EP1558630A2 - Novel ampiphilic fluorocarbon molecular vectors for biomedical and medical use - Google Patents

Novel ampiphilic fluorocarbon molecular vectors for biomedical and medical use

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EP1558630A2
EP1558630A2 EP03782534A EP03782534A EP1558630A2 EP 1558630 A2 EP1558630 A2 EP 1558630A2 EP 03782534 A EP03782534 A EP 03782534A EP 03782534 A EP03782534 A EP 03782534A EP 1558630 A2 EP1558630 A2 EP 1558630A2
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EP
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chain
formula
molecule
Prior art date
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Withdrawn
Application number
EP03782534A
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German (de)
French (fr)
Inventor
Bernard Pucci
Ange Polidori
Christiane Contino-Pepin
Grégory DURAND
Sylvain Jasseron
Sandrine Perino
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
TS Pharma
Universite dAvignon et des Pays de Vaucluse
Original Assignee
TS Pharma
Universite dAvignon et des Pays de Vaucluse
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Publication date
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Abstract

Novel ampiphilic fluorocarbon molecules applicable as vectors for active ingredients, active molecules comprising such a vector and the use thereof in the pharmaceutical field, particularly for the production of medicaments.

Description

NOUVEAUX VECTEURS MOLECULAIRES AMPHIPHILESNEW AMPHIPHILIC MOLECULAR VECTORS
FLUOROCARBONES A USAGE BIOMEDICAL ET MEDICALFLUOROCARBONS FOR BIOMEDICAL AND MEDICAL USE
L'invention a pour objet de nouvelles molécules susceptibles d'être utilisées comme vecteur de principes actifs, des molécules actives comportant un tel vecteur et leur utilisation dans le domaine de la pharmacie, notamment pour la préparation de médicaments.The subject of the invention is new molecules capable of being used as vector for active principles, active molecules comprising such a vector and their use in the field of pharmacy, in particular for the preparation of medicaments.
Les recherches actuelles sur la vectorisation des principes actifs tendent à améliorer de façon notable non seulement le confort du malade en privilégiant les voies d'administration les moins traumatisantes mais également l'efficacité globale d'un médicament en lui conférant une affinité cellulaire qui leur fait généralement défaut et qui est souvent responsable d'effets secondaires indésirables. Au concept classique d'activité thérapeutique se surajoute donc celui de la spécificité d'action qui module en fait la biodisponibilité du substrat.Current research on the vectorization of active ingredients tends to significantly improve not only the comfort of the patient by favoring the least traumatic routes of administration but also the overall effectiveness of a drug by giving it a cellular affinity which makes them usually lacking and which is often responsible for unwanted side effects. To the classic concept of therapeutic activity is therefore added that of the specificity of action which in fact modulates the bioavailability of the substrate.
En pratique, par exemple dans un domaine sensible tel que celui de la chimiothérapie anticancéreuse, les progrès observés ces dernières années (nouvelles drogues, nouvelles modalités d'administration, chimio-prédictivité in vitro ou in vivo, intégration dans de nouveaux schémas thérapeutiques...) permettent de penser que . la qualité de la chimiothérapie va continuer à progresser si elle peut désormais se doter de nouveaux outils basés sur de nouveaux concepts de transport et de ciblage cellulaire des agents anticancéreux. Afin d'augmenter l'efficacité et la dose effective de principe actif qui sera acheminée vers le site cancéreux, il paraît en effet nécessaire d'apporter une réelle spécificité à ces médicaments et de réduire leurs effets secondaires.In practice, for example in a sensitive area such as that of anticancer chemotherapy, the progress observed in recent years (new drugs, new methods of administration, chemo-predictivity in vitro or in vivo, integration into new therapeutic regimens ... .) suggest that. the quality of chemotherapy will continue to improve if it can now acquire new tools based on new concepts of transport and cellular targeting of anticancer agents. In order to increase the effectiveness and the effective dose of active ingredient which will be transported to the cancer site, it seems indeed necessary to bring a real specificity to these drugs and to reduce their side effects.
Or, la structure chimique d'un médicament conditionne à la fois ses propriétés physico-chimiques et son activité biologique et notamment son affinité pour les récepteurs membranaires. Moduler ce devenir par des modifications de la structure moléculaire risque d'altérer les propriétés pharmaceutiques. On est donc amené à traiter le produit sur le plan "galénique ", c'est à dire à s'intéresser à la forme pharmaceutique utilisée pour son administration, ou mieux de l'encapsuler dans des structures hôtes ou le greffer sur des molécules aptes à assurer cette vectorisation. La vectorisation de principes actifs doit prendre en compte plusieurs paramètres pour avoir une chance de succès :However, the chemical structure of a drug conditions both its physico-chemical properties and its biological activity and in particular its affinity for membrane receptors. Modulating this becoming by modifications of the molecular structure risks altering the pharmaceutical properties. We are therefore required to treat the product on the "galenic" level, that is to say to be interested in the pharmaceutical form used for its administration, or better to encapsulate it in host structures or to graft it onto suitable molecules. to ensure this vectorization. The vectorization of active ingredients must take into account several parameters to have a chance of success:
Comme nous venons de le préciser, le principe actif doit, autant que faire se peut, être isolé du milieu physiologique afin d'éviter toute interaction néfaste soit pour le médicament soit pour l'organisme. Le support ne doit pas altérer ou mieux doit améliorer la biodisponibilité du médicament. Autrement dit, l'agent thérapeutique doit être libéré au sein de la molécule cible (préférentiellement au niveau intracytoplasmique, dans certains cas intranucléaire) et y conserver sa totale activité.As we have just specified, the active ingredient must, as far as possible, be isolated from the physiological medium in order to avoid any harmful interaction either for the drug or for the organism. The support must not alter or better must improve the bioavailability of the drug. In other words, the therapeutic agent must be released within the molecule target (preferably at the intracytoplasmic level, in some cases intranuclear) and keep its full activity there.
Toutefois cette vision du médicament, agent spécifique d'un récepteur, apte à provoquer une réponse cellulaire et par là à corriger une défaillance est loin d'être générale. Si elle est juste pour les principes actifs de type hormonaux ou analgésiques, elle ne s'applique pas du tout à d'autres domaines comme par exemple les traitements anticancéreux. De tels substrats n'ont pas été conçus de cette façon : ils ne possèdent pas de spécificité de reconnaissance cellulaire. Leur but est d'inhiber la multiplication cellulaire. Ce sont généralement des agents antimitotiques et de ce fait ils peuvent agir sur l'ADN de toutes les cellules, qu'elles soient cancéreuses ou normales et créer ainsi certains troubles gênants dont la manifestation la plus fréquente est Paplasie des tissus hématopoïétiques à laquelle s'ajoutent ensuite Pimmuno-inhibition et les troubles digestifs. Depuis l'installation de la chimiothérapie, les principes actifs mis au point sont de plus en plus puissants mais malheureusement ne font pas la distinction entre cellules cancéreuses et cellules saines. Il est ainsi regrettable qu'efficacité et sélectivité en matière de traitement du cancer ne puissent être conjuguées sur un même principe actif.However, this vision of the drug, a specific agent for a receptor, capable of causing a cellular response and thereby correcting a failure is far from general. If it is fair for the hormonal or analgesic type active ingredients, it does not apply at all to other fields such as for example cancer treatments. Such substrates were not designed in this way: they do not have specificity for cell recognition. Their goal is to inhibit cell multiplication. They are generally antimitotic agents and therefore they can act on the DNA of all cells, whether cancerous or normal and thus create certain troublesome disorders, the most frequent manifestation of which is the hematopoietic tissue aplasia which is then add immuno-inhibition and digestive disorders. Since the installation of chemotherapy, the active ingredients developed have become more and more powerful, but unfortunately do not distinguish between cancer cells and healthy cells. It is therefore unfortunate that efficiency and selectivity in the treatment of cancer cannot be combined on the same active ingredient.
Compte tenu de ces différentes considérations et observations, différents modèles vectoriels ont été proposés essentiellement de type macromoléculaire (les polymères synthétiques ou naturels) et supramoléculaire (les liposomes). Parmi tous ces modèles de vecteurs, on peut citer notamment le développement de petits polymères amphiphiles appelés télomères susceptibles de moduler la balance hydrophile-lipophile du principe actif (et donc ses propriétés physico-chimiques intrinsèques) mais également de favoriser sa pénétration intracellulaire et de lui assurer un ciblage cellulaire par l 'intermédiaire d'agents de reconnaissance convenablement choisis. "Synthesis of new cotelomers derived from tris(hydroxymethyl)aminomethane bearing arabinofuranosylcytosine moieties. Preliminary results on their in vitro and in vivo antitumoral activities » C. Contino, J.C. Maurizis, M. Ollier, M. Rapp, J.M. Lacombe, B. Pucci. Eur. J. Med. Chem., (1998), 33, 809-816.Given these different considerations and observations, different vector models have been proposed essentially of macromolecular type (synthetic or natural polymers) and supramolecular type (liposomes). Among all these vector models, we can cite in particular the development of small amphiphilic polymers called telomeres capable of modulating the hydrophilic-lipophilic balance of the active principle (and therefore its intrinsic physicochemical properties) but also of promoting its intracellular penetration and of it. ensure cell targeting by means of suitably chosen recognition agents. "Synthesis of new cotelomers derived from tris (hydroxymethyl) aminomethane bearing arabinofuranosylcytosine moieties. Preliminary results on their in vitro and in vivo antitumoral activities" C. Contino, JC Maurizis, M. Ollier, M. Rapp, JM Lacombe, B. Pucci. Eur. J. Med. Chem., (1998), 33, 809-816.
" Synthesis and preliminary biological assessments of a new class of amphiphilic telomers bearing 5-fluorouracil moieties" C. Contino, J.C. Maurizis and B. Pucci. Macromol. Chem., (1999), 200, 1351-1355."Synthesis and preliminary biological assessments of a new class of amphiphilic telomers bearing 5-fluorouracil moieties" C. Contino, J.C. Maurizis and B. Pucci. Macromol. Chem., (1999), 200, 1351-1355.
"A new strategy in biomédical and médical field : the synthesis and applications of telomeric structures ». P.Barthelemy, A. Polidori, B. Pucci. Transworld Research Network, Récents developments in organic chemistry, Trivandrum, (1999), 3, 117-140."A new strategy in biomedical and medical field: the synthesis and applications of telomeric structures". P.Barthelemy, A. Polidori, B. Pucci. Transworld Research Network, Recent developments in organic chemistry, Trivandrum, (1999), 3, 117 -140.
"Synthesis and Preliminary biological assessments of RGD bearing biocompatible telomers. Sylvain Jasseron, Christiane Contino-Pépin, Jean Claude Maurizis , Maryse Rapp, Bernard Pucci . Bio. Med. Chem. Letters, (2002), 12, 1067-1070. "Synthesis and preliminary biological assessments of a new class of amphiphilic telomers bearing 5-fluorouracil moieties" C. Contino, J.C. Maurizis and B. Pucci. Macromol. Chem., (1999), 200, 1351-1355"Synthesis and Preliminary biological assessments of RGD bearing biocompatible telomers. Sylvain Jasseron, Christiane Contino-Pépin, Jean Claude Maurizis, Maryse Rapp, Bernard Pucci. Bio. Med. Chem. Letters, (2002), 12, 1067-1070. "Synthesis and preliminary biological assessments of a new class of amphiphilic telomers bearing 5-fluorouracil moieties" C. Contino, JC Maurizis and B. Pucci. Macromol. Chem., (1999), 200, 1351-1355
"Amphiphilic telomers : a new kind of antimitotic drugs macromolecular carriers." Christiane Contino-Pépin, Jean-Claude Maurizis, Bernard Pucci. Curr. Med. Chem. - Anti-Cancer Agents, (2002), 2, 645-665."Amphiphilic telomers: a new kind of antimitotic drugs macromolecular carriers." Christiane Contino-Pépin, Jean-Claude Maurizis, Bernard Pucci. Curr. Med. Chem. - Anti-Cancer Agents, (2002), 2, 645-665.
Les résultats acquis au cours de ces études ont permis de mettre en évidence différents points majeurs :The results acquired during these studies made it possible to highlight various major points:
Le contrôle de la balance hydrophile-lipophile du substrat favorise son passage transmembranaire (« Uptake and subcellular distribution of a new fluorinated telomeric carrier : study on cultivated B16 melanoma and skin rat fibroblastic cells. » F. Chehade, J.C. Maurizis, B. Pucci, A.A. Pavia, M. OUier, A. Veyre, F. Escaig C. Jeanguillaume, R. Dennebouy, G. Slodzian, E. Hindie, Cellular and Molecular Biology, (1996), 42, 335-342) sans pour autant apporter un caractère détergent et donc toxique ("Effîciency of new non ionic telomeric surfactants towards the solubilization of subcellular fractions proteins" B. Pucci, , J.C. Maurizis et A.A. Pavia, BioOrg. Med. Chem Lett. (1993), 3, 161-164).Controlling the hydrophilic-lipophilic balance of the substrate promotes its transmembrane passage (“Uptake and subcellular distribution of a new fluorinated telomeric carrier: study on cultivated B16 melanoma and skin rat fibroblastic cells.” F. Chehade, JC Maurizis, B. Pucci, AA Pavia, M. OUier, A. Veyre, F. Escaig C. Jeanguillaume, R. Dennebouy, G. Slodzian, E. Hindie, Cellular and Molecular Biology, (1996), 42, 335-342) without providing a detergent and therefore toxic character ("Effîciency of new non ionic telomeric surfactants towards the solubilization of subcellular fractions proteins" B. Pucci,, JC Maurizis and AA Pavia, BioOrg. Med. Chem Lett. (1993), 3, 161-164) .
Ces polymères amphiphiles permettent d'assurer un ciblage cellulaire efficace à la molécule globale et donc au principe actif ("Cell targeting by glycosidic telomers -Récognition ability of galactosylated telomers by the yeast Kluyveromyces Bulgaricus » J. Coulon, R. Bonaly, B. Pucci, A. Polidori, P. Barthélémy, C. Contino, Bioconjugate Chem. (1998), 9, 152-159. "Permeability of yeast cell enveloppe to fluorescent galactosylated telomers derived from THAM". C. Contino, M. Briot, J. Coulon, A. Polidori, R. Bonaly and B. Pucci. Bioconjugate Chem., (2000), 11, 461-468. "Synthesis and Preliminary biological assessments of RGD bearing biocompatible telomers". Sylvain Jasseron , Christiane Contino-Pépin, Jean-Claude Maurizis , Maryse Rapp, Bernard Pucci . Bio. Med. Chem. Letters, (2002), 12, 1067-1070).These amphiphilic polymers make it possible to ensure effective cellular targeting of the global molecule and therefore of the active principle ("Cell targeting by glycosidic telomers -Récognition ability of galactosylated telomers by the yeast Kluyveromyces Bulgaricus" J. Coulon, R. Bonaly, B. Pucci , A. Polidori, P. Barthélémy, C. Contino, Bioconjugate Chem. (1998), 9, 152-159. "Permeability of yeast cell envelope to fluorescent galactosylated telomers derived from THAM". C. Contino, M. Briot, J Coulon, A. Polidori, R. Bonaly and B. Pucci. Bioconjugate Chem., (2000), 11, 461-468. "Synthesis and Preliminary biological assessments of RGD bearing biocompatible telomers". Sylvain Jasseron, Christiane Contino-Pépin, Jean-Claude Maurizis, Maryse Rapp, Bernard Pucci. Bio. Med. Chem. Letters, (2002), 12, 1067-1070).
Le principe actif greffé sur le vecteur par l'intermédiaire d'un bras espaceur peptidique adapté (hydrolysable par les enzymes cytoplasmiques) est libéré au niveau intracellulaire après passage du vecteur au travers de la membrane cellulaire («Synthesis and Preliminary biological assessments of RGD bearing biocompatible telomers». Sylvain Jasseron , Christiane Contino-Pépin, Jean Claude Maurizis , Maryse Rapp, Bernard Pucci . Bio. Med. Chem. Letters, (2002), 12, 1067-1070).The active principle grafted onto the vector via a suitable peptide spacer arm (hydrolyzable by cytoplasmic enzymes) is released at the intracellular level after passage of the vector through the cell membrane ("Synthesis and Preliminary biological assessments of RGD bearing biocompatible telomers ". Sylvain Jasseron, Christiane Contino-Pépin, Jean Claude Maurizis, Maryse Rapp, Bernard Pucci. Bio. Med. Chem. Letters, (2002), 12, 1067-1070).
Cette méthode de vectorisation permet d'accroître de façon très significative l'efficacité de l'agent anticancéreux puisqu'il inhibe la prolifération des métastases, ralentit la croissance de la tumeur et prolonge la durée de vie des souris traitées d'un facteur supérieur à 3 par rapport aux souris témoins. Malgré l'intérêt évident présenté par ces télomères qui ont été décrits dans le document WO 92/02560, un des problèmes majeurs auquel sont confrontés de tels vecteurs et qui pourrait perturber leur commercialisation et leur emploi est leur polydispersité, c'est à dire leur absence de masse et de structure bien définies.This vectorization method significantly increases the effectiveness of the anticancer agent since it inhibits the proliferation of metastases, slows tumor growth and prolongs the lifespan of treated mice by a factor greater than 3 compared to control mice. Despite the obvious interest presented by these telomeres which have been described in the document WO 92/02560, one of the major problems with which such vectors are confronted and which could disturb their marketing and their use is their polydispersity, that is to say their absence of well defined mass and structure.
Aussi, la Demanderesse s'est fixé pour objectif la conception et la préparation de molécules susceptibles d'être des vecteurs de principe actif ayant une structure bien définie, dont la préparation soit aisée et qui facilitent l'acheminement du principe actif jusqu'à sa cible.Also, the Applicant has set itself the objective of designing and preparing molecules capable of being vectors of active principle having a well-defined structure, the preparation of which is easy and which facilitate the transport of the active principle to its target.
L'invention a donc pour objet les molécules répondant à la formule (I) ci- dessous :The subject of the invention is therefore the molecules corresponding to formula (I) below:
R [AA3]a3-[AA2]a2-[AA1]R [AA 3 ] a 3 - [AA 2 ] a 2 - [AA 1 ]
(X)x Y(X) x Y
I PAI PA
(I)(I)
dans laquelle :in which :
PA représente le principe actif susceptible d'agir sur une cible biologique et dont on souhaite favoriser l'acheminement jusqu'à sa cible biologique ; x représente un entier choisi parmi 0 et 1 ;PA represents the active principle capable of acting on a biological target and which it is desired to promote the routing to its biological target; x represents an integer chosen from 0 and 1;
X représente une chaîne peptidique comprenant de 1 à 5 acides aminés ; AAls AA2, AA3, identiques ou différents, représentent chacun un acide aminé ; a2, a3, identiques ou différents, représentent chacun un entier choisi parmiX represents a peptide chain comprising from 1 to 5 amino acids; AA ls AA 2 , AA 3 , identical or different, each represents an amino acid; a 2 , a 3 , identical or different, each represents an integer chosen from
O et l ;O and l;
R représente un groupement choisi parmi un agent de ciblage et un agent de solubilisation. Par agent de ciblage, on entend au sens de la présente invention : une molécule favorisant l'acheminement de l'ensemble de la molécule de formule (I) jusqu'à sa cible ou toute molécule susceptible d'être reconnue par la cible du principe actif PA. Par agent de solubilisation, on entend un agent permettant la modulation de la balance HLB de la molécule de formule (I), notamment un agent hydrophile. Parmi les agents de ciblage utilisables dans la présente invention, on peut citer les monosaccharides, les dérivés aminés de sucres, les polysaccharides, les hormones naturelles ou synthétiques, les peptides, les anticorps, et de façon générale, toute molécule susceptible d'être reconnue par la cible du O 2004/043993R represents a group chosen from a targeting agent and a solubilizing agent. By targeting agent is meant within the meaning of the present invention: a molecule promoting the routing of the whole molecule of formula (I) to its target or any molecule capable of being recognized by the target of the principle active PA. By solubilizing agent is meant an agent allowing the modulation of the HLB balance of the molecule of formula (I), in particular a hydrophilic agent. Among the targeting agents which can be used in the present invention, mention may be made of monosaccharides, amino sugar derivatives, polysaccharides, natural or synthetic hormones, peptides, antibodies, and in general, any molecule capable of being recognized. by the target of O 2004/043993
principe actif PA. Parmi les agents de solubilisation utilisables dans la présente invention, on peut citer en particulier les polyols, les polyéthers, les peptides, les polysaccharides.active ingredient PA. Among the solubilizing agents which can be used in the present invention, mention may be made in particular of polyols, polyethers, peptides, polysaccharides.
Y représente une chaîne hydrocarbonée fluorée en C4-C12 comportant un OY represents a fluorinated C 4 -C 12 hydrocarbon chain comprising an O
II groupement _ c~ , -NH-, -O-CO-NH-, S ou O permettant son rattachement, indiqué par les tirets — , soit à l'une des extrémités de la chaîne peptidiquefAAsJas-fAAJ^-fAA!], soit sur la chaîne latérale de l'un des acides aminés AAi, AA2j AA3 ; les tirets — entre PA-(X)X et la chaîne [AA3]a3-[AA2]a2-[AA1] indiquent que la liaison de PA-(X)X avec le reste de la molécule se fait avec la chaîne latérale de l'un des acides aminés AAi, AA , AA3 ou éventuellement en extrémité de la chaîne peptidique. De façon plus particulière, le principe actif est choisi parmi toutes les molécules organiques ayant une activité biologique reconnue et étant susceptibles d'être reliées à un acide aminé au moyen d'une liaison qui peut être choisie parmi les fonctions -II group _ c ~ , -NH-, -O-CO-NH-, S or O allowing its attachment, indicated by the dashes -, either at one of the ends of the peptide chain fAAsJas-fAAJ ^ -fAA ! ], or on the side chain of one of the amino acids AAi, AA 2j AA 3 ; the dashes - between PA- (X) X and the chain [AA 3 ] a3 - [AA 2 ] a2 - [AA 1 ] indicate that the binding of PA- (X) X with the rest of the molecule is made with the side chain of one of the amino acids AAi, AA, AA 3 or optionally at the end of the peptide chain. More particularly, the active principle is chosen from all organic molecules having a recognized biological activity and being capable of being linked to an amino acid by means of a bond which can be chosen from the functions -
O IIO II
O-CO-, -CO-NH-, -NH-CO-NH-, -NH-CO-O-, O-CO-O-, -O-, -S-, —S- ,O-CO-, -CO-NH-, -NH-CO-NH-, -NH-CO-O-, O-CO-O-, -O-, -S-, —S-,
O o oO o o
Il II IIHe II II
— s — — o— s— o- — o— p— o-- s - - o— s— o- - o— p— o-
II ' Il III 'He I
0 0 o0 0 o
Parmi ces principes actifs on peut citer notamment ceux ayant une activité anticancéreuse, antiinflammatoire, antiseptique, analgésique, neuroleptique, antifongique, les molécules ayant une activité anti radicaux libres.Among these active principles there may be mentioned in particular those having an anticancer, anti-inflammatory, antiseptic, analgesic, neuroleptic, antifungal activity, molecules having an anti-free radical activity.
De façon générale, le principe actif pourra être constitué d'une molécule linéaire ramifiée ou cyclique comportant de 1 à 30 atomes de carbone, une ou plusieurs insaturations, notamment un ou plusieurs cycles aromatiques, et une ou plusieurs fonctions choisies parmi :In general, the active principle may consist of a branched or cyclic linear molecule comprising from 1 to 30 carbon atoms, one or more unsaturations, in particular one or more aromatic rings, and one or more functions chosen from:
OO
I III II
-O-, -S-, -OH, -SH, -Cl, -F, -Br, -I, — N— ? _NH-, -NH2, — C— } -COH, -COOH, --O-, -S-, -OH, -SH, -Cl, -F, -Br, -I, - N— ? _ N H-, -NH 2 , - C— } -COH, -COOH, -
OO
^ O — S-^ O - S-
M I I 0 I I 0 I IM I I 0 I I 0 I I
— CON ^ I I I I 11- CON ^ I I I I 11
CONH2, -COO-, -CONH-, —s- o — O-C-O- — NH-C-0CONH 2 , -COO-, -CONH-, —s- o - OCO- - NH-C-0
-NH- O 0 0 O-NH- O 0 0 O
II IIII II
-O— P— o- — o- - •PP - — -OO--PP--HH HC-P-OH-O— P— o- - o- - • PP - - -OO - PP - HH HC-P-OH
I 1 |I 1 |
I 1 ' I I I o 0 0 0o OH OHI 1 'I I I o 0 0 0o OH OH
1 !1!
Le principe actif PA est relié, par l'intermédiaire d'une liaison dont la nature a été exposée ci-dessus, soit à la chaîne latérale de l'un des acides aminés AAls AA2, AA , soit à l'extrémité de la chaîne peptidique, éventuellement par l'intermédiaire d'une chaîne peptidique X (cas où x=l)The active ingredient PA is linked, via a bond the nature of which has been set out above, either to the side chain of one of the amino acids AA ls AA 2 , AA, or to the end of the peptide chain, possibly via a peptide chain X (case where x = l)
Le lien avec l'un des deux groupements Y et -(X)x-PA, se fait sur la chaîne latérale de l'un des acides aminés A Ai, AA , AA3. L'acide aminé relié à PA-(X)X- ou à Y par sa chaîne latérale est choisi parmi ceux comportant une fonction acide, amide, aminé, thiol, alcool sur leur chaîne latérale. Parmi ceux-ci, on peut citer notamment la lysine, l'arginine, l'ornithine, l'acide aspartique, l'acide glutamique, l'asparagine, la glutamine, la serine, la tyrosine, la cystéine. De préférence l'acide aminé relié par sa chaîne latérale à PA-(X)X- ou à Y est choisi parmi : l'acide aspartique ou la lysineThe link with one of the two groups Y and - (X) x-PA is made on the side chain of one of the amino acids A Ai, AA, AA 3 . The amino acid linked to PA- (X) X - or to Y by its side chain is chosen from those comprising an acid, amide, amino, thiol or alcohol function on their side chain. Among these, mention may in particular be made of lysine, arginine, ornithine, aspartic acid, glutamic acid, asparagine, glutamine, serine, tyrosine, cysteine. Preferably the amino acid linked by its side chain to PA- (X) X - or to Y is chosen from: aspartic acid or lysine
Le bras espaceur X, lorsqu'il est présent, est constitué d'une chaîne peptidique engagée à une extrémité dans une liaison, avec la chaîne latérale ou l'extrémité de l'un des acides aminés AAi, AA , AA et à l'autre extrémité dans une liaison avec le principe actif P A.The spacer arm X, when present, consists of a peptide chain engaged at one end in a bond, with the side chain or the end of one of the amino acids AAi, AA, AA and other end in a connection with the active ingredient P A.
