EA044759B1 - TREATMENT AND PREVENTION OF AMYLOIDOSIS - Google Patents
TREATMENT AND PREVENTION OF AMYLOIDOSIS Download PDFInfo
- Publication number
- EA044759B1 EA044759B1 EA202092264 EA044759B1 EA 044759 B1 EA044759 B1 EA 044759B1 EA 202092264 EA202092264 EA 202092264 EA 044759 B1 EA044759 B1 EA 044759B1
- Authority
- EA
- Eurasian Patent Office
- Prior art keywords
- antibody
- seq
- amino acid
- acid sequence
- approximately
- Prior art date
Links
- 238000011282 treatment Methods 0.000 title claims description 47
- 206010002022 amyloidosis Diseases 0.000 title description 13
- 230000002265 prevention Effects 0.000 title 1
- 150000001413 amino acids Chemical group 0.000 claims description 53
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 38
- 208000005531 Immunoglobulin Light-chain Amyloidosis Diseases 0.000 claims description 25
- 108010047041 Complementarity Determining Regions Proteins 0.000 claims description 24
- 208000023761 AL amyloidosis Diseases 0.000 claims description 23
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 20
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims description 19
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 17
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 16
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 claims description 15
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 claims description 15
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 claims description 15
- 229940068977 polysorbate 20 Drugs 0.000 claims description 15
- NFGXHKASABOEEW-UHFFFAOYSA-N 1-methylethyl 11-methoxy-3,7,11-trimethyl-2,4-dodecadienoate Chemical compound COC(C)(C)CCCC(C)CC=CC(C)=CC(=O)OC(C)C NFGXHKASABOEEW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 14
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 14
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 14
- HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N α-D-glucopyranosyl-α-D-glucopyranoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 13
- 102000013463 Immunoglobulin Light Chains Human genes 0.000 claims description 13
- 108010065825 Immunoglobulin Light Chains Proteins 0.000 claims description 13
- HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N Trehalose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N 0.000 claims description 13
- HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N alpha,alpha-trehalose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N 0.000 claims description 13
- 230000027455 binding Effects 0.000 claims description 13
- 230000008021 deposition Effects 0.000 claims description 10
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims description 7
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims description 7
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims description 7
- 108010067060 Immunoglobulin Variable Region Proteins 0.000 claims description 6
- 102000017727 Immunoglobulin Variable Region Human genes 0.000 claims description 6
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 claims description 6
- 102000008394 Immunoglobulin Fragments Human genes 0.000 claims description 4
- 108010021625 Immunoglobulin Fragments Proteins 0.000 claims description 4
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 claims description 2
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 claims description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 2
- FOWNDZJYGGTHRO-DKWTVANSSA-N 2-aminoacetic acid;(2s)-2-aminobutanedioic acid Chemical compound NCC(O)=O.OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O FOWNDZJYGGTHRO-DKWTVANSSA-N 0.000 claims 4
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 2
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 claims 1
- 102000012745 Immunoglobulin Subunits Human genes 0.000 claims 1
- 108010079585 Immunoglobulin Subunits Proteins 0.000 claims 1
- 229940009098 aspartate Drugs 0.000 claims 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 34
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 26
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 19
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 19
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 19
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 16
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 15
- 230000004044 response Effects 0.000 description 15
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 14
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 13
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 12
- 102400000269 Amyloid protein A Human genes 0.000 description 11
- 101710144835 Amyloid protein A Proteins 0.000 description 11
- 229960002885 histidine Drugs 0.000 description 10
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 10
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 10
- 102000001049 Amyloid Human genes 0.000 description 9
- 108010094108 Amyloid Proteins 0.000 description 9
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 9
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 8
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 8
- 208000037259 Amyloid Plaque Diseases 0.000 description 7
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 7
- 238000002648 combination therapy Methods 0.000 description 6
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 6
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 6
- 108091035707 Consensus sequence Proteins 0.000 description 5
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 5
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 5
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 5
- 208000033808 peripheral neuropathy Diseases 0.000 description 5
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 5
- 238000011269 treatment regimen Methods 0.000 description 5
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 4
- CVSVTCORWBXHQV-UHFFFAOYSA-N creatine Chemical compound NC(=[NH2+])N(C)CC([O-])=O CVSVTCORWBXHQV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000006870 function Effects 0.000 description 4
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 4
- 150000007523 nucleic acids Chemical group 0.000 description 4
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 4
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 description 4
- 102000009091 Amyloidogenic Proteins Human genes 0.000 description 3
- 108010048112 Amyloidogenic Proteins Proteins 0.000 description 3
- 108010054477 Immunoglobulin Fab Fragments Proteins 0.000 description 3
- 102000001706 Immunoglobulin Fab Fragments Human genes 0.000 description 3
- 102400001263 NT-proBNP Human genes 0.000 description 3
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 description 3
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 3
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 3
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 3
- 210000004602 germ cell Anatomy 0.000 description 3
- 230000002998 immunogenetic effect Effects 0.000 description 3
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 3
- 230000003907 kidney function Effects 0.000 description 3
- 238000000370 laser capture micro-dissection Methods 0.000 description 3
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 3
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 3
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 3
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 3
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 3
- 108010008064 pro-brain natriuretic peptide (1-76) Proteins 0.000 description 3
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 3
- 230000006337 proteolytic cleavage Effects 0.000 description 3
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 3
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 3
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 3
- 210000001835 viscera Anatomy 0.000 description 3
- HNYSIKXAASZNEM-JEDNCBNOSA-N (2s)-2-amino-3-(1h-imidazol-5-yl)propanoic acid;hydrate Chemical compound O.OC(=O)[C@@H](N)CC1=CNC=N1 HNYSIKXAASZNEM-JEDNCBNOSA-N 0.000 description 2
- GEYOCULIXLDCMW-UHFFFAOYSA-N 1,2-phenylenediamine Chemical compound NC1=CC=CC=C1N GEYOCULIXLDCMW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000002260 Alkaline Phosphatase Human genes 0.000 description 2
- 108020004774 Alkaline Phosphatase Proteins 0.000 description 2
- 108700028369 Alleles Proteins 0.000 description 2
- 208000036487 Arthropathies Diseases 0.000 description 2
- 206010061666 Autonomic neuropathy Diseases 0.000 description 2
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 2
- 108010001336 Horseradish Peroxidase Proteins 0.000 description 2
- 108010063738 Interleukins Proteins 0.000 description 2
- 102000015696 Interleukins Human genes 0.000 description 2
- 102000036770 Islet Amyloid Polypeptide Human genes 0.000 description 2
- 108010041872 Islet Amyloid Polypeptide Proteins 0.000 description 2
- 208000012659 Joint disease Diseases 0.000 description 2
- 206010025391 Macroglossia Diseases 0.000 description 2
- 206010038748 Restrictive cardiomyopathy Diseases 0.000 description 2
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 2
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 2
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 2
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 2
- 238000007622 bioinformatic analysis Methods 0.000 description 2
- 208000003295 carpal tunnel syndrome Diseases 0.000 description 2
- 239000012829 chemotherapy agent Substances 0.000 description 2
- IQFVPQOLBLOTPF-HKXUKFGYSA-L congo red Chemical compound [Na+].[Na+].C1=CC=CC2=C(N)C(/N=N/C3=CC=C(C=C3)C3=CC=C(C=C3)/N=N/C3=C(C4=CC=CC=C4C(=C3)S([O-])(=O)=O)N)=CC(S([O-])(=O)=O)=C21 IQFVPQOLBLOTPF-HKXUKFGYSA-L 0.000 description 2
- 229960003624 creatine Drugs 0.000 description 2
- 239000006046 creatine Substances 0.000 description 2
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 2
- 231100000226 haematotoxicity Toxicity 0.000 description 2
- 208000027866 inflammatory disease Diseases 0.000 description 2
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 2
- 239000008297 liquid dosage form Substances 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 2
- 201000000050 myeloid neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 210000004897 n-terminal region Anatomy 0.000 description 2
- 201000001119 neuropathy Diseases 0.000 description 2
- 230000007823 neuropathy Effects 0.000 description 2
- 208000004235 neutropenia Diseases 0.000 description 2
- 239000002773 nucleotide Chemical group 0.000 description 2
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 2
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 2
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 2
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 2
- 210000004180 plasmocyte Anatomy 0.000 description 2
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 2
- 201000001474 proteinuria Diseases 0.000 description 2
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 2
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 2
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 2
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 2
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 2
- 208000024827 Alzheimer disease Diseases 0.000 description 1
- 206010002023 Amyloidoses Diseases 0.000 description 1
- 206010002556 Ankylosing Spondylitis Diseases 0.000 description 1
- 102000007592 Apolipoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108010071619 Apolipoproteins Proteins 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- 206010004146 Basal cell carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 208000027496 Behcet disease Diseases 0.000 description 1
- 102000004506 Blood Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010017384 Blood Proteins Proteins 0.000 description 1
- 201000009030 Carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 208000005024 Castleman disease Diseases 0.000 description 1
- 208000017667 Chronic Disease Diseases 0.000 description 1
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 description 1
- 208000020406 Creutzfeldt Jacob disease Diseases 0.000 description 1
- 208000003407 Creutzfeldt-Jakob Syndrome Diseases 0.000 description 1
- 208000010859 Creutzfeldt-Jakob disease Diseases 0.000 description 1
- 208000011231 Crohn disease Diseases 0.000 description 1
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 1
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 1
- 206010012735 Diarrhoea Diseases 0.000 description 1
- 206010061818 Disease progression Diseases 0.000 description 1
- 108060006698 EGF receptor Proteins 0.000 description 1
- 206010016207 Familial Mediterranean fever Diseases 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000017604 Hodgkin disease Diseases 0.000 description 1
- 208000021519 Hodgkin lymphoma Diseases 0.000 description 1
- 208000010747 Hodgkins lymphoma Diseases 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 102000006496 Immunoglobulin Heavy Chains Human genes 0.000 description 1
- 108010019476 Immunoglobulin Heavy Chains Proteins 0.000 description 1
- 108090001005 Interleukin-6 Proteins 0.000 description 1
- 208000003456 Juvenile Arthritis Diseases 0.000 description 1
- 206010059176 Juvenile idiopathic arthritis Diseases 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- 206010024229 Leprosy Diseases 0.000 description 1
- 208000030289 Lymphoproliferative disease Diseases 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- 208000010190 Monoclonal Gammopathy of Undetermined Significance Diseases 0.000 description 1
- 208000034578 Multiple myelomas Diseases 0.000 description 1
- 206010028813 Nausea Diseases 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 206010031256 Osteomyelitis chronic Diseases 0.000 description 1
- 102000007079 Peptide Fragments Human genes 0.000 description 1
- 108010033276 Peptide Fragments Proteins 0.000 description 1
- 206010057249 Phagocytosis Diseases 0.000 description 1
- 208000004210 Pressure Ulcer Diseases 0.000 description 1
- 208000014675 Prion-associated disease Diseases 0.000 description 1
- 201000004681 Psoriasis Diseases 0.000 description 1
- 208000036824 Psoriatic arthropathy Diseases 0.000 description 1
- 206010037601 Pyelonephritis chronic Diseases 0.000 description 1
- 206010037660 Pyrexia Diseases 0.000 description 1
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 description 1
- 208000033464 Reiter syndrome Diseases 0.000 description 1
- 208000001647 Renal Insufficiency Diseases 0.000 description 1
- 206010038389 Renal cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000006265 Renal cell carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 238000012300 Sequence Analysis Methods 0.000 description 1
- 102000054727 Serum Amyloid A Human genes 0.000 description 1
- 108700028909 Serum Amyloid A Proteins 0.000 description 1
- 108010003723 Single-Domain Antibodies Proteins 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 1
- 102000000852 Tumor Necrosis Factor-alpha Human genes 0.000 description 1
- 206010047700 Vomiting Diseases 0.000 description 1
- 208000027207 Whipple disease Diseases 0.000 description 1
- 210000004100 adrenal gland Anatomy 0.000 description 1
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 1
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 1
