EP4688656A2 - Procede de synthese de nanoparticules de zeolithe dans un tampon phosphate salin - nanoparticules, suspensions composition pharmaceutique et utilisations associees - Google Patents

Procede de synthese de nanoparticules de zeolithe dans un tampon phosphate salin - nanoparticules, suspensions composition pharmaceutique et utilisations associees

Info

Publication number
EP4688656A2
EP4688656A2 EP24712249.2A EP24712249A EP4688656A2 EP 4688656 A2 EP4688656 A2 EP 4688656A2 EP 24712249 A EP24712249 A EP 24712249A EP 4688656 A2 EP4688656 A2 EP 4688656A2
Authority
EP
European Patent Office
Prior art keywords
nanoparticles
equal
pbs
composition
source
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
EP24712249.2A
Other languages
German (de)
English (en)
Inventor
Samuel VALABLE
Svetlana MINTOVA
Charly HÉLAINE
Abdallah AMEDLOUS
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Centre National de la Recherche Scientifique CNRS
Universite de Caen Normandie
Ecole Nationale Superieure dIngenieurs de Caen
Original Assignee
Centre National de la Recherche Scientifique CNRS
Universite de Caen Normandie
Ecole Nationale Superieure dIngenieurs de Caen
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Centre National de la Recherche Scientifique CNRS, Universite de Caen Normandie, Ecole Nationale Superieure dIngenieurs de Caen filed Critical Centre National de la Recherche Scientifique CNRS
Publication of EP4688656A2 publication Critical patent/EP4688656A2/fr
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C01—INORGANIC CHEMISTRY
    • C01B—NON-METALLIC ELEMENTS; COMPOUNDS THEREOF; METALLOIDS OR COMPOUNDS THEREOF NOT COVERED BY SUBCLASS C01C
    • C01B39/00—Compounds having molecular sieve and base-exchange properties, e.g. crystalline zeolites; Their preparation; After-treatment, e.g. ion-exchange or dealumination
    • C01B39/02—Crystalline aluminosilicate zeolites; Isomorphous compounds thereof; Direct preparation thereof; Preparation thereof starting from a reaction mixture containing a crystalline zeolite of another type, or from preformed reactants; After-treatment thereof
    • C01B39/32—Type L
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J13/00—Colloid chemistry, e.g. the production of colloidal materials or their solutions, not otherwise provided for; Making microcapsules or microballoons
    • B01J13/0004—Preparation of sols
    • B01J13/0008—Sols of inorganic materials in water
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C01—INORGANIC CHEMISTRY
    • C01B—NON-METALLIC ELEMENTS; COMPOUNDS THEREOF; METALLOIDS OR COMPOUNDS THEREOF NOT COVERED BY SUBCLASS C01C
    • C01B39/00—Compounds having molecular sieve and base-exchange properties, e.g. crystalline zeolites; Their preparation; After-treatment, e.g. ion-exchange or dealumination
    • C01B39/02—Crystalline aluminosilicate zeolites; Isomorphous compounds thereof; Direct preparation thereof; Preparation thereof starting from a reaction mixture containing a crystalline zeolite of another type, or from preformed reactants; After-treatment thereof
    • C01B39/20—Faujasite type, e.g. type X or Y
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/48—Preparations in capsules, e.g. of gelatin, of chocolate
    • A61K9/50—Microcapsules having a gas, liquid or semi-solid filling; Solid microparticles or pellets surrounded by a distinct coating layer, e.g. coated microspheres, coated drug crystals
    • A61K9/51—Nanocapsules; Nanoparticles
    • A61K9/5107—Excipients; Inactive ingredients
    • A61K9/5115—Inorganic compounds
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C01—INORGANIC CHEMISTRY
    • C01P—INDEXING SCHEME RELATING TO STRUCTURAL AND PHYSICAL ASPECTS OF SOLID INORGANIC COMPOUNDS
    • C01P2004/00—Particle morphology
    • C01P2004/60—Particles characterised by their size
    • C01P2004/64—Nanometer sized, i.e. from 1-100 nanometer
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C01—INORGANIC CHEMISTRY
    • C01P—INDEXING SCHEME RELATING TO STRUCTURAL AND PHYSICAL ASPECTS OF SOLID INORGANIC COMPOUNDS
    • C01P2006/00—Physical properties of inorganic compounds
    • C01P2006/12—Surface area
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C01—INORGANIC CHEMISTRY
    • C01P—INDEXING SCHEME RELATING TO STRUCTURAL AND PHYSICAL ASPECTS OF SOLID INORGANIC COMPOUNDS
    • C01P2006/00—Physical properties of inorganic compounds
    • C01P2006/14—Pore volume

