EA044754B1 - PYRIMIDINE-5-CARBOXAMIDE COMPOUND - Google Patents
PYRIMIDINE-5-CARBOXAMIDE COMPOUND Download PDFInfo
- Publication number
- EA044754B1 EA044754B1 EA202193270 EA044754B1 EA 044754 B1 EA044754 B1 EA 044754B1 EA 202193270 EA202193270 EA 202193270 EA 044754 B1 EA044754 B1 EA 044754B1
- Authority
- EA
- Eurasian Patent Office
- Prior art keywords
- compound
- pharmaceutically acceptable
- acceptable salt
- mammal
- treatment
- Prior art date
Links
- -1 PYRIMIDINE-5-CARBOXAMIDE COMPOUND Chemical class 0.000 title description 5
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 59
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 43
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 claims description 25
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 23
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims description 23
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 18
- 208000001072 type 2 diabetes mellitus Diseases 0.000 claims description 15
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- 208000020832 chronic kidney disease Diseases 0.000 claims description 11
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 10
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 10
- 125000001559 cyclopropyl group Chemical group [H]C1([H])C([H])([H])C1([H])* 0.000 claims description 9
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 9
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- 208000001145 Metabolic Syndrome Diseases 0.000 claims description 7
- 201000000690 abdominal obesity-metabolic syndrome Diseases 0.000 claims description 7
- 101000603202 Homo sapiens Nicotinamide N-methyltransferase Proteins 0.000 claims description 5
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 5
- LDHMAVIPBRSVRG-UHFFFAOYSA-O 1-methylnicotinamide Chemical class C[N+]1=CC=CC(C(N)=O)=C1 LDHMAVIPBRSVRG-UHFFFAOYSA-O 0.000 claims description 4
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 claims description 3
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 claims description 3
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 claims description 3
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 3
- 238000002347 injection Methods 0.000 claims description 3
- 239000007924 injection Substances 0.000 claims description 3
- 238000004895 liquid chromatography mass spectrometry Methods 0.000 claims description 3
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 claims description 3
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 claims description 3
- 230000009467 reduction Effects 0.000 claims description 3
- 238000004811 liquid chromatography Methods 0.000 claims description 2
- VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N Ammonium hydroxide Chemical compound [NH4+].[OH-] VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 2
- 239000000908 ammonium hydroxide Substances 0.000 claims 2
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N methanoic acid Natural products OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 2
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 claims 2
- OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 4-(3-methoxyphenyl)aniline Chemical compound COC1=CC=CC(C=2C=CC(N)=CC=2)=C1 OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N Ammonium acetate Chemical compound N.CC(O)=O USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 239000005695 Ammonium acetate Substances 0.000 claims 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 claims 1
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 claims 1
- 102100038951 Nicotinamide N-methyltransferase Human genes 0.000 claims 1
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 claims 1
- 235000019257 ammonium acetate Nutrition 0.000 claims 1
- 229940043376 ammonium acetate Drugs 0.000 claims 1
- 239000012491 analyte Substances 0.000 claims 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 claims 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 claims 1
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 claims 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 claims 1
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 claims 1
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 claims 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 claims 1
- 201000001421 hyperglycemia Diseases 0.000 claims 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 claims 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims 1
- 229940126601 medicinal product Drugs 0.000 claims 1
- NJHLGKJQFKUSEA-UHFFFAOYSA-N n-[2-(4-hydroxyphenyl)ethyl]-n-methylnitrous amide Chemical compound O=NN(C)CCC1=CC=C(O)C=C1 NJHLGKJQFKUSEA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 230000008520 organization Effects 0.000 claims 1
- 238000011002 quantification Methods 0.000 claims 1
- 239000012086 standard solution Substances 0.000 claims 1
- 230000007704 transition Effects 0.000 claims 1
- 239000003643 water by type Substances 0.000 claims 1
- 108010088865 Nicotinamide N-Methyltransferase Proteins 0.000 description 20
- 102000009063 Nicotinamide N-methyltransferase Human genes 0.000 description 20
- DFPAKSUCGFBDDF-UHFFFAOYSA-N Nicotinamide Chemical compound NC(=O)C1=CC=CN=C1 DFPAKSUCGFBDDF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 12
- SECXISVLQFMRJM-UHFFFAOYSA-N N-Methylpyrrolidone Chemical compound CN1CCCC1=O SECXISVLQFMRJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- IMNFDUFMRHMDMM-UHFFFAOYSA-N N-Heptane Chemical compound CCCCCCC IMNFDUFMRHMDMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- MEFKEPWMEQBLKI-AIRLBKTGSA-O S-adenosyl-L-methionine Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](C[S+](CC[C@H]([NH3+])C([O-])=O)C)O[C@H]1N1C2=NC=NC(N)=C2N=C1 MEFKEPWMEQBLKI-AIRLBKTGSA-O 0.000 description 8
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 8
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 8
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 8
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 8
- HBAQYPYDRFILMT-UHFFFAOYSA-N 8-[3-(1-cyclopropylpyrazol-4-yl)-1H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-5-yl]-3-methyl-3,8-diazabicyclo[3.2.1]octan-2-one Chemical class C1(CC1)N1N=CC(=C1)C1=NNC2=C1N=C(N=C2)N1C2C(N(CC1CC2)C)=O HBAQYPYDRFILMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 6
- 229960003966 nicotinamide Drugs 0.000 description 6
- 235000005152 nicotinamide Nutrition 0.000 description 6
- 239000011570 nicotinamide Substances 0.000 description 6
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 6
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 5
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 206010022489 Insulin Resistance Diseases 0.000 description 4
- JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N N,N-Diisopropylethylamine (DIPEA) Chemical compound CCN(C(C)C)C(C)C JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229940126652 NNMT inhibitor Drugs 0.000 description 4
- ZJUKTBDSGOFHSH-WFMPWKQPSA-N S-Adenosylhomocysteine Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CSCC[C@H](N)C(O)=O)O[C@H]1N1C2=NC=NC(N)=C2N=C1 ZJUKTBDSGOFHSH-WFMPWKQPSA-N 0.000 description 4
- 235000019439 ethyl acetate Nutrition 0.000 description 4
- 102000045774 human NNMT Human genes 0.000 description 4
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 4
- 150000005480 nicotinamides Chemical class 0.000 description 4
