EP3713555A1 - Quercetin-based composition for treating rhinosinusitis - Google Patents

Quercetin-based composition for treating rhinosinusitis

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EP3713555A1
EP3713555A1 EP18814794.6A EP18814794A EP3713555A1 EP 3713555 A1 EP3713555 A1 EP 3713555A1 EP 18814794 A EP18814794 A EP 18814794A EP 3713555 A1 EP3713555 A1 EP 3713555A1
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EP
European Patent Office
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quercetin
weight
dihydroxybenzoyl
trihydroxy
glucoside
Prior art date
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Withdrawn
Application number
EP18814794.6A
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German (de)
French (fr)
Inventor
Ainura Chodoeva
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Aphabio Therapeutics
Original Assignee
Aphabio Therapeutics
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Publication date
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Withdrawn legal-status Critical Current

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    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca

Definitions

  • the present invention relates to a particular composition and its use in the treatment of rhinosinusitis.
  • the invention also relates to a process for obtaining such a composition.
  • Rhinosinusitis is an inflammatory disease of the nasal cavity and paranasal sinus cavities, characterized by obstruction or congestion and runny nose, pain and pressure in the face, reduction or loss of Smell and / or mucopurulent flow mainly from the middle meatus, edema and obstruction of the mucosa of the middle meatus area.
  • Rhinosinusitis is classified as follows: acute RS (RSA) with a duration of illness ⁇ 12 weeks, chronic RS (CSR) with duration> 12 weeks, with polyp (RSCwNP) or without nasal polyp (RSCsNP).
  • RSA acute RS
  • CSR chronic RS
  • RSSNP polyp
  • RSCsNP nasal polyp
  • rhinosinusitis terminology includes all forms of the disease, including acute and chronic rhinitis, acute and chronic sinusitis, with or without nasal polyp.
  • Rhinosinusitis is one of the most prevalent diseases in the world, with an average prevalence of more than 10% of the world's population.
  • rhinosinusitis affects 1 in 8 people, with an annual health expenditure of more than $ 11 billion (Rosenfeld, RM et al., Clinical Practice Guideline (Update): Adult Sinusitis, Otolaryngology-Head and Neck Surgery 152 (2S), 2015, ppl-39).
  • the total cost of treating a patient with chronic rhinosinusitis is $ 2609 per year in the United States; the total cost of treating a patient with chronic rhinosinusitis in a university hospital is $ 1861 per year in Europe.
  • Rhinosinusitis is one of the most expensive diseases for employers in the United States. Among chronic diseases, rhinosinusitis is the disease that causes the most costs from treatment and home care.
  • rhinosinusitis The treatment of rhinosinusitis is guided by the guidelines governed by international associations such as: the European Academy of Allergology and Clinical Immunology and the European Society of Rhinology. According to the protocol established by these associations (Rhinosinusitis and Nasal Polyps 2012), the different forms of rhinosinusitis are treated in the following way:
  • the first-line treatment is symptomatic therapy: analgesics, saline irrigation, antihistamines and decongestants may be offered, despite the lack of evidence of their effectiveness. If there has been no improvement in the patient's condition for 7 to 14 days, intra-nasal corticosteroids are recommended.
  • first-line antibiotics amoxicillin alone or with clavulanic acid
  • radiological imaging should be performed to confirm the microbial cause of the disease and to verify the absence of a complication. If there is no improvement after the use of an antibiotic, it is recommended to change it (eg macrolides). If treatment fails, intra-nasal corticosteroid maintenance and / or surgery may be recommended.
  • the treatment protocol is as follows: after endoscopic examination and CT imaging of nasal cavities and sinuses, corticosteroids intravenously nasal are prescribed. If there has been no improvement in the condition of the patient for 3 months, long-term treatment with antibiotics may be added. If there is still no improvement, surgery is recommended.
  • intranasal corticosteroids are effective in one of 14 patients treated (Hayward, G et al., Intranasal Corticosteroids in Management of Acute Sinusitis:
  • Nasal decongestants may be recommended for palliative treatment, but continued administration (greater than 3 - 5 days) may cause rhinitis drug.
  • Isotonic or hypertonic saline solutions for nasal irrigation are widely used in the practice of daily hygiene. In general, saline is the most used. The volume of nasal solution varies from 5 mL to 500 mL. The effect of isotonic saline is explained by the ability of solutions to remove irritating foreign materials and mediators of inflammation of the nasal cavity.
  • saline is the most used.
  • the volume of nasal solution varies from 5 mL to 500 mL.
  • the effect of isotonic saline is explained by the ability of solutions to remove irritating foreign materials and mediators of inflammation of the nasal cavity.
  • One of the formulations for nasal lavage was developed by Ted Keller (US2013 / 0156871, Keller Ted, June 20, 2013), where he discovers the nasal solution comprising sodium chloride and a buffer consisting of sodium ascorbate and sodium bicarbonate. sodium. After dissolution in water, this composition can be used to clean
  • the present invention aims to overcome the problems of existing solutions and provide the compositions for cleaning the nose and sinuses cavity to effectively prevent and treat rhinosinusitis acute and chronic.
  • the invention relates to compositions comprising salt; and active agents of the polyphenolic group chosen from the compounds: quercetin, quercetin-4'-glucoside, 2- (3,4-dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy-3 (2H) -benzofuranone, protocatechic acid, which may be contain impurities derived from quercetin, comprising quercetin-3'-glucoside, quercetin-7'-glucoside, diglucosides and quercetin triglucosides, quercetin dimers, in an amount of less than 5% by weight of the total amount of active agents.
  • quercetin with quercetin derivatives such as quercetin-4'-glucoside, 2- (3,4-dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy-3 (2H) - benzofuranone, protocatechic acid.
  • quercetin derivatives such as quercetin-4'-glucoside, 2- (3,4-dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy-3 (2H) - benzofuranone, protocatechic acid.
  • quercetin derivatives such as quercetin-4'-glucoside, 2- (3,4-dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy-3 (2H) - benzofuranone, protocatechic acid.
  • Another object of the invention is to provide a process for the preparation of these compositions.
  • active agent within the meaning of the invention is meant the compound or the ingredient producing the desired therapeutic effect.
  • impurity within the meaning of the invention is meant the compound or the ingredient without therapeutic effect, concomitant with the active agents, present in the composition of a drug in a minor amount.
  • the term "effective therapeutic quantity" is intended to mean the amount of active agent that can produce the desired therapeutic effect in the subjects treated.
  • patient or “subject” within the meaning of the invention is meant a mammal, comprising the animal or the human, to whom the present invention may be applied.
  • the invention therefore relates to a composition for rinsing the nasal cavity and sinus cavities for the prevention or the curative or prophylactic treatment of acute and chronic rhinitis, acute and chronic sinusitis, comprising:
  • At least one active agent of the polyphenolic group chosen from the compounds: quercetin-4'-glucoside, 2- (3,4-dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy-3 (2H) -benzofuranone, protocatechic acid; and
  • quercetin is in anhydrous form with an approximate molecular weight of 302 g / mol, or in the form of quercetin hydrate with a mass approximate molecular weight of 320 g / mol, or in the form of quercetin dihydrate with an approximate molecular weight of 338 g / mol.
  • the invention relates to nasal compositions containing active ingredients with proven efficacy for the treatment of rhinosinusitis.
  • the molecules contained in the composition according to the invention can be extracted from the onion peel.
  • the efficacy of the crude extract and isolated compounds has been studied in rhinosinusite models developed in animals.
  • the results of this invention are described in the examples.
  • the results of this research have established the effectiveness of onion peel extract and compounds isolated from this extract: quercetin, quercetin-4'-glucoside, 2- (3,4-dihydroxybenzoyl) -2 , 4,6-trihydroxy-3 (2H) -benzofuranone and protocatechic acid for rhinosinusitis, to develop formulations containing these agents, and to develop methods of treatment.
  • quercetin can be used in anhydrous form, with an approximate molecular weight of 302 g / mol, or in the form of quercetin hydrate with an approximate molecular weight of 320 g / mol, or form of quercetin dihydrate, with an approximate molecular weight of 338 g / mol.
  • compositions according to the invention are conceivable.
  • Nasal composition including salt and quercetin, quercetin-4'-glucoside 2- (3,4-dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy-3 (2H) -benzofuranone and acid
  • the nasal formulation comprises salt and a plant extract containing flavonoids: quercetin, quercetin-4'-glucoside, 2- (3,4-dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy-3 ( 2H) -benzofuranone and protocatechic acid.
  • the salt may be selected from sodium chloride or potassium chloride, or both, in an amount sufficient to produce the hypotonic, isotonic or hypertonic solution.
  • the amount of salt may be from 83 to 99.77% by weight of the dry composition.
  • the amount of quercetin in the dry composition may comprise 0.23 to 3% by weight.
  • the amount of quercetin-4'-glucoside in the dry composition may be between 0.000001 - 3% by weight.
  • the amount of 2- (3,4- dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy-3 (2H) -benzofuranone in the dry composition may be between 0.000001 - 3% by weight.
  • the amount of protocatechic acid in the dry composition may be between 0.000001 - 3% by weight.
  • the active agent comprising quercetin, quercetin-4'-glucoside, 2- (3,4-dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy-3 (2H) -benzofuranone and the acid protocatechic
  • the method of preparing the extract containing active agents may comprise the following steps:
  • This method makes it possible to obtain a crude extract composed of the active agents: quercetin, 2- (3,4-dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy-3 (2H) -benzofuranone, quercetin-4'-glucoside, protocatechic acid .
  • the crude extract may also contain other impurities derived from quercetin, for example, quercetin-3'-glucoside, quercetin-7'-glucoside, diglucosides and triglucosides of quercetin, quercetin dimers, in an amount not exceeding 5% of the total mass of active agents.
  • Another extraction method consists in using organic solvents, preferably methanol or ethanol diluted with water, in a proportion of between 50/50 and 90/10 (v / v).
  • organic solvents preferably methanol or ethanol diluted with water, in a proportion of between 50/50 and 90/10 (v / v).
  • the defined amount of onion peel powder is mixed with the organic solvent in a proportion of 1-10 g / 30 mL (w / v), and stirred for 24 hours at room temperature.
  • the solution obtained is filtered and then evaporated to dryness.
  • the crude extract obtained can be separated by the method of high performance liquid chromatography.
  • the separation conditions can be as follows:
  • a Phenomenex C18 column (21.2 mm x 150 mm, 5 ⁇ m, 100 A) of the HPLC apparatus.
  • the following solvents may be used: Solvent A: 0.5% H2O / TFA (1 L / 5 mL); Solvent B: ACN.
  • the flow rate can be: 15 mL / min.
  • Qualitative and quantitative analyzes of the compositions can be performed by UPLC-DAD-MS techniques (Agilent Technologies, USA).
  • the elution conditions may be as follows: 1 ⁇ l of solution is injected into the Agilent C18 column (2.1 mm, 1.8 ⁇ m) of UPLC at a temperature of 25 ° C.
  • the solvents used can be: Solvent A: H 2 0 / 0.1% HCOH 0.1 and Solvent B: ACN / 0.1% HCOOH.
  • the flow rate can be: 0.4 mL / min.
  • Isolated compounds can be detected first by the diode array detector and then by the mass spectrometry analyzer. Mass Spectrometry analyzes can be performed in negative or positive mode. The separation and analysis techniques by the UPLC-DAD-MS method can be the same for all compositions.
  • the composition may be prepared by mixing the commercially available compounds: quercetin, 2- (3,4-dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy-3 (2H) -benzofuranone, quercetin-4'- glucoside, protocatechic acid and salt selected from sodium chloride or potassium chloride.
  • the dry composition can be prepared by one of the following methods: Dissolution of quercetin, 2- (3,4-dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy-3 (2H) -benzofuranone, quercetin-4'-glucoside, protocatechic acid with salt in water water heated to 80 - 100 ° C. Then cooling the solution to room temperature, followed by freezing and lyophilization. b). Dissolution of quercetin, 2- (3,4-dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy-3 (2H) -benzofuranone, quercetin-4'-glucoside, protocatechic acid in heated water at 80 - 100 ° C.
  • quercetin, 2- (3,4-dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy-3 (2H) -benzofuranone, quercetin-4'-glucoside and protocatechic acid powder is mixed with sodium or potassium chloride.
  • composition can be sterilized or not, can be supplied in dry or liquid form, distributed in single-dose or multi-dose containers.
  • the composition may comprise one or more biologically active ingredients consistent with the therapy and additives selected from pharmaceutical carriers, stabilizers, surfactants, preservatives, and essential oils.
  • the biologically active ingredients may be selected from antibiotics, corticosteroids, and / or copper, manganese and sulfur salts.
  • Essential oils can be chosen from eucalyptus oil, rosemary oil, tea tree oil or menthol.
  • the dry composition can subsequently be mixed with water.
  • the solution or suspension obtained comprises 0.4 - 2% by weight of sodium chloride and / or potassium chloride, 0.0023 - 0.03% by mass of quercetin, 0.00000001 - 0.03% by mass of quercetin 4'-glucoside, 0.00000001 - 0.03% by weight of 2- (3,4-dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy-3 (2H) -benzofuranone and 0.00000001 - 0.03% mass of protocatechic acid and other impurities derived from quercetin up to 0.5% by total weight of the active agents.
  • the dry composition may be mixed with the solution containing the bicarbonate salt.
  • the bicarbonate salt may be selected from sodium bicarbonate or potassium bicarbonate or both.
  • the concentration of bicarbonate salt can vary up to 0.5%, preferably between 0.1% - 0.5% by weight, more preferably 0.25 - 0.5% by weight.
  • the temperature of the water or bicarbonate solution can be between 30 ° C and 38 ° C. At this temperature, some compounds, for example quercetin, may remain in suspension, others can be completely dissolved. According to a particular variant, the water may be boiled and then cooled to 37 ° C. before mixing.
  • the water used for the preparation of the liquid composition can be distilled, deionized, purified and sterilized.
  • composition may be presented as follows:
  • composition consisting of two parts:
  • Part A containing the dry powder, including sodium chloride or potassium chloride, quercetin, 2- (3,4-dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy-3 (2H) -benzofuranone, quercetin 4'-glucoside and protocatechic acid.
  • Part B containing 20 ml of water or solution of sodium bicarbonate or potassium bicarbonate.
  • Nasal composition including salt and quercetin, quercetin-4'-glucoside and protocatechic acid.
  • the nasal formulation comprises salt and a plant extract containing flavonoids: quercetin, quercetin-4'-glucoside and protocatechic acid.
  • the salt may be selected from sodium chloride or potassium chloride, or both, in an amount sufficient to produce the hypotonic, isotonic or hypertonic solution.
  • the amount of salt may be from 86 to 99.77% by weight of the dry composition.
  • the amount of quercetin in the dry composition may comprise 0.23 to 3% by weight.
  • the amount of quercetin-4'-glucoside in the dry composition may be between 0.000001 - 3% by weight.
  • the amount of protocatechic acid in the dry composition may be between 0.000001 - 3% by weight.
  • the active agent comprising quercetin, quercetin-4'-glucoside and protocatechic acid may be prepared by a process for extracting plants containing flavonoids, for example onion peel.
  • the method of preparing the extract containing active agents may comprise the following steps:
  • This method makes it possible to obtain a crude extract composed of the active agents: quercetin, quercetin-4'-glucoside, protocatechic acid.
  • the crude extract may also contain other impurities derived from quercetin, for example, quercetin-3'-glucoside, quercetin-7'-glucoside, diglucosides and triglucosides of quercetin, quercetin dimers, in an amount not exceeding 5% of the total mass of active agents.
  • Another extraction method consists in using organic solvents, preferably methanol or ethanol diluted with water, in a proportion of between 50/50 and 90/10 (v / v).
  • organic solvents preferably methanol or ethanol diluted with water, in a proportion of between 50/50 and 90/10 (v / v).
  • the defined amount of onion peel powder is mixed with the organic solvent in a proportion of 1-10 g / 30 mL (w / v), and stirred for 24 hours at room temperature.
  • the solution obtained is filtered and then evaporated to dryness.
  • the crude extract obtained can be separated by the method of high performance liquid chromatography.
  • the separation conditions can be as follows:
  • Qualitative and quantitative analyzes of the compositions can be performed by UPLC-DAD-MS techniques (Agilent Technologies, USA).
  • the elution conditions may be as follows: 1 ⁇ l of solution is injected into the Agilent C18 column (2.1 mm, 1.8 ⁇ m) of UPLC at a temperature of 25 ° C.
  • the solvents used can be: Solvent A: H 2 0 / 0.1% HCOOH and Solvent B: ACN / 0.1% HCOOH.
  • the flow rate can be: 0.4 mL / min.
  • Isolated compounds can be detected first by the diode array detector and then by the mass spectrometry analyzer. Mass Spectrometry analyzes can be performed in negative or positive mode.
  • the separation and analysis techniques by the UPLC-DAD-MS method can be the same for all compositions.
  • the composition may be prepared by mixing the commercially available compounds: quercetin, quercetin-4'-glucoside, protocatechic acid and salt selected from sodium chloride or potassium chloride.
  • the dry composition can be prepared by one of the following methods: Dissolution of quercetin, quercetin-4'-glucoside, protocatechic acid with salt in water heated to 80-100 ° C. Then cooling the solution to room temperature, followed by freezing and lyophilization. b). Dissolution of quercetin, quercetin-4'-glucoside, protocatechic acid in water heated to 80-100 ° C. Then cooling the solution to room temperature, adding and dissolving the salt, followed by freezing and lyophilization. c). Quercetin, quercetin-4'-glucoside and protocatechic acid are dissolved in the organic solvent, preferably in ethanol or methanol diluted with water.
  • the proportion of organic solvent / water can vary between 50/50 and 90/10 (v / v). Salt is dissolved in water. Then both solutions are mixed at room temperature, then frozen and lyophilized. d).
  • the quercetin, quercetin-4'-glucoside and protocatechic acid powder is mixed with sodium chloride or potassium chloride.
  • the composition can be sterilized or not, can be supplied in dry or liquid form, distributed in single-dose or multi-dose containers.
  • the composition may comprise one or more biologically active ingredients consistent with the therapy and additives selected from pharmaceutical carriers, stabilizers, surfactants, preservatives, and essential oils.
  • the biologically active ingredients may be selected from antibiotics, corticosteroids, and / or copper, manganese and sulfur salts.
  • Essential oils can be chosen from eucalyptus oil, rosemary oil, tea tree oil or menthol.
  • the dry composition can subsequently be mixed with water.
  • the solution or suspension obtained comprises 0.4 - 2% by weight of sodium chloride and / or potassium chloride, 0.0023 - 0.03% by mass of quercetin, 0.00000001 - 0.03% by mass of quercetin 4'-glucoside and 0.00000001 - 0.03% by weight of protocatechic acid, and other impurities derived from quercetin up to 0.5% by total weight of the active agents.
  • the dry composition may be mixed with the solution containing the bicarbonate salt.
  • the bicarbonate salt may be selected from sodium bicarbonate or potassium bicarbonate or both.
  • the concentration of bicarbonate salt can vary up to 0.5%, preferably between 0.1% - 0.5% by weight, more preferably 0.25 - 0.5% by weight.
  • the temperature of the water or bicarbonate solution may be between 30 and 38 ° C. At this temperature, some compounds, for example quercetin, may remain in suspension, others may be completely dissolved. According to a particular variant, the water may be boiled and then cooled to 37 ° C. before mixing.
  • the water used for the preparation of the liquid composition can be distilled, deionized, purified and sterilized.
  • composition may be presented as follows: Composition consisting of two parts:
  • part A the dry powder, comprising sodium chloride or potassium chloride, quercetin, quercetin-4'-glucoside and protocatechic acid.
  • Part B containing 20 ml of water or solution of sodium bicarbonate or potassium bicarbonate.
  • the nasal formulation comprises salt, quercetin, 2- (3,4-dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy-3 (2H) -benzofuranone, and protocatechic acid.
  • the salt may be selected from sodium chloride or potassium chloride or both, in an amount sufficient to produce the hypotonic, isotonic or hypertonic solution.
  • the amount of salt may comprise from 91 to 99.77% by weight of the dry composition.
  • the amount of quercetin in the dry composition may comprise 0.23 to 3% by weight.
  • the amount of 2- (3,4-dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy-3 (2H) -benzofuranone in the dry composition may comprise between 0.000001 - 3% by weight.
  • the amount of protocatechic acid in the dry composition may comprise between 0.000001 - 3% by weight.
  • the active agent comprising quercetin, 2- (3,4-dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy-3 (2H) -benzofuranone and protocatechic acid
  • the active agent comprising quercetin, 2- (3,4-dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy-3 (2H) -benzofuranone and protocatechic acid
  • the method of preparing the extract containing active agents may comprise the following steps:
  • This method makes it possible to obtain a crude extract composed of the active agents: quercetin, 2- (3,4-dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy-3 (2H) -benzofuranone, quercetin-4'-glucoside, acid protocatechic.
  • the crude extract may also contain other impurities derived from quercetin, for example, quercetin-3'-glucoside, quercetin-7'-glucoside, diglucosides and triglucosides of quercetin, quercetin dimers, in an amount not exceeding 5% of the total mass of active agents.
  • Another method of extraction is to use organic solvents, preferably methanol or ethanol diluted with water in a proportion of between 50/50 and 90/10 (v / v).
  • organic solvents preferably methanol or ethanol diluted with water in a proportion of between 50/50 and 90/10 (v / v).
  • the defined amount of onion peel powder is mixed with the organic solvent in a proportion of 1-10 g / 30 ml (w / v), and stirred for 24 hours at room temperature.
  • the solution obtained is filtered and then evaporated to dryness.
  • the crude extract obtained can be separated by the method of high performance liquid chromatography.
  • the separation conditions can be as follows:
  • Qualitative and quantitative analyzes of the compositions can be performed by UPLC-DAD-MS techniques (Agilent Technologies, USA).
  • the elution conditions may be as follows: 1 ⁇ l of solution is injected into the Agilent C18 column (2.1 mm, 1.8 ⁇ m) of UPLC at a temperature of 25 ° C.
  • the solvents used can be: Solvent A: H 2 0 / 0.1% HCOOH and Solvent B: ACN / 0.1% HCOOH.
  • the flow rate can be: 0.4 mL / min.
  • Isolated compounds can be detected first by the diode array detector and then by the mass spectrometry analyzer. Mass Spectrometry analyzes can be performed in negative or positive mode.
  • the separation and analysis techniques by the UPLC-DAD-MS method can be the same for all compositions.
  • the composition can be prepared by mixing the commercially available compounds: quercetin, 2- (3,4-dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy-3 (2H) - benzofuranone, protocatechic acid and salt selected from sodium chloride or potassium chloride.
  • the dry composition can be prepared by one of the following methods: Dissolution of quercetin, 2- (3,4-dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy-3 (2H) -benzofuranone, protocatechic acid with salt in water heated to 80 - 100 ° C. Then cooling the solution to room temperature, followed by freezing and lyophilization. b). Dissolution of quercetin, 2- (3,4-dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy-3 (2H) -benzofuranone, protocatechic acid in water heated to 80-100 ° C. Then cooling the solution to room temperature, adding and dissolving the salt, followed by freezing and lyophilization. c).
  • Quercetin, 2- (3,4-dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy-3 (2H) -benzofuranone and protocatechic acid are dissolved in the organic solvent, preferably in diluted ethanol or methanol. with water.
  • the proportion of organic solvent / water can vary between 50/50 and 90/10 (v / v).
  • Salt is dissolved in water. Then, both solutions are mixed at room temperature, frozen and lyophilized. d).
  • the quercetin powder of 2- (3,4-dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy-3 (2H) -benzofuranone and protocatechic acid is mixed with sodium chloride or potassium chloride.
  • composition can be sterilized or not, can be supplied in dry or liquid form, distributed in single-dose or multi-dose containers.
  • the composition may comprise one or more biologically active ingredients consistent with the therapy and additives selected from pharmaceutical carriers, stabilizers, surfactants, preservatives, and essential oils.
  • the biologically active ingredients may be selected from antibiotics, corticosteroids, and / or copper salts, manganese and sulfur.
  • Essential oils can be chosen from eucalyptus oil, rosemary oil, tea tree oil or menthol.
  • the dry composition can subsequently be mixed with water.
  • the solution or suspension obtained comprises 0.4 - 2% by weight of sodium chloride and / or potassium chloride, 0.0023 - 0.03% by mass of quercetin, 0.00000001 - 0.03% by mass of 2 - (3,4-dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy-3 (2H) -benzofuranone and 0.00000001 - 0.03% by weight of protocatechic acid.
