ES2963858A1 - Una composicion para plantas basada en quitosano y usos de la misma como elicitor y plaguicida biologico - Google Patents

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Abstract

Una composición para plantas basada en quitosano y usos de la misma como elicitor y plaguicida biológico. Composición para plantas con un contenido en metales pesados inferior a 40 ppm, que comprende quitosano o clorhidrato de quitosano con un peso molecular promedio inferior a 800 kDa, un grado de desacetilación de 50 a 99% y una concentración de 18 a 50 g/L. Uso de la composición para estimular el crecimiento de las plantas y los mecanismos de defensa de las plantas frente a plagas y/o enfermedades y su combinación con nematodos.

Description

DESCRIPCIÓN
UNA COMPOSICIÓN PARA PLANTAS BASADA EN QUITOSANO Y USOS DE LA
MISMA COMO ELICITOR Y PLAGUICIDA BIOLÓGICO
SECTOR DE LA TÉCNICA
La invención se relaciona con composiciones de quitosano, estimulantes del crecimiento de plantas y de los mecanismos de defensa de las plantas frente a plagas y enfermedades, así como con combinaciones de estas composiciones con nematodos parásitos de insectos.
ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN
La quitina es el segundo polímero más abundante en la naturaleza, después de la celulosa. Se puede encontrar en las paredes celulares de algunos hongos, en el cartílago bovino, en los exoesqueletos de insectos y en invertebrados marinos, tales como krill, jibia, langosta, langostino, camarón, cangrejo, centollón y centolla. La quitina es principalmente un homopolímero de 2-acetamido-2-desoxi-p-D-glucopiranosa, aunque algunos de los grupos funcionales de la glucopiranosa pueden estar desacetilados y pueden presentarse como 2-amino-2-desoxi-p-D-glucopiranosa.
La desventaja de la quitina es su alta insolubilidad en la mayoría de los disolventes conocidos. Sin embargo, el quitosano es un derivado de la quitina capaz de disolverse fácilmente en disolventes ácidos, lo que le confiere una ventaja frente a la quitina para su uso industrial.
El quitosano se absorbe sistemáticamente por las plantas a través de las semillas, raíces y hojas. Como consecuencia de esto se produce un mayor crecimiento de las plantas y mejor relación suelo (raíces)/vuelo (hojas). Las plantas identifican la presencia del quitosano como un ataque por un patógeno, lo que induce en ellas una respuesta de defensa a este ataque. Esta respuesta se manifiesta en cambios bioquímicos, citogenéticos y estructurales que se traducen en un aumento significativo en la producción de los cultivos y en la biomasa de plantas cultivadas.
Los nematodos se pueden dividir en dos grandes grupos, los de vida libre y los parásitos. Los nematodos parásitos, a su vez, se dividen en parásitos de plantas (nematotodos fitoparásitos) y parásitos de animales (parásitos de vertebrados y parásitos de invertebrados).
Los nematodos son unos gusanos cilindricos no segmentados cuyo tamaño sólo permite visualizarlos por microscopía. Los nematodos que parasitan insectos e interfieren con los nematodos fitoparásitos pertenecen a dos familias incluidas en el orden Rhabditida:SteinemematidaeyHetemrhabditidae.Los nematodos presentan una relación simbiótica con una bacteria(XenorhabdusyPhotorhabdus,para losSteinemematidaeyHeterorhabditidae,respectivamente) que les confiere las particulares características del complejo nematodo-bacteria.
Dentro de la familiaSteinemematidaeestá el géneroSteinernema,en el que se encuentran las siguientes especies:Steinernema carpocapsae, Steinernema feltiae, Steinernema scapterisci, Steinernema glaseriySteinernema riobravis.Por otra parte, en la familiaHeterorhabditidae,se encuentra el géneroHeterorhabditis,en el que se encuentran las siguientes especies:Heterorhabditis bacteriophora, Heterorhabditis downesiyHeterorhabditis megidis.
El ciclo de vida de los nematodos entomopatógenos, que parasitan insectos, se desarrolla en el interior de los insectos, excepto una fase llamada infectivo juvenil (IJ), que es la única etapa infectiva y capaz de sobrevivir fuera de un insecto. Puede sobrevivir varios meses en el suelo sin alimentarse, buscando activamente insectos para parasitar.
Los nematodos en su fase de IJ penetran en los insectos normalmente por los orificios naturales, es decir por la boca, ano o espiráculos (orificios respiratorios). Una vez que llegan al interior del insecto, liberan las bacterias simbióticas que portan en el interior, y que causan la muerte del insecto por septicemia (infección generalizada) en un período de aproximadamente dos días.
Las bacterias una vez liberadas se multiplican modificando el interior del insecto produciendo con esta modificación, condiciones favorables para la alimentación de los nematodos y la muerte del insecto.
Una vez que se dan estas modificaciones por la bacteria y se producen las condiciones favorables para los nematodos, estos se desarrollan y crecen en el interior del insecto hasta que llegan a su estado de adultos y es entonces cuando se reproducen dentro del propio insecto, dando lugar a nuevas generaciones. Es necesaria la presencia de la bacteria simbiótica para que los nematodos puedan reproducirse y completar su ciclo.
Mientras en el interior del insecto haya nutrientes para los nematodos, estos seguirán creciendo, reproduciéndose y dando lugar a nuevas y numerosas generaciones.
Cuando los nutrientes en el cadáver del insecto comienzan a escasear, los nematodos dentro del insecto pasan a la fase IJ, incorporan las bacterias y abandonan el cadáver en busca de nuevos insectos hospedadores para parasitar, donde poder alimentarse, crecer y desarrollar su ciclo de vida, produciendo quitosanasas que ayudan a hacer más fácilmente asimilable el quitosano.
DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN
A efectos de la presente invención, el término “elicitor” se refiere a una composición que comprende moléculas señalizadoras que se unen a proteínas receptoras especiales ubicadas en las membranas celulares de las plantas, generando una respuesta de defensa de la planta frente a diferentes patógenos (insectos, hongos o bacterias) o ante el daño mecánico producido por los herbívoros.
A efectos de la presente invención, el término “centolla” se refiere a una especie(Lithodes santolla)de crustáceo decápodo de la familia Lithodidae conocida como centollo o centolla magallánica, centolla austral, centolla chilena, centolla argentina. Es un crustáceo migratorio de gran tamaño. Su caparazón está repleto de espinas y protuberancias y puede llegar a medir hasta 20 cm de diámetro.