- QDXGKRWDQCEABB-UHFFFAOYSA-N pyrimidine-5-carboxamide Chemical compound NC(=O)C1=CN=CN=C1 QDXGKRWDQCEABB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000004044 response Effects 0.000 description 4
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 3
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 3
- FFFHZYDWPBMWHY-VKHMYHEASA-N L-homocysteine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCS FFFHZYDWPBMWHY-VKHMYHEASA-N 0.000 description 3
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 101000603206 Mus musculus Nicotinamide N-methyltransferase Proteins 0.000 description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 3
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 3
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 3
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 3
- 208000030159 metabolic disease Diseases 0.000 description 3
- 239000012299 nitrogen atmosphere Substances 0.000 description 3
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 3
- OACCNUGECQQVLB-UHFFFAOYSA-N 2,4-dichloropyrimidine-5-carboxamide Chemical compound NC(=O)C1=CN=C(Cl)N=C1Cl OACCNUGECQQVLB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- TWGUBFQVDHJOHE-UHFFFAOYSA-N 4-[(1-cyclopropyl-2-hydroxyethyl)amino]-2-[(4-fluoro-4-methylpentyl)amino]pyrimidine-5-carboxamide Chemical compound C1(CC1)C(CO)NC1=NC(=NC=C1C(=O)N)NCCCC(C)(C)F TWGUBFQVDHJOHE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000033892 Hyperhomocysteinemia Diseases 0.000 description 2
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 2
- 208000008589 Obesity Diseases 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- UZEXZIHQTQANNO-UHFFFAOYSA-N acetic acid 4-fluoro-4-methylpentan-1-amine Chemical compound CC(O)=O.CC(C)(F)CCCN UZEXZIHQTQANNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 2
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 2
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 2
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 2
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 2
- 230000003225 hyperhomocysteinemia Effects 0.000 description 2
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 2
- 230000011987 methylation Effects 0.000 description 2
- 238000007069 methylation reaction Methods 0.000 description 2
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000020824 obesity Nutrition 0.000 description 2
- 239000012074 organic phase Substances 0.000 description 2
- BWHMMNNQKKPAPP-UHFFFAOYSA-L potassium carbonate Chemical compound [K+].[K+].[O-]C([O-])=O BWHMMNNQKKPAPP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- 150000003384 small molecules Chemical class 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 2
- ZJUKTBDSGOFHSH-UHFFFAOYSA-N (2S)-2-Amino-4-[[(2S,3S,4R,5R)-5-(6-aminopurin-9-yl)-3,4-dihydroxyoxolan-2-yl]methylsulfanyl]butanoic acid Chemical compound OC1C(O)C(CSCCC(N)C(O)=O)OC1N1C2=NC=NC(N)=C2N=C1 ZJUKTBDSGOFHSH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LLCCGHDKJXAQLS-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-cyclopropylethanol Chemical compound OCC(N)C1CC1 LLCCGHDKJXAQLS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- TWGUBFQVDHJOHE-LBPRGKRZSA-N 4-[[(1R)-1-cyclopropyl-2-hydroxyethyl]amino]-2-[(4-fluoro-4-methylpentyl)amino]pyrimidine-5-carboxamide Chemical compound C1(CC1)[C@H](CO)NC1=NC(=NC=C1C(=O)N)NCCCC(C)(C)F TWGUBFQVDHJOHE-LBPRGKRZSA-N 0.000 description 1
- 102000005234 Adenosylhomocysteinase Human genes 0.000 description 1
- 108020002202 Adenosylhomocysteinase Proteins 0.000 description 1
- 208000024172 Cardiovascular disease Diseases 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 1
- 229940126655 NDI-034858 Drugs 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 241000290929 Nimbus Species 0.000 description 1
- 101150056459 Nnmt gene Proteins 0.000 description 1
- 210000000577 adipose tissue Anatomy 0.000 description 1
- 235000012538 ammonium bicarbonate Nutrition 0.000 description 1
- 229940027991 antiseptic and disinfectant quinoline derivative Drugs 0.000 description 1
- 239000012131 assay buffer Substances 0.000 description 1
- 238000007681 bariatric surgery Methods 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000010001 cellular homeostasis Effects 0.000 description 1
- 150000005829 chemical entities Chemical class 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 1
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 1
- 238000010511 deprotection reaction Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 1
- 238000003821 enantio-separation Methods 0.000 description 1
- 208000028208 end stage renal disease Diseases 0.000 description 1
- 201000000523 end stage renal failure Diseases 0.000 description 1
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 1
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 238000002483 medication Methods 0.000 description 1
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 1
- DAZXVJBJRMWXJP-UHFFFAOYSA-N n,n-dimethylethylamine Chemical compound CCN(C)C DAZXVJBJRMWXJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000004770 neurodegeneration Effects 0.000 description 1
- 238000001543 one-way ANOVA Methods 0.000 description 1
- 238000005457 optimization Methods 0.000 description 1
- 150000002894 organic compounds Chemical class 0.000 description 1
- 230000036542 oxidative stress Effects 0.000 description 1
- 125000004430 oxygen atom Chemical group O* 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 1
- 230000036470 plasma concentration Effects 0.000 description 1
- 229910000027 potassium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 125000002943 quinolinyl group Chemical class N1=C(C=CC2=CC=CC=C12)* 0.000 description 1
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 238000012827 research and development Methods 0.000 description 1
- 238000004007 reversed phase HPLC Methods 0.000 description 1
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 1
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 1
- 238000010956 selective crystallization Methods 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 1
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 238000011269 treatment regimen Methods 0.000 description 1
- 238000001665 trituration Methods 0.000 description 1
Description
Настоящее изобретение относится к соединению пиримидин-5-карбоксамида, его фармацевтически приемлемым солям, к фармацевтической композиции и терапевтическим применениям указанного соединения.The present invention relates to a pyrimidine-5-carboxamide compound, pharmaceutically acceptable salts thereof, a pharmaceutical composition and therapeutic uses of the said compound.
Никотинамид-N-метилтрансфераза (NNMT) представляет собой фермент, который катализирует перенос метильной группы от универсального донора метильной группы, S-(5'-аденозил)-L-метионина (SAM), на никотинамид (NAM) с образованием 1-метилникотинамида (1-MeNAM). NNMT является потенциальной терапевтической мишенью для лечения сахарного диабета 2 типа (T2DM).Nicotinamide-N-methyltransferase (NNMT) is an enzyme that catalyzes the transfer of a methyl group from the universal methyl group donor, S-(5'-adenosyl)-L-methionine (SAM), to nicotinamide (NAM) to form 1-methylnicotinamide ( 1-MeNAM). NNMT is a potential therapeutic target for the treatment of type 2 diabetes mellitus (T2DM).