Definitions

  • the present invention relates to a process for the synthesis of zeolite nanoparticles, the nanoparticles thus obtained, suspensions of these nanoparticles in water or PBS buffer as well as a pharmaceutical composition and a combination product containing these nanoparticles.
  • nanoparticles can be used in the medical field, in particular for the treatment of hypoxic solid tumors.
  • TO4 Ti, Al or other heteroatoms
  • the presence of the ACUI 5 ' ions gives the framework negative charges that must be compensated by cations (alkaline or alkaline-earth) called compensation, such as Na + , K + , Ca 2+ , Sr 2+ in order to maintain electrical neutrality.
  • compensation such as Na + , K + , Ca 2+ , Sr 2+ in order to maintain electrical neutrality.
  • the vacant space is defined by the aluminosilicate framework formed by these three-dimensional chains.
  • the vacant spaces of the tetrahedral crystal lattice are connected to each other and occupied by alkali ions and water molecules.
  • Zeolites also have a microporous network formed by cavities, channels connecting the cavities and pores connecting the channels or cavities with the outside. Zeolites can be natural or synthetic. There are currently more than 250 types of zeolites.
  • Document W02015/101800 A describes a method for synthesizing faujasite nanocrystals (FAU-type zeolites), faujasite single crystals and a process for synthesizing a colloidal suspension of these nanocrystals.
  • the faujasite nanocrystals have a size ranging from 5 to 400 nm, a Si/Al molar ratio ranging from 1 to 2.5 and a Si/Na molar ratio of 1.1 to 1.5.
  • the total pore volume (total pore volume) ranges from 0.50 to 1.5 cm 3 /g.
  • WO 2019/030200 A1 describes FAU and EMT type zeolite nanocrystals for which sodium ions have been replaced by Fe or Gd ions and which can be loaded with gaseous dioxygen. These nanocrystals can be used for the diagnosis and treatment of brain tumors, including glioblastoma.
  • the publication of Anfray et al “nanosized zeolites as a gas delevery platfrom in a glioblasma model" describes a suspension of FAU type nano zeolites in water.
  • the zeolite nanocrystals that are described in these documents are synthesized in water which restricts their medical uses. Indeed, in the long term and at high concentrations, these nanocrystals are likely to cause allergy-type problems. technical problem to be solved
  • An aim of the present invention is therefore to propose new zeolite nanoparticles which can be used in the diagnosis and/or treatment of certain pathologies, in particular solid brain tumors.
  • Another aim of the invention is to propose a new method of synthesizing such nanoparticles.
  • Another aim of the invention is to provide colloidal suspensions of these nanoparticles.
  • Another aim of the invention is to provide zeolite nanoparticles which have reduced toxicity and/or exhibit an improved oxygen adsorption and/or release capacity.
  • a first aspect of the invention relates to a method for synthesizing nanoparticles consisting of or comprising at least one zeolite nanocrystal according to which:
  • composition/solution 1 is prepared containing a source of aluminum and a source of an ion of an alkali metal M, in particular Na;
  • composition/solution 2 comprising a source of silicon and a source of an ion of an alkali metal M, in particular Na, said compositions/suspensions 1 and 2 being free of any organic structuring agent;
  • said first composition/solution 1 and said second composition/suspension 2 are each a composition/solution consisting of said source and an aqueous buffer (PBS), which consists of water and 137 mM/L of NaCl, 2.7 mM/L of KCl, 10 mM/L of Na 2 HPO 4 , 1.76 mM/L of KH2PO4 and having a pH equal to 7.2 and said mixture of solutions 1 and 2 has the following molar composition (I):
  • the method of the invention is simple to implement and makes it possible to obtain zeolite nanoparticles forming a stable colloidal suspension in PBS.
  • solutions 1 and 2 are prepared.
  • the first composition/solution 1 can be prepared at room temperature.
  • the second composition/solution is prepared, for example, at a temperature below 30°C and in particular equal to 25°C.
  • the mixing of the two compositions/solutions can advantageously be carried out at a temperature equal to or greater than 0°C and equal to or less than 30°C and in particular equal to 0°C.
  • the mixture must be left stirring at a temperature equal to or greater than 0°C and equal to or less than 30°C and in particular equal to 25°C for at least 2 hours and in particular 24 hours.
  • the mixture can be crystallized at a temperature greater than or equal to 50°C.
  • the aluminum source may be chosen from any aluminum source capable of providing monomeric oxyhydroxide species.
  • any aluminum source capable of providing monomeric oxyhydroxide species means that this aluminum source does not provide polymeric aluminum oxyhydroxide species and makes it possible to dissolve all the aluminum in the clear aqueous solution 1.
  • the aluminum source may be chosen among alumina, hydrated alumina, aluminum powder, Al, Al2(SO4)3, aluminum hydroxide AI(OH)3, sodium aluminate (NaAlCh), potassium aluminate (KAIO2) and kaolin clays.
  • the silicon source may be selected from any silicon source capable of providing monomeric or Si2-Sie oxyhydroxide species. Thus, the amount of larger [SiOOH] n units is limited in the composition/suspension 2.
  • the silicon source may be selected from silica hydrogel, silicic acid, colloidal silica, fumed silica, tetraalkyl orthosilicates, silica hydroxides, precipitated silica, silica fume and clays. Colloidal silica is preferred in all embodiments of the method of the invention.
  • the alkali metal source M can be chosen in particular from a source of Na and a source of K.
  • the hydroxides of these two alkali metals are preferred as sources of alkali metal.
  • M Na
  • said aluminum source is aluminum powder
  • solutions 1 and 2 are prepared and before crystallizing said mixture of solutions 1 and 2, it is dehydrated under vacuum and the remaining solid fraction is then crystallized at a temperature greater than or equal to 30°C and less than or equal to 100°C and in particular equal to 50°C for a duration equal to or greater than 6 hours and equal to or less than 30 hours and in particular equal to 25 hours.
  • FAU type zeolite nanoparticles are thus obtained. It should be noted that the process of the invention also allows the direct production of suspensions of zeolite nanoparticles in PBS.
  • the purification of said nanoparticles is carried out using a membrane, in particular a dialysis membrane.
  • a membrane in particular a dialysis membrane.
  • the operation of this method is simple, inexpensive, generally carried out using commercially available membranes (dialysis membrane), and it also saves water.
  • This technique also makes it possible to preserve the PBS in the nanoparticles.
  • a second aspect of the invention relates to a method for manufacturing a colloidal suspension of nanoparticles, according to which nanoparticles are synthesized according to the method of the invention and said synthesized nanoparticles are dispersed in optionally sterile water or in an optionally sterile aqueous buffer solution consisting of water and 137 mM/L NaCI, 2.7 mM/L KCI, 10 mM/L Na2HPO4 and 1.76 mM/L KH2PO4 and having a pH equal to 7.2.
  • a suspension of zeolite nanoparticles in water or in PBS is thus obtained.
  • the zeolite nanoparticles are dispersed, having been previously filtered in order to eliminate the PBS.
  • the present invention also relates to a nanoparticle consisting of or comprising a zeolite nanocrystal and obtainable according to the method of the invention.
  • said zeolite is an aluminosilicate of the FAU type and it contains PBS ions, i.e. Na + , K + , H2PO4 2 ; HPCU' HsO + and Cl' ions and optionally water molecules. These ions are arranged on the surface of the crystal lattice and/or in the interstices of the crystal lattice and/or in the pore network of the particle. The surface of the crystal lattice may be the surface of the particle.
  • the Na + and K + ions may be found in the interstices of the crystal lattice as compensation ions.
  • Said nano zeolite may advantageously contain at least two species of the aforementioned ions. Depending on the pH, it can contain different quantities of the HPCU 2 ', H3O+, FhPCU' ions. These ions, whatever they may be, are located in its porous network and/or on its surface and/or in the interstices of its crystal network and/or on the surface of the crystal network, which can correspond to the surface of the particle.
  • the inventors have demonstrated that nanoparticles synthesized in PBS saline buffer are less cytotoxic and therefore likely to be better accepted by the body.
  • PBS has the same salt concentration as the human body; it also contains the dihydrogen phosphate/hydrogen phosphate pair which allows the maintenance of blood pH in the body. Without the inventors being bound to this explanation, it would seem that certain ions of the PBS contained in the crystal lattice and/or in the porous lattice and/or on the surface of the nanoparticle can stabilize the nanoparticles and prevent them from degrading in the biological environment, which reduces their toxicity potential. In addition, the ions of the PBS can also regulate the charge on the surface of the nanoparticles, which can influence their behavior and their interaction with biological cells and tissues.
  • the nanoparticles obtained according to the method of the invention thus avoid or reduce the allergy phenomena described above.
  • the nanoparticle can be a nanocrystal.
  • This nanocrystal may have an average diameter greater than or equal to 10 nm and less than or equal to 100 nm and in particular equal to 30 nm.
  • the zeolite has the following chemical composition:
  • the number of moles of water is determined by thermogravimetric analysis.
  • the number of Na, K, Si and Al atoms is determined by ICP, and the number of moles of oxygen is determined from the number of moles of the metals using the stoichiometry of the formula.
  • the nanoparticle of the invention may have a total pore volume greater than or equal to 0.4 cm 3 /g and less than or equal to 1.5 cm 3 /g and/or a specific surface area SBET greater than or equal to 200 m 2 /g and less than or equal to 1000 m 2 /g.
  • said nanoparticle has a total pore volume (cavity + pores + channels) greater than or equal to 0.6 cm 3 /g and less than or equal to 1.3 cm 3 /g and in particular equal to 0.93 cm 3 /g and/or a specific surface area SBET greater than or equal to 300 m 2 /g and less than or equal to 800 m 2 /g and in particular equal to 600 or 428 m 2 /g.
  • This nanocrystal may have the chemical formula (II)
  • porous network of the zeolite of the invention extends in the three directions of space
  • a nanoparticle as mentioned above which further contains, in the cavities of its crystal lattice, cations of a metal chosen from Fe, Gd, Cu and Ce and in particular in an amount greater than or equal to 0.2% by mass and less than or equal to 5% by mass and/or a gas contained in its pore volume and chosen from oxygen, nitrogen, carbon dioxide and mixtures thereof.
  • a metal chosen from Fe, Gd, Cu and Ce
  • a gas contained in its pore volume and chosen from oxygen, nitrogen, carbon dioxide and mixtures thereof Some of these nanoparticles can be used in diagnosis (the Gd, Fe ions serving in particular as a labeling ion) in particular in magnetic resonance imaging (MRI) and in treatment when they are loaded with oxygen. Indeed, they then provide oxygen which they deliver into the cells and thus increase the reactivity of the cells of solid cancerous tumors to anticancer agents.
  • MRI magnetic resonance imaging
  • a suspension comprising or consisting of the nanoparticles of the invention and a dispersant chosen from water, a buffer consisting of water and 137 mM/L of NaCI, 2.7 mM/L of KCI, 10 mM/L of Na2HPO4, 1.76 mM/L KH2PO4 and having a pH of 7.2 (PBS), alcohols and their mixtures.
  • a dispersant chosen from water, a buffer consisting of water and 137 mM/L of NaCI, 2.7 mM/L of KCI, 10 mM/L of Na2HPO4, 1.76 mM/L KH2PO4 and having a pH of 7.2 (PBS), alcohols and their mixtures.
  • the present invention relates to a pharmaceutical composition containing as contrast agent or pharmaceutically active agent nanoparticles according to the invention, optionally suspended in a dispersant.
  • the amount of nanoparticles is the amount suitable to obtain a therapeutic effect or to obtain a contrast allowing diagnosis.
  • the dispersant is chosen from pharmaceutically acceptable solvents, in particular water, PBS, alcohols and their mixtures.
  • composition of the invention can be administered orally, mucosally (in particular intranasally) or parenterally.
  • the present invention also relates to a nanoparticle according to the invention, for its use as a medicament, in particular for the treatment of hypoxic solid brain tumors and in particular glioblastoma, or as a diagnostic agent, in particular as a contrast agent in MRI.