- PLOPBXQQPZYQFA-AXPWDRQUSA-N amlintide Chemical compound C([C@@H](C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC=1NC=NC=1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H]1NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)CCCCN)CSSC1)[C@@H](C)O)C(C)C)C1=CC=CC=C1 PLOPBXQQPZYQFA-AXPWDRQUSA-N 0.000 description 1
- 230000006933 amyloid-beta aggregation Effects 0.000 description 1
- DZHSAHHDTRWUTF-SIQRNXPUSA-N amyloid-beta polypeptide 42 Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@H](C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)NCC(=O)NCC(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O)[C@@H](C)CC)C(C)C)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC=1N=CNC=1)NC(=O)[C@H](CC=1N=CNC=1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC=1N=CNC=1)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O)C(C)C)C(C)C)C1=CC=CC=C1 DZHSAHHDTRWUTF-SIQRNXPUSA-N 0.000 description 1
- 230000003941 amyloidogenesis Effects 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 230000001142 anti-diarrhea Effects 0.000 description 1
- 230000003474 anti-emetic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002111 antiemetic agent Substances 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 1
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 102000015736 beta 2-Microglobulin Human genes 0.000 description 1
- 108010081355 beta 2-Microglobulin Proteins 0.000 description 1
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001588 bifunctional effect Effects 0.000 description 1
- 238000003766 bioinformatics method Methods 0.000 description 1
- 238000001574 biopsy Methods 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 1
- 201000009267 bronchiectasis Diseases 0.000 description 1
- 239000004067 bulking agent Substances 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 230000000747 cardiac effect Effects 0.000 description 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 1
- 208000037976 chronic inflammation Diseases 0.000 description 1
- 208000037893 chronic inflammatory disorder Diseases 0.000 description 1
- 201000006368 chronic pyelonephritis Diseases 0.000 description 1
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 1
- 210000001072 colon Anatomy 0.000 description 1
- 238000011284 combination treatment Methods 0.000 description 1
- 230000001627 detrimental effect Effects 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 230000005750 disease progression Effects 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 230000029142 excretion Effects 0.000 description 1
- -1 for example Substances 0.000 description 1
- 239000012520 frozen sample Substances 0.000 description 1
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 1
- 125000003630 glycyl group Chemical group [H]N([H])C([H])([H])C(*)=O 0.000 description 1
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 1
- 238000001631 haemodialysis Methods 0.000 description 1
- 201000009277 hairy cell leukemia Diseases 0.000 description 1
- 230000004217 heart function Effects 0.000 description 1
- 230000000322 hemodialysis Effects 0.000 description 1
- 210000003494 hepatocyte Anatomy 0.000 description 1
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 1
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 1
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 1
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 230000001788 irregular Effects 0.000 description 1
- 210000004153 islets of langerhan Anatomy 0.000 description 1
- 201000002215 juvenile rheumatoid arthritis Diseases 0.000 description 1
- 201000006370 kidney failure Diseases 0.000 description 1
- 238000000322 laser mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 230000002045 lasting effect Effects 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 230000036210 malignancy Effects 0.000 description 1
- 230000003211 malignant effect Effects 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 1
- 201000005328 monoclonal gammopathy of uncertain significance Diseases 0.000 description 1
- 230000008693 nausea Effects 0.000 description 1
- 210000000653 nervous system Anatomy 0.000 description 1
- 238000005457 optimization Methods 0.000 description 1
- 230000004768 organ dysfunction Effects 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 230000008506 pathogenesis Effects 0.000 description 1
- 230000008782 phagocytosis Effects 0.000 description 1
- 238000009512 pharmaceutical packaging Methods 0.000 description 1
- 229920005862 polyol Polymers 0.000 description 1
- 150000003077 polyols Chemical class 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 1
- 230000017854 proteolysis Effects 0.000 description 1
- 230000002285 radioactive effect Effects 0.000 description 1
- 208000002574 reactive arthritis Diseases 0.000 description 1
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 1
- 201000010174 renal carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 1
- 206010039073 rheumatoid arthritis Diseases 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 1
- 239000013049 sediment Substances 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 1
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 1
- 230000009870 specific binding Effects 0.000 description 1
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 1
- 238000011146 sterile filtration Methods 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 1
- 238000013268 sustained release Methods 0.000 description 1
- 239000012730 sustained-release form Substances 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 201000008827 tuberculosis Diseases 0.000 description 1
- 208000001072 type 2 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- 230000002485 urinary effect Effects 0.000 description 1
- 230000007371 visceral function Effects 0.000 description 1
- 230000008673 vomiting Effects 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000008215 water for injection Substances 0.000 description 1
Description
Область техники, к которой относится изобретениеField of technology to which the invention relates
Настоящее изобретение относится к техническим областям иммунологии и медицины.The present invention relates to the technical fields of immunology and medicine.
Предшествующий уровень техникиPrior Art
Амилоидоз - это общий термин, который описывает ряд заболеваний, характеризующихся наличием патологических форм амилоидных белков, часто содержащих внеклеточное отложение белковых фибрилл, которые образуют многочисленные амилоидные отложения или амилоидные бляшки, которые могут возникать на локальных участках или систематически. Эти отложения или бляшки состоят в основном из природных растворимых белков или пептидов, собранных в обширные нерастворимые отложения диаметром 10-100 мкм в различных участках тканей. Отложения обычно состоят из латеральных агрегатов фибрилл приблизительно 10-15 нм в диаметре. Амилоидные фибриллы при окрашивании красителем Конго Красный дают характерное двойное лучепреломление яблочно-зеленого цвета в поляризованном свете. Обычно фибриллярный состав этих отложений является отличительной характеристикой различных форм амилоидного заболевания.Amyloidosis is a general term that describes a range of diseases characterized by the presence of abnormal forms of amyloid proteins, often containing extracellular deposition of protein fibrils that form numerous amyloid deposits or amyloid plaques, which may occur locally or systemically. These deposits or plaques consist primarily of naturally occurring soluble proteins or peptides collected into extensive insoluble deposits of 10-100 µm in diameter in various tissue areas. The deposits typically consist of lateral aggregates of fibrils approximately 10–15 nm in diameter. Amyloid fibrils, when stained with Congo Red, exhibit a characteristic apple-green birefringence in polarized light. Typically, the fibrillar composition of these deposits is a distinguishing characteristic of various forms of amyloid disease.
Пептиды или белки, образующие отложения бляшек, часто происходят из более крупного белкапредшественника. Более конкретно, патогенез амилоидных агрегатов, таких как отложения фибрилл, обычно включает протеолитическое расщепление аномального белка-предшественника на фрагменты, которые объединяются в антипараллельные β-складчатые листы. Фибриллярный состав этих отложений является отличительной характеристикой различных форм амилоидного заболевания. Например, внутримозговые и цереброваскулярные отложения, состоящие в основном из фибрилл бета-амилоидного пептида (β-AP), характерны для болезни Альцгеймера (как семейных, так и спорадических форм), островковый амилоидный протеиновый пептид (IAPP; амилин) является отличительной характеристикой фибрилл в амилоидных отложениях островковых клеток поджелудочной железы, вызванных диабетом типа II, а в2-микроглобулин является основным компонентом амилоидных отложений, которые образуются вследствие длительного лечения гемодиализом. Прион-ассоциированные заболевания, такие как болезнь Крейтцфельда-Якоба, также были признаны амилоидными заболеваниями.The peptides or proteins that form plaque deposits are often derived from a larger precursor protein. More specifically, the pathogenesis of amyloid aggregates, such as fibril deposits, typically involves proteolytic cleavage of the abnormal precursor protein into fragments that assemble into antiparallel β-sheet sheets. The fibrillar composition of these deposits is a distinguishing characteristic of various forms of amyloid disease. For example, intracerebral and cerebrovascular deposits consisting primarily of beta-amyloid peptide (β-AP) fibrils are characteristic of Alzheimer's disease (both familial and sporadic forms), islet amyloid protein peptide (IAPP; amylin) is a hallmark characteristic of fibrils in amyloid deposits in pancreatic islet cells caused by type II diabetes, and β2-microglobulin is the main component of amyloid deposits that form due to long-term hemodialysis treatment. Prion-associated diseases such as Creutzfeldt-Jakob disease have also been recognized as amyloid diseases.
В общем первичные амилоидозы отличаются наличием белковых фибрилл амилоидного типа легкой цепи (AL-типа), названных так из-за гомологии N-терминальной области AL фибрилл с вариабельным фрагментом легкой цепи иммуноглобулина (каппа или лямбда). Различные формы заболевания были разделены на классы в основном на основании того, связан ли амилоидоз с основным систематическим заболеванием. Таким образом, некоторые расстройства считают первичными амилоидозами, при которых нет доказательств наличия ранее существовавшего или сопутствующего заболевания. Отложение амилоида AL обычно связано с практически любой дискразией линии B-лимфоцитов от злокачественного образования плазматических клеток (множественная миелома) до доброкачественной моноклональной гаммапатии. Иногда наличие амилоидных отложений может являться первичным показателем основного заболевания.In general, primary amyloidoses are distinguished by the presence of amyloid light chain type (AL-type) protein fibrils, so named because of the homology of the N-terminal region of the AL fibrils to the immunoglobulin light chain variable fragment (kappa or lambda). The various forms of the disease have been divided into classes mainly based on whether amyloidosis is associated with an underlying systemic disease. Thus, some disorders are considered primary amyloidoses, in which there is no evidence of pre-existing or concomitant disease. AL amyloid deposition is commonly associated with virtually any B-cell lineage dyscrasia from malignant plasma cell formation (multiple myeloma) to benign monoclonal gammopathy. Sometimes the presence of amyloid deposits can be a primary indicator of an underlying disease.
Фибриллы амилоидных отложений AL состоят из легких цепей моноклонального иммуноглобулина или их фрагментов. Более конкретно, фрагменты происходят из N-терминальной области легкой цепи (каппа или лямбда) и содержат весь или часть ее вариабельного (VL) домена. Отложения обычно возникают в мезенхимальных тканях, вызывая периферическую и автономную нейропатию, туннельный запястный синдром, макроглоссию, рестриктивную кардиомиопатию, артропатию крупных суставов, иммунные дискразии, миеломы, а также скрытые дискразии. Однако следует отметить, что может быть поражена практически любая ткань, особенно внутренние органы, такие как сердце.AL amyloid deposit fibrils are composed of monoclonal immunoglobulin light chains or fragments thereof. More specifically, the fragments are derived from the N-terminal region of the light chain (kappa or lambda) and contain all or part of its variable (VL) domain. Deposits typically occur in mesenchymal tissues, causing peripheral and autonomic neuropathy, carpal tunnel syndrome, macroglossia, restrictive cardiomyopathy, large joint arthropathy, immune dyscrasias, myelomas, and hidden dyscrasias. However, it should be noted that almost any tissue can be affected, especially internal organs such as the heart.
При вторичном или реактивном (тип AA) амилоидозе, отличающемся наличием отложений фибрилл амилоидного протеина A (AA), существует основное или связанное с ним состояние хронического воспалительного или инфекционного заболевания. К таким заболеваниям относятся, но без ограничения, воспалительные заболевания, такие как ревматоидный артрит, ювенильный хронический артрит, анкилозирующий спондилит, псориаз, псориатическая артропатия, синдром Рейтера, болезнь Стилла у взрослых, синдром Бехчета и болезнь Крона. Отложения AA также образуются в результате хронических микробных инфекций, таких как проказа, туберкулез, бронхоэктаз, пролежни, хронический пиелонефрит, остеомиелит и болезнь Уиппла. Некоторые злокачественные новообразования также могут приводить к отложению амилоидных фибрилл AA. К ним относятся такие состояния, как лимфома Ходжкина, карцинома почек, карцинома кишечника, легких и мочеполовых путей, базальноклеточная карцинома и волосатоклеточный лейкоз. Амилоидная болезнь AA также может быть результатом наследственных воспалительных заболеваний, таких как семейная средиземноморская лихорадка. Кроме того, амилоидная болезнь AA может быть результатом лимфопролиферативных нарушений, таких как болезнь Кастлемана.In secondary or reactive (type AA) amyloidosis, characterized by the presence of deposits of amyloid protein A (AA) fibrils, there is an underlying or associated condition of chronic inflammatory or infectious disease. Such diseases include, but are not limited to, inflammatory diseases such as rheumatoid arthritis, juvenile chronic arthritis, ankylosing spondylitis, psoriasis, psoriatic arthropathy, Reiter's syndrome, adult Still's disease, Behçet's syndrome and Crohn's disease. AA deposits also form as a result of chronic microbial infections such as leprosy, tuberculosis, bronchiectasis, pressure ulcers, chronic pyelonephritis, osteomyelitis and Whipple's disease. Some malignancies can also result in deposition of AA amyloid fibrils. These include conditions such as Hodgkin lymphoma, renal carcinoma, colon, lung and genitourinary tract carcinoma, basal cell carcinoma and hairy cell leukemia. Amyloid AA disease can also result from inherited inflammatory diseases such as familial Mediterranean fever. In addition, amyloid AA disease can result from lymphoproliferative disorders such as Castleman disease.