  • the dry composition may be mixed with the solution containing the bicarbonate salt.
  • the bicarbonate salt may be selected from sodium bicarbonate or potassium bicarbonate or both.
  • the concentration of bicarbonate salt can vary up to 0.5%, preferably between 0.1% - 0.5% by weight, more preferably 0.25 - 0.5% by weight.
  • the temperature of the water or bicarbonate solution may be between 30 and 38 ° C. At this temperature, certain compounds, for example quercetin, may remain in suspension; others can be completely dissolved. According to a particular variant, the water may be boiled and then cooled to 37 ° C. before mixing.
  • the water used for the preparation of the liquid composition can be distilled, deionized, purified and sterilized.
  • composition may be presented as follows:
  • composition consisting of two parts:
  • Part A dry powder, including sodium chloride or potassium chloride, quercetin, 2- (3,4-dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy-3 (2H) -benzofuranone and protocatechic acid .
  • Part B containing 20 ml of water or solution of sodium bicarbonate or potassium bicarbonate.
  • Nasal composition including salt and quercetin, quercetin-4'-glucoside and 2- (3,4-dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy-3-benzofuranone.
  • the nasal formulation comprises salt and quercetin, quercetin-4'-glucoside and 2- (3,4-dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy-3 (2H) -benzofuranone.
  • the salt may be selected from sodium chloride or potassium chloride, or both, in an amount sufficient to produce the hypotonic, isotonic or hypertonic solution.
  • the amount of salt may be from 91 to 99.99% by weight of the dry composition.
  • the amount of quercetin in the dry composition can comprise between 0.000001 - 3% by weight.
  • the amount of quercetin-4'-glucoside in the dry composition may be between 0.000001 - 3% by weight.
  • the amount of 2- (3,4-dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy-3 (2H) -benzofuranone in the dry composition can be between 0.000001 - 3% by weight.
  • the active agent comprising quercetin, quercetin-4'-glucoside and 2- (3,4-dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy-3 (2H) -benzofuranone
  • the method of preparing the extract containing active agents may comprise the following steps:
  • the crude extract may also contain other impurities derived from quercetin, for example, quercetin-3'-glucoside, quercetin-7'-glucoside, diglucosides and triglycerides of quercetin, quercetin dimers, in an amount not exceeding 5% of the total mass of the active agents.
  • Another method of extraction is to use organic solvents, preferably methanol or ethanol diluted with water in a proportion between 50/50 and 90/10 (v / v).
  • organic solvents preferably methanol or ethanol diluted with water in a proportion between 50/50 and 90/10 (v / v).
  • the defined amount of onion peel powder is mixed with the organic solvent in a proportion of 1-10 g / 30 mL (w / v), and stirred for 24 hours at room temperature.
  • the solution obtained is filtered and then evaporated to dryness.
  • the crude extract obtained can be separated by the method of high performance liquid chromatography.
  • the separation conditions can be as follows:
  • Qualitative and quantitative analyzes of the compositions can be performed by UPLC-DAD-MS techniques (Agilent Technologies, USA).
  • the elution conditions may be as follows: 1 ⁇ l of solution is injected into the Agilent C18 column (2.1 mm, 1.8 ⁇ m) of UPLC at a temperature of 25 ° C.
  • the solvents used can be: Solvent A: H 2 0 / 0.1% HCOOH and Solvent B: ACN / 0.1% HCOOH.
  • the flow rate can be: 0.4 mL / min.
  • Isolated compounds can be detected first by the diode array detector and then by the mass spectrometry analyzer. Mass Spectrometry analyzes can be performed in negative or positive mode.
  • the separation and analysis techniques by the UPLC-DAD-MS method can be the same for all compositions.
  • the composition may be prepared by mixing the commercially available compounds: quercetin, quercetin-4'-glucoside and salt selected from sodium chloride or potassium chloride.
  • the dry composition can be prepared by one of the following methods: at). Dissolution of quercetin, 2- (3,4-dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy-3 (2H) -benzofuranone, quercetin-4'-glucoside with salt in water heated to 80 - 100 ° C. Then cooling the solution to room temperature, followed by freezing and lyophilization. b). Dissolution of quercetin, 2- (3,4-dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy-3 (2H) -benzofuranone, quercetin-4'-glucoside in water heated to 80 - 100 ° C. Then cooling the solution to room temperature, adding and dissolving the salt, followed by freezing and lyophilization.
  • Quercetin, 2- (3,4-dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy-3 (2H) -benzofuranone and quercetin-4'-glucoside are dissolved in the organic solvent, preferably in ethanol or methanol diluted with water.
  • the proportion of organic solvent / water can vary between 50/50 and 90/10 (v / v).
  • Salt is dissolved in water. Then both solutions are mixed at room temperature, then frozen and lyophilized.
  • the quercetin powder of 2- (3,4-dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy-3 (2H) -benzofuranone, quercetin-4'-glucoside is mixed with sodium chloride or potassium chloride.
  • composition can be sterilized or not, can be supplied in dry or liquid form, distributed in single-dose or multi-dose containers.
  • the composition may comprise one or more biologically active ingredients consistent with the therapy and additives selected from pharmaceutical carriers, stabilizers, surfactants, preservatives, and essential oils.
  • the biologically active ingredients may be selected from antibiotics, corticosteroids, and / or copper, manganese and sulfur salts.
  • Essential oils can be chosen from eucalyptus oil, rosemary oil, tea tree oil or menthol. According to one embodiment, the dry composition can subsequently be mixed with water.
  • the solution or suspension obtained comprises 0.4 - 2% by weight of sodium chloride and / or potassium chloride, 0.00000001 - 0.03% by mass of quercetin, 0.00000001 - 0.03% by mass of 2 - (3,4-dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy-3 (2H) -benzofuranone and 0.00000001 - 0.03% by weight of quercetin-4'-glucoside.
  • the dry composition may be mixed with the solution containing the bicarbonate salt.
  • the bicarbonate salt may be selected from sodium bicarbonate or potassium bicarbonate or both.
  • the concentration of bicarbonate salt can vary up to 0.5%, preferably between 0.1% - 0.5% by weight, more preferably 0.25 - 0.5% by weight.
  • the temperature of the water or bicarbonate solution can be between
  • the water may be boiled and then cooled to 37 ° C. before mixing.
  • the water used for the preparation of the liquid composition can be distilled, deionized, purified and sterilized.
  • composition may be presented as follows:
  • composition consisting of two parts:
  • Part A the dry powder, comprising sodium chloride or potassium chloride, quercetin, 2- (3,4-dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy-3 (2H) -benzofuranone and quercetin-4 glucoside.
  • the nasal composition including salt, quercetin and 2- (3,4-dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy-3 (2H) -benzofuranone.
  • the nasal formulation comprises salt, quercetin and 2- (3,4-dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy-3 (2H) -benzofuranone.
  • the salt may be selected from sodium chloride or potassium chloride, or both, in an amount sufficient to produce the hypotonic, isotonic or hypertonic solution.
  • the amount of salt may be from 94 to 99.99% by weight of the dry composition.
  • the amount of quercetin in the dry composition can comprise between 0.000001 - 3% by weight.
  • the amount of 2- (3,4-dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy-3 (2H) -benzofuranone in the dry composition may be between 0.000001 - 3% by weight.
  • the active agent comprising quercetin and 2- (3,4-dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy-3 (2H) -benzofuranone can be prepared by a plant extraction process. containing flavonoids, for example, onion peel.
  • the method of preparing the extract containing active agents may comprise the following steps:
  • This method makes it possible to obtain a crude extract composed of the active agents: quercetin, 2- (3,4-dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy-3 (2H) -benzofuranone, quercetin-4'-glucoside, protocatechic acid .
  • the crude extract may also contain other impurities derived from quercetin, for example, quercetin-3'-glucoside, quercetin-7'-glucoside, diglucosides and triglucosides of quercetin, quercetin dimers, in an amount not exceeding 5% of the total mass of active agents.
  • Another method of extraction is to use organic solvents, preferably methanol or ethanol diluted with water in a proportion between 50/50 and 90/10 (v / v).
  • organic solvents preferably methanol or ethanol diluted with water in a proportion between 50/50 and 90/10 (v / v).
  • the defined amount of onion peel powder is mixed with the organic solvent in a proportion of 1-10 g / 30 mL (w / v), and stirred for 24 hours at room temperature.
  • the solution obtained is filtered and then evaporated to dryness.
  • the crude extract obtained can be separated by the method of high performance liquid chromatography.
  • the separation conditions can be as follows:
  • Qualitative and quantitative analyzes of the compositions can be performed by UPLC-DAD-MS techniques (Agilent Technologies, USA).
  • the elution conditions may be as follows: 1 ⁇ l of solution is injected into the Agilent C18 column (2.1 mm, 1.8 ⁇ m) of UPLC at a temperature of 25 ° C.
  • the solvents used can be: Solvent A: H 2 0 / 0.1% HCOOH and Solvent B: ACN / 0.1% HCOOH.
  • the flow rate can be: 0.4 mL / min.
  • Isolated compounds can be detected first by the diode array detector and then by the mass spectrometry analyzer. Mass Spectrometry analyzes can be performed in negative or positive mode.
  • the separation and analysis techniques by the UPLC-DAD-MS method can be the same for all compositions.
  • the composition may be prepared by mixing the commercially available compounds: quercetin, 2- (3,4-dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy-3 (2H) -benzofuranone and salt selected from sodium chloride or potassium chloride.
  • the dry composition can be prepared by one of the following methods: Dissolution of quercetin, 2- (3,4-dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy-3 (2H) -benzofuranone with salt in water heated to 80-100 ° C. Then cooling the solution to room temperature, followed by freezing and lyophilization. b). Dissolution of quercetin, 2- (3,4-dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy-3 (2H) -benzofuranone in water heated to 80-100 ° C. Then cooling the solution to room temperature, adding and dissolving the salt, followed by freezing and lyophilization. c).
  • Quercetin, 2- (3,4-dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy-3 (2H) -benzofuranone are dissolved in the organic solvent, preferably in ethanol or methanol diluted with water. .
  • the proportion of organic solvent / water can vary between 50/50 and 90/10 (v / v).
  • Salt is dissolved in water. Then both solutions are mixed at room temperature, then frozen and lyophilized. d).
  • the quercetin powder of 2- (3,4-dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy-3 (2H) -benzofuranone is mixed with sodium chloride or potassium chloride.
  • composition can be sterilized or not, can be supplied in dry or liquid form, distributed in single-dose or multi-dose containers.
  • the composition may comprise one or more biologically active ingredients consistent with the therapy and additives selected from pharmaceutical carriers, stabilizers, surfactants, preservatives, and essential oils.
  • the biologically active ingredients may be selected from antibiotics, corticosteroids, and / or copper, manganese and sulfur salts.
  • Essential oils can be chosen from eucalyptus oil, rosemary oil, tea tree oil or menthol.
  • the dry composition can subsequently be mixed with water.
  • the solution or suspension obtained comprises 0.4 - 2% by weight of sodium chloride and / or potassium chloride, 0.00000001 - 0.03% by weight of quercetin and 0.00000001 - 0.03% by weight of 2 - (3,4-dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy-3 (2H) -benzofuranone.
  • the dry composition may be mixed with the solution containing the bicarbonate salt.
  • the bicarbonate salt may be selected from sodium bicarbonate or potassium bicarbonate or both.
  • the salt concentration of bicarbonate can vary up to 0.5%, preferably between 0.1% - 0.5% by weight, more preferably 0.25 - 0.5% by weight.
  • the temperature of the water or bicarbonate solution may be between 30 and 38 ° C. At this temperature, some compounds, for example quercetin, may remain in suspension, others may be completely dissolved. According to a particular variant, the water may be boiled and then cooled to 37 ° C. before mixing.
  • the water used for the preparation of the liquid composition can be distilled, deionized, purified and sterilized.
  • composition may be presented as follows: Composition consisting of two parts:
  • Part A the dry powder, comprising sodium chloride or potassium chloride, quercetin and 2- (3,4-dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy-3 (2H) -benzofuranone.
  • Part B containing 20 ml of water or solution of sodium bicarbonate or potassium bicarbonate.
  • the invention is now illustrated by examples and tests demonstrating the effectiveness of the invention in the treatment of rhinosinusitis.
  • the qualitative and quantitative analyzes of the two extracts were performed by UPLC-DAD-MS techniques (Agilent Technologies, USA).
  • the elution conditions are as follows: 1 ⁇ L of solution is injected into the Agilent C18 column (2.1 mm, 1.8 ⁇ m) of UPLC at a temperature of 25 ° C.
  • the solvents used are: Solvent A: H 2 O / 0.1% HCOOH and Solvent B: ACN / 0.1% HCOOH. Flow rate: 0.4 mL / min.
  • the isolated compounds are first detected by the diode array detector and then by the mass spectrometry analyzer. Mass spectrometry analyzes were performed in negative and positive modes.
  • LC-MAS spectra of LC-MAS are acquired in "Full Scan" over the entire mass range (m / z) ranging from 100 to 1400.
  • the data set is then collected and processed by the Hystar software version 3.0 .
  • the alcoholic crude extract was separated by the HPLC technique.
  • quercetin (purity - 98.9%) 295 mg;
  • Quercetin 40 mg was mixed with 150 mL of boiling water. Then, the solution was cooled, and 3 g of NaCl was added and dissolved. The resulting solution was frozen and lyophilized. The powder obtained was dispensed in 197.6 mg in single-dose containers under sterile conditions.
  • quercetin 50 mg quercetin was dissolved in 50 mL MeOH / H 2 O (50/50: v / v). 3.75 g of NaCl were dissolved in 150 ml of H 2 O. The two solutions were mixed at room temperature, then frozen and lyophilized. The resulting powder was dispensed by 200 mg in single-dose containers under sterile conditions.
  • the initial amounts of the active ingredients in 20 mL (the volume used for the one-time treatment) of the onion peel water extract were determined as: onion peel extract - 10 mg / 20 mL;
  • quercetin - 0.485 mg / 20 mL
  • quercetin-4'-glucoside - 0.283 mg / 20 mL; protocatechic acid - 0.722 mg / 20 mL.
  • compositions have been formulated based on water, NaCl or NaCl + NaHCO 3 and active agents (onion peel extract, quercetin, 2- (3,4-dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy- 3 (2H) -benzofuranone, quercetin-4'-glucoside or protocatechic acid).
  • active agents onion peel extract, quercetin, 2- (3,4-dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy- 3 (2H) -benzofuranone, quercetin-4'-glucoside or protocatechic acid).
  • Rhinosinusitis was induced by the introduction of 100 ⁇ L of 1% lipopolysaccharide (LPS) into each nostril of rabbits for three days.
  • LPS lipopolysaccharide
  • the compounds have been used in the following concentrations: onion peel water extract - 1 mg / mL;
  • quercetin 0.01 mg / mL
  • quercetin-4'-glucoside 0.25 mg / mL
  • the compounds were diluted in solutions of 0.9-1% sodium chloride or 0.75% NaCl + 0.25% NaHCO3 solution heated to 37 ° C prior to administration. With the exception of quercetin + 2- (3,4-dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy-3 (2H) -benzofuranone, which is a suspension, the compounds formed low opalescent color solutions.
  • the solutions were administered intranasally at a dose of 2 mL in each nasal cavity once a day for seven days.
  • the rabbits were kept in the "head down" position during administration.
  • the nasal cavities of the animals were visually examined immediately after euthanasia.
  • the nasal parts of the rabbit heads were fixed in the 10% formaldehyde solution for 24 hours and then de-calcined for 14 days in the hydrochloric acid / water solution (25: 1). . Then, the animals' noses were sectioned transversely on four levels: A - at the incisor teeth, B - at the posterior incisors, C - at the second crest of the palatal bone, and D - at the level of the teeth. first premolars. Then, the tissues were cleaned with water for 12 hours and incorporated into the paraffin wax by the conventional method. The histological sections with a thickness of 3-5 ⁇ m were prepared using a microtome.
  • tissue sections were stained with blue alcian at pH 2.5. Subsequently, some tissue sections were re-stained with hematoxylin-eosin for subsequent histological examinations.
  • the morphological study of the histological preparations was carried out using CarIZeissAxioScopeAl (Germany) optical microscope at 25X, 50X, 100X, 200X and 400X magnifications.
  • the microphotography of the samples was carried out using the AxioCamICc digital camera 1 and the AxioVisionRel.4.8 software (Germany). Morphometric measurements were performed using the AxioVisionRel.4.8 software (Germany).
  • the number of goblet cells was counted in 1 mm of the respiratory zone of the epithelium.
  • the appearance, severity of acute catarrhal rhinosinusitis, acute purulent rhinosinusitis and the occurrence of post-inflammatory goblet cell hyperplasia were assessed by assessing the degree of inflammatory lesions in different areas: vestibule, the respiratory and olfactory regions, and the paranasal sinuses.
  • the degree of epithelial desquamation and lesions of the mucociliary glands was evaluated on a scale of 0 to 3, or:
  • the degree of leukocyte and mononuclear infiltration was evaluated on a scale of 0 to 3, or:
  • 1 - the number of mononuclear cells present in the examination zone is between 1 and 5;
  • the number of mononuclear cells present in the examination zone is between 6 and 10; 3 - the number of mononuclear cells present in the examination zone is greater than 10.
  • the mucous membrane of the nasal vestibule presented the typical histological structure, represented by a stratified squamous epithelium, gradually transformed into single respiratory epithelium.
  • the inner nose was lined by two types of mucous membranes corresponding to the respiratory and olfactory regions.
  • the mucosa of the respiratory tract consisted of ciliated prismatic pseudo-stratified epithelium, basement membrane, and underlying loose connective tissue.
  • the epithelium of the respiratory tract was composed of ciliated epitheliocytes, basal cells and goblet cells. Histochemical staining with the blue alcian revealed the presence of large vesicles containing glucosamines in most goblet cells, which refers to the increased functional activity of these cells.
  • the numerous sero-mucinous glands have been observed in the basement membrane.
  • the olfactory region was located on the dorsal areas of the horns and on the roof of the nasal cavity.
  • the olfactory epithelium consisted of support cells, olfactory cells and basal cells.
  • Table 3 presents the morphometric data of the nasal mucosa.
  • the degree of inflammatory injury in the respiratory tract was significantly low in the group receiving the onion peel extract
  • goblet cells contain mucopolysaccharides that are stained by blue alcian.
  • the number of goblet cells is increased during inflammation and should decrease after treatment. From the data obtained, it can be concluded that the proportion of these cells has increased drastically after the induction of inflammation. In general, this process is accompanied by infiltration of the mucosa. If there is no infiltration, but the number of goblet cells is high, this is considered post-inflammatory hyperplasia, which is a sign of improvement.
  • Control group No macroscopic changes were observed in the control group. Microscopic examination revealed that administration of LPS triggered inflammation in the respiratory and olfactory areas. In the vestibular area, edema and leukocyte infiltration into the mucous membrane and underlying tissue were observed. In the respiratory tract, epithelial desquamation and atrophy of the mucous glands have been observed. Staining with the blue alcian revealed areas of clustered hyperplasia of goblet cells in the respiratory tract. Morphometric evaluation of the epithelium showed significant increase in goblet cells containing glucosamines and mucopolysaccharides relative to the total number of goblet cells.
  • quercetin-shaped suspension could have a long-lasting effect compared to quercetin in solution.
  • Quercetin -4'-glucoside (CGA) and protocatechic acid showed moderate activity against rhinosinusitis.

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Abstract

The present invention concerns compositions for rinsing the nasal cavity and the sinus cavities for curative or prophylactic treatments of acute and/or chronic rhinitis, and acute and chronic sinusitis, comprising: sodium chloride and/or potassium chloride; quercetin, and at least one active agent of the polyphenolic group chosen from the compounds: quercetin-4'-glucoside, 2-(3,4-dihydroxybenzoyl)-2,4,6-trihydroxy-3(2H)-benzofuranone, protocatechuic acid; and wherein the quercetin is in the anhydrous form with an approximate molecular mass of 302 g/mol, or in the form of quercetin hydrate with an approximate molecular mass of 320 g/mol, or in the form of quercetin dihydrate with an approximate molecular mass of 338 g/mol. The present invention also relates to method for preparing these compositions and to the method for treating acute and chronic rhinosinusitis using these compositions.

Description

COMPOSITION À BASE DE QUERCÉTINE POUR LE  COMPOSITION BASED ON QUERCETIN FOR
TRAITEMENT DE LA RHINOSINUSITE  TREATMENT OF RHINOSINUSITIS
La présente invention concerne une composition particulière et son utilisation dans la traitement de la rhinosinusite. L'invention a également pour objet un procédé d'obtention d'une telle composition. The present invention relates to a particular composition and its use in the treatment of rhinosinusitis. The invention also relates to a process for obtaining such a composition.
La rhinosinusite (RS) est une maladie inflammatoire de la cavité nasale et des cavités des sinus paranasaux, caractérisée par l'obstruction ou la congestion et écoulement nasal, les douleurs et une pression au niveau du visage, la réduction ou la perte de l'odorat et/ou l’écoulement mucopurulent principalement du méat moyen, un oedème et l'obstruction de la muqueuse de la zone du méat moyen.  Rhinosinusitis (RS) is an inflammatory disease of the nasal cavity and paranasal sinus cavities, characterized by obstruction or congestion and runny nose, pain and pressure in the face, reduction or loss of Smell and / or mucopurulent flow mainly from the middle meatus, edema and obstruction of the mucosa of the middle meatus area.
La rhinosinusite est classifiée de la façon suivante: RS aiguë (RSA) avec une durée de la maladie < 12 semaines, RS chronique (RSC) avec une durée > 12 semaines, avec polype (RSCwNP) ou sans polype nasal (RSCsNP).  Rhinosinusitis is classified as follows: acute RS (RSA) with a duration of illness <12 weeks, chronic RS (CSR) with duration> 12 weeks, with polyp (RSCwNP) or without nasal polyp (RSCsNP).
Dans le cadre de cette invention, la terminologie rhinosinusite comprend toutes les formes de la maladie, y compris les rhinites aiguë et chronique, les sinusites aiguë et chronique, avec ou sans polype nasal.  In the context of this invention, rhinosinusitis terminology includes all forms of the disease, including acute and chronic rhinitis, acute and chronic sinusitis, with or without nasal polyp.
En tant qu'unité nosologique, la rhinosinusite n'existe pas dans la liste de la Classification Internationale des Maladies, éditée par l'Organisation Mondiale de la Santé. En revanche, les rhinites aiguë (J30) et chronique (J31), les sinusites aiguë (J01) et chronique (J32) ont été classifiées séparemment (IDC As a nosological unit, rhinosinusitis does not exist in the list of the International Classification of Diseases, published by the World Health Organization. In contrast, acute (J30) and chronic (J31), acute (J01) and chronic (J32) rhinitis were classified separately (CDI).
WHO.http://apps.who.int/classifications/icdl0/browse/2016/en#/J30-J39)· Malgré cela, l'Académie Européenne d'Allergologie et d'immunologie Clinique, la Société Européenne de Rhinologie et l'Académie Américaine d'Otorhinolaryngologie - Fondation de la Chirurgie de la Tête et du Cou, en éditant les lignes directrices pour la prise en charge de la rhinosinusite, se sont mises d’accord pour l’utilisation de la terminologie 'rhinosinusite'. Or, dans la plupart des cas, rhinite et sinusite sont des maladies concomitantes, toujours coexistantes. «L'adoption de la terminologie 'rhinosinusite' plus répandue, au lieu de 'sinusite', indirectement soutient l'idée que la matière étrangère introduite par voie aérienne, ou probablement du nasopharynx, agit en premier lieu sur la muqueuse nasale, puis, en deuxième lieu, agit directement ou indirectement sur les muqueuses des sinus » (European Position Paper on Rhinosinusitis and Nasal Polyps 2012; Rhinology supplément 23 :l-298, 2012). WHO.http: //apps.who.int/classifications/icdl0/browse/2016/en#/J30-J39) · Despite this, the European Academy of Allergology and Clinical Immunology, the European Society of Rhinology and The American Academy of Otolaryngology - Head and Neck Surgery Foundation, by publishing the guidelines for the management of rhinosinusitis, have agreed to use the terminology 'rhinosinusitis'. However, in most cases, rhinitis and sinusitis are concomitant diseases, always coexisting. "The adoption of the more common terminology 'rhinosinusitis', instead of 'sinusitis', indirectly supports the idea that foreign material introduced by air, or probably the nasopharynx, acts primarily on the nasal mucosa, then, secondly, acts directly or indirectly on the mucous membranes of the sinuses "(European Position Paper on Rhinosinusitis and Nasal Polyps 2012, Rhinology supplement 23: 1-298, 2012).