  • the present invention also relates to a combination product comprising or consisting of the pharmaceutical composition of the invention or the suspension according to the invention and an anticancer agent, for their simultaneous or delayed administration.
  • the nanoparticles according to the invention preferably contain oxygen in their porous network and are optionally suspended in a pharmaceutically acceptable dispersant.
  • the dispersant is preferably chosen from water, PBS and mixtures thereof.
  • the anticancer agent and the pharmaceutical composition of the combination product of the invention may be administered simultaneously or in a delayed manner, the anticancer agent being advantageously administered first.
  • the anticancer agent may be chosen from temozolomide® (4-methyl-5-oxo-2,3,4,6,8-pentazabicyclo[4.3.0]nona-2,7,9-triene-9-carboxamide methazolastone), doxorubicin (8S,10S)-10-(4-amino-5-hydroxy-6-methyl-tetrahydro-2H-pyran-2-yloxy)-6,8,11-trihydroxy-8-(2-hydroxyacetyl)-1-methoxy-7,8,9,10-tetrahydrotetracene-5,12-dione), cisplatin (cis-diamminedichloroplatinum(ll)).
  • average size designate for the purposes of the invention the average size (in number or in intensity) measured by dynamic light scattering.
  • the average size corresponds to the diameter of the sphere which diffuses at the same speed as that of the particle being measured.
  • the fundamental size distribution obtained by DLS is an intensity distribution. The operating conditions are as defined in the remainder of the application.
  • nanoparticle designates any solid particle with a maximum dimension of less than 100 nm. It may be a single crystal or an aggregate of crystals.
  • PBS refers to phosphate buffered saline which is an aqueous solution of NaCl (0.137 M), KCl (0.0027 M), sodium phosphate dibasic (0.01 M) and potassium phosphate monobasic (0.0018 M). Its pH is 7.2.
  • FAU-type nanoparticle refers to nanoparticles comprising or consisting of a single crystal of FAU-type zeolite.
  • FAU-type zeolite refers to an aluminosilicate that crystallizes in a face-centered cubic system. According to the invention, the terms include FAU X-type zeolites for which the Si/Al molar ratio is greater than or equal to 1 and less than or equal to 1.5 and FAU Y-type zeolites for which the Si/Al molar ratio is greater than or equal to 1.5 and less than or equal to 2.6.
  • a chemical formula of a FAU-type zeolite nanocrystal is INa a Kb (H2O) C I(AI X Sii92-xO384), with Na + and K + ions being present to ensure the electrical neutrality of the nanocrystal. Water molecules may be absent from the nanocrystal.
  • clear suspension means an aqueous suspension having substantially the same refractive index as water, i.e. a refractive index of approximately 1.333 ⁇ 0.030, measured under standard conditions.
  • pore volume or “pore network” designate the set formed by the cavities, the channels connecting these cavities together and the pores which connect the channels and cavities to the outside of the nanoparticle.
  • pharmaceutically active means an agent which confers curative or preventive therapeutic properties to the composition which contains it and which, if it presents harmful side effects, these are not preponderant in relation to the curative and/or preventive effects.
  • composition means any homogeneous or inhomogeneous mixture of at least two compounds which may be present in different physical states; the term composition thus includes in particular solutions, suspensions and dispersions.
  • - Fig. 1 represents the size distribution of the Na-FAU-PBS nanoparticles of the invention, the nanoparticles are dispersed in a PBS solution;
  • FIG. 2A shows scanning electron microscope images of Na-FAU-PBS and Gd-FAU-PBS type nanoparticles (nanocrystals) with a scale of 500 nm
  • Fig. 2B shows scanning electron microscope images of Na-FAU-PBS type nanoparticles (nanocrystals) with a scale of 100 nm and 40 nm;
  • - Fig. 3 represents the quantity of adsorbed nitrogen as a function of the relative pressure obtained under the operating conditions described below for Na-FAU-PBS type nanoparticles;
  • Fig. 4 shows a comparison of the viability of U87-MG cells exposed to two colloidal suspensions of nanoparticles containing respectively 10 pg/mL and 100 pg/mL of Na-FAU-Water or Gd-FAU-Water nanoparticles with that obtained for the same concentrations of Na-FAU-PBS and Gd-FAU-PBS nanoparticles;
  • - Fig. 5 represents on the left the percentage of hemolysis as a function of the dose of nanoparticles (in pg/mL) of the Na-FAU and Gd-FAU type synthesized with water or PBS;
  • - Fig. 6A represents the change in the oxygen concentration in water obtained by contacting Na-FAU-Water and Gd-FAU-Water particles, previously loaded with O2
  • Fig. 6B the change in the oxygen concentration in PBS obtained by contacting with Na-FAU-PBS and Gd-FAU-PBS particles of the invention and previously loaded with O2;
  • PBS Phosphate buffered saline
  • the different zeolite materials obtained in the examples were characterized on different size scales.
  • the morphology of the nanoparticles was examined by scanning electron microscopy (SEM) using a Tescan Mira I LMH instrument at a voltage of 20 kV.
  • TEM Transmission electron microscopy
  • the hydrodynamic diameters of the zeolite material in the different suspensions were determined with a Malvern Zetasizer Nano instrument.
  • the surface charge of the samples was determined by measuring the zeta potential of the suspensions.
  • the backscattering geometry (scattering angle 173°, HeNe laser with an output power of 3 mW at a wavelength of 632.8 nm) allows measurements at high sample concentration, since a complete penetration of the incident light through the sample is not necessary.
  • the chemical composition of the zeolite samples was characterized by inductively coupled plasma mass spectrometry using Agilent Technologies 7900.
  • the samples were prepared according to the following procedure: (i) 50 mg of zeolite sample was dissolved in 3 mL of hydrofluoric acid (HF) (Sigma-Aldrich 40-45%), (ii) 0.5 mL solution (HNO3/HCl equals 1:3 v/v) was added and the mixture was heated at 110 °C for 1 h in a polytetrafluoroethylene (PTFE) bottle (100 mL), and subsequently (iii) 96.5 mL of distilled water and 2 g of boric acid (H3BO3) were added. The resulting solution was stirred overnight to facilitate the dissolution of boric acid. Finally, 10 mL of the suspension was diluted 10 times with distilled water before analysis.
  • HF hydrofluoric acid
  • the colloidal suspension of FAU was synthesized hydrothermally from the molar composition cited with reference to the first mode of implementation of the process of the invention.
  • a solution A of aluminum powder is prepared by dissolving 2.3 g of NaOH in 3 g of PBS followed by slow addition of 0.29 g of aluminum powder.
  • Silicate solution B was prepared by mixing 10 g of colloidal silica (LUDOX® HS-30) with 1.1 g of NaOH and 1 g of PBS. This cloudy solution (suspension B) was heated for 6-7 min in an oven at 100°C to be transformed into a clear solution. Solution B was then added dropwise to solution A under a temperature of 0-3°C and rapid stirring, and then the mixture was aged for 24 h at room temperature.
  • colloidal silica LUDOX® HS-30
  • the initial molar composition of the mixture is as follows:
  • the mixture obtained is dehydrated by lyophilization and then crystallized for 25 h in an oven at 50 ° C.
  • the suspension is purified by dialysis membrane (Visking Dialysis Tubing, Code No. - DTV.12000.08 Size No.8 (25.4 mm, 30 m), Molecular weight 12-14000 Daltons), until a pH of 7.2 is reached.
  • 60 - 75 mL (1.6 to 1.9 g) of a colloidal suspension containing 2.5% by mass of Na-FAU type zeolite nanocrystals in PBS are obtained.
  • the nanoparticles contain PBS ions in their porous network and as an intercalated alkali ion in the network, Na + and K + ions.
  • the final suspensions were sonicated for 2 h.
  • crystal yield ranges from 53 to 63% (crystal yield is defined as the mass of product obtained X 100/mass of SiCh contained in solution B.
  • Example 2 Synthesis of colloidal suspensions of nanoparticles according to the invention A given quantity of each of the types of nanoparticles of example 1 was dispersed in 10 mL of PBS under sonication for 2 hours. Colloidal solutions containing respectively 1%, 2%, 3% and 4% by mass of nanoparticles of the Na-FAU-PBS type dispersed in PBS are obtained.
  • nanoparticles are stable in colloidal suspension at room temperature for at least one week.
  • Example 3 Synthesis of zeolite nanoparticles charged with metal ions
  • Example 2 Each of the colloidal aqueous suspensions obtained in Example 2 or Example 3 was then bubbled with O2, CO2 or carbogen at a flow rate of 800 mL/min for 30 minutes.
  • Example 5 Morphological characterization of the nanoparticles obtained in examples 1, 2 and 4. Scanning/transmission electron microscopy (SEM)/(TEM) was used to determine the morphology and size of the synthesized Na-FAll-PBS and Gd-FAU-PBS nanoparticles.
  • Fig. 1 The curve giving the size distribution of nanoparticles dispersed in PBS is shown in Fig. 1 for Na-FAU-PBS nanoparticles.
  • the hydrodynamic size of nanoparticle aggregates in PBS solution measured by DLS is between 50-200 nm. It is observed that this is a monodisperse population.
  • Scanning electron microscopy images of Na-FAU-PBS or Gd-FAU-PBS zeolite nanoparticles show nanoparticles with a quasi-spherical shape with a homogeneous size distribution and TEM transmission electron microscopy images (see Fig. 2B) show nanoparticles (nanocrystals) with an average size of 30 nm.
  • nanoparticles are highly crystalline. These are nanoparticles each formed from a single nanocrystal.
  • the chemical formula of the zeolite material of Na-FAU-PBS and Gd-FAU-PBS type nanoparticles is as follows (determined by ICP):
  • the formula in parentheses corresponds to the crystal tetrahedral lattice, between the bars are the number of moles of compensating cations and the number of moles of water.
  • the porosity of the Na-FAU-PBS and Gd-FAU-PBS zeolites synthesized in the above examples was characterized by nitrogen gas adsorption/desorption measurements.
  • the textural properties of the nanoparticles obtained in Examples 1, 2 and 4 were determined by the adsorption/desorption isotherms of dinitrogen measured at a temperature of -196 °C using a surface characterization device "Micromeritics 3Flex". All samples were degassed at 250 °C under vacuum overnight before analysis. The external surface of the zeolite nanoparticles and the micropore volume of zeolite nanoparticles were evaluated by the t-plot method.
  • Nitrogen adsorption/desorption measurements for both zeolites resulted in hybrid isotherms of type I and IV according to the IUPAC classification (see Fig. 3).
  • the measurement of the SBET specific surface area, the total pore volume and the micropore volume of the zeolite nanoparticles are grouped in Table 1 below.
  • a micropore is defined as a pore smaller than 0.08 mm.
  • Table 2 below lists the chemical composition of the Na-FAU-PBS and Gd-FAU-PBS nanoparticles of the invention.
  • Example 8 Toxicity test on human cell line.
  • Cells used were derived from a human glioblastoma cell line, U87-MG purchased from American Type Culture Collection (ATCC). Cells were cultured in DMEM 1 g/L glucose (Sigma-Aldrich) supplemented with 10% fetal bovine serum (Eurobio), 2 mM glutamine (Sigma-Aldrich), and penicillin (100 U/mL)/streptomycin (100 pg/mL) (Sigma-Aldrich). Cells were maintained in culture at 37°C with 5% CO2 and 95% humidity. Cell viability was assessed 72 h after exposure to zeolite nanoparticles with the WST-1 test (Roche) according to the manufacturer's instructions.
  • Example 9 Red blood cell viability test.
  • Example 10 Study of oxygen release by zeolite nanoparticles in aqueous and hypoxic conditions.
  • a hypoxia chamber (IN VIV02 500TM, 3M) was used to obtain a stable and precisely controlled gas composition of the atmosphere with an accuracy of 0.1% O2 by adjusting the amount of N2.
  • the PBS solution (Sigma-Aldrich) was equilibrated with the gas mixture contained in the hypoxia chamber for 1 h before the experiment.
  • the nanoparticles of the examples of different types and previously loaded with oxygen were then added to the system and the dissolved oxygen in the PBS solution was measured continuously for 1 h. The results are visible in Fig. 6A and 6B.
  • the Gd-FAU-PBS nanoparticles of the invention previously loaded with oxygen exhibit a better release of dioxygen compared to the nanoparticles prepared in water (Gd-FAU-Water).
  • the release kinetics are also increased, which is of interest for in vivo use.
  • the release of oxygen is accelerated after 30 min, which is of considerable interest for in vivo use, the particle having time to reach the brain and deliver oxygen there.
  • Concerning the Na-FAU-PBS nanoparticles it is noted that the release kinetics of dioxygen are slower compared to Na-FAU-Water.

