EP1587508A1 - Therapeutic use of acylglycerols and the nitrogen- and sulphur-containing analogues thereof - Google Patents

Therapeutic use of acylglycerols and the nitrogen- and sulphur-containing analogues thereof

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EP1587508A1
EP1587508A1 EP04707252A EP04707252A EP1587508A1 EP 1587508 A1 EP1587508 A1 EP 1587508A1 EP 04707252 A EP04707252 A EP 04707252A EP 04707252 A EP04707252 A EP 04707252A EP 1587508 A1 EP1587508 A1 EP 1587508A1
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EP
European Patent Office
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group
use according
compound
carbon atoms
groups
Prior art date
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Withdrawn
Application number
EP04707252A
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German (de)
French (fr)
Inventor
Raphael Darteil
Karine Caumont-Bertrand
Jamila Najib
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Genfit SA
Original Assignee
Genfit SA
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Filing date
Publication date
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Withdrawn legal-status Critical Current

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    • A61K31/045—Hydroxy compounds, e.g. alcohols; Salts thereof, e.g. alcoholates
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    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C323/00—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups
    • C07C323/50—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups containing thio groups and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton
    • C07C323/51—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups containing thio groups and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton having the sulfur atoms of the thio groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton
    • C07C323/52—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups containing thio groups and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton having the sulfur atoms of the thio groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton the carbon skeleton being acyclic and saturated
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C327/00—Thiocarboxylic acids
    • C07C327/20—Esters of monothiocarboxylic acids
    • C07C327/28—Esters of monothiocarboxylic acids having sulfur atoms of esterified thiocarboxyl groups bound to carbon atoms of hydrocarbon radicals substituted by singly-bound oxygen atoms

Definitions

  • the present invention relates to the use of acylglycerols and their nitrogen and sulfur analogues in the therapeutic field, in particular for the treatment of cerebral ischemia. It also relates to processes for the preparation of these derivatives. It also relates to new particular compounds of acylglycerols and their nitrogen and sulfur analogues and their preparation methods.
  • the compounds of the invention have advantageous pharmacological, antioxidant and anti-inflammatory properties.
  • the invention also describes the methods of therapeutic treatment using these compounds and pharmaceutical compositions containing them.
  • the compounds of the invention can be used in particular for preventing or treating cerebrovascular accidents.
  • cerebrovascular pathology (150,000 new cases per year) represents the third cause of death and the first cause of disability in adults.
  • Ischemic and hemorrhagic accidents respectively concern 80% and 20% of this pathology.
  • Ischemic strokes are an important therapeutic issue to reduce the morbidity and mortality of this condition.
  • Advances have been made not only in the treatment of the acute phase of ischemia but also in its prevention. It is also important to note that the identification and management of risk factors are essential to the treatment of this pathology.
  • Drug treatments for ischemic strokes are based on different strategies.
  • a first strategy is to prevent the occurrence of ischemic strokes by preventing risk factors (high blood pressure, high cholesterol, diabetes, atrial fibrillation, etc.) or by preventing thrombosis, in particular using anti - platelet aggregators or anticoagulants (Adams 2002).
  • a second strategy is to treat the acute phase of ischemia in order to reduce the long-term consequences (Lutsep and Clark 2001).
  • the penumbra zone the intermediate zone between the heart of the ischemia where the neurons are necrotic and the intact nervous tissue, is the site of a physiopathological cascade which leads to within a few days of neuronal death, if reperfusion is not ensured or if neuroprotection is not effective enough.
  • the first event which occurs within the first few hours, is a massive release of glutamate which results in neuronal depolarization as well as cellular edema.
  • the entry of calcium into the cell induces mitochondrial damage promoting the release of free radicals as well as the induction of enzymes which cause the membrane degradation of neurons.
  • NF- ⁇ B transcription factors
  • This activation induces inflammatory processes such as the induction of adhesion proteins at the endothelial level, the infiltration of the ischemic focus by neutrophils, microglial activation, the induction of enzymes such as nitric oxide (NO) synthase type II or type II cyclooxygenase.
  • NO nitric oxide
  • These inflammatory processes lead to the release of NO or prostanoids which are toxic to the cell. All of these processes result in a phenomenon of apoptosis causing irreversible lesions (Dirnagl, ladecola et al. 1999).
  • prophylactic neuroprotection is based on experimental bases demonstrating resistance to ischemia in animal models. Indeed, various procedures applied prior to the realization of an experimental cerebral ischemia make it possible to make it less severe. Different stimuli make it possible to induce resistance to cerebral ischemia: preconditioning (brief ischemia preceding prolonged ischemia); thermal stress; administration of a low dose of bacterial lipopolysaccharide (Bordet, Deplanque et al. 2000). These stimuli induce resistance mechanisms which activate signals triggering the protective mechanisms. Different triggering mechanisms have been highlighted: cytokines, pathways of inflammation, free radicals, NO, ATP-dependent potassium channels, adenosine.
  • PPARs ( ⁇ , ⁇ , ⁇ ) belong to the family of hormone activated nuclear receptors. When activated by an association with their ligand, they heterodimerize with the Retinoid-X-Receptor (RXR) and then bind to "Peroxisome Proliferator Response Elements" (PPREs) which are localized in the promoter sequence of the target genes. The binding of PPAR to PPRE thus induces the expression of the target gene (Fruchart, Staels et al. 2001).
  • PPARs are distributed in a wide variety of organs, but with a certain specificity for each of them, with the exception of PPAR ⁇ , the expression of which seems ubiquitous.
  • the expression of PPAR ⁇ is particularly important in the liver and along the intestinal wall whereas PPAR ⁇ is mainly expressed in adipose tissue and the spleen.
  • ⁇ , ⁇ , ⁇ the three subtypes ( ⁇ , ⁇ , ⁇ ) are expressed.
  • Cells such as oligodendrocytes as well as astrocytes express more particularly the PPAR ⁇ subtype (Kainu, Wikstrom et al. 1994).
  • the target genes of PPARs control the metabolism of lipids and carbohydrates.
  • PPARs participate in other biological processes.
  • PPARs The activation of PPARs by their ligands induces the change in the transcriptional activity of genes which modulate the inflammatory process, antioxidant enzymes, angiogenesis, cell proliferation and differentiation, apoptosis, the activities of iNOS, MMPases and TIMPs (Smith, Dipreta et al. 2001) (Clark 2002).
  • Free radicals are involved in a very broad spectrum of pathologies such as allergies, cancer initiation and promotion, cardiovascular pathologies (atherosclerosis, ischemia), genetic and metabolic disorders (diabetes), infectious and degenerative diseases (Prion, etc. .) as well as ophthalmic problems (Mates, Perez-Gomez et al. 1999).
  • ROS Reactive oxygen species
  • the management of ROS is done via an antioxidant system which includes an enzymatic and non-enzymatic component.
  • the enzyme system consists of several enzymes, the characteristics of which are as follows: - Superoxide dismutase (SOD) destroys the superoxide radical by converting it into peroxide. The latter is itself supported by a other enzyme system. A low level of SOD is constantly generated by aerobic respiration.
  • SOD Superoxide dismutase
  • Three classes of SOD have been identified in humans, each containing Cu, Zn, Fe, Mn, or Ni as a cofactor.
  • the three forms of human SOD are distributed as follows Cu-Zn SOD which are cytosolic, a mitochondrial Mn-SOD and an extracellular SOD.
  • Catalase is very effective in converting hydrogen peroxide (H 2 0 2 ) into water and into 0 2 . Hydrogen peroxide is catabolized enzymatically in aerobic organisms. Catalase also catalyzes the reduction of a variety of hydroperoxides (ROOH).
  • ROOH hydroperoxides
  • Glutathione peroxidase contains selenium as a cofactor and catalyzes the reduction of hydroperoxides (ROOH and H 2 0 2 ) using glutathione, and thus protects cells against oxidative damage.
  • Non-enzymatic antioxidant cell defenses are made up of molecules that are synthesized or provided by food.
  • antioxidant molecules present in different cellular compartments.
  • Detoxifying enzymes are for example responsible for eliminating free radicals and are essential for the life of the cell.
  • the three most important types of antioxidant compounds are carotenoids, vitamin C and vitamin E (Gilgun-Sherki, Melamed et al. 2001).
  • the inventors have developed compounds capable of preventing the appearance of the risk factors described above and capable of exerting a prophylactic activity in terms of neuroprotection, but also to ensure active neuroprotection in the acute phase of ischemic strokes.
  • the compounds according to the invention have at the same time properties of PPAR activators, antioxidants and anti-inflammatory drugs and, as such, the compounds have a high therapeutic or prophylactic potential for ischemic strokes.
  • the present invention thus provides a family of compounds having advantageous pharmacological properties and usable for the curative or preventive treatment of cerebral ischemia. It also relates to processes for the preparation of these derivatives.
  • G represents an oxygen atom, a sulfur atom or an N- R4 group
  • R4 is a hydrogen atom or a linear or branched alkyl group, saturated or not, optionally substituted, containing from 1 to 5 carbon atoms,
  • R1, R2 and R3, identical or different, represent a hydrogen atom, a CO-R group or a group of formula
  • R is a linear or branched alkyl group, saturated or unsaturated, optionally substituted, the main chain of which contains from 1 to 25 carbon atoms,
  • X is a sulfur atom, a selenium atom, an SO group or an S0 2 group,
  • n is an integer between 0 and 11
  • R ' is a linear or branched alkyl group, saturated or not, optionally substituted, the main chain of which comprises from 2 to 23, preferably 10 to 23, carbon atoms and optionally one or more heterogroups chosen from an oxygen atom , a sulfur atom, a selenium atom, an SO group and an S0 2 group.
  • the group or groups R which are identical or different, preferably represent a linear or branched, saturated or unsaturated, substituted or unsubstituted alkyl group, the main chain of which comprises from 1 to 20 carbon atoms, even more preferably from 7 to 17 carbon atoms, even more preferably from 14 to 17 carbon atoms.
  • the group or groups R which are identical or different, can also represent a lower alkyl group comprising from 1 to 6 carbon atoms, such as in particular the methyl, ethyl, propyl radical , isopropyl, butyl, isobutyl, pentyl or hexyl.
  • the compounds of formula (I) are characterized in that one or two of the substituents R1, R2 and R3 is a COCH 3 group.
  • the group or groups R ′ which are identical or different, preferably represent a linear or branched, saturated or unsaturated, substituted or unsubstituted alkyl group, the main chain of which comprises from 12 to 23 carbon atoms, even more preferably from 13 to 20 carbon atoms.
  • R ′ represents a linear or branched, saturated or unsaturated, substituted or unsubstituted alkyl group, the main chain of which contains from 14 to 17 carbon atoms, even more advantageously 14 carbon atoms.
  • saturated long chain alkyl groups for R or R ′ are in particular the groups C 7 H ⁇ 5 , C ⁇ 0 H 21 , CnH 2 3. C- ⁇ 2 H 25 , C13H27, C 14 H 29 , Ci ⁇ H 3 ⁇ , C ⁇ 6 H 33 , C ⁇ 7 H 35 .
  • chain alkyl groups long unsaturated for R or R ' are in particular the groups C14H25, C ⁇ 4 H 27 , C15H29, C17H2 9 , C ⁇ 7 H 3 ⁇ , C17H33, C19H2 9 , C 19 H 31 , C 2 ⁇ H 3 ⁇ , C21H35, C21H37, C 2 ⁇ H 39 , C23H45, or the alkyl chains of eicosapentaenoic acid (EPA) C20-5 (5, 8, 11, 14, 17) and docosahexaenoic acid (DHA) C 22: 6 (4, 7, 10, 13, 16, 19).
  • EPA eicosapentaenoic acid
  • DHA docosahexaenoic acid
  • the alkyl groups R or R ′ may optionally comprise a cyclic group.
  • cyclic groups are especially cyclopropyl, cyclobutyl, cyclopentyl and cyclohexyl.
  • the alkyl groups R or R ′ may be optionally substituted by one or more substituents, identical or different.
  • This invention also relates to the optical and geometric isomers of these compounds, their racemates, their salts, their hydrates and their mixtures.
  • the compounds of formula (la) are the compounds of formula (I) according to the invention in which only one of the groups R1, R2 or R3 represents a hydrogen atom.
  • the compounds of formula (Ib) are the compounds of formula (I) according to the invention in which two of the groups R1, R2 or R3 represent a hydrogen atom.
  • R1 and R3, identical or different represent a hydrogen atom or, more particularly, a CO-R group.
  • the present invention also includes the prodrugs of the compounds of formula (I), which, after administration in a subject, will transform into compounds of formula (I) and / or the metabolites of the compounds (I) which exhibit therapeutic activities comparable to compounds of formula (I).
  • the present invention thus relates to the use of a compound of formula (I) for the preparation of a pharmaceutical composition intended for treating a cerebrovascular pathology, such as cerebral ischemia or a hemorrhagic stroke.
  • composition comprising, in a pharmaceutically acceptable carrier, a compound of general formula (I) as described above, optionally in combination with another therapeutic active.
  • This composition is in particular intended to treat a cerebrovascular pathology, such as cerebral ischemia or a hemorrhagic stroke.
  • X preferably represents a sulfur or selenium atom and advantageously a sulfur atom.
  • R ′ may comprise one or more heterogroups, preferably 0, 1 or 2, more preferably 0 or 1, chosen from an oxygen atom, a sulfur atom, a selenium atom, an SO group or an SO 2 group.
  • a specific example of group CO- (CH 2 ) 2n + rX-R 'according to the invention is the group CO-CH 2 -S-C ⁇ 4 H 29 .
  • the inventors have developed new compounds of formula (I) having a CO-CH 2 -S-Ci 4 H 2 group .
  • the subject of the present invention is therefore the compounds of formula (I) chosen from: - 1, 3-ditetradecylthioacetyl-2-palmitoylglycerol;
  • R1, R2 and R3 represents a group CO- (CH 2 ) 2n + rX-R ' in which X represents a sulfur or selenium atom, preferably a sulfur atom and / or R 'is a saturated and linear alkyl group comprising from 13 to 17 carbon atoms, preferably from 14 to 16, even more preferably 14 carbon atoms.
  • R2 is a group of formula CO- (CH 2 ) 2n + ⁇ -X-R ', in which X represents a sulfur or selenium atom, preferably a sulfur atom and / or R 'is a group as defined above.
  • R4 preferentially represents an atom of hydrogen or a methyl group.
  • R2 advantageously represents a CO- (CH 2 ) 2n + rX-R 'group as defined above.
  • the particular compounds according to the invention are compounds of general formula (I) in which the group G represents a sulfur atom.
  • R1, R2 and R3, identical or different, preferably identical, represent a group CO- (CH 2 ) 2n + ⁇ -XR 'as defined above before, in which X represents a sulfur or selenium atom and preferably a sulfur atom and / or R 'represents a saturated and linear alkyl group comprising from 13 to 17 carbon atoms, preferably from 14 to 17, even more preferably 14 carbon atoms, in which n is preferably between 0 and 3, and in particular equal to 0. More specifically, other preferred compounds are the compounds of general formula (I) in which R1, R2 and R3 represent CO-CH 2 -S-Ci 4 H 2 g groups.
  • Another subject of the present invention relates to any pharmaceutical composition
  • any pharmaceutical composition comprising in a pharmaceutically acceptable carrier at least one compound of formula (I) as described above, and in particular at least one compound of formula (I) chosen from :.
  • the invention also relates to the use of a compound as defined above for the preparation of a pharmaceutical composition intended for the implementation of a method of treatment or prophylaxis in humans or in animals .
  • the invention also relates to a method of treatment of cerebrovascular pathologies and more particularly of cerebral ischemia, comprising the administration to a subject, in particular human, of an effective dose of a compound of formula (I) or of a pharmaceutical composition as defined above.
  • compositions according to the invention advantageously comprise one or more excipients or vehicles, acceptable from the pharmaceutical point of view. Mention may be made, for example, of saline, physiological, isotonic, buffered solutions, etc., compatible with pharmaceutical use and known to those skilled in the art.
  • the compositions may contain one or more agents or vehicles chosen from dispersants, solubilizers, stabilizers, surfactants, preservatives, etc. Agents or vehicles usable in formulations (liquids and / or injectables and / or solids) are in particular methylcellulose, hydroxymethylcellulose, carboxymethylcellulose, polysorbate 80, mannitol, gelatin, lactose, vegetable oils, etc.
  • compositions may be formulated in the form of an injectable suspension, gels, oils, tablets, suppositories, powders, capsules, capsules, etc., optionally by means of dosage forms or devices ensuring sustained and / or delayed release.
  • an agent such as cellulose, carbonates or starches is advantageously used.
  • the compounds or compositions according to the invention can be administered in different ways and in different forms.
  • they can for example be administered systemically, orally, parenterally, by inhalation or by injection, such as for example by intravenous, intramuscular, subcutaneous, trans-dermal, intra-arterial, etc.
  • the compounds are generally packaged in the form of liquid suspensions, which can be injected using syringes or infusions, for example.
  • the compounds are generally dissolved in saline, physiological, isotonic, buffered solutions, etc., compatible with pharmaceutical use and known to those skilled in the art.
  • compositions can contain one or more agents or vehicles chosen from dispersants, solubilizers, emulsifiers, stabilizers, surfactants, preservatives, buffers, etc.
  • agents or vehicles which can be used in liquid and / or injectable formulations are in particular methylcellulose, hydroxymethylcellulose, carboxymethylcellulose, polysorbate 80, mannitol, gelatin, lactose, vegetable oils, liposomes, etc.
  • the compounds can thus be administered in the form of gels, oils, tablets, suppositories, powders, capsules, capsules, aerosols, etc., optionally by means of dosage forms or devices ensuring sustained and / or delayed release.
  • an agent such as cellulose, carbonates or starches is advantageously used.
  • the compounds can be administered orally in which case the agents or vehicles used are preferably chosen from water, gelatin, gums, lactose, starch, magnesium stearate, talc, an oil, polyalkylene glycol, etc. .
  • the compounds are preferably administered in the form of solutions, suspensions or emulsions with in particular water, oil or polyalkylene glycols to which it is possible to add, in addition to preservatives, stabilizers, emulsifiers , etc., salts to adjust the osmotic pressure, buffers, etc.
  • the flow rate and / or the dose injected can be adapted by a person skilled in the art depending on the patient, the pathology concerned, the mode of administration, etc.
  • the compounds are administered in doses which can vary between 1 ⁇ g and 2 g per administration, preferably from 0.1 mg to 1 g per administration.
  • the administrations can be daily or repeated several times a day, if necessary.
  • the compositions according to the invention can also comprise other agents or active principles.
  • the invention also relates to methods of preparing compounds of formula (I) as described above.
  • the compounds of the invention can be prepared from commercial products, using a combination of chemical reactions known to those skilled in the art.
  • the invention also relates to processes for the preparation of the compounds as defined above.
  • the compounds of formula (I) in which G is an oxygen or sulfur atom, R1, R2 and R3 identical or different, represent a CO-R group or a CO- group ( CH 2 ) 2n + rX-R ', are obtained from a compound of formula (I) in which G is respectively an oxygen or sulfur atom, R2 is a hydrogen atom and R1 and R3, identical or different, represent a group CO-R or CO- (CH 2 ) 2n + rX-R ', and of a compound of formula A ° -CO-A in which A is a reactive group chosen for example from OH, Cl, 0-CO-A ° and OR ", R" being an alkyl group, and A ° is the group R or the group (CH 2 ) 2 n + ⁇ -X-R ' I , optionally in the presence of coupling agents or activators known to those skilled in the art.
  • a glycerol molecule is reacted with a compound of formula A ° -CO-A1 in which A1 is a reactive group chosen, for example, from OH, Cl and OR ", R" being an alkyl group, and A ° is the group R or the group (CH 2 ) 2n + ⁇ -X-R '. possibly in the presence of coupling agents or activators known to those skilled in the art.
  • This reaction allows the synthesis of so-called symmetrical compounds, in which R1 and R3 have the same meaning.
  • This reaction can be implemented by adapting the protocols described for example in (Feuge, Gros et al. 1953), (Gangadhar, Subbarao et al. 1989), (Han, Cho et al. 1999) or (Robinson 1960).
  • the compounds of formula (I) according to the invention in which G is an oxygen atom, R2 is a hydrogen atom and R1 and R3, identical or different, represent a CO-R or CO- (CH2) 2 group n + ⁇ -X-R ', can also be obtained from a compound of formula (I) according to the invention in which G is an oxygen atom, R2 and R3 represent a hydrogen atom and R1 is a group CO-R or CO- (CH 2 ) 2n + rX-R '(this particular form of compounds of formula (I) being called compounds of formula IV), and of a compound of formula A ° -CO-A2 in which A2 is a reactive group chosen, for example, from OH and Cl, and A ° is the group R or the group (CH 2 ) 2n + rX-R ' .
  • A2 is a reactive group chosen, for example, from OH and CI
  • a ° is the group R or the group optionally in the presence of coupling agents or activators known to those skilled in the art to give a compound of general formula (III)
  • R1 represents a CO-R or CO- (CH2) 2n + ⁇ -XR 'group
  • the compounds of formula (I) in which G is an oxygen atom, R3 is a hydrogen atom and R1 and R2, identical or different, represent a CO-R or CO group - (CH 2 ) 2n + rX-R ', can be obtained from a compound of formula (I) according to the invention in which G is an oxygen atom, R2 and R3 represent a hydrogen atom and R1 is a CO-R or CO- (CH 2 ) 2n + ⁇ -XR 'group (compounds IV), according to the following steps:
  • the reaction can advantageously be carried out by adapting the protocol described by (Gaffney and Reese 1997) in which PxE can represent the compound 9-phenylxanthene-9-ol or 9-chloro-9-phenylxanthene
  • A2 is a reactive group chosen, for example, from OH and Cl
  • a ° is the group R or the group (CH 2 ) 2n + ⁇ -X-R'- in the presence, optionally, of coupling agents or activators known to those skilled in the art to give a compound of general formula (VI), in which R1 and R2, identical or different, represent a group
  • CO-R or CO- (CH 2 ) 2n + rX-R 'and Px is a protective group
  • R2 identical or different, represent a group CO-R or CO-
  • the compounds of general formula (I) in which G is an oxygen atom, R1 and R3 represent a hydrogen atom and R2 represents a CO-R or CO- (CH 2 ) 2n + ⁇ -X-R ', are obtained by a process comprising:
  • A2 is a reactive group chosen, for example, from OH and Cl, and A ° is the group R or the group (CH 2 ) 2n + rX-R ', optionally in the presence coupling agents or activators known to those skilled in the art to give a compound of general formula (VIII)
  • R2 represents a CO-R or CO- (CH 2 ) 2n + ⁇ -XR 'group
  • the compound of formula (IX) can be prepared by a process comprising:
  • step e) with a compound of formula A ° -CO-A2 in which A2 is a reactive group chosen, for example, from OH and Cl, and A ° is the group R or the group (CH2) 2n + ⁇ -X-R'- optionally in the presence of coupling agents or activators known to those skilled in the art.
  • A2 is a reactive group chosen, for example, from OH and Cl
  • a ° is the group R or the group (CH2) 2n + ⁇ -X-R'- optionally in the presence of coupling agents or activators known to those skilled in the art.
  • the compounds of formula (I) according to the invention in which G is an N- R4 group and in which R1 and R2 represent a CO-R or CO- (CH 2 ) 2n + ⁇ -X- R 'group, and R3 is a hydrogen atom can be obtained by reaction of a compound XI and a compound of formula A ° -CO-A2 in which A2 is a reactive group chosen for example between OH and Cl, and A ° is the group R or the group (CH 2 ) 2n + ⁇ -XR 'in stoichiometric amount, optionally in the presence of coupling agents or activators known to those skilled in the art.
  • a molecule of 2-aminopropane-1, 3-diol is reacted with a compound of formula A ° -CO-A in which A is a reactive group chosen for example from OH, 0-CO-A ° , OR "and Cl, and A ° is the group R or the group (CH 2 ) 2 n + ⁇ -XR ', optionally in the presence of coupling agents or activators known to those skilled in the art.
  • FIG. 1A Structure of acylglycerols according to the invention (Examples 2a, 2c, 4a-r).
  • Figure 1B Structure of particular compounds according to the invention (examples 5a-b, 6-c).
  • Figure 3 Evaluation of the properties of PPAR ⁇ agonists of compounds according to the invention with the Gal4 / PPAR ⁇ transactivation system.
  • Figure 4 Evaluation of the neuroprotective effect of compounds according to the invention.
  • Example 4g the compounds according to the invention used in the examples for measuring or evaluating activity will be abbreviated as "Ex 4g” to denote the compound according to the invention, the preparation of which is described in example 4g.
  • Thin layer chromatographies were carried out on MERCOF 6OF 254 silica gel plates 0.2 mm thick.
  • the abbreviation Rf is used to denote the retention factor.
  • the column chromatographies were carried out on silica gel 60 with a particle size 40-63 ⁇ m (reference 9385-5000 MERCK).
  • the melting points (PF) were measured using a BUCHI B 540 device by the capillary method.
  • the infrared (IR) spectra were performed on a Fourier transform spectrometer BRUKER (Vector 22).
  • the nuclear magnetic resonance (NMR) spectra were recorded on a BRUKER AC 300 spectrometer (300 MHz).
  • Each signal is identified by its chemical displacement, its intensity, its multiplicity (noted s for singlet, if for broad singlet, d for doublet, dd for split doublet, t for triplet, td for split triplet, quint for quintuplet and m for multiplet ) and its coupling constant (J).
  • Mass spectra (SM) were carried out on a PERKIN-ELMER SCIEX API 1 spectrometer (ESI-MS for ElectroSpray lonization Mass Spectrometry) or on an APPLIED BIOSYSTEMS Voyager DE-STR spectrometer of MALDI-TOF type (Matrix-Assisted Laser Desorption / lonization - Time Of Flight).
  • Decanethiol (4.57 g; 25 mmol) and 4-bromobutyric acid (5 g; 25 mmol) are stirred at room temperature under an inert atmosphere.
  • the tetradecylthioacetic acid (example 1 a) (5 g; 17.4 mmol) is dissolved in a methanol / dichloromethane mixture (160 ml / 80 ml). The reaction mixture was stirred and cooled in an ice bath before adding slowly oxone ® (12.8 g; 21 mmol) dissolved in water (160 ml). The reaction mixture is stirred at room temperature for 3 hours. The solvents are evaporated in vacuo. The precipitate formed in the residual aqueous phase is drained, washed several times with water and dried.
  • EXAMPLE 1g Preparation of tetradecylsulfonylacetic acid Tetradecylthioacetic acid (Example 1a) (5 g; 17.4 mmol) is dissolved in a methanol / dichloromethane mixture (160 ml / 80 ml). The reaction mixture is stirred and cooled in an ice bath before adding slowly oxone ® (21.8 g; 35 mmol) dissolved in water (160 ml). The reaction mixture is stirred at room temperature for 3 hours. The solvents are evaporated in vacuo. The precipitate formed in the residual aqueous phase is drained, washed several times with water and dried. Efficiency 89%
  • the tetradecylthioacetic acid (example 1a) (4 g, 13.86 mmol) is dissolved in tetrahydrofuran (100 ml) before adding the EDCI (2,658 g, 13.86 mmol), the dimethylaminopyridine (1.694 g, 13.86 mmol) then the solketal (1.72 ml, 13.86 mmol) in this order.
  • the reaction mixture is left under stirring at room temperature for 4 days.
  • the solvent is evaporated in vacuo.
  • This compound is synthesized according to the procedure previously described (Example 2a) from solketal and palmitic acid.
  • EXAMPLE 3d Preparation of 1,3-dioleoylglvcerol This compound is obtained according to the procedure previously described (Example 3a) from glycerol and oleic acid. The product is obtained in the form of a colorless oil.
  • 1-palmitoylglycerol (example 2b) (5.516 g; 17 mmol) is dissolved in dichloromethane (500 ml) before adding dicyclohexylcarbodiimide (5.165 g; 25 mmol), dimethylaminopyridine (3.058 g; 25 mmol) and oleic acid (4,714 g; 17 mmol).
  • the reaction mixture is stirred at room temperature for 24 hours.
  • the precipitate of dicyclohexyluree is filtered, rinsed with dichloromethane and the filtrate is evaporated in vacuo.
  • the residue obtained is purified by chromatography on silica gel (eluent dichloromethane) and allows the desired compound to be obtained in the form of a white solid.
  • the glycerol (30 g; 0.326 mol) is dissolved in dichloromethane (300 ml) before adding the pyridine (79 ml; 0.977 mol) then drop by drop the acetic anhydride (61.5 ml; 0.651 mol).
  • the reaction mixture is kept under stirring at ambient temperature for 48 hours.
  • the medium is taken up in dichloromethane.
  • the organic phase is washed with 1N hydrochloric acid and then with a 10% potassium carbonate solution, then with water saturated with salt, dried over magnesium sulfate, filtered and brought to dryness to provide a colorless oil which is used without further purification.
  • EXAMPLE 4c Preparation of 1,2,3-tri- (6-decylthio) hexanoylglycerol This compound is obtained according to the procedure described above (Example 4a) from 6- (decylthio) hexanoic acid (Example 1c) and glycerol.
  • 1,3-dipalmitoylglycerol (example 3a) (5.64 g; 9.9 mmol; 1eq), tetradecylthioacetic acid (example 1a) (5.74 g; 19.8 mmol; 2eq), dicyclohexylcarbodiimide (4.1 g; 19.8 mmol; 2eq) and dimethylaminopyridine (2.42 g; 19.8 mmol; 2eq) are dissolved in dichloromethane.
  • the reaction mixture is left under stirring at room temperature for 3 days.
  • the dicyclohexyluree formed is filtered and washed several times with dichloromethane.
  • the filtrate is brought to dryness.
  • the residual product is purified by chromatography on silica gel (eluent: dichloromethane / cyclohexane 4/6). Efficiency: 80%
  • EXAMPLE 4i Preparation of 1,3-oleoyl-2-tetradecylthioacetylglvcerol This compound is obtained according to the procedure described above (Example 4g) from 1,3-dioleoylglycerol (compound 3d) and tetradecylthioacetic acid (compound 1a). The product is obtained in the form of a colorless viscous oil. Yield: 32%
  • 1-oleoyl-3-palmitoylglycerol (example 3g) (2 g; 3 mmol) is dissolved in dichloromethane (150 ml) before adding dicyclohexylcarbodiimide (1.040 g; 5 mmol), dimethylaminopyridine (0.616 g; 5 mmol ) and tetradecylthioacetic acid (Example 1a) (1.455 g; 5 mmol).
  • the mixture is left stirring at room temperature for 24 hours, the precipitate of dicyclohexyluree is filtered, rinsed with dichloromethane and the filtrate is concentrated.
  • the residue obtained is purified by chromatography on silica gel (eluent dichloromethane-cyclohexane 4-6) and allows the desired compound to be obtained in the form of an oil. Yield 49%
  • EXAMPLE 4o Preparation of 1,3-ditetradecylthioacetyl-2-palmitoylglvcerol The product is prepared according to the procedure described (example 4g) from 1, 3-ditetradecylthioacetylglycerol (example 3f) and palmitic acid.
  • EXAMPLE 4p Preparation of 1,3-diacetyl-2-tetradecylthioacetylqlvcerol The product is prepared according to the procedure described (example 4g) from 1, 3-diacetylglycerol (example 3h) and tetradecylthioacetic acid (example 1a). Yield: 10% Rf (ethyl acetate-cyclohexane 3-7): 0.47
  • 1, 3-propanediol (1 g; 11 mmol) are placed in a flask and heated 190 ° C for 1 hour. After cooling to room temperature, the medium is taken up in chloroform and washed with water. The organic phase is dried over magnesium sulfate, filtered and then evaporated to provide an ocher solid residue.
  • 2-tetradecylthioacetylaminopropan-1,3-diol (example 5a) (1 g; 2.77 mmol) is dissolved in dichloromethane (180 ml) then dicyclohexycarbodiimide (1.427 g; 6.91 mmol), dimethylaminopyridine (0.845 g; 6.91 mmol) and tetradecylthioacetic acid (Example 1a) (1.995 g; 6.91 mmol) are added in this order. The reaction mixture is left under stirring at room temperature for 48 hours. The precipitate of dicyclohexyluree is filtered and washed with dichloromethane and the filtrate is concentrated.
  • Triphenylmethylthiol (9.58 g; 35 mmol) is dissolved in dichloromethane before adding dicyclohexylcarbodiimide (7.15 g; 35 mmol), dimethylaminopyridine (4.24 g; 35 mmol) and tetradecylthioacetic acid (Example 1a) (10 g; 35 mmol).
  • the reaction mixture is left under stirring at room temperature for 24 hours.
  • Dicyclohexylcarbodiimide is filtered and rinsed with dichloromethane. The filtrate is brought to dryness. The residue is purified by chromatography on silica gel (eluent dichloromethane / cyclohexane 1/9).
  • EXAMPLE 6c Preparation of 1.3-ditetradecylthioacetoxy-2- (2- tetradecylthio) methylcarbonylthiopropane 2-iodo-1, 3-ditetradecylthioacetoxypropane (example 6b) (200 mg; 0.27 mmol) and 2- (tetradecylthio) thiolacetic acid (example 6a) (82 mg; 0.27 mmol) are dissolved in distilled tetrahydrofuran (30 ml). The reaction mixture is cooled in an ice bath before adding the sodium hydride (22 mg; 0.54 mmol). The medium is left stirring at room temperature.
  • the compounds according to the invention were prepared in the form of an emulsion as described below.
  • the emulsion comprising a compound according to the invention and phosphatidylcholine (PC) is prepared according to the protocol of Spooner et al. (Spooner, Clark et al. 1988).
  • the compound according to the invention is mixed with the PC in a 4: 1 ratio (w / w) in chloroform, the mixture is dried under nitrogen, then evaporated overnight under vacuum, the resulting powder is taken up by 0 , 16 M of KCI containing 0.01 M of EDTA then the lipid particles are dispersed by ultrasound for 30 minutes at 37 ° C.
  • the liposomes formed are then separated by ultracentrifugation (XL 80 ultracentrifuge, Beckman Coulter, Villepinte, France) at 25,000 rpm for 45 minutes to recover the liposomes whose size is greater than 100 nm and approaches that of chylomicrons.
  • Liposomes consisting solely of PC are prepared in parallel to serve as a negative control.
  • composition of the liposomes in compound according to the invention is estimated using the enzymocolorimetric assay kit for triglycerides.
  • the assay is carried out against a standard range, prepared using the CFAS lipid calibrator Ref. No. 759350 (Boehringer Mannheim GmbH, Germany).
  • the standard range was built from 16 to 500 ⁇ g / ml. 100 ⁇ l of each sample or standard range dilution are deposited per well of a titration plate (96 wells). Then 200 ⁇ l of triglyceride reagents Ref. 701912 (Boehringer Mannheim GmbH, Germany) are added to each well, and the entire plate is incubated for 30 min. at 37 ° C.
  • the optical densities (OD) are read at 492 nm on the spectrophotometer.
  • liposomes containing the compounds according to the invention, thus prepared are used in the in vitro experiments described in Examples 9, 10 and 11.
  • the LDLs are prepared according to the method described by Lebeau et al. (The beautiful,
  • test compounds are prepared at 10 "2 M in ethanol and diluted in PBS to have final concentrations ranging from 0.1 to 100 ⁇ M for a total ethanol concentration of 1% (v / v ).
  • EDTA is removed from the LDL preparation by dialysis.
  • the oxidation then takes place at 30 ° C. by adding 100 ⁇ l of a solution with 16.6 ⁇ M of CuSO 4 or of 2 mM of AAPH with 800 ⁇ L of LDL (125 ⁇ g of proteins / ml) and 100 ⁇ l of a solution of the compound to be tested.
  • the formation of dienes, the species to be observed, is measured by optical density at 234 nm in samples treated with the compounds in the presence or absence of copper (or AAPH). The measurement of the optical density at 234 nm is carried out every 10 minutes for 8 hours using a thermostated spectrophotometer (Kontron Uvikon 930).
  • the analyzes are carried out in triplicate. We consider that the compounds have an antioxidant activity when they induce a phase shift compared to the control sample. The inventors demonstrate that the compounds according to the invention delay the oxidation of LDL (induced by copper), this indicating that the compounds according to the invention have an intrinsic antioxidant character. An example of results obtained with compounds according to the invention is presented in FIG. 2.
  • the delay in the formation of conjugated dienes is characteristic of the antioxidant products. 4g and 4a are those which have the most significant intrinsic antioxidant properties
  • Figure 2-b shows that the incubation of the compounds according to the invention with LDL in the presence of copper slows down the rate of formation of conjugated dienes.
  • formation of conjugated dienes is 3 nmol / min / mg LDL with copper alone, this speed is reduced to 1 nmol / min / mg LDL with compound Ex 4a at 10 "4 M, which corresponds to a decrease in 66% of the oxidation rate.
  • the compounds according to the invention Ex 4h and Ex 4g also slow down the oxidation rate of LDL which is then respectively 2.5 and 1.8 nmol / min / mg of LDL.
  • Figure 2-c shows that the incubation of LDL with copper leads to the formation of 496 nmol / mg LDL of conjugated dienes.
  • Incubation with the compound Ex 4a (10 "4 M) causes a reduction of 60% in the maximum amount of conjugated dienes formed.
  • Compounds Ex 4g and 4h (10 " 4 M) also limit the formation of conjugated dienes. Incubating LDL with these compounds decreases the maximum amount of dienes formed by 31 and 24% respectively.
  • the compounds according to the invention tested are the compounds whose preparation is described in the examples described above.
  • LDL oxidation is measured by the TBARS method. According to the same principle as that described above, the LDLs are oxidized with CuS04 and the lipid peroxidation is determined as follows:
  • TBARS are measured using a spectrophotometric method; lipid hydroperoxidation is measured using peroxide-lipid oxidation dependent on iodide iodine. The results are expressed in nmol of malonodialdehyde (MDA) or in nmol of hydroperoxide / mg of proteins. The results obtained previously, by measuring the inhibition of the formation of conjugated dienes, are confirmed by the experiments of measurement of lipid peroxidation of LDL.
  • the compounds according to the invention therefore also effectively protect LDL against lipid peroxidation induced by copper (oxidizing agent).
  • Example 9 Measurement of the antioxidant properties of the compounds according to the invention on cell cultures
  • the cell lines used for this type of experiment are of the neuronal, neuroblastoma (human) and PC12 (rat) cells type.
  • PC12 cells were prepared from a rat pheochromocytoma and are characterized by Greene and Tischler (Greene and Tischler 1976). These cells are commonly used for studies of neuronal differentiation, signal transduction and neuronal death.
  • the PC12 cells are cultured as previously described (Farinelli, Park et al. 1996), in complete RPMI medium (Invitrogen) supplemented with 10% horse serum and 5% fetal calf serum.
  • the mRNAs are extracted from the cells in culture treated or not with the compounds according to the invention. The extraction is carried out using reagents from the Absolutely RNA RT-PCR miniprep Kit (Stratagene, France) according to the supplier's instructions. The mRNAs are then assayed by spectrometry and quantified by quantitative RT-PCR using the Light Cycler Fast start DNA Master Sybr Green I kit (Roche) on a Light Cycler System device (Roche, France). Primer pairs specific for Super Oxide Dismutase (SOD), Catalase and Glutathione Peroxidase (GPx) genes, antioxidant enzymes, are used as probes.
  • SOD Super Oxide Dismutase
  • GPx Glutathione Peroxidase
  • Primer pairs specific for the b-actin and cyclophilin genes are used as control probes.
  • the increase in the expression of mRNAs, measured by quantitative RT-PCR, of the genes of the antioxidant enzymes is demonstrated in the different cell types used, when the cells are treated with the compounds according to the invention.
  • the antioxidant properties of the compounds are also evaluated using a fluorescent indicator, the oxidation of which is followed by the appearance of a signal. fluorescent.
  • the decrease in intensity of the fluorescent signal emitted is measured in the cells treated with the compounds in the following manner: the PC12 cells cultured as previously described (black plate 96 wells transparent background, Falcon) are incubated with increasing doses of H 2 0 2 (0.25 mM - 1 mM) in serum-free medium for 2 and 24 hours. After the incubation, the medium is removed and the cells are incubated with a solution of dichlorodihydrofluorescein diacetate (DCFDA, Molecular Probes, Eu subconscious, USA) 10 ⁇ M in PBS for 30 min at 37 ° C.
  • DCFDA dichlorodihydrofluorescein diacetate
  • the cells are then rinsed with PBS.
  • the detection of the fluorescence emitted by the oxidation indicator is measured using a fluorimeter (Tecan Ultra 384) at an excitation wavelength of 495 nm and an emission wavelength 535 nm.
  • the results are expressed as a percentage of protection relative to the oxidized control.
  • the fluorescence intensity is lower in the cells incubated with the compounds according to the invention than in the untreated cells.
  • the different cell lines (cell models mentioned above) as well as the cells in primary culture are treated as above.
  • the cell supernatant is recovered after the treatment and the cells are lysed and recovered for the determination of the protein concentration.
  • the detection of lipid peroxidation is determined as follows: lipid peroxidation is measured using thiobarbituric acid (TBA) which reacts with lipoperoxidation of aldehydes such as malonodialdehyde (MDA).
  • TSA thiobarbituric acid
  • MDA malonodialdehyde
  • the cell supernatant is collected (900 ⁇ l) and 90 ⁇ l of butyl hydroxytoluene are added thereto (Morliere, Moysan et al. 1991).
  • the compounds according to the invention advantageously have intrinsic antioxidant properties which make it possible to slow down and / or inhibit the effects of oxidative stress.
  • the inventors also show that the compounds according to the invention are capable of inducing the expression of the genes of antioxidant enzymes. These particular characteristics of the compounds according to the invention allow the cells to fight more effectively against oxidative stress and therefore to be protected from damage induced by free radicals.
  • Example 10 Evaluation of the activation of PPARs in vitro by the compounds according to the invention
  • the nuclear receptors belonging to the PPAR subfamily which are activated by two major classes of pharmaceutical compounds, fibrates and glitazones, which are widely used in human clinics for the treatment of dyslipidemias and diabetes, play an important role in homeostasis lipid and carbohydrate.
  • the following experimental data show that the compounds according to the invention activate PPAR ⁇ in vitro.
  • PPARs The activation of PPARs is evaluated in vitro in lines of fibroblastic type RK13 or in a hepatocyte line HepG2, by measuring the transcriptional activity of chimeras consisting of the DNA binding domain of the yeast transcription factor Gal4 and of the binding domain of ligand of the different PPARs.
  • the example presented below is given for HepG2 cells.
  • the HepG2 cells come from ECACC (Porton Down, UK) and are cultured in DMEM medium supplemented with 10% vol / vol fetal calf serum, 100 U / ml penicillin (Gibco, Paisley, UK ) and 2 mM L-Glutamine (Gibco, Paisley, UK).
  • the culture medium is changed every two days.
  • the cells are stored at 37 ° C. in a humid atmosphere containing 5% of CO 2 and 95% of air.
  • the plasmids pG5TkpGL3, pRL-CMV, pGal4-hPPAR ⁇ , pGal4-hPPAR ⁇ and pGal4-f have been described by Raspe et al. (Raspe, Madsen et al. 1999).
  • the constructs pGal4-mPPAR ⁇ and pGal4-hPPAR ⁇ were obtained by cloning into the vector pGal4-f DNA fragments amplified by PCR corresponding to the DEF domains of the mouse PPAR ⁇ and human PPAR ⁇ nuclear receptors respectively.
  • the HepG2 cells are seeded in 24-well culture dishes at a rate of 5 ⁇ 10 4 cells / well and are transfected for 2 hours with the reporter plasmid pG5TkpGL3 (50 ng / well), the expression vectors pGal4-f, pGal4- mPPAR ⁇ , pGal4-hPPAR ⁇ , pGal4-hPPAR ⁇ , pGal4-hPPAR ⁇ (100 ng / well) and the transfection efficiency control vector pRL-CMV (1 ng / well) according to the protocol described above (Raspe, Madsen et al . 1999) and incubated for 36 hours with the test compounds.
