ES2363957A1 - Employment of a mushroom extract in the production of foodstuffs. (Machine-translation by Google Translate, not legally binding) - Google Patents
Employment of a mushroom extract in the production of foodstuffs. (Machine-translation by Google Translate, not legally binding) Download PDFInfo
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Abstract
Description
Empleo de un extracto de madroño en la elaboración de productos alimenticios.Use of an extract of madroño in the Food products development.
La presente invención se encuadra dentro del sector de la alimentación y más particularmente dentro del sector de los aditivos antioxidantes para alimentos en general. En concreto la invención se refiere a un extracto con propiedades antioxidantes obtenido a partir del fruto de la madroñera (Arbutus unedo L.) y a su empleo en la elaboración de composiciones alimenticias como por ejemplo productos cárnicos que presentan propiedades mejoradas en cuanto a su vida útil y características sensoriales.The present invention falls within the food sector and more particularly within the sector of antioxidant additives for food in general. Specifically, the invention relates to an extract with antioxidant properties obtained from the fruit of the madroñera ( Arbutus unedo L.) and its use in the preparation of food compositions such as meat products that have improved properties in terms of their shelf life. and sensory characteristics.
Los antioxidantes sintéticos se han utilizado durante años como aditivos alimentarios para prolongar la vida útil, especialmente de las grasas y de productos con alto contenido en lípidos, retrasando el proceso de oxidación de los mismos. Sin embargo, su uso es cada vez más restringido debido a los riesgos y toxicidad potenciales de estas sustancias y el rechazo de los consumidores (Nawar W. W. (1996). Lipids. In Food Chemistry, O.R. Fennema (ed.), pp 225-319, Marcel Dekker, Inc., New York-Basel-Hong Kong). Así, hoy en día la tendencia de la industria alimentaria está enfocada hacia el reemplazo de estos antioxidantes sintéticos por antioxidantes de origen natural especialmente los provenientes de plantas. Hace unos años, el término antioxidante de origen natural se asociaba principalmente con compuestos tales como el ácido ascórbico -vitamina C-, la vitamina E y eventualmente con la vitamina A. Sin embargo, en los últimos años numerosas investigaciones has ampliado el número de especies químicas con actividad antioxidante, entre las que destaca especialmente, los denominados "polifenoles" debido a la presencia en su estructura química de uno o más anillos fenólicos (Heinonen, M. (2007). Antioxidant activity and antimicrobial effect of berry phenolics: a Finnish perspective- Review, Mol. Nutr. Food Res., 51, 684-691).Synthetic antioxidants have been used for years as food additives to prolong the shelf life, especially of fats and products with a high lipid content, delaying their oxidation process. However, its use is increasingly restricted due to the potential risks and toxicity of these substances and the rejection of consumers (Nawar WW (1996). Lipids. In Food Chemistry, OR Fennema (ed.), Pp 225-319 , Marcel Dekker, Inc., New York-Basel-Hong Kong). Thus, today the trend of the food industry is focused on replacing these synthetic antioxidants with naturally occurring antioxidants, especially those from plants. A few years ago, the term antioxidant of natural origin was mainly associated with compounds such as ascorbic acid -vitamin C-, vitamin E and eventually with vitamin A. However, in recent years numerous investigations have expanded the number of species Chemicals with antioxidant activity, among which the so-called "polyphenols" stand out due to the presence in their chemical structure of one or more phenolic rings (Heinonen, M. (2007). Antioxidant activity and antimicrobial effect of berry phenolics: a Finnish perspective- Review, Mol. Nutr. Food Res ., 51, 684-691).
Estos compuestos fenólicos y, en particular los presentes en frutas y vegetales, han ganado interés entre los consumidores y en la comunidad científica porque además de sus uso como antioxidantes en los alimentos, numerosos ensayos han encontrado evidencias de que esos compuestos presentan, en determinadas condiciones, propiedades antibacterianas, así como efectos beneficiosos frente a determinadas patologías cardiovasculares o frente a determinados tipos de cáncer.These phenolic compounds and in particular the present in fruits and vegetables, they have gained interest among consumers and in the scientific community because in addition to its use As antioxidants in food, numerous trials have found evidence that these compounds present, in certain conditions, antibacterial properties, as well as beneficial effects against certain pathologies cardiovascular or against certain types of cancer.
Sin embargo, también existen un buen número de publicaciones y ensayos científicos en los que la utilización de polifenoles como agentes antioxidantes no reportaron resultados beneficiosos o incluso se mostraron como agentes pro-oxidantes, es decir que promueven la oxidación, en ensayos de estabilidad oxidativa (Estévez, M.; Kylli, P.; Puolanne, E.; Kivikari, R.; & Heinonen, M. (2008) Oxidation of skeletal muscle myofibrillar proteins in oil-in-water emulsions: interaction with lipids and effect of selected phenolic compounds. Journal of Agricultural and Food Chemistry, 56, 10933-10940; Salminen, H. & Heinonen, M. (2008). Plant phenolics affect oxidation of tryptophan. Journal of Agricultural and Food Chemistry, 2008, 56, 7472-81). En la actualidad se conoce que esta aparente contradicción de los resultados obtenidos puede atribuirse a varios factores que deben siempre tenerse en cuenta cuando se plantea el uso de estos compuestos como antioxidante en alimentos:However, there are also a good number of publications and scientific trials in which the use of polyphenols as antioxidant agents did not report beneficial results or even showed themselves as pro-oxidizing agents, that is, they promote oxidation, in oxidative stability tests ( Estévez, M .; Kylli, P .; Puolanne, E .; Kivikari, R .; & Heinonen, M. (2008) Oxidation of skeletal muscle myofibrillar proteins in oil-in-water emulsions: interaction with lipids and effect of selected phenolic compounds. Journal of Agricultural and Food Chemistry , 56, 10933-10940; Salminen, H. & Heinonen, M. (2008). Plant phenolics affect oxidation of tryptophan. Journal of Agricultural and Food Chemistry, 2008, 56, 7472-81) . At present it is known that this apparent contradiction of the results obtained can be attributed to several factors that must always be taken into account when considering the use of these compounds as an antioxidant in food:
Bajo el término "polifenoles" se engloban una gran variedad de compuestos fenólicos que se clasifican en: 1.-) flavonoideos, formados por dos anillos aromáticos unidos por un heterociclo oxigenado, y entre los que se encuentran los flavonoles, flavonas, isoflavonas, antocianos, proantocianidinas, flavanonas, etc. y 2.-) no flavonoideos, comúnmente llamados ácidos fenólicos, que contienen un anillo aromático con diferentes grupos funcionales. La distribución de estos compuestos en los vegetales, su polaridad y solubilidad, así como su actividad antioxidante varía notablemente entre las distintas familias químicas, por lo que se requiere un amplio conocimiento de que compuestos fenólicos y en qué concentración están presentes en un extracto dado, con el fin de poder predecir su potencial uso como antioxidante.Under the term "polyphenols" a wide variety of phenolic compounds are included that are classified into: 1.-) flavonoids , formed by two aromatic rings joined by an oxygenated heterocycle, and among which are flavonols, flavones, isoflavones, anthocyanins , proanthocyanidins, flavanones, etc. and 2.-) non-flavonoids , commonly called phenolic acids, which contain an aromatic ring with different functional groups. The distribution of these compounds in plants, their polarity and solubility, as well as their antioxidant activity varies significantly among the different chemical families, so it is required a broad knowledge of what phenolic compounds and in what concentration are present in a given extract, in order to predict its potential use as an antioxidant.
