ES2377744T3 - Adhesivos de tejidos con elasticidad modificada - Google Patents

Adhesivos de tejidos con elasticidad modificada Download PDF

Info

Publication number
ES2377744T3
ES2377744T3 ES07796383T ES07796383T ES2377744T3 ES 2377744 T3 ES2377744 T3 ES 2377744T3 ES 07796383 T ES07796383 T ES 07796383T ES 07796383 T ES07796383 T ES 07796383T ES 2377744 T3 ES2377744 T3 ES 2377744T3
Authority
ES
Spain
Prior art keywords
extended chain
polymer
peg
give
arm
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
ES07796383T
Other languages
English (en)
Inventor
Henry Keith Chenault
Garret D. Figuly
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Actamax Surgical Materials LLC
EIDP Inc
Original Assignee
EI Du Pont de Nemours and Co
Actamax Surgical Materials LLC
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by EI Du Pont de Nemours and Co, Actamax Surgical Materials LLC filed Critical EI Du Pont de Nemours and Co
Application granted granted Critical
Publication of ES2377744T3 publication Critical patent/ES2377744T3/es
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08G—MACROMOLECULAR COMPOUNDS OBTAINED OTHERWISE THAN BY REACTIONS ONLY INVOLVING UNSATURATED CARBON-TO-CARBON BONDS
    • C08G73/00—Macromolecular compounds obtained by reactions forming a linkage containing nitrogen with or without oxygen or carbon in the main chain of the macromolecule, not provided for in groups C08G12/00 - C08G71/00
    • C08G73/02—Polyamines
    • C08G73/024—Polyamines containing oxygen in the form of ether bonds in the main chain
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08L—COMPOSITIONS OF MACROMOLECULAR COMPOUNDS
    • C08L79/00—Compositions of macromolecular compounds obtained by reactions forming in the main chain of the macromolecule a linkage containing nitrogen with or without oxygen or carbon only, not provided for in groups C08L61/00 - C08L77/00
    • C08L79/02—Polyamines

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Polyethers (AREA)
  • Macromolecular Compounds Obtained By Forming Nitrogen-Containing Linkages In General (AREA)
  • Materials For Medical Uses (AREA)
  • Other Resins Obtained By Reactions Not Involving Carbon-To-Carbon Unsaturated Bonds (AREA)

Abstract

Una composición de materia fabricada mediante un procedimiento que comprende: hacer reaccionar, opcionalmente en un primer disolvente de reacción, al menos un poliéter amina de múltiples brazos que tenga al menos tres brazos con al menos un agente reticulante bifuncional de fórmula: X1-R-X2 estando la relación molar del poliéter amina de múltiples brazos al agente reticulante bifuncional en el intervalo de 4:1 a 50:1, formando de este modo un producto tipo poliamina de cadena extendida; y en el que: (i) al menos tres de los brazos del poliéter amina de múltiples brazos están terminados en un grupo amina primaria; (ii) el poliéter amina de múltiples brazos tiene un peso molecular promedio en peso de 450 a 200.000 Daltons; (iii) X1-R-X2 es un polímero que tiene un peso molecular promedio en peso de 2.000 a 20.000 Daltons; (iv) R es un grupo polímero divalente;(v) X1 y X2 son grupos capaces de reaccionar con el grupo amina primaria para formar un enlace carbononitrógeno;siempre que el producto tipo poliamina de cadena extendida esté caracterizado por una solubilidad en agua a 20º C de al menos 20% en peso.

