EA045321B1 - (TRIFLUOROMETHYL) PYRIMIDINE-2-AMINE COMPOUNDS - Google Patents
(TRIFLUOROMETHYL) PYRIMIDINE-2-AMINE COMPOUNDS Download PDFInfo
- Publication number
- EA045321B1 EA045321B1 EA202293127 EA045321B1 EA 045321 B1 EA045321 B1 EA 045321B1 EA 202293127 EA202293127 EA 202293127 EA 045321 B1 EA045321 B1 EA 045321B1
- Authority
- EA
- Eurasian Patent Office
- Prior art keywords
- brain
- plasma
- pharmaceutically acceptable
- acceptable salt
- pain
- Prior art date
Links
- NKOTXYPTXKUCDL-UHFFFAOYSA-N 4-(trifluoromethyl)pyrimidin-2-amine Chemical class NC1=NC=CC(C(F)(F)F)=N1 NKOTXYPTXKUCDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 title 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 68
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 48
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 claims description 34
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 34
- 208000002193 Pain Diseases 0.000 claims description 28
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims description 27
- 208000000094 Chronic Pain Diseases 0.000 claims description 12
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 claims description 10
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 9
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 8
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 7
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 claims description 5
- 208000008035 Back Pain Diseases 0.000 claims description 4
- 208000032131 Diabetic Neuropathies Diseases 0.000 claims description 4
- 208000008930 Low Back Pain Diseases 0.000 claims description 4
- 230000008499 blood brain barrier function Effects 0.000 claims description 4
- 210000001218 blood-brain barrier Anatomy 0.000 claims description 4
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 claims description 4
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 claims description 4
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 4
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 claims description 4
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 230000003349 osteoarthritic effect Effects 0.000 claims description 4
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 claims description 4
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 4
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 claims description 3
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 claims description 2
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 claims 4
- 229940126601 medicinal product Drugs 0.000 claims 4
- 238000011002 quantification Methods 0.000 claims 4
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 claims 2
- 230000006920 protein precipitation Effects 0.000 claims 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims 2
- 102100026459 POU domain, class 3, transcription factor 2 Human genes 0.000 claims 1
- 101710133394 POU domain, class 3, transcription factor 2 Proteins 0.000 claims 1
- 230000009056 active transport Effects 0.000 claims 1
- 239000012491 analyte Substances 0.000 claims 1
- 210000005013 brain tissue Anatomy 0.000 claims 1
- 210000003169 central nervous system Anatomy 0.000 claims 1
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 claims 1
- 150000002431 hydrogen Chemical class 0.000 claims 1
- 238000012623 in vivo measurement Methods 0.000 claims 1
- 238000001294 liquid chromatography-tandem mass spectrometry Methods 0.000 claims 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 claims 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims 1
- 230000008520 organization Effects 0.000 claims 1
- 238000002732 pharmacokinetic assay Methods 0.000 claims 1
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 39
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 19
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 238000002330 electrospray ionisation mass spectrometry Methods 0.000 description 14
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 14
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 13
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 10
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 9
- 238000003818 flash chromatography Methods 0.000 description 8
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 8
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 7
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 7
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 7
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 6
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 6
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 6
- BWHMMNNQKKPAPP-UHFFFAOYSA-L potassium carbonate Chemical compound [K+].[K+].[O-]C([O-])=O BWHMMNNQKKPAPP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 6
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 6
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 6
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 5
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 5
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 5
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 5
- GOEYECACIBFJGZ-NPAGUKBMSA-N molport-023-276-197 Chemical compound N([C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)NCC(O)=O)C(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)C(C)C GOEYECACIBFJGZ-NPAGUKBMSA-N 0.000 description 5
- 229910052938 sodium sulfate Inorganic materials 0.000 description 5
- 235000011152 sodium sulphate Nutrition 0.000 description 5
- -1 2,4,6-trifluorophenyl Chemical group 0.000 description 4
- ZLIUVGFJXHOHLN-UHFFFAOYSA-N 4-chloro-6-(trifluoromethyl)pyrimidin-2-amine Chemical compound NC1=NC(Cl)=CC(C(F)(F)F)=N1 ZLIUVGFJXHOHLN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000012591 Dulbecco’s Phosphate Buffered Saline Substances 0.000 description 4
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 4
- ZRALSGWEFCBTJO-UHFFFAOYSA-N Guanidine Chemical compound NC(N)=N ZRALSGWEFCBTJO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 108010067610 bovine adrenal medulla 8-22 Proteins 0.000 description 4
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 4
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 4
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 4
- 239000000543 intermediate Substances 0.000 description 4
- 239000012044 organic layer Substances 0.000 description 4
- 239000000047 product Substances 0.000 description 4
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 4
- OZFAFGSSMRRTDW-UHFFFAOYSA-N (2,4-dichlorophenyl) benzenesulfonate Chemical compound ClC1=CC(Cl)=CC=C1OS(=O)(=O)C1=CC=CC=C1 OZFAFGSSMRRTDW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- KZVQEFWTOKWCGU-UHFFFAOYSA-N 4-chloro-5-methyl-6-(trifluoromethyl)pyrimidin-2-amine Chemical compound CC1=C(C(F)(F)F)N=C(N)N=C1Cl KZVQEFWTOKWCGU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N Formic acid Chemical compound OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229920000663 Hydroxyethyl cellulose Polymers 0.000 description 3
- KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N Palladium Chemical compound [Pd] KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 3
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 3
- 238000002868 homogeneous time resolved fluorescence Methods 0.000 description 3
- NFHFRUOZVGFOOS-UHFFFAOYSA-N palladium;triphenylphosphane Chemical compound [Pd].C1=CC=CC=C1P(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1.C1=CC=CC=C1P(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1.C1=CC=CC=C1P(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1.C1=CC=CC=C1P(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 NFHFRUOZVGFOOS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 3
- 229910000027 potassium carbonate Inorganic materials 0.000 description 3
- LPNYRYFBWFDTMA-UHFFFAOYSA-N potassium tert-butoxide Chemical compound [K+].CC(C)(C)[O-] LPNYRYFBWFDTMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 3
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 3
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 3
- QQFWMPUXPLBWTG-UHFFFAOYSA-N 2,4,6-trifluorophenol Chemical compound OC1=C(F)C=C(F)C=C1F QQFWMPUXPLBWTG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CKKOVFGIBXCEIJ-UHFFFAOYSA-N 2,6-difluorophenol Chemical compound OC1=C(F)C=CC=C1F CKKOVFGIBXCEIJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XVMMUXDMDCBVMJ-UHFFFAOYSA-N 2-amino-5-methyl-4-(trifluoromethyl)-1H-pyrimidin-6-one Chemical compound CC1=C(C(F)(F)F)NC(N)=NC1=O XVMMUXDMDCBVMJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GXLBZCOVVKNAKA-UHFFFAOYSA-N 4-(4-bromo-2,6-difluorophenoxy)-6-(trifluoromethyl)pyrimidin-2-amine Chemical compound NC1=NC(C(F)(F)F)=CC(OC(C(F)=CC(Br)=C2)=C2F)=N1 GXLBZCOVVKNAKA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FMSBNGUENSNSFH-UHFFFAOYSA-N 4-[2-amino-5-iodo-6-(trifluoromethyl)pyrimidin-4-yl]oxy-3,5-difluorobenzonitrile Chemical compound NC(N=C1OC(C(F)=CC(C#N)=C2)=C2F)=NC(C(F)(F)F)=C1I FMSBNGUENSNSFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HTGUNMITOARXPQ-UHFFFAOYSA-N 4-chloro-5-iodo-6-(trifluoromethyl)pyrimidin-2-amine Chemical compound NC1=NC(Cl)=C(I)C(C(F)(F)F)=N1 HTGUNMITOARXPQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000012289 Corticotropin-Releasing Hormone Human genes 0.000 description 2
- 108010022152 Corticotropin-Releasing Hormone Proteins 0.000 description 2
- 239000000055 Corticotropin-Releasing Hormone Substances 0.000 description 2
- 239000007995 HEPES buffer Substances 0.000 description 2
- AFVFQIVMOAPDHO-UHFFFAOYSA-N Methanesulfonic acid Chemical compound CS(O)(=O)=O AFVFQIVMOAPDHO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LQZMLBORDGWNPD-UHFFFAOYSA-N N-iodosuccinimide Chemical compound IN1C(=O)CCC1=O LQZMLBORDGWNPD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CHJJGSNFBQVOTG-UHFFFAOYSA-N N-methyl-guanidine Natural products CNC(N)=N CHJJGSNFBQVOTG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PXHVJJICTQNCMI-UHFFFAOYSA-N Nickel Chemical compound [Ni] PXHVJJICTQNCMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 2
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 2
- WQDUMFSSJAZKTM-UHFFFAOYSA-N Sodium methoxide Chemical compound [Na+].[O-]C WQDUMFSSJAZKTM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000556 agonist Substances 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 239000012267 brine Substances 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 2
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 2
- SWSQBOPZIKWTGO-UHFFFAOYSA-N dimethylaminoamidine Natural products CN(C)C(N)=N SWSQBOPZIKWTGO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- 238000010494 dissociation reaction Methods 0.000 description 2
- 230000005593 dissociations Effects 0.000 description 2
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 2
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 description 2
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 2
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 2
- 102000019053 human mas-related gene-X1 receptor Human genes 0.000 description 2
- 108010026956 human mas-related gene-X1 receptor Proteins 0.000 description 2
- 238000004811 liquid chromatography Methods 0.000 description 2
- 238000004895 liquid chromatography mass spectrometry Methods 0.000 description 2
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 2
- QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N nitrogen group Chemical group [N] QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 2
- XHXFXVLFKHQFAL-UHFFFAOYSA-N phosphoryl trichloride Chemical compound ClP(Cl)(Cl)=O XHXFXVLFKHQFAL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 description 2
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 2
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 2
- 230000004044 response Effects 0.000 description 2