La rhinosinusite est une des maladies les plus répandues dans le monde, avec une prévalence moyenne de plus de 10% de la population mondiale.  Rhinosinusitis is one of the most prevalent diseases in the world, with an average prevalence of more than 10% of the world's population.
Aux États-Unis, la rhinosinusite affecte 1 personne sur 8, avec une dépense annuelle pour la santé de plus de 11 milliards de dollars (Rosenfeld, RM et al. Clinical Practice Guideline (Update): Adult Sinusitis. Otolaryngology-Head and Neck Surgery \ >l. 152(2S), 2015, ppl-39). Le coût total du traitement d'un patient affecté d’une rhinosinusite chronique est de $2609 par an aux États-Unis; le coût total du traitement d'un patient ayant une rhinosinusite chronique dans un hôpital universitaire est de $1861 par an en Europe. La rhinosinusite est une des maladies qui coûte le plus cher pour les employeurs aux États-Unis. Parmi les maladies chroniques, la rhinosinusite est la maladie qui engendre le plus de frais dus au traitement et au soin à domicile. La majeure partie des dépenses indirectes comprend l'absentéisme (arrêt maladie) et le présentéisme (productivité réduite au travail). Le résultat des études réalisées par l'Agence Nationale de Surveillance de la Santé (NHIS, USA) entre 1997 et 2006, comprenant 315 000 personnes, a montré que les citoyens américains sont en arrêt maladie en moyenne 5,7 jours par an, à cause de la rhinosinusite (European Position Paper on Rhinosinusitis and Nasal Polyps 2012; Rhinology supplément 23:1-298, 2012).  In the United States, rhinosinusitis affects 1 in 8 people, with an annual health expenditure of more than $ 11 billion (Rosenfeld, RM et al., Clinical Practice Guideline (Update): Adult Sinusitis, Otolaryngology-Head and Neck Surgery 152 (2S), 2015, ppl-39). The total cost of treating a patient with chronic rhinosinusitis is $ 2609 per year in the United States; the total cost of treating a patient with chronic rhinosinusitis in a university hospital is $ 1861 per year in Europe. Rhinosinusitis is one of the most expensive diseases for employers in the United States. Among chronic diseases, rhinosinusitis is the disease that causes the most costs from treatment and home care. The bulk of indirect expenses include absenteeism (sick leave) and presenteeism (reduced productivity at work). The results of studies carried out by the National Health Surveillance Agency (NHIS, USA) between 1997 and 2006, comprising 315,000 people, showed that American citizens are on sick leave on average 5.7 days per year, at rhinosinusitis (Rhinosinusitis and Nasal Polyps 2012, Rhinology supplement 23: 1-298, 2012).
Actuellement, il n'existe pas de traitement spécifique pour soigner la rhinosinusite. Certains antibiotiques ont une indication pour la rhinosinusite aiguë d'origine bactérienne; d'autres groupes de médicaments, par exemple les corticostéroïdes, antihistaminiques, décongestionnants alpha-adrénergiques, ont été recommandés, mais aucun de ces médicaments n’a été approuvé par la Food and Drug Administration (Guidance for Industry Sinusitis: Designing Clinical Development Programs of Nonantimicrobial Drugs for Treatment. U.S. DHHS FDA Center for Drug Evaluation and Research November 2006).  Currently, there is no specific treatment for rhinosinusitis. Some antibiotics have an indication for acute rhinosinusitis of bacterial origin; other groups of drugs, such as corticosteroids, antihistamines, alpha-adrenergic decongestants, have been recommended, but none of these drugs have been approved by the Food and Drug Administration (Guidance for Industry Sinusitis). Nonantimicrobial Drugs for Treatment US DHS FDA Center for Drug Evaluation and Research November 2006).
Le traitement de la rhinosinusite est guidé par les lignes directrices régies par des associations internationales telles que: l'Académie Européenne d'Allergologie et d'immunologie Clinique et la Société Européenne de Rhinologie. Selon le protocole établi par ces associations (European Position Paper on Rhinosinusitis and Nasal Polyps 2012; Rhinology supplément 23 :l-298, 2012), les différentes formes de la rhinosinusite sont prises en charge de la façon suivante: The treatment of rhinosinusitis is guided by the guidelines governed by international associations such as: the European Academy of Allergology and Clinical Immunology and the European Society of Rhinology. According to the protocol established by these associations (Rhinosinusitis and Nasal Polyps 2012), the different forms of rhinosinusitis are treated in the following way:
- Pour la rhinosinusite aiguë (durée < 12 semaines): le traitement de première intention est la thérapie symptomatique: les analgésiques, l'irrigation saline, les antihistaminiques et les décongestionnants peuvent être proposés, malgré l'absence de preuve de leur efficacité. S'il n'y a pas eu d'amélioration de l'état du patient pendant 7 à 14 jours, les corticostéroïdes par voie intra-nasale sont recommandés. Dans le cas d'une complication microbienne de la rhinosinusite, on prescrit les antibiotiques de première ligne (amoxicilline seule ou avec de l’acide clavulanique). En parallèle, une imagerie radiologique doit être effectuée, afin de confirmer la cause microbienne de la maladie et vérifier l'absence d'une complication. S'il n'y a pas d'amélioration après l'usage d'un antibiotique, il est recommandé d'en changer (par exemple macrolides). En cas d'échec du traitement, le maintien des corticostéroïdes par voie intra-nasale et/ou une intervention chirurgicale peuvent être recommandés.  - For acute rhinosinusitis (duration <12 weeks): the first-line treatment is symptomatic therapy: analgesics, saline irrigation, antihistamines and decongestants may be offered, despite the lack of evidence of their effectiveness. If there has been no improvement in the patient's condition for 7 to 14 days, intra-nasal corticosteroids are recommended. In the case of a microbial complication of rhinosinusitis, first-line antibiotics (amoxicillin alone or with clavulanic acid) are prescribed. In parallel, radiological imaging should be performed to confirm the microbial cause of the disease and to verify the absence of a complication. If there is no improvement after the use of an antibiotic, it is recommended to change it (eg macrolides). If treatment fails, intra-nasal corticosteroid maintenance and / or surgery may be recommended.
- Pour la rhinosinusite chronique (durée > 12 semaines): malgré la présence ou l'absence de polype nasal, le protocole du traitement est le suivant: après examen endoscopique et imagerie CT des cavités nasales et des sinus, des corticostéroïdes par voie intra-nasale sont prescrits. S'il n'y a pas eu d'amélioration de l'état du patient durant 3 mois, un traitement à long terme avec des antibiotiques peut être ajouté. S'il n'y a toujours pas d'amélioration, l'intervention chirurgicale est recommandée.  - For chronic rhinosinusitis (duration> 12 weeks): despite the presence or absence of nasal polyp, the treatment protocol is as follows: after endoscopic examination and CT imaging of nasal cavities and sinuses, corticosteroids intravenously nasal are prescribed. If there has been no improvement in the condition of the patient for 3 months, long-term treatment with antibiotics may be added. If there is still no improvement, surgery is recommended.
L'efficacité des corticostéroïdes intranasales est très limitée: ils sont efficaces chez une personne parmi 14 traités (Hayward,G et al. Intranasal Corticosteroids in Management of Acute Sinusitis: The efficacy of intranasal corticosteroids is very limited: they are effective in one of 14 patients treated (Hayward, G et al., Intranasal Corticosteroids in Management of Acute Sinusitis:
A Systematic Review and Meta-Analysis. Ann Fam Med \ >l. 10: 2012, pp241-249). A Systematic Review and Meta-Analysis. Ann Fam Med \> l. 10: 2012, pp241-249).
L'évaluation de l'effet modéré par rapport aux effets secondaires est particulièrement recommandée aux médecins traitants avant de prescrire les antibiotiques. Les dernières lignes directrices américaines recommandent «la surveillance en attente» avant de prescrire les antibiotiques, même si l'origine bactérienne de la rhinosinusite est confirmée, car l'efficacité des antibiotiques en cas de rhinosinusite est très limitée: ils sont efficaces chez une personne parmi 20 traités (Rosenfeld, RM et al. Clinical Practice Guideline (Update): Adult Sinusitis. Otolaryngology-Head and Neck Surgery Vol. 152(2S), 2015, ppl-39). Evaluating the moderate effect versus side effects is especially recommended for treating physicians before prescribing antibiotics. The latest US guidelines recommend "monitoring on hold" before prescribing antibiotics, even though the bacterial origin of rhinosinusitis is confirmed, because the effectiveness of antibiotics in rhinosinusitis is very limited: they are effective in one person of 20 treated (Rosenfeld, RM et al., Clinical Practice Guideline (Update): Adult Sinusitis, Otolaryngology-Head and Neck Surgery Vol 152 (2S), 2015, ppl-39).
Les décongestionnants nasaux peuvent être recommandés pour le traitement palliatif, mais l'administration continue (supérieure à 3 - 5 jours) peut causer la rhinite médicamenteuse.  Nasal decongestants may be recommended for palliative treatment, but continued administration (greater than 3 - 5 days) may cause rhinitis drug.
Les solutions salines isotoniques ou hypertoniques pour l’irrigation nasale sont largement utilisées dans la pratique de l'hygiène au quotidien. En général, le sérum physiologique est le plus utilisé. Le volume de solution nasale varie de 5 mL à 500 mL. L'effet de la solution saline isotonique est expliqué par la capacité des solutions à éliminer des matières étrangères irritantes et les médiateurs de l'inflammation de la cavité nasale. Actuellement, plusieurs formulations des solutions nasales, comprenant les différentes solutions tampons, sont en cours d'élaboration. Une des formulations pour le lavage nasal a été élaborée par Ted Keller (US2013/0156871, Keller Ted, 20 juin 2013), où il découvre la solution nasale comprenant du chlorure de sodium et un tampon constitué d' ascorbate de sodium et de bicarbonate de sodium. Après la dissolution dans l'eau, cette composition peut être utilisée pour nettoyer les cavités du nez et des sinus. Toutefois, comme les autres solutions existantes, une telle composition n'est pas satisfaisante et ne permet pas de traiter la rhinosinusite.  Isotonic or hypertonic saline solutions for nasal irrigation are widely used in the practice of daily hygiene. In general, saline is the most used. The volume of nasal solution varies from 5 mL to 500 mL. The effect of isotonic saline is explained by the ability of solutions to remove irritating foreign materials and mediators of inflammation of the nasal cavity. Currently, several formulations of nasal solutions, including different buffer solutions, are being developed. One of the formulations for nasal lavage was developed by Ted Keller (US2013 / 0156871, Keller Ted, June 20, 2013), where he discovers the nasal solution comprising sodium chloride and a buffer consisting of sodium ascorbate and sodium bicarbonate. sodium. After dissolution in water, this composition can be used to clean the cavities of the nose and sinuses. However, like the other existing solutions, such a composition is not satisfactory and does not make it possible to treat rhinosinusitis.
La présente invention a pour objectif de pallier aux problèmes des solutions existantes et de fournir les compositions pour nettoyer la cavité du nez et des sinus pour prévenir et traiter efficacement les rhinosinusites aiguë et chronique. A cet effet l'invention vise des compositions comprenant du sel; et des agents actifs du groupe polyphénolique choisis parmi les composés : quercétine, quercétine-4'-glucoside, 2-(3,4-dihydroxybenzoyl)-2,4,6-trihydroxy-3(2H)- benzofuranone, acide protocatéchique, pouvant contenir des impuretés dérivées de la quercétine, comprenant quercétine-3'-glucoside, quercétine-7'-glucoside, diglucosides et triglucosides de quercétine, dimers de quercétine, en quantité inférieure à 5% en masse de la quantité totale des agents actifs.  The present invention aims to overcome the problems of existing solutions and provide the compositions for cleaning the nose and sinuses cavity to effectively prevent and treat rhinosinusitis acute and chronic. For this purpose the invention relates to compositions comprising salt; and active agents of the polyphenolic group chosen from the compounds: quercetin, quercetin-4'-glucoside, 2- (3,4-dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy-3 (2H) -benzofuranone, protocatechic acid, which may be contain impurities derived from quercetin, comprising quercetin-3'-glucoside, quercetin-7'-glucoside, diglucosides and quercetin triglucosides, quercetin dimers, in an amount of less than 5% by weight of the total amount of active agents.
Selon la présente invention, il est nécessaire de combiner la quercétine à des dérivés de la quercétine tels que quercétine-4'-glucoside, 2-(3,4-dihydroxybenzoyl)-2,4,6-trihydroxy-3(2H)- benzofuranone, acide protocatéchique. Cette combinaison procure un effet synergique qui augmente l'efficacité du traitement de la rhinosinusite. L'invention vise donc également ces compositions pour leur utilisation dans la prévention et le traitement de la rhinosinusite. According to the present invention, it is necessary to combine quercetin with quercetin derivatives such as quercetin-4'-glucoside, 2- (3,4-dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy-3 (2H) - benzofuranone, protocatechic acid. This combination provides a synergistic effect that increases the efficacy of rhinosinusitis treatment. The invention is therefore also directed to these compositions for their use in the prevention and treatment of rhinosinusitis.
Enfin, un autre objet de l'invention est de fournir un procédé pour la préparation de ces compositions.  Finally, another object of the invention is to provide a process for the preparation of these compositions.
L'invention est à présent décrite en détails.  The invention is now described in detail.
DÉFINITIONS DEFINITIONS
Par « agent actif» au sens de l'invention on entend le composé ou l'ingrédient produisant l'effet thérapeutique recherché.  By "active agent" within the meaning of the invention is meant the compound or the ingredient producing the desired therapeutic effect.
Par «impureté» au sens de l'invention on entend le composé ou l'ingrédient sans effet thérapeutique, concomitant aux agents actifs, présent dans la composition d'un médicament en quantité mineure.  By "impurity" within the meaning of the invention is meant the compound or the ingredient without therapeutic effect, concomitant with the active agents, present in the composition of a drug in a minor amount.
Par «quantité thérapeutique efficace » au sens de l'invention, on entend la quantité d'agent actif pouvant produire l'effet thérapeutique recherché chez les sujets traités.  For the purposes of the invention, the term "effective therapeutic quantity" is intended to mean the amount of active agent that can produce the desired therapeutic effect in the subjects treated.
Par «patient» ou «sujet» au sens de l'invention on entend un mammifère, comprenant l'animal ou l'humain, à qui la présente invention peut être appliquée.  By "patient" or "subject" within the meaning of the invention is meant a mammal, comprising the animal or the human, to whom the present invention may be applied.
DESCRIPTION DETAILLEE DE L'INVENTION DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION
L'invention a donc pour objet une composition pour rincer la cavité nasale et les cavités sinusiennes pour la prévention ou le traitement curatif ou prophylactique des rhinites aiguë et chronique, des sinusites aiguë et chronique, comprenant :  The invention therefore relates to a composition for rinsing the nasal cavity and sinus cavities for the prevention or the curative or prophylactic treatment of acute and chronic rhinitis, acute and chronic sinusitis, comprising:
- du chlorure de sodium et/ou du chlorure de potassium;  sodium chloride and / or potassium chloride;
- de la quercétine, et  - quercetin, and
- au moins un agent actif du groupe polyphénolique choisi parmi les composés: quercétine-4'-glucoside, 2-(3,4-dihydroxybenzoyl)-2,4,6-trihydroxy-3(2H)-benzofuranone, acide protocatéchique; et  at least one active agent of the polyphenolic group chosen from the compounds: quercetin-4'-glucoside, 2- (3,4-dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy-3 (2H) -benzofuranone, protocatechic acid; and
dans laquelle la quercétine est sous forme anhydrique avec une masse moléculaire approximative de 302 g/mol, ou sous forme de quercétine hydrate avec une masse moléculaire approximative de 320 g/mol, ou sous forme de quercétine dihydrate avec une masse moléculaire approximative de 338 g/mol. wherein quercetin is in anhydrous form with an approximate molecular weight of 302 g / mol, or in the form of quercetin hydrate with a mass approximate molecular weight of 320 g / mol, or in the form of quercetin dihydrate with an approximate molecular weight of 338 g / mol.
L'invention se rapporte à des compositions nasales, contenants des ingrédients actifs avec une efficacité prouvée pour le traitement de la rhinosinusite.  The invention relates to nasal compositions containing active ingredients with proven efficacy for the treatment of rhinosinusitis.
Les molécules contenues dans la composition selon l'invention peuvent être extraits de la pelure d'oignon. L'efficacité de l'extrait brut et des composés isolés a été étudiée sur les modèles de la rhinosinusite, développés sur les animaux. Les résultats de cette invention sont décrits dans les exemples. Les résultats de ces recherches ont permis d'établir l'efficacité de l'extrait de pelure d'oignon et des composés isolés de cet extrait: quercétine, quercétine-4'-glucoside, 2-(3,4- dihydroxybenzoyl)-2,4,6-trihydroxy-3(2H)-benzofuranone et acide protocatéchique pour la rhinosinusite, de développer les formulations contenant ces agents, et d’élaborer les méthodes du traitement.  The molecules contained in the composition according to the invention can be extracted from the onion peel. The efficacy of the crude extract and isolated compounds has been studied in rhinosinusite models developed in animals. The results of this invention are described in the examples. The results of this research have established the effectiveness of onion peel extract and compounds isolated from this extract: quercetin, quercetin-4'-glucoside, 2- (3,4-dihydroxybenzoyl) -2 , 4,6-trihydroxy-3 (2H) -benzofuranone and protocatechic acid for rhinosinusitis, to develop formulations containing these agents, and to develop methods of treatment.
En fonction des conditions d'extraction et de préparation, la quercétine peut être utilisée en forme anhydrique, avec une masse moléculaire approximative de 302 g/mol, ou sous forme de quercétine hydrate avec une masse moléculaire approximative de 320 g/mol, ou sous forme de quercétine dihydrate, avec une masse moléculaire approximative de 338 g/mol.  Depending on the extraction and preparation conditions, quercetin can be used in anhydrous form, with an approximate molecular weight of 302 g / mol, or in the form of quercetin hydrate with an approximate molecular weight of 320 g / mol, or form of quercetin dihydrate, with an approximate molecular weight of 338 g / mol.
Plusieurs variantes de compositions selon l'invention sont envisageables.  Several variants of compositions according to the invention are conceivable.
Composition nasale, comprenant le sel et la quercétine, la quercétine-4'- glucoside la 2-(3,4-dihydroxybenzoyl)-2,4,6-trihydroxy-3(2H)-benzofuranone et l’acide Nasal composition, including salt and quercetin, quercetin-4'-glucoside 2- (3,4-dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy-3 (2H) -benzofuranone and acid
Selon un mode de réalisation, la formulation nasale comprend du sel et un extrait de plantes contenant des flavonoïdes: quercétine, quercétine-4'-glucoside, 2-(3,4-dihydroxybenzoyl)-2,4,6- trihydroxy-3(2H)-benzofuranone et acide protocatéchique. Le sel peut être choisi parmi le chlorure de sodium ou le chlorure de potassium, ou les deux, en quantité suffisante pour produire la solution hypotonique, isotonique ou hypertonique. La quantité de sel peut être comprise entre 83 - 99,77% en masse de la composition sèche. La quantité de quercétine dans la composition sèche peut comprendre entre 0,23 - 3% en masse. La quantité de quercétine-4'-glucoside dans la composition sèche peut être comprise entre 0,000001 - 3% en masse. La quantité de 2-(3,4- dihydroxybenzoyl)-2,4,6-trihydroxy-3(2H)-benzofuranone dans la composition sèche peut être comprise entre 0,000001 - 3% en masse. La quantité d'acide protocatéchique dans la composition sèche peut être comprise entre 0,000001 - 3% en masse. According to one embodiment, the nasal formulation comprises salt and a plant extract containing flavonoids: quercetin, quercetin-4'-glucoside, 2- (3,4-dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy-3 ( 2H) -benzofuranone and protocatechic acid. The salt may be selected from sodium chloride or potassium chloride, or both, in an amount sufficient to produce the hypotonic, isotonic or hypertonic solution. The amount of salt may be from 83 to 99.77% by weight of the dry composition. The amount of quercetin in the dry composition may comprise 0.23 to 3% by weight. The amount of quercetin-4'-glucoside in the dry composition may be between 0.000001 - 3% by weight. The amount of 2- (3,4- dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy-3 (2H) -benzofuranone in the dry composition may be between 0.000001 - 3% by weight. The amount of protocatechic acid in the dry composition may be between 0.000001 - 3% by weight.
Selon un mode de réalisation, l'agent actif comprenant la quercétine, la quercétine-4'-glucoside, 2-(3,4-dihydroxybenzoyl)-2,4,6-trihydroxy-3(2H)-benzofuranone et l’acide protocatéchique peut être préparé par un procédé d'extraction de plantes contenant des flavonoïdes, par exemple de la pelure d'oignon. La méthode de préparation de l'extrait contenant des agents actifs peut comprendre les étapes suivantes:  According to one embodiment, the active agent comprising quercetin, quercetin-4'-glucoside, 2- (3,4-dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy-3 (2H) -benzofuranone and the acid protocatechic can be prepared by a process of extracting plants containing flavonoids, for example onion peel. The method of preparing the extract containing active agents may comprise the following steps:
- mélanger la pelure d'oignon broyée avec de l'eau froide en proportion 0,1-2 g / 50 mL (m/v); - mix the ground onion peel with cold water in a proportion of 0.1-2 g / 50 mL (m / v);
- amener le mélange à bouillir, et laisser frémir pendant 30 min à température d'ébullition; bring the mixture to a boil, and simmer for 30 minutes at boiling point;
- refroidir le mélange, filtrer et lyophiliser.  - Cool the mixture, filter and lyophilize.
Cette méthode permet d'obtenir un extrait brut composé des agents actifs: quercétine, 2-(3,4- dihydroxybenzoyl)-2,4,6-trihydroxy-3(2H)-benzofuranone, quercétine-4'-glucoside, acide protocatéchique. L'extrait brut peut également contenir d’autres impuretés dérivées de la quercétine, par exemple, quercétine-3'-glucoside, quercétine-7'-glucoside, diglucosides et triglucosides de la quercétine, dimers de quercétine, en quantité n'excédant pas 5% de la masse totale des agents actifs.  This method makes it possible to obtain a crude extract composed of the active agents: quercetin, 2- (3,4-dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy-3 (2H) -benzofuranone, quercetin-4'-glucoside, protocatechic acid . The crude extract may also contain other impurities derived from quercetin, for example, quercetin-3'-glucoside, quercetin-7'-glucoside, diglucosides and triglucosides of quercetin, quercetin dimers, in an amount not exceeding 5% of the total mass of active agents.
Une autre méthode d'extraction consiste à utiliser des solvants organiques, préférablement du méthanol ou de l'éthanol dilué avec de l'eau, en proportion comprise entre 50/50 et 90/10 (v/v). Selon cette méthode, la quantité définie de poudre de pelure d'oignon est mélangée avec le solvant organique en proportion de 1-10 g / 30 mL (m/v), et agitée pendant 24 heures à température ambiante. La solution obtenue est filtrée, puis évaporée à sec. L'extrait brut obtenu peut être séparé par la méthode de la chromatographie liquide à haute performance.  Another extraction method consists in using organic solvents, preferably methanol or ethanol diluted with water, in a proportion of between 50/50 and 90/10 (v / v). According to this method, the defined amount of onion peel powder is mixed with the organic solvent in a proportion of 1-10 g / 30 mL (w / v), and stirred for 24 hours at room temperature. The solution obtained is filtered and then evaporated to dryness. The crude extract obtained can be separated by the method of high performance liquid chromatography.