De manera general a los compuestos fenólicos se
le atribuyen características reductoras ya que actúan como agentes
donadores de electrones demostrando su potencial como
neutralizadores de radicales libres, y por tanto actuando así como
antioxidantes. Sin embargo, en sistemas más complejos como en un
producto cárnico, los compuestos fenólicos están integrados en
reacciones redox mucho más complejas y su potencial reductor es
dependiente de muchos factores tales como el pH, su concentración o
la presencia de otros compuestos tales como metales u otros
antioxidantes, pudiendo un mismo compuesto actuar como antioxidante
o pro-oxidante en función de los factores
anteriormente descritos. Además, los compuestos fenólicos de las
plantas pueden también regenerar otros antioxidantes o actuar
sinér-
gicamente o antagónicamente con otros compuestos
fenólicos u otros antioxidantes endógenos como la vitamina E.In general, phenolic compounds are attributed reducing characteristics as they act as electron donor agents demonstrating their potential as free radical neutralizers, and thus acting as antioxidants. However, in more complex systems such as in a meat product, phenolic compounds are integrated into much more complex redox reactions and their reducing potential is dependent on many factors such as pH, concentration or the presence of other compounds such as metals or other antioxidants, the same compound being able to act as an antioxidant or pro-oxidant depending on the factors described above. In addition, plant phenolic compounds can also regenerate other antioxidants or act synergistically.
genetically or antagonistically with other phenolic compounds or other endogenous antioxidants such as vitamin E.
Por lo tanto a la vista de lo expuesto es evidente que sigue existiendo la necesidad de proporcionar nuevos extractos naturales eficaces con capacidad antioxidante, a la vez que no pro-oxidante, para poder ser utilizados en el sector alimenticio y alargar la vida media de los mismos. En este sentido los inventores han descubierto un nuevo extracto obtenido a partir del madroño, fruto de la madroñera (Arbutus unedo L.), útil para su empleo en la elaboración en general de productos alimenticios, y productos cárnicos en particular. Este extracto ha demostrado su eficacia como agente antioxidante en productos cárnicos crudos y tratados térmicamente, mejorando la vida útil y estabilidad oxidativa de los mismos, siendo además un producto que no produce modificaciones significativas en el color o sabor de los alimentos.Therefore, in view of the above, it is evident that there is still a need to provide new effective natural extracts with antioxidant capacity, as well as non-pro-oxidant, in order to be used in the food sector and extend the half-life of same. In this sense the inventors have discovered a new extract obtained from the strawberry tree, fruit of the strawberry tree ( Arbutus unedo L.), useful for its use in the elaboration in general of food products, and meat products in particular. This extract has proven its effectiveness as an antioxidant agent in raw and heat treated meat products, improving their shelf life and oxidative stability, being also a product that does not produce significant changes in the color or taste of food.
Figura 1. Evolución del contenido en TBA-RS de hamburguesas frescas sometidas a refrigeración y elaboradas con una fórmula base (Control) y con la adición de un extracto obtenido de los frutos del Arbutus unedo L.Figure 1. Evolution of the TBA-RS content of fresh hamburgers subjected to refrigeration and made with a base formula (Control) and with the addition of an extract obtained from the fruits of Arbutus unedo L.
Figura 2. Evolución del contenido en TBA-RS de hamburguesas cocinadas sometidas a refrigeración y elaboradas con una fórmula base (Control) y con la adición de un extracto obtenido del fruto Arbutus unedo L.Figure 2. Evolution of the content in TBA-RS of cooked hamburgers subjected to refrigeration and made with a base formula (Control) and with the addition of an extract obtained from the fruit Arbutus unedo L.
Figura 3. Evolución del contenido en carbonilos de hamburguesas cocinadas sometidas a refrigeración y elaboradas con una fórmula base (Control) y con la adición de un extracto obtenido del fruto Arbutus unedo L.Figure 3. Evolution of the carbonyl content of cooked hamburgers subjected to refrigeration and made with a base formula (Control) and with the addition of an extract obtained from the Arbutus unedo L. fruit.
Figura 4. Evolución del valor a* del sistema CIELa*b* de hamburguesas cocinadas sometidas a refrigeración y elaboradas con una fórmula base (Control) y con la adición de un extracto obtenido del fruto Arbutus unedo L.Figure 4. Evolution of the a * value of the CIELa * b * system of cooked hamburgers subjected to refrigeration and made with a base formula (Control) and with the addition of an extract obtained from the Arbutus unedo L. fruit.
La presente invención se relaciona por tanto con un extracto con actividad antioxidante obtenido a partir del fruto del Arbutus unedo L. útil para su empleo en la elaboración en general de productos alimenticios, y productos cárnicos en particular.The present invention is therefore related to an extract with antioxidant activity obtained from the fruit of Arbutus unedo L. useful for its use in the preparation in general of food products, and meat products in particular.
El extracto es obtenible mediante un procedimiento, en adelante procedimiento de la invención, que comprende las siguientes etapas:The extract is obtainable by means of a procedure, hereinafter procedure of the invention, which It comprises the following stages:
(a) extracción a partir del fruto triturado con un disolvente seleccionado entre agua, etanol o sus mezclas y obtención de un sobrenadante(a) extraction from crushed fruit with a solvent selected from water, ethanol or mixtures thereof and obtaining a supernatant
(b) concentración del sobrenadante resultante de la etapa (a) mediante destilación a vacío.(b) concentration of the supernatant resulting from step (a) by vacuum distillation.
El Arbutus unedo L. (nombre común madroñera; nombre del fruto madroño) es un arbusto de amplia distribución en el ecosistema Mediterráneo. El procedimiento de la invención comprende en primer lugar la recolección de los frutos, su lavado y cortado. A continuación los frutos cortados se ponen en contacto con el disolvente seleccionado, que en una realización particular es una mezcla de etanol y agua, preferentemente en la proporción de 7:3. La cantidad relativa de fruto y disolvente puede variar entre amplios márgenes dependiendo en parte de la necesidad de obtener un extracto más o menos concentrado en función de la aplicación posterior a la que se destine. En una realización particular la proporción fruto: disolvente siendo el disolvente una mezcla de etanol agua de en la proporción 7:3, es de 1:5. El disolvente preferentemente es de uso alimentario ya que el extracto obtenido es útil en elaboración de productos alimenticios.The Arbutus unedo L. (common name madroñera; name of the madroño fruit) is a shrub of wide distribution in the Mediterranean ecosystem. The process of the invention first comprises the collection of the fruits, their washing and cutting. The cut fruits are then contacted with the selected solvent, which in a particular embodiment is a mixture of ethanol and water, preferably in the ratio of 7: 3. The relative amount of fruit and solvent can vary between wide margins depending in part on the need to obtain a more or less concentrated extract depending on the application after which it is destined. In a particular embodiment, the fruit: solvent ratio, with the solvent being a mixture of ethanol water of 7: 3, is 1: 5. The solvent is preferably for food use since the extract obtained is useful in the preparation of food products.
