguíneo.

[0048] En al menos una forma de realización, en un aspecto, el complemento de oxigenación puede administrarse al sujeto mediante administración consecutiva de la formulación de HBOC y la formulación de plasma sanguíneo, en la que la formulación de plasma sanguíneo se administra antes que la formulación de HBOC.

[0049] En al menos una forma de realización, en un aspecto, la formulación de HBOC y la formulación de plasma sanguíneo pueden administrarse al sujeto con una diferencia no mayor de aproximadamente 6 horas entre sí.

[0050] En al menos una forma de realización, en un aspecto, el complemento de oxigenación puede administrarse mediante la administración de una formulación farmacéutica líquida que ha sido preparada mezclando una preparación de HBOC y una preparación de plasma sanguíneo.

[0051] En al menos una forma de realización, en un aspecto, la formulación farmacéutica líquida puede comprender además un vehículo, diluyente o agente auxiliar farmacéuticamente aceptable.

[0052] En al menos una forma de realización, en un aspecto, el complemento de oxigenación puede comprender una cantidad de HBOC de aproximadamente 5 % a aproximadamente 95 % en peso, y una cantidad de plasma sanguíneo de aproximadamente 5 % a aproximadamente 95 % en peso, seleccionándose las cantidades de HBOC y plasma sanguíneo de manera que juntas constituyan menos del 100 % en peso del complemento de oxigenación, constituyendo el resto en peso del complemento de oxigenación un diluyente farmacéuticamente aceptable.

[0053] En al menos una forma de realización, en un aspecto, la formulación farmacéutica líquida puede comprender hasta 95 % en peso del complemento de oxigenación, comprendiendo el complemento de oxigenación una cantidad de HBOC de aproximadamente 5 % a aproximadamente 95 % en peso, y una cantidad de plasma sanguíneo de aproximadamente 5 % a aproximadamente 95 % en peso, seleccionándose las cantidades de HBOC y plasma sanguíneo de manera que juntas constituyan menos del 100 % en peso del complemento de oxigenación, constituyendo el resto en peso del complemento de oxigenación un diluyente farmacéuticamente aceptable; y

[0054] el resto en peso de la formulación farmacéutica constituido por el vehículo, diluyente o agente auxiliar farmacéuticamente aceptable.

[0055] En al menos una forma de realización, en un aspecto, el complemento de oxigenación puede comprender una cantidad de HBOC de aproximadamente 5 % a aproximadamente 50 % en peso, y una cantidad de plasma sanguíneo de aproximadamente 5 % a aproximadamente 95 % en peso, seleccionándose las cantidades de HBOC y plasma sanguíneo de manera que juntas constituyan menos del 100 % en peso del complemento de oxigenación, constituyendo el resto en peso del complemento de oxigenación un diluyente farmacéuticamente aceptable.

[0056] En al menos una forma de realización, en un aspecto, la formulación farmacéutica líquida puede comprender hasta 95 % en peso del complemento de oxigenación, comprendiendo el complemento de oxigenación una cantidad de HBOC de aproximadamente 5 % a aproximadamente 50 % en peso, y una cantidad de plasma sanguíneo de aproximadamente 5 % a aproximadamente 95 % en peso, seleccionándose las cantidades de HBOC y plasma sanguíneo de manera que juntas constituyan menos del 100 % en peso del complemento de oxigenación, constituyendo el resto en peso del complemento de oxigenación un diluyente farmacéuticamente aceptable; y

[0057] el resto en peso de la formulación farmacéutica constituido por el vehículo, diluyente o agente auxiliar farmacéuticamente aceptable.

[0058] En al menos una forma de realización, en un aspecto, el agente auxiliar puede comprender plaquetas sanguíneas.

[0059] En al menos una forma de realización, en un aspecto, una formulación farmacéutica que comprende plaquetas sanguíneas puede coadministrarse con el complemento de oxigenación.

[0060] En al menos una forma de realización, en un aspecto, el choque hemorrágico puede ser causado por el sujeto al haber experimentado pérdida traumática de sangre.

[0061] En al menos una forma de realización, en un aspecto, el choque hemorrágico puede ser causado por el sujeto al haber experimentado pérdida no traumática de sangre.

[0062] En otro aspecto, la presente divulgación proporciona, en al menos una forma de realización, un paquete farmacéutico que comprende (i) un primer paquete que comprende una preparación de un portador de oxígeno basado en hemoglobina (HBOC) y (ii) un segundo paquete que comprende una preparación de plasma sanguíneo, siendo el paquete farmacéutico capaz de ser utilizado para constituir una formulación farmacéutica líquida mediante la mezcla de la preparación de HBOC y la preparación de plasma sanguíneo, siendo la formulación farmacéutica líquida formada capaz de ser utilizada para prevenir o tratar el choque hemorrágico cuando se administra a un sujeto que lo necesita, incluyendo el paquete farmacéutico además instrucciones para preparar la formulación farmacéutica líquida.

[0063] En al menos una forma de realización, en un aspecto, el paquete farmacéutico puede comprender además (iii) un tercer paquete que comprende un vehículo, diluyente o agente auxiliar farmacéuticamente aceptable para su mezcla con la preparación de HBOC y la preparación de plasma sanguíneo para así formar la formulación farmacéutica líquida.

[0064] En al menos una forma de realización, en un aspecto, al menos una de la preparación de HBOC y la preparación de plasma sanguíneo puede ser una preparación de HBOC o de plasma sanguíneo seca, que tenga un contenido de humedad de aproximadamente 1 % (p/p) a aproximadamente 10 % (p/p).

[0065] En al menos una forma de realización, en un aspecto, la preparación de plasma sanguíneo puede ser una preparación de HBOC seca que tenga un contenido de humedad de aproximadamente 1 % (p/p) a aproximadamente 10 % (p/p), y la preparación de HBOC puede ser una preparación de HBOC de bajo contenido iónico.

[0066] En al menos una forma de realización, en un aspecto, la preparación de HBOC de bajo contenido iónico puede comprender no más de aproximadamente 13,5 mEq/L de iones sodio (Na<+>), no más de aproximadamente 0,35 mEq/L de iones potasio (K<+>), no más de aproximadamente 0,46 mEq/L de iones calcio (Ca<2+>), no más de aproximadamente 0,15 mEq/L de iones magnesio (Mg<2+>), no más de aproximadamente 9,6 mEq/L de iones cloruro (Cl-), no más de 2,4 mEq/L de iones bicarbonato (HCO<3>2-

).

[0067] En otro aspecto, la presente divulgación proporciona, en al menos una forma de realización, una preparación líquida de HBOC de bajo contenido iónico que comprende no más de aproximadamente 27 milimoles equivalentes (mEq/L) de iones sodio (Na<+>), no más de aproximadamente 0,7 mEq/L de iones potasio (K<+>), no más de aproximadamente 0,92 mEq/L de iones calcio (Ca<2+>), no más de aproximadamente 0,3 mEq/L de iones magnesio (Mg<2+>), no más de aproximadamente 19,2 mEq/L de iones cloruro (Cl-), no más de 4,8 mEq/L de iones bicarbonato (HCO<3>2-

), y no más de aproximadamente 0,5 mEq/L de iones fosfato de hidrógeno (HPO<4>2-

).

[0068] En al menos una forma de realización, en un aspecto, la preparación líquida de HBOC de bajo contenido iónico puede comprender no más de aproximadamente 13,5 mEq/L de iones sodio (Na<+>), no más de aproximadamente 0,35 mEq/L de iones potasio (K<+>), no más de aproximadamente 0,46 mEq/L de iones calcio (Ca<2+>), no más de aproximadamente 0,15 mEq/L de iones magnesio (Mg<2+>), no más de aproximadamente 9,6 mEq/L de iones cloruro (Cl-), no más de 2,4 mEq/L de iones bicarbonato (HCO<3>2-

).

[0069] En al menos una forma de realización, en un aspecto, la preparación líquida de HBOC de bajo contenido iónico puede comprender no más de aproximadamente 6,75 mEq/L de iones sodio (Na<+>), no más de aproximadamente 0,175 mEq/L de iones potasio (K<+>), no más de aproximadamente 0,23 mEq/L de iones calcio (Ca<2+>), no más de aproximadamente 0,075 mEq/L de iones magnesio (Mg<2+>), no más de aproximadamente 4,8 mEq/L de iones cloruro (Cl-), no más de 1,2 mEq/L de iones bicarbonato (HCO<3>2-

), y no más de aproximadamente 0,125 mEq/L de iones fosfato de hidrógeno (HPO<4>2-

).

[0070] En al menos una forma de realización, en un aspecto, la preparación de HBOC de bajo contenido iónico puede comprender una cantidad de HBOC de aproximadamente 5 % a aproximadamente 50 % en peso, comprendiendo el resto de la preparación un diluyente farmacéuticamente aceptable.

[0071] En otro aspecto, la presente divulgación proporciona, en al menos una forma de realización, un uso de un portador de oxígeno basado en hemoglobina (HBOC) y plasma sanguíneo para preparar un complemento de oxigenación para formular una formulación farmacéutica líquida para la prevención o el tratamiento del choque hemorrágico.

[0072] En otro aspecto, la presente divulgación proporciona, en al menos una forma de realización, un uso de una formulación farmacéutica líquida para prevenir o tratar el choque hemorrágico, comprendiendo la formulación líquida un complemento de oxigenación que comprende un portador de oxígeno basado en hemoglobina (HBOC) y plasma sanguíneo y un vehículo, diluyente o agente auxiliar farmacéuticamente aceptable.

[0073] [0059]En otro aspecto, la presente divulgación proporciona, en al menos una forma de realización, una formulación farmacéutica líquida para su uso en la prevención o el tratamiento del choque hemorrágico, comprendiendo la formulación un complemento de oxigenación que comprende un portador de oxígeno basado en hemoglobina (HBOC) y plasma sanguíneo y un vehículo, diluyente o agente auxiliar farmacéuticamente aceptable.

[0075] En otro aspecto, la presente divulgación proporciona, en al menos una forma de realización, un uso de una formulación farmacéutica líquida en la fabricación de un medicamento para su uso en la prevención o el tratamiento del choque hemorrágico, comprendiendo la formulación un complemento de oxigenación que comprende un portador de oxígeno basado en hemoglobina (HBOC) y plasma sanguíneo o constituyentes de plasma sanguíneo y un vehículo, diluyente o agente auxiliar farmacéuticamente aceptable.

[0077] Otras características y ventajas de la presente divulgación se harán aparentes a partir de la siguiente descripción detallada. Se debe entender, sin embargo, que la descripción detallada, aunque indica formas de realización o implementaciones preferidas de la presente divulgación, se proporciona únicamente a modo de ilustración, ya que diversos cambios y modificaciones dentro del espíritu y alcance de la divulgación se harán aparentes para aquellos expertos en la técnica a partir de la descripción detallada.

[0079] DESCRIPCIÓN BREVE DE LOS DIBUJOS

[0081] Estas y otras características de la divulgación se harán más evidentes en la siguiente descripción detallada en la que se hace referencia a los dibujos adjuntos. Las figuras se proporcionan en el presente documento para una mejor comprensión de las formas de realización de ejemplo y para mostrar más claramente cómo las diversas formas de realización de ejemplo pueden llevarse a efecto. Las figuras no tienen la intención de limitar la presente divulgación.

[0083] LaFIG. 1es un gráfico de barras que representa resultados del desempeño de ciertos experimentos descritos en el presente documento. Se muestra el tiempo de protrombina (PT) (PT (s)) para diversas mezclas de ensayo evaluadas que comprenden sangre total (Control), plasma fresco congelado (FFP), plasma fresco congelado HBOC (FFP HBOC), solución de Ringer lactato (LR), sangre total Plasmalyte (Control diluido), plasma fresco congelado Plasmalyte (FFP diluido), plasma fresco congelado HBOC Plasmalyte (FFP HBOC diluido), solución de Ringer lactato Plasmalyte (LR diluido); las barras gris claro representan diluciones al 10 %, las barras gris oscuro representan diluciones al 25 %; la desviación estándar es n = 6.

[0084] LaFIG. 2es un gráfico de barras que representa resultados del desempeño de ciertos experimentos descritos en el presente documento. Se muestra la lisis del coágulo (LY60(%)) para diversas mezclas de ensayo evaluadas (con y sin tPA) que comprenden sangre total (Control), plasma fresco congelado (FFP), plasma fresco congelado HBOC (FFP HBOC), solución de Ringer lactato (LR), sangre total Plasmalyte (Control diluido), plasma fresco congelado Plasmalyte (FFP diluido), plasma fresco congelado HBOC Plasmalyte (FFP HBOC diluido), solución de Ringer lactato Plasmalyte (LR diluido); las barras gris claro representan diluciones al 10 %, las barras gris oscuro representan diluciones al 25 %; las barras gris claro rayadas representan diluciones al 10 % con tPA, las barras gris oscuro rayadas representan diluciones al 20 % con tPA; la desviación estándar es n = 6.

[0085] LaFIG. 3es un gráfico de barras que representa resultados del desempeño de ciertos experimentos descritos en el presente documento. Se muestra el recuento de plaquetas (plaquetas ×10³/µl) para diversas mezclas de ensayo evaluadas que comprenden sangre total (Control), plasma fresco congelado (FFP), plasma fresco congelado HBOC (FFP HBOC), solución de Ringer lactato (LR), sangre total Plasmalyte (Control diluido), plasma fresco congelado Plasmalyte (FFP diluido), plasma fresco congelado HBOC Plasmalyte (FFP HBOC diluido), solución de Ringer lactato Plasmalyte (LR diluido); las barras gris claro representan diluciones al 10 %, las barras gris oscuro representan diluciones al 25 %; la desviación estándar es n = 6.

[0086] LaFIG. 4es un gráfico de barras que representa resultados del desempeño de ciertos experimentos descritos en el presente documento. Se muestra el contenido de hematocrito (HCT (%)) para diversas mezclas de ensayo evaluadas que comprenden sangre total (Control), plasma fresco congelado (FFP), plasma fresco congelado HBOC (FFP HBOC), solución de Ringer lactato (LR), sangre total Plasmalyte (Control diluido), plasma fresco congelado Plasmalyte (FFP diluido), plasma fresco congelado HBOC Plasmalyte (FFP HBOC diluido), solución de Ringer lactato Plasmalyte (LR diluido); las barras gris claro representan diluciones al 10 %, las barras gris oscuro representan diluciones al 25 %; la desviación estándar es n = 6.