- 238000009738 saturating Methods 0.000 description 2
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 2
- HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M sodium;chloride;hydrate Chemical compound O.[Na+].[Cl-] HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 2
- JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N toluene-4-sulfonic acid Chemical compound CC1=CC=C(S(O)(=O)=O)C=C1 JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ITMCEJHCFYSIIV-UHFFFAOYSA-M triflate Chemical compound [O-]S(=O)(=O)C(F)(F)F ITMCEJHCFYSIIV-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- RIOQSEWOXXDEQQ-UHFFFAOYSA-N triphenylphosphine Chemical compound C1=CC=CC=C1P(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 RIOQSEWOXXDEQQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 1,4-Dioxane Chemical compound C1COCCO1 RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GBBSAMQTQCPOBF-UHFFFAOYSA-N 2,4,6-trimethyl-1,3,5,2,4,6-trioxatriborinane Chemical compound CB1OB(C)OB(C)O1 GBBSAMQTQCPOBF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XZNZJDPPWWFJAL-UHFFFAOYSA-N 3,5-difluoro-4-hydroxybenzonitrile Chemical compound OC1=C(F)C=C(C#N)C=C1F XZNZJDPPWWFJAL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PEGNOMJUAGLTBP-UHFFFAOYSA-N 4-(2,6-difluorophenoxy)-5-methyl-6-(trifluoromethyl)pyrimidin-2-amine Chemical compound CC1=C(C(F)(F)F)N=C(N)N=C1OC(C(F)=CC=C1)=C1F PEGNOMJUAGLTBP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UPTVYXNVNFORDJ-UHFFFAOYSA-N 4-(2,6-difluorophenoxy)-6-(trifluoromethyl)pyrimidin-2-amine Chemical compound NC1=NC(C(F)(F)F)=CC(OC(C(F)=CC=C2)=C2F)=N1 UPTVYXNVNFORDJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 4-(3-methoxyphenyl)aniline Chemical compound COC1=CC=CC(C=2C=CC(N)=CC=2)=C1 OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VUORPWVLNWZAIG-UHFFFAOYSA-N 4-(trifluoromethyl)-6-(2,4,6-trifluorophenoxy)pyrimidin-2-amine Chemical compound NC1=NC(C(F)(F)F)=CC(OC(C(F)=CC(F)=C2)=C2F)=N1 VUORPWVLNWZAIG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UPJAVBCZLMPSFW-UHFFFAOYSA-N 4-[2-amino-5-methyl-6-(trifluoromethyl)pyrimidin-4-yl]oxy-3,5-difluorobenzonitrile Chemical compound CC1=C(C(F)(F)F)N=C(N)N=C1OC(C(F)=CC(C#N)=C1)=C1F UPJAVBCZLMPSFW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HSCWIZVCZFMSIX-UHFFFAOYSA-N 4-[2-amino-6-(trifluoromethyl)pyrimidin-4-yl]oxy-3,5-difluorobenzonitrile Chemical compound NC1=NC(C(F)(F)F)=CC(OC(C(F)=CC(C#N)=C2)=C2F)=N1 HSCWIZVCZFMSIX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GPRPSJPFAAGLCA-UHFFFAOYSA-N 4-bromo-2,6-difluorophenol Chemical compound OC1=C(F)C=C(Br)C=C1F GPRPSJPFAAGLCA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WDBDBESSWWFAGO-UHFFFAOYSA-N 5-methyl-4-(trifluoromethyl)-6-(2,4,6-trifluorophenoxy)pyrimidin-2-amine Chemical compound CC(C(C(F)(F)F)=NC(N)=N1)=C1OC(C(F)=CC(F)=C1)=C1F WDBDBESSWWFAGO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000019901 Anxiety disease Diseases 0.000 description 1
- 101100325759 Arabidopsis thaliana BAM8 gene Proteins 0.000 description 1
- 206010003497 Asphyxia Diseases 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N Copper Chemical compound [Cu] RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004354 Hydroxyethyl cellulose Substances 0.000 description 1
- 239000005909 Kieselgur Substances 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 229940100389 Sulfonylurea Drugs 0.000 description 1
- 238000006887 Ullmann reaction Methods 0.000 description 1
- INAPMGSXUVUWAF-GCVPSNMTSA-N [(2r,3s,5r,6r)-2,3,4,5,6-pentahydroxycyclohexyl] dihydrogen phosphate Chemical compound OC1[C@H](O)[C@@H](O)C(OP(O)(O)=O)[C@H](O)[C@@H]1O INAPMGSXUVUWAF-GCVPSNMTSA-N 0.000 description 1
- WDJHALXBUFZDSR-UHFFFAOYSA-N acetoacetic acid Chemical compound CC(=O)CC(O)=O WDJHALXBUFZDSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 235000012538 ammonium bicarbonate Nutrition 0.000 description 1
- 229940035676 analgesics Drugs 0.000 description 1
- 239000000730 antalgic agent Substances 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 230000004888 barrier function Effects 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- FJDQFPXHSGXQBY-UHFFFAOYSA-L caesium carbonate Chemical compound [Cs+].[Cs+].[O-]C([O-])=O FJDQFPXHSGXQBY-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910000024 caesium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011089 carbon dioxide Nutrition 0.000 description 1
- 210000002318 cardia Anatomy 0.000 description 1
- 230000006037 cell lysis Effects 0.000 description 1
- 239000013553 cell monolayer Substances 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 150000005829 chemical entities Chemical class 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 229910052802 copper Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010949 copper Substances 0.000 description 1
- 238000006880 cross-coupling reaction Methods 0.000 description 1
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 1
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 1
- 238000007405 data analysis Methods 0.000 description 1
- 230000018044 dehydration Effects 0.000 description 1
- 238000006297 dehydration reaction Methods 0.000 description 1
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 description 1
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 description 1
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- 206010013663 drug dependence Diseases 0.000 description 1
- 210000002308 embryonic cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- YLRGPBKEZVHOAW-UHFFFAOYSA-N ethyl 4,4,4-trifluoro-2-methyl-3-oxobutanoate Chemical compound CCOC(=O)C(C)C(=O)C(F)(F)F YLRGPBKEZVHOAW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000005284 excitation Effects 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 239000012065 filter cake Substances 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 239000012458 free base Substances 0.000 description 1
- 238000007429 general method Methods 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 235000019447 hydroxyethyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 208000027866 inflammatory disease Diseases 0.000 description 1
- 210000003292 kidney cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 239000012139 lysis buffer Substances 0.000 description 1
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 238000002483 medication Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 229910052759 nickel Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000012299 nitrogen atmosphere Substances 0.000 description 1
- 238000010899 nucleation Methods 0.000 description 1
- 238000007339 nucleophilic aromatic substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 238000005457 optimization Methods 0.000 description 1
- 229910052763 palladium Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000005192 partition Methods 0.000 description 1
- 239000003208 petroleum Substances 0.000 description 1
- 238000007747 plating Methods 0.000 description 1
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 description 1
- 229940126027 positive allosteric modulator Drugs 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 150000003230 pyrimidines Chemical class 0.000 description 1
- 239000002464 receptor antagonist Substances 0.000 description 1
- 229940044551 receptor antagonist Drugs 0.000 description 1
- 238000012827 research and development Methods 0.000 description 1
- 238000004366 reverse phase liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000007363 ring formation reaction Methods 0.000 description 1
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 1
- 238000010898 silica gel chromatography Methods 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 1
- 208000011117 substance-related disease Diseases 0.000 description 1
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 230000002194 synthesizing effect Effects 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
- 238000000844 transformation Methods 0.000 description 1
- 229910052723 transition metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000003624 transition metals Chemical class 0.000 description 1
- 150000003918 triazines Chemical class 0.000 description 1
- 238000001665 trituration Methods 0.000 description 1
- 238000002604 ultrasonography Methods 0.000 description 1
- 238000003828 vacuum filtration Methods 0.000 description 1
- GTLDTDOJJJZVBW-UHFFFAOYSA-N zinc cyanide Chemical compound [Zn+2].N#[C-].N#[C-] GTLDTDOJJJZVBW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Description
Настоящее изобретение относится к соединениям, которые являются потенциаторами рецептора hMrgX1, к фармацевтическим композициям, содержащим указанные соединения, к способам применения указанных соединений для лечения боли и к промежуточным соединениям и способам, подходящим для синтеза указанных соединений.The present invention relates to compounds that are potentiators of the hMrgX1 receptor, to pharmaceutical compositions containing these compounds, to methods of using these compounds for the treatment of pain, and to intermediate compounds and methods suitable for the synthesis of these compounds.
Подсчитано, что примерно 20% взрослых только в Соединенных Штатах страдают от хронической боли. Хроническая боль является одной из наиболее распространенных причин обращения взрослых за медицинской помощью и связана с ограничениями в подвижности и повседневной активности. К сожалению, хроническая боль часто не поддается современным методам лечения, и многие анальгетики связаны с дозозависимыми побочными эффектами или серьезным риском зависимости и злоупотребления, что может быть существенным препятствием для их применения для лечения хронической боли. Таким образом, существует неудовлетворенная потребность в новых способах лечения хронической боли, особенно в способах лечения, которые снижают или эффективно устраняют такие побочные эффекты.It is estimated that approximately 20% of adults in the United States alone suffer from chronic pain. Chronic pain is one of the most common reasons adults seek medical care and is associated with limitations in mobility and daily activities. Unfortunately, chronic pain is often refractory to current treatments, and many analgesics are associated with dose-related side effects or serious risks of dependence and abuse, which can be a significant barrier to their use for the treatment of chronic pain. Thus, there is an unmet need for new treatments for chronic pain, especially treatments that reduce or effectively eliminate such side effects.
В патенте США № 6326368 В1 описаны некоторые 2-арилокси- и 2-арилтиозамещенные пиримидины и триазины и их производные в качестве антагонистов рецептора кортикотропин-рилизинг фактора (CRF), подходящие для лечения различных расстройств, таких как депрессия, тревожное расстройство, зависимость от лекарственного средства и воспалительные расстройства. В патенте США № 5100459 описаны некоторые замещенные сульфонилмочевины и их промежуточные соединения. В. Вандун (W. Wangdong) et. al., ChemMedChem, vol 10(1), 57-61 (2015) описывают 2-(циклоnроnансульфонамидо)-N(2-этоксифенил)бензамид, ML382, в качестве мощного и селективного положительного аллостерического модулятора MrgX1.US Pat. No. 6,326,368 B1 discloses certain 2-aryloxy- and 2-arylthio-substituted pyrimidines and triazines and their derivatives as corticotropin-releasing factor (CRF) receptor antagonists suitable for the treatment of various disorders such as depression, anxiety disorder, drug dependence drugs and inflammatory disorders. US Pat. No. 5,100,459 describes certain substituted sulfonylureas and their intermediates. W. Wangdong et. al., ChemMedChem, vol 10(1), 57-61 (2015) describe 2-(cyclonanesulfonamido)-N(2-ethoxyphenyl)benzamide, ML382, as a potent and selective positive allosteric modulator of MrgX1.
