ES2302426B2 - Instrumento de evaluacion neurologica en roedores. - Google Patents
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Abstract
Instrumento de evaluación neurológica en
roedores diseñado para realizar un examen neurológico completo en
animales como la rata y el ratón, que son animales de
experimentación de uso habitual. Consta de una base en forma de caja
(2) con una superficie acolchada (1) que en su interior presenta un
compartimento a modo de cajón (4) conteniendo instrumental para la
evaluación neurológica, un plano inclinado abatible (3) y una barra
suspendida en forma de U invertida plegable (5). Siguiendo las
instrucciones de uso proporcionadas, se podrá evaluar la
funcionalidad básica del sistema nervioso de forma sistemática y
estandarizada. La evaluación neurológica en animales de
experimentación tiene interés en diversos sectores industriales como
el químico y agroalimentario para la determinación de posibles
efectos neurotóxicos de distintos productos, así como en el sector
farmacéutico para la valoración de propiedades psicoactivas.
Description
Instrumento de evaluación neurológica en
roedores.
El instrumento que se pretende patentar está
diseñado para la realización rápida, sistemática y estandarizada de
una serie de pruebas objetivas, que evalúan la función básica del
sistema nervioso en roedores a distintos niveles anatomofuncionales.
Mediante el instrumento que se describe podrá valorarse
objetivamente cualquier posible alteración del comportamiento en
animales de experimentación, que indicaría una acción sobre el
sistema nervioso de cualquier sustancia química o factor
ambiental.
El sector de producción principal al que
pertenece corresponde a la metalurgia y fabricación de productos
metálicos y plásticos, así como al de maquinaria y equipo mecánico.
Las aplicaciones industriales de interés de las pruebas neurológicas
en animales de experimentación se centran principalmente en el
sector químico, farmacéutico y agroalimentario.
En la actualidad, todavía no se ha detallado aún
ningún instrumento alternativo en el mercado. Sin embargo, se han
descrito diferentes pruebas neurológicas para animales de
experimentación en la literatura científica. En el sector
farmacéutico, se usa habitualmente una batería de pruebas que
se aplican de forma sistemática, conocida como test de Irwin [S.
Irwin, "Comprehensive observational assessment: Ia. A systematic
quantitative procedure for assessing the behavioral and physiologic
state of the mouse", Psychopharmacologia 13,
222-257 (1968)]. Esta batería de observación es
bastante compleja, requiriendo varias semanas para su aprendizaje y,
al menos, otras dos semanas más para su perfeccionamiento y
dominio. Además, incluye unas cincuenta medidas distintas, tanto
cualitativas como cuantitativas, existiendo una elevada
variabilidad en las puntaciones obtenidas por diferentes
experimentadores (se aborda este último punto en la propia
publicación). Al mismo tiempo, solo está diseñada para ratones. En
el sector químico, para la evaluación de la neurotoxicidad,
únicamente se utiliza un registro no sistemático de posibles
anomalías en el comportamiento de los animales. Con el fin de
resolver este inconveniente, algunos autores han publicado una
batería de pruebas para la evaluación de neurotoxicidad [K.L.
McDaniel y V.C. Moser, "Utility of a neurobehavioral screening
battery for differentiating the effects of two pyrethroids,
permethrin and cypermethrin", Neurotoxicological
Teratology 15, 71-83 (1993)], [V.C. Moser,
"The functional observational battery in adult and developing
rats", Neurotoxicology 21, 989-996
(2000)]. Sin embargo, en estos trabajos, aunque se realiza una
valoración general del estado neurológico, se caracteriza por
evaluar escasas conductas reflejas necesarias para un correcto
screening (únicamente se valora el dilatamiento de la pupila y el
reflejo de enderezamiento). Por otro lado, en el campo de la
investigación básica de la conducta se ha publicado una
batería de examen neurológico en ratas para evaluar la función del
sistema nervioso central P.P. Huston, J. Bures "Innate and
motivated behavior". En J. Bures y O. Buresova, J.P. Huston
Techniques and Basic Experiments for the Study of Brain and
Behavior, Elsevier, Amsterdam, pp. 77-133]. Sin
embargo, estos autores no emplean instrumental estandarizado como
el aquí descrito. Ademas, su forma de evaluación no ha sido
empleada habitualmente por otros autores en este mismo campo.
