EA044346B1 - VARIANT IMMUNOMODULATING PROTEINS OF ICOS LIGAND AND RELATED COMPOSITIONS AND METHODS - Google Patents

VARIANT IMMUNOMODULATING PROTEINS OF ICOS LIGAND AND RELATED COMPOSITIONS AND METHODS Download PDF

Info

Publication number
EA044346B1
EA044346B1 EA202090974 EA044346B1 EA 044346 B1 EA044346 B1 EA 044346B1 EA 202090974 EA202090974 EA 202090974 EA 044346 B1 EA044346 B1 EA 044346B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
icosl
cell
variant
polypeptide
amino acid
Prior art date
Application number
EA202090974
Other languages
Russian (ru)
Inventor
Лоуренс Эванс
Майкл Корнакер
Райан Свенсон
Original Assignee
Элпайн Иммьюн Сайенсиз, Инк.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Элпайн Иммьюн Сайенсиз, Инк. filed Critical Элпайн Иммьюн Сайенсиз, Инк.
Publication of EA044346B1 publication Critical patent/EA044346B1/en

Links

Description

Перекрестные ссылки на родственные заявкиCross references to related applications

Заявка на данный патент заявляет приоритет предварительной патентной заявки 62/574161, поданной 18 октября 2017 г., которая озаглавлена ВАРИАНТНЫЕ ИММУНОМОДУЛИРУЮЩИЕ БЕЛКИThis patent application claims priority to Provisional Patent Application 62/574161, filed October 18, 2017, which is entitled VARIANT IMMUNOMODULATING PROTEINS

ЛИГАНДА ICOS И СОПУТСТВУЮЩИЕ КОМПОЗИЦИИ И СПОСОБЫ, содержание которой полностью включено ссылкой.ICOS LIGAND AND RELATED COMPOSITIONS AND METHODS, the contents of which are incorporated by reference in their entirety.

Включение перечня последовательностей ссылкойIncluding a list of sequences with a link

Заявка подается вместе с Перечнем последовательностей в электронном формате. Список последовательностей представлен как файл под названием 761612002240SeqList.txt, созданный 13 октября 2018 г., размер которого составляет 1655996 байт. Информация списка последовательностей в электронном формате включена в виде ссылки в полном объеме.The application is submitted together with the List of sequences in electronic format. The sequence list is provided as a file called 761612002240SeqList.txt, created on October 13, 2018, which is 1655996 bytes in size. Sequence listing information in electronic format is incorporated by reference in its entirety.

Область техники, к которой относится изобретениеField of technology to which the invention relates

Настоящее изобретение относится к композициям для терапевтического модулирования иммунного ответа при лечении онкологических и иммунологических заболеваний. В некоторых аспектах настоящее раскрытие относится к особым вариантам лиганда ICOS (ICOSL), которые проявляют улучшенное связывание, например, аффинность или селективность, с одним или обоими когнатными белкамипартнерами связывания, ICOS или CD28.The present invention relates to compositions for therapeutic modulation of the immune response in the treatment of cancer and immunological diseases. In some aspects, the present disclosure relates to specific variants of the ICOS ligand (ICOSL) that exhibit improved binding, e.g., affinity or selectivity, to one or both of the cognate binding partners proteins, ICOS or CD28.

Предшествующий уровень техникиPrior Art

Модуляция иммунного ответа путем вмешательства в процессы, происходящие в иммунологическом синапсе (IS), образованные посредством и между антигенпрезентирующими клетками (APC) или клетками-мишенями и лимфоцитами, вызывает всё больший интерес для медицины. Механистически, белки клеточной поверхности в IS могут включать координированное и часто одновременное взаимодействие нескольких белковых мишеней с одиночным белком, с которым они связываются. Взаимодействие IS происходит при тесной ассоциации с соединением двух клеток, и один белок в этой структуре может взаимодействовать как с белком в той же клетке (цис), так и с белком на связанной клетке (транс), вероятно, в одно и тоже время. Хотя известны терапевтические средства, которые могут модулировать IS, существует потребность в улучшенных терапевтических средствах. В данном документе предлагаются иммуномодулирующие белки, включая растворимые белки или трансмембранные иммуномодулирующие белки, способные экспрессироваться на клетках, которые отвечают таким потребностям.Modulation of the immune response by interfering with processes occurring at the immunological synapse (IS) formed through and between antigen presenting cells (APCs) or target cells and lymphocytes is of increasing interest in medicine. Mechanistically, cell surface proteins in the IS may involve coordinated and often simultaneous interactions of multiple protein targets with the single protein to which they bind. IS interaction occurs in close association with the junction of two cells, and one protein in this structure can interact with both a protein in the same cell (cis) and a protein on the connected cell (trans), probably at the same time. Although therapeutic agents are known that can modulate IS, there is a need for improved therapeutic agents. Provided herein are immunomodulatory proteins, including soluble proteins or transmembrane immunomodulatory proteins, capable of being expressed on cells that meet such needs.

РезюмеSummary

В данном документе представлен полипептид вариантного лиганда ICOS (ICOSL), содержащий одну или несколько модификаций аминокислот в домене суперсемейства иммуноглобулинов (IgSF) референсного полипептида ICOSL, где референсный полипептид ICOSL представляет собой укороченный внеклеточный домен, содержащий непрерывную последовательность аминокислот, содержащую аминокислоты 1-112 и C-концевое укорочение, по меньшей мере, на 25 аминокислот относительно последовательности внеклеточного домена ICOSL, представленной в SEQ ID NO: 32. В некоторых из любых предлагаемых воплощений вариантный полипептид ICOSL демонстрирует измененное связывание с эктодоменом(ами) ICOS или CD28 по сравнению со связыванием референсного полипептида ICOSL с тем же эктодоменом(ами). В некоторых из любых предлагаемых воплощений вариантный полипептид ICOSL демонстрирует измененное связывание с эктодоменом(ами) ICOS или CD28 по сравнению со связыванием референсного полипептида ICOSL с тем же эктодоменом(ами).Provided herein is a variant ICOS ligand (ICOSL) polypeptide containing one or more amino acid modifications in the immunoglobulin superfamily (IgSF) domain of the ICOSL reference polypeptide, wherein the ICOSL reference polypeptide is a truncated extracellular domain containing a contiguous amino acid sequence containing amino acids 1-112 and A C-terminal truncation of at least 25 amino acids relative to the ICOSL extracellular domain sequence set forth in SEQ ID NO: 32. In some of any of the provided embodiments, the variant ICOSL polypeptide exhibits altered binding to the ICOS or CD28 ectodomain(s) compared to binding reference polypeptide ICOSL with the same ectodomain(s). In some of any of the provided embodiments, the variant ICOSL polypeptide exhibits altered binding to the ICOS or CD28 ectodomain(s) compared to the binding of the reference ICOSL polypeptide to the same ectodomain(s).

В некоторых воплощениях C-концевое укорочение составляет составляет, по меньшей мере, 30, по меньшей мере, 40, по меньшей мере, 50, по меньшей мере, 60, по меньшей мере, 70, по меньшей мере, 80, по меньшей мере, 90, по меньшей мере, 100, по меньшей мере, 125 аминокислотных остатков. В некоторых из любых предлагаемых воплощений референсный полипептид ICOSL изменен или отсутствует сайт расщепления протеазой, обозначенный как аминокислоты 204-209 в SEQ ID NO: 32. В некоторых примерах референсный полипептид ICOSL включает последовательность аминокислот, приведенную в SEQ ID NO: 545. В некоторых аспектах референсный полипептид ICOSL включает последовательность аминокислот, приведенную в SEQ ID NO: 545.In some embodiments, the C-terminal truncation is at least 30, at least 40, at least 50, at least 60, at least 70, at least 80, at least 90, at least 100, at least 125 amino acid residues. In some of any of the provided embodiments, the ICOSL reference polypeptide is altered or lacks the protease cleavage site designated as amino acids 204-209 in SEQ ID NO: 32. In some examples, the ICOSL reference polypeptide includes the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 545. In some aspects the ICOSL reference polypeptide includes the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 545.

В данном документе представлен вариант полипептида лиганда ICOSL (ICOSL), содержащий одну или несколько модификаций аминокислот в референсном полипептиде ICOSL, где референсный полипептид ICOSL состоит из аминокислотной последовательности, представленной в SEQ ID NO: 545. В данном документе также представлен вариант полипептида лиганда ICOSL (ICOSL), содержащий одну или несколько модификаций аминокислот в домене суперсемейства иммуноглобулинов (IgSF) референсного полипептида ICOSL, где референсный полипептид ICOSL изменен в одной или нескольких аминокислотах, соответствующих аминокислотам 204-209 относительно SEQ ID NO: 32. В некоторых из любых предлагаемых воплощений вариантный полипептид ICOSL проявляет измененное связывание с одним или несколькими его партнерами по связыванию по сравнению со связыванием референсного полипептида ICOSL с одним или несколькими партнерами по связыванию. В некоторых из любых предлагаемых воплощений вариантный полипептид ICOSL проявляет повышенное связывание с одним или несколькими его партнерами по связыванию по сравнению со связыванием референсного полипептида ICOSL с одним или несколькими партнерами по связыванию.Provided herein is a variant ICOSL ligand polypeptide (ICOSL) comprising one or more amino acid modifications in an ICOSL reference polypeptide, wherein the reference ICOSL polypeptide consists of the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 545. Also provided herein is a variant ICOSL ligand polypeptide ( ICOSL) containing one or more amino acid modifications in the immunoglobulin superfamily (IgSF) domain of the ICOSL reference polypeptide, wherein the ICOSL reference polypeptide is changed at one or more amino acids corresponding to amino acids 204-209 relative to SEQ ID NO: 32. In some of any of the provided embodiments, the variant the ICOSL polypeptide exhibits altered binding to one or more of its binding partners compared to the binding of the reference ICOSL polypeptide to one or more binding partners. In some of any of the provided embodiments, the variant ICOSL polypeptide exhibits increased binding to one or more binding partners thereof compared to the binding of the reference ICOSL polypeptide to one or more binding partners.

В некоторых из любых предлагаемых воплощений изменение (например, модификация) включаетIn some of any proposed embodiments, the change (eg, modification) includes

- 1 044346 делецию одной или нескольких смежных аминокислот, соответствующих аминокислотам 204-209, относительно SEQ ID NO: 32. В некоторых случаях референсный полипептид ICOSL включает последовательность аминокислот, указанную в любой из SEQ ID NO: 600-605. В некоторых из любых предлагаемых воплощений референсный полипептид ICOSL состоит из аминокислотной последовательности, представленной в любой из SEQ ID NO: 600-605.- 1044346 deletion of one or more contiguous amino acids corresponding to amino acids 204-209 relative to SEQ ID NO: 32. In some cases, the ICOSL reference polypeptide includes the amino acid sequence specified in any of SEQ ID NO: 600-605. In some of any of the provided embodiments, the ICOSL reference polypeptide consists of the amino acid sequence presented in any of SEQ ID NO: 600-605.

В некоторых из любых предлагаемых воплощений изменение (например, модификация) включает, по меньшей мере, одну аминокислотную замену в одном или обоих положениях 207 и 208, соответствующих положениям, изложенным в SEQ ID NO: 32. В некоторых примерах, по меньшей мере, одна аминокислотная замена представляет собой N207A, N207G или L208G или их консервативную аминокислотную замену.In some of any of the proposed embodiments, the change (eg, modification) includes at least one amino acid substitution at one or both of positions 207 and 208 corresponding to the provisions set forth in SEQ ID NO: 32. In some examples, at least one the amino acid substitution is N207A, N207G or L208G or a conservative amino acid substitution thereof.

В некоторых из любых предлагаемых воплощений референсный полипептид ICOSL включает последовательность аминокислот, представленную в любой из SEQ ID NO: 623-628. В некоторых из любых предлагаемых воплощений референсный полипептид ICOSL включает последовательность аминокислот, представленную в любой из SEQ ID NO: 623-628.In some of any of the provided embodiments, the ICOSL reference polypeptide comprises the amino acid sequence set forth in any of SEQ ID NOs: 623-628. In some of any of the provided embodiments, the ICOSL reference polypeptide comprises the amino acid sequence set forth in any of SEQ ID NOs: 623-628.

В некоторых из любых предлагаемых воплощений вариантный полипептид ICOSL демонстрирует пониженное протеолитическое расщепление при экспрессии в клетке. В некоторых примерах клетка является клеткой млекопитающего. В некоторых случаях клетка представляет собой клеточную линию яичника китайского хомячка (CHO) или ее производное.In some of any of the proposed embodiments, the variant ICOSL polypeptide exhibits reduced proteolytic degradation when expressed in a cell. In some examples, the cell is a mammalian cell. In some cases, the cell is a Chinese hamster ovary (CHO) cell line or a derivative thereof.

В некоторых из любых таких воплощений аминокислотная модификация представляет собой аминокислотную замену, вставку или делецию. В некоторых из любых предлагаемых воплощений одна или несколько аминокислотных модификаций находятся в положении, соответствующем положению(ям), выбранному из 10, 11, 13, 16, 18, 20, 25, 27, 30, 33, 37, 38, 42, 43, 47, 52, 54, 57, 61, 62, 67, 71, 72, 74, 75, 77, 78, 80, 84, 89, 90, 92, 93, 94, 96, 97, 98, 99, 100, 102, 103, 107, 109, 110, 111, 113, 115, 116, 117, 119, 120, 121, 122, 126, 129, 130, 132, 133, 135, 138, 139, 140, 142, 143, 144, 146, 148, 151, 152, 153, 154, 155, 156, 158, 161, 164, 166, 168, 172, 173, 175, 190, 192, 193, 194, 198, 201, 203, 207, 208, 210, 212, 217, 218, 220, 221, 224, 225 или 227 относительно SEQ ID NO: 32. В некоторых из любых предлагаемых воплощений одна или несколько аминокислотных модификаций находятся в положении, соответствующем положению(ям), выбранному из 10, 11, 13, 16, 18, 20, 25, 26, 27, 30, 33, 37, 38, 42, 43, 47, 52, 54, 57, 61, 62, 67, 71,In some of any such embodiments, the amino acid modification is an amino acid substitution, insertion, or deletion. In some of any of the proposed embodiments, one or more amino acid modifications are at a position corresponding to position(s) selected from 10, 11, 13, 16, 18, 20, 25, 27, 30, 33, 37, 38, 42, 43 , 47, 52, 54, 57, 61, 62, 67, 71, 72, 74, 75, 77, 78, 80, 84, 89, 90, 92, 93, 94, 96, 97, 98, 99, 100 , 102, 103, 107, 109, 110, 111, 113, 115, 116, 117, 119, 120, 121, 122, 126, 129, 130, 132, 133, 135, 138, 139, 140, 142, 143 , 144, 146, 148, 151, 152, 153, 154, 155, 156, 158, 161, 164, 166, 168, 172, 173, 175, 190, 192, 193, 194, 198, 201, 203, 207 , 208, 210, 212, 217, 218, 220, 221, 224, 225 or 227 relative to SEQ ID NO: 32. In some of any of the proposed embodiments, one or more amino acid modifications are at a position corresponding to position(s) selected from 10, 11, 13, 16, 18, 20, 25, 26, 27, 30, 33, 37, 38, 42, 43, 47, 52, 54, 57, 61, 62, 67, 71,

72, 74, 75, 77, 78, 80, 84, 89, 90, 92, 93, 94, 96, 97, 98, 99, 100, 102, 103, 107, 109, 110, 111, 113, 115,116,72, 74, 75, 77, 78, 80, 84, 89, 90, 92, 93, 94, 96, 97, 98, 99, 100, 102, 103, 107, 109, 110, 111, 113, 115,116,

117, 119, 120, 121, 122, 126, 129, 130, 132, 133, 135, 137, 138, 139, 140, 142, 143, 144, 146, 151, 152,153,117, 119, 120, 121, 122, 126, 129, 130, 132, 133, 135, 137, 138, 139, 140, 142, 143, 144, 146, 151, 152,153,

154, 155, 156, 158, 161, 164, 166, 168, 172, 173, 175, 190, 192, 193, 194, 198, 201, 203, 207, 208, 210,212,154, 155, 156, 158, 161, 164, 166, 168, 172, 173, 175, 190, 192, 193, 194, 198, 201, 203, 207, 208, 210,212,

217, 218, 220, 221, 224, 225 или 227 относительно SEQ ID NO: 32.217, 218, 220, 221, 224, 225, or 227 relative to SEQ ID NO: 32.

В некоторых из предлагаемых воплощений одна или несколько модификаций аминокислот выбраны из M10V, M10I, V11E, S13G, E16V, S18R, A20V, S25G, F27S, F27C, N30D, Y33del, Q37R, K42E, T43A, Y47H, N52A, N52C, N52D, N52G, N52H, N52K, N52L, N52M, N52Q, N52R, N52S, N52T, N52V, N52Y, S54A, S54P, N57A, N57D, N57E, N57F, N57H, N57K, N57L, N57M, N57L, N57M N57Q, N57S, N57T, N57V, N57Y, N57W, R61S, R61C, Y62F, L67P, A71T, G72R, L74Q, R75Q, D77G, F78L, L80P, N84Q, E90A, K92R, F93L, H94E, H94D, L96F V97A, L98F, S99G, Q100A, Q100D, Q100G, Q100K, Q100L, Q100M, Q100N, Q100P, Q100R, Q100S, Q100T, Q100V, L102R, G103E, V107A, V107I, S109G, S109N, E101, V1101 T113E, H115R, H115Q, V116A, A117T, N119Q, F120I, S121G, V122A, V122M, F120S, S126T, S126R, H129P, S130G, S132F, Q133H, E135K, F138D, C1402, T3S, T3S N144D, Y146C, V151A, Y152C, Y152H, W153R, I154F, N155H, N155Q, K156M, D158G, L161P, L161M, L166Q, N168Q, F172S, L173S, M175T, T190A, T190A, N194D, C198R, N201S, L203P, L203F, N207Q, L208P, V210A, S212G, D217V, I218T, I218N, E220G, R221G, R221I, I224V, T225A, N227K или их консервативной аминокислотной замены.In some of the proposed embodiments, one or more amino acid modifications are selected from M10V, M10I, V11E, S13G, E16V, S18R, A20V, S25G, F27S, F27C, N30D, Y33del, Q37R, K42E, T43A, Y47H, N52A, N52C, N52D, N52G, N52H, N52K, N52L, N52M, N52Q, N52R, N52S, N52T, N52V, N52Y, S54A, S54P, N57A, N57D, N57E, N57F, N57H, N57K, N57L, N57M, N57L, N57M N57Q, N57 S,N57T , N57V, N57Y, N57W, R61S, R61C, Y62F, L67P, A71T, G72R, L74Q, R75Q, D77G, F78L, L80P, N84Q, E90A, K92R, F93L, H94E, H94D, L96F V97A, L98F, S99G, Q 100A, Q100D, Q100G, Q100K, Q100L, Q100M, Q100N, Q100P, Q100R, Q100S, Q100T, Q100V, L102R, G103E, V107A, V107I, S109G, S109N, E101, V1101 T113E, H115 R, H115Q, V116A, A117T, N119Q, F120I , S121G, V122A, V122M, F120S, S126T, S126R, H129P, S130G, S132F, Q133H, E135K, F138D, C1402, T3S, T3S N144D, Y146C, V151A, Y152C, Y152H, W153R , I154F, N155H, N155Q, K156M, D158G, L161P, L161M, L166Q, N168Q, F172S, L173S, M175T, T190A, T190A, N194D, C198R, N201S, L203P, L203F, N207Q, L208P, V210A, S212G, D217V, I2 18T, I218N, E220G, R221G, R221I, I224V, T225A, N227K or their conservative amino acid substitution.

В некоторых из предлагаемых воплощений одна или несколько модификаций аминокислот выбраны из M10V, M10I, V11E, S13G, E16V, S18R, A20T, A20V, S25G, R26S, F27C, F27S, N30D, Y33del, Q37R, T38P, K42E, T43A, Y47H, N52A, N52C, N52D, N52G, N52H, N52K, N52L, N52M, N52P, N52Q, N52R, N52S, N52T, N52V, N52Y, S54A, S54F, S54P, N57A, N57D, N57E, N57H, N57K, N57L, N57M, N57P, N57Q, N57S, N57T, N57V, N57W, N57Y, R61C, R61S, Y62F, L67P, A71T, G72R, L74Q, R75Q, D77G, F78L, L80P, N84Q, DAGG, K92R, F93L, H94D, H94E, L96F, L96I, V97A, L98F, S99G, Q100A, Q100D, Q100E, Q100G, Q100K, Q100L, Q100M, Q100N, Q100P, Q100R, Q100S, Q100T, Q100A, L102R, G103R, V107I, S109G, S109N, V110A, V110D, V110N, E111del, T113E, H115Q, H115R, V116A, A117T, N119Q, F120I, F120S, S121G, V122A, V122M, S1261, S126G, S126F, S126F, T137A, F138L, T139S, C140del, C140D, S142F, I143T, I143V, N144D, Y146C, V151A, Y152C, Y152H, W153R, I154F, N155H, N155Q, K156M, D15816, L161L116 166Q, N168Q, F172S, L173S, M175T, T190A, T190S, S192G, V193A, V193M, N194D, C198R, N201S, L203F, L203P, N207Q, L208P, V210A, S212G, I21G, I21G, D7 R221I, R221K, I224V, T225A, T225S, N227K или их консервативной аминокислотной замены.In some of the proposed embodiments, one or more amino acid modifications are selected from M10V, M10I, V11E, S13G, E16V, S18R, A20T, A20V, S25G, R26S, F27C, F27S, N30D, Y33del, Q37R, T38P, K42E, T43A, Y47H, N52A, N52C, N52D, N52G, N52H, N52K, N52L, N52M, N52P, N52Q, N52R, N52S, N52T, N52V, N52Y, S54A, S54F, S54P, N57A, N57D, N57E, N57H, N57K, N57L, N5 7M, N57P, N57Q, N57S, N57T, N57V, N57W, N57Y, R61C, R61S, Y62F, L67P, A71T, G72R, L74Q, R75Q, D77G, F78L, L80P, N84Q, DAGG, K92R, F93L, H94D, H94E, L96 F, L96I, V97A, L98F, S99G, Q100A, Q100D, Q100E, Q100G, Q100K, Q100L, Q100M, Q100N, Q100P, Q100R, Q100S, Q100T, Q100A, L102R, G103R, V107I, S109G, S109N, V110A, V110D, V110N, E111del, T113E, H115Q, H115R, V116A, A117T, N119Q, F120I, F120S, S121G, V122A, V122M, S1261, S126G, S126F, S126F, T137A, F138L, T139S, C140del, C1 40D, S142F, I143T, I143V, N144D, Y146C, V151A, Y152C, Y152H, W153R, I154F, N155H, N155Q, K156M, D15816, L161L116 166Q, N168Q, F172S, L173S, M175T, T190A, T190S, S192G, V193A , V193M, N194D, C198R, N201S, L203F, L203P , N207Q, L208P, V210A, S212G, I21G, I21G, D7 R221I, R221K, I224V, T225A, T225S, N227K or their conservative amino acid substitution.

В некоторых из любых предлагаемых воплощений одна или несколько модификаций аминокислот находятся в положении, соответствующем положению(ям) 52, 57 или 100. В некоторых из предлагаемых воплощений одна или несколько модификаций аминокислот выбраны из N52A, N52C, N52D, N52G, N52H, N52K, N52L, N52M, N52Q, N52R, N52S, N52T, N52V, N52Y, N57A, N57D, N57E, N57F, N57H, N57K, N57L, N57M, N57P, N57Q, N57S, N57T, N57V, N57Y, N57W, Q100A, Q100D, Q100G, Q100K,In some of any of the provided embodiments, one or more amino acid modifications are at a position corresponding to position(s) 52, 57, or 100. In some of the provided embodiments, one or more amino acid modifications are selected from N52A, N52C, N52D, N52G, N52H, N52K, N52L, N52M, N52Q, N52R, N52S, N52T, N52V, N52Y, N57A, N57D, N57E, N57F, N57H, N57K, N57L, N57M, N57P, N57Q, N57S, N57T, N57V, N57Y, N57W, Q100A, Q 100D, Q100G, Q100K,

- 2 044346- 2 044346

Q100L, Q100M, Q100N, Q100P, Q100R, Q100V, Q100S или Q100T, Q100T. В некоторых из предлагаемых воплощений одна или несколько модификаций аминокислот выбраны из N52A, N52C, N52D, N52G, N52H, N52K, N52L, N52M, N52Q, N52R, N52S, N52T, N52V, N52Y, S54A, S54P, N57A, N57D, N57E, N57F, N57F, N57K, N57L, N57M, N57P, N57Q, N57S, N57T, N57V, N57Y, N57W, Q100A, Q100D, Q100G, Q100K, Q100L, Q100M, Q100N, Q100P, Q100R, Q100R, Q100T или Q100V. В некоторых примерах одну или несколько модификаций аминокислот выбирают из N52Y/N57Y/F138L/L203P, N52H/N57Y/Q100P, N52S/Y146C/Y152C, N52H/C198R, N52H/C140D/T225A, N52H/C198R/T225A, N52H/K92R, N52H/S99G,Q100L, Q100M, Q100N, Q100P, Q100R, Q100V, Q100S or Q100T, Q100T. In some of the proposed embodiments, one or more amino acid modifications are selected from N52A, N52C, N52D, N52G, N52H, N52K, N52L, N52M, N52Q, N52R, N52S, N52T, N52V, N52Y, S54A, S54P, N57A, N57D, N57E, N57F, N57F, N57K, N57L, N57M, N57P, N57Q, N57S, N57T, N57V, N57Y, N57W, Q100A, Q100D, Q100G, Q100K, Q100L, Q100M, Q100N, Q100P, Q100R, Q100R, Q1 00T or Q100V. In some examples, one or more amino acid modifications are selected from N52Y/N57Y/F138L/L203P, N52H/N57Y/Q100P, N52S/Y146C/Y152C, N52H/C198R, N52H/C140D/T225A, N52H/C198R/T225A, N52H/K92 R, N52H/S99G,

N57Y/Q100P,N57Y/Q100P,

N52S/S130G/Y152C,N52S/S130G/Y152C,

N52S/Y152C,N52S/Y152C,

N52S/C198R,N52S/C198R,

N52Y/N57Y/Y152C,N52Y/N57Y/Y152C,

N52Y/N57Y/H129P/C198R, N52H/T161115, N52D/S54P, N52K/L208P, N52S/Y152H, N52D/V151A, N52H/I143T, N52S/L80P, N52S/R75Q/L203P, N52S/D158G, N52D/Q133H, N52S/N57Y/H94F L969, N52S/N57Y/H94D/L96F/L98F/Q100R/G103E/F120S, N52H/F78L/Q100R, N52H/N57Y/Q100R/V110D,N52Y/N57Y/H129P/C198R, N52H/T161115, N52D/S54P, N52K/L208P, N52S/Y152H, N52D/V151A, N52H/I143T, N52S/L80P, N52S/R75Q/L203P, N52S/D1 58G, N52D/Q133H, N52S/N57Y/H94F L969, N52S/N57Y/H94D/L96F/L98F/Q100R/G103E/F120S, N52H/F78L/Q100R, N52H/N57Y/Q100R/V110D,

N52H/N57Y/R75Q/Q100R/V110D, N52H/N57Y/Q100R,/L74Q/Q100R/V110D, N52H/Q100R, N52H/S121G, A20V/N52H/N57Y/Q100R/S109G, N52H/N57Y/R61S/Q100R/V110D/L173S, N52H/N57Y/Q100R/V1002A, N100/F172S, N52H/N57Y, N52S/F120S, N52S/V97A, N52S/G72R, N52S/A71T/A117T, N52S/E220G, Y47H/N52S/V107A/F120S,N52H/N57Y/R75Q/Q100R/V110D, N52H/N57Y/Q100R,/L74Q/Q100R/V110D, N52H/Q100R, N52H/S121G, A20V/N52H/N57Y/Q100R/S109G, N52H/N57Y/R6 1S/Q100R/V110D /L173S, N52H/N57Y/Q100R/V1002A, N100/F172S, N52H/N57Y, N52S/F120S, N52S/V97A, N52S/G72R, N52S/A71T/A117T, N52S/E220G, Y47H/N52S/V10 7A/F120S,

N52H/N57Y/Q100R/V110D/S752/N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/Y152C/K156M/C198R,N52H/N57Y/Q100R/V110D/S752/N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/Y152C/K156M/C198R,

Q37R/N52H/N57Y/Q100R/V110N/S142F/C198R/D217V/R221G, N52H/N57Y/Q100R/V110D/V116A/L161M/F172S/S192G/C198R,Q37R/N52H/N57Y/Q100R/V110N/S142F/C198R/D217V/R221G, N52H/N57Y/Q100R/V110D/V116A/L161M/F172S/S192G/C198R,

N52S/H94E/L96IN52S/H94E/L96I

S166S166

N52S/F93L/I143V/R221G,N52S/F93L/I143V/R221G,

N52H/N57Y/Q100R/V110D/C198R, F27S/N52H/N57Y/V110N, A20T/N52D/Y146C/Q164L,N52H/N57Y/Q100R/V110D/C198R, F27S/N52H/N57Y/V110N, A20T/N52D/Y146C/Q164L,

V11E/N30D/N52H/N57Y/H94E/L96I/L98F/N194D/V210A/I218T, N52S/H94E/L96I/V122E,V11E/N30D/N52H/N57Y/H94E/L96I/L98F/N194D/V210A/I218T, N52S/H94E/L96I/V122E,

N12HN12H

L96I/F120I/S126T/W153R/I218N, S25G/N30D/N52S/F120S/N227K,L96I/F120I/S126T/W153R/I218N, S25G/N30D/N52S/F120S/N227K,

N30D/N52S/L67P/Q100K/D217H2N30D/N52S/L67P/Q100K/D217H2

M10V/S18R/N30D/N52S/S126R/T139S/L203F,M10V/S18R/N30D/N52S/S126R/T139S/L203F,

R2/212H2R2/212H2

R2R2

N57Y/Q100R/V110D/A117T/T190S/C198R, S25G/F27C/N52H/N57Y/Q100R/V110D/E135K/L173S/C198R2N57Y/Q100R/V110D/A117T/T190S/C198R, S25G/F27C/N52H/N57Y/Q100R/V110D/E135K/L173S/C198R2

N52H/N57Y/Q100R/V110D/F172S/C198R,N52H/N57Y/Q100R/V110D/F172S/C198R,

C198R52C198R52

R221I,R221I,

M10I/S13G/N52H/N57Y/D77G/V110A/H129P/I143V/F172S/V193M/C198R,M10I/S13G/N52H/N57Y/D77G/V110A/H129P/I143V/F172S/V193M/C198R,

N52H/N57Y/R61C/Y62F/Q100R/V110N/F120S/C198R, N52H/H111N52H/N57Y/R61C/Y62F/Q100R/V110N/F120S/C198R, N52H/H111

N52H/N57Y/Q100R/V110D/N144D/F172S/C198R, N52S/H94E/L98F/Q100R,N52H/N57Y/Q100R/V110D/N144D/F172S/C198R, N52S/H94E/L98F/Q100R,

C198R, N52S/E90A,C198R, N52S/E90A,

N30D/K42E/N52S, N52S/F120S/I143V/I22457/Q210/N52H/N C198R/S212G, N52H/N57Y/Q100R/C198R, N52S/N194D, N52H/N57Y/Q100R/L102R/V110D/H115R/C198R, N52H/N57Y/Q100R/V110D/C198R/S212YN30D/K42E/N52S, N52S/F120S/I143V/I22457/Q210/N52H/N C198R/S212G, N52H/N57Y/Q100R/C198R, N52S/N194D, N52H/N57Y/Q100R/L102R/V110D /H115R/C198R, N52H /N57Y/Q100R/V110D/C198R/S212Y

N198R/S212G N194 T38P/N52S/N57D,N198R/S212G N194 T38P/N52S/N57D,

N52S/N194D, N52H/N57Y/Q100R/L102R/V110D/H115R/C198R, N52S/S54P,N52S/N194D, N52H/N57Y/Q100R/L102R/V110D/H115R/C198R, N52S/S54P,

N52H/N57Y/L74Q/V110D/S192G, N52S/A71T/A117T/T190A/C198R, Q100R/V110D/S132F/M175T,N52H/N57Y/L74Q/V110D/S192G, N52S/A71T/A117T/T190A/C198R, Q100R/V110D/S132F/M175T,

N52H/C140del/T225A,N52H/C140del/T225A,

N52H/F78L/Q100R/C198R, N52H/N101/R755N52H/F78L/Q100R/C198R, N52H/N101/R755

N52H/S121G/C198R, N52S/F120S/N227K,N52H/S121G/C198R, N52S/F120S/N227K,

T43A/N52H/N57Y/L74Q/D89G/V2 N1Y/F2 N1Y/F2N1DT43A/N52H/N57Y/L74Q/D89G/V2 N1Y/F2 N1Y/F2N1D

N52D,N52D,

N52H/N57Y/Q100R/V107I/V110D/I154F/C198R/R221G,N52H/N57Y/Q100R/V107I/V110D/I154F/C198R/R221G,

N52Q/N207Q, N52Q/N168Q, N52Q/N84Q, N52Q/N119Q, N52Q/N119Q, N52Q/N119Q N84Q/N207Q,N52Q/N207Q, N52Q/N168Q, N52Q/N84Q, N52Q/N119Q, N52Q/N119Q, N52Q/N119Q N84Q/N207Q,

N52Q/N119Q/N155Q,N52Q/N119Q/N155Q,

N52H/N84Q/N119Q,N52H/N84Q/N119Q,

N52H/N84Q,N52H/N84Q,

N52H/N84Q/N168Q/N207Q,N52H/N84Q/N168Q/N207Q,

N52Q/N84Q/N155Q/N168Q, N52Q/N84Q/N119Q/N168, N169/N168 N207Q, N52Q/N84Q/N119Q/N155Q,N52Q/N84Q/N155Q/N168Q, N52Q/N84Q/N119Q/N168, N169/N168 N207Q, N52Q/N84Q/N119Q/N155Q,

N52Q/N84Q/N119Q/N155Q/N207Q, N52Y/F138L/L203P, N57Y/Q100R/C198R, N57Y/F138L/L203P,N52Q/N84Q/N119Q/N155Q/N207Q, N52Y/F138L/L203P, N57Y/Q100R/C198R, N57Y/F138L/L203P,

Q100R/F13RL N10011/F13RL, N1001/F138L C198R, N52H/N57Y/Q100R/F172S/C198R,Q100R/F13RL N10011/F13RL, N1001/F138L C198R, N52H/N57Y/Q100R/F172S/C198R,

N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/C198R,N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/C198R,

N52H/N57Y/Q100R/H115R/I143V/F172S/C198R,N52H/N57Y/Q100R/H115R/I143V/F172S/C198R,

N52H/N57R/2/R2/2/R2/R17/2/R/R/R/R/S/R/R/R/S/R/R/R/R/R/S/R/R/R/R/S/H/R/R/R/R/H/R/R/ R/H/R C198R, N52H/V122A/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/N194D, N52H/N57Y/H115R/F172S/C198R,N52H/N57R/2/R2/2/R2/R17/2/R/R/R/R/S/R/R/R/S/R/R/R/R/R/S/R/R/ R/R/S/H/R/R/R/R/H/R/R/ R/H/R C198R, N52H/V122A/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/N194D, N52H /N57Y/H115R/F172S/C198R,

N52H/N57Y/Q100R/H115R/C198R, N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/I224V, N52H/N5 7Y/Q100R/Q100R/F172R, N52Y/N57Y/Q100P/F172S,N52H/N57Y/Q100R/H115R/C198R, N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/I224V, N52H/N5 7Y/Q100R/Q100R/F172R, N52Y/N57Y/Q100P/F172S,

C198RC198R

N52H5N52H5

N57Y/H115R,N57Y/H115R,

F172S,F172S,

N52H/N57Y/Q100R/H115R, N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S, N52H/N57Y/Q100P/H115R/F172S,N52H/N57Y/Q100R/H115R, N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S, N52H/N57Y/Q100P/H115R/F172S,

E16V/N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/C198R,E16V/N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/C198R,

E16V/N52H/N57Y/Q100R/V5105/11/155M1/H15611/H15611/H1/155/H1/6/15/H156/11/15/15/E16V/N52H/N57Y/Q100R/V5105/11/155M1/H15611/H15611/H1/155/H1/6/15/H156/11/15/15/

15/15/10/15/R15615/15/10/15/R156

F172S/C198R,F172S/C198R,

N52S/E90A/H115R,N52S/E90A/H115R,

N30D/K42E/N52S/H115R/C198R/R221I,N30D/K42E/N52S/H115R/C198R/R221I,

N52S/H115R/F120S/I143V/C198R,N52S/H115R/F120S/I143V/C198R,

N52H/N57Y/Q100PN52H/N57Y/Q100P

N52H/N57Y/Q100P/H115R/C198R,N52H/N57Y/Q100P/H115R/C198R,

H115R/F172S/C198R,H115R/F172S/C198R,

N30D/K42E/N52S/H115R/C198R, N52S/H115R/F172S/C198R,N30D/K42E/N52S/H115R/C198R, N52S/H115R/F172S/C198R,

N52H/Q100R/C198R,N52H/Q100R/C198R,

N30D/K42E,N30D/K42E,

N52S/H115R,N52S/H115R,

N52H/N57H/Q100PN52H/N57H/Q100P

N30D/K192/N5S N5D,N30D/K192/N5S N5D,

N52H/N57Y/Q100P/C198R,N52H/N57Y/Q100P/C198R,

N57Y/Q100P/H115R,N57Y/Q100P/H115R,

N52H/Q100R/H115R/F172S,N52H/Q100R/H115R/F172S,

N52H/Q100R/F172S/C198R, N52H/Q100R/H2R1/H115 N57Y/Q100R/F172S/C198R, N52A/N57F/Q100S, N52A/N57H/Q100S, N52A/N57Y/Q100A, N52D/N57A/Q100A, N52D/Q100S, N52G/Q100A, N52H/Q100A, N52M/N57 N52M/N57W/Q100P, N52Q/N57F, N52Q/N57S/Q100A, N52R/N57L/Q100A, N52R/N57Y/Q100P,N52H/Q100R/F172S/C198R, N52H/Q100R/H2R1/H115 N57Y/Q100R/F172S/C198R, N52A/N57F/Q100S, N52A/N57H/Q100S, N52A/N57Y/Q100A, N52D/N57 A/Q100A, N52D/Q100S , N52G/Q100A, N52H/Q100A, N52M/N57 N52M/N57W/Q100P, N52Q/N57F, N52Q/N57S/Q100A, N52R/N57L/Q100A, N52R/N57Y/Q100P,

N52R/N57Y/Q100S, N52S/N57A/Q100A, N52S/N57H/Q100E, N52S/N57L/Q100S,N52R/N57Y/Q100S, N52S/N57A/Q100A, N52S/N57H/Q100E, N52S/N57L/Q100S,

N52S/N57Y/Q100S, N52S/N57Y/Q100M, N52S/N57Y/Q100V, N52T/N57H/Q100S,N52S/N57Y/Q100S, N52S/N57Y/Q100M, N52S/N57Y/Q100V, N52T/N57H/Q100S,

N52T/N57Y N52V/N57L/Q100A, N52H/N57Y/Q100K, N52K/N57Y/Q100R,N52T/N57Y N52V/N57L/Q100A, N52H/N57Y/Q100K, N52K/N57Y/Q100R,

N52R/N57F/Q100N, N52R/N57F/Q100P, N52R/N57F/Q100R, N52R/N57F/Q100T,N52R/N57F/Q100N, N52R/N57F/Q100P, N52R/N57F/Q100R, N52R/N57F/Q100T,

N57H/Q100K, N52R/N57L/Q100S, N52R/N57W/Q100K, N52R/N57W,N57H/Q100K, N52R/N57L/Q100S, N52R/N57W/Q100K, N52R/N57W,

N52S/N57M/Q100S,N52S/N57M/Q100S,

N52T/N57H/Q100A,N52T/N57H/Q100A,

N52L/N57H/Q100R,N52L/N57H/Q100R,

N52R/N57F/Q100TN52R/N57F/Q100T

N52R/N57Y/Q100R,N52R/N57Y/Q100R,

N52C/N57E/Q100S, N52G/N57P/Q100D, N52G/N57V/Q100G, N52G/N57V, N52G/N57V N57V, N52P/N57P, N52P/N57S/Q100G, N52S/N57L/Q100G, N52T/N57K/Q100P, N52V/N57T/Q100L или N57Q/Q100P.N52C/N57E/Q100S, N52G/N57P/Q100D, N52G/N57V/Q100G, N52G/N57V, N52G/N57V N57V, N52P/N57P, N52P/N57S/Q100G, N52S/N57L/Q100G, N52T/N57 K/Q100P, N52V /N57T/Q100L or N57Q/Q100P.

- 3 044346- 3 044346

В некоторых из предлагаемых воплощений одна или несколько модификаций аминокислот выбраны из N52Y/N57Y/F138L/L203P, N52H/N57Y/Q100P, N52S/Y146C/Y152C, N52H/C198R,In some of the proposed embodiments, one or more amino acid modifications are selected from N52Y/N57Y/F138L/L203P, N52H/N57Y/Q100P, N52S/Y146C/Y152C, N52H/C198R,

N52H/C140D/T225A, N52H/C198R/T225A, N52H/K92R, N52H/S99G, N57Y/Q100P, N52S/S130G/Y152C, N52S/Y152C, N52S/C198R, N52Y/N57Y/Y152C, N52Y/N57Y/H8R1 C1H/H129P C198R, N52S/T113E, N52D/S54P, N52K/L208P, N52S/Y152H, N52D/V151A, N52H/I143T, N52S/L80P, F120S/Y152H/N201S, N52S/R75Q/L203D, Q52H2/N52S, D52S N52S/N57Y/H94D/L96F/L98F/Q100R,N52H/C140D/T225A, N52H/C198R/T225A, N52H/K92R, N52H/S99G, N57Y/Q100P, N52S/S130G/Y152C, N52S/Y152C, N52S/C198R, N52Y/N57Y/Y152C, N5 2Y/N57Y/H8R1 C1H /H129P C198R, N52S/T113E, N52D/S54P, N52K/L208P, N52S/Y152H, N52D/V151A, N52H/I143T, N52S/L80P, F120S/Y152H/N201S, N52S/R75Q/L203D, Q 52H2/N52S, D52S N52S /N57Y/H94D/L96F/L98F/Q100R,

N52S/N57Y/H94D/L96F/L98F/Q100R/G103E/F120S, N52S/G103E, N52H/F78L/Q100R,N52S/N57Y/H94D/L96F/L98F/Q100R/G103E/F120S, N52S/G103E, N52H/F78L/Q100R,

N52H/N57Y/Q100R/V110D, N1 R75Q/Q100R/V110D, N52H/N57Y/Q100R,N52H/N57Y/Q100R/V110D, N1 R75Q/Q100R/V110D, N52H/N57Y/Q100R,

N52H/N57Y/L74Q/Q100R/V110D, N52H/Q100R, N52H/S121G, A20V/N52H/N57Y/Q100R/S109G,N52H/N57Y/L74Q/Q100R/V110D, N52H/Q100R, N52H/S121G, A20V/N52H/N57Y/Q100R/S109G,

N52H/N57Y/R61S/R61S L173S, N52H/N57Y/Q100R/V122A, N52H/N57Y/Q100R/F172S, N52H/N57Y, N52S/F120S, N52S/V97A, N52S/G72R, N52S/A71T/A117T, N52S/E220G, Y47H F120S,N52H/N57Y/R61S/R61S L173S, N52H/N57Y/Q100R/V122A, N52H/N57Y/Q100R/F172S, N52H/N57Y, N52S/F120S, N52S/V97A, N52S/G72R, N52S/A71T/A1 17T, N52S/E220G , Y47H F120S,

N52H/N57Y/Q100R/V110D/S132F/M175T, E16V/N52H/N100Y/Q100R/V110D/H115R/Y152C/K15 6M/C198R,N52H/N57Y/Q100R/V110D/S132F/M175T, E16V/N52H/N100Y/Q100R/V110D/H115R/Y152C/K15 6M/C198R,

Q37R/N52H/N57Y/Q100R/V110N/S142F/C198R/D217V/R221G, N52H/N57Y/Q100R/V110D/C198R,Q37R/N52H/N57Y/Q100R/V110N/S142F/C198R/D217V/R221G, N52H/N57Y/Q100R/V110D/C198R,

N52H/N57Y/Q100R/V110D/V116A/L161S192 F2/F7196/S192/F2/N52H/N57Y/V110N,N52H/N57Y/Q100R/V110D/V116A/L161S192 F2/F7196/S192/F2/N52H/N57Y/V110N,

N52S/H94E/L96I/S109N/L166Q, S18R/N52S/F93L/I143V/R221G, A20T/N52D/Y146C/Q164L,N52S/H94E/L96I/S109N/L166Q, S18R/N52S/F93L/I143V/R221G, A20T/N52D/Y146C/Q164L,

V11E/N30D/N52H/N57H/N4D986/V210A/I218T, N52S/H94E/L96I/V122M,V11E/N30D/N52H/N57H/N4D986/V210A/I218T, N52S/H94E/L96I/V122M,

N52H/N57Y/H94E/L96I/F120I/S126T/W153R/I218N, M10V/S18R/N30D/N52S/S126R/T139S/L203F N25S,N52H/N57Y/H94E/L96I/F120I/S126T/W153R/I218N, M10V/S18R/N30D/N52S/S126R/T139S/L203F N25S,

L203F, S25/N227K, N30D/N52S/L67P/Q100K/D217G/R221K/T225S,L203F, S25/N227K, N30D/N52S/L67P/Q100K/D217G/R221K/T225S,

N52H/N57Y/Q100R/V110D/A117T/T190S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/V110D/F172S/C19827725/N195S/Q100R/V110D/E135K/L173S/C198R,N52H/N57Y/Q100R/V110D/A117T/T190S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/V110D/F172S/C19827725/N195S/Q100R/V110D/E135K/L173S/C198R,

N52H/N57Y/V110A/C198R/R221I, M10I/S13G/N52H/N57Y/D77G/V110A/H129P/I143V/F172S/V193M,N52H/N57Y/V110A/C198R/R221I, M10I/S13G/N52H/N57Y/D77G/V110A/H129P/I143V/F172S/V193M,

R61N61R/Q100R/V110N/F120S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/C198R,R61N61R/Q100R/V110N/F120S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/C198R,

N52H/N57Y/Q100R/V110D/N144D/F172S/C198R, N52S/H94E/L98F/Q100D, N52S, N52S, N52S, N52S, N52S, N52S/N52S, N52S/F120S/I143V/I224V, N52H/N57Y/Q100R/V110D/C198R/S212G,N52H/N57Y/Q100R/V110D/N144D/F172S/C198R, N52S/H94E/L98F/Q100D, N52S, N52S, N52S, N52S, N52S, N52S/N52S, N52S/F120S/I143V/I224V, N52 H/N57Y/Q100R/ V110D/C198R/S212G,

N52H/N57Y/Q100R/C198R, N52S/N194D,N52H/N57Y/Q100R/C198R, N52S/N194D,

N52H/N57Y/Q100R/L102R/H1105/H1R1105/H5R110/N57Y/Q100R/V110D/C198R/S212G, N52H/N57Y/Q100R/C198R, N52S/N194D, N52H/N57Y/Q100R/L102R/V110D/H115R/C198R, N52S/S54P, T38P/N40/N52S T225A, N52H/F78L/Q100R/C198R, N52H/N57Y/R75Q/Q100P/V110D,N52H/N57Y/Q100R/L102R/H1105/H1R1105/H5R110/N57Y/Q100R/V110D/C198R/S212G, N52H/N57Y/Q100R/C198R, N52S/N194D, N52H/N57Y/Q100R/L 102R/V110D/H115R/C198R, N52S/S54P, T38P/N40/N52S T225A, N52H/F78L/Q100R/C198R, N52H/N57Y/R75Q/Q100P/V110D,

N52H/N57Y/L74Q/V110D/S192G, N52H/S121G/C198R, N52S/F120S/N227K, N52S7111 T1 C198R, T43A/N52H/N57Y/L74Q/D89G/V110D/F172S, N52H/N57Y/Q100R/V110D/S132F/M175T,N52H/N57Y/L74Q/V110D/S192G, N52H/S121G/C198R, N52S/F120S/N227K, N52S7111 T1 C198R, T43A/N52H/N57Y/L74Q/D89G/V110D/F172S, N52H/N57 Y/Q100R/V110D/S132F/ M175T,

N52H/N57Y/Q100R/V107I/V110D/I154F/C198Q/N21G N168Q, N52Q/N84Q, N52Q/N119Q,N52H/N57Y/Q100R/V107I/V110D/I154F/C198Q/N21G N168Q, N52Q/N84Q, N52Q/N119Q,

N52Q/N84Q/N168Q, N52Q/N84Q/N207Q, N52Q/N119Q/N155Q, N52H/N84Q/N119Q, N52H/N84Q, N52H/N84Q/NQ1/NQ2/N168Q N155Q/N168Q, N52Q/N84Q/N119Q/N168Q, N52Q/N84Q/N119Q/N207Q, N52Q/N84Q/N119Q/N155Q, N52Q/N84Q/N119Q/N155Q/N207Q,N52Q/N84Q/N168Q, N52Q/N84Q/N207Q, N52Q/N119Q/N155Q, N52H/N84Q/N119Q, N52H/N84Q, N52H/N84Q/NQ1/NQ2/N168Q N155Q/N168Q, N52Q/N84Q/N1 19Q/N168Q, N52Q /N84Q/N119Q/N207Q, N52Q/N84Q/N119Q/N155Q, N52Q/N84Q/N119Q/N155Q/N207Q,

N52Y/F138R/L1004/N1007/N1003/N1003/N1003/C100R N57Y/F138L/L203P, Q100R/F138L,N52Y/F138R/L1004/N1007/N1003/N1003/N1003/C100R N57Y/F138L/L203P, Q100R/F138L,

N52H/N57Y/Q100R/H115R/C198R, N52H/N57Y/Q100R/F172S/C198R,N52H/N57Y/Q100R/H115R/C198R, N52H/N57Y/Q100R/F172S/C198R,

N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/C198RY5 I143V/F172S/C198R,N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/C198RY5 I143V/F172S/C198R,

N52H/N57Y/Q100R/L102R/H115R/F172S/C198R, N52H/V122A/F172S/C198R,N52H/N57Y/Q100R/L102R/H115R/F172S/C198R, N52H/V122A/F172S/C198R,

N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/N194D, N52H1 15R/F172S/C198R, N52H/N57Y/H115R,N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/N194D, N52H1 15R/F172S/C198R, N52H/N57Y/H115R,

N52H/N57Y/Q100R/H115R, N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/I224V,N52H/N57Y/Q100R/H115R, N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/I224V,

N52H/N57Y/Q100R/H115R/H175Y/F172S, N52H1002 N52H/Q100R/H115R/I143T/F172S,N52H/N57Y/Q100R/H115R/H175Y/F172S, N52H1002 N52H/Q100R/H115R/I143T/F172S,

N52H/N57Y/Q100P/H115R/F172S, N52Y/N57Y/Q100P/F172S,N52H/N57Y/Q100P/H115R/F172S, N52Y/N57Y/Q100P/F172S,

E16V/N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/H195R/C198R V110D/H115R/Y152C/K156M/F172S/C198R,E16V/N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/H195R/C198R V110D/H115R/Y152C/K156M/F172S/C198R,

N52S/E90A/H115R, N30D/K42E, N52S/H115R, N30D/K42E/N52S/H115R/C198R/R221I,N52S/E90A/H115R, N30D/K42E, N52S/H115R, N30D/K42E/N52S/H115R/C198R/R221I,

N30D/K42E/K30E/N52S/N52S/H115R/F172S/N194D, N52S/H115R/F120S/I143V/C198R,N30D/K42E/K30E/N52S/N52S/H115R/F172S/N194D, N52S/H115R/F120S/I143V/C198R,

N52S/H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100P/C198R,N52S/H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100P/C198R,

N52H/N57Y/Q100P/H2S19/N1/N19/N19/N19/N195/N195/F/N115/Q100P/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100P/H115R, N52H/N57Y/Q100P/H115R/C198R, N52H/Q100R/C198R,N52H/N57Y/Q100P/H2S19/N1/N19/N19/N19/N195/N195/F/N115/Q100P/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100P/H115R, N52H/N57Y/Q100P/H115R/C198R, N52H/ Q100R/C198R,

N52H/Q100R/H115R/F172S, N52H/Q100R/F172/H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/F172S/C198R, N52A/N57F/Q100S, N52A/N57H/Q100S, N52A/N57Y/Q100A, N52D/N57A/Q100A, N52D/Q100H, N52G, N52G, N52G, N52G, N52G, N52G, N52G, N50/Q100A, N52M/N57H/Q100S, N52M/N57W/Q100P, N52Q/N57F, N52Q/N57S/Q100A, N52R/N57L/Q100A, N52R/N57Y/Q100P, N52R/N57Y/Q100S,N52H/Q100R/H115R/F172S, N52H/Q100R/F172/H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/F172S/C198R, N52A/N57F/Q100S, N52A/N57H/Q100S, N52A/ N57Y/Q100A, N52D/ N57A/Q100A, N52D/Q100H, N52G, N52G, N52G, N52G, N52G, N52G, N52G, N50/Q100A, N52M/N57H/Q100S, N52M/N57W/Q100P, N52Q/N57F, N52Q/N57S/Q10 0A, N52R/ N57L/Q100A, N52R/N57Y/Q100P, N52R/N57Y/Q100S,

N52S/N57A/Q100A, N52S/N57H/Q100E, N52S/N57L/Q100S, N52S/N57M/Q100S, N52S/N57Y/Q100S, N52S/N57Y/Q100M, N52S/N57Y/Q100V, N52T/N57H/Q100S, N52T/N100S Q100A, N52T/N57Y/Q100A, N52V/N57L/Q100A, N52H/N57Y/Q100K, N52K/N57Y/Q100R, N52L/N57H/Q100R, N52R/N57F/Q100N, N52R/N57F/Q100P, N52R/N57F, N52R/N57F N52R/N57F/Q100T, N52R/N57H/Q100K, N52R/N57L/Q100S, N52R/N57W/Q100K, N52R/N57W, N52R/N57Y/Q100R, N52C/N57E/Q100S, N52G/N57P/Q100D, N52G Q100G, N52G/N57V, N52L/N57V, N52P/N57P, N52P/N57S/Q100G, N52S/N57L/Q100G,N52S/N57A/Q100A, N52S/N57H/Q100E, N52S/N57L/Q100S, N52S/N57M/Q100S, N52S/N57Y/Q100S, N52S/N57Y/Q100M, N52S/N57Y/Q100V, N52T/N57H/ Q100S,N52T/ N100S Q100A, N52T/N57Y/Q100A, N52V/N57L/Q100A, N52H/N57Y/Q100K, N52K/N57Y/Q100R, N52L/N57H/Q100R, N52R/N57F/Q100N, N52R/N57F/Q100P , N52R/N57F, N52R /N57F N52R/N57F/Q100T, N52R/N57H/Q100K, N52R/N57L/Q100S, N52R/N57W/Q100K, N52R/N57W, N52R/N57Y/Q100R, N52C/N57E/Q100S, N52G/N57P/Q 100D, N52G Q100G , N52G/N57V, N52L/N57V, N52P/N57P, N52P/N57S/Q100G, N52S/N57L/Q100G,

N52T/N57K/Q100P, N52V/N57T/Q100L, N57Q/Q100P или R26S/N52H/N57/T137A/C198R.N52T/N57K/Q100P, N52V/N57T/Q100L, N57Q/Q100P or R26S/N52H/N57/T137A/C198R.

В некоторых из любых предлагаемых воплощений одна или несколько модификаций аминокислот N52H/Q100R. В некоторых из любых предлагаемых воплощений вариантный полипептид ICOSL имеетIn some of any of the proposed embodiments, one or more amino acid modifications N52H/Q100R. In some of any of the proposed embodiments, the ICOSL variant polypeptide has

- 4 044346 последовательность, представленную в SEQ ID NO: 567.- 4044346 sequence shown in SEQ ID NO: 567.

В некоторых из любых предлагаемых воплощений одна или несколько модификаций аминокислот представляют собой N52H/N57Y/Q100R. В некоторых из любых предлагаемых воплощений вариантный полипептид ICOSL включает последовательность, представленную в SEQ ID NO: 565.In some of any of the proposed embodiments, one or more amino acid modifications are N52H/N57Y/Q100R. In some of any of the provided embodiments, the ICOSL variant polypeptide includes the sequence set forth in SEQ ID NO: 565.

В некоторых из любых предлагаемых воплощений одна или несколько модификаций аминокислот представляют собой N52L/N57H/Q100R. В некоторых из любых предлагаемых воплощений вариантный полипептид ICOSL включает последовательность, представленную в SEQ ID NO: 761.In some of any of the proposed embodiments, one or more amino acid modifications are N52L/N57H/Q100R. In some of any of the provided embodiments, the ICOSL variant polypeptide includes the sequence set forth in SEQ ID NO: 761.

В некоторых из любых предлагаемых воплощений одна или несколько аминокислотных модификаций представляет собой N52D. В некоторых из любых предлагаемых воплощений вариантный полипептид ICOSL включает последовательность, представленную в SEQ ID NO: 548.In some of any of the proposed embodiments, one or more amino acid modifications is N52D. In some of any of the provided embodiments, the variant ICOSL polypeptide includes the sequence set forth in SEQ ID NO: 548.

В некоторых из любых предлагаемых воплощений одна или несколько модификаций аминокислот представляют собой N52H/N57Y/Q100P. В некоторых из любых предлагаемых воплощений вариантный полипептид ICOSL включает последовательность, представленную в SEQ ID NO: 570.In some of any of the proposed embodiments, one or more amino acid modifications are N52H/N57Y/Q100P. In some of any of the provided embodiments, the variant ICOSL polypeptide includes the sequence set forth in SEQ ID NO: 570.

В некоторых из предлагаемых воплощений одна или несколько модификаций аминокислот выбраны из F120S/Y152H/N201S, E111del, Y33del, N168Q/N207Q, N84Q/N207Q, N155Q/N207Q, N119Q/N168Q, N119Q/N207Q, N119Q/N155Q, N84Q/N119Q, N84Q/N155Q/N168Q, N84Q/N168Q/N207Q,In some of the proposed embodiments, one or more amino acid modifications are selected from F120S/Y152H/N201S, E111del, Y33del, N168Q/N207Q, N84Q/N207Q, N155Q/N207Q, N119Q/N168Q, N119Q/N207Q, N119Q/N155Q, N84Q /N119Q, N84Q/N155Q/N168Q, N84Q/N168Q/N207Q,

N84Q/N155H/N207Q, N155Q/N168Q/N207Q, N119Q N155Q/N168Q, NQ9/NQ9/NQ9/NQ9/N155H/N207Q, N84Q/N119Q/N155Q, N84Q/N119Q/N155Q/N168Q, N84Q/N155Q/N168Q/N207Q,N84Q/N155H/N207Q, N155Q/N168Q/N207Q, N119Q N155Q/N168Q, NQ9/NQ9/NQ9/NQ9/N155H/N207Q, N84Q/N119Q/N155Q, N84Q/N119Q/N155Q/N168Q, N8 4Q/N155Q/N168Q/N207Q ,

N84Q/N119Q/N155Q/N207Q, N84Q/N119Q/N155Q/N168Q/N207Q или F138L/L203P.N84Q/N119Q/N155Q/N207Q, N84Q/N119Q/N155Q/N168Q/N207Q or F138L/L203P.

В некоторых из любых таких воплощений одна или несколько модификаций аминокислот выбраны из C198R, D158G, E16V, E90A, F120S, F138L, F172S, H115R, H115X, I143T, I143V, I224V, K156M, K42E, K92R, L102R, L203, L208P, N194D, N30D, N52A, N52D, N52G, N52H, N52K, N52L, N52M, N52Q, N52R, N52S, N52T, N52Y, N57F, N57H, N57K, N57L, N57M, N57P, N57S, N57V, N57, Q100A, Q100D, Q100E, Q100K, Q100M, Q100P, Q100R, Q100S, Q100T, Q133H, R221I, R75Q, S54A, S54P, T113E, T225A, V110D, V122A, Y146C, Y152C, A117T, A91V, AE88D, C140del, C198R, D158G, D77G, D90K, E117G, E135K, E16V, E81A, E88D, E90A, F120I, F120S, F138L, F172S, F27C, F92Y, G72R, H115R, H115T, H115T, H125, I143T, I143V, I154F, I218N, I218T, I224V, K156M, К169Е, K36G, K42E, K89R, K92R, K93R, L102R, L161P, L166Q, L173S, L203F, L203P, L20P, L70P, L708, L708, L708, L708, L80P, L96I, L98F, M10I, M10V, N115Q, N119Q, N122S, N144D, N155X, N168Q, N168X, N178S, N194D, N207Q, N207X, N227K, N25S, N30D, N525, NA 7F, N57H, N57L, N57M, N57S, N57V, N57W, N57Y, N63S, N84Q, Q100G, Q100N, Q100V, R221G, S109G, S109N, S114T, S121G, S126R, S126T, S130G, S192F, S132F S212G, S25G, S54A, S54P, S99G, T113E, T120S, T130A, T139S, T190A, T199S, T225A, T41I, V107I, V110A, V110D, V11E, V122A, V122M, Y152, Y152, Y152, Y152, Y152,In some of any such embodiments, one or more amino acid modifications are selected from C198R, D158G, E16V, E90A, F120S, F138L, F172S, H115R, H115X, I143T, I143V, I224V, K156M, K42E, K92R, L102R, L203, L208P, N 194D , N30D, N52A, N52D, N52G, N52H, N52K, N52L, N52M, N52Q, N52R, N52S, N52T, N52Y, N57F, N57H, N57K, N57L, N57M, N57P, N57S, N57V, N57, Q100A, Q100D ,Q100E , Q100K, Q100M, Q100P, Q100R, Q100S, Q100T, Q133H, R221I, R75Q, S54A, S54P, T113E, T225A, V110D, V122A, Y146C, Y152C, A117T, A91V, AE88D, C140 del, C198R, D158G, D77G, D90K , E117G, E135K, E16V, E81A, E88D, E90A, F120I, F120S, F138L, F172S, F27C, F92Y, G72R, H115R, H115T, H115T, H125, I143T, I143V, I154F, I218N, I2 18T, I224V, K156M, K169E , K36G, K42E, K89R, K92R, K93R, L102R, L161P, L166Q, L173S, L203F, L203P, L20P, L70P, L708, L708, L708, L708, L80P, L96I, L98F, M10I, M10V, N115 Q, N119Q, N122S , N144D, N155X, N168Q, N168X, N178S, N194D, N207Q, N207X, N227K, N25S, N30D, N525, NA 7F, N57H, N57L, N57M, N57S, N57V, N57W, N57Y, N63S, N84Q, Q100G, Q100N, Q100V, R221G, S109G, S109N, S114T, S121G, S126R, S126T, S130G, S192F, S132F S212G, S25G, S54A, S54P, S99G, T113E, T120S, T130A, T139S, T190A, T 199S, T225A, T41I, V107I, V110A , V110D, V11E, V122A, V122M, Y152, Y152, Y152, Y152, Y152,

В некоторых из предлагаемых воплощений одна или несколько модификаций аминокислот выбраны из N52S, N52H, N52D, N52H/N57Y/Q100P, N52S/Y146C/Y152C, N52H/C198R, N52H/C198R/T225A, N52H/K92R, N57Y, N52S/C198R, N52S/T113E, S54A, N52D/S54P, N52K/L208P, N52H/I143T, N52S/R75Q/L203P, N52S/D158G, N52D/Q133H, N52H/N57Y/Q100R/V122A, N52H/N57Y/Q100R/F172S, N52H/N57Y/Q100R, N52S/N194D, N52H/N57Y/Q100R/L102R/V110D/H115R/C198R, N52S/E90A,In some of the proposed embodiments, one or more amino acid modifications are selected from N52S, N52H, N52D, N52H/N57Y/Q100P, N52S/Y146C/Y152C, N52H/C198R, N52H/C198R/T225A, N52H/K92R, N57Y, N52S/C198R, N52S/T113E, S54A, N52D/S54P, N52K/L208P, N52H/I143T, N52S/R75Q/L203P, N52S/D158G, N52D/Q133H, N52H/N57Y/Q100R/V122A, N52H/N57Y/Q100 R/F172S, N52H/ N57Y/Q100R, N52S/N194D, N52H/N57Y/Q100R/L102R/V110D/H115R/C198R, N52S/E90A,

N52S/F120S/I143V/I224V, N52H/N57Y/Q100R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/C198R, N52Y/N57Y/Q100P/F172S, E16V/N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/Y152C/K156M/F172S/C198R,N52S/F120S/I143V/I224V, N52H/N57Y/Q100R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/C198R, N52Y/N57Y/Q100P/F172S, E16V/N52H/N57Y/ Q100R/V110D/H115R/ Y152C/K156M/F172S/C198R,

N52S/H115R/F120S/I143V/C198R, N52H/N57Y/Q100P/C198R, N52H/N57Y/Q100P/H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100P/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100P/H115R, N52H/N57Y/Q100P/H115R/C198R,N52S/H115R/F120S/I143V/C198R, N52H/N57Y/Q100P/C198R, N52H/N57Y/Q100P/H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100P/F172S/C198R, N52H/N57Y /Q100P/H115R, N52H/ N57Y/Q100P/H115R/C198R,

N52H/Q100R/C198R, N52H/Q100R/H115X/F172S/C198R, N52H/Q100R/H115R/F172S/C198R,N52H/Q100R/C198R, N52H/Q100R/H115X/F172S/C198R, N52H/Q100R/H115R/F172S/C198R,

N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S,N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S,

N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/C198R, Q100R, N52Y/F138L/L203P, N57Y/Q100R/C198R,N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/C198R, Q100R, N52Y/F138L/L203P, N57Y/Q100R/C198R,

N57Y/F138L/L203P, N57Y/Q100P, Q100R/F138L, N52H/N57Y/Q100R/H115R, N52H/N57Y/Q100R/F172S, N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/I224V, N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S,N57Y/F138L/L203P, N57Y/Q100P, Q100R/F138L, N52H/N57Y/Q100R/H115R, N52H/N57Y/Q100R/F172S, N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/I224V, N52H /N57Y/Q100R/H115R/ F172S,

N52H/N57Y/Q100R/H115R/C198R, N52H/N57Y/Q100R/F172S/C198R,N52H/N57Y/Q100R/H115R/C198R, N52H/N57Y/Q100R/F172S/C198R,

N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/H115R/I143V/F172S/C198R,N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/H115R/I143V/F172S/C198R,

N52H/N57Y/Q100R/L102R, H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/H115R F172S/N194D,N52H/N57Y/Q100R/L102R, H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/H115R F172S/N194D,

N52H/N57Y/H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/H115R/C198R, N52H/N57Y/H115R,N52H/N57Y/H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/H115R/C198R, N52H/N57Y/H115R,

N52H/Q100R/H115R/I143T F172S, N52H/N57Y/Q100P/H115R/F172S,N52H/Q100R/H115R/I143T F172S, N52H/N57Y/Q100P/H115R/F172S,

E16V/N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/C198R, N52S/E90A/H115R,E16V/N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/C198R, N52S/E90A/H115R,

N30D/K42E/N52S/H115R/C198R/R221I, N30D/K42E/N52S/H115R/C198R,N30D/K42E/N52S/H115R/C198R/R221I, N30D/K42E/N52S/H115R/C198R,

N30D/K42E/N52S/H115R/F172S/N194D, N30D/K42E/N52S/H115R, N52S/E90A/H115R,N30D/K42E/N52S/H115R/F172S/N194D, N30D/K42E/N52S/H115R, N52S/E90A/H115R,

N30D/K42E/N52S/H115R, N52A/N57H/Q100S, N52A/N57Y/Q100A, N52D/Q100S, N52G/Q100A, N52M/N57H/Q100S, N52M/N57W/Q100P, N52Q/N57S/Q100A, N52R/N57L/Q100A, N52S/N57H/Q100E, N52S/N57L/Q100S, N52S/N57M/Q100S, N52S/N57Y/Q100M, N52T/N57H/Q100S, N52R/N57F/Q100P, N52R/N57F/Q100T, N52R/N57W/Q100K, N52R/N57W, N52G/N57P/Q100D, N52G/N57V/Q100G,N30D/K42E/N52S/H115R, N52A/N57H/Q100S, N52A/N57Y/Q100A, N52D/Q100S, N52G/Q100A, N52M/N57H/Q100S, N52M/N57W/Q100P, N52Q/N57S/Q100A , N52R/N57L/ Q100A, N52S/N57H/Q100E, N52S/N57L/Q100S, N52S/N57M/Q100S, N52S/N57Y/Q100M, N52T/N57H/Q100S, N52R/N57F/Q100P, N52R/N57F/Q100T, N52R /N57W/Q100K, N52R/N57W, N52G/N57P/Q100D, N52G/N57V/Q100G,

N52G/N57V, N52L/N57V, N52S/N57L/Q100G or N52T/N57K/Q100P; or N52S, N52H, N52D, N52Y/N57Y/F138L/L203P, N52H/N57Y/Q100P, N52S/Y146C/Y152C, N52H/C198R, N52H/C140del/T225A, N52H/C198R/T225A, N52H/K92R, N52H/S99G, N57Y, N57Y/Q100P, N52S/S130G/Y152C, N52S/Y152C,N52G/N57V, N52L/N57V, N52S/N57L/Q100G or N52T/N57K/Q100P; or N52S, N52H, N52D, N52Y/N57Y/F138L/L203P, N52H/N57Y/Q100P, N52S/Y146C/Y152C, N52H/C198R, N52H/C140del/T225A, N52H/C198R/T225A, N52H/K 92R, N52H/S99G , N57Y, N57Y/Q100P, N52S/S130G/Y152C, N52S/Y152C,

- 5 044346- 5 044346

N52S/C198R, N52Y/N57Y/Y152C, N52Y/N57Y/H129P/C198R, N52H/L161P/C198R, N52S/T113E, S54A,N52S/C198R, N52Y/N57Y/Y152C, N52Y/N57Y/H129P/C198R, N52H/L161P/C198R, N52S/T113E, S54A,

N52D/S54P, N52K/L208P, N52S/Y152H, N52H/I143T, N52S/L80P, N52S/D158G, N52D/Q133H, L70Q/A91G/N144D, L70Q/A91G/E117G/I118V/T120 S/T13 0A, L70R/A91G/I118V/T120 S/T130A/T199S, L70Q/E81A/A91G/I118V/T120S/I127T/ T130A, N63S/L70Q/A91G/S114T/I118V/T120S/T130A, T41I/A91G,N52D/S54P, N52K/L208P, N52S/Y152H, N52H/I143T, N52S/L80P, N52S/D158G, N52D/Q133H, L70Q/A91G/N144D, L70Q/A91G/E117G/I118V/T120 S/T13 0A, L70R/ A91G/I118V/T120 S/T130A/T199S, L70Q/E81A/A91G/I118V/T120S/I127T/ T130A, N63S/L70Q/A91G/S114T/I118V/T120S/T130A, T41I/A91G,

E88D/K89R/D90K/A91G/F92Y/K93R/N122S/N178S,E88D/K89R/D90K/A91G/F92Y/K93R/N122S/N178S,

E88D/K89R/D90K/A91G/F92Y/K93R,E88D/K89R/D90K/A91G/F92Y/K93R,

AE88D/K89R/D90K/A91G/F92Y/K93R, K36G/L40M, N52H/N57Y/Q100R/V122A,AE88D/K89R/D90K/A91G/F92Y/K93R, K36G/L40M, N52H/N57Y/Q100R/V122A,

N52H/N57Y/Q100R/F172S, N52H/N57Y/Q100R, N52S/F120S/N227K, N52S/N194D, N52S/F120S,N52H/N57Y/Q100R/F172S, N52H/N57Y/Q100R, N52S/F120S/N227K, N52S/N194D, N52S/F120S,

N52S/G72R, N52S/A71T/A117T/T190A/C198R,N52S/G72R, N52S/A71T/A117T/T190A/C198R,

N52H/N57Y/Q100R/V107I/V110D/S132F/I154F/C198R/R221G,N52H/N57Y/Q100R/V107I/V110D/S132F/I154F/C198R/R221G,

E16V/N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/Y152C/K156M/C198R, N52H/N57Y/Q100R/V110D/C198R,E16V/N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/Y152C/K156M/C198R, N52H/N57Y/Q100R/V110D/C198R,

V11E/N30D/N52H/N57Y/H94E/L96I/L98F/N194D/V210A/I218T, N52S/H94E/L96I/V122M,V11E/N30D/N52H/N57Y/H94E/L96I/L98F/N194D/V210A/I218T, N52S/H94E/L96I/V122M,

N52H/N57Y/H94E/L96I/F120I/S126T/W153R/I218N, M10V/S18R/N30D/N52S/S126R/T139S/L203F,N52H/N57Y/H94E/L96I/F120I/S126T/W153R/I218N, M10V/S18R/N30D/N52S/S126R/T139S/L203F,

S25G/N30D/N52S/F120S/N227K, N52H/N57Y/Q100R/V110D/F172S/C198R,S25G/N30D/N52S/F120S/N227K, N52H/N57Y/Q100R/V110D/F172S/C198R,

S25G/F27C/N52H/N57Y/Q100R/V110D/E135K/L173S/C198R, N52H/N57Y/V110A/C198R/R221I,S25G/F27C/N52H/N57Y/Q100R/V110D/E135K/L173S/C198R, N52H/N57Y/V110A/C198R/R221I,

M10I/S13G/N52H/N57Y/D77G/V110A/H129P/I143V/F172S/V193M,C198R,M10I/S13G/N52H/N57Y/D77G/V110A/H129P/I143V/F172S/V193M,C198R,

N52H/N57Y/Q100R/L102R/V110D/H115R/C198R, N52H/N57Y/Q100R/V110D/N144D/F172S/C198R,N52H/N57Y/Q100R/L102R/V110D/H115R/C198R, N52H/N57Y/Q100R/V110D/N144D/F172S/C198R,

N52S/H94E/L98F/Q100R, N52S/E90A, N52S/F120S/I143V/I224V, N52H/N57Y/Q100R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/H115R/ F172S/C198R, N52Y/N57Y/Q100P/F172S,N52S/H94E/L98F/Q100R, N52S/E90A, N52S/F120S/I143V/I224V, N52H/N57Y/Q100R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/H115R/ F172S/C198R, N52Y/N 57Y/Q100P/F172S,

E16V/N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/Y152C/K156M/F172S/C198R, N52S/H115R/F120S/I143V/C198R, N52H/N57Y/Q100P/C198R, N52H/N57Y/Q100P/H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100P/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100P/H115R, N52H/N57Y/Q100P/H115R/C198R, N52H/Q100R/C198R,E16V/N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/Y152C/K156M/F172S/C198R, N52S/H115R/F120S/I143V/C198R, N52H/N57Y/Q100P/C198R, N52H/N57Y/Q100 P/H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100P/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100P/H115R, N52H/N57Y/Q100P/H115R/C198R, N52H/Q100R/C198R,

N52H/Q100R/H115R/F172S, N52H/Q100R/H115X/F172S/C198R, N52H/Q100R/H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/C198R,N52H/Q100R/H115R/F172S, N52H/Q100R/H115X/F172S/C198R, N52H/Q100R/H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q10 0R/H115R/F172S/C198R,

N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S, N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/C198R,N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S, N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/C198R,

N52S/H94E/L96I/S109N/L166Q/, N52H/N57Y/Q100R/C198R, N52H/N57Y/L74Q/V110D/S192G,N52S/H94E/L96I/S109N/L166Q/, N52H/N57Y/Q100R/C198R, N52H/N57Y/L74Q/V110D/S192G,

N52H/Q100R, N52H/S121G/C198R, A20V/N52H/N57Y/Q100R/S109G, N52H/N57Y/Q100P/C198R, N52H/N57Y/Q100R/V110D/C198R/S212G, L70Q/A91G/I118A/T120S/T130A/K169E, Q100R,N52H/Q100R, N52H/S121G/C198R, A20V/N52H/N57Y/Q100R/S109G, N52H/N57Y/Q100P/C198R, N52H/N57Y/Q100R/V110D/C198R/S212G, L70Q/A91G/I 118A/T120S/T130A/ K169E, Q100R,

N52Y/F138L/L203P, N57Y/Q100R/C198R, N57Y/F138L/L203P, N52H, N57Y, N57Y/Q100P, N52H/N57Y/Q100R/H115R, N52H/N57Y/Q100R/F172S, N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/I224V,N52Y/F138L/L203P, N57Y/Q100R/C198R, N57Y/F138L/L203P, N52H, N57Y, N57Y/Q100P, N52H/N57Y/Q100R/H115R, N52H/N57Y/Q100R/F172S, N52H/N 57Y/Q100R/H115R/ F172S/I224V,

N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S, N52H/N57Y/Q100R/H115R/C198R, N52H/N57Y/Q100R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/H115R/I143V/F172S/C198R,N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S, N52H/N57Y/Q100R/H115R/C198R, N52H/N57Y/Q100R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/C198R, N52H /N57Y/Q100R/H115R/ I143V/F172S/C198R,

N52H/N57Y/Q100R/L102R H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/H115R F172S/N194D,N52H/N57Y/Q100R/L102R H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/H115R F172S/N194D,

N52H/N57Y/H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/H115R/C198R, N52H/N57Y/H115R,N52H/N57Y/H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/H115R/C198R, N52H/N57Y/H115R,

N52H/Q100R/H115R/I143T F172S, N52H/N57Y/Q100P/H115R/F172S,N52H/Q100R/H115R/I143T F172S, N52H/N57Y/Q100P/H115R/F172S,

E16V/N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/C198R, N30D/K42E/N52S/H115R/C198R R221I,E16V/N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/C198R, N30D/K42E/N52S/H115R/C198R R221I,

N52S/E90A/H115R, N30D/K42E/N52S/H115R, N52S/H115R/F172S/C198R, N119Q, N207Q, N52Q/N207X, N168X/N207X, N52Q/N168Q, N84Q/N207Q, N119Q N155X, N52Q/N119Q, N52Q/N84Q/N207Q, N119Q/N155Q/N168Q, N52H/N84Q/N119Q, N52Q/N84Q/N155X/N168X, N52A/N57F/Q100S,N52S/E90A/H115R, N30D/K42E/N52S/H115R, N52S/H115R/F172S/C198R, N119Q, N207Q, N52Q/N207X, N168X/N207X, N52Q/N168Q, N84Q/N207Q, N119Q N155X, N52Q/N119Q, N52Q /N84Q/N207Q, N119Q/N155Q/N168Q, N52H/N84Q/N119Q, N52Q/N84Q/N155X/N168X, N52A/N57F/Q100S,

N52A/N57H/Q100S, N52A/N57Y/Q100A, N52D/N57A/Q100A, N52D/Q100S, N52G/Q100A, N52H/Q100A, N52M/N57H/Q100S, N52M/N57W/Q100P, N52Q/N57F, N52Q/N57S/Q100A, N52R/N57L/Q100A,N52A/N57H/Q100S, N52A/N57Y/Q100A, N52D/N57A/Q100A, N52D/Q100S, N52G/Q100A, N52H/Q100A, N52M/N57H/Q100S, N52M/N57W/Q100P, N52Q/N57F , N52Q/N57S/ Q100A, N52R/N57L/Q100A,

N52R/N57Y/Q100P, N52R/N57Y/Q100S, N52S/N57A/Q100A, N52S/N57H/Q100E, N52S/N57L/Q100S,N52R/N57Y/Q100P, N52R/N57Y/Q100S, N52S/N57A/Q100A, N52S/N57H/Q100E, N52S/N57L/Q100S,

N52S/N57M/Q100S, N52S/N57Y/Q100S, N52S/N57Y/Q100M, N52S/N57Y/Q100V, N52T/N57H/Q100S,N52S/N57M/Q100S, N52S/N57Y/Q100S, N52S/N57Y/Q100M, N52S/N57Y/Q100V, N52T/N57H/Q100S,

N52T/N57H/Q100A, N52T/N57Y/Q100A, N52V/N57L/Q100A, N52H/N57Y/Q100K, N52K/N57Y/Q100R,N52T/N57H/Q100A, N52T/N57Y/Q100A, N52V/N57L/Q100A, N52H/N57Y/Q100K, N52K/N57Y/Q100R,

N52L/N57H/Q100R, N52R/N57F/Q100N, N52R/N57F/Q100P, N52R/N57F/Q100R, N52R/N57F/Q100T,N52L/N57H/Q100R, N52R/N57F/Q100N, N52R/N57F/Q100P, N52R/N57F/Q100R, N52R/N57F/Q100T,

N52R/N57L/Q100S, N52R/N57W/Q100K, N52R/N57W, N52G/N57V, N52L/N57V, N52S/N57L/Q100G или N52T/N57K/Q100P. В некоторых из любых предлагаемых воплощений вариантный полипептид ICOSL проявляет повышенное связывание с эктодоменом ICOS или CD28 по сравнению со связыванием референсного полипептида ICOSL с тем же эктодоменом.N52R/N57L/Q100S, N52R/N57W/Q100K, N52R/N57W, N52G/N57V, N52L/N57V, N52S/N57L/Q100G or N52T/N57K/Q100P. In some of any of the provided embodiments, the variant ICOSL polypeptide exhibits increased binding to the ICOS or CD28 ectodomain compared to the binding of the reference ICOSL polypeptide to the same ectodomain.

В некоторых из предлагаемых воплощений одна или несколько модификаций аминокислот выбраны из C198R, D158G, E16V, E90A, F120S, F138L, F172S, H115R, I143V, I224V, K156M, K42E, K92R, L102R, L203P, L208P, N194D, N30D, N52A, N52D, N52G, N52H, N52K, N52L, N52M, N52Q, N52R, N52S, N52T, N52Y, N57F, N57H, N57L, N57M, N57S, N57V, N57W, N57Y, Q100A, Q100, Q100K, Q100M, Q100P, Q100R, Q100S, Q133H, S212G, S54A, S54P, T113E, V110D, V122A, Y146C, Y152C или T225A.In some of the proposed embodiments, one or more amino acid modifications are selected from C198R, D158G, E16V, E90A, F120S, F138L, F172S, H115R, I143V, I224V, K156M, K42E, K92R, L102R, L203P, L208P, N194D, N30D, N 52A, N52D, N52G, N52H, N52K, N52L, N52M, N52Q, N52R, N52S, N52T, N52Y, N57F, N57H, N57L, N57M, N57S, N57V, N57W, N57Y, Q100A, Q100, Q100K, Q100M, Q100 P, Q100R, Q100S, Q133H, S212G, S54A, S54P, T113E, V110D, V122A, Y146C, Y152C or T225A.

В некоторых примерах одну или несколько модификаций аминокислот выбирают из N52A/N57Y/Q100A, N52D/Q100S, N52G/Q100A, N52M/N57H/Q100S, N52M/N57W/Q100P,In some examples, one or more amino acid modifications are selected from N52A/N57Y/Q100A, N52D/Q100S, N52G/Q100A, N52M/N57H/Q100S, N52M/N57W/Q100P,

N52Q/N57S/Q100A, N52R/N57L/Q100A, N52S/N57H/Q100E, N52S/N57L/Q100S, N52S/N57M/Q100S, N52S/N57Y/Q100M, N52T/N57H/Q100S, N52R/N57F/Q100P, N52R/N57F/Q100T, N52R/N57W/Q100K, N52R/N57W, N52G/N57V, N52L/N57V, N52S/N57L/Q100G, N52T/N57K/Q100P, N52S, N52H, N52D, N52Y/N57Y/F138L/L203P, N52H/N57Y/Q100P, N52S/Y146C/Y152C, N52H/C198R, N52H/C198R/T225A, N52H/K92R, N57Y, N52S/C198R, N52S/T113E, S54A, N52D/S54P, N52K/L208P, N52H/I143T, N52S/D158G, N52D/Q133H, N52H/N57Y/Q100R/V110D/C198R/S212G, N52H/N57Y/Q100R/V122A, N52H/N57Y/Q100R/F172S, N52H/N57Y/Q100R, N52S/N194D,N52Q/N57S/Q100A, N52R/N57L/Q100A, N52S/N57H/Q100E, N52S/N57L/Q100S, N52S/N57M/Q100S, N52S/N57Y/Q100M, N52T/N57H/Q100S, N52R/N57F/ Q100P, N52R/ N57F/Q100T, N52R/N57W/Q100K, N52R/N57W, N52G/N57V, N52L/N57V, N52S/N57L/Q100G, N52T/N57K/Q100P, N52S, N52H, N52D, N52Y/N57Y/F138L/L2 03P,N52H/ N57Y/Q100P, N52S/Y146C/Y152C, N52H/C198R, N52H/C198R/T225A, N52H/K92R, N57Y, N52S/C198R, N52S/T113E, S54A, N52D/S54P, N52K/L208P, N52 H/I143T, N52S/ D158G, N52D/Q133H, N52H/N57Y/Q100R/V110D/C198R/S212G, N52H/N57Y/Q100R/V122A, N52H/N57Y/Q100R/F172S, N52H/N57Y/Q100R, N52S/N194D,

- 6 044346- 6 044346

N52H/N57Y/Q100R/L102R/V110D/H115R/C198R,N52H/N57Y/Q100R/L102R/V110D/H115R/C198R,

N52S/E90A,N52S/E90A,

N52S/F120S/I143V/I224V,N52S/F120S/I143V/I224V,

N52H/N57Y/Q100R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/C198R, N52Y/N57Y/Q100P/F172S, E16V/N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/Y152C/K156M/F172S/C198R, N52S/H115R/F120S/I143V/C198R, N52H/N57Y/Q100P/C198R, N52H/N57Y/Q100P/H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100P/F172S/C198R,N52H/N57Y/Q100R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/C198R, N52Y/N57Y/Q100P/F172S, E16V/N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/Y152C /K156M/F172S/C198R, N52S/H115R/F120S/I143V/C198R, N52H/N57Y/Q100P/C198R, N52H/N57Y/Q100P/H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100P/F172S/C198R,

N52H/N57Y/Q100P/H115R, N52H/Q100R/H115R/F172S,N52H/N57Y/Q100P/H115R, N52H/Q100R/H115R/F172S,

N52H/N57Y/Q100P/H115R/C198R,N52H/N57Y/Q100P/H115R/C198R,

N52H/Q100R/C198R,N52H/Q100R/C198R,

N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/C198R, N57Y/F138L/L203P, N52H, N57Y,N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/C198R, N57Y/F138L/L203P, N52H, N57Y,

N52H/Q100R/H115X/F172S/C198R,N52H/Q100R/H115X/F172S/C198R,

N52H/Q100R/H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S,N52H/Q100R/H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S,

Q100R, N52Y/F138L/L203P, N57Y/Q100R/C198R,Q100R, N52Y/F138L/L203P, N57Y/Q100R/C198R,

N57Y/Q100P, Q100R/F138L, N52H/N57Y/Q100R/H115R,N57Y/Q100P, Q100R/F138L, N52H/N57Y/Q100R/H115R,

N52H/N57Y/Q100R/F172S, N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/I224V, N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S,N52H/N57Y/Q100R/F172S, N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/I224V, N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S,

N52H/N57Y/Q100R/H115R/C198R, N52H/N57Y/Q100R/F172S/C198R,N52H/N57Y/Q100R/H115R/C198R, N52H/N57Y/Q100R/F172S/C198R,

N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/H115R/I143V/F172S/C198R,N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/H115R/I143V/F172S/C198R,

N52H/N57Y/Q100R/L102R H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/H115R F172S/N194D,N52H/N57Y/Q100R/L102R H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/H115R F172S/N194D,

N52H/N57Y/H115R/F172S/C198R, N52H/Q100R/H115R/I143T/F172S,N52H/N57Y/H115R/F172S/C198R, N52H/Q100R/H115R/I143T/F172S,

N52H/N57Y/Q100R/H115R/C198R,N52H/N57Y/Q100R/H115R/C198R,

N52H/N57Y/H115R,N52H/N57Y/H115R,

N52H/N57Y/Q100P/H115R/F172S,N52H/N57Y/Q100P/H115R/F172S,

E16V/N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/C198R, N52S/E90A/H115R, N52S/E90A/H115R илиE16V/N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/C198R, N52S/E90A/H115R, N52S/E90A/H115R or

N30D/K42E/N52S/H115R. В некоторых из любых предлагаемых воплощений вариантный полипептид ICOSL проявляет повышенное связывание с эктодоменами ICOS и CD28 по сравнению со связыванием референсного полипептида ICOSL с теми же эктодоменами.N30D/K42E/N52S/H115R. In some of any of the provided embodiments, the variant ICOSL polypeptide exhibits increased binding to the ICOS and CD28 ectodomains compared to the binding of the reference ICOSL polypeptide to the same ectodomains.

В некоторых из любых предлагаемых воплощений вариантный полипептид ICOSL включает последовательность аминокислот, представленную в любой из SEQ ID NO: 546-599, 734-781, 783, 786, 788, 792, 796, 798, 800, 802, 804, 806, 808, 811, 813, 815, 817, 818, 820, 822, 824, 826, 827, 829, 831, 833, 834, 836, 838, 840-843, 845, 847, 848, 850-853, 855, 857, 907, 910 или последовательность аминокислот, которая имеет, по меньшей мере, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98 или 99% идентичности последовательности с любой из SEQ ID NO: 546-599, 734-781, 783, 786, 788, 792, 796, 798, 800, 802, 804, 806, 808, 811, 813, 815, 817, 818, 820, 822, 824, 826, 827, 829, 831, 833, 834, 836, 838, 840-843, 845, 847, 848, 850-853, 855, 857, 907, 910. В некоторых из любых предлагаемых воплощений вариантный полипептид ICOSL состоит из аминокислотной последовательности, представленной в любой из SEQ ID NO: 546-599, 734-781, 783, 786, 788, 792, 796, 798, 800, 802, 804, 806, 808, 811, 813, 815, 817, 818, 820, 822, 824, 826, 827, 829, 831, 833, 834, 836, 838, 840-843, 845, 847, 848, 850-853, 855, 857, 907, 910 или последовательности аминокислот, которая имеет, по меньшей мере, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98 или 99% идентичности последовательности с любой из SEQ ID NO: 546-599, 734-781, 783, 786, 788, 792, 796, 798, 800, 802, 804, 806, 808, 811, 813, 815, 817, 818, 820, 822, 824, 826, 827, 829, 831, 833, 834, 836, 838, 840-843, 845, 847, 848, 850853, 855, 857, 907, 910.In some of any of the provided embodiments, the ICOSL variant polypeptide comprises the amino acid sequence set forth in any of SEQ ID NOs: 546-599, 734-781, 783, 786, 788, 792, 796, 798, 800, 802, 804, 806, 808 , 811, 813, 815, 817, 818, 820, 822, 824, 826, 827, 829, 831, 833, 834, 836, 838, 840-843, 845, 847, 848, 850-853, 855, 8 57 , 907, 910, or an amino acid sequence that has at least 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, or 99% sequence identity with any of SEQ ID NOs: 546-599, 734- 781, 783, 786, 788, 792, 796, 798, 800, 802, 804, 806, 808, 811, 813, 815, 817, 818, 820, 822, 824, 826, 827, 829, 831, 8 33, 834, 836, 838, 840-843, 845, 847, 848, 850-853, 855, 857, 907, 910. In some of any of the provided embodiments, the variant ICOSL polypeptide consists of the amino acid sequence presented in any of SEQ ID NO: 546-599, 734-781, 783, 786, 788, 792, 796, 798, 800, 802, 804, 806, 808, 811, 813, 815, 817, 818, 820, 822, 824, 826, 827 , 829, 831, 833, 834, 836, 838, 840-843, 845, 847, 848, 850-853, 855, 857, 907, 910 or an amino acid sequence that has at least 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, or 99% sequence identity to any of SEQ ID NO: 546-599, 734-781, 783, 786, 788, 792, 796, 798, 800, 802, 804, 806 , 808, 811, 813, 815, 817, 818, 820, 822, 824, 826, 827, 829, 831, 833, 834, 836, 838, 840-843, 845, 847, 848, 850853, 85 5,857 , 907, 910.

В некоторых из предлагаемых воплощений варианта полипептида лиганда ICOS (ICOSL), содержащего домен IgV или его специфически связывающий фрагмент, домен IgC или его специфически связывающий фрагмент, или оба, вариант вариантного полипептида ICOSL содержит одну или несколько аминокислот модификации в референсном полипептиде ICOSL или его специфическом связывающем фрагменте, соответствующие аминокислотным модификациям, выбраны из N52A, N52C, N52D, N52G, N52K, N52L, N52M, N52R, N52T, N52V, N57A, N57E, N57F, N57H, N57K, N57L, N57M, N57P, N57Q, N57S, N57T, N57V, N57W, Q100A, Q100D, Q100G, Q100L, Q100M, Q100N, Q100R, Q100S, Q100T или Q100V относительно SEQ ID NO: 32. В некоторых из предлагаемых воплощений одна или несколько модификаций аминокислот выбраны из N52A/N57F/Q100S, N52A,/N57H/Q100S, N52A/N57Y/Q100A, N52D/N57A/Q100A, N52D/Q100S, N52G/Q100A, N52H/Q100A, N52M/N57H/Q100S, N52M/N57W/Q100P,In some of the proposed embodiments of a variant ICOS ligand (ICOSL) polypeptide comprising an IgV domain or a specific binding fragment thereof, an IgC domain or a specific binding fragment thereof, or both, the variant ICOSL polypeptide comprises one or more amino acid modifications in the reference ICOSL polypeptide or a specific binding fragment thereof. binding fragment corresponding to amino acid modifications selected from N52A, N52C, N52D, N52G, N52K, N52L, N52M, N52R, N52T, N52V, N57A, N57E, N57F, N57H, N57K, N57L, N57M, N57P, N57Q, N57S, N57T , N57V, N57W, Q100A, Q100D, Q100G, Q100L, Q100M, Q100N, Q100R, Q100S, Q100T or Q100V relative to SEQ ID NO: 32. In some of the proposed embodiments, one or more amino acid modifications are selected from N52A/N57F/Q100S, N52A ,/N57H/Q100S, N52A/N57Y/Q100A, N52D/N57A/Q100A, N52D/Q100S, N52G/Q100A, N52H/Q100A, N52M/N57H/Q100S, N52M/N57W/Q100P,

N52Q/N57F, N52Q/N57S/Q100A, N52R/N57L/Q100A,N52Q/N57F, N52Q/N57S/Q100A, N52R/N57L/Q100A,

N52S/Q100A, N52S/N57H/Q100E, N52S/N57L/Q100S,N52S/Q100A, N52S/N57H/Q100E, N52S/N57L/Q100S,

N52R/N57Y/Q100P, N52S/N57M/Q100S,N52R/N57Y/Q100P, N52S/N57M/Q100S,

N52S/N57Y/Q100M,N52S/N57Y/Q100M,

N52V/N57L/Q100A,N52V/N57L/Q100A,

N52R/N57F/Q100P,N52R/N57F/Q100P,

N52R/N57W/Q100K,N52R/N57W/Q100K,

N52S/N57Y/Q100V, N52T/N57H/Q100S, N52T/N57H,N52S/N57Y/Q100V, N52T/N57H/Q100S, N52T/N57H,

N52H/N57Y/Q100K, N52K/N57Y/Q100R, N52L/N57H/Q100R,N52H/N57Y/Q100K, N52K/N57Y/Q100R, N52L/N57H/Q100R,

N52R/N57F/Q100R/N57F/Q100T,N52R/N57F/Q100R/N57F/Q100T,

N52R/N57W, N52R/N57Y/Q100R,N52R/N57W, N52R/N57Y/Q100R,

N52R/N57H/Q100K,N52R/N57H/Q100K,

N52C/N57E/Q100S,N52C/N57E/Q100S,

N52P/N57S/Q100G,N52P/N57S/Q100G,

N52G/N57V, N52G/N57V, N52L/N57V, N52P/N57P,N52G/N57V, N52G/N57V, N52L/N57V, N52P/N57P,

N52T/N57K/Q100P, N52V/N57T/Q100L или N57Q/Q100P.N52T/N57K/Q100P, N52V/N57T/Q100L or N57Q/Q100P.

N52R/N57Y/Q100S, N52S/N57Y/Q100S, N52T/N57Y/Q100A, N52R/N57F/Q100N, N52R/N57L/Q100S, N52G/N57P/Q100D, N52S/N57L/Q100G,N52R/N57Y/Q100S, N52S/N57Y/Q100S, N52T/N57Y/Q100A, N52R/N57F/Q100N, N52R/N57L/Q100S, N52G/N57P/Q100D, N52S/N57L/Q100G,

В некоторых из любых предлагаемых воплощений референсный полипептид ICOSL представляет собой ICOSL млекопитающего или его специфический связывающий фрагмент. В некоторых примерах референсный полипептид ICOSL представляет собой человеческий ICOSL или его специфический связывающий фрагмент.In some of any of the provided embodiments, the ICOSL reference polypeptide is a mammalian ICOSL or a specific binding fragment thereof. In some examples, the ICOSL reference polypeptide is human ICOSL or a specific binding fragment thereof.

В некоторых из любых предлагаемых воплощений референсный полипептид ICOSL содержит (i) аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 32, (ii) аминокислотную последовательность, которая имеет, по меньшей мере, 95% идентичности последовательности с SEQ ID NO: 32; или (iii) часть (i) или (ii), содержащую домен IgV или домен IgC или их специфически связывающие фрагменты, или и то, и другое. В некоторых из любых предлагаемых воплощений специфический связывающий фрагмент домена IgV или домена IgC имеет длину, по меньшей мере, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 110In some of any of the provided embodiments, the ICOSL reference polypeptide comprises (i) an amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 32, (ii) an amino acid sequence that has at least 95% sequence identity with SEQ ID NO: 32; or (iii) part (i) or (ii) containing an IgV domain or an IgC domain or specific binding fragments thereof, or both. In some of any of the proposed embodiments, the specific binding fragment of the IgV domain or IgC domain has a length of at least 50, 60, 70, 80, 90, 100, 110

- 7 044346 или более аминокислот; или фрагмент специфического связывания домена IgV имеет длину, которая составляет, по меньшей мере, 80% длины домена IgV, заданного аминокислотами 19-129 из SEQ ID NO: 5, и/или фрагмент специфического связывания домена IgC включает длину, которая составляет, по меньшей мере, 80% длины домена IgC, заданного аминокислотами 141-227 из SEQ ID NO: 5. В некоторых из любых предлагаемых воплощений вариантный полипептид ICOSL содержит домен IgV или его конкретный фрагмент и домен IgC или его конкретный фрагмент.- 7,044,346 or more amino acids; or the IgV domain specific binding fragment has a length that is at least 80% of the length of the IgV domain defined by amino acids 19-129 of SEQ ID NO: 5, and/or the IgC domain specific binding fragment includes a length that is at least at least 80% of the length of the IgC domain defined by amino acids 141-227 of SEQ ID NO: 5. In some of any of the provided embodiments, the ICOSL variant polypeptide comprises an IgV domain or a specific fragment thereof and an IgC domain or a specific fragment thereof.

В некоторых из любых предлагаемых воплощений вариантный полипептид ICOSL включает последовательность аминокислот, указанную в любой из SEQ ID NO: 638-685, или последовательность аминокислот, которая проявляет, по меньшей мере, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98 или 99% идентичности последовательностей с любым из SEQ ID NO: 638-685. В некоторых из любых предлагаемых воплощений вариантный полипептид ICOSL состоит из аминокислотной последовательности, представленной в любой из SEQ ID NO: 638-685, или последовательности аминокислот, которая проявляет, по меньшей мере, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98 или 99% идентичности последовательности с любой из SEQ ID NO: 638685.In some of any of the provided embodiments, the ICOSL variant polypeptide comprises an amino acid sequence set forth in any of SEQ ID NOs: 638-685, or an amino acid sequence that exhibits at least 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96. 97, 98 or 99% sequence identity to any of SEQ ID NO: 638-685. In some of any of the provided embodiments, the variant ICOSL polypeptide consists of an amino acid sequence presented in any of SEQ ID NO: 638-685, or an amino acid sequence that exhibits at least 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96 , 97, 98 or 99% sequence identity to any of SEQ ID NO: 638685.

В некоторых из любых предлагаемых воплощений вариантный полипептид ICOSL содержит домен IgV или его специфически связывающий фрагмент. В некоторых из любых предлагаемых воплощений вариантный полипептид ICOSL включает последовательность аминокислот, указанную в любой из SEQ ID NO: 686-781, или последовательность аминокислот, которая проявляет, по меньшей мере, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98 или 99% идентичности последовательности с любой из SEQ ID NO: 686-781. В некоторых из любых предлагаемых воплощений вариантный полипептид ICOSL состоит из аминокислотной последовательности, представленной в любой из SEQ ID NO: 686-781, или аминокислотной последовательности, которая демонстрирует, по меньшей мере, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98 или 99% идентичности последовательности с любой из SEQ ID NO: 686-781.In some of any of the proposed embodiments, the variant ICOSL polypeptide contains an IgV domain or a specific binding fragment thereof. In some of any of the provided embodiments, the ICOSL variant polypeptide comprises an amino acid sequence set forth in any of SEQ ID NOs: 686-781, or an amino acid sequence that exhibits at least 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96. 97, 98 or 99% sequence identity to any of SEQ ID NO: 686-781. In some of any of the provided embodiments, the variant ICOSL polypeptide consists of an amino acid sequence presented in any of SEQ ID NO: 686-781, or an amino acid sequence that exhibits at least 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96 , 97, 98 or 99% sequence identity to any of SEQ ID NO: 686-781.

В некоторых из любых предлагаемых воплощений домен IgV или его специфический связывающий фрагмент является единственной частью ICOSL вариантного полипептида ICOSL. В некоторых примерах домен IgC или его специфический связывающий фрагмент является единственной частью ICOSL вариантного полипептида ICOSL.In some of any of the proposed embodiments, the IgV domain or specific binding fragment thereof is the only part of the ICOSL variant ICOSL polypeptide. In some examples, the IgC domain or a specific binding fragment thereof is the only part of the ICOSL variant ICOSL polypeptide.

В некоторых из любых предлагаемых воплощений вариантный полипептид ICOSL демонстрирует измененное связывание с эктодоменом ICOS или CD28 по сравнению со связыванием референсного полипептида ICOSL с тем же эктодоменом. В некоторых аспектах вариантный полипептид ICOSL проявляет повышенное связывание с эктодоменом(ами) ICOS или CD28 по сравнению со связыванием референсного полипептида ICOSL с тем(теми) же эктодоменом(ами). В некоторых примерах связывание увеличивается более чем в 1,2 раза, в 1,5 раза, в 2 раза, в 3 раза, в 4 раза, в 5 раз, в 6 раз, в 7 раз, в 8 раз, в 9 раз, в 10 раз, в 20 раз, в 40 раз, в 50 раз или в 60 раз.In some of any of the provided embodiments, the variant ICOSL polypeptide exhibits altered binding to the ICOS or CD28 ectodomain compared to the binding of the reference ICOSL polypeptide to the same ectodomain. In some aspects, the variant ICOSL polypeptide exhibits increased binding to ICOS or CD28 ectodomain(s) compared to the binding of the reference ICOSL polypeptide to the same ectodomain(s). In some examples, binding increases greater than 1.2-fold, 1.5-fold, 2-fold, 3-fold, 4-fold, 5-fold, 6-fold, 7-fold, 8-fold, 9-fold , 10 times, 20 times, 40 times, 50 times or 60 times.

В некоторых из любых таких воплощений ICOS представляет собой ICOS человека. В некоторых из любых предлагаемых воплощений CD28 представляет собой CD28 человека.In some of any such embodiments, the ICOS is a human ICOS. In some of any of the proposed embodiments, CD28 is human CD28.

В некоторых из любых предлагаемых воплощений вариантный полипептид ICOSL проявляет пониженное связывание с эктодоменом CTLA-4 по сравнению со связыванием референсного полипептида ICOSL для того же эктодомена. В некоторых примерах связывание увеличивается более чем в 1,2 раза, в 1,5 раза, в 2 раза, в 3 раза, в 4 раза, в 5 раз, в 6 раз, в 7 раз, в 8 раз, в 9 раз, в 10 раз, в 20 раз, в 40 раз, в 50 раз или в 60 раз. В некоторых из любых предлагаемых воплощений CTLA-4 представляет собой CTLA-4 человека.In some of any of the provided embodiments, the variant ICOSL polypeptide exhibits reduced binding to a CTLA-4 ectodomain compared to the binding of a reference ICOSL polypeptide for the same ectodomain. In some examples, binding increases greater than 1.2-fold, 1.5-fold, 2-fold, 3-fold, 4-fold, 5-fold, 6-fold, 7-fold, 8-fold, 9-fold , 10 times, 20 times, 40 times, 50 times or 60 times. In some of any of the proposed embodiments, CTLA-4 is human CTLA-4.

В некоторых из любых предлагаемых воплощений измененное (повышенное или пониженное) связывание представляет собой измененную (увеличенную или уменьшенную) аффинность связывания. В некоторых из любых таких воплощений вариантный полипептид ICOSL содержит до 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19 или 20 аминокислотных модификаций, необязательно аминокислотных замен, вставок и/или делеций. В некоторых случаях вариантный полипептид ICOSL демонстрирует идентичность последовательности, по меньшей мере, или, по меньшей мере, около 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98 или 99% относительно референсного полипептида ICOSL.In some of any of the proposed embodiments, the altered (increased or decreased) binding represents an altered (increased or decreased) binding affinity. In some of any such embodiments, the variant ICOSL polypeptide contains up to 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, or 20 amino acid modifications, optionally amino acid substitutions, insertions and/or deletions. In some cases, the variant ICOSL polypeptide exhibits at least, or at least about 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, or 99% sequence identity to the reference ICOSL polypeptide.

В некоторых из любых предлагаемых воплощений вариантный полипептид ICOSL представляет собой растворимый белок. В некоторых из любых предлагаемых воплощений вариантный полипептид ICOSL лишен трансмембранного домена и внутриклеточного сигнального домена; и/или, при экспрессии из клетки, вариантный полипептид ICOSL не экспрессируется на поверхности клетки.In some of any of the proposed embodiments, the variant ICOSL polypeptide is a soluble protein. In some of any of the proposed embodiments, the variant ICOSL polypeptide lacks a transmembrane domain and an intracellular signaling domain; and/or, when expressed from a cell, the variant ICOSL polypeptide is not expressed on the cell surface.

В некоторых из любых предлагаемых воплощений вариантный полипептид ICOSL дополнительно включает трансмембранный домен. В некоторых случаях трансмембранный домен включает аминокислотную последовательность, представленную в виде остатков 257-277 последовательности SEQ ID NO: 5, или ее функциональный вариант, который демонстрирует, по меньшей мере, 85% идентичности последовательности с остатками 257-277 последовательности SEQ ID NO: 5. В некоторых из любых предлагаемых воплощений вариантный полипептид ICOSL дополнительно включает цитоплазматический сигнальный домен, связанный с трансмембранным доменом. В некоторых случаях цитоплазматический сигнальный домен включает аминокислотную последовательность, представленную в виде остатков 278302 SEQ ID NO: 5, или ее функциональный вариант, который демонстрирует, по меньшей мере, 85%In some of any of the proposed embodiments, the variant ICOSL polypeptide further includes a transmembrane domain. In some cases, the transmembrane domain includes the amino acid sequence represented by residues 257-277 of SEQ ID NO: 5, or a functional variant thereof that exhibits at least 85% sequence identity with residues 257-277 of SEQ ID NO: 5 In some of any of the provided embodiments, the variant ICOSL polypeptide further includes a cytoplasmic signaling domain associated with a transmembrane domain. In some cases, the cytoplasmic signaling domain includes the amino acid sequence represented by residues 278302 SEQ ID NO: 5, or a functional variant thereof that exhibits at least 85%

- 8 044346 идентичности последовательности с остатками 278-302 SEQ ID NO: 5.- 8 044346 sequence identity with residues 278-302 SEQ ID NO: 5.

В некоторых из любых предлагаемых воплощений вариантный полипептид ICOSL является дегликозилированным или частично дегликозилированным по сравнению с референсной последовательностьюIn some of any of the proposed embodiments, the variant ICOSL polypeptide is deglycosylated or partially deglycosylated relative to the reference sequence

ICOSL.ICOSL.

В данном документе представлен иммуномодулирующий белок, содержащий любой из предложенных вариантных полипептидов ICOSL и фрагмент, увеличивающий период полужизни. В некоторых из любых предлагаемых воплощений, фрагмент, увеличивающий период полужизни, включает домен мультимеризации, альбумин, альбумин-связывающий полипептид, Pro/Ala/Ser (PAS), C-концевой пептид (CTP) бета-субъединицы хорионического гонадотропина человека, полиэтиленгликоль (PEG), длинные неструктурированные гидрофильные последовательности аминокислот (XTEN), гидроксиэтилкрахмал (HES), альбумин-связывающая малая молекула или их комбинацию. В некоторых случаях фрагмент, увеличивающий период полужизни, представляет собой или содержит Pro/Ala/Ser (PAS), а вариантный полипептид ICOSL является PAS-илированным. В некоторых из любых предлагаемых воплощений, увеличивающий период полужизни фрагмент включает последовательность, представленную в SEQ ID NO: 904.Provided herein is an immunomodulatory protein comprising any of the proposed ICOSL variant polypeptides and a half-life extending moiety. In some of any of the provided embodiments, the half-life increasing moiety includes a multimerization domain, albumin, albumin-binding polypeptide, Pro/Ala/Ser (PAS), human chorionic gonadotropin beta subunit C-terminal peptide (CTP), polyethylene glycol (PEG) ), long unstructured hydrophilic amino acid sequences (XTEN), hydroxyethyl starch (HES), an albumin-binding small molecule, or a combination thereof. In some cases, the half-life extending fragment is or contains Pro/Ala/Ser (PAS), and the variant ICOSL polypeptide is PAS-ylated. In some of any of the proposed embodiments, the half-life increasing fragment includes the sequence presented in SEQ ID NO: 904.

В некоторых из любых предлагаемых воплощений, фрагмент, увеличивающий период полужизни, представляет собой или содержит домен мультимеризации. В некоторых случаях домен мультимеризации выбран из Fc-области иммуноглобулина, лейциновой молнии, изолейцинной молнии или цинкового пальца. В некоторых из любых предлагаемых воплощений вариантный полипептид ICOSL напрямую или опосредованно связан через линкер с доменом мультимеризации.In some of any of the proposed embodiments, the half-life increasing moiety is or contains a multimerization domain. In some cases, the multimerization domain is selected from an immunoglobulin Fc region, a leucine zipper, an isoleucine zipper, or a zinc finger. In some of any of the proposed embodiments, the variant ICOSL polypeptide is directly or indirectly linked via a linker to the multimerization domain.

В некоторых из любых предлагаемых воплощений иммуномодулирующий белок представляет собой мультимер, содержащий первый вариантный полипептид ICOSL, связанный с первым доменом мультимеризации, и второй вариантный полипептид ICOSL, связанный со вторым доменом мультимеризации, где первый и второй домены мультимеризации взаимодействуют с образованием мультимера, включающим первый и второй вариантные полипептиды ICOSL. В некоторых случаях мультимер представляет собой димер.In some of any of the proposed embodiments, the immunomodulatory protein is a multimer comprising a first variant ICOSL polypeptide linked to a first multimerization domain and a second variant ICOSL polypeptide linked to a second multimerization domain, wherein the first and second multimerization domains interact to form a multimer comprising the first and second variant ICOSL polypeptides. In some cases, the multimer is a dimer.

В некоторых из любых предлагаемых воплощений первый вариантный полипептид ICOSL и второй вариантный полипептид ICOSL являются одинаковыми. В некоторых из любых предлагаемых воплощений димер представляет собой гомодимер. В некоторых случаях димер является гетеродимером.In some of any of the provided embodiments, the first variant ICOSL polypeptide and the second variant ICOSL polypeptide are the same. In some of any of the proposed embodiments, the dimer is a homodimer. In some cases, the dimer is a heterodimer.

В некоторых из любых предлагаемых воплощений домен мультимеризации представляет собой или содержит Fc-область иммуноглобулина. В некоторых из любых предлагаемых воплощений Fc-область представляет собой белок иммуноглобулина G1 (IgG1) или иммуноглобулина G2 (IgG2). В некоторых примерах белок иммуноглобулина является человеческим и/или Fc-область является человеческой. В некоторых из любых предлагаемых воплощений Fc-область содержит аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 227, или ее вариант, который демонстрирует, по меньшей мере, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98 или 99% идентичности последовательности с SEQ ID NO: 227. В некоторых аспектах Fc-область включает аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 226, или ее вариант, который демонстрирует, по меньшей мере, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98 или 99% идентичности последовательности с SEQ ID NO: 226. В некоторых из любых предлагаемых воплощений Fcобласть проявляет одну или несколько эффекторных функций. В некоторых из любых предлагаемых воплощений Fc-область проявляет одну или несколько сниженных эффекторных функций по сравнению с областью Fc дикого типа, необязательно, где человеческий Fc дикого типа представляет собой человеческий IgG1.In some of any of the proposed embodiments, the multimerization domain is or comprises an immunoglobulin Fc region. In some of any of the provided embodiments, the Fc region is an immunoglobulin G1 (IgG1) or immunoglobulin G2 (IgG2) protein. In some examples, the immunoglobulin protein is human and/or the Fc region is human. In some of any of the provided embodiments, the Fc region comprises the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 227, or a variant thereof that exhibits at least 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, or 99% sequence identity to SEQ ID NO: 227. In some aspects, the Fc region includes the amino acid sequence shown in SEQ ID NO: 226, or a variant thereof that exhibits at least 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98 or 99% sequence identity to SEQ ID NO: 226. In some of any of the provided embodiments, the F region exhibits one or more effector functions. In some of any of the provided embodiments, the Fc region exhibits one or more reduced effector functions compared to the wild-type Fc region, optionally wherein the wild-type human Fc is human IgG1.

В некоторых из любых предлагаемых воплощений одна или несколько эффекторных функций выбраны из числа антителозависимой клеточной цитотоксичности (ADCC), комплемент-зависимой цитотоксичности, запрограммированной гибели клеток и клеточного фагоцитоза. В некоторых из любых предлагаемых воплощений Fc-область представляет собой вариант Fc-области, содержащей одну или несколько аминокислотных замен по сравнению с Fc-областью дикого типа.In some of any of the proposed embodiments, one or more effector functions are selected from antibody-dependent cellular cytotoxicity (ADCC), complement-dependent cytotoxicity, programmed cell death, and cellular phagocytosis. In some of any of the provided embodiments, the Fc region is a variant Fc region containing one or more amino acid substitutions compared to the wild type Fc region.

В некоторых из предлагаемых примеров одна или несколько аминокислотных замен вариантной Fcобласти выбраны из N297G, E233P/L234V/L235A/G236del/S267K или L234A/L235E/G237A, где остаток пронумерован в соответствии с индексом EU по Kabat. В некоторых из любых предлагаемых воплощений вариант Fc-области дополнительно включает аминокислотную замену C220S, где остатки пронумерованы в соответствии с индексом EU по Kabat. В некоторых аспектах Fc-область включает последовательность аминокислотной последовательности, представленную в любой из SEQ ID NO: 476-478, или аминокислотную последовательность, которая проявляет, по меньшей мере, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99% или более идентичности последовательностям с любой из SEQ ID NO: 476-478 и содержат аминокислотные замены. В некоторых из любых предлагаемых воплощений Fc-область содержит K447del, где остаток пронумерован в соответствии с индексом EC по Kabat.In some of the proposed examples, one or more amino acid substitutions of the variant Fc region are selected from N297G, E233P/L234V/L235A/G236del/S267K or L234A/L235E/G237A, where the residue is numbered according to the Kabat EU index. In some of any of the proposed embodiments, the Fc region variant further includes the amino acid substitution C220S, where the residues are numbered according to the Kabat EU index. In some aspects, the Fc region includes an amino acid sequence set forth in any of SEQ ID NOs: 476-478, or an amino acid sequence that exhibits at least 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97. 98, 99% or more sequence identity to any of SEQ ID NO: 476-478 and contains amino acid substitutions. In some of any of the provided embodiments, the Fc region comprises K447del, wherein the residue is numbered according to the Kabat EC index.

В некоторых из любых предлагаемых воплощений Fc-область включает последовательность аминокислотной последовательности, представленную в любой из SEQ ID NO: 632-634, или аминокислотную последовательность, которая демонстрирует, по меньшей мере, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99% или более идентичности последовательностям любой из SEQ ID NO: 632-634 и содержит аминокислотные замены.In some of any of the provided embodiments, the Fc region includes an amino acid sequence set forth in any of SEQ ID NOs: 632-634, or an amino acid sequence that exhibits at least 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96 , 97, 98, 99% or more sequence identity to any of SEQ ID NO: 632-634 and contains amino acid substitutions.

- 9 044346- 9 044346

В некоторых из любых предлагаемых воплощений Fc-область включает последовательность аминокислотной последовательности, изложенной в SEQ ID NO: 474 или 637, или аминокислотную последовательность, которая демонстрирует, по меньшей мере, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99% или более идентичности последовательности с SEQ ID NO: 474 или 637 и содержит аминокислотные замены.In some of any of the provided embodiments, the Fc region comprises an amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 474 or 637, or an amino acid sequence that exhibits at least 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97 , 98, 99% or more sequence identity to SEQ ID NO: 474 or 637 and contains amino acid substitutions.

В некоторых из любых предлагаемых воплощений Fc-область включает аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 478 или SEQ ID NO: 634. В некоторых из любых предлагаемых воплощений Fc-область включает аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 477. В некоторых из любых предлагаемых воплощений Fc-область включает аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 633. В некоторых из любых предлагаемых воплощений Fc-область включает аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 474. В некоторых из любых предлагаемых воплощений Fc-область включает аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 637.In some of any of the provided embodiments, the Fc region includes the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 478 or SEQ ID NO: 634. In some of any of the provided embodiments, the Fc region includes the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 477. In some of any of the provided embodiments, the Fc region includes the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 477. of any of the provided embodiments, the Fc region includes the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 633. In some of any of the provided embodiments, the Fc region includes the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 474. In some of any of the provided embodiments, the Fc region includes amino acid sequence shown in SEQ ID NO: 637.

В данном документе представлен иммуномодулирующий белок, содержащий (a) вариантный полипептид ICOSL, содержащий одну или несколько модификаций аминокислот в домене суперсемейства иммуноглобулинов (IgSF) референсного полипептида ICOSL, где вариантный полипептид ICOSL демонстрирует измененное связывание с эктодоменом(ами) ICOS или CD28 по сравнению со связыванием референсного полипептида ICOSL для этого же эктодомена(ов); и (b) вариантная Fc-область, содержащей аминокислотные замены, выбранные из N297G/K447del, E233P/L234V/L235A/G236del/S267K/K447del или L234A/L235E/G237A/K447del по сравнению с человеческим IgG1 дикого типа, где остатки пронумерованы в соответствии с индексом EU по Kabat. В некоторых случаях иммуномодулирующий белок представляет собой димер. В некоторых из любых предлагаемых воплощений вариант Fc-области дополнительно включает аминокислотную замену C220S, где остатки пронумерованы в соответствии с индексом EU по Kabat. В некоторых примерах Fc-область включает последовательность аминокислотной последовательности, представленную в любой из SEQ ID NO: 632-634, или аминокислотную последовательность, которая проявляет, по меньшей мере, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99% или более идентичности последовательностям с любой из SEQ ID NO: 476-478 и содержат аминокислотные замены. В некоторых из любых предлагаемых воплощений Fc-область включает последовательность аминокислотной последовательности, изложенной в SEQ ID NO: 474 или 637, или аминокислотную последовательность, которая демонстрирует, по меньшей мере, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99% или более идентичности последовательности с SEQ ID NO: 474 или 637 и содержит аминокислотные замены.Provided herein is an immunomodulatory protein comprising (a) a variant ICOSL polypeptide containing one or more amino acid modifications in the immunoglobulin superfamily (IgSF) domain of the reference ICOSL polypeptide, wherein the variant ICOSL polypeptide exhibits altered binding to the ICOS or CD28 ectodomain(s) compared to binding of the ICOSL reference polypeptide for the same ectodomain(s); and (b) a variant Fc region containing amino acid substitutions selected from N297G/K447del, E233P/L234V/L235A/G236del/S267K/K447del or L234A/L235E/G237A/K447del compared to wild-type human IgG1, where the residues are numbered in according to the Kabat EU index. In some cases, the immunomodulatory protein is a dimer. In some of any of the proposed embodiments, the Fc region variant further includes the amino acid substitution C220S, where the residues are numbered according to the Kabat EU index. In some examples, the Fc region includes an amino acid sequence set forth in any of SEQ ID NOs: 632-634, or an amino acid sequence that exhibits at least 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97. 98, 99% or more sequence identity to any of SEQ ID NO: 476-478 and contains amino acid substitutions. In some of any of the provided embodiments, the Fc region comprises an amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 474 or 637, or an amino acid sequence that exhibits at least 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97 , 98, 99% or more sequence identity to SEQ ID NO: 474 or 637 and contains amino acid substitutions.

В некоторых из любых предлагаемых воплощений вариантный полипептид ICOSL связан, прямо или опосредованно, через линкер, с вариантной Fc-областью. В некоторых примерах линкер содержит от 1 до 10 аминокислот. В некоторых из любых предлагаемых воплощений линкер выбран из AAA, G4S (SEQ ID NO: 636), (G4S) 2 (SEQ ID NO: 229) или линкера GSGGGGS (SEQ ID NO: 635). В некоторых из любых предлагаемых воплощений линкер представляет собой (G4S)3 (SEQ ID NO: 228).In some of any of the proposed embodiments, the variant ICOSL polypeptide is linked, directly or indirectly through a linker, to the variant Fc region. In some examples, the linker contains from 1 to 10 amino acids. In some of any of the provided embodiments, the linker is selected from AAA, G4S (SEQ ID NO: 636), (G4S)2 (SEQ ID NO: 229) or GSGGGGS linker (SEQ ID NO: 635). In some of any of the proposed embodiments, the linker is (G4S)3 (SEQ ID NO: 228).

В некоторых из любых предлагаемых воплощений линкер представляет собой AAA. В некоторых из любых предлагаемых воплощений линкер представляет собой G4S (SEQ ID NO: 636). В некоторых из любых предлагаемых воплощений линкер представляет собой (G4S) 2 (SEQ ID NO: 229). В некоторых из любых предлагаемых воплощений линкер представляет собой линкер GSGGGGS (SEQ ID NO: 635).In some of any embodiments provided, the linker is AAA. In some of any of the proposed embodiments, the linker is G4S (SEQ ID NO: 636). In some of any of the proposed embodiments, the linker is (G4S)2 (SEQ ID NO: 229). In some of any embodiments provided, the linker is a GSGGGGS linker (SEQ ID NO: 635).

В некоторых из любых предусмотренных воплощений гибридного белка, например, вариантного гибридного белка ICOSL-Fc, вариантный полипептид ICOSL представляет собой или содержит домен IgV. В некоторых из любых предлагаемых воплощений вариантный полипептид ICOSL содержит аминокислотные модификации N52H/Q100R. В некоторых из любых предлагаемых воплощений вариантный полипептид ICOSL имеет последовательность, представленную в SEQ ID NO: 567. В некоторых из любых предлагаемых воплощений вариантный полипептид ICOSL включает аминокислотные модификации N52H/N57Y/Q100R. В некоторых из любых предлагаемых воплощений вариантный полипептид ICOSL имеет последовательность, представленную в SEQ ID NO: 565. В некоторых из любых предлагаемых воплощений вариантный полипептид ICOSL включает аминокислотные модификации N52L/N57H/Q100R. В некоторых из любых предлагаемых воплощений вариантный полипептид ICOSL имеет последовательность, представленную в SEQ ID NO: 761. В некоторых из любых предлагаемых воплощений вариантный полипептид ICOSL содержит модификации аминокислот N52H/N57Y/Q100P. В некоторых из любых предлагаемых воплощений вариантный полипептид ICOSL имеет последовательность, представленную в SEQ ID NO: 570. В некоторых из любых предлагаемых воплощений вариантный полипептид ICOSL включает аминокислотную модификацию N52D. В некоторых из любых предлагаемых воплощений полипептид имеет последовательность, представленную в SEQ ID NO: 548.In some of any contemplated embodiments of the fusion protein, for example, a variant ICOSL-Fc fusion protein, the variant ICOSL polypeptide is or contains an IgV domain. In some of any of the proposed embodiments, the variant ICOSL polypeptide contains amino acid modifications N52H/Q100R. In some of any of the provided embodiments, the variant ICOSL polypeptide has the sequence set forth in SEQ ID NO: 567. In some of any of the provided embodiments, the variant ICOSL polypeptide includes the amino acid modifications N52H/N57Y/Q100R. In some of any of the provided embodiments, the variant ICOSL polypeptide has the sequence set forth in SEQ ID NO: 565. In some of any of the provided embodiments, the variant ICOSL polypeptide includes the amino acid modifications N52L/N57H/Q100R. In some of any of the provided embodiments, the variant ICOSL polypeptide has the sequence set forth in SEQ ID NO: 761. In some of any of the provided embodiments, the variant ICOSL polypeptide contains amino acid modifications N52H/N57Y/Q100P. In some of any of the provided embodiments, the variant ICOSL polypeptide has the sequence set forth in SEQ ID NO: 570. In some of any of the provided embodiments, the variant ICOSL polypeptide includes the N52D amino acid modification. In some of any of the provided embodiments, the polypeptide has the sequence set forth in SEQ ID NO: 548.

В некоторых из любых предлагаемых воплощений представлен вариантный гибридный белок ICOSL-Fc, который имеет аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 928. В некоторых из любых предлагаемых воплощений представлен вариантный гибридный белок ICOSL-Fc, который имеет аминокислотную последовательность, которая имеет, по меньшей мере, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99% или более идентичности последовательности с последовательностью, указанной в SEQ ID NO: 928.In some of any of the provided embodiments, there is provided a variant ICOSL-Fc fusion protein that has the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 928. In some of any of the provided embodiments there is provided a variant ICOSL-Fc fusion protein that has an amino acid sequence that has, at least 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99% or more sequence identity with the sequence specified in SEQ ID NO: 928.

В конкретных воплощениях предлагаются иммуномодулирующие белки, такие как гибридные бел- 10 044346 ки, например, вариантные гибридные белки ICOSL-Fc, связывающие CD28 и ICOS. В некоторых воплощениях, вариантный гибридный белок ICOSL-Fc проявляет повышенную аффинность связывания с CD28 и/или ICOS по сравнению с гибридным белком ICOSL-Fc человека дикого типа, например, содержащий часть ICOSL IgV, указанный в SEQ ID NO: 545, связанную через линкер, например, представленный в SEQ ID NO: 229, с Fc-областью. В таком примере Fc-область представляет собой инертный или безэффекторный Fc, содержащий мутации L234A, L235E и L235E в Fc человеческого IgG1, например, представленный в SEQ ID NO: 637.In specific embodiments, immunomodulatory proteins are provided, such as fusion proteins, for example, CD28-ICOS binding variant ICOSL-Fc fusion proteins. In some embodiments, the variant ICOSL-Fc fusion protein exhibits increased binding affinity to CD28 and/or ICOS compared to a wild-type human ICOSL-Fc fusion protein, for example, comprising the ICOSL portion of the IgV specified in SEQ ID NO: 545 linked through a linker , for example, presented in SEQ ID NO: 229, with an Fc region. In such an example, the Fc region is an inert or effectorless Fc containing the L234A, L235E and L235E mutations in the human IgG1 Fc, for example, as shown in SEQ ID NO: 637.

В данном документе представлен иммуномодулирующий белок, содержащий любой из вариантов полипептидов ICOSL, связанных со вторым полипептидом, содержащим домен суперсемейства иммуноглобулинов (IgSF). В некоторых случаях домен IgSF является модифицированным по аффинности и демонстрирует измененное связывание с одним или несколькими его когнатными партнерами по связыванию по сравнению с немодифицированным доменом или доменом IgSF дикого типа. В некоторых из любых предлагаемых воплощений домен IgSF проявляет повышенное связывание с одним или несколькими его когнатными связывающими партнерами по сравнению с немодифицированным доменом или доменом IgSF дикого типа.Provided herein is an immunomodulatory protein comprising any of the ICOSL polypeptide variants linked to a second immunoglobulin superfamily (IgSF) domain-containing polypeptide. In some cases, an IgSF domain is affinity modified and exhibits altered binding to one or more of its cognate binding partners compared to an unmodified or wild-type IgSF domain. In some of any of the provided embodiments, the IgSF domain exhibits increased binding to one or more of its cognate binding partners compared to the unmodified or wild-type IgSF domain.

В некоторых из любых предлагаемых воплощений вариантный полипептид ICOSL представляет собой первый вариантный полипептид ICOSL, а домен IgSF второго полипептида представляет собой домен IgSF из второго вариантного полипептида ICOSL, представленного в настоящем документе, где первый и второй вариант ICOSL являются одинаковыми или разными.In some of any of the provided embodiments, the variant ICOSL polypeptide is a first variant ICOSL polypeptide and the IgSF domain of the second polypeptide is the IgSF domain of a second variant ICOSL polypeptide provided herein, wherein the first and second variant ICOSL are the same or different.

В некоторых из любых предлагаемых воплощений вариантный полипептид ICOSL способен специфически связываться с CD28 или ICOS, а домен IgSF второго полипептида способен связываться с партнером по связыванию, отличным от одного, специфически связанного с вариантным полипептидом ICOSL. В некоторых из любых предлагаемых воплощений домен IgSF относится к представителю семейства B7.In some of any of the provided embodiments, the variant ICOSL polypeptide is capable of specifically binding to CD28 or ICOS, and the IgSF domain of the second polypeptide is capable of binding to a binding partner other than the one specifically bound to the variant ICOSL polypeptide. In some of any of the proposed embodiments, the IgSF domain is a member of the B7 family.

В некоторых из любых предлагаемых воплощений домен IgSF представляет собой локализующий в опухоли фрагмент, который связывается с лигандом, экспрессируемым на опухоли, или представляет собой локализующий в воспалении фрагмент, который связывается с лигандом, экспрессируемым на клетке или ткани воспалительной среды. В некоторых случаях лиганд представляет собой B7H6. В некоторых примерах домен IgSF представляет собой NKp30.In some of any of the provided embodiments, the IgSF domain is a tumor-localizing moiety that binds to a ligand expressed on a tumor, or is an inflammasome-localizing moiety that binds to a ligand expressed on a cell or tissue in the inflammatory environment. In some cases, the ligand is B7H6. In some examples, the IgSF domain is NKp30.

В некоторых из любых предлагаемых воплощений домен IgSF второго полипептида представляет собой или содержит домен IgV. В некоторых из любых предлагаемых воплощений домен IgSF второго полипептида представляет собой вариант молекулы NKp30, содержащий L30V/A60V/S64P/S86G. В некоторых из любых предлагаемых воплощений домен IgSF второго полипептида имеет последовательность, представленную в SEQ ID NO: 504.In some of any of the proposed embodiments, the IgSF domain of the second polypeptide is or contains an IgV domain. In some of any of the proposed embodiments, the IgSF domain of the second polypeptide is a variant of the NKp30 molecule containing L30V/A60V/S64P/S86G. In some of any of the proposed embodiments, the IgSF domain of the second polypeptide has the sequence set forth in SEQ ID NO: 504.

В некоторых из любых предлагаемых воплощений домен IgSF представляет собой или содержит домен IgV. В некоторых случаях вариантный полипептид ICOSL представляет собой или содержит домен IgV.In some of any of the proposed embodiments, the IgSF domain is or contains an IgV domain. In some cases, the variant ICOSL polypeptide is or contains an IgV domain.

В некоторых из любых предлагаемых воплощений вариантный полипептид ICOSL представляет собой или содержит домен IgV. В некоторых из любых предлагаемых воплощений вариантный полипептид ICOSL содержит аминокислотные модификации N52H/Q100R. В некоторых из любых предлагаемых воплощений вариантный полипептид ICOSL имеет последовательность, представленную в SEQ ID NO: 567. В некоторых из любых предлагаемых воплощений вариантный полипептид ICOSL включает аминокислотные модификации N52H/N57Y/Q100R. В некоторых из любых предлагаемых воплощений вариантный полипептид ICOSL имеет последовательность, представленную в SEQ ID NO: 565. В некоторых из любых предлагаемых воплощений вариантный полипептид ICOSL включает аминокислотные модификации N52L/N57H/Q100R. В некоторых из любых предлагаемых воплощений вариантный полипептид ICOSL имеет последовательность, представленную в SEQ ID NO: 761. В некоторых из любых предлагаемых воплощений вариантный полипептид ICOSL содержит модификации аминокислот N52H/N57Y/Q100P. В некоторых из любых предлагаемых воплощений вариантный полипептид ICOSL имеет последовательность, представленную в SEQ ID NO: 570. В некоторых из любых предлагаемых воплощений вариантный полипептид ICOSL включает аминокислотную модификацию N52D. В некоторых из любых предлагаемых воплощений полипептид имеет последовательность, представленную в SEQ ID NO: 548.In some of any of the proposed embodiments, the variant ICOSL polypeptide is or contains an IgV domain. In some of any of the proposed embodiments, the variant ICOSL polypeptide contains amino acid modifications N52H/Q100R. In some of any of the provided embodiments, the variant ICOSL polypeptide has the sequence set forth in SEQ ID NO: 567. In some of any of the provided embodiments, the variant ICOSL polypeptide includes the amino acid modifications N52H/N57Y/Q100R. In some of any of the provided embodiments, the variant ICOSL polypeptide has the sequence set forth in SEQ ID NO: 565. In some of any of the provided embodiments, the variant ICOSL polypeptide includes the amino acid modifications N52L/N57H/Q100R. In some of any of the provided embodiments, the variant ICOSL polypeptide has the sequence set forth in SEQ ID NO: 761. In some of any of the provided embodiments, the variant ICOSL polypeptide contains amino acid modifications N52H/N57Y/Q100P. In some of any of the provided embodiments, the variant ICOSL polypeptide has the sequence set forth in SEQ ID NO: 570. In some of any of the provided embodiments, the variant ICOSL polypeptide includes the N52D amino acid modification. In some of any of the provided embodiments, the polypeptide has the sequence set forth in SEQ ID NO: 548.

В некоторых из любых предлагаемых воплощений иммуномодулирующий белок содержит домен мультимеризации, связанный с одним или обоими из вариантов полипептида ICOSL или второго полипептида, содержащего домен IgSF. В некоторых случаях мультимеризационный домен представляет собой Fc-домен или его вариант с пониженной эффекторной функцией.In some of any of the proposed embodiments, the immunomodulatory protein comprises a multimerization domain linked to one or both of a variant ICOSL polypeptide or a second IgSF domain-containing polypeptide. In some cases, the multimerization domain is an Fc domain or a variant thereof with reduced effector function.

В некоторых из любых предлагаемых воплощений иммуномодулирующий белок является димерным. В некоторых случаях иммуномодулирующий белок является гомодимерным. В некоторых аспектах иммуномодулирующий белок является гетеродимерным.In some of any of the proposed embodiments, the immunomodulatory protein is dimeric. In some cases, the immunomodulatory protein is homodimeric. In some aspects, the immunomodulatory protein is heterodimeric.

В настоящем документе представлен конъюгат, содержащий любой из предлагаемых вариантных полипептидов ICOSL или любой из предоставленного иммуномодулирующего белка и гетерологичногоProvided herein is a conjugate comprising any of the provided ICOSL variant polypeptides or any of the provided immunomodulatory protein and a heterologous

- 11 044346 фрагмента. В некоторых случаях вариантный полипептид ICOSL прямо или опосредованно связан через линкер с гетерологичным фрагментом. В некоторых из любых предлагаемых воплощений нацеливающий фрагмент представляет собой белок, пептид, нуклеиновую кислоту, низкомолекулярное вещество или наночастицу. В некоторых примерах целевой фрагмент представляет собой белок или пептид. В некоторых из любых предлагаемых воплощений конъюгат представляет собой гибридный белок.- 11 044346 fragments. In some cases, the variant ICOSL polypeptide is linked directly or indirectly via a linker to a heterologous moiety. In some of any of the proposed embodiments, the targeting moiety is a protein, peptide, nucleic acid, small molecule, or nanoparticle. In some examples, the target fragment is a protein or peptide. In some of any of the proposed embodiments, the conjugate is a fusion protein.

Предоставлен гибридный белок, содержащий любой из предлагаемых вариантных полипептидов ICOSL или любой из предлагаемых иммуномодулирующего белка и гетерологичного фрагмента. В некоторых случаях фрагмент представляет собой нацеливающий фрагмент, который специфически связывается с молекулой на поверхности клетки. В некоторых примерах нацеливающий фрагмент специфически связывается с молекулой на поверхности иммунной клетки. В некоторых из любых предлагаемых воплощений иммунная клетка представляет собой антигенпрезентирующую клетку или лимфоцит. В некоторых случаях нацеливающий фрагмент представляет собой локализующий опухоль фрагмент, который связывается с молекулой на поверхности опухоли.Provided is a fusion protein comprising any of the proposed ICOSL variant polypeptides or any of the proposed immunomodulatory protein and heterologous fragment. In some cases, the fragment is a targeting fragment that specifically binds to a molecule on the surface of a cell. In some examples, the targeting moiety specifically binds to a molecule on the surface of an immune cell. In some of any of the proposed embodiments, the immune cell is an antigen presenting cell or lymphocyte. In some cases, the targeting moiety is a tumor-localizing moiety that binds to a molecule on the surface of the tumor.

В некоторых из предлагаемых воплощений нацеливающий фрагмент связывается с молекулой HER1/EGFR, HER2/ERBB2, CD20, CD25 (рецептор IL-2Ra), CD33, CD52, CD133, CD206, CEA, CEACAM1, CEACAM3, CEACAM5, CEACAM6, раковый антиген 125 (CA125), альфа-фетопротеина (AFP), Льюис Y, TAG72, каприн-1, мезотелина, рецептора PDGF (PDGFR; такого как PDGF-Ra), PD-1, PD-L1, CTLA- 4, рецептора IL-2, фактора роста эндотелия сосудов (VEGF), CD30, EpCAM, EphA2, глипикана-3, gpA33, муцинов, CAIX, PSMA, фолат-связывающего белка, ганглиозидов (такие как GD2, GD3, GM1 и GM2), рецептора VEGF (VEGFR), VEGFR2, VEGF-A, интегрина aVe3, интегрина α5β1, ERBB3, MET, IGF1R, EPHA3, TRAILR1, TRAILR2, RANKL, FAP, тенасцина, AFP, комплекса BCR, CD3, CD18, CD44, CTL, CTL-4, gp72, HLA-DR 10 β, антигена HLA-DR, IgE, MUC-1, nuC242, антигена PEM, металлопротеиназ, рецептора эфрина, лигандов эфрина, рецептора HGF, CXCR4, CXCR4, рецептора бомбезина, антигена SK-1, Bcr-ab1, RET, MET, TRKB, TIE2, ALK, ROS, EML4-ALK, ROS1, BRAFV600E, SRC, c-KIT, mTOR, TSC1, TSC2, BTK, KIT, BRCA, CDK 4/6, JAK1, JAK2, BRAF, FLT-3, MEK1, MEK2, SMO или B7-H6 (NCR3LG1). В некоторых аспектах нацеливающий фрагмент связывается с PD-L1.In some of the proposed embodiments, the targeting moiety binds to the molecule HER1/EGFR, HER2/ERBB2, CD20, CD25 (IL-2Ra receptor), CD33, CD52, CD133, CD206, CEA, CEACAM1, CEACAM3, CEACAM5, CEACAM6, cancer antigen 125 ( CA125), alpha-fetoprotein (AFP), Lewis Y, TAG72, caprin-1, mesothelin, PDGF receptor (PDGFR; such as PDGF-Ra), PD-1, PD-L1, CTLA-4, IL-2 receptor, vascular endothelial growth factor (VEGF), CD30, EpCAM, EphA2, glypican-3, gpA33, mucins, CAIX, PSMA, folate binding protein, gangliosides (such as GD2, GD3, GM1 and GM2), VEGF receptor (VEGFR), VEGFR2, VEGF-A, aVe3 integrin, α5β1 integrin, ERBB3, MET, IGF1R, EPHA3, TRAILR1, TRAILR2, RANKL, FAP, tenascin, AFP, BCR complex, CD3, CD18, CD44, CTL, CTL-4, gp72, HLA -DR 10 β, HLA-DR antigen, IgE, MUC-1, nuC242, PEM antigen, metalloproteinases, ephrin receptor, ephrin ligands, HGF receptor, CXCR4, CXCR4, bombesin receptor, SK-1 antigen, Bcr-ab1, RET, MET, TRKB, TIE2, ALK, ROS, EML4-ALK, ROS1, BRAFV600E, SRC, c-KIT, mTOR, TSC1, TSC2, BTK, KIT, BRCA, CDK 4/6, JAK1, JAK2, BRAF, FLT-3 , MEK1, MEK2, SMO or B7-H6 (NCR3LG1). In some aspects, the targeting moiety binds to PD-L1.

В некоторых из любых предлагаемых воплощений нацеливающий фрагмент представляет собой антитело или антигенсвязывающий фрагмент. В некоторых из предлагаемых воплощений антитело выбрано из цетуксимаба, панитумумаба, залутумумаба, нимотузумаба, трастузумаба, адотрастумумаба, эмтансина, тозитумомаба (Bexxar®), ритуксимаба (Rituxan, Mabthera), Ибритумомаб тиуксетана (Zevalin), даклизумаба (Zenapax), гемтузумаба (Mylotarg), алемтузумаба, фрагмента Fab CEA-скана, моноклонального антитела OC125, ab75705, B72.3, бевацизумаба (Avastin®), афатиниба, акситиниба, бозутиниба, кабозантиниба, церитиниба, кризотиниба, дабрафениба, дасатиниба, динутуксимаба (UnituxinTM), эрлотиниба, эверолимуса, ибрутиниба, иматиниба, лапатиниба, ленватиниба, нилотиниба, олапариба, оларатумаба (LartruvoTM), палбоциклиба, пазопаниба, пертузумаба (Perjeta®), рамукирумаба (Cyramza®), регорафениба, руксолитиниба, сорафениба, сунитиниба, темсиролимуса, траметиниба, вандетаниба, вемурафениба, висмодегиба, базиликсимаба, ипилимумаба, ниволумаба, пембролизумаба, MPDL3280A, пидилизумаба (CT-011), AMP-224, MSB001078C или MEDI4736, BMS-935559, LY3300054, атезолизумаба, авелумаба или дурвалумаба или представляет собой их антигенсвязывающий фрагмент.In some of any of the proposed embodiments, the targeting fragment is an antibody or antigen binding fragment. In some of the proposed embodiments, the antibody is selected from cetuximab, panitumumab, zalutumumab, nimotuzumab, trastuzumab, adotrastumumab, emtansine, tositumomab (Bexxar®), rituximab (Rituxan, Mabthera), Ibritumomab tiuxetan (Zevalin), daclizumab (Zenapax), gemtuzumab (Mylotar g) , alemtuzumab, Fab CEA scan fragment, monoclonal antibody OC125, ab75705, B72.3, bevacizumab (Avastin®), afatinib, axitinib, bosutinib, cabozantinib, ceritinib, crizotinib, dabrafenib, dasatinib, dinutuximab (UnituxinTM), erlotinib, everolimus, ibrutinib, imatinib, lapatinib, lenvatinib, nilotinib, olaparib, olaratumab (LartruvoTM), palbociclib, pazopanib, pertuzumab (Perjeta®), ramukirumab (Cyramza®), regorafenib, ruxolitinib, sorafenib, sunitinib, temsirolimus, trametinib, vandetani ba, vemurafenib, vismodegib , basiliximab, ipilimumab, nivolumab, pembrolizumab, MPDL3280A, pidilizumab (CT-011), AMP-224, MSB001078C or MEDI4736, BMS-935559, LY3300054, atezolizumab, avelumab or durvalumab, or is an antigen-binding fragment thereof.

В некоторых из любых предлагаемых воплощений вариантный полипептид ICOSL прямо или опосредованно связан через линкер с N-концом тяжелой и/или легкой цепи антитела или антигенсвязывающего фрагмента. В некоторых случаях вариантный полипептид ICOSL прямо или опосредованно связан через линкер с C-концом тяжелой и/или легкой цепи антитела или антигенсвязывающего фрагмента.In some of any of the proposed embodiments, the variant ICOSL polypeptide is directly or indirectly linked via a linker to the N-terminus of the heavy and/or light chain of the antibody or antigen binding fragment. In some cases, the variant ICOSL polypeptide is linked directly or indirectly via a linker to the C-terminus of the heavy and/or light chain of an antibody or antigen binding fragment.

В некоторых из любых предлагаемых воплощений конъюгат является двухвалентным, четырехвалентным, шестивалентным или восьмивалентным. В некоторых из любых предлагаемых воплощений гетерологичный фрагмент представляет собой или содержит метку для обнаружения или очистки вариантного полипептида ICOSL.In some of any of the proposed embodiments, the conjugate is divalent, tetravalent, hexavalent or octavalent. In some of any of the proposed embodiments, the heterologous fragment is or contains a tag for detecting or purifying a variant ICOSL polypeptide.

В данном документе представлен одновалентный гибридный белок, содержащий вариантный полипептид ICOSL, содержащий одну или несколько модификаций аминокислот в домене суперсемейства иммуноглобулинов (IgSF) референсного полипептида ICOSL, где вариантный полипептид ICOSL демонстрирует измененное связывание с эктодоменом(ами) ICOS или CD28 по сравнению со связыванием референсного полипептида ICOSL с тем же эктодоменом(ами); и метку для обнаружения или очистки вариантного полипептида ICOSL. В некоторых из любого из предлагаемых воплощений метка для обнаружения или очистки выбрана из полигистидиновой (His) метки, FLAG-метки, Myc-метки или метки из флуоресцентного белка.Provided herein is a monovalent fusion protein comprising a variant ICOSL polypeptide containing one or more amino acid modifications in the immunoglobulin superfamily (IgSF) domain of the reference ICOSL polypeptide, wherein the variant ICOSL polypeptide exhibits altered binding to the ICOS or CD28 ectodomain(s) compared to that of the reference an ICOSL polypeptide with the same ectodomain(s); and a tag for detecting or purifying the ICOSL variant polypeptide. In some of any of the proposed embodiments, the detection or purification tag is selected from a polyhistidine (His) tag, a FLAG tag, a Myc tag, or a fluorescent protein tag.

В некоторых из любых предлагаемых воплощений вариантный полипептид ICOSL содержит одну или несколько аминокислотных модификаций в положении, соответствующем положению (положениям), выбранному из 10, 11, 13, 16, 18, 20, 25, 27, 30, 33, 37, 38, 42, 43, 47, 52, 54, 57, 61, 62, 67, 71, 72, 74, 75, 77, 78, 80, 84, 89, 90, 92, 93, 94, 96, 97, 98, 99, 100, 102, 103, 107, 109, 110, 111, 113, 115, 116, 117, 119, 120, 121, 122, 126, 129, 130, 132, 133, 135, 138, 139, 140, 142, 143, 144, 146, 148, 151, 152, 153, 154, 155, 156, 158, 161, 164, 166, 168, 172, 173, 175, 190, 192, 193, 194, 198, 201, 203, 207, 208, 210, 212, 217, 218,In some of any of the proposed embodiments, the variant ICOSL polypeptide contains one or more amino acid modifications at a position corresponding to position(s) selected from 10, 11, 13, 16, 18, 20, 25, 27, 30, 33, 37, 38, 42, 43, 47, 52, 54, 57, 61, 62, 67, 71, 72, 74, 75, 77, 78, 80, 84, 89, 90, 92, 93, 94, 96, 97, 98, 99, 100, 102, 103, 107, 109, 110, 111, 113, 115, 116, 117, 119, 120, 121, 122, 126, 129, 130, 132, 133, 135, 138, 139, 14 0, 142, 143, 144, 146, 148, 151, 152, 153, 154, 155, 156, 158, 161, 164, 166, 168, 172, 173, 175, 190, 192, 193, 194, 198, 2 01, 203, 207, 208, 210, 212, 217, 218,

- 12 044346- 12 044346

220, 221, 224, 225 или 227 относительно SEQ ID NO: 32. В некоторых из любых предлагаемых воплощений вариантный полипептид ICOSL содержит одну или несколько аминокислотных модификаций в положении, соответствующем положению (положениям), выбранному из 10, 11, 13, 16, 18, 20, 25, 26, 27, 30, 33, 37, 38, 42, 43, 47, 52, 54, 57, 61, 62, 67, 71, 72, 74, 75, 77, 78, 80, 84, 89, 90, 92, 93, 94, 96, 97, 98, 99, 100, 102, 103, 107, 109, 110, 111, 113, 115, 116, 117, 119, 120, 121, 122, 126, 129, 130, 132, 133, 135, 137, 138, 139, 140, 142, 143, 144, 146, 151, 152, 153, 154, 155, 156, 158, 161, 164, 166, 168, 172, 173, 175, 190, 192, 193, 194, 198, 201, 203, 207, 208, 210, 212, 217, 218, 220, 221, 224, 225 или 227 относительно SEQ ID NO: 32.220, 221, 224, 225 or 227 relative to SEQ ID NO: 32. In some of any of the provided embodiments, the variant ICOSL polypeptide contains one or more amino acid modifications at a position corresponding to position(s) selected from 10, 11, 13, 16, 18, 20, 25, 26, 27, 30, 33, 37, 38, 42, 43, 47, 52, 54, 57, 61, 62, 67, 71, 72, 74, 75, 77, 78, 80, 84, 89, 90, 92, 93, 94, 96, 97, 98, 99, 100, 102, 103, 107, 109, 110, 111, 113, 115, 116, 117, 119, 120, 121, 122, 126, 129, 130, 132, 133, 135, 137, 138, 139, 140, 142, 143, 144, 146, 151, 152, 153, 154, 155, 156, 158, 161, 164, 166, 1 68, 172, 173, 175, 190, 192, 193, 194, 198, 201, 203, 207, 208, 210, 212, 217, 218, 220, 221, 224, 225, or 227 relative to SEQ ID NO: 32.

В некоторых случаях одна или несколько модификаций аминокислот выбраны из M10V, M10I, V11E, S13G, E16V, S18R, A20V, S25G, F27S, F27C, N30D, Y33del, Q37R, K42E, T43A, Y47H, N52A, N52C, N52D, N52G, N52H, N52K, N52L, N52M, N52Q, N52R, N52S, N52T, N52V, N52Y, N52K, S54A, S54P, N57A, N57D, N57E, N57F, N57H, N57K, N57L, N57M, N57P N57S, N57T, N57V, N57Y, N57W, R61S, R61C, Y62F, L67P, A71T, G72R, L74Q, R75Q, D77G, F78L, L80P, N84Q, E90A, K92R, F93L, H94E, H94D, L96F, L96I L98F, S99G, Q100A, Q100D, Q100G, Q100K, Q100L, Q100M, Q100N, Q100P, Q100R, Q100S, Q100T, Q100V, L102R, G103E, V107A, V107I, S109G, S109N, V110D, V1101, V1103 H115R, H115Q, V116A, A117T, N119Q, F120I, S121G, V122A, V122M, F120S, S126T, S126R, H129P, S130G, S132F, Q133H, E135K, F138L, T139S, I143, T39S, I403 Y146C, V151A, Y152C, Y152H, W153R, I154F, N155H, N155Q, K156M, D158G, L161P, L161M, L166Q, N168Q, F172S, L173S, M175T, T190A, T19G195 L203P, L203F, N207Q, L208P, V210A, S212G, D217V, I218T, I218N, E220G, R221G, R221I, I224V, T225A, N227K или их консервативной аминокислотной замены. В некоторых случаях одна или несколько аминокислотных модификаций выбираются из M10V, M10I, V11E, S13G, E16V, S18R, A20T, A20V, S25G, R26S, F27C, F27S, N30D, Y33del, Q37R, T38P, K42E, T43A, Y47H, N52A, N52C, N52D, N52G, N52H, N52K, N52L, N52M, N52P, N52Q, N52R, N52S, N52T, N52V, N52Y, S54A, S54F, S54P, N57A, N57D, N57E, N57F, N57H N57L, N57M, N57P, N57Q, N57S, N57T, N57V, N57W, N57Y, R61C, R61S, Y62F, L67P, A71T, G72R, L74Q, R75Q, D77G, F78L, L80P, N84Q, D89G, E90A, K92R, F92R H94D, H94E, L96F, L96I, V97A, L98F, S99G, Q100A, Q100D, Q100E, Q100G, Q100K, Q100L, Q100M, Q100N, Q100P, Q100R, Q100S, Q100T, Q100V, L102R, G103E, V107A, V107A, V107A, V107A, V107A S109N, V110A, V110D, V110N, E111del, T113E, H115Q, H115R, V116A, A117T, N119Q, F120I, F120S, S121G, V122A, V122M, S126R, S126T, H129P, T1F1, S3G130B, S2G5 T139S, C140del, C140D, S142F, I143T, I143V, N144D, Y146C, V151A, Y152C, Y152H, W153R, I154F, N155H, N155Q, K156M, D158G, L161M, L161162, L161Q, L161S, M16L 75T, T190A, T190S, S192G, V193A, V193M, N194D, C198R, N201S, L203F, L203P, N207Q, L208P, V210A, S212G, D217G, D217V, I218N, I218, R220, I22, R220 T225S, N227K или их консервативной аминокислотной замены.In some cases, one or more amino acid modifications are selected from M10V, M10I, V11E, S13G, E16V, S18R, A20V, S25G, F27S, F27C, N30D, Y33del, Q37R, K42E, T43A, Y47H, N52A, N52C, N52D, N52G, N52H, N52K, N52L, N52M, N52Q, N52R, N52S, N52T, N52V, N52Y, N52K, S54A, S54P, N57A, N57D, N57E, N57F, N57H, N57K, N57L, N57M, N57P N57S, N57T, N57 V,N57Y , N57W, R61S, R61C, Y62F, L67P, A71T, G72R, L74Q, R75Q, D77G, F78L, L80P, N84Q, E90A, K92R, F93L, H94E, H94D, L96F, L96I L98F, S99G, Q100A, Q100D , Q100G, H115R, H115Q, V11 6A, A117T, N119Q, F120I, S121G, V122A , V122M, F120S, S126T, S126R, H129P, S130G, S132F, Q133H, E135K, F138L, T139S, I143, T39S, I403 Y146C, V151A, Y152C, Y152H, W153R, I154F, N155 H, N155Q, K156M, D158G, L161P, L161M, L166Q, N168Q, F172S, L173S, M175T, T190A, T19G195 L203P, L203F, N207Q, L208P, V210A, S212G, D217V, I218T, I218N, E220G, R221G, R221I, I 224V, T225A, N227K or their conservative amino acid substitution. In some cases, one or more amino acid modifications are selected from M10V, M10I, V11E, S13G, E16V, S18R, A20T, A20V, S25G, R26S, F27C, F27S, N30D, Y33del, Q37R, T38P, K42E, T43A, Y47H, N52A, N52C, N52D, N52G, N52H, N52K, N52L, N52M, N52P, N52Q, N52R, N52S, N52T, N52V, N52Y, S54A, S54F, S54P, N57A, N57D, N57E, N57F, N57H N57L, N57M, N57 P,N57Q , N57S, N57T, N57V, N57W, N57Y, R61C, R61S, Y62F, L67P, A71T, G72R, L74Q, R75Q, D77G, F78L, L80P, N84Q, D89G, E90A, K92R, F92R H94D, H94E, L96F, L 96I, V97A, L98F, S99G, Q100A, Q100D, Q100E, Q100G, Q100K, Q100L, Q100M, Q100N, Q100P, Q100R, Q100S, Q100T, Q100V, L102R, G103E, V107A, V107A, V107A , V107A, V107A S109N, V110A, V110D , V110N, E111del, T113E, H115Q, H115R, V116A, A117T, N119Q, F120I, F120S, S121G, V122A, V122M, S126R, S126T, H129P, T1F1, S3G130B, S2G5 T139S, C 140del, C140D, S142F, I143T, I143V, N144D, Y146C, V151A, Y152C, Y152H, W153R, I154F, N155H, N155Q, K156M, D158G, L161M, L161162, L161Q, L161S, M16L 75T, T190A, T190S, S192G, V19 3A, V193M, N194D, C198R, N201S, L203F , L203P, N207Q, L208P, V210A, S212G, D217G, D217V, I218N, I218, R220, I22, R220 T225S, N227K or their conservative amino acid substitution.

В некоторых из любых предлагаемых воплощений референсный полипептид ICOSL содержит (i) аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 32, (ii) аминокислотную последовательность, которая имеет, по меньшей мере, 95% идентичности последовательности с SEQ ID NO: 32; или (iii) часть (i) или (ii), содержащую домен IgV или домен IgC или их специфически связывающие фрагменты, или и то, и другое.In some of any of the provided embodiments, the ICOSL reference polypeptide comprises (i) an amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 32, (ii) an amino acid sequence that has at least 95% sequence identity with SEQ ID NO: 32; or (iii) part (i) or (ii) containing an IgV domain or an IgC domain or specific binding fragments thereof, or both.

В некоторых из любых предлагаемых воплощений референсный полипептид ICOSL включает аминокислотную последовательность, представленную в любой из SEQ ID NO: 196, 545, 600-605 и 623-628. В некоторых аспектах референсный полипептид ICOSL состоит из аминокислотной последовательности, представленной в любой из SEQ ID NO: 32, 196, 545, 600-605 и 623-628.In some of any of the provided embodiments, the ICOSL reference polypeptide includes the amino acid sequence presented in any of SEQ ID NOs: 196, 545, 600-605 and 623-628. In some aspects, the ICOSL reference polypeptide consists of an amino acid sequence set forth in any of SEQ ID NOs: 32, 196, 545, 600-605, and 623-628.

Предлагается молекула (молекулы) нуклеиновой кислоты, кодирующая любой из предлагаемых вариантных полипептидов ICOSL, иммуномодулирующих белков или гибридных белков. В некоторых случаях молекула (молекулы) нуклеиновой кислоты является синтетической нуклеиновой кислотой. В некоторых примерах молекула (молекулы) нуклеиновой кислоты представляет собой кДНК.Provided are nucleic acid molecule(s) encoding any of the proposed ICOSL variant polypeptides, immunomodulatory proteins or fusion proteins. In some cases, the nucleic acid molecule(s) is a synthetic nucleic acid. In some examples, the nucleic acid molecule(s) is cDNA.

Предлагается вектор, содержащий любую из предлагаемых молекул нуклеиновой кислоты. В некоторых случаях вектор является экспрессирующим вектором. В некоторых из любых предлагаемых воплощений вектор представляет собой экспрессирующий вектор млекопитающего или вирусный вектор.A vector is provided containing any of the proposed nucleic acid molecules. In some cases, the vector is an expression vector. In some of any of the provided embodiments, the vector is a mammalian expression vector or a viral vector.

Предлагается клетка, содержащая любой из предлагаемых векторов. В некоторых случаях клетка является клеткой млекопитающего. В некоторых из любых предлагаемых воплощений клетка представляет собой клетку яичника китайского хомячка (CHO) или ее производное.A cell containing any of the proposed vectors is proposed. In some cases, the cell is a mammalian cell. In some of any of the proposed embodiments, the cell is a Chinese hamster ovary (CHO) cell or a derivative thereof.

Предлагается способ получения иммуномодулирующего белка, содержащего любой из вариантных полипептидов ICOSL, включающий введение любой из предлагаемых молекул нуклеиновой кислоты или векторов в клетку-хозяина в условиях для экспрессии белка в клетке. В некоторых примерах клеткахозяин представляет собой клетку млекопитающего. В некоторых случаях клетка млекопитающего представляет собой клетку яичника китайского хомяка или ее производное. В некоторых из любых предлагаемых воплощений способ дополнительно включает выделение или очистку белка из клетки.A method is proposed for producing an immunomodulatory protein containing any of the variant ICOSL polypeptides, including introducing any of the proposed nucleic acid molecules or vectors into a host cell under conditions for expression of the protein in the cell. In some examples, the host cell is a mammalian cell. In some cases, the mammalian cell is a Chinese hamster ovary cell or a derivative thereof. In some of any of the proposed embodiments, the method further includes isolating or purifying the protein from the cell.

Предлагается белок, полученный любым из предлагаемых способов.Protein obtained by any of the proposed methods is offered.

Предлагается композиция, содержащая белок, содержащий любой из предлагаемых вариантных полипептидов ICOSL или иммуномодулирующих белков, где, по меньшей мере, 95, 96, 97, 98, 99% отдельных последовательностей белка или иммуномодулирующего белка в композиции имеют одинаковуюProvided is a composition comprising a protein comprising any of the proposed variant ICOSL polypeptides or immunomodulatory proteins, wherein at least 95, 96, 97, 98, 99% of the individual protein or immunomodulatory protein sequences in the composition have the same

- 13 044346 длину последовательности, необязательно, где композиция представляет собой фармацевтическую композицию, содержащую фармацевтически приемлемый носитель. В некоторых из любых предлагаемых воплощений белок или иммуномодулирующий белок очищают из клеток яичника китайского хомяка или их производного.- 13 044346 sequence length, optionally, where the composition is a pharmaceutical composition containing a pharmaceutically acceptable carrier. In some of any of the proposed embodiments, the protein or immunomodulatory protein is purified from Chinese hamster ovary cells or a derivative thereof.

Предлагается полинуклеотид, содержащий нуклеиновую кислоту, кодирующую вариантный полипептид ICOSL, содержащий предлагаемый трансмембранный домен, и одну или несколько нуклеиновых кислот, кодирующих одну или несколько цепей рекомбинантного антигенного рецептора. В некоторых случаях рекомбинантный рецептор антигена представляет собой химерный антигенный рецептор (CAR) или сконструированный T-клеточный рецептор (TCR). В некоторых из любых предлагаемых воплощений каждая из нуклеиновых кислот, кодирующих вариантный полипептид ICOSL, и одной или нескольких нуклеиновых кислот, кодирующих одну или несколько цепей рекомбинантного рецептора, отделена нуклеиновой кислотой, кодирующей саморасщепляющийся пептид или пептид, который вызывает проскок рибосомы.A polynucleotide is provided containing a nucleic acid encoding a variant ICOSL polypeptide containing the proposed transmembrane domain, and one or more nucleic acids encoding one or more chains of a recombinant antigen receptor. In some cases, the recombinant antigen receptor is a chimeric antigen receptor (CAR) or an engineered T-cell receptor (TCR). In some of any of the present embodiments, each of the nucleic acids encoding the variant ICOSL polypeptide and one or more nucleic acids encoding one or more recombinant receptor chains is separated by a nucleic acid encoding a self-cleaving peptide or a peptide that causes ribosome slippage.

В некоторых примерах полинуклеотид содержит нуклеиновую кислоту, кодирующую вариантный полипептид ICOSL, нуклеиновую кислоту, кодирующую саморасщепляющийся пептид или пептид, который вызывает проскок рибосомы, и нуклеиновую кислоту, кодирующую CAR. В некоторых примерах полинуклеотид включает нуклеиновую кислоту, кодирующую вариантный полипептид ICOSL, нуклеиновую кислоту, кодирующую первый саморасщепляющийся пептид или пептид, который вызывает проскок рибосомы, нуклеиновую кислоту, кодирующую одну сконструированную цепь TCR-альфа или сконструированную цепь TCR-бета, нуклеиновую кислоту, кодирующую второй саморасщепляющийся пептид или пептид, который вызывает проскок рибосомы, и нуклеиновую кислоту, кодирующую другую сконструированную цепь TCR-альфа или сконструированную цепь TCR-бета. В некоторых аспектах кодированный первый и второй саморасщепляющиеся пептиды является одинаковыми. В некоторых из любых предлагаемых воплощений саморасщепляющийся пептид или пептид, который вызывает проскок рибосомы, представляет собой T2A, P2A, E2A или F2A.In some examples, the polynucleotide comprises a nucleic acid encoding a variant ICOSL polypeptide, a nucleic acid encoding a self-cleaving peptide or a peptide that causes ribosome slipping, and a nucleic acid encoding a CAR. In some examples, the polynucleotide includes a nucleic acid encoding a variant ICOSL polypeptide, a nucleic acid encoding a first self-cleaving peptide or a peptide that causes ribosomal escape, a nucleic acid encoding one engineered TCR alpha chain or an engineered TCR beta chain, a nucleic acid encoding a second a self-cleaving peptide or a peptide that causes ribosome slippage, and a nucleic acid encoding another engineered TCR-alpha chain or an engineered TCR-beta chain. In some aspects, the encoded first and second self-cleaving peptides are the same. In some of any of the provided embodiments, the self-cleaving peptide or the peptide that causes ribosome slippage is T2A, P2A, E2A, or F2A.

Предлагается вектор, содержащий любой из предлагаемых полинуклеотидов. В некоторых случаях вектор является вирусным вектором. В некоторых из любых предлагаемых воплощений вирусный вектор представляет собой ретровирусный вектор или лентивирусный вектор.A vector containing any of the proposed polynucleotides is provided. In some cases, the vector is a viral vector. In some of any of the proposed embodiments, the viral vector is a retroviral vector or a lentiviral vector.

Предлагается сконструированная клетка, содержащая любой из предлагаемых полинуклеотидов или векторов. Также предлагается сконструированная клетка, содержащая любой из предлагаемых вариантов полипептидов ICOSL, иммуномодулирующих белков или гибридных белков.An engineered cell containing any of the proposed polynucleotides or vectors is provided. Also provided is an engineered cell containing any of the proposed variants of ICOSL polypeptides, immunomodulatory proteins or fusion proteins.

Предлагается сконструированная клетка, содержащая любую из предлагаемых нуклеотидных молекул или векторов. В некоторых случаях нуклеиновая кислота, кодирующая вариантный полипептид ICOSL, иммуномодулирующий белок или гибридный белок, кодирует сигнальный пептид. В некоторых из любых предлагаемых воплощений вариантный полипептид ICOSL, иммуномодулирующего белка или гибридного белка не содержит трансмембранный домен и/или не экспрессируется на поверхности клетки. В некоторых из любых предлагаемых воплощений вариантный полипептид ICOSL, иммуномодулирующий белок или гибридный белок секретируется из сконструированной клетки. В некоторых аспектах сконструированная клетка содержит вариантный полипептид ICOSL, содержащий трансмембранный домен. В некоторых аспектах вариантный полипептид ICOSL экспрессируется на поверхности клетки.An engineered cell containing any of the proposed nucleotide molecules or vectors is provided. In some cases, the nucleic acid encoding a variant ICOSL polypeptide, immunomodulatory protein, or fusion protein encodes a signal peptide. In some of any of the proposed embodiments, the variant ICOSL, immunomodulatory protein, or fusion protein polypeptide does not contain a transmembrane domain and/or is not expressed on the cell surface. In some of any of the proposed embodiments, the variant ICOSL polypeptide, immunomodulatory protein, or fusion protein is secreted from the engineered cell. In some aspects, the engineered cell comprises a variant ICOSL polypeptide containing a transmembrane domain. In some aspects, the variant ICOSL polypeptide is expressed on the surface of a cell.

В некоторых из любых предлагаемых воплощений клетка представляет собой иммунную клетку. В некоторых случаях иммунная клетка представляет собой антигенпрезентирующую клетку (APC) или лимфоцит. В некоторых примерах сконструированная ячейка является первичной клеткой. В некоторых случаях клетка является клеткой млекопитающего. В некоторых случаях клетка является клеткой человека. В некоторых из любых предлагаемых воплощений лимфоцит представляет собой T-клетку. В некоторых примерах сконструированная ячейка является APC, а APC является искусственной APC.In some of any of the proposed embodiments, the cell is an immune cell. In some cases, the immune cell is an antigen presenting cell (APC) or lymphocyte. In some examples, the engineered cell is a primary cell. In some cases, the cell is a mammalian cell. In some cases, the cell is a human cell. In some of any of the proposed embodiments, the lymphocyte is a T cell. In some examples, the engineered cell is an APC and the APC is an artificial APC.

В некоторых из любых предлагаемых воплощений сконструированная клетка дополнительно включает химерный антигенный рецептор (CAR) или сконструированный T-клеточный рецептор.In some of any of the proposed embodiments, the engineered cell further includes a chimeric antigen receptor (CAR) or an engineered T-cell receptor.

Предлагается инфекционный агент, содержащий нуклеотидную молекулу, кодирующую предлагаемый вариантный полипептид ICOSL или предлагаемый иммуномодулирующий белок, предлагаемый гибридный белок. В некоторых случаях кодируемый вариантный полипептид ICOSL, иммуномодулирующий белок или гибридный белок не содержит трансмембранный домен и/или не экспрессируется на поверхности клетки, в которой он экспрессируется. В некоторых из любых предлагаемых воплощений кодируемый вариантный полипептид ICOSL, иммуномодулирующий белок или гибридный белок секретируется из инфекционного агента, когда он экспрессируется. В некоторых случаях кодированный вариантный полипептид ICOSL включает трансмембранный домен.An infectious agent is provided that contains a nucleotide molecule encoding the proposed variant ICOSL polypeptide or the proposed immunomodulatory protein, the proposed fusion protein. In some cases, the encoded ICOSL variant polypeptide, immunomodulatory protein, or fusion protein does not contain a transmembrane domain and/or is not expressed on the surface of the cell in which it is expressed. In some of any of the proposed embodiments, the encoded ICOSL variant polypeptide, immunomodulatory protein, or fusion protein is secreted from the infectious agent when it is expressed. In some cases, the encoded variant ICOSL polypeptide includes a transmembrane domain.

В некоторых из любых предлагаемых воплощений кодированный вариантный полипептид ICOSL экспрессируется на поверхности клетки, в которой он экспрессируется. В некоторых случаях инфекционным агентом является бактерия или вирус. В некоторых из любых предлагаемых воплощений вирус представляет собой онколитический вирус. В некоторых примерах онколитический вирус представляет собой аденовирусы, адено-ассоциированные вирусы, вирусы герпеса, вирус простого герпеса, вирус желудочно-кишечного тракта, реовирус, вирус ньюкаслской болезни, парвовирус, вирус кори, вирус вези- 14 044346 кулярного стоматита (VSV), вирус Коксаки или вирус осповакцины.In some of any of the proposed embodiments, the encoded variant ICOSL polypeptide is expressed on the surface of the cell in which it is expressed. In some cases, the infectious agent is a bacteria or virus. In some of any of the proposed embodiments, the virus is an oncolytic virus. In some examples, the oncolytic virus is adenovirus, adeno-associated virus, herpes virus, herpes simplex virus, gastrointestinal virus, reovirus, Newcastle disease virus, parvovirus, measles virus, vesicular stomatitis virus (VSV), virus Coxsackie or vaccinia virus.

В некоторых из любых предлагаемых воплощений вирус специфически воздействует на дендритные клетки (DC) и/или является тропным по отношению к дендритным клеткам. В некоторых случаях вирус представляет собой лентивирусный вектор, который псевдотипируется с помощью модифицированного продукта оболочки вируса Синдбис. В некоторых из любых предлагаемых воплощений инфекционный агент дополнительно включает нуклеотидную молекулу, кодирующую дополнительный генный продукт, который приводит к гибели клетки-мишени или который может увеличивать или усиливать иммунный ответ. В некоторых из любых предлагаемых воплощений дополнительный генный продукт выбирают из противоопухолевого агента, антиметастатического агента, антиангиогенного агента, иммуномодулирующей молекулы, ингибитора иммунной контрольной точки, антитела, цитокина, фактора роста, антигена, продукта цитотоксического гена, продукта проапоптотического гена, продукта антиапоптотического гена, гена деградации клеточной матрицы, гена регенерации тканей или перепрограммирования соматических клеток человека в плюрипотентные.In some of any of the proposed embodiments, the virus specifically targets dendritic cells (DC) and/or is tropic for dendritic cells. In some cases, the virus is a lentiviral vector that is pseudotyped using a modified Sindbis virus envelope product. In some of any of the proposed embodiments, the infectious agent further includes a nucleotide molecule encoding an additional gene product that leads to the death of the target cell or that can increase or enhance the immune response. In some of any of the provided embodiments, the additional gene product is selected from an antineoplastic agent, antimetastatic agent, an antiangiogenic agent, an immunomodulatory molecule, an immune checkpoint inhibitor, an antibody, a cytokine, a growth factor, an antigen, a cytotoxic gene product, a proapoptotic gene product, an antiapoptotic gene product, a gene degradation of the cellular matrix, tissue regeneration gene or reprogramming of human somatic cells into pluripotent ones.

Предлагается фармацевтическая композиция, содержащая любой из вариантных полипептидов ICOSL, иммуномодулирующих белков, конъюгатов или гибридных белков или любые из предлагаемых сконструированных клеток или инфекционных агентов. В некоторых из любых предлагаемых воплощений фармацевтическая композиция содержит фармацевтически приемлемый наполнитель. В некоторых из любых предлагаемых воплощений фармацевтическая композиция является стерильной.A pharmaceutical composition is provided containing any of the variant ICOSL polypeptides, immunomodulatory proteins, conjugates or fusion proteins, or any of the proposed engineered cells or infectious agents. In some of any of the proposed embodiments, the pharmaceutical composition contains a pharmaceutically acceptable excipient. In some of any of the proposed embodiments, the pharmaceutical composition is sterile.

В некоторых из любых предлагаемых воплощений предлагается изделие, содержащее фармацевтическую композицию во флаконе. В некоторых случаях флакон запечатан.In some of any of the proposed embodiments, a product is provided containing a pharmaceutical composition in a vial. In some cases, the bottle is sealed.

Предлагается набор, содержащий любую из предлагаемых композиций и инструкции по применению. Также предлагается набор, содержащий любое из предлагаемых изделий и инструкции по применению.A set is offered containing any of the proposed compositions and instructions for use. A kit containing any of the proposed products and instructions for use is also offered.

Предлагается способ модулирования иммунного ответа у объекта, включающий введение фармацевтической композиции объекту. Также предлагается способ модулирования иммунного ответа у объекта, включающий введение сконструированных клеток. В некоторых случаях сконструированные клетки являются аутологичными для объекта. В некоторых из любых предлагаемых воплощений сконструированные клетки являются аллогенными для объекта.A method is proposed for modulating the immune response in a subject, which includes administering a pharmaceutical composition to the subject. Also proposed is a method of modulating the immune response in a subject, including the introduction of engineered cells. In some cases, the engineered cells are autologous to the subject. In some of any of the proposed embodiments, the engineered cells are allogeneic to the subject.

В некоторых из любых предлагаемых воплощений модулирующий иммунный ответ лечит заболевание или состояние у объекта. В некоторых аспектах иммунный ответ повышен.In some of any of the proposed embodiments, the modulating immune response treats a disease or condition in the subject. In some aspects, the immune response is increased.

В некоторых из любых предлагаемых воплощений объекту вводят иммуномодулирующий белок или конъюгат, содержащий вариантный полипептид ICOSL, связанный с функциональным фрагментом, локализующим в опухоли. В некоторых случаях функциональный фрагмент, локализующий в опухоли, представляет собой или включает связывающую молекулу, которая распознает опухолевый антиген. В некоторых из любых предлагаемых воплощений связывающая молекула включает антитело или его антигенсвязывающий фрагмент или включает домен IgSF дикого типа или его вариант. В некоторых из любых предлагаемых воплощений иммуномодулирующий белок или конъюгат или гибридный белок вводят объекту. В некоторых из любых предлагаемых воплощений объекту вводят вариантный полипептид ICOSL, который представляет собой трансмембранный иммуномодулирующий белок. В некоторых случаях сконструированную клетку, содержащую вариантный полипептид ICOSL, который представляет собой трансмембранный иммуномодулирующий белок, вводят объекту. В некоторых из любых предлагаемых воплощений заболевание или состояние представляет собой опухоль или рак. В некоторых примерах заболевание или состояние выбраны из меланомы, рака легкого, рака мочевого пузыря, гемобластозов, рака печени, рака мозга, рака почки, рака молочной железы, рака поджелудочной железы, колоректального рака, рака селезенки, рака предстательной железы, рака яичек, рака яичников, рака матки, рака желудка, мышечно-скелетного рака, рака головы и шеи, рака желудочно-кишечного тракта, герминогенного рака или эндокринного и нейроэндокринного рака. В некоторых из любых предлагаемых воплощений иммунный ответ снижается.In some of any of the proposed embodiments, the subject is administered an immunomodulatory protein or conjugate containing a variant ICOSL polypeptide linked to a functional moiety localized to the tumor. In some cases, the functional moiety located in the tumor is or includes a binding molecule that recognizes a tumor antigen. In some of any of the proposed embodiments, the binding molecule includes an antibody or an antigen binding fragment thereof, or includes a wild type IgSF domain or variant thereof. In some of any of the proposed embodiments, the immunomodulatory protein or conjugate or fusion protein is administered to a subject. In some of any of the proposed embodiments, the subject is administered a variant ICOSL polypeptide, which is a transmembrane immunomodulatory protein. In some cases, an engineered cell containing a variant ICOSL polypeptide, which is a transmembrane immunomodulatory protein, is administered to the subject. In some of any of the proposed embodiments, the disease or condition is a tumor or cancer. In some examples, the disease or condition is selected from melanoma, lung cancer, bladder cancer, hematological malignancies, liver cancer, brain cancer, kidney cancer, breast cancer, pancreatic cancer, colorectal cancer, spleen cancer, prostate cancer, testicular cancer, cancer ovarian, uterine cancer, gastric cancer, musculoskeletal cancer, head and neck cancer, gastrointestinal cancer, germ cell cancer or endocrine and neuroendocrine cancer. In some of any of the proposed embodiments, the immune response is reduced.

В некоторых из любых предлагаемых воплощений изобретения вариантный полипептид ICOSL или иммуномодулирующий белок, который растворим, вводят объекту. В некоторых из любых предлагаемых воплощений растворимый иммуномодулирующий белок представляет собой иммуномодулирующий Fcгибридный белок. В некоторых из любых предлагаемых воплощений объекту вводят предлагаемый вариантный полипептид ICOSL, иммуномодулирующего белка или гибридного белка. В некоторых из любых предлагаемых воплощений изобретения сконструированная клетка, содержащая секретируемый вариантный полипептид ICOSL, вводится объекту. В некоторых из любых предлагаемых воплощений предлагаемая сконструированная клетка вводится объекту. В некоторых из любых предлагаемых воплощений инфекционный агент, кодирующий вариантный полипептид ICOSL, который является секретируемым иммуномодулирующим белком, вводят объекту, необязательно в условиях, в которых инфекционный агент инфицирует опухолевую клетку или иммунную клетку, и секретируемый иммуномодулирующий белок секретируется из зараженной клетки. В некоторых из любых предлагаемых воплощений заболевание или состояние представляет собой воспалительное или аутоиммунное заболевание или состояние. В некоторых примерах заболевание или состояние представляют собой васкулит, ассоциированный с антиIn some of any of the proposed embodiments of the invention, the variant ICOSL polypeptide or immunomodulatory protein, which is soluble, is administered to the subject. In some of any of the proposed embodiments, the soluble immunomodulatory protein is an immunomodulatory Fc fusion protein. In some of any of the proposed embodiments, the subject is administered a proposed variant polypeptide of an ICOSL, immunomodulatory protein, or fusion protein. In some of any of the proposed embodiments of the invention, an engineered cell containing a secreted variant ICOSL polypeptide is administered to a subject. In some of any of the proposed embodiments, the proposed engineered cell is administered to a subject. In some of any of the proposed embodiments, an infectious agent encoding a variant ICOSL polypeptide that is a secreted immunomodulatory protein is administered to a subject, optionally under conditions in which the infectious agent infects a tumor cell or immune cell, and the secreted immunomodulatory protein is secreted from the infected cell. In some of any of the proposed embodiments, the disease or condition is an inflammatory or autoimmune disease or condition. In some examples, the disease or condition is anti-associated vasculitis

- 15 044346 нейтрофильными цитоплазматическими антителами (ANCA), васкулит, аутоиммунное заболевание кожи, трансплантацию, ревматическую болезнь, воспалительное желудочно-кишечное заболевание, воспалительное заболевание глаз, воспалительное неврологическое заболевание, воспалительное заболевание легкого, воспалительное эндокринное заболевание или аутоиммунное гематологическое заболевание. В некоторых случаях болезнь или состояние выбраны из воспалительного заболевания кишечника, трансплантации, болезни Крона, язвенного колита, рассеянного склероза, астмы, ревматоидного артрита или псориаза.- 15 044346 neutrophil cytoplasmic antibodies (ANCA), vasculitis, autoimmune skin disease, transplantation, rheumatic disease, inflammatory gastrointestinal disease, inflammatory eye disease, inflammatory neurological disease, inflammatory lung disease, inflammatory endocrine disease or autoimmune hematological disease. In some cases, the disease or condition is selected from inflammatory bowel disease, transplantation, Crohn's disease, ulcerative colitis, multiple sclerosis, asthma, rheumatoid arthritis, or psoriasis.

Краткое описание чертежейBrief description of drawings

На фиг. 1 показаны результаты импеданса, отражающие цитотоксическую активность клеток, сконструированных с помощью анти-CD19-химерного антигенного рецептора (CAR) самого по себе, или с примерными трансмембранными иммуномодулирующими TIP (CD80-TIP или ICOSL-TIP) или соответствующим трансмембранным белком CD80 или ICOSL дикого типа после совместного культивирования с целевыми антигенэкспрессирующими клетками. Импеданс оценивали с использованием анализатора клеток Acea Real-Time Cell Analyzer (RTCA), который измеряет изменения импеданса в культуральной среде 96-луночного микроэлектронного планшета (E-plate).In fig. 1 shows impedance results reflecting the cytotoxic activity of cells engineered with anti-CD19 chimeric antigen receptor (CAR) alone, or with exemplary transmembrane immunomodulatory TIPs (CD80-TIP or ICOSL-TIP) or the corresponding transmembrane protein CD80 or wild ICOSL type after co-culture with target antigen-expressing cells. Impedance was assessed using the Acea Real-Time Cell Analyzer (RTCA), which measures changes in impedance in the culture medium of a 96-well microelectronic plate (E-plate).

На фиг. 2A показано, что первичные T-клетки эффективно трансдуцируются вирусами, кодирующими как CAR, так и TIP-белки. Первичные T-клетки человека активировали 48 ч с помощью анти-CD3 плюс анти-CD28 гранул и затем трансдуцировали с помощью лентивируса, кодирующего анти-CD19 CAR с репортером BFP, плюс с помощью второго лентивируса кодирующего ICOSL TIP с репортером GFP. На графике FACS показана экспрессия BFP по оси y и экспрессия GFP по оси x и указан процент Tклеток, которые попадают в каждый квадрант. Результаты показывают, что культуры включают только клетки, трансдуцированные CAR (верхний левый квадрант), только клетки, трансдуцированные TIP (нижний правый квадрант), клетки, трансдуцированные обоими вирусами (верхний правый квадрант), и клетки, которые не были ничем трансдуцированы (слева внизу). На фиг. 2B, TIP, экспрессированные на CAR-T-клетках, обеспечивают совместную стимуляцию CAR-T-клеток. Клетки CAR-T с котрансдукцией TIP или без нее были помечены Cell-Trace Far Red и инкубированы с клеточной линией CD19 + NALM6 для взаимодействия с CAR. Пролиферацию оценивали по проценту CAR-экспрессирующих клеток, которые имели разбавленный флуоресцентный краситель. Клетки, трансдуцированные мутантными TIP, показали увеличение пролиферации CAR + T-клеток по сравнению с теми, у которых нет TIP или теми, которые трансдуцированы ICOSL дикого типа. Клетки, трансдуцированные пустым контролем, которые утратили экспрессию CAR, в этом анализе не пролиферировали.In fig. Figure 2A shows that primary T cells are efficiently transduced by viruses encoding both CAR and TIP proteins. Primary human T cells were activated for 48 h with anti-CD3 plus anti-CD28 beads and then transduced with a lentivirus encoding an anti-CD19 CAR with a BFP reporter plus a second lentivirus encoding ICOSL TIP with a GFP reporter. The FACS plot shows BFP expression on the y-axis and GFP expression on the x-axis and indicates the percentage of T cells that fall into each quadrant. The results show that the cultures included only cells transduced with CAR (upper left quadrant), only cells transduced with TIP (lower right quadrant), cells transduced with both viruses (upper right quadrant), and cells that were not transduced with anything (lower left). ). In fig. 2B, TIPs expressed on CAR-T cells provide co-stimulation of CAR-T cells. CAR-T cells with or without TIP cotransduction were labeled with Cell-Trace Far Red and incubated with the CD19+ NALM6 cell line to interact with CAR. Proliferation was assessed by the percentage of CAR-expressing cells that had diluted fluorescent dye. Cells transduced with mutant TIPs showed increased proliferation of CAR+ T cells compared to those without TIP or those transduced with wild-type ICOSL. Cells transduced with an empty control that had lost CAR expression did not proliferate in this assay.

На фиг. 3A-3B с помощью высвобождения цитокинов показана костимулирующая способность ICOSL дикого типа (WT) или варианта ICOSL при коиммобилизации с анти-CD3. 10 нМ анти-CD3 мокрым способом наносили на лунки 96-луночных полистирольных культуральных планшетов с плоским дном с 40 нМ (стрелки) или 10 нМ ICOSL WT или вариантного ICOSL. Добавляли 100000 очищенных CD4+ и CD8+ (пан) T-клеток и надосадочную жидкость собирали через 72 часа для анализа высвобождения цитокинов с помощью ELISA. фиг. ЗВ демонстрирует уровень белка IL-17, секретируемых пан Tклетками. Графики являются типичными ответами IFN-гамма и IL-17 на костимуляцию пан T-клеток.In fig. 3A-3B show the co-stimulatory ability of wild type (WT) ICOSL or ICOSL variant when coimmobilized with anti-CD3 via cytokine release. 10 nM anti-CD3 was wet applied to the wells of 96-well flat-bottom polystyrene culture plates containing 40 nM (arrows) or 10 nM ICOSL WT or variant ICOSL. 100,000 purified CD4+ and CD8+ (pan) T cells were added and the supernatant was collected after 72 hours for cytokine release analysis by ELISA. fig. PV demonstrates the level of IL-17 protein secreted by pan T cells. The graphs are typical IFN-gamma and IL-17 responses to pan T cell co-stimulation.

Фиг. 4A-4B демонстрируют посредством пролиферации костимулирующую способность ICOSL дикого типа (WT) или варианта ICOSL при коиммобилизации с анти-CD3. CFSE-меченые пан T-клетки инкубировали в планшетах, покрытых анти-CD3 и ICOSL, как описано выше, в течение 72 ч. Клетки собирали, промывали, окрашивали флуоресцентно конъюгированными анти-CD4 или анти-CD8 антителами и анализировали с помощью проточной цитометрии. Ворота и вольтажи цитометра устанавливали с использованием нестимулированных контрольных CFSE-меченых T-клеток. Пролиферацию определяли по разбавлению CFSE относительно контроля. Фиг. 4A демонстрирует проценты от общего количества пролиферирующих (стрелки), CD4+ (сплошной столбец) и CD8+ клеток (штрихованный столбец) Tклеток после костимуляции 40 нМ ICOSL. Фиг. 4B демонстрирует процент пролиферации всех пан Tклеток после костимуляции 10 нМ ICOSL. Графики представляют типичный пролиферативный ответ на костимуляцию пан-Т-клеток.Fig. 4A-4B demonstrate, through proliferation, the co-stimulatory ability of wild-type (WT) or ICOSL variant ICOSL when coimmobilized with anti-CD3. CFSE-labeled pan T cells were incubated in anti-CD3 and ICOSL-coated plates as described above for 72 h. Cells were harvested, washed, stained with fluorescently conjugated anti-CD4 or anti-CD8 antibodies, and analyzed by flow cytometry. Cytometer gates and voltages were set using unstimulated control CFSE-labeled T cells. Proliferation was determined by the dilution of CFSE relative to the control. Fig. 4A shows the percentages of total proliferating (arrows), CD4+ (solid bar), and CD8+ (shaded bar) T cells after co-stimulation with 40 nM ICOSL. Fig. 4B shows the percentage of proliferation of all pan T cells after costimulation with 10 nM ICOSL. The graphs represent the typical proliferative response to pan-T cell costimulation.

На фиг. 5 изображена функция кандидата ICOSL vIgD в реакции смешанных лимфоцитов человека (MLR). Варианты ICOSL и их мутации перечислены на оси х, а также ICOSL дикого типа, отрицательные контрольные группы PDL2-Fc и человеческий IgG, а также положительная контрольная молекула CTLAIg белатацепт. Линия по графику представляет базовое количество IFN-гамма, обнаруженное в надосадочных жидкостях культур отрицательного контроля. Для каждого кандидатного варианта ICOSL или контрольного ICOSL были протестированы три различных концентрации, при этом стрелки, указывают на самую высокую концентрацию белка в культурах при 40 нМ. Большинство кандидатов вариантов ICOSL демонстрируют превосходную антагонистическую активность во всех трех протестированных концентрациях по сравнению с белатацептом, что отражается в меньшей концентрации IFN-гамма в этих культурах.In fig. 5 depicts the function of the candidate ICOSL vIgD in the human mixed lymphocyte response (MLR). ICOSL variants and their mutations are listed on the x-axis, along with wild-type ICOSL, the negative controls PDL2-Fc and human IgG, and the positive control molecule CTLAIg belatacept. The line on the graph represents the basal amount of IFN-γ detected in the supernatants of the negative control cultures. For each candidate ICOSL or control ICOSL, three different concentrations were tested, with arrows indicating the highest protein concentration in the cultures at 40 nM. Most candidate ICOSL variants demonstrated superior antagonistic activity at all three concentrations tested compared to belatacept, which is reflected in the lower concentration of IFN-gamma in these cultures.

На фиг. 6A-6D показано ингибирование растворимыми ICOSL Fc-гибридными белками ответов Bи T-клеток в анализе совместной культивирования B-Т-клеток. На фиг. 6A показано ингибирование растворимыми ICOSL Fc-гибридными белками, пролиферации B-клеток, управляемой T-клетками. ОчищенIn fig. 6A-6D show the inhibition of B and T cell responses by soluble ICOSL Fc fusion proteins in a B-T cell coculture assay. In fig. 6A shows the inhibition of T cell-driven B cell proliferation by soluble ICOSL Fc fusion proteins. Cleared

- 16 044346 ные CD4+ T-клетки и B-клетки от одного донора метили CFSE и совместно инкубировали в соотношении 1:1 в присутствие или в отсутствие указанных митогенов с или без указанных ICOSL Fc-гибридных белков. Клетки стимулировали энтеротоксином B стафилококка (SEB) при 100 нг/мл, митогеном фитолакки (PWM) в дозе 1 мг/мл или и тем, и другим. ICOSL Fc-гибридные белки включали при конечной концентрации 40 нМ, и культуры инкубировали в течение 7 дней и подвергали анализу FACS. Количество поделившихся B-клеток определяли по количеству клеток в культурах, которые имели разбавленный CFSE. Все ICOSL Fc-гибридные белки тестировали, за исключением белка дикого типа, на предмет пролиферации редуцированных B-клеток. Фиг. 6B-D показывают, что ICOSL Fc-гибридные белки ингибируют продуцирование цитокинов T-клеток в совместных B-T культурах. Надосадочные жидкости из описанных выше культур собирали на 7-й день и анализировали на содержание цитокинов с использованием LEGENDplex Human Th Cytokine Panel (Biolegend). Выработка T-клетками IL-5 (фиг. 6B), IL-13 (фиг. 6C) и IL-21 (фиг. 6D) ослабляется при включении ICOSL Fc-гибридных белков.- 16 044346 New CD4+ T cells and B cells from the same donor were labeled with CFSE and co-incubated at a 1:1 ratio in the presence or absence of the indicated mitogens with or without the indicated ICOSL Fc-fusion proteins. Cells were stimulated with Staphylococcus enterotoxin B (SEB) at 100 ng/ml, Phytolacca mitogen (PWM) at 1 mg/ml, or both. ICOSL Fc fusion proteins were included at a final concentration of 40 nM and cultures were incubated for 7 days and subjected to FACS analysis. The number of B cells that divided was determined by the number of cells in cultures that had diluted CFSE. All ICOSL Fc fusion proteins were tested, with the exception of the wild type protein, for proliferation of reduced B cells. Fig. 6B-D show that ICOSL Fc-fusion proteins inhibit T cell cytokine production in B-T co-cultures. Supernatants from the above cultures were collected on day 7 and analyzed for cytokine content using the LEGENDplex Human Th Cytokine Panel (Biolegend). T cell production of IL-5 (Fig. 6B), IL-13 (Fig. 6C), and IL-21 (Fig. 6D) was attenuated by inclusion of ICOSL Fc fusion proteins.

На фиг. 7A-7F изображены различные конечные точки в мышиной модели реакции трансплантат против хозяина (GVHD), где человеческие PBMC-клетки были адоптивно перенесены в иммунодефицитных хозяев, NSG-мышей. Фиг. 7A показаны кривые выживаемости обработанных животных. Агрессивное течение болезни и последующую смертность наблюдали у животных с контрольным физраствором, при этом наблюдали одинаковую выживаемость у животных, получавших ICOSL-Fc дикого типа, а также вариантный ICOSL N52H/I143T. Вариант N52H/N57Y/Q100P имел улучшенные показатели выживаемости, сравнимые с клиническим эталоном белатацептом. На фиг. 7В показаны аналогичные тенденции в потере массы тела с вариантом ICOSL N52H/N57Y/Q100P, демонстрирующим аналогичное поддержание массы, как у животных, обработанных белатацептом, хотя все остальные группы испытывали быструю потерю массы. Фиг. 7C демонстрирует клинические баллы по стандартизованному индексу активности (DAI) заболевания GVHD, опять демонстрируя более низкие баллы у животных, получавших вариантный ICOSL N52H/N57Y/Q100P, что сопоставимо с клиническим эталоном белатацептом, в то время как другие группы животных получали более высокие баллы DAI. На фиг. 7D показано проточное цитометрическое измерение CD4 и CD8 в крови у экспериментальных животных, проведенное на 14-й день. Процент клеток CD8 между экспериментальными группами был в основном одинаковым, однако животные, обработанные вариантом ICOSL N52H/N57Y/Q100P и белатацептом, имели более низкий процент CD4-клеток по сравнению с другими экспериментальными группами.In fig. 7A-7F depict various endpoints in a mouse model of graft-versus-host disease (GVHD) where human PBMC cells were adoptively transferred into immunodeficient hosts, NSG mice. Fig. 7A shows survival curves of treated animals. Aggressive disease progression and subsequent mortality were observed in animals treated with saline control, while similar survival was observed in animals treated with wild-type ICOSL-Fc as well as the variant ICOSL N52H/I143T. The N52H/N57Y/Q100P variant had improved survival rates comparable to the clinical reference belatacept. In fig. 7B shows similar trends in body weight loss with the ICOSL variant N52H/N57Y/Q100P showing similar weight maintenance as belatacept-treated animals, although all other groups experienced rapid weight loss. Fig. 7C demonstrates clinical scores on the standardized GVHD Disease Activity Index (DAI), again showing lower scores in animals treated with the variant ICOSL N52H/N57Y/Q100P, which is comparable to the clinical reference belatacept, while other groups of animals received higher DAI scores . In fig. 7D shows flow cytometric measurement of CD4 and CD8 in the blood of experimental animals performed on day 14. The percentage of CD8 cells between treatment groups was essentially the same, however, animals treated with the ICOSL variant N52H/N57Y/Q100P and belatacept had a lower percentage of CD4 cells compared with the other treatment groups.

На фиг. 7E показаны кривые выживаемости из аналогичного эксперимента, в котором тестируются дополнительные вариантные молекулы ICOSL. На фиг. 7F показаны клинические баллы из аналогичного эксперимента, в котором тестируются дополнительные вариантные молекулы ICOSL.In fig. 7E shows survival curves from a similar experiment testing additional variant ICOSL molecules. In fig. 7F shows clinical scores from a similar experiment testing additional variant ICOSL molecules.