Les conditions de séparation peuvent être les suivantes: The separation conditions can be as follows:
50 mg à 200 mg d’extrait brut sont injectés dans une colonne Phenomenex C18 (21,2 mm x 150 mm, 5 pm, 100 A) de l'appareil HPLC. Les solvants suivants peuvent être utilisés: Solvant A: H20/TFA 0,5% (1 L/ 5 mL); Solvant B: ACN. Le débit peut être: 15 mL/min. Les analyses qualitatives et quantitatives des compositions peuvent être réalisées par les techniques de UPLC-DAD-MS (Agilent technologies, USA). Les conditions d'élution peuvent être les suivantes: 1 pL de solution est injecté dans la colonne Agilent C18 (2,1 mm, 1,8 pm) de UPLC à la température de 25 °C. Les solvants utilisés peuvent être: Solvant A: H20/HC00H 0,1% et Solvant B: ACN/HCOOH 0,1%. Le débit peut être: 0,4 mL/min. Les composés isolés peuvent être détectés dans un premier temps par le détecteur à barrette de diode, puis par l'analyseur de Spectrométrie de Masse. Les analyses de Spectrométrie de Masse peuvent être réalisées en mode négatif ou positif. Les techniques de séparation et d'analyse par la méthode de UPLC-DAD-MS peuvent être les mêmes pour toutes les compositions. 50 mg to 200 mg of crude extract are injected into a Phenomenex C18 column (21.2 mm x 150 mm, 5 μm, 100 A) of the HPLC apparatus. The following solvents may be used: Solvent A: 0.5% H2O / TFA (1 L / 5 mL); Solvent B: ACN. The flow rate can be: 15 mL / min. Qualitative and quantitative analyzes of the compositions can be performed by UPLC-DAD-MS techniques (Agilent Technologies, USA). The elution conditions may be as follows: 1 μl of solution is injected into the Agilent C18 column (2.1 mm, 1.8 μm) of UPLC at a temperature of 25 ° C. The solvents used can be: Solvent A: H 2 0 / 0.1% HCOH 0.1 and Solvent B: ACN / 0.1% HCOOH. The flow rate can be: 0.4 mL / min. Isolated compounds can be detected first by the diode array detector and then by the mass spectrometry analyzer. Mass Spectrometry analyzes can be performed in negative or positive mode. The separation and analysis techniques by the UPLC-DAD-MS method can be the same for all compositions.
Selon un mode de réalisation, la composition peut être préparée en mélangeant les composés disponibles commercialement: quercétine, 2-(3,4-dihydroxybenzoyl)-2,4,6-trihydroxy-3(2H)- benzofuranone, quercétine-4'-glucoside, acide protocatéchique et du sel choisi parmi les chlorure de sodium ou chlorure de potassium. According to one embodiment, the composition may be prepared by mixing the commercially available compounds: quercetin, 2- (3,4-dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy-3 (2H) -benzofuranone, quercetin-4'- glucoside, protocatechic acid and salt selected from sodium chloride or potassium chloride.
La composition sèche peut être préparée par un des procédés suivants: a). Dissolution de la quercétine, 2-(3,4-dihydroxybenzoyl)-2,4,6-trihydroxy-3(2H)-benzofuranone, de la quercétine-4'-glucoside, de l'acide protocatéchique avec du sel dans de l'eau chauffée à 80 - 100 °C. Puis refroidissement de la solution à température ambiante, suivi par la congélation et la lyophilisation. b). Dissolution de la quercétine, 2-(3,4-dihydroxybenzoyl)-2,4,6-trihydroxy-3(2H)-benzofuranone, de la quercétine-4'-glucoside, de l'acide protocatéchique dans de l'eau chauffée à 80 - 100 °C. Puis refroidissement de la solution à température ambiante, ajout et dissolution du sel, suivis par la congélation et la lyophilisation. c). La quercétine, la 2-(3,4-dihydroxybenzoyl)-2,4,6-trihydroxy-3(2H)-benzofuranone, la quercétine-4'-glucoside et l’acide protocatéchique sont dissouts dans le solvant organique, préférablement dans de l'éthanol ou du méthanol dilué avec de l'eau. La proportion solvant organique/eau peut varier entre 50/50 et 90/10 (v/v). Le sel est dissout dans l'eau. Ensuite, les deux solutions sont mélangées à température ambiante, puis congelées et lyophilisées. d). La poudre de quercétine, de 2-(3,4-dihydroxybenzoyl)-2,4,6-trihydroxy-3(2H)-benzofuranone, de quercétine-4'-glucoside et de l’acide protocatéchique est mélangée avec de chlorure de sodium ou chlorure de potassium. The dry composition can be prepared by one of the following methods: Dissolution of quercetin, 2- (3,4-dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy-3 (2H) -benzofuranone, quercetin-4'-glucoside, protocatechic acid with salt in water water heated to 80 - 100 ° C. Then cooling the solution to room temperature, followed by freezing and lyophilization. b). Dissolution of quercetin, 2- (3,4-dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy-3 (2H) -benzofuranone, quercetin-4'-glucoside, protocatechic acid in heated water at 80 - 100 ° C. Then cooling the solution to room temperature, adding and dissolving the salt, followed by freezing and lyophilization. c). Quercetin, 2- (3,4-dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy-3 (2H) -benzofuranone, quercetin-4'-glucoside and protocatechic acid are dissolved in the organic solvent, preferably in ethanol or methanol diluted with water. The proportion of organic solvent / water can vary between 50/50 and 90/10 (v / v). Salt is dissolved in water. Then both solutions are mixed at room temperature, then frozen and lyophilized. d). The quercetin, 2- (3,4-dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy-3 (2H) -benzofuranone, quercetin-4'-glucoside and protocatechic acid powder is mixed with sodium or potassium chloride.
La composition peut être stérilisée ou non, peut être fournie sous forme sèche ou liquide, distribuée dans des conteneurs unidoses ou multidoses. The composition can be sterilized or not, can be supplied in dry or liquid form, distributed in single-dose or multi-dose containers.
La composition peut comprendre un ou plusieurs ingrédients biologiquement actifs cohérents avec la thérapie et des additifs choisis parmi les supports pharmaceutiques, stabilisateurs, surfactants, conservateurs, et les huiles essentielles. Les ingrédients biologiquement actifs peuvent être choisis parmi les antibiotiques, les corticostéroïdes, et/ou les sels de cuivre, de manganèse et de soufre. Les huiles essentielles peuvent être choisies parmi l'huile d'eucalyptus, l'huile de romarin, l'huile d'arbre à thé ou du menthol.  The composition may comprise one or more biologically active ingredients consistent with the therapy and additives selected from pharmaceutical carriers, stabilizers, surfactants, preservatives, and essential oils. The biologically active ingredients may be selected from antibiotics, corticosteroids, and / or copper, manganese and sulfur salts. Essential oils can be chosen from eucalyptus oil, rosemary oil, tea tree oil or menthol.
Selon un mode de réalisation, la composition sèche peut par la suite être mélangée avec de l'eau. La solution ou suspension obtenue comprend 0,4 - 2% en masse de chlorure de sodium et/ou chlorure de potassium, 0,0023 - 0,03% en masse de quercétine, 0,00000001 - 0,03% en masse de quercétine-4'-glucoside, 0,00000001 - 0,03% en masse de 2-(3,4-dihydroxybenzoyl)-2,4,6- trihydroxy-3(2H)-benzofuranone et 0,00000001 - 0,03% en masse d'acide protocatéchique et d'autres impuretés, dérivées de quercétine jusqu'à 0,5% en masse totale des agents actifs.  According to one embodiment, the dry composition can subsequently be mixed with water. The solution or suspension obtained comprises 0.4 - 2% by weight of sodium chloride and / or potassium chloride, 0.0023 - 0.03% by mass of quercetin, 0.00000001 - 0.03% by mass of quercetin 4'-glucoside, 0.00000001 - 0.03% by weight of 2- (3,4-dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy-3 (2H) -benzofuranone and 0.00000001 - 0.03% mass of protocatechic acid and other impurities derived from quercetin up to 0.5% by total weight of the active agents.
Selon un autre mode de réalisation, la composition sèche peut être mélangée avec la solution contenant le sel de bicarbonate. Le sel de bicarbonate peut être choisi parmi le bicarbonate de sodium ou le bicarbonate de potassium ou les deux. La concentration en sel de bicarbonate peut varier jusqu'à 0,5%, préférentiellement entre 0,1% - 0,5% en masse, plus préférablement 0,25 - 0,5% en masse. La température de l'eau ou de la solution de bicarbonate peut être comprise entre 30 °C et 38 °C. À cette température, certains composés, par exemple la quercétine, peuvent rester en suspension, d'autres peuvent être dissouts complètement. Selon une variante particulière, l'eau peut être bouillie puis refroidie à 37 °C avant de mélanger. In another embodiment, the dry composition may be mixed with the solution containing the bicarbonate salt. The bicarbonate salt may be selected from sodium bicarbonate or potassium bicarbonate or both. The concentration of bicarbonate salt can vary up to 0.5%, preferably between 0.1% - 0.5% by weight, more preferably 0.25 - 0.5% by weight. The temperature of the water or bicarbonate solution can be between 30 ° C and 38 ° C. At this temperature, some compounds, for example quercetin, may remain in suspension, others can be completely dissolved. According to a particular variant, the water may be boiled and then cooled to 37 ° C. before mixing.
L'eau utilisée pour la préparation de la composition liquide peut être distillée, dé-ionisée, purifiée et stérilisée.  The water used for the preparation of the liquid composition can be distilled, deionized, purified and sterilized.
Même si l'usage de conservateurs et d'autres excipients n'est pas exclu, des préparations stériles sans conservateurs peuvent être fabriquées. Cela permet de conserver les compositions dans des conditions stériles et de limiter les effets indésirables dus à la présence d'excipients. La technique 'blow-fill-seal', utilisant des conteneurs unidoses en plastique ou des seringues pré-remplies dans des conditions aseptiques, peut être préférée.  Although the use of preservatives and other excipients is not excluded, sterile preparations without preservatives can be made. This makes it possible to preserve the compositions under sterile conditions and to limit the undesirable effects due to the presence of excipients. The blow-fill-seal technique, using single-dose plastic containers or pre-filled syringes under aseptic conditions, may be preferred.
Dans un mode de réalisation, la composition peut être présentée de façon suivante:  In one embodiment, the composition may be presented as follows:
Composition consistant en deux parties:  Composition consisting of two parts:
- partie A: contenant la poudre sèche, comprenant le chlorure de sodium ou chlorure de potassium, la quercétine, 2-(3,4-dihydroxybenzoyl)-2,4,6-trihydroxy-3(2H)-benzofuranone, la quercétine-4'- glucoside et l’acide protocatéchique.  Part A: containing the dry powder, including sodium chloride or potassium chloride, quercetin, 2- (3,4-dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy-3 (2H) -benzofuranone, quercetin 4'-glucoside and protocatechic acid.
- partie B: contenant 20 ml d'eau ou de solution de bicarbonate de sodium ou de bicarbonate de potassium. - Part B: containing 20 ml of water or solution of sodium bicarbonate or potassium bicarbonate.
2. Composition nasale, comprenant le sel et la quercétine, la quercétine-4'-glucoside et l'acide protocatéchique. 2. Nasal composition, including salt and quercetin, quercetin-4'-glucoside and protocatechic acid.
Selon un mode de réalisation, la formulation nasale comprend du sel et un extrait de plantes contenant des flavonoïdes: quercétine, quercétine-4'-glucoside et acide protocatéchique. Le sel peut être choisi parmi le chlorure de sodium ou le chlorure de potassium, ou les deux, en quantité suffisante pour produire la solution hypotonique, isotonique ou hypertonique. La quantité de sel peut être comprise entre 86 - 99,77% en masse de la composition sèche. La quantité de quercétine dans la composition sèche peut comprendre entre 0,23 - 3% en masse. La quantité de quercétine-4'-glucoside dans la composition sèche peut être comprise entre 0,000001 - 3% en masse. La quantité d'acide protocatéchique dans la composition sèche peut être comprise entre 0,000001 - 3% en masse. Selon un mode de réalisation, l'agent actif comprenant la quercétine, la quercétine-4'-glucoside et l’acide protocatéchique peut être préparé par un procédé d'extraction de plantes contenant des flavonoïdes, par exemple de la pelure d'oignon. La méthode de préparation de l'extrait contenant des agents actifs peut comprendre les étapes suivantes: According to one embodiment, the nasal formulation comprises salt and a plant extract containing flavonoids: quercetin, quercetin-4'-glucoside and protocatechic acid. The salt may be selected from sodium chloride or potassium chloride, or both, in an amount sufficient to produce the hypotonic, isotonic or hypertonic solution. The amount of salt may be from 86 to 99.77% by weight of the dry composition. The amount of quercetin in the dry composition may comprise 0.23 to 3% by weight. The amount of quercetin-4'-glucoside in the dry composition may be between 0.000001 - 3% by weight. The amount of protocatechic acid in the dry composition may be between 0.000001 - 3% by weight. According to one embodiment, the active agent comprising quercetin, quercetin-4'-glucoside and protocatechic acid may be prepared by a process for extracting plants containing flavonoids, for example onion peel. The method of preparing the extract containing active agents may comprise the following steps:
- mélanger la pelure d'oignon broyée avec de l'eau froide en proportion 0,1-2 g / 50mL (m/v); - mix the ground onion peel with cold water in the proportion 0.1-2 g / 50 mL (m / v);
- amener le mélange à bouillir, et laisser frémir pendant 30 min à température d'ébullition; bring the mixture to a boil, and simmer for 30 minutes at boiling point;
- refroidir le mélange, filtrer et lyophiliser.  - Cool the mixture, filter and lyophilize.
Cette méthode permet d'obtenir un extrait brut composé des agents actifs: quercétine, quercétine-4'-glucoside, acide protocatéchique. L'extrait brut peut contenir également d’autres impuretés dérivées de la quercétine, par exemple, quercétine-3'-glucoside, quercétine-7'- glucoside, diglucosides et triglucosides de la quercétine, dimers de quercétine, en quantité n'excédant pas 5% de la masse totale des agents actifs. This method makes it possible to obtain a crude extract composed of the active agents: quercetin, quercetin-4'-glucoside, protocatechic acid. The crude extract may also contain other impurities derived from quercetin, for example, quercetin-3'-glucoside, quercetin-7'-glucoside, diglucosides and triglucosides of quercetin, quercetin dimers, in an amount not exceeding 5% of the total mass of active agents.
Une autre méthode d'extraction consiste à utiliser des solvants organiques, préférablement du méthanol ou de l'éthanol dilué avec de l'eau, en proportion comprise entre 50/50 et 90/10 (v/v). Selon cette méthode, la quantité définie de poudre de pelure d'oignon est mélangée avec le solvant organique en proportion de 1-10 g / 30 mL (m/v), et agitée pendant 24 heures à température ambiante. La solution obtenue est filtrée, puis évaporée à sec. L'extrait brut obtenu peut être séparé par la méthode de la chromatographie liquide à haute performance. Another extraction method consists in using organic solvents, preferably methanol or ethanol diluted with water, in a proportion of between 50/50 and 90/10 (v / v). According to this method, the defined amount of onion peel powder is mixed with the organic solvent in a proportion of 1-10 g / 30 mL (w / v), and stirred for 24 hours at room temperature. The solution obtained is filtered and then evaporated to dryness. The crude extract obtained can be separated by the method of high performance liquid chromatography.
Les conditions de séparation peuvent être les suivantes: The separation conditions can be as follows:
50 mg à 200 mg d’extrait brut sont injectés dans une colonne Phenomenex C18 (21,2 mm x 150 mm, 5 pm, 100 A) de l'appareil HPLC. Les solvants suivants peuvent être utilisés: Solvant A: H20/TFA 0,5% (1 L/ 5 mL); Solvant B: ACN. Le débit peut être: 15 mL/min.  50 mg to 200 mg of crude extract are injected into a Phenomenex C18 column (21.2 mm x 150 mm, 5 μm, 100 A) of the HPLC apparatus. The following solvents may be used: Solvent A: 0.5% H2O / TFA (1 L / 5 mL); Solvent B: ACN. The flow rate can be: 15 mL / min.
Les analyses qualitatives et quantitatives des compositions peuvent être réalisées par les techniques de UPLC-DAD-MS (Agilent technologies, USA). Les conditions d'élution peuvent être les suivantes: 1 pL de solution est injecté dans la colonne Agilent C18 (2,1 mm, 1,8 pm) de UPLC à la température de 25 °C. Les solvants utilisés peuvent être: Solvant A: H20/HCOOH 0,1% et Solvant B: ACN/HCOOH 0,1%. Le débit peut être: 0,4 mL/min. Les composés isolés peuvent être détectés dans un premier temps par le détecteur à barrette de diode, puis par l'analyseur de Spectrométrie de Masse. Les analyses de Spectrométrie de Masse peuvent être réalisées en mode négatif ou positif. Les techniques de séparation et d'analyse par la méthode de UPLC-DAD-MS peuvent être les mêmes pour toutes les compositions. Qualitative and quantitative analyzes of the compositions can be performed by UPLC-DAD-MS techniques (Agilent Technologies, USA). The elution conditions may be as follows: 1 μl of solution is injected into the Agilent C18 column (2.1 mm, 1.8 μm) of UPLC at a temperature of 25 ° C. The solvents used can be: Solvent A: H 2 0 / 0.1% HCOOH and Solvent B: ACN / 0.1% HCOOH. The flow rate can be: 0.4 mL / min. Isolated compounds can be detected first by the diode array detector and then by the mass spectrometry analyzer. Mass Spectrometry analyzes can be performed in negative or positive mode. The separation and analysis techniques by the UPLC-DAD-MS method can be the same for all compositions.
Selon un mode de réalisation, la composition peut être préparée en mélangeant les composés disponibles commercialement: quercétine, quercétine-4'-glucoside, acide protocatéchique et de sel choisi parmi les chlorure de sodium ou chlorure de potassium. According to one embodiment, the composition may be prepared by mixing the commercially available compounds: quercetin, quercetin-4'-glucoside, protocatechic acid and salt selected from sodium chloride or potassium chloride.
La composition sèche peut être préparée par une des méthodes suivantes: a). Dissolution de la quercétine, de la quercétine-4'-glucoside, de l'acide protocatéchique avec du sel dans de l'eau chauffée à 80 - 100 °C. Puis refroidissement de la solution à température ambiante, suivi par la congélation et la lyophilisation. b). Dissolution de la quercétine, de la quercétine-4'-glucoside, de l'acide protocatéchique dans de l'eau chauffée à 80 - 100 °C. Puis refroidissement de la solution à température ambiante, ajout et dissolution du sel, suivis par la congélation et la lyophilisation. c). La quercétine, la quercétine-4'-glucoside et l’acide protocatéchique sont dissouts dans le solvant organique, préférablement dans de l'éthanol ou du méthanol dilué avec de l'eau. La proportion solvant organique/eau peut varier entre 50/50 et 90/10 (v/v). Le sel est dissout dans l'eau. Ensuite, les deux solutions sont mélangées à température ambiante, puis congelées et lyophilisées. d). La poudre de quercétine, de quercétine-4'-glucoside et de l’acide protocatéchique est mélangée avec de chlorure de sodium ou chlorure de potassium. La composition peut être stérilisée ou non, peut être fournie sous forme sèche ou liquide, distribuée dans des conteneurs unidoses ou multidoses. The dry composition can be prepared by one of the following methods: Dissolution of quercetin, quercetin-4'-glucoside, protocatechic acid with salt in water heated to 80-100 ° C. Then cooling the solution to room temperature, followed by freezing and lyophilization. b). Dissolution of quercetin, quercetin-4'-glucoside, protocatechic acid in water heated to 80-100 ° C. Then cooling the solution to room temperature, adding and dissolving the salt, followed by freezing and lyophilization. c). Quercetin, quercetin-4'-glucoside and protocatechic acid are dissolved in the organic solvent, preferably in ethanol or methanol diluted with water. The proportion of organic solvent / water can vary between 50/50 and 90/10 (v / v). Salt is dissolved in water. Then both solutions are mixed at room temperature, then frozen and lyophilized. d). The quercetin, quercetin-4'-glucoside and protocatechic acid powder is mixed with sodium chloride or potassium chloride. The composition can be sterilized or not, can be supplied in dry or liquid form, distributed in single-dose or multi-dose containers.
La composition peut comprendre un ou plusieurs ingrédients biologiquement actifs cohérents avec la thérapie et des additifs choisis parmi les supports pharmaceutiques, stabilisateurs, surfactants, conservateurs, et les huiles essentielles. Les ingrédients biologiquement actifs peuvent être choisis parmi les antibiotiques, les corticostéroïdes, et/ou les sels de cuivre, de manganèse et de soufre. Les huiles essentielles peuvent être choisies parmi l'huile d'eucalyptus, l'huile de romarin, l'huile d'arbre à thé ou du menthol.  The composition may comprise one or more biologically active ingredients consistent with the therapy and additives selected from pharmaceutical carriers, stabilizers, surfactants, preservatives, and essential oils. The biologically active ingredients may be selected from antibiotics, corticosteroids, and / or copper, manganese and sulfur salts. Essential oils can be chosen from eucalyptus oil, rosemary oil, tea tree oil or menthol.
Selon un mode de réalisation, la composition sèche peut par la suite être mélangée avec de l'eau. La solution ou suspension obtenue comprend 0,4 - 2% en masse de chlorure de sodium et/ou chlorure de potassium, 0,0023 - 0,03% en masse de quercétine, 0,00000001 - 0,03% en masse de quercétine-4'-glucoside et 0,00000001 - 0,03% en masse d'acide protocatéchique, et d'autres impuretés, dérivées de quercétine jusqu'à 0,5% en masse totale des agents actifs.  According to one embodiment, the dry composition can subsequently be mixed with water. The solution or suspension obtained comprises 0.4 - 2% by weight of sodium chloride and / or potassium chloride, 0.0023 - 0.03% by mass of quercetin, 0.00000001 - 0.03% by mass of quercetin 4'-glucoside and 0.00000001 - 0.03% by weight of protocatechic acid, and other impurities derived from quercetin up to 0.5% by total weight of the active agents.
Selon un autre mode de réalisation, la composition sèche peut être mélangée avec la solution contenant le sel de bicarbonate. Le sel de bicarbonate peut être choisi parmi le bicarbonate de sodium ou le bicarbonate de potassium ou les deux. La concentration en sel de bicarbonate peut varier jusqu'à 0,5%, préférentiellement entre 0,1% - 0,5% en masse, plus préférablement 0,25 - 0,5% en masse. La température de l'eau ou de la solution de bicarbonate peut être comprise entre 30 et 38 °C. À cette température, certains composés, par exemple la quercétine, peuvent rester en suspension, d’autres peuvent être dissouts complètement. Selon une variante particulière, l'eau peut être bouillie puis refroidie à 37 °C avant de mélanger.  In another embodiment, the dry composition may be mixed with the solution containing the bicarbonate salt. The bicarbonate salt may be selected from sodium bicarbonate or potassium bicarbonate or both. The concentration of bicarbonate salt can vary up to 0.5%, preferably between 0.1% - 0.5% by weight, more preferably 0.25 - 0.5% by weight. The temperature of the water or bicarbonate solution may be between 30 and 38 ° C. At this temperature, some compounds, for example quercetin, may remain in suspension, others may be completely dissolved. According to a particular variant, the water may be boiled and then cooled to 37 ° C. before mixing.
L'eau utilisée pour la préparation de la composition liquide peut être distillée, dé-ionisée, purifiée et stérilisée.  The water used for the preparation of the liquid composition can be distilled, deionized, purified and sterilized.
Même si l'usage de conservateurs et d'autres excipients n'est pas exclu, des préparations stériles sans conservateurs peuvent être fabriquées. Cela permet de conserver les compositions dans des conditions stériles et de limiter les effets indésirables dus à la présence d'excipients. La technique 'blow-fill-seal', utilisant des conteneurs unidoses en plastique ou des seringues pré-remplies dans des conditions aseptiques, peut être préférée.  Although the use of preservatives and other excipients is not excluded, sterile preparations without preservatives can be made. This makes it possible to preserve the compositions under sterile conditions and to limit the undesirable effects due to the presence of excipients. The blow-fill-seal technique, using single-dose plastic containers or pre-filled syringes under aseptic conditions, may be preferred.
Dans un mode de réalisation, la composition peut être présentée de façon suivante: Composition consistant en deux parties: In one embodiment, the composition may be presented as follows: Composition consisting of two parts:
- partie A: la poudre sèche, comprenant le chlorure de sodium ou chlorure de potassium, la quercétine, la quercétine-4'-glucoside et l’acide protocatéchique.  part A: the dry powder, comprising sodium chloride or potassium chloride, quercetin, quercetin-4'-glucoside and protocatechic acid.
- partie B: contenant 20 ml d'eau ou de solution de bicarbonate de sodium ou de bicarbonate de potassium.  - Part B: containing 20 ml of water or solution of sodium bicarbonate or potassium bicarbonate.
3. Composition nasale, comprenant le sel et la quercétine, la 2-(3,4-dihvdroxybenzoyl)-3. Nasal composition, including salt and quercetin, 2- (3,4-dihydroxybenzoyl)
2,4,6-trihydroxy-3 -benzofuranone et l'acide protocatéchique.2,4,6-trihydroxy-3-benzofuranone and protocatechic acid.