Ce bras espaceur comprend 1 à 5 acides aminés, préférentiellement 1 à 3 acides aminés. Le bras espaceur X et/ou la chaîne peptidique [AA3]a3-[AA2]a2-[AAι] peuvent être choisis pour leur affinité pour la cible du principe actif PA. Ils peuvent également comporter ou être constitués de résidus tyrosine permettant le suivi in vivo de la molécule de formule (I) après marquage à 125I,This spacer arm comprises 1 to 5 amino acids, preferably 1 to 3 amino acids. The spacer arm X and / or the peptide chain [AA 3 ] a 3 - [AA 2 ] a 2 - [AAι] can be chosen for their affinity for the target of the active ingredient PA. They can also comprise or consist of tyrosine residues allowing the in vivo monitoring of the molecule of formula (I) after labeling with 125 I,
R est choisi en fonction de la cible cellulaire, il pourra être de nature saccharidique (ciblage des lectines membranaires spécifiques qui se retrouvent dans des tissus particuliers et qui reconnaissent sélectivement soit le galactose -cas du foie, des os, de certaines tumeurs cancéreuses-, soit le mannose -cas des macrophages, du cœur-, soit l'acide sialique- cas des érythrocytes -...), de nature hormonale (tels que des stéroïdes), de nature synthétique tel que l'imatinib mésylate (ST571, Gleevek®) pour cibler les kinases, des anticorps spécifiques, notamment des peptide. R peut être choisi parmi tous substrats dont les recherches antérieures ont démontré la spécificité de reconnaissance. Lorsque R est un mono ou un polysaccharide ou un peptide hydrophile, il pourra de plus, apporter à la molécule l'hydrosolubilité nécessaire à son administration IV ou IP. O 2004/043993R is chosen as a function of the cell target, it may be of a saccharide nature (targeting of specific membrane lectins which are found in particular tissues and which selectively recognize either galactose - cases of the liver, bones, certain cancerous tumors -, either mannose - case of macrophages, of the heart -, or sialic acid - case of erythrocytes - ...), of a hormonal nature (such as steroids), of a synthetic nature such as imatinib mesylate (ST571, Gleevek ®) to target kinases, specific antibodies, in particular peptides. R can be chosen from any substrate for which previous research has demonstrated the specificity of recognition. When R is a mono or a polysaccharide or a hydrophilic peptide, it may moreover provide the molecule with the water solubility necessary for its IV or IP administration. O 2004/043993
Lorsque R est une chaîne peptidique, R comporte avantageusement de 3 à 15 acides aminés, encore plus avantageusement de 3 à 10 acides aminés. Il peut également comporter un ou plusieurs résidus tyrosine permettant le suivi in vivo de la molécule de formule (I) après marquage à 125I, Les acides aminés constituant le bras espaceur X, tout comme ceux constituant la chaîne [AA3]a3-[AA ]a -[AA1] ou le groupement R sont choisis parmi les acides aminés naturels comme l'alanine, l'arginine, l'asparagine, l'acide aspartique, la cystéine, la glutamine, l'acide glutamique, la glycine, l'histidine, l'isoleucine, la leucine, la lysine, la méthionine, la phénylalanine, la proline, la serine, la thréonine, le tryptophane, la tyrosine, la valine, ou les acides aminés non naturels tels que l'hydroxyprolme, la norleucine, l'ornithine, la citruline, la cyclohexylalanine.When R is a peptide chain, R advantageously comprises from 3 to 15 amino acids, even more advantageously from 3 to 10 amino acids. It can also comprise one or more tyrosine residues allowing the in vivo monitoring of the molecule of formula (I) after labeling with 125 I, the amino acids constituting the spacer arm X, just like those constituting the chain [AA 3 ] a3 - [ AA] a - [AA 1 ] or the group R are chosen from natural amino acids such as alanine, arginine, asparagine, aspartic acid, cysteine, glutamine, glutamic acid, glycine , histidine, isoleucine, leucine, lysine, methionine, phenylalanine, proline, serine, threonine, tryptophan, tyrosine, valine, or unnatural amino acids such as hydroxyprolme , norleucine, ornithine, citruline, cyclohexylalanine.
On peut également envisager d'employer des acides Ω-aminés tels que l'acide -3-aminopropionique et l'acide 4-amino-butyrique.It is also possible to envisage using Ω-amino acids such as -3-aminopropionic acid and 4-amino-butyric acid.
Lorsque R est un peptide, la chaîne peptidique R peut être un fragment d'anticorps ou épitope ayant une affinité prononcée pour la cible biologique de PA.When R is a peptide, the R peptide chain can be an antibody fragment or epitope having a pronounced affinity for the biological target of PA.
On peut citer, par exemple, parmi les peptides utilisables dans la présente invention : la séquence RGD, connue pour son affinité pour les intégrines αVβ3.Mention may be made, for example, among the peptides which can be used in the present invention: the RGD sequence, known for its affinity for the αVβ3 integrins.
R peut également être choisi parmi les polyols ou les polyéthers, notamment les polyoxydes d'éthylène de façon à donner à la molécule de formule (I) un équilibre hydrophile/lipophile favorisant sa solubilité dans l'eau et sa pénétration dans la cellule jusqu'à la cible du principe actif PA.R can also be chosen from polyols or polyethers, in particular polyethylene oxides so as to give the molecule of formula (I) a hydrophilic / lipophilic balance promoting its solubility in water and its penetration into the cell up to to the target of the active ingredient PA.
Lorsque R est constitué d'un polyol, celui-ci est avantageusement constitué d'une chaîne alkyle comprenant de 4 à 16 atomes de carbone et de 4 à 16 groupements hydroxyle. Lorsque R est constitué d'une chaîne polyoxyde d'éthylène comme motif de solubilisation, celle-ci comprend avantageusement de 5 à 30 unités oxyde d'éthylène.When R consists of a polyol, the latter advantageously consists of an alkyl chain comprising from 4 to 16 carbon atoms and from 4 to 16 hydroxyl groups. When R consists of a polyethylene oxide chain as a solubilization unit, this advantageously comprises from 5 to 30 ethylene oxide units.
R peut notamment être choisi parmi les monosaccharides, les dérivés aminés de sucres, les polysaccharides.R can in particular be chosen from monosaccharides, amino sugar derivatives, polysaccharides.
Parmi les mono-saccharides utilisables dans la présente invention, on peut citer : le glucose, le fructose, le mannose, le galactose, le ribose. Parmi les dérivés aminés de sucres, on peut citer notamment la glucosamine. Parmi les polysaccharides utilisables dans la présente invention, on peut citer le lactose, le cellobiose ou le maltose et le lactobionamide, le saccharose. De préférence les chaînes polysaccharides utilisées dans l'invention sont des di-saccharides. La fixation de R sur l'une des extrémités de la chaîne [AA3]a3-[AA ]a2-Among the mono-saccharides which can be used in the present invention, mention may be made of: glucose, fructose, mannose, galactose, ribose. Among the amino sugar derivatives, mention may in particular be made of glucosamine. Among the polysaccharides which can be used in the present invention, mention may be made of lactose, cellobiose or maltose and lactobionamide, sucrose. Preferably the polysaccharide chains used in the invention are di-saccharides. The fixation of R on one end of the chain [AA 3 ] a3 - [AA] a2 -
[AA]] se fait par une liaison adaptée : éther, amide, carbamate, thioéther, ester, urée, uréthane, en fonction de la fonctionnalité qui peut être greffée sur R. La chaîne hydro carbonée fluorée est préférentiellement choisie parmi celles répondant à la formule A- Y' dans laquelle A représente un groupement choisi O[AA]] is done by a suitable bond: ether, amide, carbamate, thioether, ester, urea, urethane, depending on the functionality which can be grafted on R. The fluorinated hydro carbon chain is preferably chosen from those corresponding to the formula A- Y 'in which A represents a group chosen O
II parmi : _ C~ , -NH- , -O-CO-NH-, S, O et Y' représente une molécule répondant à la formule -(CH2)t-(CF )rF, dans laquelle r et t représentent deux entiers avec : 12 > r+t > 4, tels que par exemple :II among: _ C ~ , -NH-, -O-CO-NH-, S, O and Y 'represents a molecule corresponding to the formula - (CH 2 ) t - (CF) r F, in which r and t represent two integers with: 12> r + t> 4, such as for example:
-(CF2)4F ; -(CF2)5F ; -(CF2)6F ; -(CF2)7F ; -(CF2)8F ; -(CF2)9F ; - (CF2)10F ; -(CF2)„F ; -(CF2)ι2F ; -(CF2)13F ; -(CF2)14F ; -CH2-(CF2)3F ; -CH2-(CF2)4F ; - CH2-(CF2)5F ; -CH2-(CF2)6F ; -CH2-(CF2)7F ; -CH2-(CF2)8F ; -CH2-(CF2)9F ; -CH2- (CF2)ι0F ; -CH2-(CF2)„F ; -CH2-(CF2)12F ; -CH2-(CF2)13F ; ~(CH2)2-(CF2)2F ; -(CH2)2- (CF2)3F-; -(CH2)2-(CF2)4F ; -(CH2)2-(CF2)5F ; -(CH2)2-(CF2)6F ; -(CH2)2-(CF2)7F ; -(CH2)2- (CF2)8F ; -(CH2)2-(CF2)9F ; -(CH2)2-(CF2)ι0F ; -(CH2)2-(CF2)πF ; -(CH2)2-(CF2)12F ; -- (CF 2 ) 4 F; - (CF 2 ) 5 F; - (CF 2 ) 6 F; - (CF 2 ) 7 F; - (CF 2 ) 8 F; - (CF 2 ) 9 F; - (CF 2 ) 10 F; - (CF 2 ) „F; - (CF 2 ) ι 2 F; - (CF 2 ) 13 F; - (CF 2 ) 14 F; -CH 2 - (CF 2 ) 3 F; -CH 2 - (CF 2 ) 4 F; - CH 2 - (CF 2 ) 5 F; -CH 2 - (CF 2 ) 6 F; -CH 2 - (CF 2 ) 7 F; -CH 2 - (CF 2 ) 8 F; -CH 2 - (CF 2 ) 9 F; -CH 2 - (CF 2 ) ι 0 F; -CH 2 - (CF 2 ) „F; -CH 2 - (CF 2 ) 12 F; -CH 2 - (CF 2 ) 13 F; ~ (CH 2 ) 2 - (CF 2 ) 2 F; - (CH 2 ) 2 - (CF 2 ) 3 F-; - (CH 2 ) 2 - (CF 2 ) 4 F; - (CH 2 ) 2 - (CF 2 ) 5 F; - (CH 2 ) 2 - (CF 2 ) 6 F; - (CH 2 ) 2 - (CF 2 ) 7 F; - (CH 2 ) 2 - (CF 2 ) 8 F; - (CH 2 ) 2 - (CF 2 ) 9 F; - (CH 2 ) 2 - (CF 2 ) ι 0 F; - (CH 2 ) 2 - (CF 2 ) π F; - (CH 2 ) 2 - (CF 2 ) 12 F; -
(CH2)3-(CF2)ιF ; -(CH2)π-(CF2)F. De préférence t>2. De préférence 12> r>4, encore plus préférentiellement 10> r>6(CH 2 ) 3 - (CF 2 ) ιF; - (CH 2 ) π - (CF 2 ) F. Preferably t> 2. Preferably 12>r> 4, even more preferably 10>r> 6
L'invention a également pour objet toute molécule biologiquement active comportant un fragment de formule (II)The invention also relates to any biologically active molecule comprising a fragment of formula (II)
(X)x Y(X) x Y
II
(il)(he)
dans laquelle R, AAj, AA2, AA3, a , a , Y, X, x ont la même définition que dans la formule (I) ci-dessus. En effet, l'invention fournit un fragment de molécule de formule (II) à laquelle on peut accrocher par une liaison appropriée un principe actif de toute nature, comme exposé ci-dessus, de façon à favoriser la pénétration de ce principe actif dans l'organisme humain ou animal et de façon à permettre à ce principe actif d'atteindre sa cible biologique. En effet, le caractère amphiphile de la molécule favorise les passages transmembranaires et l'éventuelle présence d'un agent de reconnaissance spécifique de la cible à laquelle est associé le principe actif favorise son cheminement jusqu'à cette cible.in which R, AAj, AA 2 , AA 3 , a, a, Y, X, x have the same definition as in formula (I) above. In fact, the invention provides a fragment of a molecule of formula (II) to which an active principle of any kind can be attached by an appropriate bond, as explained above, so as to promote the penetration of this active principle into the human or animal organism and so as to allow this active principle to reach its biological target. Indeed, the amphiphilic nature of the molecule promotes transmembrane passages and the possible presence of a specific target recognition agent with which the active ingredient is associated promotes its progression to this target.
L'invention a donc également pour objet l'utilisation d'un fragment de molécule de formule (II) tel que défini ci-dessus pour favoriser la biodisponibilité d'un actif. La préparation des molécules de formule (I) est illustrée ci-dessous par des exemples correspondant à plusieurs variantes de l'invention. De façon plus générale, il est fait appel aux méthodes de protection, déprotection et couplage de la synthèse peptidique, méthodes bien connues de l'homme du métier et qui sont exposées notamment dans l'ouvrage « The peptides » Gross and Meienhofer, 3 vols, Académie Press, New York, 1979-1981.The invention therefore also relates to the use of a molecule fragment of formula (II) as defined above to promote the bioavailability of an active ingredient. The preparation of the molecules of formula (I) is illustrated below by examples corresponding to several variants of the invention. More generally, use is made of the methods of protection, deprotection and coupling of peptide synthesis, methods well known to those skilled in the art and which are exposed in particular in the work "The peptides" Gross and Meienhofer, 3 vols , Academy Press, New York, 1979-1981.
Parmi les molécules répondant à la formule (I), l'un des objets particuliers de l'invention est constitué des molécules répondant à la formule (la) ci- dessous :Among the molecules corresponding to formula (I), one of the particular objects of the invention consists of the molecules corresponding to formula (la) below:
Su — [AA-,] YSu - [AA-,] Y
(X)x PA (la)(X) x PA (la)
dans laquelle Su représente une variante du groupement R, choisie parmi un monosaccharide, un dérivé aminé de monosaccharide, un polysaccharide, un polyol ou éventuellement un polyéther tels qu'ils ont été définis plus haut;in which Su represents a variant of the group R, chosen from a monosaccharide, an amino derivative of monosaccharide, a polysaccharide, a polyol or optionally a polyether as defined above;
AAj représente un acide aminé portant une fonction acide, aminé, alcool, thiol, sur sa chaîne latérale, par l'intermédiaire de laquelle il est relié soit à (X)X-PA soit à Y; AAi est relié à Su et soit à (X)X-PA, soit à Y, par ses extrémités N- et C-terminales.AAj represents an amino acid carrying an acid, amino, alcohol, thiol function, on its side chain, via which it is linked either to (X) X -PA or to Y; AAi is connected to Su and either to (X) X -PA, or to Y, by its N- and C-terminal ends.
X, x, PA et Y ont la même définition que dans la formule (I) ci-dessus. Y est rattaché à l'extrémité aminée ou acide de AAi ou éventuellement à sa chaîne latéraleX, x, PA and Y have the same definition as in formula (I) above. Y is attached to the amino or acid end of AAi or possibly to its side chain
De façon préférentielle, l'une ou plusieurs des conditions ci-dessous sont vérifiées :Preferably, one or more of the conditions below are satisfied:
- Su représente un mono ou un polysaccharide ;- Su represents a mono or a polysaccharide;
- X représente un bras espaceur de nature peptidique comportant au moins un résidu tyrosine ; de préférence X représente la tyrosine ;- X represents a spacer arm of peptide nature comprising at least one tyrosine residue; preferably X represents tyrosine;
- AAi représente un acide aminé choisi parmi l'arginine et la lysine ;- AAi represents an amino acid chosen from arginine and lysine;
- Y représente une chaîne hydrocarbonée fluorée en C6-C12 comportant de 5 à 23 atomes de fluor, reliée à l'acide aminé AAj par une fonction -NH-.- Y represents a fluorinated C 6 -C 12 hydrocarbon chain comprising from 5 to 23 fluorine atoms, linked to the amino acid AAj by a -NH- function.
Deux exemples de composés de formule (la) sont illustrés ci-dessous et dans les exemples : a) Exemple 1 : Ciblage des sites angiogéniques.Two examples of compounds of formula (la) are illustrated below and in the examples: a) Example 1: Targeting of angiogenic sites.
L'angiogénèse est un processus biologique naturel de création de nouveaux microvaisseaux sanguins à partir de veinules préexistantes. C'est un phénomène complexe qui intervient normalement chez l'adulte seulement sous certaines conditions spécifiques telles que la cicatrisation des blessures, l'inflammation ou le développement du corpus lutheum au cours du cycle menstruel. Sous des conditions normales le processus d'angiogénèse s'arrête au bout d'un laps de temps approprié indiquant une bonne régulation des facteurs stimulateurs et inhibiteurs. Sous certaines conditions pathologiques telles que la croissance des tumeurs solides, l'arthrite rhumatoïde, le psoriasis et la rétinopathie diabétique, l'angiogénèse se développe de façon nettement moins contrôlée (« Antiangiogenic agents and their promising potential in combined therapy ». P.A. Burke, S.J. DeNardo, Crit. Rew. In Oncology/Hematology, (2001), 39, 155-171). Il y a plus de 30 ans J. Folkman émit l'hypothèse que la croissance des tumeurs solides était intimement liée au développement de l'angiogénèse, depuis de très nombreuses équipes se sont intéressées à ce phénomène et ont essayé de mettre au point des substrats susceptibles de bloquer le processus d'angiogénèse ("Tumor angiogenic therapeutic applications" J. Folkman Engl. J. Med. (1971), 285, 1182-1186 et "Tumor angiogenis past, présent and the near future". R.S. Kerbel Carcinogenesis (2000), 21, 505-521). Parmi les différentes structures testées, le thalidomide initialement prescrit aux femmes enceintes comme sédatif et responsable de problèmes de tératogénèse, s'est révélé extrêmement intéressant pour inhiber le développement vasculaire. L'idée qui a prévalu dans le travail réalisé a été de greffer le thalidomide sur le vecteur préalablement doté d'un motif radioactif tel que la tyrosine marquée à l'iode 125. Le but recherché dans cet exemple est de visualiser aisément les sites angiogéniques in vivo, donc les tumeurs solides, et de bloquer leur développement.Angiogenesis is a natural biological process of creating new blood microvessels from preexisting venules. It is a complex phenomenon that normally occurs in adults only under certain specific conditions such as wound healing, inflammation or the development of the corpus lutheum during the menstrual cycle. Under normal conditions, the angiogenesis process stops after an appropriate period of time indicating good regulation of the stimulating and inhibiting factors. Under certain pathological conditions such as the growth of solid tumors, rheumatoid arthritis, psoriasis and diabetic retinopathy, angiogenesis develops in a markedly less controlled manner ("Antiangiogenic agents and their promising potential in combined therapy". PA Burke, SJ DeNardo, Crit. Rew. In Oncology / Hematology, (2001), 39, 155-171). More than 30 years ago J. Folkman hypothesized that the growth of solid tumors was intimately linked to the development of angiogenesis, since very many teams have been interested in this phenomenon and have tried to develop substrates likely to block the angiogenesis process ("Tumor angiogenic therapeutic applications" J. Folkman Engl. J. Med. (1971), 285, 1182-1186 and "Tumor angiogenis past, present and the near future". RS Kerbel Carcinogenesis ( 2000), 21, 505-521). Among the various structures tested, the thalidomide initially prescribed to pregnant women as a sedative and responsible for teratogenesis problems, has proved to be extremely interesting for inhibiting vascular development. The idea that prevailed in the work carried out was to graft the thalidomide on the vector previously provided with a radioactive motif such as tyrosine labeled with iodine 125. The aim sought in this example is to easily visualize the angiogenic sites in vivo, so solid tumors, and block their development.
Molécule modèle AModel A molecule
Dans ce but un motif lysine central a été doté d'une chaîne fluorocarbonée sur la fonction acide primaire, d'un motif de type lactose capable d'apporter à la molécule l'hydrosolubilité nécessaire à son administration intraveineuse ou intrapéritonéale, de la tyrosine que l'on marque ensuite à l'iode 125 et sur laquelle on greffe le thalidomide préalablement doté d'une fonction acide réactive en position 3.For this purpose, a central lysine motif has been provided with a fluorocarbon chain on the primary acid function, of a lactose type motif capable to provide the molecule with the water solubility necessary for its intravenous or intraperitoneal administration, tyrosine which is then marked with iodine 125 and onto which the thalidomide is grafted beforehand endowed with a reactive acid function in position 3.
Selon une variante préférée de l'invention, dans les molécules répondant à la formule (la) le principe actif est choisi parmi les molécules susceptibles de bloquer le processus d'angiogénèse, notamment le thalidomide. b) Exemple 2 : Vectorisation de spins-trapsAccording to a preferred variant of the invention, in the molecules corresponding to formula (la) the active principle is chosen from molecules capable of blocking the angiogenesis process, in particular thalidomide. b) Example 2: Vectorization of spin-traps
Les cytopathies mitochondriales regroupent une grande variété de maladies dont le dénominateur commun est un déficit de la chaîne respiratoire mitochondriale. Du fait de la présence ubiquitaire des mitochondries dans l'organisme, ce dysfonctionnement peut affecter n'importe quel organe. L'atteinte peut être isolée ou, au contraire, pluriviscérale ayant alors généralement une dominante neuromusculaire. Il n'existe actuellement aucun traitement pour ces maladies qui peuvent être classées dans le cadre des "maladies orphelines". II est néanmoins désormais clair que les mitochondries étant dans la cellule le lieu privilégié de la production des radicaux libres, les déficits de la chaîne respiratoire sont très fréquemment associés à une surproduction de radicaux libres avec pour conséquence une mort cellulaire accélérée dans les tissus atteints. Les travaux récents effectués à l'hôpital Necker dans l'équipe du Dr P. Rustin (" Increased apoptosis in vivo in cells lacking mitochondrial DNA gène expression" Wang J, Silva JP, Gustafsson C, Rustin P, Larsson NG. Proc Natl Acad Sci USA (2001) (in press)) ont permis de montrer sur une série de cellules humaines en culture l'importance de cette production des radicaux libres de l'oxygène. Ces cultures cellulaires représentent tous les types de déficits affectant les différents complexes de la chaîne respiratoire connus chez l'homme Elles ont été caractérisées tant du point de vue du déficit touchant la chaîne respiratoire que du point de vue de la production des radicaux libres et de ses conséquences sur la survie cellulaire. Cette collection de cellules représente un outil irremplaçable pour permettre d'étudier l'efficacité de toute molécule ayant pour cible les réactions radicalaires associées aux déficits de la chaîne respiratoire. L'identification récente dans notre équipe d'une molécule "spin-trap" capable de bloquer la mort cellulaire dans des modèles cellulaires d'apoptose induite par les radicaux libres produits par la chaîne respiratoire, nous a donné une base pour développer des molécules voisines présentant une efficacité encore améliorée (" Superoxide-induced massive apoptosis in cultured skin fibroblasts harboring the Neuro génie Ataxia Retinitis Pigmentosa (NARP) mutation in the ATPase-6 gène of the mitochondrial DNA". Geromel V, Kadhom N, Ceballos-Picot I, Ouari O, Polidori A, Munnich A, Rôtig A, Rustin P. Hum Mol Genêt (2001) (in press)) Le but poursuivi ici a été d'affiner et de simplifier la structure de ces substrats tout en conservant leur activité biologique afin de mettre au point un processus synthétique aisément adaptable au stade industriel. Les tests ont été réalisés sur plusieurs modèles cellulaires : des cultures cellulaires présentant un déficit de la chaîne respiratoire mitochondriale (fibroblastes en culture), des cocultures neurones/cellules musculaires soumises à l'action de radicaux libres et enfin sur des cellules extraites de peaux ayant subi une brûlure au 3eme degré.Mitochondrial cytopathies include a wide variety of diseases, the common denominator of which is a deficit in the mitochondrial respiratory chain. Due to the ubiquitous presence of mitochondria in the body, this dysfunction can affect any organ. The involvement can be isolated or, on the contrary, multi-organ then generally having a dominant neuromuscular. There is currently no treatment for these diseases which can be classified as "orphan diseases". It is nevertheless now clear that since mitochondria are the privileged place in the cell for the production of free radicals, deficits in the respiratory chain are very often associated with an overproduction of free radicals, resulting in accelerated cell death in the affected tissues. Recent work done at Necker Hospital in the team of Dr P. Rustin ("Increased apoptosis in vivo in cells lacking mitochondrial DNA gene expression" Wang J, Silva JP, Gustafsson C, Rustin P, Larsson NG. Proc Natl Acad Sci USA (2001) (in press)) have shown the importance of this production of free oxygen radicals on a series of human cells in culture. These cell cultures represent all types of deficits affecting the various complexes of the respiratory chain known in humans. They have been characterized both from the point of view of the deficit affecting the respiratory chain and from the point of view of the production of free radicals and its consequences on cell survival. This collection of cells represents an irreplaceable tool for studying the effectiveness of any molecule targeting radical reactions associated with deficits in the respiratory chain. The recent identification in our team of a “spin-trap” molecule capable of blocking cell death in cellular models of apoptosis induced by free radicals produced by the respiratory chain, has given us a basis for developing neighboring molecules with even improved efficacy ("Superoxide-induced massive apoptosis in cultured skin fibroblasts harboring the Neuro genius Ataxia Retinitis Pigmentosa (NARP) mutation in the ATPase-6 gene of the mitochondrial DNA". Geromel V, Kadhom N, Ceballos-Picot I, Ouari O, Polidori A, Munnich A, Rôtig A, Rustin P. Hum Mol Genêt (2001) (in press)) The aim here was to refine and simplify the structure of these substrates while retaining their activity biological in order to develop a synthetic process easily adaptable to the industrial stage. The tests were carried out on several cell models: cell cultures with a deficit in the mitochondrial respiratory chain (fibroblasts in culture), neuron / muscle cell cocultures subjected to the action of free radicals and finally on cells extracted from skins with suffered a burn 3rd degree.