Description

Adhesivos de tejidos con elasticidad modificada
Campo de la invención
La invención se refiere al campo de los adhesivos médicos. Más específicamente, la invención se refiere a un adhesivo polimérico de tejidos con elasticidad modificada formado haciendo reaccionar un polisacárido oxidado con un poliéter amina de múltiples brazos de cadena extendida y soluble en agua.
Antedecentes de la invención
Los adhesivos de tejidos tienen muchas aplicaciones médicas potenciales, que incluyen el cierre tópico de heridas, el suplemento o reemplazamiento de suturas o grapas en procedimientos quirúrgicos internos, la adhesión de injertos e incrustaciones sintéticas a la córnea, dispositivos para la administración de fármacos y como barreras antiadhesión para prevenir las adhesiones posquirúrgicas. Los adhesivos de tejidos convencionales no son en general adecuados para una amplia gama de aplicaciones adhesivas. Por ejemplo, los adhesivos basados en cianoacrilatos han sido usados para el cierre tópico de heridas, pero la liberación de productos de degradación tóxicos limita su uso para aplicaciones internas. Los adhesivos basados en fibrina son de curado lento, tienen mala resistencia mecánica y suponen un riesgo de infección vírica. Adicionalmente, los adhesivos basados en fibrina no se enlazan covalentemente al tejido subyacente.
Se han desarrollado varios tipos de adhesivos de tejidos tipo hidrogel, los cuales han mejorado las propiedades cohesivas y adhesivas y no son tóxicos. En general, estos hidrogeles se forman haciendo reaccionar un componente que tenga grupos nucleófilos con un componente que tenga grupos electrófilos, los cuales son capaces de reaccionar con los grupos nucleófilos del primer componente, para formar una red reticulada vía enlaces covalentes. Sin embargo, estos hidrogeles típicamente se hinchan o disuelven demasiado rápidamente, o carecen de suficiente resistencia de adhesión o mecánica, disminuyendo de este modo su efectividad como adhesivos quirúrgicos.
Ejemplos de adhesivos de tejidos tipo hidrogel son descritos por Sehl et al en la publicación de solicitud de patente de EE.UU. nº 2003/0119985. Los adhesivos se forman haciendo reaccionar un polímero hidrófilo, tal como colágeno, con un componente reticulable que tenga grupos nucleófilos y un componente reticulable que tenga grupos electrófilos. Los componentes reticulables incluyen varias formas activadas de polietilenglicol. Goldmann et al., en el documento WO 03/035122, describen un tejido adhesivo tipo hidrogel formado haciendo reaccionar quitosano o un poli(alcohol vinílico) modificado que porta grupos amino con un polisacárido oxidado, tal como dextrano oxidado. Ninguna de estas descripciones describe un polímero adhesivo formado haciendo reaccionar un polisacárido oxidado con un poliéter amina de múltiples brazos soluble en agua.
Por lo tanto, el problema a resolver es proporcionar un material adhesivo de tejidos con mejores características para usar en procedimientos quirúrgicos así como otras aplicaciones médicas. Los solicitantes han abordado el problema especificado descubriendo un adhesivo de tejidos polimérico formado haciendo reaccionar un polisacárido oxidado con un poliéter amina de múltiples brazos soluble en agua como se describe en la solicitud serial de patente de EE.UU. nº 11/244.756, presentada el 6 de octubre de 2005 y publicada como documento US 2006/0078536 A1.
Además, en la presente memoria abordan el problema especificado descubriendo un tejido adhesivo que tiene una elasticidad modificada y una mejor estabilidad derivada de hacer reaccionar un polisacárido oxidado con un producto tipo poliamina de cadena extendida de la invención.
Sumario de la invención
Una realización de la invención es una composición de materia fabricada mediante un procedimiento que comprende: hacer reaccionar, opcionalmente en un primer disolvente de reacción, al menos un poliéter amina de múltiples brazos que tenga al menos tres brazos con al menos un agente reticulante bifuncional de fórmula:
X1-R-X2
estando la relación molar del poliéter amina de múltiples brazos al agente reticulante bifuncional en el intervalo de aproximadamente 4:1 a aproximadamente 50:1, formando de este modo un producto tipo poliamina de cadena extendida; y en el que:
(i)
al menos tres de los brazos del poliéter amina de múltiples brazos están terminados en un grupo amina primaria;
(ii)
la poliéter amina de múltiples brazos tiene un peso molecular promedio en peso de aproximadamente 450 a aproximadamente 200.000 Daltons;
(iii) X1-R-X2 es un polímero que tiene un peso molecular promedio en peso de aproximadamente 2.000 a aproximadamente 20.000 Daltons;
2
(iv)
R es un grupo polímero divalente;
(v)
X1 y X2 son grupos capaces de reaccionar con el grupo amina primaria para formar un enlace carbononitrógeno;
siempre que el producto tipo poliamina de cadena extendida esté caracterizado por una solubilidad en agua a 20ºC de al menos 20% en peso.
Otra realización de la invención es una composición de materia fabricada mediante un procedimiento que comprende las etapas de: (a) hacer reaccionar, opcionalmente en un segundo disolvente de reacción, al menos un poliéter de múltiples brazos que al menos tenga tres brazos y que al menos tenga tres grupos terminales electrófilos, con un agente reticulante tipo diamina primaria de fórmula:
NH2-R2-NH2
estando la relación molar del poliéter de múltiples brazos al agente reticulante diamina primaria en el intervalo de aproximadamente 4:1 a aproximadamente 50:1, formando de este modo un polímero de cadena extendida que tiene grupos terminales electrófilos remanentes; y, (b) tratar, opcionalmente en un tercer disolvente de reacción, dicho polímero de cadena extendida para convertir los grupos terminales electrófilos remanentes en grupos amina terminales para dar un producto tipo poliamina de cadena extendida; en el que:
(i)
al menos tres de los brazos del poliéter de múltiples brazos están terminados en grupos electrófilos terminales capaces de reaccionar con una amina primaria para formar un enlace carbono-nitrógeno;
(ii)
el poliéter de múltiples brazos tiene un peso molecular promedio en peso de aproximadamente 450 a aproximadamente 200.000 Daltons;
(iii) R2 es un grupo polímero divalente;
(iv) NH2-R2-NH2 es un polímero que tiene un peso molecular promedio en peso de aproximadamente
2.000 a aproximadamente 20.000 Daltons;
siempre que el producto tipo poliamina de cadena extendida esté caracterizado por una solubilidad en agua a 20ºC de al menos 20% en peso.
Los tejidos adhesivos derivados de la reacción de un polisacárido oxidado y un producto tipo poliamina de cadena extendida de la invención exhiben mejora en uno o más de los siguientes atributos: propiedades de adhesión y cohesión, fácil reticulación a la temperatura corporal; mantenimiento de la estabilidad dimensional, estabilidad en ambientes acuosos; carencia de toxicidad para las células y no inflaman a los tejidos. En general, las mejoras realizadas en la presente memoria son una mayor elasticidad, que proporciona una mayor sumisión al tejido subyacente; y mayor estabilidad.
Breve descripción de los dibujos
La figura 1 ilustra rutas sintéticas para agentes reticulantes bifuncionales útiles en la invención.
La figura 2 ilustra rutas sintéticas para poliéteres de múltiples brazos que tienen grupos terminales electrófilos útiles en la invención.
Descripción detallada de la invención
La invención se refiere a un producto tipo poliamina de cadena extendida útil para proporcionar un tejido adhesivo mejorado haciendo reaccionar un polisacárido oxidado con un producto tipo poliamina de cadena extendida soluble en agua que comprende un poliéter amina de múltiples brazos, en el que al menos tres de los brazos están terminados por un grupo amina primaria. El polímero adhesivo es útil como adhesivo para aplicaciones médicas y veterinarias que incluyen, pero no se limitan a, cierre tópico de heridas y procedimientos quirúrgicos tales como anastomosis, anastomosis vascular, reparación de tejidos, hemostasis y procedimientos oftálmicos. Adicionalmente, el polímero adhesivo puede tener utilidad en la administración de fármacos, aplicaciones anti-adhesivas y como agente de carga para tratar la incontinencia urinaria.
En la presente memoria se usan las siguientes definiciones y hay que remitirse a ellas para interpretar las reivindicaciones y la memoria descriptiva.
Las expresiones “polisacárido oxidado” y “polisacárido dialdehído” se usan intercambiablemente en la presente memoria para referirse a un polisacárido que se ha hecho reaccionar con un agente oxidante para introducir grupos aldehído en la molécula.
La expresión “peso equivalente por grupo aldehído” se refiere al peso molecular del polisacárido oxidado dividido entre el número de grupos aldehído introducidos en la molécula.
3
En la presente memoria, los términos poli(óxido de etileno) (PEO) y polietilenglicol (PEG) son sinónimos. En la presente memoria, los términos poli(óxido de propileno) (PEO) y polipropilenglicol (PEG) son sinónimos.
Cuando se usa en la presente memoria, se pretende que “comprende”, “que comprende”, “incluye”, “que incluye”, “tiene”, “que tiene”, o cualquier otra variación de los mismos, cubran una inclusión no exclusiva. Por ejemplo, un procedimiento, un método, un artículo, o un aparato que comprenda una lista de elementos no están necesariamente limitados a sólo esos elementos sino que pueden incluir otros elementos no expresamente listados o intrínsecos a tal procedimiento, método, artículo o aparato. Además, a menos que se especifique expresamente lo contrario, “o” se refiere a una condición inclusiva y no a una exclusiva. Por ejemplo, se satisface una condición A o B por uno cualquiera de las siguientes afirmaciones. A es verdad (o está presente) y B es falso (o no está presente), A es falso (o no está presente) y B es verdad (o está presente), y tanto A como B son verdad (o están presentes).
Una primera realización de la invención es una composición de materia fabricada mediante un procedimiento que comprende: hacer reaccionar, opcionalmente en un primer disolvente de reacción, al menos un poliéter amina de múltiples brazos que tenga al menos tres brazos, con al menos un agente reticulante bifuncional de fórmula:
X1-R-X2
estando la relación molar del poliéter amina de múltiples brazos al agente reticulante bifuncional en el intervalo de aproximadamente 4:1 a aproximadamente 50:1, formando de este modo un producto tipo poliamina de cadena extendida;
en el que:
(i)
al menos tres de los brazos del poliéter amina de múltiples brazos están terminados en un grupo amina primaria;
(ii)
la poliéter amina de múltiples brazos tiene un peso molecular promedio en peso de aproximadamente 450 a aproximadamente 200.000 Daltons;
(iii) X1-R-X2 es un polímero que tiene un peso molecular promedio en peso de aproximadamente 2.000 a aproximadamente 20.000 Daltons;
(iv)
R es un grupo polímero divalente;
(v)
X1 y X2 son grupos capaces de reaccionar con el grupo amina primaria para formar un enlace carbononitrógeno;
siempre que el producto tipo poliamina de cadena extendida esté caracterizado por una solubilidad en agua a 20ºC de al menos 20% en peso.
La expresión “poliéter amina de múltiples brazos” se refiere a un poliéter ramificado que al menos tiene tres brazos que están terminados en un grupo amina primaria, el cual es soluble en agua y capaz de reaccionar con un segundo reaccionante es disolución acuosa.
Los poliéter aminas de múltiples brazos son poliéteres que tienen la unidad repetitiva [-O-R3]-, en la que R3 es un grupo hidrocarbileno que tiene 2 a 5 átomos de carbono. La expresión “grupo hidrocarbileno” se refiere a un grupo divalente formado eliminando dos átomos de hidrógeno, uno de cada uno de dos átomos de carbono diferentes, de un hidrocarburo. Los poliéter aminas de múltiples brazos útiles en la invención incluyen poliéteres dendríticos, en forma de peine y estrella ramificados e hiper-ramificados en los que al menos tres de los brazos están terminados en un grupo amina primaria. Los poliéter aminas de múltiples brazos tienen un peso molecular promedio en peso (Mw) de aproximadamente 2.000 a aproximadamente 200.000 Daltons, preferiblemente de aproximadamente 2.000 a aproximadamente 40.000 Daltons. Ejemplos adecuados de poliéter aminas de múltiples brazos solubles en agua incluyen, pero no están limitados a, poli(óxidos de etileno) estrella, dendríticos o peine amino-terminados; poli(óxidos de propileno) estrella, dendríticos o peine amino-terminados; copolímeros de poli(óxido de etileno) -poli(óxido de propileno) estrella, dendríticos o peine amino-terminados; y poli(oxialquilen triaminas) vendidos con el nombre comercial Jeffamine® triaminas por Huntsman LLC (Houston, TX). Ejemplos de poli(óxido de etileno)aminas estrella incluyen pero no se limitan a, varios polietilenglicol-aminas de múltiples brazos disponibles en Nektar Transforming Therapeutics (Hunstville, AL), y polietilenglicol-aminas estrella que tienen 3, 4, 6 u 8 brazos terminados con aminas primarias (denominados en la presente memoria como PEG-aminas de 3, 4, 6 u 8 brazos, respectivamente). Un PEG-amina de 8 brazos, Mw 10.000, está disponible en Nektar Transforming Therapeutics. Ejemplos de Jeffamine® triaminas adecuadas incluyen, pero no se limitan a, Jeffamine® T-403 (nº de CAS 39423-51-3), Jeffamine® T-3000 (nº de CAS 64852-22-8) y Jeffamine® T-5000 (nº de CAS 64852-22-8). En una realización preferida, el poliéter amina de múltiples brazos soluble en agua es un PEG de ocho brazos que tiene ocho brazos terminados en un grupo amina primaria y que tiene un peso molecular promedio en peso de aproximadamente 9.000 a aproximadamente 11.000 Daltons.
4
Estos poliéter aminas de múltiples brazos están comercialmente disponibles, como se advirtió anteriormente, o pueden prepararse usando métodos conocidos en la técnica. Por ejemplo, Larkin et al., (patente de EE.UU. nº 4.766.245), describen la conversión de poli(propilenglicoles) de tres y ocho brazos en las correspondientes poliaminas por reacción con amoníaco en presencia de hidrógeno y un catalizador de níquel Raney/aluminio. Nho et al., (publicación de solicitud de patente de EE.UU: nº U.S. 2004/0225097) describen la conversión de PEG-polioles de múltiples brazos en sus correspondientes PEG-aminas de múltiples brazos por tosilación seguido por reacción con amoníaco acuoso durante diez días. Adicionalmente, Bückmann et al. (Makromol. Chem. 182:1379-1384 (1981)) describen la conversión de PEG lineales en la correspondiente diamina vía una reacción de dos etapas que comprende hacer reaccionar el PEG con bromuro de tionilo para formar el derivado bromado, seguido por reacción con amoníaco etanólico. Un método preferido ampliamente aplicable a la preparación de poliéter aminas de múltiples brazos con alta conversión de grupos terminales en aminas se describe en la solicitud serial de patente de EE.UU. nº 11/732952, presentada el 5 de abril de 2007. El método comprende hacer reaccionar cloruro de tionilo y al menos un PEG poliol de múltiples brazos que tenga de 3 a 10 brazos, para formar un cloruro de PEG de múltiples brazos que al menos tenga aproximadamente el 95% de grupos hidroxilo terminales del PEG poliol de múltiples brazos convertidos en grupos cloruro terminales; separar el cloruro de PEG de múltiples brazos del cloruro de tionilo sin reaccionar, y hacer reaccionar el cloruro de PEG de múltiples brazos con amoníaco acuoso o amoníaco anhidro para formar un producto de reacción en el cual al menos aproximadamente el 95% de grupos cloruro terminales del cloruro de PEG de múltiples brazos son convertidos en grupos amina terminales. Otros métodos que pueden usarse para preparar poliéter aminas de múltiples brazos son descritos por Merrill et al., en la patente de EE.UU. nº 5.830.986, y por Chang et al., en el documento WO 97/30103.
Debe reconocerse que los poliéter aminas de múltiples brazos y los poliéteres de múltiples brazos descritos anteriormente son en general una mezcla un tanto heterogénea que tiene una distribución e longitudes de brazos y, en algunos casos, una distribución de especies con diferentes números de brazos. Cuando un poliéter de múltiples brazos o un poliéter amina de múltiples brazos tienen una distribución de especies que tienen diferentes números de brazos, puede decirse que están basados en el número promedio de brazos en la distribución. Por ejemplo, en una realización el poliéter amina de múltiples brazos es un PEG-amina estrella de 8 brazos, el cual comprende una mezcla de PEG-aminas estrella de múltiples brazos, algunos teniendo menos que y otros más que 8 brazos; sin embargo, los PEG-aminas estrella de múltiples brazos de la mezcla tienen un promedio de 8 brazos. Por lo tanto, las expresiones “8 brazos”, “6 brazos”, “4 brazos” y “3 brazos” que se usan en la presente memoria para referirse a poliéteres de múltiples brazos y poliéter aminas de múltiples brazos, deben interpretarse que se refieren a una mezcla heterogénea que tiene una distribución e longitudes de brazos y, en algunos casos, una distribución de especies con diferentes números de brazos, en cuyo caso el número de brazos mencionado se refiere al número medio de brazos en la mezcla.
Los agentes reticulantes bifuncionales útiles en la invención son de la fórmula:
X1-R-X2
y son polímeros que tienen un peso molecular promedio en peso de aproximadamente 2.000 a aproximadamente
20.000 Daltons.
Los grupos funcionales X1 y X2 pueden ser cualquier grupo capaz de reaccionar con un grupo amina primaria para formar un enlace carbono nitrógeno. Preferiblemente, X1 y X2 son los mismos en cualquier agente reticulante bifuncional específico. Preferiblemente, X1 y X2 se seleccionan del grupo: -CHO, -CO2H, -CO2R1, -NCO, -NCS, -COCl, -COBr, -COF, -OMs (en el que Ms es metanosulfonilo), -OTs (en el que Ts es toluenosulfonilo), y –OTf (en el que Tf es trifluorometanosulfonilo), tresilato (2,2,2-trifluoroetanosulfonato), Cl, Br, I y glicidil éter; en el que R1 es un radical N-succinimidilo, 4-nitrofenilo, 2,4-dinitrofenilo o pentafluorofenilo. Son especialmente preferidos los grupos X1 y X2 por ser conocidos como buenos grupos salientes en reacciones de sustitución nucleófila, que incluyen los seleccionados del grupo: -OMs, -OTs, -OTf, tresilato, Cl, Br y I.
Otros grupos X1 y X2 preferidos incluyen: ácidos carboxílicos y ésteres reactivos de ácidos carboxílicos que pueden condensarse con un grupo amina primario para formar una unión amida; isocianatos que pueden condensarse con un grupo amina primario para formar una unión urea; aldehídos que pueden condensar con aminas primarias para dar iminas, y opcionalmente pueden reducirse a aminas secundarias; y grupos epoxi reactivos, por ejemplo glicidil éteres, que pueden condensarse con un grupo amina primaria para formar una amina secundaria.
El grupo R puede ser cualquier grupo polímero divalente que cuando se combina con X1 y X2 cae dentro del intervalo prescrito de pesos moleculares del agente reticulante bifuncional. Preferiblemente, R es un grupo polímero divalente que se caracteriza por una alta afinidad por el agua, tal que si X1 y X2 son grupos hidroxilo, el correspondiente diol, HO-R-OH, tiene al menos una solubilidad en agua del 1% en peso a 20ºC y a 38ºC.
El grupo polímero divalente R puede estar en forma de un homopolímero o de un copolímero de bloques o al azar. En la presente memoria, copolímero se refiere a un polímero derivado de dos o más unidades repetidas. Preferiblemente, R es un grupo polímero divalente derivado de unidades repetidas de uno o más monómeros seleccionados del grupo que consiste en: óxido de etileno, óxido de propileno, acetato de vinilo, alcohol vinílico, Nvinil pirrolidona y oxetano.
5
Los agentes reticulantes bifuncionales preferidos X1 y X2 para la invención comprenden un grupo polímero divalente R seleccionado del grupo que consiste en: homopolímeros divalentes de óxido de etileno; y copolímeros de bloques divalentes y al azar de óxido de etileno y óxido de propileno.
Los polímeros terminados en grupos hidroxi útiles para preparar estos agentes reticulantes bifuncionales están comercialmente disponibles. Por ejemplo, polietilenglicoles con pesos moleculares nominales de 2000, 4000, 6000 y 8000 están disponibles en Aldrich Chemical Co. Los copolímeros de tribloques de poli(óxido de etileno) y poli(óxido de propileno) (PEG-PPG-PEG) están disponibles en BASF, Mount Olive, NI con el nombre comercial PLURONIC® con pesos moleculares nominales de 1850 a 14.600.
Los agentes reticulantes bifuncionales X1 y X2 para la invención están disponibles por rutas sintéticas bien conocidas. Por ejemplo, pueden fabricarse agentes reticulantes bifuncionales en los que X1 y X2 sean tosilato, tresilato o triflato tratando los polímeros correspondientes terminados en grupos hidroxilo con cloruro de metanosulfonilo, cloruro de toluenosulfonilo, cloruro de 2,2,2-trifluoroetanosulfonilo y cloruro de trifluorometanosulfonilo, respectivamente, en un disolvente aprótico tal como diclorometano, en presencia de un base, tal como trietilamina o piridina. Los agentes reticulantes bifuncionales en los que X1 y X2 sean cloruro y bromuro pueden fabricarse tratando los polímeros correspondientes terminados en grupos hidroxilo con cloruro de tionilo y bromuro de tionilo, respectivamente, en un disolvente aprótico tal como tolueno. El tratamiento posterior del cloruro o bromuro con yoduro de potasio en un disolvente aprótico polar tal como N,N-dimetilformamida (DMF) puede dar el yoduro correspondiente.
Otros agentes reticulantes bifuncionales para la invención incluyen polímeros terminados en grupos carboxi que tienen grupos terminales ácido carboxílico, haluro de ácido carboxílico o ésteres reactivos seleccionados del grupo: homopolímeros de óxido de etileno y copolímeros de bloques y al azar de óxido de etileno y óxido de propileno. Estos materiales están disponibles por síntesis siguiendo las rutas delineadas en la figura 1 y los métodos descritos por Bückman, A.F., et al., Makromolekulare Chemie, 182, 1379-1384 (1981). Por ejemplo, puede carboximetilarse PEG hidroxi terminado por tratamiento con naftaleno de sodio en tetrahidrofurano (THF) seguido por alquilación con 2-bromoacetato de etilo e hidrólisis del éster para dar PEG carboximetil terminado de fórmula (Ia). En otra ruta, el PEG hidroxi terminado puede tratarse con una base y acrilonitrilo para dar el producto de adición de Michael seguido por hidrólisis ácida del nitrilo para dar el PEG carboxietil terminado de fórmula (Ib). En otra ruta, puede tratarse PEG terminado con mesilato, tosilato, tresilato, triflato, cloruro, bromuro o yoduro con amoníaco en un depósito sellado para producir PEG amina terminado. El PEG amina terminado puede transformarse en un PEG carboxi terminado como se ejemplifica mediante el tratamiento con anhídrido succínico, para producir el PEG carboxi terminado (IIa). Otros anhídridos preferidos útiles en esta secuencia incluyen anhídrido glutárico, anhídrido adípico, anhídrido caproico, anhídrido maleico y anhídrido oxibisacético. En otra ruta, pueden tratarse PEG terminado y PEG amina terminado con 2-isocianoacetato de etilo seguido por hidrólisis del éster para dar un diácido unido por grupos uretano (Ic) y un diácido unido por grupos imida (Id), respectivamente, usando procedimientos similares a los descritos por Zalipsky et al., en Reac. Polym. (1994) 22, 243-258. La tabla 1 lista varios agentes reticulantes bifuncionales tipo PEG carboxi terminado útiles en la invención.
6
Los derivados carboxi de fórmulas (Ia-d) y (IIa-e) puede además transformarse en cloruros o bromuros de ácido por tratamiento con cloruro de tionilo o bromuro de tionilo, respectivamente. Los PEG carboxi terminados pueden transformarse en ésteres reactivos como se ejemplifica mediante el tratamiento de (IIa) con dicliclohexilcarbodiimida (DCC) y N-hidroxisuccinimida para dar el éster de N-oxi succinimida de fórmula (IIIa) en la figura 1. Muchos otros PEG terminados en ésteres activados que incluyen 4-nitrofenilo, 2,4-dinitrofenilo o pentafluorofenilo, pueden prepararse de una manera similar usando DCC y 4-nitrofenol, 2,4-dinitrofenol o pentafluorofenol, respectivamente. La tabla 2 lista varios agentes reticulantes bifuncionales tipo PEG terminados en grupos éster activados, útiles en la invención.
7
Los diésteres dicarboxílicos de PEG están disponibles con pesos moleculares que varían de 3.400 a 20.000 con el nombre comercial SUNBRIGHT® en NOF America Corporation, White Plains, NY. Estos productos comerciales, activados como ésteres de N-hidroxisuccinimidilo (NHS) incluyen: PEG-dicarboximetil NHS, PEG-disuccinato NHS
5 (IIIa), PEG-diglutarato NHS (IIIb), y PEG-dicaproato NHS (IIId). También está disponible un PEG-di(p-nitrofenil) carbonato.
Otros agentes reticulantes bifuncionales para la invención incluyen polímeros terminados en grupos aldehído seleccionados del grupo que consiste en: homopolímeros de óxido de etileno y copolímeros de bloques y al azar de óxido de etileno y óxido de propileno. Por ejemplo, puede tratarse PEG hidroxi terminado con naftaleno de sodio en
10 tetrahidrofurano (THF) seguido por alquilación con 2-bromoacetaldehído dietil acetal e hidrólisis del acetal para dar PEG terminado en grupos aldehído. De manera similar puede usarse 3-bromopropionaldehído dietil acetal para dar PEG terminado en grupos propionaldehído (A-PEG). Una fuente comercial de A-PEG es SUNBRIGHT® DE-050AL (Mw = 5.000).
Otros agentes reticulantes bifuncionales para la invención incluyen polímeros terminados en grupos isocianato o
15 tioisocianato seleccionados del grupo: homopolímeros de óxido de etileno y copolímeros de bloques y al azar de óxido de etileno y óxido de propileno. Por ejemplo, puede tratarse PEG terminado en grupos amina con trifosgeno según Greenwald et al. (J. Med. Chem. (1999) 42, 3657-3667). Puede tratarse PEG terminado en grupos hidroxi con un exceso de hexametileno diisocianato para dar un PEG terminado en grupos isocianato según el siguiente esquema:
El diisocianato en exceso puede separarse por varios métodos que incluyen evaporación a presión reducida o precipitación fraccionada del polímero PEG de una disolución usando un no disolvente. Otros diisocianatos que