[0087] LaFIG. 5es un gráfico de barras que representa resultados del desempeño de ciertos experimentos descritos en el presente documento. Se muestra la concentración de fibrinógeno (fibrinógeno mg/dl) para diversas mezclas de ensayo evaluadas que comprenden sangre total (Control), plasma fresco congelado (FFP), plasma fresco congelado HBOC (FFP HBOC), solución de Ringer lactato (LR), sangre total Plasmalyte (Control diluido), plasma fresco congelado Plasmalyte (FFP diluido), plasma fresco congelado HBOC Plasmalyte (FFP HBOC diluido), solución de Ringer lactato Plasmalyte (LR diluido); las barras gris claro representan diluciones al 10 %, las barras gris oscuro representan diluciones al 25 %; la desviación estándar es n = 6.

[0088] LaFIG. 6es un gráfico de barras que representa resultados del desempeño de ciertos experimentos descritos en el presente documento. Se muestra la concentración de hemoglobina (HGB g/dl) para diversas mezclas de ensayo evaluadas que comprenden sangre total (Control), plasma fresco congelado (FFP), plasma fresco congelado HBOC (FFP HBOC), solución de Ringer lactato (LR), sangre total Plasmalyte (Control diluido), plasma fresco congelado Plasmalyte (FFP diluido), plasma fresco congelado HBOC Plasmalyte (FFP HBOC diluido), solución de Ringer lactato Plasmalyte (LR diluido); las barras gris claro representan diluciones al 10 %, las barras gris oscuro representan diluciones al 25 %; la desviación estándar es n = 6.

[0089] Las figuras junto con la siguiente descripción detallada hacen evidente para aquellos expertos en la materia cómo la divulgación puede implementarse en la práctica.

[0090] DESCRIPCIÓN DETALLADA

[0091] A continuación se describirán diversos procesos, métodos y composiciones para proporcionar un ejemplo de una forma de realización del objeto reivindicado. Ninguna forma de realización descrita a continuación limita ningún objeto reivindicado y cualquier objeto reivindicado puede abarcar procesos, métodos o composiciones que difieran de los descritos a continuación. El objeto reivindicado no se limita a ningún proceso, método o composición que tenga todas las características de los procesos, métodos o composiciones descritos a continuación, ni a características comunes a múltiples procesos, métodos o composiciones descritos a continuación. Es posible que un proceso, método o composición descrito a continuación no sea una forma de realización de ningún objeto reivindicado. Cualquier materia divulgada en procesos, métodos o composiciones descritos a continuación que no esté reivindicada en este documento puede ser objeto de otro instrumento de protección, por ejemplo, una solicitud de patente continuada, y los solicitantes, inventores o propietarios no tienen la intención de abandonar, renunciar o dedicar al público dicha materia mediante su divulgación en este documento.

[0092] Tal como se utiliza en el presente documento y en las reivindicaciones, las formas singulares, tales como “un”, “una” y “el/la”, incluyen la referencia en plural y viceversa a menos que el contexto indique claramente lo contrario. A lo largo de esta memoria descriptiva, salvo que se indique lo contrario, “comprende”, “comprenden” y “comprendiendo” se utilizan de manera inclusiva en lugar de exclusiva, de modo que un elemento o grupo de elementos indicado puede incluir uno o más elementos o grupos de elementos no indicados. El término “o” es inclusivo a menos que se modifique, por ejemplo, mediante “ya sea”. El término “y/o” está destinado a representar un “o” inclusivo, es decir, “X y/o Y” está destinado a significar X o Y o ambos X e Y, por ejemplo, y como ejemplo adicional, X, Y y/o Z está destinado a significar X o Y o Z o cualquier combinación de los mismos.

[0093] Cuando se utilizan intervalos en el presente documento para propiedades físicas, tales como peso molecular, o propiedades químicas, tales como fórmulas químicas, todas las combinaciones y subcombinaciones de intervalos y formas de realización específicas dentro de los mismos están destinadas a estar incluidas. Salvo en los ejemplos de funcionamiento, o cuando se indique lo contrario, todos los números que expresan cantidades de ingredientes o condiciones de reacción utilizados en el presente documento deben entenderse modificados en todos los casos por el término “aproximadamente”. El término “aproximadamente” cuando se refiere a un número o a un intervalo numérico significa que el número o intervalo numérico al que se hace referencia es una aproximación dentro de la variabilidad experimental (o dentro del error experimental estadístico), y por lo tanto el número o intervalo numérico puede variar entre 1 % y 15 % del número o intervalo numérico indicado, como será reconocido fácilmente por el contexto. Además, cualquier intervalo de valores descrito en el presente documento está destinado a incluir específicamente los valores límite del intervalo, y cualquier valor intermedio o subintervalo dentro del intervalo dado, y todos esos valores intermedios y subintervalos se divulgan individual y específicamente (por ejemplo, un intervalo de 1 a 5 incluye 1, 1,5, 2, 2,75, 3, 3,90, 4 y 5). De manera similar, otros términos de grado tales como “sustancialmente” y “aproximadamente” utilizados en el presente documento significan una cantidad razonable de desviación del término modificado de modo que el resultado final no se cambie significativamente. Estos términos de grado deben interpretarse como incluyendo una desviación del término modificado si esta desviación no anula el significado del término que modifica.

[0094] A menos que se definan de otro modo, los términos científicos y técnicos utilizados en relación con las formulaciones descritas en el presente documento tendrán los significados que son comúnmente entendidos por los expertos en la materia. La terminología utilizada en el presente documento es únicamente para el propósito de describir formas de realización particulares y no pretende limitar el alcance del objeto de la presente divulgación, el cual se define únicamente por las reivindicaciones.

[0095] Definiciones

[0096] El término “cantidad efectiva”, tal como se utiliza en el presente documento, se refiere a una cantidad de un agente activo o formulación farmacéutica suficiente para inducir un efecto biológico o terapéutico deseado. Dicho efecto puede incluir un efecto con respecto a los signos, síntomas o causas de una lesión, trastorno o enfermedad o cualquier otra alteración deseada de un sistema biológico. La cantidad efectiva puede variar dependiendo, por ejemplo, del estado de salud, la etapa de la lesión, la etapa del trastorno o la etapa de la enfermedad de un sujeto tratado, el momento de la administración, la forma de administración, la edad del sujeto, y similares, todo lo cual puede ser determinado por expertos en la materia.

[0097] Los términos “HBOC” o “portador de oxígeno basado en hemoglobina”, utilizados de manera intercambiable en el presente documento, se refieren a un derivado de hemoglobina portador de oxígeno en el que la molécula de hemoglobina ha sido modificada, por ejemplo, mediante entrecruzamiento químico de moléculas de hemoglobina, polimerización o conjugación de hemoglobina con otras moléculas, por ejemplo, conjugación con polietilenglicol (PEG) o dextrano.

[0098] [0070]El término “hemoglobina”, tal como se utiliza en el presente documento, se refiere a la proteína contenida dentro de los glóbulos rojos que transporta oxígeno en organismos vivos. Cada molécula de hemoglobina incluye 4 subunidades, 2 cadenas α y 2 cadenas β, que juntas están configuradas en una estructura tetramérica. Cada subunidad también contiene un grupo hemo que contiene hierro, el cual se une al oxígeno. Así, cada molécula de hemoglobina puede unirse a 4 moléculas de oxígeno. Tal como se utiliza en el presente documento, el término por sí solo se refiere a hemoglobina nativa, incluyendo variantes naturales de la misma, e incluye además hemoglobina obtenible de cualquier animal invertebrado o vertebrado, o un ser humano, incluyendo, sin limitación, hemoglobina humana, hemoglobina bovina, hemoglobina aviar y hemoglobina porcina, y cualquier hemoglobina recombinante.

[0099] El término “choque hemorrágico”, tal como se utiliza en el presente documento, se refiere a una condición en un sujeto inducida por la pérdida de una cantidad sustancial del volumen sanguíneo total del sujeto, y que resulta en un flujo inadecuado de sangre a través de órganos vitales, incluidos el corazón y el cerebro, de modo que la función fisiológica normal de los órganos se ve comprometida. La pérdida de sangre puede ser causada por trauma, incluyendo trauma contuso o penetrante, tal como una lesión, un corte profundo o una quemadura, por ejemplo, o trauma sufrido en la realización de una operación quirúrgica. También puede ocurrir una pérdida sustancial de sangre como resultado de hemorragia no traumática, por ejemplo, hemorragia gastrointestinal, tal como puede ser causada, por ejemplo, por una úlcera péptica o cualquier otro trastorno gastrointestinal. La pérdida sustancial de sangre incluye la pérdida de al menos 15 %, o aproximadamente 15 %, al menos 20 %, o aproximadamente 20 %, al menos 30 %, o aproximadamente 30 %, al menos 40 % o aproximadamente 40 % del volumen sanguíneo total de un sujeto.

[0100] El término “hemostasia”, tal como se utiliza en el presente documento, se refiere a la cesación de la pérdida de sangre de uno o más vasos sanguíneos dañados, incluyendo arterias, venas o capilares, así como pérdida difusa de sangre de tejido u órgano. La hemostasia incluye la constricción de los vasos sanguíneos y la coagulación de la sangre para formar un coágulo sanguíneo que funciona como un tapón.

[0101] El término “complemento de oxigenación” se refiere al plasma sanguíneo y al HBOC en conjunto. El complemento de oxigenación puede constituirse como una mezcla líquida que comprende plasma sanguíneo y HBOC. El complemento de oxigenación puede ayudar y complementar los constituyentes de oxigenación existentes en el sistema circulatorio de un sujeto tras su administración al sujeto. El término también puede referirse a la administración más o menos contemporánea de una formulación separada de plasma sanguíneo y una formulación de HBOC a un sujeto.

[0102] El término “formulación farmacéutica”, tal como se utiliza en el presente documento, se refiere a un agente activo que, junto con al menos uno de un vehículo, diluyente o agente auxiliar, es adecuado para administración terapéutica. En el contexto de la presente divulgación, el agente activo puede ser un complemento de oxigenación que comprende HBOC y plasma sanguíneo. Una formulación farmacéutica también puede ser, en ciertas formas de realización, una formulación de plasma sanguíneo o una formulación de HBOC adecuada para administración terapéutica.

[0103] El término “farmacéuticamente aceptable”, tal como se utiliza en el presente documento, se refiere a materiales, incluidos vehículos, diluyentes o agentes auxiliares, que son compatibles con otros materiales en una formulación farmacéutica y que dentro del alcance del juicio médico razonable son adecuados para su uso en contacto con seres humanos o animales sin toxicidad excesiva, respuesta alérgica, irritación u otra respuesta adversa desproporcionada respecto de una relación riesgo/beneficio razonable.

[0104] El término “preparación”, tal como se utiliza en el presente documento, se refiere a una composición que es adecuada para su uso en la fabricación de una formulación farmacéutica. Así, por ejemplo, una preparación de HBOC se refiere a una composición que comprende HBOC adecuada para su uso en la fabricación de una formulación farmacéutica, una formulación farmacéutica para el tratamiento del choque hemorrágico, por ejemplo; y una preparación de plasma sanguíneo se refiere a una composición que comprende plasma sanguíneo adecuada para su uso en la fabricación de una formulación farmacéutica, una formulación farmacéutica para el tratamiento del choque hemorrágico, por ejemplo. La fabricación de una formulación farmacéutica puede implicar, por ejemplo, la formulación con un diluyente, vehículo o agente auxiliar farmacéuticamente aceptable.

[0105] El término “glóbulo rojo” o “eritrocito”, tal como se utiliza en el presente documento, significa una célula no nucleada que contiene hemoglobina que circula en la sangre, generalmente responsable del color rojo de la sangre.

[0106] El término “sujeto”, tal como se utiliza en el presente documento, se refiere a un animal, un mamífero o, aún más, un ser humano.

[0107] Los términos “tratar” y “tratamiento”, y similares, tal como se utilizan en el presente documento, se entienden como la obtención de un efecto fisiológico, farmacológico o biológico deseado. El efecto puede dar lugar a la mejora de un signo, síntoma o causa de una lesión, trastorno o enfermedad atribuible a la lesión, trastorno o enfermedad, o el efecto puede dar lugar a la curación o sanación parcial o completa de una lesión, trastorno o enfermedad. La evidencia clínica del tratamiento puede variar con la lesión, trastorno o enfermedad, el sujeto y el tratamiento seleccionado. En el contexto del tratamiento del choque hemorrágico, un efecto fisiológico puede incluir la hemostasia.

[0108] [0080]“Sustancialmente puro”, tal como se utiliza en el presente documento, describe una entidad, por ejemplo una célula o un compuesto químico o bioquímico, tal como la hemoglobina, que ha sido separada de constituyentes que normalmente la acompañan. Típicamente, una entidad es sustancialmente pura cuando al menos el 60 %, más preferiblemente al menos el 75 %, más preferiblemente al menos el 90 %, 95 %, 96 %, 97 % o 98 %, y más preferiblemente al menos el 99 % del material total (por volumen, por peso húmedo o seco, o por porcentaje molar o fracción molar) en una muestra es la entidad de interés. Con referencia a una preparación de glóbulos rojos, el término puede referirse además a la separación de células no eritrocitarias, por ejemplo, leucocitos y trombocitos, incluyendo una preparación que comprende no más del 2 %, 1 %, 0,5 % o 0,1 % en peso de células no eritrocitarias. Asimismo, con respecto al plasma sanguíneo, el término puede referirse además a la separación de células sanguíneas, por ejemplo, glóbulos rojos, glóbulos blancos y trombocitos, incluyendo una preparación que comprende no más del 5 %, 4 %, 3 %, 2 % o 1 % en peso de células sanguíneas. La pureza puede medirse mediante cualquier método apropiado, por ejemplo, en el caso de proteínas, mediante cromatografía, electroforesis en gel o análisis por HPLC, y en el caso de glóbulos rojos, mediante citometría de flujo.