Selon un mode de réalisation, la formulation nasale comprend du sel, de la quercétine, de 2-(3,4- dihydroxybenzoyl)-2,4,6-trihydroxy-3(2H)-benzofuranone et de l'acide protocatéchique. Le sel peut être choisi parmi le chlorure de sodium ou le chlorure de potassium ou les deux, en quantité suffisante pour produire la solution hypotonique, isotonique ou hypertonique. La quantité de sel peut comprendre entre 91 - 99,77% en masse de la composition sèche. La quantité de quercétine dans la composition sèche peut comprendre entre 0,23 - 3% en masse. La quantité de 2-(3,4- dihydroxybenzoyl)-2,4,6-trihydroxy-3(2H)-benzofuranone dans la composition sèche peut comprendre entre 0,000001 - 3% en masse. La quantité d'acide protocatéchique dans la composition sèche peut comprendre entre 0,000001 - 3% en masse.  In one embodiment, the nasal formulation comprises salt, quercetin, 2- (3,4-dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy-3 (2H) -benzofuranone, and protocatechic acid. The salt may be selected from sodium chloride or potassium chloride or both, in an amount sufficient to produce the hypotonic, isotonic or hypertonic solution. The amount of salt may comprise from 91 to 99.77% by weight of the dry composition. The amount of quercetin in the dry composition may comprise 0.23 to 3% by weight. The amount of 2- (3,4-dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy-3 (2H) -benzofuranone in the dry composition may comprise between 0.000001 - 3% by weight. The amount of protocatechic acid in the dry composition may comprise between 0.000001 - 3% by weight.
Selon un mode de réalisation, l'agent actif comprenant la quercétine, la 2-(3,4-dihydroxybenzoyl)- 2,4,6-trihydroxy-3(2H)-benzofuranone et l’acide protocatéchique peut être préparé par un procédé d'extraction de plantes contenant des flavonoïdes, par exemple de la pelure d'oignon. La méthode de préparation de l'extrait contenant des agents actifs peut comprendre les étapes suivantes: According to one embodiment, the active agent comprising quercetin, 2- (3,4-dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy-3 (2H) -benzofuranone and protocatechic acid can be prepared by a method extracting plants containing flavonoids, for example onion peel. The method of preparing the extract containing active agents may comprise the following steps:
- mélanger la pelure d'oignon broyée avec de l'eau froide en proportion 0,1-2 g / 50 mL (m/v); - amener le mélange à bouillir, et laisser frémir pendant 30 min à température d'ébullition;  - mix the ground onion peel with cold water in a proportion of 0.1-2 g / 50 mL (m / v); bring the mixture to a boil, and simmer for 30 minutes at boiling point;
- refroidir le mélange, filtrer et lyophiliser.  - Cool the mixture, filter and lyophilize.
Cette méthode permet d'obtenir un extrait brut composé des agents actifs: quercétine, 2-(3,4- dihydroxybenzoyl)-2,4,6-trihydroxy-3(2H)-benzofuranone, quercétine-4'-glucoside, acide protocatéchique. L'extrait brut peut également contenir d’autres impuretés dérivées de la quercétine, par exemple, quercétine-3'-glucoside, quercétine-7'-glucoside, diglucosides et triglucosides de la quercétine, dimers de quercétine, en quantité n’excédant pas 5% de la masse totale des agents actifs. This method makes it possible to obtain a crude extract composed of the active agents: quercetin, 2- (3,4-dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy-3 (2H) -benzofuranone, quercetin-4'-glucoside, acid protocatechic. The crude extract may also contain other impurities derived from quercetin, for example, quercetin-3'-glucoside, quercetin-7'-glucoside, diglucosides and triglucosides of quercetin, quercetin dimers, in an amount not exceeding 5% of the total mass of active agents.
Une autre méthode d'extraction consiste à utiliser des solvants organiques, préférablement du méthanol ou de l’éthanol dilué avec de l'eau en proportion comprenant entre 50/50 et 90/10 (v/v). Selon cette méthode, la quantité définie de poudre de pelure d'oignon est mélangée avec le solvant organique en proportion 1-10 g / 30 mL (m/v), et agitée pendant 24 heures à température ambiante. La solution obtenue est filtrée, puis évaporée à sec. L'extrait brut obtenu peut être séparé par la méthode de la chromatographie liquide à haute performance. Another method of extraction is to use organic solvents, preferably methanol or ethanol diluted with water in a proportion of between 50/50 and 90/10 (v / v). According to this method, the defined amount of onion peel powder is mixed with the organic solvent in a proportion of 1-10 g / 30 ml (w / v), and stirred for 24 hours at room temperature. The solution obtained is filtered and then evaporated to dryness. The crude extract obtained can be separated by the method of high performance liquid chromatography.
Les conditions de séparation peuvent être les suivantes: The separation conditions can be as follows:
50 mg à 200 mg d’extrait brut sont injectés dans une colonne Phenomenex C18 (21,2 mm x 150 mm, 5 pm, 100 A) de l'appareil HPLC. Les solvants suivants peuvent être utilisés: Solvant A: H20/TFA 0,5% (1 L/ 5 mL); Solvant B: ACN. Le débit peut être: 15 mL/min.  50 mg to 200 mg of crude extract are injected into a Phenomenex C18 column (21.2 mm x 150 mm, 5 μm, 100 A) of the HPLC apparatus. The following solvents may be used: Solvent A: 0.5% H2O / TFA (1 L / 5 mL); Solvent B: ACN. The flow rate can be: 15 mL / min.
Les analyses qualitatives et quantitatives des compositions peuvent être réalisées par les techniques de UPLC-DAD-MS (Agilent technologies, USA). Les conditions d'élution peuvent être les suivantes: 1 pL de solution est injecté dans la colonne Agilent C18 (2,1 mm, 1,8 pm) de UPLC à la température de 25 °C. Les solvants utilisés peuvent être: Solvant A: H20/HCOOH 0,1% et Solvant B: ACN/HCOOH 0,1%. Le débit peut être: 0,4 mL/min. Les composés isolés peuvent être détectés dans un premier temps par le détecteur à barrette de diode, puis par l'analyseur de Spectrométrie de Masse. Les analyses de Spectrométrie de Masse peuvent être réalisées en mode négatif ou positif. Les techniques de séparation et d'analyse par la méthode de UPLC-DAD-MS peuvent être les mêmes pour toutes les compositions. Qualitative and quantitative analyzes of the compositions can be performed by UPLC-DAD-MS techniques (Agilent Technologies, USA). The elution conditions may be as follows: 1 μl of solution is injected into the Agilent C18 column (2.1 mm, 1.8 μm) of UPLC at a temperature of 25 ° C. The solvents used can be: Solvent A: H 2 0 / 0.1% HCOOH and Solvent B: ACN / 0.1% HCOOH. The flow rate can be: 0.4 mL / min. Isolated compounds can be detected first by the diode array detector and then by the mass spectrometry analyzer. Mass Spectrometry analyzes can be performed in negative or positive mode. The separation and analysis techniques by the UPLC-DAD-MS method can be the same for all compositions.
Selon un mode de réalisation, la composition peut être préparée en mélangeant les composés disponibles commercialement: quercétine, 2-(3,4-dihydroxybenzoyl)-2,4,6-trihydroxy-3(2H)- benzofuranone, acide protocatéchique et de sel choisi parmi les chlorure de sodium ou chlorure de potassium. According to one embodiment, the composition can be prepared by mixing the commercially available compounds: quercetin, 2- (3,4-dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy-3 (2H) - benzofuranone, protocatechic acid and salt selected from sodium chloride or potassium chloride.
La composition sèche peut être préparée par une des méthodes suivantes: a). Dissolution de la quercétine, de 2-(3,4-dihydroxybenzoyl)-2,4,6-trihydroxy-3(2H)- benzofuranone, de l'acide protocatéchique avec du sel dans de l'eau chauffée à 80 - 100 °C. Puis refroidissement de la solution à température ambiante, suivi par la congélation et la lyophilisation. b). Dissolution de la quercétine, de 2-(3,4-dihydroxybenzoyl)-2,4,6-trihydroxy-3(2H)- benzofuranone, de l'acide protocatéchique dans de l'eau chauffée à 80 - 100 °C. Puis refroidissement de la solution à température ambiante, ajout et dissolution du sel, suivis par la congélation et la lyophilisation. c). La quercétine, la 2-(3,4-dihydroxybenzoyl)-2,4,6-trihydroxy-3(2H)-benzofuranone et l’acide protocatéchique sont dissouts dans le solvant organique, préférablement dans de l'éthanol ou du méthanol dilué avec de l'eau. La proportion solvant organique/eau peut varier entre 50/50 et 90/10 (v/v). Le sel est dissout dans l'eau. Puis, les deux solutions sont mélangées à température ambiante, congelées et lyophilisées. d). La poudre de quercétine, de 2-(3,4-dihydroxybenzoyl)-2,4,6-trihydroxy-3(2H)-benzofuranone et de l’acide protocatéchique est mélangée avec de chlorure de sodium ou chlorure de potassium. The dry composition can be prepared by one of the following methods: Dissolution of quercetin, 2- (3,4-dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy-3 (2H) -benzofuranone, protocatechic acid with salt in water heated to 80 - 100 ° C. Then cooling the solution to room temperature, followed by freezing and lyophilization. b). Dissolution of quercetin, 2- (3,4-dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy-3 (2H) -benzofuranone, protocatechic acid in water heated to 80-100 ° C. Then cooling the solution to room temperature, adding and dissolving the salt, followed by freezing and lyophilization. c). Quercetin, 2- (3,4-dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy-3 (2H) -benzofuranone and protocatechic acid are dissolved in the organic solvent, preferably in diluted ethanol or methanol. with water. The proportion of organic solvent / water can vary between 50/50 and 90/10 (v / v). Salt is dissolved in water. Then, both solutions are mixed at room temperature, frozen and lyophilized. d). The quercetin powder of 2- (3,4-dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy-3 (2H) -benzofuranone and protocatechic acid is mixed with sodium chloride or potassium chloride.
La composition peut être stérilisée ou non, peut être fournie sous forme sèche ou liquide, distribuée dans des conteneurs unidoses ou multidoses. The composition can be sterilized or not, can be supplied in dry or liquid form, distributed in single-dose or multi-dose containers.
La composition peut comprendre un ou plusieurs ingrédients biologiquement actifs cohérents avec la thérapie et des additifs choisis parmi les supports pharmaceutiques, stabilisateurs, surfactants, conservateurs, et les huiles essentielles. Les ingrédients biologiquement actifs peuvent être choisis parmi les antibiotiques, corticostéroïdes, et/ou les sels de cuivre, de manganèse et de soufre. Les huiles essentielles peuvent être choisies parmi l'huile d'eucalyptus, l'huile de romarin, l'huile d'arbre à thé ou du menthol. The composition may comprise one or more biologically active ingredients consistent with the therapy and additives selected from pharmaceutical carriers, stabilizers, surfactants, preservatives, and essential oils. The biologically active ingredients may be selected from antibiotics, corticosteroids, and / or copper salts, manganese and sulfur. Essential oils can be chosen from eucalyptus oil, rosemary oil, tea tree oil or menthol.
Selon un mode de réalisation, la composition sèche peut par la suite être mélangée avec de l'eau. La solution ou suspension obtenue comprend 0,4 - 2% en masse de chlorure de sodium et/ou chlorure de potassium, 0,0023 - 0,03% en masse de quercétine, 0,00000001 - 0,03% en masse de 2-(3,4- dihydroxybenzoyl)-2,4,6-trihydroxy-3(2H)-benzofuranone et 0,00000001 - 0,03% en masse d'acide protocatéchique. According to one embodiment, the dry composition can subsequently be mixed with water. The solution or suspension obtained comprises 0.4 - 2% by weight of sodium chloride and / or potassium chloride, 0.0023 - 0.03% by mass of quercetin, 0.00000001 - 0.03% by mass of 2 - (3,4-dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy-3 (2H) -benzofuranone and 0.00000001 - 0.03% by weight of protocatechic acid.
Selon un autre mode de réalisation, la composition sèche peut être mélangée avec la solution contenant le sel de bicarbonate. Le sel de bicarbonate peut être choisi parmi le bicarbonate de sodium ou le bicarbonate de potassium ou les deux. La concentration en sel de bicarbonate peut varier jusqu'à 0,5%, préférentiellement entre 0,1% - 0,5% en masse, plus préférablement 0,25 - 0,5% en masse. La température de l'eau ou de la solution de bicarbonate peut être comprise entre 30 et 38 °C. À cette température, certains composés, par exemple la quercétine, peuvent rester en suspension; d’autres peuvent être dissouts complètement. Selon une variante particulière, l'eau peut être bouillie puis refroidie à 37 °C avant de mélanger.  In another embodiment, the dry composition may be mixed with the solution containing the bicarbonate salt. The bicarbonate salt may be selected from sodium bicarbonate or potassium bicarbonate or both. The concentration of bicarbonate salt can vary up to 0.5%, preferably between 0.1% - 0.5% by weight, more preferably 0.25 - 0.5% by weight. The temperature of the water or bicarbonate solution may be between 30 and 38 ° C. At this temperature, certain compounds, for example quercetin, may remain in suspension; others can be completely dissolved. According to a particular variant, the water may be boiled and then cooled to 37 ° C. before mixing.
L'eau utilisée pour la préparation de la composition liquide peut être distillée, dé-ionisée, purifiée et stérilisée.  The water used for the preparation of the liquid composition can be distilled, deionized, purified and sterilized.
Même si l'usage de conservateurs et d'autres excipients n'est pas exclu, les préparations stériles sans conservateurs peuvent être fabriquées. Cela permet de conserver les compositions dans des conditions stériles et de limiter les effets indésirables dus à la présence d’excipients. La technique 'blow-fill-seal', utilisant des conteneurs unidoses en plastique ou des seringues pré-remplies dans des conditions aseptiques, peut être préférée. Dans un mode de réalisation, la composition peut être présentée de façon suivante:  Although the use of preservatives and other excipients is not excluded, sterile preparations without preservatives can be manufactured. This makes it possible to preserve the compositions under sterile conditions and to limit the undesirable effects due to the presence of excipients. The blow-fill-seal technique, using single-dose plastic containers or pre-filled syringes under aseptic conditions, may be preferred. In one embodiment, the composition may be presented as follows:
Composition consistant en deux parties: Composition consisting of two parts:
- partie A: la poudre sèche, comprenant le chlorure de sodium ou chlorure de potassium, la quercétine, 2-(3,4-dihydroxybenzoyl)-2,4,6-trihydroxy-3(2H)-benzofuranone et l’acide protocatéchique. - partie B: contenant 20 ml d'eau ou de solution de bicarbonate de sodium ou de bicarbonate de potassium. - Part A: dry powder, including sodium chloride or potassium chloride, quercetin, 2- (3,4-dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy-3 (2H) -benzofuranone and protocatechic acid . - Part B: containing 20 ml of water or solution of sodium bicarbonate or potassium bicarbonate.
4. Composition nasale, comprenant le sel et la quercétine, la quercétine-4'-glucoside et la 2-(3.4-dihvdroxybenzoyl)-2.4.6-trihvdroxy-3 -benzofuranone.4. Nasal composition, including salt and quercetin, quercetin-4'-glucoside and 2- (3,4-dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy-3-benzofuranone.
Selon un mode de réalisation, la formulation nasale comprend du sel et de la quercétine, de la quercétine-4'-glucoside et de la 2-(3,4-dihydroxybenzoyl)-2,4,6-trihydroxy-3(2H)-benzofuranone. Le sel peut être choisi parmi le chlorure de sodium ou le chlorure de potassium, ou les deux, en quantité suffisante pour produire la solution hypotonique, isotonique ou hypertonique. La quantité de sel peut être comprise entre 91 - 99,99% en masse de la composition sèche. La quantité de quercétine dans la composition sèche peut comprendre entre 0,000001 - 3% en masse. La quantité de quercétine-4'-glucoside dans la composition sèche peut être comprise entre 0,000001 - 3% en masse. La quantité de 2-(3,4-dihydroxybenzoyl)-2,4,6-trihydroxy-3(2H)- benzofuranone dans la composition sèche peut être comprise entre 0,000001 - 3% en masse.  According to one embodiment, the nasal formulation comprises salt and quercetin, quercetin-4'-glucoside and 2- (3,4-dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy-3 (2H) -benzofuranone. The salt may be selected from sodium chloride or potassium chloride, or both, in an amount sufficient to produce the hypotonic, isotonic or hypertonic solution. The amount of salt may be from 91 to 99.99% by weight of the dry composition. The amount of quercetin in the dry composition can comprise between 0.000001 - 3% by weight. The amount of quercetin-4'-glucoside in the dry composition may be between 0.000001 - 3% by weight. The amount of 2- (3,4-dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy-3 (2H) -benzofuranone in the dry composition can be between 0.000001 - 3% by weight.
Selon un mode de réalisation, l'agent actif comprenant la quercétine, la quercétine-4'-glucoside et le 2-(3,4-dihydroxybenzoyl)-2,4,6-trihydroxy-3(2H)-benzofuranone peut être préparé par un procédé d'extraction de plantes contenant des flavonoïdes, par exemple, de la pelure d'oignon. La méthode de préparation de l'extrait contenant des agents actifs peut comprendre les étapes suivantes: According to one embodiment, the active agent comprising quercetin, quercetin-4'-glucoside and 2- (3,4-dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy-3 (2H) -benzofuranone can be prepared by a plant extraction process containing flavonoids, for example, onion peel. The method of preparing the extract containing active agents may comprise the following steps:
- mélanger la pelure d'oignon broyée avec de l'eau froide en proportion 0,1-2 g / 50 mL (m/v); - mix the ground onion peel with cold water in a proportion of 0.1-2 g / 50 mL (m / v);
- amener le mélange à bouillir, et laisser frémir pendant 30 min à température d'ébullition; bring the mixture to a boil, and simmer for 30 minutes at boiling point;
- refroidir le mélange, filtrer et lyophiliser. Cette méthode permet d'obtenir un extrait brut composé des agents actifs: quercétine, 2-(3,4- dihydroxybenzoyl)-2,4,6-trihydroxy-3(2H)-benzofuranone, quercétine-4'-glucoside, acide protocatéchique. L'extrait brut peut également contenir d’autres impuretés dérivées de la quercétine, par exemple, quercétine-3'-glucoside, quercétine-7'-glucoside, diglucosides et triglucosides de la quercétine, dimers de quercétine, en quantité n'excédant pas 5% de la masse totale des agents actifs. - Cool the mixture, filter and lyophilize. This method makes it possible to obtain a crude extract composed of the active agents: quercetin, 2- (3,4-dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy-3 (2H) -benzofuranone, quercetin-4'-glucoside, protocatechic acid . The crude extract may also contain other impurities derived from quercetin, for example, quercetin-3'-glucoside, quercetin-7'-glucoside, diglucosides and triglycerides of quercetin, quercetin dimers, in an amount not exceeding 5% of the total mass of the active agents.
Une autre méthode d'extraction consiste à utiliser des solvants organiques, préférablement du méthanol ou de l'éthanol dilué avec de l'eau en proportion comprise entre 50/50 et 90/10 (v/v). Selon cette méthode, la quantité définie de poudre de pelure d'oignon est mélangée avec le solvant organique en proportion de 1-10 g / 30 mL (m/v), et agitée pendant 24 heures à température ambiante. La solution obtenue est filtrée, puis évaporée à sec. L'extrait brut obtenu peut être séparé par la méthode de la chromatographie liquide à haute performance. Another method of extraction is to use organic solvents, preferably methanol or ethanol diluted with water in a proportion between 50/50 and 90/10 (v / v). According to this method, the defined amount of onion peel powder is mixed with the organic solvent in a proportion of 1-10 g / 30 mL (w / v), and stirred for 24 hours at room temperature. The solution obtained is filtered and then evaporated to dryness. The crude extract obtained can be separated by the method of high performance liquid chromatography.
Les conditions de séparation peuvent être les suivantes: The separation conditions can be as follows:
50 mg à 200 mg d’extrait brut sont injectés dans une colonne Phenomenex C18 (21,2 mm x 150 mm, 5 pm, 100 A) de l'appareil HPLC. Les solvants suivants peuvent être utilisés: Solvant A: H20/TFA 0,5% (1 L/ 5 mL); Solvant B: ACN. Le débit peut être: 15 mL/min.  50 mg to 200 mg of crude extract are injected into a Phenomenex C18 column (21.2 mm x 150 mm, 5 μm, 100 A) of the HPLC apparatus. The following solvents may be used: Solvent A: 0.5% H2O / TFA (1 L / 5 mL); Solvent B: ACN. The flow rate can be: 15 mL / min.
Les analyses qualitatives et quantitatives des compositions peuvent être réalisées par les techniques de UPLC-DAD-MS (Agilent technologies, USA). Les conditions d'élution peuvent être les suivantes : 1 pL de solution est injecté dans la colonne Agilent C18 (2,1 mm, 1,8 pm) de UPLC à la température de 25 °C. Les solvants utilisés peuvent être: Solvant A: H20/HCOOH 0,1% et Solvant B: ACN/HCOOH 0,1%. Le débit peut être: 0,4 mL/min. Les composés isolés peuvent être détectés dans un premier temps par le détecteur à barrette de diode, puis par l'analyseur de Spectrométrie de Masse. Les analyses de Spectrométrie de Masse peuvent être réalisées en mode négatif ou positif. Les techniques de séparation et d'analyse par la méthode de UPLC-DAD-MS peuvent être les mêmes pour toutes les compositions. Qualitative and quantitative analyzes of the compositions can be performed by UPLC-DAD-MS techniques (Agilent Technologies, USA). The elution conditions may be as follows: 1 μl of solution is injected into the Agilent C18 column (2.1 mm, 1.8 μm) of UPLC at a temperature of 25 ° C. The solvents used can be: Solvent A: H 2 0 / 0.1% HCOOH and Solvent B: ACN / 0.1% HCOOH. The flow rate can be: 0.4 mL / min. Isolated compounds can be detected first by the diode array detector and then by the mass spectrometry analyzer. Mass Spectrometry analyzes can be performed in negative or positive mode. The separation and analysis techniques by the UPLC-DAD-MS method can be the same for all compositions.
Selon un mode de réalisation, la composition peut être préparée en mélangeant les composés disponibles commercialement: quercétine, quercétine-4'-glucoside et de sel choisi parmi les chlorure de sodium ou chlorure de potassium. According to one embodiment, the composition may be prepared by mixing the commercially available compounds: quercetin, quercetin-4'-glucoside and salt selected from sodium chloride or potassium chloride.
La composition sèche peut être préparée par une des méthodes suivantes: a). Dissolution de la quercétine, de 2-(3,4-dihydroxybenzoyl)-2,4,6-trihydroxy-3(2H)- benzofuranone, de la quercétine-4'-glucoside avec du sel dans de l'eau chauffée à 80 - 100 °C. Puis refroidissement de la solution à température ambiante, suivi par la congélation et la lyophilisation. b). Dissolution de la quercétine, de 2-(3,4-dihydroxybenzoyl)-2,4,6-trihydroxy-3(2H)- benzofuranone, de la quercétine-4'-glucoside dans de l'eau chauffée à 80 - 100 °C. Puis refroidissement de la solution à température ambiante, ajout et dissolution du sel, suivis par la congélation et la lyophilisation. c). La quercétine, la 2-(3,4-dihydroxybenzoyl)-2,4,6-trihydroxy-3(2H)-benzofuranone et la quercétine-4'-glucoside sont dissoutes dans le solvant organique, préférablement dans de l'éthanol ou du méthanol dilué avec de l'eau. La proportion solvant organique/eau peut varier entre 50/50 et 90/10 (v/v). Le sel est dissout dans l'eau. Ensuite, les deux solutions sont mélangées à température ambiante, puis congelées et lyophilisées. d). La poudre de quercétine, de 2-(3,4-dihydroxybenzoyl)-2,4,6-trihydroxy-3(2H)-benzofuranone, de quercétine-4'-glucoside est mélangée avec de chlorure de sodium ou chlorure de potassium. The dry composition can be prepared by one of the following methods: at). Dissolution of quercetin, 2- (3,4-dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy-3 (2H) -benzofuranone, quercetin-4'-glucoside with salt in water heated to 80 - 100 ° C. Then cooling the solution to room temperature, followed by freezing and lyophilization. b). Dissolution of quercetin, 2- (3,4-dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy-3 (2H) -benzofuranone, quercetin-4'-glucoside in water heated to 80 - 100 ° C. Then cooling the solution to room temperature, adding and dissolving the salt, followed by freezing and lyophilization. c). Quercetin, 2- (3,4-dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy-3 (2H) -benzofuranone and quercetin-4'-glucoside are dissolved in the organic solvent, preferably in ethanol or methanol diluted with water. The proportion of organic solvent / water can vary between 50/50 and 90/10 (v / v). Salt is dissolved in water. Then both solutions are mixed at room temperature, then frozen and lyophilized. d). The quercetin powder of 2- (3,4-dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy-3 (2H) -benzofuranone, quercetin-4'-glucoside is mixed with sodium chloride or potassium chloride.