La finalité des recherches entreprises a été de disposer de pièges à radicaux libres utilisables sur le plan clinique pour traiter les phénomènes d'apoptose et plus généralement de mort cellulaire imputables à la surproduction de radicaux libres. Les résultats extrêmement encourageants obtenus sur ces types cellulaires justifient pleinement le développement de ces modèles de vecteurs amphiphiles.The aim of the research undertaken was to have free radical scavengers that can be used clinically to treat the phenomena of apoptosis and more generally of cell death attributable to the overproduction of free radicals. The extremely encouraging results obtained on these cell types fully justify the development of these models of amphiphilic vectors.
La molécule E, bâtie sur le modèle précédent, a été dotée dans ce cas particulier d'un spin-trap bien connu et efficace qui contient un dérivé de la PBN.The molecule E, built on the previous model, was endowed in this particular case with a well-known and effective spin-trap which contains a derivative of PBN.
Molécule E Les premiers tests ont été effectués in vitro à l'hôpital Necker sur des fibroblastes issus d'une biopsie de peau d'enfant présentant la mutation NARP. De même que le produit TA 1 PBN ( "Superoxide-induced massive apoptosis in cultured skin fibroblasts harboring the Neurogenic Ataxia Retinitis Pigmentosa (NARP) mutation in the ATPase-6 gène of the mitochondrial DNA". Geromel V, Kadhom N, Ceballos-Picot I, Ouari O, Polidori A, Munnich A, Rôtig A, Rustin P. Hum Mol Genêt (2001) (in press) et "Synthesis of a glycolipidic amphiphile nitrone as a new spin trap for biological applications". O. Ouari, A. Polidori, F. Chalier, P. Tordo, B. Pucci. J. Org. Chem., (1999), 64, 3554-3556). précédemment testé, la molécule E présente un pouvoir de protection des cellules et inhibe le processus d'apoptose. Aucune toxicité n'a été mesurée sur ce type de produit sur l'ensemble des cellules mises en culture. Ces résultats valident une fois de plus l'intérêt d'un tel concept de vectorisation et montrent clairement ses potentialités dans des domaines d'application tout à fait différents.Molecule E The first tests were carried out in vitro at Necker Hospital on fibroblasts from a biopsy of the skin of children with the NARP mutation. As well as the product TA 1 PBN ("Superoxide-induced massive apoptosis in cultured skin fibroblasts harboring the Neurogenic Ataxia Retinitis Pigmentosa (NARP) mutation in the ATPase-6 gene of the mitochondrial DNA". Geromel V, Kadhom N, Ceballos-Picot I, Ouari O, Polidori A, Munnich A, Rôtig A, Rustin P. Hum Mol Genêt (2001) (in press) and "Synthesis of a glycolipidic amphiphile nitrone as a new spin trap for biological applications". O. Ouari, A Polidori, F. Chalier, P. Tordo, B. Pucci. J. Org. Chem., (1999), 64, 3554-3556). previously tested, molecule E has a protective power for cells and inhibits the process of apoptosis. No toxicity was measured on this type of product on all of the cells cultured. These results once again validate the interest of such a concept of vectorization and clearly show its potential in entirely different fields of application.
Selon une autre variante préférée de l'invention, dans les molécules répondant à la formule (la), le principe actif est choisi parmi les agents anti-radicalaires, notamment les dérivés du N-benzylidène tertiobutyl aminé oxyde.According to another preferred variant of the invention, in the molecules corresponding to formula (la), the active principle is chosen from anti-radical agents, in particular derivatives of N-benzylidene tert-butyl amine oxide.
Parmi les molécules répondant à la formule (II), un autre objet particulier de l'invention est constitué des molécules répondant à la formule (Ib) :Among the molecules corresponding to formula (II), another particular object of the invention consists of molecules corresponding to formula (Ib):
Pep-[AAι]-YPEP [AAι] -Y
(Ib) dans laquelle Y et AAi ont la même définition que dans la formule (I) ci- dessus, notamment que dans la formule (la), Pep, qui est une variante de R, représente une chaîne peptidique comportant de 2 à 10, préférentiellement de 4 à 6 acides aminés. Avantageusement, Pep ou AAi comportent au moins un motif tyrosine.(Ib) in which Y and AAi have the same definition as in formula (I) above, in particular that in formula (la), Pep, which is a variant of R, represents a peptide chain comprising from 2 to 10 , preferably from 4 to 6 amino acids. Advantageously, Pep or AAi comprise at least one tyrosine motif.
De façon avantageuse, Pep est choisi pour son affinité pour une cible biologique donnée, notamment cette chaîne peptidique peut comporter une séquence RGD (argine-glycine-acide aspartique) dont on sait qu'elle est reconnue par les intégrines αVβ3. Un autre objet de l'invention est constitué des molécules répondant à la formule (le) :Advantageously, Pep is chosen for its affinity for a given biological target, in particular this peptide chain can comprise an RGD (argine-glycine-aspartic acid) sequence which is known to be recognized by the αVβ3 integrins. Another object of the invention consists of molecules corresponding to formula (Ie):
Pep-IAA.,] — YPep-IAA.,] - Y
(X)x PA (le)(X) x PA (the)
dans laquelle x, X, PA, AAi et Y ont la même définition que dans la formule (I) ci-dessus ; notamment les molécules dans lesquelles x, X, PA, AAi et Y ont la même définition que dans la formule (la) ci-dessus ; Pep a la même définition que dans la formule (Ib) ci-dessus.in which x, X, PA, AAi and Y have the same definition as in formula (I) above; in particular the molecules in which x, X, PA, AAi and Y have the same definition as in formula (la) above; Pep has the same definition as in formula (Ib) above.
Préférentiellement, une ou plusieurs des conditions ci-dessous sont vérifiées : - Pep est un peptide reconnu par les intégrines αVβ3 et PA est un agent antimitotique ;Preferably, one or more of the conditions below are verified: - Pep is a peptide recognized by the integrins αVβ3 and PA is an antimitotic agent;
- X, Pep ou AAi comporte au moins un résidu tyrosine, - X représente une chaîne de 1 à 3 acides aminés,- X, Pep or AAi contains at least one tyrosine residue, - X represents a chain of 1 to 3 amino acids,
Un exemple de composés de formule (Ib) et (le) est illustré ci-dessous et dans la partie expérimentale : c) Exemple 3 : Thérapie anticancéreuse. A l'heure actuelle, aucune technique n'a permis de mettre en évidence un critère de différenciation efficace et donc de ciblage adéquat des cellules tumorales et des cellules saines. Comme on l'a vu cependant, la croissance d'une tumeur cancéreuse est étroitement liée à son taux de vascularisation et donc au phénomène d'angiogénèse qui l'accompagne. Ces observations ont amené la communauté scientifique à mettre au point des substrats, comme on l'a vu, aptes à inhiber l' angiogénèse et donc à bloquer par cet intermédiaire le développement des tumeurs. Il est en effet maintenant couramment admis que des protéines membranaires portées par les cellules angiogéniques et nommées intégrines participent activement au processus de prolifération de ces cellules. Plus particulièrement les intégrines αVβ3 reconnaissent une séquence peptidique particulière, la séquence RGD (arginine-glycine-acide aspartique). Le greffage de ce motif sur le vecteur proposé doit donc lui apporter une capacité de ciblage spécifique des sites d'angiogénèse et donc in fine des sites tumoraux. L'ajout sur ce même vecteur d'un agent antimitotique devrait permettre la destruction sélective des cellules cancéreuses. Dans cette optique la molécule B a été préparée dans un premier temps pour vérifier l'innocuité du vecteur et déterminer sa spécificité. Afin de donner un plus grand degré de liberté à l'agent de ciblage celui-ci a été greffé sur la lysine centrale par l'intermédiaire d'un acide aminé hydrophobe, la serine. La molécule est hydrosoluble et présente un caractère amphiphile. An example of compounds of formula (Ib) and (Ic) is illustrated below and in the experimental part: c) Example 3: Anti-cancer therapy. Currently, no technique has made it possible to demonstrate an effective differentiation criterion and therefore adequate targeting of tumor cells and healthy cells. As we have seen, however, the growth of a cancerous tumor is closely linked to its rate of vascularization and therefore to the phenomenon of angiogenesis which accompanies it. These observations have led the scientific community to develop substrates, as we have seen, capable of inhibiting angiogenesis and therefore blocking the development of tumors through this medium. It is in fact now widely accepted that membrane proteins carried by angiogenic cells and called integrins participate actively in the proliferation process of these cells. More particularly, the αVβ3 integrins recognize a particular peptide sequence, the RGD (arginine-glycine-aspartic acid) sequence. The grafting of this motif onto the proposed vector must therefore provide it with a specific targeting capacity for angiogenesis sites and therefore ultimately for tumor sites. The addition of an antimitotic agent to this same vector should allow the selective destruction of cancer cells. With this in mind, molecule B was first prepared to verify the safety of the vector and determine its specificity. In order to give the targeting agent a greater degree of freedom, it has been grafted onto the central lysine via a hydrophobic amino acid, serine. The molecule is water-soluble and has an amphiphilic nature.
Structure de la molécule B Compte tenu de ces résultats positifs, de nouveaux vecteurs porteurs de la séquence peptidique RGD et d'un agent antimitotique tel que le melphalan (molécule D) ou l'Ara-C (Molécules C et F)ont alors été synthétisés et sont en cours d'analyse pour leur activité anticancéreuse.Structure of molecule B Given these positive results, new vectors carrying the RGD peptide sequence and an antimitotic agent such as melphalan (molecule D) or Ara-C (molecules C and F) were then synthesized and are being analyzed for their anticancer activity.
Molécule C (Ara-C) Molecule C (Ara-C)
Molécule D (Melphalan)Molecule D (Melphalan)
Molécule FMolecule F
Structure des vecteurs C, F et D Les agents antimitotiques choisis ne sont ici que des modèles et illustrent simplement la commodité d'introduction et de transport d'un agent antimitotique donné. Ce type de vecteur peut et sera également utilisé comme agent de vectorisation de substrats tels que l'adryamicine (dans ce cas précis la molécule (le) comporte un fragment peptidique, soit en X soit en Pep, de type Gly-Phe-Leu-Gly), de 5-Fu (5-Fluorouracile), de Melphalan, d'inhibiteurs de tyrosine kinase tel que l'imatinib mésylate (STI571, Glivec®) par exemple ou plus généralement de tout agent anticancéreux apte à être greffé sur ces supports. La présence de la chaîne hydrophobe fluorocarbonée favorise le passage transmembranaire. Le relargage du principe actif est assuré par hydrolyse des liaisons peptidiques par l'intermédiaire des enzymes cytoplasmiques adaptées.Structure of vectors C, F and D The antimitotic agents chosen are only models here and simply illustrate the convenience of introducing and transporting a given antimitotic agent. This type of vector can and will also be used as a vectorizing agent for substrates such as adryamicin (in this precise case the molecule (it) comprises a peptide fragment, either in X or in Pep, of Gly-Phe-Leu- type. Gly), 5-Fu (5-Fluorouracil), Melphalan, tyrosine kinase inhibitors such as imatinib mesylate (STI571, Glivec®) for example or more generally of any anticancer agent capable of being grafted on these supports . The presence of the hydrophobic fluorocarbon chain promotes the passage transmembrane. The release of the active principle is ensured by hydrolysis of the peptide bonds via suitable cytoplasmic enzymes.
Les premiers résultats in vitro déjà obtenus valident pleinement ce concept. L'invention a en outre pour objet l'utilisation des composés répondant à la formule (I) telle que définie ci-dessus pour la préparation d'un médicament.The first in vitro results already obtained fully validate this concept. A subject of the invention is also the use of the compounds corresponding to formula (I) as defined above for the preparation of a medicament.
En effet, il a été démontré que les composés répondant à la formule (I) selon la présente invention étaient dotés d'une biodisponibilité et d'une capacité à atteindre leur cible biologique supérieure ou égale à celle des composés de l'art antérieur. Cette propriété permet d'envisager l'utilisation des molécules de l'invention dans des domaines variées :Indeed, it has been demonstrated that the compounds corresponding to formula (I) according to the present invention were endowed with a bioavailability and an ability to reach their biological target greater than or equal to that of the compounds of the prior art. This property makes it possible to envisage the use of the molecules of the invention in various fields:
- dans le domaine thérapeutique, les produits de l'invention peuvent être employés pour la prévention et/ou le traitement de toutes sortes de pathologies, notamment les différentes formes de cancer, les pathologies liées au stress oxydatif et à la formation des espèces radicalaires oxygénées.- in the therapeutic field, the products of the invention can be used for the prevention and / or treatment of all kinds of pathologies, in particular the various forms of cancer, pathologies linked to oxidative stress and to the formation of oxygenated radical species .
L'invention a par conséquent pour objet les compositions pharmaceutiques comprenant un composé selon l'invention dans un support pharmaceutiquement acceptable.The invention therefore relates to pharmaceutical compositions comprising a compound according to the invention in a pharmaceutically acceptable carrier.
Elle a également pour objet l'utilisation d'un composé de formule A, C, D ou F pour la préparation d'une composition pharmaceutique destinée à prévenir et/ou traiter le cancer.It also relates to the use of a compound of formula A, C, D or F for the preparation of a pharmaceutical composition intended to prevent and / or treat cancer.
Elle a également pour objet l'utilisation d'un composé de formule B pour la préparation d'une composition pharmaceutique destinée à détecter la présence de cellules cancéreuses. Elle a également pour objet l'utilisation d'un composé de formule E pour la préparation d'une composition pharmaceutique destinée à prévenir et/ou traiter les pathologies liées au stress oxydatif et à la formation des espèces radicalaires oxygénées, notamment les maladies immunitaires et inflammatoires, le syndrome d'ischémie- reperfusion, l'artériosclérose, la maladie d'Alzeimer, la maladie de Parkinson, les lésions dues aux radiations UV et ionisantes, certains cancers tels que les mélanomes, le vieillissement cellulaire.It also relates to the use of a compound of formula B for the preparation of a pharmaceutical composition intended for detecting the presence of cancer cells. It also relates to the use of a compound of formula E for the preparation of a pharmaceutical composition intended to prevent and / or treat pathologies linked to oxidative stress and to the formation of oxygenated radical species, in particular immune and inflammatory, ischemia-reperfusion syndrome, arteriosclerosis, Alzeimer disease, Parkinson's disease, lesions due to UV and ionizing radiation, certain cancers such as melanomas, cell aging.
Les produits de l'invention peuvent être administrés par toute voie connue de l'homme du métier, notamment par injection intraveineuse ou intramusculaire, par administration orale ou cutanée. Ils peuvent être utilisés seuls ou en association avec d'autres actifs. Leur dosage et la quantité administrée quotidiennement sont adaptés en fonction de l'activité mesurée pour la molécule concernée et en fonction du poids du patient. - dans le domaine cosmétique, le composé de formule E peut être utilisé pour prévenir et/ou traiter les effets du vieillissement.The products of the invention can be administered by any route known to a person skilled in the art, in particular by intravenous or intramuscular injection, by oral or cutaneous administration. They can be used alone or in combination with other active ingredients. Their dosage and the amount administered daily are adapted according to the activity measured for the molecule concerned and according to the weight of the patient. - in the cosmetic field, the compound of formula E can be used to prevent and / or treat the effects of aging.
L'invention a donc également pour objet une composition cosmétique comprenant un composé de formule E dans un support cosmétiquement acceptable. Ladite composition peut être destinée à une application sur la peau ou sur les phanères (ongles, cheveux).The invention therefore also relates to a cosmetic composition comprising a compound of formula E in a cosmetically acceptable carrier. Said composition can be intended for application to the skin or to the integuments (nails, hair).
Elle peut se présenter sous forme d'une solution aqueuse ou huileuse, d'une émulsion eau-dans-l'huile ou huile-dans-l'eau, d'une émulsion triple, d'un onguent.It can be in the form of an aqueous or oily solution, a water-in-oil or oil-in-water emulsion, a triple emulsion, an ointment.
Les composés de l'invention peuvent être introduits dans toute composition cosmétique pour laquelle une activité antiradicalaire est recherchée : une crème de soin cutanée, un produit de protection solaire, un démaquillant, un masque pour la peau ou les cheveux, un shampoing, un produit de maquillage tel qu'un rouge à lèvres, un fard, un fond de teint, un vernis à ongles, etc..The compounds of the invention can be introduced into any cosmetic composition for which an anti-free radical activity is sought: a skin care cream, a sun protection product, a makeup remover, a mask for the skin or the hair, a shampoo, a product make-up such as lipstick, make-up, foundation, nail polish, etc.
Du fait de leur solubilité dans des milieux variés, les composés de l'invention sont faciles à mettre en œuvre et peuvent être employés dans des conditions très diverses.Due to their solubility in various media, the compounds of the invention are easy to use and can be used under very diverse conditions.
PARTIE EXPERIMENTALEEXPERIMENTAL PART
1/ Exemple 1 :1 / Example 1:
A- Préparation de la molécule A 2g (4mmol) de composé azoture de 1H,1H,2H,2H perfluorodécane dissous dans 30ml de méthanol anhydre, sont soumis à une hydrogénation en présence de palladium sur charbon. Après 4 heures de réaction, le milieu est filtré sur célite et le solvant évaporé sous pression réduite. L'aminé correspondante 2 est isolée sans purification (rendement quantitatif). Le composé 2 est remis en réaction dans 30 ml de dichlorométhane en présence de 2.2g (4mmol) de Boc-Lys-(Z)- OPhF5 3. Le pH de la solution est amené à 8 par ajout de quelques gouttes de DIEA.A- Preparation of the molecule A 2g (4mmol) of azide compound of 1H, 1H, 2H, 2H perfluorodecane dissolved in 30ml of anhydrous methanol, are subjected to hydrogenation in the presence of palladium on carbon. After 4 hours of reaction, the medium is filtered through Celite and the solvent evaporated under reduced pressure. The corresponding amine 2 is isolated without purification (quantitative yield). Compound 2 is reacted in 30 ml of dichloromethane in the presence of 2.2g (4mmol) of Boc-Lys- (Z) - OPhF 5 3. The pH of the solution is brought to 8 by adding a few drops of DIEA.
Après 16 heures d'agitation à température ambiante, le milieu réactionnel est concentré sous pression réduite. Le milieu est purifié par chromato graphie sur colonne de gel de siliceAfter 16 hours of stirring at room temperature, the reaction medium is concentrated under reduced pressure. The medium is purified by chromatography on a column of silica gel
(éluant : acétate d'éthyle/cyclohexane 3/7). Par cristallisation dans un mélange acétate d'éthyle/hexane, le composé fluoré 4 (2.68 g; 3.24mmol; 80%) est obtenu sous forme d'une poudre blanche. (eluent: ethyl acetate / cyclohexane 3/7). By crystallization from an ethyl acetate / hexane mixture, the fluorinated compound 4 (2.68 g; 3.24 mmol; 80%) is obtained in the form of a white powder.
4 rf : 0.36 dans cyclohexane/acétate d'éthyle 5/5.4 rf: 0.36 in cyclohexane / ethyl acetate 5/5.
[α]D= -8.2(c:l;CHCl3). Point de fusion : 86.5-88.3°C[α] D = -8.2 (c: l; CHCl 3 ). Melting point: 86.5-88.3 ° C
RMN 1H(250MHZ, CDC13) : δ 7.36 (5H, s, CH arom), 6.85 (1H, m, NH amide), 5.27 (lH,d, J-6.65Hz, NH uréthane), 5.11 (2H, s, CH2O), 4.99 (1H, t, J=5.8Hz, NH uréthane), 4.06 (1H, m, CHCO), 3.58 (2H, dd, J=6.5Hz, CH2NH), 3.20 (2H, dd, J=6.2Hz, CH2NH), 2.35 (2H, m, CHbCFz), 2.0 à 1.0 (15H, m, CH3 du Boc et CH2 Lys). RMN 13C(62.86MHZ, CDC13) : δ 172.5 (CONH), 156.7 ; 155.91H NMR (250MHZ, CDC1 3 ): δ 7.36 (5H, s, CH arom), 6.85 (1H, m, NH amide), 5.27 (1H, d, J-6.65Hz, NH urethane), 5.11 (2H, s , CH 2 O), 4.99 (1H, t, J = 5.8Hz, NH urethane), 4.06 (1H, m, CHCO), 3.58 (2H, dd, J = 6.5Hz, CH 2 NH), 3.20 (2H, dd, J = 6.2Hz, CH 2 NH), 2.35 (2H, m, CHbCFz), 2.0 to 1.0 (15H, m, CH 3 du Boc and CH 2 Lys). 13 C NMR (62.86MHZ, CDC1 3 ): δ 172.5 (CONH), 156.7; 155.9
(OCONH), 136.6 (CIV arom.), 128.5 ; 128.1 (CH arom.), 80.4 (CIV), 66.7 (CH2OCONH), 54.4 (CHCO), 40.2 (CH2NH), 31.9 (CH2NH), 31.3 (CH2), 30.7(CH2Rf), 29.5 (CH2), 28.2 (CH3 du tert butyl), 22.4.(CH2).(OCONH), 136.6 (C IV arom.), 128.5; 128.1 (CH arom.), 80.4 (C IV ), 66.7 (CH 2 OCONH), 54.4 (CHCO), 40.2 (CH 2 NH), 31.9 (CH 2 NH), 31.3 (CH 2 ), 30.7 (CH 2 Rf ), 29.5 (CH 2 ), 28.2 (CH 3 of tert-butyl), 22.4. (CH 2 ).
RMN 19F(235MHZ, CDC13) : δ -80.7 (3F, s, CF3), -113.9 (2F, s, CF2CH2), -121.9 (6F, s, (CF2)3), -122.7(2F, s, CF2),-123.5 (2F, s, CF2), -126.6 (2F, s, CF2CF3). 19 F NMR (235MHZ, CDC1 3 ): δ -80.7 (3F, s, CF 3 ), -113.9 (2F, s, CF 2 CH 2 ), -121.9 (6F, s, (CF 2 ) 3 ), - 122.7 (2F, s, CF 2 ), - 123.5 (2F, s, CF 2 ), -126.6 (2F, s, CF 2 CF 3 ).
0.5g (0.6mmol) de composé 4 dissout dans 30 ml de dioxane subit une hydrogénation en présence de palladium sur charbon.0.5g (0.6mmol) of compound 4 dissolved in 30 ml of dioxane undergoes hydrogenation in the presence of palladium on carbon.
Après 15 heures de réaction, le milieu est filtré sur célite et le solvant évaporé sous pression réduite. L'amine 5 obtenue est mise en réaction dans du dichlorométhane en présence de 0.21g (0.44mmol) de lactobionolactone fraîchement préparée et de la DIEA est ajoutée au milieu afin d'amener le pH de la solution à 8.After 15 hours of reaction, the medium is filtered through Celite and the solvent evaporated under reduced pressure. The amine 5 obtained is reacted in dichloromethane in the presence of 0.21 g (0.44 mmol) of freshly prepared lactobionolactone and DIEA is added to the medium in order to bring the pH of the solution to 8.
Après disparition totale de l'amine 5 (CCM), le milieu réactionnel est concentré sous pression réduite. 40 mL d'un mélange anhydride acétique/pyridine 1 :1 sont additionnés à froid sur le brut réactionnel. L'agitation est maintenue à température ambiante pendant 18 heures puis le mélange réactionnel est jeté sur 150 mL d'HCl IN. La phase aqueuse est extraite par 3 fois avec 50 mL de dichlorométhane. La phase organique est respectivement lavée à deux reprises par 60 mL d'HCl IN, puis par 60 mL de saumure et enfin séchée sur Na2SO4. Les solvants sont éliminés sous pression réduite et le brut est purifié par chromatographie flash sur gel de silice (éluant : acétate d'éthyle/cyclohexane 6/4 puis 7/3) pour conduire au composé 6 (0.55 g; 0.39mmol; 65%) sous forme de poudre blanche. After complete disappearance of amine 5 (TLC), the reaction medium is concentrated under reduced pressure. 40 ml of a 1: 1 acetic anhydride / pyridine mixture are added cold to the reaction crude. Stirring is maintained at room temperature for 18 hours then the reaction mixture is poured onto 150 ml of IN HCl. The aqueous phase is extracted 3 times with 50 ml of dichloromethane. The organic phase is respectively washed twice with 60 ml of IN HCl, then with 60 ml of brine and finally dried over Na 2 SO 4 . The solvents are removed under reduced pressure and the crude is purified by flash chromatography on silica gel (eluent: ethyl acetate / cyclohexane 6/4 then 7/3) to yield compound 6 (0.55 g; 0.39mmol; 65% ) as a white powder.
rf : 0.22 dans acétate d'éthyle/cyclohexane 6/4 [α]D = + 2.9 (c, 1, CHC13) Point de fusion : 65 °C (début de décomposition)rf: 0.22 in ethyl acetate / cyclohexane 6/4 [α] D = + 2.9 (c, 1, CHC1 3 ) Melting point: 65 ° C (start of decomposition)
RMN 1H (250 MHz, DMSO-d6) : δ 8.07 (2H, m, NH), 7.34 (5H, s, CH arom.), 7.01 (1H, m, NH), 5.47 (1H, m , H du sucre),5.30 à 5.10 (2H, m, H du sucre), 5.02 à 4.79 (5H, m, CH2-O et H du sucre), 4.50 à 3.90 (8H, m, H du sucre et CHα de la lysine),1H NMR (250 MHz, DMSO-d6): δ 8.07 (2H, m, NH), 7.34 (5H, s, CH arom.), 7.01 (1H, m, NH), 5.47 (1H, m, H sugar ), 5.30 to 5.10 (2H, m, H of sugar), 5.02 to 4.79 (5H, m, CH 2 -O and H of sugar), 4.50 to 3.90 (8H, m, H of sugar and CHα of lysine) ,
3.38 (2H, m, CH2-NH), 2.97 (2H, m, CH2-NH), 2.30 (2H, m, CH2-CF2), 2.14, 2.09, 2.04, 2.01, 1.96, 1.92 (24H, 6s, CH3 des acétyls), 1.65 à 1.10 (6H, m, CH2 de la lysine)3.38 (2H, m, CH 2 -NH), 2.97 (2H, m, CH 2 -NH), 2.30 (2H, m, CH 2 -CF 2 ), 2.14, 2.09, 2.04, 2.01, 1.96, 1.92 (24H , 6s, CH 3 of acetyls), 1.65 to 1.10 (6H, m, CH 2 of lysine)
RMN 13C (62.86 MHz, CDC13) : δ 171.3 (CO-NH), 170.5, 170.5, 170.1, 170.0, 170.0, 169.7, 169.2 (7s, CO-O), 167.9 (CO-NH), 156.7 (O-CO-NH), 136.7 (CIV arom.), 128.4, 128.0, 127.9, (CH arom.), 101.6 (CH-1'), 77.9 (CH-4), 72.7 (CH-2), 71.1, 70.9 (CH-5' et CH-3'), 70.0 (CH-5), 69.4 (CH-3), 69.0 (CH-2'), 66.9 (CH-4'), 66.5 (CH2- O), 61.6, 61.0 (CH2-6 et CH2-6'), 52.6 (CH-CO), 40.4 (CH2-NH), 31.9 (CH2-NH), 31.2 (CH2-), 30.5 (CH2-Rf), 29.1 (CH2-), 22.2 (CH2-), 20.6, 20.5, 20.4, 20.4, 20.3 (CH3 des acetyls)NMR 13 C (62.86 MHz, CDC1 3 ): δ 171.3 (CO-NH), 170.5, 170.5, 170.1, 170.0, 170.0, 169.7, 169.2 (7s, CO-O), 167.9 (CO-NH), 156.7 (O -CO-NH), 136.7 (C IV arom.), 128.4, 128.0, 127.9, (CH arom.), 101.6 (CH-1 '), 77.9 (CH-4), 72.7 (CH-2), 71.1, 70.9 (CH-5 'and CH-3'), 70.0 (CH-5), 69.4 (CH-3), 69.0 (CH-2 '), 66.9 (CH-4'), 66.5 (CH 2 - O) , 61.6, 61.0 (CH 2 -6 and CH 2 -6 '), 52.6 (CH-CO), 40.4 (CH 2 -NH), 31.9 (CH 2 -NH), 31.2 (CH 2 -), 30.5 (CH 2 -Rf), 29.1 (CH 2 -), 22.2 (CH 2 -), 20.6, 20.5, 20.4, 20.4, 20.3 (CH 3 of acetyls)
RMN 19F (235 MHz, DMSO-d6) : δ -80.2 (3F,s, CF3), -113.0 (2F, s,CF2- CH2), -121.4 (6F,s, 3CF2), -122.2 (2F, s, CF2), -123.0 (2F, s, CF2), -125.4 (2F, s, CF2- CH2). 19 F NMR (235 MHz, DMSO-d6): δ -80.2 (3F, s, CF 3 ), -113.0 (2F, s, CF 2 - CH 2 ), -121.4 (6F, s, 3CF 2 ), - 122.2 (2F, s, CF 2 ), -123.0 (2F, s, CF 2 ), -125.4 (2F, s, CF 2 - CH 2 ).