На фиг. 8 показана костимулирующая активность, придаваемая указанной вариантной стековой молекулой vIgD C-L, где C представляет собой костимулирующий домен ICOSL, a L представляет собой локализующий домен NKp30. В этом анализе клетки-мишени K562, экспрессирующие локализованный на поверхности белок B7-H6, культивировали в присутствии анти-CD3 с человеческими T-клетками, а активацию T-клеток оценивали по уровням IFN-гамма в надосадочных жидкостях культуры. Ahtu-CD3 отдельно или нестековые вариантные молекулы Fc не индуцируют активацию T-клеток. Аналогичным образом, клетки, культивируемые только с локализующим доменом NKp30 дикого типа или только костимулирующим доменом ICOSL дикого типа, как Fc-гибридные белки, не приводили к активации Tклеток. Стековый домен, содержащий версию дикого типа как костимулирующего домена, так и локализующего домена, индуцировал измеряемый IFN-гамма при наиболее высокой концентрации, однако, вариантный локализующий костимулирующий стек индуцировал более чем в два раза высокие уровни IFN-гамма при максимальной концентрации, и уровни IFN-гамма, которые все еще наблюдались по мере того, как концентрацию титровали вниз.In fig. 8 shows the co-stimulatory activity conferred by said variant vIgD C-L stack molecule, where C is the ICOSL co-stimulatory domain and L is the NKp30 localization domain. In this assay, K562 target cells expressing the surface-localized B7-H6 protein were cultured in the presence of anti-CD3 with human T cells, and T cell activation was assessed by IFN-gamma levels in culture supernatants. Ahtu-CD3 alone or non-stacked variant Fc molecules do not induce T cell activation. Similarly, cells cultured with only the wild-type NKp30 localizing domain or only the wild-type ICOSL co-stimulatory domain as Fc fusion proteins did not result in T cell activation. A stack domain containing the wild-type version of both the costimulatory domain and the localizing domain induced measurable IFN-gamma at the highest concentration, however, the variant localizing costimulatory stack induced more than twice as high levels of IFN-gamma at the highest concentration, and IFN levels -gamma, which were still observed as the concentration was titrated down.

На фиг. 9 подытожены изменения толщины ушей у мышей в стандартной модели гиперчувствительности замедленного типа (DTH). Животные, обработанные PBS, сенсибилизированные овальбумином и затем получившие провокационную пробу на ухе одним и тем же белком, показали самый высокий уровень измеренного отека уха. У мышей, получавших клинический контроль абатацепт, отек уха после теста на ухе незначительно уменьшился. Все пять групп обработки ICOSL продемонстрировали равное или улучшенное снижение припухлости уха по сравнению с абатацептом.In fig. Figure 9 summarizes changes in ear thickness in mice in a standard model of delayed-type hypersensitivity (DTH). Animals treated with PBS, sensitized with ovalbumin, and then ear challenged with the same protein showed the highest level of measured ear edema. In mice treated with clinical control abatacept, ear swelling was slightly reduced after the ear test. All five ICOSL treatment groups demonstrated equal or improved reduction in ear swelling compared with abatacept.

На фиг. 10A-10C показаны различные примерные конфигурации вариантного домена IgSF (vIgD), конъюгированного с антителом (V-Mab). На фиг. 10A показаны различные конфигурации, в которых vIgD непосредственно или опосредованно связан с N-и/или C-концом легкой цепи антитела. На фиг. 10B показаны различные конфигурации, в которых vIgD непосредственно или опосредованно связан с Nи/или C-концом легкой цепи антитела. На фиг. 10C показаны итоговые конфигурации V-Mab, когда легкая цепь по фиг. 10A и тяжелая цепь фиг. 10B коэкспрессируются в клетке.In fig. 10A-10C show various exemplary configurations of a variant IgSF domain (vIgD) conjugated to an antibody (V-Mab). In fig. 10A shows various configurations in which vIgD is directly or indirectly linked to the N- and/or C-terminus of the antibody light chain. In fig. 10B shows various configurations in which vIgD is directly or indirectly linked to the N and/or C terminus of the antibody light chain. In fig. 10C shows the resulting V-Mab configurations when the light chain of FIG. 10A and the heavy chain of FIG. 10B are coexpressed in the cell.

На фиг. 11A-11B продемонстрирована специфичность V-Mab для когнатных партнеров по связыванию. Анализы связывания проводили на клетках Expi293, временно трансфицированных ДНК для поверхностной экспрессии HER2, CD28, CTLA-4 или ICOS человека на клетках млекопитающих. 200000 трансфецированных клеток инкубировали с 100000 пМ-100 пМ родительских антител (C1) или различных V-Mab (C2-9). Несвязанное антитело удаляли, связанное антитело детектировали с помощью флуоIn fig. 11A-11B demonstrate the specificity of V-Mab for cognate binding partners. Binding assays were performed on Expi293 cells transiently transfected with DNA to surface express human HER2, CD28, CTLA-4, or ICOS on mammalian cells. 200,000 transfected cells were incubated with 100,000 pM-100 pM parental antibodies (C1) or various V-Mabs (C2-9). Unbound antibody was removed and bound antibody was detected using fluo

- 17 044346 ресцентно конъюгированного антитела против IgG человека, и клетки анализировали с помощью проточной цитометрии на предмет MFI и процента положительных значений на основании Fc-контролей. Фиг. 11A демонстрирует связывание трансфектантов V-Mab с HER2 на уровнях, сходных с родительским антителом. Связывание с клетками, трансфицированными пустым контролем, наблюдалось со всеми V-Mab, но не с WT ICOSL, из-за низких уровней эндогенной экспрессии HER2 на родительских клетках Expi293. Фиг. 11B демонстрирует, что связывание родительского домена IgSF (N52H/N57Y/Q100P) с его когнатными партнерами поддерживается или увеличивается (C2, C3, C4, C5, C6, C8, C9) с помощью V-Mab.- 17 044346 resin conjugated anti-human IgG antibody, and cells were analyzed by flow cytometry for MFI and percent positive values based on Fc controls. Fig. 11A demonstrates V-Mab transfectants binding to HER2 at levels similar to the parent antibody. Binding to cells transfected with empty control was observed with all V-Mabs, but not with WT ICOSL, due to low levels of endogenous HER2 expression on parental Expi293 cells. Fig. 11B demonstrates that binding of the parental IgSF domain (N52H/N57Y/Q100P) to its cognate partners is maintained or enhanced (C2, C3, C4, C5, C6, C8, C9) by V-Mab.

Фиг. 12 демонстрируется костимулирующая и пролиферативная способность V-Mab при коиммобилизации с анти-CD3. 10 нМ анти-CD3 покрывали мокрым способом лунки 96-луночных культуральных полистирольных планшетов с плоским дном с 30 нМ-3 нМ родительского антитела, V-Mab или Fcконтроля. CFSE-меченые T-клетки добавляли в течение 72 ч. Секрецию IFN-гамма измеряли с помощью ELISA и общую пролиферацию T-клеток измеряли с помощью проточного цитометрического анализа CFSE-разведения. Секреция IFN-гамма и пролиферация домена IgSF (N52H/N57Y/Q100P) выше, чем WT ICOSL. V-Mab демонстрируют повышенную цитокиновую и пролиферативную костимулирующую способность по сравнению с родительским IgSF.Fig. 12 demonstrates the co-stimulatory and proliferative ability of V-Mab when coimmobilized with anti-CD3. 10 nM anti-CD3 was wet coated into the wells of 96-well flat-bottom polystyrene culture plates with 30 nM-3 nM parental antibody, V-Mab, or Fc control. CFSE-labeled T cells were added for 72 hours. IFN-γ secretion was measured by ELISA and total T cell proliferation was measured by CFSE dilution flow cytometric assay. IFN-gamma secretion and IgSF domain proliferation (N52H/N57Y/Q100P) are higher than WT ICOSL. V-Mabs exhibit increased cytokine and proliferative costimulatory capacity compared to parental IgSF.

На фиг. 13A-13C показаны различные форматы предлагаемых вариантов молекул домена IgSF. Фиг. 13A демонстрирует растворимые молекулы, включая: (1) вариантный домен IgSF (vIgD), слитый с цепью Fc; (2) стековая молекула, содержащая первый вариантный домен IgSF (первый vIgD) и второй домен IgSF, такой, как второй вариантный домен IgSF (второй vIgD); (3) молекула IgSF, нацеленная на опухоль, содержащая первый вариантный домен IgSF (vIgD) и домен IgSF, который нацелен на опухолевый антиген, такой как домен IgSF NkP30; и (4) вариантный домен IgSF (vIgD), связанный с антителом (V-Mab). Фиг. 13B продемонстрирован трансмембранный иммуномодулирующий белок (TIP), содержащий вариантный домен IgSF (vIgD), например вариантный ICOSL, экспрессируемый на поверхности клетки. В примерном воплощении когнатный партнер связывания трансмембранного связанного vIgD представляет собой костимулирующий рецептор, например CD28, a TIP, содержащий vIgD (например, ICOSL vIgD), выступает в качестве антагониста по отношению к костимулирующему рецептору, так что TIP индуцирует положительный сигнал в клетке, экспрессирующей костимулирующий рецептор. Фиг. 13C демонстрирует секретируемый иммуномодулирующий белок (SIP), в котором вариантный домен IgSF (vIgD), например, вариантный ICOSL, секретируется из клетки, такой как первая T-клетка (например, CAR Tклетки). В примерном воплощении когнатный партнер связывания секретируемого vIgD представляет собой активирующий рецептор, например CD28, который может быть экспрессирован в первой клетке (например, T-клетке, такой как CAR T-клетка) и/или во второй клетке (например, T-клетке, либо эндогенной, либо сконструированной, такой как CAR T-клетка). При связывании SIP с его когнатным партнером связывания блокируется сигнализация через активирующий рецептор. Во всех случаях vIgD может быть только V-доменом (IgV), комбинацией V-домена (IgV) и C-домена (IgC), включая весь внеклеточный домен (ECD) или любую комбинацию Ig-доменов представителя суперсемейства IgSF.In fig. 13A-13C show various formats of proposed variants of IgSF domain molecules. Fig. 13A shows soluble molecules including: (1) variant IgSF domain (vIgD) fused to an Fc chain; (2) a stack molecule comprising a first variant IgSF domain (first vIgD) and a second IgSF domain, such as a second variant IgSF domain (second vIgD); (3) a tumor-targeting IgSF molecule comprising a first variant IgSF domain (vIgD) and an IgSF domain that targets a tumor antigen, such as the IgSF domain of NkP30; and (4) variant IgSF domain (vIgD) linked to antibody (V-Mab). Fig. 13B shows a transmembrane immunomodulatory protein (TIP) containing a variant IgSF domain (vIgD), such as a variant ICOSL, expressed on the cell surface. In an exemplary embodiment, the cognate binding partner of the transmembrane bound vIgD is a costimulatory receptor, such as CD28, and a TIP containing vIgD (eg, ICOSL vIgD) acts as an antagonist to the costimulatory receptor such that the TIP induces a positive signal in a cell expressing the costimulatory receptor. receptor. Fig. 13C shows a secreted immunomodulatory protein (SIP) in which a variant IgSF domain (vIgD), such as a variant ICOSL, is secreted from a cell, such as a first T cell (eg, a CAR T cell). In an exemplary embodiment, the cognate binding partner of the secreted vIgD is an activating receptor, such as CD28, which may be expressed in a first cell (e.g., a T cell, such as a CAR T cell) and/or a second cell (e.g., a T cell, either endogenous or engineered such as a CAR T cell). When SIP binds to its cognate binding partner, signaling through the activating receptor is blocked. In all cases, vIgD can be the V domain alone (IgV), a combination of the V domain (IgV) and the C domain (IgC), including the entire extracellular domain (ECD), or any combination of Ig domains of a member of the IgSF superfamily.

Фиг. 14 продемонстрирована примерная схема активности вариантного домена IgSF (vIgD), слитого с Fc (vIgD-Fc), в котором vIgD является вариантом домена IgSF из ICOSL. Как показано, растворимый vIgD из ICOSL взаимодействует со своими когнатными партнерами по связыванию для блокирования взаимодействий CD80 (B7-1)/CD86 (B7-2) или ICOSL с CD28 или ICOS соответственно, тем самым блокируя костимуляцию с помощью костимулирующих рецепторов CD28 и/или ICOS.Fig. 14 shows an exemplary diagram of the activity of a variant IgSF domain (vIgD) fused to an Fc (vIgD-Fc), in which vIgD is a variant IgSF domain from ICOSL. As shown, soluble vIgD from ICOSL interacts with its cognate binding partners to block interactions of CD80 (B7-1)/CD86 (B7-2) or ICOSL with CD28 or ICOS, respectively, thereby blocking costimulation by CD28 and/or co-stimulatory receptors ICOS.

Фиг. 15 показана примерная схема стековой молекулы для локализации вариантного домена IgSF (vIgD) в опухолевой клетке. В этом формате стековая молекула включает первый вариантный домен IgSF (первый vIgD) и второй домен IgSF (например, второй vIgD), в котором второй домен IgSF (например, второй vIgD) представляет собой домен IgSF, нацеленный на опухоль, который связывается с опухолевым антигеном. Примерный домен IgSF, нацеленный на опухоль, представляет собой домен IgSF NkP30, который связывается с опухолевым антигеном B7-H6. На этом изображении vIgD является вариантом домена IgSF из ICOSL. Как показано, связывание домена IgSF, нацеленного на опухоль, на поверхности опухолевой клетки локализует первый vIgD на поверхности опухолевых клеток, где он может взаимодействовать с одним или несколькими его когнатными партнерами по связыванию (например, CD28 или ICOS), экспрессированными на поверхности соседней иммунной клетки (например, T-клетки) для стимуляции костимулирующего рецептора.Fig. 15 shows an exemplary stacking molecule diagram for localizing a variant IgSF domain (vIgD) to a tumor cell. In this format, the stack molecule includes a first variant IgSF domain (first vIgD) and a second IgSF domain (e.g., second vIgD), wherein the second IgSF domain (e.g., second vIgD) is a tumor-targeting IgSF domain that binds to a tumor antigen . An exemplary tumor-targeting IgSF domain is the NkP30 IgSF domain, which binds to the B7-H6 tumor antigen. In this image, vIgD is a variant of the IgSF domain from ICOSL. Binding of the tumor cell surface IgSF domain is shown to localize the first vIgD to the tumor cell surface, where it can interact with one or more of its cognate binding partners (e.g., CD28 or ICOS) expressed on the surface of an adjacent immune cell (eg T cells) to stimulate the costimulatory receptor.

Фиг. 16A показаны различные примерные конфигурации стековой молекулы, содержащей первый вариантный домен IgSF (первый vIgD), например, вариантный ICOSL, и второй домен IgSF, такой как второй вариантный домен IgSF (второй vIgD). Как показано, первый vIgD и второй домен IgSF независимо связаны, прямо или опосредованно, с N- или C-концом Fc-области. Для получения гомодимерной молекулы Fc, Fc-область является областью, которая способна формировать гомодимер с соответствующей Fc-областью при совместной экспрессии отдельных Fc-областей в клетке. Для генерации гетеродимерной молекулы Fc, индивидуальные Fc-области содержат мутации (например, мутации типа выступво-впадину в домене CH3), так что образование гетеродимера предпочтительнее по сравнению с образованием гомодимера, когда отдельные Fc-области совместно экспрессируются в клетке.Fig. 16A shows various exemplary configurations of a stack molecule comprising a first variant IgSF domain (first vIgD), such as an ICOSL variant, and a second IgSF domain, such as a second variant IgSF domain (second vIgD). As shown, the first vIgD and the second IgSF domain are independently associated, directly or indirectly, with the N- or C-terminus of the Fc region. To produce a homodimeric Fc molecule, an Fc region is a region that is capable of forming a homodimer with a corresponding Fc region when individual Fc regions are co-expressed in a cell. To generate a heterodimeric Fc molecule, individual Fc regions contain mutations (eg, knob-valley mutations in the CH3 domain), such that heterodimer formation is favored over homodimer formation when individual Fc regions are co-expressed in the cell.

- 18 044346- 18 044346

На фиг. 16B показаны различные примерные конфигурации стековой молекулы, содержащей первый вариантный домен IgSF (первый vIgD), второй домен IgSF, такой как второй вариантный домен IgSF (второй vIgD) и третий домен IgSF, такой как третий вариантный домен IgSF (третий vIgD). Как показано, первый vIgD и второй IgSF и третий IgSF домены независимо связаны, прямо или опосредованно, с N- или C-концом Fc-области. Для получения гомодимерной молекулы Fc, Fc-область является областью, которая способна формировать гомодимер с соответствующей Fc-областью при совместной экспрессии отдельных Fc-областей в клетке.In fig. 16B shows various exemplary configurations of a stack molecule comprising a first variant IgSF domain (first vIgD), a second IgSF domain such as a second variant IgSF domain (second vIgD), and a third IgSF domain such as a third variant IgSF domain (third vIgD). As shown, the first vIgD and second IgSF and third IgSF domains are independently associated, directly or indirectly, with the N- or C-terminus of the Fc region. To produce a homodimeric Fc molecule, an Fc region is a region that is capable of forming a homodimer with a corresponding Fc region when individual Fc regions are co-expressed in a cell.

На фиг. 17 показана примерная схема активности вариантного домена IgSF (vIgD), конъюгированного с антителом (V-Mab), в котором антитело (например, антитело против HER2) связывается с антигеном на поверхности опухолевой клетки. На этом изображении vIgD является вариантом домена IgSF из ICOSL. Как показано, связывание антитела с поверхностью опухолевой клетки локализует vIgD на поверхности опухолевых клеток, где он может взаимодействовать с одним или несколькими его когнатными партнерами связывания, экспрессируемыми на поверхности соседней иммунной клетки (например, Tклетки) для оказания агонистического воздействия на рецепторную сигнализацию. В иллюстративном воплощении, как показано, вариантный домен IgSF (vIgD) является вариантом домена IgSF из ICOSL. Связывание ICOSL vIgD с костимулирующими рецепторами CD28 или ICOS обеспечивает агонистический или костимулирующий сигнал.In fig. 17 shows an exemplary diagram of the activity of a variant IgSF domain (vIgD) conjugated to an antibody (V-Mab), in which an antibody (eg, anti-HER2 antibody) binds to an antigen on the surface of a tumor cell. In this image, vIgD is a variant of the IgSF domain from ICOSL. As shown, antibody binding to the surface of a tumor cell localizes vIgD to the surface of tumor cells, where it can interact with one or more of its cognate binding partners expressed on the surface of an adjacent immune cell (eg, T cell) to exert an agonistic effect on receptor signaling. In an illustrative embodiment, the variant IgSF domain (vIgD) is shown to be a variant of the IgSF domain from ICOSL. Binding of ICOSL vIgD to the costimulatory receptors CD28 or ICOS provides an agonistic or costimulatory signal.

Фиг. 18 изображает транскрипционную сигнатуру первичных T-клеток человека при инкубации с 10 нМ анти-CD3 с 40 нМ контрольного белка Fc, ICOSL-Fc дикого типа, CD80-Fc дикого типа, с, обоими этими белками или вариантными ICOSL-Fc-гибридными белками с указанными мутациями. Общую РНК из образцов получали из собранных клеток и переносили РНК на Nanostring, а чип Cancer Immune использовали для количественного определения транскриптов 750 генов в каждом образце. Измененные транскрипты включают те, уровень которых выше или ниже диагональной линии, включая отмеченные транскрипты.Fig. 18 depicts the transcriptional signature of primary human T cells when incubated with 10 nM anti-CD3 with 40 nM control Fc protein, wild-type ICOSL-Fc, wild-type CD80-Fc, both, or variant ICOSL-Fc fusion proteins with the specified mutations. Total RNA from the samples was obtained from the collected cells and the RNA was transferred to Nanostring, and the Cancer Immune chip was used to quantify the transcripts of 750 genes in each sample. Altered transcripts include those above or below the diagonal line, including the flagged transcripts.

На фиг. 19 показаны уровни транскриптов примерных транскриптов при инкубации, как описано на фиг. 18 в указанные моменты времени в присутствие различных иммуномодулирующих белков.In fig. 19 shows transcript levels of exemplary transcripts during incubation as described in FIG. 18 at the indicated time points in the presence of various immunomodulatory proteins.

На фиг. 20A-20B показана VmAb-опосредованная пролиферация T-клеток при совместном культивировании с мишенями, экспрессирующими HER2. Меченые CFSE пан T-клетки активировали с помощью искусственных клеток-мишеней, полученных из клеток K562, презентирующих анти-CD3 одноцепочечные Fv (OKT3) и HER2 на поверхности клетки, в присутствии VmAb или контрольных белков. Пролиферацию измеряли с помощью проточного цитометрического анализа по разведению CFSE в окрашенных CD4 + (левая панель) или окрашенных CD8 + (правая панель) T-клетках. На фиг. 20A клетки K562 титровали и покрывали с T-клетками в соотношении эффектор:мишень (E:T) от 40 до 1280:1. VmAb, родительский домен IgSF или WT ICOSL добавляли при 1000 пМ. На фиг. 20B, клетки K562 добавляли к T-клеткам для соотношения E:T 160: 1. VmAb или контрольные белки титровали и добавляли при температуре от 3000 до 37 пМ.In fig. 20A-20B show VmAb-mediated proliferation of T cells when co-cultured with HER2-expressing targets. CFSE-labeled pan T cells were activated with artificial target cells derived from K562 cells presenting anti-CD3 single-chain Fv (OKT3) and HER2 on the cell surface, in the presence of VmAb or control proteins. Proliferation was measured by flow cytometric analysis of CFSE dilution in stained CD4 + (left panel) or stained CD8 + (right panel) T cells. In fig. 20A K562 cells were titrated and plated with T cells at effector:target (E:T) ratios ranging from 40 to 1280:1. VmAb, IgSF parent domain, or WT ICOSL were added at 1000 pM. In fig. 20B, K562 cells were added to T cells for an E:T ratio of 160:1. VmAbs or control proteins were titrated and added at 3000 to 37 pM.

На фиг. 21 показаны исследования пролиферации T-клеток, трансдуцированных различными трансмембранными иммуномодулирующими белками (TIP), содержащими домен IgSF, и примерными рекомбинантными E6-специфическими TCR в первичных T-клетках человека.In fig. 21 shows proliferation studies of T cells transduced with various IgSF domain-containing transmembrane immunomodulatory proteins (TIPs) and exemplary recombinant E6-specific TCRs in primary human T cells.

Фиг. 22A-22G демонстрируют SEC-анализ протеолиза в молекулах Fc-гибридов с вариантными ICOSL, содержащих мутации N52H/N57Y/Q100R/F172S, полученные в различных референсных последовательностях, таких как белки Fc-гибридов с укороченным ICOSL ECD, Fc-гибридов с отдельным доменом IgV ICOSL, и/или Fc-гибридов с вариантными ICOSL с мутациями в N207G/L208G относительно референсной последовательности внеклеточного домена (ECD) ICOSL, приведенной в SEQ ID NO: 32. Молекулы экспрессировали с использованием клеток, полученных из ExpiCHO-S.Fig. 22A-22G show SEC analysis of proteolysis in ICOSL variant Fc hybrid molecules containing N52H/N57Y/Q100R/F172S mutations derived from various reference sequences, such as ICOSL ECD truncated Fc hybrid proteins, separate domain Fc hybrids IgV ICOSL, and/or Fc hybrids with variant ICOSLs with mutations in N207G/L208G relative to the ICOSL extracellular domain (ECD) reference sequence given in SEQ ID NO: 32. The molecules were expressed using ExpiCHO-S-derived cells.

На фиг. 23A-23B представлена пролиферация человеческих CD4 и CD8 T-клеток, стимулированных клетками K652, экспрессирующими вариантные TIP ICOSL, содержащие ECD, включающий аффинномодифицированный IgSF с аминокислотными мутациями, соответствующими N52H/N57Y/Q100P (SEQ ID NO: 288), N52H/N57Y/Q100R (SEQ ID NO: 283) иIn fig. 23A-23B show proliferation of human CD4 and CD8 T cells stimulated with K652 cells expressing variant ICOSL TIPs containing ECD including affinity modified IgSF with amino acid mutations corresponding to N52H/N57Y/Q100P (SEQ ID NO: 288), N52H/N57Y/ Q100R (SEQ ID NO: 283) and

E16V/N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/Y152C/K156M/C198R (SEQ ID NO: 300).E16V/N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/Y152C/K156M/C198R (SEQ ID NO: 300).

Фиг. 24A демонстрирует связывание V-mAb с HER2 и CD28. Фиг. 24B-24F демонстрируют результаты костимуляции VmAb T-клеток с использованием системы трансфицированных клеток на основе клеток Jurkat с люциферазным репортером промотора IL-2, показывающие, что V-mAb обеспечивали значительный костимулирующий сигнал в присутствии клеток HER2 + K562/OKT3.Fig. 24A shows V-mAb binding to HER2 and CD28. Fig. 24B-24F show the results of VmAb costimulation of T cells using a Jurkat cell-based transfected cell system with an IL-2 promoter luciferase reporter, showing that the V-mAbs provided a significant costimulatory signal in the presence of HER2 + K562/OKT3 cells.

На фиг. 25A-25D изображено связывание стековых Fc-гибридных молекул с клетками, экспрессирующими когнатных партнеров по связыванию B7H6 (фиг. 25A), ICOS (фиг. 25B), CD28 (фиг. 25C) и CTLA-4 (фиг. 25D).In fig. 25A-25D depict the binding of stacked Fc fusion molecules to cells expressing cognate binding partners B7H6 (FIG. 25A), ICOS (FIG. 25B), CD28 (FIG. 25C), and CTLA-4 (FIG. 25D).

На фиг. 26A-26B представлены исследования биологической активности для образцов протестированных стековых белков ICOSL/NKp30.In fig. 26A-26B show biological activity studies for samples of the tested ICOSL/NKp30 stack proteins.

На фиг. 27 изображена пролиферация, индуцированная стековыми белками ICOSL/NKp30, измеренная с помощью проточной цитометрии при разведении CFSE на окрашенных CD4 + или CD8 + Tклетках.In fig. 27 depicts proliferation induced by ICOSL/NKp30 stack proteins measured by flow cytometry at CFSE dilution on stained CD4+ or CD8+ T cells.

- 19 044346- 19 044346

На фиг. 28 показаны противоопухолевые эффекты комбинации протестированного стекового белкаIn fig. Figure 28 shows the antitumor effects of the tested stack protein combination.

ICOSL/NKp30 и mAb mPD-1.ICOSL/NKp30 and mAb mPD-1.

На фиг. 29A-29E показана противовоспалительная активность профилактической дозы примерной молекулы Fc-гибрида с ICOSL IgV в модели коллаген-индуцированного артрита (CIA), включая средний суммарный балл лапы (фиг. 29A), детектируемый CII IgG (фиг. 29B) уровни сывороточных цитокинов (фиг. 29C), CD44 + активированные T-клетки или TFH-клетки (фиг. 29D) и фракция B-клеток в дренирующем лимфатическом узле (фиг. 29E).In fig. 29A-29E show the anti-inflammatory activity of a prophylactic dose of an exemplary ICOSL IgV Fc hybrid molecule in a collagen-induced arthritis (CIA) model, including mean paw total score (FIG. 29A), CII IgG detection (FIG. 29B), and serum cytokine levels (FIG. 29C), CD44+ activated T cells or TFH cells (Figure 29D) and a fraction of B cells in the draining lymph node (Figure 29E).

На фиг. 30A-30D показана противовоспалительная активность при введении дозы с замедленным высвобождением примерной молекулы гибрида Fc с ICOSL IgV в модели коллаген-индуцированного артрита (CIA), включая средний суммарный балл лапы (фиг. 30A) и уровни цитокинов в сыворотке (фиг. 30C-30D).In fig. 30A-30D show the anti-inflammatory activity of sustained release dosing of an exemplary Fc-ICOSL IgV hybrid molecule in a collagen-induced arthritis (CIA) model, including mean paw total score (FIG. 30A) and serum cytokine levels (FIGS. 30C-30D ).

На фиг. 31A-31D показаны противовоспалительная активность замедленного дозирования примерной молекулы гибрида Fc с ICOSL IgV в модели экспериментального аутоиммунного энцефаломиелита (EAE), включая балл EAE (фиг. 31A), проточный цитометрический анализ T-клеток пахового лимфатического узла (фиг. 31C) и провоспалительные цитокины (фиг. 31D).In fig. 31A-31D show the anti-inflammatory activity of a sustained dose of an exemplary ICOSL IgV Fc hybrid molecule in an experimental autoimmune encephalomyelitis (EAE) model, including EAE score (FIG. 31A), flow cytometric analysis of inguinal lymph node T cells (FIG. 31C), and proinflammatory cytokines (Fig. 31D).

На фиг. 32A-32B изображен балл выживаемости и DAI у мышей с болезнью трансплантат против хозяина (GvHD), получавших различные дозы (20, 100 или 500 мкг) молекулы вариантного ICOSL IgVFc.In fig. 32A-32B depict the survival score and DAI in graft-versus-host disease (GvHD) mice treated with various doses (20, 100, or 500 μg) of the variant ICOSL IgVFc molecule.

На фиг. 33A-33F показаны результаты анализа проточной цитометрии соотношения трансплантат против хозяина (GvHD) клеток человека/клеток мыши в собранной крови (фиг. 33A) или общего количества T-клеток (фиг. 33B) в конце исследование и оценка клеток ICOS+ CD4+ или CD8+ (фиг. 33C-33D) или клеток CD28 + CD4+ или CD8+ (фиг. 33E-33F) из мышей с болезнью трансплантат против хозяина (GvHD), получавших различные дозы (20, 100 или 500 мкг) вариантной молекулы ICOSL IgV-Fc.In fig. 33A-33F show flow cytometry analysis of graft-versus-host ratio (GvHD) of human cells/mouse cells in collected blood (FIG. 33A) or total T cells (FIG. 33B) at the end of the study and evaluation of ICOS+ CD4+ or CD8+ cells ( FIGS. 33C-33D) or CD28+ CD4+ or CD8+ cells (FIGS. 33E-33F) from graft-versus-host disease (GvHD) mice treated with various doses (20, 100, or 500 μg) of the variant ICOSL IgV-Fc molecule.

На фиг. 34A-34B изображена экспрессия маркеров активации или истощения T-клеток у мышей с болезнью трансплантат против хозяина (GvHD), получавших различные дозы (20, 100 или 500 мкг) вариантной молекулы ICOSL IgV-Fc.In fig. 34A-34B depict the expression of markers of T cell activation or exhaustion in graft-versus-host disease (GvHD) mice treated with various doses (20, 100, or 500 μg) of the variant ICOSL IgV-Fc molecule.

На фиг. 34C показано отношение T-эффекторных клеток (Teff) к T-регуляторным клеткам (Treg) у мышей с болезнью трансплантат против хозяина (GvHD), которых лечили различными дозами (20, 100 или 500 мкг) вариантной молекулы ICOSL IgV-Fc.In fig. 34C shows the ratio of T effector cells (Teff) to T regulatory cells (Treg) in graft-versus-host disease (GvHD) mice treated with various doses (20, 100, or 500 μg) of the variant ICOSL IgV-Fc molecule.

На фиг. 35A-35D изображены сывороточные провоспалительные цитокины от мышей трансплантат против хозяина (GvHD), которых лечили различными дозами (20, 100 или 500 мкг) вариантной молекулы ICOSL IgV-Fc. На фиг. 35E изображено экспонирование в сыворотке вариантного ICOSL IgV-Fc (N52H/N57Y/Q100R) в модели GVHD по сравнению с нормальными мышами.In fig. 35A-35D depict serum proinflammatory cytokines from graft-versus-host (GvHD) mice treated with various doses (20, 100, or 500 μg) of the variant ICOSL IgV-Fc molecule. In fig. 35E depicts the serum exposure of variant ICOSL IgV-Fc (N52H/N57Y/Q100R) in the GVHD model compared to normal mice.

На фиг. 36A показаны результаты DAI, а на фиг. 36B показаны результаты гистологии обработки примерного вариантного ICOSL IgV-Fc по индексу активности болезни (DAI), рассчитанному по массе тела и баллам стула в модели индуцированного колита CD4 + CD45RBhigh.In fig. 36A shows the DAI results, and FIG. 36B shows the histology results of treatment of an exemplary variant ICOSL IgV-Fc by Disease Activity Index (DAI) calculated from body weight and stool scores in the CD4+CD45RBhigh induced colitis model.

Подробное описаниеDetailed description

Предлагаемое в данном документе является иммуномодулирующими белками, которые представляют собой или включают варианты или мутанты лиганда ICOS (ICOSL) или их специфические связывающие фрагменты, которые обладают активностью связываться, по меньшей мере, с одним когнатным партнером связывания целевого лиганда (также называемым контрструктурным белком). В некоторых воплощениях вариантные полипептиды ICOSL содержат одну или несколько аминокислотных модификаций (например, аминокислотные замены, делеции или добавления) по сравнению с референсным (например, немодифицированным полипептидом) ICOSL или полипептидом ICOSL дикого типа. В некоторых воплощениях одна или несколько аминокислотных модификаций (например, аминокислотные замены, делеции или добавления) находятся в домене суперсемейства иммуноглобулинов (IgSF) (например, IgV) референсного (например, немодифицированного) полипептида ICOSL или полипептида ICOSL дикого типа. В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL демонстрирует измененную, например, повышенную или пониженную, связывающую активность или аффинность, по меньшей мере, по отношению к одному когнатному связывающему партнеру, такому как, по меньшей мере, один из ICOS, CD28 или CTLA-4. В некоторых воплощениях иммуномодулирующие белки являются растворимыми. В некоторых воплощениях иммуномодулирующими белками являются трансмембранные иммуномодулирующие белки, способные экспрессироваться на поверхности клеток. В некоторых воплощениях в данном документе также представлены один или несколько других иммуномодулирующих белков, которые представляют собой конъюгаты или гибридные белки, содержащие вариантный полипептид ICOSL, представленный в данном документе, и один или несколько других фрагментов или полипептидов.Provided herein are immunomodulatory proteins that are or include variants or mutants of ICOS ligand (ICOSL) or specific binding fragments thereof that have the activity of binding to at least one cognate binding partner of a target ligand (also referred to as a counterstructural protein). In some embodiments, variant ICOSL polypeptides contain one or more amino acid modifications (eg, amino acid substitutions, deletions, or additions) compared to a reference (eg, unmodified polypeptide) ICOSL or wild-type ICOSL polypeptide. In some embodiments, one or more amino acid modifications (e.g., amino acid substitutions, deletions, or additions) are in the immunoglobulin superfamily (IgSF) domain (e.g., IgV) of a reference (e.g., unmodified) ICOSL polypeptide or a wild-type ICOSL polypeptide. In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide exhibits altered, eg, increased or decreased, binding activity or affinity for at least one cognate binding partner, such as at least one of ICOS, CD28, or CTLA-4. In some embodiments, the immunomodulatory proteins are soluble. In some embodiments, the immunomodulatory proteins are transmembrane immunomodulatory proteins capable of being expressed on the surface of cells. In some embodiments, also provided herein are one or more other immunomodulatory proteins that are conjugates or fusion proteins comprising a variant ICOSL polypeptide provided herein and one or more other fragments or polypeptides.

В некоторых воплощениях вариантные полипептиды ICOSL и иммуномодулирующие белки модулируют иммунный ответ, например, увеличенный или уменьшенный иммунный ответ. В некоторых воплощениях вариантные полипептиды ICOSL и иммуномодулирующие белки, представленные в данном документе, могут быть использованы для лечения заболеваний или состояний, которые связаны с дисрегулированным иммунным ответом.In some embodiments, variant ICOSL polypeptides and immunomodulatory proteins modulate an immune response, eg, an increased or decreased immune response. In some embodiments, the ICOSL variant polypeptides and immunomodulatory proteins provided herein can be used to treat diseases or conditions that are associated with a dysregulated immune response.

В некоторых воплощениях предлагаемые вариантные полипептиды ICOSL модулируют активациюIn some embodiments, the proposed ICOSL variant polypeptides modulate the activation

- 20 044346- 20 044346

T-клеток посредством взаимодействия с костимулирующими сигнальными молекулами. В общем, антигенспецифическая T-клеточная активация требует двух различных сигналов. Первый сигнал обеспечивается взаимодействием T-клеточного рецептора (TCR) с антигенами, ассоциированными с главными комплексами гистосовместимости (MHC), присутствующими на антигенпрезентирующих клетках (APC). Второй сигнал является костимулирующим для вовлечения TCR и необходим для предотвращения апоптоза или анергии T-клеток.T cells through interaction with co-stimulatory signaling molecules. In general, antigen-specific T cell activation requires two distinct signals. The first signal is provided by the interaction of the T cell receptor (TCR) with antigens associated with major histocompatibility complexes (MHC) present on antigen presenting cells (APCs). The second signal is costimulatory for TCR engagement and is required to prevent T cell apoptosis or anergy.

В некоторых воплощениях в нормальных физиологических условиях опосредованный T-клетками иммунный ответ инициируется распознаванием антигена T-клеточным рецептором (TCR) и регулируется балансом костимулирующих и ингибирующих сигналов (т.е. иммунных чекпоинт-рецепторов). Иммунная система опирается на иммунные чекпоинт-рецепторы для того, чтобы предотвратить аутоиммунитет (то есть, аутотолерантность) и защитить ткани от чрезмерного повреждения во время иммунного ответа, например, во время атаки на патогенную инфекцию. В некоторых случаях, однако, эти иммуномодулирующие белки могут быть дисрегулированы при заболеваниях и состояниях, включая опухоли, в качестве механизма уклонения от иммунной системы.In some embodiments, under normal physiological conditions, the T cell-mediated immune response is initiated by T cell receptor (TCR) antigen recognition and is regulated by a balance of co-stimulatory and inhibitory signals (ie, immune checkpoint receptors). The immune system relies on immune checkpoint receptors to prevent autoimmunity (ie, self-tolerance) and to protect tissues from excessive damage during an immune response, such as during an attack against a pathogenic infection. In some cases, however, these immunomodulatory proteins may be dysregulated in diseases and conditions, including tumors, as an immune evasion mechanism.

В некоторых воплощениях, среди известных T-клеточных костимулирующих рецепторов представлен CD28, который является T-клеточным рецептором для костимулирующих лигандов B7-1 (CD80) и B7-2 (CD86), оба из которых присутствуют на APC. Эти же лиганды могут также связываться с ингибирующим T-клеточным рецептором CTLA4 (цитотоксический T-лимфоцитарный белок 4) с большей аффинностью, чем с CD28; связывание с CTLA-4 действует для понижающей модуляции иммунного ответа. ICOS (индуцируемый костимулятор) является еще одним T-клеточным костимулирующим рецептором, который связывается с лигандом ICOS (ICOSL) на APC. В некоторых случаях также известно, что CD28 и CTLA-4 взаимодействуют с ICOSL в сайте связывания, который перекрывается со связыванием ICOSL с T-клеточным костимулирующим рецептором ICOS (Yao et al. (2011) Immunity, 34:729-740). Хотя CD28 и ICOS относятся к активирующим рецепторам семейства CD28, которые имеют некоторые общие внутриклеточные сигнальные мотивы, костимулирующие эффекты между CD28 и ICOS различаются. Например, CD28 экспрессируется как на неактивированных, так и на активированных T-клетках, и его сигнальный путь важен для продуцирования IL-2 и последующей эффекторной функции T-клеток. ICOS обычно не экспрессируется на поверхности T-клеток до момента активации T-клеток, а передача сигналов через ICOS на активированных T-клетках поддерживает специализированную дифференцировку подмножества T-клеток. Таким образом, в некоторых случаях костимуляция CD28 и ICOS дает перекрывающиеся и дополнительные эффекты.In some embodiments, known T cell costimulatory receptors include CD28, which is a T cell receptor for the costimulatory ligands B7-1 (CD80) and B7-2 (CD86), both of which are present on APC. These same ligands can also bind to the inhibitory T-cell receptor CTLA4 (cytotoxic T-lymphocyte protein 4) with greater affinity than CD28; binding to CTLA-4 acts to down-modulate the immune response. ICOS (inducible costimulatory receptor) is another T cell costimulatory receptor that binds to ICOS ligand (ICOSL) on APC. In some cases, CD28 and CTLA-4 are also known to interact with ICOSL at a binding site that overlaps with ICOSL binding to the T cell costimulatory receptor ICOS (Yao et al. (2011) Immunity, 34:729-740). Although CD28 and ICOS are members of the CD28 family of activating receptors that share some common intracellular signaling motifs, the costimulatory effects between CD28 and ICOS differ. For example, CD28 is expressed on both unactivated and activated T cells, and its signaling pathway is important for IL-2 production and subsequent T cell effector function. ICOS is not typically expressed on the surface of T cells until T cell activation, and signaling through ICOS on activated T cells supports the specialized differentiation of a subset of T cells. Thus, in some cases, co-stimulation of CD28 and ICOS has overlapping and additive effects.

В некоторых аспектах T-клетки экспрессируют костимуляторные молекулы CD28 и ICOS, которые взаимодействуют с CD80/CD86 и ICOSL, соответственно, на антигенпрезентирующих клетках (APC). В лимфоидных органах профессиональные APC (то есть дендритные клетки, макрофаги и B-клетки) экспрессируют CD80, CD86 и ICOSL и вовлекают CD28+/ICOS+ T-клетки. В некоторых воплощениях активированные T-клетки могут затем дифференцироваться в эффекторные клетки, такие как CD8 + цитотоксические T-клетки (CTL), IL-17A/F-секретирующие CD4+ Th17 клетки или CD4+ фолликулярные хелперные клетки (TFH). Экспрессирующие TFH CD40L вовлекают B-клетки в лимфоидные фолликулы и выделяют цитокины (например, IL-21), индуцируя дифференцировку B-клеток в плазматические клетки, секретирующие антитела (Ab). Плазматические клетки могут продуцировать повреждающие ткани антитела, например, антитела против ревматоидного фактора (RF) и цитруллинированных пептидов (ACPA) у людей, и анти-коллагеновые (CII) антитела у мышей, которые могут образовывать иммунные комплексы и отложения в суставах и других тканях. ICOSL также может быть экспрессирован на непрофессиональных APC, что приводит к активации T-клеток в нелимфоидных тканях и дальнейшему повреждению тканей и суставов.In some aspects, T cells express the costimulatory molecules CD28 and ICOS, which interact with CD80/CD86 and ICOSL, respectively, on antigen presenting cells (APCs). In lymphoid organs, professional APCs (i.e., dendritic cells, macrophages, and B cells) express CD80, CD86, and ICOSL and recruit CD28+/ICOS+ T cells. In some embodiments, the activated T cells can then differentiate into effector cells, such as CD8+ cytotoxic T cells (CTL), IL-17A/F-secreting CD4+ Th17 cells, or CD4+ follicular helper (TFH) cells. TFH-expressing CD40L recruits B cells to lymphoid follicles and releases cytokines (eg, IL-21), inducing B cells to differentiate into antibody-secreting plasma cells (Abs). Plasma cells can produce tissue-damaging antibodies, such as anti-rheumatoid factor (RF) and anti-citrullinated peptide (ACPA) antibodies in humans, and anti-collagen (CII) antibodies in mice, which can form immune complexes and deposits in joints and other tissues. ICOSL can also be expressed on nonprofessional APCs, leading to T cell activation in nonlymphoid tissues and further tissue and joint damage.

В некоторых аспектах CD4+ Th1-, Th9- и Th17-клетки участвуют в качестве ключевых факторов развития рассеянного склероза (MS) путем усиления воспаления в ЦНС как при рассеянном склерозе, так и при экспериментальном аутоиммунном энцефаломиелите и фолликулярные CD4+ ICOS+ CXCR5+ Tхелперы увеличиваются в PBMC при ремиттирующем и коррелирующем с прогрессированием заболевания при вторично прогрессирующем MS. В некоторых воплощениях значительно повышена экспрессия гена ICOS в клетках спинномозговой жидкости, при вторичном прогрессирующем MS, и наблюдается повышенный процент общих моноцитов и моноцитов, экспрессирующих ICOSL. ICOSL также экспрессируется на непрофессиональных APC, что приводит к активации T-клеток в нелимфоидных тканях и дальнейшему повреждению тканей.In some aspects, CD4+ Th1, Th9, and Th17 cells are implicated as key drivers of multiple sclerosis (MS) by increasing inflammation in the CNS in both multiple sclerosis and experimental autoimmune encephalomyelitis, and follicular CD4+ ICOS+ CXCR5+ T helper cells are increased in PBMCs in remitting and correlating with disease progression in secondary progressive MS. In some embodiments, ICOS gene expression is significantly increased in cerebrospinal fluid cells in secondary progressive MS, and an increased percentage of total monocytes and monocytes expressing ICOSL is observed. ICOSL is also expressed on nonprofessional APCs, leading to T cell activation in nonlymphoid tissues and further tissue damage.

Среди предлагаемых вариантных полипептидов ICOSL находятся полипептиды, которые при модификации одной или несколькими аминокислотными модификациями домена IgSF референсного полипептида ICOSL проявляют повышенную аффинность связывания с CD28 и/или ICOS. В некоторых случаях общее увеличение связывания с ICOS в предлагаемых вариантах меньше, чем увеличение связывания с CD28, поскольку ICOSL дикого типа уже демонстрирует существенно более высокую аффинность связывания с ICOS, чем с CD28. Также предлагаются различные форматы предлагаемых вариантных полипептидов. Как показано в данном документе, альтернативные форматы могут облегчать манипулирование иммунным ответом и, следовательно, терапевтическое применение. Например, в данном докуменAmong the proposed ICOSL variant polypeptides are polypeptides that, when modified with one or more amino acid modifications of the IgSF domain of the ICOSL reference polypeptide, exhibit increased binding affinity for CD28 and/or ICOS. In some cases, the overall increase in binding to ICOS in the proposed embodiments is less than the increase in binding to CD28, since wild-type ICOSL already exhibits substantially higher binding affinity to ICOS than to CD28. Various formats of the proposed variant polypeptides are also provided. As demonstrated herein, alternative formats may facilitate manipulation of the immune response and hence therapeutic application. For example, in this document

- 21 044346 те показано, что доставка усиленных белков ICOSL в растворимых форматах противодействует активации T-клеток путем ингибирования передачи сигналов CD28 и/или ICOS. В других примерах привязывание различных молекул ICOSL к поверхности облегчает активацию T-клеток, обеспечивая костимуляторный сигнал. Предусмотрены различные стратегии привязывания для локализации доставки костимулирующего сигнала T-клеток, включая, без ограничения указанным, прямое нанесение покрытия на пластик, использование другого вариантного домена IgSF для локализации на белке-мишени, связанном с пластиной или экспрессируемом на клеточной поверхности, или слияние вариантного белка ICOSL с опухолеспецифическим моноклональным антителом.- 21 044346 have shown that delivery of enhanced ICOSL proteins in soluble formats counteracts T cell activation by inhibiting CD28 and/or ICOS signaling. In other examples, tethering various ICOSL molecules to a surface facilitates T cell activation by providing a costimulatory signal. Various tethering strategies are contemplated to localize delivery of the T cell co-stimulatory signal, including, but not limited to, direct coating of the plastic, use of a different variant IgSF domain to localize to a target protein bound to the plate or expressed on the cell surface, or fusion of the variant protein. ICOSL with tumor-specific monoclonal antibody.

В некоторых воплощениях модуляция иммунной сигнализации, достигаемая предлагаемыми вариантными полипептидами ICOSL и иммуномодулирующими полипептидами, предлагает преимущества для лечения воспалительных и аутоиммунных расстройств и других заболеваний и состояний по сравнению с другими способами лечения. Однако в некоторых случаях, однако, терапии для вмешательства и изменения костимулирующих эффектов обоих рецепторов ограничены требованиями пространственной ориентации, а также ограничениями по размеру, налагаемыми границами иммунологического синапса. В некоторых аспектах существующие терапевтические лекарственные средства, в том числе антитела, могут быть не способны взаимодействовать одновременно с несколькими целевыми белками, участвующими в модулировании этих взаимодействий. Кроме того, в некоторых случаях существующие терапевтические лекарственные средства могут обладать способностью к антагонизму, но не к агонизму в отношении иммунного ответа. Кроме того, фармакокинетические различия между лекарственными средствами, которые независимо нацелены на один или другой из этих двух рецепторов, могут создавать трудности в правильном поддержании желаемой концентрации в крови таких комбинаций лекарств на протяжении всего курса лечения.In some embodiments, the modulation of immune signaling achieved by the proposed ICOSL variant polypeptides and immunomodulatory polypeptides offers advantages for the treatment of inflammatory and autoimmune disorders and other diseases and conditions compared to other treatments. In some cases, however, therapies to interfere with and modify the co-stimulatory effects of both receptors are limited by spatial orientation requirements as well as size restrictions imposed by the boundaries of the immunological synapse. In some aspects, existing therapeutic drugs, including antibodies, may not be able to interact simultaneously with multiple target proteins involved in modulating these interactions. In addition, in some cases, existing therapeutic drugs may have the ability to antagonize, but not agonize, the immune response. In addition, pharmacokinetic differences between drugs that independently target one or the other of these two receptors may make it difficult to properly maintain the desired blood concentrations of such drug combinations throughout the course of treatment.

В некоторых воплощениях предлагаемые вариантные полипептиды ICOSL или иммуномодулирующие белки модулируют (например, увеличивают или уменьшают) иммунологическую активность, вызванную костимулирующими рецепторами CD28 или ICOS. Таким образом, в некоторых воплощениях предоставленные полипептиды преодолевают эти ограничения, предоставляя вариантный ICOSL (индуцибельный костимулирующий лиганд) с измененными (например, увеличенными или уменьшенными) аффинностями связывания как с CD28, так и с ICOS, а в некоторых случаях CTLA-4, тем самым оказывая агонистическое или антагонистическое воздействие на комплементарные эффекты костимуляции рецепторами. Также предлагаются способы создания и применения этих вариантов ICOSL.In some embodiments, the proposed variant ICOSL polypeptides or immunomodulatory proteins modulate (eg, increase or decrease) the immunological activity caused by CD28 or ICOS co-stimulatory receptors. Thus, in some embodiments, the provided polypeptides overcome these limitations by providing a variant ICOSL (inducible costimulatory ligand) with altered (e.g., increased or decreased) binding affinities for both CD28 and ICOS, and in some cases CTLA-4, thereby having an agonistic or antagonistic effect on the complementary effects of receptor costimulation. Methods for creating and using these ICOSL variants are also provided.

В некоторых аспектах предоставленные молекулы также могут быть более эффективными, чем другие растворимые терапевтические белковые агенты. Например, было показано, что абатацепт (CTLA-4Fc) препятствует костимуляции T-клеток, ослабляя реакции T-клеток в условиях аутоиммунного заболевания, например, для лечение ревматоидного артрита, псориатического артрита и ювенильного идиопатического артрита, и белатацепта, вариантной молекулы CTLA-4-Fc, для отторжения трансплантата. Эти белки CTLA-4-Fc, однако, связываются с CD80 и CD86 и препятствуют тому, чтобы эти костимулирующие лиганды вовлекались и включались только CD28. Представленные в данном документе вариантные полипептиды ICOSL в некоторых случаях проявляют аффинность связывания и повышенную активность как для CD28, так и для ICOS.In some aspects, the provided molecules may also be more effective than other soluble therapeutic protein agents. For example, abatacept (CTLA-4Fc) has been shown to interfere with T cell costimulation, impairing T cell responses in autoimmune disease settings, such as for the treatment of rheumatoid arthritis, psoriatic arthritis, and juvenile idiopathic arthritis, and belatacept, a variant CTLA-4 molecule -Fc, for graft rejection. These CTLA-4-Fc proteins, however, bind to CD80 and CD86 and prevent these co-stimulatory ligands from being recruited and only CD28 is recruited. The variant ICOSL polypeptides presented herein in some cases exhibit binding affinity and increased activity for both CD28 and ICOS.

Кроме того, способность форматировать вариантные полипептиды в различных конфигурациях, чтобы, в зависимости от контекста, дейсвовать на иммунный ответ антагонистически или агонистически, обеспечивает гибкость в терапевтических применениях, основанную на одинаковом увеличении связывания и активности вариантного ICOSL для партнеров по связыванию. В некоторых воплощениях конкретный формат может быть выбран для искомого терапевтического применения. В некоторых примерах, как описано, иммуномодулирующий полипептид, содержащий вариантный полипептид ICOSL, предлагается в формате, например, в виде Fc-гибридного белка, для того, чтобы оказывать антагонистичное воздействие или блокировать активность его когнатного партнера связывания, например, CD28. В некоторых воплощениях блокирование или ингибирование костимулирующей передачи сигналов через CD28 или ICOS может быть полезным для подавления иммунного ответа, что может быть полезно при лечении воспалительных или аутоиммунных нарушений (например, рассеянного склероза или воспаления головного мозга) или при трансплантации органов. В качестве примера, привязывание вариантных белков ICOSL к поверхности может доставлять локализованный костимулирующий сигнал, который в некоторых аспектах может использоваться для нацеливания на опухолевую ткань для доставки локализованной костимуляции в инфильтрирующие опухоль T-клетки. В большинстве первичных опухолей отсутствует экспрессия костимулирующих молекул, таких как CD80, CD86 или ICOSL, и, таким образом, противоопухолевые ответы T-клеток могут быть скомпрометированы отсутствием костимуляции (Yu et al. (1998) Int. Immunol. 10:791-797). Путем локализации костимулирующих доменов в опухолевых клетках с использованием локализующего опухоль фрагмента, такого как Nkp30, локализованного в опухолевых клетках B7H6 или опухолеспецифического антитела, ответы T-клеток могут быть усилены в отсутствие экспрессируемых опухолью костимулирующих белков.In addition, the ability to format variant polypeptides in different configurations to act antagonistically or agonistically on the immune response, depending on the context, provides flexibility in therapeutic applications based on uniformly increasing the binding and activity of the variant ICOSL to binding partners. In some embodiments, a particular format may be selected for the therapeutic use sought. In some examples, as described, an immunomodulatory polypeptide comprising a variant ICOSL polypeptide is provided in a format, for example, as an Fc fusion protein, to antagonize or block the activity of its cognate binding partner, for example, CD28. In some embodiments, blocking or inhibiting co-stimulatory signaling through CD28 or ICOS may be useful in suppressing the immune response, which may be useful in the treatment of inflammatory or autoimmune disorders (eg, multiple sclerosis or inflammation of the brain) or in organ transplantation. As an example, tethering variant ICOSL proteins to a surface can deliver a localized costimulatory signal, which in some aspects can be used to target tumor tissue to deliver localized costimulation to tumor-infiltrating T cells. Most primary tumors lack expression of costimulatory molecules such as CD80, CD86 or ICOSL, and thus antitumor T cell responses may be compromised by the lack of costimulation (Yu et al. (1998) Int. Immunol. 10:791-797) . By localizing costimulatory domains to tumor cells using a tumor-localizing fragment such as Nkp30 tumor cell-localized B7H6 or a tumor-specific antibody, T cell responses can be enhanced in the absence of tumor-expressed costimulatory proteins.

Все публикации, в том числе патенты, патентные заявки, научные статьи и базы данных, упомянутые в данном описании, включены в настоящее описание ссылкой в полном объеме для всех целей в тойAll publications, including patents, patent applications, scientific articles and databases mentioned in this description, are incorporated herein by reference in their entirety for all purposes.

- 22 044346 же степени, как если бы каждая отдельная публикация, включая патент, патентную заявку, научную статью или базу данных, была специально и индивидуально указана для включения в качестве ссылки. Если определение, изложенное в данном документе, противоречит или иным образом противоречит определению, изложенному в патентах, заявках, опубликованных заявках и других публикациях, которые включены в настоящее описание посредством ссылки, определение, изложенное в настоящем документе, превалирует над определением, которое включено в данный документ ссылкой.- 22 044346 the same degree as if each individual publication, including a patent, patent application, scientific article or database, had been specifically and individually designated for incorporation by reference. To the extent that a definition set forth herein conflicts or is otherwise inconsistent with a definition set forth in patents, applications, published applications, and other publications that are incorporated herein by reference, the definition set forth herein shall prevail over the definition that is incorporated herein. document reference.

Используемые в данном документе заголовки разделов предназначены только для организационных целей и не должны истолковываться как ограничивающие описанный объект изобретения.The section headings used herein are for organizational purposes only and should not be construed as limiting the subject matter described.

I. ОпределенияI. Definitions

Если не указано иное, все термины данной области, обозначения и другие технические и научные термины или терминология, используемые в данном документе, имеют тот же смысл, который обычно понимается специалистом в данной области, к которой относится заявленный объект изобретения. В некоторых случаях, термины с общепризнанно понимаемыми значениями определяются в данном документе для ясности и/или в качестве быстрой справки, и включение таких определений в данном документе не должно обязательно толковаться как представляющую существенное отличие от того что обычно понимается в данной области.Unless otherwise indicated, all terms of the art, designations and other technical and scientific terms or terminology used herein have the same meaning as commonly understood by one skilled in the art to which the claimed subject matter pertains. In some cases, terms with commonly understood meanings are defined herein for clarity and/or as a quick reference, and the inclusion of such definitions herein should not necessarily be construed as representing a material difference from what is commonly understood in the art.

Термины, используемые в данном описании, определяются следующим образом, если иное не ограничено в конкретных случаях. При использовании в описании и прилагаемой формуле изобретения, слова, имеющие значение в форме единственного числа, включают множественное число, если контекст явно не указывает иное. Если не указано иное, все технические и научные термины, акронимы и аббревиатуры, используемые в данном документе, имеют то же значение, которое обычно понимается специалистом в данной области техники, к которому относится изобретение. Если не указано иное, аббревиатуры и символы для химических и биохимических названий соответствуют номенклатуре IUPAC-IUB. Если не указано иное, все числовые диапазоны включают значения, определяющие диапазон, и все целочисленные значения между ними.The terms used in this description are defined as follows, unless otherwise limited in specific cases. As used in the specification and the accompanying claims, words having a singular meaning include the plural unless the context clearly indicates otherwise. Unless otherwise specified, all technical and scientific terms, acronyms and abbreviations used herein have the same meaning as commonly understood by one skilled in the art to which the invention pertains. Unless otherwise noted, abbreviations and symbols for chemical and biochemical names follow IUPAC-IUB nomenclature. Unless otherwise noted, all numeric ranges include the values that define the range and all integer values in between.

Термин с модифицированной аффинностью, используемый в контексте домена суперсемейства иммуноглобулинов, означает домен суперсемейства иммуноглобулинов млекопитающих (IgSF), имеющий измененную аминокислотную последовательность (относительно соответствующего родительского или немодифицированного домена IgSF дикого типа), благодаря которой он имеет повышенную или пониженную аффинность или авидность связывания, по меньшей мере, по отношению к одному из его когнатных партнеров связывания (в ином случае контрструктур) по сравнению с родительским контрольным доменом IgSF дикого типа или немодифицированным (т.е. без модифицированной аффинности) контрольным доменом IgSF. В этом контексте включен аффинный модифицированный домен ICOSL IgSF. В некоторых воплощениях домен IgSF с модифицированной аффинностью может содержать 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30 или более аминокислотных различий, таких как аминокислотные замены, в референсном (например, немодифицированным) доменом IgSF дикого типа. Увеличение или уменьшение аффинности или авидности связывания можно определить с использованием хорошо известных анализов связывания, таких как проточная цитометрия. Larsen et al., American Journal of Transplantation, Vol 5: 443-453 (2005). См. Также Linsley et al., Immunity, Vol. 1: 793-801 (1994). Увеличение аффинности или авидности связывания белка или с его когнатным партнером(ами) является значением, по меньшей мере, на 10% большим, чем в случае контрольного значения домена IgSF дикого типа, а в некоторых воплощениях, по меньшей мере, на 20, 30, 40, 50, 100, 200, 300, 500, 1000, 5000 или 10000% больше, чем контрольное значение домена IgSF дикого типа. Снижение аффинности или авидности связывания белка, по меньшей мере, с одним из его когнатных партнеров связывания представляет собой значение не больше чем 90% от контроля, но не менее 10% контрольного значения домена IgSF дикого типа и в некоторых воплощениях не более 80, 70, 60, 50, 40, 30 или 20%, но не менее 10% от контрольного значения домена IgSF дикого типа. Белок с модифицированной аффинностью изменен в первичной аминокислотной последовательности заменой, добавлением или делецией аминокислотных остатков. Термин домен IgSF с модифицированной аффинностью не следует истолковывать как наложение какого-либо условия для какой-либо конкретной исходной композиции или способа, с помощью которого был создан домен с модифицированной афинностью IgSF. Таким образом, аффинность модифицированных доменов IgSF по настоящему изобретению не ограничено доменами IgF дикого типа, которые затем трансформируются в домен IgSF с модифицированной аффинностью любым конкретным процессом модификации аффинности. Полипептид домена IgSF с модифицированной аффинностью, может, например, быть получен на основании информации о последовательности домена IgSF млекопитающего дикого типа, затем смоделирован in silico для связывания с его когнатным партнером связывания и, наконец, рекомбинантно или химически синтезирован так, чтобы получить композицию домена IgSF с модифицированной аффинностью объекта изобретения. В одном альтернативном примере домен IgSF с модифицированной аффинностью может быть создан путем сайтнаправленного мутагенеза домена IgSF дикого типа. Таким образом, домен IgSF с модифицированной аффинностью обозначает продукт и не обязательно продукт, полученный любым данным способом. Могут быть использованы различные способы, включая рекомбинантные способы, химический синтез илиThe term modified affinity, as used in the context of an immunoglobulin superfamily domain, means a mammalian immunoglobulin superfamily (IgSF) domain having an altered amino acid sequence (relative to the corresponding parent or unmodified wild-type IgSF domain) such that it has increased or decreased binding affinity or avidity, according to to at least one of its cognate binding partners (otherwise counterstructures) compared to the parental wild-type IgSF control domain or the unmodified (ie, no affinity modified) IgSF control domain. In this context, the affinity modified ICOSL domain of IgSF is included. In some embodiments, the affinity modified IgSF domain may comprise 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30 or more amino acid differences, such as amino acid substitutions, in the reference (eg, unmodified) wild-type IgSF domain. Increases or decreases in binding affinity or avidity can be determined using well-known binding assays such as flow cytometry. Larsen et al., American Journal of Transplantation, Vol 5: 443-453 (2005). See also Linsley et al., Immunity, Vol. 1: 793-801 (1994). The increase in binding affinity or avidity of the protein or to its cognate partner(s) is a value of at least 10% greater than that of the wild-type IgSF domain control value, and in some embodiments, at least 20, 30, 40, 50, 100, 200, 300, 500, 1000, 5000 or 10000% greater than the wild-type IgSF domain control value. The reduction in binding affinity or avidity of a protein to at least one of its cognate binding partners is a value of no more than 90% of the control, but not less than 10% of the control value of the wild-type IgSF domain and in some embodiments no more than 80, 70, 60, 50, 40, 30 or 20%, but not less than 10% of the wild-type IgSF domain control value. An affinity modified protein is altered in the primary amino acid sequence by substitution, addition or deletion of amino acid residues. The term affinity modified IgSF domain should not be construed as imposing any condition on any particular parent composition or method by which the affinity modified IgSF domain was created. Thus, the affinity modified IgSF domains of the present invention are not limited to wild-type IgF domains, which are then transformed into an affinity modified IgSF domain by any particular affinity modification process. An affinity-modified IgSF domain polypeptide may, for example, be derived from wild-type mammalian IgSF domain sequence information, then modeled in silico to bind to its cognate binding partner, and finally recombinantly or chemically synthesized to yield an IgSF domain composition with modified affinity of the subject matter of the invention. In one alternative example, an affinity-modified IgSF domain can be created by site-directed mutagenesis of a wild-type IgSF domain. Thus, an affinity modified IgSF domain designates a product and not necessarily a product produced by any given method. Various methods can be used, including recombinant methods, chemical synthesis or

- 23 044346 их комбинации.- 23 044346 their combinations.

Используемый в данном документе термин аллогенный означает клетку или ткань, которые удаляют из одного организма, а затем вводят или адоптивно переносят в генетически непохожий организм одного и того же вида. В некоторых воплощениях изобретения вид является мышью или человеком.As used herein, the term allogeneic means a cell or tissue that is removed from one organism and then introduced or adopted into a genetically dissimilar organism of the same species. In some embodiments of the invention, the species is a mouse or a human.

Термин аутологичный, используемый в данном документе, означает клетку или ткань, которые удаляются из того же организма, в который они позже вводятся или адоптивно переносятся. Аутологичная клетка или ткань могут быть изменены, например, методами рекомбинантных ДНК, так что они уже не идентичны генетически нативной клетке или нативной ткани, которые удаляется из организма. Например, нативная аутологичная T-клетка может быть генетически модифицирована методами рекомбинантных ДНК, чтобы стать аутологичной сконструированной клеткой, экспрессирующей трансмембранный иммуномодулирующий белок и/или химерный антигенный рецептор (CAR), который в некоторых случаях включает конструирование T-клетки или TIL (инфильтрирующего опухоли лимфоцита). Затем сконструированные клетки вводят в пациента, из которого была выделена нативная T-клетка. В некоторых воплощениях организм является человеком или мышью.The term autologous as used herein means a cell or tissue that is removed from the same organism into which it is later introduced or adopted. An autologous cell or tissue can be altered, for example, by recombinant DNA techniques, so that it is no longer genetically identical to the native cell or tissue that is removed from the body. For example, a native autologous T cell can be genetically modified by recombinant DNA techniques to become an autologous engineered cell expressing a transmembrane immunomodulatory protein and/or a chimeric antigen receptor (CAR), which in some cases involves engineering a T cell or TIL (tumor infiltrating lymphocyte) ). The engineered cells are then injected into the patient from which the native T cell was isolated. In some embodiments, the organism is a human or a mouse.

Термины аффинность связывания и авидность связывания, используемые в данном описании, означает специфическую аффинность связывания и специфическую авидность связывания, соответственно, белка с его контрструктурой при определенных условиях связывания. В биохимической кинетике авидность относится к накопленной силе множественной аффинности отдельных нековалентных связывающих взаимодействий, таких как между ICOSL и ее контрструктурами ICOS и/или CD28. Таким образом, авидность отличается от аффинности, которая описывает силу одного взаимодействия. Увеличение или затухание аффинности связывания варианта ICOSL, содержащего аффинный модифицированный домен ICOSL IgSF, с его контрструктурой определяют относительно аффинности связывания немодифицированного ICOSL, такого как немодифицированный ICOSL, содержащий домен IgSF нативного или дикого типа, такого как домен IgV. Способы определения аффинности или авидности связывания известны в данной области техники. Например, см., Larsen et al., American Journal of Transplantation, Vol 5: 443-453 (2005). В некоторых воплощениях вариантный ICOSL по изобретению (то есть белок ICOSL, содержащий домен IgSF с модифицированной аффинностью) специфически связывается с CD28 и/или ICOS, измеренным проточной цитометрией с аффинностью связывания, которая дает значение средней интенсивности флуоресценции (MFI), по меньшей мере, 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90 или на 100% больше, чем контроль ICOSL дикого типа в анализе связывания, как описано в примере 6.The terms binding affinity and binding avidity as used herein mean the specific binding affinity and specific binding avidity, respectively, of a protein with its counterstructure under certain binding conditions. In biochemical kinetics, avidity refers to the accumulated strength of multiple affinities of individual noncovalent binding interactions, such as between ICOSL and its counterstructures ICOS and/or CD28. Thus, avidity is different from affinity, which describes the strength of a single interaction. The increase or decrease in binding affinity of an ICOSL variant containing an affinity-modified IgSF ICOSL domain to its counterstructure is determined relative to the binding affinity of an unmodified ICOSL, such as an unmodified ICOSL containing a native or wild-type IgSF domain, such as an IgV domain. Methods for determining binding affinity or avidity are known in the art. For example, see Larsen et al., American Journal of Transplantation, Vol 5: 443-453 (2005). In some embodiments, a variant ICOSL of the invention (i.e., an ICOSL protein containing an affinity-modified IgSF domain) specifically binds to CD28 and/or ICOS as measured by flow cytometry with a binding affinity that yields a mean fluorescence intensity (MFI) value of at least 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90 or 100% more than the wild-type ICOSL control in the binding assay as described in Example 6.

Термин биологический период полужизни относится к количеству времени, которое требуется для вещества, такого как иммуномодулирующий полипептид, содержащего вариантный ICOSL по настоящему изобретению, потерять половину своей фармакологической или физиологической активности или концентрации. На биологический период полужизни может влиять выделение, экскреция, деградация (например, ферментативная) вещества или поглощение и концентрирование в определенных органах или тканях организма. В некоторых воплощениях биологический период полужизни можно оценить, определив время, необходимое для того, чтобы концентрация в плазме крови в крови достигла половины своего уровня стационарного состояния (период полужизни в плазме). Конъюгаты, которые могут быть использованы для дериватизации и увеличения биологического периода полужизни полипептидов по изобретению, известны в данной области и включают, без ограничения указанным, полиэтиленгликоль (PEG), гидроксиэтилкрахмал (HES), XTEN (удлиненные рекомбинантные пептиды, WO 2013130683), альбумин сыворотки человека (HSA), альбумин бычьей сыворотки (BSA), липиды (ацилирование) и поли-Pro-Ala-Ser (PAS), полиглутаминовую кислоту (глутамилирование).The term biological half-life refers to the amount of time it takes for a substance, such as an immunomodulatory polypeptide containing a variant ICOSL of the present invention, to lose half of its pharmacological or physiological activity or concentration. The biological half-life may be affected by the release, excretion, degradation (eg, enzymatic) of the substance, or absorption and concentration in specific organs or tissues of the body. In some embodiments, the biological half-life can be estimated by determining the time required for the plasma concentration in the blood to reach half its steady-state level (plasma half-life). Conjugates that can be used to derivatize and increase the biological half-life of the polypeptides of the invention are known in the art and include, but are not limited to, polyethylene glycol (PEG), hydroxyethyl starch (HES), XTEN (extended recombinant peptides, WO 2013130683), serum albumin human (HSA), bovine serum albumin (BSA), lipids (acylation) and poly-Pro-Ala-Ser (PAS), polyglutamic acid (glutamylation).

Используемый в данном документе термин химерный антигенный рецептор или CAR относится к искусственному (то есть изготовленному человеком) трансмембранному белку, экспрессируемому в клетке млекопитающего, который включает, по меньшей мере, эктодомен, трансмембранный домен и эндодомен. Необязательно, белок CAR включает спейсер, который ковалентно связывает эктодомен с трансмембранным доменом. Спейсер часто представляет собой полипептид, связывающий эктодомен с трансмембранным доменом посредством пептидных связей. CAR обычно экспрессируется в лимфоците млекопитающих. В некоторых воплощениях CAR экспрессируется в клетке млекопитающего, такой как T-клетка или инфильтрирующий опухоль лимфоцит (TIL). CAR, экспрессируемый на T-клетках, упоминается в данном документе как CAR T-клетка или CAR-T. В некоторых воплощениях CAR-T представляет собой хелперную T-клетку, цитотоксическую T-клетку, T-клетку естественного киллера, Tклетку памяти, регуляторную T-клетку или гамма-дельта-Т-клетку. При использовании в клинической практике, например, при адоптивном переносе клеток, CAR-T с антигенсвязывающей специфичностью к опухоли пациента обычно конструируется для экспрессии на нативной T-клетке, полученной из пациента. Сконстуированная T-клетка, экспрессирующая CAR, затем вводится обратно пациенту. Таким образом, CAR-T часто является аутологичной CAR-T, хотя аллогенные CAR-T включены в объем изобретения. Эктодомен CAR включает антигенсвязывающую область, такую как антитело или его антигенсвязывающий фрагмент (например, scFv), который специфически связывается в физиологических условиях с антигеном, таким как опухолеспецифический антиген. При специфическом связывании биохимическая цепь событий (т.е. сигнальная трансдукция) приводит к модуляции иммунологической активности CAR- 24 044346As used herein, the term chimeric antigen receptor or CAR refers to an artificial (ie, man-made) transmembrane protein expressed in a mammalian cell that includes at least an ectodomain, a transmembrane domain, and an endodomain. Optionally, the CAR protein includes a spacer that covalently links the ectodomain to the transmembrane domain. The spacer is often a polypeptide that links the ectodomain to the transmembrane domain via peptide bonds. CAR is typically expressed in mammalian lymphocyte. In some embodiments, the CAR is expressed in a mammalian cell, such as a T cell or tumor infiltrating lymphocyte (TIL). CAR expressed on T cells is referred to herein as CAR T cell or CAR-T. In some embodiments, the CAR-T is a helper T cell, a cytotoxic T cell, a natural killer T cell, a memory T cell, a regulatory T cell, or a gamma delta T cell. When used in clinical practice, such as adoptive cell transfer, a CAR-T with antigen-binding specificity for a patient's tumor is typically engineered for expression on a native T cell derived from the patient. The engineered T cell expressing the CAR is then injected back into the patient. Thus, the CAR-T is often an autologous CAR-T, although allogeneic CAR-Ts are included within the scope of the invention. The CAR ectodomain includes an antigen-binding region, such as an antibody or an antigen-binding fragment thereof (eg, scFv), which specifically binds under physiological conditions to an antigen, such as a tumor-specific antigen. Upon specific binding, a biochemical chain of events (i.e. signal transduction) leads to modulation of the immunological activity of CAR- 24 044346

T. Так, например, при специфическом связывании антигенсвязывающей области CAR-T с его антигеном может приводить к изменениям иммунологической активности активности T-клеток, что отражается на изменениях цитотоксичности, пролиферации или продукции цитокинов. Передача сигнала при активации CAR достигается в некоторых воплощениях CD3-дзета цепью (CD3-z), которая участвует в трансдукции сигнала в нативных T-клетках млекопитающего. CAR-T могут дополнительно содержать несколько доменов сигнализации, таких как CD28, 41BB или OX40, для дальнейшей модуляции иммуномодулирующего ответа T-клетки. CD3-z включает консервативный мотив, известный как мотив активации на основе тирозина на основе иммунорецептора (ITAM), который участвует в трансдукции сигнала T-клеточного рецептора.T. For example, when the antigen-binding region of CAR-T specifically binds to its antigen, it can lead to changes in the immunological activity of T-cell activity, which is reflected in changes in cytotoxicity, proliferation or cytokine production. Signal transduction upon CAR activation is achieved in some embodiments by the CD3 zeta chain (CD3-z), which is involved in signal transduction in native mammalian T cells. CAR-Ts may additionally contain multiple signaling domains, such as CD28, 41BB, or OX40, to further modulate the T cell's immunomodulatory response. CD3-z includes a conserved motif known as the immunoreceptor-based tyrosine activation motif (ITAM), which is involved in T cell receptor signal transduction.

Термин совокупно или совокупный, когда используется в отношении выработки цитокинов, вызванной наличием двух или более вариантов ICOSL по изобретению в анализе in vitro, означает общий уровень экспрессии цитокинов независимо от выработки цитокинов, индуцированной индивидуальным вариантом ICOSL. В некоторых воплощениях анализируемый цитокин представляет собой IFN-гамма в анализе первичной T-клетки in vitro, такой как описанный в примере 6 и Примере 7.The term collectively or cumulatively, when used in relation to cytokine production induced by the presence of two or more ICOSL variants of the invention in an in vitro assay, means the overall level of cytokine expression independent of the cytokine production induced by an individual ICOSL variant. In some embodiments, the cytokine analyzed is IFN-gamma in an in vitro primary T cell assay, such as described in Example 6 and Example 7.

Термины когнатный партнер связывания или контрструктура в отношении полипептида, например, в отношении домена IgSF варианта ICOSL, относится, по меньшей мере, к одной молекуле (обычно к нативному белку млекопитающего), с которой референсный полипептид связывается в определенных условиях связывания. В некоторых аспектах вариантный ICOSL, содержащий домен IgSF с модифицированной аффинностью, специфически связывается с контрструктурой соответствующего нативного ICOSL или ICOSL дикого типа, но с повышенной или аттенуированной аффинностью. Вид лиганда, распознаваемый и специфически связывающийся с его родственным рецептором в условиях специфического связывания, является примером контрструктуры или когнатного партнера связывания этого рецептора. Когнатный партнер связывания клеточной поверхности является когнатным партнером связывания, экспрессированным на поверхности клеток млекопитающих. Молекулярное соединение клеточной поверхности является когнатным партнером связывания лигандов иммунологического синапса (IS), экспрессируемым на клетках и клетками, такими как клетки млекопитающих, образующие иммунологический синапс.The terms cognate binding partner or counterstructure with respect to a polypeptide, for example with respect to the IgSF domain of an ICOSL variant, refers to at least one molecule (usually a native mammalian protein) to which the reference polypeptide binds under certain binding conditions. In some aspects, a variant ICOSL containing an affinity-modified IgSF domain specifically binds to a counterstructure of the corresponding native or wild-type ICOSL, but with increased or attenuated affinity. A species of ligand that is recognized and specifically binds to its cognate receptor under specific binding conditions is an example of a counterstructure or cognate binding partner of that receptor. A cell surface cognate binding partner is a cognate binding partner expressed on the surface of mammalian cells. The cell surface molecular junction is a cognate binding partner of immunological synapse (IS) ligands expressed on cells and by cells, such as mammalian cells, forming the immunological synapse.

При использовании в данном описании, термин конъюгат, конъюгация или его грамматические варианты относятся к присоединению или соединению вместе двух или более соединений, что приводит к образованию другого соединения, с помощью любых соединений или связывающих способов, известных в данной области техники. Он также может относиться к соединению, которое образуется путем объединения или соединения двух или более соединений. Например, вариантный полипептид ICOSL, прямо или опосредованно связанный с одним или несколькими химическими группами или полипептидом, является примерным конъюгатом. Такие конъюгаты включают гибридные белки, продуцируемые химическими конъюгатами, и те, которые получены любыми другими способами.As used herein, the term conjugate, conjugation, or grammatical variations thereof refers to the joining or joining together of two or more compounds, resulting in the formation of another compound, using any compounds or linking methods known in the art. It can also refer to a compound that is formed by combining or combining two or more compounds. For example, a variant ICOSL polypeptide linked directly or indirectly to one or more chemical groups or polypeptide is an exemplary conjugate. Such conjugates include fusion proteins produced by chemical conjugates and those produced by any other means.

Используемый в данном документе термин конкурентное связывание означает, что белок способен специфически связываться, по меньшей мере, с двумя когнатными партнерами связывания, но что специфическое связывание одного когнатного партнера связывания ингибирует, например, предотвращает или исключает одновременное связывание второго когнатного партнера связывания. Таким образом, в некоторых случаях белок может одновременно связывать два когнатных партнера связывания. Как правило, конкурентные связующие содержат тот же или перекрывающий сайт связывания для специфического связывания, но это не является обязательным требованием. В некоторых воплощениях конкурентное связывание вызывает измеримое ингибирование (частичное или полное) специфического связывания белка с одним его когнатным партнером связывания из-за специфического связывания второго когнатного партнера связывания. Известно множество способов количественного определения конкурентного связывания, таких как анализ ELISA (твердофазный иммуноферментный анализ).As used herein, the term competitive binding means that the protein is capable of specifically binding to at least two cognate binding partners, but that the specific binding of one cognate binding partner inhibits, for example, prevents or eliminates the simultaneous binding of a second cognate binding partner. Thus, in some cases, a protein can simultaneously bind two cognate binding partners. Typically, competitive binders contain the same or overlapping binding site for specific binding, but this is not a requirement. In some embodiments, competitive binding causes a measurable inhibition (partial or complete) of the specific binding of a protein to one of its cognate binding partners due to the specific binding of a second cognate binding partner. There are many known methods for quantifying competitive binding, such as ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay) assay.

Используемый в данном документе термин консервативная аминокислотная замена означает аминокислотную замену, в которой аминокислотный остаток замещен другим аминокислотным остатком, имеющим группу R боковой цепи с аналогичными химическими свойствами (например, зарядом или гидрофобностью). Примеры групп аминокислот с боковыми цепями с аналогичными химическими свойствами включают: 1) алифатические боковые цепи: глицин, аланин, валин, лейцин и изолейцин; 2) алифатические-гидроксильные боковые цепи: серин и треонин; 3) амидсодержащие боковые цепи: аспарагин и глутамин; 4) ароматические боковые цепи: фенилаланин, тирозин и триптофан; 5) основные боковые цепи: лизин, аргинин и гистидин; 6) кислотные боковые цепи: аспарагиновая кислота и глутаминовая кислота; и 7) серосодержащие боковые цепи: цистеин и метионин. Консервативными группами замещения аминокислот являются: валин-лейцин-изолейцин, фенилаланин-тирозин, лизин-аргинин, аланин-валин, глутамат-аспартат и аспарагин-глутамин.As used herein, the term conservative amino acid substitution means an amino acid substitution in which an amino acid residue is replaced by another amino acid residue having a side chain R group with similar chemical properties (eg, charge or hydrophobicity). Examples of groups of amino acids with side chains with similar chemical properties include: 1) aliphatic side chains: glycine, alanine, valine, leucine and isoleucine; 2) aliphatic-hydroxyl side chains: serine and threonine; 3) amide-containing side chains: asparagine and glutamine; 4) aromatic side chains: phenylalanine, tyrosine and tryptophan; 5) main side chains: lysine, arginine and histidine; 6) acidic side chains: aspartic acid and glutamic acid; and 7) sulfur-containing side chains: cysteine and methionine. Conservative amino acid substitution groups are: valine-leucine-isoleucine, phenylalanine-tyrosine, lysine-arginine, alanine-valine, glutamate-aspartate and asparagine-glutamine.

Термин соответствующий по отношению к положениям белка, такой как изложение того, что положения нуклеотидов или аминокислот соответствуют нуклеотидным или аминокислотным положениям в раскрытой последовательности, как указано в списке последовательностей, относится к нуклеотидным или аминокислотным положениям, идентифицированные при совмещении с раскрытой последовательностью, основанной на выравнивании структурной последовательности или с использованием станA term corresponding to protein positions, such as stating that nucleotide or amino acid positions correspond to nucleotide or amino acid positions in a disclosed sequence as specified in a sequence listing, refers to nucleotide or amino acid positions identified by alignment with a disclosed sequence based on an alignment structural sequence or using stan

- 25 044346 дартного алгоритма выравнивания, такого как алгоритм GAP. Например, соответствующие остатки могут быть определены путем выравнивания референсной последовательности с последовательностью, указанной в SEQ ID NO: 32 (домен ECD) или указанной в SEQ ID NO: 196 или 545 (домен IgV) методами структурного выравнивания, как описано в данном документе. Выравнивая последовательности, специалист в данной области может идентифицировать соответствующие остатки, например, используя консервативные и идентичные аминокислотные остатки в качестве направляющих.- 25 044346 dart alignment algorithm such as the GAP algorithm. For example, corresponding residues can be determined by aligning the reference sequence with the sequence specified in SEQ ID NO: 32 (ECD domain) or specified in SEQ ID NO: 196 or 545 (IgV domain) by structural alignment methods as described herein. By aligning the sequences, one skilled in the art can identify the corresponding residues, for example, using conserved and identical amino acid residues as guides.

Термины уменьшать или аттенуировать или подавлять, используемые в данном документе, означают уменьшение на статистически значимую величину. Снижение может составлять не менее 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90 или 100% контрольного значения, например, ненулевого контрольного значения.The terms reduce or attenuate or suppress as used herein mean a reduction by a statistically significant amount. The reduction may be at least 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, or 100% of the control value, for example, a non-zero control value.

Термин пониженный или уменьшенный, используемый в данном документе в контексте понижения иммунологической активности лимфоцитов млекопитающих, означает увеличение одной или нескольких активностей лимфоцитов, по сравнению с контролем, таким как необработанный контроль или контроль, в котором обработку с использованием немодифицированного или неизмененного контроля применяли в тех же условиях. Пониженная активность может относиться к одному или нескольким из числа ингибирования клеточного цикла, пониженной выживаемости клеток, уменьшенной пролиферации клеток, уменьшенной выработки цитокинов или сниженной цитотоксичности T-клеток, например, в статистически значимом количестве. В некоторых воплощениях ссылка на пониженную иммунологическую активность означает уменьшение выработки интерферона-гамма (IFN-гамма) по сравнению с отсутствием обработки, например, в статистически значимом количестве. В некоторых воплощениях иммунологическая активность может быть оценена в анализе реакции смешанных лимфоцитов (MLR). Способы проведения MLR-анализов известны в данной области. Wang et al., Cancer Immunol Res. 2014 Sep: 2(9):84656. Способы оценки активности лимфоцитов известны в данной области, включая любой анализ, как описано в данном документе. В некоторых воплощениях улучшение может представлять собой понижение, по меньшей мере, на 5, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 60, 70, 80, 90 или 100% по сравнению с контрольным значением, таким как необработанное контрольное значение или ненулевое контрольное значение.The term reduced or reduced, as used herein in the context of a decrease in the immunological activity of mammalian lymphocytes, means an increase in one or more lymphocyte activities, compared to a control, such as an untreated control or a control in which treatment using an unmodified or unchanged control was applied in the same conditions. Reduced activity may refer to one or more of cell cycle inhibition, decreased cell survival, decreased cell proliferation, decreased cytokine production, or decreased T cell cytotoxicity, for example, in a statistically significant amount. In some embodiments, reference to reduced immunological activity means a decrease in the production of interferon-gamma (IFN-gamma) compared to no treatment, for example, in a statistically significant amount. In some embodiments, immunological activity can be assessed in a mixed lymphocyte reaction (MLR) assay. Methods for performing MLR assays are known in the art. Wang et al., Cancer Immunol Res. 2014 Sep: 2(9):84656. Methods for assessing lymphocyte activity are known in the art, including any assay as described herein. In some embodiments, the improvement may be a reduction of at least 5, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 60, 70, 80, 90, or 100% compared to the control value, such as a raw control value or a non-zero control value.

Термины производные или дериватизированные относятся к модификации белка путем ковалентного связывания его, прямо или опосредованно, с композицией, с тем, чтобы изменить такие характеристики, как биологический период полужизни, биодоступность, иммуногенность, растворимость, токсичность, эффективность или эффективность при хранении или усиление его терапевтического эффекта. Производные иммуномодулирующих полипептидов по изобретению входят в объем изобретения и могут быть получены, например, путем гликозилирования, пегилирования, липидации или Fc-слияния.The terms derivative or derivatized refer to the modification of a protein by covalently linking it, directly or indirectly, to a composition so as to alter characteristics such as biological half-life, bioavailability, immunogenicity, solubility, toxicity, potency or storage efficacy, or enhance its therapeutic effect. Derivatives of the immunomodulatory polypeptides of the invention are within the scope of the invention and can be prepared, for example, by glycosylation, pegylation, lipidation or Fc fusion.

Используемый в данном документе термин домен (обычно последовательность из трех или более, обычно 5 или 7 или более аминокислот, например от 10 до 200 аминокислотных остатков) относится к части молекулы, такой как белок или кодирующая нуклеиновая кислота, который структурно и/или функционально отличен от других частей молекулы и является идентифицированным. Например, домены включают те части полипептидной цепи, которые могут образовывать независимо сложную структуру внутри белка, состоящую из одного или нескольких структурных мотивов и/или распознаваемых в силу функциональной активности, такой как связывающая активность. Белок может иметь один или несколько отдельных доменов. Например, домен может быть идентифицирован, определен или выделен с помощью гомологии первичной последовательности или структуры со связанными представителями семейства, например с помощью гомологии к мотивам. В другом примере домен может быть выделен по своей функции, такой как способность взаимодействовать с биомолекулой, такой как когнатный партнер связывания. Домен независимо может проявлять биологическую функцию или активность, так что домен независимо или слитый с другой молекулой может выполнять активность, такую как, например, связывание. Домен может представлять собой линейную аминокислотную последовательность или нелинейную аминокислотную последовательность. Многие полипептиды содержат множество доменов. Такие домены известны и могут быть идентифицированы специалистами в данной области техники. В качестве примера в данном документе приведены определения, но понятно, что специалистам в данной области техники известно, что они идентифицируют определенные домены по названию. При необходимости для идентификации доменов можно использовать соответствующее программное обеспечение.As used herein, the term domain (typically a sequence of three or more, typically 5 or 7 or more amino acids, such as 10 to 200 amino acid residues) refers to a portion of a molecule, such as a protein or encoding nucleic acid, that is structurally and/or functionally distinct from other parts of the molecule and is identified. For example, domains include those parts of a polypeptide chain that can form an independently complex structure within a protein consisting of one or more structural motifs and/or recognized by functional activity, such as binding activity. A protein may have one or more distinct domains. For example, a domain may be identified, defined, or separated by primary sequence or structure homology to related family members, such as homology to motifs. In another example, a domain may be distinguished by its function, such as the ability to interact with a biomolecule, such as a cognate binding partner. A domain can independently exhibit a biological function or activity, such that a domain independently or fused to another molecule can perform an activity, such as, for example, binding. A domain may be a linear amino acid sequence or a non-linear amino acid sequence. Many polypeptides contain multiple domains. Such domains are known and can be identified by those skilled in the art. Definitions are provided herein by way of example, but it will be understood by those skilled in the art to identify certain domains by name. If necessary, appropriate software can be used to identify domains.

Термин эктодомен, используемый в данном документе, относится к области мембранного белка, такого как трансмембранный белок, которая лежит за пределами везикулярной мембраны. Эктодомены часто включают связывающие домены, которые специфически связываются с лигандами или клеточными рецепторами поверхности, например, через связывающий домен, который специфически связывается с лигандом или рецептором поверхности клетки. Эктодомен клеточного трансмембранного белка попеременно называют внеклеточным доменом.The term ectodomain as used herein refers to the region of a membrane protein, such as a transmembrane protein, that lies outside the vesicular membrane. Ectodomains often include binding domains that specifically bind to ligands or cell surface receptors, for example, through a binding domain that specifically binds to a ligand or cell surface receptor. The ectodomain of a cellular transmembrane protein is alternately called the extracellular domain.

Термины эффективное количество или терапевтически эффективное количество относится к количеству и/или концентрации терапевтической композиции по настоящему изобретению, в том числе композиции белка или клеточной композиции, которые при введении ex vivo (при контакте с клеткой от пациента) или in vivo (путем введения пациенту) либо самостоятельно (то есть, как монотерапия), либо вThe terms effective amount or therapeutically effective amount refers to the amount and/or concentration of a therapeutic composition of the present invention, including a protein composition or cellular composition, which when administered ex vivo (by contact with a cell from a patient) or in vivo (by administration to a patient) either alone (that is, as monotherapy), or in

- 26 044346 сочетании с дополнительными терапевтическими агентами приводит к статистически значимому снижению прогресса заболевания, например, путем улучшения или устранения симптомов и/или причины заболевания. Эффективным количеством может быть количество, которое уменьшает или уменьшает, по меньшей мере, один симптом или биологический ответ или эффект, связанный с заболеванием или расстройством, предотвращает прогрессирование заболевания или расстройства или улучшает физическое функционирование пациента. В случае клеточной терапии эффективное количество представляет собой эффективную дозу или количество клеток, вводимых пациенту с помощью адоптивной клеточной терапии. В некоторых воплощениях пациент является млекопитающим, таким как примат, не являющийся человеком, или человеком.- 26 044346 combination with additional therapeutic agents leads to a statistically significant reduction in disease progression, for example, by improving or eliminating symptoms and/or the cause of the disease. An effective amount may be an amount that reduces or reduces at least one symptom or biological response or effect associated with a disease or disorder, prevents the progression of a disease or disorder, or improves the physical functioning of a patient. In the case of cell therapy, the effective amount is the effective dose or number of cells administered to a patient using adoptive cell therapy. In some embodiments, the patient is a mammal, such as a non-human primate or a human.

Используемый в данном документе термин эндодомен относится к области, обнаруженной в некоторых мембранных белках, таких как трансмембранные белки, которые простираются во внутреннее пространство, определяемое поверхностной мембраной клетки. В клетках млекопитающих эндодомен представляет собой цитоплазматическую область мембранного белка. В клетках эндодомен взаимодействует с внутриклеточными компонентами и может играть роль в трансдукции сигнала и, следовательно, в некоторых случаях может быть внутриклеточным сигнальным доменом. Эндодомен клеточного трансмембранного белка попеременно называют цитоплазматическим доменом, который в некоторых случаях может быть цитоплазматическим сигнальным доменом.As used herein, the term endodomain refers to the region found in some membrane proteins, such as transmembrane proteins, that extend into the interior space defined by the surface membrane of the cell. In mammalian cells, the endodomain is the cytoplasmic region of a membrane protein. In cells, the endodomain interacts with intracellular components and may play a role in signal transduction and therefore, in some cases, may be an intracellular signaling domain. The endodomain of a cellular transmembrane protein is alternately called the cytoplasmic domain, which in some cases may be the cytoplasmic signaling domain.

Термин усиленный или увеличенный, используемый в данном документе в контексте повышения иммунологической активности лимфоцитов млекопитающих, означает увеличение одной или нескольких активностей лимфоцитов, по сравнению с контролем, таким как необработанный контроль или контроль, в котором обработку с использованием немодифицированного или неизмененного контроля применяли в тех же условиях. Повышенная активность может быть одной или более из числа увеличения выживаемости клеток, пролиферации клеток, продуцирования цитокинов или цитотоксичности T-клеток, таких как статистически значимое количество. В некоторых воплощениях ссылка на повышенную иммунологическую активность означает увеличение выработки интерферона гамма (IFN-гамма), например, статистически значимого количества. В некоторых воплощениях иммунологическая активность может быть оценена в анализе реакции смешанных лимфоцитов (MLR). Способы проведения MLR-анализов известны в данной области. Wang et al., Cancer Immunol Res. 2014 Sep: 2(9):846-56. Способы оценки активности лимфоцитов известны в данной области, включая любой анализ, как описано в данном документе. В некоторых воплощениях повышение может быть увеличением, по меньшей мере, на 10, 20, 30, 40, 50, 75, 100, 200, 300, 400 или 500% больше, чем ненулевое контрольное значение.The term enhanced or increased, as used herein in the context of increasing the immunological activity of mammalian lymphocytes, means an increase in one or more lymphocyte activities, compared to a control, such as an untreated control or a control in which treatment using an unmodified or unchanged control was applied in the same conditions. The increased activity may be one or more of increased cell survival, cell proliferation, cytokine production, or T cell cytotoxicity, such as a statistically significant amount. In some embodiments, reference to increased immunological activity means an increase in the production of interferon gamma (IFN-gamma), for example, a statistically significant amount. In some embodiments, immunological activity can be assessed in a mixed lymphocyte reaction (MLR) assay. Methods for performing MLR assays are known in the art. Wang et al., Cancer Immunol Res. 2014 Sep: 2(9):846-56. Methods for assessing lymphocyte activity are known in the art, including any assay as described herein. In some embodiments, the increase may be an increase of at least 10, 20, 30, 40, 50, 75, 100, 200, 300, 400, or 500% greater than the non-zero reference value.

Используемый в данном документе термин сконструированная клетка относится к клетке млекопитающего, которая была генетически модифицирована путем вмешательства человека, например, методами рекомбинантных ДНК или вирусной трансдукцией. В некоторых воплощениях клетка представляет собой иммунную клетку, такую как лимфоцит (например, T-клетка, B-клетка, NK-клетка) или антигенпрезентирующая клетка (например, дендритная клетка). Клетка может быть первичной клеткой из пациента или может быть клеточной линией. В некоторых воплощениях сконструированная клетка по изобретению содержит вариантный ICOSL, представленный в данном документе. В некоторых воплощениях вариантный ICOSL представляет собой трансмембранный иммуномодулирующий белок (далее называемый TIP), который экспрессируется на сконструированной клетке. В некоторых воплощениях TIP содержит внеклеточный домен или его часть, содержащую домен IgV, связанный с трансмембранным доменом (например, трансмембранным доменом ICOSL), и, необязательно, внутриклеточный сигнальный домен. В некоторых случаях TIP отформатирован как гибридный рецептор, содержащий гетерологичный цитоплазматический сигнальный домен или эндодомен. В некоторых воплощениях, сконструированная клетка способна экспрессировать и секретировать в иммуномодулирующий белок, как описано в данном документе. Среди предлагаемого сконструированные клетки также являются клетками, дополнительно содержащими сконструированный T-клеточный рецептор (TCR) или химерный антигенный рецептор (CAR).As used herein, the term engineered cell refers to a mammalian cell that has been genetically modified through human intervention, such as recombinant DNA techniques or viral transduction. In some embodiments, the cell is an immune cell, such as a lymphocyte (eg, T cell, B cell, NK cell) or an antigen presenting cell (eg, dendritic cell). The cell may be a primary cell from a patient or may be a cell line. In some embodiments, the engineered cell of the invention comprises a variant ICOSL provided herein. In some embodiments, the variant ICOSL is a transmembrane immunomodulatory protein (hereinafter referred to as TIP) that is expressed on an engineered cell. In some embodiments, the TIP comprises an extracellular domain or a portion thereof comprising an IgV domain linked to a transmembrane domain (eg, an ICOSL transmembrane domain), and optionally an intracellular signaling domain. In some cases, TIP is formatted as a hybrid receptor containing a heterologous cytoplasmic signaling domain or endodomain. In some embodiments, the engineered cell is capable of expressing and secreting an immunomodulatory protein as described herein. Among the proposed, engineered cells are also cells further containing an engineered T-cell receptor (TCR) or chimeric antigen receptor (CAR).

Используемый в данном документе термин сконструированная T-клетка относится к T-клетке, такой как хелперная T-клетка, цитотоксическая T-клетка (в качестве варианта цитотоксический Tлимфоцит или CTL), T-клетка натуральный киллер, регуляторная T-клетка, T-клетка памяти или гаммадельта-Т-клетка, которая была генетически модифицирована путем вмешательства человека, например, методами рекомбинантных ДНК. Сконструированная T-клетка включает трансмембранный иммуномодулирующий белок (TIP) или секретируемый иммуномодулирующий белок (SIP) вариантного ICOSL по настоящему изобретению, который экспрессируется на T-клетке и сконструирован для модуляции иммунологической активности самой сконструированной T-клетки или клетки млекопитающего, с которой специфически связывается вариантный ICOSL, экспрессируемый на T-клетке. Сконструированная Tклетка может содержать вариантный ICOSL секретируемого иммуномодулирующего белка (SIP) по настоящему изобретению, который экспрессируется и/или секретируется T-клеткой и сконструирован для модуляции иммунологической активности самой сконструированной T-клетки, или клетки млекопитающего, с которой вариантный ICOSL при секреции T-клеткой специфически связывается.As used herein, the term engineered T cell refers to a T cell, such as a helper T cell, a cytotoxic T cell (optionally a cytotoxic T lymphocyte or CTL), a natural killer T cell, a regulatory T cell, a T cell memory or gammadelta T cell that has been genetically modified by human intervention, such as recombinant DNA techniques. The engineered T cell includes a transmembrane immunomodulatory protein (TIP) or secreted immunomodulatory protein (SIP) of a variant ICOSL of the present invention that is expressed on the T cell and is designed to modulate the immunological activity of the engineered T cell itself or a mammalian cell to which the variant specifically binds ICOSL expressed on a T cell. The engineered T cell may comprise a variant ICOSL of a secreted immunomodulatory protein (SIP) of the present invention that is expressed and/or secreted by the T cell and is designed to modulate the immunological activity of the engineered T cell itself, or the mammalian cell with which the variant ICOSL is secreted by the T cell binds specifically.

Термин сконструированный T-клеточный рецептор или сконструированный TCR относится к T- 27 044346 клеточному рецептору (TCR), сконструированному для специфического связывания с искомой аффинностью к главному комплексу гистосовместимости (MHC)/пептидному целевому антигену, который выбран, клонирован, и/или впоследствии вводится в популяцию T-клеток, часто используемых для адоптивной иммунотерапии. В отличие от сконструированных TCR, CAR сконструированы таким образом, чтобы связывать целевые антигены MHC-независимым образом.The term engineered T cell receptor or engineered TCR refers to a T-27 044346 cell receptor (TCR) engineered to specifically bind with the desired affinity for a major histocompatibility complex (MHC)/peptide target antigen that is selected, cloned, and/or subsequently introduced into a population of T cells often used for adoptive immunotherapy. Unlike engineered TCRs, CARs are engineered to bind target antigens in an MHC-independent manner.

Используемый в данном документе термин экспрессированный на используется в данном документе в отношении белка, экспрессируемого на поверхности клетки, такой как клетка млекопитающего. Таким образом, белок экспрессируется в виде мембранного белка. В некоторых воплощениях экспрессированный белок представляет собой трансмембранный белок. В некоторых воплощениях белок конъюгирован с низкомолекулярной группой, такой как лекарственное средство или детектируемая метка. Белки, экспрессируемые на поверхности клетки, могут включать белки клеточной поверхности, такие как рецепторы клеточной поверхности, которые экспрессируются на клетках млекопитающих.As used herein, the term "expressed" is used herein to refer to a protein expressed on the surface of a cell, such as a mammalian cell. Thus, the protein is expressed as a membrane protein. In some embodiments, the expressed protein is a transmembrane protein. In some embodiments, the protein is conjugated to a small molecule moiety, such as a drug or detectable label. Proteins expressed on the cell surface may include cell surface proteins, such as cell surface receptors, which are expressed on mammalian cells.

Термин фрагмент, увеличивающий период полужизни относится к остатку гибридного полипептида или химического конъюгата, который увеличивает период полужизни белка, циркулирующего в сыворотке крови млекопитающих по сравнению с периодом полужизни белка, который не конъюгирован с функциональным фрагментом. В некоторых воплощениях период полужизни увеличивается более чем в 1,2 раза, в 1,5 раза, в 2,0 раза, в 3,0 раза, в 4 раза, в 5,0 раз или в 6,0 раз. В некоторых воплощениях период полужизни продлевается более чем на 6 ч, более 12 ч, более 24 ч, более 48 ч, более 72 ч, более 96 ч или более чем на 1 неделю после введения in vivo по сравнению с белком без фрагмента, увеличивающего период полужизни. Период полужизни относится к количеству времени, которое требуется для того, чтобы белок потерял половину своей концентрации, количества или активности. Период полужизни можно определить, например, с помощью анализа ELISA или анализа активности. Примерные фрагменты, удлиняющие период полужизни, включают домен Fc, домен мультимеризации, полиэтиленгликоль (PEG), гидроксиэтилкрахмал (HES), XTEN (удлиненные рекомбинантные пептиды, см. WO2013130683), человеческий сывороточный альбумин (HSA), бычий сывороточный альбумин (BSA), липиды (ацилирование), поли-Pro-Ala-Ser (PAS) и полиглутаминовую кислоту (глутамилирование).The term half-life extending moiety refers to a hybrid polypeptide or chemical conjugate moiety that increases the half-life of a protein circulating in mammalian serum compared to the half-life of a protein that is not conjugated to a functional moiety. In some embodiments, the half-life is increased by more than 1.2 times, 1.5 times, 2.0 times, 3.0 times, 4 times, 5.0 times, or 6.0 times. In some embodiments, the half-life is extended by more than 6 hours, more than 12 hours, more than 24 hours, more than 48 hours, more than 72 hours, more than 96 hours, or more than 1 week after administration in vivo compared to the protein without the period extending moiety half life. Half-life refers to the amount of time it takes for a protein to lose half its concentration, quantity, or activity. The half-life can be determined, for example, using an ELISA or activity assay. Exemplary half-life extending moieties include Fc domain, multimerization domain, polyethylene glycol (PEG), hydroxyethyl starch (HES), XTEN (extended recombinant peptides, see WO2013130683), human serum albumin (HSA), bovine serum albumin (BSA), lipids (acylation), poly-Pro-Ala-Ser (PAS) and polyglutamic acid (glutamylation).

Используемый в данном документе термин иммунологический синапс или иммунный синапс означает интерфейс между клеткой млекопитающего, которая экспрессирует MHC I (основной комплекс гистосовместимости) или MHC II, такой как антигенпрезентирующая клетка или опухолевая клетка, и лимфоцит млекопитающих, такой как как эффекторная T-клетка или клетка натуральный киллер (NK).As used herein, the term immunological synapse or immune synapse means the interface between a mammalian cell that expresses MHC I (major histocompatibility complex) or MHC II, such as an antigen presenting cell or tumor cell, and a mammalian lymphocyte, such as an effector T cell or cell natural killer (NK).

Fc (фрагментированная кристаллизуемая) область или домен молекулы иммуноглобулина (также называемый полипептидом Fc) в значительной степени соответствует константной области тяжелой цепи иммуноглобулина и отвечает за различные функции, включая эффекторную функцию(ии) антитела. Область Fc включает часть или весь шарнирный домен молекулы иммуноглобулина плюс домен CH2 и CH3. Fc-домен может образовывать димер двух полипептидных цепей, соединенных одной или несколькими дисульфидными связями. В некоторых воплощениях Fc представляет собой вариант Fc, который проявляет пониженную (например, пониженную более чем на 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90% или более) активность для облегчения эффекторной функции. В некоторых воплощениях ссылка на аминокислотные замены в области Fc представляет собой систему нумерации EU, если не описывается со ссылкой на конкретный SEQ ID NO. Нумерация EU известна и соответствует последней обновленной научной карте IMGT (IMGT®, международная информационная система ImMunoGeneTics® http://www.imgt.org/IMGTScientificChart/Numbering/Hu_IGHGnber.html (создана: 17 мая 2001 г., последнее обновление: 10 января 2013 г.) и индексе EU, представленному в Kabat, Kabat, E.A. et al. Sequences of Proteins of Immunological interest. 5th ed. US Department of Health and Human Services, NIH publication No. 91-3242 (1991).The Fc (fragmented crystallizable) region or domain of an immunoglobulin molecule (also called Fc polypeptide) largely corresponds to the constant region of the immunoglobulin heavy chain and is responsible for various functions, including the effector function(s) of the antibody. The Fc region includes part or all of the hinge domain of the immunoglobulin molecule plus the CH2 and CH3 domains. The Fc domain can form a dimer of two polypeptide chains connected by one or more disulfide bonds. In some embodiments, the Fc is a variant of the Fc that exhibits reduced (eg, reduced by more than 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90% or more) activity to facilitate effector function. In some embodiments, reference to amino acid substitutions in the Fc region is the EU numbering system, unless described by reference to a specific SEQ ID NO. The EU numbering is known and corresponds to the latest updated IMGT scientific map (IMGT®, international information system ImMunoGeneTics® http://www.imgt.org/IMGTScientificChart/Numbering/Hu_IGHGnber.html (created: May 17, 2001, last updated: January 10 2013) and the EU index presented in Kabat, Kabat, E. A. et al. Sequences of Proteins of Immunological Interest. 5th ed. US Department of Health and Human Services, NIH publication No. 91-3242 (1991).

Гибридный Fc иммуноглобулина (Fc-гибрид), такой как иммуномодулирующий Fc-гибридный белок, представляет собой молекулу, содержащую один или несколько полипептидов (или одну или несколько малых молекул), функционально связанных с Fc-областью иммуноглобулина. Fc-гибрид может включать, например, Fc-область антитела (что облегчает эффекторные функции и фармакокинетику) и вариантный ICOSL. Область Fc иммуноглобулина может быть связана опосредованно или непосредственно с одним или несколькими вариантами ICOSL или с небольшими молекулами (партнерами по слиянию). Различные линкеры известны в данной области техники и могут быть использованы для связывания Fc с партнером по слиянию для получения Fc-гибрида. Fc-гибриды идентичных видов можно димеризовать с образованием гомодимеров Fc-гибридов или с использованием неидентичных видов с образованием гетеродимеров Fc-гибридов. В некоторых воплощениях Fc представляет собой Fc млекопитающего, такой как мышиный или человеческий Fc.An immunoglobulin Fc fusion (Fc fusion), such as an immunomodulatory Fc fusion protein, is a molecule containing one or more polypeptides (or one or more small molecules) operably linked to the Fc region of an immunoglobulin. The Fc hybrid may include, for example, the Fc region of an antibody (which facilitates effector functions and pharmacokinetics) and a variant ICOSL. The Fc region of an immunoglobulin may be linked indirectly or directly to one or more ICOSL variants or small molecules (fusion partners). Various linkers are known in the art and can be used to link the Fc to a fusion partner to produce an Fc hybrid. Fc hybrids of identical species can be dimerized to form homodimers of Fc hybrids or using non-identical species to form heterodimers of Fc hybrids. In some embodiments, the Fc is a mammalian Fc, such as a murine or human Fc.

Термин клетка-хозяин относится к клетке, которая может быть использована для экспрессии белка, кодируемого рекомбинантным экспрессирующим вектором. Клетка-хозяин может быть прокариотическим организмом, например, E. coli, или она может представлять собой эукариотический организм, например, одноклеточный эукариотический организм (например, дрожжи или другой гриб), растительную клетку (например, растительнцю клетку табака или томата), клетку животного (например, клетку человека, клетку обезьяны, клетку хомяка, клетку крысы, клетку мыши или клетку насекомого) или гиб- 28 044346 ридому. Примеры клеток-хозяев включают клетки яичника китайского хомячка (CHO) или их производные, такие как Veggie CHO и родственные клеточные линии, которые растут в бессывороточной среде или линия CHO DX-B11, которая дефицитна по DHFR. В некоторых воплощениях клетка-хозяин представляет собой клетку млекопитающего (например, клетку человека, клетку обезьяны, клетку хомяка, клетку крысы, клетку мыши или клетку насекомого).The term host cell refers to a cell that can be used to express the protein encoded by the recombinant expression vector. The host cell may be a prokaryotic organism, such as E. coli, or it may be a eukaryotic organism, such as a single-celled eukaryotic organism (such as yeast or other fungus), a plant cell (such as a tobacco or tomato plant cell), or an animal cell (for example, a human cell, a monkey cell, a hamster cell, a rat cell, a mouse cell or an insect cell) or a hybrid cell. Examples of host cells include Chinese hamster ovary (CHO) cells or derivatives thereof, such as Veggie CHO and related cell lines that grow in serum-free media or the CHO line DX-B11, which is DHFR deficient. In some embodiments, the host cell is a mammalian cell (eg, a human cell, a monkey cell, a hamster cell, a rat cell, a mouse cell, or an insect cell).

Термин иммуноглобулин (сокращенно Ig), при использовании в данном документе, относится к иммуноглобулиновому белку млекопитающих, включающему любой и пяти классов антитела: IgA (который включает подклассы IgA1 и IgA2), IgD, IgE, IgG (который включает подклассы IgG1 IgG2, IgG3 и IgG4) и IgM. Термин также включает иммуноглобулины, которые являются менее чем полноразмерными, будь то полностью или частично синтетическими (например, рекомбинантный или химический синтез) или природными, такими как антигенсвязывающий фрагмент (Fab), вариабельный фрагмент (Fv), содержащий VH и VL, одноцепочечный вариабельный фрагмент (scFv), содержащий VH и VL, соединенные вместе в одной цепи, а также фрагменты V-областей других антител, такие как Fab', F(ab)2, F(ab')2, dsFv, полипептидные фрагменты Fc и Fd.The term immunoglobulin (abbreviated Ig), as used herein, refers to a mammalian immunoglobulin protein comprising any of the five classes of antibodies: IgA (which includes the subclasses IgA1 and IgA2), IgD, IgE, IgG (which includes the subclasses IgG1, IgG2, IgG3, and IgG4) and IgM. The term also includes immunoglobulins that are less than full-length, whether wholly or partially synthetic (eg, recombinant or chemical synthesis) or natural, such as antigen-binding fragment (Fab), variable fragment (Fv) containing VH and VL, single chain variable fragment (scFv), containing VH and VL linked together in one chain, as well as fragments of the V regions of other antibodies, such as Fab', F(ab)2, F(ab')2, dsFv, Fc and Fd polypeptide fragments.

Биспецифические антитела, гомоспецифические и гетеробиспецифические, включены в значение термина.Bispecific antibodies, homospecific and heterobispecific, are included in the meaning of the term.

Используемый в данном документе термин суперсемейство иммуноглобулинов или IgSF означает группу белков клеточной поверхности и растворимых белков, которые участвуют в процессах распознавания, связывания или адгезии клеток. Молекулы классифицируются как представители этого надсемейства, на основании общих структурных особенностей с иммуноглобулинами (т.е. антителами); все они обладают областью, известной как домен иммуноглобулина или складка. Представители IgSF включают рецепторы антигена клеточной поверхности, корецепторы и костимулирующие молекулы иммунной системы, молекулы, участвующие в представлении антигена лимфоцитам, молекулы клеточной адгезии, некоторые рецепторы цитокинов и внутриклеточные белки мышц. Они обычно связаны с ролями в иммунной системе. Белки в иммунологическом синапсе часто являются представителями IgSF. IgSF также можно разделить на подсемейства на основании общих свойств, таких как функции. Такие подсемейства обычно включают от 4 до 30 представителей IgSF.As used herein, the term immunoglobulin superfamily or IgSF refers to a group of cell surface and soluble proteins that are involved in cell recognition, binding, or adhesion. Molecules are classified as members of this superfamily based on shared structural features with immunoglobulins (i.e. antibodies); they all possess a region known as an immunoglobulin domain or fold. Members of IgSF include cell surface antigen receptors, coreceptors and co-stimulatory molecules of the immune system, molecules involved in antigen presentation to lymphocytes, cell adhesion molecules, some cytokine receptors, and intracellular muscle proteins. They are usually associated with roles in the immune system. Proteins at the immunological synapse are often representatives of IgSF. IgSFs can also be divided into subfamilies based on common properties such as functions. Such subfamilies typically include from 4 to 30 IgSF members.

Термины домен IgSF или иммуноглобулиновый домен или домен Ig, используемый в данном документе, относится к структурному домену белков IgSF. Домены Ig названы в честь молекул иммуноглобулинов. Они содержат около 70-110 аминокислот и классифицируются в зависимости от их размера и функции. Домены Ig обладают характерной Ig-складкой, которая имеет сэндвич-подобную структуру, образованную двумя листами антипараллельных бета-цепей. Взаимодействия между гидрофобными аминокислотами на внутренней стороне сэндвича и высококонсервативными дисульфидными связями, образованными между остатками цистеина в цепях B и F, стабилизируют Ig-складку. Один конец домена Ig имеет секцию, называемую областью определения комплементарности, которая важна для специфичности антител к их лигандам. Ig-подобные домены могут быть классифицированы (в классы) как: IgV, IgC1, IgC2 или IgI. Большинство доменов Ig являются либо вариабельными (IgV), либо константными (IgC). Домены IgV с 9 бета-цепями обычно больше, чем домены IgC с 7 бета-цепями. Домены Ig некоторых представителей IgSF напоминают домены IgV по аминокислотной последовательности, но по размеру сходны с доменами IgC. Они называются доменами IgC2, тогда как стандартные домены IgC называются доменами IgC1. Цепи T-клеточного рецептора (TCR) содержат два домена Ig во внеклеточной части; один домен IgV на N-конце и один домен IgC1, рядом с клеточной мембраной. ICOSL включает два домена Ig: IgV и IgC.The terms IgSF domain or immunoglobulin domain or Ig domain as used herein refers to the structural domain of IgSF proteins. Ig domains are named after immunoglobulin molecules. They contain about 70-110 amino acids and are classified according to their size and function. Ig domains have a characteristic Ig fold, which has a sandwich-like structure formed by two sheets of antiparallel beta strands. Interactions between hydrophobic amino acids on the inside of the sandwich and highly conserved disulfide bonds formed between cysteine residues in the B and F chains stabilize the Ig fold. One end of the Ig domain has a section called the complementarity determination region, which is important for the specificity of antibodies to their ligands. Ig-like domains can be classified (in classes) as: IgV, IgC1, IgC2 or IgI. Most Ig domains are either variable (IgV) or constant (IgC). IgV domains with 9 beta chains are generally larger than IgC domains with 7 beta chains. The Ig domains of some IgSF members resemble the IgV domains in amino acid sequence but are similar in size to the IgC domains. These are called IgC2 domains, whereas standard IgC domains are called IgC1 domains. T cell receptor (TCR) chains contain two Ig domains in the extracellular portion; one IgV domain at the N-terminus and one IgC1 domain, near the cell membrane. ICOSL contains two Ig domains: IgV and IgC.

Используемый в данном документе термин виды IgSF означает совокупность белковпредставителей IgSF с идентичной или по существу идентичной первичной аминокислотной последовательностью. Каждый представитель суперсемейства иммуноглобулинов млекопитающих (IgSF) определяет уникальную идентичность всех видов IgSF, которые принадлежат этому представителю IgSF. Таким образом, каждый представитель семейства IgSF уникален среди других представителей семейства IgSF, и, соответственно, каждый вид конкретного представителя семейства IgSF уникален среди видов другого представителя семейства IgSF. Тем не менее, изменение между молекулами одного и того же вида IgSF может происходить из-за различий в посттрансляционной модификации, таких как гликозилирование, фосфорилирование, убиквитинирование, нитрозилирование, метилирование, ацетилирование и липидация. Кроме того, незначительные различия в последовательности в пределах одного вида IgSF из-за полиморфизма генов представляют собой еще одну форму вариации в пределах одного вида IgSF, и укороченные формы видов IgSF дикого типа из-за, например, протеолитического расщепления. Вид IgSF клеточной поверхности представляет собой вид IgSF, экспрессируемый на поверхности клетки, как правило, клетки млекопитающих.As used herein, the term IgSF species means a collection of IgSF member proteins with identical or substantially identical primary amino acid sequence. Each member of the mammalian immunoglobulin superfamily (IgSF) defines the unique identity of all IgSF species that belong to that IgSF member. Thus, each member of the IgSF family is unique among other members of the IgSF family, and, accordingly, each species of a particular member of the IgSF family is unique among the species of another member of the IgSF family. However, variation between molecules of the same IgSF species can occur due to differences in post-translational modifications such as glycosylation, phosphorylation, ubiquitination, nitrosylation, methylation, acetylation and lipidation. In addition, minor sequence differences within a single IgSF species due to gene polymorphism represent another form of variation within a single IgSF species, and truncated forms of wild-type IgSF species due to, for example, proteolytic cleavage. A cell surface IgSF species is a species of IgSF expressed on the surface of a cell, typically a mammalian cell.

Термин иммунологическая активность, используемый в данном описании в контексте лимфоцитов млекопитающих, таких как T-клетки, относится к одному или более из числа выживаемости клеток, пролиферации клеток, выработки цитокинов (например, интерферона-гамма) или активности Tклеточной цитотоксичности. В некоторых случаях иммунологическая активность может означать клеточную экспрессию цитокинов, таких как хемокины или интерлейкины. Анализы для определения уси- 29 044346 ления или подавления иммунологической активности включают реакции MLR (реакция смешанных лимфоцитов), измеряющие уровни интерферона-гамма-цитокинов в культуральных надосадочных жидкостях (Wang et al., Cancer Immunol Res. 2014, Sep: 2 (9): 846-56), Анализ стимуляции T-клеток SEB (стафилококковым энтеротоксином B) (Wang et al., Cancer Immunol Res. 2014, Sep: 2 (9): 846-56) и анализ стимуляции T-клеток с помощью анти-CD3 (Li and Kurlander, J Transl Med. 2010: 8: 104). Поскольку активация T-клеток связана с секрецией цитокина IFN-гамма, определение уровней IFN-гамма в культуральных надосадочных жидкостях из этих анализов T-клеток человека in vitro может быть проанализировано с использованием коммерческих наборов ELISA (Wu et al., Immunol Lett 2008 Apr 15, 117 (1): 5762). Индукция иммунного ответа приводит к увеличению иммунологической активности по сравнению с покоящимися лимфоцитами. Иммуномодулирующий белок, такой как вариантный полипептид ICOSL, содержащий домен IgSF с модифицированной аффинностью, как предусмотрено в данном документе, может в некоторых воплощениях увеличивать или в альтернативных вариантах уменьшать экспрессию IFN-гамма (интерферона-гамма) в первичном анализе T-клеток относительно представителя IgSF дикого типа или контроля домена IgSF. Специалисты признают, что формат первичного анализа T-клеток, используемый для определения увеличения экспрессии IFN-гамма, будет отличаться от формата, используемого для анализа уменьшения экспрессии IFN-гамма. При анализе способности иммуномодулирующего белка или домена IgSF с модифицированной аффинностью по изобретению уменьшать экспрессию IFN-гамма в первичном анализе T-клеток может быть использован анализ реакции смешанных лимфоцитов (MLR), как описано в примере 6. Удобно, если растворимая форма модифицированного по аффинности домена IgSF по изобретению могла быть использована для определения его способности к оказывать антогонистичное воздействие и, таким образом, к уменьшению экспрессии IFN-гамма в MLR, как описано в примере 6. В ином случае при анализе способности иммуномодулирующего белка или домена IgSF с модифицированной аффинностью изобретения увеличивать экспрессию IFN-гамма в анализе первичных T-клеток может быть использован анализ коиммобилизации. В анализе коиммобилизации сигнал Tклеточного рецептора, представленный в некоторых воплощениях анти-CD3-антителом, используется в сочетании с коиммобилизованным аффинным модифицированным доменом IgSF, таким как вариантный ICOSL, для определения способности увеличивать IFN-гамма по сравнению с контрольным доменом IgSF дикого типа. Способы исследования иммунологической активности сконструированных клеток, в том числе для оценки активности трансмембранного иммуномодулирующего белка-варианта ICOSL, известны в данной области и включают, без ограничения перечисленным, способность приводить к размножению T-клеток после стимуляции антигенами, поддерживать размножение T-клеток в отсутствие повторной стимуляции и противоопухолевые активности в соответствующих животных моделях. Анализы также включают анализы для оценки цитотоксичности, включая стандартный анализ высвобождения 51Cr (см., например, Milone et al., (2009) Molecular Therapy 17: 1453-1464) или проточные анализы цитотоксичности или анализ цитотоксичности на основе импеданса (Peper et al. (2014) Journal of Immunological Methods, 405:192-198).The term immunological activity as used herein in the context of mammalian lymphocytes such as T cells refers to one or more of cell survival, cell proliferation, cytokine production (eg, interferon-gamma) or T cell cytotoxicity activity. In some cases, immunological activity may indicate cellular expression of cytokines such as chemokines or interleukins. Assays to determine the enhancement or suppression of immunological activity include MLR reactions (mixed lymphocyte reaction), measuring the levels of interferon-gamma cytokines in culture supernatants (Wang et al., Cancer Immunol Res. 2014, Sep: 2 (9) : 846-56), SEB (Staphylococcal Enterotoxin B) T-cell stimulation assay (Wang et al., Cancer Immunol Res. 2014, Sep: 2 (9): 846-56) and T-cell stimulation assay with anti- CD3 (Li and Kurlander, J Transl Med. 2010: 8: 104). Because T cell activation is associated with secretion of the cytokine IFN-gamma, determination of IFN-gamma levels in culture supernatants from these in vitro human T cell assays can be analyzed using commercial ELISA kits (Wu et al., Immunol Lett 2008 Apr 15 , 117(1):5762). The induction of an immune response leads to an increase in immunological activity compared to resting lymphocytes. An immunomodulatory protein, such as a variant ICOSL polypeptide containing an affinity modified IgSF domain as provided herein, may in some embodiments increase or in alternative embodiments decrease IFN-gamma (interferon-gamma) expression in a T cell primary assay relative to an IgSF representative wild type or IgSF domain control. Experts recognize that the format of the primary T cell assay used to determine increases in IFN-gamma expression will be different from the format used to analyze decreases in IFN-gamma expression. When analyzing the ability of an immunomodulatory protein or affinity modified IgSF domain of the invention to reduce IFN-gamma expression in a primary T cell assay, a mixed lymphocyte response (MLR) assay can be used as described in Example 6. Conveniently, the soluble form of the affinity modified domain The IgSF of the invention could be used to determine its ability to antagonize and thereby reduce IFN-gamma expression in the MLR, as described in Example 6. Alternatively, when analyzing the ability of an immunomodulatory protein or affinity-modified IgSF domain of the invention to increase expression of IFN-gamma in the analysis of primary T cells, a co-immobilization assay can be used. In a coimmobilization assay, a T cell receptor signal, represented in some embodiments by an anti-CD3 antibody, is used in combination with a coimmobilized affinity modified IgSF domain, such as a variant ICOSL, to determine the ability to increase IFN-gamma compared to a control wild-type IgSF domain. Methods for studying the immunological activity of engineered cells, including for assessing the activity of the transmembrane immunomodulatory protein variant ICOSL, are known in the field and include, but are not limited to, the ability to lead to the proliferation of T cells after stimulation with antigens, to maintain the proliferation of T cells in the absence of repeated stimulation and antitumor activities in relevant animal models. The assays also include assays to assess cytotoxicity, including a standard 51Cr release assay (see, e.g., Milone et al., (2009) Molecular Therapy 17: 1453-1464) or flow or impedance-based cytotoxicity assays (Peper et al. (2014) Journal of Immunological Methods, 405:192-198).

Термин иммуномодулирующий полипептид или иммуномодулирующий белок представляет собой полипептид или белковую молекулу, которые модулируют иммунологическую активность. Под модуляцией или модулировать иммунный ответ подразумевается, что иммунологическая активность либо увеличивается, либо уменьшается. Иммуномодулирующим белком может быть одиночная полипептидная цепь или мультимер (димеры или мультимеры более высокого порядка), по меньшей мере, две полипептидные цепи, ковалентно связанные между собой, например, дисульфидными связями между цепями. Таким образом, мономерные, димерные и мультимерные полипептиды более высокого порядка находятся в пределах указанного термина. Мультимерные полипептиды могут быть гомомультимерными (идентичных полипептидных цепей) или гетеромультимерными (из неидентичных полипептидных цепей). Иммуномодулирующий белок по изобретению включает вариантный ICOSL.The term immunomodulatory polypeptide or immunomodulatory protein is a polypeptide or protein molecule that modulates immunological activity. By modulating or modulating the immune response is meant that immunological activity is either increased or decreased. The immunomodulatory protein can be a single polypeptide chain or a multimer (dimers or higher order multimers), at least two polypeptide chains covalently linked to each other, for example, by disulfide bonds between the chains. Thus, higher order monomeric, dimeric and multimeric polypeptides are within the scope of the term. Multimeric polypeptides can be homomultimeric (identical polypeptide chains) or heteromultimeric (non-identical polypeptide chains). The immunomodulatory protein of the invention includes a variant ICOSL.

Используемый в данном документе термин увеличение означает увеличение на статистически значимое количество. Увеличение может составлять не менее 5, 10, 20, 30, 40, 50, 75, 100% или более ненулевой контрольной величины.As used herein, the term increase means an increase by a statistically significant amount. The increase may be at least 5, 10, 20, 30, 40, 50, 75, 100% or more of the non-zero control value.

Термин изоформа ICOSL (индуцируемый костимулирующий лиганд; CD275) является одним из множества природных полипептидов ICOSL, которые отличаются по аминокислотной последовательности. Изоформы могут быть продуктом вариантов сплайсинга транскрипта РНК, экспрессируемого одним геном, или продуктом экспрессии генов с высоким сходством, но отличающихся, дающих функционально подобный белок, как, например, может происходить при дубликации генов. Используемый в данном документе термин изоформа ICOSL также относится к продукту различных аллелей гена ICOSL (например, ICOSLG).The term ICOSL isoform (inducible costimulatory ligand; CD275) is one of many naturally occurring ICOSL polypeptides that differ in amino acid sequence. Isoforms may be the product of splicing variants of an RNA transcript expressed by a single gene, or the product of expression of genes that are highly similar but distinct, yielding a functionally similar protein, as may occur, for example, in gene duplication. As used herein, the term ICOSL isoform also refers to the product of different alleles of the ICOSL gene (eg, ICOSLG).

Используемый в данном документе термин лимфоцит означает любой из трех подтипов лейкоцитов в иммунной системе млекопитающих. К ним относятся натуральные клетки-киллеры (NK-клетки) (которые функционируют в клеточно-опосредованном, цитотоксическом врожденном иммунитете), Tклетки (для клеточно-опосредованного, цитотоксического адаптивного иммунитета) и B-клетки (для гуморального, адаптивного иммунитета, управляемого антителами). T-клетки включают: хелперные Tклетки, цитотоксические T-клетки, T-клетки натуральные киллеры, T-клетки памяти, регуляторные T- 30 044346 клетки или гамма-дельта T-клетки. Врожденные лимфоидные клетки (ILC) также включены в определение лимфоцитов.As used herein, the term lymphocyte means any of the three subtypes of leukocytes in the mammalian immune system. These include natural killer cells (NK cells) (which function in cell-mediated, cytotoxic innate immunity), T cells (for cell-mediated, cytotoxic adaptive immunity), and B cells (for humoral, antibody-driven adaptive immunity) . T cells include: helper T cells, cytotoxic T cells, natural killer T cells, memory T cells, regulatory T cells, or gamma delta T cells. Innate lymphoid cells (ILCs) are also included in the definition of lymphocytes.

Термины млекопитающее или пациент специфически включают ссылку, по меньшей мере, на одного животного из числа: человека, шимпанзе, макаки-резуса, яванского макака, собаки, кошки, мыши или крысы.The terms mammal or patient specifically include reference to at least one animal among: human, chimpanzee, rhesus monkey, cynomolgus monkey, dog, cat, mouse or rat.

Используемый в данном документе термин мембранный белок означает белок, который в физиологических условиях непосредственно или опосредованно прикрепляется к липидному бислою. Липидный бислой, который образует мембрану, может быть биологической мембраной, например, эукариотической клеточной мембраной (например, из млекопитающего) или искусственной мембраной (т.е. изготовленной человеком), например, такой, которая обнаруживается на липосоме. Присоединение мембранного белка к липидному бислою может быть осуществлено путем ковалентной фиксации или путем нековалентных взаимодействий, таких как гидрофобные или электростатические взаимодействия. Мембранный белок может быть интегральным мембранным белком или белком периферической мембраны. Мембранные белки, являющиеся белками периферических мембран, нековалентно присоединены к липидному бислою или нековалентно присоединены к интегральному мембранному белку. Белок периферической мембраны образует временное прикрепление к липидному бислою, так что в диапазоне физиологических условий у млекопитающего белок периферической мембраны может ассоциироваться и/или диссоциироваться от липидного бислоя. В отличие от белков периферической мембраны, интегральные мембранные белки образуют по существу постоянную связь с липидным бислоем мембраны, так что в диапазоне условий, которые являются физиологическими у млекопитающих, интегральные мембранные белки не диссоциируются от их прикрепления к липидному бислою. Мембранный белок может образовывать прикрепление к мембране посредством одного слоя липидного бислоя (монотопный) или прикрепляться через оба слоя мембраны (политопный). Интегральный мембранный белок, который взаимодействует только с одним липидным бислоем, представляет собой интегральный монотопный белок. Интегральный мембранный белок, который взаимодействует с обоими липидными бислоями, представляет собой интегральный политопный белок, альтернативно называемый в данном документе трансмембранным белком.As used herein, the term membrane protein means a protein that, under physiological conditions, is directly or indirectly attached to a lipid bilayer. The lipid bilayer that forms the membrane may be a biological membrane, such as a eukaryotic cell membrane (eg, from a mammal) or an artificial membrane (ie, human-made), such as that found on a liposome. Attachment of a membrane protein to a lipid bilayer can be accomplished by covalent fixation or by non-covalent interactions such as hydrophobic or electrostatic interactions. The membrane protein may be an integral membrane protein or a peripheral membrane protein. Membrane proteins, which are peripheral membrane proteins, are non-covalently attached to a lipid bilayer or non-covalently attached to an integral membrane protein. The peripheral membrane protein forms a transient attachment to the lipid bilayer such that, over a range of physiological conditions in a mammal, the peripheral membrane protein can associate and/or dissociate from the lipid bilayer. Unlike peripheral membrane proteins, integral membrane proteins form a substantially permanent association with the membrane lipid bilayer such that, under the range of conditions that are physiological in mammals, integral membrane proteins do not dissociate from their attachment to the lipid bilayer. A membrane protein can form an attachment to the membrane through one layer of the lipid bilayer (monotopic) or attach through both layers of the membrane (polytopic). An integral membrane protein that interacts with only one lipid bilayer is an integral monotopic protein. An integral membrane protein that interacts with both lipid bilayers is an integral polytopic protein, alternatively referred to herein as a transmembrane protein.

Термины модулирующий или модулировать, используемый в данном описании в контексте иммунного ответа, например, иммунного ответа млекопитающего, относятся к любому изменению, например, к увеличению или уменьшению, существующих или потенциальных иммунных реакций, которые происходят в результате введения иммуномодулирующего полипептида, включающего вариантный ICOSL по настоящему изобретению, или в результате введения сконструированных клеток, экспрессирующих иммуномодулирующий белок, такой как вариант трансмембранного иммуномодулирующего белка ICOSL по настоящему изобретению. Таким образом, он относится к изменению, такому как увеличение или уменьшение иммунного ответа по сравнению с иммунным ответом, который возникает или присутствует в отсутствие введения иммуномодулирующего белка, включающего вариантный ICOSL или клеток, экспрессирующих такой иммуномодулирующий полипептид. Такая модуляция включает любую индукцию, активацию, подавление или изменение степени или величины иммунологической активности иммунной клетки. Иммунные клетки включают B-клетки, T-клетки, NK-клетки (натуральные киллеры), NK T-клетки, профессиональные антигенпрезентирующие клетки (APC) и непрофессиональные антигенпрезентирующие клетки и воспалительные клетки (нейтрофилы, макрофаги, моноциты, эозинофилы и базофилы). Модуляция включает любые изменения, связанные с существующим иммунным ответом, развивающийся иммунный ответ, потенциальный иммунный ответ или способность индуцировать, регулировать, влиять или реагировать на иммунный ответ. Модуляция включает любое изменение экспрессии и/или функции генов, белков и/или других молекул в иммунных клетках как части иммунного ответа. Модуляция иммунного ответа или модуляция иммунологической активности включает, например, следующее: элиминацию, делецию или секвестрование иммунных клеток; индукцию образования иммунных клеток, которые могут модулировать функциональную способность других клеток, таких как аутореактивные лимфоциты, антигенпрезентирующие клетки или воспалительные клетки; индукцию нечувствительного состояния в иммунных клетках (т.е. анергию); усиление или подавление активности или функции иммунных клеток, включая, без ограничения указанным, изменение структуры белков, экспрессируемых этими клетками. Примеры включают измененную выработку и/или секрецию определенных классов молекул, таких как цитокины, хемокины, перфорины, гранзимы, факторы роста, факторы транскрипции, киназы, костимулирующие молекулы или другие клеточные поверхностные рецепторы или любую комбинацию этих модуляторных событий. Модуляция может быть оценена, например, путем изменения экспрессии IFN-гамма (интерферона гамма) по сравнению с контрольным ICOSL дикого типа в анализе первичных T-клеток (см. Zhao and Ji, Exp Cell Res. 2016 Jan1; 340 (1) 132-138). Модуляция может быть оценена, например, путем изменения иммунологической активности сконструированных клеток, таких как изменение цитотоксической активности сконструированных клеток или изменение секреции цитокинов сконструированных клеток по сравнению с клетками, сконструированными с трансмембранным белком ICOSL дикого типа.The terms modulating or modulating, as used herein in the context of an immune response, e.g., a mammalian immune response, refers to any change, e.g., increase or decrease, in existing or potential immune responses that occurs as a result of administration of an immunomodulatory polypeptide comprising a variant ICOSL of the present invention, or by administration of engineered cells expressing an immunomodulatory protein, such as the ICOSL transmembrane immunomodulatory protein variant of the present invention. Thus, it refers to a change, such as an increase or decrease in an immune response compared to an immune response that occurs or is present in the absence of administration of an immunomodulatory protein including a variant ICOSL or cells expressing such an immunomodulatory polypeptide. Such modulation includes any induction, activation, suppression or change in the degree or magnitude of immunological activity of an immune cell. Immune cells include B cells, T cells, NK cells (natural killer cells), NK T cells, professional antigen presenting cells (APC) and non-professional antigen presenting cells and inflammatory cells (neutrophils, macrophages, monocytes, eosinophils and basophils). Modulation includes any changes associated with an existing immune response, a developing immune response, a potential immune response, or the ability to induce, regulate, influence, or respond to an immune response. Modulation involves any change in the expression and/or function of genes, proteins and/or other molecules in immune cells as part of an immune response. Modulation of the immune response or modulation of immunological activity includes, for example, the following: elimination, deletion or sequestration of immune cells; inducing the formation of immune cells that can modulate the functional capacity of other cells, such as autoreactive lymphocytes, antigen presenting cells or inflammatory cells; induction of a nonresponsive state in immune cells (ie anergy); enhancing or suppressing the activity or function of immune cells, including, without limitation, changing the structure of proteins expressed by these cells. Examples include altered production and/or secretion of certain classes of molecules such as cytokines, chemokines, perforins, granzymes, growth factors, transcription factors, kinases, costimulatory molecules or other cell surface receptors, or any combination of these modulatory events. Modulation can be assessed, for example, by changing IFN-gamma expression compared to wild-type control ICOSL in a primary T cell assay (see Zhao and Ji, Exp Cell Res. 2016 Jan1;340(1)132- 138). Modulation can be assessed, for example, by changing the immunological activity of the engineered cells, such as changing the cytotoxic activity of the engineered cells or changing the cytokine secretion of the engineered cells compared to cells engineered with wild-type ICOSL transmembrane protein.

Используемый в данном документе термин молекулярные виды означает совокупность белков сAs used herein, the term molecular species means a collection of proteins with

- 31 044346 идентичной или по существу идентичной первичной аминокислотной последовательностью. Каждый представитель суперсемейства иммуноглобулинов млекопитающих (IgSF) определяет набор идентичных или по существу идентичных молекулярных видов. Так, например, ICOSL человека является членом IgSF, и каждая молекула ICOSL человека представляет собой молекулярный вид ICOS. Изменение между молекулами, которые принадлежат к одним и тем же молекулярным видам, может происходить из-за различий в посттрансляционной модификации, таких как гликозилирование, фосфорилирование, убиквитинирование, нитрозилирование, метилирование, ацетилирование и липидация. Кроме того, незначительные различия в последовательности в пределах одного молекулярного вида вследствие полиморфизма генов представляют собой другую форму вариации внутри одного молекулярного вида, как в случае усеченных форм дикого типа отдельного молекулярного вида вследствие, например, протеолитического расщепления. Молекулярный вид клеточной поверхности представляет собой молекулярный вид, экспрессируемый на поверхности клетки млекопитающего. Два или более различных видов белка, каждый из которых присутствует исключительно на одной или исключительно другой (но не на обеих) из двух клеток млекопитающих, образующих IS, упоминаются как находящиеся в цис или цис-конфигурации между собой. Два разных вида белка, первый из которых исключительно присутствует на одной из двух клеток млекопитающих, образующих IS, а второй из которых присутствует исключительно на второй из двух клеток млекопитающих, образующих IS, как говорят, находятся в транс или трансконфигурации. Два разных вида белка, каждый из которых присутствует на обеих клетках млекопитающих, образующих IS, находятся как в цис-, так и в транс-конфигурациях на этих клетках.- 31 044346 identical or substantially identical primary amino acid sequence. Each member of the mammalian immunoglobulin superfamily (IgSF) defines a set of identical or substantially identical molecular species. Thus, for example, human ICOSL is a member of IgSF, and each human ICOSL molecule represents a molecular species of ICOS. Variation between molecules that belong to the same molecular species can occur due to differences in post-translational modification such as glycosylation, phosphorylation, ubiquitination, nitrosylation, methylation, acetylation and lipidation. In addition, minor sequence differences within a molecular species due to gene polymorphism represent another form of variation within a molecular species, as in the case of truncated wild-type forms of a single molecular species due to, for example, proteolytic cleavage. A cell surface molecular species is a molecular species expressed on the surface of a mammalian cell. Two or more different protein species, each present exclusively on one or exclusively the other (but not both) of the two mammalian cells forming an IS, are referred to as being in cis or cis configuration with each other. Two different kinds of protein, the first of which is exclusively present on one of the two mammalian cells forming the IS, and the second of which is exclusively present on the second of the two mammalian cells forming the IS, are said to be in trans or trans configuration. Two different protein species, each present on both mammalian cells forming the IS, are found in both cis and trans configurations on these cells.

Термин домен мультимеризации относится к аминокислотной последовательности, которая способствует стабильному взаимодействию молекулы полипептида с одним или несколько дополнительными полипептидными молекулами, каждая из которых включает комплементарный домен мультимеризации (например, первый домен мультимеризации и второй домен мультимеризации), который может быть одинаковым или отличающимся доменом мультимеризации. Взаимодействия между комплементарными доменами мультимеризации, например, взаимодействие между первым доменом мультимеризации и вторым доменом мультимеризации, образует стабильное белок-белковое взаимодействие для получения мультимера молекулы полипептида с дополнительной молекулой полипептида. В некоторых случаях домен мультимеризации является одним и тем же и взаимодействует сам с собой, образуя стабильное межбелковое взаимодействие между двумя полипептидными цепями. Как правило, полипептид присоединяется прямо или опосредованно к домену мультимеризации. Типичные домены мультимеризации включают последовательности иммуноглобулина или их части, лейциновые молнии, гидрофобные области, гидрофильные области и домены белок-белкового взаимодействия. Например, домен мультимеризации может быть константной областью или доменом иммуноглобулина, таким как, например, домен Fc или его части из IgG, включая подтипы IgG1, IgG2, IgG3 или IgG4, IgA, IgE, IgD и IgM и их модифицированные формы.The term multimerization domain refers to an amino acid sequence that facilitates the stable interaction of a polypeptide molecule with one or more additional polypeptide molecules, each of which includes a complementary multimerization domain (e.g., a first multimerization domain and a second multimerization domain), which may be the same or different multimerization domain. Interactions between complementary multimerization domains, for example, the interaction between a first multimerization domain and a second multimerization domain, form a stable protein-protein interaction to produce a multimer of a polypeptide molecule with a complementary polypeptide molecule. In some cases, the multimerization domain is the same and interacts with itself to form a stable protein-protein interaction between two polypeptide chains. Typically, the polypeptide is attached directly or indirectly to the multimerization domain. Typical multimerization domains include immunoglobulin sequences or portions thereof, leucine zippers, hydrophobic regions, hydrophilic regions, and protein-protein interaction domains. For example, the multimerization domain may be an immunoglobulin constant region or domain, such as, for example, the Fc domain or portions thereof of IgG, including the IgG1, IgG2, IgG3 or IgG4 subtypes, IgA, IgE, IgD and IgM and modified forms thereof.

Термины нуклеиновая кислота и полинуклеотид взаимозаменяемы для обозначения полимера нуклеотидных остатков (например, дезоксирибонуклеотидов или рибонуклеотидов) в одно- или двухцепочечной форме. Если не указано иное, термины охватывают нуклеиновые кислоты, содержащие известные аналоги природных нуклеотидов и которые имеют с ними сходные связывающие свойства и метаболизируются аналогично естественным нуклеотидам. Если не указано иное, конкретная нуклеотидную последовательность также неявно охватывает ее консервативно модифицированные варианты (например, замены вырожденных кодонов) и комплементарные нуклеотидные последовательности, а также явно указанную последовательность (референсную последовательность). В частности, вырожденные замены кодонов могут быть получены путем генерации последовательностей, в которых третье положение одного или нескольких выбранных (или всех) кодонов замещено остатками смешанного основания и/или дезоксиинозина. Термин нуклеиновая кислота или полинуклеотид включает кДНК или мРНК, кодируемую геном.The terms nucleic acid and polynucleotide are used interchangeably to refer to a polymer of nucleotide residues (eg, deoxyribonucleotides or ribonucleotides) in single- or double-stranded form. Unless otherwise specified, the terms cover nucleic acids containing known analogues of natural nucleotides and which have similar binding properties to them and are metabolized in a similar way to natural nucleotides. Unless otherwise indicated, a specific nucleotide sequence also implicitly covers its conservatively modified variants (eg, degenerate codon substitutions) and complementary nucleotide sequences, as well as the explicitly specified sequence (reference sequence). In particular, degenerate codon substitutions can be obtained by generating sequences in which the third position of one or more selected (or all) codons is replaced by mixed base and/or deoxyinosine residues. The term nucleic acid or polynucleotide includes cDNA or mRNA encoded by a gene.

Используемый в данном документе термин неконкурентное связывание означает способность белка специфически связываться одновременно, по меньшей мере, с двумя когнатными партнерами связывания. Таким образом, белок способен связываться, по меньшей мере, с двумя разными когнатными партнерами связывания одновременно, хотя взаимодействие связывания не обязательно должно быть одной и той же продолжительности, так что в некоторых случаях белок специфически связан только с одним из когнатных партеров связывания. В некоторых воплощениях связывание происходит в определенных условиях связывания. В некоторых воплощениях одновременное связывание таково, что связывание одного родственного партнера-связывания существенно не ингибирует одновременное связывание со вторым когнатным партнером связывания. В некоторых воплощениях неконкурентное связывание означает, что связывание второго когнатного партнера связывания с его сайтом связывания на белке не вытесняет связывание первого когнатного партнера связывания с его сайтом связывания на белке. Способы оценки неконкурентного связывания хорошо известны в данной области, например, способ, описанный в Perez de La Lastra et al., Immunology, 1999 Apr: 96(4): 663-670. В некоторых случаях в неконкурентных взаимодействиях первый когнатный партнер связывания специфически связывается с участком связывания, который не перекрывается с сайтом взаимодействия второго когнатного партнера связываAs used herein, the term noncompetitive binding refers to the ability of a protein to specifically bind simultaneously to at least two cognate binding partners. Thus, the protein is capable of binding to at least two different cognate binding partners simultaneously, although the binding interaction does not necessarily have to be of the same duration, so that in some cases the protein specifically binds to only one of the cognate binding partners. In some embodiments, binding occurs under certain binding conditions. In some embodiments, the simultaneous binding is such that binding of one cognate binding partner does not significantly inhibit simultaneous binding of a second cognate binding partner. In some embodiments, non-competitive binding means that the binding of a second cognate binding partner to its binding site on the protein does not displace the binding of the first cognate binding partner to its binding site on the protein. Methods for assessing non-competitive binding are well known in the art, for example, the method described in Perez de La Lastra et al., Immunology, 1999 Apr: 96(4): 663-670. In some cases, in noncompetitive interactions, the first cognate binding partner specifically binds to a binding site that does not overlap with the interaction site of the second cognate binding partner

- 32 044346 ния, так что связывание второго когнатного партнера связывания напрямую не мешает связыванию первого когнатного партнера связывания. Таким образом, любое влияние на связывание когнатного партнера связывания посредством связывания второго когнатного партнера связывания оказывается через механизм, отличный от прямого вмешательства в связывание с первым когнатным партнером связывания. Например, в контексте фермент-субстратных взаимодействий неконкурентный ингибитор связывается с сайтом, отличным от активного сайта фермента. Неконкурентное связывание включает в себя неконкурентоспособные связывающие взаимодействия, в которых второй когнатный партнер связывания специфически связывается с сайтом взаимодействия, который не перекрывается со связыванием первого когнатного партнера, но связывается только со вторым участком взаимодействия, который занимает первый когнатный партнер связывания.- 32 044346 tions such that the binding of the second cognate binding partner does not directly interfere with the binding of the first cognate binding partner. Thus, any influence on the binding of a cognate binding partner by binding of a second cognate binding partner occurs through a mechanism other than directly interfering with the binding of the first cognate binding partner. For example, in the context of enzyme-substrate interactions, a noncompetitive inhibitor binds to a site other than the active site of the enzyme. Noncompetitive binding includes noncompetitive binding interactions in which a second cognate binding partner specifically binds to an interaction site that does not overlap with the binding of the first cognate partner, but binds only to a second interaction site occupied by the first cognate binding partner.

Термин фармацевтическая композиция относится к композиции, подходящей для фармацевтического применения у объекта млекопитающего, часто человека. Фармацевтическая композиция обычно включает эффективное количество активного агента (например, иммуномодулирующего белка, включающего вариантный ICOSL, или сконструированных клеток, экспрессирующих трансмембранный иммуномодулирующий белок-вариантный ICOSL по настоящему изобретению) и носителя, эксципиента или разбавителя. Носитель, эксципиент или разбавитель обычно представляют собой фармацевтически приемлемый носитель, эксципиент или разбавитель, соответственно.The term pharmaceutical composition refers to a composition suitable for pharmaceutical use in a mammalian subject, often a human. The pharmaceutical composition typically includes an effective amount of an active agent (eg, an ICOSL variant immunomodulatory protein or engineered cells expressing the ICOSL variant transmembrane immunomodulatory protein of the present invention) and a carrier, excipient or diluent. The carrier, excipient or diluent is typically a pharmaceutically acceptable carrier, excipient or diluent, respectively.

Термины полипептид и белок используются в данном документе взаимозаменяемо и относятся к молекулярной цепи двух или более аминокислот, связанных через пептидные связи. Термины не относятся к определенной длине продукта. Таким образом, пептиды и олигопептиды включены в определение полипептида. Термины включают посттрансляционные модификации полипептида, например гликозилирование, ацетилирование, фосфорилирование и тому подобное. Термины также включают молекулы, в которые включены один или несколько аминокислотных аналогов или неканонические или неестественные аминокислоты, которые могут быть синтезированы или экспрессированы рекомбинантно с использованием известных методов белковой инженерии. Кроме того, белки могут быть дериватизованы.The terms polypeptide and protein are used interchangeably herein and refer to a molecular chain of two or more amino acids linked through peptide bonds. Terms do not apply to a specific length of product. Thus, peptides and oligopeptides are included in the definition of polypeptide. The terms include post-translational modifications of the polypeptide, such as glycosylation, acetylation, phosphorylation and the like. The terms also include molecules that include one or more amino acid analogs or non-canonical or unnatural amino acids that can be synthesized or expressed recombinantly using known protein engineering techniques. In addition, proteins can be derivatized.

Используемый в данном документе термин первичный анализ T-клеток относится к анализу in vitro для измерения экспрессии интерферона-гамма (IFN-гамма). В данной области известно множество таких анализов первичных T-клеток, как описано в примере 7. В предпочтительном воплощении используемый анализ представляет собой анализ коиммобилизации с анти-CD3. В этом анализе первичные Tклетки стимулируются анти-CD3, иммобилизованными с помощью дополнительных рекомбинантных белков или без них. Культуральные надосадочные жидкости собирают по временным точкам, обычно через 24-72 часа. В другом воплощении используемым анализом является MLR. В этом анализе первичные T-клетки стимулируются аллогенным APC. Культуральные надосадочные жидкости собирают по временным точкам, обычно через 24-72 часа. Уровни человеческого IFN-гамма измеряют в культуральных надосадочных жидкостях стандартными методами ELISA. Коммерческие наборы доступны от поставщиков, и анализ проводится в соответствии с рекомендацией производителя.As used herein, the term primary T cell assay refers to an in vitro assay for measuring interferon-gamma (IFN-gamma) expression. A variety of such primary T cell assays are known in the art, as described in Example 7. In a preferred embodiment, the assay used is an anti-CD3 coimmobilization assay. In this assay, primary T cells are stimulated with anti-CD3 immobilized with or without additional recombinant proteins. Culture supernatants are collected at time points, typically 24-72 hours. In another embodiment, the assay used is MLR. In this assay, primary T cells are stimulated with allogeneic APC. Culture supernatants are collected at time points, typically 24-72 hours. Human IFN-γ levels are measured in culture supernatants using standard ELISA methods. Commercial kits are available from suppliers and the assay is performed according to the manufacturer's recommendation.

Термин очищенный в применении к нуклеиновым кислотам, таким как, те, которые кодируют иммуномодулирующие белки по настоящему изобретению, как правило, означает нуклеиновую кислоту или полипептид, который по существу свободен от других компонентов, определенных с помощью аналитических методов, хорошо известных в данной области техники (например, очищенный полипептид или полинуклеотид образует дискретную полосу в электрофоретическом геле, хроматографическом элюате и/или среде, подвергнутой центрифугированию в градиенте плотности). Например, нуклеиновая кислота или полипептид, который дает по существу одну полосу в электрофоретическом геле, является очищенной. Очищенная нуклеиновая кислота или белок является очищенной, по меньшей мере, около на 50%, обычно, по меньшей мере, на около 75, 80, 85, 90, 95, 96, 99% или более очищенной (например, в процентах по массе или на молярной основе).The term purified when applied to nucleic acids, such as those encoding the immunomodulatory proteins of the present invention, generally means a nucleic acid or polypeptide that is substantially free of other components, as determined by analytical methods well known in the art (eg, a purified polypeptide or polynucleotide forms a discrete band in an electrophoretic gel, chromatographic eluate and/or density gradient centrifugation medium). For example, a nucleic acid or polypeptide that produces substantially one band on an electrophoretic gel is purified. A purified nucleic acid or protein is at least about 50% purified, typically at least about 75, 80, 85, 90, 95, 96, 99% purified, or more (e.g., percent by weight or on a molar basis).

Термин рекомбинантный указывает на то, что материал (например, нуклеиновая кислота или полипептид) искусственно (т.е. не природным образом) изменен путем вмешательства человека. Изменение может быть выполнено на материале внутри или, при его удалении из его естественного окружения или состояния. Например, рекомбинантная нуклеиновая кислота представляет собой рекомбинантную нуклеиновую кислоту, которая производится рекомбинированием нуклеиновых кислот, например, во время клонирования, модификации аффинности, перетасовкой ДНК или другими хорошо известными молекулярно-биологическими процедурами. Рекомбинантная молекула ДНК состоит из сегментов ДНК, соединенных вместе с помощью таких молекулярно-биологических методов. Используемый в данном документе термин рекомбинантный белок или рекомбинантный полипептид относится к молекуле белка, которая экспрессируется с использованием молекулы рекомбинантной ДНК. Рекомбинантная клетка-хозяин представляет собой клетку, которая включает и/или экспрессирует рекомбинантную нуклеиновую кислоту или которая в противном случае изменена генной инженерией, например, путем введения в клетку молекулы нуклеиновой кислоты, кодирующей рекомбинантный белок, такой как трансмембранный иммуномодулирующий белок, предлагаемый в данном документе. Сигналы контроля транскрипции у эукариот включают элементы промотор и энхансер. Промоторы и энхансеры состоят из коротких массивов последовательностей ДНК, которые специфически взаимодействуют с клеточными белками,The term recombinant indicates that the material (eg, nucleic acid or polypeptide) has been artificially (i.e., not naturally) altered by human intervention. The change can be made to a material within or by removing it from its natural environment or state. For example, a recombinant nucleic acid is a recombinant nucleic acid that is produced by recombining nucleic acids, such as during cloning, affinity modification, DNA shuffling, or other well-known molecular biology procedures. A recombinant DNA molecule consists of segments of DNA joined together using molecular biological techniques. As used herein, the term recombinant protein or recombinant polypeptide refers to a protein molecule that is expressed using a recombinant DNA molecule. A recombinant host cell is a cell that includes and/or expresses a recombinant nucleic acid or that is otherwise altered by genetic engineering, for example, by introducing into the cell a nucleic acid molecule encoding a recombinant protein, such as a transmembrane immunomodulatory protein provided herein . Transcription control signals in eukaryotes include promoter and enhancer elements. Promoters and enhancers consist of short arrays of DNA sequences that specifically interact with cellular proteins,

- 33 044346 участвующими в транскрипции. Элементы промотора и энхансера были выделены из различных источников эукариот, включая гены в клетках дрожжей, насекомых и млекопитающих и вирусах (аналогичные контрольные элементы, т.е. промоторы, также обнаружены у прокариот). Выбор конкретного промотора и энхансера зависит от того, какой тип клетки следует использовать для экспрессии интересующего белка. Термины в функциональной комбинации, функциональным образом и функционально связанные, используемые в данном документе, относятся к связыванию нуклеотидных последовательностей таким образом или в такой ориентации, что образуется нуклеотидная молекула, способная направлять транскрипцию данного гена и/или синтез молекулы искомого белка.- 33 044346 participating in the transcription. Promoter and enhancer elements have been isolated from various eukaryotic sources, including genes in yeast, insect and mammalian cells and viruses (similar control elements, i.e. promoters, are also found in prokaryotes). The choice of a specific promoter and enhancer depends on what type of cell should be used to express the protein of interest. The terms functionally combined, functionally, and operably linked as used herein refer to the linking of nucleotide sequences in such a manner or in such an orientation that a nucleotide molecule is formed capable of directing the transcription of a given gene and/or the synthesis of a protein molecule of interest.

Термин рекомбинантный экспрессирующий вектор, при использовании в данном документе, относится к молекуле ДНК, содержащей требуемую кодирующую последовательность и соответствующую нуклеотидную последовательность, необходимую для экспрессии функционально связанной кодирующей последовательности в конкретной клетке-хозяине. Нуклеотидные последовательности, необходимые для экспрессии в прокариотах, включают промотор, необязательно последовательность оператора, сайт связывания рибосом и, возможно, другие последовательности. Известно, что эукариотические клетки используют промоторы, энхансеры, сигналы терминации и полиаденилирования. Секреторную сигнальную пептидную последовательность также необязательно можно кодировать рекомбинантным экспрессирующим вектором, функционально связанным с кодирующей последовательностью рекомбинантного белка, такой как рекомбинантный гибридный белок, так что экспрессируемый гибридный белок может быть секретирован рекомбинантной клеткой-хозяином, для облегчения выделения гибридного белка из клетки, если это необходимо. Термин включает вектор как самовоспроизводящую нуклеотидную структуру, и вектор, включенный в геном клетки-хозяина, в которую он был введен. Среди векторов есть вирусные векторы, такие как лентивирусные векторы.The term recombinant expression vector, as used herein, refers to a DNA molecule containing the desired coding sequence and the corresponding nucleotide sequence necessary for expression of the operably linked coding sequence in a particular host cell. Nucleotide sequences required for expression in prokaryotes include a promoter, optionally an operator sequence, a ribosome binding site, and possibly other sequences. It is known that eukaryotic cells use promoters, enhancers, termination and polyadenylation signals. The secretory signal peptide sequence may also optionally be encoded by a recombinant expression vector operably linked to a recombinant protein coding sequence, such as a recombinant fusion protein, such that the expressed fusion protein can be secreted by the recombinant host cell to facilitate release of the fusion protein from the cell, if desired. . The term includes a vector as a self-replicating nucleotide structure, and a vector incorporated into the genome of the host cell into which it has been introduced. Among the vectors are viral vectors such as lentiviral vectors.

Термин селективность относится к предпочтению испытуемого белка или полипептида специфически связываться с одним субстратом, таким как один когнатный партнер связывания, по сравнению со специфическим связыванием с другим субстратом, таким как другой когнатный партнер связывания целевого белка. Селективность может быть отражена как отношение активности связывания (например, аффинности связывания) испытуемого белка и первого субстрата, такого как первый когнатный партнер связывания (например, Kd1) и активность связывания (например, аффинность связывания) того же испытуемого белка со вторым когнатным партнером связывания (например, Kd2).The term selectivity refers to the preference of a test protein or polypeptide to specifically bind to one substrate, such as one cognate binding partner, over specifically binding to another substrate, such as another cognate binding partner of the target protein. Selectivity can be reflected as the ratio of the binding activity (eg, binding affinity) of a test protein to a first substrate, such as a first cognate binding partner (eg, Kd1) and the binding activity (eg, binding affinity) of the same test protein to a second cognate binding partner (eg, Kd1). for example Kd2).

Используемый в данном документе термин идентичность последовательности относится к идентичности последовательности между генами или белками на уровне нуклеотидов или аминокислот, соответственно. Идентификация последовательности является мерой идентичности между белками на уровне аминокислот и мерой идентичности между нуклеиновыми кислотами на уровне нуклеотидов. Идентификация последовательности белка может быть определена путем сравнения аминокислотной последовательности в данном положении в каждой последовательности, когда последовательности выровнены. Точно так же идентичность нуклеотидной последовательности может быть определена путем сравнения нуклеотидной последовательности в заданном положении в каждой последовательности, когда последовательности выровнены. Способы выравнивания последовательностей для сравнения хорошо известны в данной области, такие способы включают GAP, BESTFIT, BLAST, FASTA и TFASTA. Алгоритм BLAST вычисляет процент идентичности последовательности и выполняет статистический анализ сходства между двумя последовательностями. Программное обеспечение для выполнения BLASTанализа доступно на веб-сайте Национального центра биотехнологической информации (NCBI).As used herein, the term sequence identity refers to sequence identity between genes or proteins at the nucleotide or amino acid level, respectively. Sequence identification is a measure of identity between proteins at the amino acid level and a measure of identity between nucleic acids at the nucleotide level. Protein sequence identification can be determined by comparing the amino acid sequence at a given position in each sequence when the sequences are aligned. Similarly, the identity of a nucleotide sequence can be determined by comparing the nucleotide sequence at a given position in each sequence when the sequences are aligned. Methods for aligning sequences for comparison are well known in the art, such methods include GAP, BESTFIT, BLAST, FASTA and TFASTA. The BLAST algorithm calculates the percentage of sequence identity and performs statistical analysis of the similarity between two sequences. Software for performing BLAST analysis is available on the National Center for Biotechnology Information (NCBI) website.

Термин растворимый, используемый в данном документе в отношении белков, означает, что белок не является мембранным белком. В общем, растворимый белок включает только внеклеточный домен рецептора семейства IgSF или его часть, содержащую домен IgSF или домены или их специфически связывающие фрагменты, но не включает трансмембранный домен и/или не способен экспрессироваться на поверхности клетки. В некоторых случаях растворимость белка может быть улучшена путем связывания или прикрепления, прямо или опосредованно через линкер, с доменом Fc, что в некоторых случаях также может улучшить стабильность и/или период полужизни белка. В некоторых аспектах растворимый белок представляет собой Fc-гибридный белок.The term soluble, as used herein in relation to proteins, means that the protein is not a membrane protein. In general, a soluble protein comprises only the extracellular domain of an IgSF family receptor or a portion thereof containing the IgSF domain or domains or specific binding fragments thereof, but does not include a transmembrane domain and/or is not capable of being expressed on the cell surface. In some cases, protein solubility can be improved by binding or attaching, directly or indirectly through a linker, to the Fc domain, which in some cases can also improve the stability and/or half-life of the protein. In some aspects, the soluble protein is an Fc fusion protein.

Термин виды, при использовании в данном документе в отношении полипептидов или нуклеиновых кислот означает ансамбль молекул с идентичными или по существу идентичными последовательностями. Изменение между молекулами, которые принадлежат к одному и тому же молекулярному виду, может происходить из-за различий в посттрансляционной модификации, такой как гликозилирование, фосфорилирование, убиквитинирование, нитрозилирование, метилирование, ацетилирование и липидация. Слегка укороченные последовательности, которые отличаются (или кодируют отличие) от полноразмерных видов на аминоконце или карбоксиконце не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка, считаются одним видом. Такие микрогетерогенности являются общей чертой изготовленных белков.The term species, when used herein in relation to polypeptides or nucleic acids, means an ensemble of molecules with identical or substantially identical sequences. Variation between molecules that belong to the same molecular species can occur due to differences in post-translational modification such as glycosylation, phosphorylation, ubiquitination, nitrosylation, methylation, acetylation and lipidation. Slightly truncated sequences that differ (or encode a difference) from the full-length species at the amino terminus or carboxy terminus by no more than 1, 2, or 3 amino acid residues are considered a single species. Such microheterogeneities are a common feature of manufactured proteins.

Термин специфический связывающий фрагмент, используемый в данном документе в отношении полноразмерного полипептида ICOSL дикого типа млекопитающих или его домена IgV или IgC, означает полипептид, имеющий подпоследовательность с доменом IgV и/или IgC и который специфически связывается in vitro и/или in vivo с ICOS млекопитающих и/или CD28 млекопитающих, таким как человече- 34 044346 ский или мышиный ICOS или CD28. В некоторых воплощениях специфический связывающий фрагментThe term specific binding fragment, as used herein in relation to a full-length wild-type mammalian ICOSL polypeptide or its IgV or IgC domain, means a polypeptide having a subsequence with the IgV and/or IgC domain and which specifically binds in vitro and/or in vivo to mammalian ICOS and/or mammalian CD28, such as human or murine ICOS or CD28. In some embodiments, the specific binding moiety

ICOSL IgV или ICOSL IgC составляет, по меньшей мере, 60, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 96, 97, 98 или 99% длины последовательности полноразмерной последовательности дикого типа. Специфический связывающий фрагмент может быть изменен в последовательности с образованием варианта ICOSL по изобретению.The ICOSL IgV or ICOSL IgC is at least 60, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 96, 97, 98, or 99% of the sequence length of the full-length wild-type sequence. The specific binding moiety can be changed in sequence to form the ICOSL variant of the invention.

Используемый в данном документе термин специфически связывается означает способность белка в условиях специфического связывания связываться с белком-мишенью, так что его аффинность или авидность, по меньшей мере, в 10 раз больше, но необязательно 50, 100, 250 или 500 или даже, по меньшей мере, в 1000 раз больше, чем средняя аффинность или авидность одного и того же белка, к набору случайных пептидов или полипептидов с достаточным статистическим размером. Конкретно связывающийся белок не обязательно должен связываться исключительно с одной молекулой-мишенью, но может специфически связываться с молекулой, не являющейся мишенью, из-за сходства структурной конформации между мишенью и не-мишенью (например, паралогами или ортологами). Специалисты поймут, что возможно специфическое связывание с молекулой, имеющей ту же функцию у разных видов животных (то есть ортологом), или с нецелевой молекулой, имеющей по существу подобный эпитоп, что и молекула-мишень (например, паралогом) и не это не понижает специфичность связывания, которая определяется относительно статистически достоверного набора уникальных не-мишеней (например, случайных полипептидов). Таким образом, полипептид по изобретению может специфически связываться с более чем одним отдельным видом молекулы-мишени из-за перекрестной реактивности. Для определения специфического связывания между двумя белками можно использовать твердофазные иммуноанализы ELISA или измерения Biacore. Как правило, взаимодействия между двумя связывающими белками имеют константы диссоциации (Kd) менее 1x10’5 М и часто до 1х10’12 М. В некоторых аспектах настоящего раскрытия взаимодействия между двумя связывающими белками имеют константы диссоциации 1x10’6 М, 1x10’7 М, 1x10’8 М, 1x10’9 M, 1x10’10 M или 1x10’11 M.As used herein, the term specifically binds means the ability of a protein, under specific binding conditions, to bind to a target protein such that its affinity or avidity is at least 10 times greater, but not necessarily 50, 100, 250 or 500, or even at least at least 1000 times greater than the average affinity or avidity of the same protein for a set of random peptides or polypeptides of sufficient statistical size. A particular binding protein need not bind exclusively to one target molecule, but may specifically bind to a non-target molecule due to similarity in structural conformation between the target and non-target (eg, paralogs or orthologs). Those skilled in the art will appreciate that specific binding to a molecule having the same function in different animal species (i.e., an ortholog) or to a non-target molecule having a substantially similar epitope to the target molecule (i.e., a paralog) is possible and does not reduce binding specificity, which is determined relative to a statistically significant set of unique non-targets (for example, random polypeptides). Thus, a polypeptide of the invention may specifically bind to more than one distinct species of target molecule due to cross-reactivity. ELISA immunoassays or Biacore measurements can be used to determine the specific binding between two proteins. Typically, interactions between two binding proteins have dissociation constants (Kd) less than 1x10'5 M and often up to 1x10'12 M. In some aspects of the present disclosure, interactions between two binding proteins have dissociation constants of 1x10'6 M, 1x10'7 M, 1x10'8 M, 1x10'9 M, 1x10' 10 M or 1x10'11 M.

Термины экспрессирует на поверхности или поверхностная экспрессия применительно к клетке млекопитающего, экспрессирующей полипептид, означает, что полипептид экспрессируется в виде мембранного белка. В некоторых воплощениях мембранный белок представляет собой трансмембранный белок.The terms surface expressed or surface expression, when applied to a mammalian cell expressing a polypeptide, means that the polypeptide is expressed as a membrane protein. In some embodiments, the membrane protein is a transmembrane protein.

Используемый в данном документе термин синтетический применительно, например, к синтетической молекуле нуклеиновой кислоты или синтетическому гену или синтетическому пептиду относится к молекуле нуклеиновой кислоты или молекуле полипептида, которая образуется рекомбинантными способами и/или способами химического синтеза.As used herein, the term synthetic, when referring to, for example, a synthetic nucleic acid molecule or a synthetic gene or a synthetic peptide, refers to a nucleic acid molecule or polypeptide molecule that is produced by recombinant methods and/or chemical synthesis methods.

Термин нацеливающий фрагмент, используемый в данном описании, относится к композиции, которая является ковалентно или нековалентно присоединенной к, или физически инкапсулирующей полипептид, содержащий вариантный ICOSL по настоящему изобретению. В некоторых воплощениях нацеливающий фрагмент обладает специфической аффинностью связывания с молекулой-мишенью, такой как молекула-мишень, экспрессируемая в клетке. Как правило, молекула-мишень локализуется в определенной ткани или клеточном типе. Нацеливающие функциональные группы включают: антитела, антигенсвязывающий фрагмент (Fab), вариабельный фрагмент (Fv), содержащий VH и VL, одноцепочечный вариабельный фрагмент (scFv), содержащий VH и VL, соединенные вместе в одной цепи, а также другие фрагменты V-области антитела, такие как Fab', F(ab)2, F(ab')2, dsFv-диатело, нанотела, растворимые рецепторы, рецепторные лиганды, аффинные зрелые рецепторы или лиганды, а также низкомолекулярные композиции (<500 дальтон) (например, специфические связывающие рецепторные композиции). Нацеливающие функциональные группы также могут быть присоединены ковалентно или нековалентно к липидной мембране липосом, которые инкапсулируют полипептид по настоящему изобретению.The term targeting moiety as used herein refers to a composition that is covalently or non-covalently attached to, or physically encapsulating a polypeptide containing a variant ICOSL of the present invention. In some embodiments, the targeting moiety has a specific binding affinity for a target molecule, such as a target molecule expressed in a cell. Typically, the target molecule is localized to a specific tissue or cell type. Targeting functional groups include: antibodies, antigen binding fragment (Fab), variable fragment (Fv) containing VH and VL, single chain variable fragment (scFv) containing VH and VL joined together in one chain, and other fragments of the antibody V region , such as Fab', F(ab)2, F(ab')2, dsFv-diabody, nanobodies, soluble receptors, receptor ligands, affinity mature receptors or ligands, and low molecular weight compositions (<500 Daltons) (e.g., specific receptor binding compositions). Targeting functional groups may also be attached covalently or non-covalently to the lipid membrane of liposomes that encapsulate the polypeptide of the present invention.

Используемый в данном документе термин трансмембранный белок означает мембранный белок, который по существу или полностью пронизывает липидный бислой, например, липидные бислой, обнаруженные в биологической мембране, например, в клетке млекопитающего, или в искусственной конструкции, такой как липосома. Трансмембранный белок включает трансмембранный домен (трансмембранный домен), посредством которого он интегрирован в липидный бислой и с помощью которого интеграция является термодинамически устойчивой в физиологических условиях. Трансмембранные домены обычно прогнозируются по их аминокислотной последовательности любым из коммерчески доступных программных приложений для биоинформатики из-за их повышенной гидрофобности по сравнению с областями белка, которые взаимодействуют с водными средами (например, цитозолем, внеклеточной жидкостью). Трансмембранный домен часто представляет собой гидрофобную альфа-спираль, которая заполняет мембрану. Трансмембранный белок может проходить через оба слоя липидного бислоя один или несколько раз. Трансмембранный белок включает предоставленные трансмембранные иммуномодулирующие белки, описанные в данном документе. В дополнение к трансмембранному домену трансмембранный иммуномодулирующий белок по изобретению дополнительно включает эктодомен и, в некоторых воплощениях, эндодомен.As used herein, the term transmembrane protein means a membrane protein that substantially or completely spans a lipid bilayer, such as lipid bilayers found in a biological membrane, such as a mammalian cell, or in an artificial construct such as a liposome. A transmembrane protein includes a transmembrane domain (transmembrane domain) through which it is integrated into the lipid bilayer and through which the integration is thermodynamically stable under physiological conditions. Transmembrane domains are typically predicted from their amino acid sequence by any of the commercially available bioinformatics software applications due to their increased hydrophobicity compared to regions of the protein that interact with aqueous environments (e.g., cytosol, extracellular fluid). The transmembrane domain is often a hydrophobic alpha helix that fills the membrane. A transmembrane protein can pass through both layers of the lipid bilayer one or more times. Transmembrane protein includes the provided transmembrane immunomodulatory proteins described herein. In addition to the transmembrane domain, the transmembrane immunomodulatory protein of the invention further includes an ectodomain and, in some embodiments, an endodomain.

Термины лечить, лечение или терапия заболевания или расстройства, используемые в данном документе, означает замедление, прекращение или обращение прогрессирования заболевания или рас- 35 044346 стройства, о чем свидетельствует убывание, прекращение или устранение либо клинических либо диагностических симптомов, путем введения терапевтической композиции (например, содержащей иммуномодулирующий белок или сконструированные клетки) по изобретению либо отдельно, либо в комбинации с другим соединением, как описано в данном документе. Лечить, лечение или терапия также означает снижение тяжести симптомов при остром или хроническом заболевании или расстройстве или снижение частоты рецидивов, как, например, в случае рецидивирующего или ремиссионного аутоиммунного заболевания, или уменьшение воспаления в случае воспалительного аспекта аутоиммунного заболевания. При использовании в данном документе в контексте ракового заболевания, термины лечение или ингибировать или ингибирование рака относится, по меньшей мере, к одному из числа: статистически значимого снижения скорости роста опухоли, прекращению рост опухоли или уменьшению размера, массы, метаболической активности или объема опухоли, что измеряется стандартными критериями, такими как, без ограничения указанным, критерии оценки ответа для солидных опухолей (RECIST) или статистически значимое увеличение выживаемости без прогрессирования (PFS) или общая выживаемость (OS). Предотвращать, профилактика или предотвращение заболевания или расстройства, используемое в контексте настоящего изобретения, относится к введению иммуномодулирующего полипептида или сконструированных клеток, по изобретению, либо отдельно, либо в комбинации с другим соединением для предотвращения возникновения или начала заболевания или расстройства или некоторых или всех симптомов заболевания или расстройства или для уменьшения вероятности возникновения заболевания или расстройства.The terms treat, cure, or therapy for a disease or disorder as used herein means the slowing, stopping, or reversing the progression of a disease or disorder, as evidenced by the subsidence, stopping, or eliminating either clinical or diagnostic symptoms, by administering a therapeutic composition (eg containing an immunomodulatory protein or engineered cells) of the invention either alone or in combination with another compound as described herein. To treat, cure, or therapy also means to reduce the severity of symptoms in an acute or chronic disease or disorder, or to reduce the frequency of relapses, such as in the case of a relapsing or remitting autoimmune disease, or to reduce inflammation, in the case of the inflammatory aspect of an autoimmune disease. When used herein in the context of cancer, the terms treat or inhibit or inhibit cancer refers to at least one of: a statistically significant reduction in tumor growth rate, arrest of tumor growth, or reduction in tumor size, weight, metabolic activity or volume, as measured by standard criteria such as, but not limited to, Response Evaluation Criteria for Solid Tumors (RECIST) or a statistically significant increase in progression-free survival (PFS) or overall survival (OS). Prevent, prevent or prevent a disease or disorder, as used in the context of the present invention, refers to the administration of an immunomodulatory polypeptide or engineered cells of the invention, either alone or in combination with another compound, to prevent the occurrence or onset of a disease or disorder or some or all of the symptoms of a disease or disorder or to reduce the likelihood of a disease or disorder.

Термин опухоль-специфический антиген или TSA, при использовании в данном документе, относится к антигену, который присутствует, в основном, в опухолевых клетках объекта млекопитающего, но обычно не обнаруживается в нормальных клетках испытуемого млекопитающего. Опухольспецифичный антиген не обязательно должен быть эксклюзивным для опухолевых клеток, но процент клеток конкретного млекопитающего, у которых опухоль-специфичный антиген достаточно высок, или уровни опухоль-специфичного антигена на поверхности опухоли достаточно высоки, так что антиген может быть использован в качестве мишени противоопухолевой терапии и обеспечивать профилактику или лечение млекопитающего от воздействия опухоли. В некоторых воплощениях в случайном статистическом образце клеток млекопитающего с опухолью, по меньшей мере, 50% клеток, имеющих TSA, являются раковыми. В других воплощениях, по меньшей мере, 60, 70, 80, 85, 90, 95 или 99% клеток, содержащих TSA, являются раковыми.The term tumor-specific antigen or TSA, as used herein, refers to an antigen that is present primarily in tumor cells of a mammalian subject, but is not typically found in normal cells of the mammalian subject. The tumor-specific antigen need not be exclusive to tumor cells, but the percentage of cells in a particular mammal that have the tumor-specific antigen is high enough, or the levels of tumor-specific antigen on the tumor surface are high enough, such that the antigen can be used as a target for anticancer therapy and provide prevention or treatment of a mammal from the effects of a tumor. In some embodiments, in a random statistical sample of tumor-bearing mammalian cells, at least 50% of the cells having TSA are cancerous. In other embodiments, at least 60, 70, 80, 85, 90, 95, or 99% of the cells containing TSA are cancerous.

Термин вариантный (также модифицированный или мутант), используемый по отношению к вариантному ICOSL, означает ICOSL, например, ICOSL млекопитающих (например, человека или мыши), созданный путем вмешательства человека. Вариантный ICOSL представляет собой полипептид, имеющий измененную аминокислотную последовательность, относительно референсного (немодифицированного) ICOSL или ICOSL дикого типа. Вариантный ICOSL представляет собой полипептид, который отличается от референсного ICOSL, последовательности изоформы ICOSL дикого типа одной или несколькими модификациями, такими как одна или несколько аминокислотных замен, делеций, добавлений или их комбинаций. Для целей настоящего изобретения вариантный ICOSL содержит, по меньшей мере, один домен с модифицированной аффинностью, в результате чего одно или несколько аминокислотных отличий встречаются в домене IgSF (например, домене IgV). Вариантный ICOSL может содержать 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30 или более аминокислотных различий, таких как аминокислотные замены. Вариантный полипептид ICOSL обычно имеет, по меньшей мере, 50, 60, 70, 80, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99% или более идентичности последовательности относительно соответствующего референсного (например, немодифицированного ICOSL) или ICOSL дикого типа, такой как последовательность SEQ ID NO: 5, ее зрелой последовательности или ее части, содержащей внеклеточный домен или ее домен IgSF. В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL имеет, по меньшей мере, 50, 60, 70, 80, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99% или более идентичности последовательности для соответствующего референсного (например, немодифицированного ICOSL) или ICOSL дикого типа, содержащей последовательность, представленную в SEQ ID NO: 32 или SEQ ID NO: 196 или 545. Неприродные аминокислоты, а также природные аминокислоты включены в объем допустимых замен или добавлений. Вариантный ICOSL не ограничивается каким-либо конкретным способом получения и включает, например, химический синтез de novo, методы рекомбинантной ДНК de novo или их комбинации. Вариант ICOSL по изобретению специфически связывается с CD28, ICOS и/или CTLA-4 млекопитающих. В некоторых воплощениях измененная аминокислотная последовательность приводит к изменению (то есть увеличению или уменьшению) аффинности или авидности связывания с ICOS и/или CD28 по сравнению с белком ICOSL дикого типа. Увеличение или уменьшение аффинности или авидности связывания можно определить с использованием хорошо известных анализов связывания, таких как проточная цитометрия. Larsen et al., American Journal of Transplantation, Vol 5: 443-453 (2005). См. Также Linsley et al., Immunity, Vol. 1(9): 793-801 (1994). Увеличение аффинности или авидности связывания вариантного ICOSL с ICOS и/или CD28 имеет значение, по меньшей мере, на 5% больше, чем значение референсного (например, немодифицированного) ICOSL или ICOSL дикого типа, и в некоторых воплощениях, по меньшей мере,The term variant (also modified or mutant) used in relation to a variant ICOSL means an ICOSL, for example, a mammalian (eg human or mouse) ICOSL created by human intervention. A variant ICOSL is a polypeptide having a modified amino acid sequence relative to the reference (unmodified) ICOSL or wild type ICOSL. A variant ICOSL is a polypeptide that differs from the reference ICOSL, the wild-type ICOSL isoform sequence, by one or more modifications, such as one or more amino acid substitutions, deletions, additions, or combinations thereof. For purposes of the present invention, the variant ICOSL contains at least one affinity modified domain whereby one or more amino acid differences occur in the IgSF domain (eg, the IgV domain). A variant ICOSL may contain 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30 or more amino acid differences, such as amino acid substitutions. The variant ICOSL polypeptide typically has at least 50, 60, 70, 80, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99% or more sequence identity relative to a corresponding reference (eg, unmodified ICOSL) or wild-type ICOSL, such as SEQ ID NO: 5, a mature sequence thereof, or a portion thereof containing an extracellular domain or an IgSF domain thereof. In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide has at least 50, 60, 70, 80, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99% or more sequence identity to the corresponding reference (e.g., unmodified ICOSL) or wild-type ICOSL containing the sequence set forth in SEQ ID NO: 32 or SEQ ID NO: 196 or 545. Unnatural amino acids, as well as naturally occurring amino acids, are included within the scope of permissible substitutions or additions. The variant ICOSL is not limited to any particular production method and includes, for example, de novo chemical synthesis, de novo recombinant DNA methods, or combinations thereof. The ICOSL variant of the invention specifically binds to mammalian CD28, ICOS and/or CTLA-4. In some embodiments, the altered amino acid sequence results in a change (ie, increase or decrease) in binding affinity or avidity for ICOS and/or CD28 compared to wild-type ICOSL protein. Increases or decreases in binding affinity or avidity can be determined using well-known binding assays such as flow cytometry. Larsen et al., American Journal of Transplantation, Vol 5: 443-453 (2005). See also Linsley et al., Immunity, Vol. 1(9): 793-801 (1994). The increase in binding affinity or avidity of the variant ICOSL to ICOS and/or CD28 is at least 5% greater than that of the reference (e.g., unmodified) ICOSL or wild-type ICOSL, and in some embodiments, at least

- 36 044346 на 10, 15, 20, 30, 40, 50, на 100% больше контрольного значения референсного (например, немодифицированного) ICOSL или ICOSL дикого типа. Уменьшение аффинности или авидности связывания ICOSL с ICOS и/или CD28 составляет значение не более 95% от контрольных значений для дикого типа, а в некоторых воплощениях не более 80, 70, 60, 50, 40, 30, 20, 10, 5% или отсутствие обнаруживаемой аффинности или авидности связывания контрольных значений ICOS и/или CD28 дикого типа. Вариантный ICOSL изменяется в первичной аминокислотной последовательности путем замещения, добавления или делеции аминокислотных остатков. Термин вариантный в контексте вариантного ICOSL не может быть истолкован как наложение какого-либо условия для какой-либо конкретной исходной композиции или способа, с помощью которого создается вариантный ICOSL. Вариантный ICOSL может, например, быть получен, начиная с информации о последовательности референсного ICOSL или ICOSL дикого типа млекопитающего, затем смоделирован in silico для связывания с ICOS и/или CD28 и, наконец, рекомбинантно или химически синтезирован так, чтобы получить вариантный ICOSL по настоящему изобретению. В одном альтернативном примере вариантный ICOSL может быть создан путем сайт-направленного мутагенеза референсного (например, немодифицированного) ICOSL или ICOSL дикого типа. Таким образом, вариантный ICOSL обозначает композицию, а не продукт, полученный любым способом. Могут быть использованы различные способы, включая рекомбинантные способы, химический синтез или их комбинации.- 36 044346 10, 15, 20, 30, 40, 50, 100% more than the control value of the reference (for example, unmodified) ICOSL or wild-type ICOSL. The reduction in binding affinity or avidity of ICOSL to ICOS and/or CD28 is no more than 95% of wild-type control values, and in some embodiments no more than 80, 70, 60, 50, 40, 30, 20, 10, 5%, or lack of detectable binding affinity or avidity of control ICOS and/or wild-type CD28. A variant ICOSL changes the primary amino acid sequence by substitution, addition or deletion of amino acid residues. The term variant in the context of a variant ICOSL should not be construed as imposing any condition on any particular source composition or the manner in which the variant ICOSL is created. A variant ICOSL may, for example, be generated starting from the sequence information of a reference ICOSL or a wild-type mammalian ICOSL, then modeled in silico to bind to ICOS and/or CD28, and finally recombinantly or chemically synthesized so as to produce a variant ICOSL of the present invention. In one alternative example, a variant ICOSL can be created by site-directed mutagenesis of a reference (eg, unmodified) ICOSL or wild-type ICOSL. Thus, the variant ICOSL designates a composition and not a product obtained by any method. Various methods can be used, including recombinant methods, chemical synthesis, or combinations thereof.

Используемый в данном документе термин дикий тип или естественный или нативный в связи с биологическими материалами, такими как нуклеотидные молекулы, белки, представители IgSF, клеткихозяева и тому подобное, относится к тем биологическим материалам, которые обнаруживаются в природе и не модифицированы вмешательством человека.As used herein, the term wild type or natural or native in connection with biological materials, such as nucleotide molecules, proteins, IgSF members, host cells and the like, refers to those biological materials that are found in nature and are not modified by human intervention.

II. Вариантные полипептиды ICOSLII. ICOSL variant polypeptides

В данном документе, предлагаются вариантные полипептиды ICOSL, которые демонстрируют измененную (увеличенную или уменьшенную) активность связывания или аффинность к одному или нескольким из когнатных партнеров связывания ICOSL. В некоторых воплощениях когнатный партнер связывания ICOSL представляет собой один или несколько из числа CD28, ICOS или CTLA-4. В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL включает одну или несколько аминокислотных модификаций, таких как одна или несколько замен (в качестве варианта мутаций или замещений), делеций или добавлений в домене (IgD) иммуноглобулинового суперсемейства (IgSF) по отношению к полипептиду ICOSL дикого типа или немодифицированному полипептиду ICOSL или к части ICOSL дикого типа или немодифицированного ICOSL, содержащей домен суперсемейства иммуноглобулинов (IgSF) или его специфический связывающий фрагмент. Таким образом, предоставленный вариантный полипептид ICOSL представляет собой или включает вариантный IgD (далее именуемый vIgD), в котором в IgD имеют место одна или несколько аминокислотных модификаций (например, замен).Provided herein are variant ICOSL polypeptides that exhibit altered (increased or decreased) binding activity or affinity for one or more of the ICOSL cognate binding partners. In some embodiments, the ICOSL cognate binding partner is one or more of CD28, ICOS, or CTLA-4. In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide includes one or more amino acid modifications, such as one or more substitutions (as variant mutations or substitutions), deletions, or additions in an immunoglobulin superfamily (IgSF) domain (IgD) relative to the wild-type or unmodified ICOSL polypeptide to an ICOSL polypeptide or to a portion of wild-type or unmodified ICOSL containing an immunoglobulin superfamily (IgSF) domain or a specific binding fragment thereof. Thus, the provided variant ICOSL polypeptide is or includes a variant IgD (hereinafter referred to as vIgD) in which one or more amino acid modifications (eg, substitutions) have occurred in the IgD.

В некоторых воплощениях IgD включает домен IgV или домен IgC (например, IgC2) или специфический связывающий фрагмент домена IgV или домена IgC (например, IgC2), или их комбинации. В некоторых воплощениях IgD может представлять собой только IgV, комбинацию IgV и IgC, включая весь внеклеточный домен (ECD), или любую комбинацию Ig-доменов ICOSL. В табл. 2 приведены примерные остатки, которые соответствуют областям IgV или IgC в ICOSL. В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL включает домен IgV или домен IgC или их специфические связывающие фрагменты, в которых в домене IgV или IgC или его специфическом связывающем фрагменте, по меньшей мере, имеет место одна аминокислотная модификация (например, замена). В некоторых воплощениях в силу измененной связывающей активности или аффинности домен IgV или домен IgC является доменом IgSF с модифицированной аффинностью.In some embodiments, the IgD includes an IgV domain or an IgC domain (eg, IgC2) or a specific binding fragment of an IgV domain or an IgC domain (eg, IgC2), or combinations thereof. In some embodiments, the IgD may be IgV alone, a combination of IgV and IgC including the entire extracellular domain (ECD), or any combination of ICOSL Ig domains. In table Figure 2 shows exemplary residues that correspond to the IgV or IgC regions of the ICOSL. In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide includes an IgV domain or an IgC domain or specific binding fragments thereof, wherein at least one amino acid modification (eg, substitution) occurs in the IgV or IgC domain or specific binding fragment thereof. In some embodiments, due to altered binding activity or affinity, the IgV domain or IgC domain is an affinity modified IgSF domain.

В некоторых воплощениях вариант модифицирован в еще одном домене IgSF относительно последовательности референсного (например, немодифицированного) ICOSL. В некоторых воплощениях последовательность референсного (например, немодифицированного) ICOSL представляет собой ICOSL дикого типа. В некоторых воплощениях референсный (например, немодифицированный) ICOSL или ICOSL дикого типа имеет последовательность нативного ICOSL или его ортолога. В некоторых воплощениях референсный (например, немодифицированный) ICOSL или ICOSL дикого типа представляет собой или включает внеклеточный домен (ECD) ICOSL или его часть, содержащую один или несколько доменов IgSF (см. табл. 2). В некоторых воплощениях внеклеточный домен полипептида референсного (например, немодифицированного) ICOSL или полипептида ICOSL дикого типа включает домен IgV и домен IgC или домены. Однако вариантный полипептид ICOSL не должен включать как домен IgV, так и домен или домены IgC. В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL включает или состоит в основном из домена IgV или его специфического связывающего фрагмента. В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL включает или состоит в основном из домена IgC или его специфических связывающих фрагментов. В некоторых воплощениях вариантный ICOSL является растворимым и не имеет трансмембранного домена. В некоторых воплощениях вариантный ICOSL дополнительно включает трансмембранный домен, а в некоторых случаях также и цитоплазматический домен.In some embodiments, the variant is modified in yet another IgSF domain relative to the reference (eg, unmodified) ICOSL sequence. In some embodiments, the reference (eg, unmodified) ICOSL sequence is wild-type ICOSL. In some embodiments, the reference (eg, unmodified) ICOSL or wild-type ICOSL has the sequence of native ICOSL or an orthologue thereof. In some embodiments, the reference (eg, unmodified) ICOSL or wild-type ICOSL is or includes an extracellular domain (ECD) of ICOSL or a portion thereof containing one or more IgSF domains (see Table 2). In some embodiments, the extracellular domain of a reference (eg, unmodified) ICOSL polypeptide or wild-type ICOSL polypeptide includes an IgV domain and an IgC domain or domains. However, the variant ICOSL polypeptide must not include both an IgV domain and an IgC domain or domains. In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide includes or consists primarily of an IgV domain or a specific binding fragment thereof. In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide includes or consists primarily of an IgC domain or specific binding fragments thereof. In some embodiments, the variant ICOSL is soluble and lacks a transmembrane domain. In some embodiments, the variant ICOSL further includes a transmembrane domain, and in some cases also a cytoplasmic domain.

В некоторых воплощениях последовательность референсного (например, немодифицированного) ICOSL или ICOSL дикого типа представляет собой последовательность ICOSL млекопитающего. В неко- 37 044346 торых воплощениях последовательность последовательность референсного (например, немодифицированного) ICOSL или ICOSL дикого типа может представлять собой ICOSL млекопитающего, которым является, без ограничения указанным, человек, мышь, яваский макак или крыса. В некоторых воплощениях последовательность референсного (например, немодифицированного) ICOSL или ICOSL дикого типа является человеческой.In some embodiments, the reference (eg, unmodified) ICOSL or wild-type ICOSL sequence is a mammalian ICOSL sequence. In some embodiments, the sequence of the reference (eg, unmodified) ICOSL or wild-type ICOSL may be a mammalian ICOSL, which is, but is not limited to, a human, mouse, cynomolgus, or rat. In some embodiments, the sequence of the reference (eg, unmodified) ICOSL or wild-type ICOSL is human.

В некоторых воплощениях последовательность референсного (например, немодифицированного) ICOSL или ICOSL дикого типа имеет (i) аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 5 или его зрелую форму, утратившую сигнальную последовательность, (ii) аминокислотную последовательность, которая имеет, по меньшей мере, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99% и более идентичности последовательности с SEQ ID NO: 5 или ее зрелой формой или (iii) представляет собой часть (i) или (ii), содержащую домен IgV или IgC или их специфические связывающие фрагменты.In some embodiments, the sequence of the reference (e.g., unmodified) ICOSL or wild-type ICOSL has (i) the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 5 or a mature form thereof lacking the signal sequence, (ii) an amino acid sequence that has at least , 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99% or more sequence identity to SEQ ID NO: 5 or a mature form thereof, or (iii) represents is part (i) or (ii) containing the IgV or IgC domain or their specific binding fragments.

В некоторых воплощениях последовательность референсного (например, немодифицированного) ICOSL или ICOSL дикого типа представляет собой или включает внеклеточный домен ICOSL или его часть. В некоторых воплощениях последовательность референсного ICOSL или ICOSL дикого типа включает аминокислотную последовательность, указанную в SEQ ID NO: 32, или ее ортолог.In some embodiments, the reference (eg, unmodified) ICOSL or wild-type ICOSL sequence is or includes the extracellular domain of ICOSL or a portion thereof. In some embodiments, the reference ICOSL or wild-type ICOSL sequence includes the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 32, or an orthologue thereof.

DTQEKEVRAMVGSDVELSCACPEGSRFDLNDVYVYWQTSESKTVVTYHIPQNSSDTQEKEVRAMVGSDVELSCACPEGSRFDLNDVYVYWQTSESKTVVTYHIPQNSS

LENVDSRYRNRALMSPAGMLRGDFSLRLFNVTPQDEQKFHCLVLSQSLGFQEVLSVEVT LHVAANFSVPVVSAPHSPSQDELTFTCTSINGYPRPNVYWINKTDNSLLDQALQNDTVF LNMRGLYDVVSVLRIARTPSVNIGCCIENVLLQQNLTVGSQTGNDIGERDKITENPVSTG EKNAAT (SEQ ID NO:32)LENVDSRYRNRALMSPAGMLRGDFSLRLFNVTPQDEQKFHCLVLSQSLGFQEVLSVEVT LHVAANFSVPVVSAPHSPSQDELTFTCTSINGYPRPNVYWINKTDNSLLDQALQNDTVF LNMRGLYDVVSVLRIARTPSVNIGCCIENVLLQQNLTVGSQTGNDIGERDKITENPVSTG EKNAAT (SEQ ID NO:32)

В некоторых случаях последовательность референсного (например, немодифицированного) ICOSL или ICOSL дикого типа может включать (i) аминокислотную последовательность, указанную в SEQ ID NO: 32, (ii) аминокислотную последовательность, которая имеет, по меньшей мере, около 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99% идентичности с последовательностью SEQ ID NO: 32 или (iii) является специфическим связывающим фрагментом последовательности (i) или (ii), содержащей домен IgV или домен IgC.In some cases, the sequence of a reference (e.g., unmodified) ICOSL or wild-type ICOSL may include (i) an amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 32, (ii) an amino acid sequence that is at least about 85, 86, 87 , 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99% identity with SEQ ID NO: 32 or (iii) is a specific binding fragment of sequence (i) or (ii), containing an IgV domain or an IgC domain.