  • the cells are lysed (Gibco, Paisley, UK) and the luciferase activities are determined using the D ⁇ al-Luciferase TM Reporter Assay System assay kit (Promega, Madison, Wl, USA) according to the supplier's instructions.
  • the protein content of the cell extracts is then evaluated using the Bio-Rad Protein Assay (Bio-Rad, M ⁇ nchen, Germany) according to the supplier's instructions.
  • FIG. 3 An example of results obtained with compounds according to the invention is presented in FIG. 3.
  • FIG. 3 the HepG2 cells, transfected with the plasmids of the Gal4 / PPAR ⁇ system, are incubated with different concentrations of the compounds according to the invention (5, 15, 50 and 100 ⁇ M) for 24 hours as well as with different vehicle concentrations (PC).
  • the results are represented by the induction factor (luminescent signal compared to the untreated cells) according to the different treatments.
  • the compound according to the invention Ex 4a also induces an increase in the induction factor with a dose effect of 41 to 100 ⁇ M, 30 to 50 ⁇ M, 18 to 15 ⁇ M and 9 to 5 ⁇ M.
  • the compound according to the invention Ex 4p also induces an increase in the luminescent signal, revealing an activity on the nuclear receptor PPAR ⁇ .
  • the induction factors for the compound Ex 4p are 35 to 100 ⁇ M, 44 to 50 ⁇ M, 36 to 15 ⁇ M and 24 to 5 ⁇ M.
  • the vehicle PC liposome
  • cytokines and free radicals The inflammatory response appears in many neurological disorders, such as cerebral ischemia.
  • inflammation is one of the important factors of neurodegeneration.
  • One of the first reactions of glia cells to stroke is to release cytokines and free radicals.
  • cytokines and free radicals The consequence of this release of cytokines and free radicals is an inflammatory response in the brain and which can lead to the death of neurons (Rothwell 1997).
  • Cell lines and primary cells are grown as described above.
  • LPS Lipopolysaccharide
  • TNF- ⁇ is an important factor in the inflammatory response to stress (oxidant for example).
  • the culture medium of the stimulated cells is removed and the amount of TNF- ⁇ is evaluated with an ELISA-TNF- ⁇ kit (Immunotech, France ).
  • the samples are diluted 50 times in order to be in line with the standard range (Chang, Hudson et al. 2000).
  • the anti-inflammatory property of the compounds is characterized in the following way: the culture medium of the cells is completely changed and the cells are incubated with the compounds to be tested for 2 hours. After this incubation, LPS is added to the culture medium at a final concentration of 1 ⁇ g / ml.
  • the cell supernatant is recovered and stored at -80 ° C when it is not treated directly.
  • the cells are lysed and the amount of protein is measured, using the Bio-Rad Protein Assay assay kit (Bio-Rad, M ⁇ nchen, Germany) according to the supplier's instructions.
  • the measurement of the decrease in TNF- ⁇ secretion favored by the treatment with the test compounds is expressed in pg / ml / ⁇ g of protein and reported as a percentage relative to the control.
  • Example 12 Evaluation of the neuroprotective effects of the compounds according to the invention in a model of cerebral ischemia-reperfusion
  • A- / Prophylactic model 1 / Treatment of animals
  • Wistar rats weighing 200 to 350 g were used for this experiment.
  • the animals are kept under a 12 hour light / dark cycle at a temperature of 20 +/- 3 ° C. Animals have free access to water and food. Food gain and weight gain are recorded.
  • the animals are treated by gavage with the compounds according to the invention (600 mg / kg / day) suspended in a vehicle ((carboxymethylcellulose 0.5% (CMC) and Tween 0.1%) or treated with the aforementioned vehicle, for 14 days before the induction of ischemia by occlusion of the middle cerebral artery
  • CMC carboxymethylcellulose 0.5%
  • Tween Polyoxyethylenesorbitan Monooleate
  • the animals were anesthetized using an intraperitoneal injection of 300 mg / kg of chloral hydrate.
  • a rectal probe is placed and the body temperature is maintained at 37 +/- 0.5 ° C. Blood pressure is measured during the whole experiment.
  • the right carotid is updated using a medial cervical incision.
  • the pterygopalatine artery was ligated at its origin and an arteriotomy is performed in the external carotid artery in order to slide a nylon monofilament into it.
  • This filament is then gently advanced into the common carotid artery and then into the internal carotid artery in order to block the origin of the middle cerebral artery. After 1 hour, the filament is removed to allow reperfusion.
  • Brains are quickly frozen and sectioned.
  • the sections are colored in Cresyl purple.
  • the non-colored areas of the brain sections were considered to be injured by the infarction.
  • Analysis of the brain sections of animals treated with the compounds according to the invention reveals a marked reduction in the volume of the infarction compared to the untreated animals.
  • the compounds according to the invention are administered to animals before ischemia (prophylactic effect), they are capable of inducing neuroprotection.
  • the results of the figure 4-a indicate that the corrected volume of the total infarction (size of the lesion after ischemia) is 186 mm 3 .
  • the compound Ex 4a compound according to the invention described in example 4a
  • the size of the lesion is reduced by 22% (145 mm 3 ) compared to that of the control animals.
  • B- / Curative model or treatment of the acute phase 1 / Induction of ischemia-reperfusion by intraluminal occlusion of the cerebral middle artery.
  • Animals as described above are used for this experiment.
  • the animals are anesthetized using an intraperitoneal injection of 300 mg / kg of chloral hydrate.
  • a rectal probe is placed and the body temperature is maintained at 37 +/- 0.5 ° C. Blood pressure is measured during the whole experiment.
  • the right carotid is updated using a medial cervical incision.
  • the pterygopalatine artery was ligated at its origin and an arteriotomy is performed in the external carotid artery in order to slide a nylon monofilament into it.
  • This filament is then gently advanced into the common carotid artery and then into the internal carotid artery in order to close off the origin of the middle cerebral artery. After 1 hour, the filament is removed to allow reperfusion. 2 / Treatment of animals:
  • Animals having undergone prior ischemia-reperfusion are treated with the compounds according to the invention by the oral route (as already described in a CMC + Tween vehicle) one or more times after the reperfusion (600 mg / kg / d or 2 administrations 300 mg / kg / day).
  • the animals previously treated or not treated with the compounds according to the invention are killed by an overdose of pentobarbital.
  • Brains are quickly frozen and sectioned.
  • the sections are colored in Cresyl purple.
  • the non-colored areas of the brain sections were considered to be injured by the infarction.
  • a curative treatment treatment of the acute phase
  • the animals treated with the compounds according to the invention have damage to the brain level reduced compared to the untreated animals.
  • the volume of the infarction is reduced when the compounds according to the invention are administered one or more times after ischemia-reperfusion.
  • FIGS An example of results obtained with a compound according to the invention is presented in FIGS.
  • FIG. 4-c show that the animals treated (600 mg / kg / day), with the compound according to the invention Ex 4a, for 24 hours after ischemia develop lesions whose size is reduced by 27% compared to the control animals (volume of the infarction 132 mm 3 for the treated versus 180 mm 3 for the controls).
  • results of FIG. 4-d representing uncorrected infarctions indicate that the curative and neuroprotective nature of the compound according to the invention Ex 4a observed at the level of total infarction is composed of a neuroprotective effect at the level of cortical infarction (25% reduction in lesions) but without effect at the level of striatal infarction (no significant reduction in lesions).
  • the results of FIG. 4-e show that the animals treated (600 mg / kg / day), with the compound according to the invention Ex 4a, for 72 hours after ischemia develop lesions whose size is reduced by 40% compared to the control animals (volume of the corrected infarction: 110 mm 3 for the treated versus 180 mm 3 for the controls).
  • volume of the corrected infarction 110 mm 3 for the treated versus 180 mm 3 for the controls.
  • the use of the compounds according to the invention in various experimental models, shows that these compounds have an intrinsic antioxidant activity, capable of delaying and reducing the effects of oxidative stress. In addition, they induce the expression of the genes of antioxidant enzymes, which associated with their antioxidant nature makes it possible to strengthen anti-radical protections. Furthermore, the compounds according to the invention have an anti-inflammatory power and the property of activating the nuclear receptor PPAR ⁇ . Finally, the use of the compounds according to the invention in an ischemia reperfusion model in animals shows the beneficial effect on neuroprotection both with preventive and curative treatment.
  • Spooner P. J., S. B. Clark, et al. (1988). "The ionization and distribution behavior of oleic acid in chylomicrons and chylomicron-like emulsion particles and the influence of serum albumin.” J Biol Chem 263 (3): 1444-53. Spooner, R. J., A. Delides, et al. (nineteen eighty one). "Heat stability and kinetic properties of human serum glutathione reductase activity in various disease states.”

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Abstract

The invention relates to the use of acylglycerols and the nitrogen- and sulphur-containing analogues thereof in therapy, particularly for the treatment of cerebral ischemia. The invention further relates to methods for preparation of said derivatives, novel compounds, in particular acylglycerols, the nitrogen- and sulphur-containing analogues thereof and methods for production thereof.

Description

UTILISATION THERAPEUTIQUE D'ACYLGLYCEROLS ET DE LEURS ANALOGUES AZOTES ET SULFURES THERAPEUTIC USE OF ACYLGLYCEROLS AND THEIR NITROGEN AND SULFIDE ANALOGS
La présente invention concerne l'utilisation d'acylglycérols et de leurs analogues azotés et sulfurés dans le domaine thérapeutique, notamment pour le traitement de l'ischémie cérébrale. Elle a également trait à des procédés de préparation de ces dérivés. Elle concerne aussi de nouveaux composés particuliers d'acylglycérols et de leurs analogues azotés et sulfurés et leurs procédés de préparation. Les composés de l'invention possèdent des propriétés pharmacologiques, anti-oxydantes et anti-inflammatoires avantageuses. L'invention décrit également les procédés de traitement thérapeutique utilisant ces composés et des compositions pharmaceutiques les contenant. Les composés de l'invention sont utilisables en particulier pour prévenir ou traiter les accidents vasculaires cérébraux.The present invention relates to the use of acylglycerols and their nitrogen and sulfur analogues in the therapeutic field, in particular for the treatment of cerebral ischemia. It also relates to processes for the preparation of these derivatives. It also relates to new particular compounds of acylglycerols and their nitrogen and sulfur analogues and their preparation methods. The compounds of the invention have advantageous pharmacological, antioxidant and anti-inflammatory properties. The invention also describes the methods of therapeutic treatment using these compounds and pharmaceutical compositions containing them. The compounds of the invention can be used in particular for preventing or treating cerebrovascular accidents.
En France, la pathologie vasculaire cérébrale (150000 nouveaux cas par an) représente la troisième cause de mortalité et la première cause de handicap chez l'adulte. Les accidents ischémiques et hémorragiques concernent respectivement 80% et 20% de cette pathologie. Les accidents ischémiques cérébraux constituent un enjeu thérapeutique important pour diminuer la morbidité et la mortalité de cette affection. Des avancées ont été faites non seulement dans le traitement de la phase aiguë de l'ischémie mais également dans sa prévention. Il est aussi important de noter que l'identification et la prise en charge des facteurs de risque sont essentielles au traitement de cette pathologie.In France, cerebrovascular pathology (150,000 new cases per year) represents the third cause of death and the first cause of disability in adults. Ischemic and hemorrhagic accidents respectively concern 80% and 20% of this pathology. Ischemic strokes are an important therapeutic issue to reduce the morbidity and mortality of this condition. Advances have been made not only in the treatment of the acute phase of ischemia but also in its prevention. It is also important to note that the identification and management of risk factors are essential to the treatment of this pathology.
Les traitements médicamenteux des accidents ischémiques cérébraux sont fondés sur différentes stratégies. Une première stratégie consiste à prévenir la survenue des accidents ischémiques cérébraux par la prévention des facteurs de risque (hypertension artérielle, hypercholestérolémie, diabète, fibrillation auriculaire, etc.) ou par la prévention de la thrombose, en particulier à l'aide d'anti-aggrégants plaquettaires ou d'anticoagulants (Adams 2002). Une deuxième stratégie consiste à traiter la phase aiguë de l'ischémie, afin d'en diminuer les conséquences à long terme (Lutsep and Clark 2001 ).Drug treatments for ischemic strokes are based on different strategies. A first strategy is to prevent the occurrence of ischemic strokes by preventing risk factors (high blood pressure, high cholesterol, diabetes, atrial fibrillation, etc.) or by preventing thrombosis, in particular using anti - platelet aggregators or anticoagulants (Adams 2002). A second strategy is to treat the acute phase of ischemia in order to reduce the long-term consequences (Lutsep and Clark 2001).
La physiopathologie de l'ischémie cérébrale peut être décrite de la façon suivante : la zone de pénombre, zone intermédiaire entre le cœur de l'ischémie où les neurones sont nécrosés et le tissu nerveux intact, est le siège d'une cascade physiopathologique qui aboutit en quelques jours à la mort neuronale, si la reperfusion n'est pas assurée ou si la neuroprotection n'est pas assez efficace. Le premier événement, qui survient dans les premières heures, est une libération massive de glutamate qui aboutit à une dépolarisation neuronale ainsi qu'à un œdème cellulaire. L'entrée de calcium dans la cellule induit des dégâts mitochondriaux favorisant la libération de radicaux libres ainsi que l'induction d'enzymes qui provoquent la dégradation membranaire des neurones. L'entrée de calcium et la production de radicaux libres activent à leur tour certains facteurs de transcription, comme NF-κB. Cette activation induit des processus inflammatoires comme l'induction de protéines d'adhésion au niveau endothélial, l'infiltration du foyer ischémique par les polynucléaires neutrophiles, l'activation microgliale, l'induction d'enzymes comme l'oxyde nitrique (NO) synthase de type Il ou la cyclooxygénase de type II. Ces processus inflammatoires conduisent à la libération de NO ou de prostanoïdes qui sont toxiques pour la cellule. L'ensemble de ces processus aboutit à un phénomène d'apoptose provoquant des lésions irréversibles (Dirnagl, ladecola et al. 1999).The pathophysiology of cerebral ischemia can be described as follows: the penumbra zone, the intermediate zone between the heart of the ischemia where the neurons are necrotic and the intact nervous tissue, is the site of a physiopathological cascade which leads to within a few days of neuronal death, if reperfusion is not ensured or if neuroprotection is not effective enough. The first event, which occurs within the first few hours, is a massive release of glutamate which results in neuronal depolarization as well as cellular edema. The entry of calcium into the cell induces mitochondrial damage promoting the release of free radicals as well as the induction of enzymes which cause the membrane degradation of neurons. The entry of calcium and the production of free radicals in turn activate certain transcription factors, such as NF-κB. This activation induces inflammatory processes such as the induction of adhesion proteins at the endothelial level, the infiltration of the ischemic focus by neutrophils, microglial activation, the induction of enzymes such as nitric oxide (NO) synthase type II or type II cyclooxygenase. These inflammatory processes lead to the release of NO or prostanoids which are toxic to the cell. All of these processes result in a phenomenon of apoptosis causing irreversible lesions (Dirnagl, ladecola et al. 1999).
Le concept de neuroprotection prophylactique s'appuie sur des bases expérimentales mettant en évidence une résistance vis-à-vis de l'ischémie dans des modèles animaux. En effet, différentes procédures appliquées préalablement à la réalisation d'une ischémie cérébrale expérimentale permettent de rendre celle-ci moins sévère. Différents stimuli permettent d'induire une résistance à l'ischémie cérébrale : le préconditionnement (ischémie brève précédant une ischémie prolongée) ; un stress thermique ; l'administration d'une faible dose de lipopolysaccharide bactérien (Bordet, Deplanque et al. 2000). Ces stimuli induisent des mécanismes de résistance qui activent des signaux déclenchant les mécanismes de protection. Différents mécanismes de déclenchement ont été mis en évidence : cytokines, voies de l'inflammation, radicaux libres, NO, canaux potassique ATP dépendant, adénosine. Le délai observé entre le déclenchement des événements précoces et la résistance à l'ischémie provient de la nécessité d'une synthèse protéique. Différents types de protéines ont été décrits comme induisant la résistance à l'ischémie : les protéines du choc thermique, les enzymes anti-oxydantes et les protéines anti- apoptotiques (Nandagopal, Dawson et al. 2001).The concept of prophylactic neuroprotection is based on experimental bases demonstrating resistance to ischemia in animal models. Indeed, various procedures applied prior to the realization of an experimental cerebral ischemia make it possible to make it less severe. Different stimuli make it possible to induce resistance to cerebral ischemia: preconditioning (brief ischemia preceding prolonged ischemia); thermal stress; administration of a low dose of bacterial lipopolysaccharide (Bordet, Deplanque et al. 2000). These stimuli induce resistance mechanisms which activate signals triggering the protective mechanisms. Different triggering mechanisms have been highlighted: cytokines, pathways of inflammation, free radicals, NO, ATP-dependent potassium channels, adenosine. The delay observed between the onset of early events and resistance to ischemia stems from the need for protein synthesis. Different types of proteins have been described as inducing resistance to ischemia: heat shock proteins, antioxidant enzymes and anti-apoptotic proteins (Nandagopal, Dawson et al. 2001).
Il existe donc un réel besoin de composés capables de prévenir l'apparition des facteurs de risque de l'accident vasculaire cérébral tels que l'athérosclérose, le diabète, l'obésité, etc., capables d'exercer une activité prophylactique en terme de neuroprotection, mais également d'assurer une neuroprotection active dans la phase aiguë des accidents ischémiques cérébraux.There is therefore a real need for compounds capable of preventing the appearance of risk factors for stroke such as atherosclerosis, diabetes, obesity, etc., capable of exerting a prophylactic activity in terms of neuroprotection, but also to ensure active neuroprotection in the acute phase of ischemic strokes.
Les PPARs (α,β,γ) appartiennent à la famille des récepteurs nucléaires activés par les hormones. Lorsqu'ils sont activés par une association avec leur ligand, ils s'hétérodimérisent avec le Retinoïd-X-Receptor (RXR) et se fixent alors sur des « Peroxisome Proliferator Response Eléments » (PPREs) qui sont localisés dans la séquence des promoteurs des gènes cibles. La fixation de PPAR sur le PPRE induit ainsi l'expression du gène cible (Fruchart, Staels et al. 2001 ).PPARs (α, β, γ) belong to the family of hormone activated nuclear receptors. When activated by an association with their ligand, they heterodimerize with the Retinoid-X-Receptor (RXR) and then bind to "Peroxisome Proliferator Response Elements" (PPREs) which are localized in the promoter sequence of the target genes. The binding of PPAR to PPRE thus induces the expression of the target gene (Fruchart, Staels et al. 2001).
Les PPARs sont distribués dans une grande variété d'organes, mais avec une certaine tissu-spécificité pour chacun d'entre eux à l'exception de PPARβ dont l'expression semble ubiquitaire. L'expression de PPARα est particulièrement importante au niveau du foie et le long de la paroi intestinale alors que PPARγ s'exprime principalement dans le tissu adipeux et la rate. Au niveau du système nerveux central les trois sous types (α, β, γ) sont exprimés. Les cellules telles que les oligodendrocytes ainsi que les astrocytes expriment plus particulièrement le sous-type PPARα (Kainu, Wikstrom et al. 1994). Les gènes cibles des PPARs contrôlent le métabolisme des lipides et des glucides. Cependant, des découvertes récentes suggèrent que les PPARs participent à d'autres processus biologiques. L'activation des PPARs par leurs ligands induit le changement de l'activité transcriptionnelle de gènes qui modulent le processus inflammatoire, les enzymes antioxydantes, l'angiogénèse, la prolifération et la différenciation cellulaire, l'apoptose, les activités des iNOS, MMPases et TIMPs (Smith, Dipreta et al. 2001) (Clark 2002).PPARs are distributed in a wide variety of organs, but with a certain specificity for each of them, with the exception of PPARβ, the expression of which seems ubiquitous. The expression of PPARα is particularly important in the liver and along the intestinal wall whereas PPARγ is mainly expressed in adipose tissue and the spleen. At the level of the central nervous system the three subtypes (α, β, γ) are expressed. Cells such as oligodendrocytes as well as astrocytes express more particularly the PPARα subtype (Kainu, Wikstrom et al. 1994). The target genes of PPARs control the metabolism of lipids and carbohydrates. However, recent discoveries suggest that PPARs participate in other biological processes. The activation of PPARs by their ligands induces the change in the transcriptional activity of genes which modulate the inflammatory process, antioxidant enzymes, angiogenesis, cell proliferation and differentiation, apoptosis, the activities of iNOS, MMPases and TIMPs (Smith, Dipreta et al. 2001) (Clark 2002).
Les radicaux libres interviennent dans un spectre très large de pathologies comme les allergies, l'initiation et la promotion cancéreuse, les pathologies cardiovasculaires (athérosclérose, ischémie), les désordres génétiques et métaboliques (diabètes), les maladies infectieuses et dégénératives (Prion, etc.) ainsi que les problèmes ophtalmiques (Mates, Perez-Gomez et al. 1999).Free radicals are involved in a very broad spectrum of pathologies such as allergies, cancer initiation and promotion, cardiovascular pathologies (atherosclerosis, ischemia), genetic and metabolic disorders (diabetes), infectious and degenerative diseases (Prion, etc. .) as well as ophthalmic problems (Mates, Perez-Gomez et al. 1999).
Les espèces réactives oxygénées (ROS) sont produites pendant le fonctionnement normal de la cellule. Les ROS sont constituées de radicaux hydroxyle (OH°), de Fanion superoxyde (O2 "), du peroxyde d'hydrogène (H202) et de l'oxyde nitrique (NO). Ces espèces sont très labiles, et, du fait de leur grande réactivité chimique, constituent un danger pour les fonctions biologiques des cellules. Elles provoquent des réactions de peroxydation lipidique, l'oxydation de certaines enzymes et des oxydations très importantes des protéines qui mènent à leur dégradation. La protection vis-à-vis de la peroxydation lipidique est un processus essentiel chez les organismes aérobies, car les produits de peroxydation peuvent causer des dommages à l'ADN. Ainsi un dérèglement ou une modification de l'équilibre entre la production, la prise en charge et l'élimination des espèces radicalaires par les défenses antioxydantes naturelles conduisent à la mise en place de processus délétères pour la cellule ou l'organisme.Reactive oxygen species (ROS) are produced during normal cell functioning. ROS are made up of hydroxyl radicals (OH °), superoxide anion (O2 " ), hydrogen peroxide (H 2 0 2 ) and nitric oxide (NO). These species are very labile, and due to their high chemical reactivity, constitute a danger for the biological functions of cells, they provoke lipid peroxidation reactions, the oxidation of certain enzymes and very important oxidations of proteins which lead to their degradation. Lipid peroxidation is an essential process in aerobic organisms, as peroxidation products can cause DNA damage, thus disrupting or altering the balance between production, management and elimination radical species by natural antioxidant defenses lead to the establishment of deleterious processes for the cell or the organism.
La prise en charge des ROS se fait via un système antioxydant qui comprend une composante enzymatique et non enzymatique. Le système enzymatique se compose de plusieurs enzymes dont les caractéristiques sont les suivantes : - La superoxyde dismutase (SOD) détruit le radical superoxyde en le convertissant en peroxyde. Ce dernier est lui même pris en charge par un autre système enzymatique. Un faible niveau de SOD est constamment généré par la respiration aérobie. Trois classes de SOD ont été identifiées chez l'homme, elles contiennent chacune du Cu, Zn, Fe, Mn, ou Ni comme cofacteur. Les trois formes de SOD humaines sont réparties de la manière suivante Cu-Zn SOD qui sont cytosoliques, une Mn-SOD mitochondriale et une SOD extracellulaire.The management of ROS is done via an antioxidant system which includes an enzymatic and non-enzymatic component. The enzyme system consists of several enzymes, the characteristics of which are as follows: - Superoxide dismutase (SOD) destroys the superoxide radical by converting it into peroxide. The latter is itself supported by a other enzyme system. A low level of SOD is constantly generated by aerobic respiration. Three classes of SOD have been identified in humans, each containing Cu, Zn, Fe, Mn, or Ni as a cofactor. The three forms of human SOD are distributed as follows Cu-Zn SOD which are cytosolic, a mitochondrial Mn-SOD and an extracellular SOD.
- La catalase est très efficace pour convertir le peroxyde d'hydrogène (H202) en eau et en 02. Le peroxyde d'hydrogène est catabolisé de manière enzymatique dans les organismes aérobies. La catalase catalyse également la réduction d'une variété d'hydroperoxydes (ROOH).- Catalase is very effective in converting hydrogen peroxide (H 2 0 2 ) into water and into 0 2 . Hydrogen peroxide is catabolized enzymatically in aerobic organisms. Catalase also catalyzes the reduction of a variety of hydroperoxides (ROOH).
- La glutathion peroxydase contient du sélénium comme cofacteur et catalyse la réduction d'hydroperoxydes (ROOH et H202) en utilisant du glutathion, et protège ainsi les cellules contre les dommages oxydatifs.- Glutathione peroxidase contains selenium as a cofactor and catalyzes the reduction of hydroperoxides (ROOH and H 2 0 2 ) using glutathione, and thus protects cells against oxidative damage.
Les défenses cellulaires antioxydantes non enzymatiques sont constituées par des molécules qui sont synthétisées ou apportées par l'alimentation.Non-enzymatic antioxidant cell defenses are made up of molecules that are synthesized or provided by food.
Il existe des molécules antioxydantes présentes dans différents compartiments cellulaires. Les enzymes detoxifiantes sont par exemple chargées d'éliminer les radicaux libres et sont indispensables à la vie de la cellule. Les trois types de composés antioxydants les plus importants sont les caroténoïdes, la vitamine C et la vitamine E (Gilgun-Sherki, Melamed et al. 2001 ).There are antioxidant molecules present in different cellular compartments. Detoxifying enzymes are for example responsible for eliminating free radicals and are essential for the life of the cell. The three most important types of antioxidant compounds are carotenoids, vitamin C and vitamin E (Gilgun-Sherki, Melamed et al. 2001).
Pour éviter le phénomène d'apoptose induit par l'ischémie cérébrale et ses conséquences, les inventeurs ont mis au point des composés capables de prévenir l'apparition des facteurs de risque décrits ci-dessus et capables d'exercer une activité prophylactique en terme de neuroprotection, mais également d'assurer une neuroprotection active dans la phase aiguë des accidents ischémiques cérébraux.To avoid the phenomenon of apoptosis induced by cerebral ischemia and its consequences, the inventors have developed compounds capable of preventing the appearance of the risk factors described above and capable of exerting a prophylactic activity in terms of neuroprotection, but also to ensure active neuroprotection in the acute phase of ischemic strokes.
Les inventeurs ont également mis en évidence que les composés selon l'invention ont à la fois des propriétés d'activateurs PPAR, d'antioxydants et d'antiinflammatoires et, à ces titres, les composés présentent un haut potentiel thérapeutique ou prophylactique des accidents ischémiques cérébraux.The inventors have also demonstrated that the compounds according to the invention have at the same time properties of PPAR activators, antioxidants and anti-inflammatory drugs and, as such, the compounds have a high therapeutic or prophylactic potential for ischemic strokes.
La présente invention propose ainsi une famille de composés possédant des propriétés pharmacologiques avantageuses et utilisables pour le traitement curatif ou préventif de l'ischémie cérébrale. Elle a également trait à des procédés de préparation de ces dérivés.The present invention thus provides a family of compounds having advantageous pharmacological properties and usable for the curative or preventive treatment of cerebral ischemia. It also relates to processes for the preparation of these derivatives.
Les composés de l'invention répondent à la formule générale (I)The compounds of the invention correspond to the general formula (I)
dans laquelle : in which :
• G représente un atome d'oxygène, un atome de soufre ou un groupe N- R4• G represents an oxygen atom, a sulfur atom or an N- R4 group
• R4 est un atome d'hydrogène ou un groupe alkyle linéaire ou ramifié, saturé ou non, éventuellement substitué, comportant de 1 à 5 atomes de carbone,• R4 is a hydrogen atom or a linear or branched alkyl group, saturated or not, optionally substituted, containing from 1 to 5 carbon atoms,
• R1 , R2 et R3, identiques ou différents, représentent un atome d'hydrogène, un groupe CO-R ou un groupe de formule• R1, R2 and R3, identical or different, represent a hydrogen atom, a CO-R group or a group of formula
CO-(CH2)2n+ι-X-R'. l'un au moins des groupes R1 , R2 et R3 est un groupe de formule CO-(CH2)2n+1-X-R\CO- (CH 2 ) 2n + ι-X-R '. at least one of the groups R1, R2 and R3 is a group of formula CO- (CH 2 ) 2n + 1 -XR \
• R est un groupe alkyle linéaire ou ramifié, saturé ou non, éventuellement substitué, dont la chaîne principale comporte de 1 à 25 atomes de carbone,R is a linear or branched alkyl group, saturated or unsaturated, optionally substituted, the main chain of which contains from 1 to 25 carbon atoms,
• X est un atome de soufre, un atome de sélénium, un groupe SO ou un groupe S02,X is a sulfur atom, a selenium atom, an SO group or an S0 2 group,
• n est un nombre entier compris entre 0 et 11 , • R' est un groupe alkyle linéaire ou ramifié, saturé ou non, éventuellement substitué, dont la chaîne principale comporte de 2 à 23, de préférence 10 à 23, atomes de carbone et éventuellement un ou plusieurs hétérogroupes choisis parmi un atome d'oxygène, un atome de soufre, un atome de sélénium, un groupe SO et un groupe S02.• n is an integer between 0 and 11, • R 'is a linear or branched alkyl group, saturated or not, optionally substituted, the main chain of which comprises from 2 to 23, preferably 10 to 23, carbon atoms and optionally one or more heterogroups chosen from an oxygen atom , a sulfur atom, a selenium atom, an SO group and an S0 2 group.
Dans les composés de formule générale (I) selon l'invention, le ou les groupes R, identiques ou différents, représentent préférentiellement un groupe alkyle linéaire ou ramifié, saturé ou insaturé, substitué ou non, dont la chaîne principale comporte de 1 à 20 atomes de carbone, encore plus préférentiellement de 7 à 17 atomes de carbone, encore plus préférentiellement de 14 à 17 atomes de carbone. Dans les composés de formule générale (I) selon l'invention, le ou les groupes R, identiques ou différents, peuvent aussi représenter un groupe alkyle inférieur comportant de 1 à 6 atomes de carbone, tel que notamment le radical méthyle, éthyle, propyle, isopropyle, butyle, isobutyle, pentyle ou hexyle.In the compounds of general formula (I) according to the invention, the group or groups R, which are identical or different, preferably represent a linear or branched, saturated or unsaturated, substituted or unsubstituted alkyl group, the main chain of which comprises from 1 to 20 carbon atoms, even more preferably from 7 to 17 carbon atoms, even more preferably from 14 to 17 carbon atoms. In the compounds of general formula (I) according to the invention, the group or groups R, which are identical or different, can also represent a lower alkyl group comprising from 1 to 6 carbon atoms, such as in particular the methyl, ethyl, propyl radical , isopropyl, butyl, isobutyl, pentyl or hexyl.
Selon un aspect particulier de l'invention, les composés de formule (I) sont caractérisés en ce que l'un ou deux des substituants R1 , R2 et R3 est un groupe COCH3.According to a particular aspect of the invention, the compounds of formula (I) are characterized in that one or two of the substituents R1, R2 and R3 is a COCH 3 group.
Dans les composés de formule générale (I) selon l'invention, le ou les groupes R', identiques ou différents, représentent préférentiellement un groupe alkyle linéaire ou ramifié, saturé ou insaturé, substitué ou non, dont la chaîne principale comporte de 12 à 23 atomes de carbone, encore plus préférentiellement de 13 à 20 atomes de carbone. Avantageusement, R' représente un groupe alkyle linéaire ou ramifié, saturé ou insaturé, substitué ou non, dont la chaîne principale comporte de 14 à 17 atomes de carbone, encore plus avantageusement 14 atomes de carbone.In the compounds of general formula (I) according to the invention, the group or groups R ′, which are identical or different, preferably represent a linear or branched, saturated or unsaturated, substituted or unsubstituted alkyl group, the main chain of which comprises from 12 to 23 carbon atoms, even more preferably from 13 to 20 carbon atoms. Advantageously, R ′ represents a linear or branched, saturated or unsaturated, substituted or unsubstituted alkyl group, the main chain of which contains from 14 to 17 carbon atoms, even more advantageously 14 carbon atoms.
Des exemples particuliers de groupes alkyle à chaîne longue saturée pour R ou R' sont notamment les groupes C7Hι5, Cι0H21, CnH23. C-ι2H25, C13H27, C14H29, CiδH3ι, Cι6H33, Cι7H35. Des exemples particuliers de groupes alkyle à chaîne longue insaturée pour R ou R' sont notamment les groupes C14H25, Cι4H27, C15H29, C17H29, Cι7H3ι, C17H33, C19H29, C19H31, C2ιH3ι, C21H35, C21H37, C2ιH39, C23H45, ou les chaînes alkyle des acides eicosapentaènoïque (EPA) C20-5 (5, 8, 11 , 14, 17) et docosahexaènoïque (DHA) C22:6(4, 7, 10, 13, 16, 19).Particular examples of saturated long chain alkyl groups for R or R ′ are in particular the groups C 7 Hι 5 , Cι 0 H 21 , CnH 2 3. C-ι 2 H 25 , C13H27, C 14 H 29 , Ci δ H 3 ι, Cι 6 H 33 , Cι 7 H 35 . Specific examples of chain alkyl groups long unsaturated for R or R 'are in particular the groups C14H25, Cι 4 H 27 , C15H29, C17H2 9 , Cι 7 H 3 ι, C17H33, C19H2 9 , C 19 H 31 , C 2 ιH 3 ι, C21H35, C21H37, C 2 ιH 39 , C23H45, or the alkyl chains of eicosapentaenoic acid (EPA) C20-5 (5, 8, 11, 14, 17) and docosahexaenoic acid (DHA) C 22: 6 (4, 7, 10, 13, 16, 19).
Des exemples de groupes alkyle à chaîne longue ramifiée sont notamment les groupes (CH2)n-CH(CH3)C2H5, (CH=C(CH3)-(CH2)2)n"-CH=C(CH3)2 ou (CH2)2x+ι-C(CH3)2-(CH2)n"-CH3 (x étant un nombre entier égal à ou compris entre 1 et 11 , n' étant un nombre entier égal à ou compris entre 1 et 22, n" étant un nombre entier égal à ou compris entre 1 et 5, n'" étant un nombre entier égal à ou compris entre 0 et 22 et (2x+n'") étant inférieur ou égal à 22, de préférence inférieur ou égal à 20).Examples of branched long chain alkyl groups are in particular the groups (CH 2 ) n-CH (CH 3 ) C 2 H 5 , (CH = C (CH 3 ) - (CH 2 ) 2 ) n "-CH = C (CH 3 ) 2 or (CH 2 ) 2 x + ι-C (CH 3 ) 2 - (CH 2 ) n "-CH 3 (x being an integer equal to or between 1 and 11, n 'being a integer equal to or between 1 and 22, n "being an integer equal to or between 1 and 5, n '" being an integer equal to or between 0 and 22 and (2x + n'") being less than or equal to 22, preferably less than or equal to 20).
Les groupes alkyle R ou R' peuvent éventuellement comprendre un groupe cyclique. Des exemples de groupes cycliques sont notamment le cyclopropyle, le cyclobutyle, le cyclopentyle et le cyclohexyle.The alkyl groups R or R ′ may optionally comprise a cyclic group. Examples of cyclic groups are especially cyclopropyl, cyclobutyl, cyclopentyl and cyclohexyl.
Comme indiqué ci-avant, les groupes alkyle R ou R' peuvent être éventuellement substitués par un ou plusieurs substituants, identiques ou différents. Les substituants sont choisis de préférence parmi un atome d'halogène (iode, chlore, fluor, brome) et un groupe -OH, =0, -N02, -NH2, -CN, -CH2-OH, -0-CH3, -CH2OCH3, -CF3 et -COOZ (Z étant un atome d'hydrogène ou un groupe alkyle, de préférence comportant de 1 à 6 atomes de carbone).As indicated above, the alkyl groups R or R ′ may be optionally substituted by one or more substituents, identical or different. The substituents are preferably chosen from a halogen atom (iodine, chlorine, fluorine, bromine) and a group -OH, = 0, -N0 2 , -NH 2 , -CN, -CH 2 -OH, -0- CH 3 , -CH 2 OCH 3 , -CF 3 and -COOZ (Z being a hydrogen atom or an alkyl group, preferably having from 1 to 6 carbon atoms).
Cette invention concerne également les isomères optiques et géométriques de ces composés, leurs racémates, leurs sels, leurs hydrates et leurs mélanges.This invention also relates to the optical and geometric isomers of these compounds, their racemates, their salts, their hydrates and their mixtures.
Les composés de formule (la) sont les composés de formule (I) selon l'invention dans laquelle un seul des groupes R1 , R2 ou R3 représente un atome d'hydrogène. Les composés de formule (Ib) sont les composés de formule (I) selon l'invention dans laquelle deux des groupes R1 , R2 ou R3 représentent un atome d'hydrogène.The compounds of formula (la) are the compounds of formula (I) according to the invention in which only one of the groups R1, R2 or R3 represents a hydrogen atom. The compounds of formula (Ib) are the compounds of formula (I) according to the invention in which two of the groups R1, R2 or R3 represent a hydrogen atom.
Selon un aspect particulier de l'invention, R1 et R3, identiques ou différents, représentent un atome d'hydrogène ou , plus particulièrement, un groupe CO-R.According to a particular aspect of the invention, R1 and R3, identical or different, represent a hydrogen atom or, more particularly, a CO-R group.
La présente invention inclut également les prodrogues des composés de formule (I), qui, après administration chez un sujet, vont se transformer en composés de formule (I) et/ou les métabolites des composés (I) qui présentent des activités thérapeutiques comparables aux composés de formule (I).The present invention also includes the prodrugs of the compounds of formula (I), which, after administration in a subject, will transform into compounds of formula (I) and / or the metabolites of the compounds (I) which exhibit therapeutic activities comparable to compounds of formula (I).
La présente invention concerne ainsi l'utilisation d'un composé de formule (I) pour la préparation d'une composition pharmaceutique destinée à traiter une pathologie vasculaire cérébrale, telle que l'ischémie cérébrale ou un accident hémorragique cérébral.The present invention thus relates to the use of a compound of formula (I) for the preparation of a pharmaceutical composition intended for treating a cerebrovascular pathology, such as cerebral ischemia or a hemorrhagic stroke.
Elle a également pour objet une composition pharmaceutique comprenant, dans un support acceptable sur le plan pharmaceutique, un composé de formule générale (I) tel que décrit ci-dessus, éventuellement en association avec un autre actif thérapeutique. Cette composition est en particulier destinée à traiter une pathologie vasculaire cérébrale, telle que l'ischémie cérébrale ou un accident hémorragique cérébral.It also relates to a pharmaceutical composition comprising, in a pharmaceutically acceptable carrier, a compound of general formula (I) as described above, optionally in combination with another therapeutic active. This composition is in particular intended to treat a cerebrovascular pathology, such as cerebral ischemia or a hemorrhagic stroke.
Dans les composés de formule générale (I) selon l'invention, dans le groupe CO-(CH2)2n+ι-X-R'. X représente préférentiellement un atome de soufre ou de sélénium et avantageusement un atome de soufre.In the compounds of general formula (I) according to the invention, in the group CO- (CH 2 ) 2n + ι-X-R '. X preferably represents a sulfur or selenium atom and advantageously a sulfur atom.
Par ailleurs, dans le groupe CO-(CH2)2n+ι-X-R'- n est de préférence compris entre 0 et 3, plus spécifiquement compris entre 0 et 2 et est en particulier égal à 0.Furthermore, in the group CO- (CH 2 ) 2n + ι-X-R'- n is preferably between 0 and 3, more specifically between 0 and 2 and is in particular equal to 0.
Dans les composés de formule générale (I) selon l'invention, R' peut comporter un ou plusieurs hétérogroupes, de préférence 0, 1 ou 2, plus préférentiellement 0 ou 1 , choisis parmi un atome d'oxygène, un atome de soufre, un atome de sélénium, un groupe SO ou un groupe SO2.In the compounds of general formula (I) according to the invention, R ′ may comprise one or more heterogroups, preferably 0, 1 or 2, more preferably 0 or 1, chosen from an oxygen atom, a sulfur atom, a selenium atom, an SO group or an SO 2 group.
Un exemple spécifique de groupe CO-(CH2)2n+rX-R' selon l'invention est le groupe CO-CH2-S-Cι4H29.A specific example of group CO- (CH 2 ) 2n + rX-R 'according to the invention is the group CO-CH 2 -S-Cι 4 H 29 .
A cet égard, les inventeurs ont mis au point de nouveaux composés de formule (I) présentant un groupe CO-CH2-S-Ci4H2 . La présente invention a ainsi pour objet les composés de formule (I) choisis parmi : - 1 ,3-ditétradécylthioacétyl-2-palmitoylglycérol ;In this regard, the inventors have developed new compounds of formula (I) having a CO-CH 2 -S-Ci 4 H 2 group . The subject of the present invention is therefore the compounds of formula (I) chosen from: - 1, 3-ditetradecylthioacetyl-2-palmitoylglycerol;
- 1 ,3-diacétyl-2-tétradécylthioacétylglycérol ;- 1,3-diacetyl-2-tetradecylthioacetylglycerol;
- 1 ,3-dioctanoyl-2-tétradécylthioacétylglycérol ;- 1, 3-dioctanoyl-2-tetradecylthioacetylglycerol;
- 1 ,3-diundécanoyl-2-tétradécylthioacétylglycérol ; et- 1, 3-diundecanoyl-2-tetradecylthioacetylglycerol; and
- 1 ,3-ditétradécylthioacétoxy-2-(2-tétradécylthio)methylcarbonylthio- propane.- 1, 3-ditétradécylthioacétoxy-2- (2-tétradécylthio) methylcarbonylthio-propane.
D'autre composés préférés au sens de l'invention sont des composés de formule générale (I) ci-dessus dans laquelle au moins un des groupes R1 , R2 et R3 représente un groupe CO-(CH2)2n+rX-R' dans lequel X représente un atome de soufre ou de sélénium, de préférence un atome de soufre et/ou R' est un groupe alkyle saturé et linéaire comprenant de 13 à 17 atomes de carbone, de préférence de 14 à 16, encore plus préférentiellement 14 atomes de carbone.Other preferred compounds within the meaning of the invention are compounds of general formula (I) above in which at least one of the groups R1, R2 and R3 represents a group CO- (CH 2 ) 2n + rX-R ' in which X represents a sulfur or selenium atom, preferably a sulfur atom and / or R 'is a saturated and linear alkyl group comprising from 13 to 17 carbon atoms, preferably from 14 to 16, even more preferably 14 carbon atoms.
A cet égard, des composés particuliers selon l'invention sont ceux dans lesquels R2 est un groupe de formule CO-(CH2)2n+ι-X-R', dans laquelle X représente un atome de soufre ou de sélénium, de préférence un atome de soufre et/ou R' est un groupe tel que défini ci-avant.In this regard, particular compounds according to the invention are those in which R2 is a group of formula CO- (CH 2 ) 2n + ι-X-R ', in which X represents a sulfur or selenium atom, preferably a sulfur atom and / or R 'is a group as defined above.
D'autres composés particuliers selon l'invention sont des composés de formule générale (I) dans laquelle le groupe G représente avantageusement un atome d'oxygène ou un groupe N-R4, de préférence un atome d'oxygène.Other particular compounds according to the invention are compounds of general formula (I) in which the group G advantageously represents an oxygen atom or an N-R4 group, preferably an oxygen atom.