De la misma forma, se han desarrollado otras
baterías de evaluación para el "fenotipaje conductual" de
ratones transgénicos, diseñadas para analizar posibles alteraciones
conductuales, del sistema nervioso y apariencia física en estos
animales [D.C. Rogers, E.M. Fisher, S.D. Brown, J. Peters, A.J.
Hunter y J.E. Martin. Behavioral and funtional analysis of mouse
phenotype. SHIRPA, a proposed protocol for comprehesive phenotype
assessement. Mammalian Genome, 8: 711-713
(1997)], junto con una ampliación más reciente [H. Masuya y cols.
Implementation of the modified-SHIRPA protocol for
screening of dominant phenotypes in a large scale ENU mutagenesis
program. Mammalian Genome, 16: 829-837
(2005)]. Aunque ambas baterías son completas, éstas están diseñadas
específicamente para valorar anomalías genéticas características de
animales transgénicos, incluyendo, como sucedía en las baterías
previamente comentadas, un elevado número de test (más de
cuarenta), necesitando la versión modificada cincuenta y ocho test
para evaluar posibles anomalías en ratones. Además, ambas baterías
requieren gran cantidad de instrumental (rejillas, varios cilindros
y cajas, placas de metal, acero, e incluso un generador de
sobresalto acústico), e incluso material electrónico específico,
suministrado únicamente por algunas casas comerciales.
Todas estas pruebas neurológicas anteriormente
comentadas tienen elementos en común, pero fueron diseñadas con
distintos objetivos de acuerdo con el campo científico para el cual
se desarrollaron. Asimismo, los resultados de estas pruebas son
difícilmente comparables, así como cuantificables y reproducibles,
debido a las diferencias tanto en los métodos como en el material
empleado, además de requerir un entrenamiento específico y gran
experiencia por parte del evaluador.
La presente invención aporta un instrumento para
la evaluación de la función del sistema nervioso en roedores. Se
basa en la aplicación secuencial de una serie de pruebas empleando
diferentes partes del instrumento que se describe, junto con la
observación y registro de las respuestas del animal. Esto permite
una caracterización objetiva y fácilmente reproducible de la
función del sistema nervioso de roedores.
El instrumento consta de una base principal
hueca en forma de caja realizada en material rígido y resistente.
Esta base lleva acoplada a uno de sus lados, mediante una bisagra,
un plano inclinado, el cual presenta una superficie rugosa. De esta
forma, el plano inclinado puede plegarse sobre la superficie de la
base principal, para su almacenamiento cuando el aparato no esté en
uso. Con respecto a la base principal, su superficie presentará un
revestimiento plástico, antideslizante y acolchado. Una parte del
volumen de la base principal se aprovechará a modo de cajón con
diversos compartimentos que albergan diverso instrumental para
realizar el examen neurológico; para facilitar la extracción y
cierre del cajón de la base principal se dispondrá de un asa.
Por otra parte, sobre la zona central de la base
principal se elevan dos barras laterales unidas, en forma de U
invertida, por un tubo con grosor diferente, según el tipo de
roedor empleado; el tubo estará hecho de un material antideslizante,
con el fin de que el animal no resbale una vez situado sobre él.
Las barras laterales presentarán en su base un mecanismo de giro
con dos posiciones fijas a 90º.