В WO 2018/183668 описаны некоторые производные хинолина, которые описаны как ингибиторы NNMT. Описаны также бисубстратные низкомолекулярные ингибиторы NNMT (Martin, N.I.; et al., Bisubstrate Inhibitors of Nicotinamide N-Methyltransferase (NNMT) with Enhanced Activity, Journal of Medicinal Chemistry, 2019, 62, 6597-6614). В качестве ингибиторов NNMT описаны также аналоги никотинамида (см. Rajagopal, S.; Ruf, S.; et al. Novel nicotinamide analog as inhibitor of nicotinamide Nmethyltransferase, Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters, 2018, 28, 922-925, и Dhakshinamoorthy, S.; Kannt, A.; et al. A small molecule inhibitor of Nicotinamide N-methyltransferase for the treatment of metabolic disorders, Scientific Reports, 2018, 8, 3660). До настоящего времени не существует ингибиторов NNMT, одобренных для терапевтического применения.WO 2018/183668 describes certain quinoline derivatives that are described as NNMT inhibitors. Bisubstrate small molecule inhibitors of NNMT have also been described (Martin, N.I.; et al., Bisubstrate Inhibitors of Nicotinamide N-Methyltransferase (NNMT) with Enhanced Activity, Journal of Medicinal Chemistry, 2019, 62, 6597-6614). Nicotinamide analogs have also been described as NNMT inhibitors (see Rajagopal, S.; Ruf, S.; et al. Novel nicotinamide analog as inhibitor of nicotinamide Nmethyltransferase, Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters, 2018, 28, 922-925, and Dhakshinamoorthy, S.; Kannt, A.; et al. A small molecule inhibitor of Nicotinamide N-methyltransferase for the treatment of metabolic disorders, Scientific Reports, 2018, 8, 3660). To date, there are no NNMT inhibitors approved for therapeutic use.
Необходимы альтернативные соединения-ингибиторы NNMT и способы лечения с их применением. В частности, необходимы соединения-ингибиторы NNMT, которые являются эффективными и перорально биодоступными.Alternative NNMT inhibitor compounds and treatments using them are needed. In particular, NNMT inhibitor compounds that are effective and orally bioavailable are needed.
С этой целью в одном варианте реализации настоящего изобретения предложено новое соединение, которое является эффективным ингибитором NNMT для лечения T2DM.To this end, one embodiment of the present invention provides a new compound that is an effective NNMT inhibitor for the treatment of T2DM.
В одном варианте реализации настоящего изобретения предложено соединение формулы I где R выбран из группы, состоящей из циклопропила и геминального циклопропила; или его фармацевтически приемлемая соль. Формула I включает все индивидуальные энантиомеры и диастереомеры, а также смеси энантиомеров и рацематы.In one embodiment of the present invention there is provided a compound of formula I wherein R is selected from the group consisting of cyclopropyl and geminal cyclopropyl; or a pharmaceutically acceptable salt thereof. Formula I includes all individual enantiomers and diastereomers, as well as mixtures of enantiomers and racemates.
В одном варианте реализации настоящего изобретения предложено соединение формулы Ia |_|In one embodiment of the present invention there is provided a compound of formula Ia |_|
N /~~ОН или его фармацевтически приемлемая соль.N /~~OH or a pharmaceutically acceptable salt thereof.
В одном варианте реализации настоящего изобретения предложено соединение формулы Ib или его фармацевтически приемлемая соль. Формула Ib включает все отдельные энантиомеры, а также смеси энантиомеров и рацематы.In one embodiment, the present invention provides a compound of formula Ib or a pharmaceutically acceptable salt thereof. Formula Ib includes all individual enantiomers, as well as mixtures of enantiomers and racemates.
В другом варианте реализации настоящего изобретения предложена фармацевтическая композиция, содержащая соединение формулы I или его фармацевтически приемлемую соль и по меньшей мере один из фармацевтически приемлемого носителя, разбавителя или вспомогательного вещества. В предпочтительном варианте реализации фармацевтически приемлемая композиция составлена для перорального введения.In another embodiment, the present invention provides a pharmaceutical composition comprising a compound of formula I or a pharmaceutically acceptable salt thereof and at least one of a pharmaceutically acceptable carrier, diluent or excipient. In a preferred embodiment, the pharmaceutically acceptable composition is formulated for oral administration.
- 1 044754- 1 044754
В другом варианте реализации настоящего изобретения предложен способ лечения T2DM у млекопитающего, включающий введение млекопитающему, нуждающемуся в лечении, фармацевтически приемлемой композиции, содержащей эффективное количество соединения формулы I или его фармацевтически приемлемой соли и по меньшей мере один из фармацевтически приемлемого носителя, разбавителя или вспомогательного вещества. В одном варианте реализации фармацевтически приемлемая композиция составлена для перорального введения. Предпочтительно, млекопитающее является человеком.In another embodiment, the present invention provides a method of treating T2DM in a mammal, comprising administering to the mammal in need of treatment a pharmaceutically acceptable composition comprising an effective amount of a compound of Formula I or a pharmaceutically acceptable salt thereof and at least one of a pharmaceutically acceptable carrier, diluent or excipient . In one embodiment, the pharmaceutically acceptable composition is formulated for oral administration. Preferably, the mammal is human.
В другом варианте реализации настоящего изобретения также предложен способ лечения T2DM у млекопитающего, включающий введение млекопитающему, нуждающемуся в лечении, эффективного количества соединения формулы I или его фармацевтически приемлемой соли.In another embodiment, the present invention also provides a method of treating T2DM in a mammal, comprising administering to the mammal in need of treatment an effective amount of a compound of Formula I or a pharmaceutically acceptable salt thereof.
В другом варианте реализации настоящего изобретения предложен способ лечения метаболического синдрома у млекопитающего, включающий введение млекопитающему, нуждающемуся в лечении, эффективного количества соединения формулы I или его фармацевтически приемлемой соли.In another embodiment, the present invention provides a method of treating metabolic syndrome in a mammal, comprising administering to the mammal in need of treatment an effective amount of a compound of Formula I or a pharmaceutically acceptable salt thereof.
В другом варианте реализации настоящего изобретения предложен способ лечения хронической болезни почек (CKD) у млекопитающего, включающий введение млекопитающему, нуждающемуся в лечении, эффективного количества соединения формулы I или его фармацевтически приемлемой соли.In another embodiment, the present invention provides a method of treating chronic kidney disease (CKD) in a mammal, comprising administering to the mammal in need of treatment an effective amount of a compound of Formula I or a pharmaceutically acceptable salt thereof.
В одном варианте реализации настоящего изобретения предложено соединение формулы I или его фармацевтически приемлемая соль для применения в терапии.In one embodiment, the present invention provides a compound of Formula I or a pharmaceutically acceptable salt thereof for use in therapy.
В другом варианте реализации настоящего изобретения также предложено соединение формулы I или его фармацевтически приемлемая соль для применения для лечения T2DM у млекопитающего.In another embodiment, the present invention also provides a compound of formula I or a pharmaceutically acceptable salt thereof for use in the treatment of T2DM in a mammal.
В другом варианте реализации настоящего изобретения также предложено соединение формулы I или его фармацевтически приемлемая соль для применения для лечения метаболического синдрома у млекопитающего.In another embodiment, the present invention also provides a compound of formula I or a pharmaceutically acceptable salt thereof for use in the treatment of metabolic syndrome in a mammal.