D'autre part, lorsque G est N-R4, R4 représente préférentiellement un atome d'hydrogène ou un groupe méthyle. Dans ces composés, R2 représente avantageusement un groupe CO-(CH2)2n+rX-R' tel que défini ci-avant.On the other hand, when G is N-R4, R4 preferentially represents an atom of hydrogen or a methyl group. In these compounds, R2 advantageously represents a CO- (CH 2 ) 2n + rX-R 'group as defined above.
Selon un autre aspect, les composés particuliers selon l'invention sont des composés de formule générale (I) dans laquelle le groupe G représente un atome de soufre.According to another aspect, the particular compounds according to the invention are compounds of general formula (I) in which the group G represents a sulfur atom.
D'autres composés particuliers selon l'invention sont ceux dans lesquels deux des groupes R1 , R2 et R3, identiques ou différents, sont des groupes CO- (CH2)2n+rX-R' tels que définis ci-avant, dans lesquels X représente un atome de soufre ou de sélénium, de préférence un atome de soufre.Other particular compounds according to the invention are those in which two of the groups R1, R2 and R3, which are identical or different, are CO- (CH 2 ) 2n + rX-R 'groups as defined above, in which X represents a sulfur or selenium atom, preferably a sulfur atom.
D'autres composés préférés sont les composés de formule générale (I) dans laquelle R1 , R2 et R3, identiques ou différents, de préférence identiques, représentent un groupe CO-(CH2)2n+ι-X-R' tel que défini ci-avant, dans lesquels X représente un atome de soufre ou de sélénium et de préférence un atome de soufre et/ou R' représente un groupe alkyle saturé et linéaire comprenant de 13 à 17 atomes de carbone, de préférence de 14 à 17, encore plus préférentiellement 14 atomes de carbone, dans lesquels n est de préférence compris entre 0 et 3, et en particulier égal à 0. De manière plus spécifique, d'autres composés préférés sont les composés de formule générale (I) dans laquelle R1 , R2 et R3 représentent des groupes CO-CH2-S-Ci4H2g.Other preferred compounds are the compounds of general formula (I) in which R1, R2 and R3, identical or different, preferably identical, represent a group CO- (CH 2 ) 2n + ι-XR 'as defined above before, in which X represents a sulfur or selenium atom and preferably a sulfur atom and / or R 'represents a saturated and linear alkyl group comprising from 13 to 17 carbon atoms, preferably from 14 to 17, even more preferably 14 carbon atoms, in which n is preferably between 0 and 3, and in particular equal to 0. More specifically, other preferred compounds are the compounds of general formula (I) in which R1, R2 and R3 represent CO-CH 2 -S-Ci 4 H 2 g groups.
Des exemples de composés préférés selon l'invention sont représentés sur les Figures 1 A et 1 B.Examples of preferred compounds according to the invention are shown in Figures 1 A and 1 B.
Un autre objet de la présente invention concerne toute composition pharmaceutique comprenant dans un support acceptable sur le plan pharmaceutique au moins un composé de formule (I) tel que décrit ci-dessus, et en particulier au moins un composé de formule (I) choisi parmi : .Another subject of the present invention relates to any pharmaceutical composition comprising in a pharmaceutically acceptable carrier at least one compound of formula (I) as described above, and in particular at least one compound of formula (I) chosen from :.
- 1 ,3-ditétradécylthioacétyl-2-palmitoylglycérol ;- 1,3-ditetradecylthioacetyl-2-palmitoylglycerol;
- 1 ,3-diacétyl-2-tétradécylthioacétylglycérol ;- 1,3-diacetyl-2-tetradecylthioacetylglycerol;
- 1 ,3-dioctanoyl-2-tétradécylthioacétylglycérol ; - 1 ,3-diundécanoyl-2-tétradécylthioacétylglycérol ; et- 1, 3-dioctanoyl-2-tetradecylthioacetylglycerol; - 1, 3-diundecanoyl-2-tetradecylthioacetylglycerol; and
- 1 ,3-ditétradécylthioacétoxy-2-(2-tétradécylthio)methylcarbonylthio- propane.- 1, 3-ditétradécylthioacétoxy-2- (2-tétradécylthio) methylcarbonylthio-propane.
II s'agit avantageusement d'une composition pharmaceutique pour le traitement ou la prophylaxie des pathologies vasculaires cérébrales et plus particulièrement de l'ischémie cérébrale ou des accidents vasculaires cérébraux. Il a en effet été trouvé de manière surprenante que les composés de formule (I) possèdent à la fois des propriétés d'activateurs PPAR, d'antioxydants et d'anti- inflammatoires et possèdent une activité de neuroprotection prophylactique et curative pour l'ischémie cérébrale.It is advantageously a pharmaceutical composition for the treatment or prophylaxis of cerebrovascular pathologies and more particularly of cerebral ischemia or cerebrovascular accidents. It has in fact been surprisingly found that the compounds of formula (I) have both PPAR activator, antioxidant and anti-inflammatory properties and have prophylactic and curative neuroprotective activity for ischemia brain.
L'invention concerne également l'utilisation d'un composé tel que défini ci- avant pour la préparation d'une composition pharmaceutique destinée à la mise en œuvre d'une méthode de traitement ou de prophylaxie chez l'Homme ou chez l'animal.The invention also relates to the use of a compound as defined above for the preparation of a pharmaceutical composition intended for the implementation of a method of treatment or prophylaxis in humans or in animals .
L'invention concerne également une méthode de traitement des pathologies vasculaires cérébrales et plus particulièrement de l'ischémie cérébrale, comprenant l'administration à un sujet, notamment humain, d'une dose efficace d'un composé de formule (I) ou d'une composition pharmaceutique tels que définis ci-avant.The invention also relates to a method of treatment of cerebrovascular pathologies and more particularly of cerebral ischemia, comprising the administration to a subject, in particular human, of an effective dose of a compound of formula (I) or of a pharmaceutical composition as defined above.
Avantageusement, les composés de formule (I) utilisés sont tels que définis ci-dessus.Advantageously, the compounds of formula (I) used are as defined above.
Les compositions pharmaceutiques selon l'invention comprennent avantageusement un ou plusieurs excipients ou véhicules, acceptables sur le plan pharmaceutique. On peut citer par exemple des solutions salines, physiologiques, isotoniques, tamponnées, etc., compatibles avec un usage pharmaceutique et connues de l'homme du métier. Les compositions peuvent contenir un ou plusieurs agents ou véhicules choisis parmi les dispersants, solubilisants, stabilisants, surfactants, conservateurs, etc. Des agents ou véhicules utilisables dans des formulations (liquides et/ou injectables et/ou solides) sont notamment la méthylcellulose, l'hydroxyméthylcellulose, la carboxymethylcellulose, le polysorbate 80, le mannitol, la gélatine, le lactose, les huiles végétales, etc. Les compositions peuvent être formulées sous forme de suspension injectable, de gels, huiles, comprimés, suppositoires, poudres, gélules, capsules, etc., éventuellement au moyen de formes galeniques ou de dispositifs assurant une libération prolongée et/ou retardée. Pour ce type de formulation, on utilise avantageusement un agent tel que la cellulose, des carbonates ou des amidons.The pharmaceutical compositions according to the invention advantageously comprise one or more excipients or vehicles, acceptable from the pharmaceutical point of view. Mention may be made, for example, of saline, physiological, isotonic, buffered solutions, etc., compatible with pharmaceutical use and known to those skilled in the art. The compositions may contain one or more agents or vehicles chosen from dispersants, solubilizers, stabilizers, surfactants, preservatives, etc. Agents or vehicles usable in formulations (liquids and / or injectables and / or solids) are in particular methylcellulose, hydroxymethylcellulose, carboxymethylcellulose, polysorbate 80, mannitol, gelatin, lactose, vegetable oils, etc. The compositions may be formulated in the form of an injectable suspension, gels, oils, tablets, suppositories, powders, capsules, capsules, etc., optionally by means of dosage forms or devices ensuring sustained and / or delayed release. For this type of formulation, an agent such as cellulose, carbonates or starches is advantageously used.
Les composés ou compositions selon l'invention peuvent être administrés de différentes manières et sous différentes formes. Ainsi, ils peuvent être par exemple administrés de manière systémique, par voie orale, parentérale, par inhalation ou par injection, comme par exemple par voie intraveineuse, intra- musculaire, sous-cutanée, trans-dermique, intra-artérielle, etc. Pour les injections, les composés sont généralement conditionnés sous forme de suspensions liquides, qui peuvent être injectées au moyen de seringues ou de perfusions, par exemple. A cet égard, les composés sont généralement dissous dans des solutions salines, physiologiques, isotoniques, tamponnées, etc., compatibles avec un usage pharmaceutique et connues de l'homme du métier. Ainsi, les compositions peuvent contenir un ou plusieurs agents ou véhicules choisis parmi les dispersants, solubilisants, émulsifiants, stabilisants, surfactants, conservateurs, tampons, etc. Des agents ou véhicules utilisables dans des formulations liquides et/ou injectables sont notamment la méthylcellulose, l'hydroxyméthylcellulose, la carboxymethylcellulose, le polysorbate 80, le mannitol, la gélatine, le lactose, des huiles végétales, les liposomes, etc.The compounds or compositions according to the invention can be administered in different ways and in different forms. Thus, they can for example be administered systemically, orally, parenterally, by inhalation or by injection, such as for example by intravenous, intramuscular, subcutaneous, trans-dermal, intra-arterial, etc. For injections, the compounds are generally packaged in the form of liquid suspensions, which can be injected using syringes or infusions, for example. In this regard, the compounds are generally dissolved in saline, physiological, isotonic, buffered solutions, etc., compatible with pharmaceutical use and known to those skilled in the art. Thus, the compositions can contain one or more agents or vehicles chosen from dispersants, solubilizers, emulsifiers, stabilizers, surfactants, preservatives, buffers, etc. Agents or vehicles which can be used in liquid and / or injectable formulations are in particular methylcellulose, hydroxymethylcellulose, carboxymethylcellulose, polysorbate 80, mannitol, gelatin, lactose, vegetable oils, liposomes, etc.
Les composés peuvent ainsi être administrés sous forme de gels, huiles, comprimés, suppositoires, poudres, gélules, capsules, aérosols, etc., éventuellement au moyen de formes galeniques ou de dispositifs assurant une libération prolongée et/ou retardée. Pour ce type de formulation, on utilise avantageusement un agent tel que la cellulose, des carbonates ou des amidons. Les composés peuvent être administrés oralement auquel cas les agents ou véhicules utilisés sont choisis préférentiellement parmi l'eau, la gélatine, les gommes, le lactose, l'amidon, le stéarate de magnésium, le talc, une huile, le polyalkylène glycol, etc.The compounds can thus be administered in the form of gels, oils, tablets, suppositories, powders, capsules, capsules, aerosols, etc., optionally by means of dosage forms or devices ensuring sustained and / or delayed release. For this type of formulation, an agent such as cellulose, carbonates or starches is advantageously used. The compounds can be administered orally in which case the agents or vehicles used are preferably chosen from water, gelatin, gums, lactose, starch, magnesium stearate, talc, an oil, polyalkylene glycol, etc. .
Pour une administration parentérale, les composés sont préférentiellement administrés sous la forme de solutions, suspensions ou émulsions avec notamment de l'eau, de l'huile ou des polyalkylène glycols auxquels il est possible d'ajouter, outre des agents conservateurs, stabilisants, émulsifiants, etc., des sels permettant d'ajuster la pression osmotique, des tampons, etc.For parenteral administration, the compounds are preferably administered in the form of solutions, suspensions or emulsions with in particular water, oil or polyalkylene glycols to which it is possible to add, in addition to preservatives, stabilizers, emulsifiers , etc., salts to adjust the osmotic pressure, buffers, etc.
Il est entendu que le débit et/ou la dose injectée peuvent être adaptés par l'homme du métier en fonction du patient, de la pathologie concernée, du mode d'administration, etc. Typiquement, les composés sont administrés à des doses pouvant varier entre 1 μg et 2 g par administration, préférentiellement de 0,1 mg à 1 g par administration. Les administrations peuvent être quotidiennes ou répétées plusieurs fois par jour, le cas échéant. D'autre part, les compositions selon l'invention peuvent comprendre, en outre, d'autres agents ou principes actifs.It is understood that the flow rate and / or the dose injected can be adapted by a person skilled in the art depending on the patient, the pathology concerned, the mode of administration, etc. Typically, the compounds are administered in doses which can vary between 1 μg and 2 g per administration, preferably from 0.1 mg to 1 g per administration. The administrations can be daily or repeated several times a day, if necessary. On the other hand, the compositions according to the invention can also comprise other agents or active principles.
L'invention concerne aussi des méthodes de préparation de composés de formule (I) tels que décrits ci-dessus.The invention also relates to methods of preparing compounds of formula (I) as described above.
Les composés de l'invention peuvent être préparés à partir de produits du commerce, en mettant en œuvre une combinaison de réactions chimiques connues de l'homme du métier. L'invention concerne également des procédés de préparation des composés tels que définis ci-avant.The compounds of the invention can be prepared from commercial products, using a combination of chemical reactions known to those skilled in the art. The invention also relates to processes for the preparation of the compounds as defined above.
Selon un premier procédé de l'invention, les composés de formule (I) dans lesquels G est un atome d'oxygène ou de soufre, R1, R2 et R3 identiques ou différents, représentent un groupe CO-R ou un groupe CO-(CH2)2n+rX-R', sont obtenus à partir d'un composé de formule (I) dans laquelle G est respectivement un atome d'oxygène ou de soufre, R2 est un atome d'hydrogène et R1 et R3, identiques ou différents, représentent un groupe CO-R ou CO-(CH2)2n+rX-R', et d'un composé de formule A°-CO-A dans laquelle A est un groupe réactif choisi par exemple parmi OH, Cl, 0-CO-A° et OR", R" étant un groupe alkyle, et A° est le groupe R ou le groupe (CH2)2n+ι-X-R'I en présence éventuellement d'agents de couplages ou d'activateurs connus de l'homme de métier.According to a first method of the invention, the compounds of formula (I) in which G is an oxygen or sulfur atom, R1, R2 and R3 identical or different, represent a CO-R group or a CO- group ( CH 2 ) 2n + rX-R ', are obtained from a compound of formula (I) in which G is respectively an oxygen or sulfur atom, R2 is a hydrogen atom and R1 and R3, identical or different, represent a group CO-R or CO- (CH 2 ) 2n + rX-R ', and of a compound of formula A ° -CO-A in which A is a reactive group chosen for example from OH, Cl, 0-CO-A ° and OR ", R" being an alkyl group, and A ° is the group R or the group (CH 2 ) 2 n + ι-X-R ' I , optionally in the presence of coupling agents or activators known to those skilled in the art.
Les composés de formule (I) selon l'invention dans laquelle G est un atome d'oxygène, R2 est un atome d'hydrogène et R1 et R3, identiques ou différents, représentent un groupe CO-R ou CO-(CH2)2n+rX-R', peuvent être obtenus de différentes façons.The compounds of formula (I) according to the invention in which G is an oxygen atom, R2 is a hydrogen atom and R1 and R3, identical or different, represent a CO-R or CO- (CH 2 ) group 2n + rX-R ', can be obtained in different ways.
Selon un premier mode, on fait réagir une molécule de glycérol avec un composé de formule A°-CO-A1 dans laquelle A1 est un groupe réactif choisi par exemple parmi OH, Cl et OR", R" étant un groupe alkyle, et A° est le groupe R ou le groupe (CH2)2n+ι-X-R'. en présence éventuellement d'agents de couplages ou d'activateurs connus de l'homme de métier. Cette réaction permet la synthèse de composés dits symétriques, dans lesquels R1 et R3 ont la même signification. Cette réaction peut être mise en œuvre en adaptant les protocoles décrits par exemple dans (Feuge, Gros et al. 1953), (Gangadhar, Subbarao et al. 1989), (Han, Cho et al. 1999) ou (Robinson 1960).According to a first mode, a glycerol molecule is reacted with a compound of formula A ° -CO-A1 in which A1 is a reactive group chosen, for example, from OH, Cl and OR ", R" being an alkyl group, and A ° is the group R or the group (CH 2 ) 2n + ι-X-R '. possibly in the presence of coupling agents or activators known to those skilled in the art. This reaction allows the synthesis of so-called symmetrical compounds, in which R1 and R3 have the same meaning. This reaction can be implemented by adapting the protocols described for example in (Feuge, Gros et al. 1953), (Gangadhar, Subbarao et al. 1989), (Han, Cho et al. 1999) or (Robinson 1960).
Les composés de formule (I) selon l'invention dans laquelle G est un atome d'oxygène, R2 est un atome d'hydrogène et R1 et R3, identiques ou différents, représentent un groupe CO-R ou CO-(CH2)2n+ι-X-R', peuvent également être obtenus à partir d'un composé de formule (I) selon l'invention dans laquelle G est un atome d'oxygène, R2 et R3 représentent un atome d'hydrogène et R1 est un groupe CO-R ou CO-(CH2)2n+rX-R' (cette forme particulière de composés de formule (I) étant nommée composés de formule IV), et d'un composé de formule A°-CO-A2 dans laquelle A2 est un groupe réactif choisi par exemple entre OH et Cl, et A° est le groupe R ou le groupe (CH2)2n+rX-R'. en présence éventuellement d'agents de couplages ou d'activateurs connus de l'homme de métier. Cette réaction est avantageusement réalisée selon le protocole décrit par exemple dans (Daubert, SpiegI et al. 1943), (Feuge and Lovegren 1956) , (Katoch, Trivedi et al. 1999), (Strawn, Martell et al. 1989) ou (Strawn, Martell et al. 1989).The compounds of formula (I) according to the invention in which G is an oxygen atom, R2 is a hydrogen atom and R1 and R3, identical or different, represent a CO-R or CO- (CH2) 2 group n + ι-X-R ', can also be obtained from a compound of formula (I) according to the invention in which G is an oxygen atom, R2 and R3 represent a hydrogen atom and R1 is a group CO-R or CO- (CH 2 ) 2n + rX-R '(this particular form of compounds of formula (I) being called compounds of formula IV), and of a compound of formula A ° -CO-A2 in which A2 is a reactive group chosen, for example, from OH and Cl, and A ° is the group R or the group (CH 2 ) 2n + rX-R ' . possibly in the presence of coupling agents or activators known to those skilled in the art. This reaction is advantageously carried out according to the protocol described by example in (Daubert, SpiegI et al. 1943), (Feuge and Lovegren 1956), (Katoch, Trivedi et al. 1999), (Strawn, Martell et al. 1989) or (Strawn, Martell et al. 1989).
Les composés de formule IV décrits ci-dessus peuvent être préparés par un procédé comprenant :The compounds of formula IV described above can be prepared by a process comprising:
a) la réaction d'un composé de formule générale (II)a) the reaction of a compound of general formula (II)
avec un composé de formule A°-CO-A2 dans laquelle A2 est un groupe réactif choisi par exemple entre OH et CI, et A° est le groupe R ou le groupe en présence éventuellement d'agents de couplages ou d'activateurs connus de l'homme de métier pour donner un composé de formule générale (III)with a compound of formula A ° -CO-A2 in which A2 is a reactive group chosen, for example, from OH and CI, and A ° is the group R or the group optionally in the presence of coupling agents or activators known to those skilled in the art to give a compound of general formula (III)
) )
dans laquelle R1 représente un groupe CO-R ou CO-(CH2)2n+ι-X-R' ; etin which R1 represents a CO-R or CO- (CH2) 2n + ι-XR 'group; and
b) la déprotection du composé (III) par un acide (acide acétique, acide trifluoroacétique, acide borique, acide sulfurique, etc.) pour donner un composé de formule générale (IV) tel que défini ci-avant. Selon un autre procédé particulier de l'invention les composés de formule (I) dans laquelle G est un atome d'oxygène, R3 est un atome d'hydrogène et R1 et R2, identiques ou différents, représentent un groupe CO-R ou CO-(CH2)2n+rX-R', peuvent être obtenus à partir d'un composé de formule (I) selon l'invention dans laquelle G est un atome d'oxygène, R2 et R3 représentent un atome d'hydrogène et R1 est un groupe CO-R ou CO-(CH2)2n+ι-X-R' (composés IV), selon les étapes suivantes :b) deprotection of the compound (III) with an acid (acetic acid, trifluoroacetic acid, boric acid, sulfuric acid, etc.) to give a compound of general formula (IV) as defined above. According to another particular process of the invention, the compounds of formula (I) in which G is an oxygen atom, R3 is a hydrogen atom and R1 and R2, identical or different, represent a CO-R or CO group - (CH 2 ) 2n + rX-R ', can be obtained from a compound of formula (I) according to the invention in which G is an oxygen atom, R2 and R3 represent a hydrogen atom and R1 is a CO-R or CO- (CH 2 ) 2n + ι-XR 'group (compounds IV), according to the following steps:
a) réaction du composé (IV) avec un composé PxE dans lequel Px est un groupement protecteur ; et E est un groupe réactif choisi par exemple parmi OH ou un halogène, pour donner un composé de formule générale (V) dans laquelle R1 est un groupe CO-R ou CO-(CH2)2n+ι-X-R'. La réaction peut avantageusement être mise en œuvre en adaptant le protocole décrit par (Gaffney and Reese 1997) dans lequel PxE peut représenter le composé 9-phénylxanthène-9-ol ou le 9-chloro-9- phénylxanthènea) reaction of the compound (IV) with a compound PxE in which Px is a protective group; and E is a reactive group chosen, for example, from OH or a halogen, to give a compound of general formula (V) in which R1 is a CO-R or CO- (CH 2 ) 2n + ι-X-R 'group. The reaction can advantageously be carried out by adapting the protocol described by (Gaffney and Reese 1997) in which PxE can represent the compound 9-phenylxanthene-9-ol or 9-chloro-9-phenylxanthene
(V)(V)
b) réaction du composé de formule (V) avec un composé de formule A°-b) reaction of the compound of formula (V) with a compound of formula A ° -
CO-A2 dans laquelle A2 est un groupe réactif choisi par exemple entre OH et Cl, et A° est le groupe R ou le groupe (CH2)2n+ι-X-R'- en présence éventuellement d'agents de couplages ou d'activateurs connus de l'homme de métier pour donner un composé de formule générale (VI), dans laquelle R1 et R2, identiques ou différents, représentent un groupeCO-A2 in which A2 is a reactive group chosen, for example, from OH and Cl, and A ° is the group R or the group (CH 2 ) 2n + ι-X-R'- in the presence, optionally, of coupling agents or activators known to those skilled in the art to give a compound of general formula (VI), in which R1 and R2, identical or different, represent a group
CO-R ou CO-(CH2)2n+rX-R' et Px est un groupement protecteur CO-R or CO- (CH 2 ) 2n + rX-R 'and Px is a protective group
(VI)(VI)
c) déprotection du composé (VI), dans des conditions classiques connues de l'homme de métier pour donner un composé de formule générale (I) dans laquelle G est un atome d'oxygène, R3 est un atome d'hydrogène et R1 etc) deprotection of the compound (VI), under conventional conditions known to a person skilled in the art to give a compound of general formula (I) in which G is an oxygen atom, R3 is a hydrogen atom and R1 and
R2, identiques ou différents, représentent un groupe CO-R ou CO-R2, identical or different, represent a group CO-R or CO-
(CH2)2n+ι-X-R'-(CH 2 ) 2n + ι-X-R'-
Selon un autre procédé particulier de l'invention, les composés de formule générale (I) dans laquelle G est un atome d'oxygène, R1 et R3 représentent un atome d'hydrogène et R2 représente un groupe CO-R ou CO-(CH2)2n+ι-X-R', sont obtenus par un procédé comprenant :According to another particular process of the invention, the compounds of general formula (I) in which G is an oxygen atom, R1 and R3 represent a hydrogen atom and R2 represents a CO-R or CO- (CH 2 ) 2n + ι-X-R ', are obtained by a process comprising:
a) la réaction d'un composé de formule (VII)a) the reaction of a compound of formula (VII)
(VII)(VII)
avec un composé de formule A°-CO-A2 dans laquelle A2 est un groupe réactif choisi par exemple entre OH et Cl, et A° est le groupe R ou le groupe (CH2)2n+rX-R', en présence éventuellement d'agents de couplages ou d'activateurs connus de l'homme de métier pour donner un composé de formule générale (VIII) with a compound of formula A ° -CO-A2 in which A2 is a reactive group chosen, for example, from OH and Cl, and A ° is the group R or the group (CH 2 ) 2n + rX-R ', optionally in the presence coupling agents or activators known to those skilled in the art to give a compound of general formula (VIII)
(VIII)(VIII)
dans laquelle R2 représente un groupe CO-R ou CO-(CH2)2n+ι-X-R' ; etin which R2 represents a CO-R or CO- (CH 2 ) 2n + ι-XR 'group; and
b) déprotection du composé de formule (VIII) en milieu acide ou par hydrogénation catalytique pour donner un composé de formule générale (I) dans laquelle G est un atome d'oxygène, R1 et R3 représentent un atome d'hydrogène et R2 représente un groupe CO-R ou CO-(CH2)2n+ι-X- R'.b) deprotection of the compound of formula (VIII) in an acid medium or by catalytic hydrogenation to give a compound of general formula (I) in which G is an oxygen atom, R1 and R3 represent a hydrogen atom and R2 represents a CO-R or CO- (CH 2 ) 2n + ι-X- R 'group.
Les étapes ci-dessus peuvent être réalisées avantageusement selon les protocoles décrits par (Bodai, Novak et al. 1999), (Paris, Garmaise et al. 1980), (Scriba 1993) ou (Seltzman, Fleming et al. 2000).The above steps can advantageously be carried out according to the protocols described by (Bodai, Novak et al. 1999), (Paris, Garmaise et al. 1980), (Scriba 1993) or (Seltzman, Fleming et al. 2000).
Les composés de formule (I) selon l'invention dans laquelle G est un atome de soufre, R2 est un atome d'hydrogène et, R1 et R3, identiques ou différents, représentent un groupe CO-R ou CO-(CH2)2n+ι-X-R'- peuvent être obtenus à partir du composé de formule (IX) par le procédé suivant :The compounds of formula (I) according to the invention in which G is a sulfur atom, R2 is a hydrogen atom and, R1 and R3, identical or different, represent a CO-R or CO- (CH 2 ) group 2n + ι-X-R'- can be obtained from the compound of formula (IX) by the following process:
a) Réaction du composé IX et d'un premier composé de formule A°-CO-A3 dans laquelle A3 est un groupe réactif choisi par exemple entre OH, O- CO-A° et Cl, et A° est le groupe R ou le groupe (CH2)2n+1-X-R\ puis d'un second composé de formule A°-CO-A3 dans laquelle, indépendamment du premier composé, A3 est un groupe réactif choisi par exemple entre OH, 0-CO-A° et Cl, et A° est le groupe R ou le groupe (CH2)2n+ι-X-R'- en présence éventuellement d'agents de couplages ou d'activateurs connus de l'homme de métier,a) Reaction of compound IX and of a first compound of formula A ° -CO-A3 in which A3 is a reactive group chosen, for example, from OH, O-CO-A ° and Cl, and A ° is the group R or the group (CH 2 ) 2n + 1 -XR \ then of a second compound of formula A ° -CO-A3 in which, independently of the first compound, A3 is a reactive group chosen, for example, from OH, 0-CO-A ° and Cl, and A ° is the group R or the group (CH 2 ) 2 n + ι-X-R'- in the presence optionally coupling agents or activators known to those skilled in the art,
b) Déprotection du groupement thiol par l'acétate mercurique.b) deprotection of the thiol group with mercuric acetate.
Ce procédé est avantageusement réalisé selon le protocole décrit dans (Aveta, Brandt et al. 1986).This process is advantageously carried out according to the protocol described in (Aveta, Brandt et al. 1986).
Les composés de formule (I) selon l'invention dans laquelle G est un atome de soufre, R2 et R3 sont des atomes d'hydrogène et, R1 représente un groupe CO- R ou CO-(CH2)2n+rX-R', peuvent être obtenus à partir du composé de formule (IX) par le procédé suivant :The compounds of formula (I) according to the invention in which G is a sulfur atom, R2 and R3 are hydrogen atoms and, R1 represents a group CO- R or CO- (CH 2 ) 2n + rX-R ', can be obtained from the compound of formula (IX) by the following process:
a) Réaction du composé IX et d'un premier composé de formule A°-CO-A3 dans laquelle A3 est un groupe réactif choisi par exemple entre OH, O- CO-A° et Cl, et A° est le groupe R ou le groupe (CH2)2n+ι-X-R' en quantité stoechiométrique, en présence éventuellement d'agents de couplages ou d'activateurs connus de l'homme de métier,a) Reaction of compound IX and of a first compound of formula A ° -CO-A3 in which A3 is a reactive group chosen, for example, from OH, O-CO-A ° and Cl, and A ° is the group R or the group (CH 2 ) 2n + ι-XR 'in stoichiometric quantity, optionally in the presence of coupling agents or activators known to those skilled in the art,
b) Déprotection du groupement thiol par l'acétate mercurique.b) deprotection of the thiol group with mercuric acetate.
Le composé de formule (IX) peut être préparé par un procédé comprenant :The compound of formula (IX) can be prepared by a process comprising:
a) réaction d'un 2-halogénomalonate de diméthyle avec le tritylthiol pour donner le composé de formule Xa) reaction of a dimethyl 2-halogenomalonate with tritylthiol to give the compound of formula X
(X) b) Réduction des fonctions acétate par un agent réducteur connu de l'homme de métier.(X) b) Reduction of the acetate functions by a reducing agent known to those skilled in the art.
Les composés de formule (I) selon l'invention dans laquelle G est un atome de soufre, et R1 , R2 et R3, identiques ou différents, représentent un groupe CO-R ou CO-(CH2)2n+ι-X-R', peuvent également être obtenus par le procédé suivant (voir aussi schéma 1 ) :The compounds of formula (I) according to the invention in which G is a sulfur atom, and R1, R2 and R3, identical or different, represent a group CO-R or CO- (CH 2 ) 2n + ι-X- R ', can also be obtained by the following process (see also diagram 1):
a) Réaction d'un composé de formule V avec un composé de formule LG-E dans laquelle E représente un halogène et LG un groupe réactif choisi par exemple parmi mésyle, tosyle, etc., pour donner un composé de formule générale XI dans laquelle Px représente un groupement protecteur,a) Reaction of a compound of formula V with a compound of formula LG-E in which E represents a halogen and LG a reactive group chosen, for example, from mesyl, tosyle, etc., to give a compound of general formula XI in which Px represents a protective group,
b) Réaction d'un composé de formule XI avec un composé de formule Ac-S" b) Reaction of a compound of formula XI with a compound of formula Ac-S "
B+ dans laquelle Ac représente un groupe acyle court, préférentiellement le groupe acétyle, et B est un contre-ion choisi par exemple parmi le sodium ou le potassium, préférentiellement le potassium pour donner le composé de formule générale XII. Cette réaction peut avantageusement être mise en œuvre en adaptant le protocole décrit par (Gronowitz, Herslôf B + in which Ac represents a short acyl group, preferably the acetyl group, and B is a counterion chosen for example from sodium or potassium, preferentially potassium to give the compound of general formula XII. This reaction can advantageously be implemented by adapting the protocol described by (Gronowitz, Herslôf
c) Déprotection de l'atome de soufre d'un composé (XII) dans des conditions connues de l'homme de métier, pour donner un composé de formule générale (XIII),c) deprotection of the sulfur atom of a compound (XII) under conditions known to those skilled in the art, to give a compound of general formula (XIII),
d) Réaction d'un composé de formule générale (XIII) avec un composé de formule A°-CO-A2 dans laquelle A2 est un groupe réactif choisi par exemple entre OH et Cl, et A° est le groupe R ou le groupe (CH2)2n+ι-X-R', en présence éventuellement d'agents de couplages ou d'activateurs connus de l'homme de métier pour obtenir un composé de formule générale (XIV) dans laquelle R1 et R2, identiques ou différents, représentent un groupe CO-R ou CO-(CH2)2n+1-X-R', e) Déprotection d'un composé de formule (XIV) dans des conditions classiques connues de l'homme de métier, pour obtenir un composé de formule (I) selon l'invention dans laquelle (i) G est un atome de soufre, (ii) R3 est un atome d'hydrogène et (iii) R1 et R2 représentent un groupe CO-d) Reaction of a compound of general formula (XIII) with a compound of formula A ° -CO-A2 in which A2 is a reactive group chosen, for example, from OH and Cl, and A ° is the group R or the group ( CH 2 ) 2n + ι-X-R ', optionally in the presence of coupling agents or activators known to those skilled in the art to obtain a compound of general formula (XIV) in which R1 and R2, identical or different, represent a group CO-R or CO- (CH 2 ) 2n + 1 -X-R ', e) deprotection of a compound of formula (XIV) under conventional conditions known to those skilled in the art, to obtain a compound of formula (I) according to the invention in which (i) G is a sulfur atom, ( ii) R3 is a hydrogen atom and (iii) R1 and R2 represent a group CO-
R ou CO-(CH2)2n+ι-X-R\ identiques ou différents,R or CO- (CH 2 ) 2n + ι-XR \ identical or different,
f) Obtention de divers composés de formule (I) selon l'invention, dans laquelle G est un atome de soufre, et R1 , R2 et R3, identiques ou différents, représentent un groupe CO-R ou CO-(CH2)2n+ι-X-R'- par réaction des composés de formule (I) selon l'invention dans laquelle (i) G est un atome de soufre, (ii) R3 est un atome d'hydrogène et (iii) R1 et R2 représentent un groupe CO-R ou CO-(CH2)2n+rX-R'. identiques ou différents, notamment obtenus à l'étape e) ci-dessus, avec un composé de formule A°-CO-A2 dans laquelle A2 est un groupe réactif choisi par exemple entre OH et Cl, et A° est le groupe R ou le groupe (CH2)2n+ι-X-R'- en présence éventuellement d'agents de couplages ou d'activateurs connus de l'homme de métier.f) Obtaining various compounds of formula (I) according to the invention, in which G is a sulfur atom, and R1, R2 and R3, identical or different, represent a group CO-R or CO- (CH 2 ) 2n + ι-X-R'- by reaction of the compounds of formula (I) according to the invention in which (i) G is a sulfur atom, (ii) R3 is a hydrogen atom and (iii) R1 and R2 represent a group CO-R or CO- (CH2) 2n + rX-R '. identical or different, in particular obtained in step e) above, with a compound of formula A ° -CO-A2 in which A2 is a reactive group chosen, for example, from OH and Cl, and A ° is the group R or the group (CH2) 2n + ι-X-R'- optionally in the presence of coupling agents or activators known to those skilled in the art.
(XIII) (XIV)(XIII) (XIV)
schéma 1 Selon un autre mode, les composés de formule (I) selon l'invention dans laquelle G est un atome de soufre, et R1 , R2 et R3, identiques ou différents, représentent un groupe CO-R ou CO-(CH2)2n+1-X-R', peuvent également être obtenus par le procédé suivant : diagram 1 According to another mode, the compounds of formula (I) according to the invention in which G is a sulfur atom, and R1, R2 and R3, identical or different, represent a group CO-R or CO- (CH 2 ) 2n +1 -X-R ', can also be obtained by the following process:
a) Réaction d'un composé de formule générale (I) selon l'invention dans laquelle (i) G est un atome d'oxygène (ii) R2 représente un atome d'hydrogène et (iii) R1 et R3, identiques ou différents, représentent un groupe CO-R ou CO-(CH2)2n+ι-X-R' tels que définis ci-avant avec de l'iode en présence d'agents activateurs connus de l'homme de métier pour donner un composé de formule (XV) dans laquelle R1 et R3, identiques ou différents, représentent un groupe CO-R ou CO-(CH2)2n+ι-X-R'-a) Reaction of a compound of general formula (I) according to the invention in which (i) G is an oxygen atom (ii) R2 represents a hydrogen atom and (iii) R1 and R3, identical or different , represent a group CO-R or CO- (CH 2 ) 2n + ι-XR 'as defined above with iodine in the presence of activating agents known to those skilled in the art to give a compound of formula (XV) in which R1 and R3, identical or different, represent a group CO-R or CO- (CH 2 ) 2n + ι-X-R'-
(XV)(XV)
b) Réaction d'un composé de formule (XV) avec un acide thiocarboxylique en présence d'agents de couplage ou d'agents activateurs connus de l'homme de métier.b) Reaction of a compound of formula (XV) with a thiocarboxylic acid in the presence of coupling agents or activating agents known to those skilled in the art.
Les composés de formule (I) dans lesquels G est un groupe N-R4 et dans laquelle R1 , R2 et R3 identiques ou différents, représentent un groupe CO-R ou un groupe CO-(CH2)2n+ι-X-R'- sont obtenus à partir d'un composé de formule (I) dans laquelle G est un groupe N-R4, R1 et R3 sont des atomes d'hydrogène, R2 un groupe CO-R ou un groupe CO-(CH2)2n+ι-X-R' (composé XVI) selon le procédé suivant :The compounds of formula (I) in which G is an N-R4 group and in which R1, R2 and R3 which are identical or different, represent a CO-R group or a CO- (CH 2 ) 2n + ι-X-R group '- are obtained from a compound of formula (I) in which G is an N-R4 group, R1 and R3 are hydrogen atoms, R2 a CO-R group or a CO- (CH 2 ) group 2n + ι-XR '(compound XVI) according to the following process:
Réaction d'un composé XVI et d'un premier composé de formule A°-CO-A2 dans laquelle A2 est un groupe réactif choisi par exemple entre OH et Cl, et A° est le groupe R ou le groupe (CH2)2n+ι-X-R', puis d'un second composé de formule A°- CO-A2 dans laquelle, indépendamment du premier composé, A2 est un groupe réactif choisi par exemple entre OH et Cl, et A° est le groupe R ou le groupe (CH2)2n+ι-X-R', en présence éventuellement d'agents de couplages ou d'activateurs connus de l'homme de métier.Reaction of a compound XVI and of a first compound of formula A ° -CO-A2 in which A2 is a reactive group chosen for example between OH and Cl, and A ° is the group R or the group (CH 2 ) 2n + ι-X-R ', then of a second compound of formula A ° - CO-A2 in which, independently of the first compound, A2 is a reactive group chosen for example from OH and Cl, and A ° is the group R or the group (CH 2 ) 2n + ι-X-R ', optionally in the presence of coupling agents or activators known to those skilled in the art.
Ce procédé est avantageusement réalisé selon le protocole décrit dans (Terradas 1993).This process is advantageously carried out according to the protocol described in (Terradas 1993).
Les composés de formule (I) selon l'invention dans laquelle G est un groupe N- R4 et dans laquelle R1 et R2 représentent un groupe CO-R ou CO-(CH2)2n+ι-X- R', et R3 est un atome d'hydrogène peuvent être obtenus par réaction d'un composé XI et d'un composé de formule A°-CO-A2 dans laquelle A2 est un groupe réactif choisi par exemple entre OH et Cl, et A° est le groupe R ou le groupe (CH2)2n+ι-X-R' en quantité stœchiometrique, en présence éventuellement d'agents de couplages ou d'activateurs connus de l'homme de métier.The compounds of formula (I) according to the invention in which G is an N- R4 group and in which R1 and R2 represent a CO-R or CO- (CH 2 ) 2n + ι-X- R 'group, and R3 is a hydrogen atom can be obtained by reaction of a compound XI and a compound of formula A ° -CO-A2 in which A2 is a reactive group chosen for example between OH and Cl, and A ° is the group R or the group (CH 2 ) 2n + ι-XR 'in stoichiometric amount, optionally in the presence of coupling agents or activators known to those skilled in the art.
Les composés de formule (I) selon l'invention dans lesquels G est un groupe NH, R1 et R3 sont des atomes d'hydrogène, R2 un groupe CO-R ou un groupe CO- (CH2)2n+rX-R' (composé XVIa) peuvent être obtenus de différentes façons.The compounds of formula (I) according to the invention in which G is an NH group, R1 and R3 are hydrogen atoms, R2 a CO-R group or a CO- (CH 2 ) 2 n + rX-R group '(compound XVIa) can be obtained in different ways.
Selon un premier procédé, on fait réagir une molécule de 2-aminopropane-1 ,3- diol avec un composé de formule A°-CO-A dans laquelle A est un groupe réactif choisi par exemple entre OH, 0-CO-A°, OR" et Cl, et A° est le groupe R ou le groupe (CH2)2n+ι-X-R' en présence éventuellement d'agents de couplages ou d'activateurs connus de l'homme de métier.According to a first method, a molecule of 2-aminopropane-1, 3-diol is reacted with a compound of formula A ° -CO-A in which A is a reactive group chosen for example from OH, 0-CO-A ° , OR "and Cl, and A ° is the group R or the group (CH 2 ) 2 n + ι-XR ', optionally in the presence of coupling agents or activators known to those skilled in the art.
Cette réaction peut être mise en œuvre en adaptant les protocoles décrits par exemple dans (Shaban 1977), (Kurfϋrst, Roig et al. 1993), (Harada, Morie et al. 1996), (Khanolkar, Abadji et al. 1996), (Daniher and Bashkin 1998) et (Putnam and Bashkin 2000). Les composés de formule (I) selon l'invention dans lesquels G est un groupe NH, R1 et R3 sont des atomes d'hydrogène, R2 un groupe CO-R ou un groupe CO- (CH2)2n+ι-X-R' (composé XVIa) peuvent également être obtenus selon le procédé suivant :This reaction can be implemented by adapting the protocols described for example in (Shaban 1977), (Kurfϋrst, Roig et al. 1993), (Harada, Morie et al. 1996), (Khanolkar, Abadji et al. 1996), (Daniher and Bashkin 1998) and (Putnam and Bashkin 2000). The compounds of formula (I) according to the invention in which G is an NH group, R1 and R3 are hydrogen atoms, R2 a CO-R group or a CO- (CH 2 ) 2 n + ι-XR group '(compound XVIa) can also be obtained according to the following process:
a) Réaction du composé de formule XVII avec un composé de formule A°-CO-A dans laquelle A est un groupe réactif choisi par exemple entre OH, 0-CO-A°, OR" et Cl, et A° est le groupe R ou le groupe (CH2)2n+rX- R' en présence éventuellement d'agents de couplages ou d'activateurs connus de l'homme de métiera) Reaction of the compound of formula XVII with a compound of formula A ° -CO-A in which A is a reactive group chosen for example from OH, 0-CO-A °, OR "and Cl, and A ° is the group R or the group (CH 2 ) 2n + rX- R 'optionally in the presence of coupling agents or activators known to those skilled in the art
(XVII) pour donner un composé de formule générale XVIII(XVII) to give a compound of general formula XVIII
(XVIII) b) Déprotection du composé XVIII.(XVIII) b) Deprotection of compound XVIII.
Ce procédé peut avantageusement être mis en œuvre selon le protocole décrit dans (Harada, Morie et al. 1996).This process can advantageously be implemented according to the protocol described in (Harada, Morie et al. 1996).
Les composés de formule (I) selon l'invention dans lesquels G est un groupe N- R4 dans lequel R4 n'est pas un atome d'hydrogène, R1 et R3 sont des atomes d'hydrogène, R2 un groupe CO-R ou un groupe CO-(CH2)2n+ι-X-R' (composé XVIb) peuvent être obtenus selon le procédé suivant :The compounds of formula (I) according to the invention in which G is an N- R4 group in which R4 is not a hydrogen atom, R1 and R3 are hydrogen atoms, R2 a CO-R group or a group CO- (CH 2 ) 2n + ι-XR '(compound XVIb) can be obtained according to the following process:
a) Réaction du composé de formule XVII avec un composé de formule A°- CO-A dans laquelle A est un groupe réactif choisi par exemple entre OH,a) Reaction of the compound of formula XVII with a compound of formula A ° - CO-A in which A is a reactive group chosen, for example, from OH,
0-CO-A°, OR" et Cl, et A° est le groupe R ou le groupe (CH2)2n+ι-X-R' en présence éventuellement d'agents de couplages ou d'activateurs connus de l'homme de métier. )-NH2 0—0-CO-A °, OR "and Cl, and A ° is the group R or the group (CH 2 ) 2n + ι-XR ', optionally in the presence of coupling agents or activators known to those skilled in the art . ) -NH 2 0—
(XVII) pour donner un composé de formule générale XVIII(XVII) to give a compound of general formula XVIII
(XVIII) b) Réaction du composé XVIII avec un composé de type R4-A4 dans lequel A4 est un groupe réactif choisi par exemple entre Cl ou Br, en milieu basique,(XVIII) b) Reaction of compound XVIII with a compound of type R4-A4 in which A4 is a reactive group chosen, for example, from Cl or Br, in basic medium,
c) Déprotection du composé XVIII.c) Deprotection of compound XVIII.