A efectos de la presente invención, el término “centollón” se refiere a una especie(Paralomis granulosa)de crustáceo decápodo, también denominado centollón patagónico, centollón magallánico, centollón austral y falsa centolla. Es un crustáceo que habita el lecho marino de las frías aguas del sur de América del Sur.
A efectos de la presente invención, el término “metales pesados” se refiere a metales que pueden representar un serio problema medioambiental e incluyen, los siguientes metales: mercurio, plomo, cadmio, arsénico, cromo, cobalto, níquel, estaño, talio, berilio y aluminio.
A efectos de la presente invención, el término “nematodos entomopatógenos” se refiere a nematodos parásitos de insectos.
A efectos de la presente invención, el término “nematodos fitoparásitos” se refiere a nematodos parásitos de plantas.
A efectos de la presente invención, el término “infectivo juvenil (IJ)” se refiere al estadio de ciclo biológico (L3) de un nematodo que invade o infecta a un determinado insecto o planta. Posee una cubierta exterior que le protege de las condiciones ambientales adversas y actúa como reserva para permanecer en el campo hasta invadir el insecto o planta.
El problema técnico a resolver consiste en proporcionar una composición para plantas que proporcione una mayor estimulación del crecimiento de las plantas, una mayor estimulación de sus mecanismos de defensa frente a las plagas y/o enfermedades, además de controlar dichas plagas y/o enfermedades y que al mismo tiempo reduzca la contaminación asociada a la aplicación de la composición sobre las plantas.
La presente invención, tal y como se define en las reivindicaciones, proporciona una solución a dicho problema técnico complejo.
La presente invención proporciona una composición para plantas con un contenido en metales pesados inferior a 40 ppm, que comprende quitosano o clorhidrato de quitosano, con un peso molecular promedio inferior a 800 kDa, un grado de desacetilación de 50 a 99% y una concentración de 18 a 50 g/L.
En la presente invención, el quitosano o clorhidrato de quitosano ha sido producido mediante desacetilación parcial de quitina. Preferentemente, dicha quitina procede de caparazones de centollas o de centollones.
El quitosano o clorhidrato de quitosano puede tener un peso molecular de 20 kDa a 2.000 kDa, aproximadamente. El quitosano o clorhidrato de quitosano obtenido de quitina de crustáceos de tamaño mediano y pequeño, tales como krill, camarones, langostas, langostinos y cangrejos, tiene un peso molecular promedio superior a 800 kDa. En cambio, el quitosano o clorhidrato de quitosano obtenido de quitina de crustáceos de gran tamaño, tales como centolla y centollón, tiene un peso molecular promedio inferior a los 800 kDa.
El peso molecular del quitosano o clorhidrato de quitosano es importante a la hora de estimular los mecanismos de defensa de las plantas, pues una misma cantidad de quitosano o clorhidrato de quitosano de peso molecular promedio inferior a 800 kDa estimula una mayor cantidad de células vegetales en comparación con la misma cantidad de quitosano o clorhidrato de quitosano de un mayor peso molecular.
Esta ventaja de la composición de la invención se ve reflejada en la obtención de un mayor crecimiento de raíces y de hojas, un engrosamiento del pericarpio y un aumento en el calibre de los frutos, entre otras características. El quitosano o clorhidrato de quitosano de la invención es más efectivo para estimular el crecimiento de las plantas, en comparación con un quitosano o clorhidrato de quitosano de peso molecular superior a 800 kDa, tal como el que se obtiene de quitina de langosta, langostino y krill.
La composición de la invención, por tanto, resuelve así el problema asociado a proporcionar una mayor estimulación del crecimiento de las plantas y una mayor estimulación de sus mecanismos de defensa frente a las plagas y/o enfermedades.
El quitosano o clorhidrato de quitosano puede formar complejos estables con metales pesados, lo que implica que puede contener metales pesados contaminantes y que resultan muy perjudiciales para el medio ambiente y la salud de las personas. Por este motivo, existen quitosanos comerciales con contenidos en metales pesados superiores a 40 ppm, tal como por ejemplo los quitosanos procedentes de quitinas de crustáceos que viven en las desembocaduras de ríos con aguas muy contaminadas. Estos quitosanos comerciales causan un serio problema cuando se aplican sobre plantas puesto que aportan compuestos tóxicos que contaminan las plantas, el suelo y afectan a la salud de las personas al consumirlos. Sin embargo, los quitosanos procedentes de aguas antárticas más limpias tienen menor contenido en metales pesados, por la pureza de estas aguas, aumentando así su funcionalidad.
La composición de la invención, con un contenido en metales pesados inferior a 40 ppm, resuelve así el problema asociado a reducir la contaminación relacionada con la aplicación de la composición sobre las plantas y personas al no aportar residuos tóxicos.
En una realización preferente de la composición de la invención, el contenido en metales pesados es inferior a 20 ppm. Más preferentemente, el contenido en metales pesados es inferior a un valor seleccionado del grupo que consiste en: 10 ppm, 5 ppm, 1 ppm, 0,1 ppm y 0,05 ppm.
Los nematodos pueden vivir con normalidad en composiciones que comprenden quitosano o clorhidrato de quitosano. En una realización preferente, la composición de la invención además comprende nematodos. Dicha composición de la invención comprende, por tanto, quitosano o clorhidrato de quitosano, que estimula el crecimiento de las plantas y los mecanismos de defensa de las plantas y nematodos, lo que hace a esta composición para plantas particularmente eficaz para el tratamiento de plagas y/o enfermedades. Asimismo, las bacterias asociadas a los nematodos, durante el proceso de infección del insecto hospedador, comienzan a liberar una serie de metabolitos tales como enzimas quitinolíticas y antibióticos. La acción quitinolítica de las enzimas liberadas por las bacterias hace que el proceso de asimilación del quitosano o clorhidrato de quitosano por parte de la planta sea más rápido, dado que dichas enzimas actúan rompiendo los polímeros del quitosano o clorhidrato de quitosano en moléculas (monómeros y dímeros, de azúcares N-acetilados) más fácilmente asimilables por la planta. Además, gracias a la capacidad del quitosano o clorhidrato de quitosano de formar films, los nematodos se recubren de una película protectora, que les permite sobrevivir mejor que otros nematodos frente a condiciones adversas como altas temperaturas, desecación y rayos UV. Adicionalmente, se establece una sinergia entre la actividad fungiestática del quitosano o clorhidrato de quitosano, la actividad antimicótica de las enzimas anteriormente mencionadas y la actividad de los compuestos antibióticos liberados por la bacteria que inhiben la proliferación de posibles microorganismos patógenos facultativos.