[0110] Implementación general

[0112] En resumen, se ha reconocido que pueden prepararse nuevas formulaciones farmacéuticas que comprenden un complemento de oxigenación que incluye un portador de oxígeno basado en hemoglobina (HBOC) y componentes de plasma sanguíneo, y que estas formulaciones farmacéuticas pueden utilizarse de manera inesperada y eficaz para prevenir o tratar el choque hemorrágico. Las formulaciones farmacéuticas de la presente divulgación pueden administrarse a un sujeto que lo necesite, notablemente un sujeto en riesgo de sufrir un choque hemorrágico, o un sujeto que sufre un choque hemorrágico, por ejemplo, un choque hemorrágico resultante de una lesión traumática. Las formulaciones farmacéuticas de la presente divulgación pueden complementar los constituyentes de oxigenación existentes en el sistema circulatorio de un sujeto tras su administración al sujeto. Sorprendentemente, tras la administración de las formulaciones farmacéuticas de la presente divulgación, la pérdida de sangre de los vasos sanguíneos lesionados puede controlarse y la hemostasia puede lograrse rápidamente. Así, las formulaciones farmacéuticas de la presente divulgación pueden utilizarse para prevenir o tratar el choque hemorrágico. En este sentido, se observa que la eficacia de la administración de una formulación que comprende HBOC solo o plasma sanguíneo solo, como compuesto activo, puede considerarse sustancialmente inferior a la eficacia de la administración de las formulaciones farmacéuticas de la presente divulgación. En particular, la administración de preparaciones que comprenden HBOC solo como agente activo puede conducir a un aumento de la presión arterial y a un retraso en el tiempo necesario para lograr la hemostasia, lo que hace que las preparaciones que contienen HBOC solo como agente activo sean insuficientemente adecuadas para prevenir o tratar el choque hemorrágico. Las formulaciones farmacéuticas de la presente divulgación pueden fabricarse de manera segura y económica, e igualmente se incluyen en el presente documento métodos de fabricación.

[0114] Además, en ciertas formas de realización del presente documento, las formulaciones farmacéuticas de la presente divulgación pueden constituirse de manera que den lugar a productos farmacéuticos ligeros. Esto hace que las formulaciones farmacéuticas de la presente divulgación sean particularmente adecuadas para su uso en, por ejemplo, operaciones en el campo de batalla, donde el uso de suministros médicos compactos y ligeros puede ser ventajoso.

[0116] Así, la divulgación proporciona, en un aspecto, formulaciones farmacéuticas para la prevención y el tratamiento del choque hemorrágico. La divulgación proporciona, en un aspecto adicional, métodos para preparar formulaciones farmacéuticas para la prevención y el tratamiento del choque hemorrágico. Además, la presente divulgación proporciona, en otro aspecto, métodos para la prevención y el tratamiento del choque hemorrágico.

[0118] A continuación se describen formas de realización seleccionadas.

[0120] De acuerdo con ello, la presente divulgación proporciona, en un aspecto, en una forma de realización, una formulación farmacéutica que comprende un complemento de oxigenación que comprende un portador de oxígeno basado en hemoglobina (HBOC) y plasma sanguíneo. La formulación farmacéutica puede comprender además un vehículo, diluyente o agente auxiliar farmacéuticamente aceptable. La formulación farmacéutica puede utilizarse para tratar o prevenir el choque hemorrágico.

[0122] En general, las formulaciones farmacéuticas de la presente divulgación pueden prepararse proporcionando inicialmente una preparación de HBOC y una preparación de plasma sanguíneo. Así, a continuación se discutirán inicialmente métodos de ejemplo para obtener formulaciones de plasma y HBOC. Posteriormente, se discutirán métodos para preparar formulaciones farmacéuticas que comprendan ambas preparaciones. Posteriormente, se discutirán métodos para prevenir o tratar el choque hemorrágico.

[0124] [0087]En un aspecto, tanto las preparaciones de HBOC como las preparaciones de plasma pueden fabricarse utilizando sangre total como fuente. Se observa que la sangre incluye todos los componentes de la sangre que circulan en un sujeto, incluyendo, pero sin limitarse a, glóbulos rojos, glóbulos blancos, plasma, factores de coagulación, pequeñas proteínas, plaquetas y/o crioprecipitado. Este es típicamente el tipo de sangre que se dona cuando un paciente humano dona sangre. La sangre adecuada que puede utilizarse de acuerdo con lo aquí descrito incluye sangre de animales invertebrados o vertebrados o sangre humana, incluyendo, sin limitación, sangre de mamíferos y aves, incluyendo, sin limitación, sangre humana, sangre bovina, sangre porcina, sangre equina, sangre aviar o cualquier formulación recombinante de hemoglobina. Las soluciones de sangre pueden recolectarse de organismos vivos o muertos, y pueden recolectarse utilizando cualquier técnica y dispositivo conocido en la técnica, incluyendo, por ejemplo, las metodologías descritas en las Patentes de Estados Unidos 5,084,558 y 5,296,465. La sangre puede ser fresca o provenir de una muestra más antigua, por ejemplo, sangre almacenada en un banco de sangre. Se prefiere que la solución de sangre sea evaluada para detectar la presencia de patógenos transmitidos por la sangre, por ejemplo, cuando se utiliza sangre humana, VIH y hepatitis B. Preferiblemente, se selecciona sangre libre de patógenos transmitidos por la sangre para su uso de acuerdo con los métodos de la presente divulgación. Tras la recolección de la sangre, se prefiere que se añada un anticoagulante a la sangre para evitar la coagulación. Los anticoagulantes que pueden utilizarse incluyen heparina, hirudina, citrato de sodio o ácido etilendiaminotetraacético (EDTA), por ejemplo. El anticoagulante puede proporcionarse como una solución acuosa o en forma particulada. El anticoagulante además puede incluirse en un recipiente de recolección antes de la recolección de la sangre en el recipiente de recolección, por ejemplo, la sangre puede recolectarse en un tubo de recolección de sangre recubierto de heparina.

[0126] El plasma sanguíneo es conocido en la técnica como el componente líquido amarillo de la sangre en el que las células sanguíneas de la sangre total están suspendidas, constituye aproximadamente el 55 % del volumen sanguíneo total y tiene una densidad de aproximadamente 1,025 kg/L. El plasma sanguíneo incluye agua (hasta el 95 % en volumen), proteínas plasmáticas sanguíneas en suspensión, incluyendo albúminas séricas, globulinas y fibrinógeno, glucosa, factores de coagulación y electrolitos (por ejemplo, Na<+>, Ca<2+>, Mg<2+>, HCO<3>-, Cl-). Una técnica bien conocida para preparar una fracción de plasma sanguíneo a partir de sangre total se basa en la centrifugación de muestras de sangre total. Así, en un aspecto, las muestras de sangre pueden recolectarse en un recipiente de centrifugación, tal como un tubo de centrifugación, y centrifugarse a alta velocidad, por ejemplo, durante aproximadamente 10 minutos a aproximadamente 20 minutos a aproximadamente 1.000–2.000 × g utilizando una centrífuga refrigerada. Las células sanguíneas se acumularán en el fondo del recipiente de centrifugación y el plasma sanguíneo puede recolectarse mediante vertido o extracción del sobrenadante. La fracción de plasma sanguíneo recolectada puede considerarse una preparación de plasma no diluida, es decir una preparación de plasma que contiene sustancialmente nada más que todos o aproximadamente todos los constituyentes del plasma sanguíneo presentes de manera nativa en la sangre, y en aproximadamente las mismas cantidades relativas presentes de manera nativa en la sangre. Las muestras de plasma sanguíneo generalmente se mantienen preferentemente a aproximadamente 2 ºC a aproximadamente 8 ºC para uso inmediato o pueden almacenarse por períodos más largos a temperaturas de −20 ºC o inferiores. Otros métodos adecuados para aislar plasma sanguíneo de células sanguíneas que también pueden utilizarse incluyen métodos basados en filtración, incluyendo los métodos descritos en las Patentes de EE. UU. N.<os>10,088,469; 6,403,384 y 5,876,605, por ejemplo. Mediante la selección y realización de estas u otras técnicas, o combinaciones o ajustes de las mismas, puede obtenerse una preparación de plasma sanguíneo y utilizarse de acuerdo con la presente divulgación. Dependiendo de la técnica o técnicas seleccionadas, la pureza de la preparación de plasma sanguíneo puede variar. En formas de realización preferidas, la preparación de plasma sanguíneo es una preparación que está sustancialmente libre de glóbulos rojos y contiene, por ejemplo, menos de aproximadamente 0,5 % o menos de aproximadamente 0,1 % en peso de glóbulos rojos.

[0128] Así, en algunas formas de realización, la preparación de plasma sanguíneo puede ser una preparación líquida no diluida.

[0130] En un aspecto, una preparación líquida de plasma sanguíneo no diluida puede diluirse utilizando un diluyente farmacéuticamente aceptable, por ejemplo, una solución salina. Así, por ejemplo, un peso de una preparación líquida de plasma sanguíneo no diluida puede diluirse con aproximadamente 0,5x a aproximadamente 10x pesos de un diluyente, para formar una preparación líquida de plasma sanguíneo diluida. A efectos de la presente divulgación, una preparación líquida de plasma sanguíneo diluida puede considerarse que contiene un cierto porcentaje en peso de preparación líquida de plasma sanguíneo no diluida. Así, por ejemplo, cuando un peso de una preparación líquida de plasma sanguíneo no diluida se diluye con 9 pesos de un diluyente, la preparación líquida de plasma resultante puede considerarse que contiene 10 % en peso de preparación líquida de plasma no diluida. Además, cuando se prepara una preparación de plasma sanguíneo seca, como se describe más adelante, la preparación de plasma sanguíneo seca puede ser una preparación de la cual, por ejemplo, se ha eliminado el 90 % en peso del líquido endógeno, y por lo tanto la preparación de plasma sanguíneo seca puede considerarse que contiene aproximadamente 10 % en peso de preparación líquida de plasma no diluida.

[0132] En algunas formas de realización, en un aspecto, la preparación de plasma sanguíneo puede ser una preparación de plasma sanguíneo seca. En general, para obtener una preparación de plasma sanguíneo seca, una preparación de plasma sanguíneo en estado líquido se trata para transformar la preparación de plasma sanguíneo líquida en una preparación de plasma sanguíneo particulada. Una preparación de plasma sanguíneo seca de acuerdo con lo aquí descrito puede ser una preparación de plasma sanguíneo que tiene un contenido de humedad de aproximadamente 10 % (p/p) o menos, por ejemplo de aproximadamente 1 % (p/p) a aproximadamente 10 % (p/p), o de aproximadamente 1 % (p/p) a aproximadamente 8 % (p/p), o de aproximadamente 1 % (p/p) a aproximadamente 5 % (p/p), o de aproximadamente 1 % (p/p) a aproximadamente 3 % (p/p), o de aproximadamente 1 % (p/p) a aproximadamente 2 % (p/p). En este sentido, una preparación de plasma sanguíneo seca puede prepararse, por ejemplo, mediante secado por pulverización o liofilización (también conocido por los expertos en la materia como liofilización) de una preparación líquida de plasma sanguíneo.

[0134] [0092]Como será conocido por los expertos en la materia, en general, la liofilización implica la congelación de una suspensión líquida y el secado por sublimación, típicamente bajo condiciones de vacío parcial, y la posterior separación del producto seco y eliminación de la humedad sublimada. Las técnicas para liofilizar plasma sanguíneo son conocidas en la técnica y pueden seleccionarse y utilizarse por los expertos en la materia para obtener una preparación de plasma sanguíneo seca, incluyendo, por ejemplo, las técnicas para liofilizar plasma sanguíneo descritas en las Patentes de EE. UU.7,931,919 y 8,518,452, ambas incorporadas aquí por referencia.

[0136] El secado por pulverización, como será conocido por los expertos en la materia en general, implica la pulverización de una suspensión líquida, utilizando por ejemplo una boquilla a presión o un atomizador, en un medio de secado caliente, típicamente aire, aunque también pueden utilizarse otros gases como nitrógeno, de manera controlada. Tras el contacto entre las gotas líquidas pulverizadas y el medio de secado caliente, la humedad de las gotas se evapora y puede obtenerse un producto con un contenido de humedad deseado. El producto se separa entonces del medio de secado. Las técnicas para el secado por pulverización de plasma sanguíneo que pueden utilizarse en este sentido incluyen las técnicas descritas en la Patente de EE. UU.9,545,397 y la Solicitud de Patente de EE. UU. con Publicación N.º US2018/10153811, ambas incorporadas aquí por referencia.

[0138] El plasma sanguíneo seco también puede adquirirse comercialmente, por ejemplo, de Velico Medical®, Inc. (Beverly, MA) o Teleflex®, Inc. (Wayne, PA).

[0140] A continuación, en relación con las preparaciones de HBOC y los métodos de fabricación de preparaciones de HBOC, en una forma de realización, pueden utilizarse glóbulos rojos aislados como fuente a partir de la cual puede extraerse hemoglobina para obtener una preparación de hemoglobina aislada. La preparación de hemoglobina, a su vez, puede utilizarse para preparar una preparación de HBOC.

[0142] Los glóbulos rojos constituyen aproximadamente el 45 % del volumen sanguíneo total. Las técnicas que pueden utilizarse para separar glóbulos rojos de la sangre total incluyen centrifugación y/o técnicas de tamizado y filtración, o una combinación de las mismas. Las técnicas de centrifugación pueden implicar la recolección de muestras de sangre en un recipiente de centrifugación, tal como un tubo de centrifugación, y la centrifugación, por ejemplo, durante aproximadamente 10 a aproximadamente 20 minutos a aproximadamente 500–1.000 × g utilizando una centrífuga refrigerada. Los glóbulos rojos se acumularán como un pellet en el fondo del recipiente de centrifugación y pueden recolectarse vertiendo el sobrenadante de plasma sanguíneo. Los glóbulos rojos pueden entonces resuspenderse en un tampón isotónico adecuado, por ejemplo 0,9 % NaCl, 5 mM fosfato de sodio, pH 8. La centrifugación y resuspensión pueden repetirse varias veces para lavar los glóbulos rojos y eliminar impurezas solubles. También puede ser deseable eliminar los glóbulos blancos, que constituyen menos del 1 % en peso de la sangre total. En particular, cuando las células sanguíneas se almacenan durante un período más largo, los glóbulos blancos pueden deteriorarse y liberar citocinas, lo que puede causar reacciones adversas tras la administración si se incluyen en una formulación final. La eliminación de glóbulos blancos puede lograrse mediante filtración, por ejemplo, filtración de sangre total antes de la centrifugación, utilizando un filtro de leucodepleción, tal como un filtro IMUGARD® III-RC. Las muestras de glóbulos rojos generalmente se mantienen preferentemente a aproximadamente 2 ºC a aproximadamente 8 ºC y a esta temperatura pueden preservarse durante 30 a 40 días, o pueden almacenarse por períodos más largos a temperaturas de −20 ºC o inferiores.