8
pueden usarse para modificar PEG terminado en grupos hidroxi de una manera similar incluyen, pero no se limitan a, etileno diisocianato, tetrametileno diisocianato y metil pentametileno diisocianato.
Otros agentes reticulantes bifuncionales para la invención incluyen polímeros terminados en grupos epoxi reactivos, que incluyen glicidil éteres, y seleccionados del grupo: homopolímeros y copolímeros de bloques y al azar de óxido de etileno y óxido de propileno. Los polímeros terminados en grupos hidroxi útiles para preparar estos agentes reticulantes bifuncionales tipo epoxi están comercialmente disponibles como se describió anteriormente. La síntesis de agentes reticulantes bifuncionales tipo epoxi puede lograrse según el siguiente esquema:
Los PEGs heterobifuncionales en los que X1 y X2 son grupos funcionales diferentes son útiles como agentes
10 reticulantes bifuncionales en la invención. La preparación de polímeros que contienen PEGs heterobifuncionales se describe en varios artículos en “Poly(ethylene glycol) Chemistry and Biological Applications”, J. Milton Harris y Samuel Zalipsky eds., ACS Symposium Series 680, American Chemical Society, Washington DC (1997).
Varios agentes reticulantes heterofuncionales útiles incluyen los proporcionados mediante la síntesis de monocloruro de PEG usando métodos similares a los delineados por Zalipsky et al, React. Polym. (1994), 22, 243-258, según los
15 siguientes esquemas:
Los monoácidos intermedios se separan de las impurezas homofuncionales por cromatografía de intercambio de iones para dar los compuestos heterofuncionales puros de fórmula (IVa-b) y (Va-b).
Otros agentes reticulantes heterofuncionales útiles se proporcionan mediante la síntesis del PEG propionaldehído
20 (A-PEG-OH) que está disponible cuando se usa 3,3-dietoxipropil alcóxido como iniciador de la polimerización de óxido de etileno (EO) según los procedimientos descritos por Nagasaki et al., (Bioconjugate Chem., (1995) 6, 231). A-PEG-OH está comercialmente disponible con un Mw nominal de 500 – 3000 en NOF Corporation. Los agentes reticulantes aldehído heterobifuncionales que pueden derivarse de A-PEG-OH incluyen, pero no se limitan a, los proporcionados por síntesis en los siguientes esquemas:
9
Los productos tipo poliamina de cadena extendida de la invención derivados de agentes reticulantes bifuncionales se caracterizan además por un Mw determinado por cromatografía de exclusión molecular (SEC) que al menos es aproximadamente 10% mayor que el Mw de la(s) poliéter amina(s) usada(s) para fabricar el producto tipo poliamina de cadena extendida.
Otra realización de la invención es una composición de materia fabricada mediante un procedimiento que comprende las etapas de: (a) hacer reaccionar, opcionalmente en un segundo disolvente de reacción, al menos un poliéter de múltiples brazos que al menos tenga tres brazos y que al menos tenga tres grupos terminales electrófilos, con un agente reticulante tipo diamina primaria de fórmula:
NH2-R2-NH2
estando la relación molar del al menos un poliéter de múltiples brazos al agente reticulante diamina primaria en el intervalo de aproximadamente 4:1 a aproximadamente 50:1, formando de este modo un polímero de cadena extendida que tiene grupos terminales electrófilos remanentes; y, (b) tratar, opcionalmente en un tercer disolvente de reacción, dicho polímero de cadena extendida para convertir los grupos terminales electrófilos remanentes en grupos amina terminales para dar un producto tipo poliamina de cadena extendida; en el que:
(i)
al menos tres de los brazos de dicho poliéter de múltiples brazos están terminados en grupos electrófilos terminales capaces de reaccionar con una amina primaria para formar un enlace carbononitrógeno;
(ii)
el poliéter de múltiples brazos tiene un peso molecular promedio en peso de aproximadamente 450 a aproximadamente 200.000 Daltons;
(iii) R2 es un grupo polímero divalente;
(iv) NH2-R2-NH2 es un polímero que tiene un peso molecular promedio en peso de aproximadamente 2.000 a aproximadamente 20.000 Daltons;
siempre que el producto tipo poliamina de cadena extendida esté caracterizado por una solubilidad en agua a 20ºC de al menos 20% en peso.
El agente reticulante tipo diamina primaria útil en la segunda realización de la invención es un polímero aminaterminado que tiene un peso molecular promedio en peso de aproximadamente 2.000 a aproximadamente 20.000 Daltons. Preferiblemente, R2 es un grupo polímero divalente que está caracterizado por una alta afinidad por el agua, tal que el correspondiente diol, HO-R2-OH, al menos tiene una solubilidad en agua del 1% en peso, y preferiblemente al menos del 3% en peso, a 20ºC y 38ºC.
10
El grupo polímero divalente R2 puede estar en forma de un homopolímero o de un copolímero de bloques o al azar. Preferiblemente, R2 es un grupo polímero divalente derivado de unidades repetidas de uno o más monómeros seleccionados del grupo que consiste en: óxido de etileno, óxido de propileno, acetato de vinilo, alcohol vinílico, Nvinil pirrolidona y oxetano. Un agente reticulante preferido tipo diamina primaria para la invención comprende un grupo polímero divalente R seleccionado del grupo que consiste en: homopolímeros divalentes de óxido de etileno; y copolímeros de bloques divalentes y al azar de óxido de etileno y óxido de propileno. Los polímeros terminados en grupos hidroxi útiles para preparar estos agentes reticulantes tipo diamina primaria están comercialmente disponibles como se describió anteriormente. El agente reticulante tipo diamina primaria puede sintetizarse usando la ruta delineada en la figura 1 para el PEG terminado en grupos amina. Por ejemplo, el tratamiento de PEG con bromuro de tionilo proporciona el PEG terminado en bromuro, el cual puede tratarse posteriormente con amoníaco para dar el agente reticulante deseado tipo diamina primaria. Los PEGs terminados en grupos amina, que comprenden grupos aminopropilo terminales, adecuados como agentes reticulantes tipo diamina primaria, también están comercialmente disponibles en NOF Corporation en un intervalo de Mw de 3400 a aproximadamente 20.000.
La expresión “poliéter de múltiples brazos que al menos tiene tres brazos y que al menos tiene tres grupos terminales electrófilos” se refiere a un poliéter ramificado, que al menos tiene tres brazos que están terminados en grupos terminales electrófilos, el cual es soluble en agua y capaz de reaccionar con un agente reticulante tipo diamina primaria.
El poliéter de múltiples brazos es un poliéter que tienen la unidad repetitiva [-O-R3]-, en la que R3 es un grupo hidrocarbileno que tiene 2 a 5 átomos de carbono. La expresión “grupo hidrocarbileno” se refiere a un grupo divalente formado eliminando dos átomos de hidrógeno, uno de cada uno de dos átomos de carbono diferentes, de un hidrocarburo. Los poliéteres de múltiples brazos útiles en la invención incluyen poliéteres dendríticos, en forma de peine y estrella ramificados e hiper-ramificados en los que al menos tres de los brazos están terminados en un grupo terminal electrófilo. Los poliéteres de múltiples brazos tienen un peso molecular promedio en peso de aproximadamente 450 a aproximadamente 200.000 Daltons, preferiblemente de aproximadamente 2.000 a aproximadamente 40.000 Daltons.
Los poliéteres de múltiples brazos que al menos tienen tres brazos y que al menos tienen tres grupos terminales electrófilos están comercialmente disponibles, como se advierte más adelante, o pueden prepararse usando métodos conocidos en la técnica. Por ejemplo, polietilenglicoles (PEGs) de múltiples brazos, en los que al menos tres brazos están terminados en grupos hidroxilo, están disponibles por síntesis según los métodos de Merril en J. Biomater. Sci. Polymer Edn, 5, pp. 1-11 (1993). Los PEGs estrella de 3, 4, 6 y 8 brazos están también disponibles en empresas tales como Nektar Transforming Therapeutics; SunBio, Inc., Angyang City, Corea del Sur; NOF Corp., Tokio, Japón; y Jenken technology USA, Allen, TX. Los PEGs de múltiples brazos pueden transformarse en poliéteres de múltiples brazos que tienen grupos terminales electrófilos usando bromuro de tionilo y los métodos descritos por Bückmann et al. (Makromol. Chem. 182:1379-1384 (1981). En otro método preferido, los PEGs de múltiples brazos pueden transformarse en cloruros reactivos usando cloruro de tionilo como se describió anteriormente. Los PEGs de múltiples brazos pueden transformarse en mesilatos, tosilatos, tresilatos o triflatos por tratamiento con cloruro de metanosulfonilo, cloruro de toluenosulfonilo, cloruro de 2,2,2-trifluoroetanosulfonilo y cloruro de trifluorometanosulfonilo, respectivamente, en un disolvente aprótico tal como diclorometano, en presencia de una base, tal como trietilamina o piridina.
Otros poliéteres de múltiples brazos preferidos que tienen grupos terminales electrófilos útiles en la invención incluyen PEGs de múltiples brazos terminados en grupos carboxi que tienen grupos terminales ácido carboxílico, haluros de ácido carboxílico o ésteres reactivos de ácidos carboxílicos. Estos materiales están disponibles por síntesis siguiendo las rutas delineadas en la figura 2, en las que PEG-OH de múltiples brazos representa un PEG de múltiples brazos que al menos tiene tres brazos, preferiblemente 4 a 8 brazos, que están terminados en grupos hidroxilo. En las rutas , todos los grupos hidroxilo terminales sufren sustancialmente transformación en los diversos derivados indicados. Las diversas rutas útiles para preparar polímeros tipo PEGs de múltiples brazos terminados en grupos carboxi son similares a las descritas para los agentes reticulantes bifuncionales en la figura 1. Por ejemplo, el PEG de múltiples brazos terminado en grupos amina puede transformarse en un PEG terminado en grupos carboxi como se ejemplifica mediante el tratamiento con anhídrido succínico, para dar el PEG de múltiples brazos terminado en grupos carboxi (XIIa). En lugar de anhídrido succínico pueden usarse anhídrido glutárico, anhídrido caproico, anhídrido adípico, anhídrido maleico y anhídrido oxibisacético para producir una variedad de PEGs de múltiples brazos terminados en grupos carboxi. La tabla 3 lista varios PEGs de múltiples brazos terminados en grupos carboxi útiles en la invención.
11
Los PEGs de múltiples brazos terminados en grupos carboxi de fórmulas (Xa-d) y (XIIa-e) pueden además transformarse en cloruros o bromuros de ácido por tratamiento con cloruro o bromuro de tionilo, respectivamente. Los PEGs de múltiples brazos terminados en grupos carboxi pueden además transformarse en ésteres reactivos 5 como se ejemplifica mediante el tratamiento de (XIIa) con diciclohexilcarbodiimida (DCC) y N-hidroxisuccinimida para dar el éster de N-oxi succinimida de fórmula (XIIIa) en la figura 2. Muchos otros PEG terminados en ésteres activados que incluyen 4-nitrofenilo, 2,4-dinitrofenilo o pentafluorofenilo, pueden prepararse de una manera similar usando DCC y 4-nitrofenol, 2,4-dinitrofenol o pentafluorofenol, respectivamente. La tabla 4 lista varios PEGs de múltiples brazos terminados en grupos éster activados, útiles en la invención como agentes reticulantes
10 bifuncionales.
12
Algunos poliéteres de múltiples brazos que tienen grupos terminales electrófilos están comercialmente disponibles. Por ejemplo, con el nombre comercial SUNBRIGHT® NOF America Corporation ofrece un PEG de cuatro brazoséster de tetraglutarilo activado con NHS, un PEG de cuatro brazos-éster de tetracaproato NHS, un PEG de cuatro
5 brazos tetra(4-nitrofenil)carbonato, un PEG de 8 brazos-octaglutaril NHS, y un PEG de 8 brazos-octa(4nitrofenil)carbonato.
Otros poliéteres de múltiples brazos que tienen grupos terminales electrófilos útiles en la invención incluyen PEGs de múltiples brazos terminados en grupos aldehído. Por ejemplo, puede tratarse un PEG-OH de múltiples brazos con naftaleno de sodio en THF seguido por alquilación con 2-bromoacetaldehído dietil acetal e hidrólisis del acetal para
10 dar PEG de múltiples brazos terminado en grupos aldehído. De manera similar, puede usarse 3bromopropionaldehído dietil acetal para dar un PEG de múltiples brazos terminado en propionaldehído.
En una realización preferida, dentro de los poliéteres de múltiples brazos que tienen grupos terminales electrófilos, los grupos terminales electrófilos se seleccionan del grupo: -OMs, -OTs, -OTf, tresilato, Cl, Br y I; y la etapa (b) comprende hacer reaccionar el polímero de cadena extendida con suficiente amoníaco para dar un producto tipo 15 poliamina de cadena extendida. Un tercer disolvente de reacción preferido para esta realización se selecciona de alcoholes alifáticos C1 a C6, y un disolvente más preferido para esta realización es etanol. En esta realización y en
13
otras realizaciones tratadas en la presente memoria, el producto tipo poliamina de cadena extendida abarca el producto que está totalmente neutralizado con una base, parcialmente neutralizado con una base o completamente protonado que forma una sal de amonio. La extensión de la neutralización del producto tipo poliamina de cadena extendida es una función del pH de la disolución de la cual se deriva, y de si las sales se separan por diálisis u otras
5 técnicas de lavado, todas las cuales están dentro del alcance de la invención. Por ejemplo, el producto tipo poliamina de cadena extendida, si así se desea, puede estar en presencia de un gran exceso de amoníaco, y un tratamiento posterior por diálisis puede separar sustancialmente todo el subproducto sal de amonio.
En otra realización preferida, dentro de los poliéteres de múltiples brazos que tienen grupos terminales electrófilos, los grupos terminales electrófilos se seleccionan del grupo: -OMs, -OTs, -OTf, tresilato, Cl, Br y I; y la etapa (b) 10 comprende las etapas de: (i) hacer reaccionar el polímero de cadena extendida con una azida de metal alcalino para dar un polímero azido de cadena extendida; y (ii) reducir el polímero azido de cadena extendida con un agente reductor para dar un producto tipo poliamina de cadena extendida. El agente reductor puede ser uno cualquiera o más agentes que se sabe que son útiles para convertir una azida orgánica en una amina primaria que incluyen los seleccionados del grupo que consiste en: hidrógeno y un catalizador metálico seleccionado del grupo que consiste 15 en: Pt, Pd, PtO2, PdCl2 y níquel Raney; trifenilfosfina; hidruro de litio y aluminio; borohidruros seleccionados del grupo que consiste en: borohidruro de sodio, borohidruro de zinc y aminoborohidruro de litio, en el que la amina se selecciona del grupo que consiste en dietilamina, diisopropilamina, pirrolidina, piperidina y morfolina; metales y sales de metales seleccionas del grupo que consiste en cloruro de cinc y de estaño (II); y formiato de amonio. Un tercer disolvente preferido para la etapa (i) es un disolvente aprótico polar tal como N,N-dimetilformamida o N,N
20 dimetilacetamida. La azida de metal alcalino es preferiblemente azida de sodio. Si se usa, el catalizador metálico está preferiblemente dispersado sobre carbón o sílice. El catalizador metálico u otros agentes reductores remanentes se separaran deseablemente después de que haya finalizado la etapa de reducción. Esta realización puede proporcionar un producto tipo poliamina de cadena extendida que está sustancialmente exento de sal de amonio.
25 En otra realización preferida, dentro de los poliéteres de múltiples brazos que tienen grupos terminales electrófilos, los grupos terminales electrófilos son ácidos carboxílicos; la etapa (a) comprende además un agente deshidratante tipo diimida; y la etapa (b) comprende una transposición tipo Hofmann que comprende las etapas de: (i) hacer reaccionar el polímero de cadena extendida con una cantidad suficiente de reactivo tipo haluro de ácido para dar un polímero tipo haluro de ácido de cadena extendida; (ii) hacer reaccionar el polímero azido de cadena extendida con
30 suficiente amoníaco para dar un polímero amida primaria de cadena extendida; y (iii) hacer reaccionar el polímero amida primaria de cadena extendida con suficiente fuente de halógeno activo y un hidróxido de metal alcalino para dar un producto tipo poliamina de cadena extendida, como se ilustra en el siguiente esquema:
Dentro de esta realización, el agente deshidratante tipo diimida usado en la etapa (a) es preferiblemente
35 diciclohexilcarbodiimida. En la etapa (i): el reactivo tipo haluro de ácido es cualquier cloruro de ácido típicamente útil para convertir un ácido carboxílico en un cloruro de ácido carboxílico, y preferiblemente se selecciona del grupo: cloruro de tionilo, bromuro de tionilo, cloruro de oxalilo y oxicloruro de fósforo; y la etapa (i) se realiza típicamente en un disolvente aprótico, tal como tolueno, THF o diclorometano. En la etapa (iii): la fuente de halógeno activo es cualquier fuente de cloro o bromo electrófilo, y preferiblemente se selecciona del grupo que consiste en: cloro,
14
bromo, hipoclorito de sodio, hipobromito de sodio, hipoclorito de potasio, hipobromito de potasio, N-clorosuccinimida y N-bromosuccinimida. También son útiles otras fuentes de cloro o bromo electrófilo tal como (diacetoxiyodo) benceno y [bis(trifluoroacetoxi)yodo]benceno. El hidróxido de metal alcalino se selecciona preferiblemente del grupo que consiste en: hidróxido de sodio, hidróxido de potasio e hidróxido de litio. Preferiblemente, la etapa (III) se realiza
5 en un disolvente. Un disolvente preferido es el agua.
En otra realización preferida, dentro de los poliéteres de múltiples brazos que tienen grupos terminales electrófilos, los grupos terminales electrófilos son ácidos carboxílicos; la etapa (a) comprende además un agente deshidratante tipo diimida; y la etapa (b) comprende una transposición tipo Curtius que comprende las etapas de: (i) hacer reaccionar el polímero de cadena extendida con suficiente cantidad de reactivo tipo haluro de ácido para dar un
10 polímero tipo cloruro de ácido de cadena extendida; (ii) hacer reaccionar el polímero tipo cloruro de ácido de cadena extendida con suficiente azida de metal alcalino para dar un polímero tipo acil azida de cadena extendida, y (iii) calentar el polímero tipo acil azida de cadena extendida, preferiblemente en un disolvente prótico tal como agua, para inducir la transposición para dar un producto tipo poliamina de cadena extendida, como se ilustra en el siguiente esquema:
En la etapa (ii): la azida de metal alcalino es preferiblemente azida de sodio; y, preferiblemente, se usa un disolvente aprótico polar tal como THF o acetonitrilo. En la etapa (iii): se usa preferiblemente un disolvente prótico polar tal como agua y, preferiblemente, el calentamiento es hasta aproximadamente 70 a 100ºC.
En otra realización preferida, dentro de los poliéteres de múltiples brazos que tienen grupos terminales electrófilos,
20 los grupos terminales electrófilos son ésteres activados de ácidos carboxílicos o cloruros de ácidos carboxílicos; y la etapa (b) comprende una transposición tipo Hofmann que comprende las etapas de: (i) hacer reaccionar el polímero de cadena extendida con una cantidad suficiente de amoníaco para dar un polímero tipo amida primaria de cadena extendida; y (ii) hacer reaccionar el polímero amida primaria de cadena extendida con suficiente fuente de halógeno activo y un hidróxido de metal alcalino para dar un producto tipo poliamina de cadena extendida.
25 En otra realización preferida, dentro de los poliéteres de múltiples brazos que tienen grupos terminales electrófilos, los grupos terminales electrófilos son ésteres activados de ácidos carboxílicos o haluros de ácidos carboxílicos; la etapa (b) comprende una transposición tipo Curtius que comprende las etapas de: (i) hacer reaccionar el polímero de cadena extendida con suficiente azida de metal alcalino para dar un polímero tipo acil azida de cadena extendida, y
(ii) calentar el polímero tipo acil azida de cadena extendida, preferiblemente en un disolvente prótico tal como agua,
30 para inducir la transposición para dar un producto tipo poliamina de cadena extendida. Los haluros de ácidos carboxílicos adecuados incluyen fluoruros, cloruros, bromuros y yoduros de ácidos carboxílicos. Los haluros de ácidos carboxílicos preferidos son los cloruros de ácidos carboxílicos.
En otra realización preferida, dentro de los poliéteres de múltiples brazos que tienen grupos terminales electrófilos, los grupos terminales electrófilos son aldehído, y la etapa (b) comprende las etapas de: (i) hacer reaccionar el
35 polímero de cadena extendida con suficiente amoníaco para dar un polímero tipo imina de cadena extendida; y (ii) reducir el polímero tipo imina de cadena extendida para dar un producto tipo poliamina de cadena extendida; como se ilustra en el siguiente esquema:
15
La etapa (i) se realiza preferiblemente en un disolvente prótico tal como etanol; y si se desea puede estar presente un catalizador ácido tal como ácido clorhídrico. La etapa (ii) puede realizarse con un agente reductor tipo hidruro tal como triacetoxiborohidruro de sodio, cianoborohidruro de sodio y semejantes. Alternativamente, la etapa (ii) puede realizarse con un catalizador metálico e hidrógeno gas. El catalizador metálico puede ser un metal noble que incluye Pt, PtCl4, PtO2, Pd y semejantes, preferiblemente sobre un soporte tal como negro de carbono o sílice. El catalizador metálico también puede ser níquel Raney u otros catalizadores de metales de transición que se sabe reducen los dobles enlaces carbono nitrógeno a aminas primarias. La etapa (ii) se realiza preferiblemente en un disolvente prótico tal como etanol, metanol, agua y semejantes.
El producto tipo poliamina de cadena extendida de la invención derivado del agente reticulante tipo diamina primaria se caracteriza además por un Mw determinado por cromatografía de exclusión molecular (SEC) que es al menos aproximadamente 10% mayor que el Mw del poliéter de múltiples brazos usado para fabricar el producto tipo poliamina de cadena extendida. El producto tipo poliamina de cadena extendida de la invención es útil para formular adhesivos poliméricos para tejidos. Los adhesivos poliméricos para tejidos se forman haciendo reaccionar un polisacárido oxidado con el producto tipo poliamina de cadena extendida de la invención de una manera similar a la descrita por Kodokian et al en el documento US 2006/0078536 A1, el cual se incorpora a la presente memoria por referencia. Los adhesivos de tejidos derivados de las poliaminas de cadena extendida de la invención exhiben en general una elasticidad acrecentada y una mejor estabilidad en ambientes acuosos en comparación con formulaciones sin el producto tipo poliamina de cadena extendida, como se demuestra en las tablas 5 y 7, respectivamente.
Ejemplos
La presente invención se define adicionalmente en los siguientes ejemplos. Debe entenderse que estos ejemplos, aunque indican realizaciones preferidas de la invención, se dan sólo a modo de ilustración. De la discusión anterior y de estos ejemplos un experto en la técnica puede averiguar las características esenciales de esta invención, y, sin apartarse del espíritu y alcance de la misma, puede hacer varios cambios y modificaciones de la invención para adaptarla a varios usos y condiciones.
El significado de las abreviaturas usadas es como sigue: “min” significa minuto(s), “h” significa hora(s), “mL” significa mililitro(s), “L” significa litro(s), “!L” significa microlitro(s), “mol” significa mol(es), “mmol” significa milimol(es), “g” significa gramo(s), “mg” significa miligramo(s), “mm” significa milímetro(s), “Pa” significa pascal(es), “kPa” significa kilopascal(es), “atm” significa kilos por centímetro cuadrado manométricos, “% en peso” significa tanto por ciento en peso, “PEG” significa polietilenglicol, “Mw” significa peso molecular promedio en peso, “Mn” significa peso molecular promedio en número, “Mz” significa peso molecular promedio en z, “dn/dc” significa el incremento del índice de refracción específico (es decir, el cambio del índice de refracción con el cambio de la concentración), “IV” significa viscosidad intrínseca, “MHz” significa megahercios, “SEC” significa cromatografía de exclusión molecular, “PBS” significa disolución salina tamponada con fosfatos, “1H-RMN” significa espectroscopía de resonancia magnética nuclear, “DMSO-d6” significa dimetilsulfóxido deuterado, “Ac” significa un grupo acetato y “TA” significa temperatura ambiente.
Métodos generales
Reactivos
El dextrano (Mw = 10.000) se compró en Sigma-Aldrich (St Louis, MO). EL PEG amina de 8 brazos (Mw = 10.000), que tiene ocho brazos terminados en un grupo amina primaria, se compró en Nektar Transforming Therapeutic (Hunstville, AL). El peryodato de sodio (pureza 99%, nº de CAS 7790-28-5) se compró en Acros Organics (Morris Plains, NJ). Todos los otros reactivos se obtuvieron de Sigma-Aldrich a menos que se especifique lo contrario.
16
Preparación de dextrano oxidado
Para preparar un dextrano dialdehído con una conversión de dextrano, que tenía un peso molecular de 10.000 Daltons, en contenido de aldehído del 48% se usó el siguiente procedimiento, similar al descrito en Azzam, T.; Raskin, A.; Makovitzki, A.; Brem, H.; Vierling, P.; Lineal, M; Domb, A.J. Macromolecules 2002, 35, 9947-9953. Se
5 usaron procedimientos similares para dextranos que tenían pesos moleculares de 40.000, 60.000 y 250.000 Daltons. Se obtuvieron otras conversiones de aldehídos variando la concentración de la disolución de peryodato de sodio usada, como se advierte a continuación.
Se añadió dextrano (18,9 g) a 170,1 g de agua destilada (para dar una disolución acuosa al 10% en peso) en un matraz de fondo redondo de 500 mL. La disolución se agitó durante 15 a 30 min. A continuación, se añadieron 17,6 10 g de NaIO4 en 158,4 g de agua destilada (disolución acuosa al 10% en peso) a la disolución de dextrano. La concentración de la disolución de peryodato puede variarse dependiendo de la conversión de aldehído deseada. La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 5 h. Después de este tiempo, la disolución se separó del matraz de fondo redondo, se dividió en cuatro volúmenes iguales y se dispensó en 4 tubos de membranas de diálisis (MEMBRA-CELTM Dialysis Tubing, peso molecular de corte de 3500 Daltons, obtenido de Viskase Companies, Inc., 15 Willowbrook, IL). Para un dextrano que tenga un peso molecular de 40.000, 60.000, y 250.000 Daltons, se usó un tubo con membrana de diálisis con un peso molecular de corte de 14.000 Daltons (Viskase Companies, Inc.). Los tubos de diálisis se insertaron en un matraz de 5 L que contenía 4,5 L de agua destilada y se dializaron durante hasta 4 días. Durante esta diálisis, el agua destilada se cambió después de 2 días. Las muestras se separaron de los tubos con membranas de diálisis y se colocaron en un recipiente liofilizador. Las muestras se congelaron usando