El examen neurológico que se realizará con este
instrumento proporciona información sobre la actividad general del
sistema nervioso en una jerarquía de niveles que incluyen desde el
funcionamiento de los nervios periféricos y la médula espinal,
hasta funciones de la corteza cerebral. De esta forma, las medidas
neurológicas que se realizarán se encuentran agrupadas en categorías
funcionales, incluyendo respuestas autónomas (respuesta pupilar y
corneal), tono muscular y equilibrio (reflejo prensil, abducción de
patas traseras, respuesta geotáctica negativa), respuestas
sensioromotoras (respuestas auditivas/vestibulares, respuesta
táctil, reflejos de flexión y extensión patelar, reflejo de
enderezamiento, reacción de sobresalto) y fisiológicas (como la
medida de la temperatura corporal).
La realización de la serie de pruebas propuestas
con este instrumento permitirá evaluar rápidamente, y de forma
estandarizada, el estado funcional del sistema nervioso central y
periférico en animales de experimentación. A diferencia de otros
sistemas, el aparato incluye todo el material necesario para
realizar un conjunto de pruebas neurológicas. Estas pruebas son de
fácil realización, y requieren una experiencia mínima por parte del
experimentador. Además, aunque el número de pruebas es pequeño,
éstas son adecuadas y suficientes para una evaluación neurológica
básica. Mediante mínimas modificaciones del instrumental, se puede
utilizar con distintas especies de animales.
De esta forma el aparato propuesto se podrá
aplicar con diversos fines. Así, podría ser empleado para evaluar
la posible neurotoxicidad de diferentes compuestos empleados en la
industria química, así como en la industria farmacéutica, donde
serviría para realizar ensayos preclínicos que evalúen las
propiedades de diferentes sustancias químicas. Igualmente, su uso
es importante en el sector correspondiente a los servicios
públicos, sociales y colectivos, ya que con este aparato podrá
evaluarse y proporcionarse información sobre los efectos que
diversos procedimientos médicos y experimentales pueden inducir en
la función del sistema nervioso. Finalmente, su empleo también será
de gran relevancia en la detección de diversos factores ambientales
que puedan influir en el desarrollo del sistema
nervioso.
nervioso.
Para facilitar la comprensión de las pruebas
neurológicas que se proponen, se describen de un modo genérico las
distintas perspectivas del aparato objeto de esta patente, en la
que se indican las partes que lo componen:
La figura 1 es una vista en perspectiva del
instrumento sin plegar, en la que se observan la base principal
acoplada al plano inclinado y las barras laterales formado un
perfil en forma de U invertida.
La figura 2 muestra una vista del perfil del
aparato sin plegar.
La figura 3 corresponde a una vista del alzado
del aparato sin plegar, en la que se observa frontalmente la
posición del cajón.
La figura 4 es una vista del perfil del aparato
plegado.
El instrumento al que hace referencia la figura
1, consta de una base principal hueca en forma de paralelepípedo
(2) formada por tableros termoendurecidos de alta densidad. Su
superficie presentará un revestimiento flexible realizado con una
lámina de neopreno y acabado lavable, sobre una base elástica de
esponja sintética. Una parte del volumen de la base principal se
aprovechará a modo de cajón (4) con diversos compartimentos para
albergar diferente material básico de evaluación neurológica, como
una linterna pequeña, pinzas, diapasones, un alambre de acero con al
menos 10 cm de longitud, un pequeño tubo de caucho, una regla
milimetrada y un termómetro, así como un cuadernillo de
instrucciones y hojas tabuladas en las que se anotarán los
resultados de las pruebas realizadas. Para facilitar la extracción y
cierre del cajón de la base principal, se dispondrá de un asa de
acero inoxidable atornillada a la cara externa del cajón, así como
de guías laterales para el desplazamiento horizontal del cajón en el
interior de la base principal.
Esta base lleva acoplada a uno de sus lados,
mediante una bisagra de piano en acero inoxidable, un plano
inclinado (3), ranurado con una retícula. De esta forma, el plano
inclinado puede plegarse sobre la superficie de la base principal,
para su almacenamiento cuando el aparato no esté en uso. La
superficie de la base y el plano inclinado dispondrán de un herraje
de seguridad para su cierre.