Фибриллы AA состоят из пептидных фрагментов, которые различаются по размеру, но обычно составляют приблизительно 8000 дальтон (пептид AA или белок), образованных за счет протеолитического расщепления сывороточного амилоидного белка A (SSA), циркулирующего аполипопротеина, который присутствует в частицах HDL и который синтезируется в гепатоциты в ответ на такие цитокины, как интерлейкин (IL)-1 и IL-6, а также фактор некроза опухолей α. Протеолитическое расщепление приводит к патологическому отложению N-терминальных двух третей белка SAA из ~76 остатков. У людей концен- 1 044759 трация SAA в плазме обычно составляет ~0,1 мг/мл, но может увеличиваться более чем в 1000 раз в ответ на воспалительный стимул. В рамках этого процесса молекула SAA подвергается протеолизу, а продукт N-терминального расщепления системно откладывается в виде фибрилл AA в жизненно важных органах, таких как печень, селезенка, почки и надпочечники. Отложения также распространены в сердце и желудочно-кишечном тракте.AA fibrils are composed of peptide fragments that vary in size but are typically approximately 8000 daltons (AA peptide or protein) formed by proteolytic cleavage of serum amyloid protein A (SSA), a circulating apolipoprotein that is present in HDL particles and that is synthesized in hepatocytes in response to cytokines such as interleukin (IL)-1 and IL-6, as well as tumor necrosis factor α. Proteolytic cleavage results in pathological deposition of the N-terminal two-thirds of the ~76-residue SAA protein. In humans, plasma SAA concentrations are typically ~0.1 mg/mL but can increase more than 1000-fold in response to an inflammatory stimulus. As part of this process, the SAA molecule undergoes proteolysis and the N-terminal cleavage product is systemically deposited as AA fibrils in vital organs such as the liver, spleen, kidneys and adrenal glands. Deposits are also common in the heart and gastrointestinal tract.
Амилоидозы как AL, так и AA являются серьезными системными заболеваниями со значительным процентом смертности. Хотя ожидаемая продолжительность жизни пациентов с диагнозом амилоидоз увеличилась за последние два года, текущие методы лечения сосредоточены на сокращении наличия белков, которые образуют амилоидные фибриллы. Соответственно существует большая неудовлетворенная потребность в видах терапии, которые воздействуют исключительно на растворимые токсичные агрегаты и отложенные амилоидные фибриллы, тем самым сохраняя и улучшая функцию жизненно важных органов.Both AL and AA amyloidoses are serious systemic diseases with significant mortality rates. Although the life expectancy of patients diagnosed with amyloidosis has increased over the past two years, current treatments focus on reducing the presence of proteins that form amyloid fibrils. Accordingly, there is a large unmet need for therapies that exclusively target soluble toxic aggregates and deposited amyloid fibrils, thereby preserving and improving vital organ function.
Сущность изобретенияThe essence of the invention
Настоящее изобретение относится к лечению амилоидоза AL, связанного с отложением неправильно свернутых белков легкой цепи иммуноглобулина, имеющих аминокислотную последовательность GD в позициях 81-82 (нумерация по Кабату). В некоторых аспектах настоящего изобретения лечение амилоидоза AL предусматривает назначение пациенту эффективной дозы антитела. В некоторых аспектах настоящего изобретения антитело представляет собой химерное антитело. В некоторых аспектах изобретения антитело представляет собой гуманизированное антитело. В некоторых аспектах изобретения антитело представляет собой антигенсвязывающий фрагмент антитела, такой как Fab-фрагмент, Fab'-фрагмент, F(ab')2-фрагмент, F(ab)c-фрагмент, Dab, нанотело или Fv-фрагмент.The present invention relates to the treatment of AL amyloidosis associated with the deposition of misfolded immunoglobulin light chain proteins having the amino acid sequence GD at positions 81-82 (Kabat numbering). In some aspects of the present invention, treatment of AL amyloidosis involves administering to a patient an effective dose of an antibody. In some aspects of the present invention, the antibody is a chimeric antibody. In some aspects of the invention, the antibody is a humanized antibody. In some aspects of the invention, the antibody is an antigen binding fragment of an antibody, such as a Fab fragment, Fab' fragment, F(ab')2 fragment, F(ab)c fragment, Dab, nanobody, or Fv fragment.
В некоторых аспектах изобретения антитело представляет собой химерный или гуманизированный вариант антитела 2A4 (регистрационный номер ATCC 9662), например NEOD001. Некоторые формы антитела 2A4 содержат вариабельную область легкой цепи, содержащую три определяющих комплементарность области SEQ ID NO: 1, 2 и 3, и вариабельную область тяжелой цепи, содержащую три определяющих комплементарность области SEQ ID NO: 4, 5 и 6. Например, антитело 2A4 может содержать вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 7, 8 или 9, и вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 10, 11 или 12. Некоторые формы антитела 2A4 содержат легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 13 и тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 14. В некоторых аспектах легкая цепь антитела 2A4 может кодироваться последовательностью нуклеиновой кислоты SEQ ID NO: 15 или SEQ ID NO: 16. В некоторых аспектах тяжелая цепь антитела 2A4 может кодироваться последовательностью нуклеиновой кислоты SEQ ID NO: 17 или SEQ ID NO: 18.In some aspects of the invention, the antibody is a chimeric or humanized version of the 2A4 antibody (ATCC registration number 9662), such as NEOD001. Some forms of the 2A4 antibody contain a light chain variable region containing the three complementarity determining regions of SEQ ID NOs: 1, 2 and 3, and a heavy chain variable region containing the three complementarity determining regions of SEQ ID NOs: 4, 5 and 6. For example, the 2A4 antibody may contain a light chain variable region containing the amino acid sequence of SEQ ID NO: 7, 8 or 9, and a heavy chain variable region containing the amino acid sequence of SEQ ID NO: 10, 11 or 12. Some forms of the 2A4 antibody contain a light chain containing the amino acid sequence SEQ ID NO: 13 and a heavy chain comprising the amino acid sequence of SEQ ID NO: 14. In some aspects, the light chain of antibody 2A4 may be encoded by the nucleic acid sequence of SEQ ID NO: 15 or SEQ ID NO: 16. In some aspects, the heavy chain of antibody 2A4 may be encoded by the nucleic acid sequence SEQ ID NO: 17 or SEQ ID NO: 18.
Настоящее раскрытие также относится к применению антитела, такого как антитела, описанные выше, для лечения пациента, страдающего амилоидозом AL. Настоящее раскрытие также относится к применению антитела, такого как антитела, описанные выше, при производстве лекарственного средства для лечения пациента, страдающего амилоидозом AL. Настоящее раскрытие также относится к антителу, такому как антитела, описанные выше, для применения при лечении пациента, страдающего амилоидозом AL.The present disclosure also relates to the use of an antibody, such as the antibodies described above, for treating a patient suffering from AL amyloidosis. The present disclosure also relates to the use of an antibody, such as the antibodies described above, in the manufacture of a medicament for treating a patient suffering from AL amyloidosis. The present disclosure also relates to an antibody, such as the antibodies described above, for use in treating a patient suffering from AL amyloidosis.
В некоторых аспектах изобретения антитело составляют в виде и/или вводят/подлежит введению в виде фармацевтического состава, который не только содержит антитело, но также содержит гистидиновый буфер, трегалозу, полисорбат 20 и может быть составлен в определенном диапазоне pH. В некоторых аспектах изобретения фармацевтический состав вводят/подлежит введению пациенту внутривенно или подкожно через определенные интервалы времени и в определенных дозах. Такие временные интервалы и дозы могут быть заранее определены и/или могут быть скорректированы на основании измеримых улучшений почечной функции. В качестве примера антитело можно внутривенно или подкожно вводить/подлежит введению пациенту в количестве от приблизительно 0,5 мг/кг до приблизительно 30 мг/кг с частотой от приблизительно один раз в неделю до приблизительно один раз в три месяца. В качестве дополнительного примера, антитело можно внутривенно вводить/подлежит введению пациенту в количестве приблизительно 24 мг/кг каждые 28 дней.In some aspects of the invention, the antibody is formulated and/or administered/to be administered in the form of a pharmaceutical composition that not only contains the antibody, but also contains a histidine buffer, trehalose, polysorbate 20 and can be formulated in a specific pH range. In some aspects of the invention, the pharmaceutical composition is/is administered to a patient intravenously or subcutaneously at specified time intervals and in specified doses. Such time intervals and dosages may be predetermined and/or may be adjusted based on measurable improvements in renal function. By way of example, the antibody can be/is administered intravenously or subcutaneously to a patient in an amount of about 0.5 mg/kg to about 30 mg/kg at a frequency of about once per week to about once every three months. As a further example, the antibody can be/is administered intravenously to a patient in an amount of approximately 24 mg/kg every 28 days.
В некоторых аспектах изобретения одно или несколько средств можно вводить, одновременно вводят/подлежат введению или будут позже введены/можно вводить позже пациенту. Иллюстративные средства также можно вводить/подлежат введению как часть схемы лечения.In some aspects of the invention, one or more agents may be administered, are/are to be administered simultaneously, or will be/may be later administered to the patient. Exemplary agents may also be/are administered as part of a treatment regimen.
Способы лечения и соответствующие способы применения в соответствии с изложенными здесь принципами могут замедлять, останавливать или способствовать положительной динамике хронических заболеваний одной или нескольких функций внутренних органов, связанных с амилоидозом AL, и тем самым улучшать качество жизни пациента и/или увеличивать продолжительность жизни пациента.Treatments and corresponding modes of administration in accordance with the principles set forth herein can slow, stop or promote positive dynamics of chronic diseases of one or more internal organ functions associated with AL amyloidosis, and thereby improve the patient's quality of life and/or increase the patient's life expectancy.
Краткое описание чертежейBrief description of drawings
На фиг. 1 показана способность NEOD001 и 2A4 связываться с пептидами X1EDX2 и X1GDX2. Планшеты для ELISA покрывали указанными пептидами, блокировали и анализировали с помощью NEOD001 или 2A4, как указано. После промывания применяли соответствующие вторичные антитела, конъюгированные с пероксидазой хрена. Затем планшет промывали, обрабатывали о-фенилендиаменом иIn fig. Figure 1 shows the ability of NEOD001 and 2A4 to bind to the peptides X1EDX 2 and X1GDX2. ELISA plates were coated with the indicated peptides, blocked, and assayed with NEOD001 or 2A4 as indicated. After washing, appropriate horseradish peroxidase-conjugated secondary antibodies were used. The plate was then washed, treated with o-phenylenediamine and
- 2 044759 считывали оптическую плотность при 490 нм.- 2 044759 absorbance was read at 490 nm.
На фиг. 2 показана способность NEOD001 и 2A4 связываться как с растворимыми, так и с нерастворимыми амилоидными фибриллами, полученными у пациентов с амилоидозом AL. С помощью микродиссекции с лазерным захватом/масс-спектрометрии определили, что легкие амилоидные цепи пациентов содержали аминокислотные остатки -ED- и -GD- в позициях 81 и 82 соответственно (нумерация по Кабату).In fig. Figure 2 shows the ability of NEOD001 and 2A4 to bind to both soluble and insoluble amyloid fibrils obtained from patients with AL amyloidosis. Using laser capture microdissection/mass spectrometry, the patients' amyloid light chains were determined to contain amino acid residues -ED- and -GD- at positions 81 and 82, respectively (Kabat numbering).
Подробное описание изобретенияDetailed Description of the Invention
NEOD001 (SEQ ID NO: 13 и 14) представляет собой исследуемое моноклональное антитело, которое специфически нацелено на множество форм вызывающих заболевание агрегатов с неправильно свернутой легкой цепью при амилоидозе AL. Считается, что NEOD001 нейтрализует растворимые токсичные агрегаты и вызывает удаление нерастворимых отложений амилоидных фибрилл посредством фагоцитоза. NEOD001 имеет общие определяющие комплементарность области (CDR) с мышиным антителом 2A4 (регистрационный номер ATCC 9662). Такие антитела специфически распознают криптический эпитоп в белках каппа и лямбда легкой цепи (LC), который особым образом открывается во время неправильного сворачивания и агрегации и, как было показано, связывается с белками, имеющими консенсусную последовательность X1EDX2, причем X1 и X2 представляют собой различные аминокислотные остатки, присутствующие в позициях 80 и 83, и остатки глутаминовой кислоты (E) и аспарагиновой кислоты (D) в позициях 81 и 82 (нумерация легких цепей иммуноглобулина по Кабату).NEOD001 (SEQ ID NOs: 13 and 14) is an investigational monoclonal antibody that specifically targets multiple forms of disease-causing misfolded light chain aggregates in AL amyloidosis. NEOD001 is thought to neutralize soluble toxic aggregates and induce clearance of insoluble amyloid fibril deposits through phagocytosis. NEOD001 shares complementarity determining regions (CDRs) with the mouse antibody 2A4 (ATCC registration number 9662). Such antibodies specifically recognize a cryptic epitope in the kappa and lambda light chain (LC) proteins, which opens in a specific manner during misfolding and aggregation and has been shown to bind to proteins having the consensus sequence X1EDX 2 , with X1 and X 2 being various amino acid residues present at positions 80 and 83, and glutamic acid (E) and aspartic acid (D) residues at positions 81 and 82 (Kabat immunoglobulin light chain numbering).