20 nitrógeno líquido y se colocaron en un liofilizador durante 24 a 48 h o hasta que todo el agua se evaporó.
El contenido de dialdehído en el dextrano oxidado resultante se determinó usando el siguiente procedimiento. El dextrano oxidado (0,1250 g) se añadió a 10 mL de NaOH 0,25 M en un matraz Erlenmeyer de 250 mL. La mezcla se agitó suavemente formando un remolino y luego se colocó en un baño sonicador de temperatura controlada a 40ºC durante 5 min hasta que todo el material se disolvió, dando una disolución amarilla oscura. La muestra se separó del
25 baño e inmediatamente se enfrió con agua corriente fría durante 5 min. A continuación, se añadieron a la disolución 15,00 mL de HCl 0,25 M, seguidos por la adición de 50 mL de agua destilada y 1 mL de disolución de fenolftaleína al 0,2%. Esta disolución se tituló con NaOH 0,25 M usando una bureta de 50 mL y el punto final se determinó por un cambio de color del amarillo a púrpura/violeta.
El contenido de dialdehído, también denominado en la presente memoria con la conversión por oxidación, en la 30 muestra de dextrano oxidado se calculó usando la siguiente fórmula:
en la que: Vb = meq totales de base Va = meq totales de ácido
35 W = peso seco de muestra (mg) M = peso molecular de la unidad repetitiva = 162 S = la muestra oxidada P = la muestra original Síntesis de cloruro de PEG estrella de 8 brazos, Mw 10.000
40 El cloruro de PEG estrella de 8 brazos se preparó haciendo reaccionar un PEG-OH estrella de 8 brazos con cloruro
de tionilo, en ausencia de disolvente, de la siguiente manera: El PEG-OH estrella de 8 brazos, Mw 10.000 (determinado por valoración de grupos hidroxilo terminales suponiendo que todas las moléculas de polímero tienen ocho brazos), se obtuvo de NOF America Corp. (White Plains, NY). El PEG-OH estrella de 8 brazos (100 g en un matraz de fondo redondo de 500 mL) se secó por calentamiento con
45 agitación a 85ºC a vacío (0,06 mm de mercurio (8.0 Pa)) durante 4 h o por destilación azeotrópica con 50 g de
tolueno a vacío (15 mm de mercurio (2.0 kPa)) con una temperatura del baño de 60ºC. Se permitió que PEG-OH estrella de 8 brazos se enfriara a temperatura ambiente. A continuación, se añadió cloruro de tionilo (35 mL, 0,48 moles) al matraz, el cual estaba equipado con un condensador de reflujo, y la mezcla se calentó a 85ºC con agitación bajo un manto de nitrógeno durante 24 h. El cloruro de tionilo en exceso se separó por
17
evaporación en un rotavapor (temperatura del baño 40ºC). Se añadieron dos porciones sucesivas de 50 mL de tolueno y se evaporaron a presión reducida (15 mm de mercurio (2.0 kPa), temperatura del baño 60ºC) para finalizar la separación de cloruro de tionilo. El rendimiento de PEG-Cl estrella de 8 brazos fue 100,9 g (99%).
1H-RMN (500 MHz, DMSO-d6): 8 3,71-3,69 (m, 16H), 3,67-3,65 (m, 16H), 3,50 (s, � 800 H). SEC en fase acuosa con análisis de masas por difusión de luz [30ºC, PBS (fosfato 10 mM, KCl 2,7 mM, NaCl 0,137 M, pH 7,4), 0,5 mL/min, dos columnas de lecho mixto Suprema Linear M (Polymer Standard Services, Silver Springs, MD), dn/dc 0,135 mL/g] dio Mw 7.100, Mw/Mn 1,2, Mz/Mw 1,2 e IV 9,1 mL/g.
Se determinó que la conversión de grupos terminales fue 99% por acetilación de grupos terminales hidroxilo residuales y análisis por 1H RMN como sigue. Se disolvió una muestra de PEG-Cl estrella de 8 brazos (0,2 g) en una mezcla de 0,25 mL de anhídrido acético y 0,35 mL de piridina y se dejó a temperatura ambiente durante toda la noche. La reacción se paró rápidamente por adición de 5 g de hielo. La capa acuosa se extrajo con tres porciones de 3 mL de cloroformo, y los extractos de cloroformo combinados se lavaron sucesivamente con tres porciones de 1 mL de disolución acuosa de bisulfato de sodio al 20%, dos porciones de 1 mL de disolución acuosa saturada de bicarbonato de sodio y 1 mL de agua. El cloroformo se evaporó a presión reducida. El residuo se disolvió en 2 mL de agua y la disolución turbia resultante se concentró a presión reducida hasta que se transformó en transparente para separar el cloroformo residual. La disolución se congeló y se liofilizó y el residuo se disolvió en DMSO-d6 y se analizó por 1H RMN.
La proporción de grupos hidroxilo residuales en el PEG-Cl estrella de 8 brazos se determinó comparando las integrales de los picos de 1H RMN de los grupos CH2OAc terminales [8 4,09 (t, J = 4,7 Hz, 2H, CH2OAc) y 2,00 (s, 3H, AcO)] con la de los grupos CH2Cl terminales [8 3,72-3,68 (m, 2H, CH2Cl)].
Ejemplo 1
Este ejemplo ilustra la síntesis de PEG-amina de 8 brazos, Mw 10.000.
Se secó PEG-OH de ocho brazos, Mw 10.000 (Nektar Transforming Therapeutics, 100 g) por calentamiento con agitación a 85ºC a vacío (0,06 mm de Hg) durante 4 a 16 h. El PEG de 8 brazos seco se enfrió a temperatura ambiente (TA), se añadió cloruro de tionilo (35 mL, 0,49 moles) y la mezcla se calentó a 85ºC con agitación bajo un manto de nitrógeno durante 20 h. El cloruro de tionilo en exceso se separó para dar PEG-Cl de 8 brazos. 1H-RMN (500 MHz, DMSO-d6): 8 3,71-3,69 (m, 16H), 3,67-3,65 (m, 16H), 3,50 (s, � 800 H). SEC en fase acuosa con análisis de masas por difusión de luz [30ºC, disolución salina tamponada con fosfatos (PBS, fosfato 10 mM, KCl 2,7 mM, NaCl 0,137 M, pH 7,4), 0,5 mL/min, dos columnas de lecho mixto (Polymer Standard Services Suprema Linear M), dn/dc 0,135 mL/g] dio Mw 7.100, Mw/Mn 1,2, Mz/Mw 1,2 y viscosidad intrínseca (IV) de 9,1 mL/g.
El PEG-Cl de 8 brazos (100,9 g) se disolvió en 640 mL de amoníaco acuoso concentrado (28% p/p) y se calentó en un depósito sellado a 60ºC durante 48 h, dando lugar a una presión de aproximadamente 276 kPa. La disolución se enfrió a TA y se roció durante 2 h con nitrógeno seco para arrastrar aproximadamente 50 a 70 g de amoníaco. La disolución se pasó a través de una columna de resina de intercambio de aniones (Purolite® A-860, The Purolite Co., Bala-Cynwyd, PA) en forma de hidróxido. El eluyente se recogió y se concentró a presión reducida hasta aproximadamente 200 g, se congeló en porciones y se liofilizó para dar PEG-amina de 8 brazos, Mw 10.000: 1H-RMN (500 MHz, DMSO-d6): 8 3,50 (m, � 800 H), 3,34 (t, J = 5,8 Hz, 16H), 2,62 (t, J = 5,8 Hz, 16H); SEC en fase acuosa con análisis de masas por difusión de luz (condiciones que se especificaron anteriormente) dio Mw 10.300, Mw/Mn 1,5, Mz/Mw 1,7, IV 11 mL/g. El tratamiento del PEG-NH2 de 8 brazos, Mw 10.000, con anhídrido acético en exceso en piridina y el examen del producto por 1H RMN indicó una conversión global de 99% de grupos –OH terminales en grupos –NH2 terminales.
Ejemplo 2
Este ejemplo ilustra la síntesis de PEG-amina de 8 brazos, Mw 2.000.
A una disolución de 60 g de PEG-OH de 8 brazos Mw 2.000 (Nektar Transforming Therapeutics) se añadieron trietilamina (69 mL) y diclorometano (1,5 L), se enfrió a 0ºC, se añadió cloruro de metanosulfonilo (37,5 mL). La mezcla se agitó a TA durante 16 h, se concentró a presión reducida (15 mm de Hg, 40ºC) hasta 600 mL y se lavó sucesivamente tres veces con dihidrógeno fosfato de potasio 1,0 M (300 mL), una vez con disolución saturada de carbonato de potasio (300 mL) y una vez con agua (300 mL). La capa de diclorometano se secó (sulfato de magnesio), se filtró y se concentró (15 mm de Hg, temperatura del baño 40ºC) para dar PEG-metanosulfonato de ocho brazos (rendimiento 90%): 1H-RMN (500 MHz, DMSO-d6): 8 4,29 (m, 16H), 3,66 (m, 16H), 3,50 (s, � 130H), 3,16 (s, 24H); SEC en fase acuosa con análisis de masas por difusión de luz (como en el ejemplo 1) dio Mw 1.700, Mw/Mn 1,0, Mz/Mw 1,0 e IV 9,1 mL/g.
El éster PEG-metanosulfonato de 8 brazos (22 g) se disolvió en 536 mL de amoníaco acuoso concentrado (28% p/p) y se agitó en un depósito sellado a TA durante 48 h. La disolución se roció durante 4 h con nitrógeno seco para arrastrar > 50 g de amoníaco, se concentró (15 mm de Hg, 60ºC) hasta aproximadamente 200 g, se basificó con 10 g de carbonato de potasio y se extrajo 3 veces con porciones de 100 mL de cloroformo. El extracto de cloroformo
18
combinado se secó (sulfato de magnesio), se filtró y se concentró (15 mm de Hg, 40ºC). El residuo se tomó en 300 mL de diclorometano, se filtró para separar los insolubles, se concentró (15 mm de Hg, 40ºC) y se secó (0,06 mm de Hg) para dar PEG-NH2 de 8 brazos, Mw 2.000: 1H-RMN (500 MHz, DMSO-d6): 8 3,51 (m, 130H), 3,35 (t, J = 5,8 Hz, 16H), 2,63 (t, J = 5,8 Hz, 16H).
Ejemplo 3
Este ejemplo ilustra la síntesis de PEG-amina de 6 brazos, Mw 10.000.
Se secó PEG-OH de seis brazos, Mw 10.000, (SumBio, Inc, Orinda, CA; 50 g) por calentamiento con agitación a 90ºC (0,1 mm de Hg) durante 16 h. El PEG de 6 brazos se enfrió a TA, se añadió cloruro de tionilo (13 mL, 0,18 moles) y la mezcla se calentó a 90ºC con agitación bajo un manto de nitrógeno durante 16 h. El exceso de cloruro de tionilo se separó por evaporación rotatoria (40ºC). Se añadieron dos sucesivas porciones de 25 mL de tolueno y se evaporaron a presión reducida (15 mm de Hg, 60ºC) para finalizar la separación del cloruro de tionilo. El producto se secó a 90ºC con agitación (0,06 mm de Hg) para dar PEG-Cl de 6 brazos (49,0 g, rendimiento 97%): 1H-RMN (500 MHz, DMSO-d6): 8 3,71-3,69 (m, 12H), 3,67-3,65 (m, 12H), 3,50 (s, 620H); SEC en fase acuosa con análisis de masas por difusión de luz (como en el ejemplo 1) dio Mw 7.300, Mw/Mn 1,2, Mz/Mw 1,1 e IV 9,9 mL/g.
El PEG-Cl de 6 brazos (48,9 g) se disolvió en 232 mL de amoníaco acuoso concentrado (28% p/p) y se calentó en un depósito sellado a 60ºC durante 48 h. La disolución se roció durante 2 h con nitrógeno seco y a continuación se concentró por evaporación rotatoria (15 mm de Hg, 60ºC) hasta aproximadamente 160 g. A continuación, la disolución se pasó a través de una columna (volumen de lecho 450 mL) de resina de intercambio de aniones fuertemente básica (Purolite® A-860) en forma de hidróxido. El eluyente se recogió y se pasaron a través de la columna tres porciones de 200 mL de agua desionizada y se recogieron. Las fracciones acuosas se combinaron, se concentraron (15 mm de Hg, 60ºC) hasta aproximadamente 130 g, se congelaron en porciones y se liofilizó para dar PEG-amina de 6 brazos, Mw 10.000 (46,6 g, rendimiento 96%): 1H-RMN (500 MHz, DMSO-d6): 8 3,50 (m, 700H), 3,34 (t, J = 5,8 Hz, 12H), 2,63 (t, J = 5,8 Hz, 12H); SEC en fase acuosa con análisis de masas por difusión de luz (como en el ejemplo 1) dio Mw 10.300, Mw/Mn 1,3, Mz/Mw 1,4 e IV 5,7 mL/g.
Ejemplo 4
Este ejemplo ilustra la síntesis de PEG-amina de 4 brazos, Mw 2.000.
Se añadió PEG-amina de 4 brazos, Mw 2.000, (NOF America; 100 g) a 88 mL (1,2 moles) de cloruro de tionilo enfriado a -78ºC. La mezcla de reacción se calentó a TA y a continuación se calentó a 60ºC bajo un manto de nitrógeno durante 20 h. El exceso de cloruro de tionilo se separó por evaporación rotatoria (40ºC) y se añadieron dos porciones sucesivas de 50 mL de tolueno y se evaporaron a presión reducida (15 mm de Hg, 60ºC) para finalizar la separación del cloruro de tionilo. El producto se secó a TA con agitación (0,06 mm de Hg) para dar PEG-Cl de 4 brazos: 1H-RMN (500 MHz, DMSO-d6): 8 3,72-3,68 (m, 8H), 3,68-3,64 (m, 8H), 3,58-3,44 (m, 170H), 3,31 (s, 8H).
El PEG-Cl de 4 brazos (100 g) se calentó con 1000 g de amoníaco anhidro en un depósito sellado a 60ºC durante 48 h (presión desarrollada 2484 kPa). La mezcla de reacción se enfrió a TA y se dejó que el exceso de amoníaco se evaporara. El residuo resultante se disolvió en aproximadamente 700 mL de agua desionizada. La disolución se pasó a través de una columna de resina de intercambio de aniones (Purolite® A-860, The Purolite Co., Bala-Cynwyd, PA) en forma de hidróxido. El eluyente se recogió y se evaporó a presión reducida para dar PEG-amina de 4 brazos, Mw 2.000: 1H-RMN (500 MHz, DMSO-d6): 8 3,70-3,47 (m, 170H), 3,45 (t, J = 5,2 Hz, 8H), 3,35 (s, 8H), 2,80 (m, 8H); SEC en fase acuosa con análisis de masas por difusión de luz (condiciones como se especificaron anteriormente) dio Mw 2.400, Mw/Mn 1,4, Mz/Mw 1,5 e IV 2 mL/g.
Ejemplo 5
Este ejemplo ilustra la síntesis de PEG 4000 mesilato reticulante bifuncional.
A PEG (20 g, Mw 4.000) disuelto en 140 mL de diclorometano se añadieron 2,9 mL de trietilamina y 1,6 mL de cloruro de metanosulfonilo. La mezcla se agitó a TA, se diluyó con 200 mL de cloroformo, se lavó con 3 x 100 mL de dihidrógeno fosfato de potasio seguido por 100 mL de disolución saturada de carbonato de potasio, se secó (sulfato de magnesio), se filtró y se evaporó (15 mm de Hg, 40ºC). El producto se secó (0,06 mm de Hg) para dar PEG 4000 dimesilato (19,8 g, rendimiento 95%): 1H-RMN (500 MHz, DMSO-d6): 8 4,29 (m, 4H), 3,66 (m, 4H), 3,50 (s, 360H), 3,16 (s, 6H); SEC en fase acuosa con análisis de masas por difusión de luz (como en el ejemplo 1) dio Mw 3.700, Mw/Mn 1,1, Mz/Mw 1,0 e IV 5,1 mL/g.
Ejemplo 6
Este ejemplo ilustra la síntesis de PEG 6000 mesilato reticulante bifuncional.
A PEG (20 g, Mw 6.000) disuelto en 95 mL de diclorometano se añadieron 1,9 mL de trietilamina y 1,0 mL de cloruro de metanosulfonilo. La mezcla se trató de una manera similar a la del ejemplo 5 para dar PEG 6000 dimesilato (17,4 g, rendimiento 85%): 1H-RMN (500 MHz, DMSO-d6): 8 4,29 (m, 4H), 3,64 (m, 4H), 3,55 (s, 580H), 3,15 (s, 6H);
19
SEC en fase acuosa con análisis de masas por difusión de luz (como en el ejemplo 1) dio Mw 4.900, Mw/Mn 1,1, Mz/Mw 1,1 e IV 6,5 mL/g.
Ejemplo 7
Este ejemplo ilustra la síntesis de PEG 8000 mesilato reticulante bifuncional.
A PEG (20 g, Mw 8.000) disuelto en 70 mL de diclorometano se añadieron 1,5 mL de trietilamina y 0,8 mL de cloruro de metanosulfonilo. La mezcla se trató de una manera similar a la del ejemplo 5 para dar PEG 8000 dimesilato (16,4 g, rendimiento 80%): 1H-RMN (500 MHz, DMSO-d6): 8 4,29 (m, 4H), 3,64 (m, 4H), 3,55 (s, 700H), 3,15 (s, 6H); SEC en fase acuosa con análisis de masas por difusión de luz (como en el ejemplo 1) dio Mw 6.900, Mw/Mn 1,1, Mz/Mw 1,1 e IV 8,2 mL/g.
Ejemplo 8
Este ejemplo ilustra la síntesis de PEG-PPG-PEG, Mw 1850, dimesilato reticulante bifuncional.
A Pluronic® L43 (10 g, Mw 1850) disuelto en 200 mL de diclorometano se añadieron 6,0 mL de trietilamina y 3,3 mL de cloruro de metanosulfonilo. La mezcla se trató de una manera similar a la del ejemplo 5 para dar PEG-PPG-PEG Mw 1850 dimesilato (9,0 g, rendimiento 83%): 1H-RMN (500 MHz, DMSO-d6): 8 4,29 (m, 4H), 3,66 (m, 4H), 3,55 (s, 116H), 3,16 (s, 6H), 1,03 (d, J = 5,9 Hz, 75H); SEC en THF con análisis de masas por difusión de luz [30ºC, 0,5 mL/min, dn(dc 0,060 mL/g] dio Mw 2.000, Mw/Mn 1,1, Mz/Mw 1,1 e IV 7,9 mL/g.
Ejemplo 9
Este ejemplo ilustra la síntesis de PEG-PPG-PEG, Mw 2200, dimesilato reticulante bifuncional.
Se hicieron reaccionar, según el método del ejemplo 8, 10 g de Pluronic® L44 (Mw 2200) en 200 mL de diclorometano con 4,9 mL de trietilamina y 2,7 mL de cloruro de metanosulfonilo para dar, después de tratar la mezcla de reacción, 8,8 g (82% de rendimiento). 1H-RMN (500 MHz, DMSO-d6): 8 4,28 (m, 4H), 3,67 (m, 4H), 3,50 (m, 146H), 3,16 (s, 6H), 1,03 (d, J = 6,1 Hz, 66H); SEC en THF con análisis de masas por difusión de luz [30ºC, 0,5 mL/min, dn(dc 0,060 mL/g] dio Mw 2.400, Mw/Mn 1,1, Mz/Mw 1,1 e IV 7,9 mL/g.
Ejemplo 10
Este ejemplo ilustra la síntesis de PEG-PPG-PEG, Mw 4200, dimesilato reticulante bifuncional.
Se hicieron reaccionar, según el método del ejemplo 8, 20 g de Pluronic® P84 en 135 mL de diclorometano con 2,7 mL de trietilamina y 1,5 mL de cloruro de metanosulfonilo para dar, después de tratar la mezcla de reacción con porciones de 25 mL de disolución de dihidrógeno fosfato de potasio 1M y disolución saturada de carbonato de potasio, 20,4 g (99% de rendimiento). 1H-RMN (500 MHz, DMSO-d6): 8 4,29 (m, 4H), 3,66 (m, 4H), 3,50 (m, 260H), 3,16 (s, 6H), 1,03 (d, J = 5,9 Hz, 130H). SEC en THF con análisis de masas por difusión de luz [30ºC, 0,5 mL/min, dn/dc 0,060 mL/g] dio Mw 4.300, Mw/Mn 1,1, Mz/Mw 1,1 e IV 12 mL/g.
Ejemplo 11
Este ejemplo ilustra la síntesis de PEG-PPG-PEG, Mw 4400, dimesilato reticulante bifuncional.
Se hicieron reaccionar, según el método del ejemplo 8, 20 g de Pluronic® P121 en 130 mL de diclorometano con 2,7 mL de trietilamina y 1,5 mL de cloruro de metanosulfonilo para dar, después de tratar la mezcla de reacción con porciones de 50 mL de disolución de dihidrógeno fosfato de potasio 1M y disolución saturada de carbonato de potasio, 19,2 g (93% de rendimiento). 1H-RMN (500 MHz, DMSO-d6): 8 4,29 (m, 4H), 3,66 (m, 4H), 3,50 (m, 230H), 3,16 (s, 6H), 1,03 (d, J = 5,9 Hz, 180H). SEC en THF con análisis de masas por difusión de luz [30ºC, 0,5 mL/min, dn/dc 0,060 mL/g] dio Mw 3.800, Mw/Mn 1,1, Mz/Mw 1,1 e IV 13 mL/g.
Ejemplo 12
Este ejemplo ilustra la síntesis de PEG-PPG-PEG, Mw 5750, dimesilato reticulante bifuncional.
Se hicieron reaccionar, según el método del ejemplo 8, 20 g de Pluronic® P123 en 100 mL de diclorometano con 2,0 mL de trietilamina y 1,1 mL de cloruro de metanosulfonilo para dar, después de tratar la mezcla de reacción con porciones de 35 mL de disolución de dihidrógeno fosfato de potasio 1M y disolución saturada de carbonato de potasio, 17,1 g (83% de rendimiento). 1H-RMN (500 MHz, DMSO-d6): 8 4,29 (m, 4H), 3,66 (m, 4H), 3,50 (m, 300H), 3,16 (s, 6H), 1,03 (d, J = 5,9 Hz, 194H). SEC en THF con análisis de masas por difusión de luz [30ºC, 0,5 mL/min, dn/dc 0,060 mL/g] dio Mw 4.900, Mw/Mn 1,1, Mz/Mw 1,1 e IV 15 mL/g.
Ejemplo 13
Este ejemplo ilustra la síntesis de PEG-PPG-PEG, Mw 5900, dimesilato reticulante bifuncional.
20
Se hicieron reaccionar, según el método del ejemplo 8, 20 g de Pluronic® P104 en 100 mL de diclorometano con 1,9 mL de trietilamina y 1,0 mL de cloruro de metanosulfonilo para dar, después de tratar la mezcla de reacción con porciones de 30 mL de disolución de dihidrógeno fosfato de potasio 1M y disolución saturada de carbonato de potasio, 19,0 g (92% de rendimiento). 1H-RMN (500 MHz, DMSO-d6): 8 4,29 (m, 4H), 3,67 (m, 4H), 3,50 (m, 350H), 3,15 (s, 6H), 1,03 (d, J = 5,9 Hz, 172H). SEC en THF con análisis de masas por difusión de luz [30ºC, 0,5 mL/min, dn/dc 0,060 mL/g] dio Mw 5.800, Mw/Mn 1,1, Mz/Mw 1,1 e IV 14 mL/g.
Ejemplo 14
Este ejemplo ilustra la síntesis de PEG-PPG-PEG, Mw 6500, dimesilato reticulante bifuncional.
Se hicieron reaccionar, según el método del ejemplo 8, 20 g de Pluronic® P105 en 90 mL de diclorometano con 1,8 mL de trietilamina y 1,0 mL de cloruro de metanosulfonilo para dar, después de tratar la mezcla de reacción con porciones de 35 mL de disolución de dihidrógeno fosfato de potasio 1M y disolución saturada de carbonato de potasio, 17,8 g (87% de rendimiento). 1H-RMN (500 MHz, DMSO-d6): 8 4,29 (m, 4H), 3,67 (m, 4H), 3,50 (m, 460H), 3,16 (s, 6H), 1,03 (d, J = 5,9 Hz, 170H). SEC en THF con análisis de masas por difusión de luz [30ºC, 0,5 mL/min, dn/dc 0,060 mL/g] dio Mw 5.300, Mw/Mn 1,1, Mz/Mw 1,1 e IV 15 mL/g.
Ejemplo 15
Este ejemplo ilustra la síntesis de PEG-PPG-PEG, Mw 6600, dimesilato reticulante bifuncional.
Se mesitiló Pluronic® F77 (20 g) según el método del ejemplo 14 para dar 13,3 g (65% de rendimiento). 1H-RMN (500 MHz, DMSO-d6): 8 4,29 (m, 4H), 3,67 (m, 4H), 3,50 (m, 520H), 3,16 (s, 6H), 1,03 (d, J = 6,1 Hz, 100H). SEC en THF con análisis de masas por difusión de luz [30ºC, 0,5 mL/min, dn/dc 0,060 mL/g] dio Mw 5.500, Mw/Mn 1,0, Mz/Mw 1,0 e IV 17 mL/g.
Ejemplo 16
Este ejemplo ilustra la síntesis de PEG-PPG-PEG, Mw 8400, dimesilato reticulante bifuncional.
Se hicieron reaccionar, según el método del ejemplo 8, 20 g de Pluronic® F68 en 70 mL de diclorometano con 1,4 mL de trietilamina y 0,75 mL de cloruro de metanosulfonilo para dar, después de tratar la mezcla de reacción con porciones de 25 mL de disolución de dihidrógeno fosfato de potasio 1M y disolución saturada de carbonato de potasio, 16,9 g (83% de rendimiento). 1H-RMN (500 MHz, DMSO-d6): 8 4,29 (m, 4H), 3,66 (m, 4H), 3,50 (m, 660H), 3,16 (s, 6H), 1,03 (d, J = 6,1 Hz, 90H). SEC en THF con análisis de masas por difusión de luz [30ºC, 0,5 mL/min, dn/dc 0,060 mL/g] dio Mw 8.000, Mw/Mn 1,0, Mz/Mw 1,0 e IV 18 mL/g.
Ejemplo 17
Este ejemplo ilustra la síntesis de PEG-PPG-PEG, Mw 11400, dimesilato reticulante bifuncional.
Se hicieron reaccionar, según el método del ejemplo 8, 20 g de Pluronic® F88 en 50 mL de diclorometano con 1,0 mL de trietilamina y 0,54 mL de cloruro de metanosulfonilo para dar, después de diluir con 150 mL de cloroformo y tratar la mezcla resultante con porciones de 15 mL de disolución de dihidrógeno fosfato de potasio 1M y disolución saturada de carbonato de potasio, 20 g (99% de rendimiento). 1H-RMN (500 MHz, DMSO-d6): 8 4,29 (m, 4H), 3,67 (m, 4H), 3,50 (m, 1000H), 3,16 (s, 6H), 1,03 (d, J = 6,1 Hz, 120H). SEC en THF con análisis de masas por difusión de luz [30ºC, 0,5 mL/min, dn/dc 0,060 mL/g] dio Mw 9.400, Mw/Mn 1,0, Mz/Mw 1,0 e IV 25 mL/g.
Ejemplo 18
Este ejemplo ilustra la síntesis de PEG-PPG-PEG, Mw 14.600, dimesilato reticulante bifuncional.
Se hicieron reaccionar, según el método del ejemplo 8, 20 g de Pluronic® F108 en 50 mL de diclorometano con 0,76 mL de trietilamina y 0,42 mL de cloruro de metanosulfonilo para dar, después de diluir con 150 mL de cloroformo y tratar la mezcla resultante con porciones de 10 mL de disolución de dihidrógeno fosfato de potasio 1M y disolución saturada de carbonato de potasio, 20 g (99% de rendimiento). 1H-RMN (500 MHz, DMSO-d6): 8 4,30 (m, 4H), 3,67 (m, 4H), 3,50 (m, 1200H), 3,16 (s, 6H), 1,03 (d, J = 6,1 Hz, 150H). SEC en THF con análisis de masas por difusión de luz [30ºC, 0,5 mL/min, dn/dc 0,060 mL/g] dio Mw 13.000, Mw/Mn 1,1, Mz/Mw 1,1 e IV 31 mL/g.
Ejemplo 19
Este ejemplo ilustra la síntesis de un polioxetano, Mw 2.013, dimesilato reticulante bifuncional. El polioxetano se preparó según el método descrito por Sunkara y Ng en la solicitud de patente de EE.UU. 2005/0020805 A1.
Se hicieron reaccionar, según el método del ejemplo 8, 20 g de polioxetano, Mw 2.013, en 125 mL de diclorometano con 5,6 mL de trietilamina y 3,1 mL de cloruro de metanosulfonilo para dar, después de diluir con 100 mL de cloroformo y tratar la mezcla resultante con porciones de 90 mL de disolución de dihidrógeno fosfato de potasio 1M y
21
disolución saturada de carbonato de potasio, 18,3 g (85% de rendimiento). 1H-RMN (500 MHz, DMSO-d6): 8 4,22 (t, J = 6,3Hz, 4H), 3,37 (m, 120H), 3,13 (s, 6H), 1,88 (quint, J = 6,3 Hz, 4H), 1,68 (quint, J = 6,3 Hz, 60H). SEC en THF con análisis de masas por difusión de luz [30ºC, 0,5 mL/min, dn/dc 0,060 mL/g] dio Mw 2.960, Mw/Mn 1,5, Mz/Mw 1,4 e IV 11 mL/g.
Ejemplo 20
Este ejemplo ilustra la preparación de un producto tipo poliamina de cadena extendida derivado de un PEG-amina de 8 brazos y un PEG 6000 dimesilato reticulante bifuncional en una relación molar 20:1.
A 1,0 g de PEG-amina de 8 brazos, Mw 10.000 (ejemplo 1) disuelto en 2 mL de DMF y 1 mL de diclorometano se añadieron 31 mg de PEG 6000 dimesilato (ejemplo 6) disueltos en 1 mL de diclorometano. Después de agitar la mezcla a temperatura ambiente durante toda la noche, se filtró, se diluyó con 10 mL de cloroformo y se lavó con 3 x 2 mL de disolución saturada de carbonato de potasio. Los lavados acuosos combinados se extrajeron con 1 mL de cloroformo. Las capas de cloroformo combinadas se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y se evaporaron (15 mm de Hg, 40ºC). Se añadió agua (1-2 g) al residuo lo que dio una disolución turbia, la cual se concentró (15 mm de Hg, 40ºC) brevemente para separar el diclorometano y el cloroformo. La disolución clarificada se congeló y se liofilizó para dar 0,98 g (95% de rendimiento). 1H-RMN (500 MHz, CDCl3): 8 3,59 (m, 960H), 3,46 (t, J = 5,2Hz, 16H), 2,81 (t, J = 5,2Hz, 14H), 2,76 (t, J = 5,5 Hz, 2H). SEC en agua con análisis de masas por difusión de luz (como en el ejemplo 1) dio Mw 17.860 para la poliamina de cadena extendida, comparado con Mw 13.170 para el material de partida PEG-amina de 8 brazos.
Ejemplo 21
Este ejemplo ilustra la preparación de un producto tipo poliamina de cadena extendida derivado de un PEG-amina de 8 brazos y un PEG 8000 dimesilato reticulante bifuncional en una relación molar 20:1.
Se hizo reaccionar, según el método del ejemplo 20, 1,0 g de PEG-amina de 8 brazos, Mw 10.000 (ejemplo 1) con 41 mg de PEG 8000 dimesilato (ejemplo 7) para dar 0,87 g (84% de rendimiento). 1H-RMN (500 MHz, CDCl3): 8 3,58 (m, 1200H), 3,48 (t, J = 5,2Hz, 16H), 2,82 (t, J = 4,8Hz, 14H), 2,74 (t, J = 5,4 Hz, 2H). SEC en agua con análisis de masas por difusión de luz (como en el ejemplo 1) dio Mw 18.520 para la poliamina de cadena extendida, comparado con Mw 13.170 para el material de partida PEG-amina de 8 brazos.
Ejemplo 22
Este ejemplo ilustra la preparación de un producto tipo poliamina de cadena extendida derivado de un PEG-amina de 8 brazos y un PEG-PPG-PEG (Pluronic® L43) dimesilato reticulante bifuncional en una relación molar 20:1.
Se hizo reaccionar, según el método del ejemplo 20, 1,0 g de PEG-amina de 8 brazos, Mw 10.000 (ejemplo 1) con 10 mg de PEG-PPG-PEG, Mw 1850, dimesilato (ejemplo 8) para dar 0,87 g (86% de rendimiento). 1H-RMN (500 MHz, CDCl3): 8 3,59 (m, 854H), 2,84 (m, 14H), 1,09 (m, 2,8H). SEC en agua con análisis de masas por difusión de luz (como en el ejemplo 1) dio Mw 16.500 para la poliamina de cadena extendida, comparado con Mw 8.730 para el material de partida PEG-amina de 8 brazos.
Ejemplo 23
Este ejemplo ilustra la preparación de un producto tipo poliamina de cadena extendida derivado de un PEG-amina de 8 brazos y un PEG-PPG-PEG (Pluronic® L44) dimesilato reticulante bifuncional en una relación molar 20:1.
Se hizo reaccionar, según el método del ejemplo 20, 1,0 g de PEG-amina de 8 brazos, Mw 10.000 (ejemplo 1) con 12 mg de PEG-PPG-PEG (Pluronic® L44) dimesilato (ejemplo 9) para dar 0,85 g (84% de rendimiento). 1H-RMN (500 MHz, CDCl3): 8 3,59 (m, 754H), 3,50 (t, J = 5,2Hz, 16H), 2,85 (m, 14H), 2,76 (m, 2H), 1,09 (m, 3H). SEC en agua con análisis de masas por difusión de luz (como en el ejemplo 1) dio Mw 12.600 para la poliamina de cadena extendida, comparado con Mw 8.730 para el material de partida PEG-amina de 8 brazos.