В другом варианте реализации настоящего изобретения также предложено соединение формулы I или его фармацевтически приемлемая соль для применения для лечения CKD у млекопитающего.In another embodiment, the present invention also provides a compound of formula I or a pharmaceutically acceptable salt thereof for use in the treatment of CKD in a mammal.
В одном варианте реализации настоящего изобретения предложено применение соединения формулы I или его фармацевтически приемлемой соли для получения лекарственного средства для лечения T2DM у млекопитающего.In one embodiment, the present invention provides the use of a compound of formula I or a pharmaceutically acceptable salt thereof for the preparation of a medicament for the treatment of T2DM in a mammal.
В одном варианте реализации настоящего изобретения предложено применение соединения формулы I или его фармацевтически приемлемой соли для получения лекарственного средства для лечения метаболического синдрома у млекопитающего.In one embodiment, the present invention provides the use of a compound of formula I or a pharmaceutically acceptable salt thereof for the preparation of a medicament for the treatment of metabolic syndrome in a mammal.
В одном варианте реализации настоящего изобретения также предложено применение соединения формулы I или его фармацевтически приемлемой соли для получения лекарственного средства для лечения CKD у млекопитающего.One embodiment of the present invention also provides the use of a compound of formula I or a pharmaceutically acceptable salt thereof for the preparation of a medicament for the treatment of CKD in a mammal.
В предпочтительном варианте реализации соединение, соответствующее формуле I, вводят перорально. В другом предпочтительном варианте реализации млекопитающее, подлежащее лечению, является человеком.In a preferred embodiment, the compound corresponding to Formula I is administered orally. In another preferred embodiment, the mammal to be treated is a human.
В данном контексте термин геминальный имеет обычное значение, известное квалифицированным химикам. То есть атомы углерода указанного циклопропила напрямую присоединены к атому углерода в месте замещения, образуя присоединенную циклопропильную группу.In this context, the term geminal has the usual meaning known to qualified chemists. That is, the carbon atoms of said cyclopropyl are directly attached to the carbon atom at the substitution site, forming an attached cyclopropyl group.
В данном контексте термины лечить или лечение относятся к снижению, уменьшению или обращению развития или тяжести существующего симптома, расстройства или патологического состояния. Такие патологические состояния могут включать T2DM и метаболический синдром.As used herein, the terms treat or treatment refer to the reduction, reduction or reversal of the development or severity of an existing symptom, disorder or condition. Such pathological conditions may include T2DM and metabolic syndrome.
В данном контексте термин пациент относится к млекопитающему. Предпочтительно, пациентом является человек.In this context, the term patient refers to a mammal. Preferably, the patient is a human.
В данном контексте термин эффективное количество относится к количеству или дозе соединения согласно настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемой соли, которая при однодозовом или многодозовом введении пациенту обеспечивает требуемый эффект у пациента, проходящего диагностику или лечение.As used herein, the term effective amount refers to the amount or dose of a compound of the present invention or a pharmaceutically acceptable salt thereof that, when administered in a single dose or multiple doses to a patient, provides the desired effect in the patient being diagnosed or treated.
Эффективное количество может без труда установлено специалистом в данной области техники посредством применения известных технологий и наблюдения результатов, полученных при аналогичных обстоятельствах. При определении эффективного количества для пациента следует учитывать множество факторов, включая, но не ограничиваясь ими: биологический вид пациента; его размер, возраст и общее состояние здоровья; конкретное вовлеченное заболевание или расстройство; степень вовлеченности или тяжесть заболевания или расстройства; реакция отдельного пациента; конкретное введенное соединение; способ введения; характеристики биодоступности введенного препарата; выбранная схема лечения; применение сопутствующих лекарственных препаратов; и другие релевантные обстоятельства.The effective amount can be readily determined by one skilled in the art through the use of known techniques and observation of results obtained under similar circumstances. When determining an effective amount for a patient, many factors should be considered, including, but not limited to: the patient's biology; its size, age and general health; the specific disease or disorder involved; degree of involvement or severity of disease or disorder; individual patient response; the specific compound administered; method of administration; characteristics of the bioavailability of the administered drug; chosen treatment regimen; use of concomitant medications; and other relevant circumstances.
Соединение согласно настоящему изобретению приготавливают в виде фармацевтической композиции, которую вводят любым способом, обеспечивающим биодоступность соединения. Предпочтительно, такая композиция предназначена для перорального введения. Такие фармацевтические композиции и способы их получения хорошо известны в данной области техники (см., например, Remington, J.P., Remington: The Science and Practice of Pharmacy, L.V. Allen, ред., 22ое изд., Pharmaceutical Press, 2012).The compound of the present invention is formulated as a pharmaceutical composition, which is administered by any route that ensures the bioavailability of the compound. Preferably, such a composition is for oral administration. Such pharmaceutical compositions and methods for their preparation are well known in the art (see, for example, Remington, J.P., Remington: The Science and Practice of Pharmacy, L.V. Allen, ed., 22nd ed., Pharmaceutical Press, 2012).
Соединение формулы I легко подвергается превращению и может быть выделено в форме фармаThe compound of formula I is easily converted and can be isolated in pharmaceutical form
- 2 044754 цевтически приемлемой соли. Образование соли может происходить при добавлении фармацевтически приемлемой кислоты с получением соли присоединения кислоты, или при добавлении фармацевтически приемлемого основания с получением соли присоединения основания. Соли также могут образовываться одновременно со снятием защиты с атома азота или кислорода, т.е. при удалении защитной группы. Примеры, реакции и условия получения солей представлены в публикациях Gould, P.L., Salt selection for basic drugs, International Journal of Pharmaceutics, 33: 201-217 (1986); Bastin, R.J., et al. Salt Selection and Optimization Procedures for Pharmaceutical New Chemical Entities Organic Process Research and Development, 4: 427-435 (2000); и Berge, S.M., et al., Pharmaceutical Salts, Journal of Pharmaceutical Sciences, 66: 1-19, (1977).- 2 044754 ceutical acceptable salt. Salt formation can occur by adding a pharmaceutically acceptable acid to form an acid addition salt, or by adding a pharmaceutically acceptable base to form a base addition salt. Salts can also form simultaneously with the deprotection of a nitrogen or oxygen atom, i.e. when removing the protecting group. Examples, reactions and conditions for preparing salts are presented in Gould, P.L., Salt selection for basic drugs, International Journal of Pharmaceutics, 33: 201-217 (1986); Bastin, R. J., et al. Salt Selection and Optimization Procedures for Pharmaceutical New Chemical Entities Organic Process Research and Development, 4: 427-435 (2000); and Berge, S.M., et al., Pharmaceutical Salts, Journal of Pharmaceutical Sciences, 66: 1-19, (1977).
