ES2375288T3 - Procedure for determining analyte concentrations hematocrit corrected. - Google Patents

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ES2375288T3 ES07824026T ES07824026T ES2375288T3 ES 2375288 T3 ES2375288 T3 ES 2375288T3 ES 07824026 T ES07824026 T ES 07824026T ES 07824026 T ES07824026 T ES 07824026T ES 2375288 T3 ES2375288 T3 ES 2375288T3
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Stephen Patrick Blythe
Marco F. Cardosi
Andrew Gill
Christopher Philip Leach
Leanne Mills
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    • C12QMEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
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    • G01N27/30Electrodes, e.g. test electrodes; Half-cells
    • G01N27/327Biochemical electrodes electrical and mechanical details of in vitro measurements
    • G01N27/3271Amperometric enzyme electrodes for analytes in body fluids, e.g. glucose in blood

Abstract

Un procedimiento de cálculo de una concentración de glucosa corregida con hematocrito en una muestra de fluido, comprendiendo el procedimiento: proporcionar una tira de prueba que comprende un electrodo de referencia y un electrodo de trabajo formado con una pluralidad de microelectrodos y recubierto con una capa de reactivo; A method of calculating a corrected glucose concentration hematocrit in a fluid sample, the method comprising: providing a test strip comprising a reference electrode and a working electrode formed with a plurality of microelectrodes and coated with a layer of reagent; aplicar una muestra de fluido a la tira de prueba durante un periodo de reacción; applying a fluid sample to the test strip during a reaction; aplicar un voltaje de prueba entre el electrodo de referencia y el electrodo de trabajo; applying a test voltage between the reference electrode and the working electrode; medir una corriente de prueba como una función del tiempo; measuring a test current as a function of time; medir un valor de corriente de estado estacionario cuando la corriente de prueba ha alcanzado un equilibrio; measuring a value of steady state current when the test current has reached equilibrium; calcular una proporción de la corriente de prueba con respecto al valor de corriente de estado estacionario; calculating a ratio of the test current from the value of steady state current; trazar la proporción de la corriente de prueba con respecto al valor de corriente de estado estacionario como una función de la inversa de la raíz cuadrada del tiempo; plotting the ratio of the test current from the value of steady state current as a function of the inverse of the square root of time; calcular un coeficiente de difusión efectiva a partir de la pendiente de la representación gráfica de regresión lineal de la proporción de la corriente de prueba con respecto al valor de corriente de estado estacionario como una función de la inversa de la raíz cuadrada del tiempo; calculating an effective diffusion coefficient from the slope of the linear regression plot of the ratio of the test current from the value of steady state current as a function of the inverse of the square root of time; y calcular una concentración corregida con hematocrito del analito. and calculating a hematocrit corrected analyte concentration.

Description

Procedimiento para determinar concentraciones de analito corregidas con hematocrito Procedure for determining analyte concentrations corrected hematocrit

1. Prioridad 1. Priority

La presente solicitud reivindica los beneficios de la prioridad bajo el artículo 119, título 35 del USC a partir de la solicitud provisional SN 60/850.173 presentada el 5 de octubre de 2006, titulada: “Procedimiento para determinar concentraciones de analito corregidas con hematocrito”. This application claims the benefits of priority under Article 119, 35 USC from provisional application SN 60 / 850,173 filed 5 October 2006, entitled "Method for determining analyte concentrations corrected hematocrit".

2. Antecedentes de la invención 2. BACKGROUND OF THE INVENTION

Las tiras de prueba de glucosa electroquímica, tales como las que se usan en el kit de pruebas de sangre completa OneTouch® Ultra®, que se encuentra disponible a través de LifeScan, Inc., se diseñan para medir la concentración de glucosa en una muestra de sangre de pacientes con diabetes. The electrochemical test strips, such as those used in glucose testing kit whole blood OneTouch Ultra which is available from LifeScan, Inc., are designed to measure the concentration of glucose in a sample blood of patients with diabetes. La medición de la glucosa se basa en la oxidación específica de la glucosa por la flavo–enzima glucosa oxidasa. The measurement of glucose is based upon the specific oxidation of glucose by the flavo the glucose oxidase enzyme-. Las reacciones que pueden tener lugar en una tira de prueba de glucosa se resumen a continuación en las ecuaciones 1 y 2. The reactions can take place in a glucose test strip are summarized below in equations 1 and 2.

D–Glucosa + GO(ox) � Ácido glucónico + GO(red) (1) D-Glucose + GO (OX) Gluconic acid + GO (red) (1)

GO(red) + 2 FE(CN)6 3– � GO(ox) + 2 Fe(CN)6 4– (2) GO (network) + 2 FE (CN) 6 3- GO (OX) + 2 Fe (CN) 6 4- (2)

Tal como se muestra en la ecuación 1, la glucosa se oxida en ácido glucónico por la forma oxidada de la glucosa oxidasa (GO(ox)). As shown in Equation 1, glucose is oxidized to gluconic acid by the oxidized form of glucose oxidase (GO (ox)). Ha de observarse que también puede hacerse referencia a la GO(ox) como una “enzima oxidada”. It is noted that it may also be referred to GO (OX) as an "oxidized enzyme." Durante la reacción en la ecuación 1, la enzima oxidada GO(ox) se convierte en su estado reducido que se indica como GO(red) (es decir, “enzima reducida”). During the reaction in Equation 1, oxidised enzyme GO (OX) is converted to its reduced state is indicated as GO (red) (i.e., "reduced enzyme"). A continuación, la enzima reducida GO(red) se vuelve a oxidar de vuelta a GO(ox) mediante una reacción con Fe(CN)6 3– (al que se hace referencia como o bien el mediador oxidado o bien ferricianuro) tal como se muestra en la ecuación 2. Durante la regeneración de GO(red) de vuelta a su estado oxidado GO(ox), el Fe(CN)6 3– se reduce a Fe(CN)6 4– (al que se hace referencia como o bien el mediador reducido o bien ferrocianuro). Then the enzyme reduced GO (red) reoxidized back to GO (OX) by reaction with Fe (CN) 6 3- (referred as either the oxidized or mediator ferricyanide is made) as shown in equation 2. During regeneration of GO (red) back to its oxidized state GO (ox), Fe (CN) 6 3- is reduced to Fe (CN) 6 4- (to which reference is made as or reduced mediator or ferricyanide).

Cuando las reacciones que se han expuesto anteriormente se llevan a cabo aplicando un voltaje de prueba entre dos electrodos, una corriente de prueba puede crearse mediante la reoxidación electroquímica del mediador reducido en la superficie de electrodo. When the reactions discussed above are carried out by applying a test voltage between two electrodes, a test current may be created by the electrochemical re-oxidation of reduced mediator electrode surface. Por lo tanto, debido a que, en un entorno ideal, la cantidad de ferrocianuro que se crea durante la reacción química que se describe anteriormente es directamente proporcional a la cantidad de glucosa en la muestra que se coloca entre los electrodos, la corriente de prueba generada sería proporcional al contenido de glucosa de la muestra. Therefore, since, in an ideal environment, the amount of ferrocyanide created during the chemical reaction described above is directly proportional to the amount of glucose in the sample positioned between the electrodes, the test current generated would be proportional to the glucose content of the sample. Un mediador, tal como el ferricianuro, es un compuesto que acepta electrones a partir de una enzima tal como la glucosa oxidasa ya continuación dona los electrones a un electrodo. A mediator, such as ferricyanide is a compound that accepts electrons from an enzyme such as glucose oxidase and then donates electrons to an electrode. A medida que aumenta la concentración de glucosa en la muestra, la cantidad de mediador reducido formado también aumenta, de este modo, hay una relación directa entre la corriente de prueba que resulta de la reoxidación del mediador reducido y la concentración de glucosa. As the concentration of glucose in the sample, the amount of reduced mediator formed also increases, thus, there is a direct relationship between the test current resulting from the reoxidation of the reduced mediator and glucose concentration. En particular, la transferencia de electrones a través de la superficie de contacto eléctrica da como resultado un flujo de corriente de prueba (2 moles de electrones por cada mol de glucosa que se oxida). In particular, the transfer of electrons through the electrical contact surface results in a flow of test current (2 moles of electrons for every mole of glucose that is oxidized). Puede hacerse referencia a la corriente de prueba que resulta de la introducción de glucosa, por lo tanto, como una corriente de glucosa. Reference may be made to the test current resulting from the introduction of glucose, therefore, as a stream of glucose.

Debido a que puede ser muy importante conocer la concentración de glucosa en sangre, en particular en personas con diabetes, se han desarrollado unos medidores de prueba usando los principios que se han expuesto anteriormente para permitir que la persona promedio muestree y someta a prueba su sangre para determinar la concentración de glucosa en cualquier instante dado. Because it can be very important to know the concentration of glucose in blood, particularly in people with diabetes, there have been developed test meters using the principles discussed above to enable the average person to sample, and test their blood to determine the glucose concentration at any given instant. La corriente de glucosa generada se supervisa por el medidor de prueba y se convierte en una lectura de la concentración de glucosa usando un algoritmo que relaciona la corriente de prueba con una concentración de glucosa a través de una fórmula matemática simple. The glucose current generated is monitored by the test meter and converted into a reading of glucose concentration using an algorithm that relates current test with a glucose concentration via a simple mathematical formula. En general, los medidores de prueba trabajan en conjunción con una tira de prueba desechable que incluye una cámara de recepción de muestras y al menos dos electrodos que se disponen en el interior de la cámara de recepción de muestras además de la enzima (por ejemplo, glucosa oxidasa) y el mediador (por ejemplo, ferricianuro). In general, the test meters work in conjunction with a strip of disposable test including a receiving chamber samples and at least two electrodes which are disposed inside the receiving chamber of samples in addition to the enzyme (e.g., oxidase) and mediator glucose (eg, ferricyanide). Durante su uso, el usuario pincha su dedo u otro lugar conveniente para inducir un sangrado e introduce una muestra de sangre en la cámara de recepción de muestras, iniciando de este modo la reacción química que se ha expuesto anteriormente. In use, the user pricks his finger or other convenient site to induce bleeding and introduces a blood sample in the sample receiving chamber, thereby initiating the chemical reaction discussed above.

En términos electroquímicos, la función del medidor es doble. In electrochemical terms, the function of the meter is twofold. En primer lugar, proporciona un voltaje de polarización (de aproximadamente 0,4 V en el caso de OneTouch® Ultra®) que polariza la superficie de contacto eléctrica y permite el flujo de corriente en el electrodo de carbono de la superficie de trabajo. First, it provides a polarizing voltage (approximately 0.4 V in the case of OneTouch ® Ultra ®) that polarizes the electrical contact surface and allows current flow at the carbon electrode work surface. En segundo lugar, mide la corriente que fluye en el circuito externo entre el ánodo (el electrodo de trabajo) y el cátodo (el electrodo de referencia). Secondly, it is measuring the current flowing in the external circuit between the anode (working electrode) and the cathode (reference electrode). Puede, por lo tanto, considerarse que el medidor de prueba es un sistema electroquímico simple que funciona en un modo de dos electrodos a pesar de que, en la práctica, pueden usarse unos electrodos tercero e incluso cuarto para facilitar la medición de la glucosa y/o realizar otras funciones en el medidor. You can, therefore, considered that the test meter is a simple electrochemical system that operates in a mode of two electrodes even though, in practice, a third electrode can be used and even room to facilitate measurement of glucose and / or perform other functions on the meter.

En la mayoría de las situaciones, se considera que la ecuación que se ha expuesto anteriormente es una aproximación suficiente de la reacción química que tiene lugar en la tira de prueba y que el medidor de prueba emite In most situations, it is considered that the equation discussed above is a sufficient approximation of the chemical reaction that takes place in the test strip and the test meter emits

como salida una representación suficientemente precisa del contenido de glucosa de la muestra de sangre. outputting a sufficiently accurate representation of the glucose content of the blood sample. No obstante, en ciertas circunstancias y para ciertos fines, puede ser ventajoso mejorar la precisión de la medición. However, in certain circumstances and for certain purposes, it may be advantageous to improve the measurement accuracy. Por ejemplo, unas muestras de sangre que tienen un alto nivel de hematocrito o bajo nivel de hematocrito pueden dar lugar a que una medición de glucosa sea poco precisa. For example, blood samples having high hematocrit level or low hematocrit level may result in a glucose measurement is inaccurate.

Un nivel de hematocrito representa un porcentaje del volumen de una muestra de sangre completa ocupada por glóbulos rojos. A hematocrit level represents a percentage of the volume of a whole blood sample occupied by red blood cells. El nivel de hematocrito puede también representarse como una fracción de glóbulos rojos presente en una muestra de sangre completa. Hematocrit level can also be represented as a fraction of red blood cells present in a whole blood sample. En general, una muestra de sangre con contenido en hematocrito alto es más viscosa (hasta aproximadamente 10 centipoise a un 70 % de hematocrito) que una muestra de sangre con contenido en hematocrito bajo (aproximadamente 3 centipoise a un 20 % de hematocrito). In general, a blood sample containing high hematocrit is more viscous (centipoise to about 10 to 70% hematocrit) that a blood sample containing low hematocrit (about 3 centipoise to about 20% hematocrit). Además, una muestra de sangre con contenido en hematocrito alto tiene un contenido en oxígeno más alto que una sangre con contenido en hematocrito bajo debido al aumento concomitante en hemoglobina, que un portador para oxígeno. In addition, a blood sample containing high hematocrit has a higher oxygen content in a blood-containing low hematocrit due to concomitant increase in hemoglobin, a carrier for oxygen. Por lo tanto, el nivel de hematocrito puede influir en la viscosidad y en el contenido en oxígeno de la sangre. Therefore, the hematocrit level can influence the viscosity and oxygen content of the blood. Tal como se describirá posteriormente, tanto la viscosidad como el contenido en oxígeno puede cambiar la magnitud de la corriente de glucosa ya su vez dar lugar a que la concentración de glucosa sea poco precisa. As described below, both the viscosity and the oxygen content can change the magnitude of the glucose current and in turn result in the glucose concentration is inaccurate.

Una muestra de alta viscosidad (es decir, una muestra de sangre con contenido en hematocrito alto) puede dar lugar a que la corriente de prueba disminuya para una variedad de factores tal como una disminución en 1) la velocidad de disolución de la enzima y/o el mediador, 2) la velocidad de reacción de la enzima, y 3) la difusión de un mediador reducido hacia el electrodo de trabajo. A sample of high viscosity (i.e., a blood sample containing high hematocrit) can result in the test current decreases to a variety of factors such as a decrease in 1) the rate of dissolution of the enzyme and / or mediator, 2) the reaction rate of the enzyme, and 3) a reduced diffusion to the working electrode mediator. Una disminución en la corriente que no esté basada en una disminución en la concentración de glucosa puede potencialmente dar lugar a que se mida una concentración de glucosa poco precisa. A decrease in the current that is not based on a decrease in the glucose concentration can potentially result in a glucose concentration is measured inaccurately.

Una velocidad de disolución más lenta de la capa de reactivo puede ralentizar la reacción enzimática tal como se muestra en las ecuaciones 1 y 2 debido a que la enzima oxidada GO(ox) debe de disolverse en primer lugar antes de que ésta pueda reaccionar con la glucosa. A slower dissolution of the reagent layer can slow down the enzymatic reaction as shown in equations 1 and 2 because oxidised enzyme GO (OX) must be dissolved first before it can react with the glucose. De forma similar, el ferricianuro (Fe(CN)6 3–) debe de disolverse en primer lugar antes de que éste pueda reaccionar con la enzima reducida GO(red). Similarly, ferricyanide (Fe (CN) 6 3-) must first be dissolved before it can react with the reduced enzyme GO (red). Si la enzima oxidada GO(ox) no disuelta no puede oxidar la glucosa, entonces la enzima reducida GO(red) no puede producir el mediador reducido Fe(CN)6 4– que es necesario para generar la corriente de prueba. If oxidised enzyme GO (OX) undissolved can not oxidize glucose, then the reduced enzyme GO (red) can not produce the reduced mediator Fe (CN) 6 4- is necessary to generate the test current. Además, la enzima oxidada GO(ox) reaccionará con la glucosa y el mediador oxidado Fe (CN)6 3– más lentamente si ésta se encuentra en una muestra de alta viscosidad como opuesto a una muestra de baja viscosidad. Furthermore, oxidised enzyme GO (OX) react with glucose and oxidized mediator Fe (CN) 6 3- more slowly if it is in a sample of high viscosity as opposed to a sample of low viscosity. La más lenta velocidad de reacción con las muestras de alta viscosidad se atribuye a una disminución global en la difusión de masa. The slower reaction rate with high viscosity samples is attributed to an overall reduction in mass diffusion. Tanto la enzima oxidada GO(ox) como la glucosa deben chocar e interaccionar entre sí para que la reacción tenga lugar tal como se muestra en la ecuación 1. La capacidad de la enzima oxidada GO(ox) y glucosa para chocar e interactuar entre sí se ralentiza cuando éstas se encuentran una muestra viscosa. Both oxidised enzyme GO (OX) as glucose must collide and interact with each other so that the reaction takes place as shown in Equation 1. The ability of the oxidized enzyme GO (OX) and glucose to collide and interact with each other It slows down when they found a viscous sample. Aún más, el mediador reducido Fe(CN)6 4– se difundirá al electrodo de trabajo más lentamente cuando se disuelve en una muestra de alta viscosidad. Furthermore, the reduced Fe (CN) 6 4- mediator to diffuse slower work electrode when dissolved in a sample of high viscosity. Debido a que la corriente de prueba se limita típicamente por la difusión del mediador reducido Fe(CN)6 4– en el electrodo de trabajo, una muestra de alta viscosidad atenuará también la corriente de prueba. Because the test current is typically limited by the diffusion of reduced mediator Fe (CN) 6 4- in the working electrode, a sample of high viscosity also attenuate the test current. En resumen, hay varios factores que dan lugar a que la corriente de prueba disminuya cuando la muestra tiene una viscosidad aumentada. In short, there are several factors leading to the test current to decrease when the sample has an increased viscosity.