El tipo de disolvente utilizado condiciona el tipo de compuestos fenólicos extraídos en cada caso y su concentración por una cuestión evidente de polaridad o afinidad química. No obstante los inventores han demostrado que la extracción de compuestos fenólicos con agua, o etanol o con mezclas de ambos, conduce a extractos con capacidad antioxidante similar y eficacia contrastada, aunque la mezcla de etanol:agua y en particular en proporción 7:3 se ha probado como el disolvente que proporciona mayor grado de extracción. La elección del tipo de disolvente en particular de la cantidad de etanol viene determinado en gran medida por el uso al que se destine el extracto de la invención como se expone más adelante.The type of solvent used determines the type of phenolic compounds extracted in each case and their concentration for an obvious question of polarity or affinity chemistry. However, the inventors have shown that extraction of phenolic compounds with water, or ethanol or with mixtures of both, leads to extracts with similar antioxidant capacity and efficacy contrasted, although the mixture of ethanol: water and in particular in 7: 3 ratio has been tested as the solvent it provides higher degree of extraction. The choice of type of solvent in particular amount of ethanol is largely determined for the use to which the extract of the invention is intended as expose later.
La etapa a) del procedimiento se lleva a cabo en un sistema de homogeneización convencional provisto de cuchillas y provisto de medios que permitan mantener la temperatura igual o inferior a 35ºC, tal como un baño de agua fría. Se obtiene un homogeneizado, que generalmente se separa a continuación, en un sólido y un sobrenadante. Dicha separación puede hacerse mediante cualquier procedimiento convencional por ejemplo por centrifugación seguido de filtración o decantación.Stage a) of the procedure is carried out in a conventional homogenization system provided with blades and provided with means that keep the temperature the same or below 35 ° C, such as a cold water bath. You get a homogenized, which is usually separated then in a solid and a supernatant. Said separation can be done by any conventional procedure for example by centrifugation followed by filtration or decantation.
El sobrenadante resultante de la etapa a) generalmente se filtra y puede someterse a continuación a la siguiente etapa b) o alternativamente puede almacenarse refrigerado después de la filtración hasta el momento de llevar a cabo dicha etapa b).The supernatant resulting from step a) it is usually filtered and can then undergo next step b) or alternatively it can be stored refrigerated after filtration until the moment of carrying out said stage b).
La etapa b) comprende someter el sobrenadante de
la etapa a) a una destilación a vacío que puede llevarse a cabo de
forma convencional mediante por ejemplo columna de vacío o en un
evaporador rotativo. El sobrenadante se concentra por eliminación
del disolvente a baja temperatura como consecuencia del vacío lo
cual permite preservar la actividad antioxidante de los compuestos
extraídos. El tipo se disolvente utilizado en el procedimiento de la
invención influye en el tiempo necesario para la etapa b) (mayor
cuanto mayor sea el contenido en agua o si es únicamente
agua).Step b) comprises subjecting the supernatant from step a) to vacuum distillation which can be carried out in a conventional manner by means of, for example, a vacuum column or in a rotary evaporator. The supernatant is concentrated by removal of the solvent at low temperature as a result of the vacuum which allows to preserve the antioxidant activity of the extracted compounds. The type of solvent used in the process of the invention influences the time required for step b) (the higher the water content or if it is only
Water).
El procedimiento de la invención comprende una etapa adicional de caracterización y titulación de la actividad antioxidante según la determinación de los compuestos fenólicos totales llevada a cabo según el método Folin-Ciocalteau (ver Ejemplos 1 y 2).The process of the invention comprises a additional stage of characterization and titling of the activity antioxidant according to the determination of phenolic compounds totals carried out according to the method Folin-Ciocalteau (see Examples 1 and 2).
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El procedimiento de la invención presenta la ventaja de ser eficaz, rápido, y de bajo costo además de respetuoso con el medio ambiente por el tipo de disolventes utilizados, y permite la obtención de un extracto del fruto del Arbutus unedo L. con propiedades antioxidantes, que constituye otro aspecto de la presente invención, en adelante extracto de la invención.The process of the invention has the advantage of being effective, fast, and inexpensive in addition to being environmentally friendly due to the type of solvents used, and allows obtaining an extract of the fruit of Arbutus unedo L. with antioxidant properties, which constitutes another aspect of the present invention, hereinafter referred to as an extract of the invention.
El extracto de la presente invención ha demostrado su eficacia como agente antioxidante en particular en productos cárnicos crudos y tratados térmicamente ensayados (ver ejemplo 4 y Figuras 1 a 4). Los resultados obtenidos han demostrado que además el extracto mejora la apariencia visual de los productos cárnicos durante su conservación, como consecuencia de una mejor estabilidad del color en comparación con un lote control así como una inhibición efectiva frente a los procesos oxidativos de los lípidos y/o de las proteínas de los productos cárnicos, mejorando la vida útil y estabilidad oxidativa de los mismos, todo esto, sin que el extracto produzca modificaciones significativas en el color o sabor de los alimentos debido a su incorporación en los productos. Por lo tanto una ventaja adicional del extracto de la invención es la capacidad de no alterar las propiedades organolépticas, de color, y sabor de las composiciones alimenticias a las que se incorpora lo que potencia evidentemente su aceptación por parte del consumidor.The extract of the present invention has proven effective as a particular antioxidant agent in raw and heat treated meat products tested (see example 4 and Figures 1 to 4). The results obtained have shown that also the extract improves the visual appearance of the products meat during storage, as a result of better color stability compared to a control lot as well as an effective inhibition against oxidative processes of lipids and / or proteins of meat products, improving the shelf life and oxidative stability thereof, all this, without the extract produces significant changes in color or Food flavor due to its incorporation into the products. Therefore an additional advantage of the extract of the invention is the ability not to alter the organoleptic, color properties, and taste of the food compositions to which the which obviously enhances its acceptance by the consumer.
Por tanto en otro aspecto la invención se refiere a un procedimiento para preparar una composición alimenticia que comprende la adición a la misma del extracto de la invención.Therefore in another aspect the invention is refers to a procedure for preparing a food composition comprising the addition thereto of the extract of the invention.
La adición se puede llevar a cabo mediante cualquier técnica convencional. La forma de incorporación depende por ejemplo del tipo de composición alimenticia, y en particular del tipo de producto cárnico sobre el que se adiciona. Así en una realización preferente la adición se lleva a cabo por incorporación directa del extracto en la composición de un producto cárnico. En otra realización particular la adición se lleva a cabo por incorporación directa a la superficie del producto cárnico mediante micro-pulverización con spray. Típicamente antes de la micro-pulverización el extracto se filtra con un filtro de membrana adecuado (0.65 micras). La incorporación directa puede hacerse por ejemplo en el caso de productos cárnicos no picados tales como carne fresca o marinada envasadas en atmósferas modificadas.The addition can be carried out by Any conventional technique. The form of incorporation depends for example of the type of food composition, and in particular of type of meat product on which it is added. So in a preferred embodiment the addition is carried out by incorporation Direct extract in the composition of a meat product. In another particular embodiment the addition is carried out by direct incorporation to the surface of the meat product through spray micro spray. Typically before The micro-spray the extract is filtered with a suitable membrane filter (0.65 microns). Direct incorporation it can be done for example in the case of meat products not minced such as fresh or marinated meat packaged in atmospheres modified.