В некоторых воплощениях референсный полипептид ICOSL содержит укороченный внеклеточный домен, содержащий укорочение C-конца относительно референсной последовательности внеклеточного домена ICOSL, представленную в SEQ ID NO: 32. В некоторых воплощениях C-концевое укорочение составляет составляет, по меньшей мере, 10, по меньшей мере, 20, по меньшей мере, 30, по меньшей мере, 40, по меньшей мере, 50, по меньшей мере, 60, по меньшей мере, 70, по меньшей мере, 80, по меньшей мере, 90, по меньшей мере, 100, по меньшей мере, 125 аминокислотных остатков. В некоторых воплощениях C-концевое укорочение имеет, по меньшей мере, 1, по меньшей мере, 5, по меньшей мере, 10, по меньшей мере, 15, по меньшей мере, 20, по меньшей мере, 25, по меньшей мере, 30, по меньшей мере, 35 аминокислотных остатков. В некоторых воплощениях полипептид ICOSL, содержащий C-концевое укорочение, не содержит, за пределами C-концевой точки укорочения, смежные аминокислотные остатки ICOSL дикого типа. Следовательно, среди предлагаемых референсных последовательностей ICOSL имеются такие, которые короче полного внеклеточного домена ICOSL дикого типа, например изложенного в SEQ ID NO: 32. В некоторых воплощениях полипептид ICOSL, содержащий укорочение C-конца, не содержит или не слит с аминокислотными остатками домена ICOSL за пределами внеклеточного домена.In some embodiments, the ICOSL reference polypeptide comprises a truncated extracellular domain comprising a C-terminal truncation relative to the ICOSL extracellular domain reference sequence set forth in SEQ ID NO: 32. In some embodiments, the C-terminal truncation is at least 10, at least , 20, at least 30, at least 40, at least 50, at least 60, at least 70, at least 80, at least 90, at least 100 at least 125 amino acid residues. In some embodiments, the C-terminal truncation has at least 1, at least 5, at least 10, at least 15, at least 20, at least 25, at least 30 at least 35 amino acid residues. In some embodiments, the ICOSL polypeptide containing a C-terminal truncation does not contain, beyond the C-terminal truncation point, contiguous wild-type ICOSL amino acid residues. Accordingly, the proposed ICOSL reference sequences include those that are shorter than the complete wild-type ICOSL extracellular domain, such as those set forth in SEQ ID NO: 32. In some embodiments, the ICOSL polypeptide containing the C-terminal truncation does not contain or is not fused to amino acid residues of the ICOSL domain outside the extracellular domain.

В некоторых воплощениях референсный полипептид ICOSL изменен, например, мутированный или делеционный, в одном или нескольких сайтах расщепления протеазой. Как обнаружено в данной работе, полипептид ICOSL дикого типа содержит сайт расщепления протеазой, который в некоторых случаях приводит к расщеплению белка при экспрессии в клетках, например, клетках яичника китайского хомяка, в результате чего получается неоднородный продукт нескольких видов, в том числе видов различной длины или размеров. Например, расщепление полипептида ICOSL может происходить в сайте расщепления протеазы LQQN/LT между остатками 207 и 208 SEQ ID NO: 32 (/ обозначает потенциальный сайт расщепления). В некоторых воплощениях референсный полипептид ICOSL изменен или в нем отсутствует сайт расщепления протеазой, обозначенный как аминокислоты 204-209 в SEQ ID NO: 32. В некоторых воплощениях укороченный полипептид ICOSL является более устойчивым к расщеплению протеазой по сравнению с полипептидом ICOSL дикого типа или не укороченным. Примерный укороченный полипептид ICOSL с укорочением ECD, в которых отсутствует весь сайт расщепления LQQN/LT или его часть (укороченные варианты обозначены как #2, #3, #4, #5, #6, #7 или #8), представлены в SEQ ID NO: 600-606. Укороченный вариант #2:In some embodiments, the ICOSL reference polypeptide is altered, such as mutated or deleted, at one or more protease cleavage sites. As found here, the wild-type ICOSL polypeptide contains a protease cleavage site, which in some cases results in cleavage of the protein when expressed in cells, such as Chinese hamster ovary cells, resulting in a heterogeneous product of several species, including species of varying lengths or sizes. For example, cleavage of an ICOSL polypeptide may occur at the LQQN/LT protease cleavage site between residues 207 and 208 of SEQ ID NO: 32 (/ denotes a potential cleavage site). In some embodiments, the reference ICOSL polypeptide is altered or lacks the protease cleavage site designated as amino acids 204-209 in SEQ ID NO: 32. In some embodiments, the truncated ICOSL polypeptide is more resistant to protease cleavage compared to a wild-type or non-truncated ICOSL polypeptide . Exemplary truncated ICOSL polypeptides with ECD truncations lacking all or part of the LQQN/LT cleavage site (truncated variants designated #2, #3, #4, #5, #6, #7, or #8) are provided in SEQ ID NO: 600-606. Short version #2:

DTQEKEVRAMVGSDVELSCACPEGSRFDLNDVYVYWQTSESKTVVTYHIPQNSSDTQEKEVRAMVGSDVELSCACPEGSRFDLNDVYVYWQTSESKTVVTYHIPQNSS

LENVDSRYRNRALMSPAGMLRGDFSLRLFNVTPQDEQKFHCLVLSQSLGFQEVLSVEVT LHVAANFSVPVVSAPHSPSQDELTFTCTSINGYPRPNVYWINKTDNSLLDQALQNDTVF LNMRGLYDVVSVLRIARTPSVNIGCCIENVLLQQNL (SEQ ID NO: 600)LENVDSRYRNRALMSPAGMLRGDFSLRLFNVTPQDEQKFHCLVLSQSLGFQEVLSVEVT LHVAANFSVPVVSAPHSPSQDELTFTCTSINGYPRPNVYWINKTDNSLLDQALQNDTVF LNMRGLYDVVSVLRIARTPSVNIGCCIENVLLQQNL (SEQ ID NO: 600)

Укороченный вариант #3:Short version #3:

- 38 044346- 38 044346

DTQEKEVRAMVGSDVELSCACPEGSRFDLNDVYVYWQTSESKTVVTYHIPQNSS LENVDSRYRNRALMSPAGMLRGDFSLRLFNVTPQDEQKFHCLVLSQSLGFQEVLSVEVT LHVAANFSVPVVSAPHSPSQDELTFTCTSINGYPRPNVYWINKTDNSLLDQALQNDTVF LNMRGLYDVVSVLRIARTPSVNIGCCIENVLLQQNLTVGSQ (SEQ ID NO: 601)DTQEKEVRAMVGSDVELSCACPEGSRFDLNDVYVYWQTSESKTVVTYHIPQNSS LENVDSRYRNRALMSPAGMLRGDFSLRLFNVTPQDEQKFHCLVLSQSLGFQEVLSVEVT LHVAANFSVPVVSAPHSPSQDELTFTCTSINGYPRPNVYWINKTDNSLLDQALQNDTVF LNMRGLYDVVSVLRIARTPSVNIGCCIENV LLQQNLTVGSQ (SEQ ID NO: 601)

Укороченный вариант #4:Short version #4:

DTQEKEVRAMVGSDVELSCACPEGSRFDLNDVYVYWQTSESKTVVTYHIPQNSSDTQEKEVRAMVGSDVELSCACPEGSRFDLNDVYVYWQTSESKTVVTYHIPQNSS

LENVDSRYRNRALMSPAGMLRGDFSLRLFNVTPQDEQKFHCLVLSQSLGFQEVLSVEVT LHVAANFSVPVVSAPHSPSQDELTFTCTSINGYPRPNVYWINKTDNSLLDQALQNDTVF LNMRGLYDVVSVLRIARTPSVNIGCCIENVLLQQN (SEQ ID NO: 602)LENVDSRYRNRALMSPAGMLRGDFSLRLFNVTPQDEQKFHCLVLSQSLGFQEVLSVEVT LHVAANFSVPVVSAPHSPSQDELTFTCTSINGYPRPNVYWINKTDNSLLDQALQNDTVF LNMRGLYDVVSVLRIARTPSVNIGCCIENVLLQQN (SEQ ID NO: 602)

Укороченный вариант #5:Short version #5:

DTQEKEVRAMVGSDVELSCACPEGSRFDLNDVYVYWQTSESKTVVTYHIPQNSSDTQEKEVRAMVGSDVELSCACPEGSRFDLNDVYVYWQTSESKTVVTYHIPQNSS

LENVDSRYRNRALMSPAGMLRGDFSLRLFNVTPQDEQKFHCLVLSQSLGFQEVLSVEVT LHVAANFSVPVVSAPHSPSQDELTFTCTSINGYPRPNVYWINKTDNSLLDQALQNDTVF LNMRGLYDVVSVLRIARTPSVNIGCCIENVLLQQ (SEQ ID NO: 603)LENVDSRYRNRALMSPAGMLRGDFSLRLFNVTPQDEQKFHCLVLSQSLGFQEVLSVEVT LHVAANFSVPVVSAPHSPSQDELTFTCTSINGYPRPNVYWINKTDNSLLDQALQNDTVF LNMRGLYDVVSVLRIARTPSVNIGCCIENVLLQQ (SEQ ID NO: 603)

Укороченный вариант #6:Short version #6:

DTQEKEVRAMVGSDVELSCACPEGSRFDLNDVYVYWQTSESKTVVTYHIPQNSSDTQEKEVRAMVGSDVELSCACPEGSRFDLNDVYVYWQTSESKTVVTYHIPQNSS

LENVDSRYRNRALMSPAGMLRGDFSLRLFNVTPQDEQKFHCLVLSQSLGFQEVLSVEVT LHVAANFSVPVVSAPHSPSQDELTFTCTSINGYPRPNVYWINKTDNSLLDQALQNDTVF LNMRGLYDVVSVLRIARTPSVNIGCCIENVLL (SEQ ID NO: 604)LENVDSRYRNRALMSPAGMLRGDFSLRLFNVTPQDEQKFHCLVLSQSLGFQEVLSVEVT LHVAANFSVPVVSAPHSPSQDELTFTCTSINGYPRPNVYWINKTDNSLLDQALQNDTVF LNMRGLYDVVSVLRIARTPSVNIGCCIENVLL (SEQ ID NO: 604)

Укороченный вариант #7:Short version #7:

DTQEKEVRAMVGSDVELSCACPEGSRFDLNDVYVYWQTSESKTVVTYHIPQNSSDTQEKEVRAMVGSDVELSCACPEGSRFDLNDVYVYWQTSESKTVVTYHIPQNSS

LENVDSRYRNRALMSPAGMLRGDFSLRLFNVTPQDEQKFHCLVLSQSLGFQEVLSVEVT LHVAANFSVPVVSAPHSPSQDELTFTCTSINGYPRPNVYWINKTDNSLLDQALQNDTVF LNMRGLYDVVSVLRIARTPSVNIGCCIEN (SEQ ID NO: 605)LENVDSRYRNRALMSPAGMLRGDFSLRLFNVTPQDEQKFHCLVLSQSLGFQEVLSVEVT LHVAANFSVPVVSAPHSPSQDELTFTCTSINGYPRPNVYWINKTDNSLLDQALQNDTVF LNMRGLYDVVSVLRIARTPSVNIGCCIEN (SEQ ID NO: 605)

Укороченный вариант #8:Short version #8:

DTQEKEVRAMVGSDVELSCACPEGSRFDLNDVYVYWQTSESKTVVTYHIPQNSSDTQEKEVRAMVGSDVELSCACPEGSRFDLNDVYVYWQTSESKTVVTYHIPQNSS

LENVDSRYRNRALMSPAGMLRGDFSLRLFNVTPQDEQKFHCLVLSQSLGFQEVLSVEVT LHVAANFSVPVVSAPHSPSQDELTFTCTSINGYPRPNVYWINKTDNSLLDQALQNDTVF LNMRGLYDVVSVLRIARTPSVNIGCCIENVLLQQNLT (SEQ ID NO: 606)LENVDSRYRNRALMSPAGMLRGDFSLRLFNVTPQDEQKFHCLVLSQSLGFQEVLSVEVT LHVAANFSVPVVSAPHSPSQDELTFTCTSINGYPRPNVYWINKTDNSLLDQALQNDTVF LNMRGLYDVVSVLRIARTPSVNIGCCIENVLLQQNLT (SEQ ID NO: 606)

В некоторых воплощениях референсный полипептид ICOSL изменен в одной или нескольких аминокислотах, соответствующих аминокислотам 204-209, относительно SEQ ID NO: 32. В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL имеет одну или несколько аминокислотных модификаций, например, замен в референсном ICOSL или его специфическом связывающем фрагменте, соответствующих положению(ям) 207 и/или 208, относительно нумерации SEQ ID NO: 32. В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL имеет еще одну или несколько аминокислотных модификаций, например, замен, выбранных из N207A, N207G, L208G, или их консервативных аминокислотых модификаций, например, замен. В некоторых воплощениях одна или несколько аминокислотных модификаций, например, замен, представляют собой N207A/L208G или N207G/L208G. В некоторых воплощениях полноразмерные референсные ECD или укороченные референсные ECD вариантного полипептида ICOSL модифицированы так, чтобы содержать одну или несколько модификаций аминокислот, например замен, выбранных из N207A, N207G, L208G или консервативной модификации аминокислот. Примерные полноразмерные или укороченные референсные ECD с одной или несколькими модификациями приведены в SEQ ID NO: 607-628. Примерные референсные последовательности, содержащие мутации в сайте расщепления N207 и/или L208 относительно положений, приведенных в SEQ ID NO: 32, изложены в SEQ ID NO: 624-628. В некоторых случаях предоставленные модификации могут снижать расщепление протеазой полипептида ICOSL, такое как расщепление, которое может происходить в сайте расщепления протеазой LQQN/LT.In some embodiments, the ICOSL reference polypeptide is altered at one or more amino acids corresponding to amino acids 204-209 relative to SEQ ID NO: 32. In some embodiments, the ICOSL variant polypeptide has one or more amino acid modifications, such as substitutions in the ICOSL reference or a specific binding fragment thereof corresponding to position(s) 207 and/or 208, relative to SEQ ID NO: 32. In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide has one or more additional amino acid modifications, for example, substitutions selected from N207A, N207G, L208G, or conserved amino acids thereof modifications, such as replacements. In some embodiments, one or more amino acid modifications, such as substitutions, are N207A/L208G or N207G/L208G. In some embodiments, the full-length reference ECDs or shortened reference ECDs of the variant ICOSL polypeptide are modified to contain one or more amino acid modifications, such as substitutions selected from N207A, N207G, L208G, or a conservative amino acid modification. Exemplary full-length or shortened reference ECDs with one or more modifications are provided in SEQ ID NO: 607-628. Exemplary reference sequences containing mutations in the N207 and/or L208 cleavage site relative to the positions shown in SEQ ID NO: 32 are set forth in SEQ ID NO: 624-628. In some cases, the modifications provided may reduce protease cleavage of the ICOSL polypeptide, such as cleavage that may occur at the LQQN/LT protease cleavage site.

В некоторых воплощениях комбинации вышеупомянутых стратегий укорочения и модификации могут использоваться в референсной последовательности ICOSL ECD. В некоторых воплощениях модификации, например замены, сделаны в укороченном референсном полипептиде ICOSL, таком как примерная эталонная последовательность ICOSL, приведенная в SEQ ID NO: 600-606. Примерные последовательности вариантных ICOSL с модификациями в потенциальных сайтах расщепления протеаз N207 и/или L208 приведены в SEQ ID NO: 607-628. В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL проявляет пониженное расщепление протеазой по сравнению с полипептидом ICOSL дикого типа, таким как содержащий последовательность ECD, представленную в SEQ ID NO: 32.In some embodiments, combinations of the above truncation and modification strategies may be used in the ICOSL ECD reference sequence. In some embodiments, modifications, such as substitutions, are made to a truncated ICOSL reference polypeptide, such as the exemplary ICOSL reference sequence set forth in SEQ ID NOs: 600-606. Exemplary sequences of variant ICOSLs with modifications at the potential N207 and/or L208 protease cleavage sites are provided in SEQ ID NOs: 607-628. In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide exhibits reduced protease cleavage compared to a wild-type ICOSL polypeptide, such as those containing the ECD sequence set forth in SEQ ID NO: 32.

В некоторых воплощениях эталонный (например, немодифицированный) полипептид ICOSL или полипептид ICOSL дикого типа содержит домен IgV или домен IgC или их специфический связывающий фрагмент. В некоторых воплощениях референсный полипептид ICOSL, содержащий домен IgV, содер- 39 044346 жит аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 196 (соответствует аминокислотным остаткам 19-129 в SEQ ID NO: 5), или ее ортолог.In some embodiments, the reference (eg, unmodified) ICOSL polypeptide or wild-type ICOSL polypeptide comprises an IgV domain or an IgC domain or a specific binding fragment thereof. In some embodiments, the ICOSL reference IgV domain polypeptide contains the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 196 (corresponding to amino acid residues 19-129 in SEQ ID NO: 5), or an orthologue thereof.

DTQEKEVRAMVGSDVELSCACPEGSRFDLNDVYVYWQTSESKTVVTYHIPQNSSDTQEKEVRAMVGSDVELSCACPEGSRFDLNDVYVYWQTSESKTVVTYHIPQNSS

LENVDSRYRNRALMSPAGMLRGDFSLRLFNVTPQDEQKFHCLVLSQSLGFQEVLSVE (SEQID NO: 196)LENVDSRYRNRALMSPAGMLRGDFSLRLFNVTPQDEQKFHCLVLSQSLGFQEVLSVE (SEQID NO: 196)

В некоторых воплощениях референсный полипептид ICOSL, содержащий домен IgV, содержит, по меньшей мере, аминокислоты 1-112, 1-113, 1-114, 1-115, 1-116, 1-117, 1-118, 1-119, 1 -120, 1-121, 1-122, относительно представленной в SEQ ID NO: 32. В некоторых воплощениях референсный полипептид ICOSL, содержащий домен IgV, содержит аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 545 (соответствует аминокислотным остаткам 19-140 в SEQ ID NO: 5), или ее ортолог. В некоторых воплощениях домен IgV является единственным доменом IgSF референсного полипептида ICOSL.In some embodiments, the IgV domain containing reference ICOSL polypeptide contains at least amino acids 1-112, 1-113, 1-114, 1-115, 1-116, 1-117, 1-118, 1-119, 1-120, 1-121, 1-122, relative to those presented in SEQ ID NO: 32. In some embodiments, the reference IgV domain-containing ICOSL polypeptide contains the amino acid sequence presented in SEQ ID NO: 545 (corresponding to amino acid residues 19-140 in SEQ ID NO: 5), or its orthologue. In some embodiments, the IgV domain is the only IgSF domain of the ICOSL reference polypeptide.

DTQEKEVRAMVGSDVELSCACPEGSRFDLNDVYVYWQTSESKTVVTYHIPQNSSDTQEKEVRAMVGSDVELSCACPEGSRFDLNDVYVYWQTSESKTVVTYHIPQNSS

LENVDSRYRNRALMSPAGMLRGDFSLRLFNVTPQDEQKFHCLVLSQSLGFQEVLSVEVT LHVAANFSV (SEQ ID NO: 545)LENVDSRYRNRALMSPAGMLRGDFSLRLFNVTPQDEQKFHCLVLSQSLGFQEVLSVEVT LHVAANFSV (SEQ ID NO: 545)

В некоторых воплощениях домен IgV эталонного (например, немодифицированного) полипептида ICOSL или полипептида ICOSL дикого типа может содержать (i) последовательность аминокислот, указанную в SEQ ID NO: 196 или 545, (ii) последовательность аминокислот которая имеет, по меньшей мере, приблизительно 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99% идентичности последовательности SEQ ID NO: 196 или 545, или (iii) специфический связывающий фрагмент последовательности аминокислот, указанных в SEQ ID NO: 196 или 545, или специфический связывающий фрагмент последовательности (i) или (ii). В некоторых воплощениях эталонный (например, немодифицированный) домен IgV способен связывать один или несколько когнатных белков, связывающих ICOSL, таких как один или несколько из числа CD28, ICOS или CTLA-4.In some embodiments, the IgV domain of a reference (e.g., unmodified) ICOSL polypeptide or a wild-type ICOSL polypeptide may comprise (i) an amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 196 or 545, (ii) an amino acid sequence that is at least about 85 , 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99% sequence identity to SEQ ID NO: 196 or 545, or (iii) a specific binding fragment of the amino acid sequence indicated in SEQ ID NO: 196 or 545, or a specific binding fragment of sequence (i) or (ii). In some embodiments, the reference (eg, unmodified) IgV domain is capable of binding one or more cognate ICOSL binding proteins, such as one or more of CD28, ICOS, or CTLA-4.

В некоторых воплощениях домен IgC референсного (например, немодифицированного) полипептида ICOSL или полипептида ICOSL дикого типа содержит аминокислотную последовательность, представленную в виде остатков 141-227 SEQ ID NO: 5, или ее ортолог. Например, домен IgC полипептида ICOSL дикого типа или немодифицированного полипептида ICOSL может включать (i) аминокислотную последовательность, содержащую остатки 141-227 в SEQ ID NO: 5, (ii) аминокислотную последовательность, которая имеет, по меньшей мере, около 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99% идентичности последовательности к остаткам 141-227 в SEQ ID NO: 5 или (iii) (i) или (ii). В некоторых воплощениях референсный домен IgV способен связывать один или несколько родственных ICOSL связывающих белков.In some embodiments, the IgC domain of a reference (eg, unmodified) ICOSL polypeptide or a wild-type ICOSL polypeptide comprises the amino acid sequence represented by residues 141-227 of SEQ ID NO: 5, or an orthologue thereof. For example, the IgC domain of a wild-type or unmodified ICOSL polypeptide may comprise (i) an amino acid sequence comprising residues 141-227 of SEQ ID NO: 5, (ii) an amino acid sequence that has at least about 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99% sequence identity to residues 141-227 in SEQ ID NO: 5 or (iii) (i) or (ii) . In some embodiments, the IgV reference domain is capable of binding one or more ICOSL-related binding proteins.

В некоторых воплощениях референсный (например, немодифицированный) полипептид ICOSL или полипептид ICOSL дикого типа содержит специфический связывающий фрагмент ICOSL, такой как специфический связывающий фрагмент домена IgV или домена IgC. В некоторых вариантах конкретный связывающий фрагмент может связывать CD28, ICOS и/или CTLA4. В некоторых воплощениях специфический связывающий фрагмент может иметь аминокислотную длину, по меньшей мере, 50 аминокислот, например, по меньшей мере, 60, 70, 80, 90, 100 или 110 аминокислот. В некоторых воплощениях специфический связывающий фрагмент домена IgV включает аминокислотную последовательность, которая составляет, по меньшей мере, около 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99% длины домена IgV, представленного как аминокислоты 19-129 в SEQ ID NO: 5. В некоторых воплощениях специфический связывающий фрагмент домена IgC включает аминокислотную последовательность, которая составляет, по меньшей мере, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99% длины домена IgC, представленного как аминокислоты 141-227 в SEQ ID NO: 5.In some embodiments, the reference (eg, unmodified) ICOSL polypeptide or wild-type ICOSL polypeptide comprises a specific ICOSL binding fragment, such as an IgV domain specific binding fragment or an IgC domain specific binding fragment. In some embodiments, the particular binding moiety may bind CD28, ICOS, and/or CTLA4. In some embodiments, the specific binding fragment may have an amino acid length of at least 50 amino acids, such as at least 60, 70, 80, 90, 100 or 110 amino acids. In some embodiments, the specific IgV domain binding fragment comprises an amino acid sequence that is at least about 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% length of the IgV domain, represented as amino acids 19-129 in SEQ ID NO: 5. In some embodiments, the specific binding fragment of the IgC domain includes an amino acid sequence that is at least 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99% of the length of the IgC domain represented as amino acids 141-227 in SEQ ID NO: 5.

В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL включает домен ECD, укороченный домен ECD или его часть, содержащую один или большее количество IgSF доменов с модифицированной аффинностью. В некоторых воплощениях вариантные полипептиды ICOSL могут содержать домен IgV или домен IgC, в котором один или несколько доменов IgSF (IgV или IgC) или специфический связывающий фрагмент домена IgV или специфический связывающий фрагмент домена IgC включает одну или несколько аминокислотных модификаций (например, замен). В некоторых воплощениях вариантные полипептиды ICOSL могут содержать домен IgV и домен IgC или специфический связывающий фрагмент домена IgV и специфический связывающий фрагмент домена IgC. В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL включает полноразмерный домен IgV. В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL включает полноразмерный домен IgC. В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL включает специфический связывающий фрагмент домена IgV. В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL включает специфический связывающий фрагмент домена IgC. В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL включает полноразмерный домен IgV и полноразмерный домен IgC. В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL включает полноразмерный домен IgV и специфический связывающий фрагмент домена IgC. В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL включает специфический связывающий фрагмент домена IgV и полноразмерный домен IgC. В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL включает специфическийIn some embodiments, the variant ICOSL polypeptide includes an ECD domain, a truncated ECD domain, or a portion thereof containing one or more affinity modified IgSF domains. In some embodiments, variant ICOSL polypeptides may comprise an IgV domain or an IgC domain, in which one or more IgSF domains (IgV or IgC) or a specific IgV domain binding fragment or a specific IgC domain binding fragment includes one or more amino acid modifications (eg, substitutions). In some embodiments, variant ICOSL polypeptides may comprise an IgV domain and an IgC domain, or a specific binding fragment of an IgV domain and a specific binding fragment of an IgC domain. In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide includes a full-length IgV domain. In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide includes a full-length IgC domain. In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide includes a specific IgV domain binding fragment. In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide includes a specific IgC domain binding fragment. In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide includes a full-length IgV domain and a full-length IgC domain. In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide includes a full-length IgV domain and a specific IgC domain binding fragment. In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide includes a specific binding fragment of an IgV domain and a full-length IgC domain. In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide includes a specific

- 40 044346 связывающий фрагмент домена IgV и специфический связывающий фрагмент домена IgC.- 40 044346 binding fragment of the IgV domain and specific binding fragment of the IgC domain.

В любом из таких воплощений, модификация одной или нескольких аминокислот (например, замены) вариантных полипептидов ICOSL может быть расположена в любом одном или нескольких из полипептидных доменов ICOSL. Например, в некоторых воплощениях одна или несколько аминокислотных замен находятся во внеклеточном домене (ECD) вариантного полипептида ICOSL, такого как представленный в SEQ ID NO: 32. В некоторых воплощениях одна или несколько аминокислотных замен расположены в домене IgV или специфическом связывающем фрагменте домена IgV. В некоторых воплощениях одна или несколько аминокислотных модификаций (например, замены) расположены в домене IgC или специфическом связывающем фрагменте домена IgC.In any such embodiments, a modification of one or more amino acids (eg, substitutions) of the variant ICOSL polypeptides may be located in any one or more of the ICOSL polypeptide domains. For example, in some embodiments, the one or more amino acid substitutions are located in the extracellular domain (ECD) of a variant ICOSL polypeptide, such as those presented in SEQ ID NO: 32. In some embodiments, the one or more amino acid substitutions are located in the IgV domain or a specific binding fragment of the IgV domain. In some embodiments, one or more amino acid modifications (eg, substitutions) are located in the IgC domain or a specific binding fragment of the IgC domain.

В целом, каждый из различных атрибутов полипептидов раскрыт отдельно ниже (например, растворимые, секретируемые и мембраносвязанные полипептиды, аффинность ICOSL к CD28, ICOS и CTLA-4, количество вариаций в полипептидной цепи, количество связанных полипептидных цепей, количество и характер изменений аминокислот на один вариантный ICOSL и т. д.). Однако, как будет ясно специалисту в данной области, любой конкретный полипептид может включать комбинацию этих независимых атрибутов.In general, each of the various attributes of polypeptides is disclosed separately below (e.g., soluble, secreted, and membrane-bound polypeptides, affinity of ICOSL for CD28, ICOS, and CTLA-4, number of variations in a polypeptide chain, number of polypeptide chains linked, number and pattern of amino acid changes per variant ICOSL, etc.). However, as one skilled in the art will appreciate, any given polypeptide may include a combination of these independent attributes.

Понятно, что ссылка на аминокислоты, в том числе на конкретную последовательность, представленную как SEQ ID NO, используемую для описания доменной организации домена IgSF, предназначена для иллюстративных целей и не предназначена для ограничения объема предлагаемых воплощений. Понятно, что полипептиды и описание их доменов теоретически получены на основании анализа гомологии и выравнивания с аналогичными молекулами. Таким образом, точный локус может варьировать и не обязательно является одинаковым для каждого белка. Следовательно, специфический домен IgSF, такой как специфический домен IgV или домен IgC, может быть на несколько аминокислот (одну, две, три или четыре) длиннее или короче.It is understood that reference to amino acids, including the specific sequence set forth as SEQ ID NO, used to describe the domain organization of the IgSF domain is for illustrative purposes and is not intended to limit the scope of the proposed embodiments. It is clear that polypeptides and the description of their domains are theoretically derived from homology analysis and alignment with similar molecules. Thus, the exact locus may vary and is not necessarily the same for every protein. Therefore, a specific IgSF domain, such as an IgV specific domain or an IgC domain, may be several amino acids (one, two, three or four) longer or shorter.

Кроме того, различные воплощения изобретения, как обсуждается ниже, часто предоставляются в пределах значения определенного термина, как описано выше. Поэтому воплощения, описанные в конкретном определении, должны интерпретироваться как включаемые посредством ссылки, когда определенный термин используется при обсуждении различных аспектов и атрибутов, описанных в данном документе. Таким образом, заголовки, порядок представления различных аспектов и воплощений и отдельное раскрытие каждого независимого атрибута не являются ограничением объема настоящего раскрытия.In addition, various embodiments of the invention, as discussed below, are often provided within the meaning of a certain term as described above. Therefore, the embodiments described in the specific definition are to be interpreted as being incorporated by reference when the defined term is used in discussing the various aspects and attributes described herein. Thus, the headings, the order in which the various aspects and embodiments are presented, and the separate disclosure of each independent attribute are not intended to limit the scope of the present disclosure.

A. Примерные модификации.A. Approximate Modifications.

В данном документе предлагаются вариантные полипептиды ICOSL, содержащие, по меньшей мере, один аффинной модифицированный домен IgSF (например, IgV или IgC) или их специфический связывающий фрагмент в домене IgSF, содержащемся в референсном (например, немодифицированном) полипептиде ICOSL или полипептиде ICOSL дикого типа таким образом, что вариантный полипептид ICOSL проявляет измененную (увеличенную или уменьшенную) связывающую активность или аффиность к одному или нескольким лигандам, ICOS, CD28 или CTLA-4, относительно референсного (например, немодифицированного) полипептида ICOSL или полипептида ICOSL дикого типа. В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL имеет аффинность связывания с CD28, ICOS и/или CTLA-4, которая отличается от контрольной последовательности референсного (например, немодифицированного) полипептида ICOSL или полипептида ICOSL дикого типа, что определено, например, твердофазным иммуноферментным анализом ELISA, проточной цитометрией или анализом Biacore. В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL имеет повышенную аффинность связывания с CD28, ICOS и/или CTLA-4. В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL имеет уменьшенную аффинность связывания с CD28, ICOS и/или CTLA-4 относительно референсного (немодифицированного) полипептида ICOSL дикого типа или полипептида ICOSL дикого типа. CD28, ICOS и/или CTLA-4 могут представлять собой белок млекопитающих, такой как белок человека или белок мыши.Provided herein are variant ICOSL polypeptides comprising at least one affinity modified IgSF domain (e.g., IgV or IgC) or a specific binding fragment thereof in an IgSF domain contained in a reference (e.g., unmodified) ICOSL polypeptide or a wild-type ICOSL polypeptide such that the variant ICOSL polypeptide exhibits altered (increased or decreased) binding activity or affinity for one or more ligands, ICOS, CD28 or CTLA-4, relative to the reference (eg, unmodified) ICOSL polypeptide or wild-type ICOSL polypeptide. In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide has a binding affinity for CD28, ICOS, and/or CTLA-4 that is different from the control sequence of the reference (e.g., unmodified) ICOSL polypeptide or wild-type ICOSL polypeptide, as determined, for example, by a flow-through enzyme-linked immunosorbent assay cytometry or Biacore analysis. In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide has increased binding affinity for CD28, ICOS and/or CTLA-4. In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide has reduced binding affinity for CD28, ICOS and/or CTLA-4 relative to the reference (unmodified) wild-type ICOSL polypeptide or wild-type ICOSL polypeptide. CD28, ICOS and/or CTLA-4 may be a mammalian protein, such as a human protein or a mouse protein.

Аффинность связывания для каждого из когнатных партнеров связывания является независимой; то есть в некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL имеет повышенную аффинность связывания с одним, двумя или тремя из CD28, ICOS и/или CTLA-4 и уменьшенную аффинность связывания с одним, двумя или тремя из CD28, ICOS, и CTLA-4, относительно референсного (например, немодифицированного) полипептида ICOSL или полипептида ICOSL дикого типа.The binding affinity for each of the cognate binding partners is independent; that is, in some embodiments, the variant ICOSL polypeptide has increased binding affinity to one, two, or three of CD28, ICOS, and/or CTLA-4 and decreased binding affinity to one, two, or three of CD28, ICOS, and CTLA-4, relative to the reference (eg, unmodified) ICOSL polypeptide or wild-type ICOSL polypeptide.

В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL обладает повышенной аффинностью связывания с CD28, относительно референсного (например, немодифицированного) полипептида ICOSL или полипептида ICOSL дикого типа. В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL обладает повышенной аффинностью связывания с ICOS, относительно референсного (например, немодифицированного) полипептида ICOSL или полипептида ICOSL дикого типа. В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL обладает повышенной аффинностью связывания с CTLA-4, относительно референсного (например, немодифицированного) полипептида ICOSL или полипептида ICOSL дикого типа. В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL обладает пониженной аффинностью связывания с CD28, относительно референсного (например, немодифицированного) полипептида ICOSL или полипептида ICOSL дикого типа. В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL обладает пониженной аффинностью связывания с ICOS, относительно референсного (например, немодифициро- 41 044346 ванного) полипептида ICOSL или полипептида ICOSL дикого типа. В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL обладает пониженной аффинностью связывания с CTLA-4, относительно референсного (например, немодифицированного) полипептида ICOSL или полипептида ICOSL дикого типа.In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide has increased CD28 binding affinity relative to the reference (eg, unmodified) ICOSL polypeptide or wild-type ICOSL polypeptide. In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide has increased binding affinity for ICOS relative to a reference (eg, unmodified) ICOSL polypeptide or a wild-type ICOSL polypeptide. In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide has increased binding affinity for CTLA-4 relative to the reference (eg, unmodified) ICOSL polypeptide or wild-type ICOSL polypeptide. In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide has reduced CD28 binding affinity relative to the reference (eg, unmodified) ICOSL polypeptide or wild-type ICOSL polypeptide. In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide has a reduced binding affinity for ICOS relative to a reference (eg, unmodified) ICOSL polypeptide or a wild-type ICOSL polypeptide. In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide has reduced binding affinity for CTLA-4 relative to the reference (eg, unmodified) ICOSL polypeptide or wild-type ICOSL polypeptide.

В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL обладает повышенной аффинностью связывания с CD28 и ICOS, относительно референсного (например, немодифицированного) полипептида ICOSL или полипептида ICOSL дикого типа. В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL обладает повышенной аффинностью связывания с CD28 и пониженной аффинностью связывания с ICOS, относительно референсного (например, немодифицированного) полипептида ICOSL или полипептида ICOSL дикого типа. В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL обладает пониженной аффинностью связывания с CD28 и ICOS, относительно референсного (например, немодифицированного) полипептида ICOSL или полипептида ICOSL дикого типа. В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL обладает пониженной аффинностью связывания с CD28 и повышенной аффинностью связывания с ICOS, относительно референсного (например, немодифицированного) полипептида ICOSL или полипептида ICOSL дикого типа.In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide has increased binding affinity for CD28 and ICOS relative to the reference (eg, unmodified) ICOSL polypeptide or wild-type ICOSL polypeptide. In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide has increased CD28 binding affinity and decreased ICOS binding affinity relative to a reference (eg, unmodified) ICOSL polypeptide or wild-type ICOSL polypeptide. In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide has reduced binding affinity for CD28 and ICOS relative to the reference (eg, unmodified) ICOSL polypeptide or wild-type ICOSL polypeptide. In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide has reduced binding affinity for CD28 and increased binding affinity for ICOS relative to the reference (eg, unmodified) ICOSL polypeptide or wild-type ICOSL polypeptide.

В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL обладает повышенной аффинностью связывания с CD28 и CTLA-4, относительно референсного (например, немодифицированного) полипептида ICOSL или полипептида ICOSL дикого типа. В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL обладает повышенной аффинностью связывания с CD28 и пониженной аффинностью связывания с CTLA-4, относительно референсного (например, немодифицированного) полипептида ICOSL или полипептида ICOSL дикого типа. В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL обладает пониженной аффинностью связывания с CD28 и CTLA-4, относительно референсного (например, немодифицированного) полипептида ICOSL или полипептида ICOSL дикого типа. В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL обладает пониженной аффинностью связывания с CD28 и повышенной аффинностью связывания с CTLA4, относительно референсного (например, немодифицированного) полипептида ICOSL или полипептида ICOSL дикого типа.In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide has increased binding affinity for CD28 and CTLA-4 relative to the reference (eg, unmodified) ICOSL polypeptide or wild-type ICOSL polypeptide. In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide has increased binding affinity for CD28 and decreased binding affinity for CTLA-4 relative to a reference (eg, unmodified) ICOSL polypeptide or wild-type ICOSL polypeptide. In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide has reduced binding affinity for CD28 and CTLA-4 relative to the reference (eg, unmodified) ICOSL polypeptide or wild-type ICOSL polypeptide. In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide has reduced binding affinity for CD28 and increased binding affinity for CTLA4 relative to a reference (eg, unmodified) ICOSL polypeptide or wild-type ICOSL polypeptide.

В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL обладает повышенной аффинностью связывания с ICOS и CTLA-4, относительно референсного (например, немодифицированного) полипептида ICOSL или полипептида ICOSL дикого типа. В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL обладает повышенной аффинностью связывания с ICOS и пониженной аффинностью связывания с CTLA-4, относительно референсного (например, немодифицированного) полипептида ICOSL или полипептида ICOSL дикого типа. В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL обладает пониженной аффинностью связывания с ICOS и CTLA-4, относительно референсного (например, немодифицированного) полипептида ICOSL или полипептида ICOSL дикого типа. В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL обладает пониженной аффинностью связывания с ICOS и повышенной аффинностью связывания с CTLA-4, относительно референсного (например, немодифицированного) полипептида ICOSL или полипептида ICOSL дикого типа.In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide has increased binding affinity for ICOS and CTLA-4 relative to the reference (eg, unmodified) ICOSL polypeptide or wild-type ICOSL polypeptide. In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide has increased binding affinity for ICOS and decreased binding affinity for CTLA-4 relative to a reference (eg, unmodified) ICOSL polypeptide or wild-type ICOSL polypeptide. In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide has reduced binding affinity for ICOS and CTLA-4 relative to the reference (eg, unmodified) ICOSL polypeptide or wild-type ICOSL polypeptide. In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide has reduced binding affinity for ICOS and increased binding affinity for CTLA-4 relative to a reference (eg, unmodified) ICOSL polypeptide or wild-type ICOSL polypeptide.

В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL обладает повышенной аффинностью связывания с CD28, ICOS и CTLA-4, относительно референсного (например, немодифицированного) полипептида ICOSL или полипептида ICOSL дикого типа. В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL обладает повышенной аффинностью связывания с CD28 и ICOS и пониженной аффинностью связывания с CTLA-4, относительно референсного (например, немодифицированного) полипептида ICOSL или полипептида ICOSL дикого типа. В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL обладает повышенной аффинностью связывания с CD28 и CTLA-4 и пониженной аффинностью связывания с ICOS, относительно референсного (например, немодифицированного) полипептида ICOSL или полипептида ICOSL дикого типа. В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL обладает пониженной аффинностью связывания с CD28 и ICOS и повышенной аффинностью связывания с CTLA4, относительно референсного (например, немодифицированного) полипептида ICOSL или полипептида ICOSL дикого типа. В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL обладает пониженной аффинностью связывания с CD28 и повышенной аффинностью связывания с ICOS и CTLA-4, относительно референсного (например, немодифицированного) полипептида ICOSL или полипептида ICOSL дикого типа. В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL обладает повышенной аффинностью связывания с CD28 и пониженной аффинностью связывания с ICOS и CTLA-4, относительно референсного (например, немодифицированного) полипептида ICOSL или полипептида ICOSL дикого типа. В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL обладает пониженной аффинностью связывания с CD28, CTLA-4 и ICOS, относительно референсного (например, немодифицированного) полипептида ICOSL или полипептида ICOSL дикого типа. В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL обладает пониженной аффинностью связывания с CD28 и повышенной аффинностью связывания с ICOS и CTLA-4, относительно референсного (например, немодифицированного) полипептида ICOSL или полипептида ICOSL дикого типа.In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide has increased binding affinity for CD28, ICOS, and CTLA-4 relative to the reference (eg, unmodified) ICOSL polypeptide or wild-type ICOSL polypeptide. In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide has increased binding affinity for CD28 and ICOS and decreased binding affinity for CTLA-4 relative to a reference (eg, unmodified) ICOSL polypeptide or wild-type ICOSL polypeptide. In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide has increased binding affinity for CD28 and CTLA-4 and decreased binding affinity for ICOS, relative to the reference (eg, unmodified) ICOSL polypeptide or wild-type ICOSL polypeptide. In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide has reduced binding affinity for CD28 and ICOS and increased binding affinity for CTLA4 relative to a reference (eg, unmodified) ICOSL polypeptide or wild-type ICOSL polypeptide. In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide has reduced binding affinity for CD28 and increased binding affinity for ICOS and CTLA-4 relative to a reference (eg, unmodified) ICOSL polypeptide or wild-type ICOSL polypeptide. In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide has increased binding affinity for CD28 and decreased binding affinity for ICOS and CTLA-4 relative to the reference (eg, unmodified) ICOSL polypeptide or wild-type ICOSL polypeptide. In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide has reduced binding affinity for CD28, CTLA-4, and ICOS relative to the reference (eg, unmodified) ICOSL polypeptide or wild-type ICOSL polypeptide. In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide has reduced binding affinity for CD28 and increased binding affinity for ICOS and CTLA-4 relative to a reference (eg, unmodified) ICOSL polypeptide or wild-type ICOSL polypeptide.

В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL с повышенной или большей аффинностью связывания с CD28, ICOS и/или CTLA-4 будет иметь увеличение аффинности связывания относительно контрольного референсного (например, немодифицированного) полипептида ICOSL или поли- 42 044346 пептида ICOSL дикого типа, по меньшей мере, на около 5, например, по меньшей мере, на около 10, 15, 20, 25, 35 или 50% для CD28, ICOS и/или CTLA-4. В некоторых воплощениях увеличение аффинности связывания относительного референсного (например, немодифицированного) полипептида ICOSL или полипептида ICOSL дикого типа составляет более чем в 1,2 раза, в 1,5 раза, в 2 раза, в 3 раза, в 4 раза, в 5 раз, в 6 раз, 7 раз, 8 раз, 9 раз, 10 раз, 20 раз, 30 раз 40 раз или 50 раз. В таких примерах референсный (например, немодифицированный) полипептид ICOSL или полипептид ICOSL дикого типа имеет такую же последовательность, что и вариантный полипептид ICOSL, за исключением того, что он не включает одну или несколько аминокислотных модификаций (например, замен).In some embodiments, a variant ICOSL polypeptide with increased or greater binding affinity for CD28, ICOS and/or CTLA-4 will have an increase in binding affinity relative to a control reference (eg, unmodified) ICOSL polypeptide or a wild-type ICOSL polypeptide of at least , by about 5, for example, by at least about 10, 15, 20, 25, 35 or 50% for CD28, ICOS and/or CTLA-4. In some embodiments, the increase in binding affinity of the relative reference (e.g., unmodified) ICOSL polypeptide or wild-type ICOSL polypeptide is greater than 1.2-fold, 1.5-fold, 2-fold, 3-fold, 4-fold, 5-fold , 6 times, 7 times, 8 times, 9 times, 10 times, 20 times, 30 times 40 times or 50 times. In such examples, the reference (eg, unmodified) ICOSL polypeptide or wild-type ICOSL polypeptide has the same sequence as the variant ICOSL polypeptide except that it does not include one or more amino acid modifications (eg, substitutions).

В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL с уменьшенной или сниженной аффинностью связывания с CD28, ICOS, и/или CTLA-4 будет иметь снижение аффинности связывания относительно контрольного референсного (например, немодифицированного) полипептида ICOSL или полипептида ICOSL дикого типа, по меньшей мере, на 5, например, по меньшей мере, на около 10, 15, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90% или более для CD28, ICOSL и/или CTLA-4. В некоторых воплощениях уменьшение аффинности связывания относительного референсного (например, немодифицированного) полипептида ICOSL или полипептида ICOSL дикого типа составляет более чем в 1,2 раза, в 1,5 раза, в 2 раза, в 3 раза, в 4 раза, в 5 раз, в 6 раз, 7 раз, 8 раз, 9 раз, 10 раз, 20 раз, 30 раз 40 раз или 50 раз. В таких примерах референсный (например, немодифицированный) полипептид ICOSL или полипептид ICOSL дикого типа имеет такую же последовательность, что и вариантный полипептид ICOSL, за исключением того, что он не включает одну или несколько аминокислотных модификаций (например, замен).In some embodiments, a variant ICOSL polypeptide with reduced or decreased binding affinity for CD28, ICOS, and/or CTLA-4 will have a reduction in binding affinity relative to a control reference (e.g., unmodified) ICOSL polypeptide or wild-type ICOSL polypeptide by at least 5 eg, at least about 10, 15, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90% or more for CD28, ICOSL and/or CTLA-4. In some embodiments, the reduction in binding affinity of the relative reference (e.g., unmodified) ICOSL polypeptide or wild-type ICOSL polypeptide is greater than 1.2-fold, 1.5-fold, 2-fold, 3-fold, 4-fold, 5-fold , 6 times, 7 times, 8 times, 9 times, 10 times, 20 times, 30 times 40 times or 50 times. In such examples, the reference (eg, unmodified) ICOSL polypeptide or wild-type ICOSL polypeptide has the same sequence as the variant ICOSL polypeptide except that it does not include one or more amino acid modifications (eg, substitutions).

В некоторых воплощениях, равновесная константа диссоциации (Kd) любого из вышеприведенных воплощений, для CD28, ICOS и/или CTLA-4 может составлять меньше, чем 1x10’5 M, 1x10’6 M, 1х10’7 M, 1x10’8 M, 1x10’9 M, 1х10’10 M, или 1x10’11 М, или 1х10’12 M.In some embodiments, the equilibrium dissociation constant (Kd) of any of the above embodiments for CD28, ICOS and/or CTLA-4 may be less than 1x10'5 M, 1x10'6 M, 1x10'7 M, 1x10'8 M, 1x10'9 M, 1x10' 10 M, or 1x10'11 M, or 1x10' 12 M.

В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL имеет повышенную или большую аффинность связывания с CD28. В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL с повышенной или большей аффинностью связывания с CD28 будет иметь увеличение аффинности связывания по отношению к референсному (например, немодифицированному) полипептиду ICOSL или полипептиду ICOSL дикого типа, по меньшей мере, примерно на 25%, например, по меньшей мере, около 30%, 40%, 50% или 60% для CD28. В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL с повышенной или большей аффинностью связывания с CD28 имеет равновесную константу диссоциации (Kd) менее 200 пМ, 300 пМ, 400 пМ, 500 пМ или 600 мкМ для CD28. В некоторых воплощениях вариантный полипептид специфически связывается с эктодоменом одного из ICOS, CD28 или CTLA4 с повышенной селективностью по сравнению с референсным (например, немодифицированным) полипептидом ICOSL или полипептидом ICOSL дикого типа. В некоторых воплощениях повышенная селективность в отношении CD28. В некоторых воплощениях повышенная селективность включает большее соотношение связывания вариантного полипептида ICOSL с одним когнатным партнером связывания, выбранным из ICOS, CD28 и CTLA4, относительно другого когнатного партнера связывания по сравнению с соотношением связывания референсного (например, немодифицированного) полипептида ICOSL или полипептида ICOSL дикого типа с одним когнатным партнером связывания относительно другого когнатного партнера связывания. В некоторых воплощениях отношение выше, по меньшей мере, или, по меньшей мере, около в 1,5 раза, в 2,0 раза, в 3,0 раза, в 4,0 раза, в 5 раз, в 10 раз, в 15 раз, в 20 раз, в 30 раз, 40 раз, 50 раз или более.In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide has increased or greater binding affinity for CD28. In some embodiments, a variant ICOSL polypeptide with increased or greater CD28 binding affinity will have an increase in binding affinity relative to a reference (e.g., unmodified) ICOSL polypeptide or a wild-type ICOSL polypeptide of at least about 25%, e.g., at least , about 30%, 40%, 50% or 60% for CD28. In some embodiments, a variant ICOSL polypeptide with increased or greater binding affinity for CD28 has an equilibrium dissociation constant (Kd) of less than 200 pM, 300 pM, 400 pM, 500 pM, or 600 μM for CD28. In some embodiments, the variant polypeptide specifically binds to the ectodomain of one of ICOS, CD28, or CTLA4 with increased selectivity compared to a reference (eg, unmodified) ICOSL polypeptide or a wild-type ICOSL polypeptide. In some embodiments, increased selectivity for CD28. In some embodiments, increased selectivity includes a greater ratio of binding of a variant ICOSL polypeptide to one cognate binding partner selected from ICOS, CD28, and CTLA4 relative to another cognate binding partner, compared to the ratio of binding of a reference (e.g., unmodified) ICOSL polypeptide or a wild-type ICOSL polypeptide to one cognate binding partner relative to another cognate binding partner. In some embodiments, the ratio is at least or at least about 1.5 times, 2.0 times, 3.0 times, 4.0 times, 5 times, 10 times, 15 times, 20 times, 30 times, 40 times, 50 times or more.

Референсный (например, немодифицированный) полипептид ICOSL или полипептид ICOSL дикого типа не обязательно должен использоваться в качестве исходной композиции для получения описанных в данном документе вариантов полипептидов ICOSL. Поэтому применение термина модификация, например, замещение, не означает, что настоящие воплощения ограничены конкретным способом получения вариантных полипептидов ICOSL. Вариантные полипептиды ICOSL могут быть получены, например, путем пептидного синтеза de novo и, следовательно, необязательно требуют модификации, такой как замещение, в смысле изменения кодона для кодирования модификации, например замещения. Этот принцип также распространяется на термины добавление и делеция аминокислотного остатка, которые также не подразумевают конкретного способа осуществления. Средства, с помощью которых разрабатываются или создаются вариантные полипептиды ICOSL, не ограничены каким-либо конкретным способом. В некоторых воплощениях, однако, нуклеиновая кислота, кодирующая референсный (например, немодифицированный) полипептид ICOSL или полипептид ICOSL дикого типа, подергается мутагенезу из генетического материала референсного (например, немодифицированного) полипептида ICOSL или полипептида ICOSL дикого типа и подвергается скринингу для поиска искомой специфической аффинности связывания и/или индукции экспрессии IFN-гамма или другой функциональной активности. В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL синтезируется de novo с использованием последовательностей белков или нуклеиновых кислот, доступных в любом количестве из общедоступных баз данных, а затем подвергается скринингу. Национальный центр информации по биотехнологии предоставляет такую информацию, и его веб-сайт является общедоступным через Интернет, как и база данных UniProtKB, обсуждаемая ранее.A reference (eg, unmodified) ICOSL polypeptide or a wild-type ICOSL polypeptide need not be used as the starting composition to prepare the ICOSL polypeptide variants described herein. Therefore, the use of the term modification, such as substitution, does not mean that the present embodiments are limited to a particular method for producing variant ICOSL polypeptides. Variant ICOSL polypeptides can be produced, for example, by de novo peptide synthesis and therefore do not necessarily require modification, such as substitution, in the sense of changing the codon to encode the modification, such as substitution. This principle also applies to the terms addition and deletion of an amino acid residue, which also do not imply a specific mode of implementation. The means by which ICOSL variant polypeptides are designed or created are not limited to any particular method. In some embodiments, however, a nucleic acid encoding a reference (e.g., unmodified) ICOSL polypeptide or a wild-type ICOSL polypeptide is subjected to mutagenesis from the genetic material of the reference (e.g., unmodified) ICOSL polypeptide or a wild-type ICOSL polypeptide and is screened for the specific affinity being sought. binding and/or inducing IFN-gamma expression or other functional activity. In some embodiments, a variant ICOSL polypeptide is synthesized de novo using protein or nucleic acid sequences available in any quantity from publicly available databases and then screened. The National Center for Biotechnology Information provides such information and its website is publicly accessible via the Internet, as is the UniProtKB database discussed earlier.

Если не указано иное, как указано в настоящем описании, аминокислотная модификация(и) обознаUnless otherwise indicated as indicated herein, amino acid modification(s) are designated

- 43 044346 чена номером положения аминокислоты, соответствующей нумерации положений референсной последовательности ECD, указанной в SEQ ID NO: 32. Способность определения соответствующего положения модифицации находится в пределах компетенции специалиста в данной области, например, определения аминокислотной замены в полипептиде ICOSL, включая его часть, содержащую домен IgSF (например, IgV), например, путем выравнивания референсной последовательности (например, SEQ ID NO: 196, 545, 600-628) с SEQ ID NO: 32. При перечислении модификаций во всем этом описании, аминокислотное положение указывается посередине с соответствующей референсной (например, немодифицированной или дикого типа) аминокислотой, указанной перед номером, и идентифицированной аминокислотной заменой, указанной после номера. Если модификация является делецией в данном положении, то указывается del, а если модификация является вставкой в данном положении, то указывается ins. В некоторых случаях вставка указана с аминокислотным положением, указанным в середине, с соответствующей референсной аминокислотой, указанной до и после номера, и идентифицированной вариантной аминокислотной вставкой, указанной после немодифицированной (например, дикого типа) аминокислоты.- 43 044346 is designated by the amino acid position number corresponding to the position numbering of the ECD reference sequence specified in SEQ ID NO: 32. The ability to determine the corresponding modification position is within the competence of a person skilled in the art, for example, determining the amino acid substitution in the ICOSL polypeptide, including part thereof, containing an IgSF domain (e.g., IgV), for example, by aligning a reference sequence (e.g., SEQ ID NO: 196, 545, 600-628) with SEQ ID NO: 32. When listing modifications throughout this specification, the amino acid position is indicated in the middle of the corresponding reference (eg, unmodified or wild type) amino acid indicated before the number, and the identified amino acid substitution indicated after the number. If the modification is a deletion at a given position, then del is indicated, and if the modification is an insertion at a given position, then ins is indicated. In some cases, the insertion is indicated with the amino acid position indicated in the middle, with the corresponding reference amino acid indicated before and after the number, and the identified variant amino acid insertion indicated after the unmodified (eg, wild type) amino acid.

В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL имеет одну или несколько аминокислотных модификаций, например, замен в референсной (например, немодифицированной) последовательности ICOSL или последовательности ICOSL дикого типа. Одна или несколько аминокислотных модификаций, например замен, может иметь место в эктодомене (внеклеточном домене) референсной (например, немодифицированной) последовательности ICOSL или последовательности ICOSL дикого типа. В некоторых воплощениях одна или несколько аминокислотных модификаций, например замен, может иметь место в домене IgV или его специфическом связывающем фрагменте. В некоторых воплощениях одна или несколько аминокислотных модификаций, например замен, может иметь место в домене IgC или его специфическом связывающем фрагменте. В некоторых воплощениях вариантного полипептида ICOSL могут иметь место некоторые из одной или нескольких аминокислотных модификаций, например замен, в домене IgV или его специфическом связывающем фрагменте, и могут иметь место некоторые из одной или нескольких аминокислотных модификаций, например замен, в IgC домен или его специфическом связывающем фрагменте.In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide has one or more amino acid modifications, such as substitutions in the reference (eg, unmodified) ICOSL sequence or wild-type ICOSL sequence. One or more amino acid modifications, such as substitutions, may occur in the ectodomain (extracellular domain) of the reference (eg, unmodified) ICOSL sequence or the wild-type ICOSL sequence. In some embodiments, one or more amino acid modifications, such as substitutions, may occur in the IgV domain or a specific binding fragment thereof. In some embodiments, one or more amino acid modifications, such as substitutions, may occur in the IgC domain or a specific binding fragment thereof. In some embodiments of a variant ICOSL polypeptide, some of one or more amino acid modifications, such as substitutions, may occur in the IgV domain or a specific binding fragment thereof, and some of one or more amino acid modifications, such as substitutions, may occur in the IgC domain or a specific binding fragment thereof. connecting fragment.

В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL имеет до 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19 или 20 аминокислотных модификаций, например замен. Модификация, например замена, может иметь место в домене IgV или в домене IgC. В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL имеет вплоть до 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, или 20 аминокислотных замен в домене IgV или его специфическом связывающем фрагменте. В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL имеет вплоть до 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, или 20 аминокислотных замен в домене IgC или его специфическом связывающем фрагменте. В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL идентичен, по меньшей мере, на 85, 86, 86, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, или 99% с референсной (например, немодифицированной) последовательностью ICOSL или последовательностью ICOSL дикого типа или его специфического связывающего фрагмента, таких как аминокислотная последовательность SEQ ID NO: 32, 196 или 545.In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide has up to 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, or 20 amino acid modifications, for example replacements. The modification, eg substitution, may occur in the IgV domain or in the IgC domain. In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide has up to 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, or 20 amino acids substitutions in the IgV domain or its specific binding fragment. In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide has up to 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, or 20 amino acids substitutions in the IgC domain or its specific binding fragment. In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide is at least 85, 86, 86, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, or 99% identical to the reference (e.g., unmodified ) an ICOSL sequence or a wild-type ICOSL sequence or a specific binding fragment thereof, such as the amino acid sequence of SEQ ID NO: 32, 196 or 545.

В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL имеет одну или более аминокислотную модификацию, например, замену в референсном ICOSL или специфическом связывающем фрагменте в соответствующем положении(ях) 10, 11, 13, 16, 18, 20, 25, 27, 30, 33, 37, 42, 43, 47, 52, 54, 57, 61, 62, 67,In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide has one or more amino acid modification, for example, a substitution in the reference ICOSL or specific binding fragment at the corresponding position(s) 10, 11, 13, 16, 18, 20, 25, 27, 30, 33, 37 , 42, 43, 47, 52, 54, 57, 61, 62, 67,

71, 72, 74, 77, 78, 75, 80, 84, 89, 90, 92, 93, 94, 96, 97, 98, 99, 100, 102, 103, 107, 109, 110, 111, 113, 115,116,71, 72, 74, 77, 78, 75, 80, 84, 89, 90, 92, 93, 94, 96, 97, 98, 99, 100, 102, 103, 107, 109, 110, 111, 113, 115,116,

117, 119, 120, 121, 122, 126, 129, 130, 132, 133, 135, 138, 139, 140, 142, 143, 144, 146, 151, 152, 153,154,117, 119, 120, 121, 122, 126, 129, 130, 132, 133, 135, 138, 139, 140, 142, 143, 144, 146, 151, 152, 153,154,

155, 156, 158, 161, 166, 168, 172, 173, 175, 190, 192, 193, 194, 198, 201, 203, 207, 208, 210, 212, 217,218,155, 156, 158, 161, 166, 168, 172, 173, 175, 190, 192, 193, 194, 198, 201, 203, 207, 208, 210, 212, 217,218,

220, 221, 224, 225 или 227 относительно нумерации SEQ ID NO: 32. В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL имеет одну или более аминокислотную модификацию, например, замену в референсном ICOSL или специфическом связывающем фрагменте в соответствующем положении(ях) 10, 11, 13, 16, 18, 20, 25, 26, 27, 30, 33, 37, 38, 42, 43, 47, 52, 54, 57, 61, 62, 67, 71, 72, 74, 75, 77, 78, 80, 84, 89, 90, 92, 93, 94, 96, 97, 98, 99, 100, 102, 103, 107, 109, 110, 111, 113, 115, 116, 117, 119, 120, 121, 122, 126, 129, 130, 132, 133, 135, 137, 138, 139, 140, 142, 143, 144, 146, 151, 152, 153, 154, 155, 156, 158, 161, 164, 166, 168, 172, 173, 175, 190, 192, 193, 194, 198, 201, 203, 207, 208, 210, 212, 217, 218, 220, 221, 224, 225 или 227 относительно нумерации SEQ ID NO: 32.220, 221, 224, 225 or 227 relative to the numbering of SEQ ID NO: 32. In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide has one or more amino acid modifications, for example, a substitution in the reference ICOSL or specific binding moiety at the corresponding position(s) 10, 11, 13, 16, 18, 20, 25, 26, 27, 30, 33, 37, 38, 42, 43, 47, 52, 54, 57, 61, 62, 67, 71, 72, 74, 75, 77, 78, 80, 84, 89, 90, 92, 93, 94, 96, 97, 98, 99, 100, 102, 103, 107, 109, 110, 111, 113, 115, 116, 117, 119, 120, 121, 122, 126, 129, 130, 132, 133, 135, 137, 138, 139, 140, 142, 143, 144, 146, 151, 152, 153, 154, 155, 156, 158, 161, 1 64, 166, 168, 172, 173, 175, 190, 192, 193, 194, 198, 201, 203, 207, 208, 210, 212, 217, 218, 220, 221, 224, 225 or 227 regarding the numbering of SEQ ID NO : 32.

В некоторых воплощениях такие вариантные полипептиды ICOSL проявляют измененную аффинность связывания с одним или несколькими из числа CD28, ICOS и/или CTLA-4 относительно референсного (например, немодифицированного) полипептида ICOSL или полипептида ICOSL дикого типа. Например, в некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL проявляет повышенную аффинность связывания с CD28, ICOS и/или CTLA-4 по сравнению с референсным (например, немодифицированным) или полипептидом ICOSL дикого типа. В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL проявляет пониженную аффинность связывания с CD28, ICOS или CTLA-4 по сравнению с референсным (например, немодифицированным) или полипептидом ICOSL дикого типа.In some embodiments, such variant ICOSL polypeptides exhibit altered binding affinity for one or more of CD28, ICOS and/or CTLA-4 relative to a reference (eg, unmodified) ICOSL polypeptide or a wild-type ICOSL polypeptide. For example, in some embodiments, the variant ICOSL polypeptide exhibits increased binding affinity for CD28, ICOS and/or CTLA-4 compared to the reference (eg, unmodified) or wild-type ICOSL polypeptide. In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide exhibits reduced binding affinity for CD28, ICOS, or CTLA-4 compared to a reference (eg, unmodified) or wild-type ICOSL polypeptide.

В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL имеет еще одну или несколько аминокислотных модификаций, например, замен, выбранных из M10V, M10I, V11E, S13G, E16V, S18R, A20V, S25G, F27S, F27C, N30D, Y33del, Q37R, K42E, Y47H, T43A, N52A, N52C, N52D, N52G, N52H, N52L,In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide has one or more amino acid modifications, for example, substitutions selected from M10V, M10I, V11E, S13G, E16V, S18R, A20V, S25G, F27S, F27C, N30D, Y33del, Q37R, K42E, Y47H, T43A, N52A, N52C, N52D, N52G, N52H, N52L,

- 44 044346- 44 044346

N52K, N52M, N52P, N52Q, N52R, N52S, N52T, N52V, N52Y, S54A, S54P, N57A, N57E, N57F, N57H, N57K, N57L, N57M, N57P, N57Q, N57S, N57T, N57V, N57W, N57Y, R61S, R61C, Y62F, L67P, A71T, G72R, L74Q, R75Q, D77G, F78L, L80P, N84Q, D89G, E90A, K92R, F93L, H94E, H94D, L96F, L96I, V97A, L98F, S99G, Q100A, Q100D, Q100E, Q100G, Q100K, Q100L, Q100M, Q100N, Q100R, Q100P, Q100S, Q100T, Q100V, L102R, G103E, V107A, V107I, S109G, S109N, V110D, V110N, V110A, E111del, T113E, H115R, H115Q, V116A, A117T, N119Q, F120I, F120S, S121G, V122A, V122M, S126T, S126R, H129P, S130G,S132F, Q133H, E135K, F138L, T139S, C140D, C140del, S142F, I143V, I143T, N144D, Y146C, V151A, Y152C, Y152H,W153R, I154F, N155H, N155Q, K156M, D158G, L161P, L161M, L166Q, N168Q, F172S, L173S, M175T, T190S, T190A, S192G, V193M, N194D, C198R, N201S, L203P, L203F, N207Q, L208P, V210A, S212G, D217V, I218T, I218N, E220G, R221G, R221I, I224V, T225A, N227K или их консервативных аминокислотых модификаций, например, замен. В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL имеет еще одну или несколько аминокислотных модификаций, например, замен, выбранных из M10V, M10I, V11E, S13G, E16V, S18R, A20T, A20V, S25G, R26S, F27C, F27S, N30D, Y33del, Q37R, T38P, K42E, T43A, Y47H, N52A, N52C, N52D, N52G, N52H, N52K, N52L, N52M, N52P, N52Q, N52R, N52S, N52T, N52V, N52Y, S54A, S54F, S54P, N57A, N57D, N57E, N57F, N57H, N57K, N57L, N57M, N57P, N57Q, N57S, N57T, N57V, N57W, N57Y, R61C, R61S, Y62F, L67P, A71T, G72R, L74Q, R75Q, D77G, F78L, L80P, N84Q, D89G, E90A, K92R, F93L, H94D, H94E, L96F, L96I, V97A, L98F, S99G, Q100A, Q100D, Q100E, Q100G, Q100K, Q100L, Q100M, Q100N, Q100P, Q100R, Q100S, Q100T, Q100V, L102R, G103E, V107A, V107I, S109G, S109N, V110A, V110D, V110N, E111del, T113E, H115Q, H115R, V116A, A117T, N119Q, F120I, F120S, S121G, V122A, V122M, S126R,S126T, H129P, S130G, S132F, Q133H, E135K, T137A, F138L, T139S, C140del, C140D, S142F, I143T, I143V, N144D, Y146C, V151A, Y152C, Y152H, W153R, I154F, N155H, N155Q, K156M, D158G, L161M, L161P, Q164L, L166Q, N168Q, F172S, L173S, M175T, T190A, T190S, S192G, V193A, V193M, N194D, C198R, N201S, L203F, L203P, N207Q, L208P, V210A, S212G, D217G, D217V, I218N, I218T, E220G, R221G, R221I, R221K, I224V, T225A, T225S, N227K или их консервативных аминокислотых модификаций, например, замен.N52K, N52M, N52P, N52Q, N52R, N52S, N52T, N52V, N52Y, S54A, S54P, N57A, N57E, N57F, N57H, N57K, N57L, N57M, N57P, N57Q, N57S, N57T, N57V, N57W, N5 7Y, R61S, R61C, Y62F, L67P, A71T, G72R, L74Q, R75Q, D77G, F78L, L80P, N84Q, D89G, E90A, K92R, F93L, H94E, H94D, L96F, L96I, V97A, L98F, S99G, Q100A, Q 100D, Q100E, Q100G, Q100K, Q100L, Q100M, Q100N, Q100R, Q100P, Q100S, Q100T, Q100V, L102R, G103E, V107A, V107I, S109G, S109N, V110D, V110N, V110A, E1 11del, T113E, H115R, H115Q, V116A, A117T, N119Q, F120I, F120S, S121G, V122A, V122M, S126T, S126R, H129P, S130G,S132F, Q133H, E135K, F138L, T139S, C140D, C140del, S142F, I143V, I1 43T, N144D, Y146C, V151A, Y152C, Y152H,W153R, I154F, N155H, N155Q, K156M, D158G, L161P, L161M, L166Q, N168Q, F172S, L173S, M175T, T190S, T190A, S192G, V193M, N194D, C198R, N2 01S, L203P, L203F, N207Q, L208P, V210A, S212G, D217V, I218T, I218N, E220G, R221G, R221I, I224V, T225A, N227K or their conservative amino acid modifications, such as substitutions. In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide has one or more amino acid modifications, for example, substitutions selected from M10V, M10I, V11E, S13G, E16V, S18R, A20T, A20V, S25G, R26S, F27C, F27S, N30D, Y33del, Q37R, T38P, K42E, T43A, Y47H, N52A, N52C, N52D, N52G, N52H, N52K, N52L, N52M, N52P, N52Q, N52R, N52S, N52T, N52V, N52Y, S54A, S54F, S54P, N57A, N57D, N5 7E, N57F, N57H, N57K, N57L, N57M, N57P, N57Q, N57S, N57T, N57V, N57W, N57Y, R61C, R61S, Y62F, L67P, A71T, G72R, L74Q, R75Q, D77G, F78L, L80P, N84Q, D8 9G, E90A, K92R, F93L, H94D, H94E, L96F, L96I, V97A, L98F, S99G, Q100A, Q100D, Q100E, Q100G, Q100K, Q100L, Q100M, Q100N, Q100P, Q100R, Q100S, Q100T, Q100V, L102R, G103E, V107A, V107I, S109G, S109N, V110A, V110D, V110N, E111del, T113E, H115Q, H115R, V116A, A117T, N119Q, F120I, F120S, S121G, V122A, V122M, S126R,S1 26T, H129P, S130G, S132F, Q133H, E135K, T137A, F138L, T139S, C140del, C140D, S142F, I143T, I143V, N144D, Y146C, V151A, Y152C, Y152H, W153R, I154F, N155H, N155Q, K156M, D158G, L1 61M, L161P, Q164L, L166Q, N168Q, F172S, L173S, M175T, T190A, T190S, S192G, V193A, V193M, N194D, C198R, N201S, L203F, L203P, N207Q, L208P, V210A, S212G, D217G, D217V, I218N, I2 18T, E220G, R221G, R221I, R221K, I224V, T225A, T225S, N227K or their conservative amino acid modifications, such as substitutions.

Консервативная аминокислотная модификация, например замена, представляет собой любую аминокислоту, которая попадает в тот же класс аминокислот, что и замещенные аминокислоты, но отлична от референсной (например, немодифицированной) аминокислоты или аминокислоты дикого типа. Классами аминокислот являются алифатические (глицин, аланин, валин, лейцин и изолейцин), гидроксильные или серосодержащие (серин, цистеин, треонин и метионин), циклические (пролин), ароматические (фенилаланин, тирозин, триптофан) основные (гистидин, лизин и аргинин) и кислые/амид (аспартат, глутамат, аспарагин и глутамин).A conservative amino acid modification, such as a substitution, is any amino acid that falls into the same class of amino acids as the substituted amino acids, but is different from the reference (eg, unmodified) or wild-type amino acid. The classes of amino acids are aliphatic (glycine, alanine, valine, leucine and isoleucine), hydroxyl or sulfur (serine, cysteine, threonine and methionine), cyclic (proline), aromatic (phenylalanine, tyrosine, tryptophan) basic (histidine, lysine and arginine) and acid/amide (aspartate, glutamate, asparagine and glutamine).

В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL имеет еще одну или несколько аминокислотных модификаций, например, замен, выбранных из числа NM10V, M10I, V11E, S13G, E16V, S18R, A20V, S25G, F27S, F27C, N30D, Y33del, Q37R, K42E, T43A, Y47H, N52A, N52C, N52D, N52G, N52H, N52L, N52K, N52M, N52P, N52Q, N52R, N52S, N52T, N52V, N52Y, S54A, S54P, N57A, N57E, N57F, N57H, N57K, N57L, N57M, N57P, N57Q, N57S, N57T, N57V, N57W, N57Y, R61S, R61C, Y62F, L67P, A71T, G72R, L74Q, R75Q, D77G, F78L, L80P, N84Q, D89G, E90A, K92R, F93L, H94E, H94D, L96F, L96I, V97A, L98F, S99G, Q100A, Q100D, Q100E, Q100G, Q100K, Q100L, Q100M, Q100N, Q100R, Q100P, Q100S, Q100T, Q100V, G103E, L102R, V107A, V107I, S109G, S109N, V110D, V110N, V110A, E111del, T113E, H115R, H115Q, V116A, A117T, N119Q, F120I, F120S, S121G, V122A, V122M, S126T, S126R, H129P, S130G,S132F, Q133H, E135K, F138L, T139S, C140D, C140del, S142F, I143V, I143T, N144D, Y146C, V151A, Y152C, Y152H,W153R, I154F, N155H, N155Q, K156M, D158G, L161P, L161M, L166Q, N168Q, F172S, L173S, M175T, T190A, T190S, S192G, V193M, N194D, C198R, N201S, L203P, L203F, N207Q, L208P, V210A, S212G, D217V, I218T, I218N, E220G, R221G, R221I, I224V, T225A или N227K.. В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL имеет еще одну или несколько аминокислотных модификаций, например, замен, выбранных из M10V, M10I, V11E, S13G, E16V, S18R, A20T, A20V, S25G, R26S, F27C, F27S, N30D, Y33del, Q37R, T38P, K42E, T43A, Y47H, N52A, N52C, N52D, N52G, N52H, N52K, N52L, N52M, N52P, N52Q, N52R, N52S, N52T, N52V, N52Y, S54A, S54F, S54P, N57A, N57D, N57E, N57F, N57H, N57K, N57L, N57M, N57P, N57Q, N57S, N57T, N57V, N57W, N57Y, R61C, R61S, Y62F, L67P, A71T, G72R, L74Q, R75Q, D77G, F78L, L80P, N84Q, D89G, E90A, K92R, F93L, H94D, H94E, L96F, L96I, V97A, L98F, S99G, Q100A, Q100D, Q100E, Q100G, Q100K, Q100L, Q100M, Q100N, Q100P, Q100R, Q100S, Q100T, Q100V, L102R, G103E, V107A, V107I, S109G, S109N, V110A, V110D, V110N, E111del, T113E, H115Q, H115R, V116A, A117T, N119Q, F120I, F120S, S121G, V122A, V122M, S126R,S126T, H129P, S130G, S132F, Q133H, E135K, T137A, F138L, T139S, C140del, C140D, S142F, I143T, I143V, N144D, Y146C, V151A, Y152C, Y152H, W153R, I154F, N155H, N155Q, K165M, D158G, L161M, L161P, Q164L, L166Q, N168Q, F172S, L173S, M175T, T190A, T190S, S192G, V193A, V193M, N194D, C198R, N201S, L203F, L203P, N207Q, L208P, V210A, S212G, D217G, D217V, I218N, I218T, E220G, R221G, R221I, R221K, I224V, T225A, T225S, N227K или их консервативных аминокислотых модификаций, например, замен.In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide has one or more amino acid modifications, for example, substitutions selected from NM10V, M10I, V11E, S13G, E16V, S18R, A20V, S25G, F27S, F27C, N30D, Y33del, Q37R, K42E, T43A , Y47H, N52A, N52C, N52D, N52G, N52H, N52L, N52K, N52M, N52P, N52Q, N52R, N52S, N52T, N52V, N52Y, S54A, S54P, N57A, N57E, N57F, N57H, N57K, N57L, N57M , N57P, N57Q, N57S, N57T, N57V, N57W, N57Y, R61S, R61C, Y62F, L67P, A71T, G72R, L74Q, R75Q, D77G, F78L, L80P, N84Q, D89G, E90A, K92R, F93L, H94E, H94D , L96F, L96I, V97A, L98F, S99G, Q100A, Q100D, Q100E, Q100G, Q100K, Q100L, Q100M, Q100N, Q100R, Q100P, Q100S, Q100T, Q100V, G103E, L102R, V107A , V107I, S109G, S109N, V110D , V110N, V110A, E111del, T113E, H115R, H115Q, V116A, A117T, N119Q, F120I, F120S, S121G, V122A, V122M, S126T, S126R, H129P, S130G,S132F, Q133H, E135K, F138L, T139S, C140D, C140del , S142F, I143V, I143T, N144D, Y146C, V151A, Y152C, Y152H,W153R, I154F, N155H, N155Q, K156M, D158G, L161P, L161M, L166Q, N168Q, F172S, L173S, M175T, T190A, T190S, S192G, V193M , N194D, C198R, N201S, L203P, L203F, N207Q, L208P, V210A, S212G, D217V, I218T, I218N, E220G, R221G, R221I, I224V, T225A, or N227K. In some embodiments, a variant ICOSL polypeptide has one or more amino acids modifications, such as replacements selected from M10V, M10I, V11E, S13G, E16V, S18R, A20T, A20V, S25G, R26S, F27C, F27S, N30D, Y33del, Q37R, T38P, K42E, T43A, Y47H, N52A, N52C, N52D, N52G, N52H, N52K, N52L, N52M, N52P, N52Q, N52R, N52S, N52T, N52V, N52Y, S54A, S54F, S54P, N57A, N57D, N57E, N57F, N57H, N57K, N57L, N57M, N5 7P, N57Q, N57S, N57T, N57V, N57W, N57Y, R61C, R61S, Y62F, L67P, A71T, G72R, L74Q, R75Q, D77G, F78L, L80P, N84Q, D89G, E90A, K92R, F93L, H94D, H94E, L9 6F, L96I, V97A, L98F, S99G, Q100A, Q100D, Q100E, Q100G, Q100K, Q100L, Q100M, Q100N, Q100P, Q100R, Q100S, Q100T, Q100V, L102R, G103E, V107A, V107I, S109G, S109N, V110A, V110D, V110N, E111del, T113E, H115Q, H115R, V116A, A117T, N119Q, F120I, F120S, S121G, V122A, V122M, S126R,S126T, H129P, S130G, S132F, Q133H, E135K, T1 37A, F138L, T139S, C140del, C140D, S142F, I143T, I143V, N144D, Y146C, V151A, Y152C, Y152H, W153R, I154F, N155H, N155Q, K165M, D158G, L161M, L161P, Q164L, L166Q, N168Q, F172S, L1 73S, M175T, T190A, T190S, S192G, V193A, V193M, N194D, C198R, N201S, L203F, L203P, N207Q, L208P, V210A, S212G, D217G, D217V, I218N, I218T, E220G, R221G, R221I, R221K, I224V, T2 25A, T225S, N227K or their conservative amino acid modifications , for example, replacements.

В некоторых воплощениях одна или несколько аминокислотных модификаций, например, замен, выбрана из N52Y/N57Y/F138L/L203P, N52H/N57Y/Q100P, N52S/Y146C/Y152C, N52H/C198R,In some embodiments, one or more amino acid modifications, such as substitutions, are selected from N52Y/N57Y/F138L/L203P, N52H/N57Y/Q100P, N52S/Y146C/Y152C, N52H/C198R,

- 45 044346- 45 044346

N52H/C140D/T225A, N52H/C198R/T225A, N52H/K92R, N52H/S99G, N57Y/Q100P, N52S/G103E,N52H/C140D/T225A, N52H/C198R/T225A, N52H/K92R, N52H/S99G, N57Y/Q100P, N52S/G103E,

N52S/S130G/Y152C, N52S/Y152C, N52S/C198R, N52Y/N57Y/Y152C, N52Y/N57Y/H129P/C198R,N52S/S130G/Y152C, N52S/Y152C, N52S/C198R, N52Y/N57Y/Y152C, N52Y/N57Y/H129P/C198R,

N52H/L161P/C198R, N52S/T113E, N52D/S54P, N52K/L208P, N52S/Y152H, N52D/V151A, N52H/I143T,N52H/L161P/C198R, N52S/T113E, N52D/S54P, N52K/L208P, N52S/Y152H, N52D/V151A, N52H/I143T,

N52S/L80P, F120S/Y152H/N201S, N52S/R75Q/L203P, N52S/D158G, N52D/Q133H,N52S/L80P, F120S/Y152H/N201S, N52S/R75Q/L203P, N52S/D158G, N52D/Q133H,

N52S/N57Y/H94D/L96F/L98F/Q100R, N52S/N57Y/H94D/L96F/L98F/Q100R/G103E/F120S,N52S/N57Y/H94D/L96F/L98F/Q100R, N52S/N57Y/H94D/L96F/L98F/Q100R/G103E/F120S,

N52H/F78L/Q100R, N52H/N57Y/Q100R/V110D, N52H/N57Y/R75Q/Q100R/V110D, N52H/N57Y/Q100R, N52H/N57Y/L74Q/Q100R/V110D, N52H/Q100R, N52H/S121G, A20V/N52H/N57Y/Q100R/S109G,N52H/F78L/Q100R, N52H/N57Y/Q100R/V110D, N52H/N57Y/R75Q/Q100R/V110D, N52H/N57Y/Q100R, N52H/N57Y/L74Q/Q100R/V110D, N52H/Q100R, N52 H/S121G, A20V/ N52H/N57Y/Q100R/S109G,

N52H/N57Y/Q100P, N52H/N57Y/R61S/Q100R/V110D/L173S, N52H/N57Y/Q100R/V122A,N52H/N57Y/Q100P, N52H/N57Y/R61S/Q100R/V110D/L173S, N52H/N57Y/Q100R/V122A,

N52H/N57Y/Q100R/F172S, N52H/N57Y, N52S/F120S, N52S/V97A, N52S/G72R, N52S/A71T/A117T, N52S/E220G, Y47H/N52S/V107A/F120S, N52H/N57Y/Q100R/V110D/S132F/M175T,N52H/N57Y/Q100R/F172S, N52H/N57Y, N52S/F120S, N52S/V97A, N52S/G72R, N52S/A71T/A117T, N52S/E220G, Y47H/N52S/V107A/F120S, N52H/N57Y/ Q100R/V110D/ S132F/M175T,

E16V/N52H/N5 7Y/Q100R/V110D/H115R/Y152C/K15 6M/C198R, Q37R/N52H/N57Y/Q100R/V110N/S142F/C198R/D217V/R221G, N52H/N57Y/Q100R/V110D/C198R,E16V/N52H/N5 7Y/Q100R/V110D/H115R/Y152C/K15 6M/C198R, Q37R/N52H/N57Y/Q100R/V110N/S142F/C198R/D217V/R221G, N52H/N57Y/Q100R/V1 10D/C198R,

N52H/N57Y/Q100R/V110D/V116A/L161M/F172S/S192G/C198R, F27S/N52H/N57Y/V110N,N52H/N57Y/Q100R/V110D/V116A/L161M/F172S/S192G/C198R, F27S/N52H/N57Y/V110N,

N52S/H94E/L96I/S109N/L166Q, S18R/N52S/F93L/I143V/R221G, A20T/N52D/Y146C/Q164L,N52S/H94E/L96I/S109N/L166Q, S18R/N52S/F93L/I143V/R221G, A20T/N52D/Y146C/Q164L,

V11E/N30D/N52H/N57Y/H94E/L96I/L98F/N194D/V210A/I218T, N52S/H94E/L96I/V122M,V11E/N30D/N52H/N57Y/H94E/L96I/L98F/N194D/V210A/I218T, N52S/H94E/L96I/V122M,

N52H/N57Y/H94E/L96I/F120I/S126T/W153R/I218N, M10V/S18R/N30D/N52S/S126R/T139S/L203F,N52H/N57Y/H94E/L96I/F120I/S126T/W153R/I218N, M10V/S18R/N30D/N52S/S126R/T139S/L203F,

S25G/N30D/N52S/F120S/N227K, N30D/N52S/L67P/Q100K/D217G/R221K/T225S,S25G/N30D/N52S/F120S/N227K, N30D/N52S/L67P/Q100K/D217G/R221K/T225S,

N52H/N57Y/Q100R/V110D/A117T/T190S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/V110D/F172S/C198R,N52H/N57Y/Q100R/V110D/A117T/T190S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/V110D/F172S/C198R,

S25G/F27C/N52H/N57Y/Q100R/V110D/E135K/L173S/C198R, N52H/N57Y/V110A/C198R/R221I,S25G/F27C/N52H/N57Y/Q100R/V110D/E135K/L173S/C198R, N52H/N57Y/V110A/C198R/R221I,

M10I/S13G/N52H/N57Y/D77G/V110A/H129P/I143V/F172S/V193M, C198R,M10I/S13G/N52H/N57Y/D77G/V110A/H129P/I143V/F172S/V193M, C198R,

N52H/N57Y/R61C/Y62F/Q100R/V110N/F120S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/C198R,N52H/N57Y/R61C/Y62F/Q100R/V110N/F120S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/C198R,

N52H/N57Y/Q100R/V110D/N144D/F172S/C198R, N52S/H94E/L98F/Q100R, N52S/E90A,N52H/N57Y/Q100R/V110D/N144D/F172S/C198R, N52S/H94E/L98F/Q100R, N52S/E90A,

N30D/K42E/N52S, N52S/F120S/I143V/I224V, N52H/N57Y/Q100R/V110D/C198R/S212G,N30D/K42E/N52S, N52S/F120S/I143V/I224V, N52H/N57Y/Q100R/V110D/C198R/S212G,

N52H/N57Y/Q100R/C198R, N52S/N194D, N52H/N57Y/Q100R/L102R/V110D/H115R/C198R, N52S/S54P, T38P/N52S/N57D, N52H/C140del/T225A, N52H/F78L/Q100R/C198R, N52H/N57Y/R75Q/Q100P/V110D, N52H/N57Y/L74Q/V110D/S192G, N52H/S121G/C198R, N52S/F120S/N227K,N52H/N57Y/Q100R/C198R, N52S/N194D, N52H/N57Y/Q100R/L102R/V110D/H115R/C198R, N52S/S54P, T38P/N52S/N57D, N52H/C140del/T225A, N52H/F7 8L/Q100R/C198R, N52H/N57Y/R75Q/Q100P/V110D, N52H/N57Y/L74Q/V110D/S192G, N52H/S121G/C198R, N52S/F120S/N227K,

N52S/A71T/A117T/T190A/C198R, T43A/N52H/N57Y/L74Q/D89G/V110D/F172S,N52S/A71T/A117T/T190A/C198R, T43A/N52H/N57Y/L74Q/D89G/V110D/F172S,

N52H/N57Y/Q100R/V110D/S132F/M175T, N52H/N57Y/Q100R/V107I/V110D/I154F/C198R/R221G, Q100R, F138L/L203P, N57Y/F138L/L203P, N57Y/Q100R/C198R, N57Y/F138L/L203P, Q100R/F138L, L203P, N52H/N57Y/Q100R/H115R/C198R, N52H/N57Y/Q100R/F172S/C198R,N52H/N57Y/Q100R/V110D/S132F/M175T, N52H/N57Y/Q100R/V107I/V110D/I154F/C198R/R221G, Q100R, F138L/L203P, N57Y/F138L/L203P, N57Y/Q1 00R/C198R, N57Y/F138L/ L203P, Q100R/F138L, L203P, N52H/N57Y/Q100R/H115R/C198R, N52H/N57Y/Q100R/F172S/C198R,

N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/H115R/I143V/F172S/C198R,N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/H115R/I143V/F172S/C198R,

N52H/N57Y/Q100R/L102R/H115R/F172S/C198R, N52H/V122A/F172S/C198R,N52H/N57Y/Q100R/L102R/H115R/F172S/C198R, N52H/V122A/F172S/C198R,

N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/N194D, N52H/N57Y/H115R/F172S/C198R,N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/N194D, N52H/N57Y/H115R/F172S/C198R,

N52H/N57Y/Q100R/H115R/C198R, N52H/N57Y/H115R, N52H/N57Y/Q100R/H115R,N52H/N57Y/Q100R/H115R/C198R, N52H/N57Y/H115R, N52H/N57Y/Q100R/H115R,

N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/I224V, N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S, N52H/N57Y/Q100R/F172S, N52H/Q100R/H115R/I143T/F172S, N52H/N57Y/Q100P/H115R/F172S, N52Y/N57Y/Q100P/F172S,N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/I224V, N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S, N52H/N57Y/Q100R/F172S, N52H/Q100R/H115R/I143T/F172S, N52H/N57Y /Q100P/H115R/F172S, N52Y/N57Y/Q100P/F172S,

E16V/N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/C198R, E16V/N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/Y152C/K156M/F172S/C198R, N52S/E90A/H115R, N30D/K42E N52S/H115R, N30D/K42E/N52S/H115R/C198R/R221I, N30D/K42E/N52S/H115R/C198R,E16V/N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/C198R, E16V/N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/Y152C/K156M/F172S/C198R, N52S/E90A/H115R, N30D/K42E N 52S/H115R, N30D/K42E /N52S/H115R/C198R/R221I, N30D/K42E/N52S/H115R/C198R,

N30D/K42E/N52S/H115R/F172S/N194D, N52S/H115R/F120S/I143V/C198R, N52S/H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100P/C198R, N52H/N57Y/Q100P H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100P/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100P/H115R, N52H/N57Y/Q100P/H115R/C198R, N52H/Q100R/C198R,N30D/K42E/N52S/H115R/F172S/N194D, N52S/H115R/F120S/I143V/C198R, N52S/H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100P/C198R, N52H/N57Y/Q100P H115R/F172S/C198R, N52H /N57Y/Q100P/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100P/H115R, N52H/N57Y/Q100P/H115R/C198R, N52H/Q100R/C198R,

N52H/Q100R/H115R/F172S, N52H/Q100R/F172S/C198R, N52H/Q100R/H115Q/F172S/C198R,N52H/Q100R/H115R/F172S, N52H/Q100R/F172S/C198R, N52H/Q100R/H115Q/F172S/C198R,

N52H/N57Y/Q100R/F172S/C198R, N52Q/N207Q, N168Q/N207Q, N52Q/N168Q, N84Q/N207Q,N52H/N57Y/Q100R/F172S/C198R, N52Q/N207Q, N168Q/N207Q, N52Q/N168Q, N84Q/N207Q,

N155Q/N207Q, N119Q/N168Q, N119Q/N207Q, N119Q/N155Q, N52Q/N84Q, N52Q/N119Q, N84Q/N119Q, N52Q/N84Q/N168Q, N52Q/N84Q/N207Q, N84Q/N155Q/N168Q, N84Q/N168Q/N207Q,N155Q/N207Q, N119Q/N168Q, N119Q/N207Q, N119Q/N155Q, N52Q/N84Q, N52Q/N119Q, N84Q/N119Q, N52Q/N84Q/N168Q, N52Q/N84Q/N207Q, N84Q/N155Q /N168Q, N84Q/N168Q/ N207Q,

N84Q/N155H/N207Q, N155Q/N168Q/N207Q, N119Q/N155Q/N168Q, N119Q/N168Q/N207Q,N84Q/N155H/N207Q, N155Q/N168Q/N207Q, N119Q/N155Q/N168Q, N119Q/N168Q/N207Q,

N84Q/N119Q/N207Q, N119Q/N155H/N207Q, N84Q/N119Q/N155Q, N52Q/N119Q/N155Q,N84Q/N119Q/N207Q, N119Q/N155H/N207Q, N84Q/N119Q/N155Q, N52Q/N119Q/N155Q,

N52H/N84Q/N119Q, N52H/N84Q, N52H/N84Q/N168Q, N52H/N84Q/N207Q, N52H/N84Q/N168Q/N207Q, N52Q/N84Q/N155Q, N52Q/N84Q/N168Q, N52Q/N84Q/N155Q/N168Q, N52Q/N84Q/N119Q/N168Q,N52H/N84Q/N119Q, N52H/N84Q, N52H/N84Q/N168Q, N52H/N84Q/N207Q, N52H/N84Q/N168Q/N207Q, N52Q/N84Q/N155Q, N52Q/N84Q/N168Q, N52Q/N84Q/ N155Q/N168Q, N52Q/N84Q/N119Q/N168Q,

N84Q/N119Q/N155Q/N168Q, N84Q/N155Q/N168Q/N207Q, N84Q/N119Q/N155Q/N207Q,N84Q/N119Q/N155Q/N168Q, N84Q/N155Q/N168Q/N207Q, N84Q/N119Q/N155Q/N207Q,

N52Q/N84Q/N119Q/N207Q, N52Q/N84Q/N119Q/N155Q, N52Q/N84Q/N119Q/N155Q/N207Q,N52Q/N84Q/N119Q/N207Q, N52Q/N84Q/N119Q/N155Q, N52Q/N84Q/N119Q/N155Q/N207Q,

N84Q/N119Q/N155Q/N168Q/N207Q, N52A/N57F/Q100S, N52A/N57H/Q100S, N52A/N57Y/Q100A,N84Q/N119Q/N155Q/N168Q/N207Q, N52A/N57F/Q100S, N52A/N57H/Q100S, N52A/N57Y/Q100A,

N52D/N57A/Q100A, N52D/Q100S, N52G/Q100A, N52H/Q100A, N52M/N57H/Q100S, N52M/N57W/Q100P, N52Q/N57F, N52Q/N57S/Q100A, N52R/N57L/Q100A, N52R/N57Y/Q100P, N52R/N57Y/Q100S,N52D/N57A/Q100A, N52D/Q100S, N52G/Q100A, N52H/Q100A, N52M/N57H/Q100S, N52M/N57W/Q100P, N52Q/N57F, N52Q/N57S/Q100A, N52R/N57L/Q100A , N52R/N57Y/ Q100P, N52R/N57Y/Q100S,

N52S/N57A/Q100A, N52S/N57H/Q100E, N52S/N57L/Q100S, N52S/N57M/Q100S, N52S/N57Y/Q100S, N52S/N57Y/Q100M, N52S/N57Y/Q100V, N52T/N57H/Q100S, N52T/N57H/Q100A, N52T/N57Y/Q100A, N52V/N57L/Q100A, N52H/N57Y/Q100K, N52K/N57Y/Q100R, N52L/N57H/Q100R, N52R/N57F/Q100N, N52R/N57F/Q100P, N52R/N57F/Q100R, N52R/N57F/Q100T, N52R/N57H/Q100K, N52R/N57L/Q100S, N52R/N57W/Q100K, N52R/N57W, N52R/N57Y/Q100R, N52C/N57E/Q100S, N52G/N57P/Q100D,N52S/N57A/Q100A, N52S/N57H/Q100E, N52S/N57L/Q100S, N52S/N57M/Q100S, N52S/N57Y/Q100S, N52S/N57Y/Q100M, N52S/N57Y/Q100V, N52T/N57H/ Q100S,N52T/ N57H/Q100A, N52T/N57Y/Q100A, N52V/N57L/Q100A, N52H/N57Y/Q100K, N52K/N57Y/Q100R, N52L/N57H/Q100R, N52R/N57F/Q100N, N52R/N57F/Q100P , N52R/N57F/ Q100R, N52R/N57F/Q100T, N52R/N57H/Q100K, N52R/N57L/Q100S, N52R/N57W/Q100K, N52R/N57W, N52R/N57Y/Q100R, N52C/N57E/Q100S, N52G/N57P/ Q100D,

N52G/N57V/Q100G, N52G/N57V, N52L/N57V, N52P/N57P, N52P/N57S/Q100G, N52S/N57L/Q100G, N52T/N57K/Q100P, N52V/N57T/Q100L или N57Q/Q100P.N52G/N57V/Q100G, N52G/N57V, N52L/N57V, N52P/N57P, N52P/N57S/Q100G, N52S/N57L/Q100G, N52T/N57K/Q100P, N52V/N57T/Q100L or N57Q/Q100P.

- 46 044346- 46 044346

В некоторых воплощениях, одну или несколько модификаций выбирают из N52Y/N57Y/F138L/L203P, N52H/N57Y/Q100P, N52S/Y146C/Y152C, N52H/C198R, N52H/C140D/T225A, N52H/C198R/T225A, N52H/K92R, N52H/S99G, N57Y/Q100P, N52S/S130G/Y152C, N52S/Y152C, N52S/C198R, N52Y/N57Y/Y152C, N52Y/N57Y/H129P/C198R, N52H/L161P/C198R, N52S/T113E, N52D/S54P, N52K/L208P, N52S/Y152H, N52D/V151A, N52H/I143T, N52S/L80P, F120S/Y152H/N201S, N52S/R75Q/L203P, N52S/D158G, N52D/Q133H, N52S/N57Y/H94D/L96F/L98F/Q100R,In some embodiments, one or more modifications are selected from N52Y/N57Y/F138L/L203P, N52H/N57Y/Q100P, N52S/Y146C/Y152C, N52H/C198R, N52H/C140D/T225A, N52H/C198R/T225A, N52H/K92 R, N52H/S99G, N57Y/Q100P, N52S/S130G/Y152C, N52S/Y152C, N52S/C198R, N52Y/N57Y/Y152C, N52Y/N57Y/H129P/C198R, N52H/L161P/C198R, N52S/T1 13E, N52D/S54P, N52K/L208P, N52S/Y152H, N52D/V151A, N52H/I143T, N52S/L80P, F120S/Y152H/N201S, N52S/R75Q/L203P, N52S/D158G, N52D/Q133H, N52S/N57Y/H9 4D/L96F/L98F/ Q100R,

N52S/N57Y/H94D/L96F/L98F/Q100R/G103E/F120S, N52S/G103E, N52H/F78L/Q100R,N52S/N57Y/H94D/L96F/L98F/Q100R/G103E/F120S, N52S/G103E, N52H/F78L/Q100R,

N52H/N57Y/Q100R/V110D, N52H/N57Y/R75Q/Q100R/V110D, N52H/N57Y/Q100R,N52H/N57Y/Q100R/V110D, N52H/N57Y/R75Q/Q100R/V110D, N52H/N57Y/Q100R,

N52H/N57Y/L74Q/Q100R/V110D, N52H/Q100R, N52H/S121G, A20V/N52H/N57Y/Q100R/S109G,N52H/N57Y/L74Q/Q100R/V110D, N52H/Q100R, N52H/S121G, A20V/N52H/N57Y/Q100R/S109G,

N52H/N57Y/R61S/Q100R/V110D/L173S, N52H/N57Y/Q100R/V122A, N52H/N57Y/Q100R/F172S,N52H/N57Y/R61S/Q100R/V110D/L173S, N52H/N57Y/Q100R/V122A, N52H/N57Y/Q100R/F172S,

N52H/N57Y, N52S/F120S, N52S/V97A, N52S/G72R, N52S/A71T/A117T, N52S/E220G,N52H/N57Y, N52S/F120S, N52S/V97A, N52S/G72R, N52S/A71T/A117T, N52S/E220G,

Y47H/N52S/V107A/F120S, N52H/N57Y/Q100R/V110D/S132F/M175T,Y47H/N52S/V107A/F120S, N52H/N57Y/Q100R/V110D/S132F/M175T,

E16V/N52H/N5 7Y/Q100R/V110D/H115R/Y152C/K15 6M/C198R, Q37R/N52H/N57Y/Q100R/V110N/S142F/C198R/D217V/R221G, N52H/N57Y/Q100R/V110D/C198R,E16V/N52H/N5 7Y/Q100R/V110D/H115R/Y152C/K15 6M/C198R, Q37R/N52H/N57Y/Q100R/V110N/S142F/C198R/D217V/R221G, N52H/N57Y/Q100R/V1 10D/C198R,

N52H/N57Y/Q100R/V110D/V116A/L161M/F172S/S192G/C198R, F27S/N52H/N57Y/V110N,N52H/N57Y/Q100R/V110D/V116A/L161M/F172S/S192G/C198R, F27S/N52H/N57Y/V110N,

N52S/H94E/L96I/S109N/L166Q, S18R/N52S/F93L/I143V/R221G, A20T/N52D/Y146C/Q164L,N52S/H94E/L96I/S109N/L166Q, S18R/N52S/F93L/I143V/R221G, A20T/N52D/Y146C/Q164L,

V11E/N30D/N52H/N57Y/H94E/L96I/L98F/N194D/V210A/I218T, N52S/H94E/L96I/V122M,V11E/N30D/N52H/N57Y/H94E/L96I/L98F/N194D/V210A/I218T, N52S/H94E/L96I/V122M,

N52H/N57Y/H94E/L96I/F120I/S126T/W153R/I218N, M10V/S18R/N30D/N52S/S126R/T139S/L203F,N52H/N57Y/H94E/L96I/F120I/S126T/W153R/I218N, M10V/S18R/N30D/N52S/S126R/T139S/L203F,

S25G/N30D/N52S/F120S/N227K, N30D/N52S/L67P/Q100K/D217G/R221K/T225S,S25G/N30D/N52S/F120S/N227K, N30D/N52S/L67P/Q100K/D217G/R221K/T225S,

N52H/N57Y/Q100R/V110D/A117T/T190S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/V110D/F172S/C198R,N52H/N57Y/Q100R/V110D/A117T/T190S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/V110D/F172S/C198R,

S25G/F27C/N52H/N57Y/Q100R/V110D/E135K/L173S/C198R, N52H/N57Y/V110A/C198R/R221I,S25G/F27C/N52H/N57Y/Q100R/V110D/E135K/L173S/C198R, N52H/N57Y/V110A/C198R/R221I,

M10I/S13G/N52H/N57Y/D77G/V110A/H129P/I143V/F172S/V193M,C198R, N52H/N57Y/R61C/Y62F/Q100R/V110N/F120S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/C198R,M10I/S13G/N52H/N57Y/D77G/V110A/H129P/I143V/F172S/V193M,C198R, N52H/N57Y/R61C/Y62F/Q100R/V110N/F120S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/V 110D/H115R/C198R,

N52H/N57Y/Q100R/V110D/N144D/F172S/C198R, N52S/H94E/L98F/Q100R, N52S/E90A,N52H/N57Y/Q100R/V110D/N144D/F172S/C198R, N52S/H94E/L98F/Q100R, N52S/E90A,

N30D/K42E/N52S, N52S/F120S/I143V/I224V, N52H/N57Y/Q100R/V110D/C198R/S212G,N30D/K42E/N52S, N52S/F120S/I143V/I224V, N52H/N57Y/Q100R/V110D/C198R/S212G,

N52H/N57Y/Q100R/C198R, N52S/N194D, N52H/N57Y/Q100R/L102R/V110D/H115R/C198R,N52H/N57Y/Q100R/C198R, N52S/N194D, N52H/N57Y/Q100R/L102R/V110D/H115R/C198R,

N52H/N57Y/Q100R/V110D/C198R/S212G, N52H/N57Y/Q100R/C198R, N52S/N194D,N52H/N57Y/Q100R/V110D/C198R/S212G, N52H/N57Y/Q100R/C198R, N52S/N194D,

N52H/N57Y/Q100R/L102R/V110D/H115R/C198R, N52S/S54P, T38P/N52S/N57D, N52H/C140del/T225A, N52H/F78L/Q100R/C198R, N52H/N57Y/R75Q/Q100P/V110D, N52H/N57Y/L74Q/V110D/S192G,N52H/N57Y/Q100R/L102R/V110D/H115R/C198R, N52S/S54P, T38P/N52S/N57D, N52H/C140del/T225A, N52H/F78L/Q100R/C198R, N52H/N57Y/R75Q/Q10 0P/V110D, N52H/ N57Y/L74Q/V110D/S192G,

N52H/S121G/C198R, N52S/F120S/N227K, N52S/A71T/A117T/T190A/C198R,N52H/S121G/C198R, N52S/F120S/N227K, N52S/A71T/A117T/T190A/C198R,

T43A/N52H/N57Y/L74Q/D89G/V110D/F172S, N52H/N57Y/Q100R/V110D/S132F/M175T,T43A/N52H/N57Y/L74Q/D89G/V110D/F172S, N52H/N57Y/Q100R/V110D/S132F/M175T,

N52H/N57Y/Q100R/V107I/V110D/I154F/C198R/R221G, N52Q/N207Q, N168Q/N207Q, N52Q/N168Q, N84Q/N207Q, N155Q/N207Q, N119Q/N168Q, N119Q/N207Q, N119Q/N155Q, N52Q/N84Q, N52Q/N119Q, N84Q/N119Q, N52Q/N84Q/N168Q, N52Q/N84Q/N207Q, N84Q/N155Q/N168Q, N84Q/N168Q/N207Q, N84Q/N155H/N207Q, N155Q/N168Q/N207Q, N119Q N155Q/N168Q, N119Q/N168Q/N207Q,N52H/N57Y/Q100R/V107I/V110D/I154F/C198R/R221G, N52Q/N207Q, N168Q/N207Q, N52Q/N168Q, N84Q/N207Q, N155Q/N207Q, N119Q/N168Q, N119Q/N 207Q, N119Q/N155Q, N52Q/ N84Q, N52Q/N119Q, N84Q/N119Q, N52Q/N84Q/N168Q, N52Q/N84Q/N207Q, N84Q/N155Q/N168Q, N84Q/N168Q/N207Q, N84Q/N155H/N207Q, N155Q/N168Q/ N207Q, N119Q N155Q/N168Q , N119Q/N168Q/N207Q,

N84Q/N119Q/N207Q, N119Q/N155H/N207Q, N84Q/N119Q/N155Q, N52Q/N119Q/N155Q,N84Q/N119Q/N207Q, N119Q/N155H/N207Q, N84Q/N119Q/N155Q, N52Q/N119Q/N155Q,

N52H/N84Q/N119Q, N52H/N84Q, N52H/N84Q/N168Q/N207Q, N52Q/N84Q/N155Q/N168Q,N52H/N84Q/N119Q, N52H/N84Q, N52H/N84Q/N168Q/N207Q, N52Q/N84Q/N155Q/N168Q,

N52Q/N84Q/N119Q/N168Q, N84Q/N119Q/N155Q/N168Q, N84Q/N155Q/N168Q/N207Q,N52Q/N84Q/N119Q/N168Q, N84Q/N119Q/N155Q/N168Q, N84Q/N155Q/N168Q/N207Q,

N84Q/N119Q/N155Q/N207Q, N52Q/N84Q/N119Q/N207Q, N52Q/N84Q/N119Q/N155Q,N84Q/N119Q/N155Q/N207Q, N52Q/N84Q/N119Q/N207Q, N52Q/N84Q/N119Q/N155Q,

N52Q/N84Q/N119Q/N155Q/N207Q, N84Q/N119Q/N155Q/N168Q/N207Q, F138L/L203P,N52Q/N84Q/N119Q/N155Q/N207Q, N84Q/N119Q/N155Q/N168Q/N207Q, F138L/L203P,

N52Y/F138L/L203P, N57Y/Q100R/C198R, N57Y/F138L/L203P, Q100R/F138L,N52Y/F138L/L203P, N57Y/Q100R/C198R, N57Y/F138L/L203P, Q100R/F138L,

N52H/N57Y/Q100R/H115R/C198R, N52H/N57Y/Q100R/F172S/C198R,N52H/N57Y/Q100R/H115R/C198R, N52H/N57Y/Q100R/F172S/C198R,

N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/H115R/I143V/F172S/C198R,N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/H115R/I143V/F172S/C198R,

N52H/N57Y/Q100R/L102R/H115R/F172S/C198R, N52H/V122A/F172S/C198R,N52H/N57Y/Q100R/L102R/H115R/F172S/C198R, N52H/V122A/F172S/C198R,

N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/N194D, N52H/N57Y/H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/H115R,N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/N194D, N52H/N57Y/H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/H115R,

N52H/N57Y/Q100R/H115R, N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/I224V, N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S, N52H/N57Y/Q100R/F172S, N52H/Q100R/H115R/I143T/F172S, N52H/N57Y/Q100P/H115R/F172S,N52H/N57Y/Q100R/H115R, N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/I224V, N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S, N52H/N57Y/Q100R/F172S, N52H/Q100R/H115R /I143T/F172S, N52H/ N57Y/Q100P/H115R/F172S,

N52Y/N57Y/Q100P/F172S, E16V/N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/C198R,N52Y/N57Y/Q100P/F172S, E16V/N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/C198R,

E16V/N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/Y152C/K156M/F172S/C198R, N52S/E90A/H115R, N30D/K42E N52S/H115R, N30D/K42E/N52S/H115R/C198R/R221I, N30D/K42E/N52S/H115R/C198R,E16V/N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/Y152C/K156M/F172S/C198R, N52S/E90A/H115R, N30D/K42E N52S/H115R, N30D/K42E/N52S/H115R/C198R/R2 21I, N30D/K42E/N52S /H115R/C198R,

N30D/K42E/N52S/H115R/F172S/N194D, N52S/H115R/F120S/I143V/C198R, N52S/H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100P/C198R, N52H/N57Y/Q100P/H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100P/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100P/H115R, N52H/N57Y/Q100P/H115R/C198R, N52H/Q100R/C198R,N30D/K42E/N52S/H115R/F172S/N194D, N52S/H115R/F120S/I143V/C198R, N52S/H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100P/C198R, N52H/N57Y/Q100P /H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100P/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100P/H115R, N52H/N57Y/Q100P/H115R/C198R, N52H/Q100R/C198R,

N52H/Q100R/H115R/F172S, N52H/Q100R/F172S/C198R, N52H/Q100R/H115R/F172S/C198R,N52H/Q100R/H115R/F172S, N52H/Q100R/F172S/C198R, N52H/Q100R/H115R/F172S/C198R,

N52H/N57Y/Q100R/F172S/C198R, N52A/N57F/Q100S, N52A/N57H/Q100S, N52A/N57Y/Q100A,N52H/N57Y/Q100R/F172S/C198R, N52A/N57F/Q100S, N52A/N57H/Q100S, N52A/N57Y/Q100A,

N52D/N57A/Q100A, N52D/Q100S, N52G/Q100A, N52H/Q100A, N52M/N57H/Q100S, N52M/N57W/Q100P, N52Q/N57F, N52Q/N57S/Q100A, N52R/N57L/Q100A, N52R/N57Y/Q100P, N52R/N57Y/Q100S,N52D/N57A/Q100A, N52D/Q100S, N52G/Q100A, N52H/Q100A, N52M/N57H/Q100S, N52M/N57W/Q100P, N52Q/N57F, N52Q/N57S/Q100A, N52R/N57L/Q100A , N52R/N57Y/ Q100P, N52R/N57Y/Q100S,

N52S/N57A/Q100A, N52S/N57H/Q100E, N52S/N57L/Q100S, N52S/N57M/Q100S, N52S/N57Y/Q100S, N52S/N57Y/Q100M, N52S/N57Y/Q100V, N52T/N57H/Q100S, N52T/N57H/Q100A, N52T/N57Y/Q100A, N52V/N57L/Q100A, N52H/N57Y/Q100K, N52K/N57Y/Q100R, N52L/N57H/Q100R, N52R/N57F/Q100N, N52R/N57F/Q100P, N52R/N57F/Q100R, N52R/N57F/Q100T, N52R/N57H/Q100K, N52R/N57L/Q100S, N52R/N57W/Q100K, N52R/N57W, N52R/N57Y/Q100R, N52C/N57E/Q100S, N52G/N57P/Q100D,N52S/N57A/Q100A, N52S/N57H/Q100E, N52S/N57L/Q100S, N52S/N57M/Q100S, N52S/N57Y/Q100S, N52S/N57Y/Q100M, N52S/N57Y/Q100V, N52T/N57H/ Q100S,N52T/ N57H/Q100A, N52T/N57Y/Q100A, N52V/N57L/Q100A, N52H/N57Y/Q100K, N52K/N57Y/Q100R, N52L/N57H/Q100R, N52R/N57F/Q100N, N52R/N57F/Q100P , N52R/N57F/ Q100R, N52R/N57F/Q100T, N52R/N57H/Q100K, N52R/N57L/Q100S, N52R/N57W/Q100K, N52R/N57W, N52R/N57Y/Q100R, N52C/N57E/Q100S, N52G/N57P/ Q100D,

- 47 044346- 47 044346

N52G/N57V/Q100G, N52G/N57V, N52L/N57V, N52P/N57P, N52P/N57S/Q100G, N52S/N57L/Q100G,N52G/N57V/Q100G, N52G/N57V, N52L/N57V, N52P/N57P, N52P/N57S/Q100G, N52S/N57L/Q100G,

N52T/N57K/Q100P, N52V/N57T/Q100L, N57Q/Q100P, S54F/V193A илиN52T/N57K/Q100P, N52V/N57T/Q100L, N57Q/Q100P, S54F/V193A or

R26S/N52H/N57Y/V110D/T137A/C198R.R26S/N52H/N57Y/V110D/T137A/C198R.

В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL включает любую из мутаций, перечисленных в табл. 1. В табл. 1 также приведены примерные последовательности со ссылкой на SEQ ID NO для внеклеточного домена (ECD) или домена IgV референсного (например, немодифицированного) ICOSL или ICOSL дикого типа примерных вариантных полипептидов ICOSL. Как видно, точный локус или остатки, соответствующие данному домену, могут варьировать, например, в зависимости от способов, используемых для идентификации или классификации домена. Кроме того, в некоторых случаях соседние N- и/или C-концевые аминокислоты данного домена (например, IgV) также могут быть включены в последовательность вариантного полипептида IgSF, например, чтобы обеспечить правильное сворачивание домена при его экспрессии. Таким образом, понятно, что иллюстративные примеры SEQ ID NO в табл. 1 не следует рассматривать как ограничение. Например, конкретный домен, такой как домен ECD вариантного полипептида ICOSL может быть на несколько аминокислот длиннее или короче, в частности на 1-10, например на 1, 2, 3, 4, 5, 6 или 7 аминокислот длиннее или короче, чем аминокислотная последовательность, указанная в соответствующей SEQ ID NO.In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide includes any of the mutations listed in table. 1. In table. 1 also provides exemplary sequences by reference to the SEQ ID NO for the extracellular domain (ECD) or IgV domain of the reference (eg, unmodified) ICOSL or wild-type ICOSL of exemplary variant ICOSL polypeptides. As can be seen, the exact locus or residues corresponding to a given domain may vary, for example, depending on the methods used to identify or classify the domain. Additionally, in some cases, adjacent N- and/or C-terminal amino acids of a given domain (eg, IgV) may also be included in the sequence of the variant IgSF polypeptide, for example, to ensure proper folding of the domain when expressed. Thus, it is understood that the illustrative examples of SEQ ID NO in table. 1 should not be considered a limitation. For example, a particular domain, such as the ECD domain of an ICOSL variant polypeptide may be several amino acids longer or shorter, such as 1-10, such as 1, 2, 3, 4, 5, 6 or 7 amino acids longer or shorter than the amino acid the sequence indicated in the corresponding SEQ ID NO.

В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL включает любую из мутаций, перечисленных в табл. 1. В некоторых примерах мутации сделаны в референсном ICOSL, содержащем аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 32, референсном ICOSL, который содержит домен IgV ICOSL, указанный в SEQ ID NO: 196 или 545, или референсном ICOSL, который является укороченным и/или модифицированным, содержащий последовательность аминокислот, указанную в любой из SEQ ID NO: 600-628. В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL включает любую из последовательностей внеклеточного домена (ECD), перечисленных в табл. 1 (то есть любую из SEQ ID NO: 109-142, 239, 280-325, 364-381, 387-424, 427-433, 435-470, 638-685). В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL включает полипептидную последовательность, которая имеет, по меньшей мере, 90% идентичности, по меньшей мере, 91% идентичности, по меньшей мере, 92% идентичности, по меньшей мере, 93% идентичности, по меньшей мере, 94% идентичности, по меньшей мере, 95% идентичности, такие как, по меньшей мере, 96% идентичности, 97% идентичности, 98% идентичности или 99% идентичности с любой из последовательностей внеклеточного домена (ECD), перечисленных в табл. 1 (то есть любой из SEQ ID NO: 109-142, 239, 280-325, 364-381, 387-424, 427-433, 435-470, 638-685) и включает аминокислотную модификацию(ии), например, замену(ы), не присутствующую в референсном (например, немодифицированном) ICOSL или ICOSL дикого типа. В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL включает специфический связывающий фрагмент любой из последовательностей внеклеточного домена (ECD), перечисленных в табл. 1 (то есть любой из SEQ ID NO: 109-142, 239, 280-325, 364-381, 387-424, 427-433, 435-470, 638-685) и включает аминокислотную модификацию(ии), например замену(ы), не присутствующую в референсном (например, немодифицированном) ICOSL или ICOSL дикого типа.In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide includes any of the mutations listed in table. 1. In some examples, mutations are made to a reference ICOSL containing the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 32, a reference ICOSL that contains the IgV ICOSL domain set forth in SEQ ID NO: 196 or 545, or a reference ICOSL that is truncated and /or modified, containing the amino acid sequence specified in any of SEQ ID NO: 600-628. In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide includes any of the extracellular domain (ECD) sequences listed in Table. 1 (i.e., any of SEQ ID NO: 109-142, 239, 280-325, 364-381, 387-424, 427-433, 435-470, 638-685). In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide includes a polypeptide sequence that has at least 90% identity, at least 91% identity, at least 92% identity, at least 93% identity, at least 94 % identity, at least 95% identity, such as at least 96% identity, 97% identity, 98% identity, or 99% identity with any of the extracellular domain (ECD) sequences listed in table. 1 (i.e., any of SEQ ID NOs: 109-142, 239, 280-325, 364-381, 387-424, 427-433, 435-470, 638-685) and includes amino acid modification(s), e.g. substitution(s) not present in the reference (eg, unmodified) ICOSL or wild-type ICOSL. In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide includes a specific binding fragment of any of the extracellular domain (ECD) sequences listed in table. 1 (i.e., any of SEQ ID NOs: 109-142, 239, 280-325, 364-381, 387-424, 427-433, 435-470, 638-685) and includes amino acid modification(s), such as substitution (s) not present in the reference (eg, unmodified) ICOSL or wild-type ICOSL.

В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL включает любую из последовательностей внеклеточного домена (ECD), перечисленных в табл. 1 (то есть любую из SEQ ID NO: 109-142, 239, 280-325, 364-381, 387-424, 427-433, 435-470, 638-685, 905, 908). В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL включает полипептидную последовательность, которая имеет, по меньшей мере, 90% идентичности, по меньшей мере, 91% идентичности, по меньшей мере, 92% идентичности, по меньшей мере, 93% идентичности, по меньшей мере, 94% идентичности, по меньшей мере, 95% идентичности, такие как, по меньшей мере, 96% идентичности, 97% идентичности, 98% идентичности или 99% идентичности с любой из последовательностей внеклеточного домена (ECD), перечисленных в табл. 1 (то есть любой из SEQ ID NO: 109-142, 239, 280-325, 364-381, 387-424, 427-433, 435-470, 638-685, 905, 908) и включает аминокислотную модификацию(ии), например, замену(ы), не присутствующую в референсном (например, немодифицированном) ICOSL или ICOSL дикого типа. В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL включает специфический связывающий фрагмент любой из последовательностей внеклеточного домена (ECD), перечисленных в табл. 1 (то есть любой из SEQ ID NO: 109-142, 239, 280-325, 364-381, 387-424, 427-433, 435-470, 638-685, 905, 908) и включает аминокислотную модификацию(ии), например замену(ы), не присутствующую в референсном (например, немодифицированном) ICOSL или ICOSL дикого типа.In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide includes any of the extracellular domain (ECD) sequences listed in Table. 1 (i.e., any of SEQ ID NO: 109-142, 239, 280-325, 364-381, 387-424, 427-433, 435-470, 638-685, 905, 908). In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide includes a polypeptide sequence that has at least 90% identity, at least 91% identity, at least 92% identity, at least 93% identity, at least 94 % identity, at least 95% identity, such as at least 96% identity, 97% identity, 98% identity, or 99% identity with any of the extracellular domain (ECD) sequences listed in table. 1 (i.e., any of SEQ ID NOs: 109-142, 239, 280-325, 364-381, 387-424, 427-433, 435-470, 638-685, 905, 908) and includes amino acid modification(s) ), such as substitution(s) not present in the reference (e.g., unmodified) ICOSL or wild-type ICOSL. In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide includes a specific binding fragment of any of the extracellular domain (ECD) sequences listed in table. 1 (i.e., any of SEQ ID NOs: 109-142, 239, 280-325, 364-381, 387-424, 427-433, 435-470, 638-685, 905, 908) and includes amino acid modification(s) ), such as substitution(s) not present in the reference (eg, unmodified) ICOSL or wild-type ICOSL.

В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL включает любую из последовательностей IgV, перечисленных в табл. 1 (то есть любую из SEQ ID NO: 197-199, 201-208, 210, 212, 240, 326340, 382-386, 425-426, 434, 546-599, 686-857). В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL включает полипептидную последовательность, которая имеет, по меньшей мере, 90% идентичности, по меньшей мере, 91% идентичности, по меньшей мере, 92% идентичности, по меньшей мере, 93% идентичности, по меньшей мере, 94% идентичности, по меньшей мере, 95% идентичности, такие как, по меньшей мере, 96% идентичности, 97% идентичности, 98% идентичности или 99% идентичности с любой из последовательностей IgV, перечисленных в табл. 1 (то есть любой из SEQ ID NO: 197-199, 201208, 210, 212, 240, 326-340, 382-386, 425-426, 434, 546-599, 686-857) и включает аминокислотную модиIn some embodiments, the variant ICOSL polypeptide includes any of the IgV sequences listed in table. 1 (i.e. any of SEQ ID NO: 197-199, 201-208, 210, 212, 240, 326340, 382-386, 425-426, 434, 546-599, 686-857). In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide includes a polypeptide sequence that has at least 90% identity, at least 91% identity, at least 92% identity, at least 93% identity, at least 94 % identity, at least 95% identity, such as at least 96% identity, 97% identity, 98% identity, or 99% identity with any of the IgV sequences listed in table. 1 (i.e., any of SEQ ID NOs: 197-199, 201208, 210, 212, 240, 326-340, 382-386, 425-426, 434, 546-599, 686-857) and includes the amino acid modi

- 48 044346 фикацию(ии), например, замену(ы), не присутствующую в референсном (например, немодифицированном) ICOSL или ICOSL дикого типа. В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL включает специфический связывающий фрагмент любой из последовательностей IgV, перечисленных в табл. 1 (то есть в любой из SEQ ID NO: 197-199, 201-208, 210, 212, 240, 326-340, 382-386, 425-426, 434, 546-599, 686-857) и включает аминокислотную замену(ы), не присутствующую в референсном (например, немодифицированном) ICOSL или ICOSL дикого типа.- 48 044346 modification(s), eg substitution(s), not present in the reference (eg unmodified) ICOSL or wild-type ICOSL. In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide includes a specific binding fragment of any of the IgV sequences listed in table. 1 (i.e., any of SEQ ID NOs: 197-199, 201-208, 210, 212, 240, 326-340, 382-386, 425-426, 434, 546-599, 686-857) and includes the amino acid substitution(s) not present in the reference (eg, unmodified) ICOSL or wild-type ICOSL.

В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL включает любую из последовательностей IgV, перечисленных в табл. 1 (то есть любую из SEQ ID NO: 197-199, 201-208, 210, 212, 240, 326340, 382-386, 425-426, 434, 546-599, 686-857, 906-907, 909-910). В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL включает полипептидную последовательность, которая имеет, по меньшей мере, 90% идентичности, по меньшей мере, 91% идентичности, по меньшей мере, 92% идентичности, по меньшей мере, 93% идентичности, по меньшей мере, 94% идентичности, по меньшей мере, 95% идентичности, такие как, по меньшей мере, 96% идентичности, 97% идентичности, 98% идентичности или 99% идентичности с любой из последовательностей IgV, перечисленных в табл. 1 (то есть любой из SEQ ID NO: 197-199, 201-208, 210, 212, 240, 326-340, 382-386, 425-426, 434, 546-599, 686-857, 906-907, 909-910) и включает аминокислотную модификацию(ии), например, замену(ы), не присутствующую в референсном (например, немодифицированном) ICOSL или ICOSL дикого типа. В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL включает специфический связывающий фрагмент любой из последовательностей IgV, перечисленных в табл. 1 (то есть в любой из SEQ ID NO: 197-199, 201-208, 210, 212, 240, 326340, 382-386, 425-426, 434, 546-599, 686-857, 906-907, 909-910) и включает аминокислотную замену(ы), не присутствующую в референсном (например, немодифицированном) ICOSL или ICOSL дикого типа.In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide includes any of the IgV sequences listed in table. 1 (that is, any of SEQ ID NO: 197-199, 201-208, 210, 212, 240, 326340, 382-386, 425-426, 434, 546-599, 686-857, 906-907, 909- 910). In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide includes a polypeptide sequence that has at least 90% identity, at least 91% identity, at least 92% identity, at least 93% identity, at least 94 % identity, at least 95% identity, such as at least 96% identity, 97% identity, 98% identity, or 99% identity with any of the IgV sequences listed in table. 1 (that is, any of SEQ ID NO: 197-199, 201-208, 210, 212, 240, 326-340, 382-386, 425-426, 434, 546-599, 686-857, 906-907, 909-910) and includes amino acid modification(s), such as substitution(s), not present in the reference (eg, unmodified) ICOSL or wild-type ICOSL. In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide includes a specific binding fragment of any of the IgV sequences listed in table. 1 (that is, in any of SEQ ID NO: 197-199, 201-208, 210, 212, 240, 326340, 382-386, 425-426, 434, 546-599, 686-857, 906-907, 909 -910) and includes amino acid substitution(s) not present in the reference (eg, unmodified) ICOSL or wild-type ICOSL.

Мутации, обозначенные буквой X, указывают на то, что обозначенное положение включает Q или остаток дикого типа, указанный в соответствующем положении SEQ ID NO: 32.Mutations indicated by the letter X indicate that the designated position includes Q or the wild-type residue indicated at the corresponding position of SEQ ID NO: 32.

Таблица 1Table 1

Примерные вариантные полипептиды ICOSLExemplary ICOSL variant polypeptides

Мутация(и) Mutation(s) ECD SEQ ID NO ECD SEQ ID NO IgV SEQ ID NO IgV SEQ ID NO Дикий ТИП Wild TYPE 32 32 196, 545 196, 545 N52S N52S 109 109 197, 546 197, 546 N52H N52H 110 110 198, 547 198, 547 N52D N52D 111 111 199, 548 199, 548 N52 Y/N57 Y/F13 8L/L203P N52 Y/N57 Y/F13 8L/L203P 112 112 782, 783 782, 783 N52H/N57Y/Q100P N52H/N57Y/Q100P ИЗ FROM 201, 549 201, 549 N52S/Y146C/Y152C N52S/Y146C/Y152C 114 114 197, 546 197, 546 N52H/C198R N52H/C198R 115 115 198, 547 198, 547 N52H/C140D/T225A N52H/C140D/T225A 116 116 198, 547 198, 547 N52H/C198R/T225A N52H/C198R/T225A 117 117 198, 547 198, 547 N52H/K92R N52H/K92R 118 118 202, 550 202, 550 N52H/S99G N52H/S99G 119 119 203, 551 203, 551 N52Y N52Y 120 120 204, 552 204, 552 N57Y N57Y 121 121 205, 553 205, 553 N57Y/Q100P N57Y/Q100P 122 122 206, 554 206, 554 N52S/S130G/Y152C N52S/S130G/Y152C 123 123 197, 546 197, 546 N52S/Y152C N52S/Y152C 124 124 197, 546 197, 546 N52S/C198R N52S/C198R 125 125 197, 546 197, 546 N52Y/N57Y/Y152C N52Y/N57Y/Y152C 126 126 782, 783 782, 783 N52Y/N57Y/H129P/C198R N52Y/N57Y/H129P/C198R 127 127 782, 783 782, 783 N52H/L161P/C198R N52H/L161P/C198R 128 128 198, 547 198, 547 N52S/T113E N52S/T113E 129 129 197, 555 197, 555 S54A S54A 130 130 207, 556 207, 556 N52D/S54P N52D/S54P 131 131 208, 557 208, 557 N52K/L208P N52K/L208P 132 132 785, 786 785, 786

- 49 044346- 49 044346

N52S/Y152H N52S/Y152H 133 133 197, 546 197, 546 N52D/V151A N52D/V151A 134 134 199, 548 199, 548 N52H/I143T N52H/I143T 135 135 198, 547 198, 547 N52S/L80P N52S/L80P 136 136 210, 558 210, 558 F120S/Y152H/N201S F120S/Y152H/N201S 137 137 196, 545 196, 545 N52S/R75Q/L203P N52S/R75Q/L203P 138 138 787, 788 787, 788 N52S/D158G N52S/D158G 139 139 197, 546 197, 546 N52D/Q133H N52D/Q133H 140 140 199, 548 199, 548 N52 S/N57 Y/H94D/L96F/L98F/Q100R N52 S/N57 Y/H94D/L96F/L98F/Q100R 141 141 212, 559 212, 559 N52 S/N57 Y/H94D/L96F/L98F/Q100R/G103E/F120S N52 S/N57 Y/H94D/L96F/L98F/Q100R/G103E/F120S 142 142 789, 560 789, 560 N52S/G103E N52S/G103E 239 239 240, 561 240, 561 N52H/F78L/Q100R N52H/F78L/Q100R 280 280 326, 562 326, 562 N52H/N57Y/Q100R/V11OD N52H/N57Y/Q100R/V11OD 281 281 327, 563 327, 563 N52H/N57Y/R75Q/Q100R/V11OD N52H/N57Y/R75Q/Q100R/V11OD 282 282 328, 564 328, 564 N52H/N57Y/Q100R N52H/N57Y/Q100R 283 283 329, 565 329, 565 N52H/N57Y/L74Q/Q100R/V11 OD N52H/N57Y/L74Q/Q100R/V11 OD 284 284 330, 566 330, 566 N52H/Q100R N52H/Q100R 285 285 331, 567 331, 567 N52H/S121G N52H/S121G 286 286 198, 568 198, 568 A20 V/N52H/N57 Y/Q1OOR/S109G A20 V/N52H/N57 Y/Q1OOR/S109G 287 287 332, 569 332, 569 N52H/N57Y/Q100P N52H/N57Y/Q100P 288 288 333, 570 333, 570 N52H/N57Y/R61S/Q100R/V110D/L173 S N52H/N57Y/R61S/Q100R/V110D/L173 S 289 289 791, 792 791, 792 N52H/N57Y/Q100R/V122 A N52H/N57Y/Q100R/V122A 290 290 329, 571 329, 571 N52H/N57Y/Q1OOR/F172S N52H/N57Y/Q1OOR/F172S 291 291 329, 565 329, 565 N52H/N57Y N52H/N57Y 292 292 334, 572 334, 572 N52S/F120S N52S/F120S 293 293 197, 573 197, 573 N52S/V97A N52S/V97A 294 294 335, 574 335, 574 N52S/G72R N52S/G72R 295 295 336, 575 336, 575 N52S/A71T/A117T N52S/A71T/A117T 296 296 793, 576 793, 576 N52S/E220G N52S/E220G 297 297 197, 546 197, 546 Y47H/N52S/V107A/F120S Y47H/N52S/V107A/F120S 298 298 794, 577 794, 577 N52H/N57Y/Q100R/V110D/S132F/M175T N52H/N57Y/Q100R/V110D/S132F/M175T 299 299 327, 563 327, 563 E16V/N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/Y152C/K156M/C198R E16V/N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/Y152C/K156M/C198R 300 300 795, 796 795, 796 Q3 7R/N52H/N57 Y/Q 100R/V11ON/S142F/C198R/D217 V/R221G Q3 7R/N52H/N57 Y/Q 100R/V11ON/S142F/C198R/D217 V/R221G 301 301 797, 798 797, 798 N52H/N57Y/Q100R/V11OD/C198R N52H/N57Y/Q100R/V11OD/C198R 302 302 327, 563 327, 563 N52H/N57 Y/Q 100R/V110D/V116 A/L161M/F172S/S192G/C198R N52H/N57 Y/Q 100R/V110D/V116 A/L161M/F172S/S192G/C198R 303 303 799, 800 799, 800 F27S/N52H/N57Y/V1 ION F27S/N52H/N57Y/V1 ION 304 304 337, 578 337, 578 N52 S/H94E/L96I/S109N/L166Q N52 S/H94E/L96I/S109N/L166Q 305 305 801, 802 801, 802 S18R/N52S/F93L/I143V/R221G S18R/N52S/F93L/I143V/R221G 306 306 803, 804 803, 804 A20T/N52D/Y146C/Q164L A20T/N52D/Y146C/Q164L 307 307 805. 806 805.806 VI1E/N30D/N52H/N57Y/H94E/L96I/L98F/N194D/V210A/I218T VI1E/N30D/N52H/N57Y/H94E/L96I/L98F/N194D/V210A/I218T 308 308 807, 808 807, 808 N52S/H94E/L96I/V122M N52S/H94E/L96I/V122M 309 309 809, 579 809, 579 N52H/N57Y/H94E/L96I/F120I/S126T/W153R/I218N N52H/N57Y/H94E/L96I/F120I/S126T/W153R/I218N 310 310 810, 811 810, 811 M10 V/S18R/N3 0D/N52 S/S126R/T13 9 S/L203F M10 V/S18R/N3 0D/N52 S/S126R/T13 9 S/L203F 311 311 812, 813 812, 813 S25G/N30D/N52S/F120S/N227K S25G/N30D/N52S/F120S/N227K 312 312 814, 815 814, 815 N3 0D/N52S/L67P/Q100K/D217G/R221K/T225 S N3 0D/N52S/L67P/Q100K/D217G/R221K/T225 S 313 313 816, 817 816, 817

- 50 044346- 50 044346

N52H/N57Y/Q100R/V110D/A117T/T190S/C198R N52H/N57Y/Q100R/V110D/A117T/T190S/C198R 314 314 327, 818 327, 818 N52H/N57Y/Q100R/V11OD/F172S/C198R N52H/N57Y/Q100R/V11OD/F172S/C198R 315 315 327, 563 327, 563 S25G/F27C/N52H/N57Y/Q100R/V11OD/E13 5K/L173 S/C198R S25G/F27C/N52H/N57Y/Q100R/V11OD/E13 5K/L173 S/C198R 316 316 819, 820 819, 820 N52H/N57Y/V110A/C198R/R221I N52H/N57Y/V110A/C198R/R221I 317 317 821, 822 821, 822 M10I/S13G/N52H/N57Y/D77G/V110A/H129P/I143V/F172S/V193M/C198R M10I/S13G/N52H/N57Y/D77G/V110A/H129P/I143V/F172S/V193M/C198R 318 318 823, 824 823, 824 N52H/N57Y/R61C/Y62F/Q100R/V11ON/F120S/C198R N52H/N57Y/R61C/Y62F/Q100R/V11ON/F120S/C198R 319 319 825, 826 825, 826 N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/C198R N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/C198R 320 320 327, 827 327, 827 N5 2H/N5 7 Y/Q1OOR/V11OD/N144D/F172 S/C 19 8R N5 2H/N5 7 Y/Q1OOR/V11OD/N144D/F172 S/C 19 8R 321 321 327, 563 327, 563 N52S/H94E/L98F/Q1 OOR N52S/H94E/L98F/Q1 OOR 322 322 338, 580 338, 580 N52S/E90A N52S/E90A 323 323 339, 581 339, 581 N30D/K42E/N52S N30D/K42E/N52S 324 324 340, 582 340, 582 N52S/F120S/I143V/I224V N52S/F120S/I143V/I224V 325 325 197, 573 197, 573 N52H/N57Y/Q100R/V110D/C198R/S212G N52H/N57Y/Q100R/V110D/C198R/S212G 364 364 828, 829 828, 829 N52H/N57 Y/Q 1OOR/C198R N52H/N57 Y/Q 1OOR/C198R 365 365 329, 565 329, 565 N52S/N194D N52S/N194D 366 366 197, 546 197, 546 N52H/N57Y/Q100R/L102R/V110D/H115R/C198R N52H/N57Y/Q100R/L102R/V110D/H115R/C198R 367 367 830, 831 830, 831 N52S/S54P N52S/S54P 368 368 382, 583 382, 583 T38P/N52S/N57D T38P/N52S/N57D 369 369 383, 584 383, 584 Ell Idel El Idel 370 370 384, 585 384, 585 Y33del Y33del 371 371 385, 586 385, 586 N52H/C140del/T225A N52H/C140del/T225A 372 372 198, 547 198, 547 N52H/F78L/Q1 OOR/C 198R N52H/F78L/Q1 OOR/C 198R 373 373 326, 562 326, 562 N52H/N57Y/R75Q/Q100P/V11 OD N52H/N57Y/R75Q/Q100P/V11 OD 374 374 386, 587 386, 587 N52H/N57Y/L74Q/V11OD/S192G N52H/N57Y/L74Q/V11OD/S192G 375 375 832, 833 832, 833 N52H/S121G/C198R N52H/S121G/C198R 376 376 198, 568 198, 568 N52S/F120S/N227K N52S/F120S/N227K 377 377 197, 573 197, 573 N52S/A71T/A117T/T190A/C198R N52S/A71T/A117T/T190A/C198R 378 378 793, 576 793, 576 T43A/N52H/N57Y/L74Q/D89G/V110D/F172S T43A/N52H/N57Y/L74Q/D89G/V110D/F172S 379 379 790, 834 790, 834 N52H/N57Y/Q100R/V110D/S132F/M175T N52H/N57Y/Q100R/V110D/S132F/M175T 380 380 327, 563 327, 563 N52H/N57Y/Q100R/V107I/V110D/I154F/C198R/R221G N52H/N57Y/Q100R/V107I/V110D/I154F/C198R/R221G 381 381 835, 836 835, 836 N84Q N84Q 387 387 425, 588 425, 588 N119Q N119Q 388 388 196, 842 196, 842 N168Q N168Q 389 389 196, 545 196, 545 N207Q N207Q 390 390 196, 545 196, 545 N52Q/N207X N52Q/N207X 391 391 837, 838 837, 838 N168X/N207X N168X/N207X 392 392 196, 545 196, 545 N52Q/N168Q N52Q/N168Q 393 393 837, 838 837, 838 N84Q/N207Q N84Q/N207Q 394 394 425, 840 425, 840 N155Q/N207Q N155Q/N207Q 395 395 196, 545 196, 545 N119Q/N168Q N119Q/N168Q 396 396 196, 842 196, 842 N119Q/N207Q N119Q/N207Q 397 397 196, 842 196, 842 N119Q/N155X N119Q/N155X 398 398 196, 842 196, 842 N52Q/N84Q N52Q/N84Q 399 399 426, 590 426, 590 N52Q/N119Q N52Q/N119Q 400 400 837, 591 837, 591 N84Q/N119Q N84Q/N119Q 401 401 425, 592 425, 592

- 51 044346- 51 044346

N52Q/N84Q/N168Q N52Q/N84Q/N168Q 402 402 426, 590 426, 590 N52Q/N84Q/N207Q N52Q/N84Q/N207Q 403 403 426, 590 426, 590 N84Q/N155Q/N168Q N84Q/N155Q/N168Q 404 404 425, 588 425, 588 N84Q/N168Q/N207Q N84Q/N168Q/N207Q 405 405 425, 588 425, 588 N84Q/N155H/N207Q N84Q/N155H/N207Q 406 406 425, 588 425, 588 N155Q/N168Q/N207Q N155Q/N168Q/N207Q 407 407 196, 545 196, 545 N119Q N155Q/N168Q N119Q N155Q/N168Q 408 408 196, 842 196, 842 N119Q/N168Q/N207Q N119Q/N168Q/N207Q 409 409 196, 842 196, 842 N84Q/N119Q/N207Q N84Q/N119Q/N207Q 410 410 425, 592 425, 592 N119Q/N155H/N207Q N119Q/N155H/N207Q 411 411 196, 842 196, 842 N84Q/N119Q/N155Q N84Q/N119Q/N155Q 412 412 425, 592 425, 592 N52Q/N119Q/N155Q N52Q/N119Q/N155Q 413 413 837, 591 837, 591 N52H/N84Q/N119Q N52H/N84Q/N119Q 414 414 839, 593 839, 593 N52H/N84Q/N168X/N207X N52H/N84Q/N168X/N207X 415 415 839, 841 839, 841 N52Q/N84Q/N155X/N168X N52Q/N84Q/N155X/N168X 416 416 426, 590 426, 590 N52Q/N84Q/N119Q/N168Q N52Q/N84Q/N119Q/N168Q 417 417 426, 843 426, 843 N84Q/N119Q/N155Q/N168Q N84Q/N119Q/N155Q/N168Q 418 418 425, 592 425, 592 N84Q/N155Q/N168Q/N207Q N84Q/N155Q/N168Q/N207Q 419 419 425, 588 425, 588 N84Q/N119Q/N155Q/N207Q N84Q/N119Q/N155Q/N207Q 420 420 425, 592 425, 592 N52Q/N84Q/N119Q/N207Q N52Q/N84Q/N119Q/N207Q 421 421 426, 843 426, 843 N52Q/N84Q/N119Q/N155Q N52Q/N84Q/N119Q/N155Q 422 422 426, 843 426, 843 N52Q/N84Q/N119Q/N155Q/N207Q N52Q/N84Q/N119Q/N155Q/N207Q 423 423 426, 843 426, 843 N84Q/N119Q/N155Q/N168Q/N207Q N84Q/N119Q/N155Q/N168Q/N207Q 424 424 425, 592 425, 592 Q100R Q100R 427 427 434, 594 434, 594 F138L/L203P F138L/L203P 428 428 196, 545 196, 545 N52Y/F138L/L203P N52Y/F138L/L203P 429 429 204, 552 204, 552 N57Y/Q100R/C198R N57Y/Q100R/C198R 430 430 844, 845 844, 845 N57Y/F138L/L203P N57Y/F138L/L203P 431 431 205, 553 205, 553 Q100R/F138L Q100R/F138L 432 432 846, 847 846, 847 L203P L203P 433 433 196, 545 196, 545 N52H/N57Y/Q100R/H115R/C198R N52H/N57Y/Q100R/H115R/C198R 435 435 329, 596 329, 596 N52H/N57 Y/Q1OOR/F172S/C198R N52H/N57 Y/Q1OOR/F172S/C198R 436 436 329, 565 329, 565 N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/C198R N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/C198R 437 437 329, 596 329, 596 N52H/N57Y/Q100R/H115R/I143 V/F172S/C198R N52H/N57Y/Q100R/H115R/I143 V/F172S/C198R 438 438 329, 596 329, 596 N52H/N57Y/Q100R/L102R/H115R/F172S/C198R N52H/N57Y/Q100R/L102R/H115R/F172S/C198R 439 439 849, 850 849, 850 N52H/V122A/F172S/C198R N52H/V122A/F172S/C198R 440 440 198, 851 198, 851 N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/N194D N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/N194D 441 441 329, 596 329, 596 N52H/N57Y/H115R/F172S/C198R N52H/N57Y/H115R/F172S/C198R 442 442 334, 595 334, 595 N52H/N57Y/Q100R/H115R/C198R N52H/N57Y/Q100R/H115R/C198R 443 443 329, 596 329, 596 N52H/N57Y/H115R N52H/N57Y/H115R 444 444 334, 595 334, 595 N52H/N57Y/Q100R/H115R N52H/N57Y/Q100R/H115R 445 445 329, 596 329, 596 N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/I224V N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/I224V 446 446 329, 596 329, 596 N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S 447 447 329, 596 329, 596 N52H/N57Y/Q1 OOR/F 172S N52H/N57Y/Q1 OOR/F 172S 448 448 329, 565 329, 565 N52H/Q100R/H115R/1143 T/F172 S N52H/Q100R/H115R/1143 T/F172 S 449 449 331, 852 331, 852

- 52 044346- 52 044346

N52H/N57Y/Q100P/H115R/F172S N52H/N57Y/Q100P/H115R/F172S 450 450 333, 853 333, 853 N52Y/N57Y/Q1OOP/F172S N52Y/N57Y/Q1OOP/F172S 451 451 854, 855 854, 855 E16V/N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/C198R E16V/N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/C198R 452 452 795, 796 795, 796 E16V/N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/Y152C/K156M/F172S/C198R E16V/N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/Y152C/K156M/F172S/C198R 453 453 795, 796 795, 796 N52S/E90A/H115R N52S/E90A/H115R 454 454 339, 597 339, 597 N30D/K42E/N52S/H115R N30D/K42E/N52S/H115R 455 455 856, 598 856, 598 N30D/K42E/N52S/H115R/C198R/R221I N30D/K42E/N52S/H115R/C198R/R221I 456 456 856, 598 856, 598 N30D/K42E/N52S/H115R/C198R N30D/K42E/N52S/H115R/C198R 457 457 856, 598 856, 598 N30D/K42E/N52S/H115R/F172S/N194D N30D/K42E/N52S/H115R/F172S/N194D 458 458 856, 598 856, 598 N52S/H115R/F120S/I143V/C198R N52S/H115R/F120S/I143V/C198R 459 459 197, 857 197, 857 N52S/H115R/F172S/C198R N52S/H115R/F172S/C198R 460 460 197, 853 197, 853 N52H/N57 Y/Q1OOP/C198R N52H/N57 Y/Q1OOP/C198R 461 461 333,570 333,570 N52H/N57Y/Q100P/H115R/F172S/C198R N52H/N57Y/Q100P/H115R/F172S/C198R 462 462 333, 599 333, 599 N52H/N5 7 Y/Q 1 OOP/F 172 S/C198R N52H/N5 7 Y/Q 1 OOP/F 172 S/C198R 463 463 333,570 333,570 N52H/N57Y/Q100P/H115R N52H/N57Y/Q100P/H115R 464 464 333, 599 333, 599 N52H/N57Y/Q100P/H115R/C198R N52H/N57Y/Q100P/H115R/C198R 465 465 333,599 333,599 N52H/Q100R/C198R N52H/Q100R/C198R 466 466 331, 567 331, 567 N52H/Q100R/H115R/F172S N52H/Q100R/H115R/F172S 467 467 331, 852 331, 852 N52H/Q100R/H115X/F172S/C198R N52H/Q100R/H115X/F172S/C198R 468 468 331, 848 331, 848 N52H/Q100R/H115R/F172S/C198R N52H/Q100R/H115R/F172S/C198R 469 469 331, 852 331, 852 N52H/N57 Y/Q 1OOR/F172S/C198R N52H/N57 Y/Q 1OOR/F172S/C198R 470 470 329, 565 329, 565 N52A/N57F/Q100S N52A/N57F/Q100S 638 638 686, 734 686, 734 N52A/N57H/Q100S N52A/N57H/Q100S 639 639 687, 735 687, 735 N52A/N57Y/Q100A N52A/N57Y/Q100A 640 640 688, 736 688, 736 N52D/N57A/Q100A N52D/N57A/Q100A 641 641 689, 737 689, 737 N52D/Q100S N52D/Q100S 642 642 690, 738 690, 738 N52G/Q100A N52G/Q100A 643 643 691, 739 691, 739 N52H/Q100A N52H/Q100A 644 644 692, 740 692, 740 N52M/N57H/Q100S N52M/N57H/Q100S 645 645 693, 741 693, 741 N52M/N57W/Q100P N52M/N57W/Q100P 646 646 694, 742 694, 742 N52Q/N57F N52Q/N57F 647 647 695, 743 695, 743 N52Q/N57S/Q100A N52Q/N57S/Q100A 648 648 696, 744 696, 744 N52R/N57L/Q100A N52R/N57L/Q100A 649 649 697, 745 697, 745 N52R/N57Y/Q100P N52R/N57Y/Q100P 650 650 698, 746 698, 746 N52R/N57Y/Q100S N52R/N57Y/Q100S 651 651 699, 747 699, 747 N52S/N57A/Q100A N52S/N57A/Q100A 652 652 700, 748 700, 748 N52S/N57H/Q100E N52S/N57H/Q100E 653 653 701, 749 701, 749 N52S/N57L/Q100S N52S/N57L/Q100S 654 654 702, 750 702, 750 N52S/N57M/Q100S N52S/N57M/Q100S 655 655 703, 751 703, 751 N52S/N57Y/Q100S N52S/N57Y/Q100S 656 656 704, 752 704, 752 N52S/N57Y/Q100M N52S/N57Y/Q100M 657 657 705, 753 705, 753 N52S/N57Y/Q100V N52S/N57Y/Q100V 658 658 706, 754 706, 754 N52T/N57H/Q100S N52T/N57H/Q100S 659 659 707, 755 707, 755 N52T/N57H/Q100A N52T/N57H/Q100A 660 660 708, 756 708, 756 N52T/N57Y/Q100A N52T/N57Y/Q100A 661 661 709, 757 709, 757

- 53 044346- 53 044346

N52V/N57L/Q100A N52V/N57L/Q100A 662 662 710, 758 710, 758 N52H/N57Y/Q100K N52H/N57Y/Q100K 663 663 711, 759 711, 759 N52K/N57Y/Q100R N52K/N57Y/Q100R 664 664 712, 760 712, 760 N52L/N57H/Q100R N52L/N57H/Q100R 665 665 713, 761 713, 761 N52R/N57F/Q100N N52R/N57F/Q100N 666 666 714, 762 714, 762 N52R/N57F/Q100P N52R/N57F/Q100P 667 667 715, 763 715, 763 N52R/N57F/Q100R N52R/N57F/Q100R 668 668 716, 764 716, 764 N52R/N57F/Q100T N52R/N57F/Q100T 669 669 717, 765 717, 765 N52R/N57H/Q100K N52R/N57H/Q100K 670 670 718, 766 718, 766 N52R/N57L/Q100S N52R/N57L/Q100S 671 671 719, 767 719, 767 N52R/N57W/Q100K N52R/N57W/Q100K 672 672 720, 768 720, 768 N52R/N57W N52R/N57W 673 673 721, 769 721, 769 N52R/N57Y/Q100R N52R/N57Y/Q100R 674 674 722, 770 722, 770 N52C/N57E/Q100S N52C/N57E/Q100S 675 675 723,771 723.771 N52G/N57P/Q100D N52G/N57P/Q100D 676 676 724, 772 724, 772 N52G/N57V/Q100G N52G/N57V/Q100G 677 677 725, 773 725, 773 N52G/N57V N52G/N57V 678 678 726, 774 726, 774 N52L/N57V N52L/N57V 679 679 727, 775 727, 775 N52P/N57P N52P/N57P 680 680 728, 776 728, 776 N52P/N57S/Q100G N52P/N57S/Q100G 681 681 729, 777 729, 777 N52S/N57L/Q100G N52S/N57L/Q100G 682 682 730, 778 730, 778 N52T/N57K/Q100P N52T/N57K/Q100P 683 683 731, 779 731, 779 N52V/N57T/Q100L N52V/N57T/Q100L 684 684 732, 780 732, 780 N57Q/Q100P N57Q/Q100P 685 685 733, 781 733, 781 S54F/V193A S54F/V193A 905 905 906, 907 906, 907 R26S/N52H/N57Y/V110D/T137A/C198R R26S/N52H/N57Y/V110D/T137A/C198R 908 908 909, 910 909, 910

В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL проявляет повышенную аффинность к эктодомену CD28 по сравнению с референсным (например, немодифицированным) полипептидом ICOSL или полипептидом ICOSL дикого типа, например, содержащим последовательность, представленную в SEQ ID NO: 32, 196 или 545. В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL проявляет повышенную аффинность к эктодомену ICOS по сравнению с референсным (например, немодифицированным) полипептидом ICOSL или полипептидом ICOSL дикого типа, например, содержащим последовательность, представленную в SEQ ID NO: 32, 196 или 545. В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL проявляет повышенную аффинность к эктодомену CD28 и эктодомену ICOS по сравнению с референсным (например, немодифицированным) полипептидом ICOSL или полипептидом ICOSL дикого типа, например, содержащим последовательность, представленную в SEQ ID NO: 32, 196 или 545.In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide exhibits increased affinity for the CD28 ectodomain compared to a reference (e.g., unmodified) ICOSL polypeptide or a wild-type ICOSL polypeptide, e.g., comprising the sequence set forth in SEQ ID NO: 32, 196, or 545. In some embodiments, the variant The ICOSL polypeptide exhibits increased affinity for the ICOS ectodomain compared to a reference (e.g., unmodified) ICOSL polypeptide or a wild-type ICOSL polypeptide, for example, containing the sequence set forth in SEQ ID NO: 32, 196, or 545. In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide exhibits increased affinity for the CD28 ectodomain and ICOS ectodomain compared to a reference (e.g., unmodified) ICOSL polypeptide or a wild-type ICOSL polypeptide, e.g., containing the sequence set forth in SEQ ID NO: 32, 196, or 545.

В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL имеет одну или более аминокислотную модификацию, например, замену, соответствующую положению(ям) 52, 54 или 57. В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL имеет одну или несколько аминокислотных модификаций, например замену, выбранную из N52H, N52D, N52Q, N52S, N52Y, N52K, S54A, S54P или N57Y или консервативную аминокислотную модификацию, например, замену. В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL имеет одну или несколько аминокислотных модификаций, например замену, выбранную из N52H, N52D, N52S, N52K или N57Y или консервативную аминокислотную модификацию, например замену.In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide has one or more amino acid modifications, for example, a substitution corresponding to position(s) 52, 54, or 57. In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide has one or more amino acid modifications, for example, a substitution selected from N52H, N52D, N52Q, N52S, N52Y, N52K, S54A, S54P or N57Y or a conservative amino acid modification, such as a substitution. In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide has one or more amino acid modifications, such as a substitution selected from N52H, N52D, N52S, N52K, or N57Y, or a conservative amino acid modification, such as a substitution.

В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL может содержать одну или несколько дополнительных аминокислотных модификаций, например, замену в дополнение к аминокислотной модификации, например, замену в положении, соответствующем положению 52, 54 или 57. В некоторых воплощениях одна или несколько аминокислотных модификаций, например замена, находятся в положении, соответствующем 10, 11, 13, 16, 18, 20, 25, 27, 30, 37, 42, 43, 47, 52, 54, 57, 61, 62, 67, 71, 72, 74, 75, 77, 78, 80, 84, 89, 90, 92, 93, 94, 96, 97, 98, 99, 100, 102, 103, 107, 109, 110, 113, 115, 116, 117, 119, 120, 121, 122, 126, 129, 130, 132, 133, 135, 138, 139, 140, 142, 143, 144, 146, 151, 152, 153, 154, 155, 156, 158, 161, 166, 168, 172, 173, 175, 190, 192, 193, 194, 198, 201, 203, 207, 208, 210, 212, 217, 221, 224, 225 или 227. В некоторых воплощениях одна или несколько аминокислотных модификаций, например замена, находятся в положении, соответствующем 10, 11, 13, 16, 18, 20, 25, 26, 27, 30, 33, 37, 38, 42, 43, 47, 52, 54, 57, 61, 62, 67, 71, 72, 74, 75, 77, 78, 80, 84, 89, 90, 92, 93, 94, 96, 97, 98, 99, 100, 102, 103, 107, 109, 110, 111, 113, 115, 116, 117, 119, 120, 121, 122, 126, 129, 130, 132, 133, 135, 137, 138, 139, 140, 142, 143, 144, 146, 151, 152, 153, 154, 155, 156, 158, 161, 164, 166, 168, 172, 173, 175, 190, 192, 193, 194, 198, 201, 203, 207, 208, 210, 212, 217, 218, 220, 221, 224, 225 или 227 относительно SEQ ID NO: 32.In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide may contain one or more additional amino acid modifications, e.g., a substitution in addition to the amino acid modification, e.g., a substitution at a position corresponding to position 52, 54, or 57. In some embodiments, one or more amino acid modifications, e.g., a substitution, are in the position corresponding to 10, 11, 13, 16, 18, 20, 25, 27, 30, 37, 42, 43, 47, 52, 54, 57, 61, 62, 67, 71, 72, 74, 75 , 77, 78, 80, 84, 89, 90, 92, 93, 94, 96, 97, 98, 99, 100, 102, 103, 107, 109, 110, 113, 115, 116, 117, 119, 120 , 121, 122, 126, 129, 130, 132, 133, 135, 138, 139, 140, 142, 143, 144, 146, 151, 152, 153, 154, 155, 156, 158, 161, 166, 168 , 172, 173, 175, 190, 192, 193, 194, 198, 201, 203, 207, 208, 210, 212, 217, 221, 224, 225, or 227. In some embodiments, one or more amino acid modifications, such as a substitution , are in the position corresponding to 10, 11, 13, 16, 18, 20, 25, 26, 27, 30, 33, 37, 38, 42, 43, 47, 52, 54, 57, 61, 62, 67, 71, 72, 74, 75, 77, 78, 80, 84, 89, 90, 92, 93, 94, 96, 97, 98, 99, 100, 102, 103, 107, 109, 110, 111, 113, 115, 116, 117, 119, 120, 121, 122, 126, 129, 130, 132, 133, 135, 137, 138, 139, 140, 142, 143, 144, 146, 151, 152, 153, 1 54, 155, 156, 158, 161, 164, 166, 168, 172, 173, 175, 190, 192, 193, 194, 198, 201, 203, 207, 208, 210, 212, 217, 218, 220, 2 21, 224, 225 or 227 relative to SEQ ID NO: 32.

В некоторых воплощениях вариантный ICOSL включает одну или несколько аминокислотных модификаций, например замену, выбранных из M10V, M10I, V11E, S13G, E16V, S18R, A20V, S25G, F27S, F27C, N30D, Y33del, Q37R, K42E, T43A, Y47H, N52H, N52D, N52S, N52Y, N52K, N52Q, S54A, S54P, N57D, N57Y, R61S, R61C, Y62F, L67P, A71T, G72R, L74Q, R75Q, D77G, F78L, L80P, N84Q, D89G, E90A, K92R, F93L, H94E, H94D, L96F, L96I, V97A, L98F, S99G, Q100R, Q100K, Q100P, L102R, G103E, V107A,In some embodiments, the variant ICOSL includes one or more amino acid modifications, such as substitution, selected from M10V, M10I, V11E, S13G, E16V, S18R, A20V, S25G, F27S, F27C, N30D, Y33del, Q37R, K42E, T43A, Y47H, N52H , N52D, N52S, N52Y, N52K, N52Q, S54A, S54P, N57D, N57Y, R61S, R61C, Y62F, L67P, A71T, G72R, L74Q, R75Q, D77G, F78L, L80P, N84Q, D89G, E90A, K92R, F93L , H94E, H94D, L96F, L96I, V97A, L98F, S99G, Q100R, Q100K, Q100P, L102R, G103E, V107A,

- 54 044346- 54 044346

V107I, S109G, S109N, V110D, V110N, V110A, Ellldel, T113E, H115R, H115Q, V116A, A117T, N119Q, F120I, F120S, S121G, V122A, V122M, S126T, S126R, H129P, S130G, S132F, Q133H, E135K, F138L, T139S, C140del, S142F, I143V, I143T, N144D, Y146C, V151A, Y152C, Y152H,W153R, I154F, K156M, D158G, L161P, L161M, L166Q, N168Q, F172S, L173S, M175T, T190A, T190S, S192G, V193M, N194D, C198R, N201S, L203P, L203F, N207Q, L208P, V210A, S212G, D217V, I218T, I218N, E220G, R221G, R221I, I224V, T225A, N227K или их консервативных аминокислотных замен. В некоторых воплощениях вариантный ICOSL включает одну или несколько аминокислотных модификаций, например замену, выбранных из M10V, M10I, V11E, S13G, E16V, S18R, A20T, A20V, S25G, R26S, F27C, F27S, N30D, Y33del, Q37R, T38P, K42E, T43A, Y47H, N52A, N52C, N52D, N52G, N52H, N52K, N52L, N52M, N52P, N52Q, N52R, N52S, N52T, N52V, N52Y, S54A, S54F, S54P, N57A, N57D, N57E, N57F, N57H, N57K, N57L, N57M, N57P, N57Q, N57S, N57T, N57V, N57W, N57Y, R61C, R61S, Y62F, L67P, A71T, G72R, L74Q, R75Q, D77G, F78L, L80P, N84Q, D89G, E90A, K92R, F93L, H94D, H94E, L96F, L96I, V97A, L98F, S99G, Q100A, Q100D, Q100E, Q100G, Q100K, Q100L, Q100M, Q100N, Q100P, Q100R, Q100S, Q100T, Q100V, L102R, G103E, V107A, V107I, S109G, S109N, V110A, V110D, V110N, E111del, T113E, H115Q, H115R, V116A, A117T, N119Q, F120I, F120S, S121G, V122A, V122M, S126R, S126T, H129P, S130G, S132F, Q133H, E135K, T137A, F138L, T139S, C140del, C140D, S142F, I143T, I143V, N144D, Y146C, V151A, Y152C, Y152H, W153R, I154F, N155H, N155Q, K156M, D158G, L161M, L161P, Q164L, L166Q, N168Q, F172S, L173S, M175T, T190A, T190S, S192G, V193A, V193M, N194D, C198R, N201S, L203F, L203P, N207Q, L208P, V210A, S212G, D217G, D217V, I218N, I218T, E220G, R221G, R221I, R221K, I224V, T225A, T225S, N227K или их консервативных аминокислотных замен.V107I, S109G, S109N, V110D, V110N, V110A, Elldel, T113E, H115R, H115Q, V116A, A117T, N119Q, F120I, F120S, S121G, V122A, V122M, S126T, S126R, H129 P, S130G, S132F, Q133H, E135K, F138L, T139S, C140del, S142F, I143V, I143T, N144D, Y146C, V151A, Y152C, Y152H,W153R, I154F, K156M, D158G, L161P, L161M, L166Q, N168Q, F172S, L1 73S, M175T, T190A, T190S, S192G, V193M, N194D, C198R, N201S, L203P, L203F, N207Q, L208P, V210A, S212G, D217V, I218T, I218N, E220G, R221G, R221I, I224V, T225A, N227K or their conservative amino acid substitutions . In some embodiments, the variant ICOSL includes one or more amino acid modifications, such as substitution, selected from M10V, M10I, V11E, S13G, E16V, S18R, A20T, A20V, S25G, R26S, F27C, F27S, N30D, Y33del, Q37R, T38P, K42E , T43A, Y47H, N52A, N52C, N52D, N52G, N52H, N52K, N52L, N52M, N52P, N52Q, N52R, N52S, N52T, N52V, N52Y, S54A, S54F, S54P, N57A, N57D, N57E, N57F, N57H , N57K, N57L, N57M, N57P, N57Q, N57S, N57T, N57V, N57W, N57Y, R61C, R61S, Y62F, L67P, A71T, G72R, L74Q, R75Q, D77G, F78L, L80P, N84Q, D89G, E90A, K92R , F93L, H94D, H94E, L96F, L96I, V97A, L98F, S99G, Q100A, Q100D, Q100E, Q100G, Q100K, Q100L, Q100M, Q100N, Q100P, Q100R, Q100S, Q100T, Q100V, L1 02R, G103E, V107A, V107I , S109G, S109N, V110A, V110D, V110N, E111del, T113E, H115Q, H115R, V116A, A117T, N119Q, F120I, F120S, S121G, V122A, V122M, S126R, S126T, H129P, S130G, S132F, Q133H, E135K, T137A , F138L, T139S, C140del, C140D, S142F, I143T, I143V, N144D, Y146C, V151A, Y152C, Y152H, W153R, I154F, N155H, N155Q, K156M, D158G, L161M, L161P, Q164L, L166Q, N168Q, F172S, L173S , M175T, T190A, T190S, S192G, V193A, V193M, N194D, C198R, N201S, L203F, L203P, N207Q, L208P, V210A, S212G, D217G, D217V, I218N, I218T, E220G, R221G, R221I, R221K, I224V, T225A , T225S, N227K or their conservative amino acid substitutions.

В некоторых воплощениях любого из вариантных полипептидов ICOSL, описанных выше, вариантный полипептид ICOSL дополнительно включает одну или несколько аминокислотных делеций, соответствующих положению 140 из SEQ ID NO: 32.In some embodiments of any of the variant ICOSL polypeptides described above, the variant ICOSL polypeptide further includes one or more amino acid deletions corresponding to position 140 of SEQ ID NO: 32.

В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL имеет еще одну или несколько аминокислотных модификаций, например, замен, выбранных из числа N52Y/N57Y/F138L/L203P, N52H/N57Y/Q100P, N52S/Y146C/Y152C, N52H/C198R, N52H/C140del/T225A, N52H/C198R/T225A, N52H/K92R, N57Y/Q100P, N52S/C198R, N52Y/N57Y/Y152C, N52Y/N57Y/H129P/C198R,In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide has one or more amino acid modifications, for example, substitutions selected from N52Y/N57Y/F138L/L203P, N52H/N57Y/Q100P, N52S/Y146C/Y152C, N52H/C198R, N52H/C140del/T225A , N52H/C198R/T225A, N52H/K92R, N57Y/Q100P, N52S/C198R, N52Y/N57Y/Y152C, N52Y/N57Y/H129P/C198R,

N52H/L161P/C198R, N52S/T113E, N52S/S54P, N52K/L208P, N52S/Y152H, N52H/I143T,N52H/L161P/C198R, N52S/T113E, N52S/S54P, N52K/L208P, N52S/Y152H, N52H/I143T,

N52S/R75Q/L203P, N52S/D158G, N52D/Q133H, N52H/N57Y/Q100R/V110D/C198R/S212G,N52S/R75Q/L203P, N52S/D158G, N52D/Q133H, N52H/N57Y/Q100R/V110D/C198R/S212G,

N52H/N57Y/Q100R/C198R, N52S/N194D, N52H/N57Y/Q100R/L102R/V110D/H115R/C198R, N52S/S54P, T38P/N52S/N57D, N52H/C140del/T225A, N52H/F78L/Q100R/C198R, N52H/N57Y/R75Q/Q100P/V110D, N52H/N57Y/L74Q/V110D/S192G, N52H/S121G/C198R, N52S/F120S/N227K,N52H/N57Y/Q100R/C198R, N52S/N194D, N52H/N57Y/Q100R/L102R/V110D/H115R/C198R, N52S/S54P, T38P/N52S/N57D, N52H/C140del/T225A, N52H/F7 8L/Q100R/C198R, N52H/N57Y/R75Q/Q100P/V110D, N52H/N57Y/L74Q/V110D/S192G, N52H/S121G/C198R, N52S/F120S/N227K,

N52S/A71T/A117T/T190A/C198R, T43A/N52H/N57Y/L74Q/D89G/V110D/F172S,N52S/A71T/A117T/T190A/C198R, T43A/N52H/N57Y/L74Q/D89G/V110D/F172S,

N52H/N57Y/Q100R/V110D/S132F/M175T, N52H/N57Y/Q100R/V107I/V110D/I154F/C198R/R221G,N52H/N57Y/Q100R/V110D/S132F/M175T, N52H/N57Y/Q100R/V107I/V110D/I154F/C198R/R221G,

N52Q/N207Q, N52Q/N168Q, N52Q/N84Q, N52Q/N119Q, N52Q/N84Q/N168Q, N52Q/N84Q/N207Q, N52Q/N119Q/N155Q, N52H/N84Q/N119Q, N52H/N84Q, N52H/N84Q/N168Q, N52H/N84Q/N207Q, N52H/N84Q/N168Q/N207Q, N52Q/N84Q/N155Q, N52Q/N84Q/N168Q, N52Q/N84Q/N155Q/N168Q,N52Q/N207Q, N52Q/N168Q, N52Q/N84Q, N52Q/N119Q, N52Q/N84Q/N168Q, N52Q/N84Q/N207Q, N52Q/N119Q/N155Q, N52H/N84Q/N119Q, N52H/N84Q, N52H /N84Q/N168Q, N52H/N84Q/N207Q, N52H/N84Q/N168Q/N207Q, N52Q/N84Q/N155Q, N52Q/N84Q/N168Q, N52Q/N84Q/N155Q/N168Q,

N52Q/N84Q/N119Q/N168Q, N52Q/N84Q/N119Q/N207Q, N52Q/N84Q/N119Q/N155Q,N52Q/N84Q/N119Q/N168Q, N52Q/N84Q/N119Q/N207Q, N52Q/N84Q/N119Q/N155Q,

N52Q/N84Q/N119Q/N155Q/N207Q, N52Y/F138L/L203P, N57Y/Q100R/C198R, N57Y/F138L/L203P,N52Q/N84Q/N119Q/N155Q/N207Q, N52Y/F138L/L203P, N57Y/Q100R/C198R, N57Y/F138L/L203P,

N52H/N57Y/Q100R/H115R/C198R, N52H/N57Y/Q100R/F172S/C198R,N52H/N57Y/Q100R/H115R/C198R, N52H/N57Y/Q100R/F172S/C198R,

N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/H115R/I143V/F172S/C198R,N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/H115R/I143V/F172S/C198R,

N52H/N57Y/Q100R/L102R/H115R/F172S/C198R, N52H/V122A/F172S/C198R,N52H/N57Y/Q100R/L102R/H115R/F172S/C198R, N52H/V122A/F172S/C198R,

N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/N194D, N52H/N57Y/H115R/F172S/C198R,N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/N194D, N52H/N57Y/H115R/F172S/C198R,

N52H/N57Y/Q100R/H115R/C198R, N52H/N57Y/H115R, N52H/N57Y/Q100R/H115R,N52H/N57Y/Q100R/H115R/C198R, N52H/N57Y/H115R, N52H/N57Y/Q100R/H115R,

N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/I224V, N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S, N52H/N57Y/Q100R/F172S, N52H/Q100R/H115R/I143T/F172S, N52H/N57Y/Q100P/H115R/F172S, N52Y/N57Y/Q100P/F172S,N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/I224V, N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S, N52H/N57Y/Q100R/F172S, N52H/Q100R/H115R/I143T/F172S, N52H/N57Y /Q100P/H115R/F172S, N52Y/N57Y/Q100P/F172S,

E16V/N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/C198R, E16V/N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/Y152C/K156M/F172S/C198R, N52S/E90A/H115R,E16V/N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/C198R, E16V/N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/Y152C/K156M/F172S/C198R, N52S/E90A/H115R,

N30D/K42E/N52S/H115R, N30D/K42E/N52S/H115R/C198R/R221I, N30D/K42E/N52S/H115R/C198R,N30D/K42E/N52S/H115R, N30D/K42E/N52S/H115R/C198R/R221I, N30D/K42E/N52S/H115R/C198R,

N30D/K42E/N52S/H115R/F172S/N194D, N52S/H115R/F120S/I143V/C198R, N52S/H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100P/C198R, N52H/N57Y/Q100P H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100P/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100P/H115R, N52H/N57Y/Q100P/H115R/C198R, N52H/Q100R/C198R,N30D/K42E/N52S/H115R/F172S/N194D, N52S/H115R/F120S/I143V/C198R, N52S/H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100P/C198R, N52H/N57Y/Q100P H115R/F172S/C198R, N52H /N57Y/Q100P/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100P/H115R, N52H/N57Y/Q100P/H115R/C198R, N52H/Q100R/C198R,

N52H/Q100R/H115R/F172S, N52H/Q100R/F172S/C198R, N52H/Q100R/H115R/F172S/C198R илиN52H/Q100R/H115R/F172S, N52H/Q100R/F172S/C198R, N52H/Q100R/H115R/F172S/C198R or

N52H/N57Y/Q100R/F172S/C198R.N52H/N57Y/Q100R/F172S/C198R.

В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL имеет одну или более аминокислотную модификацию, например, замену в референсном ICOSL или специфическом связывающем фрагменте в соответствующем положении(ях) 52, 57 или 100 относительно нумерации SEQ ID NO: 32. В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL имеет одну или несколько аминокислотных модификаций, например, замен, выбранных из N52A, N52C, N52D, N52G, N52H, N52L, N52K, N52M, N52P, N52Q, N52R, N52S, N52T, N52V, N52Y, N57A, N57E, N57F, N57H, N57K, N57L, N57M, N57P, N57Q, N57S, N57T, N57V, N57W, N57Y, Q100A, Q100D, Q100E, Q100G, Q100K, Q100L, Q100M, Q100N, Q100R, Q100P, Q100S, Q100T или Q100V. В некоторых воплощениях одна или несколько аминокислотных мо- 55 044346 дификаций, например, замен, выбрана из N52Y/N57Y/F138L/L203P, N52H/N57Y/Q100P,In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide has one or more amino acid modification, for example, a substitution in the reference ICOSL or specific binding fragment at the corresponding position(s) 52, 57, or 100 relative to SEQ ID NO: 32. In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide has one or multiple amino acid modifications, for example substitutions selected from N52A, N52C, N52D, N52G, N52H, N52L, N52K, N52M, N52P, N52Q, N52R, N52S, N52T, N52V, N52Y, N57A, N57E, N57F, N57H, N57K , N57L, N57M, N57P, N57Q, N57S, N57T, N57V, N57W, N57Y, Q100A, Q100D, Q100E, Q100G, Q100K, Q100L, Q100M, Q100N, Q100R, Q100P, Q100S, Q100T or Q10 0V. In some embodiments, one or more amino acid modifications, such as substitutions, are selected from N52Y/N57Y/F138L/L203P, N52H/N57Y/Q100P,

N52S/Y146C/Y152C, N52H/C198R, N52H/C140D/T225A, N52H/C198R/T225A, N52H/K92R, N52H/S99G,N52S/Y146C/Y152C, N52H/C198R, N52H/C140D/T225A, N52H/C198R/T225A, N52H/K92R, N52H/S99G,

N57Y/Q100P, N52S/S130G/Y152C, N52S/Y152C, N52S/C198R, N52Y/N57Y/Y152C,N57Y/Q100P, N52S/S130G/Y152C, N52S/Y152C, N52S/C198R, N52Y/N57Y/Y152C,

N52Y/N57Y/H129P/C198R, N52H/L161P/C198R, N52S/T113E, N52D/S54P, N52K/L208P, N52S/Y152H,N52Y/N57Y/H129P/C198R, N52H/L161P/C198R, N52S/T113E, N52D/S54P, N52K/L208P, N52S/Y152H,

N52D/V151A, N52H/I143T, N52S/L80P, N52S/R75Q/L203P, N52S/D158G, N52D/Q133H,N52D/V151A, N52H/I143T, N52S/L80P, N52S/R75Q/L203P, N52S/D158G, N52D/Q133H,

N52S/N57Y/H94D/L96F/L98F/Q100R, N52S/N57Y/H94D/L96F/L98F/Q100R/G103E/F120S,N52S/N57Y/H94D/L96F/L98F/Q100R, N52S/N57Y/H94D/L96F/L98F/Q100R/G103E/F120S,

N52H/F78L/Q100R, N52H/N57Y/Q100R/V110D, N52H/N57Y/R75Q/Q100R/V110D, N52H/N57Y/Q100R, N52H/N57Y/L74Q/Q100R/V110D, N52H/Q100R, N52H/S121G, A20V/N52H/N57Y/Q100R/S109G,N52H/F78L/Q100R, N52H/N57Y/Q100R/V110D, N52H/N57Y/R75Q/Q100R/V110D, N52H/N57Y/Q100R, N52H/N57Y/L74Q/Q100R/V110D, N52H/Q100R, N52 H/S121G, A20V/ N52H/N57Y/Q100R/S109G,

N52H/N57Y/R61S/Q100R/V110D/L173S, N52H/N57Y/Q100R/V122A, N52H/N57Y/Q100R/F172S,N52H/N57Y/R61S/Q100R/V110D/L173S, N52H/N57Y/Q100R/V122A, N52H/N57Y/Q100R/F172S,

N52H/N57Y, N52S/F120S, N52S/V97A, N52S/G72R, N52S/A71T/A117T, N52S/E220G,N52H/N57Y, N52S/F120S, N52S/V97A, N52S/G72R, N52S/A71T/A117T, N52S/E220G,

Y47H/N52S/V107A/F120S, N52H/N57Y/Q100R/V110D/S132F/M175T,Y47H/N52S/V107A/F120S, N52H/N57Y/Q100R/V110D/S132F/M175T,

E16V/N52H/N5 7Y/Q100R/V110D/H115R/Y152C/K15 6M/C198R, Q37R/N52H/N57Y/Q100R/V110N/S142F/C198R/D217V/R221G, N52H/N57Y/Q100R/V110D/C198R,E16V/N52H/N5 7Y/Q100R/V110D/H115R/Y152C/K15 6M/C198R, Q37R/N52H/N57Y/Q100R/V110N/S142F/C198R/D217V/R221G, N52H/N57Y/Q100R/V1 10D/C198R,

N52H/N57Y/Q100R/V110D/V116A/L161M/F172S/S192G/C198R, F27S/N52H/N57Y/V110N,N52H/N57Y/Q100R/V110D/V116A/L161M/F172S/S192G/C198R, F27S/N52H/N57Y/V110N,

N52S/H94E/L96I/S109N/L166Q, S18R/N52S/F93L/I143V/R221G, A20T/N52D/Y146C/Q164L,N52S/H94E/L96I/S109N/L166Q, S18R/N52S/F93L/I143V/R221G, A20T/N52D/Y146C/Q164L,

V11E/N30D/N52H/N57Y/H94E/L96I/L98F/N194D/V210A/I218T, N52S/H94E/L96I/V122M,V11E/N30D/N52H/N57Y/H94E/L96I/L98F/N194D/V210A/I218T, N52S/H94E/L96I/V122M,

N52H/N57Y/H94E/L96I/F120I/S126T/W153R/I218N, M10V/S18R/N30D/N52S/S126R/T139S/L203F,N52H/N57Y/H94E/L96I/F120I/S126T/W153R/I218N, M10V/S18R/N30D/N52S/S126R/T139S/L203F,

S25G/N30D/N52S/F120S/N227K, N30D/N52S/L67P/Q100K/D217G/R221K/T225S,S25G/N30D/N52S/F120S/N227K, N30D/N52S/L67P/Q100K/D217G/R221K/T225S,

N52H/N57Y/Q100R/V110D/A117T/T190S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/V110D/F172S/C198R,N52H/N57Y/Q100R/V110D/A117T/T190S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/V110D/F172S/C198R,

S25G/F27C/N52H/N57Y/Q100R/V110D/E135K/L173S/C198R, N52H/N57Y/V110A/C198R/R221I,S25G/F27C/N52H/N57Y/Q100R/V110D/E135K/L173S/C198R, N52H/N57Y/V110A/C198R/R221I,

M10I/S13G/N52H/N57Y/D77G/V110A/H129P/I143V/F172S/V193M,C198R, N52H/N57Y/R61C/Y62F/Q100R/V110N/F120S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/C198R,M10I/S13G/N52H/N57Y/D77G/V110A/H129P/I143V/F172S/V193M,C198R, N52H/N57Y/R61C/Y62F/Q100R/V110N/F120S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/V 110D/H115R/C198R,

N52H/N57Y/Q100R/V110D/N144D/F172S/C198R, N52S/H94E/L98F/Q100R, N52S/E90A,N52H/N57Y/Q100R/V110D/N144D/F172S/C198R, N52S/H94E/L98F/Q100R, N52S/E90A,

N30D/K42E/N52S, N52S/F120S/I143V/I224V, N52H/N57Y/Q100R/V110D/C198R/S212G,N30D/K42E/N52S, N52S/F120S/I143V/I224V, N52H/N57Y/Q100R/V110D/C198R/S212G,

N52H/N57Y/Q100R/C198R, N52S/N194D, N52H/N57Y/Q100R/L102R/V110D/H115R/C198R,N52H/N57Y/Q100R/C198R, N52S/N194D, N52H/N57Y/Q100R/L102R/V110D/H115R/C198R,

N52H/N57Y/Q100R/V110D/C198R/S212G, N52H/N57Y/Q100R/C198R, N52S/N194D,N52H/N57Y/Q100R/V110D/C198R/S212G, N52H/N57Y/Q100R/C198R, N52S/N194D,

N52H/N57Y/Q100R/L102R/V110D/H115R/C198R, N52S/S54P, T38P/N52S/N57D, N52H/C140del/T225A, N52H/F78L/Q100R/C198R, N52H/N57Y/R75Q/Q100P/V110D, N52H/N57Y/L74Q/V110D/S192G,N52H/N57Y/Q100R/L102R/V110D/H115R/C198R, N52S/S54P, T38P/N52S/N57D, N52H/C140del/T225A, N52H/F78L/Q100R/C198R, N52H/N57Y/R75Q/Q10 0P/V110D, N52H/ N57Y/L74Q/V110D/S192G,

N52H/S121G/C198R, N52S/F120S/N227K, N52S/A71T/A117T/T190A/C198R,N52H/S121G/C198R, N52S/F120S/N227K, N52S/A71T/A117T/T190A/C198R,

T43A/N52H/N57Y/L74Q/D89G/V110D/F172S, N52H/N57Y/Q100R/V110D/S132F/M175T, N52D,T43A/N52H/N57Y/L74Q/D89G/V110D/F172S, N52H/N57Y/Q100R/V110D/S132F/M175T, N52D,

N52H/N57Y/Q100R/V107I/V110D/I154F/C198R/R221G, N52Q/N207Q, N168Q/N207Q, N52Q/N168Q, N52Q/N84Q, N52Q/N119Q, N52Q/N84Q/N168Q, N52Q/N84Q/N207Q, N52Q/N119Q/N155Q,N52H/N57Y/Q100R/V107I/V110D/I154F/C198R/R221G, N52Q/N207Q, N168Q/N207Q, N52Q/N168Q, N52Q/N84Q, N52Q/N119Q, N52Q/N84Q/N168Q, N52Q/ N84Q/N207Q, N52Q/ N119Q/N155Q,

N52H/N84Q/N119Q, N52H/N84Q, N52H/N84Q/N168Q/N207Q, N52Q/N84Q/N155Q/N168Q,N52H/N84Q/N119Q, N52H/N84Q, N52H/N84Q/N168Q/N207Q, N52Q/N84Q/N155Q/N168Q,

N52Q/N84Q/N119Q/N168Q, N52Q/N84Q/N119Q/N207Q, N52Q/N84Q/N119Q/N155Q,N52Q/N84Q/N119Q/N168Q, N52Q/N84Q/N119Q/N207Q, N52Q/N84Q/N119Q/N155Q,

N52Q/N84Q/N119Q/N155Q/N207Q, N52Y/F138L/L203P, N57Y/Q100R/C198R, N57Y/F138L/L203P, Q100R/F138L, N52H/N57Y/Q100R/H115R/C198R, N52H/N57Y/Q100R/F172S/C198R,N52Q/N84Q/N119Q/N155Q/N207Q, N52Y/F138L/L203P, N57Y/Q100R/C198R, N57Y/F138L/L203P, Q100R/F138L, N52H/N57Y/Q100R/H115R/C198R, N52 H/N57Y/Q100R/F172S/ C198R,

N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/H115R/I143V/F172S/C198R,N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/H115R/I143V/F172S/C198R,

N52H/N57Y/Q100R/L102R/H115R/F172S/C198R, N52H/V122A/F172S/C198R,N52H/N57Y/Q100R/L102R/H115R/F172S/C198R, N52H/V122A/F172S/C198R,

N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/N194D, N52H/N57Y/H115R/F172S/C198R,N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/N194D, N52H/N57Y/H115R/F172S/C198R,

N52H/N57Y/Q100R/H115R/C198R, N52H/N57Y/H115R, N52H/N57Y/Q100R/H115R,N52H/N57Y/Q100R/H115R/C198R, N52H/N57Y/H115R, N52H/N57Y/Q100R/H115R,

N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/I224V, N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S, N52H/N57Y/Q100R/F172S, N52H/Q100R/H115R/I143T/F172S, N52H/N57Y/Q100P/H115R/F172S, N52Y/N57Y/Q100P/F172S,N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/I224V, N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S, N52H/N57Y/Q100R/F172S, N52H/Q100R/H115R/I143T/F172S, N52H/N57Y /Q100P/H115R/F172S, N52Y/N57Y/Q100P/F172S,

E16V/N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/C198R, E16V/N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/Y152C/K156M/F172S/C198R, N52S/E90A/H115R, N30D/K42E N52S/H115R, N30D/K42E/N52S/H115R/C198R/R221I, N30D/K42E/N52S/H115R/C198R,E16V/N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/C198R, E16V/N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/Y152C/K156M/F172S/C198R, N52S/E90A/H115R, N30D/K42E N 52S/H115R, N30D/K42E /N52S/H115R/C198R/R221I, N30D/K42E/N52S/H115R/C198R,

N30D/K42E/N52S/H115R/F172S/N194D, N52S/H115R/F120S/I143V/C198R, N52S/H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100P/C198R, N52H/N57Y/Q100P H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100P/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100P/H115R, N52H/N57Y/Q100P/H115R/C198R, N52H/Q100R/C198R,N30D/K42E/N52S/H115R/F172S/N194D, N52S/H115R/F120S/I143V/C198R, N52S/H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100P/C198R, N52H/N57Y/Q100P H115R/F172S/C198R, N52H /N57Y/Q100P/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100P/H115R, N52H/N57Y/Q100P/H115R/C198R, N52H/Q100R/C198R,

N52H/Q100R/H115R/F172S, N52H/Q100R/F172S/C198R, N52H/Q100R/H115R/F172S/C198R,N52H/Q100R/H115R/F172S, N52H/Q100R/F172S/C198R, N52H/Q100R/H115R/F172S/C198R,

N52H/N57Y/Q100R/F172S/C198R, N52A/N57F/Q100S, N52A/N57H/Q100S, N52A/N57Y/Q100A,N52H/N57Y/Q100R/F172S/C198R, N52A/N57F/Q100S, N52A/N57H/Q100S, N52A/N57Y/Q100A,

N52D/N57A/Q100A, N52D/Q100S, N52G/Q100A, N52H/Q100A, N52M/N57H/Q100S, N52M/N57W/Q100P, N52Q/N57F, N52Q/N57S/Q100A, N52R/N57L/Q100A, N52R/N57Y/Q100P, N52R/N57Y/Q100S,N52D/N57A/Q100A, N52D/Q100S, N52G/Q100A, N52H/Q100A, N52M/N57H/Q100S, N52M/N57W/Q100P, N52Q/N57F, N52Q/N57S/Q100A, N52R/N57L/Q100A , N52R/N57Y/ Q100P, N52R/N57Y/Q100S,

N52S/N57A/Q100A, N52S/N57H/Q100E, N52S/N57L/Q100S, N52S/N57M/Q100S, N52S/N57Y/Q100S, N52S/N57Y/Q100M, N52S/N57Y/Q100V, N52T/N57H/Q100S, N52T/N57H/Q100A, N52T/N57Y/Q100A, N52V/N57L/Q100A, N52H/N57Y/Q100K, N52K/N57Y/Q100R, N52L/N57H/Q100R, N52R/N57F/Q100N, N52R/N57F/Q100P, N52R/N57F/Q100R, N52R/N57F/Q100T, N52R/N57H/Q100K, N52R/N57L/Q100S, N52R/N57W/Q100K, N52R/N57W, N52R/N57Y/Q100R, N52C/N57E/Q100S, N52G/N57P/Q100D, N52G/N57V/Q100G, N52G/N57V, N52L/N57V, N52P/N57P, N52P/N57S/Q100G, N52S/N57L/Q100G, N52T/N57K/Q100P, N52V/N57T/Q100L или N57Q/Q100P.N52S/N57A/Q100A, N52S/N57H/Q100E, N52S/N57L/Q100S, N52S/N57M/Q100S, N52S/N57Y/Q100S, N52S/N57Y/Q100M, N52S/N57Y/Q100V, N52T/N57H/ Q100S,N52T/ N57H/Q100A, N52T/N57Y/Q100A, N52V/N57L/Q100A, N52H/N57Y/Q100K, N52K/N57Y/Q100R, N52L/N57H/Q100R, N52R/N57F/Q100N, N52R/N57F/Q100P , N52R/N57F/ Q100R, N52R/N57F/Q100T, N52R/N57H/Q100K, N52R/N57L/Q100S, N52R/N57W/Q100K, N52R/N57W, N52R/N57Y/Q100R, N52C/N57E/Q100S, N52G/N57P/ Q100D, N52G/ N57V/Q100G, N52G/N57V, N52L/N57V, N52P/N57P, N52P/N57S/Q100G, N52S/N57L/Q100G, N52T/N57K/Q100P, N52V/N57T/Q100L or N57Q/Q100P.

В некоторых воплощениях, одну или несколько модификаций выбирают из N52Y/N57Y/F138L/L203P, N52H/N57Y/Q100P, N52S/Y146C/Y152C, N52H/C198R, N52H/C140D/T225A, N52H/C198R/T225A, N52H/K92R, N52H/S99G, N57Y/Q100P, N52S/S130G/Y152C, N52S/Y152C,In some embodiments, one or more modifications are selected from N52Y/N57Y/F138L/L203P, N52H/N57Y/Q100P, N52S/Y146C/Y152C, N52H/C198R, N52H/C140D/T225A, N52H/C198R/T225A, N52H/K92 R, N52H/S99G, N57Y/Q100P, N52S/S130G/Y152C, N52S/Y152C,

- 56 044346- 56 044346

N52S/C198R, N52Y/N57Y/Y152C, N52Y/N57Y/H129P/C198R, N52H/L161P/C198R, N52S/T113E,N52S/C198R, N52Y/N57Y/Y152C, N52Y/N57Y/H129P/C198R, N52H/L161P/C198R, N52S/T113E,

N52D/S54P, N52K/L208P, N52S/Y152H, N52D/V151A, N52H/I143T, N52S/L80P, F120S/Y152H/N201S,N52D/S54P, N52K/L208P, N52S/Y152H, N52D/V151A, N52H/I143T, N52S/L80P, F120S/Y152H/N201S,

N52S/R75Q/L203P, N52S/D158G, N52D/Q133H, N52S/N57Y/H94D/L96F/L98F/Q100R,N52S/R75Q/L203P, N52S/D158G, N52D/Q133H, N52S/N57Y/H94D/L96F/L98F/Q100R,

N52S/N57Y/H94D/L96F/L98F/Q100R/G103E/F120S, N52S/G103E, N52H/F78L/Q100R,N52S/N57Y/H94D/L96F/L98F/Q100R/G103E/F120S, N52S/G103E, N52H/F78L/Q100R,

N52H/N57Y/Q100R/V110D, N52H/N57Y/R75Q/Q100R/V110D, N52H/N57Y/Q100R,N52H/N57Y/Q100R/V110D, N52H/N57Y/R75Q/Q100R/V110D, N52H/N57Y/Q100R,

N52H/N57Y/L74Q/Q100R/V110D, N52H/Q100R, N52H/S121G, A20V/N52H/N57Y/Q100R/S109G,N52H/N57Y/L74Q/Q100R/V110D, N52H/Q100R, N52H/S121G, A20V/N52H/N57Y/Q100R/S109G,

N52H/N57Y/R61S/Q100R/V110D/L173S, N52H/N57Y/Q100R/V122A, N52H/N57Y/Q100R/F172S,N52H/N57Y/R61S/Q100R/V110D/L173S, N52H/N57Y/Q100R/V122A, N52H/N57Y/Q100R/F172S,

N52H/N57Y, N52S/F120S, N52S/V97A, N52S/G72R, N52S/A71T/A117T, N52S/E220G,N52H/N57Y, N52S/F120S, N52S/V97A, N52S/G72R, N52S/A71T/A117T, N52S/E220G,

Y47H/N52S/V107A/F120S, N52H/N57Y/Q100R/V110D/S132F/M175T,Y47H/N52S/V107A/F120S, N52H/N57Y/Q100R/V110D/S132F/M175T,

E16V/N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/Y152C/K156M/C198R, Q37R/N52H/N57Y/Q100R/V110N/S142F/C198R/D217V/R221G, N52H/N57Y/Q100R/V110D/C198R,E16V/N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/Y152C/K156M/C198R, Q37R/N52H/N57Y/Q100R/V110N/S142F/C198R/D217V/R221G, N52H/N57Y/Q100R/V110 D/C198R,

N52H/N57Y/Q100R/V110D/V116A/L161M/F172S/S192G/C198R, F27S/N52H/N57Y/V110N,N52H/N57Y/Q100R/V110D/V116A/L161M/F172S/S192G/C198R, F27S/N52H/N57Y/V110N,

N52S/H94E/L96I/S109N/L166Q, S18R/N52S/F93L/I143V/R221G, A20T/N52D/Y146C/Q164L,N52S/H94E/L96I/S109N/L166Q, S18R/N52S/F93L/I143V/R221G, A20T/N52D/Y146C/Q164L,

V11E/N30D/N52H/N57Y/H94E/L96I/L98F/N194D/V210A/I218T, N52S/H94E/L96I/V122M,V11E/N30D/N52H/N57Y/H94E/L96I/L98F/N194D/V210A/I218T, N52S/H94E/L96I/V122M,

N52H/N57Y/H94E/L96I/F120I/S126T/W153R/I218N, M10V/S18R/N30D/N52S/S126R/T139S/L203F,N52H/N57Y/H94E/L96I/F120I/S126T/W153R/I218N, M10V/S18R/N30D/N52S/S126R/T139S/L203F,

S25G/N30D/N52S/F120S/N227K, N30D/N52S/L67P/Q100K/D217G/R221K/T225S,S25G/N30D/N52S/F120S/N227K, N30D/N52S/L67P/Q100K/D217G/R221K/T225S,

N52H/N57Y/Q100R/V110D/A117T/T190S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/V110D/F172S/C198R,N52H/N57Y/Q100R/V110D/A117T/T190S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/V110D/F172S/C198R,

S25G/F27C/N52H/N57Y/Q100R/V110D/E135K/L173S/C198R, N52H/N57Y/V110A/C198R/R221I,S25G/F27C/N52H/N57Y/Q100R/V110D/E135K/L173S/C198R, N52H/N57Y/V110A/C198R/R221I,

M10I/S13G/N52H/N57Y/D77G/V110A/H129P/I143V/F172S/V193M,C198R, N52H/N57Y/R61C/Y62F/Q100R/V110N/F120S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/C198R,M10I/S13G/N52H/N57Y/D77G/V110A/H129P/I143V/F172S/V193M,C198R, N52H/N57Y/R61C/Y62F/Q100R/V110N/F120S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/V 110D/H115R/C198R,

N52H/N57Y/Q100R/V110D/N144D/F172S/C198R, N52S/H94E/L98F/Q100R, N52S/E90A,N52H/N57Y/Q100R/V110D/N144D/F172S/C198R, N52S/H94E/L98F/Q100R, N52S/E90A,

N30D/K42E/N52S, N52S/F120S/I143V/I224V, N52H/N57Y/Q100R/V110D/C198R/S212G,N30D/K42E/N52S, N52S/F120S/I143V/I224V, N52H/N57Y/Q100R/V110D/C198R/S212G,

N52H/N57Y/Q100R/C198R, N52S/N194D, N52H/N57Y/Q100R/L102R/V110D/H115R/C198R,N52H/N57Y/Q100R/C198R, N52S/N194D, N52H/N57Y/Q100R/L102R/V110D/H115R/C198R,

N52H/N57Y/Q100R/V110D/C198R/S212G, N52H/N57Y/Q100R/C198R, N52S/N194D,N52H/N57Y/Q100R/V110D/C198R/S212G, N52H/N57Y/Q100R/C198R, N52S/N194D,

N52H/N57Y/Q100R/L102R/V110D/H115R/C198R, N52S/S54P, T38P/N52S/N57D, N52H/C140del/T225A, N52H/F78L/Q100R/C198R, N52H/N57Y/R75Q/Q100P/V110D, N52H/N57Y/L74Q/V110D/S192G,N52H/N57Y/Q100R/L102R/V110D/H115R/C198R, N52S/S54P, T38P/N52S/N57D, N52H/C140del/T225A, N52H/F78L/Q100R/C198R, N52H/N57Y/R75Q/Q10 0P/V110D, N52H/ N57Y/L74Q/V110D/S192G,

N52H/S121G/C198R, N52S/F120S/N227K, N52S/A71T/A117T/T190A/C198R,N52H/S121G/C198R, N52S/F120S/N227K, N52S/A71T/A117T/T190A/C198R,

T43A/N52H/N57Y/L74Q/D89G/V110D/F172S, N52H/N57Y/Q100R/V110D/S132F/M175T,T43A/N52H/N57Y/L74Q/D89G/V110D/F172S, N52H/N57Y/Q100R/V110D/S132F/M175T,

N52H/N57Y/Q100R/V107I/V110D/I154F/C198R/R221G, N52Q/N207Q, N52Q/N168Q, N52Q/N84Q,N52H/N57Y/Q100R/V107I/V110D/I154F/C198R/R221G, N52Q/N207Q, N52Q/N168Q, N52Q/N84Q,

N52Q/N119Q, N52Q/N84Q/N168Q, N52Q/N84Q/N207Q, N52Q/N119Q/N155Q, N52H/N84Q/N119Q, N52H/N84Q, N52H/N84Q/N168Q/N207Q, N52Q/N84Q/N155Q/N168Q, N52Q/N84Q/N119Q/N168Q,N52Q/N119Q, N52Q/N84Q/N168Q, N52Q/N84Q/N207Q, N52Q/N119Q/N155Q, N52H/N84Q/N119Q, N52H/N84Q, N52H/N84Q/N168Q/N207Q, N52Q/N84Q/N155 Q/N168Q, N52Q/ N84Q/N119Q/N168Q,

N52Q/N84Q/N119Q/N207Q, N52Q/N84Q/N119Q/N155Q, N52Q/N84Q/N119Q/N155Q/N207Q,N52Q/N84Q/N119Q/N207Q, N52Q/N84Q/N119Q/N155Q, N52Q/N84Q/N119Q/N155Q/N207Q,

N52Y/F138L/L203P, N57Y/Q100R/C198R, N57Y/F138L/L203P, Q100R/F138L,N52Y/F138L/L203P, N57Y/Q100R/C198R, N57Y/F138L/L203P, Q100R/F138L,

N52H/N57Y/Q100R/H115R/C198R, N52H/N57Y/Q100R/F172S/C198R,N52H/N57Y/Q100R/H115R/C198R, N52H/N57Y/Q100R/F172S/C198R,

N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/H115R/I143V/F172S/C198R,N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/H115R/I143V/F172S/C198R,

N52H/N57Y/Q100R/L102R/H115R/F172S/C198R, N52H/V122A/F172S/C198R,N52H/N57Y/Q100R/L102R/H115R/F172S/C198R, N52H/V122A/F172S/C198R,

N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/N194D, N52H/N57Y/H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/H115R,N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/N194D, N52H/N57Y/H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/H115R,

N52H/N57Y/Q100R/H115R, N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/I224V, N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S, N52H/N57Y/Q100R/F172S, N52H/Q100R/H115R/I143T/F172S, N52H/N57Y/Q100P/H115R/F172S,N52H/N57Y/Q100R/H115R, N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/I224V, N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S, N52H/N57Y/Q100R/F172S, N52H/Q100R/H115R /I143T/F172S, N52H/ N57Y/Q100P/H115R/F172S,

N52Y/N57Y/Q100P/F172S, E16V/N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/C198R,N52Y/N57Y/Q100P/F172S, E16V/N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/C198R,

E16V/N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/Y152C/K156M/F172S/C198R, N52S/E90A/H115R, N30D/K42E N52S/H115R, N30D/K42E/N52S/H115R/C198R/R221I, N30D/K42E/N52S/H115R/C198R,E16V/N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/Y152C/K156M/F172S/C198R, N52S/E90A/H115R, N30D/K42E N52S/H115R, N30D/K42E/N52S/H115R/C198R/R2 21I, N30D/K42E/N52S /H115R/C198R,

N30D/K42E/N52S/H115R/F172S/N194D, N52S/H115R/F120S/I143V/C198R, N52S/H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100P/C198R, N52H/N57Y/Q100P/H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100P/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100P/H115R, N52H/N57Y/Q100P/H115R/C198R, N52H/Q100R/C198R,N30D/K42E/N52S/H115R/F172S/N194D, N52S/H115R/F120S/I143V/C198R, N52S/H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100P/C198R, N52H/N57Y/Q100P /H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100P/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100P/H115R, N52H/N57Y/Q100P/H115R/C198R, N52H/Q100R/C198R,

N52H/Q100R/H115R/F172S, N52H/Q100R/F172S/C198R, N52H/Q100R/H115R/F172S/C198R,N52H/Q100R/H115R/F172S, N52H/Q100R/F172S/C198R, N52H/Q100R/H115R/F172S/C198R,

N52H/N57Y/Q100R/F172S/C198R, N52A/N57F/Q100S, N52A/N57H/Q100S, N52A/N57Y/Q100A,N52H/N57Y/Q100R/F172S/C198R, N52A/N57F/Q100S, N52A/N57H/Q100S, N52A/N57Y/Q100A,

N52D/N57A/Q100A, N52D/Q100S, N52G/Q100A, N52H/Q100A, N52M/N57H/Q100S, N52M/N57W/Q100P, N52Q/N57F, N52Q/N57S/Q100A, N52R/N57L/Q100A, N52R/N57Y/Q100P, N52R/N57Y/Q100S,N52D/N57A/Q100A, N52D/Q100S, N52G/Q100A, N52H/Q100A, N52M/N57H/Q100S, N52M/N57W/Q100P, N52Q/N57F, N52Q/N57S/Q100A, N52R/N57L/Q100A , N52R/N57Y/ Q100P, N52R/N57Y/Q100S,

N52S/N57A/Q100A, N52S/N57H/Q100E, N52S/N57L/Q100S, N52S/N57M/Q100S, N52S/N57Y/Q100S, N52S/N57Y/Q100M, N52S/N57Y/Q100V, N52T/N57H/Q100S, N52T/N57H/Q100A, N52T/N57Y/Q100A, N52V/N57L/Q100A, N52H/N57Y/Q100K, N52K/N57Y/Q100R, N52L/N57H/Q100R, N52R/N57F/Q100N, N52R/N57F/Q100P, N52R/N57F/Q100R, N52R/N57F/Q100T, N52R/N57H/Q100K, N52R/N57L/Q100S, N52R/N57W/Q100K, N52R/N57W, N52R/N57Y/Q100R, N52C/N57E/Q100S, N52G/N57P/Q100D,N52S/N57A/Q100A, N52S/N57H/Q100E, N52S/N57L/Q100S, N52S/N57M/Q100S, N52S/N57Y/Q100S, N52S/N57Y/Q100M, N52S/N57Y/Q100V, N52T/N57H/ Q100S,N52T/ N57H/Q100A, N52T/N57Y/Q100A, N52V/N57L/Q100A, N52H/N57Y/Q100K, N52K/N57Y/Q100R, N52L/N57H/Q100R, N52R/N57F/Q100N, N52R/N57F/Q100P , N52R/N57F/ Q100R, N52R/N57F/Q100T, N52R/N57H/Q100K, N52R/N57L/Q100S, N52R/N57W/Q100K, N52R/N57W, N52R/N57Y/Q100R, N52C/N57E/Q100S, N52G/N57P/ Q100D,

N52G/N57V/Q100G, N52G/N57V, N52L/N57V, N52P/N57P, N52P/N57S/Q100G, N52S/N57L/Q100G, N52T/N57K/Q100P, N52V/N57T/Q100L, N57Q/Q100P или R26S/N52H/N57Y/V110D/T137A/C198R.N52G/N57V/Q100G, N52G/N57V, N52L/N57V, N52P/N57P, N52P/N57S/Q100G, N52S/N57L/Q100G, N52T/N57K/Q100P, N52V/N57T/Q100L, N57Q/Q100P or R 26S/N52H/ N57Y/V110D/T137A/C198R.