Un alto contenido en oxígeno puede también dar lugar a una disminución en la corriente de prueba. A high oxygen content can also lead to a decrease in the test current. La enzima reducida (GO(red)) puede reducir el oxígeno (O2) a peróxido de hidrógeno tal como se muestra en la ecuación 3. The reduced enzyme (GO (red)) can reduce oxygen (O2) to hydrogen peroxide as shown in Equation 3.

GO(red) + O2 � GO(ox) + H2O2 (3) GO (red) + O2 GO (ox) + H2O2 (3)

Tal como se indica anteriormente, la enzima reducida GO(red) puede reducir a ferrocianuro (Fe (CN)6 4–) también el ferricianuro (Fe(CN)6 3-) tal como se muestra en la ecuación 2. Por lo tanto, el oxígeno puede competir con el ferricianuro para reaccionar con la enzima reducida (GO(red)). As indicated above, the reduced enzyme GO (red) can be reduced to ferrocyanide (Fe (CN) 6 4-) also ferricyanide (Fe (CN) 6 3-) as shown in equation 2. Therefore oxygen can compete with ferricyanide to react with the reduced enzyme (GO (red)). En otras palabras, la aparición de la reacción en la ecuación 3 dará lugar probablemente a una disminución en la velocidad de la reacción en la ecuación 2. Debido a una competición de este tipo entre el ferricianuro y el oxígeno, un contenido en oxígeno más alto dará lugar a que se produzca menos ferrocianuro. In other words, the appearance of the reaction in Equation 3 will likely result in a decrease in the rate of reaction in equation 2. Because a competition of this type between ferricyanide and oxygen, an oxygen content higher will result to occur less ferrocyanide. A su vez, una disminución en ferrocianuro daría lugar a una disminución en la magnitud de la corriente de prueba. In turn, a decrease in ferrocyanide would result in a decrease in the magnitude of the test current. Por lo tanto, un alto contenido en oxígeno muestra de sangre puede disminuir potencialmente la corriente de prueba y afectar a la precisión de la medición de glucosa. Therefore, a high oxygen content blood sample can potentially decrease the test current and affect the accuracy of glucose measurement.

Como tal, los solicitantes de la presente invención tienen un gran interés en el desarrollo de procedimientos que reduzcan los efectos del hematocrito en una medición de glucosa. As such, applicants of the present invention have a strong interest in the development of procedures that reduce the effects of hematocrit in a glucose measurement. En ciertos protocolos, una membrana de filtrado de sangre colada previamente que está separada de la capa de reactivo se ha empleado para eliminar glóbulos rojos y reducir de ese modo el efecto del hematocrito. In certain protocols, filtering membrane blood previously casting is separated from the reagent layer is used to remove red blood cells and thereby reduce the hematocrit effect. La membrana de filtrado de sangre colada previamente que está separada de la capa de reactivo puede disponerse en el electrodo de trabajo. The filtering membrane casting blood previously which is separated from the reagent layer can be disposed on the working electrode. El uso de una membrana de filtrado de sangre colada previamente discreta es poco satisfactorio en que éste requiere una tira de prueba más compleja, un volumen de muestra aumentado, y un tiempo de prueba aumentado. The use of a membrane filter previously casting discrete blood is unsatisfactory in that it requires a more complex test strip, increased sample volume, and test time increased. La membrana de filtrado de sangre retiene una cierta cantidad de sangre que no entra en contacto con los electrodos de trabajo lo que da lugar a una necesidad de una muestra de sangre más grande. The blood filtering membrane retains a certain amount of blood does not contact with the working electrodes which results in a need for larger sample blood. Además, se necesita una cantidad finita de tiempo para que la sangre se filtre por la membrana dando lugar a un aumento en los tiempos de prueba globales. In addition, a finite amount of time it takes for blood to seep through the membrane leading to an increase in overall test times. Por lo tanto, los solicitantes de la presente invención reconocen que sería ventajoso reducir los efectos del hematocrito sin usar una membrana de filtrado de sangre colada previamente que está separada de la capa de reactivo. Therefore, applicants of the present invention recognize that it would be advantageous to reduce the effects of hematocrit without using a filtering membrane casting blood previously which is separated from the reagent layer.

En la técnica anterior, el efecto del hematocrito puede reducirse aplicando múltiples voltajes de prueba tales como, por ejemplo, un voltaje de prueba sinusoidal. In the prior art, the hematocrit effect may be reduced by applying multiple test voltages such as, for example, a sinusoidal test voltage. No obstante, aplicar un voltaje de prueba sinusoidal da como resultado un medidor de prueba más complejo y costoso. However, applying a voltage sinusoidal test results in a more complex and expensive test meter. Además, el medidor de prueba necesita medir la corriente de pruebas de forma precisa y exacta en unos intervalos de tiempo predeterminados. In addition, the test meter to measure the current needs test precisely and accurately at predetermined time intervals. Los componentes electrónicos pueden ser costosos y complicados para que un medidor de prueba aplique de forma precisa y exacta múltiples voltajes de prueba. Electronic components can be expensive and complicated to apply a test meter precisely and accurately multiple test voltages.

Los solicitantes de la presente invención observaron que sería ventajoso implementar un sistema que tuviera un medidor de prueba que aplicara sólo un voltaje de prueba y una tira de prueba que no usara una membrana colada previamente para reducir los efectos del hematocrito. Applicants of the present invention found that it would be advantageous to implement a system to have a test meter which only apply a test voltage and a test strip which did not use a cast membrane previously to reduce the effects of hematocrit. El sistema usa en su lugar una tira de prueba que tiene un electrodo de trabajo con una pluralidad de microelectrodos formados sobre la misma. The system uses instead a test strip having a working electrode with a plurality of microelectrodes formed thereon. Más en particular, los solicitantes de la presente invención reconocen que sería ventajoso desarrollar un algoritmo que procesara matemáticamente la corriente de prueba recogida usando un voltaje de prueba de tal modo que puede determinarse una concentración precisa de glucosa que reduce los efectos del hematocrito. More particularly, applicants of the present invention recognize that it would be advantageous to develop an algorithm that mathematically process the test current collected using a test voltage can be determined such that a precise concentration of glucose which reduces the effects of hematocrit.

Adicionalmente, los solicitantes de la presente invención han determinado que sería beneficioso proporcionar un mecanismo mediante el que el medidor de prueba puede diferenciar entre un fluido corporal, por ejemplo sangre completa, y una disolución de control. Additionally, applicants of the present invention have determined that it would be beneficial to provide a mechanism by which the test meter can distinguish between a body fluid, such as whole blood and a control solution. De forma similar, sería beneficioso proporcionar un procedimiento mediante el que un medidor de prueba puede determinar si una tira de prueba incluye una pluralidad de microelectrodos formados en un electrodo de trabajo. Similarly, it would be beneficial to provide a method by which a test meter can determine whether a test strip includes a plurality of microelectrodes formed on a working electrode.

Sumario de la invención SUMMARY OF THE INVENTION

En un aspecto, se proporciona un procedimiento para determinar una concentración de glucosa corregida con hematocrito. In one aspect, a method is provided for determining a corrected glucose concentration hematocrit. El procedimiento a modo de ejemplo incluye proporcionar una tira de prueba que tiene un electrodo de referencia y un electrodo de trabajo, en la que el electrodo de trabajo incluye una pluralidad de microelectrodos y se recubre con al menos una enzima y un mediador. The exemplary method includes providing a test strip having a reference electrode and a working electrode, wherein the working electrode includes a plurality of microelectrodes and coated with at least one enzyme and a mediator. El procedimiento puede llevarse a cabo: proporcionando una tira de prueba que comprende un electrodo de referencia y un electrodo de trabajo formado con una pluralidad de microelectrodos y recubierto con una capa de reactivo; The procedure may be performed: providing a test strip comprising a reference electrode and a working electrode formed with a plurality of microelectrodes and coated with a reagent layer; aplicando una muestra de fluido a la tira de prueba durante un periodo de reacción; applying a fluid sample to the test strip during a reaction; aplicando un voltaje de prueba entre el electrodo de referencia y el electrodo de trabajo; applying a test voltage between the reference electrode and the working electrode; midiendo una corriente de prueba como una función del tiempo; measuring a test current as a function of time; midiendo un valor de corriente de estado estacionario cuando la corriente de prueba ha alcanzado un equilibrio; measuring a value of steady state current when the test current has reached equilibrium; calculando una proporción de la corriente de prueba con respecto al valor de corriente de estado estacionario; calculating a ratio of the test current from the value of steady state current; trazando la proporción de la corriente de prueba con respecto al valor de corriente de estado estacionario como una función de la inversa de la raíz cuadrada del tiempo; plotting the ratio of the test current from the value of steady state current as a function of the inverse of the square root of time; calculando un coeficiente de difusión efectiva a partir de la pendiente de la representación gráfica de regresión lineal de la proporción de la corriente de prueba con respecto al valor de corriente de estado estacionario como una función de la inversa de la raíz cuadrada del tiempo; calculating an effective diffusion coefficient from the slope of the linear regression plot of the ratio of the test current from the value of steady state current as a function of the inverse of the square root of time; y calculando una concentración corregida con hematocrito del analito. and calculating a hematocrit-corrected analyte concentration.

En otro aspecto de la presente invención, el procedimiento a modo de ejemplo incluye además unas etapas para distinguir entre un fluido corporal y una disolución de control. In another aspect of the present invention, the exemplary method further includes steps for differentiating between a body fluid and a control solution. El procedimiento incluye comparar el valor calculado del coeficiente de difusión efectiva con respecto a un intervalo de aceptación para o bien un fluido corporal o bien una disolución de control, dependiendo de la muestra aplicada a la tira de prueba. The method includes comparing the calculated value of the effective diffusion coefficient with respect to an acceptance range for either a body fluid or a control solution, depending on the sample applied to the test strip. Si el valor calculado no se encuentra dentro del intervalo de aceptación para el fluido corporal o la disolución de control, el medidor de prueba no permitirá que el usuario proceda con las pruebas y visualizará un mensaje de error adecuado. If the calculated value is not within the acceptance range for body fluid or control solution, the test meter does not allow the user to proceed with the test and displays an appropriate error message.

En otro aspecto, se proporciona un procedimiento de determinación un tipo de muestra de fluido aplicada a la tira de prueba. In another aspect, a method of determining a type of fluid sample applied to the test strip is provided. El procedimiento puede llevarse a cabo: proporcionando una tira de prueba que tiene un electrodo de referencia y un electrodo de trabajo, en la que el electrodo de trabajo se forma con una pluralidad de microelectrodos y se recubre con una capa de reactivo; The procedure may be performed: providing a test strip having a reference electrode and a working electrode, wherein the working electrode is formed with a plurality of microelectrodes and coated with a reagent layer; aplicando una muestra de fluido a la tira de prueba durante un periodo de reacción; applying a fluid sample to the test strip during a reaction; aplicando un voltaje de prueba entre el electrodo de referencia y el electrodo de trabajo; applying a test voltage between the reference electrode and the working electrode; midiendo una corriente de prueba como una función del tiempo; measuring a test current as a function of time; midiendo un valor de corriente de estado estacionario cuando la corriente de prueba ha alcanzado un equilibrio; measuring a value of steady state current when the test current has reached equilibrium; calculando una proporción de la corriente de prueba con respecto al valor de corriente de estado estacionario; calculating a ratio of the test current from the value of steady state current; trazando la proporción de la corriente de prueba con respecto al valor de corriente de estado estacionario como una función de la inversa de la raíz cuadrada del tiempo; plotting the ratio of the test current from the value of steady state current as a function of the inverse of the square root of time; calculando un coeficiente de difusión efectiva a partir de la pendiente de la representación gráfica de regresión lineal de la proporción de la corriente de prueba con respecto al valor de corriente de estado estacionario como una función de la inversa de la raíz cuadrada del tiempo; calculating an effective diffusion coefficient from the slope of the linear regression plot of the ratio of the test current from the value of steady state current as a function of the inverse of the square root of time; determinando un tipo de una muestra de fluido aplicada a la tira de prueba comparando un valor medido para el coeficiente de difusión efectiva frente a un intervalo de aceptación para un fluido corporal y una disolución de control; determining a type of a fluid sample applied to the test strip by comparing a measured value for the effective diffusion coefficient against an acceptance range for a body fluid and a control solution value; y visualizando un mensaje de error adecuado si el coeficiente de difusión efectiva no pasa el intervalo de aceptación para el tipo de muestra de fluido aplicada a la tira de prueba. and displaying a proper error message if the effective diffusion coefficient fails the acceptance range for the type of fluid sample applied to the test strip.

En aún otro aspecto de la presente invención, el procedimiento a modo de ejemplo incluye además unas etapas para determinar si una tira de prueba incluye una disposición de microelectrodos. In yet another aspect of the present invention, the exemplary method further includes steps to determine if a test strip includes a microelectrode array. El procedimiento incluye usar el coeficiente de difusión efectiva para calcular un coeficiente de difusión efectiva corregido en temperatura. The method includes using effective diffusion coefficient to calculate a corrected effective diffusion coefficient in temperature. El valor calculado para el coeficiente de difusión efectiva corregido en temperatura se compara a continuación con un intervalo de aceptación para una tira de prueba que incluye una pluralidad de microelectrodos. The calculated value for the effective diffusion coefficient temperature-corrected value is then compared with an acceptance range for a test strip that includes a plurality of microelectrodes. Si el valor calculado se encuentra dentro del intervalo de aceptación para las tiras de prueba que tienen una pluralidad de microelectrodos, el usuario puede proceder con las pruebas. If the calculated value is within the acceptance range for test strips having a plurality of microelectrodes, the user can proceed with testing. No obstante, si el valor calculado no se encuentra dentro del intervalo de aceptación para las tiras de prueba que tienen una pluralidad de microelectrodos, un mensaje de error adecuado se visualiza en el medidor de prueba y el medidor de prueba no permitirá que el usuario proceda con las pruebas. However, if the calculated value is not within the acceptance range for test strips having a plurality of microelectrodes an appropriate error message is displayed on the meter test and the test meter will not allow the user to proceed with evidence.