En la realización preferente anterior, la composición de la invención comprende quitosano o clorhidrato de quitosano y nematodos. En esta realización, al aplicar el quitosano o clorhidrato de quitosano junto con los nematodos, los nematodos se ven activados por la presencia del quitosano o clorhidrato de quitosano con un peso molecular promedio inferior a 800 kDa, interpreta esta señal como la presencia de insectos (sus presas), aumentando su virulencia y movilidad por esta señal recibidoa y, por tanto, aumentando la eficacia de la combinación.
En otra realización preferente de la composición de la invención, dichos metales pesados se seleccionan del grupo que consiste en mercurio, plomo, cadmio, arsénico, cromo, cobalto, níquel, estaño, talio, berilio y aluminio.
En otra realización preferente, el pH de la composición de la invención es de 4,5 a 6,5.
En otra realización preferente, el grado de desacetilación del quitosano o clorhidrato de quitosano es de 65 a 99%.
En otra realización preferente, la viscosidad de la composición de la invención es de 80 a 2000 cps. En dicha realización preferente, la viscosidad se mide a 25°C en un viscosímetro de Brookfield.
En otra realización preferente, la composición de la invención comprende dos viales, en la que un primer vial comprende el quitosano o clorhidrato de quitosano y un segundo vial comprende los nematodos.
En otra realización preferente de la composición de la invención, los nematodos pertenecen a la familiaSteinemematidaeoHetemrhabditidae.
En una realización más preferente de la composición de la invención, los nematodos pertenecen a los génerosSteinernemaoHeterorhabditis.
En una realización aún más preferente de la composición de la invención, los nematodos se seleccionan del grupo que consiste en:Steinernema carpocapsae, Steinernema feltiae, Steinernema scapterisci, Steinernema glaseri, Steinernema riobravis, Heterorhabditis bacteriophora, Heterorhabditis downesiyHeterorhabditis megidis.Más preferentemente, la composición de la invención comprende los nematodosSteinernema carpocapsae, Steinernema feltiaeyHeterorhabditis bacteriophora.
En otra realización preferente, la composición de la invención, además, comprende un ácido. La presencia del ácido en la composición aumenta la solubilidad del quitosano o clorhidrato de quitosano en la disolución.
En otra realización preferente de la composición de la invención, el ácido se selecciona del grupo que consiste en ácido acético, ácido adípico, ácido cítrico, ácido clorhídrico, ácido fórmico, ácido láctico, ácido málico, ácido oxálico, ácido pirúvico y ácido tartárico. Más preferentemente, el ácido es ácido acético o ácido clorhídrico.
La presente invención también proporciona el uso de la composición de la invención para estimular el crecimiento de las plantas.
Adicionalmente, la presente invención proporciona el uso de la composición de la invención como elicitor para estimular los mecanismos de defensa de las plantas frente a plagas y/o enfermedades.
La composición de la invención es efectiva frente a insectos, nematodos fitoparásitos, hongos y bacterias.
Los insectos frente a los cuales es efectiva la composición de la invención incluyen, pero sin limitación:
Lepidoptera:Agrotis segetum, Autographa gamma, Chilospp.,Chrysodeixis chalcites, Cossus cossus, Cydia pomonella, Cydiaspp.,Euzophera pingüis, Gallería mellonella, Helicoverpa armigera, Heliothisspp.,Lobesiaspp.,Opogona sacchari, Paysandisia archon, Pieris rapae, Spodoptera littoralis, Thaumetaopoea pytiocampa, Tutta absolutayZeuzera pyrina.
Coleoptera:Aegorinus superciliosus, Anoxiaspp.,Anoxia villosa, Ausoniaspp.,Balaninus nucum, Capnodis tenebrionis, Cleonus mendicus, Cosmopolites sordidus, Diocalandra frumenti, Hylotrupes bajulus, Leiodes cinnamomeus, Melolonthaspp.,Otiorhynchusspp.,Rhynchophorus ferrugineus, Tomicus destruens, Tomicus piniperda, Tomicusspp. yVesperus xatarti.
Díptera:Bradysiaspp.,Ceratitis capitata, Heteropeza pygmaea, Liriomyza trifolii, Lycoriellaspp.,Suillia giganteaySuillia tuberiperda.
Ácaros:Amblyoma cajennense, Boophilus pinniperda y Dermacentor vaviabilis.
Heteroptera:Dysdercus peruvianus.
Homoptera:Dysmicoccus vacciniyTrialeurodes vaporariorum.
Hemiptera:Bemisia tabaci.
Isoptera:Kalotermes flavicollisyReticulotermesspp.
Thysanoptera:Frankliniella occidentalisyTrips tabaci.
Gastropoda:Deroceras reticulatum.
Orthoptera:Locusta migratoria, Melanoplus sanguinipesyScapteriscus vicinus.
Ixodida:Ripicephalus sanguineus.
Blatodea:Blata orientalis, Blatella germanica, Periplaneta americana, Periplaneta brunneayPeriplanetaspp.
Hymenoptera:Elasmopalpus lignosellus, Hoplocampa testudínea y Tirathaba rufivena.
Un aspecto muy importante de la composición de la invención es que es efectiva frente a nematodos fitoparásitos. Los nematodos fitoparásitos frente a los cuales es efectiva la composición de la invención incluyen, pero sin limitación:Helicotylenchusspp.,Longidorusspp.,Meloidogine javanica, Meloidogyne arenaria, Meloidogynespp.,Pratylenchusspp.,Rotilenchusspp.,Thichodorusspp.,Tylenchulusspp. yXiphinemaspp.
Otro aspecto importante de la composición de la invención es que es efectiva frente a hongos y bacterias. Los hongos frente a los cuales es efectiva la composición de la invención incluyen, pero sin limitación:Alternaría alternata, Aspergillus flaver, Aspergillus niger, Botrytis cynerea, Colletotrichum gloeosporioides, Erysiphespp.,Fusarium solani, Fusarium oxysporum, Leveillulaspp.,Oidiumspp.,Penicillium expansum, Penicilliumspp.,Phytophthora capsici, Phytophthoraspp.,Pytium deberyanum, Podosphaeraspp. yRhizofus stolonifer.Las bacterias frente a las cuales es efectiva la composición de la invención incluyen, pero sin limitación:Bacillus cereus, Escherichia coli, Micrococcus luteus, Pseudomonas aeruginosa, Salmonella typhi, Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermis, Staphylococcus typhimuriumyStreptococcus mutans.