Существует потребность в альтернативных способах лечения боли, включая хроническую боль. Кроме того, существует потребность в соединениях, которые являются потенциаторами рецептора hMrgX1.There is a need for alternative treatments for pain, including chronic pain. In addition, there is a need for compounds that are potentiators of the hMrgX1 receptor.
Соответственно, в одном варианте реализации настоящего изобретения предложено соединение формулы I:Accordingly, in one embodiment of the present invention there is provided a compound of formula I:
где R1 представляет собой водород или метил; и R2 представляет собой:where R 1 represents hydrogen or methyl; and R 2 is:
или его фармацевтически приемлемая соль. В одном варианте реализации R1 представляет собой водород. В одном варианте реализации R1 представляет собой метил. В одном варианте реализации R2 представляет собой:or a pharmaceutically acceptable salt thereof. In one embodiment, R 1 is hydrogen. In one embodiment, R 1 is methyl. In one embodiment, R 2 is:
В одном варианте реализации R2 представляет собой:In one embodiment, R 2 is:
В одном варианте реализации R2 представляет собой:In one embodiment, R 2 is:
В конкретном варианте реализации соединение представляет собой:In a specific implementation, the connection is:
или его фармацевтически приемлемую соль.or a pharmaceutically acceptable salt thereof.
В конкретном варианте реализации соединение представляет собой:In a specific implementation, the connection is:
- 1 045321- 1 045321
или его фармацевтически приемлемую соль.or a pharmaceutically acceptable salt thereof.
В конкретном варианте реализации соединение представляет собой:In a specific implementation, the connection is:
или его фармацевтически приемлемую соль.or a pharmaceutically acceptable salt thereof.
В конкретном варианте реализации соединение представляет собой:In a specific implementation, the connection is:
или его фармацевтически приемлемую соль.or a pharmaceutically acceptable salt thereof.
В конкретном варианте реализации соединение представляет собой:In a specific implementation, the connection is:
или его фармацевтически приемлемую соль.or a pharmaceutically acceptable salt thereof.
В конкретном варианте реализации соединение представляет собой:In a specific implementation, the connection is:
или его фармацевтически приемлемую соль.or a pharmaceutically acceptable salt thereof.
В одном варианте реализации в настоящем изобретении также предложен способ лечения боли у пациента, нуждающегося в таком лечении, включающий введение пациенту эффективного количества соединения формулы I или его фармацевтически приемлемой соли. В одном варианте реализации в настоящем изобретении дополнительно предложен способ лечения хронической боли у пациента, нуждающегося в таком лечении, включающий введение пациенту эффективного количества соединения формулы I или его фармацевтически приемлемой соли. В одном варианте реализации в настоящем изобретении дополнительно предложен способ лечения хронической боли в пояснице у i пациента, нуждающегося в таком лечении, включающий введение пациенту эффективного количества соединения формулы I или его фармацевтически приемлемой соли. В одном варианте реализации в настоящем изобретении дополнительно предложен способ лечения диабетической периферической нейропатической боли у пациента, нуждающегося в таком лечении, включающий введение пациенту эффективного количества соединения формулы I или его фармацевтически приемлемой соли. В одном варианте реализации в настоящем изобретении дополнительно предложен способ лечения остеоартритической боли у пациента, нуждающегося в таком лечении, включающий введение пациенту эффективного количества соединения формулы I или его фармацевтически приемлемой соли.In one embodiment, the present invention also provides a method of treating pain in a patient in need of such treatment, comprising administering to the patient an effective amount of a compound of Formula I or a pharmaceutically acceptable salt thereof. In one embodiment, the present invention further provides a method of treating chronic pain in a patient in need of such treatment, comprising administering to the patient an effective amount of a compound of Formula I or a pharmaceutically acceptable salt thereof. In one embodiment, the present invention further provides a method of treating chronic low back pain in i patient in need of such treatment, comprising administering to the patient an effective amount of a compound of Formula I or a pharmaceutically acceptable salt thereof. In one embodiment, the present invention further provides a method of treating diabetic peripheral neuropathic pain in a patient in need of such treatment, comprising administering to the patient an effective amount of a compound of Formula I or a pharmaceutically acceptable salt thereof. In one embodiment, the present invention further provides a method of treating osteoarthritic pain in a patient in need of such treatment, comprising administering to the patient an effective amount of a compound of Formula I or a pharmaceutically acceptable salt thereof.
В одном варианте реализации в настоящем изобретении дополнительно предложено соединение формулы I или его фармацевтически приемлемая соль для применения в терапии. В одном варианте реализации в настоящем изобретении предложено соединение формулы I или его фармацевтически приемлемая соль для применения для лечения боли. В одном варианте реализации в настоящем изобретении предложено соединение формулы I или его фармацевтически приемлемая соль для применения для лечения хронической боли.In one embodiment, the present invention further provides a compound of Formula I or a pharmaceutically acceptable salt thereof for use in therapy. In one embodiment, the present invention provides a compound of Formula I or a pharmaceutically acceptable salt thereof for use in the treatment of pain. In one embodiment, the present invention provides a compound of Formula I or a pharmaceutically acceptable salt thereof for use in the treatment of chronic pain.
В одном варианте реализации в настоящем изобретении также предложено применение соединения формулы I или его фармацевтически приемлемой соли для получения лекарственного средства для лечения боли. В одном варианте реализации в настоящем изобретении предложено применение соединения формулы I или его фармацевтически приемлемой соли для получения лекарственного средства для лечения хронической боли.In one embodiment, the present invention also provides the use of a compound of formula I or a pharmaceutically acceptable salt thereof for the preparation of a medicament for the treatment of pain. In one embodiment, the present invention provides the use of a compound of formula I or a pharmaceutically acceptable salt thereof for the preparation of a medicament for the treatment of chronic pain.
В одном варианте реализации в настоящем изобретении дополнительно предложена фармацевтическая композиция, содержащая соединение формулы I или его фармацевтически приемлемую соль и одинIn one embodiment, the present invention further provides a pharmaceutical composition comprising a compound of Formula I or a pharmaceutically acceptable salt thereof and one
- 2 045321 или более фармацевтически приемлемых носителей, разбавителей или вспомогательных веществ. В одном варианте реализации в настоящем изобретении дополнительно предложен способ получения фармацевтической композиции, включающий смешивание соединения формулы I или его фармацевтически приемлемой соли с одним или более фармацевтически приемлемыми носителями, разбавителями или вспомогательными веществами. В одном варианте реализации настоящее изобретение также охватывает новые промежуточные соединения и способы синтеза соединений формулы I.- 2 045321 or more pharmaceutically acceptable carriers, diluents or excipients. In one embodiment, the present invention further provides a method for preparing a pharmaceutical composition, comprising admixing a compound of Formula I or a pharmaceutically acceptable salt thereof with one or more pharmaceutically acceptable carriers, diluents or excipients. In one embodiment, the present invention also covers new intermediates and methods for the synthesis of compounds of Formula I.
Применяемые в настоящем описании термины излечение, лечение или лечить включает сдерживание, замедление, остановку или обращение вспять прогрессирования или тяжести существующего симптома или расстройства.As used herein, the terms cure, treat, or treat include containing, slowing, stopping, or reversing the progression or severity of an existing symptom or disorder.
Применяемый в настоящем описании термин пациент относится к млекопитающему, в частности человеку.As used herein, the term patient refers to a mammal, in particular a human.
Применяемый в настоящем описании термин эффективное количество относится к количеству или дозе соединения согласно настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемой соли, которое при однократном или многократном введении пациенту обеспечивает требуемый эффект у пациента, проходящего диагностику или лечение.As used herein, the term effective amount refers to an amount or dose of a compound of the present invention or a pharmaceutically acceptable salt thereof that, when administered single or multiple times to a patient, provides the desired effect in a patient being diagnosed or treated.
Эффективное количество может быть определено специалистом в данной области техники путем применения известных способов и исследования результатов, полученных при аналогичных обстоятельствах. При определении эффективного для пациента количества лечащий врач-диагност учитывает ряд факторов, включая, но не ограничиваясь ими: биологический вид пациента; его размер, возраст и общее состояние здоровья; конкретное наблюдаемое заболевание или расстройство; степень, или поражение, или тяжесть заболевания или расстройства; ответная реакция у конкретного пациента; конкретное вводимое соединение; способ введения; характеристики биодоступности вводимого лекарственного средства; выбранный режим дозирования; применение сопутствующих лекарственных средств; и другие релевантные обстоятельства.The effective amount can be determined by one skilled in the art by applying known methods and examining the results obtained under similar circumstances. When determining the amount effective for a patient, the attending diagnostician takes into account a number of factors, including, but not limited to: the biological species of the patient; its size, age and general health; the specific disease or disorder being observed; the extent or extent or severity of the disease or disorder; response in a particular patient; the specific compound administered; method of administration; characteristics of the bioavailability of the administered drug; selected dosing regimen; use of concomitant medications; and other relevant circumstances.
Соединения согласно настоящему изобретению готовят в виде фармацевтических композиций, вводимых любым способом, обеспечивающим биодоступность соединения. Наиболее предпочтительно такие композиции предназначены для перорального введения. Такие фармацевтические композиции и способы их получения хорошо известны в данной области техники (см., например, Remington: The Science and Practice of Pharmacy, L. V. Allen, Editor, 22nd Edition, Pharmaceutical Press, 2012).The compounds of the present invention are formulated into pharmaceutical compositions administered by any route that provides bioavailability of the compound. Most preferably, such compositions are for oral administration. Such pharmaceutical compositions and methods for their preparation are well known in the art (see, for example, Remington: The Science and Practice of Pharmacy, LV Allen, Editor, 22nd Edition, Pharmaceutical Press, 2012).