Como se ha mencionado anteriormente la elección del tipo de disolvente, y en particular de la cantidad de etanol en el caso de una mezcla etanol:agua, viene determinado en gran medida por el tipo de composición alimenticia al que se vaya a adicionar posteriormente el extracto de la invención así como por la técnica con la que la adición del extracto se lleva a cabo. En general para obtener productos cárnicos en los que se añade agua en la elaboración de su composición, como por ejemplo: salchichas cocidas, o fiambre de jamón, se usa preferentemente un extracto acuoso diluido en la propia agua de formulación del producto, con lo que en el procedimiento de obtención del extracto se utiliza preferentemente agua. Sin embargo, para obtener productos cárnicos en cuya elaboración no se añade agua en la composición, es preferible el empleo de etanol o de una mezcla de etanol:agua con mayor proporción de etanol en el procedimiento de la invención facilitando así la etapa de concentración a vacío. Cabe señalar no obstante que cualquier disolvente puede utilizarse en el procedimiento de la invención independientemente de la aplicación concreta y el modo de la misma. Las posibles variaciones en el grado de extracción de compuestos bioactivos en función del uso de una mayor o menor proporción de agua:etanol quedan minimizadas mediante la etapa adicional del procedimiento de la invención de caracterización y titulación de la actividad antioxidante en la que los extractos obtenidos son ajustados hasta presentar la concentración en polifenoles antioxidantes requerida en cada caso. Del mismo modo, otros parámetros, como la variabilidad intrínseca en la composición de las frutas silvestres (causada por año de cosecha, localización, tipo de suelo, estado de maduración...) hacen igualmente que esta etapa de caracterización y titulación de la actividad antioxidante se deba llevar a cabo de forma previa a su uso en productos alimenticios.As mentioned above the election of the type of solvent, and in particular of the amount of ethanol in the case of an ethanol mixture: water, is largely determined by the type of food composition to which it will be added subsequently the extract of the invention as well as by the technique with which the addition of the extract is carried out. In general for get meat products in which water is added in the elaboration of its composition, such as: cooked sausages, or ham meat, an aqueous extract is preferably used diluted in the product formulation water itself, so that in the procedure for obtaining the extract is used preferably water. However, to obtain meat products in whose preparation no water is added in the composition, it is the use of ethanol or a mixture of ethanol: water with higher proportion of ethanol in the process of the invention thus facilitating the vacuum concentration stage. It should be noted no Although any solvent can be used in the procedure of the invention regardless of application concrete and the way of it. Possible variations in grade of extraction of bioactive compounds depending on the use of a greater or lesser proportion of water: ethanol are minimized by the additional step of the process of the invention of characterization and titration of the antioxidant activity in which the extracts obtained are adjusted until the concentration in antioxidant polyphenols required in each case. Similarly, other parameters, such as intrinsic variability in the composition of wild fruits (caused by harvest year, location, soil type, maturation state ...) do also that this stage of characterization and titling of the antioxidant activity should be carried out prior to its Use in food products.
En otro aspecto adicional la invención se refiere a una composición alimenticia que comprende el extracto de la invención. Dicha composición alimenticia puede ser cualquier tipo de alimento, ingrediente alimenticio, o bebida, sin ningún tipo de limitación, tales como por ejemplo, entre otros, salsas, alimentos precocinados, sopas, leche, yogurt, quesos, pan, bizcochos, galletas, etc. En una realización particular dicha composición es producto cárnico, tal como por ejemplo un producto cárnico crudo, un producto cárnico tratado térmicamente, un producto cárnico crudo curado, un producto cárnico adobado, entre otros.In a further aspect the invention is refers to a food composition comprising the extract of the invention. Said food composition can be any type of food, food ingredient, or drink, without any limitation, such as, for example, sauces, food precooked, soups, milk, yogurt, cheeses, bread, biscuits, cookies, etc. In a particular embodiment said composition is meat product, such as for example a raw meat product, a heat treated meat product, a raw meat product Cured, a marinated meat product, among others.
La cantidad adecuada de extracto para cada composición alimenticia y en particular para cada producto cárnico, puede variar dentro de amplios márgenes, y ser determinada en cada caso fácilmente por el experto en la materia. Dicha cantidad depende sobre todo de la naturaleza de la composición alimenticia, y en particular del producto cárnico al que va destinado, en concreto de la composición, tratamiento tecnológico, contenido y tipo de grasa presente en el mismo, etc., En una realización preferente el extracto está presente en la composición alimenticia, y en particular en un producto cárnico, en una cantidad caracterizada por ser capaz de inhibir los procesos oxidativos de los lípidos y/o proteínas. En una realización particular la cantidad de extracto en un producto cárnico es tal que el contenido de polifenoles totales que presenta es de 200-400 mg de equivalentes de ácido gálico por Kg de producto cárnico, habiéndose determinado dicho contenido de los compuestos fenólicos según el método Folin-Ciocalteau (ver Ejemplo 1).The right amount of extract for each food composition and in particular for each meat product, it can vary within wide margins, and be determined in each easily case by the expert in the field. That amount depends especially of the nature of the food composition, and in particular of the meat product to which it is intended, specifically the composition, technological treatment, content and type of fat present therein, etc., In a preferred embodiment the extract is present in the food composition, and in particular in a meat product, in an amount characterized by be able to inhibit the oxidative processes of lipids and / or proteins In a particular embodiment the amount of extract in a meat product is such that the total polyphenol content which is 200-400 mg equivalent of gallic acid per kg of meat product, having been determined said content of the phenolic compounds according to the method Folin-Ciocalteau (see Example 1).