La déprotection du groupe benzyloxycarbonyle du composé 6 se déroule selon le protocole expérimental déjà décrit lors du passage du composé 4 au composé 5. A partir de 0.5 g (0.36mmol) de composé 6, on obtient l'amine 7 avec un rendement quantitatif. L'amine obtenue 7 est mise en réaction dans 30 ml de dichlorométhane en présence de 0.21g (0.44mmol) de Z-Tyr-OPhF5 (composé 8) et de la DIEA est ajoutée afin d'amener le pH de la solution à 8.The deprotection of the benzyloxycarbonyl group of compound 6 takes place according to the experimental protocol already described during the transition from compound 4 to compound 5. From 0.5 g (0.36 mmol) of compound 6, amine 7 is obtained with a quantitative yield. The amine obtained 7 is reacted in 30 ml of dichloromethane in the presence of 0.21g (0.44mmol) of Z-Tyr-OPhF 5 (compound 8) and DIEA is added in order to bring the pH of the solution to 8.
Après disparition totale de l'amine 7 (CCM), le milieu réactionnel est concentré sous pression réduite et purifié par chromatographie sur colonne gel de silice (éluant : acétate d'éthyle 7/cyclohexane3). Le composé 9 (0.32 g; 0.21mmol; 58%>) est obtenu sous forme d'une poudre blanche. After complete disappearance of amine 7 (TLC), the reaction medium is concentrated under reduced pressure and purified by chromatography on a silica gel column (eluent: ethyl acetate 7 / cyclohexane3). Compound 9 (0.32 g; 0.21mmol; 58%>) is obtained in the form of a white powder.
rf : 0.35 dans acétate d'éthyle7/cyclohexane3.rf: 0.35 in ethyl acetate7 / cyclohexane3.
[α]D = + 1.5 (c: l;CHCl3). Point de fusion : 37.6°C (début de décomposition).[α] D = + 1.5 (c: l; CHCl 3 ). Melting point: 37.6 ° C (start of decomposition).
RMN !H (250 MHz, DMSO-d6) : δ 8.01 (2H, m, NH), 7.71 (1H, m, NH), 7.21 (5H, s, CH arom.), 7.05 (3H, m, NH, 2H arom tyr), 6.89 (2H, d, J= 8.29Hz 2H arom tyr), 5.22 (1H, d , J=5.35Hz H du sucre), 5.02 (2H, s, CH2Ph), 4.99 (2H, s, CH2Ph), 4.92 (2H, m, H du sucre), 4.70 à 4.55 (5H, m, H du sucre), 4.01 à 3.75 (9H, m, CHα tyr, CHα lys, CH2NH, 5H du sucre), 2.76 (2H, m, CH2-NH), 2.16 (2H, m, CH2-CF2), 1.90 à 1.68 (24H, 6s, CH3 des acétyls), 1.29 à 0.91 (6H, m, CH2 de la lysine)NMR ! H (250 MHz, DMSO-d6): δ 8.01 (2H, m, NH), 7.71 (1H, m, NH), 7.21 (5H, s, CH arom.), 7.05 (3H, m, NH, 2H arom tyr), 6.89 (2H, d, J = 8.29Hz 2H arom tyr), 5.22 (1H, d, J = 5.35Hz H sugar), 5.02 (2H, s, CH 2 Ph), 4.99 (2H, s, CH 2 Ph), 4.92 (2H, m, H of sugar), 4.70 to 4.55 (5H, m, H of sugar), 4.01 to 3.75 (9H, m, CHα tyr, CHα lys, CH 2 NH, 5H of sugar ), 2.76 (2H, m, CH 2 -NH), 2.16 (2H, m, CH 2 -CF 2 ), 1.90 to 1.68 (24H, 6s, CH 3 of acetyls), 1.29 to 0.91 (6H, m, CH 2 of lysine)
RMN 13C (62.86 MHz, CDC13) : δ 171.85; 171.48 (CO-NH), 170.67, 170.32, 170.18, 170.0, 169.63; 169.42 (6s, CO-O), 156.29 (CO-NH), 137.47; 136.61; 135.54 (CIv arom.), 130.71; 129.03; 128.80; 128.71; 128.12; 127.96; 121.17 (CH arom.), 101.07 (CH-1 '), 78.69 (CH-4), 72.22 (CH-2), 70.86; 70.21 (CH-5' et CH-3'), 70.06 (CH- 5), 69.61 (CH-3), 69.3 (CH-2'), 67.60 (CH-4'), 65.69 (CH2-O), 61.72, 61.48 (CH2-6 et CH2-6'), 56.62 (CHαtyr); 52.68 (CHαlys); 37.48 (CH2-NH), 31.86 (CH2-NH), 31.43 (CH2-), 30.08 (CH2-Rf), 29.09 (CH2-), 22.77 (CH2-), 21.08, 21.03, 20.94, 20.86, 20.76 (CH3 des acetyls) RMN 19F (235 MHz, DMSO-d6) : δ -80.19 (3F,s, CF3), -113.38 (2F, s,CF2-CH2), -121.67 (6F,s, 3CF2), -122.45 (2F, s, CF2), -123.24(2F, s, CF2), -125.70 (2F, s, CF2-CH2). 13 C NMR (62.86 MHz, CDC1 3 ): δ 171.85; 171.48 (CO-NH), 170.67, 170.32, 170.18, 170.0, 169.63; 169.42 (6s, CO-O), 156.29 (CO-NH), 137.47; 136.61; 135.54 (C Iv arom.), 130.71; 129.03; 128.80; 128.71; 128.12; 127.96; 121.17 (CH arom.), 101.07 (CH-1 '), 78.69 (CH-4), 72.22 (CH-2), 70.86; 70.21 (CH-5 'and CH-3'), 70.06 (CH-5), 69.61 (CH-3), 69.3 (CH-2 '), 67.60 (CH-4'), 65.69 (CH 2 -O) , 61.72, 61.48 (CH 2 -6 and CH 2 -6 '), 56.62 (CHαtyr); 52.68 (CHαlys); 37.48 (CH 2 -NH), 31.86 (CH 2 -NH), 31.43 (CH 2 -), 30.08 (CH 2 -Rf), 29.09 (CH 2 -), 22.77 (CH 2 -), 21.08, 21.03, 20.94 , 20.86, 20.76 (acetyls CH 3 ) 19 F NMR (235 MHz, DMSO-d6): δ -80.19 (3F, s, CF 3 ), -113.38 (2F, s, CF2-CH 2 ), -121.67 ( 6F, s, 3CF 2 ), -122.45 (2F, s, CF 2 ), -123.24 (2F, s, CF 2 ), -125.70 (2F, s, CF 2 -CH 2 ).
A nouveau, selon le protocole expérimental déjà décrit, 0.3g (0.19mmol) de composé 9 dissout dans 30ml d'éthanol subit une hydrogénation en présence de palladium sur charbon.Again, according to the experimental protocol already described, 0.3 g (0.19 mmol) of compound 9 dissolved in 30 ml of ethanol undergoes hydrogenation in the presence of palladium on carbon.
L'amine 10 obtenue est mise en réaction dans du dichlorométhane en présence de 0.107 g (0.23mmol) d'ester actif de thalidomide 11 et de la DIEA est ajoutée afin d'amener le pH de la solution à 8. The amine 10 obtained is reacted in dichloromethane in the presence of 0.107 g (0.23mmol) of active ester of thalidomide 11 and DIEA is added in order to bring the pH of the solution to 8.
Rf = 0.65 dans AcOEt 7/cyclohex. 3 [αD] = +3.9 (c:l; DMF)Rf = 0.65 in AcOEt 7 / cyclohex. 3 [α D ] = +3.9 (c: l; DMF)
RMN 1H (250MHz, CDC13) :8.63 (1H, s, Ph); 8.61 (1H, d, Ph); 8.09 (1H, d, Ph); 5.04 (1H, m, NCH); 2.86 (3H, m, CUgCO, CHCH2CO); 2.19 (2H, m, CHCH2).1H NMR (250MHz, CDC1 3 ): 8.63 (1H, s, Ph); 8.61 (1H, d, Ph); 8.09 (1H, d, Ph); 5.04 (1H, m, NCH); 2.86 (3H, m, CUgCO, CHCH 2 CO); 2.19 (2H, m, CHCH 2 ).
RMN 19F (235MHz, CDC13)_: -152.6 (2F, d, CF); -156.67 (IF, t, CF); - 161.87 (2F, t, CF). RMN 13C (62.86, DMSO) :177.97; 174.93; 171.64; 171.61; 170.96 (5 19 F NMR (235MHz, CDC1 3 ) _: -152.6 (2F, d, CF); -156.67 (IF, t, CF); - 161.87 (2F, t, CF). 13 C NMR (62.86, DMSO): 177.97; 174.93; 171.64; 171.61; 170.96 (5
CO); 142.01; 140.94; 139.68; 136.89; 129.09; 128.64 (C aromatiques); 54.44 (NÇH); 36.13 (CH CO); 27.12.(NCHCH2) 11CO); 142.01; 140.94; 139.68; 136.89; 129.09; 128.64 (C aromatics); 54.44 (NÇH); 36.13 (CH CO); 27.12. (NCHCH 2 ) 11
Après disparition totale de l'amine 10 (CCM), le milieu réactionnel est concentré sous pression réduite et purifié par chromatographie sur colonne gel de silice (éluant : acétate d'éthyle /cyclohexane 8/2 à 9/1).After complete disappearance of amine 10 (TLC), the reaction medium is concentrated under reduced pressure and purified by chromatography on a silica gel column (eluent: ethyl acetate / cyclohexane 8/2 to 9/1).
Le composé 12 est obtenu avec un très faible rendement (1 lmg; 6.4μmol; 4.5%). rf : 0.63 dans acétate d'éthyle .Compound 12 is obtained with a very low yield (1 mg; 6.4 μmol; 4.5%). rf: 0.63 in ethyl acetate.
La désacétylation de la partie saccharidique de la molécule est effectuée à température ambiante dans du méthanol contenant une quantité catalytique de méthylate de sodium.The deacetylation of the saccharide part of the molecule is carried out at room temperature in methanol containing a catalytic amount of sodium methylate.
Après traitement sur de la résine H+ (amberlite IRC 50), filtration et évaporation du solvant, le produit désacétylé A est isolé avec un rendement quantitatif. After treatment with H + resin (amberlite IRC 50), filtration and evaporation of the solvent, the deacetylated product A is isolated with a quantitative yield.
B- Tests biologiquesB- Biological tests
Un tel substrat ne présente aucune toxicité rédhibitoire sur des cultures cellulaires de fibroblastes et de mélanomes B16. In vivo, la molécule se concentre dans le stroma de la tumeur ce qui permet de la visualiser de façon très nette (Cf Tableau 1).Such a substrate exhibits no unacceptable toxicity on cell cultures of fibroblasts and B16 melanomas. In vivo, the molecule is concentrated in the stroma of the tumor, which makes it possible to visualize it very clearly (see Table 1).
Tableau 1 : Radioactivité mesurée dans différents organes de souris porteuses de mélanomes B16 après injection par voie IP de la molécule A (10 μCi/animal).Table 1: Radioactivity measured in different organs of mice carrying B16 melanomas after IP injection of the molecule A (10 μCi / animal).
Les recherches en cours permettront de préciser son efficacité par rapport au thalidomide seul pour bloquer le développement tumoral. Les premiers résultats obtenus au cours de tests de croissance vasculaire sur des embryons de poulet (chick aortic ring assays) ont montré l'efficacité de cette structure pour inhiber la croissance des microvaisseaux, la molécule A se révèle efficace à 20μM et bloque totalement le développement à 200μM alors qu'à de telles concentrations le thalidomide se révèle inefficace. Ce premier résultat démontre l'innocuité générale de la structure proposée et son intérêt éventuel pour le diagnostic, le thalidomide n'étant ici qu'un exemple de principe actif.Current research will clarify its effectiveness compared to thalidomide alone to block tumor development. The first results obtained during vascular growth tests on chicken embryos (chick aortic ring assays) have shown the effectiveness of this structure to inhibit the growth of microvessels, molecule A proves effective at 20 μM and completely blocks development at 200 μM whereas at such concentrations thalidomide proves to be ineffective. This first result demonstrates the general safety of the proposed structure and its possible interest for diagnosis, thalidomide being here only an example of active principle.
2/ Exemple 2 : préparation de la molécule E. Cet exemple de synthèse est illustré par la figure 1.2 / Example 2: preparation of the molecule E. This synthetic example is illustrated by FIG. 1.
Synthèse de l'ester actif HOOCPBNSynthesis of the active HOOCPBN ester
YY
L'acétate de N-(tert-butyl)hydroxylamine est dissout dans une solution aqueuse saturée de carbonate de sodium. L'hydroxylamine est extraite à l'éther. La phase organique est séchée sur Na SO puis le solvant est éliminé sous pression réduite pour conduire à la N-tert-butylhydroxylamine libre sous forme de cristaux blancs pulvérulents.N- (tert-butyl) hydroxylamine acetate is dissolved in a saturated aqueous solution of sodium carbonate. The hydroxylamine is extracted with ether. The organic phase is dried over Na SO 4 then the solvent is removed under reduced pressure to yield free N-tert-butylhydroxylamine in the form of powdery white crystals.
1.00 g de 4-carboxy benzaldéhyde (6.67 mmol - 1 équiv. ) et une pointe de spatule de tamis moléculaire 4 Â sont mis en suspension sous atmosphère d'argon dans 5 mL d'éthanol anhydre dégazé. 0.570 g d'hydroxylamine (6.37 mmol - 0.95 équiv.) en solution dans 5 mL d'éthanol sont additionnés à la solution de benzaldéhyde, et le milieu est porté sous obscurité à 60 °C. Après 18 heures, 0.200 g d'hydroxylamine (2.25 mmol - 0.33 équiv .) sont additionnés au milieu et l'agitation est poursuivie pendant 18 nouvelles heures. Le mélange réactionnel est filtré sur couche de célite, le solvant est éliminé sous pression réduite et le brut est purifié par chromatographie flash sur gel de silice (éluant : acétate d'éthyle/cyclohexane 6:4). Après recristallisation dans un mélange méthanol/éther la nitrone X (0. 590 g - 2.67 mmol - 40 %) est obtenue sous forme d'une poudre blanche.1.00 g of 4-carboxy benzaldehyde (6.67 mmol - 1 equiv.) And a tip of a spatula of 4 Å molecular sieve are suspended under an argon atmosphere in 5 ml of degassed anhydrous ethanol. 0.570 g of hydroxylamine (6.37 mmol - 0.95 equiv.) In solution in 5 ml of ethanol are added to the benzaldehyde solution, and the medium is brought under darkness to 60 ° C. After 18 hours, 0.200 g of hydroxylamine (2.25 mmol - 0.33 equiv.) Are added to the medium and stirring is continued for another 18 hours. The reaction mixture is filtered through a celite layer, the solvent is removed under reduced pressure and the crude is purified by flash chromatography on silica gel (eluent: ethyl acetate / cyclohexane 6: 4). After recrystallization from a methanol / ether mixture, the nitrone X (0.590 g - 2.67 mmol - 40%) is obtained in the form of a white powder.
Masse molaire (Cι2H15NO3) : 221,3 g.mol"1 Molar mass (Cι 2 H 15 NO 3 ): 221.3 g.mol "1
Point de fusion : 214.5 - 215.7 °C RMN 1H (250 MHz, DMSO-d6) : δ 8.42 (2H, m, J = 8.5 Hz, H arom.),Melting point: 214.5 - 215.7 ° C 1 H NMR (250 MHz, DMSO-d6): δ 8.42 (2H, m, J = 8.5 Hz, H arom.),
7.95 (3H, m, H arom. et CH=N(O)), 1.51 (9H, s, CH3 du tβrt-butyl)7.95 (3H, m, H arom. And CH = N (O)), 1.51 (9H, s, CH 3 of tβrt-butyl)
RMN 13C (62.86 MHz, DMSO-d6) : δ 166.9 (CO), 135.3 (CIV arom), 131.0 (CH=N(O)), 129.2 (CH arom.), 128.3 (CIV arom), 127.9 (CH arom.), 71.1 (CIV), 27.8 (CH3 du tert-butyl) UV (MeOH, nm) : λmax = 287 13 C NMR (62.86 MHz, DMSO-d6): δ 166.9 (CO), 135.3 (C IV arom), 131.0 (CH = N (O)), 129.2 (CH arom.), 128.3 (C IV arom), 127.9 (CH arom.), 71.1 (C IV ), 27.8 (CH 3 of tert-butyl) UV (MeOH, nm): λ max = 287
0.260 g de nitrone X (1.18 mmol - 1 équiv.) sont mis en solution sous atmosphère d'argon dans 15 ml de dioxane. 0.290 g de DCC (1.41 mmol - 1.2 équiv.) et 0.16 g de HOSu (1.41 mmol -1.2 équiv.) sont additionnés au milieu réactionnel. Après 48 heures d'agitation le milieu réactionnel est filtré sur verre fritte (Porosité 4) puis le solvant est éliminé sous pression réduite. Après purification par chromatographie flash sur gel de silice (éluant : acétate d'éthyle/cyclohexane 6:4) puis recristallisation dans un mélange acétate d'éthyle/hexane, le composé Y (0.25 g - 0.79 mol - 67 %) est obtenu sous forme d'une poudre blanche.0.260 g of nitrone X (1.18 mmol - 1 equiv.) Are dissolved in an argon atmosphere in 15 ml of dioxane. 0.290 g of DCC (1.41 mmol - 1.2 equiv.) And 0.16 g of HOSu (1.41 mmol -1.2 equiv.) Are added to the reaction medium. After 48 hours of stirring the reaction medium is filtered through sintered glass (Porosity 4) then the solvent is removed under reduced pressure. After purification by flash chromatography on silica gel (eluent: ethyl acetate / cyclohexane 6: 4) then recrystallization from an ethyl acetate / hexane mixture, the compound Y (0.25 g - 0.79 mol - 67%) is obtained under form of a white powder.
Masse molaire (C16Hι8N2O5) : 318,3 g.mol"1 Molar mass (C 16 Hι 8 N 2 O 5 ): 318.3 g.mol "1
Point de fusion : 177.4 - 178.3 °CMelting point: 177.4 - 178.3 ° C
RMN 1H (250 MHz, CDC13) : δ 8.37 (2H, m, J = 8.6 Hz, H arom.), 8.12 (2H, d, J = 8.6 Hz,H arom.), 7.65 (1H, s, CH=N(O)), 2.89 (4H, s, CH2-CO), 1.61 (9H, s, CH3 du tert-butyl)1H NMR (250 MHz, CDC1 3 ): δ 8.37 (2H, m, J = 8.6 Hz, H arom.), 8.12 (2H, d, J = 8.6 Hz, H arom.), 7.65 (1H, s, CH = N (O)), 2.89 (4H, s, CH 2 -CO), 1.61 (9H, s, CH 3 of tert-butyl)
RMN 13C (62.86 MHz, CDC13) : δ 169.3, 161.3 (CO), 136.8 (CIV arom), 130.7 (CH arom.), 128.6 (CIV arom), 128.6 (CH arom.), 125.5 (CH=N(O)), 72.2 (CIV), 28.4 (CH2-CO), 25.7 (CH3 du tert-butyl)RMN 13 C (62.86 MHz, CDC1 3 ): δ 169.3, 161.3 (CO), 136.8 (C IV arom), 130.7 (CH arom.), 128.6 (C IV arom), 128.6 (CH arom.), 125.5 (CH = N (O)), 72.2 (C IV ), 28.4 (CH 2 -CO), 25.7 (CH 3 of tert-butyl)
Synthèse du r5-tert-Butoxycarbonylamino-5- (3,3,4,4,5,5,6,6,7,7,8,8,9,9,10,1 O O-heptadecafluoro-decylcarbamoyl)-pentyll-carbamic acid benzyl ester 3Synthesis of r5-tert-Butoxycarbonylamino-5- (3,3,4,4,5,5,6,6,7,7,8,8,9,9,10,1 O O-heptadecafluoro-decylcarbamoyl) - pentyll-carbamic acid benzyl ester 3
2.26 g d'azoture C8F17CH2CH2N (4.62 mmol - 1 équiv.) sont dissous dans 20 ml d'éther. Le milieu est porté à 0°C et 300 mg de palladium sur charbon (10 % - 65 mg/mmol) sont additionnés par fractions. Après 6 heures d'agitation dans la bombe à hydrogénation (pression 8 bars), le milieu est filtré sur couche de célite et les solvants sont éliminés sous pression réduite. L'amine C8F17CH2CH NH2 2 est obtenue sans purification.2.26 g of azide C 8 F 17 CH 2 CH 2 N (4.62 mmol - 1 equiv.) Are dissolved in 20 ml of ether. The medium is brought to 0 ° C. and 300 mg of palladium on charcoal (10% - 65 mg / mmol) are added in fractions. After 6 hours of stirring in the hydrogenation bomb (pressure 8 bars), the medium is filtered through a layer of celite and the solvents are removed under reduced pressure. The amine C 8 F 17 CH 2 CH NH 2 2 is obtained without purification.
