EA044652B1 - BCMA BINDING ANTIBODIES AND THEIR APPLICATIONS - Google Patents
BCMA BINDING ANTIBODIES AND THEIR APPLICATIONS Download PDFInfo
- Publication number
- EA044652B1 EA044652B1 EA202091974 EA044652B1 EA 044652 B1 EA044652 B1 EA 044652B1 EA 202091974 EA202091974 EA 202091974 EA 044652 B1 EA044652 B1 EA 044652B1
- Authority
- EA
- Eurasian Patent Office
- Prior art keywords
- seq
- bcma
- antibody
- cdr2
- cdr3
- Prior art date
Links
- 102000006942 B-Cell Maturation Antigen Human genes 0.000 title claims description 178
- 108010008014 B-Cell Maturation Antigen Proteins 0.000 title claims description 178
- 230000027455 binding Effects 0.000 title claims description 160
- BGFTWECWAICPDG-UHFFFAOYSA-N 2-[bis(4-chlorophenyl)methyl]-4-n-[3-[bis(4-chlorophenyl)methyl]-4-(dimethylamino)phenyl]-1-n,1-n-dimethylbenzene-1,4-diamine Chemical compound C1=C(C(C=2C=CC(Cl)=CC=2)C=2C=CC(Cl)=CC=2)C(N(C)C)=CC=C1NC(C=1)=CC=C(N(C)C)C=1C(C=1C=CC(Cl)=CC=1)C1=CC=C(Cl)C=C1 BGFTWECWAICPDG-UHFFFAOYSA-N 0.000 title 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims description 124
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 122
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 claims description 110
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims description 110
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 110
- 102100035360 Cerebellar degeneration-related antigen 1 Human genes 0.000 claims description 103
- 101100112922 Candida albicans CDR3 gene Proteins 0.000 claims description 96
- 101000737793 Homo sapiens Cerebellar degeneration-related antigen 1 Proteins 0.000 claims description 95
- 101000737796 Homo sapiens Cerebellar degeneration-related protein 2 Proteins 0.000 claims description 93
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 50
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 claims description 25
- 108010054477 Immunoglobulin Fab Fragments Proteins 0.000 claims description 22
- 102000001706 Immunoglobulin Fab Fragments Human genes 0.000 claims description 22
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims description 22
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims description 21
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims description 21
- 102000008394 Immunoglobulin Fragments Human genes 0.000 claims description 10
- 108010021625 Immunoglobulin Fragments Proteins 0.000 claims description 10
- 230000000779 depleting effect Effects 0.000 claims description 4
- 238000000375 direct analysis in real time Methods 0.000 claims description 3
- 238000012063 dual-affinity re-targeting Methods 0.000 claims description 3
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 69
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 64
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 59
- 229910052736 halogen Inorganic materials 0.000 description 56
- 150000002367 halogens Chemical class 0.000 description 56
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 52
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 51
- 150000001413 amino acids Chemical group 0.000 description 44
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 description 43
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 description 41
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 description 41
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 description 41
- UREBDLICKHMUKA-CXSFZGCWSA-N dexamethasone Chemical compound C1CC2=CC(=O)C=C[C@]2(C)[C@]2(F)[C@@H]1[C@@H]1C[C@@H](C)[C@@](C(=O)CO)(O)[C@@]1(C)C[C@@H]2O UREBDLICKHMUKA-CXSFZGCWSA-N 0.000 description 29
- 229960003957 dexamethasone Drugs 0.000 description 29
- -1 for example Proteins 0.000 description 29
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 27
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 26
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 description 24
- 150000002431 hydrogen Chemical class 0.000 description 24
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 24
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 24
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 24
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 21
- NFGXHKASABOEEW-UHFFFAOYSA-N 1-methylethyl 11-methoxy-3,7,11-trimethyl-2,4-dodecadienoate Chemical compound COC(C)(C)CCCC(C)CC=CC(C)=CC(=O)OC(C)C NFGXHKASABOEEW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 20
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 20
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 20
- 125000004169 (C1-C6) alkyl group Chemical group 0.000 description 19
- 125000001797 benzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])* 0.000 description 19
- GOTYRUGSSMKFNF-UHFFFAOYSA-N lenalidomide Chemical compound C1C=2C(N)=CC=CC=2C(=O)N1C1CCC(=O)NC1=O GOTYRUGSSMKFNF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 19
- 208000034578 Multiple myelomas Diseases 0.000 description 18
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 18
- 102100039498 Cytotoxic T-lymphocyte protein 4 Human genes 0.000 description 17
- 101000889276 Homo sapiens Cytotoxic T-lymphocyte protein 4 Proteins 0.000 description 17
- 125000003545 alkoxy group Chemical group 0.000 description 17
- GXJABQQUPOEUTA-RDJZCZTQSA-N bortezomib Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)B(O)O)NC(=O)C=1N=CC=NC=1)C1=CC=CC=C1 GXJABQQUPOEUTA-RDJZCZTQSA-N 0.000 description 17
- 229960001467 bortezomib Drugs 0.000 description 17
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 17
- 125000001072 heteroaryl group Chemical group 0.000 description 17
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 16
- 229960004942 lenalidomide Drugs 0.000 description 16
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 16
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 15
- 125000004209 (C1-C8) alkyl group Chemical group 0.000 description 14
- AOJJSUZBOXZQNB-TZSSRYMLSA-N Doxorubicin Chemical compound O([C@H]1C[C@@](O)(CC=2C(O)=C3C(=O)C=4C=CC=C(C=4C(=O)C3=C(O)C=21)OC)C(=O)CO)[C@H]1C[C@H](N)[C@H](O)[C@H](C)O1 AOJJSUZBOXZQNB-TZSSRYMLSA-N 0.000 description 14
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 13
- 101000801255 Homo sapiens Tumor necrosis factor receptor superfamily member 17 Proteins 0.000 description 12
- 230000002519 immonomodulatory effect Effects 0.000 description 12
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 12
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 11
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 11
- 102000046935 human TNFRSF17 Human genes 0.000 description 11
- 125000004191 (C1-C6) alkoxy group Chemical group 0.000 description 10
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 10
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 10
- 125000003282 alkyl amino group Chemical group 0.000 description 10
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 10
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 10
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 10
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 10
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 10
- 125000004648 C2-C8 alkenyl group Chemical group 0.000 description 9
- 108010019670 Chimeric Antigen Receptors Proteins 0.000 description 9
- 125000004093 cyano group Chemical group *C#N 0.000 description 9
- 238000001943 fluorescence-activated cell sorting Methods 0.000 description 9
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 9
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 description 9
- UVSMNLNDYGZFPF-UHFFFAOYSA-N pomalidomide Chemical compound O=C1C=2C(N)=CC=CC=2C(=O)N1C1CCC(=O)NC1=O UVSMNLNDYGZFPF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- UEJJHQNACJXSKW-UHFFFAOYSA-N 2-(2,6-dioxopiperidin-3-yl)-1H-isoindole-1,3(2H)-dione Chemical compound O=C1C2=CC=CC=C2C(=O)N1C1CCC(=O)NC1=O UEJJHQNACJXSKW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 8
- 229960000688 pomalidomide Drugs 0.000 description 8
- HBAQYPYDRFILMT-UHFFFAOYSA-N 8-[3-(1-cyclopropylpyrazol-4-yl)-1H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-5-yl]-3-methyl-3,8-diazabicyclo[3.2.1]octan-2-one Chemical class C1(CC1)N1N=CC(=C1)C1=NNC2=C1N=C(N=C2)N1C2C(N(CC1CC2)C)=O HBAQYPYDRFILMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- CMSMOCZEIVJLDB-UHFFFAOYSA-N Cyclophosphamide Chemical compound ClCCN(CCCl)P1(=O)NCCCO1 CMSMOCZEIVJLDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 101000648505 Homo sapiens Tumor necrosis factor receptor superfamily member 12A Proteins 0.000 description 7
- 206010025323 Lymphomas Diseases 0.000 description 7
- 101710089372 Programmed cell death protein 1 Proteins 0.000 description 7
- 102100040678 Programmed cell death protein 1 Human genes 0.000 description 7
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 7
- 239000000611 antibody drug conjugate Substances 0.000 description 7
- 229940049595 antibody-drug conjugate Drugs 0.000 description 7
- 125000003917 carbamoyl group Chemical group [H]N([H])C(*)=O 0.000 description 7
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 7
- 229960004397 cyclophosphamide Drugs 0.000 description 7
- 229910052731 fluorine Inorganic materials 0.000 description 7
- 125000000592 heterocycloalkyl group Chemical group 0.000 description 7
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 7
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 7
- 239000012453 solvate Substances 0.000 description 7
- 125000004649 C2-C8 alkynyl group Chemical group 0.000 description 6
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 6
- PXGOKWXKJXAPGV-UHFFFAOYSA-N Fluorine Chemical compound FF PXGOKWXKJXAPGV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 6
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 108060008683 Tumor Necrosis Factor Receptor Proteins 0.000 description 6
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 6
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 6
- BLMPQMFVWMYDKT-NZTKNTHTSA-N carfilzomib Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)[C@]1(C)OC1)NC(=O)CN1CCOCC1)CC1=CC=CC=C1 BLMPQMFVWMYDKT-NZTKNTHTSA-N 0.000 description 6
- 108010021331 carfilzomib Proteins 0.000 description 6
- 229960002438 carfilzomib Drugs 0.000 description 6
- 230000000139 costimulatory effect Effects 0.000 description 6
- 125000004663 dialkyl amino group Chemical group 0.000 description 6
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 6
- 229960004679 doxorubicin Drugs 0.000 description 6
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 6
- 239000011737 fluorine Substances 0.000 description 6
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 6
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 6
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 6
- 201000000050 myeloid neoplasm Diseases 0.000 description 6
- 210000000822 natural killer cell Anatomy 0.000 description 6
- 125000000449 nitro group Chemical group [O-][N+](*)=O 0.000 description 6
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 6
- YBYRMVIVWMBXKQ-UHFFFAOYSA-N phenylmethanesulfonyl fluoride Chemical compound FS(=O)(=O)CC1=CC=CC=C1 YBYRMVIVWMBXKQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 210000004180 plasmocyte Anatomy 0.000 description 6
- 230000011664 signaling Effects 0.000 description 6
- 102000003298 tumor necrosis factor receptor Human genes 0.000 description 6
- 208000003950 B-cell lymphoma Diseases 0.000 description 5
- 125000000041 C6-C10 aryl group Chemical group 0.000 description 5
- ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N Chlorine atom Chemical group [Cl] ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 229940126062 Compound A Drugs 0.000 description 5
- NLDMNSXOCDLTTB-UHFFFAOYSA-N Heterophylliin A Natural products O1C2COC(=O)C3=CC(O)=C(O)C(O)=C3C3=C(O)C(O)=C(O)C=C3C(=O)OC2C(OC(=O)C=2C=C(O)C(O)=C(O)C=2)C(O)C1OC(=O)C1=CC(O)=C(O)C(O)=C1 NLDMNSXOCDLTTB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 208000031422 Lymphocytic Chronic B-Cell Leukemia Diseases 0.000 description 5
- 229940123237 Taxane Drugs 0.000 description 5
- 102100036922 Tumor necrosis factor ligand superfamily member 13B Human genes 0.000 description 5
- 102100029690 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 13C Human genes 0.000 description 5
- 102100033726 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 17 Human genes 0.000 description 5
- 125000002252 acyl group Chemical group 0.000 description 5
- 150000001721 carbon Chemical group 0.000 description 5
- 239000000460 chlorine Chemical group 0.000 description 5
- 229910052801 chlorine Inorganic materials 0.000 description 5
- 229960002204 daratumumab Drugs 0.000 description 5
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 5
- 229960004137 elotuzumab Drugs 0.000 description 5
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 5
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 5
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 5
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 5
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 5
- 229960003433 thalidomide Drugs 0.000 description 5
- 125000006272 (C3-C7) cycloalkyl group Chemical group 0.000 description 4
- 208000010839 B-cell chronic lymphocytic leukemia Diseases 0.000 description 4
- 208000037914 B-cell disorder Diseases 0.000 description 4
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 4
- 208000011691 Burkitt lymphomas Diseases 0.000 description 4
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 208000015914 Non-Hodgkin lymphomas Diseases 0.000 description 4
- 108020005497 Nuclear hormone receptor Proteins 0.000 description 4
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 4
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 4
- 235000014680 Saccharomyces cerevisiae Nutrition 0.000 description 4
- 108700019146 Transgenes Proteins 0.000 description 4
- 101710187885 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 17 Proteins 0.000 description 4
- 239000012190 activator Substances 0.000 description 4
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 4
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 4
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 4
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 4
- 125000005605 benzo group Chemical group 0.000 description 4
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 4
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 4
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 4
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 4
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 4
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 4
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 4
- 102000055458 human TNFRSF12A Human genes 0.000 description 4
- 210000002865 immune cell Anatomy 0.000 description 4
- MXAYKZJJDUDWDS-LBPRGKRZSA-N ixazomib Chemical compound CC(C)C[C@@H](B(O)O)NC(=O)CNC(=O)C1=CC(Cl)=CC=C1Cl MXAYKZJJDUDWDS-LBPRGKRZSA-N 0.000 description 4
- 210000003292 kidney cell Anatomy 0.000 description 4
- 125000005647 linker group Chemical group 0.000 description 4
- 239000003094 microcapsule Substances 0.000 description 4
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 4
- FPOHNWQLNRZRFC-ZHACJKMWSA-N panobinostat Chemical compound CC=1NC2=CC=CC=C2C=1CCNCC1=CC=C(\C=C\C(=O)NO)C=C1 FPOHNWQLNRZRFC-ZHACJKMWSA-N 0.000 description 4
- 229960005184 panobinostat Drugs 0.000 description 4
- XKJCHHZQLQNZHY-UHFFFAOYSA-N phthalimide Chemical group C1=CC=C2C(=O)NC(=O)C2=C1 XKJCHHZQLQNZHY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 4
- 229940002612 prodrug Drugs 0.000 description 4
- 239000000651 prodrug Substances 0.000 description 4
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 4
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 4
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 4
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 4
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 4
- 238000001890 transfection Methods 0.000 description 4
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 4
- 125000004178 (C1-C4) alkyl group Chemical group 0.000 description 3
- WENKGSGGXGQHSH-UHFFFAOYSA-N 3-(3-oxo-1h-isoindol-2-yl)piperidine-2,6-dione Chemical class C1C2=CC=CC=C2C(=O)N1C1CCC(=O)NC1=O WENKGSGGXGQHSH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 208000003343 Antiphospholipid Syndrome Diseases 0.000 description 3
- 108010028006 B-Cell Activating Factor Proteins 0.000 description 3
- 108010046304 B-Cell Activation Factor Receptor Proteins 0.000 description 3
- 102000007536 B-Cell Activation Factor Receptor Human genes 0.000 description 3
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 3
- UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N Benzene Chemical compound C1=CC=CC=C1 UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108050005493 CD3 protein, epsilon/gamma/delta subunit Proteins 0.000 description 3
- 102000017420 CD3 protein, epsilon/gamma/delta subunit Human genes 0.000 description 3
- 241000282693 Cercopithecidae Species 0.000 description 3
- 108091026890 Coding region Proteins 0.000 description 3
- YZCKVEUIGOORGS-OUBTZVSYSA-N Deuterium Chemical compound [2H] YZCKVEUIGOORGS-OUBTZVSYSA-N 0.000 description 3
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 3
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 description 3
- 101000994375 Homo sapiens Integrin alpha-4 Proteins 0.000 description 3
- 101000935040 Homo sapiens Integrin beta-2 Proteins 0.000 description 3
- 101000795169 Homo sapiens Tumor necrosis factor receptor superfamily member 13C Proteins 0.000 description 3
- 102100032818 Integrin alpha-4 Human genes 0.000 description 3
- 102100032816 Integrin alpha-6 Human genes 0.000 description 3
- 102100022339 Integrin alpha-L Human genes 0.000 description 3
- 102100025390 Integrin beta-2 Human genes 0.000 description 3
- 208000031671 Large B-Cell Diffuse Lymphoma Diseases 0.000 description 3
- 229930126263 Maytansine Natural products 0.000 description 3
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 3
- 208000010190 Monoclonal Gammopathy of Undetermined Significance Diseases 0.000 description 3
- 208000007452 Plasmacytoma Diseases 0.000 description 3
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 3
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 description 3
- 108010074687 Signaling Lymphocytic Activation Molecule Family Member 1 Proteins 0.000 description 3
- 102100029215 Signaling lymphocytic activation molecule Human genes 0.000 description 3
- 241000256251 Spodoptera frugiperda Species 0.000 description 3
- 102100040247 Tumor necrosis factor Human genes 0.000 description 3
- 102100028786 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 12A Human genes 0.000 description 3
- 238000001042 affinity chromatography Methods 0.000 description 3
- 206010002022 amyloidosis Diseases 0.000 description 3
- 239000003972 antineoplastic antibiotic Substances 0.000 description 3
- 108010044540 auristatin Proteins 0.000 description 3
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 3
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 3
- 230000030833 cell death Effects 0.000 description 3
- DQLATGHUWYMOKM-UHFFFAOYSA-L cisplatin Chemical compound N[Pt](N)(Cl)Cl DQLATGHUWYMOKM-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 3
- 229960004316 cisplatin Drugs 0.000 description 3
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 3
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 3
- 125000000753 cycloalkyl group Chemical group 0.000 description 3
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 3
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 3
- 229910052805 deuterium Inorganic materials 0.000 description 3
- 206010012818 diffuse large B-cell lymphoma Diseases 0.000 description 3
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 3
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 3
- 239000003623 enhancer Substances 0.000 description 3
- VJJPUSNTGOMMGY-MRVIYFEKSA-N etoposide Chemical compound COC1=C(O)C(OC)=CC([C@@H]2C3=CC=4OCOC=4C=C3[C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@@H]4O[C@H](C)OC[C@H]4O3)O)[C@@H]3[C@@H]2C(OC3)=O)=C1 VJJPUSNTGOMMGY-MRVIYFEKSA-N 0.000 description 3
- 229960005420 etoposide Drugs 0.000 description 3
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 3
- 210000004602 germ cell Anatomy 0.000 description 3
- 208000025750 heavy chain disease Diseases 0.000 description 3
- 210000004408 hybridoma Anatomy 0.000 description 3
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 3
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 3
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 3
- 238000001361 intraarterial administration Methods 0.000 description 3
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 3
- 229960003648 ixazomib Drugs 0.000 description 3
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 3
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 3
- WKPWGQKGSOKKOO-RSFHAFMBSA-N maytansine Chemical compound CO[C@@H]([C@@]1(O)C[C@](OC(=O)N1)([C@H]([C@@H]1O[C@@]1(C)[C@@H](OC(=O)[C@H](C)N(C)C(C)=O)CC(=O)N1C)C)[H])\C=C\C=C(C)\CC2=CC(OC)=C(Cl)C1=C2 WKPWGQKGSOKKOO-RSFHAFMBSA-N 0.000 description 3
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 3
- 201000005328 monoclonal gammopathy of uncertain significance Diseases 0.000 description 3
- 125000004043 oxo group Chemical group O=* 0.000 description 3
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 3
- KNCYXPMJDCCGSJ-UHFFFAOYSA-N piperidine-2,6-dione Chemical compound O=C1CCCC(=O)N1 KNCYXPMJDCCGSJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 3
- 230000002685 pulmonary effect Effects 0.000 description 3
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 3
- 241000894007 species Species 0.000 description 3
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 3
- MFRNYXJJRJQHNW-DEMKXPNLSA-N (2s)-2-[[(2r,3r)-3-methoxy-3-[(2s)-1-[(3r,4s,5s)-3-methoxy-5-methyl-4-[methyl-[(2s)-3-methyl-2-[[(2s)-3-methyl-2-(methylamino)butanoyl]amino]butanoyl]amino]heptanoyl]pyrrolidin-2-yl]-2-methylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoic acid Chemical compound CN[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N(C)[C@@H]([C@@H](C)CC)[C@H](OC)CC(=O)N1CCC[C@H]1[C@H](OC)[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 MFRNYXJJRJQHNW-DEMKXPNLSA-N 0.000 description 2
- 125000001989 1,3-phenylene group Chemical group [H]C1=C([H])C([*:1])=C([H])C([*:2])=C1[H] 0.000 description 2
- 125000001140 1,4-phenylene group Chemical group [H]C1=C([H])C([*:2])=C([H])C([H])=C1[*:1] 0.000 description 2
- SCJORWDJJJWLJD-UHFFFAOYSA-N 2-(3-fluoro-2,6-dioxopiperidin-3-yl)isoindole-1,3-dione Chemical class O=C1C2=CC=CC=C2C(=O)N1C1(F)CCC(=O)NC1=O SCJORWDJJJWLJD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DHKAFTYWTCIWJX-UHFFFAOYSA-N 3-(3,4-dimethoxyphenyl)-3-(3-oxo-1h-isoindol-2-yl)propanamide Chemical compound C1=C(OC)C(OC)=CC=C1C(CC(N)=O)N1C(=O)C2=CC=CC=C2C1 DHKAFTYWTCIWJX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- BMOHMMOTIMUSJR-UHFFFAOYSA-N 3-(7-methyl-3-oxo-1h-isoindol-2-yl)piperidine-2,6-dione Chemical compound C1C=2C(C)=CC=CC=2C(=O)N1C1CCC(=O)NC1=O BMOHMMOTIMUSJR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QNHYEPANFMRYAK-UHFFFAOYSA-N 3-fluoro-3-(3-oxo-1h-isoindol-2-yl)piperidine-2,6-dione Chemical class C1C2=CC=CC=C2C(=O)N1C1(F)CCC(=O)NC1=O QNHYEPANFMRYAK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- TUMJPYMYNBEMDD-UHFFFAOYSA-N 4-(aminomethyl)-2-(2,6-dioxopiperidin-3-yl)isoindole-1,3-dione Chemical compound O=C1C=2C(CN)=CC=CC=2C(=O)N1C1CCC(=O)NC1=O TUMJPYMYNBEMDD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VZTDWPXKIYLLAT-UHFFFAOYSA-N 4-amino-2-(3-methyl-2,6-dioxopiperidin-3-yl)isoindole-1,3-dione Chemical compound O=C1C2=CC=CC(N)=C2C(=O)N1C1(C)CCC(=O)NC1=O VZTDWPXKIYLLAT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FPNJYPLJTAYAMP-UHFFFAOYSA-N 7a-(2,6-dioxopiperidin-3-yl)-3ah-isoindole-1,3-dione Chemical class C1=CC=CC2C(=O)NC(=O)C21C1CCC(=O)NC1=O FPNJYPLJTAYAMP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920000936 Agarose Polymers 0.000 description 2
- 206010001935 American trypanosomiasis Diseases 0.000 description 2
- 206010002412 Angiocentric lymphomas Diseases 0.000 description 2
- 208000002267 Anti-neutrophil cytoplasmic antibody-associated vasculitis Diseases 0.000 description 2
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 2
- 208000023328 Basedow disease Diseases 0.000 description 2
- 102100024263 CD160 antigen Human genes 0.000 description 2
- 102100038077 CD226 antigen Human genes 0.000 description 2
- 102100027207 CD27 antigen Human genes 0.000 description 2
- 101150015280 Cel gene Proteins 0.000 description 2
- 208000024699 Chagas disease Diseases 0.000 description 2
- 102000036364 Cullin Ring E3 Ligases Human genes 0.000 description 2
- 108010092160 Dactinomycin Proteins 0.000 description 2
- 241000255925 Diptera Species 0.000 description 2
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 2
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 2
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 2
- 208000024869 Goodpasture syndrome Diseases 0.000 description 2
- 206010072579 Granulomatosis with polyangiitis Diseases 0.000 description 2
- 208000015023 Graves' disease Diseases 0.000 description 2
- WZUVPPKBWHMQCE-UHFFFAOYSA-N Haematoxylin Chemical compound C12=CC(O)=C(O)C=C2CC2(O)C1C1=CC=C(O)C(O)=C1OC2 WZUVPPKBWHMQCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000035186 Hemolytic Autoimmune Anemia Diseases 0.000 description 2
- 208000017604 Hodgkin disease Diseases 0.000 description 2
- 208000021519 Hodgkin lymphoma Diseases 0.000 description 2
- 208000010747 Hodgkins lymphoma Diseases 0.000 description 2
- 101000761938 Homo sapiens CD160 antigen Proteins 0.000 description 2
- 101000884298 Homo sapiens CD226 antigen Proteins 0.000 description 2
- 101000914511 Homo sapiens CD27 antigen Proteins 0.000 description 2
- 101001078158 Homo sapiens Integrin alpha-1 Proteins 0.000 description 2
- 101000994365 Homo sapiens Integrin alpha-6 Proteins 0.000 description 2
- 101001046687 Homo sapiens Integrin alpha-E Proteins 0.000 description 2
- 101000935043 Homo sapiens Integrin beta-1 Proteins 0.000 description 2
- 101000971538 Homo sapiens Killer cell lectin-like receptor subfamily F member 1 Proteins 0.000 description 2
- 101001109501 Homo sapiens NKG2-D type II integral membrane protein Proteins 0.000 description 2
- 101000633786 Homo sapiens SLAM family member 6 Proteins 0.000 description 2
- 101000611183 Homo sapiens Tumor necrosis factor Proteins 0.000 description 2
- 108091006905 Human Serum Albumin Proteins 0.000 description 2
- 102000008100 Human Serum Albumin Human genes 0.000 description 2
- 206010021245 Idiopathic thrombocytopenic purpura Diseases 0.000 description 2
- 206010053574 Immunoblastic lymphoma Diseases 0.000 description 2
- 108010067060 Immunoglobulin Variable Region Proteins 0.000 description 2
- 102000017727 Immunoglobulin Variable Region Human genes 0.000 description 2
- 102100025323 Integrin alpha-1 Human genes 0.000 description 2
- 102100022341 Integrin alpha-E Human genes 0.000 description 2
- 102100025304 Integrin beta-1 Human genes 0.000 description 2
- 108010064593 Intercellular Adhesion Molecule-1 Proteins 0.000 description 2
- 102100037877 Intercellular adhesion molecule 1 Human genes 0.000 description 2
- 208000011200 Kawasaki disease Diseases 0.000 description 2
- 102100021458 Killer cell lectin-like receptor subfamily F member 1 Human genes 0.000 description 2
- 244000285963 Kluyveromyces fragilis Species 0.000 description 2
- 241001138401 Kluyveromyces lactis Species 0.000 description 2
- 108010064548 Lymphocyte Function-Associated Antigen-1 Proteins 0.000 description 2
- 208000025205 Mantle-Cell Lymphoma Diseases 0.000 description 2
- 229940121849 Mitotic inhibitor Drugs 0.000 description 2
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 2
- 101100222220 Mus musculus Ctla4 gene Proteins 0.000 description 2
- 101100519207 Mus musculus Pdcd1 gene Proteins 0.000 description 2
- 102100022680 NKG2-D type II integral membrane protein Human genes 0.000 description 2
- 102100038082 Natural killer cell receptor 2B4 Human genes 0.000 description 2
- 206010029461 Nodal marginal zone B-cell lymphomas Diseases 0.000 description 2
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 2
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 2
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Natural products OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000021161 Plasma cell disease Diseases 0.000 description 2
- 239000004698 Polyethylene Substances 0.000 description 2
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 2
- 102000014128 RANK Ligand Human genes 0.000 description 2
- 108010025832 RANK Ligand Proteins 0.000 description 2
- 102100029197 SLAM family member 6 Human genes 0.000 description 2
- 241000311088 Schwanniomyces Species 0.000 description 2
- 206010039710 Scleroderma Diseases 0.000 description 2
- 102100027744 Semaphorin-4D Human genes 0.000 description 2
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 2
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 2
- 229940126530 T cell activator Drugs 0.000 description 2
- 108010014401 TWEAK Receptor Proteins 0.000 description 2
- 102000016946 TWEAK Receptor Human genes 0.000 description 2
- 208000031981 Thrombocytopenic Idiopathic Purpura Diseases 0.000 description 2
- 241000223109 Trypanosoma cruzi Species 0.000 description 2
- 102100028785 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 14 Human genes 0.000 description 2
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 2
- 208000033559 Waldenström macroglobulinemia Diseases 0.000 description 2
- IEDXPSOJFSVCKU-HOKPPMCLSA-N [4-[[(2S)-5-(carbamoylamino)-2-[[(2S)-2-[6-(2,5-dioxopyrrolidin-1-yl)hexanoylamino]-3-methylbutanoyl]amino]pentanoyl]amino]phenyl]methyl N-[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(3R,4S,5S)-1-[(2S)-2-[(1R,2R)-3-[[(1S,2R)-1-hydroxy-1-phenylpropan-2-yl]amino]-1-methoxy-2-methyl-3-oxopropyl]pyrrolidin-1-yl]-3-methoxy-5-methyl-1-oxoheptan-4-yl]-methylamino]-3-methyl-1-oxobutan-2-yl]amino]-3-methyl-1-oxobutan-2-yl]-N-methylcarbamate Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H]([C@@H](CC(=O)N1CCC[C@H]1[C@H](OC)[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C)[C@@H](O)c1ccccc1)OC)N(C)C(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](C(C)C)N(C)C(=O)OCc1ccc(NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CCCCCN2C(=O)CCC2=O)C(C)C)cc1)C(C)C IEDXPSOJFSVCKU-HOKPPMCLSA-N 0.000 description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 2
- 229930183665 actinomycin Natural products 0.000 description 2
- 229930013930 alkaloid Natural products 0.000 description 2
- 150000003797 alkaloid derivatives Chemical class 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 201000000448 autoimmune hemolytic anemia Diseases 0.000 description 2
- 201000003710 autoimmune thrombocytopenic purpura Diseases 0.000 description 2
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 2
- YTKUWDBFDASYHO-UHFFFAOYSA-N bendamustine Chemical compound ClCCN(CCCl)C1=CC=C2N(C)C(CCCC(O)=O)=NC2=C1 YTKUWDBFDASYHO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960002707 bendamustine Drugs 0.000 description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- YCIMNLLNPGFGHC-UHFFFAOYSA-N catechol Chemical compound OC1=CC=CC=C1O YCIMNLLNPGFGHC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000004978 chinese hamster ovary cell Anatomy 0.000 description 2
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 2
- 208000032852 chronic lymphocytic leukemia Diseases 0.000 description 2
- 208000004921 cutaneous lupus erythematosus Diseases 0.000 description 2
- 230000034994 death Effects 0.000 description 2
- 231100000517 death Toxicity 0.000 description 2
- AMRJKAQTDDKMCE-UHFFFAOYSA-N dolastatin Chemical group CC(C)C(N(C)C)C(=O)NC(C(C)C)C(=O)N(C)C(C(C)C)C(OC)CC(=O)N1CCCC1C(OC)C(C)C(=O)NC(C=1SC=CN=1)CC1=CC=CC=C1 AMRJKAQTDDKMCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229930188854 dolastatin Natural products 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 2
- 210000003527 eukaryotic cell Anatomy 0.000 description 2
- 201000003444 follicular lymphoma Diseases 0.000 description 2
- 125000002485 formyl group Chemical group [H]C(*)=O 0.000 description 2
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 2
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 2
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 2
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 2
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 2
- 208000005017 glioblastoma Diseases 0.000 description 2
- 125000000623 heterocyclic group Chemical group 0.000 description 2
- 150000004677 hydrates Chemical class 0.000 description 2
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 2
- 230000002055 immunohistochemical effect Effects 0.000 description 2
- 230000004957 immunoregulator effect Effects 0.000 description 2
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 2
- 125000003387 indolinyl group Chemical group N1(CCC2=CC=CC=C12)* 0.000 description 2
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 2
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 2
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 2
- 230000004068 intracellular signaling Effects 0.000 description 2
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 2
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 2
- 238000007913 intrathecal administration Methods 0.000 description 2
- PXZQEOJJUGGUIB-UHFFFAOYSA-N isoindolin-1-one Chemical group C1=CC=C2C(=O)NCC2=C1 PXZQEOJJUGGUIB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 2
- 238000009092 lines of therapy Methods 0.000 description 2
- 210000005229 liver cell Anatomy 0.000 description 2
- 210000003563 lymphoid tissue Anatomy 0.000 description 2
- 208000006116 lymphomatoid granulomatosis Diseases 0.000 description 2
- 230000003211 malignant effect Effects 0.000 description 2
- 201000007924 marginal zone B-cell lymphoma Diseases 0.000 description 2
- 208000021937 marginal zone lymphoma Diseases 0.000 description 2
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 2
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 2
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 108010093470 monomethyl auristatin E Proteins 0.000 description 2
- 108010059074 monomethylauristatin F Proteins 0.000 description 2
- 208000001725 mucocutaneous lymph node syndrome Diseases 0.000 description 2
- 201000006417 multiple sclerosis Diseases 0.000 description 2
- 206010028417 myasthenia gravis Diseases 0.000 description 2
- IMOZEMNVLZVGJZ-UHFFFAOYSA-N n-[2-[1-(3-ethoxy-4-methoxyphenyl)-2-methylsulfonylethyl]-1,3-dioxoisoindol-4-yl]acetamide Chemical compound C1=C(OC)C(OCC)=CC(C(CS(C)(=O)=O)N2C(C3=C(NC(C)=O)C=CC=C3C2=O)=O)=C1 IMOZEMNVLZVGJZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000000581 natural killer T-cell Anatomy 0.000 description 2
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 2
- AQIXEPGDORPWBJ-UHFFFAOYSA-N pentan-3-ol Chemical compound CCC(O)CC AQIXEPGDORPWBJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 2
- 201000006292 polyarteritis nodosa Diseases 0.000 description 2
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 2
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 2
- 230000004481 post-translational protein modification Effects 0.000 description 2
- 208000017805 post-transplant lymphoproliferative disease Diseases 0.000 description 2
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 2
- 201000006037 primary mediastinal B-cell lymphoma Diseases 0.000 description 2
- QELSKZZBTMNZEB-UHFFFAOYSA-N propylparaben Chemical compound CCCOC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 QELSKZZBTMNZEB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000001742 protein purification Methods 0.000 description 2
- RXWNCPJZOCPEPQ-NVWDDTSBSA-N puromycin Chemical compound C1=CC(OC)=CC=C1C[C@H](N)C(=O)N[C@H]1[C@@H](O)[C@H](N2C3=NC=NC(=C3N=C2)N(C)C)O[C@@H]1CO RXWNCPJZOCPEPQ-NVWDDTSBSA-N 0.000 description 2
- YUOCYTRGANSSRY-UHFFFAOYSA-N pyrrolo[2,3-i][1,2]benzodiazepine Chemical compound C1=CN=NC2=C3C=CN=C3C=CC2=C1 YUOCYTRGANSSRY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UOWVMDUEMSNCAV-WYENRQIDSA-N rachelmycin Chemical class C1([C@]23C[C@@H]2CN1C(=O)C=1NC=2C(OC)=C(O)C4=C(C=2C=1)CCN4C(=O)C1=CC=2C=4CCN(C=4C(O)=C(C=2N1)OC)C(N)=O)=CC(=O)C1=C3C(C)=CN1 UOWVMDUEMSNCAV-WYENRQIDSA-N 0.000 description 2
- 201000008158 rapidly progressive glomerulonephritis Diseases 0.000 description 2
- GHMLBKRAJCXXBS-UHFFFAOYSA-N resorcinol Chemical compound OC1=CC=CC(O)=C1 GHMLBKRAJCXXBS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 201000006845 reticulosarcoma Diseases 0.000 description 2
- 208000029922 reticulum cell sarcoma Diseases 0.000 description 2
- 206010039073 rheumatoid arthritis Diseases 0.000 description 2
- 239000012146 running buffer Substances 0.000 description 2
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 2
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 2
- 239000001632 sodium acetate Substances 0.000 description 2
- 235000017281 sodium acetate Nutrition 0.000 description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 2
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 2
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 2
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 2
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 2
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 2
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 description 2
- 201000000596 systemic lupus erythematosus Diseases 0.000 description 2
- DKPFODGZWDEEBT-QFIAKTPHSA-N taxane Chemical class C([C@]1(C)CCC[C@@H](C)[C@H]1C1)C[C@H]2[C@H](C)CC[C@@H]1C2(C)C DKPFODGZWDEEBT-QFIAKTPHSA-N 0.000 description 2
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 2
- 150000003573 thiols Chemical class 0.000 description 2
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 2
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 2
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 2
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 2
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 2
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 description 2
- HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N α-D-glucopyranosyl-α-D-glucopyranoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N (3s)-4-[[(2s)-1-[[(2s)-1-[[(1s)-1-carboxy-2-hydroxyethyl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-[[2-[[(2s)-2,6-diaminohexanoyl]amino]acetyl]amino]-4-oxobutanoic acid Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCCCN MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N 0.000 description 1
- MWWSFMDVAYGXBV-MYPASOLCSA-N (7r,9s)-7-[(2r,4s,5s,6s)-4-amino-5-hydroxy-6-methyloxan-2-yl]oxy-6,9,11-trihydroxy-9-(2-hydroxyacetyl)-4-methoxy-8,10-dihydro-7h-tetracene-5,12-dione;hydrochloride Chemical compound Cl.O([C@@H]1C[C@@](O)(CC=2C(O)=C3C(=O)C=4C=CC=C(C=4C(=O)C3=C(O)C=21)OC)C(=O)CO)[C@H]1C[C@H](N)[C@H](O)[C@H](C)O1 MWWSFMDVAYGXBV-MYPASOLCSA-N 0.000 description 1
- 125000000229 (C1-C4)alkoxy group Chemical group 0.000 description 1
- 125000006730 (C2-C5) alkynyl group Chemical group 0.000 description 1
- NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 1,2-bis(ethenyl)benzene;1-ethenyl-2-ethylbenzene;styrene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1.CCC1=CC=CC=C1C=C.C=CC1=CC=CC=C1C=C NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CLGYDNGWRRGLFE-UHFFFAOYSA-N 1-[[2-(2,6-dioxopiperidin-3-yl)-1,3-dioxoisoindol-4-yl]methyl]-3-octylurea Chemical compound O=C1C=2C(CNC(=O)NCCCCCCCC)=CC=CC=2C(=O)N1C1CCC(=O)NC1=O CLGYDNGWRRGLFE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OKKBUZAPZRRSSO-UHFFFAOYSA-N 1-benzyl-3-[[2-(2,6-dioxopiperidin-3-yl)-1,3-dioxoisoindol-4-yl]methyl]urea Chemical compound C=1C=CC=2C(=O)N(C3C(NC(=O)CC3)=O)C(=O)C=2C=1CNC(=O)NCC1=CC=CC=C1 OKKBUZAPZRRSSO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VZVRSHCJXZZZAI-UHFFFAOYSA-N 2-[1-(3,4-diethoxyphenyl)ethyl]isoindole-1,3-dione Chemical compound C1=C(OCC)C(OCC)=CC=C1C(C)N1C(=O)C2=CC=CC=C2C1=O VZVRSHCJXZZZAI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000004200 2-methoxyethyl group Chemical group [H]C([H])([H])OC([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- IANVPGKFFMSOHX-UHFFFAOYSA-N 3-(1,3-dihydroisoindol-2-yl)-5-hydroxypiperidine-2,6-dione Chemical class O=C1NC(=O)C(O)CC1N1CC2=CC=CC=C2C1 IANVPGKFFMSOHX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LFQSYKFVAWOSQE-UHFFFAOYSA-N 3-(2,5-dimethyl-4-oxoquinazolin-3-yl)piperidine-2,6-dione Chemical compound CC1=NC2=CC=CC(C)=C2C(=O)N1C1CCC(=O)NC1=O LFQSYKFVAWOSQE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HQUCDINVZJIZIL-UHFFFAOYSA-N 3-(4-acetamido-1,3-dioxoisoindol-2-yl)-3-(3-ethoxy-4-methoxyphenyl)-n-hydroxypropanamide Chemical compound C1=C(OC)C(OCC)=CC(C(CC(=O)NO)N2C(C3=C(NC(C)=O)C=CC=C3C2=O)=O)=C1 HQUCDINVZJIZIL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RSNPAKAFCAAMBH-UHFFFAOYSA-N 3-(5-amino-2-methyl-4-oxoquinazolin-3-yl)piperidine-2,6-dione Chemical compound CC1=NC2=CC=CC(N)=C2C(=O)N1C1CCC(=O)NC1=O RSNPAKAFCAAMBH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XEROJSNWACQJEM-UHFFFAOYSA-N 3-(7-amino-3-oxo-1h-isoindol-2-yl)-3-fluoro-5-hydroxypiperidine-2,6-dione Chemical compound C1C=2C(N)=CC=CC=2C(=O)N1C1(F)CC(O)C(=O)NC1=O XEROJSNWACQJEM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VWZVRHSJOPXCKC-UHFFFAOYSA-N 3-[7-(benzylamino)-3-oxo-1h-isoindol-2-yl]piperidine-2,6-dione Chemical compound O=C1N(C2C(NC(=O)CC2)=O)CC2=C1C=CC=C2NCC1=CC=CC=C1 VWZVRHSJOPXCKC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IXZOHGPZAQLIBH-UHFFFAOYSA-N 3-[7-[[4-(morpholin-4-ylmethyl)phenyl]methoxy]-3-oxo-1h-isoindol-2-yl]piperidine-2,6-dione Chemical compound O=C1N(C2C(NC(=O)CC2)=O)CC2=C1C=CC=C2OCC(C=C1)=CC=C1CN1CCOCC1 IXZOHGPZAQLIBH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VQDRNQBRRSNVOR-UHFFFAOYSA-N 3-[7-[[4-[[4-(2,4-difluorophenyl)piperazin-1-yl]methyl]phenyl]methoxy]-3-oxo-1h-isoindol-2-yl]piperidine-2,6-dione Chemical compound FC1=CC(F)=CC=C1N1CCN(CC=2C=CC(COC=3C=4CN(C(=O)C=4C=CC=3)C3C(NC(=O)CC3)=O)=CC=2)CC1 VQDRNQBRRSNVOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LMUICIDWYMVFIY-UHFFFAOYSA-N 3-[[2-(2,6-dioxopiperidin-3-yl)-1,3-dioxoisoindol-4-yl]methyl]-1,1-dimethylurea Chemical compound O=C1C=2C(CNC(=O)N(C)C)=CC=CC=2C(=O)N1C1CCC(=O)NC1=O LMUICIDWYMVFIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JBYQCGLMICPOSQ-UHFFFAOYSA-N 4-(benzylamino)-2-(2,6-dioxopiperidin-3-yl)isoindole-1,3-dione Chemical compound O=C1C(C(=CC=C2)NCC=3C=CC=CC=3)=C2C(=O)N1C1CCC(=O)NC1=O JBYQCGLMICPOSQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ONSXHJKRIVTBPA-UHFFFAOYSA-N 4-(furan-2-ylmethylamino)-2-pentan-2-ylisoindole-1,3-dione Chemical compound O1C(=CC=C1)CNC1=C2C(N(C(C2=CC=C1)=O)C(C)CCC)=O ONSXHJKRIVTBPA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QCQCHGYLTSGIGX-GHXANHINSA-N 4-[[(3ar,5ar,5br,7ar,9s,11ar,11br,13as)-5a,5b,8,8,11a-pentamethyl-3a-[(5-methylpyridine-3-carbonyl)amino]-2-oxo-1-propan-2-yl-4,5,6,7,7a,9,10,11,11b,12,13,13a-dodecahydro-3h-cyclopenta[a]chrysen-9-yl]oxy]-2,2-dimethyl-4-oxobutanoic acid Chemical compound N([C@@]12CC[C@@]3(C)[C@]4(C)CC[C@H]5C(C)(C)[C@@H](OC(=O)CC(C)(C)C(O)=O)CC[C@]5(C)[C@H]4CC[C@@H]3C1=C(C(C2)=O)C(C)C)C(=O)C1=CN=CC(C)=C1 QCQCHGYLTSGIGX-GHXANHINSA-N 0.000 description 1
- KDESNQSXJGVCEL-QFIPXVFZSA-N 4-chloro-n-[[2-[(3s)-3-methyl-2,6-dioxopiperidin-3-yl]-1,3-dioxoisoindol-5-yl]methyl]benzamide Chemical class O=C1C2=CC=C(CNC(=O)C=3C=CC(Cl)=CC=3)C=C2C(=O)N1[C@@]1(C)CCC(=O)NC1=O KDESNQSXJGVCEL-QFIPXVFZSA-N 0.000 description 1
- KSCACLRGQJXDAB-UHFFFAOYSA-N 5-amino-2-(7-amino-3-oxo-1h-isoindol-2-yl)-5-oxopentanoic acid Chemical compound O=C1N(C(CCC(=O)N)C(O)=O)CC2=C1C=CC=C2N KSCACLRGQJXDAB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ROSRWBRPERVGFP-UHFFFAOYSA-N 5-amino-2-[4-(furan-2-ylmethylamino)-1,3-dioxoisoindol-2-yl]-5-oxopentanoic acid Chemical compound C=12C(=O)N(C(CCC(=O)N)C(O)=O)C(=O)C2=CC=CC=1NCC1=CC=CO1 ROSRWBRPERVGFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JVYMXRZSOURPSE-UHFFFAOYSA-N 5-amino-4-(4-amino-1,3-dioxoisoindol-2-yl)-5-oxopentanoic acid Chemical compound C1=CC(N)=C2C(=O)N(C(CCC(O)=O)C(=O)N)C(=O)C2=C1 JVYMXRZSOURPSE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- USYWQLIFELNXTA-UHFFFAOYSA-N 5-amino-4-(7-amino-3-oxo-1h-isoindol-2-yl)-5-oxopentanoic acid Chemical compound O=C1N(C(CCC(O)=O)C(=O)N)CC2=C1C=CC=C2N USYWQLIFELNXTA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DTXGRYNRUZTFMT-UHFFFAOYSA-N 5-amino-4-[4-(furan-2-ylmethylamino)-1,3-dioxoisoindol-2-yl]-5-oxopentanoic acid Chemical compound C=12C(=O)N(C(CCC(O)=O)C(=O)N)C(=O)C2=CC=CC=1NCC1=CC=CO1 DTXGRYNRUZTFMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010069754 Acquired gene mutation Diseases 0.000 description 1
- 241000256118 Aedes aegypti Species 0.000 description 1
- 241000256173 Aedes albopictus Species 0.000 description 1
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 1
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 1
- 241000219194 Arabidopsis Species 0.000 description 1
- 101100496169 Arabidopsis thaliana CLH1 gene Proteins 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N Asparagine Natural products OC(=O)C(N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000228212 Aspergillus Species 0.000 description 1
- 241000228245 Aspergillus niger Species 0.000 description 1
- 241001203868 Autographa californica Species 0.000 description 1
- 102100029822 B- and T-lymphocyte attenuator Human genes 0.000 description 1
- 102100038080 B-cell receptor CD22 Human genes 0.000 description 1
- 102100024222 B-lymphocyte antigen CD19 Human genes 0.000 description 1
- 241000255789 Bombyx mori Species 0.000 description 1
- 241000409811 Bombyx mori nucleopolyhedrovirus Species 0.000 description 1
- ZOXJGFHDIHLPTG-UHFFFAOYSA-N Boron Chemical compound [B] ZOXJGFHDIHLPTG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 1
- 102100021943 C-C motif chemokine 2 Human genes 0.000 description 1
- 101710155857 C-C motif chemokine 2 Proteins 0.000 description 1
- 108010056102 CD100 antigen Proteins 0.000 description 1
- 108010017009 CD11b Antigen Proteins 0.000 description 1
- 101150013553 CD40 gene Proteins 0.000 description 1
- 108010062802 CD66 antigens Proteins 0.000 description 1
- 102100027217 CD82 antigen Human genes 0.000 description 1
- 101710139831 CD82 antigen Proteins 0.000 description 1
- 108010021064 CTLA-4 Antigen Proteins 0.000 description 1
- 229940045513 CTLA4 antagonist Drugs 0.000 description 1
- 241000222120 Candida <Saccharomycetales> Species 0.000 description 1
- 241000282465 Canis Species 0.000 description 1
- 102100024533 Carcinoembryonic antigen-related cell adhesion molecule 1 Human genes 0.000 description 1
- 102100025466 Carcinoembryonic antigen-related cell adhesion molecule 3 Human genes 0.000 description 1
- 241000282552 Chlorocebus aethiops Species 0.000 description 1
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 108091033380 Coding strand Proteins 0.000 description 1
- 108010047041 Complementarity Determining Regions Proteins 0.000 description 1
- 229920000742 Cotton Polymers 0.000 description 1
- 241000699800 Cricetinae Species 0.000 description 1
- 102000001493 Cyclophilins Human genes 0.000 description 1
- 108010068682 Cyclophilins Proteins 0.000 description 1
- 102000013816 Cytotoxic T-lymphocyte antigen 4 Human genes 0.000 description 1
- 102100027816 Cytotoxic and regulatory T-cell molecule Human genes 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N D-mannopyranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N 0.000 description 1
- 239000012624 DNA alkylating agent Substances 0.000 description 1
- 239000004375 Dextrin Substances 0.000 description 1
- 229920001353 Dextrin Polymers 0.000 description 1
- 241000255601 Drosophila melanogaster Species 0.000 description 1
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 1
- 102100025137 Early activation antigen CD69 Human genes 0.000 description 1
- 101000585551 Equus caballus Pregnancy-associated glycoprotein Proteins 0.000 description 1
- 108010087819 Fc receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000009109 Fc receptors Human genes 0.000 description 1
- 238000012413 Fluorescence activated cell sorting analysis Methods 0.000 description 1
- 102100022086 GRB2-related adapter protein 2 Human genes 0.000 description 1