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • General Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Geology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Materials Engineering (AREA)
  • Dispersion Chemistry (AREA)
  • Silicates, Zeolites, And Molecular Sieves (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)

Abstract

La présente invention concerne un procédé de synthèse de nanoparticules constituées ou comprenant au moins un nanocristal de zéolithe selon lequel : - on prépare une première composition/solution 1 contenant une source d'aluminium et une source d'un ion d'un métal alcalin M, en particulier Na; - on prépare une deuxième composition/solution 2 comprenant une source de silicium et une source d'un ion d'un métal alcalin M, en particulier Na, lesdites solutions 1 et 2 étant exemptes de tout agent structurant organique; - on mélange les deux compositions/solutions 1 et 2; - on cristallise le mélange; et - on sépare éventuellement lesdites nanoparticules ainsi formées; Selon l'invention, ladite première composition/solution 1 et ladite deuxième composition/solution 2 sont toutes deux constituées de ladite source et d'un tampon phosphate alcalin (PBS). La présente invention concerne également les nanoparticules obtenues et des compositions les contenant.

Description

PROCEDE DE SYNTHESE DE NANOPARTICULES DE ZEOLITHE DANS UN TAMPON PHOSPHATE SALIN - NANOPARTICULES, SUSPENSIONS COMPOSITION PHARMACEUTIQUE ET UTILISATIONS ASSOCIEES
Domaine technique
La présente invention concerne un procédé de synthèse de nanoparticules de zéolithe, les nanoparticules ainsi obtenues, des suspensions de ces nanoparticules dans de l’eau ou du tampon PBS ainsi qu’une composition pharmaceutique et un produit de combinaison contenant ces nanoparticules.
Ces nanoparticules sont notamment utilisables dans le domaine médical, en particulier pour le traitement des tumeurs solides hypoxiques.
Etat de la technique
Les zéolithes sont une classe de matériaux microporeux cristallins. Ils sont formés par un agencement tridimensionnel de TO4 (T= Si, Al ou d’autres hétéroatomes) liés les uns aux autres en partageant un atome d'oxygène. Dans les zéolithes aluminosilicatées, la présence des ions AIGU5' confère à la charpente des charges négatives qui doivent être compensées par des cations (alcalins ou alcalino-terreux) dits de compensation, comme Na+, K+, Ca2+, Sr2+ dans le but de maintenir une neutralité électrique. L'espace vacant est défini par la charpente aluminosilicate formée par ces chaînes tridimensionnelles. Les espaces vacants du réseau cristallin tétraédrique sont connectés entre eux et occupés par des ions alcalins et des molécules d’eau. La déshydratation des zéolithes permet de retirer les molécules d’eau présentes. Les zéolithes comportent également un réseau microporeux formé de cavités, de canaux reliant les cavités et de pores reliant les canaux ou cavité avec l’extérieur. Les zéolithes peuvent être naturelles ou synthétiques. Il existe à l’heure actuelle plus de 250 types de zéolithes.
Le document W02015/101800 A décrit une méthode de synthèse de nanocristaux de faujasite (zéolithes de type FAU), des monocristaux de faujasite et un procédé de synthèse d’une suspension colloïdale de ces nanocristaux. Les nanocristaux de faujasite ont une taille allant de 5 à 400 nm, un ratio molaire Si/AI allant de 1 à 2,5 et un ratio molaire Si/Na de 1 ,1 à 1 ,5. Le volume total des pores (volume poreux total) va de 0,50 à 1 ,5 cm3/g. Le document WO 2019/030200 A1 décrit des nanocristaux de zéolithes de type FAU et EMT pour lesquels des ions sodium ont été remplacés par des ions Fe ou Gd et qui peuvent être chargés de dioxygène gazeux. Ces nanocristaux peuvent être utilisés pour le diagnostic et le traitement des tumeurs du cerveau, y compris le glioblastome. La publication de la publication de Anfray et al « nanosized zeolites as a gas delevery platfrom in a glioblasma model » décrit une suspension de nano zéolithes de type FAU dans de l’eau. Les nanocristaux de zéolithe qui sont décrits dans ces documents, sont synthétisés dans de l’eau ce qui restreint leurs usages médicaux. En effet, sur le long terme et à des concentrations élevées, ces nanocristaux sont susceptibles d’engendrer des problèmes de type allergie. problème technique à résoudre
Un but de la présente invention est donc de proposer de nouvelles nanoparticules de zéolithe utilisables dans le diagnostic et/ou le traitement de certaines pathologies, notamment les tumeurs solides du cerveau.
Un autre but de l’invention est de proposer une nouvelle méthode de synthèse de telles nanoparticules.
Un autre but de l’invention est de proposer des suspensions colloïdales de ces nanoparticules.
Un autre but de l’invention est de proposer des nanoparticules de zéolithe qui ont une toxicité amoindrie et/ou présentent une capacité d’adsorption et/ou de relargage de l’oxygène améliorée.
Résumé de l’invention
Un premier aspect de l’invention concerne un procédé de synthèse de nanoparticules constituées ou comprenant au moins un nanocristal de zéolithe selon lequel :
- on prépare une première composition/solution 1 contenant une source d’aluminium et une source d’un ion d’un métal alcalin M, en particulier Na;
- on prépare une deuxième composition/solution 2 comprenant une source de silicium et une source d’un ion d’un métal alcalin M, en particulier Na, lesdites compositions/suspensions 1 et 2 étant exemptes de tout agent structurant organique ;
- on mélange les compositions/solution 1 et 2 et on laisse le mélange sous agitation, - on cristallise le mélange à une température supérieure ou égale à 50°C ; et
- on sépare éventuellement lesdites nanoparticules ainsi formées,
De manière caractéristique, selon l’invention ladite première composition/solution 1 et ladite deuxième composition/suspension 2 sont chacune une composition/solution constituée de ladite source et d’un tampon aqueux (PBS), lequel est constitué d’eau et de 137 mM/L de NaCI, 2,7 mM/L de KCI, 10 mM/L de Na2HPO4, 1 ,76 mM/L de KH2PO4 et ayant un pH égal 7,2 et ledit mélange des solutions 1 et 2 présente la composition molaire suivante (I):
X1 M2O : yAI2O3 : 10SiO2 : z PBS (I) dans laquelle 2,8 <x1 < 8,8, 0,3 <y< 1 ,5 et 40 <z< 300.
Le procédé de l’invention est simple à mettre en œuvre et permet d’obtenir des nanoparticules de zéolithe formant une suspension colloïdale stable dans du PBS. De préférence, on prépare des solutions 1 et 2.
Selon le mode de mise en œuvre, il est parfois nécessaire de chauffer le mélange de tampon PBS et des autres réactifs pour obtenir une suspension claire ou limpide.
S’agissant des températures, la première composition/solution 1 peut être préparée à température ambiante. La deuxième composition/solution est préparée, par exemple, à une température inférieure à 30°C et notamment égale à 25°C. Le mélange des deux compositions/solutions peut être avantageusement réalisé à une température égale ou supérieure à 0°C et égale ou inférieure à 30°C et notamment égale à 0°C. Ensuite, le mélange doit être laissé sous agitation à une température égale ou supérieure à 0°C et égale ou inférieure à 30°C et notamment égale à 25°C pendant au moins 2h et notamment 24h. Le mélange peut être cristallisé à une température supérieure ou égale à 50°C.
Description détaillée
La source d'aluminium peut être choisie parmi toute source d'aluminium capable de fournir des espèces oxyhydroxydes monomères. Au sens de la présente invention, on entend par "toute source d'aluminium susceptible d'apporter des espèces oxyhydroxydes monomères" que cette source d'aluminium n'apporte pas d'espèces oxyhydroxydes d'aluminium polymères et permet de dissoudre tout l'aluminium dans la solution aqueuse limpide 1. En particulier, la source d'aluminium peut être choisie parmi l'alumine, l'alumine hydratée, la poudre d'aluminium, Al, Al2(SO4)3, l'hydroxyde d'aluminium AI(OH)3, l'aluminate de sodium (NaAlCh), l’aluminate de potassium (KAIO2) et les argiles de kaolin.
La source de silicium peut être choisie parmi toutes les sources de silicium susceptibles d'apporter des espèces monomères ou oxyhydroxydes Si2-Sie. Ainsi, la quantité d'unités [SiOOH]n plus grosses est limitée dans la composition/suspension 2. En particulier, la source de silicium peut être choisie parmi l'hydrogel de silice, l'acide silicique, la silice colloïdale, la silice pyrogénée, les orthosilicates de tétraalkyle, les hydroxydes de silice, la silice précipitée, la fumée de silice et les argiles. La silice colloïdale est préférée dans tous les modes de mise en œuvre du procédé de l’invention.
La source de métal alcalin M peut être choisie notamment parmi une source de Na et une source de K. Les hydroxydes de ces deux métaux alcalins sont préférés comme sources de métal alcalin.