Некоторые промежуточные соединения, описанные в следующих примерах получения, могут содержать одну или более азотзащитных групп. Следует понимать, что защитные группы могут варьироваться, как понятно специалисту в данной области техники, в зависимости от конкретных условий реакции и конкретных проводимых превращений. Условия введения защиты и снятия защиты хорошо известны специалистам в данной области техники и описаны в литературе (см., например, Greene's Protective Groups in Organic Synthesis, Fourth Edition, by Peter G.M. Wuts and Theodora W. Greene, John Wiley and Sons, Inc. 2007).Some of the intermediates described in the following preparation examples may contain one or more nitrogen protecting groups. It should be understood that the protecting groups may vary, as will be appreciated by one skilled in the art, depending on the particular reaction conditions and the particular transformations being carried out. The conditions for introducing and deprotecting are well known to those skilled in the art and are described in the literature (see, for example, Greene's Protective Groups in Organic Synthesis, Fourth Edition, by Peter G. M. Wuts and Theodora W. Greene, John Wiley and Sons, Inc. 2007).
Фармацевтически приемлемую соль соединения согласно настоящему изобретению можно получать, например, путем реакции соответствующего свободного основания соединения согласно настоящему изобретению с соответствующей фармацевтически приемлемой кислотой в подходящем растворителе, таком как диэтиловый эфир, в стандартных условиях, хорошо известных в данной области техники. Кроме того, получение таких фармацевтически приемлемых солей можно проводить одновременно со снятием азотзащитной группы. См., например, Gould, P.L., Salt selection for basic drugs, International Journal of Pharmaceutics, 33: 201-217 (1986); Bastin, R.J., et al. Salt Selection and Optimization Procedures for Pharmaceutical New Chemical Entities, Organic Process Research and Development, 4: 427-435 (2000); и Berge, S.M., et al., Pharmaceutical Salts, Journal of Pharmaceutical Sciences, 66: 1-19, (1977).A pharmaceutically acceptable salt of a compound of the present invention can be prepared, for example, by reacting the corresponding free base of a compound of the present invention with an appropriate pharmaceutically acceptable acid in a suitable solvent such as diethyl ether under standard conditions well known in the art. In addition, the preparation of such pharmaceutically acceptable salts can be carried out simultaneously with the removal of the nitrogen protecting group. See, for example, Gould, P. L., Salt selection for basic drugs, International Journal of Pharmaceutics, 33: 201-217 (1986); Bastin, R. J., et al. Salt Selection and Optimization Procedures for Pharmaceutical New Chemical Entities, Organic Process Research and Development, 4: 427-435 (2000); and Berge, S.M., et al., Pharmaceutical Salts, Journal of Pharmaceutical Sciences, 66: 1-19, (1977).
Определенные сокращения определяются следующим образом: АЦН относится к ацетонитрилу; ВАМ8-22 относится к пептиду бычьего мозгового вещества надпочечников 8-22; кат. № относится к каталожному номеру; CRC относится к кривой зависимости ответа от концентрации; DMEM относится к среде Игла, модифицированной по способу Дульбекко; ДМСО относится к диметилсульфоксиду; DPBS относится к фосфатно-солевому буферу Дульбекко; EC50 относится к эффективной концентрации агента, которая обеспечивает полумаксимальный ответ между исходным уровнем и максимумом после определенного времени воздействия; ЭДТК относится к этилендиаминтетрауксусной кислоте; ИЭР-МС относится к масс-спектрометрии с ионизацией электрораспылением; ФБС относится к фетальной бычьей сыворотке; г относится к грамму или граммам; ч относится к часу или часам; ГЭЦ относится к гидроксиэтилцеллюлозе; HEK293 относится к эмбриональной клетке или клеткам почки человека HEK293; HEPES относится к (4-(2-гидроксиэтил)-1-пиперазинэтансульфоновой кислоте); hMrgX1 относится к рецептору MrgX1 человека; HTRF относится к гомогенной флуоресценции с временным разрешением; IP1 относится к инозитолмонофосфату; Kp, uu относится к коэффициенту распределения несвязанного вещества между головным мозгом и плазмой; ЖХ/ИЭР-МС относится к жидкостной хроматографии с масс-спектрометрией с ионизацией электрораспылением; мин относится к минуте или минутам; мл относится к миллилитру или миллилитрам; Me относится к метилу; моль относится к молю или молям; ммоль относится к миллимолю или миллимолям; нм относится к нано- 3 045321 метру или нанометрам; нмоль относится к наномолям; m/z относится к отношению массы к заряду для масс-спектроскопии; n в контексте биологических данных относится к количеству проходов или количеству испытаний; ФСБ относится к фосфатно-солевому буферу; об/мин относится к оборотам в минуту или минутам; SD относится к стандартному отклонению; SEM относится к стандартной ошибке среднего; ед/мл относится к единицам на миллилитр.Specific abbreviations are defined as follows: ACN refers to acetonitrile; BAM8-22 refers to bovine adrenal medulla peptide 8-22; cat. No. refers to the catalog number; CRC refers to the concentration response curve; DMEM refers to Dulbecco's modified Eagle's medium; DMSO refers to dimethyl sulfoxide; DPBS refers to Dulbecco's phosphate buffered saline; EC 50 refers to the effective concentration of agent that produces a half-maximal response between baseline and maximum after a specified exposure time; EDTA refers to ethylenediaminetetraacetic acid; ESI-MS refers to electrospray ionization mass spectrometry; FBS refers to fetal bovine serum; g refers to a gram or grams; h refers to an hour or hours; HEC refers to hydroxyethylcellulose; HEK293 refers to human embryonic or kidney cells HEK293; HEPES refers to (4-(2-hydroxyethyl)-1-piperazineethanesulfonic acid); hMrgX1 refers to the human MrgX1 receptor; HTRF refers to homogeneous time-resolved fluorescence; IP1 refers to inositol monophosphate; K p , uu refers to the partition coefficient of unbound matter between the brain and plasma; LC/ESI-MS refers to liquid chromatography with electrospray ionization mass spectrometry; min refers to a minute or minutes; ml refers to milliliter or milliliters; Me refers to methyl; mole refers to a mole or moles; mmol refers to millimole or millimoles; nm refers to nano- 3 045321 meter or nanometers; nmol refers to nanomoles; m/z refers to the mass-to-charge ratio for mass spectroscopy; n in the context of biological data refers to the number of passes or number of trials; PBS refers to phosphate-buffered saline; rpm refers to revolutions per minute or minutes; SD refers to standard deviation; SEM refers to the standard error of the mean; U/mL refers to units per milliliter.
Общая химия.General chemistry.
Соединения согласно настоящему изобретению или их соли можно получать при помощи различных способов, известных специалистам в данной области техники, некоторые из которых представлены ниже на схемах, в способах получения и примерах. Специалисту в данной области техники понятно, что конкретные стадии синтеза для каждого из описанных способов можно комбинировать различным образом или осуществлять в сочетании со стадиями из других схем с получением соединений согласно настоящему изобретению или их солей. Продукты каждой стадии на приведенных ниже схемах выделяют при помощи традиционных способов, хорошо известных в данной области техники, включая экстракцию, выпаривание, осаждение, хроматографию, фильтрование, растирание в порошок и кристаллизацию. На приведенных ниже схемах все заместители, если не указано иное, являются такими, как определено ранее. Реагенты и исходные вещества легко доступны специалисту в данной области техники. Следующие схемы, способы получения, примеры и анализы дополнительно иллюстрируют настоящее изобретение, но их не следует рассматривать как ограничивающие объем настоящего изобретения каким-либо образом.The compounds of the present invention or their salts can be prepared using various methods known to those skilled in the art, some of which are presented below in the diagrams, methods of preparation and examples. One skilled in the art will appreciate that the specific synthetic steps for each of the described methods can be combined in various ways or carried out in combination with steps from other schemes to produce the compounds of the present invention or salts thereof. The products of each step in the following schemes are isolated using conventional methods well known in the art, including extraction, evaporation, precipitation, chromatography, filtration, trituration and crystallization. In the diagrams below, all substituents, unless otherwise noted, are as previously defined. Reagents and starting materials are readily available to one skilled in the art. The following diagrams, production methods, examples and analyzes further illustrate the present invention, but they should not be construed as limiting the scope of the present invention in any way.
Схема 1Scheme 1
LG = например, Cl, Br, I, трифлат, мезилат, тозилат Р УLG = e.g. Cl, Br, I, triflate, mesylate, tosylate R U
На схеме 1 показан общий способ получения соединений формулы I (R1 = Н или CH3; R2 = 2,6дифторфенил, 2,4,6-трифторфенил или 4-циано-2,6-дифторфенил) путем реакции нуклеофильного ароматического замещения, как хорошо известно специалисту в данной области техники. Кроме того, соединения формулы I можно получать путем реакции кросс-сочетания с переходными металлами (например, с применением меди, никеля или палладия) или реакций Ульмана, как хорошо описано в данной области техники.Scheme 1 shows a general method for preparing compounds of formula I (R 1 = H or CH 3 ; R 2 = 2,6difluorophenyl, 2,4,6-trifluorophenyl or 4-cyano-2,6-difluorophenyl) by nucleophilic aromatic substitution reaction, as is well known to one skilled in the art. In addition, compounds of formula I can be prepared by cross-coupling reactions with transition metals (eg, using copper, nickel or palladium) or Ullmann reactions, as well described in the art.