- 108700039691 Genetic Promoter Regions Proteins 0.000 description 1
- 208000034951 Genetic Translocation Diseases 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- JZNWSCPGTDBMEW-UHFFFAOYSA-N Glycerophosphorylethanolamin Natural products NCCOP(O)(=O)OCC(O)CO JZNWSCPGTDBMEW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 description 1
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 description 1
- 244000299507 Gossypium hirsutum Species 0.000 description 1
- 102100039619 Granulocyte colony-stimulating factor Human genes 0.000 description 1
- 108010017213 Granulocyte-Macrophage Colony-Stimulating Factor Proteins 0.000 description 1
- 102100039620 Granulocyte-macrophage colony-stimulating factor Human genes 0.000 description 1
- 102100025594 Guided entry of tail-anchored proteins factor CAMLG Human genes 0.000 description 1
- 239000007756 Ham's F12 Nutrient Mixture Substances 0.000 description 1
- 208000002250 Hematologic Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 102100029360 Hematopoietic cell signal transducer Human genes 0.000 description 1
- 102000008949 Histocompatibility Antigens Class I Human genes 0.000 description 1
- 101000864344 Homo sapiens B- and T-lymphocyte attenuator Proteins 0.000 description 1
- 101000884305 Homo sapiens B-cell receptor CD22 Proteins 0.000 description 1
- 101000980825 Homo sapiens B-lymphocyte antigen CD19 Proteins 0.000 description 1
- 101100112778 Homo sapiens CD247 gene Proteins 0.000 description 1
- 101100061678 Homo sapiens CTLA4 gene Proteins 0.000 description 1
- 101000914337 Homo sapiens Carcinoembryonic antigen-related cell adhesion molecule 3 Proteins 0.000 description 1
- 101000934374 Homo sapiens Early activation antigen CD69 Proteins 0.000 description 1
- 101000900690 Homo sapiens GRB2-related adapter protein 2 Proteins 0.000 description 1
- 101000746367 Homo sapiens Granulocyte colony-stimulating factor Proteins 0.000 description 1
- 101000932902 Homo sapiens Guided entry of tail-anchored proteins factor CAMLG Proteins 0.000 description 1
- 101000990188 Homo sapiens Hematopoietic cell signal transducer Proteins 0.000 description 1
- 101001035237 Homo sapiens Integrin alpha-D Proteins 0.000 description 1
- 101001046683 Homo sapiens Integrin alpha-L Proteins 0.000 description 1
- 101001046668 Homo sapiens Integrin alpha-X Proteins 0.000 description 1
- 101001015037 Homo sapiens Integrin beta-7 Proteins 0.000 description 1
- 101001033249 Homo sapiens Interleukin-1 beta Proteins 0.000 description 1
- 101001047640 Homo sapiens Linker for activation of T-cells family member 1 Proteins 0.000 description 1
- 101001090688 Homo sapiens Lymphocyte cytosolic protein 2 Proteins 0.000 description 1
- 101001109503 Homo sapiens NKG2-C type II integral membrane protein Proteins 0.000 description 1
- 101000589305 Homo sapiens Natural cytotoxicity triggering receptor 2 Proteins 0.000 description 1
- 101000873418 Homo sapiens P-selectin glycoprotein ligand 1 Proteins 0.000 description 1
- 101001124867 Homo sapiens Peroxiredoxin-1 Proteins 0.000 description 1
- 101000692259 Homo sapiens Phosphoprotein associated with glycosphingolipid-enriched microdomains 1 Proteins 0.000 description 1
- 101000941994 Homo sapiens Protein cereblon Proteins 0.000 description 1
- 101000702132 Homo sapiens Protein spinster homolog 1 Proteins 0.000 description 1
- 101000633778 Homo sapiens SLAM family member 5 Proteins 0.000 description 1
- 101000633784 Homo sapiens SLAM family member 7 Proteins 0.000 description 1
- 101000633780 Homo sapiens Signaling lymphocytic activation molecule Proteins 0.000 description 1
- 101000914496 Homo sapiens T-cell antigen CD7 Proteins 0.000 description 1
- 101000934346 Homo sapiens T-cell surface antigen CD2 Proteins 0.000 description 1
- 101000946860 Homo sapiens T-cell surface glycoprotein CD3 epsilon chain Proteins 0.000 description 1
- 101000934341 Homo sapiens T-cell surface glycoprotein CD5 Proteins 0.000 description 1
- 101000596234 Homo sapiens T-cell surface protein tactile Proteins 0.000 description 1
- 101000914514 Homo sapiens T-cell-specific surface glycoprotein CD28 Proteins 0.000 description 1
- 101000809875 Homo sapiens TYRO protein tyrosine kinase-binding protein Proteins 0.000 description 1
- 101000648507 Homo sapiens Tumor necrosis factor receptor superfamily member 14 Proteins 0.000 description 1
- 101000801234 Homo sapiens Tumor necrosis factor receptor superfamily member 18 Proteins 0.000 description 1
- 101000679857 Homo sapiens Tumor necrosis factor receptor superfamily member 3 Proteins 0.000 description 1
- 101000851376 Homo sapiens Tumor necrosis factor receptor superfamily member 8 Proteins 0.000 description 1
- 102000003839 Human Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108090000144 Human Proteins Proteins 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical class C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 206010061598 Immunodeficiency Diseases 0.000 description 1
- 208000029462 Immunodeficiency disease Diseases 0.000 description 1
- 101000668058 Infectious salmon anemia virus (isolate Atlantic salmon/Norway/810/9/99) RNA-directed RNA polymerase catalytic subunit Proteins 0.000 description 1
- 102100039904 Integrin alpha-D Human genes 0.000 description 1
- 102100022338 Integrin alpha-M Human genes 0.000 description 1
- 102100022297 Integrin alpha-X Human genes 0.000 description 1
- 108010041100 Integrin alpha6 Proteins 0.000 description 1
- 108010030465 Integrin alpha6beta1 Proteins 0.000 description 1
- 102100033016 Integrin beta-7 Human genes 0.000 description 1
- 238000012695 Interfacial polymerization Methods 0.000 description 1
- 102100039065 Interleukin-1 beta Human genes 0.000 description 1
- 102000010789 Interleukin-2 Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010038453 Interleukin-2 Receptors Proteins 0.000 description 1
- 108090001005 Interleukin-6 Proteins 0.000 description 1
- 241000235649 Kluyveromyces Species 0.000 description 1
- 241000235058 Komagataella pastoris Species 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- 241000481961 Lachancea thermotolerans Species 0.000 description 1
- 241000235651 Lachancea waltii Species 0.000 description 1
- 102100024032 Linker for activation of T-cells family member 1 Human genes 0.000 description 1
- 235000007688 Lycopersicon esculentum Nutrition 0.000 description 1
- 102100034709 Lymphocyte cytosolic protein 2 Human genes 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 1
- 108091054437 MHC class I family Proteins 0.000 description 1
- 239000012515 MabSelect SuRe Substances 0.000 description 1
- 241000282553 Macaca Species 0.000 description 1
- 241000282567 Macaca fascicularis Species 0.000 description 1
- 101001043810 Macaca fascicularis Interleukin-7 receptor subunit alpha Proteins 0.000 description 1
- 239000004907 Macro-emulsion Substances 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- 108010061593 Member 14 Tumor Necrosis Factor Receptors Proteins 0.000 description 1
- 101100044057 Mesocricetus auratus SYCP3 gene Proteins 0.000 description 1
- 102000029749 Microtubule Human genes 0.000 description 1
- 108091022875 Microtubule Proteins 0.000 description 1
- 108010085220 Multiprotein Complexes Proteins 0.000 description 1
- 102000007474 Multiprotein Complexes Human genes 0.000 description 1
- 101100226902 Mus musculus Fcrlb gene Proteins 0.000 description 1
- 101100341510 Mus musculus Itgal gene Proteins 0.000 description 1
- 101100236305 Mus musculus Ly9 gene Proteins 0.000 description 1
- 102100022683 NKG2-C type II integral membrane protein Human genes 0.000 description 1
- 108010004217 Natural Cytotoxicity Triggering Receptor 1 Proteins 0.000 description 1
- 108010004222 Natural Cytotoxicity Triggering Receptor 3 Proteins 0.000 description 1
- 102100032870 Natural cytotoxicity triggering receptor 1 Human genes 0.000 description 1
- 102100032851 Natural cytotoxicity triggering receptor 2 Human genes 0.000 description 1
- 102100032852 Natural cytotoxicity triggering receptor 3 Human genes 0.000 description 1
- 101710141230 Natural killer cell receptor 2B4 Proteins 0.000 description 1
- 229930193140 Neomycin Natural products 0.000 description 1
- 241000221960 Neurospora Species 0.000 description 1
- 241000221961 Neurospora crassa Species 0.000 description 1
- 244000061176 Nicotiana tabacum Species 0.000 description 1
- 235000002637 Nicotiana tabacum Nutrition 0.000 description 1
- 102100034925 P-selectin glycoprotein ligand 1 Human genes 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 206010053869 POEMS syndrome Diseases 0.000 description 1
- 229930040373 Paraformaldehyde Natural products 0.000 description 1
- 201000011152 Pemphigus Diseases 0.000 description 1
- 241000721454 Pemphigus Species 0.000 description 1
- 241000228143 Penicillium Species 0.000 description 1
- 240000007377 Petunia x hybrida Species 0.000 description 1
- 102100026066 Phosphoprotein associated with glycosphingolipid-enriched microdomains 1 Human genes 0.000 description 1
- 229920000805 Polyaspartic acid Polymers 0.000 description 1
- 241000288906 Primates Species 0.000 description 1
- 102100038280 Prostaglandin G/H synthase 2 Human genes 0.000 description 1
- 108050003267 Prostaglandin G/H synthase 2 Proteins 0.000 description 1
- 229940124158 Protease/peptidase inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 102100032783 Protein cereblon Human genes 0.000 description 1
- 239000012980 RPMI-1640 medium Substances 0.000 description 1
- 208000001647 Renal Insufficiency Diseases 0.000 description 1
- 108700008625 Reporter Genes Proteins 0.000 description 1
- 241000283984 Rodentia Species 0.000 description 1
- 102100029216 SLAM family member 5 Human genes 0.000 description 1
- 102100029198 SLAM family member 7 Human genes 0.000 description 1
- 241000235347 Schizosaccharomyces pombe Species 0.000 description 1
- 101100080600 Schizosaccharomyces pombe (strain 972 / ATCC 24843) nse6 gene Proteins 0.000 description 1
- 229920002684 Sepharose Polymers 0.000 description 1
- 108010071390 Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 102000007562 Serum Albumin Human genes 0.000 description 1
- 102000008115 Signaling Lymphocytic Activation Molecule Family Member 1 Human genes 0.000 description 1
- 208000021386 Sjogren Syndrome Diseases 0.000 description 1
- 208000004346 Smoldering Multiple Myeloma Diseases 0.000 description 1
- 240000003768 Solanum lycopersicum Species 0.000 description 1
- 244000061456 Solanum tuberosum Species 0.000 description 1
- 235000002595 Solanum tuberosum Nutrition 0.000 description 1
- 241000133426 Streptomyces zelensis Species 0.000 description 1
- PPBRXRYQALVLMV-UHFFFAOYSA-N Styrene Natural products C=CC1=CC=CC=C1 PPBRXRYQALVLMV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100027208 T-cell antigen CD7 Human genes 0.000 description 1
- 102100025237 T-cell surface antigen CD2 Human genes 0.000 description 1
- 102100035794 T-cell surface glycoprotein CD3 epsilon chain Human genes 0.000 description 1
- 102100037906 T-cell surface glycoprotein CD3 zeta chain Human genes 0.000 description 1
- 102100025244 T-cell surface glycoprotein CD5 Human genes 0.000 description 1
- 102100035268 T-cell surface protein tactile Human genes 0.000 description 1
- 102100027213 T-cell-specific surface glycoprotein CD28 Human genes 0.000 description 1
- 102100038717 TYRO protein tyrosine kinase-binding protein Human genes 0.000 description 1
- 241000255588 Tephritidae Species 0.000 description 1
- 241001149964 Tolypocladium Species 0.000 description 1
- 102000050862 Transmembrane Activator and CAML Interactor Human genes 0.000 description 1
- 108700002109 Transmembrane Activator and CAML Interactor Proteins 0.000 description 1
- HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N Trehalose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N 0.000 description 1
- 241000223259 Trichoderma Species 0.000 description 1
- 108090000704 Tubulin Proteins 0.000 description 1
- 102000004243 Tubulin Human genes 0.000 description 1
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 1
- 102100033728 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 18 Human genes 0.000 description 1
- 102100033733 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 1B Human genes 0.000 description 1
- 101710187830 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 1B Proteins 0.000 description 1
- 102100022156 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 3 Human genes 0.000 description 1
- 102100022153 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 4 Human genes 0.000 description 1
- 101710165473 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 4 Proteins 0.000 description 1
- 102100040245 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 5 Human genes 0.000 description 1
- 102100036857 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 8 Human genes 0.000 description 1
- 244000000188 Vaccinium ovalifolium Species 0.000 description 1
- 241000251539 Vertebrata <Metazoa> Species 0.000 description 1
- 241000235013 Yarrowia Species 0.000 description 1
- 101001038499 Yarrowia lipolytica (strain CLIB 122 / E 150) Lysine acetyltransferase Proteins 0.000 description 1
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 1
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 1
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 1
- KXKVLQRXCPHEJC-UHFFFAOYSA-N acetic acid trimethyl ester Natural products COC(C)=O KXKVLQRXCPHEJC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940009456 adriamycin Drugs 0.000 description 1
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 1
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 1
- 229940100198 alkylating agent Drugs 0.000 description 1
- 239000002168 alkylating agent Substances 0.000 description 1
- 230000029936 alkylation Effects 0.000 description 1
- 238000005804 alkylation reaction Methods 0.000 description 1
- HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N alpha,alpha-trehalose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N 0.000 description 1
- 230000009435 amidation Effects 0.000 description 1
- 238000007112 amidation reaction Methods 0.000 description 1
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 description 1
- 238000012870 ammonium sulfate precipitation Methods 0.000 description 1
- 239000004037 angiogenesis inhibitor Substances 0.000 description 1
- 210000004102 animal cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000003957 anion exchange resin Substances 0.000 description 1
- 150000001450 anions Chemical class 0.000 description 1
- 229940045799 anthracyclines and related substance Drugs 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 230000002424 anti-apoptotic effect Effects 0.000 description 1
- 230000000340 anti-metabolite Effects 0.000 description 1
- 230000000692 anti-sense effect Effects 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- 238000011091 antibody purification Methods 0.000 description 1
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 1
- 239000013059 antihormonal agent Substances 0.000 description 1
- 229940100197 antimetabolite Drugs 0.000 description 1
- 239000002256 antimetabolite Substances 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000004507 artificial chromosome Anatomy 0.000 description 1
- 239000000823 artificial membrane Substances 0.000 description 1
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 description 1
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 description 1
- 235000009582 asparagine Nutrition 0.000 description 1
- 239000012298 atmosphere Substances 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 229960000686 benzalkonium chloride Drugs 0.000 description 1
- UREZNYTWGJKWBI-UHFFFAOYSA-M benzethonium chloride Chemical compound [Cl-].C1=CC(C(C)(C)CC(C)(C)C)=CC=C1OCCOCC[N+](C)(C)CC1=CC=CC=C1 UREZNYTWGJKWBI-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229960001950 benzethonium chloride Drugs 0.000 description 1
- CADWTSSKOVRVJC-UHFFFAOYSA-N benzyl(dimethyl)azanium;chloride Chemical compound [Cl-].C[NH+](C)CC1=CC=CC=C1 CADWTSSKOVRVJC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- 230000001588 bifunctional effect Effects 0.000 description 1
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 230000005540 biological transmission Effects 0.000 description 1
- HUTDDBSSHVOYJR-UHFFFAOYSA-H bis[(2-oxo-1,3,2$l^{5},4$l^{2}-dioxaphosphaplumbetan-2-yl)oxy]lead Chemical compound [Pb+2].[Pb+2].[Pb+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O HUTDDBSSHVOYJR-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 1
- 239000002981 blocking agent Substances 0.000 description 1
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 1
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 1
- 229910052796 boron Inorganic materials 0.000 description 1
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N butyl alcohol Substances CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000484 butyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 229930195731 calicheamicin Natural products 0.000 description 1
- HXCHCVDVKSCDHU-LULTVBGHSA-N calicheamicin Chemical compound C1[C@H](OC)[C@@H](NCC)CO[C@H]1O[C@H]1[C@H](O[C@@H]2C\3=C(NC(=O)OC)C(=O)C[C@](C/3=C/CSSSC)(O)C#C\C=C/C#C2)O[C@H](C)[C@@H](NO[C@@H]2O[C@H](C)[C@@H](SC(=O)C=3C(=C(OC)C(O[C@H]4[C@@H]([C@H](OC)[C@@H](O)[C@H](C)O4)O)=C(I)C=3C)OC)[C@@H](O)C2)[C@@H]1O HXCHCVDVKSCDHU-LULTVBGHSA-N 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 1
- 150000001722 carbon compounds Chemical class 0.000 description 1
- 150000003857 carboxamides Chemical class 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 239000003729 cation exchange resin Substances 0.000 description 1
- 230000025084 cell cycle arrest Effects 0.000 description 1
- 230000011712 cell development Effects 0.000 description 1
- 239000002771 cell marker Substances 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 230000010001 cellular homeostasis Effects 0.000 description 1
- 208000019065 cervical carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 239000002738 chelating agent Substances 0.000 description 1
- 238000007385 chemical modification Methods 0.000 description 1
- 229940124444 chemoprotective agent Drugs 0.000 description 1
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 1
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 description 1
- 238000011098 chromatofocusing Methods 0.000 description 1
- 239000012539 chromatography resin Substances 0.000 description 1
- 108010072917 class-I restricted T cell-associated molecule Proteins 0.000 description 1
- 238000005354 coacervation Methods 0.000 description 1
- 238000004891 communication Methods 0.000 description 1
- 239000000562 conjugate Substances 0.000 description 1
- 239000005289 controlled pore glass Substances 0.000 description 1
- 230000001276 controlling effect Effects 0.000 description 1
- 101150111293 cor-1 gene Proteins 0.000 description 1
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 1
- 239000003246 corticosteroid Substances 0.000 description 1
- 239000006071 cream Substances 0.000 description 1
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 1
- 150000003950 cyclic amides Chemical class 0.000 description 1
- HPXRVTGHNJAIIH-UHFFFAOYSA-N cyclohexanol Chemical compound OC1CCCCC1 HPXRVTGHNJAIIH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000003675 cytokine receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010057085 cytokine receptors Proteins 0.000 description 1
- 230000001086 cytosolic effect Effects 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 229940094732 darzalex Drugs 0.000 description 1
- 238000007405 data analysis Methods 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 238000013461 design Methods 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- 235000019425 dextrin Nutrition 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 1
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 1
- 150000002016 disaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 238000010494 dissociation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000005593 dissociations Effects 0.000 description 1
- 125000002228 disulfide group Chemical group 0.000 description 1
- 239000003534 dna topoisomerase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 239000006196 drop Substances 0.000 description 1
- 238000012377 drug delivery Methods 0.000 description 1
- 230000009977 dual effect Effects 0.000 description 1
- 229960005501 duocarmycin Drugs 0.000 description 1
- VQNATVDKACXKTF-XELLLNAOSA-N duocarmycin Chemical compound COC1=C(OC)C(OC)=C2NC(C(=O)N3C4=CC(=O)C5=C([C@@]64C[C@@H]6C3)C=C(N5)C(=O)OC)=CC2=C1 VQNATVDKACXKTF-XELLLNAOSA-N 0.000 description 1
- 229930184221 duocarmycin Natural products 0.000 description 1
- 238000012869 ethanol precipitation Methods 0.000 description 1
- 229960000752 etoposide phosphate Drugs 0.000 description 1
- LIQODXNTTZAGID-OCBXBXKTSA-N etoposide phosphate Chemical compound COC1=C(OP(O)(O)=O)C(OC)=CC([C@@H]2C3=CC=4OCOC=4C=C3[C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@@H]4O[C@H](C)OC[C@H]4O3)O)[C@@H]3[C@@H]2C(OC3)=O)=C1 LIQODXNTTZAGID-OCBXBXKTSA-N 0.000 description 1
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 1
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 201000006569 extramedullary plasmacytoma Diseases 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 1
- 238000005194 fractionation Methods 0.000 description 1
- 230000006870 function Effects 0.000 description 1
- 125000002541 furyl group Chemical group 0.000 description 1
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 1
- 238000001502 gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 238000001415 gene therapy Methods 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- 229940093915 gynecological organic acid Drugs 0.000 description 1
- 125000001188 haloalkyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000005843 halogen group Chemical group 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 201000005787 hematologic cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000024200 hematopoietic and lymphoid system neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 206010073071 hepatocellular carcinoma Diseases 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000013632 homeostatic process Effects 0.000 description 1
- 229940125697 hormonal agent Drugs 0.000 description 1
- 230000004727 humoral immunity Effects 0.000 description 1
- 229920001477 hydrophilic polymer Polymers 0.000 description 1
- 238000012872 hydroxylapatite chromatography Methods 0.000 description 1
- 229920003063 hydroxymethyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 229940031574 hydroxymethyl cellulose Drugs 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 1
- 230000007813 immunodeficiency Effects 0.000 description 1
- 238000003364 immunohistochemistry Methods 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 230000008595 infiltration Effects 0.000 description 1
- 238000001764 infiltration Methods 0.000 description 1
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 102000006495 integrins Human genes 0.000 description 1
- 108010044426 integrins Proteins 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 238000007917 intracranial administration Methods 0.000 description 1
- 230000002601 intratumoral effect Effects 0.000 description 1
- 238000007914 intraventricular administration Methods 0.000 description 1
- 238000005342 ion exchange Methods 0.000 description 1
- 238000006317 isomerization reaction Methods 0.000 description 1
- 201000006370 kidney failure Diseases 0.000 description 1
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 239000006210 lotion Substances 0.000 description 1
- 210000005265 lung cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000001165 lymph node Anatomy 0.000 description 1
- 201000000564 macroglobulinemia Diseases 0.000 description 1
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 210000001806 memory b lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002184 metal Chemical class 0.000 description 1
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 1
- 239000004292 methyl p-hydroxybenzoate Substances 0.000 description 1
- 235000010270 methyl p-hydroxybenzoate Nutrition 0.000 description 1
- 229960002216 methylparaben Drugs 0.000 description 1
- 239000004530 micro-emulsion Substances 0.000 description 1
- 239000004005 microsphere Substances 0.000 description 1
- 210000004688 microtubule Anatomy 0.000 description 1
- 210000001616 monocyte Anatomy 0.000 description 1
- 150000002772 monosaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 210000004400 mucous membrane Anatomy 0.000 description 1
- AOFBWOWGDIJWCR-UHFFFAOYSA-N n-[2-(2,6-dioxopiperidin-3-yl)-1,3-dioxoisoindol-4-yl]pentanamide Chemical compound O=C1C=2C(NC(=O)CCCC)=CC=CC=2C(=O)N1C1CCC(=O)NC1=O AOFBWOWGDIJWCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QDZOBXFRIVOQBR-LJQANCHMSA-N n-[2-[(1s)-1-(3-ethoxy-4-methoxyphenyl)-2-methylsulfonylethyl]-3-oxo-1h-isoindol-4-yl]cyclopropanecarboxamide Chemical compound C1=C(OC)C(OCC)=CC([C@@H](CS(C)(=O)=O)N2C(C3=C(NC(=O)C4CC4)C=CC=C3C2)=O)=C1 QDZOBXFRIVOQBR-LJQANCHMSA-N 0.000 description 1
- XYXZUBMCEWJOLA-UHFFFAOYSA-N n-[[2-(2,6-dioxopiperidin-3-yl)-1,3-dioxoisoindol-4-yl]methyl]acetamide Chemical compound O=C1C=2C(CNC(=O)C)=CC=CC=2C(=O)N1C1CCC(=O)NC1=O XYXZUBMCEWJOLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UDODWYJNTGKWBS-UHFFFAOYSA-N n-[[2-(2,6-dioxopiperidin-3-yl)-1,3-dioxoisoindol-4-yl]methyl]heptanamide Chemical compound O=C1C=2C(CNC(=O)CCCCCC)=CC=CC=2C(=O)N1C1CCC(=O)NC1=O UDODWYJNTGKWBS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FWELFDXVJGXJIY-UHFFFAOYSA-N n-[[2-(2,6-dioxopiperidin-3-yl)-1,3-dioxoisoindol-4-yl]methyl]propanamide Chemical compound O=C1C=2C(CNC(=O)CC)=CC=CC=2C(=O)N1C1CCC(=O)NC1=O FWELFDXVJGXJIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JFBUADCBCGPBTM-UHFFFAOYSA-N n-[[2-(2,6-dioxopiperidin-3-yl)-1,3-dioxoisoindol-5-yl]methyl]-4-(trifluoromethoxy)benzamide Chemical class C1=CC(OC(F)(F)F)=CC=C1C(=O)NCC1=CC=C(C(=O)N(C2C(NC(=O)CC2)=O)C2=O)C2=C1 JFBUADCBCGPBTM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MVDRVXKBZVFDKB-QFIPXVFZSA-N n-[[2-[(3s)-3-methyl-2,6-dioxopiperidin-3-yl]-1,3-dioxoisoindol-5-yl]methyl]-4-(trifluoromethyl)benzamide Chemical compound O=C1C2=CC=C(CNC(=O)C=3C=CC(=CC=3)C(F)(F)F)C=C2C(=O)N1[C@@]1(C)CCC(=O)NC1=O MVDRVXKBZVFDKB-QFIPXVFZSA-N 0.000 description 1
- 239000002088 nanocapsule Substances 0.000 description 1
- 239000002105 nanoparticle Substances 0.000 description 1
- 239000006199 nebulizer Substances 0.000 description 1
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 1
- 229960004927 neomycin Drugs 0.000 description 1
- 238000007481 next generation sequencing Methods 0.000 description 1
- 229940030115 ninlaro Drugs 0.000 description 1
- 239000012457 nonaqueous media Substances 0.000 description 1
- 239000002736 nonionic surfactant Substances 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- 210000004940 nucleus Anatomy 0.000 description 1
- 239000002674 ointment Substances 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 1
- 201000009234 osteosclerotic myeloma Diseases 0.000 description 1
- 229940043515 other immunoglobulins in atc Drugs 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- LXCFILQKKLGQFO-UHFFFAOYSA-N p-hydroxybenzoic acid methyl ester Natural products COC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 LXCFILQKKLGQFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920002866 paraformaldehyde Polymers 0.000 description 1
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 201000001976 pemphigus vulgaris Diseases 0.000 description 1
- 239000000137 peptide hydrolase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 1
- 210000001322 periplasm Anatomy 0.000 description 1
- 150000002978 peroxides Chemical class 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- 229960003742 phenol Drugs 0.000 description 1
- WVDDGKGOMKODPV-ZQBYOMGUSA-N phenyl(114C)methanol Chemical compound O[14CH2]C1=CC=CC=C1 WVDDGKGOMKODPV-ZQBYOMGUSA-N 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- WTJKGGKOPKCXLL-RRHRGVEJSA-N phosphatidylcholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCCC=CCCCCCCCC WTJKGGKOPKCXLL-RRHRGVEJSA-N 0.000 description 1
- 150000008104 phosphatidylethanolamines Chemical class 0.000 description 1
- SIOXPEMLGUPBBT-UHFFFAOYSA-N picolinic acid Chemical class OC(=O)C1=CC=CC=N1 SIOXPEMLGUPBBT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000006187 pill Substances 0.000 description 1
- 210000003720 plasmablast Anatomy 0.000 description 1
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 1
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 description 1
- 229940063179 platinol Drugs 0.000 description 1
- 230000008488 polyadenylation Effects 0.000 description 1
- 108010064470 polyaspartate Proteins 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 description 1
- 239000001267 polyvinylpyrrolidone Substances 0.000 description 1
- 229920000036 polyvinylpyrrolidone Polymers 0.000 description 1
- 235000013855 polyvinylpyrrolidone Nutrition 0.000 description 1
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 1
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 1
- 230000001124 posttranscriptional effect Effects 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 230000002062 proliferating effect Effects 0.000 description 1
- 235000010232 propyl p-hydroxybenzoate Nutrition 0.000 description 1
- 239000004405 propyl p-hydroxybenzoate Substances 0.000 description 1
- 229960003415 propylparaben Drugs 0.000 description 1
- 230000009993 protective function Effects 0.000 description 1
- 238000000159 protein binding assay Methods 0.000 description 1
- 230000017854 proteolysis Effects 0.000 description 1
- 229950010131 puromycin Drugs 0.000 description 1
- 125000004076 pyridyl group Chemical group 0.000 description 1
- 239000002534 radiation-sensitizing agent Substances 0.000 description 1
- 238000002708 random mutagenesis Methods 0.000 description 1
- 238000010188 recombinant method Methods 0.000 description 1
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 1
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 1
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 1
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 230000001177 retroviral effect Effects 0.000 description 1
- 238000004007 reversed phase HPLC Methods 0.000 description 1
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 1
- 229940120975 revlimid Drugs 0.000 description 1
- 210000000717 sertoli cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 description 1
- 238000002741 site-directed mutagenesis Methods 0.000 description 1
- 238000001542 size-exclusion chromatography Methods 0.000 description 1
- 208000010721 smoldering plasma cell myeloma Diseases 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 description 1
- NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K sodium citrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 238000002415 sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 201000006576 solitary osseous plasmacytoma Diseases 0.000 description 1
- 230000037439 somatic mutation Effects 0.000 description 1
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 1
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- SFVFIFLLYFPGHH-UHFFFAOYSA-M stearalkonium chloride Chemical compound [Cl-].CCCCCCCCCCCCCCCCCC[N+](C)(C)CC1=CC=CC=C1 SFVFIFLLYFPGHH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 238000011476 stem cell transplantation Methods 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 125000005415 substituted alkoxy group Chemical group 0.000 description 1
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000008093 supporting effect Effects 0.000 description 1
- 230000003319 supportive effect Effects 0.000 description 1
- 238000002198 surface plasmon resonance spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 238000004114 suspension culture Methods 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 238000010189 synthetic method Methods 0.000 description 1
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 1
- UMLXMDSGUCNRJE-UHFFFAOYSA-N tert-butyl n-[[2-(2,6-dioxopiperidin-3-yl)-1,3-dioxoisoindol-4-yl]methyl]carbamate Chemical compound O=C1C=2C(CNC(=O)OC(C)(C)C)=CC=CC=2C(=O)N1C1CCC(=O)NC1=O UMLXMDSGUCNRJE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 238000011285 therapeutic regimen Methods 0.000 description 1
- 125000001544 thienyl group Chemical group 0.000 description 1
- DLFVBJFMPXGRIB-UHFFFAOYSA-N thioacetamide Natural products CC(N)=O DLFVBJFMPXGRIB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000003396 thiol group Chemical group [H]S* 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 230000000699 topical effect Effects 0.000 description 1
- 229940044693 topoisomerase inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 239000003053 toxin Substances 0.000 description 1
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 description 1
- 238000010361 transduction Methods 0.000 description 1
- 230000026683 transduction Effects 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 238000013519 translation Methods 0.000 description 1
- 230000014616 translation Effects 0.000 description 1
- 102000035160 transmembrane proteins Human genes 0.000 description 1
- 108091005703 transmembrane proteins Proteins 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005483 tyrosine kinase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 229940121358 tyrosine kinase inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 150000004917 tyrosine kinase inhibitor derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 241000701447 unidentified baculovirus Species 0.000 description 1
- 210000005166 vasculature Anatomy 0.000 description 1
- KAKZBPTYRLMSJV-UHFFFAOYSA-N vinyl-ethylene Natural products C=CC=C KAKZBPTYRLMSJV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000013603 viral vector Substances 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000005253 yeast cell Anatomy 0.000 description 1
Description
1. Список последовательностей1. List of sequences
Изобретение содержит список последовательностей, который был подан в электронном виде в ASCII-формате и, таким образом, полностью включен в настоящее описание посредством ссылки. Указанная копия ASCII, созданная 13 февраля 2019 г., называется 298068-00272_SL.txt и имеет размер 26248 байт.The invention contains a sequence listing that has been filed electronically in ASCII format and is thus incorporated herein by reference in its entirety. The ASCII copy in question, created on February 13, 2019, is called 298068-00272_SL.txt and is 26248 bytes in size.
2. Область техники2. Field of technology
Настоящее изобретение относится к выделенным антителам или их фрагментам, которые связываются с антигеном созревания В-клеток (BCMA), к полинуклеотидам, кодирующим антитела или фрагменты, клеткам-хозяевам, продуцирующим антитела или фрагменты, и к способам применения или лечения с использованием антител или фрагментов.The present invention relates to isolated antibodies or fragments thereof that bind to B-cell maturation antigen (BCMA), polynucleotides encoding the antibodies or fragments, host cells producing the antibodies or fragments, and methods of using or treating using the antibodies or fragments .
3. Уровень техники3. State of the art
BCMA (антиген созревания В-клеток; также именуемый как TNFRSF17 или CD269) представляет собой трансмембранный белок, принадлежащий к суперсемейству рецепторов TNF. BCMA является маркером В-клеток, который важен для развития и гомеостаза В-клеток благодаря своему взаимодействию со своими лигандами BAFF (фактором активации В-клеток из TNF-семейства; также именуемым TALL-1 или TNFSF13B) и APRIL (индуцирующим пролиферацию лигандом).BCMA (B cell maturation antigen; also referred to as TNFRSF17 or CD269) is a transmembrane protein belonging to the TNF receptor superfamily. BCMA is a B cell marker that is important for B cell development and homeostasis through its interaction with its ligands BAFF (B cell activating factor of the TNF family; also called TALL-1 or TNFSF13B) and APRIL (proliferation-inducing ligand).
Известно, что экспрессия BCMA ограничена клонами В-клеток, и белок в основном присутствует на плазматических клетках и плазмобластах, и в некоторой степени на В-клетках памяти, но практически отсутствует на периферических и наивных В-клетках. Вместе с членами своего семейства, белком TACI (трансмембранным активатором и взаимодействующим с циклофилиновым лигандом) и BAFF-R (Рецептором фактора активации В-клеток из семейства TNF), BCMA регулирует различные аспекты гуморального иммунитета, развития В-клеток и гомеостаза.BCMA expression is known to be restricted to B cell lineages, and the protein is primarily present on plasma cells and plasmablasts, and to some extent on memory B cells, but is virtually absent on peripheral and naïve B cells. Together with its family members, TACI (transmembrane activator and cyclophilin ligand-interacting) protein and BAFF-R (B-cell activating factor receptor of the TNF family), BCMA regulates various aspects of humoral immunity, B-cell development and homeostasis.
BCMA также экспрессируется на клетках множественной миеломы (MM). BCMA, по-видимому, поддерживает рост и выживание клеток множественной миеломы (MM). Клеточные линии MM и свежевыделенные клетки MM обычно экспрессируют белки BCMA и TACI на своей клеточной поверхности и имеют вариабельную экспрессию белка BAFF-R на своей клеточной поверхности. Множественная миелома - вторая по частоте гематологическая злокачественная опухоль, составляющая 2% всех случаев смерти от рака. MM является гетерогенным заболеванием и вызывается в основном хромосомными транслокациями, включая t(11;14), t(4;14), t(8;14), del(13) и del(17). Пациенты с MM могут иметь множество связанных с заболеванием симптомов из-за инфильтрации костного мозга, разрушения костей, почечной недостаточности, иммунодефицита и психологического бремени, связанного с онкологическим диагнозом.BCMA is also expressed on multiple myeloma (MM) cells. BCMA appears to support the growth and survival of multiple myeloma (MM) cells. MM cell lines and freshly isolated MM cells typically express BCMA and TACI proteins on their cell surface and have variable expression of BAFF-R protein on their cell surface. Multiple myeloma is the second most common hematologic malignancy, accounting for 2% of all cancer deaths. MM is a heterogeneous disease and is caused primarily by chromosomal translocations, including t(11;14), t(4;14), t(8;14), del(13), and del(17). Patients with MM may have a variety of disease-related symptoms due to bone marrow infiltration, bone destruction, renal failure, immunodeficiency, and the psychological burden associated with a cancer diagnosis.
Современные методы лечения, применяемые для лечения множественной миеломы, обычно не позволяют достичь излечения пациента. Трансплантация стволовых клеток может не подходить для многих пациентов из-за преклонного возраста, наличия других серьезных заболеваний или других физических ограничений. Химиотерапия лишь частично контролирует множественную миелому и редко приводит к полной ремиссии. Таким образом, существует потребность в новых, инновационных методах лечения множественной миеломы и других заболеваний или расстройств, связанных с плазматическими или Вклетками.Current treatments used to treat multiple myeloma usually do not cure the patient. Stem cell transplantation may not be suitable for many patients due to advanced age, other serious illnesses, or other physical limitations. Chemotherapy only partially controls multiple myeloma and rarely leads to complete remission. Thus, there is a need for new, innovative treatments for multiple myeloma and other plasma cell or B cell diseases or disorders.
4. Сущность изобретения4. Essence of the invention
В первом аспекте в настоящем документе предложено антитело, которое связывается с Антигеном созревания В-клеток (BCMA), или его BCMA-связывающий фрагмент, содержащий последовательности CDR1, CDR2 или CDR3 тяжелой цепи: SEQ ID NO: 7, SEQ ID NO: 8 и SEQ ID NO: 9, соответственно; SEQ ID NO: 10, SEQ ID NO: 11 и SEQ ID NO: 12, соответственно; SEQ ID NO: 13, SEQ ID NO: 14 и SEQ ID NO: 15, соответственно; SEQ ID NO: 18, SEQ ID NO: 19 и SEQ ID NO: 20, соответственно; SEQ ID NO: 21, SEQ ID NO: 22 и SEQ ID NO: 23, соответственно; SEQ ID NO: 24, SEQ ID NO: 25 и SEQ ID NO: 26, соответственно; SEQ ID NO: 29, SEQ ID NO: 30 и SEQ ID NO: 31, соответственно; SEQ ID NO: 32, SEQ ID NO: 33 и SEQ ID NO: 34, соответственно; SEQ ID NO: 35, SEQ ID NO: 36 и SEQ ID NO: 37, соответственно; SEQ ID NO: 40, SEQ ID NO: 41 и SEQ ID NO: 42, соответственно; SEQ ID NO: 43, SEQ ID NO: 44 и SEQ ID NO: 45, соответственно; SEQ ID NO: 46, SEQ ID NO: 47 и SEQ ID NO: 48, соответственно; SEQ ID NO: 51, SEQ ID NO: 52 и SEQ ID NO: 53, соответственно; SEQ ID NO: 54, SEQ ID NO: 55 и SEQ ID NO: 56, соответственно; или SEQ ID NO: 57, SEQ ID NO: 58 и SEQ ID NO: 59, соответственно. В конкретном варианте осуществления антитело дополнительно содержит последовательности CDR1, CDR2 или CDR3 легкой цепи SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 3 или SEQ ID NO: 4, соответственно. В другом конкретном варианте осуществления антитело дополнительно содержит последовательности CDR1, CDR2 и CDR3 легкой цепи SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 3 и SEQ ID NO: 4, соответственно.In a first aspect, provided herein is an antibody that binds to B Cell Maturation Antigen (BCMA), or a BCMA-binding fragment thereof, comprising heavy chain CDR1, CDR2, or CDR3 sequences: SEQ ID NO: 7, SEQ ID NO: 8, and SEQ ID NO: 9, respectively; SEQ ID NO: 10, SEQ ID NO: 11 and SEQ ID NO: 12, respectively; SEQ ID NO: 13, SEQ ID NO: 14 and SEQ ID NO: 15, respectively; SEQ ID NO: 18, SEQ ID NO: 19 and SEQ ID NO: 20, respectively; SEQ ID NO: 21, SEQ ID NO: 22 and SEQ ID NO: 23, respectively; SEQ ID NO: 24, SEQ ID NO: 25 and SEQ ID NO: 26, respectively; SEQ ID NO: 29, SEQ ID NO: 30 and SEQ ID NO: 31, respectively; SEQ ID NO: 32, SEQ ID NO: 33 and SEQ ID NO: 34, respectively; SEQ ID NO: 35, SEQ ID NO: 36 and SEQ ID NO: 37, respectively; SEQ ID NO: 40, SEQ ID NO: 41 and SEQ ID NO: 42, respectively; SEQ ID NO: 43, SEQ ID NO: 44 and SEQ ID NO: 45, respectively; SEQ ID NO: 46, SEQ ID NO: 47 and SEQ ID NO: 48, respectively; SEQ ID NO: 51, SEQ ID NO: 52 and SEQ ID NO: 53, respectively; SEQ ID NO: 54, SEQ ID NO: 55 and SEQ ID NO: 56, respectively; or SEQ ID NO: 57, SEQ ID NO: 58 and SEQ ID NO: 59, respectively. In a specific embodiment, the antibody further comprises the light chain CDR1, CDR2, or CDR3 sequences of SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 3, or SEQ ID NO: 4, respectively. In another specific embodiment, the antibody further comprises the light chain CDR1, CDR2 and CDR3 sequences of SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 3 and SEQ ID NO: 4, respectively.
В конкретном варианте осуществления в настоящем документе предложено антитело, которое связывается с BCMA, или его BCMA-связывающий фрагмент, содержащий легкую цепь, содержащую последовательности CDR1, CDR2 или CDR3 SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 3 и SEQ ID NO: 4, соответственно, и последовательности CDR1, CDR2 и CDR3 тяжелой цепи SEQ ID NO: 7, SEQ ID NO: 8 и SEQ ID NO: 9, соответственно; SEQ ID NO: 10, SEQ ID NO: 11 и SEQ ID NO: 12, соответственно; или SEQ ID NO: 13, SEQ ID NO: 14 и SEQ ID NO: 15, соответственно.In a specific embodiment, provided herein is an antibody that binds to BCMA, or a BCMA-binding fragment thereof, comprising a light chain comprising the CDR1, CDR2, or CDR3 sequences of SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 3, and SEQ ID NO: 4 , respectively, and the heavy chain CDR1, CDR2 and CDR3 sequences of SEQ ID NO: 7, SEQ ID NO: 8 and SEQ ID NO: 9, respectively; SEQ ID NO: 10, SEQ ID NO: 11 and SEQ ID NO: 12, respectively; or SEQ ID NO: 13, SEQ ID NO: 14 and SEQ ID NO: 15, respectively.
- 1 044652- 1 044652
В другом конкретном варианте осуществления в настоящем документе предложено антитело, которое связывается с BCMA, или его BCMA-связывающий фрагмент, содержащий легкую цепь, содержащую последовательности CDR1, CDR2 или CDR3 SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 3 и SEQ ID NO: 4, соответственно, и последовательности CDR1, CDR2 и CDR3 тяжелой цепи SEQ ID NO: 18, SEQ ID NO: 19 и SEQ ID NO: 20, соответственно; SEQ ID NO: 21, SEQ ID NO: 22 и SEQ ID NO: 23, соответственно; или SEQ ID NO: 24, SEQ ID NO: 25 и SEQ ID NO: 26, соответственно.In another specific embodiment, provided herein is an antibody that binds to BCMA, or a BCMA-binding fragment thereof, comprising a light chain comprising the sequences CDR1, CDR2 or CDR3 of SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 3 and SEQ ID NO: 4, respectively, and the heavy chain CDR1, CDR2 and CDR3 sequences of SEQ ID NO: 18, SEQ ID NO: 19 and SEQ ID NO: 20, respectively; SEQ ID NO: 21, SEQ ID NO: 22 and SEQ ID NO: 23, respectively; or SEQ ID NO: 24, SEQ ID NO: 25 and SEQ ID NO: 26, respectively.
В другом конкретном варианте осуществления в настоящем документе предложено антитело, которое связывается с BCMA, или его BCMA-связывающий фрагмент, содержащий легкую цепь, содержащую последовательности CDR1, CDR2 или CDR3 SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 3 и SEQ ID NO: 4, соответственно, и последовательности CDR1, CDR2 и CDR3 тяжелой цепи SEQ ID NO: 29, SEQ ID NO: 30 и SEQ ID NO: 31, соответственно; SEQ ID NO: 32, SEQ ID NO: 33 и SEQ ID NO: 34, соответственно; или SEQ ID NO: 35, SEQ ID NO: 36 и SEQ ID NO: 37, соответственно.In another specific embodiment, provided herein is an antibody that binds to BCMA, or a BCMA-binding fragment thereof, comprising a light chain comprising the sequences CDR1, CDR2 or CDR3 of SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 3 and SEQ ID NO: 4, respectively, and the heavy chain CDR1, CDR2 and CDR3 sequences of SEQ ID NO: 29, SEQ ID NO: 30 and SEQ ID NO: 31, respectively; SEQ ID NO: 32, SEQ ID NO: 33 and SEQ ID NO: 34, respectively; or SEQ ID NO: 35, SEQ ID NO: 36 and SEQ ID NO: 37, respectively.
В другом конкретном варианте осуществления в настоящем документе предложено антитело, которое связывается с BCMA, или его BCMA-связывающий фрагмент, содержащий легкую цепь, содержащую последовательности CDR1, CDR2 или CDR3 SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 3 и SEQ ID NO: 4, соответственно, и последовательности CDR1, CDR2 и CDR3 тяжелой цепи SEQ ID NO: 40, SEQ ID NO: 41 и SEQ ID NO: 42, соответственно; SEQ ID NO: 43, SEQ ID NO: 44 и SEQ ID NO: 45, соответственно; или SEQ ID NO: 46, SEQ ID NO: 47 и SEQ ID NO: 48, соответственно.In another specific embodiment, provided herein is an antibody that binds to BCMA, or a BCMA-binding fragment thereof, comprising a light chain comprising the sequences CDR1, CDR2 or CDR3 of SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 3 and SEQ ID NO: 4, respectively, and the heavy chain CDR1, CDR2 and CDR3 sequences of SEQ ID NO: 40, SEQ ID NO: 41 and SEQ ID NO: 42, respectively; SEQ ID NO: 43, SEQ ID NO: 44 and SEQ ID NO: 45, respectively; or SEQ ID NO: 46, SEQ ID NO: 47 and SEQ ID NO: 48, respectively.
В другом конкретном варианте осуществления в настоящем документе предложено антитело, которое связывается с BCMA, или его BCMA-связывающий фрагмент, содержащий легкую цепь, содержащую последовательности CDR1, CDR2 или CDR3 SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 3 и SEQ ID NO: 4, соответственно, и последовательности CDR1, CDR2 и CDR3 тяжелой цепи SEQ ID NO: 51, SEQ ID NO: 52 и SEQ ID NO: 53, соответственно; SEQ ID NO: 54, SEQ ID NO: 55 и SEQ ID NO: 56, соответственно; или SEQ ID NO: 57, SEQ ID NO: 58 и SEQ ID NO: 59, соответственно.In another specific embodiment, provided herein is an antibody that binds to BCMA, or a BCMA-binding fragment thereof, comprising a light chain comprising the sequences CDR1, CDR2 or CDR3 of SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 3 and SEQ ID NO: 4, respectively, and the heavy chain CDR1, CDR2 and CDR3 sequences of SEQ ID NO: 51, SEQ ID NO: 52 and SEQ ID NO: 53, respectively; SEQ ID NO: 54, SEQ ID NO: 55 and SEQ ID NO: 56, respectively; or SEQ ID NO: 57, SEQ ID NO: 58 and SEQ ID NO: 59, respectively.