Los inventores han llevado a cabo ensayos comparativos que muestran la eficacia antioxidante del extracto de la invención incorporado a productos cárnicos (ver Ejemplo 4). Así en las figuras 1 y 2 se muestran los resultados de la evolución del contenido en TBA-RS de hamburguesas frescas y cocinadas sometidas a refrigeración. La determinación del contendido en TBA-RS (sustancias reactivas al ácido tiobarbitúrico) es uno de los métodos mas extendidos para el estudio de la oxidación de los lípidos en los alimentos (Raharjo, S. & Sofos, J. N. (1993). Methodology for measuring malonaldehyde as a product of lipid peroxidation in muscles tissues: a review. Meat Science, 35: 145-169; Estévez, M., Morcuende, D. & Ventanas, S. (2009). Determination of oxidation. In "Handbook of Muscle Foods Analysis" 13, 221-239. CRC Press. Taylor & Francis Groups). Esta determinación se realizó siguiendo el método descrito por Tarladgis y cols. (1960). El fundamento de este método reside en que el malondialdehído (un producto resultante de la oxidación lipídica) reacciona con el ácido tiobarbitúrico en medio ácido dando lugar a un pigmento coloreado que es medible espectrofotométricamente a 532 nm; por tanto un incremento del contenido en TBA-RS está relacionado con un incremento en el desarrollo de los procesos oxidativos de los lípidos de los alimentos.The inventors have carried out comparative tests that show the antioxidant efficacy of the extract of the invention incorporated into meat products (see Example 4). Thus, figures 1 and 2 show the results of the evolution of the TBA-RS content of fresh and cooked hamburgers subjected to refrigeration. The determination of the content in TBA-RS (thiobarbituric acid reactive substances) is one of the most widespread methods for the study of lipid oxidation in food (Raharjo, S. & Sofos, JN (1993). Methodology for measuring malonaldehyde as a product of lipid peroxidation in muscles tissues: a review. Meat Science , 35: 145-169; Estévez, M., Morcuende, D. & Ventanas, S. (2009). Determination of oxidation. In "Handbook of Muscle Foods Analysis "13, 221-239. CRC Press. Taylor & Francis Groups). This determination was made following the method described by Tarladgis et al. (1960). The rationale for this method is that malondialdehyde (a product resulting from lipid oxidation) reacts with thiobarbituric acid in an acidic medium resulting in a colored pigment that is spectrophotometrically measurable at 532 nm; therefore an increase in the content in TBA-RS is related to an increase in the development of oxidative processes of food lipids.
En la figura 3 se muestra los resultados de la evolución del contenido en carbonilos de hamburguesas cocinadas sometidas a refrigeración. El incremento de los carbonilos es una medida que nos indica el desarrollo de los procesos oxidativos de las proteínas de los alimentos. La medida de contenido en carbonilos es unos de los métodos más utilizado y extendido para determinación de la oxidación de las proteínas la carne y los productos cárnicos (Estévez, M., Morcuende, D. & Ventanas, S. (2009). Determination of oxidation. In "Handbook of Muscle Foods Analysis" 13, 221-239. CRC Press. Taylor & Francis Groups). Esta determinación del contenido en carbonilos mostrado en este ejemplo del ensayo de la actividad antioxidante del extracto de Arbutus unedo L. se realizó según el método descrito por Oliver y cols. (Oliver, C.N.; Ahn, B.-W-; Moerman, E.J.; Goldstein, S.; & Stadtman, E.R. (1997) Aged-related changes in oxidized proteins, J. Biol. Chem., 262, 5488) cuyo fundamento consiste en que los carbonilos (productos resultantes de la oxidación de las proteínas) reaccionan con el reactivo DNPH (2,4-dinitrofenilhidracina) produciendo de manera proporcional a su concentración un pigmento medible espectrofotométricamente.Figure 3 shows the results of the evolution of the carbonyl content of cooked hamburgers under refrigeration. The increase of carbonyls is a measure that indicates the development of oxidative processes of food proteins. The measurement of carbonyl content is one of the most widely used and widespread methods for determining the oxidation of meat and meat products (Estévez, M., Morcuende, D. & Ventanas, S. (2009). Determination of oxidation. In "Handbook of Muscle Foods Analysis" 13, 221-239. CRC Press. Taylor & Francis Groups). This determination of the carbonyl content shown in this example of the test of the antioxidant activity of the extract of Arbutus unedo L. was carried out according to the method described by Oliver et al. (Oliver, CN; Ahn, B.-W-; Moerman, EJ; Goldstein, S .; & Stadtman, ER (1997) Aged-related changes in oxidized proteins, J. Biol. Chem ., 262, 5488) whose basis it consists in that the carbonyls (products resulting from the oxidation of the proteins) react with the DNPH reagent (2,4-dinitrophenylhydrazine) producing a spectrophotometrically measurable pigment proportional to its concentration.
En la figura 4 se muestra la evolución del valor a* del sistema CIELa*b* de hamburguesas cocinadas sometidas a refrigeración. La medida de color instrumental está ampliamente difundida en el estudio de las características visuales de la carne y los productos cárnicos (Faustman, C. & Cassen, R.G. (1990). The biochemical basis for discoloration in fresh meat: A review. Journal of Muscle Food, 1: 217-243). En el presente ensayo el color instrumental de las hamburguesas se determinó mediante un colorímetro Minolta modelo Chroma Meter CR-300 equipado con iluminación difusa de lámpara de xenón y con un área de medición de 8 mm. Se empleó un iluminante D65 con geometría de observación con ángulo de 0º. El aparato fue calibrado mediante una placa de calibración de color blanco modelo CR-A43. Las mediciones se hicieron en el espacio de color CIEL*a*b* (CIE, 1976) del que se obtienen las coordenadas de cromaticidad L* (luminosidad), a* (eje rojo-verde) y b* (eje amarillo-azul). Los resultados del la figura 4 muestran la evolución del valor a* (intervalo -60, verde puro; +60, rojo puro) del sistema CIELa*b* que es una medida que nos indica principalmente la evolución del color rojo de los alimentos, siendo este hecho de especial interés en los productos cárnicos. La reducción de la coloración roja de la carne y productos cárnicos durante la refrigeración está relacionada con la oxidación de los pigmentos presentes en la carne (mioglobina).Figure 4 shows the evolution of the a * value of the CIELa * b * system of cooked hamburgers under refrigeration. Instrumental color measurement is widespread in the study of the visual characteristics of meat and meat products (Faustman, C. & Cassen, RG (1990). The biochemical basis for discoloration in fresh meat: A review. Journal of Muscle Food , 1: 217-243). In this test, the instrumental color of the hamburgers was determined by a Minolta colorimeter model Chroma Meter CR-300 equipped with diffuse xenon lamp illumination and with a measuring area of 8 mm. A D65 illuminant with observation geometry with an angle of 0 ° was used. The device was calibrated using a white calibration plate model CR-A43. The measurements were made in the CIEL * a * b * (CIE, 1976) color space from which the chromaticity coordinates L * (luminosity), a * (red-green axis) and b * (yellow-blue axis) are obtained . The results in Figure 4 show the evolution of the a * value (range -60, pure green; +60, pure red) of the CIELa * b * system, which is a measure that mainly indicates the evolution of the red color of food, this fact being of special interest in meat products. The reduction of the red coloration of meat and meat products during refrigeration is related to the oxidation of pigments present in meat (myoglobin).
Por último una ventaja adicional de la presente invención reside en que el extracto se obtiene a partir del fruto de un arbusto de amplia distribución y accesibilidad en el ecosistema Mediterráneo.Finally an additional advantage of the present invention resides in that the extract is obtained from the fruit of a bush with wide distribution and accessibility in the ecosystem Mediterranean.
A continuación se presentan ejemplos ilustrativos de la invención que se exponen para una mejor comprensión de la invención y en ningún caso deben considerarse una limitación del alcance de la misma.Below are examples illustrative of the invention set forth for a better understanding of the invention and in no case should be considered a Limitation of its scope.