Por otra parte, sobre la zona central de la base
principal se elevan dos barras laterales unidas, en forma de U
invertida (5), por un tubo de acero inoxidable de diferente grosor,
según el tipo-tamaño de la cepa que se evalúe; el
tubo presentará un dibujo impreso antideslizante, con el fin de que
el animal no resbale una vez situado sobre él. Las barras laterales
presentarán en su base un mecanismo de giro con dos posiciones
fijas a 90º.
Por otra parte, para una óptima realización de
las pruebas será necesario que el experimentador haya manipulado
sistemáticamente al animal previamente durante varios días
(aproximadamente durante 10-15 minutos) antes de
realizar la batería de pruebas. Posteriormente, comenzará el examen
neurológico del animal, realizando secuencialmente cada una de las
pruebas mencionadas, y anotando en el cuadernillo/hoja tabulada
suministrada en el cajón (4) los resultados obtenidos, así como
otras notas de interés. La forma propuesta de evaluación neurológica
que presentamos a continuación es rápida y sencilla de realizar, y
mediante su aplicación se obtendrá una valoración general del
estado neurológico básico de cualquier roedor. Dada su simplicidad,
es poco susceptible de presentar variabilidad en los resultados
obtenidos por diferentes evaluadores.
Introducir al animal en una habitación con luz
roja o bien con poca iluminación. Rápidamente, haciendo uso de la
linterna que se proporciona dentro del cajón (4), encenderla y
orientarla hacia cada uno de los ojos del animal. Se anotará si sus
pupilas responden a la iluminación, así como si la respuesta es
simétrica en ambos ojos.
Aplicar un soplo de aire cerca de la córnea del
ojo mediante el tubo de caucho que se encuentra en el cajón (4) y
anotar la respuesta de parpadeo en ambos ojos.
El animal se sostendrá en posición vertical y
sus patas delanteras se pondrán en contacto con el alambre de acero
suministrado (dentro del cajón, 4) en posición horizontal. Se
evaluará la fuerza con la que el animal se agarra al alambre,
intentando separarlo de él.
Soltar al animal con sus cuatro patas orientadas
hacia la base acolchada (1) de la base principal (2), desde una
altura de unos 30 cm. En condiciones normales, balanceará su cuerpo
para caer sobre sus cuatro patas. En caso de existir alguna
alteración, el animal se balanceará exageradamente durante la caída
y, como consecuencia, la distancia entre sus patas traseras se hará
mayor de lo normal. Repetir dos veces y calcular el promedio de la
distancia entre los dos talones de ambas patas traseras con la
regla suministrada dentro del cajón (4).
Situar al animal en posición descendente sobre
el plano inclinado (3). El animal deberá girarse 180º para intentar
subir por el plano inclinado.
Poner en contacto las patas delanteras del
animal con la barra horizontal suspendida en forma de U invertida
(5), de modo que éste se agarre a ella. Soltarlo y evaluar su
habilidad para mantenerse suspendido de la barra durante 3
minutos.
a) Soltar al animal boca arriba desde una altura
de 30 cm, sobre la superficie acolchada (1) de la base principal
(2). Éste girará su cuerpo durante la caída, y caerá sobre sus
patas.
b) Colocar al animal sobre la misma superficie
acolchada (1). Cuando deje de moverse, aplicar un estímulo auditivo
fuerte golpeando el diapasón proporcionado en el cajón (4) sobre la
barra horizontal de acero (5). El animal debería reaccionar con una
extensión súbita de las patas posteriores, flexión de las patas
anteriores, arqueando su lomo; asimismo, parpadeará y moverá las
orejas hacia atrás.