La faisabilité, la réalisation et d'autres avantages de l'invention sont illustrés plus en détail dans les exemples qui suivent, qui doivent être considérés comme illustratifs et non limitatifs.The feasibility, implementation and other advantages of the invention are illustrated in more detail in the examples which follow, which should be considered as illustrative and not limiting.
Légende des figures :Legend of figures:
Figure 1A : Structure d'acylglycérols selon l'invention (exemples 2a, 2c, 4a-r).Figure 1A: Structure of acylglycerols according to the invention (Examples 2a, 2c, 4a-r).
Figure 1B : Structure de composés particuliers selon l'invention (exemples 5a-b, 6-c).Figure 1B: Structure of particular compounds according to the invention (examples 5a-b, 6-c).
Figure 2 : Evaluation des propriétés antioxydantes de composés selon l'invention sur l'oxydation des LDL par le cuivre (Cu).Figure 2: Evaluation of the antioxidant properties of compounds according to the invention on the oxidation of LDL by copper (Cu).
- Figure 2-a : formation de diènes conjugués en fonction du temps ou Lag-Phase. - Figure 2-b : vitesse de formation des diènes.- Figure 2-a: formation of conjugated dienes as a function of time or Lag-Phase. - Figure 2-b: speed of formation of the dienes.
- Figure 2-c : quantité maximum de diènes conjugués formés.- Figure 2-c: maximum quantity of conjugated dienes formed.
Figure 3: Evaluation des propriétés d'agonistes PPARα de composés selon l'invention avec le système de transactivation Gal4/PPARα. Figure 4 : Evaluation de l'effet neuroprotecteur de composés selon l'invention.Figure 3: Evaluation of the properties of PPARα agonists of compounds according to the invention with the Gal4 / PPARα transactivation system. Figure 4: Evaluation of the neuroprotective effect of compounds according to the invention.
- Figure 4-a : Effet neuroprotecteur prophylactique.- Figure 4-a: Prophylactic neuroprotective effect.
- Figure 4-b : Effet neuroprotecteur prophylactique sur les différentes régions de l'encéphale.- Figure 4-b: Prophylactic neuroprotective effect on the different regions of the brain.
- Figure 4-c : Effet neuroprotecteur curatif (phase aiguë 24 h).- Figure 4-c: Curative neuroprotective effect (acute phase 24 h).
- Figure 4-d : Effet neuroprotecteur curatif sur les différentes régions de l'encéphale (phase aiguë 24 h).- Figure 4-d: Curative neuroprotective effect on the different regions of the brain (acute phase 24 h).
- Figure 4-e : Effet neuroprotecteur curatif (phase aiguë 72 h). - Figure 4-f : Effet neuroprotecteur curatif sur les différentes régions de l'encéphale (phase aiguë 72 h).- Figure 4-e: Curative neuroprotective effect (acute phase 72 h). - Figure 4-f: Curative neuroprotective effect on the different regions of the brain (acute phase 72 h).
EXEMPLES :EXAMPLES:
Pour faciliter la lecture du texte, les composés selon l'invention utilisés dans les exemples de mesure ou d'évaluation d'activité seront notés de manière abrégée telle que « Ex 4g » pour désigner le composé selon l'invention dont la préparation est décrite à l'exemple 4g.To make the text easier to read, the compounds according to the invention used in the examples for measuring or evaluating activity will be abbreviated as "Ex 4g" to denote the compound according to the invention, the preparation of which is described in example 4g.
Les chromatographies sur couche mince (CCM) ont été effectuées sur des plaques de gel de silice 6OF254 MERCK d'épaisseur 0.2 mm. On utilise l'abréviation Rf pour désigner le facteur de rétention (rétention factor). Les chromatographies sur colonne ont été réalisées sur gel de silice 60 de granulométrie 40-63 μm (référence 9385-5000 MERCK). Les points de fusion (PF) ont été mesurés à l'aide d'un appareil BUCHI B 540 par la méthode des capillaires. Les spectres infra-rouge (IR) ont été réalisés sur un spectromètre à transformée de Fourier BRUKER (Vector 22). Les spectres de résonance magnétique nucléaire (RMN) ont été enregistrés sur un spectromètre BRUKER AC 300 (300 MHz). Chaque signal est repéré par son déplacement chimique, son intensité, sa multiplicité (notée s pour singulet, si pour singulet large, d pour doublet, dd pour doublet dédoublé, t pour triplet, td pour triplet dédoublé, quint pour quintuplet et m pour multiplet) et sa constante de couplage (J). Les spectres de masse (SM) ont été réalisés sur un spectromètre PERKIN- ELMER SCIEX API 1 (ESI-MS pour ElectroSpray lonization Mass Spectrometry) ou sur un spectromètre APPLIED BIOSYSTEMS Voyager DE-STR de type MALDI-TOF (Matrix-Assisted Laser Desorption/lonization - Time Of Flight).Thin layer chromatographies (TLC) were carried out on MERCOF 6OF 254 silica gel plates 0.2 mm thick. The abbreviation Rf is used to denote the retention factor. The column chromatographies were carried out on silica gel 60 with a particle size 40-63 μm (reference 9385-5000 MERCK). The melting points (PF) were measured using a BUCHI B 540 device by the capillary method. The infrared (IR) spectra were performed on a Fourier transform spectrometer BRUKER (Vector 22). The nuclear magnetic resonance (NMR) spectra were recorded on a BRUKER AC 300 spectrometer (300 MHz). Each signal is identified by its chemical displacement, its intensity, its multiplicity (noted s for singlet, if for broad singlet, d for doublet, dd for split doublet, t for triplet, td for split triplet, quint for quintuplet and m for multiplet ) and its coupling constant (J). Mass spectra (SM) were carried out on a PERKIN-ELMER SCIEX API 1 spectrometer (ESI-MS for ElectroSpray lonization Mass Spectrometry) or on an APPLIED BIOSYSTEMS Voyager DE-STR spectrometer of MALDI-TOF type (Matrix-Assisted Laser Desorption / lonization - Time Of Flight).
EXEMPLE 1 : Préparation de dérivés d'acides grasEXAMPLE 1 Preparation of fatty acid derivatives
EXEMPLE 1a : Préparation de l'acide tetradécylthioacétiqueEXAMPLE 1a: Preparation of tetradecylthioacetic acid
L'hydroxyde de potassium (34.30 g, 0.611 mol), l'acide mercaptoacétiquePotassium hydroxide (34.30 g, 0.611 mol), mercaptoacetic acid
(20.9 ml, 0.294 mol) et le 1 -bromotétradécane (50 ml, 0.184 mol) sont ajoutés dans l'ordre au méthanol (400 ml). Ce mélange est placé sous agitation pendant une nuit à température ambiante. Au mélange réactionnel précédent est alors ajoutée une solution d'acide chlorhydrique concentré (60 ml) dissous dans l'eau (800 ml). L'acide tetradécylthioacétique précipite. Le mélange est laissé sous agitation une nuit à température ambiante. Le précipité est ensuite filtré, lavé cinq fois à l'eau puis séché au dessiccateur. Le produit est recristallisé dans le méthanol.(20.9 ml, 0.294 mol) and 1 -bromotetradecane (50 ml, 0.184 mol) are added in order to methanol (400 ml). This mixture is stirred overnight at room temperature. To the above reaction mixture is then added a solution of concentrated hydrochloric acid (60 ml) dissolved in water (800 ml). Tetradecylthioacetic acid precipitates. The mixture is left stirring overnight at room temperature. The precipitate is then filtered, washed five times with water and then dried in a desiccator. The product is recrystallized from methanol.
Rendement 94% Rf (dichlorométhane-méthanol 9-1) : 0.60Yield 94% Rf (dichloromethane-methanol 9-1): 0.60
PF : 67-68°CMp: 67-68 ° C
IR : vCO acide 1726 et 1684 cm"1 IR: vCO acid 1726 and 1684 cm "1
RMN (1H, CDCI3): 0.84-0.95 (t, 3H, -CH3, J=6.5Hz); 1.20-1.45 (massif, 22H, -NMR (1 H, CDCl 3): 0.84-0.95 (t, 3H, -CH 3, J = 6.5Hz); 1.20-1.45 (massive, 22H, -
CH2-); 1.55-1.69 (quint, 2H, -CH2-CH2-S-, J=7Hz); 2.63-2.72 (t, 2H, CH2-CH2-S-, J=7Hz); 3.27 (s, 2H, S-CH2-COOH)CH 2 -); 1.55-1.69 (quint, 2H, -CH 2 -CH 2 -S-, J = 7Hz); 2.63-2.72 (t, 2H, CH 2 -CH 2 -S-, J = 7Hz); 3.27 (s, 2H, S-CH 2 -COOH)
SM (ESI-MS) : M-1 = 287.SM (ESI-MS): M-1 = 287.
EXEMPLE 1b: Préparation de l'acide 4-(dodécylthio)butanoïqueEXAMPLE 1b: Preparation of 4- (dodecylthio) butanoic acid
Le dodécanethiol (2.01 g ; 10 mmol) et le bromobutyrate d'éthyle (1.971 g ; 10 mmol) sont placés sous agitation à température ambiante sous atmosphère inerte. L'hydroxyde de potassium (1.36 g ; 21 mmol) dissous dans 50 ml d'éthanol est ajouté lentement. Le mélange réactionnel est porté à reflux pendant 3 heures. L'éthanol est évaporé sous vide. Le résidu est repris par l'eau et acidifié. Le précipité formé est filtré, lavé à l'eau et séché. Rendement 90% Rf (dichlorométhane-méthanol 9-1) : 0.46 IR : vCO acide 1689 cm"1 Dodecanethiol (2.01 g; 10 mmol) and ethyl bromobutyrate (1.971 g; 10 mmol) are placed under stirring at room temperature under an inert atmosphere. Potassium hydroxide (1.36 g; 21 mmol) dissolved in 50 ml ethanol is added slowly. The reaction mixture is brought to reflux for 3 hours. The ethanol is evaporated in vacuo. The residue is taken up in water and acidified. The precipitate formed is filtered, washed with water and dried. Yield 90% Rf (dichloromethane-methanol 9-1): 0.46 IR: vCO acid 1689 cm "1
RMN (1H, CDCI3) : 0.86-0.91 (t, 3H, -CH3, J=6.2Hz) ; 1.25-1.45 (massif, 18H, - CH2-) ; 1.53-1.63 (quint, 2H, -CH2-CH2-S-, J=6.7Hz) ; 1.87-2.00 (quint, 2H, -CH2- S-CH2-CH2-CH2-COOH, J=7.2Hz) ; 2.47-2.55 (m, 4H, -CH2-S-CH2-CH2-CH2- COOH) ; 2.55-2.62 (t, 2H, -CH2-S-CH2-CH2-CH2-COOH, J=7.2Hz) SM (ESI-MS) : M-1 = 287NMR (1 H, CDCl 3): 0.86-0.91 (t, 3H, -CH 3, J = 6.2Hz); 1.25-1.45 (solid, 18H, - CH 2 -); 1.53-1.63 (quint, 2H, -CH 2 -CH 2 -S-, J = 6.7Hz); 1.87-2.00 (quint, 2H, -CH 2 - S-CH 2 -CH 2 -CH 2 -COOH, J = 7.2Hz); 2.47-2.55 (m, 4H, -CH 2 -S-CH 2 -CH 2 -CH 2 - COOH); 2.55-2.62 (t, 2H, -CH 2 -S-CH 2 -CH 2 -CH 2 -COOH, J = 7.2Hz) SM (ESI-MS): M-1 = 287
EXEMPLE 1c : Préparation de l'acide 6-(décylthio)hexanoïqueEXAMPLE 1c: Preparation of 6- (decylthio) hexanoic acid
Le décanethiol (4.57 g ; 25 mmol) et l'acide 4-bromobutyrique (5 g ; 25 mmol) sont placés sous agitation à température ambiante sous atmosphère inerte.Decanethiol (4.57 g; 25 mmol) and 4-bromobutyric acid (5 g; 25 mmol) are stirred at room temperature under an inert atmosphere.
L'hydroxyde de potassium dissous dans 50 ml d'éthanol est ajouté lentement. Le mélange réactionnel est porté à reflux pendant 3 heures. L'éthanol est évaporé sous vide. Le résidu est repris par l'eau et acidifié. Le précipité formé est filtré, lavé à l'eau et séché. Rendement 95%The potassium hydroxide dissolved in 50 ml of ethanol is added slowly. The reaction mixture is brought to reflux for 3 hours. The ethanol is evaporated in vacuo. The residue is taken up in water and acidified. The precipitate formed is filtered, washed with water and dried. 95% efficiency
Rf (dichlorométhane-méthanol 9-1) : 0.37Rf (dichloromethane-methanol 9-1): 0.37
IR: vCO acide 1690 cm"1 IR: vCO acid 1690 cm "1
RMN (1H, CDCI3) : 0.86-0.91 (t, 3H, -CH3, J=6.5Hz) ; 1.22-1.41 (massif, 14H, -NMR (1 H, CDCl 3): 0.86-0.91 (t, 3H, -CH 3, J = 6.5Hz); 1.22-1.41 (massive, 2 p.m., -
CH2-) ; 1.42-1.50 (m, 2H, CH2-S-CH2-CH2-CH2-CH2-CH2-COOH) ; 1.53-1.75 (massif, 6H, -CH2-CH2-S-CH2-CH2-CH2-CH2-CH2-COOH) ; 2.35-2.42 (t, 2H, -CH 2 -); 1.42-1.50 (m, 2H, CH 2 -S-CH 2 -CH 2 -CH 2 -CH 2 -CH 2 -COOH); 1.53-1.75 (solid, 6H, -CH 2 -CH 2 -S-CH 2 -CH 2 -CH 2 -CH 2 -CH 2 -COOH); 2.35-2.42 (t, 2H, -
CH2-S-CH2-CH2-CH2-CH2-CH2-COOH, J=7Hz) ; 2.48-2.55 (massif, 4H, -CH2-S-CH 2 -S-CH 2 -CH 2 -CH 2 -CH 2 -CH 2 -COOH, J = 7 Hz); 2.48-2.55 (solid, 4H, -CH 2 -S-
CH2 ).CH 2 ).
SM (ESI-MS) : M-1 = 287 EXEMPLE 1d : Préparation de l'acide tétradécylsélénoacétiqueSM (ESI-MS): M-1 = 287 EXAMPLE 1d: Preparation of tetradecylselenoacetic acid
Préparation du tétradécyldisélénurePreparation of tetradecyldiselenide
Sous atmosphère inerte, du sélénium (1.19 g ; 15 mmol) est introduit dans un mélange tétrahydrofuranne/eau (1/1) (50 ml). Le mélange réactionnel est refroidi dans un bain de glace avant d'ajouter lentement le tetraborohydrure de sodium (1.325 g ; 35 mmol). Une seconde fraction de sélénium (1.19 g ; 15 mmol) est ajoutée. Le mélange réactionnel est maintenu sous agitation à température ambiante pendant 15 min puis chauffé à reflux pour dissoudre tous les réactifs. Le bromotétradécane (9 ml ; 30 mmol) dissous dans 25 ml de tétrahydrofuranne est ajouté. Le mélange réactionnel est laissé sous agitation à température ambiante pendant 3 heures. Le milieu réactionnel est alors extrait au dichlorométhane. Les phases organiques sont groupées, séchées sur du sulfate de magnésium, filtrées et portées à sec. Le produit est utilisé sans autre purification. Rf (éther de pétrole) : 0.77 PF : 43°CUnder an inert atmosphere, selenium (1.19 g; 15 mmol) is introduced into a tetrahydrofuran / water mixture (1/1) (50 ml). The reaction mixture is cooled in an ice bath before slowly adding sodium tetraborohydride (1.325 g; 35 mmol). A second fraction of selenium (1.19 g; 15 mmol) is added. The reaction mixture is stirred at room temperature for 15 min and then heated to reflux to dissolve all the reagents. Bromotetradecane (9 ml; 30 mmol) dissolved in 25 ml of tetrahydrofuran is added. The reaction mixture is left under stirring at room temperature for 3 hours. The reaction medium is then extracted with dichloromethane. The organic phases are grouped, dried over magnesium sulfate, filtered and brought to dryness. The product is used without further purification. Rf (petroleum ether): 0.77 PF: 43 ° C
IR : vCH 2960-2850 cm"1 IR: vCH 2960-2850 cm "1
RMN (1H, CDCIs) : 0.87-0.93 (t, 6H, -CH3l J=6.5Hz) ; 1.20-1.48 (massif, 44H, - CH2-) ; 1.62-1.80 (m, 4H, -CH2-CH2-Se-) ; 2.88-2.96 (t, 4H, -CH2-CH2-Se-, J=7Hz).NMR ( 1 H, CDCIs): 0.87-0.93 (t, 6H, -CH 3l J = 6.5Hz); 1.20-1.48 (massive, 44H, - CH 2 -); 1.62-1.80 (m, 4H, -CH 2 -CH 2 -Se-); 2.88-2.96 (t, 4H, -CH 2 -CH 2 -Se-, J = 7Hz).
Préparation de l'acide tétradécylsélénoacétiquePreparation of tetradecylselenoacetic acid
Sous atmosphère inerte, le ditétradécyldisélénure (8.5 g ; 17 mmol) est dissous dans un mélange tétrahydrofuranne/eau (150 ml/50 ml) et refroidi dans un bain de glace. Le tetraborohydrure de sodium (2.9 g ; 61 mmol) est ajouté lentement (la solution se décolore) puis est ajouté l'acide bromoacétique (8.5 g ; 61 mmol) dissous dans un mélange tétrahydrofuranne/eau (25 ml / 25 ml). Le mélange réactionnel est maintenu sous agitation à température ambiante pendant 6 heures. Le mélange réactionnel est extrait à l'éther puis la phase aqueuse est acidifiée. Le précipité obtenu est filtré, lavé plusieurs fois à l'eau et séché. Rendement 29% Rf (dichlorométhane-méthanol 9-1 ) : 0.60 PF : 68°CUnder an inert atmosphere, the ditétradécyldisélénure (8.5 g; 17 mmol) is dissolved in a tetrahydrofuran / water mixture (150 ml / 50 ml) and cooled in an ice bath. Sodium tetraborohydride (2.9 g; 61 mmol) is added slowly (the solution discolours) and then bromoacetic acid (8.5 g; 61 mmol) dissolved in a tetrahydrofuran / water mixture (25 ml / 25 ml) is added. The reaction mixture is stirred at room temperature for 6 hours. The reaction mixture is extracted with ether then the aqueous phase is acidified. The precipitate obtained is filtered, washed several times with water and dried. Yield 29% Rf (dichloromethane-methanol 9-1): 0.60 Mp: 68 ° C
IR : vCO acide 1719 et 1680 cm"1 IR: vCO acid 1719 and 1680 cm "1
RMN (1H, CDCI3) : 0.85-0.95 (t, 3H, -CH3, J=6.5Hz) ; 1.25-1.48 (massif, 22H, - CH2-) ; 1.65-1.78 (quint, 2H, -CH2-CH2-Se-, J=7Hz) ; 2.78-2.84 (t, 2H, CH2-CH2- Se-, J=7Hz) ; 3.18 (s, 2H, Se-CH2-COOH) SM (ESI-MS) : M-1 = 335NMR (1 H, CDCl 3): 0.85-0.95 (t, 3H, -CH 3, J = 6.5Hz); 1.25-1.48 (massive, 22H, - CH 2 -); 1.65-1.78 (quint, 2H, -CH 2 -CH 2 -Se-, J = 7Hz); 2.78-2.84 (t, 2H, CH 2 -CH 2 - Se-, J = 7Hz); 3.18 (s, 2H, Se-CH 2 -COOH) SM (ESI-MS): M-1 = 335
EXEMPLE 1e : Préparation de l'acide tétradécylsulfoxyacétiqueEXAMPLE 1e: Preparation of tetradecylsulfoxyacetic acid
L'acide tetradécylthioacétique (exemple 1 a) (5 g ; 17.4 mmol) est dissous dans un mélange méthanol/dichlorométhane (160 ml / 80 ml). Le mélange réactionnel est mis sous agitation et refroidi dans un bain de glace avant d'ajouter lentement l'oxone® (12.8 g ; 21 mmol) dissous dans l'eau (160 ml). Le mélange réactionnel est maintenu sous agitation à température ambiante pendant 3 heures. Les solvants sont évaporés sous vide. Le précipité formé dans la phase aqueuse résiduelle est essoré, lavé plusieurs fois à l'eau et séché .The tetradecylthioacetic acid (example 1 a) (5 g; 17.4 mmol) is dissolved in a methanol / dichloromethane mixture (160 ml / 80 ml). The reaction mixture was stirred and cooled in an ice bath before adding slowly oxone ® (12.8 g; 21 mmol) dissolved in water (160 ml). The reaction mixture is stirred at room temperature for 3 hours. The solvents are evaporated in vacuo. The precipitate formed in the residual aqueous phase is drained, washed several times with water and dried.
Rendement 90%Yield 90%
Rf (dichlorométhane-méthanol 9-1 ) : 0.27Rf (dichloromethane-methanol 9-1): 0.27
IR : vCO acide 1723 et 1690 cm"1 IR: vCO acid 1723 and 1690 cm "1
RMN (1H, DMSO) : 0.80-0.92 (t, 3H, -CH3, J=6.4Hz) ; 1.19-1.50 (massif, 22H, - CH2-) ; 1.55-1.71 (quint, 2H, -CH2-CH2-SO-) ; 2.70-2.89 (t, 2H, -CH2-CH2-SO-NMR (1H, DMSO): 0.80-0.92 (t, 3H, -CH 3, J = 6.4Hz); 1.19-1.50 (massive, 22H, - CH 2 -); 1.55-1.71 (quint, 2H, -CH 2 -CH 2 -SO-); 2.70-2.89 (t, 2H, -CH 2 -CH 2 -SO-
CH2-COOH, J=6.7Hz) ; 3.52-3.70 (d, 1H, -CH2-SO-CH2-COOH, J=14.5Hz) ;CH 2 -COOH, J = 6.7 Hz); 3.52-3.70 (d, 1H, -CH 2 -SO-CH 2 -COOH, J = 14.5Hz);
3.80-3.95 (d, 1 H, -CH2-SO-CH2-COOH, J=14.1 Hz).3.80-3.95 (d, 1 H, -CH 2 -SO-CH 2 -COOH, J = 14.1 Hz).
SM (ESI-MS) : M+1 = 305 ; M+23 = 327 (M+Na+) ; M+39 = 343 (M+K+)MS (ESI-MS): M + 1 = 305; M + 23 = 327 (M + Na + ); M + 39 = 343 (M + K + )
EXEMPLE 1f: Préparation de l'acide 6-(décylsulfoxy)hexanoïqueEXAMPLE 1f Preparation of 6- (decylsulfoxy) hexanoic acid
Le produit est préparé selon la procédure précédemment décrite (exemple 1e) à partir de l'acide 6-(décylthio)hexanoïque (exemple 1 c). Rendement 94%.The product is prepared according to the procedure previously described (example 1e) from 6- (decylthio) hexanoic acid (example 1c). Yield 94%.
Rf (dichlorométhane-méthanol 9-1) : 0.18 RMN (1H, CDCI3) : 0.86-0.91 (t, 3H, -CH3, J = 6.8 Hz) ; 1.20-1.40 (massif, 14H, - CH2-) ; 1.40-1.60 (m, 2H, CH2-SO-CH2-CH2-CH2-CH2-CH2-COOH) ; 1.63-1.95 (massif, 6H, -CH2-CH2-SO-CH2-CH2-CH2-CH2-CH2-COOH) ; 2.35-2.42 (m, 3H, - CH2-SO-CH2-CH2-CH2-CH2-CH2-COOH et -CH2-SO-CH2-CH2-CH2-CH2-CH2- COOH) ; 2.60-2.71 (m, 1 H, -CH2-SO-CH2-CH2-CH2-CH2-CH2-COOH) ; 2.75-2.85 (m, 1 H, -CH2-SO-(CH2)5-COOH) ; 2.80-3.01 (m, 1 H, -CH2-SO-(CH2)5-COOH).Rf (dichloromethane-methanol 9-1): 0.18 NMR ( 1 H, CDCI 3 ): 0.86-0.91 (t, 3H, -CH 3 , J = 6.8 Hz); 1.20-1.40 (massive, 14H, - CH 2 -); 1.40-1.60 (m, 2H, CH 2 -SO-CH 2 -CH 2 -CH 2 -CH 2 -CH 2 -COOH); 1.63-1.95 (solid, 6H, -CH 2 -CH 2 -SO-CH 2 -CH 2 -CH 2 -CH 2 -CH 2 -COOH); 2.35-2.42 (m, 3H, - CH 2 -SO-CH 2 -CH 2 -CH 2 -CH 2 -CH 2 -COOH and -CH 2 -SO-CH 2 -CH 2 -CH 2 -CH 2 -CH 2 - COOH); 2.60-2.71 (m, 1H, -CH 2 -SO-CH 2 -CH 2 -CH 2 -CH 2 -CH 2 -COOH); 2.75-2.85 (m, 1H, -CH 2 -SO- (CH 2 ) 5 -COOH); 2.80-3.01 (m, 1 H, -CH 2 -SO- (CH 2 ) 5 -COOH).
EXEMPLE 1g : Préparation de l'acide tétradécylsulfonylacétique L'acide tetradécylthioacétique (exemple 1a) (5 g ; 17.4 mmol) est dissous dans un mélange méthanol/dichlorométhane (160 ml / 80 ml). Le mélange réactionnel est placé sous agitation et refroidi dans un bain de glace avant d'ajouter lentement l'oxone® (21.8 g ; 35 mmol) dissous dans l'eau (160 ml). Le mélange réactionnel est maintenu sous agitation à température ambiante pendant 3 heures. Les solvants sont évaporés sous vide. Le précipité formé dans la phase aqueuse résiduelle est essoré, lavé plusieurs fois à l'eau et séché . Rendement 89%EXAMPLE 1g: Preparation of tetradecylsulfonylacetic acid Tetradecylthioacetic acid (Example 1a) (5 g; 17.4 mmol) is dissolved in a methanol / dichloromethane mixture (160 ml / 80 ml). The reaction mixture is stirred and cooled in an ice bath before adding slowly oxone ® (21.8 g; 35 mmol) dissolved in water (160 ml). The reaction mixture is stirred at room temperature for 3 hours. The solvents are evaporated in vacuo. The precipitate formed in the residual aqueous phase is drained, washed several times with water and dried. Efficiency 89%
Rf (dichlorométhane-méthanol 9-1 ) : 0.21 IR : vCO acide 1701 cm"1 RMN (1H, DMSO) : 0.85-0.96 (t, 3H, -CH3, J=6Hz) ; 1.20-1.40 (massif, 20H, -Rf (dichloromethane-methanol 9-1): 0.21 IR: vCO acid 1701 cm "1 NMR ( 1 H, DMSO): 0.85-0.96 (t, 3H, -CH 3 , J = 6Hz); 1.20-1.40 (solid, 8 p.m. -
CH2-) ; 1.40-1.55 (m, 2H, -CH2-CH2-CH2-S02-) ; 1.80-1.96 (m, 2H, -CH2-CH2-CH 2 -); 1.40-1.55 (m, 2H, -CH 2 -CH 2 -CH 2 -S0 2 -); 1.80-1.96 (m, 2H, -CH 2 -CH 2 -
S02-) ; 3.22-3.34 (t, 2H, -CH2-CH2-S02-CH2-COOH, J=8 Hz) ; 4.01 (s, 2H, -CH2-S0 2 -); 3.22-3.34 (t, 2H, -CH 2 -CH 2 -S0 2 -CH 2 -COOH, J = 8 Hz); 4.01 (s, 2H, -CH 2 -
S02-CH2-COOH).S0 2 -CH 2 -COOH).
SM (ESI-MS) : M-1 = 319SM (ESI-MS): M-1 = 319
EXEMPLE 1h : Préparation de l'acide 6-(décylsulfonyl)hexanoïqueEXAMPLE 1h: Preparation of 6- (decylsulfonyl) hexanoic acid
Le produit est obtenu selon la procédure précédemment décrite (exemple 1g) à partir de l'acide 6-(décylthio)hexanoïque (exemple 1c).The product is obtained according to the procedure previously described (example 1g) from 6- (decylthio) hexanoic acid (example 1c).
Rendement 87%. Rf (dichlorométhane-méthanol 9-1 ) : 0.15Yield 87%. Rf (dichloromethane-methanol 9-1): 0.15
IR : vCO acide 1689 cm"1 IR: vCO acid 1689 cm "1
RMN (1H, CDCI3) : 0.85-0.96 (t, 3H, -CH3, J=6.5Hz) ; 1.22-1.40 (massif, 14H, -NMR (1 H, CDCl 3): 0.85-0.96 (t, 3H, -CH 3, J = 6.5Hz); 1.22-1.40 (massive, 2 p.m., -
CH2-) ; 1.40-1.61 (m, 2H, -S02-CH2-CH2-CH2-) ; 1.65-1.95 (massif, 6H, -CH2-CH 2 -); 1.40-1.61 (m, 2H, -S0 2 -CH 2 -CH 2 -CH 2 -); 1.65-1.95 (solid, 6H, -CH 2 -
CH2-S02-CH2-CH2-CH2-CH2-CH2-COOH) ; 2.35-2.46 (m, 2H, -CH2-COOH) ; 2.60-2.84 (m, 2H, -CH2-S02-CH2-CH2-CH2-CH2-CH2-COOH) ; 2.90-3.02 (m, 2H, -CH 2 -S0 2 -CH 2 -CH 2 -CH 2 -CH 2 -CH 2 -COOH); 2.35-2.46 (m, 2H, -CH 2 -COOH); 2.60-2.84 (m, 2H, -CH 2 -S0 2 -CH 2 -CH 2 -CH 2 -CH 2 -CH 2 -COOH); 2.90-3.02 (m, 2H, -
CH2-S02-CH2-CH2-CH2-CH2-CH2-COOH). EXEMPLE 1i : Préparation de l'acide docosylthioacétiqueCH 2 -S0 2 -CH 2 -CH 2 -CH 2 -CH 2 -CH 2 -COOH). EXAMPLE 1i: Preparation of docosylthioacetic acid
Le produit est obtenu selon la procédure précédemment décrite (exemple 1a) à partir de l'acide mercaptoacétique et du bromodocosane.The product is obtained according to the procedure previously described (Example 1a) from mercaptoacetic acid and bromodocosan.
Rendement 90%Yield 90%
Rf (dichlorométhane-méthanol 9-1) : 0.62Rf (dichloromethane-methanol 9-1): 0.62
IR : vCO acide 1728 et 1685 cm"1 IR: vCO acid 1728 and 1685 cm "1
RMN (1H, CDCI3) : 0.83-0.94 (t, 3H, -CH3, J=6.6Hz) ; 1.18-1.48 (massif, 38H, -NMR (1H, CDCl3): 0.83-0.94 (t, 3H, -CH 3, J = 6.6Hz); 1.18-1.48 (massive, 38H, -
CH2-) ; 1.55-1.69 (quint, 2H, -CH2-CH2-S-, J=7Hz) ; 2.63-2.72 (t, 2H, CH2-CH2-S-CH 2 -); 1.55-1.69 (quint, 2H, -CH 2 -CH 2 -S-, J = 7Hz); 2.63-2.72 (t, 2H, CH 2 -CH 2 -S-
, J=7Hz) ; 3.26 (s, 2H, S-CH2-COOH), J = 7 Hz); 3.26 (s, 2H, S-CH 2 -COOH)
EXEMPLE 2 : Préparation de monoacylglvcérolsEXAMPLE 2 Preparation of monoacylglvcerols
EXEMPLE 2a : Préparation du 1-tétradécylthioacétylqlvcérolEXAMPLE 2a: Preparation of 1-tetradecylthioacetylqlvcerol
Préparation du 1-tétradécylthioacétyl-2.3-isopropylidèneαlvcérolPreparation of 1-tetradecylthioacetyl-2.3-isopropylideneαlvcerol
Dans un ballon immergé dans un bain de glace, l'acide tetradécylthioacétique (exemple 1a) (4 g, 13.86 mmol) est dissous dans le tétrahydrofuranne (100 ml) avant d'ajouter l'EDCI (2.658 g, 13.86 mmol), la diméthylaminopyridine (1.694 g, 13.86 mmol) puis le solketal (1.72 ml, 13.86 mmol) dans cet ordre. Le mélange réactionnel est laissé sous agitation à température ambiante pendant 4 jours. Le solvant est évaporé sous vide. Le résidu est repris par le dichlorométhane, lavé par une solution aqueuse d'acide chlorhydrique 1 N puis par une solution aqueuse de bicarbonate de sodium 10% et enfin par une solution saturée en chlorure de sodium. La phase organique est séchée sur sulfate de magnésium, filtrée et évaporée sous vide. L'huile résiduelle obtenue est purifiée par chromatographie sur gel de silice (acétate d'éthyle-cyclohexane 1-9). Le produit est obtenu sous forme d'huile jaune.In a flask immersed in an ice bath, the tetradecylthioacetic acid (example 1a) (4 g, 13.86 mmol) is dissolved in tetrahydrofuran (100 ml) before adding the EDCI (2,658 g, 13.86 mmol), the dimethylaminopyridine (1.694 g, 13.86 mmol) then the solketal (1.72 ml, 13.86 mmol) in this order. The reaction mixture is left under stirring at room temperature for 4 days. The solvent is evaporated in vacuo. The residue is taken up in dichloromethane, washed with a 1N aqueous hydrochloric acid solution then with a 10% aqueous sodium bicarbonate solution and finally with a saturated solution of sodium chloride. The organic phase is dried over magnesium sulfate, filtered and evaporated in vacuo. The residual oil obtained is purified by chromatography on silica gel (ethyl acetate-cyclohexane 1-9). The product is obtained in the form of a yellow oil.
Rendement 80%Efficiency 80%
Rf (cyclohexane-acétate d'éthyle 8-2) : 0.65 IR : vCO ester 1736 cm"1 RMN (1H, CDCI3) : 0.86 (t, 3H, -CH3) J=7.8Hz) ; 1.25 (massif, 20H, -CH2-) ; 1.33 (s, 3H, CH3 isopropylidène) ; 1.37 (s, 3H, CH3 isopropylidène) ; 1.59 (m, 4H, OCO-CH2-S-CH2-CH2-CH2-) ; 2.62 (t, 2H, -0-CO-CH2-S-CH2-, J=7.4Hz) ; 3.25 (s, 2H, -0-CO-CH2-S-CH2-) ; 3.75 (m, 1 H, -CO-0-CH2-CH(0)-CH2(0) (isopropylidène)) ; 4.08 (m, 2H, -CO-0-CH2-CH(0)-CH2(0)- (isopropylidène)) ; 4.18 (m, 1 H, -CO-0-CH2-CH(0)-CH2(0)- (isopropylidène) ; 4.35 (m, 1 H, -CO-O- CH2-CH(0)-CH2(0)- (isopropylidène)).Rf (cyclohexane-ethyl acetate 8-2): 0.65 IR: vCO ester 1736 cm "1 NMR ( 1 H, CDCI 3 ): 0.86 (t, 3H, -CH 3) J = 7.8 Hz); 1.25 (solid, 20H, -CH 2 -); 1.33 (s, 3H, CH 3 isopropylidene); 1.37 (s, 3H, CH 3 isopropylidene); 1.59 (m, 4H, OCO-CH 2 -S-CH 2 -CH 2 -CH 2 -); 2.62 (t, 2H, -0-CO-CH 2 -S-CH 2 -, J = 7.4Hz); 3.25 (s, 2H, -0-CO-CH 2 -S-CH 2 -); 3.75 (m, 1H, -CO-0-CH 2 -CH (0) -CH 2 (0) (isopropylidene)); 4.08 (m, 2H, -CO-0-CH 2 -CH (0) -CH 2 (0) - (isopropylidene)); 4.18 (m, 1 H, -CO-0-CH 2 -CH (0) -CH 2 (0) - (isopropylidene); 4.35 (m, 1 H, -CO-O- CH 2 -CH (0) - CH 2 (0) - (isopropylidene)).
Préparation du 1-tétradécylthioacétylαlvcérol Le 1-tétradécylthioacétyl-2,3-isopropylidèneglycérol (4.163 g, 10.356 mmol) est dissous dans l'acide acétique (60 ml) et laissé sous agitation à température ambiante. Après 11 jours de réaction, le mélange réactionnel est dilué dans l'eau puis extrait par de l'acétate d'éthyle. La phase organique est lavée par une solution aqueuse saturée en chlorure de sodium puis séchée sur sulfate de magnésium, filtrée et le solvant est évaporé. La poudre blanche obtenue est recristallisée dans l'heptane. Rendement 90%Preparation of 1-tetradecylthioacetylαlvcerol The 1-tetradecylthioacetyl-2,3-isopropylidene glycerol (4.163 g, 10.356 mmol) is dissolved in acetic acid (60 ml) and allowed to stir at room temperature. After 11 days of reaction, the reaction mixture is diluted in water and then extracted with ethyl acetate. The organic phase is washed with a saturated aqueous solution of sodium chloride and then dried over magnesium sulfate, filtered and the solvent is evaporated. The white powder obtained is recrystallized from heptane. Yield 90%
Rf (acétate d'éthyle-cyclohexane 5-5) : 0.30 PF : 63-65°C IR : vCO ester 1720 cm"1 Rf (ethyl acetate-cyclohexane 5-5): 0.30 PF: 63-65 ° C IR: vCO ester 1720 cm "1
RMN (1H, CDCI3) : 0.89 (t, 3H, -CH3, J=6.6Hz) ; 1.28 (massif, 20H, -CH2-) ; 1.59 (massif, 4H, -CH2-CH2-CH2-S-) ; 2.64 (t, 2H, CH2-CH2-S-, J=7.2Hz) ; 3.26 (s, 2H, S-CH2-COO) ; 3.64 (m, 2H, -COO-CH2-CHOH-CH2OH) ; 3.97 (m, 1 H, -COO- CH2-CHOH-CH2OH) ; 4.27 (m, 2H, -COO-CH2-CHOH-CH2OH). SM (MALDI-TOF) : M+23 = 385 (M+Na+)NMR (1 H, CDCl 3): 0.89 (t, 3H, -CH 3, J = 6.6Hz); 1.28 (solid, 20H, -CH 2 -); 1.59 (solid, 4H, -CH 2 -CH 2 -CH 2 -S-); 2.64 (t, 2H, CH 2 -CH 2 -S-, J = 7.2Hz); 3.26 (s, 2H, S-CH 2 -COO); 3.64 (m, 2H, -COO-CH 2 -CHOH-CH 2 OH); 3.97 (m, 1H, -COO- CH 2 -CHOH-CH 2 OH); 4.27 (m, 2H, -COO-CH 2 -CHOH-CH 2 OH). MS (MALDI-TOF): M + 23 = 385 (M + Na + )
EXEMPLE 2b : Préparation du 1-palmitoylglvcérolEXAMPLE 2b: Preparation of 1-palmitoylglvcerol
Ce composé est synthétisé selon la procédure précédemment décrite (exemple 2a) à partir du solketal et de l'acide palmitique.This compound is synthesized according to the procedure previously described (Example 2a) from solketal and palmitic acid.
1-Palmitoyl-(2.3-isoDroDylidène)αlvcérol1-palmitoyl (2,3-isoDroDylidène) αlvcérol
Rendement 55% Rf (dichlorométhane): 0.35 PF : 32-33°C IR : vCO ester 1733 cm"1 Yield 55% Rf (dichloromethane): 0.35 PF: 32-33 ° C IR: vCO ester 1733 cm "1
RMN (1H, CDCI3) : 0.89 (t, 3H, -CH3, J=6.6Hz) ; 1.27 (massif, 24H, -CH2-) ; 1.39 (s, 3H, CH3 isopropylidène) ; 1.45 (s, 3H, CH3 isopropylidène) ; 1.62 (m, 2H, OCO-CH2-CH2-CH2-) ; 2.32 (t, 2H, -0-CO-CH2-CH2-CH2-, J=7.4Hz) ; 3.75 (dd, 1 H, CO-0-CH2-CH(0)-CH2(0) (isopropylidène), J=8.3Hz et J=2.1 Hz) ; 4.10 (m, 2H, -CO-0-CH2-CH(0)-CH2(0)- (isopropylidène)); 4.18 (dd, 1 H, -CO-0-CH2- CH(0)-CH2(0)- (isopropylidène), J=11.6Hz et J=4.6Hz) ; 4.33 (m, 1H, -CO-O- CH2-CH(0)-CH2(0)- (isopropylidène) )NMR (1 H, CDCl 3): 0.89 (t, 3H, -CH 3, J = 6.6Hz); 1.27 (solid, 24H, -CH 2 -); 1.39 (s, 3H, CH 3 isopropylidene); 1.45 (s, 3H, CH 3 isopropylidene); 1.62 (m, 2H, OCO-CH 2 -CH 2 -CH 2 -); 2.32 (t, 2H, -0-CO-CH 2 -CH 2 -CH 2 -, J = 7.4Hz); 3.75 (dd, 1 H, CO-0-CH 2 -CH (0) -CH 2 (0) (isopropylidene), J = 8.3 Hz and J = 2.1 Hz); 4.10 (m, 2H, -CO-0-CH 2 -CH (0) -CH 2 (0) - (isopropylidene)); 4.18 (dd, 1 H, -CO-0-CH 2 - CH (0) -CH 2 (0) - (isopropylidene), J = 11.6Hz and J = 4.6Hz); 4.33 (m, 1H, -CO-O- CH 2 -CH (0) -CH 2 (0) - (isopropylidene))
1 -palmitoylalycérol1 -palmitoylalycerol
Rendement 84%84% efficiency
Rf (acétate d'éthyle-cyclohexane 5-5) : 0.30 PF : 72-74°CRf (ethyl acetate-cyclohexane 5-5): 0.30 PF: 72-74 ° C
IR : vCO ester 1730 cm"1 IR: vCO ester 1730 cm "1
RMN (1H, CDCI3) : 0.89 (t, 3H, -CH3, J=6.5Hz) ; 1.26 (massif, 24H, -CH2-) ; 1.64NMR (1 H, CDCl 3): 0.89 (t, 3H, -CH 3, J = 6.5Hz); 1.26 (solid, 24H, -CH 2 -); 1.64
(m, 2H, OCO-CH2-CH2-CH2-) ; 2.36 (t, 2H, -0-CO-CH2-CH2-CH2-, J=7.4Hz) ;(m, 2H, OCO-CH 2 -CH 2 -CH 2 -); 2.36 (t, 2H, -0-CO-CH 2 -CH 2 -CH 2 -, J = 7.4Hz);
3.60 (dd, 1 H, -CO-0-CH2-CHOH-CH2OH, J=11.8Hz et J=6.1 Hz) ; 3.71 (dd, 1 H, - CO-0-CH2-CHOH-CH2OH, J=11.8Hz et J=3.9Hz) ; 3.94 (m, 1 H, -CO-0-CH2-3.60 (dd, 1 H, -CO-0-CH 2 -CHOH-CH 2 OH, J = 11.8Hz and J = 6.1 Hz); 3.71 (dd, 1 H, - CO-0-CH 2 -CHOH-CH 2 OH, J = 11.8Hz and J = 3.9Hz); 3.94 (m, 1 H, -CO-0-CH 2 -
CHOH-CH2OH) ; 4.19 (m, 2H, -CO-0-CH2-CHOH-CH2OH) ;CHOH-CH 2 OH); 4.19 (m, 2H, -CO-O-CH 2 -CHOH-CH 2 OH);
EXEMPLE 2c : Préparation du 2-tétradécylthioacétylglvcérolEXAMPLE 2c: Preparation of 2-tetradecylthioacetylglvcerol
Préparation du 1 ,3-benzylidèneαlvcérolPreparation of 1, 3-benzylideneαlvcerol
Le glycérol (30 g ; 0.326 mol), le benzaldéhyde (34.5 g ; 0.326 mol) et l'acide p- toluène sulfonique (50 mg) sont dissous dans 350 ml de toluène et placés à reflux dans un appareil de Dean-Stark pendant 18 heures. Le mélange réactionnel est porté à sec. Le produit résiduel est purifié par chromatographie sur gel de silice (éluant : cyclohexane/acétate d'éthyle 8/2 puis 7/3) puis recristallisé. Rendement : 20% Rf (acétate d'éthyle-cyclohexane 5-5) : 0.34 IR : vOH 3286 cm"1 Glycerol (30 g; 0.326 mol), benzaldehyde (34.5 g; 0.326 mol) and p-toluene sulfonic acid (50 mg) are dissolved in 350 ml of toluene and placed under reflux in a Dean-Stark apparatus for 18 hours. The reaction mixture is brought to dryness. The residual product is purified by chromatography on silica gel (eluent: cyclohexane / ethyl acetate 8/2 then 7/3) then recrystallized. Yield: 20% Rf (ethyl acetate-cyclohexane 5-5): 0.34 IR: vOH 3286 cm "1
RMN (1H, CDCI3) : 3.19 (si, 1 H échangeable, -OH) ; 3.64 (si, 1 H, -0-CH2-CHOH- CH20-) ; 3.99-4.16 (dd, 2H, -O-CHaHb-CHOH-CHaHbO-, J=1.1 Hz et J=10.4Hz) ; 4.17-4.23 (dd, 2H, -O-CHaHb-CHOH-CHaHbO-, J=1.6Hz et J=11.5Hz) ; 5.57 (s, 1 H, F-CH-) ; 7.34-7.45 (m, 3H, H aromatiques) ; 7.49-7.55 (m, 2H, H aromatiques).NMR ( 1 H, CDCI 3 ): 3.19 (si, 1 H exchangeable, -OH); 3.64 (si, 1H, -0-CH 2 -CHOH- CH 2 0-); 3.99-4.16 (dd, 2H, -O-CHaHb-CHOH-CHaHbO-, J = 1.1 Hz and J = 10.4Hz); 4.17-4.23 (dd, 2H, -O-CHaHb-CHOH-CHaHbO-, J = 1.6Hz and J = 11.5Hz); 5.57 (s, 1H, F-CH-); 7.34-7.45 (m, 3H, aromatic H); 7.49-7.55 (m, 2H, aromatic H).