1.79 g de Boc-Lys(Z)OH (4.70 mmol - 1 équiv.), 1.07 g de DCC (5.18 mmol - 1.1 équiv.) et 0.64 g d'HOBt (4.70 mmol - 1 équiv.) sont mis en solution dans 20 mL de dichlorométhane anhydre. Après 15 minutes d'agitation, l'amine 2 en solution dans 10 mL de dichlorométhane anhydre est ajoutée au mélange. L'agitation est poursuivie pendant 24 heures. Le brut réactionnel est filtré sur verre fritte (Porosité 4) puis les solvants sont éliminés sous pression réduite. Après purification par chromatographie flash sur gel de silice (éluant : cyclohexane/acétate d'éthyle 7:3 à 6:4) le composé fluoré 3 (3.11 g - 3.70 mmol - 79 %>) est obtenue sous forme d'une poudre blanche. Masse molaire (C29H32F17N3O5) : 825,6 g.mol"1 1.79 g of Boc-Lys (Z) OH (4.70 mmol - 1 equiv.), 1.07 g of DCC (5.18 mmol - 1.1 equiv.) And 0.64 g of HOBt (4.70 mmol - 1 equiv.) Are dissolved in 20 mL of anhydrous dichloromethane. After 15 minutes of stirring, amine 2 dissolved in 10 ml of anhydrous dichloromethane is added to the mixture. The agitation is continued for 24 hours. The reaction crude is filtered through sintered glass (Porosity 4) and then the solvents are removed under reduced pressure. After purification by flash chromatography on silica gel (eluent: cyclohexane / ethyl acetate 7: 3 to 6: 4) the fluorinated compound 3 (3.11 g - 3.70 mmol - 79%>) is obtained in the form of a white powder . Molar mass (C 29 H 32 F 17 N 3 O 5 ): 825.6 g.mol "1
Point de fusion : 86.5 - 88.3 °CMelting point: 86.5 - 88.3 ° C
RMN 1H (250 MHz, CDC13) : δ 7.36 (5H, s, CH arom.), 6.85 (IH, m, NH amide), 5.27 (IH, d , J = 6.65 Hz, NH uréthane), 5.11 (2H, s, CH2-O), 4.99 (IH, t, J = 5.8 Hz, NH uréthane), 4.06 (IH, m, CH-CO), 3.58 (2H, dd, J ≈ 6.5 Hz, CH2-NH), 3.20 (2H, dd, J = 6.2 Hz, CH2-NH), 2.35 (2H, m, CH2-CF2), 2.0 à 1.0 (15 H, m, CH3 du Boc et CH2 lys)1H NMR (250 MHz, CDC1 3 ): δ 7.36 (5H, s, CH arom.), 6.85 (IH, m, NH amide), 5.27 (IH, d, J = 6.65 Hz, NH urethane), 5.11 (2H , s, CH 2 -O), 4.99 (IH, t, J = 5.8 Hz, NH urethane), 4.06 (IH, m, CH-CO), 3.58 (2H, dd, J ≈ 6.5 Hz, CH 2 -NH ), 3.20 (2H, dd, J = 6.2 Hz, CH 2 -NH), 2.35 (2H, m, CH 2 -CF 2 ), 2.0 to 1.0 (15 H, m, CH 3 du Boc and CH 2 lys)
RMN 13C (62.86 MHz, CDC13) : δ 172.5 (CO-NH), 156.7, 155.9 (O-CO- NH), 136.6 (CIV arom.), 128.5, 128.1 (CH arom.), 80.4 (CIV), 66.7 (CH2-O-CO-NH), 54.4 (CH-CO), 40.2 (CH2-NH), 31.9 (triplet, CH2-NH), 31.3 (CH2), 30.7 (CH -Rf), 29.5 (CH2), 28.2 (CH3 du tert-butyl), 22.4 (CH2)RMN 13 C (62.86 MHz, CDC1 3 ): δ 172.5 (CO-NH), 156.7, 155.9 (O-CO- NH), 136.6 (C IV arom.), 128.5, 128.1 (CH arom.), 80.4 (C IV ), 66.7 (CH 2 -O-CO-NH), 54.4 (CH-CO), 40.2 (CH 2 -NH), 31.9 (triplet, CH 2 -NH), 31.3 (CH 2 ), 30.7 (CH - Rf), 29.5 (CH 2 ), 28.2 (CH 3 of tert-butyl), 22.4 (CH 2 )
RMN 19F (235 MHz, DMSO-d6) : δ -80.7 (CF3, s), -113.9 (CF2-CF3, s), - 121.9 (3 CF2, m), -122.7 (CF2, s), -123.5 (CF2, s), -126.0 (CF2-CH2, s) 19 F NMR (235 MHz, DMSO-d6): δ -80.7 (CF 3 , s), -113.9 (CF 2 -CF 3 , s), - 121.9 (3 CF 2 , m), -122.7 (CF 2 , s), -123.5 (CF 2 , s), -126.0 (CF 2 -CH 2 , s)
[αjD = - 8.2 (c, 1, CHC13)[αj D = - 8.2 (c, 1, CHC1 3 )
Synthèse du LactoLys(Z)CsFr7(OAc 8 5Synthesis of LactoLys (Z) CsFr7 (OAc 8 5
2.03 g du composé 3 (2.45 mmol - 1 équiv.) sont dissous dans 20 mL de dichlorométhane anhydre. Le milieu est amené à 0°C et 40 mL d'un mélange CH2CI2/TFA 8.5:1.5 sont additionnés goutte à goutte en conservant la température à 0°C tout au long de l'addition. Après 4 heures d'agitation les solvants sont éliminés sous pression réduite. Le brut est repris dans l'éther puis évaporé afin d'éliminer les traces de TFA résiduelles par co-évaporation. L'opération est répétée plusieurs fois et conduit à l'amine libre 4. Parallèlement 1.15 g d'acide lactobionique (3.19 mmol - 1.3 équiv.) est mis en suspension dans 40 mL d'un mélange méthoxyéthanol/toluène 1:1 acidifié par 3 gouttes de TFA.2.03 g of compound 3 (2.45 mmol - 1 equiv.) Are dissolved in 20 ml of anhydrous dichloromethane. The medium is brought to 0 ° C and 40 mL of a CH 2 CI 2 / TFA 8.5: 1.5 mixture are added dropwise while maintaining the temperature at 0 ° C throughout the addition. After 4 hours of stirring the solvents are removed under reduced pressure. The crude is taken up in ether and then evaporated in order to remove the traces of residual TFA by co-evaporation. The operation is repeated several times and leads to the free amine 4. At the same time 1.15 g of lactobionic acid (3.19 mmol - 1.3 equiv.) Is suspended in 40 ml of a methoxyethanol / toluene mixture 1: 1 acidified with 3 drops of TFA.
Après évaporation à 45 °C sous pression réduite, le milieu est repris dans 30 mL de mélange méthoxyéthanol/toluène 2:1 puis évaporé sec. Cette dernière opération est répétée 2 fois pour conduire à la lactobionolactone.After evaporation at 45 ° C under reduced pressure, the medium is taken up in 30 ml of methoxyethanol / toluene mixture 2: 1 and then evaporated to dryness. This last operation is repeated 2 times to lead to lactobionolactone.
La lactobionolactone et l'amine 4 sont mises en solution sous atmosphère d'argon dans 40 mL de méthanol. Le pH de la solution est amené à 9 par addition de TEA puis le milieu est porté à reflux pendant 24 heures. Après élimination du méthanol sous pression réduite, 40 mL d'un mélange anhydride acétique/pyridine 1 :1 sont additionnés à froid sur le brut. L'agitation est maintenue pendant 18 heures puis le mélange réactionnel est jeté sur 150 mL d'HCl IN. la phase aqueuse est extraite par 3 fois 50 mL de dichlorométhane. La phase organique est respectivement lavée par 2 fois 60 mL d'HCl IN, puis par 60 mL de saumure et enfin séchée sur Na2SO4. Les solvants sont éliminés sous pression réduite et le brut est purifié par chromatographie flash sur gel de silice (éluant : acétate d'éthyle/cyclohexane 6:4 à 7:3) pour conduire au composé 5 (2.23 g - 1.59 mmol - 65 %) sous forme de poudre blanche. Masse molaire (C52H60F17N3O22) : 1402,0 g.mol"1 The lactobionolactone and amine 4 are dissolved in an argon atmosphere in 40 ml of methanol. The pH of the solution is brought to 9 by addition of TEA then the medium is brought to reflux for 24 hours. After removal of the methanol under reduced pressure, 40 ml of a 1: 1 acetic anhydride / pyridine mixture are added cold to the crude. Stirring is continued for 18 hours then the reaction mixture is poured onto 150 ml of IN HCl. the aqueous phase is extracted with 3 times 50 mL of dichloromethane. The organic phase is respectively washed with twice 60 ml of IN HCl, then with 60 ml of brine and finally dried over Na 2 SO 4 . The solvents are removed under reduced pressure and the crude is purified by flash chromatography on silica gel (eluent: ethyl acetate / cyclohexane 6: 4 to 7: 3) to yield compound 5 (2.23 g - 1.59 mmol - 65% ) as a white powder. Molar mass (C 52 H 60 F 17 N 3 O 2 2): 1402.0 g.mol "1
Point de fusion : 65 °C (début de décomposition)Melting point: 65 ° C (start of decomposition)
RMN 1H (250 MHz, DMSO-d6) : δ 8.07 (2H, m, NH), 7.34 (5H, s, CH arom.), 7.01 (IH, m, NH), 5.47 (IH, m , H du sucre), 5.30 à 5.10 (2H, m, H du sucre), 5.02 à 4.79 (5H, m, CH2-O et H du sucre), 4.50 à 3.90 (8H, m, H du sucre et CH de la lysine), 3.38 (2H, m, CH2-NH), 2.97 (2H, m, CH2-NH), 2.30 (2H, m, CH2-CF2), 2.14, 2.09, 2.04,1H NMR (250 MHz, DMSO-d6): δ 8.07 (2H, m, NH), 7.34 (5H, s, CH arom.), 7.01 (IH, m, NH), 5.47 (IH, m, H sugar ), 5.30 to 5.10 (2H, m, H of sugar), 5.02 to 4.79 (5H, m, CH 2 -O and H of sugar), 4.50 to 3.90 (8H, m, H of sugar and CH of lysine) , 3.38 (2H, m, CH 2 -NH), 2.97 (2H, m, CH 2 -NH), 2.30 (2H, m, CH 2 -CF 2 ), 2.14, 2.09, 2.04,
2.01, 1.96, 1.92 (24H, 6s, CH3 des acétyls), 1.65 à 1.10 (6H, m, CH2 de la lysine)2.01, 1.96, 1.92 (24H, 6s, CH 3 of acetyls), 1.65 to 1.10 (6H, m, CH 2 of lysine)
RMN 13C (62.86 MHz, CDC13) : δ 171.3 (CO-NH), 170.5, 170.5, 170.1, 170.0, 170.0, 169.7, 169.2 (7s, CO-O), 167.9 (CO-NH), 156.7 (O-CO-NH), 136.7 (CIV arom.), 128.4, 128.0, 127.9, (CH arom.), 101.6 (CH-1'), 77.9 (CH-4), 72.7 (CH-2), 71.1, 70.9 (CH-5' et CH-3'), 70.0 (CH-5), 69.4 (CH-3), 69.0 (CH-2'), 66.9 (CH-4'), 66.5 (CH2- O), 61.6, 61.0 (CH2-6 et CH2-6'), 52.6 (CH-CO), 40.4 (CH2-NH), 31.9 (triplet, CH2-NH), 31.2 (CH2-), 30.5 (triplet, CH2-Rf), 29.1 (CH2-), 22.2 (CH2-), 20.6, 20.5, 20.4, 20.4, 20.3 (5 s, CH3 des acetyls)NMR 13 C (62.86 MHz, CDC1 3 ): δ 171.3 (CO-NH), 170.5, 170.5, 170.1, 170.0, 170.0, 169.7, 169.2 (7s, CO-O), 167.9 (CO-NH), 156.7 (O -CO-NH), 136.7 (C IV arom.), 128.4, 128.0, 127.9, (CH arom.), 101.6 (CH-1 '), 77.9 (CH-4), 72.7 (CH-2), 71.1, 70.9 (CH-5 'and CH-3'), 70.0 (CH-5), 69.4 (CH-3), 69.0 (CH-2 '), 66.9 (CH-4'), 66.5 (CH 2 - O) , 61.6, 61.0 (CH 2 -6 and CH 2 -6 '), 52.6 (CH-CO), 40.4 (CH 2 -NH), 31.9 (triplet, CH 2 -NH), 31.2 (CH 2 -), 30.5 (triplet, CH 2 -Rf), 29.1 (CH 2 -), 22.2 (CH 2 -), 20.6, 20.5, 20.4, 20.4, 20.3 (5 s, CH 3 of acetyls)
RMN 19F (235 MHz, DMSO-d6) : δ -80.2 (CF3, s), -113.0 (CFj2-CF3, s), - 121.4 (3 CF2, s), -122.2 (CF2, s), -123.0 (CF2, s), -125.4 (CF2-CH2, s) 19 F NMR (235 MHz, DMSO-d6): δ -80.2 (CF 3 , s), -113.0 (CFj 2 -CF 3 , s), - 121.4 (3 CF 2 , s), -122.2 (CF 2 , s), -123.0 (CF 2 , s), -125.4 (CF 2 -CH 2 , s)
[α]D = + 2.9 (c, 1, CHC13)[α] D = + 2.9 (c, 1, CHC1 3 )
Synthèse du LactoLvs(PBN CgFi7(OAc 7Synthesis of LactoLvs (PBN CgFi7 (OAc 7
0.400 g de composé 5 (0.28 mmol - 1 équiv.) sont dissous dans 10 ml de dioxane. Le milieu est porté à 0°C et 0.190 g de palladium sur charbon (10 % - 65 mg/mmol) sont additionnés par fractions. Après 20 heures d'agitation dans la bombe à hydrogénation (pression 8 bars), le milieu est filtré sur couche de célite et les solvants sont éliminés sous pression réduite. L'amine 6 est obtenue sous forme d'une poudre blanche sans purification. 0.400 g of compound 5 (0.28 mmol - 1 equiv.) Are dissolved in 10 ml of dioxane. The medium is brought to 0 ° C. and 0.190 g of palladium on charcoal (10% - 65 mg / mmol) are added in fractions. After 20 hours of stirring in the hydrogenation bomb (pressure 8 bars), the medium is filtered through a layer of celite and the solvents are removed under reduced pressure. Amine 6 is obtained in the form of a white powder without purification.
L'amine 6 est mise en solution sous flux d'argon dans 5 mL de dichlorométhane anhydre. 0.090 g d'ester actif X (0.28 mmol — 1 équiv.) sont ajoutés au milieu et le pH est amené à 9 par addition de DIEA. L'agitation est poursuivie sous atmosphère d'argon pendant 24 heures.The amine 6 is dissolved in a stream of argon in 5 ml of anhydrous dichloromethane. 0.090 g of active ester X (0.28 mmol - 1 equiv.) Are added to the medium and the pH is brought to 9 by addition of DIEA. Stirring is continued under an argon atmosphere for 24 hours.
Les solvants sont évaporés sous pression réduite et le brut est purifié par flash chromatographie sur gel de silice (éluant : acétate d'éthyle). Une purification supplémentaire par chromatographie d'exclusion de taille sur résine Sephadex LH-20 (éluant : dichlorométhane/éthanol 1 :1) permet d'obtenir la nitrone 7 (0.230 g - 0.156 mmol - 54 %) sous forme d'une poudre blanche.The solvents are evaporated under reduced pressure and the crude is purified by flash chromatography on silica gel (eluent: ethyl acetate). Additional purification by size exclusion chromatography on Sephadex LH-20 resin (eluent: dichloromethane / ethanol 1: 1) makes it possible to obtain nitrone 7 (0.230 g - 0.156 mmol - 54%) in the form of a white powder. .
Masse molaire (C56H67F17N4O22) : 1471,1 g-mol"1 Molar mass (C 56 H 67 F 17 N 4 O 22 ): 1471.1 g-mol "1
Point de fusion : 75 °C (début de décomposition)Melting point: 75 ° C (start of decomposition)
RMN 1H (250 MHz, CDC13) : δ 8.36 (2H, d, J = 8.3 Hz, H arom.), 7.92 (2H, d, J = 8.4 Hz, H arom.), 7.68 (IH, s, CH=N(O)), 6.94 (3H, m, NH), 5.51 (IH, dd, J = 2 Hz et J = 4.4 Hz, H-4'), 5.32 (2H, m, H-2 et H-3), 5.17 à 4.95 (3H, m, H-2',H-5 et H-3'), 4.62 (IH, d, J = 7.7 Hz, H-l '), 4.50 (IH, dd, J - 2.7 Hz et J = 12.5 Hz, H du sucre), 4.33 (IH, m, CH de la lysine), 4.18 (IH, dd, J = 1.6 Hz et J = 6.3 Hz, H sucre), 4.12 à 3.87 (4H, m, H sucre et H-5'), 3.50 (2H, m, CH2-NH), 3.39 (2H, m, CH2-NH), 2.35 (2H, m, CH2- CF2), 2.15, 2.09, 2.08, 2.04, 2.02, 2.00, 1.96 (24H, 7s, CH3 des acétyls), 1.60 (1 IH, m, CH3 du tert-butyl et CH2 Lys), 1.85 (2H, m, CH2 Lys), 1.35 (2H, m, CH2 Lys)1H NMR (250 MHz, CDC1 3 ): δ 8.36 (2H, d, J = 8.3 Hz, H arom.), 7.92 (2H, d, J = 8.4 Hz, H arom.), 7.68 (IH, s, CH = N (O)), 6.94 (3H, m, NH), 5.51 (IH, dd, J = 2 Hz and J = 4.4 Hz, H-4 '), 5.32 (2H, m, H-2 and H- 3), 5.17 to 4.95 (3H, m, H-2 ', H-5 and H-3'), 4.62 (IH, d, J = 7.7 Hz, Hl '), 4.50 (IH, dd, J - 2.7 Hz and J = 12.5 Hz, H of sugar), 4.33 (IH, m, CH of lysine), 4.18 (IH, dd, J = 1.6 Hz and J = 6.3 Hz, H sugar), 4.12 to 3.87 (4H, m, H sugar and H-5 '), 3.50 (2H, m, CH 2 -NH), 3.39 (2H, m, CH 2 -NH), 2.35 (2H, m, CH 2 - CF 2 ), 2.15, 2.09, 2.08, 2.04, 2.02, 2.00, 1.96 (24H, 7s, CH 3 of acetyls), 1.60 (1 IH, m, CH 3 of tert-butyl and CH 2 Lys), 1.85 (2H, m, CH 2 Lys ), 1.35 (2H, m, CH 2 Lys)
RMN 13C (62.86 MHz, CDC13) : δ 171.5 (CO-NH), 170.6, 170.5, 170.3, 170.3, 170.0, 169.7, 169.32 (7s, CO-O), 168.2 (CO-NH), 167.1 (CO-NH), 135.2 (CIV arom.), 133.7 (CIV arom.), 129.3 (CH=N(O)), 128.6, 127.3, (CH arom.), 101.7 (CH-1'), 78.5 (CH-4), 72.9 (CH-2), 71.4 (CIV), 71.0, 70.9 (CH-5' et CH-3'), 68.9 (CH-5), 69.3 (CH- 3), 69.0 (CH-2'), 66.9 (CH-4'), 61.6, 61.1 (CH2-6 et CH2-6'), 52.7 (CH-CO), 39.4 (CH2- NH), 31.9 (m, CH2-NH), 31.1 (CH2-), 30.5 (triplet, CH2-Rf), 28.7 (CH2-), 28.2 (CH3 du tert-butyl), 22.2 (CH2-), 20.7, 20.7, 20.7, 20.6, 20.5, 20.5, 20.4, (7s, CH3 des acetyls)RMN 13 C (62.86 MHz, CDC1 3 ): δ 171.5 (CO-NH), 170.6, 170.5, 170.3, 170.3, 170.0, 169.7, 169.32 (7s, CO-O), 168.2 (CO-NH), 167.1 (CO -NH), 135.2 (C IV arom.), 133.7 (C IV arom.), 129.3 (CH = N (O)), 128.6, 127.3, (CH arom.), 101.7 (CH-1 '), 78.5 ( CH-4), 72.9 (CH-2), 71.4 (C IV ), 71.0, 70.9 (CH-5 'and CH-3'), 68.9 (CH-5), 69.3 (CH- 3), 69.0 (CH -2 '), 66.9 (CH-4'), 61.6, 61.1 (CH 2 -6 and CH 2 -6 '), 52.7 (CH-CO), 39.4 (CH 2 - NH), 31.9 (m, CH 2 -NH), 31.1 (CH 2 -), 30.5 (triplet, CH 2 -Rf), 28.7 (CH 2 -), 28.2 (CH 3 of tert-butyl), 22.2 (CH 2 -), 20.7, 20.7, 20.7 , 20.6, 20.5, 20.5, 20.4, (7s, CH 3 of acetyls)
RMN 19F (235 MHz, CDC13) : δ -80.7(s, CF3), -114.2 (s, CF^-CFs), - 121.9 (s, 3 CF2), -122.7 (s, CF2), -123.5 (s, CF2), -126.1 (s, CF2-CH2) [α]D = + 1.6 (c, 1, CHC13) 3/ Exemple 3 :RMN 19 F (235 MHz, CDC1 3 ): δ -80.7 (s, CF 3 ), -114.2 (s, CF ^ -CFs), - 121.9 (s, 3 CF 2 ), -122.7 (s, CF 2 ) , -123.5 (s, CF 2 ), -126.1 (s, CF 2 -CH 2 ) [α] D = + 1.6 (c, 1, CHC1 3 ) 3 / Example 3:
A- Synthèse du composé BA- Synthesis of compound B
Dans un ballon de 100 ml, 0,99 g (3.10"3 mol) de CF+H3N Lys(Z) OMe sont dissous dans 10 ml de Dichlorométhane. Le pH est amené à 8 à l'aide de TEA. Ensuite 1,15 g (3.10" mol, 1 eq.) de Fmoc Ser(OtBu) OH sont ajoutés ainsi que 1,72 g (3,9.10"3 mol, l,3 eq) de BOP. Le pH est maintenu à 8 tout au long de la réaction. Le milieu est maintenu sous agitation à température ambiante pendant 24 heures. Une fois la réaction terminée (CCM), la phase organique est lavée au HC1 IN, puis au NaHCO3 afin de rétablir un pH de 7. La phase organique est séchée sur Na2SO4, filtrée, puis évaporée sous pression réduite. La cristallisation peut s'effectuer dans un mélange Dichlorométhane / Et2O. On obtient 1,93g du composé 1 sous forme d'une poudre blanche.In a 100 ml flask, 0.99 g (3.10 "3 mol) of CF + H 3 N Lys (Z) OMe are dissolved in 10 ml of Dichloromethane. The pH is brought to 8 using TEA. Then 1.15 g (3.10 " mol, 1 eq.) Of Fmoc Ser (OtBu) OH are added as well as 1.72 g (3.9.10 " 3 mol, 1.3 eq) of BOP. The pH is maintained at 8 The reaction medium is kept stirring at ambient temperature for 24 hours after the reaction is complete (TLC), the organic phase is washed with IN HCl, then with NaHCO 3 in order to restore a pH of 7. The organic phase is dried over Na 2 SO 4 , filtered, then evaporated under reduced pressure, crystallization can be carried out in a Dichloromethane / Et 2 O mixture. 1.93 g of compound 1 are obtained in the form of a white powder.
Rendement : 98%.Yield: 98%.
Rf - 0,58 dans 6 Acétate d'éthyle/ cyclohexane 4. Température de dégradation: 80,6°C. [α]D 2o= +17,9 (c, 1 , CH C12). RMN du 1H dans CDC13: δ = 7,75 (2H, d, ar Fmoc); 7,60 (2H, d, ar Fmoc); 7,43-7,21 (5H, m, arRf - 0.58 in 6 Ethyl acetate / cyclohexane 4. Degradation temperature: 80.6 ° C. [α] D 2 o = +17.9 (c, 1, CH C1 2 ). 1H NMR in CDC1 3 : δ = 7.75 (2H, d, ar Fmoc); 7.60 (2H, d, ar Fmoc); 7.43-7.21 (5H, m, ar
Fmoc, NH Lys); 7,31(5H, s, ar Z Lys); 5,78 (IH, d, NH Ser); 5,08 (2H, s, CH Z Lys); 4,84 (IH, t, NH Z Lys); 4,60 (IH, m, CH Lys); 4,39 (2H, d, CH^ Fmoc); 4,24 (2H, m, CH Ser, CH Fmoc); 3,81 (IH, dd, CΗ^ Ser); 3,73 (3H, s, OCH3 Lys); 3,39 (IH, dd, CH2 Ser); 3,17 (2H, CH2-NH Lys); 1,85-1,29 (6H, m, 1,22 (9H, s, tBu Ser).Fmoc, NH Lys); 7.31 (5H, s, ar Z Lys); 5.78 (1H, d, NH Ser); 5.08 (2H, s, CH Z Lys); 4.84 (1H, t, NH Z Lys); 4.60 (1H, m, CH Lys); 4.39 (2H, d, CH ^ Fmoc); 4.24 (2H, m, CH Ser, CH Fmoc); 3.81 (1H, dd, CΗ ^ Ser); 3.73 (3H, s, OCH 3 Lys); 3.39 (1H, dd, CH 2 Ser); 3.17 (2H, CH2-NH Lys); 1.85-1.29 (6H, m, 1.22 (9H, s, tBu Ser).
RMN du 13C dans CDC13: δ = 172,94 (CO Lys); 170,88 (ÇO Ser); 157,08; 156,67 (2 O-ÇO-NH 13 C NMR in CDC1 3 : δ = 172.94 (CO Lys); 170.88 (ÇO Ser); 157.08; 156.67 (2 O-ÇO-NH
Fmoc et Z); 144,52; 144,36; 141,93; 137,23; 129,13; 128,71 ; 128,35; 127,71; 125,76;Fmoc and Z); 144.52; 144.36; 141.93; 137.23; 129.13; 128.71; 128.35; 127.71; 125.76;
120,62 (C ar Fmoc et Z); 74,96 (Ç_(CH3)3 Ser); 67,80; 67,24 (Ç_H2 Fmoc et Ç_H2 Z); 62,39 (C*-Ç_H2 Ser); 54,93 (Ç_*-CH2 Ser); 52,99; 52,74 (OÇ_H3 Lys et Ç*-CH2 Lys); 47,76 (ÇH Fmoc); 41,27 (ÇH2-NH-CO-O Lys); 32,74 (ÇH2- CH2-NH-CO-O Lys); 30,02 (C*-ÇH2 Lys) ; 27,99 (C(ÇH3)3 Ser); 22,92 (C*-CH2- ÇH2Lys).120.62 (C ar Fmoc and Z); 74.96 (Ç_ (CH 3 ) 3 Ser); 67.80; 67.24 (Ç_H 2 Fmoc and Ç_H 2 Z); 62.39 (C * -Ç_H 2 Ser); 54.93 (Ç _ * - CH 2 Ser); 52.99; 52.74 (OÇ_H 3 Lys and Ç * -CH 2 Lys); 47.76 (ÇH Fmoc); 41.27 (CH 2 -NH-CO-O Lys); 32.74 (CH 2 - CH 2 -NH-CO-O Lys); 30.02 (C * -CH 2 Lys); 27.99 (C (H 3 ) 3 Ser); 22.92 (C * -CH 2 - ÇH 2 Lys).
Dans un ballon de 50 ml, on dissout 0,68 g (1,53.10"3 mol) de Fmoc Asp(OtBu)OH, dans 10' ml de dichlorométhane, 0,34 g (1.83.10"3 mol, 1,2 eq) de pentafluorophénol et 0,38 g (1.83.10" mol, 1,2 eq) de DCC. La réaction est laissée sous agitation à température ambiante pendant 15 heures. Après fîltration, le milieu est concentré sous pression réduite. L'huile résiduelle est chromatographiée sur gel de silice (éluant acétate d'éthyle/ cyclohexane : 2/8). La cristallisation se fait dans l'acétate d'éthyle/ hexane. On obtient 760 mg de 2 sous forme d'une poudre blanche.0.68 g (1.53.10 "3 mol) of Fmoc Asp (OtBu) OH are dissolved in a 50 ml flask, in 10 'ml of dichloromethane, 0.34 g (1.83.10 " 3 mol, 1, 2 eq) of pentafluorophenol and 0.38 g (1.83.10 " mol, 1.2 eq) of DCC. The reaction is left under stirring at room temperature for 15 hours. After filtration, the medium is concentrated under reduced pressure. residual oil is chromatographed on silica gel (eluent ethyl acetate / cyclohexane: 2/8). Crystallization takes place in ethyl acetate / hexane. 760 mg of 2 is obtained in the form of a white powder .
Rendement : 86,2% Point de fusion : 94,6 - 95,8 °C. [ ]D 20= -2,3 (c, 1 , CH2C12).Yield: 86.2% Melting point: 94.6 - 95.8 ° C. [] D 20 = -2.3 (c, 1, CH 2 C1 2 ).