Selon un mode de mise en œuvre particulier, M = Na, ladite source d’aluminium est de la poudre d’aluminium, on prépare des solutions 1 et 2 et avant de cristalliser ledit mélange des solutions 1 et 2, on le déshydrate sous vide et l’on cristallise ensuite la fraction solide restante à une température supérieure ou égale à 30°C et inférieure ou égale à 100°C et en particulier égale à 50°C pendant une durée égale ou supérieure à 6h et égale ou inférieure à 30h et notamment égale à 25h.
Selon une variante particulière, 5 <x1 < 8.8, 0,3 <y< 1 ,5 et 40 <z< 200 et selon une variante plus particulière x1 = 8,3 , y =1 , 1 et z = 55,6.
On obtient ainsi des nanoparticules de zéolithe de type FAU. Il est à noter que le procédé de l’invention permet également l’obtention directe de suspensions de nanoparticules de zéolithe dans du PBS.
Avantageusement, la purification desdites nanoparticules est réalisée à l'aide d'une membrane, notamment une membrane de dialyse. Le fonctionnement de cette méthode est simple, peu coûteux, généralement effectué à l'aide de membranes commercialement disponibles (membrane de dialyse), et il permet également d’économiser de l’eau. Cette technique permet également de conserver le PBS dans les nanoparticules.
Un second aspect de l’invention concerne un procédé de fabrication d’une suspension colloïdale de nanoparticules, selon lequel on synthétise des nanoparticules selon le procédé de l’invention et l’on disperse lesdites nanoparticules synthétisées dans de l’eau éventuellement stérile ou dans une solution tampon aqueuse éventuellement stérile constituée d’eau et de 137 mM/L de NaCI, 2,7 mM/L de KCI, 10 mM/L de Na2HPO4 et 1 ,76 mM/L de KH2PO4 et ayant un pH égal 7,2. On obtient ainsi une suspension de nanoparticules de zéolithe dans de l’eau ou dans du PBS. Dans le cas d’une suspension dans de l’eau, on disperse les nanoparticules de zéolithe qui ont été filtrées au préalable afin d’éliminer le PBS.
La présente invention concerne également une nanoparticule constituée ou comprenant un nanocristal de zéolithe et pouvant être obtenue selon le procédé de l’invention. Selon l’invention, ladite zéolithe est un aluminosilicate de type FAU et elle contient des ions du PBS, c’est-à-dire des ions Na+, K+, H2PO42; HPCU’ HsO+ et Cl’ et éventuellement des molécules d’eau. Ces ions sont disposés à la surface du réseau cristallin et/ou dans les interstices du réseau cristallin et/ou dans le réseau poreaux de la particule. La surface du réseau cristallin peut être la surface de la particule. Les ions Na+ et K+, notamment peuvent se trouver dans les interstices du réseau cristallin en tant qu’ions de compensation. Ladite nano zéolithe peut contenir avantageusement au moins deux espèces des ions précités. En fonction du pH, elle peut contenir des quantités différentes des ions HPCU2’, H3O+, FhPCU’. Ces ions quels qu’ils soient, sont localisés dans son réseau poreux et/ou à sa surface et/ou dans les interstices de son réseau cristallin et/ou à la surface du réseau cristallin, lequel peut correspondre à la surface de la particule .
Les inventeurs ont mis en évidence que les nanoparticules synthétisées dans du tampon salin PBS sont moins cytotoxiques et par conséquent susceptibles d’être mieux acceptées par l’organisme.
Le PBS présente la même concentration en sels que le corps humain ; il comporte également le couple dihydrogénophosphate/hydrogénophosphate lequel permet le maintien du pH sanguin dans le corps. Sans que les inventeurs soient liés à cette explication, il semblerait que certains ions du PBS contenu dans le réseau cristallin et /ou dans le réseau poreux et/ou à la surface de la nanoparticule peuvent stabiliser les nanoparticules et les empêcher de se dégrader dans l’environnement biologique, ce qui réduit leur potentiel de toxicité. De plus, les ions du PBS peuvent également réguler la charge sur la surface des nanoparticules, ce qui peut influencer leur comportement et leur interaction avec les cellules et les tissus biologiques. Les nanoparticules obtenues selon le procédé de l’invention évitent ou diminuent ainsi les phénomènes d’allergie décrits précédemment. La nanoparticule peut être un nanocristal.
Ce nanocristal peut avoir un diamètre moyen supérieur ou égal à 10 nm et inférieur ou égal à 100 nm et notamment égale à 30 nm. Selon un mode de réalisation particulier, la zéolithe présente la composition chimique suivante :
| Na69.79K6.O6 (H2O)211.85| (Sil23.09Al66.59O384) (H).
Le nombre de moles d’eau est déterminé par analyse thermogravimétrique. Le nombre d’atome Na, K, Si et Al est déterminé par ICP, et le nombre de mole d'oxygène est déterminé à partir du nombre de mole des métaux en utilisant la stœchiométrie de la formule.
Quel que soit le mode de réalisation, la nanoparticule de l’invention peut présenter un volume total de pores supérieur ou égal à 0,4 cm3/g et inférieur ou égal à 1 ,5 cm3/g et/ou une surface spécifique SBET supérieure ou égale à 200 m2/g et inférieure ou égale à 1000 m2/g.
Selon une variante particulière ladite nanoparticule présente un volume poreux total (cavité + pores + canaux) supérieur ou égal à 0,6 cm3/g et inférieur ou égal 1 ,3 cm3/g à et notamment égal à 0,93 cm3/g et/ou une aire de surface spécifique SBET supérieure ou égale à 300 m2/g et inférieure ou égale à 800 m2/g et notamment égale à 600 ou 428 m2/g. Ce nanocristal peut présenter la formule chimique (II)
Le réseau poreux de la zéolithe de l’invention s’étend selon les trois directions de l’espace
Selon un quatrième aspect de l’invention, elle concerne une nanoparticule telle que précitée qui contient en outre, dans les cavités de son réseau cristallin des cations d’un métal choisi parmi Fe, Gd, Cu et Ce et en particulier en une quantité supérieure ou égale à 0,2 % massique et inférieure ou égale à 5 % massique et/ou un gaz contenu dans son volume poreux et choisi parmi l’oxygène, le diazote, le dioxyde de carbone et leurs mélanges. Certaines de ces nanoparticules peuvent être utilisées dans le diagnostic (les ions Gd, Fe servant notamment d’ion de marquage) en particulier en imagerie par résonance magnétique (IRM) et dans le traitement lorsqu’elles sont chargées en oxygène. En effet, elles apportent alors de l’oxygène qu’elles délivrent dans les cellules et augmentent ainsi la réactivité des cellules des tumeurs cancéreuses solides aux agents anticancéreux.
Selon un autre aspect de l’invention, elle concerne une suspension comprenant ou constituée des nanoparticules de l’invention et d’un dispersant choisi pami l’eau, un tampon constitué d’eau et de 137mM/L de NaCI, 2,7 mM/L de KCI, 10 mM/L de Na2HPO4, 1 ,76 mM/L de KH2PO4 et ayant un pH égal 7,2 (PBS), les alcools et leurs mélanges.
Selon un autre aspect, la présente invention concerne une composition pharmaceutique contenant en tant qu’agent de contraste ou agent pharmaceuticalement actif des nanoparticules selon l’invention, éventuellement en suspension dans un dispersant.
La quantité de nanoparticules est la quantité adaptée pour obtenir un effet thérapeutique ou pour obtenir un contraste permettant le diagnostic.
Le dispersant est choisi parmi les solvants pharmaceuticalement acceptables en particulier l’eau, le PBS, les alcools et leurs mélanges.
La composition de l’invention peut être administrée par voie orale, mucosale (en particulier intranasale) ou parentérale.
La présente invention concerne également une nanoparticule selon l’invention, pour son utilisation en tant que médicament en particulier pour le traitement des tumeurs solides hypoxiques cérébrales et notamment le glioblastome ou en tant qu’agent de diagnostic, en particulier comme agent de contraste en IRM.
La présente invention concerne également un produit de combinaison comprenant ou constitué de la composition pharmaceutique de l’invention ou de la suspension selon l’invention et d’un agent anticancéreux, pour leur administration simultanée ou différée. Les nanoparticules selon l’invention, contiennent de préférence de l’oxygène dans leur réseau poreux et sont éventuellement en suspension dans un dispersant pharmaceuticalement acceptable. Le dispersant est de préférence choisi parmi l’eau, le PBS et leurs mélanges. L’anticancéreux et la composition pharmaceutique du produit de combinaison de l’invention peuvent être administrés simultanément ou de manière différée, l’anticancéreux étant administré avantageusement en premier. L’anticancéreux peut être choisi parmi le temozolomide® (4-méthyl-5-oxo-2,3,4,6,8- pentazabicyclo [4.3.0]nona-2,7,9-triène-9-carboxamide methazolastone), la doxorubicine (8S,10S)-10-(4-amino-5-hydroxy-6-méthyl-tétrahydro-2H-pyran-2- yloxy)-6,8, 11 -trihydroxy-8-(2-hydroxyacétyl)-1 -méthoxy-7,8,9, 10-tétrahydrotétracène- 5,12-dione)., cisplatine (cis-diamminedichloroplatine(ll)).
Définitions
Les termes « taille moyenne » désignent au sens de l’invention la taille moyenne (en nombre ou en intensité) mesurée par diffusion dynamique de la lumière. La taille moyenne correspond au diamètre de la sphère qui diffuse à la même vitesse que celle de la particule que l’on mesure. La distribution fondamentale de taille obtenue par DLS est une distribution en intensité. Les conditions opératoires sont telles que définies dans la suite de la demande.