В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL имеет одну или несколько аминокислотных модификаций, например, замен, выбранных из N52A, N52C, N52D, N52G, N52K, N52L, N52M, N52R, N52T, N52V, N57A, N57E, N57F, N57H, N57K, N57L, N57M, N57P, N57Q, N57S, N57T, N57V, N57W, Q100A, Q100D, Q100G, Q100L, Q100M, Q100N, Q100R, Q100S, Q100T или Q100V относительно SEQ ID NO: 32. В некоторых воплощениях, одну или несколько модификаций выбирают из N52A/N57F/Q100S, N52A/N57H/Q100S, N52A/N57Y/Q100A, N52D/N57A/Q100A, N52D/Q100S,In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide has one or more amino acid modifications, e.g., substitutions selected from N52A, N52C, N52D, N52G, N52K, N52L, N52M, N52R, N52T, N52V, N57A, N57E, N57F, N57H, N57K, N57L . from N52A/N57F/Q100S, N52A/N57H/Q100S, N52A/N57Y/Q100A, N52D/N57A/Q100A, N52D/Q100S,

- 57 044346- 57 044346

N52G/Q100A, N52H/Q100A, N52M/N57H/Q100S, N52M/N57W/Q100P, N52Q/N57F, N52Q/N57S/Q100A, N52R/N57L/Q100A, N52R/N57Y/Q100P, N52R/N57Y/Q100S, N52S/N57A/Q100A, N52S/N57H/Q100E, N52S/N57L/Q100S, N52S/N57M/Q100S, N52S/N57Y/Q100S, N52S/N57Y/Q100M, N52S/N57Y/Q100V, N52T/N57H/Q100S, N52T/N57H/Q100A, N52T/N57Y/Q100A, N52V/N57L/Q100A, N52H/N57Y/Q100K, N52K/N57Y/Q100R, N52L/N57H/Q100R, N52R/N57F/Q100N, N52R/N57F/Q100P, N52R/N57F/Q100R, N52R/N57F/Q100T, N52R/N57H/Q100K, N52R/N57L/Q100S, N52R/N57W/Q100K, N52R/N57W, N52R/N57Y/Q100R, N52C/N57E/Q100S, N52G/N57P/Q100D, N52G/N57V/Q100G, N52G/N57V, N52L/N57V, N52P/N57P, N52P/N57S/Q100G, N52S/N57L/Q100G, N52T/N57K/Q100P, N52V/N57T/Q100L или N57Q/Q100P.N52G/Q100A, N52H/Q100A, N52M/N57H/Q100S, N52M/N57W/Q100P, N52Q/N57F, N52Q/N57S/Q100A, N52R/N57L/Q100A, N52R/N57Y/Q100P, N52R/N57Y/ Q100S, N52S/ N57A/Q100A, N52S/N57H/Q100E, N52S/N57L/Q100S, N52S/N57M/Q100S, N52S/N57Y/Q100S, N52S/N57Y/Q100M, N52S/N57Y/Q100V, N52T/N57H/Q100S , N52T/N57H/ Q100A, N52T/N57Y/Q100A, N52V/N57L/Q100A, N52H/N57Y/Q100K, N52K/N57Y/Q100R, N52L/N57H/Q100R, N52R/N57F/Q100N, N52R/N57F/Q100P, N52R /N57F/Q100R, N52R/N57F/Q100T, N52R/N57H/Q100K, N52R/N57L/Q100S, N52R/N57W/Q100K, N52R/N57W, N52R/N57Y/Q100R, N52C/N57E/Q100S, N52G/N57P/Q100D, N52G/N57V/ Q100G, N52G/N57V, N52L/N57V, N52P/N57P, N52P/N57S/Q100G, N52S/N57L/Q100G, N52T/N57K/Q100P, N52V/N57T/Q100L or N57Q/Q100P.

В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL имеет одну или несколько аминокислотных модификаций, например, замену, выбранных из N52H/N57Y/Q100R/C198R, N52H/N57Y/Q100R/V122A, N52H/N57Y/Q100R/F172S, N52Y/N57Y/F138L/L203P,In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide has one or more amino acid modifications, e.g., substitution selected from N52H/N57Y/Q100R/C198R, N52H/N57Y/Q100R/V122A, N52H/N57Y/Q100R/F172S, N52Y/N57Y/F138L/L203P ,

V11E/N30D/N52H/N57Y/H94E/L96I/L98F/N194D/V210A/I218T,V11E/N30D/N52H/N57Y/H94E/L96I/L98F/N194D/V210A/I218T,

N52H/N57Y/Q100R/L102R/V110D/H115R/C198R, N52H/N57Y/Q100R, N52H/Q100R,N52H/N57Y/Q100R/L102R/V110D/H115R/C198R, N52H/N57Y/Q100R, N52H/Q100R,

N52H/N57Y/Q100R/V110D/C198/RS212G, N52H/N57Y/Q100R/L102R/V110D/H115R/C198R,N52H/N57Y/Q100R/V110D/C198/RS212G, N52H/N57Y/Q100R/L102R/V110D/H115R/C198R,

E16V/N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/V152C/K156M/C198R, N30D/K42E/N52S,E16V/N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/V152C/K156M/C198R, N30D/K42E/N52S,

N52S/F120S/I143V/I224V, N52S/E90A, N52H/N57Y/V110A/C198R/R221I, N52H/N57Y/Q100P или N52S/N194D.N52S/F120S/I143V/I224V, N52S/E90A, N52H/N57Y/V110A/C198R/R221I, N52H/N57Y/Q100P or N52S/N194D.

В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL имеет одну или несколько аминокислотных модификаций, например, замен, выбранных из N52H/N57Y/Q100R/F172S, N52H/Q100R или N52H/N57Y/Q100R/C198R. В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL имеет одну или несколько аминокислотных модификаций, например, замен, выбранных из E16V/N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/Y152C/K156M/C198R, N52H/N57Y/Q100R и N52H/N57Y/Q100P.In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide has one or more amino acid modifications, for example, substitutions selected from N52H/N57Y/Q100R/F172S, N52H/Q100R, or N52H/N57Y/Q100R/C198R. In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide has one or more amino acid modifications, for example, substitutions selected from E16V/N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/Y152C/K156M/C198R, N52H/N57Y/Q100R, and N52H/N57Y/Q100P.

В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL имеет одну или несколько аминокислотных модификаций, например, замен, выбранных из N52H/N57Y/F138L/L203P, N52H/N57Y/Q100P, N52H/K92R, N52H/C140del/T225A, N52H/C198R/T225A, N52H/K92R, N57Y/Q100P,In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide has one or more amino acid modifications, for example, substitutions selected from N52H/N57Y/F138L/L203P, N52H/N57Y/Q100P, N52H/K92R, N52H/C140del/T225A, N52H/C198R/T225A, N52H /K92R, N57Y/Q100P,

N52Y/N57Y/H129P/C198R, N52H/L161P/C198R, N52K/L208P или N52H/I143T.N52Y/N57Y/H129P/C198R, N52H/L161P/C198R, N52K/L208P or N52H/I143T.

В некоторых воплощениях, одну или несколько модификаций выбирают из F120S/Y152H/N201S, E111del, Y33del, N168Q/N207Q, N84Q/N207Q, N155Q/N207Q, N119Q/N168Q, N119Q/N207Q, N119Q/N155Q, N84Q/N119Q, N84Q/N155Q/N168Q, N84Q/N168Q/N207Q, N84Q/N155H/N207Q, N155Q/N168Q/N207Q, N119Q N155Q/N168Q, N119Q/N168Q/N207Q, N84Q/N119Q/N207Q,In some embodiments, one or more modifications are selected from F120S/Y152H/N201S, E111del, Y33del, N168Q/N207Q, N84Q/N207Q, N155Q/N207Q, N119Q/N168Q, N119Q/N207Q, N119Q/N155Q, N84Q/N11 9Q, N84Q/ N155Q/N168Q, N84Q/N168Q/N207Q, N84Q/N155H/N207Q, N155Q/N168Q/N207Q, N119Q N155Q/N168Q, N119Q/N168Q/N207Q, N84Q/N119Q/N207Q,

N119Q/N155H/N207Q, N84Q/N119Q/N155Q, N84Q/N119Q/N155Q/N168Q, N84Q/N155Q/N168Q/N207Q, N84Q/N119Q/N155Q/N207Q, N84Q/N119Q/N155Q/N168Q/N207Q или F138L/L203P.N119Q/N155H/N207Q, N84Q/N119Q/N155Q, N84Q/N119Q/N155Q/N168Q, N84Q/N155Q/N168Q/N207Q, N84Q/N119Q/N155Q/N207Q, N84Q/N119Q/N155Q/N 168Q/N207Q or F138L/L203P.

В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL проявляет повышенную аффинность связывания при связывании с одним из эктодоменов CD28 или ICOS и проявляет пониженную аффинность связывания при связывании с другими эктодоменами из CD28 или ICOS по сравнению с референсным (например, немодифицированным) полипептидом ICOSL или полипептидом ICOSL дикого типа, например, включающим последовательность, представленную в SEQ ID NO: 32, 196 или 545.In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide exhibits increased binding affinity when binding to one of the ectodomains of CD28 or ICOS and exhibits reduced binding affinity when binding to other ectodomains of CD28 or ICOS compared to a reference (e.g., unmodified) ICOSL polypeptide or a wild-type ICOSL polypeptide, for example, including the sequence shown in SEQ ID NO: 32, 196 or 545.

В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL проявляет повышенную аффинность связывания с ICOS. В некоторых воплощениях одна или несколько аминокислотных замен находится в положении, соответствующем 16, 30, 42, 52, 54, 57, 75, 90, 92, 100, 102, 110, 113, 115, 120, 122, 133, 138, 143, 146, 152, 156, 158, 172, 194, 198, 203, 208, 221, 224 или 225. В некоторых воплощениях вариантный ICOSL включает одну или несколько аминокислотных замен, выбранных из C198R, D158G, E16V, E90A, F120S, F138L, F172S, H115R, H115X, I143T, I143V, I224V, K156M, K42E, K92R, L102R, L203P, L208P, N194D, N30D, N52A, N52D, N52G, N52H, N52K, N52L, N52M, N52Q, N52R, N52S, N52T, N52Y, N57F, N57H, N57K, N57L, N57M, N57P, N57S, N57V, N57W, N57Y, Q100A, Q100D, Q100E, Q100K, Q100M, Q100P, Q100P, Q100R, Q100S, Q100T, Q133H, R221I, R75Q, S54A, S54P, T113E, T225A, V110D, V122A, Y146C, Y152C или их консервативных аминокислотных замен. В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL имеет одну или несколько аминокислотных замен, выбранных из N52S, N52H, N52D, N52H/N57Y/Q100P, N52S/Y146C/Y152C, N52H/C198R, N52H/C198R/T225A, N52H/K92R, N57Y, N52S/C198R, N52S/T113E, S54A, N52D/S54P, N52K/L208P, N52H/I143T, N52S/R75Q/L203P, N52S/D158G, N52D/Q133H, N52H/N57Y/Q100R/V122A, N52H/N57Y/Q100R/F172S, N52H/N57Y/Q100R, N52S/N194D, N52H/N57Y/Q100R/L102R/V110D/H115R/C198R, N52S/E90A, N52S/F120S/I143V/I224V, N52H/N57Y/Q100R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/C198R, N52Y/N57Y/Q100P/F172S, E16V/N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/Y152C/K156M/F172S/C198R, N52S/H115R/F120S/I143V/C198R, N52H/N57Y/Q100P/C198R, N52H/N57Y/Q100P/H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100P/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100P/H115R, N52H/N57Y/Q100P/H115R/C198R, N52H/Q100R/C198R,In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide exhibits increased binding affinity for ICOS. In some embodiments, one or more amino acid substitutions are at a position corresponding to 16, 30, 42, 52, 54, 57, 75, 90, 92, 100, 102, 110, 113, 115, 120, 122, 133, 138, 143 , 146, 152, 156, 158, 172, 194, 198, 203, 208, 221, 224, or 225. In some embodiments, the variant ICOSL includes one or more amino acid substitutions selected from C198R, D158G, E16V, E90A, F120S, F138L , F172S, H115R, H115X, I143T, I143V, I224V, K156M, K42E, K92R, L102R, L203P, L208P, N194D, N30D, N52A, N52D, N52G, N52H, N52K, N52L, N52M, N52Q , N52R, N52S, N52T , N52Y, N57F, N57H, N57K, N57L, N57M, N57P, N57S, N57V, N57W, N57Y, Q100A, Q100D, Q100E, Q100K, Q100M, Q100P, Q100P, Q100R, Q100S, Q100T, Q133H , R221I, R75Q, S54A , S54P, T113E, T225A, V110D, V122A, Y146C, Y152C or their conservative amino acid substitutions. In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide has one or more amino acid substitutions selected from N52S, N52H, N52D, N52H/N57Y/Q100P, N52S/Y146C/Y152C, N52H/C198R, N52H/C198R/T225A, N52H/K92R, N57Y, N52S /C198R, N52S/T113E, S54A, N52D/S54P, N52K/L208P, N52H/I143T, N52S/R75Q/L203P, N52S/D158G, N52D/Q133H, N52H/N57Y/Q100R/V122A, N52H/N5 7Y/Q100R/F172S , N52H/N57Y/Q100R, N52S/N194D, N52H/N57Y/Q100R/L102R/V110D/H115R/C198R, N52S/E90A, N52S/F120S/I143V/I224V, N52H/N57Y/Q100R/F172 S/C198R, N52H/N57Y /Q100R/H115R/F172S/C198R, N52Y/N57Y/Q100P/F172S, E16V/N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/Y152C/K156M/F172S/C198R, N52S/H115R/F120S/I 143V/C198R, N52H/N57Y /Q100P/C198R, N52H/N57Y/Q100P/H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100P/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100P/H115R, N52H/N57Y/Q100P/H115R/C19 8R, N52H/Q100R/C198R ,

N52H/Q100R/H115X/F172S/C198R, N52H/Q100R/H115R/F172S/C198R,N52H/Q100R/H115X/F172S/C198R, N52H/Q100R/H115R/F172S/C198R,

N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S,N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S,

N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/C198R, Q100R, N52Y/F138L/L203P, N57Y/Q100R/C198R,N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/C198R, Q100R, N52Y/F138L/L203P, N57Y/Q100R/C198R,

N57Y/F138L/L203P, N57Y/Q100P, Q100R/F138L, N52H/N57Y/Q100R/H115R, N52H/N57Y/Q100R/F172S, N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/I224V, N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S,N57Y/F138L/L203P, N57Y/Q100P, Q100R/F138L, N52H/N57Y/Q100R/H115R, N52H/N57Y/Q100R/F172S, N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/I224V, N52H /N57Y/Q100R/H115R/ F172S,

- 58 044346- 58 044346

N52H/N57Y/Q100R/H115R/C198R, N52H/N57Y/Q100R/F172S/C198R,N52H/N57Y/Q100R/H115R/C198R, N52H/N57Y/Q100R/F172S/C198R,

N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/H115R/I143V/F172S/C198R,N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/H115R/I143V/F172S/C198R,

N52H/N57Y/Q100R/L102R, H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/H115R F172S/N194D,N52H/N57Y/Q100R/L102R, H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/H115R F172S/N194D,

N52H/N57Y/H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/H115R/C198R, N52H/N57Y/H115R,N52H/N57Y/H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/H115R/C198R, N52H/N57Y/H115R,

N52H/Q100R/H115R/I143T F172S, N52H/N57Y/Q100P/H115R/F172S,N52H/Q100R/H115R/I143T F172S, N52H/N57Y/Q100P/H115R/F172S,

E16V/N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/C198R, N52S/E90A/H115R,E16V/N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/C198R, N52S/E90A/H115R,

N30D/K42E/N52S/H115R/C198R/R221I, N30D/K42E/N52S/H115R/C198R,N30D/K42E/N52S/H115R/C198R/R221I, N30D/K42E/N52S/H115R/C198R,

N30D/K42E/N52S/H115R/F172S/N194D, N30D/K42E/N52S/H115R, N52S/E90A/H115R,N30D/K42E/N52S/H115R/F172S/N194D, N30D/K42E/N52S/H115R, N52S/E90A/H115R,

N30D/K42E/N52S/H115R, N52A/N57H/Q100S, N52A/N57Y/Q100A, N52D/Q100S, N52G/Q100A, N52M/N57H/Q100S, N52M/N57W/Q100P, N52Q/N57S/Q100A, N52R/N57L/Q100A, N52S/N57H/Q100E, N52S/N57L/Q100S, N52S/N57M/Q100S, N52S/N57Y/Q100M, N52T/N57H/Q100S, N52R/N57F/Q100P, N52R/N57F/Q100T, N52R/N57W/Q100K, N52R/N57W, N52G/N57P/Q100D, N52G/N57V/Q100G, N52G/N57V, N52L/N57V, N52S/N57L/Q100G или N52T/N57K/Q100P.N30D/K42E/N52S/H115R, N52A/N57H/Q100S, N52A/N57Y/Q100A, N52D/Q100S, N52G/Q100A, N52M/N57H/Q100S, N52M/N57W/Q100P, N52Q/N57S/Q100A , N52R/N57L/ Q100A, N52S/N57H/Q100E, N52S/N57L/Q100S, N52S/N57M/Q100S, N52S/N57Y/Q100M, N52T/N57H/Q100S, N52R/N57F/Q100P, N52R/N57F/Q100T, N52R /N57W/Q100K, N52R/N57W, N52G/N57P/Q100D, N52G/N57V/Q100G, N52G/N57V, N52L/N57V, N52S/N57L/Q100G or N52T/N57K/Q100P.

В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL проявляет повышенную аффинность связывания с ICOS и проявляет пониженную аффинностью связывания с CD28. В некоторых воплощениях одна или несколько дополнительных аминокислотных замен находятся в положении, соответствующем 52, 57, 80 100, 130, 152, 161 или 198. В некоторых воплощениях вариантный ICOSL включает одну или несколько аминокислотных замен, выбранных из N52S, N52H, N52Y, N52H, N57Y, L80P, Q100P Q100R, Q100K, V110D, S130G, Y152C, L161P, L161M, C198R, R221G или их консервативных аминокислотных замен. В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL имеет одну или несколько аминокислотных замен, выбранных из N57Y/Q100P, N52S/S130G/Y152C, N52S/Y152C, N52Y/N57Y/Y152C, N52H/L161P/C198R, N52H/L161P/C198R, N52S/L80P,In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide exhibits increased binding affinity for ICOS and exhibits reduced binding affinity for CD28. In some embodiments, one or more additional amino acid substitutions are at a position corresponding to 52, 57, 80, 100, 130, 152, 161, or 198. In some embodiments, the variant ICOSL includes one or more amino acid substitutions selected from N52S, N52H, N52Y, N52H , N57Y, L80P, Q100P Q100R, Q100K, V110D, S130G, Y152C, L161P, L161M, C198R, R221G or their conservative amino acid substitutions. In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide has one or more amino acid substitutions selected from N57Y/Q100P, N52S/S130G/Y152C, N52S/Y152C, N52Y/N57Y/Y152C, N52H/L161P/C198R, N52H/L161P/C198R, N52S/L80P ,

A20V/N52H/N57Y/Q100R/S109G, N52H/N57Y/R61S/Q100R/V110D/L173S,A20V/N52H/N57Y/Q100R/S109G, N52H/N57Y/R61S/Q100R/V110D/L173S,

N52H/N57Y/Q100R/V107I/V110D/S132F/I154F/C198R/R221G, Q37R/N52H/N57Y/Q100R/V110N/S142F/C198R/D217V/R221G, N52H/N57Y/Q100R/V110D/C198R,N52H/N57Y/Q100R/V107I/V110D/S132F/I154F/C198R/R221G, Q37R/N52H/N57Y/Q100R/V110N/S142F/C198R/D217V/R221G, N52H/N57Y/Q100R/V11 0D/C198R,

F27S/N52H/N57Y/V110N, S18R/N52S/F93L/I143V/R221G, A20T/N52D/Y146C/Q164L,F27S/N52H/N57Y/V110N, S18R/N52S/F93L/I143V/R221G, A20T/N52D/Y146C/Q164L,

N52H/N57Y/H94E/L96I/F120I/S126T/W153R/I218N, N52H/N57Y/Q100R/V110D/F172S/C198R,N52H/N57Y/H94E/L96I/F120I/S126T/W153R/I218N, N52H/N57Y/Q100R/V110D/F172S/C198R,

S25G/F27C/N52H/N57Y/Q100R/V110D/E135K/L173S/C198R, M10I/S13G/N52H/N57Y/D77G/V110A/H129P/I143V/F172S/V193M/C198R.S25G/F27C/N52H/N57Y/Q100R/V110D/E135K/L173S/C198R, M10I/S13G/N52H/N57Y/D77G/V110A/H129P/I143V/F172S/V193M/C198R.

В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL проявляет повышенную аффинность связывания с CD28. В некоторых воплощениях одна или несколько аминокислотных замен находится в положении, соответствующем 10, 11, 13, 16, 18, 20, 25, 27, 30, 36, 40, 41, 42, 52, 54, 57, 63, 70, 71, 72, 74, 77, 80, 81, 84, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 96, 98, 99, 100, 102, 107, 109, 110, 113, 114, 115, 117, 118, 119, 120, 121, 122, 126, 127, 129, 130, 132, 133, 135, 138, 139, 140, 143, 144, 146, 152, 153, 154, 155, 156, 158, 161, 166, 168, 169, 172, 173, 178, 190, 192, 193, 194, 198, 199, 201, 203, 207, 208, 209, 212, 218, 221, 224, 225 или 227.In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide exhibits increased binding affinity for CD28. In some embodiments, one or more amino acid substitutions are at a position corresponding to 10, 11, 13, 16, 18, 20, 25, 27, 30, 36, 40, 41, 42, 52, 54, 57, 63, 70, 71 , 72, 74, 77, 80, 81, 84, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 96, 98, 99, 100, 102, 107, 109, 110, 113, 114, 115, 117 , 118, 119, 120, 121, 122, 126, 127, 129, 130, 132, 133, 135, 138, 139, 140, 143, 144, 146, 152, 153, 154, 155, 156, 158, 161 , 166, 168, 169, 172, 173, 178, 190, 192, 193, 194, 198, 199, 201, 203, 207, 208, 209, 212, 218, 221, 224, 225 or 227.

В некоторых воплощениях вариантный ICOSL включает одну или несколько аминокислотных замен, выбранных из A117T, A20V, A71T, A91G, A91G, AE88D, C140del, C198R, D158G, D77G, D90K, E117G, E135K, E16V, E81A, E88D, E90A, F120I, F120S, F138L, F172S, F27C, F92Y, G72R, H115R, H115X, H129P, H94E, I118V, I127T, I143T, I143V, I154F, I218N, I218T, I224V, K156M, K169E, K36G, K42E, K89R, K92R, K93R, L102R, L161P, L166Q, L173S, L203F, L203P, L208P, L209P, L40M, L70Q, L70R, L74Q, L80P, L96I, L98F, M10I, M10V, N115Q, N119Q, N122S, N144D, N155X, N168Q, N168X, N178S, N194D, N207Q, N207X, N227K, N25S, N30D, N52A, N52D, N52G, N52H, N52K, N52L, N52M, N52Q, N52R, N52S, N52T, N52V, N52Y, N57A, N57F, N57H, N57L, N57M, N57S, N57V, N57W, N57Y, N63S, N84Q, Q100A, Q100E, Q100G, Q100K, Q100M, Q100N, Q100P, Q100R, Q100S, Q100T, Q100V, Q133H, R221G, R221I, S109G, S109N, S114T, S121G, S126R, S126T, S130G, S132F, S13G, S18R, S192G, S212G, S25G, S54A, S54P, S99G, T113E, T120S, T130A, T139S, T190A, T199S, T225A, T41I, V107I, V110A, V110D, V11E, V122A, V122M, V193M, V210A, W153R, Y146C, Y152C, Y152H или их консервативных аминокислотных замен. В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL имеет одну или несколько аминокислотных замен, выбранных из N52S, N52H, N52D, N52Y/N57Y/F138L/L203P, N52H/N57Y/Q100P, N52S/Y146C/Y152C, N52H/C198R, N52H/C140del/T225A, N52H/C198R/T225A, N52H/K92R, N52H/S99G, N57Y, N57Y/Q100P, N52S/S130G/Y152C, N52S/Y152C, N52S/C198R, N52Y/N57Y/Y152C, N52Y/N57Y/H129P/C198R, N52H/L161P/C198R, N52S/T113E, S54A, N52D/S54P, N52K/L208P, N52S/Y152H, N52H/I143T, N52S/L80P, N52S/D158G, N52D/Q133H, L70Q/A91G/N144D, L70Q/A91G/E117G/I118V/T120S/T130A, L70R/A91G/I118V/T120S/T130A/T199S,In some embodiments, the variant ICOSL includes one or more amino acid substitutions selected from A117T, A20V, A71T, A91G, A91G, AE88D, C140del, C198R, D158G, D77G, D90K, E117G, E135K, E16V, E81A, E88D, E90A, F120I, F120S, F138L, F172S, F27C, F92Y, G72R, H115R, H115X, H129P, H94E, I118V, I127T, I143T, I143V, I154F, I218N, I218T, I224V, K156M, K169E, K36G, K 42E, K89R, K92R, K93R, L102R, L161P, L166Q, L173S, L203F, L203P, L208P, L209P, L40M, L70Q, L70R, L74Q, L80P, L96I, L98F, M10I, M10V, N115Q, N119Q, N122S, N144D, N155X , N168Q, N168X, N178S, N194D, N207Q, N207X, N227K, N25S, N30D, N52A, N52D, N52G, N52H, N52K, N52L, N52M, N52Q, N52R, N52S, N52T, N52V, N52Y, N57A, N57F, N57H, N57L, N57 M, N57S, N57V, N57W, N57Y, N63S, N84Q, Q100A, Q100E, Q100G, Q100K, Q100M, Q100N, Q100P, Q100R, Q100S, Q100T, Q100V, Q133H, R221G, R221I, S109G, S109N, S 114T, S121G, S126R, S126T, S130G, S132F, S13G, S18R, S192G, S212G, S25G, S54A, S54P, S99G, T113E, T120S, T130A, T139S, T190A, T199S, T225A, T41I, V107I, V110A, V110D, V11 E, V122A, V122M, V193M, V210A, W153R, Y146C, Y152C, Y152H or their conservative amino acid substitutions. In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide has one or more amino acid substitutions selected from N52S, N52H, N52D, N52Y/N57Y/F138L/L203P, N52H/N57Y/Q100P, N52S/Y146C/Y152C, N52H/C198R, N52H/C140del/T225A , N52H/C198R/T225A, N52H/K92R, N52H/S99G, N57Y, N57Y/Q100P, N52S/S130G/Y152C, N52S/Y152C, N52S/C198R, N52Y/N57Y/Y152C, N52Y/N57Y/H1 29P/C198R, N52H /L161P/C198R, N52S/T113E, S54A, N52D/S54P, N52K/L208P, N52S/Y152H, N52H/I143T, N52S/L80P, N52S/D158G, N52D/Q133H, L70Q/A91G/N144D, L7 0Q/A91G/E117G /I118V/T120S/T130A, L70R/A91G/I118V/T120S/T130A/T199S,

L70Q/E81A/A91G/I118V/T120S/I127T/ T130A, N63S/L70Q/A91G/S114T/I118V/T120S/T130A, T41I/A91G, E88D/K89R/D90K/A91G/F92Y/K93R/N122S/N178S, E88D/K89R/D90K/A91G/F92Y/K93R,L70Q/E81A/A91G/I118V/T120S/I127T/ T130A, N63S/L70Q/A91G/S114T/I118V/T120S/T130A, T41I/A91G, E88D/K89R/D90K/A91G/F92Y/K93R/N122 S/N178S, E88D/ K89R/D90K/A91G/F92Y/K93R,

AE88D/K89R/D90K/A91G/F92Y/K93R, K36G/L40M, N52H/N57Y/Q100R/V122A,AE88D/K89R/D90K/A91G/F92Y/K93R, K36G/L40M, N52H/N57Y/Q100R/V122A,

N52H/N57Y/Q100R/F172S, N52H/N57Y/Q100R, N52S/F120S/N227K, N52S/N194D, N52S/F120S,N52H/N57Y/Q100R/F172S, N52H/N57Y/Q100R, N52S/F120S/N227K, N52S/N194D, N52S/F120S,

N52S/G72R, N52S/A71T/A117T/T190A/C198R,N52S/G72R, N52S/A71T/A117T/T190A/C198R,

N52H/N57Y/Q100R/V107I/V110D/S132F/I154F/C198R/R221G, E16V/N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/Y152C/K156M/C198R, N52H/N57Y/Q100R/V110D/C198R,N52H/N57Y/Q100R/V107I/V110D/S132F/I154F/C198R/R221G, E16V/N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/Y152C/K156M/C198R, N52H/N57Y/Q100R/V11 0D/C198R,

- 59 044346- 59 044346

V11E/N30D/N52H/N57Y/H94E/L96I/L98F/N194D/V210A/I218T, N52S/H94E/L96I/V122M,V11E/N30D/N52H/N57Y/H94E/L96I/L98F/N194D/V210A/I218T, N52S/H94E/L96I/V122M,

N52H/N57Y/H94E/L96I/F120I/S126T/W153R/I218N, M10V/S18R/N30D/N52S/S126R/T139S/L203F,N52H/N57Y/H94E/L96I/F120I/S126T/W153R/I218N, M10V/S18R/N30D/N52S/S126R/T139S/L203F,

S25G/N30D/N52S/F120S/N227K, N52H/N57Y/Q100R/V110D/F172S/C198R,S25G/N30D/N52S/F120S/N227K, N52H/N57Y/Q100R/V110D/F172S/C198R,

S25G/F27C/N52H/N57Y/Q100R/V110D/E135K/L173S/C198R, N52H/N57Y/V110A/C198R/R221I,S25G/F27C/N52H/N57Y/Q100R/V110D/E135K/L173S/C198R, N52H/N57Y/V110A/C198R/R221I,

M10I/S13G/N52H/N57Y/D77G/V110A/H129P/I143V/F172S/V193M,C198R,M10I/S13G/N52H/N57Y/D77G/V110A/H129P/I143V/F172S/V193M,C198R,

N52H/N57Y/Q100R/L102R/V110D/H115R/C198R, N52H/N57Y/Q100R/V110D/N144D/F172S/C198R,N52H/N57Y/Q100R/L102R/V110D/H115R/C198R, N52H/N57Y/Q100R/V110D/N144D/F172S/C198R,

N52S/H94E/L98F/Q100R, N52S/E90A, N52S/F120S/I143V/I224V, N52H/N57Y/Q100R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/H115R/ F172S/C198R, N52Y/N57Y/Q100P/F172S,N52S/H94E/L98F/Q100R, N52S/E90A, N52S/F120S/I143V/I224V, N52H/N57Y/Q100R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/H115R/ F172S/C198R, N52Y/N 57Y/Q100P/F172S,

E16V/N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/Y152C/K156M/F172S/C198R, N52S/H115R/F120S/I143V/C198R, N52H/N57Y/Q100P/C198R, N52H/N57Y/Q100P/H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100P/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100P/H115R, N52H/N57Y/Q100P/H115R/C198R, N52H/Q100R/C198R,E16V/N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/Y152C/K156M/F172S/C198R, N52S/H115R/F120S/I143V/C198R, N52H/N57Y/Q100P/C198R, N52H/N57Y/Q100 P/H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100P/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100P/H115R, N52H/N57Y/Q100P/H115R/C198R, N52H/Q100R/C198R,

N52H/Q100R/H115R/F172S, N52H/Q100R/H115X/F172S/C198R, N52H/Q100R/H115R/F172S/C198R,N52H/Q100R/H115R/F172S, N52H/Q100R/H115X/F172S/C198R, N52H/Q100R/H115R/F172S/C198R,

N52H/N57Y/Q100R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/C198R,N52H/N57Y/Q100R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/C198R,

N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S, N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/C198R,N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S, N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/C198R,

N52S/H94E/L96I/S109N/L166Q/, N52H/N57Y/Q100R/C198R, N52H/N57Y/L74Q/V110D/S192G,N52S/H94E/L96I/S109N/L166Q/, N52H/N57Y/Q100R/C198R, N52H/N57Y/L74Q/V110D/S192G,

N52H/Q100R, N52H/S121G/C198R, A20V/N52H/N57Y/Q100R/S109G, N52H/N57Y/Q100P/C198R,N52H/Q100R, N52H/S121G/C198R, A20V/N52H/N57Y/Q100R/S109G, N52H/N57Y/Q100P/C198R,

N52H/N57Y/Q100R/V110D/C198R/S212G, L70Q/A91G/I118A/T120S/T130A/K169E, Q100R,N52H/N57Y/Q100R/V110D/C198R/S212G, L70Q/A91G/I118A/T120S/T130A/K169E, Q100R,

N52Y/F138L/L203P, N57Y/Q100R/C198R, N57Y/F138L/L203P, N52H, N57Y, N57Y/Q100P,N52Y/F138L/L203P, N57Y/Q100R/C198R, N57Y/F138L/L203P, N52H, N57Y, N57Y/Q100P,

N52H/N57Y/Q100R/H115R, N52H/N57Y/Q100R/F172S, N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/I224V,N52H/N57Y/Q100R/H115R, N52H/N57Y/Q100R/F172S, N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/I224V,

N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S, N52H/N57Y/Q100R/H115R/C198R, N52H/N57Y/Q100R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/H115R/I143V/F172S/C198R,N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S, N52H/N57Y/Q100R/H115R/C198R, N52H/N57Y/Q100R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/C198R, N52H /N57Y/Q100R/H115R/ I143V/F172S/C198R,

N52H/N57Y/Q100R/L102R H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/H115R F172S/N194D,N52H/N57Y/Q100R/L102R H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/H115R F172S/N194D,

N52H/N57Y/H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/H115R/C198R, N52H/N57Y/H115R,N52H/N57Y/H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/H115R/C198R, N52H/N57Y/H115R,

N52H/Q100R/H115R/I143T F172S, N52H/N57Y/Q100P/H115R/F172S,N52H/Q100R/H115R/I143T F172S, N52H/N57Y/Q100P/H115R/F172S,

E16V/N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/C198R, N30D/K42E/N52S/H115R/C198R R221I,E16V/N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/C198R, N30D/K42E/N52S/H115R/C198R R221I,

N52S/E90A/H115R, N30D/K42E/N52S/H115R, N52S/H115R/F172S/C198R, N119Q, N207Q, N52Q/N207X, N168X/N207X, N52Q/N168Q, N84Q/N207Q, N119Q N155X, N52Q/N119Q, N52Q/N84Q/N207Q, N119Q/N155Q/N168Q, N52H/N84Q/N119Q, N52Q/N84Q/N155X/N168X, N52A/N57F/Q100S,N52S/E90A/H115R, N30D/K42E/N52S/H115R, N52S/H115R/F172S/C198R, N119Q, N207Q, N52Q/N207X, N168X/N207X, N52Q/N168Q, N84Q/N207Q, N119Q N155X, N52Q/N119Q, N52Q /N84Q/N207Q, N119Q/N155Q/N168Q, N52H/N84Q/N119Q, N52Q/N84Q/N155X/N168X, N52A/N57F/Q100S,

N52A/N57H/Q100S, N52A/N57Y/Q100A, N52D/N57A/Q100A, N52D/Q100S, N52G/Q100A, N52H/Q100A, N52M/N57H/Q100S, N52M/N57W/Q100P, N52Q/N57F, N52Q/N57S/Q100A, N52R/N57L/Q100A,N52A/N57H/Q100S, N52A/N57Y/Q100A, N52D/N57A/Q100A, N52D/Q100S, N52G/Q100A, N52H/Q100A, N52M/N57H/Q100S, N52M/N57W/Q100P, N52Q/N57F , N52Q/N57S/ Q100A, N52R/N57L/Q100A,

N52R/N57Y/Q100P, N52R/N57Y/Q100S, N52S/N57A/Q100A, N52S/N57H/Q100E, N52S/N57L/Q100S,N52R/N57Y/Q100P, N52R/N57Y/Q100S, N52S/N57A/Q100A, N52S/N57H/Q100E, N52S/N57L/Q100S,

N52S/N57M/Q100S, N52S/N57Y/Q100S, N52S/N57Y/Q100M, N52S/N57Y/Q100V, N52T/N57H/Q100S,N52S/N57M/Q100S, N52S/N57Y/Q100S, N52S/N57Y/Q100M, N52S/N57Y/Q100V, N52T/N57H/Q100S,

N52T/N57H/Q100A, N52T/N57Y/Q100A, N52V/N57L/Q100A, N52H/N57Y/Q100K, N52K/N57Y/Q100R,N52T/N57H/Q100A, N52T/N57Y/Q100A, N52V/N57L/Q100A, N52H/N57Y/Q100K, N52K/N57Y/Q100R,

N52L/N57H/Q100R, N52R/N57F/Q100N, N52R/N57F/Q100P, N52R/N57F/Q100R, N52R/N57F/Q100T,N52L/N57H/Q100R, N52R/N57F/Q100N, N52R/N57F/Q100P, N52R/N57F/Q100R, N52R/N57F/Q100T,

N52R/N57L/Q100S, N52R/N57W/Q100K, N52R/N57W, N52G/N57V, N52L/N57V, N52S/N57L/Q100G или N52T/N57K/Q100P.N52R/N57L/Q100S, N52R/N57W/Q100K, N52R/N57W, N52G/N57V, N52L/N57V, N52S/N57L/Q100G or N52T/N57K/Q100P.

В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL проявляет повышенную аффинность связывания с CD28 и проявляет пониженную аффинность связывания с ICOS. В некоторых воплощениях одна или несколько аминокислотных замен находится в положении, соответствующем 52, 75 или 203. В некоторых воплощениях вариантный ICOSL включает одну или несколько аминокислотных замен, выбранных из N52S, R75Q, L203F или L203P. В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL имеет аминокислотные замены N52S/R75Q/L203P.In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide exhibits increased binding affinity for CD28 and exhibits reduced binding affinity for ICOS. In some embodiments, the one or more amino acid substitutions are at a position corresponding to 52, 75, or 203. In some embodiments, the variant ICOSL includes one or more amino acid substitutions selected from N52S, R75Q, L203F, or L203P. In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide has the amino acid substitutions N52S/R75Q/L203P.

В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL имеет одну или более аминокислотную модификацию, например, замену в референсном ICOSL или специфическом связывающем фрагменте в соответствующем положении(ях) 16, 30, 42, 52, 57, 90, 100, 102, 110, 115, 120, 122, 138, 143, 152, 156, 172, 194, 198, 203, 221 или 224 относительно нумерации SEQ ID NO: 32. В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL имеет одну или несколько аминокислотных модификаций, например, замен, выбранных из E16V, N30D, K42E, N52H, N52Y, N52S, N57Y, E90A, Q100R, Q100P, L102R, V110D, H115R, F120S, V122A, F138L, I143V, I143T, H152C, K156M, F172S, N194D, C198R, L203P, R221I или I224V. В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL имеет одну или более аминокислотную модификацию, например, замену в референсном ICOSL или специфическом связывающем фрагменте в соответствующем положении(ях) 115, 172 или 198 относительно нумерации SEQ ID NO: 32. В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL имеет одну или несколько аминокислотных модификаций, например, замен, выбранных из H115R, F172S или C198R. В некоторых воплощениях одна или несколько аминокислотных модификаций, например, замен, представляют собой N52H/N57Y/Q100R/H115R/C198R, N52H/N57Y/Q100R/F172S/C198R,In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide has one or more amino acid modification, for example, a substitution in the reference ICOSL or specific binding fragment at the corresponding position(s) 16, 30, 42, 52, 57, 90, 100, 102, 110, 115, 120 , 122, 138, 143, 152, 156, 172, 194, 198, 203, 221, or 224 relative to SEQ ID NO: 32. In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide has one or more amino acid modifications, such as substitutions selected from E16V , N30D, K42E, N52H, N52Y, N52S, N57Y, E90A, Q100R, Q100P, L102R, V110D, H115R, F120S, V122A, F138L, I143V, I143T, H152C, K156M, F172S, N194D, C 198R, L203P, R221I or I224V . In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide has one or more amino acid modification, for example, a substitution in the reference ICOSL or specific binding fragment at the corresponding position(s) 115, 172, or 198 relative to the numbering of SEQ ID NO: 32. In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide has one or multiple amino acid modifications, for example substitutions selected from H115R, F172S or C198R. In some embodiments, one or more amino acid modifications, such as substitutions, are N52H/N57Y/Q100R/H115R/C198R, N52H/N57Y/Q100R/F172S/C198R,

N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/H115R/I143V/F172S/C198R,N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/H115R/I143V/F172S/C198R,

N52H/N57Y/Q100R/L102R/H115R/F172S/C198R, N52H/V122A/F172S/C198R,N52H/N57Y/Q100R/L102R/H115R/F172S/C198R, N52H/V122A/F172S/C198R,

N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/N194D, N52H/N57Y/H115R/F172S/C198R,N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/N194D, N52H/N57Y/H115R/F172S/C198R,

N52H/N57Y/Q100R/H115R/C198R, N52H/N57Y/H115R, N52H/N57Y/Q100R/H115R,N52H/N57Y/Q100R/H115R/C198R, N52H/N57Y/H115R, N52H/N57Y/Q100R/H115R,

N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/I224V, N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S, N52H/N57Y/Q100R/F172S, N52H/Q100R/H115R/I143T/F172S, N52H/N57Y/Q100P/H115R/F172S, N52Y/N57Y/Q100P/F172S,N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/I224V, N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S, N52H/N57Y/Q100R/F172S, N52H/Q100R/H115R/I143T/F172S, N52H/N57Y /Q100P/H115R/F172S, N52Y/N57Y/Q100P/F172S,

- 60 044346- 60 044346

E16V/N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/C198R,E16V/N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/C198R,

E16V/N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/Y152C/K156M/F172S/C198R, N52S/E90A/H115R, N30D/K42EE16V/N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/Y152C/K156M/F172S/C198R, N52S/E90A/H115R, N30D/K42E

N52S/H115R, N30D/K42E/N52S/H115R/C198R/R221I, N30D/K42E/N52S/H115R/C198R,N52S/H115R, N30D/K42E/N52S/H115R/C198R/R221I, N30D/K42E/N52S/H115R/C198R,

N30D/K42E/N52S/H115R/F172S/N194D, N52S/H115R/F120S/I143V/C198R, N52S/H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100P/C198R, N52H/N57Y/Q100P H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100P/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100P/H115R, N52H/N57Y/Q100P/H115R/C198R, N52H/Q100R/C198R,N30D/K42E/N52S/H115R/F172S/N194D, N52S/H115R/F120S/I143V/C198R, N52S/H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100P/C198R, N52H/N57Y/Q100P H115R/F172S/C198R, N52H /N57Y/Q100P/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100P/H115R, N52H/N57Y/Q100P/H115R/C198R, N52H/Q100R/C198R,

N52H/Q100R/H115R/F172S, N52H/Q100R/F172S/C198R, N52H/Q100R/H115R/F172S/C198R илиN52H/Q100R/H115R/F172S, N52H/Q100R/F172S/C198R, N52H/Q100R/H115R/F172S/C198R or

N52H/N57Y/Q100R/F172S/C198R. В некоторых воплощениях вариантные полипептиды ICOSL демонстрируют потенциально повышенную растворимость белка или повышенную экспрессию белка (мутации растворимости) относительно референсного (например, немодифицированного) полипептида ICOSL или полипептида ICOSL дикого типа.N52H/N57Y/Q100R/F172S/C198R. In some embodiments, variant ICOSL polypeptides exhibit potentially increased protein solubility or increased protein expression (solubility mutations) relative to a reference (eg, unmodified) ICOSL polypeptide or wild-type ICOSL polypeptide.

В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL включает любую из последовательностей внеклеточного домена (ECD), представленную в SEQ ID NO: 435-470. В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL включает полипептидную последовательность, которая имеет, по меньшей мере, 90% идентичности, по меньшей мере, 91% идентичности, по меньшей мере, 92% идентичности, по меньшей мере, 93% идентичности, по меньшей мере, 94% идентичности, по меньшей мере, 95% идентичности, такие как, по меньшей мере, 96% идентичности, 97% идентичности, 98% идентичности или 99% идентичности с любым из внеклеточных доменов (ECD), предлагаемых в SEQ ID NO: 435-470, и включает аминокислотную модификацию(ии), например, замену(ы) отсутствующую в референсном (например, немодифицированном) полипептиде ICOSL или полипептиде ICOSL дикого типа. В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL включает специфический связывающий фрагмент любой из последовательностей внеклеточного домена (ECD), предлагаемых в SEQ ID NO: 435-470, и включает аминокислотную модификацию(ии), например, замену(ы) отсутствующую в референсном (например, немодифицированном) полипептиде ICOSL или полипептиде ICOSL дикого типа.In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide includes any of the extracellular domain (ECD) sequences set forth in SEQ ID NOs: 435-470. In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide includes a polypeptide sequence that has at least 90% identity, at least 91% identity, at least 92% identity, at least 93% identity, at least 94 % identity, at least 95% identity, such as at least 96% identity, 97% identity, 98% identity, or 99% identity to any of the extracellular domains (ECDs) provided in SEQ ID NO: 435- 470, and includes amino acid modification(s), such as substitution(s) not present in the reference (eg, unmodified) ICOSL polypeptide or wild-type ICOSL polypeptide. In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide includes a specific binding fragment of any of the extracellular domain (ECD) sequences set forth in SEQ ID NO: 435-470, and includes amino acid modification(s), e.g., substitution(s) not present in the reference (e.g., unmodified ) ICOSL polypeptide or wild-type ICOSL polypeptide.

В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL проявляет повышенную аффинность связывания с CD28 и проявляет пониженную аффинность связывания с ICOS. В некоторых воплощениях одна или несколько аминокислотных замен находится в положении, соответствующем 16, 30, 42, 52, 54, 57, 90, 92, 100, 102, 110, 113, 115, 120, 122, 133, 138, 143, 146, 152, 156, 158, 172, 194, 198, 203, 208, 212, 224 или 225. В некоторых воплощениях вариантный ICOSL включает одну или несколько аминокислотных замен, выбранных из C198R, D158G, E16V, E90A, F120S, F138L, F172S, H115R, I143V, I224V, K156M, K42E, K92R, L102R, L203P, L208P, N194D, N30D, N52A, N52D, N52G, N52H, N52K, N52L, N52M, N52Q, N52R, N52S, N52T, N52Y, N57F, N57H, N57L, N57M, N57S, N57V, N57W, N57Y, Q100A, Q100E, Q100G, Q100K, Q100M, Q100P, Q100R, Q100S, Q133H, S212G, S54A, S54P, T113E, T225A, V110D, V122A, Y146C, Y152C или их консервативных аминокислотных замен. В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL имеет одну или несколько аминокислотных замен, выбранных из N52A/N57Y/Q100A, N52D/Q100S, N52G/Q100A, N52M/N57H/Q100S, N52M/N57W/Q100P,In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide exhibits increased binding affinity for CD28 and exhibits reduced binding affinity for ICOS. In some embodiments, one or more amino acid substitutions are at a position corresponding to 16, 30, 42, 52, 54, 57, 90, 92, 100, 102, 110, 113, 115, 120, 122, 133, 138, 143, 146 , 152, 156, 158, 172, 194, 198, 203, 208, 212, 224, or 225. In some embodiments, the variant ICOSL includes one or more amino acid substitutions selected from C198R, D158G, E16V, E90A, F120S, F138L, F172S , H115R, I143V, I224V, K156M, K42E, K92R, L102R, L203P, L208P, N194D, N30D, N52A, N52D, N52G, N52H, N52K, N52L, N52M, N52Q, N52R, N52S, N52T, N5 2Y, N57F, N57H , N57L, N57M, N57S, N57V, N57W, N57Y, Q100A, Q100E, Q100G, Q100K, Q100M, Q100P, Q100R, Q100S, Q133H, S212G, S54A, S54P, T113E, T225A, V110D, V1 22A, Y146C, Y152C or their conservative amino acid substitutions. In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide has one or more amino acid substitutions selected from N52A/N57Y/Q100A, N52D/Q100S, N52G/Q100A, N52M/N57H/Q100S, N52M/N57W/Q100P,

N52Q/N57S/Q100A, N52R/N57L/Q100A, N52S/N57H/Q100E, N52S/N57L/Q100S, N52S/N57M/Q100S, N52S/N57Y/Q100M, N52T/N57H/Q100S, N52R/N57F/Q100P, N52R/N57F/Q100T, N52R/N57W/Q100K, N52R/N57W, N52G/N57V, N52L/N57V, N52S/N57L/Q100G, N52T/N57K/Q100P, N52S, N52H, N52D, N52Y/N57Y/F138L/L203P, N52H/N57Y/Q100P, N52S/Y146C/Y152C, N52H/C198R, N52H/C198R/T225A, N52H/K92R, N57Y, N52S/C198R, N52S/T113E, S54A, N52D/S54P, N52K/L208P, N52H/I143T, N52S/D158G, N52D/Q133H, N52H/N57Y/Q100R/V110D/C198R/S212G, N52H/N57Y/Q100R/V122A, N52H/N57Y/Q100R/F172S, N52H/N57Y/Q100R, N52S/N194D,N52Q/N57S/Q100A, N52R/N57L/Q100A, N52S/N57H/Q100E, N52S/N57L/Q100S, N52S/N57M/Q100S, N52S/N57Y/Q100M, N52T/N57H/Q100S, N52R/N57F/ Q100P, N52R/ N57F/Q100T, N52R/N57W/Q100K, N52R/N57W, N52G/N57V, N52L/N57V, N52S/N57L/Q100G, N52T/N57K/Q100P, N52S, N52H, N52D, N52Y/N57Y/F138L/L2 03P,N52H/ N57Y/Q100P, N52S/Y146C/Y152C, N52H/C198R, N52H/C198R/T225A, N52H/K92R, N57Y, N52S/C198R, N52S/T113E, S54A, N52D/S54P, N52K/L208P, N52 H/I143T, N52S/ D158G, N52D/Q133H, N52H/N57Y/Q100R/V110D/C198R/S212G, N52H/N57Y/Q100R/V122A, N52H/N57Y/Q100R/F172S, N52H/N57Y/Q100R, N52S/N194D,

N52H/N57Y/Q100R/L102R/V110D/H115R/C198R, N52S/E90A, N52S/F120S/I143V/I224V,N52H/N57Y/Q100R/L102R/V110D/H115R/C198R, N52S/E90A, N52S/F120S/I143V/I224V,

N52H/N57Y/Q100R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/C198R, N52Y/N57Y/Q100P/F172S, E16V/N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/Y152C/K156M/F172S/C198R, N52S/H115R/F120S/I143V/C198R, N52H/N57Y/Q100P/C198R, N52H/N57Y/Q100P/H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100P/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100P/H115R, N52H/N57Y/Q100P/H115R/C198R, N52H/Q100R/C198R,N52H/N57Y/Q100R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/C198R, N52Y/N57Y/Q100P/F172S, E16V/N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/Y152C /K156M/F172S/C198R, N52S/H115R/F120S/I143V/C198R, N52H/N57Y/Q100P/C198R, N52H/N57Y/Q100P/H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100P/F172S/C198R, N52H/N57Y /Q100P/H115R, N52H/ N57Y/Q100P/H115R/C198R, N52H/Q100R/C198R,

N52H/Q100R/H115R/F172S, N52H/Q100R/H115X/F172S/C198R, N52H/Q100R/H115R/F172S/C198R,N52H/Q100R/H115R/F172S, N52H/Q100R/H115X/F172S/C198R, N52H/Q100R/H115R/F172S/C198R,

N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S,N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S,

N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/C198R, Q100R, N52Y/F138L/L203P, N57Y/Q100R/C198R,N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/C198R, Q100R, N52Y/F138L/L203P, N57Y/Q100R/C198R,

N57Y/F138L/L203P, N52H, N57Y, N57Y/Q100P, Q100R/F138L, N52H/N57Y/Q100R/H115R,N57Y/F138L/L203P, N52H, N57Y, N57Y/Q100P, Q100R/F138L, N52H/N57Y/Q100R/H115R,

N52H/N57Y/Q100R/F172S, N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/I224V, N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S, N52H/N57Y/Q100R/H115R/C198R, N52H/N57Y/Q100R/F172S/C198R,N52H/N57Y/Q100R/F172S, N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/I224V, N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S, N52H/N57Y/Q100R/H115R/C198R, N52H/N57Y/ Q100R/F172S/C198R,

N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/H115R/I143V/F172S/C198R,N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/H115R/I143V/F172S/C198R,

N52H/N57Y/Q100R/L102R H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/H115R F172S/N194D,N52H/N57Y/Q100R/L102R H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/H115R F172S/N194D,

N52H/N57Y/H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/H115R/C198R, N52H/N57Y/H115R,N52H/N57Y/H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/H115R/C198R, N52H/N57Y/H115R,

N52H/Q100R/H115R/I143T/F172S, N52H/N57Y/Q100P/H115R/F172S,N52H/Q100R/H115R/I143T/F172S, N52H/N57Y/Q100P/H115R/F172S,

E16V/N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/C198R, N52S/E90A/H115R, N52S/E90A/H115R,E16V/N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/C198R, N52S/E90A/H115R, N52S/E90A/H115R,

N30D/K42E/N52S/H115R.N30D/K42E/N52S/H115R.

В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL имеет одну или более аминокислотную модификацию, например, замену в референсном ICOSL или специфическом связывающем фрагменте вIn some embodiments, the variant ICOSL polypeptide has one or more amino acid modifications, such as a substitution in the reference ICOSL or a specific binding fragment in

- 61 044346 соответствующем положении(ях) 52, 57, 100, 138, 198 или 203 относительно нумерации SEQ ID NO: 32. В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL имеет одну или несколько аминокислотных модификаций, например, замен, выбранных из N52H, N52Y, N57Y, Q100R, Q100P, F138L, C198R или L203P. В некоторых воплощениях одна или несколько аминокислотных модификаций, например, замен, представляют собой Q100R, F138L/L203P, N52Y/F138L/L203P, N57Y/Q100R/C198R, N57Y/F138L/L203P, N52H, N57Y, N57Y/Q100P, Q100R/F138L, или L203P.- 61 044346 corresponding to position(s) 52, 57, 100, 138, 198 or 203 relative to the numbering of SEQ ID NO: 32. In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide has one or more amino acid modifications, for example, substitutions selected from N52H, N52Y, N57Y, Q100R, Q100P, F138L, C198R or L203P. In some incarnations, one or more amino acid modifications, for example, substitutions, are Q100R, F138L/L203P, N52Y/F138L/L203P, N57Y/Q100R/C198R, N57Y/F138L/L203P, N52H, N57Y/Q100P, Q100R/F1 38L , or L203P.

В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL включает любую из последовательностей внеклеточного домена (ECD), предлагаемых в SEQ ID NO: 427-433. В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL включает полипептидную последовательность, которая имеет, по меньшей мере, 90% идентичности, по меньшей мере, 91% идентичности, по меньшей мере, 92% идентичности, по меньшей мере, 93% идентичности, по меньшей мере, 94% идентичности, по меньшей мере, 95% идентичности, такие как, по меньшей мере, 96% идентичности, 97% идентичности, 98% идентичности или 99% идентичности с любым из внеклеточных доменов (ECD), предлагаемых в SEQ ID NO: 435-470, и включает аминокислотную модификацию(ии), например, замену(ы) отсутствующую в референсном (например, немодифицированном) полипептиде ICOSL или полипептиде ICOSL дикого типа. В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL включает специфический связывающий фрагмент любой из последовательностей внеклеточного домена (ECD), предлагаемых в SEQ ID NO: 427-433, и включает аминокислотную модификацию(ии), например, замену(ы) отсутствующую в референсном (например, немодифицированном) полипептиде ICOSL или полипептиде ICOSL дикого типа. В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL включает последовательность IgV, представленную в SEQ ID NO: 434. В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL включает полипептидную последовательность, которая имеет, по меньшей мере, 90% идентичности, по меньшей мере, 91% идентичности, по меньшей мере, 92% идентичности, по меньшей мере, 93% идентичности, по меньшей мере, 94% идентичности, по меньшей мере, 95% идентичности, например, по меньшей мере, 96% идентичности, 97% идентичности, 98% идентичности или 99% идентичности с последовательностью IgV, представленной в SEQ ID NO: 434, и включает аминокислотную модификацию(ии), например, замену(ы), отсутствующую в референсном (например, немодифицированном) полипептиде ICOSL или полипептиде ICOSL дикого типа. В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL включает специфический связывающий фрагмент последовательности IgV, представленный в SEQ ID NO: 434, и включает аминокислотную замену(ы), не присутствующую в референсном (например, немодифицированном) полипептиде ICOSL или полипептиде ICOSL дикого типа.In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide includes any of the extracellular domain (ECD) sequences set forth in SEQ ID NOs: 427-433. In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide includes a polypeptide sequence that has at least 90% identity, at least 91% identity, at least 92% identity, at least 93% identity, at least 94 % identity, at least 95% identity, such as at least 96% identity, 97% identity, 98% identity, or 99% identity to any of the extracellular domains (ECDs) provided in SEQ ID NO: 435- 470, and includes amino acid modification(s), such as substitution(s) not present in the reference (eg, unmodified) ICOSL polypeptide or wild-type ICOSL polypeptide. In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide includes a specific binding fragment of any of the extracellular domain (ECD) sequences set forth in SEQ ID NO: 427-433, and includes amino acid modification(s), e.g., substitution(s) not present in the reference (e.g., unmodified ) ICOSL polypeptide or wild-type ICOSL polypeptide. In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide includes the IgV sequence set forth in SEQ ID NO: 434. In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide includes a polypeptide sequence that has at least 90% identity, at least 91% identity, at least , 92% identical, at least 93% identical, at least 94% identical, at least 95% identical, for example, at least 96% identical, 97% identical, 98% identical, or 99% identical with the IgV sequence set forth in SEQ ID NO: 434 and includes amino acid modification(s), eg, substitution(s), not present in the reference (eg, unmodified) ICOSL polypeptide or wild-type ICOSL polypeptide. In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide includes the specific binding fragment of the IgV sequence set forth in SEQ ID NO: 434 and includes amino acid substitution(s) not present in the reference (eg, unmodified) ICOSL polypeptide or wild-type ICOSL polypeptide.

В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL имеет одну или более аминокислотную модификацию, например, замену в референсном ICOSL или специфическом связывающем фрагменте в соответствующем положении(ях) 52, 84, 91, 119, 155, 168, 207 относительно нумерации SEQ ID NO: 32. В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL имеет одну или несколько аминокислотных модификаций, например, замен, выбранных из A91S, N52H, N52Q, N84Q, N119Q, N155H, N155Q, N168Q, N207Q. В некоторых воплощениях одна или несколько аминокислотных модификаций, например, замен, представляют собой N84Q, N119Q, N168Q, N207Q, N52Q, N52Q/N207Q, N168Q/N207Q, N52Q/N168Q, N84Q/N207Q, N155Q/N207Q, N119Q/N168Q, N119Q/N207Q, N119Q/N155Q, N52Q/N84Q, N52Q/N119Q, N84Q/N119Q, N52Q/N84Q/N168Q, N52Q/N84Q/N207Q, N84Q/N155Q/N168Q,In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide has one or more amino acid modifications, for example, a substitution in the reference ICOSL or specific binding fragment at the corresponding position(s) 52, 84, 91, 119, 155, 168, 207 relative to SEQ ID NO: 32. In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide has one or more amino acid modifications, for example, substitutions selected from A91S, N52H, N52Q, N84Q, N119Q, N155H, N155Q, N168Q, N207Q. In some embodiments, one or more amino acid modifications, such as substitutions, are N84Q, N119Q, N168Q, N207Q, N52Q, N52Q/N207Q, N168Q/N207Q, N52Q/N168Q, N84Q/N207Q, N155Q/N207Q, N119Q/N168Q, N119 Q /N207Q, N119Q/N155Q, N52Q/N84Q, N52Q/N119Q, N84Q/N119Q, N52Q/N84Q/N168Q, N52Q/N84Q/N207Q, N84Q/N155Q/N168Q,

N84Q/N168Q/N207Q, N84Q/N155H/N207Q, N155Q/N168Q/N207Q, N119Q N155Q/N168Q,N84Q/N168Q/N207Q, N84Q/N155H/N207Q, N155Q/N168Q/N207Q, N119Q N155Q/N168Q,

N119Q/N168Q/N207Q, N84Q/N119Q/N207Q, N119Q/N155H/N207Q, N84Q/N119Q/N155Q,N119Q/N168Q/N207Q, N84Q/N119Q/N207Q, N119Q/N155H/N207Q, N84Q/N119Q/N155Q,

N52Q/N119Q/N155Q, N52H/N84Q/N119Q, N52H/N84Q, N52H/N84Q/N168Q, N52H/N84Q/N207Q, N52H/N84Q/N168Q/N207Q, N52Q/N84Q/N155Q, N52Q/N84Q/N168Q, N52Q/N84Q/N155Q/N168Q,N52Q/N119Q/N155Q, N52H/N84Q/N119Q, N52H/N84Q, N52H/N84Q/N168Q, N52H/N84Q/N207Q, N52H/N84Q/N168Q/N207Q, N52Q/N84Q/N155Q, N52Q/N84Q /N168Q, N52Q/ N84Q/N155Q/N168Q,

N52Q/N84Q/N119Q/N168Q, N84Q/N119Q/N155Q/N168Q, N84Q/N155Q/N168Q/N207Q,N52Q/N84Q/N119Q/N168Q, N84Q/N119Q/N155Q/N168Q, N84Q/N155Q/N168Q/N207Q,

N84Q/N119Q/N155Q/N207Q, N52Q/N84Q/N119Q/N207Q, N52Q/N84Q/N119Q/N155Q,N84Q/N119Q/N155Q/N207Q, N52Q/N84Q/N119Q/N207Q, N52Q/N84Q/N119Q/N155Q,

N52Q/N84Q/N119Q/N155Q/N207Q, N84Q/N119Q/N155Q/N168Q/N207Q or A91S/N119Q/N168Q/N207Q. В некоторых воплощениях вариантные полипептиды ICOSL проявляют потенциально сниженное гликозилирование относительно референсного (например, немодифицированного) полипептида ICOSL или полипептида ICOSL дикого типа.N52Q/N84Q/N119Q/N155Q/N207Q, N84Q/N119Q/N155Q/N168Q/N207Q or A91S/N119Q/N168Q/N207Q. In some embodiments, variant ICOSL polypeptides exhibit potentially reduced glycosylation relative to a reference (eg, unmodified) ICOSL polypeptide or wild-type ICOSL polypeptide.

В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL включает любой из последовательностей внеклеточного домена (ECD) представлены в SEQ ID NO: 387-424, 427-433, 435-470. В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL включает полипептидную последовательность, которая имеет, по меньшей мере, 90% идентичности, по меньшей мере, 91% идентичности, по меньшей мере, 92% идентичности, по меньшей мере, 93% идентичности, по меньшей мере, 94% идентичности, по меньшей мере, 95% идентичности, такие как, по меньшей мере, 96% идентичности, 97% идентичности, 98% идентичности или 99% идентичности с любым из внеклеточных доменов (ECD), предлагаемых в SEQ ID NO: 435-470, и включает аминокислотную модификацию(ии), например, замену(ы) отсутствующую в референсном (например, немодифицированном) полипептиде ICOSL или полипептиде ICOSL дикого типа. В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL включает специфический связывающий фрагмент любой из последовательностей внеклеточного домена (ECD), предлагаемых в SEQ ID NO: 387-424, 427-433, 435-470, и включает аминокислотную модификацию(ии), например, замену(ы)In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide includes any of the extracellular domain (ECD) sequences set forth in SEQ ID NOs: 387-424, 427-433, 435-470. In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide includes a polypeptide sequence that has at least 90% identity, at least 91% identity, at least 92% identity, at least 93% identity, at least 94 % identity, at least 95% identity, such as at least 96% identity, 97% identity, 98% identity, or 99% identity to any of the extracellular domains (ECDs) provided in SEQ ID NO: 435- 470, and includes amino acid modification(s), such as substitution(s) not present in the reference (eg, unmodified) ICOSL polypeptide or wild-type ICOSL polypeptide. In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide includes a specific binding fragment of any of the extracellular domain (ECD) sequences set forth in SEQ ID NOs: 387-424, 427-433, 435-470, and includes amino acid modification(s), such as substitution(s) )

- 62 044346 отсутствующую в референсном (например, немодифицированном) полипептиде ICOSL или полипептиде ICOSL дикого типа. В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL включает любую из последовательностей IgV, предлагаемых в SEQ ID NO: 425-426. В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL включает полипептидную последовательность, которая имеет, по меньшей мере, 90% идентичности, по меньшей мере, 91% идентичности, по меньшей мере, 92% идентичности, по меньшей мере, 93% идентичности, по меньшей мере, 94% идентичности, по меньшей мере, 95% идентичности, например, по меньшей мере, 96% идентичности, 97% идентичности, 98% идентичности или 99% идентичности с последовательностью IgV, представленной в SEQ ID NO: 425-426, и включает аминокислотную модификацию(ии), например, замену(ы), отсутствующую в референсном (например, немодифицированном) полипептиде ICOSL или полипептиде ICOSL дикого типа. В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL включает специфический связывающий фрагмент последовательностей IgV, предлагаемых в SEQ ID NO: 425-426, и включает аминокислотную замену(ы), не присутствующую в референсном (например, немодифицированном) полипептиде ICOSL или полипептиде ICOSL дикого типа.- 62 044346 not present in the reference (eg, unmodified) ICOSL polypeptide or wild-type ICOSL polypeptide. In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide includes any of the IgV sequences set forth in SEQ ID NOs: 425-426. In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide includes a polypeptide sequence that has at least 90% identity, at least 91% identity, at least 92% identity, at least 93% identity, at least 94 % identity, at least 95% identity, e.g., at least 96% identity, 97% identity, 98% identity, or 99% identity to the IgV sequence set forth in SEQ ID NO: 425-426, and includes amino acid modification (ii), for example, substitution(s) not present in the reference (eg, unmodified) ICOSL polypeptide or wild-type ICOSL polypeptide. In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide includes a specific binding fragment of the IgV sequences set forth in SEQ ID NO: 425-426 and includes amino acid substitution(s) not present in the reference (eg, unmodified) ICOSL polypeptide or wild-type ICOSL polypeptide.

III. Форматы вариантных полипептидовIII. Variant polypeptide formats

Иммуномодуляторный полипептид, содержащий вариантный ICOSL, представленный в данном документе, может быть задан в формате различных форм, в том числе и в виде растворимого белка, мембранного связанного белка, секретируемого белка, конъюгата или гибрида или для экспрессии сконструированной клеткой с помощью инфекционного агента, как описано в других местах в данном документе. В некоторых аспектах как иммуномодулирующие полипептиды, содержащие один или несколько видов ICOSL, так и иммуномодулирующие полипептиды, содержащие несколько доменов IgSF, могут быть отформатированы различными способами.The immunomodulatory polypeptide comprising the variant ICOSL provided herein may be formatted in a variety of forms, including as a soluble protein, membrane bound protein, secreted protein, conjugate or hybrid, or for expression by an engineered cell using an infectious agent, such as described elsewhere in this document. In some aspects, both immunomodulatory polypeptides containing one or more ICOSL species and immunomodulatory polypeptides containing multiple IgSF domains can be formatted in various ways.

В некоторых воплощениях конкретный формат может быть выбран для искомого терапевтического применения. В некоторых случаях иммуномодулирующий полипептид, содержащий вариантный полипептид ICOSL, предоставляется в формате для того, чтобы оказывать антагонистичное воздействие или блокировать активность его когнатного партнера связывания, например, CD28. В некоторых воплощениях антагонизм CD28 может быть полезен для лечения воспаления или аутоиммунитета. В некоторых случаях иммуномодулирующий полипептид, содержащий вариантный полипептид ICOSL, предоставляется в форме для агонистического воздействия или стимуляции активности его когнатного партнера связывания, например, CD28. В некоторых воплощениях агонизм CD28 может быть полезен для лечения онкологических заболеваний. Специалист в данной области может легко определить активность конкретного формата, например, для антагонизма или агонизма одного или нескольких конкретных когнатных партнеров связывания. Примерные способы оценки таких видов активности приведены в данном документе, в том числе в примерах.In some embodiments, a particular format may be selected for the therapeutic use sought. In some cases, an immunomodulatory polypeptide containing a variant ICOSL polypeptide is provided in a format to antagonize or block the activity of its cognate binding partner, for example, CD28. In some embodiments, CD28 antagonism may be useful for treating inflammation or autoimmunity. In some cases, an immunomodulatory polypeptide comprising a variant ICOSL polypeptide is provided in a form to agonize or stimulate the activity of its cognate binding partner, for example, CD28. In some embodiments, CD28 agonism may be useful for the treatment of cancer. One skilled in the art can readily determine the activity of a particular format, for example, for antagonism or agonism of one or more specific cognate binding partners. Exemplary methods for assessing such activities are provided throughout this document, including examples.

В некоторых воплощениях, растворимый иммуномодулирующий полипептид, такие как вариантный ICOSL, содержащий vIgD, может быть инкапсулирован в липосоме, которая сам по себе может быть конъюгирована с любым из или с любой комбинацией предлагаемых конъюгатов (например, нацеливающим функциональным фрагментом). В некоторых воплощениях растворимые или мембранные иммуномодулирующие полипептиды по изобретению дегликозилируются. В более конкретных воплощениях последовательность вариантного ICOSL является дегликозилированной. В еще более конкретных воплощениях IgG и/или IgC (например, IgC2) домен или домены варианта ICOSL дегликозилированы.In some embodiments, a soluble immunomodulatory polypeptide, such as a variant ICOSL containing vIgD, can be encapsulated in a liposome, which itself can be conjugated to any one or any combination of the provided conjugates (eg, a targeting functional moiety). In some embodiments, the soluble or membrane immunomodulatory polypeptides of the invention are deglycosylated. In more specific embodiments, the variant ICOSL sequence is deglycosylated. In even more specific embodiments, the IgG and/or IgC (eg, IgC2) domain or domains of the ICOSL variant are deglycosylated.

Неограничивающие примеры предлагаемых форматов описаны на фиг. 13A-13C и дополнительно описано ниже.Non-limiting examples of proposed formats are described in FIGS. 13A-13C and further described below.

A. Растворимые полипептиды.A. Soluble polypeptides.

В некоторых аспектах предлагаются иммуномодулирующие полипептиды, содержащие vIgD из ICOSL. В некоторых воплощениях изобретения иммуномодулирующий белок, содержащий вариантный полипептид ICOSL представляет собой растворимый белок. Специалистам будет понятно, что клеточные поверхностные белки обычно имеют внутриклеточный, трансмембранный и внеклеточный домен (ECD) и что растворимая форма таких белков может быть получена с использованием внеклеточного домена или его иммунологически активной подпоследовательности. Таким образом, в некоторых воплощениях иммуномодулирующий белок, содержащий вариантный полипептид ICOSL, не имеет трансмембранного домена или части трансмембранного домена. В некоторых воплощениях иммуномодулирующий белок, содержащий вариантный ICOSL, не имеет внутриклеточного (цитоплазматического) домена или части внутриклеточного домена. В некоторых воплощениях иммуномодулирующий белок, содержащий вариантный полипептид ICOSL, включает только часть vIgD, содержащую домен ECD, или его часть, содержащую домен IgV и/или IgC (например, IgC2) или домены или их специфические связывающие фрагменты, содержащие аминокислотную модификацию(ии).In some aspects, immunomodulatory polypeptides comprising vIgD from ICOSL are provided. In some embodiments of the invention, the immunomodulatory protein comprising the ICOSL variant polypeptide is a soluble protein. Those skilled in the art will appreciate that cell surface proteins typically have an intracellular, transmembrane, and extracellular domain (ECD) and that a soluble form of such proteins can be produced using the extracellular domain or an immunologically active subsequence thereof. Thus, in some embodiments, the immunomodulatory protein comprising the ICOSL variant polypeptide lacks a transmembrane domain or a portion of a transmembrane domain. In some embodiments, the immunomodulatory protein comprising the variant ICOSL does not have an intracellular (cytoplasmic) domain or part of an intracellular domain. In some embodiments, the immunomodulatory protein comprising the variant ICOSL polypeptide comprises only the vIgD portion containing the ECD domain, or a portion thereof containing the IgV and/or IgC domain (e.g., IgC2) or domains or specific binding fragments thereof containing amino acid modification(s) .

В некоторых воплощениях иммуномодулирующий полипептид, содержащий вариантный ICOSL, может включать один или несколько вариантных полипептидов ICOSL. В некоторых аспектах один или несколько дополнительных доменов IgSF, таких как один или несколько дополнительных vIgD, могут быть связаны с vIgD ICOSL, как предлагается в настоящем документе. В некоторых аспектах как иммуномодулирующие полипептиды, содержащие один или несколько видов ICOSL, так и иммуномодулирующие полипептиды, содержащие несколько доменов IgSF, могут быть отформатированы различнымиIn some embodiments, the ICOSL variant-containing immunomodulatory polypeptide may include one or more ICOSL variant polypeptides. In some aspects, one or more additional IgSF domains, such as one or more additional vIgDs, may be associated with an ICOSL vIgD, as proposed herein. In some aspects, both immunomodulatory polypeptides containing one or more ICOSL species and immunomodulatory polypeptides containing multiple IgSF domains can be formatted with different

- 63 044346 способами, например, описанными в подразделе C в Разделе III.- 63 044346 in ways such as those described in subsection C in Section III.

В некоторых воплощениях иммуномодулирующий полипептид, содержащий вариантный ICOSL, может включать один или несколько вариантных полипептидов ICOSL согласно изобретению. В некоторых воплощениях полипептид по изобретению будет содержать точно 1, 2, 3, 4, 5 вариантных последовательностей ICOSL. В некоторых воплощениях, по меньшей мере, две из вариантных последовательностей ICOSL являются идентичными вариантными последовательностями ICOSL.In some embodiments, the immunomodulatory polypeptide containing a variant ICOSL may include one or more variant ICOSL polypeptides of the invention. In some embodiments, a polypeptide of the invention will contain exactly 1, 2, 3, 4, 5 variant ICOSL sequences. In some embodiments, at least two of the variant ICOSL sequences are identical variant ICOSL sequences.

В некоторых воплощениях предлагаемое представляет собой иммуномодулирующий полипептид, который включает две или более vIgD-последовательности ICOSL. Множество вариантных полипептидов ICOSL в пределах полипептидной цепи могут быть идентичными (то есть одинаковыми) между собой или могут быть не идентичными (то есть различными видами) вариантными последовательностями ICOSL. В дополнение к воплощениям с одной полипептидной цепью, в некоторых воплощениях два, три, четыре или более полипептидов по изобретению могут быть ковалентно или нековалентно прикреплены друг к другу. Таким образом, в данном документе предлагаются мономерные, димерные и более высокого порядка (например, 3, 4, 5 или более) мультимерные белки. Например, в некоторых воплощениях точно два полипептида по изобретению могут быть ковалентно или нековалентно прикреплены друг к другу с образованием димера. В некоторых воплощениях присоединение осуществляют посредством межцепочечных дисульфидных связей. Композиции, содержащие два или более полипептида по изобретению, могут иметь идентичные виды или, по существу, идентичные виды полипептида (например, гомодимеры) или не идентичные виды полипептидов (например, гетеродимеры). Композиция, имеющая множество связанных полипептидов по изобретению, может, как отмечено выше, иметь один или несколько идентичных или не идентичных вариантных полипептидов ICOSL по изобретению в каждой полипептидной цепи.In some embodiments, the present invention is an immunomodulatory polypeptide that includes two or more vIgD ICOSL sequences. The plurality of ICOSL variant polypeptides within a polypeptide chain may be identical (ie, the same) to each other, or may be non-identical (ie, different types) of ICOSL variant sequences. In addition to single polypeptide chain embodiments, in some embodiments two, three, four or more polypeptides of the invention may be covalently or non-covalently attached to each other. Thus, monomeric, dimeric, and higher order (eg, 3, 4, 5 or more) multimeric proteins are provided herein. For example, in some embodiments, exactly two polypeptides of the invention may be covalently or non-covalently attached to each other to form a dimer. In some embodiments, the coupling is accomplished through interchain disulfide bonds. Compositions containing two or more polypeptides of the invention may have identical or substantially identical polypeptide species (eg, homodimers) or non-identical polypeptide species (eg, heterodimers). A composition having a plurality of linked polypeptides of the invention may, as noted above, have one or more identical or non-identical variant ICOSL polypeptides of the invention in each polypeptide chain.

В некоторых аспектах один или несколько дополнительных доменов IgSF, таких как один или несколько дополнительных vIgD, могут быть связаны с vIgD из ICOSL, как указано в данном документе (далее называемый стек или стековый иммуномодулирующий белок). В некоторых воплощениях модульный формат предлагаемых иммуномодулирующих белков обеспечивает гибкость при разработке или получении иммуномодулирующих белков для модуляции активности множественных контрструктур (множественных когнатных партнеров связывания). В некоторых воплощениях такие стековые молекулы могут быть представлены в растворимом формате или, в некоторых случаях, могут быть представлены в виде связанных с мембраной или секретируемых белков.In some aspects, one or more additional IgSF domains, such as one or more additional vIgDs, may be linked to a vIgD from an ICOSL as defined herein (hereinafter referred to as a stack or stacked immunomodulatory protein). In some embodiments, the modular format of the proposed immunomodulatory proteins provides flexibility in the design or production of immunomodulatory proteins to modulate the activity of multiple counterstructures (multiple cognate binding partners). In some embodiments, such stacking molecules may be presented in a soluble format or, in some cases, may be presented as membrane-associated or secreted proteins.

В некоторых воплощениях иммуномодулирующие белки могут содержать любой из вариантных полипептидов ICOSL, предлагаемых в данном документе, который связан, прямо или опосредованно, с одним или несколькими другим доменом суперсемейства иммуноглобулинов (IgSF) (стековая конструкция иммуномодулирующего белка и также называется иммуномодулирующий белок II типа). В некоторых аспектах это может создать уникальные многодоменные иммуномодулирующие белки, которые связывают два или более таких, например, три или более, когнатных партнеров связывания, тем самым обеспечивая мультитаргетную модуляцию иммунного синапса.In some embodiments, the immunomodulatory proteins may comprise any of the variant ICOSL polypeptides provided herein that is linked, directly or indirectly, to one or more other immunoglobulin superfamily (IgSF) domains (an immunomodulatory protein stack construct and also referred to as a type II immunomodulatory protein). In some aspects, this can create unique multi-domain immunomodulatory proteins that bind two or more of these, eg, three or more, cognate binding partners, thereby providing multi-targeted modulation of the immune synapse.

В некоторых воплощениях иммуномодулирующий белок включает комбинацию (комбинацию не дикого типа) и/или компоновку (компоновку не дикого типа или пермутацию не дикого типа) домена вариантного ICOSL с одной или несколькими последовательностями других модифицированных по аффинности и/или не модифицированных по аффинности доменов IgSF другого представителя семейства IgSF (например, представителя семейства IgSF млекопитающих), которые не встречаются в представителях семейства IgSF дикого типа. В некоторых воплощениях иммуномодулирующий белок включает 2, 3, 4, 5 или 6 доменов суперсемейства иммуноглобулина (IgSF), где, по меньшей мере, один из доменов IgSF является вариантным ICOSL IgSF доменом (vIgD ICOSL) в соответствии с предоставленным описанием.In some embodiments, the immunomodulatory protein includes a combination (non-wild-type combination) and/or arrangement (non-wild-type arrangement or non-wild-type permutation) of a variant ICOSL domain with one or more sequences of other affinity-modified and/or non-affinity-modified IgSF domains of another a member of the IgSF family (eg, a member of the mammalian IgSF family) that are not found in wild-type IgSF family members. In some embodiments, the immunomodulatory protein includes 2, 3, 4, 5, or 6 immunoglobulin superfamily (IgSF) domains, wherein at least one of the IgSF domains is a variant ICOSL IgSF domain (vIgD ICOSL) as provided herein.

В некоторых воплощениях, последовательности дополнительных доменов IgSF могут быть модифицированным доменом IgSF, который включает одну или несколько аминокислотных модификаций, например, замен, по сравнению с референсным (например, немодифицированным) доменом IgSF или доменом IgSF дикого типа. В некоторых воплощениях домен IgSF может быть с немодифицированной аффинностью (например, дикого типа) или с модифицированной аффинностью. В некоторых воплощениях референсный (например, немодифицированный) домен IgSF или домен IgSF дикого типа может происходить из мыши, крысы, яванского макака или человека или их комбинаций. В некоторых воплощениях дополнительные домены IgSF могут быть доменом IgSF представителя семейства IgSF, описанного в табл. 2. В некоторых воплощениях дополнительный домен IgSF может быть доменом IgSF с модифицированной аффинностью, содержащим одну или несколько аминокислотных модификаций, например замен, по сравнению с доменом IgSF, содержащимся в представителе семейства IgSF, описанном в табл. 2.In some embodiments, the additional IgSF domain sequences may be a modified IgSF domain that includes one or more amino acid modifications, such as substitutions, relative to a reference (eg, unmodified) IgSF domain or a wild-type IgSF domain. In some embodiments, the IgSF domain may be unaffinity modified (eg, wild type) or affinity modified. In some embodiments, the reference (eg, unmodified) IgSF domain or wild-type IgSF domain may be derived from mouse, rat, cynomolgus or human, or combinations thereof. In some embodiments, the additional IgSF domains may be an IgSF domain of a member of the IgSF family described in Table. 2. In some embodiments, the additional IgSF domain may be an affinity modified IgSF domain containing one or more amino acid modifications, such as substitutions, compared to the IgSF domain contained in the IgSF family member described in Table. 2.

В некоторых воплощениях дополнительный домен IgSF является доменом IgSF с модифицированной или немодифицированной аффинностью содержащийся в представителе семейства IgSF, выбранном из семейства сигнал-регулирующего белка (SIRP), семейства белков, подобных инициирующему рецептору на миелоидных клетках (TREML), семейства молекул клеточной адгезии связанный с карциноэмбриональным антигеном (CEACAM), семейства Ig-подобного лектина, связывающего сиаловую кислотуIn some embodiments, the additional IgSF domain is an affinity-modified or unmodified IgSF domain contained in a member of the IgSF family selected from the signal-regulatory protein (SIRP) family, the initiating receptor-on-myeloid cell-like protein (TREML) family, the cell adhesion molecule-associated protein family carcinoembryonic antigen (CEACAM), a family of Ig-like sialic acid-binding lectins

- 64 044346 (SIGLEC), семейства бутирофилина, семейства B7, семейства CD28, семейства белков, содержащих V-set и иммуноглобулиновый домен (VSIG), семейства V-set трансмембранного домена (VSTM), семейства главного комплекса гистосовместимости (MHC), семейства молекул активации лимфоцитарного сигналинга (SLAM), лейкоцитарного иммуноглобулиноподобного рецептора (LIR), семейства нектинов (Nec), семейства нектиноподобных белков (NECL), семейства белков, родственных рецептору полиовируса (PVR), семейства рецептора запуска естественной цитотоксичности (NCR), семейства T-клеточного иммуноглобулина и муцина (TIM) или семейства иммуноглобулиноподобных рецепторов клеток-киллеров (KIR). В некоторых воплощениях дополнительные домены IgSF независимо получены из белка IgSF, выбранного из группы, состоящей из CD80(B7-1), CD86(B7-2), CD274 (PD-L1, B7-H1), PDCD1LG2(PDL2, CD273), ICOSLG(B7RP1, CD275, ICOSL, B7-H2), CD276(B7-H3), VTCN1(B7-H4), CD28, CTLA4, PDCDl(PD-1), ICOS, BTLA(CD272), CD4, CD8A(CD8-alpha), CD8B(CD8-beta), LAG3, HAVCR2(TIM-3), CEACAM1, TIGIT, PVR(CD155), PVRL2(CD112), CD226, CD2, CD160, CD200, CD200R1(CD200R) и NCR3 (NKp30).- 64 044346 (SIGLEC), butyrophilin family, B7 family, CD28 family, V-set and immunoglobulin domain-containing protein (VSIG) family, V-set transmembrane domain (VSTM) family, major histocompatibility complex (MHC) family, family of molecules lymphocyte signaling activation (SLAM), leukocyte immunoglobulin-like receptor (LIR), nectin family (Nec), nectin-like protein family (NECL), poliovirus receptor (PVR) family, natural cytotoxicity triggering receptor (NCR) family, T-cell family immunoglobulin and mucin (TIM) or the killer cell immunoglobulin-like receptor (KIR) family. In some embodiments, additional IgSF domains are independently derived from an IgSF protein selected from the group consisting of CD80(B7-1), CD86(B7-2), CD274 (PD-L1, B7-H1), PDCD1LG2(PDL2, CD273), ICOSLG(B7RP1, CD275, ICOSL, B7-H2), CD276(B7-H3), VTCN1(B7-H4), CD28, CTLA4, PDCDl(PD-1), ICOS, BTLA(CD272), CD4, CD8A(CD8 -alpha), CD8B(CD8-beta), LAG3, HAVCR2(TIM-3), CEACAM1, TIGIT, PVR(CD155), PVRL2(CD112), CD226, CD2, CD160, CD200, CD200R1(CD200R) and NCR3 (NKp30 ).

В первом столбце табл. 2 указано название и, необязательно, название некоторых возможных синонимов для данного конкретного представителя IgSF. Второй столбец включает идентификатор белка в базе данных UniProtKB, публичной базе данных, доступной через Интернет на uniprot.org или, в некоторых случаях, номер GenBank. Universal Protein Resource (UniProt) - это комплексный ресурс для белковых последовательностей и аннотирующих данных. Базы данных UniProt включают UniProt Knowledgebase (UniProtKB). UniProt представляет собой сотрудничество между Европейским институтом биоинформатики (EMBL-EBI), Швейцарским институтом биоинформатики SIB и Protein Information Resource (PIR) и поддерживается главным образом грантом Национальных институтов здоровья США (NIH). GenBank это база данных генетических последовательностей NIH, аннотированная коллекция всех общедоступных последовательностей ДНК (Nucleic Acids Research, 2013 Jan; 41 (D1): D36-42). Третий столбец включает область, в которой расположен указанный домен IgSF. Область указана как диапазон, где домен расположен между остатками, определяющими диапазон. Столбец 3 также указывает класс домена IgSF для указанной области IgSF. Столбец 4 описывает область, в которой расположены указанные дополнительные домены (сигнальный пептид, S, внеклеточный домен, E, трансмембранный домен, T; цитоплазматический домен, C). Понятно, что описание доменов может варьировать в зависимости от способов, используемых для идентификации или классификации домена, и может быть идентифицировано поразному из разных источников. Описание остатков, соответствующих домену в табл. 2, представлено только для примера и может быть на несколько аминокислот (например, одну, две, три или четыре) длиннее или короче. Столбец 5 указывает для некоторых из перечисленных представителей IgSF, некоторые из их когнатных партнеров связывания клеточной поверхности.In the first column of the table. 2 indicates the name and, optionally, the name of some possible synonyms for this particular IgSF member. The second column includes the protein ID in the UniProtKB database, a public database accessible online at uniprot.org, or in some cases the GenBank number. Universal Protein Resource (UniProt) is a comprehensive resource for protein sequences and annotation data. UniProt databases include UniProt Knowledgebase (UniProtKB). UniProt is a collaboration between the European Bioinformatics Institute (EMBL-EBI), the Swiss Institute of Bioinformatics SIB and Protein Information Resource (PIR) and is supported primarily by a grant from the US National Institutes of Health (NIH). GenBank is the NIH genetic sequence database, an annotated collection of all publicly available DNA sequences (Nucleic Acids Research, 2013 Jan; 41(D1): D36-42). The third column includes the region in which the specified IgSF domain is located. The region is specified as a range where the domain is located between the residues that define the range. Column 3 also indicates the IgSF domain class for the specified IgSF region. Column 4 describes the region in which these additional domains are located (signal peptide, S; extracellular domain, E; transmembrane domain, T; cytoplasmic domain, C). It is understood that the description of domains may vary depending on the methods used to identify or classify the domain, and may be identified differently from different sources. Description of residues corresponding to the domain in Table. 2 is provided by way of example only and may be several amino acids (eg, one, two, three, or four) longer or shorter. Column 5 indicates, for some of the listed IgSF members, some of their cognate cell surface binding partners.

Таблица 2table 2

Представители IgSF согласно настоящему изобретениюRepresentatives of IgSF according to the present invention

Представитель IgSF (Синонимы) Representative IgSF (Synonyms) Идентификационный номер белка NCBI/ Идентификатор белка UniProtKB NCBI Protein Identification Number/ Protein ID UniProtKB Область IgSF & Класс Домена IgSF Region & Domain Class Другие домены Other domains Когнатные партнеры связывания клеточной поверхности Cognate cell surface binding partners Аминокислотная последовательность представителя IgSF (SEQ ID NO) Amino acid sequence of the IgSF representative (SEQ ID NO) Прекурсор (зрелые остатки) Precursor (mature residues) Зрелый Mature ECD ECD CD80 (В7-1) CD80 (B7-1) NP_00518 2.1 Р33681 NP_00518 2.1 Р33681 35-135, 35138 или 35141, 37-138 IgV, 145-230 или 154-232 IgC 35-135, 35138 or 35141, 37-138 IgV, 145-230 or 154-232 IgC S: 1-34, Е: 35242, Т: 243-263, С: 264288 S: 1-34, E: 35242, T: 243-263, S: 264288 CD28, CTLA4, PD- L1 CD28, CTLA4, PD- L1 SEQ ID NO: 1 (35-288) SEQ ID NO: 1 (35-288) SEQID NO: 253 SEQID NO: 253 SEQID NO: 28 SEQID NO: 28 CD86 (В7-2) CD86 (B7-2) Р42081.2 R42081.2 33-131 IgV, 150-225 IgC2 33-131 IgV, 150-225 IgC2 S: 1-23, Е: 24247, Т: 248-268, С:269329 S: 1-23, E: 24247, T: 248-268, S:269329 CD28, CTLA4 CD28, CTLA4 SEQ ID NO: 2 (24-329) SEQ ID NO: 2 (24-329) SEQID NO: 254 SEQID NO: 254 SEQID NO: 29 SEQID NO: 29

- 65 044346- 65 044346

CD274 (PD-L1, B7-H1) CD274 (PD-L1, B7-H1) Q9NZQ7.1 Q9NZQ7.1 24-130, ΙΟΙ 27, IgV, 133-225 IgC2 24-130, ΙΟΙ 27, IgV, 133-225 IgC2 S: 1-18, E: 19238, T: 239-259, C:260290 S: 1-18, E: 19238, T: 239-259, C:260290 PD-1, B7-1 PD-1, B7-1 SEQ ID NO: 3 (19-290) SEQ ID NO: 3 (19-290) SEQID NO: 255 SEQID NO: 255 SEQID NO: 30 SEQID NO: 30 PDCD1 LG2 (PD-L2, CD273) PDCD1 LG2 (PD-L2, CD273) Q9BQ51.2 Q9BQ51.2 21-118 IgV, 122-203 IgC2 21-118 IgV, 122-203 IgC2 S: 1-19, E: 20220, T: 221-241, C:242273 S: 1-19, E: 20220, T: 221-241, C:242273 PD-1, RGMb PD-1, RGMb SEQ ID NO: 4 (20-273) SEQ ID NO: 4 (20-273) SEQID NO: 256 SEQID NO: 256 SEQID NO: 31 SEQID NO: 31 ICOSLG (B7RP1, CD275, ICOSL, B7-H2) ICOSLG (B7RP1, CD275, ICOSL, B7-H2) 075144.2 075144.2 19-129 IgV, 141-227 IgC2 19-129 IgV, 141-227 IgC2 S: 1-18, E: 19256, T: 257-277, C:278302 S: 1-18, E: 19256, T: 257-277, C:278302 ICOS, CD28, CTLA4 ICOS, CD28, CTLA4 SEQ ID NO: 5 (19-302) SEQ ID NO: 5 (19-302) SEQID NO: 257 SEQID NO: 257 SEQID NO: 32 SEQID NO: 32 CD276 (B7-H3) CD276 (B7-H3) Q5ZPR3.1 Q5ZPR3.1 29-139 IgV, 145-238 IgC2, 243-357 IgV2, 367453, 363456 IgC2 29-139 IgV, 145-238 IgC2, 243-357 IgV2, 367453, 363456 IgC2 S: 1-28, E: 29466, T: 467-487, C: 488534 S: 1-28, E: 29466, T: 467-487, C: 488534 SEQ ID NO: 6 (29-534) SEQ ID NO: 6 (29-534) SEQID NO: 258 SEQID NO: 258 SEQID NO: 33 SEQID NO: 33 VTCN1 (B7-H4) VTCN1 (B7-H4) Q7Z7D3.1 Q7Z7D3.1 35-146 IgV, 153-241 IgV 35-146 IgV, 153-241 IgV S: 1-24, E: 25259, T: 260-280, C: 281282 S: 1-24, E: 25259, T: 260-280, C: 281282 SEQ ID NO: 7 (25-282) SEQ ID NO: 7 (25-282) SEQID NO: 259 SEQID NO: 259 SEQID NO: 34 SEQID NO: 34 CD28 CD28 P10747.1 P10747.1 28-137 IgV 28-137 IgV S: 1-18, E: 19152, T: 153-179, C: 180220 S: 1-18, E: 19152, T: 153-179, C: 180220 B7-1, B7-2, B7RP1 B7-1, B7-2, B7RP1 SEQ ID NO: 8 (19-220) SEQ ID NO: 8 (19-220) SEQID NO: 260 SEQID NO: 260 SEQID NO: 35 SEQID NO: 35 CTLA4 CTLA4 AAL07473 .1P16410.3 AAL07473.1P16410.3 39-152 IgV, 39-140 IgV 39-152 IgV, 39-140 IgV S: 1-35, E: 36161, T. 162-182, C: 183223 S: 1-35, E: 36161, T. 162-182, C: 183223 B7-1, B7-2, B7RP1 B7-1, B7-2, B7RP1 SEQ ID NO: 9 (36-223) SEQ ID NO: 9 (36-223) SEQID NO: 261 SEQID NO: 261 SEQID NO: 36 SEQID NO: 36 PDCD1 (PD-1) PDCD1 (PD-1) Q15116.3 Q15116.3 35-145 IgV 35-145 IgV S: 1-20, E: 21170, T: 171-191, C: 192288 S: 1-20, E: 21170, T: 171-191, C: 192288 PD-L1, PD- L2 PD-L1, PD- L2 SEQ ID NO: 10 (21-288) SEQ ID NO: 10 (21-288) SEQID NO: 262 SEQID NO: 262 SEQID NO: 37 SEQID NO: 37 ICOS ICOS Q9Y6W8. 1 Q9Y6W8. 1 30-132 IgV 30-132 IgV S: 1-20, E: 21140, T: 141-161, C: 162199 S: 1-20, E: 21140, T: 141-161, C: 162199 B7RP1 B7RP1 SEQ ID NO: 11 (21-199) SEQ ID NO: 11 (21-199) SEQID NO: 263 SEQID NO: 263 SEQID NO: 38 SEQID NO: 38 BTLA (CD272) BTLA (CD272) Q7Z6A9.3 Q7Z6A9.3 31-132 IgV 31-132 IgV S: 1-30, E: 31157, T: 158-178, C: 179289 S: 1-30, E: 31157, T: 158-178, C: 179289 HVEM HVEM SEQ ID NO: 12 (31-289) SEQ ID NO: 12 (31-289) SEQID NO: 264 SEQID NO: 264 SEQID NO: 39 SEQID NO: 39 CD4 CD4 P01730.1 P01730.1 26-125 IgV, 126-203 IgC2, 204317IgC2, 317-389, 318-374 IgC2 26-125 IgV, 126-203 IgC2, 204317IgC2, 317-389, 318-374 IgC2 S: 1-25, E: 26396, T: 397-418, C: 419458 S: 1-25, E: 26396, T: 397-418, C: 419458 МНС класс II MNS class II SEQ ID NO: 13 (26-458) SEQ ID NO: 13 (26-458) SEQID NO: 265 SEQID NO: 265 SEQID NO: 40 SEQID NO: 40 CD8A (CDSальфа) CD8A (CDSalpha) P01732.1 P01732.1 22-135 IgV 22-135 IgV S: 1-21, E: 22182, T: 183-203, C: 204235 S: 1-21, E: 22182, T: 183-203, C: 204235 МНС класс I MHC class I SEQ ID NO: 14 (22-235) SEQ ID NO: 14 (22-235) SEQID NO: 266 SEQID NO: 266 SEQID NO: 41 SEQID NO: 41

- 66 044346- 66 044346

CD8B (CDSбета) CD8B (CDSbeta) P10966.1 P10966.1 22-132 IgV 22-132 IgV S: 1-21, E: 22170, T: 171-191, C: 192210 S: 1-21, E: 22170, T: 171-191, C: 192210 МНС класс I MHC class I SEQID NO: 15 (22-210) SEQID NO: 15 (22-210) SEQID NO: 267 SEQID NO: 267 SEQID NO: 42 SEQID NO: 42 LAG3 LAG3 P18627.5 P18627.5 37-167 IgV, 168-252 IgC2, 265-343 IgC2, 349- 419IgC2 37-167 IgV, 168-252 IgC2, 265-343 IgC2, 349- 419IgC2 S: 1-28, E: 29450, T: 451-471, C: 472525 S: 1-28, E: 29450, T: 451-471, C: 472525 МНС класс II MNS class II SEQ ID NO: 16 (29-525) SEQ ID NO: 16 (29-525) SEQID NO: 268 SEQID NO: 268 SEQID NO: 43 SEQID NO: 43 HAVCR 2 (TIM-3) HAVCR 2 (TIM-3) Q8TDQ0.3 Q8TDQ0.3 22-124 IgV 22-124 IgV S: 1-21, E: 22202, T: 203-223, C: 224301 S: 1-21, E: 22202, T: 203-223, C: 224301 CEACAM-1, фосфатидил серин, Г алектин-9, HMGB1 CEACAM-1, phosphatidyl serine, G alectin-9, HMGB1 SEQ ID NO: 17 (22-301) SEQ ID NO: 17 (22-301) SEQID NO: 269 SEQID NO: 269 SEQID NO: 44 SEQID NO: 44 CEACA Ml CEACA Ml P13688.2 P13688.2 35-142 IgV, 145-232 IgC2, 237317IgC2, 323-413 IgC2 35-142 IgV, 145-232 IgC2, 237317IgC2, 323-413 IgC2 S: 1-34, E: 35428, T: 429-452, C: 453526 S: 1-34, E: 35428, T: 429-452, C: 453526 TIM-3 TIM-3 SEQ ID NO: 18 (35-526) SEQ ID NO: 18 (35-526) SEQID NO: 270 SEQID NO: 270 SEQID NO: 45 SEQID NO: 45 TIGIT TIGIT Q495A1.1 Q495A1.1 22-124 IgV 22-124 IgV S: 1-21, E: 22141, T: 142-162, C: 163244 S: 1-21, E: 22141, T: 142-162, C: 163244 CD155, CD112 CD155, CD112 SEQ ID NO: 19 (22-244) SEQ ID NO: 19 (22-244) SEQID NO: 271 SEQID NO: 271 SEQID NO: 46 SEQID NO: 46 PVR (CD 15 5) PVR (CD 15 5) P15151.2 P15151.2 24-139 IgV, 145-237 IgC2, 244- 328 IgC2 24-139 IgV, 145-237 IgC2, 244- 328 IgC2 S: 1-20, E: 21343, T: 344-367, C: 368417 S: 1-20, E: 21343, T: 344-367, C: 368417 TIGIT, CD226, CD96, полиовирус TIGIT, CD226, CD96, poliovirus SEQ ID NO: 20 (21-417) SEQ ID NO: 20 (21-417) SEQID NO: 272 SEQID NO: 272 SEQID NO: 47 SEQID NO: 47 PVRL2 (CD 112) PVRL2 (CD 112) Q92692.1 Q92692.1 32-156 IgV, 162-256 IgC2, 261- 345 IgC2 32-156 IgV, 162-256 IgC2, 261- 345 IgC2 S: 1-31, E: 32360, T: 361-381, C:382538 S: 1-31, E: 32360, T: 361-381, C:382538 TIGIT, CD226, CD112R TIGIT, CD226, CD112R SEQ ID NO: 21 (32-538) SEQ ID NO: 21 (32-538) SEQID NO: 273 SEQID NO: 273 SEQID NO: 48 SEQID NO: 48 CD226 CD226 Q15762.2 Q15762.2 19-126 IgC2, 135- 239 IgC2 19-126 IgC2, 135- 239 IgC2 S: 1-18, E: 19254, T: 255-275, C: 276336 S: 1-18, E: 19254, T: 255-275, C: 276336 CD155, CD112 CD155, CD112 SEQ ID NO: 22 (19-336) SEQ ID NO: 22 (19-336) SEQID NO: 274 SEQID NO: 274 SEQID NO: 49 SEQID NO: 49 CD2 CD2 P06729.2 P06729.2 25-128 IgV, 129-209 IgC2 25-128 IgV, 129-209 IgC2 S: 1-24, E: 25209, T: 210-235, C:236351 S: 1-24, E: 25209, T: 210-235, C:236351 CD58 CD58 SEQ ID NO: 23 (25-351) SEQ ID NO: 23 (25-351) SEQID NO: 275 SEQID NO: 275 SEQID NO: 50 SEQID NO: 50 CD 160 CD 160 095971.1 095971.1 27-122 IgV 27-122 IgV S: 1-26 E: 27-122 S: 1-26 E: 27-122 HVEM, семейство белков МНС HVEM, MHC family of proteins SEQ ID NO: 24 (27-159) SEQ ID NO: 24 (27-159) SEQID NO: 276 SEQID NO: 276 SEQID NO: 51 SEQID NO: 51 CD200 CD200 P41217.4 P41217.4 31-141 IgV, 142-232 IgC2 31-141 IgV, 142-232 IgC2 S: 1-30, E: 31232, T: 233-259, C: 260278 S: 1-30, E: 31232, T: 233-259, C: 260278 CD200R CD200R SEQ ID NO: 25 (31-278) SEQ ID NO: 25 (31-278) SEQID NO: 277 SEQID NO: 277 SEQID NO: 52 SEQID NO: 52 CD200R 1 (CD200 R) CD200R 1 (CD200 R) Q8TD46.2 Q8TD46.2 53-139 IgV, 140-228 IgC2 53-139 IgV, 140-228 IgC2 S: 1-28, E: 29243, T: 244-264, C: 265325 S: 1-28, E: 29243, T: 244-264, C: 265325 CD200 CD200 SEQ ID NO: 26 (29-325) SEQ ID NO: 26 (29-325) SEQID NO: 278 SEQID NO: 278 SEQID NO: 53 SEQID NO: 53 NCR3 (NKp30) NCR3 (NKp30) 014931.1 014931.1 19-126 IgClike 19-126 IgClike S: 1-18, E: 19135, T: 136-156, C: 157201 S: 1-18, E: 19135, T: 136-156, C: 157201 В7-Н6 B7-H6 SEQID NO:27 (19-201) SEQID NO:27 (19-201) SEQID NO: 279 SEQID NO: 279 SEQID NO: 54 SEQID NO: 54

- 67 044346- 67 044346

VSIG8 VSIG8 Q5VU13 Q5VU13 22-141 IgVl 146-257 IgV2 22-141 IgVl 146-257 IgV2 S: 1-21 Е: 22-263 Т: 264284 С: 285- 414 S: 1-21 E: 22-263 T: 264284 S: 285- 414 VISTA VISTA SEQIDNO: 341 (22-414) SEQIDNO: 341 (22-414) SEQID NO: 342 SEQID NO: 342 SEQID NO: 343 SEQID NO: 343

В некоторых воплощениях настоящего изобретения предлагаемые иммуномодулирующие белки, в дополнении к вариантному полипептиду ICOSL, также содержат, по меньшей мере, 2, 3, 4, 5 или 6 дополнительных доменов суперсемейства иммуноглобулинов (IgSF), такие как домен IgD из представителя семейства IgSF, указанного в табл. 2.In some embodiments of the present invention, the proposed immunomodulatory proteins, in addition to the variant ICOSL polypeptide, also contain at least 2, 3, 4, 5 or 6 additional immunoglobulin superfamily (IgSF) domains, such as an IgD domain from a member of the IgSF family indicated in table 2.

В некоторых воплощениях предлагаемый иммуномодулирующий белок содержит, по меньшей мере, один дополнительный домен IgSF (например, второй домен IgSF). В некоторых воплощениях предлагаемый иммуномодулирующий белок содержит, по меньшей мере, два дополнительных домена IgSF (например, второй и третий домен IgSF). В некоторых воплощениях предлагаемый иммуномодулирующий белок содержит, по меньшей мере, три дополнительных домена IgSF (например, второй, третий и четвертый). В некоторых воплощениях предлагаемый иммуномодулирующий белок содержит, по меньшей мере, четыре дополнительных домена IgSF (например, второй, третий, четвертый и пятый). В некоторых воплощениях предлагаемый иммуномодулирующий белок содержит, по меньшей мере, пять дополнительных доменов IgSF (например, второй, третий, четвертый, пятый и шестой). В некоторых воплощениях предлагаемый иммуномодулирующий белок содержит, по меньшей мере, шесть дополнительных доменов IgSF (например, второй, третий, четвертый, пятый, шестой и седьмой). В некоторых воплощениях каждый из доменов IgSF в иммуномодулирующем белке различен. В некоторых воплощениях, по меньшей мере, один из дополнительных доменов IgSF является таким же, как, по меньшей мере, один другой домен IgSF в иммуномодулирующем белке. В некоторых воплощениях каждый из доменов IgSF происходит из или получен из другого представителя семейства IgSF. В некоторых воплощениях, по меньшей мере, два из доменов IgSF происходят из одного и того же члена семейства IgSF или происходят от него.In some embodiments, the immunomodulatory protein of the invention comprises at least one additional IgSF domain (eg, a second IgSF domain). In some embodiments, the immunomodulatory protein of the invention contains at least two additional IgSF domains (eg, a second and third IgSF domain). In some embodiments, the immunomodulatory protein of the invention contains at least three additional IgSF domains (eg, a second, a third, and a fourth). In some embodiments, the proposed immunomodulatory protein contains at least four additional IgSF domains (eg, second, third, fourth and fifth). In some embodiments, the immunomodulatory protein of the invention contains at least five additional IgSF domains (eg, second, third, fourth, fifth, and sixth). In some embodiments, the immunomodulatory protein of the invention comprises at least six additional IgSF domains (eg, second, third, fourth, fifth, sixth and seventh). In some embodiments, each of the IgSF domains in the immunomodulatory protein is different. In some embodiments, at least one of the additional IgSF domains is the same as at least one other IgSF domain in the immunomodulatory protein. In some embodiments, each of the IgSF domains is derived from or derived from another member of the IgSF family. In some embodiments, at least two of the IgSF domains are derived from or derived from the same IgSF family member.

В некоторых воплощениях дополнительный домен IgSF содержит домен или домены IgV или домен или домены IgC (например, IgC2), или специфический фрагмент связывания домена IgV или специфический фрагмент связывания домена или доменов IgC (например, IgC2). В некоторых воплощениях дополнительный домен IgSF представляет собой или содержит полноразмерный домен IgV. В некоторых воплощениях дополнительный домен IgSF представляет собой или содержит полноразмерный домен или домены IgC (например, IgC2). В некоторых воплощениях дополнительный домен IgSF представляет собой или содержит специфический связывающий фрагмент домена IgV. В некоторых воплощениях дополнительный домен IgSF представляет собой или содержит специфический связывающий фрагмент домена или доменов IgC (например, IgC2). В некоторых воплощениях иммуномодулирующий белок содержит, по меньшей мере, два дополнительных домена IgSF от одного (того же) представителя IgSF. Например, в некоторых аспектах иммуномодулирующий белок содержит ECD или его часть члена IgSF, содержащего полноразмерный домен IgV и полноразмерный домен IgC (например, IgC2) или домены или их специфические связывающие фрагменты.In some embodiments, the additional IgSF domain comprises an IgV domain or domains or an IgC domain or domains (eg, IgC2), or a specific IgV domain binding fragment or a specific IgC domain or domains binding fragment (eg, IgC2). In some embodiments, the additional IgSF domain is or contains a full-length IgV domain. In some embodiments, the additional IgSF domain is or contains a full-length IgC domain or domains (eg, IgC2). In some embodiments, the additional IgSF domain is or contains a specific binding fragment of an IgV domain. In some embodiments, the additional IgSF domain is or contains a specific binding fragment of an IgC domain or domains (eg, IgC2). In some embodiments, the immunomodulatory protein contains at least two additional IgSF domains from the same IgSF member. For example, in some aspects, the immunomodulatory protein comprises an ECD or a portion thereof of an IgSF member comprising a full-length IgV domain and a full-length IgC domain (eg, IgC2) or domains or specific binding fragments thereof.

В некоторых воплощениях предоставленные иммуномодулирующие белки содержат, по меньшей мере, один дополнительный домен IgSF (например, второй домен IgSF, или, в некоторых случаях, также третий домен IgSF), в котором, по меньшей мере, один дополнительный, например, второй или третий домен IgSF представляет собой домен IgSF, указанный в референсном (например, немодифицированном) домене IgSF или домене IgSF дикого типа или специфического связывающего фрагмента, содержащегося в аминокислотной последовательности, указанной в любой из SEQ ID NO: 1-27 и 341. В некоторых воплощениях референсный (например, немодифицированный) домен IgSF или домен IgSF дикого типа представляет собой домен IgV или домен IgC, такой как домен IgC1 или IgC2.In some embodiments, the provided immunomodulatory proteins comprise at least one additional IgSF domain (e.g., a second IgSF domain, or in some cases also a third IgSF domain), in which at least one additional, e.g., second or third The IgSF domain is the IgSF domain specified in the reference (e.g., unmodified) IgSF domain or wild-type IgSF domain or specific binding fragment contained in the amino acid sequence specified in any of SEQ ID NOs: 1-27 and 341. In some embodiments, the reference The (eg, unmodified) IgSF domain or wild-type IgSF domain is an IgV domain or an IgC domain, such as an IgC1 or IgC2 domain.

В некоторых воплощениях настоящего изобретения, предусмотренные иммуномодулирующие белки, в дополнении к вариантному полипептиду ICOSL, также включают, по меньшей мере, один дополнительный домен IgSF (например, или в некоторых случаях, также третий домен IgSF с модифицированной аффинностью и т.д.), в котором, по меньшей мере, один дополнительный домен IgSF представляет собой vIgD, который включает одну или несколько аминокислотных модификаций (например, замен, делеций или мутаций) по сравнению с доменом IgSF в референсном (например, немодифицированной) домене IgSF или IgSF дикого типа, таком как домен IgSF в представителе семейства IgSF, представленном в табл. 2. В некоторых воплощениях дополнительный, например, второй или третий домен IgSF с модифицированной аффинностью включает, по меньшей мере, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99% или более идентичности последовательности с референсным (например, немодифицированным) доменом IgSF или доменом IgSF дикого типа или его фрагментом специфического связывания, содержащемся в аминокислотной последовательности, указанной в любой из SEQ ID NO: 1-27 и 341. В некоторых воплощениях референсный (например, немодифицированный) домен IgSF или домен IgSF дикого типа представляет собой домен IgV или домен IgC, такой как домен IgC1 или IgC2. В некоторых воплощениях дополнительный, например, второй или третий домен IgSF представляет собой аффинномодифицированный домен IgV и/или домен IgC. В некоторых воплощениях один или несколько дополIn some embodiments of the present invention, the immunomodulatory proteins provided, in addition to the variant ICOSL polypeptide, also include at least one additional IgSF domain (for example, or in some cases, also a third affinity modified IgSF domain, etc.), wherein the at least one additional IgSF domain is a vIgD that includes one or more amino acid modifications (e.g., substitutions, deletions or mutations) relative to the IgSF domain in a reference (e.g., unmodified) IgSF domain or wild-type IgSF, such as the IgSF domain in the representative of the IgSF family presented in table. 2. In some embodiments, an additional, e.g., second or third affinity modified IgSF domain includes at least 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98 99% or greater sequence identity to a reference (e.g., unmodified) IgSF domain or wild-type IgSF domain or specific binding fragment thereof contained in the amino acid sequence set forth in any of SEQ ID NOs: 1-27 and 341. In some embodiments, the reference The (eg, unmodified) IgSF domain or wild-type IgSF domain is an IgV domain or an IgC domain, such as an IgC1 or IgC2 domain. In some embodiments, the additional, eg, second or third IgSF domain is an affinity modified IgV domain and/or an IgC domain. In some embodiments, one or more additional

- 68 044346 нительных доменов IgSF представляет собой аффинно-модифицированный домен IgSF, который содержит домен или домены IgV и/или домен или домены IgC (например, IgC2), или специфический связывающий фрагмент домена IgV и/или специфический связывающий фрагмент домена или доменов IgC (например, IgC2), в котором домен IgV и/или IgC содержит аминокислотную(ые) модификацию(ии) (например, замену(ы)). В некоторых воплощениях один или несколько дополнительных аффинномодифицированных доменов IgSF содержат домен IgV, содержащий аминокислотную(ые) модификацию(ии) (например, замену(ы)). В некоторых воплощениях один или несколько дополнительных аффинно-модифицированных доменов IgSF включают в себя домены IgSF, присутствующие в ECD, или часть ECD соответствующего представителя референсного семейства IgSF, такие как полноразмерный домен IgV и полноразмерный домен или домены IgC (например, IgC2) или их специфически связывающие фрагменты, в которых один или оба из IgV и IgC содержат аминокислотную(ые) модификацию(ии) (например, замену(ы)). В некоторых воплощениях специфический домен или каждый из конкретных доменов (например, дополнительный, например, второй или третий домен IgSF) полипептида вариантного домена IgSF может быть на несколько аминокислот длиннее или короче, например 1-10, например 1, 2, 3, 4, 5, 6 или 7 аминокислот длиннее или короче, чем последовательность аминокислот, указанная в соответствующей SEQ ID NO.- 68 044346 nitrous domains IgSF is an affinity-modified IgSF domain that contains an IgV domain or domains and/or an IgC domain or domains (for example, IgC2), or a specific binding fragment of an IgV domain and/or a specific binding fragment of an IgC domain or domains ( eg, IgC2) in which the IgV and/or IgC domain contains amino acid modification(s) (eg, substitution(s)). In some embodiments, one or more additional affinity modified IgSF domains comprise an IgV domain containing amino acid modification(s) (eg, substitution(s)). In some embodiments, the one or more additional affinity-modified IgSF domains include the IgSF domains present in the ECD, or a portion of the ECD of a corresponding member of the IgSF reference family, such as the full-length IgV domain and the full-length IgC domain or domains (e.g., IgC2) or specifically thereof binding fragments in which one or both of IgV and IgC contain amino acid modification(s) (eg, substitution(s)). In some embodiments, the specific domain or each of the specific domains (e.g., additional, e.g., second or third IgSF domain) of the variant IgSF domain polypeptide may be several amino acids longer or shorter, such as 1-10, such as 1, 2, 3, 4, 5, 6 or 7 amino acids longer or shorter than the amino acid sequence specified in the corresponding SEQ ID NO.

В некоторых воплощениях предоставленный иммуномодулирующий белок содержит, по меньшей мере, один дополнительный (например, второй или, в некоторых случаях, также третий домен IgSF и т.д.) или второй домен IgSF, который представляет собой vIgD, который содержит одну или несколько аминокислотных замен по сравнению с доменом IgSF (например, IgV) референсного (например, немодифицированного) домена IgSF или домена IgSF дикого типа, отличного от ICOSL.In some embodiments, the provided immunomodulatory protein contains at least one additional (e.g., a second or, in some cases, also a third IgSF domain, etc.) or a second IgSF domain that is a vIgD that contains one or more amino acids substitutions relative to an IgSF domain (eg, IgV) of a reference (eg, unmodified) IgSF domain or a wild-type IgSF domain other than ICOSL.

В некоторых воплощениях дополнительный или второй домен IgSF включает одну или несколько аминокислотных замен по сравнению с доменом референсного (например, немодифицированного) домена IgSF или домена IgSF дикого типа, таким как домен IgSF в представителе семейства IgSF, указанном в табл. 2. В некоторых воплощениях дополнительный, например, второй или третий домен IgSF с модифицированной аффинностью включает, по меньшей мере, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99% или более идентичности последовательности с референсным (например, немодифицированным) доменом IgSF или доменом IgSF дикого типа или его фрагментом специфического связывания, содержащемся в аминокислотной последовательности, указанной в любой из SEQ ID NO: 1-27. В некоторых воплощениях референсный (например, немодифицированный) домен IgSF или домен IgSF дикого типа представляет собой домен IgV или домен IgC, такой как домен IgC1 или IgC2. В некоторых воплощениях дополнительный или второй домен IgSF представляет собой домен IgV или IgC с модифицированный аффинностью. В таблицах 3-5 представлены примерные полипептиды, содержащие один или несколько доменов с модифицированным аффинностью IgSF, которые могут быть использованы в стековых конструкциях, предлагаемых в данном документе.In some embodiments, the additional or second IgSF domain includes one or more amino acid substitutions relative to a domain of a reference (eg, unmodified) IgSF domain or a wild-type IgSF domain, such as the IgSF domain of the IgSF family member listed in Table 1. 2. In some embodiments, an additional, e.g., second or third affinity modified IgSF domain includes at least 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98 , 99% or more sequence identity with the reference (eg, unmodified) IgSF domain or wild-type IgSF domain or specific binding fragment thereof contained in the amino acid sequence specified in any of SEQ ID NO: 1-27. In some embodiments, the reference (eg, unmodified) IgSF domain or wild-type IgSF domain is an IgV domain or an IgC domain, such as an IgC1 or IgC2 domain. In some embodiments, the additional or second IgSF domain is an affinity modified IgV or IgC domain. Tables 3-5 present exemplary polypeptides containing one or more IgSF affinity modified domains that may be used in the stacking constructs provided herein.

В некоторых воплощениях один или несколько дополнительных доменов IgSF (например, второй IgSF) является доменом IgSF (например, IgV) другого представителя семейства IgSF, который связывается или распознает опухолевый антиген. В таких воплощениях представитель семейства IgSF служит в качестве функциональной составляющей, локализующей в опухоли, тем самым доставляя vIgD ICOSL в непосредственную близость от иммунных клеток в микроокружении опухоли. В некоторых воплощениях дополнительный домен IgSF (например, второй IgSF) представляет собой домен IgSF NkP30, который связывает или распознает B7-H6, экспрессируемый в опухолевой клетке. В некоторых воплощениях, по меньшей мере, один дополнительный (например, второй) домен IgSF, например NkP30, представляет собой vIgD, который включает одну или несколько аминокислотных модификаций (например, замены, делеции или добавления). В некоторых воплощениях одна или несколько аминокислотных модификаций увеличивают аффинность и/или селективность связывания с B7-H6 по сравнению с немодифицированным доменом IgSF, например, NkP30, например, по меньшей мере, или, по меньшей мере, около в 1,2 раза, в 1,5 раза, 2-в 3 раза, в 4 раза, в 5 раз, в 6 раз, в 7 раз, в 8 раз, в 9 раз, в 10 раз, в 20 раз, в 30 раз в 40 раз или в 50 раз.In some embodiments, the one or more additional IgSF domains (eg, a second IgSF) is an IgSF domain (eg, IgV) of another member of the IgSF family that binds or recognizes a tumor antigen. In such embodiments, a member of the IgSF family serves as a functional tumor localizing moiety, thereby delivering the vIgD ICOSL into close proximity to immune cells in the tumor microenvironment. In some embodiments, the additional IgSF domain (eg, a second IgSF) is an IgSF NkP30 domain that binds or recognizes B7-H6 expressed in a tumor cell. In some embodiments, at least one additional (eg, second) IgSF domain, such as NkP30, is a vIgD that includes one or more amino acid modifications (eg, substitutions, deletions, or additions). In some embodiments, one or more amino acid modifications increase the binding affinity and/or selectivity of B7-H6 relative to an unmodified IgSF domain, e.g., NkP30, e.g., by at least, or at least about 1.2-fold, by 1.5 times, 2-3 times, 4 times, 5 times, 6 times, 7 times, 8 times, 9 times, 10 times, 20 times, 30 times, 40 times or 50 times.

- 69 044346- 69 044346

Таблица 3Table 3

Примерные вариантные полипептиды CD80Exemplary CD80 variant polypeptides

Мутация(и) Mutation(s) ECD SEQ ID NO ECD SEQ ID NO IgV SEQ ID NO IgV SEQ ID NO Дикий тип Wild type 28 28 152 152 L70Q/A91G L70Q/A91G 55 55 153 153 L70Q/A91G/T130A L70Q/A91G/T130A 56 56 L70Q/ А91G/1118 А/Т120 S/T13 0 А L70Q/ А91G/1118 А/Т120 S/T13 0 А 57 57 V4M/L70Q/А91G/T120 S/T 13 0 А V4M/L70Q/A91G/T120 S/T 13 0 A 58 58 154 154 L70Q/А91 G/T 120 S/T 13 0 А L70Q/A91 G/T 120 S/T 13 0 A 59 59 V20L/L70Q/А91 S/T 120 S/T 13 0 А V20L/L70Q/A91 S/T 120 S/T 13 0 A 60 60 155 155 S44P/L70Q/A91 G/T 13 0 А S44P/L70Q/A91 G/T 13 0 A 61 61 156 156 L70Q/A91G/E117G/T120S/T130A L70Q/A91G/E117G/T120S/T130A 62 62 A91G/T120S/T130A A91G/T120S/T130A 63 63 157 157 L70R/А91 G/T 120 S/T 13 0 А L70R/A91 G/T 120 S/T 13 0 A 64 64 158 158 L70Q/E81 А/А91 G/T 120 S/1127Т/Т13 0 А L70Q/E81 A/A91 G/T 120 S/1127T/T13 0 A 65 65 159 159 L70Q/Y87N/A91 G/T 13 0 А L70Q/Y87N/A91 G/T 13 0 A 66 66 160 160 Т28 S/L70Q/A91G/E95K/T120 S/T 13 0 А T28 S/L70Q/A91G/E95K/T120 S/T 13 0 A 67 67 161 161 N63 S/L70Q/A91 G/T 120 S/T 13 0 А N63 S/L70Q/A91 G/T 120 S/T 13 0 A 68 68 162 162 КЗ 6E/I67T/L70Q/A91 G/T 120 S/T 13 0 A/N152Т KZ 6E/I67T/L70Q/A91 G/T 120 S/T 13 0 A/N152Т 69 69 163 163 E52G/L70Q/A91 G/T 120 S/T 13 0 А E52G/L70Q/A91 G/T 120 S/T 13 0 A 70 70 164 164 K37E/F59S/L70Q/A91G/T120S/T130A K37E/F59S/L70Q/A91G/T120S/T130A 71 71 165 165 A91G/S103P A91G/S103P 72 72 К89Е/Т130А K89E/T130A 73 73 166 166 A91G A91G 74 74 D60 V/A91 G/T 120 S/T 13 0 А D60 V/A91 G/T 120 S/T 13 0 A 75 75 167 167 K54M/A91G/T120S K54M/A91G/T120S 76 76 168 168 М3 8T/L70Q/E77G/A91 G/T 120S/T130A/N152Т M3 8T/L70Q/E77G/A91 G/T 120S/T130A/N152T 77 77 169 169 R29H/E52G/L70R/E88G/A91 G/T 13 0 А R29H/E52G/L70R/E88G/A91 G/T 13 0 A 78 78 170 170 Y31Н/Т41G/L70Q/A91 G/T 120S/T13 0 А Y31N/T41G/L70Q/A91 G/T 120S/T13 0 A 79 79 171 171 V68A/T110A V68A/T110A 80 80 172 172 S66H/D90G/T110A/F116L S66H/D90G/T110A/F116L 81 81 173 173 R29H/E52G/T120 S/T 13 0 А R29H/E52G/T120 S/T 13 0 A 82 82 174 174 A91G/L102S A91G/L102S 83 83 I67T/L70Q/A91G/T120S I67T/L70Q/A91G/T120S 84 84 175 175 L70Q/A91G/T110A/T120S/T130A L70Q/A91G/T110A/T120S/T130A 85 85 М3 8 V/T41D/M43I/W50G/D76G/V83 А/К89Е/Т120S/T13 0 А M3 8 V/T41D/M43I/W50G/D76G/V83 A/K89E/T120S/T13 0 A 86 86 176 176 V22A/L70Q/S121P V22A/L70Q/S121P 87 87 177 177 Al 2 V/S15F/Y31Н/Т41 G/T 13 ОА/Р13 7L/N152Т Al 2 V/S15F/Y31Н/Т41 G/T 13 OA/Р13 7L/N152Т 88 88 178 178 I67F/L70R/E88G/A91 G/T 120S/T13 0 А I67F/L70R/E88G/A91 G/T 120S/T13 0 A 89 89 179 179 E24G/L25P/L70Q/T120S E24G/L25P/L70Q/T120S 90 90 180 180 А91G/F92L/F108L/T120S А91G/F92L/F108L/T120S 91 91 181 181 R29D/Y31L/Q33H/K36G/M38I/T41A/M43R/M47T/E81V/L85R/K89 N/A91T/F92P/K93V/R94L/I118T/N149S R29D/Y31L/Q33H/K36G/M38I/T41A/M43R/M47T/E81V/L85R/K89 N/A91T/F92P/K93V/R94L/I118T/N149S 92 92 182 182 R29D/Y31L/Q3 ЗН/КЗ 6G/M3 8I/T41A/M43R/M47T/E81V/L85R/K89 N/A91T/F92P/K93V/R94L/N144S/N149S R29D/Y31L/Q3 ZN/KZ 6G/M3 8I/T41A/M43R/M47T/E81V/L85R/K89 N/A91T/F92P/K93V/R94L/N144S/N149S 93 93 R29D/Y31L/Q33H/K36G/M38I/T41A/M42T/M43R/M47T/E81V/L85 R/K89N/А91T/F92P/K93 V/R94L/L148 S/N149 S R29D/Y31L/Q33H/K36G/M38I/T41A/M42T/M43R/M47T/E81V/L85 R/K89N/A91T/F92P/K93 V/R94L/L148 S/N149 S 94 94 183 183 E24G/R29D/Y31L/Q33H/K36G/M38I/T41A/M43R/M47T/F59L/E81 E24G/R29D/Y31L/Q33H/K36G/M38I/T41A/M43R/M47T/F59L/E81 95 95 184 184

- 70 044346- 70 044346

V/L85R/K89N/A91T/F92P/K93 V/R94L/H96R/N149S/C182S V/L85R/K89N/A91T/F92P/K93 V/R94L/H96R/N149S/C182S R29D/Y31L/Q3 ЗН/КЗ 6G/M3 8I/T41A/M43R/M47T/E81V/L85R/K89 N/A91T/F92P/K93 V/R94L/N149S R29D/Y31L/Q3 ZN/KZ 6G/M3 8I/T41A/M43R/M47T/E81V/L85R/K89 N/A91T/F92P/K93 V/R94L/N149S 96 96 R29V/M43Q/E81R/L85I/K89R/D90L/A91E/F92N/K93Q/R94G R29V/M43Q/E81R/L85I/K89R/D90L/A91E/F92N/K93Q/R94G 97 97 185 185 T41I/A91G T41I/A91G 98 98 186 186 K89R/D90K/A91G/F92Y/K93R/N122S/N177S K89R/D90K/A91G/F92Y/K93R/N122S/N177S 99 99 187 187 K89R/D90K/А91G/F92 Y/K93R K89R/D90K/A91G/F92 Y/K93R 100 100 K36G/K37Q/M38I/F59L/E81V/L85R/K89N/A91T/F92P/K93V/R94L/ E99G/T130A/N149S K36G/K37Q/M38I/F59L/E81V/L85R/K89N/A91T/F92P/K93V/R94L/ E99G/T130A/N149S 101 101 188 188 Е8 8D/K89R/D90K/A91G/F92 Y/K93R E8 8D/K89R/D90K/A91G/F92 Y/K93R 102 102 189, 543 189, 543 КЗ 6G/K3 7Q/M3 8I/L40M KZ 6G/K3 7Q/M3 8I/L40M 103 103 190 190 K36G K36G 104 104 191 191 R29H/Y31Н/Т41G/Y87N/E8 8G/K89E/D90N/A91G/P109S R29H/Y31Н/Т41G/Y87N/E8 8G/K89E/D90N/A91G/P109S 105 105 192 192 Al 2Т/Н18L/M43 V/F59L/E77K/P109S/I118Т Al 2Т/Н18L/M43 V/F59L/E77K/P109S/I118Т 106 106 193 193 R29V/Y3 IF/КЗ 6G/M3 8L/M43Q/E81R/V83I/L85I/K89R/D90L/A91Е/ F92N/K93Q/R94G R29V/Y3 IF/KZ 6G/M3 8L/M43Q/E81R/V83I/L85I/K89R/D90L/A91E/ F92N/K93Q/R94G 107 107 194 194 V68M/L70P/L72P/K86E V68M/L70P/L72P/K86E 108 108 195 195 L70Q/A91G/N144D L70Q/A91G/N144D 508 508 L70Q/ А91G/1118 А/Т 120 S/T 13 0 А/К169Е L70Q/ A91G/1118 A/T 120 S/T 13 0 A/K169E 509 509 V4M/L70Q/A91G/1118 V/T120S/T13 0А/К169Е V4M/L70Q/A91G/1118 V/T120S/T13 0A/K169E 510 510 L70Q/А91G/1118 V/T 120 S/T 13 0 А/К 169Е L70Q/A91G/1118 V/T 120 S/T 13 0 A/K 169E 511 511 L70Q/А91G/1118 V/T 120 S/T 13 0 А L70Q/A91G/1118 V/T 120 S/T 13 0 A 512 512 V20L/L70Q/А91S/1118 V/T 120 S/T 13 0 А V20L/L70Q/A91S/1118 V/T 120 S/T 13 0 A 513 513 L70Q/А91G/E117G/1118 V/T 120 S/T 13 0 А L70Q/A91G/E117G/1118 V/T 120 S/T 13 0 A 514 514 А91G/1118 V/T 120 S/T 13 0 А A91G/1118 V/T 120 S/T 13 0 A 515 515 L70R/A91G/I118V/T120S/T130A/T199S L70R/A91G/I118V/T120S/T130A/T199S 516 516 L70Q/E81А/А91G/1118 V/T 120 S/1127Т/Т13 0 А L70Q/E81A/A91G/1118 V/T 120 S/1127T/T13 0 A 517 517 Т2 8 S/L70Q/A91G/E95K/1118 V/T 120 S/1126 V/T 13 0 А/К 169Е T2 8 S/L70Q/A91G/E95K/1118 V/T 120 S/1126 V/T 13 0 A/K 169E 518 518 N63 S/L70Q/A91G/S114T/1118 V/T 120 S/T 13 0 А N63 S/L70Q/A91G/S114T/1118 V/T 120 S/T 13 0 A 519 519 КЗ 6E/I67T/L70Q/A91G/1118 V/T 120 S/T 13 0 A/N152Т KZ 6E/I67T/L70Q/A91G/1118 V/T 120 S/T 13 0 A/N152Т 520 520 Е5 2G/L70Q/A91G/D107N/1118 V/T 120 S/T 13 0 А/К 169Е E5 2G/L70Q/A91G/D107N/1118 V/T 120 S/T 13 0 A/K 169E 521 521 K37E/F59S/L70Q/A91G/I118V/T120S/T130A/K185E K37E/F59S/L70Q/A91G/I118V/T120S/T130A/K185E 522 522 D60 V/A91G/1118 V/T 120S/T13 0АК169Е D60 V/A91G/1118 V/T 120S/T13 0АК169Э 523 523 K54M/L70Q/A91 G/Yl 64Н/Т120S K54M/L70Q/A91 G/Yl 64Н/Т120S 524 524 М3 8T/L70Q/E77G/A91G/1118 V/T 120 S/T 13 0 A/N 152Т M3 8T/L70Q/E77G/A91G/1118 V/T 120 S/T 13 0 A/N 152T 525 525 Y31Н/Т41G/M43L/L70Q/А91G/1118 V/T 120 S/1126 V/T 13 0 А Y31Н/Т41G/M43L/L70Q/А91G/1118 V/T 120 S/1126 V/T 13 0 A 526 526 LS656H/D90G/T110A/F116L LS656H/D90G/T110A/F116L 527 527 R29H/E52G/D90N/I118 V/T 120 S/T 13 0 А R29H/E52G/D90N/I118 V/T 120 S/T 13 0 A 528 528 R29H/E52G/D90N/I118 V/T 120 S/T 13 0 А R29H/E52G/D90N/I118 V/T 120 S/T 13 0 A 529 529 I67T/L70Q/A91G/1118 V/T 120 S I67T/L70Q/A91G/1118 V/T 120 S 530 530 L70Q/А91G/T110 A/1118 V/T 120 S/T 13 0 А L70Q/A91G/T110 A/1118 V/T 120 S/T 13 0 A 531 531 М3 8 V/T41D/M431/W5 0G/D76G/V83 A/K89E/1118 V/T 120 S/1126 V/T 1 ЗОА M3 8 V/T41D/M431/W5 0G/D76G/V83 A/K89E/1118 V/T 120 S/1126 V/T 1 ZOA 532 532 Al 2 V/S15F/Y31Н/МЗ 8L/T41G/M43L/D90N/T13 0 А/Р13 7L/N149D/N 152Т Al 2 V/S15F/Y31Н/МЗ 8L/T41G/M43L/D90N/T13 0 А/Р13 7L/N149D/N 152Т 533 533 I67F/L70R/E8 8G/ А91G/1118 V/T 120 S/T 13 0 А I67F/L70R/E8 8G/ A91G/1118 V/T 120 S/T 13 0 A 534 534 E24G/L25P/L70Q/A91G/I118 VT120S/N152Т E24G/L25P/L70Q/A91G/I118 VT120S/N152T 535 535 А91G/F92L/F108L/1118 V/T 120S А91G/F92L/F108L/1118 V/T 120S 536 536 E88D/K89R/D90K/A91G/F92Y/K93R/N122S/N177S E88D/K89R/D90K/A91G/F92Y/K93R/N122S/N177S 537 537 K36G/K3 7Q/M3 8I/L40M/F59L/E81V/L85R/K89N/A91T/F92P/K93 V /R94L/E99G/T13 0A/N149S K36G/K3 7Q/M3 8I/L40M/F59L/E81V/L85R/K89N/A91T/F92P/K93 V /R94L/E99G/T13 0A/N149S 539 539 K36G/L40M K36G/L40M 540 540 542, 544 542, 544

Таблица 4Table 4

Примерные вариантные полипептиды NKp30Exemplary NKp30 variant polypeptides

Мутация(и) Mutation(s) ECD SEQ ID NO ECD SEQ ID NO IgCподобный домен SEQ ID NO IgC-like domain SEQ ID NO IgVподобный домен SEQ ID NO IgV-like domain SEQ ID NO Дикий тип Wild type 54 54 214 214 929 929 L30V/A60V/S64P/S86G L30V/A60V/S64P/S86G 143 143 215 215 504 504 L30V L30V 144 144 216 216 930 930 A60V A60V 145 145 217 217 931 931 S64P S64P 146 146 218 218 932 932 S86G S86G 147 147 219 219 933 933

- 71 044346- 71 044346

Таблица 5Table 5

Примерные вариантные полипептиды CD86Exemplary CD86 variant polypeptides

Мутация(и) Mutation(s) ECD SEQ ID NO ECD SEQ ID NO IgV SEQ ID NO IgV SEQ ID NO Дикий тип Wild type 29 29 220 220 Q35H/H90L/Q102H Q35H/H90L/Q102H 148 148 221 221 Q35H Q35H 149 149 222 222 H90L H90L 150 150 223 223 Q102H Q102H 151 151 224 224

Количество таких доменов IgSF с немодифицированной или модифицированной аффинностью, присутствующих в стековой конструкции иммуномодулирующего белка (будь то комбинации дикого типа или компоновки не дикого типа) составляет, по меньшей мере, 2, 3, 4 или 5 и в некоторых воплощениях точно 2, 3, 4 или 5 доменов IgSF (при этом определение количества доменов IgSF с модифицированной аффинностью игнорирует любые их фракционные последовательности неспецифического связывания и/или по существу иммунологически неактивные фракционные последовательности).The number of such unmodified or affinity modified IgSF domains present in an immunomodulatory protein stack construct (whether wild-type or non-wild-type combinations) is at least 2, 3, 4, or 5, and in some embodiments exactly 2, 3. 4 or 5 IgSF domains (whereby the determination of the number of affinity modified IgSF domains ignores any nonspecific binding fractional sequences thereof and/or substantially immunologically inactive fractional sequences).

В некоторых воплощениях стекового иммуномодулирующего белка, представленного в данном описании, число доменов IgSF составляет, по меньшей мере, 2, где количество IgSF доменов с модифицированной или немодифицированной аффинностью независимо друг от друга составляет по меньшей мере: 0, 1, 2, 3, 4, 5 или 6. Таким образом, количество доменов с модифицированной аффинностью IgSF и количество доменов IgSF с немодифицированной аффинностью, соответственно (домен IgSF модифицированной аффинностью: домен IgSF немодифицированной аффинностью), может составлять точно или не менее: 2:0 (с модифицированной аффинностью дикого типа), 0:2, 2:1, 1:2, 2:2, 2:3, 3:2, 2:4, 4:2, 1:1, 1:3, 3:1, 1:4, 4:1, 1:5 или 5:1.In some embodiments of the stacked immunomodulatory protein provided herein, the number of IgSF domains is at least 2, wherein the number of independently modified or unmodified IgSF domains is at least: 0, 1, 2, 3, 4 , 5 or 6. Thus, the number of affinity-modified IgSF domains and the number of unaffinity-modified IgSF domains, respectively (affinity-modified IgSF domain: unaffinity-modified IgSF domain) can be exactly or no less than: 2:0 (affinity-modified wild type), 0:2, 2:1, 1:2, 2:2, 2:3, 3:2, 2:4, 4:2, 1:1, 1:3, 3:1, 1:4 , 4:1, 1:5 or 5:1.

В некоторых воплощениях стекового иммуномодулирующего белка, по меньшей мере, два из числа доменов с немодифицированной и/или модифицированной аффинностью идентичны доменам IgSF.In some embodiments of the immunomodulatory protein stack, at least two of the unmodified and/or affinity modified domains are identical to IgSF domains.

В некоторых воплощениях стековый иммуномодулирующий белок, представленный в данном документе, включает, по меньшей мере, два домена IgSF с модифицированной и/или немодифицированной аффиностью из одного представителя IgSF, но в компоновке не дикого типа (в качестве варианта пермутации). Одним иллюстративным примером компоновки или пермутации не дикого типа является иммуномодуляторный белок, включающим порядок не дикого типа аффинности последовательностей домена IgSF с модифицированной и/или немодифицированной аффинностью относительно тех, которые обнаруживаются в ICOSL дикого типа, чьи последовательности домена IgSF служили источником вариантных доменов IgSF, предлагаемых в настоящем документе. Таким образом, в одном примере иммуномодулирующий белок может содержать проксимальный IgV и IgC, дистальный к трансмембранному домену, хотя и в форме с немодифицированной аффинностью и/или модифицированной аффинностью. Присутствие в иммуномодулирующем белке, представленном в данном документе, как комбинаций недикого типа, так и компоновок недикого типа доменов IgSF с немодифицированной и/или модифицированной аффинностью также входит в объем предоставленного объекта изобретения.In some embodiments, a stacked immunomodulatory protein provided herein includes at least two affinity-modified and/or unmodified IgSF domains from a single IgSF member, but in a non-wild-type arrangement (as a permutation option). One illustrative example of non-wild-type assembly or permutation is an immunomodulatory protein comprising the order of non-wild-type affinity-modified and/or unmodified IgSF domain sequences relative to those found in wild-type ICOSL, whose IgSF domain sequences served as the source of the variant IgSF domains proposed in this document. Thus, in one example, the immunomodulatory protein may comprise IgV proximal and IgC distal to the transmembrane domain, albeit in an unmodified and/or affinity modified form. The presence of both non-wild-type and non-wild-type combinations of unmodified and/or affinity-modified IgSF domains in the immunomodulatory protein provided herein is also within the scope of the invention.

В некоторых воплощениях стекового иммуномодулирующего белка, домены IgSF с немодифицированной и/или модифицированной аффинностью являются неидентичными (то есть, разными) доменами IgSF. Неидентичные модифицированные по аффинности домены IgSF специфически связывают в специфических условиях связывания с различными когнатными партнерами по связыванию и являются неидентичными независимо от того, являются ли референсные (например, немодифицированные) домены IgSF или домены IgSF дикого типа, из которых они были сконструированы, одинаковыми. Так, например, комбинация недикого типа, по меньшей мере, двух неидентичных доменов IgSF в иммуномодулирующем белке может включать, по меньшей мере, одну последовательность домена IgSF, чье происхождение уникально для одного ICOSL, и, по меньшей мере, одну последовательность второго IgSF, чье происхождение уникально для другого представителя семейства IgSF, который не является ICOSL, где домены IgSF иммуномодулирующего белка находятся форме с немодифицированной и/или модифицированной аффинностью. Однако в альтернативных воплощениях два неидентичных домена IgSF происходят из одной и той же последовательности доменов IgSF, но, по меньшей мере, один из них с модифицированной аффинностью, так что они специфически связывают различные когнатные партнеры связы вания.In some embodiments of the stacked immunomodulatory protein, the unmodified and/or affinity modified IgSF domains are non-identical (ie, different) IgSF domains. Non-identical affinity modified IgSF domains specifically bind under specific binding conditions to different cognate binding partners and are non-identical regardless of whether the reference (eg, unmodified) IgSF domains or the wild-type IgSF domains from which they were constructed are the same. Thus, for example, a non-wild type combination of at least two non-identical IgSF domains in an immunomodulatory protein may include at least one IgSF domain sequence whose origin is unique to one ICOSL, and at least one second IgSF sequence whose origin origin is unique to another member of the IgSF family that is not ICOSL, where the IgSF domains of the immunomodulatory protein are in the unmodified and/or affinity modified form. However, in alternative embodiments, two non-identical IgSF domains are derived from the same IgSF domain sequence, but at least one of them is with a modified affinity such that they specifically bind different cognate binding partners.

Множество доменов IgSF с немодифицированной и/или модифицированной аффинностью в полипептидной цепи стекового иммуномодулирующего белка не должно быть обязательно ковалентно связанно непосредственно между собой. В некоторых воплощениях промежуточный интервал одного или нескольких аминокислотных остатков опосредованно ковалентно связывает домены IgSF с немодифицированной аффинностью и/или домены IgSF с модифицированной аффинностью между собой. Связь может осуществляться через от N-концевые остатки с C-концевыми остатками.The plurality of unmodified and/or affinity modified IgSF domains in the polypeptide chain of a stacked immunomodulatory protein need not necessarily be covalently linked directly to each other. In some embodiments, an intervening interval of one or more amino acid residues indirectly covalently links unaffinity-modified IgSF domains and/or affinity-modified IgSF domains to each other. Communication can occur through N-terminal residues to C-terminal residues.

В некоторых воплощениях, связь может быть выполнена с помощью боковых цепей аминокислотных остатков, которые не расположены на N-конце или C-конце домена IgSF с модифицированной и/или немодифицированной аффинностью. Таким образом, связи могут быть осуществлены через концевыеIn some embodiments, the linkage can be made using side chains of amino acid residues that are not located at the N-terminus or C-terminus of the affinity-modified and/or unmodified IgSF domain. Thus, connections can be made through terminal

- 72 044346 или внутренние аминокислотные остатки или их комбинации.- 72 044346 or internal amino acid residues or combinations thereof.

В некоторых воплощениях два или более доменов IgSF, в том числе vIgD из ICOSL и один или более дополнительных доменов IgSF (например, второй или третий вариантный домен IgSF) от другого представителя семейства IgSF, ковалентно или нековалентно связаны между собой. В некоторых воплощениях два или более домена IgSF связаны прямо или опосредованно, например, через линкер. В некоторых воплощениях промежуточный участок из одного или нескольких аминокислотных остатков опосредованно ковалентно связывает домены IgSF между собой. Связь может осуществляться через от Nконцевые остатки с C-концевыми остатками. В некоторых воплощениях связь может быть осуществлена через боковые цепи аминокислотных остатков, которые не расположены на N-конце или C-конце домена(ов) IgSF. Таким образом, связи могут быть осуществлены через концевые или внутренние аминокислотные остатки или их комбинации.In some embodiments, two or more IgSF domains, including vIgD from ICOSL and one or more additional IgSF domains (eg, a second or third variant IgSF domain) from another member of the IgSF family, are covalently or non-covalently linked to each other. In some embodiments, two or more IgSF domains are linked directly or indirectly, for example, through a linker. In some embodiments, an intermediate region of one or more amino acid residues indirectly covalently links the IgSF domains together. The connection can occur through N-terminal residues with C-terminal residues. In some embodiments, the linkage may be through side chains of amino acid residues that are not located at the N-terminus or C-terminus of the IgSF domain(s). Thus, connections can be made through terminal or internal amino acid residues or combinations thereof.

В некоторых воплощениях иммуномодулирующий белок содержит, по меньшей мере, два домена IgSF, каждый из которых прямо или опосредованно связан через линкер. В некоторых воплощениях иммуномодулирующий белок содержит, по меньшей мере, три иммуномодулирующих белка, каждый из которых связан прямо или опосредованно через линкер. Различные конфигурации показаны на фиг. 16A и 16B.In some embodiments, the immunomodulatory protein contains at least two IgSF domains, each of which is linked directly or indirectly through a linker. In some embodiments, the immunomodulatory protein comprises at least three immunomodulatory proteins, each linked directly or indirectly through a linker. Various configurations are shown in FIGS. 16A and 16B.

В некоторых воплощениях один или более пептидных линкеров связывают vIgD из ICOSL и дополнительный домен IgSF (например, второй или третий вариантный домен IgSF). В некоторых воплощениях пептидный линкер может быть одним аминокислотным остатком или иметь большую длину. В некоторых воплощениях пептидный линкер имеет, по меньшей мере, один аминокислотный остаток, но не более 20, 19, 18, 17, 16, 15, 14, 13, 12, 11, 10, 9, 8, 7, 6, 5, 4, 3, 2 или 1 аминокислотного остатка. В некоторых воплощениях линкер представляет собой гибкий линкер. В некоторых воплощениях линкер представляет собой (в однобуквенном аминокислотном коде): GGGGS (4GS; SEQ ID NO: 636) или мультимеры линкера 4GS, такие как повторы 2, 3, 4 или 5 линкеров 4GS. В некоторых воплощениях пептидный линкер представляет собой (GGGGS)2 или (GGGGS)3, как указано в SEQ ID NO: 229 и 228, соответственно. В некоторых воплощениях линкер также может включать ряд остатков аланина отдельно или в дополнение к другому пептидному линкеру (такому как линкер 4GS или его мультимер). В некоторых воплощениях количество аланиновых остатков в каждой серии составляет: 2, 3, 4, 5 или 6 аланинов. В некоторых воплощениях линкер представляет собой жесткий линкер. Например, линкер представляет собой α-спиральный линкер. В некоторых воплощениях линкер представляет собой (в однобуквенном аминокислотном коде): EAAAK или мультимеры линкера EAAAK, такие как повторы 2, 3, 4 или 5 линкеров EAAAK, как указано в SEQ ID NO: 629 (1xEAAAK), SEQ ID NO: 630 (3xEAAAK) или SEQ ID NO: 631 (5xEAAAK). В некоторых воплощениях линкер может дополнительно включать аминокислоты, введенные путем клонирования и/или из сайта рестрикции, например, линкер может включать аминокислоты GS (в однобуквенном аминокислотном коде), которые введены с использованием сайта рестрикции BAMHI. В некоторых воплощениях линкер (в однобуквенном аминокислотном коде) представляет собой GSGGGGS (SEQ ID NO: 635). В некоторых примерах линкер представляет собой 2xGGGGS, за которым следуют три аланина (GGGGSGGGGSAAA; SEQ ID NO: 230).In some embodiments, one or more peptide linkers link vIgD from ICOSL and an additional IgSF domain (eg, a second or third variant IgSF domain). In some embodiments, the peptide linker can be a single amino acid residue or be longer. In some embodiments, the peptide linker has at least one amino acid residue, but not more than 20, 19, 18, 17, 16, 15, 14, 13, 12, 11, 10, 9, 8, 7, 6, 5, 4, 3, 2 or 1 amino acid residue. In some embodiments, the linker is a flexible linker. In some embodiments, the linker is (in single letter amino acid code): GGGGS (4GS; SEQ ID NO: 636) or 4GS linker multimers, such as 4GS linker repeats 2, 3, 4 or 5. In some embodiments, the peptide linker is (GGGGS)2 or (GGGGS)3, as set forth in SEQ ID NOs: 229 and 228, respectively. In some embodiments, the linker may also include a number of alanine residues alone or in addition to another peptide linker (such as a 4GS linker or a multimer thereof). In some embodiments, the number of alanine residues in each series is: 2, 3, 4, 5 or 6 alanines. In some embodiments, the linker is a rigid linker. For example, the linker is an α-helical linker. In some embodiments, the linker is (in single letter amino acid code): EAAAK or EAAAK linker multimers, such as EAAAK linker repeats 2, 3, 4, or 5, as set forth in SEQ ID NO: 629 (1xEAAAK), SEQ ID NO: 630 ( 3xEAAAK) or SEQ ID NO: 631 (5xEAAAK). In some embodiments, the linker may further include amino acids introduced by cloning and/or from a restriction site, for example, the linker may include GS (in single letter amino acid code) amino acids that are introduced using a BAMHI restriction site. In some embodiments, the linker (in single letter amino acid code) is GSGGGGS (SEQ ID NO: 635). In some examples, the linker is 2xGGGGS followed by three alanines (GGGGSGGGGSAAA; SEQ ID NO: 230).

В некоторых воплощениях домены IgSF с модифицированной и/или немодифицированной аффинностью связываются пептидными линкерами дикого типа, вставленными на N-конце и/или C-конце вторых доменов IgSF с модифицированной и/или немодифицированной аффинностью. В некоторых воплощениях присутствует лидерный пептидный линкер, вставленный на N-конце первого домена IgSF и/или первая трейлерная последовательность, вставленная на C-конце первого домена IgSF с модифицированной и/или немодифицированной аффинностью. В некоторых воплощениях присутствует второй лидерный пептидный линкер, вставленный на N-конец второго домена IgSF и/или вторая трейлерная последовательность, вставленная на C-конце второго домена IgSF с модифицированной и/или немодифицированной аффинностью. Если первый и второй домены IgSF с модифицированной и/или немодифицированной аффинностью получены из одного и того же родительского белка и связаны в одной и той же ориентации, то пептидные линкеры дикого типа между первым и вторым доменами IgSF с модифицированной и/или немодифицированной аффинностью не дублируются. Например, когда первый трейлерный пептидный линкер дикого типа и второй лидерный пептидный линкер дикого типа являются одинаковыми, иммуномодулирующий белок II типа не включает ни первый трейлерный пептидный линкер дикого типа, ни второй лидерный пептидный линкер дикого типа.In some embodiments, the affinity-modified and/or unmodified IgSF domains are linked by wild-type peptide linkers inserted at the N-terminus and/or C-terminus of the second affinity-modified and/or unmodified IgSF domains. In some embodiments, there is a leader peptide linker inserted at the N-terminus of the first IgSF domain and/or a first trailer sequence inserted at the C-terminus of the first affinity-modified and/or unmodified IgSF domain. In some embodiments, there is a second leader peptide linker inserted at the N-terminus of the second IgSF domain and/or a second trailer sequence inserted at the C-terminus of the second IgSF domain with modified and/or unmodified affinity. If the first and second affinity-modified and/or unmodified IgSF domains are derived from the same parent protein and linked in the same orientation, then the wild-type peptide linkers between the first and second affinity-modified and/or unmodified IgSF domains are not duplicated . For example, when the first wild-type trailer peptide linker and the second wild-type leader peptide linker are the same, the type II immunomodulatory protein includes neither the first wild-type trailer peptide linker nor the second wild-type leader peptide linker.

В некоторых воплощениях иммуномодулирующие белки II типа включают первый лидерный пептидный линкер дикого типа, вставленный на N-конце первого домена IgSF с модифицированной и/или немодифицированной аффинностью, в котором первый лидерный пептидный линкер дикого типа включает, по меньшей мере, 5 (например, по меньшей мере, около любое количество из 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15 или более) последовательных аминокислот из промежуточной последовательности в белке дикого типа из которых первый домен IgSF с модифицированной и/или немодифицированной аффинностью получен между родительским доменом IgSF и непосредственно предшествующим доменом (таким как сигнальный пептид или домен IgSF). В некоторых воплощениях первый лидерный пептидный линкер дикого типа включает всю промежуточную последовательность в белке дикого типа, из которой получа- 73 044346 ют первый домен IgSF с модифицированной и/или немодифицированной аффинностью между родительским доменом IgSF и непосредственно предшествующим доменом (таким как сигнальный пептид или домен IgSF).In some embodiments, type II immunomodulatory proteins include a first wild-type leader peptide linker inserted at the N-terminus of a first affinity-modified and/or unmodified IgSF domain, wherein the first wild-type leader peptide linker includes at least 5 (e.g., at least about any number of 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15 or more) consecutive amino acids from the intervening sequence in the wild-type protein of which the first affinity-modified and/or unmodified IgSF domain derived between the parent IgSF domain and the immediately preceding domain (such as a signal peptide or IgSF domain). In some embodiments, the wild-type first leader peptide linker includes all of the intervening sequence in the wild-type protein from which the first IgSF domain is derived, with modified and/or unmodified affinity between the parent IgSF domain and the immediately preceding domain (such as a signal peptide or domain IgSF).

В некоторых воплощениях иммуномодулирующих белки II типа дополнительно включает первый трейлерный пептидный линкер дикого типа, вставленный на C-конце первого домена IgSF с модифицированной и/или немодифицированной аффинностью, в котором первый трейлерный пептидный линкер дикого типа включает, по меньшей мере, 5 (например, по меньшей мере, около любое количество из 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15 или более) последовательных аминокислот из промежуточной последовательности в белке дикого типа, из которого получают первый домен IgSF с модифицированной и/или немодифицированной аффинностью между родительским доменом IgSF и непосредственно следующим доменом (таким как домен IgSF или трансмембранный домен). В некоторых воплощениях первый трейлерный пептидный линкер дикого типа включает всю промежуточную последовательность в белке дикого типа, из которой происходит первый домен IgSF с модифицированной и/или немодифицированной аффинностью между родительским доменом IgSF и непосредственно следующим доменом (например, доменом IgSF или трансмембранным доменом).In some embodiments, the type II immunomodulatory proteins further comprise a first wild-type trailer peptide linker inserted at the C-terminus of the first affinity-modified and/or unmodified IgSF domain, wherein the first wild-type trailer peptide linker includes at least 5 (e.g. at least about any number of 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15 or more) consecutive amino acids from the intervening sequence in the wild-type protein from which the first modified IgSF domain is derived or an unmodified affinity between the parent IgSF domain and the immediately following domain (such as an IgSF domain or transmembrane domain). In some embodiments, the first wild-type trailer peptide linker includes all of the intervening sequence in the wild-type protein from which the first IgSF domain is derived, with modified and/or unmodified affinity between the parent IgSF domain and the immediately following domain (e.g., IgSF domain or transmembrane domain).

В некоторых воплощениях иммуномодулирующий белок II типа дополнительно включает второй лидерный пептидный линкер дикого типа, вставленный на N-конце второго домена IgSF с модифицированной и/или немодифицированной аффинностью, в котором второй лидерный пептидный линкер дикого типа включает, по меньшей мере, 5 (например, по меньшей мере, около любое количество из 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15 или более) последовательных аминокислот из промежуточной последовательности белка дикого типа из которой получают второй домен IgSF с модифицированной и/или немодифицированной аффинностью между родительским доменом IgSF и непосредственно предшествующим доменом (таким как сигнальный пептид или домен IgSF). В некоторых воплощениях второй лидерный пептидный линкер дикого типа включает всю промежуточную последовательность в белке дикого типа, из которой получен второй домен IgSF с модифицированной и/или немодифицированной аффинностью, между родительским доменом IgSF и непосредственно предшествующим доменом (таким как сигнальный пептид или домен IgSF).In some embodiments, the type II immunomodulatory protein further includes a second wild-type leader peptide linker inserted at the N-terminus of a second affinity-modified and/or unmodified IgSF domain, wherein the second wild-type leader peptide linker includes at least 5 (e.g. at least about any number of 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15 or more) consecutive amino acids from the intervening wild-type protein sequence from which the modified and/or unmodified second IgSF domain is derived affinity between the parent IgSF domain and the immediately preceding domain (such as a signal peptide or IgSF domain). In some embodiments, the wild-type second leader peptide linker includes all of the intervening sequence in the wild-type protein from which the second affinity-modified and/or unmodified IgSF domain is derived, between the parent IgSF domain and the immediately preceding domain (such as a signal peptide or IgSF domain).

В некоторых воплощениях иммуномодулирующий белок II типа дополнительно включает второй продольный пептидный линкер дикого типа, вставленный в C-конце второе домена IgSF с модифицированной и/или немодифицированной аффинностью, в котором второй пептидный линкер дикого типа включает, по меньшей мере, 5 (например, по меньшей мере, любое количество из около 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15 или более) последовательных аминокислот из промежуточной последовательности в белке дикого типа, из которого получают второй домен IgSF с модифицированной и/или немодифицированной аффинностью между родительским доменом IgSF и непосредственно следующим доменом (таким как домен IgSF или трансмембранный домен). В некоторых воплощениях второй конечный пептидный линкер дикого типа включает всю промежуточную последовательность в белке дикого типа, из которой получен второй домен IgSF с модифицированной и/или немодифицированной аффинностью между родительским доменом IgSF и непосредственно следующим доменом (например, доменом IgSF или трансмембранным доменом).In some embodiments, the type II immunomodulatory protein further includes a second longitudinal wild-type peptide linker inserted at the C-terminus of the second affinity-modified and/or unmodified IgSF domain, wherein the second wild-type peptide linker includes at least 5 (e.g., at least any number of about 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15 or more) consecutive amino acids from the intervening sequence in the wild-type protein from which the second IgSF domain with the modified and/or unmodified affinity between the parent IgSF domain and the immediately following domain (such as the IgSF domain or transmembrane domain). In some embodiments, the wild-type second terminal peptide linker includes all of the intervening sequence in the wild-type protein from which a second IgSF domain is derived with modified and/or unmodified affinity between the parent IgSF domain and the immediately following domain (e.g., an IgSF domain or a transmembrane domain).

Пример лидерной последовательности и трейлерной последовательности для белка типа II, содержащего домен CD80 IgSF, представлен в SEQ ID NO: 231 и SEQ ID NO: 232. Пример лидерной последовательности и трейлерной последовательности для белка типа II, содержащего домен ICOSL IgSF, представлен в SEQ ID NO: 233 и 234. Примеры лидерной последовательности и трейлерной последовательности для белка типа II, содержащего домен CD86 IgSF, изложены в любой из SEQ ID NO: 236-238. Пример линкерной последовательности дикого типа для белка типа II, содержащего домен IgGF NKp30, представлен в SEQ ID NO: 235.An example leader sequence and trailer sequence for a type II protein containing a CD80 IgSF domain is provided in SEQ ID NO: 231 and SEQ ID NO: 232. An example leader sequence and trailer sequence for a type II protein containing an ICOSL IgSF domain is provided in SEQ ID NOs: 233 and 234. Examples of a leader sequence and a trailer sequence for a type II IgSF CD86 domain-containing protein are set forth in any one of SEQ ID NOs: 236-238. An example of a wild-type linker sequence for a type II NKp30 IgGF domain-containing protein is provided in SEQ ID NO: 235.

1. Моновалентные.1. Monovalent.

В данном документе представлены иммуномодулирующие белки, содержащие вариантный полипептид ICOSL, которые является моновалентными. В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL моновалентного иммуномодулирующего белка прямо или опосредованно связан с другим фрагментом. В некоторых воплощениях дополнительная часть представляет собой белок, пептид, небольшую молекулу или нуклеиновую кислоту. В некоторых воплощениях одновалентный иммуномодулирующий белок представляет собой гибридный белок.Presented herein are immunomodulatory proteins containing a variant ICOSL polypeptide that are monovalent. In some embodiments, the variant monovalent immunomodulatory protein ICOSL polypeptide is linked directly or indirectly to another moiety. In some embodiments, the additional portion is a protein, peptide, small molecule, or nucleic acid. In some embodiments, the monovalent immunomodulatory protein is a fusion protein.

В некоторых воплощениях фрагмент представляет собой молекулу, продлевающую период полужизни. Примеры таких молекул, продлевающих период полужизни, включают, без ограничения указанным, альбумин, альбумин-связывающий полипептид, Pro/Ala/Ser (PAS), C-концевой пептид (CTP) бетасубъединицы хорионического гонадотропина человека, полиэтиленгликоль (PEG), длинные неструктурированные гидрофильные последовательности аминокислот (XTEN), гидроксиэтилкрахмал (HES), альбумин-связывающая малая молекула или их комбинацию.In some embodiments, the moiety is a half-life extending molecule. Examples of such half-life prolonging molecules include, but are not limited to, albumin, albumin-binding polypeptide, Pro/Ala/Ser (PAS), human chorionic gonadotropin beta-subunit C-terminal peptide (CTP), polyethylene glycol (PEG), long unstructured hydrophilic amino acid sequence (XTEN), hydroxyethyl starch (HES), albumin-binding small molecule, or a combination thereof.

В некоторых воплощениях иммуномодулирующий полипептид, содержащий вариант ICOSL, может включать конформационно неупорядоченные полипептидные последовательности, состоящие из аминокислот Pro, Ala и Ser (см., например, WO2008/155134; SEQ ID NO: 904). В некоторых случаях аминокис- 74 044346 лотный повтор включает, по меньшей мере, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30 или более аминокислотных остатков, где каждый повтор включает остаткок(ки) Ala, Ser и Pro. Таким образом, в данном документе представлен иммуномодулирующий белок, представляющий собой PAS-илированный белок, в котором вариантный полипептид ICOSL прямо или опосредованно связан через линкер с Pro/Ala/Ser (PAS). В некоторых воплощениях может использоваться одна или несколько дополнительных линкерных структур.In some embodiments, the immunomodulatory polypeptide comprising the ICOSL variant may include conformationally disordered polypeptide sequences consisting of the amino acids Pro, Ala and Ser (see, for example, WO2008/155134; SEQ ID NO: 904). In some cases, the amino acid repeat includes at least 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20 , 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30 or more amino acid residues, where each repeat includes Ala, Ser and Pro residue(s). Thus, provided herein is an immunomodulatory protein that is a PASylated protein in which the ICOSL variant polypeptide is directly or indirectly linked via a linker to Pro/Ala/Ser (PAS). In some embodiments, one or more additional linker structures may be used.

В некоторых воплощениях фрагмент облегчает обнаружение или очистку вариантного полипептида ICOSL. В некоторых случаях иммуномодулирующий полипептид содержит метку или слитый домен, например, метка аффинности или очистки, прямо или опосредованно связанная с N- и/или с-концом полипептида ICOSL. Известны различные подходящие полипептидные метки и/или гибридные домены, которые включают, без ограничения указанным, полигистидиновую (His) метку, FLAG-метку (SEQ ID NO: 865), Myc-метку и метку на основе флуоресцентного белка (например, EGFP, указанные в SEQ ID NO: 858, 859 или 896). В некоторых случаях иммуномодулирующий полипептид, включающий вариант ICOSL, содержит, по меньшей мере, шесть остатков гистидина (изложенных в SEQ ID NO: 864). В некоторых случаях иммуномодулирующий полипептид, включающий вариант ICOSL, дополнительно включает различные комбинации фрагментов. Например, иммуномодулирующий полипептид, включающий вариант ICOSL, дополнительно включает одну или несколько полигистидиновых меток и FLAG-меток.In some embodiments, the fragment facilitates the detection or purification of the ICOSL variant polypeptide. In some cases, the immunomodulatory polypeptide contains a tag or fusion domain, such as an affinity or purification tag, directly or indirectly linked to the N- and/or C-terminus of the ICOSL polypeptide. Various suitable polypeptide tags and/or fusion domains are known, which include, but are not limited to, a polyhistidine (His) tag, a FLAG tag (SEQ ID NO: 865), a Myc tag, and a fluorescent protein tag (e.g., EGFP, indicated in SEQ ID NO: 858, 859 or 896). In some cases, the immunomodulatory polypeptide comprising the ICOSL variant contains at least six histidine residues (set forth in SEQ ID NO: 864). In some cases, the immunomodulatory polypeptide comprising the ICOSL variant further includes various combinations of fragments. For example, an immunomodulatory polypeptide comprising an ICOSL variant further includes one or more polyhistidine tags and FLAG tags.

В некоторых воплощениях полипептид ICOSL связан с модифицированной константной областью тяжелой цепи иммуноглобулина (Fc), которая остается в моновалентной форме, такой как представлена в SEQ ID NO: 472.In some embodiments, the ICOSL polypeptide is linked to a modified immunoglobulin heavy chain constant region (Fc) that remains in a monovalent form such as that shown in SEQ ID NO: 472.

2. Бивалентные.2. Bivalent.

В некоторых воплощениях иммуномодулирующий белок, содержащий вариант ICOSL, является многовалентным, таким как бивалентный. В некоторых аспектах иммуномодулирующий белок прямо или опосредованно связан через линкер с доменом мультимеризации. В некоторых аспектах домен мутлимизации увеличивает период полужизни молекулы.In some embodiments, the ICOSL variant-containing immunomodulatory protein is multivalent, such as bivalent. In some aspects, the immunomodulatory protein is directly or indirectly linked via a linker to the multimerization domain. In some aspects, the mutlimization domain increases the half-life of the molecule.

Взаимодействие двух или более вариантных полипептидов ICOSL может быть облегчено за счет их связи, прямо или опосредованно, с любым фрагментом или другим полипептидом, которые сами способны взаимодействовать с образованием стабильной структуры. Например, отдельные кодируемые варианты полипептидных цепей ICOSL могут быть соединены путем мультимеризации, при этом мультимеризация полипептидов опосредуется мультимеризационным доменом. Как правило, домен мультимеризации обеспечивает формирование стабильного межбелкового взаимодействия между первым вариантным полипептидом ICOSL и вторым вариантным полипептидом ICOSL. Гомо- или гетеромультимерные полипептиды могут быть получены при коэкспрессии отдельных вариантных полипептидов ICOSL. Первый и второй вариантные полипептиды ICOSL могут быть одинаковыми или разными.The interaction of two or more variant ICOSL polypeptides can be facilitated by their association, directly or indirectly, with any fragment or other polypeptide that is itself capable of interacting to form a stable structure. For example, individual encoded variants of ICOSL polypeptide chains can be linked by multimerization, with multimerization of the polypeptides mediated by a multimerization domain. Typically, the multimerization domain allows for the formation of a stable protein-protein interaction between the first variant ICOSL polypeptide and the second variant ICOSL polypeptide. Homo- or heteromultimeric polypeptides can be obtained by co-expression of individual ICOSL variant polypeptides. The first and second variant ICOSL polypeptides may be the same or different.

В некоторых воплощениях домен мультимеризации включает любой, способный образовывать стабильное белок-белковое взаимодействие. Домены мультимеризации могут взаимодействовать через последовательность иммуноглобулина (например, Fc-домен; см., например, International Patent Pub. No. WO 93/10151 и WO 2005/063816 US; U.S. публ. No. 2006/0024298; U.S. Пат. США № 5457035); лейциновую молнию (например, из ядерных трансформирующих белков fos и jun или протоонкогена с-тус или из белка общего контроля азота (GCN4)) (см., например, Busch and Sassone-Corsi (1990) Trends Genetics, 6: 36-40; Gentz et al., (1989) Science, 243: 1695-1699); гидрофобную область; гидрофильную область; или свободный тиол, который образует межмолекулярную дисульфидную связь между химерными молекулами гомо- или гетеромультимера. Кроме того, домен мультимеризации может включать аминокислотную последовательность, содержащую выпуклость, комплементарную аминокислотной последовательности, содержащей углубление, как описано, например, в пат. США США № 5731168; международных патентных публ. No. WO 98/50431 и WO 2005/063816; Ridgway et al. (1996) Protein Engineering, 9:617621. Такая область мультимеризации может быть сконструирована таким образом, что стерические взаимодействия не только способствовали стабильному взаимодействию, но также способствовали образованию гетеродимеров вместо гомодимеров из смеси химерных мономеров. Обычно выступы конструируют путем замены небольших аминокислотных боковых цепей на границе первого полипептида более крупными боковыми цепями (например, тирозином или триптофаном). Компенсаторные полости идентичного или похожего размера с крупной боковой цепью создают в области контакта второго полипептида путем замены аминокислотных боковых цепей на боковые цепи меньшего размера (например, аланин или треонин). Примерные домены мультимеризации описаны ниже.In some embodiments, the multimerization domain includes any capable of forming a stable protein-protein interaction. Multimerization domains can interact through the immunoglobulin sequence (eg, Fc domain; see, for example, International Patent Pub. No. WO 93/10151 and WO 2005/063816 US; U.S. Pub. No. 2006/0024298; U.S. Pat. US No. 5457035); leucine zipper (eg, from the nuclear transforming proteins fos and jun or the c-myc proto-oncogene or from the general nitrogen control protein (GCN4)) (see, eg, Busch and Sassone-Corsi (1990) Trends Genetics, 6: 36-40; Gentz et al., (1989) Science, 243: 1695-1699); hydrophobic region; hydrophilic region; or a free thiol that forms an intermolecular disulfide bond between chimeric homo- or heteromultimer molecules. In addition, the multimerization domain may include an amino acid sequence containing a bulge complementary to an amino acid sequence containing a depression, as described, for example, in US Pat. US US No. 5731168; international patent publications No. WO 98/50431 and WO 2005/063816; Ridgway et al. (1996) Protein Engineering, 9:617621. Such a multimerization region can be designed such that steric interactions not only promote stable interactions but also promote the formation of heterodimers instead of homodimers from a mixture of chimeric monomers. Typically, overhangs are constructed by replacing small amino acid side chains at the interface of the first polypeptide with larger side chains (eg, tyrosine or tryptophan). Compensatory cavities of identical or similar size with a large side chain are created at the interface of the second polypeptide by replacing the amino acid side chains with smaller side chains (eg, alanine or threonine). Exemplary multimerization domains are described below.

Вариантный полипептид ICOSL может быть присоединен где угодно, но обычно через его N- или C-конец, к N- или C-концу домена мультимеризации с образованием химерного полипептида. Связь может быть прямой или опосредованной с помощью линкера. Кроме того, химерный полипептид может представлять собой гибридный белок или может быть образован путем химической связи, такой как ковалентные или нековалентные взаимодействия. Например, при получении химерного полипептида, содержащего домен мультимеризации, нуклеиновая кислота, кодирующая весь или часть вариантного полипептида ICOSL, может быть функционально связана с нуклеиновой кислотой, кодирующей последовательность домена мультимеризации, прямо, опосредованно или необязательно, через линкерный домен.The ICOSL variant polypeptide can be fused anywhere, but typically through its N- or C-terminus to the N- or C-terminus of the multimerization domain to form a chimeric polypeptide. The connection can be direct or indirect via a linker. In addition, the chimeric polypeptide may be a fusion protein or may be formed through chemical bonding such as covalent or non-covalent interactions. For example, when producing a chimeric polypeptide containing a multimerization domain, a nucleic acid encoding all or part of a variant ICOSL polypeptide can be operably linked to a nucleic acid encoding a multimerization domain sequence, directly, indirectly, or optionally through a linker domain.

- 75 044346- 75 044346

В некоторых случаях конструкция кодирует химерный белок, где C-конец вариантного полипептидаIn some cases, the construct encodes a chimeric protein, where the C terminus of the variant polypeptide

ICOSL соединен с N-концом домена мультимеризации. В некоторых случаях конструкция кодирует химерный белок, где N-конец вариантного полипептида ICOSL соединен с N-или C-концом домена мультимеризации.ICOSL is connected to the N-terminus of the multimerization domain. In some cases, the construct encodes a chimeric protein where the N-terminus of the variant ICOSL polypeptide is connected to the N- or C-terminus of a multimerization domain.

Полипептидный мультимер содержит два химерных белка, созданных путем прямого или опосредованного связывания двух одинаковых или разных вариантных полипептидов ICOSL прямо или опосредованно с доменом мультимеризации. В некоторых примерах, где домен мультимеризации представляет собой полипептид, гибридный ген, кодирующий вариантный полипептид ICOSL и домен мультимеризации, вставляется в соответствующий экспрессирующий вектор. Полученный химерный или гибридный белок может экспрессироваться в клетках-хозяевах, трансформированных рекомбинантным экспрессирующим вектором, и может собираться в мультимеры, где домены мультимеризации взаимодействуют с образованием многовалентных полипептидов. Химерная связь доменов мультимеризации вариантных полипептидов ICOSL может быть осуществлена с использованием гетеробифункциональных линкеров.A polypeptide multimer contains two chimeric proteins created by binding two identical or different variant ICOSL polypeptides directly or indirectly to a multimerization domain. In some examples, where the multimerization domain is a polypeptide, a fusion gene encoding the variant ICOSL polypeptide and the multimerization domain is inserted into an appropriate expression vector. The resulting chimeric or fusion protein can be expressed in host cells transformed with a recombinant expression vector and can assemble into multimers where the multimerization domains interact to form multivalent polypeptides. Chimeric linkage of multimerization domains of variant ICOSL polypeptides can be accomplished using heterobifunctional linkers.

Полученные в результате химерные полипептиды, такие как гибридные белки и образованные из них мультимеры, могут быть очищены любым подходящим способом, таким как, например, аффинная хроматография на колонках с протеином A или протеином G. Если две молекулы нуклеиновой кислоты, кодирующие разные полипептиды, трансформируются в клетки, происходит образование гомо- и гетеродимеров. Условия для экспрессии можно регулировать так, чтобы образование гетеродимера было предпочтительным по сравнению с образованием гомодимера.The resulting chimeric polypeptides, such as fusion proteins and the multimers formed therefrom, can be purified by any suitable method, such as, for example, affinity chromatography on Protein A or Protein G columns. If two nucleic acid molecules encoding different polypeptides are transformed into cells, the formation of homo- and heterodimers occurs. Expression conditions can be adjusted so that heterodimer formation is favored over homodimer formation.

Иммуноглобулиновый домен.Immunoglobulin domain.

В некоторых воплощениях иммуномодулирующий белок содержит вариантный полипептид ICOSL, присоединенный к Fc-области иммуноглобулина (приводящий к иммуномодулирующий Fc-гибрид, такой как вариантный гибрид ICOSL-Fc, также называемый гибридом ICOSL vIgD-Fc). В некоторых воплощениях вариантный гибрид ICOSL-Fc также содержит один или несколько дополнительных доменов IgSF, таких как один или несколько дополнительных vIgD, связанных с vIgD ICOSL. В некоторых воплощениях присоединение вариантного полипептида ICOSL или дополнительного домена IgSF происходит на N-конце Fc. В некоторых воплощениях присоединение вариантного ICOSL или дополнительного полипептида домена IgSF происходит на C-конце Fc. В некоторых воплощениях два или более вариантных полипептида ICOSL или дополнительных вариантных IgSF-домена (одинаковых или разных) независимо присоединены на N-конце и на C-конце.In some embodiments, the immunomodulatory protein comprises a variant ICOSL polypeptide fused to the Fc region of an immunoglobulin (resulting in an immunomodulatory Fc hybrid, such as a variant ICOSL-Fc hybrid, also referred to as an ICOSL vIgD-Fc hybrid). In some embodiments, the variant ICOSL-Fc fusion also contains one or more additional IgSF domains, such as one or more additional vIgDs associated with the ICOSL vIgD. In some embodiments, the attachment of a variant ICOSL polypeptide or an additional IgSF domain occurs at the N-terminus of the Fc. In some embodiments, attachment of a variant ICOSL or additional IgSF domain polypeptide occurs at the C terminus of the Fc. In some embodiments, two or more variant ICOSL polypeptides or additional variant IgSF domains (same or different) are independently linked at the N-terminus and at the C-terminus.

В некоторых воплощениях Fc является мышиным или человеческим Fc. В некоторых воплощениях Fc представляет собой области Fc из IgG1, IgG2, IgG3 или lgG4 млекопитающих или человека. В некоторых воплощениях Fc получают из IgG1, такого как IgG1 человека. В некоторых воплощениях Fc включает аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 226, или аминокислотную последовательность, которая имеет, по меньшей мере, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99% или более идентичности последовательности с SEQ ID NO: 226.In some embodiments, the Fc is a murine or human Fc. In some embodiments, the Fc is a mammalian or human IgG1, IgG2, IgG3, or IgG4 Fc region. In some embodiments, the Fc is derived from IgG1, such as human IgG1. In some embodiments, the Fc comprises the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 226, or an amino acid sequence that is at least 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96 , 97, 98, 99% or more sequence identity to SEQ ID NO: 226.

В некоторых воплощениях Fc-область включает более одной модификации для изменения (например, уменьшения) одной или нескольких из ее нормальных функций. В целом, Fc-область отвечает за эффекторные функции, такие как комплементарно-зависимая цитотоксичность (CDC) и антителозависимая клеточная цитотоксичность (ADCC), в дополнение к антигенсвязывающей способности, которая является основной функцией иммуноглобулинов. Кроме того, последовательность FcRn, присутствующая в области Fc, играет роль регулирования уровня IgG в сыворотке путем увеличения периода полужизни in vivo путем конъюгации с рецептором FcRn in vivo. В некоторых воплощениях такие функции могут быть уменьшены или изменены в Fc для применения с предлагаемыми Fc-гибридными белками.In some embodiments, the Fc region includes more than one modification to alter (eg, reduce) one or more of its normal functions. In general, the Fc region is responsible for effector functions such as complement-dependent cytotoxicity (CDC) and antibody-dependent cellular cytotoxicity (ADCC), in addition to antigen-binding capacity, which is the main function of immunoglobulins. In addition, the FcRn sequence present in the Fc region plays a role in regulating serum IgG levels by increasing the in vivo half-life through conjugation with the FcRn receptor in vivo. In some embodiments, such functions may be reduced or altered in the Fc for use with the proposed Fc fusion proteins.

В некоторых воплощениях одна или несколько аминокислотных модификаций могут быть введены в Fc-область вариантного гибрида ICOSL-Fc, представленного в данном описании, тем самым формируя вариантную Fc-область. В некоторых воплощениях вариантная Fc-область уменьшает эффекторную функцию. Существует много примеров изменений или мутаций в последовательностях Fc, которые могут изменять эффекторную функцию. Например, WO 2000/42072, WO2006/019447, WO2012/125850, WO2015/107026, US2016/0017041 и Shields et al. J Biol. Chem. 9(2): 6591-6604 (2001) описывают примерные варианты Fc с улучшенным или уменьшенным связыванием с FcR. Содержание этих публикаций конкретно включено в данный документ ссылкой.In some embodiments, one or more amino acid modifications may be introduced into the Fc region of the variant ICOSL-Fc hybrid provided herein, thereby forming a variant Fc region. In some embodiments, the variant Fc region reduces effector function. There are many examples of changes or mutations in Fc sequences that can alter effector function. For example, WO2000/42072, WO2006/019447, WO2012/125850, WO2015/107026, US2016/0017041 and Shields et al. J Biol. Chem. 9(2): 6591-6604 (2001) describe exemplary Fc variants with improved or reduced binding to FcR. The contents of these publications are specifically incorporated herein by reference.

В некоторых воплощениях настоящего изобретения предлагаемые вариантные гибриды ICOSL-Fc содержат Fc-область, которая проявляет пониженные эффекторные функции (также называемой инертной Fc или Fc без эффекторной функции), что делает их желательным кандидатом для приложений, в которых период полужизни вариантного гибрида ICOSL -Fc in vivo является важным, а некоторые эффекторные функции (такие как CDC и ADCC) не нужны или вредны. Анализы цитотоксичности in vitro и/или in vivo могут проводиться для подтверждения сокращения/истощения активности CDC и/или ADCC. Например, анализы связывания Fc-рецептора (FcR) могут быть проведены для того, чтобы гарантировать, что вариантный ICOSL- Fc гибрид утратил способность связывания с FcyR (следовательно, вероятно, не имеет активности ADCC), но сохраняет способность связывания FcRn. Первичные клетки,In some embodiments of the present invention, the proposed ICOSL-Fc variant hybrids contain an Fc region that exhibits reduced effector functions (also referred to as inert Fc or Fc without effector function), making them a desirable candidate for applications in which the half-life of the ICOSL-Fc variant hybrid in vivo is important, and some effector functions (such as CDC and ADCC) are unnecessary or deleterious. In vitro and/or in vivo cytotoxicity assays can be performed to confirm reduction/depletion of CDC and/or ADCC activity. For example, Fc receptor (FcR) binding assays can be performed to ensure that the variant ICOSL-Fc fusion has lost FcyR binding ability (thus likely lacking ADCC activity) but retains FcRn binding ability. Primary cells

- 76 044346 опосредующие ADCC, NK-клетки, экспрессируют только FcyRIII, тогда как моноциты экспрессируют FcyRI, FcyRII и FcyRIII. Экспрессия FcR на гематопоэтических клетках приведена в табл. 3 на стр. 464 Ravetch and Kinet, Annu. Rev. Immunol. 9:457-492 (1991). Неограничивающие примеры анализов in vitro для оценки активности ADCC представляющей интерес молекулы описаны в патенте Пат. США № 5500362 (см., например, Hellstrom, I. et al. Proc. Nat'l Acad. Sci. USA 83: 7059-7063 (1986) и Hellstrom, I et al., Proc. Nat'l Acad. Sci. USA 82:1499-1502 (1985); U.S. Пат. США № 5821337 (см. Bruggemann, M. et al., J. Exp. Med. 166: 1351-1361 (1987)). Альтернативно, могут быть использованы способы нерадиоактивного анализа (см., например, нерадиоактивный анализ цитотоксичности ACTI™ для проточной цитометрии (CellTechnology, Inc. Маунтин-Вью, Калифорния; и CytoTox 96™ нерадиоактивный анализ цитотоксичности (Promega, Мэдисон, Висконсин). Полезные эффекторные клетки для таких анализов включают мононуклеарные клетки периферической крови (PBMC) и клетки-натуральные киллеры (NK). В ином случае или дополнительно активность ADCC представляющей интерес молекулы может быть оценена in vivo, например, в модели на животных, такой как описанная в Clynes et al. Proc. Nat'l Acad. Sci. USA 95:652-656 (1998). Анализы связывания C1q также могут быть проведены для подтверждения того, что гибридный вариантный ICOSL-Fc не может связывать C1q и, следовательно, не обладает активностью CDC. См., например, ELISA для определения связывания C1q и C3c в WO 2006/029879 и WO 2005/100402. Для оценки активации комплемента может быть проведен анализ CDC (см., например, Gazzano-Santoro et al., J. Immunol. Methods 202:163 (1996); Cragg, M. S. et al., Blood 101:1045-1052 (2003); b Cragg, M. S. and M. J. Glennie, Blood 103:2738-2743 (2004)). Связывание FcRn и определение клирена/полужизни in vivo также могут быть выполнены с использованием способов, известных в данной области (см., например, Petkova, SB et al., Immunol. 18(12): 1759-1769 (2006)).- 76 044346 ADCC mediating NK cells express only FcyRIII, while monocytes express FcyRI, FcyRII and FcyRIII. The expression of FcR on hematopoietic cells is shown in Table. 3 at page 464 Ravetch and Kinet, Annu. Rev. Immunol. 9:457-492 (1991). Non-limiting examples of in vitro assays for assessing ADCC activity of a molecule of interest are described in US Pat. US No. 5500362 (see, for example, Hellstrom, I. et al. Proc. Nat'l Acad. Sci. USA 83: 7059-7063 (1986) and Hellstrom, I et al., Proc. Nat'l Acad. Sci. USA 82:1499-1502 (1985);U.S. Pat. US No. 5821337 (See Bruggemann, M. et al., J. Exp. Med. 166: 1351-1361 (1987)). Alternatively, methods may be used non-radioactive assay (see, for example, the ACTI™ Non-Radioactive Cytotoxicity Assay for Flow Cytometry (CellTechnology, Inc. Mountain View, CA; and the CytoTox 96™ Non-Radioactive Cytotoxicity Assay (Promega, Madison, WI). Useful effector cells for such assays include mononuclear cells peripheral blood cells (PBMC) and natural killer (NK) cells. Alternatively or additionally, the ADCC activity of a molecule of interest can be assessed in vivo, for example, in an animal model such as that described in Clynes et al. Proc. Nat' l Acad Sci USA 95:652-656 (1998) C1q binding assays can also be performed to confirm that the hybrid variant ICOSL-Fc cannot bind C1q and therefore does not have CDC activity. See, for example, ELISA for determination of C1q and C3c binding in WO 2006/029879 and WO 2005/100402. A CDC assay can be performed to assess complement activation (see, e.g., Gazzano-Santoro et al., J. Immunol. Methods 202:163 (1996); Cragg, M. S. et al., Blood 101:1045-1052 (2003) b Cragg, M. S. and M. J. Glennie, Blood 103:2738-2743 (2004)). FcRn binding and in vivo clearance/half-life determination can also be performed using methods known in the art (see, for example, Petkova, SB et al., Immunol. 18(12): 1759-1769 (2006)).

Вариантные гибриды ICOSL-Fc с пониженной эффекторной функцией включают те, у которых заменен один или несколько остатков в области Fc из числа 238, 265, 269, 270, 297, 327 и 329 по нумерации EU (Пат. США США № 6737056). Такие Fc-мутанты включают Fc-мутанты с заменами в двух или более положениях аминокислот из числа 265, 269, 270, 297 и 327 по нумерации EU, включая так называемый DANA Fc-мутант с заменой остатков 265 и 297 на аланин (Пат. США США № 7323281).Variant ICOSL-Fc hybrids with reduced effector function include those with one or more residues in the Fc region of EU numbering 238, 265, 269, 270, 297, 327, and 329 replaced (US Pat. No. 6,737,056). Such Fc mutants include Fc mutants with substitutions at two or more amino acid positions from EU numbering 265, 269, 270, 297 and 327, including the so-called DANA Fc mutant with residues 265 and 297 replaced by alanine (US Pat. US No. 7323281).

В некоторых воплощениях Fc-область вариантных ICOSL-Fc гибридов имеет Fc область, в которой любая одна или несколько из аминокислот в положениях 234, 235, 236, 237, 238, 239, 270, 297, 298, 325, и 329 (обозначенные по нумерации EU) заменены различными аминокислотами по сравнению с нативной Fc-областью. Такие изменения Fc-области не ограничиваются описанными выше изменениями и включают, например, такие изменения, как дегликозилированные цепи (N297A и N297Q), IgG1-N297G, IgG1L234A/L235A, IgG1-L234A/L235E/G237A, IgG1-A325A/A330S/P331S, IgG1-C226S/C229S, IgG1C226S/C229S/E233P/L234V/L235A, IgG1- E233P/L234V/L235A/G236del/S267K, IgG1L234F/L235E/P331S, IgG1-S267E/L328F, IgG2-V234A/G237A, IgG2-H268Q/V309L/A330S/A331S, IgG4L235A/G237A/E318A и IgG4-L236E, описанные в WO 2008/092117; аминокислотные вставки в положениях 233, 234, 235 и 237 (обозначены по нумерации EU); и изменения в сайтах, описанных в WO 2000/042072.In some embodiments, the Fc region of variant ICOSL-Fc hybrids has an Fc region in which any one or more of amino acids at positions 234, 235, 236, 237, 238, 239, 270, 297, 298, 325, and 329 (designated by EU numbering) are replaced by different amino acids compared to the native Fc region. Such Fc region changes are not limited to the changes described above and include, for example, changes such as deglycosylated chains (N297A and N297Q), IgG1-N297G, IgG1L234A/L235A, IgG1-L234A/L235E/G237A, IgG1-A325A/A330S/P331S , IgG1-C226S/C229S, IgG1C226S/C229S/E233P/L234V/L235A, IgG1- E233P/L234V/L235A/G236del/S267K, IgG1L234F/L235E/P331S, IgG1-S267E/L328F, IgG2-V2 34A/G237A, IgG2-H268Q /V309L/A330S/A331S, IgG4L235A/G237A/E318A and IgG4-L236E, described in WO 2008/092117; amino acid insertions at positions 233, 234, 235 and 237 (designated by EU numbering); and changes to the sites described in WO 2000/042072.

Описаны некоторые варианты Fc с повышенным или пониженным связыванием с FcR. (См., например, патенты США США No. 6,737,056; WO 2004/056312, WO2006/019447 и Shields et al., J. Biol. Chem. 9(2): 6591-6604 (2001).)Several Fc variants with increased or decreased binding to FcR have been described. (See, for example, US Patent No. 6,737,056; WO2004/056312, WO2006/019447 and Shields et al., J. Biol. Chem. 9(2): 6591-6604 (2001).)