Однако из-за генетической изменчивости не у всех пациентов с амилоидозом AL продуцируются неправильно свернутые легкие цепи, имеющие криптический эпитоп, содержащий консенсусную последовательность X1EDX2. Соответственно до настоящего раскрытия рядовой специалист в данной области мог бы полагать, что лечение этих пациентов любым из вышеуказанных антител не будет эффективным, поскольку антитела не будут связываться с растворимыми или осажденными амилоидными белками у пациентов. Вопреки этому мнению неожиданно было обнаружено, что NEOD001 и 2A4 также связываются с белками легкой цепи с глициновым остатком в позиции 81 (нумерация по Кабату), т.е. с пептидами и белками, которые содержат последовательность X1GDX2.However, due to genetic variability, not all patients with AL amyloidosis produce misfolded light chains that have a cryptic epitope containing the consensus sequence X1EDX2. Accordingly, prior to the present disclosure, one of ordinary skill in the art would have believed that treatment of these patients with any of the foregoing antibodies would not be effective because the antibodies would not bind to soluble or precipitated amyloid proteins in the patients. Contrary to this opinion, it was unexpectedly found that NEOD001 and 2A4 also bind to light chain proteins with a glycine residue at position 81 (Kabat numbering), i.e. with peptides and proteins that contain the X1GDX2 sequence.
Таким образом, в изобретении представлены способы лечения пациента, страдающего или имеющего риск развития амилоидоза AL, связанного с отложением неправильно свернутых белков легкой цепи иммуноглобулина, имеющих аминокислотную последовательность GD в позициях 81-82 (нумерация по Кабату). Не связывая себя теорией, авторы полагают, что эти неправильно свернутые белки легкой цепи содержат криптический эпитоп, содержащий консенсусную последовательность X1GDX2. Лечение таких пациентов предусматривает введение пациенту эффективной дозы антитела, тем самым замедляя, останавливая или способствуя положительной динамике нарушений одной или нескольких функций внутренних органов пациента. Рядовому специалисту в данной области будет понятно, что оценка функции внутренних органов до и после лечения может быть выполнена множеством способов, установленных в данной области.Thus, the invention provides methods for treating a patient suffering from or at risk of developing AL amyloidosis associated with the deposition of misfolded immunoglobulin light chain proteins having the amino acid sequence GD at positions 81-82 (Kabat numbering). Without being bound by theory, the authors believe that these misfolded light chain proteins contain a cryptic epitope containing the consensus sequence X1GDX2. Treatment of such patients involves administering to the patient an effective dose of the antibody, thereby slowing down, stopping or promoting the positive dynamics of disorders of one or more functions of the patient's internal organs. One of ordinary skill in the art will appreciate that assessment of visceral function before and after treatment can be accomplished by a variety of methods established in the art.
Антитело может представлять собой химерное антитело. Другое иллюстративное антитело представляет собой гуманизированное антитело. Антитело может представлять собой антигенсвязывающий фрагмент антитела, такой как Fab-фрагмент, Fab'-фрагмент, F(ab')2-фрагмент, F(ab)c-фрагмент, Dab, нанотело или Fv-фрагмент.The antibody may be a chimeric antibody. Another exemplary antibody is a humanized antibody. The antibody may be an antigen binding fragment of an antibody, such as a Fab fragment, Fab' fragment, F(ab') 2 fragment, F(ab)c fragment, Dab, nanobody or Fv fragment.
В некоторых способах изобретения антитело представляет собой моноклональное антитело, содержащее определяющие комплементарность области антитела 2A4 (регистрационный номер ATCC 9662), например химерное антитело или гуманизированное антитело. В некоторых способах антитело представляет собой NEOD001. Некоторые формы антитела 2A4 содержат вариабельную область легкой цепи, содержащую три определяющие комплементарность области SEQ ID NO: 1, 2 и 3, и вариабельную область тяжелой цепи, содержащую три определяющие комплементарность области SEQ ID NO: 4, 5 и 6. Например, антитело 2A4 может содержать вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 7, 8 или 9, и вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 10, 11 или 12. Некоторые формы антитела 2A4 содержат легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 13, и тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 14. В некоторых аспектах легкая цепь антитела 2A4 может кодироваться последовательностью нуклеиновой кислоты SEQ ID NO: 15 или SEQ ID NO: 16. В некоторых аспектах тяжелая цепь антитела 2A4 может кодироваться последовательностью нуклеиновой кислоты SEQ ID NO: 17 или SEQ ID NO: 18.In some methods of the invention, the antibody is a monoclonal antibody containing the complementarity determining region of antibody 2A4 (ATCC registration number 9662), such as a chimeric antibody or a humanized antibody. In some methods, the antibody is NEOD001. Some forms of the 2A4 antibody contain a light chain variable region containing the three complementarity determining regions of SEQ ID NOs: 1, 2 and 3, and a heavy chain variable region containing the three complementarity determining regions of SEQ ID NOs: 4, 5 and 6. For example, the 2A4 antibody may contain a light chain variable region containing the amino acid sequence of SEQ ID NO: 7, 8 or 9, and a heavy chain variable region containing the amino acid sequence of SEQ ID NO: 10, 11 or 12. Some forms of the 2A4 antibody contain a light chain containing the amino acid sequence SEQ ID NO: 13, and a heavy chain comprising the amino acid sequence of SEQ ID NO: 14. In some aspects, the light chain of antibody 2A4 may be encoded by the nucleic acid sequence of SEQ ID NO: 15 or SEQ ID NO: 16. In some aspects, the heavy chain of antibody 2A4 may be encoded by the nucleic acid sequence of SEQ ID NO: 17 or SEQ ID NO: 18.
Некоторые способы согласно настоящему изобретению предусматривают применение определенных фармацевтических составов, например, фармацевтических составов, содержащихSome methods of the present invention involve the use of certain pharmaceutical compositions, for example, pharmaceutical compositions containing
a) антитело в концентрации в диапазоне от приблизительно 1 мг/мл до приблизительно 100 мг/мл;a) an antibody at a concentration ranging from about 1 mg/ml to about 100 mg/ml;
b) гистидиновый буфер в концентрации в диапазоне от приблизительно 20 мМ до приблизительно 30 мМ;b) histidine buffer at a concentration ranging from about 20 mM to about 30 mM;
c) трегалозу в концентрации в диапазоне от приблизительно 210 мМ до приблизительно 250 мМ; иc) trehalose at a concentration ranging from about 210 mM to about 250 mM; And
d) полисорбат 20 в концентрации в диапазоне от приблизительно 0,005% по массе до приблизительно 0,05% по массе,d) polysorbate 20 at a concentration ranging from about 0.005% by weight to about 0.05% by weight,
- 3 044759 причем состав отличается pH в диапазоне от приблизительно 6 до приблизительно 7.- 3 044759 wherein the composition differs in pH in the range from approximately 6 to approximately 7.
В некоторых составахIn some formulations
a) антитело присутствует в концентрации приблизительно 50 мг/мл;a) the antibody is present at a concentration of approximately 50 mg/ml;
b) гистидиновый буфер присутствует в концентрации приблизительно 25 мМ;b) histidine buffer is present at a concentration of approximately 25 mM;
c) трегалоза присутствует в концентрации приблизительно 230 мМ;c) trehalose is present at a concentration of approximately 230 mM;
d) полисорбат 20 присутствует в концентрации приблизительно 0,2 г/л, при этом pH составляет приблизительно 6,5.d) Polysorbate 20 is present at a concentration of approximately 0.2 g/L, with a pH of approximately 6.5.
Некоторые способы согласно настоящему изобретению предусматривают применение определенных дозировок и лечебной схемы. В некоторых способах дозировка составляет от приблизительно 0,5 мг/кг до приблизительно 30 мг/кг, а антитело вводят внутривенно или подкожно с частотой от приблизительно один раз в неделю до приблизительно один раз в три месяца. В некоторых способах дозировка составляет приблизительно 24 мг/кг, а антитело вводят внутривенно каждые 28 дней.Some methods according to the present invention involve the use of certain dosages and treatment regimens. In some methods, the dosage is from about 0.5 mg/kg to about 30 mg/kg, and the antibody is administered intravenously or subcutaneously at a frequency of from about once per week to about once every three months. In some methods, the dosage is approximately 24 mg/kg and the antibody is administered intravenously every 28 days.
Антитела.Antibodies.
Термин антитело включает в себя интактные антитела и их антигенсвязывающие фрагменты. Как правило, фрагменты конкурируют с интактным антителом, из которого они были получены, за конкретное связывание с мишенью, в том числе отдельными тяжелыми цепями, легкими цепями Fab, Fab', F(ab')2, F(ab)c, Dab, нанотелами и Fv. Фрагменты могут быть получены методами рекомбинантной ДНК или ферментативным или химическим разделением интактных иммуноглобулинов. Термин антитело также включает в себя биспецифическое антитело и/или гуманизированное антитело. Биспецифическое или бифункциональное антитело представляет собой искусственное гибридное антитело, имеющее две разные пары тяжелой/легкой цепи и два разных участка связывания.The term antibody includes intact antibodies and antigen-binding fragments thereof. Typically, the fragments compete with the intact antibody from which they were derived for specific binding to the target, including individual heavy chains, light chains Fab, Fab', F(ab')2, F(ab)c, Dab, nanobodies and Fv. Fragments can be obtained by recombinant DNA methods or by enzymatic or chemical separation of intact immunoglobulins. The term antibody also includes a bispecific antibody and/or a humanized antibody. A bispecific or bifunctional antibody is an artificial hybrid antibody having two different heavy/light chain pairs and two different binding sites.
Термин гуманизированный иммуноглобулин или гуманизированное антитело относится к иммуноглобулину или антителу, которое содержит по меньшей мере одну цепь гуманизированного иммуноглобулина или антитела (т.е. по меньшей мере одну гуманизированную легкую или тяжелую цепь). Термин цепь гуманизированного иммуноглобулина или цепь гуманизированного антитела (т.е. легкая цепь гуманизированного иммуноглобулина или тяжелая цепь гуманизированного иммуноглобулина) относится к цепи иммуноглобулина или антитела (т.е. легкой или тяжелой цепи соответственно), имеющей вариабельную область, которая содержит вариабельную каркасную область, по существу из человеческого иммуноглобулина или антитела, и области, определяющие комплементарность (CDR) (например, по меньшей мере одну CDR, предпочтительно две CDR, более предпочтительно три CDR), по существу из не являющегося человеческим иммуноглобулина или антитела, и дополнительно содержит константные области (например, по меньшей мере одну константную область или ее часть в случае легкой цепи, и предпочтительно три константные области в случае тяжелой цепи). Термин гуманизированная вариабельная область (например, гуманизированная вариабельная область легкой цепи или гуманизированная вариабельная область тяжелой цепи) относится к вариабельной области, которая содержит вариабельную каркасную область, по существу из человеческого иммуноглобулина или антитела, и области, определяющие комплементарность (CDR), по существу из не являющегося человеческим иммуноглобулина или антитела.The term humanized immunoglobulin or humanized antibody refers to an immunoglobulin or antibody that contains at least one humanized immunoglobulin or antibody chain (ie, at least one humanized light or heavy chain). The term humanized immunoglobulin chain or humanized antibody chain (i.e., humanized immunoglobulin light chain or humanized immunoglobulin heavy chain) refers to an immunoglobulin or antibody chain (i.e., light or heavy chain, respectively) having a variable region that contains a variable framework region , essentially of a human immunoglobulin or antibody, and complementarity determining regions (CDRs) (e.g., at least one CDR, preferably two CDRs, more preferably three CDRs), essentially of a non-human immunoglobulin or antibody, and further comprises constant region (eg at least one constant region or part thereof in the case of a light chain, and preferably three constant regions in the case of a heavy chain). The term humanized variable region (eg, humanized light chain variable region or humanized heavy chain variable region) refers to a variable region that contains a variable framework region substantially from a human immunoglobulin or antibody and complementarity determining regions (CDRs) substantially from a human immunoglobulin or antibody. non-human immunoglobulin or antibody.