Ejemplo 24
Este ejemplo ilustra la preparación de un producto tipo poliamina de cadena extendida derivado de un PEG-amina de 8 brazos y un PEG-PPG-PEG (Pluronic® P84) dimesilato reticulante bifuncional en una relación molar 20:1.
Se hizo reaccionar, según el método del ejemplo 20, 1,0 g de PEG-amina de 8 brazos, Mw 10.000 (ejemplo 1) con 22 mg de PEG-PPG-PEG (Pluronic® P84) dimesilato (ejemplo 10) para dar 0,76 g (74% de rendimiento). 1H-RMN (500 MHz, CDCl3): 8 3,59 (m, 754H), 3,50 (t, J = 5,2Hz, 16H), 2,85 (t, J = 5,1Hz, 14H), 2,76 (t, J = 5,4 Hz, 2H), 1,09 (m, 3H). SEC en agua con análisis de masas por difusión de luz (como en el ejemplo 1) dio Mw 12.600 para la poliamina de cadena extendida, comparado con Mw 8.730 para el material de partida PEG-amina de 8 brazos.
22
Ejemplo 25
Este ejemplo ilustra la preparación de un producto tipo poliamina de cadena extendida derivado de un PEG-amina de 8 brazos y un PEG-PPG-PEG (Pluronic® P123) dimesilato reticulante bifuncional en una relación molar 20:1.
Se hizo reaccionar, según el método del ejemplo 20, 1,0 g de PEG-amina de 8 brazos, Mw 10.000 (ejemplo 1) con 29 mg de PEG-PPG-PEG (Pluronic® P123) dimesilato (ejemplo 12) para dar 0,91 g (89% de rendimiento). 1H-RMN (500 MHz, CDCl3): 8 3,60 (m, 934H), 3,47 (t, J = 4,8Hz, 16H), 2,82 (t, J = 4,8 Hz, 14H), 2,76 (t, J = 5,4 Hz, 2H), 1,09 (m, 10H).
Ejemplo 26
Este ejemplo ilustra la preparación de un producto tipo poliamina de cadena extendida derivado de un PEG-amina de 8 brazos y un PEG-PPG-PEG (Pluronic® P104) dimesilato reticulante bifuncional en una relación molar 20:1.
A 40,0 g de PEG-amina de 8 brazos, Mw 10.000 (ejemplo 1) disueltos en 80 mL de DMF y 40 mL de diclorometano se añadieron 1,22 g de PEG-PPG-PEG (Pluronic® P104) dimesilato (ejemplo 13) disueltos en 40 mL de diclorometano y la mezcla se agitó a TA durante toda la noche. La mezcla se filtró, se diluyó con 300 mL de cloroformo y se lavó con 3 x 80 mL de disolución saturada de carbonato de potasio. Los lavados acuosos combinados se extrajeron con 40 mL de cloroformo. Las capas de cloroformo combinadas se secaron (sulfato de magnesio), se filtraron y se evaporaron (15 mm de Hg, 40ºC). Se añadió agua (35 g) al residuo lo que dio una disolución turbia, la cual se concentró (15 mm de Hg, 40ºC) brevemente para separar el diclorometano y el cloroformo. La disolución clarificada se congeló y se liofilizó para dar 37,74 g (92% de rendimiento). 1H-RMN (500 MHz, DMSO-d6): 8 3,50 (m, 880H), 3,35 (t, J = 5,8Hz, 16H), 2,64 (t, J = 5,8Hz, 16H), 1,03 (d, J = 6,0 Hz, 8,0H). SEC en agua con análisis de masas por difusión de luz (como en el ejemplo 1) dio Mw 11.630 para la poliamina de cadena extendida, comparado con Mw 9.990 para el material de partida PEG-amina de 8 brazos.
Ejemplo 27
Este ejemplo ilustra la preparación de un producto tipo poliamina de cadena extendida derivado de un PEG-amina de 8 brazos y un PEG-PPG-PEG (Pluronic® P105) dimesilato reticulante bifuncional en una relación molar 20:1.
Se hizo reaccionar, según el método del ejemplo 20, 1,0 g de PEG-amina de 8 brazos, Mw 10.000 (ejemplo 1) con 33 mg de PEG-PPG-PEG (Pluronic® P105) dimesilato (ejemplo 14) para dar 0,97 g (94% de rendimiento). 1H-RMN (500 MHz, CDCl3): 8 3,58 (m, 1120H), 2,82 (m, 14H), 2,74 (t, J = 5,4 Hz, 2H), 1,08 (m, 9.2H)
Ejemplo 28
Este ejemplo ilustra la preparación de un producto tipo poliamina de cadena extendida derivado de un PEG-amina de 8 brazos y un PEG-PPG-PEG (Pluronic® F77) dimesilato reticulante bifuncional en una relación molar 20:1.
Se hizo reaccionar, según el método del ejemplo 20, 1,0 g de PEG-amina de 8 brazos, Mw 10.000 (ejemplo 1) con 34 mg de PEG-PPG-PEG (Pluronic® P123) dimesilato (ejemplo 15) para dar 0,88 g (85% de rendimiento). 1H-RMN (500 MHz, CDCl3): 8 3,55 (m, 1040H), 3,44 (t, J = 5,3Hz, 16H), 2,78 (t, J = 4,8 Hz, 14H), 2,72 (t, J = 5,4 Hz, 2H), 1,05 (m, 5,9H). SEC en agua con análisis de masas por difusión de luz (como en el ejemplo 1) dio Mw 14.810 para la poliamina de cadena extendida, comparado con Mw 13.170 para el material de partida PEG-amina de 8 brazos.
Ejemplo 29
Este ejemplo ilustra la preparación de un producto tipo poliamina de cadena extendida derivado de un PEG-amina de 8 brazos y un PEG-PPG-PEG (Pluronic® F68) dimesilato reticulante bifuncional en una relación molar 20:1.
Se hizo reaccionar, según el método del ejemplo 20, 1,0 g de PEG-amina de 8 brazos, Mw 10.000 (ejemplo 1) con 43 mg de PEG-PPG-PEG (Pluronic® F68) dimesilato (ejemplo 16) para dar 0,56 g (54% de rendimiento). 1H-RMN (500 MHz, CDCl3): 8 3,59 (m, 1160H), 3,50 (t, J = 5,2Hz, 16H), 2,85 (t, J = 5,2 Hz, 14H), 2,76 (t, J = 5,3 Hz, 2H), 1,09 (m, 5,4H). SEC en agua con análisis de masas por difusión de luz (como en el ejemplo 1) dio Mw 16.550 para la poliamina de cadena extendida, comparado con Mw 13170 para el material de partida PEG-amina de 8 brazos.
Ejemplo 30
Este ejemplo ilustra la preparación de un producto tipo poliamina de cadena extendida derivado de un PEG-amina de 8 brazos y un PEG-PPG-PEG (Pluronic® F88) dimesilato reticulante bifuncional en una relación molar 20:1.
Se hizo reaccionar, según el método del ejemplo 20, 1,0 g de PEG-amina de 8 brazos, Mw 10.000 (ejemplo 1) con 58 mg de PEG-PPG-PEG (Pluronic® F88) dimesilato (ejemplo 17) para dar 1,02 g (96% de rendimiento). 1H-RMN (500 MHz, DMSO-d6): 8 3,50 (m, 990H), 3,36 (t, J = 5,8Hz, 16H), 2,65 (t, J = 5,8 Hz, 16H), 1,03 (d, J = 6,0 Hz, 5,7H). SEC en agua con análisis de masas por difusión de luz (como en el ejemplo 1) dio Mw 14.140 para la poliamina de cadena extendida, comparado con Mw 10.800 para el material de partida PEG-amina de 8 brazos.
23
Ejemplo 31
Este ejemplo ilustra la preparación de un producto tipo poliamina de cadena extendida derivado de un PEG-amina de 8 brazos y un PEG-PPG-PEG (Pluronic® F108) dimesilato reticulante bifuncional en una relación molar 20:1.
Se hicieron reaccionar, según el método del ejemplo 26, 20,0 g de PEG-amina de 8 brazos, Mw 10.000 (ejemplo 1)
5 con 1,48 g de PEG-PPG-PEG (Pluronic® F108) dimesilato (ejemplo 18) para dar 20,9 g (97% de rendimiento). 1H-RMN (500 MHz, DMSO-d6): 8 3,50 (m, 1060H), 3,36 (t, J = 5,8Hz, 16H), 2,65 (t, J = 5,8 Hz, 16H), 1,03 (d, J = 6,0 Hz, 5,7H). SEC en agua con análisis de masas por difusión de luz (como en el ejemplo 1) dio Mw 14.820 para la poliamina de cadena extendida, comparado con Mw 10.800 para el material de partida PEG-amina de 8 brazos.
Ejemplo 32
10 Este ejemplo ilustra la preparación de un producto tipo poliamina de cadena extendida derivado de un PEG-amina de 8 brazos y un PEG-PPG-PEG (Pluronic® F104) dimesilato reticulante bifuncional en una relación molar 8.69:1.
Se hicieron reaccionar, según el método del ejemplo 20, 1,0 g de PEG-amina de 8 brazos, Mw 10.000 (ejemplo 1) con 70 mg g de PEG-PPG-PEG (Pluronic® F104) dimesilato (ejemplo 13) para dar 0,51 g (48% de rendimiento). 1H-RMN (500 MHz, CDCl3): 8 3,59 (m, 866H), 3,51 (t, J = 5,2Hz, 16H), 2,85 (t, J = 5,0 Hz, 14H), 2,75 (d, J = 5,4 Hz,
15 2H), 1,08 (M, 20h). No hubo ninguna elución por SEC.
Ejemplo 33 (Comparativo)
Ensayo de poliaminas de cadena extendida en adhesivos
Como testigo se preparó una disolución de PEG-amina, Mw 10.000, al 25% en peso sin añadir producto tipo poliamina de cadena extendida disolviendo 1 equivalente en peso de el PEG-amina de 8 brazos, Mw 10.000, en 3 20 equivalentes en peso de agua desionizada. Similarmente, se preparó en agua desionizada una disolución de dextrano dialdehído al 25% en peso, con un conversión del 48% en aldehído, preparado como se describió anteriormente en la sección titulada “Preparación de dextrano oxidado”. Jeringas con doble depósito (MixPac SDL 005-01-50M) se cargaron en un depósito con la disolución al 25% en peso de dextrano dialdehído y en el otro depósito con una disolución al 25% en peso de PEG-amina de 8 brazos, Mw 10.000, y se equiparon con puntas para
25 el mezclado estático (12 etapas, MixPac ML 2,5-12-DM). Se extruyó un adhesivo tipo hidrogel por cada jeringa de doble depósito sobre una lámina de vidrio para que formara una estructura alargada de aproximadamente 6 cm de longitud y 4 a 5 mm de diámetro. Las muestras se curaron a TA y se ensayó su elasticidad después de 1-2 minutos.
Ejemplos 34-44
Los siguientes ejemplos demuestran que la incorporación de un producto tipo poliamina de cadena extendida en un
30 componente PEG-amina de un adhesivo tipo hidrogel mejora en general, pero no siempre, el alargamiento en el punto de ruptura del hidrogel formado.
Se prepararon disoluciones (25% en peso) de los productos tipo poliamina de cadena extendida de los ejemplos 20, 22-28 y 30-32 disolviendo 1 equivalente en peso del producto tipo poliamina de cadena extendida en 3 equivalentes en peso de agua desionizada. Los hidrogeles adhesivos se prepararon a partir de estas disoluciones con el mismo
35 dextrano dialdehído que se describió en el ejemplo 33.
El alargamiento en el punto de ruptura se determinó para cada formulación y el ejemplo comparativo según la fórmula, alargamiento en el punto de ruptura (%) = 100 x (longitud final – longitud inicial)/longitud inicial). Los resultados están en la tabla 5.
Tabla 5. Alargamiento en el punto de ruptura de hidrogeles adhesivos de productos tipo poliamina de cadena 40 extendida y testigo PEG-amina de 8 brazos
Ej. nº
Producto tipo poliamina de cadena extendida Alargamiento en el punto de ruptura, %
33 Comparativo
Ninguno 50
34
Ej. 22 (PLuronic® L43)a <10
35
Ej. 23 (PLuronic® L44) 50
36
Ej. 24 (PLuronic® P84) 93
37
Ej. 25 (PLuronic® L123) 78
38
Ej. 26 (PLuronic® P104) 152
39
Ej. 27 (PLuronic® P105) 63
24
Ej. nº
Producto tipo poliamina de cadena extendida Alargamiento en el punto de ruptura, %
40
Ej. 28 (PLuronic® F77) 118
41
Ej. 30 (PLuronic® F88) 159
42
Ej. 31 (PLuronic® F108) 133
43
Ej. 20 (PEG 6000) 85
44
Ej. 32 (PLuronic® P104) 100
a El nombre entre paréntesis identifica el agente reticulante bifuncional, en forma de un dimesilato, usado para fabricar el producto tipo poliamina de cadena extendida.
Ejemplos 45-52
Resistencia al estallido del intestino de cerdo in vitro
Los siguientes ejemplos comparativos 45, 47 y 50, y los ejemplos 46, 48, 49, 51 y 52 demuestran que la incorporación de un producto tipo poliamina de cadena extendida en un hidrogel adhesivo no deteriora la capacidad 5 del hidrogel formado de adherirse al tejido.
Jeringas con doble depósito (MixPac SDL 005-01-50M) se cargaron en un depósito con una disolución al 25% en peso del mismo dextrano dialdehído que se describió en el ejemplo 33 y en el otro depósito con una disolución al 25%, 30% ó 50% en peso de PEG-amina de 8 brazos, Mw 10.000, (como testigos) o con el producto tipo poliamina de cadena extendida de los ejemplos, y se equiparon con puntas para el mezclado estático (8 etapas, MixPac ML 10 2,5-08-SM). Se perforó un agujero circular de 0,625 cm en la pared de una sección de 6 a 8 cm de intestino fresco de cerdo sellado (obtenido de un matadero local), y la herida se selló aplicando aproximadamente 0,4 mL de hidrogel adhesivo extruido por la jeringa de doble depósito. Después de curar el adhesivo durante 2 a 5 minutos ambos extremos de la sección se cerraron con grapas. Se insertó a través de la pared del intestino en el lumen intestinal una aguja de jeringa de calibre 14 conectada por un tubo de plástico a una bomba de jeringa (Modelo nº 22, Harvard 15 Apparatus, Holliston, MA) equipada con un medidor de presión. La sección del intestino se sumergió en un plato transparente de agua y se bombeó aire mediante la bomba de jeringa en la sección intestinal a 11 mL/h. Se anotó la presión a la cual cada herida sellada fugaba. Los resultados se dan en la tabla 6. El error experimental típico de estas medidas es al menos ± 20%. Así, los resultados son los mismos en todos los casos con la posible excepción del ejemplo 52. Sin embargo, el ejemplo 52 aún exhibe una presión de estallido significativamente mayor que la
20 presión intraintestinal de aproximadamente 6.9 kPa y se considera aún útil.
Tabla 6. Resistencias al estallido in vitro de hidrogeles adhesivos que contienen PEG-amina de 8 brazos (testigos) o producto tipo poliamina de cadena extendida cuando se usan para sellar agujeros en intestino de cerdo
Ej. nº
Producto tipo poliamina de cadena extendidaa PEG-amina de 8 brazos o producto tipo poliamina de cadena extendida, % en peso Presión de estallido, kPa
45 Comparativo
Ninguno 25 28,84
46
Ej. 26 (PLuronic® P104) 25 25,53
47 Comparativo
Ninguno 30 20,7
48
Ej. 30 (PLuronic® F88) 30 20,01
49
Ej. 31 (PLuronic® F108) 30 20,7
50 Comparativo
Ninguno 50 24,15
51
Ej. 30 (PLuronic® F88) 50 28,84
52
Ej. 31 (PLuronic® F108) 50 17,25
a El nombre entre paréntesis identifica el agente reticulante bifuncional, en forma de un dimesilato, usado para fabricar el producto tipo poliamina de cadena extendida.
Ejemplos 53-60
25 Degradación in vitro de hidrogeles adhesivos
Los siguientes ejemplos demuestran que el producto tipo poliamina de cadena extendida en un hidrogel adhesivo no es perjudicial para la estabilidad del hidrogel adhesivo formado.
Jeringas con doble depósito (MixPac SDL 005-01-50M) se cargaron en un depósito con una disolución al 25% en
30 peso del mismo dextrano dialdehído que se describió en el ejemplo 33 y en el otro depósito con una disolución al 25% en peso de PEG-amina de 8 brazos, Mw 10.000 (testigo), o con producto tipo poliamina de cadena extendida, y
25
se equiparon con puntas para el mezclado estático (8 etapas, MixPac ML 2,5-08-SM). Se extruyó hidrogel adhesivo por cada jeringa de doble depósito en un disco circular de policarbonato (10 mm de diámetro x 3 mm de espesor) para formar un pelet. Los pelets se pesaron inicialmente y a continuación se colocaron individualmente en frascos que contenían disolución salina tamponada con fosfatos (PBS), pH 7,4, y se incubaron a 37ºC en un agitador orbital programado a 80 rpm. Los pelets se monitorizaron a lo largo del tiempo respecto a su degradación por inspección visual y por ganancia o pérdida de peso. los resultados se sumarizan en la tabla 7.
Tabla 7. Masa (% de la original) de pelets de hidrogel adhesivo incubada en PBS, pH 7,4, a 37ºC y 80 rpm.
Ejemploa
53C
54 55 56 57 58 59 60
Adhesivo
Ej. 33Cb Ej. 34 Ej. 35 Ej. 36 Ej. 38 Ej. 41 Ej. 42 Ej. 44
Reticulante bifuncional
Ninguno L43 L44 P84 P104 F88 F108 P104 23%
Tiempo, días
0
100 100 100 100 100 100 100 100
1
198 206 207 196 168 218 217 199
2
194 201 201 187 165 217 214 194
3
190 203 201 187 161 215 213 nd
4
183 205 204 188 159 nd nd 193
6
183 206 203 189 159 222 214 197
8
171 210 204 191 162 nd nd nd
9
nd nd nd nd nd 226 218 202
11
160 215 210 193 165 231 220 205
12
nd nd nd nd nd nd nd 205
13
161 218 214 195 165 nd nd nd
14
155 216 214 193 162 nd nd nd
17
nd nd nd nd nd 242 231 nd
20
nd nd nd nd nd nd nd 217
22
154 230 227 201 171 nd nd nd
26
nd nd nd nd nd nd nd 223
28
154 235 233 201 176 nd nd nd
31
nd nd nd nd nd 262 245 nd
39
nd nd nd nd nd 267 248 nd
40
nd nd nd nd nd nd nd 233
42
140 246 241 209 186 nd nd nd
45
nd nd nd nd nd 268 248 nd
48
nd nd nd nd nd nd nd 234
50
112 239 237 205 183 nd nd nd
54
nd nd nd nd nd nd nd 233
56
88 229 236 202 179 nd nd nd
75
nd nd nd nd nd 285 261 nd
84
nd nd nd nd nd nd nd 243
86
86
nd 224 243 201 188 nd nd
aA menos que se especifique lo contrario, el 10% de las moléculas de PEG-amina de 8 brazos, Mw 10.000, están reticuladas por el agente reticulante Pluronic®. Cb designa un ejemplo comparativo. “nd” significa no determinado.
Ejemplos 61-66
Biocompatibilidad in vitro con fibroblastos de ser humano NIH3T3
10 Los siguientes ejemplos demuestran que el producto tipo poliamina de cadena extendida en un hidrogel adhesivo no es perjudicial para los cultivos de células de fibroblastos de ser humano NIH3T3.
El ensayo se hizo usando cultivos de células de fibroblastos de ser humano NIH3T3 según la norma ISO109935:1999. Las células de fibroblastos de ser humano NIH3T3 se obtuvieron de la American Type Collection (ATCC; Manassas, VA) y se hicieron crecer en medio esencial modificado de Dulbecco (DMEM) suplementado con suero de
15 ternero fetal al 10%.
Jeringas con doble depósito (MixPac SDL 005-01-50M) se cargaron en un depósito con una disolución al 25% en peso del mismo dextrano dialdehído que se describió en el ejemplo 33 y en el otro depósito con una disolución al 30% o al 50% en peso de PEG-amina de 8 brazos, Mw 10.000 (testigo), o con el producto tipo poliamina de cadena extendida de los ejemplos, y se equiparon con puntas para el mezclado estático (12 etapas, MixPac ML 2,5-12-DM). 20 Se extruyó hidrogel adhesivo por cada jeringa de doble depósito en el pocillo de una placa de cultivo de poliestireno
26
tal que se cubriera aproximadamente un tercio del fondo del pocillo. A continuación, el pocillo se esterilizó con luz UV y se sembró con 50.000-100.000 células NIH3T3. Después de 48 h de incubación a 37ºC, los cultivos celulares se examinaron respecto al número de células redondeadas (que indica muerte), revestimiento confluente del fondo del pocillo, crecimiento por los bordes del hidrogel y crecimiento excesivo del hidrogel (que indica adhesión de cultivos celulares al hidrogel). Los resultados, que no indican ningún efecto adverso sobre los cultivos de células de fibroblastos de ser humano NIH3T3, se sumarizan en la tabla 8.
Tabla 8. Biocompatibilidad in vitro de hidrogeles adhesivos que contienen PEG-amina de 8 brazos (testigo) o producto tipo poliamina de cadena extendida con fibroblastos de ser humano NIH3T3.
Ejemplo
61 Cb 62 Cb 63 64 65 66
Producto tipo poliamina de cadena extendida
Ninguno Ninguno Ej. 26 (PLuronic® P104) Ej. 26 (PLuronic® P104) Ej. 31 (PLuronic® F88) Ej. 31 (PLuronic® F88)
PEG-amina de 8 brazos o producto tipo poliamina de cadena extendida, % en peso
30 50 30 50 30 50
Células redondeadas
No No No No No No
Revestimiento confluente
Sí Sí Sí Sí Sí Sí
Crecimiento por los bordes del hidrogel
Sí Sí Sí Sí Sí Sí
Crecimiento excesivo del hidrogel
No No No No No No
aEl nombre entre paréntesis identifica el agente reticulante bifuncional, en forma de un dimesilato, usado para fabricar el producto tipo poliamina de cadena extendida. Cb designa un ejemplo comparativo.
Ejemplos 67-74
10 Falta de respuesta inflamatoria in vitro
Los siguientes ejemplos demuestran que el producto tipo poliamina de cadena extendida en un hidrogel adhesivo no genera ninguna respuesta inflamatoria en un ensayo in vitro usando células de macrófago J774.
El ensayo se hizo usando cultivos celulares de macrófago J774 peritoneal de ratón según la norma ISO109935:1999. Las células de macrófago J774 peritoneal de ratón se obtuvieron de ATCC y se hicieron crecer en DMEM
15 suplementado con suero de bovino fetal al 10%.
Jeringas con doble depósito (MixPac SDL 005-01-50M) se cargaron en un depósito con una disolución al 25% en peso del mismo dextrano dialdehído que se describió en el ejemplo 33 y en el otro depósito con una disolución al 30% o al 50% en peso de PEG-amina de 8 brazos, Mw 10.000 (testigo), o con el producto tipo poliamina de cadena extendida de los ejemplos, y se equiparon con puntas para el mezclado estático (12 etapas, MixPac ML 2,5-12-DM).
20 Se extruyó hidrogel adhesivo por cada jeringa de doble depósito en el pocillo de una placa de cultivo de poliestireno tal que se cubriera aproximadamente un tercio del fondo del pocillo. A continuación, el pocillo se esterilizó con luz UV y se sembró con células de macrófago J774 peritoneal de ratón. Después de 48 h de incubación a 37ºC, los cultivos celulares se analizaron respecto al factor alfa de la necrosis tumoral (TNF-a), un indicador de la respuesta inflamatoria, usando un ensayo ELISA, como describen Lara et al. (Journal of Dental Research 82(6):460-465,
25 2003). El título de TNF-a se comparó con el células J774 incubadas sin ningún aditivo (testigo negativo) o con lipopolisacárido, un componente de las paredes de las células bacterianas gram-negativas (7,5 !g/mL, testigo positivo). Los resultados, que no indican ninguna respuesta inflamatoria, se sumarizan en la tabla 9.
27
Tabla 9. TNF-a producido por células de macrófag o J774 peritoneal de ratón cuando se exponen a hidrogeles adhesivos que contienen PEG-amina de 8 brazos o producto tipo poliamina de cadena extendida.
Ej.
Producto tipo poliamina de cadena extendidaa PEG-amina de 8 brazos o producto tipo poliamina de cadena extendida, % en peso Título de TNF-a, pg/mL
67 Comparativo
Ninguno 30 0
68 Comparativo
Ninguno 50 34
69
Ej. 26 (PLuronic® P104) 30 0
70
Ej. 26 (PLuronic® P104) 50 0
71
Ej. 31 (PLuronic® F108) 30 0
72
Ej. 31 (PLuronic® F108 50 0
73 Comparativo
Ningún aditivo (testigo negativo) 0
74 Comparativo
LPS (Testigo positivo) 271
a El nombre entre paréntesis identifica el agente reticulante bifuncional, en forma de un dimesilato, usado para fabricar el producto tipo poliamina de cadena extendida.
Ejemplos 75-81
Falta de inhibición in vitro de la secreción de VEGF
5 El factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF) es una citoquina y un mitógeno que promueve la angiogénesis y por tanto es importante para curar las heridas. Los siguientes ejemplos demuestran que el producto tipo poliamina de cadena extendida en un hidrogel adhesivo no inhibe la secreción de VEGF por células de fibroblastos de ser humano NIH3T3.
El ensayo se hizo usando cultivos de células de fibroblastos de ser humano NIH3T3 según la norma ISO10993
10 5:1999. Las células de fibroblastos de ser humano NIH3T3 se obtuvieron de ATCC y se hicieron crecer en DMEM suplementado con suero de ternero fetal al 10%.
Jeringas con doble depósito (MixPac SDL 005-01-50M) se cargaron en un depósito con una disolución al 25% en peso del mismo dextrano dialdehído que se describió en el ejemplo 33 y en el otro depósito con una disolución al 30% o al 50% en peso de PEG-amina de 8 brazos, Mw 10.000 (testigo), o con el producto tipo poliamina de cadena 15 extendida de los ejemplos, y se equiparon con puntas para el mezclado estático (12 etapas, MixPac ML 2,5-12-DM). Se extruyó hidrogel adhesivo por cada jeringa de doble depósito en el pocillo de una placa de cultivo de poliestireno tal que se cubriera aproximadamente un tercio del fondo del pocillo. A continuación, el pocillo se esterilizó con luz UV y se sembró con 50.000-100.000 células NIH3T3. Después de 48 h de incubación a 37ºC, los cultivos celulares se analizaron respecto a VEGF usando un ensayo tipo inmunoabsorbente ligado a enzimas (ELISA) como describen
20 Lara et al. (Journal of Dental Research 82(6):460-465, 2003). Los títulos de VEGF se compararon con los de células NIH3T3 incubadas en pocillos blancos (testigos negativos). Los resultados, que no indican ninguna inhibición de la secreción de VEGF, se sumarizan en la tabla 10.
Tabla 10. VEGF producido por células NIH3T3 cuando se exponen a hidrogeles adhesivos que contienen PEGamina de 8 brazos o producto tipo poliamina de cadena extendida.
Ej.
Producto tipo poliamina de cadena extendidaa PEG-amina de 8 brazos o producto tipo poliamina de cadena extendida, % en peso Título de VEGF, pg/mL
75 Comparativo
Ninguno 30 22
76 Comparativo
Ninguno 50 24
77
Ej. 26 (PLuronic® P104) 30 17
78
Ej. 26 (PLuronic® P104) 50 22
79
Ej. 31 (PLuronic® F108) 30 17
80
Ej. 31 (PLuronic® F108 50 14
81 Comparativo
Pocillo blanco (testigo negativo) 30
a El nombre entre paréntesis identifica el agente reticulante bifuncional, en forma de un dimesilato, usado para fabricar el producto tipo poliamina de cadena extendida.
25 Ejemplos 82-87
Respuesta de los tejidos in vivo sobre el tejido no dañado
Los siguientes ejemplos demuestran que el producto tipo poliamina de cadena extendida en un hidrogel adhesivo no
causa ninguna respuesta adversa de los tejidos cuando se aplica a la serosa intestinal no rota de conejos.
Disoluciones del mismo dextrano dialdehído que se describió en el ejemplo 33 (al 25% en peso en agua desionizada y tratada en autoclave), PEG-amina de 8 brazos, Mw 10.000 (al 30% en peso en agua desionizada y tratada en autoclave) y el producto tipo poliamina de cadena extendida de los ejemplos (al 30% en peso en agua desionizada y tratada en autoclave) en viales tratados en autoclave y cubiertos con suero, jeringas con doble depósito (MixPac
5 SDL 005-01-50M) y puntas para el mezclado estático (8 etapas, MixPac ML 2,5-08-SM) se esterilizaron con radicación gamma. En un campo quirúrgico estéril, las jeringas con doble depósito esterilizadas se cargaron en un depósito con la disolución estéril al 25% en peso del dextrano dialdehído y en el otro depósito con la disolución al 30% estéril de PEG-amina de 8 brazos, Mw 10.000 (testigo), o con el producto tipo poliamina de cadena extendida de los ejemplos, y se equiparon con las puntas para el mezclado estático.
10 Se mantuvieron en ayuno durante toda la noche cinco conejos blancos hembra de Nueva Zelanda (4,0-4,6 kg), se anestesiaron, se afeitaron, se restregaron y se cubrieron. Se expuso el intestino delgado de cada conejo mediante una técnica de laparotomía estándar y se extruyó el hidrogel adhesivo estéril (aproximadamente 0,6 mL) por la jeringa de doble depósito estéril para formar una banda de 1,5 cm de anchura alrededor de la superficie serosal del intestino, de mesenterio a mesenterio. El hidrogel adhesivo se aplico en dos sitios. El sitio 1 fue el duodeno, 10 cm
15 caudal al origen del intestino delgado; el sitio 2 fue el íleo, 10-20 cm caudal al sitio 1. En cada sitio, se dejó que el hidrogel permaneciera durante 30 s antes de manipular más el intestino. El peritoneo y el abdomen se cerraron usando un procedimiento quirúrgico estándar.
Tres días después de la cirugía, los conejos fueron sacrificados por inhalación de dióxido de carbono, y los sitios de tratamiento se examinaron inmediatamente respecto a la presencia del adhesivo, la respuesta bruta de los tejidos y
20 respecto a la formación de adhesiones fibrosas. Se evaluaron el eritema y el edema en los sitios de aplicación según el sistema de clasificación usado en el ensayo de reactividad intracutánea de la norma ISO 10993-12. Los resultados, que no indican ninguna respuesta adversa de los tejidos, se sumarizan en la tabla 11.