Breve descripción de los dibujos BRIEF DESCRIPTION OF THE DRAWINGS

Una mejor comprensión de las características y ventajas de la presente invención se obtendrá por referencia a la siguiente descripción detallada que expone unas realizaciones ilustrativas, en las que se utilizan los principios de la invención, y los dibujos adjuntos de los que: A better understanding of the features and advantages of the present invention will be obtained by reference to the following detailed description that sets forth illustrative embodiments, in which the principles of the invention are utilized, and the accompanying drawings of which:

La figura 1 es una vista en perspectiva en despiece ordenado desde arriba de una tira de prueba sin montar de acuerdo con una realización a modo de ejemplo de la presente invención; Figure 1 is a perspective exploded top view of a test strip unassembled according to an embodiment exemplary of the present invention;

La figura 2 es una vista desde arriba de la tira de prueba tal como se muestra en la figura 1 después de que ésta se ha montado; Figure 2 is a top view of the test strip as shown in Figure 1 after it has been mounted;

Las figuras 3 a 7 son unas vistas desde arriba de una parte distal de una tira de prueba montada parcialmente de acuerdo con unas realizaciones a modo de ejemplo de la presente invención; Figures 3 to 7 are top views of a distal portion of a test strip partially assembled according to embodiments exemplary of the present invention;

La figura 8 es una vista en sección transversal de la tira de prueba que se muestra en la figura 3 a través de una disposición de microelectrodos en un primer electrodo de trabajo de acuerdo con una realización a modo de ejemplo; Figure 8 is a cross-sectional view of the test strip shown in Figure 3 through a microelectrode array in a first working electrode according to an exemplary embodiment;

La figura 9 es una vista en sección transversal a través de una disposición de microelectrodos en un primer electrodo de trabajo de la figura 3 con unas capas adicionales recubiertas sobre una parte de aislamiento que incluye una capa de reactivo, unas almohadillas de adhesivo, y una parte hidrófila. Figure 9 is a cross section through a microelectrode array in a first working electrode of Figure 3 with further layers coated on a portion of insulation which includes a reagent layer, pads of adhesive, and hydrophilic part. La capa de reactivo se dispone en el lado distal de la parte hidrófila de acuerdo con una realización a modo de ejemplo; The reagent layer is disposed on the distal side of the hydrophilic part according to an exemplary embodiment;

La figura 10 es una vista en sección transversal a través de una disposición de microelectrodos en un primer electrodo de trabajo de la figura 3 con unas capas adicionales recubiertas sobre una parte de aislamiento que incluye una capa de reactivo, unas almohadillas de adhesivo, y una parte hidrófila. Figure 10 is a cross section through a microelectrode array in a first working electrode of Figure 3 with further layers coated on a portion of insulation which includes a reagent layer, pads of adhesive, and hydrophilic part. La capa de reactivo se dispone por encima de la parte de aislamiento de acuerdo con una realización a modo de ejemplo; The reagent layer is disposed above the insulation part according to an exemplary embodiment;

La figura 11 es una vista desde arriba cercana de la pluralidad de microelectrodos en el primer electrodo de trabajo de la tira de prueba que se muestra en la figura 3 de acuerdo con una realización a modo de ejemplo; Figure 11 is a top view near the plurality of microelectrodes in the first working electrode of the test strip shown in Figure 3 according to an exemplary embodiment;

Lla figura 12 es una vista desde arriba de un medidor de prueba conectado a la tira de prueba de las figuras 1 y 2; Tthe 12 is a top view of a test meter connected to the test strip of Figures 1 and 2;

La figura 13 es una vista esquemática simplificada del medidor de prueba de la figura 12 formando una conexión eléctrica con la tira de prueba de las figuras 1 y 2; Figure 13 is a simplified schematic view of the test meter of Figure 12 forming an electrical connection with the test strip of Figures 1 and 2;

Llas figuras 14 y 15 son unas representaciones gráficas de un voltaje de prueba aplicado a un electrodo de trabajo de una tira de prueba de acuerdo con los procedimientos de la presente invención; Tthe Figures 14 and 15 are graphical representations of a test voltage applied to a working electrode of a test strip according to the methods of the present invention;

La figura 16 es una representación gráfica de una corriente como una función del tiempo (es decir, un transitorio de corriente–tiempo) para una muestra de fluido que se genera mediante un procedimiento; Figure 16 is a graphical representation of a current as a function of time (ie, a transient current-time) for a sample fluid is generated by a process;

La figura 17 es una representación gráfica de Figure 17 is a graphical representation of

como una función de as a function of

que se genera mediante un procedimiento; It generated by a process;

La figura 18 es un diagrama de flujo que ilustra una secuencia de etapas en un procedimiento para determinar una concentración de analito corregida con hematocrito de la que informa un medidor de prueba de acuerdo con una realización a modo de ejemplo; 18 is a flowchart illustrating a sequence of steps in a method for determining an analyte concentration corrected with hematocrit of reporting a test meter according to an embodiment example;

Lla figura 19 es un diagrama de flujo que ilustra una secuencia de etapas en un procedimiento para determinar si un fluido corporal o una disolución de control se ha añadido a una tira de prueba de acuerdo con una realización a modo de ejemplo; Tthe 19 is a flowchart illustrating a sequence of steps in a method for determining whether a body fluid or a control solution was added to a test strip according to an exemplary embodiment;

La figura 20 es un diagrama de flujo que ilustra una secuencia de etapas en un procedimiento para determinar si una tira de prueba incluye una disposición de microelectrodos de acuerdo con una realización a modo de ejemplo; 20 is a flowchart illustrating a sequence of steps in a method for determining whether a test strip includes a microelectrode array according to an exemplary embodiment;

La figura 21 es una representación gráfica que ilustra unos datos simulados que se usan para diferenciar entre una tira de prueba que incluye una disposición de microelectrodos y una tira de prueba que no incluye una disposición de microelectrodos, en la que la representación gráfica se genera mediante un procedimiento; Figure 21 is a graph illustrating a simulated data used to differentiate between a test strip that includes an array of microelectrodes and a test strip that does not include a microelectrode array, wherein the graphical representation is generated by A procedure; y Y

Las figuras 22 y 23 son unas vistas en perspectiva y lateral, respectivamente, de un dispositivo médico que es adecuado para su uso en la presente invención. Figures 22 and 23 are perspective views and side views, respectively, of a medical device which is suitable for use in the present invention.

Descripción detallada de las realizaciones a modo de ejemplo Detailed description of exemplary embodiments

La divulgación a continuación describe la medición de una concentración de glucosa en una muestra de sangre completa; The disclosure below describes the measurement of a glucose concentration in a whole blood sample; no obstante, el experto reconocerá que la descripción se adapta fácilmente para medir las propiedades de otros analitos, tales como colesterol, cuerpos cetónicos o alcohol, ya otros fluidos tales como saliva, orina, fluido intersticial, o disoluciones de control de la tira de prueba. however, the artisan will recognize that and other fluids such as saliva, urine, interstitial fluid, or control solutions test strip description is easily adapted to measure properties of other analytes, such as cholesterol, ketone bodies or alcohol, .

Ha de entenderse adicionalmente que la presente invención no se limita sólo a la corrección de hematocrito y puede ser también aplicarse para la corrección del efecto de una viscosidad o un contenido en oxígeno variables en las muestras de fluido. It is to be further understood that the present invention is not limited to the correction of hematocrit and may be also applied to correct the effect of a viscosity or an oxygen content varying in the fluid samples. Por ejemplo, las muestras de sangre completan pueden tener una alta viscosidad para una variedad de otras razones además de alto hematocrito lo que incluye una temperatura baja (por ejemplo, de aproximadamente 10 ºC), una concentración de lípidos alta, y/o una concentración de proteínas alta. For example, blood samples round may have a high viscosity for a variety of reasons other than high hematocrit including a low temperature (e.g., about 10 ° C), a concentration of high lipid, and / or a concentration high protein.

Se entenderá aún más que la invención sería también aplicable para reducir los efectos a lo que da lugar el oxígeno y/o la viscosidad de los fluidos fisiológicos diferentes de la sangre. It is further understood that the invention would also be applicable to reduce the effects resulting oxygen and / or viscosity of the different physiological fluids blood. Por ejemplo, los fluidos fisiológicos pueden también incluir plasma, suero, fluido intersticial, y una combinación de los mismos. For example, physiological fluids may also include plasma, serum, interstitial fluid, and a combination thereof. Ha de observarse que no es infrecuente que las muestras de fluido intersticial extraídas estén parcialmente mezcladas con sangre. It is noted that it is not uncommon for interstitial fluid extracted samples are partially mixed with blood.

Las secciones describirán una realización de tira de prueba que puede usarse con un algoritmo de acuerdo con una realización para calcular una concentración de glucosa corregida con hematocrito. The sections will describe an embodiment of test strip that can be used with an algorithm according to an embodiment to calculate a corrected glucose concentration hematocrit. La figura 1 es una vista en perspectiva en despiece ordenado de una tira 100 de prueba, que incluye múltiples capas que se disponen sobre un sustrato 5. Estas capas pueden incluir una capa 50 conductora, una capa 16 de aislamiento, una capa 22 de reactivo, una capa 60 de adhesivo, una capa 70 hidrófila, y una capa 80 de arriba. Figure 1 is a perspective view of test strip 100, which includes multiple layers that are arranged on a substrate 5. These layers may include a layer 50 conductive layer 16 insulation, a reagent layer 22 Exploded a layer 60 of adhesive, a layer 70 hydrophilic, and a layer 80 above. La tira 100 de prueba puede manufacturarse en una serie de etapas en las que la capa 50 conductora, la capa 16 de aislamiento, la capa 22 de reactivo y la capa 60 de adhesivo se depositan de forma secuencial sobre el sustrato 5 usando, por ejemplo, un proceso de serigrafía tal como se describe en la publicación anterior a la concesión de los Estados Unidos con no US20050096409A1 y las solicitudes internacionales publicadas con n.os WO2004040948A1, WO2004040290A1, WO2004040287A1, WO2004040285A2, WO2004040005A1, WO2004039897A2, y WO2004039600A2. The test strip 100 can be manufactured in a series of stages in which the layer 50 conductive layer 16 insulation, reagent layer 22 and the layer 60 of adhesive are deposited sequentially on the substrate 5 using, for example , a screen printing process as described in the above publication to the grant of the United States with no US20050096409A1 and international applications published under Nos WO2004040948A1, WO2004040290A1, WO2004040287A1, WO2004040285A2, WO2004040005A1, WO2004039897A2, and WO2004039600A2. En una realización alternativa, un proceso de inyección de tinta puede usarse para depositar una capa 22 de reactivo sobre el sustrato 5. Un ejemplo de un proceso de inyección de tinta se describe en la patente de los Estados Unidos con In an alternative embodiment, an inkjet process can be used for depositing a reagent layer 22 on substrate 5. An example of an inkjet process is described in patent US with

no 6.179.979. no 6,179,979. La capa 70 hidrófila y la capa 80 de arriba pueden disponerse a partir de un material en rollo y laminarse sobre el sustrato 5. La tira 100 de prueba también incluye una parte 3 distal y una parte 4 proximal tal como se muestra en las figuras 1 y 2. The layer 70 hydrophilic and the layer 80 above may be provided from a rollstock and laminated on the substrate 5. The test strip 100 also includes a portion 3 distal and proximal portion 4 as shown in Figures 1 and 2.

La tira 100 de prueba montada completamente, tal como se muestra en la figura 2, incluye una entrada 82 a través de la que una muestra de sangre puede introducirse en una cámara 84 de recepción de muestras. The test strip 100 mounted completely, as shown in Figure 2, it includes an inlet 82 through which a blood sample can be introduced into a receiving chamber 84 samples. La entrada 82 puede formarse cortando a través de una parte 3 distal de la tira 100 de prueba. The inlet 82 may be formed by cutting through a distal portion 3 of test strip 100. Una muestra 94 de sangre puede aplicarse a la entrada 82 para rellenar una cámara 84 de recepción de muestras de tal modo que la glucosa puede medirse, tal como se muestra en la figura 12. Cada uno de los bordes laterales de una primera almohadilla 24 de adhesivo y de una segunda almohadilla 26 de adhesivo que se encuentran adyacentes a la capa 22 de reactivo define una pared de la cámara 84 de recepción de muestras. A sample 94 of blood can be applied to inlet 82 to fill a chamber 84 for receiving samples so that glucose can be measured, as shown in Figure 12. Each of the side edges of a first pad 24 adhesive and a second adhesive pad 26 that are adjacent to the reagent layer 22 defines a chamber wall 84 for samples. Una parte de abajo o “piso” de la cámara 84 de recepción de muestras incluye una parte 5 de sustrato, la capa 50 conductora, y la capa 16 de aislamiento. A bottom or "floor" of the receiving chamber 84 includes a sample substrate portion 5, the conductive layer 50 and insulating layer 16. Una parte de arriba o “techo” de la cámara 84 de recepción de muestras incluye una parte 32 hidrófila distal. A top or "roof" of the chamber 84 includes a sample receiving portion 32 distal hydrophilic.

Para la tira 100 de prueba, tal como se muestra en la figura 1, la capa 50 conductora incluye un electrodo 10 de referencia, un primer electrodo 12 de trabajo, un segundo electrodo 14 de trabajo, un primer contacto 13, un segundo contacto 15, un contacto 11 de referencia, y una barra 17 de detección de tira. For test strip 100, as shown in Figure 1, the 50 conductive layer includes a reference electrode 10, first working electrode 12, a second electrode 14 work, a first contact 13, second contact 15 a reference contact 11, and a rod 17 sensing strip. Los materiales adecuados que pueden usarse para la capa conductora son Au, Pd, Ir, Pt, Rh, acero inoxidable, óxido de estaño dopado, carbono, y similares. Suitable materials that can be used for the conductive layer are Au, Pd, Ir, Pt, Rh, stainless steel, doped tin oxide, carbon, and the like. En una realización, el material para la capa conductora puede ser una tinta de carbono tal como las que se describen en la patente de los Estados Unidos 5.653.918. In one embodiment, the material for the conductive layer may be a carbon ink such as those described in patent US 5,653,918. En otra realización, el material para la capa conductora puede ser un metal metalizado por bombardeo iónico tal como oro o paladio. In another embodiment, the material for the conductive layer may be metallized by sputtering metal such as gold or palladium. Un patrón de ablación por láser puede formarse en la capa de metal metalizada por bombardeo iónico para formar una pluralidad de electrodos. A laser ablation pattern can be formed in the metal layer metallized by sputtering to form a plurality of electrodes.

Para la tira 100 de prueba, la capa 16 de aislamiento incluye una primera abertura 18 que expone una parte del electrodo 10 de referencia, unos orificios 20 que exponen una parte del primer electrodo 12 de trabajo, y una segunda abertura 21 que expone una parte del segundo electrodo 14 de trabajo. For test strip 100, the layer 16 of insulation includes a first opening 18 that exposes a portion of reference electrode 10, holes 20 that expose a portion of first working electrode 12, and a second opening 21 that exposes a portion the second electrode 14 work. Las partes del electrodo 10 de referencia, el primer electrodo 12 de trabajo y el segundo electrodo 14 de trabajo que se exponen mediante la primera abertura 18, los orificios 20 y la segunda abertura 21, respectivamente, pueden humedecerse mediante una muestra de líquido tal como se muestra en la figura 1. Los orificios 20 en la capa de aislamiento exponen una pluralidad de microelectrodos 120 tal como se describirá con referencia a las figuras 5 a 9. En una realización a modo de ejemplo, la capa 16 de aislamiento es la tinta Ercon E6110–116 Jet Black Insulayer™ que puede adquirirse a través de Ercon, Inc (Waltham, Massachusetts). Parts of the reference electrode 10, first working electrode 12 and second electrode 14 work are exposed through the first opening 18, the holes 20 and the second opening 21, respectively, can be wetted by a liquid sample such as shown in figure 1. the holes 20 in the insulating layer exposed a plurality of microelectrodes 120 as will be described with reference to figures 5 to 9. in one embodiment for example, the isolation layer 16 is the ink Ercon E6110-116 Jet Black Insulayer ™ can be purchased through Ercon, Inc (Waltham, Massachusetts).

La capa 22 de reactivo puede disponerse en una parte de capa 50 conductora, el sustrato 5, y la capa 16 de aislamiento tal como se muestra en la figura 1. En una realización, la capa 22 de reactivo puede incluir una enzima, un mediador que reacciona de forma selectiva con la glucosa y un tampón para mantener un pH deseado. The reagent layer 22 may be disposed on a portion of conductive layer 50, substrate 5, and insulation layer 16 as shown in Figure 1. In one embodiment, the reagent layer 22 can include an enzyme, a mediator which selectively reacts with glucose and a buffer for maintaining a desired pH. Los ejemplos de enzimas adecuados para su uso en la presente invención pueden incluir o bien glucosa oxidasa o bien glucosa deshidrogenasa. Examples of suitable enzymes for use in the present invention may include either glucose oxidase or glucose dehydrogenase. Más específicamente, la glucosa deshidrogenasa puede tener un cofactor pirroloquinolin– quinona (al que puede hacerse referencia abreviada como PQQ oa su nombre común que es metoxatina). More specifically, glucose dehydrogenase may have a pirroloquinolin- quinone cofactor (which can be abbreviated reference as PQQ or its common name is methoxatin). Los ejemplos de un mediador adecuado para su uso en la presente invención pueden incluir o bien ferricianuro o hexamina de rutenio (Rum(NH3)6). Examples of mediator suitable for use in the present invention may include either ferricyanide or hexamine or ruthenium (Rum (NH3) 6). Durante las reacciones tal como se muestra en las ecuaciones 1 y 2, puede generarse una cantidad de mediador reducido proporcional que se mide electroquímicamente para calcular una concentración de glucosa. During the reactions as shown in equations 1 and 2, it can be generated a proportional amount of reduced mediator is electrochemically measured to calculate a glucose concentration. Los ejemplos de tampones adecuados para su uso en la presente invención pueden incluir fosfato, citrato o citraconato. Examples of suitable buffers for use in the present invention may include phosphate, citrate or citraconate. Pueden encontrarse ejemplos de formulaciones de reactivo o de tintas adecuadas para su uso en la presente invención en las patentes de los Estados Unidos 5.708.247 y 6.046.051 y en las solicitudes internacionales publicadas WO01/67099 y WO01/73124. Examples can be found in reagent formulations or suitable for use in the present invention in patents US 5,708,247 and 6,046,051 and published international applications WO01 / 67099 and WO01 / 73124 inks.