Otras especies frente a las cuales es efectiva la composición de la invención incluyen, pero sin limitación:Acalyma vittatum, Acrolepia assectela, Adoryphorus couloni, Agrotis ipsilon, Agrotis palustris, Amyelois transitella, Anabrus simplex, Anomalaspp.,Anoplophora malasiaca, Apriona cinerea, Bemisiaspp.,Blastophagus pinniperda, Boophilus annulatus, Bradysia coprophila, Carpoaina nipponensis, Carpocapsa pomonella, Castnia dedalus, Cephalcia abietis, Cephalcia lariciphila, Ceuthorrynchus napi, Choristeneura occidentalis, Cirphis compta, Conopia myopasformis, Conorhynchus mendicus, Costrelytra zealandica, Curalio caryae, Cyclocephala borealis, Cydocephala hirta, Cylas formicarius, Dacus cucurbitae, Delia antiqua, Delia floralis, Delia platura, Delia radicum, Dendroctonus frontalia, Diabrotica balteata, Diabrotica barberi, Diabrotica virgifera, Diaprepes abbreviatus, Earias insulana, Eldanaspp.,Fumibotys fumalis, German cockroach, Grapholita funebrana, Grapholita molesta, Graphonathus peregrinus, Helicoverpa zea, Heliothis armigera, Heliothis zea, Hylenia brasicae, Hylobius abietia, Hylobius transversovittatus, Hypantria cunea, Ixodes scapularis, Ixodid ticks, Laspeyreaia pomonella, Leptinotarsa decenlineata, Limonius califormicus, Listronotus orejonensis, Lixusspp.,Longitarsus waterhorsei, Lycoriella auripila, Maladera motrica, Manduca sexta, Megaselia halterata, Melolontha melolontha, Migdolusspp.,Monochamus alternatus, Musca domestica, Nemocestes incomptus, Oamona hirta, Operhoptera brumata, Ostrinia nubilalis, Otiorhynchus ovatus, Otiorhynchusspp.,Otiorhynchus sulcatus, Pachnaeus litus, Panisetia marginata, Pantomorusspp.,Parapediasia teterrella, Pectinophora gossyprella, Phlyctinus callosus, Phyllonictis citrella, Phyllotreta cruciferae, Phylophagaspp.,Reticulitermes lucifugus, Strobilomyia appalachensis, Tipula paludosa, Tomicus piniperda, Tomicus destruens, Tomicus spp., Tryporysa incertulas, Vespulaspp.,Vietacea polistiformis,Wiseana copularís, Xylotrechus arvícola, Zeiraphera canadensisyZophodis gmssulataríata.
Por tanto, en una realización preferente del uso de la invención, la plaga es de una especie seleccionada del grupo que consiste en:Acalyma vittatum, Acrolepia assectela, Adoryphorus couloni, Aegorinus superciliosus, Agrotis ipsailon, Agrotis palustris, Agrotis segetum, Alternaría alternata, Amblyoma cajennense, Amyelois transitella, Anabrus simplex, Anomalaspp.,Anoplophora malasiaca, Anoxiaspp.,Anoxia villosa, Apriona cinerea, Aspergillus flaver, Aspergillus niger, Ausoniaspp.,Autographa gamma, Bacillus cereus, Balaninus nucum, Bemisiaspp.,Bemisia tabaci, Blastophagus pinniperda, Blata orientalis, Blatella germanica, Boophilus annulatus, Boophilus pinniperda, Botrytis cynerea, Bradysia coprophila, Bradysiaspp.,Capnodis tenebrionis, Carpoaina nipponensis, Carpocapsa pomonella, Castnia dedalus, Cephalcia abietis, Cephalcia lariciphila, Ceratitis capitata, Ceuthorrynchus napi, Chilospp.,Choristeneura occidentalis, Chrysodeixis chalcites, Cirphis compta, Cleonus mendicus, Colletotrichum gloeosporioides, Conopia myopasformis, Conorhynchus mendicus, Cosmopolites sordidus, Cossus cossus, Costrelytra zealandica, Curalio caryae, Cyclocephala borealis, Cydia pomonella, Cydiaspp.,Cydocephala hirta, Cylaus formicarius, Dacus cucurbitae, Delia antiqua, Delia floralis, Delia platura, Delia radicum, Dendroctonus frontalia, Dermacentor vaviabilis, Deroceras reticulatum, Diabrotica balteata, Diabrotica barberi, Diabrotica virgifera, Diaprepes abbreviatus, Diocalandra frumenti, Dysdercus peruvianus, Dysmicoccus vaccini, Earias insulana, Elasmopalpus lignosellus, Eldanaspp.,Erysiphespp,Escherichia coli, Euzophera pingüis, Frankliniella occidentalis, Fumibotys fumalis, Fusarium solani, Fusarium oxysporum, Galleria mellonella, German cockroach, Glyptotermes dilatatus, Grapholita funebrana, Grapholita molesta, Graphonathus peregrinus, Helicotylenchusspp.,Helicoverpa armigera, Helicoverpa zea, Heliothis armigera, Heliothisspp.,Heliothis zea, Heteropeza pygmaea, Hoplocampa testudinea, Hylenia brasicae, Hylobius abietia, Hylobius transversovittatus, Hylotrupes bajulus, Hypantria cunea, Ixodes scapularis, Ixodid ticks, Kalotermes flavicollis, Laspeyreaia pomonella, Leiodes cinnamomeus, Leptinotarsa decenlineata, Leveillulaspp.,Limonius califormicus, Liriomyza trifolii, Listronotus orejonensis, Lixusspp.,Lobesiaspp.,Locusta migratoria, Longidorusspp.,Longitarsus waterhorsei, Lycoriella auripila, Lycoriellaspp.,Maladera motrica, Manduca sexta, Megaselia halterata, Melanoplus sanguinipes, Meloidogyne arenaria, Meloydogine javanica, Meloidogynespp.,Melolontha melolontha, Melolonthaspp.,Micrococcus luteus, Migdolusspp.,Monochamus alternatus, Musca domestica, Nemocestes incomptus, Oamona hirta, Oidiumspp.,Operhoptera brumata, Opogona sacchari, Ostrinia nubilalis, Otiorhynchus ovatus, Otiorhynchusspp.,Otiorhynchusspp.,Otiorhynchus sulcatus, Pachnaeus litus, Panisetia marginata, Pantomorusspp.,Parapediasia teterrella, Paysandisia archon, Pectinophora gossyprella, Penicillium expansum, Penicilliumspp,Periplaneta americana, Periplaneta brunnea, Periplanetaspp.,Phlyctinus callosus, Phyllonictis citrella, Phyllotreta cruciferae, Phylophagaspp.,Phytophthora capsici, Phytophthoraspp.,Pieris rapae, Podosphaeraspp.,Pratylenchusspp.,Pseudomonas aeruginosa, Pytium deberyanum, Reticulitermes lucifugus, Reticulotermesspp.,Rhizofus stolonifer, Rhynchophorus ferrugineus, Ripicephalus sanguineus, Rotilenchusspp.,Salmonella typhi, Scapteriscus vicinus, Spodoptera littoralis, Strobilomyia appalachensis, Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermis, Staphylococcus typhimurium, Streptococcus mutans, Suillia gigantea, Suillia tuberiperda, Thaumetaopoea pytiocampa, Thichodorusspp.,Tipula paludosa, Tirathaba rufivena, Tomicus destruens, Tomicus piniperda, Tomicusspp.,Trialeurodes vaporariorum, Trips tabaci, Tryporysa incertulas, Tutta absoluta, Tylenchulusspp.,Vesperus xatarti, Vespulaspp.,Vietacea polistiformis, Wiseana copularis, Xylotrechus arvicola, Xiphinemaspp.,Zeiraphera canadensis, Zeuzera pyrinayZophodis grossulatariata.