Se caracterizó el potencial antioxidante de los frutos mediante técnicas que cuantifican el contenido en compuestos fenólicos totales y actividad antioxidante in vitro:The antioxidant potential of the fruits was characterized by techniques that quantify the total phenolic compound content and antioxidant activity in vitro :
La determinación de compuestos fenólicos en los extractos del fruto de Arbutus unedo L. se realizó mediante el método de Folin-Ciocalteu descrito por Singleton y Rossi (Singleton, V. L., & Rossi, J.A. (1965). Colorimetry of total phenolics with phosphomolybdic-phosphotungstic acid reagents. Am. J. Enol. Vitic., 144-158) con modificaciones Pantelidis y cols. (Pantelidis, G. E., Vasilakakis, M., Manganaris, G. A., & Diamantidis, Gr. (2007). Antioxidant capacity, phenol, anthocyanin and ascorbic acid contents in raspberries, blackberries, red currants, gooseberries and Cornelian cherries. Food Chemistry, 102, 777-783). Los resultados se muestran en la tabla 1. El fundamento de esta determinación se basa en los compuestos fenólicos de las frutas se oxidan por el reactivo Folin-Ciocalteu, dando una coloración azul directamente proporcional al contenido de polifenoles. Brevemente, se tomó una alícuota de 0,5 mL del extracto etanólico en un tubo de ensayo; posteriormente se añadieron 2.5 mL de reactivo de Folin-Ciocalteu al 10% (en agua) y 2,0 mL de carbonato de sodio al 7,5% (p/v). La mezcla fue incubada a temperatura ambiente a oscuridad durante 60 minutos. Tras este periodo de tiempo la absorbencia fue medida inmediatamente a 740 nm, contra un blanco en el que la muestra se sustituyó por la misma cantidad de agua. Las medidas cuantitativas fueron realizadas contrastando los resultados con una curva de calibración utilizando ácido gálico como estándar. Los resultados se expresaron como mg de equivalentes de ácido gálico (GAE)/100 g de fruta.The determination of phenolic compounds in the extracts of the fruit of Arbutus unedo L. was carried out by the Folin-Ciocalteu method described by Singleton and Rossi (Singleton, VL, & Rossi, JA (1965). Colorimetry of total phenolics with phosphomolybdic-phosphotungstic acid reagents Am. J. Enol. Vitic ., 144-158) with modifications Pantelidis et al. (Pantelidis, GE, Vasilakakis, M., Manganaris, GA, & Diamantidis, Gr. (2007). Antioxidant capacity, phenol, anthocyanin and ascorbic acid contents in raspberries, blackberries, red currants, gooseberries and Cornelian cherries. Food Chemistry , 102 , 777-783). The results are shown in Table 1. The rationale for this determination is based on the phenolic compounds of the fruits oxidized by the Folin-Ciocalteu reagent, giving a blue coloration directly proportional to the polyphenol content. Briefly, a 0.5 mL aliquot of the ethanol extract was taken in a test tube; subsequently 2.5 mL of 10% Folin-Ciocalteu reagent (in water) and 2.0 mL of 7.5% sodium carbonate (w / v) were added. The mixture was incubated at room temperature in the dark for 60 minutes. After this period of time the absorbency was measured immediately at 740 nm, against a blank in which the sample was replaced by the same amount of water. Quantitative measurements were performed by contrasting the results with a calibration curve using gallic acid as standard. The results were expressed as mg of gallic acid equivalents (GAE) / 100 g of fruit.
La determinación de la actividad antioxidante in vitro de las frutas se llevó a cabo mediante el ensayo con el radical, 2,2-difenil-1-picrilhidrazilo -DPPH- y con la determinación de la capacidad antioxidante equivalente de TROLOX (TEAC) utilizando el radical ABTS. Estas técnicas se basan en la capacidad de las sustancias con actividad antioxidante en reducir un radical sintético que presenta una coloración medible espectrofotométricamente, siendo su actividad antioxidante in vitro proporcional a la decoloración producida al radical.The determination of the in vitro antioxidant activity of the fruits was carried out by testing with the radical, 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl -DPPH- and with the determination of the equivalent antioxidant capacity of TROLOX (TEAC) using the radical ABTS. These techniques are based on the ability of substances with antioxidant activity to reduce a synthetic radical that has a spectrophotometrically measurable coloration, its in vitro antioxidant activity being proportional to the discoloration produced to the radical.
La actividad antioxidante del extracto etanólico del madroño fue determinada mediante la técnica del radical DPPH descrita por Turkmen y cols., (Turkmen, N., Sari, F., & Velioglu, Y. S. (2006). Effects of extraction solvents on concentration and antioxidant activity of black and mate tea polyphenols determined by ferrous tartrate and Folin-Ciocalteu methods. Food Chemistry, 99, 835-841); los resultados se muestran en la tabla 1. Se preparó una solución de DPPH 6 x 10^{-5} M en metanol. Esta disolución de color violeta intenso presenta un máximo de absorción a 517 nm. Se prepararon disoluciones con concentraciones crecientes del extracto etanólico de Arbutus unedo L. Así, se mezcló una alícuota de cada una de las disoluciones con 1,950 mL del radical DPPH en metanol. La mezcla se dejó incubar a temperatura ambiente y en la oscuridad durante 90 minutos. La absorbancia de la disolución violeta del radical DPPH fue medida a 517 nm contra un blanco de metanol (Absorbancia del DPPH inicial) presentando valores próximos a 0.700. Para calcular el porcentaje de inhibición del radical DPPH para cada concentración de extracto se usó a siguiente ecuación:The antioxidant activity of the ethanolic extract of the arbutus was determined by the DPPH radical technique described by Turkmen et al. (Turkmen, N., Sari, F., & Velioglu, YS (2006). Effects of extraction solvents on concentration and antioxidant activity of black and mate tea polyphenols determined by ferrous tartrate and Folin-Ciocalteu methods. Food Chemistry , 99, 835-841); The results are shown in Table 1. A solution of 6 x 10-5M DPPH in methanol was prepared. This intense violet solution has a maximum absorption at 517 nm. Solutions with increasing concentrations of the ethanolic extract of Arbutus unedo L. were prepared. Thus, an aliquot of each of the solutions was mixed with 1,950 mL of the DPPH radical in methanol. The mixture was allowed to incubate at room temperature and in the dark for 90 minutes. The absorbance of the violet solution of the DPPH radical was measured at 517 nm against a methanol blank (Initial DPPH Absorbance) presenting values close to 0.700. To calculate the percentage of DPPH radical inhibition for each extract concentration, the following equation was used:
% inhibición = [(Abs DPPH inicial - Abs DPPH remanente)/Abs DPPH inicial]*100% inhibition = [(Initial DPPH Abs - Remaining DPPH Abs) / DPPH Abs initial] * 100
La capacidad antioxidante de cada muestra fue expresada como la cantidad de muestra (concentración de antioxidante) necesaria para disminuir la concentración inicial de DPPH al 50% (EC50). Para calcular este parámetro es necesario elaborar una curva patrón para cada extracto de fruto donde se enfrentan concentraciones crecientes del antioxidante (extracto de fruto) con el porcentaje de inhibición del radical obtenido para dicha concentración.The antioxidant capacity of each sample was expressed as the amount of sample (concentration of antioxidant) necessary to decrease the initial concentration of 50% DPPH (EC50). To calculate this parameter it is necessary develop a standard curve for each fruit extract where face increasing concentrations of the antioxidant (extract of fruit) with the percentage inhibition of the radical obtained for said concentration
El análisis de la capacidad antioxidante equivalente de Trolox (TEAC) del extracto del fruto de Arbutus unedo L. fue realizada usando el método del radical ácido 2,2'-azinobis-(3-etilbenzotiazolina-6-sulfonico) -ABTS- según el método descrito por Re y cols. (Re R., Pellegrini, N., Proteggente, A., Pannala, A., Yang, M., & Rice-Evans, C. (1999). Antioxidant activity applying an improved ABTS radical catión decolorization assay. Free Radical Biol. Med., 26, 1231-1237).The analysis of the equivalent antioxidant capacity of Trolox (TEAC) of the extract of the fruit of Arbutus unedo L. was performed using the method of the radical 2,2'-azinobis- (3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid) -ABTS- according to the method described by Re et al. (Re R., Pellegrini, N., Proteggente, A., Pannala, A., Yang, M., & Rice-Evans, C. (1999). Antioxidant activity applying an improved ABTS radical cation decolorization assay. Free Radical Biol Med ., 26, 1231-1237).