Повышенная экспрессия и активность NNMT связана с патологией различных заболеваний, включая метаболический синдром, сердечно-сосудистые заболевания, нейродегенерацию и рак. Особый интерес представляет собой корреляция, наблюдаемая между активностью адипозной NNMT и инсулинорезистентностью. По-видимому, такой механизм является обратимым, поскольку активность адипозной NNMT снижается после вмешательств, облегчающих инсулинорезистентность (т.е. после бариатрической хирургии и изменения образа жизни, см. Kannt, A.; Pfenninger, A.; Teichert, L; et al. Association of nicotinamide-N-methyltransferase mRNA expression in human adipose tissue and the plasma concentration of its product, 1-methylnicotinamide, with insulin resistance. Diabetologia, 2015, 58, 799-808). Генетический нокдаун гена NNMT у мышей продемонстрировал защитный эффект против ожирения, вызванного питанием, и животные показали улучшенную чувствительность к инсулину, что подтверждает его потенциальное применение в качестве терапевтической мишени для лечения метаболического расстройства и сахарного диабета 2 типа (Kraus D, Yang Q, Kong D, et al. Nicotinamide N-methyltransferase knockdown protects against diet-induced obesity. Nature, 2014, 508, 258-262).Increased expression and activity of NNMT are associated with the pathology of various diseases, including metabolic syndrome, cardiovascular disease, neurodegeneration, and cancer. Of particular interest is the correlation observed between adipose NNMT activity and insulin resistance. This mechanism appears to be reversible, as adipose NNMT activity is reduced following interventions that alleviate insulin resistance (i.e., bariatric surgery and lifestyle changes, see Kannt, A.; Pfenninger, A.; Teichert, L.; et al Association of nicotinamide-N-methyltransferase mRNA expression in human adipose tissue and the plasma concentration of its product, 1-methylnicotinamide, with insulin resistance. Diabetologia, 2015, 58, 799-808). Genetic knockdown of the NNMT gene in mice demonstrated a protective effect against diet-induced obesity, and the animals showed improved insulin sensitivity, supporting its potential use as a therapeutic target for the treatment of metabolic disorder and type 2 diabetes mellitus (Kraus D, Yang Q, Kong D , et al. Nicotinamide N-methyltransferase knockdown protects against diet-induced obesity. Nature, 2014, 508, 258-262).
Дополнительная практическая ценность ингибитора NNMT как терапевтического агента, представляющего интерес при метаболических расстройствах, заключается в его роли для регуляции метилирующей способности клетки посредством использования SAM. Для метилирования NAM посредством NNMT используется метильная группа универсального донора метильной группы SAM, которая превращает SAM в его деметилированную форму, S-аденозил-L-гомоцистеин (SAH). SAH является субстратом для фермента аденозилгомоцистеиназы для превращения SAH в гомоцистеин. Повышенные уровни гомоцистеина (гипергомоцистеинемия) наблюдают у пациентов с хронической и терминальной стадией болезни почек, и предположительно он способствует дисбалансу клеточного гомеостаза и окислительновосстановительных процессов, что приводит к повышенному окислительному стрессу (Ostrakhovitch, E.A.; Tabibzadeh S. Homocysteine in Chronic Kidney Disease, Advances in Clinical Chemistry, 2015, 72, 77106). Облегчение гипергомоцистеинемии у таких пациентов посредством ингибирования NNMT может служить ценным терапевтическим механизмом для лечения хронической болезни почек.An additional practical value of an NNMT inhibitor as a therapeutic agent of interest in metabolic disorders lies in its role in regulating cell methylation capacity through the use of SAM. Methylation of NAM by NNMT utilizes the methyl group of the universal methyl group donor SAM, which converts SAM to its demethylated form, S-adenosyl-L-homocysteine (SAH). SAH is a substrate for the enzyme adenosylhomocysteinase to convert SAH to homocysteine. Elevated levels of homocysteine (hyperhomocysteinemia) are observed in patients with chronic and end-stage kidney disease and are thought to contribute to an imbalance of cellular homeostasis and redox processes, leading to increased oxidative stress (Ostrakhovitch, E.A.; Tabibzadeh S. Homocysteine in Chronic Kidney Disease, Advances in Clinical Chemistry, 2015, 72, 77106). Alleviation of hyperhomocysteinemia in these patients through NNMT inhibition may serve as a valuable therapeutic mechanism for the treatment of chronic kidney disease.
Соединения согласно настоящему изобретению или его соли могут быть получены различными способами, некоторые из которых представлены ниже в разделе Способы получения и примеры. Продукт каждой стадии, представленной ниже в разделе Способы получения и примеры, можно выделять обычными способами, включая экстракцию, выпаривание, осаждение, хроматографию, фильтрование, растирание и кристаллизацию. Отдельные изомеры, энантиомеры и диастереомеры могут быть выделены или разделены на любой удобной точке синтеза такими способами как технологии селективной кристаллизации или хиральная хроматография (см., например, J. Jacques, et al., Enantiomers, Racemates, and Resolutions, John Wiley and Sons, Inc., 1981, и E.L. Eliel and S.H. Wilen, Stereochemistry of Organic Compounds, Wiley-Interscience, 1994).The compounds of the present invention or salts thereof can be prepared by various methods, some of which are presented below in the Preparation Methods and Examples section. The product of each step presented below in the Preparation Methods and Examples section can be isolated by conventional methods, including extraction, evaporation, precipitation, chromatography, filtration, trituration and crystallization. The individual isomers, enantiomers, and diastereomers can be isolated or separated at any convenient point of synthesis by methods such as selective crystallization techniques or chiral chromatography (see, for example, J. Jacques, et al., Enantiomers, Racemates, and Resolutions, John Wiley and Sons , Inc., 1981, and E. L. Eliel and S. H. Wilen, Stereochemistry of Organic Compounds, Wiley-Interscience, 1994).
Ниже приведено определение некоторых сокращений: EtOAc относится к этилацетату; ВЭЖХ относится к высокоэффективной жидкостной хроматографии; NMP относится к N-метил-2пирролидинону; комн. т-ра относится к комнатной температуре; и СЖХ относится к сверхкритической жидкостной хроматографии.Some abbreviations are defined below: EtOAc refers to ethyl acetate; HPLC refers to high-performance liquid chromatography; NMP refers to N-methyl-2pyrrolidinone; room t-ra refers to room temperature; and SLC refers to supercritical liquid chromatography.
Пример получения 1.Receipt example 1.