[0144] Los glóbulos rojos también pueden aislarse de sangre total mediante diafiltración utilizando una solución isotónica, que tenga un pH y una osmolaridad que preserven la integridad de la membrana celular eritrocitaria, por ejemplo, una solución de citrato de sodio (aproximadamente 6,0 g/L) y cloruro de sodio (aproximadamente 8,0 g/L) con una osmolaridad de 285–315 mOsm. Los filtros de diafiltración aceptables que pueden utilizarse de acuerdo con lo aquí descrito incluyen membranas microporosas que separan sustancialmente los eritrocitos de componentes más pequeños, por ejemplo, una membrana de filtración de flujo tangencial de fibra hueca de polisulfona modificada obtenible de Spectrum® Labs Inc. La solución isotónica puede añadirse en lotes o de forma continua, típicamente aproximadamente a la misma velocidad a la que se pierde el filtrado. Durante este paso, los componentes de la solución sanguínea más pequeños que los glóbulos rojos, generalmente la porción plasmática de la sangre, incluyendo proteínas sanguíneas extracelulares, por ejemplo, anticuerpos y albúminas séricas, se separan como filtrado de los glóbulos rojos, que se retienen y se añaden de forma continua o por lotes a la solución isotónica. Los volúmenes de solución isotónica utilizados pueden variar y pueden ser, por ejemplo, al menos 2x, 3x, 4x, 5x, 6x o 7x el volumen de la solución sanguínea. En algunas formas de realización, se utilizan volúmenes suficientes de solución isotónica para eliminar al menos de aproximadamente 90 % a 95 % (mol/mol) de las proteínas del plasma sanguíneo y obtener una preparación de glóbulos rojos sustancialmente pura, por ejemplo, una preparación de glóbulos rojos que sea al menos aproximadamente 90 %, al menos aproximadamente 95 % o al menos aproximadamente 99 % pura.

[0146] Las técnicas utilizadas para aislar glóbulos rojos de la sangre y obtener una preparación de glóbulos rojos pueden ser las deseadas e incluyen cualquier técnica conocida en la técnica, incluyendo, además, por ejemplo, los métodos para aislar glóbulos rojos descritos en la Patente de EE. UU.5,955,581.

[0148] Para aislar hemoglobina de glóbulos rojos aislados, los glóbulos rojos aislados pueden lisarse. Puede utilizarse cualquier técnica de lisis de glóbulos rojos conocida en la técnica, incluyendo cualquier técnica de lisis mecánica, química o fisicoquímica de tonicidad de fluidos, siempre que dicha técnica no afecte sustancialmente de manera negativa la capacidad de la hemoglobina para transportar y liberar oxígeno.

[0150] [0100]En un aspecto, los glóbulos rojos aislados pueden lisarse sometiendo los glóbulos rojos a un choque hipotónico para obtener un lisado de glóbulos rojos. Las soluciones hipotónicas adecuadas que pueden utilizarse de acuerdo con lo aquí descrito incluyen, por ejemplo, un tampón fosfato 3,75 mM, pH 7,2 o agua que puede mezclarse con los glóbulos rojos, y la mezcla puede incubarse en hielo, por ejemplo, durante 1 hora para obtener una preparación de glóbulos rojos lisados. Posteriormente, puede obtenerse una fracción de hemoglobina a partir del lisado de glóbulos rojos utilizando una variedad de técnicas adecuadas de purificación de proteínas, incluyendo técnicas de separación cromatográfica que incluyen métodos basados en absorción, que implican la retención inicial de hemoglobina en medios cromatográficos sólidos y posteriormente elución basada en solventes, o técnicas basadas en flujo continuo, que implican la retención de impurezas y el flujo de paso de la hemoglobina. Otras técnicas basadas en cromatografía incluyen cromatografía de afinidad y cromatografía líquida de alta resolución (HPLC). Las técnicas cromatográficas para aislar hemoglobina y obtener una preparación de hemoglobina aislada que puede utilizarse adicionalmente incluyen, por ejemplo, aquellas descritas en la Patente de EE. UU.5,691,453, Andrade et al., Int. J. Biol. Macromol.2004, 34: 233-240, y Lu et al., Artif. Cells Blood Substit. Immobil. Biotechnol. 2004, 32: 2004. Alternativamente, para aislar hemoglobina, los lisados de glóbulos rojos pueden someterse a técnicas de purificación no basadas en cromatografía, incluyendo, por ejemplo, extracción en fase acuosa, técnicas de microfiltración y ultrafiltración basadas en membranas y técnicas basadas en flujo tangencial. Las técnicas basadas en ultrafiltración que pueden utilizarse incluyen aquellas descritas por Feins et al.2005, J. Membr. Sci 248: 137-148. Las técnicas basadas en flujo tangencial que pueden utilizarse incluyen aquellas descritas por ejemplo por Palmer et al., 2009, en Biotechnol. Progr.2009, 26 (1) 189-199 y Elmer et al., Biotechnol. Progr.2009, 25(5) 1402-1410. Las técnicas de extracción acuosa en dos fases que pueden utilizarse para obtener hemoglobina incluyen aquellas descritas en la Patente de EE. UU.5,407,579.

[0152] Utilizando las técnicas anteriores, o combinaciones o modificaciones de las mismas, u otras técnicas adecuadas, en algunas formas de realización pueden obtenerse preparaciones de hemoglobina sustancialmente puras, incluyendo, por ejemplo, preparaciones que son al menos aproximadamente 80 %, 85 %, 90 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % o 99 % puras.

[0154] Las preparaciones de hemoglobina obtenidas utilizando las técnicas anteriores pueden utilizarse para preparar preparaciones de HBOC, incluyendo preparaciones de HBOC polimerizadas, por ejemplo, mediante entrecruzamiento de moléculas de hemoglobina o mediante modificación química de moléculas de hemoglobina. El entrecruzamiento de moléculas de hemoglobina generalmente implica el uso de agentes de entrecruzamiento para causar enlaces entre residuos de aminoácidos de múltiples moléculas de hemoglobina y formar enlaces intermoleculares entre moléculas de hemoglobina. Así, por ejemplo, polialdehídos a concentraciones finales entre aproximadamente 0,15 g/L y 20 g/L pueden utilizarse como agentes de entrecruzamiento. Por ejemplo, glutaraldehído a una concentración final de aproximadamente 0,15 g/L a aproximadamente 2 g/L, o succinaldehído a una concentración final de aproximadamente 0,15 g/L a aproximadamente 1,7 g/L pueden utilizarse para entrecruzar moléculas de hemoglobina. Ejemplos de moléculas de hemoglobina polimerizada y técnicas para su preparación se describen, por ejemplo, en la Patente de EE. UU.5,955,581; la Patente de EE. UU.5,895,810; la Solicitud de Patente de EE. UU. US2012/0028899 y las Solicitudes de Patente PCT PCT/CA2017/051111 y PCT/US2018/042497. Ejemplos de moléculas de hemoglobina modificadas químicamente y técnicas para su preparación incluyen, por ejemplo, hemoglobina conjugada con polisacáridos (véase: por ejemplo, PCT PCT/CA99/00260), hemoglobina conjugada con óxido de polialquileno (véase: por ejemplo, Patente de EE. UU.

[0155] 5,650,388) y hemoglobina conjugada con polietilenglicol (PEG) (véase: por ejemplo, Patente de EE. UU. 5,750,725, Patente de EE. UU.7,144,989 y Patente de EE. UU.8,609,815).

[0157] En una forma de realización, la preparación de HBOC puede comprender moléculas de hemoglobina hiperpolimerizada. Las moléculas de hemoglobina hiperpolimerizada pueden tener una masa molecular de al menos 1.600 kDa y una capacidad de transporte de oxígeno de 11 g/dl [Hb], y pueden presentar extravasación limitada o nula (es decir, fuga fuera del vaso sanguíneo). Sin pretender quedar ligado a teoría, se considera que moléculas de HBOC de menor tamaño pueden extravasarse y unirse al óxido nítrico endotelial (NO) (también conocido como factor relajante derivado del endotelio), reduciendo así la concentración de NO, lo que a su vez causa constricción vascular, reducción del flujo sanguíneo y aumento de la presión arterial.

[0159] En algunas formas de realización, una preparación de HBOC que puede utilizarse de acuerdo con lo aquí descrito puede ser una preparación de HBOC de baja carga iónica. El término “preparación de HBOC de baja carga iónica” se refiere en el presente documento a una preparación de HBOC que comprende una concentración de electrolitos iónicos solubles sustancialmente menor que la concentración fisiológica de electrolitos solubles presente en el plasma sanguíneo humano. En este sentido, los niveles fisiológicos de electrolitos iónicos solubles son aproximadamente de 135 a 145 miliequivalentes (mEq/L) de iones sodio (Na<+>), aproximadamente de 3,5 mEq/L a 5,5 mEq/L de iones potasio (K<+>), aproximadamente de 4,6 mEq/L a 5,5 mEq/L de iones calcio (Ca<2+>), aproximadamente de 1,5 mEq/L a 2,5 mEq/L de iones magnesio (Mg<2+>), aproximadamente de 96 mEq/L a 106 mEq/L de iones cloruro (Cl-), aproximadamente de 24 mEq/L a 30 mEq/L de iones bicarbonato (HCO<3>2-

) y aproximadamente de 2,5 mEq/L a 4,5 mEq/L de iones fosfato de hidrógeno (HPO<4>2-

). En formas de realización de ejemplo, una preparación de HBOC de baja carga iónica puede ser una preparación de HBOC que comprende no más de aproximadamente 27 mEq/L de iones sodio (Na<+>), no más de aproximadamente 0,7 mEq/L de iones potasio (K<+>), no más de aproximadamente 0,92 mEq/L de iones calcio (Ca<2+>), no más de aproximadamente 0,3 mEq/L de iones magnesio (Mg<2+>), no más de aproximadamente 19,2 mEq/L de iones cloruro (Cl-), no más de 4,8 mEq/L de iones bicarbonato (HCO<3>2-

) y no más de aproximadamente 0,5 mEq/L de iones fosfato de hidrógeno (HPO<4>2-

); o no más de aproximadamente 13,5 mEq/L de iones sodio (Na<+>), no más de aproximadamente 0,35 mEq/L de iones potasio (K<+>), no más de aproximadamente 0,46 mEq/L de iones calcio (Ca<2+>), no más de aproximadamente 0,15 mEq/L de iones magnesio (Mg<2+>), no más de aproximadamente 9,6 mEq/L de iones cloruro (Cl-), no más de 2,4 mEq/L de iones bicarbonato (HCO<3>2-

) y no más de aproximadamente 0,25 mEq/L de iones fosfato de hidrógeno (HPO<4>2-

); o no más de aproximadamente 6,75 mEq/L de iones sodio (Na<+>), no más de aproximadamente 0,175 mEq/L de iones potasio (K<+>), no más de aproximadamente 0,23 mEq/L de iones calcio (Ca<2+>), no más de aproximadamente 0,075 mEq/L de iones magnesio (Mg<2+>), no más de aproximadamente 4,8 mEq/L de iones cloruro (Cl-), no más de 1,2 mEq/L de iones bicarbonato (HCO<3>2-

) y no más de aproximadamente 0,125 mEq/L de iones fosfato de hidrógeno (HPO<4>2-

).

[0161] En general, una preparación de HBOC de baja carga iónica puede prepararse partiendo de una preparación de HBOC que comprende concentraciones fisiológicas de carga iónica y sustituyendo el diluyente o excipiente por un tampón de baja carga iónica. Esto puede lograrse, por ejemplo, mediante diálisis o diafiltración utilizando un tampón de baja carga iónica, o utilizando cualquier otra técnica adecuada conocida en la técnica.

[0163] En algunas formas de realización, la preparación de HBOC puede ser una preparación líquida o puede prepararse como una formulación líquida, por ejemplo, añadiendo un diluyente o excipiente farmacéuticamente aceptable, tal como una solución salina que comprenda concentraciones fisiológicas o de baja carga iónica, y mezclando la preparación de HBOC y el diluyente para diluir la preparación de HBOC. De este modo, en formas de realización preferidas, una preparación líquida de HBOC puede prepararse para constituir una cantidad de HBOC de aproximadamente 10 % a aproximadamente 90 % en peso, y una cantidad de diluyente, de modo que el resto en peso (es decir 90 % a 10 % en peso) constituya el diluyente.

[0165] En algunas formas de realización, la preparación de HBOC puede ser una preparación de HBOC seca. En general, para obtener una preparación de HBOC seca, una preparación de HBOC en estado líquido puede tratarse para transformar la preparación líquida de HBOC en una preparación particulada de HBOC. Una preparación de HBOC seca de acuerdo con lo aquí descrito puede ser una preparación de HBOC que tiene un contenido de humedad inferior a aproximadamente 10 % (p/p), por ejemplo, de aproximadamente 1 % (p/p) a aproximadamente 10 % (p/p), o de aproximadamente 1 % (p/p) a aproximadamente 8 % (p/p), o de aproximadamente 1 % (p/p) a aproximadamente 5 % (p/p), o de aproximadamente 1 % (p/p) a aproximadamente 3 % (p/p), o de aproximadamente 1 % (p/p) a aproximadamente 2 % (p/p). En este sentido, una preparación de HBOC seca puede prepararse, por ejemplo, mediante secado por pulverización o liofilización de una preparación líquida de HBOC, utilizando técnicas conocidas por los expertos en la materia, incluyendo técnicas sustancialmente similares a las técnicas para obtener una preparación de plasma sanguíneo seca descritas anteriormente.

[0167] Las preparaciones de plasma sanguíneo, preparaciones de glóbulos rojos y preparaciones de hemoglobina también pueden obtenerse de un proveedor comercial. Los proveedores comerciales de plasma sanguíneo incluyen Sigma-Aldrich®, St Louis (MO). Los proveedores comerciales de hemoglobina incluyen Thomas Scientific, Inc., Swedesboro (NJ) y Sigma-Aldrich®. Los proveedores comerciales de glóbulos rojos incluyen bancos de sangre, como la Cruz Roja.

[0169] De acuerdo con ciertos aspectos de la presente divulgación, pueden proporcionarse preparaciones de plasma sanguíneo líquido o seco y preparaciones de HBOC líquidas o secas, y se describen formas de realización ejemplares de la preparación de formulaciones farmacéuticas utilizando las preparaciones de plasma sanguíneo y las preparaciones de HBOC.