En una realización preferente, el uso de la invención comprende aplicar a las plantas la composición de la invención mediante una técnica seleccionada del grupo que consiste en irrigación, pulverización e inyección.
En otra realización preferente del uso de la invención, la pulverización es foliar.
En otra realización preferente del uso de la invención, se aplica a las plantas una dosis de 1 a 10 cm3 de la composición que comprende quitosano o clorhidrato de quitosano, por cada 106 nematodos.
En otra realización preferente, el uso de la invención comprende una primera etapa de tratamiento con una composición de la invención que no contiene nematodos y una segunda etapa de la composición de la invención que comprende nematodos.
DESCRIPCIÓN DE MODOS DE REALIZACIÓN
Ejemplo 1. Preparación de formulaciones
Formulación 1: Se preparó una disolución que contiene quitosano a una concentración de 18 g/L, con un grado de desacetilación de 50 a 90%, un contenido en metales pesados < 40 ppm, peso molecular promedio < 800 Kda, a pH < 6. A continuación, se añadió el nematodoSteinemema carpocapsaea dicha disolución.
Formulación 2: Se preparó una disolución que contiene quitosano a una concentración de 18 g/L, con un grado de desacetilación de 50 a 90%, un contenido en metales pesados < 40 ppm, peso molecular promedio < 800 Kda, a pH <6. A continuación, se añadió el nematodoSteinemema feltiaea dicha disolución.
Formulación 3: Se preparó una disolución que contiene quitosano a una concentración de 18 g/L, con un grado de desacetilación de 50 a 90%, un contenido en metales pesados < 40 ppm, peso molecular promedio < 800 Kda, a pH <6. A continuación, se añadió el nematodoHetemrhabditis bacteriophoraa dicha disolución.
Formulación 4: Se preparó una disolución que contiene clorhidrato de quitosano a una concentración de 18 g/L, con un grado de desacetilación de 50 a 90%, un contenido en metales pesados < 40 ppm, peso molecular promedio < 800 Kda, a pH < 6. A continuación, se añadió el nematodoSteinernema carpocapsaea dicha disolución.
Formulación 5: Se preparó una disolución que contiene clorhidrato de quitosano a una concentración de 18 g/L, con un grado de desacetilación de 50 a 90%, un contenido en metales pesados < 40 ppm, peso molecular promedio < 800 Kda, a pH < 6. A continuación, se añadió el nematodoSteinemema feltiaea dicha disolución.
Formulación 6: Se preparó una disolución que contiene clorhidrato de quitosano a una concentración de 18 g/L, con un grado de desacetilación de 50 a 90%, un contenido en metales pesados < 0,05 ppm, peso molecular promedio < 800 Kda, a pH < 6. A continuación, se añadió el nematodoHeterorhabditis bacteriophoraa dicha disolución.
Formulación 7: Se preparó una disolución que contiene quitosano a una concentración de 18 g/L, con un grado de desacetilación de 50 a 90%, un contenido en metales pesados < 40 ppm, peso molecular promedio < 800 Kda, a pH < 6. A continuación, se añadieron los nematodosSteinemema carpocapsae, Steinemema feltiaeyHetemrhabditis bacteriophoraa dicha disolución.
Formulación 8: Se preparó una disolución que contiene clorhidrato de quitosano a una concentración de 18 g/L, con un grado de desacetilación de 50 a 90%, un contenido en metales pesados < 40 ppm, peso molecular promedio < 800 Kda, a pH < 6. A continuación, se añadieron los nematodosSteinemema carpocapsae, Steinemema feltiaeyHeterorhabditis bacteriophoraa dicha disolución.
Formulación 9: Se preparó una disolución que contiene quitosano a una concentración de 18 g/L, con un grado de desacetilación de 50 a 90%, un contenido en metales pesados < 40 ppm, peso molecular promedio < 800 Kda, a pH < 6.
Formulación 10: Se preparó una disolución que contiene clorhidrato de quitosano a una concentración de 18 g/L, con un grado de desacetilación de 50 a 90%, un contenido en metales pesados < 40 ppm, peso molecular promedio < 800 Kda, a pH < 6.
Ejemplo 2. Ensayo en cultivo de palmeras (formulaciones 1 a 8)
En un vivero controlado, en palmeras canarias se realizaron 8 tratamientos con una cadencia mensual, mediante pulverización con mochila a las balonas con las formulaciones de la invención, a una dosis de 25 x 106 nematodos en combinación con quitosano o clorhidrato de quitosano/palmera. Coincidiendo con la primera aplicación, sobre estas palmeras, se realizaron sueltas de adultos machos y hembras de la plagaRhynchophorus ferrugineus.10 meses después de la liberación de los escarabajos se evaluaron las palmeras. La efectividad en el control de la plaga con respecto a la zona testigo fue entre el 80 y 95% dependiendo de la formulación utilizada. El año siguiente, se comprobó una recuperación de la balona con la emisión de nuevas palmas sanas que demostraban la supervivencia de las palmeras en la zona tratada, y no así en el testigo donde la mayoría de las palmeras murieron.