В некоторых воплощениях изобретения, предложен вариант синтеза ICOSL -Fc, включающий вариантную Fc-область, содержащую одну или несколько аминокислотных замен, которые увеличивают период полужизни и/или улучшение связывания с неонатальным рецептором Fc (FcRn). Антитела с повышенным периодом полужизни и улучшенным связыванием с FcRn описаны в US2005/0014934A1 (Hinton et al.) или WO2015107026. Эти антитела содержат Fc-область с одной или несколькими заменами, которые улучшают связывание Fc-области с FcRn. Такие варианты Fc включают те, которые имеют замены в одном или нескольких остатках области Fc: 238, 256, 265, 272, 286, 303, 305, 307, 311, 312, 317, 340, 356, 360, 362, 376, 378, 380, 382, 413, 424 или 434 в соответствии с нумерацией EU, например, замена остатка 434 в Fc-области (Пат. США США №7371826).In some embodiments of the invention, a variant of the ICOSL-Fc synthesis is provided comprising a variant Fc region containing one or more amino acid substitutions that increase the half-life and/or improve binding to the neonatal Fc receptor (FcRn). Antibodies with increased half-life and improved binding to FcRn are described in US2005/0014934A1 (Hinton et al.) or WO2015107026. These antibodies contain an Fc region with one or more substitutions that improve the binding of the Fc region to FcRn. Such Fc variants include those that have substitutions at one or more residues of the Fc region: 238, 256, 265, 272, 286, 303, 305, 307, 311, 312, 317, 340, 356, 360, 362, 376, 378 , 380, 382, 413, 424 or 434 in accordance with EU numbering, for example, replacing residue 434 in the Fc region (US Pat. US No. 7371826).

В некоторых воплощениях Fc-область вариантного гибрида ICOSL-Fc содержит одну или несколько аминокислотных замен E356D и M358L по нумерации EU. В некоторых воплощениях Fc-область вариантного гибрида ICOSL-Fc содержит одну или несколько аминокислотных замен C220S, C226S и/или C229S по нумерации EU. В некоторых воплощениях Fc-область вариантного гибрида ICOSL включает одну или несколько аминокислотных замен R292C и V302C. См. пакже Duncan & Winter, Nature 322: 73840 (1988); Пат. США США № 5648260; Пат. США CIF № 5624821; и WO 94/29351, касающейся других примеров вариантов Fc-области.In some embodiments, the Fc region of the variant ICOSL-Fc hybrid contains one or more EU numbering amino acid substitutions E356D and M358L. In some embodiments, the Fc region of the variant ICOSL-Fc hybrid contains one or more EU numbering amino acid substitutions C220S, C226S and/or C229S. In some embodiments, the Fc region of the ICOSL variant hybrid includes one or more amino acid substitutions R292C and V302C. See also Duncan & Winter, Nature 322: 73840 (1988); Pat. US US No. 5648260; Pat. US CIF No. 5624821; and WO 94/29351 regarding other examples of Fc region variants.

В некоторых воплощениях Fc IgG1 дикого типа может представлять собой Fc, представленный в SEQ ID NO: 226, имеющий аллотип, содержащий остатки Glu (E) и Met (M) в положениях 356 и 358 по нумерации EU (например, аллотип f), В других воплощениях Fc IgG1 дикого типа содержит аминокислоты аллотипа G1m1 человека, такие как остатки, содержащие Asp (D) и Leu (L) в положениях 356 и 358, например, как указано в SEQ ID NO: 927. Таким образом, в некоторых случаях представленный в данномIn some embodiments, the wild-type IgG1 Fc may be the Fc set forth in SEQ ID NO: 226 having an allotype containing Glu (E) and Met (M) residues at EU numbering positions 356 and 358 (e.g., allotype f), B In other embodiments, the wild-type IgG1 Fc contains amino acids of the human G1m1 allotype, such as residues containing Asp (D) and Leu (L) at positions 356 and 358, for example, as set forth in SEQ ID NO: 927. Thus, in some cases, the present in this

- 77 044346 документе Fc может содержать аминокислотные замены E356D и M358L для восстановления остатков аллотипа G1 m1 (например, альфа-аллотипа). В некоторых аспектах Fc дикого типа модифицируют одной или несколькими аминокислотными заменами, чтобы уменьшить эффекторную активность или сделать Fc инертным для эффекторной функции Fc. Типичные мутации с потерей эффекторной функции или инертные мутации включают мутации, описанные в данном документе. Среди мутаций с потерей эффекторной функции, которые могут быть включены в Fc конструкций, предлагаемых в настоящем документе, предлагаются L234A, L235E и G237A по нумерации EU. В некоторых воплощениях Fc дикого типа дополнительно модифицируется удалением одного или нескольких остатков цистеина, например заменой остатков цистеина на остаток серина в положении 220 (C220S) по нумерации EU. Примерные инертные Fc-области, имеющие пониженную эффекторную функцию, приведены в SEQ ID NO: 633 или 477 и SEQ ID NO: 474 или 637, которые основаны на аллотипах, указанных в SEQ ID NO: 226 или SEQ ID NO: 927, соответственно. В некоторых воплощениях Fc-область, используемая в конструкции, предоставленной в настоящем документе, может дополнительно не иметь C-концевой остаток лизина.- 77 044346 document Fc may contain amino acid substitutions E356D and M358L to restore residues of the G1 m1 allotype (for example, the alpha allotype). In some aspects, a wild-type Fc is modified with one or more amino acid substitutions to reduce effector activity or render the Fc inert for Fc effector function. Exemplary loss-of-effect or inert mutations include those described herein. Loss of effector function mutations that may be included in the Fc constructs proposed herein include EU numbering L234A, L235E, and G237A. In some embodiments, the wild-type Fc is further modified by removing one or more cysteine residues, such as replacing the cysteine residues with a serine residue at position 220 (C220S) of the EU numbering. Exemplary inert Fc regions having reduced effector function are set forth in SEQ ID NO: 633 or 477 and SEQ ID NO: 474 or 637, which are based on the allotypes shown in SEQ ID NO: 226 or SEQ ID NO: 927, respectively. In some embodiments, the Fc region used in the construct provided herein may additionally lack a C-terminal lysine residue.

В некоторых воплощениях в Fc-область вносятся изменения, которые приводят к уменьшению связывания C1q и/или комплемент-зависимой цитотоксичности (CDC), например, как описано в Пат. США США № 6194551, WO 99/51642 и Idusogie et al., J. Immunol. 164: 4178-4184 (2000).In some embodiments, changes are made to the Fc region that result in decreased C1q binding and/or complement-dependent cytotoxicity (CDC), for example, as described in US Pat. US US No. 6194551, WO 99/51642 and Idusogie et al., J. Immunol. 164: 4178-4184 (2000).

В некоторых воплощениях изобретения, предлагается гибридный вариант ICOSL -Fc, включающий вариант Fc-область, содержащий одну или несколько аминокислотных модификаций, где вариантная Fcобласть является производным IgG1, такого как IgG1 человека. В некоторых воплощениях вариантная Fc-область получена из аминокислотной последовательности, представленной в SEQ ID NO: 226. В некоторых воплощениях Fc проявляет пониженную эффекторную функцию. В некоторых воплощениях Fc включает, по меньшей мере, одну аминокислотную замену, которая представляет собой N82G по нумерации SEQ ID NO: 226 (что соответствует N297G в соответствии с нумерацией EU). В некоторых воплощениях Fc дополнительно включает, по меньшей мере, одну аминокислотную замену, которая представляет собой R77C или V87C по нумерации SEQ ID NO: 226 (соответствующих R292C или V302C в соответствии с нумерацией EU). В некоторых воплощениях вариант Fc-области дополнительно включает модификацию аминокислоты C5S по нумерации SEQ ID NO: 226 (что соответствует C220S в соответствии с нумерацией EU). Например, в некоторых воплощениях вариант Fc-области включает следующие модификации аминокислот: V297G и одну или несколько из следующих модификаций аминокислот C220S, R292C или V302C по нумерации EU (соответствует N82G и одной или нескольким из следующих аминокислотных модификаций C5S, R77C или V87C относительно SEQ ID NO: 226), например Fcобласть включает последовательность, представленную в SEQ ID NO: 476. В некоторых воплощениях вариант Fc-области включает одну или несколько аминокислотных модификаций C220S, L234A, L235E или G237A, например, Fc-область включает последовательность, представленную в SEQ ID NO: 477. В некоторых воплощениях вариант Fc-области включает одну или несколько аминокислотных модификаций C220S, E233P, L234V, L235A, G236del or S267K, например, Fc-область включает последовательность, представленную в SEQ ID NO: 478. В некоторых воплощениях вариант Fc-области включает одну или несколько аминокислотных модификаций C220S, L234A, L235E, G237A, E356D или M358L, например, Fc-область включает последовательность, представленную в SEQ ID NO: 474.In some embodiments of the invention, an ICOSL-Fc hybrid variant is provided, comprising a variant Fc region containing one or more amino acid modifications, wherein the variant Fc region is a derivative of IgG1, such as human IgG1. In some embodiments, the variant Fc region is derived from the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 226. In some embodiments, the Fc exhibits reduced effector function. In some embodiments, the Fc includes at least one amino acid substitution that is N82G according to SEQ ID NO: 226 (which corresponds to N297G according to EU numbering). In some embodiments, the Fc further includes at least one amino acid substitution that is R77C or V87C according to SEQ ID NO: 226 (corresponding to R292C or V302C according to EU numbering). In some embodiments, the Fc region variant further includes a C5S amino acid modification at SEQ ID NO: 226 (corresponding to EU numbering C220S). For example, in some embodiments, the Fc region variant includes the following amino acid modifications: V297G and one or more of the following amino acid modifications C220S, R292C, or V302C by EU numbering (corresponding to N82G and one or more of the following amino acid modifications C5S, R77C, or V87C by SEQ ID NO: 226), e.g., the Fc region includes the sequence set forth in SEQ ID NO: 476. In some embodiments, the Fc region variant includes one or more amino acid modifications C220S, L234A, L235E, or G237A, e.g., the Fc region includes the sequence set forth in SEQ ID NO: 477. In some embodiments, the variant Fc region includes one or more amino acid modifications C220S, E233P, L234V, L235A, G236del or S267K, for example, the Fc region includes the sequence set forth in SEQ ID NO: 478. In some embodiments, the variant The Fc region includes one or more amino acid modifications C220S, L234A, L235E, G237A, E356D, or M358L, for example, the Fc region includes the sequence shown in SEQ ID NO: 474.

В некоторых воплощениях в Fc-области отсутствует C-концевой лизин, соответствующий положению 232 референсной (например, немодифицированной) Fc или Fc дикого типа, представленной в SEQ ID NO: 56 (соответствует K447del по нумерации EU). В некоторых воплощениях, поскольку C-концевой лизин может быть дифференцированно удален во время биосинтеза, удаление C-концевого остатка лизина приводит к более гомогенному продукту, при экспрессии белка в клетках. В некоторых аспектах такая Fc-область может дополнительно включать одну или несколько дополнительных модификаций, например, аминокислотные замены, такие как любые из описанных. Пример такой Fc-области приведен в SEQ ID NO: 632, 633, 634 или 637.In some embodiments, the Fc region lacks the C-terminal lysine corresponding to position 232 of the reference (eg, unmodified) Fc or wild-type Fc shown in SEQ ID NO: 56 (corresponding to EU numbering K447del). In some embodiments, because the C-terminal lysine can be differentially removed during biosynthesis, removal of the C-terminal lysine residue results in a more homogeneous product when the protein is expressed in cells. In some aspects, such an Fc region may further include one or more additional modifications, for example, amino acid substitutions such as any of those described. An example of such an Fc region is provided in SEQ ID NO: 632, 633, 634 or 637.

В некоторых воплощениях предложен вариантный гибрид ICOSL-Fc, содержащий вариант Fcобласть, в которой вариант Fc включает аминокислотную последовательность, представленную в любой из SEQ ID NO: 474, 476, 477, 478 или 507 или аминокислотную последовательность, которая имеет, по меньшей мере, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99% или более идентичности последовательности с любой из SEQ ID NO: 474, 476, 477, 478 или 507. В некоторых воплощениях Fc проявляет пониженную эффекторную функцию.In some embodiments, an ICOSL-Fc variant fusion is provided comprising a variant Fc region, wherein the Fc variant comprises an amino acid sequence set forth in any of SEQ ID NO: 474, 476, 477, 478, or 507 or an amino acid sequence that has at least 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99% or more sequence identity with any of SEQ ID NO: 474, 476, 477, 478 or 507 In some embodiments, the Fc exhibits reduced effector function.

В некоторых воплощениях Fc является производным от IgG2, такого как IgG2 человека. В некоторых воплощениях Fc включает аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 227, или аминокислотную последовательность, которая имеет, по меньшей мере, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99% или более идентичности последовательности с SEQ ID NO: 227.In some embodiments, the Fc is derived from IgG2, such as human IgG2. In some embodiments, the Fc comprises the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 227, or an amino acid sequence that is at least 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96 , 97, 98, 99% or more sequence identity to SEQ ID NO: 227.

В некоторых воплощениях Fc включает аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 505 или аминокислотную последовательность, которая обладает по меньшей мере, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99% или более идентичности последовательности с SEQ ID NO: 505. В некоторых воплощениях Fc IgG4 представляет собой стабилизированную Fc, в котором домен CH3 человеческого IgG4 замещен доменом CH3 человеческого IgG1 и который проявляет ингибированIn some embodiments, the Fc comprises the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 505 or an amino acid sequence that has at least 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97 98, 99% or greater sequence identity to SEQ ID NO: 505. In some embodiments, the IgG4 Fc is a stabilized Fc in which the CH3 domain of human IgG4 is replaced by the CH3 domain of human IgG1 and which exhibits inhibition

- 78 044346 ное образование агрегатов, антитело, в котором домены CH3 и CH2 человеческого IgG4 замещены доменами CH3 и CH2 человеческого IgG1 соответственно или антитело, в котором аргинин в положении 409, указанный по индексу EU, предложенном Kabat et al. человеческого IgG4 замещен лизином, и которое проявляет ингибированное образование агрегатов (см., например, патенты США No. 6159477). В некоторых воплощениях Fc представляет собой IgG4, содержащий мутацию S228P, которая, как было показано, предотвращает рекомбинацию между терапевтическим антителом и эндогенным IgG4 путем обмена Fabплеча (см., например, Labrijin et al. (2009) Nat. Biotechnol, 27(8)767-71.) В некоторых воплощениях Fc включает аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 506, или аминокислотную последовательность, которая имеет, по меньшей мере, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99% или более идентичности последовательности с SEQ ID NO: 506.- 78 044346 aggregate formation, an antibody in which the CH3 and CH2 domains of human IgG4 are replaced by the CH3 and CH2 domains of human IgG1, respectively, or an antibody in which the arginine at position 409, indicated by the EU index proposed by Kabat et al. human IgG4 is replaced by lysine, and which exhibits inhibited formation of aggregates (see, for example, US patent No. 6159477). In some embodiments, the Fc is an IgG4 containing the S228P mutation, which has been shown to prevent recombination between a therapeutic antibody and endogenous IgG4 through Fab arm exchange (see, e.g., Labrijin et al. (2009) Nat. Biotechnol, 27(8) 767-71.) In some embodiments, the Fc comprises the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 506, or an amino acid sequence that has at least 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99% or more sequence identity to SEQ ID NO: 506.

В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL непосредственно связана с последовательностью Fc. В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL опосредованно связан с последовательностью Fc, например, через линкер. В некоторых воплощениях один или несколько пептидных линкеров связывают вариантный полипептид ICOSL и домен Fc. В некоторых воплощениях пептидный линкер может быть одним аминокислотным остатком или иметь большую длину. В некоторых воплощениях пептидный линкер имеет, по меньшей мере, один аминокислотный остаток, но не более 20, 19, 18, 17, 16, 15, 14, 13, 12, 11, 10, 9, 8, 7, 6, 5, 4, 3, 2 или 1 аминокислотного остатка. В некоторых воплощениях линкер представляет собой три аланина (AAA). В некоторых воплощениях линкер представляет собой (в однобуквенном аминокислотном коде): GGGGS (4GS; SEQ ID NO: 636) или мультимеры 4GS-линкера, такие как повторы 2, 3, 4, 5 или линкеры 6 4GS, такие как указанные в SEQ ID NO: 229 (2xGGGGS) или SEQ ID NO: 228 (3xGGGGS). В некоторых воплощениях линкер представляет собой жесткий линкер. Например, линкер представляет собой α-спиральный линкер. В некоторых воплощениях линкер представляет собой (в однобуквенном аминокислотном коде): EAAAK или мультимеры линкера EAAAK, такие как повторы 2, 3, 4 или 5 линкеров 4GS, как указано в SEQ ID NO: 629 (EAAAK) или SEQ ID NO: 630 (3xEAAAK) или SEQ ID NO: 631 (5xEAAAK). В некоторых воплощениях линкеры начинаются с одного или нескольких блоков EAAAK и могут быть удлинены путем добавления последовательностей A, AA, AAA, AAAA, EAAAA и EAAAK. В некоторых воплощениях линкер может дополнительно включать аминокислоты, введенные путем клонирования и/или из сайта рестрикции, например, линкер может включать аминокислоты GS (в однобуквенном аминокислотном коде), которые введены с использованием сайта рестрикции BAMHI. В некоторых воплощениях линкер (в однобуквенном аминокислотном коде) представляет собой GSGGGGS (SEQ ID NO: 635). В некоторых примерах линкер представляет собой 2xGGGGS, за которым следуют три аланина (GGGGSGGGGSAAA; SEQ ID NO: 230).In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide is directly linked to an Fc sequence. In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide is indirectly linked to an Fc sequence, for example, through a linker. In some embodiments, one or more peptide linkers link the variant ICOSL polypeptide and the Fc domain. In some embodiments, the peptide linker can be a single amino acid residue or be longer. In some embodiments, the peptide linker has at least one amino acid residue, but not more than 20, 19, 18, 17, 16, 15, 14, 13, 12, 11, 10, 9, 8, 7, 6, 5, 4, 3, 2 or 1 amino acid residue. In some embodiments, the linker is three alanines (AAA). In some embodiments, the linker is (in single letter amino acid code): GGGGS (4GS; SEQ ID NO: 636) or 4GS linker multimers, such as repeats 2, 3, 4, 5 or 4GS linkers 6, such as those specified in SEQ ID NO: 229 (2xGGGGS) or SEQ ID NO: 228 (3xGGGGS). In some embodiments, the linker is a rigid linker. For example, the linker is an α-helical linker. In some embodiments, the linker is (in single letter amino acid code): EAAAK or EAAAK linker multimers, such as 4GS linker repeats 2, 3, 4, or 5, as set forth in SEQ ID NO: 629 (EAAAK) or SEQ ID NO: 630 ( 3xEAAAK) or SEQ ID NO: 631 (5xEAAAK). In some embodiments, linkers begin with one or more EAAAK blocks and can be extended by adding A, AA, AAA, AAAA, EAAAA, and EAAAK sequences. In some embodiments, the linker may further include amino acids introduced by cloning and/or from a restriction site, for example, the linker may include GS (in single letter amino acid code) amino acids that are introduced using a BAMHI restriction site. In some embodiments, the linker (in single letter amino acid code) is GSGGGGS (SEQ ID NO: 635). In some examples, the linker is 2xGGGGS followed by three alanines (GGGGSGGGGSAAA; SEQ ID NO: 230).

В некоторых воплощениях вариантный гибридный белок ICOSL-Fc представляет собой димер, образованный двумя вариантными полипептидами ICOSL-Fc, связанными с доменом Fc. В некоторых конкретных воплощениях идентичные или по существу идентичные виды (с учетом 3 или меньшего количества различий в аминокислотных последовательностях на N-конце или C-конце) вариантных гибридных полипептидов ICOSL-Fc будут димеризоваться с созданием гомодимера. В некоторых воплощениях димер является гомодимером, в котором два вариантных полипептида ICOSL-Fc являются одинаковыми. В ином случае, различные разновидности гибридных полипептидов ICOSL-Fc можно димеризовать, чтобы получить гетеродимер. Таким образом, в некоторых воплощениях димер представляет собой гетеродимер, в котором два вариантных полипептида ICOSL-Fc различны.In some embodiments, the variant ICOSL-Fc fusion protein is a dimer formed by two variant ICOSL-Fc polypeptides linked to an Fc domain. In some specific embodiments, identical or substantially identical species (subject to 3 or fewer amino acid sequence differences at the N-terminus or C-terminus) of variant ICOSL-Fc fusion polypeptides will dimerize to create a homodimer. In some embodiments, the dimer is a homodimer in which the two variant ICOSL-Fc polypeptides are the same. Alternatively, different species of ICOSL-Fc fusion polypeptides can be dimerized to form a heterodimer. Thus, in some embodiments, the dimer is a heterodimer in which the two variant ICOSL-Fc polypeptides are different.

В некоторых воплощениях представлен вариантный гибридный белок ICOSL-Fc, содержащий вариантный полипептид ICOSL, который включает одну или несколько аминокислотных модификаций в референсном ICOSL, как описано в разделе II, который прямо или опосредованно связан с Fc-областью. В некоторых случаях C-конец вариантного полипептида ICOSL присоединен к N-концу Fc-области. В некоторых воплощениях вариант ICOSL гибрида ICOSL-Fc содержит одну или несколько аминокислотных модификаций в аминокислотной последовательности референсного домена IgV, указанного в SEQ ID NO: 545. В конкретных случаях такой иммуномодулирующий белок содержит вариантный полипептид ICOSL, содержащий домен IgV, такой как домен IgV, представленный в любом из SEQ ID NO: 197-199, 201-208, 210, 212, 240, 326-340, 382-386, 425-426, 434, 546-599, 686-857, 906-907, 909-910 или домен IgV, который имеет, по меньшей мере, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99% к любому из SEQ ID NO: 197-199, 201-208, 210, 212, 240, 326-340, 382-386, 425-426, 434, 546-599, 686-857, 906-907, 909-910 и содержит одну или несколько аминокислотных модификаций, соответствующей SEQ ID NO. В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL имеет домен IgSF (например, домен IgV), который проявляет повышенную аффинность связывания с CD28 или ICOS, такой как любая из модификаций аминокислот, описанных в настоящем документе. В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL имеет домен IgSF (например, домен IgV), содержащий одну или более аминокислотную модификацию, например, замену в референсном ICOSL или специфическом связывающем фрагменте в соответствующем положении(ях) 52, 57 или 100 относительно нумерации SEQ ID NO: 32. В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL имеет одну или несколько аминокислотных модификаций, например, замен, выбранных из N52A, N52C, N52D, N52G, N52H, N52L, N52K, N52M, N52P, N52Q, N52R, N52S, N52T, N52V, N52Y, N57A, N57E, N57F, N57H, N57K, N57L, N57M, N57P, N57Q, N57S, N57T,In some embodiments, a variant ICOSL-Fc fusion protein is provided, comprising a variant ICOSL polypeptide that includes one or more amino acid modifications in the reference ICOSL, as described in Section II, that is directly or indirectly linked to the Fc region. In some cases, the C-terminus of the variant ICOSL polypeptide is attached to the N-terminus of the Fc region. In some embodiments, the ICOSL variant of the ICOSL-Fc fusion contains one or more amino acid modifications in the amino acid sequence of the IgV reference domain set forth in SEQ ID NO: 545. In particular cases, such immunomodulatory protein comprises a variant ICOSL polypeptide containing an IgV domain, such as an IgV domain, presented in any of SEQ ID NO: 197-199, 201-208, 210, 212, 240, 326-340, 382-386, 425-426, 434, 546-599, 686-857, 906-907, 909- 910 or an IgV domain that is at least 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99% to any of SEQ ID NO: 197 -199, 201-208, 210, 212, 240, 326-340, 382-386, 425-426, 434, 546-599, 686-857, 906-907, 909-910 and contains one or more amino acid modifications, corresponding SEQ ID NO. In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide has an IgSF domain (eg, an IgV domain) that exhibits increased binding affinity for CD28 or ICOS, such as any of the amino acid modifications described herein. In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide has an IgSF domain (e.g., an IgV domain) containing one or more amino acid modification, e.g., a substitution in the reference ICOSL or specific binding fragment at the corresponding position(s) 52, 57, or 100 relative to SEQ ID NO: 32. In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide has one or more amino acid modifications, for example, substitutions selected from N52A, N52C, N52D, N52G, N52H, N52L, N52K, N52M, N52P, N52Q, N52R, N52S, N52T, N52V, N52Y , N57A, N57E, N57F, N57H, N57K, N57L, N57M, N57P, N57Q, N57S, N57T,

- 79 044346- 79 044346

N57V, N57W, N57Y, Q100A, Q100D, Q100E, Q100G, Q100K, Q100L, Q100M, Q100N, Q100R, Q100P, Q100S, Q100T или Q100V. Примеры таких вариантных молекул включают любые, как описано в настоящем документе. В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL содержит аминокислотные модификации N52H/N57Y/Q100R (например, является или включает домен IgV, указанный в SEQ ID NO: 565). В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL содержит аминокислотные модификации N52D (например, является или включает домен IgV, указанный в SEQ ID NO: 548). В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL содержит аминокислотные модификации N52H/Q100R (например, является или включает домен IgV, указанный в SEQ ID NO: 567). В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL содержит аминокислотные модификации N52L/N57H/Q100R (например, является или включает домен IgV, указанный в SEQ ID NO: 761). В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL содержит аминокислотные модификации N52H/N57Y/Q100P (например, является или включает домен IgV, указанный в SEQ ID NO: 570).N57V, N57W, N57Y, Q100A, Q100D, Q100E, Q100G, Q100K, Q100L, Q100M, Q100N, Q100R, Q100P, Q100S, Q100T or Q100V. Examples of such variant molecules include any as described herein. In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide contains amino acid modifications N52H/N57Y/Q100R (eg, is or includes the IgV domain specified in SEQ ID NO: 565). In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide contains amino acid modifications of N52D (eg, is or includes the IgV domain specified in SEQ ID NO: 548). In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide contains amino acid modifications N52H/Q100R (eg, is or includes the IgV domain specified in SEQ ID NO: 567). In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide contains amino acid modifications N52L/N57H/Q100R (eg, is or includes the IgV domain specified in SEQ ID NO: 761). In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide contains amino acid modifications N52H/N57Y/Q100P (eg, is or includes the IgV domain specified in SEQ ID NO: 570).

В конкретных воплощениях таких вариантных гибридных белков ICOSL-Fc, полипептид Fc представляет собой вариант Fc-области человеческого IgG1, который проявляет пониженные эффекторные функции, такие как любые из описанных. В некоторых воплощениях Fc-область представляет собой человеческий IgG1, который содержит аминокислотные модификации N297G, E233P/L234V/L235A/G236del/S267K или L234A/L235E/G237A, где остаток пронумерован в соответствии с индексом EU по Kabat. В некоторых воплощениях вариантная Fc-область из IgG1 дополнительно включает аминокислотную замену C220S, где остатки пронумерованы в соответствии с индексом EU по Kabat. В некоторых воплощениях Fc-область содержит K447del, где остаток пронумерован в соответствии с индексом EU по Kabat. В некоторых аспектах Fc-область включает последовательность аминокислотной последовательности, представленную в любой из SEQ ID NO: 474, 476, 477, 478, 633 или 637, или аминокислотную последовательность, которая проявляет, по меньшей мере, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99% или более идентичности последовательностям с любой из SEQ ID NO: 474, 476, 477, 478, 633 или 637 и содержат аминокислотные замены соответствующего SEQ ID NO. Связь между вариантным полипептидом ICSL IgSF (например, IgV) и Fc может осуществляться через пептидный линкер, такой как любой из описанных. В некоторых воплощениях линкер представляет собой GGGGS (4GS; SEQ ID NO: 636), SEQ ID NO: 229 (2xGGGGS) или SEQ ID NO: 228 (3xGGGGS). В конкретных примерах C-конец вариантного полипептида ICOSL присоединен к N-концу Fc-области, так что порядок компонентов представляет собой вариантный ICOSL-линкер-Fc.In specific embodiments of such variant ICOSL-Fc fusion proteins, the Fc polypeptide is a variant of the human IgG1 Fc region that exhibits reduced effector functions such as any of those described. In some embodiments, the Fc region is a human IgG1 that contains the amino acid modifications N297G, E233P/L234V/L235A/G236del/S267K or L234A/L235E/G237A, where the residue is numbered according to the Kabat EU index. In some embodiments, the variant Fc region of IgG1 further includes the amino acid substitution C220S, where the residues are numbered according to the Kabat EU index. In some embodiments, the Fc region comprises K447del, wherein the residue is numbered according to the Kabat EU index. In some aspects, the Fc region includes an amino acid sequence set forth in any of SEQ ID NOs: 474, 476, 477, 478, 633, or 637, or an amino acid sequence that exhibits at least 90, 91, 92, 93. 94, 95, 96, 97, 98, 99% or more sequence identity to any of SEQ ID NO: 474, 476, 477, 478, 633 or 637 and contains amino acid substitutions of the corresponding SEQ ID NO. The link between the variant ICSL IgSF polypeptide (eg, IgV) and the Fc can be through a peptide linker, such as any of those described. In some embodiments, the linker is GGGGS (4GS; SEQ ID NO: 636), SEQ ID NO: 229 (2xGGGGS), or SEQ ID NO: 228 (3xGGGGS). In specific examples, the C-terminus of the variant ICOSL polypeptide is attached to the N-terminus of the Fc region such that the order of the components is variant ICOSL-linker-Fc.

В некоторых воплощениях предлагается вариантный гибридный белок ICOSL-Fc, например, вариантный ICOSL-линкер-Fc, содержащий вариантный домен ICVL IgV, указанный в SEQ ID NO: 565, линкер, указанный в SEQ ID NO: 636, и полипептид Fc, указанный в SEQ ID NO: 637. В некоторых воплощениях предлагается вариантный гибридный белок ICOSL-Fc, например, вариантный ICOSL-линкер-Fc, содержащий вариантный домен ICVL IgV, указанный в SEQ ID NO: 565, линкер, указанный в SEQ ID NO: 636, и полипептид Fc, указанный в SEQ ID NO: 474. В некоторых воплощениях предлагается вариантный гибридный белок ICOSL-Fc, например, вариантный ICOSL-линкер-Fc, содержащий вариантный домен ICVL IgV, указанный в SEQ ID NO: 565, линкер, указанный в SEQ ID NO: 636, и полипептид Fc, указанный в SEQ ID NO: 477. В некоторых воплощениях предлагается вариантный гибридный белок ICOSL-Fc, например, вариантный ICOSL-линкер-Fc, содержащий вариантный домен ICVL IgV, указанный в SEQ ID NO: 565, линкер, указанный в SEQ ID NO: 636, и полипептид Fc, указанный в SEQ ID NO: 633.In some embodiments, a variant ICOSL-Fc fusion protein is provided, for example, a variant ICOSL-linker-Fc protein comprising a variant IgV ICVL domain set forth in SEQ ID NO: 565, a linker set forth in SEQ ID NO: 636, and an Fc polypeptide set forth in SEQ ID NO: 637. In some embodiments, a variant ICOSL-Fc fusion protein is provided, e.g., a variant ICOSL-linker-Fc comprising a variant IgV ICVL domain set forth in SEQ ID NO: 565, a linker set forth in SEQ ID NO: 636, and an Fc polypeptide set forth in SEQ ID NO: 474. In some embodiments, a variant ICOSL-Fc fusion protein is provided, for example, a variant ICOSL-linker-Fc containing a variant IgV ICVL domain set forth in SEQ ID NO: 565, a linker set forth in SEQ ID NO: 636, and the Fc polypeptide set forth in SEQ ID NO: 477. In some embodiments, a variant ICOSL-Fc fusion protein is provided, e.g., a variant ICOSL-linker-Fc containing a variant IgV ICVL domain set forth in SEQ ID NO: 565, the linker shown in SEQ ID NO: 636, and the Fc polypeptide shown in SEQ ID NO: 633.

В некоторых воплощениях предлагается вариантный гибридный белок ICOSL-Fc, например, вариантный ICOSL-линкер-Fc, содержащий вариантный домен ICVL IgV, указанный в SEQ ID NO: 565, линкер, указанный в SEQ ID NO: 229, и полипептид Fc, указанный в SEQ ID NO: 637. В некоторых воплощениях предлагается вариантный гибридный белок ICOSL-Fc, например, вариантный ICOSL-линкер-Fc, содержащий вариантный домен ICVL IgV, указанный в SEQ ID NO: 565, линкер, указанный в SEQ ID NO: 229, и полипептид Fc, указанный в SEQ ID NO: 474. В некоторых воплощениях предлагается вариантный гибридный белок ICOSL-Fc, например, вариантный ICOSL-линкер-Fc, содержащий вариантный домен ICVL IgV, указанный в SEQ ID NO: 565, линкер, указанный в SEQ ID NO: 229, и полипептид Fc, указанный в SEQ ID NO: 477. В некоторых воплощениях предлагается вариантный гибридный белок ICOSL-Fc, например, вариантный ICOSL-линкер-Fc, содержащий вариантный домен ICVL IgV, указанный в SEQ ID NO: 565, линкер, указанный в SEQ ID NO: 229, и полипептид Fc, указанный в SEQ ID NO: 633.In some embodiments, a variant ICOSL-Fc fusion protein is provided, for example, a variant ICOSL-linker-Fc comprising the variant IgV ICVL domain set forth in SEQ ID NO: 565, the linker set forth in SEQ ID NO: 229, and the Fc polypeptide set forth in SEQ ID NO: 637. In some embodiments, a variant ICOSL-Fc fusion protein is provided, for example, a variant ICOSL-linker-Fc comprising a variant IgV ICVL domain set forth in SEQ ID NO: 565, a linker set forth in SEQ ID NO: 229, and an Fc polypeptide set forth in SEQ ID NO: 474. In some embodiments, a variant ICOSL-Fc fusion protein is provided, for example, a variant ICOSL-linker-Fc containing a variant IgV ICVL domain set forth in SEQ ID NO: 565, a linker set forth in SEQ ID NO: 229, and the Fc polypeptide set forth in SEQ ID NO: 477. In some embodiments, a variant ICOSL-Fc fusion protein is provided, for example, a variant ICOSL-linker-Fc containing a variant IgV ICVL domain set forth in SEQ ID NO: 565, the linker shown in SEQ ID NO: 229, and the Fc polypeptide shown in SEQ ID NO: 633.

В некоторых воплощениях предлагается вариантный гибридный белок ICOSL-Fc, например, вариантный ICOSL-линкер-Fc, содержащий вариантный домен ICVL IgV, указанный в SEQ ID NO: 565, линкер, указанный в SEQ ID NO: 228, и полипептид Fc, указанный в SEQ ID NO: 637. В некоторых воплощениях предлагается вариантный гибридный белок ICOSL-Fc, например, вариантный ICOSL-линкер-Fc, содержащий вариантный домен ICVL IgV, указанный в SEQ ID NO: 565, линкер, указанный в SEQ ID NO: 228, и полипептид Fc, указанный в SEQ ID NO: 474. В некоторых воплощениях предлагается вариантный гибридный белок ICOSL-Fc, например, вариантный ICOSL-линкер-Fc, содержащий вариантный домен ICVL IgV, указанный в SEQ ID NO: 565, линкер, указанный в SEQ ID NO: 228, и полипептид Fc,In some embodiments, a variant ICOSL-Fc fusion protein is provided, for example, a variant ICOSL-linker-Fc comprising a variant IgV ICVL domain set forth in SEQ ID NO: 565, a linker set forth in SEQ ID NO: 228, and an Fc polypeptide set forth in SEQ ID NO: 637. In some embodiments, a variant ICOSL-Fc fusion protein is provided, for example, a variant ICOSL-linker-Fc comprising a variant IgV ICVL domain set forth in SEQ ID NO: 565, a linker set forth in SEQ ID NO: 228, and an Fc polypeptide set forth in SEQ ID NO: 474. In some embodiments, a variant ICOSL-Fc fusion protein is provided, for example, a variant ICOSL-linker-Fc containing a variant IgV ICVL domain set forth in SEQ ID NO: 565, a linker set forth in SEQ ID NO: 228, and Fc polypeptide,

- 80 044346 указанный в SEQ ID NO: 477. В некоторых воплощениях предлагается вариантный гибридный белок- 80 044346 specified in SEQ ID NO: 477. In some embodiments, a variant fusion protein is provided

ICOSL-Fc, например, вариантный ICOSL-линкер-Fc, содержащий вариантный домен ICVL IgV, указанный в SEQ ID NO: 565, линкер, указанный в SeQ ID NO: 228, и полипептид Fc, указанный в SEQ ID NO:ICOSL-Fc, for example, a variant ICOSL linker-Fc containing a variant ICVL domain of IgV specified in SEQ ID NO: 565, a linker specified in SeQ ID NO: 228, and an Fc polypeptide specified in SEQ ID NO:

633.633.

В некоторых воплощениях предлагается вариантный гибридный белок ICOSL IgSF Fc, который имеет аминокислотную последовательность, указанную в SEQ ID NO: 928, или аминокислотную последовательность, которая имеет, по меньшей мере, 85, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99% от SEQ ID NO: 928. В некоторых воплощениях вариантный гибридный белок ICOSL IgSF Fc связывается с CD28 и ICOS, например, с повышенной аффинностью связывания по сравнению с референсным гибридным белком (дикого типа) ICOSL-Fc. В некоторых воплощениях вариантный гибрид ICOSL IgSF Fc проявляет пониженную эффекторную функцию Fc по сравнению с гибридом с Fc IgG1 человека дикого типа.In some embodiments, a variant ICOSL IgSF Fc fusion protein is provided that has the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 928, or an amino acid sequence that has at least 85, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96 , 97, 98, 99% of SEQ ID NO: 928. In some embodiments, the variant ICOSL IgSF Fc fusion protein binds to CD28 and ICOS, eg, with increased binding affinity compared to the reference (wild type) ICOSL-Fc fusion protein. In some embodiments, the variant ICOSL IgSF Fc fusion exhibits reduced Fc effector function compared to a wild-type human IgG1 Fc fusion.

В некоторых воплощениях предлагается иммуномодулирующий белок с мультидоменным стеком, в котором два или более домена IgSF, в том числе vIgD из ICOSL и один или более дополнительный домен IgSF (например, второй вариантный домен IgSF) из другого представителя семейства IgSF, связаны или присоединены к Fc с образованием гибрида Fc, который при экспрессии в клетке, может, в некоторых аспектах, продуцировать иммуномодулирующий белок с димерным мультидоменным стеком. Таким образом, также предлагаются димерные мультидоменные иммуномодулирующие белки.In some embodiments, an immunomodulatory protein with a multi-domain stack is provided, in which two or more IgSF domains, including vIgD from ICOSL and one or more additional IgSF domain (e.g., a second variant IgSF domain) from another member of the IgSF family, are linked or linked to an Fc to form an Fc fusion which, when expressed in a cell, can, in some aspects, produce an immunomodulatory protein with a dimeric multi-domain stack. Thus, dimeric multidomain immunomodulatory proteins are also proposed.

В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL и одного или более дополнительного домена IgSF независимо связаны, прямо или опосредованно, с N- или C-концом Fc-области. В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL и, по меньшей мере, один или более дополнительный домен IgSF связаны прямо или опосредованно, и один из вариантных ICOSL или один из одного или более дополнительного домена IgSF также прямо или опосредованно связаны с N- или C-концом Fc-области. В некоторых воплощениях N- или C-конец Fc-области связан с вариантным полипептидом ICOSL или одним или несколькими дополнительными доменами IgSF, a другой N- или C-конец Fc-области связан с другим вариантным ICOSL или другим из одного или нескольких дополнительных доменов IgSF. В некоторых воплощениях связь с Fc осуществляется через пептидный линкер, например пептидный линкер, такой как описано выше. В некоторых воплощениях связь между вариантным ICOSL и вторым доменом IgSF осуществляется через пептидный линкер, например пептидный линкер, такой как описанный выше. В некоторых воплощениях связь между вариантным ICOSL и одним или несколькими дополнительными доменами IgSF осуществляется через пептидный линкер, например пептидный линкер, такой как описанный выше. В некоторых воплощениях vIgD ICOSL, один или несколько дополнительных доменов IgSF и домен Fc могут быть связаны между собой в любой из многочисленных конфигураций, как показано на фиг. 16A и 16B. В некоторых воплощениях вариантный гибрид ICOSL-Fc может дополнительно содержать сигнальный пептид, такой как примерный сигнальный пептид, который содержится в последовательности аминокислот, представленной в SEQ ID NO: 59 или 225. Примерные конфигурации описаны в примерах.In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide and one or more additional IgSF domains are independently linked, directly or indirectly, to the N- or C-terminus of the Fc region. In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide and at least one or more additional IgSF domains are linked directly or indirectly, and one of the variant ICOSLs or one of the one or more additional IgSF domains is also directly or indirectly linked to the N- or C-terminus of the Fc -regions In some embodiments, the N- or C-terminus of the Fc region is linked to a variant ICOSL polypeptide or one or more additional IgSF domains, and the other N- or C-terminus of the Fc region is linked to another variant ICOSL or another of one or more additional IgSF domains . In some embodiments, the connection to the Fc is via a peptide linker, such as a peptide linker such as those described above. In some embodiments, the connection between the variant ICOSL and the second IgSF domain is through a peptide linker, such as a peptide linker such as those described above. In some embodiments, the connection between the variant ICOSL and one or more additional IgSF domains is through a peptide linker, such as a peptide linker such as those described above. In some embodiments, the vIgD ICOSL, one or more additional IgSF domains, and the Fc domain may be linked together in any of numerous configurations, as shown in FIG. 16A and 16B. In some embodiments, the variant ICOSL-Fc hybrid may further comprise a signal peptide, such as an exemplary signal peptide that is contained in the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 59 or 225. Exemplary configurations are described in the Examples.

В некоторых воплощениях изобретения стековый иммуномодулирующий белок представляет собой димер, образованный двумя иммуномодулирующими гибридными полипептидами Fc. Также предлагаются молекулы нуклеиновых кислот, кодирующие любой из стековых иммуномодулирующих белков. В некоторых воплощениях димерный многодоменный стековый иммуномодулирующий белок может быть получен в клетках путем экспрессии или, в некоторых случаях, совместной экспрессии иммунодулирующих Fc-гибридных полипептидов, таких как описанные ниже.In some embodiments of the invention, the stacked immunomodulatory protein is a dimer formed by two immunomodulatory Fc fusion polypeptides. Nucleic acid molecules encoding any of the stacked immunomodulatory proteins are also provided. In some embodiments, a dimeric multidomain stacked immunomodulatory protein can be produced in cells by expressing, or in some cases co-expressing, immunomodulatory Fc fusion polypeptides, such as those described below.

В некоторых воплощениях димерный многодоменный стековый иммуномодулирующий белок является двухвалентным для каждой субъединицы Fc, одновалентным для каждой субъединицы, или двухвалентным для одной субъединицы и четырехвалентным для другой.In some embodiments, the dimeric multidomain stacked immunomodulatory protein is bivalent for each Fc subunit, monovalent for each subunit, or bivalent for one subunit and tetravalent for another.

В некоторых воплощениях димерный многодоменный стековый иммуномодулирующий белок представляет собой гомодимерный многодоменный стековый Fc-белок. В некоторых воплощениях димерный многодоменный стековый иммуномодулирующий белок включает первый стековый иммуномодулирующий гибридный полипептид Fc и второй стековый иммунодулирующий гибридный полипептид Fc, в котором первый и второй полипептиды являются одинаковыми. В некоторых воплощениях Fc-часть полипептида может представлять собой любой Fc, описанный выше.In some embodiments, the dimeric multidomain stacked immunomodulatory protein is a homodimeric multidomain stacked Fc protein. In some embodiments, the dimeric multidomain stacked immunomodulatory protein includes a first stacked immunomodulatory Fc fusion polypeptide and a second stacked immunomodulatory Fc fusion polypeptide, wherein the first and second polypeptides are the same. In some embodiments, the Fc portion of the polypeptide can be any Fc described above.

В некоторых воплощениях мультидоменная стековая молекула включает первый полипептид Fc, содержащий вариантный ICOSL и второй домен IgSF, и второй полипептид Fc, содержащий вариантный ICOSL и второй домен IgSF. В некоторых воплощениях мультидоменная стековая молекула включает первый полипептид Fc, содержащий вариантный ICOSL и второй домен IgSF, и третий домен IgSF, и второй гибридный полипептид Fc, содержащий вариантный ICOSL и второй домен IgSF и третий домен IgSF. В некоторых воплощениях Fc-часть первого и/или второго гибридного полипептида может представлять собой любой Fc, как описано выше. В некоторых воплощениях Fc-часть или область первого и второго гибридных полипептидов являются одинаковыми.In some embodiments, the multidomain stack molecule includes a first Fc polypeptide comprising a variant ICOSL and a second IgSF domain, and a second Fc polypeptide comprising a variant ICOSL and a second IgSF domain. In some embodiments, the multidomain stack molecule includes a first Fc polypeptide comprising a variant ICOSL and a second IgSF domain, and a third IgSF domain, and a second fusion Fc polypeptide comprising the variant ICOSL and a second IgSF domain and a third IgSF domain. In some embodiments, the Fc portion of the first and/or second fusion polypeptide can be any Fc as described above. In some embodiments, the Fc portion or region of the first and second hybrid polypeptides are the same.

В некоторых воплощениях предлагается иммуномодулирующий белок, который представляет собой мультидоменный стек ICOSL-NKp30, содержащий любой из вариантных полипептидов ICOSL и один или несколько доменов IgF из NKp30, например, NKp30 дикого типа или немодифицированногоIn some embodiments, an immunomodulatory protein is provided that is a multi-domain ICOSL-NKp30 stack comprising any of the ICOSL variant polypeptides and one or more IgF domains from NKp30, e.g., wild-type or unmodified NKp30

- 81 044346- 81 044346

NKp30, такого как домен IgV, указанный в SEQ ID NO: 929, или ECD или его связывающая часть, указанную в SEQ ID NO: 215, или его связывающая часть. В некоторых воплощениях предлагается иммуномодулирующий белок, содержащий любой вариантный полипептид ICOSL и один или несколько доменов IgSF варианта NKp30, содержащего одну или несколько аминокислотных модификаций в последовательности дикого типа или немодифицированной последовательности, представленной в SEQ ID NO: 215 или 929. В некоторых воплощениях одна или несколько модификаций аминокислот (например, замен) включают одну или несколько из L30V, A60V, S64P, S86G, таких как 1, 2, 3 или 4 таких аминокислотных модификаций. В некоторых аспектах вариант NKp30 мультидоменных стековых полипептидов представляет собой или включает вариантный домен IgV, такой как вариантный домен IgV, указанный в любом из SEQ ID NO: 504, 930, 931, 932 или 933, или IgV домен, который имеет, по меньшей мере, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99% с любой из SEQ ID NO: 504, 930, 931, 932 или 933 и содержит одну или несколько аминокислотных модификаций соответствующей SEQ ID NO. В некоторых аспектах вариантный полипептид NKp30 мультидоменных стековых полипептидов представляет собой или включает вариант домена ECD, такой как вариант ECD, представленный в любой из SEQ ID NO: 215, 216, 217, 218 или 219, или домен ECD который имеет, по меньшей мере, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99% с любой из SEQ ID NO: 215, 216, 217, 218 или 219 и содержит одну или несколько аминокислотных модификаций соответствующей SEQ ID NO.NKp30, such as the IgV domain specified in SEQ ID NO: 929, or the ECD or a binding portion thereof specified in SEQ ID NO: 215, or a binding portion thereof. In some embodiments, an immunomodulatory protein is provided comprising any ICOSL variant polypeptide and one or more NKp30 variant IgSF domains comprising one or more amino acid modifications in the wild-type or unmodified sequence set forth in SEQ ID NO: 215 or 929. In some embodiments, one or more multiple amino acid modifications (eg, substitutions) include one or more of L30V, A60V, S64P, S86G, such as 1, 2, 3 or 4 such amino acid modifications. In some aspects, the NKp30 variant multi-domain stacked polypeptide is or includes a variant IgV domain, such as a variant IgV domain set forth in any of SEQ ID NO: 504, 930, 931, 932, or 933, or an IgV domain that has at least , 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99% with any of SEQ ID NO: 504, 930, 931, 932 or 933 and contains one or multiple amino acid modifications corresponding to SEQ ID NO. In some aspects, a variant NKp30 polypeptide of multi-domain stacked polypeptides is or includes a variant ECD domain, such as an ECD variant set forth in any of SEQ ID NOs: 215, 216, 217, 218, or 219, or an ECD domain that has at least 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99% with any of SEQ ID NO: 215, 216, 217, 218 or 219 and contains one or several amino acid modifications corresponding to SEQ ID NO.

В любом из таких воплощений мультидоменного стека ICOSL-NKp30, вариантный полипептид ICOSL может включать любой, описанный в разделе II, содержащий вариантный домен IgSF (например, IgV или ECD), такой как включение любой из аминокислотных модификаций, указанных в табл. 1. В некоторых случаях такой иммуномодулирующий белок содержит вариантный полипептид ICOSL, содержащий домен ECD, такой как домен ECD, указанный в любом из SEQ ID NO: 09-142, 239, 280-325, 364-381, 387-424, 427-433, 435-470, 638-685, 905, 908, или ECD-домен, который имеет, по меньшей мере, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93 , 94, 95, 96, 97, 98, 99% к любому из SEQ ID NO: 109-142, 239, 280-325, 364-381, 387-424, 427-433, 435-470, 638-685, 905, 908 и содержит одну или несколько аминокислотных модификаций соответствующей SEQ ID NO. В конкретных случаях такой иммуномодулирующий белок содержит вариантный полипептид ICOSL, содержащий домен IgV, такой как домен IgV, представленный в любом из SEQ ID NO: 197-199, 201-208, 210, 212, 240, 326-340, 382-386, 425-426, 434, 546-599, 686-857, 906-907, 909-910 или домен IgV, который имеет, по меньшей мере, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99% к любому из SEQ ID NO: 197-199, 201-208, 210, 212, 240, 326-340, 382-386, 425-426, 434, 546-599, 686-857, 906-907, 909-910 и содержит одну или несколько аминокислотных модификаций, соответствующей SEQ ID NO. В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL имеет домен IgSF (например, домен IgV), который проявляет повышенную аффинность связывания с CD28 или ICOS, как описано где-либо в данном документе. В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL имеет домен IgSF (например, домен IgV), содержащий одну или более аминокислотную модификацию, например, замену в референсном ICOSL или специфическом связывающем фрагменте в соответствующем положении(ях) 52, 57 или 100 относительно нумерации SEQ ID NO: 32. В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL имеет одну или несколько аминокислотных модификаций, например, замен, выбранных из N52A, N52C, N52D, N52G, N52H, N52L, N52K, N52M, N52P, N52Q, N52R, N52S, N52T, N52V, N52Y, N57A, N57E, N57F, N57H, N57K, N57L, N57M, N57P, N57Q, N57S, N57T, N57V, N57W, N57Y, Q100A, Q100D, Q100E, Q100G, Q100K, Q100L, Q100M, Q100N, Q100R, Q100P, Q100S, Q100T или Q100V. Примеры таких вариантных молекул включают любые, как описано в настоящем документе. В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL содержит модификации аминокислот N52D (например, представляет собой или включен в домен IgV, указанный в SEQ ID NO: 548), N52H/Q100R (например, представляет собой или включен в домен IgV, указанный в SEQ ID NO: 567), N52H/N57Y/Q100R (например, представляет собой или включен в домен IgV, указанный в SEQ ID NO: 565), или N52L/N57H/Q100R (например, представляет собой или включен в домен IgV, указанный в SEQ ID NO: 761).In any such embodiments of the ICOSL-NKp30 multi-domain stack, the variant ICOSL polypeptide may include any of those described in section II containing a variant IgSF domain (eg, IgV or ECD), such as including any of the amino acid modifications listed in table. 1. In some cases, such immunomodulatory protein contains a variant ICOSL polypeptide containing an ECD domain, such as the ECD domain specified in any of SEQ ID NO: 09-142, 239, 280-325, 364-381, 387-424, 427- 433, 435-470, 638-685, 905, 908, or an ECD domain that has at least 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99% to any of SEQ ID NO: 109-142, 239, 280-325, 364-381, 387-424, 427-433, 435-470, 638-685, 905, 908 and contains one or several amino acid modifications corresponding to SEQ ID NO. In particular cases, such an immunomodulatory protein comprises a variant ICOSL polypeptide containing an IgV domain, such as the IgV domain set forth in any of SEQ ID NOs: 197-199, 201-208, 210, 212, 240, 326-340, 382-386, 425-426, 434, 546-599, 686-857, 906-907, 909-910 or an IgV domain that has at least 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99% to any of SEQ ID NO: 197-199, 201-208, 210, 212, 240, 326-340, 382-386, 425-426, 434, 546-599 , 686-857, 906-907, 909-910 and contains one or more amino acid modifications corresponding to SEQ ID NO. In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide has an IgSF domain (eg, an IgV domain) that exhibits increased binding affinity for CD28 or ICOS, as described elsewhere herein. In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide has an IgSF domain (e.g., an IgV domain) containing one or more amino acid modification, e.g., a substitution in the reference ICOSL or specific binding fragment at the corresponding position(s) 52, 57, or 100 relative to SEQ ID NO: 32. In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide has one or more amino acid modifications, for example, substitutions selected from N52A, N52C, N52D, N52G, N52H, N52L, N52K, N52M, N52P, N52Q, N52R, N52S, N52T, N52V, N52Y , N57A, N57E, N57F, N57H, N57K, N57L, N57M, N57P, N57Q, N57S, N57T, N57V, N57W, N57Y, Q100A, Q100D, Q100E, Q100G, Q100K, Q100L, Q100M, Q100N, Q1 00R, Q100P, Q100S , Q100T or Q100V. Examples of such variant molecules include any as described herein. In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide contains amino acid modifications N52D (e.g., is or is included in the IgV domain set forth in SEQ ID NO: 548), N52H/Q100R (e.g., is or is included in the IgV domain set forth in SEQ ID NO: 567), N52H/N57Y/Q100R (e.g., is or is included in the IgV domain set forth in SEQ ID NO: 565), or N52L/N57H/Q100R (e.g., is or is included in the IgV domain set forth in SEQ ID NO: : 761).

В некоторых воплощениях предоставленные иммуномодулирующие белки с множеством доменов, такие как иммуномодулирующий белок с множеством доменов ICOSL-NKp30, слиты с полипептидом Fc. В конкретных воплощениях полипептид Fc представляет собой вариант Fc-области человеческого IgG1, который проявляет пониженные эффекторные функции, такие как любые из описанных. В некоторых воплощениях Fc-область представляет собой человеческий IgG1, который содержит аминокислотные модификации N297G, E233P/L234V/L235A/G236del/S267K или L234A/l235E/G237A, где остаток пронумерован в соответствии с индексом EU по Kabat. В некоторых воплощениях вариантная Fc-область из IgG1 дополнительно включает аминокислотную замену C220S, где остатки пронумерованы в соответствии с индексом EU по Kabat. В некоторых воплощениях Fc-область содержит K447del, где остаток пронумерован в соответствии с индексом EU по Kabat. В некоторых аспектах Fc-область включает последовательность аминокислотной последовательности, представленную в любой из SEQ ID NO: 474, 476, 477, 478, 633 или 637, или аминокислотную последовательность, которая проявляет, по меньшей мере, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99% или более идентичности последовательностям с любой из SEQ ID NO: 474, 476, 477, 478, 633 или 637 и содержат аминокислотные замены соответствующего SEQ ID NO.In some embodiments, the provided multi-domain immunomodulatory proteins, such as the ICOSL-NKp30 multi-domain immunomodulatory protein, are fused to an Fc polypeptide. In specific embodiments, the Fc polypeptide is a variant of the human IgG1 Fc region that exhibits reduced effector functions such as any of those described. In some embodiments, the Fc region is a human IgG1 that contains the amino acid modifications N297G, E233P/L234V/L235A/G236del/S267K or L234A/l235E/G237A, where the residue is numbered according to the Kabat EU index. In some embodiments, the variant Fc region of IgG1 further includes the amino acid substitution C220S, where the residues are numbered according to the Kabat EU index. In some embodiments, the Fc region comprises K447del, wherein the residue is numbered according to the Kabat EU index. In some aspects, the Fc region includes an amino acid sequence set forth in any of SEQ ID NOs: 474, 476, 477, 478, 633, or 637, or an amino acid sequence that exhibits at least 90, 91, 92, 93. 94, 95, 96, 97, 98, 99% or more sequence identity to any of SEQ ID NO: 474, 476, 477, 478, 633 or 637 and contains amino acid substitutions of the corresponding SEQ ID NO.

- 82 044346- 82 044346

Пример таких конфигураций представлен на фиг. 16A-16B и описан в данном документе. В некоторых воплощениях любой из предлагаемых иммуномодулирующих полипептидов ICOSL-NKp30 может содержать две копии полипептида, имеющего структуру: вариантный ICOSL IgSF (например, IgV, такой как представлен в SEQ ID NO: 548, 565, 567 или 761) - линкер 1 - вариантный NKp30 IgSF (например, IgV, такой как представлен в SEQ ID NO: 504) - линкер 2 - Fc. В некоторых воплощениях любой из предлагаемых иммуномодулирующих полипептидов ICOSL-NKp30 может содержать две копии полипептида, имеющего структуру: вариантный ICOSL IgSF (например, IgV, такой как представлен в SEQ ID NO: 548, 565, 567 или 761) - линкер 1 - вариантный NKp30 IgSF (например, IgV, такой как указано в SEQ ID NO: 504) - линкер 1 - вариантный NKp30 IgSF (например, IgV, такой как представлен в SEQ ID NO: 504) линкер 2 - Fc. В некоторых воплощениях линкер 1 и линкер 2 представляют собой пептидные линкеры, такие как любые описанные. В некоторых воплощениях линкер 1 и линкер 2 являются одинаковыми. В некоторых воплощениях линкер 1 и линкер 2 являются разными. В некоторых воплощениях линкер 1 представляет собой 3x GGGGS (SEQ ID NO: 228). В некоторых воплощениях линкер 2 представляет собой GSGGGS (SEQ ID NO: 635).An example of such configurations is shown in Fig. 16A-16B and described herein. In some embodiments, any of the proposed ICOSL-NKp30 immunomodulatory polypeptides may contain two copies of a polypeptide having the structure: variant ICOSL IgSF (e.g., IgV such as those provided in SEQ ID NO: 548, 565, 567 or 761) - linker 1 - variant NKp30 IgSF (eg, IgV, such as shown in SEQ ID NO: 504) - linker 2 - Fc. In some embodiments, any of the proposed ICOSL-NKp30 immunomodulatory polypeptides may contain two copies of a polypeptide having the structure: variant ICOSL IgSF (e.g., IgV such as those provided in SEQ ID NO: 548, 565, 567 or 761) - linker 1 - variant NKp30 IgSF (eg, IgV, such as shown in SEQ ID NO: 504) - linker 1 - variant NKp30 IgSF (eg, IgV, such as shown in SEQ ID NO: 504) linker 2 - Fc. In some embodiments, linker 1 and linker 2 are peptide linkers, such as any described. In some embodiments, linker 1 and linker 2 are the same. In some embodiments, linker 1 and linker 2 are different. In some embodiments, linker 1 is 3x GGGGS (SEQ ID NO: 228). In some embodiments, linker 2 is GSGGGS (SEQ ID NO: 635).

Типичные мультидоменные стеки ICOSL-NKp30 имеют последовательность аминокислот, указанную в любой из SEQ ID NO: 912, 914, 916, 918, 920, 922, 924 или 926, или последовательность аминокислот, которая имеет, по меньшей мере, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99% для любой из SEQ ID NOS: 912, 914, 916, 918, 920, 922, 924 или 926.Exemplary multi-domain ICOSL-NKp30 stacks have an amino acid sequence specified in any of SEQ ID NO: 912, 914, 916, 918, 920, 922, 924 or 926, or an amino acid sequence that is at least 85, 86, 87 , 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99% for any of SEQ ID NOS: 912, 914, 916, 918, 920, 922, 924 or 926.

В некоторых воплощениях любой из предлагаемых иммуномодулирующих белков мультидоменного стека ICOSL-NKp30 связывается с ICOS и/или CD28 и связывается с B7-H6. В некоторых воплощениях иммуномодулирующие белки ICOSL-NKp30 обеспечивают связывающую молекулу, способную локализоваться в опухоли, рядом с иммунной клеткой, которая экспрессирует ICOS и/или CD28 (например, T-клетку). В некоторых воплощениях такие иммуномодулирующие белки ICOSL-NKp30 могут использоваться для усиления иммунного ответа путем вовлечения костимулирующих рецепторов ICOS и/или CD28 в T-клетках в микроокружении опухоли. В некоторых случаях такие мультидоменные стековые иммуномодулирующие белки ICOSL-NKp30 или их фармацевтические композиции можно использовать для лечения опухоли или рака.In some embodiments, any of the proposed immunomodulatory proteins of the ICOSL-NKp30 multidomain stack binds to ICOS and/or CD28 and binds to B7-H6. In some embodiments, the ICOSL-NKp30 immunomodulatory proteins provide a binding molecule capable of localizing to a tumor adjacent to an immune cell that expresses ICOS and/or CD28 (eg, a T cell). In some embodiments, such ICOSL-NKp30 immunomodulatory proteins can be used to enhance the immune response by engaging the costimulatory ICOS and/or CD28 receptors on T cells in the tumor microenvironment. In some cases, such multi-domain stacked immunomodulatory proteins ICOSL-NKp30 or pharmaceutical compositions thereof can be used to treat a tumor or cancer.

В некоторых воплощениях мультидоменная стековая молекула является гетеродимерной и содержит два различных полипептида Fc-гибрида, например первый и второй полипептид Fc, где, по меньшей мере, один представляет собой полипептид Fc-гибрида, содержащий, по меньшей мере, один вариантный полипептид ICOSL, и/или, по меньшей мере, один полипептид Fc содержит второй домен IgSF (например, второй вариант домена IgSF). В некоторых воплощениях первый или второй полипептид Fc-гибрида дополнительно включает третий домен IgSF (например, третий вариантный домен IgSF). В некоторых воплощениях мультидоменная стековая молекула включает первый полипептид Fc-гибрида, содержащий вариантный ICOSL и второй полипептид Fc-гибрида, содержащий домен IgSF, в котором, в некоторых случаях, первый или второй полипептид Fc-гибрида дополнительно включает третий домен IgSF. В некоторых воплощениях мультидоменная стековая молекула включает первый полипептид Fc, содержащий вариантный ICOSL, второй домен IgSF, и в некоторых случаях третий домен IgSF, и второй полипептид Fc-гибрида, который не связан либо с полипептидом вариантного ICOSL или дополнительного домена IgSF. В некоторых воплощениях Fc-часть или область первого и второго гибридных полипептидов являются одинаковыми. В некоторых воплощениях Fc-часть или область первого и второго гибридных полипептидов являются одинаковыми. В некоторых воплощениях многодоменная стековая молекула включает первый полипептид Fc, содержащий 1, 2, 3, 4 или больше вариантных полипептидов ICOSL и/или 1, 2, 3, 4 или больше дополнительных доменов IgSF, где общее количество доменов IgSF в первом стековом полипептиде Fc больше, чем 2, 3, 4, 5, 6 или более. В одном примере такого воплощения второй стековый полипептид Fc включает 1, 2, 3, 4 или более вариантных полипептидов ICOSL и/или 1, 2, 3, 4 или более вторых доменов IgSF, где общее количество доменов IgSF во втором стековом полипептиде Fc больше 2, 3, 4, 5, 6 или более. В другом примере такого воплощения второй полипептид Fc-гибрида не связан ни с вариантным полипептидом ICOSL, ни с дополнительным доменом IgSF.In some embodiments, the multidomain stack molecule is heterodimeric and comprises two different Fc fusion polypeptides, such as a first and a second Fc polypeptide, wherein at least one is an Fc fusion polypeptide comprising at least one variant ICOSL polypeptide, and /or at least one Fc polypeptide contains a second IgSF domain (eg, a second variant of the IgSF domain). In some embodiments, the first or second Fc fusion polypeptide further includes a third IgSF domain (eg, a third variant IgSF domain). In some embodiments, the multidomain stack molecule includes a first Fc fusion polypeptide comprising a variant ICOSL and a second Fc fusion polypeptide comprising an IgSF domain, wherein, in some cases, the first or second Fc fusion polypeptide further includes a third IgSF domain. In some embodiments, the multidomain stack molecule includes a first Fc polypeptide comprising a variant ICOSL, a second IgSF domain, and in some cases a third IgSF domain, and a second Fc fusion polypeptide that is not linked to either a variant ICOSL polypeptide or an additional IgSF domain. In some embodiments, the Fc portion or region of the first and second hybrid polypeptides are the same. In some embodiments, the Fc portion or region of the first and second hybrid polypeptides are the same. In some embodiments, the multi-domain stacking molecule includes a first Fc polypeptide comprising 1, 2, 3, 4 or more variant ICOSL polypeptides and/or 1, 2, 3, 4 or more additional IgSF domains, wherein the total number of IgSF domains in the first stacking Fc polypeptide more than 2, 3, 4, 5, 6 or more. In one example of such an embodiment, the second stacked Fc polypeptide includes 1, 2, 3, 4 or more variant ICOSL polypeptides and/or 1, 2, 3, 4 or more second IgSF domains, wherein the total number of IgSF domains in the second stacked Fc polypeptide is greater than 2 , 3, 4, 5, 6 or more. In another example of such an embodiment, the second Fc fusion polypeptide is not associated with either the variant ICOSL polypeptide or the additional IgSF domain.

В некоторых воплощениях гетеродимерная стековая молекула включает первый стековый иммуномодулирующий гибридный полипептид Fc и второй стековый иммуномодулирующий гибридный полипептид Fc, в котором первый и второй полипептиды различны. В некоторых воплощениях стековая гетеродимерная молекула включает первый полипептид Fc-гибрида, содержащий Fc-область и первый вариантный полипептид ICOSL и/или второй домен IgSF (например, второй вариантный домен IgSF) и второй полипептид Fc-гибрида, содержащий отличный от первого вариантный полипептид ICOSL или второй домен IgSF. В некоторых воплощениях молекула гетеродимерная стековая молекула содержит первый полипептид Fc-гибрида, содержащий Fc-область и первый вариантный полипептид ICOSL и/или второй домен IgSF (например, второй вариантный домен IgSF), и второй полипептид Fc-гибрида, содержащий как первый вариантный полипептид ICOSL и второй домен IgSF (например, второй вариантный домен IgSF), но в ориентации или конфигурации отличной, от первой Fc-области. В некоторых воплощениях первый или второй полипептид Fc-гибрида дополнительно включает третий домен IgSF (например, третий вариантный домен IgSF).In some embodiments, the heterodimeric stack molecule includes a first stacked immunomodulatory Fc fusion polypeptide and a second stacked immunomodulatory Fc fusion polypeptide, wherein the first and second polypeptides are different. In some embodiments, the stacked heterodimeric molecule includes a first Fc fusion polypeptide comprising an Fc region and a first variant ICOSL polypeptide and/or a second IgSF domain (e.g., a second variant IgSF domain) and a second Fc fusion polypeptide comprising a different variant ICOSL polypeptide from the first variant ICOSL polypeptide. or the second IgSF domain. In some embodiments, the heterodimeric stack molecule comprises a first Fc fusion polypeptide comprising an Fc region and a first variant ICOSL polypeptide and/or a second IgSF domain (e.g., a second variant IgSF domain), and a second Fc fusion polypeptide comprising both the first variant polypeptide ICOSL and a second IgSF domain (eg, a second variant IgSF domain), but in a different orientation or configuration from the first Fc region. In some embodiments, the first or second Fc fusion polypeptide further includes a third IgSF domain (eg, a third variant IgSF domain).

- 83 044346- 83 044346

В некоторых воплощениях домен Fc одного или обоих из первого и второго стековых иммуномодулирующих гибридных полипептидов Fc включает модификацию (например, замену) таким образом, что интерфейс молекулы Fc модифицируется для облегчения и/или содействия гетеродимеризации. В некоторых воплощениях модификации включают введение выступов (выпуклостей) в первый полипептид Fc и полостей (отверстий) во второй полипептид Fc, так чтобы выступы устанавливались в полости для содействия комплексообразованию первого и второго Fc-содержащих полипептидов. Аминокислоты, предназначенные для замены и/или модификации для создания выступов или полостей в полипептиде, обычно являются аминокислотами интерфейса, которые взаимодействуют или контактируют с одной или несколькими аминокислотами в интерфейсе второго полипептида.In some embodiments, the Fc domain of one or both of the first and second stacked immunomodulatory Fc fusion polypeptides includes modification (eg, substitution) such that the interface of the Fc molecule is modified to facilitate and/or promote heterodimerization. In some embodiments, modifications include introducing projections (bulges) into the first Fc polypeptide and cavities (holes) into the second Fc polypeptide such that the projections are positioned in the cavities to facilitate complexation of the first and second Fc-containing polypeptides. The amino acids intended to be replaced and/or modified to create protrusions or cavities in the polypeptide are typically interface amino acids that interact or contact one or more amino acids at the interface of the second polypeptide.

В некоторых воплощениях аминокислотную последовательность добавляют перед последовательностью Fc для конструкций, в которых последовательность Fc является N-концевой частью последовательности. В некоторых случаях последовательность аминокислот HMSSVSAQ (SEQ ID NO: 475) добавляют непосредственно перед последовательностью Fc для конструкций, в которых последовательность Fc является N-концевой частью последовательности. В некоторых воплощениях гетеродимерная стековая молекула содержит первый полипептид Fc-гибрида, содержащий Fc-область (выступ) и первый вариантный полипептид ICOSL и/или второй домен IgSF (например, второй вариант домена IgSF), и второй полипептид Fc-гибрида, содержащий Fc-область (углубление) и промежуточную последовательность HMSSVSAQ (SEQ ID NO: 475), добавленную непосредственно перед обеими Fc-областями первого и второго полипептида Fc-гибрида.In some embodiments, an amino acid sequence is added before the Fc sequence for constructs in which the Fc sequence is the N-terminal portion of the sequence. In some cases, the amino acid sequence HMSSVSAQ (SEQ ID NO: 475) is added immediately before the Fc sequence for constructs in which the Fc sequence is the N-terminal portion of the sequence. In some embodiments, the heterodimeric stack molecule comprises a first Fc-hybrid polypeptide comprising an Fc region (overhang) and a first variant ICOSL polypeptide and/or a second IgSF domain (e.g., a second variant IgSF domain), and a second Fc-hybrid polypeptide containing an Fc- region (groove) and the intervening sequence HMSSVSAQ (SEQ ID NO: 475) added immediately before both Fc regions of the first and second Fc hybrid polypeptide.

В некоторых воплощениях первый полипептид, который модифицирован так, чтобы содержать выпуклость (отверстие) аминокислот включающих замену нативной или исходной аминокислоты на аминокислоту, которая имеет, по меньшей мере, одну боковую цепь, которая выступает из интерфейса первого полипептида и поэтому размещается в компенсационной полости (отверстии) в соседнем интерфейсе второго полипептида. Чаще всего замещающая аминокислота представляет собой такую, которая имеет больший объем боковой цепи, чем исходный аминокислотный остаток. Специалист в данной области знает, как определить и/или оценить свойства аминокислотных остатков, чтобы идентифицировать те, которые являются идеальными аминокислотами для замены с тем, чтобы создать выступ. В некоторых воплощениях замещающие остатки для образования выступов представляют собой встречающиеся в природе аминокислотные остатки и включают, например, аргинин (R), фенилаланин (F), тирозин (Y) или триптофан (W). В некоторых примерах исходный остаток, идентифицированный для замещения, представляет собой аминокислотный остаток, который имеет небольшую боковую цепь, такую как, например, аланин, аспарагин, аспарагиновая кислота, глицин, серин, треонин или валин.In some embodiments, a first polypeptide that is modified to contain an amino acid bulge comprising the replacement of a native or parent amino acid with an amino acid that has at least one side chain that protrudes from the interface of the first polypeptide and is therefore accommodated in the compensation cavity ( hole) at the adjacent interface of the second polypeptide. Most often, the replacement amino acid is one that has a larger side chain than the original amino acid residue. One skilled in the art will know how to determine and/or evaluate the properties of amino acid residues to identify those that are ideal amino acids to substitute to create a protrusion. In some embodiments, the substituting residues for forming the protrusions are naturally occurring amino acid residues and include, for example, arginine (R), phenylalanine (F), tyrosine (Y), or tryptophan (W). In some examples, the parent residue identified for substitution is an amino acid residue that has a small side chain, such as, for example, alanine, asparagine, aspartic acid, glycine, serine, threonine, or valine.

В некоторых воплощениях второй полипептид, который модифицирован для того, чтобы содержать полость (отверстие), является полипептидом, который включает замену нативной или исходной аминокислоты на аминокислоту, которая имеет, по меньшей мере, одну боковую цепь, которая утоплена в интерфейсе второго полипептида и, таким образом, способна уместить соответствующий выступ интерфейса первого полипептида. Чаще всего замещающая аминокислота представляет собой ту, которая имеет меньший объем боковой цепи, чем исходный аминокислотный остаток. Специалист в данной области знает, как определить и/или оценить свойства аминокислотных остатков, чтобы идентифицировать те, которые являются идеальными заменами остатков для образования полости. Как правило, замещающие остатки для образования полости представляют собой встречающиеся в природе аминокислоты и включают, например, аланин (A), серин (S), треонин (T) и валин (V). В некоторых примерах исходная аминокислота, идентифицированная для замещения, представляет собой аминокислоту, которая имеет большую боковую цепь, такую как, например, тирозин, аргинин, фенилаланин или триптофан.In some embodiments, the second polypeptide that is modified to contain a cavity is a polypeptide that includes replacing a native or parent amino acid with an amino acid that has at least one side chain that is recessed in the interface of the second polypeptide and, thus being able to accommodate a corresponding protrusion of the interface of the first polypeptide. Most often, the replacement amino acid is one that has a smaller side chain volume than the original amino acid residue. One skilled in the art will know how to determine and/or evaluate the properties of amino acid residues to identify those that are ideal replacement residues for cavity formation. Typically, the substituting residues for cavity formation are naturally occurring amino acids and include, for example, alanine (A), serine (S), threonine (T) and valine (V). In some examples, the parent amino acid identified for substitution is an amino acid that has a large side chain, such as, for example, tyrosine, arginine, phenylalanine, or tryptophan.

Интерфейс CH3 IgG1 человека, например, включает шестнадцать остатков в каждом домене, расположенном на четырех антипараллельных β-цепях, которые создают углубление 1090 А 2 с каждой поверхности (см., например, Deisenhofer et al. (1981) Biochemistry, 20:2361-2370; Miller et al., (1990) J Mol. Biol., 216, 965-973; Ridgway et al., (1996) Prot. Engin., 9: 617-621; U.S. Пат. США No. 5,731,168). Модификации домена CH3 для создания выступов или полостей описаны, например, в Пат. США США № 5731168; Международных патентных заявках WO 98/50431 и WO 2005/063816; и Ridgway et al., (1996) Prot. Engin., 9: 617-621. В некоторых примерах модификации домена CH3 для создания выступов или полостей обычно ориентированы на остатки, расположенные на двух центральных антипараллельных βцепях. Цель состоит в том, чтобы свести к минимуму риск того, чтобы создающиеся выступы, могли быть размещены путем выпячивания в окружающий растворитель, и не размещены в компенсаторную полость в домене партнера CH3.The CH3 interface of human IgG1, for example, includes sixteen residues in each domain located on four antiparallel β-strands that create a 1090 A 2 depression on each surface (see, for example, Deisenhofer et al. (1981) Biochemistry, 20:2361- 2370; Miller et al., (1990) J Mol. Biol., 216, 965-973; Ridgway et al., (1996) Prot. Engin., 9: 617-621; U.S. Pat. US No. 5,731,168). Modifications of the CH3 domain to create protrusions or cavities are described, for example, in Pat. US US No. 5731168; International patent applications WO 98/50431 and WO 2005/063816; and Ridgway et al., (1996) Prot. Engin., 9: 617-621. In some examples, modifications to the CH3 domain to create protrusions or cavities typically target residues located on the two central antiparallel β strands. The goal is to minimize the risk that the protrusions created may be accommodated by protruding into the surrounding solvent and not placed into a compensatory cavity in the CH3 partner domain.

В некоторых воплощениях гетеродимерная молекула включает мутацию T366W в домене CH3 из цепи с выступом цепи и мутации T366S, L368A, Y407V в домене CH3 цепи с полостью. В некоторых случаях также может быть использован дополнительный межцепочечный дисульфидный мостик между доменами CH3 (Merchant, A. M., et al., Nature Biotech. 16 (1998) 677-681), например, путем введения мутации Y349C в домен CH3 цепи выступа или отверстия и мутацит E356C или мутацит S354C в домен CH3 другой цепи. В некоторых воплощениях гетеродимерная молекула включает мутации S354C,In some embodiments, the heterodimeric molecule includes mutation T366W in the CH3 domain of the overhang chain and mutations T366S, L368A, Y407V in the CH3 domain of the cavity chain. In some cases, an additional interchain disulfide bridge between the CH3 domains can also be used (Merchant, A. M., et al., Nature Biotech. 16 (1998) 677-681), for example, by introducing the Y349C mutation into the CH3 domain of the knob or hole chain and mutacite E356C or mutate S354C to the CH3 domain of another chain. In some embodiments, the heterodimeric molecule includes S354C mutations,

- 84 044346- 84 044346

T366W в одной из двух доменов CH3 и мутации Y349C, T366S, L368A, Y407V в другом из двух доменов CH3. В некоторых воплощениях гетеродимерная молекула включает мутации E356C, T366W в одной из двух доменов CH3 и мутации Y349C, T366S, L368A, Y407V в другом из двух доменов CH3. В некоторых воплощениях гетеродимерная молекула включает мутации Y349C, T366W в одном из двух доменов CH3 и мутации E356C, T366S, L368A, Y407V в другом из двух доменов CH3. В некоторых воплощениях гетеродимерная молекула включает мутации Y349C, T366W в одной из двух доменов CH3 и мутации S354C, T366S, L368A, Y407V в другом из двух доменов CH3. Примеры других технологий выступ-во-впадину известны в данной области техники, например, как описано в EP 1 870 459 A1.T366W in one of the two CH3 domains and mutations Y349C, T366S, L368A, Y407V in the other of the two CH3 domains. In some embodiments, the heterodimeric molecule includes mutations E356C, T366W in one of two CH3 domains and mutations Y349C, T366S, L368A, Y407V in the other of two CH3 domains. In some embodiments, the heterodimeric molecule includes mutations Y349C, T366W in one of two CH3 domains and mutations E356C, T366S, L368A, Y407V in the other of two CH3 domains. In some embodiments, the heterodimeric molecule includes mutations Y349C, T366W in one of two CH3 domains and mutations S354C, T366S, L368A, Y407V in the other of two CH3 domains. Examples of other projection-to-recess technologies are known in the art, for example as described in EP 1 870 459 A1.

В некоторых воплощениях Fc-области гетеродимерной молекулы могут дополнительно включать одну или более других мутаций Fc, например, любые описанные выше. В некоторых воплощениях молекула гетеродимера включает Fc-область с мутацией, которая уменьшает эффекторную функцию.In some embodiments, the Fc regions of the heterodimeric molecule may further include one or more other Fc mutations, such as any of those described above. In some embodiments, the heterodimer molecule includes an Fc region with a mutation that reduces effector function.

В некоторых воплощениях вариантный Fc, содержащий модификации выступа(выпуклость) или полости(отверстие) в CH3, может быть присоединен к стековому иммуномодулирующему полипептиду в любом месте, но обычно через его N-или C-конец, к N- или C-концу первого и/или второго стекового иммуномодулирующего полипептида, например, для образования гибридного полипептида. Связь может быть прямой или опосредованной с помощью линкера. Как правило, молекула с выступом и отверстием генерируется путем совместной экспрессии первого стекового иммуномодулирующего полипептида, связанного с вариантным Fc, содержащим модификацию(ии) выступ на CH3, со вторым стековым иммуномодулирующим полипептидом, связанным с вариантом Fc, содержащим модификацию(ии) полости на CH3.In some embodiments, a variant Fc containing bulge or hole modifications in CH3 can be attached to the stacked immunomodulatory polypeptide at any location, but typically through its N- or C-terminus, to the N- or C-terminus of the first and/or a second stacked immunomodulatory polypeptide, for example, to form a hybrid polypeptide. The connection can be direct or indirect via a linker. Typically, a knob-hole molecule is generated by coexpression of a first stacked immunomodulatory polypeptide associated with an Fc variant containing the knob modification(s) on CH3 with a second stacked immunomodulatory polypeptide associated with the Fc variant containing the cavity modification(s) on CH3 .

Кроме того, предлагаемое представляет собой нуклеотидную молекулу, кодирующую вариантный гибридный белок ICOSL-Fc. В некоторых воплощениях для получения гибридного белка Fc нуклеотидную молекулу, кодирующую гибридный белок ICOSL-Fc, встраивают в соответствующий экспрессирующий вектор. Полученный в результате вариантный гибридный белок ICOSL-Fc может быть экспрессирован в клетках-хозяевах, трансформированных экспрессией, где сборка между доменами Fc происходит посредством межцепочечных дисульфидных связей, формирующихся между Fc-фрагментами, с получением димера, такого как двухвалентные, вариантные гибридные белки ICOSL-Fc.In addition, the proposed is a nucleotide molecule encoding a variant fusion protein ICOSL-Fc. In some embodiments, to produce an Fc fusion protein, a nucleotide molecule encoding an ICOSL-Fc fusion protein is inserted into an appropriate expression vector. The resulting ICOSL-Fc variant fusion protein can be expressed in expression-transformed host cells where assembly between Fc domains occurs via interchain disulfide bonds formed between the Fc moieties to produce a dimer such as divalent ICOSL-Fc variant fusion proteins Fc.

Полученные гибридные белки Fc могут быть легко очищены с помощью аффинной хроматографии на колонках с протеином A или протеином G. Для получения гетеродимеров могут потребоваться дополнительные стадии очистки. Например, когда две нуклеиновые кислоты, кодирующие различные вариантные полипептиды ICOSL, трансформируются в клетки, образование гетеродимеров должно быть достигнуто биохимически, поскольку вариантные молекулы ICOSL, несущие Fc-домен, будут также экспрессироваться как дисульфидные гомодимеры. Таким образом, гомодимеры могут быть восстановлены в условиях, благоприятствующих разрушению межцепочечных дисульфидов, но не влияют на внутрицепочечные дисульфиды. В некоторых случаях различные мономеры ICOSL-Fc смешивают в эквимолярных количествах и окисляют с образованием смеси гомо- и гетеродимеров. Компоненты этой смеси разделяют хроматографическими методами. В ином случае, на образование этого типа гетеродимера может быть оказано влияние с помощью генной инженерии и экспрессии гибридных молекул Fc, которые содержат вариантный полипептид ICOSL с использованием описанных ниже способов выступ-вовпадине.The resulting Fc fusion proteins can be easily purified by affinity chromatography on Protein A or Protein G columns. Additional purification steps may be required to obtain heterodimers. For example, when two nucleic acids encoding different variant ICOSL polypeptides are transformed into cells, the formation of heterodimers must be achieved biochemically, since the variant ICOSL molecules bearing the Fc domain will also be expressed as disulfide homodimers. Thus, homodimers can be reduced under conditions that favor the destruction of interchain disulfides but do not affect intrachain disulfides. In some cases, different ICOSL-Fc monomers are mixed in equimolar amounts and oxidized to form a mixture of homo- and heterodimers. The components of this mixture are separated by chromatographic methods. Alternatively, the formation of this type of heterodimer can be influenced by genetic engineering and expression of hybrid Fc molecules that contain a variant ICOSL polypeptide using the tongue-and-groove methods described below.

B. Конъюгаты и гибриды вариантных полипептидов и иммуномодулирующих белков.B. Conjugates and hybrids of variant polypeptides and immunomodulatory proteins.

В некоторых воплощениях настоящего изобретения вариантные полипептиды, представленные в данном документе, которые представляют собой иммуномодулирующие белки, содержащие варианты домена Ig семейства IgSF (vIgD), могут быть конъюгированы с или слиты прямо или опосредованно с фрагментом, таким как эффекторный фрагмент, такой как другой белок, прямо или опосредованно, с образованием конъюгата (конъюгат IgSF). В некоторых воплощениях вариантный иммуномодулирующий белок ICOSL предоставляется в виде конъюгата, в котором имеет место прямое или оспосредованное связывание ICOSL с нацеливающим агентом или функциональным фрагментом, например, с антителом или другими связывающими молекулами, которые специфически связываются с лигандом, например, антигеном, например, для нацеливания или локализации vIgD в конкретной среде или клетке, например, при введении объекту. В некоторых воплощениях нацеливающий агент, например антитело или другая связывающая молекула, связывается с опухолевым антигеном, тем самым локализуя вариантный ICOSL, содержащий vIgD, в микроокружении опухоли, например, для модуляции активности инфильтрационных опухолей лимфоцитов (TIL), специфичных для микроокружение опухоли. В некоторых воплощениях соединение может быть ковалентным или нековалентным, например, посредством нековалентного взаимодействия биотина-стрептавидина. В некоторых воплощениях конъюгат представляет собой гибридный белок вариантного полипептида ICOSL, связанный напрямую или через линкер с другим белком или полипептидным фрагментом.In some embodiments of the present invention, variant polypeptides provided herein, which are immunomodulatory proteins containing variants of the IgSF family Ig domain (vIgD), can be conjugated to or fused directly or indirectly to a fragment, such as an effector fragment, such as another protein , directly or indirectly, to form a conjugate (IgSF conjugate). In some embodiments, the variant immunomodulatory protein ICOSL is provided as a conjugate in which there is direct or indirect binding of ICOSL to a targeting agent or functional moiety, e.g., an antibody or other binding molecules that specifically bind to a ligand, e.g., an antigen, e.g. targeting or localizing vIgD to a specific environment or cell, for example, when administered to a subject. In some embodiments, a targeting agent, such as an antibody or other binding molecule, binds to a tumor antigen, thereby localizing the variant ICOSL containing vIgD to the tumor microenvironment, for example, to modulate the activity of tumor infiltrating lymphocytes (TILs) specific to the tumor microenvironment. In some embodiments, the compound may be covalent or non-covalent, for example, through a non-covalent biotin-streptavidin interaction. In some embodiments, the conjugate is a fusion protein of a variant ICOSL polypeptide linked directly or via a linker to another protein or polypeptide fragment.

В некоторых воплощениях гибридный белок представляет собой вариантный гибрид ICOSL-Fc, в котором любые два или более из вышеупомянутых вариантных полипептидов могут быть присоединены к Fc.In some embodiments, the fusion protein is an ICOSL-Fc variant fusion in which any two or more of the above variant polypeptides can be fused to the Fc.

В некоторых воплощениях конъюгат IgSF, такой как гибридный белок, содержит ECD дикого типаIn some embodiments, the IgSF conjugate, such as a fusion protein, contains wild-type ECD

- 85 044346 (полноразмерный или укороченный) или вариантный полипептид ICOSL. В некоторых воплощениях дополнительный домен IgSF содержит домен или домены IgV или домен или домены IgC (например, IgC2), или специфический фрагмент связывания домена IgV или специфический фрагмент связывания домена или доменов IgC (например, IgC2). В некоторых воплощениях конъюгат IgSF, такой как гибридный белок, содержит домен IgV ICOSL, как указано в SEQ ID NO: 196 или 545.- 85 044346 (full-length or shortened) or variant ICOSL polypeptide. In some embodiments, the additional IgSF domain comprises an IgV domain or domains or an IgC domain or domains (eg, IgC2), or a specific IgV domain binding fragment or a specific IgC domain or domains binding fragment (eg, IgC2). In some embodiments, the IgSF conjugate, such as a fusion protein, contains an IgV ICOSL domain as set forth in SEQ ID NO: 196 or 545.

В некоторых воплощениях фрагмент может быть нацеливающим фрагментом, низкомолекулярным лекарственным средством (неполипептидным лекарственным средством с молярной массой менее 500 дальтон), токсином, цитостатическим агентом, цитотоксическим агентом, иммунодепрессантом, радиоактивным агентом, пригодным для диагностических целей, ионом радиоактивного металла в терапевтических целях, ферментом, активирующим пролекарство, агентом, который увеличивает биологический период полужизни или диагностическим или детектируемым агентом.In some embodiments, the fragment may be a targeting moiety, a small molecule drug (a non-polypeptide drug with a molar mass of less than 500 daltons), a toxin, a cytostatic agent, a cytotoxic agent, an immunosuppressant, a radioactive agent useful for diagnostic purposes, a radioactive metal ion for therapeutic purposes, an enzyme , a prodrug activating agent, an agent that increases the biological half-life, or a diagnostic or detectable agent.

В некоторых воплощениях эффекторный фрагмент представляет собой терапевтический агент, такой как противоопухолевый терапевтический агент, который является либо цитотоксическим, цитостатическим, либо иным образом обеспечивает некоторое терапевтическое преимущество. В некоторых воплощениях эффекторная часть представляет собой нацеливающий фрагмент или агент, такой как агент, который нацелен на антиген клеточной поверхности, например антиген на поверхности опухолевой клетки. В некоторых воплощениях эффекторная часть представляет собой метку, которая может генерировать детектируемый сигнал, прямо или опосредованно. В некоторых воплощениях эффекторная часть представляет собой токсин. В некоторых воплощениях эффекторная часть представляет собой белок, пептид, нуклеиновую кислоту, малую молекулу или наночастицу.In some embodiments, the effector moiety is a therapeutic agent, such as an antitumor therapeutic agent, that is either cytotoxic, cytostatic, or otherwise provides some therapeutic benefit. In some embodiments, the effector portion is a targeting moiety or agent, such as an agent that targets a cell surface antigen, such as an antigen on the surface of a tumor cell. In some embodiments, the effector portion is a label that can generate a detectable signal, directly or indirectly. In some embodiments, the effector portion is a toxin. In some embodiments, the effector moiety is a protein, peptide, nucleic acid, small molecule, or nanoparticle.

В некоторых воплощениях, 1, 2, 3, 4, 5 или более эффекторных фрагментов, которые могут быть одинаковыми или различными, конъюгированы, связаны или слиты с вариантным полипептидом или белком с образованием конъюгата IgSF. В некоторых воплощениях такие эффекторные фрагменты могут быть присоединены к вариантному полипептиду или иммуномодулирующему белку с использованием различных способов молекулярно-биологической или химической конъюгации и связывания, известных в данной области и описанных ниже. В некоторых воплощениях линкеры, такие как пептидные линкеры, расщепляемые линкеры, нерасщепляемые линкеры или линкеры, которые помогают в реакции конъюгации, могут быть использованы для связывания или конъюгации эффекторных фрагментов с вариантным полипептидом или иммуномодулирующим белком.In some embodiments, 1, 2, 3, 4, 5 or more effector fragments, which may be the same or different, are conjugated, linked or fused to a variant polypeptide or protein to form an IgSF conjugate. In some embodiments, such effector fragments can be attached to a variant polypeptide or immunomodulatory protein using various molecular biological or chemical conjugation and coupling techniques known in the art and described below. In some embodiments, linkers, such as peptide linkers, cleavable linkers, non-cleavable linkers, or linkers that assist in the conjugation reaction, can be used to link or conjugate effector moieties to a variant polypeptide or immunomodulatory protein.

В некоторых воплощениях конъюгат IgSF включает следующие компоненты: (белок или полипептид), (L)q и (эффекторный фрагмент)n, в котором белок или полипептид представляет собой любой из описанных вариантных полипептидов или иммуномодулирующих белков, способных связывать один или несколько когнатных контрструктурных лигандов, как описано; L представляет собой линкер для связывания белка или полипептида с фрагментом; m равно, по меньшей мере, 1; q равно 0 или более; и полученный конъюгат IgGF связывается с одним или несколькими контрструктурными лигандами. В конкретных воплощениях m составляет от 1 до 4, a q равно от 0 до 8. В некоторых воплощениях линкер представляет собой пептид. В некоторых воплощениях эффекторный фрагмент представляет собой белок или полипептид.In some embodiments, the IgSF conjugate includes the following components: (protein or polypeptide), (L)q, and (effector moiety)n, wherein the protein or polypeptide is any of the described variant polypeptides or immunomodulatory proteins capable of binding one or more cognate counterstructural ligands as described; L is a linker for linking a protein or polypeptide to a fragment; m is at least 1; q is 0 or more; and the resulting IgGF conjugate binds to one or more counterstructural ligands. In certain embodiments, m is from 1 to 4 and q is from 0 to 8. In some embodiments, the linker is a peptide. In some embodiments, the effector moiety is a protein or polypeptide.

В некоторых воплощениях предлагается конъюгат IgSF, содержащий вариантный полипептид или иммуномодулирующий белок, обеспеченный в данном документе, конъюгированный с направляющим агентом, который связывается с молекулой клеточной поверхности, например, для направленной доставки вариантного полипептида или иммуномодулирующего белка к специфической клетке. В некоторых воплощениях нацеливающий агент представляет собой молекулу(ы), которая обладает способностью локализоваться и связываться с молекулой, присутствующей в нормальной клетке/ткани и/или опухолевой клетке/опухоли у объекта. Другими словами, конъюгаты IgSF, содержащие нацеливающий агент, могут связываться с лигандом (прямо или опосредованно), который присутствует в клетке, такой как опухолевая клетка. Нацеливающие агенты по изобретению включают антитела, полипептиды, пептиды, аптамеры, другие лиганды или любую их комбинацию, которые могут связывать компонент клеткимишени или молекулы.In some embodiments, an IgSF conjugate containing a variant polypeptide or immunomodulatory protein provided herein is provided conjugated to a targeting agent that binds to a cell surface molecule, for example, to target the variant polypeptide or immunomodulatory protein to a specific cell. In some embodiments, the targeting agent is a molecule(s) that has the ability to localize to and bind to a molecule present in a normal cell/tissue and/or tumor cell/tumor in a subject. In other words, IgSF conjugates containing a targeting agent can bind to a ligand (directly or indirectly) that is present in a cell, such as a tumor cell. Targeting agents of the invention include antibodies, polypeptides, peptides, aptamers, other ligands, or any combination thereof that can bind a target cell component or molecule.

В некоторых воплощениях нацеливающий агент связывает клетку(и) опухоли или может связываться в непосредственной близости от опухолевой клетки(ок) (например, опухолевой сосудистой системы или опухолевого микроокружения) после введения объекту. Нацеливающий агент может связываться с рецептором или лигандом на поверхности раковой клетки. В другом аспекте изобретения выбран нацеливающий агент, который специфичен для нераковых или ткани. Например, нацеливающий агент может быть специфичным для молекулы, обычно присутствующей на конкретной клетке или ткани. Кроме того, в некоторых воплощениях одна и та же молекула может присутствовать на нормальных и раковых клетках. Известны различные клеточные компоненты и молекулы. Например, если целевой агент специфичен для EGFR, полученный конъюгат IgSF может быть нацелен на раковые клетки, экспрессирующие EGFR, а также на нормальные эпидермальные клетки кожи, экспрессирующие EGFR. Поэтому в некоторых воплощениях конъюгат IgSF по изобретению может функционировать с помощью двух отдельных механизмов (нацеленных на раковые и незлокачественные клетки).In some embodiments, the targeting agent binds to the tumor cell(s) or may bind in the vicinity of the tumor cell(s) (eg, tumor vasculature or tumor microenvironment) after administration to the subject. The targeting agent can bind to a receptor or ligand on the surface of the cancer cell. In another aspect of the invention, a targeting agent is selected that is noncancerous or tissue specific. For example, the targeting agent may be specific to a molecule typically present on a particular cell or tissue. Additionally, in some embodiments, the same molecule may be present on normal and cancer cells. Various cellular components and molecules are known. For example, if the targeting agent is specific for EGFR, the resulting IgSF conjugate can target cancer cells expressing EGFR as well as normal epidermal skin cells expressing EGFR. Therefore, in some embodiments, the IgSF conjugate of the invention may function through two separate mechanisms (targeting cancerous and non-cancerous cells).

В различных аспектах настоящего изобретения, раскрытый в настоящем описании конъюгат IgSFIn various aspects of the present invention, the IgSF conjugate disclosed herein

- 86 044346 по настоящему изобретению включает нацеливающий агент, который может связывать/нацеливать на клеточный компонент, такой как опухолевый антиген, бактериальный антиген, вирусный антиген, антиген микоплазмы, антиген гриба, прионный антиген, антиген из паразита. В некоторых аспектах клеточный компонент, антиген или молекула могут быть использованы для обозначения искомой мишени для нацеливающего агента. Например, в различных воплощениях нацеливающий агент специфичен или связывается с компонентом, который включает, но не ограничивается ими, рецептор эпидермального фактора роста (EGFR, ErbB-1, HER1), ErbB-2 (HER2/neu), ErbB-3/HER3, ErbB-4/HER4, семейство лигандов EGFR; семейство инсулиноподобных рецепторов фактора роста (IGFR), IGF-связывающие белки (IGFBP), семейство лигандов IGFR; семейство рецепторов фактора роста тромбоцитов (PDGFR), семейство лигандов PDGFR; семейство рецепторов фактора роста фибробластов (FGFR), семейство лигандов FGFR, семейство рецепторов фактора роста эндотелиальных сосудов (VEGFR), семейство VEGF; семейство рецепторов HGF; семейство TRK-рецепторов; семейство рецепторов эфрина (EPH); семейство рецепторов AXL; семейство рецепторов лейкоцитарной тирозинкиназы (LTK); семейство рецепторов TIE, ангиопоэтин 1,2; семейство рецепторов-сирот, подобных рецепторной тирозинкиназе (ROR), например ROR1; CD171 (L1CAM); B7-H6 (NCR3LG1); PD-L1, антиген гликозилирования опухолей, например sTn или Tn, такой как sTn Ag MUC1; LHR (LHCGR); фосфатидилсерин, семейство рецепторов доменного диска (DDR); семейство RET-рецепторов; семейство рецепторов KLG; семейство рецепторов RYK; семейство рецепторов MuSK; рецепторы трансформирующего фактора роста-α (TGF-α), TGF-β; рецепторы цитокинов, рецепторы класса I (семейство гематопоэтина) и семейства II (интерферон/IL-10), суперсемейство рецепторов некроза опухолей (TNF) (TNFRSF), семейство рецепторов смерти; антигены рака яичка (CT), специфические для линии антигены, дифференцирующие антигены, альфа-актинин-4, ARTCl, область кластеров точки останова-продукты слияния Абелсона (Bcr-abl), B-RAF, каспаза-5 (CASP-5) каспаза-8 (CASP-8), β-катенин (CTNNBl), цикл клеточного деления 27 (CDC27), циклинзависимая киназа 4 (CDK4), CDKN2A, COA-I, гибридный белок dek-can, EFTUD-2, фактор элонгации 2 (ELF2), гибридный белок, содержащий вариантный ген Ets 6/острый миелоидный лейкоз 1 ген ETS (ETC6-AML1), фибронектин (FN), например экстрадомен A (EDA) фибронектина, GPNMB, гибридный белок, включающий липидный рецептор низкой плотности/GDP-L фукоза: гибридный белок β-D галактоза 2-a-L фукозилтрансферазу (LDLR/FUT), HLA-A2 замена аргинина на изолейцин в остатке 170 αспирали а2-домена в гене HLA-A2 (HLA-A * 201-R170I), HLA-A1 1, мутированный белок теплового шока 70-2 (HSP70-2M), K1AA0205, MART2, убиквитарный для меланомы, мутированный 1, 2, 3 (MUM-I, 2, 3), простатическая кислая фосфатаза (PAP), нео-PAP, миозин класса I, NFYC, OGT, OS-9, гибридный белок pml-RAR-альфа, PRDX5, PTPRK, K-ras (KRAS2), N-ras (NRAS), HRAS, RBAF600, SIRT2, SNRPD1, SYT-SSX1 или -SSX2, триозофосфатизомераза, BAGE, BAGK-1, BAGE-2,3, 4,5, GAGE-1,2,3,4,5,6,7,8, GnT-V (аберрантная N-ацетилглюкозанилтрансфераза V, MGAT5), HERV-K-MEL, KK-LC, KM- H-1, LAGE, LAGE-I, CTL-распознаваемый антиген при меланоме (CAMEL), MAGE-A1 (MAGE-I), MAGE-A2, MAGE-A3, MAGE-A4, MAGE-A5, MAGE-A6, MAGE-A8, MAGE-A9, MAGE-A10, MAGE-A11, MAGEA12, MAGE-3, MAGE-B1, MAGE-B2, MAGE-B5, MAGE-B6, MAGE-C1, MAGE-C2, муцин 1 (MUC1), MART-1/мелан-А (MLANA), gp100, gpl00/Pmell7 (SILV), тирозиназа (TYR), TRP-I, HAGE, NA-88, NYESO-I, NY-ESO-1/LAGE-2, SAGE, Spl7, SS X-1,2,3,4, TRP2-INT2, карцино-эмбриональный антиген (CEA), калликреин 4, маммаглобин-A, OA1, антиген предстательной железы (PSA), TRP-1/gp75, TRP-2, адипофилин, индуцируемый интерфероном белок в меланоме 2 (AIM-2), BING-4, CPSF, циклин D1, молекула адгезии эпителиальных клеток (Ep-CAM), EphA3, фактор роста фибробластов-5 (FGF-5), гликопротеин 250 (gp250), EGFR (ERBB1), HER-2/neu (ERBB2), цепь α2 рецептора интерлейкина-13 (IL13Ra2), рецептор IL-6, кишечная карбоксиэстераза (iCE), альфа-фетобетон (AFP), M-CSF, mdm-2, MUC1, p53 (TP53), PBF, PRAME, PSMA, RAGE-I, RNF43, RU2AS, SOXlO, STEAPl, сурвивин (BIRC5), обратную транскриптазу теломеразы человека (hTERT), теломеразу, ген опухоли Вильмса (WTl) SYCPl, BRDT, SPANX, XAGE, ADAM2, PAGE-5, LIPl, CTAGE-I, CSAGE, MMAl, CAGE, BORIS, HOM-TES-85, AF15ql4, HCA661, LDHC, MORC, SGY-I, SPO1 1, TPXl, NY-SAR-35, FTHL17, NXF2, TDRD1, TEX15, FATE, TPTE, идиотипы иммуноглобулина, белок Bence-Jones, рецепторы эстрогенов (ER), андрогенные рецепторы (AR), CD40, CD30, CD20, CD19, CD33, опухолевый антиген 72-4 (Ca 72-4), опухолевый антиген 15-3 (CA 15-3), опухолевый антиген 27-29 (CA 27-29), опухолевый антиген 125 (CA 125), опухолевый антиген 19-9 (CA 19-9), хорионический гонадотропин β-человека, β-2 микроглобулин, антиген плоскоклеточной карциномы, нейроспецифическую энолазу, белок теплового шока gp96, GM2, сарграмостим, CTLA-4, 707 аланин-пролин (707-AP), антиген аденокарциномы, распознаваемый T-клетками 4 (APT-4), карциноэмбриональный антигенный пептид 1 (CAP-1), кальций-активированный хлоридный канал-2 (CLCA2), циклофилин B (Cyp-B), перстневидноклеточная опухоль человека-2 (HST-2), белки вируса папилломы человека (HPV) (HPV-E6, HPV-E7, основные или малые капсидные антигены, другие), белки вируса Эпштейна-Барр (EBV) (латентные мембранные белки EBV-LMP1, LMP2; другие), белки вируса гепатита B или C и белки HIV.- 86 044346 of the present invention includes a targeting agent that can bind/target a cellular component such as a tumor antigen, a bacterial antigen, a viral antigen, a mycoplasma antigen, a fungal antigen, a prion antigen, an antigen from a parasite. In some aspects, a cellular component, antigen, or molecule can be used to designate the desired target for a targeting agent. For example, in various embodiments, the targeting agent is specific to or binds to a component that includes, but is not limited to, epidermal growth factor receptor (EGFR, ErbB-1, HER1), ErbB-2 (HER2/neu), ErbB-3/HER3, ErbB-4/HER4, EGFR family of ligands; insulin-like growth factor receptor (IGFR) family, IGF-binding proteins (IGFBPs), IGFR ligand family; platelet-derived growth factor receptor (PDGFR) family, PDGFR family of ligands; fibroblast growth factor receptor (FGFR) family, FGFR ligand family, vascular endothelial growth factor receptor (VEGFR) family, VEGF family; HGF receptor family; TRK receptor family; ephrin receptor family (EPH); AXL receptor family; leukocyte tyrosine kinase (LTK) receptor family; TIE receptor family, angiopoietin 1,2; the receptor tyrosine kinase (ROR)-like orphan receptor family, such as ROR1; CD171 (L1CAM); B7-H6 (NCR3LG1); PD-L1, tumor glycosylation antigen, such as sTn or Tn, such as sTn Ag MUC1; LHR (LHCGR); phosphatidylserine, domain disc receptor (DDR) family; RET receptor family; KLG receptor family; RYK receptor family; MuSK receptor family; transforming growth factor-α (TGF-α), TGF-β receptors; cytokine receptors, class I (hematopoietin family) and family II (interferon/IL-10) receptors, tumor necrosis receptor (TNF) superfamily (TNFRSF), death receptor family; testicular cancer antigens (CT), lineage-specific antigens, differentiation antigens, alpha-actinin-4, ARTCl, breakpoint cluster region-Abelson fusion products (Bcr-abl), B-RAF, caspase-5 (CASP-5) caspase -8 (CASP-8), β-catenin (CTNNBl), cell division cycle 27 (CDC27), cyclin-dependent kinase 4 (CDK4), CDKN2A, COA-I, dek-can fusion protein, EFTUD-2, elongation factor 2 ( ELF2), Ets 6/acute myeloid leukemia 1 ETS gene variant fusion protein (ETC6-AML1), fibronectin (FN), e.g. fibronectin extradomain A (EDA), GPNMB, low-density lipid receptor/GDP- fusion protein L fucose: fusion protein β-D galactose 2-a-L fucosyltransferase (LDLR/FUT), HLA-A2 replacement of arginine with isoleucine at residue 170 of the α-helix a2 domain in the HLA-A2 gene (HLA-A * 201-R170I), HLA- A1 1, mutated heat shock protein 70-2 (HSP70-2M), K1AA0205, MART2, melanoma ubiquitous, mutated 1, 2, 3 (MUM-I, 2, 3), prostatic acid phosphatase (PAP), neo-PAP , class I myosin, NFYC, OGT, OS-9, pml-RAR-alpha fusion protein, PRDX5, PTPRK, K-ras (KRAS2), N-ras (NRAS), HRAS, RBAF600, SIRT2, SNRPD1, SYT-SSX1 or -SSX2, triosephosphate isomerase, BAGE, BAGK-1, BAGE-2,3, 4,5, GAGE-1,2,3,4,5,6,7,8, GnT-V (aberrant N-acetylglucosanyltransferase V, MGAT5), HERV-K-MEL, KK-LC, KM-H-1, LAGE, LAGE-I, CTL-recognized antigen in melanoma (CAMEL), MAGE-A1 (MAGE-I), MAGE-A2, MAGE- A3, MAGE-A4, MAGE-A5, MAGE-A6, MAGE-A8, MAGE-A9, MAGE-A10, MAGE-A11, MAGEA12, MAGE-3, MAGE-B1, MAGE-B2, MAGE-B5, MAGE- B6, MAGE-C1, MAGE-C2, mucin 1 (MUC1), MART-1/melan-A (MLANA), gp100, gpl00/Pmell7 (SILV), tyrosinase (TYR), TRP-I, HAGE, NA-88 , NYESO-I, NY-ESO-1/LAGE-2, SAGE, Spl7, SS X-1,2,3,4, TRP2-INT2, carcinoembryonic antigen (CEA), kallikrein 4, mammaglobin-A, OA1 , prostate antigen (PSA), TRP-1/gp75, TRP-2, adipophilin, interferon-inducible protein in melanoma 2 (AIM-2), BING-4, CPSF, cyclin D1, epithelial cell adhesion molecule (Ep-CAM) , EphA3, fibroblast growth factor-5 (FGF-5), glycoprotein 250 (gp250), EGFR (ERBB1), HER-2/neu (ERBB2), interleukin-13 receptor α2 chain (IL13Ra2), IL-6 receptor, intestinal carboxylesterase (iCE), alpha-fetobeton (AFP), M-CSF, mdm-2, MUC1, p53 (TP53), PBF, PRAME, PSMA, RAGE-I, RNF43, RU2AS, SOXlO, STEAPl, survivin (BIRC5), human telomerase reverse transcriptase (hTERT), telomerase, Wilms tumor gene (WTl) SYCPl, BRDT, SPANX, XAGE, ADAM2, PAGE-5, LIPl, CTAGE-I, CSAGE, MMAl, CAGE, BORIS, HOM-TES-85, AF15ql4, HCA661, LDHC, MORC, SGY-I, SPO1 1, TPXl, NY-SAR-35, FTHL17, NXF2, TDRD1, TEX15, FATE, TPTE, immunoglobulin idiotypes, Bence-Jones protein, estrogen receptors (ER), androgen receptors (AR), CD40, CD30, CD20, CD19, CD33, tumor antigen 72-4 (Ca 72-4), tumor antigen 15-3 (CA 15-3), tumor antigen 27-29 (CA 27-29) , tumor antigen 125 (CA 125), tumor antigen 19-9 (CA 19-9), β-human chorionic gonadotropin, β-2 microglobulin, squamous cell carcinoma antigen, neurospecific enolase, heat shock protein gp96, GM2, sargramostim, CTLA- 4, 707 alanine-proline (707-AP), adenocarcinoma antigen recognized by T cells 4 (APT-4), carcinoembryonic antigen peptide 1 (CAP-1), calcium-activated chloride channel-2 (CLCA2), cyclophilin B ( Cyp-B), human signet ring cell tumor-2 (HST-2), human papillomavirus (HPV) proteins (HPV-E6, HPV-E7, major or small capsid antigens, others), Epstein-Barr virus (EBV) proteins ( latent membrane proteins EBV-LMP1, LMP2; others), hepatitis B or C virus proteins and HIV proteins.

В некоторых воплощениях нацеливающий агент является специфическим или связывается с компонентом, который включает, без ограничения указанным, HER1/EGFR, HER2/ERBB2, CD20, CD25 (реIn some embodiments, the targeting agent is specific to or binds to a component that includes, but is not limited to, HER1/EGFR, HER2/ERBB2, CD20, CD25 (re

- 87 044346 цептор IL-2Ra), CD33, CD52, CD133, CD206, CEA, CEACAM1, CEACAM3, CEACAM5, CEACAM6, раковый антиген 125 (CA125), альфа-фетопротеина (AFP), Льюис Y, TAG72, каприн-1, мезотелина, рецептора PDGF (PDGFR; такого как PDGF-Ra), PD-1, PD-L1, CTLA-4, рецептора IL-2, фактора роста эндотелия сосудов (VEGF), CD30, EpCAM, EphA2, глипикана-3, gpA33, муцинов, CAIX, PSMA, фолатсвязывающего белка, ганглиозидов (такие как GD2, GD3, GM1 и GM2), рецептора VEGF (VEGFR), VEGFR2, VEGF-A, интегрина aVe3, интегрина α5β1, ERBB3, MET, IGF1R, EPHA3, TRAILR1, TRAILR2, RANKL, FAP, тенасцина, AFP, комплекса BCR, CD3, CD18, CD44, CTL, CTL-4, gp72, HLADR 10 β, антигена HLA-DR, IgE, MUC-1, nuC242, антигена PEM, металлопротеиназ, рецептора эфрина, лигандов эфрина, рецептора HGF, CXCR4, CXCR4, рецептора бомбезина, антигена SK-1, Bcr- abl, RET, MET, TRKB, TIE2, ALK, ROS, EML4-ALK, ROS1, BRAFV600E, SRC, c-KIT, mTOR, TSC1, TSC2, BTK, KIT, BRCA, CDK 4/6, JAK1, JAK2, BRAF, FLT-3, MEK1, MEK2, SMO или B7-H6 (NCR3LG1).- 87 044346 IL-2Ra receptor), CD33, CD52, CD133, CD206, CEA, CEACAM1, CEACAM3, CEACAM5, CEACAM6, cancer antigen 125 (CA125), alpha-fetoprotein (AFP), Lewis Y, TAG72, caprin-1, mesothelin, PDGF receptor (PDGFR; such as PDGF-Ra), PD-1, PD-L1, CTLA-4, IL-2 receptor, vascular endothelial growth factor (VEGF), CD30, EpCAM, EphA2, glypican-3, gpA33 , mucins, CAIX, PSMA, folate binding protein, gangliosides (such as GD2, GD3, GM1 and GM2), VEGF receptor (VEGFR), VEGFR2, VEGF-A, aVe3 integrin, α5β1 integrin, ERBB3, MET, IGF1R, EPHA3, TRAILR1 , TRAILR2, RANKL, FAP, tenascin, AFP, BCR complex, CD3, CD18, CD44, CTL, CTL-4, gp72, HLADR 10 β, HLA-DR antigen, IgE, MUC-1, nuC242, PEM antigen, metalloproteinases, ephrin receptor, ephrin ligands, HGF receptor, CXCR4, CXCR4, bombesin receptor, SK-1 antigen, Bcr-abl, RET, MET, TRKB, TIE2, ALK, ROS, EML4-ALK, ROS1, BRAFV600E, SRC, c-KIT , mTOR, TSC1, TSC2, BTK, KIT, BRCA, CDK 4/6, JAK1, JAK2, BRAF, FLT-3, MEK1, MEK2, SMO or B7-H6 (NCR3LG1).

В некоторых воплощениях, конъюгат IgSF, через его нацеливающий агент, связывается клеточный компонент опухолевой клетки, опухолевой сосудистой системы или опухолевого микроокружения, способствуя тем самым уничтожению клеток-мишеней с помощью модуляции иммунного ответа, (например, путем активации ко-стимулирующих молекул или ингибирования отрицательных регуляторных молекул активации иммунных клеток), ингибирования сигналов выживаемости (например, фактор роста или антагонистов цитокинов или антагонистов гормонов), активации сигналов смерти и/или иммуноопосредованной цитотоксичности, например, через антителозависимую клеточную цитотоксичность. Такие конъюгаты IgSF могут функционировать с помощью нескольких механизмов для предотвращения, уменьшения или устранения опухолевых клеток, например, для облегчения доставки конъюгированных эффекторных фрагментов в опухолевую мишень, например, посредством рецептор-опосредованного эндоцитоза конъюгата IgSF; или такие конъюгаты могут рекрутировать, связывать и/или активировать иммунные клетки (например, NK-клетки, моноциты/макрофаги, дендритные клетки, T-клетки, B-клетки). Более того, в некоторых случаях один или несколько из вышеперечисленных путей могут действовать при введении одного или нескольких конъюгатов IgSF по изобретению.In some embodiments, the IgSF conjugate, through its targeting agent, binds to a cellular component of a tumor cell, tumor vasculature, or tumor microenvironment, thereby promoting the killing of target cells by modulating the immune response (for example, by activating co-stimulatory molecules or inhibiting negative regulatory molecules of immune cell activation), inhibition of survival signals (eg, growth factor or cytokine antagonists or hormone antagonists), activation of death signals and/or immune-mediated cytotoxicity, for example, through antibody-dependent cellular cytotoxicity. Such IgSF conjugates can function through several mechanisms to prevent, reduce or eliminate tumor cells, for example, to facilitate the delivery of conjugated effector fragments to the tumor target, for example, through receptor-mediated endocytosis of the IgSF conjugate; or such conjugates can recruit, bind and/or activate immune cells (eg, NK cells, monocytes/macrophages, dendritic cells, T cells, B cells). Moreover, in some cases, one or more of the above pathways may operate upon administration of one or more IgSF conjugates of the invention.

В некоторых воплощениях конъюгат IgSF, через нацеливающий агент, будет локализован на, например, связываться с, клеточным компонентом опухолевой клетки, опухолевой сосудистой системы или опухолевого микроокружения, модулируя тем самым клетки иммунной реакции в непосредственной близости от опухоли. В некоторых воплощениях нацеливающий агент облегчает доставку конъюгированного IgSF (например, vIgD) в опухолевую мишень, например, для того, чтобы взаимодействовать со своим когнатным партнером связывания для изменения сигнализации иммунных клеток (например, NKклеток, моноцитов/макрофагов, дендритных клеток, T-клеток, B-клеток), несущих когнатный партнер связывания. В некоторых воплощениях локализованная доставка оказывает агонистическое воздействие или стимулирует костимулирующий рецептор.In some embodiments, the IgSF conjugate, through a targeting agent, will localize to, for example, bind to a cellular component of a tumor cell, tumor vasculature, or tumor microenvironment, thereby modulating the immune response cells in the immediate vicinity of the tumor. In some embodiments, the targeting agent facilitates delivery of conjugated IgSF (e.g., vIgD) to a tumor target, e.g., to interact with its cognate binding partner to alter immune cell signaling (e.g., NK cells, monocytes/macrophages, dendritic cells, T cells , B cells) carrying a cognate binding partner. In some embodiments, localized delivery has an agonistic effect or stimulates a costimulatory receptor.

В некоторых воплощениях нацеливающий агент представляет собой иммуноглобулин. Используемый в данном документе термин иммуноглобулин включает природные или искусственные моно- или поливалентные антитела, включая, без ограничения указанным, поликлональные, моноклональные, мультиспецифические, человеческие, гуманизированные или химерные антитела, одноцепочечные антитела, Fab-фрагменты, F(ab')-фрагменты, фрагменты, полученные библиотекой экспрессии Fab, одноцепочечные Fv (scFv); анти-идиотипические (анти-Id) антитела (включая, например, антитела против Id к антителам по изобретению) и эпитоп-связывающие фрагменты любого из вышеуказанных. Термин антитело, используемый в данном описании, относится к молекулам иммуноглобулинов и иммунологически активным частям молекул иммуноглобулина, то есть к молекулам, которые содержат сайт связывания антигена, который специфически связывается с антигеном. Молекулы иммуноглобулина по изобретению могут быть любого типа (например, IgG, IgE, IgM, IgD, IgA и IgY), класса (например, IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA1 и IgA2) или подкласса молекулы иммуноглобулина.In some embodiments, the targeting agent is an immunoglobulin. As used herein, the term immunoglobulin includes natural or artificial mono- or multivalent antibodies, including, but not limited to, polyclonal, monoclonal, multispecific, human, humanized or chimeric antibodies, single chain antibodies, Fab fragments, F(ab') fragments, Fab expression library-derived fragments, single-chain Fv (scFv); anti-idiotypic (anti-Id) antibodies (including, for example, anti-Id antibodies of the invention) and epitope-binding fragments of any of the above. The term antibody as used herein refers to immunoglobulin molecules and the immunologically active portions of immunoglobulin molecules, that is, molecules that contain an antigen binding site that specifically binds to an antigen. The immunoglobulin molecules of the invention can be of any type (eg, IgG, IgE, IgM, IgD, IgA and IgY), class (eg, IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA1 and IgA2) or subclass of immunoglobulin molecule.

В некоторых воплощениях конъюгат IgSF, через его антительный нацеливающий фрагмент, будет связывать клеточный компонент опухолевой клетки, опухолевой сосудистой системы или опухолевого микроокружения, способствуя тем самым апоптозу клеток-мишеней с помощью модуляции иммунного ответа (например, путем активации костимулирующих молекул или ингибирования отрицательных регуляторных молекул активацией иммунных клеток), ингибированию сигналов выживаемости (например, антагонистов рецепторов факторов роста или цитокинов или гормонов), активацию сигналов смерти и/или иммуно-опосредованной цитотоксичности, такой как антителозависимая клеточная цитотоксичность. Такие конъюгаты IgSF могут функционировать с помощью нескольких механизмов для предотвращения, уменьшения или устранения опухолевых клеток, например, для облегчения доставки конъюгированных эффекторных фрагментов в опухолевую мишень, например, посредством рецепторопосредованного эндоцитоза конъюгата IgSF; или такие конъюгаты могут рекрутировать, связывать и/или активировать иммунные клетки (например, NK-клетки, моноциты/макрофаги, дендритные клетки, T-клетки, B-клетки).In some embodiments, the IgSF conjugate, through its antibody targeting moiety, will bind a cellular component of a tumor cell, tumor vasculature, or tumor microenvironment, thereby promoting apoptosis of target cells through modulation of the immune response (e.g., by activating co-stimulatory molecules or inhibiting negative regulatory molecules activation of immune cells), inhibition of survival signals (eg, growth factor receptor antagonists or cytokines or hormones), activation of death signals and/or immune-mediated cytotoxicity such as antibody-dependent cellular cytotoxicity. Such IgSF conjugates can function through several mechanisms to prevent, reduce or eliminate tumor cells, for example, to facilitate the delivery of conjugated effector fragments to the tumor target, for example, through receptor-mediated endocytosis of the IgSF conjugate; or such conjugates can recruit, bind and/or activate immune cells (eg, NK cells, monocytes/macrophages, dendritic cells, T cells, B cells).

В некоторых воплощениях конъюгат IgSF, через его антительный нацеливающий фрагмент, будет связывать клеточный компонент опухолевой клетки, опухолевой сосудистой системы или опухолевогоIn some embodiments, the IgSF conjugate, through its antibody targeting moiety, will bind a cellular component of a tumor cell, tumor vasculature, or tumor

- 88 044346 микроокружения, тем самым модулируя иммунный ответ (например, путем активации костимулирующих молекул или ингибирования молекул отрицательной регуляции активации иммунных клеток). В некоторых воплощениях такие конъюгаты могут распознавать, связывать и/или модулировать (например, ингибировать или активировать) иммунные клетки (например, NK-клетки, моноциты/макрофаги, дендритные клетки, T-клетки, B-клетки).- 88 044346 microenvironment, thereby modulating the immune response (for example, by activating co-stimulatory molecules or inhibiting molecules that negatively regulate immune cell activation). In some embodiments, such conjugates can recognize, bind and/or modulate (eg, inhibit or activate) immune cells (eg, NK cells, monocytes/macrophages, dendritic cells, T cells, B cells).

Антительные нацеливающие фрагменты по изобретению включают фрагменты антител, которые включают, без ограничения указанным, Fab, Fab' и F(ab')2, Fd, одноцепочечные Fv (ScFv), одноцепочечные антитела, дисульфидсвязанные Fv (sdFv) и фрагменты, содержащие либо домен VL, либо VH. Антигенсвязывающие фрагменты антител, включая одноцепочечные антитела, могут содержать вариабельную область(и) самостоятельно или в комбинации со всей или частью следующих областей: шарнирной областью, доменами CH1, CH2 и CH3. Также в изобретение включены антигенсвязывающие фрагменты, которые также включают любую комбинацию вариабельной области(ей) с шарнирной областью, доменами CH1, CH2 и CH3. Также в изобретение включены фрагменты Fc, гибридные белки антиген-Fc и конъюгаты Fc-нацеливающий фрагмент или гибридные продукты (Fc-пептид, Fc-аптамер). Антитела, нацеливающие фрагменты по изобретению, могут быть любого животного происхождения, включая птиц и млекопитающих. В одном аспекте антительные нацеливающие фрагменты, происходят из человека, представителей подсемейства мышиных (например, мыши и крысы), осла, овцы, кролика, козы, морской свинки, верблюда, лошади или курицы. Кроме того, такие антитела могут быть гуманизированными вариантами антител животных. Антитела, нацеливающие фрагменты по изобретению, могут быть моноспецифическими, биспецифическими, триспецифическими или обладать большей мультиспецифичностью.Antibody targeting fragments of the invention include antibody fragments that include, but are not limited to, Fab, Fab' and F(ab')2, Fd, single chain Fv (ScFv), single chain antibodies, disulfide linked Fv (sdFv) and fragments containing either a domain VL or VH. Antigen-binding antibody fragments, including single chain antibodies, may contain variable region(s) alone or in combination with all or part of the following regions: hinge region, CH1, CH2 and CH3 domains. Also included in the invention are antigen binding fragments which also include any combination of variable region(s) with a hinge region, CH1, CH2 and CH3 domains. Also included in the invention are Fc fragments, antigen-Fc fusion proteins and Fc-targeting fragment conjugates or fusion products (Fc peptide, Fc aptamer). Antibodies targeting fragments of the invention can be of any animal origin, including birds and mammals. In one aspect, the antibody targeting fragments are derived from human, members of the murine subfamily (eg, mouse and rat), donkey, sheep, rabbit, goat, guinea pig, camel, horse, or chicken. In addition, such antibodies may be humanized versions of animal antibodies. Antibodies targeting fragments of the invention may be monospecific, bispecific, trispecific, or more multispecific.

В различных воплощениях антитело/нацеливающий фрагмент рекрутирует, связывается и/или активирует иммунные клетки (например, NK-клетки, моноциты/макрофаги, дендритные клетки) с помощью взаимодействий между Fc (антителами) и рецепторами Fc (на иммунных клетках) и через конъюгированные вариантные полипептиды или иммуномодулирующие белки, представленные в данном документе. В некоторых воплощениях антитело/нацеливающий фрагмент распознает или связывает опухолевой агент через и локализует в опухолевой клетке конъюгированные вариантные полипептиды или иммуномодулирующие белки, представленные в данном документе, для облегчения модуляции иммунных клеток в окрестности опухоли.In various embodiments, the antibody/targeting moiety recruits, binds and/or activates immune cells (eg, NK cells, monocytes/macrophages, dendritic cells) through interactions between Fc (antibodies) and Fc receptors (on immune cells) and through conjugated variants polypeptides or immunomodulatory proteins presented herein. In some embodiments, the antibody/targeting moiety recognizes or binds a tumor agent through and localizes to the tumor cell conjugated variant polypeptides or immunomodulatory proteins provided herein to facilitate modulation of immune cells in the vicinity of the tumor.

Примеры антител, которые могут быть включены в конъюгаты IgSF включают, без ограничения указанным, антитела, такие как цетуксимаб (IMC-C225; Erbitux®), трастузумаб (Herceptin®), ритуксимаб (Rituxan®; MabThera®), бевацизумаб (Avastin ®), алемтузумаб (Campath®, Campath-1H®, Mabcampath®), пертузумаб (Perjeta®), панитумумаб (ABX-EGF, Vectibix®), ранибизумаб (Lucentis®), ибритумомаб, ибритумомаб тиуксетан, (Zevalin®), тоситумомаб, йод I131 тоситумомаб (BEXXAR®), катумаксомаб (Removab®), динутуксимаб (UnituxinTM), гемтузумаб, гемтузумаб озогамицин (Mylotarg®), абатацепт (CTLA4-Ig, Orencia®), белатацепт (L104EA29YIg, LEA29Y, LEA), ипилимумаб (mDX-010, MDX-101), тремелимумаб (тицилимумаб, CP-675,206), PRS-010, PRS-050, афлиберцепт (VEGF Trap, AVE005), волоциксимаб (M200), F200, MORAb-009, SS1P (CAT-5001), циксутумумаб (IMCA12), матузумаб (EMD72000), нимотузумаб (h-R3), залутумумаб (HuMax-EGFR), нецитумумаб IMC11F8, mAb806/ch806, Sym004, mAb-425, панорекс α (17-1A) (мышиное моноклональное антитело); панорекс α (17-1A) (химерное мышиное моноклональное антитело); IDEC-Y2B8 (мышиное, анти-CD2O моноклональное антитело); BEC2 (анти-идиотипическое моноклональное антитело, имитирующий эпитоп GD) (с BCG); оларатумаб (LartruvoTM); онколим (моноклональное антитело Lym-1); SMART MI95 Ab, гуманизированный 13 'I LYM-I (Oncolym), оварекс (B43.13, анти-идиотипическое мышиное моноклональное антитело); MDX-210 (гуманизированное биспецифическое антитело против FLER-2); моноклональное антитело 3622W94 MAb, которое связывается с антигенами панкарциномы EGP40 (17-1A) на аденокарциномах; Анти-VEGF, зенапакс (SMART Anti-Tac (рецептор IL-2), SMART MI95 Ab, гуманизированное Ab, гуманизированное); Рамучирумаб (Cyramza®); MDX-210 (гуманизированное биспецифическое антитело против HER-2); MDX-447 (гуманизированное биспецифическое антитело против рецептора EGF); NovoMAb-G2 (специфичное для панкрециномы антитело); TNT (химерное моноклональное антитело-гистоновые антигены); TNT (химерное моноклональное антитело-гистоновые антигены); Gliomab-H (моноклональные-гуманизированные антитела); GNI-250 Mab; EMD-72000 (антагонист химерного EGF); LymphoCide (гуманизированное антитело LL2); и MDX-260, предназначенные для GD-2, ANA Ab, SMART IDlO Ab, SMART ABL 364 Ab или ImmuRAIT-CEA. Как проиллюстрировано вышеизложенным перечнем, принято получать антитела к определенному целевому эпитопу.Examples of antibodies that may be included in IgSF conjugates include, but are not limited to, antibodies such as cetuximab (IMC-C225; Erbitux®), trastuzumab (Herceptin®), rituximab (Rituxan®; MabThera®), bevacizumab (Avastin®) , alemtuzumab (Campath®, Campath-1H®, Mabcampath®), pertuzumab (Perjeta®), panitumumab (ABX-EGF, Vectibix®), ranibizumab (Lucentis®), ibritumomab, ibritumomab tiuxetan, (Zevalin®), tositumomab, iodine I131 tositumomab (BEXXAR®), catumaxomab (Removab®), dinutuximab (UnituxinTM), gemtuzumab, gemtuzumab ozogamicin (Mylotarg®), abatacept (CTLA4-Ig, Orencia®), belatacept (L104EA29YIg, LEA29Y, LEA), ipilimumab (mDX- 010, MDX-101), tremelimumab (ticilimumab, CP-675,206), PRS-010, PRS-050, aflibercept (VEGF Trap, AVE005), volociximab (M200), F200, MORAb-009, SS1P (CAT-5001), cixutumumab (IMCA12), matuzumab (EMD72000), nimotuzumab (h-R3), zalutumumab (HuMax-EGFR), necitumumab IMC11F8, mAb806/ch806, Sym004, mAb-425, Panorex α (17-1A) (mouse monoclonal antibody); Panorex α (17-1A) (chimeric mouse monoclonal antibody); IDEC-Y2B8 (mouse, anti-CD2O monoclonal antibody); BEC2 (anti-idiotypic monoclonal antibody mimicking the GD epitope) (with BCG); olaratumab (LartruvoTM); oncolim (monoclonal antibody Lym-1); SMART MI95 Ab, humanized 13'I LYM-I (Oncolym), Ovarex (B43.13, anti-idiotypic mouse monoclonal antibody); MDX-210 (humanized bispecific antibody against FLER-2); monoclonal antibody 3622W94 MAb, which binds to pancarcinoma antigens EGP40 (17-1A) on adenocarcinomas; Anti-VEGF, Zenapax (SMART Anti-Tac (IL-2 receptor), SMART MI95 Ab, humanized Ab, humanized); Ramuchirumab (Cyramza®); MDX-210 (humanized bispecific antibody against HER-2); MDX-447 (humanized bispecific antibody against EGF receptor); NovoMAb-G2 (pancrecinoma-specific antibody); TNT (chimeric monoclonal antibody-histone antigens); TNT (chimeric monoclonal antibody-histone antigens); Gliomab-H (monoclonal-humanized antibodies); GNI-250 Mab; EMD-72000 (chimeric EGF antagonist); LymphoCide (humanized LL2 antibody); and MDX-260, targeting GD-2, ANA Ab, SMART IDlO Ab, SMART ABL 364 Ab, or ImmuRAIT-CEA. As illustrated by the above list, it is common to obtain antibodies to a specific target epitope.

В некоторых воплощениях антитело или антигенсвязывающий фрагмент предлагаемых конъюгатов, включая гибридные молекулы, представляет собой цетуксимаб, панитумумаб, залутумумаб, нимотузумаб, трастузумаб, адотрастумумаб, эмтансин, тозитумомаб (Bexxar ®), ритуксимаб (Rituxan, Mabthera), ибритумомаб тиуксетан (Zevalin), даклизумаб (Zenapax), гемтузумаб (Mylotarg), алемтузумаб, CEA-скан Fab-фрагмент, моноклональное антитело OC125, ab75705, B72.3, бевацизумаб (Avastin ®), афатиниб, акситиниб, босутиниб, кабозантиниб, церитиниб, кризотиниб, дабрафениб, дазатиниб, динутуксимабIn some embodiments, the antibody or antigen binding moiety of the proposed conjugates, including hybrid molecules, is cetuximab, panitumumab, zalutumumab, nimotuzumab, trastuzumab, adotrastumumab, emtansine, tositumomab (Bexxar®), rituximab (Rituxan, Mabthera), ibritumomab tiuxetan (Zevalin), daclizumab (Zenapax), gemtuzumab (Mylotarg), alemtuzumab, CEA scan Fab fragment, monoclonal antibody OC125, ab75705, B72.3, bevacizumab (Avastin ®), afatinib, axitinib, bosutinib, cabozantinib, ceritinib, crizotinib, dabrafenib, dasatinib, dinutuximab

- 89 044346 (UnituxinTM), эрлотиниб, эверолимус, ибрутиниб, иматиниб, лапатиниб, ленватиниб, нилотиниб, олапариб, оларатумаб (LartruvoTM), палбоциклиб, пазопаниб, пертузумаб (Perjeta®), рамукирумаб (Cyramza®), регорафениб, руксолитиниб, сорафениб, сунитиниб, темсиролимус, траметиниб, вандетаниб, вемурафениб, висмодегиб, базиликсимаб, ипилимумаб, ниволумаб, пембролизумаб, MPDL3280A, пидилизумаб (CT-011), AMP-224, MSB001078C или MEDI4736, BMS-935559, LY3300054, атезолизумаб, авелумаб или дурвалумаб или является его антигенсвязывающим фрагментом.- 89 044346 (UnituxinTM), erlotinib, everolimus, ibrutinib, imatinib, lapatinib, lenvatinib, nilotinib, olaparib, olaratumab (LartruvoTM), palbociclib, pazopanib, pertuzumab (Perjeta®), ramukirumab (Cyramza®), regorafenib, ruxolit inib, sorafenib, sunitinib, temsirolimus, trametinib, vandetanib, vemurafenib, vismodegib, basiliximab, ipilimumab, nivolumab, pembrolizumab, MPDL3280A, pidilizumab (CT-011), AMP-224, MSB001078C or MEDI4736, BMS-935559, LY33000 54, atezolizumab, avelumab or durvalumab or is its antigen-binding fragment.

В некоторых воплощениях антитела против PD-L1 или их антигенсвязывающие фрагменты могут быть включены в конъюгаты IgSF. Примеры антител PD-L1, которые могут быть включены в конъюгаты IgSF, включают, без ограничения указанным, антитела, такие как BMS-936559, 12A4, LY3300054, атезолизумаб (Tecentriq®), авелумаб (Bavencio®), дурвалумаб (Imfinzi®). См., например, WO2007/005874, WO2017/034916, WO2010/077634, WO2013/079174, WO2011/066389, эти источники включены в ссылкой во всей полноте. В некоторых воплощениях vIgD прямо или опосредованно связан с N- или C-концом легкой и/или тяжелой цепи антитела против PD-L1. В некоторых воплощениях антитело против PD-L1 представляет собой BMS-936559, LY3300054, атезолизумаб, авелумаб или дурвалумаб. Примерные легкая цепь и тяжелая цепь атезолизумаба антитела против PD-L1 приведены в SEQ ID NO: 866 и 867, соответственно. Типичные конъюгаты IgSF, которые включают антитело против PD-L1 атезолизумаб, приведены в SEQ ID NO: 868-895.In some embodiments, anti-PD-L1 antibodies or antigen binding fragments thereof may be included in IgSF conjugates. Examples of PD-L1 antibodies that may be included in IgSF conjugates include, but are not limited to, antibodies such as BMS-936559, 12A4, LY3300054, atezolizumab (Tecentriq®), avelumab (Bavencio®), durvalumab (Imfinzi®). See, for example, WO2007/005874, WO2017/034916, WO2010/077634, WO2013/079174, WO2011/066389, these sources are incorporated by reference in their entirety. In some embodiments, vIgD is directly or indirectly linked to the N- or C-terminus of the light and/or heavy chain of an anti-PD-L1 antibody. In some embodiments, the anti-PD-L1 antibody is BMS-936559, LY3300054, atezolizumab, avelumab, or durvalumab. An exemplary light chain and heavy chain of the anti-PD-L1 antibody atezolizumab are set forth in SEQ ID NOs: 866 and 867, respectively. Exemplary IgSF conjugates that include the anti-PD-L1 antibody atezolizumab are set forth in SEQ ID NOs: 868-895.

В некоторых воплощениях изобретения антительный нацеливающий фрагмент представляет собой полноразмерное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, содержащий домен Fc. В некоторых воплощениях вариантный полипептид или иммуномодулирующий белок конъюгируют с Fc-частью антительного нацеливающего фрагмента, например, конъюгацией с N-концом Fc-части антитела.In some embodiments of the invention, the antibody targeting fragment is a full-length antibody or an antigen binding fragment thereof containing an Fc domain. In some embodiments, the variant polypeptide or immunomodulatory protein is conjugated to the Fc portion of an antibody targeting moiety, for example, by conjugation to the N-terminus of the Fc portion of the antibody.

В некоторых воплощениях vIgD связана, прямо или опосредованно, к N- или C-концом легкой и/или тяжелой цепи антитела. В некоторых воплощениях связь может осуществляться через пептидный линкер, такой как любой описанный выше. В некоторых воплощениях линкер может дополнительно включать аминокислоты, введенные путем клонирования и/или из сайта рестрикции. В некоторых воплощениях линкер может включать дополнительные аминокислоты на каждом конце, введенные сайтом рестрикции. Например, линкер может включать дополнительные аминокислоты, такие как SA (в однобуквенном аминокислотном коде), которые вводятся с использованием сайта рестрикции AFEI. Могут быть построены различные конфигурации. На фиг. 10A-10C изображены примерные конфигурации. В некоторых воплощениях конъюгат антитела может быть получен путем совместной экспрессии тяжелой и легкой цепи антитела в клетке.In some embodiments, vIgD is linked, directly or indirectly, to the N- or C-terminus of the light and/or heavy chain of the antibody. In some embodiments, the linkage may be via a peptide linker, such as any described above. In some embodiments, the linker may further include amino acids introduced by cloning and/or from a restriction site. In some embodiments, the linker may include additional amino acids at each end introduced by a restriction site. For example, the linker may include additional amino acids, such as SA (in the single letter amino acid code), which are introduced using the AFEI restriction site. Various configurations can be built. In fig. 10A-10C illustrate exemplary configurations. In some embodiments, an antibody conjugate can be produced by co-expressing an antibody heavy and light chain in a cell.

В одном аспекте настоящего изобретения нацеливающий агент представляет собой молекулуаптамер. Например, в некоторых воплощениях аптамер состоит из нуклеиновых кислот, которые действуют как нацеливающий агент. В различных воплощениях конъюгат IgSF по изобретению включает аптамер, который специфичен для молекулы в опухолевой клетке, опухолевой сосудистой сети и/или микроокружении опухоли. В некоторых воплощениях сам аптамер может содержать биологически активную последовательность в дополнение к целевому модулю (последовательности), где биологически активная последовательность может индуцировать иммунный ответ на клетку-мишень. Другими словами, такая молекула аптамера является агентом двойного назначения. В некоторых воплощениях конъюгат IgSF по изобретению включает конъюгацию аптамера с антителом, где аптамер и антитело специфичны для связывания с отдельными молекулами на опухолевой клетке, опухолевой сосудистой сети, микроокружении опухоли и/или иммунных клетках.In one aspect of the present invention, the targeting agent is an aptamer molecule. For example, in some embodiments, the aptamer consists of nucleic acids that act as a targeting agent. In various embodiments, the IgSF conjugate of the invention includes an aptamer that is specific for a molecule in a tumor cell, tumor vasculature, and/or tumor microenvironment. In some embodiments, the aptamer itself may contain a biologically active sequence in addition to a target module (sequence), wherein the biologically active sequence may induce an immune response to the target cell. In other words, such an aptamer molecule is a dual-use agent. In some embodiments, the IgSF conjugate of the invention comprises conjugating an aptamer to an antibody, wherein the aptamer and antibody are specific for binding to distinct molecules on a tumor cell, tumor vasculature, tumor microenvironment, and/or immune cells.

Термин аптамер включает ДНК, РНК или пептиды, которые выбираются на основе специфических связывающих свойств к конкретной молекуле. Например, аптамер(ы) может быть выбран для связывания определенного гена или продукта гена в опухолевой клетке, опухолевой сосудистой сети, микроокружении опухоли и/или иммунной клетке, как раскрыто в данном документе, где селекцию осуществляют способами, известными в данной области и знакомыми специалисту в данной области техники.The term aptamer includes DNA, RNA or peptides that are selected based on specific binding properties to a particular molecule. For example, the aptamer(s) may be selected to bind a specific gene or gene product in a tumor cell, tumor vasculature, tumor microenvironment, and/or immune cell, as disclosed herein, where selection is accomplished by methods known in the art and familiar to one skilled in the art. in this field of technology.

В некоторых аспектах настоящего изобретения нацеливающий агент представляет собой пептид. Например, вариантные полипептиды или иммуномодулирующие белки, представленные в данном документе, могут быть конъюгированы с пептидом, который может связываться с компонентом раковых или опухолевых клеток. Следовательно, такие конъюгаты IgSF по изобретению включают агенты, нацеленные на пептид, которые связываются с клеточным компонентом опухолевой клетки, опухолевой сосудистой сети и/или компонентом микроокружения опухоли. В некоторых воплощениях пептиды нацеливающего агента могут быть антагонистом или агонистом интегрина. Интегрины, которые включают альфа- и бета-субъединицу, включают многочисленные типы, хорошо известные специалисту в данной области техники.In some aspects of the present invention, the targeting agent is a peptide. For example, variant polypeptides or immunomodulatory proteins provided herein can be conjugated to a peptide that can bind to a component of cancer or tumor cells. Therefore, such IgSF conjugates of the invention include peptide-targeting agents that bind to a cellular component of a tumor cell, a tumor vasculature, and/or a component of the tumor microenvironment. In some embodiments, the targeting agent peptides may be an integrin antagonist or agonist. Integrins that include an alpha and a beta subunit include numerous types well known to one skilled in the art.

В одном воплощении нацеливающий агент представляет собой Vve3. Интегрин Vve3 экспрессируется на множестве клеток и, как было показано, опосредует несколько биологически важных процессов, включая адгезию остеокластов к костному матриксу, миграцию клеток гладких мышц сосудов и ангиогенез. Подходящие молекулы-мишени для интегринов включают RGD-пептиды или пептидомиметики, а также не-RGD-пептиды или пептидомиметики (см., например, США Пат. США No. 5777071 и 5780426)In one embodiment, the targeting agent is Vve3. The Vve3 integrin is expressed on a variety of cells and has been shown to mediate several biologically important processes, including osteoclast adhesion to bone matrix, vascular smooth muscle cell migration, and angiogenesis. Suitable integrin target molecules include RGD peptides or peptidomimetics, as well as non-RGD peptides or peptidomimetics (see, for example, US Pat. US No. 5777071 and 5780426)

- 90 044346 для других интегринов, таких как ν4.βί (VLA-4), V4-P7 (см., например, патенты США США № 6366519;- 90 044346 for other integrins, such as ν4.βί (VLA-4), V4-P7 (see, for example, US patents US No. 6366519;

Chang et al., Bioorganic & Medicinal Chem Lett, 12: 159-163 (2002); Lin et al., Bioorganic & Medicinal ChemChang et al., Bioorganic & Medicinal Chem Lett, 12: 159-163 (2002); Lin et al., Bioorganic & Medicinal Chem

Lett, 12: 133-136 (2002)) и тому подобное.Lett, 12: 133-136 (2002)) and the like.

В некоторых воплощениях предлагается конъюгат IgSF, включающий вариантный полипептид или иммуномодулирующий белок, обеспеченный в данном документе, конъюгированный с терапевтическим агентом. В некоторых воплощениях терапевтический агент включает, например, дауномицин, доксорубицин, метотрексат и виндезин (Rowland et al., Cancer Immunol. Immunother. 21:183-187, 1986). В некоторых воплощениях терапевтический агент обладает внутриклеточной активностью. В некоторых воплощениях конъюгат IgSF интернализуется, и терапевтический агент представляет собой цитотоксин, который блокирует белковый синтез клетки, что приводит к гибели клеток. В некоторых воплощениях терапевтический агент представляет собой цитотоксин, содержащий полипептид, обладающий активностью, дезактивирующей рибосому, включая, например, гелонин, буганин, сапорин, рицин, цепь рицина A, бриодин, дифтерийный токсин, рестриктоцин, экссутоксин A Pseudomonas и их варианты. В некоторых воплощениях, где терапевтический агент представляет собой цитотоксин, содержащий полипептид, обладающий активностью, дезактивирующей рибосому, конъюгат IgSF необходимо интернализовать при связывании с клеткой-мишенью, чтобы белок был цитотоксичным по отношению к клеткам.In some embodiments, an IgSF conjugate is provided, comprising a variant polypeptide or immunomodulatory protein provided herein, conjugated to a therapeutic agent. In some embodiments, the therapeutic agent includes, for example, daunomycin, doxorubicin, methotrexate and vindesine (Rowland et al., Cancer Immunol. Immunother. 21:183-187, 1986). In some embodiments, the therapeutic agent has intracellular activity. In some embodiments, the IgSF conjugate is internalized and the therapeutic agent is a cytotoxin that blocks protein synthesis of the cell, resulting in cell death. In some embodiments, the therapeutic agent is a cytotoxin containing a polypeptide having ribosome deactivating activity, including, for example, gelonin, buganin, saporin, ricin, ricin A chain, briodine, diphtheria toxin, restrictocin, Pseudomonas exutoxin A, and variants thereof. In some embodiments, where the therapeutic agent is a cytotoxin containing a polypeptide having ribosome deactivating activity, the IgSF conjugate must be internalized upon binding to the target cell for the protein to be cytotoxic to the cells.

В некоторых воплощениях, предлагается конъюгат IgSF, содержащий вариантный полипептид или иммуномодулирующий белок, предлагаемый в данном документе, конъюгированный с токсином. В некоторых воплощениях токсин включает, например, бактериальные токсины, такие как дифтерийный токсин, растительные токсины, такие как рицин, низкомолекульные токсины, такие как гелданамицин (Mandler et al., J.Nat. Cancer Inst. 92(19): 1573-1581 (2000); Mandler et al., Bioorganic & Med. Chem. Letters 10:1025- 1028 (2000); Mandler et al., Bioconjugate Chem. 13:786-791 (2002)), maytansinoids (EP 1391213; Liu et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 93: 8618-8623 (1996)) и калихеамицин (Lode et al., Cancer Res. 58:2928 (1998); Hinman et al., Cancer Res. 53: 3336-3342 (1993)). Токсины могут оказывать свои цитотоксические и цитостатические эффекты с помощью механизмов, включая связывание тубулина, связывание ДНК или ингибирование топоизомеразы.In some embodiments, an IgSF conjugate is provided containing a variant polypeptide or immunomodulatory protein provided herein conjugated to a toxin. In some embodiments, the toxin includes, for example, bacterial toxins such as diphtheria toxin, plant toxins such as ricin, small molecule toxins such as geldanamycin (Mandler et al., J. Nat. Cancer Inst. 92(19): 1573-1581 (2000); Mandler et al., Bioorganic & Med. Chem. Letters 10:1025-1028 (2000); Mandler et al., Bioconjugate Chem. 13:786-791 (2002)), maytansinoids (EP 1391213; Liu et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 93: 8618-8623 (1996)) and calicheamicin (Lode et al., Cancer Res. 58:2928 (1998); Hinman et al., Cancer Res. 53: 3336 -3342 (1993)). Toxins may exert their cytotoxic and cytostatic effects through mechanisms including tubulin binding, DNA binding, or topoisomerase inhibition.

В некоторых воплощениях предлагается конъюгат IgSF, содержащий вариантный полипептид или иммуномодулирующий белок, предлагаемый в данном документе, конъюгированный с меткой, которая может генерировать детектируемый сигнал, непосредственно или опосредованно. Эти конъюгаты IgSF могут использоваться для исследований или диагностических применений, например, для выявления рака in vivo. Метка предпочтительно способна производить, прямо или опосредованно, детектируемый сигнал. Например, метка может быть радионепрозрачной или радиоизотопом, таким как 3H, 14C, 32P, 35S, 123I, 125I, 131I; флуоресцентным (флуорофорным) или хемилюминесцентным (хромофорным) соединением, такое как изотиоцианат флуоресцеин, родамин или люциферин; ферментом, таким как щелочная фосфатаза, β-галактозидаза или пероксидаза хрена; визуализирующим агентом; или ионом металла. В некоторых воплощениях метка представляет собой радиоактивный атом для сцинтиграфических исследований, например 99Tc или 123I, или спиновую метку для визуализации с помощью ядерного магнитного резонанса (ЯМР) (также известную как магнитно-резонансная томография, МРТ), такую как цирконий-89, йод-123, йод-131, индий-111, фтор-19, углерод-13, азот-15, кислород-17, гадолиний, марганец или железо. Цирконий-89 может быть введен в комплекс с различными металлическими хелатирующими агентами и конъюгирован с антителами, например, для PET-визуализации (WO 2011/056983). В некоторых воплощениях конъюгат IgSF детектируется косвенно. Например, вторичное антитело, специфичное для конъюгата IgSF и содержащее детектируемую метку, может быть использовано для детекции конъюгата IgSF.In some embodiments, there is provided an IgSF conjugate containing a variant polypeptide or immunomodulatory protein provided herein conjugated to a label that can generate a detectable signal, directly or indirectly. These IgSF conjugates can be used for research or diagnostic applications, such as in vivo cancer detection. The tag is preferably capable of producing, directly or indirectly, a detectable signal. For example, the label may be radioopaque or a radioisotope such as 3H, 14C, 32P, 35S, 123I, 125I, 131I; a fluorescent (fluorophore) or chemiluminescent (chromophoric) compound such as fluorescein isothiocyanate, rhodamine or luciferin; an enzyme such as alkaline phosphatase, β-galactosidase or horseradish peroxidase; imaging agent; or a metal ion. In some embodiments, the label is a radioactive atom for scintigraphic studies, such as 99Tc or 123I, or a spin label for nuclear magnetic resonance (NMR) imaging (also known as magnetic resonance imaging, MRI), such as zirconium-89, iodine- 123, iodine-131, indium-111, fluorine-19, carbon-13, nitrogen-15, oxygen-17, gadolinium, manganese or iron. Zirconium-89 can be complexed with various metal chelating agents and conjugated to antibodies, for example for PET imaging (WO 2011/056983). In some embodiments, the IgSF conjugate is detected indirectly. For example, a secondary antibody specific for the IgSF conjugate and containing a detectable label can be used to detect the IgSF conjugate.

Конъюгаты IgSF могут быть получены с использованием любых способов, известных в данной области техники. См., например, WO 2009/067800, WO 2011/133886 и публикация патентной заявки США № 2014322129, полностью включенная в настоящий документ ссылкой.IgSF conjugates can be prepared using any methods known in the art. See, for example, WO 2009/067800, WO 2011/133886 and US Patent Application Publication No. 2014322129, incorporated herein by reference in its entirety.

Вариантные полипептиды или иммуномодулирующие белки конъюгата IgSF могут быть присоединены к эффекторному фрагменту с помощью любых средств, с помощью которых вариантные полипептиды или иммуномодулирующие белки могут быть ассоциированы с, или связаны с эффекторным фрагментом. Например, вариантные полипептиды или иммуномодулирующие белки конъюгата IgSF могут быть присоединены к эффекторному фрагменту с помощью химических или рекомбинантных средств. Химические средства для получения гибридов или конъюгатов известны в данной области и могут быть использованы для получения конъюгата IgSF. Способ, используемый для конъюгации вариантных полипептидов или иммуномодулирующих белков и эффекторного фрагмента, должен быть способен связывать вариантные полипептиды или иммуномодулирующие белки с эффекторным фрагментом, не мешая способности вариантных полипептидов или иммуномодулирующих белков связываться с их одним или более контрструктурных лигандов.The variant polypeptides or immunomodulatory proteins of the IgSF conjugate can be attached to the effector fragment by any means by which the variant polypeptides or immunomodulatory proteins can be associated with, or linked to, the effector fragment. For example, variant polypeptides or immunomodulatory proteins of the IgSF conjugate can be attached to the effector moiety by chemical or recombinant means. Chemical means for producing hybrids or conjugates are known in the art and can be used to produce an IgSF conjugate. The method used to conjugate variant polypeptides or immunomodulatory proteins and an effector fragment must be capable of binding the variant polypeptides or immunomodulatory proteins to the effector fragment without interfering with the ability of the variant polypeptides or immunomodulatory proteins to bind to their one or more counterstructural ligands.

Вариантные полипептиды или иммуномодулирующие белки конъюгата IgSF могут быть связаны опосредованно с эффекторным фрагментом. Например, вариантные полипептиды или иммуномодулирующие белки конъюгата IgSF могут быть непосредственно связаны с липосомой, содержащей эффек- 91 044346 торный фрагмент одного из нескольких типов. Эффекторный фрагмент(ы) и/или вариантные полипептиды или иммуномодулирующие белки также могут быть связаны с твердой поверхностью.Variant polypeptides or immunomodulatory proteins of the IgSF conjugate can be associated indirectly with the effector fragment. For example, variant polypeptides or immunomodulatory IgSF conjugate proteins can be directly associated with a liposome containing one of several types of effector fragment. Effector fragment(s) and/or variant polypeptides or immunomodulatory proteins may also be associated with a solid surface.

В некоторых воплощениях вариантные полипептиды или иммуномодулирующие белки конъюгата IgSF и эффекторный фрагмент оба являются белками и могут быть конъюгированы с использованием методов, хорошо известных в данной области. Существует несколько сотен сшивающих агентов, которые могут конъюгировать два белка. (См., например, Chemistry of Protein Conjugation and Crosslinking, 1991, Shans Wong, CRC Press, Ann Arbor). Сшивающий агент обычно выбирают на основе реакционноспособных функциональных групп, доступных или вставленных на вариантные полипептиды или иммуномодулирующие белки и/или эффекторный фрагмент. Кроме того, если нет реакционноспособных групп, может быть использован фотоактивируемый сшивающий агент. В некоторых случаях желательным может быть включение спейсера между вариантными полипептидами или иммуномодулирующими белками и эффекторным фрагментом. Сшивающие агенты, известные в данной области, включают гомобифункциональные агенты: глутаровый альдегид, диметиладипимидат и бис (диазобензидин) и гетеробифункциональные агенты: m Малеимидобензоил-К-гидроксисукцинимид и Сульфо-m Малеимидобензоил-N-гидроксисукцинимид.In some embodiments, the variant polypeptides or immunomodulatory proteins of the IgSF conjugate and the effector fragment are both proteins and can be conjugated using methods well known in the art. There are several hundred cross-linking agents that can conjugate two proteins. (See, for example, Chemistry of Protein Conjugation and Crosslinking, 1991, Shans Wong, CRC Press, Ann Arbor). The cross-linking agent is typically selected based on the reactive functional groups available or inserted on the variant polypeptides or immunomodulatory proteins and/or effector moiety. In addition, if there are no reactive groups, a photoactivatable cross-linking agent can be used. In some cases, it may be desirable to include a spacer between the variant polypeptides or immunomodulatory proteins and the effector fragment. Cross-linking agents known in the art include the homobifunctional agents: glutaraldehyde, dimethyl adipimidate and bis(diazobenzidine) and the heterobifunctional agents: m Maleimidobenzoyl-N-hydroxysuccinimide and Sulfo-m Maleimidobenzoyl-N-hydroxysuccinimide.

В некоторых воплощениях вариантный полипептид или иммуномодулирующие белки конъюгата IgSF может быть сконструирован с конкретными остатками для химического присоединения эффекторного фрагмента. Специфические остатки, используемые для химического присоединения молекулы, известные в данной области, включают лизин и цистеин. Сшивающий агент выбирают на основе реакционноспособных функциональных групп, вставленных в вариантные полипептиды или иммуномодулирующие белки, и доступные на эффекторном фрагменте.In some embodiments, the variant polypeptide or immunomodulatory proteins of the IgSF conjugate can be designed with specific residues for chemical attachment of the effector moiety. Specific residues used to chemically attach a molecule known in the art include lysine and cysteine. The cross-linking agent is selected based on the reactive functional groups inserted into the variant polypeptides or immunomodulatory proteins and available on the effector moiety.

Конъюгат IgSF также может быть получен с использованием методик рекомбинантной ДНК. В этом случае последовательность ДНК, кодирующая вариантные полипептиды или иммуномодулирующие белки, слита с последовательностью ДНК, кодирующей эффекторную часть, в результате чего образуется молекула гибридной ДНК. Гибридную последовательность ДНК трансфицируют в клетку-хозяин, которая экспрессирует гибридный белок. Гибридный белок может быть выделен из культуры клеток и очищен с использованием методов, известных в данной области.The IgSF conjugate can also be produced using recombinant DNA techniques. In this case, the DNA sequence encoding the variant polypeptides or immunomodulatory proteins is fused to the DNA sequence encoding the effector portion, resulting in a hybrid DNA molecule. The fusion DNA sequence is transfected into a host cell, which expresses the fusion protein. The fusion protein can be isolated from cell culture and purified using methods known in the art.

Примеры присоединения эффекторного фрагмента, который представляет собой метку, к вариантным полипептидам или иммуномодулирующим белкам включают способы, описанные в Hunter, et al., Nature 144: 945 (1962); David et al., Biochemistry 13: 1014 (1974); Pain et al., J. Immunol. Meth. 40:219 (1981); Nygren, J. Histochem. and Cytochem. 30:407 (1982); Wensel and Meares, Radioimmunoimaging and Radioimmunotherapy, Elsevier, N.Y. (1983); and Colcher et al., Use Of Monoclonal Antibodies as Radiopharmaceuticals For The Localization Of Human Carcinoma Xenografts In Athymic Mice, Meth. Enzymol., 121:802-16 (1986).Examples of attaching an effector moiety that is a tag to variant polypeptides or immunomodulatory proteins include the methods described in Hunter, et al., Nature 144: 945 (1962); David et al., Biochemistry 13: 1014 (1974); Pain et al., J. Immunol. Meth. 40:219 (1981); Nygren, J. Histochem. and Cytochem. 30:407 (1982); Wensel and Meares, Radioimmunoimaging and Radioimmunotherapy, Elsevier, N.Y. (1983); and Colcher et al., Use Of Monoclonal Antibodies as Radiopharmaceuticals For The Localization Of Human Carcinoma Xenografts In Athymic Mice, Meth. Enzymol., 121:802-16 (1986).

Радиоактивные или другие метки могут быть включены в конъюгат известными способами. Например, пептид может быть получен биосинтезом или может быть синтезирован химическим аминокислотным синтезом с помощью подходящих аминокислотных предшественников, с включением, например, фтора-19 вместо водорода. Метки, такие как 99Tc или 123I, 186Re, 188Re и 111In, могут быть присоединены через остаток цистеина в пептиде. Иттрий-90 может быть прикреплен через остаток лизина. Способ IODOGEN (Fraker et al. (1978) Biochem. Biophys. Res. Commun. 80:49-57 (1978)) можно использовать для включения йода-123. Monoclonal Antibodies in Immunoscintigraphy (Chatal, CRC Press 1989) подробно описывает другие способы.Radioactive or other labels can be included in the conjugate by known methods. For example, the peptide can be produced by biosynthesis or can be synthesized by chemical amino acid synthesis using suitable amino acid precursors, including, for example, fluorine-19 instead of hydrogen. Tags such as 99Tc or 123I, 186Re, 188Re and 111In can be attached via a cysteine residue in the peptide. Yttrium-90 can be attached via a lysine residue. The IODOGEN method (Fraker et al. (1978) Biochem. Biophys. Res. Commun. 80:49-57 (1978)) can be used to incorporate iodine-123. Monoclonal Antibodies in Immunoscintigraphy (Chatal, CRC Press 1989) details other methods.

Конъюгаты вариантных полипептидов или иммуномодулирующих белков и цитотоксического агента могут быть получены с использованием различных бифункциональных связывающих белки агентов, таких как N-сукцинимидил-3-(2-пиридилдитио)пропионат (SPDP), сукцинимидил-4-(Nмалеимидометил) циклогексан-1-карбоксилат (SMCC), иминотиолан (IT), бифункциональные производные имидоэфиров (таких как диметиладипимидат HCl), активные сложные эфиры (такие как дисукцинимидил суберат), альдегиды (такие как глутаровый альдегид), бис-азидосоединения (такие как бис (пазидобензоил) гександиамин), производные бис-диазония (такие как бис-(п-диазонийбензоил)этилендиамин), диизоцианаты (такие как толуол-2,6-диизоцианат) и бис-активные соединения фтора (такие как 1,5-дифтор-2,4-динитробензол). Например, иммунотоксин рицин может быть получен, как описано у Vitetta et al. (1987) Science, 238:1098. Меченная углеродом-14 1-п-изотиоцианатобензил-3метилдиэтилентриаминпентауксусная кислота (MX-DTPA) представляет собой типичный хелатирующий агент для конъюгации радионуклеотида с антителом. См., например, WO94/11026. Линкер может быть расщепляемым линкером, облегчающим высвобождение цитотоксического лекарственного средства в клетке. Например, может быть использован кислотно-лабильный линкер, линкер, чувствительный к пептидазе, фотолабильный линкер, диметиловый линкер или дисульфидсодержащий линкер (Chari et al., Patent No. 5,208,020).Conjugates of variant polypeptides or immunomodulatory proteins and a cytotoxic agent can be prepared using various bifunctional protein coupling agents such as N-succinimidyl-3-(2-pyridyldithio)propionate (SPDP), succinimidyl-4-(Nmaleimidomethyl)cyclohexane-1-carboxylate (SMCC), iminothiolane (IT), bifunctional imidoester derivatives (such as dimethyladipimidate HCl), active esters (such as disuccinimidyl suberate), aldehydes (such as glutaraldehyde), bis-azido compounds (such as bis(pazidobenzoyl)hexanediamine), bis-diazonium derivatives (such as bis-(p-diazoniumbenzoyl)ethylenediamine), diisocyanates (such as toluene-2,6-diisocyanate) and bis-active fluorine compounds (such as 1,5-difluoro-2,4-dinitrobenzene) . For example, the ricin immunotoxin can be prepared as described by Vitetta et al. (1987) Science, 238:1098. Carbon-14 labeled 1-p-isothiocyanatobenzyl-3methyldiethylenetriaminepentaacetic acid (MX-DTPA) is a typical chelating agent for radionucleotide-antibody conjugation. See for example WO94/11026. The linker may be a cleavable linker that facilitates release of the cytotoxic drug into the cell. For example, an acid-labile linker, a peptidase-sensitive linker, a photolabile linker, a dimethyl linker, or a disulfide-containing linker can be used (Chari et al., Patent No. 5,208,020).

Конъюгаты IgSF по настоящему изобретению явно рассматривают, без ограничения указанным, конъюгаты лекарственных средств, приготовленных с помощью перекрестно-связывающих реагентов: Bmps, EMCS, GMBS, HBVS, LC-SMCC, MBS, MPBH, SBAP, SIA, SIAB, SMCC, SMPB, SMPH, сульфоEMCS, сульфо-GMBS, сульфо-KMUS, сульфо-MBS, сульфо-SIAB, сульфо-SMCC и сульфо-SMPB иThe IgSF conjugates of the present invention explicitly contemplate, without limitation, drug conjugates prepared using cross-linking reagents: Bmps, EMCS, GMBS, HBVS, LC-SMCC, MBS, MPBH, SBAP, SIA, SIAB, SMCC, SMPB, SMPH, sulfoEMCS, sulfo-GMBS, sulfo-KMUS, sulfo-MBS, sulfo-SIAB, sulfo-SMCC and sulfo-SMPB and

- 92 044346- 92 044346

SVSB (сукцинимидил-(4-винилсульфон)бензоат), которые являются коммерчески доступными (например, у Pierce Biotechnology, Inc., Рокфорд, Иллинойс, США). См. стр. 467-498, 2003-2004 ApplicationsSVSB (succinimidyl (4-vinyl sulfone) benzoate), which are commercially available (eg, Pierce Biotechnology, Inc., Rockford, IL, USA). See pages 467-498, 2003-2004 Applications

Handbook and Catalog.Handbook and Catalog.

C. Трансмембранные и секретируемые иммуномодулирующие белки и сконструированные клетки.C. Transmembrane and secreted immunomodulatory proteins and engineered cells.

В данном документе предлагаются сконструированы клетки, которые экспрессируют иммуномодулирующие вариантные полипептиды ICOSL (в качестве варианта сконструированные клетки). В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL экспрессируется в клетке, такой как иммунная клетка (например, T-клетка или клетка, представляющая антиген), в связанной с мембраной форме, тем самым обеспечивая трансмембранный иммуномодулирующий белок (далее также называемый TIP). В некоторых аспектах вариантный полипептид ICOSL экспрессируется в клетке, такой как иммунная клетка (например, T-клетка или клетка, представляющая антиген), в секретируемой форме, чтобы таким образом продуцировать секретируемую или растворимую форму вариантного полипептида ICOSL (далее также называемого SIP), например, когда клетки вводят объекту. В некоторых аспектах SIP может оказывать антагонистическое воздействие на когнатного партнера связывания в окружающей среде (например, в микроокружение опухоли), в котором он секретируется.Provided herein are engineered cells that express immunomodulatory variant ICOSL polypeptides (optionally engineered cells). In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide is expressed in a cell, such as an immune cell (eg, a T cell or antigen presenting cell), in a membrane-bound form, thereby providing a transmembrane immunomodulatory protein (hereinafter also referred to as TIP). In some aspects, the variant ICOSL polypeptide is expressed in a cell, such as an immune cell (e.g., a T cell or antigen presenting cell), in a secreted form to thereby produce a secreted or soluble form of the variant ICOSL polypeptide (hereinafter also referred to as SIP), for example when cells are injected into an object. In some aspects, SIP may have an antagonistic effect on a cognate binding partner in the environment (eg, tumor microenvironment) in which it is secreted.

1. Трансмембранные иммуномодулирующие белки.1. Transmembrane immunomodulatory proteins.

В некоторых воплощениях иммуномодулирующий полипептид, содержащий вариантный ICOSL может быть мембраносвязанным белком. Как описано более подробно ниже, иммуномодулирующий полипептид может представлять собой трансмембранный иммуномодулирующий полипептид, содержащий вариантный ICOSL, в котором содержится: эктодомен, содержащий, по меньшей мере, один домен IgSF с модифицированной аффинностью (IgV или IgC), трансмембранный домен и, необязательно, цитоплазматический домен. В некоторых воплощениях трансмембранный иммуномодулирующий белок может быть экспрессирован на поверхности иммунной клетки, такой как клетка млекопитающего, в том числе на поверхности лимфоцита (например, T-клетки или NK-клетки) или антигенпрезентирующей клетки. В некоторых воплощениях трансмембранный иммуномодулирующий белок экспрессируется на поверхности T-клетки млекопитающего, включая такие T-клетки, как: T-хелперная клетка, цитотоксическая Tклетка (альтернативно цитотоксический T- лимфоцит или ЦТЛ), T-клетка натуральный киллер, регуляторная T-клетка, T-клетка памяти или гамма-дельта T-клетка. В некоторых воплощениях клетка млекопитающего представляет собой антигенпрезентирующую клетку (APC). Обычно, но не исключительно, эктодомен (в качестве варианта внеклеточный домен) включает одну или несколько вариаций аминокислот (например, аминокислотных замен) варианта ICOSL по изобретению. Так, например, в некоторых воплощениях трансмембранный белок будет содержать эктодомен, который включает одну или несколько аминокислотных замен в вариантном ICOSL по изобретению.In some embodiments, the immunomodulatory polypeptide containing the variant ICOSL may be a membrane-bound protein. As described in more detail below, the immunomodulatory polypeptide may be a transmembrane immunomodulatory polypeptide comprising a variant ICOSL comprising: an ectodomain containing at least one affinity modified IgSF domain (IgV or IgC), a transmembrane domain, and optionally a cytoplasmic domain. In some embodiments, the transmembrane immunomodulatory protein may be expressed on the surface of an immune cell, such as a mammalian cell, including on the surface of a lymphocyte (eg, T cell or NK cell) or antigen presenting cell. In some embodiments, the transmembrane immunomodulatory protein is expressed on the surface of a mammalian T cell, including T cells such as: T helper cell, cytotoxic T cell (alternatively cytotoxic T lymphocyte or CTL), natural killer T cell, regulatory T cell, Memory T cell or gamma delta T cell. In some embodiments, the mammalian cell is an antigen presenting cell (APC). Typically, but not exclusively, the ectodomain (optionally the extracellular domain) includes one or more amino acid variations (eg, amino acid substitutions) of the ICOSL variant of the invention. Thus, for example, in some embodiments, the transmembrane protein will comprise an ectodomain that includes one or more amino acid substitutions in a variant ICOSL of the invention.

В некоторых воплощениях сконструированные клетки экспрессируют вариантные полипептиды ICOSL, которые являются трансмембранными иммуномодулирующими полипептидами (TIPS), которые могут представлять собой мембранный белок, такой как трансмембранный белок. В типичных воплощениях эктодомен мембранного белка включает внеклеточный домен или его домен IgSF вариантного ICOSL, представленного в данном документе, в котором содержится одна или несколько аминокислотных замен, по меньшей мере, в одном домене IgSF, как описано. Трансмембранные иммуномодулирующие белки, представленные в данном документе, дополнительно содержат трансмембранный домен, связанный с эктодоменом. В некоторых воплощениях трансмембранный домен приводит к кодированному белку для экспрессии на поверхности клетки. В некоторых воплощениях трансмембранный домен связан непосредственно с эктодоменом. В некоторых воплощениях трансмембранный домен связывается опосредованно с эктодоменом через один или несколько линкеров или спейсеров. В некоторых воплощениях трансмембранный домен включает преимущественно гидрофобные аминокислотные остатки, такие как лейцин и валин.In some embodiments, the engineered cells express variant ICOSL polypeptides that are transmembrane immunomodulatory polypeptides (TIPS), which may be a membrane protein, such as a transmembrane protein. In typical embodiments, the ectodomain of the membrane protein includes an extracellular domain or an IgSF domain thereof of a variant ICOSL provided herein that contains one or more amino acid substitutions in at least one IgSF domain as described. The transmembrane immunomodulatory proteins provided herein further comprise a transmembrane domain linked to an ectodomain. In some embodiments, the transmembrane domain results in an encoded protein for cell surface expression. In some embodiments, the transmembrane domain is linked directly to the ectodomain. In some embodiments, the transmembrane domain communicates indirectly with the ectodomain through one or more linkers or spacers. In some embodiments, the transmembrane domain comprises predominantly hydrophobic amino acid residues such as leucine and valine.

В некоторых воплощениях может быть использован полноразмерный трансмембранный якорный домен, чтобы гарантировать, что TIP будут экспрессированы на поверхности сконструированной клетки, такой как сконструированная T-клетка. Удобно, что этот домен может быть из конкретного нативного белка, который является модифицированным по аффинности (например, CD80 или ICOSL или другого нативного белка IgSF), и который просто сливается с последовательностью первого мембранного проксимального домена аналогично природному белку IgSF (например, CD80 или ICOSL). В некоторых воплощениях трансмембранный иммуномодулирующий белок включает трансмембранный домен соответствующего референсного (например, немодифицированного) представителя IgSF или представителя IgSF дикого типа, такого как трансмембранный домен, содержащийся в аминокислотной последовательности, указанные в SEQ ID NO: 5 (табл. 2). В некоторых воплощениях связанная с мембраной форма включает трансмембранный домен соответствующего полипептида референсного (например, немодифицированного) пептида или пептида дикого типа, такого как соответствующие остатки 257-277 из SEQ ID NO: 5.In some embodiments, a full-length transmembrane anchor domain may be used to ensure that the TIPs are expressed on the surface of an engineered cell, such as an engineered T cell. Conveniently, this domain may be from a particular native protein that is affinity modified (e.g. CD80 or ICOSL or another native IgSF protein) and which is simply fused to the first membrane proximal domain sequence in a manner similar to the native IgSF protein (e.g. CD80 or ICOSL ). In some embodiments, the transmembrane immunomodulatory protein comprises the transmembrane domain of a corresponding reference (eg, unmodified) IgSF member or wild-type IgSF member, such as the transmembrane domain contained in the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 5 (Table 2). In some embodiments, the membrane-associated form includes the transmembrane domain of the corresponding reference (e.g., unmodified) or wild-type peptide polypeptide, such as the corresponding residues 257-277 of SEQ ID NO: 5.

В некоторых воплощениях трансмембранный домен является ненативным трансмембранным доменом, который не является трансмембранным доменом нативного ICOSL. В некоторых воплощениях трансмембранный домен получают из трансмембранного домена из другого полипептида-представителя семейства ICOSL, который является мембранным или представляет собой трансмембранный белок. ВIn some embodiments, the transmembrane domain is a non-native transmembrane domain that is not the transmembrane domain of the native ICOSL. In some embodiments, the transmembrane domain is derived from a transmembrane domain from another ICOSL family member polypeptide that is membrane or is a transmembrane protein. IN

- 93 044346 некоторых воплощениях может быть использован трансмембранный якорный домен из другого белка на T-клетках. В некоторых воплощениях трансмембранный домен получен из CD8. В некоторых воплощениях трансмембранный домен может дополнительно содержать внеклеточную часть CD8, которая служит в качестве спейсерного домена. Примерный трансмембранный домен, полученный из CD8, представлен в SEQ ID NO: 246 или 483 или их части, содержащей трансмембранный домен CD8. В некоторых воплощениях трансмембранный домен представляет собой синтетический трансмембранный домен.- 93 044346 In some embodiments, a transmembrane anchor domain from another protein on T cells may be used. In some embodiments, the transmembrane domain is derived from CD8. In some embodiments, the transmembrane domain may further comprise an extracellular portion of CD8 that serves as a spacer domain. An exemplary transmembrane domain derived from CD8 is provided in SEQ ID NO: 246 or 483 or a portion thereof containing the CD8 transmembrane domain. In some embodiments, the transmembrane domain is a synthetic transmembrane domain.

В некоторых воплощениях трансмембранный иммуномодулирующий белок дополнительно включает эндодомен, такой как цитоплазматический сигнальный домен, связанный с трансмембранным доменом. В некоторых воплощениях цитоплазматический сигнальный домен индуцирует клеточную сигнализацию. В некоторых воплощениях эндодомен трансмембранного иммуномодулирующего белка включает цитоплазматический домен соответствующего референсного (например, немодифицированного) пептида или пептида дикого типа, такого как цитоплазматический домен, содержащийся в аминокислотной последовательности, представленной в SEQ ID NO: 5 (см. табл. 2).In some embodiments, the transmembrane immunomodulatory protein further includes an endodomain, such as a cytoplasmic signaling domain associated with a transmembrane domain. In some embodiments, the cytoplasmic signaling domain induces cellular signaling. In some embodiments, the endodomain of the transmembrane immunomodulatory protein includes the cytoplasmic domain of a corresponding reference (eg, unmodified) peptide or wild-type peptide, such as the cytoplasmic domain contained in the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 5 (see Table 2).

В некоторых воплощениях предлагаемый трансмембранный иммуномодулирующий белок, который является или включает вариантный ICOSL включающий аминокислотную последовательность, которая имеет, по меньшей мере, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98 или 99% последовательности SEQ ID NO: 257 и включает эктодомен, содержащий, по меньшей мере, один аффинномодифицированный домен ICOSL IgSF, как описано, и трансмембранный домен. В некоторых воплощениях трансмембранный иммуномодулирующий белок включает любую одну или несколько аминокислотных замен в домене IgSF (например, домен IgV), как описано, включая любые, указанные в табл. 1. В некоторых воплощениях трансмембранный иммуномодулирующий белок может дополнительно содержать цитоплазматический домен, как описано. В некоторых воплощениях трансмембранный иммуномодулирующий белок может дополнительно включать сигнальный пептид. В некоторых воплощениях сигнальный пептид представляет собой нативный сигнальный пептид из представителя IgSF дикого типа, такой как содержащийся в аминокислотной последовательности, указанной в SEQ ID NO: 5 (см., например, табл. 2).In some embodiments, a proposed transmembrane immunomodulatory protein that is or includes a variant ICOSL comprising an amino acid sequence that has at least 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97 , 98 or 99% of the sequence of SEQ ID NO: 257 and includes an ectodomain containing at least one affinity modified ICOSL IgSF domain as described and a transmembrane domain. In some embodiments, the transmembrane immunomodulatory protein includes any one or more amino acid substitutions in the IgSF domain (eg, IgV domain) as described, including any listed in table. 1. In some embodiments, the transmembrane immunomodulatory protein may further comprise a cytoplasmic domain, as described. In some embodiments, the transmembrane immunomodulatory protein may further include a signal peptide. In some embodiments, the signal peptide is a native signal peptide from a wild-type IgSF representative, such as those contained in the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 5 (see, for example, Table 2).

В некоторых воплощениях предлагаемое представляет собой трансмембранные иммуномодулирующие белки, содержащие аминокислотные заменыIn some embodiments, the proposed are transmembrane immunomodulatory proteins containing amino acid substitutions

E16V/N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/Y152C/K156M/C198R, N52H/N57Y/Q100R илиE16V/N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/Y152C/K156M/C198R, N52H/N57Y/Q100R or

N52H/N57Y/Q100P. В некоторых воплощениях предоставленный трансмембранный иммуномодулирующий белок представляет собой или включает вариантный ICOSL, включающий аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 257, но в которой содержатся аминокислотные замены E16V/N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/Y152C/K156M/C198R, N52H/N57Y/Q100R илиN52H/N57Y/Q100P. In some embodiments, the provided transmembrane immunomodulatory protein is or includes a variant ICOSL comprising the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 257, but containing amino acid substitutions E16V/N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/Y152C/K156M/C198R, N52H/N57Y/Q100R or

N52H/N57Y/Q100P в соответствующих положениях в SEQ ID NO: 257 или в аминокислотной последовательности, которая имеет, по меньшей мере, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98 или 99% идентичности с последовательностью SEQ ID NO: 257 и включает аминокислотные замены E16V/N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/Y152C/K156M/C198R, N52H/N57Y/Q100R илиN52H/N57Y/Q100P at the corresponding positions in SEQ ID NO: 257 or in an amino acid sequence that is at least 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98 or 99% identity to SEQ ID NO: 257 and includes amino acid substitutions E16V/N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/Y152C/K156M/C198R, N52H/N57Y/Q100R or

N52H/N57Y/Q100P.N52H/N57Y/Q100P.

В некоторых воплощениях предлагаемое представляет собой трансмембранные иммуномодулирующие белки, содержащие аминокислотную последовательность, указанную в SEQ ID NO: 496 или 497 (каждая из которых включает аминокислотную замену N52D), SEQ ID NO: 498 или 499 (каждая из которых включает аминокислотные замены N52H/N57Y/Q100P), SEQ ID NO: 500 или 501 (каждый из которых включает аминокислотные замены E16V/N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/Y152C/K156M/C198R) или SEQ ID NO: 502 или 503 (каждый из которых включает аминокислотные замены N52H/N57Y/Q100R) или аминокислотную последовательность, которая имеет, по меньшей мере, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98 или 99% идентичности последовательности к любой из SEQ ID NO: 495-503 и которая включает указанные аминокислотные замены. В некоторых воплощениях при экспрессии в сконструированной клетке, такие трансмембранные иммуномодулирующие белки экспрессируются на поверхности клетки.In some embodiments, the present invention is a transmembrane immunomodulatory proteins containing the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 496 or 497 (each including amino acid substitution N52D), SEQ ID NO: 498 or 499 (each including amino acid substitution N52H/N57Y /Q100P), SEQ ID NO: 500 or 501 (each including amino acid substitutions E16V/N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/Y152C/K156M/C198R) or SEQ ID NO: 502 or 503 (each including amino acid substitution N52H/N57Y/Q100R) or an amino acid sequence that has at least 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98 or 99% sequence identity to any of SEQ ID NO: 495-503 and which includes the specified amino acid substitutions. In some embodiments, when expressed in an engineered cell, such transmembrane immunomodulatory proteins are expressed on the surface of the cell.

Настоящее изобретение также относится к молекуле нуклеиновой кислоты, кодирующей такие трансмембранные иммуномодулирующие белки. В некоторых воплощениях нуклеотидная молекула, кодирующая трансмембранный иммуномодулирующий белок, включает нуклеотидную последовательность, которая кодирует аминокислотную последовательность, которая имеет, по меньшей мере, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98 или 99% идентичности с последовательностью SEQ ID NO: 257 и включает эктодомен, содержащий, по меньшей мере, один домен IgSF с модифицированной аффинностью, как описано, трансмембранный домен и, необязательно, цитоплазматический домен. В некоторых воплощениях нуклеотидная молекула может дополнительно содержать последовательность нуклеотидов, кодирующую сигнальный пептид. В некоторых воплощениях сигнальный пептид представляет собой нативный сигнальный пептид соответствующего представителя IgSF дикого типа (см., например, табл. 2).The present invention also provides a nucleic acid molecule encoding such transmembrane immunomodulatory proteins. In some embodiments, the nucleotide molecule encoding a transmembrane immunomodulatory protein includes a nucleotide sequence that encodes an amino acid sequence that has at least 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96 , 97, 98 or 99% identity to the sequence of SEQ ID NO: 257 and includes an ectodomain containing at least one affinity modified IgSF domain as described, a transmembrane domain and, optionally, a cytoplasmic domain. In some embodiments, the nucleotide molecule may further comprise a nucleotide sequence encoding a signal peptide. In some embodiments, the signal peptide is the native signal peptide of the corresponding wild-type IgSF representative (see, for example, Table 2).

Примерный трансмембранный иммуномодулирующий белок представляет собой ICOSL TIP, включающий i) аминокислотную последовательность, указанную в SEQ ID NO: 383 или ii) аминокислотнуюAn exemplary transmembrane immunomodulatory protein is an ICOSL TIP comprising i) the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 383 or ii) the amino acid

- 94 044346 последовательность, которая обладает, по меньшей мере, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98 или 99% идентичностью с SEQ ID NO: 243 и которая включает домен с модифицированной аффинностью, содержащийся в SEQ ID NO: 243, или аминокислотные замены в нем. Также предусматривается i) последовательность нуклеотидов, предлагаемых в SEQ ID NO: 384, ii) последовательность, которая имеет, по меньшей мере, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98% или 99% последовательности SEQ ID NO: 244 и которая кодирует TIP, который включает домен с модифицированной аффинностью SEQ ID NO: 243 или iii) последовательность i) или ii) с вырожденными кодонами.- 94 044346 a sequence that has at least 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98 or 99% identity with SEQ ID NO: 243 and which includes the affinity modified domain contained in SEQ ID NO: 243, or amino acid substitutions therein. Also provided is i) a nucleotide sequence as set forth in SEQ ID NO: 384, ii) a sequence that has at least 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98% or 99% of the sequence of SEQ ID NO: 244 and which encodes a TIP that includes an affinity modified domain of SEQ ID NO: 243 or iii) a sequence of i) or ii) with degenerate codons.

В некоторых воплощениях предлагаются трансмембранные иммуномодулирующие белки, связанные с CAR, в которых эндодомен трансмембранного иммуномодулирующего белка включает цитоплазматический сигнальный домен, который включает, по меньшей мере, один ITAM (иммунорецепторный тирозиновый активирующий мотив)-содержащий сигнальный домен. ITAM является консервативным мотивом, обнаруженным в ряде белковых доменов сигнализации, участвующих в сигнальной трансдукции иммунных клеток, в том числе в CD3-дзета-цепи (CD3-z), участвующей в трансдукции сигнала Tклеточного рецептора. В некоторых воплощениях эндодомен включает сигнальный домен CD3-дзета. В некоторых воплощениях сигнальный домен CD3-дзета включает аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 387, или аминокислотную последовательность, которая имеет, по меньшей мере, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98 или 99% идентичности с SEQ ID NO: 387 и сохраняет сигнальную активность для T-клеток. В некоторых воплощениях эндодомен трансмембранного иммуномодулирующего белка, связанного с CAR, может дополнительно содержать костимулирующий сигнальный домен для дальнейшей модуляции иммуномодулирующих ответов T-клетки. В некоторых воплощениях костимулирующий сигнальный домен является CD28, ICOS, 41BB или OX40. В некоторых воплощениях костимулирующий сигнальный домен является производным от CD28 или 4-1BB и включает аминокислотную последовательность, указанную в любом из SEQ ID NO: 484-487, или аминокислотную последовательность, которая имеет, по меньшей мере, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98 или 99% идентичности с SEQ ID NO: 484-487 и сохраняет костимулирующую сигнальную активность T-клеток. В некоторых воплощениях предоставленные связанные с CAR трансмембранные иммуномодулирующие белки имеют признаки CAR для стимуляции передачи T-клеток при связывании домена IgSF с модифицированной аффинностью с когнатным связывающим партнером или контрструктурой. В некоторых воплощениях специфическое связывание домена с модифицированной аффинностью IgSF с его контрструктурой может приводить к изменениям в иммунологической активности T-клеток, что отражается в изменениях цитотоксичности, пролиферации или выработки цитокинов.In some embodiments, CAR-related transmembrane immunomodulatory proteins are provided, wherein the endodomain of the transmembrane immunomodulatory protein includes a cytoplasmic signaling domain that includes at least one ITAM (immunoreceptor tyrosine activating motif)-containing signaling domain. ITAM is a conserved motif found in a number of protein signaling domains involved in immune cell signal transduction, including the CD3 zeta chain (CD3-z), involved in T cell receptor signal transduction. In some embodiments, the endodomain includes a CD3-zeta signaling domain. In some embodiments, the CD3 zeta signaling domain comprises the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 387, or an amino acid sequence that is at least 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94 , 95, 96, 97, 98 or 99% identity to SEQ ID NO: 387 and retains T cell signaling activity. In some embodiments, the endodomain of the CAR-associated transmembrane immunomodulatory protein may further comprise a co-stimulatory signaling domain to further modulate T cell immunomodulatory responses. In some embodiments, the costimulatory signaling domain is CD28, ICOS, 41BB, or OX40. In some embodiments, the co-stimulatory signaling domain is derived from CD28 or 4-1BB and includes an amino acid sequence set forth in any of SEQ ID NO: 484-487, or an amino acid sequence that is at least 85, 86, 87, 88. 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98 or 99% identity with SEQ ID NO: 484-487 and retains co-stimulatory T cell signaling activity. In some embodiments, the provided CAR-associated transmembrane immunomodulatory proteins have CAR features to promote T cell trafficking upon binding of an affinity-modified IgSF domain to a cognate binding partner or counterstructure. In some embodiments, the specific binding of an IgSF affinity modified domain to its counterstructure can result in changes in T cell immunological activity, reflected by changes in cytotoxicity, proliferation, or cytokine production.

В некоторых воплощениях трансмембранный иммуномодулирующий белок не включает эндодомен, способный опосредовать цитоплазматическую сигнализацию. В некоторых воплощениях трансмембранный иммуномодулирующий белок утратил механизм трансдукции сигнала полипептида дикого типа или немодифицированного полипептида и, следовательно, сам по себе не индуцирует клеточную сигнализацию. В некоторых воплощениях трансмембранный иммуномодулирующий белок не имеет внутриклеточного (цитоплазматического) домена или части внутриклеточного домена соответствующего референсного (например, немодифицированного) полипептида или полипептида дикого типа, такого как цитоплазматический сигнальный домен, содержащийся в аминокислотной последовательности, указанной в SEQ ID NO: 5 (см. табл. 2). В некоторых воплощениях трансмембранный иммуномодулирующий белок не включает ITIM (иммунорецепторный тирозиновый ингибирующий мотив), такой как содержащийся в некоторых ингибирующих рецепторах, включая ингибирующие рецепторы семейства IgSF (например, PD-1 или TIGIT). Таким образом, в некоторых воплощениях трансмембранный иммуномодулирующий белок включает только эктодомен и трансмембранный домен, например, любой из описанных.In some embodiments, the transmembrane immunomodulatory protein does not include an endodomain capable of mediating cytoplasmic signaling. In some embodiments, the transmembrane immunomodulatory protein has lost the signal transduction mechanism of the wild-type or unmodified polypeptide and therefore does not itself induce cellular signaling. In some embodiments, the transmembrane immunomodulatory protein does not have an intracellular (cytoplasmic) domain or part of the intracellular domain of a corresponding reference (e.g., unmodified) polypeptide or wild-type polypeptide, such as a cytoplasmic signaling domain contained in the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 5 (see Table 2). In some embodiments, the transmembrane immunomodulatory protein does not include an ITIM (immunoreceptor tyrosine inhibitory motif) such as that found in certain inhibitory receptors, including the IgSF family inhibitory receptors (eg, PD-1 or TIGIT). Thus, in some embodiments, the transmembrane immunomodulatory protein includes only an ectodomain and a transmembrane domain, such as any of those described.

2. Секретируемые иммуномодулирующие белки и сконструированные клетки.2. Secreted immunomodulatory proteins and engineered cells.

В некоторых воплощениях вариантный иммуномодулирующий полипептид ICOSL, содержащий одну или несколько аминокислотных мутаций, как описано в настоящем документ, является секретируемым, например, при экспрессии из клетки. Такой вариантный иммуностимулирующий белок ICOSL не включает трансмембранного домена. В некоторых воплощениях вариантный иммуномодулирующий белок ICOSL не конъюгирован с фрагментом для удлинения периода полужизни (таким как домен Fc или домен мультимеризации). В некоторых воплощениях вариантный иммуномодулирующий белок ICOSL включает сигнальный пептид, например сигнальный пептид антитела или другую эффективную сигнальную последовательность для получения доменов вне клетки. Когда иммуномодулирующий белок включает сигнальный пептид и экспрессируется сконструированной клеткой, сигнальный пептид вызывает секрецию иммуномодулирующего белка сконструированной клеткой. Как правило, сигнальный пептид или часть сигнального пептида отщепляется от иммуномодулирующего белка при секреции. Иммуномодулирующий белок можно кодировать нуклеиновой кислотой (которая может быть частью экспрессирующего вектора). В некоторых воплощениях иммуномодулирующий белок экспрессируется и секретируется клеткой (такой как иммунная клетка, например первичная иммунная клетка).In some embodiments, a variant ICOSL immunomodulatory polypeptide containing one or more amino acid mutations, as described herein, is secreted, for example, when expressed from a cell. This variant immunostimulatory protein ICOSL does not include a transmembrane domain. In some embodiments, the variant immunomodulatory protein ICOSL is not conjugated to a half-life extension moiety (such as an Fc domain or multimerization domain). In some embodiments, the variant ICOSL immunomodulatory protein includes a signal peptide, such as an antibody signal peptide or other effective signal sequence for obtaining extracellular domains. When the immunomodulatory protein includes a signal peptide and is expressed by the engineered cell, the signal peptide causes the engineered cell to secrete the immunomodulatory protein. Typically, the signal peptide or part of the signal peptide is cleaved from the immunomodulatory protein upon secretion. The immunomodulatory protein may be encoded by a nucleic acid (which may be part of an expression vector). In some embodiments, the immunomodulatory protein is expressed and secreted by a cell (such as an immune cell, such as a primary immune cell).

Таким образом, в некоторых воплощениях, предлагаются вариантные иммуномодулирующие белки ICOSL, которые дополнительно содержат сигнальный пептид. В некоторых воплощениях, предлагаемое в данном документе, представляет собой нуклеотидную молекулу, кодирующую вариантный иммуномо- 95 044346 дулирующий белок ICOSL, функционально связанный с последовательностью секреции, кодирующей сигнальный пептид.Thus, in some embodiments, variant ICOSL immunomodulatory proteins are provided that further comprise a signal peptide. In some embodiments, provided herein is a nucleotide molecule encoding a variant immunomodulatory protein ICOSL operably linked to a secretion sequence encoding a signal peptide.

Сигнальный пептид представляет собой последовательность на N-конце иммуномодулирующего белка, которая дает сигнал о секреции иммуномодулирующего белка из клетки. В некоторых воплощениях сигнальный пептид имеет длину от около 5 до около 40 аминокислот (например, от около 5 до около 7, от около 7 до около 10, от около 10 до около 15, от около 15 до около 20, от около 20 до около 25, или от около 25 до около 30, от около 30 до около 35 или от около 35 до около 40 аминокислот).A signal peptide is a sequence at the N-terminus of an immunomodulatory protein that signals the secretion of the immunomodulatory protein from the cell. In some embodiments, the signal peptide is about 5 to about 40 amino acids in length (e.g., about 5 to about 7, about 7 to about 10, about 10 to about 15, about 15 to about 20, about 20 to about 25, or about 25 to about 30, about 30 to about 35, or about 35 to about 40 amino acids).

В некоторых воплощениях, сигнальный пептид представляет собой нативный сигнальный пептид из соответствующего ICOSL дикого типа (табл. 6). В некоторых воплощениях сигнальный пептид является ненативным сигнальным пептидом. Например, в некоторых воплощениях ненативный сигнальный пептид является мутантным нативным сигнальным пептидом из соответствующего ICOSL дикого типа и может включать одну или несколько (таких как 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, или 10, или более) замен, вставок или делеций. В некоторых воплощениях ненативный сигнальный пептид представляет собой сигнальный пептид или мутант представителя семейства из того же семейства IgSF, что и представитель семейства IgSF дикого типа. В некоторых воплощениях ненативный сигнальный пептид является сигнальным пептидом или мутантом из представителя семейства IgSF из другого семейства IgSF, чем представитель семейства IgSF дикого типа. В некоторых воплощениях сигнальный пептид представляет собой сигнальный пептид или его мутант не из семейства белков IgSF, такой как сигнальный пептид из иммуноглобулина (такого как тяжелая цепь IgG или легкая цепь IgG-каппа), цитокина (такой как интерлейкин-2 (IL-2) или CD33), сывороточного альбумина (например, HSA или альбумина), сигнальной последовательности предшественника азуроцидина человека, люциферазы, трипсиногена (например, химотрипсиногена или трипсиногена) или другого сигнального пептида, способного эффективно секретировать белок из клетки. Примерные сигнальные пептиды включают любые, описанные в табл. 6.In some embodiments, the signal peptide is a native signal peptide from the corresponding wild-type ICOSL (Table 6). In some embodiments, the signal peptide is a non-native signal peptide. For example, in some embodiments, the non-native signal peptide is a mutant of the native signal peptide from the corresponding wild-type ICOSL and may include one or more (such as 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, or 10 or more) substitutions , insertions or deletions. In some embodiments, the non-native signal peptide is a signal peptide or a mutant of a family member from the same IgSF family as the wild-type IgSF family member. In some embodiments, the non-native signal peptide is a signal peptide or mutant from an IgSF family member of a different IgSF family than the wild-type IgSF family member. In some embodiments, the signal peptide is a signal peptide or mutant thereof not from the IgSF family of proteins, such as a signal peptide from an immunoglobulin (such as IgG heavy chain or IgG kappa light chain), a cytokine (such as interleukin-2 (IL-2) or CD33), serum albumin (eg, HSA or albumin), human azurocidin precursor signal sequence, luciferase, trypsinogen (eg, chymotrypsinogen or trypsinogen), or other signal peptide capable of efficiently secreting a protein from a cell. Exemplary signal peptides include any described in table. 6.