RMN du 1H dans le CDC13: δ = 7,77 (2H, d, ar Fmoc); 7,61 (2H, d, ar Fmoc); 7,43-7,28 (4H, m, ar Fmoc); 5,98 (IH, d, NH); 4,98 (IH, m, CH Asp); 4,49-4,23 (3H, m, CH2 Fmoc, CH Fmoc); 3,15 (IH, dd, CHg Asp); 2,90 (IH, dd, CH2 Asp); 1,48 (9H, s, tBu Asp). RMN du 13C dans le CDC13: δ = 170,35; 168,09 (2 ÇO-O); 156,55 (O-ÇO-NH Fmoc); 144,43; 144,26; 142,01; 128,47; 127,78; 125,79; 120,71 (Ç ar Fmoc); 143,82-136,34 (ÇF) ; 83,39 (Ç(CH3)3 Asp); 68,21 (ÇH2 Fmoc); 50,97 (Ç*-CH2 Asp); 47,76 (ÇH Fmoc); 38,31 (C*- ÇH2 Asp); 28,68 (C(ÇH3)3 Asp). RMN du 19F dans le CDC13: δ = -152,22 (2F); -157,36 (IF); -162,10 (2F) 1H NMR in CDC1 3 : δ = 7.77 (2H, d, ar Fmoc); 7.61 (2H, d, ar Fmoc); 7.43-7.28 (4H, m, ar Fmoc); 5.98 (1H, d, NH); 4.98 (1H, m, CH Asp); 4.49-4.23 (3H, m, CH 2 Fmoc, CH Fmoc); 3.15 (1H, dd, CHg Asp); 2.90 (1H, dd, CH2 Asp); 1.48 (9H, s, tBu Asp). 13 C NMR in CDC1 3 : δ = 170.35; 168.09 (2 ÇO-O); 156.55 (O-ÇO-NH Fmoc); 144.43; 144.26; 142.01; 128.47; 127.78; 125.79; 120.71 (C ar Fmoc); 143.82-136.34 (ÇF); 83.39 (Ç (CH 3 ) 3 Asp); 68.21 (CH 2 Fmoc); 50.97 (C * -CH 2 Asp); 47.76 (CH Fmoc); 38.31 (C * - H 2 Asp); 28.68 (C (H 3 ) 3 Asp). 19 F NMR in CDC1 3 : δ = -152.22 (2F); -157.36 (IF); -162.10 (2F)
Avant le couplage entre le dipeptide et l'acide aminé activé, une étape de déprotection du composé 2 est nécessaire. Pour cela, 1,3 g (1,97 mmole) du dipeptide 1 sont dissous dans 15 ml d'un mélange de pipéridine / dichlorométhane à 10% v/v. Laissé sous agitation pendant deux heures à température ambiante, le milieu est ensuite lavé dans une ampoule à décanter, avec une solution de HC1 IN. La phase organique est ensuite lavée avec une solution saturée d'hydrogénocarbonate de sodium. Les phases organiques sont ensuite séchées sur sulfate de sodium, puis concentrées sous pression réduite. Le couplage peut alors être réalisé.Before coupling between the dipeptide and the activated amino acid, a step of deprotection of the compound 2 is necessary. For this, 1.3 g (1.97 mmol) of dipeptide 1 are dissolved in 15 ml of a mixture of piperidine / dichloromethane at 10% v / v. Left stirring for two hours at room temperature, the medium is then washed in a separatory funnel, with a solution of IN HCl. The organic phase is then washed with a saturated solution of sodium hydrogencarbonate. The organic phases are then dried over sodium sulphate, then concentrated under reduced pressure. The coupling can then be carried out.
Dans un ballon monocol de 100 ml, le dipeptide déprotégé précédemment est dissout dans 20 ml de dichlorométhane en présence de 1,138g (1,97 mmole, leq) de composé 2 sont ajoutés dans le ballon. La réaction se déroule à température ambiante sous flux d'azote, à l'abrit de la lumière, à un pH de 8 fixé par de la DIEA. Au bout de 15 heures, la réaction est terminée (CCM). Le milieu réactionnel est concentré et le résidu est chromatographie sur gel de silice dans un mélange éluant acétate d'éthyle / cyclohexane : 5/5. Après évaporation du solvant, on obtient 970 mg de composé 3 sous forme d'un gel translucide.In a 100 ml single-necked flask, the previously deprotected dipeptide is dissolved in 20 ml of dichloromethane in the presence of 1.138 g (1.97 mmol, leq) of compound 2 are added to the flask. The reaction takes place at room temperature under a flow of nitrogen, protected from light, at a pH of 8 fixed by DIEA. After 15 hours, the reaction is complete (TLC). The reaction medium is concentrated and the residue is chromatographed on silica gel in an eluent mixture of ethyl acetate / cyclohexane: 5/5. After evaporation of the solvent, 970 mg of compound 3 are obtained in the form of a translucent gel.
Rendement : 59,2%. RMN du 1H dans CDC13: δ = 7,78 (2H, d, ar Fmoc); 7,61 (2H, d, arYield: 59.2%. 1H NMR in CDC1 3 : δ = 7.78 (2H, d, ar Fmoc); 7.61 (2H, d, ar
Fmoc); 7,46-7,23 (6H, m, ar Fmoc, NH Lys, NH Ser); 7,36(5H, s, H ar Z Lys);5,93 (IH, d, NH Asp); 5,11 (2H, s, CHz Z Lys); 4,91 (IH, t, NH Z Lys); 4,57 (2H, m, CH Asp, CH Lys); 4,48-4,42 (3H, m, CH Ser, CHj Fmoc); 4,26 (IH, t, CH Fmoc); 3,85 (IH, dd, CTJb Ser); 3,74 (3H, s, OCH3 Lys); 3,41 (IH, dd, CI ; Ser); 3,17 (2H, CH^-NH Lys); 2,88 (IH, dd, CI ; Asp); 2,72 (IH, dd, CH2 Asp); 1,48 (9H, s, tBu Asp); 1,84-1,28 (6H, m, CH-CH CHî-CH^Lys); 1,22 (9H, s, tBu Ser).Fmoc); 7.46-7.23 (6H, m, ar Fmoc, NH Lys, NH Ser); 7.36 (5H, s, H ar Z Lys); 5.93 (1H, d, NH Asp); 5.11 (2H, s, CHz Z Lys); 4.91 (1H, t, NH Z Lys); 4.57 (2H, m, CH Asp, CH Lys); 4.48-4.42 (3H, m, CH Ser, CHj Fmoc); 4.26 (1H, t, CH Fmoc); 3.85 (1H, dd, CTJb Ser); 3.74 (3H, s, OCH3 Lys); 3.41 (1H, dd, CI; Ser); 3.17 (2H, CH ^ -NH Lys); 2.88 (1H, dd, CI; Asp); 2.72 (1H, dd, CH2 Asp); 1.48 (9H, s, tBu Asp); 1.84-1.28 (6H, m, CH-CH CH 1 -CH ^ Lys); 1.22 (9H, s, tBu Ser).
RMN du 13C dans CDC13: δ = 172.96; 171.74; 171.14 ; 170.52 (ÇO Lys, ÇO Ser, 2 ÇO Asp); 157.06; 156.65 (2 O-ÇO-NH Fmoc et Z); 144.32; 141.94; 137.28; 129.14; 128.71; 128.41; 127.76; 125.72; 120.65 (Ç ar Fmoc et Z); 82.59 (Ç(CH3)3 Asp); 74.80 (Ç(CH3)3 Ser); 68.04; 67,88 (ÇH2 Fmoc et ÇH2 Z); 61.61 (C*-ÇH2 Ser); 53.99 (Ç*- CH2 Ser); 52.95; 52.70 (OÇH3 Lys et Ç*-CH2 Lys); 52.04 (Ç*-CH2 Asp); 47.74 (ÇH Fmoc); 41.32 (ÇH2-NH-CO-O Lys); 38.25 (C*-ÇH2 Asp); 32.55 (ÇH2- CH2-NH-CO-O Lys); 29.93 (C*-ÇH2 Lys); 28.67 (C(ÇH3)3 Asp); 27.97 (C(ÇH3)3 Ser); 22.99(C*-CH2- ÇH2 Lys). 13 C NMR in CDC1 3 : δ = 172.96; 171.74; 171.14; 170.52 (ÇO Lys, ÇO Ser, 2 ÇO Asp); 157.06; 156.65 (2 O-ÇO-NH Fmoc and Z); 144.32; 141.94; 137.28; 129.14; 128.71; 128.41; 127.76; 125.72; 120.65 (Ç ar Fmoc and Z); 82.59 (Ç (CH 3 ) 3 Asp); 74.80 (Ç (CH 3 ) 3 Ser); 68.04; 67.88 (ÇH 2 Fmoc and ÇH 2 Z); 61.61 (C * -ÇH 2 Ser); 53.99 (Ç * - CH 2 Ser); 52.95; 52.70 (OÇH 3 Lys and Ç * -CH 2 Lys); 52.04 (Ç * -CH 2 Asp); 47.74 (ÇH Fmoc); 41.32 (CH 2 -NH-CO-O Lys); 38.25 (C * -CH 2 Asp); 32.55 (ÇH 2 - CH 2 -NH-CO-O Lys); 29.93 (C * -ÇH 2 Lys); 28.67 (C (CH 3 ) 3 Asp); 27.97 (C (ÇH 3 ) 3 Ser); 22.99 (C * -CH 2 - ÇH 2 Lys).
Dans 10 ml de dichlorométl ane, sont dissous 1 g (3,36.10" mol) de Fmoc Gly OH, 0,681g de pentafluorophénol (3,7.10"3 mol, 1,1 eq) et 0,764 g de DCC (3,7.10" mol, 1,1 eq). Le milieu est abandonné à température ambiante pendant 24 heures. Le milieu réactionnel est ensuite filtré, puis le filtrat est concentré par évaporation sous pression réduite. Le résidu subit une chromatographie flash sur gel de silice avec un mélange éluant acétate d'éthyle / cyclohexane : 5/5. la cristallisation se fait dans un mélange acétate d'éthyle / cyclohexane. 955 mg de 4 sous forme d'une poudre blanche sont obtenus. Rendement : 61,3%In 10 ml of dichloromethane, 1 g (3.36.10 " mol) of Fmoc Gly OH, 0.681 g of pentafluorophenol (3.7.10 " 3 mol, 1.1 eq) and 0.764 g of DCC (3.7.10 ") are dissolved. mol, 1.1 eq) The medium is left at room temperature for 24 hours, the reaction medium is then filtered, then the filtrate is concentrated by evaporation under reduced pressure The residue is subjected to flash chromatography on silica gel with a mixture eluent ethyl acetate / cyclohexane: 5/5, crystallization takes place in an ethyl acetate / cyclohexane mixture, 955 mg of 4 in the form of a white powder are obtained Yield: 61.3%
Point de fusion :.156,3-157,4. [ ]D 20= -1,3 (c, 1, CH2C12).Melting point: .156.3-157.4. [] D 20 = -1.3 (c, 1, CH 2 C1 2 ).
RMN du 1H dans CDC13 :δ = 7,82 (2H, d, ar Fmoc); 7,65 (2H, d, ar Fmoc); 7,47-7,25 (4H, m, ar Fmoc); 5,40 (IH, t, NH); 4,54-4,42 (5H, m, CH2 Fmoc, CH Fmoc, CH2 Gly)1H NMR in CDC1 3 : δ = 7.82 (2H, d, ar Fmoc); 7.65 (2H, d, ar Fmoc); 7.47-7.25 (4H, m, ar Fmoc); 5.40 (1H, t, NH); 4.54-4.42 (5H, m, CH 2 Fmoc, CH Fmoc, CH 2 Gly)
RMN du 13C dans le CDC13: δ = 167,14 (ÇO-O Gly); 156,84 (NH-ÇO- O); 144,31 ; 142,00; 128,46; 127,77; 125,66; 120,70 (Ç ar Fmoc); 68,14 (ÇH2 Fmoc); 47,73 (ÇH Fmoc); 42,87 (ÇH2 Gly). 13 C NMR in CDC1 3 : δ = 167.14 (ÇO-O Gly); 156.84 (NH-CO-O); 144.31; 142.00; 128.46; 127.77; 125.66; 120.70 (C ar Fmoc); 68.14 (CH 2 Fmoc); 47.73 (CH Fmoc); 42.87 (CH 2 Gly).
RMN du 19F dans le CDC13: δ = -152,44 (2F); -157,25 (IF); -161,96 (2F). 19 F NMR in CDC1 3 : δ = -152.44 (2F); -157.25 (IF); -161.96 (2F).
Cette synthèse est précédée de la déprotection du tripeptide suivant le même protocole que pour la synthèse de ce tripeptide (composé 3). Ce sont 500 mg (6.10"4 mole) de 3 qui sont déprotégés. Une fois déprotégé, ce peptide est dissout dans 10 ml de dichlorométhane dans un ballon de 100 ml. 278 mg(6.10"4 mole, leq) du composé 4 sont ajoutés au milieu réactionnel. La réaction se fait à température ambiante sous flux d'azote, et est maintenue à pH 8 à l'aide de DIEA. Au bout de 16 heures, la réaction est terminée (CCM). Après évaporation sous pression réduite du milieu, l'huile résiduelle est chromatographiée sur gel de silice avec un mélange éluant acétate d'éthyle / cyclohexane : 6/3. Dans un mélange d'acétate d'éthyle / cyclohexane, on obtient 426 mg de 5 sous forme d'une poudre blanche. Rendement : 80%). This synthesis is preceded by deprotection of the tripeptide according to the same protocol as for the synthesis of this tripeptide (compound 3). It is 500 mg (6.10 "4 mole) of 3 which are deprotected. Once deprotected, this peptide is dissolved in 10 ml of dichloromethane in a 100 ml flask. 278 mg (6.10 " 4 mole, leq) of compound 4 are added to the reaction medium. The reaction is carried out at room temperature under a stream of nitrogen, and is maintained at pH 8 using DIEA. After 16 hours, the reaction is complete (TLC). After evaporation of the medium under reduced pressure, the residual oil is chromatographed on silica gel with an eluent mixture of ethyl acetate / cyclohexane: 6/3. In a mixture of ethyl acetate / cyclohexane, 426 mg of 5 is obtained in the form of a white powder. Yield: 80%).
Température de dégradation: 63,7°C. [α]D 20 = +4,6 (c, 1, CH2C12).Degradation temperature: 63.7 ° C. [α] D 20 = +4.6 (c, 1, CH 2 C1 2 ).
RMN du 1H dans CDC13: δ = 7,76 (2H, d, ar Fmoc); 7,60 (2H, d, ar Fmoc); 7,45-7,22 (7H, m, ar Fmoc, NH Lys, NH Ser, NH Asp,); 7,34 (5H, s, ar Z Lys); 5,83 (IH, d, NH Gly); 5,14 (IH, t, NH Z Lys) 5,07 (2H, s, CH Z Lys); 4,82 (IH, m, CH Asp); 4,57 (IH, m, CH Lys); 4,45-4,35 (3H, m, CH Ser, CH2 Fmoc); 4,20 (IH, t, CH Fmoc); 3,89 (2H, m, CHb Gly); 3,75 (IH, dd, CH2 Ser); 3,68 (3H, s, OCH3 Lys); 3,39 (IH, dd, CH2 Ser); 3,15 (2H, CH2-NH Lys); 2,88 (IH, dd, CJJ2 Asp); 2,68 (IH, dd, CH2 Asp); 1,41 (9H, s, tBu Asp); 1,91-1,29 (4H, m, CH-CH2-CH2 Lys); 1,22 (9H, s, tBu Ser). RMN du 13C dans CDC13: δ = 173,00; 171,90; 170,75; 170,49; 169,761H NMR in CDC1 3 : δ = 7.76 (2H, d, ar Fmoc); 7.60 (2H, d, ar Fmoc); 7.45-7.22 (7H, m, ar Fmoc, NH Lys, NH Ser, NH Asp,); 7.34 (5H, s, ar Z Lys); 5.83 (1H, d, NH Gly); 5.14 (1H, t, NH Z Lys) 5.07 (2H, s, CH Z Lys); 4.82 (1H, m, CH Asp); 4.57 (1H, m, CH Lys); 4.45-4.35 (3H, m, CH Ser, CH 2 Fmoc); 4.20 (1H, t, CH Fmoc); 3.89 (2H, m, CHb Gly); 3.75 (1H, dd, CH 2 Ser); 3.68 (3H, s, OCH 3 Lys); 3.39 (1H, dd, CH 2 Ser); 3.15 (2H, CH2-NH Lys); 2.88 (1H, dd, CJJ 2 Asp); 2.68 (1H, dd, CH2 Asp); 1.41 (9H, s, tBu Asp); 1.91-1.29 (4H, m, CH-CH 2 -CH 2 Lys); 1.22 (9H, s, tBu Ser). 13 C NMR in CDC1 3 : δ = 173.00; 171.90; 170.75; 170.49; 169.76
(ÇO Lys, ÇO Ser, 2 ÇO Asp, ÇO Gly); 157,31; 157,13 (2 O-ÇO-NH Fmoc et Z); 144,45; 141,98; 137,27; 129,19; 128,78; 128,42; 127,78; 125,77; 120,68 (Ç ar Fmoc et Z); 82,78 (Ç(CH3)3 Asp); 74,78 (Ç(CH3)3 Ser); 68,05; 67,30 (ÇH2 Fmoc et ÇH2 Z); 61,60 (C*-ÇH2 Ser); 54,19 (Ç*-CH2 Ser); 53,01; 52,72 (OÇH3 Lys et Ç*-CH2 Lys); 50,28 (Ç*-CH2 Asp); 47,76 (ÇH Fmoc); 45,26 (ÇH2 Gly); 41,38 (ÇH2-NH-CO-O Lys); 37,68 (C*-ÇH2 Asp); 32,58 (ÇH2- CH2-NH-CO-O Lys); 29,99 (C*-ÇH2 Lys); 28,67 (C(ÇH3)3 Asp); 28,00 (C(ÇH3)3 Ser); 23,03 (C*-CH2- ÇH2Lys).(ÇO Lys, ÇO Ser, 2 ÇO Asp, ÇO Gly); 157,31; 157.13 (2 O-O-NH Fmoc and Z); 144.45; 141.98; 137.27; 129.19; 128.78; 128.42; 127.78; 125.77; 120.68 (C ar Fmoc and Z); 82.78 (Ç (CH 3 ) 3 Asp); 74.78 (Ç (CH 3 ) 3 Ser); 68.05; 67.30 (ÇH 2 Fmoc and ÇH 2 Z); 61.60 (C * -CH 2 Ser); 54.19 (C * -CH 2 Ser); 53.01; 52.72 (OÇH 3 Lys and Ç * -CH 2 Lys); 50.28 (C * -CH 2 Asp); 47.76 (CH Fmoc); 45.26 (CH 2 Gly); 41.38 (CH 2 -NH-CO-O Lys); 37.68 (C * -CH 2 Asp); 32.58 (CH 2 - CH 2 -NH-CO-O Lys); 29.99 (C * -ÇH 2 Lys); 28.67 (C (H 3 ) 3 Asp); 28.00 (C (H 3 ) 3 Ser); 23.03 (C * -CH 2 - ÇH 2 Lys).
La déprotection du pentapeptide 5 se fait dans les mêmes conditions que lors de la synthèse du composé 1. 400 mg (4,5.10 -"4 mole) du tétrapeptide sont déprotégés. Une fois la déprotection terminée, ce tétrapeptide est dissout dans 15 ml de dichlorométhane dans un ballon monocol de 50 ml. 219 mg (4,5.10" mole, leq) de Boc Arg(Mtr) OH et 188 mg (5,85.10"4 mole, l,3eq) de TBTU sont ajoutés. La réaction se déroule à température ambiante sous flux d'azote, à l'abri de la lumière et est maintenue à pH 8 avec de la DIEA. Au bout de 16 heures, la réaction est terminée (CCM). Après évaporation sous pression réduite, l'huile résiduelle est chromatographiée sur gel de silice à l'aide d'un éluant Acétate d'éthyle/cyclohexane : 9/1. La cristallisation se fait dans l'acétate d'éthyle-cyclohexane. 417 mg de 6 sous forme d'une poudre blanche sont obtenus. Rendement : 92,5 %. Deprotection of pentapeptide 5 is carried out under the same conditions as during the synthesis of compound 1. 400 mg (4.5 × 10 −4 " mole) of the tetrapeptide are deprotected. Once deprotection is complete, this tetrapeptide is dissolved in 15 ml of dichloromethane in a 50 ml monocol flask. 219 mg (4.5.10 " mole, leq) of Boc Arg (Mtr) OH and 188 mg (5.85.10 " 4 mole, l, 3eq) of TBTU are added. takes place at room temperature under nitrogen flow, protected from light and is maintained at pH 8 with DIEA. After 16 hours, the reaction is complete (TLC). After evaporation under reduced pressure, the residual oil is chromatographed on silica gel using an eluent ethyl acetate / cyclohexane: 9/1, crystallization takes place in ethyl acetate-cyclohexane, 417 mg of 6 in the form of a white powder are obtained Yield: 92.5%.
Point de dégradation : 80,2 °C.Degradation point: 80.2 ° C.
[α]D 20= -2,9 (c, l, CH2Cl2). RMN du 1H dans CDC13: δ = 7,64 (IH, d, NH Asp); 7,53 (IH, d, NH[α] D 20 = -2.9 (c, l, CH 2 Cl 2 ). 1H NMR in CDC1 3 : δ = 7.64 (1H, d, NH Asp); 7.53 (1H, d, NH
Gly); 7,49-7,29 (7H, m, ar Z Lys, NH Lys, NH Ser); 6,54 (IH, s, H ar Mtr); 6,34-6,15 (3H, m, 3 NH guanidine Arg); 5,65 (IH, d, NH Boc Arg); 5,24 (IH, t, NH Z Lys); 5,10 (2H, s, CH2 Z Lys); 4,77 (IH, m, CH Asp); 4,46 (2H, m, CH Lys, CH Ser); 4,22 (IH, m, CH Arg); 3,89-3,70 (3H, m, CH Gly, IH du CIL; Ser); 3,84 (3H, s, OCH3 Mtr Arg); 3,71 (3H, s, OCHj Lys); 3,50 (IH, dd, CH^ Ser); 3,21 (2H, m, CH2-CHr-NH Arg); 3,17 (2H, CT ;- NH Lys); 2,90-2,64 (8H, m, 2 CH3 Mtr Arg, CH2 Asp); 2,15 (3H, s, CH3 Mtr Arg); 1,84- 1,19 (37H, m, tBu Asp, tBu Ser, tBu Boc Arg, CH-CH^-CHz-CH^Lys, CH-CH2-CH2 Arg).Gly); 7.49-7.29 (7H, m, ar Z Lys, NH Lys, NH Ser); 6.54 (1H, s, H ar Mtr); 6.34-6.15 (3H, m, 3 NH guanidine Arg); 5.65 (1H, d, NH Boc Arg); 5.24 (1H, t, NH Z Lys); 5.10 (2H, s, CH 2 Z Lys); 4.77 (1H, m, CH Asp); 4.46 (2H, m, CH Lys, CH Ser); 4.22 (1H, m, CH Arg); 3.89-3.70 (3H, m, CH Gly, 1H CIL; Ser); 3.84 (3H, s, OCH 3 Mtr Arg); 3.71 (3H, s, OCHj Lys); 3.50 (1H, dd, CH ^ Ser); 3.21 (2H, m, CH 2 -CHr-NH Arg); 3.17 (2H, CT; - NH Lys); 2.90-2.64 (8H, m, 2 CH 3 Mtr Arg, CH 2 Asp); 2.15 (3H, s, CH 3 Mtr Arg); 1.84-1.19 (37H, m, tBu Asp, tBu Ser, tBu Boc Arg, CH-CH ^ -CHz-CH ^ Lys, CH-CH 2 -CH 2 Arg).
RMN du 13C dans CDC13: δ = 174,32; 174,13; 172,85; 171,48; 171,35; 170,92; 170,18 (ÇO Lys, ÇO Ser, 2 ÇO Asp, ÇO Gly, ÇO Arg, NH-Ç-NH Arg); 158,96; 157,20; 156,55 (2 O-ÇO-NH Boc et Z, Ç-OCH3 Mtr Arg); 139,07; 137,25; 137,06; 134,19; 129,07; 128,87; 128,61; 125,30, 112,28 (Ç ar Mtr et Z); 82,37 (Ç(CH3)3 Asp); 80,53 (Ç(CH3)3 Arg); 74,63 (Ç(CH3)3 Ser); 67,09 (ÇH2 Z); 60,96 (C*-ÇH2 Ser); 55,99 (C-OÇH3 Mtr Arg); 54,57; 54,23 (Ç*-CH2 Ser, Ç*-CH2 Arg); 52,87; 52,74 (OÇH3 Lys et Ç*-CH2 Lys); 50,37 (Ç*-CH2 Asp); 43,92 (ÇH2 Gly); 41,25; 40,75 (ÇH2-NH-CO-O Lys, ÇH2-NH- C-NH Arg); 37,59 (C*-ÇH2 Asp); 32,27 (ÇH2- CH2-NH-CO-O Lys); 30,33; 29,83 (C*- ÇH2 Lys, C*-ÇH2 Arg); 28,94; 28,56; 27,86 (C(ÇH3)3 Asp, C(ÇH3)3 Ser, C(ÇH3)3 Arg); 25,93 (C*-CT2- ÇH2 Arg); 24,74 (C*-CH2- ÇH2 Lys); 23,06; 18,95; 12,52 (3 ÇH3 Mtr Arg). 13 C NMR in CDC1 3 : δ = 174.32; 174.13; 172.85; 171.48; 171.35; 170.92; 170.18 (ÇO Lys, ÇO Ser, 2 ÇO Asp, ÇO Gly, ÇO Arg, NH-Ç-NH Arg); 158.96; 157.20; 156.55 (2 O-ÇO-NH Boc and Z, Ç-OCH 3 Mtr Arg); 139.07; 137.25; 137.06; 134.19; 129.07; 128.87; 128.61; 125.30, 112.28 (C ar Mtr and Z); 82.37 (Ç (CH 3 ) 3 Asp); 80.53 (Ç (CH 3 ) 3 Arg); 74.63 (Ç (CH 3 ) 3 Ser); 67.09 (CH 2 Z); 60.96 (C * -CH 2 Ser); 55.99 (C-OÇH 3 Mtr Arg); 54.57; 54.23 (Ç * -CH 2 Ser, Ç * -CH 2 Arg); 52.87; 52.74 (OÇH 3 Lys and Ç * -CH 2 Lys); 50.37 (C * -CH 2 Asp); 43.92 (CH 2 Gly); 41.25; 40.75 (CH 2 -NH-CO-O Lys, CH 2 -NH-C-NH Arg); 37.59 (C * -CH 2 Asp); 32.27 (CH 2 - CH 2 -NH-CO-O Lys); 30.33; 29.83 (C * -CH 2 Lys, C * -CH 2 Arg); 28.94; 28.56; 27.86 (C (H 3 ) 3 Asp, C (H 3 ) 3 Ser, C (H 3 ) 3 Arg); 25.93 (C * -CT 2 - H 2 Arg); 24.74 (C * -CH 2 - CH 2 Lys); 23.06; 18.95; 12.52 (3 CH 3 Arg Mtr).