Préparation du 2-tétradécylthioacétyl-1.3-benzylidèneαlvcérol Dans un ballon immergé dans un bain de glace, l'acide tetradécylthioacétique (exemple 1a) (0.800 g, 2.774 mmol) est dissous dans le tétrahydrofuranne (75 ml) avant d'ajouter l'EDCI (0.532 g, 2.774 mmol), la diméthylaminopyridine (0.339 g, 2.774 mmol) puis le 1 ,3-benzylidèneglycérol (0.5 g, 2.774 mmol) dans cet ordre. Le mélange est laissé sous agitation à température ambiante pendant 16 heures. Le solvant est évaporé. Le résidu obtenu est repris par le dichlorométhane, lavé par une solution d'acide chlorhydrique 1 N puis par une solution de carbonate de potassium à 10% et enfin par une solution aqueuse saturée en sel. La phase organique est séchée sur sulfate de magnésium, filtrée et portée à sec. Le résidu est repris dans l'éther de pétrole. Le précipité formé est filtré puis purifié par chromatographie sur gel de silice (éluant : acétate d'éthyle-cyclohexane 2-8) et permet d'obtenir le produit souhaité sous forme de poudre blanche. Rendement 50% Rf (acétate d'éthyle-cyclohexane 2-8) : 0.53 PF : 51-53°CPreparation of 2-tetradecylthioacetyl-1.3-benzylideneαlvcerol In a flask immersed in an ice bath, tetradecylthioacetic acid (example 1a) (0.800 g, 2.774 mmol) is dissolved in tetrahydrofuran (75 ml) before adding the EDCI (0.532 g, 2.774 mmol), dimethylaminopyridine (0.339 g, 2.774 mmol) and then 1, 3-benzylidene glycerol (0.5 g, 2.774 mmol) in this order. The mixture is left stirring at room temperature for 16 hours. The solvent is evaporated. The residue obtained is taken up in dichloromethane, washed with a 1N hydrochloric acid solution and then with a 10% potassium carbonate solution and finally with an aqueous solution saturated with salt. The organic phase is dried over magnesium sulfate, filtered and brought to dryness. The residue is taken up in petroleum ether. The precipitate formed is filtered and then purified by chromatography on silica gel (eluent: ethyl acetate-cyclohexane 2-8) and allows the desired product to be obtained in the form of white powder. Yield 50% Rf (ethyl acetate-cyclohexane 2-8): 0.53 PF: 51-53 ° C
IR : vCO ester 1723 cm"1 IR: vCO ester 1723 cm "1
RMN (1H, CDCI3) : 0.85-0.96 (t, 3H, CH3, J=6.8Hz) ; 1.19-1.44 (massif, 20H, - CH2) ; 1.52-1.69 (massif, 4H, -CH2-CH2-CH2-S-) ; 2.62-2.80 (t, 2H, -CH2-CH2- CH2-S-, J=7.2Hz) ; 3.34 (s, 2H, -CH2-S-CH2-COO-) ; 4.12-4.29 (dd, 2H, -O- CHaHb-CH(OCO)-CHaHbO-, J=1.7Hz et J=13.1 Hz) ; 4.30-4.41 (dd, 2H, -O- CHaHb-CH(OCO)-CHaHbO-, J=1.3Hz et J=13.1 Hz) ; 4.75-4.79 (t, 1 H, -0-CH2- CH(OCO)-CH20-, J=1.7Hz) ; 5.59 (s, 1 H, F -CH-) ; 7.35-7.45 (m, 3H, H aromatiques) ; 7.48-7.57 (m, 2H, H aromatiques).NMR (1 H, CDCl 3): 0.85-0.96 (t, 3H, CH 3, J = 6.8Hz); 1.19-1.44 (solid, 20H, - CH 2 ); 1.52-1.69 (solid, 4H, -CH 2 -CH 2 -CH 2 -S-); 2.62-2.80 (t, 2H, -CH 2 -CH 2 - CH 2 -S-, J = 7.2Hz); 3.34 (s, 2H, -CH 2 -S-CH 2 -COO-); 4.12-4.29 (dd, 2H, -O- CHaHb-CH (OCO) -CHaHbO-, J = 1.7Hz and J = 13.1 Hz); 4.30-4.41 (dd, 2H, -O- CHaHb-CH (OCO) -CHaHbO-, J = 1.3Hz and J = 13.1 Hz); 4.75-4.79 (t, 1 H, -0-CH 2 - CH (OCO) -CH 2 0-, J = 1.7 Hz); 5.59 (s, 1 H, F -CH-); 7.35-7.45 (m, 3H, aromatic H); 7.48-7.57 (m, 2H, aromatic H).
Préparation du 2-tétradécylthioacétylαlvcérol Le 2-tétradécylthioacétyl-1.3-benzylidèneαlvcérol (0.576 g, 1.278 mmol) est dissous dans un mélange de dioxanne et de triethylborate (50-50 v/v) avant d'ajouter l'acide borique (0.317 g, 5.112 mmol). Le mélange réactionnel est chauffé à 100°C pendant 4 heures. Sont encore ajoutés 2 équivalents d'acide borique (0.158 g, 2.556 mmol) puis 2 équivalents après 5.5 heures et 7 heures de réaction. Après 24 heures de réaction, le triethylborate est évaporé. Le résidu est repris par de l'acétate d'éthyle et lavé par l'eau. La phase aqueuse est neutralisée avec bicarbonate de sodium puis extraite avec le dichloromethane. La phase organique est lavée avec de l'eau saturée en sel, séchée sur sulfate de magnésium, filtrée et portée à sec. Le résidu est purifié par chromatographie sur gel de silice (éluant acétate d'éthyle-cyclohexane 5-5). Rendement 62%Preparation of 2-tetradecylthioacetylαlvcerol The 2-tetradecylthioacetyl-1.3-benzylideneαlvcerol (0.576 g, 1.278 mmol) is dissolved in a mixture of dioxane and triethylborate (50-50 v / v) before adding boric acid (0.317 g, 5.112 mmol). The reaction mixture is heated at 100 ° C for 4 hours. Are also added 2 equivalents of boric acid (0.158 g, 2.556 mmol) then 2 equivalents after 5.5 hours and 7 hours of reaction. After 24 hours of reaction, the triethylborate is evaporated. The residue is taken up in ethyl acetate and washed with water. The aqueous phase is neutralized with sodium bicarbonate and then extracted with dichloromethane. The organic phase is washed with water saturated with salt, dried over magnesium sulfate, filtered and brought to dryness. The residue is purified by chromatography on silica gel (eluent ethyl acetate-cyclohexane 5-5). Yield 62%
Rf (acétate d'éthyle-cyclohexane 7-3) : 0.51 IR : vCO ester 1739 cm"1 RMN (1H, CDCI3) : 0.82-0.95 (t, 3H, -CH3, J=6.9Hz) ; 1.15-1.35 (massif, 22H, - CH2-) ; 1.55-1.68 (m, 2H, -CH2-CH2-S-) ; 2.23 (si, 2H, OH) ; 2.65 (m, 2H, CH2- CH2-S-) ; 3.26 (s, 2H, S-CH2-COO) ; 3.64-3.73 (m, 4H, HOCH2-CH(OCO-R)- CH2OH) ; 3.97 (m, 1 H, HOCH2-CH(OCO-R)-CH2OH).Rf (ethyl acetate-cyclohexane 7-3): 0.51 IR: vCO ester 1739 cm "1 NMR ( 1 H, CDCI 3 ): 0.82-0.95 (t, 3H, -CH 3 , J = 6.9Hz); 1.15 -1.35 (solid, 22H, - CH 2 -); 1.55-1.68 (m, 2H, -CH 2 -CH 2 -S-); 2.23 (si, 2H, OH); 2.65 (m, 2H, CH 2 - CH 2 -S-); 3.26 (s, 2H, S-CH 2 -COO); 3.64-3.73 (m, 4H, HOCH 2 -CH (OCO-R) - CH 2 OH); 3.97 (m, 1 H , HOCH 2 -CH (OCO-R) -CH 2 OH).
EXEMPLE 3 : Préparation de 1.3-diacylglycérolsEXAMPLE 3 Preparation of 1.3-diacylglycerols
EXEMPLE 3a : Préparation du 1,3-dipalmitoylglvcérolEXAMPLE 3a: Preparation of 1,3-dipalmitoylglvcerol
Le glycérol (10 g ; 0.109 mol ; 1eq), l'acide palmitique (55.69 g ; 0.217 mol ; 2 eq), la dicyclohexylcarbodiimide (44.77 g ; 0.217 mol ; 2eq) et la diméthylaminopyridine (26.51 g ; 0.217 mol ; 2eq) sont dissous dans le dichloromethane. Le mélange réactionnel est placé sous agitation à température ambiante pendant 48 heures. La dicyclohexylurée formée est filtrée et lavée plusieurs fois au dichloromethane. Le filtrat est porté à sec. Le produit résiduel est purifié par chromatographie sur gel de silice (éluant : dichloromethane). Rendement : 45% Rf (dichloromethane) : 0.30 PF: 70-73°CGlycerol (10 g; 0.109 mol; 1eq), palmitic acid (55.69 g; 0.217 mol; 2 eq), dicyclohexylcarbodiimide (44.77 g; 0.217 mol; 2eq) and dimethylaminopyridine (26.51 g; 0.217 mol; 2eq) are dissolved in dichloromethane. The reaction mixture is stirred at room temperature for 48 hours. The dicyclohexylurea formed is filtered and washed several times with dichloromethane. The filtrate is brought to dryness. The residual product is purified by chromatography on silica gel (eluent: dichloromethane). Yield: 45% Rf (dichloromethane): 0.30 PF: 70-73 ° C
IR : vCO ester 1735 et 1716 cm"1 IR: vCO ester 1735 and 1716 cm "1
RMN (1H, CDCI3) : 0.86-91 (t, 6H, -CH3, J=6.5Hz) ; 1.27 (massif, 48H, -CH2-) ; 1.60-1.65 (quint, 4H, OCOCH2-CH2-, J=7.4Hz) ; 2.32-2.38 (t, 4H, OCOCH2-CH2., J=7.6Hz) ; 2.51-2.52 (d, 1 H, OH (échangeable)) ; 4.06-4.21 (massif, 5H, -CH2- CH-CH2-)NMR (1 H, CDCl 3): 0.86-91 (t, 6H, -CH 3, J = 6.5Hz); 1.27 (solid, 48H, -CH 2 -); 1.60-1.65 (quint, 4H, OCOCH 2 -CH 2 -, J = 7.4Hz); 2.32-2.38 (t, 4H, OCOCH 2 -CH 2. , J = 7.6Hz); 2.51-2.52 (d, 1 H, OH (exchangeable)); 4.06-4.21 (solid, 5H, -CH 2 - CH-CH 2 -)
SM (MALDI-TOF) : M+23 = 591 (M+Na+) ; M+39 = 607 (M+K+)MS (MALDI-TOF): M + 23 = 591 (M + Na + ); M + 39 = 607 (M + K + )
EXEMPLE 3b : Préparation du 1.3-dilinoléoylglycérolEXAMPLE 3b: Preparation of 1.3-dilinoleoylglycerol
Ce composé est obtenu selon la procédure précédemment décrite (exemple 3a) à partir du glycérol et de l'acide linoléique. Le produit est obtenu sous forme d'huile incolore.This compound is obtained according to the procedure described above (Example 3a) from glycerol and linoleic acid. The product is obtained in the form of a colorless oil.
Rendement 26%Yield 26%
Rf (dichloromethane) : 0.30Rf (dichloromethane): 0.30
IR : vCO ester 1743 et 1719 cm"1 RMN (1H, CDCI3) : 0.83-0.93 (t, 6H, -CH3, J=6.5Hz) ; 1.15-1.44 (massif, 28H, -IR: vCO ester 1743 and 1719 cm "1 NMR ( 1 H, CDCI 3 ): 0.83-0.93 (t, 6H, -CH 3 , J = 6.5Hz); 1.15-1.44 (solid, 28H, -
CH2-) ; 1.55-1.70 (quint, 4H, OCOCH2-CH2-, J=7.4Hz) ; 1.90-2.15 (massif, 8H, -CH 2 -); 1.55-1.70 (quint, 4H, OCOCH 2 -CH 2 -, J = 7.4Hz); 1.90-2.15 (massive, 8H, -
CH2-CH=CH-CH2-CH=CH-CH2-) ; 2.30-2.41 (t, 4H, OCOCH2-CH2-, J=7.6Hz) ;CH 2 -CH = CH-CH 2 -CH = CH-CH 2 -); 2.30-2.41 (t, 4H, OCOCH 2 -CH 2 -, J = 7.6Hz);
2.48-2.52 (d, 1 H, OH (échangeable)) ; 2.70-2.83 (t, 4H, -CH2-CH=CH-CH2-2.48-2.52 (d, 1 H, OH (exchangeable)); 2.70-2.83 (t, 4H, -CH 2 -CH = CH-CH 2 -
CH=CH-CH2-) ; 4.05-4.25 (massif, 5H, -CHaHb-CH-CHaHb-) ; 5.25-5.46 (m, 8H, -CH2-CH=CH-CH2-CH=CH-CH2-).CH = CH-CH 2 -); 4.05-4.25 (solid, 5H, -CHaHb-CH-CHaHb-); 5.25-5.46 (m, 8H, -CH 2 -CH = CH-CH 2 -CH = CH-CH 2 -).
SM (MALDI-TOF) : M+23 = 639 (M+Na+) ; M+39 = 655 (M+K+)MS (MALDI-TOF): M + 23 = 639 (M + Na + ); M + 39 = 655 (M + K + )
EXEMPLE 3c : Préparation du 1,3-distéaroylglvcérolEXAMPLE 3c: Preparation of 1,3-distearoylglvcerol
Ce composé est obtenu selon la procédure précédemment décrite (exemple 3a) à partir du glycérol et de l'acide stéarique. Le produit est obtenu sous forme d'une poudre blanche. Rendement 21% Rf (dichloromethane) : 0.30 IR: vCO ester 1735 et 1716 cm"1 This compound is obtained according to the procedure described above (Example 3a) from glycerol and stearic acid. The product is obtained in the form of a white powder. Yield 21% Rf (dichloromethane): 0.30 IR: vCO ester 1735 and 1716 cm "1
RMN (1H, CDCI3) : 0.83-0.91 (t, 6H, -CH3, J=6.5Hz) ; 1.27 (massif, 56H,-CH2-) ; 1.59-1.66 (quint, 4H, OCOCH2-CH2-, J=7.4Hz) ; 2.33-2.38 (t, 4H, OCOCH2-CH2-, J=7.5Hz) ; 2.45-2.47 (d, 1 H, OH (échangeable), J=4.3Hz) ; 4.08-4.23 (massif, 5H, -CHaHb-CH-CHaHb-). SM (MALDI-TOF) : M+23 = 647 (M+Na+)NMR (1 H, CDCl 3): 0.83-0.91 (t, 6H, -CH 3, J = 6.5Hz); 1.27 (solid, 56H, -CH 2 -); 1.59-1.66 (quint, 4H, OCOCH 2 -CH 2 -, J = 7.4Hz); 2.33-2.38 (t, 4H, OCOCH 2 -CH 2 -, J = 7.5Hz); 2.45-2.47 (d, 1H, OH (exchangeable), J = 4.3Hz); 4.08-4.23 (solid, 5H, -CHaHb-CH-CHaHb-). MS (MALDI-TOF): M + 23 = 647 (M + Na + )
EXEMPLE 3d : Préparation du 1,3-dioléoylglvcérol Ce composé est obtenu selon la procédure précédemment décrite (exemple 3a) à partir du glycérol et de l'acide oléique. Le produit est obtenu sous forme d'huile incolore.EXAMPLE 3d: Preparation of 1,3-dioleoylglvcerol This compound is obtained according to the procedure previously described (Example 3a) from glycerol and oleic acid. The product is obtained in the form of a colorless oil.
Rendement 15% Rf (dichloromethane) : 0.23 I R : vCO ester 1743 et 1720 cm"1 Yield 15% Rf (dichloromethane): 0.23 IR: vCO ester 1743 and 1720 cm "1
RMN (1H, CDCI3) : 0.89 (t, 6H, -CH3, J=7.2Hz) ; 1.30 (massif, 40H, -CH2-) ; 1.64 (quint, 4H, OCOCH2-CH2-, J=7.4Hz) ; 2.02 (massif, 8H,-CH2-CH=CH-CH2-) ; 2.36 (t, 4H, OCOCH2-CH2-, J=7.2Hz) ; 2.45 (d, 1 H, OH (échangeable), J=4.2Hz) ; 4.18 (massif, 5H, -CHaHb-CH-CHaHb-) ; 5.35 (m, 4H, -CH2-CH=CH-CH2-). SM (MALDI-TOF) : M+23 = 643 (M+Na+)NMR (1 H, CDCl 3): 0.89 (t, 6H, -CH 3, J = 7.2Hz); 1.30 (solid, 40H, -CH 2 -); 1.64 (quint, 4H, OCOCH 2 -CH 2 -, J = 7.4Hz); 2.02 (solid, 8H, -CH 2 -CH = CH-CH 2 -); 2.36 (t, 4H, OCOCH 2 -CH 2 -, J = 7.2Hz); 2.45 (d, 1H, OH (exchangeable), J = 4.2Hz); 4.18 (solid, 5H, -CHaHb-CH-CHaHb-); 5.35 (m, 4H, -CH 2 -CH = CH-CH 2 -). MS (MALDI-TOF): M + 23 = 643 (M + Na + )
EXEMPLE 3e : Préparation du 1 ,3-ditétradécanoylgl vcérolEXAMPLE 3: Preparation of 1, 3-ditétradécanoylgl vcérol
Ce composé est obtenu selon la procédure précédemment décrite (exemple 3a) à partir du glycérol et de l'acide tétradécanoïque. Le produit est obtenu sous forme d'une poudre blanche. Rendement 30% Rf (dichloromethane) : 0.30 IR : vCO ester 1733 et 1707 cm"1 RMN (1H, CDCI3) : 089 (t, 6H, -CH3, J=6.5Hz) ; 1.26 (massif, 40H, -CH2-) ; 1.62 (quint, 4H, OCOCH2-CH2-, J=7.4Hz) ; 2.36 (t, 4H, OCOCH2-CH2-, J=7.5Hz) ; 2.45 (d, 1 H, OH (échangeable), J=4.3Hz) ; 4.15 (massif, 5H, -CHaHb-CH- CHaHb-). EXEMPLE 3f : Préparation de 1.3-ditétradécylthioacétylglvcérolThis compound is obtained according to the procedure previously described (Example 3a) from glycerol and tetradecanoic acid. The product is obtained in the form of a white powder. Yield 30% Rf (dichloromethane): 0.30 IR: vCO ester 1733 and 1707 cm "1 NMR ( 1 H, CDCI 3 ): 089 (t, 6H, -CH 3 , J = 6.5Hz); 1.26 (solid, 40H, -CH 2 -); 1.62 (quint, 4H, OCOCH 2 -CH 2 -, J = 7.4Hz); 2.36 (t, 4H, OCOCH 2 -CH 2 -, J = 7.5Hz); 2.45 (d, 1 H , OH (exchangeable), J = 4.3Hz); 4.15 (solid, 5H, -CHaHb-CH- CHaHb-). EXAMPLE 3f Preparation of 1.3-ditetradecylthioacetylglvcerol
Ce composé est obtenu selon la procédure précédemment décrite (exemple 3a) à partir du glycérol et de l'acide tetradécylthioacétique (exemple 1a). Le produit est obtenu sous forme d'une poudre blanche. Rendement 37%This compound is obtained according to the procedure previously described (example 3a) from glycerol and tetradecylthioacetic acid (example 1a). The product is obtained in the form of a white powder. Yield 37%
Rf (dichloromethane) : 0.27 PF : 71-73°C IR : vCO ester 1704 cm"1 Rf (dichloromethane): 0.27 PF: 71-73 ° C IR: vCO ester 1704 cm "1
RMN (1H, CDCI3) : 089 (t, 6H, -CH3, J=6.3Hz) ; 1.27 (massif, 44H, -CH2-) ; 1.58- 1.63 (m, 4H, -OCO-CH2-S-CH2-CH2-) ; 2.64 (t, 4H, -OCO-CH2-S-CH2-CH2-, J=7.4Hz) ; 3.26 (s, 4H, -OCO-CH2-S-CH2-) ; 4.16-4.29 (massif, 5H, -CHaHb-CH- CHaHb-).NMR (1 H, CDCl 3): 089 (t, 6H, -CH 3, J = 6.3Hz); 1.27 (solid, 44H, -CH 2 -); 1.58-1.63 (m, 4H, -OCO-CH 2 -S-CH 2 -CH 2 -); 2.64 (t, 4H, -OCO-CH 2 -S-CH 2 -CH 2 -, J = 7.4Hz); 3.26 (s, 4H, -OCO-CH 2 -S-CH 2 -); 4.16-4.29 (solid, 5H, -CHaHb-CH- CHaHb-).
EXEMPLE 3g : Préparation de 1-oléoyl-3-palmitoylgl vcérolEXAMPLE 3g: Preparation of 1-oleoyl-3-palmitoylgl vcerol
Le 1-palmitoylglycérol (exemple 2b) (5.516 g ; 17 mmol) est dissous dans le dichloromethane (500 ml) avant d'ajouter la dicyclohexylcarbodiimide (5.165 g ; 25 mmol), la diméthylaminopyridine (3.058 g ; 25 mmol) et l'acide oléique (4.714 g ; 17 mmol). Le mélange réactionnel est maintenu sous agitation à température ambiante pendant 24 heures. Le précipité de dicyclohexyluree est filtré, rincé au dichloromethane et le filtrat est évaporé sous vide. Le résidu obtenu est purifié par chromatographie sur gel de silice (éluant dichloromethane) et permet d'obtenir le composé souhaité sous forme de solide blanc.1-palmitoylglycerol (example 2b) (5.516 g; 17 mmol) is dissolved in dichloromethane (500 ml) before adding dicyclohexylcarbodiimide (5.165 g; 25 mmol), dimethylaminopyridine (3.058 g; 25 mmol) and oleic acid (4,714 g; 17 mmol). The reaction mixture is stirred at room temperature for 24 hours. The precipitate of dicyclohexyluree is filtered, rinsed with dichloromethane and the filtrate is evaporated in vacuo. The residue obtained is purified by chromatography on silica gel (eluent dichloromethane) and allows the desired compound to be obtained in the form of a white solid.
Rendement : 23% Rf (dichloromethane) : 0.24Yield: 23% Rf (dichloromethane): 0.24
PF : 30°CMp: 30 ° C
IR : vCO ester 1731 et 1710 cm"1 IR: vCO ester 1731 and 1710 cm "1
RMN (1H, CDCI3) : 087 (t, 6H, -CH3, J=6.5Hz) ; 1.26 (massif, 44H, -CH2-) ; 1.62NMR (1 H, CDCl 3): 087 (t, 6H, -CH 3, J = 6.5Hz); 1.26 (solid, 44H, -CH 2 -); 1.62
(quint, 4H, OCOCH2-CH2-, J=7.4Hz) ; 2.01 (massif, 4H, -CH2-CH=CH-CH2-) ; 2.36 (t, 4H, OCOCH2-CH2-, J=7.3Hz) ; 2.465 (d, 1 H, OH (échangeable),(quint, 4H, OCOCH 2 -CH 2 -, J = 7.4Hz); 2.01 (solid, 4H, -CH 2 -CH = CH-CH 2 -); 2.36 (t, 4H, OCOCH 2 -CH 2 -, J = 7.3Hz); 2.465 (d, 1 H, OH (exchangeable),
J=4.3Hz) ; 4.17 (massif, 5H, -CHaHb-CH-CHaHb-) ; 5.34 (m, 4H, -CH2-CH=CH-J = 4.3Hz); 4.17 (solid, 5H, -CHaHb-CH-CHaHb-); 5.34 (m, 4H, -CH 2 -CH = CH-
CH2-). SM (MALDI-TOF) : M+23 = 617 (M+Na+)CH 2 -). MS (MALDI-TOF): M + 23 = 617 (M + Na + )
EXEMPLE 3h : Préparation du 1.3-diacétylαl vcérolEXAMPLE 3h: Preparation of 1,3-diacetylαl vcerol
Le glycérol (30 g ; 0.326 mol) est dissous dans le dichloromethane (300 ml) avant d'ajouter la pyridine (79 ml ; 0.977 mol) puis goutte à goutte l'anhydride acétique (61.5 ml ; 0.651 mol). Le mélange réactionnel est maintenu sous agitation à température ambiante pendant 48 heures. Le milieu est repris par le dichloromethane. La phase organique est lavée avec de l'acide chlorhydrique 1 N puis par une solution de carbonate de potassium à 10% puis par l'eau saturée en sel, séchée sur sulfate de magnésium, filtrée et portée à sec pour fournir une huile incolore qui est utilisée sans autre purification. Rendement : 34% IR: vCO ester 1742 cm"1 The glycerol (30 g; 0.326 mol) is dissolved in dichloromethane (300 ml) before adding the pyridine (79 ml; 0.977 mol) then drop by drop the acetic anhydride (61.5 ml; 0.651 mol). The reaction mixture is kept under stirring at ambient temperature for 48 hours. The medium is taken up in dichloromethane. The organic phase is washed with 1N hydrochloric acid and then with a 10% potassium carbonate solution, then with water saturated with salt, dried over magnesium sulfate, filtered and brought to dryness to provide a colorless oil which is used without further purification. Efficiency: 34% IR: vCO ester 1742 cm "1
EXEMPLE 3i : Préparation du 1.3-dioctanoylαl vcérolEXAMPLE 3i: Preparation of 1.3-dioctanoylαl vcerol
Ce composé est obtenu selon la procédure précédemment décrite (exemple 3a) à partir du glycérol et de l'acide octanoïque. Le produit est obtenu sous forme d'une huile incolore.This compound is obtained according to the procedure described above (Example 3a) from glycerol and octanoic acid. The product is obtained in the form of a colorless oil.
Rendement 10% Rf (acétate d'éthyle-cyclohexane 3-7) : 0.55Yield 10% Rf (ethyl acetate-cyclohexane 3-7): 0.55
PF < 4°CMp <4 ° C
IR : vCO ester 1742 et 1719 cm"1 IR: vCO ester 1742 and 1719 cm "1
RMN (1H, CDCI3) : 0.89 (t, 6H, -CH3, J=6.9Hz) ; 1.29 (massif, 16H, -CH2-) ; 1.62NMR ( 1 H, CDCI 3 ): 0.89 (t, 6H, -CH 3 , J = 6.9 Hz); 1.29 (solid, 16H, -CH 2 -); 1.62
(massif, 4H, OCOCH2-CH2-) ; 2.36 (t, 4H, OCOCH2-CH2-, J=7.4Hz) ; 2.52 (si, 1 H, OH (échangeable)) ; 4.14 (massif, 5H, -CH2-CH-CH2-)(solid, 4H, OCOCH 2 -CH 2 -); 2.36 (t, 4H, OCOCH 2 -CH 2 -, J = 7.4Hz); 2.52 (si, 1 H, OH (exchangeable)); 4.14 (solid, 5H, -CH 2 -CH-CH 2 -)
SM (MALDI-TOF) : M+23 = 591 (M+Na+) ; M+39 = 607 (M+K+)MS (MALDI-TOF): M + 23 = 591 (M + Na + ); M + 39 = 607 (M + K + )
EXEMPLE 3i : Préparation du 1.3-diundécanoylql vcérolEXAMPLE 3i: Preparation of 1.3-diundecanoylql vcerol
Ce composé est obtenu selon la procédure précédemment décrite (exemple 3a) à partir du glycérol et de l'acide undécanoïque. Le produit est obtenu sous forme d'une poudre blanche. Rendement 28% Rf (dichloromethane) : 0.20 IR : vCO ester 1730 et 1705 cm"1 This compound is obtained according to the procedure described above (Example 3a) from glycerol and undecanoic acid. The product is obtained in the form of a white powder. Yield 28% Rf (dichloromethane): 0.20 IR: vCO ester 1730 and 1705 cm "1
RMN (1H, CDCI3) : 0.89 (t, 6H, -CH3, J=6.7Hz) ; 1.27 (massif, 28H, -CH2-) ; 1.64 (m, 4H, OCOCH2-CH2-) ; 2.36 (t, 4H, OCOCH2-CH2-, J=7.4Hz) ; 4.18 (massif, 5H, -CH2-CH-CH2-) SM (MALDI-TOF) : M+23 = 451 (M+Na+) ; M+39 = 467 (M+K+)NMR (1 H, CDCl 3): 0.89 (t, 6H, -CH 3, J = 6.7Hz); 1.27 (solid, 28H, -CH 2 -); 1.64 (m, 4H, OCOCH 2 -CH 2 -); 2.36 (t, 4H, OCOCH 2 -CH 2 -, J = 7.4Hz); 4.18 (solid, 5H, -CH 2 -CH-CH 2 -) MS (MALDI-TOF): M + 23 = 451 (M + Na + ); M + 39 = 467 (M + K + )
EXEMPLE 4 : Préparation de 1.2.3-triacylαlvcérolsEXAMPLE 4 Preparation of 1.2.3-triacylαlvcerols
EXEMPLE 4a : Préparation du 1.2.3-tritétradécylthioacétylglvcérolEXAMPLE 4a: Preparation of 1.2.3-tritetradecylthioacetylglvcerol
Le glycérol (1 g, 10.86 mmol) est dissous dans le dichloromethane (200 ml) avant d'ajouter la dicyclohexylcarbodiimide (7.84 g, 38.01 mmol), la diméthylaminopyridine (4.64 g, 38.01 mmol) et l'acide tetradécylthioacétique (exemple 1a) (9.40 g, 32.58 mmol). Le mélange est laissé sous agitation à température ambiante. Après 48 heures de réaction, le précipité de dicyclohexyluree est filtré, lavé plusieurs fois au dichloromethane et le filtrat est évaporé. Le résidu obtenu est purifié par chromatographie sur gel de silice (dichlorométhane-cyclohexane 4-6). Le 1 ,2,3-tritétradécylthioacétyl-glycérol est obtenu sous forme de poudre blanche . Rendement 65%Glycerol (1 g, 10.86 mmol) is dissolved in dichloromethane (200 ml) before adding dicyclohexylcarbodiimide (7.84 g, 38.01 mmol), dimethylaminopyridine (4.64 g, 38.01 mmol) and tetradecylthioacetic acid (example 1a) (9.40 g, 32.58 mmol). The mixture is left stirring at room temperature. After 48 hours of reaction, the precipitate of dicyclohexyluree is filtered, washed several times with dichloromethane and the filtrate is evaporated. The residue obtained is purified by chromatography on silica gel (dichloromethane-cyclohexane 4-6). 1,2,3-Tritetradecylthioacetyl-glycerol is obtained in the form of a white powder. Yield 65%
Rf (dichlorométhane-cyclohexane 7-3) : 0.47Rf (dichloromethane-cyclohexane 7-3): 0.47
PF : 57°CMp: 57 ° C
IR : vCO ester 1738 et 1722 cm"1 IR: vCO ester 1738 and 1722 cm "1
RMN (1H, CDCI3) : 0.89 (t, 9H, -CH3, J=6.5Hz) ; 1.26 (massif, 66H, -CH2-) ; 1.62 (m, 6H, -CH2-CH2-CH2-S-) ; 2.63 (t, 6H, CH2-CH2-S-, J=7.3Hz) ; 3.23 (s, 6H, S- CH2-COO) ; 4.27 (dd, 2H, -CHaHb-CH-CHaHb-, J=12Hz et J=6Hz) ; 4.39 (dd, 2H, -CHaHb-CH-CHaHb-, J=12Hz et J=4.3Hz) ; 5.34 (m, 1H, -CHaHb-CH- CHaHb-) SM (MALDI-TOF) : M+23 = 925 (M+Na+) ; M+39 = 941 (M+K+) EXEMPLE 4b : Préparation du 1.2.3-tri-(4-dodécylthio butanoylqlvcérolNMR (1H, CDCl3): 0.89 (t, 9H, -CH 3, J = 6.5Hz); 1.26 (solid, 66H, -CH 2 -); 1.62 (m, 6H, -CH 2 -CH 2 -CH 2 -S-); 2.63 (t, 6H, CH 2 -CH 2 -S-, J = 7.3Hz); 3.23 (s, 6H, S-CH 2 -COO); 4.27 (dd, 2H, -CHaHb-CH-CHaHb-, J = 12Hz and J = 6Hz); 4.39 (dd, 2H, -CHaHb-CH-CHaHb-, J = 12Hz and J = 4.3Hz); 5.34 (m, 1H, -CHaHb-CH- CHaHb-) MS (MALDI-TOF): M + 23 = 925 (M + Na + ); M + 39 = 941 (M + K + ) EXAMPLE 4b: Preparation of 1.2.3-tri- (4-dodecylthio butanoylqlvcerol)
Ce composé est obtenu selon la procédure précédemment décrite (exemple 4a) à partir de l'acide 4-(dodécylthio)butanoïque (exemple 1 b) et du glycérol. Rf (dichlorométhane-cyclohexane 7-3) : 0.43 IR : vCO ester 1738 et 1727 cm"1 This compound is obtained according to the procedure described above (Example 4a) from 4- (dodecylthio) butanoic acid (Example 1b) and glycerol. Rf (dichloromethane-cyclohexane 7-3): 0.43 IR: vCO ester 1738 and 1727 cm "1
RMN (1H, CDCI3) : 0.84-0.92 (t, 9H, -CH3, J=6.3Hz) ; 1.22-1.44 (massif, 54H, - CH2-) ; 1.50-1.64 (massif, 6H, -CH2-CH2-S-CH2-CH2-CH2-COO) ; 1.83-1.97 (massif, 6H, -CH2-S-CH2-CH2-CH2-COO) ; 2.42-2.59 (massif, 18H, -CH2-CH2- CH2-S-CH2-CH2-CH2-COO) ; 4.11-4.20 (dd, 2H, -CHaHb-CH-CHaHb-, J=12Hz et J=5.9Hz) ; 4.29-4.36 (dd, 2H, -CHaHb-CH-CHaHb-, J=12Hz et J=4.5Hz) ; 5.22- 5.32 (m, 1 H, -CHaHb-CH-CHaHb-) SM (MALDI-TOF) : M+23 = 925 (M+Na+) ; M+39 = 941 (M+K+)NMR (1 H, CDCl 3): 0.84-0.92 (t, 9H, -CH 3, J = 6.3Hz); 1.22-1.44 (solid, 54H, - CH 2 -); 1.50-1.64 (solid, 6H, -CH 2 -CH 2 -S-CH 2 -CH 2 -CH 2 -COO); 1.83-1.97 (solid, 6H, -CH 2 -S-CH 2 -CH 2 -CH 2 -COO); 2.42-2.59 (solid, 18H, -CH 2 -CH 2 - CH 2 -S-CH 2 -CH 2 -CH 2 -COO); 4.11-4.20 (dd, 2H, -CHaHb-CH-CHaHb-, J = 12Hz and J = 5.9Hz); 4.29-4.36 (dd, 2H, -CHaHb-CH-CHaHb-, J = 12Hz and J = 4.5Hz); 5.22- 5.32 (m, 1H, -CHaHb-CH-CHaHb-) MS (MALDI-TOF): M + 23 = 925 (M + Na + ); M + 39 = 941 (M + K + )
EXEMPLE 4c : Préparation du 1,2,3-tri-(6-décylthio)hexanoylglycérol Ce composé est obtenu selon la procédure précédemment décrite (exemple 4a) à partir de l'acide 6-(décylthio)hexanoïque (exemple 1c) et du glycérol.EXAMPLE 4c: Preparation of 1,2,3-tri- (6-decylthio) hexanoylglycerol This compound is obtained according to the procedure described above (Example 4a) from 6- (decylthio) hexanoic acid (Example 1c) and glycerol.
Rf (dichlorométhane-cyclohexane 7-3) : 0.43Rf (dichloromethane-cyclohexane 7-3): 0.43
IR : vCO ester 1730 cm"1 IR: vCO ester 1730 cm "1
RMN (1H, CDCI3) : 0.85-0.92 (t, 9H, -CH3, J=6.5Hz) ; 1.21-1.50 (massif, 48H, - CH2-) ; 1.51-1.72 (massif, 18H, -CH2-CH2-S-CH2-CH2-CH2-CH2-CH2-COOH) ;NMR (1 H, CDCl 3): 0.85-0.92 (t, 9H, -CH 3, J = 6.5Hz); 1.21-1.50 (solid, 48H, - CH 2 -); 1.51-1.72 (solid, 18H, -CH 2 -CH 2 -S-CH 2 -CH 2 -CH 2 -CH 2 -CH 2 -COOH);
2.28-2.40 (massif, 6H, -CH2-S-CH2-CH2-CH2-CH2-CH2-COO) ; 2.45-2.57 (massif,2.28-2.40 (solid, 6H, -CH 2 -S-CH 2 -CH 2 -CH 2 -CH 2 -CH 2 -COO); 2.45-2.57 (massive,
12H, -CH2-S-CH2-) ; 4.10-4.20 (dd, 2H, -CHaHb-CH-CHaHb-, J=12Hz et J=6Hz) ;12H, -CH 2 -S-CH 2 -); 4.10-4.20 (dd, 2H, -CHaHb-CH-CHaHb-, J = 12Hz and J = 6Hz);
4.25-4.38 (dd, 2H, -CHaHb-CH-CHaHb-, J=12Hz et J=4.3Hz) ; 5.22-5.32 (m, 1 H,4.25-4.38 (dd, 2H, -CHaHb-CH-CHaHb-, J = 12Hz and J = 4.3Hz); 5.22-5.32 (m, 1 H,
-CHaHb-CH-CHaHb-) SM (MALDI-TOF) : M+23 = 925 (M+Na+) ; M+39 = 941 (M+K+)-CHaHb-CH-CHaHb-) MS (MALDI-TOF): M + 23 = 925 (M + Na + ); M + 39 = 941 (M + K + )
EXEMPLE 4d : Préparation du 1,2,3-tritétradécylsulfoxyacétylglvcérolEXAMPLE 4d: Preparation of 1,2,3-tritetradecylsulfoxyacetylglvcerol
Ce composé est obtenu selon la procédure précédemment décrite (exemple 4a) à partir de l'acide tétradécylsulfoxyacétique (exemple 1e) et du glycérol. Rf (dichlorométhane-cyclohexane 7-3) : 0.33 IR : vCO ester 1730 cm"1 RMN (1H, CDCI3) : 0.80-0.92 (t, 9H, -CH3, J=6.4Hz) ; 1.20-1.39 (massif, 60H, - CH2-) ; 1.40-1.55 (massif, 6H, CH2-) ; 1.70-1.90 (quint, 6H, -CH2-CH2-SO-) ; 2.82- 2.89 (m, 6H, -CH2-CH2-SO-CH2-COO-) ; 3.49-3.90 (m, 6H, -CH2-SO-CH2-COO) ; 4.10-4.30 (m, 2H, -CH2-CH-CH2-) ; 4.30-4.60 (m, 2H, -CH2-CH-CH2-) ; 5.45 (m, 1 H, -CH2-CH-CH2-).This compound is obtained according to the procedure previously described (Example 4a) from tetradecylsulfoxyacetic acid (Example 1e) and glycerol. Rf (dichloromethane-cyclohexane 7-3): 0.33 IR: vCO ester 1730 cm "1 NMR (1 H, CDCl 3): 0.80-0.92 (t, 9H, -CH 3, J = 6.4Hz); 1.20-1.39 (solid, 60H, - CH 2 -); 1.40-1.55 (solid, 6H, CH 2 -); 1.70-1.90 (quint, 6H, -CH 2 -CH 2 -SO-); 2.82-2.89 (m, 6H, -CH 2 -CH 2 -SO-CH 2 -COO-); 3.49-3.90 (m, 6H, -CH 2 -SO-CH 2 -COO); 4.10-4.30 (m, 2H, -CH 2 -CH-CH 2 -); 4.30-4.60 (m, 2H, -CH 2 -CH-CH 2 -); 5.45 (m, 1 H, -CH 2 -CH-CH 2 -).
SM (MALDI-TOF) : M+1 = 951 ; M+23 = 974 (M+Na+) ; M+39 = 990 (M+K+)MS (MALDI-TOF): M + 1 = 951; M + 23 = 974 (M + Na + ); M + 39 = 990 (M + K + )
EXEMPLE 4e : Préparation du 1.2.3-tri-ftétradécylsulfonyl)acétylglvcérolEXAMPLE 4: Preparation of 1.2.3-tri-ftetradecylsulfonyl) acetylglvcerol
Ce composé est obtenu selon la procédure précédemment décrite (exemple 4a) à partir de l'acide tétradécylsulfonylacétique (exemple 1g) et du glycérol.This compound is obtained according to the procedure described above (Example 4a) from tetradecylsulfonylacetic acid (Example 1g) and glycerol.