Таблица 6 Примерные сигнальные пептидыTable 6 Exemplary signal peptides

SEQ ID NO. SEQ ID NO. Сигнальный Пептид Signal Peptide Последовательность пептида Peptide sequence SEQ ID NO: 346 SEQ ID NO: 346 сигнальный пептид HSA HSA signal peptide MKWVTFISLLFLFSSAYS MKWVTFISLLFLFSSAYS SEQ ID NO: 347 SEQ ID NO: 347 Ig легкая цепь каппа Ig light chain kappa MDMRAPAGIFGFLLVLFPGYRS MDMRAPAGIFGFFLLVLFPGYRS SEQ ID NO: 348 SEQ ID NO: 348 Сигнальная последовательность пребелка азуроцидина человека Signal Azurocidin preprotein sequence person MTRLT VL ALL AGLL AS SRA MTRLT VL ALL AGLL AS SRA SEQ ID NO: 349 SEQ ID NO: 349 сигнальный пептид тяжелой signal peptide heavy MELGLSWIFLLAILKGVQC MELGLSWIFLLAILKGVQC цепи IgG IgG chains SEQ ID NO: 350 SEQ ID NO: 350 сигнальный пептид тяжелой цепи IgG IgG heavy chain signal peptide MELGLRWVFLVAILEGVQC MELGLRWVFLVAIEGVQC SEQ ID NO: 351 SEQ ID NO: 351 сигнальный пептид тяжелой цепи IgG IgG heavy chain signal peptide MKHLWFFLLLVAAPRWVLS MKHLWFFLLLVAAPRWVLS SEQ ID NO: 352 SEQ ID NO: 352 сигнальный пептид тяжелой цепи IgG IgG heavy chain signal peptide MDWTWRILFLVAAATGAHS MDWTWRILFLVAATGAHS SEQ ID NO: 353 SEQ ID NO: 353 сигнальный пептид тяжелой цепи IgG IgG heavy chain signal peptide MDWTWRFLFVVAAATGVQS MDWTWRFLFVVAAATGVQS SEQ ID NO: 354 SEQ ID NO: 354 сигнальный пептид тяжелой цепи IgG IgG heavy chain signal peptide MEFGLSWLFLVAILKGVQC MEFGLSWLFLVAILKGVQC SEQ ID NO: 355 SEQ ID NO: 355 сигнальный пептид тяжелой цепи IgG IgG heavy chain signal peptide MEFGLSWVFLVALFRGVQC MEFGLSWVFLVALFRGVQC SEQ ID NO: 356 SEQ ID NO: 356 сигнальный пептид тяжелой цепи IgG IgG heavy chain signal peptide MDLLHKNMKHLWFFLLLVAA PRWVLS MDLLHKNMKHLWFFLLLVAA PRWVLS SEQ ID NO: 357 SEQ ID NO: 357 сигнальная последовательность легкой цепи каппа IgG IgG kappa light chain signal sequence MDMRVPAQLLGLLLLWLSGA RC MDMRVPAQLLGLLLLWLSGA RC SEQ ID NO: 358 SEQ ID NO: 358 сигнальная последовательность легкой цепи каппа IgG IgG kappa light chain signal sequence MKYLLPTAAAGLLLLAAQPAM A MKYLLPTAAAGLLLLLAAQPAM A SEQ ID NO: 359 SEQ ID NO: 359 Люцифераза Gaussia Gaussia luciferase MGVKVLFALICIAVAEA MGVKVLFALICIAVAEA SEQ ID NO: 360 SEQ ID NO: 360 Альбумин человека Human albumin MKWVTFISLLFLFSSAYS MKWVTFISLLFLFSSAYS SEQ ID NO: 361 SEQ ID NO: 361 химотрипсиноген человека human chymotrypsinogen MAFLWLLSCWALLGTTFG MAFLWLLSCWALLGTTFG SEQ ID NO: 362 SEQ ID NO: 362 интерлейкин-2 человека human interleukin-2 MQLLSCIALILALV MQLLSCIALILALV SEQ ID NO: 363 SEQ ID NO: 363 Трипсиноген-2 человека Trypsinogen-2 humans MNLLLILTFVAAAVA MNLLLILTFVAAAVA

В некоторых воплощениях секретируемого вариантного иммуномодулирующего белка ICOSL, иммуномодулирующий белок включает сигнальный пептид при экспрессии, и сигнальный пептид (или его часть) отщепляются от иммуномодулирующего белка после секреции.In some embodiments of the secreted variant immunomodulatory protein ICOSL, the immunomodulatory protein includes a signal peptide upon expression, and the signal peptide (or a portion thereof) is cleaved from the immunomodulatory protein upon secretion.

В некоторых воплощениях сконструированные клетки экспрессируют вариантные полипептиды ICOSL, которые секретируются из клетки. В некоторых воплощениях такой вариантный полипептидIn some embodiments, the engineered cells express variant ICOSL polypeptides that are secreted from the cell. In some embodiments, such a variant polypeptide

- 96 044346- 96 044346

ICOSL кодируется нуклеотидной молекулой, кодирующей иммуномодулирующий белок, под функциональным контролем сигнальной последовательности для секреции. В некоторых воплощениях кодируемый иммуномодулирующий белок секретируется при экспрессии из клетки. В некоторых воплощениях иммуномодулирующий белок, кодируемый нуклеотидной молекулой, не включает трансмембранный домен. В некоторых воплощениях иммуномодулирующий белок, кодируемый нуклеотидной молекулой, не включает фрагмент для увеличения периода полужизни (такой как домен Fc или домен мультимеризации). В некоторых воплощениях иммуномодулирующий белок, кодируемый нуклеотидной молекулой, включает сигнальный пептид. В некоторых воплощениях нуклеиновая кислота по изобретению дополнительно включает нуклеотидную последовательность, которая кодирует секреторный или сигнальный пептид, функционально связанный с нуклеиновой кислотой, кодирующей иммуномодулирующий белок, тем самым позволяя секрецию иммуномодулирующего белка.ICOSL is encoded by a nucleotide molecule encoding an immunomodulatory protein under the functional control of a signal sequence for secretion. In some embodiments, the encoded immunomodulatory protein is secreted when expressed from a cell. In some embodiments, the immunomodulatory protein encoded by the nucleotide molecule does not include a transmembrane domain. In some embodiments, the immunomodulatory protein encoded by the nucleotide molecule does not include a half-life extension moiety (such as an Fc domain or multimerization domain). In some embodiments, the immunomodulatory protein encoded by the nucleotide molecule includes a signal peptide. In some embodiments, the nucleic acid of the invention further includes a nucleotide sequence that encodes a secretory or signal peptide operably linked to the nucleic acid encoding an immunomodulatory protein, thereby allowing secretion of the immunomodulatory protein.

3. Клетки и сконструированные клетки.3. Cells and engineered cells.

В данном документе предлагаются сконструированные клетки, экспрессирующие любой из предлагаемых иммуномодулирующих полипептидов. В некоторых воплощениях сконструированные клетки экспрессируют на своей поверхности любой из предлагаемых трансмембранных иммуномодулирующих полипептидов. В некоторых воплощениях сконструированные клетки экспрессируют и способны или могут секретировать иммуномодулирующий белок из клеток в условиях, подходящих для секреции белка. В некоторых воплощениях трансмембранный иммуномодулирующий белок экспрессируется на лимфоците, таком как инфильтрирующий опухоль лимфоцит (TIL), T-клетка или NK-клетка, или на миелоидной клетке. В некоторых воплощениях сконструированные клетки представляют собой антигенпрезентирующие клетки (APC). В некоторых воплощениях сконструированные клетки представляют собой модифицированные T-клетки млекопитающих или сконструированные антигенпрезентирующие клетки млекопитающих (APC). В некоторых воплощениях сконструированные T-клетки или APC представляют собой человеческие или мышиные клетки.Provided herein are engineered cells expressing any of the proposed immunomodulatory polypeptides. In some embodiments, the engineered cells express on their surface any of the proposed transmembrane immunomodulatory polypeptides. In some embodiments, the engineered cells express and are capable of or may secrete an immunomodulatory protein from the cells under conditions suitable for protein secretion. In some embodiments, the transmembrane immunomodulatory protein is expressed on a lymphocyte, such as a tumor infiltrating lymphocyte (TIL), T cell or NK cell, or on a myeloid cell. In some embodiments, the engineered cells are antigen presenting cells (APC). In some embodiments, the engineered cells are engineered mammalian T cells or engineered mammalian antigen presenting cells (APCs). In some embodiments, the engineered T cells or APCs are human or murine cells.

В некоторых воплощениях сконструированные T-клетки включают, без ограничения перечисленным, хелперную T-клетку, цитотоксическую T-клетку (в качестве варианта цитотоксический T-лимфоцит или CTL), T-клетку естественного киллера, регуляторную T-клетку, T-клетку памяти, или гамма-дельтаТ-клетку. В некоторых воплощениях сконструированные T-клетки являются CD4+ или CD8+. В дополнение к сигналу MHC, сконструированные T-клетки также нуждаются в костимулирующем сигнале, который в некоторых воплощениях обеспечивается вариантным трансмембранным иммуномодулирующим полипептидом ICOSL, экспрессированным в мембраносвязанной форме, как обсуждалось ранее.In some embodiments, the engineered T cells include, but are not limited to, a helper T cell, a cytotoxic T cell (optionally a cytotoxic T lymphocyte or CTL), a natural killer T cell, a regulatory T cell, a memory T cell, or gamma delta T cell. In some embodiments, the engineered T cells are CD4+ or CD8+. In addition to the MHC signal, the engineered T cells also require a co-stimulatory signal, which in some embodiments is provided by the variant transmembrane immunomodulatory polypeptide ICOSL expressed in a membrane-bound form, as discussed previously.

В некоторых воплощениях сконструированные APC включают, например, APC, экспрессирующие MHC II, такие как макрофаги, B-клетки и дендритные клетки, и искусственные APC (aAPC), включая как клеточные, так и бесклеточные (например, биодеградируемые полимерные микрочастицы) aAPC. Искусственные APC (aAPC) - это синтетические версии APC, которые могут действовать аналогично APC, поскольку они презентируют антигены T-клеткам, и активируют их. Презентацию антигена осуществляет MHC (класс I или класс II). В некоторых аспектах в сконструированных APC, таких как aAPC, антиген, который загружается в MHC, в некоторых воплощениях представляет собой опухолеспецифический антиген или опухолесодержащий антиген. Антиген, загруженный в MHC, распознается T-клеточным рецептором (TCR) T-клетки, который в некоторых случаях может экспрессировать ICOS, CD28 или другую молекулу, распознанную вариантными полипептидами ICOSL, представленными в данном документе. Материалы, которые могут быть использованы для разработки aAPC, включают: поли (гликолевую кислоту), поли (молочно-ко-гликолевую кислоту), оксид железа, липосомы, липидные бислои, сефарозу и полистирол.In some embodiments, engineered APCs include, for example, MHC II-expressing APCs, such as macrophages, B cells, and dendritic cells, and artificial APCs (aAPCs), including both cellular and acellular (eg, biodegradable polymer microparticles) aAPCs. Artificial APCs (aAPCs) are synthetic versions of APCs that can act similarly to APCs in that they present antigens to T cells and activate them. Antigen presentation is carried out by MHC (class I or class II). In some aspects, in engineered APCs, such as aAPC, the antigen that is loaded into the MHC is, in some embodiments, a tumor-specific antigen or a tumor-containing antigen. The antigen loaded into the MHC is recognized by the T cell receptor (TCR) of the T cell, which in some cases may express ICOS, CD28, or another molecule recognized by the variant ICOSL polypeptides provided herein. Materials that can be used to develop aAPC include: poly(glycolic acid), poly(lactic-co-glycolic acid), iron oxide, liposomes, lipid bilayers, Sepharose, and polystyrene.

В некоторых воплощениях клеточная aAPC может быть сконструирована так, чтобы содержать агонист TIP и TCR, который используется в адоптивной клеточной терапии. В некоторых воплощениях клеточная aAPC может быть сконструирована так, чтобы содержать агонист TIP и TCR, который используется для экспансии ex vivo человеческих T-клеток, например, перед введением, например, для повторной интродукции в организм пациента. В некоторых аспектах aAPC может включать экспрессию, по меньшей мере, одного клона анти-CD3 антитела, например, такого как, например, OKT3 и/или UCHT1. В некоторых аспектах aAPC могут быть инактивированы (например, облучены). В некоторых воплощениях TIP может включать любой вариантный домен IgSF, который проявляет аффинность связывания к когнатному связывающему партнеру на T-клетке.In some embodiments, the cellular aAPC can be engineered to contain a TIP and TCR agonist that is used in adoptive cell therapy. In some embodiments, the cellular aAPC can be engineered to contain a TIP and TCR agonist that is used for ex vivo expansion of human T cells, for example, prior to administration, for example, for reintroduction into a patient. In some aspects, aAPC may include expression of at least one anti-CD3 antibody clone, such as, for example, OKT3 and/or UCHT1. In some aspects, aAPCs may be inactivated (eg, irradiated). In some embodiments, the TIP may include any variant IgSF domain that exhibits binding affinity for a cognate binding partner on a T cell.

В некоторых воплощениях изобретения иммуномодулирующий белок, представленный в данном документе, такой как трансмембранный иммуномодулирующий белок или секретируемый иммуномодулирующий белок, коэкспрессирован или сконструирован в клетке, которая экспрессирует антигенсвязывающий рецептор, такой как рекомбинантный рецептор, такой как химерный антигенный рецептор (CAR) или T-клеточный рецептор (TCR). В некоторых воплощениях сконструированная клетка, такая как сконструированная T-клетка, распознает искомый антиген, связанный со раковой опухолью, воспалительными и аутоиммунными нарушениями, или вирусной инфекцией. В конкретных воплощениях антигенсвязывающий рецептор включает антигенсвязывающий фрагмент, который специфически связывает опухолеспецифический антиген или опухоль-ассоциированный антиген. В некоторых воплощенияхIn some embodiments of the invention, an immunomodulatory protein provided herein, such as a transmembrane immunomodulatory protein or a secreted immunomodulatory protein, is coexpressed or engineered in a cell that expresses an antigen binding receptor, such as a recombinant receptor such as a chimeric antigen receptor (CAR) or T cell receptor (TCR). In some embodiments, the engineered cell, such as an engineered T cell, recognizes a target antigen associated with cancer, inflammatory and autoimmune disorders, or viral infection. In specific embodiments, the antigen binding receptor includes an antigen binding moiety that specifically binds a tumor-specific antigen or tumor-associated antigen. In some incarnations

- 97 044346 сконструированная T-клетка представляет собой T-клетку с CAR (химерным антигенным рецептором), которая включает антигенсвязывающий домен (например, scFv), который специфически связывается с антигеном, таким как опухолеспецифический антиген или опухольассоциированный антиген. В некоторых воплощениях антигенсвязывающий домен (например, scFv) является специфичным к конкретному антигену, например, CD19. Примером CAR является анти-CD19 CAR, такой как CAR, содержащий антиCD19 scFv, представленный в SEQ ID NO: 482 или SEQ ID NO: 245. В некоторых воплощениях белок TIP экспрессируется в сконструированной клетке T-клеточного рецептора или в сконструированной клетке с химерным антигенным рецептором. В таких воплощениях сконструированная клетка совместно экспрессирует TIP и CAR или TCR. В некоторых воплощениях белок SIP экспрессируется в сконструированной клетке T-клеточного рецептора или в сконструированной клетке с химерным антигенным рецептором. В таких воплощениях сконструированная клетка совместно экспрессирует SIP и CAR или TCR.- 97 044346 the engineered T cell is a T cell with a CAR (chimeric antigen receptor) that includes an antigen binding domain (eg, scFv) that specifically binds to an antigen, such as a tumor-specific antigen or tumor-associated antigen. In some embodiments, the antigen binding domain (eg, scFv) is specific for a particular antigen, for example, CD19. An example of a CAR is an anti-CD19 CAR, such as a CAR containing an anti-CD19 scFv set forth in SEQ ID NO: 482 or SEQ ID NO: 245. In some embodiments, the TIP protein is expressed in an engineered T cell receptor cell or in an engineered cell with a chimeric antigen receptor. In such embodiments, the engineered cell co-expresses TIP and a CAR or TCR. In some embodiments, the SIP protein is expressed in an engineered T cell receptor cell or in an engineered chimeric antigen receptor cell. In such embodiments, the engineered cell co-expresses SIP and a CAR or TCR.

Химерные антигенные рецепторы (CAR) представляют собой рекомбинантные рецепторы, которые включают антигенсвязывающий домен (эктодомен), трансмембранный домен и внутриклеточную сигнальную область (эндодомен), которая способна индуцировать или опосредовать сигнал активации для T-клетки после связывания антигена. В некоторых примерах CAR-экспрессирующие клетки сконструированы для экспрессии внеклеточного одноцепочечного вариабельного фрагмента (scFv) со специфичностью к конкретному опухолевому антигену, связанному с внутриклеточной сигнальной частью, содержащей активирующий домен и, в некоторых случаях, костимулирующий домен. Костимулирующий домен может быть получен, например, из CD28, OX-40, 4-1BB/CD137 или индуцибельного T-клеточного костимулятора (ICOS). Активирующий домен может быть получен, например, из CD3, такого как дзета CD3, эпсилон, дельта, гамма или тому подобное. В некоторых воплощениях изобретения CAR имеет два, три, четыре или более костимулирующих домена. CAR scFv может быть предназначен для направленного воздействия на антиген, экспрессируемый в клетке, связанной с заболеванием или состоянием, например, опухолевый антиген, такой как, например, CD19, который представляет собой трансмембранный белок, экспрессируемый клетками в линии B-клеток, включая все нормальные B-клетки и B-клеточные злокачественные новообразования, включая, без ограничения указанным, NHL, CLL и не-Т-клеточные ALL. Пример терапии и конструкций с CAR + T-клетками описан в Патентных публикациях США No. 2013/0287748, 2014/0227237, 2014/0099309 и 2014/0050708, и эти источники включены ссылкой во всей полноте.Chimeric antigen receptors (CARs) are recombinant receptors that include an antigen-binding domain (ectodomain), a transmembrane domain, and an intracellular signaling region (endodomain) that is capable of inducing or mediating an activation signal for a T cell upon antigen binding. In some examples, CAR-expressing cells are engineered to express an extracellular single chain variable fragment (scFv) with specificity for a particular tumor antigen associated with an intracellular signaling moiety containing an activating domain and, in some cases, a co-stimulatory domain. The costimulatory domain can be derived from, for example, CD28, OX-40, 4-1BB/CD137 or inducible T cell costimulator (ICOS). The activating domain can be derived, for example, from CD3 such as CD3 zeta, epsilon, delta, gamma or the like. In some embodiments of the invention, the CAR has two, three, four or more co-stimulatory domains. A CAR scFv may be designed to target an antigen expressed on a cell associated with a disease or condition, for example a tumor antigen such as, for example, CD19, which is a transmembrane protein expressed by cells in the B cell lineage, including all normal B-cells and B-cell malignancies, including, but not limited to, NHL, CLL and non-T-cell ALL. An example of CAR+ T cell therapies and constructs is described in US Patent Publication No. 2013/0287748, 2014/0227237, 2014/0099309 and 2014/0050708, and these sources are incorporated by reference in their entirety.

В некоторых аспектах антигенсвязывающий домен представляет собой антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, такой как одноцепочечный фрагмент (scFv). В некоторых воплощениях антиген экспрессируется в опухолевой или раковой. Примером антигена является CD19. Примером CAR является CAR против CD19, такой как CAR, содержащий scFv против CD19, представленный в SEQ ID NO: 245. В некоторых воплощениях CAR дополнительно включает спейсер, трансмембранный домен и внутриклеточный сигнальный домен или область, содержащую сигнальный домен ITAM, такой как сигнальный домен CD3дзета. В некоторых воплощениях CAR дополнительно включает костимулирующий сигнальный домен.In some aspects, the antigen binding domain is an antibody or an antigen binding fragment thereof, such as a single chain fragment (scFv). In some embodiments, the antigen is expressed in a tumor or cancer. An example of an antigen is CD19. An example of a CAR is an anti-CD19 CAR, such as a CAR containing an anti-CD19 scFv presented in SEQ ID NO: 245. In some embodiments, the CAR further includes a spacer, a transmembrane domain, and an intracellular signaling domain or a region containing an ITAM signaling domain, such as a signaling domain CD3zeta. In some embodiments, the CAR further includes a co-stimulatory signaling domain.

В некоторых воплощениях CAR дополнительно включает спейсер или шарнир, трансмембранный домен и внутриклеточный домен сигнализации (эндодомен), содержащий сигнальный домен ITAM, например, сигнальный домен CD3-дзета. В некоторых воплощениях CAR дополнительно включает костимулирующий сигнальный домен. Костимулирующий домен может быть получен, например, из CD28, OX-40, 4-1BB/CD137 или индуцибельного T-клеточного костимулятора (ICOS). В некоторых воплощениях изобретения CAR имеет два, три, четыре или более костимулирующих домена. CAR scFv может быть предназначен для направленного воздействия на антиген, экспрессируемый в клетке, связанной с заболеванием или состоянием, например, опухолевый антиген, такой как, например, CD19, который представляет собой трансмембранный белок, экспрессируемый клетками в линии B-клеток, включая все нормальные B-клетки и B-клеточные злокачественные новообразования, включая, без ограничения указанным, NHL, CLL и не-Т-клеточные ALL. Пример терапии и конструкций с CAR + T-клетками описан в Патентных публикациях США No. 2013/0287748, 2014/0227237, 2014/0099309 и 2014/0050708, и эти источники включены ссылкой во всей полноте. В некоторых воплощениях спейсер или шарнир присутствует между антигенсвязывающим доменом и трансмембранным доменом, например, между антигенсвязывающим доменом и плазматической мембраной, когда он экспрессируется в клетке. В некоторых воплощениях спейсер или шарнир получают из подкласса IgG (такого как IgG1 и IgG4, IgD или CD8 (см., например, Qin et al. (2017) J. Hematol. Oncol., 10:68). В некоторых воплощениях спейсер или шарнир получают из IgG1.In some embodiments, the CAR further includes a spacer or hinge, a transmembrane domain, and an intracellular signaling domain (endodomain) comprising an ITAM signaling domain, for example, a CD3 zeta signaling domain. In some embodiments, the CAR further includes a co-stimulatory signaling domain. The costimulatory domain can be derived from, for example, CD28, OX-40, 4-1BB/CD137 or inducible T cell costimulator (ICOS). In some embodiments of the invention, the CAR has two, three, four or more co-stimulatory domains. A CAR scFv may be designed to target an antigen expressed on a cell associated with a disease or condition, for example a tumor antigen such as, for example, CD19, which is a transmembrane protein expressed by cells in the B cell lineage, including all normal B-cells and B-cell malignancies, including, but not limited to, NHL, CLL and non-T-cell ALL. An example of CAR+ T cell therapies and constructs is described in US Patent Publication No. 2013/0287748, 2014/0227237, 2014/0099309 and 2014/0050708, and these sources are incorporated by reference in their entirety. In some embodiments, a spacer or hinge is present between the antigen binding domain and the transmembrane domain, for example, between the antigen binding domain and the plasma membrane when expressed in a cell. In some embodiments, the spacer or hinge is derived from a subclass of IgG (such as IgG1 and IgG4, IgD, or CD8 (see, e.g., Qin et al. (2017) J. Hematol. Oncol. 10:68). In some embodiments, the spacer or the hinge is derived from IgG1.

В некоторых воплощениях спейсер и трансмембранный домен являются шарниром и трансмембранным доменом, которые получены из CD8, например, как указано в SEQ ID NO: 246, 483 или 897 или аминокислотной последовательности, которая имеет по меньшей мере, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99% или более идентичности последовательности с SEQ ID NO: 246, 483 или 897. В некоторых воплощениях эндодомен включает сигнальный домен CD3-дзета. В некоторых воплощениях сигнальный домен CD3-дзета включает аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 243, или аминокислотную последовательность, которая имеет, по меньшей мере, 85, 86, 87, 88, 89,In some embodiments, the spacer and transmembrane domain are a hinge and transmembrane domain that are derived from CD8, for example, as set forth in SEQ ID NO: 246, 483, or 897, or an amino acid sequence that is at least 85, 86, 87, 88. 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99% or greater sequence identity to SEQ ID NO: 246, 483, or 897. In some embodiments, the endodomain includes a CD3 zeta signaling domain. In some embodiments, the CD3 zeta signaling domain comprises the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 243, or an amino acid sequence that is at least 85, 86, 87, 88, 89,

- 98 044346- 98 044346

90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98 или 99% идентичности с SEQ ID NO: 247 и сохраняет сигнальную активность для T-клеток. В некоторых воплощениях эндодомен CAR может дополнительно содержать костимулирующий сигнальный домен или область для дальнейшей модуляции иммуномодулирующих ответов T-клетки. В некоторых воплощениях костимулирующий сигнальный домен является или включает костимулирующую область или происходит из костимулирующей области CD28, ICOS, 41BB или OX40. В некоторых воплощениях костимулирующий сигнальный домен является производным от CD28 или 41BB и включает аминокислотную последовательность, указанную в любом из SEQ ID NO: 484-487, или аминокислотную последовательность, которая имеет, по меньшей мере, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98 или 99% идентичности с SEQ ID NO: 484-487 и сохраняет костимулирующую сигнальную активность T-клеток.90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98 or 99% identity to SEQ ID NO: 247 and retains T cell signaling activity. In some embodiments, the CAR endodomain may further comprise a co-stimulatory signaling domain or region to further modulate T cell immunomodulatory responses. In some embodiments, the co-stimulatory signaling domain is or includes a co-stimulatory region or is derived from a co-stimulatory region of CD28, ICOS, 41BB, or OX40. In some embodiments, the co-stimulatory signaling domain is derived from CD28 or 41BB and includes an amino acid sequence set forth in any of SEQ ID NO: 484-487, or an amino acid sequence that is at least 85, 86, 87, 88, 89. 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98 or 99% identity with SEQ ID NO: 484-487 and retains co-stimulatory T cell signaling activity.

В данном документе представлен полинуклеотид, кодирующий полипептид ICOSL и кодирующий один или несколько белков, таких как рекомбинантный антигенный рецептор (например, химерный антигенный рецептор (CAR) или сконструированный T-клеточный рецептор (TCR)), маркер и один или несколько саморасщепляющихся пептидов. В некоторых воплощениях конструкция, кодирующая CAR, дополнительно кодирует второй белок, такой как маркер, например, детектируемый белок, отделенный от CAR саморасщепляющейся пептидной последовательностью. В некоторых примерах нуклеиновая кислота, кодирующая вариантный полипептид ICOSL, отделена от одной или нескольких последовательностей, которые представляют собой нуклеиновую кислоту, кодирующую белок, где белок кодирует рекомбинантный антигенный рецептор (например, CAR или TCR), маркер, цитокин или хемокин. Любая из нуклеотидных последовательностей может находиться в векторе, таком как вирусный вектор. В некоторых примерах вирусный вектор представляет собой лентивирусный вектор или ретровирусный вектор.Provided herein is a polynucleotide encoding an ICOSL polypeptide and encoding one or more proteins, such as a recombinant antigen receptor (eg, chimeric antigen receptor (CAR) or engineered T-cell receptor (TCR)), a marker, and one or more self-cleaving peptides. In some embodiments, the construct encoding the CAR further encodes a second protein, such as a marker, for example, a detectable protein separated from the CAR by a self-cleaving peptide sequence. In some examples, the nucleic acid encoding the variant ICOSL polypeptide is separated from one or more sequences that are a nucleic acid encoding a protein, wherein the protein encodes a recombinant antigen receptor (eg, CAR or TCR), marker, cytokine, or chemokine. Any of the nucleotide sequences may be present in a vector, such as a viral vector. In some examples, the viral vector is a lentiviral vector or a retroviral vector.

В некоторых вариантах воплощения саморасщепляющаяся пептидная последовательность представляет собой саморасщепляющийся пептид F2A, T2A, E2A или P2A. Типичные последовательности саморасщепляющегося пептида T2A представлены в любой из SEQ ID NO: 250, 488, 860-862 или последовательности аминокислот, которая демонстрирует, по меньшей мере, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98 или 99% или более идентичности последовательностей с любой из SEQ ID NO: 250, 488, 860-862. В некоторых воплощениях T2A кодируется последовательностью нуклеотидов, представленной в SEQ ID NO: 249, или последовательностью, которая демонстрирует, по меньшей мере, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98 или 99% или более идентичности последовательности с любой из SEQ ID NO: 249. Примерная последовательность саморасщепляющегося пептида P2A представлена в SEQ ID NO: 863 или последовательности аминокислот, которая демонстрирует, по меньшей мере, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98 или 99% или более идентичности последовательности с SEQ ID NO: 863. В некоторых случаях нуклеотидная конструкция, которая кодирует более одного саморасщепляющегося пептида P2A (такого как P2A1 и P2A2), в которой каждая нуклеотидная последовательность P2A1 и P2A2 кодирует P2A, представленный в SEQ ID NO: 863, то нуклеотидные последовательности могут отличаться, чтобы избежать рекомбинации между последовательностями.In some embodiments, the self-cleaving peptide sequence is an F2A, T2A, E2A, or P2A self-cleaving peptide. Exemplary T2A self-cleaving peptide sequences are represented by any of SEQ ID NOs: 250, 488, 860-862 or an amino acid sequence that exhibits at least 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94 , 95, 96, 97, 98, or 99% or greater sequence identity to any of SEQ ID NOs: 250, 488, 860-862. In some embodiments, T2A is encoded by the nucleotide sequence set forth in SEQ ID NO: 249, or a sequence that exhibits at least 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96. 97, 98 or 99% or more sequence identity with any of SEQ ID NO: 249. An exemplary sequence of a P2A self-cleaving peptide is shown in SEQ ID NO: 863 or an amino acid sequence that exhibits at least 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, or 99% or more sequence identity to SEQ ID NO: 863. In some cases, a nucleotide construct that encodes more than one P2A self-cleaving peptide (such as P2A1 and P2A2) in which the nucleotide sequences of P2A1 and P2A2 each encode P2A shown in SEQ ID NO: 863, then the nucleotide sequences may differ to avoid recombination between the sequences.

В некоторых воплощениях маркер представляет собой детектируемый белок, такой как флуоресцентный белок, например зеленый флуоресцентный белок (GFP) или синий флуоресцентный белок (BFP). Примерные последовательности маркера на основе флуоресцентного белка приведены в SEQ ID NO: 489, 858, 859, 903 или последовательности аминокислот, которая демонстрирует, по меньшей мере, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98 или 99% или более идентичности последовательности с SEQ ID NO: 489, 858, 859, 903.In some embodiments, the marker is a detectable protein, such as a fluorescent protein, such as green fluorescent protein (GFP) or blue fluorescent protein (BFP). Exemplary fluorescent protein marker sequences are set forth in SEQ ID NO: 489, 858, 859, 903 or amino acid sequences that exhibit at least 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94 , 95, 96, 97, 98, or 99% or greater sequence identity to SEQ ID NO: 489, 858, 859, 903.

В некоторых воплощениях CAR является анти-CD19 CAR, который имеет аминокислотную последовательность, указанную в любой из SEQ ID NO: 479, 490, 491, 492, 898, 899, 901 или 902, или последовательность аминокислот, которая демонстрирует, по меньшей мере, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98 или 99% или более идентичности последовательностей с любой из SEQ ID NO: 479, 490, 491, 492, 898, 899, 901 или 902. В некоторых воплощениях CAR кодируется последовательностью нуклеотидов, представленной в SEQ ID NO: 248 или 900, или последовательностью аминокислот, которая демонстрирует, по меньшей мере, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98 или 99% или более идентичности последовательностей с любой из SEQ ID NO: 248 или 900.In some embodiments, the CAR is an anti-CD19 CAR that has an amino acid sequence set forth in any of SEQ ID NO: 479, 490, 491, 492, 898, 899, 901, or 902, or an amino acid sequence that exhibits at least 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, or 99% or more sequence identity with any of SEQ ID NO: 479, 490, 491, 492, 898 , 899, 901, or 902. In some embodiments, the CAR is encoded by a nucleotide sequence represented by SEQ ID NO: 248 or 900, or an amino acid sequence that exhibits at least 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, or 99% or more sequence identity to any of SEQ ID NO: 248 or 900.

В другом воплощении сконструированная T-клетка обладает TCR, включая рекомбинантный или сконструированный TCR. В некоторых воплощениях TCR может быть нативным TCR. Специалисты в данной области техники поймут, что в основном нативные рецепторы T-клеток млекопитающих содержат альфа- и бета-цепь (или гамма и дельта-цепь), участвующие в специфическом распознавании и связывании антигена. В некоторых воплощениях TCR представляет собой сконструированный TCR. В некоторых воплощениях TCR сконструированной T-клетки специфически связывается с ассоциированным с опухолью или опухолеспецифическим антигеном, представленным APC.In another embodiment, the engineered T cell has a TCR, including a recombinant or engineered TCR. In some embodiments, the TCR may be a native TCR. Those skilled in the art will appreciate that generally native mammalian T cell receptors contain an alpha and beta chain (or a gamma and delta chain) involved in specific antigen recognition and binding. In some embodiments, the TCR is an engineered TCR. In some embodiments, the TCR of the engineered T cell specifically binds to a tumor-associated or tumor-specific antigen presented by an APC.

В некоторых воплощениях иммуномодулирующие полипептиды, такие как трансмембранные иммуномодулирующие полипептиды или секретируемые иммуномодулирующие полипептиды, могут быть включены в сконструированные клетки, такие как сконструированные T-клетки или сконструированные APC, с помощью различных стратегий, таких как те, которые используются для рекомбинантных клетокхозяев. В данной области техники известно множество способов введения ДНК-конструкций в первичIn some embodiments, immunomodulatory polypeptides, such as transmembrane immunomodulatory polypeptides or secreted immunomodulatory polypeptides, can be incorporated into engineered cells, such as engineered T cells or engineered APCs, using various strategies such as those used for recombinant host cells. There are many methods known in the art for introducing DNA constructs into primary

- 99 044346 ные T-клетки. В некоторых воплощениях используют вирусную трансдукцию или плазмидную электропорацию. В типичных воплощениях нуклеотидная молекула, кодирующая иммуномодулирующий белок или экспрессирующий вектор, включают сигнальный пептид, который локализует экспрессируемые трансмембранные иммуномодулирующие белки в клеточной мембране или для секреции. В некоторых воплощениях нуклеиновая кислота, кодирующая трансмембранные иммуномодулирующие белки по изобретению, субклонируется в вирусный вектор, такой как ретровирусный вектор, который позволяет экспрессироваться в клетке-хозяине млекопитающего. Экспрессирующий вектор можно вводить в клетку-хозяин млекопитающего, и в условиях культивирования клеток-хозяев иммуномодулирующий белок экспрессируется на поверхности или секретируется.- 99 044346 new T cells. In some embodiments, viral transduction or plasmid electroporation is used. In typical embodiments, the nucleotide molecule encoding the immunomodulatory protein or expression vector includes a signal peptide that localizes the expressed transmembrane immunomodulatory proteins to the cell membrane or for secretion. In some embodiments, the nucleic acid encoding the transmembrane immunomodulatory proteins of the invention is subcloned into a viral vector, such as a retroviral vector, that allows expression in a mammalian host cell. The expression vector can be introduced into a mammalian host cell, and under culture conditions of the host cells, the immunomodulatory protein is surface expressed or secreted.

В типичном примере первичные T-клетки могут быть очищены ex vivo (CD4-клетки или CD8клетки или и те, и другие) и стимулироваться протоколом активации, состоящим из различных агонистов TCR/CD28, например, с помощью гранул, покрытых анти-CD3/анти-CD28. После 2 или 3-дневного процесса активации рекомбинантный экспрессирующий вектор, содержащий иммуномодулирующий полипептид, можно стабильно вводить в первичные T-клетки с помощью стандартных в данной области лентивирусных или ретровирусных протоколов трансдукции или стратегии плазмидной электропорации. Клетки могут отслеживаться по экспрессии иммуномодулирующего полипептида, например, с помощью проточной цитометрии с использованием антител против эпитопной метки или антител, которые перекрестно реагируют с нативной родительской молекулой и полипептидами, включающими вариантный ICOSL. T-клетки, которые экспрессируют иммуномодулирующий полипептид, могут быть обогащены путем сортировки с антителами против эпитопной метки или могут быть обогащены по высокой или низкой экспрессии в зависимости от применения.In a typical example, primary T cells can be purified ex vivo (CD4 cells or CD8 cells or both) and stimulated with an activation protocol consisting of various TCR/CD28 agonists, for example, using anti-CD3/anti-coated beads. -CD28. After a 2 or 3 day activation process, the recombinant expression vector containing the immunomodulatory polypeptide can be stably introduced into primary T cells using lentiviral or retroviral transduction protocols standard in the art or plasmid electroporation strategies. Cells can be monitored for expression of the immunomodulatory polypeptide, for example, by flow cytometry using antibodies against an epitope tag or antibodies that cross-react with the native parent molecule and polypeptides comprising the variant ICOSL. T cells that express an immunomodulatory polypeptide can be enriched by sorting with antibodies against an epitope tag or can be enriched for high or low expression depending on the application.

При экспрессии иммуномодулирующего полипептида сконструированные T-клетки могут быть проанализированы по соответствующей функции с помощью различных средств. Коэкспрессия сконструированных CAR или TCR может быть подтверждена для того, чтобы показать, что эта часть сконструированной T-клетки существенно не повлияла на экспрессию иммуномодулирующего белка. После подтверждения, для оценки функции сконструированных T-клеток можно использовать стандартные анализы цитотоксичности, пролиферации или выработки цитокинов in vitro (например, экспрессии IFNгамма). Типичными стандартными конечными точками являются процент лизиса опухолевой линии, пролиферация сконструированной T-клетки или экспрессия белка IFN-гамма в культуральных надосадочных жидкостях. Может быть выбрана сконструированная конструкция, которая приводит к статистически значимому увеличению лизиса опухолевой линии, увеличению пролиферации сконструированной T-клетки или увеличению экспрессии IFN-гамма по сравнению с контрольной конструкцией. Кроме того, несконструированные клетки, такие как нативные первичные или эндогенные T-клетки, также могут быть включены в один и тот же анализ in vitro для измерения способности иммуномодулирующей полипептидной конструкции, экспрессированной в сконструированных клетках, таких как сконструированные T-клетки, модулировать активность, в том числе, в некоторых случаях, модулировать активацию и генерацию эффекторной функции у нативных T-клеток-свидетелей. Повышенная экспрессия маркеров активации, таких как CD69, CD44 или CD62L, может контролироваться на эндогенных T-клетках, а увеличенные пролиферация и/или выработка цитокинов могут указывать на искомую активность TIP, экспрессированных на сконструированных T-клетках.Upon expression of an immunomodulatory polypeptide, the engineered T cells can be analyzed for their respective function by various means. Co-expression of the engineered CAR or TCR can be confirmed to show that that portion of the engineered T cell has not significantly affected the expression of the immunomodulatory protein. Once confirmed, standard in vitro cytotoxicity, proliferation, or cytokine production assays (eg, IFNγ expression) can be used to assess the function of the engineered T cells. Typical standard endpoints are percentage of tumor line lysis, engineered T cell proliferation, or IFN-gamma protein expression in culture supernatants. An engineered construct may be selected that results in a statistically significant increase in tumor line lysis, an increase in engineered T cell proliferation, or an increase in IFN-gamma expression compared to the control construct. In addition, unengineered cells, such as native primary or endogenous T cells, can also be included in the same in vitro assay to measure the ability of an immunomodulatory polypeptide construct expressed in engineered cells, such as engineered T cells, to modulate activity. including, in some cases, modulating the activation and generation of effector function in naïve bystander T cells. Increased expression of activation markers such as CD69, CD44 or CD62L may be monitored on endogenous T cells, and increased proliferation and/or cytokine production may indicate the desired activity of TIPs expressed on engineered T cells.

В некоторых воплощениях аналогичные анализы могут использоваться для сравнения функции сконструированных T-клеток, содержащих CAR или TCR отдельно, с теми, которые содержат CAR или TCR и конструкцию TIP. Как правило, эти анализы in vitro проводят путем рассевания вместе в культуре различных соотношений сконструированных T-клеток и опухолевой клеточной линии, содержащей когнатный CAR или TCR антиген. Стандартными конечными точками являются процент лизиса опухолевой линии, пролиферация сконструированных T-клеток, или продуцирование IFN-гамма в культуральных надосадочных жидкостях. Может быть выбран сконструированный иммуномодулирующий белок, который дает статистически значимое увеличение лизиса опухолевой линии, увеличение пролиферации сконструированной T-клетки или увеличение продуцирования IFN-гамма по сравнению с одной и той же конструкцией TCR или CAR отдельно.In some embodiments, similar assays can be used to compare the function of engineered T cells containing a CAR or TCR alone with those containing a CAR or TCR and a TIP construct. Typically, these in vitro assays are performed by seeding together in culture different ratios of engineered T cells and a tumor cell line containing a cognate CAR or TCR antigen. Standard endpoints include percentage of tumor line lysis, proliferation of engineered T cells, or IFN-γ production in culture supernatants. An engineered immunomodulatory protein may be selected that produces a statistically significant increase in tumor line lysis, increase in engineered T cell proliferation, or increase in IFN-gamma production compared to the same TCR or CAR construct alone.

Сконструированные человеческие T-клетки могут быть проанализированы у мышей с ослабленным иммунитетом, таких как линия NSG, которая утратила мышиные T-, NK- и B-клетки. Сконструированные человеческие T-клетки, в которых CAR или TCR связывают контрструктуру-мишень на ксенотрансплантате и коэкспрессируются с TIP с доменом IgSF с модифицированной аффинностью, могут быть адоптивно перенесены in vivo в разных количествах и соотношениях клеток по сравнению с ксенотрансплантатом. Например, приживление опухолевых линий CD19+ лейкоза, содержащих вектор люциферазы/GFP, можно контролировать с помощью биолюминесценции или ex vivo с помощью проточной цитометрии. В обычном воплощении ксенотрансплантат вводят в мышиную модель, а затем через несколько дней - сконструированные T-клетки. Сконструированные T-клетки, содержащие иммуномодулирующий белок, могут быть проанализированы на предмет увеличения выживаемости, клиренса опухоли или количества размноженных сконструированных T-клеток по сравнению с сконструированными T-клетками, содержащими только CAR или TCR. Как и в анализе in vitro, эндогенные, нативные (т.е. не- 100 044346 сконструированные) человеческие T-клетки могут быть ко-адоптивно перенесены для поиска успешного распространения эпитопа в этой популяции, что приводит к лучшей выживаемости или клиренсу опухоли.Engineered human T cells can be analyzed in immunocompromised mice, such as the NSG strain, which have lost mouse T, NK and B cells. Engineered human T cells in which a CAR or TCR binds a target counterstructure on a xenograft and is coexpressed with an affinity-modified IgSF domain TIP can be adoptively transferred in vivo in different numbers and ratios of cells compared to the xenograft. For example, engraftment of CD19+ leukemia tumor lines containing a luciferase/GFP vector can be monitored by bioluminescence or ex vivo by flow cytometry. In a typical embodiment, the xenograft is introduced into a mouse model, followed by engineered T cells a few days later. Engineered T cells containing an immunomodulatory protein can be analyzed for increased survival, tumor clearance, or the number of engineered T cells expanded compared to engineered T cells containing only a CAR or TCR. As in the in vitro assay, endogenous, native (ie, non-engineered) human T cells can be co-adoptively transferred to seek successful epitope spreading in this population, resulting in better survival or tumor clearance.

D. Инфекционные агенты, экспрессирующие вариантные полипептиды и иммуномодулирующие белки.D. Infectious agents expressing variant polypeptides and immunomodulatory proteins.

Также предлагаемое представляет собой инфекционные агенты, которые содержат нуклеиновые кислоты, кодирующие любой из вариантных полипептидов, таких как полипептиды ICOSL vIgD, в том числе секретируемые или трансмембранные иммуномодулирующие белки, описанные в настоящей заявке. В некоторых воплощениях такие инфекционные агенты могут доставлять нуклеиновые кислоты, кодирующие описанные в данном документе вариантные иммуномодулирующие полипептиды, такие как полипептиды ICOSL vIgD, в клетку-мишень у объекта, например иммунную клетку и/или антигенпрезентирующую клетку (APC) или опухолевую клетку в объекте. Также предусмотрены нуклеиновые кислоты, содержащиеся в таких инфекционных агентах, и/или нуклеиновые кислоты для получения или модификации таких инфекционных агентов, такие как векторы и/или плазмиды, и композиции, содержащие такие инфекционные агенты. В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL экспрессируется в инфекционном агенте (например, вирусном или бактериальном агенте), который при введении объекту способен инфицировать клетку in vivo, такую как иммунная клетка (например, T-клетка или антигенпрезентирующая клетка) или опухоль, для доставки или экспрессии вариантного полипептида в виде TIP или SIP в клетке.Also provided are infectious agents that contain nucleic acids encoding any of the variant polypeptides, such as ICOSL vIgD polypeptides, including secreted or transmembrane immunomodulatory proteins described in this application. In some embodiments, such infectious agents can deliver nucleic acids encoding variant immunomodulatory polypeptides described herein, such as ICOSL vIgD polypeptides, to a target cell in a subject, such as an immune cell and/or an antigen presenting cell (APC) or a tumor cell in the subject. Also provided are nucleic acids contained in such infectious agents and/or nucleic acids for producing or modifying such infectious agents, such as vectors and/or plasmids, and compositions containing such infectious agents. In some embodiments, the variant ICOSL polypeptide is expressed in an infectious agent (e.g., a viral or bacterial agent) that, when administered to a subject, is capable of infecting a cell in vivo, such as an immune cell (e.g., a T cell or antigen presenting cell) or a tumor, for delivery or expression variant polypeptide as TIP or SIP in the cell.

В некоторых воплощениях инфекционный агент представляет собой микроорганизм или микроб. В некоторых воплощениях инфекционный агент представляет собой вирус или бактерию. В некоторых воплощениях инфекционный агент представляет собой вирус. В некоторых воплощениях инфекционный агент представляет собой бактерию. В некоторых воплощениях такие инфекционные агенты могут доставлять нуклеотидные последовательности, кодирующие любой из вариантных полипептидов, таких как полипептиды ICOSL vIgD, включая описанные в данном документе секретируемые или трансмембранные иммуномодулирующие белки. Таким образом, в некоторых воплощениях клетка в объекте, которая инфицирована или контактирует с инфекционными агентами, может быть сделана экспрессирующей на поверхности клетки или секретирующей вариантные иммуномодулирующие полипептиды. В некоторых воплощениях инфекционный агент может также доставлять одно или несколько других терапевтических средств или нуклеиновых кислот, кодирующих другие терапевтические средства, в клетке и/или в среде внутри объекта. В некоторых воплощениях другие терапевтические средства, которые могут быть доставлены инфекционными агентами, включают цитокины или другие иммуномодулирующие молекулы.In some embodiments, the infectious agent is a microorganism or microbe. In some embodiments, the infectious agent is a virus or bacteria. In some embodiments, the infectious agent is a virus. In some embodiments, the infectious agent is a bacterium. In some embodiments, such infectious agents can deliver nucleotide sequences encoding any of the variant polypeptides, such as ICOSL vIgD polypeptides, including the secreted or transmembrane immunomodulatory proteins described herein. Thus, in some embodiments, a cell in a subject that is infected or exposed to infectious agents can be made to express or secrete variant immunomodulatory polypeptides on the cell surface. In some embodiments, the infectious agent may also deliver one or more other therapeutic agents or nucleic acids encoding other therapeutic agents to the cell and/or environment within the entity. In some embodiments, other therapeutic agents that can be delivered by infectious agents include cytokines or other immunomodulatory molecules.

В некоторых воплощениях инфекционный агент, например, вирус или бактерии, включает нуклеотидные последовательности, которые кодируют любые из вариантных полипептидов, таких как полипептиды ICOSL vIgD, в том числе секретируемых или трансмембранных иммуномодулирующих белков, описанных в данном документе, и в силу контакта и/или инфекции клетки у объекта, клетка экспрессирует вариантные полипептиды, такие как полипептиды ICOSL vIgD, включая секретируемые или трансмембранные иммуномодулирующие белки, кодируемые нуклеотидными последовательностями, содержащимися в инфекционном агенте. В некоторых воплощениях инфекционный агент может вводиться объекту. В некоторых воплощениях инфекционный агент может быть введен в клетки из объекта ex vivo.In some embodiments, the infectious agent, such as a virus or bacteria, includes nucleotide sequences that encode any of the variant polypeptides, such as ICOSL vIgD polypeptides, including secreted or transmembrane immunomodulatory proteins described herein, and by virtue of contact and/or infection of a cell in a subject, the cell expresses variant polypeptides, such as ICOSL vIgD polypeptides, including secreted or transmembrane immunomodulatory proteins encoded by nucleotide sequences contained in the infectious agent. In some embodiments, the infectious agent may be administered to a subject. In some embodiments, the infectious agent can be introduced into cells from an ex vivo site.

В некоторых воплощениях настоящего изобретения вариантные полипептиды, такие как полипептиды ICOSL vIgD, в том числе трансмембранные иммуномодулирующие белки, экспрессируемые в клетке, инфицированной инфекционным агентом, является трансмембранным белком и является экспрессируемым на поверхности клетки. В некоторых воплощениях вариантные полипептиды, такие как полипептиды ICOSL vIgD, включая секретируемые иммуномодулирующие белки, экспрессируемые клеткой, инфицированной инфекционным агентом, экспрессируются и секретируются из клетки. Трансмембранный иммуномодулирующий белок или секретируемый иммуномодулирующий белок может быть любым описанным в данном документе.In some embodiments of the present invention, variant polypeptides, such as ICOSL vIgD polypeptides, including transmembrane immunomodulatory proteins expressed in a cell infected with an infectious agent, is a transmembrane protein and is expressed on the surface of the cell. In some embodiments, variant polypeptides, such as ICOSL vIgD polypeptides, including secreted immunomodulatory proteins expressed by a cell infected with an infectious agent are expressed and secreted from the cell. The transmembrane immunomodulatory protein or secreted immunomodulatory protein may be any one described herein.

В некоторых воплощениях настоящего изобретения клетки в объекте, которые нацелены на инфекционный агент включает опухолевую клетку, иммунную клетку и/или антигенпрезентирующую клетку (APC). В некоторых воплощениях инфекционный агент нацелен на клетку в микроокружении опухоли (TME). В некоторых воплощениях инфекционный агент доставляет нуклеиновые кислоты, кодирующие вариантные полипептиды, такие как полипептиды ICOSL vIgD, включая секретируемые или трансмембранные иммуномодулирующие белки, в соответствующую клетку (например, APC, такую как клетка, которая презентирует комплекс пептид/MHC на своей клеточной поверхности, такой как дендритная клетка) или ткань (например, лимфоидная ткань), которая модулирует иммунный ответи/или специфический клеточно-опосредованный иммунный ответ, например, CD4 и/или CD8 T-клеточный ответ, где CD8 T-клеточный ответ может включать цитотоксический T-клеточный ответ (CTL). В некоторых воплощениях инфекционный агент нацелен на APC, такую как дендритная клетка (DC). В некоторых воплощениях нуклеотидная молекула, доставленная описанными в данном документе инфекционными агентами, включает соответствующие нуклеотидные последовательности, необходимые для экспрессии функционально связанных последовательностей, кодирующих вариантные иммуномодулирующие полипептиды, в конкретной клетке-мишени, например регуляторные элементы, такие как промоторы.In some embodiments of the present invention, the cells in the subject that are targeted by the infectious agent include a tumor cell, an immune cell, and/or an antigen presenting cell (APC). In some embodiments, the infectious agent targets a cell in the tumor microenvironment (TME). In some embodiments, the infectious agent delivers nucleic acids encoding variant polypeptides, such as ICOSL vIgD polypeptides, including secreted or transmembrane immunomodulatory proteins, into an appropriate cell (e.g., an APC, such as a cell that presents a peptide/MHC complex on its cell surface, such as a dendritic cell) or tissue (eg, lymphoid tissue) that modulates an immune response/or a specific cell-mediated immune response, for example, a CD4 and/or CD8 T cell response, where the CD8 T cell response may include a cytotoxic T cell response response (CTL). In some embodiments, the infectious agent targets an APC, such as a dendritic cell (DC). In some embodiments, the nucleotide molecule delivered by the infectious agents described herein includes the appropriate nucleotide sequences necessary for the expression of operably linked sequences encoding variant immunomodulatory polypeptides in a particular target cell, for example, regulatory elements such as promoters.

- 101 044346- 101 044346

В некоторых воплощениях, инфекционный агент, который включает нуклеотидные последовательности, кодирующие иммуномодулирующие полипептиды может также содержать нуклеотидные последовательности, которые кодируют один или несколько дополнительных генных продуктов, например, цитокин, ферменты, конвертирующие пролекарства, цитотоксины и/или детектируемые генные продукты. Например, в некоторых воплощениях инфекционный агент представляет собой онколитический вирус, и вирус может включать нуклеотидные последовательности, кодирующие дополнительные терапевтические генные продукты (см., например, Kirn et al., (2009) Nat Rev Cancer 9: 64-71; Garcia -Aragoncillo et al., (2010) Curr Opin Mol Ther 12: 403-411, см. Пат. США No. 7,588,767, 7,588,771, 7,662,398 и 7,754,221 и Пат. США публ. США No. 2007/0202572, 2007/0212727, 2010/0062016, 2009/0098529, 2009/0053244, 2009/0155287, 2009/0117034, 2010/0233078, 2009/0162288, 2010/0196325, 2009/0136917 и 2011/0064650. В некоторых воплощениях дополнительный генный продукт может быть продуктом терапевтического гена, который может привести к гибели клетки-мишени (например, опухолевой клетки) или генными продуктами, которые могут усиливать или стимулировать или регулировать иммунный ответ (например, цитокином). Примеры генных продуктов также включают противоопухолевый агент, антиметастатический агент, антиангиогенный агент, иммуномодулирующую молекулу, ингибитор иммунного чекпоинта, антитело, цитокин, фактор роста, антиген, продукт цитотоксического гена, продукт апоптотического гена, продукт антиапоптотического гена, ген деградации клеточной матрицы, гены для регенерации тканей и перепрограммирования соматических клеток человека в плюрипотентность и другие гены, описанные в данном документе или известные специалисту в данной области. В некоторых воплощениях дополнительный генный продукт представляет собой гранулоцитарно-макрофагальный колониестимулирующий фактор (GM-CSF).In some embodiments, an infectious agent that includes nucleotide sequences encoding immunomodulatory polypeptides may also contain nucleotide sequences that encode one or more additional gene products, such as cytokines, prodrug converting enzymes, cytotoxins, and/or detectable gene products. For example, in some embodiments, the infectious agent is an oncolytic virus, and the virus may include nucleotide sequences encoding additional therapeutic gene products (see, e.g., Kirn et al., (2009) Nat Rev Cancer 9: 64-71; Garcia - Aragoncillo et al., (2010) Curr Opin Mol Ther 12: 403-411, see US Pat. Nos. 7,588,767, 7,588,771, 7,662,398 and 7,754,221 and US Pat. Pub. US No. 2007/0202572, 2007/0212727, 201 0/ 0062016, 2009/0098529, 2009/0053244, 2009/0155287, 2009/0117034, 2010/0233078, 2009/0162288, 2010/0196325, 2009/0136917 and 2011/0064650 In some embodiments, the additional gene product may be a therapeutic gene product, which can lead to the death of a target cell (for example, a tumor cell) or gene products that can enhance or stimulate or regulate the immune response (for example, a cytokine).Examples of gene products also include an antitumor agent, antimetastatic agent, an antiangiogenic agent, an immunomodulatory molecule, immune checkpoint inhibitor, antibody, cytokine, growth factor, antigen, cytotoxic gene product, apoptotic gene product, anti-apoptotic gene product, cell matrix degradation gene, genes for tissue regeneration and reprogramming human somatic cells to pluripotency and other genes described herein or known to one skilled in the art. In some embodiments, the additional gene product is granulocyte-macrophage colony-stimulating factor (GM-CSF).

1. Вирусы.1. Viruses.

В некоторых воплощениях инфекционный агент представляет собой вирус. В некоторых воплощениях инфекционный агент представляет собой онколитический вирус или вирус, который нацелен на конкретные клетки, например иммунные клетки. В некоторых воплощениях инфекционный агент нацелен на опухолевую клетку и/или раковую клетку у объекта. В некоторых воплощениях инфекционный агент нацелен на иммунную клетку или антигенпрезентирующую клетку (APC).In some embodiments, the infectious agent is a virus. In some embodiments, the infectious agent is an oncolytic virus or a virus that targets specific cells, such as immune cells. In some embodiments, the infectious agent targets a tumor cell and/or a cancer cell in a subject. In some embodiments, the infectious agent targets an immune cell or antigen presenting cell (APC).

В некоторых воплощениях инфекционный агент представляет собой онколитический вирус. Онколитические вирусы - это вирусы, которые накапливаются в опухолевых клетках и реплицируются в опухолевых клетках. В силу репликации в опухолевых клетках и необязательной доставки нуклеиновых кислот, кодирующих вариантные полипептиды ICOSL или иммуномодулирующие полипептиды, описанные в данном документе, опухолевые клетки лизируются, и опухоль сжимается и может быть устранена. Онколитические вирусы также могут иметь широкий диапазон хозяев и типов клеток. Например, онколитические вирусы могут накапливаться в иммунопривилегированных клетках или иммунопривилегированных тканях, включая опухоли и/или метастазы, а также включая раневые ткани и клетки, что позволяет доставку и экспрессию нуклеиновых кислот, кодирующих вариантные иммуномодулирующие полипептиды, описанные в данном документе, в широком диапазоне типов клеток. Онколитические вирусы могут также реплицироваться специфическим для опухолевых клеток образом, что приводит к лизису опухолевых клеток и эффективной регрессии опухоли.In some embodiments, the infectious agent is an oncolytic virus. Oncolytic viruses are viruses that accumulate in tumor cells and replicate in tumor cells. By virtue of replication in tumor cells and optional delivery of nucleic acids encoding variant ICOSL polypeptides or immunomodulatory polypeptides described herein, the tumor cells are lysed and the tumor shrinks and can be eliminated. Oncolytic viruses can also have a wide range of hosts and cell types. For example, oncolytic viruses can accumulate in immunoprivileged cells or immunoprivileged tissues, including tumors and/or metastases, and also including wound tissues and cells, allowing the delivery and expression of nucleic acids encoding variant immunomodulatory polypeptides described herein in a wide range of types cells. Oncolytic viruses can also replicate in a tumor cell-specific manner, resulting in tumor cell lysis and efficient tumor regression.

Примерные онколитические вирусы включают аденовирусы, адено-ассоциированные вирусы, вирусы герпеса, вирус простого герпеса, вирус везикулярного стоматита, реовирус, вирус болезни Ньюкасла, парвовирус, вирус кори, вирус везикулярного стоматита (VSV), вирус Коксаки и вирус осповакцины. В некоторых воплощениях онколитические вирусы могут специфически колонизировать солидные опухоли, не заражая другие органы, и могут быть использованы в качестве инфекционного агента для доставки нуклеиновых кислот, кодирующих вариантные иммуномодулирующие полипептиды, описанные в данном документе, в такие солидные опухоли.Exemplary oncolytic viruses include adenoviruses, adeno-associated viruses, herpes viruses, herpes simplex virus, vesicular stomatitis virus, reovirus, Newcastle disease virus, parvovirus, measles virus, vesicular stomatitis virus (VSV), coxsackie virus, and vaccinia virus. In some embodiments, oncolytic viruses can specifically colonize solid tumors without infecting other organs, and can be used as an infectious agent to deliver nucleic acids encoding the variant immunomodulatory polypeptides described herein to such solid tumors.

Онколитической вирусы для применения в доставке нуклеиновых кислот, кодирующие вариантные полипептиды ICOSL или иммуномодулирующие полипептиды, описанные в данном документе, могут быть любыми из тех, которые известны специалисту в данной области и включают, например, вирус везикулярного стоматита, см., например, патенты США No. 7,731,974, 7,153,510, 6,653,103 и Пат. США публ. No. 2010/0178684, 2010/0172877, 2010/0113567, 2007/0098743, 20050260601, 20050220818 и пат. ЕП No. 1385466, 1606411 и 1520175; вирус простого герпеса, см., например, патенты США No. 7 897 146, 7 731 952, 7 550 296, 7 537 924, 6 723 316, 6 428 968 и патенты США публ. Nos., 2014/0154216, 2011/0177032, 2011/0158948, 2010/0092515, 2009/0274728, 2009/0285860, 2009/0215147, 2009/0010889, 2007/0110720, 2006/0039894, 2004/0009604, 2004/00066094 Международная пат. публ. № WO 2007/052029, WO 1999/038955; ретровирусы, см., например, патенты США No. 6 689 871, 6 635 472, 5 851 529, 5 716 826, 5 716 613 и патент США публ. № 20110212530; вирусы осповакцины, см., например, 2016/0339066, и аденоассоциированные вирусы, см., например, патенты США No. 8 007 780, 7 968 340, 7 943 374, 7 906 111, 7 927 585, 7 811 814, 7 662 627, 7 241 447, 7 238 526, 7 172 893, 7 033 826, 7 001 765, 6 897 045 и 6 632 670.Oncolytic viruses for use in nucleic acid delivery encoding variant ICOSL polypeptides or immunomodulatory polypeptides described herein can be any of those known to one of ordinary skill in the art and include, for example, vesicular stomatitis virus, see, for example, US patents No. 7,731,974, 7,153,510, 6,653,103 and Pat. USA publ. No. 2010/0178684, 2010/0172877, 2010/0113567, 2007/0098743, 20050260601, 20050220818 and Pat. EP No. 1385466, 1606411 and 1520175; herpes simplex virus, see, for example, US patent no. 7,897,146, 7,731,952, 7,550,296, 7,537,924, 6,723,316, 6,428,968 and US patents publ. Nos., 2014/0154216, 2011/0177032, 2011/0158948, 2010/0092515, 2009/0274728, 2009/0285860, 2009/0215147, 2009/0010889, 2007/ 0110720, 2006/0039894, 2004/0009604, 2004/00066094 International Pat. publ. No. WO 2007/052029, WO 1999/038955; retroviruses, see, for example, US patent no. 6,689,871, 6,635,472, 5,851,529, 5,716,826, 5,716,613 and US Patent Pub. No. 20110212530; vaccinia viruses, see, for example, 2016/0339066, and adeno-associated viruses, see, for example, US patent no. 8 007 780, 7 968 340, 7 943 374, 7 906 111, 7 927 585, 7 811 814, 7 662 627, 7 241 447, 7 238 526, 7 172 893, 7 033 826, 7 001 765, 6 897 045 and 6 632 670.

Онколитические вирусы также включают вирусы, которые были генетически изменены для ослабления их вирулентности, для улучшения их профиля безопасности, повышения их специфичности к опуOncolytic viruses also include viruses that have been genetically modified to reduce their virulence, improve their safety profile, or increase their specificity for cancer.

- 102 044346 холи, а также были оснащены дополнительными генами, например цитотоксинами, цитокинами, ферментами, конвертирующими пролекарства, для улучшения общей эффективности вирусов (см., например, Kirn et al., (2009) Nat Rev Cancer 9: 64-71; Garcia-Aragoncillo et al., (2010) Curr Opin Mol Ther 12: 403411, см. Пат. США No. 7,588,767, 7,588,771, 7,662,398 и 7,754,221 и Пат. США публ. США No. 2007/0202572, 2007/0212727, 2010/0062016, 2009/0098529, 2009/0053244, 2009/0155287, 2009/0117034, 2010/0233078, 2009/0162288, 2010/0196325, 2009/0136917 и 2011/0064650). В некоторых воплощениях онколитические вирусы могут быть теми, которые были модифицированы так, чтобы они выборочно реплицировались в раковых клетках и, таким образом, являлись онколитическими. Например, онколитический вирус представляет собой аденовирус, который был спроектирован так, чтобы иметь модифицированный тропизм для лечения опухолей, а также в качестве векторов для генной терапии. Примерами таких вирусов являются ONYX-015, H101 и Ad5ACR (Hallden and Portella (2012) Expert Opin Ther Targets, 16: 945-58) и TNFerade (McLoughlin et al. (2005) Ann. Surg. Oncol, 12:825-30) или условно-репликативный аденовирус Oncorine®.- 102 044346 holi, and were also equipped with additional genes, such as cytotoxins, cytokines, prodrug converting enzymes, to improve the overall effectiveness of the viruses (see, for example, Kirn et al., (2009) Nat Rev Cancer 9: 64-71; Garcia-Aragoncillo et al., (2010) Curr Opin Mol Ther 12: 403411, see US Pat. No. 7,588,767, 7,588,771, 7,662,398 and 7,754,221 and US Pat. Pub. US No. 2007/0202572, 2007/0212727 , 2010 /0062016, 2009/0098529, 2009/0053244, 2009/0155287, 2009/0117034, 2010/0233078, 2009/0162288, 2010/0196325, 2009/0136917 and 2011/0064650). In some embodiments, oncolytic viruses can be those that have been modified so that they selectively replicate in cancer cells and are thus oncolytic. For example, an oncolytic virus is an adenovirus that has been engineered to have modified tropism for the treatment of tumors and also as vectors for gene therapy. Examples of such viruses are ONYX-015, H101 and Ad5ACR (Hallden and Portella (2012) Expert Opin Ther Targets, 16: 945-58) and TNFerade (McLoughlin et al. (2005) Ann. Surg. Oncol, 12:825-30 ) or conditionally replicative adenovirus Oncorine®.

В некоторых воплощениях инфекционный агент представляет собой модифицированный вирус простого герпеса. В некоторых воплощениях инфекционный агент представляет собой модифицированную версию Talimogene laherparepvec (также известную как T-Vec, Imlygic или OncoVex GM-CSF), которая модифицирована, чтобы включать нуклеиновые кислоты, кодирующие любой из вариантных полипептидов ICOSL или иммуномодулирующих полипептидов, описанных в данном документе. В некоторых воплощениях инфекционный агент представляет собой модифицированный вирус простого герпеса, который описан, например, в WO 2007/052029, WO 1999/038955, US 2004/0063094, US 2014/0154216 или их вариантах.In some embodiments, the infectious agent is a modified herpes simplex virus. In some embodiments, the infectious agent is a modified version of Talimogene laherparepvec (also known as T-Vec, Imlygic or OncoVex GM-CSF) that is modified to include nucleic acids encoding any of the variant ICOSL polypeptides or immunomodulatory polypeptides described herein. In some embodiments, the infectious agent is a modified herpes simplex virus, which is described, for example, in WO 2007/052029, WO 1999/038955, US 2004/0063094, US 2014/0154216 or variations thereof.

В некоторых воплощениях инфекционный агент представляет собой вирус, который нацелен на конкретный тип клеток у объекта, которому вводят вирус, например, вирус, который нацелен на иммунные клетки или антигенпрезентирующие клетки (APC). Дендритные клетки (DC) являются важными APC для инициирования и контроля иммунных реакций. DC могут захватывать и обрабатывать антигены, мигрировать с периферии в лимфоидный орган и представлять антигены в покоящиеся T-клетки в манере, ограниченной по основному комплексу гистосовместимости (MHC). В некоторых воплощениях инфекционный агент представляет собой вирус, который специфически может нацеливать DC для доставки нуклеиновых кислот, кодирующих вариантный полипептид ICOSL или иммуномодулирующие полипептиды для экспрессии в DC. В некоторых воплощениях вирус представляет собой лентивирус или его вариант или производное, такой как лентивирусный вектор, дефицитный по интеграции. В некоторых воплощениях вирус представляет собой лентивирус, который псевдотипирован для эффективного связывания и продуктивного заражения клеток, экспрессирующих клеточный маркер, специфичный для дендритных клеток не-интегрин, захыватывающий молекулу межклеточной адгезии-3 (DC-SIGN), таких как DC. В некоторых воплощениях вирус представляет собой лентивирус, псевдотипированный гликопротеином E2 вируса Синдбис или его модифицированной формой, такой как описанная в публикации WO 2013/149167. В некоторых воплощениях вирус допускает доставку и экспрессию представляющей интерес последовательности (например, нуклеиновой кислоты, кодирующей любой из вариантных полипептидов ICOSL или иммуномодулирующих полипептидов, описанных в данном документе) в DC. В некоторых воплощениях вирус включает последовательности, которые описаны в WO 2008/011636, US 2011/0064763, Tareen et al. (2014) Mol. Ther., 22:575-587, или их варианты. Образцом, обладающим тропизмом к дедритным клеткам векторной платформы, является ZVex™.In some embodiments, the infectious agent is a virus that targets a specific cell type in the subject to which the virus is administered, for example, a virus that targets immune cells or antigen presenting cells (APCs). Dendritic cells (DCs) are important APCs for initiating and controlling immune responses. DCs can take up and process antigens, migrate from the periphery to the lymphoid organ, and present antigens to resting T cells in a major histocompatibility complex (MHC)-restricted manner. In some embodiments, the infectious agent is a virus that can specifically target DCs for delivery of nucleic acids encoding variant ICOSL polypeptide or immunomodulatory polypeptides for expression in DCs. In some embodiments, the virus is a lentivirus or a variant or derivative thereof, such as an integration-deficient lentiviral vector. In some embodiments, the virus is a lentivirus that is pseudotyped to efficiently bind and productively infect cells expressing the cellular marker dendritic cell-specific non-integrin intercellular adhesion molecule-3 (DC-SIGN) molecule, such as DC. In some embodiments, the virus is a lentivirus pseudotyped with Sindbis virus E2 glycoprotein or a modified form thereof, such as described in WO 2013/149167. In some embodiments, the virus allows delivery and expression of a sequence of interest (eg, a nucleic acid encoding any of the variant ICOSL polypeptides or immunomodulatory polypeptides described herein) into DCs. In some embodiments, the virus includes sequences that are described in WO 2008/011636, US 2011/0064763, Tareen et al. (2014) Mol. Ther., 22:575-587, or variations thereof. A sample with tropism for dendritic cells of the vector platform is ZVex™.

1. Бактерии.1. Bacteria.

В некоторых воплощениях инфекционный агент представляет собой бактерию. Например, в некоторых воплощениях бактерии могут доставлять нуклеиновые кислоты, кодирующие любой из вариантных иммуномодулирующих полипептидов, описанных в данном документе, например, вариантный полипептид ICOSL или иммуномодулирующий полипептид, в клетку-мишень у объекта, такую как опухолевая клетка, иммунная клетка, антигенпрезентирующая клетка и/или фагоцитарная клетка. В некоторых воплощениях бактерия может быть предпочтительно нацелена на конкретную среду внутри объекта, такую как микроокружение опухоли (TME), для экспрессии и/или секреции вариантных иммуномодулирующих полипептидов и/или для поражения определенных клеток в среде для экспрессии вариантных иммуномодулирующих полипептидов.In some embodiments, the infectious agent is a bacterium. For example, in some embodiments, bacteria can deliver nucleic acids encoding any of the variant immunomodulatory polypeptides described herein, e.g., an ICOSL variant polypeptide or an immunomodulatory polypeptide, to a target cell in a subject, such as a tumor cell, an immune cell, an antigen presenting cell, and /or phagocytic cell. In some embodiments, the bacterium may be preferentially targeted to a specific environment within an entity, such as a tumor microenvironment (TME), to express and/or secrete variant immunomodulatory polypeptides and/or to target specific cells in the variant immunomodulatory polypeptide expression environment.

В некоторых воплощениях эта бактерия доставляет нуклеиновые кислоты в клетки с помощью бактериального-опосредованного переноса плазмидной ДНК в клетки млекопитающих (также называемый как бактофекцией). Например, в некоторых воплощениях доставка генетического материала достигается путем ввода всей бактерии в клетки-мишени. В некоторых воплощениях спонтанный или индуцированный бактериальный лизис может привести к высвобождению плазмиды для последующей экспрессии в эукариотических клетках. В некоторых воплощениях бактерия может доставлять нуклеиновые кислоты в нефагоцитирующие клетки млекопитающих (например, опухолевые клетки) и/или в фагоцитирующие клетки, например, определенные иммунные клетки и/или APC. В некоторых воплощениях нуклеиновые кислоты, доставленные бактерией, могут быть перенесены в ядро клетки объекта для экспрессии. В неIn some embodiments, the bacterium delivers nucleic acids into cells via bacterial-mediated transfer of plasmid DNA into mammalian cells (also referred to as bactofection). For example, in some embodiments, delivery of genetic material is achieved by introducing the entire bacterium into target cells. In some embodiments, spontaneous or induced bacterial lysis may result in the release of the plasmid for subsequent expression in eukaryotic cells. In some embodiments, the bacterium can deliver nucleic acids to non-phagocytic mammalian cells (eg, tumor cells) and/or phagocytic cells, such as certain immune cells and/or APCs. In some embodiments, nucleic acids delivered by the bacterium can be transferred to the nucleus of a cell of the subject for expression. In no

- 103 044346 которых воплощениях нуклеиновые кислоты также включают соответствующие нуклеотидные последовательности, необходимые для экспрессии функционально связанных последовательностей, кодирующих вариантные иммуномодулирующие полипептиды в конкретной клетке-хозяине, например регуляторные элементы, такие как промоторы или энхансеры. В некоторых воплощениях инфекционный агент, который представляет собой бактерию, может доставлять нуклеиновые кислоты, кодирующие иммуномодулирующие белки, в форме РНК, такой как предварительно обработанная трансляционно-компетентная РНК, доставляемая в цитоплазму клетки-мишени для трансляции машинерией клетки-мишени.- 103 044346 in which embodiments the nucleic acids also include the corresponding nucleotide sequences necessary for the expression of operably linked sequences encoding variant immunomodulatory polypeptides in a particular host cell, for example regulatory elements such as promoters or enhancers. In some embodiments, the infectious agent, which is a bacterium, can deliver nucleic acids encoding immunomodulatory proteins in the form of RNA, such as pre-processed translation competent RNA, delivered into the cytoplasm of the target cell for translation by the target cell machinery.

В некоторых воплощениях эта бактерия способна к репликации и лизису клеток-мишеней, например, опухолевых клеток. В некоторых воплощениях бактерия может содержать и/или высвобождать нуклеотидные последовательности и/или продукты гена в цитоплазму клеток-мишеней, тем самым убивая клетку-мишень, например опухолевую клетку. В некоторых воплощениях инфекционный агент представляет собой бактерию, которая может специфически реплицироваться в конкретной среде у объекта, например, в микроокружении опухоли (TME). Например, в некоторых воплощениях бактерии могут реплицироваться специфически в анаэробных или гипоксических микросредах. В некоторых воплощениях условия или факторы, присутствующие в конкретных средах, например, аспартат, серин, цитрат, рибоза или галактоза, продуцируемые клетками в TME, могут действовать как хемоаттрактанты для привлечения бактерии к среде. В некоторых воплощениях бактерия может экспрессировать и/или секретировать иммуномодулирующие белки, описанные в данном документе в окружающей среде, например TME.In some embodiments, the bacterium is capable of replicating and killing target cells, such as tumor cells. In some embodiments, the bacterium may contain and/or release nucleotide sequences and/or gene products into the cytoplasm of target cells, thereby killing the target cell, such as a tumor cell. In some embodiments, the infectious agent is a bacterium that can specifically replicate in a particular environment of the subject, such as a tumor microenvironment (TME). For example, in some embodiments, bacteria can replicate specifically in anaerobic or hypoxic microenvironments. In some embodiments, conditions or factors present in particular media, such as aspartate, serine, citrate, ribose or galactose, produced by cells in the TME, can act as chemoattractants to attract the bacterium to the media. In some embodiments, the bacterium may express and/or secrete the immunomodulatory proteins described herein in the environment, such as the TME.

В некоторых воплощениях инфекционный агент является бактерией, которая принадлежит к Listeria sp., a Bifidobacterium sp., an Escherichia sp., a Clostridium sp., a Salmonella sp., a Shigella sp., a Vibrio sp. или Yersinia sp. В некоторых воплощениях бактерии выбраны из одной или нескольких из числа Listeria monocytogenes, Salmonella typhimurium, Salmonella choleraesuis, Escherichia coli, Vibrio cholera, Clostridium perfringens, Clostridium butyricum, Clostridium novyi, Clostridium acetobutylicum, Bifidobacterium infantis, Bifidobacterium longum и Bifidobacterium adolescentis. В некоторых воплощениях бактерия представляет собой сконструированную бактерию. В некоторых воплощениях бактерия представляет собой сконструированную бактерию, такую как бактерии, описанные, например, в Seow and Wood (2009), Molecular Therapy 17 (5): 767-777; Baban et al. (2010) Bioengineered Bugs 1:6, 385-394; Patyar et al. (2010) J Biomed Sci 17:21; Tangney et al. (2010) Bioengineered Bugs 1:4, 284-287; van Pijkeren et al. (2010) Hum Gene Ther. 21 (4): 405-416; WO 2012/149364; WO 2014/198002; US 9103831; US 9453227; US 2014/0186401; US 2004/0146488; US 2011/0293705; US 2015/0359909 и EP 3020816. Бактерия может быть модифицирована для доставки нуклеотидных последовательностей, кодирующих любой из вариантных иммуномодулирующих полипептидов, конъюгатов и/или гибридов, предлагаемых в данном документе, и/или для экспрессии таких вариантных иммуномодулирующих полипептидов в объекте.In some embodiments, the infectious agent is a bacterium that belongs to Listeria sp., a Bifidobacterium sp., an Escherichia sp., a Clostridium sp., a Salmonella sp., a Shigella sp., a Vibrio sp. or Yersinia sp. In some embodiments, the bacteria are selected from one or more of Listeria monocytogenes, Salmonella typhimurium, Salmonella choleraesuis, Escherichia coli, Vibrio cholera, Clostridium perfringens, Clostridium butyricum, Clostridium novyi, Clostridium acetobutylicum, Bifidobacterium infantis, Bifidobacterium longum, and Bifidobacterium adolescentis. In some embodiments, the bacterium is an engineered bacterium. In some embodiments, the bacterium is an engineered bacterium, such as those described, for example, in Seow and Wood (2009), Molecular Therapy 17 (5): 767-777; Baban et al. (2010) Bioengineered Bugs 1:6, 385-394; Patyar et al. (2010) J Biomed Sci 17:21; Tangney et al. (2010) Bioengineered Bugs 1:4, 284-287; van Pijkeren et al. (2010) Hum Gene Ther. 21 (4): 405-416; WO 2012/149364; WO 2014/198002; US 9103831; US 9453227; US 2014/0186401; US 2004/0146488; US 2011/0293705; US 2015/0359909 and EP 3020816. The bacterium can be modified to deliver nucleotide sequences encoding any of the variant immunomodulatory polypeptides, conjugates and/or hybrids provided herein and/or to express such variant immunomodulatory polypeptides in the subject.

IV. Нуклеиновые кислоты, векторы и способы получения полипептидов или клетокIV. Nucleic acids, vectors and methods for producing polypeptides or cells

Предлагаемое в данном документе представляет собой выделенные или рекомбинантные нуклеиновые кислоты, совместно именуемые как нуклеиновые кислоты, которые кодируют любой из различных предусмотренных воплощениями вариантных полипептидов ICOSL или иммуномодулирующих полипептидов, предлагаемых в данном документе. В некоторых воплощениях нуклеиновые кислоты, представленные в данном документе, включая все описанные ниже, пригодны для рекомбинантного продуцирования (например, экспрессии) вариантных полипептидов ICOSL или иммуномодулирующих полипептидов, предлагаемых в данном документе. В некоторых воплощениях нуклеиновые кислоты, представленные в данном документе, включая все описанные ниже, полезны для экспрессии вариантных полипептидов ICOSL или иммуномодулирующих полипептидов, предлагаемых в данном документе в клетках, например, в сконструированных клетках, например, иммунных клетках или клетках инфекционного агента. Нуклеиновые кислоты, представленные в данном документе, могут быть в форме РНК или в форме ДНК и включать мРНК, кРНК, рекомбинантную или синтетическую РНК и ДНК и кДНК. Нуклеиновые кислоты по изобретению представляют собой, как правило, молекулы ДНК и обычно двухцепочечные молекулы ДНК. Тем не менее также предлагаются одноцепочечная ДНК, одноцепочечная РНК, двухцепочечная РНК и гибридные ДНК/РНК нуклеиновые кислоты или их комбинации, включающие любую из нуклеотидных последовательностей по изобретению.Provided herein are isolated or recombinant nucleic acids, collectively referred to as nucleic acids, that encode any of the various embodiments of variant ICOSL polypeptides or immunomodulatory polypeptides provided herein. In some embodiments, the nucleic acids provided herein, including all those described below, are suitable for the recombinant production (eg, expression) of variant ICOSL polypeptides or immunomodulatory polypeptides provided herein. In some embodiments, the nucleic acids provided herein, including all those described below, are useful for the expression of variant ICOSL polypeptides or immunomodulatory polypeptides provided herein in cells, for example, engineered cells, such as immune cells or infectious agent cells. Nucleic acids provided herein may be in the form of RNA or in the form of DNA and include mRNA, cRNA, recombinant or synthetic RNA, and DNA and cDNA. The nucleic acids of the invention are typically DNA molecules and typically double-stranded DNA molecules. However, single-stranded DNA, single-stranded RNA, double-stranded RNA and hybrid DNA/RNA nucleic acids or combinations thereof, including any of the nucleotide sequences of the invention, are also provided.

Кроме того, предлагаемое в данном документе представляют собой рекомбинантные экспрессирующие векторы и рекомбинантные клетки-хозяева, используемые при получении вариантных полипептидов ICOSL или иммуномодулирующих полипептидов, приведенных в данном документе.Also provided herein are recombinant expression vectors and recombinant host cells used in the production of the variant ICOSL polypeptides or immunomodulatory polypeptides provided herein.

Предлагаемое в данном документе также представляют собой сконструированные клетки, такие как сконструированные иммунные клетки, содержащие любую из предлагаемых нуклеотидных молекул или любой из вариантных полипептидов ICOSL или иммуномодулирующих полипептидов, например, любой из трансмембранных иммуномодулирующих полипептидов или секретируемых иммуномодулирующих полипептидов.Also provided herein are engineered cells, such as engineered immune cells, comprising any of the proposed nucleotide molecules or any of the variant ICOSL polypeptides or immunomodulatory polypeptides, for example, any of the transmembrane immunomodulatory polypeptides or secreted immunomodulatory polypeptides.

Кроме того, предлагаемое в данном документе, представляет собой инфекционные агенты, такие как бактериальные или вирусные клетки, содержащие любую из предусмотренных нуклеотидных молекул или любой из вариантных полипептидов ICOSL или иммуномодулирующих полипептидов, таких как любой из трансмембранных иммуномодулирующих полипептидов или секретируемых иммуномодулиAlso provided herein are infectious agents, such as bacterial or viral cells, containing any of the provided nucleotide molecules or any of the variant ICOSL polypeptides or immunomodulatory polypeptides, such as any of the transmembrane immunomodulatory polypeptides or secreted immunomodules

- 104 044346 рующих полипептидов.- 104 044346 binding polypeptides.

В любом из указанных выше предлагаемых воплощениях, нуклеиновые кислоты, кодирующие вариантные полипептиды или иммуномодулирующие полипептиды, приведенные в данном документе, могут быть введены в клетки с использованием методов рекомбинантных ДНК и клонирования. Для этого получают рекомбинантную молекулу ДНК, кодирующую иммуномодулирующий полипептид. Способы получения таких молекул ДНК хорошо известны в данной области. Например, последовательности, кодирующие пептиды, могут быть вырезаны из ДНК с использованием подходящих рестрикционных ферментов. В ином случае, молекулу ДНК можно синтезировать с использованием методов химического синтеза, таких как фосфорамидитный способ. Кроме того, можно использовать комбинацию этих методов. В некоторых случаях рекомбинантная или синтетическая нуклеиновая кислота может быть получена посредством полимеразной цепной реакции (ПЦР). В некоторых воплощениях может быть сгенерирована вставка ДНК, кодирующая один или несколько вариантных полипептидов ICOSL, содержащих, по меньшей мере, один домен с модифицированной аффинностью IgSF, и в некоторых воплощениях сигнальный пептид, трансмембранный домен и/или эндодомен в соответствии с предоставленным описанием. Эта ДНК-вставка может быть клонирована в соответствующий вектор трансдукции/трансфекции Tклеток, как известно специалистам в данной области. Также представлены векторы, содержащие нуклеотидные молекулы.In any of the above proposed embodiments, nucleic acids encoding variant polypeptides or immunomodulatory polypeptides provided herein can be introduced into cells using recombinant DNA and cloning techniques. To do this, a recombinant DNA molecule encoding an immunomodulatory polypeptide is obtained. Methods for producing such DNA molecules are well known in the art. For example, peptide coding sequences can be excised from DNA using suitable restriction enzymes. Alternatively, the DNA molecule can be synthesized using chemical synthesis methods such as the phosphoramidite method. Alternatively, a combination of these methods can be used. In some cases, recombinant or synthetic nucleic acid can be produced by polymerase chain reaction (PCR). In some embodiments, a DNA insert may be generated encoding one or more variant ICOSL polypeptides containing at least one IgSF affinity modified domain, and in some embodiments a signal peptide, transmembrane domain, and/or endodomain as described herein. This DNA insert can be cloned into an appropriate T cell transduction/transfection vector as known to those skilled in the art. Vectors containing nucleotide molecules are also presented.

В некоторых воплощениях экспрессирующие векторы способны экспрессировать трансмембранные иммуномодулирующие белки в соответствующей клетке в условиях, подходящих для экспрессии белка. В некоторых аспектах нуклеотидная молекула или экспрессирующий вектор включает молекулу ДНК, которая кодирует иммуномодулирующий белок, функционально связанный с соответствующими последовательностями контроля экспрессии. Способы влияния на эту функциональную связь, как до, так и после молекулы ДНК, вставленной в вектор, хорошо известны. Контрольные последовательности экспрессии включают промоторы, активаторы, энхансеры, операторы, сайты рибосомного связывания, сигналы запуска, сигналы остановки, кэп-сигналы, сигналы полиаденилирования и другие сигналы, связанные с контролем транскрипции или трансляции.In some embodiments, the expression vectors are capable of expressing transmembrane immunomodulatory proteins in the appropriate cell under conditions suitable for protein expression. In some aspects, the nucleotide molecule or expression vector includes a DNA molecule that encodes an immunomodulatory protein operably linked to corresponding expression control sequences. Methods for influencing this functional relationship, both before and after the DNA molecule inserted into the vector, are well known. Expression control sequences include promoters, activators, enhancers, operators, ribosomal binding sites, start signals, stop signals, cap signals, polyadenylation signals, and other signals associated with transcriptional or translational control.

В некоторых воплощениях экспрессия иммуномодулирующего белка контролируется промотором или энхансером для того, чтобы контролировать или регулировать экспрессию. Промотор функционально связан с частью молекулы нуклеиновой кислоты, кодирующей вариантный полипептид или иммуномодулирующий белок. В некоторых воплощениях промотор представляет собой конститутивно активный промотор (такой как тканеспецифический конститутивно активный промотор или другой конститутивный промотор). В некоторых воплощениях промотор представляет собой индуцибельный промотор, который может реагировать на индуцирующий агент (такой как сигнал активации T-клеток).In some embodiments, expression of the immunomodulatory protein is controlled by a promoter or enhancer to control or regulate expression. The promoter is operably linked to a portion of a nucleic acid molecule encoding a variant polypeptide or immunomodulatory protein. In some embodiments, the promoter is a constitutively active promoter (such as a tissue-specific constitutively active promoter or other constitutive promoter). In some embodiments, the promoter is an inducible promoter that can respond to an inducing agent (such as a T cell activation signal).

В некоторых воплощениях конститутивный промотор функционально связан с нуклеотидной молекулой, кодирующей вариантный полипептид или иммуномодулирующий белок. Типичные конститутивные промоторы включают промотор вакуолизирующего вируса обезьян 40 (SV40), промотор цитомегаловируса (CMV), промотор убиквитина C (UbC) и промотор EF-1 альфа (EF1a). В некоторых воплощениях конститутивный промотор специфичен к тканям. Например, в некоторых воплощениях промотор допускает конститутивную экспрессию иммуномодулирующего белка в определенных тканях, таких как иммунные клетки, лимфоциты или T-клетки. Примерные тканеспецифические промоторы описанные в патенте США № 5998205, включают, например, фетопротеин, DF3, тирозиназу, CEA, белок поверхностно-активного вещества и промоторы ErbB2.In some embodiments, the constitutive promoter is operably linked to a nucleotide molecule encoding a variant polypeptide or immunomodulatory protein. Typical constitutive promoters include the simian vacuolating virus 40 (SV40) promoter, the cytomegalovirus (CMV) promoter, the ubiquitin C (UbC) promoter, and the EF-1 alpha (EF1a) promoter. In some embodiments, the constitutive promoter is tissue specific. For example, in some embodiments, the promoter allows constitutive expression of the immunomodulatory protein in certain tissues, such as immune cells, lymphocytes, or T cells. Exemplary tissue-specific promoters described in US Pat. No. 5,998,205 include, for example, fetoprotein, DF3, tyrosinase, CEA, surfactant protein, and ErbB2 promoters.

В некоторых воплощениях, индуцируемый промотор функционально связан с нуклеотидной молекулой, кодирующей вариантный полипептид или иммуномодулирующий белок, таким образом, что экспрессия нуклеиновой кислоты является управляемой путем контроля наличия или отсутствия соответствующего индуктора транскрипции. Например, промотор может быть регулируемой промоторной системой и системой экспрессии транскрипционных факторов, такой как опубликованные системы, регулируемые тетрациклином, или другие регулируемые системы (см., например, опубликованную Международную заявку PCT No. № WO 01/30843), чтобы обеспечить регулируемую экспрессию кодированного полипептида. Типичной регулируемой промоторной системой является система Tet-On (и Tet-Off), доступная, например, у Clontech (Пало-Альто, Калифорния). Эта промоторная система позволяет регулировать экспрессию трансгена, контролируемого производными тетрациклина или тетрациклина, такими как доксициклин. Известны другие регулируемые промоторные системы (см., например, опубликованную заявку США № 2002-0168714, озаглавленную Регулирование экспрессии генов с использованием одноцепочечных, мономерных, зависимых от лиганда полипептидных переключателей, которая описывает переключатели генов, которые содержат домены, связывающие лиганды, и домены, регулирующие транскрипцию, такие как гормональные рецепторы).In some embodiments, the inducible promoter is operably linked to a nucleotide molecule encoding a variant polypeptide or immunomodulatory protein such that expression of the nucleic acid is controlled by controlling the presence or absence of a corresponding transcription inducer. For example, the promoter may be a regulated promoter system and transcription factor expression system, such as published tetracycline-regulated systems or other regulated systems (see, for example, published PCT International Application No. WO 01/30843) to provide regulated expression of the encoded polypeptide. A typical regulated promoter system is the Tet-On (and Tet-Off) system available, for example, from Clontech (Palo Alto, Calif.). This promoter system allows the regulation of transgene expression controlled by tetracycline or tetracycline derivatives such as doxycycline. Other regulated promoter systems are known (see, for example, US Pub. No. 2002-0168714, entitled Regulation of Gene Expression Using Single-Chain, Monomeric, Ligand-Dependent Polypeptide Switches, which describes gene switches that contain ligand-binding domains and domains regulating transcription, such as hormone receptors).

В некоторых воплощениях промотор является респонсивным для элемента, который является респонсивным по отношению к сигналам активации T-клеток. Исключительно в качестве примера в некоторых воплощениях сконструированная T-клетка включает экспрессирующий вектор, кодирующий иммуномодулирующий белок, и промотор, функционально связанный с контрольной экспрессией иммуномодулирующего белка. Сконструированную T-клетку можно активировать, например, посредством переда- 105 044346 чи через T-клеточный рецептор (TCR) или химерный антигенный рецептор (CAR) и тем самым инициируя экспрессию и секрецию иммуномодулирующего белка через респонсивный промотор.In some embodiments, the promoter is responsive to an element that is responsive to T cell activation signals. By way of example only, in some embodiments the engineered T cell includes an expression vector encoding an immunomodulatory protein and a promoter operably linked to control expression of the immunomodulatory protein. The engineered T cell can be activated, for example, by transmission through the T cell receptor (TCR) or chimeric antigen receptor (CAR) and thereby initiating expression and secretion of the immunomodulatory protein through a responsive promoter.

В некоторых воплощениях индуцируемый промотор функционально связан с нуклеотидной молекулой, кодирующей иммуномодулирующий белок таким образом, чтобы иммуномодулирующий белок экспрессировался в ответ на ядерный фактор активированных T-клеток (NFAT) или ядерный фактор, энхансер легких цепей каппа активированных B-клеток (NF-кВ). Например, в некоторых воплощениях индуцируемый промотор включает сайт связывания для NFAT или NF-кВ. Например, в некоторых воплощениях промотор представляет собой промотор NFAT или NF-кВ или его функциональную вариацию. Таким образом, в некоторых воплощениях нуклеиновые кислоты позволяют контролировать экспрессию иммуномодулирующего белка, одновременно уменьшая или устраняя токсичность иммуномодулирующего белка. В частности, сконструированные иммунные клетки, содержащие нуклеиновые кислоты по изобретению, экспрессируют и секретируют иммуномодулирующий белок только тогда, когда клетка (например, T-клеточный рецептор (TCR) или химерный антигенный рецептор (CAR), экспрессируемый клеткой) специфически стимулируется антигеном и/или клеткой (например, сигнальный путь кальция в клетке), неспецифически стимулируется, например, форболмиристатацетатом (PMA)/иономицином.In some embodiments, the inducible promoter is operably linked to a nucleotide molecule encoding an immunomodulatory protein such that the immunomodulatory protein is expressed in response to nuclear factor of activated T cells (NFAT) or nuclear factor kappa light chain enhancer of activated B cells (NF-κB) . For example, in some embodiments, the inducible promoter includes a binding site for NFAT or NF-κB. For example, in some embodiments, the promoter is the NFAT or NF-κB promoter or a functional variation thereof. Thus, in some embodiments, the nucleic acids allow the expression of an immunomodulatory protein to be controlled while reducing or eliminating the toxicity of the immunomodulatory protein. In particular, engineered immune cells containing the nucleic acids of the invention express and secrete an immunomodulatory protein only when the cell (e.g., T cell receptor (TCR) or chimeric antigen receptor (CAR) expressed by the cell) is specifically stimulated by an antigen and/or cell (eg, cellular calcium signaling pathway), nonspecifically stimulated, for example, by phorbol myristate acetate (PMA)/ionomycin.

Соответственно, экспрессия и, в некоторых случаях, секреция иммуномодулирующего белка может контролироваться только тогда, когда и где это необходимо (например, в присутствии возбудителя инфекционных заболеваний, в раковой опухоли или в опухолевом участке), что позволяет уменьшить или избежать нежелательных иммуномодулирующих белковых взаимодействий.Accordingly, expression and, in some cases, secretion of an immunomodulatory protein can be controlled only when and where it is needed (eg, in the presence of an infectious agent, in a cancer tumor or at a tumor site), thereby reducing or avoiding unwanted immunomodulatory protein interactions.

В некоторых воплощениях нуклеиновая кислота, кодирующая, описанный в данном документе иммуномодулирующий белок, включает подходящую нуклеотидную последовательность, которая кодирует промотор NFAT, промотор NF-кВ, или его функциональный вариант. Используемый в данном документе промотор NFAT означает один или несколько чувствительных к NFAT элементов, связанных с минимальным промотором. Промотор NF-кВ относится к одному или нескольким чувствительным к NF-кВ элементам, связанным с минимальным промотором. В некоторых воплощениях минимальный промотор гена представляет собой минимальный промотор IL-2 человека или промотор CMV. Респонсивные элементы NFAT могут включать, например, респонсивные элементы NFAT1, NFAT2, NFAT3 и/или NFAT4. Промотор NFAT, промотор NF-kB или его функциональный вариант, может включать любое количество связывающих мотивов, например, по меньшей мере, два, по меньшей мере, три, по меньшей мере, четыре, по меньшей мере, пять, или, по меньшей мере, шесть, по меньшей мере, семь, по меньшей мере, восемь, по меньшей мере, девять, по меньшей мере, десять, по меньшей мере, одиннадцать или вплоть до двенадцати мотивов связывания.In some embodiments, the nucleic acid encoding an immunomodulatory protein described herein includes a suitable nucleotide sequence that encodes an NFAT promoter, an NF-κB promoter, or a functional variant thereof. As used herein, NFAT promoter means one or more NFAT responsive elements associated with a minimal promoter. An NF-κB promoter refers to one or more NF-κB responsive elements associated with a minimal promoter. In some embodiments, the minimal gene promoter is the human IL-2 minimal promoter or the CMV promoter. NFAT responsive elements may include, for example, NFAT1, NFAT2, NFAT3 and/or NFAT4 responsive elements. An NFAT promoter, an NF-kB promoter, or a functional variant thereof may include any number of binding motifs, such as at least two, at least three, at least four, at least five, or at least , six, at least seven, at least eight, at least nine, at least ten, at least eleven, or up to twelve binding motifs.

Полученный рекомбинантный экспрессирующий вектор, имеющий молекулу ДНК, используются для трансформации соответствующего хозяина. Эта трансформация может быть выполнена с использованием способов, хорошо известных в данной области техники. В некоторых воплощениях нуклеиновая кислота, представленная в данном документе, дополнительно включает нуклеотидную последовательность, которая кодирует секреторный или сигнальный пептид, функционально связанный с нуклеиновой кислотой, кодирующей иммуномодулирующий полипептид, так что результирующий растворимый иммуномодулирующий полипептид извлекают из культуральной среды, клетки-хозяина или периплазмы клетки-хозяина. В других воплощениях соответствующие сигналы контроля экспрессии выбирают так, чтобы обеспечить экспрессию иммуномодулирующего полипептида на мембране. Кроме того, коммерчески доступные наборы, а также подрядные производственные компании также могут быть использованы для создания сконструированных клеток или рекомбинантных клеток-хозяев, предлагаемых в данном документе.The resulting recombinant expression vector having a DNA molecule is used to transform the appropriate host. This transformation can be performed using methods well known in the art. In some embodiments, the nucleic acid provided herein further includes a nucleotide sequence that encodes a secretory or signal peptide operably linked to a nucleic acid encoding an immunomodulatory polypeptide such that the resulting soluble immunomodulatory polypeptide is recovered from a culture medium, host cell, or cell periplasm -the owner. In other embodiments, appropriate expression control signals are selected to ensure expression of the immunomodulatory polypeptide on the membrane. In addition, commercially available kits as well as contract manufacturing companies can also be used to create the engineered cells or recombinant host cells provided herein.

В некоторых воплощениях полученный экспрессирующий вектор, несущий молекулу ДНК, используется для трансформации, такой как трансдукция, соответствующей клетки. Введение может быть выполнено с использованием способов, хорошо известных в данной области. Примерные способы включают те, которые переносят нуклеиновые кислоты, кодирующие рецепторы, в том числе с помощью вирусов, например, ретровирусов или лентивирусов, трансдукции, транспозонов и электропорации. В некоторых воплощениях, экспрессирующий вектор представляет собой вирусный вектор. В некоторых воплощениях нуклеиновая кислота переносится в клетки с помощью лентивирусных или ретровирусных методов трансдукции.In some embodiments, the resulting expression vector carrying a DNA molecule is used for transformation, such as transduction, of a suitable cell. Administration can be accomplished using methods well known in the art. Exemplary methods include those that transfer nucleic acids encoding receptors, including via viruses, such as retroviruses or lentiviruses, transduction, transposons, and electroporation. In some embodiments, the expression vector is a viral vector. In some embodiments, the nucleic acid is transferred into cells using lentiviral or retroviral transduction methods.

Любой из большого числа общедоступных и хорошо известных клеток-хозяев млекопитающих, в том числе T-клеток или APC млекопитающих, могут быть использованы при получении полипептидов или сконструированных клеток. Выбор клетки зависит от ряда факторов, признанных в данной области. К ним относятся, например, совместимость с выбранным экспрессирующим вектором, токсичность пептидов, кодируемых молекулой ДНК, скорость трансформации, легкость извлечения пептидов, характеристики экспрессии, биологическая безопасность и затраты. Баланс этих факторов должен быть принят с пониманием того, что не все клетки могут быть одинаково эффективными для экспрессии конкретной последовательности ДНК.Any of a large number of publicly available and well-known mammalian host cells, including mammalian T cells or APCs, can be used in the production of polypeptides or engineered cells. The choice of cell depends on a number of factors recognized in the art. These include, for example, compatibility with the chosen expression vector, toxicity of the peptides encoded by the DNA molecule, transformation rate, ease of peptide recovery, expression characteristics, biosafety and costs. The balance of these factors must be taken with the understanding that not all cells may be equally efficient at expressing a particular DNA sequence.

- 106 044346- 106 044346

В некоторых воплощениях, клетки-хозяева могут представлять собой различные эукариотические клетки, например, клетки дрожжей, или с клетки млекопитающих, таких как клетки яичника китайского хомячка (CHO) или клетки HEK293. В некоторых воплощениях клетка-хозяин представляет собой суспензионную клетку, и полипептид сконструирован или продуцируется в культивируемой суспензии, такой как в культивируемая суспензия клеток CHO, например, клеток CHO-S. В некоторых примерах клеточная линия представляет собой клеточную линию CHO, которая дефицитна по DHFR (DHFR-), такую как DG44 и DUXB11. В некоторых воплощениях в клетке наблюдается дефицит глютаминсинтазы (GS), например, в клетках CHO-S, в клетках CHOK1 SV и в клетках CHOZN((R)) GS-/-. В некоторых воплощениях клетки CHO, такие как клетки суспензии CHO, могут быть клетками CHO-S-2H2, клетками CHO-Sclone 14 или клетками ExpiCHO-S.In some embodiments, the host cells may be various eukaryotic cells, such as yeast cells, or mammalian cells, such as Chinese hamster ovary (CHO) cells or HEK293 cells. In some embodiments, the host cell is a suspension cell and the polypeptide is engineered or produced in a cultured suspension, such as a cultured suspension of CHO cells, such as CHO-S cells. In some examples, the cell line is a CHO cell line that is DHFR deficient (DHFR-), such as DG44 and DUXB11. In some embodiments, the cell is glutamine synthase (GS) deficient, for example, in CHO-S cells, in CHOK1 SV cells, and in CHOZN((R)) GS-/- cells. In some embodiments, CHO cells, such as CHO suspension cells, may be CHO-S-2H2 cells, CHO-Sclone 14 cells, or ExpiCHO-S cells.

В некоторых воплощениях экспрессия предлагаемых полипептидов ICOSL из клеток CHO приводит к более гомогенной композиции продуцируемых белков. В некоторых воплощениях предлагаемые полипептиды ICOSL приводят к более гомогенному продукту, когда белки экспрессируются из клеток CHO по сравнению с полипептидами ICOSL, содержащими полную референсную последовательность ECD и/или содержащими сайт расщепления протеазой (например, LQQN/LT). В некоторых воплощениях, по меньшей мере, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98 или 99% композиции продуцируемых белков, содержат вариантный полипептид ICOSL, полученный в данной работе, который имеет ту же самую длину в аминокислотах или тот же размер. Методы оценки однородности размера включают высокоэффективную жидкостную хроматографию (ВЭЖХ), эксклюзионную хроматографию по размеру, SDS-PAGE или секвенирование.In some embodiments, expression of the proposed ICOSL polypeptides from CHO cells results in a more homogeneous composition of the proteins produced. In some embodiments, the proposed ICOSL polypeptides result in a more homogeneous product when the proteins are expressed from CHO cells compared to ICOSL polypeptides containing the complete ECD reference sequence and/or containing a protease cleavage site (eg, LQQN/LT). In some embodiments, at least 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, or 99% of the protein composition produced comprises a variant ICOSL polypeptide produced herein that has the same amino acid length or the same same size. Methods for assessing size uniformity include high-performance liquid chromatography (HPLC), size exclusion chromatography, SDS-PAGE, or sequencing.

В некоторых воплощениях клетки-хозяева также могут быть прокариотическими клетками, такими как E.coli. Трансформированный рекомбинантный хозяин культивируется в условиях экспрессии полипептидов и затем очищается с получением растворимого белка. Рекомбинантные клетки-хозяева можно культивировать в обычных условиях ферментации, так чтобы экспрессировались искомые полипептиды. Такие условия ферментации хорошо известны в данной области. Наконец, представленные в данном документе полипептиды могут быть выделены и очищены из культур рекомбинантных клеток любым из ряда способов, хорошо известных в данной области, включая осаждение сульфатом аммония или этанолом, экстракцию кислотой, анионную или катионообменную хроматографию, фосфоцеллюлозную хроматографию, хроматографию с гидрофобным взаимодействием, аффинную хроматографию. Стадии повторного сворачивания белка можно использовать по желанию при завершении конфигурации зрелого белка. Наконец, высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ) может быть использована на заключительных стадиях очистки.In some embodiments, the host cells can also be prokaryotic cells, such as E. coli. The transformed recombinant host is cultured under polypeptide expression conditions and then purified to produce a soluble protein. Recombinant host cells can be cultured under conventional fermentation conditions such that the desired polypeptides are expressed. Such fermentation conditions are well known in the art. Finally, the polypeptides provided herein can be isolated and purified from recombinant cell cultures by any of a number of methods well known in the art, including ammonium sulfate or ethanol precipitation, acid extraction, anion or cation exchange chromatography, phosphocellulose chromatography, hydrophobic interaction chromatography, affinity chromatography. Protein refolding steps can be used as desired to complete the configuration of the mature protein. Finally, high performance liquid chromatography (HPLC) can be used in the final stages of purification.

В некоторых воплощениях клетка является иммунной клеткой, такой, как любая из описанных выше в связи с получением сконструированных клеток. В некоторых воплощениях такие сконструированные клетки являются первичными клетками. В некоторых воплощениях сконструированные клетки являются аутологичными для объекта. В некотором воплощении сконструированные клетки являются аллогенными для объекта. В некоторых воплощениях сконструированные клетки получают из объекта, например, лейкаферезом, и трансформируют ex vivo для экспрессии иммуномодулирующего полипептида, например трансмембранного иммуномодулирующего полипептида или секретируемого иммуномодулирующего полипептида.In some embodiments, the cell is an immune cell, such as any of those described above in connection with the production of engineered cells. In some embodiments, such engineered cells are primary cells. In some embodiments, the engineered cells are autologous to the subject. In some embodiment, the engineered cells are allogeneic to the subject. In some embodiments, the engineered cells are obtained from the subject, for example by leukapheresis, and transformed ex vivo to express an immunomodulatory polypeptide, such as a transmembrane immunomodulatory polypeptide or a secreted immunomodulatory polypeptide.

Кроме того, предлагаемое представляет собой нуклеиновые кислоты, кодирующие любой из вариантных иммуномодулирующих полипептидов, содержащихся в инфекционных агентах, описанных в данном документе. В некоторых воплощениях инфекционные агенты доставляют нуклеиновые кислоты в клетку объекта и/или делают возможной экспрессию кодированных вариантных полипептидов в клетке. Также предлагаются нуклеиновые кислоты, которые используются для получения, производства или модификации таких инфекционных агентов. Например, в некоторых воплощениях представлены векторы и/или плазмиды, которые содержат нуклеиновые кислоты, кодирующие вариантные иммуномодулирующие полипептиды, для образования инфекционных агентов, доставку в клетки у объекта и/или экспрессию вариантных иммуномодулирующих полипептидов в клетках объекта.Also provided herein are nucleic acids encoding any of the variant immunomodulatory polypeptides contained in the infectious agents described herein. In some embodiments, infectious agents deliver nucleic acids into a cell of the subject and/or allow expression of the encoded variant polypeptides in the cell. Also provided are nucleic acids that are used to obtain, produce or modify such infectious agents. For example, in some embodiments, vectors and/or plasmids are provided that contain nucleic acids encoding variant immunomodulatory polypeptides for the production of infectious agents, delivery to cells in a subject, and/or expression of variant immunomodulatory polypeptides in cells of a subject.

В некоторых воплощениях предлагаемые нуклеиновые кислоты представляют собой рекомбинантные вирусные или бактериальные векторы, содержащие нуклеотидные последовательности, кодирующие вариантные иммуномодулирующие полипептиды. В некоторых воплощениях рекомбинантные векторы могут быть использованы для получения инфекционного агента, который включает нуклеотидные последовательности, кодирующие вариантные иммуномодулирующие полипептиды и/или доставляемые в клетку-мишень у объекта для экспрессии клеткой-мишенью. В некоторых воплощениях рекомбинантный вектор представляет собой экспрессирующий вектор. В некоторых воплощениях рекомбинантный вектор включает соответствующие последовательности, необходимые для генерации и/или продуцирования инфекционного агента и экспрессии в клетке-мишени.In some embodiments, the nucleic acids provided are recombinant viral or bacterial vectors containing nucleotide sequences encoding variant immunomodulatory polypeptides. In some embodiments, recombinant vectors can be used to produce an infectious agent that includes nucleotide sequences encoding variant immunomodulatory polypeptides and/or delivered to a target cell of the subject for expression by the target cell. In some embodiments, the recombinant vector is an expression vector. In some embodiments, the recombinant vector includes the appropriate sequences necessary for the generation and/or production of the infectious agent and expression in the target cell.

В некоторых воплощениях рекомбинантный вектор представляет собой плазмиду или космиду. Плазмиды и космиды, кодирующие вариабельные иммуномодулирующие полипептиды, описанные в данном документе, легко конструируют с использованием стандартных методов, хорошо известных в данной области. Для получения инфекционного агента вектор или геном могут быть сконструированы вIn some embodiments, the recombinant vector is a plasmid or cosmid. Plasmids and cosmids encoding the variable immunomodulatory polypeptides described herein are readily constructed using standard methods well known in the art. To obtain an infectious agent, a vector or genome can be constructed in

- 107 044346 форме плазмиды, которая затем может быть трансфицирована в упаковочную или продуцирующую клеточную линию бактерию-хозяина. Рекомбинантные векторы могут быть получены с использованием любого из рекомбинантных методов, известных в данной области. В некоторых воплощениях векторы могут включать прокариотическую точку начала репликации и/или ген, чья экспрессия придает детектируемый или селектируемый маркер, такой как лекарственное средство для размножения и/или отбора в прокариотических системах.- 107 044346 form of a plasmid, which can then be transfected into a packaging or cell line producing host bacterium. Recombinant vectors can be produced using any of the recombinant methods known in the art. In some embodiments, the vectors may include a prokaryotic origin of replication and/or a gene whose expression confers a detectable or selectable marker, such as a drug, for propagation and/or selection in prokaryotic systems.

В некоторых воплощениях рекомбинантный вектор представляет собой вирусный вектор. Иллюстративные рекомбинантные вирусные векторы включают геном лентивирусного вектора, геном поксвирусного вектора, геномом вектора вируса осповаакцины, геном аденовирусного вектора, геном вектора на основе аденоассоциированного вируса, геном герпесвирусного вектора и геном альфа-вирусного вектора. Вирусные векторы могут быть живыми, ослабленными, вектором с зависимой от условий репликацией или репликативно-дефицитным вектором, непатогенным (дефектным), репликативнокомпетентным вектором и/или модифицированным для экспрессии гетерологичного гена, например, вариантных иммуномодулирующих полипептидов, предлагаемых в данном документе. Векторы для получения вирусов также могут быть модифицированы для изменения ослабления вируса, которое включает любой способ увеличения или уменьшения транскрипционной или трансляционной нагрузки.In some embodiments, the recombinant vector is a viral vector. Exemplary recombinant viral vectors include a lentiviral vector genome, a poxviral vector genome, a vaccinia virus vector genome, an adenoviral vector genome, an adeno-associated virus vector genome, a herpesvirus vector genome, and an alpha viral vector genome. Viral vectors can be a live, attenuated, replication-dependent or replication-deficient vector, a non-pathogenic (defective), a replication-competent vector, and/or modified to express a heterologous gene, such as the variant immunomodulatory polypeptides provided herein. Viral production vectors can also be modified to alter viral attenuation, which includes any method of increasing or decreasing transcriptional or translational load.

Примерные вирусные векторы, которые могут быть использованы, включают модифицированные вирусные векторы вируса осповакцины (см., например, Guerra et al., 80:985-98 (2006); Tartaglia et al., AIDS Research and Human Retroviruses 8: 1445-47 (1992); Gheradi et al., J. Gen. Virol. 86:2925-36 (2005); Mayr et al., Infection 3:6-14 (1975); Hu et al., J. Virol. 75: 10300-308 (2001); Пат. США № 5 698 530, 6 998 252, 5 443 964, 7 247 615 и 7 368 116); аденовирусный вектор или векторы на основе аденовирусассоциированного вируса (см., например, Molin et al., J. Virol. 72:8358-61 (1998); Narumi et al., Am J. Respir. Cell Mol. Biol. 19:936-41 (1998); Mercier et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 101:6188-93 (2004); Пат. США № 6 143 290; 6 596 535; 6 855 317; 6 936 257; 7 125 717; 7 378 087; 7 550 296); ретровирусные векторы, включая те, которые основаны на вирусе лейкоза мышей (MuLV), вирусе лейкоза гиббонов (GaLV), экотропных ретровирусах, вирусе иммунодефицита обезьян (SIV), вирусе иммунодефицита человека (HIV) и комбинациях (см., например, Buchscher et al., J. Virol. 66:2731-39 (1992); Johann et al., J. Virol. 66: 1635-40 (1992); Sommerfelt et al., Virology 176:58-59 (1990); Wilson et al., J. Virol. 63:2374-78 (1989); Miller et al., J. Virol. 65:2220-24 (1991); Miller et al., Mol. Cell Biol. 10:4239 (1990); Kolberg, NIH Res. 4:43 1992; Cornetta et al., Hum. Gene Ther. 2: 215 (1991)); лентивирусные векторы, включая те, которые основаны на вирусе иммунодефицита человека (HIV-1), вирусе иммунодефицита кошек (FIV), вирусе инфекционной анемии лошадей, вирусе иммунодефицита обезьян (SIV) и вирусе Маеди/Висна (см., например, Pfeifer et al., Annu. Rev. Genomics Hum. Genet. 2: 177-211 (2001); Zufferey et al., J. Virol. 72: 9873, 1998; Miyoshi et al., J. Virol. 72:8150, 1998; Philpott and Thrasher, Human Gene Therapy 18:483, 2007; Engelman et al., J. Virol. 69: 2729, 1995; Nightingale et al., Mol. Therapy, 13: 1121, 2006; Brown et al., J. Virol. 73:9011 (1999); WO 2009/076524; WO 2012/141984; WO 2016/011083; McWilliams et al., J. Virol. 77: 11150, 2003; Powell et al., J. Virol. 70:5288, 1996) или любые их варианты и/или векторы, которые могут быть использованы для получения любого из описанных выше вирусов. В некоторых воплощениях рекомбинантный вектор может включать регуляторные последовательности, такие как промоторные или энхансерные последовательности, которые могут регулировать экспрессию вирусного генома, например, в случае РНК-вирусов, в упаковочной клеточной линии (см., например, пат. США № 5 385 839 и 5 168 062).Exemplary viral vectors that may be used include modified vaccinia virus viral vectors (see, e.g., Guerra et al., 80:985-98 (2006); Tartaglia et al., AIDS Research and Human Retroviruses 8: 1445-47 (1992);Gheradi et al., J. Gen. Virol. 86:2925-36 (2005); Mayr et al., Infection 3:6-14 (1975); Hu et al., J. Virol. 75: 10300-308 (2001); US Pat. No. 5,698,530, 6,998,252, 5,443,964, 7,247,615 and 7,368,116); adenovirus vector or adenovirus-associated virus vectors (see, for example, Molin et al., J. Virol. 72:8358-61 (1998); Narumi et al., Am J. Respir. Cell Mol. Biol. 19:936 -41 (1998); Mercier et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 101:6188-93 (2004); US Pat. No. 6,143,290; 6,596,535; 6,855,317; 6,936,257; 7 125 717; 7 378 087; 7 550 296); retroviral vectors, including those based on murine leukemia virus (MuLV), gibbon leukemia virus (GaLV), ecotropic retroviruses, simian immunodeficiency virus (SIV), human immunodeficiency virus (HIV) and combinations (see, for example, Buchscher et al ., J. Virol. 66:2731-39 (1992); Johann et al., J. Virol. 66: 1635-40 (1992); Sommerfelt et al., Virology 176:58-59 (1990); Wilson et al. al., J. Virol. 63:2374-78 (1989); Miller et al., J. Virol. 65:2220-24 (1991); Miller et al., Mol. Cell Biol. 10:4239 (1990) ; Kolberg, NIH Res. 4:43 1992; Cornetta et al., Hum. Gene Ther. 2: 215 (1991)); lentiviral vectors, including those based on human immunodeficiency virus (HIV-1), feline immunodeficiency virus (FIV), equine infectious anemia virus, simian immunodeficiency virus (SIV) and Maedi/Visna virus (see, for example, Pfeifer et al ., Annu. Rev. Genomics Hum. Genet. 2: 177-211 (2001); Zufferey et al., J. Virol. 72: 9873, 1998; Miyoshi et al., J. Virol. 72:8150, 1998; Philpott and Thrasher, Human Gene Therapy 18:483, 2007; Engelman et al., J. Virol. 69: 2729, 1995; Nightingale et al., Mol. Therapy, 13: 1121, 2006; Brown et al., J. Virol. 73:9011 (1999); WO 2009/076524; WO 2012/141984; WO 2016/011083; McWilliams et al., J. Virol. 77: 11150, 2003; Powell et al., J. Virol. 70: 5288, 1996) or any variants thereof and/or vectors that can be used to produce any of the viruses described above. In some embodiments, the recombinant vector may include regulatory sequences, such as promoter or enhancer sequences, that can regulate the expression of the viral genome, for example, in the case of RNA viruses, in a packaging cell line (see, for example, US Pat. No. 5,385,839 and 5 168 062).

В некоторых воплощениях рекомбинантный вектор представляет собой экспрессирующий вектор, например, экспрессирующий вектор, который позволяет экспрессию кодируемого генного продукта при доставке в клетку-мишень, например, клетку в объекте, например, опухолевую клетку, иммунную клетку и/или APC. В некоторых воплощениях рекомбинантные экспрессирующие векторы, содержащиеся в инфекционном агенте, способны экспрессировать иммуномодулирующие белки в клетке-мишени у объекта в условиях, подходящих для экспрессии белка.In some embodiments, the recombinant vector is an expression vector, e.g., an expression vector that allows expression of the encoded gene product when delivered to a target cell, e.g., a cell in an entity, e.g., a tumor cell, an immune cell, and/or an APC. In some embodiments, recombinant expression vectors contained in an infectious agent are capable of expressing immunomodulatory proteins in a target cell of the subject under conditions suitable for protein expression.

В некоторых аспектах нуклеиновые кислоты или экспрессирующий вектор включают нуклеотидную последовательность, которая кодирует иммуномодулирующий белок, функционально связанный с соответствующими последовательностями, контролирующими экспрессию. Способы воздействия на эту функциональную связь, либо до, либо после нуклеотидной последовательности, кодирующей иммуномодулирующий белок, вставленной в вектор, хорошо известны. Контрольные последовательности экспрессии включают промоторы, активаторы, энхансеры, операторы, сайты рибосомного связывания, сигналы запуска, сигналы остановки, кэп-сигналы, сигналы полиаденилирования и другие сигналы, связанные с контролем транскрипции или трансляции. Промотор может быть функционально связан с частью нуклеотидные последовательности, кодирующей иммуномодулирующий белок. В некоторых воплощениях промотор представляет собой конститутивно активный промотор в клетке-мишени (такой как тканеспецифический конститутивно активный промотор или другой конститутивный промотор). Например, рекомбинантный экспрессирующий вектор может также включать регуляторные элементы транскрипции, специфичные для лимфоидной ткани (TRE), такой как TRE, специфичные для B-лимфоцитов, Tлимфоцитов или дендритных клеток. TRE, специфические для лимфоидной ткани, известны в данной области (см., например, Thompson et al., Mol. Cell. Biol. 12:1043-53 (1992); Todd et al., J. Exp. Med.In some aspects, the nucleic acids or expression vector includes a nucleotide sequence that encodes an immunomodulatory protein operably linked to corresponding expression control sequences. Methods for influencing this functional relationship, either before or after the nucleotide sequence encoding the immunomodulatory protein inserted into the vector, are well known. Expression control sequences include promoters, activators, enhancers, operators, ribosomal binding sites, start signals, stop signals, cap signals, polyadenylation signals, and other signals associated with transcriptional or translational control. The promoter may be operably linked to a portion of the nucleotide sequence encoding the immunomodulatory protein. In some embodiments, the promoter is a constitutively active promoter in the target cell (such as a tissue-specific constitutively active promoter or other constitutive promoter). For example, the recombinant expression vector may also include lymphoid tissue-specific transcription regulatory elements (TREs), such as TREs specific for B lymphocytes, T lymphocytes, or dendritic cells. TREs specific for lymphoid tissue are known in the art (see, for example, Thompson et al., Mol. Cell. Biol. 12:1043-53 (1992); Todd et al., J. Exp. Med.

- 108 044346- 108 044346

177:1663-74 (1993); Penix et al., J. Exp. Med. 178:1483-96 (1993)). В некоторых воплощениях промотор представляет собой индуцибельный промотор, который может реагировать на индуцирующий агент (такой как сигнал активации T-клеток). В некоторых воплощениях нуклеиновые кислоты, доставленные в клетку-мишень объекта, например, опухолевую клетку, иммунную клетку и/или APC, могут быть функционально связаны с любым из регуляторных элементов, описанных выше.177:1663-74 (1993); Penix et al., J. Exp. Med. 178:1483-96 (1993)). In some embodiments, the promoter is an inducible promoter that can respond to an inducing agent (such as a T cell activation signal). In some embodiments, the nucleic acids delivered to the target cell of the entity, such as a tumor cell, an immune cell, and/or an APC, may be operably linked to any of the regulatory elements described above.

В некоторых воплощениях вектор представляет собой бактериальный вектор, например, бактериальную плазмиду или космиду. В некоторых воплощениях бактериальный вектор доставляется в клеткумишень, например опухолевую клетку, иммунные клетки и/или APC, посредством опосредованной бактериями передачи плазмидной ДНК в клетки млекопитающих (также называемой бактофекцией). В некоторых воплощениях доставленный бактериальный вектор также включает соответствующие последовательности контроля экспрессии для экспрессии в клетках-мишенях, такие как промоторная последовательность и/или энхансерные последовательности, или любые регуляторные или контрольные последовательности, описанные выше. В некоторых воплощениях бактериальный вектор включает соответствующие последовательности для контроля экспрессии для экспрессии и/или секреции кодированных вариантных полипептидов в инфекционном агенте, например бактерии.In some embodiments, the vector is a bacterial vector, such as a bacterial plasmid or cosmid. In some embodiments, the bacterial vector is delivered to a target cell, such as a tumor cell, immune cells, and/or APCs, through bacteria-mediated transfer of plasmid DNA into mammalian cells (also called bactofection). In some embodiments, the delivered bacterial vector also includes appropriate expression control sequences for expression in target cells, such as a promoter sequence and/or enhancer sequences, or any of the regulatory or control sequences described above. In some embodiments, the bacterial vector includes appropriate expression control sequences for expression and/or secretion of the encoded variant polypeptides in an infectious agent, such as a bacterium.

В некоторых воплощениях полипептиды, представленные в данном документе, также могут быть получены синтетическими способами. Твердофазный синтез является предпочтительным методом получения индивидуальных пептидов, поскольку он является наиболее экономичным способом получения небольших пептидов. Например, хорошо известные методы твердофазного синтеза включают использование защитных групп, линкеров и твердофазных носителей, а также специфические условия реакции защиты и снятия защиты, условия расщепления линкера, использование поглотителей и другие аспекты твердофазного пептидного синтеза. Затем пептиды могут быть собраны в полипептиды, как указано в данном документе.In some embodiments, the polypeptides provided herein can also be produced by synthetic methods. Solid-phase synthesis is the preferred method for preparing individual peptides because it is the most cost-effective way to produce small peptides. For example, well-known solid-phase synthesis methods include the use of protecting groups, linkers and solid-phase supports, as well as specific protection and deprotection reaction conditions, linker cleavage conditions, the use of scavengers and other aspects of solid-phase peptide synthesis. The peptides can then be assembled into polypeptides as described herein.

V. Способы оценки иммунной модуляции активности вариантных полипептидов ICOSL и иммуномодулирующих белковV. Methods for assessing the immune modulation activity of variant ICOSL polypeptides and immunomodulatory proteins

В некоторых воплощениях вариантные полипептиды ICOSL, представленные в данном документе (например, полноразмерные и/или специфические связывающие фрагменты или конъюгаты, стековые конструкции или их гибриды), демонстрируют иммуномодулирующую активность - модулируют активацию T-клеток. В некоторых воплощениях полипептиды ICOSL модулируют экспрессию IFN-гамма в первичном анализе T-клеток относительно контрольного референсного (например, немодифицированного) ICOSL или ICOSL дикого типа. В некоторых случаях модуляция экспрессии IFN-гамма может увеличивать или уменьшать экспрессию IFN-гамма по сравнению с контролем. Анализы для определения специфического связывания и экспрессии IFN-гамма хорошо известны в данной области и включают реакции MLR (реакции смешанных лимфоцитов), в которых измеряются уровни интерферона-гаммацитокинов в культуральных надосадочных жидкостях (Wang et al., Cancer Immunol Res. 2014, Sep: 2 (9): 846-56), Анализ стимуляции T-клеток SEB (стафилококковым энтеротоксином B) (Wang et al., Cancer Immunol Res. 2014, Sep: 2 (9): 846-56) и анализ стимуляции T-клеток с помощью анти-CD3 (Li and Kurlander, J Transl Med. 2010: 8: 104).In some embodiments, variant ICOSL polypeptides provided herein (eg, full-length and/or specific binding fragments or conjugates, stack constructs, or hybrids thereof) exhibit immunomodulatory activity—modulating T cell activation. In some embodiments, ICOSL polypeptides modulate IFN-gamma expression in a primary T cell assay relative to a control reference (eg, unmodified) ICOSL or wild-type ICOSL. In some cases, modulation of IFN-gamma expression may increase or decrease IFN-gamma expression compared to control. Assays to determine the specific binding and expression of IFN-gamma are well known in the art and include MLR reactions (mixed lymphocyte reactions), which measure the levels of interferon-gammacytokines in culture supernatants (Wang et al., Cancer Immunol Res. 2014, Sep: 2 (9): 846-56), SEB (Staphylococcal Enterotoxin B) T Cell Stimulation Assay (Wang et al., Cancer Immunol Res. 2014, Sep: 2 (9): 846-56) and T Cell Stimulation Assay with anti-CD3 (Li and Kurlander, J Transl Med. 2010: 8: 104).

В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL может в некоторых воплощениях увеличить или, в альтернативных воплощениях, снизить экспрессию IFN-гамма (интерферона-гамма) в первичном T-клеточном анализе относительно контрольного ICOSL дикого типа. В некоторых воплощениях предлагаемых полипептидов, содержащих последовательность растворимого ICOSL, полипептид может увеличивать экспрессию IFN-гамма, а в альтернативных вариантах уменьшать экспрессию IFN-гамма в первичном анализе T-клеток относительно контрольного ICOSL дикого типа. В некоторых воплощениях предлагаемых полипептидов, включающих последовательности множества вариантных ICOSL, полипептид может увеличивать экспрессию IFN-гамма и в альтернативных вариантах уменьшать экспрессию IFN-гамма в первичном анализе T-клеток по сравнению с контрольным ICOSL дикого типа.In some embodiments, a variant ICOSL polypeptide may, in some embodiments, increase or, in alternative embodiments, decrease IFN-gamma (interferon-gamma) expression in a primary T cell assay relative to a wild-type ICOSL control. In some embodiments of the proposed polypeptides containing a soluble ICOSL sequence, the polypeptide can increase IFN-gamma expression, and in alternative embodiments, decrease IFN-gamma expression in a primary T cell assay relative to a wild-type ICOSL control. In some embodiments of the proposed polypeptides comprising sequences from multiple variant ICOSLs, the polypeptide may increase IFN-gamma expression and, in alternative embodiments, decrease IFN-gamma expression in a primary T cell assay compared to a wild-type ICOSL control.

Специалистам будет понятно, что формат анализа первичных T-клеток, используемый для определения увеличения экспрессии IFN-гамма, может отличаться от используемого для анализа снижения экспрессии IFN-гамма. При анализе способности вариантного ICOSL уменьшать экспрессию IFN-гамма в первичном анализе T-клеток может быть использован анализ реакции смешанных лимфоцитов (MLR), как описано в примере 6. В некоторых случаях растворимую форму варианта ICOSL можно использовать для определения способности варианта ICOSL оказывать антагонистическое воздействие и тем самым уменьшать экспрессию IFN-гамма в MLR, как описано в примере 6.Those skilled in the art will appreciate that the primary T cell assay format used to determine increases in IFN-gamma expression may be different from those used to assay decreases in IFN-gamma expression. When analyzing the ability of the ICOSL variant to reduce IFN-gamma expression in a primary T cell assay, a mixed lymphocyte response (MLR) assay can be used as described in Example 6. In some cases, a soluble form of the ICOSL variant can be used to determine the ability of the ICOSL variant to exert antagonistic effects and thereby reduce the expression of IFN-gamma in the MLR, as described in example 6.

В качестве альтернативы, при тестировании способности вариантного ICOSL повышать экспрессию IFN-гамма в анализе первичных T-клеток, может быть использован анализ коиммобилизации, описанный в примере 6. В анализе коиммобилизации сигнал TCR, представленный в некоторых воплощениях антиCD3 антителом, используется в сочетании с совместно иммобилизованным вариантным ICOSL для определения способности увеличивать экспрессию IFN-гамма по сравнению с контрольным ICOSL. В некоторых случаях растворимая форма вариантного ICOSL, которая мультимеризуется до степени, обеспечивающей многовалентное связывание, может быть использована для определения способности вариантного ICOSL оказывать агонистическое воздействие и, таким образом, увеличивать экспрессию IFN-гамма вAlternatively, when testing the ability of a variant ICOSL to increase IFN-gamma expression in a primary T cell assay, the co-immobilization assay described in Example 6 can be used. In the co-immobilization assay, a TCR signal, represented in some embodiments by an anti-CD3 antibody, is used in combination with a co-immobilization assay. immobilized variant ICOSL to determine the ability to increase IFN-gamma expression compared to control ICOSL. In some cases, a soluble form of the variant ICOSL that multimerizes to the extent of multivalent binding can be used to determine the ability of the variant ICOSL to exert agonistic effects and thereby increase IFN-gamma expression in

- 109 044346- 109 044346

MLR, как описано в примере 6.MLR as described in Example 6.

В некоторых воплощениях при анализе способности вариантного ICOSL модулировать увеличение или уменьшение экспрессии IFN-гамма можно использовать T-клеточный репортерный анализ. В некоторых воплощениях T-клетка представляет собой T-клеточную линию Jurkat или происходит от Tклеточных линий Jurkat. В репортерных анализах линию репортерных клеток (например, репортерную клетку Jurkat) также получают для сверхэкспрессии ингибиторного рецептора, который является когнатным партнером связывания вариантного полипептида домена IgSF. В некоторых воплощениях репортерные T-клетки также содержат репортерную конструкцию, содержащую индуцибельный промотор, чувствительный к активации T-клеток, функционально связанный с репортером. В некоторых воплощениях репортер представляет собой флуоресцентный или люминесцентный репортер. В некоторых воплощениях репортером является люцифераза. В некоторых воплощениях промотор реагирует на передачу сигналов CD3. В некоторых воплощениях промотор представляет собой промотор NFAT. В некоторых воплощениях промотор реагирует на костимулирующую передачу сигналов, например, по сигнальному пути CD28. В некоторых воплощениях промотор представляет собой промотор IL-2.In some embodiments, a T cell reporter assay can be used to analyze the ability of a variant ICOSL to modulate an increase or decrease in IFN-gamma expression. In some embodiments, the T cell is a Jurkat T cell line or is derived from Jurkat T cell lines. In reporter assays, a reporter cell line (eg, a Jurkat reporter cell) is also generated to overexpress an inhibitory receptor that is a cognate binding partner of a variant IgSF domain polypeptide. In some embodiments, the reporter T cells also contain a reporter construct comprising an inducible promoter responsive to T cell activation operably linked to the reporter. In some embodiments, the reporter is a fluorescent or luminescent reporter. In some embodiments, the reporter is a luciferase. In some embodiments, the promoter is responsive to CD3 signaling. In some embodiments, the promoter is an NFAT promoter. In some embodiments, the promoter is responsive to co-stimulatory signaling, such as through the CD28 signaling pathway. In some embodiments, the promoter is an IL-2 promoter.

В некоторых аспектах репортерного анализа репортерная клеточная линия стимулируется, например, путем совместной инкубации с антигенпрезентирующими клетками (APC), экспрессирующими лиганд дикого типа ингибирующего рецептора, например, ICOSL. В некоторых воплощениях APC являются искусственными APC. Искусственные APC хорошо известны специалистам в данной области. В некоторых воплощениях искусственные APC получают из одной или нескольких клеточных линий млекопитающих, таких как клетки K562, CHO или 293.In some aspects of the reporter assay, the reporter cell line is stimulated, for example, by co-incubation with antigen presenting cells (APCs) expressing a wild-type inhibitory receptor ligand, such as ICOSL. In some embodiments, the APCs are artificial APCs. Artificial APCs are well known to those skilled in the art. In some embodiments, artificial APCs are derived from one or more mammalian cell lines, such as K562, CHO, or 293 cells.

В некоторых воплощениях репортерные клетки Jurkat совместно инкубируют с искусственными APC, сверхэкспрессирующими ингибирующий лиганд, в присутствии молекулы вариантного домена IgSF или иммуномодулирующего белка, например, вариантного полипептида ICOSL или иммуномодулирующего белка. В некоторых воплощениях мониторинг репортерной экспрессии осуществляют, например, путем определения люминесценции или флуоресценции клеток. В некоторых воплощениях нормальные взаимодействия между ингибирующим рецептором и лигандом приводят к подавлению или уменьшению сигнала репортера, например по сравнению с контролем, например, репортерной экспрессии при совместной инкубации контрольных T-клеток и APC, в которых отсутствует ингибирующее взаимодействие рецептора и лиганда, например, в случае APC, которые не сверхэкспрессируют ICOSL. В некоторых воплощениях вариантный полипептид ICOSL или иммуномодулирующий белок, предлагаемый в настоящем документе, противодействует взаимодействию, например когда он представлен в растворимой форме в качестве вариантного ICOSL-Fc или когда экспрессируется из APC в виде секретируемого иммуномодулирующего белка, что приводит к увеличению сигнала репортера по сравнению с отсутствием вариантного полипептида ICOSL или иммуномодулирующего белка. В некоторых случаях определенные форматы вариантного полипептида ICOSL или иммуномодулирующего белка, представленные в настоящем документе, могут обеспечивать активность агониста, тем самым уменьшая репортерную экспрессию по сравнению с отсутствием вариантного полипептида ICOSL или иммуномодулирующего белка.In some embodiments, Jurkat reporter cells are co-incubated with artificial APCs overexpressing an inhibitory ligand in the presence of a variant IgSF domain molecule or an immunomodulatory protein, for example, a variant ICOSL polypeptide or an immunomodulatory protein. In some embodiments, reporter expression is monitored, for example, by detecting luminescence or fluorescence of cells. In some embodiments, normal interactions between inhibitory receptor and ligand result in suppression or reduction of the reporter signal, e.g., compared to a control, e.g., reporter expression when control T cells are co-incubated with APCs that lack inhibitory receptor-ligand interaction, e.g. case of APCs that do not overexpress ICOSL. In some embodiments, a variant ICOSL polypeptide or immunomodulatory protein provided herein antagonizes the interaction, such as when presented in soluble form as a variant ICOSL-Fc or when expressed from an APC as a secreted immunomodulatory protein, resulting in an increase in the reporter signal relative to lacking variant ICOSL polypeptide or immunomodulatory protein. In some cases, certain variant ICOSL polypeptide or immunomodulatory protein formats provided herein may provide agonist activity, thereby reducing reporter expression compared to the absence of the variant ICOSL polypeptide or immunomodulatory protein.

Применение надлежащих контролей известно специалистам в данной области, однако, в вышеупомянутых воплощениях контроль, как правило, включает применение референсного ICOSL, такого как, например, изоформы дикого типа нативного ICOSL из того же вида млекопитающих, что и вид, из которого был получен или разработан вариантный ICOSL. Независимо от того, увеличена или уменьшена аффинность связывания с одним или обоими из числа ICOS и CD28, вариантный ICOSL в некоторых воплощениях увеличит экспрессию IFN-гамма и в альтернативных вариантах уменьшит экспрессию IFNгамма в первичном анализе T-клеток по сравнению с контрольным ICOSL дикого типа.The use of appropriate controls is known to those skilled in the art, however, in the above embodiments, the control typically involves the use of a reference ICOSL, such as, for example, a wild-type isoform of the native ICOSL from the same mammalian species as the species from which it was derived or developed. variant ICOSL. Regardless of whether the binding affinity to one or both of ICOS and CD28 is increased or decreased, the variant ICOSL will in some embodiments increase IFN-gamma expression and in alternative embodiments decrease IFNgamma expression in a primary T cell assay compared to the control wild-type ICOSL.

В некоторых воплощениях вариантный ICOSL увеличивает экспрессию IFN-гамма (т.е. экспрессию белка) относительно контрольного референсного (например, немодифицированного) ICOSL или ICOSL дикого типа, по меньшей мере, на 5, 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90% или выше. В других воплощениях вариантный ICOSL уменьшает экспрессию IFN-гамма (т.е. экспрессию белка) относительно контрольного ICOSL дикого типа или немодифицированного ICOSL, по меньшей мере, на 5, 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90% или выше. В некоторых воплощениях контрольный ICOSL дикого типа представляет собой мышиный ICOSL, такой как обычно используется для вариантного ICOSL, измененного по последовательности из последовательности мышиной последовательности ICOSL дикого типа. В некоторых воплощениях контрольный ICOSL дикого типа представляет собой ICOSL человека, такой как обычно используется для вариантного ICOSL, измененного в последовательности относительно последовательности ICOSL человека дикого типа, такой как последовательность ICOSL, содержащая аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 32 или SEQ ID NO: 196 или 545.In some embodiments, the variant ICOSL increases IFN-gamma expression (i.e., protein expression) relative to the control reference (e.g., unmodified) ICOSL or wild-type ICOSL by at least 5, 10, 20, 30, 40, 50, 60 , 70, 80, 90% or higher. In other embodiments, the variant ICOSL reduces IFN-gamma expression (i.e., protein expression) relative to control wild-type ICOSL or unmodified ICOSL by at least 5, 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80. 90% or higher. In some embodiments, the wild-type control ICOSL is a mouse ICOSL such as is typically used for a variant ICOSL altered in sequence from the wild-type mouse ICOSL sequence. In some embodiments, the control wild-type ICOSL is a human ICOSL, such as is typically used for a variant ICOSL altered in sequence relative to a wild-type human ICOSL sequence, such as an ICOSL sequence comprising the amino acid sequence of SEQ ID NO: 32 or SEQ ID NO: 196 or 545.

- 110 044346- 110 044346

VI. Фармацевтические составыVI. Pharmaceutical compounds

В данном документе предлагаются композиции, содержащие любой из вариантных полипептидов ICOSL, иммуномодулирующих белков, конъюгатов, сконструированных клеток или инфекционных агентов, описанных в данном документе. Фармацевтическая композиция может дополнительно содержать фармацевтически приемлемый эксципиент. Например, фармацевтическая композиция может содержать один или несколько эксципиентов для модификации, поддержания или сохранения, например, pH, осмолярности, вязкости, прозрачности, цвета, изотоничности, запаха, стерильности, стабильности, скорости растворения или высвобождения, адсорбции или проникновения композиции. В некоторых аспектах квалифицированный специалист понимает, что фармацевтическая композиция, содержащая клетки, может отличаться от фармацевтической композиции, содержащей белок.Provided herein are compositions containing any of the variant ICOSL polypeptides, immunomodulatory proteins, conjugates, engineered cells, or infectious agents described herein. The pharmaceutical composition may further contain a pharmaceutically acceptable excipient. For example, a pharmaceutical composition may contain one or more excipients to modify, maintain or maintain, for example, the pH, osmolarity, viscosity, clarity, color, isotonicity, odor, sterility, stability, dissolution or release rate, adsorption or permeation of the composition. In some aspects, one skilled in the art will appreciate that a pharmaceutical composition containing cells may be different from a pharmaceutical composition containing protein.

В некоторых воплощениях фармацевтическая композиция представляет собой твердое вещество, например, в виде порошка, капсулы, или таблетки. Например, компоненты фармацевтической композиции могут быть лиофилизированы. В некоторых воплощениях твердая фармацевтическая композиция восстанавливается или растворяется в жидкости перед введением.In some embodiments, the pharmaceutical composition is a solid, such as a powder, capsule, or tablet. For example, the components of the pharmaceutical composition may be lyophilized. In some embodiments, the solid pharmaceutical composition is reconstituted or dissolved in a liquid prior to administration.

В некоторых воплощениях фармацевтическая композиция представляет собой жидкость, например с вариантными полипептидами ICOSL, растворенными в водном растворе (например, в физиологическом растворе или растворе Рингера). В некоторых воплощениях pH фармацевтической композиции составляет от около 4,0 до около 8,5 (например, от около 4,0 до около 5,0, от около 4,5 до около 5,5, от около 5,0 до около 6,0, от около 5,5 до около 6,5, 6,0 и около 7,0, от около 6,5 до около 7,5, от около 7,0 до около 8,0 или от около 7,5 до около 8,5).In some embodiments, the pharmaceutical composition is a liquid, for example with ICOSL variant polypeptides dissolved in an aqueous solution (eg, saline or Ringer's solution). In some embodiments, the pH of the pharmaceutical composition is from about 4.0 to about 8.5 (e.g., from about 4.0 to about 5.0, from about 4.5 to about 5.5, from about 5.0 to about 6 .0, from about 5.5 to about 6.5, 6.0 and about 7.0, from about 6.5 to about 7.5, from about 7.0 to about 8.0 or from about 7.5 up to about 8.5).

В некоторых воплощениях изобретения фармацевтическая композиция включает фармацевтически приемлемый наполнитель, например, наполнитель, связующее, покрытие, консервант, смазывающее вещество, вкусовое вещество, подсластитель, красящий агент, растворитель, буферный агент, хелатирующий агент или стабилизатор. Примеры фармацевтически приемлемых наполнителей включают целлюлозу, двухосновный фосфат кальция, карбонат кальция, микрокристаллическую целлюлозу, сахарозу, лактозу, глюкозу, маннит, сорбит, мальтол, прежелатинизированный крахмал, кукурузный крахмал или картофельный крахмал. Примеры фармацевтически приемлемых связующих включают поливинилпирролидон, крахмал, лактозу, ксилит, сорбит, мальтит, желатин, сахарозу, полиэтиленгликоль, метилцеллюлозу или целлюлозу. Примеры фармацевтически приемлемых покрытий включают гидроксипропилметилцеллюлозу (HPMC), шеллак, кукурузный белок зеин или желатин. Примеры фармацевтически приемлемых разрыхлителей включают поливинилпирролидон, карбоксиметилцеллюлозу или гликолят крахмала натрия. Примеры фармацевтически приемлемых смазывающих веществ включают полиэтиленгликоль, стеарат магния или стеариновую кислоту. Примеры фармацевтически приемлемых консервантов включают метилпарабен, этилпарабен, пропилпарабен, бензойную кислоту или сорбиновую кислоту. Примеры фармацевтически приемлемых подсластителей включают сахарозу, сахарин, аспартам или сорбит. Примеры фармацевтически приемлемых буферных агентов включают карбонаты, цитраты, глюконаты, ацетаты, фосфаты или тартраты.In some embodiments of the invention, the pharmaceutical composition includes a pharmaceutically acceptable excipient, for example, a filler, a binder, a coating, a preservative, a lubricant, a flavoring agent, a sweetener, a coloring agent, a solvent, a buffering agent, a chelating agent, or a stabilizer. Examples of pharmaceutically acceptable excipients include cellulose, dibasic calcium phosphate, calcium carbonate, microcrystalline cellulose, sucrose, lactose, glucose, mannitol, sorbitol, maltol, pregelatinized starch, corn starch or potato starch. Examples of pharmaceutically acceptable binders include polyvinylpyrrolidone, starch, lactose, xylitol, sorbitol, maltitol, gelatin, sucrose, polyethylene glycol, methylcellulose or cellulose. Examples of pharmaceutically acceptable coatings include hydroxypropyl methylcellulose (HPMC), shellac, corn protein zein, or gelatin. Examples of pharmaceutically acceptable disintegrants include polyvinylpyrrolidone, carboxymethylcellulose or sodium starch glycolate. Examples of pharmaceutically acceptable lubricants include polyethylene glycol, magnesium stearate or stearic acid. Examples of pharmaceutically acceptable preservatives include methylparaben, ethylparaben, propylparaben, benzoic acid or sorbic acid. Examples of pharmaceutically acceptable sweeteners include sucrose, saccharin, aspartame or sorbitol. Examples of pharmaceutically acceptable buffering agents include carbonates, citrates, gluconates, acetates, phosphates or tartrates.

В некоторых воплощениях фармацевтическая композиция дополнительно включает средство для контролируемого или замедленного высвобождения продукта, такого как инъецируемые микросферы, биоразрушаемые частицы, полимерные соединения (полимолочная кислота, полигликолевая кислота), гранулы или липосомы.In some embodiments, the pharmaceutical composition further includes an agent for controlled or sustained release of a product, such as injectable microspheres, biodegradable particles, polymer compounds (polylactic acid, polyglycolic acid), granules or liposomes.

В некоторых воплощениях фармацевтическая композиция является стерильной. Стерилизацию можно осуществлять путем фильтрации через стерильные фильтрующие мембраны или радиацией. Если композиция лиофилизирована, стерилизация с использованием этого способа может проводиться либо до, либо после лиофилизации и восстановления. Композиция для парентерального введения может храниться в лиофилизированной форме или в растворе. Кроме того, парентеральные композиции обычно помещают в контейнер, имеющий стерильный порт доступа, например, мешок для внутривенного раствора или флакон, имеющий пробку, прокалываемую иглой для подкожных инъекций.In some embodiments, the pharmaceutical composition is sterile. Sterilization can be accomplished by filtration through sterile filter membranes or by radiation. If the composition is lyophilized, sterilization using this method can be carried out either before or after lyophilization and reconstitution. The composition for parenteral administration can be stored in lyophilized form or in solution. In addition, parenteral compositions are typically placed in a container having a sterile access port, such as an intravenous solution bag or vial having a stopper pierced by a hypodermic needle.

В некоторых воплощениях предлагаемое представляет собой фармацевтические композиции, содержащие трансмембранные иммуномодулирующие белки, в том числе сконструированные клетки, экспрессирующие такие трансмембранные иммуномодулирующие белки. В некоторых воплощениях фармацевтические композиции и составы включают один или несколько необязательных фармацевтически приемлемых носителей или эксципиентов. Такие композиции могут включать буферы, например, нейтральный буферный физиологический раствор, фосфатно-солевой буферный раствор и т.п.; углеводы, такие как глюкоза, манноза, сахароза или декстраны, маннит; белки; полипептиды или аминокислоты, такие как глицин; антиоксиданты; хелатирующие агенты, такие как EDTA или глутатион; адъюванты (например, гидроксид алюминия); и консерванты. Композиции по настоящему изобретению предпочтительно составлены для внутривенного введения.In some embodiments, the present invention comprises pharmaceutical compositions containing transmembrane immunomodulatory proteins, including engineered cells expressing such transmembrane immunomodulatory proteins. In some embodiments, the pharmaceutical compositions and formulations include one or more optional pharmaceutically acceptable carriers or excipients. Such compositions may include buffers, for example, neutral buffered saline, phosphate buffered saline, and the like; carbohydrates such as glucose, mannose, sucrose or dextrans, mannitol; proteins; polypeptides or amino acids such as glycine; antioxidants; chelating agents such as EDTA or glutathione; adjuvants (eg aluminum hydroxide); and preservatives. The compositions of the present invention are preferably formulated for intravenous administration.

В некоторых воплощениях изобретения фармацевтическая композиция включает инфекционные агенты, содержащие нуклеотидные последовательности, кодирующие иммуномодулирующее вариантные полипептиды. В некоторых воплощениях фармацевтическая композиция включает дозу инфекционных агентов, подходящих для введения объекту, которому необходимо лечение. В некоторых воплощеIn some embodiments of the invention, the pharmaceutical composition includes infectious agents containing nucleotide sequences encoding immunomodulatory variant polypeptides. In some embodiments, the pharmaceutical composition includes a dose of infectious agents suitable for administration to the subject in need of treatment. In some incarnations

- 111 044346 ниях фармацевтическая композиция включает инфекционный агент, который является вирусом, в количестве одной или нескольких доз, от около 1x105 до около 1х1012 бляшкообразующих единиц (БОЕ), 1х106х1010 БОЕ или 1x107x1010 БОЕ, в каждом случае включительно, например, по меньшей мере, или, по меньшей мере, около или около 1x106, 1x107, 1x108, 1x109, 2x109, 3x109, 4x109, 5x109 БОЕ или около 1x1010 БОЕ. В некоторых воплощениях фармацевтическая композиция может содержать концентрацию вируса от или от около 105 до около 1010 БОЕ/мл, например, от 5x106 до 5x109 или от 1x107 до 1x109 БОЕ/мл, например, по меньшей мере, или, по меньшей мере, около или около 106 БОЕ/мл, 107 БОЕ/мл, 108 БОЕ/мл или 109 БОЕ/мл. В некоторых воплощениях фармацевтическая композиция включает инфекционный агент, который представляет собой бактерию, в количестве единичной или множественной дозы, от, от около 1x103 до около 1x109 колониеобразующих единиц (КОЕ), 1x104 и 1x109 КОЕ, или 1x105 и 1x107 КОЕ, в каждом случае включительно, например, по меньшей мере, или, по меньшей мере, около или около 1x104, 1x105, 1x106, 1x107, 1x108 или 1x109KOE. В некоторых воплощениях фармацевтическая композиция может включать бактерии в концентрации от или от около 103 до около 108 КОЕ/мл, например, от 5x105 до 5x107 или от 1x106 до 1x107 КОЕ/мл, например, по меньшей мере, или, по меньшей мере, около или около 105 КОЕ/мл, 106 КОЕ/мл, 107 КОЕ/мл или 108 КОЕ/мл.- 111 044346 the pharmaceutical composition includes an infectious agent, which is a virus, in an amount of one or more doses, from about 1x105 to about 1x1012 plaque forming units (PFU), 1x106x1010 PFU or 1x107x1010 PFU , in each case inclusive eg at least, or at least about or about 1x10 6 , 1x10 7 , 1x10 8 , 1x10 9 , 2x109, 3x109, 4x109, 5x109 PFU or about 1x1010 PFU. In some embodiments, the pharmaceutical composition may contain a virus concentration of from or about 10 5 to about 10 10 PFU/ml, for example, from 5x10 6 to 5x109 or from 1x10 7 to 1x109 PFU/ml, for example, at least, or at least at least about or about 10 6 PFU/ml, 10 7 PFU/ml, 10 8 PFU/ml or 10 9 PFU/ml. In some embodiments, the pharmaceutical composition includes an infectious agent that is a bacterium, in a single or multiple dose amount of about 1x103 to about 1x109 colony forming units (CFU), 1x104 and 1x109 CFU, or 1x105 and 1x107 CFU, in in each case inclusive, for example, at least, or at least about or about 1x10 4 , 1x10 5 , 1x10 6 , 1x10 7 , 1x10 8 or 1x10 9 KOE. In some embodiments, the pharmaceutical composition may include bacteria at a concentration of from or about 103 to about 10 8 CFU/ml, for example, from 5x10 5 to 5x10 7 or from 1x10 6 to 1x10 7 CFU/ml, for example, at least or, at least about or about 10 5 CFU/ml, 10 6 CFU/ml, 10 7 CFU/ml or 10 8 CFU/ml.

Такая композиция может, например, быть в форме, подходящей для внутривенного вливания. Фармацевтически приемлемый носитель может представлять собой фармацевтически приемлемый материал, композицию или носитель, который участвует в переносе или транспортировке интересующих клеток из одной ткани, органа или части тела в другую ткань, орган или часть тела. Например, носитель может быть жидким или твердым наполнителем, разбавителем, эксципиентом, растворителем или инкапсулирующим материалом или их комбинацией. Каждый компонент носителя должен быть фармацевтически приемлемым, поскольку он должен быть совместим с другими ингредиентами композиции. Он также должен быть подходящим для контакта с любой тканью, органом или частью тела, с которой он может столкнуться, что означает, что он не должен нести риск токсичности, раздражения, аллергической реакции, иммуногенности или любого другого осложнения, которое чрезмерно перевешивает его терапевтическую выгоду.Such a composition may, for example, be in a form suitable for intravenous infusion. A pharmaceutically acceptable carrier may be a pharmaceutically acceptable material, composition or carrier that is involved in the transfer or transport of cells of interest from one tissue, organ or body part to another tissue, organ or body part. For example, the carrier may be a liquid or solid filler, diluent, excipient, solvent or encapsulating material, or a combination thereof. Each component of the carrier must be pharmaceutically acceptable because it must be compatible with the other ingredients of the composition. It must also be suitable for contact with any tissue, organ or body part it may encounter, meaning that it must not carry a risk of toxicity, irritation, allergic reaction, immunogenicity or any other complication that unduly outweighs its therapeutic benefit .

В некоторых воплощениях фармацевтическую композицию вводят объекту. Как правило, дозы и пути введения фармацевтической композиции определяются в соответствии с размером и состоянием объекта, в соответствии со стандартной фармацевтической практикой. Для любой композиции терапевтически эффективную дозу можно оценить первоначально либо в анализах на клеточных культурах, либо на моделях животных, таких как мыши, крысы, кролики, собаки, свиньи или обезьяны. Животную модель также можно использовать для определения подходящего диапазона концентраций и пути введения. Такая информация может затем использоваться для определения полезных доз и путей введения людям. Точная дозировка будет определяться в свете факторов, связанных с объектом, нуждающимся в лечении. Дозировка и введение корректируются для обеспечения достаточных уровней активного соединения или для поддержания желаемого эффекта. Факторы, которые могут быть приняты во внимание, включают серьезность болезненного состояния, общее состояние здоровья объекта, возраст, массу и пол объекта, время и частоту введения, комбинацию (комбинации) лекарственных средств, чувствительность к реакции и реакцию к терапии.In some embodiments, the pharmaceutical composition is administered to a subject. Typically, dosages and routes of administration of a pharmaceutical composition are determined according to the size and condition of the subject, in accordance with standard pharmaceutical practice. For any composition, the therapeutically effective dose can be assessed initially either in cell culture assays or in animal models such as mice, rats, rabbits, dogs, pigs or monkeys. An animal model can also be used to determine the appropriate concentration range and route of administration. Such information can then be used to determine useful doses and routes of administration to humans. The exact dosage will be determined in light of factors related to the subject being treated. Dosage and administration are adjusted to provide sufficient levels of the active compound or to maintain the desired effect. Factors that may be taken into account include the severity of the disease state, the general health of the subject, the age, weight and sex of the subject, time and frequency of administration, drug combination(s), sensitivity to reaction, and response to therapy.

Фармацевтические композиции длительного действия можно вводить каждые 3-4 дня, каждую неделю или раз в две недели в зависимости от периода полужизни и скорости выведения конкретного состава. Частота дозирования будет зависеть от фармакокинетических параметров молекулы в используемой композиции. Как правило, композицию вводят до тех пор, пока не будет достигнута дозировка, которая достигает желаемого эффекта. Поэтому композицию можно вводить в виде одной дозы или в виде нескольких доз (в одинаковых или разных концентрациях/дозировках) с течением времени или в виде непрерывной инфузии. Дальнейшее уточнение соответствующей дозировки производится регулярно. Подходящие дозы могут быть определены путем использования соответствующих данных доза-ответ. Можно отслеживать ряд биомаркеров или физиологических маркеров для терапевтического эффекта, включая активацию или пролиферацию T-клеток, синтез или выработку цитокинов (например, выработку TNF-α, IFN-γ, IL-2), индукцию различных маркеров активации (например, CD25, рецептор IL-2), воспаления, набухания или болезненности суставов, уровень C-реактивного белка в сыворотке, продуцирования антител против коллагена и/или T-зависимого ответа на антитела.Long-acting pharmaceutical compositions can be administered every 3-4 days, every week or every two weeks depending on the half-life and elimination rate of the particular composition. The frequency of dosing will depend on the pharmacokinetic parameters of the molecule in the composition used. Typically, the composition is administered until a dosage is reached that achieves the desired effect. Therefore, the composition can be administered as a single dose or in multiple doses (at the same or different concentrations/dosages) over time or as a continuous infusion. Further refinement of the appropriate dosage is carried out regularly. Suitable doses can be determined by using appropriate dose-response data. A number of biomarkers or physiological markers can be monitored for therapeutic effect, including T cell activation or proliferation, cytokine synthesis or production (eg, TNF-α, IFN-γ, IL-2 production), induction of various activation markers (eg, CD25, receptor IL-2), inflammation, joint swelling or tenderness, serum C-reactive protein levels, anti-collagen antibody production and/or T-dependent antibody response.

В некоторых воплощениях фармацевтическую композицию вводят объекту любым путем, в том числе перорально, трансдермально, путем ингаляции, внутривенно, внутриартериально, внутримышечно, непосредственно применяют на участок раны, применяют к хирургическому участку, внутрибрюшинно, суппозиторием, подкожно, внутрикожно, чрескожно, путем распыления, внутриплеврально, внутрижелудочково, внутрисуставно, внутриглазно или внутрипозвоночно.In some embodiments, the pharmaceutical composition is administered to a subject by any route, including orally, transdermally, inhalation, intravenously, intraarterially, intramuscularly, directly applied to a wound site, applied to a surgical site, intraperitoneally, suppository, subcutaneously, intradermally, transdermally, by nebulization, intrapleural, intraventricular, intraarticular, intraocular or intravertebral.

В некоторых воплощениях изобретения доза фармацевтической композиции представляет собой разовую дозу или повторяющуюся дозу. В некоторых воплощениях дозы вводят объекту один раз в день, два раза в день, три раза в день или четыре или более раз в день. В некоторых воплощениях в течение недели вводят около 1 или более (например, около 2 или более, около 3 или более, около 4 или более,In some embodiments of the invention, the dose of the pharmaceutical composition is a single dose or a repeat dose. In some embodiments, doses are administered to the subject once a day, twice a day, three times a day, or four or more times a day. In some embodiments, about 1 or more (e.g., about 2 or more, about 3 or more, about 4 or more,

- 112 044346 около 5 или более, около 6 или более или около 7 или более) доз. В некоторых воплощениях множественные дозы вводятся в течение дней, недель, месяцев или лет. В некоторых воплощениях курс лечения составляет около 1 или более доз (например, около 2 или более, около 3 или более доз, около 4 или более доз, около 5 или более доз, около 7 или более доз, около 10 или больше доз, около 15 или более доз, около 25 или более доз, около 40 или более доз, около 50 или более доз или около 100 или более доз).- 112 044346 about 5 or more, about 6 or more or about 7 or more) doses. In some embodiments, multiple doses are administered over days, weeks, months or years. In some embodiments, the course of treatment is about 1 or more doses (e.g., about 2 or more doses, about 3 or more doses, about 4 or more doses, about 5 or more doses, about 7 or more doses, about 10 or more doses, about 15 or more doses, about 25 or more doses, about 40 or more doses, about 50 or more doses, or about 100 or more doses).

В некоторых воплощениях вводимая доза фармацевтической композиции составляет около 1 мкг белка на кг массы тела объекта или более (например, около 2 мкг белка на кг при условии массы тела объекта или более, около 5 мкг белка на кг массы тела объекта или более, около 10 мкг белка на кг массы тела объекта или более, около 25 мкг белка на кг массы тела объекта или более, около 50 мкг белка на кг массы тела объекта или более, около 100 мкг белка на кг массы тела объекта тела или более, около 250 мкг белка на кг массы тела объекта или более, около 500 мкг белка на кг массы тела объекта тела или более, около 1 мг белка на кг массы тела объекта или более, около 2 мг белка на кг массы тела объекта или более, или около 5 мг белка на кг массы тела объекта или более).In some embodiments, the administered dose of the pharmaceutical composition is about 1 μg of protein per kg of subject's body weight or more (e.g., about 2 μg of protein per kg of subject's body weight or more, about 5 μg of protein per kg of subject's body weight or more, about 10 µg protein per kg body weight or more, about 25 µg protein per kg body weight or more, about 50 µg protein per kg body weight or more, about 100 µg protein per kg body weight or more, about 250 µg of protein per kg body weight of the subject or more, about 500 mcg of protein per kg body weight of the subject or more, about 1 mg of protein per kg body weight of the subject or more, about 2 mg of protein per kg body weight of the subject or more, or about 5 mg protein per kg of subject's body weight or more).

В некоторых воплощениях вводится терапевтическое количество клеточной композиции. Как правило, точное количество композиций по настоящему изобретению, подлежащих введению, может быть определено врачом с учетом индивидуальных различий в возрасте, массе, размере опухоли, степени заражения или метастазировании и состояния пациента (объекта). Как правило, можно утверждать, что фармацевтическая композиция, содержащая сконструированные клетки, например, T-клетки, как описано в данном описании, можно вводить в дозировке от 104 до 109 клеток/кг массы тела, например, от 105 до 106 клеток/кг массы тела, включая все целочисленные значения в пределах этих диапазонов. Композиции сконструированных клеток, такие как композиции T-клеток, также могут вводиться несколько раз в этих дозах. Клетки можно вводить с использованием методов инфузии, которые широко известны в иммунотерапии (см., например, Rosenberg et al., New Eng. J. of Med. 319: 1676, 1988). Оптимальная дозировка и режим лечения для конкретного пациента может быть легко определен специалистом в данной области медицины путем мониторинга у пациента признаков заболевания и соответствующей корректировки лечения.In some embodiments, a therapeutic amount of the cellular composition is administered. In general, the exact amount of compositions of the present invention to be administered can be determined by the physician, taking into account individual differences in age, weight, tumor size, degree of infection or metastasis, and condition of the patient. In general, it can be stated that a pharmaceutical composition containing engineered cells, for example T cells, as described herein, can be administered at a dosage of 10 4 to 10 9 cells/kg body weight, for example 105 to 106 cells/ kg body weight, including all integer values within these ranges. Engineered cell compositions, such as T cell compositions, may also be administered multiple times at these dosages. The cells can be administered using infusion techniques that are widely known in immunotherapy (see, for example, Rosenberg et al., New Eng. J. of Med. 319: 1676, 1988). The optimal dosage and treatment regimen for a particular patient can be easily determined by one skilled in the art by monitoring the patient for signs of disease and adjusting treatment accordingly.

Известно множество способов определения того, позволяет ли введение терапевтической композиции по изобретению достаточно модулировать иммунологическую активность путем элиминации, секвестрации или инактивации иммунных клеток, опосредующих или способных опосредовать нежелательный иммунный ответ; индуцирования, образования или включения иммунных клеток, которые опосредуют или способны опосредовать защитный иммунный ответ; изменения физических или функциональных свойств иммунных клеток; или сочетания этих эффектов. Примеры измерений модуляции иммунологической активности включают, без ограничения указанным, исследование наличия или отсутствия популяций иммунных клеток (с использованием проточной цитометрии, иммуногистохимии, гистологии, электронной микроскопии, полимеразной цепной реакции (ПЦР)); измерение функциональной способности иммунных клеток, включая способность или устойчивость к пролиферации или делению в ответ на сигнал (например, с использованием анализов пролиферации T-клеток и pepscan-анализа на основе включения 3H-тимидина после стимуляции анти-CD3 антителом, антителом T-клеточного рецептора, анти-CD28 антителом, ионофорами кальция, PMA (форбол-12-миристат-13-ацетатом), антигенпрезентирующими клетками, загруженными пептидом или белковым антигеном; анализов пролиферации Bклеток); измерение способности убивать или лизировать другие клетки (такие как анализы цитотоксичных T-клеток); измерения цитокинов, хемокинов, молекул клеточной поверхности, антител и других продуктов клеток (например, проточной цитометрией, иммуноферментными анализами, связанными с ферментами, анализом вестерн-блоттинга, анализом белковых микрочипов, анализом иммунопреципитации); измерение биохимических маркеров активации иммунных клеток или сигнальных путей в иммунных клетках (например, анализ Вестерн-блоттингом и иммунопреципитационный анализ фосфорилирования тирозина, серина или треонина, расщепление полипептида, образование или диссоциация белковых комплексов, анализ белковой матрицы, транскрипция ДНК, профилирование с помощью ДНКэрреев или субтрактивная гибридизация); измерение гибели клеток из-за апоптоза, некроза или других механизмов (например, окрашивание аннексином V, анализы TUNEL, гель-электрофорез для измерения ДНК-лестницы, гистология, флуорогенные анализы каспазы, вестерн-блот-анализ субстратов каспазы); измерение генов, белков и других молекул, продуцируемых иммунными клетками (например, анализ нозерн-блоттингом, полимеразной цепной реакцией, на ДНК-микроэрреях, белковых микроэрреях, двухмерным гель-электрофорезом, анализ вестерн-блоттингом, твердофазным иммуноферментным анализом, проточной цитометрией); и измерение клинических симптомов или результатов, таких как улучшение аутоиммунных, нейродегенеративных и других заболеваний, включающих собственные белки или собственные полипептиды (клинические оценки, требования к применению дополнительных способов лечения, функциональный статус, визуализационные исследования), например, путем измерения частоты рецидивов или тяжести заболевания (с использованием клинических показателей, известных обычному квалифицированному специалисту) в случае рассеянного склероза, измерения уровня глюкозы в крови при диабете I типа или воспаления суставов в случае ревматоидного артрита.There are many known methods for determining whether administration of a therapeutic composition of the invention sufficiently modulates immunological activity by eliminating, sequestering or inactivating immune cells mediating or capable of mediating an unwanted immune response; inducing, generating or recruiting immune cells that mediate or are capable of mediating a protective immune response; changes in the physical or functional properties of immune cells; or a combination of these effects. Examples of measurements of modulation of immunological activity include, but are not limited to, examining the presence or absence of immune cell populations (using flow cytometry, immunohistochemistry, histology, electron microscopy, polymerase chain reaction (PCR)); measurement of the functional capacity of immune cells, including the ability or resistance to proliferate or divide in response to a signal (eg, using T-cell proliferation assays and the 3H-thymidine incorporation pepscan assay after stimulation with an anti-CD3 antibody, T-cell receptor antibody , anti-CD28 antibody, calcium ionophores, PMA (phorbol 12-myristate 13-acetate), antigen presenting cells loaded with peptide or protein antigen; B cell proliferation assays); measuring the ability to kill or lyse other cells (such as cytotoxic T cell assays); measurements of cytokines, chemokines, cell surface molecules, antibodies and other cell products (eg, flow cytometry, enzyme-linked immunosorbent assays, Western blot analysis, protein microarray analysis, immunoprecipitation assay); measurement of biochemical markers of immune cell activation or signaling pathways in immune cells (eg, Western blot analysis and immunoprecipitation analysis of tyrosine, serine, or threonine phosphorylation, polypeptide cleavage, protein complex formation or dissociation, protein matrix analysis, DNA transcription, DNA array profiling, or subtractive hybridization); measurement of cell death due to apoptosis, necrosis, or other mechanisms (eg, Annexin V staining, TUNEL assays, gel electrophoresis for DNA ladder measurements, histology, fluorogenic caspase assays, Western blot analysis of caspase substrates); measurement of genes, proteins, and other molecules produced by immune cells (eg, Northern blot, polymerase chain reaction, DNA microarray, protein microarray, two-dimensional gel electrophoresis, Western blot, enzyme-linked immunosorbent assay, flow cytometry); and measuring clinical symptoms or outcomes, such as improvement in autoimmune, neurodegenerative and other diseases involving self-proteins or self-polypeptides (clinical assessments, requirements for additional treatments, functional status, imaging studies), for example, by measuring relapse rates or disease severity (using clinical parameters known to those of ordinary skill in the art) in the case of multiple sclerosis, blood glucose measurements in type I diabetes, or joint inflammation in the case of rheumatoid arthritis.

- 113 044346- 113 044346

VII. Готовые изделия и наборыVII. Finished products and kits

Кроме того, предлагаемое в данном документе представляет собой готовые изделия, содержащие фармацевтические композиции, описанные в данном документе, в соответствующей упаковке. Подходящая упаковка для композиций (таких как офтальмические композиции), описанных в данном документе, известна в данной области и включает, например, флаконы (например, герметичные флаконы), сосуды, ампулы, бутылки, банки, гибкую упаковку (например, герметичные майларовые или пластиковые пакеты), и тому подобное. Эти готовые изделия могут дополнительно стерилизоваться и/или запечатываться.Also provided herein are finished products containing the pharmaceutical compositions described herein in appropriate packaging. Suitable packaging for the compositions (such as ophthalmic compositions) described herein is known in the art and includes, for example, vials (eg, sealed vials), vials, ampoules, bottles, jars, flexible packaging (eg, sealed mylar or plastic packages), and the like. These finished products can be further sterilized and/or sealed.

Кроме того, представлены наборы, содержащие фармацевтические композиции (или готовые изделия), описанные в данном документе, которые могут дополнительно содержать инструкцию(ии) о способах применения композиции, такие как используемые описанные в данном документе. Наборы, описанные в данном документе, могут также включать другие материалы, желательные с коммерческой и пользовательской точек зрения, включая другие буферы, разбавители, фильтры, иглы, шприцы и вкладыши для упаковки с инструкциями для выполнения любых способов, описанных в данном документе.Also provided are kits containing the pharmaceutical compositions (or finished products) described herein, which may further contain instruction(s) on how to use the compositions, such as those described herein. The kits described herein may also include other materials commercially and user-desirable, including other buffers, diluents, filters, needles, syringes, and package inserts with instructions for performing any of the methods described herein.

VIII. Терапевтические примененияVIII. Therapeutic Applications

Фармацевтические композиции, описанные в данном документе (в том числе фармацевтическая композиция, содержащая вариантные полипептиды ICOSL, иммуномодулирующие протеины, конъюгаты, сконструированные клетки и инфекционные агенты, описанные в данном описании) могут быть использованы в различных терапевтических применениях, таких, как лечение заболевания. Например, в некоторых воплощениях фармацевтическая композиция используется для лечения воспалительных или аутоиммунных заболеваний, рака, трансплантации органов, вирусных инфекций и/или бактериальных инфекций у млекопитающих. Фармацевтическая композиция может модулировать (например, увеличивать или уменьшать) иммунный ответ для лечения заболевания.The pharmaceutical compositions described herein (including pharmaceutical compositions containing variant ICOSL polypeptides, immunomodulatory proteins, conjugates, engineered cells and infectious agents described herein) can be used in a variety of therapeutic applications, such as the treatment of disease. For example, in some embodiments, the pharmaceutical composition is used to treat inflammatory or autoimmune diseases, cancer, organ transplantation, viral infections and/or bacterial infections in mammals. The pharmaceutical composition can modulate (eg, increase or decrease) the immune response to treat a disease.

Такие способы и применения включают терапевтические способы и применения, например, включающие введение молекул или сконструированных клеток или композиций, содержащих их, объекту, имеющему заболевание, состояние или расстройство. В некоторых описанных случаях, заболевание или расстройство представляет собой аутоиммунное или воспалительное заболевание или расстройство. В некоторых описанных случаях, заболевание или расстройство представляет собой опухоль или рак. В некоторых воплощениях молекулу или сконструированную клетку вводят в эффективном количестве для эффективного лечения заболевания или расстройства. Применение включает использование молекул, содержащих вариантный полипептид ICOSL, иммуномодулирующий белок, конъюгат, сконструированные клетки и инфекционные агенты, в таких способах и подходах лечения, а также при приготовлении лекарственного средства для осуществления таких подходов лечения. В некоторых воплощениях способы осуществляются путем введения вариантного полипептида ICOSL, иммуномодулирующего белка, конъюгата, сконструированной клетки и инфекционного агента или композиций, содержащих их, объекту, имеющему или у которого подозревается заболевание или состояние. В некоторых воплощениях способы, таким образом, лечат заболевание или состояние или расстройство у объекта.Such methods and applications include therapeutic methods and applications, for example, involving the administration of molecules or engineered cells or compositions containing them to a subject having a disease, condition or disorder. In some cases described, the disease or disorder is an autoimmune or inflammatory disease or disorder. In some cases described, the disease or disorder is a tumor or cancer. In some embodiments, the molecule or engineered cell is administered in an effective amount to effectively treat a disease or disorder. Uses include the use of molecules comprising a variant ICOSL polypeptide, immunomodulatory protein, conjugate, engineered cells and infectious agents in such treatment methods and approaches, as well as in the preparation of a medicament for carrying out such treatment approaches. In some embodiments, the methods are carried out by administering a variant ICOSL polypeptide, an immunomodulatory protein, a conjugate, an engineered cell and an infectious agent, or compositions containing them, to a subject having or suspected of having a disease or condition. In some embodiments, the methods thus treat a disease or condition or disorder in a subject.

В некоторых воплощениях предлагаемые способы применимы для терапевтического введения вариантных полипептидов ICOSL, иммуномодулирующих белков, конъюгатов, сконструированных клеток и инфекционных агентов, описанных в данном документе. В пределах уровня квалифицированного специалиста, с учетом предоставленного раскрытия, выбирать формат для указания в зависимости от типа модуляции иммунного ответа, например увеличения или уменьшения желаемого.In some embodiments, the proposed methods are useful for the therapeutic administration of variant ICOSL polypeptides, immunomodulatory proteins, conjugates, engineered cells, and infectious agents described herein. It is within the scope of one skilled in the art, given the disclosure provided, to select the format to be indicated depending on the type of modulation of the immune response, such as increasing or decreasing what is desired.

В некоторых воплощениях вводится фармацевтическая композиция, предлагаемая в данном описании, стимулирующая иммунный ответ, которая может быть полезна, например, при лечении рака, вирусных или бактериальных инфекций. В некоторых воплощениях фармацевтическая композиция включает вариантный полипептид ICOSL в формате, который проявляет агонистическую активность к его когнатному связующему партнеру CD28 или ICOS и/или который стимулирует или инициирует костимулирующую сигнализацию через CD28 или ICOS. Типичные форматы полипептида ICOSL для применения в таких терапевтических применениях включают, например, иммуномодулирующий белок или стековый вариантный полипептид ICOSL и домен IgSF или его вариант, который связывается с опухолевым антигеном (например, Nkp30 или вариантом с модифицированной аффинностью) (также называемый доменом IgSF, локализующим в опухоли), конъюгатом, содержащим вариантный полипептид ICOSL, связанный с нацеливающим на опухоль фрагментом (также называемым фрагментом, локализующим в опухоли), сконструированную клетку, экспрессирующую трансмембранный иммуномодулирующий белок или инфекционный агент, включающий нуклеотидную молекулу, кодирующую трансмембранный иммуномодулирующий белок, например, для экспрессии трансмембранного иммуномодулирующего белка в инфицированной клетке (например, опухолевой клетке или APC, например дендритной клетке).In some embodiments, a pharmaceutical composition as provided herein is administered to stimulate an immune response, which may be useful, for example, in the treatment of cancer, viral or bacterial infections. In some embodiments, the pharmaceutical composition includes a variant ICOSL polypeptide in a format that exhibits agonistic activity to its cognate binding partner CD28 or ICOS and/or that stimulates or initiates co-stimulatory signaling through CD28 or ICOS. Exemplary ICOSL polypeptide formats for use in such therapeutic applications include, for example, an immunomodulatory protein or stacked variant ICOSL polypeptide and an IgSF domain or variant thereof that binds a tumor antigen (e.g., Nkp30 or an affinity modified variant) (also referred to as an IgSF localizing domain in a tumor), a conjugate containing a variant ICOSL polypeptide linked to a tumor-targeting fragment (also called a tumor-localizing fragment), an engineered cell expressing a transmembrane immunomodulatory protein, or an infectious agent comprising a nucleotide molecule encoding a transmembrane immunomodulatory protein, e.g. expression of a transmembrane immunomodulatory protein in an infected cell (eg, a tumor cell or an APC, eg a dendritic cell).

Фармацевтические композиции, включающие сконструированные клетки и способы, описанные в данном документе, могут быть использованы в приложениях адоптивного переноса клеток. В некоторых воплощениях клеточные композиции, содержащие сконструированные клетки, могут быть использованы в связанных способах, например, для модуляции иммунологической активности в иммунотерапевтическом подходе для лечения, например, рака млекопитающих или в других воплощениях для лечения аутоиммунных расстройств. Используемые способы обычно включают способ контакта TIP по настоящемуPharmaceutical compositions comprising the engineered cells and methods described herein can be used in adoptive cell transfer applications. In some embodiments, cellular compositions containing engineered cells can be used in related methods, for example, to modulate immunological activity in an immunotherapeutic approach for treating, for example, mammalian cancer or in other embodiments for treating autoimmune disorders. The methods used usually include the TIP contact method on the present

- 114 044346 изобретению с клеткой млекопитающего в условиях, которые разрешают специфическое связывание домена IgSF с модифицированной аффинностью и модуляцию иммунологической активности клетки млекопитающего. В некоторых воплощениях иммунные клетки (такие как инфильтрирующие опухоли лимфоциты (TIL), T-клетки (включая CD8 + или CD4 + T-клетки) или APC) сконструированы для экспрессии в виде мембранного белка и/или в виде растворимого полипептида ICOSL, иммуномодулирующего белка или конъюгата, как описано в данном документе. Затем сконструированные клетки могут контактировать с клеткой млекопитающего, такой как APC, второй лимфоцит или опухолевая клетка, в которой желательна модуляция иммунологической активности и в условиях, которые разрешают специфическое связывание домена IgSF с модифицированной аффинностью с контрструктурой на клетка млекопитающего, так что иммунологическая активность может модулироваться в клетке млекопитающего. Клетки могут контактировать in vivo или ex vivo.- 114 044346 the invention with a mammalian cell under conditions that allow specific binding of the affinity modified IgSF domain and modulation of the immunological activity of the mammalian cell. In some embodiments, immune cells (such as tumor infiltrating lymphocytes (TILs), T cells (including CD8+ or CD4+ T cells), or APCs) are engineered to be expressed as a membrane protein and/or as a soluble ICOSL polypeptide, an immunomodulatory protein or a conjugate as described herein. The engineered cells can then be contacted with a mammalian cell, such as an APC, a second lymphocyte, or a tumor cell, in which modulation of immunological activity is desired and under conditions that permit specific binding of the affinity-modified IgSF domain to a counterstructure on the mammalian cell such that immunological activity can be modulated in a mammalian cell. Cells can contact in vivo or ex vivo.

В некоторых воплощениях сконструированные клетки являются аутологичными клетками. В других воплощениях клетки являются аллогенными. В некоторых воплощениях клетки представляют собой аутологичные модифицированные клетки, повторно вводимые в организм млекопитающего, из которого он был выделен. В некоторых воплощениях клетки представляют собой аллогенные сконструированные клетки, введенные в млекопитающее. В некоторых воплощениях клетки собирают из крови или опухоли пациента, конструируют для экспрессии полипептида (такого как вариантный полипептид ICOSL, иммуномодулирующий белок или конъюгат, как описано в данном документе), размножают в системе культивирования in vitro (например, посредством стимуляции клетки) и повторно вводят пациенту для опосредования разрушению опухоли. В некоторых воплощениях способы проводят с помощью адоптивного переноса клеток, в которой клетки, экспрессирующие TIP (например, T-клетки), вводятся обратно пациенту. В некоторых воплощениях способы по изобретению используются для лечения пациентовмлекопитающих от рака, такого как лимфома, лимфоидный лейкоз, миелоидный лейкоз, рак шейки матки, нейробластома или множественная миелома.In some embodiments, the engineered cells are autologous cells. In other embodiments, the cells are allogeneic. In some embodiments, the cells are autologous modified cells reintroduced into the mammal from which it was isolated. In some embodiments, the cells are allogeneic engineered cells introduced into a mammal. In some embodiments, cells are collected from the patient's blood or tumor, engineered to express a polypeptide (such as an ICOSL variant polypeptide, immunomodulatory protein, or conjugate as described herein), expanded in an in vitro culture system (e.g., by cell stimulation), and reintroduced to the patient to mediate tumor destruction. In some embodiments, the methods are carried out using adoptive cell transfer, in which TIP-expressing cells (eg, T cells) are introduced back into the patient. In some embodiments, the methods of the invention are used to treat mammalian patients with cancer, such as lymphoma, lymphoid leukemia, myeloid leukemia, cervical cancer, neuroblastoma, or multiple myeloma.

В некоторых воплощениях фармацевтическая композиция может быть использована для ингибирования роста раковых клеток у млекопитающих (например, раковых клеток человека). Способ лечения рака может включать введение эффективного количества любой из описанных в данном документе фармацевтических композиций объекту с раком. Эффективное количество фармацевтической композиции можно вводить для ингибирования, остановки или обратного прогрессирования рака.In some embodiments, the pharmaceutical composition can be used to inhibit the growth of cancer cells in mammals (eg, human cancer cells). A method of treating cancer may include administering an effective amount of any of the pharmaceutical compositions described herein to a subject with cancer. An effective amount of the pharmaceutical composition can be administered to inhibit, stop, or reverse the progression of cancer.

Рак, который можно лечить с помощью фармацевтических композиций и способов лечения, описанных в данном документе, включает, без ограничения указанным, меланому, рак мочевого пузыря, гематологические раки (лейкоз, лимфому, миелому), рак печени, рак мозга, рак почек, рак молочной железы, рак поджелудочной железы (аденокарцинома), колоректальный рак, рак легкого (мелкоклеточный рак легкого и немелкоклеточный рак легкого), рак селезенки, рак тимуса или клеток крови (то есть лейкемия), рак предстательной железы, яичек рак, рак яичников, рак матки, рак желудка, мышечноскелетный рак, рак головы и шеи, рак желудочно-кишечного тракта, рак зародышевых клеток или эндокринный и нейроэндокринный рак. В некоторых воплощениях рак представляет собой саркому Юинга. В некоторых воплощениях рак выбирают из меланомы, рака легкого, рака мочевого пузыря и гематологического рака. В некоторых воплощениях рак представляет собой лимфому, лимфоидный лейкоз, миелоидный лейкоз, рак шейки матки, нейробластому или множественную миелому.Cancers that can be treated with the pharmaceutical compositions and methods of treatment described herein include, but are not limited to, melanoma, bladder cancer, hematologic cancers (leukemia, lymphoma, myeloma), liver cancer, brain cancer, kidney cancer, cancer breast cancer, pancreatic cancer (adenocarcinoma), colorectal cancer, lung cancer (small cell lung cancer and non-small cell lung cancer), spleen cancer, thymus or blood cell cancer (i.e. leukemia), prostate cancer, testicular cancer, ovarian cancer, cancer uterine cancer, stomach cancer, musculoskeletal cancer, head and neck cancer, gastrointestinal cancer, germ cell cancer or endocrine and neuroendocrine cancer. In some embodiments, the cancer is Ewing's sarcoma. In some embodiments, the cancer is selected from melanoma, lung cancer, bladder cancer, and hematologic cancer. In some embodiments, the cancer is lymphoma, lymphoid leukemia, myeloid leukemia, cervical cancer, neuroblastoma, or multiple myeloma.

Раковые клетки человека можно обрабатывать in vivo или ex vivo. При обработке ex vivo пациентачеловека, ткань или жидкости, содержащие раковые клетки, обрабатываются вне организма, а затем ткань или жидкости снова вводятся обратно в пациента. В некоторых воплощениях рак лечится у пациента-человека in vivo путем введения терапевтической композиции пациенту.Human cancer cells can be treated in vivo or ex vivo. In ex vivo treatment of a human patient, tissue or fluids containing cancer cells are processed outside the body and then the tissue or fluids are reinserted back into the patient. In some embodiments, cancer is treated in a human patient in vivo by administering the therapeutic composition to the patient.

В некоторых воплощениях фармацевтическую композицию вводят в виде монотерапии (т.е. в виде единственного агента) или в виде комбинированной терапии (то есть в сочетании с одним или несколькими дополнительными противоопухолевыми агентами, такими как химиотерапевтическое лекарственное средство, противоопухолевая вакцина или ингибитор иммунной контрольной точки. В некоторых воплощениях фармацевтическая композиция также может вводиться с лучевой терапией.In some embodiments, the pharmaceutical composition is administered as monotherapy (i.e., as a single agent) or as combination therapy (i.e., in combination with one or more additional anticancer agents, such as a chemotherapy drug, a tumor vaccine, or an immune checkpoint inhibitor In some embodiments, the pharmaceutical composition may also be administered with radiation therapy.

В некоторых воплощениях фармацевтическую композицию вводят в виде монотерапии (т.е. в виде единственного агента) или в виде комбинированной терапии (то есть в сочетании с одним или несколькими дополнительными противоопухолевыми агентами, такими как химиотерапевтическое лекарственное средство, противоопухолевая вакцина или ингибитор иммунной контрольной точки. В некоторых воплощениях фармацевтическая композиция также может вводиться с лучевой терапией. В некоторых аспектах ингибитор иммунной контрольной точки блокирует взаимодействия PD-1 с PD-L1 и/или PD-L2. В некоторых случаях ингибитор иммунной контрольной точки представляет собой антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, который специфически связывает PD-1, PD-L1 или PD-L2. В некоторых случаях ингибитор иммунной контрольной точки представляет собой антитело против PD-1, такое как ниволумаб или пембролизумаб или его антигенсвязывающий фрагмент. В некоторых случаях ингибитор иммунной контрольной точки блокирует или является антагонистом CTLA-4, таким как антитело против CTLA-4 или его антигенсвязывающий фрагмент. В некоторых аспектах настоящего изобретения ингибитор иммунной контрольной точки представляет собой тремелимумаб или ипилимумаб.In some embodiments, the pharmaceutical composition is administered as monotherapy (i.e., as a single agent) or as combination therapy (i.e., in combination with one or more additional anticancer agents, such as a chemotherapy drug, a tumor vaccine, or an immune checkpoint inhibitor In some embodiments, the pharmaceutical composition can also be administered with radiation therapy. In some aspects, the immune checkpoint inhibitor blocks the interactions of PD-1 with PD-L1 and/or PD-L2. In some cases, the immune checkpoint inhibitor is an antibody or an antigen-binding fragment thereof , which specifically binds PD-1, PD-L1, or PD-L2. In some cases, the immune checkpoint inhibitor is an anti-PD-1 antibody such as nivolumab or pembrolizumab or an antigen-binding fragment thereof. In some cases, the immune checkpoint inhibitor blocks or is a CTLA-4 antagonist, such as an anti-CTLA-4 antibody or an antigen-binding fragment thereof. In some aspects of the present invention, the immune checkpoint inhibitor is tremelimumab or ipilimumab.

- 115 044346- 115 044346

В некоторых воплощениях фармацевтическая композиция подавляет иммунный ответ, что может быть полезно при лечении воспалительных или аутоиммунных расстройств или трансплантации органов. В некоторых воплощениях фармацевтическая композиция включает вариантный полипептид ICOSL в формате, который проявляет антагонистическую активность к его когнатному партнеру связывания CD28 или ICOS и/или который блокирует или ингибирует костимулирующую сигнализацию через CD28 или ICOS. Иллюстративные форматы полипептида ICOSL для использования в таких терапевтических применениях включают, например, вариантный полипептид ICOSL, который является растворимым (например, гибридный белок IFOSL-Fc), иммуномодулирующий белок или стек вариантного полипептида ICOSL и другого IgSF, включая его растворимые формы, которые представляют собой Fc-гибриды, сконструированную клетку, экспрессирующую секретируемый иммуномодулирующий белок, или инфекционный агент, содержащий нуклеотидную молекулу, кодирующую секретируемый иммуномодулирующий белок, например, для экспрессии и секреции секретируемого иммуномодулирующего белка в инфицированной клетке (например, опухолевой клетке или APC, например дендритной клетке).In some embodiments, the pharmaceutical composition suppresses the immune response, which may be useful in the treatment of inflammatory or autoimmune disorders or organ transplantation. In some embodiments, the pharmaceutical composition includes a variant ICOSL polypeptide in a format that exhibits antagonistic activity to its cognate binding partner CD28 or ICOS and/or that blocks or inhibits co-stimulatory signaling through CD28 or ICOS. Exemplary ICOSL polypeptide formats for use in such therapeutic applications include, for example, a variant ICOSL polypeptide that is soluble (e.g., an IFOSL-Fc fusion protein), an immunomodulatory protein, or a stack of a variant ICOSL polypeptide and other IgSF, including soluble forms thereof that are Fc hybrids, an engineered cell expressing a secreted immunomodulatory protein, or an infectious agent containing a nucleotide molecule encoding a secreted immunomodulatory protein, for example, to express and secrete a secreted immunomodulatory protein in an infected cell (eg, a tumor cell or an APC, such as a dendritic cell).

В некоторых воплощениях воспалительное или аутоиммунное заболевание представляет собой васкулит, ассоциированный с антинейтрофильными цитоплазматическими антителами (ANCA), васкулит, аутоиммунные заболевания кожи, трансплантацию, болезнь ревматической, воспалительное желудочнокишечные заболевания, воспалительное заболевание глаз, воспалительные неврологическое болезнь, воспалительное заболевание легких, воспалительное эндокринное заболевание или аутоиммунное гематологическое заболевание.In some embodiments, the inflammatory or autoimmune disease is antineutrophil cytoplasmic antibody (ANCA) associated vasculitis, vasculitis, autoimmune skin disease, transplantation, rheumatic disease, inflammatory gastrointestinal disease, inflammatory eye disease, inflammatory neurological disease, inflammatory pulmonary disease, inflammatory endocrine disease or autoimmune hematological disease.

В некоторых воплощениях воспалительные и аутоиммунные расстройства, которые можно лечить с помощью фармацевтической композиции, описанной в данном документе, представляют собой болезнь Аддисона, аллергии, гнездную алопецию, болезнь Альцгеймера, васкулит, ассоциированный с антинейтрофильными цитоплазматическими антителами (ANCA), анкилозирующий спондилит, антифосфолипидный синдром (синдром Хьюза), астму, атеросклероз, ревматоидный артрит, аутоиммунную гемолитическую анемию, аутоиммунный гепатит, аутоиммунный синдром внутреннего уха, аутоиммунный лимфопролиферативный синдром, аутоиммунный миокардит, аутоиммунный оофорит, аутоиммунный орхит, азооспермию, болезнь Бехчета, болезнь Бергера, буллезный пемфигоид, кардиомиопатию, сердечно-сосудистые заболевания, целиакию-спру/глютеновую энтеропатию, синдром хронической усталостной иммунной дисфункции (CFIDS), хронический идиопатический полиневрит, хроническую воспалительную демиелинизацию, сочетание синдрома Гийена-Барре с миозитом (CIDP), хроническая рецидивирующую полинейропатию (синдром Гийена-Барре), синдром Чарга Стросса (CSS), рубцовый пемфигоид, болезнь холодовых агглютининов (CAD), COPD (хроническую обструктивную болезнь легких), синдром CREST, болезнь Крона, дерматит, герпетиформ, дерматомиозит, диабет, дискоидную волчанку, экзему, буллезный эпидермоз, существенную смешанную криоглобулинемию, синдром Эвана, экзофтальм, фибромиалгию, синдром Гудпасчера, Болезнь Грейвса, тиреоидит Хасимото, идиопатический фиброз легких, идиопатическую тромбоцитопеническую пурпуру (ITP), нефропатию IgA, иммунопролиферативное заболевание или расстройство, воспалительное заболевание кишечника (IBD), интерстициальную болезнь легких, ювенильный артрит, ювенильный идиопатический артрит (JIA), болезнь Кавасаки, мигренический синдром Ламберт-Итона, красный плоский лишай, волчаночный нефрит, лимфоцитарный липофизит, болезнь Меньера, синдром Миллера-Фишера/острую диссеминированную энцефаломиелорадикулопатию, смешанную болезнь соединительной ткани, рассеянный склероз (MS), мышечный ревматизм, миалгический энцефаломиелит (ME), миастению, воспаление глаз, листовидную пузырчатку, обыкновенную пузырчатку, злокачественную анемию, нодозный полиартериит, полихондрию, полигландулярные синдромы (синдром Витакера), ревматическую полимиалгию, полимиозит, первичную агаммаглобулинемию, первичный билиарный цирроз/аутоиммунную холангиопатию, псориаз, псориатический артрит, феномен Рейно, синдром Рейтера/реактивный артрит, рестеноз, ревматическую лихорадку, ревматическое заболевание, саркоидоз, синдром Шмидта, склеродермию, синдром Сьоргена, синдром жесткого человека, системную красную волчанку (SLE), системную склеродермию, артерит Такаюсу, височный артериит/гигантский клеточный артериит, тиреоидит, диабет 1 типа, язвенный колит, увеит, васкулит, витилиго, интерстициальное заболевание кишечника или гранулематоз Вегенера. В некоторых воплощениях воспалительное или аутоиммунное заболевание выбрано из интерстициального заболевания кишечника, трансплантации, болезни Крона, язвенного колита, рассеянного склероза, астмы, ревматоидного артрита и псориаза.In some embodiments, inflammatory and autoimmune disorders that can be treated with the pharmaceutical composition described herein are Addison's disease, allergies, alopecia areata, Alzheimer's disease, antineutrophil cytoplasmic antibody-associated (ANCA) vasculitis, ankylosing spondylitis, antiphospholipid syndrome (Hughes syndrome), asthma, atherosclerosis, rheumatoid arthritis, autoimmune hemolytic anemia, autoimmune hepatitis, autoimmune inner ear syndrome, autoimmune lymphoproliferative syndrome, autoimmune myocarditis, autoimmune oophoritis, autoimmune orchitis, azoospermia, Behcet's disease, Berger's disease, bullous pemphigoid, cardiomyopathy, cardiovascular diseases, celiac sprue/celiac enteropathy, chronic fatigue immune dysfunction syndrome (CFIDS), chronic idiopathic polyneuritis, chronic inflammatory demyelination, combination of Guillain-Barré syndrome with myositis (CIDP), chronic relapsing polyneuropathy (Guillain-Barré syndrome), Churg-Strauss syndrome (CSS), cicatricial pemphigoid, cold agglutinin disease (CAD), COPD (chronic obstructive pulmonary disease), CREST syndrome, Crohn's disease, dermatitis, herpetiformis, dermatomyositis, diabetes, discoid lupus, eczema, epidermosis bullosa, significant mixed cryoglobulinemia , Evan's syndrome, proptosis, fibromyalgia, Goodpasture's syndrome, Graves' disease, Hashimoto's thyroiditis, idiopathic pulmonary fibrosis, idiopathic thrombocytopenic purpura (ITP), IgA nephropathy, immunoproliferative disease or disorder, inflammatory bowel disease (IBD), interstitial lung disease, juvenile arthritis, juvenile idiopathic arthritis (JIA), Kawasaki disease, Lambert-Eaton migraine syndrome, lichen planus, lupus nephritis, lymphocytic lipophysitis, Meniere's disease, Miller-Fisher syndrome/acute disseminated encephalomyeloradiculopathy, mixed connective tissue disease, multiple sclerosis (MS), muscular rheumatism, myalgic encephalomyelitis (ME), myasthenia gravis, ocular inflammation, pemphigus foliaceus, pemphigus vulgaris, pernicious anemia, polyarteritis nodosa, polychondria, polyglandular syndromes (Whitaker syndrome), polymyalgia rheumatica, polymyositis, primary agammaglobulinemia, primary biliary cirrhosis/a utoimmune cholangiopathy, psoriasis , psoriatic arthritis, Raynaud's phenomenon, Reiter's syndrome/reactive arthritis, restenosis, rheumatic fever, rheumatic disease, sarcoidosis, Schmidt's syndrome, scleroderma, Sjorgen's syndrome, stiff man syndrome, systemic lupus erythematosus (SLE), systemic scleroderma, Takayusu arteritis, temporal arteritis /giant cell arteritis, thyroiditis, type 1 diabetes, ulcerative colitis, uveitis, vasculitis, vitiligo, interstitial bowel disease or Wegener's granulomatosis. In some embodiments, the inflammatory or autoimmune disease is selected from interstitial bowel disease, transplantation, Crohn's disease, ulcerative colitis, multiple sclerosis, asthma, rheumatoid arthritis, and psoriasis.