Tabla 11. Respuesta in vivo cuando un tejido no dañado se expone a hidrogeles adhesivos que contienen PEGamina de 8 brazos o producto tipo poliamina de cadena extendida.
Ejemplo
Producto tipo poliamina de cadena extendidaa Sitio Adhesivo presente Adhesiones Edema Eritema
82 Comparativo
Ninguno 1 Síb Nob 0b 0b
83 Comparativo
Ninguno 2 Síb Nob 0b 0b
84
Ej. 26 (PLuronic® P104) 1 Síb Nob 0b 0b
85
Ej. 26 (PLuronic® P104) 2 Síb Nob 0b 0b
86
Ej. 31 (PLuronic® F108) 1 Síb Nob 0b 0b
87
Ej. 31 (PLuronic® F108 2 Síb Nob 0b 0b
aEl nombre entre paréntesis identifica el agente reticulante bifuncional, en forma de un dimesilato, usado para fabricar el producto tipo poliamina de cadena extendida. bLa observación o clasificación para cada uno de los cinco conejos fue la misma.
25 Ejemplos 88-89
Respuesta de los tejidos in vivo sobre el tejido dañado
Los siguientes ejemplos demuestran que el producto tipo poliamina de cadena extendida en un hidrogel adhesivo no causa ninguna respuesta adversa de los tejidos cuando se aplica a la serosa intestinal enterotomizada de conejos.
Se prepararon disoluciones esterilizadas el mismo dextrano dialdehído que se describió en el ejemplo 33 y del 30 producto tipo poliamina de cadena extendida de los ejemplos y se cargaron en jeringas con doble depósito esterilizadas equipadas con puntas para el mezclado estático como en los ejemplos 82-85.
Se mantuvieron en ayuno durante toda la noche cinco conejos blancos hembra de Nueva Zelanda (4,0-4,6 kg), se anestesiaron, se afeitaron, se restregaron y se cubrieron. Se expuso el intestino delgado de cada conejo mediante una técnica de laparotomía estándar y se extruyó el hidrogel adhesivo estéril (aproximadamente 0,6 mL) por la 35 jeringa de doble depósito estéril para formar una banda de 1,5 cm de anchura alrededor de la superficie serosal del
29
duodeno, 10 cm caudal al origen del intestino delgado, de mesenterio a mesenterio (sitio 1). Se dejó que el hidrogel permaneciera durante 30 s. Se enterotomizó el íleo 10-20 cm caudal al sitio 1 y opuesto al mesenterio con una incisión de 0,5 cm de longitud y perpendicular al eje longitudinal. La herida se cerró con 3 ó 4 suturas Vicryl 6/0 interrumpidas, y se extruyó el hidrogel adhesivo estéril por la jeringa de doble depósito estéril para formar una banda
5 de 1,5 cm de anchura alrededor de la superficie serosal del íleo, de mesenterio a mesenterio, para cubrir el sitio de la enterotomía (sitio 2). Después de que el hidrogel hubo permanecido durante 2 min, se cerraron el peritoneo y el abdomen usando un procedimiento quirúrgico estándar.
Tres días después de la cirugía, los conejos fueron sacrificados por inhalación de dióxido de carbono, y los sitios de tratamiento se examinaron inmediatamente respecto a la presencia del adhesivo, respecto a la respuesta bruta de 10 los tejidos y respecto a la formación de adhesiones fibrosas. Se evaluaron el eritema y el edema en los sitios de aplicación según el sistema de clasificación usado en el ensayo de reactividad intracutánea de la norma ISO 10993
12. Los resultados, que no indican ninguna respuesta adversa de los tejidos, se sumarizan en la tabla 12.