В другом более конкретном варианте осуществления любого из вышеуказанных антител или их BCMA-связывающих фрагментов, антитело или его BCMA-связывающий фрагмент содержит аминокислотную последовательность вариабельного домена легкой цепи по меньшей мере на 80, по меньшей мере на 85, по меньшей мере на 90, по меньшей мере на 95, по меньшей мере на 96%, по меньшей мере не 97, по меньшей мере на 98, по меньшей мере на 99 или на 100% идентичную SEQ ID NO: 1, и аминокислотную последовательность вариабельного домена тяжелой цепи по меньшей мере на 80, по меньшей мере на 85, по меньшей мере на 90, по меньшей мере на 95, по меньшей мере на 96, по меньшей мере на 97, по меньшей мере на 98, по меньшей мере на 99 или на 100% идентичную SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 17, SEQ ID NO: 28, SEQ ID NO: 39 или SEQ ID NO: 50.In another more specific embodiment of any of the above antibodies or BCMA-binding fragments thereof, the antibody or BCMA-binding fragment thereof comprises at least 80%, at least 85%, at least 90% of the light chain variable domain amino acid sequence. at least 95%, at least 96% identical, at least not 97% identical, at least 98% identical, at least 99% identical, or 100% identical to SEQ ID NO: 1, and the amino acid sequence of the heavy chain variable domain is at least 80, at least 85, at least 90, at least 95, at least 96, at least 97, at least 98, at least 99, or 100% identical to SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 17, SEQ ID NO: 28, SEQ ID NO: 39 or SEQ ID NO: 50.
В более конкретном варианте осуществления любого из вышеуказанных антител или их BCMAсвязывающих фрагментов, антитело или его BCMA-связывающий фрагмент содержит аминокислотную последовательность вариабельного домена легкой цепи SEQ ID NO: 1 или аминокислотную последовательность вариабельного домена легкой цепи по меньшей мере на 80, по меньшей мере на 85, по меньшей мере на 90, по меньшей мере на 95, по меньшей мере на 96, по меньшей мере на 97, по меньшей мере на 98 или по меньшей мере на 99% идентичную SEQ ID NO: 1. В другом более конкретном варианте осуществления любого из вышеуказанных антител или их BCMA-связывающих фрагментов это антитело или его BCMA-связывающий фрагмент содержат аминокислотную последовательность вариабельного домена тяжелой цепи SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 17, SEQ ID NO: 28, SEQ ID NO: 39 или SEQ ID NO: 50, или аминокислотную последовательность вариабельного домена тяжелой цепи по меньшей мере на 80, по меньшей мере на 85, по меньшей мере на 90, по меньшей мере на 95, по меньшей мере на 96, по меньшей мере на 97, по меньшей мере на 98 или по меньшей мере на 99% идентичную SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 18, SEQ ID NO: 28, SEQ ID NO: 39 или SEQ ID NO: 50. В другом более конкретном варианте осуществления любого из вышеуказанных антител или их BCMA-связывающих фрагментов антитело или его BCMA-связывающий фрагмент содержит аминокислотную последовательность вариабельного домена легкой цепи по меньшей мере на 80, по меньшей мере на 85, по меньшей мере на 90, по меньшей мере на 95, по меньшей мере на 96, по меньшей мере на 97, по меньшей мере на 98, по меньшей мере на 99 или на 100% идентичную SEQ ID NO: 1, и аминокислотную последовательность вариабельного домена тяжелой цепи по меньшей мере на 80, при по меньшей мере на 85, по меньшей мере на 90, по меньшей мере на 95, по меньшей мере на 96, по меньшей мере на 97, по меньшей мере на 98, по меньшей мере на 99 или на 100% идентичную SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 17, SEQ ID NO: 28, SEQ ID NO: 39 или SEQ ID NO: 50.In a more specific embodiment of any of the above antibodies or BCMA binding fragments thereof, the antibody or BCMA binding fragment thereof comprises a light chain variable domain amino acid sequence of SEQ ID NO: 1 or a light chain variable domain amino acid sequence of at least 80, 85, at least 90, at least 95, at least 96, at least 97, at least 98, or at least 99% identical to SEQ ID NO: 1. In another more specific embodiment implementation of any of the above antibodies or BCMA-binding fragments thereof, this antibody or BCMA-binding fragment thereof contains the amino acid sequence of the heavy chain variable domain of SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 17, SEQ ID NO: 28, SEQ ID NO: 39 or SEQ ID NO: 50, or the amino acid sequence of the heavy chain variable domain of at least 80, at least 85, at least 90, at least 95, at least 96, at least 97, according to at least 98% or at least 99% identical to SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 18, SEQ ID NO: 28, SEQ ID NO: 39, or SEQ ID NO: 50. In another more specific embodiment, any of of the above antibodies or BCMA-binding fragments thereof, the antibody or BCMA-binding fragment thereof contains the amino acid sequence of the light chain variable domain at least 80, at least 85, at least 90, at least 95, at least 96, at least 97, at least 98, at least 99, or 100% identical to SEQ ID NO: 1, and the amino acid sequence of the heavy chain variable domain at least 80, at least 85, at least 90, at least 95, at least 96, at least 97, at least 98, at least 99 or 100% identical to SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 17, SEQ ID NO: 28, SEQ ID NO: 39 or SEQ ID NO: 50.
В более конкретном варианте осуществления любого из вышеуказанных антител или их BCMAсвязывающих фрагментов, антитело или его BCMA-связывающий фрагмент содержит аминокислотную последовательность вариабельного домена легкой цепи, которая содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 3 и SEQ ID NO: 4, и является по меньшей мере на 80, по меньшей мере на 85, по меньшей мере на 90, по меньшей мере на 95, по меньшей мере на 96, по меньшей мере на 97, по меньшей мере на 98 или по меньшей мере на 99% идентичной SEQ ID NO: 1. В других более конкретных вариантах осуществления любого из вышеуказанных антител или их BCMA-связывающихIn a more specific embodiment of any of the above antibodies or BCMA binding fragments thereof, the antibody or BCMA binding fragment thereof comprises a light chain variable domain amino acid sequence that comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 3 and SEQ ID NO: 4 , and is at least 80, at least 85, at least 90, at least 95, at least 96, at least 97, at least 98 or at least 99 % identical to SEQ ID NO: 1. In other more specific embodiments, any of the above antibodies or BCMA-binding antibodies thereof
- 2 044652 фрагментов антитело или его BCMA-связывающий фрагмент содержит аминокислотную последовательность вариабельного домена тяжелой цепи SEQ ID NO: 7-9, 10-12 или 13-15 и являются по меньшей мере на 80, по меньшей мере на 85, по меньшей мере на 90, по меньшей мере на 95, по меньшей мере на 96, по меньшей мере на 97, по меньшей мере на 98 или по меньшей мере на 99% идентичными SEQ ID NO: 6; антитело или его BCMA-связывающий фрагмент содержит аминокислотную последовательность вариабельного домена тяжелой цепи SEQ ID NO: 18-20, 21-23 или 24-26 и являются по меньшей мере на 85, по меньшей мере на 90, по меньшей мере на 95, по меньшей мере на 96, по меньшей мере на 97, по меньшей мере на 98 или по меньшей мере на 99%, идентичными SEQ ID NO: 17; антитело или его BCMAсвязывающий фрагмент содержит аминокислотную последовательность вариабельного домена тяжелой цепи SEQ ID NO: 29-31, 32-34 или 35-37 и являются по меньшей мере на 80, по меньшей мере на 85, по меньшей мере на 90 по меньшей мере на 95, по меньшей мере на 96, по меньшей мере на 97, по меньшей мере на 98 или по меньшей мере на 99% идентичными SEQ ID NO: 28; антитело или его BCMAсвязывающий фрагмент содержит аминокислотную последовательность вариабельного домена тяжелой цепи SEQ ID NO: 40-42, 43-45 или 46-48 и являются по меньшей мере на 80, по меньшей мере на 85, по меньшей мере на 90, по меньшей мере на 95, по меньшей мере на 96, по меньшей мере на 97, по меньшей мере на 98 или по меньшей мере на 99% идентичными SEQ ID NO: 39; антитело или его BCMAсвязывающий фрагмент содержит аминокислотную последовательность вариабельного домена тяжелой цепи SEQ ID NO: 51-53, 54-56 или 57-59 и являются по меньшей мере на 80, по меньшей мере на 85, по меньшей мере на 90, по меньшей мере на 95, по меньшей мере на 96, по меньшей мере на 97, по меньшей мере на 98 или по меньшей мере на 99% идентичными SEQ ID NO: 50.- 2 044652 fragments of an antibody or a BCMA-binding fragment thereof contains the amino acid sequence of the heavy chain variable domain of SEQ ID NO: 7-9, 10-12 or 13-15 and is at least 80, at least 85, at least 90, at least 95, at least 96, at least 97, at least 98, or at least 99% identical to SEQ ID NO: 6; the antibody or BCMA-binding fragment thereof contains the amino acid sequence of the heavy chain variable domain of SEQ ID NO: 18-20, 21-23 or 24-26 and is at least 85, at least 90, at least 95, according to at least 96, at least 97, at least 98, or at least 99% identical to SEQ ID NO: 17; the antibody or BCMA binding fragment thereof contains the amino acid sequence of the heavy chain variable domain of SEQ ID NO: 29-31, 32-34 or 35-37 and is at least 80, at least 85, at least 90 at least 95, at least 96, at least 97, at least 98, or at least 99% identical to SEQ ID NO: 28; the antibody or BCMA binding fragment thereof contains the amino acid sequence of the heavy chain variable domain of SEQ ID NO: 40-42, 43-45 or 46-48 and is at least 80, at least 85, at least 90, at least 95, at least 96, at least 97, at least 98, or at least 99% identical to SEQ ID NO: 39; the antibody or BCMA binding fragment thereof contains the amino acid sequence of the heavy chain variable domain of SEQ ID NO: 51-53, 54-56 or 57-59 and is at least 80, at least 85, at least 90, at least 95, at least 96, at least 97, at least 98, or at least 99% identical to SEQ ID NO: 50.
В конкретных вариантах осуществления любого из антител против BCMA или их BCMAсвязывающих фрагментов, предложенных в настоящем документе, антитело представляет собой моноклональное антитело, химерное антитело, диантитело, Fab-фрагмент, Fab'-фрагмент или F(ab')=-фрагент, Fv, биспецифичное антитело, биспецифичный Fab2, биспецифичный (mab)2, гуманизированное антитело, искусственно созданное человеческое антитело, биспецифичный активатор Т-клеток, биспецифичный активатор NK-клеток, одноцепочечное антитело (например, одноцепочечный Fv-фрагмент или scFv), Triomab, вариант IgG выступ и впадина (kih) с общей легкой цепью, антитела на платформе CrossMAb, орто-Fab IgG, DVD-Ig, 2 в 1-IgG, IgG-scFv, sdFv2-Fc, би-нанотело, TandAb, антитело на платформе с перепрограммируемой направленностью и двойной аффинностью (DART-платформе), DART-Fc, scFvHSA-scFv (где HSA представляет собой сывороточный альбумин человека) или антитело с запирающим связыванием (dock-and-lock) (DNL)-Fab3. В другом конкретном варианте осуществления любого из антител против BCMA или их BCMA-связывающих фрагментов, предложенных в настоящем документе, указанное антитело или фрагмент представляет собой конъюгат антитела с лекарственным средством.In specific embodiments of any of the anti-BCMA antibodies or BCMA-binding fragments thereof provided herein, the antibody is a monoclonal antibody, a chimeric antibody, a diantibody, a Fab fragment, a Fab' fragment, or an F(ab')=fragent, Fv, bispecific antibody, bispecific Fab 2 , bispecific (mab) 2 , humanized antibody, engineered human antibody, bispecific T cell activator, bispecific NK cell activator, single chain antibody (eg, single chain Fv fragment or scFv), Triomab, IgG variant ridge and valley (kih) with common light chain, CrossMAb platform antibodies, ortho-Fab IgG, DVD-Ig, 2 in 1-IgG, IgG-scFv, sdFv2-Fc, bi-nanobody, TandAb, reprogrammable platform antibody targeting and dual affinity (DART platform), DART-Fc, scFvHSA-scFv (where HSA is human serum albumin) or dock-and-lock antibody (DNL)-Fab3. In another specific embodiment of any of the anti-BCMA antibodies or BCMA-binding fragments thereof provided herein, the antibody or fragment is an antibody-drug conjugate.
В другом аспекте в настоящем документе предложен полипептид, который содержит последовательности CDR1, CDR2 или CDR3 тяжелой цепи SEQ ID NO: 7, SEQ ID NO: 8 и SEQ ID NO: 9, соответственно; SEQ ID NO: 10, SEQ ID NO: 11 и SEQ ID NO: 12, соответственно; SEQ ID NO: 13, SEQ ID NO: 14 и SEQ ID NO: 15, соответственно; SEQ ID NO: 18, SEQ ID NO: 19 и SEQ ID NO: 20, соответственно; SEQ ID NO: 21, SEQ ID NO: 22 и SEQ ID NO: 23, соответственно; SEQ ID NO: 24, SEQ ID NO: 25 и SEQ ID NO: 26, соответственно; SEQ ID NO: 29, SEQ ID NO: 30 и SEQ ID NO: 31, соответственно; SEQ ID NO: 32, SEQ ID NO: 33 и SEQ ID NO: 34, соответственно; SEQ ID NO: 35, SEQ ID NO: 36 и SEQ ID NO: 37, соответственно; SEQ ID NO: 40, SEQ ID NO: 41 и SEQ ID NO: 42, соответственно; SEQ ID NO: 43, SEQ ID NO: 44 и SEQ ID NO: 45, соответственно; SEQ ID NO: 46, SEQ ID NO: 47 и SEQ ID NO: 48, соответственно; SEQ ID NO: 51, SEQ ID NO: 52 и SEQ ID NO: 53, соответственно; SEQ ID NO: 54, SEQ ID NO: 55 и SEQ ID NO: 56, соответственно; или SEQ ID NO: 57, SEQ ID NO: 58 и SEQ ID NO: 59, соответственно. В другом варианте осуществления в настоящем документе предложен полипептид, который содержит последовательности CDR1, CDR2 и CDR3 легкой цепи SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 3 и SEQ ID NO: 4, соответственно. В конкретном варианте осуществления любого из полипептидов, предложенных в настоящем документе, полипептид дополнительно содержит последовательности CDR1, CDR2 или CDR3 легкой цепи SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 3 или SEQ ID NO: 4, соответственно. В конкретном варианте осуществления любого из полипептидов, предложенных в настоящем документе, полипептид дополнительно содержит последовательности CDR1, CDR2 или CDR3 легкой цепи SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 3 и SEQ ID NO: 4, соответственно. Кроме того, в настоящем документе предложен полипептид, который содержит вариабельную последовательность легкой цепи SEQ ID NO: 1. Кроме того, в настоящем документе предложен полипептид, который содержит вариабельную последовательность тяжелой цепи SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 17, SEQ ID NO: 28, SEQ ID NO: 39 или SEQ ID NO: 50.In another aspect, provided herein is a polypeptide that comprises the heavy chain CDR1, CDR2, or CDR3 sequences of SEQ ID NO: 7, SEQ ID NO: 8, and SEQ ID NO: 9, respectively; SEQ ID NO: 10, SEQ ID NO: 11 and SEQ ID NO: 12, respectively; SEQ ID NO: 13, SEQ ID NO: 14 and SEQ ID NO: 15, respectively; SEQ ID NO: 18, SEQ ID NO: 19 and SEQ ID NO: 20, respectively; SEQ ID NO: 21, SEQ ID NO: 22 and SEQ ID NO: 23, respectively; SEQ ID NO: 24, SEQ ID NO: 25 and SEQ ID NO: 26, respectively; SEQ ID NO: 29, SEQ ID NO: 30 and SEQ ID NO: 31, respectively; SEQ ID NO: 32, SEQ ID NO: 33 and SEQ ID NO: 34, respectively; SEQ ID NO: 35, SEQ ID NO: 36 and SEQ ID NO: 37, respectively; SEQ ID NO: 40, SEQ ID NO: 41 and SEQ ID NO: 42, respectively; SEQ ID NO: 43, SEQ ID NO: 44 and SEQ ID NO: 45, respectively; SEQ ID NO: 46, SEQ ID NO: 47 and SEQ ID NO: 48, respectively; SEQ ID NO: 51, SEQ ID NO: 52 and SEQ ID NO: 53, respectively; SEQ ID NO: 54, SEQ ID NO: 55 and SEQ ID NO: 56, respectively; or SEQ ID NO: 57, SEQ ID NO: 58 and SEQ ID NO: 59, respectively. In another embodiment, provided herein is a polypeptide that contains the light chain sequences CDR1, CDR2, and CDR3 of SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 3, and SEQ ID NO: 4, respectively. In a specific embodiment of any of the polypeptides provided herein, the polypeptide further comprises the light chain CDR1, CDR2, or CDR3 sequences of SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 3, or SEQ ID NO: 4, respectively. In a specific embodiment of any of the polypeptides provided herein, the polypeptide further comprises the light chain sequences CDR1, CDR2, or CDR3 of SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 3, and SEQ ID NO: 4, respectively. Further provided herein is a polypeptide that contains a light chain variable sequence of SEQ ID NO: 1. Further provided herein is a polypeptide that contains a heavy chain variable sequence of SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 17, SEQ ID NO: 28, SEQ ID NO: 39 or SEQ ID NO: 50.
В другом аспекте в настоящем документе предложена композиция, содержащая любое из антител, их связывающих фрагментов или полипептидов, предложенных в настоящем документе. В конкретном варианте осуществления композиция представляет собой фармацевтическую композицию. В других конкретных вариантах осуществления композиция составлена для внутривенной, внутриартериальной, внутримышечной, внутрикожной, подкожной, интрадуральной, интратекальной или внутрибрюшинной доставки.In another aspect, provided herein is a composition comprising any of the antibodies, binding fragments thereof, or polypeptides provided herein. In a specific embodiment, the composition is a pharmaceutical composition. In other specific embodiments, the composition is formulated for intravenous, intraarterial, intramuscular, intradermal, subcutaneous, intradural, intrathecal, or intraperitoneal delivery.
В другом аспекте в настоящем документе предложены полинуклеотиды, кодирующие любые из анIn another aspect, provided herein are polynucleotides encoding any of
- 3 044652 тител, фрагментов антител или полипептидов, предложенных в настоящем документе. В одном варианте осуществления в настоящем документе предложен полинуклеотид, кодирующий антитело против BCMA, BCMA-связывающий фрагмент антитела или полипептид, содержащие последовательности CDR1, CDR2 или CDR3 тяжелой цепи SEQ ID NO: 7, SEQ ID NO: 8 и SEQ ID NO: 9, соответственно; SEQ ID NO: 10, SEQ ID NO: 11 и SEQ ID NO: 12, соответственно; SEQ ID NO: 13, SEQ ID NO: 14 и SEQ ID NO: 15, соответственно; SEQ ID NO: 18, SEQ ID NO: 19 и SEQ ID NO: 20, соответственно; SEQ ID NO: 21, SEQ ID NO: 22 и SEQ ID NO: 23, соответственно; SEQ ID NO: 24, SEQ ID NO: 25 и SEQ ID NO: 26, соответственно; SEQ ID NO: 29, SEQ ID NO: 30 и SEQ ID NO: 31, соответственно; SEQ ID NO: 32, SEQ ID NO: 33 и SEQ ID NO: 34, соответственно; SEQ ID NO: 35, SEQ ID NO: 36 и SEQ ID NO: 37, соответственно; SEQ ID NO: 40, SEQ ID NO: 41 и SEQ ID NO: 42, соответственно; SEQ ID NO: 43, SEQ ID NO: 44 и SEQ ID NO: 45, соответственно; SEQ ID NO: 46, SEQ ID NO: 47 и SEQ ID NO: 48, соответственно; SEQ ID NO: 51, SEQ ID NO: 52 и SEQ ID NO: 53, соответственно; SEQ ID NO: 54, SEQ ID NO: 55 и SEQ ID NO: 56, соответственно; или SEQ ID NO: 57, SEQ ID NO: 58 и SEQ ID NO: 59, соответственно. В более конкретном варианте осуществления любого из полинуклеотидов, предложенных в данном документе, полинуклеотид содержит нуклеотидную последовательность SEQ ID NO: 5, SEQ ID NO: 16, SEQ ID NO: 27, SEQ ID NO: 38, SEQ ID NO: 49 или SEQ ID NO: 60. В другом варианте осуществления в настоящем документе предложен полинуклеотид, кодирующий антитело против BCMA, фрагмент связывающего BCMA антитела или полипептид, содержащие последовательности CDR1, CDR2 или CDR3 легкой цепи SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 3 и SEQ ID NO: 4, соответственно. В другом варианте осуществления в настоящем документе предложен полинуклеотид, который кодирует антитело против BCMA, BCMA-связывающий фрагмент антитела или полипептид, содержащие вариабельную последовательность легкой цепи SEQ ID NO: 1. В другом варианте осуществления в настоящем документе предложен полинуклеотид, который кодирует антитело против BCMA, BCMA-связывающий фрагмент антитела или полипептид, содержащие вариабельную последовательность тяжелой цепи SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 17, SEQ ID NO: 28, SEQ ID NO: 39 или SEQ ID NO: 50. В конкретном варианте осуществления в настоящем документе предложен полинуклеотид, который кодирует антитело против BCMA, BCMAсвязывающий фрагмент антитела или полипептид, содержащие вариабельную последовательность легкой цепи SEQ ID NO: 1 и вариабельную последовательность тяжелой цепи SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 17, SEQ ID NO: 28, SEQ ID NO: 39 или SEQ ID NO: 50.- 3 044652 antibodies, antibody fragments or polypeptides proposed herein. In one embodiment, provided herein is a polynucleotide encoding an anti-BCMA antibody, a BCMA-binding antibody fragment, or a polypeptide comprising the heavy chain CDR1, CDR2, or CDR3 sequences of SEQ ID NO: 7, SEQ ID NO: 8, and SEQ ID NO: 9. respectively; SEQ ID NO: 10, SEQ ID NO: 11 and SEQ ID NO: 12, respectively; SEQ ID NO: 13, SEQ ID NO: 14 and SEQ ID NO: 15, respectively; SEQ ID NO: 18, SEQ ID NO: 19 and SEQ ID NO: 20, respectively; SEQ ID NO: 21, SEQ ID NO: 22 and SEQ ID NO: 23, respectively; SEQ ID NO: 24, SEQ ID NO: 25 and SEQ ID NO: 26, respectively; SEQ ID NO: 29, SEQ ID NO: 30 and SEQ ID NO: 31, respectively; SEQ ID NO: 32, SEQ ID NO: 33 and SEQ ID NO: 34, respectively; SEQ ID NO: 35, SEQ ID NO: 36 and SEQ ID NO: 37, respectively; SEQ ID NO: 40, SEQ ID NO: 41 and SEQ ID NO: 42, respectively; SEQ ID NO: 43, SEQ ID NO: 44 and SEQ ID NO: 45, respectively; SEQ ID NO: 46, SEQ ID NO: 47 and SEQ ID NO: 48, respectively; SEQ ID NO: 51, SEQ ID NO: 52 and SEQ ID NO: 53, respectively; SEQ ID NO: 54, SEQ ID NO: 55 and SEQ ID NO: 56, respectively; or SEQ ID NO: 57, SEQ ID NO: 58 and SEQ ID NO: 59, respectively. In a more specific embodiment of any of the polynucleotides provided herein, the polynucleotide comprises the nucleotide sequence of SEQ ID NO: 5, SEQ ID NO: 16, SEQ ID NO: 27, SEQ ID NO: 38, SEQ ID NO: 49, or SEQ ID NO: 60. In another embodiment, provided herein is a polynucleotide encoding an anti-BCMA antibody, a fragment of a BCMA binding antibody, or a polypeptide comprising the light chain CDR1, CDR2, or CDR3 sequences of SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 3, and SEQ ID NO : 4, respectively. In another embodiment, provided herein is a polynucleotide that encodes an anti-BCMA antibody, a BCMA-binding antibody fragment, or a polypeptide comprising a light chain variable sequence of SEQ ID NO: 1. In another embodiment, provided herein is a polynucleotide that encodes an anti-BCMA antibody , a BCMA-binding antibody fragment or polypeptide comprising a heavy chain variable sequence of SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 17, SEQ ID NO: 28, SEQ ID NO: 39, or SEQ ID NO: 50. In a particular embodiment herein The document provides a polynucleotide that encodes an anti-BCMA antibody, a BCMA-binding antibody fragment or a polypeptide containing a light chain variable sequence of SEQ ID NO: 1 and a heavy chain variable sequence of SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 17, SEQ ID NO: 28, SEQ ID NO: 39 or SEQ ID NO: 50.
В другом аспекте в настоящем документе предложены полинуклеотидные векторы, содержащие полинуклеотиды, предложенные в настоящем документе. В конкретном варианте осуществления вектор представляет собой экспрессионный вектор. В другом конкретном варианте осуществления вектор представляет собой ретровирусный вектор или лентивирусный вектор.In another aspect, provided herein are polynucleotide vectors comprising the polynucleotides provided herein. In a specific embodiment, the vector is an expression vector. In another specific embodiment, the vector is a retroviral vector or a lentiviral vector.
В другом аспекте в настоящем документе предложена клетка, содержащая любой из полинуклеотидов, предложенных в настоящем документе, или экспрессирующая любое из антител против BCMA, их BCMA-связывающие фрагменты или полипептиды, предложенные в настоящем документе. В конкретном варианте осуществления клетка содержит любой из векторов, предложенных в данном документе.In another aspect, provided herein is a cell comprising any of the polynucleotides provided herein or expressing any of the anti-BCMA antibodies, BCMA-binding fragments thereof, or polypeptides provided herein. In a specific embodiment, the cell contains any of the vectors provided herein.
В другом аспекте в настоящем документе предложен способ получения полипептида, включающий в себя инициацию в любой из клеток, предложенных в настоящем документе, экспрессии полинуклеотида, предложенного в настоящем документе, вследствие которой продуцируется указанный полипептид; и выделение указанного полипептида. Кроме того, в настоящем документе предложен способ получения антитела против BCMA или его BCMA-связывающего фрагмента, включающий в себя инициацию в любой из клеток, предложенных в настоящем документе, экспрессии полинуклеотида, предложенного в настоящем документе, вследствие которой продуцируется указанное антитело или его фрагмент; и выделение указанного антитела или его фрагмента.In another aspect, provided herein is a method for producing a polypeptide, comprising causing, in any of the cells provided herein, expression of a polynucleotide provided herein thereby producing said polypeptide; and isolating said polypeptide. In addition, provided herein is a method of producing an anti-BCMA antibody or a BCMA-binding fragment thereof, comprising inducing in any of the cells provided herein expression of a polynucleotide provided herein, thereby producing said antibody or fragment thereof; and isolating said antibody or fragment thereof.
В другом аспекте, в настоящем документе предложен способ истощения экспрессирующих BCMA клеток у пациента, нуждающегося в этом, включающий введение пациенту терапевтически эффективного количества любого из антител против BCMA, их BCMA-связывающего фрагмента или полипептидов, предложенных в данном документе. Кроме того, в настоящем документе предложен способ истощения экспрессирующих BCMA клеток у пациента, нуждающегося в этом, включающий в себя введение пациенту терапевтически эффективного количества любого из антител против BCMA, их BCMAсвязывающего фрагмента или полипептидов, предложенных в настоящем документе. Кроме того, в настоящем документе предложен способ лечения заболевания, вызванного экспрессирующими BCMA клетками, например экспрессирующими BCMA плазматическими клетками, у пациента, нуждающегося в этом, включающий в себя введение пациенту терапевтически эффективного количества антител против BCMA, их BCMA-связывающего фрагмента или полипептидов, предложенных в настоящем документе. Кроме того, в настоящем документе предложен способ лечения связанного с В-клетками заболевания, ассоциированного с экспрессией BCMA, у пациента, нуждающегося в этом, включающий в себя введение пациенту терапевтически эффективного количества любого из антител против BCMA, их BCMAсвязывающего фрагмента или полипептидов, предложенных в настоящем документе. В конкретных вариантах осуществления изобретения связанное с В-клетками заболевание представляет собой множественную миелому, плазмоцитому, лимфому Ходжкина, неходжкинскую лимфому, фолликулярную лимIn another aspect, provided herein is a method of depleting BCMA-expressing cells in a patient in need thereof, comprising administering to the patient a therapeutically effective amount of any of the anti-BCMA antibodies, a BCMA-binding fragment thereof, or polypeptides provided herein. Further provided herein is a method of depleting BCMA expressing cells in a patient in need thereof, comprising administering to the patient a therapeutically effective amount of any of the anti-BCMA antibodies, a BCMA binding fragment thereof, or polypeptides provided herein. Further provided herein is a method of treating a disease caused by BCMA-expressing cells, such as BCMA-expressing plasma cells, in a patient in need thereof, comprising administering to the patient a therapeutically effective amount of an anti-BCMA antibody, a BCMA-binding fragment thereof, or polypeptides provided herein. in this document. Further provided herein is a method of treating a B cell disease associated with BCMA expression in a patient in need thereof, comprising administering to the patient a therapeutically effective amount of any of the anti-BCMA antibodies, a BCMA binding fragment thereof, or polypeptides provided in this document. In specific embodiments, the B cell-related disease is multiple myeloma, plasmacytoma, Hodgkin's lymphoma, non-Hodgkin's lymphoma, follicular lymphoma
- 4 044652 фому, мелкоклеточную лимфому с нерасщепленным ядром, эндемическую лимфому Беркитта, спорадическую лимфому Беркитта, лимфому маргинальной зоны, экстра-нодальную лимфому лимфоидной ткани, ассоциированной со слизистыми оболочками, узловую моноцитоидную В-клеточную лимфому, лимфому селезенки, лимфому клеток мантийной зоны, крупноклеточную лимфому, диффузную лимфому из смешанных клеток, диффузную крупноклеточную В-клеточную лимфому (DLBCL), индолентную лимфому, лимфоплазматическую В-клеточную лимфому, иммунобластную лимфому, первичную медиастинальную В-клеточную лимфому, легочную В-клеточную ангиоцентрическую лимфому, малую лимфоцитарную лимфому, хронический лимфоцитарный лейкоз, пролиферацую B-клеток с неопределенным злокачественным потенциалом, лимфоматоидный гранулематоз, посттрансплантационное лимфопролиферативное заболевание, иммунорегуляторное заболевание, ревматоидный артрит, миастению, идиопатическую тромбоцитопеническую пурпуру, антифосфолипидный синдром, болезнь Шагаса, болезнь Грейвса, гранулематоз Вегенера, узелковый полиартериит, синдром Шегрена, вульгарную пузырчатку, склеродермию, рассеянный склероз, антифосфолипидный синдром, ANCA-ассоциированный васкулит, болезнь Гудпасчера, болезнь Кавасаки, аутоиммунную гемолитическую анемию, системную красную волчанку, быстро прогрессирующий гломерулонефрит, болезнь тяжелых цепей, первичный или иммуноцитассоциированный амилоидоз, кожную красную волчанку, моноклональную гаммопатию неустановленного значения или глиобластому.- 4 044652 foma, small cell lymphoma with non-split nucleus, endemic Burkitt lymphoma, sporadic Burkitt lymphoma, marginal zone lymphoma, extra-nodal lymphoma of mucosal associated lymphoid tissue, nodular monocytoid B-cell lymphoma, splenic lymphoma, mantle cell lymphoma, large cell lymphoma, diffuse mixed cell lymphoma, diffuse large B-cell lymphoma (DLBCL), indolent lymphoma, lymphoplasmacytic B-cell lymphoma, immunoblastic lymphoma, primary mediastinal B-cell lymphoma, pulmonary angiocentric B-cell lymphoma, small lymphocytic lymphoma, chronic lymphocytic leukemia, B-cell proliferator of uncertain malignant potential, lymphomatoid granulomatosis, post-transplant lymphoproliferative disease, immunoregulatory disease, rheumatoid arthritis, myasthenia gravis, idiopathic thrombocytopenic purpura, antiphospholipid syndrome, Chagas disease, Graves' disease, Wegener's granulomatosis, polyarteritis nodosa, Sjögre's syndrome on, vulgar pemphigus, scleroderma, multiple sclerosis, antiphospholipid syndrome, ANCA-associated vasculitis, Goodpasture's disease, Kawasaki disease, autoimmune hemolytic anemia, systemic lupus erythematosus, rapidly progressive glomerulonephritis, heavy chain disease, primary or immune cell-associated amyloidosis, cutaneous lupus erythematosus, monoclonal gammopathy of undetermined significance or glioblastoma.
В дополнительном аспекте в настоящем документе предложены химерные антигенные рецепторы (CAR), которые содержат любую из последовательностей CDR тяжелой или легкой цепи, предложенных в настоящем документе, или любую из вариабельных последовательностей тяжелой или легкой цепи, предложенных в настоящем документе. В одном варианте осуществления CAR содержит указанные последовательности CDR1, CDR2 и CDR3 тяжелой цепи и/или указанные последовательности CDR1, CDR2 и CDR3 легкой цепи во внеклеточном BCMA-связывающем домене. В другом варианте осуществления CAR содержит указанную последовательность легкой цепи и/или указанную последовательность тяжелой цепи во внеклеточном BCMA-связывающем домене. В другом варианте осуществления CAR содержит или дополнительно содержит один или несколько из: трансмембранного домена, первичного сигнального домена и/или костимулирующего домена. В данном документе также предложены клетки, например иммунные клетки, которые экспрессируют любой из CAR, предложенных в настоящем документе. В более конкретных вариантах осуществления клетки представляют собой Т-клетки, естественные киллерные клетки (NK-клетки) или естественные киллерные Т-клетки (NKT-клетки). Кроме того, в настоящем документе предложен способ истощения клеток, экспрессирующих BCMA, например плазматических клеток, у пациента, нуждающегося в этом, включающий в себя введение пациенту терапевтически эффективного количества клеток, экспрессирующих анти-BCMA CAR, предложенный в настоящем документе. Способ лечения связанного с В-клетками заболевания, ассоциированного с экспрессией BCMA, у пациента, нуждающегося в этом, включающий в себя введение пациенту терапевтически эффективного количества клеток по любому из вариантов осуществления, представленных в настоящем описании. В конкретном варианте осуществления любого из способов, включающих клетку, экспрессирующую анти-BCMA CAR, предложенную в настоящем документе, связанное с В-клетками заболевание, представляет собой множественную миелому, плазмоцитому, лимфому Ходжкина, неходжкинскую лимфому, фолликулярную лимфому, мелкоклеточную лимфому с нерасщепленным ядром, эндемическую лимфому Беркитта, спорадическую лимфому Беркитта, лимфому маргинальной зоны, экстра-нодальную лимфому лимфоидной ткани, ассоциированной со слизистыми оболочками, узловую моноцитоидную Вклеточную лимфому, лимфому селезенки, лимфому клеток мантийной зоны, крупноклеточную лимфому, диффузную лимфому из смешанных клеток, диффузную крупноклеточную В-клеточную лимфому (DLBCL), индолентную лимфому, лимфоплазматическую В-клеточную лимфому, иммунобластную лимфому, первичную медиастинальную В-клеточную лимфому, легочную В-клеточную ангиоцентрическую лимфому, малую лимфоцитарную лимфому, хронический лимфоцитарный лейкоз, пролиферацую В-клеток с неопределенным злокачественным потенциалом, лимфоматоидный гранулематоз, посттрансплантационное лимфопролиферативное заболевание, иммунорегуляторное заболевание, ревматоидный артрит, миастению, идиопатическую тромбоцитопеническую пурпуру, антифосфолипидный синдром, болезнь Шагаса, болезнь Грейвса, гранулематоз Вегенера, узелковый полиартериит, синдром Шегрена, вульгарную пузырчатку, склеродермию, рассеянный склероз, антифосфолипидный синдром, ANCAассоциированный васкулит, болезнь Гудпасчера, болезнь Кавасаки, аутоиммунную гемолитическую анемию, системную красную волчанку, быстро прогрессирующий гломерулонефрит, болезнь тяжелых цепей, первичный или иммуноцит-ассоциированный амилоидоз, кожную красную волчанку, моноклональную гаммопатию неустановленного значения или глиобластому.In a further aspect, provided herein are chimeric antigen receptors (CARs) that comprise any of the heavy or light chain CDR sequences provided herein or any of the heavy or light chain variable sequences provided herein. In one embodiment, the CAR contains the specified heavy chain CDR1, CDR2 and CDR3 sequences and/or the specified light chain CDR1, CDR2 and CDR3 sequences in the extracellular BCMA-binding domain. In another embodiment, the CAR contains the specified light chain sequence and/or the specified heavy chain sequence in the extracellular BCMA-binding domain. In another embodiment, the CAR comprises or further comprises one or more of: a transmembrane domain, a primary signaling domain, and/or a co-stimulatory domain. Also provided herein are cells, such as immune cells, that express any of the CARs provided herein. In more specific embodiments, the cells are T cells, natural killer cells (NK cells), or natural killer T cells (NKT cells). Further provided herein is a method of depleting BCMA expressing cells, such as plasma cells, from a patient in need thereof, comprising administering to the patient a therapeutically effective amount of anti-BCMA CAR expressing cells as provided herein. A method of treating a B cell disease associated with BCMA expression in a patient in need thereof, comprising administering to the patient a therapeutically effective amount of cells according to any of the embodiments provided herein. In a specific embodiment of any of the methods comprising a cell expressing an anti-BCMA CAR as provided herein, the B cell-related disease is multiple myeloma, plasmacytoma, Hodgkin's lymphoma, non-Hodgkin's lymphoma, follicular lymphoma, small cell nuclear fusion lymphoma , endemic Burkitt's lymphoma, sporadic Burkitt's lymphoma, marginal zone lymphoma, extra-nodal lymphoma of mucous membrane-associated lymphoid tissue, nodular monocytoid B cell lymphoma, splenic lymphoma, mantle cell lymphoma, large cell lymphoma, diffuse mixed cell lymphoma, diffuse large cell B -cell lymphoma (DLBCL), indolent lymphoma, lymphoplasmic B-cell lymphoma, immunoblastic lymphoma, primary mediastinal B-cell lymphoma, pulmonary angiocentric B-cell lymphoma, small lymphocytic lymphoma, chronic lymphocytic leukemia, proliferating B-cells of uncertain malignant potential, lymphomatoid granulomatosis, post-transplant lymphoproliferative disease, immunoregulatory disease, rheumatoid arthritis, myasthenia gravis, idiopathic thrombocytopenic purpura, antiphospholipid syndrome, Chagas disease, Graves' disease, Wegener's granulomatosis, polyarteritis nodosa, Sjögren's syndrome, pemphigus vulgaris, scleroderma, multiple sclerosis, antiphospholipid ny syndrome, ANCA-associated vasculitis , Goodpasture's disease, Kawasaki disease, autoimmune hemolytic anemia, systemic lupus erythematosus, rapidly progressive glomerulonephritis, heavy chain disease, primary or immune cell-associated amyloidosis, cutaneous lupus erythematosus, monoclonal gammopathy of undetermined significance, or glioblastoma.
5. Фигуры5. Shapes
Фиг. 1 представляет собой схематическую иллюстрацию авидного (1А) и неавидного (1В) связываний.Fig. 1 is a schematic illustration of avid (1A) and non-avid (1B) binding.
На фиг. 2 представлены гистограммы, показывающие, что IgG человека, 320262, 319966, 320111, 319883 и 320199, связывают клетки С6, экспрессирующие BCMA человека.In fig. 2 are histograms showing that human IgGs, 320262, 319966, 320111, 319883, and 320199, bind C6 cells expressing human BCMA.
На фиг. 3 представлены гистограммы, демонстрирующие, что IgG человека, 320262, 319966,In fig. 3 shows histograms demonstrating that human IgG, 320262, 319966,
- 5 044652- 5 044652
320111, 319883 и 320199, не связывают клетки Hek293, экспрессирующие представителя семейства TNFрецепторов, TNFRSF12A.320111, 319883, and 320199 do not bind Hek293 cells expressing the TNF receptor family member, TNFRSF12A.
На фиг. 4 представлены гистограммы, подтверждающие, что IgG человека, 320262, 319966, 320111, 319883 и 320199 связывают клетки множественной миеломы человека NCIH929, которые эндогенно экспрессируют BCMA.In fig. 4 shows histograms confirming that human IgG, 320262, 319966, 320111, 319883 and 320199 bind human multiple myeloma cells NCIH929, which endogenously express BCMA.
На фиг. 5 представлены кривые доза-ответ для связывания IgG человека, 320262, 319966, 320111, 319883 и 320199, с BCMA-положительными клетками множественной миеломы человека U266B1 и KMS12BM. На фиг. 5 также представлены гистограммы, изображающие профили экспрессии представителей семейства TNF-рецепторов, BCMA, TACI и BAFF, в клетках ОРМ2 и NUDHL1 с использованием коммерчески доступных антител. Наконец, на фигуре показаны кривые доза-ответ для связывания антител 320111 и 320262 с клетками ОРМ2 (BCMA+/TACI7BAFFR-), но не с клетками NUDHL1 (BCMA /TACI+/BAFFR+).In fig. Figure 5 shows dose-response curves for the binding of human IgG, 320262, 319966, 320111, 319883 and 320199, to BCMA-positive human multiple myeloma cells U266B1 and KMS12BM. In fig. 5 also shows histograms depicting the expression profiles of TNF receptor family members, BCMA, TACI, and BAFF, in OPM2 and NUDHL1 cells using commercially available antibodies. Finally, the figure shows dose-response curves for the binding of antibodies 320111 and 320262 to OPM2 cells (BCMA+/TACI7BAFFR-), but not with NUDHL1 cells (BCMA /TACI+/BAFFR+).
6. Подробное описание6. Detailed description
В настоящем документе предложены полипептиды, например, BCMA-связывающие полипептиды, которые содержат специфичные последовательности CDR1, CDR2 и CDR3, и BCMA-связывающие антитела, фрагменты антител и полипептиды, которые содержат такие последовательности CDR1, CDR2 и CDR3. В настоящем документе также предложены способы применения таких антител, фрагментов антител и полипептидов для терапевтических целей, например, для лечения субъектов, страдающих заболеванием или расстройством, связанным с плазматическими или В-клетками.Provided herein are polypeptides, for example, BCMA-binding polypeptides that contain specific CDR1, CDR2, and CDR3 sequences, and BCMA-binding antibodies, antibody fragments, and polypeptides that contain such CDR1, CDR2, and CDR3 sequences. Also provided herein are methods of using such antibodies, antibody fragments and polypeptides for therapeutic purposes, for example, for treating subjects suffering from a plasma cell or B cell disease or disorder.
В контексте настоящего описания CDR означает определяющую комплементарность область, которая представляет собой определенные последовательности тяжелой или легкой цепей антитела, опосредующие связывание между антителом и антигеном или эпитопом, на который направлено антитело; аминокислотные остатки антитела, которые (обычно три или четыре короткие области с крайней изменчивостью последовательности) находятся в домене V-области иммуноглобулина, которые образуют антигенсвязывающий сайт и являются основными детерминантами антигенной специфичности. Последовательность CDR может быть определена или пронумерована, например, по системе Кабата (см. Kabat, et al., 1983. Sequence of Proteins of Immunological Interest. National Institutes of Health, Bethesda, Maryland); по системе Чотии (см. Chothia &, Lesk, “Canonical Structures for the Hypervariable Regions of Immunoglobulins,”As used herein, CDR means complementarity determining region, which represents certain sequences of the heavy or light chains of an antibody that mediate binding between the antibody and the antigen or epitope to which the antibody is directed; amino acid residues of an antibody that (usually three or four short regions of extreme sequence variability) are found in the V region domain of an immunoglobulin that form the antigen-binding site and are the major determinants of antigen specificity. The CDR sequence may be defined or numbered, for example, according to the Kabat system (see Kabat, et al., 1983. Sequence of Proteins of Immunological Interest. National Institutes of Health, Bethesda, Maryland); according to the Chothia system (see Chothia &, Lesk, “Canonical Structures for the Hypervariable Regions of Immunoglobulins,”
I J. Mol. Biol. 196, 901-917 (1987)); или по системе IMGT (cm. Lefranc et al., “IMGT Unique Numbering for Immunoglobulin and Cell Receptor Variable Domains and Ig superfamily V-like domains,” Dev. Comp. Immunol. 27, 55-77 (2003)). См. также Abhinandan & Martin, “Analysis and Improvements to Kabat and Structurally Correct Numbering of Antibody Variable Domains,” Mol. Immunol. 45:3832 (2008).I J. Mol. Biol. 196, 901-917 (1987)); or according to the IMGT system (see Lefranc et al., “IMGT Unique Numbering for Immunoglobulin and Cell Receptor Variable Domains and Ig superfamily V-like domains,” Dev. Comp. Immunol. 27, 55-77 (2003)). See also Abhinandan & Martin, “Analysis and Improvements to Kabat and Structurally Correct Numbering of Antibody Variable Domains,” Mol. Immunol. 45:3832 (2008).
6.1. Полипептиды.6.1. Polypeptides.
В настоящем документе предложен полипептид, который содержит специфичные последовательности CDR1, CDR2 и CDR3 тяжелой цепи. В конкретных вариантах осуществления изобретения такие полипептиды способны связывать BCMA либо по отдельности, либо в комбинации с полипептидом, содержащим специфичные последовательности CDR1, CDR2 и CDR3 легкой цепи.Provided herein is a polypeptide that contains specific heavy chain CDR1, CDR2 and CDR3 sequences. In specific embodiments of the invention, such polypeptides are capable of binding BCMA, either alone or in combination with a polypeptide containing specific light chain CDR1, CDR2 and CDR3 sequences.
В первом варианте осуществления в настоящем документе предложен полипептид, который содержит последовательности CDR1, CDR2 и/или CDR3 SEQ ID NO: 7, 8 и 9, соответственно. Кроме того, в настоящем документе предложен полипептид, который содержит последовательности CDR1, CDR2 и/или CDR3 SEQ ID NO: 10, 11 и 12, соответственно. Кроме того, в настоящем документе предложен полипептид, который содержит последовательности CDR1, CDR2 и/или CDR3 с SEQ ID NO: 13, 14 и 15, соответственно. В конкретном варианте осуществления любого из этих вариантов осуществления полипептид содержит последовательность вариабельной области тяжелой цепи SEQ ID NO: 2. В конкретном варианте осуществления любого из этих вариантов осуществления полипептид представляет собой Fabфрагмент, который содержит последовательность вариабельной области тяжелой цепи SEQ ID NO: 6. В другом конкретном варианте осуществления любого из этих вариантов осуществления, полипептид представляет собой F(ab')2-фрагмент, который содержит последовательность вариабельной области тяжелой цепи SEQ ID NO: 6.In a first embodiment, provided herein is a polypeptide that contains the sequences CDR1, CDR2 and/or CDR3 of SEQ ID NO: 7, 8 and 9, respectively. In addition, provided herein is a polypeptide that contains the sequences CDR1, CDR2 and/or CDR3 of SEQ ID NO: 10, 11 and 12, respectively. Further provided herein is a polypeptide that contains CDR1, CDR2 and/or CDR3 sequences of SEQ ID NOs: 13, 14 and 15, respectively. In a particular embodiment of any of these embodiments, the polypeptide comprises a heavy chain variable region sequence of SEQ ID NO: 2. In a particular embodiment of any of these embodiments, the polypeptide is a Fab fragment that contains a heavy chain variable region sequence of SEQ ID NO: 6. B In another specific embodiment of any of these embodiments, the polypeptide is an F(ab')2 fragment that contains the heavy chain variable region sequence of SEQ ID NO: 6.
В другом варианте осуществления в настоящем документе предложен полипептид, который содержит последовательности CDR1, CDR2 и/или CDR3 SEQ ID NO: 18, 19 и 20, соответственно. Кроме того, в настоящем документе предложен полипептид, который содержит последовательности CDR1, CDR2 и/или CDR3 с SEQ ID NO: 21, 22 и 23, соответственно. В настоящем документе дополнительно предложен полипептид, который содержит последовательности CDR1, CDR2 и/или CDR3 SEQ ID NO: 24, 25 и 26, соответственно. В конкретном варианте любого из этих вариантов осуществления полипептид содержит последовательность вариабельной области тяжелой цепи SEQ ID NO: 17. В конкретном варианте осуществления любого из этих вариантов осуществления полипептид представляет собой Fab-фрагмент, который содержит последовательность вариабельной области тяжелой цепи SEQ ID NO: 17. В другомIn another embodiment, provided herein is a polypeptide that contains the sequences CDR1, CDR2 and/or CDR3 of SEQ ID NO: 18, 19 and 20, respectively. Further provided herein is a polypeptide that contains CDR1, CDR2 and/or CDR3 sequences of SEQ ID NOs: 21, 22 and 23, respectively. Further provided herein is a polypeptide that contains the sequences CDR1, CDR2 and/or CDR3 of SEQ ID NO: 24, 25 and 26, respectively. In a particular embodiment of any of these embodiments, the polypeptide comprises a heavy chain variable region sequence of SEQ ID NO: 17. In a particular embodiment of any of these embodiments, the polypeptide is a Fab fragment that contains a heavy chain variable region sequence of SEQ ID NO: 17. In a different
- 6 044652 конкретном варианте осуществления любого из этих вариантов осуществления полипептид представляет собой F(ab')2-фрагмент, который содержит последовательность вариабельной области тяжелой цепи SEQ ID NO: 17.- 6 044652 in a specific embodiment of any of these embodiments, the polypeptide is an F(ab') 2 fragment that contains the heavy chain variable region sequence of SEQ ID NO: 17.