La composition peut être stérilisée ou non, peut être fournie sous forme sèche ou liquide, distribuée dans des conteneurs unidoses ou multidoses. The composition can be sterilized or not, can be supplied in dry or liquid form, distributed in single-dose or multi-dose containers.
La composition peut comprendre un ou plusieurs ingrédients biologiquement actifs cohérents avec la thérapie et des additifs choisis parmi les supports pharmaceutiques, stabilisateurs, surfactants, conservateurs, et les huiles essentielles. Les ingrédients biologiquement actifs peuvent être choisis parmi les antibiotiques, les corticostéroïdes, et/ou les sels de cuivre, de manganèse et de soufre. Les huiles essentielles peuvent être choisies parmi l'huile d'eucalyptus, l'huile de romarin, l'huile d'arbre à thé ou du menthol. Selon un mode de réalisation, la composition sèche peut par la suite être mélangée avec de l'eau. La solution ou suspension obtenue comprend 0,4 - 2% en masse de chlorure de sodium et/ou chlorure de potassium, 0,00000001 - 0,03% en masse de quercétine, 0,00000001 - 0,03% en masse de 2-(3,4-dihydroxybenzoyl)-2,4,6-trihydroxy-3(2H)-benzofuranone et 0,00000001 - 0,03% en masse de quercétine-4'-glucoside. The composition may comprise one or more biologically active ingredients consistent with the therapy and additives selected from pharmaceutical carriers, stabilizers, surfactants, preservatives, and essential oils. The biologically active ingredients may be selected from antibiotics, corticosteroids, and / or copper, manganese and sulfur salts. Essential oils can be chosen from eucalyptus oil, rosemary oil, tea tree oil or menthol. According to one embodiment, the dry composition can subsequently be mixed with water. The solution or suspension obtained comprises 0.4 - 2% by weight of sodium chloride and / or potassium chloride, 0.00000001 - 0.03% by mass of quercetin, 0.00000001 - 0.03% by mass of 2 - (3,4-dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy-3 (2H) -benzofuranone and 0.00000001 - 0.03% by weight of quercetin-4'-glucoside.
Selon un autre mode de réalisation, la composition sèche peut être mélangée avec la solution contenant le sel de bicarbonate. Le sel de bicarbonate peut être choisi parmi le bicarbonate de sodium ou le bicarbonate de potassium ou les deux. La concentration en sel de bicarbonate peut varier jusqu'à 0,5%, préférentiellement entre 0,1% - 0,5% en masse, plus préférablement 0,25 - 0,5% en masse. La température de l'eau ou de la solution de bicarbonate peut être comprise entre In another embodiment, the dry composition may be mixed with the solution containing the bicarbonate salt. The bicarbonate salt may be selected from sodium bicarbonate or potassium bicarbonate or both. The concentration of bicarbonate salt can vary up to 0.5%, preferably between 0.1% - 0.5% by weight, more preferably 0.25 - 0.5% by weight. The temperature of the water or bicarbonate solution can be between
30 et 38 °C. À cette température, certains composés, par exemple la quercétine, peuvent rester en suspension, d’autres peuvent être dissouts complètement. Selon une variante particulière, l'eau peut être bouillie puis refroidie à 37 °C avant de mélanger. 30 and 38 ° C. At this temperature, some compounds, for example quercetin, may remain in suspension, others may be completely dissolved. According to a particular variant, the water may be boiled and then cooled to 37 ° C. before mixing.
L'eau utilisée pour la préparation de la composition liquide peut être distillée, dé-ionisée, purifiée et stérilisée.  The water used for the preparation of the liquid composition can be distilled, deionized, purified and sterilized.
Même si l'usage de conservateurs et d'autres excipients n'est pas exclu, des préparations stériles sans conservateurs peuvent être fabriquées. Cela permet de conserver les compositions dans des conditions stériles et de limiter les effets indésirables dus à la présence d'excipients. La technique 'blow-fill-seal', utilisant des conteneurs unidoses en plastique ou des seringues pré-remplies dans des conditions aseptiques, peut être préférée.  Although the use of preservatives and other excipients is not excluded, sterile preparations without preservatives can be made. This makes it possible to preserve the compositions under sterile conditions and to limit the undesirable effects due to the presence of excipients. The blow-fill-seal technique, using single-dose plastic containers or pre-filled syringes under aseptic conditions, may be preferred.
Dans un mode de réalisation, la composition peut être présentée de façon suivante: In one embodiment, the composition may be presented as follows:
Composition consistant en deux parties:  Composition consisting of two parts:
- partie A: la poudre sèche, comprenant le chlorure de sodium ou chlorure de potassium, la quercétine, 2-(3,4-dihydroxybenzoyl)-2,4,6-trihydroxy-3(2H)-benzofuranone et la quercétine-4'- glucoside.  Part A: the dry powder, comprising sodium chloride or potassium chloride, quercetin, 2- (3,4-dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy-3 (2H) -benzofuranone and quercetin-4 glucoside.
- partie B: contenant 20 ml d'eau ou de solution de bicarbonate de sodium ou de bicarbonate de potassium. 5. La composition nasale, comprenant le sel, la quercétine et la 2-(3,4- dihydroxybenzoyl)-2,4,6-trihydroxy-3(2H)-benzofuranone. - Part B: containing 20 ml of water or solution of sodium bicarbonate or potassium bicarbonate. 5. The nasal composition, including salt, quercetin and 2- (3,4-dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy-3 (2H) -benzofuranone.
Selon un mode de réalisation, la formulation nasale comprend du sel, de la quercétine et de la 2- (3,4-dihydroxybenzoyl)-2,4,6-trihydroxy-3(2H)-benzofuranone. Le sel peut être choisi parmi le chlorure de sodium ou le chlorure de potassium, ou les deux, en quantité suffisante pour produire la solution hypotonique, isotonique ou hypertonique. La quantité de sel peut être comprise entre 94 - 99,99% en masse de la composition sèche. La quantité de quercétine dans la composition sèche peut comprendre entre 0,000001 - 3% en masse. La quantité de 2-(3,4-dihydroxybenzoyl)- 2,4,6-trihydroxy-3(2H)-benzofuranone dans la composition sèche peut être comprise entre 0,000001 - 3% en masse.  According to one embodiment, the nasal formulation comprises salt, quercetin and 2- (3,4-dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy-3 (2H) -benzofuranone. The salt may be selected from sodium chloride or potassium chloride, or both, in an amount sufficient to produce the hypotonic, isotonic or hypertonic solution. The amount of salt may be from 94 to 99.99% by weight of the dry composition. The amount of quercetin in the dry composition can comprise between 0.000001 - 3% by weight. The amount of 2- (3,4-dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy-3 (2H) -benzofuranone in the dry composition may be between 0.000001 - 3% by weight.
Selon un mode de réalisation, l'agent actif comprenant la quercétine et le 2-(3,4- dihydroxybenzoyl)-2,4,6-trihydroxy-3(2H)-benzofuranone peut être préparé par un procédé d'extraction de plantes contenant des flavonoïdes, par exemple, de la pelure d'oignon. La méthode de préparation de l'extrait contenant des agents actifs peut comprendre les étapes suivantes: According to one embodiment, the active agent comprising quercetin and 2- (3,4-dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy-3 (2H) -benzofuranone can be prepared by a plant extraction process. containing flavonoids, for example, onion peel. The method of preparing the extract containing active agents may comprise the following steps:
- mélanger la pelure d'oignon broyée avec de l'eau froide en proportion 0,1-2 g / 50 mL (m/v); - mix the ground onion peel with cold water in a proportion of 0.1-2 g / 50 mL (m / v);
- amener le mélange à bouillir, et laisser frémir pendant 30 min à température d'ébullition; bring the mixture to a boil, and simmer for 30 minutes at boiling point;
- refroidir le mélange, filtrer et lyophiliser.  - Cool the mixture, filter and lyophilize.
Cette méthode permet d'obtenir un extrait brut composé des agents actifs: quercétine, 2-(3,4- dihydroxybenzoyl)-2,4,6-trihydroxy-3(2H)-benzofuranone, quercétine-4'-glucoside, acide protocatéchique. L'extrait brut peut également contenir d’autres impuretés dérivées de la quercetine, par exemple, quercétine-3'-glucoside, quercétine-7'-glucoside, diglucosides et triglucosides de la quercétine, dimers de quercétine, en quantité n'excédant pas 5% de la masse totale des agents actifs. This method makes it possible to obtain a crude extract composed of the active agents: quercetin, 2- (3,4-dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy-3 (2H) -benzofuranone, quercetin-4'-glucoside, protocatechic acid . The crude extract may also contain other impurities derived from quercetin, for example, quercetin-3'-glucoside, quercetin-7'-glucoside, diglucosides and triglucosides of quercetin, quercetin dimers, in an amount not exceeding 5% of the total mass of active agents.
Une autre méthode d'extraction consiste à utiliser des solvants organiques, préférablement du méthanol ou de l'éthanol dilué avec de l'eau en proportion comprise entre 50/50 et 90/10 (v/v). Selon cette méthode, la quantité définie de poudre de pelure d'oignon est mélangée avec le solvant organique en proportion de 1-10 g / 30 mL (m/v), et agitée pendant 24 heures à température ambiante. La solution obtenue est filtrée, puis évaporée à sec. L'extrait brut obtenu peut être séparé par la méthode de la chromatographie liquide à haute performance. Another method of extraction is to use organic solvents, preferably methanol or ethanol diluted with water in a proportion between 50/50 and 90/10 (v / v). According to this method, the defined amount of onion peel powder is mixed with the organic solvent in a proportion of 1-10 g / 30 mL (w / v), and stirred for 24 hours at room temperature. The solution obtained is filtered and then evaporated to dryness. The crude extract obtained can be separated by the method of high performance liquid chromatography.
Les conditions de séparation peuvent être les suivantes: The separation conditions can be as follows:
50 mg à 200 mg d’extrait brut sont injectés dans une colonne Phenomenex C18 (21,2 mm x 150 mm, 5 pm, 100 A) de l'appareil HPLC. Les solvants suivants peuvent être utilisés: Solvant A: H20/TFA 0,5% (1 L/ 5 mL); Solvant B: ACN. Le débit peut être: 15 mL/min.  50 mg to 200 mg of crude extract are injected into a Phenomenex C18 column (21.2 mm x 150 mm, 5 μm, 100 A) of the HPLC apparatus. The following solvents may be used: Solvent A: 0.5% H2O / TFA (1 L / 5 mL); Solvent B: ACN. The flow rate can be: 15 mL / min.
Les analyses qualitatives et quantitatives des compositions peuvent être réalisées par les techniques de UPLC-DAD-MS (Agilent technologies, USA). Les conditions d'élution peuvent être les suivantes: 1 pL de solution est injecté dans la colonne Agilent C18 (2,1 mm, 1,8 pm) de UPLC à la température de 25 °C. Les solvants utilisés peuvent être: Solvant A: H20/HCOOH 0,1% et Solvant B: ACN/HCOOH 0,1%. Le débit peut être: 0,4 mL/min. Les composés isolés peuvent être détectés dans un premier temps par le détecteur à barrette de diode, puis par l'analyseur de Spectrométrie de Masse. Les analyses de Spectrométrie de Masse peuvent être réalisées en mode négatif ou positif. Les techniques de séparation et d'analyse par la méthode de UPLC-DAD-MS peuvent être les mêmes pour toutes les compositions. Qualitative and quantitative analyzes of the compositions can be performed by UPLC-DAD-MS techniques (Agilent Technologies, USA). The elution conditions may be as follows: 1 μl of solution is injected into the Agilent C18 column (2.1 mm, 1.8 μm) of UPLC at a temperature of 25 ° C. The solvents used can be: Solvent A: H 2 0 / 0.1% HCOOH and Solvent B: ACN / 0.1% HCOOH. The flow rate can be: 0.4 mL / min. Isolated compounds can be detected first by the diode array detector and then by the mass spectrometry analyzer. Mass Spectrometry analyzes can be performed in negative or positive mode. The separation and analysis techniques by the UPLC-DAD-MS method can be the same for all compositions.
Selon un mode de réalisation, la composition peut être préparée en mélangeant les composés disponibles commercialement: quercétine, 2-(3,4-dihydroxybenzoyl)-2,4,6-trihydroxy-3(2H)- benzofuranone et de sel choisi parmi les chlorure de sodium ou chlorure de potassium. According to one embodiment, the composition may be prepared by mixing the commercially available compounds: quercetin, 2- (3,4-dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy-3 (2H) -benzofuranone and salt selected from sodium chloride or potassium chloride.
La composition sèche peut être préparée par une des méthodes suivantes: a). Dissolution de la quercétine, de 2-(3,4-dihydroxybenzoyl)-2,4,6-trihydroxy-3(2H)- benzofuranone avec du sel dans de l'eau chauffée à 80 - 100 °C. Puis refroidissement de la solution à température ambiante, suivi par la congélation et la lyophilisation. b). Dissolution de la quercétine, de 2-(3,4-dihydroxybenzoyl)-2,4,6-trihydroxy-3(2H)- benzofuranone dans de l'eau chauffée à 80 - 100 °C. Puis refroidissement de la solution à température ambiante, ajout et dissolution du sel, suivis par la congélation et la lyophilisation. c). La quercétine, le 2-(3,4-dihydroxybenzoyl)-2,4,6-trihydroxy-3(2H)-benzofuranone sont dissoute dans le solvant organique, préférablement dans de l'éthanol ou du méthanol dilué avec de l'eau. La proportion solvant organique/eau peut varier entre 50/50 et 90/10 (v/v). Le sel est dissout dans l'eau. Ensuite, les deux solutions sont mélangées à température ambiante, puis congelées et lyophilisées. d). La poudre de quercétine, de 2-(3,4-dihydroxybenzoyl)-2,4,6-trihydroxy-3(2H)-benzofuranone est mélangée avec de chlorure de sodium ou chlorure de potassium. The dry composition can be prepared by one of the following methods: Dissolution of quercetin, 2- (3,4-dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy-3 (2H) -benzofuranone with salt in water heated to 80-100 ° C. Then cooling the solution to room temperature, followed by freezing and lyophilization. b). Dissolution of quercetin, 2- (3,4-dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy-3 (2H) -benzofuranone in water heated to 80-100 ° C. Then cooling the solution to room temperature, adding and dissolving the salt, followed by freezing and lyophilization. c). Quercetin, 2- (3,4-dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy-3 (2H) -benzofuranone are dissolved in the organic solvent, preferably in ethanol or methanol diluted with water. . The proportion of organic solvent / water can vary between 50/50 and 90/10 (v / v). Salt is dissolved in water. Then both solutions are mixed at room temperature, then frozen and lyophilized. d). The quercetin powder of 2- (3,4-dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy-3 (2H) -benzofuranone is mixed with sodium chloride or potassium chloride.
La composition peut être stérilisée ou non, peut être fournie sous forme sèche ou liquide, distribuée dans des conteneurs unidoses ou multidoses. The composition can be sterilized or not, can be supplied in dry or liquid form, distributed in single-dose or multi-dose containers.
La composition peut comprendre un ou plusieurs ingrédients biologiquement actifs cohérents avec la thérapie et des additifs choisis parmi les supports pharmaceutiques, stabilisateurs, surfactants, conservateurs, et les huiles essentielles. Les ingrédients biologiquement actifs peuvent être choisis parmi les antibiotiques, les corticostéroïdes, et/ou les sels de cuivre, de manganèse et de soufre. Les huiles essentielles peuvent être choisies parmi l'huile d'eucalyptus, l'huile de romarin, l'huile d'arbre à thé ou du menthol.  The composition may comprise one or more biologically active ingredients consistent with the therapy and additives selected from pharmaceutical carriers, stabilizers, surfactants, preservatives, and essential oils. The biologically active ingredients may be selected from antibiotics, corticosteroids, and / or copper, manganese and sulfur salts. Essential oils can be chosen from eucalyptus oil, rosemary oil, tea tree oil or menthol.
Selon un mode de réalisation, la composition sèche peut par la suite être mélangée avec de l'eau. La solution ou suspension obtenue comprend 0,4 - 2% en masse de chlorure de sodium et/ou chlorure de potassium, 0,00000001 - 0,03% en masse de quercétine et 0,00000001 - 0,03% en masse de 2-(3,4-dihydroxybenzoyl)-2,4,6-trihydroxy-3(2H)-benzofuranone. According to one embodiment, the dry composition can subsequently be mixed with water. The solution or suspension obtained comprises 0.4 - 2% by weight of sodium chloride and / or potassium chloride, 0.00000001 - 0.03% by weight of quercetin and 0.00000001 - 0.03% by weight of 2 - (3,4-dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy-3 (2H) -benzofuranone.
Selon un autre mode de réalisation, la composition sèche peut être mélangée avec la solution contenant le sel de bicarbonate. Le sel de bicarbonate peut être choisi parmi le bicarbonate de sodium ou le bicarbonate de potassium ou les deux. La concentration en sel de bicarbonate peut varier jusqu'à 0,5%, préférentiellement entre 0,1% - 0,5% en masse, plus préférablement 0,25 - 0,5% en masse. La température de l'eau ou de la solution de bicarbonate peut être comprise entre 30 et 38 °C. À cette température, certains composés, par exemple la quercétine, peuvent rester en suspension, d’autres peuvent être dissouts complètement. Selon une variante particulière, l'eau peut être bouillie puis refroidie à 37 °C avant de mélanger. In another embodiment, the dry composition may be mixed with the solution containing the bicarbonate salt. The bicarbonate salt may be selected from sodium bicarbonate or potassium bicarbonate or both. The salt concentration of bicarbonate can vary up to 0.5%, preferably between 0.1% - 0.5% by weight, more preferably 0.25 - 0.5% by weight. The temperature of the water or bicarbonate solution may be between 30 and 38 ° C. At this temperature, some compounds, for example quercetin, may remain in suspension, others may be completely dissolved. According to a particular variant, the water may be boiled and then cooled to 37 ° C. before mixing.
L'eau utilisée pour la préparation de la composition liquide peut être distillée, dé-ionisée, purifiée et stérilisée.  The water used for the preparation of the liquid composition can be distilled, deionized, purified and sterilized.
Même si l'usage de conservateurs et d'autres excipients n'est pas exclu, des préparations stériles sans conservateurs peuvent être fabriquées. Cela permet de conserver les compositions dans des conditions stériles et de limiter les effets indésirables dus à de la présence d'excipients. La technique 'blow-fill-seal', utilisant des conteneurs unidoses en plastique ou des seringues pré remplies dans des conditions aseptiques, peut être préférée.  Although the use of preservatives and other excipients is not excluded, sterile preparations without preservatives can be made. This makes it possible to preserve the compositions under sterile conditions and to limit the undesirable effects due to the presence of excipients. The blow-fill-seal technique, using single-dose plastic containers or pre-filled syringes under aseptic conditions, may be preferred.
Dans un mode de réalisation, la composition peut être présentée de façon suivante: Composition consistant en deux parties:  In one embodiment, the composition may be presented as follows: Composition consisting of two parts:
- partie A: la poudre sèche, comprenant le chlorure de sodium ou chlorure de potassium, la quercétine et 2-(3,4-dihydroxybenzoyl)-2,4,6-trihydroxy-3(2H)-benzofuranone.  Part A: the dry powder, comprising sodium chloride or potassium chloride, quercetin and 2- (3,4-dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy-3 (2H) -benzofuranone.
- partie B: contenant 20 ml d'eau ou de solution de bicarbonate de sodium ou de bicarbonate de potassium.  - Part B: containing 20 ml of water or solution of sodium bicarbonate or potassium bicarbonate.
L'invention est à présent illustrée par des exemples et essais démontrant l'efficacité de l'invention dans le traitement des rhinosinusites. The invention is now illustrated by examples and tests demonstrating the effectiveness of the invention in the treatment of rhinosinusitis.
EXEMPLES EXAMPLES
Exemple 1.  Example 1
Extraction de la pelure d'oignon.  Extraction of the onion peel.
40 g de pelure d'oignon broyée a été mélangé avec 2L d'eau froide; amené à bouillir, et laissé frémir pendant 30 min à température d'ébullition. Le liquide obtenu est refroidi, filtré et lyophilisé. 5 g d'extrait sec sont obtenus. Extraction à l'éthanol. 40g ground onion peel was mixed with 2L cold water; boiled, and allowed to simmer for 30 minutes at boiling temperature. The resulting liquid is cooled, filtered and lyophilized. 5 g of dry extract are obtained. Ethanol extraction.
200 g de pelure d'oignon a été extrait par 6L d'un mélange éthanol/eau en proportion 70/30 (v/v) pendant 24 heures à température ambiante sous agitation. La solution obtenue est filtrée, puis évaporée à sec. 25,5 g d'extrait sec sont obtenus.  200 g of onion peel was extracted with 6L of an ethanol / water mixture in proportion 70/30 (v / v) for 24 hours at room temperature with stirring. The solution obtained is filtered and then evaporated to dryness. 25.5 g of dry extract are obtained.
Les analyses qualitatives et quantitatives des deux extraits ont été réalisées par les techniques de UPLC-DAD-MS (Agilent technologies, USA). Les conditions d'élution sont les suivantes: 1 pL de solution est injecté dans la colonne Agilent C18 (2,1 mm, 1,8 pm) de UPLC à la température de 25 °C. Les solvants utilisés sont: Solvant A: H20/HCOOH 0,1% et Solvant B: ACN/HCOOH 0,1%. Le débit: 0,4 mL/min. Les composés isolés sont détectés dans un premier temps par le détecteur à barrette de diode, puis par l'analyseur de Spectrométrie de Masse. Les analyses de Spectrométrie de Masse ont été réalisées en modes négatif et positif. The qualitative and quantitative analyzes of the two extracts were performed by UPLC-DAD-MS techniques (Agilent Technologies, USA). The elution conditions are as follows: 1 μL of solution is injected into the Agilent C18 column (2.1 mm, 1.8 μm) of UPLC at a temperature of 25 ° C. The solvents used are: Solvent A: H 2 O / 0.1% HCOOH and Solvent B: ACN / 0.1% HCOOH. Flow rate: 0.4 mL / min. The isolated compounds are first detected by the diode array detector and then by the mass spectrometry analyzer. Mass spectrometry analyzes were performed in negative and positive modes.
Les spectres de LC-MAS sont acquis en «Full Scan», sur l'ensemble de la gamme des masses (m/z) allant de 100 à 1400. L'ensemble des données est ensuite collecté et traité par le logiciel Hystar version 3.0. The spectra of LC-MAS are acquired in "Full Scan" over the entire mass range (m / z) ranging from 100 to 1400. The data set is then collected and processed by the Hystar software version 3.0 .
Les résultats des analyses qualitatives et quantitatives des extraits alcoolique et à l'eau obtenus à partir de pelure d'oignon sont présentés dans les Tableaux 1 et 2. The results of qualitative and quantitative analyzes of the alcoholic and water extracts obtained from onion peel are presented in Tables 1 and 2.
Tableau 1. Caractéristiques qualitatives et quantitatives de l'extrait à l'eau de pelure d'oignon Table 1. Qualitative and Quantitative Characteristics of Onion Peel Water Extract
Tableau 2. Caractéristiques qualitatives et quantitatives de l'extrait alcoolique de pelure d'oignon. Table 2. Qualitative and quantitative characteristics of alcoholic extract of onion peel.
Exemple 2. Example 2
Isolation des composés purs.  Isolation of pure compounds.
L'extrait brut alcoolique a été séparé par la technique de HPLC.  The alcoholic crude extract was separated by the HPLC technique.
50 mg à 200 mg d’extrait brut sont injectés dans une colonne Phenomenex C18 (21,2 mm x 150 mm, 5 pm, 100 A) de l'appareil HPLC. Les solvants utilisés sont: Solvant A: H20/TFA 0,5% (1 L/ 5 mL); Solvant B: ACN. Le débit est: 15 mL/min. 50 mg to 200 mg of crude extract are injected into a Phenomenex C18 column (21.2 mm x 150 mm, 5 μm, 100 A) of the HPLC apparatus. The solvents used are: Solvent A: H 2 O / 0.5% TFA (1 L / 5 mL); Solvent B: ACN. The flow rate is: 15 mL / min.