Es importante resaltar que en este ejemplo se aplicaron los nematodos fuera de su hábitat natural, que es el suelo y, aun así, los nematodos fueron capaces de sobrevivir en estas condiciones extremas para ellos, debido a la capacidad que tienen el quitosano y el clorhidrato de quitosano de formar film que les protege contra condiciones adversas.
Ejemplo 3. Ensayo en cultivo de trufas (formulaciones 1 a 8)
Se aplicaron las formulaciones de la invención en encinas inoculadas conTubersp. afectadas porLeiodes cinnamomeus.La Tabla 1 describe los distintos sistemas de aplicación y dosis utilizados, así como los resultados obtenidos de reducción del nivel de plaga respecto al testigo (zonas no tratadas).
* Rangos de reducción obtenidos de las 8 formulaciones probadas. ;;Además de esta reducción respecto al nivel de plaga, en todos los casos se observó un aumento en la producción de trufa respecto a las zonas no tratadas debido a los efectos inductores de las formulaciones de la invención. ;;Ejemplo 4. Ensayo en cultivo de fresas (formulaciones 1 a 8);;Para evaluar la efectividad del producto como nematicida en el cultivo de la fresa, se realizó un protocolo de tratamientos desde el inicio del cultivo, con aplicaciones mensuales de las formulaciones de la invención, inyectadas a través del riego por goteo en un invernadero con problemas recurrentes todos los años del nematodo fitoparásitoMeloidogynesp. La Tabla 2 muestra las dosis utilizadas y los resultados de reducción del nivel de plaga respecto a las zonas no tratadas (testigo) al finalizar la campaña. ; ;; *Rangos de reducción obtenidos de las 8 formulaciones probadas
En todos los casos se obtuvo una evidente mejoría y regeneración del sistema radicular, llegando a conseguir un aumento de producción de raicillas finas en torno a un 40-45% más que en la zona no tratada.
Ejemplo 5. Ensayo en cultivo de palmito (formulaciones 1 a 8)
Se evaluó la eficacia contra la plagaPaysandisia archonen palmitos(Chamahemps humulis)en vivero controlado, pulverizando las formulaciones de la invención en el estípite de los ejemplares, previamente infectados por la plagaPaysandisia archon.La pulverización se realizó con mochila pulverizadora con una dosis de 500.000 nematodos/m2 junto con quitosano y/o clorhidrato de quitosano. Las eficacias obtenidas fueron del 89 - 100% (dependiendo de la formulación utilizada), respecto a los palmitos no tratados. Se encontraron galerías de longitud considerable sin tener ya ninguna larva en su interior puesto que había sido parasitada por los nematodos.
En este ejemplo se llevó a cabo una aplicación foliar, no óptima para los nematodos. Sin embargo, el efecto formador de film del quitosano o clorhidrato de quitosano protegió los nematodos, permitiendo así su aplicación foliar sin que se vea comprometida ni la viabilidad de los nematodos ni su eficacia.
Ejemplo 6. Ensayo en cultivo de arándano (formulaciones 1 a 8)
Se realizaron aplicaciones de las formulaciones de la invención de dos modos diferentes, uno a través del riego por goteo y otro mediante sistemas inyectores dirigidos al sistema radicular con dosis de 500.000 nematodos quitosano y/o clorhidrato de quitosano/m2, para verificar la eficacia contraOtiorhynchusspp., y melolontinos en plantas de arándano. En todos los casos, las eficacias mostradas contra estas plagas fueron superiores al 80-95%, y se pudo verificar en ambos casos una regeneración del sistema radicular de un modo más rápido del que lo hacen los arándanos de forma natural, consiguiendo además en ese mismo año que no se detectaran plantas muertas ni se produjera un descenso en la producción a pesar de los daños ocasionados por la plaga. No sucedió lo mismo en el testigo, que obtuvo un descenso de producción de un 25% y continuaron apareciendo nuevos casos de plantas muertas.
Ejemplo 7. Ensayo en cultivo de olivos (formulaciones 1 a 8)
Se evaluó la eficacia de las formulaciones de la invención en olivos afectados por la plaga de Gusanos Blancos (del géneroMelolontha).Para ello se inyectó la composición a través del sistema de riego por goteo, con una dosis de 1.000.000 nematodos quitosano y/o clorhidrato de quitosano/m2. Previo a la aplicación de producto, se realizaron muestreos sobre el terreno (dividido en sectores que se iban a tratar y los que no se tratarían), para cuantificar el nivel poblacional inicial de la plaga y así ver el efecto de las aplicaciones, puesto que esta plaga tiene un ciclo largo en el suelo que puede variar de 2 a 3 años.
Trascurridos 45 días de la aplicación se realizaron los primeros muestreos. En estos primeros muestreos, en los sectores tratados, la población inicial de la que se partía se redujo en entre un 80-88% (dependiendo de cada una de las formulaciones testadas) mientras que en los sectores no tratados la población inicial de la que partían permaneció similar a la inicial.
Trascurridos 120 días de la aplicación se realizaron los segundos muestreos. En estos segundos muestreos, en los sectores tratados, la población inicial de la que se partía mantuvo una reducción de entre el 80-88% (dependiendo de cada una de las formulaciones testadas), mientras que en los sectores no tratados la población inicial de la que se partía no solo no permaneció similar a la inicial, sino que aumentó debido a las nuevas puestas del año.
Estos resultados demuestran que las formulaciones de 1 a 8 no solo redujeron los niveles poblacionales de los que se partía, sino que además controlaron las nuevas puestas que se produjeron ese año. Además, después de 4 meses de ensayo en todos los sectores tratados, fue posible detectar regeneración y recuperación de los sistemas radiculares y una considerable mejoría del vigor foliar de los árboles.
Ejemplo 8. Ensayo en viñedo (formulaciones 1 a 8)
Se realizaron ensayos del comportamiento de las formulaciones de la invención en nuevas plantaciones de viñedo y, especialmente en replantaciones, en el control de nematodos fitoparásitos de los génerosMeloidogyneyXiphinema.Se tomó como parcela elemental una superficie de 10.000 m2 dejando como testigo un 20% de la misma. Previo a la plantación, se confirmó mediante las correspondientes analíticas que el terreno estaba afectado porMeloidogyne,detectando niveles de entre 40 y 60 Infectivo Juvenil (IJ)/100 g de tierra y teniendo constancia de que las viñas anteriores habían tenido problemas de entrenudo corto, evidenciando la presencia deXiphinema, ydetectado en niveles de entre 4-8 IJ/100 g de tierra.