7 Dans un ballon de 50 ml, 500 mg (1,01.10"3 mol) de C8Fι7CH2CH2COOH, 278 mg de H2N TYR(OH) OtBu (1,01.10"3 mol, 1 eq) et 251 mg de DCC (1,2.10"3 mol, 1,2 eq) sont dissous dans 10 ml de DMF. La réaction se fait à température ambiante pendant 24 heures sous flux d'azote, à l'abrit de la lumière et est maintenue à pH 8 à l'aide de DIEA. Après évaporation sous pression réduite du DMF, le résidu est chromatographiée sur gel de silice à l'aide d'un éluant Acétate d'éthyle/cyclohexane : 2/8. Le produit est cristallisable dans acétate d'éthyle / n heptane. 550 mg de 7 sous forme d'une poudre blanche sont obtenus. Rendement: 16%. Point de fusion :. [α]D 20= +30,0 (c, 1, CH2C12).7 In a 50 ml flask, 500 mg (1.01.10 "3 mol) of C 8 Fι 7 CH 2 CH 2 COOH, 278 mg of H 2 N TYR (OH) OtBu (1.01.10 " 3 mol, 1 eq ) and 251 mg of DCC (1.2.10 "3 mol, 1.2 eq) are dissolved in 10 ml of DMF. The reaction is carried out at room temperature for 24 hours under a flow of nitrogen, protected from light and is maintained at pH 8 using DIEA After evaporation of the DMF under reduced pressure, the residue is chromatographed on silica gel using an eluent ethyl acetate / cyclohexane: 2/8. is crystallizable from ethyl acetate / n heptane 550 mg of 7 in the form of a white powder are obtained Yield: 16% Melting point:. [α] D 20 = +30.0 (c, 1, CH 2 C1 2 ).
RMN du 1H dans CDC13: δ = 6,98 (2H, d, 2H ar Tyr); 6,72 (2H, d, 2H ar Tyr); 6,04 (IH, m, NH Tyr); 4,72 (IH, m, CH Tyr); 3,02 (2H, m, CF2-CH2-CH2-CO); 2,47 (4H, m, CF2-CH2-CH2-CO, CH2 Tyr); 1,44 (9H, s, tBu).1H NMR in CDC1 3 : δ = 6.98 (2H, d, 2H ar Tyr); 6.72 (2H, d, 2H ar Tyr); 6.04 (1H, m, NH Tyr); 4.72 (1H, m, CH Tyr); 3.02 (2H, m, CF 2 -CH 2 -CH 2 -CO); 2.47 (4H, m, CF 2 -CH2-CH 2 -CO, CH2 Tyr); 1.44 (9H, s, tBu).
RMN du 13C dans CDC13: δ = 170,94 (ÇO-O); 169,52 (ÇO-NH); 155,13 (Ç-OH Tyr); 130,70 (Ç ar Tyr); 127,82 (C-ÇH ar Tyr); 115,49 (ÇH-C-OH ar Tyr); 122.5- 106.3 (ÇF3(ÇF2)7); 82,92 (Ç-(CH3)3)); 53,93 (NH-Çf-CO); 37,32 (C*-ÇH2); 27,16 (ÇH2- CF2); 25,02 (ÇH2-CO). 13 C NMR in CDC1 3 : δ = 170.94 (ÇO-O); 169.52 (C0-NH); 155.13 (C-OH Tyr); 130.70 (C ar Tyr); 127.82 (C-CH ar Tyr); 115.49 (CH-C-OH ar Tyr); 122.5-106.3 (ÇF 3 (ÇF 2 ) 7 ); 82.92 (Ç- (CH 3 ) 3 )); 53.93 (NH-Cf-CO); 37.32 (C * -CH 2 ); 27.16 (CH 2 - CF 2 ); 25.02 (CH 2 -CO).
RMN du 19F dans le CDC13: δ = -82,17 ; -115,50 ; -122,63 ; -123,49 ; - 124,25 ; -127,06. 19 F NMR in CDC1 3 : δ = -82.17; -115.50; -122.63; -123.49; - 124.25; -127.06.
10 380 mg (5,34.10"4 mol) du composé 7 sont dissous à froid dans une solution TFA / CH2CI2 (3/7). Après 2 heures d'agitation, la déprotection est terminée. Le milieu réactionnel est ensuite concentré puis précipité dans l'éther plusieurs fois. Après évaporation, une poudre blanche est obtenue (composé 8).10 380 mg (5,34.10 "4 mol) of compound 7 are dissolved in a cold solution TFA / CH 2 Cl 2 (3/7). After stirring for 2 hours, deprotection is complete. The reaction mixture is then concentrated then precipitated in ether several times After evaporation, a white powder is obtained (compound 8).
150 mg (1,32.10"4 mol) du composé 6 sont dissous dans du méthanol. 8 mg de Palladium sur charbon à 10%» sont additionnés à froid. Le milieu réactionnel est placé sous 8 atmosphères d'hydrogène. Au bout de 2 h 30 la réaction est terminée. Le mélange est filtré sur célite 521 et le filtrat concentré sous pression réduite (composé 9).150 mg (1.32 × 10 −4 mol) of compound 6 are dissolved in methanol. 8 mg of Palladium on carbon at 10% "are added cold. The reaction medium is placed under 8 atmospheres of hydrogen. After 2 At 30 h the reaction is complete, the mixture is filtered through Celite 521 and the filtrate concentrated under reduced pressure (compound 9).
Dans un ballon de 50 ml, le composé 9 (1,32.10"4 mol) est dissout dans 10 ml de DMF. 95 mg du composé 8 (1,45.10"4 mol, 1,1 eq) et 76 mg de TBTU (1,72.10"4 mol, 1,3 eq) sont additionnés. La réaction se fait à température ambiante pendant 24 heures sous flux d'azote, à l'abri de la lumière et est maintenue à pH 8 à l'aide de DIEA. Le milieu réactionnel est concentré sous pression réduite. Le résidu est chromatographiée sur gel de silice à l'aide d'un éluant Acétate d'éthyle. 141 mg de produit 10 sont obtenus sous forme d'une poudre blanche. Rendement 65,3%.In a 50 ml flask, compound 9 (1.32.10 "4 mol) is dissolved in 10 ml of DMF. 95 mg of compound 8 (1.45.10 " 4 mol, 1.1 eq) and 76 mg of TBTU ( 1.72.10 "4 mol, 1.3 eq) are added. The reaction is carried out at room temperature for 24 hours under a flow of nitrogen, protected from light and is maintained at pH 8 using DIEA The reaction medium is concentrated under reduced pressure The residue is chromatographed on silica gel using an eluent Ethyl acetate 141 mg of product 10 are obtained in the form of a white powder. %.
Température de dégradation: 76,8 °C. [α]D 20 = -5,4 (c, l, CH3OH). RMN du 1H dans CD3OD: δ = 7,06 (2H, d, 2H ar Tyr); 6,74 (IH, s, H arDegradation temperature: 76.8 ° C. [α] D 20 = -5.4 (c, l, CH 3 OH). 1H NMR in CD 3 OD: δ = 7.06 (2H, d, 2H ar Tyr); 6.74 (IH, s, H ar
Mtr); 6,69 (2H, d, 2H ar Tyr); 4,80-4,53 (4H, m, CH Asp, CH Lys, CH Ser CH Tyr); 4,04 (IH, m, CH Arg); 3,88-3,85 (5H, m, CI ; Gly, OCH3 Mtr Arg) ; 3,72-3,63 (5H, m, OCH3 Lys, CH2 Ser); 3,22-2,31 (18H, m, CH2-CH2-NH Arg, CH^-NH Lys, 2 CH3 Mtr Arg, CI , Asp, CF2-CH2-CH2-CO, CF2-CH2-CH2-CO, CI , Tyr); 2,15 (3H, s, CH3 Mtr Arg); 1,85- 1,20 (37H, m, tBu Asp, tBu Ser, tBu Boc Arg, CH-CH^-CHj-CI Lys, CH-CH^-CI Arg).Mtr); 6.69 (2H, d, 2H ar Tyr); 4.80-4.53 (4H, m, CH Asp, CH Lys, CH Ser CH Tyr); 4.04 (1H, m, CH Arg); 3.88-3.85 (5H, m, CI; Gly, OCH 3 Mtr Arg); 3.72-3.63 (5H, m, OCH 3 Lys, CH2 Ser); 3.22-2.31 (18H, m, CH 2 -CH 2 -NH Arg, CH ^ -NH Lys, 2 CH3 Mtr Arg, CI, Asp, CF 2 -CH 2 -CH2-CO, CF 2 -CH2 -CH 2 -CO, CI, Tyr); 2.15 (3H, s, CH 3 Mtr Arg); 1.85-1.20 (37H, m, tBu Asp, tBu Ser, tBu Boc Arg, CH-CH ^ -CH j -CI Lys, CH-CH ^ -CI Arg).
RMN du 13C dans CDC13: δ = 179,69; 174,13- 173,95; 172,32; 172,07; 171,29; 171,10; 170,77; 170,21 (CO Lys, ÇO Ser, 2 ÇO Asp, ÇO Gly, ÇO Arg, NH-Ç- NH Arg, ÇO-NH Tyr, ÇO-NH, C8Fι7CH2CH2ÇONH); 158,49; 156,80; 155,94 (O-ÇO-NH Boc, Ç-OCH3 Mtr Arg, Ç-OH ar Tyr); 138,10; 136,49; 133,45; 129,97; 127,54; 124,31; 114,81; 111,41 (Ç ar Mtr, Ç ar Tyr); 81,22; 79,47 (Ç(CH3)3 Asp, Ç(CH3)3 Arg); 73,42 (Ç(CH3)3 Ser); 61,12 (C*-ÇH2 Ser); 54,61; 52,24; 51,31; 49,91 (C-OÇH3 Mtr Arg, Ç*- CH2 Ser, Ç*-CH2 Arg, NH-Ç^-CO Tyr, OÇH3 Lys et Ç*-CH2 Lys, Ç*-CH2 Asp) ; 42,29 ; 40,08 ; 38,60 ; 37,15 ; 36,69 (ÇH2 Gly, ÇH2-NH-CO-O Lys, ÇH2-NH-C-NH Arg, C*-ÇH2 Asp, C*-ÇH2 Tyr); 30,77 ; 28,92 ; 28,25 ; 27,40 ; 26,96 ; 26,34 ; 25,95 (ÇH2- CH2-NH- CO-O Lys, C*-ÇH2 Lys, C*-ÇH2 Arg, C(ÇH3)3 Asp, C(ÇH3)3 Ser, C(ÇH3)3 Arg, ÇH2- CF2, C*-CH2- ÇH2 Lys) ; 22,94 ; 22,53 (1 ÇH3 Mtr Arg, CF2-CH2-ÇH2-CO) ; 17,42 ; 10,71 (2 ÇH3 Mtr Arg). 13 C NMR in CDC1 3 : δ = 179.69; 174.13-173.95; 172.32; 172.07; 171.29; 171,10; 170.77; 170.21 (CO Lys, ÇO Ser, 2 ÇO Asp, ÇO Gly, ÇO Arg, NH-Ç- NH Arg, ÇO-NH Tyr, ÇO-NH, C 8 Fι 7 CH 2 CH 2 ÇONH); 158.49; 156.80; 155.94 (O-ÇO-NH Boc, Ç-OCH 3 Mtr Arg, Ç-OH ar Tyr); 138.10; 136.49; 133.45; 129.97; 127.54; 124.31; 114.81; 111.41 (Ç ar Mtr, Ç ar Tyr); 81.22; 79.47 (Ç (CH 3 ) 3 Asp, Ç (CH 3 ) 3 Arg); 73.42 (Ç (CH 3 ) 3 Ser); 61.12 (C * -CH 2 Ser); 54.61; 52.24; 51.31; 49.91 (C-OÇH 3 Mtr Arg, Ç * - CH 2 Ser, Ç * -CH 2 Arg, NH-Ç ^ -CO Tyr, OÇH 3 Lys and Ç * -CH 2 Lys, Ç * -CH 2 Asp ); 42.29; 40.08; 38.60; 37.15; 36.69 (CH 2 Gly, CH 2 -NH-CO-O Lys, CH 2 -NH-C-NH Arg, C * -CH 2 Asp, C * -CH 2 Tyr); 30.77; 28.92; 28.25; 27.40; 26.96; 26.34; 25.95 (ÇH 2 - CH 2 -NH- CO-O Lys, C * -ÇH 2 Lys, C * -ÇH 2 Arg, C (ÇH 3 ) 3 Asp, C (ÇH 3 ) 3 Ser, C (ÇH 3 ) 3 Arg, ÇH 2 - CF 2, C * -CH 2 - ÇH 2 Lys); 22.94; 22.53 (1 CH 3 Mtr Arg, CF 2 -CH2-CH2-CO); 17.42; 10.71 (2 ÇH 3 Mtr Arg).
Le composé 10 soumis à l'action d'une solution d'acide trifluoroacétique dans le CH2C12 en présence de thioanizole (3 ;5 ;2) pendant 24H conduit au composé B qui est isolé pur après précipitation par ajout d'éther à la solution et chromatographie sur colonne Séphadex G50 (éluant H2O). Après lyophilisation le produit B se présente sous forme de poudre blanche.Compound 10 subjected to the action of a solution of trifluoroacetic acid in CH2Cl2 in the presence of thioanizole (3; 5; 2) for 24 hours leads to compound B which is isolated pure after precipitation by adding ether to the solution and chromatography on a Sephadex G50 column (eluent H2O). After lyophilization, product B is in the form of a white powder.
B- Tests BiologiquesB- Biological Tests
La cytotoxicité de cette molécule a été testée sur des cellules de mélanome B16, aucune toxicité n'a pu être mesurée jusqu'à des concentrations supérieures à lOOμM. Après marquage à l'iode 125, cette molécule injectée par voie IV à un lot de souris porteuses d'un mélanome s'accumule au niveau du stroma de la tumeur puis diffuse lentement au sein de la tumeur (cf Tableau 2)The cytotoxicity of this molecule was tested on B16 melanoma cells, no toxicity could be measured up to concentrations greater than 100 μM. After labeling with iodine 125, this molecule injected IV into a batch of mice carrying a melanoma accumulates in the stroma of the tumor and then diffuses slowly within the tumor (see Table 2)
Tableau 2 : Radoactivité mesurée chez des souris porteuses de mélanome B16 après injection par voie IV de la molécule B (10 μCi/animal). 4/ Exemple 4 : N-(t-butyloxycarbonyl)-iV-γ-(2,3,6-triméthyl-4-méthoxy-benzènesulfonyl)-L-arginyl- glycinyl-0-(t-butyl)-L-aspartyl-0-(t-butyl)-L-sérinyl-Λ'-ε- ((4,4,5,556,6,7,7,8,8,9,9,10,10,ll,ll,ll-heptadécafluoroundécanoyl)-7V-ε-(4-(4-[bis(2- chloroéthyl)amino]phényl)-butyramido)-L-lysinyl-L-tyrosinamido)-L-lysinate de méthyle :Table 2: Radoactivity measured in mice carrying melanoma B16 after IV injection of the molecule B (10 μCi / animal). 4 / Example 4: N- (t-butyloxycarbonyl) -iV- γ - (2,3,6-trimethyl-4-methoxy-benzenesulfonyl) -L-arginyl-glycinyl-0- (t-butyl) -L-aspartyl -0- (t-butyl) -L-serinyl-Λ'- ε - ((4,4,5,5 5 6,6,7,7,8,8,9,9,10,10, ll, ll, ll-heptadécafluoroundécanoyl) -7V- ε - (4- (4- [bis (2-chloroethyl) amino] phenyl) -butyramido) -L-lysinyl-L-tyrosinamido) -L-lysinate:
La synthèse du composé D est comparable à celles précédemment décrite pour les composés précédents et est résumé sur les figures 2 A et 2B. Caractéristique physico-chimiques de DThe synthesis of compound D is comparable to that previously described for the preceding compounds and is summarized in Figures 2 A and 2B. Physico-chemical characteristic of D
Rf : 0.49 dans acétate d'éthyle / méthanol: 98/2. MM : 2051.87 g-mol"1.Rf: 0.49 in ethyl acetate / methanol: 98/2. MM: 2051.87 g-mol "1 .
Température de dégradation : 134 °C. [α]D 20 = - 0.77 (c, 0.1 , CH3OH).Degradation temperature: 134 ° C. [α] D 20 = - 0.77 (c, 0.1, CH 3 OH).
MS (FAB): m/z 2052 [M+H]+, 2074 [M+Na]+.MS (FAB): m / z 2052 [M + H] + , 2074 [M + Na] + .
RMN 1H (CD3OD) :1 H NMR (CD 3 OD):
£7.03 (4H, m, 2H arom. Tyr, 2H arom. Chloramb); 6.67 (5H, m, 2H arom. Tyr, 2H arom. Chloramb., H arom Mtr); 4.81; 4.47; 4.20; 4.01 (6H, 3m, Hα Tyr, 2Hα Lys, Hα Asp, Hα Ser, Hα Arg); 3.82 (3H, s, CH3 éther Mtr Arg); 3.68 (3H, s, CH3 ester méthylique Lys); 3.83- 3.60 (12H, m, 2Hα Gly, 2Hβ Ser, 8H Chloramb.); 3.14-2.75 (10H, m, 4Hε Lys, 2HδArg, 2HβAsp, 2Hβ Tyr); 2.67-2.48 (8H, m, 2Hα et 2Hβ chaîne fluorée, 2Hα Chloramb., 2Hγ Chloramb.); 2.67; 2.61 (6H, 2m, 2 CH3 Mtr Arg); 2.13 (5H, m, 2Hβ Chloramb., CH3 Mtr Arg); 1.93-1.16 (16H, m, 4Hβ Lys, 4Hγ Lys, 4Hδ Lys, 2Hβ Arg ,2Hγ Arg); 1.44; 1.42; 1.16 (27H, 3 s, 9 CH3 ester ter butylique Asp, éther ter butylique Ser, uréthane ter butylique Arg).£ 7.03 (4H, m, 2H arom. Tyr, 2H arom. Chloramb); 6.67 (5H, m, 2H arom. Tyr, 2H arom. Chloramb., H arom Mtr); 4.81; 4.47; 4.20; 4.01 (6H, 3m, H α Tyr, 2H α Lys, H α Asp, H α Ser, H α Arg); 3.82 (3H, s, CH 3 ether Mtr Arg); 3.68 (3H, s, CH 3 methyl ester Lys); 3.83-3.60 (12H, m, 2H α Gly, 2H β Ser, 8H Chloramb.); 3.14-2.75 (10H, m, 4H ε Lys, 2H δ Arg, 2H β Asp, 2H β Tyr); 2.67-2.48 (8H, m, 2H α and 2H β fluorinated chain, 2H α Chloramb., 2H γ Chloramb.); 2.67; 2.61 (6H, 2m, 2 CH 3 Mtr Arg); 2.13 (5H, m, 2H β Chloramb., CH 3 Mtr Arg); 1.93-1.16 (16H, m, 4H β Lys, 4H γ Lys, 4H δ Lys, 2H β Arg , 2H γ Arg); 1.44; 1.42; 1.16 (27H, 3 s, 9 CH 3 ter butyl ester Asp, ter butyl ether Ser, u buthane ter butyl Arg).
RMN 13C (CD3OD) δ 174.67; 174.14; 172.57; 172.31; 171.80; 171.75; 171.26; 170.80; 170.17 (CO Tyr, 2CO 13 C NMR (CD 3 OD) δ 174.67; 174.14; 172.57; 172.31; 171.80; 171.75; 171.26; 170.80; 170.17 (CO Tyr, 2CO
Lys, CO Ser, 2 CO Asp, CO Gly, CO Arg, CO chaîne fluorée, CO Chloramb.); 158.46;Lys, CO Ser, 2 CO Asp, CO Gly, CO Arg, CO fluorinated chain, CO Chloramb.); 158.46;
156.80; 156.67; 155.93 (CO uréthane Boc, C-OCH3 arom. Mtr Arg, C-OH arom. Tyr, C guanidine Arg); 144.55 (C-N arom. Chloramb.); 138.10; 136.48; 133.42; 130.29; 129.97;156.80; 156.67; 155.93 (CO urethane Boc, C-OCH 3 arom. Mtr Arg, C-OH arom. Tyr, C guanidine Arg); 144.55 (CN arom. Chloramb.); 138.10; 136.48; 133.42; 130.29; 129.97;
129.22; 127.51; 124.29; 114.83; 112.06; 111.38; 110.73 (C arom. Mtr, C arom. Tyr, C arom. Chloramb.); 81.17; 79.43 (C ter butylique ester Asp, C uréthane ter butylique Arg);129.22; 127.51; 124.29; 114.83; 112.06; 111.38; 110.73 (C arom. Mtr, C arom. Tyr, C arom. Chloramb.); 81.17; 79.43 (C butyl ester Asp, C urethane ter butyl Arg);
73.40 (C ter butylique éther Ser); 61.14 (Cβ Ser); 54.96; 54.60; 54.53; 53.89; 53.14; 52.26;73.40 (C ter butyl ether Ser); 61.14 (C β Ser); 54.96; 54.60; 54.53; 53.89; 53.14; 52.26;
51.31; 49.90 (CH3 éther méthylique Mtr Arg, Cα Ser, Cα Arg, Cα Tyr, CH3 ester méthylique Lys, 2Cα Lys, Cα Asp, 2C-N Chloramb.); 42.30; 40.29; 38.58; 36.67; 36.52;51.31; 49.90 (CH 3 methyl ether Mtr Arg, C α Ser, C α Arg, C α Tyr, CH 3 methyl ester Lys, 2C α Lys, C α Asp, 2C-N Chloramb.); 42.30; 40.29; 38.58; 36.67; 36.52;
35.20 (Cα Gly, 2Cε Lys, Cδ Arg, Cβ Asp, Cβ Tyr, 2C-C1 Chloramb.); 33.85; 31.02; 30.69;35.20 (C α Gly, 2C ε Lys, C δ Arg, C β Asp, C β Tyr, 2C-C1 Chloramb.); 33.85; 31.02; 30.69;
28.91; 28.67; 28.15; 27.69; 27.41; 26.96; 26.36; 25.82; 25.46 (2Cδ Lys, 2Cβ Lys, Cβ Arg, Cγ Arg, 9 CH3 ter butylique Asp, Ser, Arg, Cα-CF2, 2Cγ Lys, Cα, Cγ Chloramb.); 23.00; 22.66 (Cβ chaîne fluorée, Cγ Chloramb.); 22.52; 17.47; 10.74 (3 CH3 méthyle Mtr Arg).28.91; 28.67; 28.15; 27.69; 27.41; 26.96; 26.36; 25.82; 25.46 (2C δ Lys, 2C β Lys, C β Arg, C γ Arg, 9 CH 3 ter butyl Asp, Ser, Arg, C α -CF 2 , 2C γ Lys, C α , C γ Chloramb.); 23.00; 22.66 (C β fluorinated chain, C γ Chloramb.); 22.52; 17.47; 10.74 (3 CH 3 methyl Mtr Arg).
RMN 19F (CD3OD) : δ -82.26 (3F); -115.39 (2F); -122.77 (6F); -123.62 (2F); -124.30 (2F); -127.17 (2F). 19 F NMR (CD 3 OD): δ -82.26 (3F); -115.39 (2F); -122.77 (6F); -123.62 (2F); -124.30 (2F); -127.17 (2F).
5/ Exemple 5: L-arginyl-glycinyl-L-aspartyl-L-sérinyl-Λ^-ε-(-O-(N-4-(iV-(4,4,5,5,6,6,7,7,8,8,9,9,9- tridécafluorononanoyl)-L-sérinyl)-l->^-D-arabinofuranosylcytosine)-oxycarbonyl)-L- lysinate de méthyle :5 / Example 5: L-arginyl-glycinyl-L-aspartyl-L-serinyl-Λ ^ - ε - (- O- (N- 4 - (iV- (4,4,5,5,6,6,7 , 7,8,8,9,9,9- tridecafluorononanoyl) -L-serinyl) -l -> ^ - D-arabinofuranosylcytosine) -oxycarbonyl) -L- methyl lysinate:
Mode opératoire :Procedure:
Procédé de préparation de F identique aux précédents, la synthèse est résumée sur les figures 3A, 3B et 3C.Method for preparing F identical to the previous ones, the synthesis is summarized in FIGS. 3A, 3B and 3C.
Caractéristiques phsyco-chimiques de F.Phsyco-chemical characteristics of F.
MM : 1390.45 g.mol -1 MS (FAB): m/zMM: 1390.45 g.mol -1 MS (FOB): m / z
1391 [M+H]+.1391 [M + H] + .
RMN 1H (DMSO, D6) :1 H NMR (DMSO, D 6 ):
£8.66 (IH, s, H acide Asp); 8.27-8.16; 7.94-7.84; 7.65; 7.21-6.92 (15H, 3m, Ha, NH GABA, 2NH Ser, 4H guanidine Arg, NH2 Arg, NH Gly, NH Asp, 2NH Lys, NH Ara-C); 5.84 (IH, m, Hb); 5.31 (2H, m, lHα Ser, H ; 4.92 (IH, m, HαAsp); 4.37-3.71 (17H, m, HαLys, Hα Ser, HαArg, 2Hα Gly, 4Hβ Ser, H2, H3, H4, CH3 ester méthylique Lys, 2 H5); 3.18-2.53 (14H, m, 2Hε Lys, CH2-NH GABA, 4OH, 2HβAsp, 2 Hα et 2 Hβ chaîne fluorée); 2.23 (2H, m, CH2-CO GABA); 1.46-1.03 (14H, m, 2Hβ, 2Hγ> 2Hδ Lys, 2Hβ,2Hγ, 2Hδ Arg, CH2 GABA).£ 8.66 (1H, s, H acid Asp); 8.27-8.16; 7.94-7.84; 7.65; 7.21-6.92 (15H, 3m, H a , NH GABA, 2NH Ser, 4H guanidine Arg, NH 2 Arg, NH Gly, NH Asp, 2NH Lys, NH Ara-C); 5.84 (1H, m, H b ); 5.31 (2H, m, 1H α Ser, H; 4.92 (IH, m, H α Asp); 4.37-3.71 (17H, m, H α Lys, H α Ser, H α Arg, 2H α Gly, 4H β Ser , H 2 , H 3 , H 4 , CH 3 methyl ester Lys, 2 H 5 ); 3.18-2.53 (14H, m, 2H ε Lys, CH 2 -NH GABA, 4OH, 2H β Asp, 2 H α and 2 H β chain fluorine); 2.23 (2H, m, CH 2 -CO GABA); 1.46-1.03 (14H, m, 2H β, 2H γ> 2H δ Lys, 2H β, 2H γ , 2H δ Arg, CH 2 GABA).