В другом варианте осуществления в настоящем документе предложен полипептид, который содержит последовательности CDR1, CDR2 и/или CDR3 SEQ ID NO: 29, 30 и 31, соответственно. Кроме того, в настоящем документе предложен полипептид, который содержит последовательности CDR1, CDR2 и/или CDR3 SEQ ID NO: 32, 33 и 34, соответственно. Кроме того, в настоящем документе предложен полипептид, который содержит последовательности CDR1, CDR2 и/или CDR3 с SEQ ID NO: 35, 36 и 37, соответственно. В конкретном варианте любого из этих вариантов осуществления полипептид содержит последовательность вариабельной области тяжелой цепи SEQ ID NO: 28. В конкретном варианте осуществления любого из этих вариантов осуществления полипептид представляет собой Fab-фрагмент, который содержит последовательность вариабельной области тяжелой цепи SEQ ID NO: 28. В другом конкретном варианте осуществления любого из этих вариантов осуществления, полипептид представляет собой F(ab')2-фрагмент, который содержит последовательность вариабельной области тяжелой цепи SEQ ID NO:28.In another embodiment, provided herein is a polypeptide that contains the sequences CDR1, CDR2 and/or CDR3 of SEQ ID NO: 29, 30 and 31, respectively. In addition, provided herein is a polypeptide that contains the sequences CDR1, CDR2 and/or CDR3 of SEQ ID NO: 32, 33 and 34, respectively. Further provided herein is a polypeptide that contains CDR1, CDR2 and/or CDR3 sequences of SEQ ID NOs: 35, 36 and 37, respectively. In a particular embodiment of any of these embodiments, the polypeptide comprises a heavy chain variable region sequence of SEQ ID NO: 28. In a particular embodiment of any of these embodiments, the polypeptide is a Fab fragment that contains a heavy chain variable region sequence of SEQ ID NO: 28. In another specific embodiment of any of these embodiments, the polypeptide is an F(ab') 2 fragment that contains the heavy chain variable region sequence of SEQ ID NO:28.
В другом варианте осуществления в настоящем документе предложен полипептид, который содержит последовательности CDR1, CDR2 и/или CDR3 SEQ ID NO: 40, 41 и 42, соответственно. Кроме того, в настоящем документе предложен полипептид, который содержит последовательности CDR1, CDR2 и/или CDR3 SEQ ID NO: 43, 44 и 45, соответственно. Кроме того, в настоящем документе предложен полипептид, который содержит последовательности CDR1, CDR2 и/или CDR3 SEQ ID NO: 46, 47 и 48, соответственно. В конкретном варианте любого из этих вариантов осуществления полипептид содержит последовательность вариабельной области тяжелой цепи SEQ ID NO: 39. В конкретном варианте любого из этих вариантов осуществления полипептид представляет собой Fab-фрагмент, который содержит последовательность вариабельной области тяжелой цепи SEQ ID NO: 39. В другом конкретном варианте осуществления любого из этих вариантов осуществления, полипептид представляет собой F(ab')2фрагмент, который содержит последовательность вариабельной области тяжелой цепи SEQ ID NO: 39.In another embodiment, provided herein is a polypeptide that contains the sequences CDR1, CDR2 and/or CDR3 of SEQ ID NO: 40, 41 and 42, respectively. In addition, provided herein is a polypeptide that contains the sequences CDR1, CDR2 and/or CDR3 of SEQ ID NO: 43, 44 and 45, respectively. In addition, provided herein is a polypeptide that contains the sequences CDR1, CDR2 and/or CDR3 of SEQ ID NO: 46, 47 and 48, respectively. In a particular embodiment of any of these embodiments, the polypeptide comprises a heavy chain variable region sequence of SEQ ID NO: 39. In a particular embodiment of any of these embodiments, the polypeptide is a Fab fragment that contains a heavy chain variable region sequence of SEQ ID NO: 39. B In another specific embodiment of any of these embodiments, the polypeptide is an F(ab')2 fragment that contains the heavy chain variable region sequence of SEQ ID NO: 39.
В другом варианте осуществления в настоящем документе предложен полипептид, который содержит последовательности CDR1, CDR2 и/или CDR3 SEQ ID NO: 51, 52 и 53, соответственно. Кроме того, в настоящем документе предложен полипептид, который содержит последовательности CDR1, CDR2 и/или CDR3 SEQ ID NO: 54, 55 и 56, соответственно. Кроме того, в настоящем документе предложен полипептид, который содержит последовательности CDR1, CDR2 и/или CDR3 SEQ ID NO: 57, 58 и 59, соответственно. В конкретном варианте любого из этих вариантов осуществления полипептид содержит последовательность вариабельной области тяжелой цепи SEQ ID NO: 50. В конкретном варианте любого из этих вариантов осуществления полипептид представляет собой Fab-фрагмент, который содержит последовательность вариабельной области тяжелой цепи SEQ ID NO: 50. В другом конкретном варианте любого из этих вариантов осуществления полипептид представляет собой F(ab')2-фрагмент, который содержит последовательность вариабельной области тяжелой цепи SEQ ID NO: 50.In another embodiment, provided herein is a polypeptide that contains the sequences CDR1, CDR2 and/or CDR3 of SEQ ID NO: 51, 52 and 53, respectively. In addition, provided herein is a polypeptide that contains the sequences CDR1, CDR2 and/or CDR3 of SEQ ID NO: 54, 55 and 56, respectively. In addition, provided herein is a polypeptide that contains the sequences CDR1, CDR2 and/or CDR3 of SEQ ID NO: 57, 58 and 59, respectively. In a particular embodiment of any of these embodiments, the polypeptide comprises a heavy chain variable region sequence of SEQ ID NO: 50. In a particular embodiment of any of these embodiments, the polypeptide is a Fab fragment that contains a heavy chain variable region sequence of SEQ ID NO: 50. B In another specific embodiment of any of these embodiments, the polypeptide is an F(ab') 2 fragment that contains the heavy chain variable region sequence of SEQ ID NO: 50.
В настоящем документе также предложено антитело, которое содержит специфичные последовательности CDR1, CDR2 и CDR3 легкой цепи. В конкретных вариантах осуществления изобретения такие антитела способны связывать BCMA либо отдельно, либо в сочетании с последовательностями CDR1, CDR2 и CDR3 тяжелой цепи. В первом варианте осуществления в настоящем документе предложено антитело, которое содержит последовательности CDR1, CDR2 и/или CDR3 SEQ ID NO: 2, 3 и 4, соответственно. В конкретном варианте осуществления любого из этих вариантов осуществления антитела содержат последовательность вариабельной области легкой цепи SEQ ID NO: 1. В конкретном варианте осуществления любого из этих вариантов осуществления антитела представляют собой Fab-фрагмент, который содержит последовательность вариабельной области легкой цепи SEQ ID NO: 1. В другом конкретном варианте осуществления антитело представляет собой F(ab')2-фрагмент, который содержит последовательность вариабельной области легкой цепи SEQ ID NO: 1.Also provided herein is an antibody that contains specific light chain CDR1, CDR2 and CDR3 sequences. In specific embodiments, such antibodies are capable of binding BCMA either alone or in combination with the heavy chain CDR1, CDR2 and CDR3 sequences. In a first embodiment, provided herein is an antibody that contains the sequences CDR1, CDR2 and/or CDR3 of SEQ ID NO: 2, 3 and 4, respectively. In a specific embodiment of any of these embodiments, the antibodies comprise a light chain variable region sequence of SEQ ID NO: 1. In a particular embodiment of any of these embodiments, the antibodies are a Fab fragment that contains a light chain variable region sequence of SEQ ID NO: 1 In another specific embodiment, the antibody is an F(ab') 2 fragment that contains the light chain variable region sequence of SEQ ID NO: 1.
В данном документе предложено антитело, которое содержит специфичные последовательности CDR1, CDR2 и CDR3 тяжелой цепи. В конкретных вариантах осуществления изобретения такие полипептиды способны связывать BCMA либо отдельно, либо в комбинации с полипептидом, содержащим специфичные последовательности CDR1, CDR2 и CDR3 легкой цепи.Provided herein is an antibody that contains specific heavy chain CDR1, CDR2 and CDR3 sequences. In specific embodiments of the invention, such polypeptides are capable of binding BCMA, either alone or in combination with a polypeptide containing specific light chain CDR1, CDR2 and CDR3 sequences.
В первом варианте осуществления в настоящем документе предложено антитело, которое содержит последовательности CDR1, CDR2 и/или CDR3 SEQ ID NO: 7, 8 и 9, соответственно. Кроме того, в настоящем документе предложено антитело, которое содержит последовательности CDR1, CDR2 и/или CDR3 SEQ ID NO: 10, 11 и 12, соответственно. Кроме того, в настоящем документе предложено антитело, которое содержит последовательности CDR1, CDR2 и/или CDR3 SEQ ID NO: 13, 14 и 15, соответственно. В конкретном варианте осуществления любого из этих вариантов осуществления антитело содержит последовательность вариабельной области тяжелой цепи SEQ ID NO: 2. В конкретном варианте осуществления любого из этих вариантов осуществления антитело представляет собой Fab-фрагмент, который содержит последовательность вариабельной области тяжелой цепи SEQ ID NO: 6. В другом конкретном варианте осуществления антитело представляет собой F(ab')2-фрагмент, который содержитIn a first embodiment, provided herein is an antibody that contains the sequences CDR1, CDR2 and/or CDR3 of SEQ ID NO: 7, 8 and 9, respectively. In addition, provided herein is an antibody that contains the sequences CDR1, CDR2 and/or CDR3 of SEQ ID NO: 10, 11 and 12, respectively. In addition, provided herein is an antibody that contains the sequences CDR1, CDR2 and/or CDR3 of SEQ ID NO: 13, 14 and 15, respectively. In a specific embodiment of any of these embodiments, the antibody comprises a heavy chain variable region sequence of SEQ ID NO: 2. In a particular embodiment of any of these embodiments, the antibody is a Fab fragment that contains a heavy chain variable region sequence of SEQ ID NO: 6 In another specific embodiment, the antibody is an F(ab') 2 fragment that contains
- 7 044652 последовательность вариабельной области тяжелой цепи SEQ ID NO: 6.- 7 044652 heavy chain variable region sequence SEQ ID NO: 6.
В другом варианте осуществления в настоящем документе предложено антитело, которое содержит последовательности CDR1, CDR2 и/или CDR3 SEQ ID NO: 18, 19 и 20, соответственно. Кроме того, в настоящем документе предложено антитело, которое содержит последовательности CDR1, CDR2 и/или CDR3 SEQ ID NO: 21, 22 и 23, соответственно. Кроме того, в настоящем документе предложено антитело, которое содержит последовательности CDR1, CDR2 и/или CDR3 SEQ ID NO: 24, 25 и 26, соответственно. В конкретном варианте осуществления любого из этих вариантов осуществления антитело содержит последовательность вариабельной области тяжелой цепи SEQ ID NO: 17. В конкретном варианте осуществления любого из этих вариантов осуществления антитело представляет собой Fab-фрагмент, который содержит последовательность вариабельной области тяжелой цепи SEQ ID NO: 17. В другом конкретном варианте осуществления любого из этих вариантов осуществления, антитело представляет собой F(ab')2-фрагмент, который содержит последовательность вариабельной области тяжелой цепи SEQ ID NO: 17.In another embodiment, provided herein is an antibody that contains the sequences CDR1, CDR2 and/or CDR3 of SEQ ID NO: 18, 19 and 20, respectively. In addition, provided herein is an antibody that contains the sequences CDR1, CDR2 and/or CDR3 of SEQ ID NO: 21, 22 and 23, respectively. In addition, provided herein is an antibody that contains the sequences CDR1, CDR2 and/or CDR3 of SEQ ID NO: 24, 25 and 26, respectively. In a specific embodiment of any of these embodiments, the antibody comprises a heavy chain variable region sequence of SEQ ID NO: 17. In a particular embodiment of any of these embodiments, the antibody is a Fab fragment that contains a heavy chain variable region sequence of SEQ ID NO: 17 In another specific embodiment of any of these embodiments, the antibody is an F(ab') 2 fragment that contains the heavy chain variable region sequence of SEQ ID NO: 17.
В другом варианте осуществления в настоящем документе предложено антитело, которое содержит последовательности CDR1, CDR2 и/или CDR3 SEQ ID NO: 29, 30 и 31, соответственно. Кроме того, в настоящем документе предложено антитело, которое содержит последовательности CDR1, CDR2 и/или CDR3 SEQ ID NO: 32, 33 и 34, соответственно. Кроме того, в настоящем документе предложено антитело, которое содержит последовательности CDR1, CDR2 и/или CDR3 SEQ ID NO: 35, 36 и 37, соответственно. В конкретном варианте осуществления любого из этих вариантов осуществления антитело содержит последовательность вариабельной области тяжелой цепи SEQ ID NO: 28. В конкретном варианте любого из этих вариантов осуществления изобретения антитело представляет собой Fab-фрагмент, который содержит последовательность вариабельной области тяжелой цепи SEQ ID NO: 28. В другом конкретном варианте осуществления любого из этих вариантов осуществления антитело представляет собой F(ab')2-фрагмент, который содержит последовательность вариабельной области тяжелой цепи SEQ ID NO: 28.In another embodiment, provided herein is an antibody that contains the sequences CDR1, CDR2 and/or CDR3 of SEQ ID NO: 29, 30 and 31, respectively. In addition, provided herein is an antibody that contains the sequences CDR1, CDR2 and/or CDR3 of SEQ ID NO: 32, 33 and 34, respectively. In addition, provided herein is an antibody that contains the sequences CDR1, CDR2 and/or CDR3 of SEQ ID NO: 35, 36 and 37, respectively. In a specific embodiment of any of these embodiments, the antibody comprises a heavy chain variable region sequence of SEQ ID NO: 28. In a particular embodiment of any of these embodiments, the antibody is a Fab fragment that contains a heavy chain variable region sequence of SEQ ID NO: 28 In another specific embodiment of any of these embodiments, the antibody is an F(ab')2 fragment that contains the heavy chain variable region sequence of SEQ ID NO: 28.
В другом варианте осуществления в настоящем документе предложено антитело, которое содержит последовательности CDR1, CDR2 и/или CDR3 SEQ ID NO: 40, 41 и 42, соответственно. Кроме того, в настоящем документе предложено антитело, которое содержит последовательности CDR1, CDR2 и/или CDR3 SEQ ID NO: 43, 44 и 45, соответственно. Кроме того, в настоящем документе предложено антитело, которое содержит последовательности CDR1, CDR2 и/или CDR3 SEQ ID NO: 46, 47 и 48, соответственно. В конкретном варианте осуществления любого из этих вариантов осуществления антитело содержит последовательность вариабельной области тяжелой цепи SEQ ID NO: 39. В конкретном варианте осуществления любого из этих вариантов осуществления антитело представляет собой Fab-фрагмент, который содержит последовательность вариабельной области тяжелой цепи SEQ ID NO: 39. В другом конкретном варианте осуществления любого из этих вариантов осуществления, антитело представляет собой F(ab')2-фрагмент, который содержит последовательность вариабельной области тяжелой цепи SEQ ID NO: 39.In another embodiment, provided herein is an antibody that contains the sequences CDR1, CDR2 and/or CDR3 of SEQ ID NO: 40, 41 and 42, respectively. In addition, provided herein is an antibody that contains the sequences CDR1, CDR2 and/or CDR3 of SEQ ID NO: 43, 44 and 45, respectively. In addition, provided herein is an antibody that contains the sequences CDR1, CDR2 and/or CDR3 of SEQ ID NO: 46, 47 and 48, respectively. In a particular embodiment of any of these embodiments, the antibody comprises a heavy chain variable region sequence of SEQ ID NO: 39. In a particular embodiment of any of these embodiments, the antibody is a Fab fragment that contains a heavy chain variable region sequence of SEQ ID NO: 39 In another specific embodiment of any of these embodiments, the antibody is an F(ab')2 fragment that contains the heavy chain variable region sequence of SEQ ID NO: 39.
В другом варианте осуществления в настоящем документе предложено антитело, которое содержит последовательности CDR1, CDR2 и/или CDR3 SEQ ID NO: 51, 52 и 53, соответственно. Кроме того, в настоящем документе предложено антитело, которое содержит последовательности CDR1, CDR2 и/или CDR3 SEQ ID NO: 54, 55 и 56, соответственно. Кроме того, в настоящем документе предложено антитело, которое содержит последовательности CDR1, CDR2 и/или CDR3 SEQ ID NO: 57, 58 и 59, соответственно. В конкретном варианте осуществления любого из этих вариантов осуществления антитело содержит последовательность вариабельной области тяжелой цепи SEQ ID NO: 50. В конкретном варианте осуществления любого из этих вариантов осуществления антитело представляет собой Fab-фрагмент, который содержит последовательность вариабельной области тяжелой цепи SEQ ID NO: 50. В другом конкретном варианте осуществления любого из этих вариантов осуществления, антитело представляет собой F(ab')2-фрагмент, который содержит последовательность вариабельной области тяжелой цепи SEQ ID NO: 50.In another embodiment, provided herein is an antibody that contains the sequences CDR1, CDR2 and/or CDR3 of SEQ ID NO: 51, 52 and 53, respectively. In addition, provided herein is an antibody that contains the sequences CDR1, CDR2 and/or CDR3 of SEQ ID NO: 54, 55 and 56, respectively. In addition, provided herein is an antibody that contains the sequences CDR1, CDR2 and/or CDR3 of SEQ ID NO: 57, 58 and 59, respectively. In a specific embodiment of any of these embodiments, the antibody comprises a heavy chain variable region sequence of SEQ ID NO: 50. In a particular embodiment of any of these embodiments, the antibody is a Fab fragment that contains a heavy chain variable region sequence of SEQ ID NO: 50 In another specific embodiment of any of these embodiments, the antibody is an F(ab') 2 fragment that contains the heavy chain variable region sequence of SEQ ID NO: 50.
В настоящем документе также предложен полипептид, который содержит специфичные последовательности CDR1, CDR2 и CDR3 легкой цепи. В конкретных вариантах осуществления такие полипептиды способны связывать BCMA либо по отдельности, либо в комбинации с полипептидом, содержащим специфичные последовательности CDR1, CDR2 и CDR3. В первом варианте осуществления в настоящем документе предложен полипептид, который содержит последовательности CDR1, CDR2 и/или CDR3 SEQ ID NO: 2, 3 и 4, соответственно. В конкретном варианте любого из этих вариантов осуществления полипептид содержит последовательность вариабельной области легкой цепи SEQ ID NO: 1. В конкретном варианте осуществления любого из этих вариантов осуществления полипептид представляет собой Fab-фрагмент, который содержит последовательность вариабельной области легкой цепи SEQ ID NO: 1. В другом конкретном варианте осуществления любого из этих вариантов осуществления полипептид представляет собой F(ab')2-фрагмент, который содержит последовательность вариабельной области легкой цепи SEQ ID NO: 1.Also provided herein is a polypeptide that contains specific light chain CDR1, CDR2 and CDR3 sequences. In specific embodiments, such polypeptides are capable of binding BCMA either alone or in combination with a polypeptide containing specific CDR1, CDR2 and CDR3 sequences. In a first embodiment, provided herein is a polypeptide that contains the sequences CDR1, CDR2 and/or CDR3 of SEQ ID NO: 2, 3 and 4, respectively. In a particular embodiment of any of these embodiments, the polypeptide comprises a light chain variable region sequence of SEQ ID NO: 1. In a particular embodiment of any of these embodiments, the polypeptide is a Fab fragment that contains a light chain variable region sequence of SEQ ID NO: 1. In another specific embodiment of any of these embodiments, the polypeptide is an F(ab') 2 fragment that contains the light chain variable region sequence of SEQ ID NO: 1.
В настоящем документе также предложено антитело, которое содержит специфичные последоваAlso provided herein is an antibody that contains specific sequences
- 8 044652 тельности CDR1, CDR2 и CDR3 легкой цепи. В первом варианте осуществления в настоящем документе предложено антитело, которое содержит последовательности CDR1, CDR2 и/или CDR3 SEQ ID NO: 2, 3 и 4, соответственно. В конкретном варианте осуществления любого из этих вариантов осуществления антитело содержит последовательность вариабельной области легкой цепи SEQ ID NO: 1. В конкретном варианте осуществления любого из этих вариантов осуществления антитело представляет собой Fabфрагмент, который содержит последовательность вариабельной области легкой цепи SEQ ID NO: 1. В другом конкретном варианте осуществления любого из этих вариантов осуществления антитело представляет собой F(ab')2-фрагмент, который содержит последовательность вариабельной области легкой цепи SEQ ID NO: 1.- 8 044652 activity of CDR1, CDR2 and CDR3 of the light chain. In a first embodiment, provided herein is an antibody that contains the sequences CDR1, CDR2 and/or CDR3 of SEQ ID NO: 2, 3 and 4, respectively. In a specific embodiment of any of these embodiments, the antibody comprises a light chain variable region sequence of SEQ ID NO: 1. In a particular embodiment of any of these embodiments, the antibody is a Fab fragment that contains a light chain variable region sequence of SEQ ID NO: 1. B In another specific embodiment of any of these embodiments, the antibody is an F(ab') 2 fragment that contains the light chain variable region sequence of SEQ ID NO: 1.
В более конкретных вариантах осуществления изобретения любого из вышеуказанных антител или их BCMA-связывающих фрагментов, антитело или его BCMA-связывающий фрагмент содержит аминокислотную последовательность вариабельного домена легкой цепи по меньшей мере на 80, по меньшей мере на 85, по меньшей мере на 90, по меньшей мере на 95, по меньшей мере на 96, по меньшей мере на 97, по меньшей мере на 98, по меньшей мере на 99 или на 100% идентичную SEQ ID NO: 1, и аминокислотную последовательность вариабельного домена тяжелой цепи по меньшей мере на 80, по меньшей мере на 85, по меньшей мере на 90, по меньшей мере на 95, по меньшей мере на 96, по меньшей мере на 97, по меньшей мере на 98, по меньшей мере на 99 или на 100% идентичную SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 17, SEQ ID NO: 28, SEQ ID NO: 39 или SEQ ID NO: 50.In more specific embodiments of any of the foregoing antibodies or BCMA-binding fragments thereof, the antibody or BCMA-binding fragment thereof comprises at least 80%, at least 85%, at least 90% of the light chain variable domain amino acid sequence. at least 95, at least 96, at least 97, at least 98, at least 99, or 100% identical to SEQ ID NO: 1, and the amino acid sequence of the heavy chain variable domain at least 80, at least 85, at least 90, at least 95, at least 96, at least 97, at least 98, at least 99, or 100% identical to SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 17, SEQ ID NO: 28, SEQ ID NO: 39 or SEQ ID NO: 50.
В более конкретном варианте осуществления любого из вышеуказанных антител или их BCMAсвязывающих фрагментов, антитело или его BCMA-связывающий фрагмент содержит аминокислотную последовательность вариабельного домена легкой цепи SEQ ID NO: 1, или аминокислотную последовательность вариабельного домена легкой цепи по меньшей мере на 80, по меньшей мере на 85, по меньшей мере на 90, по меньшей мере на 95, по меньшей мере на 96, по меньшей мере на 97, по меньшей мере на 98 или по меньшей мере на 99% идентичную SEQ ID NO: 1. В других более конкретных вариантах осуществления любого из вышеуказанных антител или их BCMA-связывающих фрагментов антитело или его BCMA-связывающий фрагмент содержит аминокислотную последовательность вариабельного домена тяжелой цепи SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 17, SEQ ID NO: 28, SEQ ID NO: 39 или SEQ ID NO: 50, или аминокислотную последовательность вариабельного домена тяжелой цепи по меньшей мере на 80, по меньшей мере на 85, по меньшей мере на 90, по меньшей мере на 95, по меньшей мере на 96, по меньшей мере на 97, по меньшей мере на 98 или по меньшей мере на 99% идентичную SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 18, SEQ ID NO: 28, SEQ ID NO: 39 или SEQ ID NO: 50. В другом более конкретном варианте осуществления любого из вышеуказанных антител или их BCMA-связывающих фрагментов антитело или его BCMA-связывающий фрагмент содержит аминокислотную последовательность вариабельного домена легкой цепи по меньшей мере на 80, по меньшей мере на 85, по меньшей мере на 90, по меньшей мере на 95, по меньшей мере на 96, по меньшей мере на 97, по меньшей мере на 98, по меньшей мере на 99 или на 100% идентичную SEQ ID NO: 1, и аминокислотную последовательность вариабельного домена тяжелой цепи по меньшей мере на 80, по меньшей мере на 85, по меньшей мере на 90, по меньшей мере на 95, по меньшей мере на 96, по меньшей мере на 97, по меньшей мере на 98, по меньшей мере на 99 или на 100% идентичную SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 17, SEQ ID NO: 28, SEQ ID NO: 39 или SEQ ID NO: 50.In a more specific embodiment of any of the above antibodies or BCMA binding fragments thereof, the antibody or BCMA binding fragment thereof comprises a light chain variable domain amino acid sequence of SEQ ID NO: 1, or a light chain variable domain amino acid sequence of at least 80 by at least 85, at least 90, at least 95, at least 96, at least 97, at least 98, or at least 99% identical to SEQ ID NO: 1. In other more specific In embodiments of any of the above antibodies or BCMA-binding fragments thereof, the antibody or BCMA-binding fragment thereof comprises the heavy chain variable domain amino acid sequence of SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 17, SEQ ID NO: 28, SEQ ID NO: 39, or SEQ ID NO: 50, or the amino acid sequence of the heavy chain variable domain of at least 80, at least 85, at least 90, at least 95, at least 96, at least 97, according to at least 98% or at least 99% identical to SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 18, SEQ ID NO: 28, SEQ ID NO: 39, or SEQ ID NO: 50. In another more specific embodiment, any of of the above antibodies or BCMA-binding fragments thereof, the antibody or BCMA-binding fragment thereof contains the amino acid sequence of the light chain variable domain at least 80, at least 85, at least 90, at least 95, at least 96, at least 97, at least 98, at least 99, or 100% identical to SEQ ID NO: 1, and the amino acid sequence of the heavy chain variable domain at least 80, at least 85, according to at least 90, at least 95, at least 96, at least 97, at least 98, at least 99 or 100% identical to SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 17 , SEQ ID NO: 28, SEQ ID NO: 39, or SEQ ID NO: 50.
В более конкретном варианте осуществления любого из вышеуказанных антител или их BCMAсвязывающих фрагментов, антитело или его BCMA-связывающий фрагмент содержит аминокислотную последовательность вариабельного домена легкой цепи, которая содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 3 и SEQ ID NO: 4 и является по меньшей мере на 80, по меньшей мере на 85, по меньшей мере на 90, по меньшей мере на 95, по меньшей мере на 96, по меньшей мере на 97, по меньшей мере на 98 или по меньшей мере на 99% идентичной SEQ ID NO: 1. В других более конкретных вариантах осуществления изобретения любого из вышеуказанных антител или их BCMAсвязывающих фрагментов антитело или его BCMA-связывающий фрагмент содержит аминокислотную последовательность вариабельного домена тяжелой цепи SEQ ID NO: 7-9, 10-12 или 13-15 и являются по меньшей мере на 80, по меньшей мере на 85, по меньшей мере на 90, по меньшей мере на 95, по меньшей мере на 96, по меньшей мере на 97, по меньшей мере на 98 или по меньшей мере на 99% идентичными SEQ ID NO: 6; антитело или его BCMA-связывающий фрагмент содержит аминокислотную последовательность вариабельного домена тяжелой цепи SEQ ID NO: 18-20, 21-23 или 24-26 и являются по меньшей мере на 80, по меньшей мере на 85, по меньшей мере на 90, по меньшей мере на 95, по меньшей мере на 96, по меньшей мере на 97, по меньшей мере на 98 или по меньшей мере на 99% идентичными SEQ ID NO: 17; антитело или его BCMA-связывающий фрагмент содержит аминокислотную последовательность вариабельного домена тяжелой цепи SEQ ID NO: 29-31, 32-34 или 35-37 и являются по меньшей мере на 80, по меньшей мере на 85, по меньшей мере на 90, по меньшей мере на 95, по меньшей мере на 96, по меньшей мере на 97, по меньшей мере на 98 или по меньшей мере на 99% идентичными SEQ ID NO: 28; антитело или его BCMA-связывающий фрагмент содержит аминокислотную последовательность вариабельного домена тяжелой цепи SEQ ID NO: 40-42, 43-45 или 46-48 и являются по меньшей мере на 80, по меньшей мере на 85, по меньшей мере на 90, по меньшей мере на 95, по меньшей мере на 96, поIn a more specific embodiment of any of the above antibodies or BCMA binding fragments thereof, the antibody or BCMA binding fragment thereof comprises a light chain variable domain amino acid sequence that comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 3 and SEQ ID NO: 4 and is at least 80, at least 85, at least 90, at least 95, at least 96, at least 97, at least 98 or at least 99% identical to SEQ ID NO: 1. In other more specific embodiments of any of the above antibodies or BCMA binding fragments thereof, the antibody or BCMA binding fragment thereof comprises the amino acid sequence of the heavy chain variable domain SEQ ID NO: 7-9, 10-12 or 13- 15 and are at least 80, at least 85, at least 90, at least 95, at least 96, at least 97, at least 98 or at least 99 % identical to SEQ ID NO: 6; the antibody or BCMA-binding fragment thereof contains the amino acid sequence of the heavy chain variable domain of SEQ ID NO: 18-20, 21-23 or 24-26 and is at least 80, at least 85, at least 90, at least 95, at least 96, at least 97, at least 98, or at least 99% identical to SEQ ID NO: 17; the antibody or BCMA-binding fragment thereof contains the amino acid sequence of the heavy chain variable domain of SEQ ID NO: 29-31, 32-34 or 35-37 and is at least 80, at least 85, at least 90, at least 95, at least 96, at least 97, at least 98, or at least 99% identical to SEQ ID NO: 28; the antibody or BCMA-binding fragment thereof contains the amino acid sequence of the heavy chain variable domain of SEQ ID NO: 40-42, 43-45 or 46-48 and is at least 80, at least 85, at least 90, at least 95, at least 96, according to
- 9 044652 меньшей мере на 97, по меньшей мере на 98 или по меньшей мере на 99% идентичными SEQ ID NO: 39; антитело или его BCMA-связывающий фрагмент содержит аминокислотную последовательность вариабельного домена тяжелой цепи SEQ ID NO: 51-53, 54-56 или 57-59 и являются по меньшей мере на 80%, по меньшей мере на 85%, по меньшей мере на 90, по меньшей мере на 95, по меньшей мере на 96, по меньшей мере на 97, по меньшей мере на 98 или по меньшей мере на 99% идентичными SEQ ID NO: 50.- 9 044652 at least 97, at least 98 or at least 99% identical to SEQ ID NO: 39; the antibody or BCMA-binding fragment thereof contains the amino acid sequence of the heavy chain variable domain of SEQ ID NO: 51-53, 54-56 or 57-59 and is at least 80%, at least 85%, at least 90 , at least 95, at least 96, at least 97, at least 98, or at least 99% identical to SEQ ID NO: 50.
6.2. Антитела.6.2. Antibodies.
В настоящем документе также предложены антитела, которые представляют собой или содержат последовательности CDR или вариабельные последовательности тяжелой или легкой цепей.Also provided herein are antibodies that are or contain CDR sequences or heavy or light chain variable sequences.
Термин антитело, используемый в данном документе, означает любую природную или искусственно созданную конфигурацию антигенсвязывающего полипептида, включающую одну, две или три CDR легкой цепи и одну, две или три CDR тяжелой цепи, где полипептид способен связываться с антигеном.The term antibody, as used herein, means any natural or engineered configuration of an antigen-binding polypeptide comprising one, two or three light chain CDRs and one, two or three heavy chain CDRs, wherein the polypeptide is capable of binding to an antigen.
В некоторых вариантах осуществления изобретения, антитело по изобретению представляет собой антитело с Fc-частью или без Fc-части. В некоторых вариантах осуществления изобретения, антитела, предложенные в настоящем документе, представляют собой антитела IgG, например антитела IgG1, IgG2, IgG3 или IgG4. В некоторых вариантах осуществления изобретения, антитела представляют собой антитела IgA, антитела IgE, антитела IgD или антитела IgM. В некоторых вариантах осуществления изобретения, антитела представляют собой моноклональные антитела, например, моноклональные антитела IgG.In some embodiments, the antibody of the invention is an antibody with or without an Fc portion. In some embodiments, the antibodies provided herein are IgG antibodies, such as IgG1, IgG2, IgG3, or IgG4 antibodies. In some embodiments, the antibodies are IgA antibodies, IgE antibodies, IgD antibodies, or IgM antibodies. In some embodiments, the antibodies are monoclonal antibodies, such as IgG monoclonal antibodies.
В некоторых вариантах осуществления изобретения, любое из предложенных в настоящем документе антител содержит вариант Fc для Fc-области человеческого IgG дикого типа, где указанное антитело имеет пониженную аффинность к FcyRIIIA и/или FcyRIIA и/или FcyRI человека по сравнению с антителом, содержащим Fc-область IgG дикого типа.In some embodiments, any antibody provided herein contains an Fc variant for the Fc region of a wild-type human IgG, wherein the antibody has reduced affinity for human FcyRIIIA and/or FcyRIIA and/or FcyRI compared to an antibody containing Fc- wild type IgG region.
В некоторых вариантах осуществления изобретения, указанные антитела представляют собой искусственно полученные полностью человеческие антитела, например антитела, продуцируемые мышью или крысой, генетически модифицированные для продукции человеческих антител, например OMNIRAT или OMNIMOUSE (Ligand Pharmaceuticals). Такие антитела не встречаются в природе, но имеют каркас и константные области антител человека. Поскольку BCMA человека является аутоантигеном, человеческий организм не вырабатывает антитела к BCMA человека. Антитела человека против BCMA могут представлять собой антитела, имеющие вариабельные и константные области, по существу соответствующие последовательностям иммуноглобулинов зародышевой линии человека, известным в данной области, включая, например, те, которые описаны Kabat et al. Антитела человека по изобретению могут включать аминокислотные остатки, не кодируемые последовательностями иммуноглобулинов зародышевой линии человека (например, мутации, введенные случайным или сайт-специфическим мутагенезом in vitro или в результате соматической мутации in vivo), например, в CDR, и, в частности, в CDR3. Предложенные в настоящем документе человеческие антитела против BCMA могут иметь по меньшей мере одно, два, три, четыре, пять или более положений, замененных аминокислотным остатком, который не кодируется последовательностью иммуноглобулина зародышевой линии человека.In some embodiments, the antibodies are artificially produced fully human antibodies, such as mouse or rat antibodies, genetically modified to produce human antibodies, such as OMNIRAT or OMNIMOUSE (Ligand Pharmaceuticals). Such antibodies do not occur naturally, but have the framework and constant regions of human antibodies. Because human BCMA is a self-antigen, the human body does not produce antibodies to human BCMA. Human anti-BCMA antibodies may be antibodies having variable and constant regions substantially corresponding to human germline immunoglobulin sequences known in the art, including, for example, those described by Kabat et al. The human antibodies of the invention may include amino acid residues not encoded by human germline immunoglobulin sequences (e.g., mutations introduced by random or site-specific mutagenesis in vitro or as a result of somatic mutation in vivo), for example, in the CDR, and in particular in CDR3. Human anti-BCMA antibodies provided herein may have at least one, two, three, four, five or more positions replaced by an amino acid residue that is not encoded by a human germline immunoglobulin sequence.
В некоторых вариантах осуществления изобретения, антитела, предложенные в настоящем документе, представляют собой моноклональные антитела. Используемый в настоящем документе термин моноклональное антитело относится к антителу, полученному из популяции по существу гомогенных антител, то есть отдельные антитела, составляющие популяцию, являются идентичными, за исключением возможных мутаций и/или посттрансляционных модификаций (например, изомеризации, амидирования), которые могут присутствовать в незначительных количествах. Этот термин можно использовать для обозначения такой гомогенной популяции антител. Моноклональные антитела являются высоко специфичными, они направлены против одного антигенного сайта. Кроме того, в отличие от препаратов поликлональных антител, которые обычно включают разные антитела, направленные против разных детерминант (эпитопов), каждое моноклональное антитело направлено против одной детерминанты на антигене. В дополнение к своей специфичности моноклональные антитела имеют то преимущество, что они могут быть синтезированы культуре гибридом, не загрязненные другими иммуноглобулинами. Определение моноклональное указывает на характер антитела, как полученного из по существу гомогенной популяции антител, и его не следует истолковывать как требующий получения антитела каким-либо конкретным способом. Например, предложенные в настоящем документе моноклональные антитела против BCMA могут быть получены гибридомным способом, впервые описанным Kohler et al., Nature, 256:495 (1975), или могут быть получены способами рекомбинантных ДНК (см., например, патент США № 4816567). Моноклональные антитела также могут быть выделены из фаговых библиотек антител с использованием методик, например, описанных в Clackson et al., Nature, 352:624-628 (1991) и Marks et al., J. Mol. Biol., 222:581-597 (1991).In some embodiments, the antibodies provided herein are monoclonal antibodies. As used herein, the term monoclonal antibody refers to an antibody derived from a population of essentially homogeneous antibodies, that is, the individual antibodies comprising the population are identical except for possible mutations and/or post-translational modifications (e.g., isomerization, amidation) that may be present in small quantities. This term can be used to refer to such a homogeneous population of antibodies. Monoclonal antibodies are highly specific, directed against a single antigenic site. Additionally, unlike polyclonal antibody preparations, which typically include different antibodies directed against different determinants (epitopes), each monoclonal antibody is directed against a single determinant on an antigen. In addition to their specificity, monoclonal antibodies have the advantage that they can be synthesized by hybridoma cultures without being contaminated by other immunoglobulins. The designation monoclonal refers to the nature of the antibody as being derived from a substantially homogeneous population of antibodies, and should not be construed as requiring the antibody to be produced by any particular method. For example, the anti-BCMA monoclonal antibodies provided herein can be produced by the hybridoma method first described by Kohler et al., Nature, 256:495 (1975), or can be produced by recombinant DNA methods (see, for example, US Pat. No. 4,816,567). . Monoclonal antibodies can also be isolated from phage antibody libraries using techniques such as those described in Clackson et al., Nature, 352:624-628 (1991) and Marks et al., J. Mol. Biol., 222:581-597 (1991).
В некоторых вариантах осуществления изобретения антитела, предложенные в настоящем документе, например моноклональные антитела, представляют собой химерные антитела (иммуноглобулины), в которых участок тяжелой и/или легкой цепи является идентичным или гомологичным соответствующим последовательностям в антителах, полученных из конкретных биологических видов, или отноIn some embodiments, the antibodies provided herein, such as monoclonal antibodies, are chimeric antibodies (immunoglobulins) in which a region of the heavy and/or light chain is identical or homologous to the corresponding sequences in antibodies derived from specific biological species, or relative to
- 10 044652 сится к определенному классу или подклассу антител, в то время как остальная часть цепи (цепей) является идентичной или гомологичной соответствующим последовательностям в антителах, полученных из другого биологического вида или относящихся к другому классу или подклассу антител, а также представляют собой фрагменты таких антител. Предпочтительно, чтобы такие химерные антитела проявляли желаемую биологическую активность, например связывались с BCMA (патент США № 4816567; Morrison et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 81:6851-6855 (1984)). В некоторых вариантах осуществления изобретения предложенные в настоящем документе химерные антитела включают приматизированные антитела, содержащие антигенсвязывающие последовательности вариабельного домена, полученные из приматов, кроме человека (например, яванского макака, обезьян и т.д.), и последовательности константных областей антитела человека.- 10 044652 refers to a specific class or subclass of antibodies, while the rest of the chain(s) is identical or homologous to the corresponding sequences in antibodies obtained from another biological species or belonging to a different class or subclass of antibodies, and also represent fragments of such antibodies. Preferably, such chimeric antibodies exhibit the desired biological activity, such as binding to BCMA (US Pat. No. 4,816,567; Morrison et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 81:6851-6855 (1984)). In some embodiments, chimeric antibodies provided herein include primatized antibodies comprising antigen binding variable domain sequences derived from non-human primates (eg, cynomolgus monkeys, monkeys, etc.) and human antibody constant region sequences.
В некоторых вариантах осуществления изобретения BCMA-связывающие антитела, предложенные в настоящем документе, являются моновалентными. В других вариантах осуществления изобретения BCMA-связывающие антитела, предложенные в настоящем документе, являются поливалентными, например двухвалентными, трехвалентными или четырехвалентными. В некоторых вариантах осуществления изобретения BCMA-связывающие антитела, предложенные в настоящем документе, являются моноспецифичными. В других вариантах осуществления изобретения BCMA-связывающие антитела, предложенные в настоящем документе, являются мультиспецифичными, например биспецифичными, триспецифичными и т.д. В некоторых вариантах осуществления изобретения предложенные в настоящем документе BCMA-связывающие антитела, которые являются поливалентными, связывают два или несколько эпитопов на BCMA.In some embodiments, the BCMA-binding antibodies provided herein are monovalent. In other embodiments, the BCMA-binding antibodies provided herein are multivalent, such as divalent, trivalent, or tetravalent. In some embodiments, the BCMA-binding antibodies provided herein are monospecific. In other embodiments, the BCMA-binding antibodies provided herein are multispecific, such as bispecific, trispecific, etc. In some embodiments, the BCMA-binding antibodies provided herein, which are multivalent, bind two or more epitopes on BCMA.
В некоторых других вариантах осуществления изобретения антитела, например, моноклональные антитела, предложенные в настоящем документе, могут являться гуманизированными антителами, которые могут быть получены с использованием методов рекомбинантных ДНК, известных в данной области. Описаны различные подходы к получению химерных антител. См., например, Morrison et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 81:6851 (1985); Takeda et al., Nature 314:452 (1985), Cabilly et al., патент США № 4816567; Boss et al., патент США № 4816397; Tanaguchi et al., EP 0171496; EP 0173494, GB 2177096.In some other embodiments, antibodies, such as monoclonal antibodies, provided herein may be humanized antibodies that can be produced using recombinant DNA techniques known in the art. Various approaches to the production of chimeric antibodies have been described. See, for example, Morrison et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 81:6851 (1985); Takeda et al., Nature 314:452 (1985), Cabilly et al., US Pat. No. 4,816,567; Boss et al., US Patent No. 4816397; Tanaguchi et al., EP 0171496; EP 0173494, GB 2177096.
В других вариантах осуществления изобретения антитело, предложенное в настоящем документе, представляет собой биспецифичное антитело; то есть оно направлено на второй антиген в дополнение к BCMA. Биспецифичное или бифункциональное антитело или иммуноглобулин представляет собой искусственное гибридное антитело или иммуноглобулин, имеющее две разные пары тяжелой/легкой цепей и два разных сайта связывания. Биспецифичные антитела можно получить различными способами, включая слияние гибридом или связывание Fab'-фрагментов. См., например, Songsivilai & Lachmann, Clin. Exp. Immunol. 79: 315-321 (1990). Для получения антител или их антигенсвязывающих фрагментов доступны многочисленные способы, известные специалистам в данной области. Например, антитела можно получить с использованием способов рекомбинантных ДНК (см., например, патент США № 4816567). В недавнем прошлом было разработано большое количество форматов рекомбинантных биспецифичных антител (см., например, Kontermann RE, mAbs 4:2, (2012) 1-16). В конкретных вариантах осуществления изобретения антитело представляет собой диатело, биспецифичное антитело, биспецифичное антитело по технологии выступы и впадины, биспецифичное антитело по технологии CrossMAB, например, где VL и VH или СН1 и CL одного или нескольких Fab-фрагментов поменяны местами, биспецифичный Fab2 и/или биспецифичный (mab)2 и т.п. В конкретном варианте осуществления antiBCMA Fab включает технологию CrossMAB. В другом конкретном варианте указанный второй антиген представляет собой CD19.In other embodiments, the antibody provided herein is a bispecific antibody; that is, it targets a second antigen in addition to BCMA. A bispecific or bifunctional antibody or immunoglobulin is an artificial hybrid antibody or immunoglobulin having two different heavy/light chain pairs and two different binding sites. Bispecific antibodies can be produced by a variety of methods, including hybridoma fusion or the binding of Fab' fragments. See, for example, Songsivilai & Lachmann, Clin. Exp. Immunol. 79: 315-321 (1990). Numerous methods known to those skilled in the art are available for the production of antibodies or antigen-binding fragments thereof. For example, antibodies can be produced using recombinant DNA techniques (see, for example, US Pat. No. 4,816,567). In the recent past, a large number of recombinant bispecific antibody formats have been developed (see, for example, Kontermann RE, mAbs 4:2, (2012) 1-16). In specific embodiments, the antibody is a diabody, a bispecific antibody, a peak-and-groove bispecific antibody, a CrossMAB bispecific antibody, for example, where VL and VH or CH1 and CL of one or more Fab fragments are swapped, bispecific Fab 2 and /or bispecific (mab) 2 , etc. In a specific embodiment, the antiBCMA Fab includes CrossMAB technology. In another specific embodiment, said second antigen is CD19.
В других конкретных вариантах осуществления изобретения антитело представляет собой биспецифичный агент, взаимодействующий с Т-клетками. В более конкретном варианте осуществления вторым антигеном, на который нацелен активатор Т-клеток, является CD3. В других конкретных вариантах осуществления изобретения антитело представляет собой биспецифичный агент, взаимодействующий с NK-клетками. В более конкретном варианте осуществления вторым антигеном, на который нацелен активатор NK-клеток, является NKG2D.In other specific embodiments, the antibody is a bispecific agent that interacts with T cells. In a more specific embodiment, the second antigen targeted by the T cell activator is CD3. In other specific embodiments, the antibody is a bispecific agent that interacts with NK cells. In a more specific embodiment, the second antigen targeted by the NK cell activator is NKG2D.
В некоторых вариантах осуществления изобретения биспецифичное антитело содержит не более двух Fab-фрагментов из анти-BCMA антитела и не более одного Fab-фрагмента из второго антитела, например, не более одного Fab-фрагмента анти-CD3-антитела, (схема 2+1), необязательно, не более чем с одной Fc-частью.In some embodiments, the bispecific antibody contains no more than two Fab fragments from an anti-BCMA antibody and no more than one Fab fragment from a second antibody, for example, no more than one Fab fragment from an anti-CD3 antibody, (2+1 design) , optionally, with no more than one Fc part.
В других вариантах осуществления в настоящем документе предложены фрагменты BCMAсвязывающих антител, например одноцепочечные антитела, Fab-фрагменты или F'(ab)2-фрагменты.In other embodiments, provided herein are fragments of BCMA-binding antibodies, such as single chain antibodies, Fab fragments, or F'(ab) 2 fragments.
Кроме того, в настоящем документе предложены BCMA-связывающие антитела в других конфигурациях, например, указанное антитело представляет собой или включает Triomab, kih IgG с общей легкой цепью, CrossMAb, например где VL и VH или СН1 и CL одного или нескольких Fab-фрагментов поменяны местами, орто-Fab IgG, DVD-Ig, 2 в 1-IgG, IgG-scFv, sdFv2-Fc, би-нанотело, TandAb, антитело на платформе с перепрограммируемой направленностью и двойной аффинностью (DART-платформе, например от Creative Biolabs), DART-Fc, scFv-HSA-scFv (где HSA представляет собой сывороточный альбумин человека), антитело с запирающим связыванием (dock-and-lock) (DNL)-Fab3, ImmTAC, DAF,Also provided herein are BCMA-binding antibodies in other configurations, e.g., wherein said antibody is or includes Triomab, a common light chain IgG, CrossMAb, e.g., wherein VL and VH or CH1 and CL of one or more Fab fragments are swapped in places, ortho-Fab IgG, DVD-Ig, 2 in 1-IgG, IgG-scFv, sdFv2-Fc, bi-nanobody, TandAb, antibody on a target-reprogrammable dual-affinity platform (DART platform, for example from Creative Biolabs) , DART-Fc, scFv-HSA-scFv (where HSA is human serum albumin), dock-and-lock antibody (DNL)-Fab3, ImmTAC, DAF,
- 11 044652- 11 044652
HSA body, IgG-финомер и ART-Ig.HSA body, IgG-finomer and ART-Ig.
6.3. Конъюгаты антитело-лекарственное средство.6.3. Antibody-drug conjugates.