[0171] En una forma de realización ejemplar, una preparación de plasma sanguíneo y una preparación de HBOC pueden ponerse en contacto entre sí y mezclarse hasta obtener una mezcla líquida sustancialmente homogénea, por ejemplo, mediante la adición conjunta de las dos preparaciones en un recipiente de mezcla adecuado, por ejemplo un vaso de precipitados, matraz o botella, preferentemente a una temperatura de 2 ºC a aproximadamente 8 ºC, mediante mezcla o agitación suave, utilizando, por ejemplo, un agitador magnético u otro dispositivo de agitación mecánica, y la mezcla líquida así constituida que comprende plasma sanguíneo y HBOC, en el contexto de la presente divulgación, se denomina en el presente documento “complemento de oxigenación”; y se señala que el complemento de oxigenación puede ayudar y complementar los constituyentes de oxigenación existentes en el sistema circulatorio de un sujeto tras su administración al sujeto; y se señala adicionalmente que el término “complemento de oxigenación” en el presente documento también puede referirse a la administración más o menos contemporánea de una formulación de plasma sanguíneo separada y una formulación de HBOC, cuando ello sea claramente evidente por el contexto.

[0173] Las cantidades relativas de la preparación de HBOC y la preparación de plasma sanguíneo que constituyen el complemento de oxigenación pueden variar, de modo que, en formas de realización ejemplares, el complemento de oxigenación puede comprender una cantidad de HBOC de aproximadamente 5 % a aproximadamente 95 % en peso, y una cantidad de plasma sanguíneo de aproximadamente 5 % a aproximadamente 95 % en peso, en donde las cantidades de HBOC y plasma sanguíneo se seleccionan de modo que en conjunto constituyan menos del 100 % en peso del complemento de oxigenación, y en donde adicionalmente el resto en peso del complemento de oxigenación constituye, o constituye sustancialmente, un diluyente farmacéuticamente aceptable, notablemente un diluyente incluido cuando se prepararon las preparaciones de HBOC y de plasma sanguíneo.

[0175] [0112]Así, por ejemplo, el complemento de oxigenación puede prepararse seleccionando cantidades de HBOC y de plasma sanguíneo de modo que el complemento de oxigenación comprenda una cantidad de HBOC de aproximadamente 5 % en peso y una cantidad de plasma sanguíneo de aproximadamente 5 % a aproximadamente 90 % en peso; o una cantidad de HBOC de aproximadamente 10 % en peso y una cantidad de plasma sanguíneo de aproximadamente 5 % a aproximadamente 85 % en peso; o una cantidad de HBOC de aproximadamente 15 % en peso y una cantidad de plasma sanguíneo de aproximadamente 5 % a aproximadamente 80 % en peso; o una cantidad de HBOC de aproximadamente % en peso y una cantidad de plasma sanguíneo de aproximadamente 5 % a aproximadamente 75 % en peso; o una cantidad de HBOC de aproximadamente 25 % en peso y una cantidad de plasma sanguíneo de aproximadamente 5 % a aproximadamente 70 % en peso; o una cantidad de HBOC de aproximadamente 30 % en peso y una cantidad de plasma sanguíneo de aproximadamente 5 % a aproximadamente 65 % en peso; o una cantidad de HBOC de aproximadamente 35 % en peso y una cantidad de plasma sanguíneo de aproximadamente 5 % a aproximadamente 60 % en peso; o una cantidad de HBOC de aproximadamente 40 % en peso y una cantidad de plasma sanguíneo de aproximadamente 5 % a aproximadamente 55 % en peso; o una cantidad de HBOC de aproximadamente 45 % en peso y una cantidad de plasma sanguíneo de aproximadamente 5 % a aproximadamente 55 % en peso; o una cantidad de HBOC de aproximadamente 50 % en peso y una cantidad de plasma sanguíneo de aproximadamente 5 % a aproximadamente 45 % en peso; o una cantidad de HBOC de aproximadamente 55 % en peso y una cantidad de plasma sanguíneo de aproximadamente 5 % a aproximadamente 40 % en peso; o una cantidad de HBOC de aproximadamente 60 % en peso y una cantidad de plasma sanguíneo de aproximadamente 5 % a aproximadamente 35 % en peso; o una cantidad de HBOC de aproximadamente 65 % en peso y una cantidad de plasma sanguíneo de aproximadamente 5 % a aproximadamente 30 % en peso; o una cantidad de HBOC de aproximadamente 70 % en peso y una cantidad de plasma sanguíneo de aproximadamente 5 % a aproximadamente 25 % en peso; o una cantidad de HBOC de aproximadamente 75 % en peso y una cantidad de plasma sanguíneo de aproximadamente 5 % a aproximadamente 20 % en peso; o una cantidad de HBOC de aproximadamente 80 % en peso y una cantidad de plasma sanguíneo de aproximadamente 5 % a aproximadamente 15 % en peso; o una cantidad de HBOC de aproximadamente 85 % en peso y una cantidad de plasma sanguíneo de aproximadamente 5 % a aproximadamente 10 % en peso; o una cantidad de HBOC de aproximadamente 90 % en peso y una cantidad de plasma sanguíneo de aproximadamente 5 % en peso; en donde en cada una de las cantidades ejemplares seleccionadas de HBOC y plasma sanguíneo anteriores, el resto en peso del complemento de oxigenación constituye, o constituye sustancialmente, un diluyente farmacéuticamente aceptable, es decir, de aproximadamente 5 % a aproximadamente 90 % en peso de diluyente.

[0177] Así, por ejemplo, el complemento de oxigenación puede prepararse seleccionando cantidades de HBOC y de plasma sanguíneo de modo que el complemento de oxigenación comprenda una cantidad de plasma sanguíneo de aproximadamente 5 % en peso y una cantidad de HBOC de aproximadamente 5 % a aproximadamente 90 % en peso; o una cantidad de plasma sanguíneo de aproximadamente 10 % en peso y una cantidad de HBOC de aproximadamente 5 % a aproximadamente 85 % en peso; o una cantidad de plasma sanguíneo de aproximadamente 15 % en peso y una cantidad de HBOC de aproximadamente 5 % a aproximadamente 80 % en peso; o una cantidad de plasma sanguíneo de aproximadamente 20 % en peso y una cantidad de HBOC de aproximadamente 5 % a aproximadamente 75 % en peso; o una cantidad de plasma sanguíneo de aproximadamente 25 % en peso y una cantidad de HBOC de aproximadamente 5 % a aproximadamente 70 % en peso; o una cantidad de plasma sanguíneo de aproximadamente 30 % en peso y una cantidad de HBOC de aproximadamente 5 % a aproximadamente 65 % en peso; o una cantidad de plasma sanguíneo de aproximadamente 35 % en peso y una cantidad de HBOC de aproximadamente 5 % a aproximadamente 60 % en peso; o una cantidad de plasma sanguíneo de aproximadamente 40 % en peso y una cantidad de HBOC de aproximadamente 5 % a aproximadamente 55 % en peso; o una cantidad de plasma sanguíneo de aproximadamente 45 % en peso y una cantidad de HBOC de aproximadamente 5 % a aproximadamente 55 % en peso; o una cantidad de plasma sanguíneo de aproximadamente 50 % en peso y una cantidad de HBOC de aproximadamente 5 % a aproximadamente 45 % en peso; o una cantidad de plasma sanguíneo de aproximadamente 55 % en peso y una cantidad de HBOC de aproximadamente 5 % a aproximadamente 40 % en peso; o una cantidad de plasma sanguíneo de aproximadamente 60 % en peso y una cantidad de HBOC de aproximadamente 5 % a aproximadamente 35 % en peso; o una cantidad de plasma sanguíneo de aproximadamente 65 % en peso y una cantidad de HBOC de aproximadamente 5 % a aproximadamente 30 % en peso; o una cantidad de plasma sanguíneo de aproximadamente 70 % en peso y una cantidad de HBOC de aproximadamente 5 % a aproximadamente 25 % en peso; o una cantidad de plasma sanguíneo de aproximadamente 75 % en peso y una cantidad de HBOC de aproximadamente 5 % a aproximadamente 20 % en peso; o una cantidad de plasma sanguíneo de aproximadamente 80 % en peso y una cantidad de HBOC de aproximadamente 5 % a aproximadamente 15 % en peso; o una cantidad de plasma sanguíneo de aproximadamente 85 % en peso y una cantidad de HBOC de aproximadamente 5 % a aproximadamente 10 % en peso; o una cantidad de plasma sanguíneo de aproximadamente 90 % en peso y una cantidad de HBOC de aproximadamente 5 % en peso; en donde en cada una de las cantidades ejemplares seleccionadas de HBOC y plasma sanguíneo anteriores, el resto en peso del complemento de oxigenación constituye, o constituye sustancialmente, un diluyente farmacéuticamente aceptable, es decir, de aproximadamente 5 % a aproximadamente 90 % en peso de diluyente.

[0179] Además, a modo de ejemplo no limitativo únicamente, un complemento de oxigenación puede constituirse para contener una cantidad de HBOC de 10 % en peso, una cantidad de plasma sanguíneo de 35 % en peso, siendo el resto en peso (es decir, 55 %) constituido por diluyente, y dicho complemento de oxigenación puede prepararse, por ejemplo, mezclando 50 % en peso de una preparación de HBOC que contiene una cantidad de HBOC de 20 % en peso y una cantidad de diluyente de 80 % en peso de diluyente, con 50 % en peso de una preparación de plasma sanguíneo que contiene una cantidad de plasma sanguíneo de 70 % en peso y una cantidad de diluyente de 30 % en peso de diluyente.

[0181] [0115]Se señala que en formas de realización en las que se utiliza una preparación de plasma sanguíneo seco (que tiene un contenido de humedad de, por ejemplo, de aproximadamente 1 % (p/p) a aproximadamente 10 % (p/p)) a fin de formular el complemento de oxigenación, debido al bajo contenido de humedad, es posible limitar el volumen (y por lo tanto el peso) de las formulaciones farmacéuticas preparadas utilizando plasma sanguíneo seco, y dicha limitación de volumen (y peso) puede ser particularmente beneficiosa cuando las formulaciones farmacéuticas de la presente divulgación se utilizan en operaciones en el campo de batalla u otras operaciones, por ejemplo operaciones médicas de emergencia por accidentes de tráfico, en las que se considera ventajoso el transporte o almacenamiento de suministros médicos compactos y ligeros, por ejemplo para simplificar la logística operativa o limitar los costes de transporte, y en una forma de realización, a fin de preparar una formulación farmacéutica líquida para administración utilizando una preparación de plasma sanguíneo seco, puede utilizarse una preparación de HBOC líquida para reconstituir la preparación de plasma sanguíneo seco, mezclando la preparación de plasma sanguíneo seco con la preparación de HBOC líquida.

[0183] Se señala que dado que en un concentrado de plasma sanguíneo seco los electrolitos iónicos plasmáticos endógenos están concentrados por encima de las concentraciones fisiológicas, y pueden ser por ejemplo 5x o 10x de la concentración fisiológica, a fin de lograr una reducción en el volumen (y el peso) de la formulación farmacéutica, la preparación de HBOC es preferentemente una preparación de HBOC de bajo contenido iónico, de modo que tras la mezcla de la preparación de HBOC y el concentrado de plasma sanguíneo seco se forme una formulación farmacéutica que comprenda niveles aproximadamente fisiológicos de electrolitos iónicos, y los niveles fisiológicos de electrolitos iónicos en este sentido son de aproximadamente 135 a aproximadamente 145 miliequivalentes (mEq/L) de iones sodio (Na<+>), de aproximadamente 3,5 mEq/L a aproximadamente 5,5 mEq/L de iones potasio (K<+>), de aproximadamente 4,6 mEq/L a aproximadamente 5,5 mEq/L de iones calcio (Ca<2+>), de aproximadamente 1,5 mEq/L a aproximadamente 2,5 mEq/L de iones magnesio (Mg<2+>), de aproximadamente 96 mEq/L a aproximadamente 106 mEq/L de iones cloruro (Cl-), de aproximadamente 24 mEq/L a aproximadamente 30 mEq/L de iones bicarbonato (HCO<3>2-

), y de aproximadamente 2,5 mEq/L a aproximadamente 4,5 mEq/L de iones fosfato de hidrógeno (HPO<4>2-

), y así, por ejemplo, si el concentrado de plasma seco comprende electrolitos plasmáticos endógenos a una concentración de aproximadamente 9x por encima de la concentración fisiológica, puede prepararse una formulación farmacéutica mezclando aproximadamente 1x de un concentrado de plasma sanguíneo seco con aproximadamente 9x de una preparación de HBOC que comprende de aproximadamente 13,5 a aproximadamente 14,5 miliequivalentes (mEq/L) de iones sodio (Na<+>), de aproximadamente 0,35 mEq/L a aproximadamente 0,55 mEq/L de iones potasio (K<+>), de aproximadamente 0,46 mEq/L a aproximadamente 0,55 mEq/L de iones calcio (Ca<2+>), de aproximadamente 0,15 mEq/L a aproximadamente 0,25 mEq/L de iones magnesio (Mg<2+>), de aproximadamente 9,6 mEq/L a aproximadamente 10,6 mEq/L de iones cloruro (Cl-), de aproximadamente 2,4 mEq/L a aproximadamente 3 mEq/L de iones bicarbonato (HCO<3>2-

), y de aproximadamente 0,25 mEq/L a aproximadamente 0,45 mEq/L de iones fosfato de hidrógeno (HPO<4>2-

).

[0185] El complemento de oxigenación puede ponerse en contacto con uno o más ingredientes adicionales farmacéuticamente aceptables, en particular, un portador, diluyente o agente auxiliar farmacéuticamente aceptable, para formular una formulación farmacéutica que comprenda el complemento de oxigenación y un portador, diluyente o agente auxiliar farmacéuticamente aceptable.

[0187] En un aspecto, el complemento de oxigenación puede ponerse en contacto con un portador, diluyente o agente auxiliar farmacéuticamente aceptable y mezclarse hasta obtener una mezcla líquida sustancialmente homogénea, en este sentido, el complemento de oxigenación y el portador, diluyente o agente auxiliar farmacéuticamente aceptable pueden mezclarse en un recipiente de mezcla adecuado, por ejemplo, un vaso de precipitados, matraz o botella, una vez más, preferentemente a una temperatura de 2 ºC a aproximadamente 8 ºC, mediante agitación suave, utilizando, por ejemplo, un agitador magnético u otro dispositivo de agitación mecánica.