Rf (dichlorométhane-acétate d'éthyle 9-1 ) : 0.51Rf (dichloromethane-ethyl acetate 9-1): 0.51
PF : 107.0 à 110.6°CPF: 107.0 to 110.6 ° C
IR : vCO ester 1769, 1754 et 1735 cm"1 ; vSO 1120 cm"1 IR: vCO ester 1769, 1754 and 1735 cm "1 ; vSO 1120 cm " 1
RMN (1H, CDCI3) : 0.87 (t, 9H, -CH3, J=6.5Hz) ; 1.19-1.35 (massif, 60H, -CH2-) ; 1.44-1.49 (m, 6H, -CH2-CH2-CH2-S02-) ; 1.81-1.92 (m, 6H, -CH2-CH2-S02-) ;NMR (1 H, CDCl 3): 0.87 (t, 9H, -CH 3, J = 6.5Hz); 1.19-1.35 (solid, 60H, -CH 2 -); 1.44-1.49 (m, 6H, -CH 2 -CH 2 -CH 2 -S0 2 -); 1.81-1.92 (m, 6H, -CH 2 -CH 2 -S0 2 -);
3.23 (t, 6H, -CH2-CH2-S02-CH2-COO, J=7.5Hz) ; 4.01 (s, 4H, -CH2-S02-CH2-3.23 (t, 6H, -CH 2 -CH 2 -S0 2 -CH 2 -COO, J = 7.5Hz); 4.01 (s, 4H, -CH 2 -S0 2 -CH 2 -
COO) ; 4.03 (s, 2H, -CH2-S02-CH2-COO) ; 4.67 (m, 4H, -CH2-CH-CH2-) ; 5.49COO); 4.03 (s, 2H, -CH 2 -S0 2 -CH 2 -COO); 4.67 (m, 4H, -CH 2 -CH-CH 2 -); 5.49
(m, 1 H, -CH2-CH-CH2-).(m, 1 H, -CH 2 -CH-CH 2 -).
SM (MALDI-TOF) : M+23 = 1021 (M+Na+) ; M+39 = 1037 (M + K+)MS (MALDI-TOF): M + 23 = 1021 (M + Na + ); M + 39 = 1037 (M + K + )
EXEMPLE 4f : Préparation du 1.2.3-tri-tétradécylsélénoacétylglvcérolEXAMPLE 4f Preparation of 1.2.3-tri-tetradecylselenoacetyl glycerol
Ce composé est obtenu selon la procédure précédemment décrite (exemple 4a) à partir de l'acide tétradécvlsélénoacétique (exemple 1d) et du glycérol.This compound is obtained according to the procedure described above (Example 4a) from tetradecvlsélénoacétique acid (Example 1d) and glycerol.
Rf (dichlorométhane-cyclohexane 7-3) : 0.74 IR : vCO ester 1737 et 1721 cm"1 Rf (dichloromethane-cyclohexane 7-3): 0.74 IR: vCO ester 1737 and 1721 cm "1
RMN (1H, CDCI3) : 0.85-0.92 (t, 9H, -CH3, J=6.2Hz) ; 1.23-1.46 (massif, 66H, -NMR (1 H, CDCl 3): 0.85-0.92 (t, 9H, -CH 3, J = 6.2Hz); 1.23-1.46 (massive, 66H, -
CH2-) ; 1.62-1.76 (massif, 6H, -CH2-CH2-CH2-Se-) ; 2.72-2.79 (t, 6H, CH2-CH2-CH 2 -); 1.62-1.76 (solid, 6H, -CH 2 -CH 2 -CH 2 -Se-); 2.72-2.79 (t, 6H, CH 2 -CH 2 -
Se-, J=7.4Hz) ; 3.15 (s, 6H, Se-CH2-COO) ; ; 4.10-4.30 (m, 2H, -CH2-CH-CH2-) ;Se-, J = 7.4Hz); 3.15 (s, 6H, Se-CH 2 -COO); ; 4.10-4.30 (m, 2H, -CH 2 -CH-CH 2 -);
4.30-4.60 (m, 2H, -CH2-CH-CH2-) ; 5.37 (m, 1H, -CH2-CH-CH2-). EXEMPLE 4g : Préparation du 1.3-dipalmitoyl-2-tétradécylthioacétylglvcérol4.30-4.60 (m, 2H, -CH 2 -CH-CH 2 -); 5.37 (m, 1H, -CH 2 -CH-CH 2 -). EXAMPLE 4g: Preparation of 1,3-dipalmitoyl-2-tetradecylthioacetylglvcerol
Le 1 ,3-dipalmitoylglycérol (exemple 3a) (5.64 g ; 9.9 mmol ; 1eq), l'acide tetradécylthioacétique (exemple 1a) (5.74 g ; 19.8 mmol ; 2eq), la dicyclohexylcarbodiimide (4.1 g ; 19.8 mmol ; 2eq) et la diméthylaminopyridine (2.42 g ; 19.8 mmol ; 2eq) sont mis en solution dans le dichloromethane. Le mélange réactionnel est laissé sous agitation à température ambiante pendant 3 jours. La dicyclohexyluree formée est filtrée et lavée plusieurs fois au dichloromethane. Le filtrat est porté à sec. Le produit résiduel est purifié par chromatographie sur gel de silice (éluant : dichlorométhane/cyclohexane 4/6) . Rendement : 80%1,3-dipalmitoylglycerol (example 3a) (5.64 g; 9.9 mmol; 1eq), tetradecylthioacetic acid (example 1a) (5.74 g; 19.8 mmol; 2eq), dicyclohexylcarbodiimide (4.1 g; 19.8 mmol; 2eq) and dimethylaminopyridine (2.42 g; 19.8 mmol; 2eq) are dissolved in dichloromethane. The reaction mixture is left under stirring at room temperature for 3 days. The dicyclohexyluree formed is filtered and washed several times with dichloromethane. The filtrate is brought to dryness. The residual product is purified by chromatography on silica gel (eluent: dichloromethane / cyclohexane 4/6). Efficiency: 80%
Rf (dichlorométhane-cyclohexane 7-3) : 0.32Rf (dichloromethane-cyclohexane 7-3): 0.32
PF : 60-62°CMp: 60-62 ° C
IR : vCO ester 1744 et 1730 cm"1 IR: vCO ester 1744 and 1730 cm "1
RMN (1H, CDCI3) : 0.86-0.91 (t, 9H, -CH3, J=6.6Hz) ; 1.10-1.45 (massif, 70H, - CH2-) ; 1.57-1.64 (massif, 6H, -CH2-CH2-CH2-S- et OCOCH2-CH2) ; 2.30-2.35 (t, 4H, OCOCH2-CH2-, J=7.4Hz) ; 2.60-2.66 (t, 2H, CH2-CH2-S-, J=7.4Hz) ; 3.23 (s, 2H, S-CH2-COO) ; 4.14-4.21 (dd, 2H, -CHaHb-CH-CHaHb-, J=12Hz et J=5.8Hz) ; 4.30-4.36 (dd, 2H, -CHaHb-CH-CHaHb-, J=12Hz et J=4Hz) ; 5.26- 5.33 (m, 1 H, -CHaHb-CH-CHaHb-) SM (MALDI-TOF) : M+23 = 861 (M+Na+) ; M+39 = 877 (M+K+)NMR (1 H, CDCl 3): 0.86-0.91 (t, 9H, -CH 3, J = 6.6Hz); 1.10-1.45 (solid, 70H, - CH 2 -); 1.57-1.64 (solid, 6H, -CH 2 -CH 2 -CH 2 -S- and OCOCH 2 -CH 2 ); 2.30-2.35 (t, 4H, OCOCH 2 -CH 2 -, J = 7.4Hz); 2.60-2.66 (t, 2H, CH 2 -CH 2 -S-, J = 7.4Hz); 3.23 (s, 2H, S-CH 2 -COO); 4.14-4.21 (dd, 2H, -CHaHb-CH-CHaHb-, J = 12Hz and J = 5.8Hz); 4.30-4.36 (dd, 2H, -CHaHb-CH-CHaHb-, J = 12Hz and J = 4Hz); 5.26 - 5.33 (m, 1H, -CHaHb-CH-CHaHb-) MS (MALDI-TOF): M + 23 = 861 (M + Na + ); M + 39 = 877 (M + K + )
EXEMPLE 4h : Préparation du 1.3-dilinoléoyl-2-tétradécylthioacétylglvcérolEXAMPLE 4h: Preparation of 1,3-dilinoleoyl-2-tetradecylthioacetylglvcerol
Ce composé est obtenu selon la procédure précédemment décrite (exemple 4g) à partir du 1 ,3-dilinoléoylglycérol (exemple 3b) et de l'acide tetradécylthioacétique (exemple 1a). Le produit est obtenu sous forme d'huile visqueuse incolore.This compound is obtained according to the procedure described above (example 4g) from 1,3-dilinoleoylglycerol (example 3b) and tetradecylthioacetic acid (example 1a). The product is obtained in the form of a colorless viscous oil.
Rendement : 56%Yield: 56%
Rf (dichlorométhane-cyclohexane 7-3) : 0.32Rf (dichloromethane-cyclohexane 7-3): 0.32
IR : vCO ester 1745 cm"1 RMN (1H, CDCI3) : 0.82-0.93 (t, 9H, -CH3, J=6.6Hz) ; 1.15-1.45 (massif, 50H, -IR: vCO ester 1745 cm "1 NMR ( 1 H, CDCI 3 ): 0.82-0.93 (t, 9H, -CH 3 , J = 6.6Hz); 1.15-1.45 (solid, 50H, -
CH2-) ; 1.52-1.70 (massif, 6H, -CH2-CH2-CH2-S- et OCOCH2-CH2) ; 1.93-2.14CH 2 -); 1.52-1.70 (solid, 6H, -CH 2 -CH 2 -CH 2 -S- and OCOCH 2 -CH 2 ); 1.93-2.14
(massif, 8H, -CH2-CH=CH-CH2-) ; 2.28-2.37 (t, 4H, OCOCH2-CH2-, J=7.5Hz) ; 2.59-2.67 (t, 2H, CH2-CH2-S-, J=7.4Hz) ; 2.70-2.83 (t, 4H, -CH2-CH=CH-CH2- CH=CH-CH2-) ; 3.22 (s, 2H, S-CH2-COO) ; 4.12-4.23 (dd, 2H, -CHaHb-CH- CHaHb-, J=12Hz et J=6.2Hz) ; 4.28-4.37 (dd, 2H, -CHaHb-CH-CHaHb-, J=12Hz et J=4Hz) ; 5.24-5.45 (m, 1 H, -CHaHb-CH-CHaHb-) SM (MALDI-TOF) : M+23 = 909 (M+Na+) ; M+39 = 925 (M+K+)(solid, 8H, -CH 2 -CH = CH-CH 2 -); 2.28-2.37 (t, 4H, OCOCH 2 -CH 2 -, J = 7.5Hz); 2.59-2.67 (t, 2H, CH 2 -CH 2 -S-, J = 7.4Hz); 2.70-2.83 (t, 4H, -CH 2 -CH = CH-CH 2 - CH = CH-CH 2 -); 3.22 (s, 2H, S-CH 2 -COO); 4.12-4.23 (dd, 2H, -CHaHb-CH- CHaHb-, J = 12Hz and J = 6.2Hz); 4.28-4.37 (dd, 2H, -CHaHb-CH-CHaHb-, J = 12Hz and J = 4Hz); 5.24-5.45 (m, 1H, -CHaHb-CH-CHaHb-) MS (MALDI-TOF): M + 23 = 909 (M + Na + ); M + 39 = 925 (M + K + )
EXEMPLE 4i : Préparation du 1.3-distéaroyl-2-tétradécylthioacétylglvcérolEXAMPLE 4i: Preparation of 1,3-distearoyl-2-tetradecylthioacetylglvcerol
Ce composé est obtenu selon la procédure précédemment décrite (exemple 4g) à partir du 1 ,3-distéaroylglycérol (composé 3c) et de l'acide tetradécylthioacétique (composé 1a). Rendement 41 % Rf (dichloromethane) : 0.32 IR : vCO ester 1744 et 1731 cm"1 RMN ( H, CDCI3) : 0.86-0.91 (t, 9H, -CH3, J=6.6Hz) ; 1.10-1.45 (massif, 78H, - CH2-) ; 1.57-1.64 (massif, 6H, -CH2-CH2-CH2-S- et OCOCH2-CH2) ; 2.29-2.35 (t, 4H, OCOCH2-CH2-, J=7.4Hz) ; 2.60-2.66 (t, 2H, CH2-CH2-S-, J=7.4Hz) ; 3.23 (s, 2H, S-CH2-COOH) ; 4.14-4.21 (dd, 2H, -CHaHb-CH-CHaHb-, J=12Hz et J=5.8Hz) ; 4.30-4.36 (dd, 2H, -CHaHb-CH-CHaHb-, J=12Hz et J=4 Hz) ; 5.26- 5.32 (m, 1 H, -CHaHb-CH-CHaHb-)This compound is obtained according to the procedure previously described (example 4g) from 1,3-distearoylglycerol (compound 3c) and tetradecylthioacetic acid (compound 1a). Yield 41% Rf (dichloromethane): 0.32 IR: vCO ester 1744 and 1731 cm "1 NMR (H, CDCI 3 ): 0.86-0.91 (t, 9H, -CH 3 , J = 6.6Hz); 1.10-1.45 (solid , 78H, - CH 2 -); 1.57-1.64 (solid, 6H, -CH 2 -CH 2 -CH 2 -S- and OCOCH 2 -CH 2 ); 2.29-2.35 (t, 4H, OCOCH 2 -CH 2 -, J = 7.4Hz); 2.60-2.66 (t, 2H, CH 2 -CH 2 -S-, J = 7.4Hz); 3.23 (s, 2H, S-CH 2 -COOH); 4.14-4.21 (dd , 2H, -CHaHb-CH-CHaHb-, J = 12Hz and J = 5.8Hz); 4.30-4.36 (dd, 2H, -CHaHb-CH-CHaHb-, J = 12Hz and J = 4 Hz); 5.26- 5.32 (m, 1 H, -CHaHb-CH-CHaHb-)
EXEMPLE 4i : Préparation du 1.3-oléoyl-2-tétradécylthioacétylglvcérol Ce composé est obtenu selon la procédure précédemment décrite (exemple 4g) à partir du 1 ,3-dioléoylglycérol (composé 3d) et de l'acide tetradécylthioacétique (composé 1a). Le produit est obtenu sous forme d'huile visqueuse incolore. Rendement : 32%EXAMPLE 4i: Preparation of 1,3-oleoyl-2-tetradecylthioacetylglvcerol This compound is obtained according to the procedure described above (Example 4g) from 1,3-dioleoylglycerol (compound 3d) and tetradecylthioacetic acid (compound 1a). The product is obtained in the form of a colorless viscous oil. Yield: 32%
Rf (dichlorométhane-cyclohexane 7-3) : 0.50Rf (dichloromethane-cyclohexane 7-3): 0.50
IR : vCO ester 1746 cm"1 IR: vCO ester 1746 cm "1
RMN (1H, CDCI3) : 0.89 (t, 9H, -CH3, J=6.4Hz) ; 1.31 (massif, 66H, -CH2-) ; 1.60NMR (1 H, CDCl 3): 0.89 (t, 9H, -CH 3, J = 6.4Hz); 1.31 (massif, 66H, -CH 2 -); 1.60
(massif, 6H, -CH2-CH2-CH2-S- et OCOCH2-CH2) ; 2.02 (massif, 8H, -CH2- CH=CH-CH2-) ; 2.33 (t, 4H, OCOCH2-CH2-, J=7.3Hz) ; 2.63 (t, 2H, CH2-CH2-S-, J=7.7Hz) ; 3.23 (s, 2H, S-CH2-COO) ; 4.18 (dd, 2H, -CHaHb-CH-CHaHb-, J=12.4Hz et J=6.4Hz) ; 4.33 (dd, 2H, -CHaHb-CH-CHaHb-, J=12.4Hz et J=4.5Hz) ; 5.33 (massif, 1H, -CHaHb-CH-CHaHb- et -CH2-CH=CH-CH2-) SM (MALDI-TOF) : M+23 = 913 (M+Na+) ; M+39 = 929 (M+K+)(solid, 6H, -CH 2 -CH 2 -CH 2 -S- and OCOCH 2 -CH 2 ); 2.02 (solid, 8H, -CH 2 - CH = CH-CH 2 -); 2.33 (t, 4H, OCOCH 2 -CH 2 -, J = 7.3Hz); 2.63 (t, 2H, CH 2 -CH 2 -S-, J = 7.7Hz); 3.23 (s, 2H, S-CH 2 -COO); 4.18 (dd, 2H, -CHaHb-CH-CHaHb-, J = 12.4Hz and J = 6.4Hz); 4.33 (dd, 2H, -CHaHb-CH-CHaHb-, J = 12.4Hz and J = 4.5Hz); 5.33 (solid, 1H, -CHaHb-CH-CHaHb- and -CH 2 -CH = CH-CH 2 -) MS (MALDI-TOF): M + 23 = 913 (M + Na + ); M + 39 = 929 (M + K + )
EXEMPLE 4k : Préparation du 1.3-ditétradécanoyl-2- tétradécylthioacétylqlvcérolEXAMPLE 4k: Preparation of 1,3-ditétradécanoyl-2- tétradécylthioacétylqlvcérol
Ce composé est obtenu selon la procédure précédemment décrite (exemple 4g) à partir du 1 ,3-ditétradécanoylglycérol (composé 3e) et de l'acide tetradécylthioacétique (composé 1 a). Rendement : 28%This compound is obtained according to the procedure previously described (example 4g) from 1,3-ditetradecanoylglycerol (compound 3e) and tetradecylthioacetic acid (compound 1a). Efficiency: 28%
Rf (dichlorométhane-cyclohexane 7-3) : 0.30Rf (dichloromethane-cyclohexane 7-3): 0.30
PF : 60-62°CMp: 60-62 ° C
IR : vCO ester 1744 et 1730 cm"1 IR: vCO ester 1744 and 1730 cm "1
RMN (1H, CDCI3) : 0.87 (t, 9H, -CH3, J=7.2Hz) ; 1.27 (massif, 62H, -CH2-) ; 1.60 (massif, 6H, -CH2-CH2-CH2-S- et OCOCH2-CH2) ; 2.33 (t, 4H, OCOCH2-CH2-, J=7.7Hz) ; 2.63 (t, 2H, CH2-CH2-S-, J=7.2Hz) ; 3.23 (s, 2H, S-CH2-COO) ; 4.18 (dd, 2H, -CHaHb-CH-CHaHb-, J=12Hz et J=5.8Hz) ; 4.33 (dd, 2H, -CHaHb-CH- CHaHb-, J=11.5Hz et J=5.8Hz) ; 5.30 (m, 1 H, -CHaHb-CH-CHaHb-). SM (MALDI-TOF) : M+23 = 805 (M+Na+)NMR (1 H, CDCl 3): 0.87 (t, 9H, -CH 3, J = 7.2Hz); 1.27 (solid, 62H, -CH 2 -); 1.60 (solid, 6H, -CH 2 -CH 2 -CH 2 -S- and OCOCH 2 -CH 2 ); 2.33 (t, 4H, OCOCH 2 -CH 2 -, J = 7.7Hz); 2.63 (t, 2H, CH 2 -CH 2 -S-, J = 7.2Hz); 3.23 (s, 2H, S-CH 2 -COO); 4.18 (dd, 2H, -CHaHb-CH-CHaHb-, J = 12Hz and J = 5.8Hz); 4.33 (dd, 2H, -CHaHb-CH- CHaHb-, J = 11.5Hz and J = 5.8Hz); 5.30 (m, 1H, -CHaHb-CH-CHaHb-). MS (MALDI-TOF): M + 23 = 805 (M + Na + )
EXEMPLE 41 : Préparation du 1-palmitoyl-2.3-ditétradécylthioacétylglvcérol Le 1-palmitoylglycérol (exemple 2b) (4.804 g ; 14 mmol) est dissous dans le dichloromethane (300 ml) avant d'ajouter la dicyclohexylcarbodiimide (7.498 g ; 36 mmol), la diméthylaminopyridine (4.439 g ; 0.036 mol) et l'acide tetradécylthioacétique (exemple 1a) (8.386 g ; 29 mmol). Le mélange réactionnel est placé sous agitation à température ambiante pendant 48 heures. Le précipité de dicyclohexyluree est filtré, lavé au dichloromethane. Le filtrat est porté à sec. Le résidu obtenu est purifié par chromatographie sur gel de silice (éluant dichlorométhane-cyclohexane 4-6) et donne le composé souhaité sous forme de poudre blanche. Rendement 42% Rf (dichlorométhane-cyclohexane 7-3) : 0.31 PF : 57-59°CEXAMPLE 41 Preparation of 1-palmitoyl-2.3-ditetradecylthioacetylglvcerol The 1-palmitoylglycerol (example 2b) (4.804 g; 14 mmol) is dissolved in dichloromethane (300 ml) before adding the dicyclohexylcarbodiimide (7.498 g; 36 mmol), dimethylaminopyridine (4,439 g; 0.036 mol) and tetradecylthioacetic acid (example 1a) (8,386 g; 29 mmol). The reaction mixture is stirred at room temperature for 48 hours. The precipitate of dicyclohexyluree is filtered, washed with dichloromethane. The filtrate is brought to dryness. The residue obtained is purified by chromatography on silica gel (eluent dichloromethane-cyclohexane 4-6) and gives the desired compound in the form of white powder. Yield 42% Rf (dichloromethane-cyclohexane 7-3): 0.31 Mp: 57-59 ° C
IR : vCO ester 1736 et 1722 cm"1 IR: vCO ester 1736 and 1722 cm "1
RMN (1H, CDCI3) : 0.89 (t, 9H, -CH3, J=6.6Hz) ; 1.27 (massif, 68H, -CH2-) ; 1.60 (massif, 6H, -CH2-CH2-CH2-S- et OCOCH2-CH2) ; 2.33 (t, 2H, OCOCH2-CH2-, J=7Hz) ; 2.63 (t, 4H, CH2-CH2-S-, J=8.9Hz) ; 3.23 (s, 4H, S-CH2-COO); 4.23 (m, 2H, -CHaHb-CH-CHaHb-) ; 4.37 (m, 2H, -CHaHb-CH-CHaHb) ; 5.31 (m, 1 H, - CHaHb-CH-CHaHb-) SM (MALDI-TOF) : M+23 = 893 (M+Na+) ; M+39 = 909 (M+K+)NMR ( 1 H, CDCI 3 ): 0.89 (t, 9H, -CH 3 , J = 6.6 Hz); 1.27 (solid, 68H, -CH 2 -); 1.60 (solid, 6H, -CH 2 -CH 2 -CH 2 -S- and OCOCH 2 -CH 2 ); 2.33 (t, 2H, OCOCH 2 -CH 2 -, J = 7Hz); 2.63 (t, 4H, CH 2 -CH 2 -S-, J = 8.9Hz); 3.23 (s, 4H, S-CH 2 -COO); 4.23 (m, 2H, -CHaHb-CH-CHaHb-); 4.37 (m, 2H, -CHaHb-CH-CHaHb); 5.31 (m, 1H, - CHaHb-CH-CHaHb-) MS (MALDI-TOF): M + 23 = 893 (M + Na + ); M + 39 = 909 (M + K + )
EXEMPLE 4m : Préparation du 1-oléoyl-3-palmitoyl-2- tétradécylthioacétylglvcérolEXAMPLE 4m: Preparation of 1-oleoyl-3-palmitoyl-2-tetradecylthioacetylglvcerol
Le 1-oléoyl-3-palmitoylglycérol (exemple 3g) (2 g ; 3 mmol) est dissous dans le dichloromethane (150 ml) avant d'ajouter la dicyclohexylcarbodiimide (1.040 g ; 5 mmol), la diméthylaminopyridine (0.616 g ; 5 mmol) et l'acide tetradécylthioacétique (exemple 1a) (1.455 g ; 5 mmol). Le mélange est laissé sous agitation à température ambiante pendant 24 heures, Le précipité de dicyclohexyluree est filtré, rincé au dichloromethane et le filtrat est concentré. Le résidu obtenu est purifié par chromatographie sur gel de silice (éluant dichlorométhane-cyclohexane 4-6) et permet d'obtenir le composé souhaité sous forme d'huile. Rendement 49%1-oleoyl-3-palmitoylglycerol (example 3g) (2 g; 3 mmol) is dissolved in dichloromethane (150 ml) before adding dicyclohexylcarbodiimide (1.040 g; 5 mmol), dimethylaminopyridine (0.616 g; 5 mmol ) and tetradecylthioacetic acid (Example 1a) (1.455 g; 5 mmol). The mixture is left stirring at room temperature for 24 hours, the precipitate of dicyclohexyluree is filtered, rinsed with dichloromethane and the filtrate is concentrated. The residue obtained is purified by chromatography on silica gel (eluent dichloromethane-cyclohexane 4-6) and allows the desired compound to be obtained in the form of an oil. Yield 49%
Rf (dichlorométhane-cyclohexane 7-3) : 0.45 PF < 4°C IR : vCO ester 1742 cm"1 RMN (1H, CDCI3) : 0.89 (t, 9H, -CH3, J=6.5Hz) ; 1.26 (massif, 66H, -CH2-) ; 1.60 (massif, 6H, -CH2-CH2-CH2-S- et OCOCH2-CH2) ; 2.03 (massif, 4H, -CH2- CH=CH-CH2-) ; 2.33 (t, 4H, OCOCH2-CH2-, J=7.4Hz) ; 2.63 (t, 2H, CH2-CH2-S-, J=7.4Hz) ; 3.23 (s, 2H, S-CH2-COO) ; 4.18 (dd, 2H, -CHaHb-CH-CHaHb-, J=12.2Hz et J=6.1 Hz) ; 4.33 (dd, 2H, -CHaHb-CH-CHaHb-, J=12.2Hz et J=4.4Hz) ; 5.32 (massif, 3H, -CHaHb-CH-CHaHb- et -CH2-CH=CH-CH2-) SM (MALDI-TOF) : M+23 = 887 (M+Na+) ; M+39 = 903 (M+K+) EXEMPLE 4n : Préparation du 1.3-dipalmitoyl-2-docosylthioacétylqlvcérolRf (dichloromethane-cyclohexane 7-3): 0.45 PF <4 ° C IR: vCO ester 1742 cm "1 NMR ( 1 H, CDCI 3 ): 0.89 (t, 9H, -CH 3 , J = 6.5Hz); 1.26 (solid, 66H, -CH 2 -); 1.60 (solid, 6H, -CH 2 -CH 2 -CH 2 -S- and OCOCH 2 -CH 2 ); 2.03 (solid, 4H, -CH 2 - CH = CH -CH 2 -); 2.33 (t, 4H, OCOCH 2 -CH 2 -, J = 7.4Hz); 2.63 (t, 2H, CH 2 -CH 2 -S-, J = 7.4Hz); 3.23 (s, 2H, S-CH 2 -COO); 4.18 (dd, 2H, -CHaHb-CH-CHaHb-, J = 12.2Hz and J = 6.1 Hz); 4.33 (dd, 2H, -CHaHb-CH-CHaHb-, J = 12.2Hz and J = 4.4Hz); 5.32 (solid, 3H, -CHaHb-CH-CHaHb- and -CH 2 -CH = CH-CH 2 -) SM (MALDI-TOF): M + 23 = 887 (M + Na + ); M + 39 = 903 (M + K + ) EXAMPLE 4n: Preparation of 1,3-dipalmitoyl-2-docosylthioacetylqlvcerol
Le produit est préparé selon la procédure décrite (exemple 4g) à partir du 1 ,3- dipalmitoylglycérol (exemple 3a) et de l'acide docosylthioacétique (exemple 1 i). Rendement : 77% Rf (dichlorométhane-cyclohexane 7-3) : 0.32 IR : vCO ester 1745 et 1730 cm"1 The product is prepared according to the procedure described (example 4g) from 1, 3-dipalmitoylglycerol (example 3a) and docosylthioacetic acid (example 1 i). Yield: 77% Rf (dichloromethane-cyclohexane 7-3): 0.32 IR: vCO ester 1745 and 1730 cm "1
RMN (1H, CDCI3) : 0.86-0.91 (t, 9H, -CH3, J=6.6Hz) ; 1.10-1.45 (massif, 86H, - CH2-) ; 1.57-1.64 (massif, 6H, -CH2-CH2-CH2-S- et OCOCH2-CH2) ; 2.29-2.34 (t, 4H, OCOCH2-CH2-, J=7.5Hz) ; 2.60-2.66 (t, 2H, CH2-CH2-S-, J=7.4Hz) ; 3.23 (s, 2H, S-CH2-COO-) ; 4.13-4.22 (dd, 2H, -CHaHb-CH-CHaHb-, J=12Hz et J=5.8Hz) ; 4.30-4.36 (dd, 2H, -CHaHb-CH-CHaHb-, J=12Hz et J=4Hz) ; 5.27- 5.34 (m, 1H, -CHaHb-CH-CHaHb-)NMR (1 H, CDCl 3): 0.86-0.91 (t, 9H, -CH 3, J = 6.6Hz); 1.10-1.45 (solid, 86H, - CH 2 -); 1.57-1.64 (solid, 6H, -CH 2 -CH 2 -CH 2 -S- and OCOCH 2 -CH 2 ); 2.29-2.34 (t, 4H, OCOCH 2 -CH 2 -, J = 7.5Hz); 2.60-2.66 (t, 2H, CH 2 -CH 2 -S-, J = 7.4Hz); 3.23 (s, 2H, S-CH 2 -COO-); 4.13-4.22 (dd, 2H, -CHaHb-CH-CHaHb-, J = 12Hz and J = 5.8Hz); 4.30-4.36 (dd, 2H, -CHaHb-CH-CHaHb-, J = 12Hz and J = 4Hz); 5.27- 5.34 (m, 1H, -CHaHb-CH-CHaHb-)
EXEMPLE 4o : Préparation du 1.3-ditétradécylthioacétyl-2-palmitoylglvcérol Le produit est préparé selon la procédure décrite (exemple 4g) à partir du 1 ,3- ditétradécylthioacétylglycérol (exemple 3f) et de l'acide palmitique.EXAMPLE 4o: Preparation of 1,3-ditetradecylthioacetyl-2-palmitoylglvcerol The product is prepared according to the procedure described (example 4g) from 1, 3-ditetradecylthioacetylglycerol (example 3f) and palmitic acid.
Rendement : 36%Efficiency: 36%
PF : 59-61 °CMp: 59-61 ° C
Rf (dichlorométhane-cyclohexane 7-3) : 0.35 IR : vCO ester 1740 cm"1 Rf (dichloromethane-cyclohexane 7-3): 0.35 IR: vCO ester 1740 cm "1
RMN (1H, CDCI3) : 0.89 (t, 9H, -CH3, J=6.5Hz) ; 1.26 (massif, 68H, -CH2-) ; 1.55-NMR (1 H, CDCl 3): 0.89 (t, 9H, -CH 3, J = 6.5Hz); 1.26 (solid, 68H, -CH 2 -); 1.55-
1.65 (massif, 6H, -CH2-CH2-CH2-S- et -OCOCH2-CH2) ; 2.34 (td, 2H, OCOCH2-1.65 (solid, 6H, -CH 2 -CH 2 -CH 2 -S- and -OCOCH 2 -CH 2 ); 2.34 (td, 2H, OCOCH 2 -
CH2-, J=7.7Hz et J=1.9Hz) ; 2.63 (td, 4H, CH2-CH2-S-, J=7.3Hz et J=1.9Hz) ;CH 2 -, J = 7.7Hz and J = 1.9Hz); 2.63 (td, 4H, CH 2 -CH 2 -S-, J = 7.3Hz and J = 1.9Hz);
3.23 (s, 4H, S-CHz-COO-) ; 3.68 (dd, 2H, -CHaHb-CH-CHaHb-, J=10.4Hz et J=4.6Hz) ; 4.36 (dd, 2H, -CHaHb-CH-CHaHb-, J=11.9Hz et J=4.2Hz) ; 5.31 (m,3.23 (s, 4H, S-CHz-COO-); 3.68 (dd, 2H, -CHaHb-CH-CHaHb-, J = 10.4Hz and J = 4.6Hz); 4.36 (dd, 2H, -CHaHb-CH-CHaHb-, J = 11.9Hz and J = 4.2Hz); 5.31 (m,
1 H, -CHaHb-CH-CHaHb-)1 H, -CHaHb-CH-CHaHb-)
SM (MALDI-TOF) : M+23 = 893 (M+Na+) ; M+39 = 909 (M+K+)MS (MALDI-TOF): M + 23 = 893 (M + Na + ); M + 39 = 909 (M + K + )
EXEMPLE 4p : Préparation du 1.3-diacétyl-2-tétradécylthioacétylqlvcérol Le produit est préparé selon la procédure décrite (exemple 4g) à partir du 1 ,3- diacétylglycérol (exemple 3h) et de l'acide tetradécylthioacétique (exemple 1a). Rendement : 10% Rf (acétate d'éthyle-cyclohexane 3-7) : 0.47EXAMPLE 4p: Preparation of 1,3-diacetyl-2-tetradecylthioacetylqlvcerol The product is prepared according to the procedure described (example 4g) from 1, 3-diacetylglycerol (example 3h) and tetradecylthioacetic acid (example 1a). Yield: 10% Rf (ethyl acetate-cyclohexane 3-7): 0.47
PF < 4°CMp <4 ° C
IR : vCO ester 1748 cm"1 IR: vCO ester 1748 cm "1
RMN (1H, CDCI3) : 0.89 (t, 3H, -CH3, J=6.9Hz) ; 1.26 (massif, 20H, -CH2-) ; 1.60NMR ( 1 H, CDCI 3 ): 0.89 (t, 3H, -CH 3 , J = 6.9 Hz); 1.26 (solid, 20H, -CH 2 -); 1.60
(massif, 4H, -CH2-CH2-CH2-S-) ; 2.09 (s, 6H, -OCOCH3) ; 2.64 (t, 2H, CH2-CH2-(solid, 4H, -CH 2 -CH 2 -CH 2 -S-); 2.09 (s, 6H, -OCOCH 3 ); 2.64 (t, 2H, CH 2 -CH 2 -
S-, J=7.4Hz) ; 3.24 (s, 2H, S-CH2-COO) ; 4.17 (dd, 2H, -CHaHb-CH-CHaHb-,S-, J = 7.4Hz); 3.24 (s, 2H, S-CH 2 -COO); 4.17 (dd, 2H, -CHaHb-CH-CHaHb-,
J=12Hz et J=5.8Hz) ; 4.34 (dd, 2H, -CHaHb-CH-CHaHb-, J=12Hz et J=4Hz) ;J = 12Hz and J = 5.8Hz); 4.34 (dd, 2H, -CHaHb-CH-CHaHb-, J = 12Hz and J = 4Hz);
5.28 (m, 1 H, -CHaHb-CH-CHaHb-)5.28 (m, 1 H, -CHaHb-CH-CHaHb-)
SM (MALDI-TOF) : M+23 = 469 (M+Na+) ; M+39 = 485 (M+K+)MS (MALDI-TOF): M + 23 = 469 (M + Na + ); M + 39 = 485 (M + K + )
EXEMPLE 4q : Préparation du 1,3-dioctanoyl-2-tétradécylthioacétylglvcérolEXAMPLE 4q: Preparation of 1,3-dioctanoyl-2-tetradecylthioacetylglvcerol
Le produit est préparé selon la procédure décrite (exemple 4g) à partir du 1 ,3- dioctanoylglycérol (exemple 3i) et de l'acide tetradécylthioacétique (exemple 1a). Rendement : 88% Rf (dichloromethane 10) : 0.52 PF < 4°CThe product is prepared according to the procedure described (example 4g) from 1,3-dioctanoylglycerol (example 3i) and tetradecylthioacetic acid (example 1a). Yield: 88% Rf (dichloromethane 10): 0.52 PF <4 ° C
IR : vCO ester 1745 cm"1 IR: vCO ester 1745 cm "1
RMN (1H, CDCI3) : 0.89 (t, 9H, -CH3, J=7.0Hz) ; 1.27 (massif, 38H, -CH2-) ; 1.60 (massif, 6H, -CH2-CH2-CH2-S- et OCOCH2-CH2) ; 2.32 (t, 4H, OCOCH2-CH2-, J=7.3Hz) ; 2.63 (t, 2H, CH2-CH2-S-, J = 7.3 Hz) ; 3.23 (s, 2H, S-CH2-COO) ; 4.17 (dd, 2H, -CHaHb-CH-CHaHb-, J=11.9Hz et J=5.8Hz) ; 4.33 (dd, 2H, -CHaHb- CH-CHaHb-, J=11.9Hz et J=4.3Hz) ; 5.30 (m, 1 H, -CHaHb-CH-CHaHb-) SM (MALDI-TOF) : M+23 = 637 (M+Na+) ; M+39 = 653 (M+K+)NMR (1 H, CDCl 3): 0.89 (t, 9H, -CH 3, J = 7.0Hz); 1.27 (solid, 38H, -CH 2 -); 1.60 (solid, 6H, -CH 2 -CH 2 -CH 2 -S- and OCOCH 2 -CH 2 ); 2.32 (t, 4H, OCOCH 2 -CH 2 -, J = 7.3Hz); 2.63 (t, 2H, CH 2 -CH 2 -S-, J = 7.3 Hz); 3.23 (s, 2H, S-CH 2 -COO); 4.17 (dd, 2H, -CHaHb-CH-CHaHb-, J = 11.9Hz and J = 5.8Hz); 4.33 (dd, 2H, -CHaHb- CH-CHaHb-, J = 11.9Hz and J = 4.3Hz); 5.30 (m, 1H, -CHaHb-CH-CHaHb-) MS (MALDI-TOF): M + 23 = 637 (M + Na + ); M + 39 = 653 (M + K + )
EXEMPLE 4r Préparation du 1.3-diundécanoyl-2- tétradécylthioacétylglvcérolEXAMPLE 4r Preparation of 1,3-diundecanoyl-2-tetradecylthioacetylglvcerol
Le produit est préparé selon la procédure décrite (exemple 4g) à partir du 1 ,3- diundécanoylglycérol (exemple 3j) et de l'acide tetradécylthioacétique (exemple 1a). Rendement : 28%The product is prepared according to the procedure described (example 4g) from 1,3-diundecanoylglycerol (example 3d) and tetradecylthioacetic acid (example 1a). Efficiency: 28%
Rf (dichlorométhane-cyclohexane 7-3) : 0.16 IR : vCO ester 1738 et 1725 cm"1 RMN (1H, CDCI3) : 0.89 (t, 9H, -CH3, J=6.9Hz) ; 1.26 (massif, 50H, -CH2-) ; 1.62 (massif, 6H, -CH2-CH2-CH2-S- et OCOCH2-CH2) ; 2.33 (t, 4H, OCOCH2-CH2-, J=7.7Hz) ; 2.63 (t, 2H, CH2-CH2-S-, J=7.3Hz) ; 3.23 (s, 2H, S-CH2-COO) ; 4.20 (dd, 2H, -CHaHb-CH-CHaHb-, J=12.1 Hz et J=6.1 Hz) ; 4.35 (dd, 2H, -CHaHb- CH-CHaHb-, J=12.1 Hz et J=4.5Hz) ; 5.29 (m, 1 H, -CHaHb-CH-CHaHb-) SM (MALDI-TOF) : M+23 = 722 (M+Na+) ; M+39 = 738 (M+K+)Rf (dichloromethane-cyclohexane 7-3): 0.16 IR: vCO ester 1738 and 1725 cm "1 NMR ( 1 H, CDCI 3 ): 0.89 (t, 9H, -CH 3 , J = 6.9 Hz); 1.26 (solid, 50H, -CH 2 -); 1.62 (solid, 6H, -CH 2 -CH 2 -CH 2 -S- and OCOCH 2 -CH 2 ); 2.33 (t, 4H, OCOCH 2 -CH 2 -, J = 7.7Hz); 2.63 (t, 2H, CH 2 -CH 2 -S-, J = 7.3Hz); 3.23 (s, 2H, S-CH 2 -COO); 4.20 (dd, 2H, -CHaHb-CH-CHaHb-, J = 12.1 Hz and J = 6.1 Hz); 4.35 (dd, 2H, -CHaHb- CH-CHaHb-, J = 12.1 Hz and J = 4.5Hz); 5.29 (m, 1H, -CHaHb-CH-CHaHb-) MS (MALDI-TOF): M + 23 = 722 (M + Na + ); M + 39 = 738 (M + K + )
EXEMPLE 5 : Préparation des dérivés 2-aminoglvcérolEXAMPLE 5 Preparation of 2-aminoglvcerol derivatives
EXEMPLE 5a : Préparation du 2-tétradécylthioacétylamino propan-1.3-diolEXAMPLE 5a: Preparation of 2-tetradecylthioacetylamino propan-1.3-diol
L'acide tetradécylthioacétique (exemple 1a) (2.878 g ; 10 mmol) et le 2-amino-Tetradecylthioacetic acid (Example 1a) (2,878 g; 10 mmol) and 2-amino-
1 ,3-propanediol (1 g ; 11 mmol) sont placés dans un ballon et chauffés 190°C pendant 1 heure. Après refroidissement à température ambiante, le milieu est repris par du chloroforme et lavé à l'eau. La phase organique est séchée sur sulfate de magnésium, filtrée puis évaporée pour fournir un résidu solide ocre.1, 3-propanediol (1 g; 11 mmol) are placed in a flask and heated 190 ° C for 1 hour. After cooling to room temperature, the medium is taken up in chloroform and washed with water. The organic phase is dried over magnesium sulfate, filtered and then evaporated to provide an ocher solid residue.
Ce résidu est placé sous agitation dans l'éther diéthylique pendant 12 heures. Le produit est isolé par filtration et fournit une poudre blanche .This residue is placed under stirring in diethyl ether for 12 hours. The product is isolated by filtration and provides a white powder.
Rendement : 6% Rf (dichlorométhane-méthanol 9-1) : 0.60Yield: 6% Rf (dichloromethane-methanol 9-1): 0.60
PF : 95-97°CMp: 95-97 ° C
IR : vCO amide 1640 cm"1 IR: vCO amide 1640 cm "1
RMN (1H, CDCI3) : 0.84-0.93 (t, 3H, -CH3, J=6.4Hz) ; 1.21-1.45 (massif, 22H, -NMR (1 H, CDCl 3): 0.84-0.93 (t, 3H, -CH 3, J = 6.4Hz); 1.21-1.45 (massive, 22H, -
CH2-) ; 1.54-1.72 (m, 2H, -CH2-CH2-CH2-S-) ; 2.52-2.59 (t, 2H, CH2-CH2-S-, J=7.1Hz) ; 2.63 (si, 2H, OH) ; 3.27 (s, 2H, S-CH2-COO) ; 3.77-3.96 (massif, 4H, -CH 2 -); 1.54-1.72 (m, 2H, -CH 2 -CH 2 -CH 2 -S-); 2.52-2.59 (t, 2H, CH 2 -CH 2 -S-, J = 7.1Hz); 2.63 (si, 2H, OH); 3.27 (s, 2H, S-CH 2 -COO); 3.77-3.96 (massive, 4H, -
CH2-CH-CH2-) ; 3.97-4.04 (m, 1 H, - CH2-CH-CH2-) ; 7.55 (d, 1 H, -CONH-,CH 2 -CH-CH 2 -); 3.97-4.04 (m, 1 H, - CH 2 -CH-CH 2 -); 7.55 (d, 1 H, -CONH-,
J=6.7Hz).J = 6.7Hz).