В некоторых воплощениях воспалительное или аутоиммунное расстройство представляет собой хроническое аутоиммунное заболевание. В некоторых воплощениях воспалительное или аутоиммунное расстройство представляет собой синдром Шегрена (pSS) или системную красную волчанку (SLE). В некоторых воплощениях воспалительное или аутоиммунное расстройство представляет собой воспалительное заболевание кишечника (IBD). В некоторых примерах воспалительное или аутоиммунное заболевание представляет собой болезнь Крона. В некоторых воплощениях воспалительное или аутоиммунное расстройство представляет собой заболевание или расстройство, связанное с IBD, например интерстициальная болезнь легких (ILD). В некоторых воплощениях воспалительное или аутоиммунное расстройство представляет собой псориатический артрит или ревматоидный артрит. В некоторых воплощеIn some embodiments, the inflammatory or autoimmune disorder is a chronic autoimmune disease. In some embodiments, the inflammatory or autoimmune disorder is Sjögren's syndrome (pSS) or systemic lupus erythematosus (SLE). In some embodiments, the inflammatory or autoimmune disorder is inflammatory bowel disease (IBD). In some examples, the inflammatory or autoimmune disease is Crohn's disease. In some embodiments, the inflammatory or autoimmune disorder is a disease or disorder associated with IBD, such as interstitial lung disease (ILD). In some embodiments, the inflammatory or autoimmune disorder is psoriatic arthritis or rheumatoid arthritis. In some incarnations

- 116 044346 ниях фармацевтической композиция вводится для того, чтобы модулировать аутоиммунное состояние. Например, подавление иммунного ответа может быть полезным в способах ингибирования отторжения трансплантата ткани, клетки или органа от донора реципиентом. Соответственно, в некоторых воплощениях фармацевтические композиции, описанные в данном документе, используются для ограничения или предотвращения связанных с трансплантатом или связанных с трансплантацией заболеваний или расстройств, таких как болезнь трансплантат против хозяина (GVHD). В некоторых воплощениях фармацевтические композиции используются для подавления аутоиммунного отторжения трансплантированного или привитого костного мозга, органов, кожи, мышц, нейронов, островков или паренхиматозных клеток.- 116 044346 nyah pharmaceutical composition is administered in order to modulate an autoimmune condition. For example, suppression of the immune response may be useful in methods of inhibiting the rejection of a tissue, cell, or organ graft from a donor by a recipient. Accordingly, in some embodiments, the pharmaceutical compositions described herein are used to limit or prevent graft-related or transplant-related diseases or disorders, such as graft-versus-host disease (GVHD). In some embodiments, pharmaceutical compositions are used to suppress autoimmune rejection of transplanted or engrafted bone marrow, organs, skin, muscle, neurons, islets, or parenchymal cells.

В некоторых воплощениях фармацевтическая композиция, предоставленная в настоящем документе, такая как вариантный Fc-гибридный белок ICOSL IgSF (например, IgV), предоставленный в настоящем документе, используется для лечения псориатического артрита (PsA). В некоторых случаях PsA поражает один или несколько суставов, таких как пальцы рук, ног, рук или ног, включая локти, запястья, кисти рук и ступни или крестцово-подвздошное сочленение. В некоторых случаях PsA является слабым и/или поражает четыре или менее суставов. В некоторых случаях PsA является умеренным и/или затрагивает четыре или более суставов. В некоторых случаях у объекта с PsA может наблюдаться боль, скованность или воспаление в позвоночнике или шее или в еще одном суставе.In some embodiments, a pharmaceutical composition provided herein, such as the variant ICOSL IgSF Fc fusion protein (eg, IgV) provided herein, is used for the treatment of psoriatic arthritis (PsA). In some cases, PsA affects one or more joints such as the fingers, toes, arms or legs, including the elbows, wrists, hands and feet, or the sacroiliac joint. In some cases, PsA is mild and/or affects four or fewer joints. In some cases, PsA is mild and/or affects four or more joints. In some cases, a person with PsA may have pain, stiffness, or inflammation in the spine or neck or another joint.

В некоторых воплощениях фармацевтическая композиция, предоставленная в настоящем документе, такая как вариантный Fc-гибридный белок ICOSL IgSF (например, IgV), предоставленный в настоящем документе, используется для лечения ревматоидного артрита (RA). В некоторых случаях RA влияет на суставы, выстилку суставов и/или несуставные структуры в организме (например, на кожу, глаза, легкие, сердце, почки, слюнные железы, нервную ткань, костный мозг или кровеносные сосуды). В некоторых воплощениях RA или симптомы RA являются хроническими.In some embodiments, a pharmaceutical composition provided herein, such as the variant ICOSL IgSF Fc fusion protein (eg, IgV) provided herein, is used for the treatment of rheumatoid arthritis (RA). In some cases, RA affects joints, the lining of joints, and/or non-articular structures in the body (such as skin, eyes, lungs, heart, kidneys, salivary glands, nerve tissue, bone marrow, or blood vessels). In some embodiments, RA or symptoms of RA are chronic.

В некоторых воплощениях фармацевтическая композиция, предоставленная в настоящем документе, такая как вариантный Fc-гибридный белок ICOSL IgSF (например, IgV), предоставленный в настоящем документе, используется для лечения GVHD. В некоторых воплощениях GVHD является острой GVHD (aGVHD). В некоторых случаях aGVHD возникает после аллогенной трансплантации гемопоэтических стволовых клеток (HSCT) и/или реакции донорных иммунных клеток против тканей хозяина. В некоторых случаях aGVHD проявляется в коже, печени или желудочно-кишечном тракте.In some embodiments, a pharmaceutical composition provided herein, such as the variant ICOSL IgSF Fc fusion protein (eg, IgV) provided herein, is used for the treatment of GVHD. In some embodiments, GVHD is acute GVHD (aGVHD). In some cases, aGVHD occurs after allogeneic hematopoietic stem cell transplantation (HSCT) and/or reaction of donor immune cells against host tissues. In some cases, aGVHD manifests itself in the skin, liver, or gastrointestinal tract.

В некоторых воплощениях фармацевтическая композиция, предоставленная в настоящем документе, такая как вариантный Fc-гибридный белок ICOSL IgSF (например, IgV), предоставленный в настоящем документе, используется для лечения аутоиммунного состояния, ассоциированного с органным трансплантом. В некоторых случаях лечение аутоиммунного состояния, связанного с трансплантацией органа, может продлить выживаемость хозяина и трансплантированного органа. В некоторых воплощениях лечение аутоиммунного состояния, связанного с трансплантацией органа, включает профилактику или ингибирование или предотвращение отторжения трансплантата объектом, который является реципиентом органного трансплантата.In some embodiments, a pharmaceutical composition provided herein, such as the variant ICOSL IgSF Fc fusion protein (eg, IgV) provided herein, is used to treat an organ transplant-associated autoimmune condition. In some cases, treating an autoimmune condition associated with organ transplantation may prolong survival of the host and the transplanted organ. In some embodiments, treating an autoimmune condition associated with organ transplantation includes preventing or inhibiting or preventing transplant rejection by a subject who is an organ transplant recipient.

В некоторых воплощениях фармацевтическая композиция, предоставленная в настоящем документе, такая как вариантный Fc-гибридный белок ICOSL IgSF (например, IgV), предоставленный в настоящем документе, используется для лечения воспалительной болезни кишечника (IBD). В некоторых воплощениях фармацевтическая композиция, предоставленная в настоящем документе, такая как вариантный Fc-гибридный белок ICOSL IgSF (например, IgV), предоставленный в настоящем документе, используется для лечения болезни Крона. В некоторых воплощениях болезнь Крона может включать подтип из колита Крона, энтерита Крона, илеита Крона или энтероколита Крона.In some embodiments, a pharmaceutical composition provided herein, such as the variant ICOSL IgSF Fc fusion protein (eg, IgV) provided herein, is used for the treatment of inflammatory bowel disease (IBD). In some embodiments, a pharmaceutical composition provided herein, such as the variant ICOSL IgSF Fc fusion protein (eg, IgV) provided herein, is used for the treatment of Crohn's disease. In some embodiments, Crohn's disease may include a subtype of Crohn's colitis, Crohn's enteritis, Crohn's ileitis, or Crohn's enterocolitis.

В некоторых воплощениях фармацевтическая композиция, предоставленная в настоящем документе, такая как вариантный Fc-гибридный белок ICOSL IgSF (например, IgV), предоставленный в настоящем документе, используется для лечения системной красной волчанки (SLE). В некоторых воплощениях фармацевтическая композиция, предоставленная в настоящем документе, такая как вариантный Fcгибридный белок ICOSL IgSF (например, IgV), предоставленный в настоящем документе, используется для лечения синдрома Шегрена.In some embodiments, a pharmaceutical composition provided herein, such as the variant ICOSL IgSF Fc fusion protein (eg, IgV) provided herein, is used for the treatment of systemic lupus erythematosus (SLE). In some embodiments, a pharmaceutical composition provided herein, such as the variant ICOSL IgSF Fc fusion protein (eg, IgV) provided herein, is used for the treatment of Sjögren's syndrome.

IX. Примерные воплощенияIX. Exemplary embodiments

Среди предлагаемых воплощений.Among the proposed embodiments.

1. Полипептид вариантного лиганда ICOS (ICOSL), включающий одну или несколько модификаций аминокислот в домене суперсемейства иммуноглобулинов (IgSF) референсного полипептида ICOSL, где референсный полипептид ICOSL представляет собой укороченный внеклеточный домен, содержащий непрерывную последовательность аминокислот, содержащую аминокислоты 1-112 и C-концевое укорочение, по меньшей мере, 25 аминокислот относительно последовательности внеклеточного домена ICOSL, представленного в SEQ ID NO: 32.1. An ICOS variant ligand (ICOSL) polypeptide comprising one or more amino acid modifications in the immunoglobulin superfamily (IgSF) domain of the ICOSL reference polypeptide, where the ICOSL reference polypeptide is a truncated extracellular domain containing a contiguous amino acid sequence containing amino acids 1-112 and C- a terminal truncation of at least 25 amino acids relative to the ICOSL extracellular domain sequence set forth in SEQ ID NO: 32.

2. Вариантный полипептид ICOSL по воплощению 1, где вариантный полипептид ICOSL проявляет усиленное связывание с эктодоменом(ами) ICOS или CD28 по сравнению со связыванием референсного полипептида ICOSL с тем же эктодоменом(ами).2. The variant ICOSL polypeptide of embodiment 1, wherein the variant ICOSL polypeptide exhibits enhanced binding to ICOS or CD28 ectodomain(s) compared to the binding of the reference ICOSL polypeptide to the same ectodomain(s).

3. Вариантный полипептид ICOSL по воплощению 1 или воплощению 2, где вариантный полипептид ICOSL проявляет измененное связывание с эктодоменом(ами) ICOS или CD28 по сравнению со свя-3. The variant ICOSL polypeptide of embodiment 1 or embodiment 2, wherein the variant ICOSL polypeptide exhibits altered binding to ICOS or CD28 ectodomain(s) compared to binding to

- 117 044346 зыванием референсного полипептида ICOSL с тем же эктодоменом(ами).- 117 044346 naming the ICOSL reference polypeptide with the same ectodomain(s).

4. Вариантный полипептид ICOSL по любому из воплощений 1-3, где C-концевое укорочение составляет, по меньшей мере, 30, по меньшей мере, 40, по меньшей мере, 50, по меньшей мере, 60, по меньшей мере, 70, по меньшей мере, 80, по меньшей мере, 90, по меньшей мере, 100, по меньшей мере,4. The variant ICOSL polypeptide according to any one of embodiments 1-3, wherein the C-terminal truncation is at least 30, at least 40, at least 50, at least 60, at least 70, at least 80, at least 90, at least 100, at least

125 аминокислотных остатков.125 amino acid residues.

5. Вариантный полипептид ICOSL по любому из воплощений 1-4, где референсный полипептид ICOSL изменен или отсутствует сайт расщепления протеазой, представленный в виде аминокислот 204209 из SEQ ID NO: 32.5. The variant ICOSL polypeptide of any one of embodiments 1-4, wherein the reference ICOSL polypeptide is altered or lacks the protease cleavage site represented by amino acids 204209 of SEQ ID NO: 32.

6. Вариантный полипептид ICOSL по любому из воплощений 1-5, где референсный полипептид ICOSL включает аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 545.6. The variant ICOSL polypeptide of any one of embodiments 1-5, wherein the reference ICOSL polypeptide includes the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 545.

7. Вариантный полипептид ICOSL по любому из воплощений 1-5, где референсный полипептид ICOSL состоит из аминокислотной последовательности, представленной в SEQ ID NO: 545.7. The variant ICOSL polypeptide of any one of embodiments 1-5, wherein the reference ICOSL polypeptide consists of the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 545.

8. Вариантный полипептид лиганда ICOSL (ICOSL), содержащий одну или несколько модификаций аминокислот в референсном полипептиде ICOSL, где референсный полипептид ICOSL состоит из аминокислотной последовательности, представленной в SEQ ID NO: 545.8. A variant ICOSL ligand polypeptide (ICOSL) comprising one or more amino acid modifications to an ICOSL reference polypeptide, wherein the ICOSL reference polypeptide consists of the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 545.

9. Вариантный полипептид лиганда ICOS (ICOSL), содержащий одну или несколько модификаций аминокислот в домене суперсемейства иммуноглобулинов (IgSF) референсного полипептида ICOSL, где референсный полипептид ICOSL изменен в одной или нескольких аминокислотах, соответствующих аминокислотам 204-209 относительно SEQ ID NO: 32.9. A variant ICOS ligand (ICOSL) polypeptide comprising one or more amino acid modifications in the immunoglobulin superfamily (IgSF) domain of the ICOSL reference polypeptide, wherein the ICOSL reference polypeptide is altered at one or more amino acids corresponding to amino acids 204-209 relative to SEQ ID NO: 32.

10. Вариантный полипептид ICOSL по воплощению 8 или воплощению 9, где вариантный полипептид ICOSL проявляет измененное связывание с одним или несколькими его партнерами по связыванию по сравнению со связыванием референсного полипептида ICOSL с одним или несколькими связывающими партнерами.10. The variant ICOSL polypeptide of embodiment 8 or embodiment 9, wherein the variant ICOSL polypeptide exhibits altered binding to one or more binding partners thereof compared to the binding of the reference ICOSL polypeptide to one or more binding partners.

11. Вариантный полипептид ICOSL по воплощению 8 или воплощению 9, где вариантный полипептид ICOSL проявляет повышенное связывание с одним или несколькими его партнерами по связыванию по сравнению со связыванием референсного полипептида ICOSL с одним или несколькими связывающими партнерами.11. The variant ICOSL polypeptide of embodiment 8 or embodiment 9, wherein the variant ICOSL polypeptide exhibits increased binding to one or more binding partners thereof compared to the binding of the reference ICOSL polypeptide to one or more binding partners.

12. Вариантный полипептид ICOSL по любому из воплощений 9-11, где изменение включает делецию одной или нескольких смежных аминокислот, соответствующих аминокислотам 204-209 относительно SEQ ID NO: 32.12. The ICOSL variant polypeptide of any one of embodiments 9-11, wherein the change includes the deletion of one or more contiguous amino acids corresponding to amino acids 204-209 relative to SEQ ID NO: 32.

13. Вариантный полипептид ICOSL по любому из воплощений 1-6 и 9-12, где референсный полипептид ICOSL включает аминокислотную последовательность, представленную в любой из SEQ ID NO: 600-605.13. The ICOSL variant polypeptide of any one of embodiments 1-6 and 9-12, wherein the reference ICOSL polypeptide comprises the amino acid sequence set forth in any of SEQ ID NOs: 600-605.

14. Вариантный полипептид ICOSL по любому из воплощений 1-6 и 9-12, где референсный полипептид ICOSL включает аминокислотную последовательность, представленную в любой из SEQ ID NO: 600-605.14. The ICOSL variant polypeptide of any one of embodiments 1-6 and 9-12, wherein the reference ICOSL polypeptide comprises the amino acid sequence set forth in any of SEQ ID NOs: 600-605.

15. Вариантный полипептид ICOSL по любому из воплощений 1-6 и 9-14, где изменение включает, по меньшей мере, одну аминокислотную замену в одном или обоих положениях 207 и 208, соответствующих положениям, изложенным в SEQ ID NO: 32.15. The ICOSL variant polypeptide of any one of embodiments 1-6 and 9-14, wherein the change includes at least one amino acid substitution at one or both of positions 207 and 208 corresponding to the provisions set forth in SEQ ID NO: 32.

16. Вариантный полипептид ICOSL по воплощению 15, где, по меньшей мере, одна аминокислотная замена представляет собой N207A, N207G или L208G или их консервативную аминокислотную замену.16. The ICOSL variant polypeptide of embodiment 15, wherein at least one amino acid substitution is N207A, N207G or L208G or a conservative amino acid substitution thereof.

17. Вариантный полипептид ICOSL по любому из воплощений 9-16, где референсный полипептид ICOSL включает аминокислотную последовательность, представленную в любой из SEQ ID NO: 623-628.17. The variant ICOSL polypeptide of any one of embodiments 9-16, wherein the reference ICOSL polypeptide includes the amino acid sequence presented in any of SEQ ID NOs: 623-628.

18. Вариантный полипептид ICOSL по любому из воплощений 9-17, где референсный полипептид ICOSL состоит из аминокислотной последовательности, представленной в любой из SEQ ID NO: 623628.18. The ICOSL variant polypeptide of any one of embodiments 9-17, wherein the reference ICOSL polypeptide consists of the amino acid sequence set forth in any one of SEQ ID NO: 623628.

19. Вариантный полипептид ICOSL по любому из воплощений 5-7 и 9-18, где вариантный полипептид ICOSL проявляет пониженное протеолитическое расщепление при экспрессии из клетки, необязательно по сравнению с полноразмерным внеклеточным доменом вариантного полипептида ICOSL при экспрессии из той же самой клетки.19. The variant ICOSL polypeptide of any one of embodiments 5-7 and 9-18, wherein the variant ICOSL polypeptide exhibits reduced proteolytic cleavage when expressed from a cell, optionally compared to the full-length extracellular domain of the variant ICOSL polypeptide when expressed from the same cell.

20. Вариантный полипептид ICOSL по воплощению 19, где клетка представляет собой клетку млекопитающего.20. The ICOSL variant polypeptide of embodiment 19, wherein the cell is a mammalian cell.

21. Вариантный полипептид ICOSL по воплощению 19 или воплощению 20, где клетка представляет собой клеточную линию яичника китайского хомячка (CHO) или ее производное.21. The ICOSL variant polypeptide of embodiment 19 or embodiment 20, wherein the cell is a Chinese hamster ovary (CHO) cell line or a derivative thereof.

22. Вариантный полипептид ICOSL по любому из воплощений 1-21, где аминокислотная модификация представляет собой аминокислотную замену, вставку или делецию.22. The ICOSL variant polypeptide of any one of embodiments 1-21, wherein the amino acid modification is an amino acid substitution, insertion or deletion.

23. Вариант любого из воплощений 1-22, в котором одна или несколько аминокислотных модификаций находятся в положении, соответствующем положению(положениям), выбранному из 10, 11, 13, 16, 18, 20, 25, 26, 27, 30, 33, 37, 38, 42, 43, 47, 52, 54, 57, 61, 62, 67, 71, 72, 74, 75, 77, 78, 80, 84, 89, 90, 92, 93, 94, 96, 97, 98, 99, 100, 102, 103, 107, 109, 110, 111, 113, 115, 116, 117, 119, 120, 121, 122, 126, 129, 130, 132, 133, 135, 137, 138, 139, 140, 142, 143, 144, 146, 151, 152, 153, 154, 155, 156, 158, 161, 164, 166, 168, 172, 173, 175, 190, 192, 193, 194, 198, 201, 203, 207, 208, 210, 212, 217, 218, 220, 221, 224, 225 или 227 относи-23. A variant of any of embodiments 1-22, wherein one or more amino acid modifications are at a position corresponding to position(s) selected from 10, 11, 13, 16, 18, 20, 25, 26, 27, 30, 33 , 37, 38, 42, 43, 47, 52, 54, 57, 61, 62, 67, 71, 72, 74, 75, 77, 78, 80, 84, 89, 90, 92, 93, 94, 96 , 97, 98, 99, 100, 102, 103, 107, 109, 110, 111, 113, 115, 116, 117, 119, 120, 121, 122, 126, 129, 130, 132, 133, 135, 13 7 , 138, 139, 140, 142, 143, 144, 146, 151, 152, 153, 154, 155, 156, 158, 161, 164, 166, 168, 172, 173, 175, 190, 192, 193, 194 , 198, 201, 203, 207, 208, 210, 212, 217, 218, 220, 221, 224, 225 or 227 relative

- 118 044346 тельно SEQ ID NO: 32.- 118 044346 detailed SEQ ID NO: 32.

24. Вариант любого из воплощений 1-23, в котором одну или несколько модификаций аминокислот выбирают из M10V, M10I, V11E, S13G, E16V, S18R, A20T, A20V, S25G, R26S, F27C, F27S, N30D, Y33del, Q37R, T38P, K42E, T43A, Y47H, N52A, N52C, N52D, N52G, N52H, N52K, N52L, N52M, N52P, N52Q, N52R, N52S, N52T, N52V, N52Y, S54A, S54F, S54P, N57A, N57D, N57F, N57H, N57K, N57L, N57M, N57P, N57Q, N57S, N57T, N57V, N57W, N57Y, R61C, R61S, Y62F, L67P, A71T, G72R, L74Q, R75Q, D77G, F78L, L80P, NQQ, E90A, K92R, F93L, H94D, H94E, L96F, L96I, V97A, L98F, S99G, Q100A, Q100D, Q100E, Q100G, Q100K, Q100L, Q100M, Q100N, Q100P, Q100R, Q100S, Q100T, Q100E, L102, L102, V107A, V107I, S109G, S109N, V110A, V110D, V110N, E111del, T113E, H115Q, H115R, V116A, A117T, N119Q, F120I, F120S, S121G, V122A, V122H, S121306, S126305, E135K, T137A, F138L, T139S, C140del, C140D, S142F, I143T, I143V, N144D, Y146C, V151A, Y152C, Y152H, W153R, I154F, N155H, N155Q, Q154161, L15D L, L166Q, N168Q, F172S, L173S, M175T, T190A, T190S, S192G, V193A, V193M, N194D, C198R, N201S, L203F, L203P, N207Q, L208P, V210A, I218, I21G R221G, R221I, R221K, I224V, T225A, T225S, N227K или их консервативной аминокислотной замены.24. A variant of any of embodiments 1-23, wherein one or more amino acid modifications are selected from M10V, M10I, V11E, S13G, E16V, S18R, A20T, A20V, S25G, R26S, F27C, F27S, N30D, Y33del, Q37R, T38P , K42E, T43A, Y47H, N52A, N52C, N52D, N52G, N52H, N52K, N52L, N52M, N52P, N52Q, N52R, N52S, N52T, N52V, N52Y, S54A, S54F, S54P, N57A, N57D, N57F, N57H , N57K, N57L, N57M, N57P, N57Q, N57S, N57T, N57V, N57W, N57Y, R61C, R61S, Y62F, L67P, A71T, G72R, L74Q, R75Q, D77G, F78L, L80P, NQQ, E90A, K92R, F 93L , H94D, H94E, L96F, L96I, V97A, L98F, S99G, Q100A, Q100D, Q100E, Q100G, Q100K, Q100L, Q100M, Q100N, Q100P, Q100R, Q100S, Q100T, Q100E, L102, L1 02, V107A, V107I, S109G , S109N, V110A, V110D, V110N, E111del, T113E, H115Q, H115R, V116A, A117T, N119Q, F120I, F120S, S121G, V122A, V122H, S121306, S126305, E135K, T1 37A, F138L, T139S, C140del, C140D, S142F , I143T, I143V, N144D, Y146C, V151A, Y152C, Y152H, W153R, I154F, N155H, N155Q, Q154161, L15D L, L166Q, N168Q, F172S, L173S, M175T, T190A, T190 S, S192G, V193A, V193M, N194D, C198R, N201S, L203F, L203P, N207Q, L208P, V210A, I218, I21G R221G, R221I, R221K, I224V, T225A, T225S, N227K or their conservative amino acid substitution.

25. Вариантный полипептид ICOSL по любому из воплощений 1-24, где одна или несколько аминокислотных модификаций находятся в положении, соответствующем положению(ям) 52, 57 или 100.25. The ICOSL variant polypeptide of any one of embodiments 1-24, wherein the one or more amino acid modifications are at a position corresponding to position(s) 52, 57 or 100.

26. Вариантный полипептид ICOSL по любому из воплощений 1-25, где одна или несколько аминокислотных модификаций выбраны из N52A, N52C, N52D, N52G, N52H, N52K, N52L, N52M, N52Q, N52R, N52S, N52T, N52V, N52Y, N52K, S54A, S54P, N57A, N57D, N57E, N57F, N57H, N57K, N57L, N57M, N57P, N57Q, N57S, N57T, N57V, N57Y, N57W, Q100A, Q100D, Q100G, Q100K, Q100L, Q100M, Q100N, Q100P, Q100R, Q100S, Q100T или Q100V.26. The ICOSL variant polypeptide of any one of embodiments 1-25, wherein one or more amino acid modifications are selected from N52A, N52C, N52D, N52G, N52H, N52K, N52L, N52M, N52Q, N52R, N52S, N52T, N52V, N52Y, N52K , S54A, S54P, N57A, N57D, N57E, N57F, N57H, N57K, N57L, N57M, N57P, N57Q, N57S, N57T, N57V, N57Y, N57W, Q100A, Q100D, Q100G, Q100K, Q100L, Q100M , Q100N, Q100P , Q100R, Q100S, Q100T or Q100V.

27. Вариантный полипептид ICOSL по любому из воплощений 1-26, где одна или несколько аминокислотных модификаций выбраны из числа N52Y/N57Y/F138L/L203P, N52H/N57Y/Q100P, N52S/Y146C/Y152C, N52H/C198R, N52H/C140D/T225A, N52H/C198R/T225A, N52H/K92R, N52H/S99G, N57Y/Q100P, N52S/S130G/Y152C, N52S/Y152C, N52S/C198R, N52Y/N57Y/Y152C,27. A variant ICOSL polypeptide according to any one of embodiments 1-26, where one or more amino acid modifications are selected from N52Y/N57Y/F138L/L203P, N52H/N57Y/Q100P, N52S/Y146C/Y152C, N52H/C198R, N52H/C140D/ T225A, N52H/C198R/T225A, N52H/K92R, N52H/S99G, N57Y/Q100P, N52S/S130G/Y152C, N52S/Y152C, N52S/C198R, N52Y/N57Y/Y152C,

N52Y/N57Y/H129P/C198R, N52H/L161P/C198R, N52S/T113E, N52D/S54P, N52K/L208P, N52S/Y152H, N52D/V151A, N52H/I143T, N52S/L80P, N52S/R75Q/L203P, N52S/D158G, N52D/Q133H,N52Y/N57Y/H129P/C198R, N52H/L161P/C198R, N52S/T113E, N52D/S54P, N52K/L208P, N52S/Y152H, N52D/V151A, N52H/I143T, N52S/L80P, N52S/R75 Q/L203P, N52S/ D158G, N52D/Q133H,

N52S/N57Y/H94D/L96F/L98F/Q100R, N52S/N57Y/H94D/L96F/L98F/Q100R/G103E/F120S, N52S/G103E, N52H/F78L/Q100R, N52H/N57Y/Q100R/V110D, N52H/N57Y/R75Q/Q100R/V110D, N52H/N57Y/Q100R, N52H/N57Y/L74Q/Q100R/V110D, N52H/Q100R, N52H/S121G, A20V/N52H/N57Y/Q100R/S109G,N52S/N57Y/H94D/L96F/L98F/Q100R, N52S/N57Y/H94D/L96F/L98F/Q100R/G103E/F120S, N52S/G103E, N52H/F78L/Q100R, N52H/N57Y/Q100R/V110D , N52H/N57Y/ R75Q/Q100R/V110D, N52H/N57Y/Q100R, N52H/N57Y/L74Q/Q100R/V110D, N52H/Q100R, N52H/S121G, A20V/N52H/N57Y/Q100R/S109G,

N52H/N57Y/R61S/Q100R/V110D/L173S, N52H/N57Y/Q100R/V122A, N52H/N57Y/Q100R/F172S,N52H/N57Y/R61S/Q100R/V110D/L173S, N52H/N57Y/Q100R/V122A, N52H/N57Y/Q100R/F172S,

N52H/N57Y, N52S/F120S, N52S/V97A, N52S/G72R, N52S/A71T/A117T, N52S/E220G,N52H/N57Y, N52S/F120S, N52S/V97A, N52S/G72R, N52S/A71T/A117T, N52S/E220G,

Y47H/N52S/V107A/F120S, N52H/N57Y/Q100R/V110D/S132F/M175T,Y47H/N52S/V107A/F120S, N52H/N57Y/Q100R/V110D/S132F/M175T,

E16V/N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/Y152C/K156M/C198R, Q37R/N52H/N57Y/Q100R/V110N/S142F/C198R/D217V/R221G, N52H/N57Y/Q100R/V110D/C198R,E16V/N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/Y152C/K156M/C198R, Q37R/N52H/N57Y/Q100R/V110N/S142F/C198R/D217V/R221G, N52H/N57Y/Q100R/V110 D/C198R,

N52H/N57Y/Q100R/V110D/V116A/L161M/F172S/S192G/C198R, F27S/N52H/N57Y/V110N,N52H/N57Y/Q100R/V110D/V116A/L161M/F172S/S192G/C198R, F27S/N52H/N57Y/V110N,

N52S/H94E/L96I/S109N/L166Q, S18R/N52S/F93L/I143V/R221G, A20T/N52D/Y146C/Q164L,N52S/H94E/L96I/S109N/L166Q, S18R/N52S/F93L/I143V/R221G, A20T/N52D/Y146C/Q164L,

V11E/N30D/N52H/N57Y/H94E/L96I/L98F/N194D/V210A/I218T, N52S/H94E/L96I/V122M,V11E/N30D/N52H/N57Y/H94E/L96I/L98F/N194D/V210A/I218T, N52S/H94E/L96I/V122M,

N52H/N57Y/H94E/L96I/F120I/S126T/W153R/I218N, M10V/S18R/N30D/N52S/S126R/T139S/L203F,N52H/N57Y/H94E/L96I/F120I/S126T/W153R/I218N, M10V/S18R/N30D/N52S/S126R/T139S/L203F,

S25G/N30D/N52S/F120S/N227K, N30D/N52S/L67P/Q100K/D217G/R221K/T225S,S25G/N30D/N52S/F120S/N227K, N30D/N52S/L67P/Q100K/D217G/R221K/T225S,

N52H/N57Y/Q100R/V110D/A117T/T190S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/V110D/F172S/C198R,N52H/N57Y/Q100R/V110D/A117T/T190S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/V110D/F172S/C198R,

S25G/F27C/N52H/N57Y/Q100R/V110D/E135K/L173S/C198R, N52H/N57Y/V110A/C198R/R221I,S25G/F27C/N52H/N57Y/Q100R/V110D/E135K/L173S/C198R, N52H/N57Y/V110A/C198R/R221I,

M10I/S13G/N52H/N57Y/D77G/V110A/H129P/I143V/F172S/V193M,C198R, N52H/N57Y/R61C/Y62F/Q100R/V110N/F120S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/C198R,M10I/S13G/N52H/N57Y/D77G/V110A/H129P/I143V/F172S/V193M,C198R, N52H/N57Y/R61C/Y62F/Q100R/V110N/F120S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/V 110D/H115R/C198R,

N52H/N57Y/Q100R/V110D/N144D/F172S/C198R, N52S/H94E/L98F/Q100R, N52S/E90A,N52H/N57Y/Q100R/V110D/N144D/F172S/C198R, N52S/H94E/L98F/Q100R, N52S/E90A,

N30D/K42E/N52S, N52S/F120S/I143V/I224V, N52H/N57Y/Q100R/V110D/C198R/S212G,N30D/K42E/N52S, N52S/F120S/I143V/I224V, N52H/N57Y/Q100R/V110D/C198R/S212G,

N52H/N57Y/Q100R/C198R, N52S/N194D, N52H/N57Y/Q100R/L102R/V110D/H115R/C198R,N52H/N57Y/Q100R/C198R, N52S/N194D, N52H/N57Y/Q100R/L102R/V110D/H115R/C198R,

N52H/N57Y/Q100R/V110D/C198R/S212G, N52H/N57Y/Q100R/C198R, N52S/N194D,N52H/N57Y/Q100R/V110D/C198R/S212G, N52H/N57Y/Q100R/C198R, N52S/N194D,

N52H/N57Y/Q100R/L102R/V110D/H115R/C198R, N52S/S54P, T38P/N52S/N57D, N52H/C140del/T225A, N52H/F78L/Q100R/C198R, N52H/N57Y/R75Q/Q100P/V110D, N52H/N57Y/L74Q/V110D/S192G,N52H/N57Y/Q100R/L102R/V110D/H115R/C198R, N52S/S54P, T38P/N52S/N57D, N52H/C140del/T225A, N52H/F78L/Q100R/C198R, N52H/N57Y/R75Q/Q10 0P/V110D, N52H/ N57Y/L74Q/V110D/S192G,

N52H/S121G/C198R, N52S/F120S/N227K, N52S/A71T/A117T/T190A/C198R,N52H/S121G/C198R, N52S/F120S/N227K, N52S/A71T/A117T/T190A/C198R,

T43A/N52H/N57Y/L74Q/D89G/V110D/F172S, N52H/N57Y/Q100R/V110D/S132F/M175T, N52D,T43A/N52H/N57Y/L74Q/D89G/V110D/F172S, N52H/N57Y/Q100R/V110D/S132F/M175T, N52D,

N52H/N57Y/Q100R/V107I/V110D/I154F/C198R/R221G, N52Q/N207Q, N168Q/N207Q, N52Q/N168Q, N52Q/N84Q, N52Q/N119Q, N52Q/N84Q/N168Q, N52Q/N84Q/N207Q, N52Q/N119Q/N155Q,N52H/N57Y/Q100R/V107I/V110D/I154F/C198R/R221G, N52Q/N207Q, N168Q/N207Q, N52Q/N168Q, N52Q/N84Q, N52Q/N119Q, N52Q/N84Q/N168Q, N52Q/ N84Q/N207Q, N52Q/ N119Q/N155Q,

N52H/N84Q/N119Q, N52H/N84Q, N52H/N84Q/N168Q/N207Q, N52Q/N84Q/N155Q/N168Q,N52H/N84Q/N119Q, N52H/N84Q, N52H/N84Q/N168Q/N207Q, N52Q/N84Q/N155Q/N168Q,

N52Q/N84Q/N119Q/N168Q, N52Q/N84Q/N119Q/N207Q, N52Q/N84Q/N119Q/N155Q,N52Q/N84Q/N119Q/N168Q, N52Q/N84Q/N119Q/N207Q, N52Q/N84Q/N119Q/N155Q,

N52Q/N84Q/N119Q/N155Q/N207Q, N52Y/F138L/L203P, N57Y/Q100R/C198R, N57Y/F138L/L203P, Q100R/F138L, N52H/N57Y/Q100R/H115R/C198R, N52H/N57Y/Q100R/F172S/C198R,N52Q/N84Q/N119Q/N155Q/N207Q, N52Y/F138L/L203P, N57Y/Q100R/C198R, N57Y/F138L/L203P, Q100R/F138L, N52H/N57Y/Q100R/H115R/C198R, N52 H/N57Y/Q100R/F172S/ C198R,

N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/H115R/I143V/F172S/C198R,N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/H115R/I143V/F172S/C198R,

N52H/N57Y/Q100R/L102R/H115R/F172S/C198R, N52H/V122A/F172S/C198R,N52H/N57Y/Q100R/L102R/H115R/F172S/C198R, N52H/V122A/F172S/C198R,

N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/N194D, N52H/N57Y/H115R/F172S/C198R,N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/N194D, N52H/N57Y/H115R/F172S/C198R,

N52H/N57Y/Q100R/H115R/C198R, N52H/N57Y/H115R, N52H/N57Y/Q100R/H115R,N52H/N57Y/Q100R/H115R/C198R, N52H/N57Y/H115R, N52H/N57Y/Q100R/H115R,

- 119 044346- 119 044346

N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/I224V, N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S, N52H/N57Y/Q100R/F172S,N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/I224V, N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S, N52H/N57Y/Q100R/F172S,

N52H/Q100R/H115R/I143T/F172S, N52H/N57Y/Q100P/H115R/F172S, N52Y/N57Y/Q100P/F172S,N52H/Q100R/H115R/I143T/F172S, N52H/N57Y/Q100P/H115R/F172S, N52Y/N57Y/Q100P/F172S,

E16V/N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/C198R,E16V/N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/C198R,

E16V/N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/Y152C/K156M/F172S/C198R, N52S/E90A/H115R, N30D/K42EE16V/N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/Y152C/K156M/F172S/C198R, N52S/E90A/H115R, N30D/K42E

N52S/H115R, N30D/K42E/N52S/H115R/C198R/R221I, N30D/K42E/N52S/H115R/C198R,N52S/H115R, N30D/K42E/N52S/H115R/C198R/R221I, N30D/K42E/N52S/H115R/C198R,

N30D/K42E/N52S/H115R/F172S/N194D, N52S/H115R/F120S/I143V/C198R, N52S/H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100P/C198R, N52H/N57Y/Q100P H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100P/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100P/H115R, N52H/N57Y/Q100P/H115R/C198R, N52H/Q100R/C198R,N30D/K42E/N52S/H115R/F172S/N194D, N52S/H115R/F120S/I143V/C198R, N52S/H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100P/C198R, N52H/N57Y/Q100P H115R/F172S/C198R, N52H /N57Y/Q100P/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100P/H115R, N52H/N57Y/Q100P/H115R/C198R, N52H/Q100R/C198R,

N52H/Q100R/H115R/F172S, N52H/Q100R/F172S/C198R, N52H/Q100R/H115R/F172S/C198R,N52H/Q100R/H115R/F172S, N52H/Q100R/F172S/C198R, N52H/Q100R/H115R/F172S/C198R,

N52H/N57Y/Q100R/F172S/C198R, N52A/N57F/Q100S, N52A/N57H/Q100S, N52A/N57Y/Q100A,N52H/N57Y/Q100R/F172S/C198R, N52A/N57F/Q100S, N52A/N57H/Q100S, N52A/N57Y/Q100A,

N52D/N57A/Q100A, N52D/Q100S, N52G/Q100A, N52H/Q100A, N52M/N57H/Q100S, N52M/N57W/Q100P, N52Q/N57F, N52Q/ N57S/Q100A, N52R/N57L/Q100A, N52R/N57Y/Q100P, N52R/N57Y/Q100S, N52S/N57A/Q100A, N52S/N57H/Q100E, N52S/N57L/Q100S, N52S/N57M/Q100S, N52S/N57Y/Q100S, N52S/N57Y/Q100M, N52S/N57Y/Q100V, N52T/N57H/Q100S, N52T/N57H/Q100A, N52T/N57Y/Q100A, N52V/N57L/Q100A, N52H/N57Y/Q100K, N52K/N57Y/Q100R, N52L/N57H/Q100R, N52R/N57F/Q100N, N52R/N57F/Q100P, N52R/N57F/Q100R, N52R/N57F/Q100T, N52R/N57H/Q100K, N52R/N57L/Q100S, N52R/N57W/Q100K, N52R/N57W, N52R/N57Y/Q100R, N52C/N57E/Q100S, N52G/N57P/Q100D, N52G/N57V/Q100G, N52G/N57V, N52L/N57V, N52P/N57P, N52P/N57S/Q100G, N52S/N57L/Q100G, N52T/N57K/Q100P, N52V/N57T/Q100L, N57Q/Q100P или R26S/N52H/N57Y/V110D/T137A/C198R.N52D/N57A/Q100A, N52D/Q100S, N52G/Q100A, N52H/Q100A, N52M/N57H/Q100S, N52M/N57W/Q100P, N52Q/N57F, N52Q/ N57S/Q100A, N52R/N57L/Q100A , N52R/N57Y/ Q100P, N52R/N57Y/Q100S, N52S/N57A/Q100A, N52S/N57H/Q100E, N52S/N57L/Q100S, N52S/N57M/Q100S, N52S/N57Y/Q100S, N52S/N57Y/Q100M, N52S /N57Y/Q100V, N52T/N57H/Q100S, N52T/N57H/Q100A, N52T/N57Y/Q100A, N52V/N57L/Q100A, N52H/N57Y/Q100K, N52K/N57Y/Q100R, N52L/N57H/Q100R, N52R/N57F/ Q100N, N52R/ N57F/Q100P, N52R/N57F/Q100R, N52R/N57F/Q100T, N52R/N57H/Q100K, N52R/N57L/Q100S, N52R/N57W/Q100K, N52R/N57W, N52R/N57Y/Q100R, N52C/ N57E/Q100S, N52G/N57P/Q100D, N52G/N57V/Q100G, N52G/N57V, N52L/N57V, N52P/N57P, N52P/N57S/Q100G, N52S/N57L/Q100G, N52T/N57K/Q100P, N52V/N57T/Q1 00L,N57Q/ Q100P or R26S/N52H/N57Y/V110D/T137A/C198R.

28. Вариантный полипептид ICOSL по любому из воплощений 1-24, где одна или несколько аминокислотных модификаций выбраны из числа F120S/Y152H/N201S, E111del, Y33del, N168Q/N207Q, N84Q/N207Q, N155Q/N207Q, N119Q/N168Q, N119Q/N207Q, N119Q/N155Q, N84Q/N119Q,28. The variant ICOSL polypeptide according to any one of embodiments 1-24, where one or more amino acid modifications are selected from F120S/Y152H/N201S, E111del, Y33del, N168Q/N207Q, N84Q/N207Q, N155Q/N207Q, N119Q/N168Q, N119Q/ N207Q, N119Q/N155Q, N84Q/N119Q,

N84Q/N155Q/N168Q, N84Q/N168Q/N207Q, N84Q/N155H/N207Q, N155Q/N168Q/N207Q, N119Q N155Q/N168Q, N119Q/N168Q/N207Q, N84Q/N119Q/N207Q, N119Q/N155H/N207Q, N84Q/N119Q/N155Q, N84Q/N119Q/N155Q/N168Q, N84Q/N155Q/N168Q/N207Q, N84Q/N119Q/N155Q/N207Q,N84Q/N155Q/N168Q, N84Q/N168Q/N207Q, N84Q/N155H/N207Q, N155Q/N168Q/N207Q, N119Q N155Q/N168Q, N119Q/N168Q/N207Q, N84Q/N119Q/N207Q, N 119Q/N155H/N207Q, N84Q/N119Q /N155Q, N84Q/N119Q/N155Q/N168Q, N84Q/N155Q/N168Q/N207Q, N84Q/N119Q/N155Q/N207Q,

N84Q/N119Q/N155Q/N168Q/N207Q или F138L/L203P.N84Q/N119Q/N155Q/N168Q/N207Q or F138L/L203P.

29. Вариантный полипептид ICOSL по любому из воплощений 1-28, где одна или несколько аминокислотных модификаций выбраны из C198R, D158G, E16V, E90A, F120S, F138L, F172S, H115R, H115X, I143T, I143V, I224V, K156M, K42E, K92R, L102R, L203P, L208P, N194D, N30D, N52A, N52D, N52G, N52H, N52K, N52L, N52M, N52Q, N52R, N52S, N52T, N52Y, N57F, N57H, N57K, N57L, N57M, N57P, N57S, N57V, N57W, N57Y, Q100A, Q100D, Q100E, Q100K, Q100M, Q100P, Q100P, Q100R, Q100S, Q100T, Q133H, R221I, R75Q, S54A, S54P, T113E, T225A, V110D, V122A, Y146C, или Y152C; или A117T, A20V, A71T, A91G, A91G, AE88D, C140del, C198R, D158G, D77G, D90K, E117G, E135K, E16V, E81A, E88D, E90A, F120I, F120S, F138L, F172S, F27C, F92Y, G72R, H115R, H115X, H129P, H94E, I118V, I127T, I143T, I143V, I154F, I218N, I218T, I224V, K156M, K169E, K36G, K42E, K89R, K92R, K93R, L102R, L161P, L166Q, L173S, L203F, L203P, L208P, L209P, L40M, L70Q, L70R, L74Q, L80P, L96I, L98F, M10I, M10V, N115Q, N119Q, N122S, N144D, N155X, N168Q, N168X, N178S, N194D, N207Q, N207X, N227K, N25S, N30D, N52A, N52D, N52G, N52H, N52K, N52L, N52M, N52Q, N52R, N52S, N52T, N52V, N52Y, N57A, N57F, N57H, N57L, N57M, N57S, N57V, N57W, N57Y, N63S, N84Q, Q100A, Q100E, Q100G, Q100K, Q100M, Q100N, Q100P, Q100R, Q100S, Q100T, Q100V, Q133H, R221G, R221I, S109G, S109N, S114T, S121G, S126R, S126T, S130G, S132F, S13G, S18R, S192G, S212G, S25G, S54A, S54P, S99G, T113E, T120S, T130A, T139S, T190A, T199S, T225A, T41I, V107I, V110A, V110D, V11E, V122A, V122M, V193M, V210A, W153R, Y146C, Y152C или Y152H.29. The ICOSL variant polypeptide of any one of embodiments 1-28, wherein one or more amino acid modifications are selected from C198R, D158G, E16V, E90A, F120S, F138L, F172S, H115R, H115X, I143T, I143V, I224V, K156M, K42E, K92R , L102R, L203P, L208P, N194D, N30D, N52A, N52D, N52G, N52H, N52K, N52L, N52M, N52Q, N52R, N52S, N52T, N52Y, N57F, N57H, N57K, N57L, N57M, N57P, N 57S, N57V , N57W, N57Y, Q100A, Q100D, Q100E, Q100K, Q100M, Q100P, Q100P, Q100R, Q100S, Q100T, Q133H, R221I, R75Q, S54A, S54P, T113E, T225A, V110D, V122A , Y146C, or Y152C; or A117T, A20V, A71T, A91G, A91G, AE88D, C140del, C198R, D158G, D77G, D90K, E117G, E135K, E16V, E81A, E88D, E90A, F120I, F120S, F138L, F172S, F27C, F92Y, G72R, H115R , H115X, H129P, H94E, I118V, I127T, I143T, I143V, I154F, I218N, I218T, I224V, K156M, K169E, K36G, K42E, K89R, K92R, K93R, L102R, L161P, L166Q, L173S, L203F, L203P, L208P , L209P, L40M, L70Q, L70R, L74Q, L80P, L96I, L98F, M10I, M10V, N115Q, N119Q, N122S, N144D, N155X, N168Q, N168X, N178S, N194D, N207Q, N207X, N22 7K, N25S, N30D, N52A , N52D, N52G, N52H, N52K, N52L, N52M, N52Q, N52R, N52S, N52T, N52V, N52Y, N57A, N57F, N57H, N57L, N57M, N57S, N57V, N57W, N57Y, N63S, N84Q, Q100A ,Q100E , Q100G, Q100K, Q100M, Q100N, Q100P, Q100R, Q100S, Q100T, Q100V, Q133H, R221G, R221I, S109G, S109N, S114T, S121G, S126R, S126T, S130G, S132F, S13G, S18R, S192G, S212G, S25G , S54A, S54P, S99G, T113E, T120S, T130A, T139S, T190A, T199S, T225A, T41I, V107I, V110A, V110D, V11E, V122A, V122M, V193M, V210A, W153R, Y146C , Y152C or Y152H.

30. Вариантный полипептид ICOSL по любому из воплощений 1-29, где одна или несколько аминокислотных модификаций выбраны из числа N52S, N52H, N52D, N52H/N57Y/Q100P, N52S/Y146C/Y152C, N52H/C198R, N52H/C198R/T225A, N52H/K92R, N57Y, N52S/C198R, N52S/T113E, S54A, N52D/S54P, N52K/L208P, N52H/I143T, N52S/R75Q/L203P, N52S/D158G, N52D/Q133H, N52H/N57Y/Q100R/V122A, N52H/N57Y/Q100R/F172S, N52H/N57Y/Q100R, N52S/N194D,30. The variant ICOSL polypeptide according to any one of embodiments 1-29, where one or more amino acid modifications are selected from N52S, N52H, N52D, N52H/N57Y/Q100P, N52S/Y146C/Y152C, N52H/C198R, N52H/C198R/T225A, N52H/K92R, N57Y, N52S/C198R, N52S/T113E, S54A, N52D/S54P, N52K/L208P, N52H/I143T, N52S/R75Q/L203P, N52S/D158G, N52D/Q133H, N52H/N57Y/ Q100R/V122A, N52H/N57Y/Q100R/F172S, N52H/N57Y/Q100R, N52S/N194D,

N52H/N57Y/Q100R/L102R/V110D/H115R/C198R, N52S/E90A, N52S/F120S/I143V/I224V,N52H/N57Y/Q100R/L102R/V110D/H115R/C198R, N52S/E90A, N52S/F120S/I143V/I224V,

N52H/N57Y/Q100R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/C198R, N52Y/N57Y/Q100P/F172S, E16V/N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/Y152C/K156M/F172S/C198R, N52S/H115R/F120S/I143V/C198R, N52H/N57Y/Q100P/C198R, N52H/N57Y/Q100P/H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100P/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100P/H115R, N52H/N57Y/Q100P/H115R/C198R, N52H/Q100R/C198R,N52H/N57Y/Q100R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/C198R, N52Y/N57Y/Q100P/F172S, E16V/N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/Y152C /K156M/F172S/C198R, N52S/H115R/F120S/I143V/C198R, N52H/N57Y/Q100P/C198R, N52H/N57Y/Q100P/H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100P/F172S/C198R, N52H/N57Y /Q100P/H115R, N52H/ N57Y/Q100P/H115R/C198R, N52H/Q100R/C198R,

N52H/Q100R/H115X/F172S/C198R, N52H/Q100R/H115R/F172S/C198R,N52H/Q100R/H115X/F172S/C198R, N52H/Q100R/H115R/F172S/C198R,

N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S,N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S,

N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/C198R, Q100R, N52Y/F138L/L203P, N57Y/Q100R/C198RN52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/C198R, Q100R, N52Y/F138L/L203P, N57Y/Q100R/C198R

N57Y/F138L/L203P, N57Y/Q100P, Q100R/F138L, N52H/N57Y/Q100R/H115R, N52H/N57Y/Q100R/F172S, N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/I224V, N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S,N57Y/F138L/L203P, N57Y/Q100P, Q100R/F138L, N52H/N57Y/Q100R/H115R, N52H/N57Y/Q100R/F172S, N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/I224V, N52H /N57Y/Q100R/H115R/ F172S,

N52H/N57Y/Q100R/H115R/C198R, N52H/N57Y/Q100R/F172S/C198R,N52H/N57Y/Q100R/H115R/C198R, N52H/N57Y/Q100R/F172S/C198R,

N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/H115R/I143V/F172S/C198R,N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/H115R/I143V/F172S/C198R,

N52H/N57Y/Q100R/L102R, H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/H115R F172S/N194D,N52H/N57Y/Q100R/L102R, H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/H115R F172S/N194D,

N52H/N57Y/H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/H115R/C198R, N52H/N57Y/H115R,N52H/N57Y/H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/H115R/C198R, N52H/N57Y/H115R,

- 120 044346- 120 044346

N52H/Q100R/H115R/I143T F172S, N52H/N57Y/Q100P/H115R/F172S,N52H/Q100R/H115R/I143T F172S, N52H/N57Y/Q100P/H115R/F172S,

E16V/N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/C198R, N52S/E90A/H115R,E16V/N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/C198R, N52S/E90A/H115R,

N30D/K42E/N52S/H115R/C198R/R221I, N30D/K42E/N52S/H115R/C198R,N30D/K42E/N52S/H115R/C198R/R221I, N30D/K42E/N52S/H115R/C198R,

N30D/K42E/N52S/H115R/F172S/N194D, N30D/K42E/N52S/H115R, N52S/E90A/H115R,N30D/K42E/N52S/H115R/F172S/N194D, N30D/K42E/N52S/H115R, N52S/E90A/H115R,

N30D/K42E/N52S/H115R, N52A/N57H/Q100S, N52A/N57Y/Q100A, N52D/Q100S, N52G/Q100A,N30D/K42E/N52S/H115R, N52A/N57H/Q100S, N52A/N57Y/Q100A, N52D/Q100S, N52G/Q100A,

N52M/N57H/Q100S, N52M/N57W/Q100P, N52Q/N57S/Q100A, N52R/N57L/Q100A, N52S/N57H/Q100E, N52S/N57L/Q100S, N52S/N57M/Q100S, N52S/N57Y/Q100M, N52T/N57H/Q100S, N52R/N57F/Q100P, N52R/N57F/Q100T, N52R/N57W/Q100K, N52R/N57W, N52G/N57P/Q100D, N52G/N57V/Q100G, N52G/N57V, N52L/N57V, N52S/N57L/Q100G или N52T/N57K/Q100P; или N52S, N52H, N52D, N52Y/N57Y/F138L/L203P, N52H/N57Y/Q100P, N52S/Y146C/Y152C, N52H/C198R, N52H/C140del/T225A, N52H/C198R/T225A, N52H/K92R, N52H/S99G, N57Y, N57Y/Q100P, N52S/S130G/Y152C, N52S/Y152C, N52S/C198R, N52Y/N57Y/Y152C, N52Y/N57Y/H129P/C198R, N52H/L161P/C198R, N52S/T113E, S54A, N52D/S54P, N52K/L208P, N52S/Y152H, N52H/I143T, N52S/L80P, N52S/D158G, N52D/Q133H, L70Q/A91G/N144D, L70Q/A91G/E117G/ I118V/T120S/T130A, L70R/A91G/I118V/T120S/T130A/T199S, L70Q/E81A/A91G/I118V/T120S/I127T/T130A, N63S/L70Q/A91G/S114T/I118V/T120S/T130A, T41I/A91G,N52M/N57H/Q100S, N52M/N57W/Q100P, N52Q/N57S/Q100A, N52R/N57L/Q100A, N52S/N57H/Q100E, N52S/N57L/Q100S, N52S/N57M/Q100S, N52S/N57Y/ Q100M,N52T/ N57H/Q100S, N52R/N57F/Q100P, N52R/N57F/Q100T, N52R/N57W/Q100K, N52R/N57W, N52G/N57P/Q100D, N52G/N57V/Q100G, N52G/N57V, N52L/N57V, N 52S/N57L/ Q100G or N52T/N57K/Q100P; or N52S, N52H, N52D, N52Y/N57Y/F138L/L203P, N52H/N57Y/Q100P, N52S/Y146C/Y152C, N52H/C198R, N52H/C140del/T225A, N52H/C198R/T225A, N52H/K 92R, N52H/S99G , N57Y, N57Y/Q100P, N52S/S130G/Y152C, N52S/Y152C, N52S/C198R, N52Y/N57Y/Y152C, N52Y/N57Y/H129P/C198R, N52H/L161P/C198R, N52S/T113E , S54A, N52D/S54P , N52K/L208P, N52S/Y152H, N52H/I143T, N52S/L80P, N52S/D158G, N52D/Q133H, L70Q/A91G/N144D, L70Q/A91G/E117G/ I118V/T120S/T130A, L70R/ A91G/I118V/T120S /T130A/T199S, L70Q/E81A/A91G/I118V/T120S/I127T/T130A, N63S/L70Q/A91G/S114T/I118V/T120S/T130A, T41I/A91G,

E88D/K89R/D90K/A91G/F92Y/K93R/N122S/N178S, E88D/K89R/D90K/A91G/F92Y/K93R,E88D/K89R/D90K/A91G/F92Y/K93R/N122S/N178S, E88D/K89R/D90K/A91G/F92Y/K93R,

AE88D/K89R/D90K/A91G/F92Y/K93R, K36G/L40M, N52H/N57Y/Q100R/V122A,AE88D/K89R/D90K/A91G/F92Y/K93R, K36G/L40M, N52H/N57Y/Q100R/V122A,

N52H/N57Y/Q100R/F172S, N52H/N57Y/Q100R, N52S/F120S/N227K, N52S/N194D, N52S/F120S,N52H/N57Y/Q100R/F172S, N52H/N57Y/Q100R, N52S/F120S/N227K, N52S/N194D, N52S/F120S,

N52S/G72R, N52S/A71T/A117T/T190A/C198R,N52S/G72R, N52S/A71T/A117T/T190A/C198R,

N52H/N57Y/Q100R/V107I/V110D/S132F/I154F/C198R/R221G,N52H/N57Y/Q100R/V107I/V110D/S132F/I154F/C198R/R221G,

E16V/N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/Y152C/K156M/C198R, N52H/N57Y/Q100R/V110D/C198R,E16V/N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/Y152C/K156M/C198R, N52H/N57Y/Q100R/V110D/C198R,

V11E/N30D/N52H/N57Y/H94E/L96I/L98F/N194D/V210A/I218T, N52S/H94E/L96I/V122M,V11E/N30D/N52H/N57Y/H94E/L96I/L98F/N194D/V210A/I218T, N52S/H94E/L96I/V122M,

N52H/N57Y/H94E/L96I/F120I/S126T/W153R/I218N, M10V/S18R/N30D/N52S/S126R/T139S/L203F,N52H/N57Y/H94E/L96I/F120I/S126T/W153R/I218N, M10V/S18R/N30D/N52S/S126R/T139S/L203F,

S25G/N30D/N52S/F120S/N227K, N52H/N57Y/Q100R/V110D/F172S/C198R,S25G/N30D/N52S/F120S/N227K, N52H/N57Y/Q100R/V110D/F172S/C198R,

S25G/F27C/N52H/N57Y/Q100R/V110D/E135K/L173S/C198R, N52H/N57Y/V110A/C198R/R221I,S25G/F27C/N52H/N57Y/Q100R/V110D/E135K/L173S/C198R, N52H/N57Y/V110A/C198R/R221I,

M10I/S13G/N52H/N57Y/D77G/V110A/H129P/I143V/F172S/V193M,C198R, N52H/N57Y/Q100R/L102R/V110D/H115R/C198R, N52H/N57Y/Q100R/V110D/N144D/F172S/C198R,M10I/S13G/N52H/N57Y/D77G/V110A/H129P/I143V/F172S/V193M,C198R, N52H/N57Y/Q100R/L102R/V110D/H115R/C198R, N52H/N57Y/Q100R/V110D /N144D/F172S/C198R,

N52S/H94E/L98F/Q100R, N52S/E90A, N52S/F120S/I143V/I224V, N52H/N57Y/Q100R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/C198R, N52Y/N57Y/Q100P/F172S,N52S/H94E/L98F/Q100R, N52S/E90A, N52S/F120S/I143V/I224V, N52H/N57Y/Q100R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/C198R, N52Y/N 57Y/Q100P/F172S,

E16V/N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/Y152C/K156M/F172S/C198R, N52S/H115R/F120S/I143V/C198R, N52H/N57Y/Q100P/C198R, N52H/N57Y/Q100P/H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100P/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100P/H115R, N52H/N57Y/Q100P/H115R/C198R, N52H/Q100R/C198R,E16V/N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/Y152C/K156M/F172S/C198R, N52S/H115R/F120S/I143V/C198R, N52H/N57Y/Q100P/C198R, N52H/N57Y/Q100 P/H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100P/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100P/H115R, N52H/N57Y/Q100P/H115R/C198R, N52H/Q100R/C198R,

N52H/Q100R/H115R/F172S, N52H/Q100R/H115X/F172S/C198R, N52H/Q100R/H115R/F172S/C198R,N52H/Q100R/H115R/F172S, N52H/Q100R/H115X/F172S/C198R, N52H/Q100R/H115R/F172S/C198R,

N52H/N57Y/Q100R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/C198R,N52H/N57Y/Q100R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/C198R,

N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S, N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/C198R,N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S, N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/C198R,

N52S/H94E/L96I/S109N/L166Q/, N52H/N57Y/Q100R/C198R, N52H/N57Y/L74Q/V110D/S192G,N52S/H94E/L96I/S109N/L166Q/, N52H/N57Y/Q100R/C198R, N52H/N57Y/L74Q/V110D/S192G,

N52H/Q100R, N52H/S121G/C198R, A20V/N52H/N57Y/Q100R/S109G, N52H/N57Y/Q100P/C198R,N52H/Q100R, N52H/S121G/C198R, A20V/N52H/N57Y/Q100R/S109G, N52H/N57Y/Q100P/C198R,

N52H/N57Y/Q100R/V110D/C198R/S212G, L70Q/A91G/I118A/T120S/T130A/K169E, Q100R,N52H/N57Y/Q100R/V110D/C198R/S212G, L70Q/A91G/I118A/T120S/T130A/K169E, Q100R,

N52Y/F138L/L203P, N57Y/Q100R/C198R, N57Y/F138L/L203P, N52H, N57Y, N57Y/Q100P,N52Y/F138L/L203P, N57Y/Q100R/C198R, N57Y/F138L/L203P, N52H, N57Y, N57Y/Q100P,

N52H/N57Y/Q100R/H115R, N52H/N57Y/Q100R/F172S, N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/I224V,N52H/N57Y/Q100R/H115R, N52H/N57Y/Q100R/F172S, N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/I224V,

N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S, N52H/N57Y/Q100R/H115R/C198R, N52H/N57Y/Q100R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/H115R/I143V/F172S/C198R,N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S, N52H/N57Y/Q100R/H115R/C198R, N52H/N57Y/Q100R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/C198R, N52H /N57Y/Q100R/H115R/ I143V/F172S/C198R,

N52H/N57Y/Q100R/L102R H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/H115R F172S/N194D,N52H/N57Y/Q100R/L102R H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/H115R F172S/N194D,

N52H/N57Y/H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/H115R/C198R, N52H/N57Y/H115R,N52H/N57Y/H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/H115R/C198R, N52H/N57Y/H115R,

N52H/Q100R/H115R/I143T F172S, N52H/N57Y/Q100P/H115R/F172S,N52H/Q100R/H115R/I143T F172S, N52H/N57Y/Q100P/H115R/F172S,

E16V/N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/C198R, N30D/K42E/N52S/H115R/C198R R221I,E16V/N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/C198R, N30D/K42E/N52S/H115R/C198R R221I,

N52S/E90A/H115R, N30D/K42E/N52S/H115R, N52S/H115R/F172S/C198R, N119Q, N207Q, N52Q/N207X, N168X/N207X, N52Q/N168Q, N84Q/N207Q, N119Q N155X, N52Q/N119Q, N52Q/N84Q/N207Q, N119Q/N155Q/N168Q, N52H/N84Q/N119Q, N52Q/N84Q/N155X/N168X, N52A/N57F/Q100S,N52S/E90A/H115R, N30D/K42E/N52S/H115R, N52S/H115R/F172S/C198R, N119Q, N207Q, N52Q/N207X, N168X/N207X, N52Q/N168Q, N84Q/N207Q, N119Q N155X, N52Q/N119Q, N52Q /N84Q/N207Q, N119Q/N155Q/N168Q, N52H/N84Q/N119Q, N52Q/N84Q/N155X/N168X, N52A/N57F/Q100S,

N52A/N57H/Q100S, N52A/N57Y/Q100A, N52D/N57A/Q100A, N52D/Q100S, N52G/Q100A, N52H/Q100A, N52M/N57H/Q100S, N52M/N57W/Q100P, N52Q/N57F, N52Q/N57S/Q100A, N52R/N57L/Q100A,N52A/N57H/Q100S, N52A/N57Y/Q100A, N52D/N57A/Q100A, N52D/Q100S, N52G/Q100A, N52H/Q100A, N52M/N57H/Q100S, N52M/N57W/Q100P, N52Q/N57F , N52Q/N57S/ Q100A, N52R/N57L/Q100A,

N52R/N57Y/Q100P, N52R/N57Y/Q100S, N52S/N57A/Q100A, N52S/N57H/Q100E, N52S/N57L/Q100S,N52R/N57Y/Q100P, N52R/N57Y/Q100S, N52S/N57A/Q100A, N52S/N57H/Q100E, N52S/N57L/Q100S,

N52S/N57M/Q100S, N52S/N57Y/Q100S, N52S/N57Y/Q100M, N52S/N57Y/Q100V, N52T/N57H/Q100S,N52S/N57M/Q100S, N52S/N57Y/Q100S, N52S/N57Y/Q100M, N52S/N57Y/Q100V, N52T/N57H/Q100S,

N52T/N57H/Q100A, N52T/N57Y/Q100A, N52V/N57L/Q100A, N52H/N57Y/Q100K, N52K/N57Y/Q100R,N52T/N57H/Q100A, N52T/N57Y/Q100A, N52V/N57L/Q100A, N52H/N57Y/Q100K, N52K/N57Y/Q100R,

N52L/N57H/Q100R, N52R/N57F/Q100N, N52R/N57F/Q100P, N52R/N57F/Q100R, N52R/N57F/Q100T,N52L/N57H/Q100R, N52R/N57F/Q100N, N52R/N57F/Q100P, N52R/N57F/Q100R, N52R/N57F/Q100T,

N52R/N57L/Q100S, N52R/N57W/Q100K, N52R/N57W, N52G/N57V, N52L/N57V, N52S/N57L/Q100G или N52T/N57K/Q100P.N52R/N57L/Q100S, N52R/N57W/Q100K, N52R/N57W, N52G/N57V, N52L/N57V, N52S/N57L/Q100G or N52T/N57K/Q100P.

31. Вариантный полипептид ICOSL по любому из воплощений 1-30, где вариантный полипептид ICOSL проявляет повышенное связывание с эктодоменом ICOS или CD28 по сравнению со связыванием референсного полипептида ICOSL с тем же эктодоменом.31. The variant ICOSL polypeptide of any one of embodiments 1-30, wherein the variant ICOSL polypeptide exhibits increased binding to the ICOS or CD28 ectodomain compared to the binding of the reference ICOSL polypeptide to the same ectodomain.

32. Вариантный полипептид ICOSL по любому из воплощений 1-31, где одна или несколько аминокислотных модификаций выбраны из C198R, D158G, E16V, E90A, F120S, F138L, F172S, H115R, I143V,32. The ICOSL variant polypeptide of any one of embodiments 1-31, wherein one or more amino acid modifications are selected from C198R, D158G, E16V, E90A, F120S, F138L, F172S, H115R, I143V,

- 121 044346- 121 044346

I224V, K156M, K42E, K92R, L102R, L203P, L208P, N194D, N30D, N52A, N52D, N52G, N52H, N52K,I224V, K156M, K42E, K92R, L102R, L203P, L208P, N194D, N30D, N52A, N52D, N52G, N52H, N52K,

N52L, N52M, N52Q, N52R, N52S, N52T, N52Y, N57F, N57H, N57L, N57M, N57S, N57V, N57W, N57Y,N52L, N52M, N52Q, N52R, N52S, N52T, N52Y, N57F, N57H, N57L, N57M, N57S, N57V, N57W, N57Y,

Q100A, Q100E, Q100G, Q100K, Q100M, Q100P, Q100R, Q100S, Q133H, S212G, S54A, S54P, T113E,Q100A, Q100E, Q100G, Q100K, Q100M, Q100P, Q100R, Q100S, Q133H, S212G, S54A, S54P, T113E,

V110D, V122A, Y146C, Y152C или T225A.V110D, V122A, Y146C, Y152C or T225A.

33. Вариантный полипептид ICOSL по любому из воплощений 1-33, где одна или несколько аминокислотных модификаций выбраны из числа N52A/N57Y/Q100A, N52D/Q100S, N52G/Q100A, N52M/N57H/Q100S, N52M/N57W/Q100P, N52Q/N57S/Q100A, N52R/N57L/Q100A, N52S/N57H/Q100E, N52S/N57L/Q100S, N52S/N57M/Q100S, N52S/N57Y/Q100M, N52T/N57H/Q100S, N52R/N57F/Q100P, N52R/N57F/Q100T, N52R/N57W/Q100K, N52R/N57W, N52G/N57V, N52L/N57V, N52S/N57L/Q100G, N52T/N57K/Q100P, N52S, N52H, N52D, N52Y/N57Y/F138L/L203P, N52H/N57Y/Q100P,33. A variant ICOSL polypeptide according to any one of embodiments 1-33, where one or more amino acid modifications are selected from N52A/N57Y/Q100A, N52D/Q100S, N52G/Q100A, N52M/N57H/Q100S, N52M/N57W/Q100P, N52Q/ N57S/Q100A, N52R/N57L/Q100A, N52S/N57H/Q100E, N52S/N57L/Q100S, N52S/N57M/Q100S, N52S/N57Y/Q100M, N52T/N57H/Q100S, N52R/N57F/Q100P , N52R/N57F/ Q100T, N52R/N57W/Q100K, N52R/N57W, N52G/N57V, N52L/N57V, N52S/N57L/Q100G, N52T/N57K/Q100P, N52S, N52H, N52D, N52Y/N57Y/F138L/L203P, N 52H/N57Y/ Q100P,

N52S/Y146C/Y152C, N52H/C198R, N52H/C198R/T225A, N52H/K92R, N57Y, N52S/C198R, N52S/T113E, S54A, N52D/S54P, N52K/L208P, N52H/I143T, N52S/D158G, N52D/Q133H,N52S/Y146C/Y152C, N52H/C198R, N52H/C198R/T225A, N52H/K92R, N57Y, N52S/C198R, N52S/T113E, S54A, N52D/S54P, N52K/L208P, N52H/I143T, N52 S/D158G, N52D/ Q133H,

N52H/N57Y/Q100R/V110D/C198R/S212G, N52H/N57Y/Q100R/V122A, N52H/N57Y/Q100R/F172S,N52H/N57Y/Q100R/V110D/C198R/S212G, N52H/N57Y/Q100R/V122A, N52H/N57Y/Q100R/F172S,

N52H/N57Y/Q100R, N52S/N194D, N52H/N57Y/Q100R/L102R/V110D/H115R/C198R, N52S/E90A,N52H/N57Y/Q100R, N52S/N194D, N52H/N57Y/Q100R/L102R/V110D/H115R/C198R, N52S/E90A,

N52S/F120S/I143V/I224V, N52H/N57Y/Q100R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/C198R, N52Y/N57Y/Q100P/F172S, E16V/N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/Y152C/K156M/F172S/C198R,N52S/F120S/I143V/I224V, N52H/N57Y/Q100R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/C198R, N52Y/N57Y/Q100P/F172S, E16V/N52H/N57Y/ Q100R/V110D/H115R/ Y152C/K156M/F172S/C198R,

N52S/H115R/F120S/I143V/C198R, N52H/N57Y/Q100P/C198R, N52H/N57Y/Q100P/H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100P/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100P/H115R, N52H/N57Y/Q100P/H115R/C198R,N52S/H115R/F120S/I143V/C198R, N52H/N57Y/Q100P/C198R, N52H/N57Y/Q100P/H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100P/F172S/C198R, N52H/N57Y /Q100P/H115R, N52H/ N57Y/Q100P/H115R/C198R,

N52H/Q100R/C198R, N52H/Q100R/H115R/F172S, N52H/Q100R/H115X/F172S/C198R,N52H/Q100R/C198R, N52H/Q100R/H115R/F172S, N52H/Q100R/H115X/F172S/C198R,

N52H/Q100R/H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/C198R,N52H/Q100R/H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/C198R,

N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S, N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/C198R, Q100R, N52Y/F138L/L203P, N57Y/Q100R/C198R, N57Y/F138L/L203P, N52H, N57Y, N57Y/Q100P, Q100R/F138L,N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S, N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/C198R, Q100R, N52Y/F138L/L203P, N57Y/Q100R/C198R, N57Y/F138L/L203P, N52 H, N57Y, N57Y/Q100P, Q100R/F138L,

N52H/N57Y/Q100R/H115R, N52H/N57Y/Q100R/F172S, N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/I224V,N52H/N57Y/Q100R/H115R, N52H/N57Y/Q100R/F172S, N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/I224V,

N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S, N52H/N57Y/Q100R/H115R/C198R, N52H/N57Y/Q100R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/H115R/I143V/F172S/C198R,N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S, N52H/N57Y/Q100R/H115R/C198R, N52H/N57Y/Q100R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/C198R, N52H /N57Y/Q100R/H115R/ I143V/F172S/C198R,

N52H/N57Y/Q100R/L102R H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/H115R F172S/N194D,N52H/N57Y/Q100R/L102R H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/H115R F172S/N194D,

N52H/N57Y/H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/H115R/C198R, N52H/N57Y/H115R,N52H/N57Y/H115R/F172S/C198R, N52H/N57Y/Q100R/H115R/C198R, N52H/N57Y/H115R,

N52H/Q100R/H115R/I143T/F172S, N52H/N57Y/Q100P/H115R/F172S,N52H/Q100R/H115R/I143T/F172S, N52H/N57Y/Q100P/H115R/F172S,

E16V/N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/C198R, N52S/E90A/H115R, N52S/E90A/H115R илиE16V/N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/C198R, N52S/E90A/H115R, N52S/E90A/H115R or

N30D/K42E/N52S/H115R.N30D/K42E/N52S/H115R.

34. Вариантный полипептид ICOSL по любому из воплощений 1-33, где вариантный полипептид ICOSL проявляет повышенное связывание с эктодоменом ICOS и CD28 по сравнению со связыванием референсного полипептида ICOSL с тем же эктодоменом.34. The variant ICOSL polypeptide according to any one of embodiments 1-33, wherein the variant ICOSL polypeptide exhibits increased binding to the ICOS and CD28 ectodomain compared to the binding of the reference ICOSL polypeptide to the same ectodomain.

35. Вариантный полипептид ICOSL по любому из воплощений 1-34, где вариантный полипептид ICOSL включает аминокислотную последовательность, представленную в любой из SEQ ID NO: 546-599, 734-781, 783, 786, 788, 792, 796, 798, 800, 802, 804, 806, 808, 811, 813, 815, 817, 818, 820, 822, 824, 826, 827, 829, 831, 833, 834, 836, 838, 840-843, 845, 847, 848, 850-853, 855, 857, 907, 910, или последовательность аминокислот, которая имеет, по меньшей мере, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98 или 99% идентичности последовательности с любой из SEQ ID NO: 546-599, 734-781, 783, 786, 788, 792, 796, 798, 800, 802, 804, 806, 808, 811, 813, 815, 817, 818, 820, 822, 824, 826, 827, 829, 831, 833, 834, 836, 838, 840-843, 845, 847, 848, 850-853, 855, 857, 907, 910.35. The ICOSL variant polypeptide of any one of embodiments 1-34, wherein the ICOSL variant polypeptide comprises the amino acid sequence set forth in any of SEQ ID NOs: 546-599, 734-781, 783, 786, 788, 792, 796, 798, 800 , 802, 804, 806, 808, 811, 813, 815, 817, 818, 820, 822, 824, 826, 827, 829, 831, 833, 834, 836, 838, 840-843, 845, 847, 848 , 850-853, 855, 857, 907, 910, or an amino acid sequence that has at least 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, or 99% sequence identity with any of SEQ ID NO: 546-599, 734-781, 783, 786, 788, 792, 796, 798, 800, 802, 804, 806, 808, 811, 813, 815, 817, 818, 820, 822, 824, 826 , 827, 829, 831, 833, 834, 836, 838, 840-843, 845, 847, 848, 850-853, 855, 857, 907, 910.

36. Вариантный полипептид ICOSL по любому из воплощений 1-34, где вариантный полипептид ICOSL включает аминокислотную последовательность, представленную в любой из SEQ ID NO: 546-599, 734-781, 783, 786, 788, 792, 796, 798, 800, 802, 804, 806, 808, 811, 813, 815, 817, 818, 820, 822, 824, 826, 827, 829, 831, 833, 834, 836, 838, 840-843, 845, 847, 848, 850-853, 855, 857, 907, 910, или последовательность аминокислот, которая имеет, по меньшей мере, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98 или 99% идентичности последовательности с любой из SEQ ID NO: 546-599, 734-781, 783, 786, 788, 792, 796, 798, 800, 802, 804, 806, 808, 811, 813, 815, 817, 818, 820, 822, 824, 826, 827, 829, 831, 833, 834, 836, 838, 840-843, 845, 847, 848, 850-853, 855, 857, 907 или 910.36. The ICOSL variant polypeptide of any one of embodiments 1-34, wherein the ICOSL variant polypeptide comprises the amino acid sequence set forth in any of SEQ ID NOs: 546-599, 734-781, 783, 786, 788, 792, 796, 798, 800 , 802, 804, 806, 808, 811, 813, 815, 817, 818, 820, 822, 824, 826, 827, 829, 831, 833, 834, 836, 838, 840-843, 845, 847, 848 , 850-853, 855, 857, 907, 910, or an amino acid sequence that has at least 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, or 99% sequence identity with any of SEQ ID NO: 546-599, 734-781, 783, 786, 788, 792, 796, 798, 800, 802, 804, 806, 808, 811, 813, 815, 817, 818, 820, 822, 824, 826 , 827, 829, 831, 833, 834, 836, 838, 840-843, 845, 847, 848, 850-853, 855, 857, 907 or 910.

37. Вариантный полипептид лиганда ICOS (ICOSL), содержащий домен IgV или его специфически связывающий фрагмент, домен IgC или его специфически связывающий фрагмент, или оба домена, где вариантный полипептид ICOSL содержит одну или несколько аминокислотных модификаций в референсном полипептиде ICOSL или его специфически связывающем фрагменте, соответствующих аминокислотным модификациям, выбранных из N52A, N52C, N52D, N52G, N52K, N52L, N52M, N52R, N52T, N52V, N57A, N57E, N57F, N57H, N57K, N57L, N57M, N57P, N57Q, N57S, N57T, N57V, N57W, Q100A, Q100D, Q100G, Q100L, Q100M, Q100N, Q100R, Q100S, Q100T или Q100V. относительно SEQ ID NO: 32.37. A variant ICOS ligand polypeptide (ICOSL) containing an IgV domain or a specific binding fragment thereof, an IgC domain or a specific binding fragment thereof, or both domains, where the variant ICOSL polypeptide contains one or more amino acid modifications in the reference ICOSL polypeptide or a specific binding fragment thereof , corresponding to amino acid modifications selected from N52A, N52C, N52D, N52G, N52K, N52L, N52M, N52R, N52T, N52V, N57A, N57E, N57F, N57H, N57K, N57L, N57M, N57P, N57Q, N57S, N57T, N57V , N57W, Q100A, Q100D, Q100G, Q100L, Q100M, Q100N, Q100R, Q100S, Q100T or Q100V. relative to SEQ ID NO: 32.

38. Вариантный полипептид ICOSL по воплощению 37, где одна или несколько аминокислотных модификаций выбраны из числа N52A/N57F/Q100S, N52A,/N57H/Q100S, N52A/N57Y/Q100A, N52D/N57A/Q100A, N52D/Q100S, N52G/Q100A, N52H/Q100A, N52M/N57H/Q100S, N52M/N57W/Q100P, N52Q/N57F, N52Q/N57S/Q100A, N52R/N57L/Q100A, N52R/N57Y/Q100P, N52R/N57Y/Q100S,38. The ICOSL variant polypeptide of embodiment 37, wherein one or more amino acid modifications are selected from N52A/N57F/Q100S, N52A,/N57H/Q100S, N52A/N57Y/Q100A, N52D/N57A/Q100A, N52D/Q100S, N52G/Q100A , N52H/Q100A, N52M/N57H/Q100S, N52M/N57W/Q100P, N52Q/N57F, N52Q/N57S/Q100A, N52R/N57L/Q100A, N52R/N57Y/Q100P, N52R/N57Y/Q100S,

N52S/N57A/Q100A, N52S/N57H/Q100E, N52S/N57L/Q100S, N52S/N57M/Q100S, N52S/N57Y/Q100S, N52S/N57Y/Q100M, N52S/N57Y/Q100V, N52T/N57H/Q100S, N52T/N57H/Q100A, N52T/N57Y/Q100A,N52S/N57A/Q100A, N52S/N57H/Q100E, N52S/N57L/Q100S, N52S/N57M/Q100S, N52S/N57Y/Q100S, N52S/N57Y/Q100M, N52S/N57Y/Q100V, N52T/N57H/ Q100S,N52T/ N57H/Q100A, N52T/N57Y/Q100A,

- 122 044346- 122 044346

N52V/N57L/Q100A, N52H/N57Y/Q100K, N52K/N57Y/Q100R, N52L/N57H/Q100R, N52R/N57F/Q100N,N52V/N57L/Q100A, N52H/N57Y/Q100K, N52K/N57Y/Q100R, N52L/N57H/Q100R, N52R/N57F/Q100N,

N52R/N57F/Q100P, N52R/N57F/Q100R, N52R/N57F/Q100T, N52R/N57H/Q100K, N52R/N57L/Q100S,N52R/N57F/Q100P, N52R/N57F/Q100R, N52R/N57F/Q100T, N52R/N57H/Q100K, N52R/N57L/Q100S,

N52R/N57W/Q100K, N52R/N57W, N52R/N57Y/Q100R, N52C/N57E/Q100S, N52G/N57P/Q100D,N52R/N57W/Q100K, N52R/N57W, N52R/N57Y/Q100R, N52C/N57E/Q100S, N52G/N57P/Q100D,

N52G/N57V/Q100G, N52G/N57V, N52L/N57V, N52P/N57P, N52P/N57S/Q100G, N52S/N57L/Q100G,N52G/N57V/Q100G, N52G/N57V, N52L/N57V, N52P/N57P, N52P/N57S/Q100G, N52S/N57L/Q100G,

N52T/N57K/Q100P, N52V/N57T/Q100L или N57Q/Q100P.N52T/N57K/Q100P, N52V/N57T/Q100L or N57Q/Q100P.

39. Вариантный полипептид ICOSL по воплощению 37 или воплощению 38, где референсный полипептид ICOSL представляет собой ICOSL млекопитающего или его специфический связывающий фрагмент.39. The variant ICOSL polypeptide of embodiment 37 or embodiment 38, wherein the reference ICOSL polypeptide is a mammalian ICOSL or a specific binding fragment thereof.

40. Вариантный полипептид ICOSL по любому из воплощений 37-39, где референсный полипептид ICOSL представляет собой человеческий ICOSL или его специфически связывающий фрагмент.40. The variant ICOSL polypeptide of any one of embodiments 37-39, wherein the reference ICOSL polypeptide is a human ICOSL or a specific binding fragment thereof.

41. Вариантный полипептид ICOSL по любому из воплощений 37-40, где немодифицированный ICOSL включает (i) аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 32, (ii) аминокислотную последовательность, которая имеет, по меньшей мере, 95% идентичности последовательности с SEQ ID NO: 32; или (iii) часть (i) или (ii), содержащую домен IgV или домен IgC или их специфические связывающие фрагменты или и то, и другое.41. The ICOSL variant polypeptide of any one of embodiments 37-40, wherein the unmodified ICOSL comprises (i) an amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 32, (ii) an amino acid sequence that has at least 95% sequence identity with SEQ ID NO: 32; or (iii) part (i) or (ii) containing an IgV domain or an IgC domain or specific binding fragments thereof or both.

42. Вариантный полипептид ICOSL по любому из воплощений 37-41, где: специфический связывающий фрагмент домена IgV или домена IgC имеет длину, по меньшей мере, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 110 или более аминокислот; или специфический связывающий фрагмент домена IgV имеет длину, которая составляет, по меньшей мере, 80% длины домена IgV, представленного аминокислотами 19-129 из SEQ ID NO: 5, и/или специфический связывающий фрагмент домена IgC имеет длину, которая составляет, по меньшей мере, 80% длины домена IgC, представленного аминокислотами 141-227 из SEQ ID NO: 5.42. The ICOSL variant polypeptide of any one of embodiments 37-41, wherein: the specific binding fragment of the IgV domain or IgC domain is at least 50, 60, 70, 80, 90, 100, 110 or more amino acids in length; or the IgV domain specific binding fragment has a length that is at least 80% of the length of the IgV domain represented by amino acids 19-129 of SEQ ID NO: 5, and/or the IgC domain specific binding fragment has a length that is at least at least 80% of the length of the IgC domain represented by amino acids 141-227 of SEQ ID NO: 5.

43. Вариантный полипептид ICOSL по любому из воплощений 1-16, где вариантный полипептид ICOSL включает домен IgV или его специфический фрагмент и домен IgC или его специфический фрагмент.43. The variant ICOSL polypeptide according to any one of embodiments 1-16, wherein the variant ICOSL polypeptide includes an IgV domain or a specific fragment thereof and an IgC domain or a specific fragment thereof.

44. Вариантный полипептид ICOSL по любому из воплощений 37-43, где вариантный полипептид ICOSL включает аминокислотную последовательность, представленную в любой из SEQ ID NO: 638-685, 905, 908, или последовательность аминокислот, которая имеет, по меньшей мере, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98 или 99% идентичности последовательности с любой из SEQ ID NO: 638-685, 905, 908.44. The ICOSL variant polypeptide of any one of embodiments 37-43, wherein the ICOSL variant polypeptide comprises an amino acid sequence set forth in any of SEQ ID NOs: 638-685, 905, 908, or an amino acid sequence that has at least 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, or 99% sequence identity to any of SEQ ID NOs: 638-685, 905, 908.

45. Вариантный полипептид ICOSL по любому из воплощений 37-43, где вариантный полипептид ICOSL включает аминокислотную последовательность, представленную в любой из SEQ ID NO: 638-685, 905, 908, или последовательность аминокислот, которая имеет, по меньшей мере, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98 или 99% идентичности последовательности с любой из SEQ ID NO: 638-685, 905, 908.45. The ICOSL variant polypeptide of any one of embodiments 37-43, wherein the ICOSL variant polypeptide comprises an amino acid sequence set forth in any of SEQ ID NOs: 638-685, 905, 908, or an amino acid sequence that has at least 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, or 99% sequence identity to any of SEQ ID NOs: 638-685, 905, 908.

46. Вариантный полипептид ICOSL по любому из воплощений 37-43, где вариантный полипептид ICOSL включает домен IgV или его специфический связывающий фрагмент.46. The variant ICOSL polypeptide of any one of embodiments 37-43, wherein the variant ICOSL polypeptide comprises an IgV domain or a specific binding fragment thereof.

47. Вариантный полипептид ICOSL по любому из воплощений 37-43 и 46, где вариантный полипептид ICOSL включает аминокислотную последовательность, представленную в любой из SEQ ID NO: 686781, 907, 910, или последовательность аминокислот, которая имеет, по меньшей мере, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98 или 99% идентичности последовательности с любой из SEQ ID NO: 686-781, 907, 910.47. The ICOSL variant polypeptide of any one of embodiments 37-43 and 46, wherein the ICOSL variant polypeptide comprises an amino acid sequence set forth in any of SEQ ID NOs: 686781, 907, 910, or an amino acid sequence that has at least 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98 or 99% sequence identity to any of SEQ ID NOs: 686-781, 907, 910.

48. Вариантный полипептид ICOSL по любому из воплощений 37-43 и 46, где вариантный полипептид ICOSL включает аминокислотную последовательность, представленную в любой из SEQ ID NO: 686781, 907, 910, или последовательность аминокислот, которая имеет, по меньшей мере, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98 или 99% идентичности последовательности с любой из SEQ ID NO: 686-781, 907, 910.48. The ICOSL variant polypeptide of any one of embodiments 37-43 and 46, wherein the ICOSL variant polypeptide comprises an amino acid sequence set forth in any of SEQ ID NOs: 686781, 907, 910, or an amino acid sequence that has at least 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98 or 99% sequence identity to any of SEQ ID NOs: 686-781, 907, 910.

49. Вариантный полипептид ICOSL по любому из воплощений 37-43 и 46-48, где домен IgV или его специфический связывающий фрагмент является единственной частью ICOSL вариантного полипептида ICOSL.49. The ICOSL variant polypeptide of any one of embodiments 37-43 and 46-48, wherein the IgV domain or a specific binding fragment thereof is the only ICOSL portion of the ICOSL variant polypeptide.

50. Вариантный полипептид ICOSL по любому из воплощений 37-42, где домен IgC или его специфический связывающий фрагмент является единственной частью ICOSL вариантного полипептида ICOSL.50. The ICOSL variant polypeptide of any one of embodiments 37-42, wherein the IgC domain or a specific binding fragment thereof is the only ICOSL portion of the ICOSL variant polypeptide.

51. Вариантный полипептид ICOSL по любому из воплощений 37-50, где вариантный полипептид ICOSL проявляет измененное связывание с эктодоменом ICOS или CD28 по сравнению со связыванием референсного полипептида ICOSL для того же эктодомена.51. The variant ICOSL polypeptide of any one of embodiments 37-50, wherein the variant ICOSL polypeptide exhibits altered binding to the ICOS or CD28 ectodomain compared to the binding of a reference ICOSL polypeptide for the same ectodomain.

52. Вариантный полипептид ICOSL по воплощениям 37-51, где вариантный полипептид ICOSL проявляет измененное связывание с эктодоменом(ами) ICOS или CD28 по сравнению со связыванием референсного полипептида ICOSL с тем же эктодоменом(ами).52. The variant ICOSL polypeptide of embodiments 37-51, wherein the variant ICOSL polypeptide exhibits altered binding to ICOS or CD28 ectodomain(s) compared to the binding of the reference ICOSL polypeptide to the same ectodomain(s).

53. Вариантный полипептид ICOSL по любому из воплощений 1-52, где связывание увеличивается более чем в 1,2 раза, в 1,5 раза, в 2 раза, в 3 раза, в 4 раза, в 5 раз, в 6 раз, в 7 раз, в 8 раз, в 9 раз, в 10 раз, в 20 раз, в 30 раз в 40 раз или в 50 раз или в 60 раз.53. The ICOSL variant polypeptide of any one of embodiments 1-52, wherein binding is increased by greater than 1.2-fold, 1.5-fold, 2-fold, 3-fold, 4-fold, 5-fold, 6-fold, 7 times, 8 times, 9 times, 10 times, 20 times, 30 times, 40 times or 50 times or 60 times.

54. Вариантный полипептид ICOSL по любому из воплощений 1-53, где ICOS представляет собой ICOS человека.54. The ICOSL variant polypeptide of any one of embodiments 1-53, wherein the ICOS is human ICOS.

55. Вариантный полипептид ICOSL по любому из воплощений 1-54, где CD28 представляет собой CD28 человека.55. The ICOSL variant polypeptide of any one of embodiments 1-54, wherein CD28 is human CD28.

56. Вариантный полипептид ICOSL по любому из воплощений 1-55, где вариантный полипептид ICOSL проявляет повышенное связывание с эктодоменом ICOS или CD28 по сравнению со связыванием56. The variant ICOSL polypeptide according to any one of embodiments 1-55, wherein the variant ICOSL polypeptide exhibits increased binding to the ICOS or CD28 ectodomain compared to binding

- 123 044346 референсного полипептида ICOSL с тем же эктодоменом.- 123 044346 reference polypeptide ICOSL with the same ectodomain.

57. Вариантный полипептид ICOSL по воплощений 56, где связывание увеличивается более чем в57. The ICOSL variant polypeptide of embodiment 56, wherein binding is increased by more than

1,2 раза, в 1,5 раза, в 2 раза, в 3 раза, в 4 раза, в 5 раз, в 6 раз, в 7 раз, в 8 раз, в 9 раз, в 10 раз, в 20 раз, в раз в 40 раз или в 50 раз или в 60 раз.1.2 times, 1.5 times, 2 times, 3 times, 4 times, 5 times, 6 times, 7 times, 8 times, 9 times, 10 times, 20 times , times 40 times or 50 times or 60 times.

58. Вариантный полипептид ICOSL по любому из воплощений 1-57, где CTLA-4 представляет собой CTLA-4 человека.58. The ICOSL variant polypeptide of any one of embodiments 1-57, wherein CTLA-4 is human CTLA-4.

59. Вариантный полипептид ICOSL по любому из воплощений 1-58, где измененное (повышенное или пониженное) связывание представляет собой измененную (увеличенную или уменьшенную) аффинность связывания.59. The ICOSL variant polypeptide of any one of embodiments 1-58, wherein the altered (increased or decreased) binding is an altered (increased or decreased) binding affinity.

60. Вариантный полипептид ICOSL по любому из воплощений 1-59, где вариантный ICOSL включает вплоть до 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19 или 20 аминокислотных модификаций, необязательно, аминокислотных замен, вставок и/или делеций.60. The variant ICOSL polypeptide of any one of embodiments 1-59, wherein the variant ICOSL includes up to 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16 , 17, 18, 19 or 20 amino acid modifications, optionally amino acid substitutions, insertions and/or deletions.

61. Вариантный полипептид ICOSL по любому из воплощений 1-60, где вариантный полипептид ICOSL демонстрирует идентичность последовательности, по меньшей мере, или, по меньшей мере, около 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98 или 99% относительно референсного полипептида ICOSL.61. The ICOSL variant polypeptide of any one of embodiments 1-60, wherein the ICOSL variant polypeptide exhibits sequence identity of at least, or at least about 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, or 99% relative to the ICOSL reference polypeptide.

62. Вариантный полипептид ICOSL по любому из воплощений 1-61, который является растворимым белком.62. The ICOSL variant polypeptide of any one of embodiments 1-61, which is a soluble protein.

63. Вариантный полипептид ICOSL по любому из воплощений 1-62, где вариантный полипептид ICOSL, утратил трансмембранный домен или внутриклеточный сиганльный домен; и/или при экспрессии из клетки вариантный полипептид ICOSL не экспрессируется на поверхности клетки.63. The variant ICOSL polypeptide according to any one of embodiments 1-62, wherein the variant ICOSL polypeptide has lost the transmembrane domain or the intracellular signal domain; and/or when expressed from a cell, the variant ICOSL polypeptide is not expressed on the cell surface.

64. Вариантный полипептид ICOSL по любому из воплощений 1-61, где вариантный полипептид ICOSL дополнительно включает трансмембранный домен.64. The variant ICOSL polypeptide of any one of embodiments 1-61, wherein the variant ICOSL polypeptide further comprises a transmembrane domain.

65. Вариантный полипептид ICOSL по воплощению 64, в котором трансмембранный домен включает аминокислотную последовательность, обозначенную как остатки 257-277 из SEQ ID NO: 5, или его функциональный вариант, который имеет, по меньшей мере, 85% идентичности последовательности с остатками 257-277 из SEQ ID NO: 5.65. The variant ICOSL polypeptide of embodiment 64, wherein the transmembrane domain comprises the amino acid sequence designated residues 257-277 of SEQ ID NO: 5, or a functional variant thereof that has at least 85% sequence identity with residues 257- 277 from SEQ ID NO: 5.

66. Вариантный полипептид ICOSL по воплощению 64 или воплощению 65, дополнительно содержащий цитоплазматический сигнальный домен, связанный с трансмембранным доменом.66. The variant ICOSL polypeptide of embodiment 64 or embodiment 65, further comprising a cytoplasmic signaling domain linked to a transmembrane domain.

67. Вариантный полипептид ICOSL по воплощению 66, в котором цитоплазматический сигнальный домен включает аминокислотную последовательность, обозначенную как остатки 278-302 из SEQ ID NO: 5, или их функциональный вариант, который имеет, по меньшей мере, 85% идентичности последовательности с остатками 278-302 из SEQ ID NO: 5.67. The ICOSL variant polypeptide of embodiment 66, wherein the cytoplasmic signaling domain comprises the amino acid sequence designated residues 278-302 of SEQ ID NO: 5, or a functional variant thereof that has at least 85% sequence identity with residues 278 -302 from SEQ ID NO: 5.

68. Вариантный полипептид ICOSL по любому из воплощений 1-67, который является дигликозилированным или частично дигликозилированным по сравнению с референсной последовательностью ICOSL.68. A variant ICOSL polypeptide according to any one of embodiments 1-67 that is diglycosylated or partially diglycosylated relative to the ICOSL reference sequence.

69. Иммуномодулирующий белок, содержащий вариантный полипептид ICOSL по любому из воплощений 1-68 и фрагмент, увеличивающий период полужизни.69. An immunomodulatory protein comprising a variant ICOSL polypeptide according to any one of embodiments 1-68 and a half-life extending moiety.

70. Иммуномодулирующий белок по воплощению 67, где фрагмент, увеличивающий период полужизни, включает домен мультимеризации, альбумин, альбумин-связывающий полипептид, Pro/Ala/Ser (PAS), C-концевой пептид (CTP) бета-субъединицы хорионического гонадотропина человека, полиэтиленгликоль (PEG), длинные неструктурированные гидрофильные последовательности аминокислот (XTEN), гидроксиэтилкрахмал (HES), альбумин-связывающая малая молекула или их комбинацию.70. The immunomodulatory protein of embodiment 67, wherein the half-life increasing moiety comprises a multimerization domain, albumin, albumin-binding polypeptide, Pro/Ala/Ser (PAS), human chorionic gonadotropin beta subunit C-terminal peptide (CTP), polyethylene glycol (PEG), long unstructured hydrophilic amino acid sequences (XTEN), hydroxyethyl starch (HES), albumin-binding small molecule, or a combination thereof.

71. Иммуномодулирующий белок по воплощению 69 или воплощению 70, где фрагмент, увеличивающий период полужизни, представляет собой или содержит Pro/Ala/Ser (PAS), а вариантный полипептид ICOSL является PAS-илированным.71. The immunomodulatory protein of embodiment 69 or embodiment 70, wherein the half-life increasing moiety is or contains Pro/Ala/Ser (PAS) and the variant ICOSL polypeptide is PAS-ylated.

72. Иммуномодулирующий белок по воплощению 71, где фрагмент, увеличивающий период полужизни, включает последовательность, представленную в SEQ ID NO: 904.72. The immunomodulatory protein of embodiment 71, wherein the half-life increasing moiety comprises the sequence set forth in SEQ ID NO: 904.

73. Иммуномодулирующий белок по воплощению 69 или воплощению 70, где фрагмент, увеличивающий период полужизни, представляет собой или содержит домен мультимеризации.73. The immunomodulatory protein of embodiment 69 or embodiment 70, wherein the half-life increasing moiety is or contains a multimerization domain.

74. Иммуномодулирующий белок по воплощению 73, где домен мультимеризации выбран из Fcобласти иммуноглобулина, лейциновой молнии, изолейцинной молнии или цинкового пальца.74. The immunomodulatory protein of embodiment 73, wherein the multimerization domain is selected from an immunoglobulin F region, a leucine zipper, an isoleucine zipper, or a zinc finger.

75. Иммуномодулирующий белок по воплощению 73 или воплощению 74, где вариантный полипептид ICOSL связан, прямо или опосредованно, через линкер, с доменом мультимеризации.75. The immunomodulatory protein of embodiment 73 or embodiment 74, wherein the variant ICOSL polypeptide is linked, directly or indirectly through a linker, to a multimerization domain.

76. Иммуномодулирующий белок по любому из воплощений 73-75, где иммуномодулирующий белок представляет собой мультимер, содержащий первый вариантный полипептид ICOSL, связанный с первым доменом мультимеризации, и второй вариантный полипептид ICOSL, связанный со вторым доменом мультимеризации, где первый и второй домены мультимеризации взаимодействуют с образованием мультимера, содержащего первый и второй вариантный полипептид ICOSL.76. The immunomodulatory protein according to any one of embodiments 73-75, wherein the immunomodulatory protein is a multimer comprising a first variant ICOSL polypeptide associated with a first multimerization domain, and a second variant ICOSL polypeptide associated with a second multimerization domain, wherein the first and second multimerization domains interact to form a multimer containing the first and second variant ICOSL polypeptides.

77. Иммуномодулирующий белок по п.76, где мультимер представляет собой димер.77. The immunomodulatory protein according to claim 76, wherein the multimer is a dimer.

78. Иммуномодулирующий белок по воплощению 76 или воплощению 77, где первый вариантный полипептид ICOSL и второй вариантный полипептид ICOSL являются одинаковыми.78. The immunomodulatory protein of embodiment 76 or embodiment 77, wherein the first variant ICOSL polypeptide and the second variant ICOSL polypeptide are the same.

79. Иммуномодулирующий белок по воплощению 77 или воплощению 78, где димер представляет79. The immunomodulatory protein of embodiment 77 or embodiment 78, wherein the dimer is

- 124 044346 собой гомодимер.- 124 044346 is a homodimer.

80. Иммуномодулирующий белок по воплощению 77, где димер представляет собой гетеродимер.80. The immunomodulatory protein of embodiment 77, wherein the dimer is a heterodimer.

81. Иммуномодулирующий белок по любому из воплощений 73-80, где домен мультимеризации представляет собой или содержит Fc-область иммуноглобулина.81. The immunomodulatory protein of any one of embodiments 73-80, wherein the multimerization domain is or comprises an immunoglobulin Fc region.

82. Иммуномодулирующий белок по воплощению 81, в котором Fc-область представляет собой белок иммуноглобулина G1 (IgG1) или иммуноглобулина G2 (IgG2).82. The immunomodulatory protein of embodiment 81, wherein the Fc region is an immunoglobulin G1 (IgG1) or immunoglobulin G2 (IgG2) protein.

83. Иммуномодулирующий белок по воплощению 81 или воплощению 82, где белок иммуноглобулина является человеческим и/или Fc-область является человеческой.83. The immunomodulatory protein of embodiment 81 or embodiment 82, wherein the immunoglobulin protein is human and/or the Fc region is human.

84. Иммуномодулирующий белок по любому из воплощений 81-83, где Fc-область включает аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 227, или ее вариант, который демонстрирует, по меньшей мере, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98 или 99% идентичности последовательности с SEQ ID NO: 227.84. The immunomodulatory protein of any one of embodiments 81-83, wherein the Fc region comprises the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 227, or a variant thereof that exhibits at least 90, 91, 92, 93, 94, 95 , 96, 97, 98 or 99% sequence identity to SEQ ID NO: 227.

85. Иммуномодулирующий белок по любому из воплощений 81-84, где Fc-область включает аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 226, или ее вариант, который демонстрирует, по меньшей мере, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98 или 99% идентичности последовательности с SEQ ID NO: 226.85. The immunomodulatory protein of any one of embodiments 81-84, wherein the Fc region comprises the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 226, or a variant thereof that exhibits at least 90, 91, 92, 93, 94, 95 , 96, 97, 98 or 99% sequence identity to SEQ ID NO: 226.

86. Иммуномодулирующий белок по любому из воплощений 81-85, где Fc-область проявляет одну или несколько эффекторных функций.86. The immunomodulatory protein of any one of embodiments 81-85, wherein the Fc region exhibits one or more effector functions.

87. Иммуномодулирующий белок по любому из воплощений 81-86, где Fc-область проявляет одну или несколько сниженных эффекторных функций по сравнению с областью Fc дикого типа, необязательно где человеческий Fc дикого типа представляет собой человеческий IgG1.87. The immunomodulatory protein of any one of embodiments 81-86, wherein the Fc region exhibits one or more reduced effector functions compared to the wild-type Fc region, optionally wherein the human wild-type Fc is human IgG1.

88. Иммуномодулирующий белок по воплощению 86 или воплощению 87,где одну или несколько эффекторных функций выбирают из числа нтителозависимой клеточной цитотоксичности (ADCC), комплемент-зависимой цитотоксичности, запрограммированной гибели клеток и клеточного фагоцитоза.88. The immunomodulatory protein of embodiment 86 or embodiment 87, wherein one or more effector functions are selected from antibody-dependent cellular cytotoxicity (ADCC), complement-dependent cytotoxicity, programmed cell death, and cellular phagocytosis.

89. Иммуномодулирующий белок по воплощению 87 или воплощению 88, где Fc-область представляет собой вариантную Fc-область, содержащей одну или несколько аминокислотных замен по сравнению с Fc-областью дикого типа.89. The immunomodulatory protein of embodiment 87 or embodiment 88, wherein the Fc region is a variant Fc region containing one or more amino acid substitutions compared to the wild type Fc region.

90. Иммуномодулирующий белок по воплощению 89, где одна или несколько аминокислотных замен вариантной Fc-области выбраны из N297G, E233P/L234V/L235A/G236del/S267K or90. The immunomodulatory protein of embodiment 89, wherein the one or more amino acid substitutions of the variant Fc region are selected from N297G, E233P/L234V/L235A/G236del/S267K or

L234A/L235E/G237A, где остаток пронумерован в соответствии с индексом EU по Kabat.L234A/L235E/G237A, where the remainder is numbered according to the Kabat EU index.

91. Иммуномодулирующий белок по воплощению 90, где вариантная Fc-область из IgG1 дополнительно включает аминокислотную замену C220S, где остатки пронумерованы в соответствии с индексом EU по Kabat.91. The immunomodulatory protein of embodiment 90, wherein the variant Fc region of IgG1 further includes the amino acid substitution C220S, wherein the residues are numbered according to the Kabat EU index.

92. Иммуномодулирующий белок по любому из воплощений 87-91, где Fc-область включает последовательность аминокислотной последовательности, изложенной в любой из SEQ ID NO: 476-478, или последовательность аминокислот, которая проявляет, по меньшей мере, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99% или более идентичности последовательностям любой из SEQ ID NO: 476-478 и содержит аминокислотные замены.92. The immunomodulatory protein of any one of embodiments 87-91, wherein the Fc region comprises an amino acid sequence set forth in any of SEQ ID NOs: 476-478, or an amino acid sequence that exhibits at least 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99% or more sequence identity to any of SEQ ID NO: 476-478 and contains amino acid substitutions.

93. Иммуномодулирующий белок по любому из воплощений 87-92, где Fc-область содержит K447del, где остаток пронумерован в соответствии с индексом EU по Kabat.93. The immunomodulatory protein of any one of embodiments 87-92, wherein the Fc region comprises K447del, wherein the residue is numbered according to the Kabat EU index.

94. Иммуномодулирующий белок по любому из воплощений 87-92 и 93, где Fc-область включает последовательность аминокислотной последовательности, изложенной в любой из SEQ ID NO: 476-478, или последовательность аминокислот, которая демонстрирует, по меньшей мере, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99% или более идентичности последовательностям любой из SEQ ID NO: 476-478 и содержат аминокислотные замены.94. The immunomodulatory protein of any one of embodiments 87-92 and 93, wherein the Fc region comprises an amino acid sequence set forth in any of SEQ ID NOs: 476-478, or an amino acid sequence that exhibits at least 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99% or more sequence identity to any of SEQ ID NO: 476-478 and contain amino acid substitutions.

95. Иммуномодулирующий белок, включающий:95. Immunomodulatory protein, including:

(a) вариантный полипептид ICOSL, включающий одну или несколько модификаций аминокислот в домене суперсемейства иммуноглобулинов (IgSF) референсного полипептида ICOSL, где вариантный полипептид ICOSL демонстрирует измененное связывание с эктодоменом(ами) ICOS или CD28 по сравнению со связыванием референсного полипептида ICOSL с тем же эктодоменом(ами); и (b) вариантная Fc-область, включающая аминокислотные замены, выбранные из N297G/K447del, E233P/L234V/L235A/G236del/S267K/K447del или L234A/L235E/G237A/K447del по сравнению с человеческим IgG1 дикого типа, где остатки пронумерованы в соответствии с индексом EU по Kabat.(a) a variant ICOSL polypeptide comprising one or more amino acid modifications in the immunoglobulin superfamily (IgSF) domain of the reference ICOSL polypeptide, wherein the variant ICOSL polypeptide exhibits altered binding to the ICOS or CD28 ectodomain(s) compared to the binding of the reference ICOSL polypeptide to the same ectodomain (ami); and (b) a variant Fc region comprising amino acid substitutions selected from N297G/K447del, E233P/L234V/L235A/G236del/S267K/K447del or L234A/L235E/G237A/K447del compared to wild-type human IgG1, where the residues are numbered at according to the Kabat EU index.

96. Иммуномодулирующий белок по воплощению 95, который представляет собой димер.96. The immunomodulatory protein of embodiment 95, which is a dimer.

97. Иммуномодулирующий белок по воплощению 95 или воплощению 96, где вариантная Fcобласть из IgG1 дополнительно включает аминокислотную замену C220S, где остатки пронумерованы в соответствии с индексом EU по Kabat.97. The immunomodulatory protein of embodiment 95 or embodiment 96, wherein the variant F region of IgG1 further comprises the amino acid substitution C220S, wherein the residues are numbered according to the Kabat EU index.

98. Иммуномодулирующий белок по любому из воплощений 95-97, где Fc-область включает последовательность аминокислотной последовательности, изложенной в любой из SEQ ID NO: 632-634, или последовательность аминокислот, которая проявляет, по меньшей мере, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99% или более идентичности последовательностям любой из SEQ ID NO: 632-634 и содержит аминокислотные замены.98. The immunomodulatory protein of any one of embodiments 95-97, wherein the Fc region comprises an amino acid sequence set forth in any of SEQ ID NOs: 632-634, or an amino acid sequence that exhibits at least 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99% or more sequence identity to any of SEQ ID NO: 632-634 and contains amino acid substitutions.

- 125 044346- 125 044346

99. Иммуномодулирующий белок по любому из воплощений 95-98, где вариантный полипептид99. The immunomodulatory protein according to any one of embodiments 95-98, wherein the variant polypeptide

ICOSL связан прямо или опосредованно через линкер с вариантной Fc-областью.ICOSL is linked directly or indirectly through a linker to the variant Fc region.

100. Иммуномодулирующий белок по воплощению 75 и воплощению 99, где линкер содержит от 1 до 10 аминокислот.100. The immunomodulatory protein of embodiment 75 and embodiment 99, wherein the linker contains from 1 to 10 amino acids.

101. Иммуномодулирующий белок по воплощению 100, где линкер выбран из линкера AAA, G4S (SEQ ID NO: 636), (G4S) 2 (SEQ ID NO: 229) или GSGGGGS (SEQ ID NO: 635).101. The immunomodulatory protein of embodiment 100, wherein the linker is selected from linker AAA, G4S (SEQ ID NO: 636), (G4S)2 (SEQ ID NO: 229) or GSGGGGS (SEQ ID NO: 635).

102. Иммуномодулирующий белок, включающий вариантный полипептид ICOSL по любому из воплощений 1-68, связанного со вторым полипептидом, содержащим домен суперсемейства иммуноглобулинов (IgSF).102. An immunomodulatory protein comprising a variant ICOSL polypeptide of any one of embodiments 1-68 linked to a second immunoglobulin superfamily (IgSF) domain-containing polypeptide.

103. Иммуномодулирующий белок по воплощению 102, где домен IgSF имеет модифицированную аффинность и имеет измененное связывание с одним или несколькими его когнатными партнерами связывания по сравнению с немодифицированным доменом IgSF или доменом IgSF дикого типа.103. The immunomodulatory protein of embodiment 102, wherein the IgSF domain has a modified affinity and has altered binding to one or more of its cognate binding partners compared to an unmodified IgSF domain or a wild-type IgSF domain.

104. Иммуномодулирующий полипептид по воплощению 103, где домен IgSF проявляет повышенное связывание с одним или несколькими его когнатными партнерами связывания по сравнению с немодифицированным доменом IgSF или доменом IgSF дикого типа.104. The immunomodulatory polypeptide of embodiment 103, wherein the IgSF domain exhibits increased binding to one or more of its cognate binding partners compared to an unmodified IgSF domain or a wild-type IgSF domain.

105. Иммуномодулирующий полипептид по любому из воплощений 102-104, где вариантный полипептид ICOSL представляет собой первый вариантный полипептид ICOSL, а домен IgSF второго полипептида представляет собой домен IgSF из второго вариантного полипептида ICOSL по любому из воплощений 1-68, где первый и второй варианты ICOSL являются одинаковыми или разными.105. The immunomodulatory polypeptide of any one of embodiments 102-104, wherein the variant ICOSL polypeptide is a first variant ICOSL polypeptide and the IgSF domain of the second polypeptide is the IgSF domain of a second variant ICOSL polypeptide of any one of embodiments 1-68, wherein the first and second variants ICOSL are the same or different.

106. Иммуномодулирующий белок по любому из воплощений 102-105, где вариантный полипептид ICOSL способен специфически связываться с CD28 или ICOS, а домен IgSF второго полипептида способен связываться с партнером связывания, отличным от партнера связывания, специфически связанного вариантным полипептидом ICOSL.106. The immunomodulatory protein of any one of embodiments 102-105, wherein the variant ICOSL polypeptide is capable of specifically binding to CD28 or ICOS, and the IgSF domain of the second polypeptide is capable of binding to a binding partner other than the binding partner specifically bound by the variant ICOSL polypeptide.

107. Иммуномодулирующий полипептид по воплощению 106, где домен IgSF является представителем семейства B7.107. The immunomodulatory polypeptide of embodiment 106, wherein the IgSF domain is a member of the B7 family.

108. Иммуномодулирующий полипептид по любому из пп. 102-104 и 106, в котором домен IgSF представляет собой фрагмент, локализующий на опухоли, который связывается с лигандом, экспрессируемым на опухоли, или представляет собой фрагмент, локализующий в воспалении, который связывается с лигандом, экспрессируемым на клетке или ткани воспалительной среды.108. Immunomodulatory polypeptide according to any one of paragraphs. 102-104 and 106, wherein the IgSF domain is a tumor-localizing moiety that binds to a ligand expressed on a tumor, or is an inflammasome-localizing moiety that binds to a ligand expressed on a cell or tissue of the inflammatory environment.

109. Иммуномодулирующий полипептид по воплощению 108, где лиганд представляет собой B7H6.109. The immunomodulatory polypeptide of embodiment 108, wherein the ligand is B7H6.

110. Иммуномодулирующий полипептид по воплощению 108 или воплощению 109, где домен IgSF находится из NKp30.110. The immunomodulatory polypeptide of embodiment 108 or embodiment 109, wherein the IgSF domain is from NKp30.

111. Иммуномодулирующий полипептид по любому из воплощений 102-110, где домен IgSF является или включает домен IgV.111. The immunomodulatory polypeptide of any one of embodiments 102-110, wherein the IgSF domain is or includes an IgV domain.

112. Иммуномодулирующий полипептид по любому из воплощений 102-111, где вариантный полипептид ICOSL представляет собой или включает домен IgV.112. The immunomodulatory polypeptide of any one of embodiments 102-111, wherein the variant ICOSL polypeptide is or includes an IgV domain.

113. Иммуномодулирующий белок по любому из воплощений 102-112, где иммуномодулирующий белок включает домен мультимеризации, связанный с одним или обоими вариантными полипептидами ICOSL или вторым полипептидом, содержащим домен IgSF.113. The immunomodulatory protein of any one of embodiments 102-112, wherein the immunomodulatory protein comprises a multimerization domain linked to one or both of the variant ICOSL polypeptides or a second IgSF domain-containing polypeptide.

114. Иммуномодулирующий белок по воплощению 113, где домен мультимеризации является доменом Fc или его вариантом с уменьшенной эффекторной функцией.114. The immunomodulatory protein of embodiment 113, wherein the multimerization domain is an Fc domain or a variant thereof with reduced effector function.

115. Иммуномодулирующий белок по любому из воплощений 102-114, который является димерным.115. The immunomodulatory protein of any one of embodiments 102-114, which is dimeric.

116. Иммуномодулирующий белок по воплощению 115, который является гомодимерным.116. The immunomodulatory protein of embodiment 115, which is homodimeric.

117. Иммуномодулирующий белок по воплощению 116, который является гетеродимерным.117. The immunomodulatory protein of embodiment 116, which is heterodimeric.

118. Конъюгат, содержащий вариантный полипептид ICOSL по любому из воплощений 1-68 или иммуномодулирующий полипептид по любому из воплощений 69-117, и гетерологичный фрагмент.118. A conjugate comprising a variant ICOSL polypeptide of any one of embodiments 1-68 or an immunomodulatory polypeptide of any of embodiments 69-117, and a heterologous fragment.

119. Конъюгат по воплощению 118, где вариантный полипептид ICOSL прямо или опосредованно связан через линкер с гетерологичным фрагментом.119. The conjugate of embodiment 118, wherein the variant ICOSL polypeptide is linked directly or indirectly via a linker to the heterologous moiety.

120. Конъюгат по любому из воплощения 118 или воплощения 119, где нацеливающий фрагмент представляет собой белок, пептид, нуклеиновую кислоту, низкомолекулярное вещество или наночастицу.120. The conjugate of any one of embodiment 118 or embodiment 119, wherein the targeting moiety is a protein, peptide, nucleic acid, small molecule, or nanoparticle.

121. Конъюгат по любому из воплощений 118-120, где нацеливающий фрагмент представляет собой белок или пептид.121. The conjugate of any one of embodiments 118-120, wherein the targeting moiety is a protein or peptide.

122. Конъюгат по воплощению 121, в котором конъюгат представляет собой гибридный белок.122. The conjugate of embodiment 121, wherein the conjugate is a fusion protein.

123. Гибридный белок, содержащий вариантный полипептид ICOSL по любому из воплощений 1-68 или иммуномодулирующий белок по любому из воплощений 69-117 и гетерологичный фрагмент.123. A fusion protein comprising a variant ICOSL polypeptide of any one of embodiments 1-68 or an immunomodulatory protein of any of embodiments 69-117 and a heterologous fragment.

124. Конъюгат или гибридный белок по любому из воплощений 118-123, где фрагмент представляет собой нацеливающий фрагмент, который специфически связывается с молекулой на поверхности клетки.124. The conjugate or fusion protein of any one of embodiments 118-123, wherein the moiety is a targeting moiety that specifically binds to a molecule on the surface of a cell.

125. Конъюгат или гибридный белок по воплощению 124, где нацеливающий фрагмент специфически связывается с молекулой на поверхности иммунной клетки.125. The conjugate or fusion protein of embodiment 124, wherein the targeting moiety specifically binds to a molecule on the surface of an immune cell.

126. Конъюгат или гибридный белок по воплощению 125, где иммунная клетка представляет собой антигенпрезентирующую клетку или лимфоцит.126. The conjugate or fusion protein of embodiment 125, wherein the immune cell is an antigen presenting cell or lymphocyte.

- 126 044346- 126 044346

127. Конъюгат или гибридный белок по воплощению 124, где нацеливающий фрагмент представляет собой локализующий в опухоли фрагмент, который связывается с молекулой на поверхности опухоли.127. The conjugate or fusion protein of embodiment 124, wherein the targeting moiety is a tumor-localizing moiety that binds to a molecule on the surface of the tumor.

128. Конъюгат или гибридный белок по любому из воплощений 124-127, где нацеливающий фрагмент связывается с молекулой HER1/EGFR, HER2/ERBB2, CD20, CD25 (рецептор IL-2Ra), CD33, CD52, CD133, CD206, CEA, CEACAM1, CEACAM3, CEACAM5, CEACAM6, раковый антиген 125 (CA125), альфа-фетопротеина (AFP), Льюис Y, TAG72, каприн-1, мезотелина, рецептора PDGF (PDGFR) PDGFRa, PD-1, PD-L1, CTLA-4, рецептора IL-2, фактора роста эндотелия сосудов (VEGF), CD30, EpCAM, EphA2, глипикана-3, gpA33, муцинов, CAIX, PSMA, фолат-связывающего белка, ганглиозидов (такие как GD2, GD3, GM1 и GM2), рецептора VEGF (VEGFR), VEGFR2, VEGF-A, интегрина aVe3, интегрина α5β1, ERBB3, MET, IGF1R, EPHA3, TRAILR1, TRAILR2, RANKL, FAP, тенасцина, AFP, комплекса BCR, CD3, CD18, CD44, CTL, CTL-4, gp72, HLA-DR 10 β, антигена HLA-DR, IgE, MUC-1, nuC242, антигена PEM, металлопротеиназ, рецептора эфрина, лигандов эфрина, рецептора HGF, CXCR4, CXCR4, рецептора бомбезина, антигена SK-1, Bcr- abl, RET, MET, TRKB, TIE2, ALK, ROS, EML4-ALK, ROS1, BRAFV600E, SRC, c-KIT, mTOR, TSC1, TSC2, BTK, KIT, BRCA, CDK 4/6, JAK1, JAK2, BRAF, FLT-3, MEK1, MEK2, SMO или B7-H6 (NCR3LG1).128. The conjugate or fusion protein of any one of embodiments 124-127, wherein the targeting moiety binds to a molecule HER1/EGFR, HER2/ERBB2, CD20, CD25 (IL-2Ra receptor), CD33, CD52, CD133, CD206, CEA, CEACAM1, CEACAM3, CEACAM5, CEACAM6, Cancer Antigen 125 (CA125), Alpha Fetoprotein (AFP), Lewis Y, TAG72, Caprin-1, Mesothelin, PDGF Receptor (PDGFR) PDGFRa, PD-1, PD-L1, CTLA-4, IL-2 receptor, vascular endothelial growth factor (VEGF), CD30, EpCAM, EphA2, glypican-3, gpA33, mucins, CAIX, PSMA, folate binding protein, gangliosides (such as GD2, GD3, GM1 and GM2), receptor VEGF (VEGFR), VEGFR2, VEGF-A, aVe3 integrin, α5β1 integrin, ERBB3, MET, IGF1R, EPHA3, TRAILR1, TRAILR2, RANKL, FAP, tenascin, AFP, BCR complex, CD3, CD18, CD44, CTL, CTL- 4, gp72, HLA-DR 10 β, HLA-DR antigen, IgE, MUC-1, nuC242, PEM antigen, metalloproteinases, ephrin receptor, ephrin ligands, HGF receptor, CXCR4, CXCR4, bombesin receptor, SK-1 antigen, Bcr - abl, RET, MET, TRKB, TIE2, ALK, ROS, EML4-ALK, ROS1, BRAFV600E, SRC, c-KIT, mTOR, TSC1, TSC2, BTK, KIT, BRCA, CDK 4/6, JAK1, JAK2, BRAF, FLT-3, MEK1, MEK2, SMO or B7-H6 (NCR3LG1).

129. Конъюгат или гибридный белок по любому из воплощений 124-128, где нацеливающий фрагмент связывается с PD-L1.129. The conjugate or fusion protein of any one of embodiments 124-128, wherein the targeting moiety binds to PD-L1.

130. Конъюгат или гибридный белок по любому из воплощений 124-129, где нацеливающий фрагмент представляет собой антитело или антигенсвязывающий фрагмент.130. The conjugate or fusion protein of any one of embodiments 124-129, wherein the targeting moiety is an antibody or antigen binding moiety.

131. Конъюгат или гибридный белок по воплощению 130, где антитело выбрано из цетуксимаба, панитумумаба, залутумумаба, нимотузумаба, трастузумаба, адотрастумумаба, эмтансина, тозитумомаба (Bexxar®), ритуксимаба (Rituxan, Mabthera), Ибритумомаб тиуксетана (Zevalin), даклизумаба (Zenapax), гемтузумаба (Mylotarg), алемтузумаба, фрагмента Fab CEA-скана, моноклонального антитела OC125, ab75705, B72.3, бевацизумаба (Avastin®), афатиниба, акситиниба, бозутиниба, кабозантиниба, церитиниба, кризотиниба, дабрафениба, дасатиниба, динутуксимаба, эрлотиниба, эверолимуса, ибрутиниба, иматиниба, лапатиниба, ленватиниба, нилотиниба, олапариба, оларатумаба, палбоциклиба, пазопаниба, пертузумаба, рамукирумаба, регорафениба, руксолитиниба, сорафениба, сунитиниба, темсиролимуса, траметиниба, вандетаниба, вемурафениба, висмодегиба, базиликсимаба, ипилимумаба, ниволумаба, пембролизумаба, MPDL3280A, пидилизумаба (CT-011), AMP-224, MSB001078C или MEDI4736, BMS-935559, LY3300054, атезолизумаба, авелумаба или дурвалумаба или представляет собой их антигенсвязывающий фрагмент.131. The conjugate or fusion protein of embodiment 130, wherein the antibody is selected from cetuximab, panitumumab, zalutumumab, nimotuzumab, trastuzumab, adotrastumumab, emtansine, tositumomab (Bexxar®), rituximab (Rituxan, Mabthera), Ibritumomab tiuxetan (Zevalin), daclizumab (Zenapax ), gemtuzumab (Mylotarg), alemtuzumab, Fab CEA scan fragment, monoclonal antibody OC125, ab75705, B72.3, bevacizumab (Avastin®), afatinib, axitinib, bosutinib, cabozantinib, ceritinib, crizotinib, dabrafenib, dasatinib, dinutuximab, erlotinib , everolimus, ibrutinib, imatinib, lapatinib, lenvatinib, nilotinib, olaparib, olaratumab, palbociclib, pazopanib, pertuzumab, ramukirumab, regorafenib, ruxolitinib, sorafenib, sunitinib, temsirolimus, trametinib, vandetanib, vemurafenib, in ismodegib, basiliximab, ipilimumab, nivolumab, pembrolizumab , MPDL3280A, pidilizumab (CT-011), AMP-224, MSB001078C or MEDI4736, BMS-935559, LY3300054, atezolizumab, avelumab or durvalumab, or is an antigen-binding fragment thereof.

132. Конъюгат или гибридный белок по воплощению 130 или воплощению 131, где вариантный полипептид ICOSL прямо или опосредованно связан через линкер с N-концом тяжелой и/или легкой цепи антитела или антигенсвязывающего фрагмента.132. The conjugate or fusion protein of embodiment 130 or embodiment 131, wherein the variant ICOSL polypeptide is linked directly or indirectly via a linker to the N-terminus of the heavy and/or light chain of the antibody or antigen binding fragment.

133. Конъюгат или гибридный белок по воплощению 130 или воплощению 131, где вариантный полипептид ICOSL прямо или опосредованно связан через линкер с C-концом тяжелой и/или легкой цепи антитела или антигенсвязывающего фрагмента.133. The conjugate or fusion protein of embodiment 130 or embodiment 131, wherein the variant ICOSL polypeptide is linked directly or indirectly via a linker to the C-terminus of the heavy and/or light chain of the antibody or antigen binding fragment.

134. Конъюгат или гибридный белок по любому из воплощений 118-133, где конъюгат является двухвалентным, четырехвалентным, шестивалентным или восьмивалентным.134. The conjugate or fusion protein of any one of embodiments 118-133, wherein the conjugate is divalent, tetravalent, hexavalent, or octavalent.

135. Конъюгат или гибридный белок по любому из воплощений 118-123, где гетерологичный фрагмент представляет собой или содержит метку для обнаружения или очистки вариантного полипептида ICOSL.135. The conjugate or fusion protein of any one of embodiments 118-123, wherein the heterologous fragment is or contains a tag for detecting or purifying an ICOSL variant polypeptide.

136. Моновалентный гибридный белок, содержащий:136. Monovalent hybrid protein containing:

(a) вариантный полипептид ICOSL, включающий одну или несколько модификаций аминокислот в домене суперсемейства иммуноглобулинов (IgSF) референсного полипептида ICOSL, где вариантный полипептид ICOSL демонстрирует измененное связывание с эктодоменом(ами) ICOS или CD28 по сравнению со связыванием референсного полипептида ICOSL с тем же эктодоменом(ами); и (b) метку для обнаружения или очистки вариантного полипептида ICOSL.(a) a variant ICOSL polypeptide comprising one or more amino acid modifications in the immunoglobulin superfamily (IgSF) domain of the reference ICOSL polypeptide, wherein the variant ICOSL polypeptide exhibits altered binding to the ICOS or CD28 ectodomain(s) compared to the binding of the reference ICOSL polypeptide to the same ectodomain (ami); and (b) a tag for detecting or purifying the ICOSL variant polypeptide.

137. Конъюгат или гибридный белок по воплощению 135 или воплощению 136, в котором метка для детекции или очистки выбрана из полигистидиновой (His) метки, FLAG-метки, Myc-метки или метки на основе флуоресцентного белка.137. The conjugate or fusion protein of embodiment 135 or embodiment 136, wherein the detection or purification tag is selected from a polyhistidine (His) tag, a FLAG tag, a Myc tag, or a fluorescent protein tag.

138. Иммуномодулирующий белок по любому из воплощений 95-101 или гибридный белок по воплощению 136 или воплощению 137, где вариантный полипептид ICOSL содержит одну или несколько аминокислотных модификаций, находятся в положении, соответствующем положению(ям), выбранному из 10, 11, 13, 16, 18, 20, 25, 26, 27, 30, 33, 37, 38, 42, 43, 47, 52, 54, 57, 61, 62, 67, 71, 72, 74, 75, 77, 78, 80, 84, 89, 90, 92, 93, 94, 96, 97, 98, 99, 100, 102, 103, 107, 109, 110, 111, 113, 115, 116, 117, 119, 120, 121, 122, 126, 129, 130, 132, 133, 135, 137, 138, 139, 140, 142, 143, 144, 146, 151, 152, 153, 154, 155, 156, 158, 161, 164, 166, 168, 172, 173, 175, 190, 192, 193, 194, 198, 201, 203, 207, 208, 210, 212, 217, 218, 220, 221, 224, 225 или 227 относительно SEQ ID NO: 32.138. The immunomodulatory protein of any one of embodiments 95-101 or the fusion protein of embodiment 136 or embodiment 137, wherein the variant ICOSL polypeptide contains one or more amino acid modifications, is at a position corresponding to the position(s) selected from 10, 11, 13, 16, 18, 20, 25, 26, 27, 30, 33, 37, 38, 42, 43, 47, 52, 54, 57, 61, 62, 67, 71, 72, 74, 75, 77, 78, 80, 84, 89, 90, 92, 93, 94, 96, 97, 98, 99, 100, 102, 103, 107, 109, 110, 111, 113, 115, 116, 117, 119, 120, 121, 122, 126, 129, 130, 132, 133, 135, 137, 138, 139, 140, 142, 143, 144, 146, 151, 152, 153, 154, 155, 156, 158, 161, 164, 1 66, 168, 172, 173, 175, 190, 192, 193, 194, 198, 201, 203, 207, 208, 210, 212, 217, 218, 220, 221, 224, 225, or 227 relative to SEQ ID NO: 32.

139. Иммуномодулирующий белок или гибридный белок по воплощению 138, где одна или несколько модификаций аминокислот выбраны из M10V, M10I, V11E, S13G, E16V, S18R, A20T, A20V,139. The immunomodulatory protein or fusion protein of embodiment 138, wherein one or more amino acid modifications are selected from M10V, M10I, V11E, S13G, E16V, S18R, A20T, A20V,

- 127 044346- 127 044346

S25G, R26S, F27C, F27S, N30D, Y33del, Q37R, T38P, K42E, T43A, Y47H, N52A, N52C, N52D, N52G, N52H, N52K, N52L, N52M, N52P, N52Q, N52R, N52S, N52T, N52V, N52Y, S54A, S54F, S54P, N57A, N57D, N57E, N57F, N57H, N57K, N57L, N57M, N57P, N57Q, N57S, N57T, N57V, N57W, N57Y, R61C, R61S, Y62F, L67P, A71T, G72R, L74Q, R75Q, D77G, F78L, L80P, N84Q, D89G, E90A, K92R, F93L, H94D, H94E, L96F, L96I, V97A, L98F, S99G, Q100A, Q100D, Q100E, Q100G, Q100K, Q100L, Q100M, Q100N, Q100P, Q100R, Q100S, Q100T, Q100V, L102R, G103E, V107A, V107I, S109G, S109N, V110A, V110D, V110N, E111del, T113E, H115Q, H115R, V116A, A117T, N119Q, F120I, F120S, S121G, V122A, V122M, S126R, S126T, H129P, S130G, S132F, Q133H, E135K, T137A, F138L, T139S, C140del, C140D, S142F, I143T, I143V, N144D, Y146C, V151A, Y152C, Y152H, W153R, I154F, N155H, N155Q, K156M, D158G, L161M, L161P, Q164L, L166Q, N168Q, F172S, L173S, M175T, T190A, T190S, S192G, V193A, V193M, N194D, C198R, N201S, L203F, L203P, N207Q, L208P, V210A, S212G, D217G, D217V, I218N, I218T, E220G, R221G, R221I, R221K, I224V, T225A, T225S, N227K или их консервативная аминокислотная замена.S25G, R26S, F27C, F27S, N30D, Y33del, Q37R, T38P, K42E, T43A, Y47H, N52A, N52C, N52D, N52G, N52H, N52K, N52L, N52M, N52P, N52Q, N52R, N52S, N52T, N5 2V, N52Y, S54A, S54F, S54P, N57A, N57D, N57E, N57F, N57H, N57K, N57L, N57M, N57P, N57Q, N57S, N57T, N57V, N57W, N57Y, R61C, R61S, Y62F, L67P, A71T, G7 2R, L74Q, R75Q, D77G, F78L, L80P, N84Q, D89G, E90A, K92R, F93L, H94D, H94E, L96F, L96I, V97A, L98F, S99G, Q100A, Q100D, Q100E, Q100G, Q100K, Q100L, Q 100M, Q100N, Q100P, Q100R, Q100S, Q100T, Q100V, L102R, G103E, V107A, V107I, S109G, S109N, V110A, V110D, V110N, E111del, T113E, H115Q, H115R, V116A, A117T, N1 19Q, F120I, F120S, S121G, V122A, V122M, S126R, S126T, H129P, S130G, S132F, Q133H, E135K, T137A, F138L, T139S, C140del, C140D, S142F, I143T, I143V, N144D, Y146C, V151A, Y152C, Y1 52H, W153R, I154F, N155H, N155Q, K156M, D158G, L161M, L161P, Q164L, L166Q, N168Q, F172S, L173S, M175T, T190A, T190S, S192G, V193A, V193M, N194D, C198R, N201S, L203F, L203P, N2 07Q, L208P, V210A, S212G, D217G, D217V, I218N, I218T, E220G, R221G, R221I, R221K, I224V, T225A, T225S, N227K or their conservative amino acid substitution.

140. Иммуномодулирующий белок или гибридный белок по воплощению 138 или воплощению 139, где референсный полипептид ICOSL включает (i) последовательность аминокислот, указанную в SEQ ID NO: 32, (ii) последовательность аминокислот, которая имеет, по меньшей мере, 95% идентичности с последовательностью SEQ ID NO: 32; или (iii) часть (i) или (ii), содержащая домен IgV или домен IgC или их специфически связывающие фрагменты или и тот, и другой.140. The immunomodulatory protein or fusion protein of embodiment 138 or embodiment 139, wherein the ICOSL reference polypeptide comprises (i) an amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 32, (ii) an amino acid sequence that has at least 95% identity with sequence SEQ ID NO: 32; or (iii) part (i) or (ii) containing an IgV domain or an IgC domain or specific binding fragments thereof or both.

141. Иммуномодулирующий белок или гибридный белок по любому из воплощений 138-140, где референсный полипептид ICOSL включает аминокислотную последовательность, представленную в любой из SEQ ID NO: 196, 545, 600-605 и 623-628.141. The immunomodulatory protein or fusion protein of any one of embodiments 138-140, wherein the ICOSL reference polypeptide includes the amino acid sequence presented in any of SEQ ID NOs: 196, 545, 600-605 and 623-628.

142. Иммуномодулирующий белок или белок слияния по любому из воплощений 138-141, где референсный полипептид ICOSL состоит из аминокислотной последовательности, представленной в любой из SEQ ID NO: 32, 196, 545, 600-605 и 623-628.142. The immunomodulatory protein or fusion protein of any one of embodiments 138-141, wherein the ICOSL reference polypeptide consists of the amino acid sequence presented in any of SEQ ID NOs: 32, 196, 545, 600-605 and 623-628.

143. Молекула(ы) нуклеиновой кислоты, кодирующая вариантный полипептид ICOSL по любому из воплощений 1-68, иммуномодулирующий белок по любому из воплощений 69-117 и 118-142 или гибридный белок по любому из воплощений 123-142.143. Nucleic acid molecule(s) encoding the ICOSL variant polypeptide of any one of embodiments 1-68, the immunomodulatory protein of any of embodiments 69-117 and 118-142, or the fusion protein of any of embodiments 123-142.

144. Молекула(ы) нуклеиновой кислоты по воплощению 143, которая представляет собой синтетическую нуклеиновую кислоту.144. The nucleic acid molecule(s) of embodiment 143, which is a synthetic nucleic acid.

145. Молекула(ы) нуклеиновой кислоты по воплощению 143 или воплощению 144, которая представляет собой кДНК.145. The nucleic acid molecule(s) of embodiment 143 or embodiment 144, which is a cDNA.

146. Вектор, включающий молекулу(ы) нуклеиновой кислоты по любому из воплощений 143-145.146. A vector comprising the nucleic acid molecule(s) of any one of embodiments 143-145.

147. Вектор по воплощению 146, который является экспрессирующим вектором.147. The vector of embodiment 146, which is an expression vector.

148. Вектор по воплощению 146 или по воплощению 147, где вектор представляет собой экспрессирующий вектор млекопитающих или вирусный вектор.148. The vector of embodiment 146 or embodiment 147, wherein the vector is a mammalian expression vector or a viral vector.

149. Клетка, содержащая вектор по любому из воплощений 146-148.149. A cell containing the vector of any one of embodiments 146-148.

150. Клетка по воплощению 149, которая является клеткой млекопитающего.150. The cell of embodiment 149, which is a mammalian cell.

151. Клетка по воплощению 149 или воплощению 150, которая представляет собой клетку яичника китайского хомячка (CHO) или ее производное.151. The cell of embodiment 149 or embodiment 150, which is a Chinese hamster ovary (CHO) cell or a derivative thereof.

152. Способ получения вариантного полипептида ICOSL или иммуномодулирующего белка, включающий введение молекулы нуклеиновой кислоты по любому из воплощений 143-145 или вектора по любому из воплощений 146-148 в клетку-хозяина в условиях экспрессии белка в клетке.152. A method of producing a variant ICOSL polypeptide or immunomodulatory protein, comprising introducing a nucleic acid molecule according to any one of embodiments 143-145 or a vector according to any one of embodiments 146-148 into a host cell under conditions of expression of the protein in the cell.

153. Способ воплощения 152, где клетка-хозяин представляет собой клетку млекопитающего.153. Method of embodiment 152, wherein the host cell is a mammalian cell.

154. Способ по воплощению 153, где клетка млекопитающего представляет собой клетку яичника китайского хомяка или ее производное.154. The method of embodiment 153, wherein the mammalian cell is a Chinese hamster ovary cell or a derivative thereof.

155. Способ по любому из воплощений 152-154, дополнительно включающий выделение или очистку белка из клетки.155. The method of any one of embodiments 152-154, further comprising isolating or purifying the protein from the cell.

156. Белок, полученный способом по любому из воплощений 152-155.156. A protein produced by the method of any one of embodiments 152-155.

157. Композиция, включающая белок, содержащий вариантный полипептид ICOSL по любому из воплощений 1-68 или иммуномодулирующий белок по любому из воплощений 69-117, где, по меньшей мере, 95, 96, 97, 98, 99% отдельных последовательностей белка или иммуномодулирующего белка в композиции имеют идентичную длину последовательности, необязательно, где композиция представляет собой фармацевтическую композицию, содержащую фармацевтически приемлемый носитель.157. A composition comprising a protein comprising a variant ICOSL polypeptide according to any one of embodiments 1-68 or an immunomodulatory protein according to any one of embodiments 69-117, wherein at least 95, 96, 97, 98, 99% of the individual sequences of the protein or immunomodulatory proteins in the composition have identical sequence length, optionally where the composition is a pharmaceutical composition containing a pharmaceutically acceptable carrier.

158. Композиция по воплощению 157, где белок или иммуномодулирующий белок очищают из клеток яичника китайского хомяка или их производного.158. The composition of embodiment 157, wherein the protein or immunomodulatory protein is purified from Chinese hamster ovary cells or a derivative thereof.

159. Полинуклеотид, содержащий нуклеиновую кислоту, кодирующую вариантный полипептид ICOSL, содержащий трансмембранный домен по любому из воплощений 64-68, и одну или несколько нуклеиновых кислот, кодирующих одну или несколько цепей рекомбинантного антигенного рецептора.159. A polynucleotide comprising a nucleic acid encoding a variant ICOSL polypeptide containing the transmembrane domain of any one of embodiments 64-68, and one or more nucleic acids encoding one or more recombinant antigen receptor chains.

160. Полинуклеотид по воплощению 159, где рекомбинантный рецептор антигена представляет собой химерный антигенный рецептор (CAR) или сконструированный T-клеточный рецептор (TCR).160. The polynucleotide of embodiment 159, wherein the recombinant antigen receptor is a chimeric antigen receptor (CAR) or an engineered T-cell receptor (TCR).

161. Полинуклеотид по воплощению 159 или воплощению 160, где каждая из нуклеиновых кислот, кодирующих вариантный полипептид ICOSL, и одной или нескольких нуклеиновых кислот, кодирую-161. The polynucleotide of embodiment 159 or embodiment 160, wherein each of a nucleic acid encoding a variant ICOSL polypeptide and one or more nucleic acids encoding

- 128 044346 щих одну или несколько цепей рекомбинантного рецептора, отделена нуклеиновой кислотой, кодирующей саморасщепляющийся пептид или пептид, который вызывает проскок рибосомы.- 128 044346 containing one or more chains of a recombinant receptor, separated by a nucleic acid encoding a self-cleaving peptide or a peptide that causes ribosome slippage.

162. Полинуклеотид по воплощению 161, где полинуклеотид содержит нуклеиновую кислоту, кодирующую вариантный полипептид ICOSL, нуклеиновую кислоту, кодирующую саморасщепляющийся пептид или пептид, который вызывает проскок рибосомы, и нуклеиновую кислоту, кодирующую CAR.162. The polynucleotide of embodiment 161, wherein the polynucleotide comprises a nucleic acid encoding a variant ICOSL polypeptide, a nucleic acid encoding a self-cleaving peptide or a peptide that causes ribosome slipping, and a nucleic acid encoding a CAR.

163. Полинуклеотид по воплощению 161, гдеполинуклеотид включает нуклеиновую кислоту, кодирующую вариантный полипептид ICOSL, нуклеиновую кислоту, кодирующую первый саморасщепляющийся пептид или пептид, который вызывает проскок рибосомы, нуклеиновую кислоту, кодирующую одну сконструированную цепь TCR-альфа или сконструированную цепь TCR-бета, нуклеиновую кислоту, кодирующую второй саморасщепляющийся пептид или пептид, который вызывает проскок рибосомы, и нуклеиновую кислоту, кодирующую другую сконструированную цепь TCR-альфа или сконструированную цепь TCR-бета.163. The polynucleotide of embodiment 161, wherein the polynucleotide comprises a nucleic acid encoding a variant ICOSL polypeptide, a nucleic acid encoding a first self-cleaving peptide or a peptide that causes ribosome escape, a nucleic acid encoding a single engineered TCR-alpha chain or an engineered TCR-beta chain, a nucleic acid an acid encoding a second self-cleaving peptide or a peptide that causes ribosome slippage; and a nucleic acid encoding another engineered TCR-alpha chain or an engineered TCR-beta chain.

164. Полинуклеотид по воплощению 163, в котором кодированный первый и второй саморасщепляющийся пептид является одинаковыми.164. The polynucleotide of embodiment 163, wherein the encoded first and second self-cleaving peptide are the same.

165. Полинуклеотид по любому из воплощений 160-163, где саморасщепляющийся пептид или пептид, который вызывает проскок рибосомы, представляет собой T2A, P2A, E2A или F2A.165. The polynucleotide according to any one of embodiments 160-163, wherein the self-cleaving peptide or the peptide that causes ribosome slipping is T2A, P2A, E2A or F2A.

166. Вектор, включающий полинуклеотид по любому из воплощений 159-165.166. A vector comprising the polynucleotide of any one of embodiments 159-165.

167. Вектор по воплощению 166, где вектор представляет собой вирусный вектор.167. The vector of embodiment 166, wherein the vector is a viral vector.

168. Вектор по воплощению 167, где вирусный вектор представляет собой ретровирусный вектор или лентивирусный вектор.168. The vector of embodiment 167, wherein the viral vector is a retroviral vector or a lentiviral vector.

169. Сконструированная клетка, включающая полинуклеотид по любому из воплощений 159-165 или вектор по любому из воплощений 166-168.169. An engineered cell comprising a polynucleotide of any of embodiments 159-165 or a vector of any of embodiments 166-168.

170. Сконструированная клетка, включающая вариантный полипептид ICOSL по любому из воплощений 1-68, иммуномодулирующий белок по любому из воплощений 69-117 или гибридный белок по любому из воплощений 123-142.170. An engineered cell comprising a variant ICOSL polypeptide of any one of embodiments 1-68, an immunomodulatory protein of any of embodiments 69-117, or a fusion protein of any of embodiments 123-142.

171. Сконструированная клетка, включающая молекулу нуклеиновой кислоты по любому из воплощений 143-145 или вектор по любому из воплощений 146-148.171. An engineered cell comprising the nucleic acid molecule of any of embodiments 143-145 or the vector of any of embodiments 146-148.

172. Сконструированная клетка по любому из воплощений 169-171, где нуклеиновая кислота, кодирующая вариантный полипептид ICOSL, иммуномодулирующий белок или гибридный белок, кодирует сигнальный пептид.172. The engineered cell of any one of embodiments 169-171, wherein the nucleic acid encoding a variant ICOSL polypeptide, immunomodulatory protein, or fusion protein encodes a signal peptide.

173. Сконструированная клетка по любому из воплощений 169-172, где вариантный полипептид ICOSL, иммуномодулирующий белок или гибридный белок не содержит трансмембранного домена и/или не экспрессируется на поверхности клетки.173. The engineered cell of any one of embodiments 169-172, wherein the variant ICOSL polypeptide, immunomodulatory protein, or fusion protein does not contain a transmembrane domain and/or is not expressed on the surface of the cell.

174. Сконструированная клетка по любому из воплощений 169-173, где вариантный полипептид ICOSL, иммуномодулирующий белок или гибридный белок секретируется из сконструированной клетки.174. The engineered cell of any one of embodiments 169-173, wherein the variant ICOSL polypeptide, immunomodulatory protein, or fusion protein is secreted from the engineered cell.

175. Сконструированная клетка по любому из воплощений 169-171, где сконструированная клетка включает вариантный полипептид ICOSL, включающий трансмембранный домен любого из воплощений 64-68.175. The engineered cell of any one of embodiments 169-171, wherein the engineered cell comprises a variant ICOSL polypeptide comprising the transmembrane domain of any of embodiments 64-68.

176. Сконструированная клетка по любому из воплощений 169-171 и 175, где вариантный полипептид ICOSL экспрессируется на поверхности клетки.176. The engineered cell of any one of embodiments 169-171 and 175, wherein the variant ICOSL polypeptide is expressed on the surface of the cell.

177. Сконструированная клетка по любому из воплощений 169-176, где клетка представляет собой иммунную клетку.177. The engineered cell of any one of embodiments 169-176, wherein the cell is an immune cell.

178. Сконструированная клетка по воплощению 177, где иммунная клетка представляет собой антигенпрезентирующую клетку (APC) или лимфоцит.178. The engineered cell of embodiment 177, wherein the immune cell is an antigen presenting cell (APC) or a lymphocyte.

179. Сконструированная клетка по любому из воплощений 169-178, которая является первичной клеткой.179. The engineered cell of any one of embodiments 169-178, which is a primary cell.

180. Сконструированная клетка по любому из воплощений 169-179, где клетка представляет собой клетку млекопитающего.180. The engineered cell of any one of embodiments 169-179, wherein the cell is a mammalian cell.

181. Сконструированная клетка по любому из воплощений 169-180, где клетка представляет собой клетку человека.181. The engineered cell of any one of embodiments 169-180, wherein the cell is a human cell.

182. Сконструированная клетка по любому из воплощений 169-181, где лимфоцит представляет собой T-клетку.182. The engineered cell of any one of embodiments 169-181, wherein the lymphocyte is a T cell.

183. Сконструированная клетка по воплощению 178, где сконструированная клетка является APC и APC является искусственной APC.183. The engineered cell of embodiment 178, wherein the engineered cell is an APC and the APC is an artificial APC.

184. Сконструированная клетка по любому из воплощений 169-183, дополнительно включающая химерный антигенный рецептор (CAR) или сконструированный T-клеточный рецептор.184. The engineered cell of any one of embodiments 169-183, further comprising a chimeric antigen receptor (CAR) or an engineered T-cell receptor.

185. Фармацевтическая композиция, включающая вариантный полипептид ICOSL по любому из воплощений 1-68, иммуномодулирующий белок по любому из воплощений 69-117, конъюгат по любому из воплощений 118-142, сконструированная клетка по любому из воплощений 169-184 или инфекционный агент по любому из воплощений 216-227.185. A pharmaceutical composition comprising a variant ICOSL polypeptide according to any one of embodiments 1-68, an immunomodulatory protein according to any one of embodiments 69-117, a conjugate according to any one of embodiments 118-142, an engineered cell according to any one of embodiments 169-184, or an infectious agent according to any one from incarnations 216-227.

186. Фармацевтическая композиция по воплощению 185, содержащая фармацевтически приемлемый эксципиент.186. The pharmaceutical composition of embodiment 185, comprising a pharmaceutically acceptable excipient.

- 129 044346- 129 044346

187. Фармацевтическая композиция по воплощению 185 или 186, где фармацевтическая композиция является стерильной.187. The pharmaceutical composition of embodiment 185 or 186, wherein the pharmaceutical composition is sterile.

188. Изделие, содержащее фармацевтическую композицию по любому из воплощений 185-187 во флаконе.188. An article containing the pharmaceutical composition of any one of embodiments 185-187 in a vial.

189. Изделие по воплощению 188, где флакон герметизирован.189. The article of embodiment 188, wherein the bottle is sealed.

190. Набор, включающий фармацевтическую композицию по любому из воплощений 157-158 и 185-187 и инструкции для применения.190. A kit comprising a pharmaceutical composition according to any of embodiments 157-158 and 185-187 and instructions for use.

191. Набор, включающий изделие по воплощению 189 и 190, и инструкции по применению.191. A kit including the product of embodiments 189 and 190, and instructions for use.

192. Способ модуляции иммунного ответа у объекта, включающий введение объекту фармацевтической композиции по любому из воплощений 157-158 и 185-187.192. A method of modulating the immune response in a subject, comprising administering to the subject a pharmaceutical composition according to any of embodiments 157-158 and 185-187.

193. Способ модуляции иммунного ответа у объекта, включающий введение сконструированных клеток по любому из воплощений 169-184.193. A method of modulating an immune response in a subject, comprising administering engineered cells according to any one of embodiments 169-184.

194. Способ по воплощению 193, где сконструированные клетки являются аутологичными объекту.194. The method of embodiment 193, wherein the engineered cells are autologous to the subject.

195. Способ по воплощению 193, где сконструированные клетки являются аллогенными объекту.195. The method of embodiment 193, wherein the engineered cells are allogeneic to the subject.

196. Способ по любому из воплощений 193-195, где модуляция иммунного ответа лечит заболевание или состояние у объекта.196. The method of any one of embodiments 193-195, wherein modulating the immune response treats a disease or condition in the subject.

197. Способ по любому из воплощений 193-196, где иммунный ответ увеличивается.197. The method of any one of embodiments 193-196, wherein the immune response is increased.

198. Способ по любому из воплощений 192, 196 и 197, где объекту вводят иммуномодулирующий белок или конъюгат, содержащий вариантный полипептид ICOSL, связанный с опухоль-локализующим фрагментом.198. The method of any one of embodiments 192, 196, and 197, wherein the subject is administered an immunomodulatory protein or conjugate comprising a variant ICOSL polypeptide linked to a tumor-locating moiety.

199. Способ по воплощению 198, где опухоль-локализующий фрагмент представляет собой или включает связывающую молекулу, которая распознает опухолевой антиген.199. The method of embodiment 198, wherein the tumor-locating moiety is or includes a binding molecule that recognizes a tumor antigen.

200. Способ по воплощению 199, где связывающая молекула включает антитело или его антигенсвязывающий фрагмент или включает домен IgSF дикого типа или его вариант.200. The method of embodiment 199, wherein the binding molecule comprises an antibody or an antigen-binding fragment thereof, or comprises a wild-type IgSF domain or variant thereof.

201. Способ по любому из воплощений 192 и 196-200, где иммуномодулирующий белок по любому из воплощений 102-117 или конъюгат или гибридный белок по любому из воплощений 118-142 вводят объекту.201. The method of any one of embodiments 192 and 196-200, wherein the immunomodulatory protein of any of embodiments 102-117 or the conjugate or fusion protein of any of embodiments 118-142 is administered to the subject.

202. Способ по любому из воплощений 193-197, где вариантный полипептид ICOSL, который представляет собой трансмембранный иммуномодулирующий белок, вводят объекту.202. The method of any one of embodiments 193-197, wherein the variant ICOSL polypeptide, which is a transmembrane immunomodulatory protein, is administered to the subject.

203. Способ по любому из воплощений 193-197 и 202, где сконструированную клетку, содержащую вариантный полипептид ICOSL, который представляет собой трансмембранный иммуномодулирующий белок по любому из воплощений 64-68, вводят объекту.203. The method of any one of embodiments 193-197 and 202, wherein the engineered cell containing the variant ICOSL polypeptide, which is a transmembrane immunomodulatory protein of any of embodiments 64-68, is administered to the subject.

204. Способ по воплощению 192-203, где заболевание или состояние являются опухолью или раком.204. The method of embodiment 192-203, wherein the disease or condition is a tumor or cancer.

205. Способ по любому из воплощений 192-204, где заболевание или состояние выбраны из меланомы, рака легкого, рака мочевого пузыря, гематологического рака, рака печени, рака мозга, рака почки, рака молочной железы, рака поджелудочной железы, колоректального рака, рака селезенки, рака предстательной железы, рака яичка, рака яичника, рака матки, рака желудка, мышечно-скелетного рака, рака головы и шеи, рака желудочно-кишечного тракта, герминогенного рака или эндокринного и нейроэндокринного рака.205. The method of any one of embodiments 192-204, wherein the disease or condition is selected from melanoma, lung cancer, bladder cancer, hematologic cancer, liver cancer, brain cancer, kidney cancer, breast cancer, pancreatic cancer, colorectal cancer, cancer spleen, prostate cancer, testicular cancer, ovarian cancer, uterine cancer, stomach cancer, musculoskeletal cancer, head and neck cancer, gastrointestinal cancer, germ cell cancer or endocrine and neuroendocrine cancer.

206. Способ по любому из воплощений 192-196, где иммунный ответ уменьшается.206. The method of any one of embodiments 192-196, wherein the immune response is reduced.

207. Способ по любому из воплощений 192, 196 и 206, где объекту вводится вариантный полипептид ICOSL или иммуномодулирующий белок, который является растворимым.207. The method of any one of embodiments 192, 196 and 206, wherein the subject is administered a variant ICOSL polypeptide or immunomodulatory protein that is soluble.

208. Способ по воплощению 207, где растворимый полипептид или иммуномодулирующий белок представляет собой белок Fc-гибрида.208. The method of embodiment 207, wherein the soluble polypeptide or immunomodulatory protein is an Fc fusion protein.

209. Способ по любому из воплощений 192-196 и 206-208, где вводят вариантный полипептид ICOSL по любому из воплощений 1-63 и 68, иммуномодулирующий белок по любому из воплощений 70101 или гибридный белок по воплощениям 136 и 137 объекту.209. The method of any one of embodiments 192-196 and 206-208, wherein the ICOSL variant polypeptide of any of embodiments 1-63 and 68, the immunomodulatory protein of any of embodiments 70101, or the fusion protein of embodiments 136 and 137 is administered.

210. Способ по любому из воплощений 192-196 и 206-208, где сконструированную клетку, содержащую секретируемый полипептид ICOSL, вводят объекту.210. The method of any one of embodiments 192-196 and 206-208, wherein the engineered cell containing the secreted ICOSL polypeptide is administered to the subject.

211. Способ по любому из воплощений 192-196, 206-208 и 210, где сконструированную клетку по любому из воплощений 169-174 и 177-184 вводят объекту.211. The method of any one of embodiments 192-196, 206-208 and 210, wherein the engineered cell of any of embodiments 169-174 and 177-184 is administered to a subject.

212. Способ по любому из воплощений 192, 196 и 206-208 и 210, где инфекционный агент, кодирующий вариантный полипептид ICOSL, который является секретируемым иммуномодулирующим белком, вводят объекту, необязательно в условиях, при которых инфекционный агент инфицирует опухолевую клетку или иммунную клетку и секретируемый иммуномодулирующий белок секретируется из инфицированной клетки.212. The method of any one of embodiments 192, 196 and 206-208 and 210, wherein an infectious agent encoding a variant ICOSL polypeptide that is a secreted immunomodulatory protein is administered to a subject, optionally under conditions in which the infectious agent infects a tumor cell or immune cell and secreted immunomodulatory protein is secreted from the infected cell.

213. Способ по любому из воплощений 192-196 и 206-212, где заболевание или состояние являются воспалительным или аутоиммунным заболеванием или состоянием.213. The method of any one of embodiments 192-196 and 206-212, wherein the disease or condition is an inflammatory or autoimmune disease or condition.

214. Способ по любому из воплощений 192-196 и 206-213, где заболевание или состояние представляют собой васкулит, ассоциированный с антинейтрофильными цитоплазматическими антителами (ANCA), васкулит, аутоиммунное заболевание кожи, трансплантацию, ревматическую болезнь, воспалительное желудочно-кишечное заболевание, воспалительное заболевание глаз, воспалительное неврологиче-214. The method of any one of embodiments 192-196 and 206-213, wherein the disease or condition is antineutrophil cytoplasmic antibody (ANCA) associated vasculitis, vasculitis, autoimmune skin disease, transplantation, rheumatic disease, inflammatory gastrointestinal disease, inflammatory eye disease, inflammatory neurological

- 130 044346 ское заболевание, воспалительное заболевание легкого, воспалительное эндокринное заболевание или аутоиммунное гематологическое заболевание.- 130 044346 disease, inflammatory lung disease, inflammatory endocrine disease or autoimmune hematological disease.

215. Способ по воплощению 213 или воплощению 214, где заболевание или состояние выбрано из воспалительного заболевания кишечника, трансплантации, болезни Крона, язвенного колита, рассеянного склероза, астмы, ревматоидного артрита или псориаза.215. The method of embodiment 213 or embodiment 214, wherein the disease or condition is selected from inflammatory bowel disease, transplantation, Crohn's disease, ulcerative colitis, multiple sclerosis, asthma, rheumatoid arthritis, or psoriasis.

216. Инфекционный агент, содержащий молекулу нуклеиновой кислоты, кодирующую вариантный полипептид ICOSL по любому из воплощений 1-68, или иммуномодулирующий белок по любому из воплощений, иммуномодулирующий белок по любому из воплощений 69-117 или гибридный белок по любому из воплощений 123-142.216. An infectious agent comprising a nucleic acid molecule encoding a variant ICOSL polypeptide of any one of embodiments 1-68, or an immunomodulatory protein of any of embodiments, an immunomodulatory protein of any of embodiments 69-117, or a fusion protein of any of embodiments 123-142.

217. Инфекционный агент по воплощению 216, где кодированный вариантный полипептид ICOSL или иммуномодулирующий полипептид или гибридный белок не включает трансмембранный домен и/или не экспрессируется на поверхности клетки, в которой он экспрессируется.217. The infectious agent of embodiment 216, wherein the encoded variant ICOSL polypeptide or immunomodulatory polypeptide or fusion protein does not include a transmembrane domain and/or is not expressed on the surface of the cell in which it is expressed.

218. Инфекционный агент по воплощению 216 или воплощению 217, где кодируемый вариантный полипептид ICOSL или иммуномодулирующий полипептид или гибридный белок секретируется из клетки, в которой он экспрессируется.218. The infectious agent of embodiment 216 or embodiment 217, wherein the encoded variant ICOSL polypeptide or immunomodulatory polypeptide or fusion protein is secreted from a cell in which it is expressed.

219. Инфекционный агент по воплощению 218, где кодируемый вариантный полипептид ICOSL включает трансмембранный домен.219. The infectious agent of embodiment 218, wherein the encoded variant ICOSL polypeptide includes a transmembrane domain.

220. Инфекционный агент по воплощению 216, по воплощению 217 или воплощению 219, где кодируемый вариантный полипептид ICOSL экспрессируется на поверхности клетки, в которой он экспрессируется.220. The infectious agent of embodiment 216, embodiment 217, or embodiment 219, wherein the encoded variant ICOSL polypeptide is expressed on the surface of the cell in which it is expressed.

221. Инфекционный агент по любому из воплощений 216-220, где инфекционный агент представляет собой бактерию или вирус.221. The infectious agent according to any one of embodiments 216-220, wherein the infectious agent is a bacterium or a virus.

222. Инфекционный агент по воплощению 221, где вирус является онколитическим вирусом.222. The infectious agent of embodiment 221, wherein the virus is an oncolytic virus.

223. Инфекционный агент по воплощению 222, где онколитический вирус представляет собой аденовирусы, адено-ассоциированные вирусы, вирусы герпеса, вирус простого герпеса, вирус везикулярного стоматита, реовирус, вирус болезни Ньюкасла, парвовирус, вирус кори, вирус имплантированного стоматита (VSV), вирус Коксаки или вирус осповакцины.223. The infectious agent of embodiment 222, wherein the oncolytic virus is adenoviruses, adeno-associated viruses, herpes viruses, herpes simplex virus, vesicular stomatitis virus, reovirus, Newcastle disease virus, parvovirus, measles virus, implanted stomatitis virus (VSV), virus Coxsackie or vaccinia virus.

224. Инфекционный агент по воплощению 222, где вирус специфически нацелен на дендритные клетки (DC) и/или является тройным к дендритным клеткам.224. The infectious agent of embodiment 222, wherein the virus specifically targets dendritic cells (DC) and/or is triadic to dendritic cells.

225. Инфекционный агент по воплощению 224, где вирус представляет собой лентивирусный вектор, который псевдотипирован модифицированным продуктом оболочки вируса Синдбис.225. The infectious agent of embodiment 224, wherein the virus is a lentiviral vector that is pseudotyped with a modified Sindbis virus envelope product.

226. Инфекционный агент по любому из воплощений 216-225, дополнительно включающий нуклеотидную молекулу, кодирующую дополнительный генный продукт, который приводит к гибели клетки-мишени или которая может усиливать или стимулировать иммунный ответ.226. The infectious agent of any one of embodiments 216-225, further comprising a nucleotide molecule encoding an additional gene product that results in the death of a target cell or that can enhance or stimulate an immune response.

227. Инфекционный агент по воплощению 226, где дополнительный генный продукт выбирают из противоопухолевого агента, антиметастатического агента, антиангиогенного агента, иммуномодулирующей молекулы, ингибитора иммунного чекпоинта, антитела, цитокина, фактора роста, антигена, продукта цитотоксического гена, проапоптотического генного продукта, продукта антиапоптотического гена, гена деградации клеточной матрицы, генов регенерации тканей или перепрограммирования соматических клеток человека в плюрипотентные.227. The infectious agent of embodiment 226, wherein the additional gene product is selected from an antineoplastic agent, antimetastatic agent, an antiangiogenic agent, an immunomodulatory molecule, an immune checkpoint inhibitor, an antibody, a cytokine, a growth factor, an antigen, a cytotoxic gene product, a proapoptotic gene product, an antiapoptotic gene product , cell matrix degradation gene, tissue regeneration genes or reprogramming of human somatic cells into pluripotent ones.

X. ПримерыX. Examples

Следующие примеры включены только для иллюстративных целей и не предназначены для ограничения объема изобретения.The following examples are included for illustrative purposes only and are not intended to limit the scope of the invention.

Пример 1.Example 1.

Получение мутантных ДНК-конструкций доменов IgSF.Preparation of mutant DNA constructs of IgSF domains.

Пример 1 описывает получение мутантных ДНК-конструкций доменов ICOSL IgSF человека для трансляции и экспрессии на поверхности дрожжей в качестве библиотек дрожжевого дисплея.Example 1 describes the production of mutant DNA constructs of human ICOSL domains of IgSF for translation and expression on the surface of yeast as yeast display libraries.

A. Вырожденные библиотеки.A. Degenerate libraries.

Были получены мутантные ДНК-конструкции, кодирующие вариантный ECD-домен ICOSL. Конструкции были созданы на основе последовательности ICOSL человека дикого типа, представленной в SEQ ID NO: 32, содержащей домен ECD, представленный ниже:Mutant DNA constructs encoding the variant ECD domain of ICOSL were obtained. The constructs were generated based on the wild-type human ICOSL sequence shown in SEQ ID NO: 32, containing the ECD domain shown below:

DTQEKEVRAMVGSDVELSCACPEGSRFDLNDVYVYWQTSESKTVVTYHIPQNSSDTQEKEVRAMVGSDVELSCACPEGSRFDLNDVYVYWQTSESKTVVTYHIPQNSS

LENVDSRYRNRALMSPAGMLRGDFSLRLFNVTPQDEQKFHCLVLSQSLGFQEVLSVEVT LHVAANFSVPVVSAPHSPSQDELTFTCTSINGYPRPNVYWINKTDNSLLDQALQNDTVF LNMRGLYDVVSVLRIARTPSVNIGCCIENVLLQQNLTVGSQTGNDIGERDKITENPVSTG EKNAATLENVDSRYRNRALMSPAGMLRGDFSLRLFNVTPQDEQKFHCLVLSQSLGFQEVLSVEVT LHVAANFSVPVVSAPHSPSQDELTFTCTSINGYPRPNVYWINKTDNSLLDQALQNDTVF LNMRGLYDVVSVLRIARTPSVNIGCCIENVLLQQNLTVGSQTGNDIGERDKITENPVSTG EKNAAT

Для библиотек, которые нацелены на специфические остатки для полной или частичной рандомизации с помощью вырожденных кодонов, кодирующую ДНК из SEQ ID NO: 32 заказали в Integrated DNA Technologies (Коралвилл, Айова) в виде набора перекрывающихся олигонуклеотидов до 80 пар оснований (п.о.) в длину. Для получения библиотеки различных вариантов каждого ECD, олигонуклеотиды содержали искомые вырожденные кодоны, такие как в специфических наборах оснований для раз- 131 044346 личных аминокислотных замен, в искомых положениях аминокислот. Вырожденные кодоны были сгенерированы с использованием алгоритма по URL: rosettadesign.med.unc.edu/SwiftLib/.For libraries that target specific residues for complete or partial randomization by degenerate codons, the coding DNA from SEQ ID NO: 32 was ordered from Integrated DNA Technologies (Coralville, Iowa) as a set of overlapping oligonucleotides up to 80 base pairs (bp). ) in length. To obtain a library of different variants of each ECD, the oligonucleotides contained the desired degenerate codons, such as in specific sets of bases for various amino acid substitutions, at the desired amino acid positions. Degenerate codons were generated using the algorithm at URL: rosettadesign.med.unc.edu/SwiftLib/.

В целом, положения для мутации и вырождения кодонов были выбраны из моделей гомологии (ICOSL) представляющих интерес пар мишень-лиганд, для идентификации контактных остатков лиганда, таких как остатки целевых боковых цепей, которые взаимодействуют с лигандом, а также остатков, которые находятся на границе взаимодействия белка. Этот анализ был выполнен с использованием средства просмотра структуры, доступного по адресу URL: spdbv.vital-it.ch).In general, positions for mutation and codon degeneration were selected from homology models (ICOSL) of target-ligand pairs of interest, to identify ligand contact residues, such as target side chain residues that interact with the ligand, as well as residues that are at the interface protein interactions. This analysis was performed using the structure viewer available at URL: spdbv.vital-it.ch).

Следующим шагом при разработке библиотеки было выравнивание последовательностей ICOSL человека, мыши, крысы и обезьяны для идентификации консервативных остатков. Основываясь на этом анализе, консервативные целевые остатки мутировали с помощью вырожденных кодонов, которые только указывали на консервативные аминокислотные изменения плюс остаток дикого типа. Остатки, которые не были консервативны, мутировали более агрессивно, но также включали остатки дикого типа. Во избежание чрезмерного мутагенеза целевого белка были размещены вырожденные кодоны, которые также кодировали остаток дикого типа. По той же причине одновременно мутагенезу были подвержены только вплоть до 20 положений. Эти остатки представляют собой комбинацию контактных остатков и неконтактных остатков области взаимодействия.The next step in library development was to align the human, mouse, rat, and monkey ICOSL sequences to identify conserved residues. Based on this analysis, the conserved target residues were mutated by degenerate codons that only indicated the conserved amino acid changes plus the wild-type residue. Residues that were not conserved were mutated more aggressively but also included wild-type residues. To avoid excessive mutagenesis of the target protein, degenerate codons were placed that also encoded the wild-type residue. For the same reason, only up to 20 positions were subject to mutagenesis at a time. These residues are a combination of contact residues and non-contact residues of the interaction region.

Олигонуклеотиды растворяли в стерильной воде, смешивали в эквимолярных соотношениях, нагревали до 95°C в течение 5 мин и медленно охлаждали до комнатной температуры для отжига. ECDспецифические олигонуклеотидные праймеры, которые отжигали на начале и конце ECD, соответственно, затем использовали для получения продукта ПЦР. ECD-специфические олигонуклеотиды, которые перекрываются на 40-50 п.о. с модифицированной версией вектора клонирования pBYDS03 (Life Technologies США), за пределами и включая сайты клонирования BamH1 и Kpn1, затем использовали для амплификации 100 мкг продукта ПЦР с предыдущей стадии для получения в общей сложности 5 мкг ДНК. Обе ПЦР проводились с помощью полимеразной цепной реакции (ПЦР) с использованием мастермикса OneTaq 2x PCR (New England Biolabs, США). Второй продукт ПЦР очищали с использованием набора для очистки ПЦР (Qiagen, Германия) и ресуспендировали в стерильной деионизированной воде.Oligonucleotides were dissolved in sterile water, mixed in equimolar ratios, heated to 95°C for 5 min, and slowly cooled to room temperature for annealing. ECD-specific oligonucleotide primers that annealed to the start and end of the ECD, respectively, were then used to generate the PCR product. ECD-specific oligonucleotides that overlap by 40-50 bp. with a modified version of the cloning vector pBYDS03 (Life Technologies USA), beyond and including the BamH1 and Kpn1 cloning sites, was then used to amplify 100 μg of PCR product from the previous step to obtain a total of 5 μg of DNA. Both PCRs were performed by polymerase chain reaction (PCR) using OneTaq 2x PCR Mastermix (New England Biolabs, USA). The second PCR product was purified using a PCR purification kit (Qiagen, Germany) and resuspended in sterile deionized water.

Для приготовления вставок в библиотеку модифицированную версию вектора pBYDS03 дрожжевого дисплея расщепляли рестрикционными ферментами BamH1 и Kpn1 (New England Biolabs, США), очищали большой векторный фрагмент в геле и растворяли в стерильной деионизированной воде. Готовая к электропорации ДНК для следующей стадии была получена путем смешивания 12 мкг библиотеки ДНК с 4 мкг линеаризованного вектора в общем объеме 50 мкл деионизированной и стерильной воды. Альтернативным способом создания целевых библиотек было проведение сайт-направленного мутагенеза (Multisite kit, Agilent, США) целевых ECD с помощью олигонуклеотидов, содержащих вырожденные кодоны. Этот подход был использован для создания суббиблиотек, предназначенных только для мутагенеза конкретных участков целевого белка. В этих случаях суббиблиотеки были перемешаны перед переходом к стадиям отбора. В общем, размеры библиотеки находились в диапазоне от 10E7 до 10E8 клонов, причем суббиблиотеки находились только в диапазоне от 10E4 до 10E5. Для ICOSL были созданы большие библиотеки и суббиблиотеки.To prepare library inserts, a modified version of the yeast display vector pBYDS03 was digested with restriction enzymes BamH1 and Kpn1 (New England Biolabs, USA), the large vector fragment was gel purified, and dissolved in sterile deionized water. Electroporation-ready DNA for the next step was prepared by mixing 12 μg of library DNA with 4 μg of linearized vector in a total volume of 50 μl of deionized and sterile water. An alternative way to create target libraries was to perform site-directed mutagenesis (Multisite kit, Agilent, USA) of target ECDs using oligonucleotides containing degenerate codons. This approach has been used to create sublibraries designed only to mutagenesis specific regions of a target protein. In these cases, the sublibraries were mixed before proceeding to the selection stages. In general, library sizes ranged from 10E7 to 10E8 clones, with sublibraries only ranging from 10E4 to 10E5. Large libraries and sub-libraries have been created for ICOSL.

A. Случайные библиотеки.A. Random libraries.

Для идентификации вариантов ECD ICOSL, указанного в SEQ ID NO: 32, содержащей домен ECD, также были сконструированы случайные библиотеки, ДНК, кодирующую ECD дикого типа, клонировали между сайтами BamH1 и Kpn1 модифицированного вектора pBYDS03 для дрожжевого дисплея. Затем ДНК подвергали мутагенезу с помощью набора Genemorph II (Agilent, США) для того, чтобы получить в среднем три-пять аминокислотных изменений на один вариант библиотеки. Затем подвергнутую мутагенезу ДНК амплифицировали с помощью двухступенчатой ПЦР и далее обрабатывали, как описано выше, для целевых библиотек.To identify variants of the ECD ICOSL specified in SEQ ID NO: 32 containing the ECD domain, random libraries were also constructed, DNA encoding wild-type ECD was cloned between the BamH1 and Kpn1 sites of the modified yeast display vector pBYDS03. The DNA was then subjected to mutagenesis using the Genemorph II kit (Agilent, USA) to obtain an average of three to five amino acid changes per library variant. The mutagenized DNA was then amplified by two-step PCR and further processed as described above for target libraries.

Пример 2.Example 2.

Введение ДНК-библиотек в дрожжи.Introduction of DNA libraries into yeast.

Пример 2 описывает введение ДНК-библиотек ICOSL в дрожжи.Example 2 describes the introduction of ICOSL DNA libraries into yeast.

Чтобы ввести вырожденную и случайную библиотечную ДНК в дрожжи, подготавливали компетентные к электропорации клетки штамма дрожжей BJ5464 (ATCC.org, ATCC номер 208288) и подвергали электропорации на Gene Pulser II (Biorad, США) с помощью ДНК, готовой к электропорации, по существу со стадии выше, как описано (Colby, D.W. et al. 2004 Methods Enzymology 388, 348-358). Единственным исключением является то, что трансформированные клетки выращивали в неиндуцирующей минимальной селективной среде SCD-Leu для обеспечения селективного маркера LEU2, переносимого модифицированной плазмидой pBYDS03. Один литр среды SCD-Leu состоит из 14,7 г цитрата натрия, 4,29 грамма моногидрата лимонной кислоты, 20 г декстрозы, 6,7 г основы азотного агара для дрожжей Difco и 1,6 г дрожжевой синтетической исключающей средовой добавки без лейцина. Перед применением среду стерильно фильтровали с помощью 0,2 мкМ вакуумного фильтрующего устройства.To introduce degenerate and random library DNA into yeast, electroporation-competent cells of the yeast strain BJ5464 (ATCC.org, ATCC number 208288) were prepared and electroporated on a Gene Pulser II (Biorad, USA) with electroporation-ready DNA essentially with stages above as described (Colby, D.W. et al. 2004 Methods Enzymology 388, 348-358). The only exception is that transformed cells were grown in non-inducing minimal selection medium SCD-Leu to provide the selectable marker LEU2 carried by the modified plasmid pBYDS03. One liter of SCD-Leu medium consists of 14.7 g sodium citrate, 4.29 g citric acid monohydrate, 20 g dextrose, 6.7 g Difco Nitrogen Yeast Agar Base and 1.6 g Leucine-Free Yeast Synthetic Exclusion Supplement. Before use, the medium was sterile filtered using a 0.2 μM vacuum filter device.

Размер библиотеки определяли путем рассева разведений свежесобранных клеток на планшетах с агаром SCD-Leu, с последующей экстраполяцией размера библиотеки из числа одиночных колоний при рассевании, при котором образовывались, по меньшей мере, 50 колоний на планшет. Как правило, раз- 132 044346 меры библиотек варьировали от 10E8 до 10E9 трансформантов на основе этого анализа разбавления. Остальную часть электропорированной культуры выращивали до насыщения в SCD-Leu и клетки из этой культуры снова субкультивировали (например, 1/100) в свежей SCD-Leu, чтобы минимизировать фракцию ^трансформированных клеток. Для поддержания разнообразия библиотеки эта стадия субкультивирования проводилась с использованием инокулята, который содержал, по меньшей мере, 10x больше клеток, чем рассчитанный размер библиотеки. Клетки из второй насыщенной культуры ресуспендировали в свежей среде, содержащей 25% (масс/ об.) стерильного глицерина, до плотности 10Е10/мл и замораживали и хранили при -80°C (сток замороженной библиотеки).Library size was determined by plating dilutions of freshly collected cells onto SCD-Leu agar plates, then extrapolating the library size from the number of single colonies when plated to produce at least 50 colonies per plate. Typically, library sizes ranged from 10E8 to 10E9 transformants based on this dilution analysis. The remainder of the electroporated culture was grown to saturation in SCD-Leu, and cells from this culture were again subcultured (eg, 1/100) in fresh SCD-Leu to minimize the fraction of transformed cells. To maintain library diversity, this subculture step was performed using an inoculum that contained at least 10x more cells than the calculated library size. Cells from the second saturated culture were resuspended in fresh medium containing 25% (wt/vol) sterile glycerol to a density of 10E10/ml and frozen and stored at -80°C (frozen library stock).

Размер библиотеки определяли путем рассева разведений свежесобранных клеток на чашках агара SCD-Leu с последующей экстраполяции размера библиотеки из числа отдельных колоний при рассевании, при котором образуются, по меньшей мере, 50 колоний на чашку.Library size was determined by plating dilutions of freshly collected cells onto SCD-Leu agar plates and then extrapolating the library size from the number of individual colonies when plated to produce at least 50 colonies per plate.

Для отделения плазмиды от клеток, которые содержат два или более различных клонов библиотеки, количество клеток, соответствующее 10-кратному размеру библиотеки, отбирали из культуры SCD-Leu в течение ночи, субкультивировали 1/100 в свежей среде SCD-Leu и выращивали в течение ночи. Клетки из этой ночной культуры ресуспендировали в стерильном 25% (масс./об.) глицерине до плотности 10 Е10/мл и замораживали и хранили при -80°C (сток замороженной библиотеки).To separate the plasmid from cells that contain two or more different library clones, a number of cells corresponding to 10 times the size of the library were removed from the SCD-Leu culture overnight, subcultured 1/100 in fresh SCD-Leu medium, and grown overnight . Cells from this overnight culture were resuspended in sterile 25% (wt/vol) glycerol to a density of 10 E10/ml and frozen and stored at -80°C (frozen library stock).

Пример 3.Example 3.

Отбор дрожжей.Yeast selection.

Пример 3 описывает отбор дрожжей, экспрессирующих вариантные ICOSL с модифицированной аффинностью.Example 3 describes the selection of yeast expressing affinity modified ICOSL variants.

Количество клеток, по меньшей мере, в 10 раз превышающее размер библиотеки, оттаивали из отдельных библиотечных стоков, суспендировали до 0,1x10E6 клеток/мл в неиндуцирующей среде SCDLeu и выращивали в течение ночи. На следующий день количество клеток, в 10 раз превышающее размер библиотеки, центрифугировали при 2000 об/мин в течение 2 мин и ресуспендировали до 0,5x10E6 клеток/мл в индуцирующей среде SCDG-Leu. Один литр индуцирующей среды SCDG-Leu состоит из 5,4 г Na2HPO4, 8,56 г NaH2PO4 * H2O, 20 г галактозы, 2,0 г декстрозы, 6,7 г основы азотного агара для дрожжей Difco и 1,6 г дрожжевой синтетической исключающей средовой добавки без лейцина, растворенных в воде, и стерилизованных через 0,22 мкм мембранное фильтрующее устройство. Культуру выращивали в течение двух дней при 20°C, чтобы индуцировать экспрессию библиотечных белков на поверхности клеток дрожжей.A number of cells at least 10 times the library size were thawed from individual library stocks, suspended to 0.1x10E6 cells/ml in SCDLeu non-inducing medium, and grown overnight. The next day, a number of cells 10 times the library size were centrifuged at 2000 rpm for 2 min and resuspended to 0.5x10E6 cells/ml in SCDG-Leu induction medium. One liter of SCDG-Leu induction medium consists of 5.4 g Na 2 HPO 4 , 8.56 g NaH 2 PO 4 * H 2 O, 20 g galactose, 2.0 g dextrose, 6.7 g nitrogen yeast agar base Difco and 1.6 g of yeast synthetic exclusion medium without leucine, dissolved in water, and sterilized through a 0.22 micron membrane filter device. The culture was grown for two days at 20°C to induce expression of library proteins on the surface of yeast cells.

Клетки процессировали с помощью магнитных гранул, чтобы уменьшить количество несвязывающих молекул и обогатить все вариантные ICOSL, которые обладают способностью связывать их экзогенные рекомбинантные контрструктурные белки. Затем следовало от двух до трех циклов сортировки проточной цитометрией с использованием окрашивания экзогенными контрструктурными белками для обогащения фракции дрожжевых клеток, презентирующих улучшенные связывающие молекулы. Обогащение с помощью магнитных гранул и отбор с помощью проточной цитометрии в основном описаны в Miller, K.D. Current Protocols in Cytometry 4.7.1-4.7.30, July 2008.Cells were processed using magnetic beads to reduce the number of non-binding molecules and enrich for all variant ICOSLs that have the ability to bind their exogenous recombinant counterstructural proteins. This was followed by two to three rounds of flow cytometric sorting using exogenous counterstructure protein staining to enrich for the fraction of yeast cells presenting improved binding molecules. Magnetic bead enrichment and flow cytometry selection are primarily described in Miller, K.D. Current Protocols in Cytometry 4.7.1-4.7.30, July 2008.

С помощью библиотеки ICOSL, получали следующие целевые лигандные белки у R & D Systems (США): rCD28.Fc человека (т.е. рекомбинантный гибридный белок CD28-Fc), rCTLA4.Fc и rICOS.Fc. Магнитные гранулы со стрептавидином получали у New England Biolabs, США. Для биотинилирования контрструктурного белка использовали биотинилирующий набор № 21955, Life Technologies, США. Для двухцветной, проточной цитометрической сортировки использовали сортировщик Becton Dickinson FACS Aria II. Уровни презентации ICOSL контролировали антителом против гемагглютинина, помеченным Alexafluor 488 (Life Technologies, США). Лиганд-связывающие Fc-гибридные белки rCD28.Fc, rCTLA4.Fc, или rCD112R.Fc, детектировали с помощью PE-конъюгированных козьих Fab, специфичных к человеческому Ig (Jackson ImmunoResearch, США). Двойные дрожжи были отобраны выше порогового значения с использованием параметров прямого рассеяния (FSC)/бокового рассеяния (SSC), а сортировочные ворота были основаны на более высоком лигандном связывании, обнаруженном в FL4, который обладал более ограниченным связыванием экспрессии метки в FL1.Using the ICOSL library, the following target ligand proteins were obtained from R&D Systems (USA): human rCD28.Fc (i.e. recombinant CD28-Fc fusion protein), rCTLA4.Fc and rICOS.Fc. Streptavidin magnetic beads were obtained from New England Biolabs, USA. For biotinylation of the counterstructural protein, biotinylation kit No. 21955, Life Technologies, USA, was used. A Becton Dickinson FACS Aria II sorter was used for two-color, flow cytometric sorting. ICOSL presentation levels were monitored with an anti-hemagglutinin antibody labeled Alexafluor 488 (Life Technologies, USA). Ligand-binding Fc fusion proteins rCD28.Fc, rCTLA4.Fc, or rCD112R.Fc were detected using PE-conjugated goat Fabs specific for human Ig (Jackson ImmunoResearch, USA). Double yeasts were selected above the threshold using forward scatter (FSC)/side scatter (SSC) parameters, and the sorting gate was based on the higher ligand binding found in FL4, which had more limited tag expression binding in FL1.

Дрожжи, полученные в результате проточной цитометрической сортировки анализировали на предмет более высокой удельной аффинности связывания. Полученные в результате отсортированные дрожжи размножали и повторно индуцировали для того, чтобы экспрессировать специфические варианты доменов IgSF с модифицированной аффинностью, которые они кодируют. Затем эту популяцию можно было сравнить с родительским штаммом дрожжей дикого типа или с любыми другими дрожжами, такими как популяция дрожжей, отобранных на гранулах, с помощью проточной цитометрии.Yeast obtained from flow cytometric sorting was analyzed for higher specific binding affinity. The resulting sorted yeasts were propagated and re-induced to express specific affinity-modified variants of the IgSF domains that they encode. This population could then be compared to the parental wild-type yeast strain or to any other yeast, such as a bead-selected yeast population, using flow cytometry.

Для ICOSL результаты второй сортировки (F2) сравнивались с родительскими дрожжами ICOSL для связывания каждого из числа rICOS.Fc, rCD28.Fc и rCTLA4.Fc путем двойного окрашивания каждой популяции с помощью экспрессии анти-HA (гемагглютинин) метки вторичного антитела против Fc человека для детекции связывания лиганда.For ICOSL, the results of the second sort (F2) were compared with the ICOSL yeast parent for binding each of the number of rICOS.Fc, rCD28.Fc and rCTLA4.Fc by double staining each population with an anti-HA (hemagglutinin) expression tag of a secondary anti-human Fc antibody for detection of ligand binding.

В случае вариантных ICOSL в дрожжах, отобранных по связыванию с ICOS, результаты сортировки F2 дали значения средней интенсивности флуоресценции (MFI) 997 при окрашивании с помощью 5,6 нМFor variant ICOSLs in yeast selected for ICOS binding, F2 sort results yielded a mean fluorescence intensity (MFI) of 997 when stained with 5.6 nM

- 133 044346 rICOS.Fc, тогда как MFI родительского штамма ICOSL равно 397 при окрашивании в той же самой концентрации rICOS.Fc. Это представляет собой приблизительно трехкратное улучшение среднего связывания в этом выбранном пуле клонов F2, и прогнозируется, что отдельные клоны из этого пула будут иметь значительно улучшенное MFI/аффинности при индивидуальном тестировании.- 133 044346 rICOS.Fc, while the MFI of the parent strain ICOSL is 397 when stained with the same concentration of rICOS.Fc. This represents an approximately threefold improvement in average binding in this selected pool of F2 clones, and individual clones from this pool are predicted to have significantly improved MFI/affinities when tested individually.

В случае вариантных ICOSL в дрожжах, выбранных для связывания с CD28, результаты сортировки F2 дали значения MFI 640 при окрашивании 100 нМ rCD28.Fc, тогда как MFI родительского штамма ICOSL было равно 29 при окрашивании с той же концентрацией rCD28.Fc (улучшение в 22 раза). В случае вариантов дрожжей ICOSL, выбранных для связывания с CTLA4, результаты сортировки F2 дали значения MFI 949 при окрашивании 100 нМ rCTLA4.Fc, тогда как MFI родительского штамма ICOSL измеряли при 29 при окраске с той же концентрацией rCTLA4.Fc (32-кратное улучшение).For variant ICOSLs in yeast selected for binding to CD28, F2 sort results yielded MFI values of 640 when stained with 100 nM rCD28.Fc, whereas the MFI of the parent strain ICOSL was 29 when stained with the same concentration of rCD28.Fc (an improvement of 22 times). For the ICOSL yeast variants selected for binding to CTLA4, the F2 sort results yielded MFI values of 949 when stained with 100 nM rCTLA4.Fc, whereas the MFI of the parent strain ICOSL was measured at 29 when stained with the same concentration of rCTLA4.Fc (32-fold improvement ).

Важно отметить, что значения MFI всех результатов F2, описанных выше, при измерении антителом против HA-метки на FL1, не увеличивались и иногда уменьшались по сравнению с штаммами дикого типа, что указывает на то, что увеличенное связывание было не функцией повышенной экспрессии выбранных вариантов на поверхность дрожжей, а валидированной стратегией отбора выше порогового значения только для отбора средних и низких экспрессоров с высоким связыванием лиганда.It is important to note that the MFI values of all F2 results described above, when measured with an antibody against the HA tag on FL1, were not increased and were sometimes decreased compared to wild-type strains, indicating that increased binding was not a function of increased expression of selected variants to the surface of yeast, and a validated selection strategy above a threshold only selects for medium and low expressors with high ligand binding.

Отобранные вариантные ICOSL ECD домены были дополнительно отформатированы в виде гибридных белков и испытаны на связывание и функциональную активность, как описано ниже.Selected variant ICOSL ECD domains were further formatted as fusion proteins and tested for binding and functional activity as described below.

Пример 4.Example 4.

Переформатирование результатов отбора в виде Fc-гибридов и в различных типах иммуномодулирующих белков.Reformatting of selection results in the form of Fc hybrids and in various types of immunomodulatory proteins.

В примере 4 описывается переформатирование результатов отбора идентифицированного в примере 3 в качестве иммуномодулирующих белков, содержащих модифицированный (вариантный) внеклеточный домен (ECD) ICOSL, слитый с молекулой Fc (вариантные гибридные молекулы ECD-Fc).Example 4 describes the reformatting of the selection results identified in example 3 as immunomodulatory proteins containing a modified (variant) extracellular domain (ECD) of ICOSL fused to an Fc molecule (variant hybrid ECD-Fc molecules).

Клетки, полученные на выходе конечной проточной цитометрической сортировки ICOSL, выращивали до предельной плотности в среде SCD-Leu. Плазмидную ДНК в случае каждого результата выделяли с использованием набора для выделения дрожжевой плазмидной ДНК (Zymo Research, США). Для Fcгибридов ПЦР-праймеры с добавленными сайтами рестрикции, подходящими для клонирования в выбранный Fc-гибридный вектор, использовали для периодической амплификации из препаратов плазмидной ДНК, кодирующей ДНК мутантных целевых ECD. После рестрикционного гидролиза продукты ПЦР лигировали в соответствующий Fc-вектор с последующей химической трансформацией в штамм XL1 Blue E.Coli (Agilent, США) или NEB5alpha (New England Biolabs), как указано поставщиком. Примером Fc-гибридного вектора является pFUSE-hIgG1-Fc2 (Invivogen, США)Cells obtained from the final flow cytometric sorting ICOSL were grown to maximum density in SCD-Leu medium. Plasmid DNA for each result was isolated using a yeast plasmid DNA isolation kit (Zymo Research, USA). For Fc hybrids, PCR primers with added restriction sites suitable for cloning into the selected Fc hybrid vector were used for batch amplification from preparations of plasmid DNA encoding the DNA of mutant ECD targets. After restriction digestion, the PCR products were ligated into the appropriate Fc vector, followed by chemical transformation into E. Coli strain XL1 Blue (Agilent, USA) or NEB5alpha (New England Biolabs), as specified by the supplier. An example of an Fc-hybrid vector is pFUSE-hIgG1-Fc2 (Invivogen, USA)

Разбавления реакций трансформации высевали на LB-агар, содержащий 100 мкг/мл карбенициллина (Teknova, США) для получения отдельных колоний. До 96 колоний из каждой трансформации затем выращивали в 96-луночных планшетах до насыщения в течение ночи при 37°C в LB-бульоне (Teknova cat # L8112) и небольшую аликвоту из каждой лунки представляли для секвенирования ДНК ECDвставки для того, чтобы идентифицировать мутацию(и) во всех клонах. Подготовка образца для секвенирования ДНК проводилась с использованием протоколов, предлагаемых поставщиком услуг (Genewiz, Cayc Плейнфилд, Нью-Джерси). После удаления образца для секвенирования ДНК к оставшимся культурам добавляли глицерин для получения конечного содержания глицерина 25% и планшеты хранили при 20°C для будущего применения в качестве мастер-планшетов (см. ниже). В ином случае, образцы для секвенирования ДНК были получены путем пересева репликацией из растущих жидких культур на планшетах с твердым агаром с использованием одноразового 96-луночного репликатора (VWR, США). Эти планшеты инкубировали в течение ночи для получения ростовых патчей, при этом планшеты были предлагаются Genewiz с их указаниями. В некоторых случаях для проверки мутаций выполняли повторное ресеквенирование.Dilutions of transformation reactions were plated on LB agar containing 100 μg/ml carbenicillin (Teknova, USA) to obtain individual colonies. Up to 96 colonies from each transformation were then grown in 96-well plates to saturation overnight at 37°C in LB broth (Teknova cat #L8112) and a small aliquot from each well was submitted for DNA sequencing of the ECD insert in order to identify the mutation ( i) in all clones. Sample preparation for DNA sequencing was performed using protocols offered by the service provider (Genewiz, Cayc Plainfield, NJ). After removing the DNA sequencing sample, glycerol was added to the remaining cultures to obtain a final glycerol content of 25% and the plates were stored at 20°C for future use as master plates (see below). Otherwise, samples for DNA sequencing were obtained by replication subculture from growing liquid cultures on solid agar plates using a disposable 96-well replicator (VWR, USA). These plates were incubated overnight to obtain growth patches and the plates were provided by Genewiz with their directions. In some cases, resequencing was performed to check for mutations.

После анализа представляющих интерес клонов из результатов анализа данных секвенирования ДНК, полученных от Genewiz, клоны, представляющие интерес, извлекали из мастер-планшетов и индивидуально выращивали до насыщения в 5 мл жидкого LB-бульона, содержащего 100 мкг/мл карбенициллина (Teknova, США) и 2 мл каждой культуры затем использовали для приготовления около 10 мкг минипрепаративной плазмидной ДНК каждого клона с использованием стандартного набора, такого как набор Pureyield (Promega, США). Идентификация клонов, представляющих интерес, обычно включает следующие стадии. Сначала файлы данных последовательности ДНК загружались с веб-сайта Genewiz. Затем все последовательности обрабатывали вручную, так чтобы они начинались с начала кодирующей области ECD. Проверенные последовательности затем пакетно транслировали с использованием подходящей программы, доступной по URL: www.ebi.ac.uk/Tools/st/emboss_transeq/. Затем транслированные последовательности выравнивали с использованием подходящей программы, доступной по URL: multalin.toulouse.inra.fr/multalin/multalin.html. Кроме того, последовательности Genewiz были обработаны для создания выравниваний с использованием программного обеспечения Ugene (http://ugene.net).After analysis of clones of interest from DNA sequencing data obtained from Genewiz, clones of interest were removed from master plates and individually grown to saturation in 5 ml liquid LB broth containing 100 μg/ml carbenicillin (Teknova, USA) and 2 ml of each culture was then used to prepare about 10 μg of miniprep plasmid DNA of each clone using a standard kit such as the Pureyield kit (Promega, USA). Identification of clones of interest typically involves the following steps. First, DNA sequence data files were downloaded from the Genewiz website. All sequences were then manually processed to start at the beginning of the ECD coding region. Validated sequences were then batch translated using a suitable program available at URL: www.ebi.ac.uk/Tools/st/emboss_transeq/. The translated sequences were then aligned using a suitable program available at URL: multalin.toulouse.inra.fr/multalin/multalin.html. In addition, Genewiz sequences were processed to generate alignments using Ugene software ( http://ugene.net ).

Клоны, представляющие интерес, затем идентифицировали с использованием следующих критериев: 1.) идентичный клон встречается, по меньшей мере, два раза при выравнивании и 2.) мутация происходит, по меньшей мере, два раза в выравнивании и предпочтительно в отдельных клонах. Клоны, кото- 134 044346 рые удовлетворяют хотя бы одному из этих критериев, были клонами, которые были обогащены нашим процессом сортировки из-за улучшения связывания.Clones of interest were then identified using the following criteria: 1.) an identical clone occurs at least twice in the alignment and 2.) a mutation occurs at least twice in the alignment and preferably in separate clones. Clones that met at least one of these criteria were clones that were enriched by our sorting process due to improved binding.