2-Хлор-4-[1-(гидроксиметил)циклопропил]амино]пиримидин-5-карбоксамид О NH2 2-Chloro-4-[1-(hydroxymethyl)cyclopropyl]amino]pyrimidine-5-carboxamide O NH 2
N /-ОНN/-OH
N^N ClN^N Cl
К раствору 2,4-дихлорпиримидин-5-карбоксамида (10 г, 52 ммоль) в NMP (50 мл) при комнатной температуре добавляли N,N-диизопропилэтиламин (27 мл, 155 ммоль) и затем по частям добавляли гидрохлорид (1-аминоциклопропил)метанола (6,95 г, 56,2 ммоль), наблюдая небольшую экзотерму во время добавления (до 32°C за 10 мин). Перемешивали суспензию при комнатной температуре в атмосфере азота. Через 1 ч 15 мин выливали реакционную смесь в смесь воды и льда (500 мл) и перемешивали один час. Отфильтровывали твердое вещество и промывали водой 3 раза, затем сушили в вакуумной печи при 45°C в течение ночи с получением указанного в заголовке соединения (11,05 г, 85%) в виде бежевого твердого вещества. ЭР/МС m/z 243 [М+Н]+.To a solution of 2,4-dichloropyrimidine-5-carboxamide (10 g, 52 mmol) in NMP (50 ml) at room temperature was added N,N-diisopropylethylamine (27 ml, 155 mmol) and then hydrochloride (1-aminocyclopropyl) was added portionwise )methanol (6.95 g, 56.2 mmol), observing a slight exotherm during addition (to 32°C in 10 min). The suspension was stirred at room temperature under a nitrogen atmosphere. After 1 hour 15 minutes, the reaction mixture was poured into a mixture of water and ice (500 ml) and stirred for one hour. The solid was filtered and washed with water 3 times, then dried in a vacuum oven at 45°C overnight to give the title compound (11.05 g, 85%) as a beige solid. ER/MS m/z 243 [M+H]+.
- 3 044754- 3 044754
Пример 1.Example 1.
2-[(4-Фтор-4-метилпентил)амино]-4-[1-(гидроксиметил)циклопропил]амино]пиримидин-5-карбоксамид2-[(4-Fluoro-4-methylpentyl)amino]-4-[1-(hydroxymethyl)cyclopropyl]amino]pyrimidine-5-carboxamide
К раствору 2-хлор-4-[1-(гидроксиметил)циклопропил]амино]пиримидин-5-карбоксамида (88,3 г, 346 ммоль) в NMP (450 мл) при комнатной температуре добавляли карбонат калия (143 г, 1034 ммоль) и затем уксуснокислую соль 4-фтор-4-метилпентан-1-амина (68,5 г, 382 ммоль). Нагревали смесь при 80°C в атмосфере азота. Через 2 ч охлаждали реакционную смесь до комнатной температуры и выливали в смесь льда/воды (2000 мл). Перемешивали смесь в течение ночи. Отфильтровывали твердое вещество, промывали водой и сушили в вакуумной печи в течение ночи при 45°C с получением бежевого твердого вещества. Твердое вещество смешивали с этанолом (850 мл) и гептаном (850 мл), нагревали до получения раствора, используя баню при 95°C, и затем оставляли смесь медленно остывать до комнатной температуры в течение ночи. Охлаждали смесь на ледяной бане в течение 30 мин, отфильтровывали твердое вещество и промывали гептаном. Сушили твердое вещество в вакуумной печи. Для удаления остаточного этанола добавляли EtOAc (850 мл) и нагревали смесь на бане при 75°C в течение 2 ч. Оставляли смесь медленно остывать до комнатной температуры в течение ночи. Концентрировали в вакууме для уменьшения объема смеси до примерно одной трети от исходного объема. В смесь добавляли гептан (250 мл) и перемешивали на ледяной бане в течение 30 мин. Отфильтровывали твердое вещество, промывали гептаном и сушили при 45°C в вакуумной печи в течение 2 дней с получением указанного в заголовке соединения (78,4 г, 68%) в виде белого твердого вещества. ЭР/МС m/z 326 [М+Н]+.To a solution of 2-chloro-4-[1-(hydroxymethyl)cyclopropyl]amino]pyrimidine-5-carboxamide (88.3 g, 346 mmol) in NMP (450 mL) was added potassium carbonate (143 g, 1034 mmol) at room temperature ) and then 4-fluoro-4-methylpentan-1-amine acetate (68.5 g, 382 mmol). The mixture was heated at 80°C in a nitrogen atmosphere. After 2 h, the reaction mixture was cooled to room temperature and poured into ice/water (2000 ml). Stir the mixture overnight. The solid was filtered, washed with water and dried in a vacuum oven overnight at 45°C to obtain a beige solid. The solid was mixed with ethanol (850 ml) and heptane (850 ml), heated to a solution using a 95°C bath, and then the mixture was allowed to cool slowly to room temperature overnight. Cool the mixture in an ice bath for 30 minutes, filter the solid and wash with heptane. The solid was dried in a vacuum oven. To remove residual ethanol, EtOAc (850 ml) was added and the mixture was heated in a 75°C bath for 2 hours. The mixture was allowed to cool slowly to room temperature overnight. Concentrated in vacuo to reduce the volume of the mixture to approximately one third of the original volume. Heptane (250 ml) was added to the mixture and stirred in an ice bath for 30 minutes. The solid was filtered, washed with heptane and dried at 45°C in a vacuum oven for 2 days to obtain the title compound (78.4 g, 68%) as a white solid. ER/MS m/z 326 [M+H]+.
Пример 2.Example 2.
4-[(1-Циклопропил-2-гидроксиэтил)амино]-2-[(4-фтор-4-метилпентил)амино]пиримидин-5-карбоксамид4-[(1-Cyclopropyl-2-hydroxyethyl)amino]-2-[(4-fluoro-4-methylpentyl)amino]pyrimidine-5-carboxamide
К раствору 2,4-дихлорпиримидин-5-карбоксамида (300 мг, 1,56 ммоль) в NMP (1,5 мл, 16 ммоль) при комнатной температуре добавляли N,N-диизопропилэтиламин (0,4 мл, 2 ммоль) и затем рацемический 2-амино-2-циклопропилэтанол (158 мг, 1,56 ммоль). Перемешивали суспензию при комнатной температуре в атмосфере азота. Через 1 ч добавляли уксуснокислую соль 4-фтор-4-метилпентан-1-амина (186 мг, 1,56 ммоль) и нагревали смесь при 80°C в атмосфере азота в течение 16 ч. Охлаждали смесь до комнатной температуры и добавляли воду и EtOAc. Отделяли органическую фазу, промывали водой и насыщенным водным раствором NaCl. Органическую фазу сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали.To a solution of 2,4-dichloropyrimidine-5-carboxamide (300 mg, 1.56 mmol) in NMP (1.5 mL, 16 mmol) at room temperature was added N,N-diisopropylethylamine (0.4 mL, 2 mmol) and then racemic 2-amino-2-cyclopropylethanol (158 mg, 1.56 mmol). The suspension was stirred at room temperature under a nitrogen atmosphere. After 1 hour, 4-fluoro-4-methylpentan-1-amine acetate (186 mg, 1.56 mmol) was added and the mixture was heated at 80°C under nitrogen for 16 hours. Cool the mixture to room temperature and add water and EtOAc. The organic phase was separated, washed with water and saturated aqueous NaCl solution. The organic phase was dried over Na 2 SO 4 , filtered and concentrated.