En una realización, la formulación puede incluir un tampón fosfato 200 milimolar que tiene un pH de aproximadamente 7 y un mediador de hexamina de rutenio. In one embodiment, the formulation may include a buffer 200 millimolar phosphate having a pH of about 7 and a ruthenium hexamine mediator. El pH de alrededor de 7 se eligió debido a que la glucosa oxidasa tiene una actividad lo suficientemente alta a este pH cuando se usa hexamina de rutenio como un mediador. The pH of around 7 was chosen because glucose oxidase has a sufficiently high activity at this pH when hexamine ruthenium is used as a mediator. En una realización, la formulación puede tener una actividad enzimática que varía desde aproximadamente 1.500 unidades/ml hasta aproximadamente 8.000 unidades/ml. In one embodiment, the formulation may have an enzyme activity ranging from about 1500 units / ml to about 8000 units / ml. El intervalo de actividad enzimática puede seleccionarse de tal modo que la corriente de glucosa no depende del nivel de actividad enzimática en la formulación a condición de que el nivel de actividad enzimática se encuentre dentro del nivel expuesto anteriormente. The enzyme activity range may be selected so that the glucose current does not depend on the level of enzyme activity in the formulation provided that the enzyme activity level is within the level above. La actividad enzimática debería de ser lo suficientemente grande como para asegurar que la corriente de glucosa resultante no estará en función de unas variaciones pequeñas en la actividad enzimática. The enzyme activity should be sufficiently large to ensure that the resulting glucose current will not be a function of small variations in enzyme activity. Por ejemplo, la corriente de glucosa dependerá de la cantidad de actividad enzimática en la formulación si la actividad enzimática es de menos de 1.500 unidades/ml. For example, the glucose current will depend on the amount of enzyme activity in the formulation if the enzyme activity is less than 1500 units / ml. Por otro lado, para unos niveles de actividad enzimática superiores a Furthermore, for higher levels of enzyme activity

8.000 unidades/ml, pueden surgir problemas de solubilidad en los que la glucosa oxidasa no puede disolverse suficientemente en la formulación. 8000 units / ml, solubility issues may arise where the glucose oxidase can not dissolve sufficiently in the formulation. La glucosa oxidasa puede adquirirse comercialmente a través de Biozyme Laboratories International Limited (San Diego, California, los Estados Unidos de América). Glucose oxidase is commercially available through Biozyme Laboratories International Limited (San Diego, California, United States). La glucosa oxidasa puede tener una actividad enzimática de aproximadamente 250 unidades/mg en la que las unidades de actividad enzimática se basan en un ensayo de o–dianisidina con un pH 7 y 25 ºC. The glucose oxidase may have an enzyme activity of about 250 units / mg where the enzyme activity units are based on o-dianisidine assay at pH 7 and 25 ° C.

Opcionalmente, la capa 22 de reactivo incluye un material de matriz que ayuda a retener la capa 22 de reactivo en la superficie de capa 50 conductora en la presencia de la muestra de fluido. Optionally, the reagent layer 22 includes a matrix material that helps retain the reagent layer 22 on the surface of conductive layer 50 in the presence of the fluid sample. Los materiales de matriz útiles incluyen sílice tal como Cab–o–Sil® TS630 o Cab–o–Sil® 530 (Cabot Corporation, Boston, los Estados Unidos de América). Useful matrix materials include silica such as Cab-o-Sil® TS630 or Cab-o-Sil® 530 (Cabot Corporation, Boston, United States of America). A pesar de que no se desea estar limitado por ninguna teoría particular, se cree que la sílice forma una red de gel en la presencia de la muestra que mantiene de forma efectiva el recubrimiento en la superficie del electrodo. Although not wishing to be bound by any particular theory, it is believed that silica forms a gel network in the presence of the sample that effectively maintains the coating on the electrode surface. Otros materiales de matriz útiles incluyen materiales poliméricos tales como polietersulfonas, polímeros de ácidos acrílico y metacrílico; Other useful matrix materials include polymeric materials such as methacrylic polyethersulfones, acrylic acid polymers and; polímeros obtenidos a partir de almidón, celulosa y otros polisacáridos naturales; polymers derived from starch, cellulose and other natural polysaccharides; poliamidas y colágeno. polyamides and collagen. Un ejemplo de una composición de recubrimiento útil se da a conocer en el ejemplo 1 de la patente de los Estados Unidos con número 5.708.247. An example of a useful coating composition is disclosed in Example 1 of the patent US number 5,708,247. La capa 22 de reactivo puede incluir también opcionalmente al menos un agente estabilizante tal como albúmina, sacarosa, trehalosa, manitol o lactosa, un agente tal como hidroxietilcelulosa para ajustar la viscosidad, un agente antiespumante tal como DC1500, y al menos un agente humectante tal como polivinilpirrilidona o acetato de polivinilo. The reagent layer 22 may also optionally include at least one stabilizing agent such as albumin, sucrose, trehalose, mannitol or lactose, an agent such as hydroxyethylcellulose to adjust the viscosity, an antifoam such as DC1500 agent, and at least one wetting agent such as polyvinylpyrrolidone or polyvinyl acetate.

Para la tira 100 de prueba, la capa 60 de adhesivo incluye la primera almohadilla 24 de adhesivo, la segunda almohadilla 26 de adhesivo, y la tercera almohadilla de adhesivo 28 tal como se muestra en la figura 1. En una realización, la capa 60 de adhesivo puede comprender un adhesivo sensible a la presión de copolímero acrílico basado en agua, que se encuentra comercialmente disponible a través de Tape Specialties LTD (Tring, Herts, Reino Unido; parte no A6435). For test strip 100, the layer 60 of adhesive includes the first pad 24 of adhesive, the second pad 26 of adhesive, and the third pad adhesive 28 as shown in Figure 1. In one embodiment, the layer 60 adhesive may comprise a pressure sensitive acrylic copolymer water based, which is commercially available from Tape Specialties through LTD (Tring, Herts, UK, part no A6435) adhesive. La capa 60 de adhesivo se dispone en una parte de la capa 16 de aislamiento, la capa 50 conductora, y el sustrato 5. La capa 60 de adhesivo une la capa 70 hidrófila a la tira 100 de prueba. The adhesive layer 60 is disposed on a portion of insulation layer 16, conductive layer 50, and substrate 5. Adhesive layer 60 binds hydrophilic layer 70 to test strip 100.

La capa 70 hidrófila incluye una parte 32 hidrófila distal y una parte proximal hidrófila 34. Como un ejemplo no limitante, la capa 70 hidrófila es un poliéster que tiene una superficie hidrófila tal como un recubrimiento antivaho que se encuentra comercialmente disponible a través de 3M. Hydrophilic layer 70 includes a distal hydrophilic portion 32 and proximal hydrophilic portion 34. As a non-limiting example, hydrophilic layer 70 is a polyester having one hydrophilic surface such as an anti-fog coating which is commercially available from 3M.

Para la tira 100 de prueba, la capa 80 de arriba incluye una parte transparente 36 y una parte opaca 38 tal como se muestra en la figura 1. La capa 80 de arriba se dispone en y se adhiere a la capa 70 hidrófila. For test strip 100, top layer 80 includes a clear portion 36 and opaque portion 38 as shown in Figure 1. The top layer 80 is disposed on and adhered to hydrophilic layer 70. En una realización, la capa 80 de arriba es un poliéster. In one embodiment, top layer 80 is a polyester. Ha de observarse que la parte transparente 36 se solapa sustancialmente a la parte 32 hidrófila distal lo que permite que un usuario confirme visualmente que la cámara 84 de recepción de muestras se ha llenado suficientemente. It is noted that the clear portion 36 to distal hydrophilic portion 32 which allows a user to visually confirm that the receiving chamber 84 is filled sample substantially overlaps sufficiently. La parte opaca 38 ayuda a que el usuario observe un alto grado de contraste entre un fluido coloreado tal como, por ejemplo, sangre en el interior de la cámara 84 de recepción de muestras y la parte opaca 38 de la capa 80 de arriba. Opaque portion 38 helps the user to observe a high degree of contrast between a colored such as, for example, blood inside chamber 84 and the sample receiving portion 38 of the opaque layer 80 above fluid.

La figura 3 muestra una vista desde arriba simplificada de un montaje parcial de una tira 100 de prueba que incluye un primer electrodo 12 de trabajo en la forma de una disposición 110 de microelectrodos de acuerdo con una realización a modo de ejemplo. Figure 3 shows a simplified top view of a partial assembly of a test strip 100 including a first working electrode 12 in the form of a microelectrode array 110 according to an embodiment example. En general, la disposición 110 de microelectrodos aumentará los efectos de la difusión radial que dan lugar a un aumento en la densidad corriente medida (la corriente por unidad de área del In general, the microelectrode array 110 increase the effects of radial diffusion which lead to an increase in the current density measured (current per unit area

electrodo de trabajo). working electrode). La difusión radial hace referencia al flujo del mediador reducido que se difunde al primer electrodo 106 de trabajo de una forma no perpendicular con respecto a un plano del primer electrodo 106 de trabajo. Radial diffusion refers to the flow of reduced mediator diffusing to the first working electrode 106 in a non-perpendicular with respect to a plane of the first electrode 106 work. Por el contrario, la difusión plana hace referencia al flujo del mediador reducido que se difunde al primer electrodo 106 de trabajo de una forma aproximadamente perpendicular con respecto a un plano del primer electrodo 106 de trabajo. In contrast, the planar diffusion refers to the flow of reduced mediator diffusing to the first electrode 106 working approximately perpendicular with respect to a plane of the first electrode 106 work. Como resultado de la difusión radial aumentada, la aplicación de un voltaje de prueba de limitación para la disposición 110 de microelectrodos puede dar lugar a que una corriente de prueba consiga un valor de estado estacionario distinto de cero que es independiente del tiempo. As a result of the increased radial diffusion, applying a test voltage limitation for the microelectrode array 110 may result in a test current get a steady state value other than zero which is independent of time. Por el contrario, la aplicación de un voltaje de prueba de limitación a uno distinto de un microelectrodo dará como resultado una corriente de prueba que se aproxima a cero a medida que el tiempo prosigue. Conversely, applying a test voltage limitation to other than a microelectrode will result in a test current approaches zero as time continues the. Debido a que el valor de estado estacionario es independiente del tiempo para una disposición 110 de microelectrodos, puede calcularse un coeficiente de difusión efectiva D del mediador en la muestra de sangre. Because the steady state value is independent of time for a microelectrode array 110, it can be calculated effective diffusion coefficient D of the mediator in the blood sample. A su vez, el coeficiente de difusión efectiva D puede usarse como una entrada a un algoritmo para reducir los efectos del hematocrito. In turn, the effective diffusion coefficient D can be used as an input to an algorithm for reducing the effects of hematocrit.

Haciendo referencia de nuevo a la figura 3, una parte 102 distal de la tira 100 de prueba incluye un electrodo 10 de referencia, un primer electrodo 12 de trabajo y un segundo electrodo 14 de trabajo. Referring again to Figure 3, a portion 102 distal of the test strip 100 includes a reference electrode 10, first working electrode 12 and second electrode 14 work. El primer electrodo 10 de trabajo se encuentra en la forma de una disposición 110 de microelectrodos que incluye una pluralidad de microelectrodos The first electrode 10 is working in the form of a microelectrode array 110 including a plurality of microelectrodes

120. 120.

En otra realización que se muestra en la figura 4, una parte 202 distal de una tira 200 de prueba incluye un electrodo 204 de referencia, un primer electrodo 206 de trabajo y un segundo electrodo 208 de trabajo. In another embodiment shown in Figure 4, a distal portion 202 of test strip 200 it includes an electrode 204 reference, a first electrode 206 of working electrode 208 and second working. La tira 200 de prueba se diferencia de la tira 100 de prueba en que un segundo electrodo 208 de trabajo incluye una disposición 210 de microelectrodos con una pluralidad de microelectrodos 220. En aún otra realización que se muestra en la figura 5, tanto un primer electrodo 306 de trabajo como un segundo electrodo 308 de trabajo incluyen una disposición de microelectrodos 310 con una pluralidad de microelectrodos 320. The test strip 200 differs from test strip 100 in which a second electrode 208 includes a working microelectrode arrangement 210 with a plurality of microelectrodes 220. In yet another embodiment shown in Figure 5, both a first electrode 306 work as a second electrode 308 includes a working microelectrode array 310 with a plurality of microelectrodes 320.

Otra realización de una tira 400 de prueba que tiene una disposición 410 de microelectrodos se muestra en la figura Another embodiment of a strip 400 test having an array of microelectrodes 410 shown in Figure

6. Una parte 402 distal de la tira 400 de prueba incluye un electrodo 404 de referencia, un electrodo 406 de trabajo y un electrodo 412 de detector de llenado. 6. A distal portion 402 of test strip 400 includes an electrode 404 reference working electrode 406 and an electrode 412 of fill sensor. El electrodo 406 de trabajo se encuentra en la forma de una disposición 410 de microelectrodos que incluye una pluralidad de microelectrodos 420. La tira 400 de prueba se diferencia de la tira 100 de prueba en que el electrodo 406 de trabajo se encuentra aguas arriba del electrodo 404 de referencia y no incluye un segundo electrodo de trabajo. The electrode 406 is working in the form of a microelectrode arrangement 410 including a plurality of microelectrodes 420. The test strip 400 differs from test strip 100 in the electrode 406 is working upstream electrode 404 reference and does not include a second working electrode. Tal como se muestra en la figura 6, el electrodo 406 de trabajo puede tener opcionalmente al menos el doble del área superficial que el electrodo 404 de referencia. As shown in Figure 6, the electrode 406 work may optionally have at least twice the surface area that the electrode 404 reference.

La figura 7 muestra aún otra realización de una tira 500 de prueba en la que la tira 500 de prueba incluye un electrodo 504 de referencia y un electrodo 506 de trabajo. 7 shows yet another embodiment of a strip 500 of test strip 500 which includes a test electrode 504 and reference electrode 506 work. En la presente realización, el electrodo 504 de referencia y el electrodo 506 de trabajo tienen un área superficial aproximadamente igual. In the present embodiment, the electrode 504 and reference electrode 506 work having a surface area approximately equal. El electrodo 506 de trabajo incluye una disposición de microelectrodos 510 y se encuentra aguas abajo con respecto al electrodo 504 de referencia con respecto al flujo de fluido en la tira 500 de prueba. The electrode 506 includes a working microelectrode array 510 and is downstream with respect to the electrode 504 with respect to the reference fluid flow test strip 500. La figura 7 también muestra un electrodo 512 de detector de llenado opcional. Figure 7 also shows an electrode 512 of detector optional filling.

Muchas de la capas de la tira 100 de prueba, tal como se muestra en la figura 1, pueden usarse para las tiras 100, 200, 300, 400 y 500 de prueba, tal como la capa 16 de aislamiento, la capa 22 de reactivo, la capa 60 de adhesivo, la capa 70 hidrófila, y la capa 80 de arriba. Many of the layers of test strip 100, as shown in Figure 1, can be used for the strips 100, 200, 300, 400 and 500 test, such as layer 16 of insulation, the reagent layer 22 the layer 60 of adhesive layer 70 hydrophilic, and the layer 80 above.

La figura 8 es una vista en sección transversal a través de la disposición 110 de microelectrodos en el primer electrodo 106 de trabajo de la figura 3 que muestra que una parte 130 de aislamiento se dispone en el primer electrodo 106 de trabajo. 8 is a cross section through the microelectrode array 110 in the first electrode 106 working of Figure 3 showing an insulation portion 130 is disposed on the first electrode 106 work. En una realización a modo de ejemplo, la parte 130 de aislamiento es contigua a la capa 16 de aislamiento de la figura 1. Por lo tanto, en la presente realización, la parte 130 de aislamiento se imprime en la misma etapa que la impresión de la capa 16 de aislamiento. In one embodiment for example, the insulation portion 130 is adjacent to the isolation layer 16 of Figure 1. Therefore, in the present embodiment, the insulation portion 130 is printed in the same printing stage insulation layer 16. La realización de una ablación por láser de la parte 130 de aislamiento para formar los orificios 20 que exponen una pluralidad de microelectrodos 120 puede formar a continuación la disposición 110 de microelectrodos. Performing a laser ablation of the insulation portion 130 to form the holes 20 that expose a plurality of microelectrodes 120 can then form the microelectrode array 110.

En otra realización, la parte 130 de aislamiento es un elemento separado de la capa 16 de aislamiento de la figura 1. En la presente realización, la parte 130 de aislamiento se dispone en el primer electrodo 106 de trabajo en una etapa separada de la impresión de la capa 16 de aislamiento. In another embodiment, the insulation portion 130 is a separate element of the layer 16 of insulation Figure 1. In the present embodiment, the insulation portion 130 is disposed on the first electrode 106 working in a separate printing stage layer 16 of insulation. La parte 130 de aislamiento puede disponerse por encima de y unirse al primer electrodo 106 de trabajo mediante unos procesos tales como soldadura por ultrasonidos, serigrafía, oa través del uso de un adhesivo. The isolation part 130 may be disposed above and attached to the first electrode 106 by means of working processes such as ultrasonic welding, screen printing, or through the use of an adhesive. En la presente realización, los orificios 20 en la parte 130 de aislamiento pueden formarse antes o después de que se adhiera la parte 130 de aislamiento al primer electrodo 106 de trabajo. In the present embodiment, the holes 20 in the insulation portion 130 may be formed before or after the insulation portion 130 to the first electrode 106 adheres work.