Фраза по существу из человеческого иммуноглобулина или антитела или по существу человеческий означает, что при выравнивании с аминокислотной последовательностью человеческого иммуноглобулина или антитела для целей сравнения область имеет по меньшей мере 80-90%, предпочтительно 90-95%, более предпочтительно 95-99% идентичность (т.е. идентичность локальной последовательности) с последовательностью человеческой каркасной или константной области, что позволяет, например, делать консервативные замены, замены консенсусной последовательности, замены зародышевой линии, обратные мутации и т.п. Применение консервативных замен, замен консенсусной последовательности, замен зародышевой линии, обратных мутаций и т.п. часто называют оптимизацией гуманизированного антитела или цепи. Фраза по существу из иммуноглобулина или антитела, не являющегося человеческим или по существу не являющийся человеческим означает наличие последовательности иммуноглобулина или антитела не менее 80-95%, предпочтительно 90-95%, более предпочтительно 96%, 97%, 98% или на 99% идентичного таковому для не человеческого организма, например, не являющего человеком млекопитающего.The phrase essentially human immunoglobulin or antibody or essentially human means that when aligned with the amino acid sequence of a human immunoglobulin or antibody for purposes of comparison, the region has at least 80-90%, preferably 90-95%, more preferably 95-99% identity (i.e., local sequence identity) with a human framework or constant region sequence, allowing, for example, conservative substitutions, consensus sequence substitutions, germline substitutions, back mutations, and the like. Use of conservative substitutions, consensus sequence substitutions, germline substitutions, reverse mutations, etc. often referred to as humanized antibody or chain optimization. The phrase substantially non-human or substantially non-human immunoglobulin or antibody means the presence of an immunoglobulin or antibody sequence of at least 80-95%, preferably 90-95%, more preferably 96%, 97%, 98% or 99% identical to that of a non-human organism, such as a non-human mammal.
Соответственно все области или остатки гуманизированного иммуноглобулина или антитела либо цепи гуманизированного иммуноглобулина или антитела за исключением, возможно, CDR по существу идентичны соответствующим областям или остаткам одной или нескольких нативных последовательностей иммуноглобулина человека. Термин соответствующая область или соответствующий остаток относится к области или остатку на второй аминокислотной или нуклеотидной последовательности, который занимает такую же (т.е. эквивалентную) позицию, как и область или остаток на первой аминокислотной или нуклеотидной последовательности, когда первая и вторая последовательности оптимально выровнены для целей сравнения.Accordingly, all regions or residues of the humanized immunoglobulin or antibody or chains of the humanized immunoglobulin or antibody, except possibly the CDRs, are substantially identical to the corresponding regions or residues of one or more native human immunoglobulin sequences. The term corresponding region or corresponding residue refers to a region or residue on a second amino acid or nucleotide sequence that occupies the same (i.e., equivalent) position as a region or residue on a first amino acid or nucleotide sequence when the first and second sequences are optimally aligned for comparison purposes.
Предусмотрены различные антитела, подходящие для лечения амилоидоза AL в соответствии со способами и соответствующими вариантами применения, раскрытыми в данном документе. Например, подходит химерный вариант антитела 2A4. Подходит также гуманизированный вариант антитела 2A4.Various antibodies are provided that are suitable for the treatment of AL amyloidosis in accordance with the methods and corresponding uses disclosed herein. For example, a chimeric version of the 2A4 antibody is suitable. A humanized version of the 2A4 antibody is also suitable.
- 4 044759- 4 044759
Один подходящий вариант антитела 2A4 содержит вариабельную область легкой цепи, содержащую три определяющих комплементарность области SEQ ID NO: 1, 2 и 3, и вариабельную область тяжелой цепи, содержащую три определяющих комплементарность области SEQ ID NO: 4, 5 и 6. Другой подходящий вариант антитела 2A4 содержит вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 7, 8 и 9, и вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 10, 11 или 12. Еще один подходящий вариант антитела 2A4 содержит легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 13, и тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 14. Также подходят и предусмотрены антигенсвязывающие фрагменты антитела 2A4, такие как Fab-фрагмент, Fab'-фрагмент, F(ab')2-фрагмент, F(ab)c-фрагмент, Dab, нанотело или Fv-фрагмент.One suitable embodiment of the 2A4 antibody comprises a light chain variable region comprising the three complementarity determining regions of SEQ ID NOs: 1, 2 and 3, and a heavy chain variable region comprising the three complementarity determining regions of SEQ ID NOs: 4, 5 and 6. Another suitable embodiment The 2A4 antibody contains a light chain variable region containing the amino acid sequence of SEQ ID NOs: 7, 8 and 9, and a heavy chain variable region containing the amino acid sequence of SEQ ID NO: 10, 11 or 12. Another suitable embodiment of the 2A4 antibody contains a light chain, containing the amino acid sequence of SEQ ID NO: 13, and a heavy chain containing the amino acid sequence of SEQ ID NO: 14. Antigen binding fragments of the 2A4 antibody, such as a Fab fragment, a Fab' fragment, an F(ab') 2 fragment, are also suitable and provided. , F(ab)c fragment, Dab, nanobody or Fv fragment.
Фармацевтические составы.Pharmaceutical compounds.
В некоторых раскрытых в данном документе способах и соответствующих вариантах применения антитело можно вводить в виде фармацевтического состава. Например, иллюстративные фармацевтические составы в дополнение к антителам содержат гистидиновый буфер, трегалозу и полисорбат 20. В некоторых составах антитело присутствует в концентрации в диапазоне от приблизительно 1 мг/мл до приблизительно 100 мг/мл; гистидиновый буфер присутствует в концентрации в диапазоне от приблизительно 20 мМ до приблизительно 30 мМ; трегалоза присутствует в концентрации в диапазоне от приблизительно 210 мМ до приблизительно 250 мМ; полисорбат 20 присутствует в концентрации в диапазоне от приблизительно 0,005% до приблизительно 0,05% по массе; и pH находится в диапазоне от приблизительно 6 до приблизительно 7.In some of the methods and corresponding uses disclosed herein, the antibody may be administered in the form of a pharmaceutical formulation. For example, exemplary pharmaceutical formulations contain a histidine buffer, trehalose, and polysorbate 20 in addition to the antibodies. In some formulations, the antibody is present at a concentration ranging from about 1 mg/ml to about 100 mg/ml; the histidine buffer is present in a concentration ranging from about 20 mM to about 30 mM; trehalose is present in concentrations ranging from about 210 mM to about 250 mM; polysorbate 20 is present in a concentration ranging from about 0.005% to about 0.05% by weight; and the pH ranges from about 6 to about 7.
В некоторых составах антитело присутствует в концентрации в диапазоне от приблизительно 5 мг/мл до приблизительно 100 мг/мл. В некоторых составах антитело присутствует в концентрации в диапазоне от приблизительно 5 мг/мл до приблизительно 15 мг/мл. В некоторых составах антитело присутствует в концентрации в диапазоне от приблизительно 25 мг/мл до приблизительно 75 мг/мл. Например, антитело может присутствовать в концентрации приблизительно 10 мг/мл или присутствовать в концентрации приблизительно 50 мг/мл. Антитело может присутствовать в стерильной жидкой дозированной лекарственной форме от приблизительно 50 мг/флакон до приблизительно 500 мг/флакон или более. Например, антитело может присутствовать в стерильной жидкой дозированной лекарственной форме приблизительно 100 мг/флакон.In some formulations, the antibody is present at a concentration ranging from about 5 mg/ml to about 100 mg/ml. In some formulations, the antibody is present at a concentration ranging from about 5 mg/ml to about 15 mg/ml. In some formulations, the antibody is present at a concentration ranging from about 25 mg/ml to about 75 mg/ml. For example, the antibody may be present at a concentration of about 10 mg/ml or present at a concentration of about 50 mg/ml. The antibody may be present in a sterile liquid dosage form from about 50 mg/vial to about 500 mg/vial or more. For example, the antibody may be present in a sterile liquid dosage form at approximately 100 mg/vial.
Гистидиновый буфер может присутствовать в некоторых составах в концентрации приблизительно 25 мМ. В некоторых составах гистидиновый буфер содержит L-гистидин и моногидрат L-гистидина HCl. Например, в некоторых составах L-гистидин присутствует в концентрации в диапазоне от приблизительно 16 мМ до приблизительно 22 мМ и моногидрат L-гистидина HCl присутствует в концентрации в диапазоне от приблизительно 4 мМ до приблизительно 8 мМ.Histidine buffer may be present in some formulations at a concentration of approximately 25 mM. In some formulations, the histidine buffer contains L-histidine and L-histidine monohydrate HCl. For example, in some formulations, L-histidine is present at a concentration ranging from about 16 mM to about 22 mM and L-histidine monohydrate HCl is present at a concentration ranging from about 4 mM to about 8 mM.
В некоторых составах трегалоза присутствует в концентрации от приблизительно 210 мМ до приблизительно 250 мМ, например приблизительно 230 мМ. В некоторых составах используется другой невосстанавливающий сахар, такой как сахароза, маннит или сорбит.In some formulations, trehalose is present at a concentration of from about 210 mM to about 250 mM, such as about 230 mM. Some formulations use other non-reducing sugars such as sucrose, mannitol or sorbitol.
В некоторых составах полисорбат 20 присутствует в концентрации в диапазоне от приблизительно 0,005% по весу до приблизительно 0,05% по весу, например 0,005, 0,01, 0,015, 0,02, 0,025, 0,03, 0,035, 0,04, 0,045 или 0,05% по весу. В альтернативном варианте в некоторых составах полисорбат 20 присутствует в концентрации в диапазоне приблизительно от 0,05, 0,1, 0,15, 0,2, 0,25, 0,3, 0,35, 0,4, 0,45 или 0,5 г/л. Некоторые составы включают полисорбат 20 г/л в концентрации 0,2 г/л.In some formulations, polysorbate 20 is present at a concentration ranging from about 0.005% by weight to about 0.05% by weight, for example 0.005, 0.01, 0.015, 0.02, 0.025, 0.03, 0.035, 0.04, 0.045 or 0.05% by weight. Alternatively, in some formulations, polysorbate 20 is present at a concentration ranging from about 0.05, 0.1, 0.15, 0.2, 0.25, 0.3, 0.35, 0.4, 0.45 or 0.5 g/l. Some formulations include polysorbate 20 g/L at a concentration of 0.2 g/L.
Некоторые составы отличаются pH в диапазоне приблизительно 6-7, например pH 6,0, 6,1, 6,2, 6,3, 6,4, 6,5, 6,6, 6,7, 6,8, 6,9 или 7,0. Некоторые составы имеют pH приблизительно 6,5. Некоторые составы отличаются тем, что осмоляльность составляет приблизительно 300 мОсм/кг. В некоторые составы также может быть включен объемообразующий агент.Some formulations differ in pH in the range of approximately 6-7, for example pH 6.0, 6.1, 6.2, 6.3, 6.4, 6.5, 6.6, 6.7, 6.8, 6 .9 or 7.0. Some formulations have a pH of approximately 6.5. Some formulations have an osmolality of approximately 300 mOsm/kg. Some formulations may also include a bulking agent.
Обычно составы являются стерильными, что достигается, например, путем стерильной фильтрации с использованием фильтра 0,2 или 0,22 мкм. Раскрытые в данном документе составы также обычно стабильны при замораживании и оттаивании.Typically the formulations are sterile, which is achieved, for example, by sterile filtration using a 0.2 or 0.22 µm filter. The compositions disclosed herein are also generally freeze-thaw stable.
Необязательно раскрытые в данном документе составы могут дополнительно содержать другие вспомогательные вещества, такие как сахариды, полиолы и аминокислоты (например, аргинин, лизин и метионин). В настоящем изобретении также представлены составы, по существу не содержащие поверхностно-активное вещество, неорганические соли, дополнительные сахара и/или другие вспомогательные вещества, т.е. приблизительно менее 0,0005%, менее 0,0003% или менее 0,0001% таких соединений.Optionally, the compositions disclosed herein may further contain other excipients such as saccharides, polyols and amino acids (eg, arginine, lysine and methionine). The present invention also provides formulations substantially free of surfactant, inorganic salts, additional sugars and/or other excipients, i.e. about less than 0.0005%, less than 0.0003%, or less than 0.0001% of such compounds.
Иллюстративный состав содержит антитело, которое присутствует в концентрации приблизительно 50 мг/мл, гистидиновый буфер присутствует в концентрации приблизительно 25 мМ, трегалоза присутствует в концентрации приблизительно 230 мМ, полисорбат 20 присутствует в концентрации приблизительно 0,2 г/л и pH приблизительно 6,5.An exemplary formulation contains an antibody that is present at a concentration of approximately 50 mg/mL, a histidine buffer is present at a concentration of approximately 25 mM, trehalose is present at a concentration of approximately 230 mM, polysorbate 20 is present at a concentration of approximately 0.2 g/L, and a pH of approximately 6.5 .
Раскрытые в данном документе составы могут быть представлены в дозированной лекарственной форме, подходящей для парентерального (например, внутривенного, внутримышечного, подкожного) введения. В зависимости от конкретных применений состав может быть альтернативно представлен в дозировке, подходящей для ректального, трансдермального, назального, вагинального, ингаляционного,The compositions disclosed herein may be presented in dosage dosage form suitable for parenteral (eg, intravenous, intramuscular, subcutaneous) administration. Depending on the specific applications, the formulation may alternatively be presented in a dosage suitable for rectal, transdermal, nasal, vaginal, inhalation,
- 5 044759 глазного или другого введения. Фармацевтические составы обычно готовят в соответствии с обычной фармацевтической практикой. См., например, Remington: The Science and Practice of Pharmacy (19th ed.) ed. A.R. Gennaro, 1995, Mack Publishing Company, Easton, Pa. and Encyclopedia of Pharmaceutical Technology, eds. J. Swarbrick and J.C. Boylan, 1988-1999, Marcel Dekker, N.Y.- 5 044759 ophthalmic or other administration. Pharmaceutical compositions are generally prepared in accordance with standard pharmaceutical practice. See, for example, Remington: The Science and Practice of Pharmacy (19th ed.) ed. A.R. Gennaro, 1995, Mack Publishing Company, Easton, Pa. and Encyclopedia of Pharmaceutical Technology, eds. J. Swarbrick and J.C. Boylan, 1988-1999, Marcel Dekker, N.Y.