В другом аспекте, в некоторых вариантах осуществления изобретения каждое или любое из антител или их BCMA-связывающих фрагментов может быть конъюгировано с лекарственным средством, например, токсином или токсическим фрагментом, белком, полисахаридом или низкомолекулярным соединением, с образованием конъюгата антитела и лекарственного средства. В одном варианте осуществления изобретения лекарственное средство представляет собой, например, одно или несколько из антиапоптотического агента, митотического ингибитора, противоопухолевого антибиотика, иммуномодулирующего агента, нуклеиновой кислоты для генной терапии, алкилирующего агента, анти-ангиогенного агента, антиметаболита, борсодержащего агента, химиопротекторного агента, гормонального агента, антигормонального агента, кортикостероида, фотоактивного терапевтического агента, олигонуклеотида, радионуклидного агента, радиосенсибилизатора, ингибитора топоизомеразы и ингибитора тирозинкиназ. В некоторых вариантах осуществления изобретения митотическим ингибитором является доластатин, ауристатин, майтанзиноид и растительный алкалоид. В некоторых вариантах осуществления изобретения лекарственное средство представляет собой доластатин, ауристатин, майтанзиноид и растительный алкалоид. Примером ауристатина является монометилауристатин F (MMAF) или монометиауристатин Е (ММАЕ). Примеры майтанзиноидов включают, но не ограничиваются ими, DM1, DM2, DM3 и DM4. В некоторых вариантах осуществления изобретения противоопухолевый антибиотик выбирают из группы, состоящей из актиномицина, антрациклина, калихеамицина и дуокармицина. В некоторых вариантах осуществления изобретения актиномицин представляет собой пирролобензодиазепин (PBD).In another aspect, in some embodiments, each or any of the antibodies or BCMA-binding moieties thereof may be conjugated to a drug, eg, a toxin or toxic moiety, protein, polysaccharide, or small molecule compound, to form an antibody-drug conjugate. In one embodiment, the drug is, for example, one or more of an anti-apoptotic agent, a mitotic inhibitor, an antitumor antibiotic, an immunomodulatory agent, a gene therapy nucleic acid, an alkylating agent, an anti-angiogenic agent, an antimetabolite, a boron agent, a chemoprotective agent, hormonal agent, antihormonal agent, corticosteroid, photoactive therapeutic agent, oligonucleotide, radionuclide agent, radiosensitizer, topoisomerase inhibitor and tyrosine kinase inhibitor. In some embodiments, the mitotic inhibitor is dolastatin, auristatin, a maytansinoid, and a plant alkaloid. In some embodiments, the drug is a dolastatin, auristatin, a maytansinoid, and a plant alkaloid. An example of an auristatin is monomethyl auristatin F (MMAF) or monomethyl auristatin E (MMAE). Examples of maytansinoids include, but are not limited to, DM1, DM2, DM3 and DM4. In some embodiments, the antitumor antibiotic is selected from the group consisting of actinomycin, anthracycline, calicheamicin, and duocarmycin. In some embodiments, actinomycin is a pyrrolobenzodiazepine (PBD).
В некоторых вариантах осуществления изобретения, в которых лекарственное средство представляет собой майтанзиноид, майтанзиноид представляет собой тиолсодержащий майтанзиноид, полученный, например, в соответствии со способами, раскрытыми в патенте США № 6333410. В конкретном варианте осуществления майтанзиноид представляет собой DM-1 (N2-деацетил-N2-(3-меркапто-1оксопропил)майтанзин). DM-1 в 3-10 раз более цитотоксичен, чем майтанзин, и может быть превращен в пролекарство путем связывания его через дисульфидную связь (связи) с анти-BCMA антителом или его BCMA-связывающим фрагментом, предложенными в настоящем документе. Некоторые из этих конъюгатов (иногда называемые пролекарственными соединениями, активируемыми опухолью (ТАР)) не являются цитотоксическими в кровотоке, поскольку они активируются при связывании с клеткамимишенями и интернализуются в клетку, таким образом высвобождая лекарственное соединение. В других конкретных вариантах осуществления изобретения майтанзиноиды содержат боковую цепь, которая содержит стерически закрытую тиольную связь, такие как, помимо прочего, майтанзиноиды N2деацетил-N2-(4-меркапто-1-оксопентил)-майтанзин, также именуемый DM3 и N2-деацетил-N2-(4метил-4-меркапто-1-оксопентил) майтанзин, также именуемый DM4. DM4 отличается от DM1 и DM3 тем, что он несет метальные группы на своем аС. Это приводит к стерическим затруднениям, когда DM4 присоединяется через линкер, в частности, но не ограничиваясь этим, линкер, содержащий дисульфидную связь, к направляющему агенту, такому как nBT062. Большое разнообразие майтанзиноидов, несущих стерически закрытую тиольную группу (имеющую один или два заместителя, в частности алкильные заместители, такие как метальные заместители в DM4), раскрыты в публикации патента США № 2004/0235840, которая полностью включена в настоящий документ посредством ссылки. Могут быть использованы другие эффекторные молекулы, содержащие заместители (такие как алкильные группы) в таких положениях, которые обеспечивают стерическую закрытость, когда эффектор присоединен к направляющему агенту через линкер. В некоторых конкретных вариантах осуществления эта закрытость вызывает химическую модификацию, такую как алкилирование свободного лекарственного соединения, для повышения его общей стабильности, что позволяет лекарственному соединению не только вызывать гибель клеток или постоянную блокировку клеточного цикла в опухолевых клетках, экспрессирующих BCMA, но, необязательно, также могут воздействовать на вспомогательные клетки, которые, например, поддерживают или защищают опухоль от лекарственных средств, в частности, клетки стромы опухоли и сосудистой сети опухоли, и которые обычно не экспрессируют BCMA, чтобы уменьшить или подавить их поддерживающую или защитную функцию. ДНК-алкилирующие агенты также могут быть использованы в качестве эффекторных молекул и включают, без ограничения, аналоги или производные СС-1065. СС-1065 представляет собой мощный противоопухолевый антибиотик, выделенный из культур Streptomyces zelensis, и было показано, что он исключительно цитотоксичен ш vitro (патент США № 4169888).In some embodiments in which the drug is a maytansinoid, the maytansinoid is a thiol-containing maytansinoid prepared, for example, in accordance with the methods disclosed in US Pat. No. 6,333,410. In a particular embodiment, the maytansinoid is DM-1 (N2-deacetyl -N2-(3-mercapto-1oxopropyl)maytansine). DM-1 is 3-10 times more cytotoxic than maytansine and can be converted into a prodrug by linking it via disulfide bond(s) to the anti-BCMA antibody or BCMA-binding fragment thereof provided herein. Some of these conjugates (sometimes called tumor-activated prodrugs (TAPs)) are not cytotoxic in the bloodstream because they are activated upon binding to target cells and are internalized into the cell, thereby releasing the drug compound. In other specific embodiments, maytansinoids contain a side chain that contains a sterically closed thiol bond, such as, but not limited to, the maytansinoids N2deacetyl-N2-(4-mercapto-1-oxopentyl)-maytansine, also referred to as DM3 and N2-deacetyl-N2 -(4methyl-4-mercapto-1-oxopentyl) maytansine, also called DM4. DM4 differs from DM1 and DM3 in that it carries methyl groups on its AC. This results in steric hindrance when DM4 is attached via a linker, particularly but not limited to a disulfide bond-containing linker, to a targeting agent such as nBT062. A wide variety of maytansinoids bearing a sterically closed thiol group (having one or two substituents, particularly alkyl substituents such as the methyl substituents in DM4) are disclosed in US Patent Publication No. 2004/0235840, which is incorporated herein by reference in its entirety. Other effector molecules may be used containing substituents (such as alkyl groups) at positions that provide steric closure when the effector is attached to the targeting agent via a linker. In some specific embodiments, this closure causes a chemical modification, such as alkylation of the free drug compound, to increase its overall stability, which allows the drug compound not only to cause cell death or permanent cell cycle arrest in BCMA-expressing tumor cells, but optionally also may target supporting cells that, for example, support or protect the tumor from drugs, in particular cells of the tumor stroma and tumor vasculature, and that do not normally express BCMA, to reduce or suppress their supportive or protective function. DNA alkylating agents can also be used as effector molecules and include, without limitation, CC-1065 analogs or derivatives. CC-1065 is a potent antitumor antibiotic isolated from cultures of Streptomyces zelensis and has been shown to be exceptionally cytotoxic in vitro (US Patent No. 4,169,888).
В некоторых других конкретных вариантах осуществления изобретения лекарственное средство представляет собой таксан, например таксан, который содержит одну или несколько тиольных или дисульфидных групп. Таксаны ингибируют деполимеризацию тубулина, что приводит к увеличению скорости сборки микротрубочек и гибели клеток. Таксаны, которые могут быть использованы в конъюгатах антитело-лекарственное средство с представленными в настоящем документе антителами против BCMA или их BCMA-связывающими фрагментами, например, раскрыты в патентах США №№ 6436931, 6340701, 6706708 и публикациях патентов США №№ 2004/0087649, 2004/0024049 и 2003/0004210. Другие таксаны, которые могут быть использованы, раскрыты, например, в патентах США №№ 6002023, 5998656, 5892063, 5763477, 5705508, 5703247, 5367086 и 6596757.In some other specific embodiments, the drug is a taxane, for example a taxane that contains one or more thiol or disulfide groups. Taxanes inhibit tubulin depolymerization, which leads to an increase in the rate of microtubule assembly and cell death. Taxanes that can be used in antibody-drug conjugates with the anti-BCMA antibodies or BCMA-binding fragments thereof provided herein are, for example, disclosed in US Patent Nos. 6,436,931, 6,340,701, 6,706,708 and US Patent Publications No. 2004/0087649. 2004/0024049 and 2003/0004210. Other taxanes that may be used are disclosed, for example, in US Pat. Nos. 6,002,023, 5,998,656, 5,892,063, 5,763,477, 5,705,508, 5,703,247, 5,367,086, and 6,596,757.
- 12 044652- 12 044652
В некоторых вариантах осуществления изобретения лекарственное средство представляет собой помалидомид(4-амино-2-[(3RS)-(2,6-диоксоnиперидин-3-ил)-1Н-изоиндол-1,3(2Н)-дион). В другом конкретном варианте осуществления изобретения лекарственное средство представляет собой талидомид((RS)-2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-1H-изоиндол-1,3(2Н)-дион). В другом конкретном варианте осуществления изобретения лекарственное средство представляет собой леналидомид(3-(4-амино-1оксо-1,3-дигидро-2Н-изоиндол-2-ил)пиперидин-2,6-дион). В другом конкретном варианте осуществления изобретения лекарственное средство представляет собой 3-[4-(4-морфолин-4-илметилбензилокси)-1оксо-1,3-дигидро-изоиндол-2-и 1]пиперидин-2,6-дион. В другом конкретном варианте осуществления изобретения цереблон-связывающее соединение, используемое в соответствии со способами, описанными в настоящем документе, представляет собой 3-(4-((4-((4-(2,4-дифторфенил)пиперазин-1ил)метил)бензил)окси)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион. См., например, раскрытие этих соединений в публикации патентной заявки США № 2014/0162282, которая полностью включена в настоящий документ посредством ссылки.In some embodiments, the drug is pomalidomide (4-amino-2-[(3RS)-(2,6-dioxoniperidin-3-yl)-1H-isoindole-1,3(2H)-dione). In another specific embodiment of the invention, the drug is thalidomide ((RS)-2-(2,6-dioxopiperidin-3-yl)-1H-isoindole-1,3(2H)-dione). In another specific embodiment, the drug is lenalidomide (3-(4-amino-1oxo-1,3-dihydro-2H-isoindol-2-yl)piperidin-2,6-dione). In another specific embodiment, the drug is 3-[4-(4-morpholin-4-ylmethylbenzyloxy)-1oxo-1,3-dihydro-isoindole-2-and 1]piperidine-2,6-dione. In another specific embodiment of the invention, the cereblon binding compound used in accordance with the methods described herein is 3-(4-((4-((4-(2,4-difluorophenyl)piperazin-1yl)methyl) benzyl)oxy)-1-oxoisoindolin-2-yl)piperidin-2,6-dione. See, for example, the disclosure of these compounds in US Patent Application Publication No. 2014/0162282, which is incorporated herein by reference in its entirety.
Соединения для способов, предложенных в настоящем документе, включают, но не ограничиваются ими, иммуномодулирующие соединения (Celgene Corporation), группу соединений, которые могут быть полезны для лечения нескольких типов заболеваний человека, включая некоторые виды рака.Compounds for the methods provided herein include, but are not limited to, immunomodulatory compounds (Celgene Corporation), a group of compounds that may be useful in the treatment of several types of human diseases, including some types of cancer.
Используемый в настоящем документе (если не указано иное) термин иммуномодулирующее соединение может охватывать определенные небольшие органические молекулы, которые ингибируют индуцированную LPS продукцию моноцитами TNF-α, IL-1B, 1L-12, IL-6, MIP-1a, MCP-1, GM-CSF, GCSF и СОХ-2. Эти соединения могут быть получены синтетическим путем или могут быть приобретены коммерчески.As used herein (unless otherwise indicated), the term immunomodulatory compound may encompass certain small organic molecules that inhibit LPS-induced monocyte production of TNF-α, IL-1B, 1L-12, IL-6, MIP-1a, MCP-1, GM-CSF, GCSF and COX-2. These compounds can be produced synthetically or can be purchased commercially.
В некоторых вариантах осуществления изобретения лекарственное средство включает тетразамещенные 2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-1-оксоизоиндолины, описанные в патенте США № 5798368; 1оксо- и 1,3-диоксо-2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)изоиндолины (например, 4-метилпроизводные талидомида), замещенные 2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)фталимиды и замещенные 2-(2,6-диоксопиперидин-3ил)-1-оксоизоиндолы, включая, но не ограничиваясь ими, раскрытые в патентах США №№ 5635517, 6281230, 6316471, 6403613, 6476052 и 6555554; публикации № WO 02/059106). Полное содержание каждого из патентов и патентных заявок, указанных в настоящем документе, включено посредством ссылки.In some embodiments, the drug includes tetrasubstituted 2-(2,6-dioxopiperidin-3-yl)-1-oxoisoindolines described in US Pat. No. 5,798,368; 1-oxo- and 1,3-dioxo-2-(2,6-dioxopiperidin-3-yl)isoindolines (e.g. 4-methyl thalidomide derivatives), substituted 2-(2,6-dioxopiperidin-3-yl)phthalimides and substituted 2 -(2,6-dioxopiperidin-3yl)-1-oxoisoindoles, including, but not limited to, those disclosed in US patent No. 5635517, 6281230, 6316471, 6403613, 6476052 and 6555554; publication no. WO 02/059106). The entire contents of each of the patents and patent applications set forth herein are incorporated by reference.
Различные описанные в настоящем документе соединения содержат один или несколько хиральных центров и могут существовать в виде рацемических смесей энантиомеров или смесей диастереомеров. Таким образом, в настоящем документе также предложено использование стереомерно чистых форм таких соединений, а также использование смесей этих форм. Например, можно использовать смеси, содержащие равные или неравные количества энантиомеров определенных иммуномодулирующих соединений. Эти изомеры могут быть синтезированы асимметрично или разделены с использованием стандартных методик, таких как хиральные колонки или хиральные разделяющие агенты. См., например, Jacques, J., et al., Enantiomers, Racemates and Resolutions (Wiley-Interscience, New York, 1981); Wilen, S. H., et al., Tetrahedron 33:2725 (1977); Eliel, E. L., Stereochemistry of Carbon Compounds (McGraw-Hill, NY, 1962); и Wilen, S. H., Tables of Resolving Agents and Optical Resolutions p. 268 (E. L. Eliel, Ed., Univ. of Notre Dame Press, Notre Dame, Ind., 1972).The various compounds described herein contain one or more chiral centers and may exist as racemic mixtures of enantiomers or mixtures of diastereomers. Thus, the present document also provides for the use of stereomerically pure forms of such compounds, as well as the use of mixtures of these forms. For example, mixtures containing equal or unequal amounts of enantiomers of certain immunomodulatory compounds can be used. These isomers can be synthesized asymmetrically or separated using standard techniques such as chiral columns or chiral resolving agents. See, for example, Jacques, J., et al., Enantiomers, Racemates and Resolutions (Wiley-Interscience, New York, 1981); Wilen, S. H., et al., Tetrahedron 33:2725 (1977); Eliel, E. L., Stereochemistry of Carbon Compounds (McGraw-Hill, NY, 1962); and Wilen, S. H., Tables of Resolving Agents and Optical Resolutions p. 268 (E. L. Eliel, Ed., Univ. of Notre Dame Press, Notre Dame, Ind., 1972).
Иммуномодулирующие соединения, предложенные в настоящем документе, включают, но не ограничиваются ими, 1-оксо-1,3-диоксо-2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)изоиндолины, замещенные аминогруппой в бензольном кольце, как описано в патенте США № 5635517, который включен в настоящий документ посредством ссылки.The immunomodulatory compounds provided herein include, but are not limited to, 1-oxo-1,3-dioxo-2-(2,6-dioxopiperidin-3-yl)isoindolines substituted with an amino group on the benzene ring as described in the patent US No. 5635517, which is incorporated herein by reference.
Эти соединения имеют структуру I:These compounds have structure I:
в которой один из X и Y представляет собой С=О, другой из X и Y представляет собой С=О или СН2, и R2 представляет собой водород или низший алкил, в частности метил. Конкретные иммуномодулирующие соединения включают, но не ограничиваются ими:wherein one of X and Y is C=O, the other of X and Y is C=O or CH 2 , and R 2 is hydrogen or lower alkyl, particularly methyl. Specific immunomodulatory compounds include, but are not limited to:
- 13 044652- 13 044652
и их оптически чистые изомеры.and their optically pure isomers.
Соединения могут быть получены стандартными способами синтеза (см., например, патент США № 5635517, включенный в настоящий документ посредством ссылки). Соединения также доступны от Celgene Corporation, Warren, NJ.The compounds can be prepared by standard synthetic methods (see, for example, US Pat. No. 5,635,517, incorporated herein by reference). Connections are also available from Celgene Corporation, Warren, NJ.
Другие лекарственные средства, используемые в описанных в настоящем документе композициях, относятся к классу замещенных 2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)фталимидов и замещенных 2-(2,6диоксопиперидин-3-ил)-1-оксоизоиндолов, таких как описанные в патентах США №№ 6281230, 6316471, 6335349 и 6476052, и международной патентной заявке № PCT/US97/13375 (международная публикация № WO 98/03502), каждая из которых включена в настоящий документ посредством ссылки. Типичные соединения имеют формулу:Other drugs used in the compositions described herein belong to the class of substituted 2-(2,6-dioxopiperidin-3-yl)phthalimides and substituted 2-(2,6dioxopiperidin-3-yl)-1-oxoisoindoles, such as disclosed in US Patent Nos. 6,281,230, 6,316,471, 6,335,349 and 6,476,052, and International Patent Application No. PCT/US97/13375 (International Publication No. WO 98/03502), each of which is incorporated herein by reference. Typical compounds have the formula:
R4 в которой: один из X и Y представляет собой С=О, а другой из X и Y представляет собой С=О или СН2; (i) каждый из R1, R2, R3 и R4, независимо от других, представляет собой галоген, алкил с 1-4 атомами углерода или алкоксигруппу с 1-4 атомами углерода, или (ii) один из R1, R2, R3 и R4 представляют собой -NHR5, а оставшиеся из R1, R2, R3 и R4 представляют собой водород; R5 представляет собой водород или алкил с 1-8 атомами углерода; R6 представляет собой водород, алкил с 1-8 атомами углерода, бензил или галоген; при условии, что R6 не является водородом, если X и Y представляют собой С=О, и (i) каждый из R1, R2, R3 и R4 представляет собой фтор, или (ii) один из R1, R2, R3 или R4 является аминогруппой.R 4 in which: one of X and Y is C=O, and the other of X and Y is C=O or CH 2 ; (i) each of R 1 , R 2 , R 3 and R 4 , independently of the others, is halogen, C1-4 alkyl or C1-4 alkoxy, or (ii) one of R1 , R 2 , R 3 and R 4 are -NHR 5 and the remainder of R 1 , R 2 , R 3 and R 4 are hydrogen; R 5 represents hydrogen or alkyl with 1-8 carbon atoms; R 6 represents hydrogen, C1-8 alkyl, benzyl or halogen; provided that R 6 is not hydrogen if X and Y are C=O, and (i) each of R 1 , R 2 , R 3 and R 4 is fluorine, or (ii) one of R 1 , R 2 , R 3 or R 4 is an amino group.
Соединения, представляющие этот класс, имеют формулы:Compounds representing this class have the formulas:
где R1 представляет собой водород или метил. В отдельном варианте осуществления в настоящем документе предложено использование энантиомерно чистых форм (например, оптически чистых (R) илиwhere R 1 represents hydrogen or methyl. In a separate embodiment, provided herein is the use of enantiomerically pure forms (e.g., optically pure (R) or
- 14 044652 (S) энантиомеров) этих соединений.- 14 044652 (S) enantiomers) of these compounds.
Другими специфическими иммуномодулирующими соединениями являются тетразамещенные 2(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-1-оксоизоиндолины, описанные в патенте США № 5798368, который включен в настоящий документ посредством ссылки. Типичные соединения имеют формулу:Other specific immunomodulatory compounds are the tetrasubstituted 2(2,6-dioxopiperidin-3-yl)-1-oxoisoindolines described in US Pat. No. 5,798,368, which is incorporated herein by reference. Typical compounds have the formula:
EL: EL :
КTO
оO
R1 где каждый из R1, R2, R3 и R4, независимо от других, представляет собой галоген, алкил с 1-4 атомами углерода или алкоксигруппу с 1-4 атомами углерода.R 1 where each of R 1 , R 2 , R 3 and R 4 , independently of the others, represents a halogen, alkyl with 1-4 carbon atoms or an alkoxy group with 1-4 carbon atoms.
Другими конкретными иммуномодулирующими соединениями являются 1-оксо- и 1,3-диоксо-2(2,6-диоксопиперидин-3-ил)изоиндолины, раскрытые в патенте США № 6403613, который включен в настоящий документ посредством ссылки. Типичные соединения имеют формулу:Other specific immunomodulatory compounds are 1-oxo- and 1,3-dioxo-2(2,6-dioxopiperidin-3-yl)isoindolines, disclosed in US Pat. No. 6,403,613, which is incorporated herein by reference. Typical compounds have the formula:
в которой Y представляет собой кислород или Н2, первый из R1 и R2 представляет собой галоген, алкил, алкоксигруппу, алкиламиногруппу, диалкиламиногруппу, цианогруппу или карбамоильную группу, второй из R1 и R2, независимо от первого, представляет собой водород, галоген, алкил, алкоксигруппу, алкиламиногруппу, диалкиламиногруппу, цианогруппу или карбамоильную группу, иin which Y represents oxygen or H2 , the first of R1 and R2 represents a halogen, alkyl, alkoxy group, alkylamino group, dialkylamino group, cyano group or carbamoyl group, the second of R1 and R2 , regardless of the first, represents hydrogen, a halogen, alkyl, alkoxy, alkylamino, dialkylamino, cyano or carbamoyl group, and
R3 представляет собой водород, алкил или бензил.R 3 represents hydrogen, alkyl or benzyl.
Конкретные примеры соединений имеют формулу:Specific examples of compounds have the formula:
алкоксигруппу, содержащую от 1 до 4 атомов углерода, диалкиламиногруппу, в которой каждый алкил имеет от 1 до 4 атомов углерода, цианогруппу или карбамоильную группу; второй из R1 и R2, независимо от первого, представляет собой водород, галоген, алкил, содержащий от 1 до 4 атомов углерода, алкоксигруппу, содержащую от 1 до 4 атомов углерода, алкиламиногруппу, в которой алкил содержит от 1 до 4 атомов углерода, диалкиламиногруппу, в которой каждый алкил содержит от 1 до 4 атомов углерода, цианогруппу или карбамоильную группу; и R3 представляет собой водород, алкил, содержащий от 1 до 4 атомов углерода, или бензил. Конкретные примеры включают, но не ограничиваются ими, 1-оксо-2-(2,6диоксопиперидин-3-ил)-4-метилизоиндолин.an alkoxy group containing from 1 to 4 carbon atoms, a dialkylamino group in which each alkyl has from 1 to 4 carbon atoms, a cyano group or a carbamoyl group; the second of R 1 and R 2 , regardless of the first, is hydrogen, halogen, alkyl containing from 1 to 4 carbon atoms, an alkoxy group containing from 1 to 4 carbon atoms, an alkylamino group in which the alkyl contains from 1 to 4 carbon atoms , a dialkylamino group in which each alkyl contains from 1 to 4 carbon atoms, a cyano group or a carbamoyl group; and R 3 represents hydrogen, alkyl containing from 1 to 4 carbon atoms, or benzyl. Specific examples include, but are not limited to, 1-oxo-2-(2,6dioxopiperidin-3-yl)-4-methylisoindoline.
где: первый из R1 и R2 представляет собой галоген, алкил, содержащий от 1 до 4 атомов углерода, алкоксигруппу, содержащую от 1 до 4 атомов углерода, диалкиламиногруппу, в которой каждый алкил содержит от 1 до 4 атомов углерода, цианогруппу или карбамоильную группу; второй из R1 и R2, независимо от первого, представляет собой водород, галоген, алкил, содержащий от 1 до 4 атомов углерода, алкоксигруппу, содержащую от 1 до 4 атомов углерода, алкиламиногруппу, в которой алкил содержит от 1 до 4 атомов углерода, диалкиламиногруппу, в которой каждый алкил содержит от 1 до 4 атомов углерода, цианогруппу или карбамоильную группу; и R3 представляет собой водород, алкил, содержащий от 1 до 4 атомов углерода, или бензил.where: the first of R 1 and R 2 is a halogen, an alkyl containing from 1 to 4 carbon atoms, an alkoxy group containing from 1 to 4 carbon atoms, a dialkylamino group in which each alkyl contains from 1 to 4 carbon atoms, a cyano group or a carbamoyl group group; the second of R 1 and R 2 , regardless of the first, is hydrogen, halogen, alkyl containing from 1 to 4 carbon atoms, an alkoxy group containing from 1 to 4 carbon atoms, an alkylamino group in which the alkyl contains from 1 to 4 carbon atoms , a dialkylamino group in which each alkyl contains from 1 to 4 carbon atoms, a cyano group or a carbamoyl group; and R 3 represents hydrogen, alkyl containing from 1 to 4 carbon atoms, or benzyl.
Другие конкретные соединения, предложенные в настоящем документе, имеют формулу:Other specific compounds provided herein have the formula:
- 15 044652- 15 044652
и их фармацевтически приемлемые соли, сольваты и стереоизомеры, где:and their pharmaceutically acceptable salts, solvates and stereoisomers, where:
R1 представляет собой: водород; галоген; -(СН2)пОН; (С1-С6)алкил, необязательно замещенный одним или несколькими галогенами; (С1-С6)алкоксигруппу, необязательно замещенную одним или несколькими галогенами; илиR 1 represents: hydrogen; halogen; -(CH 2 ) p OH; (C 1 -C 6 )alkyl, optionally substituted with one or more halogens; (C1- C6 )alkoxy group, optionally substituted with one or more halogens; or
-(CH2)nNHRa, где Ra представляет собой:-(CH2) n NHR a , where R a is:
водород;hydrogen;
(С1-С6)алкил, необязательно замещенный одним или несколькими галогенами;(C1- C6 )alkyl, optionally substituted with one or more halogens;
-(СН2)n-(6-10-членный арил);-(CH 2 ) n -(6-10 membered aryl);
-С(О)-(СН2)n-(6-10-членный арил) или -С(О)-(СН2)n-(6-10-членный гетероарил), где арил или гетероарил необязательно замещен одним или несколькими из: галогена; -SCF3; (С1-С6)алкила, самого необязательно замещенного одним или несколькими галогенами; или (С1-С6)алкоксигруппы, самой необязательно замещенной одним или несколькими галогенами;-C(O)-(CH 2 ) n -(6-10 membered aryl) or -C(O)-(CH 2 ) n -(6-10 membered heteroaryl), where the aryl or heteroaryl is optionally substituted by one or several of: halogen; -SCF3; (C1- C6 )alkyl, itself optionally substituted with one or more halogens; or a (C1- C6 )alkoxy group, itself optionally substituted with one or more halogens;
-С(О)-(С1-С8)алкил, где алкил необязательно замещен одним или несколькими галогенами;-C(O)-(C 1 -C 8 )alkyl, where the alkyl is optionally substituted with one or more halogens;
-С(О)-(СН2)n-(C3-C10-циклоалкил);-C(O)-(CH 2 ) n -(C 3 -C 10 -cycloalkyl);
-C(O)-(CH2)n-NRbRc, где Rb и Rc, каждый независимо, представляют собой: водород;-C(O)-(CH2) n -NR b R c where R b and R c are each independently: hydrogen;
(С1-С6)алкил, необязательно замещенный одним или несколькими галогенами;(C1- C6 )alkyl, optionally substituted with one or more halogens;
(С1-С6)алкоксигруппу, необязательно замещенную одним или несколькими галогенами; или(C1- C6 )alkoxy group, optionally substituted with one or more halogens; or
6-10-членный арил, необязательно замещенный одним или несколькими из следующих групп: гало гена;6-10 membered aryl, optionally substituted with one or more of the following groups: gene halo;
(С1-С6)алкила, самого необязательно замещенного одним или несколькими галогенами; или (С1-С6)алкоксигруппы, самой необязательно замещенной одним или несколькими галогенами;(C1- C6 )alkyl, itself optionally substituted with one or more halogens; or a (C1- C6 )alkoxy group, itself optionally substituted with one or more halogens;
-С(О)-(СН2)n-О-(С1-С6)алкил; или-C(O)-(CH2)n-O-(C1-C6)alkyl; or
-С(О)-(СН2)n-О-(СН2)n-(6-10-членный арил);-C(O)-(CH2)n-O-(CH2)n-(6-10 membered aryl);
R2 представляет собой: водород; -(СН2)пОН; фенил, -О-(С1-С6)алкил; или (С1-С6)алкил, необязательно замещенный одним или несколькими галогенами;R 2 represents: hydrogen; -(CH 2 ) p OH; phenyl, -O-(C1- C6 )alkyl; or (C1- C6 )alkyl, optionally substituted with one or more halogens;
R3 представляет собой водород; или (С1-С6)алкил, необязательно замещенный одним или несколькими галогенами; и n имеет значение 0, 1 или 2.R 3 represents hydrogen; or (C1- C6 )alkyl, optionally substituted with one or more halogens; and n has the value 0, 1 or 2.
Конкретные примеры включают, но не ограничиваются ими, 3-(5-амино-2-метил-4-оксо-4Нхиназолин-3-ил)пиперидин-2,6-дион (Соединение А), которое имеет следующую структуру:Specific examples include, but are not limited to, 3-(5-amino-2-methyl-4-oxo-4Hquinazolin-3-yl)piperidin-2,6-dione (Compound A), which has the following structure:
или его энантиомер, или смесь его энантиомеров, или его фармацевтически приемлемую соль, сольват, гидрат, сокристалл, клатрат или полиморф.or an enantiomer thereof, or a mixture of enantiomers thereof, or a pharmaceutically acceptable salt, solvate, hydrate, co-crystal, clathrate or polymorph thereof.
Соединение А может быть получено в соответствии со способами, описанными в разделе Примеры, представленном в настоящем документе, или как описано в патенте США № 7635700, раскрытие которого полностью включено в настоящий документ посредством ссылки. Соединение также может быть синтезировано другими способами, очевидными для специалистов в данной области, на основе представленных в настоящем документе идей. В некоторых вариантах осуществления соединение А находится в кристаллической форме, описанной в предварительной патентной заявке США № 61/451806, поданной 11 марта 2011 г., которая полностью включена в настоящий документ посредством ссылки. В некоторых вариантах осуществления изобретения гидрохлоридная соль соединения А используется в способах, предложенных в настоящем документе. Способы лечения, профилактики и/или контроля раковых и других заболеваний с использованием соединения А описаны в патенте США № 8802685, который полностью включен в настоящий документ посредством ссылки.Compound A can be prepared in accordance with the methods described in the Examples section presented herein or as described in US Pat. No. 7,635,700, the disclosure of which is incorporated herein by reference in its entirety. The compound may also be synthesized by other methods apparent to those skilled in the art based on the ideas presented herein. In some embodiments, Compound A is in the crystalline form described in US Provisional Patent Application No. 61/451,806, filed March 11, 2011, which is incorporated herein by reference in its entirety. In some embodiments, the hydrochloride salt of Compound A is used in the methods provided herein. Methods for treating, preventing and/or controlling cancer and other diseases using Compound A are described in US Pat. No. 8,802,685, which is incorporated herein by reference in its entirety.
Другие конкретные соединения, предложенные в настоящем документе, имеют формулу:Other specific compounds provided herein have the formula:
или являются его фармацевтически приемлемыми солью, сольватом или стереоизомером, где:or is a pharmaceutically acceptable salt, solvate or stereoisomer thereof, wherein:
- 16 044652- 16 044652
X представляет собой С=О или СН2;X represents C=O or CH2;
R1 представляет собой Y-R3;R 1 represents Y-R3;
R2 представляет собой Н или (С1-С6)алкил;R 2 represents H or (C1-C 6 )alkyl;
Y представляет собой 6-10-членный арил, гетероарил или гетероцикл, каждый из которых может быть необязательно замещен одним или несколькими галогенами; или связь;Y is a 6-10 membered aryl, heteroaryl or heterocycle, each of which may be optionally substituted with one or more halogens; or communication;
R3 представляет собой:R 3 represents:
- (СН2)n-арил, -О-(СН2)n-арил или -(СН2)n-О-арил, где арил необязательно замещен одним или несколькими из: (С1-С6)алкила, самого необязательно замещенного одним или несколькими галогенами; (С1-С6)алкоксигруппы, самой замещенный одним или несколькими галогенами; оксогруппы; аминогруппы; карбоксильной группы; цианогруппы; гидроксильной группы; галогена; дейтерия; 6-10-членного арила или гетероарила, необязательно замещенного одним или несколькими (C1-С6)алкилами, (С1С6)алкоксигруппами или галогенами; -CONH2; или -СОО-(С1-С6)алкила, где алкил может быть необязательно замещен одним или несколькими галогенами;- (CH 2 ) n -aryl, -O-(CH 2 ) n -aryl or -(CH 2 ) n -O-aryl, where aryl is optionally substituted by one or more of: (C 1 -C 6 )alkyl, itself optionally substituted with one or more halogens; (C1- C6 )alkoxy group, itself substituted by one or more halogens; oxo groups; amino groups; carboxyl group; cyano groups; hydroxyl group; halogen; deuterium; 6-10 membered aryl or heteroaryl, optionally substituted with one or more (C 1 -C 6 )alkyl, (C1C 6 )alkoxy groups or halogens; -CONH2; or -COO-(C 1 -C 6 )alkyl, where the alkyl may be optionally substituted by one or more halogens;
- (СН2)n-гетероцикл, -О-(СН2)n-гетероцикл или -(СН2)n-О-гетероцикл, где гетероцикл необязательно замещен одним или несколькими из: (С1-С6)алкила, самого необязательно замещенного одним или несколькими галогенами; (С1-С6)алкоксигруппы, самой замещенный одним или несколькими галогенами; оксогруппы; аминогруппы; карбоксильной группы; цианогруппы; гидроксильной группы; галогена; дейтерия; 6-10-членного арила или гетероарила, необязательно замещенного одним или несколькими (C1С6)алкилами, (С1-С6)алкоксигруппами или галогенами; -CONH2; или -СОО-(С1-С6)алкила, где алкил может быть необязательно замещен одним или несколькими галогенами; или- (CH 2 ) n -heterocycle, -O-(CH 2 ) n -heterocycle or -(CH 2 ) n -O-heterocycle, where the heterocycle is optionally substituted by one or more of: (C1-C 6 )alkyl, optionally itself substituted with one or more halogens; (C1- C6 )alkoxy group, itself substituted by one or more halogens; oxo groups; amino groups; carboxyl group; cyano groups; hydroxyl group; halogen; deuterium; 6-10 membered aryl or heteroaryl, optionally substituted with one or more (C 1 C 6 ) alkyls, (C 1 - C 6 ) alkoxy groups or halogens; -CONH2; or -COO-(C1-C 6 )alkyl, where the alkyl may be optionally substituted with one or more halogens; or
- (СН2)n-гетероарил, -О-(СН2)n-гетероарил или -(СН2)n-О-гетероарил, где гетероарил необязательно замещен одним или несколькими из: (С1-С6)алкила, самого необязательно замещенного одним или несколькими галогенами; (С1-С6)алкоксигруппы, самой замещенный одним или несколькими галогенами; оксогруппы; аминогруппы; карбоксильной группы; цианогруппы; гидроксильной группы; галогена; дейтерия; 6-10-членного арила или гетероарила, необязательно замещенного одним или несколькими (C1С6)алкилами, (С1-С6)алкоксигруппами или галогенами; -CONH2; или -СОО-(С1-С6)алкила, где алкил может быть необязательно замещен одним или несколькими галогенами; и n имеет значение 0, 1, 2 или 3.- (CH 2 ) n -heteroaryl, -O-(CH 2 ) n -heteroaryl or -(CH 2 ) n -O-heteroaryl, where the heteroaryl is optionally substituted by one or more of: (C1-C 6 )alkyl, optionally itself substituted with one or more halogens; (C1- C6 )alkoxy group, itself substituted by one or more halogens; oxo groups; amino groups; carboxyl group; cyano groups; hydroxyl group; halogen; deuterium; 6-10 membered aryl or heteroaryl, optionally substituted with one or more ( C1C6 )alkyl, (C1- C6 )alkoxy groups or halogens; -CONH2; or -COO-(C1-C 6 )alkyl, where the alkyl may be optionally substituted with one or more halogens; and n is 0, 1, 2 or 3.
Конкретные примеры включают, но не ограничиваются ими, 3-(4-((4(морфолинометил)бензил)окси)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,-6-дион. В одном из вариантов осуществления изобретения соединение представляет собой (S) стереоизомер 3-(4-((4(морфолинометил)бензил)окси)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,-6-диона (Соединение В) например, для использования в описанных в настоящем документе способах. Рацемический 3-(4-((4(морфолинометил)бензил)окси)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион и способы его получения описаны в патентной публикации США № 2011/0196150, которая полностью включена в настоящий документ посредством ссылки. Соединение В имеет следующую структуру:Specific examples include, but are not limited to, 3-(4-((4(morpholinomethyl)benzyl)oxy)-1-oxoisoindolin-2-yl)piperidin-2,-6-dione. In one embodiment, the compound is the (S) stereoisomer of 3-(4-((4(morpholinomethyl)benzyl)oxy)-1-oxoisoindolin-2-yl)piperidin-2,-6-dione (Compound B), e.g. , for use in the methods described herein. Racemic 3-(4-((4(morpholinomethyl)benzyl)oxy)-1-oxoisoindolin-2-yl)piperidin-2,6-dione and methods for its preparation are described in US Patent Publication No. 2011/0196150, which is incorporated in its entirety. this document by reference. Compound B has the following structure:
Все описанные соединения можно либо приобрести у компаний, либо получить в соответствии со способами, описанными в патентах или патентных публикациях, раскрытых в настоящем документе. Кроме того, оптически чистые соединения могут быть синтезированы асимметрично или разделены с использованием известных разделяющих агентов или хиральных колонок, а также других стандартных методов синтетической органической химии. Дополнительную информацию об иммуномодулирующих соединениях, их получении и применении можно найти, например, в публикациях патентных заявок США №№ US 20060188475, US 20060205787 и US 20070049618, каждая из которых полностью включена в настоящий документ посредством ссылки.All described compounds can either be purchased from companies or prepared in accordance with methods described in patents or patent publications disclosed herein. In addition, optically pure compounds can be synthesized asymmetrically or separated using known resolving agents or chiral columns, as well as other standard methods of synthetic organic chemistry. Additional information regarding immunomodulatory compounds, their preparation and use can be found, for example, in US Patent Application Publications Nos. US 20060188475, US 20060205787 and US 20070049618, each of which is incorporated herein by reference in its entirety.
В случае несоответствия между изображенной структурой и названием, данным этой структуре, структура на изображении имеет больший больший вес. Кроме того, если стереохимия структуры или части структуры не обозначена, например, жирными или пунктирными линиями, то структура или участок структуры должны интерпретироваться как охватывающие все ее стереоизомеры.If there is a discrepancy between the structure depicted and the name given to that structure, the structure in the image is given greater weight. In addition, if the stereochemistry of a structure or portion of a structure is not indicated, for example, by thick or dotted lines, then the structure or portion of a structure should be interpreted as encompassing all of its stereoisomers.
6.4. Химерные антигенные рецепторы.6.4. Chimeric antigen receptors.
В некоторых вариантах осуществления изобретения любое из антител против BCMA или ихIn some embodiments, any of the anti-BCMA antibodies or
- 17 044652- 17 044652
BCMA-связывающих участков включено в химерный антигенный рецептор, например, в виде направляющего на BCMA домена или части направляющего на BCMA домена. В конкретных вариантах осуществления CAR содержит фрагмент связывающего BCMA антитела, предложенного в настоящем документе, например, одноцепочечный Fv-фрагмент или Fab-фрагмент.The BCMA-binding sites are included in the chimeric antigen receptor, for example, as a BCMA targeting domain or part of a BCMA targeting domain. In specific embodiments, the CAR comprises a fragment of a BCMA binding antibody provided herein, for example, a single chain Fv fragment or a Fab fragment.
В некоторых вариантах осуществления изобретения химерные антигенные рецепторы (CAR) представляют собой искусственные мембраносвязанные белки, которые направляют Т-лимфоциты или естественные киллеры (NK) к антигену, например, ВСМА, и стимулируют Т-лимфоциты или NK-клетки на уничтожение клетки, представляющей антиген, например BCMA. См., например, Eshhar, патент США № 7741465. Как минимум, указанные в настоящем документе CAR содержат внеклеточный домен, который связывается с BCMA; трансмембранный домен и внутриклеточный (цитоплазматический) сигнальный домен, который передает сигнал первичной активации иммунной клетке. При соблюдении всех других условий, когда CAR экспрессируется на поверхности, например, Т-лимфоцита, и внеклеточный домен CAR связывается с BCMA, внутриклеточный сигнальный домен передает сигнал Т-лимфоциту для активации и/или пролиферации, и, если BCMA присутствует на поверхности клетки, для уничтожения клетки, экспрессирующей BCMA.In some embodiments, chimeric antigen receptors (CARs) are artificial membrane-bound proteins that direct T cells or natural killer (NK) cells to an antigen, such as BCMA, and stimulate the T cells or NK cells to kill the cell presenting the antigen. , for example BCMA. See, for example, Eshhar, US Pat. No. 7,741,465. At a minimum, the CARs provided herein contain an extracellular domain that binds BCMA; a transmembrane domain and an intracellular (cytoplasmic) signaling domain that transmits the primary activation signal to the immune cell. Under all other conditions, when CAR is expressed on the surface of, for example, a T lymphocyte, and the extracellular domain of CAR binds to BCMA, the intracellular signaling domain signals the T lymphocyte to activate and/or proliferate, and if BCMA is present on the cell surface, to kill the BCMA-expressing cell.
Поскольку Т-лимфоцитам для полной активации требуется по меньшей мере два сигнала, первичный сигнал активации и костимулирующий сигнал, обычно CAR также содержат костимулирующий домен, так что связывание внеклеточного домена с BCMA на поверхности клетки приводит к передаче как первичного сигнала активации, так и костимулирующего сигнала.Because T cells require at least two signals, a primary activation signal and a co-stimulatory signal, to be fully activated, typically CARs also contain a co-stimulatory domain such that binding of the extracellular domain to BCMA on the cell surface results in transmission of both the primary activation signal and the co-stimulatory signal .
В некоторых вариантах осуществления изобретения внутриклеточный домен CAR представляет собой или включает внутриклеточный домен или мотив белка, который экспрессируется Т-лимфоцитами и запускает активацию и/или пролиферацию указанных Т-лимфоцитов. Такой домен или мотив способен передавать первичный антигенсвязывающий сигнал, который необходим для активации Т-лимфоцита в ответ на связывание антигена с внеклеточной частью CAR. Обычно этот домен или мотив содержит или представляет собой ITAM (мотив активации иммунорецепторного тирозина). ITAM-содержащие полипептиды, подходящие для CAR, включают, например, дзета-цепь CD3 (CD3Z) или ее участки, содержащие ITAM. В конкретном варианте осуществления внутриклеточный домен представляет собой внутриклеточный сигнальный домен CD3Z. В других конкретных вариантах осуществления изобретения внутриклеточный домен происходит из цепи рецептора лимфоцитов, комплексного белка TCR/CD3, субъединицы рецептора Fc или субъединицы рецептора IL-2. В некоторых вариантах осуществления изобретения первичный сигнальный домен представляет собой или содержит сигнальный домен из TCRZ, FcRy, FcRe, CD3y, CD3δ, CD3ε, CD5, CD22, CD79a, CD79b, CD278, FceRI, DAP10, DAP12 или CD66d.In some embodiments, the intracellular domain of a CAR is or includes an intracellular domain or motif of a protein that is expressed by T lymphocytes and triggers the activation and/or proliferation of said T lymphocytes. Such a domain or motif is capable of transmitting the primary antigen-binding signal, which is necessary for T-lymphocyte activation in response to antigen binding to the extracellular part of the CAR. Typically this domain or motif contains or is an ITAM (immunoreceptor tyrosine activation motif). ITAM-containing polypeptides suitable for CAR include, for example, the CD3 zeta chain (CD3Z) or ITAM-containing regions thereof. In a specific embodiment, the intracellular domain is a CD3Z intracellular signaling domain. In other specific embodiments, the intracellular domain is derived from a lymphocyte receptor chain, a TCR/CD3 complex protein, an Fc receptor subunit, or an IL-2 receptor subunit. In some embodiments, the primary signaling domain is or comprises a signaling domain from TCRZ, FcRy, FcRe, CD3y, CD3δ, CD3ε, CD5, CD22, CD79a, CD79b, CD278, FceRI, DAP10, DAP12, or CD66d.
В некоторых вариантах осуществления изобретения CAR дополнительно содержит один или несколько костимулирующих доменов или мотивов, например, в качестве части внутриклеточного домена полипептида. Один или несколько костимулирующих доменов или мотивов могут представлять собой или содержать одну или несколько последовательности костимулирующего полипептида CD27, последовательности костимулирующего полипептида CD28, последовательности костимулирующего полипептида ОХ40 (CD134), последовательности костимулирующего полипептида 4-1ВВ (CD137) или последовательности индуцируемого костимулирующего Т-клеточного (ICOS) полипептида, или другого костимулирующего домена или мотива. В некоторых других вариантах осуществления изобретения костимулирующий домен представляет собой или включает функциональный сигнальный домен, полученный из одной или нескольких молекул МНС класса I, TNF-рецептора, иммуноглобулиноподобного белка, цитокинового рецептора, интегрина, сигнальной молекулы активации лимфоцитов (белка SLAM), активирующего NK-клеточного рецептора, BTLA, рецептора Toll-лиганда,In some embodiments, the CAR further comprises one or more co-stimulatory domains or motifs, for example, as part of the intracellular domain of the polypeptide. The one or more costimulatory domains or motifs may be or comprise one or more CD27 costimulatory polypeptide sequences, CD28 costimulatory polypeptide sequences, OX40 costimulatory polypeptide sequences (CD134), 4-1BB costimulatory polypeptide sequences (CD137), or inducible T cell costimulatory polypeptide sequences (CD137). ICOS) polypeptide, or other co-stimulatory domain or motif. In some other embodiments, the co-stimulatory domain is or includes a functional signaling domain derived from one or more MHC class I molecules, TNF receptor, immunoglobulin-like protein, cytokine receptor, integrin, signaling lymphocyte activation molecule (SLAM protein), NK-activating protein. cellular receptor, BTLA, Toll ligand receptor,
CD2, CD7, CD27, CD30, CD40, CDS, ICAM-1, LFA-1(CD1 la/CD18), В7-НЗ, CDS, ICAM-1,CD2, CD7, CD27, CD30, CD40, CDS, ICAM-1, LFA-1(CD1 la/CD18), B7-NZ, CDS, ICAM-1,
ICOS (CD278), GITR, BAFFR, LIGHT, HVEM (LIGHTR), KIRDS2, SLAMF7, NKp80 (KLRF1), NKp44, NKp30, NKp46, CD 19, CD4, CD8aa, CD8p, IL2Rp, IL2Ry, IL7Ra, ITGA4, VLA1, CD49a, ITGA4, IA4, CD49D, ITGA6, VLA-6, CD49f, ITGAD, CDlld, ITGAE, CD103, ITGAL, CDlla, LFA-1, ITGAM, CDllb, ITGAX, CDllc, ITGB1, CD29, ITGB2, CD18, LFA1, ITGB7, NKG2D, NKG2C, TNFR2, TRANCE/RANKL, DNAM1 (CD226), SLAMF4 (CD244, 2B4), CD84, CD96, CEACAM1, CRTAM, Ly9 (CD229), CD160 (BY55), PSGL1, CD100 (SEMA4D), CD69, SLAMF6 (NTB-A, Lyl08), SLAM (SLAMF1, CD 150, IPO-3), BLAME (SLAMF8), SELPLG (CD 162), LTBR, LAT, GADS, SLP-76 или PAG/Cbp.ICOS (CD278), GITR, BAFFR, LIGHT, HVEM (LIGHTR), KIRDS2, SLAMF7, NKp80 (KLRF1), NKp44, NKp30, NKp46, CD 19, CD4, CD8aa, CD8p, IL2Rp, IL2Ry, IL7Ra, ITGA4, VLA1, CD49a, ITGA4, IA4, CD49D, ITGA6, VLA-6, CD49f, ITGAD, CDlld, ITGAE, CD103, ITGAL, CDlla, LFA-1, ITGAM, CDllb, ITGAX, CDllc, ITGB1, CD29, ITGB2, CD18, LFA1, ITGB7, NKG2D, NKG2C, TNFR2, TRANCE/RANKL, DNAM1 (CD226), SLAMF4 (CD244, 2B4), CD84, CD96, CEACAM1, CRTAM, Ly9 (CD229), CD160 (BY55), PSGL1, CD100 (SEMA4D), CD69 , SLAMF6 (NTB-A, Lyl08), SLAM (SLAMF1, CD 150, IPO-3), BLAME (SLAMF8), SELPLG (CD 162), LTBR, LAT, GADS, SLP-76 or PAG/Cbp.