Se tocará la piel de los flancos del animal con
las pinzas del cajón (4) y se anotará el grado de atención hacia el
lugar donde se le ha tocado (orientación de su cabeza y giro hacia
atrás de la oreja ipsilateral).
a) Elevar al animal sujetándole por la piel
colgante del lomo. Pinchar o presionar cada una de las patas con la
misma pinza. Éste retirará su pata inmediatamente, manteniéndose la
flexión brevemente.
b) A continuación, el animal se situará en uno
de los extremos de la superficie acolchada (1), dejando una de sus
patas traseras suspendidas fuera de la superficie; el animal deberá
flexionarla e intentar apoyarla sobre la superficie de nuevo. La
prueba se realizará con cada una de sus patas traseras.
a) Tras suspender verticalmente al animal,
acercaremos sus patas traseras a la superficie acolchada (1). El
animal debería extender sus patas para soportar el peso de su
cuerpo tan pronto como éstas rocen la superficie.
b) Posteriormente, acercaremos su cabeza a la
superficie (1) de la base principal (2); el animal extenderá
rápidamente sus patas delanteras hacia ésta.
Colocar al animal boca arriba sobre la
superficie acolchada (1), aprisionando su cola y abdomen; éste
inmediatamente intentará incorporarse sobre sus cuatro patas.
Situar al animal sobre la superficie acolchada
(1) y aplicar un soplo de aire cerca de uno de sus oídos mediante
el tubo de caucho que se encuentra en el cajón (4). Responderá con
giros bruscos de la cabeza según el eje
antero-posterior de su cuerpo.
Medida de la temperatura corporal, a nivel
rectal, haciendo uso del termómetro que se proporciona dentro del
cajón (4).
Claims (5)
1. Instrumento para la evaluación neurológica en
roedores el cual comprende una base principal (2):
- con una superficie acolchada (1),
- que tiene un cajón (4) con espacio para diverso instrumental de evaluación neurológica,
- que en uno de sus lados lleva incorporado un plano inclinado (3),
- que lleva acoplada una barra en forma de U invertida (5), que presenta un mecanismo de giro con dos posiciones fijas.
2. Instrumento según la reivindicación 1,
caracterizado porque tanto el plano inclinado (3) como la
barra en U invertida (5) son plegables para facilitar su transporte
y almacenamiento.
3. Instrumento según la reivindicación 1,
caracterizado porque la parte central de la barra en forma
de U invertida (5), como el plano inclinado (3) acoplado a la base
principal (2), están ranurados para facilitar el agarre del
animal.
4. Instrumento según la reivindicación 3
caracterizado porque la barra horizontal de la forma de U
invertida es de grosor diferente, según el tipo de animal
empleado.
5. Instrumento según la reivindicación 1,
caracterizado porque el cajón (4) dispone de un asa para
facilitar la extracción y cierre del cajón (4) de la base principal
(2).
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| ES200601024A ES2302426B2 (es) | 2006-04-11 | 2006-04-11 | Instrumento de evaluacion neurologica en roedores. |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| ES200601024A ES2302426B2 (es) | 2006-04-11 | 2006-04-11 | Instrumento de evaluacion neurologica en roedores. |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| ES2302426A1 ES2302426A1 (es) | 2008-07-01 |
| ES2302426B2 true ES2302426B2 (es) | 2009-05-01 |
Family
ID=39514599
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| ES200601024A Active ES2302426B2 (es) | 2006-04-11 | 2006-04-11 | Instrumento de evaluacion neurologica en roedores. |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| ES (1) | ES2302426B2 (es) |
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| US4337726A (en) * | 1980-07-07 | 1982-07-06 | Czekajewski Jan A | Animal activity monitor and behavior processor |
| JPH07108285B2 (ja) * | 1988-10-14 | 1995-11-22 | 東洋産業株式会社 | 実験動物の行動観測器 |
| FR2811511B1 (fr) * | 2000-07-17 | 2002-09-27 | Univ Nancy 1 Henri Poincare | Procede et dispositif d'evaluation des fonctions locomotrices de rongeurs |
| US7121229B2 (en) * | 2004-06-29 | 2006-10-17 | Chen-Jee Hong | Method and system for evaluating interest of a tested animal |
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2006
- 2006-04-11 ES ES200601024A patent/ES2302426B2/es active Active
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| ES2302426A1 (es) | 2008-07-01 |
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