Tabla 12. Respuesta in vivo cuando un tejido dañado se expone a hidrogeles adhesivos que contienen producto tipo poliamina de cadena extendida.
Ejemplo
Producto tipo poliamina de cadena extendidaa Sitio Adhesivo presente Adhesiones Edema Eritema
86
Ej. 26 (PLuronic® P104) 1 Síb Nob 0b 0,1,0,0,0
87
Ej. 26 (PLuronic® P104) 2 Síb Nob 0b 0,0,0,1,0
aEl nombre entre paréntesis identifica el agente reticulante bifuncional, en forma de un dimesilato, usado para fabricar el producto tipo poliamina de cadena extendida. bLa observación o clasificación para cada uno de los cinco conejos fue la misma.
15 Ejemplo 90
Incorporación de un colorante en el hidrogel adhesivo que contiene el producto tipo poliamina de cadena extendida
Este ejemplo demuestra que la estabilidad del color de un colorante cuando se incorpora en el hidrogel adhesivo que contiene el producto tipo poliamina de cadena extendida. El colorante también es estable en las disoluciones de componentes usadas para formar el hidrogel adhesivo.
20 Se prepararon en agua desionizada disoluciones del producto tipo poliamina de cadena extendida del ejemplo 26 (25% en peso) que contenía 333 ppm de �?cido verde 25 y del mismo dextrano dialdehído que se describió en elejemplo 33 (25% en peso) que contenía 333 ppm de �?cido verde 25. Las disoluciones se almacenaron a TA a presión atmosférica y se observaron periódicamente. Después de 42 días ambas disoluciones aún tenían un color azul turquesa oscuro.
25 Una jeringa con doble depósito (MixPac SDL 005-01-50M) se cargó en un depósito con una disolución al 25% en peso del mismo dextrano dialdehído que se describió en el ejemplo 33 y en el otro depósito con una disolución al25% en peso del producto tipo poliamina de cadena extendida del ejemplo 26 que contenía 333 ppm de �?cido verde 25, y se equipó con puntas para el mezclado estático (12 etapas, MixPac ML 2,5-12-DM). Se extruyó hidrogel adhesivo por la jeringa de doble depósito sobre una placa de vidrio para formar una bola de aproximadamente 4 mm
30 de anchura. La bola sellante se seccionó aproximadamente por la mitad. Una sección se colocó en 10 mL de PBS y la otra sección se colocó en una bolsa de plástico con cierre de cremallera que contenía una toalla de papel completamente humedecida con agua desionizada. Las muestras se observaron periódicamente. Después de 1, 10 y 21 días el hidrogel dentro de la bolsa cerrada con cremallera estaba verde. No se observó ninguna lixiviación ni decoloración. Después de 24 h y 10 días, la muestra almacenada en PBS aún estaba visiblemente verde, pero
35 aproximadamente el 40% del colorante había sido lixiviado por la disolución de PBS.
Ejemplo 91 comparativo
Inestabilidad del color de índigo carmín cuando se incorpora en el hidrogel adhesivo que contiene producto tipo poliamina de cadena extendida
Este ejemplo demuestra que la inestabilidad del índigo carmín (FD&C Azul nº 2) cuando se incorpora en el hidrogel
40 adhesivo que contiene producto tipo poliamina de cadena extendida o cuando se incorpora en las disoluciones de componentes usadas para formar el hidrogel adhesivo.
Se prepararon en agua desionizada disoluciones del producto tipo poliamina de cadena extendida del ejemplo 26 (25% en peso) que contenía 759 ppm de índigo carmín (FD&C Azul nº 2) y del mismo dextrano dialdehído que se describió en el ejemplo 33 (25% en peso) que contenía 1000 ppm de índigo carmín. Las disoluciones se
45 almacenaron a TA a presión atmosférica y se observaron periódicamente. Después de 16 h ambas disoluciones se habían decolorado de azul medianoche profundo a naranja herrumbre.
Una jeringa con doble depósito (MixPac SDL 005-01-50M) se cargó en un depósito con una disolución al 25% en peso del mismo dextrano dialdehído que se describió en el ejemplo 33 y en el otro depósito con una disolución al
30
25% en peso del producto tipo poliamina de cadena extendida del ejemplo 26 que contenía 1000 ppm de índigo carmín, y se equipó con puntas para el mezclado estático (12 etapas, MixPac ML 2,5-12-DM). Se extruyó hidrogel adhesivo por la jeringa de doble depósito sobre una placa de vidrio para formar una bola de aproximadamente 4 mm de anchura. La bola sellante se seccionó aproximadamente por la mitad. Una sección se colocó en 10 mL de PBS y la otra sección se colocó en una bolsa de plástico con cierre de cremallera que contenía una toalla de papel completamente humedecida con agua desionizada. Después de 2 h ambas muestras se habían decolorado notablemente. Después de 16 h ambas muestras de hidrogel se habían decolorado a amarillo-naranja, pero no se observó ninguna pérdida por lixiviación.
Ejemplo 92
Este ejemplo ilustra la preparación de un producto tipo poliamina de cadena extendida derivado de un PEG-amina de 8 brazos y un polioxetano, Mw 2.013, dimesilato reticulante bifuncional en una relación molar 20:1.
Se hizo reaccionar, según el método del ejemplo 20, 1,0 g de PEG-amina de 8 brazos, Mw 10.000 (ejemplo 1) con 11 mg de polioxietano, Mw 2.013, dimesilato (ejemplo 19) para dar 0,77 g (76% de rendimiento). 1H-RMN (500 MHz, CDCl3): 8 3,58 (m, 930H), 3,46 (t, J = 5,3 Hz, 16H), 3,42 (t, J = 6,4 Hz, 16H), 2,81 (t, J = 5,1 Hz, 14H), 2,74 (t, J = 5,4 Hz, 2H), 1,76 (quint, J = 6,4Hz, 4,1H). SEC en agua con análisis de masas por difusión de luz (como en el ejemplo 1) dio Mw 13.150 para la poliamina de cadena extendida, comparado con Mw 11.040 para el material de partida PEG-amina de 8 brazos.
Ejemplo 93
Este ejemplo ilustra la síntesis de un poliéter de múltiples brazos que tiene grupos terminales electrófilos, PEG de 8 brazos, Mw 10.000, octamesilato.
A 20 g de PEG-OH de 8 brazos Mw 10.000 (Nektar Transforming Therapeutics) disueltos en 100 mL de diclorometano se añadieron 4,5 mL de trietilamina y 2,5 mL de cloruro de metanosulfonilo. La mezcla se agitó a TA durante toda la noche, se diluyó con 200 mL de cloroformo, se lavó con 3 x 80 mL de dihidrógeno fosfato de potasio 1,0 M seguido por 80 mL de disolución saturada de carbonato de potasio, se secó (sulfato de magnesio), se filtró y se evaporó (15 mm de Hg, 40ºC). El producto se secó (0,06 mm de Hg) para dar PEG, Mw 10.000, octamesilato de ocho brazos (20,1 g, rendimiento 94%): 1H-RMN (500 MHz, DMSO-d6): 8 4,29 (m, 16H), 3,67 (m, 16H), 3,50 (s, 900H), 3,16 (s, 24H); SEC en fase acuosa con análisis de masas por difusión de luz (como en el ejemplo 1) dio Mw 7.300, Mw/Mn 1,0, Mz/Mw 1,0 e IV 4,7 mL/g.
Ejemplo 94
Este ejemplo ilustra la síntesis de un agente reticulante tipo diamina primaria, Pluronic® P104 diamina.
Se añadieron 30 mL de amoníaco acuoso concentrado (28% p/p) a Pluronic® P104 dimesilato (ejemplo 13, 10 g)) disueltos en 16 mL de acetonitrilo. La mezcla se agitó en un depósito sellado a TA durante 48 h. La mezcla de reacción se roció con nitrógeno durante 1 h y luego se concentró (15 mm de Hg, 40ºC). La disolución remanente se diluyó con 20 mL de disolución saturada de carbonato de potasio y se extrajo 2 x 50 mL de cloroformo. Las capas de cloroformo combinadas se secaron (sulfato de magnesio), se filtraron y se evaporaron (15 mm de Hg, 40ºC). El residuo se disolvió en 10 mL de agua y la disolución resultante se evaporó hasta que fue transparente (15 mm de Hg, 40ºC), se congeló y se liofilizó para dar 7,02 g (72% de rendimiento). 1H-RMN (500 MHz, DMSO-d6): 8 3,50 (m, 500H), 2,62 (m, 4H), 1,03 (d, J = 5,8 Hz, 260H).
Ejemplo 95
Este ejemplo ilustra la síntesis de un producto tipo poliamina de cadena extendida derivado de un poliéter de múltiples brazos que tiene grupos terminales electrófilos (PEG de 8 brazos, Mw 10.000, octamesilato) y un agente reticulante tipo diamina primaria (Pluronic® P104 diamina) en una relación molar 20:1.
A 5 g de PEG-OH de 8 brazos, Mw 10.000, octamesilato (ejemplo 91) disueltos en 10 mL de DMF se añadieron 139 mg de Pluronic® P104 diamina (ejemplo 92) en 2 mL de DMF. Después de agitar la mezcla a TA durante toda la noche, se combinó con 32 mL de amoníaco acuoso concentrado y se agitó en un depósito sellado a TA durante 3 días. La mezcla de reacción se roció con nitrógeno durante 1 h, se combinó con 2 g de carbonato de potasio y se extrajo con 3 x 25 mL de diclorometano. Las capas combinadas de diclorometano se secaron (sulfato de magnesio), se filtraron y se evaporaron (15 mm de Hg, 40ºC). El producto se secó adicionalmente (0,06 mm de Hg) para dar 4,19 g (rendimiento 87%): 1H-RMN (500 MHz, CDCl3): 8 3,60 (m, 1080H), 3,47 (t, J = 5,2 Hz, 16H), 2,82 (t, J = 5,3 Hz, 15H), 2,76 (t, J = 5,5 Hz, 1H), 1,10 (m, 9,8H); SEC en fase acuosa con análisis de masas por difusión de luz (como en el ejemplo 1) dio Mw 37.660 para la poliamina de cadena extendida, comparado con Mw 7.300 para el material de partida PEG octamesilato de 8 brazos.
31
Ejemplo 96
Este ejemplo ilustra la preparación de un producto tipo poliamina de cadena extendida derivado de un PEG-amina de 4 brazos y un agente reticulante bifuncional tipo PEG-PPG-PEG (Pluronic® P104) dimesilato en una relación molar 20:1.
A 1,00 g de PEG-amina de 4 brazos, Mw 2.000 (ejemplo 4), disueltos en 2 mL de DMF y 1 mL de diclorometano se añadieron 0,151 g de PEG-PPG-PEG (Pluronic® P104) dimesilato (ejemplo 13) disueltos en 1 mL de diclorometano y la mezcla se agitó a TA durante toda la noche. La mezcla se diluyó con 10 mL de cloroformo y se lavó con 3 x 2 mL de carbonato de potasio 1M. Las fases acuosas combinadas se extrajeron con 1 mL de cloroformo. Las capas de cloroformo combinadas se secaron (sulfato de magnesio), se filtraron y se evaporaron (15 mm de Hg, 40ºC) para dar 1,07 g (rendimiento 93%): 1H-RMN (500 MHz, CDCl3): 8 3,60 (m, 238H), 3,38 (m, 14H), 2,82 (m, 7H), 2,76 (t, J = 5,4 Hz, 1H), 1,10 (m, 10,5H). SEC en fase acuosa con análisis de masas por difusión de luz (como en el ejemplo 1) dio Mw 3.600 para la poliamina de cadena extendida, comparado con Mw 2.420 para el material de partida PEGamina de 4 brazos.
Ejemplo 97
Este ejemplo ilustra la síntesis de un agente reticulante tipo diamina primaria, PEG 6000 diamina.
A PEG 6000 dimesilato (ejemplo 6, 3,0 g), disuelto en 4 mL de acetonitrilo se añadieron 8 mL de amoníaco acuoso concentrado (28% p/p). La mezcla se agitó en un depósito sellado a TA durante 48 h. La mezcla de reacción se repartió entre 30 mL de cloroformo y 10 mL de disolución saturada de carbonato de potasio. La capa de cloroformo se secó (sulfato de magnesio), se filtró y se evaporó (15 mm de Hg, 40ºC). El residuo se secó adicionalmente a vacío (0,2 mm de Hg, TA) para 1,07 g (rendimiento 89%): 1H-RMN (500 MHz, DMSO-d6): 8 3,50 (m, 578H), 2,63 (t, J = 5,8 Hz, 4H).
Ejemplo 98
Este ejemplo ilustra la síntesis de un agente reticulante tipo diisocianato, PEG 6000 diisocianato.
A 1 g de PEG 6000 diamina (ejemplo 97) disuelto en 25 mL de tolueno se añadieron 60 mg de trifosgeno y 0,28 mL de diisopropiletilamina. La mezcla de reacción se calentó a 70-80ºC en nitrógeno durante 3 h. La mezcla de reacción se enfrió a TA y se diluyó con 200 mL de éter de petróleo. El precipitado formado se aisló por filtración, se lavó con éter de petróleo y se secó a vacío (0,2 mm de Hg, TA). 1H-RMN (500 MHz, CDCl3): 8 3,60 (m, 708H), 3,37 (t, J = 5,2 Hz, 4H). Este producto se usó sin purificación adicional en el ejemplo 99.
Ejemplo 99
Este ejemplo ilustra la preparación de un producto tipo poliamina de cadena extendida derivado de un PEG-amina de 8 brazos y un agente reticulante bifuncional, PEG 6000 diisocianato, en una relación molar 20:1.
A 1,00 g de PEG-amina de 8 brazos, Mw 10.000 (ejemplo 1), disueltos en 3 mL de diclorometano se añadieron 36 mg de PEG 6000 diisocianato (ejemplo 98) disueltos en 1 mL de diclorometano y la mezcla se agitó a TA durante 1
h. La mezcla se diluyó con 10 mL de cloroformo y se lavó con 2 x 2 mL dihidrógeno fosfato de potasio 1 M seguido por 3 x 3 mL de carbonato de potasio 1M. Las fases acuosas combinadas se extrajeron con 1 mL de cloroformo. Las capas de cloroformo combinadas se secaron (sulfato de magnesio), se filtraron y se evaporaron (15 mm de Hg, 40ºC) para dar el producto tipo poliamina de cadena extendida. 1H-RMN (500 MHz, CDCl3): 8 3,61 (m, 1000H), 3,32 (q, J = 5,4 Hz, 14H), 2,78 (t, J = 5,0 Hz, 12H). SEC en fase acuosa con análisis de masas por difusión de luz [30ºC, disolución salina tamponada con fosfatos (PBS, fosfato 10 mM, KCl 2,7 mM, NaCl 0,137 M, pH 7,4), 0,5 mL/min, dos columnas de lecho mixto Suprema Linear M + 1 columna Lux Suprema 1000A (Polymer Standard Services), dn/dc 0,135 mL/g] dio Mw 18.230 para la poliamina de cadena extendida, comparado con Mw 13.170 para el material de partida PEG-amina de 8 brazos.
32