Остаток очищали обращенно-фазовой ВЭЖХ, используя 25-55% смесь ацетонитрил/(20 мМ водный раствор NH4HCO3), с получением 163 мг (40%) указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества. ЭР/МС m/z 340 [М+Н]+.The residue was purified by reverse phase HPLC using 25-55% acetonitrile/(20 mM aqueous NH4HCO3) to give 163 mg (40%) of the title compound as a white solid. ER/MS m/z 340 [M+H]+.
Пример 2а.Example 2a.
4-{[(18)-1-Циклопропил-2-гидроксиэтил]амино}-2-[(4-фтор-4-метилпентил)амино]пиримидин-5карбоксамид4-{[(18)-1-Cyclopropyl-2-hydroxyethyl]amino}-2-[(4-fluoro-4-methylpentyl)amino]pyrimidine-5carboxamide
Очищали рацемический 4-[(1-циклопропил-2-гидроксиэтил)амино]-2-[(4-фтор-4-метилпентил)амино]пиримидин-5-карбоксамид (148 мг, 0,37 ммоль) с помощью хиральной СЖХ (колонка: Chiralpak® IG 25x2 см, размер частиц 5 мкм; температура колонки: 40°C; скорость потока: 65 мл/мин; элюент: 30% (0,2% диметилэтиламин в изопропаноле)/CO2; ввод проб по 10 мг каждые 8 мин), в качестве первогоRacemic 4-[(1-cyclopropyl-2-hydroxyethyl)amino]-2-[(4-fluoro-4-methylpentyl)amino]pyrimidine-5-carboxamide (148 mg, 0.37 mmol) was purified by chiral SLC ( column: Chiralpak® IG 25x2 cm, particle size 5 µm; column temperature: 40°C; flow rate: 65 ml/min; eluent: 30% (0.2% dimethylethylamine in isopropanol)/CO 2 ; sample injection 10 mg every 8 minutes), as the first
- 4 044754 элюированного изомера получали 52 мг указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества. МС m/z 340 (М+Н).- 4 044754 of the eluted isomer gave 52 mg of the title compound as a white solid. MS m/z 340 (M+H).
Пример 2b.Example 2b.
4-{[(1R)-1-Циклопропил-2-гидроксиэтил]амино}-2-[(4-фтор-4-метилпентил)амино]пиримидин-5карбоксамид4-{[(1R)-1-Cyclopropyl-2-hydroxyethyl]amino}-2-[(4-fluoro-4-methylpentyl)amino]pyrimidine-5carboxamide
FF
В качестве второго элюированного изомера, полученного хиральной СЖХ, описанной для примера 2а, получали 49 мг указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества. ЭР/МС m/z 340 [М+Н]+.As the second eluted isomer, the chiral SLC described for Example 2a gave 49 mg of the title compound as a white solid. ER/MS m/z 340 [M+H]+.
Биологические анализы.Biological analyses.
Биохимическое ингибирование NNMT.Biochemical inhibition of NNMT.
Биохимическую активность соединений согласно настоящему изобретению в отношении ингибирования человеческого и мышиного фермента NNMT количественно определяли анализом, основанным на масс-спектроскопии. Экспериментальные соединения разбавляли и акустически переносили в аналитические планшеты до достижения конечной концентрации ДМСО в аналитическом растворе 2%. Аналитический буфер содержал 50 мМ Tris-HCl при рН 7,5 (Invitrogen 15567-027) и 0,05 мг/мл BSA, не содержащего жирных кислоты (Sigma A6003). Анализ человеческой NNMT проводили с использованием манипулятора Hamilton Nimbus для переноса 10 мкМ SAM (S-(5'-аденозил)-L-метионин) (American Radiolabeled 0768), 15 мк MNAM (никотинамид) (Sigma 72340) и 10 нМ полноразмерной человеческой NNMT с меткой his на N-конце на аналитический планшет, содержащий разбавленные экспериментальные соединения. Соответствующий аналитический раствор мышиной NNMT содержал 20 мкМ SAM, 20 мкМ NAM и 10 нМ мышиной NNMT. Контрольные лунки максимального ответа, отражающие полную активность фермента, содержали ДМСО без экспериментальных соединений. Контрольные лунки минимального ответа, отражающие отсутствие активности фермента, были идентичны контрольным лункам максимального ответа, но без NNMT. После двухчасовой инкубации при комнатной температуре в 1 части реакционной смеси останавливали реакцию, добавляя 6 частей останавливающего раствора, содержащего 158,5 нМ 13C-SAH (S-аденозил-L-гомоцистеин (аденозин-13^)) (Cambridge Isotope Laboratories CLM8906) и 50 нМ d7-метилникотинамида (BDG Biosynthesis 140138-25) в качестве внутренних стандартов. Измеряли уровни MeNAM (1-метилникотинамид) и SAH (S-аденозилгомоцистеин) с помощью массспектроскопии RapidFire и проводили преобразование в соотношение площадей посредством деления содержания продукта на содержание соответствующего внутреннего стандарта. Отношение площади продукта пересчитывали в процентное ингибирование по следующему уравнению: % Ингибирование = 100 - [(экспериментальное соединение - медианное минимальное значение)/(медианное максимальное значение - медианное минимальное значение) х 100].The biochemical activity of the compounds of the present invention in inhibiting human and murine NNMT enzyme was quantified by mass spectroscopy based assay. Experimental compounds were diluted and acoustically transferred into assay plates to achieve a final concentration of DMSO in the assay solution of 2%. The assay buffer contained 50 mM Tris-HCl pH 7.5 (Invitrogen 15567-027) and 0.05 mg/ml fatty acid-free BSA (Sigma A6003). Human NNMT assay was performed using a Hamilton Nimbus manipulator to transfer 10 μM SAM (S-(5'-adenosyl)-L-methionine) (American Radiolabeled 0768), 15 μM MNAM (nicotinamide) (Sigma 72340), and 10 nM full-length human NNMT with a his tag at the N-terminus onto an assay plate containing diluted experimental compounds. The corresponding mouse NNMT assay solution contained 20 μM SAM, 20 μM NAM, and 10 nM mouse NNMT. Maximum response control wells, representing full enzyme activity, contained DMSO without experimental compounds. Minimal response control wells, reflecting no enzyme activity, were identical to maximal response control wells but without NNMT. After two hours of incubation at room temperature, 1 part of the reaction mixture was stopped by adding 6 parts of stopping solution containing 158.5 nM 13 C-SAH (S-adenosyl-L-homocysteine (adenosine- 13 ^)) (Cambridge Isotope Laboratories CLM8906) and 50 nM d 7 -methylnicotinamide (BDG Biosynthesis 140138-25) as internal standards. MeNAM (1-methylnicotinamide) and SAH (S-adenosylhomocysteine) levels were measured using RapidFire mass spectroscopy and converted to area ratios by dividing the product content by the corresponding internal standard content. The product area ratio was converted to percent inhibition using the following equation: % Inhibition = 100 - [(experimental compound - median minimum value)/(median maximum value - median minimum value) x 100].