En la parcela se procedió a marcar 70 puntos fijos de los cuales mensualmente se tomaron muestras de suelo (transcurridos 30 días desde la aplicación) para determinar la evolución de la población de nematodos fitoparásitos tanto de la zona tratada como de la testigo. La dosis de aplicación fue de 1.500.000 nematodos quitosano o clorhidrato de quitosano/cepa. La aplicación se llevó a cabo por inyección con una máquina de pulverización a la que se acoplaron mangueras que finalizaban en un inyector barra. En todos los muestreos realizados la población deMeloidogynese vio disminuida como poco en un 80% respecto a la zona no tratada.
No fue posible detectar en ninguna de las zonas tratadas la presencia deXiphinema,no así en la zona no tratada. El desarrollo del cultivo fue en todo momento superior tanto en superficie foliar como radicular frente al testigo y plantas colindantes debido al efecto inductor de los polímeros de quitosano y/o clorhidrato de quitosano.
En los casos de las zonas tratadas en los que se detectaron nematodosMeloidogyne, a pesar de detectar los típicos nódulos formados porMeloidogyneen las raíces, las plantas habían sido capaces de generar nuevas raicillas sanas en sustitución de estas, permitiendo a la planta ser asintomática y llevar a cabo un desarrollo normal.
Ejemplo 9. Ensayo en cultivo de tomate (formulaciones 1 a 8)
Se estudió la eficacia de las formulaciones de la invención contra la plagaBemisia tabaci(mosca blanca) en tomate en invernadero. Para ello se realizaron aplicaciones foliares de las formulaciones de la invención mediante pulverizaciones cada semana, durante 1 mes (4 Aplicaciones en total) en un cultivo previamente afectado por esta plaga.
Se observó una disminución progresiva en la población de mosca blanca en los muestreos realizados a los 5 días de cada aplicación. Con cada aplicación se consiguió una disminución de entre 15-20%, por lo que al final del ensayo se consiguió un descenso de entre 60-80% de la población con todas las formulaciones de la invención probadas.
En este ejemplo se llevó a cabo una aplicación foliar, no óptima para los nematodos. Sin embargo, el efecto formador de film del quitosano o clorhidrato de quitosano protegió los nematodos, permitiendo así su aplicación foliar sin que se vea comprometida ni la viabilidad de los nematodos ni su eficacia.
Ejemplo 10. Ensayo en cultivo de tomate (formulaciones 9 y 10)
Se evaluó el efecto del quitosano y del clorhidrato de quitosano sobre el crecimiento radical de plantas de tomate en condiciones de invernadero aplicando dosis de 10 L/ha a través del riego por goteo, con repeticiones cada 30 días, durante 3 meses. Se evaluó el efecto de los tratamientos sobre:
- Peso seco radical
- Peso seco aéreo
El estudio indicó que para la evaluación de peso seco radical ambos tratamientos tuvieron diferencias estadísticas respecto al testigo absoluto.
Ambos tratamientos mostraron un incremento del peso seco radical en comparación con el testigo absoluto. Con el quitosano se obtuvo un aumento del 52% y con el clorhidrato de quitosano del 54%.
En la evaluación de peso seco aéreo, los tratamientos con quitosano y clorhidrato de quitosano tuvieron diferencias estadísticas con el testigo, con aumentos del 33%. No se encontraron diferencias significativas entre los dos productos testados a los 60 días de implementado el estudio.
Ejemplo 11. Ensayo en cultivo de sandía (formulaciones 9 y 10)
Se estudió el efecto del quitosano y del clorhidrato de quitosano en el crecimiento y la productividad de plantas de sandía. Se realizaron 3 aplicaciones vía riego por goteo.
- 1a aplicación: 5 L/ha a los 10 días del trasplante
- 2a aplicación: 10 L/ha (a los 20 días de la primera aplicación)
- 3a aplicación: 10 L/ha (a los 15 días de la segunda aplicación)
Las plantas tratadas con quitosano y clorhidrato de quitosano mantuvieron consistentes diferencias durante los 3 cortes con respecto a las testigos y sin diferencias significativas entre los 2 productos. De media, el diámetro de frutos aumentó un 5%, el peso de los frutos, un 16% y el número de frutos, un 34%.
Ejemplo 12: Ensayo en vivero de lechugas (formulaciones 9 y 10)
Se evaluó el efecto del quitosano y clorhidrato de quitosano sobre el desarrollo del cultivo de lechuga en vivero. Se realizaron 2 aplicaciones foliares al 5%, con una cadencia quincenal.
Los resultados obtenidos con quitosano fueron:
- 26% más de peso fresco radical
- 44% más de peso fresco foliar
- 36% más de altura de planta
Los resultados obtenidos con clorhidrato de quitosano fueron:
- 28% más de peso fresco radical
- 40% más de peso fresco foliar
- 35% más de altura de planta

Claims (18)

REIVINDICACIONES
1. Una composición para plantas con un contenido en metales pesados inferior a 40 ppm, que comprende quitosano o clorhidrato de quitosano con un peso molecular promedio inferior a 800 kDa, un grado de desacetilación de 50 a 99% y una concentración de 18 a 50 g/L.
2. La composición según la reivindicación 1, que además comprende nematodos.
3. La composición según la reivindicación 1 ó 2, en la que el pH es de 4,5 a 6,5.
4. La composición según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en la que la viscosidad es de 80 a 2000 cps.
5. La composición según cualquiera de las reivindicaciones 2 a 4, que comprende dos viales, en la que un primer vial comprende el quitosano o clorhidrato de quitosano y un segundo vial comprende los nematodos.
6. La composición según cualquiera de las reivindicaciones 2 a 5, en la que los nematodos pertenecen a la familiaSteinemematidaeoHetemrhabditidae.
7. La composición según cualquiera de las reivindicaciones 2 a 6, en la que los nematodos pertenecen a los génerosSteinernemaoHeterorhabditis.
8. La composición según cualquiera de las reivindicaciones 2 a 7, en la que los nematodos se seleccionan del grupo que consiste en:Steinernema carpocapsae, Steinernema feltiae, Steinernema scapterisci, Steinernema glaseri, Steinernema riobravis, Heterorhabditis bacteriophora, Heterorhabditis downesiyHeterorhabditis megidis.
9. La composición según cualquiera de las reivindicaciones 2 a 8, que comprende los nematodosSteinernema carpocapsae, Steinernema feltiaeyHeterorhabditis bacteriophora.