Las figuras 9 y 10 son unas vistas en sección transversal a través de la disposición 110 de microelectrodos en el primer electrodo 106 de trabajo de la figura 3 con unas capas adicionales que incluyen la capa 22 de reactivo, unas almohadillas 24 y 26 de adhesivo, y la parte 32 hidrófila. Figures 9 and 10 are cross-sectional views through the microelectrode array 110 in the first electrode 106 working in Figure 3 with further layers including the reagent layer 22, pads 24 and 26 of adhesive, and the hydrophilic portion 32. La capa 22 de reactivo puede disponerse en la parte 32 hidrófila distal tal como se muestra en la figura 9. En la presente realización, la capa 22 de reactivo es muy soluble, lo que asegura que cuando una muestra de fluido se aplica a la tira 100 de prueba, la capa 22 de reactivo se disuelve fácilmente y el mediador se difunde rápidamente a los microelectrodos 120. Alternativamente, la capa 22 de reactivo puede disponerse por encima de una parte 130 de aislamiento tal como se muestra en la figura 10. En la The reagent layer 22 may be disposed in the part 32 distal hydrophilic as shown in Figure 9. In the present embodiment, the reagent layer 22 is very soluble which ensures that when a fluid sample is applied to the strip 100 test, the reagent layer 22 dissolves easily and mediator diffuses rapidly microelectrodes 120. Alternatively, the reagent layer 22 may be disposed above a insulation portion 130 as shown in figure 10. in the

presente realización, la capa 22 de reactivo puede ser insoluble debido a la proximidad inmediata de la capa 22 de reactivo a los microelectrodos 120. Las almohadillas 24 y 26 de adhesivo primera y segunda se aplican de una forma tal como para definir una altura de separación L entre la parte de aislante 130 y la capa 22 de reactivo (véase la figura 9) o entre la capa 22 de reactivo y la parte hidrófila distal (véase la figura 10). present embodiment, the reagent layer 22 may be insoluble due to the immediate vicinity of the reagent layer 22 to 120. microelectrode pads 24 and 26 of first and second adhesive are applied in such a way as to define a gap height L between the insulating part 130 and the reagent layer 22 (see figure 9) or between the reagent layer 22 and the distal hydrophilic portion (see figure 10). Las almohadillas de adhesivo primera y segunda 24 y 26 también definen una anchura W de la capa 22 de reactivo. Pads first and second adhesive 24 and 26 also define a width W of the reagent layer 22.

Para que la disposición 110 de microelectrodos tenga un efecto aumentado debido a la difusión radial, la parte 130 de aislamiento debería tener las dimensiones adecuadas. For the microelectrode array 110 have an increased effect due to radial diffusion, the insulation portion 130 should have the appropriate dimensions. En un aspecto, la parte 130 de aislamiento puede incluir una altura H que es de entre aproximadamente 1 micrómetro y aproximadamente 6 micrómetros. In one aspect, the insulation portion 130 may include a height H which is between about 1 micron and about 6 microns. Es necesario que la parte 130 de aislamiento sea lo suficientemente delgada como para permitir la difusión radial. It is necessary that the insulation portion 130 is thin enough to allow airplay. Si la parte 130 de aislamiento es mucho más grande que 6 micrómetros, entonces la parte 130 de aislamiento interfiere con la difusión radial y realmente fomentaría la difusión plana. If the insulation portion 130 is much larger than 6 microns, then the insulation portion 130 interferes with radial diffusion and actually encourage the planar diffusion.

En otro aspecto que se muestra en la figura 11, cada microelectrodo 120 debería de separarse lo suficientemente lejos de los demás como para evitar que un primer microelectrodo compita con un segundo microelectrodo adyacente para un mediador de oxidación. In another aspect shown in Figure 11, each microelectrode 120 should be separated far enough from the others to prevent a first microelectrode compete with an adjacent second microelectrode for a mediator of oxidation. Cada microelectrodo 120 puede separarse una distancia B que varía desde aproximadamente 5 veces hasta aproximadamente 10 veces el diámetro del microelectrodo 120. En una realización tal como se muestra en la figura 10, cada microelectrodo 120 puede espaciarse uniformemente a lo largo de la totalidad de la parte 130 de aislamiento, en la que un microelectrodo puede tener seis microelectrodos colindantes que adoptan una forma hexagonal. Each microelectrode 120 can be separated one B distance ranging from about 5 times to about 10 times the diameter of the microelectrode 120. In one embodiment as shown in Figure 10, each microelectrode 120 can be evenly spaced along the entire insulation portion 130 in which a microelectrode can have six neighboring microelectrodes that adopt a hexagonal shape.

En aún otro aspecto, cada microelectrodo 120 debería de ser lo suficientemente pequeño de tal modo que la proporción de la corriente de prueba que se atribuye a la difusión radial es más grande que la proporción de la corriente de prueba que se atribuye a la difusión plana. In yet another aspect, each microelectrode 120 should be small enough so that the proportion of the test current is attributed to radial diffusion is greater than the proportion of the test current attributed to the planar diffusion . El microelectrodo 120 puede tener una forma de disco con un diámetro A que varía desde aproximadamente 3 micrómetros hasta aproximadamente 20 micrómetros. The microelectrode 120 may have a disk shape with a diameter A ranging from about 3 microns to about 20 microns. En realizaciones alternativas, el microelectrodo 120 puede tener la forma de un cuadrado, un rectángulo, una elipse o un óvalo. In alternative embodiments, the microelectrode 120 may have the shape of a square, a rectangle, an ellipse or an oval.

En otro aspecto, la disposición 110 de microelectrodos puede ser cualquier forma geométrica lo que incluye, pero que no se limita a, un círculo, un óvalo, un cuadrado o un rectángulo. In another aspect, the microelectrode array 110 can be any geometric shape including, but not limited to, a circle, oval, square or rectangle. Si tienen una forma rectangular, el área superficial es en general de entre aproximadamente 0,3 y aproximadamente 3 micrómetros cuadrados. If have a rectangular shape, the surface area is generally between about 0.3 and about 3 square micrometers.

La figura 12 ilustra un medidor 600 de prueba adecuado para su conexión a la tira 100 de prueba. Figure 12 illustrates one suitable test meter 600 for connection to the test strip 100. El medidor 600 de prueba incluye un visualizador 602, una carcasa 604, una pluralidad de botones 606 de interfaz de usuario, y un conector 608 de orificio de tira. The test meter 600 includes a display 602, a housing 604, a plurality of buttons 606 user interface, and a connector 608 of orifice strip. El medidor 600 de prueba incluye además un conjunto de circuitos electrónico en el interior de la carcasa 604 tal como una memoria 620, un microprocesador 622, unos componentes electrónicos para aplicar un voltaje de prueba, y también para medir una pluralidad de valores de corriente de prueba. The test meter 600 further includes a set of electronic circuits inside the housing 604 such as a memory 620, a microprocessor 622, electronic components for applying a test voltage, and also to measure a plurality of current values test. La parte 4 proximal de la tira 100 de prueba puede insertarse en el conector 608 de orificio de tira. The proximal portion 4 of test strip 100 can be inserted into the connector 608 of orifice strip. El visualizador 102 puede emitir como salida una concentración de glucosa y usarse para mostrar una interfaz de usuario para instar a un usuario acerca de cómo realizar una prueba. The display 102 can emit as output a glucose concentration and used to display a user interface to urge a user about how to perform a test. La pluralidad de botones 606 de interfaz de usuario permite que un usuario accione el medidor 600 de prueba navegando a través del software de interfaz de usuario. The plurality of buttons 606 user interface allows a user to operate the test meter 600 by navigating through the user interface software.

La figura 13 muestra un diagrama esquemático simplificado de un medidor 600 de prueba que funciona en conjunto con la tira 100 de prueba. Figure 13 shows a simplified schematic diagram of a test meter 600 that works in conjunction with the test strip 100. El medidor 600 de prueba incluye un primer conector 612, un segundo conector 614, y un conector 610 de referencia que forman respectivamente una conexión eléctrica con el primer contacto 13, el segundo contacto 15, y el contacto 11 de referencia. The test meter 600 includes a first connector 612, a second connector 614, a connector 610 and reference respectively form an electrical connection with the first contact 13, second contact 15 on, and reference contact 11. Los tres conectores que se mencionan anteriormente son parte del conector 608 de orificio de tira. The three connectors as mentioned above are part of the connector 608 of orifice strip. Cuando se realiza una prueba, una primera fuente 616 de voltaje de prueba puede aplicar un primer voltaje de prueba V1 entre el primer electrodo 12 de trabajo y el electrodo 10 de referencia. When a test, a first source 616 of voltage test is performed can apply a first test voltage V1 between first working electrode 12 and reference electrode 10. Como resultado del primer voltaje de prueba V1, el medidor 600 de prueba puede medir a continuación una primera corriente de prueba I1. As a result of first test voltage V1, the test meter 600 can measure below a first test current I1. De una forma similar, la segunda fuente 618 de voltaje de prueba aplica un segundo voltaje de prueba V2 entre el segundo electrodo 14 de trabajo y el electrodo 10 de referencia. In a similar fashion, the second source voltage 618 applies a second test voltage V2 between the second test electrode 14 working and reference electrode 10. Como resultado del segundo voltaje de prueba V2, el medidor 600 de prueba puede medir a continuación una segunda corriente de prueba I2. As a result the second voltage V2 test, test meter 600 may then measure a second test current I2. En una realización, el primer voltaje de prueba V1 y el segundo voltaje de prueba V2 pueden ser aproximadamente iguales, lo que permite que se realice dos veces una medición de glucosa, en la que se realiza una primera medición con el primer electrodo 12 de trabajo y se realiza una segunda medición con el segundo electrodo 14 de trabajo. In one embodiment, the first test voltage V1 and second test voltage V2 may be about equal, allowing to be performed twice glucose test, in which a first measurement is performed with the first working electrode 12 and a second measurement is made with the second electrode 14 work. El uso de dos mediciones de glucosa puede aumentar la precisión promediando los dos resultados entre sí. Using two glucose measurements can increase the accuracy by averaging the two results together. Para simplificar la descripción de las secciones siguientes, los algoritmos para determinar una concentración de glucosa corregida con hematocrito se describirá para sólo un electrodo de trabajo y el electrodo de referencia. To simplify the description of the following sections, the algorithms to determine a corrected glucose concentration hematocrit will be described for only a working electrode and reference electrode. Debería de ser evidente para un experto en la técnica que la invención no debería de estar limitada al electrodo de trabajo y el electrodo de referencia, sino que pueden también aplicarse múltiples electrodos de trabajo a la presente invención. Should be apparent to one skilled in the art that the invention should not be limited to the working electrode and the reference electrode, but can also be applied to multiple working electrodes the present invention.

Los siguientes procedimientos describirán unos algoritmos que pueden aplicarse a microelectrodos y, más en particular, a unas disposiciones de microelectrodos, en las que la corriente de prueba consigue un valor de estado estacionario debido a una proporción de difusión radial más alta. The following procedures describe algorithms which can be applied to microelectrodes and, more particularly, to a microelectrode arrangements, in which the test current gets a steady-state value due to a higher proportion of radial diffusion.

La figura 18 es un diagrama de flujo que ilustra una secuencia de etapas en un procedimiento 700 que usa el medidor 600 de prueba para aplicar una corrección de hematocrito a una concentración de glucosa de acuerdo con 18 is a flowchart illustrating a sequence of steps in a process 700 using test meter 600 to apply a hematocrit correction to a glucose concentration according to

una realización a modo de ejemplo. one embodiment for example.

El procedimiento 700 incluye proporcionar una tira 100 de prueba con un electrodo 10 de referencia, un primer electrodo 12 de trabajo, un segundo electrodo 14 opcional y un medidor 600 de prueba, tal como se ha expuesto mediante la etapa 710. El primer electrodo 12 de trabajo incluye una pluralidad de microelectrodos 120 (es decir, la disposición 110 de microelectrodos) teniendo cada microelectrodo con forma de disco un diámetro de aproximadamente 3 micrómetros hasta aproximadamente 50 micrómetros y estando separado por de aproximadamente 5 hasta aproximadamente 10 veces el diámetro del mismo. Method 700 includes providing a test strip 100 with reference electrode 10, first working electrode 12, a second electrode 14 and an optional test meter 600, as set forth by step 710. The first electrode 12 work includes a plurality of microelectrodes 120 (ie, the microelectrode array 110) having each microelectrode disk shaped a diameter of about 3 microns to about 50 microns and being separated by about 5 to about 10 times the diameter thereof . El electrodo 10 de referencia incluye un área superficial que es al menos igual al área superficial de la disposición 110 de microelectrodos. The reference electrode 10 includes a surface area that is at least equal to the surface area of ​​the microelectrode array 110.

La figura 14 es una representación gráfica de un voltaje de prueba que se aplica a la tira 100 de prueba de acuerdo con el procedimiento. Figure 14 is a graphical representation of a test voltage applied to the test strip 100 according to the procedure. Antes de que se aplique una muestra de fluido a la tira 100 de prueba, el medidor 600 de prueba se encuentra en un modo de detección de fluidos en el que un voltaje de prueba (que no se muestra) de aproximadamente 100 milivoltios hasta aproximadamente 600 milivoltios, típicamente de 400 milivoltios se aplica entre el primer electrodo 12 de trabajo y el electrodo 10 de referencia. Before a fluid sample is applied to test strip 100, the test meter 600 is in a mode for detecting fluids in which a test voltage (not shown) of about 100 millivolts to about 600 millivolts, typically millivolts 400 is applied between the first working electrode 12 and reference electrode 10. Tal como se ha expuesto en la etapa 720, la muestra de fluido se aplica a la tira 100 de prueba en t0 y se permite que reaccione con la capa 22 de reactivo durante un periodo de reacción tR. As set forth in step 720, the fluid sample is applied to test strip 100 at t0 and allowed to react with reagent layer 22 for a reaction time tR. La presencia de una muestra en la zona de reacción de la tira 100 de prueba se determina midiendo la corriente que fluye a través del primer electrodo 12 de trabajo. The presence of a sample in the reaction zone of the test strip 100 is determined by measuring the current flowing through the first working electrode 12. Se determina que el comienzo de periodo de reacción tR se inicia cuando la corriente que fluye a través del primer electrodo 12 de trabajo alcanza un valor deseado, típicamente de aproximadamente 0,150 nanoamperios (lo que no se muestra), punto en el que un voltaje de prueba de cero milivoltios se aplica entre el primer electrodo 12 de trabajo y el electrodo 10 de referencia. It is determined that the start of the reaction period tR is started when the current flowing through the first working electrode 12 reaches a desired value, typically about 0,150 nanoamperes (which is not shown), point where a voltage of test zero millivolts is applied between the first working electrode 12 and reference electrode 10. El periodo de reacción tR es típicamente de entre aproximadamente 2 y aproximadamente 3 segundos y es más típicamente de aproximadamente 2,5 segundos. The reaction period tR is typically between about 2 and about 3 seconds and is more typically about 2.5 seconds. Después del periodo de reacción tR, el voltaje de prueba en el procedimiento a modo de ejemplo se aplica a la tira 100 de prueba en t1 durante un tiempo de prueba total tT. After the reaction period tR, the test voltage in the exemplary procedure is applied to the test strip 100 at t1 for a total test time tT of. En un procedimiento alternativo que se muestra en la figura 15, el periodo de reacción tR se omite, de tal modo que el inicio de la prueba comienza tan pronto como fluye una corriente suficiente a través del primer electrodo 12 de trabajo. In an alternative method shown in Figure 15, the reaction period tR is omitted, so that the start of the test begins as soon as enough current flows through the first working electrode 12.

Tal como se ha expuesto en la etapa 730, un voltaje de prueba de limitación de aproximadamente 100 milivoltios hasta aproximadamente 600 milivoltios, típicamente de 400 milivoltios, se aplica entre el electrodo 10 de referencia y el primer electrodo 12 de trabajo y se mide la corriente de prueba como una función del tiempo, tal como se ilustra en la figura 16. Obsérvese que la corriente de prueba se aproxima a un valor de estado estacionario de corriente a medida que el tiempo prosigue. As set forth in step 730, a test voltage limitation about 100 millivolts to about 600 millivolts, typically 400 millivolts is applied between the reference electrode 10 and the first working electrode 12 and the current is measured test as a function of time, as illustrated in figure 16. Note that the test current approaches a steady state value of current as time continues. Un valor de corriente de estado estacionario ISS se mide cuando se obtiene un valor de corriente de equilibrio, tal como se ha expuesto mediante la etapa 740. El valor de corriente de estado estacionario ISS en general se alcanza entre aproximadamente 0,5 y aproximadamente 2 segundos después de que se aplique el voltaje de prueba a la tira 100 de prueba. A value of steady state current ISS is measured when a current value of equilibrium is obtained, as set forth by step 740. The value of steady state current ISS generally is achieved between about 0.5 and about 2 seconds after the test voltage is applied to the test strip 100.