Trois composés majeurs ont été isolés: Three major compounds have been isolated:
1. acide protocatéchique (pureté - 98,6%), 92,5 mg;  1. protocatechic acid (purity - 98.6%), 92.5 mg;
2. quercétine (pureté - 98,9%) 295 mg;  2. quercetin (purity - 98.9%) 295 mg;
3. quercétine-4'-glucoside (pureté - 96,5%), 143 mg.  3. quercetin-4'-glucoside (purity - 96.5%), 143 mg.
Procédés pour préparer les compositions. Processes for preparing the compositions
1.  1.
40 mg de quercétine et 3 g de NaCI ont été mélangés avec 150 mL d'eau bouillante. Puis, la solution a été refroidie, congelée et lyophilisée. La poudre obtenue a été distribuée par 197,6 mg dans des conteneurs unidoses dans des conditions stériles.  40 mg of quercetin and 3 g of NaCl were mixed with 150 mL of boiling water. Then, the solution was cooled, frozen and lyophilized. The powder obtained was dispensed in 197.6 mg in single-dose containers under sterile conditions.
2. 2.
40 mg de quercétine ont été mélangés avec 150 mL d'eau bouillante. Puis, la solution a été refroidie, et 3 g de NaCI ont été ajoutés et dissouts. La solution obtenue a été congelée et lyophilisée. La poudre obtenue a été distribuée par 197,6 mg dans des conteneurs unidoses dans des conditions stériles.  Quercetin 40 mg was mixed with 150 mL of boiling water. Then, the solution was cooled, and 3 g of NaCl was added and dissolved. The resulting solution was frozen and lyophilized. The powder obtained was dispensed in 197.6 mg in single-dose containers under sterile conditions.
3. 3.
50 mg de quercétine ont été dissouts dans 50 mL de MeOH/H20 (50/50:v/v). 3,75 g de NaCI ont été dissouts dans 150 mL de H20. Les deux solutions ont été mélangées à température ambiante, puis congelées et lyophilisées. La poudre obtenue a été distribuée par 200 mg dans des conteneurs unidoses dans des conditions stériles. 50 mg quercetin was dissolved in 50 mL MeOH / H 2 O (50/50: v / v). 3.75 g of NaCl were dissolved in 150 ml of H 2 O. The two solutions were mixed at room temperature, then frozen and lyophilized. The resulting powder was dispensed by 200 mg in single-dose containers under sterile conditions.
4. 4.
40 mg de quercétine ont été mélangés avec 3 g de NaCI. La poudre obtenue a été distribuée par 200 mg dans des conteneurs unidoses dans des conditions stériles.  40 mg quercetin was mixed with 3 g NaCl. The resulting powder was dispensed by 200 mg in single-dose containers under sterile conditions.
Exemple 3. Example 3
Préparation des solvants.  Preparation of solvents
Trois différents solvants ont été préparés:  Three different solvents were prepared:
1. 0,625 g de NaCI a été dissout dans 250 mL d'eau distillée. La solution obtenue a été stérilisée par filtration à travers un filtre dont le diamètre des pores était de 0,22 pm et distribuée dans des conteneurs unidoses dans des conditions stériles.  0.625 g of NaCl was dissolved in 250 ml of distilled water. The resulting solution was sterilized by filtration through a filter with a pore diameter of 0.22 μm and dispensed in single-dose containers under sterile conditions.
2. 0,625 g de NaHC03 a été dissout dans 250 mL d'eau distillée. La solution obtenue a été stérilisée par filtration à travers un filtre dont le diamètre des pores était de 0,22 pm et distribuée dans des conteneurs unidoses dans des conditions stériles. 2. 0.625 g of NaHCO 3 was dissolved in 250 ml of distilled water. The resulting solution was sterilized by filtration through a filter with a pore diameter of 0.22 μm and dispensed in single-dose containers under sterile conditions.
3. L'eau distillée a été distribuée dans des conteneurs unidoses dans des conditions stériles. 3. Distilled water was dispensed in single-dose containers under sterile conditions.
Formulations. Formulations.
En se basant sur les résultats expérimentaux décrits dans les exemples 1 et 2, les quantités initiales des ingrédients actifs dans 20 mL (le volume utilisé pour le traitement en une seule fois) de l'extrait à l'eau de pelure d'oignon ont été déterminées comme: extrait de pelure d'oignon - 10 mg/ 20 mL;  Based on the experimental results described in Examples 1 and 2, the initial amounts of the active ingredients in 20 mL (the volume used for the one-time treatment) of the onion peel water extract were were determined as: onion peel extract - 10 mg / 20 mL;
quercétine - 0,485 mg/ 20 mL; quercetin - 0.485 mg / 20 mL;
quercétine-4'- glucoside - 0,283 mg/ 20 mL; acide protocatéchique - 0,722 mg/ 20 mL. quercetin-4'-glucoside - 0.283 mg / 20 mL; protocatechic acid - 0.722 mg / 20 mL.
Différentes compositions pharmaceutiques ont été formulées à base d'eau, NaCI ou NaCI+NaHC03 et des agents actifs (extrait de pelure d'oignon, quercétine, 2-(3,4-dihydroxybenzoyl)-2,4,6- trihydroxy-3(2H)-benzofuranone, quercétine-4'-glucoside ou acide protocatéchique). Various pharmaceutical compositions have been formulated based on water, NaCl or NaCl + NaHCO 3 and active agents (onion peel extract, quercetin, 2- (3,4-dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy- 3 (2H) -benzofuranone, quercetin-4'-glucoside or protocatechic acid).
Les caractéristiques qualitative et quantitative de quercétine utilisée pour cette expérimentation sont les suivantes: The qualitative and quantitative characteristics of Quercetin used for this experiment are as follows:
quercétine - 98% quercetin - 98%
2-(3,4-dihydroxybenzoyl)-2,4,6-trihydroxy-3(2H)-benzofuranone - 0,5%  2- (3,4-dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy-3 (2H) -benzofuranone - 0.5%
quercétine-4'-glucoside - 0,1%. Quercetin-4'-glucoside - 0.1%.
RÉSULTATS D'ESSAIS DÉMONTRANT D'EFFICACITE DE L'INVENTION TEST RESULTS DEMONSTRATING EFFECTIVENESS OF THE INVENTION
Traitement de la rhinosinusite. Treatment of rhinosinusitis.
Matériels et méthodes.  Materials and methods.
Conception de l'étude.  Design of the study.
42 lapins mâles ont été utilisés dans cette étude. Les animaux ont été séparés en sept groupes, chacun contenant six lapins. Le 1er groupe a servi comme contrôle non traité, le 2nd groupe a été traité avec une solution de 0,9% NaCI, et cinq groupes expérimentaux ont été utilisés pour tester les différentes formulations: extrait de pelure d’oignon, quercétine+2-(3,4-dihydroxybenzoyl)- 2,4,6-trihydroxy-3(2H)-benzofuranone, quercétine, quercétine-4'-glucoside et l'acide protocatéchique.  42 male rabbits were used in this study. The animals were separated into seven groups, each containing six rabbits. The first group served as an untreated control, the 2nd group was treated with a 0.9% NaCl solution, and five experimental groups were used to test the different formulations: onion peel extract, quercetin + 2- (3,4-dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy-3 (2H) -benzofuranone, quercetin, quercetin-4'-glucoside and protocatechic acid.
Induction de la rhinosinusite. Induction of rhinosinusitis.
La rhinosinusite a été induite par l'introduction de 100 pL de 1% lipopolysaccharide (LPS) dans chaque narine des lapins pendant trois jours.  Rhinosinusitis was induced by the introduction of 100 μL of 1% lipopolysaccharide (LPS) into each nostril of rabbits for three days.
Composés. Compounds.
Les composés ont été utilisés en concentrations suivants : l'extrait à l’eau de pelure d'oignon - 1 mg/mL ; The compounds have been used in the following concentrations: onion peel water extract - 1 mg / mL;
la mélange de la quercétine - 0,009 mg/mL et de 2-(3,4-dihydroxybenzoyl)-2,4,6-trihydroxy-the mixture of quercetin - 0.009 mg / mL and 2- (3,4-dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy-
3(2H)-benzofuranone - 0,001 mg/mL ; 3 (2H) -benzofuranone - 0.001 mg / mL;
quercetine - 0,01 mg/mL quercetin - 0.01 mg / mL
quercétine-4'-glucoside - 0,25 mg/mL ; quercetin-4'-glucoside - 0.25 mg / mL;
l’acide protocatéchique - 0,25 mg/mL ; protocatechic acid - 0.25 mg / mL;
Les composés ont été dilués dans les solutions de 0,9 - 1 % de chlorure de sodium ou dans la solution de 0,75 % NaCI+0,25%NaHCO3 chauffées à 37 °C avant l'administration. A l'exception de la mélange de quercétine+2-(3,4-dihydroxybenzoyl)-2,4,6-trihydroxy-3(2H)-benzofuranone, qui est une suspension, les composés ont formé des solutions colorées faiblement opalescentes. The compounds were diluted in solutions of 0.9-1% sodium chloride or 0.75% NaCl + 0.25% NaHCO3 solution heated to 37 ° C prior to administration. With the exception of quercetin + 2- (3,4-dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy-3 (2H) -benzofuranone, which is a suspension, the compounds formed low opalescent color solutions.
Régime de traitement. Treatment regime.
Les solutions ont été administrées par voie intranasale à la dose de 2 mL dans chaque cavité nasale, une fois par jour pendant sept jours. Afin d'obtenir un contact maximal des produits testés avec la surface de la cavité nasale, les lapins ont été maintenus en position « tête vers le bas » pendant l'administration.  The solutions were administered intranasally at a dose of 2 mL in each nasal cavity once a day for seven days. In order to achieve maximum contact of the tested products with the surface of the nasal cavity, the rabbits were kept in the "head down" position during administration.
L'examen après le traitement. The examination after the treatment.
Le jour suivant le dernier traitement, les animaux ont été sacrifiés par surdosage des anesthésiques généraux : Zoletil (Virbac, France) et Rometar (Bioveta, République Tchèque). The day after the last treatment, the animals were sacrificed by overdose of general anesthetics: Zoletil (Virbac, France) and Rometar (Bioveta, Czech Republic).
Les cavités nasales des animaux ont été soumises à l'examen visuel immédiatement après l'euthanasie. The nasal cavities of the animals were visually examined immediately after euthanasia.
Après l'examen macroscopique, les parties nasales des têtes des lapins ont été fixées dans la solution de 10% formaldéhyde pendant 24 heures, puis ont été dé-calcinées pendant 14 jours dans la solution d'acide hydrochlorique/eau (25:1). Puis, les nez des animaux ont été sectionnés transversalement sur quatre niveaux: A - au niveau des dents incisives, B - au niveau postérieur des incisives, C - au niveau de la seconde crête de l’os palatin, et D - au niveau des premières prémolaires. Ensuite, les tissus ont été nettoyés à l'eau pendant 12 heures et incorporés dans la cire de paraffine par la méthode conventionnelle. Les sections histologiques d'épaisseur de 3 - 5 pm ont été préparées à l'aide de microtome. Pour examiner les cellules caliciformes et leur contenu glucosamine, les sections de tissus ont été colorées par alcian bleu à pH 2,5. Par la suite, certaines sections des tissus ont été re-colorées avec de l’hematoxylin-eosin pour les examens histologiques consécutifs. After the macroscopic examination, the nasal parts of the rabbit heads were fixed in the 10% formaldehyde solution for 24 hours and then de-calcined for 14 days in the hydrochloric acid / water solution (25: 1). . Then, the animals' noses were sectioned transversely on four levels: A - at the incisor teeth, B - at the posterior incisors, C - at the second crest of the palatal bone, and D - at the level of the teeth. first premolars. Then, the tissues were cleaned with water for 12 hours and incorporated into the paraffin wax by the conventional method. The histological sections with a thickness of 3-5 μm were prepared using a microtome. To examine the goblet cells and their glucosamine content, the tissue sections were stained with blue alcian at pH 2.5. Subsequently, some tissue sections were re-stained with hematoxylin-eosin for subsequent histological examinations.
L'étude morphologique des préparations histologiques a été effectuée à l'aide de microscope optique CarIZeissAxioScopeAl (Allemagne) à des grossissements de 25X, 50X, 100X, 200X et 400X. La microphotographie des échantillons a été réalisée à l'aide de la caméra digitale AxioCamICc 1 et du logiciel AxioVisionRel.4.8 (Allemagne). Les mesures morphométriques ont été réalisées à l'aide du logiciel AxioVisionRel.4.8 (Allemagne).  The morphological study of the histological preparations was carried out using CarIZeissAxioScopeAl (Germany) optical microscope at 25X, 50X, 100X, 200X and 400X magnifications. The microphotography of the samples was carried out using the AxioCamICc digital camera 1 and the AxioVisionRel.4.8 software (Germany). Morphometric measurements were performed using the AxioVisionRel.4.8 software (Germany).
Le nombre de cellules caliciformes a été compté dans 1 mm de la zone respiratoire de l'épithélium. L'apparence, la sévérité de la rhinosinusite catarrhale aiguë, de la rhinosinusite purulente aiguë et de l'occurrence de l’hyperplasie post-inflammatoire des cellules caliciformes ont été évaluées par l'évaluation du degré des lésions inflammatoires dans différentes zones: vestibule, les régions respiratoires et olfactives, et les sinus para-nasaux.  The number of goblet cells was counted in 1 mm of the respiratory zone of the epithelium. The appearance, severity of acute catarrhal rhinosinusitis, acute purulent rhinosinusitis and the occurrence of post-inflammatory goblet cell hyperplasia were assessed by assessing the degree of inflammatory lesions in different areas: vestibule, the respiratory and olfactory regions, and the paranasal sinuses.
Le degré de desquamation épithéliale et des lésions des glandes mucociliaires a été évalué sur une échelle de 0 à 3, ou:  The degree of epithelial desquamation and lesions of the mucociliary glands was evaluated on a scale of 0 to 3, or:
0 - absence de lésion;  0 - no lesion;
1 - faible lésion;  1 - weak lesion;
2 - lésion modérée;  2 - moderate lesion;
3 - lésions fortes.  3 - strong lesions.
Le degré d'infiltration leucocytaire et mononucléaire a été évalué sur une échelle de 0 à 3, ou: The degree of leukocyte and mononuclear infiltration was evaluated on a scale of 0 to 3, or:
0 - les cellules absentes;  0 - the absent cells;
1 - le nombre des cellules mononucléaires présentes dans la zone d'examen est entre 1 et 5;  1 - the number of mononuclear cells present in the examination zone is between 1 and 5;
2 - le nombre des cellules mononucléaires présentes dans la zone d'examen est entre 6 et 10; 3 - le nombre des cellules mononucléaires présentes dans la zone d'examen est supérieur à 10. 2 - the number of mononuclear cells present in the examination zone is between 6 and 10; 3 - the number of mononuclear cells present in the examination zone is greater than 10.
Analyses statistiques. Statistical analyzes.
Toutes les données ont été analysées à l'aide de la statistique descriptive. La normalité de la distribution des données a été vérifiée par le test de Shapiro-Wilks. En cas de distribution normale des données, la moyenne et l'erreur standard de la moyenne ont été calculées et présentées ensemble en tableau avec n (nombre de valeurs). Dans le cas où les données ne correspondent pas aux critères de normalité, la médiane et les 1er et 3eme interquartiles ont été calculés. Les différences entre les groupes ont été analysées par les tests paramétriques ou non- paramétriques, en fonction du type de distribution. L'analyse des données qui suivent la distribution normale a été réalisée par le test de dispersion unifactorielle (ANOVA), puis l'analyse post-hoc supplémentaire a été effectuée par la méthode de Tukey. Les données qui ne suivent pas la distribution normale ont été analysées par le test non paramétrique de Kruskal-Wallis, et les différences entre les groupes ont été analysées par le test de Mann-Whitney. La différence a été déterminée à un niveau significatif de 0,05.  All data were analyzed using descriptive statistics. The normality of the data distribution was verified by the Shapiro-Wilks test. In case of normal data distribution, the mean and standard error of the mean were calculated and presented together in a table with n (number of values). In the case where the data do not correspond to the normality criteria, the median and the 1st and 3rd interquartiles were calculated. The differences between the groups were analyzed by parametric or non-parametric tests, depending on the type of distribution. The analysis of the data following the normal distribution was performed by the single-factor dispersion test (ANOVA), then the additional post-hoc analysis was performed by the Tukey method. Data that did not follow the normal distribution were analyzed by the nonparametric Kruskal-Wallis test, and the differences between the groups were analyzed by the Mann-Whitney test. The difference was determined at a significant level of 0.05.
Les analyses statistiques ont été réalisées à l'aide du logiciel Statistica 10.0 (StatSoftlnc, USA).  Statistical analyzes were performed using the Statistica 10.0 software (StatSoftlnc, USA).
Résultats. Results.
Les résultats de l'examen visuel.  The results of the visual examination.
Tous les groupes de lapins ont présenté les mêmes signes de rhinite après la première administration de LPS : éternuement et éraflures de nez, qui correspondent au premier signe de la rhinosinusite. Le troisième jour d'administration, le LPS a déclenché une congestion nasale et un oedème de la membrane muqueuse dans des zones visibles de la cavité nasale. Après la première administration des composés sous étude, un oedème et un écoulement nasal ont été observés. Aux 9ème et lOème jours d'étude, les cas rares (1 parmi 6) de sécheresse de la cavité nasale et d’éternuement sans écoulement ont été observés dans les groupes traités. Les résultats de l'examen histologique. All groups of rabbits showed the same signs of rhinitis after the first administration of LPS: sneezing and scratching of the nose, which is the first sign of rhinosinusitis. On the third day of administration, LPS triggered nasal congestion and edema of the mucous membrane in visible areas of the nasal cavity. After the first administration of the compounds under study, edema and nasal discharge were observed. On the 9th and 10th days of study, rare cases (1 out of 6) of dryness of the nasal cavity and sneezing without discharge were observed in the treated groups. The results of the histological examination.
La membrane muqueuse du vestibule nasal a présenté la structure histologique typique, représentée par un épithélium squameux stratifié, progressivement transformé en épithélium simple respiratoire.  The mucous membrane of the nasal vestibule presented the typical histological structure, represented by a stratified squamous epithelium, gradually transformed into single respiratory epithelium.
Le nez intérieur a été tapissé par deux types de membranes muqueuses correspondant aux régions respiratoire et olfactive. La muqueuse de la région respiratoire a été constituée de l'épithélium pseudo-stratifié prismatique cilié, de la membrane basale et du tissu conjonctif lâche sous-jacent. L'épithélium de la région respiratoire a été composé des épithéliocytes ciliés, des cellules basales et des cellules caliciformes. La coloration histochimique avec l'alcian bleu a révélé la présence de vésicules larges contenant des glucosamines dans la plupart des cellules caliciformes, qui se réfère à l'activité fonctionnelle accrue de ces cellules. Les nombreuses glandes séro-mucineuses ont été observées dans la membrane basale. The inner nose was lined by two types of mucous membranes corresponding to the respiratory and olfactory regions. The mucosa of the respiratory tract consisted of ciliated prismatic pseudo-stratified epithelium, basement membrane, and underlying loose connective tissue. The epithelium of the respiratory tract was composed of ciliated epitheliocytes, basal cells and goblet cells. Histochemical staining with the blue alcian revealed the presence of large vesicles containing glucosamines in most goblet cells, which refers to the increased functional activity of these cells. The numerous sero-mucinous glands have been observed in the basement membrane.
La région olfactive a été localisée sur les zones dorsales des cornets et sur le toit de la cavité nasale. L'épithélium olfactif a été constitué des cellules de soutien, des cellules olfactives et des cellules basales.  The olfactory region was located on the dorsal areas of the horns and on the roof of the nasal cavity. The olfactory epithelium consisted of support cells, olfactory cells and basal cells.
Le Tableau 3 présente les données morphométriques de la muqueuse nasale. Table 3 presents the morphometric data of the nasal mucosa.
Tableau 3. Résultats de l'étude morphométrique des cellules caliciformes (M±m, n=6). Table 3. Results of the morphometric study of goblet cells (M ± m, n = 6).
* - Différence statistiquement significative, p < 0,05; test de Tukey.  * - Statistically significant difference, p <0.05; Tukey test.
Les données primaires ont suivi le critère de distribution normale. L'analyse faite par le test de dispersion unifactorielle (ANOVA) et l'analyse post-hoc supplémentaire effectuée par la méthode de Tukey ont révélé les différences suivantes (Tableau 3): réduction de la proportion de cellules positives à la coloration par l'alcian par rapport au nombre total de cellules caliciformes chez les lapins, après administration de l’extrait de pelure d’oignon et de quercétine+2-(3,4- dihydroxybenzoyl)-2,4,6-trihydroxy-3(2H)-benzofuranone en comparaison avec le contrôle. Augmentation du nombre de cellules caliciformes dans 1 mm d'épithélium chez les lapins, après administration de quercétine-4'-glucoside en comparaison avec le contrôle. Tableau 4. Morphométrie et degré d'inflammation. Évaluation en échelle (0 - 3) n=6. Primary data followed the normal distribution criterion. The analysis performed by the uniforal dispersion test (ANOVA) and the additional post-hoc analysis carried out by the Tukey method revealed the following differences (Table 3): reduction of the proportion of cells positive for staining by the alcian relative to total number of goblet cells in rabbits after administration of onion peel extract and quercetin + 2- (3,4-dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy-3 (2H) -benzofuranone in comparison with the control. Increased number of goblet cells in 1 mm epithelium in rabbits after administration of quercetin-4'-glucoside in comparison with control. Table 4. Morphometry and degree of inflammation. Evaluation in scale (0 - 3) n = 6.
* - Différence statistiquement significative, p < 0,05; test de Mann-Whitney. * - Statistically significant difference, p <0.05; Mann-Whitney test.
Tableau 5. Résultats de l'étude de l'inflammation sino-nasale de lapins. Table 5. Results of the study of sino-nasal inflammation of rabbits.
L'analyse non-paramétrique du degré de l'inflammation pathologique sur l'échelle allant de 0 à 3, en utilisant les tests de Kruskal-Wallis et de Mann-Whitney, a permis de révéler les différences suivantes entre les groupes: The non-parametric analysis of the degree of pathological inflammation on the scale from 0 to 3, using the Kruskal-Wallis and Mann-Whitney tests, revealed the following differences between the groups:
- dans les groupes recevant l’extrait de pelure d’oignon, la quercétine+ 2-(3,4-dihydroxybenzoyl)- 2,4,6-trihydroxy-3(2H)-benzofuranone et l’acide protocatéchique, l’infiltration des cellules leucocytaires dans la membrane muqueuse a été plus faible que dans le groupe contrôle;  in groups receiving onion peel extract, quercetin + 2- (3,4-dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy-3 (2H) -benzofuranone and protocatechic acid, the infiltration of leukocyte cells in the mucous membrane was lower than in the control group;
- la desquamation épithéliale n'a pas été détectée dans le groupe recevant la quercétine + 2-(3,4- dihydroxybenzoyl)-2,4,6-trihydroxy-3(2H)-benzofuranone et la quercétine-4'-glucoside;  epithelial desquamation was not detected in the group receiving quercetin + 2- (3,4-dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy-3 (2H) -benzofuranone and quercetin-4'-glucoside;
- le degré de la lésion inflammatoire dans la région respiratoire a été faible de façon significative dans le groupe recevant l’extrait de pelure d’oignon;  the degree of inflammatory injury in the respiratory tract was significantly low in the group receiving the onion peel extract;
- pas de signe d'hyperplasie post-inflammatoire des cellules caliciformes et de rhinosinusite purulente aiguë dans le groupe recevant la quercétine;  no sign of post-inflammatory hyperplasia of goblet cells and acute purulent rhinosinusitis in the group receiving quercetin;
- la fréquence de la rhinosinusite catarrhale aiguë a été plus faible dans le groupe recevant la quercétine + 2-(3,4-dihydroxybenzoyl)-2,4,6-trihydroxy-3(2H)-benzofuranone et l’extrait de pelure d’oignon;  - the frequency of acute catarrhal rhinosinusitis was lower in the group receiving quercetin + 2- (3,4-dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy-3 (2H) -benzofuranone and the peel extract. 'onion;
- pas de différence observée parmi les groupes contrôle et traités dans la survenue de la rhinosinusite purulente aiguë.  - no difference observed among the control and treated groups in the occurrence of acute purulent rhinosinusitis.