Исходный 2-амино-6-трифторметил-5-замещенный пиримидин с соответствующей уходящей группой (LG) в положении 4 (например, LG = Cl, Br, I, трифлат, мезилат, тозилат) является коммерчески доступным. Альтернативно, специалисту в данной области техники понятно, что соответствующий исходный материал можно получать при помощи различных способов, хорошо описанных в данной области, таких как дегидратационная циклизация гуанидина с соответствующим 5-замещенным сложным эфиром 4,4,4-трифтор-2-метил-3-оксобутановой кислоты (R1 = Н, CH3) в щелочных условиях. Превращение последующего циклизованного 2-амино-6-трифторметил-4-гидрокси-5-замещенного пиримидина в соединение с соответствующей LG в положении 4 хорошо известно специалистам в данной области техники.The starting 2-amino-6-trifluoromethyl-5-substituted pyrimidine with the appropriate leaving group (LG) at position 4 (eg LG = Cl, Br, I, triflate, mesylate, tosylate) is commercially available. Alternatively, one skilled in the art will understand that the corresponding starting material can be prepared using various methods well described in the art, such as dehydration cyclization of guanidine with the corresponding 5-substituted 4,4,4-trifluoro-2-methyl-ester. 3-oxobutanoic acid (R 1 = H, CH 3 ) under alkaline conditions. Conversion of the subsequent cyclized 2-amino-6-trifluoromethyl-4-hydroxy-5-substituted pyrimidine to the corresponding LG at position 4 is well known to those skilled in the art.
Способы получения и примеры.Methods of obtaining and examples.
Следующие способы получения и примеры дополнительно иллюстрируют настоящее изобретение и демонстрируют типичные способы синтеза соединения согласно настоящему изобретению. Реагенты и исходные вещества легко доступны или могут быть легко синтезированы специалистом в данной области техники. Следует понимать, что приведенные ниже способы получения и примеры представлены для иллюстрации, а не ограничения, и что специалистами в данной области техники могут быть осуществлены различные модификации.The following preparation methods and examples further illustrate the present invention and demonstrate typical methods for synthesizing the compound of the present invention. The reagents and starting materials are readily available or can be easily synthesized by one skilled in the art. It should be understood that the following preparation methods and examples are presented for illustration and not limitation, and that various modifications may be made by those skilled in the art.
ЖХ/ИЭР-МС проводили на системе для жидкостной хроматографии AGILENT® НР1100. Измерения масс-спектрометрии с ионизацией электрораспылением проводили на квадрупольном массспектрометре с масс-селективным детектором, соединенном с ВЭЖХ HP1100. Условия для ЖХ-МС (низкий рН): колонка: PHENOMENEX® GEMINI® NX C18 2,1x50 мм, 3,0 мкм; градиент: 5-100% В в течение 3 мин, а затем 100% В в течение 0,75 мин, температура колонки: 50°C ± 10°C; скорость потока: 1,2 мл/мин; растворитель А: деионизированная вода с 0,1% НСООН, растворитель В: АЦН с 0,1% муравьиной кислоты; длина волны 214 нм. Альтернативные условия для ЖХ-МС (высокий рН): колонка: колонки XTERRA® MS C18 2,1x50 мм, 3,5 мкм; градиент: 5% растворителя А в течение 0,25 мин, градиент от 5 до 100% растворителя В в течение 3 мин и 100% растворителя В в течение 0,5 мин или от 10% до 100% растворителя В в течение 3 мин и при 100% растворителя В в течение 0,75 мин; температура колонки: 50°C±10°C; скорость потока: 1,2 мл/мин; растворитель А: 10 мМ NH4HCO3 рН 9; растворитель В: АЦН; длина волны: 214 нм.LC/ESI-MS was performed on an AGILENT® HP1100 liquid chromatography system. Electrospray ionization mass spectrometry measurements were performed on a quadrupole mass spectrometer with a mass selective detector coupled to an HP1100 HPLC. Conditions for LC-MS (low pH): column: PHENOMENEX® GEMINI® NX C18 2.1x50 mm, 3.0 µm; gradient: 5-100% B for 3 min followed by 100% B for 0.75 min, column temperature: 50°C ± 10°C; flow rate: 1.2 ml/min; solvent A: deionized water with 0.1% HCOOH, solvent B: ACN with 0.1% formic acid; wavelength 214 nm. Alternative LC-MS conditions (high pH): Column: XTERRA® MS C18 2.1x50 mm, 3.5 µm columns; gradient: 5% solvent A over 0.25 min, gradient from 5 to 100% solvent B over 3 min and 100% solvent B over 0.5 min, or from 10% to 100% solvent B over 3 min and at 100% solvent B for 0.75 min; column temperature: 50°C±10°C; flow rate: 1.2 ml/min; solvent A: 10 mM NH4HCO3 pH 9; solvent B: ACN; wavelength: 214 nm.
- 4 045321- 4 045321
Способ получения 1.Method of obtaining 1.
4-(4-Бром-2,6-дифторфенокси)-6-(трифторметил)пиримидин-2-амин4-(4-Bromo-2,6-difluorophenoxy)-6-(trifluoromethyl)pyrimidin-2-amine
2-Амино-4-хлор-6-(трифторметил)пиримидин (500 мг, 2,4 ммоль) и 4-бром-2,6-дифторфенол (616 мг, 2,9 ммоль) вносили в пробирку для микроволновой печи и добавляли АЦН (10 мл). Добавляли карбонат калия (665 мг, 4,8 ммоль), пробирку герметизировали и грели при 160°C в течение 1 ч в микроволновом реакторе. Реакционную смесь охлаждали, разбавляли водой и три раза экстрагировали этилацетатом. Органические экстракты объединяли и сушили над сульфатом натрия. Смесь фильтровали и полученный фильтрат выпаривали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали путем флэшхроматографии на силикагеле с применением градиента 5-100% этилацетата в гексане с получением указанного в заголовке соединения (789 мг, выход 89%), после выпаривания растворителя из желаемых хроматографических фракций. ИЭР-МС (m/z, 79Br/81Br): 370/372 [М+Н].2-Amino-4-chloro-6-(trifluoromethyl)pyrimidine (500 mg, 2.4 mmol) and 4-bromo-2,6-difluorophenol (616 mg, 2.9 mmol) were added to a microwavable tube ACN (10 ml). Potassium carbonate (665 mg, 4.8 mmol) was added and the tube was sealed and heated at 160°C for 1 hour in a microwave reactor. The reaction mixture was cooled, diluted with water and extracted three times with ethyl acetate. The organic extracts were combined and dried over sodium sulfate. The mixture was filtered and the resulting filtrate was evaporated under reduced pressure. The resulting residue was purified by flash chromatography on silica gel using a 5-100% ethyl acetate in hexane gradient to give the title compound (789 mg, 89% yield) after evaporation of the solvent from the desired chromatographic fractions. ESI-MS (m/z, 79 Br/ 81 Br): 370/372 [M+H].
Способ получения 2.Method of obtaining 2.
2-Амино-5-метил-6-(трифторметил)пиримидин-4-ол сн3 .он nh2 2-Amino-5-methyl-6-(trifluoromethyl)pyrimidin-4-ol sn 3 .on nh 2
25% раствор метоксида натрия в метаноле (5,5 мл, 24 ммоль) добавляли к раствору этил-4,4,4трифтор-2-метил-3-оксобутаноата (4 г, 20 ммоль) и гуанидина (1,2 г, 20 ммоль) в метаноле (100 мл). Перемешивали в течение 23 ч при комнатной температуре. Реакционную смесь выпаривали при пониженном давлении. Полученное белое твердое вещество растворяли в воде (20 мл) и подкисляли уксусной кислотой (2 мл). Полученный продукт собирали путем вакуумного фильтрования, два раза промывали водой и полученный осадок на фильтре сушили под вакуумом с получением указанного в заголовке соединения (2,3 г, выход 60%) в виде белого твердого вещества. ИЭР-МС (m/z): 194 [М+Н].A 25% solution of sodium methoxide in methanol (5.5 ml, 24 mmol) was added to a solution of ethyl 4,4,4trifluoro-2-methyl-3-oxobutanoate (4 g, 20 mmol) and guanidine (1.2 g, 20 mmol) in methanol (100 ml). Stirred for 23 hours at room temperature. The reaction mixture was evaporated under reduced pressure. The resulting white solid was dissolved in water (20 ml) and acidified with acetic acid (2 ml). The resulting product was collected by vacuum filtration, washed with water twice, and the resulting filter cake was dried under vacuum to give the title compound (2.3 g, 60% yield) as a white solid. ESI-MS (m/z): 194 [M+H].
Способ получения 3.Method of obtaining 3.
4-Хлор-5-метил-6-(трифторметил)пиримидин-2-амин сн3 4-Chloro-5-methyl-6-(trifluoromethyl)pyrimidin-2-amine CH 3
X Cl nh2 X Cl nh 2
В пробирке для микроволновой печи фосфорилхлорид (5,5 мл, 59 ммоль) добавяли к 2-амино-5метил-6-(трифторметил)пиримидин-4-олу (2,3 г, 11,9 ммоль). Реакционную смесь грели при 110°C в течение 30 мин в микроволновом реакторе. Реакционную смесь погружали в лед, подщелачивали 5 М водным раствором NaOH (50 мл) и экстрагировали этилацетатом (100 мл). Объединенные экстракты сушили над сульфатом натрия и фильтровали и полученный фильтрат выпаривали при пониженном давлении. Полученный остаток растворяли в дихлорметане и очищали путем флэш-хроматографии на силикагеле, элюируя с градиентом 10-25% этилацетата в гексане, с получением указанного в заголовке соединения (813 мг, выход 32%) в виде белого твердого вещества, после выпаривания желаемых хроматографических фракций. ИЭР-МС (m/z, 35Cl/37Cl): 212/214 [М+Н].In a microwavable tube, phosphoryl chloride (5.5 mL, 59 mmol) was added to 2-amino-5methyl-6-(trifluoromethyl)pyrimidin-4-ol (2.3 g, 11.9 mmol). The reaction mixture was heated at 110°C for 30 min in a microwave reactor. The reaction mixture was immersed in ice, basified with 5 M aqueous NaOH (50 ml) and extracted with ethyl acetate (100 ml). The combined extracts were dried over sodium sulfate and filtered, and the resulting filtrate was evaporated under reduced pressure. The resulting residue was dissolved in dichloromethane and purified by flash chromatography on silica gel, eluting with a gradient of 10-25% ethyl acetate in hexanes, to give the title compound (813 mg, 32% yield) as a white solid, after evaporation of the desired chromatographic fractions . ESI-MS (m/z, 35 Cl/ 37 Cl): 212/214 [M+H].
Способ получения 4.Method of obtaining 4.