Tal como se ha expuesto en la etapa 750, la proporción de la corriente de prueba con respecto a un valor de As set forth in step 750, the ratio of the test current relative to a value of

corriente de estado estacionario steady state current

se calcula a continuación para cada punto de tiempo en el que se mide la corriente de prueba. It is then calculated for each time point in which the test current is measured. Para la disposición 110 de microelectrodos que tiene una pluralidad de microelectrodos 120 en forma de disco en la que se aplica un voltaje de prueba de limitación, la siguiente ecuación estima una proporción de la corriente de prueba con respecto al valor de estado estacionario de corriente: For microelectrode array 110 having a plurality of microelectrodes 120 as disk in which a test voltage limitation applies, the following equation estimates a ratio of the test current with respect to the steady state value of current:

En la que: In which:

I(t) es la corriente de prueba en microamperios, medida en el instante t; I (t) is the test current in microamperes, measured at time t; ISS es el valor de estado estacionario de corriente en microamperios; ISS is the steady state value microamp current; rd es el radio del microelectrodo 120 en centímetros; rd is the radius of the microelectrode 120 centimeters; t es el tiempo en segundos; t is the time in seconds; y D es el coeficiente de difusión efectiva en unidades de centímetro2/segundo. and D is the effective diffusion coefficient in units centímetro2 / second.

El coeficiente de difusión efectiva D tiene en cuenta la difusión del mediador en una muestra de sangre que tiene una capa de reactivo disuelta. The effective diffusion coefficient D takes into account the diffusion of mediator in a blood sample having a layer of dissolved reagent. En general, el coeficiente de difusión efectiva D debería de disminuir con el aumento en los niveles de hematocrito. In general, the effective diffusion coefficient D should decrease with increasing hematocrit levels. Por lo tanto, el coeficiente de difusión efectiva D está en función del nivel de hematocrito y puede usarse en un algoritmo para disminuir los efectos del hematocrito. Therefore, the effective diffusion coefficient D is a function of hematocrit level and can be used in an algorithm to reduce the effects of hematocrit. Lo siguiente describirá cómo calcular el coeficiente de difusión efectiva D ya continuación aplicar el coeficiente de difusión efectiva D para calcular una concentración de glucosa. The following will describe how to calculate the diffusion coefficient D and then effectively apply the effective diffusion coefficient D to calculate a glucose concentration.

Usando la ecuación 4, el coeficiente de difusión efectiva D puede calcularse trazando los valores Using equation 4, the effective diffusion coefficient D can be calculated by plotting the values

en el eje Y y on the Y axis and

en el eje X tal como se ilustra en la figura 17 y que se ha expuesto en la etapa 760. La pendiente resultante a partir de la parte lineal de la línea puede calcularse y convertirse a continuación y en el coeficiente de difusión efectiva D, tal como se ha expuesto en la etapa 770. En la práctica, la totalidad de los cálculos que se requieren para determinar el coeficiente de difusión efectiva D estaría programada con anterioridad en el medidor de prueba como un algoritmo. in the X axis as illustrated in Figure 17 and discussed in step 760. The resulting slope from the linear portion of the line can be calculated and become below and in the effective diffusion coefficient D, such as discussed in step 770. in practice, all the calculations required to determine the effective diffusion coefficient D would be previously programmed in the test meter as an algorithm. Una ventaja de este enfoque de determinar el coeficiente de difusión efectiva D es que el coeficiente de difusión efectiva D es independiente de la concentración de glucosa. An advantage of this approach to determine the effective diffusion coefficient D is the effective diffusion coefficient D is independent of the glucose concentration.

Tal como se ha expuesto en la etapa 780, el coeficiente de difusión efectiva D puede usarse con la ecuación 5 a As set forth in step 780, the effective diffusion coefficient D can be used with equation 5

4–). 4-).

continuación para estimar la concentración de mediador reducida Cred (por ejemplo, la concentración de Fe(CN)6 then to estimate the concentration of reduced mediator Cred (for example, the concentration of Fe (CN) 6

En la que: In which:

n es el número de electrones que se intercambian por molécula de mediador reducido; n is the number of electrons exchanged per molecule of reduced mediator; F es la constante de Faraday. F is the Faraday constant.

Cred puede usarse a continuación para estimar la concentración de glucosa corregida con hematocrito. Cred may then be used to estimate the glucose concentration hematocrit-corrected. Por ejemplo, puede generarse una curva de calibración, en la que el eje Y es Cred en la que Cred se calcula para unas muestras de sangre completa con un intervalo de concentraciones de glucosa y de hematocrito. For example, you can generate a calibration curve, in which the Y axis is Cred Cred in which is calculated for some whole blood samples with a range of concentrations of glucose and hematocrit. El eje X es la concentración de glucosa de referencia Gref de las mismas muestras de sangre completa tal como se mide en un analizador de glucosa de referencia. The X axis is the reference glucose concentration thereof Gref whole blood samples as measured by a glucose analyzer reference. El punto de intersección de calibración puede sustraerse con respecto a Cred s continuación de una división que usa una pendiente de calibración para deparar la concentración de glucosa Gref. The intersection point calibration can escape over Cred s continuation of a division using a calibration slope to yield glucose concentration Gref. En resumen, las ecuaciones 1 y 2 permiten que se calculen unas concentraciones de glucosa con un efecto reducido a partir del hematocrito cuando se usan unas disposiciones de microelectrodos tal como se ilustra en las figuras 3 a 7, lo que de este modo da como resultado una concentración más precisa de glucosa. In summary, equations 1 and 2 allow a glucose concentrations were calculated with a reduced from the hematocrit effect when some provisions of microelectrodes are used as illustrated in Figures 3 to 7, which thus results a concentration more accurate glucose.

Por último, la concentración de analito corregida con hematocrito se visualiza en el medidor 600 de prueba, tal como se ha expuesto en la etapa 790. Finally, the analyte concentration hematocrit-corrected is displayed in the test meter 600, as discussed in step 790.

La figura 19 es un diagrama de flujo que ilustra una secuencia de etapas en un procedimiento 800 que se usa por el medidor 600 de prueba para establecer si una muestra de fluido es un fluido corporal (por ejemplo, sangre completa) 19 is a flowchart illustrating a sequence of steps in a process 800 used by the test meter 600 to determine if a fluid sample is a bodily fluid (e.g., whole blood)

o una disolución de control de acuerdo con una realización a modo de ejemplo. or a control solution according to an embodiment example. Una disolución de control se usa para asegurar que el medidor de prueba y la tira de prueba están funcionando de forma apropiada. A control solution is used to ensure that the test meter and test strip are functioning properly. En una realización, las concentraciones de analito para un fluido corporal se promedian a lo largo de un periodo del tiempo para evaluar la salud del paciente. In one embodiment, analyte concentrations to a body fluid is averaged over a period of time to evaluate the patient's health. Si una disolución de control valor se almacena en el medidor de prueba como una concentración de analito, la concentración de analito promedio para el fluido corporal será incorrecta. If a control solution value is stored in the test meter as an analyte concentration, the analyte concentration average body fluid will be incorrect. Por lo tanto, es ventajoso tener un procedimiento para distinguir entre un fluido corporal y una disolución de control. Therefore, it is advantageous to have a method for distinguishing between a body fluid and a control solution.

El procedimiento 800 incluye proporcionar una tira 100 de prueba con un electrodo 10 de referencia, un primer electrodo 12 de trabajo, un segundo electrodo 14 opcional y un medidor 600 de prueba, tal como se ha expuesto mediante la etapa 810. El primer electrodo 12 de trabajo incluye una pluralidad de microelectrodos 120 (es decir, la disposición 110 de microelectrodos) teniendo cada microelectrodo con forma de disco un diámetro de aproximadamente 3 de hasta aproximadamente 50 micrómetros y estando separado por de aproximadamente 5 hasta aproximadamente 10 veces el diámetro del mismo. The method 800 includes providing a test strip 100 with reference electrode 10, first working electrode 12, a second electrode 14 and an optional test meter 600, as set forth by step 810. The first electrode 12 work includes a plurality of microelectrodes 120 (ie, the microelectrode array 110) having each microelectrode disk shaped a diameter of about 3 to about 50 microns and being separated by about 5 to about 10 times the diameter thereof . El electrodo 10 de referencia incluye un área superficial que es al menos igual al área superficial de la disposición 110 de microelectrodos. The reference electrode 10 includes a surface area that is at least equal to the surface area of ​​the microelectrode array 110.

Tal como se ha expuesto en la etapa 820, la muestra de fluido se aplica a la tira 100 de prueba en t0 y se permite que reaccione con la capa 22 de reactivo durante un periodo de reacción tR (véase la figura 14). As set forth in step 820, the fluid sample is applied to test strip 100 at t0 and allowed to react with reagent layer 22 during a reaction period tR (see Figure 14). La presencia de una muestra en la zona de reacción de la tira 100 de prueba se determina midiendo la corriente que fluye a través del primer electrodo 12 de trabajo. The presence of a sample in the reaction zone of the test strip 100 is determined by measuring the current flowing through the first working electrode 12. El comienzo de periodo de reacción tR se determina que se inicia cuando la corriente que fluye a través del primer electrodo 12 de trabajo alcanza un valor deseado, típicamente de aproximadamente 0,150 nanoamperios (lo que no se muestra), punto en el que un voltaje de prueba de entre aproximadamente – 50 milivoltios y aproximadamente + 50 milivoltios, típicamente de aproximadamente cero milivoltios, se aplica entre el primer electrodo 12 de trabajo y el electrodo 10 de referencia. The beginning of the reaction period tR is determined that starts when the current flowing through the first working electrode 12 reaches a desired value, typically about 0,150 nanoamperes (which is not shown), point where a voltage of test between about - 50 millivolts and about 50 millivolts +, typically about zero millivolts is applied between the first working electrode 12 and reference electrode 10. El periodo de reacción tR es típicamente de entre aproximadamente 2 y aproximadamente 3 segundos y es más típicamente de aproximadamente 2,5 segundos. The reaction period tR is typically between about 2 and about 3 seconds and is more typically about 2.5 seconds. Después del periodo de reacción tR, el voltaje de prueba en el procedimiento a modo de ejemplo se aplica a la tira 100 de prueba en t1 durante un tiempo de prueba total tT. After the reaction period tR, the test voltage in the exemplary procedure is applied to the test strip 100 at t1 for a total test time tT of. En un procedimiento alternativo que se muestra en la figura 15, el periodo de reacción tR se omite, de tal modo que el inicio de la prueba comienza tan pronto como fluye una corriente suficiente a través del primer electrodo 12 de trabajo. In an alternative method shown in Figure 15, the reaction period tR is omitted, so that the start of the test begins as soon as enough current flows through the first working electrode 12.

Tal como se ha expuesto en la etapa 830, un voltaje de prueba de limitación de aproximadamente 100 milivoltios As set forth in step 830, a test voltage of 100 millivolts limitation of approximately

hasta aproximadamente 600 milivoltios, típicamente de 400 milivoltios, se aplica entre el electrodo 10 de referencia y el primer electrodo 12 de trabajo y se mide la corriente de prueba como una función del tiempo, tal como se ilustra en la figura 16. Un valor de corriente de estado estacionario ISS se mide cuando se obtiene un valor de corriente de equilibrio, tal como se ha expuesto mediante la etapa 840. El valor de corriente de estado estacionario ISS en general se alcanza entre aproximadamente 0,5 y aproximadamente 2 segundos después de que se aplique el voltaje de prueba a la tira 100 de prueba. to about 600 millivolts, typically 400 millivolts is applied between the reference electrode 10 and the first working electrode 12 and the test current is measured as a function of time, as illustrated in Figure 16. A value of steady state current ISS is measured when a current value of equilibrium is obtained, as set forth by step 840. the value of steady state current ISS generally is achieved between about 0.5 and about 2 seconds after the test voltage is applied to the test strip 100.

Tal como se ha expuesto en la etapa 850, la proporción de la corriente de prueba con respecto a un valor de As set forth in step 850, the ratio of the test current relative to a value of

corriente de estado estacionario steady state current

se calcula a continuación para cada punto de tiempo en el que se mide la corriente de prueba. It is then calculated for each time point in which the test current is measured. Para la disposición 110 de microelectrodos que tiene una pluralidad de microelectrodos 120 en forma de disco en la que se aplica un voltaje de prueba de limitación, la ecuación 4 anterior se usa para estimar una proporción de la corriente de prueba con respecto al valor de estado estacionario de corriente. For microelectrode array 110 having a plurality of microelectrodes 120 as disk in which a test voltage limitation applies Equation 4 above is used to estimate a ratio of the test current with respect to the state value steady current.

Usando la ecuación 4, el coeficiente de difusión efectiva D puede también calcularse trazando los valores Using equation 4, the effective diffusion coefficient D can also be calculated by plotting the values

en in

el eje Y y the Y axis and

en el eje X tal como se ilustra en la figura 17 y que se ha expuesto en la etapa 860. La pendiente resultante a partir de la parte lineal de la línea puede calcularse y convertirse a continuación y en el coeficiente de difusión efectiva D, tal como se ha expuesto en la etapa 870. in the X axis as illustrated in Figure 17 and discussed in step 860. The resulting slope from the linear portion of the line can be calculated and become below and in the effective diffusion coefficient D, such as set forth in step 870.

Tal como se ha expuesto en la etapa 880, el coeficiente de difusión efectiva D puede usarse con la ecuación 5 anterior para estimar la concentración de mediador reducida Cred (por ejemplo, la concentración de Fe(CN)6 4–). As set forth in step 880, the effective diffusion coefficient D can be used with equation 5 above to estimate the concentration of reduced mediator Cred (for example, the concentration of Fe (CN) 6 4-).

Para determinar el tipo de muestra de fluido (por ejemplo, el fluido corporal o la disolución de control) que se aplica a la tira 100 de prueba, el medidor 600 de prueba compara un valor medido para el coeficiente de difusión efectiva D con respecto a un intervalo de aceptación para el fluido corporal y un intervalo de aceptación para la disolución de control, tal como se ha expuesto mediante la etapa 880. Para sangre completa con un nivel de hematocrito de entre aproximadamente un 20 % y aproximadamente un 70 %, el coeficiente de difusión efectiva D es típicamente de entre aproximadamente 0,7 x 10 –6 centímetros2/segundo y aproximadamente 2,7 x 10 –6 centímetros2/segundo. To determine the type of fluid sample (e.g., body fluid or control solution) that is applied to test strip 100, the test meter 600 compares a measured value for the effective diffusion coefficient D to acceptance range for the body fluid and an acceptance range for dissolution control, such as set forth by step 880. for the whole blood with a hematocrit of between about 20% and about 70%, effective diffusion coefficient D is typically between about 0.7 x 10 -6 centímetros2 / second and about 2.7 x 10 -6 centímetros2 / second. El coeficiente de difusión efectiva D para la disolución de control típicamente es de entre aproximadamente 4,0 x 10 –6 centímetros2/segundo y aproximadamente 7,2 x 10 –6 centímetros2/segundo. The effective diffusion coefficient D for the control solution is typically between about 4.0 x 10 -6 centímetros2 / second and about 7.2 x 10 -6 centímetros2 / second.

Finalmente, el medidor 600 de prueba visualiza un mensaje de error adecuado si la muestra de fluido no se encuentra en el intervalo de aceptación para el fluido corporal o la disolución de control, dependiendo de qué tipo de muestra de fluido se ha aplicado a la tira 100 de prueba, o permite que el usuario proceda con las pruebas, tal como se ha expuesto mediante la etapa 890. Finally, the test meter 600 displays an appropriate error message if the fluid sample is not in the acceptance range for body fluid or control solution, depending on what type of fluid sample has been applied to the strip test 100, or allows the user to proceed with the test, as set forth by step 890.

El coeficiente de difusión estimado efectivo D puede también usarse para distinguir entre las tiras 100 de prueba que incluyen los microelectrodos 120 y las que no incluyen los microelectrodos 120. El coeficiente de difusión estimado efectivo d puede también usarse para determinar si la capa 22 de reactivo se ha formulado o recubierto de forma incorrecta. The effective diffusion coefficient D calculated may also be used to distinguish between the strips 100 test including the microelectrodes 120 and not including the microelectrodes 120. The estimated effective diffusion coefficient d can also be used to determine whether the reagent layer 22 it has been formulated or coated incorrectly. La figura 20 es un diagrama de flujo que ilustra una secuencia de etapas en un procedimiento 900 que se usa por un medidor de prueba para determinar si una tira 100 de prueba incluye una pluralidad de microelectrodos 120 e incluye una capa 22 de reactivo que se ha formulado y recubierto de forma correcta de acuerdo con una realización a modo de ejemplo. 20 is a flowchart illustrating a sequence of steps in a method 900 used by a test meter to determine whether a test strip 100 includes a plurality of microelectrodes 120 and includes a reagent layer 22 that has formulated and coated correctly according to one embodiment example.