Toutes les cellules caliciformes contiennent des mucopolysaccharides qui sont colorés par alcian bleu. Le nombre de cellules caliciformes est augmenté pendant l'inflammation et doit diminuer après le traitement. À partir des données obtenues, on peut conclure que la proportion de ces cellules a drastiquement augmenté, après l'induction de l'inflammation. En général, ce processus est accompagné de l’infiltration de la muqueuse. S'il n y a pas d'infiltration, mais si le nombre de cellules caliciformes est élevé, cela est considérée comme une hyperplasie post-inflammatoire, qui est un signe d'amélioration. All goblet cells contain mucopolysaccharides that are stained by blue alcian. The number of goblet cells is increased during inflammation and should decrease after treatment. From the data obtained, it can be concluded that the proportion of these cells has increased drastically after the induction of inflammation. In general, this process is accompanied by infiltration of the mucosa. If there is no infiltration, but the number of goblet cells is high, this is considered post-inflammatory hyperplasia, which is a sign of improvement.
Groupe de contrôle. Aucun changement macroscopique n’a été observé dans le groupe de contrôle. Les examens microscopiques ont révélé que l'administration de LPS a déclenché une inflammation dans les zones respiratoire et olfactive. Dans la zone vestibulaire, un oedème et une infiltration leucocytaire dans la membrane muqueuse et le tissu sous-jacent ont été observés. Dans la zone respiratoire, la desquamation épithéliale et l'atrophie des glandes muqueuses ont été observées. La coloration avec l’alcian bleu a révélé les zones d'hyperplasie groupée des cellules caliciformes dans la région respiratoire. L'évaluation morphométrique de l'épithélium a montré l'augmentation significative des cellules caliciformes contenant les glucosamines et les mucopolysaccharides par rapport au nombre total de cellules caliciformes. Une infiltration modérée des lymphocytes et des macrophages dans la membrane muqueuse et le tissu sous-jacent a également été observée. Des changements inflammatoires modérés ont été observés dans l'organe voméronasal. Au total, suite à l'administration de LPS de l'agent pro-inflammatoire chez les lapins, nous avons observé la rhinosinusite catarrhale aiguë (Tableau 5). Control group. No macroscopic changes were observed in the control group. Microscopic examination revealed that administration of LPS triggered inflammation in the respiratory and olfactory areas. In the vestibular area, edema and leukocyte infiltration into the mucous membrane and underlying tissue were observed. In the respiratory tract, epithelial desquamation and atrophy of the mucous glands have been observed. Staining with the blue alcian revealed areas of clustered hyperplasia of goblet cells in the respiratory tract. Morphometric evaluation of the epithelium showed significant increase in goblet cells containing glucosamines and mucopolysaccharides relative to the total number of goblet cells. Moderate infiltration of lymphocytes and macrophages into the mucous membrane and underlying tissue was also observed. Moderate inflammatory changes were observed in the vomeronasal organ. In total, following LPS administration of the pro-inflammatory agent in rabbits, acute catarrhal rhinosinusitis was observed (Table 5).
Les animaux du second groupe traité avec la solution de 0,9% sodium chlorure n'ont pas montré de signe de changement macroscopique pendant l'observation visuelle. Animals in the second group treated with 0.9% sodium chloride solution showed no sign of macroscopic change during visual observation.
Les études microscopiques ont révélé quelques signes de desquamation épithéliale dans les zones respiratoire et olfactive de la membrane muqueuse, une infiltration modérée ou significative des leucocytes, la présence d'exsudat avec quantité élevée de neutrophiles et de débris cellulaires. Le nombre de cellules positives à l’alcian bleu dans 1 mm d'épithélium, et le nombre de cellules caliciformes ont été plus faibles que ceux des animaux non-traités. Cela est dû à la nécrotisation de la membrane muqueuse et aux lésions inflammatoires de l'épithélium. En général, des signes de la rhinosinusite catarrhale aiguë et de la rhinosinusite purulente ont été observés dans ce groupe.  Microscopic studies revealed some evidence of epithelial desquamation in the respiratory and olfactory areas of the mucous membrane, moderate or significant leukocyte infiltration, the presence of exudate with high levels of neutrophils and cellular debris. The number of blue alcian-positive cells in 1 mm epithelium, and the number of goblet cells were lower than those of untreated animals. This is due to necrosis of the mucous membrane and inflammatory lesions of the epithelium. In general, signs of acute catarrhal rhinosinusitis and purulent rhinosinusitis have been observed in this group.
Les animaux des 3ème et 4ème groupes recevant l’extrait de pelure d’oignon et la quercétine+ 2- (3,4-dihydroxybenzoyl)-2,4,6-trihydroxy-3(2H)-benzofuranone n'ont pas montré les signes de la maladie pendant l'examen macroscopique. Animals on the 3rd and 4th groups receiving onion peel extract and quercetin + 2- (3,4-dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy-3 (2H) -benzofuranone did not show the signs of the disease during macroscopic examination.
L'examen microscopique a montré des signes très insignifiants d'inflammation comparé au groupe non traité. Nous avons observé une infiltration très faible des lymphocytes dans la membrane muqueuse et aucune cellule leucocytaire dans le tissu sous-jacent. Aucun signe de desquamation épithéliale n'a été observé dans les deux groupes. Des signes de régénération ont été observés dans les régions respiratoire et olfactive et dans des glandes muqueuses. Certains animaux ont présenté une hyperplasie post-inflammatoire de cellules caliciformes. Aucun cas de rhinosinusite purulente aiguë n'a été observé dans le groupe recevant la quercétine+2-(3,4-dihydroxybenzoyl)-Microscopic examination showed very insignificant signs of inflammation compared to the untreated group. We observed a very weak infiltration of lymphocytes into the membrane mucosa and no leukocyte cells in the underlying tissue. No evidence of epithelial desquamation was observed in either group. Signs of regeneration have been observed in the respiratory and olfactory regions and in mucous glands. Some animals showed post-inflammatory goblet cell hyperplasia. No cases of acute purulent rhinosinusitis were observed in the quercetin + 2- (3,4-dihydroxybenzoyl) group -
2.4.6-trihydroxy-3(2H)-benzofuranone. 2,4,6-trihydroxy-3 (2H) -benzofuranone.
Aucun changement extérieur n'a été observé chez les animaux des 5ème, 6ème et 7ème groupes recevant la quercétine, la quercétine-4'-glucoside et l’acide protocatéchique respectivement, pendant l'examen macroscopique. No external changes were observed in animals of the 5th, 6th and 7th groups receiving quercetin, quercetin-4'-glucoside and protocatechic acid respectively, during macroscopic examination.
L'examen microscopique a révélé des signes de processus inflammatoire, qui été plus fort que celui des animaux recevant l’extrait de pelure d’oignon et la quercétine+2-(3,4-dihydroxybenzoyl)- Microscopic examination revealed signs of an inflammatory process, which was stronger than that of animals receiving onion peel extract and quercetin + 2- (3,4-dihydroxybenzoyl) -
2.4.6-trihydroxy-3(2H)-benzofuranone, mais plus faible que celui des animaux non traités. Aucun cas de rhinosinusite purulente aiguë n’a été observé dans ces groupes. 2.4.6-trihydroxy-3 (2H) -benzofuranone, but lower than that of untreated animals. No cases of acute purulent rhinosinusitis were observed in these groups.
Conclusion. Conclusion.
Les résultats de l'examen histologique des animaux, après traitement avec l’extrait de pelure d’oignon et les composés isolés de cet extrait, ont révélé que l’extrait de pelure d’oignon et la quercétine+2-(3,4-dihydroxybenzoyl)-2,4,6-trihydroxy-3(2H)-benzofuranone ont montré le meilleur effet thérapeutique, comparé à celui des animaux non traités ou des animaux recevant le placebo. Le meilleur effet thérapeutique de l’extrait de pelure d’oignon pourrait être expliqué par la présence de plusieurs composés, chacun possédant plus ou moins un effet anti inflammatoire et probablement la capacité potentialisante. De manière inattendue, la quercétine+2-(3,4-dihydroxybenzoyl)-2,4,6-trihydroxy-3(2H)-benzofuranone a montré le meilleur effet thérapeutique, en comparaison avec celui de la quercétine. Cela pourrait être expliqué par deux raisons. La 1ère, par la présence de 2-(3,4-dihydroxybenzoyl)-2,4,6-trihydroxy-3(2H)- benzofuranone. La 2ème, la quercétine en forme de suspension pourrait avoir un effet de longue durée comparée à la quercétine en solution. La quercétine -4'-glucoside (CGA) et l’acide protocatéchique ont montré une activité modérée contre la rhinosinusite. En comparant les doses de chaque substance testée et l'effet thérapeutique obtenu, nous avons conclu que la quercétine en forme de suspension dans la solution de NaCI ou NaCI/NaHC03 pourrait être un médicament préféré pour le traitement des rhinosinusites aiguë et chronique. The results of the histological examination of the animals, after treatment with the onion peel extract and the compounds isolated from this extract, revealed that onion peel extract and quercetin + 2- (3,4 -dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy-3 (2H) -benzofuranone showed the best therapeutic effect, compared to untreated animals or animals receiving placebo. The best therapeutic effect of onion peel extract could be explained by the presence of several compounds, each with more or less anti-inflammatory effect and probably the potentiating capacity. Unexpectedly, quercetin + 2- (3,4-dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy-3 (2H) -benzofuranone showed the best therapeutic effect compared with that of quercetin. This could be explained by two reasons. 1st, by the presence of 2- (3,4-dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy-3 (2H) -benzofuranone. The second, quercetin-shaped suspension could have a long-lasting effect compared to quercetin in solution. Quercetin -4'-glucoside (CGA) and protocatechic acid showed moderate activity against rhinosinusitis. By comparing the doses of each test substance and the therapeutic effect obtained, we concluded that quercetin-like suspension in NaCl or NaCl / NaHCO 3 solution could be a preferred drug for the treatment of acute and chronic rhinosinusitis.

Claims

REVENDICATIONS
1. Composition pour rincer la cavité nasale et les cavités sinusiennes pour les traitements curatif ou prophylactique des rhinites aiguë et chronique et/ou des sinusites aiguë et chronique, comprenant : A composition for rinsing the nasal cavity and sinus cavities for curative or prophylactic treatments of acute and chronic rhinitis and / or acute and chronic sinusitis, comprising:
du chlorure de sodium et/ou du chlorure de potassium; de la quercétine, et au moins un agent actif du groupe polyphénolique choisi parmi les composés: quercétine-4'-glucoside, 2-(3,4-dihydroxybenzoyl)-2,4,6-trihydroxy-3(2H)-benzofuranone, acide protocatéchique; et dans laquelle la quercétine est sous forme anhydrique avec une masse moléculaire approximative de 302 g/mol, ou sous forme de quercétine hydrate avec une masse moléculaire approximative de 320 g/mol, ou sous forme de quercétine dihydrate avec une masse moléculaire approximative de 338 g/mol. sodium chloride and / or potassium chloride; quercetin, and at least one active agent of the polyphenolic group chosen from the compounds: quercetin-4'-glucoside, 2- (3,4-dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy-3 (2H) -benzofuranone, protocatechic acid; and wherein quercetin is in anhydrous form with an approximate molecular weight of 302 g / mol, or in the form of quercetin hydrates with an approximate molecular weight of 320 g / mol, or in the form of quercetin dihydrate with an approximate molecular weight of 338 g / mol.
2. Composition pour une utilisation selon la revendication 1, caractérisée en ce qu'elle comprend en outre des impuretés dérivées de la quercétine, choisi parmi: quercétine-3'- glucoside, quercétine-7'-glucoside, diglucosides et triglucosides de la quercétine, dimers de quercétine en quantité inférieure à 5% de la quantité totale des agents actifs.  2. Composition for a use according to claim 1, characterized in that it further comprises quercetin-derived impurities, chosen from quercetin-3'-glucoside, quercetin-7'-glucoside, diglucosides and quercetin triglucosides. Quercetin dimers in an amount of less than 5% of the total amount of the active agents.
3. Composition sèche pour une utilisation selon la revendication 1, comprenant Dry composition for use according to claim 1, comprising
94 - 99,99% en masse de chlorure de sodium et/ou chlorure de potassium, 0,000001 - 3% en masse de quercétine et 0,000001 - 3% en masse de 2-(3,4-dihydroxybenzoyl)-2,4,6-trihydroxy- 3(2H)-benzofuranone. 94 - 99.99% by weight of sodium chloride and / or potassium chloride, 0.000001 - 3% by weight of quercetin and 0.000001 - 3% by weight of 2- (3,4-dihydroxybenzoyl) -2 , 4,6-trihydroxy-3 (2H) -benzofuranone.
4. Composition sèche pour une utilisation selon la revendication 1, comprenant Dry composition for use according to claim 1, comprising
91 - 99,99% en masse de chlorure de sodium et/ou chlorure de potassium, 0,000001 - 3% en masse de quercétine, 0,000001 - 3% en masse de 2-(3,4-dihydroxybenzoyl)-2,4,6-trihydroxy- 3(2H)-benzofuranone et 0,000001 - 3% en masse de quercétine-4'-glucoside. 91 - 99.99% by weight of sodium chloride and / or potassium chloride, 0.000001 - 3% by weight of quercetin, 0.000001 - 3% by weight of 2- (3,4-dihydroxybenzoyl) -2 , 4,6-trihydroxy-3 (2H) -benzofuranone and 0.000001 - 3% by weight of quercetin-4'-glucoside.
5. Composition sèche pour une utilisation selon la revendication 1, comprenant Dry composition for use according to claim 1, comprising
91 - 99,77% en masse de chlorure de sodium et/ou chlorure de potassium, 0,23 - 3% en masse de quercétine, 0,000001 - 3% en masse de 2-(3,4-dihydroxybenzoyl)-2,4,6-trihydroxy-3(2H)- benzofuranone et 0,000001 - 3% en masse d'acide protocatéchique. 91 - 99.77% by weight of sodium chloride and / or potassium chloride, 0.23 - 3% by mass of quercetin, 0.000001 - 3% by weight of 2- (3,4-dihydroxybenzoyl) -2 , 4,6-trihydroxy-3 (2H) -benzofuranone and 0.000001 - 3% by weight of protocatechic acid.
6. Composition sèche pour une utilisation selon la revendication 2, comprenant 86 - 99,77% en masse de chlorure de sodium et/ou chlorure de potassium et de l'extrait des plantes contenant des flavonoides: 0,23 - 3% en masse de quercétine, 0,000001 - 3% en masse de quercétine-4'-glucoside et 0,000001 - 3% en masse d'acide protocatéchique, et des impuretés, dérivées de quercétine en quantité jusqu'à 5 % en masse totale des agents actifs. 6. Dry composition for use according to claim 2, comprising 86 - 99.77% by weight of sodium chloride and / or potassium chloride and of the extract of the plants containing flavonoids: 0.23 - 3% by weight of quercetin, 0.000001 - 3% by mass of quercetin-4'-glucoside and 0.000001 - 3% by weight of protocatechic acid, and impurities, derived from quercetin in an amount up to 5% by total mass of active agents.
7. Composition sèche pour une utilisation selon la revendication 2, comprenant 83 - 99,77% en masse de chlorure de sodium et/ou chlorure de potassium et de l'extrait des plantes contenant les flavonoides: 0,23 - 3% en masse de quercétine, 0,000001 - 3% en masse de quercétine-4'-glucoside, 0,000001 - 3% en masse de 2-(3,4-dihydroxybenzoyl)-2,4,6-trihydroxy- 3(2H)-benzofuranone et 0,000001 - 3% en masse d'acide protocatéchique, et des impuretés, dérivées de quercétine en quantité jusqu'à 5 % en masse totale des agents actifs.  7. Dry composition for use according to claim 2, comprising 83 - 99.77% by weight of sodium chloride and / or potassium chloride and of the extract of the plants containing the flavonoids: 0.23 - 3% by weight quercetin, 0.000001 - 3% by weight of quercetin-4'-glucoside, 0.000001 - 3% by weight of 2- (3,4-dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy-3 (2H) benzofuranone and 0.000001-3% by weight of protocatechic acid, and impurities derived from quercetin in an amount up to 5% by total weight of the active agents.
8. Composition liquide à base d'eau comprenant une composition sèche selon la revendication 3, dans laquelle la solution ou suspension comprend 0,4 - 2% en masse de chlorure de sodium et/ou chlorure de potassium, 0,00000001 - 0,03% en masse de quercétine et 0,00000001 - 0,03% en masse de 2-(3,4-dihydroxybenzoyl)-2,4,6-trihydroxy-3(2H)- benzofuranone.  A water-based liquid composition comprising a dry composition according to claim 3, wherein the solution or suspension comprises 0.4 - 2% by weight of sodium chloride and / or potassium chloride, 0.00000001-0, 03% by weight of quercetin and 0.00000001 - 0.03% by weight of 2- (3,4-dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy-3 (2H) -benzofuranone.
9. Composition liquide à base d'eau comprenant une composition sèche selon la revendication 4, dans laquelle la solution ou suspension comprend 0,4 - 2% en masse de chlorure de sodium et/ou chlorure de potassium, 0,00000001 - 0,03% en masse de quercétine, 0,00000001 - 0,03% en masse de 2-(3,4-dihydroxybenzoyl)-2,4,6-trihydroxy-3(2H)- benzofuranone et 0,00000001 - 0,03% en masse de quercétine-4'-glucoside.  A water-based liquid composition comprising a dry composition according to claim 4, wherein the solution or suspension comprises 0.4 - 2% by weight of sodium chloride and / or potassium chloride, 0.00000001-0, 03% by weight of quercetin, 0.00000001 - 0.03% by weight of 2- (3,4-dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy-3 (2H) -benzofuranone and 0.00000001 - 0.03 % by weight of quercetin-4'-glucoside.
10. Composition liquide à base d'eau comprenant une composition sèche selon la revendication 5, dans laquelle la solution ou suspension comprend 0,4 - 2% en masse de chlorure de sodium et/ou chlorure de potassium, 0,0023 - 0,03% en masse de quercétine, 0,00000001 - 0,03% en masse de 2-(3,4-dihydroxybenzoyl)-2,4,6-trihydroxy-3(2H)-enzofuranone et 0,00000001 - 0,03% en masse d'acide protocatéchique.  A water-based liquid composition comprising a dry composition according to claim 5, wherein the solution or suspension comprises 0.4 - 2% by weight of sodium chloride and / or potassium chloride, 0.0023-0, 03% by weight of quercetin, 0.00000001 - 0.03% by weight of 2- (3,4-dihydroxybenzoyl) -2,4,6-trihydroxy-3 (2H) -enzofuranone and 0.00000001 - 0.03 % by weight of protocatechic acid.
11. Composition liquide à base d'eau comprenant une composition sèche selon la revendication 6, dans laquelle la solution ou suspension comprend 0,4 - 2% en masse de chlorure de sodium et/ou chlorure de potassium, 0,0023 - 0,03% en masse de quercétine, 0,00000001 - 0,03% en masse de quercétine-4'-glucoside et 0,00000001 - 0,03% en masse d'acide protocatéchique, et des impuretés, dérivées de quercétine jusqu'à 0,5% en masse totale des agents actifs. A water-based liquid composition comprising a dry composition according to claim 6, wherein the solution or suspension comprises 0.4 - 2% by weight of sodium chloride and / or potassium chloride, 0.0023-0, 03% by mass of quercetin, 0.00000001 - 0.03% by mass of quercetin-4'-glucoside and 0.00000001 - 0.03% by weight of protocatechic acid, and impurities, derived from quercetin up to 0.5% by total mass active agents.
12. Composition liquide à base d'eau comprenant une composition sèche selon la revendication 7, dans laquelle la solution ou suspension comprend 0,4 - 2% en masse de chlorure de sodium et/ou chlorure de potassium, 0,0023 - 0,03% en masse de quercétine, 0,00000001 - 0,03% en masse de quercétine-4'-glucoside, 0,00000001 - 0,03% en masse de 2- (3,4-dihydroxybenzoyl)-2,4,6-trihydroxy-3(2H)-benzofuranone et 0,00000001 - 0,03% en masse d'acide protocatéchique et des impuretés, dérivées de quercétine jusqu'à 0,5% en masse totale des agents actifs.  A water-based liquid composition comprising a dry composition according to claim 7, wherein the solution or suspension comprises 0.4 - 2% by weight of sodium chloride and / or potassium chloride, 0.0023-0, 03% by mass of quercetin, 0.00000001 - 0.03% by weight of quercetin-4'-glucoside, 0.00000001 - 0.03% by weight of 2- (3,4-dihydroxybenzoyl) -2,4, 6-trihydroxy-3 (2H) -benzofuranone and 0.00000001 - 0.03% by weight of protocatechic acid and impurities derived from quercetin up to 0.5% by total weight of the active agents.
13. Composition liquide selon l'une quelconque des revendications 8 à 12, dans laquelle la solution ou suspension contient en outre jusqu'à 0,5% en masse de bicarbonate de sodium ou de bicarbonate de potassium ou un mélange des deux.  The liquid composition according to any one of claims 8 to 12, wherein the solution or suspension further contains up to 0.5% by weight of sodium bicarbonate or potassium bicarbonate or a mixture of both.
14. Composition liquide selon l'une quelconque des revendications 8 à 13, qui comprend en outre un ou plusieurs ingrédients thérapeutiques choisis parmi les antibiotiques, les corticostéroïdes et/ou les sels de cuivre, de manganèse et de soufre, les huiles essentielles et les excipients choisis parmi les supports pharmaceutiques, stabilisants, surfactants, conservateurs.  The liquid composition according to any one of claims 8 to 13, which further comprises one or more therapeutic ingredients selected from antibiotics, corticosteroids and / or salts of copper, manganese and sulfur, essential oils and the like. excipients selected from pharmaceutical carriers, stabilizers, surfactants, preservatives.
15. Composition liquide selon l'une des revendications 8 à 13, pour une utilisation dans les traitements curatif ou prophylactique des rhinites aiguë et chronique et/ou des sinusites aiguë et chronique.  15. Liquid composition according to one of claims 8 to 13 for use in the curative or prophylactic treatment of acute and chronic rhinitis and / or acute and chronic sinusitis.
16. Procédé de préparation de compositions sèches selon l'une quelconque des revendications 1 à 7, comprenant:  16. Process for the preparation of dry compositions according to any one of Claims 1 to 7, comprising:
a). La dissolution du ou des agents actifs et de chlorure de sodium ou chlorure de potassium dans l'eau chauffée jusqu'à 80 - 100 °C. Puis, refroidissement de la solution, suivi de congélation et lyophilisation; ou at). The dissolution of the active agent (s) and sodium chloride or potassium chloride in water heated to 80 - 100 ° C. Then cooling of the solution followed by freezing and lyophilization; or
b). La dissolution du ou des agents actifs dans l'eau chauffée jusqu'à 80 - 100 °C. Puis, refroidissement de la solution, ajout de chlorure de sodium ou chlorure de potassium, suivi de congélation et lyophilisation; ou c). Le ou les agents actifs sont dissouts dans un solvant organique, préférablement dans de l'éthanol ou du méthanol dilué avec de l'eau. La proportion solvant organique/eau étant comprise entre 50/50 et 90/10. Le chlorure de sodium ou le chlorure de potassium est dissout dans l'eau. Les deux solutions sont mélangées à température ambiante, puis congelées et lyophilisées; ou d). La poudre de ou des agents actifs est mélangée avec du chlorure de sodium ou chlorure de potassium. b). The dissolution of the active agent (s) in the heated water up to 80 - 100 ° C. Then cooling the solution, adding sodium chloride or potassium chloride, followed by freezing and lyophilization; or c). The active agent (s) are dissolved in an organic solvent, preferably in ethanol or methanol diluted with water. The organic solvent / water ratio being between 50/50 and 90/10. Sodium chloride or potassium chloride is dissolved in water. Both solutions are mixed at room temperature, then frozen and lyophilized; or d). The powder of active agents is mixed with sodium chloride or potassium chloride.
17. Procédé de préparation de compositions sèches selon la revendication 16, caractérisé en ce que le ou les agents actifs sont issus d'un extrait qui est préparé en utilisant une pelure d'oignon broyée, qui est mélangée avec de l'eau froide en proportion 0,1-2 g / 50 mL; amené à bouillir, et on laisse frémir pendant 30 min à température d'ébullition. Le liquide est refroidi, filtré et lyophilisé.  17. Process for the preparation of dry compositions according to claim 16, characterized in that the active agent (s) is (are) derived from an extract which is prepared using ground onion peel, which is mixed with cold water in proportion 0.1-2 g / 50 mL; boiled, and allowed to simmer for 30 minutes at boiling temperature. The liquid is cooled, filtered and lyophilized.
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