RMN 13C (DMSO, D6) : δ 173.9; 173.6; 173.4; 172.8; 171.1; 170.4; 170.1; 169.6; 169.1; 168.6 (CO Lys, 2 CO Ser, 2 CO Asp, CO Gly, CO Arg, CO chaîne fluorée, CO GABA); 162.6; 157.4; 156.2; 155.0 (C guanidine Arg, CO uréthane Ser, N-C-NH, N-CO-N); 147.2 (Ca); 94.8 (Cb); 87.5; 86.2 (Cl3 C4); 76.6; 75.0 (C2, C3); 65.4; 62.0; 61.5 (2 Cβ Ser, C5); 55.6; 53.0; 52.5; 52.3; 51.7; 50.1 (2 Cα Ser, Cα Arg, CH3 ester méthylique Lys, Cα Lys, Cα Asp); 42.5 (Cα Gly); 40.8; 38.5; 37.3; 34.8; 34.1; 30.9; 29.4; 29.0; 26.3; 24.8; 24.3; 23.0 (Cε Lys, Cδ Arg, CH2-NH GABA, Cβ Asp, Cδ Lys, Cβ Lys, CH2-CO GABA, Cβ Arg, Cα et Cβ chaîne fluorée, Cγ Arg, CH2 GABA, Cγ Lys). 13 C NMR (DMSO, D 6 ): δ 173.9; 173.6; 173.4; 172.8; 171.1; 170.4; 170.1; 169.6; 169.1; 168.6 (CO Lys, 2 CO Ser, 2 CO Asp, CO Gly, CO Arg, CO fluorinated chain, CO GABA); 162.6; 157.4; 156.2; 155.0 (C guanidine Arg, CO urethane Ser, NC-NH, N-CO-N); 147.2 (C a ); 94.8 (C b ); 87.5; 86.2 (C 13 C 4 ); 76.6; 75.0 (C 2 , C 3 ); 65.4; 62.0; 61.5 (2 C β Ser, C 5 ); 55.6; 53.0; 52.5; 52.3; 51.7; 50.1 (2 C α Ser, C α Arg, CH 3 Lys methyl ester, C α Lys, C α Asp); 42.5 (C α Gly); 40.8; 38.5; 37.3; 34.8; 34.1; 30.9; 29.4; 29.0; 26.3; 24.8; 24.3; 23.0 (C ε Lys, C δ Arg, CH 2 -NH GABA, C β Asp, C δ Lys, C β Lys, CH 2 -CO GABA, C β Arg, C α and C β fluorinated chain, C γ Arg, CH 2 GABA, C γ Lys).
RMN 19F (DMSO, D6) : δ -82.30 (3F); -115.51 (2F); -122.81 (6F); -123.82 (2F); -124.46 (2F); -127.21 (2F). 19 F NMR (DMSO, D 6 ): δ -82.30 (3F); -115.51 (2F); -122.81 (6F); -123.82 (2F); -124.46 (2F); -127.21 (2F).

Claims

REVENDICATIONS
1. Composé répondant à la formule (I) ci-dessous :1. Compound corresponding to formula (I) below:
R [AA3]a3-[AA2]a2-[AA1 ] i IR [AA 3 ] a 3 - [AA 2 ] a 2 - [AA 1 ] i I
(X)x Y PA(X) x Y PA
((
dans laquelle :in which :
PA représente un principe actif susceptible d'agir sur une cible biologique x représente un entier choisi parmi 0 et 1 ; X représente une chaîne peptidique comprenant de 1 à 5 acides aminés ;PA represents an active principle capable of acting on a biological target x represents an integer chosen from 0 and 1; X represents a peptide chain comprising from 1 to 5 amino acids;
AA1? AA2, AA3, identiques ou différents, représentent chacun un acide aminé ; a2, a3, identiques ou différents, représentent chacun un entier choisi parmi O et l ; R représente un groupement choisi parmi :AA 1? AA 2 , AA 3 , identical or different, each represents an amino acid; a 2 , a 3 , identical or different, each represents an integer chosen from O and l; R represents a group chosen from:
- toute molécule susceptible d'être reconnue par la cible du principe actif PA, et- any molecule capable of being recognized by the target of the active ingredient PA, and
- un agent hydrophile permettant la modulation de la balance HLB de la molécule de formule (I), R étant choisi parmi les monosaccharides, les dérivés aminés de sucres, les polysaccharides, les hormones naturelles ou synthétiques, les peptides, les anticorps, les polyéthers, les polyols,a hydrophilic agent allowing the modulation of the HLB balance of the molecule of formula (I), R being chosen from monosaccharides, amino sugar derivatives, polysaccharides, natural or synthetic hormones, peptides, antibodies, polyethers , polyols,
Y représente une chaîne hydrocarbonée fluorée en C4-C12 comportant un O II groupement _ c~ , -NH-, -O-CO-NH-, S ou O permettant son rattachement soit à l'une des extrémités de la chaîne peptidique[AA3]a3-[AA2]a2-[AA1], soit sur la chaîne latérale de l'un des acides aminés AAi, AA.2, AA3 ; la liaison entre PA-(X)X et la chaîne [AA3]a3-[AA2]a2-[AA1] se faisant avec la chaîne latérale de l'un des acides aminés AAl5 AA2, AA3 ou en extrémité de la chaîne peptidique. Y represents a C 4 -C 12 fluorinated hydrocarbon chain comprising an O II group _ c ~ , -NH-, -O-CO-NH-, S or O allowing its attachment either to one of the ends of the peptide chain [AA 3 ] a3 - [AA 2 ] a 2 - [AA 1 ], or on the side chain of one of the amino acids AAi, AA. 2, AA 3 ; the link between PA- (X) X and the chain [AA 3 ] a3 - [AA 2 ] a2 - [AA 1 ] being made with the side chain of one of the amino acids AA l5 AA 2 , AA 3 or end of the peptide chain.
2. Composé selon la revendication 1, caractérisé en ce que le principe actif est choisi parmi ceux ayant une activité anticancéreuse, une activité anti radicaux libres, anti-inflammatoire, antiseptique, analgésique, neuroleptique, antifongique.2. Compound according to Claim 1, characterized in that the active principle is chosen from those having an anticancer activity, an anti-free radical, anti-inflammatory, antiseptic, analgesic, neuroleptic, antifungal activity.
3. Composé selon l'une quelconque des revendications 1 et 2, caractérisé en ce que le principe actif est une molécule linéaire ramifiée ou cyclique comportant de 1 à3. Compound according to any one of claims 1 and 2, characterized in that the active principle is a branched or cyclic linear molecule comprising from 1 to
30 atomes de carbone, une ou plusieurs insaturations, notamment un ou plusieurs cycles aromatiques, et une ou plusieurs fonctions choisies parmi : -O-, -S-, -OH, -SH, -Cl, -F, -Br,30 carbon atoms, one or more unsaturations, in particular one or more aromatic rings, and one or more functions chosen from: -O-, -S-, -OH, -SH, -Cl, -F, -Br,
OO
I III II
-I, — N— , -NH-, -NH2, — C— 3 -COH, -COOH, -CONH2, -COO-, -CONH-,-I, - N—, -NH-, -NH 2 , - C— 3 -COH, -COOH, -CONH 2 , -COO-, -CONH-,
O I I o —s- o o oO I I o —s- o o o
-CON: -s- o -O-C-O- -NH-C-O- -NH-C-NH- =NH,-CON: -s- o -O-C-O- -NH-C-O- -NH-C-NH- = NH,
-O- -O-
O O O OO O O O
-O-P M— O- —O-P II - —O-P H-H — HÇ-P "-OH-O-P M— O- —O-P II - —O-P H-H - HÇ-P "-OH
O O O OH OH i i ιO O O OH OH i i ι
4. Composé selon l'une quelconque des revendications 1 à 3, caractérisé en ce que l'acide aminé relié à PA-(X)X- ou à Y par sa chaîne latérale est choisi parmi ceux comportant une fonction acide, amide, aminé, thiol, alcool sur leur chaîne latérale.4. Compound according to any one of claims 1 to 3, characterized in that the amino acid linked to PA- (X) X - or to Y by its side chain is chosen from those comprising an acid, amide or amino function , thiol, alcohol on their side chain.
5. Composé selon l'une quelconque des revendications 1 à 4, caractérisé en ce que le bras espaceur X comprend 1 à 3 acides aminés.5. Compound according to any one of claims 1 to 4, characterized in that the spacer arm X comprises 1 to 3 amino acids.
6. Composé selon l'une quelconque des revendications 1 à 5, caractérisé en ce que R est un peptide choisi parmi les fragments d'anticorps ou épitope ayant une affinité prononcée pour la cible biologique de PA6. Compound according to any one of claims 1 to 5, characterized in that R is a peptide chosen from antibody fragments or epitopes having a pronounced affinity for the biological target of PA
7. Composé selon la revendications 6, caractérisé en ce qu'il comporte au moins une séquence peptidique choisie parmi la séquence Arg-Gly-Asp.7. Compound according to Claims 6, characterized in that it comprises at least one peptide sequence chosen from the Arg-Gly-Asp sequence.
8. Composé selon l'une quelconque des revendications 1 à 7, caractérisé en ce que R est constitué d'une chaîne polyoxyde d'éthylène comprenant de 5 à 30 unités oxyde d'éthylène ou d'un polyol constitué d'une chaîne alkyle comprenant de 4 à 16 atomes de carbone et de 4 à 16 groupements hydroxyle.8. Compound according to any one of claims 1 to 7, characterized in that R consists of a polyethylene oxide chain comprising from 5 to 30 ethylene oxide units or of a polyol consisting of an alkyl chain comprising from 4 to 16 carbon atoms and from 4 to 16 hydroxyl groups.
9. Composé selon l'une quelconque des revendications 1 à 8, caractérisé en ce que R est choisi parmi : le glucose, le fructose, le mannose, le galactose, le ribose, la glucosamine, le lactose, le cellobiose, le maltose, le lactobionamide, le saccharose. 9. Compound according to any one of claims 1 to 8, characterized in that R is chosen from: glucose, fructose, mannose, galactose, ribose, glucosamine, lactose, cellobiose, maltose, lactobionamide, sucrose.
10. Composé selon l'une quelconque des revendications 1 à 9, caractérisé en ce que l'un au moins du bras espaceur X, de la chaîne peptidique [AA3]a3-[AA2]a2- [AAi] et de R comporte au moins un résidu tyrosine.10. Compound according to any one of claims 1 to 9, characterized in that at least one of the spacer arm X, of the peptide chain [AA 3 ] a3 - [AA 2 ] a 2 - [AAi] and R contains at least one tyrosine residue.
11. Composé selon l'une quelconque des revendications 1 à 10, caractérisé en ce que la chaîne hydrocarbonée fluorée Y est choisie parmi celles répondant11. Compound according to any one of claims 1 to 10, characterized in that the fluorinated hydrocarbon chain Y is chosen from those corresponding
OO
II à la formule A-Y' dans laquelle A représente un groupement choisi parmi : ~ c_ , -NH- , - O-CO-NH-, S, O et Y' représente une molécule répondant à la formule -(CH2)t-(CF )rF, dans laquelle r et t représentent deux entiers avec : 12 > r+t > 4.II to the formula AY 'in which A represents a group chosen from: ~ c_ , -NH-, - O-CO-NH-, S, O and Y' represents a molecule corresponding to the formula - (CH 2 ) t - (CF) r F, in which r and t represent two integers with: 12> r + t> 4.
12. Molécule biologiquement active comportant un fragment de formule (II) :12. Biologically active molecule comprising a fragment of formula (II):
R [AA3]a3-[AA2]a2-[AA1]R [AA 3 ] a 3 - [AA 2 ] a 2 - [AA 1 ]
(X)x(X) x
(II)(II)
dans laquelle x représente un entier choisi parmi 0 et 1 ;in which x represents an integer chosen from 0 and 1;
X représente une chaîne peptidique comprenant de 1 à 5 acides aminés ;X represents a peptide chain comprising from 1 to 5 amino acids;
AAi, AA , AA3, identiques ou différents, représentent chacun un acide aminé a2, a3, identiques ou différents, représentent chacun un entier choisi parmi O et l ;AAi, AA, AA 3 , identical or different, each represents an amino acid a 2 , a 3 , identical or different, each represents an integer chosen from O and l;
R est choisi parmi les monosaccharides, les dérivés aminés de sucres, les polysaccharides, les polyéthers, les polyols, les peptides, les hormones naturelles ou synthétiques, les anticorps ;R is chosen from monosaccharides, amino sugar derivatives, polysaccharides, polyethers, polyols, peptides, natural or synthetic hormones, antibodies;
Y représente une chaîne hydrocarbonée fluorée en C -Cι2 comportant un OY represents a C -Cι 2 fluorinated hydrocarbon chain comprising an O
II groupement _ c_ ,-NH, -O-CO-NH-, S, O permettant son rattachement soit à l'une des extrémités de la chaîne peptidiquefAAsJas-fAAJ^-fAA]], soit sur la chaîne latérale de l'un des acides aminés AA1? AA2> AA3, l'un au moins du bras espaceur X, de la chaîne peptidique [AA3]a3-[AA2]a2-[AAι] et de R comporte au moins un résidu tyrosine.II group _ c_ , -NH, -O-CO-NH-, S, O allowing its attachment either to one of the ends of the peptide chain fAAsJas-fAAJ ^ -fAA]], or on the side chain of one amino acids AA 1? AA 2> AA 3 , at least one of the spacer arm X, of the peptide chain [AA3] a3 - [AA 2 ] a2 - [AAι] and of R comprises at least one tyrosine residue.
13. Composé selon l'une quelconque des revendications 1 à 9, caractérisé en ce qu'il répond à la formule (la) : Su — [AA-,] Y13. Compound according to any one of claims 1 to 9, characterized in that it corresponds to formula (la): Su - [AA-,] Y
(X)x(X) x
PAPA
(la)(the)
dans laquelle :in which :
Su représente un groupement choisi parmi un monosaccharide, un dérivé aminé de monosaccharide, un polysaccharide, un polyol ou un polyéther; AA} représente un acide aminé portant une fonction acide, aminé, alcool, thiol, sur sa chaîne latérale, par l'intermédiaire de laquelle il est relié soit à (X)X-PA soit àSu represents a group chosen from a monosaccharide, an amino derivative of monosaccharide, a polysaccharide, a polyol or a polyether; AA} represents an amino acid carrying an acid, amino, alcohol, thiol function on its side chain, via which it is linked either to (X) X -PA or to
Y; AAi est relié à Su et soit à (X)X-PA, soit à Y, par ses extrémités N- et C-terminales ;Y; AAi is connected to Su and either to (X) X -PA, or to Y, by its N- and C-terminal ends;
PA représente un principe actif susceptible d'agir sur une cible biologique ; x représente un entier choisi parmi 0 et 1 ;PA represents an active principle capable of acting on a biological target; x represents an integer chosen from 0 and 1;
X représente une chaîne peptidique comprenant de 1 à 5 acides aminés ;X represents a peptide chain comprising from 1 to 5 amino acids;
Y représente une chaîne hydrocarbonée fluorée en C -C12 comportant une OY represents a C -C 12 fluorinated hydrocarbon chain comprising an O
II fonction choisie parmi ~ c~ ,-NH, -O-CO-NH-, S, O permettant son rattachement soit à l'une des extrémités de l'acide aminé AAi, soit sur la chaîne latérale de AAII function chosen from ~ c ~ , -NH, -O-CO-NH-, S, O allowing its attachment either to one of the ends of the amino acid AAi, or on the side chain of AA
14. Composé selon la revendication 13, caractérisé en ce que l'une ou plusieurs des conditions ci-dessous sont vérifiées :14. Compound according to claim 13, characterized in that one or more of the conditions below are satisfied:
- Su représente un mono ou un polysaccharide ;- Su represents a mono or a polysaccharide;
- X représente un bras espaceur de nature peptidique comportant au moins un résidu tyrosine ; - AAi représente un acide aminé choisi parmi l'arginine et la lysine ;- X represents a spacer arm of peptide nature comprising at least one tyrosine residue; - AAi represents an amino acid chosen from arginine and lysine;
- Y représente une chaîne hydrocarbonée fluorée en C6-C12 comportant de 5 à 23 atomes de fluor, reliée à l'acide aminé AAi par une fonction -NH-.- Y represents a fluorinated C 6 -C 12 hydrocarbon chain comprising from 5 to 23 fluorine atoms, linked to the amino acid AAi by a -NH- function.
15. Composé selon la revendication 14, caractérisé en ce que le principe actif est choisi parmi les molécules susceptibles de bloquer le processus d'angiogénèse, notamment le thalidomide.15. Compound according to Claim 14, characterized in that the active principle is chosen from molecules capable of blocking the angiogenesis process, in particular thalidomide.
16. Composé selon la revendication 15, caractérisé en ce qu'il répond à la formule A : 16. Compound according to claim 15, characterized in that it corresponds to formula A:
Molécule AMolecule A
17. Composé selon la revendication 15, caractérisé en ce que le principe actif PA est choisi parmi les agents anti-radicalaires, notamment les dérivés du N- benzylidène tertiobutyl aminé oxyde.17. Compound according to claim 15, characterized in that the active ingredient PA is chosen from anti-radical agents, in particular derivatives of N-benzylidene tert-butyl amine oxide.
18. Composé selon la revendication 17, caractérisé en ce qu'il répond à la formule E :18. Compound according to claim 17, characterized in that it corresponds to formula E:
Molécule EMolecule E
19. Composé selon la revendication 12 caractérisé en ce qu'il répond à la formule (Ib) :19. Compound according to Claim 12, characterized in that it corresponds to the formula (Ib):
Pep-[AAι]-Y (Ib) dans laquelle :Pep- [AAι] -Y (Ib) in which :
AAi représente un acide aminé portant une fonction acide, aminé, alcool ou thiol, sur sa chaîne latérale,AAi represents an amino acid carrying an acid, amino, alcohol or thiol function on its side chain,
Y représente une chaîne hydrocarbonée fluorée en C4-C12 comportant une O fonction choisie parmi _ c il_ ,-NH, -O-CO-NH-, S, O permettant son rattachement soit à l'une des extrémités de l'acide aminé AA1; soit sur la chaîne latérale de AAi.Y represents a C 4 -C 12 fluorinated hydrocarbon chain comprising an O function chosen from _ c it _ , -NH, -O-CO-NH-, S, O allowing its attachment either to one of the ends of the amino acid AA 1; either on the side chain of AAi.
Pep représente une chaîne peptidique comportant de 2 à 10, préférentiellement de 4 à 6 acides aminés, l'un au moins de Pep et de AAi comportant au moins un motif tyrosine.Pep represents a peptide chain comprising from 2 to 10, preferably from 4 to 6 amino acids, at least one of Pep and AAi comprising at least one tyrosine unit.
20. Composé selon la revendication 19, caractérisé en ce que Pep comporte une séquence argine-glycine-acide aspartique.20. Compound according to claim 19, characterized in that Pep comprises an argine-glycine-aspartic acid sequence.
21. Composé selon l'une quelconque des revendications 19 et 20, caractérisé en ce qu'il répond à la formule B :21. Compound according to any one of claims 19 and 20, characterized in that it corresponds to formula B:
Molécule BMolecule B
22. Composé selon l'une quelconque des revendications 1 à 11, caractérisé en ce qu'il répond à la formule (le) : Pep-[AAι] — Y22. Compound according to any one of claims 1 to 11, characterized in that it corresponds to the formula (le): Pep- [AAι] - Y
(X)x PA (le)(X) x PA (the)
dans laquelle :in which :
PA représente un principe actif susceptible d'agir sur une cible biologique ; Pep représente une chaîne peptidique comportant de 2 à 10 acides aminés x représente un entier choisi parmi 0 et 1 ;PA represents an active principle capable of acting on a biological target; Pep represents a peptide chain comprising from 2 to 10 amino acids x represents an integer chosen from 0 and 1;
X représente une chaîne peptidique comprenant de 1 à 5 acides aminés ;X represents a peptide chain comprising from 1 to 5 amino acids;
AA} représente un acide aminé portant une fonction acide, aminé, alcool, thiol, sur sa chaîne latérale, Y représente une chaîne hydrocarbonée fluorée en C -Ci2 comportant uneAA} represents an amino acid carrying an acid, amino, alcohol, thiol function on its side chain, Y represents a C -Ci 2 fluorinated hydrocarbon chain comprising a
OO
II fonction choisie parmi _ c_ ,— NH, -O-CO-NH-, S, O permettant son rattachement soit à l'une des extrémités de l'acide aminé AAl5 soit sur la chaîne latérale de AAi.II function chosen from _ c_ , - NH, -O-CO-NH-, S, O allowing its attachment either to one of the ends of the amino acid AA 15 or on the side chain of AAi.
23. Composé selon la revendication 22, caractérisé en ce que l'une ou plusieurs des conditions ci-dessous sont vérifiées : Pep est un peptide reconnu par les intégrines αVβ3 et PA est un agent antimitotique ;23. Compound according to claim 22, characterized in that one or more of the conditions below are verified: Pep is a peptide recognized by the integrins αVβ3 and PA is an antimitotic agent;
X, Pep ou AAi comporte au moins un résidu tyrosine,X, Pep or AAi contains at least one tyrosine residue,
X représente une chaîne de 1 à 3 acides aminés,X represents a chain of 1 to 3 amino acids,
24. Composé selon la revendication 22 ou la revendication 23, caractérisé en ce qu'il répond à l'une des formules C, D et F : 24. Compound according to claim 22 or claim 23, characterized in that it corresponds to one of the formulas C, D and F:
Molécule C (Ara-C)Molecule C (Ara-C)
Molécule D (Melphalan) Molecule D (Melphalan)
Molécule FMolecule F
25. Composé selon la revendication 22, caractérisé en ce que PA est l'adryamicine et X ou Pep comporte un fragment Gly-Phe-Leu-Gly. 25. Compound according to claim 22, characterized in that PA is adryamicin and X or Pep comprises a Gly-Phe-Leu-Gly fragment.
26. Composé selon la revendication 22, caractérisé en ce que PA est choisi parmi le melphalan, le 5-fluorouracile, l'imitinib mésylate.26. Compound according to claim 22, characterized in that PA is chosen from melphalan, 5-fluorouracil, imitinib mesylate.
27. Composition pharmaceutique comprenant un composé selon l'une quelconque des revendications 1 à l l et 13 à 18 dans un support pharmaceutiquement acceptable. 27. A pharmaceutical composition comprising a compound according to any one of claims 1 to 1 and 13 to 18 in a pharmaceutically acceptable carrier.
28. Utilisation d'un composé de formule A, C, D ou F selon l'une des revendications 16 et 24 pour la préparation d'une composition pharmaceutique destinée à prévenir et/ou traiter le cancer.28. Use of a compound of formula A, C, D or F according to one of claims 16 and 24 for the preparation of a pharmaceutical composition intended to prevent and / or treat cancer.
29. Utilisation d'un composé de formule B selon la revendication 21 pour la préparation d'une composition pharmaceutique destinée à détecter la présence de cellules cancéreuses.29. Use of a compound of formula B according to claim 21 for the preparation of a pharmaceutical composition intended for detecting the presence of cancer cells.
30. Utilisation d'un composé de formule E selon la revendication 18 pour la préparation d'une composition pharmaceutique destinée à prévenir et/ou traiter les pathologies liées au stress oxydatif et à la formation des espèces radicalaires oxygénées. 30. Use of a compound of formula E according to claim 18 for the preparation of a pharmaceutical composition intended for preventing and / or treating pathologies linked to oxidative stress and to the formation of oxygenated radical species.
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Families Citing this family (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20050182060A1 (en) * 2004-02-13 2005-08-18 Kelly Michael G. 2-Substituted and 4-substituted aryl nitrone compounds
GB0408164D0 (en) * 2004-04-13 2004-05-19 Immune Targeting Systems Ltd Antigen delivery vectors and constructs
FR2883563B1 (en) * 2005-03-24 2007-06-01 Ts Pharma Sarl NOVEL HEMIFLUOROCARBON BOLAFORM CATIONIC VECTORS AND THEIR APPLICATIONS
CN103764169B (en) * 2011-03-31 2017-06-13 康斯坦策·沙费尔 For the perfluorochemical of non-viral transfer nucleic acid
US11318206B2 (en) 2014-03-28 2022-05-03 Aposense Ltd Compounds and methods for trans-membrane delivery of molecules
AU2015237746B2 (en) * 2014-03-28 2020-01-30 Aposense Ltd. Compounds and methods for trans-membrane delivery of molecules
US9993563B2 (en) 2014-03-28 2018-06-12 Aposense Ltd. Compounds and methods for trans-membrane delivery of molecules
US9889202B2 (en) 2014-03-28 2018-02-13 Aposense Ltd. Compounds and methods for trans-membrane delivery of molecules
US9694084B2 (en) 2014-12-23 2017-07-04 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Methods to induce targeted protein degradation through bifunctional molecules
CN107257800B (en) 2014-12-23 2020-06-30 达纳-法伯癌症研究所股份有限公司 Method for inducing target protein degradation by bifunctional molecules
US11230710B2 (en) 2017-01-09 2022-01-25 Aposense Ltd Compounds and methods for trans-membrane delivery of molecules

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
IT8820888A0 (en) * 1988-06-08 1988-06-08 Eniricerche Spa IMMUNOLOGICALLY ACTIVE SYNTHETIC PEPTIDES FOR THE PREPARATION OF ANTIMALARIA VACCINES.
GB9019558D0 (en) * 1990-09-07 1990-10-24 Szelke Michael Enzyme inhibitors
FR2694559B1 (en) * 1992-08-06 1994-10-28 Atta New amphiphilic derivatives of amino acids or peptides, their preparation process and their use in preparations for biomedical use.
DE69939689D1 (en) * 1998-03-19 2008-11-20 Vertex Pharma CASPASE INHIBITORS

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
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