[0189] Los portadores farmacéuticamente aceptables adecuados incluyen líquidos como agua, solución de Ringer lactato, solución de Ringer lactato modificada que incluye un antioxidante como N-acetilcisteína, soluciones salinas, tales como soluciones salinas tamponadas con fosfato, soluciones hipertónicas e isotónicas, tales como cloruro de sodio hipertónico o hipotónico, y emulsiones, tales como emulsiones aceite/agua.

[0191] Los diluyentes farmacéuticamente aceptables adecuados que pueden utilizarse en el presente documento incluyen agua, tampones, por ejemplo, solución de Ringer, solución de Hank y soluciones salinas tamponadas fisiológicamente, por ejemplo, soluciones salinas tamponadas con fosfato, y solución de Ringer lactato, solución de Ringer lactato modificada que incluye un antioxidante como N-acetilcisteína.

[0193] Las formulaciones farmacéuticas de la presente divulgación pueden formularse adicionalmente para incluir sustancias auxiliares, tales como conservantes, antioxidantes, agentes antimicrobianos, aglutinantes, agentes emulsionantes, agentes tamponadores de pH, incluyendo aminoácidos que pueden funcionar como agentes tamponadores, tales como ácido glutámico, ácido aspártico, histidina, arginina, sales o adyuvantes, y estas sustancias auxiliares se incluyen generalmente en pequeñas cantidades, constituyendo en conjunto 10 % o menos, o 5 % o menos, o 2,5 % o menos en peso de las formulaciones farmacéuticas de la presente divulgación.

[0195] [0122]En una forma de realización, una sustancia auxiliar que puede incluirse en las formulaciones farmacéuticas de la presente divulgación son las plaquetas sanguíneas, en general, las plaquetas pueden incluirse en las formulaciones farmacéuticas para facilitar la coagulación sanguínea y la hemostasia, y las plaquetas sanguíneas pueden prepararse a partir de sangre humana o animal utilizando técnicas conocidas en la técnica, incluyendo, por ejemplo, las técnicas descritas en la Solicitud de Patente PCT PCT/US93/04142 y la Solicitud de Patente de EE. UU. que tiene el número de publicación US2021/0023140, que se incluyen en el presente documento por referencia, además, las plaquetas pueden ser plaquetas sintéticas, tales como, por ejemplo, las descritas en la Patente de EE. UU. 10,426,820, y las plaquetas pueden proporcionarse en forma concentrada o seca, por ejemplo, en forma secada por pulverización o liofilizada, para su uso en la formulación de las formulaciones farmacéuticas de la divulgación, y las plaquetas también pueden adquirirse comercialmente, por ejemplo, de Cellero™ (Lowell, MA), y generalmente las formulaciones farmacéuticas de la presente divulgación se formulan para incluir plaquetas en una cantidad de aproximadamente 5 % o menos, aproximadamente 4 % o menos, aproximadamente 3 % o menos, o aproximadamente 2 % o menos, o aproximadamente 1 % o menos, incluyendo, por ejemplo, de aproximadamente 0,5 % a aproximadamente 5 %, de aproximadamente 0,5 % a aproximadamente 2,5 %, o de aproximadamente 0,5 % a aproximadamente 1 % en peso de las formulaciones farmacéuticas.

[0196] Las cantidades relativas del complemento de oxigenación y del portador, diluyente o agente auxiliar farmacéuticamente aceptable pueden variar, en una forma de realización, por ejemplo, la formulación farmacéutica puede comprender o consistir en hasta 50 %, 60 %, 70 %, 80 %, 90 % o 95 % en peso del complemento de oxigenación, el complemento de oxigenación comprendiendo una cantidad de aproximadamente 5 % a aproximadamente 95 % en peso, y una cantidad de aproximadamente 5 % a aproximadamente 95 % en peso de plasma sanguíneo no diluido, seleccionándose las cantidades de HBOC y de plasma sanguíneo no diluido de modo que en conjunto constituyan menos del 100 % en peso del complemento de oxigenación, el resto en peso del complemento de oxigenación siendo constituido por un diluyente farmacéuticamente aceptable, y el resto en peso de la formulación farmacéutica siendo constituido sustancialmente, o constituido por un portador, diluyente o agente auxiliar farmacéuticamente aceptable.

[0197] A modo de ejemplo no limitativo únicamente, un complemento de oxigenación puede constituirse para contener una cantidad de HBOC de 5 % en peso, una cantidad de plasma sanguíneo de 45 % en peso, siendo el resto en peso (es decir, 50 %) constituido por un diluyente, y dicho complemento de oxigenación puede prepararse, por ejemplo, mezclando 50 % en peso de una preparación de HBOC que contiene una cantidad de HBOC de 10 % en peso y 90 % en peso de diluyente, con 50 % en peso de una preparación de plasma sanguíneo que contiene una cantidad de plasma sanguíneo de 90 % en peso y 10 % en peso de diluyente, y una formulación farmacéutica puede formularse para contener 70 % en peso del constituyente de oxigenación, y el resto en peso (es decir, 30 %) conteniendo 28 % en peso de un diluyente farmacéuticamente aceptable, y 2 % en peso de un agente auxiliar farmacéuticamente aceptable, y la misma formulación farmacéutica contiene 3,5 % en peso de HBOC y 31,5 % en peso de plasma sanguíneo no diluido.

[0198] Se señala que para preparar las formulaciones farmacéuticas líquidas de la presente divulgación, en diferentes formas de realización, el orden en el que se mezclan los diversos compuestos constituyentes de las formulaciones farmacéuticas puede variarse según se desee, por ejemplo, también es posible seleccionar inicialmente y mezclar un portador, diluyente o agente auxiliar farmacéuticamente aceptable con una preparación de HBOC, y posteriormente poner en contacto la mezcla obtenida con una preparación de plasma sanguíneo para formar una formulación farmacéutica que comprenda un complemento de oxigenación que comprenda plasma sanguíneo y HBOC, o es posible seleccionar inicialmente y mezclar un portador, diluyente o agente auxiliar farmacéuticamente aceptable con una preparación de plasma sanguíneo, y posteriormente poner en contacto la mezcla obtenida con una preparación de HBOC para formar una formulación farmacéutica que comprenda un complemento de oxigenación que comprenda plasma sanguíneo y HBOC.

[0199] Se señala adicionalmente que las formulaciones farmacéuticas líquidas de la presente divulgación pueden considerarse formulaciones solubles en proteínas, es decir, las proteínas contenidas en las mismas se encuentran en un estado disuelto.

[0200] Así, a modo de breve recapitulación, de acuerdo con el presente documento, en un aspecto, pueden prepararse preparaciones que comprenden HBOC y pueden prepararse preparaciones que comprenden plasma sanguíneo, estas preparaciones pueden utilizarse para preparar un complemento de oxigenación, y el complemento de oxigenación puede utilizarse para formular una formulación farmacéutica, notablemente una formulación farmacéutica que contiene una cantidad eficaz del complemento de oxigenación para administrar la formulación farmacéutica a un sujeto que lo necesite para tratar o prevenir el choque hemorrágico.

[0201] Será evidente a partir de lo anterior que, en un aspecto, la presente divulgación proporciona adicionalmente, en una forma de realización, un método de preparación de una formulación farmacéutica líquida para la prevención o el tratamiento del choque hemorrágico, el método que comprende:

[0202] mezclar

[0203] (i) una preparación de portador de oxígeno basada en hemoglobina (HBOC); y

[0204] (ii) una preparación de plasma sanguíneo;

[0205] para así constituir un complemento de oxigenación y formular una formulación farmacéutica líquida.

[0206] [0129]Se señala que en algunas formas de realización la formulación farmacéutica puede formularse como una formulación terminada en una instalación de fabricación adecuada para la producción de materiales de grado farmacéutico, y posteriormente, en un solo envase, ser transportada y/o almacenada hasta que se desee su uso para administración a un sujeto que lo necesite.

[0207] En otras formas de realización, la preparación de HBOC y la preparación de plasma sanguíneo pueden fabricarse y envasarse en dos envases separados, y la formulación líquida puede prepararse justo antes de su administración a un sujeto que lo necesite, por ejemplo, menos de 6 horas, menos de 5 horas, menos de 4 horas, menos de 3 horas, menos de 2 horas o menos de 1 hora antes de la administración.

[0208] Así, en otro aspecto, la presente divulgación proporciona un kit o envase farmacéutico que comprende (i) un primer envase que comprende una preparación de portador de oxígeno basada en hemoglobina (HBOC) y (ii) un segundo envase que comprende una preparación de plasma sanguíneo, en donde tras la mezcla de la preparación de HBOC y la preparación de plasma sanguíneo se constituye una formulación farmacéutica líquida para prevenir o tratar el choque hemorrágico, junto con instrucciones para preparar la formulación farmacéutica líquida.

[0209] El paquete farmacéutico y el primer y segundo paquete pueden seleccionarse de una amplia variedad de contenedores, y pueden, por ejemplo, ser una botella, un tubo, una bolsa, una bolsita, un sobre, una jeringa o similares, fabricados para ser adecuados para contener, almacenar, transportar y dispensar productos medicinales. Por lo tanto, dichos contenedores generalmente se fabrican para limitar el deterioro por calor, oxígeno, contaminación microbiana, humedad, y así sucesivamente, y para facilitar la formulación de las formulaciones farmacéuticas líquidas de la presente divulgación.

[0210] En algunos modos de realización, el paquete farmacéutico puede comprender además (iii) un tercer paquete que comprende un vehículo farmacéuticamente aceptable, diluyente o agente auxiliar para la mezcla con la preparación de HBOC y la preparación de plasma sanguíneo para así formar la formulación farmacéutica líquida.

[0211] Un paquete farmacéutico ligero puede incluir una preparación de HBOC y/o una preparación de plasma sanguíneo en el que la preparación de HBOC y/o la preparación de plasma sanguíneo son preparaciones secas, con un contenido de humedad de aproximadamente 1 % (p/p) a aproximadamente 10 % (p/p). Como será apreciado por los expertos en la materia, en modos de realización en los que tanto la preparación de HBOC como la preparación de plasma sanguíneo son preparaciones secas, para preparar una formulación farmacéutica será necesario combinar la preparación de HBOC seca y la preparación de plasma sanguíneo seca con un diluyente farmacéuticamente aceptable antes de la administración.

[0212] En el paquete también pueden incluirse instrucciones para la preparación de las formulaciones farmacéuticas líquidas, y el paquete puede incluir además instrucciones para la administración (por ejemplo, impresas en papel y proporcionadas directamente con el paquete), y/o puede proporcionarse una referencia para acceso en línea a las instrucciones, todo lo cual se pretende que se incluya en el presente documento. Las instrucciones pueden comprender además información adicional relativa a los productos y su uso, por ejemplo información de seguridad. Los paquetes farmacéuticos pueden incluir además dispositivos, tales como agujas y jeringas, para la administración intravenosa de las formulaciones farmacéuticas líquidas.

[0213] En otro aspecto, la presente divulgación proporciona, en un modo de realización, un uso de un portador de oxígeno basado en hemoglobina y plasma sanguíneo para preparar un complemento de oxigenación para formular una formulación farmacéutica líquida soluble en proteínas.

[0214] Como se señaló anteriormente, las formulaciones farmacéuticas de la presente divulgación pueden utilizarse para prevenir o tratar el choque hemorrágico. Por lo tanto, en otro aspecto, la presente divulgación proporciona, en al menos un modo de realización, un método para prevenir o tratar el choque hemorrágico, comprendiendo el método administrar por vía intravenosa a un sujeto que lo necesite una cantidad efectiva de un complemento de oxigenación que comprende un portador de oxígeno basado en hemoglobina (HBOC) y plasma sanguíneo, en una cantidad efectiva para prevenir o tratar el choque hemorrágico en el sujeto.

[0215] En algunos modos de realización, el complemento de oxigenación puede administrarse al sujeto mediante administración consecutiva más o menos contemporánea de una formulación líquida de HBOC y una formulación líquida de plasma sanguíneo, en la que la formulación líquida de HBOC está sustancialmente libre de plasma sanguíneo, y en la que la formulación líquida de plasma sanguíneo está sustancialmente libre de HBOC.

[0216] En algunos modos de realización, el complemento de oxigenación puede administrarse al sujeto mediante administración consecutiva de la formulación de HBOC y la formulación de plasma sanguíneo, en la que la formulación de HBOC se administra antes de la formulación de plasma sanguíneo.

[0217] En algunos modos de realización, la formulación de HBOC y la formulación de plasma sanguíneo pueden administrarse con no más de aproximadamente 12 horas de diferencia entre sí, por ejemplo con no más de 6 horas de diferencia, con no más de 3 horas de diferencia, con no más de 2 horas de diferencia, o con no más de 1 hora de diferencia entre sí.

[0218] En algunos modos de realización, el complemento de oxigenación puede administrarse al sujeto mediante administración consecutiva de la formulación de HBOC y la formulación de plasma sanguíneo, en la que la formulación de plasma sanguíneo se administra antes de la formulación de HBOC.

[0219] En algunos modos de realización, el complemento de oxigenación puede administrarse mediante la administración de una formulación farmacéutica líquida que ha sido preparada mezclando una preparación de HBOC y una preparación de plasma sanguíneo.

[0220] En algunos modos de realización, una formulación farmacéutica que comprende plaquetas sanguíneas puede coadministrarse con el complemento de oxigenación. Por el término “coadministrada” se entiende que la formulación farmacéutica que comprende plaquetas sanguíneas se administra por separado pero más o menos contemporáneamente con el complemento de oxigenación, por ejemplo aproximadamente 1 hora o menos, aproximadamente 30 minutos o menos, o aproximadamente 15 minutos o menos antes o después de la administración del complemento de oxigenación.

[0221] En otro aspecto, la presente divulgación proporciona, en un modo de realización, un uso de una formulación farmacéutica líquida para prevenir o tratar el choque hemorrágico, comprendiendo la formulación líquida un complemento de oxigenación que comprende un portador de oxígeno basado en hemoglobina (HBOC) y plasma sanguíneo y un vehículo, diluyente o agente auxiliar farmacéuticamente aceptable.

[0222] En otro aspecto, la presente divulgación proporciona, en un modo de realización, una formulación farmacéutica líquida para su uso en la prevención o el tratamiento del choque hemorrágico, comprendiendo la formulación un complemento de oxigenación que comprende un portador de oxígeno basado en hemoglobina (HBOC) y plasma sanguíneo y un vehículo, diluyente o agente auxiliar farmacéuticamente aceptable.