В некоторых способах фармацевтический состав можно вводить пациенту внутривенно или подкожно с частотой от приблизительно один раз в неделю до приблизительно один раз в три месяца с дозировкой антитела в диапазоне от приблизительно 0,5 мг/кг до приблизительно 30 мг/кг. Например, фармацевтический состав можно вводить пациенту внутривенно каждые 28 дней с дозировкой антитела приблизительно 24 мг/кг.In some methods, the pharmaceutical composition can be administered to a patient intravenously or subcutaneously at a frequency of about once per week to about once every three months, with an antibody dosage ranging from about 0.5 mg/kg to about 30 mg/kg. For example, the pharmaceutical formulation may be administered intravenously to a patient every 28 days at an antibody dosage of approximately 24 mg/kg.
В раскрытых в данном документе способах и соответствующих вариантах применения также могут быть использованы фармацевтические препараты, содержащие лиофилизированную форму антитела и инструкции по восстановлению и применению. Например, иллюстративный фармацевтический препарат может содержать (a) флакон, содержащий приблизительно от 100 до 500 мг антитела в форме порошка;The methods and associated uses disclosed herein may also include pharmaceutical preparations containing a lyophilized form of the antibody and instructions for reconstitution and use. For example, an exemplary pharmaceutical preparation may contain (a) a vial containing from about 100 to 500 mg of antibody in powder form;
(b) инструкции по восстановлению антитела; и (c) инструкции по приготовлению восстановленного антитела для инъекции, так что лиофилизированное антитело восстанавливают водой для инъекций до экстрагируемого объема 10 мл.(b) instructions for reconstituting the antibody; and (c) instructions for preparing the reconstituted antibody for injection, such that the lyophilized antibody is reconstituted with water for injection to an extractable volume of 10 ml.
Способы лечения.Methods of treatment.
Раскрытые в данном документе способы и соответствующие варианта применения предназначены для лечения пациентов, страдающих амилоидозом AL, связанным с отложением неправильно свернутых белков легкой цепи иммуноглобулина, имеющих аминокислотную последовательность GD в позициях 81-82 (нумерация по Кабату). Такие способы лечения предусматривают введение пациенту эффективной дозировки антитела.The methods and corresponding uses disclosed herein are intended for the treatment of patients suffering from AL amyloidosis associated with the deposition of misfolded immunoglobulin light chain proteins having the amino acid sequence GD at positions 81-82 (Kabat numbering). Such treatments involve administering an effective dosage of the antibody to the patient.
Некоторые раскрытые в данном документе способы лечения предусматривают введение пациенту эффективной дозы химерного или гуманизированного варианта антитела 2A4 (регистрационный номер ATCC 9662). Антитело 2A4 может содержать вариабельную область легкой цепи, содержащую три определяющих комплементарность области SEQ ID NO: 1, 2 и 3, и вариабельную область тяжелой цепи, содержащую три определяющих комплементарность области SEQ ID NO: 4, 5 и 6. В некоторых способах антитело 2A4 содержит вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 7, 8 или 9, и вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 10, 11 или 12. В некоторых способах антитело 2A4 содержит легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 13, и тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 14.Certain methods of treatment disclosed herein involve administering to a patient an effective dose of a chimeric or humanized variant of the 2A4 antibody (ATCC registration number 9662). The 2A4 antibody may comprise a light chain variable region comprising the three complementarity determining regions of SEQ ID NOs: 1, 2 and 3, and a heavy chain variable region comprising the three complementarity determining regions of SEQ ID NOs: 4, 5 and 6. In some methods, the 2A4 antibody contains a light chain variable region containing the amino acid sequence of SEQ ID NO: 7, 8 or 9, and a heavy chain variable region containing the amino acid sequence of SEQ ID NO: 10, 11 or 12. In some methods, the 2A4 antibody contains a light chain containing the amino acid sequence SEQ ID NO: 13, and a heavy chain containing the amino acid sequence of SEQ ID NO: 14.
В рамках настоящего изобретения термины лечить и лечение относятся к облегчению или уменьшению интенсивности одного или нескольких симптомов или эффектов, связанных с амилоидозом AL, профилактике, ингибированию или задержке появления одного или нескольких симптомов или эффектов амилоидоза AL, уменьшению тяжести или частоты проявления одного или нескольких симптомов или эффектов амилоидоза AL и/или улучшению или изменению в сторону желаемых результатов, как описано в данном документе.As used herein, the terms treat and treatment refer to alleviating or reducing the intensity of one or more symptoms or effects associated with AL amyloidosis, preventing, inhibiting or delaying the onset of one or more symptoms or effects of AL amyloidosis, reducing the severity or frequency of one or more symptoms or the effects of AL amyloidosis and/or improvement or modification towards the desired results as described herein.
Желаемые результаты раскрытых в данном документе способов лечения варьируются в зависимости от профиля пациента, и специалист в данной области может легко их определить. Обычно желаемые результаты включают измеримые показатели, такие как уменьшение или клиренс патологических амилоидных фибрилл, снижение или ингибирование агрегации амилоида и/или отложения амилоидных фибрилл, и усиление иммунного ответа на патологические и/или агрегированные амилоидные фибриллы. Желаемые результаты также подразумевают уменьшение симптомов, характерных для амилоидного заболевания. Например, желаемые результаты лечения амилоидоза AL подразумевают уменьшение частоты возникновения или тяжести известных симптомов, таких как дисфункция органов, периферическая и автономная невропатия, туннельный запястный синдром, макроглоссия, рестриктивная кардиомиопатия, артропатия крупных суставов, иммунные дискразии, миеломы, а также скрытые дискразии. Желаемые результаты раскрытых терапий, как правило, представляют собой поддающиеся количественной оценке показатели в сравнении с контрольными или исходными измерениями. В рамках настоящего изобретения относительные понятия, такие как улучшать, увеличивать или уменьшать указывают значения, относящиеся к контрольному варианту, как например измерение у одного и того же пациента до начала лечения, описанного в данном документе, или измерение у контрольного пациента или группы. Контрольный пациент - это пациент, страдающий тем же амилоидным заболеванием, что и пациент, подлежащий лечению, приблизительно одного возраста с пациентом, подлежащим лечению (для гарантии, что стадии заболевания у пациента, получающего лечение, и контрольного пациента сопоставимы), но который не получал лечения с использованием раскрытых составов антител. В этом случае эффективность раскрытых составов антител оценивается по сдвигу или тенденции отклонения от измеримых показателей в контрольном варианте до лечения. В альтернативном варианте контрольным пациентом является здоровый пациент, приблизительно одного возраста с пациентом, подлежащим лечению. В этом случае эффективность раскрытых составов антител оценивается по сдвигу или тенденции в сторону от измери- 6 044759 мых показателей в здоровом контрольном варианте. Изменения или улучшения в ответ на терапию обычно являются статистически значимыми и описываются значением p, меньше или равным 0,1, меньше 0,05, меньше 0,01, меньше 0,005 или меньше 0,001, которые можно рассматривать как значимые.The desired results of the treatment methods disclosed herein vary depending on the patient profile and can be readily determined by one skilled in the art. Generally, desired results include measurable parameters such as reduction or clearance of pathological amyloid fibrils, reduction or inhibition of amyloid aggregation and/or amyloid fibril deposition, and enhancement of the immune response to pathological and/or aggregated amyloid fibrils. Desired results also include a reduction in symptoms characteristic of amyloid disease. For example, desired results in the treatment of AL amyloidosis include a reduction in the incidence or severity of known symptoms such as organ dysfunction, peripheral and autonomic neuropathy, carpal tunnel syndrome, macroglossia, restrictive cardiomyopathy, large joint arthropathy, immune dyscrasias, myelomas, and hidden dyscrasias. Desired outcomes of disclosed therapies are typically quantifiable measures relative to control or baseline measurements. In the context of the present invention, relative terms such as improve, increase or decrease indicate values relative to a control case, such as a measurement in the same patient prior to the treatment described herein, or a measurement in a control patient or group. A control patient is a patient who has the same amyloid disease as the patient being treated, is approximately the same age as the patient being treated (to ensure that the disease stages of the treated patient and the control patient are comparable), but who has not received treatments using the disclosed antibody formulations. In this case, the effectiveness of the disclosed antibody formulations is assessed by the shift or tendency to deviate from the measurable indicators in the control variant before treatment. Alternatively, the control patient is a healthy patient approximately the same age as the patient being treated. In this case, the effectiveness of the disclosed antibody formulations is assessed by a shift or trend away from the measured values in the healthy control. Changes or improvements in response to therapy are usually statistically significant and are described by a p value of less than or equal to 0.1, less than 0.05, less than 0.01, less than 0.005, or less than 0.001, which can be considered significant.
Как у бессимптомных, так и у пациентов с симптомами лечение в соответствии с раскрытыми способами можно начинать в любое время до или после диагностики основного амилоидного заболевания AL. Лечение обычно предполагает прием нескольких доз в течение периода времени. Лечение можно контролировать путем проведения анализа на содержание антитела или применения SAP сцинтиграфии с радиоактивной меткой в динамике. Если реакция снижается, может быть показана повторная доза. Реакцию пациентов с амилоидозом AL на лечение можно контролировать путем оценки сердечных маркеров, таких как NT-proBNP и/или тропонин, креатин сыворотки и/или щелочная фосфатаза; путем проведения анализов на содержание свободной легкой цепи (SFLC), количественных анализов на содержание иммуноглобулина, биопсии, электрофореза сывороточных белков (SPEP), электрофореза белков мочи (UPEP), сыворотки, электрофореза иммунофиксации мочи (IFE) и/или методов визуализации органов. Иллюстративный полный ответ (CR) может быть определен из критериев ответа, в том числе отрицательной IFE сыворотки и мочи, нормального содержания и/или <5% плазматических клеток в костном мозге. Иллюстративный очень хороший частичный ответ (VGPR) можно определить по dFLC <40 мг/л. Иллюстративный частичный ответ (PR) можно определить по уменьшению dFLC на >50%. В почках ответ на лечение может быть определен, например, по снижению >50% (например, >0,5 г/24 ч) экскреции белка в суточной моче при отсутствии снижения eGFR на >25% или повышения сывороточного креатина на >0,5 мг/дл. В печени ответ на лечение может быть определен, например, по уменьшению на >50% первоначально повышенного уровня щелочной фосфатазы или уменьшению на >2 см размера печени при КТ или МРТ. В сердце ответ на лечение может быть определен, например, по снижению NT-proBNP на >30% и >300 нг/л у пациентов с исходным уровнем NT-proBNP >650 нг/л. В почках ответ на лечение может быть определен, например, по уменьшению протеинурии >30% или снижению протеинурии до <0,5 г/24 ч при отсутствии прогрессирования почечной недостаточности. Пациенты с невропатией обычно отличаются увеличением NIS-LL на <2 пункта от исходного уровня. Улучшение при невропатии (например, улучшение функции нервной системы) определяют по уменьшению NIS-LL в сравнении с исходным уровнем.In both asymptomatic and symptomatic patients, treatment in accordance with the disclosed methods can be initiated at any time before or after diagnosis of the underlying AL amyloid disease. Treatment usually involves taking several doses over a period of time. Treatment can be monitored by testing for antibody content or using SAP scintigraphy with a radioactive label over time. If the response decreases, a repeat dose may be indicated. The response of patients with AL amyloidosis to treatment can be monitored by assessing cardiac markers such as NT-proBNP and/or troponin, serum creatine and/or alkaline phosphatase; by performing free light chain (SFLC) assays, quantitative immunoglobulin assays, biopsy, serum protein electrophoresis (SPEP), urine protein electrophoresis (UPEP), serum, urine immunofixation electrophoresis (IFE), and/or organ imaging techniques. An illustrative complete response (CR) may be defined from response criteria including negative serum and urine IFE, normal bone marrow, and/or <5% plasma cells. An illustrative very good partial response (VGPR) can be defined as a dFLC <40 mg/L. An illustrative partial response (PR) can be defined as a >50% decrease in dFLC. In the kidney, response to treatment may be defined, for example, by a >50% reduction (eg, >0.5 g/24 h) in 24-hour urinary protein excretion in the absence of a >25% reduction in eGFR or a >0.5 increase in serum creatine mg/dl. In the liver, response to treatment can be determined, for example, by a >50% decrease in initially elevated alkaline phosphatase levels or a >2 cm decrease in liver size on CT or MRI. In the heart, response to treatment can be determined, for example, by a decrease in NT-proBNP of >30% and >300 ng/L in patients with a baseline NT-proBNP level of >650 ng/L. In the kidneys, response to treatment can be defined, for example, as a >30% reduction in proteinuria or a reduction in proteinuria to <0.5 g/24 hours in the absence of progression of renal failure. Patients with neuropathy typically have <2 points increase in NIS-LL from baseline. Improvement in neuropathy (eg, improvement in nervous system function) is defined as a decrease in NIS-LL compared to baseline.