El procedimiento 900 incluye proporcionar una tira 100 de prueba con un electrodo 10 de referencia, un primer electrodo 12 de trabajo, un segundo electrodo 14 opcional y un medidor 600 de prueba, tal como se ha expuesto mediante la etapa 910. El primer electrodo 12 de trabajo incluye una pluralidad de microelectrodos 120 (es decir, una disposición 110 de microelectrodos), teniendo cada microelectrodo 120 un diámetro de entre aproximadamente 3 micrómetros y aproximadamente 50 micrómetros y estando separado por de aproximadamente 5 hasta aproximadamente 10 veces el diámetro del mismo. The method 900 includes providing a test strip 100 with reference electrode 10, first working electrode 12, a second electrode 14 and an optional test meter 600, as set forth by step 910. The first electrode 12 work includes a plurality of microelectrodes 120 (ie a microelectrode array 110), each microelectrode 120 a diameter of between about 3 microns to about 50 microns and being separated by about 5 to about 10 times the diameter thereof. El electrodo 10 de referencia incluye un área superficial que es al menos igual al área superficial de la disposición 110 de microelectrodos. The reference electrode 10 includes a surface area that is at least equal to the surface area of ​​the microelectrode array 110.

Tal como se ha expuesto en la etapa 920, la muestra de fluido se aplica a la tira 100 de prueba en t0 y se permite que reaccione con la capa 22 de reactivo durante un periodo de reacción tR (véase la figura 14). As set forth in step 920, the fluid sample is applied to test strip 100 at t0 and allowed to react with reagent layer 22 during a reaction period tR (see Figure 14). La presencia de una muestra en la zona de reacción de la tira 100 de prueba se determina midiendo la corriente que fluye a través del primer electrodo 12 de trabajo. The presence of a sample in the reaction zone of the test strip 100 is determined by measuring the current flowing through the first working electrode 12. Se determina que el comienzo de periodo de reacción tR se inicia cuando la corriente que fluye a través del primer electrodo 12 de trabajo alcanza un valor deseado, típicamente de aproximadamente 0,150 nanoamperios (lo que no se muestra), punto en el que un voltaje de prueba de cero milivoltios se aplica entre el primer electrodo 12 de trabajo y el electrodo 10 de referencia. It is determined that the start of the reaction period tR is started when the current flowing through the first working electrode 12 reaches a desired value, typically about 0,150 nanoamperes (which is not shown), point where a voltage of test zero millivolts is applied between the first working electrode 12 and reference electrode 10. El periodo de reacción tR es típicamente de entre aproximadamente 2 y aproximadamente 3 segundos y es más típicamente de aproximadamente 2,5 segundos. The reaction period tR is typically between about 2 and about 3 seconds and is more typically about 2.5 seconds.

Después del periodo de reacción tR, el voltaje de prueba en el procedimiento a modo de ejemplo se aplica a la tira 100 de prueba en t1 durante un tiempo de prueba total tT. After the reaction period tR, the test voltage in the exemplary procedure is applied to the test strip 100 at t1 for a total test time tT of. En un procedimiento alternativo que se muestra en la figura 15, el periodo de reacción tR se omite, de tal modo que el inicio de la prueba comienza tan pronto como fluye una corriente suficiente a través del primer electrodo 12 de trabajo. In an alternative method shown in Figure 15, the reaction period tR is omitted, so that the start of the test begins as soon as enough current flows through the first working electrode 12.

Tal como se ha expuesto en la etapa 930, un voltaje de prueba de limitación de aproximadamente 100 milivoltios hasta aproximadamente 600 milivoltios, típicamente de 400 milivoltios, se aplica entre el electrodo 10 de referencia y el primer electrodo 12 de trabajo y se mide la corriente de prueba como una función del tiempo, tal como se ilustra en la figura 16. Un valor de corriente de estado estacionario ISS se mide cuando se obtiene un valor de corriente de equilibrio, tal como se ha expuesto mediante la etapa 940. El valor de corriente de estado estacionario ISS en general se alcanza entre aproximadamente 0,5 y aproximadamente 2 segundos después de que se aplique el voltaje de prueba a la tira 100 de prueba. As set forth in step 930, a test voltage limitation about 100 millivolts to about 600 millivolts, typically 400 millivolts is applied between the reference electrode 10 and the first working electrode 12 and the current is measured test as a function of time, as illustrated in figure 16. a value of steady state current ISS is measured when a current value of equilibrium is obtained, as set forth by step 940. the value of steady state current is reached ISS generally from about 0.5 to about 2 seconds after the test voltage is applied to the test strip 100.

Tal como se ha expuesto en la etapa 950, la proporción de la corriente de prueba con respecto a un valor de As set forth in step 950, the ratio of the test current relative to a value of

corriente de estado estacionario steady state current

se calcula a continuación para cada punto de tiempo en que se mide la corriente de prueba. It is then calculated for each time point that the test current is measured. Para la disposición 110 de microelectrodos que tiene una pluralidad de microelectrodos 120 en forma de disco en la que se aplica un voltaje de prueba de limitación, la ecuación 4 anterior se usa para estimar una proporción de la corriente de prueba con respecto al valor de estado estacionario de corriente. For microelectrode array 110 having a plurality of microelectrodes 120 as disk in which a test voltage limitation applies Equation 4 above is used to estimate a ratio of the test current with respect to the state value steady current.

Usando la ecuación 4, el coeficiente de difusión efectiva D puede calcularse trazando los valores Using equation 4, the effective diffusion coefficient D can be calculated by plotting the values

en el eje Y y on the Y axis and

en el eje X tal como se ilustra en la figura 17 y que se ha expuesto en la etapa 960. La pendiente resultante a partir de la parte lineal de la línea puede calcularse y convertirse a continuación y en el coeficiente de difusión efectiva D, tal como se ha expuesto en la etapa 970. in the X axis as illustrated in Figure 17 and discussed in step 960. The resulting slope from the linear portion of the line can be calculated and become below and in the effective diffusion coefficient D, such as set forth in step 970.

A continuación, tal como se ha expuesto mediante la etapa 980, un coeficiente de difusión corregido en temperatura Next, as set forth by step 980, a diffusion coefficient corrected temperature

se calcula sustituyendo coeficiente de difusión efectiva D en la ecuación 6 a continuación que aproxima la difusión en función de la temperatura en un gel. It is calculated by substituting effective diffusion coefficient D in equation 6 below which approximates the diffusion function of temperature on a gel.

En la que: In which:

es el coeficiente de difusión efectiva corregido en temperatura en centímetro2/segundo; is the effective diffusion coefficient corrected temperature centímetro2 / second; D es el coeficiente de difusión estimado efectivo en centímetro2/segundo; D is the effective diffusion coefficient estimated centímetro2 / second; 8 es una constante conocida para la difusión en función de la temperatura; 8 is a known constant for diffusion function of temperature; T es la temperatura en Kelvin de la muestra de fluido tal como se mide por el medidor de prueba y en general es de entre aproximadamente 283 K y aproximadamente 317 K; T is the temperature in Kelvin of the fluid sample as measured by the test meter and is generally between about 283 K and about 317 K; y T0 es una temperatura de referencia (por ejemplo, la temperatura ambiente) en Kelvin. and T0 is a reference temperature (eg room temperature) in Kelvin. T0 varía entre aproximadamente 293 Kelvin y aproximadamente 298 Kelvin. T0 ranging from about 293 Kelvin to about 298 Kelvin.

A continuación, el medidor 600 de prueba determina si la tira 100 de prueba incluye una disposición 110 de microelectrodos y una capa 22 de reactivo formulada y recubierta de forma correcta comparando un valor calculado Then, the test meter 600 determines whether the test strip 100 includes a microelectrode array 110 and a reagent layer 22 and coated formulated correctly by comparing a value calculated

de coeficiente de difusión efectiva corregido en temperatura frente a un intervalo de aceptación, tal como se ha effective diffusion coefficient temperature-corrected against an acceptance range, as has

expuesto mediante la etapa 990. El coeficiente de difusión efectiva corregido en temperatura exposed by the step 990. The effective diffusion coefficient corrected temperature

es típicamente de aproximadamente 1,8 x 10 –6 centímetros2/segundo y normalmente es de entre aproximadamente 1,6 x 10 –6 centímetros2/segundo y 2,0 x 10 –6 centímetros2/segundo. It is typically about 1.8 x 10 -6 centímetros2 / second and typically is between about 1.6 x 10 -6 centímetros2 / second and 2.0 x 10 -6 centímetros2 / second.

Finalmente, si el valor calculado para el coeficiente de difusión efectiva corregido en temperatura Finally, if the calculated effective diffusion coefficient value corrected temperature

se encuentra dentro del intervalo de aceptación, se permite que el usuario proceda con las pruebas. is within the acceptance range, the user is allowed to proceed with testing. Si, no obstante, el valor If, however, the value

calculado para el coeficiente de difusión efectiva corregido en temperatura calculated for the effective diffusion coefficient corrected temperature

se encuentra fuera del intervalo de aceptación, el medidor 600 de prueba visualiza un mensaje de error adecuado (por ejemplo, no se reconoció la tira de prueba) para el usuario, tal como se ha expuesto mediante la etapa 995. It is outside the acceptance range, the test meter 600 displays an appropriate error message (for example, not the test strip is recognized) for the user, as stated by step 995.

La figura 21 es una representación gráfica que ilustra unos valores simulados para el coeficiente de difusión efectiva Figure 21 is a graph illustrating a simulated for the effective diffusion coefficient values

corregido en temperatura temperature-corrected

para las tiras 100 de prueba que incluyen una disposición 110 de microelectrodos y las que no incluyen una disposición 110 de microelectrodos. for test strips 100 including a microelectrode array 110 and that they do not include a microelectrode array 110. La punta de flecha M indica un intervalo adecuado de Arrowhead M indicates a suitable range

valores para el coeficiente de difusión efectiva corregido en temperatura values ​​for the effective diffusion coefficient corrected temperature

para la tira 100 de prueba que incluye 5 una disposición 110 de microelectrodos. for test strip 100 that includes 1 May microelectrode array 110. Los valores para el coeficiente de difusión efectiva corregido en The values ​​for the effective diffusion coefficient corrected

temperatura temperature

de las tiras de prueba que no incluyen una disposición 110 de microelectrodos se encontraría fuera de la punta de flecha M tal como se indica por las puntas de flecha N1 y N2 en esta representación gráfica. of test strips that do not include a microelectrode array 110 would be outside of the arrowhead M as indicated by arrowheads N1 and N2 in this graphic representation.

Las figuras 22 y 23 son unas vistas en perspectiva y lateral, respectivamente, de un dispositivo 1000 médico integrado que puede incluir una pluralidad de microelectrodos 120 de acuerdo con las realizaciones a modo de 10 ejemplo. Figures 22 and 23 are perspective views and side views, respectively, of an integrated medical device 1000 may include a plurality of microelectrodes 120 according to embodiments 10 example. El dispositivo 1000 médico integrado incluye una tira 1004 de prueba y un elemento 1002 de penetración de tejido dérmico. The integrated medical device 1000 includes a strip test 1004 and an element 1002 of dermal tissue penetration. La tira 1004 de prueba tiene un área 1005 de reacción que está compuesto por la capa 22 de reactivo recubierta en el electrodo de referencia y uno o más electrodos de trabajo (que no se muestran). Test strip 1004 has an area 1005 reaction comprises the reagent layer 22 coated on the reference electrode and one or more working electrodes (not shown). Los contactos 1006 eléctricos aparecen en un extremo 1010 proximal del dispositivo 1000 médico integrado y están formados por cualquier material conductor adecuado, tal como oro, plata, platino o carbono. Electrical contacts 1006 appear at a proximal end 1010 of the integrated medical device 1000 and are formed of any suitable conductive material such as gold, silver, platinum or carbon. El elemento 1002 de 15 penetración de tejido dérmico incluye una lanceta 1020 adaptada para perforar la piel de un usuario y extraer sangre al interior del área 1005 de reacción. The element 1002 15 dermal tissue penetration 1020 includes a lancet adapted to pierce the skin of a user and to draw blood into the reaction area 1005. El elemento 1002 de penetración de tejido dérmico se adhiere a la tira 100 de prueba4 por una capa 1014 de adhesivo. The element 1002 of penetration of dermal tissue adheres to the strip 100 prueba4 by a layer 1014 of adhesive. Esta capa 1014 de adhesivo puede ser un adhesivo sensible a la presión o termosellado. This layer 1014 of adhesive may be a pressure sensitive adhesive or heat sealing. La lanceta 1020 incluye una base 1022 de lanceta que termina en el extremo 1012 distal de la tira de prueba montada. The lancet 1020 includes a lancet base 1022 terminates at end 1012 distal strip mounted test. Unas descripciones adicionales de los dispositivos médicos integrados que pueden usarse con la A further descriptions of integrated medical devices that can be used with the

20 presente invención se encuentran en la solicitud de patente de los Estados Unidos con no 10/432.827 (publicada como 2004/0096959 el 20 de mayo de 2004) y en la solicitud de patente de los Estados Unidos con no 10/143.399 (publicada como 2003/0143113 el 31 de julio de 2003). 20 present invention are in the patent application US with 10 / 432,827 (published as 2004/0096959 on 20 May 2004) and in patent application US with 10 / 143,399 (published as 2003/0143113 on July 31, 2003).

Claims (15)