4-Хлор-5-йод-6-(трифторметил)пиримидин-2-амин4-Chloro-5-iodo-6-(trifluoromethyl)pyrimidin-2-amine
Объединяли 4-хлор-6-(трифторметил)пиримидин-2-амин (5 г, 25,2 ммоль) в уксусной кислоте (300 мл) с N-йодсукцинимидом (32,0 г, 138 ммоль) при 0°C. Полученную смесь нагревали и перемешивали при 70°C в течение ночи. Реакционную смесь охлаждали и реакцию гасили водой (120 мл). Смесь экстрагировали этилацетатом (100 млх2). Объединенные органические слои промывали солевым раствором (50 млх2), сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Неочищенный продукт очищали путем флэш-хроматографии с получением 4,8 г (выход 53%) указанного в заголовке продукта в виде желтого твердого вещества. ИЭР/МС m/z 324 [M+H]+.Combine 4-chloro-6-(trifluoromethyl)pyrimidin-2-amine (5 g, 25.2 mmol) in acetic acid (300 ml) with N-iodosuccinimide (32.0 g, 138 mmol) at 0°C. The resulting mixture was heated and stirred at 70°C overnight. The reaction mixture was cooled and the reaction was quenched with water (120 ml). The mixture was extracted with ethyl acetate (100 mlx2). The combined organic layers were washed with brine (50 mlx2), dried over Na 2 SO 4 , filtered and concentrated under reduced pressure. The crude product was purified by flash chromatography to provide 4.8 g (53% yield) of the title product as a yellow solid. ESI/MS m/z 324 [M+H]+.
Способ получения 5.Method of obtaining 5.
4-((2-Амино-5-йод-6-(трифторметил)пиримидин-4-ил)окси)-3,5-дифторбензонитрил4-((2-Amino-5-iodo-6-(trifluoromethyl)pyrimidin-4-yl)oxy)-3,5-difluorobenzonitrile
- 5 045321- 5 045321
Объединяли 4-хлор-5-йод-6-(трифторметил)пиримидин-2-амин (2,5 г, 7,0 ммоль, 90 мас.%) и 3,5дифтор-4-гидроксибензонитрил (1,33 г, 8,49 ммоль) в ДМФА (35 мл) и добавляли карбонат калия (2,88 г, 20,8 ммоль). Реакционную смесь грели при 90°C в течение 3 ч. Реакционную смесь охлаждали и реакцию гасили водой (100 мл). Экстрагировали этилацетатом (60 млх2) и объединенные органические слои промывали солевым раствором (50 млх2), сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Неочищенный продукт очищали путем флэш-хроматографии с получением 2,6 г (выход 76%) указанного в заголовке продукта в виде белого твердого вещества. ИЭР/МС m/z 443 [M+H]+.Combine 4-chloro-5-iodo-6-(trifluoromethyl)pyrimidin-2-amine (2.5 g, 7.0 mmol, 90 wt%) and 3,5difluoro-4-hydroxybenzonitrile (1.33 g, 8 .49 mmol) in DMF (35 ml) and potassium carbonate (2.88 g, 20.8 mmol) was added. The reaction mixture was heated at 90°C for 3 hours. The reaction mixture was cooled and the reaction was quenched with water (100 ml). Extracted with ethyl acetate (60 ml x 2 ) and the combined organic layers were washed with brine (50 ml x 2 ), dried over Na 2 SO 4 , filtered and concentrated under reduced pressure. The crude product was purified by flash chromatography to provide 2.6 g (76% yield) of the title product as a white solid. ESI/MS m/z 443 [M+H] + .
Пример 1.Example 1.
4-(2,6-Дифторфенокси)-6-(трифторметил)пиримидин-2-амин4-(2,6-Difluorophenoxy)-6-(trifluoromethyl)pyrimidin-2-amine
В пробирке для микроволновой печи трет-бутоксид калия (270 мг, 2,4 ммоль) добавляли к раствору 2-амино-4-хлор-6-(трифторметил)пиримидина (395 мг, 2,0 ммоль) и 2,6-дифторфенола (289 мг, 2,2 ммоль) в АЦН (8,0 мл). Реакционную смесь грели при 120°C в течение 30 мин в микроволновом реакторе. Реакционную смесь фильтровали через диатомовую землю и фильтрат выпаривали при пониженном давлении. Полученный остаток растворяли в дихлорметане, содержащем небольшое количество метанола, и смесь очищали путем флэш-хроматографии на силикагеле, элюируя с градиентом 5-20% этилацетата в гексане, с получением указанного в заголовке соединения (512 мг, выход 88%) в виде белого кристаллического твердого вещества, после выпаривания растворителя из желаемых хроматографических фракций. ИЭР-МС (m/z): 292 [М+Н].In a microwavable tube, potassium tert-butoxide (270 mg, 2.4 mmol) was added to a solution of 2-amino-4-chloro-6-(trifluoromethyl)pyrimidine (395 mg, 2.0 mmol) and 2,6-difluorophenol (289 mg, 2.2 mmol) in ACN (8.0 ml). The reaction mixture was heated at 120°C for 30 min in a microwave reactor. The reaction mixture was filtered through diatomaceous earth and the filtrate was evaporated under reduced pressure. The resulting residue was dissolved in dichloromethane containing a small amount of methanol, and the mixture was purified by flash chromatography on silica gel, eluting with a gradient of 5-20% ethyl acetate in hexane, to give the title compound (512 mg, 88% yield) as a white crystalline solid, after evaporation of the solvent from the desired chromatographic fractions. ESI-MS (m/z): 292 [M+H].
Пример 2.Example 2.
4-(2,4,6-Трифторфенокси)-6-(трифторметил)пиримидин-2-амин4-(2,4,6-Trifluorophenoxy)-6-(trifluoromethyl)pyrimidin-2-amine
В 500 мл круглодонной колбе карбонат калия (26,9 г, 194,7 ммоль) добавляли к раствору 2-амино-4хлор-6-(трифторметил)пиримидина (19,55 г, 97 ммоль) и 2,4,6-трифторфенола (15,2 г, 97,5 ммоль) в N,Nдиметилформамиде (200 мл). Реакционную смесь грели при 80°C в течение 16 ч. Реакцию гасили водой (500 мл) и реакционную смесь экстрагировали этилацетатом (2х500 мл). Объединенные органические экстракты промывали насыщенным водным раствором NaCl (2х800 мл), сушили над сульфатом натрия, фильтровали и полученный фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали путем флэш-хроматографии на силикагеле, элюируя с градиентом 0-37% этилацетата в петролейном эфире, с получением указанного в заголовке соединения (15,9 г, выход 53%) в виде желтого твердого вещества, после выпаривания желаемых хроматографических фракций. ИЭР-МС (m/z): 310 [М+Н].In a 500 mL round bottom flask, potassium carbonate (26.9 g, 194.7 mmol) was added to a solution of 2-amino-4chloro-6-(trifluoromethyl)pyrimidine (19.55 g, 97 mmol) and 2,4,6-trifluorophenol (15.2 g, 97.5 mmol) in N,Ndimethylformamide (200 ml). The reaction mixture was heated at 80°C for 16 hours. The reaction was quenched with water (500 ml) and the reaction mixture was extracted with ethyl acetate (2x500 ml). The combined organic extracts were washed with saturated aqueous NaCl (2 x 800 ml), dried over sodium sulfate, filtered and the resulting filtrate was concentrated under reduced pressure. The resulting residue was purified by flash chromatography on silica gel, eluting with a gradient of 0-37% ethyl acetate in petroleum ether to give the title compound (15.9 g, 53% yield) as a yellow solid after evaporation of the desired chromatographic fractions. ESI-MS (m/z): 310 [M+H].
Пример 3.Example 3.
4-[2-Амино-6-(трифторметил)пиримидин-4-ил]окси-3,5-дифторбензонитрил4-[2-Amino-6-(trifluoromethyl)pyrimidin-4-yl]oxy-3,5-difluorobenzonitrile
Объединяли 4-(4-бром-2,6-дифторфенокси)-6-(трифторметил)пиримидин-2-амин (300 мг, 0,8 ммоль), цианид цинка (291 мг, 2,4 ммоль), тетракис(трифенилфосфин)палладий (0) (188 мг, 162 нмоль) в пробирке для микроволновой печи и добавляли N,N-диметилформамид (6 мл). Пробирку герметизировали и грели при 100°C в течение ночи в термостате. Реакционную смесь охлаждали, разбавляли водой и три раза экстрагировали этилацетатом. Органические экстракты объединяли и сушили над сульфатом натрия. Смесь фильтровали и полученный фильтрат выпаривали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали путем флэш-хроматографии на силикагеле с применением градиента 5-100% этилацетата в гексане с получением указанного в заголовке соединения (200 мг, выход 78%), после выпаривания растворителя из желаемых хроматографических фракций. ИЭР-МС (m/z): 317 [М+Н].Combine 4-(4-bromo-2,6-difluorophenoxy)-6-(trifluoromethyl)pyrimidin-2-amine (300 mg, 0.8 mmol), zinc cyanide (291 mg, 2.4 mmol), tetrakis(triphenylphosphine) )palladium(0) (188 mg, 162 nmol) in a microwave-safe tube and N,N-dimethylformamide (6 mL) was added. The tube was sealed and heated at 100°C overnight in an incubator. The reaction mixture was cooled, diluted with water and extracted three times with ethyl acetate. The organic extracts were combined and dried over sodium sulfate. The mixture was filtered and the resulting filtrate was evaporated under reduced pressure. The resulting residue was purified by flash silica gel chromatography using a 5-100% ethyl acetate in hexane gradient to give the title compound (200 mg, 78% yield) after evaporation of the solvent from the desired chromatographic fractions. ESI-MS (m/z): 317 [M+H].
- 6 045321- 6 045321
Пример 4.Example 4.