En primer lugar, el radical catión ABTS+ fue generado in vitro mediante la reacción de iguales cantidades (5 mL) de 7 mM ABTS (en agua) y 2,45 mM de persulfato del potasio (en agua). A continuación la mezcla fue incubada a temperatura ambiente y en oscuridad durante 15 horas (se obtiene una solución azul marino oscuro). Esta solución fue diluida posteriormente con etanol hasta que la absorbancia alcanzó (Abs ABTS+ inicial).First, the ABTS + cation radical was generated in vitro by reacting equal amounts (5 mL) of 7 mM ABTS (in water) and 2.45 mM of potassium persulfate (in water). The mixture was then incubated at room temperature and in the dark for 15 hours (a dark navy solution is obtained). This solution was subsequently diluted with ethanol until the absorbance reached (initial ABTS + Abs).
Un mililitro de la solución diluida de ABTS+ (absorbancia inicial: 0.700 a 734 nm) se mezcló con 10 \muL de un extracto diluido (1:10) del fruto de Arbutus unedo L. La mezcla reactiva fue incubada en oscuridad a temperatura ambiente durante 6 minutos. Las absorbancias de la disolución del radical ABTS+ y de las muestras problema (extractos de frutas + ABTS+) fueron medidas inmediatamente a 734 nm, contra un blanco de etanol. Se calculó en porcentaje de inhibición de acuerdo con la siguiente fórmula:One milliliter of the diluted ABTS + solution (initial absorbance: 0.700 at 734 nm) was mixed with 10 µL of a diluted extract (1:10) of the Arbutus unedo L. fruit. The reaction mixture was incubated in the dark at room temperature for 6 minutes The absorbances of the ABTS + radical solution and of the test samples (fruit extracts + ABTS +) were measured immediately at 734 nm, against an ethanol blank. It was calculated as a percentage of inhibition according to the following formula:
% inhibición = [(Abs ABTS+ inicial - Abs ABTS+ remanente)/Abs ABTS+ inicial]*100% inhibition = [(Abs ABTS + initial - Abs ABTS + remaining) / Abs ABTS + initial] * 100
Los porcentajes de inhibición obtenidos para las muestras problema se extrapolan en la curva de calibración lo que nos permite presentar los resultados como TEAC (Trolox equivalent antioxidant activity) es decir, la actividad antioxidante equivalente a la que tiene el Trolox (mM Trolox/miligramo extracto fruta fresca).The percentages of inhibition obtained for the problem samples are extrapolated in the calibration curve which allows us to present the results as TEAC (Trolox equivalent antioxidant activity) that is, antioxidant activity equivalent to that of Trolox (mM Trolox / milligram extract fresh fruit).
Una vez contrastada la capacidad antioxidantes in vitro del extracto se determinó el perfil de compuestos fenólicos mediante HPLC con el fin de poder conocer los principales compuestos determinar su potencial uso.Once the in vitro antioxidant capacity of the extract was tested, the profile of phenolic compounds was determined by HPLC in order to know the main compounds to determine their potential use.
Para ello se realizó un análisis según los métodos descritos por Kähkönen y cols. (Kähkönen, M., Hopia, A. & Heinonen, M. 2001. Berry Phenolics and Their Antioxidant Activity. Journal of Agricultural and Food Chemistry. 49:4076-4082) y Kylli y cols (Kylli, P., Nousiainen, P., Biely, P., Sipilä, J., Tenkanen, T & Heinonen, M. 2008. Antioxidant Potential of Hydroxycinnamic Acid Glycoside Esters. Journal of Agricultural and Food Chemistry, 56:4797-4805) mediante HPLC acoplado a detectores diode array y de fluorescencia. Los resultados obtenidos aparecen en la tabla 2.For this, an analysis was performed according to the methods described by Kähkönen et al. (Kähkönen, M., Hopia, A. & Heinonen, M. 2001. Berry Phenolics and Their Antioxidant Activity. Journal of Agricultural and Food Chemistry . 49: 4076-4082) and Kylli et al (Kylli, P., Nousiainen, P ., Biely, P., Sipilä, J., Tenkanen, T & Heinonen, M. 2008. Antioxidant Potential of Hydroxycinnamic Acid Glycoside Esters. Journal of Agricultural and Food Chemistry , 56: 4797-4805) via HPLC coupled to diode array detectors and fluorescence. The results obtained appear in table 2.
El procedimiento comenzó con el lavado y precortado de los frutos de Arbutus unedo L. recolectados en su momento óptimo de maduración. Los frutos precortados se mezclaron con una mezcla agua:etanol 7:3 en una proporción 1:5 en un bote para centrífuga de nalgene®.The procedure began with the washing and pre-cutting of the fruits of Arbutus unedo L. collected at their optimum ripening time. The pre-cut fruits were mixed with a 7: 3 water: ethanol mixture in a 1: 5 ratio in a nalgene® centrifuge bottle.
La extracción se llevó a cabo en un sistema de homogenización de cuchillas Sorvall Omni Mixer durante 5 minutos a 3000 r.p.m. Durante el procedimiento de picado el bote para centrífuga se introdujo en agua helada para evitar que la temperatura del contenido ascendiera de 35ºC. Tras el proceso de picado el bote con el homogeneizado se sometió a centrifugación (2000 r.p.m. 5 minutos) para separar los sólidos resultantes del proceso de homogeneizado.The extraction was carried out in a system of homogenization of Sorvall Omni Mixer blades for 5 minutes at 3000 r.p.m. During the chopping procedure the boat for centrifuge was introduced in ice water to prevent the content temperature would rise to 35 ° C. After the process of chopped the canister with the homogenate was subjected to centrifugation (2000 r.p.m. 5 minutes) to separate the resulting solids from the homogenization process.
El sobrenadanante obtenido se pasó a través de un papel de filtro y fue refrigerado hasta su concentración mediante destilado a vacío.The supernatant obtained was passed through a filter paper and was cooled to its concentration by vacuum distillate.