  1. REIVINDICACIONES What is claimed
    1. one.
    Un procedimiento de cálculo de una concentración de glucosa corregida con hematocrito en una muestra de fluido, comprendiendo el procedimiento: A method of calculating a corrected glucose concentration in a sample with hematocrit fluid, the method comprising:
    proporcionar una tira de prueba que comprende un electrodo de referencia y un electrodo de trabajo formado con una pluralidad de microelectrodos y recubierto con una capa de reactivo; providing a test strip comprising a reference electrode and a working electrode formed with a plurality of microelectrodes and coated with a reagent layer; aplicar una muestra de fluido a la tira de prueba durante un periodo de reacción; applying a fluid sample to the test strip during a reaction; aplicar un voltaje de prueba entre el electrodo de referencia y el electrodo de trabajo; applying a test voltage between the reference electrode and the working electrode; medir una corriente de prueba como una función del tiempo; measuring a test current as a function of time; medir un valor de corriente de estado estacionario cuando la corriente de prueba ha alcanzado un equilibrio; measuring a value of steady state current when the test current has reached equilibrium; calcular una proporción de la corriente de prueba con respecto al valor de corriente de estado estacionario; calculating a ratio of the test current from the value of steady state current; trazar la proporción de la corriente de prueba con respecto al valor de corriente de estado estacionario como una función de la inversa de la raíz cuadrada del tiempo; plotting the ratio of the test current from the value of steady state current as a function of the inverse of the square root of time; calcular un coeficiente de difusión efectiva a partir de la pendiente de la representación gráfica de regresión lineal de la proporción de la corriente de prueba con respecto al valor de corriente de estado estacionario como una función de la inversa de la raíz cuadrada del tiempo; calculating an effective diffusion coefficient from the slope of the linear regression plot of the ratio of the test current from the value of steady state current as a function of the inverse of the square root of time; y calcular una concentración corregida con hematocrito del analito. and calculating a hematocrit corrected analyte concentration.
  2. 2. two.
    Un procedimiento de determinación un tipo de muestra de fluido aplicada a la tira de prueba, comprendiendo el procedimiento: A method of determining a type of fluid sample applied to the test strip, the method comprising:
    proporcionar una tira de prueba que tiene un electrodo de referencia y un electrodo de trabajo, en la que el electrodo de trabajo se forma con una pluralidad de microelectrodos y se recubre con una capa de reactivo; providing a test strip having a reference electrode and a working electrode, wherein the working electrode is formed with a plurality of microelectrodes and coated with a reagent layer; aplicar una muestra de fluido a la tira de prueba durante un periodo de reacción; applying a fluid sample to the test strip during a reaction; aplicar un voltaje de prueba entre el electrodo de referencia y el electrodo de trabajo; applying a test voltage between the reference electrode and the working electrode; medir una corriente de prueba como una función del tiempo; measuring a test current as a function of time; medir un valor de corriente de estado estacionario cuando la corriente de prueba ha alcanzado un equilibrio; measuring a value of steady state current when the test current has reached equilibrium; calcular una proporción de la corriente de prueba con respecto al valor de corriente de estado estacionario; calculating a ratio of the test current from the value of steady state current; trazar la proporción de la corriente de prueba con respecto al valor de corriente de estado estacionario como una función de la inversa de la raíz cuadrada del tiempo; plotting the ratio of the test current from the value of steady state current as a function of the inverse of the square root of time; calcular un coeficiente de difusión efectiva a partir de la pendiente de la representación gráfica de regresión lineal de la proporción de la corriente de prueba con respecto al valor de corriente de estado estacionario como una función de la inversa de la raíz cuadrada del tiempo; calculating an effective diffusion coefficient from the slope of the linear regression plot of the ratio of the test current from the value of steady state current as a function of the inverse of the square root of time; determinar un tipo de una muestra de fluido aplicada a la tira de prueba comparando un valor medido para el coeficiente de difusión efectiva frente a un intervalo de aceptación para un fluido corporal y una disolución de control; determining a type of a fluid sample applied to the test strip by comparing a measured value for the effective diffusion coefficient against an acceptance range for a body fluid and a control solution value; y visualizar un mensaje de error adecuado si el coeficiente de difusión efectiva no pasa el intervalo de aceptación para el tipo de muestra de fluido aplicada a la tira de prueba. and display an error message if the appropriate effective diffusion coefficient fails the acceptance range for the type of fluid sample applied to the test strip.
  3. 3. 3.
    El procedimiento de la reivindicación 1 o 2, en la que la etapa de cálculo del coeficiente de difusión efectiva utiliza una ecuación de la forma: The method of claim 1 or 2, wherein the step of calculating the effective diffusion coefficient using an equation of the form:
    en la que: in which:
    I(t) es el valor de corriente en microamperios, medida en el instante t; I (t) is the value microamp current, measured at time t; ISS es la corriente de estado estacionario en microamperios; ISS is the steady state current in microamps; rd es el radio de un microelectrodo en centímetros; rd is the radius of a microelectrode in centimeters; yt es el tiempo en segundos. t is time in seconds.
  4. 4. El procedimiento de la reivindicación 3, en la que la etapa de cálculo de una concentración corregida con 4. The method of claim 3, wherein the step of calculating a corrected concentration
    hematocrito del analito comprende además: sustituir el coeficiente de difusión estimado en una ecuación de la forma: hematocrit analyte further comprising: replacing the estimated diffusion coefficient in an equation of the form:
    en la que: in which:
    Cred es una concentración de mediador reducida; Cred is a reduced mediator concentration; ISS es la corriente de estado estacionario en microamperios; ISS is the steady state current in microamps; n es el número de electrones que se intercambian por ión que se somete a una reacción de oxidación/reducción; n is the number of electrons exchanged by ion undergoes oxidation / reduction;
    F es la constante de Faraday; F is the Faraday constant; D es el coeficiente de difusión estimado en centímetro2/segundo; D is the diffusion coefficient estimated centímetro2 / second; y rd es el radio del microelectrodo en centímetros; and rd is the radius of the microelectrode in centimeters;
    generar una curva de calibración en la que un eje Y es la concentración de mediador reducida y un eje X es una concentración de analito de referencia; generating a calibration curve in which one axis is the concentration of reduced mediator and an X axis is a reference analyte concentration; calcular una concentración de analito sustrayendo un punto de intersección de calibración con respecto a la concentración de mediador reducida y dividir con una pendiente de calibración. calculating an analyte concentration by subtracting an intersection point calibration with respect to the reduced mediator concentration and split with a calibration slope.
  5. 5. 5.
    El procedimiento de la reivindicación 1 o 2, en la que la tira de prueba comprende además una parte de aislamiento que se dispone en la pluralidad de microelectrodos y la parte de aislamiento tiene una altura de entre aproximadamente un micrómetro y seis micrómetros. The method of claim 1 or 2, wherein the test strip further comprises an insulating portion provided in the plurality of microelectrodes and the insulation portion has a height of between about one micron and six micrometers.
  6. 6. 6.
    El procedimiento de la reivindicación 1 o 2, en el que el electrodo de referencia y el electrodo de trabajo están compuestos por oro. The method of claim 1 or 2, wherein the reference electrode and the working electrode are composed of gold.
  7. 7. 7.
    El procedimiento de la reivindicación 1 o 2, en la que la capa de reactivo comprende una enzima, un mediador y un agente de tamponamiento en la que el mediador comprende hexamina de rutenio (III). The method of claim 1 or 2, wherein the reagent layer comprises an enzyme, a mediator and a buffering agent wherein the mediator comprises ruthenium hexamine (III).
  8. 8. 8.
    El procedimiento de la reivindicación 1 o 2, en el que el diámetro de cada uno de la pluralidad de microelectrodos es de entre aproximadamente 5 micrómetros y 50 micrómetros. The method of claim 1 or 2, wherein the diameter of each of the plurality of microelectrodes is between about 5 microns and 50 microns.
  9. 9. 9.
    El procedimiento de la reivindicación 1 o 2, en el que cada uno de la pluralidad de microelectrodos se separa por una distancia que varía desde aproximadamente 5 a 10 veces el diámetro de un microelectrodo o que varía desde aproximadamente 25 micrómetros hasta 500 micrómetros. The method of claim 1 or 2, wherein each of the plurality of microelectrodes are separated by a distance ranging from about 5 to 10 times the diameter of a microelectrode or ranging from about 25 microns to 500 microns.
  10. 10. 10.
    El procedimiento de la reivindicación 1 o 2, en el que la forma de cada uno de la pluralidad de microelectrodos se selecciona de un grupo que consiste esencialmente en un círculo, un cuadrado, un rectángulo, un óvalo y una elipse y combinaciones de las mismas. The method of claim 1 or 2, wherein the shape of each of the plurality of microelectrodes is selected from a group consisting essentially of a circle, a square, a rectangle, an oval and an ellipse and combinations thereof .
  11. 11. eleven.
    Un sistema que comprende: A system comprising:
    una tira de prueba que tiene un electrodo de referencia y un electrodo de trabajo, en la que el electrodo de trabajo se forma con una pluralidad de microelectrodos y se recubre con una capa de reactivo, y un medidor de prueba que comprende: a test strip having a reference electrode and a working electrode, wherein the working electrode is formed with a plurality of microelectrodes and coated with a reagent layer, and a test meter comprising:
    un circuito electrónico para aplicar un voltaje de prueba entre el electrodo de referencia y el electrodo de trabajo; an electronic circuit for applying a test voltage between the reference electrode and the working electrode; y un procesador de señal para medir una corriente de prueba y para calcular un coeficiente de difusión efectiva. and a signal processor for measuring a test current and for calculating an effective diffusion coefficient.
  12. 12. 12.
    El sistema de la reivindicación 11, en el que la tira de prueba comprende además una parte de aislamiento que se dispone en la pluralidad de microelectrodos y la parte de aislamiento tiene una altura de entre aproximadamente un micrómetro y seis micrómetros. The system of claim 11, wherein the test strip further comprises an insulating portion provided in the plurality of microelectrodes and the insulation portion has a height of between about one micron and six micrometers.
  13. 13. 13.
    El sistema de la reivindicación 11, en el que el coeficiente de difusión efectiva se calcula a partir de la pendiente The system of claim 11, wherein the effective diffusion coefficient is calculated from the slope
    de la representación gráfica de regresión lineal de en base a una ecuación de la forma: the graphical representation of linear regression based on an equation of the form:
    en la que: in which:
    I(t) es la corriente de prueba en microamperios, medida en el instante t; I (t) is the test current in microamperes, measured at time t; ISS es la corriente de estado estacionario en microamperios; ISS is the steady state current in microamps; rd es el radio de un microelectrodo en centímetros; rd is the radius of a microelectrode in centimeters; yt es el tiempo en segundos. t is time in seconds.
  14. 14. El sistema de la reivindicación 13, en el que una concentración de glucosa corregida con hematocrito se calcula 14. The system of claim 13, wherein a corrected glucose concentration is calculated hematocrit
    en la que: in which:
    Cred es una concentración de mediador reducida; Cred is a reduced mediator concentration; ISS es la corriente de estado estacionario en microamperios; ISS is the steady state current in microamps; n es el número de electrones que se intercambian por ión que se somete a una reacción de oxidación/reducción; n is the number of electrons exchanged by ion undergoes oxidation / reduction;
    5 F es la constante de Faraday; 5 F is the Faraday constant; D es un coeficiente de difusión estimado en centímetro2/segundo; D is a diffusion coefficient estimated centímetro2 / second; y rd es el radio del microelectrodo en centímetros. and rd is the radius of the microelectrode in centimeters.
  15. 15. El sistema de la reivindicación 14, en el que un coeficiente de difusión efectiva se usa para discriminar entre una muestra de fluido de sangre completa y una muestra de fluido de disolución de control comparando el coeficiente de 15. The system of claim 14, wherein an effective diffusion coefficient is used to discriminate between a fluid sample of whole blood and fluid sample control solution by comparing the ratio of
    10 difusión efectiva con un intervalo de aceptación para sangre completa y un intervalo de aceptación para la disolución de control y el coeficiente de difusión efectiva se usa para determinar si una tira de prueba se forma con una 10 effective dissemination with an acceptance range for whole blood and an acceptance range for the control solution and the effective diffusion coefficient is used to determine whether a test strip is formed with a
    En la que: In which:
    es un coeficiente de difusión efectiva corregido en temperatura en centímetro2/segundo; is an effective diffusion coefficient corrected temperature centímetro2 / second; D es un coeficiente de difusión estimado efectivo en centímetro2/segundo; D is an effective diffusion coefficient estimated centímetro2 / second; 8 es una constante conocida para la difusión en función de la temperatura; 8 is a known constant for diffusion function of temperature; T es la temperatura en Kelvin de la muestra de fluido tal como se mide por el medidor de prueba; T is the temperature in Kelvin of the fluid sample as measured by the test meter; y T0 es una temperatura de referencia en Kelvin. and T0 is a reference temperature in Kelvin.
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Families Citing this family (17)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US8012428B2 (en) * 2008-10-30 2011-09-06 Lifescan Scotland, Ltd. Analytical test strip with minimal fill-error sample viewing window
GB2465842A (en) * 2008-12-05 2010-06-09 Accunostics Ltd Adaptor for an analyte measuring device
TWI388823B (en) * 2009-04-09 2013-03-11 Bionime Corp A method for estimating the distribution of a sample
CN106053585A (en) * 2009-05-12 2016-10-26 华广生技股份有限公司 Detection method for judging sample distribution status
US8101065B2 (en) * 2009-12-30 2012-01-24 Lifescan, Inc. Systems, devices, and methods for improving accuracy of biosensors using fill time
GB201005359D0 (en) 2010-03-30 2010-05-12 Menai Medical Technologies Ltd Sampling plate
GB201005357D0 (en) 2010-03-30 2010-05-12 Menai Medical Technologies Ltd Sampling plate
US8940141B2 (en) 2010-05-19 2015-01-27 Lifescan Scotland Limited Analytical test strip with an electrode having electrochemically active and inert areas of a predetermined size and distribution
JP5540384B2 (en) * 2011-05-16 2014-07-02 株式会社タニタ Biochemical measurement device
KR101466222B1 (en) * 2012-06-01 2014-12-01 주식회사 아이센스 Electrochemical biosensor with improved accuracy
KR20150036605A (en) * 2012-07-27 2015-04-07 바이엘 헬쓰케어, 엘엘씨 System and method for detecting used and dried sensors
WO2014072820A2 (en) * 2012-11-08 2014-05-15 Thomas William Beck Chronoamperometric methods and devices for electrochemical quantification of analytes
EP3327133A1 (en) * 2012-12-21 2018-05-30 Abbott Diabetes Care Inc. Method for improving measurement accuracy and devices and systems related thereto
FR3005505B1 (en) * 2013-05-13 2015-05-01 Biomerieux Sa Method for measuring the plasma concentration of an analyte directly on a whole blood sample
GB2514846B (en) * 2013-06-07 2015-09-30 Lifescan Scotland Ltd Electrochemical-based analytical test strip with a soluble electrochemically-active coating opposite a bare electrode
DE102013227125B4 (en) 2013-12-23 2016-04-07 Senslab-Gesellschaft Zur Entwicklung Und Herstellung Bioelektrochemischer Sensoren Mbh A method for determining a measurement signal hämatokritabhängigen in the determination of an analyte from whole blood using enzymatically-voltammetric Disposable sensors
CN105816184B (en) * 2015-01-06 2018-11-27 陈建诚 Glucose measurement method and apparatus

Family Cites Families (33)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5312590A (en) 1989-04-24 1994-05-17 National University Of Singapore Amperometric sensor for single and multicomponent analysis
AUPN661995A0 (en) 1995-11-16 1995-12-07 Memtec America Corporation Electrochemical cell 2
US5653918A (en) 1996-01-11 1997-08-05 E. I. Du Pont De Nemours And Company Flexible thick film conductor composition
US7112265B1 (en) * 1996-02-14 2006-09-26 Lifescan Scotland Limited Disposable test strips with integrated reagent/blood separation layer
US6241862B1 (en) 1996-02-14 2001-06-05 Inverness Medical Technology, Inc. Disposable test strips with integrated reagent/blood separation layer
US5708247A (en) 1996-02-14 1998-01-13 Selfcare, Inc. Disposable glucose test strips, and methods and compositions for making same
US6046051A (en) 1997-06-27 2000-04-04 Hemosense, Inc. Method and device for measuring blood coagulation or lysis by viscosity changes
JP3848993B2 (en) 1998-01-06 2006-11-22 アークレイ株式会社 Component of the measuring method and the measuring apparatus in the presence of a coexisting substance
GB9802503D0 (en) * 1998-02-05 1998-04-01 Isis Innovation Sensor
JP4050434B2 (en) 1999-11-29 2008-02-20 アークレイ株式会社 Discrimination method of sample
AU2006200073A1 (en) * 2000-02-02 2006-02-02 Lifescan, Inc. Electrochemical methods and devices for use in the determination of hematocrit corrected analyte concentrations
GB0005564D0 (en) 2000-03-08 2000-05-03 Inverness Medical Ltd Measurjement of substances in liquid
CN1319761A (en) 2000-03-15 2001-10-31 清华大学 Apparatus and method for high-flux electric rotation detection
CZ20023249A3 (en) 2000-03-28 2003-08-13 Diabetes Diagnostics, Inc. Quick-acting electrochemical sensor for monitoring glucose level
US20020092612A1 (en) 2000-03-28 2002-07-18 Davies Oliver William Hardwicke Rapid response glucose sensor
GB0030929D0 (en) 2000-12-19 2001-01-31 Inverness Medical Ltd Analyte measurement
CN1304838C (en) 2001-09-14 2007-03-14 爱科来株式会社 Concentration measuring method, concentration test instrument, and concentration measuring apparatus
CN1311233C (en) 2001-10-26 2007-04-18 爱科来株式会社 Method and apparatus for measuring specific component
US20030116447A1 (en) 2001-11-16 2003-06-26 Surridge Nigel A. Electrodes, methods, apparatuses comprising micro-electrode arrays
US6872299B2 (en) 2001-12-10 2005-03-29 Lifescan, Inc. Passive sample detection to initiate timing of an assay
CN1639563A (en) * 2002-03-08 2005-07-13 松下电器产业株式会社 Substrate determining method
US20030143113A2 (en) 2002-05-09 2003-07-31 Lifescan, Inc. Physiological sample collection devices and methods of using the same
GB0211449D0 (en) 2002-05-17 2002-06-26 Oxford Biosensors Ltd Analyte measurement
JP4642472B2 (en) 2002-10-30 2011-03-02 ライフスキャン・スコットランド・リミテッド Humidification of the enzyme print in a continuous process for manufacturing electrochemical sensors
MXPA05004644A (en) 2002-10-30 2005-06-08 Inverness Medical Ltd Respirators.
EP1467206A1 (en) 2003-04-08 2004-10-13 F.Hoffmann-La Roche Ag Biosensor system
US7488601B2 (en) 2003-06-20 2009-02-10 Roche Diagnostic Operations, Inc. System and method for determining an abused sensor during analyte measurement
CA2543802A1 (en) 2003-10-31 2005-05-19 Lifescan Scotland Limited Method of reducing the effect of direct and mediated interference current in an electrochemical test strip
US20060113187A1 (en) 2004-11-22 2006-06-01 Deng David Z Biosensors comprising semiconducting electrodes or ruthenium containing mediators and method of using the same
US7418285B2 (en) 2004-12-29 2008-08-26 Abbott Laboratories Analyte test sensor and method of manufacturing the same
US7468125B2 (en) 2005-10-17 2008-12-23 Lifescan, Inc. System and method of processing a current sample for calculating a glucose concentration
US8529751B2 (en) 2006-03-31 2013-09-10 Lifescan, Inc. Systems and methods for discriminating control solution from a physiological sample
US8163162B2 (en) 2006-03-31 2012-04-24 Lifescan, Inc. Methods and apparatus for analyzing a sample in the presence of interferents

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