Для облегчения или уменьшения интенсивности одного или нескольких симптомов или эффектов, связанных с амилоидозом, можно проводить их лечение независимо друг от друга. Термин независимо означает, что антитело или состав антитела можно вводить в дозировке, достаточной для лечения одного или нескольких симптомов или эффектов (например, периферической невропатии), без лечения всех симптомов или эффектов или конкретных симптомов или эффектов (например, функции сердца, функции почек).To alleviate or reduce the intensity of one or more symptoms or effects associated with amyloidosis, they can be treated independently of each other. The term independently means that the antibody or antibody composition can be administered in a dosage sufficient to treat one or more symptoms or effects (eg, peripheral neuropathy), without treating all symptoms or effects or specific symptoms or effects (eg, cardiac function, renal function) .
Некоторые пациенты либо ранее получали лечение, или одновременно получают лечение, или позже получат лечение при помощи одного или нескольких химиотерапевтических средств. Некоторые пациенты либо ранее получали лечение, или одновременно получают лечение, или позже получат лечение при помощи одного или нескольких антител. Некоторые пациенты либо ранее получали лечение, или одновременно получают лечение, или позже получат лечение с помощью комбинированной терапии.Some patients have either previously been treated, are currently being treated, or will later be treated with one or more chemotherapy agents. Some patients have either been previously treated, are currently being treated, or will later receive treatment with one or more antibodies. Some patients have either been previously treated, are being treated concurrently, or will later be treated with combination therapy.
Некоторым пациентам была сделана аутогенная трансплантация. Некоторые пациенты могли получать комбинированные методы лечения. Некоторые пациенты могут быть выбраны для лечения в соответствии со способами, раскрытыми в настоящем документе, только в том случае, если они ранее получали лечение с помощью альтернативной терапии.Some patients underwent autogenous transplantation. Some patients may have received combination treatments. Some patients may be selected for treatment in accordance with the methods disclosed herein only if they have previously been treated with an alternative therapy.
Однако некоторым пациентам может быть противопоказано лечение одним или несколькими химиотерапевтическими средствами, антителами, аутогенной трансплантацией, комбинированной терапией или их комбинацией. Например, лечащий врач может предполагать, что конкретное лечение или режим введения дозы лекарственного средства, требуемые для достижения желаемого эффекта, окажут больше вредных эффектов на функцию почек пациента, чем любая ожидаемая польза.However, some patients may be contraindicated for treatment with one or more chemotherapy agents, antibodies, autogenous transplantation, combination therapy, or a combination of these. For example, the treating physician may anticipate that a particular treatment or drug dosage regimen required to achieve a desired effect will have more detrimental effects on the patient's renal function than any expected benefit.
Схемы лечения.Treatment regimens.
Лечение в соответствии со способами, раскрытыми в данном документе, обычно предусматривает введение пациенту нескольких доз антитела в течение некоторого периода времени. Антитела можно вводить пациенту, например, внутривенно в виде фармацевтического состава в диапазоне доз от приблизительно 10 мг до приблизительно 5000 мг, например приблизительно 10 мг, приблизительно 30 мг, приблизительно 100 мг, приблизительно 300 мг, приблизительно 1000 мг, приблизительно 2000 мг или приблизительно 2500 мг. Антитела также можно вводить внутривенно в диапазоне доз от приблизительно 0,1 мг/кг до приблизительно 50 мг/кг или от приблизительно 0,5 мг/кг до приблизительно 30 мг/кг в зависимости от массы тела пациента. Например, дозировки могут составлять приблизительно 0,5 мг/кг веса тела, приблизительно 1,0 мг/кг, приблизительно 1,5 мг/кг, приблизительно 2,0 мг/кг, приблизительно 4,0 мг/кг, приблизительно 5,0 мг/кг, приблизительно 8,0 мг/кг, приблизительно 10 мг/кг, приблизительно 15 мг/кг, приблизительно 16 мг/кг, приблизительно 20 мг/кг, приблизительно 24 мг/кг, приблизительно 25 мг/кг или приблизительно 30 мг/кг веса тела. Эскалация для отдельного пациента может происходить по усмотрению лечащего врача при отсутствии какого-либо клинически значимого явления, которое, поTreatment in accordance with the methods disclosed herein typically involves administering multiple doses of the antibody to the patient over a period of time. The antibodies may be administered to a patient, for example, intravenously as a pharmaceutical formulation in a dosage range of about 10 mg to about 5000 mg, such as about 10 mg, about 30 mg, about 100 mg, about 300 mg, about 1000 mg, about 2000 mg, or about 2500 mg. Antibodies can also be administered intravenously in a dosage range of about 0.1 mg/kg to about 50 mg/kg or from about 0.5 mg/kg to about 30 mg/kg depending on the patient's body weight. For example, dosages may be about 0.5 mg/kg body weight, about 1.0 mg/kg, about 1.5 mg/kg, about 2.0 mg/kg, about 4.0 mg/kg, about 5. 0 mg/kg, approximately 8.0 mg/kg, approximately 10 mg/kg, approximately 15 mg/kg, approximately 16 mg/kg, approximately 20 mg/kg, approximately 24 mg/kg, approximately 25 mg/kg or approximately 30 mg/kg body weight. Escalation for an individual patient may occur at the discretion of the treating physician in the absence of any clinically significant event that is considered
- 7 044759 обоснованному предположению лечащего врача, может повлечь за собой чрезмерную угрозу безопасности пациента, например негематологическая токсичность >3 степени, тошнота, рвота или диарея >3 степени, неконтролируемые максимальной противорвотной/противодиарейной терапией, нейтропения 4 степени, продолжающаяся >7 дней при отсутствии поддержки фактора роста, нейтропения 3 или 4 степени любой продолжительности, сопровождающаяся лихорадкой >38,5°С и/или системная инфекция, или другая гематологическая токсичность степени >4.- 7 044759 reasonable judgment of the attending physician, may result in an excessive threat to patient safety, such as non-hematological toxicity >Grade 3, nausea, vomiting or diarrhea >Grade 3 uncontrolled by maximal antiemetic/antidiarrheal therapy, Grade 4 neutropenia lasting >7 days in the absence of growth factor support, grade 3 or 4 neutropenia of any duration accompanied by fever >38.5°C and/or systemic infection, or other grade >4 hematologic toxicity.
Антитела обычно вводят пациенту в несколько приемов. Иллюстративная схема лечения предусматривает введение один раз в две недели, один раз в месяц или один раз каждые 3-6 месяцев. Например, пациенты могут получать антитело (например, в виде внутривенного состава) один раз каждые четыре недели в виде цикла, например каждые двадцать восемь дней. Частоту дозирования можно регулировать в зависимости от фармакокинетического профиля антитела у пациента. Например, время полужизни антитела может служить основанием для двухнедельной частоты дозирования. В некоторых способах два или более антитела с разными специфичностями связывания можно вводить одновременно, и в этом случае доза каждого вводимого антитела попадает в указанные диапазоны. Интервалы между разовыми дозами могут составлять неделю, месяц или год. Интервалы также могут быть нерегулярными в зависимости от уровней антител в крови и других клинических признаков. В некоторых способах дозировку корректируют для достижения концентрации антител в плазме приблизительно 1-1000 мкг/мл или приблизительно 25-300 мкг/мл. В альтернативных вариантах антитела можно вводить в виде состава с замедленным высвобождением, и в этом случае требуется менее частое введение. Антитела можно вводить пациенту в течение по меньшей мере 9 месяцев, по меньшей мере 12 месяцев или в течение более длительного периода времени для достижения желаемого результата.Antibodies are usually administered to the patient in several doses. An exemplary treatment regimen is administered once every two weeks, once a month, or once every 3-6 months. For example, patients may receive the antibody (eg, as an intravenous formulation) once every four weeks in a cycle, such as every twenty-eight days. The dosing frequency can be adjusted depending on the pharmacokinetic profile of the antibody in the patient. For example, the half-life of an antibody may justify a biweekly dosing frequency. In some methods, two or more antibodies with different binding specificities can be administered simultaneously, in which case the dose of each antibody administered falls within the specified ranges. The intervals between single doses can be a week, a month or a year. Intervals may also be irregular depending on blood antibody levels and other clinical signs. In some methods, the dosage is adjusted to achieve a plasma antibody concentration of approximately 1-1000 μg/ml or approximately 25-300 μg/ml. In alternative embodiments, the antibodies can be administered as a sustained release formulation, in which case less frequent administration is required. Antibodies can be administered to a patient over at least 9 months, at least 12 months, or a longer period of time to achieve the desired result.
Дозировка и частота варьируются в зависимости от времени полужизни антитела у пациента. В общем человеческие антитела показывают самое длительное время полужизни, затем гуманизированные антитела, химерные антитела и не являющиеся человеческими антитела. Дозировка и частота введения могут варьироваться в зависимости от того, является ли лечение профилактическим или терапевтическим. В профилактических целях относительно небольшую дозу вводят через относительно нечастые интервалы в течение длительного периода времени. Некоторые пациенты продолжают получать лечение всю оставшуюся жизнь. В терапевтических целях иногда требуется относительно высокая доза с относительно короткими интервалами до тех пор, пока прогрессирование заболевания не уменьшится или не прекратится, пока не будет достигнут частичный или полный ответ, и/или пока у пациента не наступит облегчение или уменьшение интенсивности симптомов заболевания. После этого патенту может быть назначен профилактический режим.Dosage and frequency vary depending on the half-life of the antibody in the patient. In general, human antibodies show the longest half-life, followed by humanized antibodies, chimeric antibodies and non-human antibodies. Dosage and frequency of administration may vary depending on whether the treatment is prophylactic or therapeutic. For prophylactic purposes, a relatively small dose is administered at relatively infrequent intervals over a long period of time. Some patients continue to receive treatment for the rest of their lives. For therapeutic purposes, a relatively high dose is sometimes required at relatively short intervals until disease progression is reduced or stopped, a partial or complete response is achieved, and/or until the patient experiences relief or amelioration of disease symptoms. The patent may then be placed on a prophylactic regimen.
Продолжительность схемы лечения зависит от заболевания, которое подлежит лечению, возраста и состояния пациента, стадии и типа заболевания у пациента, реакции пациента на лечение и т.д. Лечащий врач может внимательно наблюдать за эффектами терапии и проводить любые корректировки по мере необходимости. Когда средства используют в комбинации, два или более терапевтических средства вводят одновременно или последовательно в любом порядке, т.е. антитело, раскрытое в данном документе, вводят до введения второго терапевтического средства, одновременно со вторым терапевтическим средством или после введения второго терапевтического средства. Например, комбинированная терапия может быть выполнена путем введения первого терапевтического средства перед (например, за 1, 5, 15, 30, 45 мин, 1, 2, 4, 6, 12, 24, 48, 72, 96 ч, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 8 или 12 недель до), одновременно с или после (например, 1, 5, 15, 30, 45 мин, 1, 2, 4, 6, 12, 24, 48, 72, 96 ч, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 8 или 12 недель после) введения второго терапевтического средства.The duration of the treatment regimen depends on the disease being treated, the age and condition of the patient, the stage and type of disease in the patient, the patient's response to treatment, etc. The treating physician can closely monitor the effects of therapy and make any adjustments as needed. When the agents are used in combination, two or more therapeutic agents are administered simultaneously or sequentially in any order, i.e. the antibody disclosed herein is administered before the administration of the second therapeutic agent, simultaneously with the second therapeutic agent, or after the administration of the second therapeutic agent. For example, combination therapy can be performed by administering the first therapeutic agent before (eg, 1, 5, 15, 30, 45 minutes, 1, 2, 4, 6, 12, 24, 48, 72, 96 hours, 1, 2 , 3, 4, 5, 6, 8, or 12 weeks before, simultaneously with, or after (e.g., 1, 5, 15, 30, 45 minutes, 1, 2, 4, 6, 12, 24, 48, 72, 96 hours, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 8 or 12 weeks after) administration of the second therapeutic agent.