Au sens de l’invention, le terme « nanoparticule » désigne toute particule solide de dimension maximale inférieure à 100 nm. Il peut s’agir d’un monocristal ou d’un agrégat de cristaux.
Le terme PBS désigne le tampon phosphate salin lequel est une solution aqueuse de NaCI (0,137 M), KCI (0,0027 M), phosphate de sodium dibasique (0,01 M) et phosphate de potassium monobasique (0,0018 M). Son pH est de 7,2.
Le terme « nanoparticule de type FAU » désigne des nanoparticules comprenant ou constituées d’un monocristal de zéolithe de type FAU.
Les termes « zéolithe de type FAU » désignent un aluminosilicate qui cristallise dans un système cubique à faces centrées. Selon l’invention, les termes incluent les zéolithes de type FAU X pour lesquelles le rapport molaire Si/AI est supérieur ou égal à 1 et inférieur ou égal à 1 ,5 et les zéolithes de type FAU Y pour lesquelles le rapport molaire Si/AI est supérieur ou égal à 1 ,5 et inférieur ou égal à 2,6. Ainsi, une formule chimique d’un nanocristal de zéolithe de type FAU est INaa Kb (H2O)CI(AIX Sii92-xO384), les ions Na+ et K+ étant présents de manière à assurer la neutralité électrique du nanocristal. Les molécules d’eau peuvent être absentes du nanocristal.
Le terme « suspension claire » désigne une suspension aqueuse ayant sensiblement le même indice de réfraction que l'eau, c'est-à-dire un indice de réfraction d'environ 1 ,333 ± 0,030, mesuré dans les conditions standard.
Les termes « volume poreux » ou « réseau poreux » désignent l’ensemble formé des cavités, des canaux reliant ces cavités entre elles et des pores qui relient les canaux et cavités à l’extérieur de la nanoparticule.
Les termes « pharmaceuticalement actif » désigne un agent qui confère des propriétés thérapeutiques curatives ou préventives à la composition qui le contient et qui s’il présente des effets secondaires néfastes ceux-ci ne sont pas prépondérants par rapport aux effets curatifs et/ou préventifs.
Les termes « pharmaceuticalement acceptable » désignent tout agent susceptible d’être ingéré, injecté ou mis en contact avec la peau et les muqueuses sans qu’il ne génère d’effet indésirable ou sans qu’il ne génère d’effet indésirable d’une ampleur telle qu’il perturbe l’état de santé du patient. Le terme « composition » désigne tout mélange homogène ou inhomogène d’au moins deux composés pouvant se présenter dans un état physique différents ; le terme composition englobe ainsi notamment les solutions, les suspensions et les dispersions.
Brève description des figures
Les caractéristiques et avantages de l’invention apparaîtront à la lecture de la description suivante s’appuyant sur les figures annexées, parmi lesquelles :
-la Fig. 1 représente la distribution de taille des nanoparticules Na-FAU-PBS de l’invention, les nanoparticules sont dispersées dans une solution de PBS;
-la Fig. 2A représente des images obtenues au microscope électronique à balayage des nanoparticules (nanocristaux) de type Na-FAU-PBS et Gd-FAU-PBS avec une échelle de 500 nm et la Fig. 2B représente des images obtenues au microscope électronique à balayage des nanoparticules (nanocristaux) de type Na-FAU-PBS avec une échelle de 100 nm et 40 nm;
-la Fig. 3représente la quantité de diazote adsorbé en fonction de la pression relative obtenue dans les conditions opératoires décrites ci-après pour les nanoparticules de type Na-FAU-PBS ;
-la Fig. 4 représente une comparaison de la viabilité des cellules U87-MG exposées à deux suspensions colloïdales de nanoparticules contenant respectivement 10 pg/mL et 100 pg/mL de nanoparticules Na-FAU-Eau ou Gd-FAU-Eau avec celle obtenue pour les mêmes concentrations de nanoparticules Na-FAU-PBS et Gd-FAU-PBS ;
-la Fig. 5 représente à gauche le pourcentage d’hémolyse en fonction de la dose de nanoparticules (en pg/mL) de type Na-FAU et Gd-FAU synthétisées avec de l’eau ou du PBS ;
-la Fig. 6A représente le changement de la concentration en oxygène dans l’eau obtenu par mise au contact de particules Na-FAU-Eau et Gd-FAU-Eau, préalablement chargées en O2 et la Fig. 6B le changement de la concentration en oxygène dans le PBS obtenu par mise en contact avec des particules Na-FAU-PBS et Gd-FAU-PBS de l’invention et préalablement chargées en O2 ;
EXEMPLES
SYNTHESE ET CARACTERISATION DES NANOPARTICULES
Les matières premières utilisées dans les exemples qui suivent, sont listées ci- dessous : - Hydroxyde de sodium (Sigma Aldrich, 98%)
- Hydroxyde de potassium (Sigma Aldrich, 90%)
- Hydroxyde d’aluminium (type A2100, Alfa Aesar, 76,5 % en masse AI(OH)3, 23,5 % en masse H2O)
- Poudre d’aluminium (325 mesh, Alfa Aesar 99,5%)
- Silice colloïdale (SiCh (Ludox HS-30, 30 wt.% SiC>2, pH=9,5-10,2 Sigma Aldrich)
- Silice colloïdale (SiCh (Ludox SM-30, 30 wt.% SiC>2, pH=9,7-10,3 Sigma Aldrich)
- Nitrate de gadolinium Gd(NOs)3, 6H2O (Aldrich, 99,9%)
- Tampon de phosphate saline (PBS) (Sigma Aldrich, pH=7, 15-7,25)
Ces réactifs de départ ont été utilisés tels que reçus des fabricants, sans purification supplémentaire.
Méthodes d’analyse utilisées et conditions opératoires
Les différents matériaux zéolithiques obtenus dans les exemples ont été caractérisés sur différentes échelles de tailles.
Imagerie par microscopie électronique à balayage et en transmission (MEB/MET) :
La morphologie des nanoparticules a été examinée par microscopie électronique à balayage (MEB) utilisant un appareil Tescan Mira I LMH à une tension de 20 kV.
Microscopie électronique à transmission (MET) : les suspensions colloïdales sont soniquées pendant 15 minutes, puis 2 à 3 gouttes de suspensions de particules fines sont séchées sur des grilles de microscope électronique en cuivre de 300 mesh recouvertes d'un film de carbone. Les images ont été obtenus à l'aide d'un microscope FEI Tecnai G2 30 (Vacc = 300 kV, LaB6).
Analyse par diffusion dynamique de la lumière (DLS) :
Les diamètres hydrodynamiques du matériau zéolithique dans les différentes suspensions ont été déterminés avec un appareil Malvern Zetasizer Nano. La charge de surface des échantillons a été déterminée par mesure du potentiel zêta des suspensions. Les analyses ont été effectuées sur des échantillons après purification avec une concentration en solide de 1 % en poids dispersés dans une solution de PBS à pH = 7,2. La géométrie de rétrodiffusion (angle de diffusion 173°, laser HeNe avec une puissance de sortie de 3 mW à une longueur d'onde de 632,8 nm) permet des mesures à une concentration d'échantillon élevée, car une pénétration complète de la lumière incidente à travers l'échantillon n'est pas nécessaire. Analyse chimique par ICP-MS (spectrométrie de masse à plasma à couplage inductif)
La composition chimique des échantillons de zéolithe a été caractérisée par la spectrométrie de masse à plasma à couplage inductif en utilisant l’équipement Agilent Technologies 7900. Les échantillons ont été préparés selon la procédure suivante: (i) 50 mg d'échantillon de zéolithe ont été dissous dans 3 mL d'acide fluohydrique (HF) (Sigma-Aldrich 40-45%), (ii) une solution de 0,5 mL (HNO3 / HCl équivaut à 1 :3 v/v) a été ajoutée puis le mélange a été chauffé à 110°C pendant 1 h dans une bouteille en polytétrafluoroéthylène (PTFE) (100 mL), et par la suite (iii) 96,5 mL d'eau distillée et 2 g d'acide borique (H3BO3) ont été ajoutés. La solution obtenue a été agitée pendant une nuit pour faciliter la dissolution de l'acide borique. Enfin, 10 mL de la suspension ont été dilués 10 fois avec de l'eau distillée avant analyse.
Exemple 1 : Synthèse de nanocristaux de type FAU dans une solution de PBS (Na- FAU-PBS)
La suspension colloïdale de FAU a été synthétisée par voie hydrothermique à partir de la composition molaire citée en référence au premier mode de mise en œuvre du procédé de l’invention.
Une solution A de poudre d’aluminium est préparée par dissolution de 2,3 g de NaOH dans 3 g de PBS suivi par un ajout lent de 0,29 g de poudre d’aluminium.
Une solution B de silicate est préparée par mélange de 10 g de silice colloïdale (LUDOX® HS-30) avec 1 ,1 g de NaOH et 1 g de PBS. Cette solution trouble (suspension B) a été chauffée pendant 6-7 min dans un four à 100°C pour être transformée en une solution claire. La solution B a été ensuite ajoutée goutte à goutte à la solution A sous une température de 0-3°C et une agitation rapide, puis le mélange a été vieilli pendant 24h à une température ambiante.
La composition molaire initiale du mélange est la suivante :
8,3Na2O : 1 ,1 AI2O3 : 10SiO2 : 55,6 (PBS)
Le mélange obtenu est déshydraté par lyophilisation et puis cristallisé pendant 25h dans une étuve à 50°C. La suspension est purifiée par membrane de dialyse (Visking Dialysis Tubing, Code No. - DTV.12000.08 Size No.8 (25,4mm, 30m), Poids moléculaire 12-14000 Daltons), jusqu'à ce qu'un pH de 7,2 soit atteint. On obtient 60 - 75 mL (de 1 ,6 à 1 ,9 g) d’une suspension colloïdale contenant 2,5% en masse de nanocristaux de zéolithes de type Na-FAU dans du PBS. Les nanoparticules comportent dans leur réseau poreux des ions du PBS et en tant qu’ion alcalin intercalé dans le réseau, des ions Na+ et K+. Les suspensions finales ont été soumises à une sonication pendant 2h.