Una vez obtenidos el sobrenadante hidro-alcohólico del madroño de la fase anterior éste se sometió a una concentración mediante destilación a vacío. La concentración a vacío y bajas temperaturas permite preservar la actividad antioxidante de los compuestos extraídos. El proceso de concentración se llevó a cabo en un evaporador rotativo de vacío (Heidolph modelo W2000) acoplado a una bomba de vacío Büchi V-700 con controlador de vacío Büchi V-850.Once the supernatant is obtained hydro-alcoholic of the madroño of the previous phase This was subjected to a concentration by vacuum distillation. The vacuum concentration and low temperatures allows to preserve the antioxidant activity of the extracted compounds. The process of concentration was carried out on a rotary vacuum evaporator (Heidolph model W2000) coupled to a Büchi vacuum pump V-700 with Büchi vacuum controller V-850.
A continuación se llevó a cabo la caracterización y titulación de la actividad antioxidante hasta el nivel determinado para su aplicación en productos cárnicos mediante la determinación de los compuestos fenólicos totales (método Folin-Ciocalteau).Then the characterization and titration of antioxidant activity until level determined for application in meat products by the determination of total phenolic compounds (method Folin-Ciocalteau).
Como se ha descrito apartado "estado de la técnica" de esta memoria, la eficacia de los extractos antioxidantes en sistemas cárnicos depende de múltiples factores como la matriz del producto, la concentración de los compuestos fenólicos o la presencia de otros antioxidantes. Por este motivo se realizaron una serie de pruebas iniciales para determinar el nivel óptimo de incorporación del extracto con actividad antioxidante obtenido del Arbutus unedo L. Por otra parte, debido a la naturaleza de la fuente de extracción de los compuestos activos (frutos silvestres) se hace necesario caracterizar la eficacia de los extractos obtenidos, pues pueden existir variaciones en función del lugar o momento de recolección de los mismos. Tras una serie de pruebas experimentales iniciales en diversos productos cárnicos se determinó que el óptimo de utilización del extracto del Arbutus unedo L. se sitúa entre 200-400 ppm (partes por millón; mg/kg de producto cárnico), expresado en equivalentes de ácido gálico según se describe en el Ejemplo 1.1.As described in the " state of the art " section of this report, the efficacy of antioxidant extracts in meat systems depends on multiple factors such as the product matrix, the concentration of phenolic compounds or the presence of other antioxidants. For this reason, a series of initial tests were carried out to determine the optimum level of incorporation of the extract with antioxidant activity obtained from Arbutus unedo L. On the other hand, due to the nature of the source of extraction of the active compounds (wild fruits) It is necessary to characterize the effectiveness of the extracts obtained, as there may be variations depending on the place or time of collection. After a series of initial experimental tests on various meat products, it was determined that the optimal use of the extract of Arbutus unedo L. is between 200-400 ppm (parts per million; mg / kg of meat product), expressed in acid equivalents Gallic as described in Example 1.1.
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La forma de aplicación del extracto del fruto del Arbutus unedo L varió en función de tipo de producto cárnico al que fue destinado.The form of application of the extract of the fruit of Arbutus unedo L varied depending on the type of meat product to which it was intended.
Se ha testado la eficacia del extracto mediante aplicación directa en superficie mediante micro-pulverización con spray previa filtración con filtro de membrana de 0.65 micras; este método de aplicación se ha testado en productos no picados tales como carne fresca o marinada envasadas en atmósferas modificadas.The effectiveness of the extract has been tested by direct surface application by Spray micro-spray prior filtration with 0.65 micron membrane filter; This method of application has been tested on non-minced products such as fresh or marinated meat packaged in modified atmospheres.
A continuación se muestran los resultados obtenidos mediante en un producto cárnico fresco y tratado térmicamente incorporados directamente en la masa del producto a una concentración de 300 ppm.The results are shown below. obtained through a fresh and treated meat product thermally incorporated directly into the product mass at a 300 ppm concentration.
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Los datos mostrados en las Figuras 1 a 4 corresponden a un ejemplo de la utilización del extracto del fruto del Arbutus unedo L. realizado en hamburguesas (lotes control y con adicción del extracto de la presente invención) frescas y cocinadas que fueron sometidas a un periodo de refrigeración. A continuación se describe brevemente el procedimiento de fabricación y almacenamiento.The data shown in Figures 1 to 4 correspond to an example of the use of the extract of the fruit of Arbutus unedo L. made in hamburgers (control batches and with addiction of the extract of the present invention) fresh and cooked that were subjected to a period of refrigeration. The manufacturing and storage procedure is briefly described below.
Elaboración de las hamburguesas: La composición inicial de las hamburguesas por kilo de masa fresca fue la siguiente: Preparation of hamburgers : The initial composition of hamburgers per kilo of fresh dough was as follows:
- 725 gramos de lomo de cerdo725 grams of pork tenderloin
- 250 gramos de agua250 grams of Water
- 25 gramos de sal25 grams of Salt
El procesado del producto comenzó con un troceado grosero de la carne. En el bol de una cúter se añadieron la carne troceada, la sal y el extracto concentrado (salvo en el lote control) del Arbutus unedo L. (300 ppm respecto al producto final) diluido en el agua de la fórmula del producto. La masa se sometió a un proceso de picado fino durante 6 minutos en una cúter a vacío hasta obtener una pasta fina y homogénea; posteriormente se realizaron hamburguesas (peso 100 gramos) mediante un aparato al efecto.The processing of the product began with a crude chopping of the meat. In the bowl of a cutter, the chopped meat, salt and concentrated extract (except in the control lot) of the Arbutus unedo L. (300 ppm relative to the final product) diluted in the water of the product formula were added. The dough was subjected to a finely chopped process for 6 minutes in a vacuum cutter until a fine and homogeneous paste was obtained; Subsequently, hamburgers (weight 100 grams) were made using an apparatus for this purpose.
Cocinado de las hamburguesas: Parte de las hamburguesa obtenidas (lotes control y con extracto de la invención) se sometieron a un proceso de cocinado en horno de convección (180ºC/15 minutos). Burger cooking: Part of the hamburger obtained (control batches and extract of the invention) underwent a cooking process in a convection oven (180ºC / 15 minutes).
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Periodo de refrigeración de las hamburguesas: Posteriormente a la elaboración de las hamburguesas (frescas y cocinadas) se sometieron a un proceso de refrigeración comercial de 12 días, a una temperatura de 2ºC bajo iluminación fluorescente con un ciclo de luz/oscuridad de 12 horas. El objetivo de este procedimiento fue el simular las condiciones de almacenamiento de un lineal comercial. Durante los días 1, 4, 8 y 12 del periodo de refrigeración se extrajeron hamburguesas y se almacenaron a -80ºC hasta su análisis para poder realizar un seguimiento de los fenómenos oxidativos durante el periodo de refrigeración. Period of refrigeration of the hamburgers : Subsequently to the elaboration of the hamburgers (fresh and cooked) they underwent a commercial refrigeration process of 12 days, at a temperature of 2ºC under fluorescent lighting with a light / dark cycle of 12 hours. The objective of this procedure was to simulate the storage conditions of a commercial linear. On days 1, 4, 8 and 12 of the cooling period burgers were extracted and stored at -80 ° C until analysis to track oxidative phenomena during the cooling period.
Claims (15)
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