[0223] En otro aspecto, la presente divulgación proporciona, en un modo de realización, un uso de una formulación farmacéutica líquida en la fabricación de un medicamento para su uso en la prevención o el tratamiento del choque hemorrágico, comprendiendo la formulación un complemento de oxigenación que comprende un portador de oxígeno basado en hemoglobina (HBOC) y plasma sanguíneo o componentes de plasma sanguíneo y un vehículo, diluyente o agente auxiliar farmacéuticamente aceptable.

[0224] Las formulaciones farmacéuticas líquidas de la presente divulgación pueden administrarse a un sujeto que lo necesite y generalmente se administran por vía intravenosa para prevenir o tratar el choque hemorrágico. La causa del choque hemorrágico puede variar e incluye trauma, incluyendo trauma contundente o trauma penetrante, o hemorragia no traumática. A los efectos de la presente divulgación, la causa del choque hemorrágico no es de particular importancia, y las formulaciones farmacéuticas líquidas pueden utilizarse para prevenir o tratar un sujeto que haya experimentado, o se espere que esté experimentando cualquier choque hemorrágico, independientemente de su causa. Como es conocido por los expertos en la materia, además de la pérdida sustancial de sangre, otros síntomas diagnósticos clínicos del choque hemorrágico incluyen taquicardia, taquipnea, un pulso estrechado y extremidades frías. Cualquiera o todos estos síntomas pueden observarse en un sujeto y considerarse con la debida consideración médica razonable antes de la administración de las formulaciones farmacéuticas de la presente divulgación a un sujeto.

[0225] De acuerdo con un aspecto del presente documento, se administra a un sujeto una cantidad efectiva de las formulaciones líquidas. La dosis administrada de las formulaciones farmacéuticas puede variar, por ejemplo, dependiendo de la gravedad de la condición de choque hemorrágico, o la edad y el tamaño del sujeto. Por ejemplo, cuando se estima que el choque hemorrágico es causado por una pérdida de sangre del 15 % del volumen total de sangre, puede administrarse un volumen de las formulaciones farmacéuticas líquidas aproximadamente igual a aproximadamente el 15 %, o cuando se estima que el choque hemorrágico es causado por una pérdida de sangre del 20 % del volumen total de sangre, puede administrarse un volumen de las formulaciones farmacéuticas aproximadamente igual al 20 %, y así sucesivamente. Puede administrarse una o múltiples dosis de la formulación farmacéutica líquida a un sujeto. En particular, cuando tras la administración de una primera dosis de una formulación farmacéutica la hemorragia no se detiene, pueden administrarse una o más dosis adicionales de la formulación farmacéutica líquida al sujeto.

[0226] Tras la administración de las formulaciones farmacéuticas de la presente divulgación, los síntomas del choque hemorrágico pueden mejorar. Así, por ejemplo, tras la administración de las formulaciones farmacéuticas de la presente divulgación puede alcanzarse la hemostasia. Además, los síntomas diagnósticos clínicos del choque hemorrágico, incluyendo los síntomas antes mencionados, pueden desaparecer.

[0227] Como ahora puede apreciarse, pueden formularse formulaciones farmacéuticas de acuerdo con la presente divulgación, incluyendo formulaciones farmacéuticas que comprenden un complemento de oxigenación que comprende un portador de oxígeno basado en hemoglobina (HBOC) y plasma sanguíneo. Las formulaciones farmacéuticas pueden utilizarse para prevenir o tratar el choque hemorrágico.

[0228] [0151]Los modos de realización de ejemplo de la presente divulgación descritos anteriormente tienen la intención de ser únicamente ilustrativos y de ninguna manera limitantes. Los modos de realización descritos son susceptibles de muchas modificaciones de composición, detalles y orden de operación. La divulgación, más bien, tiene la intención de abarcar todas dichas modificaciones dentro de su alcance, tal como se define en las reivindicaciones, las cuales deben interpretarse de manera amplia consistente con la descripción en su conjunto.

[0229] EJEMPLOS

[0230] A continuación se proporcionan ejemplos de modos de realización adicionales específicos para llevar a cabo los métodos de la presente divulgación, así como modos de realización que representan las composiciones de la presente divulgación. Los ejemplos se proporcionan únicamente con fines ilustrativos y no tienen la intención de limitar el alcance de la presente divulgación de ninguna manera.

[0231] Ejemplo 1 - Preparación de una preparación de HBOC (“OxyBridge”)

[0232] Se obtuvieron concentrados de glóbulos rojos de un distribuidor autorizado y se lavaron mediante 6 intercambios de diafiltración de solución salina normal a través de un filtro de fibra hueca de 0,45 µM y luego se lisaron con otros 6 intercambios de diafiltración de agua purificada. La fracción de filtrado que contenía proteínas se purificó entonces con 6 intercambios de diafiltración de tampón fosfato a través de un filtro de fibra hueca de 500 kDa, y la proteína recogida en el filtrado se lavó adicionalmente con 6 intercambios de diafiltración de tampón fosfato y N-acetilcisteína a través de un filtro de fibra hueca de 10 kDa, manteniendo el retenido. Durante el último paso, la solución se desoxigenó concurrentemente con un cartucho de intercambio de gases y nitrógeno. La solución proteica resultante (2 g/dl) se hizo reaccionar con glutaraldehído a una concentración final de 1,25 g/l durante 3 horas y luego se redujo con cianoborohidruro (BH<3>CN) y se colocó en una solución de Ringer lactato con N-acetilcisteína, de manera que el glutaraldehído y el cianoborohidruro se eliminaron mediante diafiltración para obtener así una preparación de sustituto sanguíneo de baja pureza. La concentración del complemento proteico no hemoglobínico endógeno en la preparación proteica se estimó entre aproximadamente 0,2 mol/mol y aproximadamente 20 % mol/mol, basándose en una evaluación en gel SDS. Todas las etapas se realizaron a temperatura ambiente. La preparación de HBOC obtenida se denomina en el presente documento “OxyBridge”.

[0233] OxyBridge puede describirse como un producto de portador de oxígeno basado en hemoglobina humana de hemoglobina humana hipermolimerizada con un peso molecular medio alto de 1,6 MDa, con un rango estrecho en el tamaño de polímero. Otras propiedades de OxyBridge incluyen una concentración de Hb superior al promedio (11 g/dl), baja presión oncótica coloidal de la solución (12 mmHg) y alta viscosidad (12 cPs). El diseño molecular de OxyBridge actúa en virtud de su gran tamaño (PM; 1600 kDa frente a 64 kDa para un tetrámero de hemoglobina) y su alta capacidad de transporte de oxígeno (concentración de hemoglobina; 11 g/dl). La naturaleza polimérica proporciona propiedades coloidales y viscosas. OxyBridge se formula bajo una atmósfera desoxigenada de modo que no está sujeto a oxidación por oxígeno ambiental.

[0234] Ejemplo 2 - Preparación de una preparación de plasma sanguíneo

[0235] Para la preparación de plasma sanguíneo, muestras de sangre completa que contenían aditivos anticoagulantes se centrifugaron a 2.000 × g durante 20 min para separar la capa de plasma, la cual se recolectó. Se observa que el plasma sanguíneo recolectado puede centrifugarse una segunda vez a 2.000 × g durante 20 min para aumentar la pureza. Alternativamente, puede utilizarse plasma fresco congelado disponible comercialmente o plasma secado por aspersión.

[0236] Ejemplo 3 - Preparación de una preparación de HBOC de soluto electrolítico bajo

[0237] Para la preparación de una solución de HBOC de electrolitos bajos, el HBOC puede prepararse como se describe en el Ejemplo 1 y luego diafiltrarse con un tampón de electrolitos bajos durante al menos 3 intercambios, preferiblemente 6 intercambios, utilizando cualquier filtro que permita la diafiltración y tenga un rango de exclusión por tamaño de poro menor que el peso molecular del HBOC. En caso de que se utilice una preparación de polímeros de HBOC en la que los polímeros tengan un rango de tamaños de polímero, puede seleccionarse un filtro que tenga un tamaño de poro menor que el peso molecular de los polímeros de menor tamaño. Si se acepta una pérdida de rendimiento de HBOC, el tamaño de poro del filtro puede seleccionarse con un punto de corte de peso molecular que pueda ser mayor que los polímeros más pequeños de la preparación, pero aún menor que el peso molecular promedio del polímero. Así, cuando se utiliza la preparación de HBOC del Ejemplo 1, puede seleccionarse un filtro que tenga un tamaño de poro menor de 1,6 MDa.Ejemplo 4 - Formulación de una formulación farmacéutica que comprende plasma sanguíneo y HBOC [0157]Las preparaciones de plasma sanguíneo y HBOC se prepararon como se describe en los Ejemplos 3 y 1, respectivamente, y posteriormente se vertieron 5 ml de la preparación de plasma sanguíneo y 5 ml de la preparación de HBOC en un tubo de 10 ml con tapa de rosca. Se preparó una formulación farmacéutica mediante inversión manual repetida del tubo con tapa de rosca hasta obtener una mezcla homogénea.

[0238] [0158]En general, para preparar la formulación farmacéutica para usoin vivo, las preparaciones de HBOC y plasma sanguíneo son fisiológicamente compatibles entre sí, de modo que su mezcla en cualquier proporción da lugar a una formulación farmacéutica. Ambos son ingredientes activos cuya función está al menos parcialmente limitada por la concentración, por lo que cuando se desea una formulación equilibrada, como la utilizada para la realización del trabajo descrito en el Ejemplo 6, es deseable una mezcla 1 a 1. La formulación farmacéutica se prepara preferiblemente poco antes de su uso.

[0239] Ejemplo 5 - Eficacia de una formulación farmacéutica que comprende plasma sanguíneo y HBOC (in vitro)

[0240] Este ejemplo describe una evaluación de la coagulopatía de formulaciones farmacéuticas que comprenden plasma sanguíneo y HBOC.

[0241] Se recogió sangre total (WB) mediante flebotomía de seis donantes sanos bajo un procedimiento operativo estándar institucional aprobado. Se obtuvo plasma fresco congelado mediante centrifugación de sangre completa de un conjunto diferente de diez donantes (Grupo O+), el cual se agrupó y alicuotó antes del almacenamiento a -80 ºC hasta el día de la prueba y se descongeló rápidamente a 37 ºC inmediatamente antes de su uso. Como se trataba de una evaluaciónin vitro, el HBOC se expuso al 100 % de oxígeno en un tubo cónico de 50 ml, y la saturación de oxígeno se midió en el RAPIDPoint 500 (Siemens) antes de su uso.In vivo, el HBOC se oxigena mediante el paso a través de los pulmones.

[0242] Las muestras se prepararon para simular diversos escenarios de reanimación mezclando sangre total con aditivos en diferentes proporciones. Se prepararon un total de 18 muestras, utilizando sangre total como control, reemplazos volumétricos del 10 % y 25 % con OxyBridge, plasma fresco congelado (FFP), una división 50-50 de cada uno, o Lactato-Ringer (LR) (como control del vehículo de OxyBridge) como condiciones de prueba principales. En un conjunto paralelo de muestras, la sangre total se pre-diluyó con 25 % de Plasmalyte (DIL) para simular una coagulopatía dilucional antes de añadir los reemplazos volumétricos indicados anteriormente. LaTabla 1a continuación muestra el conjunto de 18 muestras.

[0243] La hemoglobina, el hematocrito y el recuento de plaquetas se determinaron en el Advia 120 (Siemens). Las muestras se sometieron a cizallamiento sobre una superficie recubierta de colágeno en un modelo microfluídico de flujo capilar para medir el efecto sobre la adhesión plaquetaria en el sistema BioFlux 1000 (Fluxion Biosciences). Tras la centrifugación, la porción líquida se analizó para tiempo de protrombina (PT) y concentración de fibrinógeno en el STA-R Evolution (Stago), así como generación de trombina en el Calibrated Automated Thrombogram (CAT; Thrombinoscope). Los resultados se muestran en lasFIGS.1 - 6.

[0244] Tabla 1: Muestras de ensayoin vitro.

[0247]

[0250] Como puede verse en lasFIGS.1 - 6, no se detectó impacto negativo en los parámetros de coagulación utilizando formulaciones farmacéuticas que comprenden plasma sanguíneo y HBOC. En particular, no se observó impacto adverso en el recuento de plaquetas en muestras que incluían HBOC FFP (FIG.3), no se observó indicación de lisis celular en muestras que incluían HBOC FFP (FIG. 4), y no se observó indicación de impacto en la concentración de fibrinógeno en muestras que incluían HBOC FFP (FIG.5). Además, los resultados en las FIGS.1 y 2 muestran que en formulaciones que comprenden HBOC solo, los parámetros de coagulación (tiempo de protrombina y lisis del coágulo) se reducen. Estos efectos se anularon cuando, además del HBOC, se incluyó FFP en las formulaciones.

[0252] Ejemplo 6 - Eficacia de una formulación farmacéutica que comprende plasma sanguíneo y HBOC (in vivo)

[0254] Se probaron tres formulaciones farmacéuticas en un estudio controlado de hemorragia en ratas (n=4) para la capacidad de estas formulaciones de proporcionar alivio de reanimación de la siguiente manera: (i) HBOC (OxyBridge), (ii) Plasma (plasma autólogo fresco), y (iii) HBOC (OxyBridge) Plasma. Las formulaciones HBOC (OxyBridge), Plasma y HBOC (OxyBridge) Plasma se prepararon como se describe en los Ejemplos 1, 3 y 4, respectivamente. Una hora después de una hemorragia controlada de tasa variable (50 % del volumen sanguíneo total estimado, T<BV>), se administraron las formulaciones farmacéuticas. El volumen de reanimación se limitó a un único bolo del 20 % T<BV>(equivalente a 1 L en humanos) para simular disponibilidad limitada de reanimación en teatros de combate austeros. Tras la reanimación, se recogió una muestra de sangre para evaluar el panel de coagulación mediante tromboelastometría y analizador de hemostasia. A continuación, se extirpó el 80 % de la cola de la rata, induciendo hemorragia no controlada en el animal. Este estudio, en parte, tenía como objetivo identificar y correlacionar indicadores coagulopáticos (por ejemplo, máxima firmeza del coágulo y tiempo de protrombina) con la hemostasia y establecer cómo funcionaba esta estrategia de reanimación. Se utilizaron muestras de sangre fresca para tromboelastometría. Se recogieron muestras de plasma y se almacenaron para su uso en un analizador de hemostasia. Una vez analizados, se evaluaron tendencias asociadas con el tiempo de protrombina y/o D-dímero con los resultados de hemostasia.