Трансмембранная область может представлять собой любую трансмембранную область, которая может быть включена в функциональный CAR, обычно трансмембранную область из молекулы CD4 или CD8. В некоторых вариантах осуществления изобретения трансмембранный домен CAR происходит из белка иммунной системы, который обычно передает ингибирующий сигнал таким клеткам иммунной системы, например, трансмембранного домена из CTLA4 (цитотоксического Т-лимфоцитарного антигена 4 или цитотоксического Т-лимфоцитарно-ассоциированного белка 4) или PD-1 (белка программируемой смерти-1).The transmembrane region can be any transmembrane region that can be included in a functional CAR, typically a transmembrane region from a CD4 or CD8 molecule. In some embodiments, the transmembrane domain of the CAR is derived from an immune system protein that typically conveys an inhibitory signal to such immune system cells, for example, the transmembrane domain from CTLA4 (cytotoxic T lymphocyte antigen 4 or cytotoxic T lymphocyte associated protein 4) or PD- 1 (programmed death protein-1).
- 18 044652- 18 044652
В некоторых вариантах осуществления изобретения любой из предложенных в настоящем документе Т-лимфоцитов, которые содержат множество полипептидов клеточной смерти, содержат трансмембранный домен из CTLA4 или PD-1. В конкретном варианте осуществления изобретения Тлимфоцит, экспрессирующий указанный полипептид или любой из таких полипептидов, описанных в данном документе, активируется или стимулируется к пролиферации, когда указанный полипептид связывается с указанным антигеном. В конкретном варианте осуществления изобретения полипептид, когда он экспрессируется на поверхности Т-лимфоцита, направляет Т-лимфоцит на уничтожение клетки, экспрессирующей указанный антиген.In some embodiments, any of the T lymphocytes provided herein that contain multiple cell death polypeptides contain a transmembrane domain from CTLA4 or PD-1. In a specific embodiment of the invention, a T lymphocyte expressing said polypeptide or any of such polypeptides described herein is activated or stimulated to proliferate when said polypeptide binds to said antigen. In a specific embodiment of the invention, the polypeptide, when expressed on the surface of a T lymphocyte, directs the T lymphocyte to destroy a cell expressing the specified antigen.
В конкретных вариантах осуществления изобретения любого из полипептидов в данном документе, в которых трансмембранный домен полипептида происходит из CTLA4, трансмембранный домен CTLA4 получают из CTLA4 млекопитающих, например человека, приматов или грызунов, например, мышиного CTLA4. Предпочтительно, чтобы трансмембранный домен не содержал аминокислот из внутриклеточного домена, внеклеточного домена или внутриклеточного или внеклеточного домена CTLA4 или PD-1. Конкретные неограничивающие примеры последовательностей трансмембранного домена CTLA4 или PD-1 представлены ниже.In specific embodiments of any of the polypeptides herein in which the transmembrane domain of the polypeptide is derived from CTLA4, the transmembrane domain of CTLA4 is derived from mammalian, eg, human, primate, or rodent CTLA4, eg, murine CTLA4. Preferably, the transmembrane domain does not contain amino acids from the intracellular domain, extracellular domain, or intracellular or extracellular domain of CTLA4 or PD-1. Specific non-limiting examples of CTLA4 or PD-1 transmembrane domain sequences are provided below.
В конкретном варианте осуществления трансмембранный домен CTLA4 представляет собой полипептидную последовательность, кодируемую экзоном 3 гена CTLA4 человека. В другом конкретном варианте осуществления трансмембранный домен CTLA4 представляет собой или содержит аминокислотную последовательность PEPCPDSDFLLWILAAVSSGLFFYSFLLTAVSLSKM (в трехбуквенном кодеIn a specific embodiment, the CTLA4 transmembrane domain is a polypeptide sequence encoded by exon 3 of the human CTLA4 gene. In another specific embodiment, the transmembrane domain of CTLA4 is or contains the amino acid sequence PEPCPDSDFLLWILAAVSSGLFFYSFLLTAVSLSKM (in three-letter code
Pro-Glu-ProCys-Pro-Asp-Ser-Asp-Phe-Leu-Leu-Trp-Ile-Leu-Ala-Ala-Val-Ser-Ser-Gly-Leu-Phe-Phe-TyrS er-Phe-Leu-Leu-Thr-Al a-Vai - S er-Leu-S er-Ly s-Met) (SEQ ID NO: 61). В другом конкретном варианте осуществления трансмембранный домен CTLA4 представляет собой полипептидную последовательность, кодируемую нуклеотидами 610-722 из последовательности с регистрационным номером GenBank NM_005214.4 или содержит ее. В другом конкретном варианте осуществления трансмембранный домен CTLA4 представляет собой или включает аминокислотную последовательность PDSDFLLWILAAVSSGLFFYSFLLTAVSL (в трехбуквенном кодеPro-Glu-ProCys-Pro-Asp-Ser-Asp-Phe-Leu-Leu-Trp-Ile-Leu-Ala-Ala-Val-Ser-Ser-Gly-Leu-Phe-Phe-TyrS er-Phe-Leu -Leu-Thr-Al a-Vai - S er-Leu-S er-Ly s-Met) (SEQ ID NO: 61). In another specific embodiment, the CTLA4 transmembrane domain is or comprises the polypeptide sequence encoded by nucleotides 610-722 of GenBank accession number NM_005214.4. In another specific embodiment, the transmembrane domain of CTLA4 is or includes the amino acid sequence PDSDFLLWILAAVSSGLFFYSFLLTAVSL (in three-letter code
Pro-Asp-Ser-Asp-PheLeu-Leu-Trp-Ile-Leu-Ala-Ala-Val-Ser-Ser-Gly-Leu-Phe-Phe-Tyr-Ser-Phe-Leu-Leu-Thr-AlaVal-Ser-Leu) (SEQ ID NO: 62). В другом конкретном варианте осуществления трансмембранный домен CTLA4 представляет собой полипептидную последовательность, кодируемую нуклеотидами 636-699 из последовательности с регистрационным номером GenBank NM_005214.4 или содержит ее. В другом конкретном варианте осуществления трансмембранный домен CTLA4 представляет собой или содержит аминокислотную последовательность FLLWILAAVSSGLFFYSFLLTAV (в трехбуквенном кодеPro-Asp-Ser-Asp-PheLeu-Leu-Trp-Ile-Leu-Ala-Ala-Val-Ser-Ser-Gly-Leu-Phe-Phe-Tyr-Ser-Phe-Leu-Leu-Thr-AlaVal- Ser-Leu) (SEQ ID NO: 62). In another specific embodiment, the CTLA4 transmembrane domain is or comprises the polypeptide sequence encoded by nucleotides 636-699 of GenBank accession number NM_005214.4. In another specific embodiment, the transmembrane domain of CTLA4 is or contains the amino acid sequence FLLWILAAVSSGLFFYSFLLTAV (in three-letter code
Phe-Leu-LeuTrp-Ile-Leu-Ala-Ala-Val-Ser-Ser-Gly-Leu-Phe-Phe-Tyr-Ser-Phe-Leu-Leu-Thr-Ala-Val) (SEQ ID NO: 63). См., например, ссылку на белок с регистрационным номером ENSP00000303939.3 в базе Ensembl. В другом конкретном варианте осуществления трансмембранный домен CTLA4 представляет собой или включает полипептидную последовательность FLLWILAAVSSGLFFYSFLLT (в трехбук венном кодеPhe-Leu-LeuTrp-Ile-Leu-Ala-Ala-Val-Ser-Ser-Gly-Leu-Phe-Phe-Tyr-Ser-Phe-Leu-Leu-Thr-Ala-Val) (SEQ ID NO: 63 ). See, for example, the protein reference with accession number ENSP00000303939.3 in the Ensembl database. In another specific embodiment, the transmembrane domain of CTLA4 is or includes the polypeptide sequence FLLWILAAVSSGLFFYSFLLT (in three letter code
Phe-Leu-LeuTrp-Il e-Leu-Ala-Ala-Val-Ser-Ser-Gly-Leu-Phe-Phe-Tyr-Ser-Phe-Leu-Leu-Thr) (SEQ ID NO: 64), см., например, последовательность с регистрационным номером UNIPROT P16410.Phe-Leu-LeuTrp-Il e-Leu-Ala-Ala-Val-Ser-Ser-Gly-Leu-Phe-Phe-Tyr-Ser-Phe-Leu-Leu-Thr) (SEQ ID NO: 64), cm ., for example, the sequence with registration number UNIPROT P16410.
В другом конкретном варианте осуществления трансмембранный домен CTLA4 представляет собой или содержит полипептидную последовательность FLLWILVAVSLGLFFYSFLVSAVSLS (в трехбуквенном кодеIn another specific embodiment, the transmembrane domain of CTLA4 is or contains the polypeptide sequence FLLWILVAVSLGLFFYSFLVSAVSLS (in three-letter code
Phe-Leu-Leu-Trp-Ile-Leu-ValAla-Val-Ser-Leu-Gly-Leu-Phe-Phe-Tyr-Ser-Phe-Leu-Val-Ser-Ala-Val-Ser-Leu-Ser) (SEQ ID NO: 65). См., например, Shin et al., Blood 119:5678-5687 (2012). В другом конкретном варианте осуществления трансмембранный домен PD-1 представляет собой или содержит аминокислотную последовательность TLVVGVVGGLLGSLVLLVWVLAVICSRAA (в трехбуквенном кодеPhe-Leu-Leu-Trp-Ile-Leu-ValAla-Val-Ser-Leu-Gly-Leu-Phe-Phe-Tyr-Ser-Phe-Leu-Val-Ser-Ala-Val-Ser-Leu-Ser) (SEQ ID NO: 65). See, for example, Shin et al., Blood 119:5678-5687 (2012). In another specific embodiment, the transmembrane domain of PD-1 is or contains the amino acid sequence TLVVGVVGGLLGSLVLLVWVLAVICSRAA (in three letter code
Thr-Leu-Val-Val-Gly-Val-Val-Gly-Gly-Leu-Leu-Gly-Ser-Leu-Val-LeuLeu-Val-Trp-Val-Leu-Ala-Val-Ile-Cys-Ser-Arg-Ala-Ala) (SEQ ID NO: 66). См. Finger et al., Gene 197 (1-2): 177-187 (1997). В другом конкретном варианте осуществления трансмембранный домен PD-1 представляет собой или содержит аминокислотную последовательность VGVVGGLLGSLVLLVWVLAVI (в трехбуквенном кодеThr-Leu-Val-Val-Gly-Val-Val-Gly-Gly-Leu-Leu-Gly-Ser-Leu-Val-LeuLeu-Val-Trp-Val-Leu-Ala-Val-Ile-Cys-Ser- Arg-Ala-Ala) (SEQ ID NO: 66). See Finger et al., Gene 197 (1-2): 177-187 (1997). In another specific embodiment, the transmembrane domain of PD-1 is or contains the amino acid sequence VGVVGGLLGSLVLLVWVLAVI (in three-letter code
- 19 044652- 19 044652
Val-Gly-ValVal-Gly-Gly-Leu-Leu-Gly-Ser-Leu-Val-Leu-Leu-Val-Trp-Val-Leu-Ala-Val-Ue) (SEQ ID NO: 67). См., например, последовательность с регистрационным номером UNIPROT Q15116. В другом конкретном варианте осуществления трансмембранный домен PD-1 представляет собой или содержит аминокислотную последовательность FQTLVVGVVGGLLGSLVLLVWVLAVI (в трехбуквенном кодеVal-Gly-ValVal-Gly-Gly-Leu-Leu-Gly-Ser-Leu-Val-Leu-Leu-Val-Trp-Val-Leu-Ala-Val-Ue) (SEQ ID NO: 67). See, for example, sequence registration number UNIPROT Q15116. In another specific embodiment, the transmembrane domain of PD-1 is or contains the amino acid sequence FQTLVVGVVGGLLGSLVLLVWVLAVI (in three letter code
Phe-Glu-Thr-Leu-Val-ValGly-Val-Val-Gly-Gly-Leu-Leu-Gly-Ser-Leu-Val-Leu-Leu-Val-Trp-Val-Leu-Ala-Val-Ile) (SEQ ID NO: 68). См., например, последовательность с регистрационным номером GenBank NM_005018.2.Phe-Glu-Thr-Leu-Val-ValGly-Val-Val-Gly-Gly-Leu-Leu-Gly-Ser-Leu-Val-Leu-Leu-Val-Trp-Val-Leu-Ala-Val-Ile) (SEQ ID NO: 68). See, for example, sequence GenBank accession number NM_005018.2.
В некоторых вариантах осуществления изобретения нуклеотидная последовательность, кодирующая один из трансмембранных полипептидов, раскрытые в настоящем документе, содержит нуклеотидную последовательность, которая кодирует любую из аминокислотных последовательностей, раскрытых в SEQ ID NO: 61, SEQ ID NO: 62, SEQ ID NO: 63, SEQ ID NO: 64, SEQ ID NO: 65, SEQ ID NO: 66, SEQ ID NO: 67 или SEQ ID NO: 68. В другом конкретном варианте осуществления трансмембранный домен PD-1 представляет собой или содержит по меньшей мере 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20 или 21 последовательных аминокислот, раскрытую в SEQ ID NO: 61, SEQ ID NO: 62, SEQ ID NO: 63, SEQ ID NO: 64, SEQ ID NO: 65, SEQ ID NO: 66, SEQ ID NO: 67 или SEQ ID NO: 68. В некоторых вариантах осуществления изобретения нуклеотидная последовательность, которая кодирует один из раскрытых в настоящем документе полипептидов, включает нуклеотидную последовательность, которая кодирует по меньшей мере 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20 или 21 последовательных аминокислот, раскрытых в SEQ ID NO: 61, SEQ ID NO: 62, SEQ ID NO: 63, SEQ ID NO: 64, SEQ ID NO: 65, SEQ ID NO: 66, SEQ ID NO: 67 или SEQ ID NO: 68. При конструировании полипептида, например CAR, в некоторых вариантах осуществления изобретения последовательности, принадлежащие человеку, могут быть объединены с последовательностями, принадлежащими животным. Например, полипептид, например CAR, содержащий аминокислотные последовательности внеклеточного и внутриклеточного доменов белка человека, может включать трансмембранный домен из белка биологического вида, кроме человека; например, может содержать трансмембранный домен CTLA4 мыши или трансмембранный домен PD-1 мыши. В более конкретном варианте осуществления изобретения может включать трансмембранный домен CTLA4 мыши или трансмембранный домен PD-1 мыши. В более конкретном варианте осуществления изобретения полипептид, например CAR, содержит аминокислотные последовательности, принадлежащие человеку, для внеклеточного и внутриклеточного доменов и содержит трансмембранный домен, имеющий или состоящий из аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 65.In some embodiments, the nucleotide sequence encoding one of the transmembrane polypeptides disclosed herein comprises a nucleotide sequence that encodes any of the amino acid sequences disclosed in SEQ ID NO: 61, SEQ ID NO: 62, SEQ ID NO: 63, SEQ ID NO: 64, SEQ ID NO: 65, SEQ ID NO: 66, SEQ ID NO: 67, or SEQ ID NO: 68. In another specific embodiment, the PD-1 transmembrane domain is or contains at least 10, 11 , 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20 or 21 consecutive amino acids disclosed in SEQ ID NO: 61, SEQ ID NO: 62, SEQ ID NO: 63, SEQ ID NO: 64, SEQ ID NO: 65, SEQ ID NO: 66, SEQ ID NO: 67, or SEQ ID NO: 68. In some embodiments, a nucleotide sequence that encodes one of the polypeptides disclosed herein includes a nucleotide sequence that encodes at least 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, or 21 consecutive amino acids disclosed in SEQ ID NO: 61, SEQ ID NO: 62, SEQ ID NO: 63, SEQ ID NO: 64, SEQ ID NO: 65, SEQ ID NO: 66, SEQ ID NO: 67, or SEQ ID NO: 68. When constructing a polypeptide, such as a CAR, in some embodiments, human sequences may be combined with human sequences. animals. For example, a polypeptide, such as CAR, containing the amino acid sequences of the extracellular and intracellular domains of a human protein may include a transmembrane domain from a protein of a non-human species; for example, may contain the mouse CTLA4 transmembrane domain or the mouse PD-1 transmembrane domain. In a more specific embodiment, the invention may include a mouse CTLA4 transmembrane domain or a mouse PD-1 transmembrane domain. In a more specific embodiment, a polypeptide, such as a CAR, contains human amino acid sequences for extracellular and intracellular domains and contains a transmembrane domain having or consisting of the amino acid sequence of SEQ ID NO: 65.
6.5. Фармацевтические композиции.6.5. Pharmaceutical compositions.
В другом аспекте в настоящем документе предложены фармацевтические композиции, содержащие любое из антител против BCMA или их BCMA-связывающих фрагментов. В некоторых вариантах осуществления изобретения фармацевтические композиции содержат фармацевтически приемлемый носитель.In another aspect, provided herein are pharmaceutical compositions comprising any of the anti-BCMA antibodies or BCMA-binding fragments thereof. In some embodiments, the pharmaceutical compositions contain a pharmaceutically acceptable carrier.
В некоторых вариантах осуществления изобретения составы анти-BCMA антител или их BCMAсвязывающих фрагментов, предложенных в настоящем документе, изготавливают для хранения и применения путем объединения очищенного связывающего агента по настоящему изобретению с фармацевтически приемлемым носителем (например, носителем или наполнителем). Подходящие фармацевтически приемлемые носители включают, но не ограничиваются ими, нетоксичные буферы, такие как фосфат, цитрат и другие органические кислоты; соли, такие как хлорид натрия; антиоксиданты, включая аскорбиновую кислоту и метионин; консерванты, такие как хлорид октадецилдиметилбензиламмония, хлорид гексаметония, хлорид бензалкония, хлорид бензетония, фенол, бутиловый или бензиловый спирт, алкилпарабены, такие как метил- или пропилпарабен, катехол, резорцин, циклогексанол, 3-пентанол и мкрезол; полипептиды с низкой молекулярной массой (например, менее примерно 10 аминокислотных остатков); белки, такие как сывороточный альбумин, желатин или иммуноглобулины; гидрофильные полимеры, такие как поливинилпирролидон; аминокислоты, такие как глицин, глутамин, аспарагин, гистидин, аргинин или лизин; углеводы, такие как моносахариды, дисахариды, глюкоза, манноза или декстрины; хелатирующие агенты, такие как EDTA; сахара, такие как сахароза, маннит, трегалоза или сорбитол; солеобразующие противоионы, такие как натрий; комплексы металлов, такие как комплексы Znбелок; и неионные поверхностно-активные вещества, такие как TWEEN или полиэтиленгликоль (ПЭГ). (См., например, Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 22st Edition, 2012, Pharmaceutical Press, London).In some embodiments, the anti-BCMA antibody formulations or BCMA binding fragments thereof provided herein are formulated for storage and use by combining the purified binding agent of the present invention with a pharmaceutically acceptable carrier (eg, carrier or excipient). Suitable pharmaceutically acceptable carriers include, but are not limited to, non-toxic buffers such as phosphate, citrate and other organic acids; salts such as sodium chloride; antioxidants including ascorbic acid and methionine; preservatives such as octadecyldimethylbenzylammonium chloride, hexamethonium chloride, benzalkonium chloride, benzethonium chloride, phenol, butyl or benzyl alcohol, alkylparabens such as methyl or propylparaben, catechol, resorcinol, cyclohexanol, 3-pentanol and mcresol; low molecular weight polypeptides (eg, less than about 10 amino acid residues); proteins such as serum albumin, gelatin or immunoglobulins; hydrophilic polymers such as polyvinylpyrrolidone; amino acids such as glycine, glutamine, asparagine, histidine, arginine or lysine; carbohydrates such as monosaccharides, disaccharides, glucose, mannose or dextrins; chelating agents such as EDTA; sugars such as sucrose, mannitol, trehalose or sorbitol; salt-forming counterions such as sodium; metal complexes such as Zn protein complexes; and nonionic surfactants such as TWEEN or polyethylene glycol (PEG). (See, for example, Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 22nd Edition, 2012, Pharmaceutical Press, London).
Предложенные в настоящем документе фармацевтические композиции могут быть составлены для введения любым способом для местного или системного лечения. Предложенные в настоящем документе фармацевтические составы могут быть составлены для местного применения, например, в виде эпидермальных или трансдермальных пластырей, мазей, лосьонов, кремов или гелей; или в форме капель, суппозиториев, спреев, жидкостей и порошков; для легочного введения путем ингаляции или инсуффляThe pharmaceutical compositions provided herein can be formulated for administration by any route for local or systemic treatment. The pharmaceutical compositions provided herein may be formulated for topical use, for example, in the form of epidermal or transdermal patches, ointments, lotions, creams or gels; or in the form of drops, suppositories, sprays, liquids and powders; for pulmonary administration by inhalation or insufflation
- 20 044652 ции, в том числе с помощью небулайзера, или интратрахеального или интраназального введения; или для парентерального введения, включая внутривенное, внутриартериальное, внутриопухолевое, подкожное, внутрибрюшинное, внутримышечное (например, инъекция или инфузия) или внутричерепное (например, интратекальное или внутрижелудочковое) введение.- 20 044652 tion, including using a nebulizer, or intratracheal or intranasal administration; or for parenteral administration, including intravenous, intraarterial, intratumoral, subcutaneous, intraperitoneal, intramuscular (eg, injection or infusion), or intracranial (eg, intrathecal or intraventricular) administration.
Терапевтический состав антител против BCMA или их BCMA-связывающих фрагментов, предложенных в настоящем документе, может представлять собой стандартную лекарственную форму. Такие составы включают таблетки, пилюли, капсулы, порошки, гранулы, растворы или суспензии в воде или неводной среде, или суппозитории, или пластиковые пакеты для крови или аналогичные устройства, подходящие, например, для однократного внутривенного или внутриартериального введения.The therapeutic formulation of anti-BCMA antibodies or BCMA-binding fragments thereof provided herein may be in a unit dosage form. Such formulations include tablets, pills, capsules, powders, granules, solutions or suspensions in water or non-aqueous media, or suppositories, or plastic blood bags or similar devices suitable, for example, for single intravenous or intra-arterial administration.
В некоторых вариантах осуществления изобретения антитела против BCMA или их BCMAсвязывающие фрагменты, предложенные в настоящем документе, заключены в микрокапсулы. Такие микрокапсулы получают, например, методами коацервации или межфазной полимеризации, например, гидроксиметилцеллюлозные или желатиновые микрокапсулы и полиметилметацилатные микрокапсулы, соответственно, в коллоидных системах доставки лекарственных средств (например, липосомы, альбуминовые микросферы, микроэмульсии, наночастицы и нанокапсулы) или в макроэмульсиях, как описано в Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 22st Edition, 2012, Pharmaceutical Press, London.In some embodiments, anti-BCMA antibodies or BCMA-binding fragments thereof provided herein are contained in microcapsules. Such microcapsules are prepared, for example, by coacervation or interfacial polymerization methods, for example, hydroxymethylcellulose or gelatin microcapsules and polymethylmethacylate microcapsules, respectively, in colloidal drug delivery systems (for example, liposomes, albumin microspheres, microemulsions, nanoparticles and nanocapsules) or in macroemulsions, as described in Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 22nd Edition, 2012, Pharmaceutical Press, London.
В некоторых вариантах осуществления изобретения фармацевтические составы, предложенные в настоящем документе, включают одно или несколько антител против BCMA или их BCMAсвязывающих фрагментов, предложенных в настоящем документе, в комплексе с липосомами. Способы получения липосом известны специалистам в данной области. Например, некоторые липосомы можно получить путем испарения в обращенной фазе с липидной композицией, содержащей фосфатидилхолин, холестерин и ПЭГ-модифицированный фосфатидилэтаноламин (PEG-РЕ). Липосомы можно экструдировать через фильтры с определенным размером пор, чтобы получить липосомы желаемого диаметра.In some embodiments, the pharmaceutical compositions provided herein include one or more anti-BCMA antibodies or BCMA-binding fragments thereof provided herein in combination with liposomes. Methods for preparing liposomes are known to those skilled in the art. For example, some liposomes can be prepared by reverse phase evaporation with a lipid composition containing phosphatidylcholine, cholesterol and PEG-modified phosphatidylethanolamine (PEG-PE). Liposomes can be extruded through filters of specific pore sizes to produce liposomes of the desired diameter.
6.6. Полинуклеотиды и способы получения полипептидов и антител.6.6. Polynucleotides and methods for producing polypeptides and antibodies.
В другом аспекте в настоящем документе предложены полинуклеотиды, например, полинуклеотидные последовательности, которые кодируют любое из антител против BCMA или их BCMAсвязывающие фрагменты, включая тяжелые или легкие цепи, и/или последовательности CDR для каждой цепи. В некоторых вариантах осуществления в настоящем документе предложены полинуклеотиды, содержащие полинуклеотиды, которые кодируют полипептид (или фрагмент полипептида), который специфично связывает BCMA. Термин полинуклеотиды, кодирующие полипептид охватывает полинуклеотид, который включает только кодирующие последовательности для полипептида, а также полинуклеотид, который включает дополнительные кодирующие и/или некодирующие последовательности. Например, в некоторых вариантах осуществления изобретение относится к полинуклеотиду, содержащему полинуклеотидную последовательность, которая кодирует антитело к BCMA человека или кодирует фрагмент такого антитела (например, фрагмент, содержащий сайт связывания BCMA). Полинуклеотиды по изобретению могут находиться в форме РНК или в форме ДНК. В конкретных вариантах осуществления ДНК может представлять собой, например, кДНК, геномную ДНК и синтетическую ДНК; и может быть двухцепочечной или одноцепочечной, и, в одноцепочечной форме может быть кодирующей цепью или некодирующей (антисмысловой) цепью.In another aspect, provided herein are polynucleotides, eg, polynucleotide sequences that encode any of the anti-BCMA antibodies or BCMA-binding fragments thereof, including heavy or light chains, and/or CDR sequences for each chain. In some embodiments, provided herein are polynucleotides comprising polynucleotides that encode a polypeptide (or fragment of a polypeptide) that specifically binds BCMA. The term polynucleotides encoding a polypeptide includes a polynucleotide that includes only coding sequences for the polypeptide, as well as a polynucleotide that includes additional coding and/or non-coding sequences. For example, in some embodiments, the invention provides a polynucleotide comprising a polynucleotide sequence that encodes an anti-human BCMA antibody or encodes a fragment of such an antibody (eg, a fragment containing a BCMA binding site). The polynucleotides of the invention may be in the form of RNA or in the form of DNA. In specific embodiments, the DNA may be, for example, cDNA, genomic DNA, and synthetic DNA; and may be double-stranded or single-stranded, and, in single-stranded form, may be a coding strand or a non-coding (antisense) strand.
В конкретных вариантах осуществления изобретения полинуклеотиды, предложенные в настоящем документе, кодируют вариабельную область легкой цепи антитела, содержащую, состоящую в основном из или состоящую из нуклеотидной последовательности SEQ ID NO: 5.In specific embodiments, the polynucleotides provided herein encode an antibody light chain variable region comprising, consisting essentially of, or consisting of the nucleotide sequence of SEQ ID NO: 5.
В других конкретных вариантах осуществления изобретения полинуклеотиды, предложенные в настоящем документе, кодируют вариабельную область тяжелой цепи антитела, содержащую, состоящую в основном из или состоящую из нуклеотидной последовательности SEQ ID NO: 16, SEQ ID NO: 27, SEQ ID NO: 38, SEQ ID NO: 49 или SEQ ID NO: 60.In other specific embodiments, the polynucleotides provided herein encode an antibody heavy chain variable region comprising, consisting essentially of, or consisting of the nucleotide sequence of SEQ ID NO: 16, SEQ ID NO: 27, SEQ ID NO: 38, SEQ ID NO: 49 or SEQ ID NO: 60.
В других конкретных вариантах осуществления изобретения полинуклеотиды, предложенные в настоящем документе, кодируют вариабельную область легкой цепи антитела, содержащую, состоящую в основном из или состоящую из нуклеотидной последовательности SEQ ID NO: 5, и кодируют цепь вариабельной области тяжелой цепи антитела, содержащую, состоящую в основном из или состоящую из нуклеотидной последовательности SEQ ID NO: 16. В других конкретных вариантах осуществления изобретения полинуклеотиды, предложенные в настоящем документе, кодируют вариабельную область легкой цепи антитела, содержащую, состоящую в основном из или состоящую из нуклеотидной последовательности SEQ ID NO: 5, и кодируют вариабельную область тяжелой цепи антитела, содержащую, состоящую в основном из или состоящую из нуклеотидной последовательности SEQ ID NO: 27. В других конкретных вариантах осуществления изобретения полинуклеотиды, предложенные в настоящем документе, кодируют вариабельную область легкой цепи антитела, содержащую, состоящую в основном из или состоящую из нуклеотидной последовательности SEQ ID NO: 5, и кодируют вариабельную область тяжелой цепи антитела, содержащую, состоящую в основном из или состоящую из нуклеотидной последовательности SEQ ID NO: 38. В других конкретных вариантах осуществления изобретения полинуклеотиды, предложенные в настоящем документе, кодируют вариабельную область легкой цепи антитела, содержащую, состоящую в основном из или состоящую из нуклеотидной последовательности SEQ IDIn other specific embodiments, the polynucleotides provided herein encode an antibody light chain variable region comprising, consisting essentially of, or consisting of the nucleotide sequence of SEQ ID NO: 5, and encode an antibody heavy chain variable region comprising, consisting of substantially of or consisting of the nucleotide sequence of SEQ ID NO: 16. In other specific embodiments, the polynucleotides provided herein encode an antibody light chain variable region comprising, consisting primarily of or consisting of the nucleotide sequence of SEQ ID NO: 5, and encode an antibody heavy chain variable region comprising, consisting essentially of, or consisting of the nucleotide sequence of SEQ ID NO: 27. In other specific embodiments, the polynucleotides provided herein encode an antibody light chain variable region containing, consisting essentially of of or consisting of the nucleotide sequence of SEQ ID NO: 5, and encode an antibody heavy chain variable region comprising, consisting essentially of, or consisting of the nucleotide sequence of SEQ ID NO: 38. In other specific embodiments, the polynucleotides provided herein are encodes an antibody light chain variable region comprising, consisting essentially of, or consisting of the nucleotide sequence of SEQ ID
- 21 044652- 21 044652
NO: 5, и кодируют вариабельную область тяжелой цепи антитела, содержащую, состоящую в основном из или состоящую из нуклеотидной последовательности SEQ ID NO: 49. В других конкретных вариантах осуществления изобретения полинуклеотиды, предложенные в настоящем документе, кодируют вариабельную область легкой цепи антитела, содержащую, состоящую в основном из или состоящую из нуклеотидной последовательности SEQ ID NO: 5, и кодируют вариабельную область тяжелой цепи антитела, содержащую, состоящую в основном из или состоящую из нуклеотидной последовательности SEQ ID NO: 60.NO: 5, and encode an antibody heavy chain variable region comprising, consisting essentially of, or consisting of the nucleotide sequence of SEQ ID NO: 49. In other specific embodiments, the polynucleotides provided herein encode an antibody light chain variable region comprising consisting essentially of or consisting of the nucleotide sequence of SEQ ID NO: 5, and encodes an antibody heavy chain variable region comprising, consisting essentially of or consisting of the nucleotide sequence of SEQ ID NO: 60.
Любой из полинуклеотидов, предложенных в настоящем документе, может содержаться в полинуклеотидном векторе и/или экспрессироваться с него. В некоторых вариантах осуществления изобретения вектор содержится в клетке-хозяине. Такая клетка-хозяин после трансформации или трансфекции вектором, предложенным в настоящем документе, экспрессирует или способна экспрессировать полинуклеотидные последовательности, кодирующие антитела против BCMA, предложенные в настоящем документе. В некоторых вариантах осуществления изобретения полинуклеотиды, предложенные в настоящем документе, функционально связаны с одной или несколькими регуляторными последовательностями в векторе, чтобы обеспечить экспрессию BCMA-связывающего антитела.Any of the polynucleotides provided herein may be contained in and/or expressed from a polynucleotide vector. In some embodiments, the vector is contained in a host cell. Such a host cell, when transformed or transfected with a vector provided herein, expresses or is capable of expressing polynucleotide sequences encoding the anti-BCMA antibodies provided herein. In some embodiments, the polynucleotides provided herein are operably linked to one or more regulatory sequences in a vector to allow expression of a BCMA-binding antibody.
Термин вектор, используемый в данном документе, означает молекулу нуклеиновой кислоты, используемую в качестве носителя для переноса генетического материала в клетку, и охватывает, без ограничения, плазмиды, вирусные геномы (включая неспособные к репликации вирусные геномы и вирусные геномы в нескольких сегментах), космиды и искусственные хромосомы. В общем, сконструированные векторы содержат точку инициации репликации, участок с множеством сайтов для клонирования и селективный маркер. Сам вектор обычно представляет собой нуклеотидную последовательность, обычно последовательность ДНК, которая содержит вставку (трансген, например, любую из описанных в настоящем документе последовательностей, кодирующих антитело против BCMA) и более длинную последовательность, которая служит каркасом вектора. Векторы могут включать дополнительные функции, помимо вставки трансгена и каркаса: промотор, генетический маркер, устойчивость к антибиотику, репортерный ген, направляющую последовательность, тег для очистки белка. Векторы, называемые экспрессионными векторами, обеспечивают экспрессию трансгена в клетке-мишени и обычно имеют регуляторные последовательности, такие как промоторная последовательность, которая управляет экспрессией трансгена. Встраивание вектора в клетку-мишень обычно называется трансформацией для бактериальных клеток и трансфекцией для эукариотических клеток; также, вставка вирусного вектора в клетку млекопитающего называется трансдукцией.The term vector as used herein means a nucleic acid molecule used as a carrier for the transfer of genetic material into a cell and includes, without limitation, plasmids, viral genomes (including replication-incompetent viral genomes and viral genomes in multiple segments), cosmids and artificial chromosomes. In general, the constructed vectors contain an origin of replication, a region with multiple cloning sites, and a selectable marker. The vector itself is typically a nucleotide sequence, typically a DNA sequence, that contains an insert (a transgene, e.g., any of the anti-BCMA antibody coding sequences described herein) and a longer sequence that serves as the backbone of the vector. Vectors may include additional functions beyond transgene insertion and scaffold: promoter, genetic marker, antibiotic resistance, reporter gene, guide sequence, protein purification tag. Vectors, called expression vectors, provide expression of a transgene in a target cell and typically have regulatory sequences, such as a promoter sequence, that direct expression of the transgene. Incorporation of a vector into a target cell is usually called transformation for bacterial cells and transfection for eukaryotic cells; Also, the insertion of a viral vector into a mammalian cell is called transduction.
Используемый в настоящем документе термин клетка-хозяин относится к клетке, в которую полинуклеотид, кодирующий BCMA-связывающее антитело, предложенное в настоящем документе, вводится посредством трансформации, трансфекции и т.п. Этот термин относится не только к конкретным клеткам, которые трансфицируются, трансформируются или трансдуцируются, но и к потомкам таких клеток. Поскольку определенные модификации могут возникать в последующих поколениях из-за мутаций или влияния окружающей среды, такое потомство может не быть идентичным родительским клеткам, но по-прежнему входит в объем используемого в настоящем документе термина.As used herein, the term host cell refers to a cell into which a polynucleotide encoding a BCMA-binding antibody provided herein is introduced through transformation, transfection, or the like. The term refers not only to the specific cells that are transfected, transformed or transduced, but also to the descendants of such cells. Since certain modifications may arise in subsequent generations due to mutations or environmental influences, such progeny may not be identical to the parent cells, but are still within the scope of the term as used herein.
Используемый в настоящем документе термин экспрессия включает любую стадию, участвующую в продукции связывающей молекулы по изобретению, включая, но не ограничиваясь, транскрипцию (например, с полинуклеотида, предложенного в настоящем документе, или полинуклеотида, кодирующего BCMA-связывающее антитело или его BCMA-связывающий фрагмент, предложенные в настоящем документе), и, в некоторых вариантах осуществления изобретения, посттранскрипционную модификацию, трансляцию, посттрансляционную модификацию и секрецию, например, BCMAсвязывающего антитела или его BCMA-связывающего фрагмента, предложенных в настоящем документе.As used herein, the term expression includes any step involved in the production of a binding molecule of the invention, including, but not limited to, transcription (for example, from a polynucleotide provided herein or a polynucleotide encoding a BCMA-binding antibody or a BCMA-binding fragment thereof provided herein), and, in some embodiments, post-transcriptional modification, translation, post-translational modification and secretion of, for example, a BCMA binding antibody or a BCMA binding fragment thereof provided herein.
Термин регуляторные последовательности относится к нуклеотидным последовательностям, необходимым для экспрессии функционально связанной кодирующей последовательности в конкретном организме-хозяине. Регуляторные последовательности, которые подходят для прокариот, например, включают промотор, необязательно, операторную последовательность и сайт связывания рибосомы. Известно, что эукариотические клетки используют, а вектор может содержать: промоторы, сигналы полиаденилирования и энхансеры.The term regulatory sequences refers to nucleotide sequences necessary for the expression of an operably linked coding sequence in a particular host organism. Regulatory sequences that are suitable for prokaryotes, for example, include a promoter, optionally an operator sequence and a ribosome binding site. It is known that eukaryotic cells are used, and the vector may contain: promoters, polyadenylation signals and enhancers.
В данном контексте нуклеиновая кислота или полинуклеотид функционально связаны, когда они находятся в функциональной связи с другой нуклеотидной последовательностью. Например, нуклеотидная последовательность промотора функционально связана с нуклеотидной последовательностью, кодирующей BCMA-связывающее антитело или его BCMA-связывающий фрагмент, если промотор управляет экспрессией BCMA-связывающего антитела или его BCMA-связывающего фрагмента; или, в качестве другого примера, нуклеотидная последовательность для пре-последовательности или секреторного лидера функционально связана с нуклеиновой кислотой, кодирующей полипептид, если она экспрессируется в виде пребелка, который участвует в секреции полипептида; промотор или энхансер функционально связаны с кодирующей последовательностью, если они влияют на транскрипцию последовательности; или сайт связывания рибосомы функционально связан с кодирующей последовательностью, если он расAs used herein, a nucleic acid or polynucleotide is operably linked when it is in operative relationship with another nucleotide sequence. For example, the nucleotide sequence of a promoter is operably linked to a nucleotide sequence encoding a BCMA-binding antibody or a BCMA-binding fragment thereof, if the promoter drives expression of the BCMA-binding antibody or a BCMA-binding fragment thereof; or, as another example, the nucleotide sequence for a pre-sequence or secretory leader is operably linked to a nucleic acid encoding a polypeptide if expressed as a preprotein that participates in the secretion of the polypeptide; a promoter or enhancer is operably linked to a coding sequence if it affects transcription of the sequence; or the ribosome binding site is operably linked to the coding sequence if it is
- 22 044652 положен так, чтобы способствовать трансляции. Обычно функционально связанный означает, что связанные последовательности нуклеиновых кислот являются смежными, а в случае секреторного лидера являются смежными и находятся в одной и той же рамке считывания. Однако энхансеры не обязательно должны быть смежными. Связывание можно осуществлять, например, лигированием по удобным сайтам рестрикции. Если такие сайты не существуют, используются синтетические олигонуклеотидные адаптеры или линкеры в соответствии с общепринятой практикой.- 22 044652 is placed so as to facilitate broadcasting. Generally, operably linked means that the linked nucleic acid sequences are contiguous, and in the case of a secretory leader, contiguous and in the same reading frame. However, enhancers do not have to be contiguous. Linking can be accomplished, for example, by ligation at convenient restriction sites. If such sites do not exist, synthetic oligonucleotide adapters or linkers are used in accordance with standard practice.
Термины клетка-хозяин, клетка-мишень или клетка-реципиент включают любую отдельную клетку или культуру клеток, которые могут быть или были реципиентами для векторов или для включения экзогенных молекул нуклеиновых кислот, полинуклеотидов и/или белков. Эти термины также включают потомство одной клетки, и это потомство необязательно должно быть полностью идентичным (по морфологии, геномной или общей ДНК) исходной родительской клетке из-за естественной, случайной или преднамеренной мутации. Клетки могут быть прокариотическими или эукариотическими и включать, помимо прочего, бактериальные клетки, дрожжевые клетки, клетки животных и клетки млекопитающих, например мыши, крысы, макака или человека. Подходящие клетки-хозяева включают прокариотические и эукариотические клетки-хозяева, включая дрожжи, грибы, клетки насекомых и клетки млекопитающих.The terms host cell, target cell or recipient cell include any individual cell or culture of cells that can be or have been recipients for vectors or for the incorporation of exogenous nucleic acid molecules, polynucleotides and/or proteins. These terms also include the progeny of a single cell, and these progeny need not be completely identical (in morphology, genomic or total DNA) to the original parent cell due to natural, accidental or intentional mutation. The cells may be prokaryotic or eukaryotic and include, but are not limited to, bacterial cells, yeast cells, animal cells and mammalian cells such as mouse, rat, macaque or human. Suitable host cells include prokaryotic and eukaryotic host cells, including yeast, fungi, insect cells and mammalian cells.
Антитела или их фрагменты могут продуцироваться бактериями. После экспрессии связывающая молекула по изобретению, предпочтительно, выделяется из осадка клеток Е. coli в растворимой фракции и может быть очищена, например, с помощью аффинной хроматографии и/или гель-хроматографии. Окончательную очистку можно проводить аналогично процессу очистки антител, экспрессируемых, например, в клетках CHO.Antibodies or fragments thereof can be produced by bacteria. Once expressed, the binding molecule of the invention is preferably recovered from the E. coli cell pellet in a soluble fraction and can be purified, for example, by affinity chromatography and/or size exclusion chromatography. Final purification can be carried out similarly to the purification process for antibodies expressed, for example, in CHO cells.
В дополнение к прокариотам, подходящими хозяевами для клонирования или экспрессии связывающей молекулы по изобретению являются эукариотические микроорганизмы, такие как мицелиальные грибы или дрожжи. Saccharomyces cerevisiae, или обычные пекарские дрожжи, наиболее часто используются из низших эукариотических микроорганизмов-хозяев. Однако ряд других родов, видов и штаммов обычно доступны и подходят для применения в настоящем изобретении, такие как Schizosaccharomyces pombe, клетки-хозяева Kluyveromyces, такие как, например, K. lactis, K. fragilis (ATCC 12424), K. bulgaricus (ATCC 16045), K. wickeramii (ATCC 24178), K. waltii (ATCC 56500), K. drosophilarum (ATCC 36906), K. thermotolerans и K. marxianus; Yarrowia (EP 402 226); Pichia pastoris (EP 183 070); Candida; Trichoderma reesia (EP 244 234); Neurospora crassa; Schwanniomyces, такие как Schwanniomyces occidentalism и мицелиальные грибы, такие как, например, Neurospora, Penicillium, Tolypocladium, и клетки-хозяева Aspergillus, такие как А nidulans и A. niger.In addition to prokaryotes, suitable hosts for cloning or expression of the binding molecule of the invention include eukaryotic microorganisms such as filamentous fungi or yeast. Saccharomyces cerevisiae, or common baker's yeast, is the most commonly used lower eukaryotic microorganism host. However, a number of other genera, species and strains are commonly available and suitable for use in the present invention, such as Schizosaccharomyces pombe, Kluyveromyces host cells such as, for example, K. lactis, K. fragilis (ATCC 12424), K. bulgaricus (ATCC 16045), K. wickeramii (ATCC 24178), K. waltii (ATCC 56500), K. drosophilarum (ATCC 36906), K. thermotolerans and K. marxianus; Yarrowia (EP 402 226); Pichia pastoris (EP 183 070); Candida; Trichoderma reesia (EP 244 234); Neurospora crassa; Schwanniomyces such as Schwanniomyces occidentalism and filamentous fungi such as, for example, Neurospora, Penicillium, Tolypocladium, and Aspergillus host cells such as A nidulans and A. niger.
Подходящие клетки-хозяева для экспрессии гликозилированной связывающей молекулы по изобретению, предпочтительно, связывающих молекул, полученных из антител, происходят из многоклеточных организмов. Примеры клеток беспозвоночных включают клетки растений и насекомых. Были идентифицированы многочисленные штаммы и варианты бакуловирусов и соответствующие пермиссивные клетки-хозяева насекомых, такие как Spodoptera frugiperda (гусеница совки), Aedes aegypti (комар), Aedes albopictus (комар), Drosophila melanogaster (плодовая мушка) и Bombyx mori. Разнообразные вирусные штаммы для трансфекции являются общедоступными, например, вариант L-1 Autographa californica NPV и штамм Bm-5 у Bombyx mori NPV, и такие вирусы могут использоваться в качестве вируса в настоящем документе согласно настоящему изобретению, в частности, для трансфекции клеток Spodoptera frugiperda.Suitable host cells for expressing the glycosylated binding molecule of the invention, preferably antibody-derived binding molecules, are from multicellular organisms. Examples of invertebrate cells include plant and insect cells. Numerous strains and variants of baculoviruses and their corresponding permissive insect host cells have been identified, such as Spodoptera frugiperda (fall armyworm caterpillar), Aedes aegypti (mosquito), Aedes albopictus (mosquito), Drosophila melanogaster (fruit fly) and Bombyx mori. A variety of viral strains for transfection are publicly available, for example Autographa californica NPV variant L-1 and Bombyx mori NPV strain Bm-5, and such viruses can be used as the virus herein according to the present invention, in particular for transfecting Spodoptera frugiperda cells .
Культуры растительных клеток хлопчатника, кукурузы, картофеля, сои, петунии, томата, Arabidopsis или табака также можно использовать в качестве хозяев. Векторы для клонирования и экспрессии, применимые для продукции белков в культуре растительных клеток, известны специалистам в данной области. См., например, Hiatt et al., Nature (1989) 342: 76-78, Owen et al. (1992) Bio/Technology 10: 790794, Artsaenko et al. (1995) The Plant J. 8: 745-750 и Fecker et al. (1996) Plant Mol. Biol. 32: 979-986.Plant cell cultures from cotton, corn, potato, soybean, petunia, tomato, Arabidopsis or tobacco can also be used as hosts. Cloning and expression vectors useful for producing proteins in plant cell culture are known to those skilled in the art. See, for example, Hiatt et al., Nature (1989) 342: 76-78, Owen et al. (1992) Bio/Technology 10: 790794, Artsaenko et al. (1995) The Plant J. 8: 745-750 and Fecker et al. (1996) Plant Mol. Biol. 32: 979-986.
Размножение клеток позвоночных в культуре (культуре ткани) и экспрессия в них белков стали рутинной процедурой. Примерами подходящих линий клеток-хозяев млекопитающих являются линия CV1 почки обезьяны, трансформированная SV40 (C0S-7, ATCC CRL 1651); линия почки эмбриона человека (клетки 293 или 293, субклонированные для роста в суспензионной культуре, Graham et al., J. Gen Virol. 36:59 (1977)); клетки почки детеныша хомячка (ВНК, ATCC CCL 10); Клетки яичника китайского хомячка/-DHFR (СНО, Urlaub et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 77: 4216 (1980)); мышиные клетки Сертоли (TM4, Mather, Biol. Reprod. 23: 243-251 (1980)); клетки почки обезьяны (CV1, ATCC CCL 70); клетки почки африканской зеленой мартышки (VERO-76, ATCC CRL1587); клетки карциномы шейки матки человека (HELA, ATCC CCL 2); клетки почки собаки (MDCK, ATCC CCL 34); клетки печени серой крысы (BRL ЗА, АТСС CRL 1442); клетки легкого человека (W138, АТСС CCL 75); клетки печени человека (Hep G2, 1413 8065); клетки опухоли молочной железы мыши (ММТ 060562, АТСС CCL51); клетки TRI (Mather et al., Annals N.Y. Acad. Sci. 383:44-68 (1982)); клетки MRC 5; клетки FS4; и линия клеток гепатомы человека (Hep G2).The propagation of vertebrate cells in culture (tissue culture) and the expression of proteins in them has become a routine procedure. Examples of suitable mammalian host cell lines include monkey kidney line CV1 transformed with SV40 (C0S-7, ATCC CRL 1651); human embryonic kidney line (293 or 293 cells subcloned for growth in suspension culture, Graham et al., J. Gen Virol. 36:59 (1977)); baby hamster kidney cells (BHK, ATCC CCL 10); Chinese Hamster Ovary Cells/-DHFR (CHO, Urlaub et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 77: 4216 (1980)); mouse Sertoli cells (TM4, Mather, Biol. Reprod. 23: 243-251 (1980)); monkey kidney cells (CV1, ATCC CCL 70); African green monkey kidney cells (VERO-76, ATCC CRL1587); human cervical carcinoma cells (HELA, ATCC CCL 2); canine kidney cells (MDCK, ATCC CCL 34); gray rat liver cells (BRL 3A, ATCC CRL 1442); human lung cells (W138, ATCC CCL 75); human liver cells (Hep G2, 1413 8065); mouse mammary tumor cells (MMT 060562, ATCC CCL51); TRI cells (Mather et al., Annals N.Y. Acad. Sci. 383:44-68 (1982)); MRC 5 cells; FS4 cells; and a human hepatoma cell line (Hep G2).