Дозировку, частоту и способ введения каждого компонента комбинированной терапии можно контролировать независимо. Например, одно терапевтическое средство можно вводить перорально три раза в день, в то время как второе терапевтическое средство можно вводить внутримышечно один раз в день. Комбинированная терапия может проводиться циклами включения и выключения, которые включают периоды отдыха. Соединения можно также смешивать или иным образом составлять вместе, так чтобы одно введение обеспечивало доставку обоих терапевтических средств. В этом случае каждое терапевтическое средство обычно присутствует в количестве 1-95% по весу от общего веса композиции. В альтернативном варианте терапевтические средства могут быть составлены отдельно и в индивидуально дозированных количествах. Комбинации терапевтических средств для лечения могут быть предоставлены в составе фармацевтической упаковки.The dosage, frequency, and route of administration of each component of the combination therapy can be controlled independently. For example, one therapeutic agent may be administered orally three times daily, while a second therapeutic agent may be administered intramuscularly once daily. Combination therapy may be administered in on-off cycles that include periods of rest. The compounds may also be mixed or otherwise formulated together such that a single administration provides delivery of both therapeutic agents. In this case, each therapeutic agent is typically present in an amount of 1-95% by weight of the total weight of the composition. Alternatively, the therapeutic agents may be formulated separately and in individually dosed amounts. Combinations of therapeutic agents for treatment may be provided in pharmaceutical packaging.
Предпочтительно, чтобы комбинированная терапия вызывала синергетический терапевтический эффект, т.е. эффект, превышающий сумму индивидуальных эффектов или терапевтических результатов, таких как описанные выше. Например, синергетический терапевтический эффект может быть эффектом по меньшей мере приблизительно в два раза большим, чем сумма терапевтических эффектов, вызываемых отдельными средствами данной комбинации, или по меньшей мере приблизительно в пять раз больше, или по меньшей мере приблизительно в десять раз больше, или по меньшей мере приблизительно в двадцать раз больше, или по меньшей мере приблизительно в пятьдесят раз больше, или по меньшей мере приблизительно в сто раз больше. Синергетический терапевтический эффект также может наблюPreferably, the combination therapy produces a synergistic therapeutic effect, i.e. an effect greater than the sum of individual effects or therapeutic results such as those described above. For example, a synergistic therapeutic effect may be an effect that is at least about twice as large as the sum of the therapeutic effects produced by the individual agents in the combination, or at least about five times as large, or at least about ten times as large, or at least about twenty times more, or at least about fifty times more, or at least about one hundred times more. A synergistic therapeutic effect may also be observed
- 8 044759 даться как увеличение терапевтического эффекта по меньшей мере на 10% по сравнению с суммой терапевтических эффектов, вызываемых отдельными средствами данной комбинации, или по меньшей мере на 20%, или по меньшей мере на 30%, или по меньшей мере на 40%, или по меньшей мере на 50%, или по меньшей мере на 60%, или по меньшей мере на 70%, или по меньшей мере на 80%, или по меньшей мере на 90%, или по меньшей мере на 100%, или более. Синергетический эффект также является эффектом, который позволяет снизить дозировку терапевтических средств, когда они используются в комбинации.- 8 044759 be given as an increase in the therapeutic effect by at least 10% compared to the sum of the therapeutic effects caused by the individual agents of this combination, or by at least 20%, or by at least 30%, or by at least 40% , or by at least 50%, or by at least 60%, or by at least 70%, or by at least 80%, or by at least 90%, or by at least 100%, or more. A synergistic effect is also an effect that allows the dosage of therapeutic agents to be reduced when they are used in combination.
ПримерыExamples
Следующие примеры были предусмотрены для иллюстрации аспектов раскрытых здесь способов. Некоторые аспекты следующих примеров описаны применительно к методике и процедурам, которые получены или рассмотрены соавторами настоящего изобретения для практического использования, раскрытого в данном документе. В свете настоящего раскрытия и общего уровня квалификации в данной области специалистам в данной области должно быть понятно, что следующие примеры предназначены только для иллюстрации и многочисленные изменения, модификации и перемены могут быть использованы не выходя за рамки объема раскрытия.The following examples have been provided to illustrate aspects of the methods disclosed herein. Certain aspects of the following examples are described in relation to the techniques and procedures that have been obtained or discussed by the inventors of the present invention for the practical use disclosed herein. In light of the present disclosure and the general level of skill in the art, it will be understood by those skilled in the art that the following examples are intended to be illustrative only and numerous changes, modifications and variations may be used without departing from the scope of the disclosure.
Пример 1. Биоинформационный анализ AL-ассоциированных последовательностей легких цепей.Example 1. Bioinformatic analysis of AL-associated light chain sequences.
Наличие различных аминокислот в позициях 81 и 82 во всем репертуаре генов зародышевых линий VK и VL человека определили путем применения системы нумерации Кабата к последовательностям легких цепей из базы данных ImMunoGeneTics (IMGT) и выравнивания аминокислотных последовательностей с помощью инструмента MegAlign программного обеспечения LaserGene DNA.The presence of different amino acids at positions 81 and 82 throughout the human VK and VL germline gene repertoire was determined by applying the Kabat numbering system to light chain sequences from the ImMunoGeneTics (IMGT) database and aligning the amino acid sequences using the MegAlign tool of LaserGene DNA software.
Частота генных подтипов и аллелей, преобладающих у пациентов с амилоидозом AL, была определена с помощью биоинформационного анализа опубликованных в AL базе последовательностей легких цепей (Бостонский университет) и целого ряда публикаций. Для идентификации генного подтипа и аллеля была использована система нумерации Кабата и программный инструмент IMGT/DomainGapAlign.The frequency of gene subtypes and alleles predominant in patients with AL amyloidosis was determined using bioinformatic analysis of light chain sequences published in the AL database (Boston University) and a number of publications. The Kabat numbering system and the IMGT/DomainGapAlign software tool were used to identify gene subtype and allele.
Преобладающая аминокислотная последовательность в позициях 81 и 82, идентифицированная с помощью этого биоинформационного анализа, была -ED-, которая была идентифицирована в 77,89% проанализированных легких цепей. -GD- была второй по частоте последовательностью, хотя и гораздо менее распространенной, чем -ED-, и была идентифицирована в 11,58% проанализированных легких цепей. Также были идентифицированы -MD-, - DD- и -EA-.The predominant amino acid sequence at positions 81 and 82 identified by this bioinformatics analysis was -ED-, which was identified in 77.89% of the light chains analyzed. -GD- was the second most common sequence, although much less abundant than -ED-, and was identified in 11.58% of the light chains analyzed. -MD-, -DD- and -EA- were also identified.
Пример 2. Иммунологическая реактивность NEOD001 и 2A4 относительно пептидов X1EDX2 и X1GDX2.Example 2. Immunological reactivity of NEOD001 and 2A4 relative to peptides X1EDX 2 and X1GDX2.
Планшеты для ELISA покрывали пептидами, имеющими аминокислотную последовательность HEDT (SEQ ID NO: 19), AEDS (SEQ ID NO: 20) или HGDT (SEQ ID NO: 21), блокировали и анализировали с помощью NEOD001 (антитело с легкой цепью, имеющей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 13, и тяжелой цепью, имеющей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 14) или 2A4 (регистрационный номер ATCC 9662), как указано. После промывания применяли соответствующие вторичные антитела, конъюгированные с пероксидазой хрена. Затем планшет промывали и обрабатывали о-фенилендиаменом и считывали оптическую плотность при 490 нм.ELISA plates were coated with peptides having the amino acid sequence HEDT (SEQ ID NO: 19), AEDS (SEQ ID NO: 20) or HGDT (SEQ ID NO: 21), blocked and analyzed using NEOD001 (antibody with a light chain having an amino acid the sequence of SEQ ID NO: 13, and a heavy chain having the amino acid sequence of SEQ ID NO: 14) or 2A4 (ATCC accession number 9662), as indicated. After washing, appropriate horseradish peroxidase-conjugated secondary antibodies were used. The plate was then washed and treated with o-phenylenediamine, and the absorbance was read at 490 nm.
Как представлено на фиг. 1, оба NEOD001 и 2A4 связывают все три пептида. Таким образом, эти антитела связывают обе аминокислотные последовательности X1EDX2 и X1GDX2, присутствующие в легких цепях иммуноглобулина.As shown in FIG. 1, both NEOD001 and 2A4 bind all three peptides. Thus, these antibodies bind both amino acid sequences X1EDX2 and X1GDX2 present in the immunoglobulin light chains.
Пример 3. Определение подтипов легких цепей в образцах ткани амилоидоза AL, связанных при помощи NEOD001 и 2A4.Example 3 Determination of light chain subtypes in AL amyloidosis tissue samples bound by NEOD001 and 2A4.
Свежезамороженных образцов от пациентов с AL были обработаны до растворимых и нерастворимых образцов, а связывание 2A4 оценивали с помощью электрохемилюминесцентного (ECL) иммуноанализа. Результаты показаны на фиг. 2. Впоследствии на образцах была проведена массспектрометрия с лазерным захватом и микродиссекцией (LCM-MS). Образцы окрашивали Конго красным для локализации амилоидных отложений, и отложения иссекали микродиссекцией с лазерным захватом. Изолированные отложения распарафинировали и растворяли перед анализом и секвенированием с помощьюFresh frozen samples from AL patients were processed to soluble and insoluble samples, and 2A4 binding was assessed using an electrochemiluminescent (ECL) immunoassay. The results are shown in Fig. 2. Laser capture microdissection mass spectrometry (LCM-MS) was subsequently performed on the samples. Specimens were stained with Congo red to localize amyloid deposits, and deposits were excised by laser capture microdissection. Isolated sediments were deparaffinized and dissolved before analysis and sequencing using
LCM-MS. Остатки эпитопа определяли непосредственно с помощью LCM-MS. Результаты представлены в таблице.LCM-MS. Epitope residues were determined directly by LCM-MS. The results are presented in the table.
- 9 044759- 9 044759
Примечательно, что пациент AL-8, у которого было определено наличие -GD- в эпитопе легкой цепи, имел значительно больший сигнал в растворимом экстракте образца почек по сравнению с образцами пациентов, у которых было определено наличие -ED- в эпитопе.Notably, patient AL-8, who was determined to have -GD- at the light chain epitope, had significantly greater signal in the soluble extract of the kidney sample compared to samples from patients who were determined to have -ED- at the epitope.
Раскрытие каждого патента, патентной заявки и публикации, цитируемых в данном документе, настоящим полностью включено в данный документ посредством ссылки.The disclosure of each patent, patent application and publication cited herein is hereby incorporated by reference in its entirety.
Хотя это изобретение было раскрыто со ссылкой на конкретные варианты осуществления, очевидно, что другие варианты осуществления и варианты этого изобретения могут быть разработаны другими специалистами в данной области без отклонения от истинной сущности и объема изобретения. Прилагаемая формула изобретения содержит все такие варианты осуществления и эквивалентные варианты.Although this invention has been disclosed with reference to specific embodiments, it will be appreciated that other embodiments and variations of this invention may be developed by others skilled in the art without departing from the true spirit and scope of the invention. The appended claims contain all such embodiments and equivalent embodiments.
Claims (33)
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US62/647,341 | 2018-03-23 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| EA044759B1 true EA044759B1 (en) | 2023-09-28 |
Family
ID=
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US7858087B2 (en) | Enhancing the efficacy of immunotherapies by supplementing with complement | |
| CN107233569B (en) | Antibody formulations and methods | |
| US20210079078A1 (en) | Compositions for Treating Amyloidosis | |
| KR20160044030A (en) | Anti-b7-h1 antibodies for treating tumors | |
| EP3934689A1 (en) | Methods of treating al amyloidosis | |
| JP2022116305A (en) | Antibody-containing formulation | |
| KR20210143752A (en) | Treatment of AL amyloidosis using a combination of monoclonal antibodies against the CD38 cell membrane molecule and immunoglobulin light chain on antibody-producing cells and other immune cells | |
| EA044759B1 (en) | TREATMENT AND PREVENTION OF AMYLOIDOSIS | |
| US20210017278A1 (en) | Treatment and Prophylaxis of Amyloidosis | |
| JP2023502103A (en) | Methods of treating lupus nephritis with interleukin-17 (IL-17) antagonists | |
| WO2023134787A2 (en) | Use of combination of anti-pd-1 antibody and anti-vegf antibody in treatment of hepatocellular carcinoma | |
| KR20230136643A (en) | How to treat AL amyloidosis | |
| EP4021457A1 (en) | Method for the treatment of chronic fatigue syndrome using an inhibitory or cytotoxic agent against plasma cells | |
| TW202421653A (en) | Method for treating membranous nephropathy with taci-fc fusion prtein | |
| KR20230142834A (en) | Anti-CD38 antibodies and uses thereof | |
| WO2023185720A1 (en) | Pharmaceutical composition containing mixed antibody of anti-ctla4 and anti-pd1 and therapeutic use thereof |