Claims (17)

  1. REIVINDICACIONES
    1. Una composición de materia fabricada mediante un procedimiento que comprende: hacer reaccionar, opcionalmente en un primer disolvente de reacción, al menos un poliéter amina de múltiples brazos que tenga al menos tres brazos con al menos un agente reticulante bifuncional de fórmula:
    X1-R-X2
    estando la relación molar del poliéter amina de múltiples brazos al agente reticulante bifuncional en el intervalo de
    4:1 a 50:1, formando de este modo un producto tipo poliamina de cadena extendida; y
    en el que:
    (i)
    al menos tres de los brazos del poliéter amina de múltiples brazos están terminados en un grupo amina primaria;
    (ii)
    el poliéter amina de múltiples brazos tiene un peso molecular promedio en peso de 450 a 200.000 Daltons;
    (iii) X1-R-X2 es un polímero que tiene un peso molecular promedio en peso de 2.000 a 20.000 Daltons;
    (iv)
    R es un grupo polímero divalente;
    (v)
    X1 y X2 son grupos capaces de reaccionar con el grupo amina primaria para formar un enlace carbononitrógeno;
    siempre que el producto tipo poliamina de cadena extendida esté caracterizado por una solubilidad en agua a 20ºC de al menos 20% en peso.
  2. 2.
    La composición según la reivindicación 1, que además se caracteriza por un peso molecular promedio en peso por cromatografía de exclusión molecular que es al menos 10% mayor que el peso molecular promedio en peso del poliéter amina de múltiples brazos usado para fabricar el producto tipo poliamina de cadena extendida.
  3. 3.
    La composición según la reivindicación 1, en la que X1 y X2 se seleccionan del grupo que consiste en: -CHO, -CO2H, -CO2R1, -NCO, -NCS, -COCl, -COBr, -COF, -OMs, -OTs, –OTf, tresilato, Cl, Br, I y glicidil éter; en la que R1 es un radical N-succinimidilo, 4-nitrofenilo, 2,4-dinitrofenilo o pentafluorofenilo.
  4. 4.
    La composición según la reivindicación 1, en la que X1 y X2 se seleccionan del grupo que consiste en: -OMs, -OTs, –OTf, tresilato, Cl, Br y I.
  5. 5.
    La composición según la reivindicación 1, en la que el grupo polímero divalente R se selecciona del grupo que consiste en: homopolímeros divalentes de óxido de etileno y copolímeros divalentes de bloques y al azar de óxido de etileno y óxido de propileno.
  6. 6.
    La composición según la reivindicación 1, en la que el poliéter amina de múltiples brazos tiene un peso molecular promedio en peso de 2.000 a 40.000 Daltons.
  7. 7.
    La composición según la reivindicación 1, en la que el poliéter amina de múltiples brazos es un polietilenglicol de ocho brazos que tiene ocho brazos terminados por un grupo amina y que tiene un peso molecular promedio en peso de 9.000 a 11.000 Daltons.
  8. 8.
    Una composición de materia fabricada mediante un procedimiento que comprende las etapas de:
    (a) hacer reaccionar, opcionalmente en un segundo disolvente de reacción, al menos un poliéter de múltiples brazos que al menos tenga tres brazos y que al menos tenga tres grupos terminales electrófilos, con un agente reticulante tipo diamina primaria de fórmula:
    NH2-R2-NH2
    estando la relación molar del poliéter de múltiples brazos al agente reticulante tipo diamina primaria en el intervalo de
    4:1 a 50:1, formando de este modo un polímero de cadena extendida que tiene grupos terminales electrófilos remanentes; y,
    (b) tratar, opcionalmente en un tercer disolvente de reacción, dicho polímero de cadena extendida para convertir los grupos terminales electrófilos remanentes en grupos amina terminales para dar un producto tipo poliamina de cadena extendida; en el que:
    (i)
    al menos tres de los brazos del poliéter de múltiples brazos están terminados en grupos electrófilos terminales capaces de reaccionar con una amina primaria para formar un enlace carbono-nitrógeno;
    (ii)
    el poliéter de múltiples brazos tiene un peso molecular promedio en peso de 450 a 200.000 Daltons; y
    33
    (iii) R2 es un grupo polímero divalente;
    (iv) NH2-R2-NH2 es un polímero que tiene un peso molecular promedio en peso de 2.000 a 20.000 Daltons;
    siempre que el producto tipo poliamina de cadena extendida esté caracterizado por una solubilidad en agua a 20ºC de al menos 20% en peso.
  9. 9.
    La composición según la reivindicación 8, en la que los grupos electrófilos terminales se seleccionan del grupo que consiste en: -OMs, -OTs, –OTf, tresilato, Cl, Br y I; y la etapa (b) comprende hacer reaccionar el polímero de cadena extendida con amoníaco para dar el producto tipo poliamina de cadena extendida.
  10. 10.
    La composición según la reivindicación 8, en la que los grupos electrófilos terminales se seleccionan del grupo que consiste en: -OMs, -OTs, –OTf, tresilato, Cl, Br y I; y la etapa (b) comprende las etapas de:
    (i)
    hacer reaccionar el polímero de cadena extendida con una azida de metal alcalino para dar un polímero azido de cadena extendida; y
    (ii)
    reducir el polímero azido de cadena extendida con un agente reductor para dar el producto tipo poliamina de cadena extendida.
  11. 11.
    La composición según la reivindicación 8, en la que los grupos electrófilos terminales son ácidos carboxílicos; la etapa (a) comprende además un agente deshidratante tipo diimida; y la etapa (b) comprende las etapas de:
    (i)
    hacer reaccionar el polímero de cadena extendida con una cantidad suficiente de reactivo tipo haluro de ácido para dar un polímero tipo haluro de ácido de cadena extendida;
    (ii)
    hacer reaccionar el polímero tipo haluro de ácido de cadena extendida con suficiente amoníaco para dar un polímero tipo amida primaria de cadena extendida; y
    (iii) hacer reaccionar el polímero tipo amida primaria de cadena extendida con suficiente fuente de halógeno activo y un hidróxido de metal alcalino para dar el producto tipo poliamina de cadena extendida.
  12. 12.
    La composición según la reivindicación 8, en la que los grupos electrófilos terminales son ácidos carboxílicos; la etapa (a) comprende además un agente deshidratante tipo diimida; y la etapa (b) comprende las etapas de:
    (i)
    hacer reaccionar el polímero de cadena extendida con una cantidad suficiente de reactivo tipo haluro de ácido para dar un polímero tipo haluro de ácido de cadena extendida;
    (ii)
    hacer reaccionar el polímero tipo haluro de ácido de cadena extendida con suficiente azida de metal alcalino para dar un polímero tipo acil azida de cadena extendida; y
    (iii) calentar el polímero tipo acil azida de cadena extendida para inducir una transposición para dar el producto tipo poliamina de cadena extendida.
  13. 13.
    La composición según la reivindicación 8, en la que los grupos electrófilos terminales son ésteres activados de ácidos carboxílicos o cloruros de ácidos carboxílicos; y la etapa (b) comprende las etapas de:
    (i)
    hacer reaccionar el polímero de cadena extendida con una cantidad suficiente de amoníaco para dar un polímero tipo amida primaria de cadena extendida; y
    (ii)
    hacer reaccionar el polímero amida primaria de cadena extendida con suficiente fuente de halógeno activo y un hidróxido de metal alcalino para dar el producto tipo poliamina de cadena extendida.
  14. 14.
    La composición según la reivindicación 8, en la que los grupos electrófilos terminales son ésteres activados de ácidos carboxílicos o cloruros de ácidos carboxílicos; y la etapa (b) comprende las etapas de:
    (i)
    hacer reaccionar el polímero de cadena extendida con suficiente azida de metal alcalino para dar un polímero tipo acil azida de cadena extendida, y
    (ii)
    calentar el polímero tipo acil azida de cadena extendida para inducir una transposición para dar el producto tipo poliamina de cadena extendida.
  15. 15.
    La composición según la reivindicación 8, en la que los grupos electrófilos terminales son aldehídos, y la etapa
    (b) comprende las etapas de:
    (i)
    hacer reaccionar el polímero de cadena extendida con suficiente amoníaco para dar un polímero tipo imina de cadena extendida; y
    (ii)
    reducir el polímero tipo imina de cadena extendida para dar un producto tipo poliamina de cadena extendida.
    34
  16. 16.
    La composición según la reivindicación 8, caracterizada además por un peso molecular promedio en peso determinado por cromatografía de exclusión molecular que al menos es 10% mayor que el peso molecular promedio en peso del poliéter de múltiples brazos usado para fabricar el producto tipo poliamina de cadena extendida.
  17. 17.
    La composición según la reivindicación 8, en la que el grupo polímero divalente R2 se selecciona del grupo que consiste en: homopolímeros divalentes de óxido de etileno y copolímeros divalentes de bloques y al azar de óxido de etileno y óxido de propileno.
    35
    36
ES07796383T 2006-06-30 2007-06-22 Adhesivos de tejidos con elasticidad modificada Active ES2377744T3 (es)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US81775806P 2006-06-30 2006-06-30
US817758P 2006-06-30
PCT/US2007/014640 WO2008005207A2 (en) 2006-06-30 2007-06-22 Tissue adhesives with modified elasticity

Publications (1)

Publication Number Publication Date
ES2377744T3 true ES2377744T3 (es) 2012-03-30

Family

ID=38667159

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
ES07796383T Active ES2377744T3 (es) 2006-06-30 2007-06-22 Adhesivos de tejidos con elasticidad modificada

Country Status (6)

Country Link
US (2) US7960498B2 (es)
EP (1) EP2035482B1 (es)
JP (1) JP5123939B2 (es)
CN (1) CN101479320B (es)
ES (1) ES2377744T3 (es)
WO (1) WO2008005207A2 (es)

Families Citing this family (42)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP1796746B1 (en) 2004-10-07 2011-05-04 E.I. Du Pont De Nemours And Company Polysaccharide-based polymer tissue adhesive for medical use
EP2041214A4 (en) 2006-07-10 2009-07-08 Medipacs Inc SUPERELASTIC EPOXY HYDROGEL
US8674987B2 (en) 2006-09-19 2014-03-18 Caustic Graphics, Inc. Dynamic ray population control
CN101541857B (zh) * 2006-11-27 2012-12-12 阿克塔马克斯手术器材有限责任公司 多官能聚环氧烷、水凝胶和组织粘合剂
US20090035249A1 (en) * 2007-08-02 2009-02-05 Bhatia Sujata K Method of inhibiting proliferation of Escherichia coli
US8426492B2 (en) 2007-11-14 2013-04-23 Actamax Surgical Materials, Llc Oxidized cationic polysaccharide-based polymer tissue adhesive for medical use
EP2227635A2 (en) 2007-12-03 2010-09-15 Medipacs, Inc. Fluid metering device
KR100967833B1 (ko) * 2008-05-20 2010-07-05 아이디비켐(주) 고순도의 폴리에틸렌글리콜 알데하이드 유도체의 제조방법
US8551136B2 (en) 2008-07-17 2013-10-08 Actamax Surgical Materials, Llc High swell, long-lived hydrogel sealant
US20100015231A1 (en) * 2008-07-17 2010-01-21 E.I. Du Pont De Nemours And Company Low swell, long-lived hydrogel sealant
EP2326351B1 (en) 2008-08-19 2017-12-27 Nektar Therapeutics Conjugates of small-interfering nucleic acids
EP2349357B1 (en) * 2008-11-19 2012-10-03 Actamax Surgical Materials LLC Hydrogel tissue adhesive formed from aminated polysaccharide and aldehyde-functionalized multi-arm polyether
US8466327B2 (en) 2008-11-19 2013-06-18 Actamax Surgical Materials, Llc Aldehyde-functionalized polyethers and method of making same
US20100160960A1 (en) * 2008-12-19 2010-06-24 E. I. Du Pont De Nemours And Company Hydrogel tissue adhesive having increased degradation time
US7728175B1 (en) 2008-12-23 2010-06-01 E. I. Du Pont De Nemours And Company Linear amine functionalized poly(trimethylene ether) compositions
JP2012522074A (ja) * 2009-03-27 2012-09-20 アクタマックス サージカル マテリアルズ リミテッド ライアビリティ カンパニー ポリグリセロールアルデヒド
WO2010118284A1 (en) 2009-04-09 2010-10-14 E. I. Du Pont De Nemours And Company Hydrogel tissue adhesive having reduced degradation time
US8796242B2 (en) 2009-07-02 2014-08-05 Actamax Surgical Materials, Llc Hydrogel tissue adhesive for medical use
US8580950B2 (en) 2009-07-02 2013-11-12 Actamax Surgical Materials, Llc Aldehyde-functionalized polysaccharides
WO2011002956A1 (en) 2009-07-02 2011-01-06 E. I. Du Pont De Nemours And Company Aldehyde-functionalized polysaccharides
JP5872463B2 (ja) 2009-07-02 2016-03-01 アクタマックス サージカル マテリアルズ リミテッド ライアビリティカンパニー 医療用ヒドロゲル組織接着剤
JP2011052051A (ja) * 2009-08-31 2011-03-17 Jsr Corp 接着剤組成物、それを用いた基材の加工または移動方法および半導体素子
US20110081398A1 (en) * 2009-10-01 2011-04-07 Tyco Healthcare Group Lp Multi-mechanism surgical compositions
US20110081701A1 (en) * 2009-10-02 2011-04-07 Timothy Sargeant Surgical compositions
US8968785B2 (en) * 2009-10-02 2015-03-03 Covidien Lp Surgical compositions
JP5846404B2 (ja) * 2010-10-14 2016-01-20 国立研究開発法人産業技術総合研究所 光分解性ゲル、細胞培養器具、細胞配列・分別装置、細胞配列方法および細胞分別方法
JP5783593B2 (ja) * 2010-12-17 2015-09-24 国立研究開発法人産業技術総合研究所 細胞分別用マイクロチップおよび細胞分別方法ならびに細胞分別装置
CN102786682B (zh) * 2011-05-20 2014-05-21 上海景宇生物科技有限公司 聚乙二醇醛基活性物
WO2013138524A1 (en) * 2012-03-14 2013-09-19 Medipacs, Inc. Smart polymer materials with excess reactive molecules
CN102784414B (zh) * 2012-08-02 2014-07-23 东华大学 一种可用于组织工程的可注射性双交联水凝胶的制备方法
US8859705B2 (en) 2012-11-19 2014-10-14 Actamax Surgical Materials Llc Hydrogel tissue adhesive having decreased gelation time and decreased degradation time
US9446166B2 (en) 2013-01-24 2016-09-20 Ethicon, Inc. Fibrin sealant compositions with chemical crosslinking
US20140315828A1 (en) 2013-04-22 2014-10-23 Allergan, Inc. Cross-linked silk-hyaluronic acid compositions
US9908972B2 (en) 2013-05-22 2018-03-06 National Institute Of Advanced Industrial Science And Technology Photodegradable cross-linking agent, photodegradable gel, cell culture instrument, cell arrangement-sorting apparatus, cell arrangement method, cell sorting method, tissue forming method, and tissue
US20160184474A1 (en) 2013-07-29 2016-06-30 Actamax Surgical Materials, Llc Low swell tissue adhesive and sealant formulations
CN104177607B (zh) * 2014-09-01 2016-05-11 浙江永杰汽车电子有限公司 一种高环氧乙烷聚醚的制备方法
US10723839B2 (en) * 2015-07-09 2020-07-28 Solvay Specialty Polymers Italy S.P.A. Process for the synthesis of (per)fluoropolyether amines
US10300169B2 (en) 2016-08-24 2019-05-28 Allergan, Inc. Co-crosslinked hyaluronic acid-silk fibroin hydrogels for improving tissue graft viability and for soft tissue augmentation
CN108003041A (zh) * 2016-10-28 2018-05-08 中国石油化工股份有限公司 一种分离聚醚醇和聚醚胺的方法
KR102679768B1 (ko) * 2017-08-16 2024-06-28 소에이 가가쿠 고교 가부시키가이샤 분산성이 향상되고 성능이 개선된 peg계 리간드
NL2019652B1 (en) * 2017-09-29 2019-04-08 Polyganics Ip B V Tissue-adhesive sealant device
WO2023212312A2 (en) * 2022-04-29 2023-11-02 Biodevek, Inc. Biocompatible adhesive materials and methods of use

Family Cites Families (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4766245A (en) 1985-03-01 1988-08-23 Texaco Inc. Process for the preparation of polyoxyalkylene polyamines
BR8807710A (pt) * 1987-09-21 1990-08-07 Dow Chemical Co Polieteres amino-funcionais contendo moleculas de ureia, biureto, tioureia, ditiobiureto, tioamida e/ou amida em sua cadeia principal,e pre-polimeros de uretana/ureia e polimeros produzidos a partir desses pre-polimeros
WO1997022371A1 (en) * 1995-12-18 1997-06-26 Collagen Corporation Crosslinked polymer compositions and methods for their use
US6833408B2 (en) 1995-12-18 2004-12-21 Cohesion Technologies, Inc. Methods for tissue repair using adhesive materials
WO1997030103A2 (en) 1996-02-15 1997-08-21 The Dow Chemical Company Preparation of polyetheramines and polyetheramine derivatives
US20020064546A1 (en) * 1996-09-13 2002-05-30 J. Milton Harris Degradable poly(ethylene glycol) hydrogels with controlled half-life and precursors therefor
US5830986A (en) 1996-10-28 1998-11-03 Massachusetts Institute Of Technology Methods for the synthesis of functionalizable poly(ethylene oxide) star macromolecules
DE10152407A1 (de) 2001-10-24 2003-05-08 Aesculap Ag & Co Kg Zusammensetzung aus mindestens zwei biokompatiblen chemisch vernetzbaren Komponenten
US7323539B2 (en) 2003-05-06 2008-01-29 E. I. Du Pont De Nemours And Company Polytrimethylene ether glycol and polytrimethylene ether ester with excellent quality
KR100512483B1 (ko) 2003-05-07 2005-09-05 선바이오(주) 신규한 폴리에틸렌글리콜-말레이미드 유도체의 합성방법
US7423112B2 (en) * 2004-05-27 2008-09-09 Bayer Materialscience Llc Polyether polyols containing pendant amine groups and a process for their preparation
EP1796746B1 (en) * 2004-10-07 2011-05-04 E.I. Du Pont De Nemours And Company Polysaccharide-based polymer tissue adhesive for medical use
CN101541857B (zh) * 2006-11-27 2012-12-12 阿克塔马克斯手术器材有限责任公司 多官能聚环氧烷、水凝胶和组织粘合剂

Also Published As

Publication number Publication date
EP2035482A2 (en) 2009-03-18
WO2008005207A3 (en) 2008-02-21
US20080004421A1 (en) 2008-01-03
US8202963B2 (en) 2012-06-19
WO2008005207A2 (en) 2008-01-10
EP2035482B1 (en) 2011-12-14
CN101479320B (zh) 2012-07-18
JP2009542843A (ja) 2009-12-03
JP5123939B2 (ja) 2013-01-23
US20110269916A1 (en) 2011-11-03
US7960498B2 (en) 2011-06-14
CN101479320A (zh) 2009-07-08

Similar Documents

Publication Publication Date Title
ES2377744T3 (es) Adhesivos de tejidos con elasticidad modificada
JP5539725B2 (ja) 分岐末端反応物及びそれから製造されるポリマーヒドロゲル組織接着剤
ES2342499T3 (es) Metodo para preparar aminas de poli(etilenglicol) de multiples brazos.
US8790632B2 (en) Polymer-based tissue-adhesive form medical use
US8426492B2 (en) Oxidized cationic polysaccharide-based polymer tissue adhesive for medical use
US20100112063A1 (en) Method for preparing a hydrogel adhesive having extended gelation time and decreased degradation time
US8715636B2 (en) Polysaccharide-based polymer tissue adhesive for medical use
CN105833337B (zh) 纤维组织封合剂及其使用方法
US8778326B2 (en) Hydrogel tissue adhesive for medical use
EP2416811B1 (en) Hydrogel tissue adhesive having reduced degradation time
US20110224724A1 (en) Hydrogel tissue adhesive formed from aminated polysaccharide and aldehyde-functionalized multi-arm polyether
US8859705B2 (en) Hydrogel tissue adhesive having decreased gelation time and decreased degradation time
US8796242B2 (en) Hydrogel tissue adhesive for medical use