10. La composición según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, que además comprende un ácido.
11. La composición según la reivindicación 10, en la que el ácido se selecciona del grupo que consiste en ácido acético, ácido adípico, ácido cítrico, ácido clorhídrico, ácido fórmico, ácido láctico, ácido málico, ácido oxálico, ácido pirúvico y ácido tartárico.
12. Uso de la composición de las reivindicaciones 1 a 11 para estimular el crecimiento de las plantas.
13. Uso de la composición de las reivindicaciones 1 a 11 para estimular los mecanismos de defensa de las plantas frente a plagas y/o enfermedades.
14. El uso según la reivindicación 13, en el que la plaga es de una especie seleccionada del grupo que consiste en:Acalyma vittatum, Acmlepia assectela, Adoryphorus couloni, Aegorinus superciliosus, Agrotis ipsailon, Agrotis palustris, Agrotis segetum, Alternaría alternata, Amblyoma cajennense, Amyelois transitella, Anabrus simplex, Anomalaspp.,Anoplophora malasiaca, Anoxiaspp.,Anoxia villosa, Apriona cinerea, Aspergillus flaver, Aspergillus niger, Ausoniaspp.,Autographa gamma, Bacillus cereus, Balaninus nucum, Bemisiaspp.,Bemisia tabaci, Blastophagus pinniperda, Blata orientalis, Blatella germanica, Boophilus annulatus, Boophilus pinniperda, Botrytis cynerea, Bradysia coprophila, Bradysiaspp.,Capnodis tenebrionis, Carpoaina nipponensis, Carpocapsa pomonella, Castnia dedalus, Cephalcia abietis, Cephalcia lariciphila, Ceratitis capitata, Ceuthorrynchus napi, Chilospp.,Choristeneura occidentalis, Chrysodeixis chalcites, Cirphis compta, Cleonus mendicus, Colletotrichum gloeosporioides, Conopia myopasformis, Conorhynchus mendicus, Cosmopolites sordidus, Cossus cossus, Costrelytra zealandica, Curalio caryae, Cyclocephala borealis, Cydia pomonella, Cydiaspp.,Cydocephala hirta, Cylaus formicarius, Dacus cucurbitae, Delia antiqua, Delia floralis, Delia platura, Delia radicum, Dendroctonus frontalia, Dermacentor vaviabilis, Deroceras reticulatum, Diabrotica balteata, Diabrotica barberi, Diabrotica virgifera, Diaprepes abbreviatus, Diocalandra frumenti, Dysdercus peruvianus, Dysmicoccus vaccini, Earias insulana, Elasmopalpus lignosellus, Eldanaspp.,Erysiphespp,Escherichia coli, Euzophera pingüis, Frankliniella occidentalis, Fumibotys fumalis, Fusarium solani, Fusarium oxysporum, Galleria mellonella, German cockroach, Glyptotermesdilatatus, Grapholita funebrana, Grapholita molesta, Graphonathus peregrinus, Helicotylenchusspp.,Helicoverpa armígera, Helicoverpa zea, Heliothis armígera, Heliothisspp.,Heliothis zea, Heteropeza pygmaea, Hoplocampa testudínea, Hylenia brasicae, Hylobius abietia, Hylobius transversovittatus, Hylotrupes bajulus, Hypantria cunea, Ixodes scapularis, Ixodid ticks, Kalotermes flavicollis, Laspeyreaia pomonella, Leiodes cinnamomeus, Leptinotarsa decenlineata, Leveillulaspp.,Limonius califormicus, Liriomyza trifolii, Listronotus orejonensis, Lixusspp.,Lobesiaspp.,Locusta migratoria, Longidorusspp.,Longitarsus waterhorsei, Lycoriella auripila, Lycoriellaspp.,Maladera motrica, Manduca sexta, Megaselia halterata, Melanoplus sanguinipes, Meloidogyne arenaria, Meloydogine javanica, Meloidogynespp.,Melolontha melolontha, Melolonthaspp.,Micrococcus luteus, Migdolusspp.,Monochamus alternatus, Musca domestica, Nemocestes incomptus, Oamona hirta, Oidiumspp.,Operhoptera brumata, Opogona sacchari, Ostrinia nubilalis, Otiorhynchus ovatus, Otiorhynchusspp.,Otiorhynchusspp.,Otiorhynchus sulcatus, Pachnaeus litus, Panisetia marginata, Pantomorusspp.,Parapediasia teterrella, Paysandisia archon, Pectinophora gossyprella, Penicillium expansum, Penicilliumspp,Periplaneta americana, Periplaneta brunnea, Periplanetaspp.,Phlyctinus callosus, Phyllonictis citrella, Phyllotreta cruciferae, Phylophagaspp.,Phytophthora capsici, Phytophthoraspp.,Pieris rapae, Podosphaeraspp.,Pratylenchusspp.,Pseudomonas aeruginosa, Pytium deberyanum, Reticulitermes lucifugus, Reticulotermesspp.,Rhizofus stolonifer, Rhynchophorus ferrugineus, Ripicephalus sanguineus, Rotilenchusspp.,Salmonella typhi, Scapteriscus vicinus, Spodoptera littoralis, Strobilomyia appalachensis, Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermis, Staphylococcus typhimurium, Streptococcus mutans, Suillia gigantea, Suillia tuberiperda, Thaumetaopoea pytiocampa, Thichodorusspp.,Tipula paludosa, Tirathaba rufivena, Tomicus destruens, Tomicus piniperda, Tomicusspp.,Trialeurodes vaporariorum, Trips tabaci, Tryporysa incertulas, Tutta absoluta, Tylenchulusspp.,Vesperus xatarti, Vespulaspp.,Vietacea polistiformis, Wiseana copularis, Xylotrechus arvicola, Xiphinemaspp.,Zeiraphera canadensis, Zeuzera pyrinayZophodis grossulatariata.
15. El uso según cualquiera de las reivindicaciones 12 a 14, que comprende aplicar a las plantas la composición mediante una técnica seleccionada del grupo que consiste en irrigación, pulverización e inyección.
16. El uso según la reivindicación 15, en el que la pulverización es foliar.
17. El uso según cualquiera de las reivindicaciones 12 a 16, en el que se aplica a las plantas una dosis de 1 a 10 cm3 de la composición que comprende quitosano o clorhidrato de quitosano, por cada 106 nematodos.
18. El uso según cualquiera de las reivindicaciones 12 a 17, que comprende una primera etapa de tratamiento con una composición según la reivindicación 1 y una segunda etapa de tratamiento con la composición que comprende nematodos según la reivindicación 2.
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