SM (MALDI-TOF) : M+1=362 ; M+23 = 384 (M+Na+) ; M+39 = 400 (M+K+) EXEMPLE 5b : Préparation du 2-tétradécylthioacétylamino-1.3- ditétradécylthioacétyloxypropaneMS (MALDI-TOF): M + 1 = 362; M + 23 = 384 (M + Na + ); M + 39 = 400 (M + K + ) EXAMPLE 5b: Preparation of 2-tetradecylthioacetylamino-1.3- ditetradecylthioacetyloxypropane
Le 2-tétradécylthioacétylaminopropan-1 ,3-diol (exemple 5a) (1 g ; 2.77 mmol) est dissous dans le dichloromethane (180 ml) puis la dicyclohexycarbodiimide (1.427 g ; 6.91 mmol), la diméthylaminopyridine (0.845 g ; 6.91 mmol) et l'acide tetradécylthioacétique (exemple 1a) (1.995 g ; 6.91 mmol) sont ajoutés dans cet ordre. Le mélange réactionnel est laissé sous agitation à température ambiante pendant 48 heures. Le précipité de dicyclohexyluree est filtré et lavé par du dichloromethane et le filtrat est concentré. Le résidu obtenu est purifié par chromatographie sur gel de silice (éluant dichlorométhane-cyclohexane 7-3). Le composé souhaité est obtenu sous forme de poudre blanche. Rendement : 66% Rf (dichloromethane) : 0.18 PF : 82-84°C IR : vCO ester 1715 et 1730 cm"1 ; vCO amide 1648 cm"1 2-tetradecylthioacetylaminopropan-1,3-diol (example 5a) (1 g; 2.77 mmol) is dissolved in dichloromethane (180 ml) then dicyclohexycarbodiimide (1.427 g; 6.91 mmol), dimethylaminopyridine (0.845 g; 6.91 mmol) and tetradecylthioacetic acid (Example 1a) (1.995 g; 6.91 mmol) are added in this order. The reaction mixture is left under stirring at room temperature for 48 hours. The precipitate of dicyclohexyluree is filtered and washed with dichloromethane and the filtrate is concentrated. The residue obtained is purified by chromatography on silica gel (eluent dichloromethane-cyclohexane 7-3). The desired compound is obtained in the form of a white powder. Yield: 66% Rf (dichloromethane): 0.18 PF: 82-84 ° C IR: vCO ester 1715 and 1730 cm "1 ; vCO amide 1648 cm " 1
RMN (1H, CDCI3) : 0.84-0.95 (t, 9H, -CH3, J=6.6Hz) ; 1.22-1.45 (massif, 66H, - CH2-) ; 1.54-1.69 (massif, 6H, -CH2-CH2-CH2-S-) ; 2.48-2.55 (t, 2H, CH2-CH2-S- CH2-CONH-, J=7.5Hz) ; 2.59-2.70 (t, 4H, CH2-CH2-S-CH2-COO-, J=7.2Hz) ; 3.24 (s, 6H, S-CH2-CO-) ; 4.18-4.35 (massif, 4H, -CH2-CH-CH2-) ; 4.47-4.60 (m, 1H, - CH2-CH-CH2-) ; 7.23 (d, 1 H, -CONH-, J=8.5Hz). SM (MALDI-TOF) : M+23 = 924 (M+Na+)NMR (1 H, CDCl 3): 0.84-0.95 (t, 9H, -CH 3, J = 6.6Hz); 1.22-1.45 (solid, 66H, - CH 2 -); 1.54-1.69 (solid, 6H, -CH 2 -CH 2 -CH 2 -S-); 2.48-2.55 (t, 2H, CH 2 -CH 2 -S- CH 2 -CONH-, J = 7.5Hz); 2.59-2.70 (t, 4H, CH 2 -CH 2 -S-CH 2 -COO-, J = 7.2Hz); 3.24 (s, 6H, S-CH 2 -CO-); 4.18-4.35 (solid, 4H, -CH 2 -CH-CH 2 -); 4.47-4.60 (m, 1H, - CH 2 -CH-CH 2 -); 7.23 (d, 1H, -CONH-, J = 8.5Hz). MS (MALDI-TOF): M + 23 = 924 (M + Na + )
EXEMPLE 6 : Préparation des dérivés 2-thioglvcérolEXAMPLE 6 Preparation of 2-thioglvcerol derivatives
EXEMPLE βa : Préparation de l'acide 2-(tétradécylthio)thiolacétiqueEXAMPLE βa: Preparation of 2- (tetradecylthio) thiolacetic acid
Préparation du 2-(tétradécylthio)thioacétate de S-triphénvIméthyle Le triphénylméthylthiol (9.58 g ; 35 mmol) est dissous dans le dichloromethane avant d'ajouter la dicyclohexylcarbodiimide (7.15 g ; 35 mmol), la diméthylaminopyridine (4.24 g ; 35 mmol) et l'acide tetradécylthioacétique (exemple 1a) (10 g ; 35 mmol). Le mélange réactionnel est laissé sous agitation à température ambiante pendant 24 heures. La dicyclohexylcarbodiimide est filtrée et rincée au dichloromethane. Le filtrat est porté à sec. Le résidu est purifié par chromatographie sur gel de silice (éluant dichlorométhane/cyclohexane 1/9).Preparation of S-triphenylmethyl 2- (tetradecylthio) thioacetate Triphenylmethylthiol (9.58 g; 35 mmol) is dissolved in dichloromethane before adding dicyclohexylcarbodiimide (7.15 g; 35 mmol), dimethylaminopyridine (4.24 g; 35 mmol) and tetradecylthioacetic acid (Example 1a) (10 g; 35 mmol). The reaction mixture is left under stirring at room temperature for 24 hours. Dicyclohexylcarbodiimide is filtered and rinsed with dichloromethane. The filtrate is brought to dryness. The residue is purified by chromatography on silica gel (eluent dichloromethane / cyclohexane 1/9).
Rendement : 30%Yield: 30%
Rf (dichlorométhane-cyclohexane 2-8) : 0.43Rf (dichloromethane-cyclohexane 2-8): 0.43
PF : 45-50°CMp: 45-50 ° C
IR : vCO ester 1689 cm"1 IR: vCO ester 1689 cm "1
RMN (1H, CDCI3) : 0.89 (t, 3H, -CH3, J=6.4Hz) ; 1.26 (massif, 22H, -CH2-) ; 1.51-NMR (1 H, CDCl 3): 0.89 (t, 3H, -CH 3, J = 6.4Hz); 1.26 (solid, 22H, -CH 2 -); 1.51-
1.54 (m, 2H, -CH2-CH2-CH2-S-) ; 2.47 (t, 2H, CH2-CH2-S-CH2-COS-, J=7.1 Hz) ;1.54 (m, 2H, -CH 2 -CH 2 -CH 2 -S-); 2.47 (t, 2H, CH 2 -CH 2 -S-CH 2 -COS-, J = 7.1 Hz);
3.30 (s, 2H, S-CH2-COS-) ; 7.23 (massif, 15H, H aromatiques).3.30 (s, 2H, S-CH 2 -COS-); 7.23 (massive, 15H, aromatic H).
Préparation de acide2-(tétradécylthio)thiolacétiquePreparation of 2- (tetradecylthio) thiolacetic acid
Le 2-(tétradécylthio)thioacétate de S-triphénylméthyle (4.715 g ; 9 mmol) est ajouté à froid à une suspension d'acétate mercurique (5.495 g ; 17 mmol) dans du dichloromethane (150 ml). Le mélange réactionnel est laissé sous agitation pendant 18 heures. Le milieu est filtré sur célite® et rincé par du dichloromethane chaud. Le filtrat est évaporé et fournit un résidu poudreux qui est repris par de l'éthanol absolu et filtré. La concentration du filtrat conduit à une huile jaune qui est utilisée sans autre purification. Rf (dichlorométhane-méthanol 9-1) : 0.58S-triphenylmethyl 2- (tetradecylthio) thioacetate (4,715 g; 9 mmol) is added cold to a suspension of mercuric acetate (5,495 g; 17 mmol) in dichloromethane (150 ml). The reaction mixture is left under stirring for 18 hours. The medium is filtered over Celite ® and washed with hot dichloromethane. The filtrate is evaporated and provides a powdery residue which is taken up in absolute ethanol and filtered. The concentration of the filtrate leads to a yellow oil which is used without further purification. Rf (dichloromethane-methanol 9-1): 0.58
EXEMPLE 6b : Préparation du 2-iodo-1,3-ditétradécylthioacétoxypropaneEXAMPLE 6b: Preparation of 2-iodo-1,3-ditetradecylthioacetoxypropane
Le 1 ,3-ditétradécylthioacétylglycérol (exemple 3f) (2 g ; 3 mmol) est dissous dans le toluène (180 ml) avant d'ajouter l'imidazole (0.538 g ; 8 mmol), la triphénylphosphine (2.072 g ; 8 mmol) et l'iode (1.604 g ; 6 mmol). Le mélange réactionnel est laissé sous agitation à température ambiante et l'évolution de la réaction est suivie par chromatographie sur couche mince. Après 20 heures de réaction, une solution saturée en sulfite de sodium est ajoutée jusqu'à décoloration totale du milieu. Le milieu est décanté et la phase aqueuse extraite par du toluène. Les phases organiques sont groupées et lavées par une solution aqueuse saturée en chlorure de sodium. La phase organique est séchée sur sulfate de magnésium, filtrée et le solvant est évaporé. Le résidu obtenu (4.4 g) est purifié par chromatographie sur colonne Puriflash, (éluant dichlorométhane- cyclohexane 1-9 puis 3-7). Rendement : 95% Rf (dichlorométhane-cyclohexane 6-4) : 0.62 PF : 51-53°CThe 1,3-ditetradecylthioacetylglycerol (example 3f) (2 g; 3 mmol) is dissolved in toluene (180 ml) before adding imidazole (0.538 g; 8 mmol), triphenylphosphine (2.072 g; 8 mmol) and iodine (1.604 g; 6 mmol). The reaction mixture is left under stirring at room temperature and the progress of the reaction is followed by thin layer chromatography. After 20 hours of reaction, a saturated solution of sodium sulfite is added until the medium is completely discolored. The medium is decanted and the aqueous phase extracted with toluene. The organic phases are grouped together and washed with a saturated aqueous solution of sodium chloride. The organic phase is dried over magnesium sulfate, filtered and the solvent is evaporated. The residue obtained (4.4 g) is purified by chromatography on a Puriflash column (eluent dichloromethane-cyclohexane 1-9 then 3-7). Yield: 95% Rf (dichloromethane-cyclohexane 6-4): 0.62 PF: 51-53 ° C
RMN (1H, CDCI3) : 0.89 (t, 6H, -CH3, J=6.6Hz) ; 1.27 (massif, 44H, -CH2-) ; 1.63 (massif, 4H, -CH2-CH2-CH2-S-) ; 2.66 (t, 4H, CH2-CH2-S-CH2-COO-, J=7.4Hz) ; 3.26 (s, 4H, S-CH2-CO-) ; 4.42 (massif, 5H- CH2-CH-CH2-)). SM (MALDI-TOF) : M+23 = 765 (M+Na+) ; 781 (M+K+)NMR (1 H, CDCl 3): 0.89 (t, 6H, -CH 3, J = 6.6Hz); 1.27 (solid, 44H, -CH 2 -); 1.63 (solid, 4H, -CH 2 -CH 2 -CH 2 -S-); 2.66 (t, 4H, CH 2 -CH 2 -S-CH 2 -COO-, J = 7.4Hz); 3.26 (s, 4H, S-CH 2 -CO-); 4.42 (solid, 5H- CH 2 -CH-CH 2 -)). MS (MALDI-TOF): M + 23 = 765 (M + Na + ); 781 (M + K + )
EXEMPLE 6c : Préparation du 1.3-ditétradécylthioacétoxy-2-(2- tétradécylthio)methylcarbonylthiopropane Le 2-iodo-1 ,3-ditétradécylthioacétoxypropane (exemple 6b) (200 mg ; 0.27 mmol) et l'acide 2-(tétradécylthio)thiolacétique (exemple 6a) (82 mg ; 0.27 mmol) sont dissous dans du tetrahydrofuranne distillé (30 ml). Le mélange réactionnel est refroidi dans un bain de glace avant d'ajouter l'hydrure de sodium (22 mg ; 0.54 mmol). Le milieu est laissé sous agitation à température ambiante. Après 48 heures, le hydrure de sodium est hydrolyse et le tetrahydrofuranne évaporé. Le milieu est extrait par de l'acétate d'éthyle ; la phase organique est lavée par de l'eau, séchée sur sulfate de magnésium, filtrée et évaporée. Le résidu huileux jaune obtenu (164 mg) est purifié par chromatographie courte sur gel de silice (éluant dichlorométhane-cyclohexane 5-5) et permet d'obtenir le composé souhaité sous forme d'huile jaune.EXAMPLE 6c Preparation of 1.3-ditetradecylthioacetoxy-2- (2- tetradecylthio) methylcarbonylthiopropane 2-iodo-1, 3-ditetradecylthioacetoxypropane (example 6b) (200 mg; 0.27 mmol) and 2- (tetradecylthio) thiolacetic acid (example 6a) (82 mg; 0.27 mmol) are dissolved in distilled tetrahydrofuran (30 ml). The reaction mixture is cooled in an ice bath before adding the sodium hydride (22 mg; 0.54 mmol). The medium is left stirring at room temperature. After 48 hours, the sodium hydride is hydrolyzed and the tetrahydrofuran evaporated. The medium is extracted with ethyl acetate; the organic phase is washed with water, dried over magnesium sulfate, filtered and evaporated. The yellow oily residue obtained (164 mg) is purified by short chromatography on silica gel (eluent dichloromethane-cyclohexane 5-5) and allows the desired compound to be obtained in the form of a yellow oil.
Rf (dichlorométhane-cyclohexane 5-5) : 0.20Rf (dichloromethane-cyclohexane 5-5): 0.20
IR : vCO ester 1737 cm"1 IR: vCO ester 1737 cm "1
RMN (1H, CDCI3) : 0.87 (t, 9H, -CH3, J=6.7Hz) ; 1.26 (massif, 66H, -CH2-) ; 1.56-NMR (1 H, CDCl 3): 0.87 (t, 9H, -CH 3, J = 6.7Hz); 1.26 (solid, 66H, -CH 2 -); 1.56-
1.63 (massif, 6H, -CH2-CH2-CH2-S-) ; 2.19 (s, 2H, S-CH2-COS-) ; 2.65 (t, 4H, CH2-CH2-S-CH2-COO-, J=7.5Hz) ; 2.87 (t, 2H, CH2-CH2-S-CH2-COS-, J=4.6Hz) ; 3.22-3.26 (m, 1 H, - CH2-CH-CH2-) ; 3.27 (s, 4H, S-CH2-COO-) ; 3.97-4.02 (m, 2H, -CHaHb-CH-CHaHb-) ; 4.46-4.51 (m, 2H, -CHaHb-CH-CHaHb-). SM (MALDI-TOF) : M+1 = 919 (M+H+)1.63 (solid, 6H, -CH 2 -CH 2 -CH 2 -S-); 2.19 (s, 2H, S-CH 2 -COS-); 2.65 (t, 4H, CH 2 -CH 2 -S-CH 2 -COO-, J = 7.5Hz); 2.87 (t, 2H, CH 2 -CH 2 -S-CH 2 -COS-, J = 4.6Hz); 3.22-3.26 (m, 1 H, - CH 2 -CH-CH 2 -); 3.27 (s, 4H, S-CH 2 -COO-); 3.97-4.02 (m, 2H, -CHaHb-CH-CHaHb-); 4.46-4.51 (m, 2H, -CHaHb-CH-CHaHb-). SM (MALDI-TOF): M + 1 = 919 (M + H + )
EXEMPLE 7 : Méthode de préparation des composés selon l'invention pour les expériences in vitroEXAMPLE 7 Method for preparing the compounds according to the invention for in vitro experiments
Pour conduire les expériences in vitro décrites dans les exemples suivants, les composés selon l'invention ont été préparés sous forme d'une émulsion telle que décrite ci-après.To carry out the in vitro experiments described in the following examples, the compounds according to the invention were prepared in the form of an emulsion as described below.
L'émulsion comprenant un composé selon l'invention et de la phosphatidylcholine (PC) est préparée selon le protocole de Spooner et al. (Spooner, Clark et al. 1988). Le composé selon l'invention est mélangé à la PC selon un rapport 4:1 (w/w) dans du chloroforme, la mixture est séchée sous azote, puis évaporée toute la nuit sous vide, la poudre qui en résulte est reprise par 0,16 M de KCI contenant 0,01 M d'EDTA puis les particules lipidiques sont dispersées par ultra-sons pendant 30 minutes à 37°C. Les liposomes formés sont ensuite séparés par ultracentrifugation (ultracentrifugeuse XL 80, Beckman Coulter, Villepinte, France) à 25000 tr/m pendant 45 minutes pour récupérer les liposomes dont la taille est supérieure à 100 nm et se rapproche de celle des chylomicrons. Des liposomes constitués uniquement de PC sont préparés en parallèle pour servir de témoin négatif.The emulsion comprising a compound according to the invention and phosphatidylcholine (PC) is prepared according to the protocol of Spooner et al. (Spooner, Clark et al. 1988). The compound according to the invention is mixed with the PC in a 4: 1 ratio (w / w) in chloroform, the mixture is dried under nitrogen, then evaporated overnight under vacuum, the resulting powder is taken up by 0 , 16 M of KCI containing 0.01 M of EDTA then the lipid particles are dispersed by ultrasound for 30 minutes at 37 ° C. The liposomes formed are then separated by ultracentrifugation (XL 80 ultracentrifuge, Beckman Coulter, Villepinte, France) at 25,000 rpm for 45 minutes to recover the liposomes whose size is greater than 100 nm and approaches that of chylomicrons. Liposomes consisting solely of PC are prepared in parallel to serve as a negative control.
La composition des liposomes en composé selon l'invention est estimée en utilisant le kit de dosage enzymocolorimétrique des triglycérides. Le dosage est effectué contre une gamme standard, préparée grâce au calibrateur des lipides CFAS Réf. N° 759350 (Boehringer Mannheim GmbH, Allemagne). La gamme standard a été construite de 16 à 500 μg/ml. 100 μl de chaque dilution d'échantillon ou de gamme étalon sont déposés par puits d'une plaque de titration (96 puits). Ensuite 200 μl de réactifs triglycérides Réf. 701912 (Boehringer Mannheim GmbH, Allemagne) sont rajoutés dans chaque puits, et l'ensemble de la plaque est incubé pendant 30 min. à 37°C. La lecture des Densités Optiques (DO) est effectuée à 492 nm sur le spectrophotomètre. Les concentrations en triglycérides de chaque échantillon sont calculées après construction de la courbe étalon selon une fonction linéaire y=ax+b, où y représente les DO et x les concentrations en triglycérides.The composition of the liposomes in compound according to the invention is estimated using the enzymocolorimetric assay kit for triglycerides. The assay is carried out against a standard range, prepared using the CFAS lipid calibrator Ref. No. 759350 (Boehringer Mannheim GmbH, Germany). The standard range was built from 16 to 500 μg / ml. 100 μl of each sample or standard range dilution are deposited per well of a titration plate (96 wells). Then 200 μl of triglyceride reagents Ref. 701912 (Boehringer Mannheim GmbH, Germany) are added to each well, and the entire plate is incubated for 30 min. at 37 ° C. The optical densities (OD) are read at 492 nm on the spectrophotometer. The triglyceride concentrations of each sample are calculated after construction of the standard curve according to a linear function y = ax + b, where y represents the OD and x the triglyceride concentrations.
Les liposomes contenant les composés selon l'invention, ainsi préparés sont utilisés dans les expériences in vitro décrites dans les exemples 9, 10 et 11.The liposomes containing the compounds according to the invention, thus prepared are used in the in vitro experiments described in Examples 9, 10 and 11.
Exemple 8 : Evaluation des propriétés antioxydantes des composés selon l'inventionExample 8: Evaluation of the antioxidant properties of the compounds according to the invention
A-/Protection de l'oxydation des LDL par le cuivre ou le dichlorhydrate d'azobis (2-amidinopropane) (AAPH) :A- / Protection of LDL oxidation by copper or azobis (2-amidinopropane) dihydrochloride (AAPH):
L'oxydation des LDL est une modification importante et joue un rôle prépondérant dans la mise en place et le développement de l'athérosclérose (Jurgens, Hoff et al. 1987). Le protocole suivant permet la mise en évidence des propriétés antioxydantes des composés. Sauf mention différente, les réactifs proviennent de chez Sigma (St Quentin, France).The oxidation of LDL is an important modification and plays a predominant role in the establishment and development of atherosclerosis (Jurgens, Hoff et al. 1987). The following protocol makes it possible to demonstrate the antioxidant properties of the compounds. Unless otherwise stated, the reagents come from Sigma (St Quentin, France).
Les LDL sont préparés suivant la méthode décrite par Lebeau et al. (Lebeau,The LDLs are prepared according to the method described by Lebeau et al. (The beautiful,
Furman et al. 2000). Les solutions de composés à tester sont préparées à 10"2 M dans de l'éthanol et diluées dans du PBS pour avoir des concentrations finales allant de 0,1 à 100 μM pour une concentration totale d'éthanol de 1 % (v/v).Furman et al. 2000). The solutions of test compounds are prepared at 10 "2 M in ethanol and diluted in PBS to have final concentrations ranging from 0.1 to 100 μM for a total ethanol concentration of 1% (v / v ).
Avant l'oxydation, l'EDTA est retiré de la préparation de LDL par dialyse. L'oxydation a ensuite lieu à 30°C en ajoutant 100 μl d'une solution à 16,6 μM de CuS04 ou de 2 mM de AAPH à 800 μL de LDL (125 μg de protéines/ml) et 100 μl d'une solution du composé à tester. La formation de diènes, l'espèce à observer, se mesure par densité optique à 234 nm dans les échantillons traités avec les composés en présence ou en absence de cuivre (ou AAPH). La mesure de la densité optique à 234 nm est réalisée toutes les 10 minutes pendant 8 heures à l'aide d'un spectrophotomètre thermostaté (Kontron Uvikon 930). Les analyses sont réalisées en triplicata. Nous considérons que les composés ont une activité antioxydante lorsqu'ils induisent un décalage de phase par rapport à l'échantillon témoin. Les inventeurs mettent en évidence que les composés selon l'invention retardent l'oxydation des LDL (induite par le cuivre), ceci indiquant que les composés selon l'invention possèdent un caractère antioxydant intrinsèque. Un exemple de résultats obtenus avec des composés selon l'invention est présenté dans la figure 2.Before oxidation, EDTA is removed from the LDL preparation by dialysis. The oxidation then takes place at 30 ° C. by adding 100 μl of a solution with 16.6 μM of CuSO 4 or of 2 mM of AAPH with 800 μL of LDL (125 μg of proteins / ml) and 100 μl of a solution of the compound to be tested. The formation of dienes, the species to be observed, is measured by optical density at 234 nm in samples treated with the compounds in the presence or absence of copper (or AAPH). The measurement of the optical density at 234 nm is carried out every 10 minutes for 8 hours using a thermostated spectrophotometer (Kontron Uvikon 930). The analyzes are carried out in triplicate. We consider that the compounds have an antioxidant activity when they induce a phase shift compared to the control sample. The inventors demonstrate that the compounds according to the invention delay the oxidation of LDL (induced by copper), this indicating that the compounds according to the invention have an intrinsic antioxidant character. An example of results obtained with compounds according to the invention is presented in FIG. 2.
Sur la figure 2-a, on peut observer que l'incubation des LDL avec les composés selon l'invention, retarde la formation de diènes conjugués. La Lag-Phase est de 104 minutes pour le cuivre seul alors que le délai d'apparition des diènes conjugués atteint 282 minutes lorsque les LDL sont incubés avec le composé selon l'invention Ex 4g (composé selon l'invention décrit à l'exemple 4g ci- dessus) à 10"4 M. Le composé selon l'invention Ex 4a décale également la Lag- Phase à 270 minutes. Ces deux composés induisent une augmentation de la lag phase respectivement de 170 et 160%. Les composés Ex 4h, 4q, 4o et 2a permettent un décalage de la lag-phase, correspondant respectivement à 43, 54, 37, 67% d'augmentation. Le retard de formation de diènes conjugués est caractéristique des produits antioxydants. Les composés selon l'invention Ex 4g et 4a sont ceux qui possèdent les propriétés antioxydantes intrinsèques les plus significatives. La figure 2-b montre que l'incubation des composés selon l'invention avec les LDL en présence de cuivre ralentit la vitesse de formation des diènes conjugués. La vitesse de formation des diènes conjugués est de 3 nmol/min/mg de LDL avec le cuivre seul, cette vitesse est réduite à 1 nmol/min/mg de LDL avec le composé Ex 4a à 10"4 M, ce qui correspond à une diminution de 66% de la vitesse d'oxydation. Les composés selon l'invention Ex 4h et Ex 4g ralentissent également la vitesse d'oxydation des LDL qui est alors respectivement de 2,5 et de 1,8 nmol/min/mg de LDL. L'incubation des LDL avec les composés selon l'invention Ex 4q, 4o et 2a ne modifie pas de manière significative la vitesse d'oxydation des LDL. Les composés selon l'invention Ex 4a, 4g et 4h possèdent des propriétés antioxydantes intrinsèques et favorisent également le ralentissement de la vitesse d'oxydation des LDL par le cuivre.On the figure 2-a, one can observe that the incubation of LDL with the compounds according to the invention, delays the formation of conjugated dienes. The Lag-Phase is 104 minutes for copper alone while the time for the appearance of conjugated dienes reaches 282 minutes when the LDLs are incubated with the compound according to the invention Ex 4g (compound according to the invention described in the example 4g above) at 10 "4 M. The compound according to the invention Ex 4a also shifts the Lag-Phase to 270 minutes. These two compounds induce an increase in the lag phase respectively of 170 and 160%. The Ex 4h compounds , 4q, 4o and 2a allow a lag-phase shift, corresponding respectively to 43, 54, 37, 67% increase. The delay in the formation of conjugated dienes is characteristic of the antioxidant products. 4g and 4a are those which have the most significant intrinsic antioxidant properties Figure 2-b shows that the incubation of the compounds according to the invention with LDL in the presence of copper slows down the rate of formation of conjugated dienes. formation of conjugated dienes is 3 nmol / min / mg LDL with copper alone, this speed is reduced to 1 nmol / min / mg LDL with compound Ex 4a at 10 "4 M, which corresponds to a decrease in 66% of the oxidation rate. The compounds according to the invention Ex 4h and Ex 4g also slow down the oxidation rate of LDL which is then respectively 2.5 and 1.8 nmol / min / mg of LDL. Incubation of LDL with the compounds according to the invention Ex 4q, 4o and 2a does not significantly modify the oxidation rate of LDL. The compounds according to the invention Ex 4a, 4g and 4h have intrinsic antioxidant properties and also promote the slowing down of the rate of oxidation of LDL by copper.
La figure 2-c montre que l'incubation des LDL avec le cuivre entraîne la formation de 496 nmol/mg de LDL de diènes conjugués. L'incubation avec le composé Ex 4a (10"4 M) entraîne une diminution de 60% de la quantité maximale de diènes conjugués formés. Les composés Ex 4g et 4h (10"4 M) limitent également la formation de diènes conjugués. L'incubation des LDL avec ces composés diminue respectivement de 31 et 24% la quantité maximum de diènes formés.Figure 2-c shows that the incubation of LDL with copper leads to the formation of 496 nmol / mg LDL of conjugated dienes. Incubation with the compound Ex 4a (10 "4 M) causes a reduction of 60% in the maximum amount of conjugated dienes formed. Compounds Ex 4g and 4h (10 " 4 M) also limit the formation of conjugated dienes. Incubating LDL with these compounds decreases the maximum amount of dienes formed by 31 and 24% respectively.
B-/Evaluation de la protection conférée par les composés selon l'invention vis-à-vis de la peroxydation lipidique : Les composés selon l'invention testés sont les composés dont la préparation est décrite dans les exemples décrits ci-dessus.B- / Evaluation of the protection conferred by the compounds according to the invention with respect to lipid peroxidation: The compounds according to the invention tested are the compounds whose preparation is described in the examples described above.
La mesure de l'oxydation des LDL est réalisée par la méthode des TBARS. Selon le même principe que celui décrit précédemment, les LDL sont oxydés avec du CuS04 et la peroxydation lipidique est déterminée de la manière suivante :LDL oxidation is measured by the TBARS method. According to the same principle as that described above, the LDLs are oxidized with CuS04 and the lipid peroxidation is determined as follows:
Les TBARS sont mesurés à l'aide d'une méthode spectrophotométrique; l'hydroperoxydation lipidique est mesurée en utilisant l'oxydation peroxyde-lipide dépendante de l'iodure en iode. Les résultats sont exprimés en nmol de malonodialdehyde (MDA) ou en nmol d'hydroperoxyde/mg de protéines. Les résultats obtenus précédemment, en mesurant l'inhibition de la formation de diènes conjugués, sont confirmés par les expériences de mesure de peroxydation lipidique des LDL. Les composés selon l'invention, protègent donc également de manière efficace les LDL contre la peroxydation lipidique induite par le cuivre (agent oxydant).TBARS are measured using a spectrophotometric method; lipid hydroperoxidation is measured using peroxide-lipid oxidation dependent on iodide iodine. The results are expressed in nmol of malonodialdehyde (MDA) or in nmol of hydroperoxide / mg of proteins. The results obtained previously, by measuring the inhibition of the formation of conjugated dienes, are confirmed by the experiments of measurement of lipid peroxidation of LDL. The compounds according to the invention therefore also effectively protect LDL against lipid peroxidation induced by copper (oxidizing agent).
Exemple 9 : Mesure des propriétés antioxydantes des composés selon l'invention sur des cultures de cellulesExample 9: Measurement of the antioxidant properties of the compounds according to the invention on cell cultures
A-/Protocole de culture :A- / Culture protocol:
Les lignées cellulaires utilisées pour ce type d'expériences sont de type neuronales, neuroblastomes (humains) et cellules PC12 (rat). Les cellules PC12 ont été préparées à partir d'un pheochromocytome de rat et sont caractérisées par Greene et Tischler (Greene and Tischler 1976). Ces cellules sont couramment utilisées pour des études de différenciation neuronale, transduction du signal et mort neuronale. Les cellules PC12 sont cultivées comme précédemment décrit (Farinelli, Park et al. 1996), dans du milieu complet RPMI (Invitrogen) complémenté avec 10% de sérum de cheval et 5% de sérum de veau fœtal.The cell lines used for this type of experiment are of the neuronal, neuroblastoma (human) and PC12 (rat) cells type. PC12 cells were prepared from a rat pheochromocytoma and are characterized by Greene and Tischler (Greene and Tischler 1976). These cells are commonly used for studies of neuronal differentiation, signal transduction and neuronal death. The PC12 cells are cultured as previously described (Farinelli, Park et al. 1996), in complete RPMI medium (Invitrogen) supplemented with 10% horse serum and 5% fetal calf serum.
Des cultures (primaires) de cellules endothéliales et de muscles lisses sont également utilisées. Les cellules sont commandées chez Promocell (Promocell GmBH, Heidelberg) et sont cultivées selon les indications du fournisseur. Les cellules sont traitées avec différentes doses de composés de 5 à 300 μM pendant 24 heures. Les cellules sont alors récupérées et l'augmentation de l'expression des gènes cibles est évaluée par PCR quantitative.(Primary) cultures of endothelial cells and smooth muscles are also used. The cells are ordered from Promocell (Promocell GmBH, Heidelberg) and are cultured according to the supplier's instructions. The cells are treated with different doses of compounds from 5 to 300 μM for 24 hours. The cells are then recovered and the increase in the expression of the target genes is evaluated by quantitative PCR.
B-/Mesure des ARMm : Les ARNm sont extraits des cellules en culture traitées ou non avec les composés selon l'invention. L'extraction est réalisée à l'aide des réactifs du kit Absolutely RNA RT-PCR miniprep Kit (Stratagene, France) selon les indications du fournisseur. Les ARNm sont ensuite dosés par spectrométrie et quantifiés par RT-PCR quantitative à l'aide du kit Light Cycler Fast start DNA Master Sybr Green I kit (Roche) sur un appareil Light Cycler System (Roche, France). Des paires d'amorces spécifiques des gènes de la Super Oxyde Dismutase (SOD), de la Catalase et de la Glutathion Peroxydase (GPx), enzymes anti-oxydantes, sont utilisées comme sondes. Des paires d'amorces spécifiques des gènes b- actine et cyclophiline sont utilisées comme sondes témoin. L'augmentation de l'expression des ARNm, mesurée par RT-PCR quantitative, des gènes des enzymes antioxydantes est mise en évidence dans les différents types cellulaires utilisés, lorsque les cellules sont traitées avec les composés selon l'invention.B- / Measurement of mRNAs: The mRNAs are extracted from the cells in culture treated or not with the compounds according to the invention. The extraction is carried out using reagents from the Absolutely RNA RT-PCR miniprep Kit (Stratagene, France) according to the supplier's instructions. The mRNAs are then assayed by spectrometry and quantified by quantitative RT-PCR using the Light Cycler Fast start DNA Master Sybr Green I kit (Roche) on a Light Cycler System device (Roche, France). Primer pairs specific for Super Oxide Dismutase (SOD), Catalase and Glutathione Peroxidase (GPx) genes, antioxidant enzymes, are used as probes. Primer pairs specific for the b-actin and cyclophilin genes are used as control probes. The increase in the expression of mRNAs, measured by quantitative RT-PCR, of the genes of the antioxidant enzymes is demonstrated in the different cell types used, when the cells are treated with the compounds according to the invention.
C-/Contrôle du stress oxydatif :C- / Oxidative stress control:
Mesure des espèces oxydantes dans les cellules en culture :Measurement of oxidizing species in cultured cells:
Les propriétés antioxydantes des composés sont également évaluées à l'aide d'un indicateur fluorescent dont l'oxydation est suivie par l'apparition d'un signal fluorescent. La diminution d'intensité du signal fluorescent émis est mesurée dans les cellules traitées avec les composés de la manière suivante : les cellules PC12 cultivées comme précédemment décrit (plaque noire 96 puits fonds transparent, Falcon) sont incubées avec des doses croissantes de H202 (0,25 mM - 1 mM) dans du milieu sans sérum pendant 2 et 24 heures. Après l'incubation, le milieu est enlevé et les cellules sont incubées avec une solution de diacétate de dichlorodihydrofluorescéine (DCFDA, Molecular Probes, Eugène, USA) 10 μM dans du PBS pendant 30 min à 37°C et dans une atmosphère contenant 5% de C02. Les cellules sont ensuite rincées avec du PBS. La détection de la fluorescence émise par l'indicateur de l'oxydation est mesurée à l'aide d'un fluorimètre (Tecan Ultra 384) à une longueur d'onde d'excitation de 495 nm et une longueur d'onde d'émission de 535 nm. Les résultats sont exprimés en pourcentage de protection par rapport au témoin oxydé. L'intensité de fluorescence est plus faible dans les cellules incubées avec les composés selon l'invention que dans les cellules non traitées. Ces résultats indiquent que les composés selon l'invention favorisent l'inhibition de la production d'espèces oxydantes dans des cellules soumises à un stress oxydatif. Les propriétés antioxydantes décrites précédemment sont également efficaces pour induire une protection antiradicalaire dans des cellules en culture.The antioxidant properties of the compounds are also evaluated using a fluorescent indicator, the oxidation of which is followed by the appearance of a signal. fluorescent. The decrease in intensity of the fluorescent signal emitted is measured in the cells treated with the compounds in the following manner: the PC12 cells cultured as previously described (black plate 96 wells transparent background, Falcon) are incubated with increasing doses of H 2 0 2 (0.25 mM - 1 mM) in serum-free medium for 2 and 24 hours. After the incubation, the medium is removed and the cells are incubated with a solution of dichlorodihydrofluorescein diacetate (DCFDA, Molecular Probes, Eugène, USA) 10 μM in PBS for 30 min at 37 ° C. and in an atmosphere containing 5% of C0 2 . The cells are then rinsed with PBS. The detection of the fluorescence emitted by the oxidation indicator is measured using a fluorimeter (Tecan Ultra 384) at an excitation wavelength of 495 nm and an emission wavelength 535 nm. The results are expressed as a percentage of protection relative to the oxidized control. The fluorescence intensity is lower in the cells incubated with the compounds according to the invention than in the untreated cells. These results indicate that the compounds according to the invention promote the inhibition of the production of oxidizing species in cells subjected to oxidative stress. The antioxidant properties described above are also effective in inducing free radical protection in cultured cells.
D-/Mesure de la peroxydation lipidique :D- / Measurement of lipid peroxidation:
Les différentes lignées cellulaires (modèles cellulaires cités précédemment) ainsi que les cellules en culture primaire sont traitées comme précédemment. Le surnageant des cellules est récupéré après le traitement et les cellules sont lysées et récupérées pour la détermination de la concentration protéique. La détection de la peroxydation lipidique est déterminée de la manière suivante : la peroxydation lipidique est mesurée à l'aide d'acide thiobarbiturique (TBA) qui réagit avec la lipoperoxydation des aldéhydes tel que le malonodialdéhyde (MDA). Après les traitements, le surnageant des cellules est collecté (900 μl) et 90 μl d'hydroxytoluène butyle y sont ajoutés (Morliere, Moysan et al. 1991). 1 ml d'une solution de TBA à 0,375% dans 0,25M Carbonate de potassium contenant 15% d'acide trichloroacétique est également ajouté aux milieux réactionnels. Le mélange est chauffé à 80°C pendant 15 min, refroidi sur glace et la phase organique est extraite avec du butanol. L'analyse de la phase organique se fait par spectrofluorométrie (?exc=515 nm et ?em=550 nm) à l'aide du spectrofluorimètre Shimazu 1501 (Shimadzu Corporation, Kyoto, Japon). Les TBARS sont exprimés en équivalents MDA en utilisant comme standard le tétraéthoxypropane. Les résultats sont normalisés par rapport au contenu en protéines.The different cell lines (cell models mentioned above) as well as the cells in primary culture are treated as above. The cell supernatant is recovered after the treatment and the cells are lysed and recovered for the determination of the protein concentration. The detection of lipid peroxidation is determined as follows: lipid peroxidation is measured using thiobarbituric acid (TBA) which reacts with lipoperoxidation of aldehydes such as malonodialdehyde (MDA). After the treatments, the cell supernatant is collected (900 μl) and 90 μl of butyl hydroxytoluene are added thereto (Morliere, Moysan et al. 1991). 1 ml of a 0.375% TBA solution in 0.25M potassium carbonate containing 15% trichloroacetic acid is also added to the reaction media. The mixture is heated at 80 ° C for 15 min, cooled on ice and the organic phase is extracted with butanol. The analysis of the organic phase is done by spectrofluorometry (? Exc = 515 nm and? Em = 550 nm) using the Shimazu 1501 spectrofluorimeter (Shimadzu Corporation, Kyoto, Japan). TBARS are expressed in MDA equivalents using standard tetraethoxypropane. The results are normalized with respect to the protein content.
La diminution de la peroxydation lipidique observée dans les cellules traitées avec les composés selon l'invention confirme les résultats obtenus précédemment.The reduction in lipid peroxidation observed in cells treated with the compounds according to the invention confirms the results obtained previously.
Les composés selon l'invention présentent avantageusement des propriétés antioxydantes intrinsèques qui permettent de ralentir et/ou d'inhiber les effets d'un stress oxydatif. Les inventeurs montrent également que les composés selon l'invention sont capables d'induire l'expression des gènes d'enzymes antioxydantes. Ces caractéristiques particulières des composés selon l'invention permettent aux cellules de lutter plus efficacement contre le stress oxydatif et donc d'être protégées vis à vis des dommages induits par les radicaux libres.The compounds according to the invention advantageously have intrinsic antioxidant properties which make it possible to slow down and / or inhibit the effects of oxidative stress. The inventors also show that the compounds according to the invention are capable of inducing the expression of the genes of antioxidant enzymes. These particular characteristics of the compounds according to the invention allow the cells to fight more effectively against oxidative stress and therefore to be protected from damage induced by free radicals.
Exemple 10 : Evaluation de l'activation des PPARs in vitro par les composés selon l'inventionExample 10: Evaluation of the activation of PPARs in vitro by the compounds according to the invention
Les récepteurs nucléaires membres de la sous-famille des PPARs qui sont activés par deux classes majeures de composés pharmaceutiques, les fibrates et les glitazones, abondamment utilisées en clinique humaine pour le traitement des dyslipidemies et du diabète, jouent un rôle important dans l'homéostasie lipidique et glucidique. Les données expérimentales suivantes montrent que les composés selon l'invention activent PPARα in vitro.The nuclear receptors belonging to the PPAR subfamily which are activated by two major classes of pharmaceutical compounds, fibrates and glitazones, which are widely used in human clinics for the treatment of dyslipidemias and diabetes, play an important role in homeostasis lipid and carbohydrate. The following experimental data show that the compounds according to the invention activate PPARα in vitro.
L'activation des PPARs est évaluée in vitro dans des lignées de type fibroblastique RK13 ou dans une lignée hépatocytaire HepG2, par la mesure de l'activité transcriptionnelle de chimères constituées du domaine de liaison à l'ADN du facteur de transcription Gal4 de levure et du domaine de liaison du ligand des différents PPARs. L'exemple présenté ci-dessous est donné pour les cellules HepG2.The activation of PPARs is evaluated in vitro in lines of fibroblastic type RK13 or in a hepatocyte line HepG2, by measuring the transcriptional activity of chimeras consisting of the DNA binding domain of the yeast transcription factor Gal4 and of the binding domain of ligand of the different PPARs. The example presented below is given for HepG2 cells.
A-/Protocoles de culture Les cellules HepG2 proviennent de l'ECACC (Porton Down, UK) et sont cultivées dans du milieu DMEM supplémenté de 10% vol/vol sérum de veau foetal, 100 U/ml pénicilline (Gibco, Paisley, UK) et 2 mM L-Glutamine (Gibco, Paisley, UK). Le milieu de culture est changé tous les deux jours. Les cellules sont conservées à 37°C dans une atmosphère humide contenant 5% de C02 et 95% d'air.A- / Culture protocols The HepG2 cells come from ECACC (Porton Down, UK) and are cultured in DMEM medium supplemented with 10% vol / vol fetal calf serum, 100 U / ml penicillin (Gibco, Paisley, UK ) and 2 mM L-Glutamine (Gibco, Paisley, UK). The culture medium is changed every two days. The cells are stored at 37 ° C. in a humid atmosphere containing 5% of CO 2 and 95% of air.
B-/Description des plasmides utilisés en transfectionB- / Description of the plasmids used in transfection
Les plasmides pG5TkpGL3, pRL-CMV, pGal4-hPPARα, pGal4-hPPARγ et pGal4-f ont été décrits par Raspe et al. (Raspe, Madsen et al. 1999). Les constructions pGal4-mPPARα et pGal4-hPPARβ ont été obtenues par clonage dans le vecteur pGal4-f de fragments d'ADN amplifiés par PCR correspondants aux domaines DEF des récepteurs nucléaires PPARα de souris et PPARβ humain respectivement.The plasmids pG5TkpGL3, pRL-CMV, pGal4-hPPARα, pGal4-hPPARγ and pGal4-f have been described by Raspe et al. (Raspe, Madsen et al. 1999). The constructs pGal4-mPPARα and pGal4-hPPARβ were obtained by cloning into the vector pGal4-f DNA fragments amplified by PCR corresponding to the DEF domains of the mouse PPARα and human PPARβ nuclear receptors respectively.