5-Метил-4-(трифторметил)-6-(2,4,6-трифторфенокси)пиримидин-2-амин5-Methyl-4-(trifluoromethyl)-6-(2,4,6-trifluorophenoxy)pyrimidin-2-amine
СН3 FCH 3 F
II т Т Н N^N рААр nh2 II t T N N^N p AA p nh 2
В пробирке для микроволновой печи трет-бутоксид калия (69 мг, 0,6 ммоль) добавляли к раствору 4-хлор-5-метил-6-(трифторметил)пиримидин-2-амина (106 мг, 0,5 ммоль) и 2,4,6-трифторфенола (84 мг, 0,6 ммоль) в АЦН (2,0 мл). Реакционную смесь грели при 120°C в течение 30 мин в микроволновом реакторе. Реакционную смесь фильтровали и полученный фильтрат выпаривали под током воздуха. Полученный остаток растворяли в смеси 1: 1 дихлорметана и метанола и очищали путем флэш-хроматографии на силикагеле, элюируя с градиентом 5-10% этилацетата в гексане, с получением указанного в заголовке соединения (154 мг, выход 95%) в виде беловатого твердого вещества, после выпаривания растворителя из желаемых хроматографических фракций. ИЭР-МС (m/z): 324 [М+Н].In a microwave-safe tube, potassium tert-butoxide (69 mg, 0.6 mmol) was added to a solution of 4-chloro-5-methyl-6-(trifluoromethyl)pyrimidin-2-amine (106 mg, 0.5 mmol) and 2 ,4,6-trifluorophenol (84 mg, 0.6 mmol) in ACN (2.0 ml). The reaction mixture was heated at 120°C for 30 min in a microwave reactor. The reaction mixture was filtered and the resulting filtrate was evaporated under a stream of air. The resulting residue was dissolved in a 1:1 mixture of dichloromethane and methanol and purified by flash chromatography on silica gel, eluting with a gradient of 5-10% ethyl acetate in hexanes, to give the title compound (154 mg, 95% yield) as an off-white solid , after evaporating the solvent from the desired chromatographic fractions. ESI-MS (m/z): 324 [M+H].
Пример 5.Example 5.
4-[2-Амино-5-метил-6-(трифторметил)пиримидин-4-ил]окси-3,5 -дифторбензонитрил4-[2-Amino-5-methyl-6-(trifluoromethyl)pyrimidin-4-yl]oxy-3,5-difluorobenzonitrile
СИз F F3C^^°^ACIz F F 3 C ^^°^A
Η I Т П n^n I nh2 Η I T P n^n I nh 2
Объединяли 4-((2-амино-5-йод-6-(трифторметил)пиримидин-4-ил)окси)-3,5-дифторбензонитрил (1,2 г, 2,4 ммоль, чистота 90%) и триметилбороксин (2,5 г, 10 ммоль, 50 мас.%) в 1,4-диоксане (25 мл), а затем добавляли карбонат цезия (2,4 г, 7,4 ммоль) и тетракис(трифенилфосфин)палладий (0) (580 мг, 0,486855 ммоль) и грели реакционную смесь при 120°C в течение 2 ч в атмосфере азота. Реакционную смесь охлаждали, реакцию гасили водой (50 мл) и реакционную смесь экстрагировали этилацетатом (50 млх2). Органические слои объединяли и промывали солевым раствором (30 млх2). Органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Неочищенный продукт сначала очищали путем флэш-хроматографии на силикагеле, а затем дополнительно очищали путем преп. ВЭЖХ (прибор: DD, способ: с применением колонки Xtimate C18 150x40 ммх10 мкм, условия: вода (10 мМ NH4HO3) - АЦН, В в начале: 50%, В в конце: 80%, с градиентом в течение 10 мин (мин), 100% В, время удерживания: 2 (мин), скорость потока: 60 мл/мин). Полученные потоки объединяли, концентрировали для удаления большей части CH3CN, а затем лиофилизировали с получением 481 мг (выход 60%) указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества. ИЭР/МС (m/z): 331 (М+Н).Combine 4-((2-amino-5-iodo-6-(trifluoromethyl)pyrimidin-4-yl)oxy)-3,5-difluorobenzonitrile (1.2 g, 2.4 mmol, 90% purity) and trimethylboroxine ( 2.5 g, 10 mmol, 50 wt%) in 1,4-dioxane (25 ml), and then cesium carbonate (2.4 g, 7.4 mmol) and tetrakis(triphenylphosphine) palladium (0) were added ( 580 mg, 0.486855 mmol) and heated the reaction mixture at 120°C for 2 hours under a nitrogen atmosphere. The reaction mixture was cooled, the reaction was quenched with water (50 ml) and the reaction mixture was extracted with ethyl acetate (50 ml x 2). The organic layers were combined and washed with saline (30 mlx2). The organic layer was dried over sodium sulfate, filtered and concentrated under reduced pressure. The crude product was first purified by flash chromatography on silica gel and then further purified by Rev. HPLC (device: DD, method: using Xtimate C18 column 150x40 mmx10 µm, conditions: water (10 mM NH4HO3) - ACN, B at the beginning: 50%, B at the end: 80%, with a gradient over 10 min (min ), 100% B, retention time: 2 (min), flow rate: 60 ml/min). The resulting streams were combined, concentrated to remove most of the CH3CN, and then lyophilized to give 481 mg (60% yield) of the title compound as a white solid. ESI/MS (m/z): 331 (M+H).
Пример 6.Example 6.
4-(2,6-Дифторфенокси)-5-метил-6-(трифторметил)пиримидин-2-амин4-(2,6-Difluorophenoxy)-5-methyl-6-(trifluoromethyl)pyrimidin-2-amine
В пробирке для микроволновой печи трет-бутоксид калия (69 мг, 0,6 ммоль) добавляли к раствору 4-хлор-5-метил-6-(трифторметил)пиримидин-2-амина (106 мг, 0,5 ммоль) и 2,6-дифторфенола (72 мг, 0,6 ммоль) в ацетонитриле (2,0 мл). Реакционную смесь грели при 120°C в течение 30 мин в микроволновом реакторе. Реакционную смесь фильтровали и полученный фильтрат выпаривали под током воздуха. Неочищенный продукт очищали путем обращенно-фазовой хроматографии с получением указанного в заголовке соединения (124 мг, выход 81%) в виде белого твердого вещества. ИЭР-МС (m/z): 306 [М+Н].In a microwave-safe tube, potassium tert-butoxide (69 mg, 0.6 mmol) was added to a solution of 4-chloro-5-methyl-6-(trifluoromethyl)pyrimidin-2-amine (106 mg, 0.5 mmol) and 2 ,6-difluorophenol (72 mg, 0.6 mmol) in acetonitrile (2.0 ml). The reaction mixture was heated at 120°C for 30 min in a microwave reactor. The reaction mixture was filtered and the resulting filtrate was evaporated under a stream of air. The crude product was purified by reverse phase chromatography to give the title compound (124 mg, 81% yield) as a white solid. ESI-MS (m/z): 306 [M+H].
Клеточный анализ IP1 для определения EC50 в отношении hMrgX1 путем HTRF.Cellular IP1 assay to determine EC 50 against hMrgX1 by HTRF.
Посев клеток: клетки HEK293, стабильно экспрессирующие рекомбинантный рецептор MrgX1 человека, выращивали в колбах для культивирования (Corning, T150), используя питательную среду, содержащую DMEM с глутамином (GIBCO™ кат. № 11960-044), с добавлением 10% инактивированной нагреванием ФБС (HyClone™, кат. № СН30073), 1% пенициллин/стрептомицин (HyClone™, кат. № СВ30010; 10000 ед/мл пенициллина; 10000 мкг/мл стрептомицина в 0,85% NaCl), 20 мМ HEPES (GIBCO™, кат. № 15630122) и 0,3 мг/мл G418 (GIBCO™, кат. № 11811031). Когда клеточные монослои достигали уровня конфлюентности 80-90%, монослои один раз промывали 10 мл DPBS (HyClone™, кат. № 14190-144), диссоциировали с применением среды для ферментативной диссоциации клеток TrypLE™Cell seeding: HEK293 cells stably expressing the recombinant human MrgX1 receptor were grown in culture flasks (Corning, T150) using growth medium containing DMEM with glutamine (GIBCO™ cat. no. 11960-044) supplemented with 10% heat-inactivated PBS. (HyClone™, cat. no. CH30073), 1% penicillin/streptomycin (HyClone™, cat. no. CB30010; 10,000 units/ml penicillin; 10,000 μg/ml streptomycin in 0.85% NaCl), 20 mM HEPES (GIBCO™, cat. no. 15630122) and 0.3 mg/ml G418 (GIBCO™, cat. no. 11811031). When cell monolayers reached 80-90% confluency, the monolayers were washed once with 10 ml DPBS (HyClone™, cat. no. 14190-144), dissociated using TrypLE™ Enzymatic Cell Dissociation Medium
Express (GIBCO™, кат. № 12605-010) и разбавляли путем добавления 10 мл DPBS. Диссоциированные клетки переносили в стерильную 50 мл коническую пробирку, осаждали путем центрифугирования при 300xg для удаления питательной среды и среды для диссоциации и разбавляли до 1 М клеток/мл в DMEM для посева.Express (GIBCO™, Cat. No. 12605-010) and diluted by adding 10 ml DPBS. Dissociated cells were transferred to a sterile 50 ml conical tube, pelleted by centrifugation at 300xg to remove growth and dissociation media, and diluted to 1 M cells/ml in DMEM for plating.