IC50 определяли посредством подгонки процентного ингибирования при каждой концентрации ингибитора к следующему уравнению с использованием результатов следующего поколения Rel-IC50: Анализировали данные, используя 4-параметрическое нелинейное логистическое уравнение у = (А+((ВА)/(1+ ((C/x)AD)))), где у = % специфического ингибирования, А = нижнее значение кривой, В = верхнее значение кривой, С = относительная IC50 = концентрация, вызывающая 50% ингибирование на основании диапазона данных от верхнего значения до нижнего значения, D = угловой коэффициент Хилла = угол наклона кривой.The IC 50 was determined by fitting the percent inhibition at each inhibitor concentration to the following equation using the next generation Rel-IC 50 results: Data were analyzed using the 4-parameter nonlinear logistic equation y = (A+((BA)/(1+((C /x) A D)))) where y = % specific inhibition, A = lower value of the curve, B = upper value of the curve, C = relative IC 50 = concentration causing 50% inhibition based on the data range from the upper value to the lower value values, D = Hill slope = slope of the curve.
В данном анализе пример 1 ингибировал человеческую NNMT с относительной IC50 74 нМ, и мышиную NNMT с относительной IC50 21 нМ. Пример 2а ингибировал человеческую NMMT с относительной IC50 385 нМ, и пример 2b ингибировал человеческую NNMT с относительной IC50 57 нМ.In this assay, Example 1 inhibited human NNMT with a relative IC 50 of 74 nM, and mouse NNMT with a relative IC 50 of 21 nM. Example 2a inhibited human NMMT with a relative IC 50 of 385 nM, and Example 2b inhibited human NNMT with a relative IC 50 of 57 nM.
In vivo анализ ФД.In vivo PD analysis.
Самцов мышей С57В1/6 содержали при 12-часовом цикле освещения/темноты при 22°C с неограниченным доступом к корму (Teklad 2014) и воде. Животным перорально вводили три концентрации (1, 3 и 10 мг/кг) экспериментального соединения перед подкожной инъекцией 25 мг/кг дейтерированного никотинамида (Cambridge Isotope Laboratories DLM-6883). Собирали плазму через 0, 60, 120 и 240 минут после инъекции дейтерированного никотинамида (d4-NAM) и количественно определяли содержание меченного d4-1-метилникотинамида с помощью ЖХ/МС в соответствии со способом, описанным ниже. Профили ингибирования экспериментальных соединений рассчитывали как площадь под кривой (AUC) прохождения d4-1-MeNAM через плазму в течение 240-минутного анализа и статистически анализировали однофакторным дисперсионным анализом (GraphPad Prism 7.03). Полученные расчеты AUC демонст-Male C57B1/6 mice were housed on a 12-hour light/dark cycle at 22°C with ad libitum access to food (Teklad 2014) and water. Animals were orally administered three concentrations (1, 3, and 10 mg/kg) of the experimental compound before subcutaneous injection of 25 mg/kg deuterated nicotinamide (Cambridge Isotope Laboratories DLM-6883). Plasma was collected at 0, 60, 120 and 240 minutes after injection of deuterated nicotinamide (d 4 -NAM) and the content of labeled d 4 -1-methylnicotinamide was quantified by LC/MS according to the method described below. Inhibition profiles of experimental compounds were calculated as the area under the curve (AUC) of d 4 -1-MeNAM plasma transit over the 240-minute assay and statistically analyzed by one-way analysis of variance (GraphPad Prism 7.03). The resulting AUC calculations demonstrate
Claims (20)
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| EP19382686.4 | 2019-08-06 | ||
| EP19382744.1 | 2019-09-02 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| EA044754B1 true EA044754B1 (en) | 2023-09-28 |
Family
ID=
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| TWI741501B (en) | Solid forms of fxr agonists | |
| US20230218595A1 (en) | Combination therapy using enantiopure, oxy-substituted, deuterium-enriched 5-(benzyl)-5-deutero-thiazolidine-2,4-diones for treatment of medical disorders | |
| CN109476635B (en) | Disubstituted pyrazoles for treatment of diseases | |
| EP2275108A1 (en) | Pharmaceutical preparation comprising dpp-iv inhibitor and other diabetes therapeutic agent in concomitant or combined form | |
| US11203597B2 (en) | Crystalline spirocyclic compound, a dosage form containing, a method for using in treatment of disease, and a method for recrystallizing | |
| KR20120114174A (en) | 1-(3-cyano-1-isopropyl-indol-5-yl)pyrazole-4-carboxylic acid crystalline form and the producing method thereof | |
| EA015745B1 (en) | Compounds expressing activity to cb | |
| US20240207265A1 (en) | TREATMENT OF CNS DISEASES WITH sGC STIMULATORS | |
| EP4228628A1 (en) | Metalloenzyme inhibitors for treating cancers, alzheimer's disease, hemochromatosis, and other disorders | |
| RU2719484C2 (en) | Sodium salt of the uric acid transporter inhibitor and its crystalline form | |
| AU2020326552B2 (en) | Pyrimidine-5-carboxamide compound | |
| EA044754B1 (en) | PYRIMIDINE-5-CARBOXAMIDE COMPOUND | |
| US7410980B2 (en) | Crystals of taxane derivative and process for their production | |
| US10556872B2 (en) | Fatty acid synthase inhibitors and methods of use | |
| TW201029999A (en) | Cyclopropyl compounds | |
| US8685952B2 (en) | Method for the treatment of diabetes | |
| TWI843243B (en) | Compounds as glp-1 receptor agonist, pharmaceutical composition including the same and use thereof | |
| US10894794B1 (en) | Substituted [1,2,4]triazolo[4,3-a]pyrazines as antidiabetics | |
| TW202342414A (en) | Crystal form of cyclohexenone compound | |
| CN103910692B (en) | Tetrahydrothiazole derivates, Preparation Method And The Use | |
| Gao | The development and evaluation of multi-target-directed ligands as cholinergic and amyloid β aggregation inhibitors for Alzheimer's disease | |
| JP2004292366A (en) | 1,2-dioxane compound |