C-/TransfectionC- / Transfection
Les cellules HepG2 sont ensemencées dans des boîtes de culture de 24 puits à raison de 5x104 cellules/puit et sont transfectées pendant 2 heures avec le plasmide rapporteur pG5TkpGL3 (50 ng/puit), les vecteurs d'expression pGal4-f, pGal4-mPPARα, pGal4-hPPARα, pGal4-hPPARγ, pGal4-hPPARβ (100 ng/puit) et le vecteur de contrôle de l'efficacité de transfection pRL-CMV (1 ng/puit) suivant le protocole décrit précédemment (Raspe, Madsen et al. 1999) et incubées pendant 36 heures avec les composés testés. A l'issue de l'expérience, les cellules sont lysées (Gibco, Paisley, UK) et les activités luciférase sont déterminées à l'aide du kit de dosage Dϋal-Luciferase™ Reporter Assay System (Promega, Madison, Wl, USA) selon la notice du fournisseur. Le contenu en protéines des extraits cellulaires est ensuite évalué à l'aide du kit de dosage Bio-Rad Protein Assay (Bio-Rad, Mϋnchen, Allemagne) selon la notice du fournisseur.The HepG2 cells are seeded in 24-well culture dishes at a rate of 5 × 10 4 cells / well and are transfected for 2 hours with the reporter plasmid pG5TkpGL3 (50 ng / well), the expression vectors pGal4-f, pGal4- mPPARα, pGal4-hPPARα, pGal4-hPPARγ, pGal4-hPPARβ (100 ng / well) and the transfection efficiency control vector pRL-CMV (1 ng / well) according to the protocol described above (Raspe, Madsen et al . 1999) and incubated for 36 hours with the test compounds. At the end of the experiment, the cells are lysed (Gibco, Paisley, UK) and the luciferase activities are determined using the Dϋal-Luciferase ™ Reporter Assay System assay kit (Promega, Madison, Wl, USA) according to the supplier's instructions. The protein content of the cell extracts is then evaluated using the Bio-Rad Protein Assay (Bio-Rad, Mϋnchen, Germany) according to the supplier's instructions.
Les inventeurs mettent en évidence une augmentation de l'activité luciférase dans les cellules traitées avec les composés selon l'invention et transfectées avec le plasmide pGal4-hPPARα. Cette induction de l'activité luciférase indique que les composés selon l'invention, sont des activateurs de PPARα. Un exemple de résultats obtenus avec des composés selon l'invention est présenté dans la figure 3. Figure 3 : les cellules HepG2, transfectées avec les plasmides du système Gal4/PPARα, sont incubées avec différentes concentrations des composés selon l'invention (5, 15, 50 et 100 μM) pendant 24h ainsi qu'avec différentes concentrations de véhicule (PC). Les résultats sont représentés par le facteur d'induction (signal luminescent par rapport aux cellules non traitées) en fonction des différents traitements. Plus le facteur d'induction est élevé, meilleure est la propriété d'agoniste pour PPARα. Les résultats montrent que le composé selon l'invention Ex 2a favorise l'induction du signal luminescent d'un facteur maximal de 62 à 100 μM, de 41 à 50 μM, de 31 à 15 μM et de 17 à 5 μM. Le composé selon l'invention Ex 4a induit également une augmentation du facteur d'induction avec un effet dose de 41 à 100μM, 30 à 50μM, 18 à 15μM et 9 à 5μM. Le composé selon l'invention Ex 4p induit aussi une augmentation du signal luminescent, révélateur d'une activité sur le récepteur nucléaire PPARα. Les facteurs d'induction pour le composé Ex 4p sont de 35 à 100 μM, 44 à 50 μM, 36 à 15 μM et 24 à 5 μM. En revanche lorsque les cellules sont incubées avec le véhicule (liposome de PC), aucune induction significative n'est observée.The inventors demonstrate an increase in luciferase activity in cells treated with the compounds according to the invention and transfected with the plasmid pGal4-hPPARα. This induction of luciferase activity indicates that the compounds according to the invention are activators of PPARα. An example of results obtained with compounds according to the invention is presented in FIG. 3. FIG. 3: the HepG2 cells, transfected with the plasmids of the Gal4 / PPARα system, are incubated with different concentrations of the compounds according to the invention (5, 15, 50 and 100 μM) for 24 hours as well as with different vehicle concentrations (PC). The results are represented by the induction factor (luminescent signal compared to the untreated cells) according to the different treatments. The higher the induction factor, the better the agonist property for PPARα. The results show that the compound according to the invention Ex 2a promotes the induction of the luminescent signal by a maximum factor of 62 to 100 μM, from 41 to 50 μM, from 31 to 15 μM and from 17 to 5 μM. The compound according to the invention Ex 4a also induces an increase in the induction factor with a dose effect of 41 to 100 μM, 30 to 50 μM, 18 to 15 μM and 9 to 5 μM. The compound according to the invention Ex 4p also induces an increase in the luminescent signal, revealing an activity on the nuclear receptor PPARα. The induction factors for the compound Ex 4p are 35 to 100 μM, 44 to 50 μM, 36 to 15 μM and 24 to 5 μM. On the other hand, when the cells are incubated with the vehicle (PC liposome), no significant induction is observed.
Ces résultats montrent que les composés selon l'invention testés possèdent, de manière significative, la propriété de ligand vis à vis de PPARα et permettent aussi son activation au niveau transcriptionnel. Exemple 11 : Evaluation des propriétés anti-inflammatoires des composés selon l'inventionThese results show that the compounds according to the invention tested possess, significantly, the ligand property with respect to PPARα and also allow its activation at the transcriptional level. Example 11: Evaluation of the anti-inflammatory properties of the compounds according to the invention
La réponse inflammatoire apparaît dans de nombreux désordres neurologiques, comme les ischémies cérébrales. De plus l'inflammation est l'un des facteurs importants de la neurodégénérescence. Lors d'accidents cérébraux, une des premières réactions des cellules de la glie est de libérer des cytokines et des radicaux libres. La conséquence de cette libération de cytokines et de radicaux libres est une réponse inflammatoire au niveau cérébral et qui peut mener à la mort des neurones (Rothwell 1997).The inflammatory response appears in many neurological disorders, such as cerebral ischemia. In addition, inflammation is one of the important factors of neurodegeneration. One of the first reactions of glia cells to stroke is to release cytokines and free radicals. The consequence of this release of cytokines and free radicals is an inflammatory response in the brain and which can lead to the death of neurons (Rothwell 1997).
Les lignées cellulaires et les cellules primaires sont cultivées comme décrit précédemment.Cell lines and primary cells are grown as described above.
Le lipopolysaccharide (LPS), endotoxine bactérienne (Escherichia coli 0111 :B4)Lipopolysaccharide (LPS), bacterial endotoxin (Escherichia coli 0111: B4)
(Sigma, France) est reconstitué dans de l'eau distillée et conservé à 4°C. Les cellules sont traitées avec une concentration de LPS de 1 μg/ml pendant 24 heures. Pour éviter toutes interférences avec d'autres facteurs, le milieu de culture des cellules est totalement changé.(Sigma, France) is reconstituted in distilled water and stored at 4 ° C. The cells are treated with an LPS concentration of 1 μg / ml for 24 hours. To avoid interference with other factors, the cell culture medium is completely changed.
Le TNF-α est un facteur important de la réponse inflammatoire à un stress (oxydant par exemple). Pour évaluer la sécrétion de TNF-α en réponse à une stimulation par des doses croissantes de LPS, le milieu de culture des cellules stimulées est prélevé et la quantité de TNF-α est évaluée avec un kit ELISA- TNF-α (Immunotech, France). Les échantillons sont dilués 50 fois afin d'être en adéquation avec la gamme étalon (Chang, Hudson et al. 2000). La propriété anti-inflammatoire des composés est caractérisée de la manière suivante : le milieu de culture des cellules est totalement changé et les cellules sont incubées avec les composés à tester pendant 2 heures. Après cette incubation, du LPS est rajouté au milieu de culture à une concentration finale de 1 μg/ml. Après 24 heures d'incubation, le surnageant des cellules est récupéré et stocké à -80°C lorsqu'il n'est pas traité directement. Les cellules sont lysées et la quantité de protéines est mesurée, à l'aide du kit de dosage Bio-Rad Protein Assay (Bio-Rad, Mϋnchen, Allemagne) selon la notice du fournisseur. La mesure de la diminution de sécrétion de TNF-α favorisée par le traitement avec les composés testés est exprimée en pg/ml/μg de protéine et rapportée en pourcentage par rapport au témoin. Ces résultats montrent que les composés selon l'invention possèdent des propriétés anti-inflammatoires.TNF-α is an important factor in the inflammatory response to stress (oxidant for example). To assess the secretion of TNF-α in response to stimulation with increasing doses of LPS, the culture medium of the stimulated cells is removed and the amount of TNF-α is evaluated with an ELISA-TNF-α kit (Immunotech, France ). The samples are diluted 50 times in order to be in line with the standard range (Chang, Hudson et al. 2000). The anti-inflammatory property of the compounds is characterized in the following way: the culture medium of the cells is completely changed and the cells are incubated with the compounds to be tested for 2 hours. After this incubation, LPS is added to the culture medium at a final concentration of 1 μg / ml. After 24 hours of incubation, the cell supernatant is recovered and stored at -80 ° C when it is not treated directly. The cells are lysed and the amount of protein is measured, using the Bio-Rad Protein Assay assay kit (Bio-Rad, Mϋnchen, Germany) according to the supplier's instructions. The measurement of the decrease in TNF-α secretion favored by the treatment with the test compounds is expressed in pg / ml / μg of protein and reported as a percentage relative to the control. These results show that the compounds according to the invention have anti-inflammatory properties.
Exemple 12 : Evaluation des effets neuro-protecteurs des composés selon l'invention dans un modèle d'ischémie-reperfusion cérébralExample 12: Evaluation of the neuroprotective effects of the compounds according to the invention in a model of cerebral ischemia-reperfusion
A-/Modèle Prophylactique : 1/ Traitement des animauxA- / Prophylactic model: 1 / Treatment of animals
1.1 Animaux et administration des composés1.1 Animals and administration of the compounds
Des rats Wistar de 200 à 350 g ont été utilisés pour cette expérience.Wistar rats weighing 200 to 350 g were used for this experiment.
Les animaux sont maintenus sous un cycle lumière/obscurité de 12 h à une température de 20 +/- 3°C. Les animaux ont un accès libre à l'eau et à la nourriture. La prise de nourriture et la prise de poids sont enregistrées.The animals are kept under a 12 hour light / dark cycle at a temperature of 20 +/- 3 ° C. Animals have free access to water and food. Food gain and weight gain are recorded.
Les animaux sont traités par gavage avec les composés selon l'invention (600 mg/kg/jour) suspendus dans un véhicule ((carboxymethylcellulose 0,5% (CMC) et Tween 0,1%) ou traités avec le véhicule susmentionné, pendant 14 jours avant l'induction de l'ischémie par occlusion de l'artère cérébrale moyenne. La carboxymethylcellulose utilisée est un sel de sodium de carboxymethylcellulose de viscosité moyenne (Réf. C4888, Sigma-aldrich, France). Le Tween utilisé est le Polyoxyethylenesorbitan Monooleate (Tween 80, Réf. P8074, Sigma-aldrich, France)The animals are treated by gavage with the compounds according to the invention (600 mg / kg / day) suspended in a vehicle ((carboxymethylcellulose 0.5% (CMC) and Tween 0.1%) or treated with the aforementioned vehicle, for 14 days before the induction of ischemia by occlusion of the middle cerebral artery The carboxymethylcellulose used is a sodium salt of carboxymethylcellulose of medium viscosity (Ref. C4888, Sigma-aldrich, France). The Tween used is Polyoxyethylenesorbitan Monooleate (Tween 80, Ref. P8074, Sigma-aldrich, France)
1.2 Induction d'une ischémie-reperfusion par occlusion intraluminale de l'artère moyenne cérébrale :1.2 Induction of ischemia-reperfusion by intraluminal occlusion of the cerebral middle artery:
Les animaux ont été anesthésiés à l'aide d'une injection intra-péritonéale de 300 mg/kg d'hydrate de chloral. Une sonde rectale est mise en place et la température du corps est maintenue à 37 +/- 0,5°C. La pression artérielle est mesurée au cours de toute l'expérience.The animals were anesthetized using an intraperitoneal injection of 300 mg / kg of chloral hydrate. A rectal probe is placed and the body temperature is maintained at 37 +/- 0.5 ° C. Blood pressure is measured during the whole experiment.
Sous un microscope chirurgical, la carotide droite est mise à jour à l'aide d'une incision cervicale médiale. L'artère ptérygopalatine a été ligaturée à son origine et une artériotomie est réalisée dans l'artère carotide externe afin d'y glisser un mono-filament de nylon. Ce filament est alors doucement avancé dans l'artère carotide commune puis dans l'artère carotide interne afin d'obturer l'origine de l'artère cérébrale moyenne. Après 1 heure, le filament est retiré pour permettre la reperfusion.Under a surgical microscope, the right carotid is updated using a medial cervical incision. The pterygopalatine artery was ligated at its origin and an arteriotomy is performed in the external carotid artery in order to slide a nylon monofilament into it. This filament is then gently advanced into the common carotid artery and then into the internal carotid artery in order to block the origin of the middle cerebral artery. After 1 hour, the filament is removed to allow reperfusion.
2/ Mesure du volume de l'infarctus cérébral :2 / Measurement of the volume of the cerebral infarction:
24 heures après la reperfusion, les animaux préalablement traités ou non traités avec les composés selon l'invention sont tués par une overdose de pentobarbital.24 hours after reperfusion, the animals previously treated or not treated with the compounds according to the invention are killed by an overdose of pentobarbital.
Les cerveaux sont rapidement congelés et sectionnés. Les sections sont colorées au violet Cresyl. Les zones non colorées des sections cérébrales ont été considérées comme lésées par l'infarctus. Les aires (de l'infarctus et des deux hémisphères) ont été mesurées, les volumes de l'infarctus et des deux hémisphères ont été calculés et le volume de l'infarctus corrigé a été calculé par la formule suivante (Volume de l'infarctus corrigé = Volume de l'infarctus - (volume de l'hémisphère droit - volume de l'hémisphère gauche)) pour compenser l'œdème cérébral. L'analyse des coupes de cerveaux d'animaux traités avec les composés selon l'invention révèle une nette diminution du volume de l'infarctus par rapport aux animaux non traités. Lorsque les composés selon l'invention sont administrés aux animaux avant l'ischémie (effet prophylactique), ils sont capables d'induire une neuroprotection.Brains are quickly frozen and sectioned. The sections are colored in Cresyl purple. The non-colored areas of the brain sections were considered to be injured by the infarction. The areas (of the infarction and of the two hemispheres) were measured, the volumes of the infarction and of the two hemispheres were calculated and the volume of the corrected infarction was calculated by the following formula (Volume of the infarction corrected = Volume of infarction - (volume of the right hemisphere - volume of the left hemisphere)) to compensate for cerebral edema. Analysis of the brain sections of animals treated with the compounds according to the invention reveals a marked reduction in the volume of the infarction compared to the untreated animals. When the compounds according to the invention are administered to animals before ischemia (prophylactic effect), they are capable of inducing neuroprotection.
Un exemple de résultats obtenus avec un composé selon l'invention est présenté dans les figures 4-a et 4-b.An example of results obtained with a compound according to the invention is presented in figures 4-a and 4-b.
Les résultats de la figure 4-a indiquent que le volume corrigé de l'infarctus total (taille de la lésion après ischémie) est de 186 mm3. Lorsque les animaux sont traités par voie orale avec le composé Ex 4a (composé selon l'invention décrit à l'exemple 4a), pendant 14 jours avant l'ischémie expérimentale, à 2 fois 300 mg/kg/j, la taille de la lésion est diminuée de 22% (145 mm3) par rapport à celle des animaux contrôles. Les résultats de la figure 4-b représentant des infarctus non corrigés indiquent que le caractère curatif et neuroprotecteur du composé selon l'invention Ex 4a observé au niveau de l'infarctus total est composé d'un effet neuroprotecteur au niveau de l'infarctus cortical (22 % de diminution des lésions) mais sans effet au niveau de l'infarctus striatal (pas de diminution significative des lésions).The results of the figure 4-a indicate that the corrected volume of the total infarction (size of the lesion after ischemia) is 186 mm 3 . When the animals are treated orally with the compound Ex 4a (compound according to the invention described in example 4a), for 14 days before the experimental ischemia, at twice 300 mg / kg / day, the size of the lesion is reduced by 22% (145 mm 3 ) compared to that of the control animals. The results of the figure 4-b representing uncorrected infarctions indicate that the curative and neuroprotective character of the compound according to the invention Ex 4a observed at the level of the total infarction is composed of a neuroprotective effect at the level of cortical infarction (22% reduction in lesions) but no effect on striatal infarction (no significant reduction in lesions).
3/ Mesure de l'activité des enzymes anti-oxydantes :3 / Measurement of the activity of antioxidant enzymes:
Les cerveaux des rats sont congelés, écrasés et réduits en poudre puis re- suspendus dans une solution saline. Les différentes activités enzymatiques sont ensuite mesurées comme décrit par les auteurs suivants : superoxide dismutaseThe brains of rats are frozen, crushed and reduced to powder and then resuspended in saline. The different enzymatic activities are then measured as described by the following authors: superoxide dismutase
(Flohe and Otting 1984); glutathion peroxidase (Paglia and Valentine 1967); glutathion reductase (Spooner, Delides et al. 1981); glutathion-S-transferase(Flohe and Otting 1984); glutathione peroxidase (Paglia and Valentine 1967); glutathione reductase (Spooner, Delides et al. 1981); glutathione S-transferase
(Habig and Jakoby 1981); catalase (Aebi 1984). Les différentes activités enzymatiques mentionnées ci-dessus sont augmentées dans les préparations de cerveaux des animaux traités avec les composés selon l'invention.(Habig and Jakoby 1981); catalase (Aebi 1984). The various enzymatic activities mentioned above are increased in the preparations of brains of animals treated with the compounds according to the invention.
B-/Modèle curatif ou traitement de la phase aiguë : 1/ Induction d'une ischémie-reperfusion par occlusion intraluminale de l'artère moyenne cérébrale.B- / Curative model or treatment of the acute phase: 1 / Induction of ischemia-reperfusion by intraluminal occlusion of the cerebral middle artery.
Des animaux tels que décrits précédemment sont utilisés pour cette expérience. Les animaux sont anesthésiés à l'aide d'une injection intra-péritonéale de 300 mg/kg d'hydrate de chloral. Une sonde rectale est mise en place et la température du corps est maintenue à 37 +/- 0,5°C. La pression artérielle est mesurée au cours de toute l'expérience.Animals as described above are used for this experiment. The animals are anesthetized using an intraperitoneal injection of 300 mg / kg of chloral hydrate. A rectal probe is placed and the body temperature is maintained at 37 +/- 0.5 ° C. Blood pressure is measured during the whole experiment.
Sous un microscope chirurgical, la carotide droite est mise à jour à l'aide d'une incision cervicale médiale. L'artère ptérygopalatine a été ligaturée à son origine et une artériotomie est réalisée dans l'artère carotide externe afin d'y glisser un mono-filament de nylon. Ce filament est ensuite doucement avancé dans l'artère carotide commune puis dans l'artère carotide interne afin d'obturer l'origine de l'artère cérébrale moyenne. Après 1 heure, le filament est retiré pour permettre la reperfusion. 2/ Traitement des animaux :Under a surgical microscope, the right carotid is updated using a medial cervical incision. The pterygopalatine artery was ligated at its origin and an arteriotomy is performed in the external carotid artery in order to slide a nylon monofilament into it. This filament is then gently advanced into the common carotid artery and then into the internal carotid artery in order to close off the origin of the middle cerebral artery. After 1 hour, the filament is removed to allow reperfusion. 2 / Treatment of animals:
Les animaux ayant subi une ischémie-reperfusion préalable sont traités par les composés selon l'invention par voie orale (tel que déjà décrit dans un véhicule CMC + Tween) une ou plusieurs fois après la reperfusion (600 mg/kg/j ou 2 administrations de 300 mg/kg/j).Animals having undergone prior ischemia-reperfusion are treated with the compounds according to the invention by the oral route (as already described in a CMC + Tween vehicle) one or more times after the reperfusion (600 mg / kg / d or 2 administrations 300 mg / kg / day).
3/ Mesure du volume de l'infarctus cérébral :3 / Measurement of the volume of the cerebral infarction:
24, 48 ou 72 heures après la reperfusion, les animaux préalablement traités ou non traités avec les composés selon l'invention sont tués par une overdose de pentobarbital.24, 48 or 72 hours after the reperfusion, the animals previously treated or not treated with the compounds according to the invention are killed by an overdose of pentobarbital.
Les cerveaux sont rapidement congelés et sectionnés. Les sections sont colorées au violet Cresyl. Les zones non colorées des sections cérébrales ont été considérées comme lésées par l'infarctus. Les aires (de l'infarctus et des deux hémisphères) ont été mesurées, les volumes de l'infarctus et des deux hémisphères ont été calculés et le volume de l'infarctus corrigé a été calculé par la formule suivante (Volume de l'infarctus corrigé = Volume de l'infarctus - (volume de l'hémisphère droit - volume de l'hémisphère gauche)) pour compenser l'œdème cérébral. Dans les cas d'un traitement curatif (traitement de la phase aiguë), les animaux traités avec les composés selon l'invention ont des dommages au niveau cérébral réduit par rapport aux animaux non traités. En effet le volume de l'infarctus est diminué lorsque les composés selon l'invention sont administrés une ou plusieurs fois après l'ischémie-reperfusion. Un exemple de résultats obtenus avec un composé selon l'invention est présenté dans les figures 4-c à4- f.Brains are quickly frozen and sectioned. The sections are colored in Cresyl purple. The non-colored areas of the brain sections were considered to be injured by the infarction. The areas (of the infarction and of the two hemispheres) were measured, the volumes of the infarction and of the two hemispheres were calculated and the volume of the corrected infarction was calculated by the following formula (Volume of the infarction corrected = Volume of infarction - (volume of the right hemisphere - volume of the left hemisphere)) to compensate for cerebral edema. In the case of a curative treatment (treatment of the acute phase), the animals treated with the compounds according to the invention have damage to the brain level reduced compared to the untreated animals. In fact, the volume of the infarction is reduced when the compounds according to the invention are administered one or more times after ischemia-reperfusion. An example of results obtained with a compound according to the invention is presented in FIGS.
Les résultats de la figure 4-c montrent que les animaux traités (600 mg/kg/j), avec le composé selon l'invention Ex 4a, pendant 24 heures après l'ischémie développent des lésions dont la taille est réduite de 27% par rapport aux animaux contrôles (volume de l'infarctus 132 mm3 pour les traités contre 180 mm3 pour les contrôles).The results of FIG. 4-c show that the animals treated (600 mg / kg / day), with the compound according to the invention Ex 4a, for 24 hours after ischemia develop lesions whose size is reduced by 27% compared to the control animals (volume of the infarction 132 mm 3 for the treated versus 180 mm 3 for the controls).
Les résultats de la figure 4-d représentant des infarctus non corrigés indiquent que le caractère curatif et neuroprotecteur du composé selon l'invention Ex 4a observé au niveau de l'infarctus total est composé d'un effet neuroprotecteur au niveau de l'infarctus cortical (25 % de diminution des lésions) mais sans effet au niveau de l'infarctus striatal (pas de diminution significative des lésions). Les résultats de la figure 4-e montrent que les animaux traités (600 mg/kg/j), avec le composé selon l'invention Ex 4a, pendant 72 heures après l'ischémie développent des lésions dont la taille est réduite de 40% par rapport aux animaux contrôles (volume de l'infarctus corrigé : 110 mm3 pour les traités contre 180 mm3 pour les contrôles). Les résultats de la figure 4-f représentant des infarctus non corrigés indiquent que le caractère curatif et neuroprotecteur du composé selon l'invention Ex 4a observé au niveau de l'infarctus total est composé d'un effet neuroprotecteur au niveau de l'infarctus cortical (32 % de diminution des lésions) mais également au niveau de l'infarctus striatal (23% de diminution des lésions).The results of FIG. 4-d representing uncorrected infarctions indicate that the curative and neuroprotective nature of the compound according to the invention Ex 4a observed at the level of total infarction is composed of a neuroprotective effect at the level of cortical infarction (25% reduction in lesions) but without effect at the level of striatal infarction (no significant reduction in lesions). The results of FIG. 4-e show that the animals treated (600 mg / kg / day), with the compound according to the invention Ex 4a, for 72 hours after ischemia develop lesions whose size is reduced by 40% compared to the control animals (volume of the corrected infarction: 110 mm 3 for the treated versus 180 mm 3 for the controls). The results of FIG. 4-f representing uncorrected infarctions indicate that the curative and neuroprotective nature of the compound according to the invention Ex 4a observed at the level of total infarction is composed of a neuroprotective effect at the level of cortical infarction (32% reduction in lesions) but also at the level of striatal infarction (23% reduction in lesions).
L'utilisation des composés selon l'invention, dans différents modèles expérimentaux, montre que ces composés possèdent une activité antioxydante intrinsèque, capable de retarder et de réduire les effets d'un stress oxydatif. De plus, ils induisent l'expression des gènes des enzymes antioxydantes, ce qui associé à leur caractère antioxydant permet de renforcer les protections anti- radicalaires. Par ailleurs, les composés selon l'invention possèdent un pouvoir anti-inflammatoire et la propriété d'activer le récepteur nucléaire PPARα. Enfin, l'utilisation des composés selon l'invention dans un modèle d'ischémie reperfusion chez l'animal montre l'effet bénéfique sur la neuroprotection aussi bien avec un traitement préventif que curatif. REFERENCES BIBLIOGRAPHIQUESThe use of the compounds according to the invention, in various experimental models, shows that these compounds have an intrinsic antioxidant activity, capable of delaying and reducing the effects of oxidative stress. In addition, they induce the expression of the genes of antioxidant enzymes, which associated with their antioxidant nature makes it possible to strengthen anti-radical protections. Furthermore, the compounds according to the invention have an anti-inflammatory power and the property of activating the nuclear receptor PPARα. Finally, the use of the compounds according to the invention in an ischemia reperfusion model in animals shows the beneficial effect on neuroprotection both with preventive and curative treatment. BIBLIOGRAPHICAL REFERENCES
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Claims

REVENDICATIONS
1. Utilisation d'un composé pour la préparation d'une composition pharmaceutique destinée à traiter une pathologie vasculaire cérébrale, le composé présentant la formule générale (I) suivante :1. Use of a compound for the preparation of a pharmaceutical composition intended for treating a cerebrovascular pathology, the compound having the following general formula (I):
dans laquellein which
• G représente un atome d'oxygène, un atome de soufre ou un groupe N- R4• G represents an oxygen atom, a sulfur atom or an N- R4 group
• R4 est un atome d'hydrogène ou un groupe alkyle linéaire ou ramifié, saturé ou non, éventuellement substitué, comportant de 1 à 5 atomes de carbone,• R4 is a hydrogen atom or a linear or branched alkyl group, saturated or not, optionally substituted, containing from 1 to 5 carbon atoms,
• R1, R2 et R3, identiques ou différents, représentent un atome d'hydrogène, un groupe CO-R ou un groupe de formule CO-(CH2)2n+rX-R' , l'un au moins des groupes R1 , R2 et R3 est un groupe de formule CO- (CH2)2n+1-X-R\R1, R2 and R3, identical or different, represent a hydrogen atom, a CO-R group or a group of formula CO- (CH 2 ) 2n + rX-R ', at least one of the groups R1, R2 and R3 is a group of formula CO- (CH 2 ) 2n + 1 -XR \
• R est un groupe alkyle linéaire ou ramifié, saturé ou non, éventuellement substitué, dont la chaîne principale comporte de 1 à 25 atomes de carbone,R is a linear or branched alkyl group, saturated or unsaturated, optionally substituted, the main chain of which contains from 1 to 25 carbon atoms,
• X est un atome de soufre, un atome de sélénium, un groupe SO ou un groupe S02,X is a sulfur atom, a selenium atom, an SO group or an S0 2 group,
• n est un nombre entier compris entre 0 et 11 ,• n is an integer between 0 and 11,
• R' est un groupe alkyle linéaire ou ramifié, saturé ou non, éventuellement substitué, dont la chaîne principale comporte de 2 à 23, de préférence 10 à 23, atomes de carbone et éventuellement un ou plusieurs hétérogroupes choisis parmi un atome d'oxygène, un atome de soufre, un atome de sélénium, un groupe SO et un groupe S02.• R 'is a linear or branched alkyl group, saturated or not, optionally substituted, the main chain of which comprises from 2 to 23, preferably 10 to 23, carbon atoms and optionally one or more heterogroups chosen from an oxygen atom, a sulfur atom, a selenium atom, an SO group and an S0 2 group.
2. Utilisation selon la revendication 1 , dans laquelle la pathologie vasculaire cérébrale est l'ischémie cérébrale ou un accident hémorragique cérébral2. Use according to claim 1, in which the cerebrovascular pathology is cerebral ischemia or a hemorrhagic stroke.
3. Utilisation selon la revendication 1 ou 2, caractérisée en ce que le ou les groupes R, identiques ou différents, représentent un groupe alkyle linéaire ou ramifié, saturé ou insaturé, substitué ou non, dont la chaîne principale comporte de 1 à 20 atomes de carbone, de préférence de 7 à 17 atomes de carbone, encore plus préférentiellement 14 à 17 atomes de carbone.3. Use according to claim 1 or 2, characterized in that the group or groups R, identical or different, represent a linear or branched, saturated or unsaturated, substituted or unsubstituted alkyl group, the main chain of which contains from 1 to 20 atoms carbon, preferably from 7 to 17 carbon atoms, even more preferably 14 to 17 carbon atoms.
4. Utilisation selon l'une des revendications 1 à 3, caractérisée en ce que le ou les groupes R', identiques ou différents, représentent un groupe alkyle linéaire ou ramifié, saturé ou insaturé, substitué ou non, dont la chaîne principale comporte de 12 à 23 atomes de carbone, encore plus préférentiellement de 13 à 20 atomes de carbone, avantageusement de 14 à 17 atomes de carbone.4. Use according to one of claims 1 to 3, characterized in that the group or groups R ', identical or different, represent a linear or branched, saturated or unsaturated, substituted or unsubstituted alkyl group, the main chain of which comprises 12 to 23 carbon atoms, even more preferably from 13 to 20 carbon atoms, advantageously from 14 to 17 carbon atoms.
5. Utilisation selon l'une des revendications précédentes, caractérisée en ce que le ou les groupes R, identiques ou différents, sont choisis parmi C H-|5,5. Use according to one of the preceding claims, characterized in that the group or groups R, which are identical or different, are chosen from C H- | 5 ,
C-ιoH2ι, CιιH23, C-ι2H25, Ci3H2 , C-|4H2g, C16H33, C17H35, C15H31, Ci4H27, Cι4H25,C-ιoH 2 ι, CιιH 23 , C-ι 2 H 25 , Ci 3 H 2 , C- | 4H 2 g C 16 H 33, C 17 H 35, C 15 H 31, C 4 H 27, Cι 4 H 25,
Cl5H2g, Cι7H2g, C17H31, C17H33, C-|gH g, C-|gH3i, C21H31, C21H35, C2ιH37, C2ιH3g,C 15 H 2 g, Cι 7 H 2 g , C 17 H 31 , C 17 H 33 , C- | gH g, C- | gH 3 i, C 21 H 31 , C 21 H 35 , C 2 ιH 37 , C 2 ιH 3 g,
C23H45ι les chaînes alkyle des acides eicosapentaènoïque (EPA) C20-5 (5, 8, 11 , 14, 17) et docosahexaènoïque (DHA) C22:6 (4, 7, 10, 13, 16, 19), (CH2)n- CH(CH3)C2H5, (CH=C(CH3)(CH2)2)n"-CH=C(CH3)2 et (CH2)2x+ι-C(CH3)2-(CH2)n- CH3, x étant un nombre entier égal à ou compris entre 1 et 11 , n' étant un nombre entier égal à ou compris entre 1 et 22, n" étant un nombre entier égal à ou compris entre 1 et 5, n'" étant un nombre entier égal à ou compris entre 0 et 22 et (2x+n'") étant inférieur ou égal à 22 de préférence inférieur ou égal à 20.C 23 H 45 ι the alkyl chains of eicosapentaenoic acids (EPA) C 20 -5 (5, 8, 11, 14, 17) and docosahexaenoic acids (DHA) C 22: 6 (4, 7, 10, 13, 16, 19) , (CH 2 ) n - CH (CH 3 ) C 2 H 5 , (CH = C (CH 3 ) (CH 2 ) 2 ) n "-CH = C (CH 3 ) 2 and (CH 2 ) 2x + ι- C (CH 3 ) 2 - (CH 2 ) n- CH 3 , x being an integer equal to or between 1 and 11, n 'being an integer equal to or between 1 and 22, n "being a number integer equal to or between 1 and 5, n '"being an integer equal to or between 0 and 22 and (2x + n'") being less than or equal to 22 preferably less than or equal to 20.
6. Utilisation selon l'une des revendications précédentes, caractérisée en ce que le ou les groupes R', identiques ou différents, sont choisis parmi C7H15,6. Use according to one of the preceding claims, characterized in that the group or groups R ', identical or different, are chosen from C 7 H 15 ,
C-|θH2ι, C-|-|H23, C-|2H25, Ci3H27, C-|4H2g, C16H33, C17H35, C15H31, C20:δ(5, 8, 11 , 14, 17), C22:6(4, 7, 10, 13, 16, 19), Cι4H27, Cι4H25, CιsH2g, Cι7H2g, C-| H3i, Cι7H33,C- | θ H 2 ι, C- | - | H 23 , C- | 2 H 25, C 3 H 27 C | 4 H 2 g, C 16 H 33 , C 17 H 35 , C 15 H 31 , C 2 0: δ (5, 8, 11, 14, 17), C 22: 6 (4, 7, 10, 13, 16, 19), Cι 4 H 27 , Cι 4 H 2 5, CιsH 2 g, Cι 7 H 2 g, C- | H 3 i, Cι 7 H 33 ,
CιgH2g, C19H31, C2IH31, C2ιH35, C2ιH37, C2lH3g, C^^s, (CH2)n'-CH(CH3)C2H5,CιgH 2 g, C 19 H 31 , C 2 IH 3 1, C 2 ιH 35 , C 2 ιH 37 , C 2l H 3 g, C ^^ s, (CH 2 ) n '-CH (CH 3 ) C 2 H 5 ,
(CH=C(CH3)(CH2)2)n"-CH=C(CH3)2 et (CH2)2χ+ι-C(CH3)2-(CH2)n--CH3, x étant un nombre entier égal à ou compris entre 1 et 11 , n' étant un nombre entier égal à ou compris entre 1 et 22, n" étant un nombre entier égal à ou compris entre 1 et 5, n'" étant un nombre entier égal à ou compris entre 0 et 22 et (2x+n'") étant inférieur ou égal à 22, de préférence inférieur ou égal à 20.(CH = C (CH 3 ) (CH 2 ) 2 ) n "-CH = C (CH 3 ) 2 and (CH 2 ) 2 χ + ι-C (CH 3 ) 2 - (CH 2 ) n --CH 3 , x being an integer equal to or between 1 and 11, n 'being an integer equal to or between 1 and 22, n "being an integer equal to or between 1 and 5, n'" being an integer equal to or between 0 and 22 and (2x + n '") being less than or equal to 22, preferably less than or equal to 20.
7. Utilisation selon l'une des revendications précédentes, caractérisée en ce que le ou les groupes R, identiques ou différents, représentent un groupe alkyle inférieur comportant de 1 à 6 atomes de carbone.7. Use according to one of the preceding claims, characterized in that the group or groups R, which are identical or different, represent a lower alkyl group comprising from 1 to 6 carbon atoms.
8. Utilisation selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisé en ce que le ou les groupes R', identiques ou différents, sont des groupes alkyle saturés et linéaires comportant 14 atomes de carbone.8. Use according to any one of the preceding claims, characterized in that the group or groups R ′, which are identical or different, are saturated and linear alkyl groups containing 14 carbon atoms.
9. Utilisation selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce que les groupes alkyle sont substitués par un ou plusieurs substituants, identiques ou différents choisis parmi un atome d'halogène (iode, chlore, fluor, brome) et un groupe OH, =0, N02, NH2, CN, CH2-OH, 0-CH3, CH2OCH3, CF3 et COOZ dans lequel Z est un atome d'hydrogène ou un groupe alkyle comportant de 1 à 6 atomes de carbone.9. Use according to any one of the preceding claims, characterized in that the alkyl groups are substituted by one or more substituents, identical or different chosen from a halogen atom (iodine, chlorine, fluorine, bromine) and an OH group , = 0, N0 2 , NH 2 , CN, CH 2 -OH, 0-CH 3 , CH 2 OCH 3 , CF 3 and COOZ in which Z is a hydrogen atom or an alkyl group having from 1 to 6 atoms of carbon.
10. Utilisation selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce que X est un atome de soufre ou de sélénium, de préférence un atome de soufre.10. Use according to any one of the preceding claims, characterized in that X is a sulfur or selenium atom, preferably a sulfur atom.
11. Utilisation selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce que le groupe G représente un atome d'oxygène ou un groupe N-R4 et, lorsque G est N-R4, R4 représente préférentiellement un atome d'hydrogène ou un groupe méthyle. 11. Use according to any one of the preceding claims, characterized in that the group G represents an oxygen atom or an N-R4 group and, when G is N-R4, R4 preferably represents a hydrogen atom or a methyl group.
12. Utilisation selon l'une des revendications précédentes, caractérisée en ce que dans le groupe CO-(CH2)2n+rX-R', n est compris entre 0 et 3, plus spécifiquement compris entre 0 et 2 et est en particulier égal à 0.12. Use according to one of the preceding claims, characterized in that in the group CO- (CH 2 ) 2n + rX-R ', n is between 0 and 3, more specifically between 0 and 2 and is in particular equal to 0.
13. Utilisation de formule (I) selon l'une quelconque des revendications précédentes, dans laquelle au moins un des groupes R1 , R2 et R3 représente un groupe CO-(CH2)2n+rX-R' dans lequel X représente un atome de sélénium ou de préférence de soufre et/ou R' est un groupe alkyle saturé et linéaire comprenant de 13 à 17 atomes de carbone, de préférence de 14 à 16, encore plus préférentiellement 14 atomes de carbone.13. Use of formula (I) according to any one of the preceding claims, in which at least one of the groups R1, R2 and R3 represents a group CO- (CH 2 ) 2n + rX-R 'in which X represents an atom of selenium or preferably sulfur and / or R 'is a saturated and linear alkyl group comprising from 13 to 17 carbon atoms, preferably from 14 to 16, even more preferably 14 carbon atoms.
14. Utilisation selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce que R2 est un groupe de formule CO-(CH2)2n+rX-R', de préférence dans laquelle X représente un atome de sélénium ou de préférence de soufre et/ou R' est un groupe alkyle saturé et linéaire comprenant de 13 à 17 atomes de carbone, plus préférentiellement dans lesquels n est égal à 0, en particulier un groupe de formule CO-CH2-S-Ci4H29.14. Use according to any one of the preceding claims, characterized in that R2 is a group of formula CO- (CH 2 ) 2n + rX-R ', preferably in which X represents a selenium or preferably sulfur atom and / or R ′ is a saturated and linear alkyl group comprising from 13 to 17 carbon atoms, more preferably in which n is equal to 0, in particular a group of formula CO-CH 2 -S-Ci 4 H 29 .
15. Utilisation selon la revendication 14, caractérisé en ce que R1 et R3, identiques ou différents, représentent un atome d'hydrogène ou un groupe CO-15. Use according to claim 14, characterized in that R1 and R3, identical or different, represent a hydrogen atom or a CO- group
R.R.
16. Utilisation selon la revendication 15, caractérisée en ce que R1 et R3, identiques ou différents, représentent un groupe CO-R.16. Use according to claim 15, characterized in that R1 and R3, identical or different, represent a CO-R group.
17. Utilisation selon l'une des revendications 1 à 16, caractérisée en ce que deux des groupes R1 , R2 et R3 sont des groupes CO-(CH2)2n+ι-X-R', identiques ou différents, de préférence dans lesquels X représente un atome de sélénium ou de préférence de soufre et/ou R' est un groupe alkyle saturé et linéaire comprenant de 13 à 17 atomes de carbone, plus préférentiellement dans lesquels n est égal à 0, en particulier des groupes CO-CH2-S-Ci4H2g . 17. Use according to one of claims 1 to 16, characterized in that two of the groups R1, R2 and R3 are groups CO- (CH 2 ) 2n + ι-X-R ', identical or different, preferably in which X represents a selenium or preferably sulfur atom and / or R 'is a saturated and linear alkyl group comprising from 13 to 17 carbon atoms, more preferably in which n is equal to 0, in particular CO-CH groups 2 -S-Ci 4 H 2 g.
18. Utilisation selon l'une des revendications 1 à 16, caractérisée en ce que R1 , R2 et R3, identiques ou différents, de préférence identiques, sont des groupes CO-(CH2)2n+rX-R', de préférence dans lesquels X représente un atome de sélénium ou de préférence de soufre et/ou R' est un groupe alkyle saturé et linéaire comprenant de 13 à 17 atomes de carbone, plus préférentiellement dans lesquels n est compris entre 0 et 3, et en particulier égal à 0.18. Use according to one of claims 1 to 16, characterized in that R1, R2 and R3, identical or different, preferably identical, are CO- (CH 2 ) 2n + rX-R 'groups, preferably in which X represents a selenium or preferably sulfur atom and / or R 'is a saturated and linear alkyl group comprising from 13 to 17 carbon atoms, more preferably in which n is between 0 and 3, and in particular equal to 0.
19. Utilisation selon l'une quelconque des revendications 1 à 17, caractérisée en ce que R1 , R2 et R3 représentent des groupes CO-CH2-S-Ci4H2g..19. Use according to any one of claims 1 to 17, characterized in that R1, R2 and R3 represent CO-CH 2 -S-Ci 4 H 2 g groups.
20. Utilisation selon l'une quelconque des revendications 1 à 17, caractérisée en ce que l'un ou deux des substituants R1 , R2 ou R3 est un groupe COCH3.20. Use according to any one of claims 1 to 17, characterized in that one or two of the substituents R1, R2 or R3 is a COCH 3 group.
21. Utilisation selon l'une des revendications précédentes 1 à 10 et 12 à 20, caractérisée en ce que le groupe G représente un atome de soufre.21. Use according to one of the preceding claims 1 to 10 and 12 to 20, characterized in that the group G represents a sulfur atom.
22. Composés de formule (I) telle que définie à la revendication 1 , choisis parmi :22. Compounds of formula (I) as defined in claim 1, chosen from:
- 1 ,3-ditétradécylthioacétyl-2-palmitoylglycérol ;- 1,3-ditetradecylthioacetyl-2-palmitoylglycerol;
- 1 ,3-diacétyl-2-tétradécylthioacétylglycérol ; - 1 ,3-dioctanoyl-2-tétradécylthioacétylglycérol ;- 1,3-diacetyl-2-tetradecylthioacetylglycerol; - 1, 3-dioctanoyl-2-tetradecylthioacetylglycerol;
- 1 ,3-diundécanoyl-2-tétradécylthioacétylglycérol ; et- 1, 3-diundecanoyl-2-tetradecylthioacetylglycerol; and
- 1 ,3-ditétradécylthioacétoxy-2-(2-tétradécylthio)methylcarbonylthio- propane.- 1, 3-ditétradécylthioacétoxy-2- (2-tétradécylthio) methylcarbonylthio-propane.
23. Composition pharmaceutique, caractérisée en ce qu'elle comprend, dans un véhicule acceptable sur le plan pharmaceutique, au moins un composé de formule générale (I) identifié à la revendication 22.23. Pharmaceutical composition, characterized in that it comprises, in a pharmaceutically acceptable vehicle, at least one compound of general formula (I) identified in claim 22.
24. Composition pharmaceutique selon la revendication précédente, destinée au traitement des pathologies vasculaires cérébrales et plus particulièrement de l'ischémie cérébrale ou des accidents vasculaires cérébraux. 24. Pharmaceutical composition according to the preceding claim, intended for the treatment of cerebrovascular pathologies and more particularly of cerebral ischemia or cerebrovascular accidents.
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