- 7 045321- 7 045321
Определение активности и эффективности IP1. испытываемые соединения растворяли в ДМСО до концентрации 10 мМ и последовательно разбавляли в ДМСО в планшете для разбавленного маточного раствора для получения кривой зависимости ответа от концентрации из 10 точек. Питательную среду удаляли из планшета с клетками, разбавляли содержимое планшета с маточным разбавленным раствором в 10 концентрациях в среде и вносили в планшет с клетками в концентрации, в 2 раза превышающей конечную максимальную испытываемую концентрацию 30 мкМ. Эндогенный агонист ВАМ8-22 (TocrisBioScience®, кат. № 1763) разбавляли до ЕС15, определенной независимо при минимуме п=3, в планшете с клетками и инкубировали при комнатной температуре в течение 120 мин. Затем в планшет с клетками добавляли половину объема каждого из анти-IPl криптата и й2-меченого IP1 в буфере для лизиса, поставляемого вместе с набором IP-One Gq (CisBio, кат. № 62IPAPEC), для инициирования лизиса клеток и инкубировали в течение 60 мин при комнатной температуре в темноте. В этот момент определяли флуоресценцию при 620 и 665 нм (-100 мкс после лазерного возбуждения).Determination of IP1 activity and efficiency. test compounds were dissolved in DMSO to a concentration of 10 mM and serially diluted in DMSO in a dilution stock plate to obtain a 10-point concentration response curve. The culture medium was removed from the cell plate, the contents of the plate were diluted with the stock dilution solution at 10 concentrations in the medium, and added to the cell plate at a concentration of 2 times the final maximum tested concentration of 30 μM. The endogenous agonist BAM8-22 (TocrisBioScience®, cat. no. 1763) was diluted to EC15, determined independently at a minimum of n=3, in the cell plate and incubated at room temperature for 120 min. Half the volume of each of anti-IPl cryptate and d2-labeled IP1 in the lysis buffer supplied with the IP-One Gq kit (CisBio, cat. no. 62IPAPEC) was then added to the cell plate to initiate cell lysis and incubated for 60 min at room temperature in the dark. At this point, fluorescence was determined at 620 and 665 nm (−100 μs after laser excitation).
Анализ данных: отношение флуоресценции определяли как отношение эмиссии флуоресценции при 620 нм к 665 нм и преобразовывали в концентрацию IP1 при помощи стандартной кривой IP1, полученной в отдельном планшете, в соответствии с инструкциями производителя. Затем строили график зависимости концентрации IP1 от концентрации соединения. Эффективность потенциатора (ЕС50) определяли как концентрацию соединения, которая в присутствии ECi5 эндогенного агониста ВАМ8-22, приводит к 50% увеличению концентрации IP1, достигаемому за счет насыщающей концентрации ВАМ8-22, и определяли при помощи программного обеспечения Genedata (GeneData AG, Базель, Швейцария), подставляя данные из 10-точечной CRC в следующее уравнение, где Y представляет собой концентрацию IP1, определенную для данной концентрации соединения, [L] представляет собой концентрацию испытываемого соединения, и Мах представляет собой максимальное увеличение, достигаемое за счет насыщающей концентрации ВАМ8-22:Data analysis: Fluorescence ratio was determined as the ratio of fluorescence emission at 620 nm to 665 nm and converted to IP1 concentration using an IP1 standard curve obtained in a separate plate according to the manufacturer's instructions. IP1 concentration was then plotted against compound concentration. Potentiator potency (EC50) was defined as the concentration of compound that, in the presence of ECi 5 of the endogenous BAM8-22 agonist, results in a 50% increase in IP1 concentration achieved by the saturating concentration of BAM8-22, and was determined using Genedata software (GeneData AG, Basel , Switzerland) by substituting the data from the 10-point CRC into the following equation, where Y is the IP1 concentration determined for a given compound concentration, [L] is the concentration of the test compound, and Max is the maximum increase achieved by the saturating concentration of BAM8 -22:
Y=Maxx[L]/(EC50+[L]).Y=Maxx[L]/(EC 50 +[L]).
Значения ЕС5о представляли как среднее геометрическое в нМ (SEM, п). EC5o values were presented as geometric mean in nM (SEM, n).
Таблица 1Table 1
Относительная ЕС5р по отношению к hMrgXl IP-1 для соединений согласно примерам 1 -6Relative EC 5 p in relation to hMrgXl IP-1 for connections according to examples 1 -6
В табл. 1 представлены относительная ЕС5о и максимальная стимуляция, достигнутые в анализе для соединений согласно примерам 1-6, что указывает на то, что указанные соединения являются потенциаторами hMrgXl.In table 1 shows the relative EC 5 o and maximum stimulation achieved in the analysis for the compounds according to examples 1-6, which indicates that these compounds are potentiators of hMrgXl.
Определение Кр uu гол мозг in vivo у мышей.Determination of the brain in vivo in mice.
Коэффициент распределения несвязанного вещества между головным мозгом и плазмой (Кр uu гол.мозг) является одним из ключевых фармакокинетических параметров для оценки способности соединения преодолевать гематоэнцефалический барьер (ГЭБ). Обычно его измеряют в доклинических исследованиях с применением следующей методики. Значения Кр uu гол мозг показывают долю свободного лекарственного средства в плазме, которая распределяется через ГЭБ.The distribution coefficient of the unbound substance between the brain and plasma (K p uu brain) is one of the key pharmacokinetic parameters for assessing the ability of a compound to cross the blood-brain barrier (BBB). It is typically measured in preclinical studies using the following methodology. K p uu gol brain values indicate the proportion of free drug in the plasma that is distributed across the BBB.
Субъекты: субъектами указанных исследований являлись 12 самцов мышей С57В1/6 (Envigo, Индианаполис, Индиана, США) в возрасте 8-10 недель на момент проведения испытания. Мышей содержали группами по 4 особи в домашних клетках из пластика высокой плотности. Доступ к еде и воде предоставляли без ограничений. В помещениях поддерживали температуру 73°F (23°С), относительную влажность 30-70% и цикл дня и ночи с 06:00 до 18:00.Subjects: Subjects for these studies were 12 male C57B1/6 mice (Envigo, Indianapolis, IN, USA) 8-10 weeks of age at the time of testing. Mice were housed in groups of 4 in high-density plastic home cages. Access to food and water was provided without restrictions. The rooms were maintained at 73°F (23°C), 30-70% relative humidity, and a 06:00 to 18:00 day/night cycle.
Агент: соединение согласно примеру 2 готовили в концентрации 0,3, 1 и 3 мг/мл в растворе 1% ГЭЦ, 0,25% TWEEN®80, 0,05% DOWSIL™ в воде. Приготовленное соединение обрабатывали ультразвуком на водяной бане в течение 30 мин до образования суспензии. Мышам вводили дозу 10 мл/кг с получением соответствующей дозы 3, 10 или 30 мг/кг.Agent: The compound of Example 2 was prepared at concentrations of 0.3, 1 and 3 mg/ml in a solution of 1% HEC, 0.25% TWEEN®80, 0.05% DOWSIL™ in water. The prepared compound was treated with ultrasound in a water bath for 30 min until a suspension was formed. Mice were dosed at 10 mL/kg to produce a corresponding dose of 3, 10, or 30 mg/kg.
Дозирование и сбор тканей: в указанном эксперименте четыре мыши на группу дозирования получали перорально дозу: 3, 10 или 30 мг/кг соединения согласно примеру 2. Через 2 ч после введения мышей подвергали эвтаназии путем асфикции при помощи СО2, собирали образцы плазмы путем пункции кардии и головной мозг мышей извлекали, взвешивали и замораживали в сухом льде. Образцы крови хранили в пробирках с ЭДТК в жидком льде и центрифугировали при 15 тысячах об/мин в течение 10Dosing and Tissue Collection: In this experiment, four mice per dosing group were dosed orally with 3, 10, or 30 mg/kg of compound according to Example 2. 2 hours after administration, mice were euthanized by CO 2 asphyxia, and plasma samples were collected by puncture. The cardia and brain of the mice were removed, weighed, and frozen in dry ice. Blood samples were stored in EDTA tubes in liquid ice and centrifuged at 15 thousand rpm for 10
Claims (35)
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US63/021,806 | 2020-05-08 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| EA045321B1 true EA045321B1 (en) | 2023-11-15 |
Family
ID=
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| BR112021010871A2 (en) | THRB RECEPTOR AGONIST COMPOUND AND METHOD OF PREPARATION AND USE THEREOF | |
| KR102090453B1 (en) | Salts of an epidermal growth factor receptor kinase inhibitor | |
| US11773067B2 (en) | (Trifluoromethyl)pyrimidine-2-amine compounds | |
| TWI718113B (en) | Pyridinecarboxamides derivatives, preparation process and pharmaceutical use thereof | |
| RU2720810C2 (en) | Salts of a quinazoline derivative and a method for production thereof | |
| US8680101B2 (en) | Crystalline pimobendan, process for the preparation thereof, pharmaceutical composition and use | |
| US20220133723A1 (en) | (4-((3r,4r)-3-methoxytetrahydro-pyran-4-ylamino)piperidin-1-yl)(5-methyl-6-(((2r,6s)-6-(p-tolyl)tetrahydro-2h-pyran-2-yl)methylamino)pyrimidin-4-yl)methanone citrate | |
| EA045321B1 (en) | (TRIFLUOROMETHYL) PYRIMIDINE-2-AMINE COMPOUNDS | |
| WO2019228330A1 (en) | Substituted benzo[d]imidazole compound and pharmaceutical composition thereof | |
| JP2017505788A (en) | Solid form of ion channel modulator | |
| KR20200091422A (en) | Pyridinone derivatives and their use as selective ALK-2 inhibitors | |
| IL171120A (en) | 4 - (4 - TRANS - HYDROXYCYCLOHEXYL) AMINO - 2 - PHENYL - 7H - PYRROLO [2,3d] PYRIMIDINE HYDROGEN MESYLATE AND ITS POLYMORPHIC FORMS AND PHARMACEUTICAL COMPOSITIONS THEREOF | |
| WO2023081463A1 (en) | Deuterated (trifluoromethyl)pyrimidine-2-amine compounds as potentiators of the hmrgx1 receptor | |
| KR20240072258A (en) | Deuterated (trifluoromethyl)pyrimidin-2-amine compounds as enhancers of the hMrgX1 receptor | |
| WO2022199699A1 (en) | Crystal form of salt of nitrogen-containing fused heterocyclic compound, preparation method therefor, and application thereof | |
| CN111825690B (en) | Novel crystal form of PHD inhibitor and preparation method thereof | |
| WO2022152138A1 (en) | Condensed heterocyclic compound, preparation method therefor, and medical use thereof | |
| WO2023030335A1 (en) | Compound as tyk2/jak1 pseudokinase domain inhibitor, and synthesis and use methods | |
| WO2024036243A2 (en) | Salts of heterocyclic inhibitors of monocarboxylate transporter 4 for the treatment of disease | |
| WO2022037601A1 (en) | Pyrazolamide derivative serving as ep4 receptor antagonist and use thereof in preparation of drugs for treating cancer and inflammation |