При использовании рекомбинантных методов, BCMA-связывающие антитела или их фрагменты, предложенные в настоящем документе, могут продуцироваться внутриклеточно, в периплазматическомUsing recombinant methods, BCMA-binding antibodies or fragments thereof provided herein can be produced intracellularly, in the periplasmic
- 23 044652 пространстве или прямо секретироваться в среду. Если связывающая молекула продуцируется внутриклеточно, на первом этапе частицы дебриса, будь то клетки-хозяева или лизированные фрагменты, удаляются, например, с помощью центрифугирования или ультрафильтрации. В статье Carter et al., Bio/Technology 10: 163-167 (1992) описана процедура выделения антител, которые секретируются в периплазматическое пространство Е. coli. Вкратце, клеточный осадок размораживается в присутствии ацетата натрия (рН 3,5), EDTA и фенилметилсульфонилфторида (PMSF) в течение примерно 30 мин. Остатки клеток можно удалить центрифугированием. Когда антитело секретируется в среду, супернатанты таких экспрессионных систем обычно сначала концентрируют с использованием коммерчески доступного фильтра для концентрации белка, например, устройства для ультрафильтрации Amicon или Millipore Pellicon. Ингибитор протеаз, такой как PMSF, может быть включен на любой из вышеуказанных стадий для ингибирования протеолиза, а антибиотики могут быть включены для предотвращения роста попавших микроорганизмов.- 23 044652 space or directly secreted into the environment. If the binding molecule is produced intracellularly, in a first step the debris particles, whether host cells or lysed fragments, are removed, for example by centrifugation or ultrafiltration. Carter et al., Bio/Technology 10: 163-167 (1992) describe a procedure for isolating antibodies that are secreted into the periplasmic space of E. coli. Briefly, the cell pellet is thawed in the presence of sodium acetate (pH 3.5), EDTA, and phenylmethylsulfonyl fluoride (PMSF) for approximately 30 min. Remaining cells can be removed by centrifugation. When the antibody is secreted into the medium, the supernatants of such expression systems are typically first concentrated using a commercially available protein concentration filter, such as an Amicon or Millipore Pellicon ultrafiltration device. A protease inhibitor such as PMSF may be included at any of the above steps to inhibit proteolysis, and antibiotics may be included to prevent the growth of ingested microorganisms.
Антитела против BCMA или их BCMA-связывающие фрагменты, полученные из клеток-хозяев, могут быть очищены с использованием, например, хроматографии на гидроксилапатите, гельэлектрофореза, диализа и аффинной хроматографии, причем предпочтительной методикой очистки является аффинная хроматография. Носитель, к которой присоединен аффинный лиганд, чаще всего представляет собой агарозу, но доступны и другие носители. Механически стабильные носители, такие как стекло с контролируемым размером пор или поли(стиролдивинил)бензол, обеспечивают более высокие скорости потока и более короткое время процедуры, по сравнению с теми, которые могут быть достигнуты с агарозой. Если связывающая молекула по настоящему изобретению содержит домен СН3, для очистки можно использовать ABXMresin Bakerbond (JT Baker, Phillipsburg, NJ). В зависимости от антитела, подлежащего выделению, могут использоваться другие методы очистки белков, такие как фракционирование на ионообменной колонке, осаждение этанолом, обращеннофазовая ВЭЖХ, хроматография на диоксиде кремния, хроматография на гепарин-SEPHAROSE!!!, хроматография на анионной или катионообменной смоле (такой как колонка с полиаспарагиновой кислотой), хроматофокусировка, SDS-PAGE и осаждение сульфатом аммония в соответствии со стандартными процедурами.Anti-BCMA antibodies or BCMA-binding fragments thereof obtained from host cells can be purified using, for example, hydroxylapatite chromatography, gel electrophoresis, dialysis and affinity chromatography, with affinity chromatography being the preferred purification technique. The carrier to which the affinity ligand is attached is most often agarose, but other carriers are available. Mechanically stable supports such as controlled pore glass or poly(styrene divinyl)benzene provide higher flow rates and shorter treatment times than can be achieved with agarose. If the binding molecule of the present invention contains a CH3 domain, ABXMresin Bakerbond (JT Baker, Phillipsburg, NJ) can be used for purification. Depending on the antibody to be isolated, other protein purification methods may be used, such as ion exchange column fractionation, ethanol precipitation, reverse phase HPLC, silica chromatography, heparin-SEPHAROSE!!! chromatography, anion or cation exchange resin chromatography (such as a polyaspartic acid column), chromatofocusing, SDS-PAGE and ammonium sulfate precipitation according to standard procedures.
В другом аспекте предложены способы получения связывающих молекул по настоящему изобретению, где указанные способы включают культивирование клетки-хозяина, определенной в данном документе, в условиях, позволяющих экспрессию связывающей молекулы, и выделение полученной связывающей молекулы из культуры.In another aspect, methods are provided for producing the binding molecules of the present invention, wherein the methods comprise culturing a host cell as defined herein under conditions allowing expression of the binding molecule, and isolating the resulting binding molecule from the culture.
Термин культивирование относится к поддержанию, дифференцировке, росту, пролиферации и/или размножению клеток in vitro в подходящих условиях в среде.The term culture refers to the maintenance, differentiation, growth, proliferation and/or propagation of cells in vitro under suitable environmental conditions.
6.7. Способы применения.6.7. Methods of application.
В другом аспекте в настоящем документе предложены способы применения антител против BCMA или их BCMA-связывающих фрагментов, например способы лечения с использованием таких антител или фрагментов антител.In another aspect, provided herein are methods of using anti-BCMA antibodies or BCMA-binding fragments thereof, such as methods of treatment using such antibodies or antibody fragments.
В некоторых вариантах осуществления изобретения, в настоящем документе предложен способ лечения субъекта, страдающего заболеванием или нарушением, связанным с BCMA, включающий в себя введение субъекту терапевтически эффективного количества одного или нескольких антител против BCMA или их BCMA-связывающих фрагментов. В настоящем документе также предложен способ лечения субъекта, страдающего заболеванием или нарушением, связанным с плазматическими клетками, включающий в себя введение субъекту терапевтически эффективного количества одного или нескольких антител против BCMA или их, BCMA-связывающих фрагментов. В настоящем документе также предложен способ лечения субъекта, страдающего заболеванием или нарушением, связанным с В-клетками, включающий в себя введение субъекту терапевтически эффективного количества одного или нескольких антител против BCMA или их BCMA-связывающих фрагментов. В конкретных вариантах осуществления изобретения связанное с BCMA заболевание представляет собой макроглобулинемию, амилоидоз, макроглобулинемию Вальденстрема, солитарную плазмоцитому кости, экстрамедуллярную плазмоцитому, остеосклеротическую миелому, заболевания тяжелых цепей, моноклональную гаммопатию неустановленного значения и тлеющую множественную миелому.In some embodiments, provided herein is a method of treating a subject suffering from a BCMA-related disease or disorder, comprising administering to the subject a therapeutically effective amount of one or more anti-BCMA antibodies or BCMA-binding fragments thereof. Also provided herein is a method of treating a subject suffering from a plasma cell-related disease or disorder, comprising administering to the subject a therapeutically effective amount of one or more anti-BCMA antibodies or BCMA-binding fragments thereof. Also provided herein is a method of treating a subject suffering from a B cell-related disease or disorder, comprising administering to the subject a therapeutically effective amount of one or more anti-BCMA antibodies or BCMA-binding fragments thereof. In specific embodiments, the BCMA-related disease is macroglobulinemia, amyloidosis, Waldenström's macroglobulinemia, solitary plasmacytoma of bone, extramedullary plasmacytoma, osteosclerotic myeloma, heavy chain diseases, monoclonal gammopathy of undetermined significance, and smoldering multiple myeloma.
В настоящем документе также предложен способ подавления роста клеток множественной миеломы, включающий в себя контактирование клеток множественной миеломы с одним или несколькими антителами против BCMA или их BCMA-связывающими фрагментами, предложенными в настоящем документе. Кроме того, в настоящем документе предложен способ снижения скорости роста клеток множественной миеломы, включающий в себя контактирование клеток множественной миеломы с одним или несколькими антителами против BCMA или их BCMA-связывающими фрагментами, предложенными в настоящем документе.Also provided herein is a method of inhibiting the growth of multiple myeloma cells, comprising contacting the multiple myeloma cells with one or more anti-BCMA antibodies or BCMA-binding fragments thereof provided herein. Further provided herein is a method of reducing the growth rate of multiple myeloma cells comprising contacting the multiple myeloma cells with one or more anti-BCMA antibodies or BCMA-binding fragments thereof provided herein.
В любом из способов, например, способов лечения, предложенных в настоящем документе, антитело или его BCMA-связывающий фрагмент представляет собой голое антитело или фрагмент, то есть антитело или фрагмент не модифицированы для включения токсичного фрагмента. В любом из способов, например, способов лечения, предложенных в настоящем документе, антитело или его BCMAсвязывающий фрагмент является частью конъюгата антитело-лекарственное средство (ADC), напримерIn any of the methods, for example, methods of treatment proposed herein, the antibody or BCMA-binding fragment thereof is a naked antibody or fragment, that is, the antibody or fragment is not modified to include a toxic fragment. In any of the methods, such as the treatments provided herein, the antibody or a BCMA binding fragment thereof is part of an antibody-drug conjugate (ADC), e.g.
- 24 044652- 24 044652
ADC, описанного в разделе 5.3 выше.ADC described in section 5.3 above.
В любом из способов лечения, предложенных в настоящем документе, антитела против BCMA или их BCMA-связывающие фрагменты используются или вводятся в терапевтически эффективном количестве. В различных вариантах осуществления терапевтически эффективное количество составляет от 1x105 до 5x105, от 5x105 до 1х106, от 1х106 до 5х106, от 5х106 до 1х107, от 1х107 до 5х107, от 5х107 до 1х108, от 1х108 до 5х108, от 5х108 до 1х109 наномоль указанных антител или фрагментов. В различных других вариантах осуществления изобретения терапевтически эффективное количество составляет от 1х105 до 5х105, от 5х105 до 1х106, от 1х106 до 5х106, от 5х106 до 1х107, от 1х107 до 5х107, от 5х107 до 1х108, от 1х108 до 5х108, от 5х108 до 1х109 наномоль указанных антител или фрагментов.In any of the treatment methods provided herein, anti-BCMA antibodies or BCMA-binding fragments thereof are used or administered in a therapeutically effective amount. In various embodiments, the therapeutically effective amount is from 1x105 to 5x105, from 5x105 to 1x10 6 , from 1x10 6 to 5x10 6 , from 5x10 6 to 1x10 7 , from 1x10 7 to 5x10 7 , from 5x10 7 to 1x10 8 , from 1x10 8 up to 5x10 8 , from 5x10 8 to 1x10 9 nanomoles of the indicated antibodies or fragments. In various other embodiments of the invention, the therapeutically effective amount is from 1x10 5 to 5x105, from 5x105 to 1x10 6 , from 1x10 6 to 5x10 6 , from 5x10 6 to 1x10 7 , from 1x10 7 to 5x10 7 , from 5x10 7 to 1x10 8 , from 1x10 8 to 5x10 8 , from 5x10 8 to 1x10 9 nanomoles of the indicated antibodies or fragments.
Антитела против BCMA или BCMA-связывающие фрагменты могут вводиться пациенту, который в этом нуждается, по любой схеме введения, которую лечащие врачи или клиницисты сочтут подходящей, например, один раз каждые 1, 2, 3, 4, 5, 6 или 7 дней или один раз в 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 или 10 недель. Антитела против BCMA или их BCMA-связывающие фрагменты можно вводить в течение определенного периода времени, например, 1, 2, 3 или 4 недель, с последующим отдыхом без введения антитела или фрагмента антитела. Такой цикл введения-отдыха может повторяться 2, 3, 4 или 5 раз.Anti-BCMA antibodies or BCMA-binding fragments may be administered to a patient who requires it at any dosing schedule deemed appropriate by the treating physicians or clinicians, for example, once every 1, 2, 3, 4, 5, 6 or 7 days or once every 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 or 10 weeks. Antibodies against BCMA or BCMA-binding fragments thereof can be administered for a specified period of time, for example, 1, 2, 3 or 4 weeks, followed by rest without administration of the antibody or antibody fragment. This insertion-rest cycle can be repeated 2, 3, 4 or 5 times.
В некоторых вариантах осуществления изобретения пациент, которому вводят антитела против BCMA или их BCMA-связывающие фрагменты, ранее получал 1, 2, 3 или более линий терапии, причем предыдущие линии терапии могут включать введение одного или нескольких из следующих лекарственных средств: леналидомида (Ревлимида), помалидомида (Помалиста), талидомида (Таломида), бортезомиба (Велкада), дексаметазона, циклофосфамида, доксорубицина (Адриамицина, Рубекса), карфилзомиба (Криполиса), иксазомиба (Нинларо), цисплатина (Платинола), доксорубицина (Адриамицина), этопозида (Этопофос), антител против CD38, таких как даратумумаб (Дарзалекс); панобиностата или элотузумаба (Эмплисити). В конкретных вариантах осуществления изобретения такие пациенты получали терапию бортезомибом, леналидомидом и дексаметазоном (RVD); бортезомибом, циклофосфамидом и дексаметазоном (BCD); бортезомибом, доксорубицином и дексаметазоном; карфилзомибом, леналидомидом и дексаметазоном (CRD); иксазомибом, леналидомидом и дексаметазоном; бортезомибом и дексаметазоном; бортезомибом, талидомидом и дексаметазоном; леналидомидом и дексаметазоном; дексаметазоном, талидомидом, цисплатином, доксорубицином, циклофосфамидом, этопозидом и бортезомибом (VTDРАСЕ); леналидомидом и дексаметазоном в низких дозах; бортезомибом, циклофосфамидом и дексаметазоном; карфилзомибом и дексаметазоном; только леналидомидом; только бортезомибом; только даратумумабом; бортезомибом, леналидомидом и дексаметазоном; даратумумабом, бортезомибом и дексаметазоном; даратумумабом, леналидомидом и дексаметазоном; элотузумабом, леналидомидом и дексаметазоном; элотузумабом, леналидомидом и дексаметазоном; бендамустином, бортезомибом и дексаметазоном; бендамустином, леналидомидом и дексаметазоном; помалидомидом и дексаметазоном; помалидомидом, бортезомибом и дексаметазоном; помалидомидом, карфилзомибом и дексаметазоном; бортезомибом и липосомальным доксорубицином; циклофосфамидом, леналидомидом и дексаметазоном; элотузумабом, бортезомибом и дексаметазоном; иксазомибом и дексаметазоном; панобиностатом, бортезомибом и дексаметазоном; панобиностатом и карфилзомибом; или помалидомидом, циклофосфамидом и дексаметазоном.In some embodiments, the patient being administered anti-BCMA antibodies or BCMA-binding fragments thereof has previously received 1, 2, 3, or more lines of therapy, wherein the previous lines of therapy may include administration of one or more of the following drugs: lenalidomide (Revlimid) , pomalidomide (Pomalista), thalidomide (Thalomida), bortezomib (Velkada), dexamethasone, cyclophosphamide, doxorubicin (Adriamycin, Rubexa), carfilzomib (Kripolis), ixazomib (Ninlaro), cisplatin (Platinol), doxorubicin (Adriamycin), etoposide (Etopofos ), anti-CD38 antibodies such as daratumumab (Darzalex); panobinostat or elotuzumab (Emplicity). In specific embodiments of the invention, such patients received therapy with bortezomib, lenalidomide and dexamethasone (RVD); bortezomib, cyclophosphamide and dexamethasone (BCD); bortezomib, doxorubicin and dexamethasone; carfilzomib, lenalidomide and dexamethasone (CRD); ixazomib, lenalidomide and dexamethasone; bortezomib and dexamethasone; bortezomib, thalidomide and dexamethasone; lenalidomide and dexamethasone; dexamethasone, thalidomide, cisplatin, doxorubicin, cyclophosphamide, etoposide and bortezomib (VTDRACE); lenalidomide and dexamethasone in low doses; bortezomib, cyclophosphamide and dexamethasone; carfilzomib and dexamethasone; lenalidomide only; bortezomib only; daratumumab only; bortezomib, lenalidomide and dexamethasone; daratumumab, bortezomib and dexamethasone; daratumumab, lenalidomide and dexamethasone; elotuzumab, lenalidomide and dexamethasone; elotuzumab, lenalidomide and dexamethasone; bendamustine, bortezomib and dexamethasone; bendamustine, lenalidomide and dexamethasone; pomalidomide and dexamethasone; pomalidomide, bortezomib and dexamethasone; pomalidomide, carfilzomib and dexamethasone; bortezomib and liposomal doxorubicin; cyclophosphamide, lenalidomide and dexamethasone; elotuzumab, bortezomib and dexamethasone; ixazomib and dexamethasone; panobinostat, bortezomib and dexamethasone; panobinostat and carfilzomib; or pomalidomide, cyclophosphamide and dexamethasone.
Введение антител против BCMA или их BCMA-связывающих фрагментов пациенту, нуждающемуся в этом, может сопровождаться одним или несколькими дополнительными методами лечения. Для некоторых видов рака, например множественной миеломы, одна или несколько дополнительных терапевтических схем могут включать в себя один или несколько из следующих препаратов: леналидомид, помалидомид, талидомид, бортезомиб, дексаметазон, циклофосфамид, доксорубицин, карфилзомиб, иаксизомиб, цисплатин, доксорубицин, этопозид, анти-CD38 антитело, такое как даратумумаб, панобиностат и/или элотузумаб, по отдельности или в одной из комбинаций, перечисленных выше, или в любой другой комбинации.Administration of antibodies against BCMA or BCMA-binding fragments thereof to a patient in need thereof may be accompanied by one or more additional treatments. For some types of cancer, such as multiple myeloma, one or more additional therapeutic regimens may include one or more of the following drugs: lenalidomide, pomalidomide, thalidomide, bortezomib, dexamethasone, cyclophosphamide, doxorubicin, carfilzomib, iaxizomib, cisplatin, doxorubicin, etoposide, an anti-CD38 antibody such as daratumumab, panobinostat and/or elotuzumab, alone or in one of the combinations listed above, or in any other combination.
В некоторых вариантах осуществления изобретения пациенту, нуждающемуся в этом, вводят одно или несколько антител против BCMA, предложенных в настоящем документе, в комбинации с одним или несколькими соединениями, описанными в разделе 5.3 выше, например, в комбинации с леналидомидом или помалидомидом.In some embodiments, one or more anti-BCMA antibodies provided herein are administered to a patient in need thereof in combination with one or more compounds described in section 5.3 above, for example, in combination with lenalidomide or pomalidomide.
В некоторых других вариантах осуществления изобретения пациенту, нуждающемуся в этом, вводят одно или несколько антител против BCMA, предложенных в настоящем документе, в комбинации с одним или несколькими из следующих соединений.In some other embodiments of the invention, one or more anti-BCMA antibodies provided herein are administered to a patient in need thereof in combination with one or more of the following compounds.
Примеры соединений включают, но не ограничиваются ими, N-{[2-(2,6-диоксо(3-nиnеридил)-1,3диоксоизоиндолин-4-ил]метил}циклопропил-карбоксамид; 3-[2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-1,3-диоксо2,3-дигидро-1Н-изоиндол-4-илметил] -1,1 -диметилмочевина; (-)-3 -(3,4-диметоксифенил)-3-(1 -оксо-1,3дигидроизоиндол-2-ил)пропионамид; (+)-3-(3,4-диметоксифенил)-3 -(1 -оксо- 1,3-дигидроизоиндол-2ил)пропионамид; (-)-{2-[1-(3-этокси-4-метоксифенил)-2-метилсульфонилэтил]-4-ацетиламиноизоиндолин-1,3-дион}; (+)-{2-[1-(3-этокси-4-метоксифенил)-2-метилсульфонилэтил] -4ацетиламиноизоиндолин-1,3-дион}; дифторметокси-SelCID; 1-фталимидо-1-(3,4-диэтоксифенил)этан; 3- 25 044652 (3,4-диметоксифенил)-3-(3,5-диметоксифенил)акрилонитрил; 1-оксо-2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-4аминоизоиндолин; 1,3-диоксо-2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-4-аминоизоиндолин; 4-амино-2-(3-метил2,6-диоксопиперидин-3-ил)изоиндол-1,3-дион; 3-(3-ацетоамидофталимидо)-3-(3-этокси-4метоkсифенил)-N-гидроkсипропионамид; 1-оксо-2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-4-метилизоиндолин; циклопропил-N-{2-[(1S)-1-(3-этокси-4-метоkсифенил)-2-(метилсульфонил)этил]-3-оксоизоиндолин-4ил}карбоксамид; замещенный 2-(3-гидрокси-2,6-диоксопиперидин-5-ил)изоиндолин; N-[2-(2,6диоксопиперидин-3 -ил)-1,3-диоксо-2,3-дигидро-1 Н-изоиндол-5-илметил] -4-трифторметоксибензамид; (S)-4-хлор-N-((2-(3-метил-2,6-диоксопиперидин-3-ил)-1,3-диоксоизоиндолин-5-ил)метил)бензамид; пиридин-2-карбоновая кислота[2-[(3S)-3-метил-2,6-диоkCOпиперидин-3-ил]-1,3-диоксо-2,3-дигидро-1Низоиндол-5-илметил]амид; (S)-N-((2-(3-метил-2,6-диоkсопиперидин-3-ил)-1,3-диоkсоизоиндолин-5ил)метил)-4-(трифторметил)бензамид; 3-(2,5-диметил-4-оксо-4Н-хиназолин-3-ил)пиперидин-2,6-дион и т.п.Examples of compounds include, but are not limited to, N-{[2-(2,6-dioxo(3-nineridyl)-1,3dioxoisoindolin-4-yl]methyl}cyclopropyl-carboxamide; 3-[2-(2,6 -dioxopiperidin-3-yl)-1,3-dioxo2,3-dihydro-1H-isoindol-4-ylmethyl]-1,1-dimethylurea; (-)-3 -(3,4-dimethoxyphenyl)-3-( 1 -oxo-1,3-dihydroisoindol-2-yl)propionamide; (+)-3-(3,4-dimethoxyphenyl)-3 -(1-oxo-1,3-dihydroisoindol-2yl)propionamide; (-)-{ 2-[1-(3-ethoxy-4-methoxyphenyl)-2-methylsulfonylethyl]-4-acetylaminoisoindoline-1,3-dione}; (+)-{2-[1-(3-ethoxy-4-methoxyphenyl) -2-methylsulfonylethyl]-4acetylaminoisoindoline-1,3-dione}; difluoromethoxy-SelCID; 1-phthalimido-1-(3,4-diethoxyphenyl)ethane; 3- 25 044652 (3,4-dimethoxyphenyl)-3-(3 ,5-dimethoxyphenyl)acrylonitrile; 1-oxo-2-(2,6-dioxopiperidin-3-yl)-4-aminoisoindoline; 1,3-dioxo-2-(2,6-dioxopiperidin-3-yl)-4-aminoisoindoline ; 4-amino-2-(3-methyl2,6-dioxopiperidin-3-yl)isoindole-1,3-dione; 3-(3-acetoamidophthalimido)-3-(3-ethoxy-4methoxyphenyl)-N-hydroxypropionamide; 1-oxo-2-(2,6-dioxopiperidin-3-yl)-4-methylisoindoline; cyclopropyl-N-{2-[(1S)-1-(3-ethoxy-4-methoxyphenyl)-2-(methylsulfonyl)ethyl]-3-oxoisoindolin-4yl}carboxamide; substituted 2-(3-hydroxy-2,6-dioxopiperidin-5-yl)isoindoline; N-[2-(2,6dioxopiperidin-3-yl)-1,3-dioxo-2,3-dihydro-1 H-isoindol-5-ylmethyl]-4-trifluoromethoxybenzamide; (S)-4-chloro-N-((2-(3-methyl-2,6-dioxopiperidin-3-yl)-1,3-dioxoisoindolin-5-yl)methyl)benzamide; pyridin-2-carboxylic acid[2-[(3S)-3-methyl-2,6-diokCOpiperidin-3-yl]-1,3-dioxo-2,3-dihydro-1Nisoindol-5-ylmethyl]amide; (S)-N-((2-(3-methyl-2,6-dioxopiperidin-3-yl)-1,3-dioxoisoindolin-5yl)methyl)-4-(trifluoromethyl)benzamide; 3-(2,5-dimethyl-4-oxo-4H-quinazolin-3-yl)piperidin-2,6-dione, etc.
В некоторых вариантах осуществления изобретения пациенту, нуждающемуся в этом, вводят одно или несколько антител против BCMA, предложенных в настоящем документе, в комбинации с одним или несколькими циано- и карбокси-производными замещенных стиролов, такими как те, что раскрыты в патенте США № 5929117; 1-оксо-2-(2,6-диоксо-3-фторпиперидин-3-ил)изоиндолинами и 1,3-диоксо-2(2,6-диоксо-3-фторпиперидин-3-ил)изоиндолинами, такими как описанные в патентах США №№ 5874448 и 5955476; 1-оксо- и 1,3-диоксоизоиндолинами, замещенными в 4-м или 5-м положении индолинового кольца (например, 4-(4-амино-1,3-диоксоизоиндолин-2-ил)-4-карбамоилбутановая кислота), описанными в патенте США № 6380239; изоиндолин-1-оном и изоиндолин-1,3-дионом, замещенными во 2-м положении 2,6-диоксо-3-гидроксипиперидин-5-илом (например, 2-(2,6-диоксо-3-гидрокси-5фторпиперидин-5-ил)-4-аминоизоиндолин-1-он), описанный в патенте США № 6458810; представителями класса неполипептидных циклических амидов, раскрытых в патентах США №№ 5698579 и 5877200; и изоиндолеимидными соединениями, такими как описанные в публикации патента США № 2003/0045552, публикации патента США № 2003/0096841 и международной заявке № PCT/US01/50401 (международная публикация № WO 02/059106). В публикации патента США № 2006/0205787 описаны композиции 4амино-2-(3-метил-2,6-диоксопиперидин-3-ил)изоиндол-1,3-диона. В публикации патента США № 2007/0049618 описаны изоиндолеимидные соединения.In some embodiments, one or more anti-BCMA antibodies provided herein are administered to a patient in need thereof in combination with one or more cyano- and carboxy-substituted styrene derivatives, such as those disclosed in US Pat. No. 5,929,117 ; 1-oxo-2-(2,6-dioxo-3-fluoropiperidin-3-yl)isoindolines and 1,3-dioxo-2(2,6-dioxo-3-fluoropiperidin-3-yl)isoindolines, such as those described in US patent Nos. 5874448 and 5955476; 1-oxo- and 1,3-dioxoisoindolines substituted at the 4th or 5th position of the indoline ring (for example, 4-(4-amino-1,3-dioxoisoindolin-2-yl)-4-carbamoylbutanoic acid), described in US Pat. No. 6,380,239; isoindolin-1-one and isoindolin-1,3-dione substituted at the 2-position with 2,6-dioxo-3-hydroxypiperidin-5-yl (for example, 2-(2,6-dioxo-3-hydroxy-5fluoropiperidine -5-yl)-4-aminoisoindolin-1-one), described in US patent No. 6458810; representatives of the class of non-polypeptide cyclic amides disclosed in US patent Nos. 5698579 and 5877200; and isoindoleimide compounds such as those described in US Patent Publication No. 2003/0045552, US Patent Publication No. 2003/0096841 and International Application No. PCT/US01/50401 (International Publication No. WO 02/059106). US Patent Publication No. 2006/0205787 describes compositions of 4amino-2-(3-methyl-2,6-dioxopiperidin-3-yl)isoindole-1,3-dione. US Patent Publication No. 2007/0049618 describes isoindoleimide compounds.
В некоторых вариантах осуществления изобретения пациенту, нуждающемуся в этом, вводят одно или несколько антител против BCMA, предложенных в настоящем документе, в сочетании с одним или несколькими представителями класса изоиндолеимидов, раскрытых в патенте США № 7091353, публикации патента США № 2003/0045552 и международной заявке № PCT/US01/50401 (международная публикация № WO 02/059106), каждый из которых включен в настоящий документ посредством ссылки. Типичные соединения имеют формулу II:In some embodiments, a patient in need thereof is administered one or more of the anti-BCMA antibodies provided herein in combination with one or more members of the isoindoleimide class disclosed in U.S. Patent No. 7,091,353, U.S. Patent Publication No. 2003/0045552, and International Application No. PCT/US01/50401 (International Publication No. WO 02/059106), each of which is incorporated herein by reference. Typical compounds have formula II:
оO
и их фармацевтически приемлемые соли, гидраты, сольваты, клатраты, энантиомеры, диастереомеры, рацематы и смеси стереоизомеров, где: один из X и Y представляет собой С=О, а другой представляет собой СН2 или С=О; R1 представляет собой Н, (С1-С8)алкил, (С3-С7)циклоалкил, (С2-С8)алкенил, (С2С8)алкинил, бензил, арил, (С0-С4)алкил-(С1-С6)гетероциклоалкил, (С0-С4)алкил-(С2-С5)гетероарил, C(O)R3, C(S)R3, C(O)OR4, (C1-C8)алкил-N(R6)2, (C1-C8)алкил-OR5, (C1-C8)алкил-C(O)ORS, C(O)NHR3, C(S)NHR3, C(O)NR3R3', C(S)NR3R3' или (C1-C8)αлkил-O(CO)R5; R2 представляет собой Н, F, бензил, (Cr C8)алкил, (С2-С8)алкенил или (С2-С8)алкинил; R3 и R3' представляют собой независимо (C1-C8)αлкил, (С3С7)циклоалкил, (С2-С8)алкенил, (С2-С5)алкинил, бензил, арил, (С0-С4)алкил-(С1-С6)гетероциклоалкил, (С0-С4)алкил-(С2-С5)гетероарил, (С0-С8)алкил-N(R6)2, (C1-C8)алкил-OR5, (C1-C8)алкил-C(O)OR5, (C1C8)αлкил-O(CO)R5 или C(O)OR5; R4 представляет собой (C1-C8)алкил, (С2-С8)алкенил, (С2-С8)алкинил, (C1-C4)алкил-OR5, бензил, ар ил, (С0-С4)алкил-(С1-С6)гетероциклоалкил или (С0-С4)алкил-(С2С5)гетероарил; R5 представляет собой (C1-C8)алkил, (С2-С8)алкенил, (С2-С8)алкинил, бензил, арил, or (C2С5)гетероарил; во всех случаях R6 представляет собой независимо Н, (C1-C8)αлкил, (С2-С8)алкенил, (С2С8)алкинил, бензил, арил, (С2-С5)гетероарил или (С0-С8)aлkил-С(О)О-R5, или группы R6 могут соединяться с образованием гетероциклоалкильной группы;and their pharmaceutically acceptable salts, hydrates, solvates, clathrates, enantiomers, diastereomers, racemates and mixtures of stereoisomers, where: one of X and Y is C=O and the other is CH 2 or C=O; R 1 represents H, (C1-C8)alkyl, (C3-C7)cycloalkyl, (C2-C8)alkenyl, (C2C8)kynyl, benzyl, aryl, (C0-C4)alkyl-(C1-C6)heterocycloalkyl, (C0-C4)alkyl-(C2-C5)heteroaryl, C(O)R 3 , C(S)R 3 , C(O)OR 4 , (C1-C 8 )alkyl-N(R 6 )2, (C1-C8)alkyl-OR 5 , (C1-C 8 )alkyl-C(O)ORS, C(O)NHR 3 , C(S)NHR 3 , C(O)NR 3 R 3 ', C( S)NR 3 R 3 ' or (C1-C8)αlkyl-O(CO)R 5 ; R 2 represents H, F, benzyl, (CrC8)alkyl, (C2-C8)alkenyl or (C2-C8)alkynyl; R 3 and R 3 ' are independently (C1- C8 )αalkyl, ( C3C7 ) cycloalkyl , ( C2 - C8 )alkenyl, ( C2 - C5 )alkynyl, benzyl, aryl, ( C0 -C 4 )alkyl-(C1-C 6 )heterocycloalkyl, (C 0 -C 4 )alkyl-(C 2 -C 5 )heteroaryl, (C 0 -C 8 )alkyl-N(R 6 )2, (C1 -C8)alkyl-OR 5 , (C1-C 8 )alkyl-C(O)OR 5 , (C1C8)αalkyl-O(CO)R 5 or C(O)OR 5 ; R 4 is (C1- C8 )alkyl, ( C2 - C8 )alkenyl, ( C2 - C8 )kynyl, (C1 - C4 )alkyl- OR5 , benzyl, aryl, (C0- C4)alkyl-(C1-C6)heterocycloalkyl or (C0-C4)alkyl-(C2C5)heteroaryl; R 5 is (C1- C8 )alkyl, ( C2 - C8 )alkenyl, ( C2 - C8 )alkynyl, benzyl, aryl, or ( C2C5 )heteroaryl; in all cases, R 6 is independently H, (C 1 -C 8 )αalkyl, (C 2 -C 8 )alkenyl, (C 2 C 8 )alkynyl, benzyl, aryl, (C 2 -C 5 )heteroaryl or ( C 0 -C 8 )alkyl-C(O)O-R 5 , or R 6 groups can combine to form a heterocycloalkyl group;
n имеет значение 0 или 1; и * представляет собой хиральный углеродный центр.n has the value 0 or 1; and * represents a chiral carbon center.
В конкретных соединениях по формуле II, когда n имеет значение 0, тогда R1 представляет собой (С3-С7)циклоалкил, (С2-С8)алкенил, (С2-С8)алкинил, бензил, арил, (С0-С4)алкил-(C1-C6)гетероциkлоалкил, (С0-С4)алкил-(С2-С5)гетероарил, C(O)R3, C(O)OR4, (C1-C8)алkил-N(R6)2, (C1-C8)алкил-OR5, (C1-C8)алκилC(O)OR5, C(S)NHR3 или (С1-С8)алкил-O(CO)R5;In specific compounds of Formula II, when n is 0, then R 1 is (C 3 -C 7 )cycloalkyl, (C 2 -C 8 )alkenyl, (C 2 -C 8 )alkynyl, benzyl, aryl, ( C 0 -C 4 )alkyl-(C 1 -C 6 )heterocycloalkyl, (C0-C4)alkyl-(C2-C5)heteroaryl, C(O)R 3 , C(O)OR 4 , (C1-C8) alkyl-N(R 6 )2, (C1-C8)alkyl-OR 5 , (C1-C8)alkylC(O)OR 5 , C(S)NHR 3 or (C1-C8)alkyl-O(CO)R 5 ;
R2 представляет собой Н или (C1-C8)алkил; и R3 представляет собой (С1-С8)алкил, (С3 R 2 represents H or (C1-C8)alkyl; and R 3 represents (C1-C8)alkyl, (C 3
- 26 044652- 26 044652
С7)циклоалкил, (С2-С8)алкенил, (С2-С8)алкинил, бензил, арил, (С0-С4)алкил-(С1-С6)гетероциклоалкил, (Со-С4)алкил-(С2-С5)гетероарил, (С5-С8)алкил-N(R6)2; (Сo-С8)алкил-NH-С(О)О-R5; (C1-C8)алкил-OR5, (Cr C8)алкил-C(O)OR5, (C1-C8)алкил-O(CO)R5 или C(O)OR5; и другие переменные имеют такие же определе ния.C7)cycloalkyl, ( C2 - C8 )alkenyl, ( C2 - C8 )alkynyl, benzyl, aryl, ( C0 - C4 )alkyl-(C1- C6 )heterocycloalkyl, (Co-C4)alkyl- (C2-C5)heteroaryl, (C5-C8)alkyl-N(R 6 )2; (Co-C8)alkyl-NH-C(O)O-R 5 ; (C1-C8)alkyl-OR 5 , (Cr C8)alkyl-C(O)OR 5 , (C1-C 8 )alkyl-O(CO)R 5 or C(O)OR 5 ; and other variables have the same definitions.
В других конкретных соединениях по формуле II R2 представляет собой Н или (С1-С4)алкил.In other specific compounds of Formula II, R 2 represents H or (C1-C 4 )alkyl.
В других конкретных соединениях по формуле II R1 представляет собой (C1-С8)αлкил или бензил.In other specific compounds of Formula II, R 1 is (C 1 -C 8 )αalkyl or benzyl.
В других конкретных соединениях по формуле II R1 представляет собой Н, (C1-C8)алкил, бензил, w^ch2—$In other specific compounds of formula II, R 1 represents H, (C 1 -C 8 )alkyl, benzyl, w^ch 2 -$
СН2ОСН3, СН2ОСН3, СН2СН2ОСН3 или 0 CH2OCH3, CH2OCH3, CH2CH2OCH3 or 0
В другом варианте соединений по формуле II, R1 представляет собойIn another embodiment of the compounds of Formula II, R 1 is
где Q представляет собой О или S, и в каждом случае R7 независимо представляет собой Н, (С1С8)алкил, (С3-С7)циклоалкил, (С2-С8)алкенил, (С2-С8)алкинил, бензил, арил, галоген, (С0-С4)алкил-(С1С6)гетероциклоалкил, (С0-С4)алкил-(С2-С5)гетероарил, (С0-С8)алкил- N(R6)2, (C1-C8)алкил- OR5, (C1C8)алкил-C(O)OR5, (C1-C8)алкил-O(CO)R5 или C(O)OR5, или соседние R7 могут быть объединены с обра зованием бициклического алкильного или арильного кольца.where Q is O or S, and in each case R7 is independently H, ( C1C8 )alkyl, (C3-C7)cycloalkyl, ( C2 - C8 )alkenyl, ( C2 - C8 )alkynyl, benzyl , aryl, halogen, (C 0 -C 4 )alkyl-(C1C 6 )heterocycloalkyl, (C 0 -C 4 )alkyl-(C2-C 5 )heteroaryl, (C 0 -C 8 )alkyl-N(R 6 )2, (C1-C8)alkyl- OR5 , (C1C8)alkyl-C(O) OR5 , (C1 - C8 )alkyl-O(CO) R5 or C(O) OR5 , or neighboring R7 can be combined to form a bicyclic alkyl or aryl ring.
В других конкретных соединениях по формуле II R1 представляет собой C(O)R3.In other specific compounds of Formula II, R 1 is C(O)R 3 .
В других конкретных соединений формулы II, R3 представляет собой (С0-С4)алкил-(С2С5)гетероарил, (C1-C8)алкил, арил или (С0-С4)алкил-OR5.In other specific compounds of formula II, R 3 is (C 0 -C 4 )alkyl-(C 2 C 5 )heteroaryl, (C 1 -C 8 )alkyl, aryl or (C 0 -C 4 )alkyl-OR 5 .
В других конкретных соединениях по формуле II гетероарил представляет собой пиридил, фурил или тиенил.In other specific compounds of Formula II, heteroaryl is pyridyl, furyl or thienyl.
В других конкретных соединениях по формуле II R1 представляет собой C(O)OR4.In other specific compounds of Formula II, R 1 is C(O)OR 4 .
В других конкретных соединениях по формуле II Н в C(O)NHC(O) может быть заменен (С1С4)алкилом, арилом или бензилом.In other specific compounds of Formula II, the H in C(O)NHC(O) may be replaced by ( C1C4 )alkyl, aryl or benzyl.
Дополнительные примеры соединений этого класса включают, но не ограничиваются ими: [2-(2,6диоксопиперидин-3-ил)-1,3-диоксо-2,3-дигидро-1H-изоиндол-4-илметил]амид; трет-бутиловыйэфир(2(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-1,3-диоксо-2,3-дигидро-1H-изоиндол-4-илметил)карбаминовой кислоты; 4(аминометил)-2-(2,6-диоксо(3-пиперидил))изоиндолин-1,3-дион; N-(2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-1,3диоксо-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-4-илметил)ацетамид; N-{(2-(2,6-диоксо(3-пиперидил)-1,3диоксоизоиндолин-4-ил)метил}циклопропилкарбоксамид; 2-хлор-N-{(2-(2,6-диоксо(3-пиперид ил))-1,3диоксоизоиндолин-4-ил)метил}ацетамид; N-(2-(2,6-диоксо(3-nиnерид ил))-1,3-диоксоизоиндолин-4-ил)3-пиридилкарбоксамид; 3-{1-оксо-4-(бензиламино)изоиндолин-2-ил}пиперидин-2,6-дион; 2-(2,6диоксо(3-пиперидил))-4-(бензиламино)изоиндолин-1,3-дион; N-{(2-(2,6-диоксо(3-пиперидил))-1,3диоксоизоиндолин-4-ил)метил}пропанамид; N-{(2-(2,6-диоксо(3-nиnеридил))-1,3-диоксоизоиндолин-4ил)метил} -3 -пиридилкарбоксамид; N-{ (2-(2,6-диоксо(3 -пиперидил))-1,3-диоксоизоиндолин-4ил)метил}гептанамид; N-{(2-(2,6-диоксо(3-πиπеридил))-1,3-диоксоизоиндолин-4-ил)метил}-2фурилкарбоксамид; (N-(2-(2,6-диоксо(3-пиnеридил))-1,3-диоксоизоиндолин-4ил)карбамоил}метилацетат; N-(2-(2,6-диоксо(3-пиперидил))-1,3-диоксоизоиндолин-4-ил)пентанамид; N(2-(2,6-диоксо(3-пиперидил))-1,3-диоксоизоиндолин-4-ил)-2-тиенилкарбоксамид; N-{[2-(2,6-диоксо(3пиперидил))-1,3-диоксоизоиндолин-4-ил]метил}(бутиламиднет)карбоксамид; N-{[2-(2,6-диоксо(3пиперидил))-1,3-диоксоизоиндолин-4-ил]метил}(октиламино)карбоксамид; и N-{[2-(2,6-диоксо(3пиперидил))-1,3-диоксоизоинд олин-4-ил]метил}(бензиламино)карбоксамид.Additional examples of compounds in this class include, but are not limited to: [2-(2,6dioxopiperidin-3-yl)-1,3-dioxo-2,3-dihydro-1H-isoindol-4-ylmethyl]amide; (2(2,6-dioxopiperidin-3-yl)-1,3-dioxo-2,3-dihydro-1H-isoindol-4-ylmethyl)carbamic acid tert-butyl ester; 4(aminomethyl)-2-(2,6-dioxo(3-piperidyl))isoindoline-1,3-dione; N-(2-(2,6-dioxopiperidin-3-yl)-1,3dioxo-2,3-dihydro-1H-isoindol-4-ylmethyl)acetamide; N-{(2-(2,6-dioxo(3-piperidyl)-1,3dioxoisoindolin-4-yl)methyl}cyclopropylcarboxamide; 2-chloro-N-{(2-(2,6-dioxo(3-piperide yl))-1,3-dioxoisoindolin-4-yl)methyl}acetamide; N-(2-(2,6-dioxo(3-ninerid yl))-1,3-dioxoisoindolin-4-yl)3-pyridylcarboxamide; 3 -{1-oxo-4-(benzylamino)isoindolin-2-yl}piperidin-2,6-dione; 2-(2,6dioxo(3-piperidyl))-4-(benzylamino)isoindoline-1,3-dione ; N-{(2-(2,6-dioxo(3-piperidyl))-1,3dioxoisoindolin-4-yl)methyl}propanamide; N-{(2-(2,6-dioxo(3-niperidyl)) -1,3-dioxoisoindolin-4yl)methyl}-3-pyridylcarboxamide; N-{(2-(2,6-dioxo(3-piperidyl))-1,3-dioxoisoindolin-4yl)methyl}heptanamide; N-{ (2-(2,6-dioxo(3-πpiperidyl))-1,3-dioxoisoindolin-4-yl)methyl}-2furylcarboxamide; (N-(2-(2,6-dioxo(3-pineridyl)))- 1,3-dioxoisoindolin-4yl)carbamoyl}methyl acetate; N-(2-(2,6-dioxo(3-piperidyl))-1,3-dioxoisoindolin-4-yl)pentanamide; N(2-(2,6 -dioxo(3-piperidyl))-1,3-dioxoisoindolin-4-yl)-2-thienylcarboxamide; N-{[2-(2,6-dioxo(3piperidyl))-1,3-dioxoisoindolin-4-yl ]methyl}(butylamidenet)carboxamide; N-{[2-(2,6-dioxo(3piperidyl))-1,3-dioxoisoindolin-4-yl]methyl}(octylamino)carboxamide; and N-{[2-(2,6-dioxo(3piperidyl))-1,3-dioxoisoind olin-4-yl]methyl}(benzylamino)carboxamide.
В некоторых других вариантах осуществления изобретения пациенту, нуждающемуся в этом, вводят одно или несколько антител против BCMA, предложенных в настоящем документе, в комбинации с одним или несколькими представителями класса изоиндолимидов, раскрытых в публикации патентной заявки США № US 2002/0045643, международной публикации № WO 98/54170 и патенте США № 6395754, каждый из которых включен в настоящий документ посредством ссылки. Типичные соединения имеют формулу III:In some other embodiments of the invention, one or more anti-BCMA antibodies provided herein are administered to a patient in need thereof in combination with one or more members of the isoindolimide class disclosed in US Patent Application Publication No. US 2002/0045643, International Publication No. WO 98/54170 and US Patent No. 6395754, each of which is incorporated herein by reference. Typical compounds have formula III:
О RO R
-Y /—-Y /—
JL JZ )=° id и их фармацевтически приемлемые соли, гидраты, сольваты, клатраты, энантиомеры, диастереомеры, рацематы и смеси стереоизомеров, где: один из X и Y представляет собой С=О, а другой представляJL JZ )=° id and their pharmaceutically acceptable salts, hydrates, solvates, clathrates, enantiomers, diastereomers, racemates and mixtures of stereoisomers, where: one of X and Y represents C=O and the other represents
- 27 044652 ет собой СН2 или С=О;- 27 044652 is CH2 or C=O;
R представляет собой Н или CH2OCOR';R is H or CH2OCOR';
(i) каждый из R1, R2, R3 или R4, независимо от других, представляет собой галоген, алкил с 1-4 атомами углерода или алкоксигруппу с 1-4 атомами углерода, или (ii) один из R1, R2, R3 или R4 представляет собой нитрогруппу или -NHR5, а оставшиеся из R1, R2, R3 или R4 представляют собой водород; R5 представляет собой водород или алкил с 1-8 атомами углерода, R6 представляет собой водород, алкил с 1-8 атомами углерода, бензо, хлор или фтор;(i) each of R 1 , R 2 , R 3 or R 4 , independently of the others, is halogen, a C 1-4 alkyl or a C 1-4 alkoxy group, or (ii) one of R 1 , R 2 , R 3 or R 4 is nitro or -NHR5 and the remainder of R 1 , R 2 , R 3 or R 4 is hydrogen; R 5 is hydrogen or C1-8 alkyl; R6 is hydrogen, C1-8 alkyl, benzo, chlorine or fluorine;
R' представляет собой R7-CHR10-N(R8R9);R' is R 7 -CHR 10 -N(R 8 R 9 );
R7 представляет собой м-фенилен или п-фенилен или -(CnH2n)-, в которой n имеет значение от 0 до 4; каждый из R8 и R9, независимо друг от друга, представляет собой водород или алкил, содержащий от 1 до 8 атомов углерода, или R8 и R9, взятые вместе, представляют собой тетраметилен, пентаметилен, гексаметилен или -CH2CH2X1CH2CH2-, в которой X1 представляет собой -О-, -S- или -NH-; R10 представляет собой водород, алкил с 8 атомами углерода или фенил; и * представляет собой хиральный углеродный центр.R 7 represents m-phenylene or p-phenylene or -(C n H 2n )-, in which n is from 0 to 4; each of R8 and R9 , independently of each other, represents hydrogen or alkyl containing from 1 to 8 carbon atoms, or R8 and R9 taken together represent tetramethylene, pentamethylene, hexamethylene or -CH2CH2X1CH2CH2-, in in which X1 represents -O-, -S- or -NH-; R 10 represents hydrogen, alkyl with 8 carbon atoms or phenyl; and * represents a chiral carbon center.