[0256] Ninguno de los animales tratados únicamente con HBOC (OxyBridge) logró hemostasia (0/0), pero tampoco hubo evidencia de fibrinólisis. Los animales tratados con plasma mostraron una tasa ligeramente mayor de éxito de hemostasia del 25 % (1/4). Sin embargo, de manera inesperada y de forma importante, la combinación de HBOC (OxyBridge) plasma logró hemostasia en el 100 % de los animales (4/4).

[0258] [0166]Por lo tanto en este estudio, mientras que la reanimación utilizando HBOC (OxyBridge) (0/0) o plasma (1/4) por separado no proporcionó hemostasia exitosa en ninguno o en la mayoría de los animales de prueba, una combinación de los dos productos (HBOC (OxyBridge) plasma) proporcionó hemostasia en el 100 % (4/4) de los animales de prueba. Además, de manera importante, estos hallazgos muestran que HBOC (OxyBridge) no indujo fibrinólisis. Además, cuando se administra a una dosis relevante en campo, HBOC (OxyBridge) no induce coagulopatía dilucional como se ha demostrado que lo hacen expansores plasmáticos más tradicionales.

Claims

1. REIVINDICACIONES

1. Una preparación líquida de portador de oxígeno basado en hemoglobina (HBOC) de soluto iónico bajo que comprende:

un HBOC,

no más de aproximadamente 27 miliequivalentes (mEq/L) de iones sodio (Na<+>),

no más de aproximadamente 0,7 mEq/L de iones potasio (K<+>),

no más de aproximadamente 0,92 mEq/L de iones calcio (Ca<2+>),

no más de aproximadamente 0,3 mEq/L de iones magnesio (Mg<2+>),

no más de aproximadamente 19,2 mEq/L de iones cloruro (Cl-),

no más de 4,8 mEq/L de iones bicarbonato (HCO<3>2-

) y

no más de aproximadamente 0,5 mEq/L de iones fosfato de hidrógeno (HPO<4>2-

).

2. La preparación líquida de HBOC de soluto iónico bajo según la reivindicación 1, en la que

(i) la preparación líquida de HBOC de soluto iónico bajo comprende no más de aproximadamente 13,5 mEq/L de iones sodio (Na<+>),no más de aproximadamente 0,35 mEq/L de iones potasio (K<+>),no más de aproximadamente 0,46 mEq/L de iones calcio (Ca<2+>),no más de aproximadamente 0,15 mEq/L de iones magnesio (Mg<2+>),no más de aproximadamente 9,6 mEq/L de iones cloruro (Cl-), no más de 2,4 mEq/L de iones bicarbonato (HCO<3>2-

);

opcionalmente en la que la preparación líquida de HBOC de soluto iónico bajo comprende no más de aproximadamente 6,75 mEq/L de iones sodio (Na<+>),no más de aproximadamente 0,175 mEq/L de iones potasio (K<+>), no más de aproximadamente 0,23 mEq/L de iones calcio (Ca<2+>), no más de aproximadamente 0,075 mEq/L de iones magnesio (Mg<2+>), no más de aproximadamente 4,8 mEq/L de iones cloruro (Cl-), no más de 1,2 mEq/L de iones bicarbonato (HCO<3>2-

); y/o

(ii) la preparación líquida de HBOC de soluto iónico bajo comprende una cantidad de HBOC de entre aproximadamente 5 % y aproximadamente 50 % en peso, constituyendo el resto de la preparación un diluyente farmacéuticamente aceptable.

3. Una formulación farmacéutica líquida que comprende un complemento de oxigenación que comprende la preparación líquida de HBOC de soluto iónico bajo según la reivindicación 1 o 2, y plasma sanguíneo.

4. Una formulación farmacéutica líquida según la reivindicación 3, en la que el complemento de oxigenación comprende una cantidad de HBOC de entre aproximadamente 5 % y aproximadamente 95 % en peso, y una cantidad de plasma sanguíneo de entre aproximadamente 5 % y aproximadamente 95 % en peso, seleccionándose las cantidades de HBOC y plasma sanguíneo de manera que juntas constituyan menos del 100 % en peso del complemento de oxigenación, constituyendo el resto en peso del complemento de oxigenación un diluyente farmacéuticamente aceptable;

por ejemplo, en la que el complemento de oxigenación comprende una cantidad de HBOC de entre aproximadamente 5 % y aproximadamente 50 % en peso, y una cantidad de plasma sanguíneo de entre aproximadamente 5 % y aproximadamente 95 % en peso, seleccionándose las cantidades de HBOC y plasma sanguíneo de manera que juntas constituyan menos del 100 % en peso del complemento de oxigenación, constituyendo el resto en peso del complemento de oxigenación un diluyente farmacéuticamente aceptable.

5. Una formulación farmacéutica líquida según la reivindicación 3, en la que la formulación farmacéutica comprende:

(i) hasta aproximadamente 95 % en peso del complemento de oxigenación, comprendiendo el complemento de oxigenación una cantidad de HBOC de entre aproximadamente 5 % y aproximadamente 95 % en peso, y una cantidad de plasma sanguíneo de entre aproximadamente 5 % y aproximadamente 95 % en peso, seleccionándose las cantidades de HBOC y plasma sanguíneo de manera que juntas constituyan menos del 100 % en peso del complemento de oxigenación, constituyendo el resto en peso del complemento de oxigenación un diluyente farmacéuticamente aceptable; y

constituyendo el resto en peso de la formulación farmacéutica un agente portador, diluyente o auxiliar farmacéuticamente aceptable;

por ejemplo, (ii) hasta aproximadamente 95 % en peso del complemento de oxigenación, comprendiendo el complemento de oxigenación una cantidad de HBOC de entre aproximadamente 5 % y aproximadamente 50 % en peso, y una cantidad de plasma sanguíneo de entre aproximadamente 5 % y aproximadamente 95 % en peso, seleccionándose las cantidades de HBOC y plasma sanguíneo de manera que juntas constituyan menos del 100 % en peso del complemento de oxigenación, constituyendo el resto en peso del complemento de oxigenación un diluyente farmacéuticamente aceptable; y

constituyendo el resto en peso de la formulación farmacéutica un agente portador, diluyente o auxiliar farmacéuticamente aceptable.

6. Una formulación farmacéutica líquida según la reivindicación 3, en la que el HBOC comprende moléculas de hemoglobina polimerizada que tienen una masa molecular de al menos 1,600 kDa;

o en la que el agente auxiliar comprende plaquetas sanguíneas.

7. Un complemento de oxigenación que comprende la preparación líquida de HBOC de soluto iónico bajo según la reivindicación 1 o 2 y plasma sanguíneo para su uso en un método para prevenir o tratar el choque hemorrágico, comprendiendo el método la administración intravenosa a un sujeto que lo necesite de dicho complemento de oxigenación que comprende la preparación líquida de HBOC de soluto iónico bajo y plasma sanguíneo, en una cantidad eficaz para prevenir o tratar el choque hemorrágico en el sujeto.

8. El complemento de oxigenación para su uso en el método para prevenir o tratar el choque hemorrágico según la reivindicación 7, en el que

(i) el complemento de oxigenación se administra al sujeto mediante administración consecutiva de la preparación líquida de HBOC de soluto iónico bajo y una formulación líquida de plasma sanguíneo, en la que la preparación líquida de HBOC de soluto iónico bajo está sustancialmente libre de plasma sanguíneo, y en la que la formulación líquida de plasma sanguíneo está sustancialmente libre de HBOC;

(ii) el complemento de oxigenación se administra al sujeto mediante administración consecutiva de la preparación líquida de HBOC de soluto iónico bajo y la formulación de plasma sanguíneo, en la que la preparación líquida de HBOC de soluto iónico bajo se administra antes de la formulación de plasma sanguíneo;

(iii) el complemento de oxigenación se administra al sujeto mediante administración consecutiva de la preparación líquida de HBOC de soluto iónico bajo y la formulación de plasma sanguíneo, en la que la formulación de plasma sanguíneo se administra antes de la preparación líquida de HBOC de soluto iónico bajo; o

(iv) la preparación líquida de HBOC de soluto iónico bajo y la formulación de plasma sanguíneo se administran al sujeto con no más de aproximadamente 6 horas de diferencia entre sí; o

(v) el complemento de oxigenación se administra mediante la administración de una formulación farmacéutica líquida que ha sido preparada mezclando la preparación líquida de HBOC de soluto iónico bajo y la preparación de plasma sanguíneo;

opcionalmente en la que la formulación farmacéutica líquida comprende además un agente portador, diluyente o auxiliar farmacéuticamente aceptable.

9. El complemento de oxigenación para su uso en el método para prevenir o tratar el choque hemorrágico según la reivindicación 8, parte (v), en el que

(i) el complemento de oxigenación comprende una cantidad de HBOC de entre aproximadamente 5 % y aproximadamente 95 % en peso, y una cantidad de plasma sanguíneo de entre aproximadamente 5 % y aproximadamente 95 % en peso, seleccionándose las cantidades de HBOC y plasma sanguíneo de manera que juntas constituyan menos del 100 % en peso del complemento de oxigenación, constituyendo el resto en peso del complemento de oxigenación un diluyente farmacéuticamente aceptable;

(ii) la formulación farmacéutica líquida comprende

hasta 95 % en peso del complemento de oxigenación, comprendiendo el complemento de oxigenación una cantidad de HBOC de entre aproximadamente 5 % y aproximadamente 95 % en peso, y una cantidad de plasma sanguíneo de entre aproximadamente 5 % y aproximadamente 95 % en peso, seleccionándose las cantidades de HBOC y plasma sanguíneo de manera que juntas constituyan menos del 100 % en peso del complemento de oxigenación, constituyendo el resto en peso del complemento de oxigenación un diluyente farmacéuticamente aceptable; y

opcionalmente en la que el agente auxiliar comprende plaquetas sanguíneas;

(iii) el complemento de oxigenación comprende una cantidad de HBOC de entre aproximadamente 5 % y aproximadamente 50 % en peso, y una cantidad de plasma sanguíneo de entre aproximadamente 5 % y aproximadamente 95 % en peso, seleccionándose las cantidades de HBOC y plasma sanguíneo de manera que juntas constituyan menos del 100 % en peso del complemento de oxigenación, constituyendo el resto en peso del complemento de oxigenación un diluyente farmacéuticamente aceptable; o

(iv) la formulación farmacéutica líquida comprende

hasta 95 % en peso del complemento de oxigenación, comprendiendo el complemento de oxigenación una cantidad de HBOC de entre aproximadamente 5 % y aproximadamente 50 % en peso, y una cantidad de plasma sanguíneo de entre aproximadamente 5 % y aproximadamente 95 % en peso, seleccionándose las cantidades de HBOC y plasma sanguíneo de manera que juntas constituyan menos del 100 % en peso del complemento de oxigenación, constituyendo el resto en peso del complemento de oxigenación un diluyente farmacéuticamente aceptable; y

10. El complemento de oxigenación para su uso en el método para prevenir o tratar el choque hemorrágico según cualquiera de las reivindicaciones 7 a 9, en el que

(i) una formulación farmacéutica que comprende plaquetas sanguíneas se coadministra con el complemento de oxigenación;

(ii) el choque hemorrágico es causado por una pérdida de sangre traumática en el sujeto; o

(iii) el choque hemorrágico es causado por una pérdida de sangre no traumática en el sujeto.

11. Un envase farmacéutico que comprende (i) un primer envase que comprende la preparación líquida de HBOC de soluto iónico bajo según la reivindicación 1 o 2 y (ii) un segundo envase que comprende una preparación de plasma sanguíneo, e instrucciones para preparar la formulación farmacéutica líquida según la reivindicación 3.

12. Un envase farmacéutico según la reivindicación 11, en el que el envase farmacéutico comprende además (iii) un tercer envase que comprende un agente portador, diluyente o auxiliar farmacéuticamente aceptable para mezclar con la preparación líquida de HBOC de soluto iónico bajo y la preparación de plasma sanguíneo para así formar la formulación farmacéutica líquida.

13. Un envase farmacéutico según la reivindicación 11, en el que la preparación de plasma sanguíneo es una preparación de plasma sanguíneo desecado que tiene un contenido de humedad de entre aproximadamente 1 % (p/p) y aproximadamente 10 % (p/p);

opcionalmente en el que la preparación líquida de HBOC de soluto iónico bajo puede comprender no más de aproximadamente 13,5 mEq/L de iones sodio (Na<+>), no más de aproximadamente 0,35 mEq/L de iones potasio (K<+>), no más de aproximadamente 0,46 mEq/L de iones calcio (Ca<2+>), no más de aproximadamente 0,15 mEq/L de iones magnesio (Mg<2+>), no más de aproximadamente 9,6 mEq/L de iones cloruro (Cl-), no más de 2,4 mEq/L de iones bicarbonato (HCO<3>2-

).

14. Un método de preparación de una formulación farmacéutica líquida según cualquiera de las reivindicaciones 3 a 6, comprendiendo el método:

mezclar

(i) la preparación líquida de HBOC de soluto iónico bajo según la reivindicación 1 o 2; y (ii) una preparación de plasma sanguíneo;

para así constituir un complemento de oxigenación o formular una formulación farmacéutica líquida.

15. Un método de preparación de una formulación farmacéutica líquida según la reivindicación 14, en el que

(a) la preparación de plasma sanguíneo es una preparación de plasma sanguíneo desecado que tiene un contenido de humedad de entre aproximadamente 1 % (p/p) y aproximadamente 10 % (p/p), opcionalmente en el que la preparación líquida de HBOC de soluto iónico bajo puede comprender no más de aproximadamente 13,5 mEq/L de iones sodio (Na<+>), no más de aproximadamente 0,35 mEq/L de iones potasio (K<+>), no más de aproximadamente 0,46 mEq/L de iones calcio (Ca<2+>), no más de aproximadamente 0,15 mEq/L de iones magnesio (Mg<2+>), no más de aproximadamente 9,6 mEq/L de iones cloruro (Cl-), no más de 2,4 mEq/L de iones bicarbonato (HCO<3>2-

);

(b) el método comprende además mezclar (iii) un agente portador, diluyente o auxiliar farmacéuticamente aceptable junto con el complemento de oxigenación para así formar una formulación farmacéutica líquida; o (c) la preparación líquida de HBOC de soluto iónico bajo y la preparación de plasma sanguíneo se mezclan 1 hora o menos antes de la administración a un sujeto que lo necesita.