Le rendement en cristaux va de 53 à 63% (le rendement en cristaux est défini comme étant la masse de produit obtenu X 100/masse de SiCh contenue dans la solution B. Formule chimique du nanocristal de zéolithe Na-FAU-PBS obtenue par ICP:
| Na69.79K6.O6 (H2O)211.85| (Sil23.09Al66.59O384)
La formule entre parenthèses correspond au réseau cristallin, entre les barres figurent le nombre de moles d’ions de compensation et le nombre de moles d’eau.
Exemple 2 : Synthèse de suspensions colloïdales de nanoparticules selon l’invention Une quantité donnée de chacun des types de nanoparticules de l’exemple 1 a été dispersée dans 10 mL de PBS sous sonication pendant 2h. On obtient des solutions colloïdales contenant respectivement 1 %, 2%, 3% et 4% en masse de nanoparticules de type Na-FAU-PBS dispersées dans du PBS.
Ces nanoparticules sont stables en suspension colloïdale à température ambiante pendant au moins une semaine.
Exemple 3 : Synthèse des nanoparticules de zéolithes chargées par des ions métalliques
5 mL de chacune des deux suspensions colloïdales obtenues à l’exemple 2, contenant chacune 2,5% en masse de nanoparticules ont été ajoutées séparément à 25 mL d’une solution de nitrate de gadolinium (III) hexahydraté (Gd(NO3)3.6H2O) avec une concentration de 0,03 mM). La suspension est ensuite maintenue sous agitation à température ambiante pendant 1 h. Ce processus d'échange d'ions a été effectué deux fois. La suspension finale a ensuite été lavée 3 fois avec du PBS pour obtenir finalement une suspension de zéolithe Gd-FAU-PBS dans du PBS et donc à pH=7,2. Exemple 4 : Incorporation de dioxygène et/ou de CO2 dans le réseau poreux des nanoparticules
Chacune des suspensions aqueuses colloïdales obtenues dans l’exemple 2 ou dans l’exemple 3 a ensuite été mise à barboter avec de l'O2 ,du CO2 ou du carbogène à un débit de 800 mL/min pendant 30 minutes.
On obtient ainsi des nanoparticules dont le réseau poreux est au moins partiellement rempli d’Û2 et/ou de CO2.
Exemple 5: Caractérisation morphologique des nanoparticules obtenues aux exemples 1 , 2 et 4. La microscopie électronique à balayage/en transmission (MEB)/(MET) ont été utilisées pour déterminer la morphologie et la taille des nanoparticules synthétisées Na-FAll- PBS et Gd-FAU-PBS
La courbe donnant la distribution de taille des nanoparticules dispersées dans le PBS est représentée sur la Fig. 1 pour les nanoparticules Na-FAU-PBS.
Pour les nanoparticules de type Na-FAU-PBS, la taille hydrodynamique des agrégats de nanoparticules dans une solution de PBS mesurée par DLS est entre 50-200 nm. On constate qu’il s’agit d’une population mono-dispersée.
Les images de microscopie électronique à balayage des nanoparticules de zéolithes Na-FAU-PBS ou Gd-FAU-PBS (voir Fig. 2A) montrent des nanoparticules avec une forme quasi-sphériques avec une distribution homogène de taille et les images de microscopie électronique en transmission MET (voir Fig. 2B) montrent des nanoparticules (nanocristaux) ayant une taille moyenne de 30 nm.
De plus, les images de microscopie électronique à transmission haute résolution montrent que les nanoparticules sont hautement crystallines. Il s’agit de nanoparticules formées chacune d’un unique nanocristal.
Exemple 6 : Analyse chimique des nanoparticules Na-FAU
La formule chimique du matériau zéolitique des nanoparticules de type Na-FAU-PBS et Gd-FAU-PBS est la suivante (déterminée par ICP):
| Na69.79K6.O6 (H2O)21 1.85| (Sil 23.09Al66.59O384)
I Na63.92K2.33Gd2.44 (H2O)l 65.49| (Sil 23.26Al67.13O384)
La formule entre parenthèses correspond au réseau tétraédrique cristallin, entre les barres figurent le nombre de moles de cations de compensation et le nombre de moles d’eau.
Exemple? : Détermination de la porosité par adsorption/désorption de diazote
La porosité des zéolithes Na-FAU-PBS et Gd-FAU-PBS synthétisées dans les exemples précités a été caractérisée par des mesures d’adsorption/désorption d’azote gazeux.
Les propriétés texturales des nanoparticules obtenues au exemples 1 , 2 et 4 ont été déterminées par les isothermes d’adsorption/désorption de diazote mesurées à une température de -196°C à l'aide d'un dispositif de caractérisation de surface «Micromeritics 3Flex». Tous les échantillons ont été dégazés à 250°C sous vide pendant une nuit avant l'analyse. La surface externe des nanoparticules de zéolithes et le volume des micropores des nanoparticules de zéolithe ont été évalués par la méthode t-plot.
Les mesures adsorption/désorption d’azote pour les des deux zéolithes ont donné lieu à des isothermes hybrides de type I et IV selon la classification de l’IUPAC (voir Fig. 3). La mesure de la surface spécifique SBET, le volume poreux total et le volume des micropores des nanoparticules de zéolithe sont regroupés dans le tableau 1 ci- dessous. On définit un micropore comme étant un pore de taille inférieure à 0,08mm.
Tableau 1
Le tableau 2 ci-dessous regroupe la composition chimique des nanoparticules Na- FAU-PBS et Gd-FAU-PBS de l’invention.
Tableau 2
Les propriétés pharmacologiques des nanoparticules de l’invention ont été étudiées. Les résultats figurent dans les exemples suivants.
Exemple 8: test de toxicité sur lignée de cellules humaines.
Les cellules utilisées proviennent d’une lignée cellulaire de glioblastome humain, U87-MG achetée chez American Type Culture Collection (ATCC). Les cellules ont été cultivées dans du DMEM 1 g/L de glucose (Sigma-Aldrich) supplémenté de 10% de sérum de veau fœtal (Eurobio), de glutamine 2 mM (Sigma-Aldrich) et de pénicilline (100 U/mL)/streptomycine (100 pg/mL) (Sigma-Aldrich). Les cellules ont été maintenues en culture à 37°C avec 5% de CO2 et 95% d'humidité. La viabilité cellulaire a été évaluée 72h après l'exposition aux nanoparticules de zéolithe avec le test WST-1 (Roche) selon les instructions du fabricant.
Les résultats sont visibles sur la figure 4 5. Cette figure montre également le pourcentage de viabilité des cellules avec une exposition à des nanoparticules synthétisées dans de l’eau en lieu et place du PBS. On constate que pour les nanoparticules Na-FAU-PBS, Gd-FAU-PBS de l’invention, le pourcentage de cellules viables est plus élevé que pour les nanoparticules synthétisées à partir du même mélange mais avec de l’eau à la place du PBS (Na-FAU-Eau, Gd-FAU-Eau).
Exemple 9 : Test de viabilité des globules rouges.
Pour confirmer l’absence de toxicité des nanoparticules de l’invention, des globules rouges ont été exposés à des concentrations croissantes de nanoparticules selon l’invention (issues des exemples 1 , 2 et 4). Les résultats sont visibles sur la Fig.5. On constate ainsi que pour les nanoparticules synthétisées dans de l’eau, le pourcentage maximal d’hémolyse est de 1 ,85% pour les nanoparticules Na-FAU-Eau et 1 ,19% pour les nanoparticules Gd-FAU-Eau. Ce pourcentage décroit à 0,408% et 0,590% pour les particules Na-FAU-PBS et Gd-FAU-PBS, respectivement.
Par ailleurs, en présence d’une grande quantité de nanoparticules (500 pg/mL), le pourcentage d’hémolyse le plus élevé obtenu pour les nanoparticules Gd-FAU-Eau est de 2%. Il chute à 1 % pour les nanoparticules Gd-FAU-PBS.
Ces résultats confirment que l’utilisation de PBS lors de la synthèse des nanoparticules décroît leur toxicité.
Exemple 10 : Etude du relargage d'oxygène par les nanoparticules zéolitiques en conditions aqueuses et hypoxiques.
Une chambre à hypoxie (IN VIV02 500™, 3M) a été utilisée pour obtenir une composition gazeuse stable et précisément contrôlée de l'atmosphère avec une précision de 0,1 % O2 en adaptant la quantité de N2. La solution de PBS (Sigma- Aldrich) a été équilibrée avec le mélange gazeux contenu dans la chambre d'hypoxie pendant 1 h avant l'expérience. Un tube fermé contenant 12 mL de PBS équilibré à 37°C et un capteur d'oxygène dissous (SevenGo (Duo) pro™ / OptiOx™, Mettler Toledo) ont été utilisé à l'intérieur de la chambre à hypoxie. Avant l'expérience, la ligne de base a été établie en mesurant la teneur en oxygène du PBS pendant 30 min.
Les nanoparticules des exemples des différents types et préalablement chargées en oxygène ont ensuite été ajoutées au système et l'oxygène dissous dans la solution de PBS a été mesuré en continu pendant 1 h. Les résultats sont visibles sur les Fig. 6A et 6B. On constate que les nanoparticules Gd-FAU-PBS de l’invention préalablement chargées en oxygène présentent un meilleur relargage du dioxygène par rapport aux nanoparticules préparées dans l’eau (Gd-FAU-Eau). De plus, la cinétique de relargage est également augmentée ce qui est intéressant pour un usage in vivo. Le relargage d’oxygène est accéléré après 30min ce qui est d’un intérêt considérable pour une utilisation in vivo, la particule ayant le temps d’atteindre le cerveau et d’y délivrer l’oxygène. Concernant les nanoparticules Na-FAU-PBS, on constate que la cinétique de relargage du dioxygène est plus lente par rapport au Na-FAU-Eau.