Другие типичные соединения имеют формулу:Other typical compounds have the formula:
V о, о Г R®V o, o G R®
II Ί / ^Х У-N—С1Г-О —С —R7—С —NII Ί / ^Х У-N—С1Г-О —С —R7—С —N
[| Ч X / \ ' ИХ[| H X / \ ' IH
I Σ )=0 Rt I Σ )= 0 Rt
R4 где: один из X и Y представляет собой С=О, а другой из X и Y представляет собой С=О или СН2;R 4 where: one of X and Y is C=O, and the other of X and Y is C=O or CH2;
(i) каждый из R1, R2, R3 или R4, независимо от других, представляет собой галоген, алкил с 1-4 атомами углерода или алкоксигруппу с 1-4 атомами углерода, или (ii) один из R1, R2, R3 и R4 представляет собой -NHR5, а оставшиеся из R1, R2, R3 или R4 представляют собой водород;(i) each of R 1 , R 2 , R 3 or R 4 , independently of the others, is halogen, a C 1-4 alkyl or a C 1-4 alkoxy group, or (ii) one of R 1 , R 2 , R 3 and R 4 are -NHR5 and the remainder of R 1 , R 2 , R 3 or R 4 are hydrogen;
R5 представляет собой водород или алкил с 1-8 атомами углерода;R 5 represents hydrogen or alkyl with 1-8 carbon atoms;
R6 представляет собой водород, алкил с 1-8 атомами углерода, бензо, хлор или фтор;R 6 is hydrogen, C1-C8 alkyl, benzo, chlorine or fluorine;
R7 представляет собой м-фенилен или п-фенилен или -(CnH2n)-, в которой n имеет значение от 0 до 4;R 7 represents m-phenylene or p-phenylene or -(CnH2n)-, in which n is from 0 to 4;
каждый из R8 и R9, независимо друг от друга, представляет собой водород или алкил, содержащий от 1 до 8 атомов углерода, или R8 и R9, взятые вместе, представляют собой тетраметилен, пентаметилен, гексаметилен или -CH2CH2X1CH2CH2-, в которой X1 представляет собой -О-, -S- или -NH-; иeach of R8 and R9 , independently of each other, represents hydrogen or alkyl containing from 1 to 8 carbon atoms, or R8 and R9 taken together represent tetramethylene, pentamethylene, hexamethylene or -CH2CH2X1CH2CH2-, in in which X1 represents -O-, -S- or -NH-; And
R10 представляет собой водород, алкил до 8 атомов углерода или фенил.R 10 represents hydrogen, alkyl up to 8 carbon atoms or phenyl.
Другие типичные соединения имеют формулу:Other typical compounds have the formula:
| о| O
X X >ХX X >X
R4 в которой один из X и Y представляет собой С=О, а другой из X и Y представляет собой С=О или СН2;R 4 in which one of X and Y is C=O and the other of X and Y is C=O or CH2;
каждый из R1, R2, R3 и R4, независимо от других, представляет собой галоген, алкил с 1-4 атомами углерода или алкоксигруппу с 1-4 атомами углерода или (ii) один из R1, R2, R3 и R4 представляет собой нитрогруппу или защищенную аминогруппу, а оставшиеся из R1, R2, R3 и R4 представляют собой водород; иeach of R 1 , R 2 , R 3 and R 4 , independently of the others, is a halogen, a C 1-4 alkyl or a C 1-4 alkoxy group, or (ii) one of R 1 , R 2 , R 3 and R 4 represents a nitro group or a protected amino group, and the remainder of R 1 , R 2 , R 3 and R 4 represent hydrogen; And
R6 представляет собой водород, алкил с 1-8 атомами углерода, бензо, хлор или фтор.R 6 represents hydrogen, alkyl with 1-8 carbon atoms, benzo, chlorine or fluorine.
Другие типичные соединения имеют формулу:Other typical compounds have the formula:
X X /X х°X X /X x°
Ri X---/Ri X---/
RJ в которой: один из X и Y представляет собой С=О, а другой из X и Y представляет собой С=О или СН2;R J in which: one of X and Y is C=O, and the other of X and Y is C=O or CH2;
(i) каждый из R1, R2, R3 и R4, независимо от других, представляет собой галоген, алкил с 1-4 атомами углерода или алкоксигруппу с 1-4 атомами углерода, или (ii) один из(i) each of R 1 , R 2 , R 3 and R 4 , independently of the others, is halogen, C 1-4 alkyl or C 1-4 alkoxy, or (ii) one of
R1, R2, R3 и R4 представляет собой -NHR5, а оставшиеся из R1, R2, R3 и R4 представляют собой водород;R 1 , R 2 , R 3 and R 4 are -NHR5 and the remainder of R 1 , R 2 , R 3 and R 4 are hydrogen;
R5 представляет собой водород, алкил с 1-8 атомами углерода или CO-R7-CH(R10)NR8R9, в которой каждый из R7, R8, R9 и R10 имеет значения, указанные в данном документе; иR 5 is hydrogen, alkyl of 1-8 carbon atoms, or CO-R 7 -CH(R 10 )NR 8 R 9 , in which R 7 , R 8 , R 9 and R 10 are each as defined herein document; And
R6 представляет собой алкил с 1-8 атомами углерода, бензо, хлор или фтор.R 6 represents C1-C8 alkyl, benzo, chlorine or fluorine.
Конкретные примеры соединений имеют формулуSpecific examples of compounds have the formula
- 28 044652- 28 044652
один из X и Y представляет собой С=О, а другой из X и Y представляет собой С=О или СН2;one of X and Y is C=O, and the other of X and Y is C=O or CH2;
R6 представляет собой алкил с 1-8 атомами углерода, бензил, хлор или фтор;R 6 represents C1-C8 alkyl, benzyl, chlorine or fluorine;
R7 представляет собой м-фенилен, п-фенилен или-(СпН2п)-, в которой n имеет значение от 0 до 4;R 7 represents m-phenylene, p-phenylene or -(C p H 2p )-, in which n is from 0 to 4;
каждый из R8 и R9, независимо друг от друга, представляет собой водород или алкил, содержащий от 1 до 8 атомов углерода, или R8 и R9, взятые вместе, представляют собой тетраметилен, пентаметилен, гексаметилен или -CH2CH2X1CH2CH2-, в которой X1 представляет собой -О-, -S- или -NH-; иeach of R 8 and R 9 , independently of each other, is hydrogen or alkyl containing from 1 to 8 carbon atoms, or R 8 and R 9 taken together are tetramethylene, pentamethylene, hexamethylene or -CH 2 CH 2 X 1 CH 2 CH 2 -, in which X 1 represents -O-, -S- or -NH-; And
R10 представляет собой водород, алкил с 1-8 атомами углерода или фенил.R 10 represents hydrogen, alkyl with 1-8 carbon atoms or phenyl.
Другими специфичными иммуномодулирующими соединениями являются 1-оксо-2-(2,6-диоксо-3фторпиперидин-3-ил)изоиндолины и 1,3-диоксо-2-(2,6-диоксо-3-фторпиперидин-3-ил)изоиндолины, такие как описанные в патентах США №№ 5874448 и 5955476, каждый из которых включен в настоящий документ посредством ссылки. Типичные соединения имеют формулу:Other specific immunomodulatory compounds are 1-oxo-2-(2,6-dioxo-3fluoropiperidin-3-yl)isoindolines and 1,3-dioxo-2-(2,6-dioxo-3-fluoropiperidin-3-yl)isoindolines , such as those described in US Patent Nos. 5,874,448 and 5,955,476, each of which is incorporated herein by reference. Typical compounds have the formula:
представляет собой водород, галоген, алкил с 1-4 атомами углерода, алкоксигруппу с 1-4 атомами углерода или аминогруппу.represents hydrogen, halogen, alkyl of 1-4 carbon atoms, alkoxy group of 1-4 carbon atoms or an amino group.
Другими специфичными иммуномодулирующими соединениями, раскрытыми в данном документе, являются 1-оксо- и 1,3-диоксоизоиндолины, замещенные в 4-м или 5-м положении индолинового кольца, описанные в патенте США № 6380239 и патенте США № 7244759, которые оба включены в настоящий документ посредством ссылки. Типичные соединения имеют формулу:Other specific immunomodulatory compounds disclosed herein are 1-oxo- and 1,3-dioxoisoindolines substituted at the 4th or 5th position of the indoline ring described in US Pat. No. 6,380,239 and US Pat. No. 7,244,759, which are both included incorporated into this document by reference. Typical compounds have the formula:
в которой атом углерода, обозначенный С*, представляет собой хиральный центр (когда n не равно нулю, и R1 не является тем же, что и R2); один из X1 и X2 представляет собой аминогруппу, нитрогруппу, алкил с числом атомов углерода от одного до шести или NH-Z, а другой из X1 или X2 представляет собой водород; каждый из R1 и R2, независимо от другого, представляет собой гидроксигруппу или NH-Z; R3 представляет собой водород, алкил с числом атомов углерода от одного до шести, галоген или галогеналкил; Z представляет собой водород, арил, алкил с числом атомов углерода от одного до шести, формил или ацил с числом атомов углерода от одного до шести; и n имеет значение 0, 1 или 2; при условии, что если X1 представляет собой аминогруппу, а n имеет значение 1 или 2, тогда R1 и R2, оба не являются гидроксильной группой; и их соли.in which the carbon atom designated C* is a chiral center (when n is not zero and R 1 is not the same as R 2 ); one of X 1 and X 2 represents an amino group, a nitro group, alkyl having one to six carbon atoms, or NH-Z, and the other of X 1 or X 2 represents hydrogen; R 1 and R 2 are each, independently of the other, hydroxy or NH-Z; R 3 represents hydrogen, alkyl of one to six carbon atoms, halogen or haloalkyl; Z represents hydrogen, aryl, alkyl of one to six carbon atoms, formyl or acyl of one to six carbon atoms; and n is 0, 1 or 2; with the proviso that if X 1 is an amino group and n is 1 or 2, then R 1 and R 2 are both non-hydroxy; and their salts.
Другие типичные соединения имеют формулу: в которой атом углерода, обозначенный С*, представляет собой хиральный центр, когда n не равно нулю, и R1 не является R2; один из X1 и X2 представляет собой аминогруппу, нитрогруппу, алкил с числом атомов углерода от одного до шести или NH-Z, а другой из X1 или X2 представляет собой водород; каждый из R1 и R2, независимо от другого, представляет собой гидроксигруппу или NH-Z; R3 представляет собой алкил с числом атомов углерода от одного до шести, галоген или водород; Z представляет собой водород, арил или алкил или ацил с числом атомов углерода от одного до шести; и n имеет значение 0, 1 или 2.Other typical compounds have the formula: in which the carbon atom, designated C*, represents a chiral center when n is not zero and R 1 is not R 2 ; one of X 1 and X 2 represents an amino group, a nitro group, alkyl having one to six carbon atoms, or NH-Z, and the other of X 1 or X 2 represents hydrogen; R 1 and R 2 are each, independently of the other, hydroxy or NH-Z; R 3 represents alkyl of one to six carbon atoms, halogen or hydrogen; Z represents hydrogen, aryl or alkyl or acyl of one to six carbon atoms; and n has the value 0, 1 or 2.
Конкретные примеры включают, но не ограничиваются ими, 2-(4-амино-1-оксо-1,3дигидроизоиндол-2-ил)-4-карбамоилмасляную кислоту и 4-(4-амино-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)4-карбамоилмасляную кислоту, которые имеют нижеследующие структуры, соответственно, и их фарма цевтически приемлемые соли, сольваты, пролекарственные соединения и стереоизомеры:Specific examples include, but are not limited to, 2-(4-amino-1-oxo-1,3-dihydroisoindol-2-yl)-4-carbamoylbutyric acid and 4-(4-amino-1-oxo-1,3-dihydroisoindole -2-yl)4-carbamoylbutyric acid, which have the following structures, respectively, and their pharmaceutically acceptable salts, solvates, prodrugs and stereoisomers:
- 29 044652- 29 044652
в которой атом углерода, обозначенный С*, представляет собой хиральный центр, когда n не равно нулю, и R1 не является R2; один из X1 и X2 представляет собой аминогруппу, нитрогруппу, алкил с числом атомов углерода от одного до шести или NH-Z, а другой из X1 или X2 представляет собой водород; каждый из R1 и R2, независимо от другого, представляет собой гидроксигруппу или NH-Z; R3 представляет собой алкил с числом атомов углерода от одного до шести, галоген или водород; Z представляет собой водород, арил или алкил или ацил с числом атомов углерода от одного до шести; и n имеет значение 0, 1 или 2; и их соли.in which the carbon atom designated C* represents a chiral center when n is not zero and R 1 is not R 2 ; one of X 1 and X 2 represents an amino group, a nitro group, alkyl having one to six carbon atoms, or NH-Z, and the other of X 1 or X 2 represents hydrogen; R 1 and R 2 are each, independently of the other, hydroxy or NH-Z; R 3 represents alkyl of one to six carbon atoms, halogen or hydrogen; Z represents hydrogen, aryl or alkyl or acyl of one to six carbon atoms; and n is 0, 1 or 2; and their salts.
Конкретные примеры включают, но не ограничиваются ими, 4-карбамоил-4-{4-[(фуран-2илметил)амино]-1,3-диоксо-1,3 -дигидроизоиндол-2-ил} масляную кислоту, 4-карбамоил-2- {4-[(фуран-2илметил)амино]-1,3-диоксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил} масляную кислоту, 2- {4-[(фуран-2илметил)амино]-1,3-диоксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил} -4-п-генилкарбамоил-масляную кислоту и 2-{4[(фуран-2-илметил)амино] 1,3-диоксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил}пентандновую кислоту, которые имеют нижеследующие структуры, соответственно, и их фармацевтически приемлемые соли, сольваты, пролекарственные соединения и стереоизомеры:Specific examples include, but are not limited to, 4-carbamoyl-4-{4-[(furan-2ylmethyl)amino]-1,3-dioxo-1,3-dihydroisoindol-2-yl}butyric acid, 4-carbamoyl- 2-{4-[(furan-2ylmethyl)amino]-1,3-dioxo-1,3-dihydroisoindol-2-yl}butyric acid, 2-{4-[(furan-2ylmethyl)amino]-1,3 -dioxo-1,3-dihydroisoindol-2-yl}-4-p-genylcarbamoyl-butyric acid and 2-{4[(furan-2-ylmethyl)amino]1,3-dioxo-1,3-dihydroisoindole-2 -yl}pentane acid, which have the following structures, respectively, and their pharmaceutically acceptable salts, solvates, prodrugs and stereoisomers:
- 30 044652 в которой: один из X1 и X2 представляет собой нитро или NH-Z, а другой из X1 или X2 представляет собой водород;- 30 044652 in which: one of X 1 and X 2 represents nitro or NH-Z, and the other of X 1 or X 2 represents hydrogen;
каждый из R1 и R2, независимо от другого, представляет собой гидроксигруппу или NH-Z;R 1 and R 2 are each, independently of the other, hydroxy or NH-Z;
R3 представляет собой алкил с числом атомов углерода от одного до шести, галоген или водород;R 3 represents alkyl of one to six carbon atoms, halogen or hydrogen;
Z представляет собой водород, фенил, ацил с числом атомов углерода от одного до шести или алкил с числом атомов углерода от одного до шести; и n имеет значение 0, 1 или 2; и если -COR2 и -(CH2)nCOR1 различны, атом углерода, обозначенный С*, представляет собой хиральный центр.Z represents hydrogen, phenyl, acyl of one to six carbon atoms or alkyl of one to six carbon atoms; and n is 0, 1 or 2; and if -COR 2 and -(CH 2 ) n COR 1 are different, the carbon atom designated C* represents the chiral center.
Другие типичные соединения имеют формулу:Other typical compounds have the formula:
в которой: один из X1 и X2 представляет собой алкил, содержащий от одного до шести атомов угле рода;in which: one of X 1 and X 2 is an alkyl containing from one to six carbon atoms;
каждый из R1 и R2, независимо от другого, представляет собой гидроксигруппу или NH-Z;R 1 and R 2 are each, independently of the other, hydroxy or NH-Z;
R3 представляет собой алкил с числом атомов углерода от одного до шести, галоген или водород;R 3 represents alkyl of one to six carbon atoms, halogen or hydrogen;
Z представляет собой водород, фенил, ацил с числом атомов углерода от одного до шести или алкил с числом атомов углерода от одного до шести; и n имеет значение 0, 1 или 2; и если -COR2 и -(CH2)nCOR1 различны, атом углерода, обозначенный С*, представляет собой хиральный центр.Z represents hydrogen, phenyl, acyl of one to six carbon atoms or alkyl of one to six carbon atoms; and n is 0, 1 or 2; and if -COR 2 and -(CH 2 ) n COR1 are different, the carbon atom designated C* represents the chiral center.
Еще одними специфичными иммуномодулирующими соединениями являются изоиндолин-1-он и изоиндолин-1,3-дион, замещенные во 2-м положении 2,6-диоксо-3-гидроксипиперидин-5-илом, описанные в патенте США № 6458810, который включен в настоящий документ посредством ссылки.Other specific immunomodulatory compounds are isoindolin-1-one and isoindolin-1,3-dione, substituted at the 2-position with 2,6-dioxo-3-hydroxypiperidin-5-yl, described in US Pat. No. 6,458,810, which is included in this document by reference.
Типичные соединения имеют формулу:Typical compounds have the formula:
в которой: атомы углерода, обозначенные *, представляют собой хиральные центры; X представляет собой -С (О) - или -СН2-;in which: the carbon atoms designated * represent chiral centers; X represents -C(O)- or -CH2- ;
R1 представляет собой алкил с 1-8 атомами углерода или -NHR3;R 1 represents alkyl with 1-8 carbon atoms or -NHR 3 ;
R2 представляет собой водород, алкил с 1-8 атомами углерода или галоген; иR 2 represents hydrogen, alkyl with 1-8 carbon atoms or halogen; And
R3 представляет собой водород, алкил с 1-8 атомами углерода, незамещенную или замещенную алкоксигруппу с 1-8 атомами углерода, галоген, амино- или алкиламиногруппу с 1-4 атомами углерода, циклоалкил с 3-18 атомами углерода, фенил, незамещенный или замещенный алкилом с 1-8 атомами углерода, алкоксигруппой с 1-8 атомами углерода, галогеном, амино- или алкиламиногруппой с 1-4 атомами углерода, бензил, незамещенный или замещенный алкилом с 1-8 атомами углерода, алкоксигруппой с 1-8 атомами углерода, галогеном, амино- или алкиламиногруппой с 1-4 атомами углерода или -COR4, в которой R4 представляет собой водород, алкил с 1-8 атомами углерода, незамещенный или замещенный алкоксигруппой с 1-8 атомами углерода, галогеном, амино- или алкиламиногруппой с 1-4 атомами углерода, циклоалкил с 3-18 атомами углерода, фенил, незамещенный или замещенный алкилом с 1-8 атомами углерода, алкоксигруппой с 1-8 атомами углерода, галогеном, амино- или алкиламиногруппой с 1-4 атомами углерода, или бензил, незамещенный или замещенный алкилом с 1-8 атомами углерода, алкоксигруппой с 1-8 атомами углерода, галогеном, амино- или алкиламиногруппой с 1-4 атомами углерод.R 3 represents hydrogen, alkyl of 1-8 carbon atoms, unsubstituted or substituted alkoxy of 1-8 carbon atoms, halogen, amino or alkylamino group of 1-4 carbon atoms, cycloalkyl of 3-18 carbon atoms, phenyl, unsubstituted or substituted by alkyl of 1-8 carbon atoms, alkoxy group of 1-8 carbon atoms, halogen, amino or alkylamino group of 1-4 carbon atoms, benzyl, unsubstituted or substituted by alkyl group of 1-8 carbon atoms, alkoxy group of 1-8 carbon atoms , halogen, amino or alkylamino group with 1-4 carbon atoms or -COR 4 in which R 4 represents hydrogen, alkyl with 1-8 carbon atoms, unsubstituted or substituted with alkoxy group with 1-8 carbon atoms, halogen, amino or alkylamino group with 1-4 carbon atoms, cycloalkyl with 3-18 carbon atoms, phenyl, unsubstituted or substituted with alkyl with 1-8 carbon atoms, alkoxy group with 1-8 carbon atoms, halogen, amino or alkylamino group with 1-4 carbon atoms, or benzyl, unsubstituted or substituted with alkyl of 1-8 carbon atoms, alkoxy group of 1-8 carbon atoms, halogen, amino or alkylamino group of 1-4 carbon atoms.
7. Примеры7. Examples
В экспериментах, описанных в примерах 1-3, использовали следующие материалы и способы.In the experiments described in examples 1-3, the following materials and methods were used.
Культивирование клеток: клетки Hek293 выращивали в среде DMEM (ThermoFisher) с добавлением 10% фетальной бычьей сыворотки (FBS). Клетки С6 культивировали на питательной смеси Ham's F12 (ThermoFisher) с добавлением 10% FBS. Клетки NCIH929, U266B1, KMS12BM, ОРМ2 и NUDHL1 культивировали в среде RPMI-1640 с добавлением 10% FBS.Cell culture: Hek293 cells were grown in DMEM (ThermoFisher) supplemented with 10% fetal bovine serum (FBS). C6 cells were cultured in Ham's F12 nutrient mixture (ThermoFisher) supplemented with 10% FBS. NCIH929, U266B1, KMS12BM, OPM2 and NUDHL1 cells were cultured in RPMI-1640 medium supplemented with 10% FBS.
Плазмиды: кДНК, кодирующую полноразмерный BCMA человека (UniProtKB-Q02223; TNFRSF17) клонировали в экспрессионный вектор SF#10008 и трансфицировали в клетки С6. Полноразмерную кДНК, кодирующую TNFRSF12A человека (TWEAKR; NP_057723.1), субклонировали в экспрессионный вектор pCDNA3.1 (+), который впоследствии трансфицировали в клетки Hek293. Трансфектанты были отобраны с использованием пуромицина или неомицина, и клональные популяции были созданы и проанализированы с помощью проточной цитометрии.Plasmids: cDNA encoding full-length human BCMA (UniProtKB-Q02223; TNFRSF17) was cloned into the expression vector SF#10008 and transfected into C6 cells. The full-length cDNA encoding human TNFRSF12A (TWEAKR; NP_057723.1) was subcloned into the expression vector pCDNA3.1 (+), which was subsequently transfected into Hek293 cells. Transfectants were selected using puromycin or neomycin, and clonal populations were generated and analyzed by flow cytometry.
FACS-анализ: FACS-антитела, используемые в этом исследовании, включают: 1) LS-C106982-100, мышиное моноклональное антитело против TNFRSF12A человека, конъюгированное с R-фикоэритриномFACS Analysis: FACS antibodies used in this study include: 1) LS-C106982-100, a mouse monoclonal anti-human TNFRSF12A antibody conjugated to R-phycoerythrin
- 31 044652 (РЕ) (LifeSpan BioSciences, Inc.); 2) ЕМ901, которое ранее было охарактеризовано как BCMAсвязывающее антитело (Mab42; номер международной заявки WO2017/021450); 3) специфичное к Fcy IgG человека от компании Ebiosciences, меченное РЕ; 4) контроль изотипа IgG человка; 5) анти-TACI антитело [1А1] (Abcam); 6) антитело к рецептору BAFF 8A7 (ThermoFisher); 7) анти-BCMA антитело 19F2 (BioLegend). Каждый тип клеток (75000 клеток/лунку) инкубировали с первичными антителами в буфере для FACS (PBS, содержащий 0,2% BSA) в течение 25 мин в 96-луночном планшете. Клетки промывали один раз буфером для FACS и инкубировали с вторичным антителом в разведении 1:100 в течение 25 мин. После однократной промывки клетки фиксировали в течение 10 мин 1%-м параформальдегидом, промывали буфером для FACS и ресуспендировали в 100 мкл буфера для FACS. Меченые клетки анализировали с использованием проточного цитометра Attune NxT, а данные обрабатывали с помощью FlowJo 10.0.8rl (FLOWJO LLC) в соответствии с инструкциями производителя.- 31 044652 (PE) (LifeSpan BioSciences, Inc.); 2) EM901, which was previously characterized as a BCMA-binding antibody (Mab42; international application number WO2017/021450); 3) human Fcy-specific IgG from Ebiosciences, labeled with PE; 4) human IgG isotype control; 5) anti-TACI antibody [1A1] (Abcam); 6) antibody to the BAFF receptor 8A7 (ThermoFisher); 7) anti-BCMA antibody 19F2 (BioLegend). Each cell type (75,000 cells/well) was incubated with primary antibodies in FACS buffer (PBS containing 0.2% BSA) for 25 min in a 96-well plate. Cells were washed once with FACS buffer and incubated with a 1:100 dilution of secondary antibody for 25 min. After washing once, cells were fixed for 10 min with 1% paraformaldehyde, washed with FACS buffer, and resuspended in 100 μl of FACS buffer. Labeled cells were analyzed using an Attune NxT flow cytometer, and data were processed using FlowJo 10.0.8rl (FLOWJO LLC) according to the manufacturer's instructions.
7.1. Пример 1.7.1. Example 1.
Антиген созревания В-клеток (BCMA), также известный как член суперсемейства 17 рецепторов фактора некроза опухоли (TNFRSF17), представляет собой белок, который найден при многих различных типах рака.B cell maturation antigen (BCMA), also known as tumor necrosis factor receptor superfamily member 17 (TNFRSF17), is a protein that is found in many different types of cancer.
Получение антител против BCMA: антитела против BCMA человека были получены в результате иммунизации животных OmniFlic (Ligand Pharmaceuticals)x RAT5Lew, проведенной в Aldevron Freiburg (Фрайбург, Германия) с многократным применением вектора ДНК, содержащего BCMA-(ак 1-54) и рекомбинантный внеклеточный домен BCMA человека (ак 1-54), приобретенный в AcroBiosystem (Ньюарк, Делавер, 19711). Собирали лимфатические узлы от иммунореактивных животных, и общую РНК экстрагировали из первичных лимфоцитов в Teneobio, Inc. (Пало-Альто, Калифорния). Вариабельные области IgG были амплифицированы в каждом образце перед проведением парноконцевого секвенирования следующего поколения с последующим ранговым анализом для количественного определения уровня экспрессии для каждой уникальной вариабельной области IgG человека.Preparation of anti-BCMA antibodies: Anti-human BCMA antibodies were obtained by immunizing animals with OmniFlic (Ligand Pharmaceuticals)x RAT5Lew, carried out at Aldevron Freiburg (Freiburg, Germany) with repeated use of a DNA vector containing BCMA-(aa 1-54) and recombinant extracellular human BCMA domain (aa 1-54), purchased from AcroBiosystem (Newark, DE, 19711). Lymph nodes from immunoreactive animals were collected, and total RNA was extracted from primary lymphocytes at Teneobio, Inc. (Palo Alto, California). IgG variable regions were amplified from each sample prior to paired-end next-generation sequencing followed by rank order analysis to quantify the expression level for each unique human IgG variable region.
Экспрессия антител против BCMA: ранее описанные пять VH-областей вместе с панелью предполагаемых BCMA-реактивных VH были котрансфицированы с одной общей VL в стандартном формате антител IgG1/карра. Все последовательности антител были субклонированы в вектор рТТ5 для экспрессии белков млекопитающих (NRC-CNRC, Оттава, Онтарио, Канада). Антитела транзиентно трансфицировали в клетки Expi293 или ExpiCHO-S (Thermo Fisher Scientific, Уолтам, Массачусетс) в 24-глубоколуночных планшетах (кат. № P-DW-10ML-24-CS, Axygen, Тьюксбери, Массачусетс) в соответствии с протоколами производителя. Для каждого антитела соотношение ДНК для LC:HC 1:1 использовали для экспрессии при 0,5 мкг/мл ДНК/мл экспрессионной среды, и культуры встряхивали при 500 об/мин, используя 3-мм орбитальную платформу для встряхивания при 37°С в атмосфере 5% СО2. Через шесть-семь дней после трансфекции среду в планшетах осветляли центрифугированием (3724 RCF, 4°С, 30 мин), и супернатанты переносили в новые многолуночные планшеты, предназначенные для определения титра с использованием биосенсоров на белке А на устройстве Octet Red 384 (Pall ForteBio, Фримонт, Калифорния) и проводили скрининг на активность.Expression of anti-BCMA antibodies: The previously described five VH regions, along with a panel of putative BCMA-reactive VHs, were cotransfected with one common VL in a standard IgG1/Carr antibody format. All antibody sequences were subcloned into the mammalian protein expression vector pTT5 (NRC-CNRC, Ottawa, ON, Canada). Antibodies were transiently transfected into Expi293 or ExpiCHO-S cells (Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA) in 24-deep well plates (cat. no. P-DW-10ML-24-CS, Axygen, Tewksbury, MA) according to the manufacturer's protocols. For each antibody, a 1:1 DNA ratio for LC:HC was used for expression at 0.5 μg/ml DNA/ml expression medium, and cultures were shaken at 500 rpm using a 3 mm orbital shaking platform at 37°C at atmosphere 5% CO 2 . Six to seven days after transfection, the media in the plates was clarified by centrifugation (3724 RCF, 4°C, 30 min), and the supernatants were transferred to new multiwell plates designed for titer determination using Protein A biosensors on an Octet Red 384 device (Pall ForteBio , Fremont, California) and screened for activity.
После идентификации супернатантов, дающих положительный ответ, потенциальные анти-BCMA молекулы были транзиентно трансфицированы в клетки ExpiCHO-S в объеме 60 мл в колбах Эрленмейера на 250 мл (кат. №: 431144, Corning, Тьюксбери, Массачусетс) в соответствии с инструкциями производителя и встряхивали при 37°С и 120 об/мин на встряхиваемой платформе с орбитой 25 мм. После одной недели культивирования супернатанты собирали центрифугированием (3724 RCF, 4°С, 30 мин) с последующей фильтрацией (кат. № 89220-720, VWR, Реднор, Пенсильвания) и затем очищали.After identification of positive supernatants, potential anti-BCMA molecules were transiently transfected into ExpiCHO-S cells in a volume of 60 ml in 250 ml Erlenmeyer flasks (Cat. No: 431144, Corning, Tewksbury, MA) according to the manufacturer's instructions and shaken at 37°C and 120 rpm on a shaking platform with a 25 mm orbit. After one week of culture, supernatants were collected by centrifugation (3724 RCF, 4°C, 30 min) followed by filtration (Cat. No. 89220-720, VWR, Rednor, PA) and then purified.
Очистка анти-BCMA антител: отфильтрованные супернатанты очищали с использованием 5 мл смолы Mab Select Sure Lx (кат. № 29157185, GE Healthcare) на хроматографической системе АКТА Pure (кат. № 29046694, GE Healthcare). Эти образцы элюировали с колонки, используя цитрат натрия, рН 3,0, и нейтрализовали до рН 5,5 с помощью 3М Tris-HCl. Конечные образцы диализовали в лабораторный универсальный буфер (10 мМ ацетат натрия, рН 5,2 и 9 мас./об.% сахарозы). Концентрацию и чистоту (оценка агрегации) измеряли с использованием SEC-колонки (кат. № PL 1580-3301, Agilent, США).Anti-BCMA Antibody Purification: Filtered supernatants were purified using 5 mL of Mab Select Sure Lx Resin (Cat. No. 29157185, GE Healthcare) on an ACT Pure Chromatography System (Cat. No. 29046694, GE Healthcare). These samples were eluted from the column using sodium citrate, pH 3.0, and neutralized to pH 5.5 with 3M Tris-HCl. The final samples were dialyzed into laboratory universal buffer (10 mM sodium acetate, pH 5.2 and 9 w/v% sucrose). Concentration and purity (aggregation assessment) were measured using a SEC column (cat. no. PL 1580-3301, Agilent, USA).
Анализ связывания для анти-BCMA антител методом поверхностного плазмонного резонанса: рабочий буфер, используемый в этом анализе, представлял собой HBS-EP (150 мМ NaCl, 10 мМ Hepes рН 7,4, 3 мМ EDTA и 0,005% поверхностно-активного вещества Р20). Для неавидных измерений, антитела 320199 и 319883 были иммобилизованы на чипе с белком A (GE Healthcare) в концентрации 2 мкг/мл, в то время как рекомбинантный Hu-BCMA (BCMA человека) от Acro Biosystems (BCA-H522y), а также Cyno-BCMA (BCMA яванского макака) с отщепленным Fc пропускали над ними, начиная с максимальной концентрации 50 нМ с последующими 3-кратными разбавлениями до 0,6 нМ (50, 16,66, 5,55, 1,85, 0,6 и 0 нМ). Анализы проводили при 25°С и 37°С и скорости потока 10 мкл.Surface Plasmon Resonance Binding Assay for Anti-BCMA Antibodies: The running buffer used in this assay was HBS-EP (150 mM NaCl, 10 mM Hepes pH 7.4, 3 mM EDTA, and 0.005% P20 surfactant) . For non-avid measurements, antibodies 320199 and 319883 were immobilized on a Protein A chip (GE Healthcare) at a concentration of 2 μg/ml, while recombinant Hu-BCMA (human BCMA) from Acro Biosystems (BCA-H522y) as well as Cyno -BCMA (cynomolgus BCMA) with the cleaved Fc was passed over them, starting at a maximum concentration of 50 nM followed by 3-fold dilutions to 0.6 nM (50, 16.66, 5.55, 1.85, 0.6 and 0 nM). Assays were performed at 25°C and 37°C and a flow rate of 10 μL.
Шесть анти-BCMA клонов от Teniobio (320199, 319883, 319952, 320262, 319966, 320111) были протестированы на связывание с Human-BCMA (человека), Cyno-BCMA (яванского макака) и Cyno-TACI (взаимодействующий с CAML трансмебранный активаторный белок яванского макака), экспрессированных в клетках 293 с мышиным Fc-тегом, с использованием прибора Biacore-8K (GE Healthcare). БылиSix anti-BCMA clones from Teniobio (320199, 319883, 319952, 320262, 319966, 320111) were tested for binding to Human-BCMA, Cyno-BCMA (cynomolgus), and Cyno-TACI (CAML transmembrane activator protein-interacting protein). cynomolgus) expressed in mouse Fc-tagged 293 cells using a Biacore-8K instrument (GE Healthcare). Were
- 32 044652 проведены измерения авидности (фиг. 1А) и неавидности (фиг. 1В).- 32 044652 measurements of avidity (Fig. 1A) and non-avidity (Fig. 1B) were carried out.
Для измерения авидности антигены захватывали на поверхности, способной связываться с мышиными антителами, в концентрации 2 мкг/мл, в то время как антитела пропускали с начальной максимальной концентрацией 50 нМ с последующими 3-кратными разбавлениями до 0,6 нМ (50, 16,66, 5,55, 1,85, 0,6 и 0 нм). Анализы проводили при 25°С и скорости потока 10 мкл/мин для захвата, 30 мкл/мин в течение 3 мин для ассоциации и 5 мин для диссоциации. Поверхность регенерировали после каждого цикла с помощью 10 мМ глицина, рН 1,5, в течение 1 мин. В качестве рабочего буфера, используемого в этом анализе, был взят HBS-EP (150 мМ NaCl, 10 мМ Hepes рН 7,4, 3 мМ EDTA и 0,005% поверхностноактивного вещества Р20).To measure avidity, antigens were captured on surfaces capable of binding to murine antibodies at a concentration of 2 μg/ml, while antibodies were run at an initial maximum concentration of 50 nM followed by 3-fold dilutions to 0.6 nM (50, 16,66 , 5.55, 1.85, 0.6 and 0 nm). Assays were performed at 25°C and a flow rate of 10 μL/min for uptake, 30 μL/min for 3 min for association, and 5 min for dissociation. The surface was regenerated after each cycle with 10 mM glycine, pH 1.5, for 1 min. The running buffer used in this assay was HBS-EP (150 mM NaCl, 10 mM Hepes pH 7.4, 3 mM EDTA, and 0.005% surfactant P20).
Анализ данных проводили с использованием программного обеспечения Biacore 8K Analysis (GE Healthcare), рассматривая данные с двойными контролями и используя модель Ленгмюра 1: 1 для аппроксимации кривой. Анти-BCMA антитело от EngMab использовали в качестве положительного контроля, а антитело против RSV1-IgG1 использовали в качестве отрицательного контроля.Data analysis was performed using Biacore 8K Analysis software (GE Healthcare), considering data with duplicate controls and using a 1:1 Langmuir model for curve fitting. Anti-BCMA antibody from EngMab was used as a positive control, and anti-RSV1-IgG1 antibody was used as a negative control.
Иммуногистохимия: одноцветное иммуногистохимическое окрашивание (IHC) с использованием DAB связывающих молекул в каркасе IgG человека или кролика с нормальными IgG человека и кролика (Abcam, ab172730) в качестве контролей изотипа выполняли на Bond-Ill Autostainer (Leica Microsystems) с набором Bond polymer refine detection (Leica, DS9800). В фиксированных формалином, залитых парафином (FFPE) срезах (4 мкм) клеточного осадка демаскировали антиген с помощью раствора 1 для извлечения эпитопов (Leica, AR9961) в течение 20 мин при 100°С и блокировали пероксидным блокирующим агентом в течение 5 мин. Срезы инкубировали со связывающими агентами при соответствующих разведениях в течение 15 мин. Для связывающих агентов в каркасе IgG человека использовали вторичное кроличье антитело против IgG человека (Abcam, ab2410, 1:100) на 8 мин. Этот шаг не требовался для связывающих агентов в каркасе кроличьего IgG. Затем срезы инкубировали в полимере в течение 8 мин, проявляли в DAB в течение 10 мин, окрашивали гематоксилином в течение 5 мин, покрывали покровным стеклом Sakura Finetek.Immunohistochemistry: Single-color immunohistochemical (IHC) staining using DAB binding molecules in a human or rabbit IgG backbone with normal human and rabbit IgG (Abcam, ab172730) as isotype controls was performed on a Bond-Ill Autostainer (Leica Microsystems) with a Bond polymer refine detection kit (Leica, DS9800). Formalin-fixed, paraffin-embedded (FFPE) sections (4 μm) of the cell pellet were antigen unmasked using epitope retrieval solution 1 (Leica, AR9961) for 20 min at 100°C and blocked with peroxide blocking agent for 5 min. Sections were incubated with binding agents at appropriate dilutions for 15 min. For binding agents in the human IgG framework, a secondary rabbit anti-human IgG antibody (Abcam, ab2410, 1:100) was used for 8 min. This step was not required for the binding agents in the rabbit IgG scaffold. Sections were then incubated in polymer for 8 min, developed in DAB for 10 min, stained with hematoxylin for 5 min, and covered with a Sakura Finetek coverslip.
7.2. Исследования связывания анти-BCMA антител. Пример 2.7.2. Anti-BCMA antibody binding studies. Example 2.
Этот пример демонстрирует, что IgG человека, 320262, 319966, 320111, 319883 и 320199, распознают клетки С6, экспрессирующие белок BCMA человека. Клетки С6, стабильно трансфицированные BCMA человека или ложно-трансфицированные клетки С6, инкубировали с 0,4 мкг/мл ЕМ901, 320262, 319966, 320111, 319883 или 320199. Реактивность каждого антитела контролировали с помощью FACS. EM901, антитело, для которого ранее было показано связывание с BCMA (номер патента WO 2017021450), хорошо связывало трансфектантов C6-BCMA, подтверждая экспрессию BCMA этими клетками. По сравнению с нетрансфицированными клетками С6 (левая гистограмма (синяя) кривая в каждой панели), гистограммы, соответствующие номерам 320262, 319966, 320111, 319883 и 320199 (правая гистограмма (красная) кривая в каждой панели), показали существенные сдвиги вправо (фигура 2). Эти результаты показывают, что 320262, 319966, 320111, 319883 и 320199 реагируют с человеческим BCMA, экспрессируемым на клеточной поверхности. Включены геометрические средние значения, количественно описывающие это связывание (фиг. 2).This example demonstrates that human IgGs, 320262, 319966, 320111, 319883 and 320199, recognize C6 cells expressing human BCMA protein. C6 cells stably transfected with human BCMA or mock-transfected C6 cells were incubated with 0.4 μg/ml EM901, 320262, 319966, 320111, 319883, or 320199. The reactivity of each antibody was monitored by FACS. EM901, an antibody previously shown to bind to BCMA (patent number WO 2017021450), bound C6-BCMA transfectants well, confirming BCMA expression by these cells. Compared to untransfected C6 cells (left histogram (blue) curve in each panel), histograms corresponding to numbers 320262, 319966, 320111, 319883, and 320199 (right histogram (red) curve in each panel) showed significant shifts to the right (Figure 2 ). These results indicate that 320262, 319966, 320111, 319883 and 320199 react with human BCMA expressed on the cell surface. Geometric means quantifying this binding are included (Figure 2).
7.3. Исследования связывания анти-BCMA антител. Пример 3.7.3. Anti-BCMA antibody binding studies. Example 3.
Этот пример показывает, что 320262, 319966, 320111, 319883 и 320199 не связывают клетки Hek293, экспрессирующие полноразмерный человеческий TNFRSF12A/TWEAKR, член семейства TNFрецепторов, родственных BCMA. Клетки Hek293 стабильно трансфицированные человеческим TNFRSF12A, инкубировали с 0,4 мкг/мл контроля изотипа IgG человека, 320262, 319966, 320111, 319883 или 320199. Реактивность каждого антитела контролировали с помощью FACS. Клетки Hek293TNFRSF12A, окрашенные антителом против TNFRSF12A, свидетельствуют об экспрессии TNFRSF12A. Относительно контроля изотипа (синяя гистограмма) сдвиги вправо гистограмм, соответствующих номерам 320262, 319966, 320111, 319883 и 320199 (показаны красным), обнаружить не удалось (фиг. 3). Эти результаты показывают, что 320262, 319966, 320111, 319883 и 320199 не проявляли значительной связывающей активности в отношении TNFRSF12A человека. Показаны геометрические средние для количественной оценки этого связывания (фиг. 3).This example shows that 320262, 319966, 320111, 319883 and 320199 do not bind Hek293 cells expressing full-length human TNFRSF12A/TWEAKR, a member of the BCMA-related TNF receptor family. Hek293 cells stably transfected with human TNFRSF12A were incubated with 0.4 μg/ml human IgG isotype control, 320262, 319966, 320111, 319883, or 320199. The reactivity of each antibody was monitored by FACS. Hek293TNFRSF12A cells stained with anti-TNFRSF12A antibody indicate expression of TNFRSF12A. Relative to the isotype control (blue histogram), no rightward shifts were detected in the histograms corresponding to numbers 320262, 319966, 320111, 319883, and 320199 (shown in red) (Fig. 3). These results indicate that 320262, 319966, 320111, 319883, and 320199 did not exhibit significant binding activity toward human TNFRSF12A. Geometric means to quantify this binding are shown (Figure 3).
7.4. Исследования связывания анти-BCMA антител. Пример 4.7.4. Anti-BCMA antibody binding studies. Example 4.
Этот пример демонстрирует, что 320262, 319966, 320111, 319883 и 320199 распознают клетки множественной миеломы NCIH929, которые эндогенно экспрессируют BCMA человека. Клетки NCIH929 инкубировали с 1,0 мкг/мл контроля изотипа IgG человека, ЕМ901, 320262, 319966, 320111, 319883 или 320199. Реактивность каждого антитела контролировали с помощью FACS. Антитело ЕМ901, распознающее BCMA, прочно связывается с клетками NCIH929. Относительно контроля изотипа (левая гистограмма (синяя) кривая в каждой панели) гистограммы, соответствующие номерам 320262, 319966, 320111, 319883 и 320199 (правая гистограмма (красная) кривая в каждой панели), показали существенные сдвиги вправо (фиг. 4). Эти результаты показывают, что 320262, 319966, 320111, 319883 и 320199 взаимодействовали с клетками NCIH929. Показаны геометрические средние для количественной оценки этого связывания (фиг. 4).This example demonstrates that 320262, 319966, 320111, 319883 and 320199 recognize NCIH929 multiple myeloma cells that endogenously express human BCMA. NCIH929 cells were incubated with 1.0 μg/ml human IgG isotype control, EM901, 320262, 319966, 320111, 319883, or 320199. The reactivity of each antibody was monitored by FACS. The BCMA-recognizing antibody EM901 binds strongly to NCIH929 cells. Relative to the isotype control (left histogram (blue) curve in each panel), histograms corresponding to numbers 320262, 319966, 320111, 319883, and 320199 (right histogram (red) curve in each panel) showed significant shifts to the right (Fig. 4). These results indicate that 320262, 319966, 320111, 319883, and 320199 interacted with NCIH929 cells. Geometric means to quantify this binding are shown (Figure 4).
7.5 Исследования связывания анти-BCMA антител. Пример 5.7.5 Anti-BCMA antibody binding studies. Example 5.
- 33 044652- 33 044652
Этот пример демонстрирует, что 320262, 319966, 320111, 319883 и 320199 распознают клетки множественной миеломы BCMA+, U266B1 и KMS12BM, инкубированные с 0,016-10 мкг/мл контроля изотипа IgG человека, ЕМ901, фигуре 5. Реактивность каждого антитела контролировали с помощью FACS. EM901, 320262, 319966, 320111, 319883 и 320199 связывали U266B1 и KMS12BM относительно контроля изотипа дозозависимым образом (фиг. 5). Кроме того, 320262 и 320111 распознали клетки множественной миеломы ОРМ2, которые экспрессируют BCMA, но не TACI или BAFF рецептор, другие члены семейства TNF-рецепторов, родственные BCMA (кривая доза-ответ и гистограмма, фиг. 5). Напротив, 320262 и 320111 не связывают клетки NUDHL1, которые являются BCMA'/TACI+/BAFFR+ (кривая дозаответ и гистограмма, фиг. 5). Эти результаты показывают, что 320262, 319966, 320111, 319883 и 320199 проявляют BCMA-зависимое, дозозависимое связывание с клетками. Показаны геометрические средние для количественной оценки этого связывания (фиг. 5).This example demonstrates that 320262, 319966, 320111, 319883 and 320199 recognize BCMA+, U266B1 and KMS12BM multiple myeloma cells incubated with 0.016-10 μg/ml human IgG isotype control, EM901, Figure 5. The reactivity of each antibody was monitored by FACS. EM901, 320262, 319966, 320111, 319883, and 320199 bound U266B1 and KMS12BM relative to the isotype control in a dose-dependent manner (Fig. 5). In addition, 320262 and 320111 recognized OPM2 multiple myeloma cells that express BCMA, but not TACI or BAFF receptor, other members of the BCMA-related TNF receptor family (dose-response curve and histogram, Fig. 5). In contrast, 320262 and 320111 do not bind NUDHL1 cells, which are BCMA'/TACI + /BAFFR + (dose response curve and histogram, Fig. 5). These results indicate that 320262, 319966, 320111, 319883 and 320199 exhibit BCMA-dependent, dose-dependent binding to cells. Geometric means to quantify this binding are shown (Figure 5).
- 34 044652- 34 044652
- 35 044652- 35 044652
--
Claims (14)
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US62/633,152 | 2018-02-21 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
EA044652B1 true EA044652B1 (en) | 2023-09-20 |
Family
ID=
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP7301915B2 (en) | Chimeric Antigen Receptors Targeting B Cell Maturation Antigens | |
US20220324991A1 (en) | Bcma-binding antibodies and uses thereof | |
TW202043280A (en) | Antibodies and chimeric antigen receptors specific for receptor tyrosine kinase like orphan receptor 1 (ror1) | |
TW202037606A (en) | Single-domain antibodies against cll1 and constructs thereof | |
KR20170128234A (en) | Antibodies specific for ROR1 and chimeric antigen receptors | |
CN118459611A (en) | GPRC5D chimeric antigen receptors and cells expressing these receptors | |
CN114007642A (en) | Chimeric receptors and methods of use thereof | |
KR20170057298A (en) | Antibodies and chimeric antigen receptors specific for cd19 | |
TW201902919A (en) | Chimeric antigen receptor targeting FLT3 | |
KR20200140315A (en) | Anti-CD27 antibodies and uses thereof | |
US20230227527A1 (en) | Tcr-t cell therapy targeting epstein-barr virus | |
CA3170020A1 (en) | Anti-hpv t cell receptors and engineered cells | |
WO2023030539A1 (en) | Anti-gpc3 chimeric antigen receptor and methods of use thereof | |
EA044652B1 (en) | BCMA BINDING ANTIBODIES AND THEIR APPLICATIONS | |
JP2022537068A (en) | Anti-ALPP CAR-T cell therapy | |
TWI851650B (en) | Gprc5d chimeric antigen receptors and cells expressing the same | |
WO2023006118A1 (en) | Anti-cd33 antibodies and uses thereof | |
WO2023006117A1 (en) | Antibodies against cll1 and constructs thereof |