Claims

Revendications
1 . Procédé de synthèse de nanoparticules constituées ou comprenant au moins un nanocristal de zéolithe selon lequel :
- on prépare une première composition/solution 1 contenant une source d’aluminium et une source d’un ion d’un métal alcalin M, en particulier Na;
- on prépare une deuxième composition/solution 2 comprenant une source de silicium et une source d’un ion d’un métal alcalin M en particulier Na, lesdites compositions/solutions 1 et 2 étant exemptes de tout agent structurant organique ;
- on mélange les compositions/ solutions 1 et 2 et on laisse le mélange sous agitation,
- on cristallise le mélange à une température supérieure ou égale à 50°C ; et
- on sépare éventuellement lesdites nanoparticules ainsi formées, caractérisé en ce que ladite première composition/solution 1 et ladite deuxième composition/solution 2 sont chacune constituées de ladite source et d’un tampon aqueux constitué d’eau et de 137mM/L de NaCI, 2,7 mM/L de KCI , 10 mM/L de Na2HPO4, 1 ,76 mM/L de KH2PO4 et ayant un pH égal 7,2 (PBS) et en ce que ledit mélange desdites compositions/ suspensions 1 et 2 présente la composition molaire suivante (I):
XI M2O : YAI2O3 : 10SiO2 : Z PBS (I) dans laquelle 2,8 <X1 < 8,8,
0,3<Y< 1 ,5,
40<Z<300.
2. Procédé selon la revendication 1 , caractérisé en ce M=Na, en ce que ladite source d’aluminium est de la poudre d’aluminium, en ce qu’avant de cristalliser ledit mélange desdites compositions/solutions 1 et 2, on le déshydrate sous vide et en ce que l’on cristallise ensuite la fraction solide restante à une température supérieure ou égale à 30°C et inférieure ou égale à 100°C et en particulier égale à 50°C pendant une durée égale ou supérieure à 6h et égale ou inférieure à 30h et notamment égale à 25h.
3. Procédé selon l’une quelconque des revendications 1 et 2, caractérisé en ce que M= Na et en ce que 5 <x1 < 8.8, 0,3 <y< 1 ,5 et 40 <z< 200 et en particulier x1 = 8,3, y =1 ,1 et z = 55,6.
4. Procédé selon l’une quelconque des revendications précédentes, caractérisé en ce que l’on sépare lesdites nanoparticules par filtration membranaire.
5. Nanoparticule constituée ou comprenant au moins un nanocristal de zéolithe et pouvant être obtenue selon le procédé de l’une quelconque des revendications 1 à 4, caractérisée en ce que ladite zéolithe est un aluminosilicate de type FAU et en ce qu’elle contient des ions Na+, K+, HPO42; HsCT, H2PO4 et Cl’.
6. Nanoparticule selon la revendication 5, caractérisée en ce que ledit nanocristal présente la formule (II) suivante:
INa69.79K6.06 (H2O)2i i.85| (Sii23.09Al66.59O384) (II) ou la formule suivante INa63.92K2.33Gd2.44 (H2O)l65.49| (Sil23.26Al67.13O384)
7. Nanoparticule selon la revendication 5 ou 6, caractérisée en ce qu’elle présente un volume poreux total supérieur ou égal à 0,4 cm3/g et inférieur ou égal à 1 ,5 cm3/g et/ou une surface spécifique SBET supérieure ou égale à 200 m2/g et inférieure ou égale à 1000 m2/g.
8. Nanoparticule selon l’une quelconque des revendications 5 à 7, caractérisée en ce qu’elle contient en outre dans son réseau cristallin des cations d’un métal choisi parmi Fe, Gd, Cu et Ce et en particulier en une quantité supérieure ou égale à 0,2 % massique et inférieure ou égale à 5 % massique et/ou un gaz contenu dans son volume poreux et choisi parmi l’oxygène, le diazote, le dioxyde de carbone et leurs mélanges.
9. Suspension comprenant ou constituée des nanoparticules selon l’une quelconque des revendications 5 à 8 et d’un dispersant choisi parmi l’eau, un tampon constitué d’eau et de 137mM/L de NaCI, 2,7 mM/L de KCI , 10 mM/L de Na2HPO4, 1 ,76 mM/L de KH2PO4 et ayant un pH égal 7,2, les alcools et leurs mélanges.
10. Composition pharmaceutique contenant en tant qu’agent de contraste ou agent pharmaceuticalement actif des nanoparticules selon l’une quelconque des revendications 5 à 8, éventuellement en suspension dans un dispersant ou la suspension selon la revendication 9.
11 . Composition pharmaceutique selon la revendication 10, caractérisé en ce que ledit dispersant est choisi parmi l’eau, un tampon constitué d’eau et de 137mM/L de NaCI, 2,7 mM/L de KCI , 10 mM/L de Na2HPO4, 1 ,76 mM/L de KH2PO4 et ayant un pH égal 7,2, les alcools et leurs mélanges.
12. Produit de combinaison caractérisé en ce qu’il comprend ou est constitué de la composition pharmaceutique selon la revendication 10 ou 11 ou de la suspension selon la revendication 9 et d’un agent anticancéreux pour leur administration simultanée ou différée.
13. Utilisation de la nanoparticule selon l’une quelconque des revendications 5 à 8 en tant que médicament, notamment pour le traitement des tumeurs solides en particulier du cerveau, en particulier le glioblastome.
14. Utilisation de la nanoparticule selon l’une quelconque des revendications 5 à 8 en tant qu’agent de contraste, notamment en imagerie par résonance magnétique (IRM).
15. Utilisation de la suspension selon la revendication 9, notamment dans du PBS, en tant que médicament, notamment pour le traitement des tumeurs solides en particulier du cerveau, en particulier le glioblastome.
16. Utilisation de la suspension selon la revendication 9, notamment dans du PBS, pour son utilisation en tant qu’agent de contraste, notamment en imagerie par résonance magnétique (IRM).
EP24712249.2A 2023-03-28 2024-03-19 Procede de synthese de nanoparticules de zeolithe dans un tampon phosphate salin - nanoparticules, suspensions composition pharmaceutique et utilisations associees Pending EP4688656A2 (fr)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
FR2302982 2023-03-28
PCT/EP2024/057254 WO2024200101A2 (fr) 2023-03-28 2024-03-19 Procede de synthese de nanoparticules de zeolithe dans un tampon phosphate salin - nanoparticules, suspensions composition pharmaceutique et utilisations associees

Publications (1)

Publication Number Publication Date
EP4688656A2 true EP4688656A2 (fr) 2026-02-11

Family

ID=88068905

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EP24712249.2A Pending EP4688656A2 (fr) 2023-03-28 2024-03-19 Procede de synthese de nanoparticules de zeolithe dans un tampon phosphate salin - nanoparticules, suspensions composition pharmaceutique et utilisations associees

Country Status (5)

Country Link
EP (1) EP4688656A2 (fr)
JP (1) JP2026511198A (fr)
CN (1) CN120826370A (fr)
AU (1) AU2024245504A1 (fr)
WO (1) WO2024200101A2 (fr)

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2015101800A1 (fr) 2013-12-30 2015-07-09 Centre National De La Recherche Scientifique Procédé de préparation d'un matériau à base de faujasite de synthèse comprenant des nanoparticules monodispersées constituées de nanocristaux isolés
EP3441138A1 (fr) 2017-08-08 2019-02-13 Centre National De La Recherche Scientifique Procédé de préparation d'une suspension de matières zéolitiques synthétiques de taille nanométrique, suspensions de matières zéolitiques synthétiques de taille nanométrique obtenues par ledit procédé et leurs utilisations en thérapie et diagnostic

Also Published As

Publication number Publication date
JP2026511198A (ja) 2026-04-10
WO2024200101A2 (fr) 2024-10-03
CN120826370A (zh) 2025-10-21
AU2024245504A1 (en) 2025-08-07
WO2024200101A3 (fr) 2024-11-21

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Lin et al. Stability of small mesoporous silica nanoparticles in biological media
Gu et al. Hydrophilic mesoporous carbon nanoparticles as carriers for sustained release of hydrophobic anti-cancer drugs
CN106729928B (zh) 一种聚乙烯醇/海藻酸钠/羟基磷灰石复合纤维膜及其制备方法、应用
CN106495225B (zh) 一种用于磁共振显影的多糖杂化二氧化锰纳米粒子及其制法和用途
Ortiz et al. Comparative hydrothermal synthesis of hydroxyapatite by using cetyltrimethylammonium bromide and hexamethylenetetramine as additives
CN103923277A (zh) 一种两亲性聚合物、其制备方法、复合纳米药物载体及其制备方法
Yang et al. RGO/AuNR/HA-5FU nanocomposite with multi-stage release behavior and efficient antitumor activity for synergistic therapy
US11547680B2 (en) Benzalkonium-embedded mesostructured silica compositions and uses of same
Wang et al. Synthesis of different-sized SBA-15 nanoparticles and their fluoride release performances from poly (methyl methacrylate) dental restorative resin
EP4688656A2 (fr) Procede de synthese de nanoparticules de zeolithe dans un tampon phosphate salin - nanoparticules, suspensions composition pharmaceutique et utilisations associees
Chen et al. Facile synthesis, microstructure and BMP-2 delivery of novel silica hollow flowers for enhanced osteoblast differentiation
WO2024200094A2 (fr) Procede de synthese de nanoparticules de zeolithe dans un tampon phosphate salin – nanoparticules, suspensions et composition pharmaceutique associees
JP2024174904A (ja) 医薬品および化粧用途のための一酸化窒素担体としての硫黄官能化モノリスおよびそれに由来する粒子
Cheng et al. Biphasic synthesis of biodegradable urchin-like mesoporous organosilica nanoparticles for enhanced cellular internalization and precision cascaded therapy
CN114615966A (zh) 稳定的非晶态钙镁磷酸盐颗粒组合物
JP6548617B2 (ja) コラーゲン産生促進剤
Bando et al. Electric charge dependence of controlled dye-release behavior in glass ionomer cement containing nano-porous silica particles
CN104873975B (zh) 一种金纳米材料及其制备方法和应用
Rosdi et al. Stability analysis of immobilized ozonated vegetable oil on silica nanoparticles
KR20230050952A (ko) 광열 치료 및 광역학 치료가 가능한 암세포 표적 다공성 환원 그래핀 옥사이드 나노 복합체 및 이의 제조방법
JP6555722B2 (ja) 歯面修復材
Salem et al. Mesoporous Silica Nanoparticles as a Potential Drug Delivery System in Dentistry
CN108186677A (zh) 新型自由基高效产生的可降解纳米材料及其制备方法和应用
Wijewantha Design of Biocompatible Mineral Materials for Drug Delivery
Xiao et al. Lanthanum-loaded ZIF nanomaterials for caries prevention

Legal Events

Date Code Title Description
STAA Information on the status of an ep patent application or granted ep patent

Free format text: STATUS: UNKNOWN

STAA Information on the status of an ep patent application or granted ep patent

Free format text: STATUS: THE INTERNATIONAL PUBLICATION HAS BEEN MADE

PUAI Public reference made under article 153(3) epc to a published international application that has entered the european phase

Free format text: ORIGINAL CODE: 0009012

STAA Information on the status of an ep patent application or granted ep patent

Free format text: STATUS: REQUEST FOR EXAMINATION WAS MADE

17P Request for examination filed

Effective date: 20250911

AK Designated contracting states

Kind code of ref document: A2

Designated state(s): AL AT BE BG CH CY CZ DE DK EE ES FI FR GB GR HR HU IE IS IT LI LT LU LV MC ME MK MT NL NO PL PT RO RS SE SI SK SM TR