Для получения иммуномодулирующих белков, которые являются Fc-гибридными белками, содержащими ECD из ICOSL, по меньшей мере, с одним доменом с модифицированной аффинностью (например, вариантный ICOSL ECD-Fc), кодирующую нуклеотидную молекулу получали для кодирования белка, спроектированного следующим образом: сигнальный пептид за которым следует вариантный (мутантный) ECD, за которым следует линкер из трех аланинов (AAA), за которым следует человеческий IgG1 Fc, содержащий мутацию N82G, относительно референсного Fc IgG1 человека или Fc IgG1 человека дикого типа, представленного в SEQ ID NO: 226 (что соответствует N297G по нумерации EU). Этот примерный Fc также содержал стабилизирующие цистеиновые мутации R77C и V87C и замену остатка цистеина на остаток серина в положении 220 (C220S), по нумерации EU (соответствующему положению 5 (C5S) относительно референсного Fc IgG1 человека или Fc IgG1 человека дикого типа, представленного в SEQ ID NO: 226 (соответствует R292C, V302C и C220S, соответственно, по нумерации EU). В некоторых случаях сайт клонирования NotI, который вносит вклад в линкерную последовательность AAA, был удален для создания прямого слияния ICOSL ECD и начала Fc. Поскольку конструкции не включают никаких легких цепей антител, которые могут образовывать ковалентную связь с цистеином, человеческий IgG1 Fc также содержал замену остатков цистеина на остаток серина в положении 5 (C5S) по сравнению с диким или немодифицированным Fc, представленным в SEQ ID NO: 226.To produce immunomodulatory proteins that are Fc fusion proteins containing the ECD from ICOSL with at least one affinity modified domain (eg, variant ICOSL ECD-Fc), an encoding nucleotide molecule was prepared to encode a protein designed as follows: signal a peptide followed by a variant (mutant) ECD, followed by a three-alanine (AAA) linker, followed by a human IgG1 Fc containing the N82G mutation, relative to the reference human IgG1 Fc or wild-type human IgG1 Fc represented in SEQ ID NO: 226 (corresponding to N297G according to EU numbering). This exemplary Fc also contained stabilizing cysteine mutations R77C and V87C and a replacement of a cysteine residue with a serine residue at position 220 (C220S), at EU numbering (corresponding to position 5 (C5S) relative to the reference human IgG1 Fc or wild-type human IgG1 Fc presented in SEQ ID NO: 226 (corresponding to R292C, V302C and C220S, respectively, by EU numbering) In some cases, the NotI cloning site that contributes to the AAA linker sequence was removed to create a direct fusion of the ICOSL ECD and the start of the Fc. Since the constructs do not include no antibody light chains that can form a covalent bond with cysteine, the human IgG1 Fc also contained a substitution of cysteine residues for a serine residue at position 5 (C5S) compared to the wild-type or unmodified Fc presented in SEQ ID NO: 226.

Пример 5.Example 5.

Экспрессия и очистка Fc-гибридов.Expression and purification of Fc hybrids.

Пример 5 описывает крупномасштабную экспрессию и очистку Fc-гибридных белков, содержащих вариантный ECD ICOSL, как описано в примерах выше.Example 5 describes the large-scale expression and purification of Fc-fusion proteins containing the ICOSL variant ECD as described in the examples above.

Рекомбинантные вариантные Fc-гибриды были получены из адаптированных к суспензии клеток эмбриональной почки человека (HEK) 293 с помощью экспрессирующей системы Expi293 (Invitrogen, США). 4 мкг каждой плазмидной ДНК с предыдущей стадии добавляли к 200 мкл Opti-MEM (Invitrogen, США) с одновременным отдельным добавлением 10,8 мкл ExpiFectamine к другим 200 мкл Opti-MEM. Через 5 мин 200 мкл плазмидной ДНК смешивали с 200 мкл ExpiFectamine и дополнительно инкубировали в течение дополнительных 20 мин перед добавлением этой смеси к клеткам. Десять миллионов клеток Expi293 распределяли в отдельные стерильные 10 мл лунки 24-луночного глубокого планшета с коническим дном (Thomson Instrument Company, США) в объеме 3,4 мл среды Expi293 (Invitrogen, США). Планшеты встряхивали в течение 5 дней при 120 об./ мин. в инкубаторе для клеточных культур млекопитающих при 95% влажности и 8% CO2. После 5-дневной инкубации клетки осаждали и удаляли культуральные надосадочные жидкости.Recombinant variant Fc hybrids were obtained from suspension-adapted human embryonic kidney (HEK) 293 cells using the Expi293 expression system (Invitrogen, USA). 4 μg of each plasmid DNA from the previous step was added to 200 μl of Opti-MEM (Invitrogen, USA) while separately adding 10.8 μl of ExpiFectamine to another 200 μl of Opti-MEM. After 5 min, 200 μl of plasmid DNA was mixed with 200 μl of ExpiFectamine and further incubated for an additional 20 min before adding the mixture to the cells. Ten million Expi293 cells were dispensed into individual sterile 10 ml wells of a 24-well conical bottom deep plate (Thomson Instrument Company, USA) in a volume of 3.4 ml Expi293 medium (Invitrogen, USA). The plates were shaken for 5 days at 120 rpm. in a mammalian cell culture incubator at 95% humidity and 8% CO 2 . After 5 days of incubation, cells were pelleted and culture supernatants were removed.

Белок очищали из надосадочных жидкостей с помощью высокопроизводительного набора для очистки с протеином Ав 96 луночном формате согласно протоколу производителя (каталожный номер 45202, Life Technologies, США). В полученных элюированных фракциях заменяли буфер на PBS с использованием спин-обессоливающего планшета Zeba 96 (каталожный номер 89807, Life Technologies, США) в соответствии с протоколом изготовителя. Очищенный белок определяли количественно при оптической плотности 280 нм, измеренной прибором Nanodrop (Thermo Fisher Scientific, США), и степень чистоты белка оценивали путем загрузки 5 мкг белка на готовые полиакриламидные гели NUPAGE (Life Technologies, США) в условиях денатурации и восстановления и последующего гель-электрофореза. Белки визуализировали в геле с использованием стандартного окрашивания Кумасси.Protein was purified from the supernatants using a High Throughput Protein Purification Kit in 96 well format according to the manufacturer's protocol (cat. no. 45202, Life Technologies, USA). The resulting eluted fractions were buffer exchanged to PBS using a Zeba 96 spin desalting plate (cat. no. 89807, Life Technologies, USA) according to the manufacturer's protocol. Purified protein was quantified at an optical density of 280 nm measured by a Nanodrop instrument (Thermo Fisher Scientific, USA), and protein purity was assessed by loading 5 μg of protein onto NUPAGE precast polyacrylamide gels (Life Technologies, USA) under denaturation and reduction conditions and then gelling. -electrophoresis. Proteins were visualized in the gel using standard Coomassie staining.

Пример 6.Example 6.

Оценка связывания и активности молекул, содержащих домен IgSF со зрелой аффинностью.Assessment of binding and activity of molecules containing an affinity mature IgSF domain.

A. Связывание с контрструктурами, экспрессируемыми клетками.A. Binding to counterstructures expressed by cells.

В этом примере описаны исследования связывания Fc-гибридов для того, чтобы оценить специфичность и аффинность вариантных иммуномодулирующих белков с доменом ICOSL к когнатным партнерам связывания.This example describes Fc fusion binding studies to evaluate the specificity and affinity of variant ICOSL domain immunomodulatory proteins for cognate binding partners.

Для получения клеток, экспрессирующих когнатные партнеры связывания, конструкции на основе полноразмерных последовательностей млекопитающих для поверхностной экспрессии для каждого из CD28 и ICOS человека были спроектированы в экспрессирующем векоре pcDNA3.1 (Life Technologies) и получены с помощью GenScript, США. Исследования связывания проводились на трансфицированных клетках HEK293, полученных для экспрессии полноразмерных поверхностных лигандов млекопитающих с использованием системы транзиторной трансфекции (Life Technologies, США), описанной выше. В качестве контроля также оценивали связывание с ложными (нетрансфицированными) клетками. Определяли количество клеток, необходимых для эксперимента, и выполняли в соответствующем 30 мл масштабе с использованием рекомендованного изготовителем протокола. Для каждой 30 мл трансфекции CD28, ICOS или отрицательного контроля 75 миллионов клеток Expi293F инкубировали с 30 мкг ДНК экспрессирующей конструкции и 1,5 мл разбавленного реактива ExpiFectamine 293 в течение 48 ч, после чего клетки собирали для окрашивания.To obtain cells expressing cognate binding partners, constructs based on full-length mammalian surface expression sequences for each of human CD28 and ICOS were designed in the pcDNA3.1 expression vector (Life Technologies) and generated using GenScript, USA. Binding studies were performed on transfected HEK293 cells prepared to express full-length mammalian surface ligands using the transient transfection system (Life Technologies, USA) described above. As a control, binding to mock (untransfected) cells was also assessed. The number of cells required for the experiment was determined and performed at the appropriate 30 ml scale using the manufacturer's recommended protocol. For each 30-ml CD28, ICOS, or negative control transfection, 75 million Expi293F cells were incubated with 30 μg of expression construct DNA and 1.5 ml of diluted ExpiFectamine 293 reagent for 48 h, after which the cells were collected for staining.

Для окрашивания с помощью проточной цитометрии 200 000 клеток соответствующей транзиторной трансфекции или отрицательного контроля (ложных клеток) высевали в 96-луночные круглодонныеFor flow cytometry staining, 200,000 cells from the corresponding transient transfection or negative control (mock cells) were seeded in 96-well round-bottomed

- 135 044346 планшеты. Клетки центрифугировали и ресуспендировали в буфере для окрашивания (PBS (фосфатносолевой буферный раствор), 1% BSA (бычий сывороточный альбумин) и 0,1% азида натрия) в течение 20 мин для блокирования неспецифического связывания. Затем клетки снова центрифугировали и ресуспендировали в 50 мкл буфера для окрашивания, содержащем 100 нМ-1 нМ вариантного иммуномодулирующего белка, в зависимости от эксперимента с каждым из кандидатных вариантного CD80 Fc, вариантного ICOSL Fc или стекового вариантного IgSF Fc-гибридного белка. Первичное окрашивание проводили на льду в течение 45 мин, перед двухкратной промывкой клеток в буфере для окрашивания. РЕконъюгированные антитела против Fc человека (Jackson ImmunoResearch, США) разбавляли 1: 150 в 50 мкл окрашивающего буфера и добавляли к клеткам и инкубировали еще 30 мин на льду. Вторичное антитело дважды вымывали, клетки фиксировали в 4% формальдегиде/PBS и образцы анализировали на проточном цитометре FACScan (Becton Dickinson, США) или проточном цитометре Hypercyt (Intellicyte, США).- 135 044346 tablets. Cells were centrifuged and resuspended in staining buffer (PBS, 1% BSA, and 0.1% sodium azide) for 20 min to block nonspecific binding. The cells were then centrifuged again and resuspended in 50 μl of staining buffer containing 100 nM-1 nM variant immunomodulatory protein, depending on the experiment with each of the candidate variant CD80 Fc, variant ICOSL Fc, or stacked variant IgSF Fc fusion protein. Primary staining was performed on ice for 45 min before washing the cells twice in staining buffer. Reconjugated antibodies against human Fc (Jackson ImmunoResearch, USA) were diluted 1:150 in 50 μl of staining buffer and added to the cells and incubated for another 30 min on ice. The secondary antibody was washed twice, the cells were fixed in 4% formaldehyde/PBS, and the samples were analyzed on a FACScan flow cytometer (Becton Dickinson, USA) or a Hypercyt flow cytometer (Intellicyte, USA).

Среднюю интенсивность флуоресценции (MFI) рассчитывали для каждого трансфектанта и родительской линии отрицательного контроля с помощью программного обеспечения Cell Quest Pro (Becton Dickinson, США), или проточного цитометра Hypercyt (Intellicyte, США).Mean fluorescence intensity (MFI) was calculated for each transfectant and negative control parental line using Cell Quest Pro software (Becton Dickinson, USA) or a Hypercyt flow cytometer (Intellicyte, USA).

B. Характеристика биоактивности.B. Characteristics of bioactivity.

В этом примере далее описывается характеристика биоактивности вариантного белка Fc-гибрида в in vitro анализах первичных T-клеток человека.This example further describes the characterization of the bioactivity of a variant Fc fusion protein in in vitro assays of primary human T cells.

1. Реакция смешанных лимфоцитов (MLR).1. Mixed lymphocyte reaction (MLR).

Биоактивность растворимого rICOSL.Fc тестировали в реакции смешанных лимфоцитов (MLR) человека. Первичные дендритные клетки человека (DC) получали путем культивирования моноцитов, выделенных из PBMC (BenTech Bio, США) in vitro в течение 7 дней с 500 Ед./мл rIL-4 (R & D Systems, США) и 250 Ед./мл rGM-CSF (R & D Systems, США) в среде Ex-Vivo 15 (Lonza, Швейцария). 10000 зрелых DC и 100000 очищенных аллогенных CD4+ T-клеток (BenTech Bio, США) совместно культивировали с гибридным белком ICOSL, гибридным белком CF80 Fc или контролем в 96-луночных круглодонных планшетах в 200 мкл конечного объема среды Ex-Vivo 15. На 5-й день анализировали секрецию IFNгамма в культуральных надосадочных жидкостях с помощью набора ELISA для человеческого IFNгамма Duoset (R & D Systems, США). Оптическую плотность измеряли с помощью микропланшетного ридера VMax ELISA (Molecular Devices, США) и определяли по титрованному стандарту rIFN-гамма, включенному в набор набора для IFN-гамма Duo (R & D Systems, США). Второй протокол MLR состоял из человеческих первичных дендритных клеток (DC), полученных при культивировании моноцитов, выделенных из PBMC (BenTech Bio, США) in vitro в течение 7 дней с 50 нг/мл rIL-4 (R & D Systems, США) и 80 нг/мл rGM -CSF (R & D Systems, США) в среде Ex-Vivo 15 (Lonza, Швейцария). В дни 3 и 5 половину среды удаляли и заменяли свежей средой, содержащей 50 нг/мл rIL-4 и 80 нг/мл rGM-CSF. Чтобы полностью индуцировать созревание DC, на 6 день добавляли липополисахарид (LPS) (InvivoGen Corp., США) при 100 нг/мл в культурах DC и клетки инкубировали в течение дополнительных 24 ч. Около 10000 зрелых DC и 100000 очищенных аллогенных CD3 + T-клеток (BenTech Bio, США) совместно культивировали с гибридными белками IFOSL Fc и контролем в 96-луночных круглодонных планшетах в 200 мкл конечного объема среды Ex-Vivo 15. На 5-й день секрецию IFN-гамма в культуральных надосадочных жидкостях анализировали с использованием набора ELISA для человеческого IFN-гамма Duoset (R & D Systems, США). Оптическую плотность измеряли на мультирежимного ридере для микропланшетов BioTek Cytation (BioTek Corp., США) и определяли по титрованному стандарту rIFN-гамма, включенному в набор набора для IFN-гамма Duo (R & D Systems, США).The bioactivity of soluble rICOSL.Fc was tested in the human mixed lymphocyte reaction (MLR). Primary human dendritic cells (DC) were prepared by culturing monocytes isolated from PBMC (BenTech Bio, USA) in vitro for 7 days with 500 U/ml rIL-4 (R&D Systems, USA) and 250 U/ml rGM-CSF (R&D Systems, USA) in Ex-Vivo 15 environment (Lonza, Switzerland). 10,000 mature DCs and 100,000 purified allogeneic CD4+ T cells (BenTech Bio, USA) were co-cultured with ICOSL fusion protein, CF80 Fc fusion protein or control in 96-well round-bottom plates in 200 µl of a final volume of Ex-Vivo 15 medium. For 5- On day 1, IFNγ secretion in culture supernatants was analyzed using the Human IFNγ Duoset ELISA kit (R&D Systems, USA). Optical density was measured using a VMax ELISA microplate reader (Molecular Devices, USA) and determined against the rIFN-gamma titrated standard included in the IFN-gamma Duo kit kit (R&D Systems, USA). The second MLR protocol consisted of human primary dendritic cells (DCs) obtained by culturing monocytes isolated from PBMC (BenTech Bio, USA) in vitro for 7 days with 50 ng/ml rIL-4 (R&D Systems, USA) and 80 ng/ml rGM-CSF (R&D Systems, USA) in Ex-Vivo 15 medium (Lonza, Switzerland). On days 3 and 5, half of the medium was removed and replaced with fresh medium containing 50 ng/ml rIL-4 and 80 ng/ml rGM-CSF. To fully induce DC maturation, lipopolysaccharide (LPS) (InvivoGen Corp., USA) at 100 ng/ml was added to DC cultures on day 6 and cells were incubated for an additional 24 h. About 10,000 mature DCs and 100,000 purified allogeneic CD3+ T- cells (BenTech Bio, USA) were co-cultured with IFOSL Fc fusion proteins and control in 96-well round-bottom plates in 200 μl of a final volume of Ex-Vivo 15 medium. On day 5, IFN-gamma secretion in culture supernatants was analyzed using a kit Human IFN-gamma Duoset ELISA (R&D Systems, USA). Optical density was measured on a BioTek Cytation Multimode Microplate Reader (BioTek Corp., USA) and determined using the rIFN-gamma titrated standard included in the IFN-gamma Duo Kit (R&D Systems, USA).

1. Анализ коиммобилизации с Ahtu-CD3.1. Coimmobilization assay with Ahtu-CD3.

Костимулирующую биологическую активность гибридных вариантов ICOSL определяли в анализах коиммобилизации с анти-CD3. 1nM или 10 нМ мышиного анти-CD3 человека (OKT3, Biolegends, США) разводили в PBS с 1 нМ-80 нМ вариантных белков RICOSL.Fc. Эту смесь добавляли к обработанным 96луночным планшетам с плоским дном для тканевых культур (Corning, США) в течение ночи для облегчения прилипания стимулирующих белков к лункам планшета. На следующий день несвязанный белок смывали с планшетов и в каждую лунку добавляли 100000 очищенных человеческих пан T-клеток (BenTech Bio, США) или клона T-клетки человека BC3 (Astarte Biologies, США) в конечном объеме 200 мкл среды Ex-Vivo 15 (Lonza, Швейцария). В некоторых случаях человеческие пан-Т-клетки были помечены 0,25 мкМ карбоксифлуоресцеина сукцинимидилового эфира (CFSE, ThermoFisher Scientific, США). Клетки культивировали за 3 дня до сбора культуральных надосадочных жидкостей и измерения уровней IFN-гамма человека с помощью набора Duoset ELISA (R & D Systems, США), как упомянуто выше. Клеточную пролиферация определяли по проценту исходных клеток, которые вошли в деление, путем измерения с помощью разведения CFSE на клетках, окрашенных флуоресцентно-конъюгированными антиCD4, анти-CD8 антителами (BD, США) или общими T-клетками посредством проточного цитометрического анализа на LSRII (BD, США).The costimulatory biological activity of the ICOSL hybrid variants was determined in coimmobilization assays with anti-CD3. 1nM or 10 nM mouse anti-human CD3 (OKT3, Biolegends, USA) was diluted in PBS with 1 nM-80 nM RICOSL.Fc variant proteins. This mixture was added to treated 96-well flat-bottom tissue culture plates (Corning, USA) overnight to facilitate adhesion of the stimulating proteins to the wells of the plate. The next day, unbound protein was washed off the plates and 100,000 purified human pan T cells (BenTech Bio, USA) or human T cell clone BC3 (Astarte Biologies, USA) were added to each well in a final volume of 200 μl Ex-Vivo 15 medium ( Lonza, Switzerland). In some cases, human pan-T cells were labeled with 0.25 μM carboxyfluorescein succinimidyl ester (CFSE, ThermoFisher Scientific, USA). Cells were cultured 3 days before collecting culture supernatants and measuring human IFN-gamma levels using a Duoset ELISA kit (R&D Systems, USA) as mentioned above. Cell proliferation was determined by the percentage of original cells that entered division by measuring by CFSE dilution on cells stained with fluorescently conjugated anti-CD4, anti-CD8 antibodies (BD, USA) or total T cells by flow cytometric analysis for LSRII (BD , USA).

C. Результаты.C. Results.

Результаты исследований связывания и активности для примерных протестированных вариантов приведены в табл. 7, в котором указаны аминокислотные замены (замещения) в примерном домене IgSFThe results of binding and activity studies for exemplary tested variants are shown in table. 7, which identifies amino acid substitutions (substitutions) in an exemplary IgSF domain

- 136 044346 в ECD из ICOSL, отборанных при скрининге созревшей аффинности относительно соответствующих когнатных структур ICOS и CD28. В таблицах примерные аминокислотные замены обозначаются номером аминокислотного положения, аналогичного соответствующей референсной (например, немодифицированной) последовательности ECD, как указано далее. Например, референсная (например, немодифицированная) последовательность ECD в табл. 7 (WT ICOSL) является (например, немодифицированной) последовательностью ECD ICOSL, изложенной в SEQ ID NO: 32. Положение аминокислоты указывается посередине с соответствующей референсной (например, немодифицированной или дикого типа) аминокислотой, указанной перед номером, и идентифицированной вариантной аминокислотной заменой, указанной после номера. В столбце 2 указан идентификатор SEQ ID NO для вариантного ECD для каждой вариантной гибридной молекулы ECD-Fc.- 136 044346 in ECDs from ICOSL, selected by affinity mature screening against the corresponding ICOS and CD28 cognate structures. In the tables, exemplary amino acid substitutions are designated by the number of the amino acid position similar to the corresponding reference (eg, unmodified) ECD sequence, as follows. For example, the reference (eg, unmodified) ECD sequence in Table. 7 (WT ICOSL) is the (e.g., unmodified) ICOSL ECD sequence set forth in SEQ ID NO: 32. The amino acid position is indicated in the middle with the corresponding reference (e.g., unmodified or wild type) amino acid indicated before the number and the identified variant amino acid substitution, indicated after the number. Column 2 lists the variant ECD SEQ ID NO for each variant ECD-Fc fusion molecule.

Также показана активность связывания, измеренная по значению средней интенсивности флуоресценции (MFI) для связывания каждой вариантной Fc-гибридной молекулы с клетками, сконструированными для экспрессии когнатного контрструктурного лиганда, и соотношение MFI по сравнению со связыванием соответствующей референсной (например, немодифицированной) гибридной молекулы ECDFc, не содержащей аминокислотной замены(замен) с тем же самым экспрессируемым в клетке контрструктурным лигандом. Функциональная активность вариантных Fc-гибридных молекул в отношении модуляции активности T-клеток также показана на основе рассчитанных уровней IFN-гамма в культуральных надосадочных жидкостях (пг/мл), получаемых либо i) с указанной вариантной гибридной молекулой ECD-Fc, коиммобилизованной с анти-CD3 либо ii) с указанной вариантной гибридной молекулой ECD-Fc в анализе MLR. В табл. также показано соотношение IFN-гамма, продуцируемого каждым вариантным ECD-Fc, по сравнению с соответствующим немодифицированным ECD-Fc (дикого типа) в обоих функциональных анализах.Also shown is binding activity, as measured by the mean fluorescence intensity (MFI) value for binding of each variant Fc-fusion molecule to cells engineered to express the cognate counterstructure ligand, and the ratio of MFI compared to binding of the corresponding reference (e.g., unmodified) ECDFc fusion molecule. not containing amino acid substitution(s) with the same counter-structural ligand expressed in the cell. The functional activity of the variant Fc-fusion molecules in modulating T cell activity is also shown based on the calculated levels of IFN-gamma in culture supernatants (pg/ml) obtained with either i) with the indicated variant ECD-Fc fusion molecule coimmobilized with anti- CD3 or ii) with the specified variant ECD-Fc fusion molecule in an MLR assay. In table also shown is the ratio of IFN-gamma produced by each variant ECD-Fc compared to the corresponding unmodified ECD-Fc (wild type) in both functional assays.

Как показано, отборы привели к идентификации ряда вариантных доменов ICOSL IgSF, которые были модифицированы по аффинности, демонстрирующих повышенное связывание, по меньшей мере, с одним, а в некоторых случаях и более чем с одним, когнатным контрструктурным лигандом. Кроме того, результаты показали, что модификация аффинности вариантных молекул также демонстрирует улучшенные активности как для увеличения, так и уменьшения иммунологической активности в зависимости от формата молекулы. Например, коиммобилизация лиганда, вероятно, обеспечивает мультивалентное взаимодействие с клеткой для кластеризации или увеличения авидности, что способствует активности агонистов и повышает активацию T-клеток по сравнению с референсной (например, немодифицированной или дикого типа) молекулой ECD-Fc, не содержащей аминокислотную замену(ы). Однако, когда молекула представлена в виде двухвалентной молекулы Fc в растворе, те же вариантные домены IgSF проявляют антагонистическую активность в отношении уменьшения активации T-клеток по сравнению с референсной (например, немодифицированной или дикого типа) молекулой ECD-Fv, не содержащей аминокислотную замену(ы).As shown, screens have led to the identification of a number of variant ICOSL IgSF domains that have been modified in affinity, demonstrating increased binding to at least one, and in some cases more than one, cognate counterstructure ligand. In addition, the results showed that affinity modification of variant molecules also exhibited improved activities for both increasing and decreasing immunological activity depending on the molecule format. For example, ligand coimmobilization likely provides a multivalent interaction with the cell to cluster or increase avidity, which promotes agonist activity and increases T cell activation compared to a reference (e.g., unmodified or wild-type) ECD-Fc molecule that does not contain the amino acid substitution ( s). However, when the molecule is presented as a divalent Fc molecule in solution, the same variant IgSF domains exhibit antagonistic activity in reducing T cell activation compared to a reference (e.g., unmodified or wild type) ECD-Fv molecule not containing the amino acid substitution ( s).

- 137 044346- 137 044346

Таблица 7Table 7

Варианты ICOSL, выбранные против CD28 или ICOS. Последовательности молекул, данные связывания и данные костимулирующей биоактивностиICOSL variants selected against CD28 or ICOS. Molecular sequences, binding data and costimulatory bioactivity data

Мутация(ии) ICOSL ICOSL mutation(s) SEQ ID NO. (ECD) SEQ ID NO. (ECD) Связывание Binding Коиммобилизация с анти-СОЗ Coimmobilization with anti-POPs MLR MLR ICOS OD (исходное соотношение) ICOS OD (original ratio) CD28 MFI (исходное соотношение) CD28 MFI (original ratio) IFN-гамма пг/мл (исходное соотноше-ние) IFN-gamma pg/ml (initial ratio) уровни IFNгамма пг/мл (исходное соотношение) IFNgamma levels pg/ml (initial ratio) N52S N52S 109 109 1,33 (1,55) 1.33 (1.55) 162 (9,00) 162 (9.00) 1334 (1,93) 1334 (1.93) 300 (0,44) 300 (0.44) N52H N52H 110 110 1,30 (1,51) 1.30 (1.51) 368 (20,44) 368 (20.44) 1268 (1,83) 1268 (1.83) 39 (0,06) 39 (0.06) N52D N52D 111 111 1,59 (1,85) 1.59 (1.85) 130 (7,22) 130 (7.22) 1943 (2,80) 1943 (2.80) 190 (0,28) 190 (0.28) N52 Y/N57 Y/F13 8L/L203P N52 Y/N57 Y/F13 8L/L203P 112 112 1,02 (1,19) 1.02 (1.19) 398 (22,11) 398 (22.11) 510* (1,47*) 510* (1.47*) 18 (0,03) 18 (0.03) N52H/N57Y/Q100P N52H/N57Y/Q100P 113 113 1,57 (1,83) 1.57 (1.83) 447 (24,83) 447 (24.83) 2199 (3,18) 2199 (3.18) 25 (0,04) 25 (0.04) N52S/Y146C/Y152C N52S/Y146C/Y152C 114 114 1,26 (1,47) 1.26 (1.47) 39 (2,17) 39 (2.17) 1647 (2,38) 1647 (2.38) 152 (0,22) 152 (0.22) N52H/C198R N52H/C198R 115 115 1,16 (1,35) 1.16 (1.35) 363 (20,17) 363 (20.17) 744* (2,15*) 744* (2.15*) ND (ND) ND (ND) N52H/C140del/T225A N52H/C140del/T225A 372 372 ND (ND) ND (ND) 154 (8,56) 154 (8.56) 522* (1,51*) 522* (1.51*) ND (ND) ND (ND) N52H/C198R/T225A N52H/C198R/T225A 117 117 1,41 (1,64) 1.41 (1.64) 344 (19,11) 344 (19.11) 778* (2,25*) 778* (2.25*) 0 (0) 0 (0) N52H/K92R N52H/K92R 118 118 1,48 (1,72) 1.48 (1.72) 347 (19,28) 347 (19.28) 288* (0,83*) 288* (0.83*) 89 (0,13) 89 (0.13) N52H/S99G N52H/S99G 119 119 0,09 (0,10) 0.09 (0.10) 29 (1,61) 29 (1.61) 184* (0,53*) 184* (0.53*) 421 (0,61) 421 (0.61) N52Y N52Y 120 120 0,08 (0,09) 0.08 (0.09) 18 (1,00) 18 (1.00) 184* (0,53*) 184* (0.53*) 568 (0,83) 568 (0.83) N57Y N57Y 121 121 1,40 (1,63) 1.40 (1.63) 101 (5,61) 101 (5.61) 580* (1,68*) 580* (1.68*) 176 (0,26) 176 (0.26) N57Y/Q100P N57Y/Q100P 122 122 0,62 (0,72) 0.62 (0.72) 285 (15,83) 285 (15.83) 301* (0,87*) 301* (0.87*) 177 (0,26) 177 (0.26) N52S/S130G/Y152C N52S/S130G/Y152C 123 123 0,16 (0,19) 0.16 (0.19) 24 (1,33) 24 (1.33) 266* (0,77*) 266* (0.77*) 1617 (2,35) 1617 (2.35) N52S/Y152C N52S/Y152C 124 124 0,18 (0,21) 0.18 (0.21) 29 (1,61) 29 (1.61) 238* (0,69*) 238* (0.69*) 363 (0,53) 363 (0.53) N52S/C198R N52S/C198R 125 125 1,80 (2,09) 1.80 (2.09) 82 (4,56) 82 (4.56) 1427 (2,06) 1427 (2.06) 201 (0,29) 201 (0.29) N52Y/N57Y/Y152C N52Y/N57Y/Y152C 126 126 0,08 (0,09) 0.08 (0.09) 56 (3,11) 56 (3.11) 377* (1,09*) 377* (1.09*) 439 (0,64) 439 (0.64) N52Y/N57Y/H129P/C198R N52Y/N57Y/H129P/C198R 127 127 ND (ND) ND (ND) 449 (24,94) 449 (24.94) 1192 (1,72) 1192 (1.72) ND (ND) ND (ND) N52H/L161P/C198R N52H/L161P/C198R 128 128 0,18 (0,21) 0.18 (0.21) 343 (19,05) 343 (19.05) 643* (1,86*) 643* (1.86*) 447 (0,65) 447 (0.65)

- 138 044346- 138 044346

N52S/T113E N52S/T113E 129 129 1,51 (1,76) 1.51 (1.76) 54 (3,00) 54 (3.00) 451* (1,30*) 451* (1.30*) 345 (0,50) 345 (0.50) S54A S54A 1,62 1.62 48 48 386* 386* 771 771 130 130 (1,88) (1.88) (2,67) (2.67) (1,12*) (1.12*) (1,12) (1.12) N52D/S54P N52D/S54P 1,50 1.50 38 38 476* 476* 227 227 ЗОо ZOO (1,74) (1.74) (2,И) (2,I) (1,38*) (1.38*) (0,33) (0.33) S54F/V193A S54F/V193A 905 905 0,51 0.51 16 16 294 294 262 262 (0,59) (0.59) (0,87) (0.87) (0,85) (0.85) (0,38) (0.38) N52K/L208P N52K/L208P 1,91 1.91 291 291 1509 1509 137 137 132 132 (2,22) (2.22) (16,17) (16.17) (2,18) (2.18) (0,20) (0.20) N52S/Y152H N52S/Y152H 133 133 0,85 0.85 68 68 2158 2158 221 221 (0,99) (0.99) (3,78) (3.78) (3,12) (3.12) (0,32) (0.32) N52D/V151A N52D/V151A 0,90 0.90 19 19 341* 341* 450 450 134 134 (1,05) (1.05) (1,06) (1.06) (0,99*) (0.99*) (0,66) (0.66) N52H/I143T N52H/I143T 135 135 1,83 1.83 350 350 2216 2216 112 112 (2,13) (2.13) (19,44) (19.44) (3,20) (3.20) (0,16) (0.16) N52S/L80P N52S/L80P 136 136 0,09 0.09 22 22 192* 192* 340 340 (0,Ю) (0,Yu) (1,22) (1.22) (0,55*) (0.55*) (0,49) (0.49) F120S/Y152H/N201S F120S/Y152H/N201S 137 137 0,63 0.63 16 16 351* 351* 712 712 (0,73) (0.73) (0,89) (0.89) (1,01*) (1.01*) (1,04) (1.04) N52S/R75Q/L203P N52S/R75Q/L203P 138 138 1,71 (1,99) 1.71 (1.99) 12 (0,67) 12 (0.67) 1996 (2,88) 1996 (2.88) 136 (0,20) 136 (0.20) N52S/D158G N52S/D158G 139 139 1,33 (1,55) 1.33 (1.55) 39 (2,17) 39 (2.17) 325* (0,94*) 325* (0.94*) 277 (0,40) 277 (0.40) N52D/Q133H N52D/Q133H 140 140 1,53 (1,78) 1.53 (1.78) 104 (5,78) 104 (5.78) 365* (1,05*) 365* (1.05*) 178 (0,26) 178 (0.26) WT ICOSL WT ICOSL 0,86 0.86 18 18 692 / 346* 692 / 346* 687 687 32 32 (1,00) (1.00) (1,00) (1.00) (1,00) (1.00) (1,00) (1.00)

*: родительское соотношение, рассчитанное с использованием 346 пг/мл IFN-гамма для WT ICOSL.*: parental ratio calculated using 346 pg/ml IFN-gamma for WT ICOSL.

Анализы связывания повторяли, по существу, как описано выше, за исключением того, что связывание также оценивали против клеток, экспрессирующих полноразмерный CTLA4 человека. Варианты гибридных белков ICOSL Fc также были дополнительно оценены в анализе коиммобилизации с антиCD3, как описано выше. Результаты подтвердили идентификацию ряда вариантных доменов ICOSL IgSF, которые проявили повышенную аффинность связывания, по меньшей мере, с одним, а в некоторых случаях и более чем с одним когнатным лигандом. Кроме того, результаты показали, что аффинная модификация вариантных молекул также демонстрирует улучшенные активности в анализе коиммобилизации.Binding assays were repeated essentially as described above, except that binding was also assessed against cells expressing full-length human CTLA4. ICOSL Fc fusion protein variants were also further evaluated in a co-immobilization assay with anti-CD3 as described above. The results confirmed the identification of a number of IgSF variant ICOSL domains that exhibited increased binding affinity to at least one, and in some cases more than one, cognate ligand. In addition, the results showed that affinity modification of the variant molecules also exhibited improved activities in the coimmobilization assay.

Пример 7.Example 7.

Дополнительные домены IgSF с модифицированной аффинностью.Additional affinity-modified IgSF domains.

В этих примерах описываются конструирование, создание и скрининг дополнительных сенсибилизированных модифицированных CD80 (B7-1), CD86 (B7-2) и NKM30 иммуномодулирующих белков, которые являются другими компонентами иммунного синапса (IS), которые продемонстрировали двойную роль как в иммунной активации, так и в ингибировании. Эти примеры демонстрируют, что аффинная модификация доменов IgSF дает белки, которые могут действовать как для повышения, так и для снижения иммунологической активности. В этой работе также описываются различные комбинации таких доменов, слитых парами (то есть сложенных в стек), с вариантным ICOSL с модифицированной аффинностью с образованием иммуномодулирующего белка типа II для получения иммуномодулирующей активности.These examples describe the design, generation, and screening of additional sensitized modified CD80 (B7-1), CD86 (B7-2), and NKM30 immunomodulatory proteins, which are other components of the immune synapse (IS) that have demonstrated dual roles in both immune activation and and in inhibition. These examples demonstrate that affinity modification of IgSF domains produces proteins that can act to either enhance or reduce immunological activity. This work also describes various combinations of such domains fused in pairs (i.e., stacked) with an affinity-modified variant ICOSL to form a type II immunomodulatory protein to produce immunomodulatory activity.

Мутантные ДНК-конструкции человеческих CD80, CD86 и NKp30 IgSF доменов для трансляции и экспрессии в виде библиотек для дрожжевого дисплея получали по существу так же, как описано в примере 1. Для библиотек, которые нацелены на конкретные остатки целевого белка, для полной или частичной рандомизации с вырожденными кодонами, кодирующие ДНК для внеклеточных доменов (ECD) человеческих CD80 (SEQ ID NO: 28) и NKp30 (SEQ ID NO: 54) были заказаны у Integrated DNA Technologies (Коралвилл, Айова) в виде набора перекрывающихся олигонуклеотидов длиной до 80 пар оснований (п.о.). В ином случае остатки мутировали путем сайт-направленного мутагенеза по существу так, как описано в примере 1. В ином случае случайные библиотеки были сконструированы для идентификации вариантов ECD CD80 (SEQ ID NO: 28), CD86 (SEQ ID NO: 29) и NKp30 (SEQ ID NO: 54), по существу, как описано в примере 1.Mutant DNA constructs of the human CD80, CD86 and NKp30 IgSF domains for translation and expression as yeast display libraries were prepared essentially as described in Example 1. For libraries that target specific residues of the target protein, either full or partial randomization with degenerate codons encoding DNA for the extracellular domains (ECD) of human CD80 (SEQ ID NO: 28) and NKp30 (SEQ ID NO: 54) were ordered from Integrated DNA Technologies (Coralville, Iowa) as a set of overlapping oligonucleotides up to 80 pairs in length bases (bp). Otherwise, the remaining residues were mutated by site-directed mutagenesis essentially as described in Example 1. Otherwise, random libraries were constructed to identify ECD variants CD80 (SEQ ID NO: 28), CD86 (SEQ ID NO: 29) and NKp30 (SEQ ID NO: 54) essentially as described in Example 1.

Целевую ДНК и ДНК случайной библиотеки вводили в дрожжи, по существу так, как описано в примере 2, для получений дрожжевой библиотеки. Библиотеки использовали для отбора дрожжей, экспрессирующих варианты CD80, CD86 и NKp30 с модифицированной аффинностью, по существу так, как описано в примере 3. Клетки обрабатывали для уменьшения количества невзаимодействующих молекул и обогащали варианты CD80, CD86 или NKp30 с возможностью связывания их экзогенных рекомбинантных контрструктурных белков по существу так, как описано в примере 3. Например, дрожжи преThe target DNA and random library DNA were introduced into yeast essentially as described in Example 2 to produce a yeast library. The libraries were used to select yeast expressing affinity modified CD80, CD86 and NKp30 variants essentially as described in Example 3. Cells were treated to reduce the number of non-interacting molecules and enriched for CD80, CD86 or NKp30 variants to bind their exogenous recombinant counterstructure proteins essentially as described in example 3. For example, yeast

- 139 044346 зентировали целевые или случайные библиотеки CD80 для каждого из CD28, CTL-4 и PD-L1 по отдельности. Затем следовало от двух до трех циклов сортировки проточной цитометрией с использованием окрашивания экзогенными контрструктурными белками для обогащения фракции дрожжевых клеток, презентирующих улучшенные связывающие молекулы. Обогащение с помощью магнитных гранул и отбор с помощью проточной цитометрии в основном описаны в Keith D. Miller, 1 Noah B. Pefaur, 2 and Cheryl L. Baird1 Current Protocols in Cytometry 4.7.1-4.7.30, July 2008.- 139 044346 cored targeted or random CD80 libraries for each of CD28, CTL-4 and PD-L1 separately. This was followed by two to three rounds of flow cytometric sorting using exogenous counterstructure protein staining to enrich for the fraction of yeast cells presenting improved binding molecules. Enrichment by magnetic beads and selection by flow cytometry are primarily described in Keith D. Miller, 1 Noah B. Pefaur, 2 and Cheryl L. Baird1 Current Protocols in Cytometry 4.7.1-4.7.30, July 2008.

С помощью библиотек CD80, CD86, ICOSL и NKp30 в R & D Systems (США) были получены следующие целевые белки-лиганды: человеческий rCD28.Fc (т.е. рекомбинантный гибридный белок CD28Fc), rPDL1.Fc, rCTLA4.Fc и rB7H6.Fc. Двухцветную проточную цитометрию проводили по существу, как описано в примере 3. Дрожжи, полученные в результате проточной цитометрической сортировки анализировали на предмет более высокой удельной аффинности связывания. Полученные в результате отсортированные дрожжи размножали и повторно индуцировали для того, чтобы экспрессировать специфические варианты доменов IgSF с модифицированной аффинностью, которые они кодируют. Затем эту популяцию можно было сравнить с родительским штаммом дрожжей дикого типа или с любыми другими дрожжами, такими как популяция дрожжей, отобранных на гранулах, с помощью проточной цитометрии.Using the CD80, CD86, ICOSL and NKp30 libraries at R&D Systems (USA), the following target protein ligands were obtained: human rCD28.Fc (i.e. recombinant fusion protein CD28Fc), rPDL1.Fc, rCTLA4.Fc and rB7H6 .Fc. Two-color flow cytometry was performed essentially as described in Example 3. Yeast resulting from flow cytometry sorting was analyzed for higher specific binding affinity. The resulting sorted yeasts were propagated and re-induced to express specific affinity-modified variants of the IgSF domains that they encode. This population could then be compared to the parental wild-type yeast strain or to any other yeast, such as a bead-selected yeast population, using flow cytometry.

В случае дрожжей с вариантными NKp30, отобранными по связыванию с B7-H6, выходы сортировки F2 дали значения MFI равные 533 при окраске с помощью 16,6 нМ rB7H6. Fc, тогда как родительский штамм NKp30 дал значение MFI равное 90 при окрашивании той же концентрацией rB7H6.Fc (6-кратное улучшение).In the case of yeast with NKp30 variants selected for binding to B7-H6, F2 sort yields gave MFI values of 533 when stained with 16.6 nM rB7H6. Fc, whereas the parent strain NKp30 gave an MFI value of 90 when stained with the same concentration of rB7H6.Fc (6-fold improvement).

Среди вариантных NKp30, которые были идентифицированы, был вариант, который содержал мутацию L30V/A60V/S64P/S86G относительно положений во внеклеточном домене NKp30, соответствующих положениям, представленным в SEQ ID NO: 54. Среди идентифицированных вариантных CD86 был вариант, который содержал мутации Q35H/H90L/Q102H относительно положений во внеклеточном домене CD86, соответствующих положениям, представленным в SEQ ID NO: 29. Среди идентифицированных вариантных CD80 были варианты, приведенные в табл. 8 и дополнительно описанные ниже.Among the NKp30 variants that were identified was a variant that contained the L30V/A60V/S64P/S86G mutation relative to positions in the extracellular domain of NKp30 corresponding to the positions presented in SEQ ID NO: 54. Among the CD86 variants identified was a variant that contained the Q35H mutations /H90L/Q102H relative to positions in the extracellular domain of CD86 corresponding to the positions presented in SEQ ID NO: 29. Among the CD80 variants identified were the variants shown in table. 8 and further described below.

Как и с ICOSL, значения MFI для всех выходов F2, описанных выше, при измерении антителом против HA-метки на FL1, не увеличивались и иногда уменьшались по сравнению с штаммами дикого типа, что указывает на то, что увеличенное связывание не было функцией повышенной экспрессии отобранных вариантов на поверхности дрожжей, а валидированных стратегий отбора выше порогового значения только для отбора средних и низких экспрессоров с высоким связыванием лиганда.As with ICOSL, MFI values for all F2 yields described above, when measured with an antibody against the HA tag on FL1, were not increased and sometimes decreased compared to wild-type strains, indicating that increased binding was not a function of increased expression selected variants on the surface of yeast, and validated selection strategies above the threshold only select for medium and low expressors with high ligand binding.

Примерные результаты отбора были переформатированы в виде иммуномодулирующих белков, содержащих (вариантнтный) внеклеточный домен (ECD) с модифицированной аффинностью из CD80, скомбинированный с молекулой Fc (вариантные гибридные молекулы ECD-Fc) по существу, как описано в примере 4, и Fc-гибридный белок экспрессировали и очищали, по существу, как описано в примере 5.The exemplary selection results were reformatted as immunomodulatory proteins containing an affinity-modified (variant) extracellular domain (ECD) from CD80 combined with an Fc molecule (variant ECD-Fc fusion molecules) essentially as described in Example 4, and an Fc fusion the protein was expressed and purified essentially as described in Example 5.

Затем оценивали по существу связывание примерных вариантных гибридных белков CD80-Fc с экспрессированными клетками контрструктурами, как описано в примере 6. Для получения клеток, экспрессирующих когнатные партнеры связывания, были созданы конструкции для поверхностной экспрессии полноразмерных белков млекопитающих для каждого из CD28, CTLA4 и PD-L1 человека, как описано в примере 6. Исследования связывания и проточная цитометрия проводились по существу, как описано в примере 6. Кроме того, биологическая активность вариантного белка Fc-гибрида характеризовали либо методом реакции смешанных лимфоцитов (MLR), либо коиммобилизацией с анти-CD3, по существу, как описано в примере 6.The binding of exemplary CD80-Fc variant fusion proteins to cell-expressed counterstructures was then assessed as described in Example 6. To obtain cells expressing cognate binding partners, surface expression constructs of full-length mammalian proteins were generated for each of CD28, CTLA4, and PD- human L1 as described in Example 6. Binding studies and flow cytometry were performed essentially as described in Example 6. In addition, the biological activity of the variant Fc fusion protein was characterized by either mixed lymphocyte reaction (MLR) or coimmobilization with anti-CD3 , essentially as described in example 6.

Результаты исследований связывания и активности для примерных протестированных вариантов приведены в табл. 8 и 9. В частности, в табл. 8 приведены примерные аминокислотные замены (замещения) домена IgSF в ECD из CD80, выбранных скринингом для созревания аффинности против соответствующей когнатной структуры CD28. Табл. 9 демонстрирует примерные аминокислотные замены (замещения) домена IgSF в ECD из CD80, выбранных скринингом по созреванию аффинности против соответствующей когнатной структуры PD-L1. Как и выше, для каждой Таблицы примерные аминокислотные замены обозначаются номером аминокислотного положения, аналогичного соответствующему в референсной (например, немодифицированной) последовательности ECD. Например, референсная (например, немодифицированная) последовательность ECD в табл. 8 и 9 представляет собой немодифицированную последовательность ECD CD80, представленную в SEQ ID NO: 28. Положение аминокислоты указывается посередине с соответствующей референсной (например, немодифицированной) аминокислотой, указанной перед номером, и идентифицированной вариантной аминокислотной заменой, указанной после номера. В столбце 2 указан идентификатор SEQ ID NO для вариантного ECD для каждой вариантной гибридной молекулы ECD-Fc.The results of binding and activity studies for exemplary tested variants are shown in table. 8 and 9. In particular, in table. 8 shows exemplary amino acid substitutions (substitutions) of the IgSF domain in the ECD from CD80, selected by affinity maturation screening against the corresponding cognate structure of CD28. Table 9 shows exemplary IgSF domain amino acid substitutions in ECDs from CD80 selected by affinity maturation screening against the corresponding PD-L1 cognate structure. As above, for each Table, exemplary amino acid substitutions are indicated by the number of the amino acid position similar to the corresponding one in the reference (eg, unmodified) ECD sequence. For example, the reference (eg, unmodified) ECD sequence in Table. 8 and 9 is the unmodified CD80 ECD sequence shown in SEQ ID NO: 28. The amino acid position is indicated in the middle with the corresponding reference (eg, unmodified) amino acid listed before the number and the identified variant amino acid substitution listed after the number. Column 2 lists the variant ECD SEQ ID NO for each variant ECD-Fc fusion molecule.

Также показана активность связывания, измеренная по значению средней интенсивности флуоресценции (MFI) для связывания каждой вариантной Fc-гибридной молекулы с клетками, сконструированными для экспрессии когнатного контрструктурного лиганда, и соотношение MFI по сравнению со связыванием соответствующей референсной (например, немодифицированной) гибридной молекулы ECDFc, не содержащей аминокислотной замены (замен) к одному и тому же клеточно-экспрессируемому контрструктурному лиганду. Функциональная активность вариантных Fc-гибридных молекул в отношеAlso shown is binding activity, as measured by the mean fluorescence intensity (MFI) value for binding of each variant Fc-fusion molecule to cells engineered to express the cognate counterstructure ligand, and the ratio of MFI compared to binding of the corresponding reference (e.g., unmodified) ECDFc fusion molecule. containing no amino acid substitution(s) to the same cell-expressed counterstructural ligand. Functional activity of variant Fc-hybrid molecules in relation to

- 140 044346 нии модуляции активности T-клеток также показана на основе рассчитанных уровней IFN-гамма в культуральных надосадочных жидкостях (пг/мл), получаемых либо i) с указанной вариантной гибридной молекулой ECD-Fc, коиммобилизованной с анти-CD3 либо ii) с указанной вариантной гибридной молекулой ECD-Fc в анализе MLR. В таблицах также показано соотношение IFN-гамма, продуцируемое каждым вариантным ECD-Fc, по сравнению с соответствующим референсным (например, немодифицированным) ECD-Fc в обоих функциональных анализах.- 140 044346 modulation of T cell activity is also indicated based on calculated IFN-gamma levels in culture supernatants (pg/ml) obtained either i) with the indicated variant ECD-Fc hybrid molecule coimmobilized with anti-CD3 or ii) with the indicated variant ECD-Fc hybrid molecule in an MLR assay. The tables also show the ratio of IFN-gamma produced by each variant ECD-Fc compared to the corresponding reference (eg, unmodified) ECD-Fc in both functional assays.

Как показано, отборы привели к идентификации ряда доменных вариантов CD80 IgSF, модифицированных по аффинности, которые демонстрировали повышенное связывание, по меньшей мере, с одним, а в некоторых случаях и более чем с одним, когнатным контрструктурным лигандом. Кроме того, результаты показали, что модификация аффинности вариантных молекул также демонстрирует улучшенные активности как для увеличения, так и уменьшения иммунологической активности в зависимости от формата молекулы. Например, коиммобилизация лиганда, вероятно, обеспечивает мультивалентное взаимодействие с клеткой для кластеризации или увеличения авидности, что способствует активности агонистов и повышает активацию T-клеток по сравнению с референсной (например, немодифицированной или дикого типа) молекулой ECD-Fc, не содержащей аминокислотную замену(ы). Однако, когда молекула представлена в виде двухвалентной молекулы Fc в растворе, те же вариантные домены IgSF проявляют антагонистическую активность в отношении уменьшения активации T-клеток по сравнению с референсной (например, немодифицированной или дикого типа) молекулой ECD-Fc, не содержащей аминокислотную замену(ы).As shown, the screens led to the identification of a number of affinity modified CD80 IgSF domain variants that exhibited increased binding to at least one, and in some cases more than one, cognate counterstructure ligand. In addition, the results showed that affinity modification of variant molecules also exhibited improved activities for both increasing and decreasing immunological activity depending on the molecule format. For example, ligand coimmobilization likely provides a multivalent interaction with the cell to cluster or increase avidity, which promotes agonist activity and increases T cell activation compared to a reference (e.g., unmodified or wild-type) ECD-Fc molecule that does not contain the amino acid substitution ( s). However, when the molecule is presented as a divalent Fc molecule in solution, the same variant IgSF domains exhibit antagonistic activity in reducing T cell activation compared to a reference (e.g., unmodified or wild type) ECD-Fc molecule not containing the amino acid substitution ( s).

Таблица 8Table 8

Варианты CD80, отобранные против CD28.CD80 variants selected against CD28.

Последовательности молекул, данные связывания и данные костимулирующей биоактивностиMolecular sequences, binding data and costimulatory bioactivity data

Мутация(ии) CD 80 Mutation(s) CD 80 SEQ ID NO. (ECD) SEQ ID NO. (ECD) Связывание Binding Коиммобилизация с анти-СОЗ Coimmobilization with anti-POPs MLR MLR CD28 MFI (исходное соотношение) CD28 MFI (original ratio) CTLA-4 MFI (исходное соотношение) CTLA-4 MFI (original ratio) PD-L1 MFI (исходное соотношение) PD-L1 MFI (original ratio) IFN-гамма пг/мл (исходное соотношен ие) IFN-gamma pg/ml (initial ratio) уровни IFN- гамма пг/мл (исходное соотношение) levels IFN- gamma pg/ml (original ratio) L70Q/A91G/N144D L70Q/A91G/N144D 508 508 125 (1,31) 125 (1.31) 283 (1,36) 283 (1.36) 6 (0,08) 6 (0.08) 93 (1,12) 93 (1.12) 716 (0,83) 716 (0.83) L70Q/A91G/T130A L70Q/A91G/T130A 56 56 96 (1,01) 96 (1.01) 234 (1,13) 234 (1.13) 7 (0,10) 7 (0.10) 99 (1,19) 99 (1.19) 752 (0,87) 752 (0.87) L70Q/A91G/I118А/ T120S/T130A/K169E L70Q/A91G/I118A/ T120S/T130A/K169E 59 59 123 (1,29) 123 (1.29) 226 (1,09) 226 (1.09) 7 (0,10) 7 (0.10) 86 (1,03) 86 (1.03) 741 (0,86) 741 (0.86) V4M/L70Q/A91G/I118V/T120S/ Т130А/К169Е V4M/L70Q/A91G/I118V/T120S/ T130A/K169E 510 510 89 (0,94) 89 (0.94) 263 (1,26) 263 (1.26) 6 (0,09) 6 (0.09) 139 (1,67) 139 (1.67) 991 (1,14) 991 (1.14) L70Q/А91G/1118 V/T120 S/T13 0 А/ К169Е L70Q/A91G/1118 V/T120 S/T13 0 A/ K169E 59 59 106 (1,12) 106 (1.12) 263 (1,26) 263 (1.26) 6 (0,09) 6 (0.09) 104 (1,25) 104 (1.25) 741 (0,86) 741 (0.86) V20L/L70Q/A91S/I118V/T120S/ Т130А V20L/L70Q/A91S/I118V/T120S/ T130A 513 513 105 (1,11) 105 (1.11) 200 (0,96) 200 (0.96) 9 (0,13) 9 (0.13) 195 (2,34) 195 (2.34) 710 (0,82) 710 (0.82) S44P/L70Q/A91G/T13 0 А S44P/L70Q/A91G/T13 0 A 61 61 88 (0,92) 88 (0.92) 134 (0,64) 134 (0.64) 5 (0,07) 5 (0.07) 142 (1,71) 142 (1.71) 854 (0,99) 854 (0.99) L70Q/А91G/E117G/1118 V/T 120 S/ Т130А L70Q/A91G/E117G/1118 V/T 120 S/ T130A 514 514 120 (1,27) 120 (1.27) 193 (0,93) 193 (0.93) 6 (0,08) 6 (0.08) 98 (1,05) 98 (1.05) 736 (0,85) 736 (0.85) А91G/1118 V/T 120 S/T 13 0 А A91G/1118 V/T 120 S/T 13 0 A 515 515 84 (0,89) 84 (0.89) 231 (1,И) 231 (1,I) 44 (0,62) 44 (0.62) 276 (3,33) 276 (3.33) 714 (0,82) 714 (0.82) L70R/А91G/1118 V/T 120 S/T 13 0 А/ T199S L70R/A91G/1118 V/T 120 S/T 13 0 A/ T199S 516 516 125 (1,32) 125 (1.32) 227 (1,09) 227 (1.09) 6 (0,09) 6 (0.09) 105 (1,26) 105 (1.26) 702 (0,81) 702 (0.81) L70Q/E81 А/А91G/1118 V/T 120 S/ I127T/T130A L70Q/E81 A/A91G/1118 V/T 120 S/ I127T/T130A 517 517 140 (1,48) 140 (1.48) 185 (0,89) 185 (0.89) 18 (0,25) 18 (0.25) 98 (1,18) 98 (1.18) 772 (0,89) 772 (0.89) L70Q/Y87N/A91 G/T 13 0 А L70Q/Y87N/A91 G/T 13 0 A 66 66 108 (1,13) 108 (1.13) 181 (0,87) 181 (0.87) 6 (0,08) 6 (0.08) 136 (1,63) 136 (1.63) 769 (0,89) 769 (0.89) T28S/L70Q/A91G/I118V/E95K/ T120S/I126V/T130A/K169E T28S/L70Q/A91G/I118V/E95K/ T120S/I126V/T130A/K169E 518 518 32 (0,34) 32 (0.34) 65 (0,31) 65 (0.31) 6 (0,08) 6 (0.08) 120 (1,44) 120 (1.44) 834 (0,96) 834 (0.96)

- 141 044346- 141 044346

N63 S/L70Q/A91G/S114T/1118 V /T120S/T130A N63 S/L70Q/A91G/S114T/1118 V/T120S/T130A 519 519 124 (1,30) 124 (1.30) 165 (0,79) 165 (0.79) 6 (0,08) 6 (0.08) 116 (1,39) 116 (1.39) 705 (0,81) 705 (0.81) КЗ 6E/I67T/L70Q/A91G/1118 V/ KZ 6E/I67T/L70Q/A91G/1118 V/ 520 520 8 8 21 21 5 5 53 53 852 852 T120S/T130A/N152T T120S/T130A/N152T (0,09) (0.09) (0,10) (0.10) (0,08) (0.08) (0,63) (0.63) (0,98) (0.98) E52G/L70Q/A91G/D107N/1118 V/ E52G/L70Q/A91G/D107N/1118V/ 521 521 113 113 245 245 6 6 94 94 874 874 T120S/T130A K169E T120S/T130A K169E (1,19) (1.19) (1,18) (1.18) (0,08) (0.08) (1,13) (1.13) (1,01) (1.01) K37E/F59S/L70Q/A91G/I118V/ K37E/F59S/L70Q/A91G/I118V/ 522 522 20 20 74 74 6 6 109 109 863 863 T120S/T130A/K185E T120S/T130A/K185E (0,21) (0.21) (0,36) (0.36) (0,08) (0.08) (1,31) (1.31) (1,00) (1.00) A91G/S103P A91G/S103P 39 39 56 56 9 9 124 124 670 670 n n (0,41) (0.41) (0,27) (0.27) (0,13) (0.13) (1,49) (1.49) (0,77) (0.77) K89E/T130A K89E/T130A 90 90 148 148 75 75 204 204 761 761 1 j 1 j (0,95) (0.95) (0,71) (0.71) (1,07) (1.07) (2,45) (2.45) (0,88) (0.88) A91G A91G ΊΛ ΊΛ 96 96 200 200 85 85 220 220 877 877 (1,01) (1.01) (0,96) (0.96) (1,21) (1.21) (2,65) (2.65) (1,01) (1.01) D60 V/A91G/1118 V/T120 S/T13 0 A / D60 V/A91G/1118 V/T120 S/T13 0 A / 111 111 222 222 12 12 120 120 744 744 / K169E / K169E jZj jZj (1,17) (1.17) (1,07) (1.07) (0,18) (0.18) (1,44) (1.44) (0,86) (0.86) 68 68 131 131 5 5 152 152 685 685 K54M/L70Q/A91 G/Yl 64H K54M/L70Q/A91 G/Yl 64H 524 524 (0,71) (0.71) (0,63) (0.63) (0,08) (0.08) (1,83) (1.83) (0,79) (0.79) М3 8T/L70Q/E77G/A91G/1118 V/ M3 8T/L70Q/E77G/A91G/1118 V/ 61 61 102 102 5 5 119 119 796 796 T120S/T130A/N152T T120S/T130A/N152T (0,64) (0.64) (0,49) (0.49) (0,07) (0.07) (1,43) (1.43) (0,92) (0.92) R29H/E52G/L70R/E88G/A91G/ R29H/E52G/L70R/E88G/A91G/ 78 78 100 100 119 119 5 5 200 200 740 740 T130A T130A (1,05) (1.05) (0,57) (0.57) (0,08) (0.08) (2,41) (2.41) (0,85) (0.85) Y31H/T41G/M43L/L70Q/A91G/ Y31H/T41G/M43L/L70Q/A91G/ 526 526 85 85 85 85 6 6 288 288 782 782 1118 V/T 120 S/1126 V/T 13 0 A 1118 V/T 120 S/1126 V/T 13 0 A (0,89) (0.89) (0,41) (0.41) (0,08) (0.08) (3,47) (3.47) (0,90) (0.90) V68A/T110A V68A/T110A 103 103 233 233 48 48 163 163 861 861 oU oU (1,08) (1.08) (1,12) (1.12) (0,68) (0.68) (1,96) (1.96) (0,99) (0.99) L65H/D90G/T11OA/F116L L65H/D90G/T11OA/F116L 527 527 33 33 121 121 11 eleven 129 129 758 758 (0,35) (0.35) (0,58) (0.58) (0,15) (0.15) (1,55) (1.55) (0,88) (0.88) R29H/E52G/D90N/I118V/T120S/ R29H/E52G/D90N/I118V/T120S/ 82 82 66 66 141 141 11 eleven 124 124 800 800 T130A T130A (0,69) (0.69) (0,68) (0.68) (0,15) (0.15) (1,49) (1.49) (0,92) (0.92) A91G/L102S A91G/L102S 83 83 6 6 6 6 5 5 75 75 698 698 (0,06) (0.06) (0,03) (0.03) (0,08) (0.08) (0,90) (0.90) (0,81) (0.81) I67T/L70Q/A91G/I118V T120S I67T/L70Q/A91G/I118V T120S 530 530 98 98 160 160 5 5 1751 1751 794 794 (1,03) (1.03) (0,77) (0.77) (0,08) (0.08) (21,1) (21.1) (0,92) (0.92) L70Q/A91G/T110 A/1118 V/T 120 S/ L70Q/A91G/T110 A/1118 V/T 120 S/ 8 8 14 14 5 5 77 77 656 656 T130A T130A 531 531 (0,09) (0.09) (0,07) (0.07) (0,07) (0.07) (0,93) (0.93) (0,76) (0.76) М3 8 V/T41D/M43I/W50G/D76G/ M3 8 V/T41D/M43I/W50G/D76G/ c c Q Q Q Q 82 82 671 671 V83A/K89E/I118V/T120S/I126V/ V83A/K89E/I118V/T120S/I126V/ 532 532 T130A T130A (0,06) (0.06) (0,04) (0.04) (0,11) (0.11) (0,99) (0.99) (0,78) (0.78) V22A/L70Q/S121P V22A/L70Q/S121P 87 87 5 (0,06) 5 (0.06) 7 (0,04) 7 (0.04) 5 (0,07) 5 (0.07) 105 (1,27) 105 (1.27) 976 (1,13) 976 (1.13) Al 2V/S15F/Y31H/M3 8L/T41G/ Al 2V/S15F/Y31H/M3 8L/T41G/ 104 104 711 711 M43L/D90N/T13 0 A/P13 7L/ M43L/D90N/T13 0 A/P13 7L/ 533 533 0 0 0 0 J J N149DN152T N149DN152T (0,06) (0.06) (0,03) (0.03) (0,08) (0.08) (1,25) (1.25) (0,82) (0.82) I67F/L70R/E88G/A91G/I118V/ I67F/L70R/E88G/A91G/I118V/ 534 534 5 5 6 6 6 6 62 62 1003 1003 T120S/T130A T120S/T130A (0,05) (0.05) (0,03) (0.03) (0,08) (0.08) (0,74) (0.74) (1,16) (1.16) E24G/L25P/L70Q/A91G/1118 V/ E24G/L25P/L70Q/A91G/1118V/ 535 535 26 26 38 38 8 8 101 101 969 969 T120S/N152T T120S/N152T (0,27) (0.27) (0,18) (0.18) (0,11) (0.11) (1,21) (1.21) (1,12) (1.12) 50 50 128 128 16 16 59 59 665 665 A91G/F92L/F108L/1118 V/T 120S A91G/F92L/F108L/1118 V/T 120S 536 536 (0,53) (0.53) (0,11) (0.11) (0,71) (0.71) (0,77) (0.77) (0,61) (0.61) WT CD80 WT CD80 28 28 95 95 208 208 70 70 83 83 866 866 (1,00) (1.00) (1,00) (1.00) (1,00) (1.00) (1,00) (1.00) (1,00) (1.00)

- 142 044346- 142 044346

Таблица 9Table 9

Варианты CD80, отобранные против PD-L1.CD80 variants selected against PD-L1.

Последовательности молекул, данные связывания и данные костимулирующей биоактивностиMolecular sequences, binding data and costimulatory bioactivity data

Мутация (ии) CD 80 R29D/ Y31L/ Q33H/ K36G/M38 I/ Т41А/ M43R/ М47Т/ E81V/ L85R/K89 N/A91T/ F92P/K93 V/ R94L/ 111817 N149S R29D/ Y31L/ Q33H/ K36G/M38 1/Т41А/ M43R/ М47Т/ E81V/ L85R/K89 N/A91T/ F92P/K93 V/R94L/ N144S/ N149S Mutation(s) CD 80 R29D/ Y31L/ Q33H/ K36G/M38 I/ Т41А/ M43R/ М47Т/ E81V/ L85R/K89 N/A91T/ F92P/K93 V/ R94L/ 111817 N149S R29D/ Y31L/ Q33H/ K36G/M38 1/Т41А/ M43R/ М47Т/ E81V/ L85R/K89 N/A91T/ F92P/K93 V/R94L/ N144S/ N149S SEQ ID NO. (ECD) 92 93 SEQ ID NO. (ECD) 92 93 Связывание Binding Коиммобилизация с анти-CD3 Coimmobilization with anti-CD3 MLR MLR CD28 MFI (исходное соотношение) 1071 (0,08) 1065 (0,08) CD28 MFI (original ratio) 1071 (0.08) 1065 (0.08) CTLA-4 MFI (исходное соотношение) 1089 (0,02) 956 (0,02) CTLA-4 MFI (original ratio) 1089 (0.02) 956 (0.02) PD-L1 MFI (исходное соотношение) 37245 (2,09) 30713 (1,72) PD-L1 MFI (original ratio) 37245 (2.09) 30713 (1.72) IFN-гамма пг/мл (исходное соотношение) 387 (0,76) 400 (0,79) IFN-gamma pg/ml (initial ratio) 387 (0.76) 400 (0.79) уровни IFN-гамма пг/мл (исходное соотношение) 5028 (0,26) 7943 (0,41) IFN-gamma levels pg/ml (initial ratio) 5028 (0.26) 7943 (0.41) R29D/Y31 L/Q33H/ K36G/M38 1/Т41А/ M42T/M43 R/M47T/ E81V/L85 R/K89N/ A91T/F92P /K93V/ R94L/L148 S/N149S R29D/Y31 L/Q33H/ K36G/M38 1/Т41А/ M42T/M43 R/M47T/ E81V/L85 R/K89N/ A91T/F92P /K93V/ R94L/L148S/N149S 94 94 926 (0,07) 926 (0.07) 954 (0,02) 954 (0.02) 47072 (2,64) 47072 (2.64) 464 (0,91) 464 (0.91) 17387 (0,91) 17387 (0.91)

- 143 044346- 143 044346

E24G/R29 D/Y31L/ Q33H/K36 G/M38I/ Т41А/М43 E24G/R29 D/Y31L/ Q33H/K36 G/M38I/ T41A/M43 R/ М47Т/ F59L/E81V R/ М47Т/ F59L/E81V 1074 1074 1022 1022 1121 1121 406 406 13146 13146 УД UD (0,08) (0.08) (0,02) (0.02) (0,06) (0.06) (0,80) (0.80) (0,69) (0.69) /L85R/ /L85R/ K89N/A91 K89N/A91 T/F92P/ K93V/R94 T/F92P/ K93V/R94 L/H96R L/H96R R29D/Y31 L/ R29D/Y31 L/ Q33H/ K36G/M38 Q33H/ K36G/M38 1/Т41А/ M43R/M47 1/T41A/ M43R/M47 1018 1018 974 974 25434 25434 405 405 24029 24029 (0,08) (0.08) (0,02) (0.02) (1,43) (1.43) (0,80) (0.80) (1,25) (1.25) T/E81V/ T/E81V/ L85R/K89 L85R/K89 N/A91T/ N/A91T/ F92P/K93 V/R94L/ N149S R29V/ F92P/K93 V/R94L/ N149S R29V/ M43Q/ E81R/ L85I/K89R M43Q/ E81R/ L85I/K89R 07 07 1029 1029 996 996 1575 1575 342 342 11695 11695 /D90L/ A91E/F92 N/K93Q/ R94G /D90L/ A91E/F92 N/K93Q/ R94G (0,08) (0.08) (0,02) (0.02) (0,09) (0.09) (0,67) (0.67) (0,61) (0.61) T41I/A91G T41I/A91G по By 17890 17890 50624 50624 12562 12562 433 433 26052 26052 Уо Whoa (1,35) (1.35) (1,01) (1.01) (0,70) (0.70) (0,85) (0.85) (1,36) (1.36) E88D/K89 R/D90K/ A91G/ E88D/K89 R/D90K/ A91G/ 41687 41687 49429 49429 20140 20140 773 773 6345 6345 F92Y/K93 R/N122S/ N178S E88D/K89 R/D90K/ F92Y/K93 R/N122S/ N178S E88D/K89 R/D90K/ JJ / JJ/ (3,15) (3.15) (0,99) (0.99) (1,13) (1.13) (1,52) (1.52) (0,33) (0.33) A91G/ F92Y/ A91G/ F92Y/ 51663 51663 72214 72214 26405 26405 1125 1125 9356 9356 ЭД О ED O (3,91) (3.91) (1,44) (1.44) (1,48) (1.48) (2,21) (2.21) (0,49) (0.49) K93R K93R K36G/K37 Q/M38I/ L40M/F59 L/E81V/L8 5R/ K89N/A91 K36G/K37 Q/M38I/ L40M/F59 L/E81V/L8 5R/ K89N/A91 539 539 1298 1298 1271 1271 3126 3126 507 507 3095 3095 T/F92P/ K93V/R94 L/E99G/ T130A/N1 49S AE88D/ T/F92P/ K93V/R94 L/E99G/ T130A/N1 49S AE88D/ (0,10) (0.10) (0,03) (0.03) (0,18) (0.18) (1,00) (1.00) (0,16) (0.16) K89R/ D90K/ A91G/F92 K89R/ D90K/A91G/F92 102 102 31535 31535 50868 50868 29077 29077 944 944 5922 5922 (2,38) (2.38) (1,02) (1.02) (1,63) (1.63) (1,85) (1.85) (0,31) (0.31) Y/K93R K36G/K37 Y/K93R K36G/K37 1170 1170 1405 1405 959 959 427 427 811 811 Q/M38I/ L40M Q/M38I/ L40M 103 103 (0,09) (0.09) (0,03) (0.03) (0,05) (0.05) (0,84) (0.84) (0,04) (0.04) K36G/ K36G/ 540 540 29766 29766 58889 58889 20143 20143 699 699 30558 30558 L40M L40M (2,25) (2.25) (1,18) (1.18) (1,13) (1.13) (1,37) (1.37) (1,59) (1.59) WTCD80 WTCD80 28 28 13224 13224 50101 50101 17846 17846 509 509 19211 19211 (1,00) (1.00) (1,00) (1.00) (1,00) (1.00) (1,00) (1.00) (1,00) (1.00)

Пример 8.Example 8.

Получение и оценка стековых молекул, содержащих различные домены с модифицированной аффинностью.Preparation and evaluation of stacking molecules containing various affinity-modified domains.

В этом примере дополнительно описаны иммуномодулирующие белки, которые были созданы вThis example further describes immunomodulatory proteins that have been created in

- 144 044346 виде стековых конструкций, содержащих, по меньшей мере, два различных домена с модифицированной аффинностью из идентифицированных вариантных полипептидов ICOSL и еще один дополнительный вариант молекул CD80, CD86, ICOSL и NKp30, связанных между собой и слитых с Fc.- 144 044346 in the form of stacked constructs containing at least two different affinity-modified domains from identified variant ICOSL polypeptides and one additional variant of the CD80, CD86, ICOSL and NKp30 molecules linked to each other and fused to Fc.

Отобранные вариантные молекулы, описанные выше, которые были модифицированы по аффинности к одному или нескольким контрструктурным лигандам, использовали для получения стековой молекулы (т.е. иммуномодулирующего белка типа II), содержащей два или более доменов IgSF с модифицированной аффинностью. Стековые конструкции были получены в виде генных блоков (Integrated DNA Technologies, Коралвилл, Айова), которые кодируют стек в формате, который позволяет его слияние с Fc с помощью стандартной сборки Gibson с использованием сборочного набора Gibson (New England Biolabs).Selected variant molecules described above that were modified in affinity for one or more counterstructure ligands were used to prepare a stack molecule (ie, type II immunomodulatory protein) containing two or more affinity-modified IgSF domains. Stack constructs were generated as gene blocks (Integrated DNA Technologies, Coralville, Iowa) that encode the stack in a format that allows its fusion to Fc by standard Gibson assembly using the Gibson assembly kit (New England Biolabs).

Кодирующую нуклеотидную молекулу всех стеков получали для кодирования белка, сконструированного следующим образом: сигнальный пептид, за которым следует первый вариант IgV, за которым следует 15 аминокислотный линкер, который состоит из трех мотивов GGGGS (G4S) (SEQ ID NO: 228), за которым следует второй IgV, за которым следуют два линкера GGGGS (SEQ ID NO: 229), за которыми следуют три аланина (AAA), за которыми следует человеческий IgG1 Fc, как описано выше. Чтобы максимизировать вероятность правильного сворачивания доменов IgV в каждом стеке, первому IgV предшествовали все остатки, которые обычно встречаются в белке дикого типа между этим IgV и сигнальным пептидом (лидерная последовательность). Аналогичным образом, за первым IgV следовали все остатки, которые обычно связывают его в белке дикого типа, либо со следующим доменом Ig (обычно с доменом IgC), либо если такой второй домен IgV отсутствует, остатки, которые соединяют его с трансмембранным доменом (трейлерная последовательность). Тот же принцип дизайна был применен ко второму домену IgV, за исключением того, что, когда оба домена IgV были получены из одного и того же родительского белка (например, CD80 IgV в стеке с другим CD80 IgV), линкер между ними не дублировался.The coding nucleotide molecule of all stacks was prepared to encode a protein constructed as follows: a signal peptide followed by the first IgV variant, followed by a 15 amino acid linker that consists of three GGGGS (G4S) motifs (SEQ ID NO: 228), followed by followed by a second IgV, followed by two GGGGS linkers (SEQ ID NO: 229), followed by three alanines (AAA), followed by a human IgG1 Fc, as described above. To maximize the likelihood of correct folding of the IgV domains in each stack, the first IgV was preceded by all residues that are normally found in the wild-type protein between that IgV and the signal peptide (leader sequence). Likewise, the first IgV was followed by all the residues that normally bind it in the wild-type protein, either to the next Ig domain (usually the IgC domain) or, if such a second IgV domain is absent, to the residues that connect it to the transmembrane domain (trailer sequence ). The same design principle was applied to the second IgV domain, except that when both IgV domains were derived from the same parent protein (e.g., IgV CD80 stacked with another IgV CD80), the linker between them was not duplicated.

В табл. 10 представлен дизайн примерных стековых конструкций. Примерные стековые молекулы, показанные в табл. 10, содержат домены Ig (например, домен IgV), как указано, и дополнительно трейлерные последовательности, как описано выше. В таблице представлены следующие компоненты: сигнальный пептид (SP, SEQ ID NO: 225), домен Ig 1 (например, Ig1), трейлерная последовательность 1 (TS1), линкер 1 (LR1, SEQ ID NO: 228), Ig-домен 2 (Ig2), трейлерная последовательность 2 (TS2), линкер 2 (LR2, SEQ ID NO: 230) и Fc-домен (SEQ ID NO: 226, содержащий аминокислотную замену C5S/R77C/N82G/V87C). В некоторых случаях между сигнальным пептидом и IgV1 присутствует лидерная последовательность 1 (LS1), и в некоторых случаях между линкером и IgV2 присутствует лидерная последовательность 2 (LS2).In table Figure 10 shows the design of exemplary stack structures. Exemplary stacking molecules shown in Table. 10 contain Ig domains (eg, IgV domain) as indicated, and additionally trailer sequences as described above. The table shows the following components: signal peptide (SP, SEQ ID NO: 225), Ig domain 1 (for example, Ig1), trailer sequence 1 (TS1), linker 1 (LR1, SEQ ID NO: 228), Ig domain 2 (Ig2), trailer sequence 2 (TS2), linker 2 (LR2, SEQ ID NO: 230) and Fc domain (SEQ ID NO: 226, containing the amino acid substitution C5S/R77C/N82G/V87C). In some cases, leader sequence 1 (LS1) is present between the signal peptide and IgV1, and in some cases, leader sequence 2 (LS2) is present between the linker and IgV2.

Таблица 10Table 10

Аминокислотная последовательность (SEQ ID NO) компонентов примерных стековых конструкцийAmino acid sequence (SEQ ID NO) of components of exemplary stacking constructs

SP SP Первый домен First domain LR 1 LR 1 Второй домен Second domain LR2 LR2 Fc Fc LSI LSI Igl Igl TSI TSI LS2 LS2 Ig2 Ig2 TS2 TS2 Домен 1: NKp30 WT Домен 2: ICOSL WT Domain 1: NKp30 WT Domain 2: ICOSL WT + + - - 214 214 235 235 + + - - 196 196 233 233 + + + + Домен 1: NKp30 L30V/A60V/S6 4P/S86G Домен 2: ICOSL N52S/N57Y/H9 4D/L96F/L98F/ Q100R Domain 1: NKp30 L30V/A60V/S6 4P/S86G Domain 2: ICOSL N52S/N57Y/H9 4D/L96F/L98F/ Q100R + + - - 215 215 235 235 + + - - 212 212 233 233 + + + + Домен 1: NKp30 L30V/A60V/S6 4P/S86G) Domain 1: NKp30 L30V/A60V/S6 4P/S86G) + + - - 215 215 235 235 + + - - 199 199 233 233 + +

- 145 044346- 145 044346

Домен 2: ICOSL N52D Domain 2: ICOSL N52D Домен 1: NKp30 L30V/A60V/S6 4P/S86G Домен 2: ICOSL N52H/N57Y/Q1 OOP Domain 1: NKp30 L30V/A60V/S6 4P/S86G Domain 2: ICOSL N52H/N57Y/Q1 OOP + + - - 215 215 235 235 + + - - 201 201 233 233 + + + + Домен 1: ICOSL WT Домен 2: Nkp30 WT Domain 1: ICOSL WT Domain 2: Nkp30 WT + + - - 196 196 233 233 + + - - 214 214 235 235 + + + + Домен 1: ICOSL N52D Домен 2: NKp30 L30V/A60V/S6 4P/S86G Domain 1: ICOSL N52D Domain 2: NKp30 L30V/A60V/S6 4P/S86G + + - - 199 199 233 233 + + - - 215 215 235 235 + + + + Домен 1: ICOSL N52H/N57Y/Q1 OOP Домен 2: NKp30 L30V/A60V/S6 4P/S86G Domain 1: ICOSL N52H/N57Y/Q1 OOP Domain 2: NKp30 L30V/A60V/S6 4P/S86G + + - - 201 201 233 233 + + - - 215 215 235 235 + + Домен 1: CD80 WT Домен 2: ICOSL WT Domain 1: CD80 WT Domain 2: ICOSL WT + + - - 152 152 471 471 + + - - 196 196 233 233 + + Домен 1: CD80 E88D/K89R/D9 0K/A91G/F92Y/ K93R Домен 2: ICOSL N52S/N57Y/H9 4D/L96F/L98F/ Q100R/G103E/ F120S Domain 1: CD80 E88D/K89R/D9 0K/A91G/F92Y/ K93R Domain 2: ICOSL N52S/N57Y/H9 4D/L96F/L98F/ Q100R/G103E/ F120S + + - - 189 189 471 471 + + - - 213 213 233 233 + + Домен 1: CD80 A12T/H18L/M4 3V/F59L/E77K/ P109S/I118T Домен 2: ICOSL Domain 1: CD80 A12T/H18L/M4 3V/F59L/E77K/ P109S/I118T Domain 2: ICOSL + + - - 193 193 471 471 + + - - 213 213 233 233 + +

- 146 044346- 146 044346

N52S/N57Y/H9 4D/L96F/L98F/ Q100R/G103E/ F120S N52S/N57Y/H9 4D/L96F/L98F/ Q100R/G103E/ F120S Домен 1: CD80 A12T/H18L/M4 3V/F59L/E77K/ P109S/I118Т Домен 2: ICOSL N52D Domain 1: CD80 A12T/H18L/M4 3V/F59L/E77K/ P109S/I118T Domain 2: ICOSL N52D + + - - 193 193 471 471 + + - - 199 199 233 233 + + Домен 1: CD80 E88D/K89R/D9 0K/A91G/F92Y/ K93R Домен 2: ICOSL N52H/N57Y/Q1 OOP Domain 1: CD80 E88D/K89R/D9 0K/A91G/F92Y/ K93R Domain 2: ICOSL N52H/N57Y/Q1 OOP + + - - 189 189 471 471 + + - - 201 201 233 233 + + Домен 1: CD80 A12T/H18L/M4 3V/F59L/E77K/ P109S/I118Т Домен 2: ICOSL N52H/N57Y/Q1 OOP Domain 1: CD80 A12T/H18L/M4 3V/F59L/E77K/ P109S/I118T Domain 2: ICOSL N52H/N57Y/Q1 OOP + + - - 193 193 471 471 + + - - 201 201 233 233 + + Домен 1: ICOSL WT Домен 2: CD80 WT Domain 1: ICOSL WT Domain 2: CD80 WT + + - - 196 196 233 233 + + - - 152 152 471 471 + + Домен 1: ICOSL N52S/N57Y/H9 4D/L96F/L98F/ Q100R/G103E/ F120S Домен 2: CD80 E88D/K89R/D9 0K/A91G/F92Y/ K93R Domain 1: ICOSL N52S/N57Y/H9 4D/L96F/L98F/ Q100R/G103E/ F120S Domain 2: CD80 E88D/K89R/D9 0K/A91G/F92Y/ K93R + + - - 213 213 233 233 + + - - 189 189 471 471 + + Домен 1: ICOSL N52S/N57Y/H9 4D/L96F/L98F/ Q100R/G103E/ F120S Домен 2: CD80 Domain 1: ICOSL N52S/N57Y/H9 4D/L96F/L98F/ Q100R/G103E/ F120S Domain 2: CD80 + + - - 213 213 233 233 + + - - 193 193 471 471 + +

- 147 044346- 147 044346

A12T/H18L/M4 3V/F59L/E77K/ P109S/I118T A12T/H18L/M4 3V/F59L/E77K/ P109S/I118T Домен 1: ICOSL N52D Домен 2: CD80 E88D/K89R/D9 0K/A91G/F92Y/ K93R Domain 1: ICOSL N52D Domain 2: CD80 E88D/K89R/D9 0K/A91G/F92Y/ K93R + + - - 199 199 233 233 + + - - 189 189 471 471 + + Домен 1: ICOSL N52D Домен 2: CD80 A12T/H18L/M4 3V/F59L/E77K/ P109S/I118Т Domain 1: ICOSL N52D Domain 2: CD80 A12T/H18L/M4 3V/F59L/E77K/ P109S/I118Т + + - - 199 199 233 233 + + - - 193 193 471 471 + + Домен 1: ICOSL N52H/N57Y/Q1 OOP Домен 2: CD80 E88D/K89R/D9 0K/A91G/F92Y/ K93R Domain 1: ICOSL N52H/N57Y/Q1 OOP Domain 2: CD80 E88D/K89R/D9 0K/A91G/F92Y/ K93R + + - - 201 201 233 233 + + - - 189 189 471 471 + + + + Домен 1: ICOSL N52H/N57Y/Q1 OOP Домен 2: CD80 A12T/H18L/M4 3V/F59L/E77K/ P109S/I118Т Domain 1: ICOSL N52H/N57Y/Q1 OOP Domain 2: CD80 A12T/H18L/M4 3V/F59L/E77K/ P109S/I118T + + - - 201 201 233 233 + + - - 193 193 471 471 + + + + Домен 1: CD86 WT Домен 2: ICOSL WT Domain 1: CD86 WT Domain 2: ICOSL WT + + 236 236 220 220 237 237 + + - - 196 196 233 233 + + Домен 1: CD80 R29H/Y31H/T4 1G/Y87N/E88G /K89E/D90N/A 91G/P109S Домен 2: ICOSL N52S/N57Y/H9 4D/L96F/L98F/ Q100R/G103E/ F120S Domain 1: CD80 R29H/Y31H/T4 1G/Y87N/E88G /K89E/D90N/A 91G/P109S Domain 2: ICOSL N52S/N57Y/H9 4D/L96F/L98F/ Q100R/G103E/ F120S + + - - 192 192 471 471 + + - - 213 213 233 233 + +

- 148 044346- 148 044346

Домен 1: CD80 I67T/L70Q/A91 G/T120S Домен 2: ICOSL N52S/N57Y/H9 4D/L96F/L98F/ Q100R/G103E/ F120S Domain 1: CD80 I67T/L70Q/A91 G/T120S Domain 2: ICOSL N52S/N57Y/H9 4D/L96F/L98F/ Q100R/G103E/ F120S + + - - 175 175 471 471 + + - - 213 213 233 233 + + + + Домен 1: CD80 R29H/Y31H/T4 1G/Y87N/E88G /K89E/D90N/A 91G/P109S Домен 2: ICOSL N52D Domain 1: CD80 R29H/Y31H/T4 1G/Y87N/E88G /K89E/D90N/A 91G/P109S Domain 2: ICOSL N52D + + - - 192 192 471 471 + + - - 199 199 233 233 + + + + Домен 1: CD80 I67T/L70Q/A91 G/T120S Домен 2: ICOSL N52D Domain 1: CD80 I67T/L70Q/A91 G/T120S Domain 2: ICOSL N52D + + - - 175 175 471 471 + + - - 199 199 233 233 + + + + Домен 1: CD80 R29H/Y31H/T4 1G/Y87N/E88G /K89E/D90N/A 91G/P109S Домен 2: ICOSL N52H/N57Y/Q1 OOP Domain 1: CD80 R29H/Y31H/T4 1G/Y87N/E88G /K89E/D90N/A 91G/P109S Domain 2: ICOSL N52H/N57Y/Q1 OOP + + - - 192 192 471 471 + + - - 201 201 233 233 + + + + Домен 1: CD80 I67T/L70Q/A91 G/T120S Домен 2: ICOSL N52H/N57Y/Q1 OOP Domain 1: CD80 I67T/L70Q/A91 G/T120S Domain 2: ICOSL N52H/N57Y/Q1 OOP + + - - 175 175 471 471 + + - - 201 201 233 233 + + Домен 1: CD86 Q35H/H90L/Q1 02Н Домен 2: ICOSL N52S/N57Y/H9 4D/L96F/L98F/ Q100R/G103E/ F120S Domain 1: CD86 Q35H/H90L/Q1 02H Domain 2: ICOSL N52S/N57Y/H9 4D/L96F/L98F/ Q100R/G103E/ F120S + + 236 236 221 221 237 237 + + - - 213 213 233 233 + +

- 149 044346- 149 044346

Домен 1: CD86 Q35H/H90L/Q1 02Н Домен 2: ICOSL N52D Domain 1: CD86 Q35H/H90L/Q1 02H Domain 2: ICOSL N52D + + 236 236 221 221 237 237 + + - - 199 199 233 233 + + Домен 1: CD86 Q35H/H90L/Q1 02Н Домен 2: ICOSL N52H/N57Y/Q1 OOP Domain 1: CD86 Q35H/H90L/Q1 02H Domain 2: ICOSL N52H/N57Y/Q1 OOP + + 236 236 221 221 237 237 + + - - 201 201 233 233 + + Домен 1: ICOSL WT Домен 2: CD86 WT Domain 1: ICOSL WT Domain 2: CD86 WT + + - - 196 196 233 233 + + 236 236 220 220 237 237 + + Домен 1 ; ICOSL N52S/N57Y/H9 4D/L96F/L98F/ Q100R/G103E/ F120S Домен 2: CD80 R29H/Y31H/T4 1G/Y87N/E88G /K89E/D90N/A 91G/P109S Domain 1; ICOSL N52S/N57Y/H9 4D/L96F/L98F/ Q100R/G103E/ F120S Domain 2: CD80 R29H/Y31H/T4 1G/Y87N/E88G /K89E/D90N/A 91G/P109S + + - - 213 213 233 233 + + - - 192 192 471 471 + + Домен 1: ICOSL N52S/N57Y/H9 4D/L96F/L98F/ Q100R/G103E/ F120S Домен 2: CD80 I67T/L70Q/A91 G/T120S Domain 1: ICOSL N52S/N57Y/H9 4D/L96F/L98F/ Q100R/G103E/ F120S Domain 2: CD80 I67T/L70Q/A91 G/T120S + + - - 213 213 233 233 + + - - 175 175 471 471 + + + + Домен 1: ICOSL N52D Домен 2: CD80 R29H/Y31H/T4 1G/Y87N/E88G /K89E/D90N/A 91G/P109S Domain 1: ICOSL N52D Domain 2: CD80 R29H/Y31H/T4 1G/Y87N/E88G /K89E/D90N/A 91G/P109S + + - - 199 199 233 233 + + - - 192 192 471 471 + + + + Домен 1: ICOSL N52D Domain 1: ICOSL N52D + + - - 199 199 233 233 + + - - 175 175 471 471 + + + +

- 150 044346- 150 044346

Домен 2: CD80 I67T/L70Q/A91 G/T120S Domain 2: CD80 I67T/L70Q/A91 G/T120S Домен 1: ICOSL N52H/N57Y/Q1 OOP Домен 2: CD80 R29H/Y31H/T4 1G/Y87N/E88G /K89E/D90N/A 91G/P109S Domain 1: ICOSL N52H/N57Y/Q1 OOP Domain 2: CD80 R29H/Y31H/T4 1G/Y87N/E88G /K89E/D90N/A 91G/P109S + + - - 201 201 233 233 + + - - 192 192 471 471 + + + + Домен 1: ICOSL N52S/N57Y/H9 4D/L96F/L98F/ Q100R/G103E/ F120S Домен 2: CD86 Q35H/H90L/Q1 02Н Domain 1: ICOSL N52S/N57Y/H9 4D/L96F/L98F/ Q100R/G103E/ F120S Domain 2: CD86 Q35H/H90L/Q1 02H + + - - 213 213 233 233 + + 236 236 221 221 237 237 + + + + Домен 1: ICOSL N52D Домен 2: CD86 Q35H/H90L/Q1 02Н Domain 1: ICOSL N52D Domain 2: CD86 Q35H/H90L/Q1 02H + + - - 199 199 233 233 + + 236 236 221 221 237 237 + + + +

Домен 1:Domain 1:

ICOSLICOSL

N52H/N57Y/Q1 00Р N52H/N57Y/Q1 00Р + + 201 201 233 233 + + 236 236 221 221 237 237 + +

Домен 2: CD86 Q35H/H90L/Q1 02НDomain 2: CD86 Q35H/H90L/Q1 02H

Крупномасштабную экспрессию и очистку вариантных гибридных молекул IgV-в стеке-Fc, содержащих различные комбинации вариантных доменов IgV из CD80, CD86, ICOSL или Nkp30, содержащих, по меньшей мере, один домен IgV с модифицированной аффинностью, проводили, как описано в примере 5. Связывание вариантных гибридных молекул IgV-в стеке-Fc с соответствующими контрструктурами и функциональную активность с помощью анализа коиммобилизации с анти-CD3 также оценивали, как описано в примере 6. Например, костимулирующую биоактивность гибридных стековых белков IgSF Fc определяли в аналогичном анализе с иммобилизованными анти-CD3, как описано выше. В этом случае 4 нМ анти-CD3 (OKT3, Biolegend, США) коиммобилизовали с 4 нМ -120 нМ человеческого rB7-H6.Fc (R & D Systems, США) или человеческого rPD-L1.Fc (R & D Systems, США) в течение ночи в 96-луночных обработанных планшетах для тканевых культур (Corning, США). На следующий день несвязанный белок смывали PBS и 100000 очищенных пан-Т-клеток добавляли в каждую лунку в 100 мкл среды Ex-Vivo 15 (Lonza, Швейцария). Стековые домены IgSF затем добавляли в концентрациях от 8 нМ до 40 нМ в объеме 100 мкл до общего объема 200 мкл. Клетки культивировали за 3 дня до сбора культуральных надосадочных жидкостей и измерения уровней IFN-гамма человека с помощью набора Duoset ELISA (R & D Systems, США), как упомянуто выше.Large-scale expression and purification of variant stacked-Fc IgV fusion molecules containing various combinations of variant IgV domains from CD80, CD86, ICOSL, or Nkp30 containing at least one affinity-modified IgV domain was performed as described in Example 5. Binding of variant IgV-stack-Fc fusion molecules to the corresponding counterstructures and functional activity using an anti-CD3 co-immobilization assay were also assessed as described in Example 6. For example, the co-stimulatory bioactivity of the IgSF Fc stack fusion proteins was determined in a similar anti-CD3 immobilization assay. CD3 as described above. In this case, 4 nM anti-CD3 (OKT3, Biolegend, USA) was coimmobilized with 4 nM -120 nM human rB7-H6.Fc (R&D Systems, USA) or human rPD-L1.Fc (R&D Systems, USA ) overnight in 96-well treated tissue culture plates (Corning, USA). The next day, unbound protein was washed away with PBS and 100,000 purified pan-T cells were added to each well in 100 μl of Ex-Vivo 15 medium (Lonza, Switzerland). IgSF stack domains were then added at concentrations ranging from 8 nM to 40 nM in a volume of 100 μL for a total volume of 200 μL. Cells were cultured 3 days before collecting culture supernatants and measuring human IFN-gamma levels using a Duoset ELISA kit (R&D Systems, USA) as mentioned above.

Результаты приведены в табл. 11-13. В частности, в табл. 11 приведены результаты связывания и функциональной активности вариантных гибридных молекул IgV-в стеке Fc, содержащих домен NKp30 IgV и домен ICOSL IgV. В табл. 12 и 13 представлены результаты связывания и функциональной активности для вариантных гибридных молекул с IgV-в стеке-Fc, содержащих вариантный домен ICOSL IgV и вариантные домены Ig80 IgV или CD86 IgV.The results are shown in table. 11-13. In particular, in table. Figure 11 shows the binding and functional activity results of variant IgV-Fc stack hybrid molecules containing the IgV NKp30 domain and the IgV ICOSL domain. In table 12 and 13 present binding and functional activity results for variant stacked-Fc IgV fusion molecules containing a variant ICOSL domain of IgV and variant Ig80 IgV or CD86 IgV domains.

Для каждой из табл. 11-13 в столбце 1 показана структурная организация и ориентация доменов в стеке с модифицированной аффинностью или доменов дикого типа (WT), с аминоконцевым (Nконцевым) доменом, за которым следует средний домен WT или домен с модифицированной аффинностью, расположенных перед C-концевыми доменами человеческого IgG1 Fc. Столбец 2 показывает идентификатор SEQ ID NO для последовательности каждого домена IgV, содержащегося в соответствующей молекуле в стеке. В столбце 3 показаны партнеры по связыванию, против которых были отобраны указанные стековые домены с модифицированной аффинностью из столбца 1.For each of the tables. 11-13 Column 1 shows the structural organization and orientation of domains in a stack of affinity-modified or wild-type (WT) domains, with the amino-terminal (N-terminal) domain followed by the middle WT or affinity-modified domain located before the C-terminal domains human IgG1 Fc. Column 2 shows the SEQ ID NO for the sequence of each IgV domain contained in the corresponding molecule in the stack. Column 3 shows the binding partners against which the indicated affinity-modified stacking domains from column 1 were selected.

Также показана активность связывания, измеренная по значению средней интенсивности флуоресценции (MFI) для связывания каждой стековой молекулы, с клетками, сконструированными для экспрессии различных контрструктурных лигандов и соотношение MFI по сравнению со связыванием соответAlso shown is the binding activity, measured by the mean fluorescence intensity (MFI) value for binding of each stacked molecule, to cells engineered to express different counterstructure ligands and the ratio of MFI versus binding corresponding

- 151 044346 ствующей стековой молекулы, содержащей референсные (например, немодифицированные) домены IgV, которые не включают аминокислотную замену(ы), с тем же самым контрструктурным лигандом, экспрессируемым клетками. Функциональная активность вариантных стековых молекул для модуляции активности Т-клеток также показана на основе рассчитанных уровней IFN-гамма в культуральных надосадочных жидкостях (пг/мл), полученных с помощью указанной вариантной стековой молекулы и соответствующего лиганда, ко иммобилизованного с анти-СПЗ, как описано в примере 6. В таблицах также отображено соотношение IFN-гамма, продуцируемого каждой вариантной стековой молекулой по сравнению с соответствующей референсной (например, немодифицированной) стековой молекулой в анализе коиммобилизации.- 151 044346 a stacking molecule containing reference (eg, unmodified) IgV domains that do not include amino acid substitution(s), with the same counterstructural ligand expressed by the cells. The functional activity of the variant stack molecules to modulate T cell activity is also shown based on the calculated levels of IFN-γ in culture supernatants (pg/ml) obtained with the indicated variant stack molecule and the corresponding ligand co-immobilized with anti-SPZ as described in Example 6. The tables also display the ratio of IFN-gamma produced by each variant stack molecule compared to the corresponding reference (eg, unmodified) stack molecule in the coimmobilization assay.

Как показано, результаты продемонстрировали, что возможно создание стековых молекул, содержащих, по меньшей мере, одни вариантные домены IgSF, которые обладают активностью с модифицированной аффинностью повышенного связывания, по меньшей мере, с одним когнатным контрструктурным лигандом по сравнению с соответствующей стековой молекулой, содержащей аналогичный референсный (например, дикого типа или немодифицированный) домен IgV. В некоторых случаях стековая молекула, либо из одного, либо из комбинации обоих вариантных доменов IgSF в молекуле, демонстрирует повышенное связывание более чем с одним когнатным контрструктурным лигандом. Результаты также показали, что порядок доменов IgV в стековых молекулах может в некоторых случаях изменять степень повышенной активности связывания. В некоторых случаях активность функциональных Тклеток также была изменена при оценке в целевом коиммобилизационном анализе.As shown, the results demonstrated that it is possible to create stack molecules containing at least one variant IgSF domains that have modified, increased binding affinity activity to at least one cognate counterstructure ligand compared to a corresponding stack molecule containing the same reference (eg, wild-type or unmodified) IgV domain. In some cases, a stacked molecule, either from one or a combination of both variant IgSF domains in the molecule, exhibits increased binding to more than one cognate counterstructure ligand. The results also showed that the order of IgV domains in stacked molecules may, in some cases, alter the extent of increased binding activity. In some cases, the activity of functional T cells was also altered when assessed in a targeted co-immobilization assay.

Таблица 11Table 11

Стековые вариантные гибридные белки IgV Fc, включающие домен NKp30 IgV и домен ICOSL IgVStacked variant IgV Fc fusion proteins including the IgV NKp30 domain and the IgV ICOSL domain

Структура Домена от N-конца к Сконцу: домен 1/домен 2/Fc Domain structure from N-end to End: domain 1/domain 2/Fc SEQ ID NO. (домен ig) SEQ ID NO. (domain ig) Контрструктура, отобранная против Counterstructure selected against Активность связывания Binding activity Анализ коиммобилизации с анти-СВЗ пг/мл IFN- гамма (соотношение IFN-гамма к исходному дикому типу) Coimmobilization assay with anti-SVZ pg/ml IFN- gamma (ratio of IFN-gamma to wild type parent) B7H6 MFI (соотношение MFI к исходному дикому типу) B7H6 MFI (ratio of MFI to original wild type) ICOS MFI (соотношение MFI к исходному дикому типу) ICOS MFI (ratio of MFI to original wild type) CD28 MFI (соотношение MFI к исходному дикому типу) CD28 MFI (ratio of MFI to original wild type) Домен 1: NKp30 WT Домен 2: ICOSL WT Domain 1: NKp30 WT Domain 2: ICOSL WT 214 196 214 196 - - 64538 (1,00) 64538 (1.00) 26235 (1,00) 26235 (1.00) 6337 (1,00) 6337 (1.00) 235 (1,00) 235 (1.00) Домен 1: NKp30 L30V/A60V/S64P/S8 6G Домен 2: ICOSL N52S N57Y H94D L96F L98FQ100R Domain 1: NKp30 L30V/A60V/S64P/S8 6G Domain 2: ICOSL N52S N57Y H94D L96F L98FQ100R 215 212 215 212 B7-H6 ICOSCD28 B7-H6 ICOSCD28 59684 (0,92) 59684 (0.92) 12762 (0,49) 12762 (0.49) 9775 (1,54) 9775 (1.54) 214 (0,91) 214 (0.91) Домен 1: NKp30 L30V/A60V/S64P/S8 6G Домен 2: ICOSL N52D Domain 1: NKp30 L30V/A60V/S64P/S8 6G Domain 2: ICOSL N52D 215 199 215 199 B7-H6 ICOSCD28 B7-H6 ICOSCD28 65470 (1,01) 65470 (1.01) 30272 (1,15) 30272 (1.15) 9505 (1,50) 9505 (1.50) 219 (0,93) 219 (0.93) Домен 1: NKp30 L30V/A60V/S64P/S8 6G Домен 2: ICOSL N52H N57YQ100P Domain 1: NKp30 L30V/A60V/S64P/S8 6G Domain 2: ICOSL N52H N57YQ100P 215 201 215 201 B7-H6 ICOSCD28 B7-H6 ICOSCD28 38153 (0,59) 38153 (0.59) 27903 (1,06) 27903 (1.06) 11300 (1,78) 11300 (1.78) 189 (0,80) 189 (0.80) Домен 1: ICOSL WT Домен 2: Nkp30 WT Domain 1: ICOSL WT Domain 2: Nkp30 WT 196 214 196 214 117853 (1,0) 117853 (1.0) 70320 (1,0) 70320 (1.0) 7916 (1,0) 7916 (1.0) 231 (1,0) 231 (1.0) Домен LICOSL N52D Домен 2: NKp30 L30V/A60V/S64P/S8 6G Domain LICOSL N52D Domain 2: NKp30 L30V/A60V/S64P/S8 6G 199 215 199 215 ICOSCD28 B7-H6 ICOSCD28 B7-H6 100396 (0,85) 100396 (0.85) 83912 (1,19) 83912 (1.19) 20778 (2,62) 20778 (2.62) 228 (0,98) 228 (0.98) Домен 1: ICOSL N52H/N57Y/Q100P Домен 2: NKp30 L30V/A60V/S64P/S8 6G Domain 1: ICOSL N52H/N57Y/Q100P Domain 2: NKp30 L30V/A60V/S64P/S8 6G 201 215 201 215 ICOSCD28 B7-H6 ICOSCD28 B7-H6 82792 (0,70) 82792 (0.70) 68874 (0,98) 68874 (0.98) 72269 (9,12) 72269 (9.12) 561 (2,43) 561 (2.43)

- 152044346- 152044346

Таблица 12Table 12

Стековые вариантные гибридные белки IgV Fc, включающие домен CD80 IgV и домен ICOSL IgVIgV Fc stack variant fusion proteins comprising the IgV CD80 domain and the IgV ICOSL domain

Активность связывания Binding activity Анализ Analysis Структура Домена от N-конца к Сконцу: домен 1/домен 2/Fc Domain structure from N-end to End: domain 1/domain 2/Fc SEQ ID NO. (домен ig) SEQ ID NO. (domain ig) Контрструктура, отобранная против Counterstructure selected against CD28 MFI (соотно шение MFI к исходному дикому типу) CD28 MFI (ratio of MFI to original wild type) PD-L1 MFI (соотно шение MFI к исходному дикому типу) PD-L1 MFI (ratio of MFI to original wild type) ICOS MFI (соотнош ение MFI к исходному дикому типу) ICOS MFI (ratio of MFI to original wild type) коиммобилизац ии с anrn-CD3 пг/мл IFN- гамма (соотношение IFN-гамма к исходному дикому типу) coimmobilization with anrn-CD3 pg/ml IFN- gamma (ratio of IFN-gamma to wild type parent) Домен 1: CD80WT Домен 2: ICOSL WT Domain 1: CD80WT Domain 2: ICOSL WT 152 196 152 196 1230 (1,00) 1230 (1.00) 2657 (1,00) 2657 (1.00) 11122 (1,00) 11122 (1.00) 69 (1,00) 69 (1.00) Домен 1: CD80 E88D/K89R/D90K/A 91G/F92Y/K93R Домен 2: ICOSL N52S/N57Y/H94D/L9 6F/L98F/Q100R/G103 E/F120S Domain 1: CD80 E88D/K89R/D90K/A 91G/F92Y/K93R Domain 2: ICOSL N52S/N57Y/H94D/L9 6F/L98F/Q100R/G103 E/F120S 189 213 189 213 PD-L1 ICOS/CD 28 PD-L1 ICOS/CD 28 3383 (2,75) 3383 (2.75) 4515 (1,70) 4515 (1.70) 5158 (0,46) 5158 (0.46) 90 (1,30) 90 (1.30) Домен 1: CD80 A12T/H18L/M43V/F5 9L/E77K/P109S/I118 Т Домен 2: ICOSL N52S/N57Y/H94D/L9 6F/L98F/Q100R/G103 E/F120S Domain 1: CD80 A12T/H18L/M43V/F5 9L/E77K/P109S/I118 T Domain 2: ICOSL N52S/N57Y/H94D/L9 6F/L98F/Q100R/G103 E/F120S 193 213 193 213 PD-L1 ICOS/CD 28 PD-L1 ICOS/CD 28 2230 (1,81) 2230 (1.81) 2148 (0,81) 2148 (0.81) 3860 (0,35) 3860 (0.35) 112 (1,62) 112 (1.62) Домен 1: CD80 A12T/H18L/M43V/F5 9L/E77K/P109S/I118 Т Домен 2: ICOSL N52D Domain 1: CD80 A12T/H18L/M43V/F5 9L/E77K/P109S/I118 T Domain 2: ICOSL N52D 193 199 193 199 PD-L1 ICOS/CD 28 PD-L1 ICOS/CD 28 5665 (4,61) 5665 (4.61) 6446 (2,43) 6446 (2.43) 15730 (1,41) 15730 (1.41) 126 (1,83) 126 (1.83)

- 153 044346- 153 044346

Домен 1: CD80 E88D/K89R/D90K/A 91G/F92Y/K93R Домен 2: ICOSL N52H/N57Y/Q100P Domain 1: CD80 E88D/K89R/D90K/A 91G/F92Y/K93R Domain 2: ICOSL N52H/N57Y/Q100P 189 201 189 201 PD-L1 ICOS/CD 28 PD-L1 ICOS/CD 28 6260 (5,09) 6260 (5.09) 4543 (1,71) 4543 (1.71) 11995 (1,08) 11995 (1.08) 269 (3,90) 269 (3.90) Домен 1: CD80 A12T/H18L/M43V/F5 9L/E77K/P109S/ I118T Домен 2: ICOSL N52H/N57Y/Q100P Domain 1: CD80 A12T/H18L/M43V/F5 9L/E77K/P109S/ I118T Domain 2: ICOSL N52H/N57Y/Q100P 193 201 193 201 PD-L1 ICOS/CD 28 PD-L1 ICOS/CD 28 3359 (2,73) 3359 (2.73) 3874 (1,46) 3874 (1.46) 8541 (0,77) 8541 (0.77) 97 (1,41) 97 (1.41) Домен 1: ICOSL WT Домен 2: CD80 WT Domain 1: ICOSL WT Domain 2: CD80 WT 196 152 196 152 3000 (1,00) 3000 (1.00) 2966 (1,00) 2966 (1.00) 14366 (1,00) 14366 (1.00) 101 (1,00) 101 (1.00) Домен 1: ICOSL N52S/N57Y/H94D/L9 6F/L98F/Q100R/G103 E/F120S Домен 2: CD80 E88D/K89R/D90K/A 91G/F92Y/K93R Domain 1: ICOSL N52S/N57Y/H94D/L9 6F/L98F/Q100R/G103 E/F120S Domain 2: CD80 E88D/K89R/D90K/A 91G/F92Y/K93R 213 189 213 189 ICOS/CD 28 PD-L1 ICOS/CD 28 PD-L1 3634 (1,21) 3634 (1.21) 4893 (1,65) 4893 (1.65) 6403 (0,45) 6403 (0.45) 123 (1,22) 123 (1.22) Домен 1: ICOSL N52S/N57Y/H94D/L9 6F/L98F/Q100R/G103 E/F120S Домен 2: CD80 A12T/H18L/M43V/F5 9L/E77K/P109S/ I118T Domain 1: ICOSL N52S/N57Y/H94D/L9 6F/L98F/Q100R/G103 E/F120S Domain 2: CD80 A12T/H18L/M43V/F5 9L/E77K/P109S/ I118T 213 193 213 193 ICOS/CD 28 PD-L1 ICOS/CD 28 PD-L1 1095 (0,37) 1095 (0.37) 5929 (2,0) 5929 (2.0) 7923 (0,55) 7923 (0.55) 127 (1,26) 127 (1.26) Домен 1: ICOSL N52D Домен 2: CD80 E88D/K89R/D90K/A 91G/F92Y/K93R Domain 1: ICOSL N52D Domain 2: CD80 E88D/K89R/D90K/A 91G/F92Y/K93R 199 189 199 189 ICOS/CD 28 PD-L1 ICOS/CD 28 PD-L1 2023 (0,67) 2023 (0.67) 5093 (1,72) 5093 (1.72) 16987 (1,18) 16987 (1.18) 125 (1,24) 125 (1.24) Домен 1: ICOSL N52D Домен 2: CD80 A12T/H18L/M43V/F5 9L/E77K/P109S/I118 Т Domain 1: ICOSL N52D Domain 2: CD80 A12T/H18L/M43V/F5 9L/E77K/P109S/I118T 199 193 199 193 ICOS/CD 28 PD-L1 ICOS/CD 28 PD-L1 3441 (1,15) 3441 (1.15) 3414 (1,15) 3414 (1.15) 20889 (1,45) 20889 (1.45) 165 (1,63) 165 (1.63) Домен 1: ICOSL N52H/N57Y/Q100P Домен 2: CD80 E88D/K89R/D90K/A 91G/F92Y/K93R Domain 1: ICOSL N52H/N57Y/Q100P Domain 2: CD80 E88D/K89R/D90K/A 91G/F92Y/K93R 201 189 201 189 ICOS/CD 28 PD-L1 ICOS/CD 28 PD-L1 7835 (2,61) 7835 (2.61) 6634 (2,24) 6634 (2.24) 20779 (1,45) 20779 (1.45) 95 (0,94) 95 (0.94) Домен 1: ICOSL N52H/N57Y/Q100P Домен 2: CD80 A12T/H18L/M43V/F5 9L/E77K/P109S/I118 Т Domain 1: ICOSL N52H/N57Y/Q100P Domain 2: CD80 A12T/H18L/M43V/F5 9L/E77K/P109S/I118 T 201 193 201 193 ICOS/CD 28 PD-L1 ICOS/CD 28 PD-L1 8472 (2,82) 8472 (2.82) 3789 (1,28) 3789 (1.28) 13974 (0,97) 13974 (0.97) 106 (1,05) 106 (1.05)

- 154 044346- 154 044346

Таблица 13Table 13

Стековые вариантные гибридные белки IgV Fc, включающие домен CD80 или домен CD86 IgV и домен ICOSL IgVIgV Fc stack variant fusion proteins comprising the CD80 domain or CD86 domain of IgV and the ICOSL domain of IgV

Структура Домена от N-конца к Сконцу: домен 1/домен 2/Fc Domain structure from N-terminal to C-terminal: domain 1/domain 2/Fc SEQID NO. (домен ig) SEQID NO. (domain ig) Контрструктура, отобранная против Counterstructure selected against Активность связывания Binding activity Функциональная ктивность MLR IFNгамма пг/мл Functional activity MLR IFNgamma pg/ml PD-L1 MFI (соотношение MFI к исходному дикому типу) PD-L1 MFI (ratio of MFI to original wild type) CTLA-4 MFI (соотношение MFI к исходному дикому типу) CTLA-4 MFI (ratio of MFI to original wild type) Домен 1: CD80WT Домен 2: ICOSL WT Domain 1: CD80WT Domain 2: ICOSL WT 152 196 152 196 1230 (1,00) 1230 (1.00) 11122 (1,00) 11122 (1.00) 1756 (1,00) 1756 (1.00) Домен 1: CD86WT Домен 2: ICOSL WT Domain 1: CD86WT Domain 2: ICOSL WT 220 196 220 196 29343 (1,00) 29343 (1.00) 55193 (1,00) 55193 (1.00) 6305 (1,00) 6305 (1.00) Домен 1: CD80 R29H/Y31H/T41G/Y 87N/E88G/K89E/D90 N/A91G/P109S Домен 2: ICOSL N52S/N57Y/H94D/L9 6F/L98F/Q100R/G103 E/F120S Domain 1: CD80 R29H/Y31H/T41G/Y 87N/E88G/K89E/D90 N/A91G/P109S Domain 2: ICOSL N52S/N57Y/H94D/L9 6F/L98F/Q100R/G103 E/F120S 192 213 192 213 CD28 ICOS/CD 28 CD28 ICOS/CD 28 2280 (1,85) 2280 (1.85) 3181 (0,29) 3181 (0.29) 2281 (1,30) 2281 (1.30) Домен 1: CD80 I67T/L70Q/A91G/T12 0S Домен 2: ICOSL N52S/N57Y/H94D/L9 6F/L98F/Q100R/G103 E/F120S Domain 1: CD80 I67T/L70Q/A91G/T12 0S Domain 2: ICOSL N52S/N57Y/H94D/L9 6F/L98F/Q100R/G103 E/F120S 175 213 175 213 CD28 ICOS/CD 28 CD28 ICOS/CD 28 2309 (1,88) 2309 (1.88) 26982 (2,43) 26982 (2.43) 1561 (0,89) 1561 (0.89) Домен 1: CD80 R29H/Y31H/T41G/Y 87N/E88G/K89E/D90 N/A91G/P109S Домен 2: ICOSL N52D Domain 1: CD80 R29H/Y31H/T41G/Y 87N/E88G/K89E/D90 N/A91G/P109S Domain 2: ICOSL N52D 192 199 192 199 CD28 ICOS/CD 28 CD28 ICOS/CD 28 4285 (3,48) 4285 (3.48) 22744 (2,04) 22744 (2.04) 1612 (0,92) 1612 (0.92) Домен 1: CD80 I67T/L70Q/A91G/ T120S Домен 2: ICOSL N52D Domain 1: CD80 I67T/L70Q/A91G/ T120S Domain 2: ICOSL N52D 175 199 175 199 CD28 ICOS/CD 28 CD28 ICOS/CD 28 3024 (2,46) 3024 (2.46) 16916 (1,52) 16916 (1.52) 3857 (2,20) 3857 (2.20) Домен 1: CD80 R29H/Y31H/T41G/Y 87N/E88G/K89E/D90 N/A91G/P109S Домен 2: ICOSL N52H/N57Y/Q100P Domain 1: CD80 R29H/Y31H/T41G/Y 87N/E88G/K89E/D90 N/A91G/P109S Domain 2: ICOSL N52H/N57Y/Q100P 192 201 192 201 CD28 ICOS/CD 28 CD28 ICOS/CD 28 6503 (5,29) 6503 (5.29) 7240 (0,65) 7240 (0.65) 6886 (3,92) 6886 (3.92) Домен 1: CD80 I67T/L70Q/A91G/ T120S Domain 1: CD80 I67T/L70Q/A91G/ T120S 175 175 CD28 CD28 3110 (2,53) 3110 (2.53) 4848 (0,44) 4848 (0.44) 3393 (1,93) 3393 (1.93)

- 155 044346- 155 044346

Домен 2: ICOSL N52H/N57Y/Q100P Домен 1: CD86 Q35H/H90L/Q102H Домен 2: ICOSL N52S/N57Y/H94D/L9 6F/L98F/Q100R/G103 E/F120S Domain 2: ICOSL N52H/N57Y/Q100P Domain 1: CD86 Q35H/H90L/Q102H Domain 2: ICOSL N52S/N57Y/H94D/L9 6F/L98F/Q100R/G103 E/F120S 201 221 213 201 221 213 ICOS/CD 28 CD28 ICOS/CD 28 ICOS/CD 28CD28 ICOS/CD 28 11662 (0,40) 11662 (0.40) 21165 (0,38) 21165 (0.38) 880 (0,14) 880 (0.14) Домен 1: CD86 Q35H/H90L/Q102H Domain 1: CD86 Q35H/H90L/Q102H 221 221 CD28 CD28 24230 24230 73287 73287 1110 1110 Домен 2: ICOSL Domain 2: ICOSL 199 199 ICOS/CD ICOS/CD (0,83) (0.83) (1,33) (1.33) (0,18) (0.18) N52D N52D 28 28 Домен 1: CD86 Q35H/H90L/Q102H Domain 1: CD86 Q35H/H90L/Q102H 221 221 CD28 CD28 1962 1962 1630 1630 587 587 Домен 2: ICOSL Domain 2: ICOSL 201 201 ICOS/CD ICOS/CD (0,07) (0.07) (0,03) (0.03) (0,09) (0.09) N52H/N57Y/Q100P N52H/N57Y/Q100P 28 28 Домен 1: ICOSL WT Домен 2: CD80 WT Domain 1: ICOSL WT Domain 2: CD80 WT 196 196 3000 3000 14366 14366 4113 4113 152 152 (1,00) (1.00) (1,00) (1.00) (1,00) (1.00) Домен 1: ICOSL WT Domain 1: ICOSL WT 196 196 18005 (1,00) 18005 (1.00) 53602 (1,00) 53602 (1.00) Домен 2: CD86 WT Domain 2: CD86 WT 220 220 18393 (1,00) 18393 (1.00) Домен 1: ICOSL Domain 1: ICOSL 213 213 ICOS/CD ICOS/CD N52S/N57Y/H94D/L9 N52S/N57Y/H94D/L9 28 28 6F/L98F/Q100R/G103 E/F120S 6F/L98F/Q100R/G103 E/F120S 192 192 CD28 CD28 10426 10426 51286 51286 18680 18680 Домен 2: CD80 R29H/Y31H/T41G/Y 87N/E88G/K89E/D90 N/A91G/P109S Домен 1: ICOSL Domain 2: CD80 R29H/Y31H/T41G/Y 87N/E88G/K89E/D90 N/A91G/P109S Domain 1: ICOSL 213 213 ICOS/CD ICOS/CD (3,48) (3.48) (3,57) (3.57) (4,54) (4.54) N52S/N57Y/H94D/L9 6F/L98F/Q100R/G103 E/F120S N52S/N57Y/H94D/L9 6F/L98F/Q100R/G103 E/F120S 175 175 28 CD28 28 CD28 17751 17751 29790 29790 10637 10637 Домен 2: CD80 I67T/L70Q/A91G/T12 0S Domain 2: CD80 I67T/L70Q/A91G/T12 0S (5,92) (5.92) (2,07) (2.07) (2,59) (2.59) Домен 1: ICOSL Domain 1: ICOSL 199 199 ICOS/CD ICOS/CD N52D Домен 2: CD80 N52D Domain 2: CD80 28 28 2788 2788 25870 25870 6205 6205 R29H/Y31H/T41G/Y 87N/E88G/K89E/D90 N/A91G/P109S R29H/Y31H/T41G/Y 87N/E88G/K89E/D90 N/A91G/P109S 192 192 CD28 CD28 (0,93) (0.93) (1,80) (1.80) (1,51) (1.51) Домен 1: ICOSL Domain 1: ICOSL 199 199 ICOS/CD ICOS/CD N52D N52D 28 28 Домен 2: CD80 Domain 2: CD80 175 175 CD28 CD28 2522 2522 13569 13569 5447 5447 I67T/L70Q/A91G/T12 0S I67T/L70Q/A91G/T12 0S (0,84) (0.84) (0,94) (0.94) (1,32) (1.32) Домен 1: ICOSL Domain 1: ICOSL 201 201 ICOS/CD ICOS/CD N52H/N57Y/Q100P N52H/N57Y/Q100P 28 28 9701 9701 9187 9187 5690 5690 Домен 2: CD80 R29H/Y31H/T41G/Y Domain 2: CD80 R29H/Y31H/T41G/Y 192 192 CD28 CD28 (3,23) (3.23) (0,64) (0.64) (1,38) (1.38) 87N/E88G/K89E/D90 N/A91G/P109S 87N/E88G/K89E/D90 N/A91G/P109S Домен 1: ICOSL Domain 1: ICOSL 213 213 ICOS/CD ICOS/CD N52S/N57Y/H94D/L9 6F/L98F/Q100R/G103 N52S/N57Y/H94D/L9 6F/L98F/Q100R/G103 28 28 27050 27050 21257 21257 8131 8131 E/F120S Домен 2: CD86 Q35H/H90L/Q102H E/F120S Domain 2: CD86 Q35H/H90L/Q102H 221 221 CD28 CD28 (1,50) (1.50) (0,40) (0.40) (0,44) (0.44) Домен 1: ICOSL Domain 1: ICOSL 199 199 ICOS/CD ICOS/CD N52D N52D 28 28 34803 34803 80210 80210 6747 6747 Домен 2: CD86 Q35H/H90L/Q102H Domain 2: CD86 Q35H/H90L/Q102H 221 221 CD28 CD28 (1,93) (1.93) (1,50) (1.50) (0,37) (0.37) Домен 1: ICOSL Domain 1: ICOSL 201 201 ICOS/CD ICOS/CD N52H/N57Y/Q100P N52H/N57Y/Q100P 28 28 5948 5948 4268 4268 26219 26219 Домен 2: CD86 Q35H/H90L/Q102H Domain 2: CD86 Q35H/H90L/Q102H 221 221 CD28 CD28 (0,33) (0.33) (0,08) (0.08) (1,43) (1.43)

- 156 044346- 156 044346

Пример 9.Example 9.

Получение и оценка сконструированных клеток, экспрессирующих трансмембранный иммуномодулирующий белок.Generation and evaluation of engineered cells expressing a transmembrane immunomodulatory protein.

Были сконструированы Т-клетки, в которых трансмембранный иммуномодулирующий белок (TIP), включающий внеклеточный домен (ECD), содержащий либо вариант CD80, как описано выше, либо домен IgSF с модифицированной аффинностью из ICOSL, были совместно экспрессированы с химерным антигенным рецептором (CAR). TIP также содержал трансмембранный домен и цитоплазматический домен соответствующей последовательности трансмембранного белка CD80 или ICOSL дикого типа. Иммуномодулирующую активность сконструированных клеток сравнивали с клетками, которые экспрессировали только CAR или клетки, которые совместно экспрессировали соответствующий трансмембранный белок CD80 или ICOSL дикого типа с CAR.T cells were engineered in which a transmembrane immunomodulatory protein (TIP) comprising an extracellular domain (ECD) containing either the CD80 variant as described above or the affinity-modified IgSF domain from ICOSL was co-expressed with a chimeric antigen receptor (CAR) . TIP also contained a transmembrane domain and a cytoplasmic domain corresponding to the wild-type CD80 or ICOSL transmembrane protein sequence. The immunomodulatory activity of the engineered cells was compared with cells that expressed CAR alone or cells that coexpressed the corresponding transmembrane protein CD80 or wild-type ICOSL with CAR.

Примерный CD80-TIP представляет собой вариантный CD80, имеющий домен IgSF с модифицированной афинностью, содержащий аминокислотные мутации в доменах IgV и IgC, соответствующие I67T/L70Q/A91G/T120S, относительно положений во внеклеточном домене CD80, представленном в SEQ ID NO: 28 и трансмембранном и цитоплазматическом домене, соответствующем остаткам 243-288 в SEQ ID NO: 1. Аминокислотная последовательность примерного CD80-TIP изложена в SEQ ID NO: 241 и кодируется последовательностью нуклеотидов, представленной в SEQ ID NO: 242. Соответствующий трансмембранный белок CD80 дикого типа имел аминокислотную последовательность, представленную как аминокислотные остатки 35-288 в SEQ ID NO: 1 и кодировался аминокислотной последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 251.An exemplary CD80-TIP is a variant CD80 having an affinity modified IgSF domain containing amino acid mutations in the IgV and IgC domains corresponding to I67T/L70Q/A91G/T120S, relative to positions in the CD80 extracellular domain shown in SEQ ID NO: 28 and transmembrane and a cytoplasmic domain corresponding to residues 243-288 in SEQ ID NO: 1. The amino acid sequence of the exemplary CD80-TIP is set forth in SEQ ID NO: 241 and is encoded by the nucleotide sequence shown in SEQ ID NO: 242. The corresponding wild-type CD80 transmembrane protein had the amino acid sequence shown as amino acid residues 35-288 in SEQ ID NO: 1 and encoded by the amino acid sequence shown in SEQ ID NO: 251.

Примерный ICOSL-TIP представляет собой вариантный ICOSL, имеющий домен IgSF с модифицированной аффинностью, содержащий аминокислотные мутации в домене IgV, соответствующие Ν52Η/Π43Τ, относительно положений во внеклеточном домене ICOSL, указанном в SEQ ID NO: 32, и в трансмембранном и цитоплазматическом домене, соответствующем остаткам 257-302 в SEQ ID NO: 5. Аминокислотная последовательность примерного ICOSL-TIP представлена в SEQ ID NO: 243 и кодируется последовательностью нуклеотидов, представленной в SEQ ID NO: 244. Соответствующий трансмембранный белок ICOSL дикого типа имел аминокислотную последовательность, обозначенную как аминокислотные остатки 19-302 в SEQ ID NO: 5 и кодировался последовательностью аминокислот, представленной в SEQ ID NO: 252.An exemplary ICOSL-TIP is a variant ICOSL having an affinity modified IgSF domain containing amino acid mutations in the IgV domain corresponding to Ν52Η/Π43Τ, relative to positions in the extracellular domain of ICOSL specified in SEQ ID NO: 32, and in the transmembrane and cytoplasmic domain, corresponding to residues 257-302 in SEQ ID NO: 5. The amino acid sequence of the exemplary ICOSL-TIP is shown in SEQ ID NO: 243 and is encoded by the nucleotide sequence shown in SEQ ID NO: 244. The corresponding wild-type ICOSL transmembrane protein had the amino acid sequence designated as amino acid residues 19-302 in SEQ ID NO: 5 and is encoded by the amino acid sequence shown in SEQ ID NO: 252.

TIP, содержащий домен с модифицированной аффинностью или трансмембранный белок дикого типа, содержащий соответствующий домен IgSF с немодифицированной аффинностью, был совместно экспрессирован в Т-клетках с химерным антигенным рецептором l-ro поколения (CAR), содержащим внутриклеточный сигнальный домен СПЗдзета. CAR 1-го поколения включал ScFv, специфический для CD 19 (SEQ ID NO: 345), шарнирный и трансмембранный домен, полученный из CD8 (SEQ ID NO: 346), и внутриклеточный сигнальный домен, полученный из CD3дзета (из SEQ ID NO: 47). Нуклеотидная последовательность, кодирующая CD 19 scFv-CD3дзета CAR, представлена в SEQ ID NO: 248, а аминокислотная последовательность CAR19 scFv-CD3дзета CD 19 представлена в SEQ ID NO: 479.A TIP containing an affinity-modified domain or a wild-type transmembrane protein containing a corresponding IgSF domain with an unmodified affinity was co-expressed in T cells with a chimeric antigen receptor l-ro generation (CAR) containing the intracellular signaling domain SPZzeta. The 1st generation CAR included ScFv specific for CD 19 (SEQ ID NO: 345), a hinge and transmembrane domain derived from CD8 (SEQ ID NO: 346), and an intracellular signaling domain derived from CD3zeta (from SEQ ID NO: 47). The nucleotide sequence encoding CD 19 scFv-CD3zeta CAR is presented in SEQ ID NO: 248, and the amino acid sequence of CAR19 scFv-CD3zeta CD 19 is presented in SEQ ID NO: 479.

Были получены нуклеотидные молекулы, кодирующие CAR отдельно, или также кодирующие один из примерных TIP или трансмембранные белки дикого типа, отделенных от CAR посредством саморасщепляющейся последовательности Т2А (SEQ ID NO: 250 и кодируемые нуклеотидной последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 249). Примеры конструкций содержат нуклеотидные последовательности, приведенные в табл. 14. Также в качестве контроля была создана нуклеотидная конструкция, кодирующая CAR 2-го поколения, дополнительно содержащая костимулирующий домен CD28 (CD 19 scFv-CD28-CD3 дзета).Nucleotide molecules were prepared encoding the CAR alone, or also encoding one of the exemplary TIP or wild-type transmembrane proteins separated from the CAR by the self-cleaving sequence T2A (SEQ ID NO: 250 and encoded by the nucleotide sequence presented in SEQ ID NO: 249). Examples of constructs contain the nucleotide sequences given in table. 14. Also, as a control, a nucleotide construct encoding a 2nd generation CAR was also created, additionally containing the costimulatory domain of CD28 (CD 19 scFv-CD28-CD3 zeta).

Таблица 14 Нуклеотидные конструкцииTable 14 Nucleotide constructs

CAR (SEQ ID NO) CAR (SEQ ID NO) Линкер T2A (SEQ ID NO) Linker T2A (SEQ ID NO) TIP (SEQ ID NO) TIP (SEQ ID NO) CD 19 scFv - CD3 дзета CD 19 scFv - CD3 zeta + (248) + (248) - - - - CD 19 scFv - CD3 дзета - Т2А -В7-1 CD 19 scFv - CD3 zeta - T2A -B7-1 + (248) + (248) + (249) + (249) CD80 дикого типа (251) CD80 wild type (251) CD 19 scFv - CD3 дзета - T2A -B7-1 TIP CD 19 scFv - CD3 zeta - T2A -B7-1 TIP + (248) + (248) + (249) + (249) CD80 TIP (242) CD80 TIP (242) CD 19 scFv - CD3 дзета - T2A - ICOSL CD 19 scFv - CD3 zeta - T2A - ICOSL + (248) + (248) + (249) + (249) ICOSL дикого типа (252) Wild type ICOSL (252) CD 19 scFv - CD3 дзета - T2A -ICOSL TIP CD 19 scFv - CD3 zeta - T2A -ICOSL TIP + (248) + (248) + (249) + (249) ICOSL TIP (244) ICOSL TIP (244)

Нуклеотидные молекулы индивидуально клонировали в лентивирусный вектор, который использовали для трансдукции Т-клеток, выделенных из образцов РВМС человека, полученных от трех разных здоровых доноров. Лентивирусные частицы, содержащие нуклеотидные последовательности, получали после совместной трансфекции клеток НЕК293 с помощью векторов и конструкций для упаковки лентиThe nucleotide molecules were individually cloned into a lentiviral vector, which was used to transduce T cells isolated from human PBMC samples obtained from three different healthy donors. Lentiviral particles containing nucleotide sequences were obtained after co-transfection of HEK293 cells using vectors and constructs for packaging lenti

- 157044346 вирусов. Лентивирусные частицы собирали из культуральной среды ультрацентрифугированием и титровали с помощью qRT-PCR. Мононуклеарные клетки периферической крови человека (PBMC) выделяли из трех нормальных доноров крови с использованием осаждения в градиенте плотности. PBMC культивировали в течение ночи с анти-CD3 и анти-CD28 антителами и IL-2, затем трансдуцировали препаратами лентивируса при множественности заражения 5:1. Лентивирусные векторы, кодирующие контрольный CAR 2-го поколения, использовали только для трансдуцирования клеток от одного донора.- 157044346 viruses. Lentiviral particles were collected from the culture medium by ultracentrifugation and titrated by qRT-PCR. Human peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) were isolated from three normal blood donors using density gradient sedimentation. PBMCs were cultured overnight with anti-CD3 and anti-CD28 antibodies and IL-2, then transduced with lentivirus preparations at a multiplicity of infection of 5:1. Lentiviral vectors encoding the 2nd generation control CAR were used only to transduce cells from a single donor.

Через две недели (14 дней) культивирования клетки анализировали на цитотоксичность после совместного культивирования с целевыми антиген-экспрессирующими клетками с использованием анализатора клеток Acea Real-Time Cell Analyzer (RTCA), который измеряет вариации импеданса в культуральной среде 96-луночного микроэлектронного планшета (E-plate), и показывает изменения в количестве клеток и морфологии клеток в графике реального времени. CD19-экспрессирующие клетки-мишени HeLa (HeLa-CD19) высевали в 96-луночный E-планшет, и импеданс каждого монослоя контролировали в течение 24 ч с помощью системы RTCA. Сконструированные T-клетки добавляли к лункам при соотношении эффектор-мишень 10: 1, и отслеживали лунки еще 48 ч. Результаты были отображены и записаны как значение клеточного индекса (CI, Cell Index), полученное из изменения измеренного электрического импеданса, и затем были преобразованы путем деления показаний CI всех лунок во всех временных точках на значение CI индивидуальных лунок в одно и то же время (исходный момент времени) для получения нормализованного значения клеточного индекса, представляющего процент значения в исходный момент времени (см. Zhang et al. Introduction to the Data Analysis of the Roche xCELLigence®System with RTCA Package. Bioconductor. May, 3, 2016, bioconductor.org/packages/devel/bioc/vignettes/After two weeks (14 days) of culture, cells were assayed for cytotoxicity after co-culture with target antigen-expressing cells using an Acea Real-Time Cell Analyzer (RTCA), which measures impedance variations in the culture medium of a 96-well microelectronic plate (E-plate). plate) and shows changes in cell number and cell morphology in a real-time graph. CD19-expressing HeLa target cells (HeLa-CD19) were seeded in a 96-well E-plate, and the impedance of each monolayer was monitored for 24 h using an RTCA system. The engineered T cells were added to the wells at an effector-to-target ratio of 10:1, and the wells were monitored for an additional 48 hours. The results were displayed and recorded as a Cell Index (CI) value derived from the change in measured electrical impedance and then converted by dividing the CI readings of all wells at all time points by the CI readings of individual wells at the same time (baseline time point) to obtain a normalized cell index value representing the percentage of the value at the baseline time point (see Zhang et al. Introduction to the Data Analysis of the Roche xCELLigence®System with RTCA Package. Bioconductor. May, 3, 2016, bioconductor.org/packages/devel/bioc/vignettes/

RTCA/inst/doc/aboutRTCA.pdf. Доступно с 9 сентября 2016 года). В этом анализе уменьшение импеданса монослоя отражает уничтожение клеток-мишеней с помощью трансдуцированных клеток.RTCA/inst/doc/aboutRTCA.pdf. Available from September 9, 2016). In this assay, the decrease in monolayer impedance reflects the killing of target cells by the transduced cells.

Результаты показали, что снижение импеданса наблюдалась в клетках, экспрессирующих CAR 1-го поколения по сравнению с не-трансдуцированными T-клетками, хотя степень снижения импеданса для клеток, экспрессирующих CAR 1-го поколения, была меньше, чем для клеток, экспрессирующих CAR 2го поколения. Снижение импеданса в клетках, экспрессирующих CAR 1-го поколения продолжалось вплоть до 8 ч анализа, тогда как импеданс CAR-экспрессирующих клеток 2-го поколения продолжало снижаться и после этого.The results showed that a decrease in impedance was observed in cells expressing 1st generation CAR compared to non-transduced T cells, although the extent of the decrease in impedance for cells expressing 1st generation CAR was less than for cells expressing 2nd generation CAR generations. The decrease in impedance in cells expressing 1st generation CARs continued until 8 h of analysis, whereas the impedance of 2nd generation CAR-expressing cells continued to decrease thereafter.

Как показано на фиг. 1, у одного донора, каждая из клеток, ко-экспрессирующих TIP или соответствующий трансмембранный белок дикого типа с CAR 1-го поколения, демонстрирует большее уменьшение импеданса, что указывает на большую цитотоксическую активность, по сравнению с клетками, экспрессирующими только CAR 1-го поколения. Кроме того, результаты показали, что цитотоксическая активность была большей в CAR-экспрессирующих клетках, которые совместно экспрессировали CD80TIP или ICOSL-TIP относительно CAR-экспрессирующих клеток, которые совместно экспрессировали соответствующие трансмембранные белки CD80 или ICOSL дикого типа, содержащие домен IgSF с немодифицированной аффинностью. Наблюдаемые результаты этих сконструированных клеток с TIP показали, что цитотоксическая активность в клетках, коэкспрессирующих CD80-TIP или ICOSL-TIP с CAR, проявляет повышенную активность для модуляции цитотоксического иммунного ответа антигенспецифических T-клеток, таких как CAR-экспрессирующие T-клетки.As shown in FIG. 1, in a single donor, each of the cells co-expressing TIP or the corresponding wild-type transmembrane protein with the 1st generation CAR exhibited a greater decrease in impedance, indicating greater cytotoxic activity, compared to cells expressing only the 1st generation CAR generations. In addition, the results showed that the cytotoxic activity was greater in CAR-expressing cells that co-expressed CD80TIP or ICOSL-TIP relative to CAR-expressing cells that co-expressed the corresponding wild-type CD80 or ICOSL transmembrane proteins containing an unaffinity-modified IgSF domain. The observed results of these engineered TIP cells showed that cytotoxic activity in cells coexpressing CD80-TIP or ICOSL-TIP with CAR exhibited enhanced activity to modulate the cytotoxic immune response of antigen-specific T cells, such as CAR-expressing T cells.

У двух других донорах клетки, экспрессирующие CD80-TIP, не приводили к намного более сниженному импедансу по сравнению с клетками, экспрессирующими соответствующий трансмембранный белок CD80 дикого типа. У одного донора было недостаточно клеток для трансдукции трансмембранной белковой конструкцией дикого типа, хотя у этого донора ICOS-L TIP обеспечивал лучшую цитотоксичность по сравнению с другими тестируемыми конструкциями. В другом доноре клетки, экспрессирующие ICOS-L-TIP, не приводили к более сниженному импедансу по сравнению с клетками, экспрессирующими соответствующий трансмембранный белок ICOS-L дикого типа. В тестируемых клетках все клетки, коэкспрессирующие либо CD80-TIP, ICOSL-TIP, либо соответствующий трансмембранный белок дикого типа с CAR, проявляли большую цитотоксическую активность, чем клетки, экспрессирующие только CAR первого поколения. Различия в результатах, наблюдаемых среди доноров, могут быть связаны с различиями в T-клетках среди доноров, различиями в уровнях экспрессии различных сконструированных белков на поверхности клеток, конкретными условиями, используемыми в этом примерном анализе для оценки цитолиза клеток (например, при оценке трансформированных клеток 14-го дня, при оценке отношения одиночный эффектор:клетка-мишень) или другими факторами.In the other two donors, cells expressing CD80-TIP did not result in much lower impedance compared with cells expressing the corresponding wild-type CD80 transmembrane protein. One donor did not have enough cells to be transduced with the wild-type transmembrane protein construct, although in this donor ICOS-L TIP provided better cytotoxicity compared with other constructs tested. In another donor, cells expressing ICOS-L-TIP did not result in more reduced impedance compared with cells expressing the corresponding wild-type ICOS-L transmembrane protein. In the cells tested, all cells coexpressing either CD80-TIP, ICOSL-TIP, or the corresponding wild-type transmembrane protein with the CAR exhibited greater cytotoxic activity than cells expressing only the first generation CAR. Differences in results observed among donors may be due to differences in T cells among donors, differences in the expression levels of various engineered proteins on the cell surface, the specific conditions used in this example assay to assess cell cytolysis (e.g., when assessing transformed cells 14th day, when assessing the single effector:target cell ratio) or other factors.

Пример 10.Example 10.

Оценка связывания и активности доменных вариантов ICOSL IgSF.Assessment of binding and activity of ICOSL IgSF domain variants.

Дополнительные варианты ECD ICOSL идентифицировали с помощью способа селекции дрожжей, по существу, как описано выше, и использовали для получения гибридных белков ECD-Fc, как описано в примере 5. Были проведены исследования связывания для оценки специфичности и аффинности иммуномодулирующих белков с доменом ICOSL для когнатных партнеров связывания по существу так, как описано в примере 6.Additional ECD ICOSL variants were identified using a yeast selection method essentially as described above and used to generate ECD-Fc fusion proteins as described in Example 5. Binding studies were conducted to evaluate the specificity and affinity of immunomodulatory ICOSL domain proteins for cognate binding partners essentially as described in Example 6.

- 158 044346- 158 044346

A. Связывание и функциональная характеристика.A. Binding and functional characterization.

Связывание оценивали с клетками, экспрессирующими полноразмерные когнатные партнеры связывания CD28, ICOS и CTLA-4, по существу, как описано в примере 6. Биоактивность вариантов ECD ICOSL также оценивали в анализе коиммобилизации с анти-CD3 или реакции смешанных лимфоцитов человека (MLR) по существу, как описано в примере 6, за исключением того, что для анализа коиммобилизации костимулирующую активность определяли культурой человеческих T-клеток со смесью 10 нМ связанных с планшетом антител против CD3 и 40 нМ ICOSL Fc.Binding was assessed to cells expressing full-length cognate binding partners CD28, ICOS and CTLA-4 essentially as described in Example 6. The bioactivity of ECD ICOSL variants was also assessed in a co-immobilization assay with anti-CD3 or human mixed lymphocyte response (MLR) essentially as described in Example 6, except that for the coimmobilization assay, co-stimulatory activity was determined by culture of human T cells with a mixture of 10 nM plate-bound anti-CD3 antibodies and 40 nM ICOSL Fc.

В табл. 15 показаны примерные результаты для дополнительных вариантов домена ICOSL IgSF по связыванию с контрструктурами, экспрессируемыми клетками, и по биоактивности в анализе коиммобилизации с анти-CD3 или MLR-анализе. Примерные аминокислотные замены, изображенные в табл. 15, обозначены номером аминокислотного положения, соответствующего аналогичной референсной (например, немодифицированной) последовательности ICOSL ECD, представленной в SEQ ID NO: 32. Положение аминокислоты указывается посередине с соответствующей немодифицированной (например, дикого типа) аминокислотой, указанной перед номером, и идентифицированной аминокислотной заменой, указанной после номера. В столбце 2 указан идентификатор SEQ ID NO для вариантного ECD для каждой вариантной гибридной молекулы ECD-Fc.In table 15 shows exemplary results for additional IgSF ICOSL domain variants for binding to cell-expressed counterstructures and bioactivity in an anti-CD3 coimmobilization or MLR assay. Approximate amino acid substitutions shown in table. 15 are indicated by the amino acid position number corresponding to the similar reference (e.g., unmodified) ICOSL ECD sequence shown in SEQ ID NO: 32. The amino acid position is indicated in the middle with the corresponding unmodified (e.g., wild type) amino acid indicated before the number and the identified amino acid substitution , indicated after the number. Column 2 lists the variant ECD SEQ ID NO for each variant ECD-Fc fusion molecule.

Результаты, представленные в табл. 15, показывают активность связывания, измеренную с помощью значения средней интенсивности флуоресценции (MFI) для связывания каждой вариантной Fcгибридной молекулы с клетками, сконструированными для экспрессии когнатного контрструктурного лиганда и отношение MFI по сравнению со связыванием соответствующей референсной (например, немодифицированной) гибридной молекулы ECD-Fc, не содержащей аминокислотных замен, с тем же контрструктурным лигандом, экспрессируемым клетками. Функциональная активность вариантных Fcгибридных молекул в отношении модуляции активности T-клеток также показана на основе рассчитанных уровней IFN-гамма в культуральных надосадочных жидкостях (пг/мл), получаемых либо i) с указанной вариантной гибридной молекулой ECD-Fc, коиммобилизованной с анти-CD3 либо ii) с указанной вариантной гибридной молекулой ECD-Fc в анализе MLR. В табл. также показано отношение IFN-гамма, вырабатываемое каждым вариантом ECD-Fc, по сравнению с соответствующим немодифицированным (родительским) ECD-Fc в обоих функциональных анализах.The results presented in table. 15 show binding activity measured by the mean fluorescence intensity (MFI) value for binding of each variant Fc hybrid molecule to cells engineered to express a cognate counterstructure ligand and the ratio of MFI compared to binding of the corresponding reference (eg, unmodified) ECD-Fc hybrid molecule , containing no amino acid substitutions, with the same counterstructural ligand expressed by the cells. The functional activity of the variant Fc fusion molecules in modulating T cell activity is also shown based on the calculated levels of IFN-gamma in culture supernatants (pg/ml) prepared with either i) the indicated variant ECD-Fc fusion molecule coimmobilized with anti-CD3 or ii) with said variant ECD-Fc fusion molecule in an MLR assay. In table also shown is the IFN-gamma ratio produced by each ECD-Fc variant compared to the corresponding unmodified (parental) ECD-Fc in both functional assays.

Результаты показывают, измененную, в том числе увеличенную, аффинность связывания доменных вариантов ICOSL IgSF с модифицированной аффинностью, по меньшей мере, с одним когнатным контрструктрурным лигандом, и/или улучшение иммунологической активности. В частности, аналогично исходным полученным вариантам, указанным в примере 6, выбор привел к идентификации ряда дополнительных вариантов домена ICOSL IgSF, которые были модифицированы по аффинности, которые проявляют повышенное связывание, по меньшей мере, с одним, а в некоторых случаях более чем с одним когнатным контрструктурным лигандом. Кроме того, результаты показали, что аффинная модификация вариантных молекул также демонстрирует улучшенные активности как для увеличения, так и для уменьшения иммунологической активности в зависимости от формата молекулы, как описано в примере 6.The results indicate altered, including increased, binding affinity of ICOSL IgSF domain variants with modified affinity to at least one cognate counterstructural ligand, and/or improved immunological activity. In particular, similar to the original variants obtained in Example 6, the selection resulted in the identification of a number of additional affinity modified ICOSL IgSF domain variants that exhibit increased binding to at least one, and in some cases more than one cognate counterstructural ligand. In addition, the results showed that affinity modification of the variant molecules also exhibited improved activities for both increasing and decreasing immunological activity depending on the molecule format, as described in Example 6.

Таблица 15Table 15

Варианты ICOSL: данные связывания и данные костимулирующей активностиICOSL variants: binding data and costimulatory activity data

Мутация(ии) ICOSL ICOSL mutation(s) SEQID NO. (ECD) SEQID NO. (ECD) ICOS tfxn MFI (исходное соотношение) ICOS tfxn MFI (original ratio) CD28 tfxn MFI (исходное соотношение) CD28 tfxn MFI (original ratio) CTLA-4 tfxn MFI (исходное соотношение) CTLA-4 tfxn MFI (original ratio) анализ коиммоби лизации АнтиСОЗ IFN- гамма пг/мл (исходное соотношение) coimmobi analysis lysis of AntiPOPs IFN- gamma pg/ml (original ratio) MLR IFNгамма пг/мл (исходное соотношение) MLR IFNgamma pg/ml (initial ratio) N52H, F78L, Q100R, C198R N52H, F78L, Q100R, C198R 373 373 9568 (0,12) 9568 (0.12) 1966 (0,24) 1966 (0.24) 1454 (0,12) 1454 (0.12) 130(0,31) 130(0.31) 5927 (1,84) 5927 (1.84) N52H, N57Y, Q100R, V110D, C198R, S212G N52H, N57Y, Q100R, V110D, C198R, S212G 364 364 9418 (1Д6) 9418 (1D6) 136665 (16,55) 136665 (16.55) 115352 (9,59) 115352 (9.59) 944 (2,21) 944 (2.21) 821 (0,25) 821 (0.25)

- 159 044346- 159 044346

N52H, N57Y, R75Q, Q100P, V110D N52H, N57Y, R75Q, Q100P, V110D 374 374 5558 (0,07) 5558 (0.07) 7465 (0,90) 7465 (0.90) 4689 (0,39) 4689 (0.39) 122 (0,28) 122 (0.28) 1136 (0,35) 1136 (0.35) N52H, N57Y, Q100R, C198R N52H, N57Y, Q100R, C198R 365 365 9148 (1,13) 9148 (1.13) 134923 (16,33) 134923 (16.33) 83241 (6,92) 83241 (6.92) 1060 (2,48) 1060 (2.48) 375 (0,12) 375 (0.12) N52H, N57Y, L74Q, V110D, S192G N52H, N57Y, L74Q, V110D, S192G 375 375 9448 (1,17) 9448 (1.17) 128342 (15,54) 128342 (15.54) 123510 (10,26) 123510 (10.26) 1137 (2,66) 1137 (2.66) 889 (0,28) 889 (0.28) N52H, Q100R N52H,Q100R 285 285 9478 (1,17) 9478 (1.17) 151977 (18,40) 151977 (18.40) 133929 (11,13) 133929 (11.13) 972 (2,28) 972 (2.28) 794 (0,25) 794 (0.25) N52H, S121G, C198R N52H, S121G, C198R 376 376 9128 (1,13) 9128 (1.13) 124732 (15,10) 124732 (15.10) 182607 (15,18) 182607 (15.18) 827 (1,94) 827 (1.94) 1257 (0,39) 1257 (0.39) A20V, N52H, N57Y, Q100R, S109G A20V, N52H, N57Y, Q100R, S109G 287 287 5828 (0,72) 5828 (0.72) 76973 (9,32) 76973 (9.32) 73640 (6,12) 73640 (6.12) 447 (1,05) 447 (1.05) 2283 (0,71) 2283 (0.71) N52H, N57Y, QI OOP, C198R N52H, N57Y, QI OOP, C198R 461 461 9548 (1,18) 9548 (1.18) 130676 (15,82) 130676 (15.82) 81966 (6,81) 81966 (6.81) 1125 (2,64) 1125 (2.64) 643 (0,20) 643 (0.20) N52H, N57Y, R61S, Q100R, V110D, L173S N52H, N57Y, R61S, Q100R, V110D, L173S 289 289 1018 (0,13) 1018 (0.13) 9129 (1,11) 9129 (1.11) 5790 (0,48) 5790 (0.48) 109 (0,25) 109 (0.25) 5094 (1,58) 5094 (1.58) N52H, N57Y, Q100R, V122A N52H, N57Y, Q100R, V122A 290 290 9978 (1,23) 9978 (1.23) 137372 (16,63) 137372 (16.63) 70764 (5,88) 70764 (5.88) 1316 (3,08) 1316 (3.08) 473 (0,15) 473 (0.15) N52H, N57Y, Q100R, F172S N52H, N57Y, Q100R, F172S 291 291 1028 (1,27) 1028 (1.27) 135821 (16,44) 135821 (16.44) 73320 (6,09) 73320 (6.09) 1561 (3,66) 1561 (3.66) 486 (0,15) 486 (0.15) N52H, N57Y, Q100R N52H, N57Y, Q100R 283 283 9858 (1,22) 9858 (1.22) 140612 (17,02) 140612 (17.02) 75106 (6,24) 75106 (6.24) 1648 (3,86) 1648 (3.86) 778 (0,24) 778 (0.24) N52S, F120S, N227K N52S, F120S, N227K 377 377 9438 (1,17) 9438 (1.17) 67796 (8,21) 67796 (8.21) 82370 (6,85) 82370 (6.85) 1157 (2,71) 1157 (2.71) 1626 (0,50) 1626 (0.50) N52S, N194D N52S, N194D 366 366 9798 (1,21) 9798 (1.21) 59431 (7,19) 59431 (7.19) 74502 (6,19) 74502 (6.19) 1671 (3,91) 1671 (3.91) 1690 (0,52) 1690 (0.52) N52S, V97A N52S, V97A 294 294 3138 (0,04) 3138 (0.04) 1733 (0,21) 1733 (0.21) 1541 (0,13) 1541 (0.13) 84 (0,20) 84 (0.20) 3858 (1,20) 3858 (1.20) N52S, F120S N52S, F120S 293 293 9068 (1,12) 9068 (1.12) 67233 (8,14) 67233 (8.14) 97880 (8,13) 97880 (8.13) 1178 (2,76) 1178 (2.76) 2814 (0,87) 2814 (0.87) N52S, G72R N52S, G72R 295 295 9288 (1,15) 9288 (1.15) 51638 (6,25) 51638 (6.25) 62339 (5,18) 62339 (5.18) 1161 (2,72) 1161 (2.72) 2947 (0,91) 2947 (0.91) N52S, A71T, A117T, T190A, C198R N52S, A71T, A117T, T190A, C198R 378 378 8918 (1,10) 8918 (1.10) 44044 (5,33) 44044 (5.33) 56646 (4,71) 56646 (4.71) 1076 (2,52) 1076 (2.52) 4031 (1,25) 4031 (1.25) N52S, E220G N52S, E220G 297 297 3878 (0,05) 3878 (0.05) 2047 (0,25) 2047 (0.25) 1796 (0,15) 1796 (0.15) 122 (0,29) 122 (0.29) 1927 (0,60) 1927 (0.60) Y47H, N52S, V107A, F120S Y47H, N52S, V107A, F120S 298 298 3268 (0,04) 3268 (0.04) 2562 (0,31) 2562 (0.31) 2104 (0,17) 2104 (0.17) 334 (0,78) 334 (0.78) 4390 (1,36) 4390 (1.36) WT ICOSL WT ICOSL 32 32 8088 8088 8260 8260 12033 12033 427 (1,00) 427 (1.00) 3226 3226

- 160 044346- 160 044346

(1,00) (1.00) (1,00) (1.00) (1,00) (1.00) (1,00) (1.00) T43A, N52H, N57Y, L74Q, D89G, V110D, F172S T43A, N52H, N57Y, L74Q, D89G, V110D, F172S 379 379 2821 (0,02) 2821 (0.02) 2180 (0,49) 2180 (0.49) 2051 (0,12) 2051 (0.12) 184 (0,75) 184 (0.75) N52H, N57Y, Q100R, V107I, V110D, S132F, I154F, C198R, R221G N52H, N57Y, Q100R, V107I, V110D, S132F, I154F, C198R, R221G 381 381 174586 (0,97) 174586 (0.97) 122383 (27,24) 122383 (27.24) 76202 (4,31) 76202 (4.31) 985 (4,01) 985 (4.01) 1037 (0,36) 1037 (0.36) E16V, N52H, N57Y, Q100R, V110D, H115R, Y152C, K156M, C198R E16V, N52H, N57Y, Q100R, V110D, H115R, Y152C, K156M, C198R 300 300 190765 (1,05) 190765 (1.05) 129070 (28,73) 129070 (28.73) 68488 (3,87) 68488 (3.87) 4288 (17,46) 4288 (17.46) 1225 (0,43) 1225 (0.43) Q37R, N52H, N57Y, Q100R, V110N, S142F, C198R, D217V, R221G Q37R, N52H, N57Y, Q100R, V110N, S142F, C198R, D217V, R221G 301 301 148638 (0,82) 148638 (0.82) 91104 (20,28) 91104 (20.28) 13498 (0,76) 13498 (0.76) 62 (0,25) 62 (0.25) 7643 (2,68) 7643 (2.68) N52H, N57Y, Q100R, V110D, C198R N52H, N57Y, Q100R, V110D, C198R 302 302 179194 (0,99) 179194 (0.99) 123312 (27,45) 123312 (27.45) 84136 (4,76) 84136 (4.76) 762 (3,10) 762 (3.10) 1342 (0,47) 1342 (0.47) N52H, N57Y, Q100R, V110D, V116A, L161M, F172S, S192G, C198R N52H, N57Y, Q100R, V110D, V116A, L161M, F172S, S192G, C198R 303 303 5236 (0,03) 5236 (0.03) 4160 (0,93) 4160 (0.93) 3305 (0,19) 3305 (0.19) 49 (0,20) 49 (0.20) 2039 (0,72) 2039 (0.72) F27S, N52H, N57Y, V110N F27S, N52H, N57Y, V110N 304 304 20154 (0,11) 20154 (0.11) 8613 (1,92) 8613 (1.92) 3903 (0,22) 3903 (0.22) 83 (0,34) 83 (0.34) 7522 (2,64) 7522 (2.64) F27S, N52H, N57Y, V110N F27S, N52H, N57Y, V110N 304 304 5236 (0,03) 5236 (0.03) 4160 (0,93) 4160 (0.93) 2957 (0,17) 2957 (0.17) 40 (0,16) 40 (0.16) - - N52S, H94E, L96I, S109N, L166Q, N52S, H94E, L96I, S109N, L166Q, 305 305 198604 (1,10) 198604 (1.10) 100361 (22,34) 100361 (22.34) 102892 (5,82) 102892 (5.82) 1253 (5,10) 1253 (5.10) 5645 (1,98) 5645 (1.98) S18R, N52S, F93L, I143V, R221G S18R, N52S, F93L, I143V, R221G 306 306 154561 (0,85) 154561 (0.85) 7625 (1,70) 7625 (1.70) 4254 (0,24) 4254 (0.24) 203 (0,83) 203 (0.83) 5239 (1,84) 5239 (1.84) A20T, N52D, Y146C, Q164L A20T, N52D, Y146C, Q164L 307 307 149661 (0,83) 149661 (0.83) 9073 (2,02) 9073 (2.02) 6901 (0,39) 6901 (0.39) 287 (1,17) 287 (1.17) 4829 (1,69) 4829 (1.69) V11E, N30D, N52H, N57Y, H94E, L96I, L98F, N194D, V210A, I218T V11E, N30D, N52H, N57Y, H94E, L96I, L98F, N194D, V210A, I218T 308 308 180016 (1,00) 180016 (1.00) 120230 (26,76) 120230 (26.76) 62809 (3,55) 62809 (3.55) 2218 (9,03) 2218 (9.03) 7283 (2,56) 7283 (2.56) N52S, H94E, L96I, V122M N52S, H94E, L96I, V122M 309 309 198717 (1,10) 198717 (1.10) 88901 (19,79) 88901 (19.79) 94231 (5,33) 94231 (5.33) 590 (2,40) 590 (2.40) 618 (0,22) 618 (0.22) N52H, N57Y, H94E, L96I, Fl 201, S126T, W153R, I218N N52H, N57Y, H94E, L96I, Fl 201, S126T, W153R, I218N 310 310 87711 (0,48) 87711 (0.48) 42035 (9,36) 42035 (9.36) 31798 (1,80) 31798 (1.80) 67 (0,27) 67 (0.27) 2500 (0,88) 2500 (0.88) M10V, S18R, N30D, N52S, S126R, T139S, L203F M10V, S18R, N30D, N52S, S126R, T139S, L203F 311 311 180665 (1,00) 180665 (1.00) 64929 (14,45) 64929 (14.45) 48362 (2,73) 48362 (2.73) 1193 (4,86) 1193 (4.86) 13647 (4,79) 13647 (4.79)

- 161 044346- 161 044346

S25G, N30D, N52S, F120S, N227K S25G, N30D, N52S, F120S, N227K 312 312 178834 (0,99) 178834 (0.99) 66127 (14,72) 66127 (14.72) 46631 (2,64) 46631 (2.64) 1246 (5,07) 1246 (5.07) 2202 (0,77) 2202 (0.77) N30D, N52S, L67P, Q100K, D217G, R221K, T225S N30D, N52S, L67P, Q100K, D217G, R221K, T225S 313 313 18630 (0,10) 18630 (0.10) 1986 (0,44) 1986 (0.44) 1940 (0,11) 1940 (0.11) 54 (0,22) 54 (0.22) 2752 (0,97) 2752 (0.97) WT ICOSL WT ICOSL 32 32 180900 (LOO) 180900 (LOO) 4493 (1,00) 4493 (1.00) 17685 (1,00) 17685 (1.00) 246 (1,00) 246 (1.00) 2850 (1,00) 2850 (1.00) R26S, N52H, N57Y, V110D, Т137А, C198R R26S, N52H, N57Y, V110D, T137A, C198R 908 908 N/A N/A N/A N/A N/A N/A N/A N/A N/A N/A N52H, N57Y, Q100R, V110D, А117Т, T190S, C198R N52H, N57Y, Q100R, V110D, A117T, T190S, C198R 314 314 2831 (0,04) 2831 (0.04) 2881 (0,57) 2881 (0.57) 2464 (0,23) 2464 (0.23) 59 (0,08) 59 (0.08) - - N52H, N57Y, Q100R, V110D, F172S, C198R N52H, N57Y, Q100R, V110D, F172S, C198R 315 315 58478 (0,79) 58478 (0.79) 74031 (14,75) 74031 (14.75) 56850 (5,33) 56850 (5.33) 712 (0,96) 712 (0.96) 1093 (0,23) 1093 (0.23) S25G, F27C, N52H, N57Y, Q100R, V110D, Е135К, L173S, C198R S25G, F27C, N52H, N57Y, Q100R, V110D, E135K, L173S, C198R 316 316 22514 (0,30) 22514 (0.30) 21320 (4,25) 21320 (4.25) 20450 (1,92) 20450 (1.92) 353 (0,48) 353 (0.48) 5765 (1,21) 5765 (1.21) N52H, N57Y, V110A, C198R, R221I N52H, N57Y, V110A, C198R, R221I 317 317 84236 (1,14) 84236 (1.14) 81842 (16,31) 81842 (16.31) 121519 (11,39) 121519 (11.39) 4593 (6,18) 4593 (6.18) 1137 (0,24) 1137 (0.24) M10I, S13G, N52H, N57Y, D77G, V110A, Н129Р, I143V, F172S, V193M, C198R M10I, S13G, N52H, N57Y, D77G, V110A, H129P, I143V, F172S, V193M, C198R 318 318 6362 (0,09) 6362 (0.09) 6001 (1,20) 6001 (1.20) 4834 (0,45) 4834 (0.45) 141 (0,19) 141 (0.19) 4326 (0,91) 4326 (0.91) N52H, N57Y, R61C, Y62F, Q100R, Vl 10N, F120S, C198R N52H, N57Y, R61C, Y62F, Q100R, Vl 10N, F120S, C198R 319 319 4355 (0,06) 4355 (0.06) 4316 (0,86) 4316 (0.86) 3430 (0,32) 3430 (0.32) 110(0,15) 110(0.15) 6854 (1,44) 6854 (1.44) N52H, N57Y, Q100R, L102R, V110D, H115R, C198R N52H, N57Y, Q100R, L102R, V110D, H115R, C198R 367 367 96736 (1,31) 96736 (1.31) 77881 (15,52) 77881 (15.52) 148012 (13,88) 148012 (13.88) 8765 (11,79) 8765 (11.79) 630 (0,13) 630 (0.13) N52H, N57Y, Q100R, V110D, N144D, F172S, C198R N52H, N57Y, Q100R, V110D, N144D, F172S, C198R 321 321 67578 (0,91) 67578 (0.91) 64953 (12,94) 64953 (12.94) 95731 (8,98) 95731 (8.98) 1672 (2,52) 1672 (2.52) 1490 (0,31) 1490 (0.31) N52S, H94E, L98F, Q100R, N52S, H94E, L98F, Q100R, 322 322 80690 (1,09) 80690 (1.09) 78750 (15,69) 78750 (15.69) 148160 (13,89) 148160 (13.89) 3564 (4,80) 3564 (4.80) 1497 (0,32) 1497 (0.32) N52S, E90A N52S, E90A 323 323 108908 (1,47) 108908 (1.47) 31086 (6,19) 31086 (6.19) 108866 (10,21) 108866 (10.21) 4564 (6,14) 4564 (6.14) 3927 (0,83) 3927 (0.83) N30D, K42E, N52S N30D, K42E, N52S 324 324 85726 (1,16) 85726 (1.16) 4293 (0,86) 4293 (0.86) 10755 (1,01) 10755 (1.01) 5211 (7,01) 5211 (7.01) 5656 (1,19) 5656 (1.19) N52S, F120S, I143V, I224V N52S, F120S, I143V, I224V 325 325 90862 (1,23) 90862 (1.23) 28443 (5,67) 28443 (5.67) 105229 105229 4803 (6,46) 4803 (6.46) 4357 (0,92) 4357 (0.92) (9,87) (9.87) WT ICOSL WT ICOSL 32 32 73964 (1,00) 73964 (1.00) 5018 (1,00) 5018 (1.00) 10665 (1,00) 10665 (1.00) 743 (1,00) 743 (1.00) 4748 (1,00) 4748 (1.00)

C. Выработка цитокинов в анализах костимуляции с aHmu-CD3.C. Cytokine production in costimulation assays with aHmu-CD3.

Примерные вариантные ECD ICOSL Fc-гибридные молекулы, описанные выше, были дополнительно оценены на предмет стимуляции цитокинов IL-17 в анализе костимулирующей (коиммобилизационной) биоактивности с aнти-CD3, описанном выше. Смесь 10 нМ связанных с планшетом aнти-CD3 и 40 нм ICOSL Fc культивировали с человеческими T-клетками. Надосадочные жидкости собирали и определяли уровни IL-17 с помощью ELISA. Измеряли количество IL-17 в культуральных надосадочных жидкостях (пг/мл), полученного с помощью указанных вариантных гибридных молекул ECD-Fc и соответствующим немодифицированным (родительским) ECD-Fc, коиммобилизованным с aнти-CD3. Для сравнения, также в этой таблице, показаны результаты по выработке IFN-гамма в том же анализе, что отображено в табл. 15 для примерных вариантов.The exemplary variant ECD ICOSL Fc-fusion molecules described above were further assessed for IL-17 cytokine stimulation in the anti-CD3 co-stimulatory bioactivity assay described above. A mixture of 10 nM plate-bound anti-CD3 and 40 nM ICOSL Fc was cultured with human T cells. Supernatants were collected and IL-17 levels were determined by ELISA. The amount of IL-17 in culture supernatants (pg/ml) produced with the indicated variant ECD-Fc fusion molecules and the corresponding unmodified (parental) ECD-Fc coimmobilized with anti-CD3 was measured. For comparison, also in this table, the results for the production of IFN-gamma in the same analysis as shown in the table are shown. 15 for approximate options.

Результаты представлены в табл. 16, который отбражают пг/мл IL-17, измеренного в надосадочной жидкости, а также соотношения (кратное увеличение) IL-17, продуцируемого с помощью каждого варианта ECD-Fc по сравнению с соответствующим немодифицированным ECD-Fc (дикого типа). Аналогичные результаты показаны для IFN-гамма. Также показан % общего количества цитокинов IL-17 или IFNгамма, продуцируемых клетками. Результаты показали, что в анализе костимуляции аффинная модификация вариантных молекул продемонстрировала измененную функциональную активность T-клеток в отношении увеличения IL-17 в дополнение к IFN-гамма.The results are presented in table. 16, which shows the pg/ml IL-17 measured in the supernatant, as well as the ratio (fold increase) of IL-17 produced by each ECD-Fc variant compared to the corresponding unmodified ECD-Fc (wild type). Similar results are shown for IFN-gamma. The % of total IL-17 or IFNgamma cytokines produced by the cells is also shown. The results showed that in a co-stimulation assay, affinity modification of variant molecules demonstrated altered T cell functional activity to increase IL-17 in addition to IFN-gamma.

- 162 044346- 162 044346

Таблица 16Table 16

Данные костимулирующей биоактивности для доменных вариантов ICOSL IgSFCostimulatory bioactivity data for ICOSL IgSF domain variants

Мутация(ии) ICOSL Mutation(s) ICOSL SEQ ID NO. (ECD) SEQ ID NO. (ECD) IL-17A [пг/мл] IL-17A [pg/ml] IL-17A кратное ть TWT IL-17A multiple of TWT IFN-g [пг/мл] IFN-g [pg/ml] IFN-g кратность TWT IFN-g fold TWT Об- щая кратность TWT About- current multiplicity TWT % от общего выработанного цитокина % of total cytokine produced % Общий IL-17 + IFN-g % General IL-17+ IFN-g % IL-17 % IL-17 % IFN-g % IFN-g N52H, N57Y, Q100R, C198R N52H, N57Y, Q100R, C198R 365 365 617 617 7,93 7.93 1060 1060 2,48 2.48 10,42 10.42 5,51 5.51 0,77 0.77 6,28 6.28 N52H, N57Y, Q100R, V122A N52H, N57Y, Q100R, V122A 290 290 647 647 8,33 8.33 1316 1316 3,08 3.08 11,41 11.41 5,79 5.79 0,96 0.96 6,75 6.75 N52H, N57Y, Q100R, F172S N52H, N57Y, Q100R, F172S 291 291 549 549 7,06 7.06 1561 1561 3,66 3.66 10,72 10.72 4,91 4.91 1,14 1.14 6,05 6.05 N52Y, N57Y, F138L, L203P N52Y, N57Y, F138L, L203P 112 112 90 90 1,05 1.05 1999 1999 2,69 2.69 3,74 3.74 0,81 0.81 2,91 2.91 3,72 3.72 VI IE, N30D, N52H, N57Y, Н94Е, L96I, L98F, N194D, V210A, I218T N52H, N57Y, VI IE, N30D, N52H, N57Y, H94E, L96I, L98F, N194D, V210A, I218T N52H, N57Y, 308 308 319 319 3,16 3.16 2218 2218 9,03 9.03 12,19 12.19 2,85 2.85 3,23 3.23 6,08 6.08 QI OOR, L102R, V110D, H115R, C198R QI OOR, L102R, V110D, H115R, C198R 367 367 510 510 5,90 5.90 8765 8765 11,79 11.79 17,70 17.70 4,56 4.56 12,78 12.78 17,33 17.33 N52H, N57Y, QI OOR N52H, N57Y, QI OOR 283 283 473 473 6,08 6.08 1648 1648 3,86 3.86 9,94 9.94 4,23 4.23 1,20 1.20 5,43 5.43 N52H, QIOOR N52H, N57Y, N52H, QIOOR N52H, N57Y, 285 285 358 358 4,60 4.60 972 972 7,01 7.01 11,62 11.62 3,20 3.20 0,71 0.71 3,91 3.91 QI OOR, V110D, C198R, S212G QI OOR, V110D, C198R, S212G 364 364 124 124 1,60 1.60 944 944 2,21 2.21 3,81 3.81 1,11 1.11 0,69 0.69 1,80 1.80 N52H, N57Y, QI OOP N52H, N57Y, QI OOP 113 113 127 127 1,47 1.47 4922 4922 6,62 6.62 8,09 8.09 1,14 1.14 7,17 7.17 8,31 8.31 E16V, N52H, N57Y, QI OOR, V110D, H115R, Y152C, K156M, C198R E16V, N52H, N57Y, QI OOR, V110D, H115R, Y152C, K156M, C198R 300 300 22 22 7,11 7.11 130 130 17,46 17.46 24,57 24.57 6,41 6.41 6,25 6.25 12,66 12.66 N30D, K42E, N52S N30D, K42E, N52S 324 324 349 349 4,04 4.04 5211 5211 7,01 7.01 11,05 11.05 3,12 3.12 7,60 7.60 10,71 10.71 N52S, F120S, 1143 V, 1224V N52S, F120S, 1143V, 1224V 325 325 292 292 3,39 3.39 4803 4803 6,46 6.46 9,85 9.85 2,61 2.61 7,00 7.00 9,62 9.62 N52S, E90A N52S, E90A 323 323 306 306 3,54 3.54 4564 4564 6,14 6.14 9,68 9.68 2,73 2.73 6,65 6.65 9,39 9.39 N52H, N57Y, V110A, C198R, R221I N52H, N57Y, V110A, C198R, R221I 317 317 290 290 3,35 3.35 4593 4593 6,18 6.18 9,53 9.53 2,59 2.59 6,69 6.69 9,28 9.28 N52S, N194D N52S, N194D 366 366 428 428 5,50 5.50 1671 1671 3,90 3.90 9,4 9.4 1,52 1.52 5,19 5.19 5,40 5.40 N52H, I143T N52H, I143T 135 135 84 84 - - 1727 1727 - - 3,30 3.30 0,75 0.75 2,52 2.52 3,27 3.27 N52D N52D 111 111 126 126 - - 1447 1447 - - 3,41 3.41 1,13 1.13 2,И 2,I 3,23 3.23

Пример 11.Example 11.

Получение дополнительной сконструированной T-клетки, экспрессирующей трансмембранный иммуномодулирующий белок, и оценка пролиферации.Generation of an additional engineered T cell expressing a transmembrane immunomodulatory protein and assessment of proliferation.

В этом примере описывается получение дополнительных сконструированных T-клеток, в которых трансмембранный иммуномодулирующий белок (TIP), содержащий внеклеточный домен (ECD), включающий домен ICOSL IgSF с модифицированной аффинностью, был совместно экспрессирован с химерным антигенным рецептором (CAR). В частности, TIP был получен для включения ECD примерного вариантного ICOSL, содержащего аминокислотные мутации N52D, N52H/N57Y/Q100P,This example describes the generation of additional engineered T cells in which a transmembrane immunomodulatory protein (TIP) containing an extracellular domain (ECD) including an affinity-modified ICOSL domain of IgSF was co-expressed with a chimeric antigen receptor (CAR). Specifically, a TIP was generated to include the ECD of an exemplary variant ICOSL containing the amino acid mutations N52D, N52H/N57Y/Q100P,

E16V/N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/Y152C/K156M/C198R или N52H/N57Y/Q100R относительно положений во внеклеточном домене ICOSL, представленном в SEQ ID NO: 32. TIP также содержал трансмембранный домен и цитоплазматический домен соответствующей последовательности трансмембранного белка ICOSL дикого типа, соответствующего остаткам 257-302 SEQ ID NO: 5. Последовательность TIP с сигнальным пептидом и без него выглядит следующим образом: N52D (SEQ ID NO: 496 и 497); N52H/N57Y/Q100P (SEQ ID NO: 498 и 499);E16V/N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/Y152C/K156M/C198R or N52H/N57Y/Q100R relative to positions in the ICOSL extracellular domain shown in SEQ ID NO: 32. TIP also contained a transmembrane domain and a cytoplasmic domain of the corresponding transmembrane protein sequence Wild type ICOSL corresponding to residues 257-302 of SEQ ID NO: 5. The sequence of TIP with and without signal peptide is as follows: N52D (SEQ ID NO: 496 and 497); N52H/N57Y/Q100P (SEQ ID NO: 498 and 499);

E16V/N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/Y152C/K156M/C198R (SEQ ID NO: 500 и 501) и N52H/N57Y/Q100R (SEQ ID NO: 502 и 503). Для сравнения полноразмерный трансмембранный ICOSL дикого типа (аминокислотные остатки 19-302 SEQ ID NO: 5) также был экспрессирован в клетках. Последовательность TIP дикого типа с сигнальным пептидом и без него изложена в SEQ ID NO: 494 и 495. Нуклеиновая кислота, кодирующая TIP, также включала последовательность, кодирующую зеленыйE16V/N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/Y152C/K156M/C198R (SEQ ID NO: 500 and 501) and N52H/N57Y/Q100R (SEQ ID NO: 502 and 503). For comparison, full-length wild-type transmembrane ICOSL (amino acid residues 19-302 SEQ ID NO: 5) was also expressed in cells. The sequence of wild type TIP with and without signal peptide is set forth in SEQ ID NOs: 494 and 495. The nucleic acid encoding TIP also included the sequence encoding green

- 163 044346 флуоресцентный белок (GFP), отделенный от TIP с помощью саморасщепляющейся последовательности- 163 044346 fluorescent protein (GFP) separated from TIP by a self-cleaving sequence

T2A.T2A.

TIP, содержащий домен с модифицированной аффинностью или трансмембранный белок дикого типа, содержащий соответствующий домен IgSF с немодифицированной аффинностью, был совместно экспрессирован в T-клетках с химерным антигенным рецептором (CAR). Нуклеотидная последовательность, кодирующая CAR, кодирует, по порядку: сигнальную последовательность CD8 (SEQ ID NO: 481), анти-CD19 scFv (SEQ ID NO: 482), шарнирную/трансмембранную область, полученную из CD8 (SEQ ID NO: 483), костимулирующий сигнальный домен, полученный из 4-1BB (SEQ ID NO: 484) и сигнальный домен CD3 дзета (SEQ ID NO: 247). Полученный анти-CD19 CAR имеет аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 490. Нуклеиновая кислота, кодирующая CAR, также включала последовательность, кодирующую синий флуоресцентный белок (BFP, SEQ ID NO: 489), отделенный от CAR с помощью саморасщепляющейся последовательности T2A (приведенной в SEQ ID NO: 488).TIP containing an affinity-modified domain or a wild-type transmembrane protein containing the corresponding unmodified IgSF domain was co-expressed in chimeric antigen receptor (CAR) T cells. The nucleotide sequence encoding the CAR encodes, in order: CD8 signal sequence (SEQ ID NO: 481), anti-CD19 scFv (SEQ ID NO: 482), CD8-derived hinge/transmembrane region (SEQ ID NO: 483), a costimulatory signaling domain derived from 4-1BB (SEQ ID NO: 484); and a CD3 zeta signaling domain (SEQ ID NO: 247). The resulting anti-CD19 CAR has the amino acid sequence shown in SEQ ID NO: 490. The nucleic acid encoding the CAR also included a sequence encoding blue fluorescent protein (BFP, SEQ ID NO: 489) separated from the CAR by a self-cleaving sequence T2A ( given in SEQ ID NO: 488).

По отдельности были получены вирусные векторные конструкции, в которых были клонированы либо нуклеотидная молекула, кодирующая CAR отдельно, либо нуклеотидная молекула, кодирующей один из приведенных в качестве примера TIP или ICOSL дикого типа. Вирусный вектор, кодирующий CAR, и вирусный вектор, кодирующий TIP или ICOSL дикого типа, были совместно трансформированы в T-клетки. Для трансдукции первичные T-клетки активировали анти-CD3 и анти-CD28-гранулами (Dynal) при соотношении гранул: 1: 1 и инкубировали в присутствии 100 МЕ/мл IL-2 при 37°C в течение 2 дней. T-клетки затем собирали и трансдуцировали с помощью 400 мкл вирусной надосадочной жидкости CAR и 400 мкл вирусной надосадочной жидкости TIP в присутствии 8 мкг/мл полибрена. Клетки были подвергнуты центрифужной инокуляции при 1000 g в течение 30 мин при 30°C. Затем клетки переносили и инкубировали в течение ночи при 37°C. После инкубации клетки собирали и удаляли вирусную надосадочную жидкость. Клетки ресуспендировали с полной средой и 50 МЕ/мл IL-2. Клетки размножали, пополняли IL-2 и среду каждые два дня в течение 6 дней. Гранулы удаляли из клеток с использованием магнита и подсчитывали перед оценкой в анализе пролиферации. Примерный профиль экспрессии TIP и CAR в примерных трансдуцированных T-клетках показан на фиг. 2A.Separately, viral vector constructs were prepared in which either a nucleotide molecule encoding the CAR alone or a nucleotide molecule encoding one of the exemplified wild-type TIPs or ICOSLs were cloned. A viral vector encoding CAR and a viral vector encoding wild-type TIP or ICOSL were cotransformed into T cells. For transduction, primary T cells were activated with anti-CD3 and anti-CD28 beads (Dynal) at a bead ratio of 1:1 and incubated in the presence of 100 IU/ml IL-2 at 37°C for 2 days. T cells were then collected and transduced with 400 μl CAR viral supernatant and 400 μl TIP viral supernatant in the presence of 8 μg/ml polybrene. Cells were centrifugally inoculated at 1000 g for 30 min at 30°C. Cells were then transferred and incubated overnight at 37°C. After incubation, cells were harvested and viral supernatant was removed. Cells were resuspended with complete medium and 50 IU/ml IL-2. Cells were expanded and replenished with IL-2 and medium every two days for 6 days. The beads were removed from the cells using a magnet and counted before evaluation in the proliferation assay. An exemplary TIP and CAR expression profile in exemplary transduced T cells is shown in FIG. 2A.

Для оценки пролиферации T-клеток CAR и CAR-TIP T-клеток в ответ на антиген, клетки метили с помощью следовых количеств красителя дальнего красного спектра. CD19-экспрессирующие целевые клетки Nalm6 титровали, начиная с соотношения мишени:Т-клетки 1,5: 1 и разведением 1:2 с 8-точечным разбавлением. К клеткам Nalm6 добавляли меченные клетки CAR T или T-клетки CAR-TIP, и культуру инкубировали в течение 4 дней до того, как клетки были проанализированы с помощью проточной цитометрии. Надосадочную жидкость собирали и дополнительно оценивали в анализе высвобождения цитокинов.To assess the proliferation of CAR T cells and CAR-TIP T cells in response to antigen, cells were labeled using trace amounts of far-red dye. CD19-expressing Nalm6 target cells were titrated starting at a target:T cell ratio of 1.5:1 and a 1:2 dilution with an 8-point dilution. CAR T-labeled cells or CAR-TIP T cells were added to Nalm6 cells and the culture was incubated for 4 days before the cells were analyzed by flow cytometry. The supernatant was collected and further evaluated in a cytokine release assay.

Как показано на фиг. 2B, CAR+ первичные T-клетки пролиферируют дозозависимым образом в клетки CD19+ NALM6. По сравнению с T-клетками только с CAR, T-клетки, коэкспрессирующие CAR и ICOSL дикого типа, или один из примерных ICOSL TIP, демонстрировали повышенную пролиферацию по сравнению с T-клетками, экспрессирующими только CAR. Совместная экспрессия CAR и TIP, содержащих либо варианты N52H/N57Y/Q100P,As shown in FIG. 2B, CAR+ primary T cells proliferate in a dose-dependent manner into CD19+ NALM6 cells. Compared to CAR-only T cells, T cells coexpressing CAR and wild-type ICOSL, or one of the exemplary ICOSL TIPs, showed increased proliferation compared to CAR-only T cells. Co-expression of CAR and TIP containing either N52H/N57Y/Q100P variants

E16V/N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/Y152C/K156M/C198R, либо вариант N52H/N57Y/Q100R ICOSLECD, демонстрировала большую пролиферацию, чем T-клетки коэкспрессирующие CAR и ICOSL дикого типа, что указывает на то, что TIP, экспрессированные на первичных T-клетках, обеспечивают улучшенный костимулирующий сигнал для усиления пролиферации T-клеток.E16V/N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/Y152C/K156M/C198R, or the N52H/N57Y/Q100R ICOSLECD variant, exhibited greater proliferation than T cells coexpressing wild-type CAR and ICOSL, indicating that TIP, expressed on primary T cells provide an enhanced co-stimulatory signal to enhance T cell proliferation.

Пример 12.Example 12.

Очистка и оценка очищенных вариантов домена IgSF ICOSL.Purification and evaluation of purified IgSF ICOSL domain variants.

Стратегия очистки была использована для примерных отобранных кандидатов, описанных в примерах 6 и 10. Человеческие клетки, полученные из клеточной линии 293 (Expi293), транзиторно трансфицировали экспрессирующей конструкцией, и в клетках экспрессировалась гибридная молекула ECD ICOSL Fc. Затем гибридные белки Fc очищали из надосадочных жидкостей с помощью протеина A и аффинной хроматографии (MabSelect SuRe). За этой начальной стадией очистки проводилась эксклюзионная хроматография (SEC) для дополнительной очистки белков (Superdex200 16x60). Образцы после обеих стадий очистки сохраняли и сравнивали с помощью аналитической SEC. Концентрация белка была определена после очистки на протеине A. Полученные очищенные белки также анализировали аналитической SEC на высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) для оценки чистоты.The purification strategy was used for the exemplary selected candidates described in Examples 6 and 10. Human cells derived from cell line 293 (Expi293) were transiently transfected with an expression construct and the cells expressed the ICOSL Fc ECD fusion molecule. Fc fusion proteins were then purified from supernatants using protein A and affinity chromatography (MabSelect SuRe). This initial purification step was followed by size exclusion chromatography (SEC) to further purify the proteins (Superdex200 16x60). Samples from both purification steps were stored and compared using analytical SEC. Protein concentration was determined after purification on Protein A. The resulting purified proteins were also analyzed by analytical SEC on high performance liquid chromatography (HPLC) to assess purity.

Процент основного пика в очищенных образцах определяли и по сравнению с белком, очищенным изначально на стадии с протеином A (% основного пика пула прот. A) по сравнению с белком, очищенным с помощью протеина A с последующей препаративной SEC (% основного пика пула SEC T=D0). Как показано в табл. 17, дополнительная стадия SEC значительно увеличивает чистоту белка очищенных белков. Для дальнейшей оценки стабильности белков, белки, очищенные препаративной SEC, оставляли при комнатной температуре в течение 24 ч, а затем оценивали и сравнивали по основному пику с помощью ВЭЖХ (% основного пика пула SEC T=D24) и сравнивали с образцом D0. Было определено изменение в % основного пика в D0 по сравнению с D24 (▲% основного пика пула SEC). Как показано в табл. 17, большая часть протестированных примерных вариантных гибридных молекул ECD ICOSL Fc демон- 164 044346 стрировали незначительное изменение в % основного пика, что указывает на минимальную агрегацию вариантов белка.The percentage of the major peak in the purified samples was determined and compared to the protein purified initially in the Protein A step (% of the major peak of the prot. A pool) compared to the protein purified with Protein A followed by preparative SEC (% of the major peak of the SEC T pool =D0). As shown in table. 17, the additional SEC step significantly increases the protein purity of the purified proteins. To further evaluate protein stability, preparative SEC-purified proteins were left at room temperature for 24 h and then scored and compared by HPLC major peak (% SEC pool major peak T=D24) and compared to sample D0. The change in % of the main peak in D0 compared to D24 (▲% of the main peak of the SEC pool) was determined. As shown in table. 17, most of the exemplary ECD ICOSL Fc variant fusion molecules tested showed little change in the % of the main peak, indicating minimal aggregation of the protein variants.

Таблица 17Table 17

Очистка вариантов белков ICOSLPurification of ICOSL protein variants

Мутация (ии) ICOSL ICOSL mutation(s) SEQ ID NO. (ECD ) SEQ ID NO. (ECD) Expi29 3 ирод. Прот. А мг/л Expi29 3 herod. Prot. A mg/l % ОСНОВНОЕ о пика пула Прот. А % BASIC about peak pool Prot. A % ОСНОВНОЕ о пика пула SEC T=D0 % BASIC about peak pool SEC T=D0 % ОСНОВНОЕ о пика пула SEC T=D24 % BASIC about SEC pool peak T=D24 А% ОСНОВНОЕ о пика пула SEC A% BASIC about SEC pick pool N52S, N194D N52S, N194D 300 300 60 60 73,8 73.8 97,1 97.1 95,8 95.8 1,3 1.3 N52H, N57Y, Q100R, F172S N52H, N57Y, Q100R, F172S 317 317 95 95 65,4 65.4 90,9 90.9 86 86 4,9 4.9 N52S, Е90А N52S, E90A 364 364 73 73 50,6 50.6 87,9 87.9 78,6 78.6 9,3 9.3 N52H, Q100R N52H,Q100R 308 308 58 58 - - - - - - - - N52H, N57Y, Q100R N52H, N57Y, Q100R 135 135 134 134 93,2 93.2 96 96 92,7 92.7 3,3 3.3 N52S, F120S, I143V, N52S, F120S, I143V, 111 111 136 136 90,4 90.4 95,5 95.5 93,3 93.3 2,2 2.2 I224V N52H, N57Y, Q100R, C198R I224V N52H, N57Y, Q100R, C198R 300 300 60 60 73,8 73.8 97,1 97.1 95,8 95.8 1,3 1.3 N52H, N57Y, Q100P N52H, N57Y, Q100P 317 317 95 95 65,4 65.4 90,9 90.9 86 86 4,9 4.9 N30D, К42Е, N52S N30D, K42E, N52S 364 364 73 73 50,6 50.6 87,9 87.9 78,6 78.6 9,3 9.3 N52H, N57Y, Q100R, L102R, V110D, H115R, C198R N52H, N57Y, Q100R, L102R, V110D, H115R, C198R 308 308 58 58 - - - - - - - - N52H, N57Y, Q100R, V122A N52H, N57Y, Q100R, V122A 135 135 134 134 93,2 93.2 96 96 92,7 92.7 3,3 3.3 N52 Y/N57 Y/F13 8L/L203 Р N52 Y/N57 Y/F13 8L/L203 R 111 111 136 136 90,4 90.4 95,5 95.5 93,3 93.3 2,2 2.2 E16V, N52H, N57Y, Q100R, V110D, H115R, E16V, N52H, N57Y, Q100R, V110D, H115R, 300 300 60 60 73,8 73.8 97,1 97.1 95,8 95.8 1,3 1.3 Y152C, К156М, C198R N52H, N57Y, V110A, C198R, R221I Y152C, K156M, C198R N52H, N57Y, V110A, C198R, R221I 317 317 95 95 65,4 65.4 90,9 90.9 86 86 4,9 4.9 N52H, N57Y, Q100R, V110D, C198R, S212G N52H, N57Y, Q100R, V110D, C198R, S212G 364 364 73 73 50,6 50.6 87,9 87.9 78,6 78.6 9,3 9.3 VI IE, N30D, N52H, N57Y, Н94Е, L96I, L98F, N194D, V210A, I218T VI IE, N30D, N52H, N57Y, H94E, L96I, L98F, N194D, V210A, I218T 308 308 58 58 - - - - - - - - N52H, I143T N52H, I143T 135 135 134 134 93,2 93.2 96 96 92,7 92.7 3.3 3.3 N52D N52D 111 111 136 136 90,4 90.4 95,5 95.5 93,3 93.3 2,2 2.2

Пример 13.Example 13.

Оценка костимулирующей биоактивности очищенных отобранных вариантов доменов ICOSL IgSF.Evaluation of co-stimulatory bioactivity of purified selected variants of ICOSL IgSF domains.

Примерные гибридные молекулы ECD ICOSL Fc, очищенные, как описано в примере 12, оценивали по их биоактивности с помощью MLR, по существу, как описано в примере 6. Смесь из 10 нМ или 40 нМ вариантных ICOSL Fc-белков связывали в течение ночи в 96-луночных планшетах в присутствии 10 нМ αнти-CD3. Планшеты промывали и в течение 96 ч добавляли 100000 меченых CFSE пан T-клеток. Надосадочные жидкости собирали, и уровни IFN-гамма и IL-17 измеряли с помощью ELISA.Exemplary ICOSL Fc ECD fusion molecules, purified as described in Example 12, were assessed for their bioactivity by MLR essentially as described in Example 6. A mixture of 10 nM or 40 nM variant ICOSL Fc proteins was coupled overnight at 96 -well plates in the presence of 10 nM αanti-CD3. The plates were washed and 100,000 CFSE-labeled pan T cells were added for 96 h. Supernatants were collected, and IFN-γ and IL-17 levels were measured by ELISA.

Результаты по секреции цитокинов, индуцированной костимуляцией анти-CD3 с примерными тестируемыми вариантами (10 нМ и 40 нМ ICOSL Fc), показаны на фиг. 3A и 3A, где представлены примерные аминокислотные замены (замещения) доменов IgSF в ECD из ICOSL. Гистограммы на фиг. 3A и 3B демонстрируют количество секретируемого IFN-гамма и IL-17, соответственно, с помощью ELISA в надосадочных жидкостях (пг/мл).Results for cytokine secretion induced by anti-CD3 costimulation with exemplary variants tested (10 nM and 40 nM ICOSL Fc) are shown in FIG. 3A and 3A, which shows exemplary amino acid substitutions (substitutions) of IgSF domains in the ECD from ICOSL. The histograms in Fig. 3A and 3B show the amount of IFN-gamma and IL-17 secreted, respectively, by ELISA in the supernatants (pg/ml).

Уровень высвобождения цитокинов, индуцированного костимуляцией aнти-CD3 с тестируемыми вариантами по сравнению с уровнем, индуцированным костимуляцией анти-CD3 с WT ICOSL, обозначен горизонтальной линией. Результаты показали, что аффинная модификация вариантных молекул проявляет активность в отношении модуляции функциональной активности T-клеток, в том числе в отношении существенного увеличения секреции IFN-гамма и IL-17 в анализе костимуляции. Повышенная иммунологическая активность наблюдалась с некоторыми вариантами.The level of cytokine release induced by anti-CD3 costimulation with the tested variants compared to the level induced by anti-CD3 costimulation with WT ICOSL is indicated by the horizontal line. The results showed that affinity modification of the variant molecules was active in modulating T cell functional activity, including a significant increase in IFN-gamma and IL-17 secretion in a costimulation assay. Increased immunological activity has been observed with some variants.

Пример 14.Example 14.

Оценка пролиферации очищенных отобранных вариантов домена ICOSL IgSF.Assessment of proliferation of purified selected ICOSL domain variants of IgSF.

Примерные варианты гибридных молекул ECD ICOSL Fc, очищенных, как описано в примере 12, были оценены по способности костимулировать анти-CD3-индуцированную пролиферации T-клеток. Первичные T-клетки метили карбоксифлуоресцеин сукцинмидиловым эфиром (CFSE). Смесь 10 нМ или 40 нМ вариантного белка ECD ICOSL Fc или белка ICOSL дикого типа связывали в течение ночи с 96луночными планшетами в присутствии 10 нМ анти-CD3 и затем помещали T-клетки и инкубировали в течение 3 дней. В качестве контроля пролиферация также оценивалась в присутствии связанных анти- 165 044346Exemplary ECD ICOSL Fc fusion molecule variants purified as described in Example 12 were evaluated for their ability to co-stimulate anti-CD3-induced T cell proliferation. Primary T cells were labeled with carboxyfluorescein succinmidyl ester (CFSE). A mixture of 10 nM or 40 nM variant ECD ICOSL Fc protein or wild-type ICOSL protein was bound overnight to 96-well plates in the presence of 10 nM anti-CD3 and then loaded onto T cells and incubated for 3 days. As a control, proliferation was also assessed in the presence of bound anti- 165 044346

CD3 и IgG или IgG отдельно. Клетки окрашивали на поверхностные маркеры CD4 или CD8, а пролиферацию T-клеток, CD4+ T-клеток или CD8+ T-клеток определяли путем оценки CFSE-разбавления с помощью проточной цитометрии.CD3 and IgG or IgG separately. Cells were stained for CD4 or CD8 surface markers, and T cell, CD4+ T cell, or CD8+ T cell proliferation was determined by assessing CFSE dilution using flow cytometry.

Результаты приведены на фиг. 4A и 4B для примерных вариантов, протестированных при 40 нМ и 10 нМ ICOSL, соответственно. Как показано на фиг. 4A, почти все протестированные вариантные гибридные молекулы ECD ICOSL Fc индуцировали пролиферацию, превышающую пролиферацию для контрольного WT. Как показано на фиг. 4B, различия в пролиферации были более очевидными при 10 нМ с некоторыми вариантами, обеспечивающими максимальную пролиферацию даже при этой более низкой концентрации.The results are shown in Fig. 4A and 4B for exemplary embodiments tested at 40 nM and 10 nM ICOSL, respectively. As shown in FIG. 4A, almost all variant ECD ICOSL Fc fusion molecules tested induced proliferation greater than that of the WT control. As shown in FIG. 4B, differences in proliferation were more apparent at 10 nM with some variants providing maximum proliferation even at this lower concentration.

Пример 15.Example 15.

Оценка связывания и активности очищенных отобранных доменных вариантов ICOSL IgSF.Assessment of binding and activity of purified selected ICOSL IgSF domain variants.

Примерные вариантные гибридные молекулы ECD ICOSL Fc, очищенные, как описано в примере 12, оценивали на предмет связывания и функциональные активности с использованием способов, по существу, как описано в примере 6, или Примере 10.Exemplary ECD ICOSL Fc variant fusion molecules, purified as described in Example 12, were assessed for binding and functional activities using methods substantially as described in Example 6 or Example 10.

A. Проточные цитометрические анализы связывания.A. Flow cytometric binding assays.

Клетки человека, полученные из клеточной линии 293 (Expi293) трансфицировали CD28, CTLA-4, ICOS или ложно трансфицировали. Затем клетки инкубировали с гибридными молекулами ECD ICOSL Fc или ECD ICOSL-Fc дикого типа, которые титровали от 100000 пМ до 46 пМ, и связывание наблюдали с использованием РЕ-конъюгированного антитела против Fc человека, как описано в примере 6. Связывание оценивали с помощью проточной цитометрии и средней интенсивности флуоресценции (MFI), а процент (%) клеток, положительных для сигнала, определяли с использованием программного обеспечения Cell Quest Pro (Becton Dickinson, США). Определяли концентрацию ICOSL-Fc, которая давала полумаксимальный ответ MFI (MFI EC50) или % положительных клеток (% (+) EC50).Human cells derived from cell line 293 (Expi293) were transfected with CD28, CTLA-4, ICOS, or mock transfected. Cells were then incubated with wild-type ECD ICOSL Fc or ECD ICOSL-Fc fusion molecules titrated from 100,000 pM to 46 pM, and binding was monitored using PE-conjugated anti-human Fc antibody as described in Example 6. Binding was assessed by flow assay cytometry and mean fluorescence intensity (MFI), and the percentage (%) of cells positive for signal was determined using Cell Quest Pro software (Becton Dickinson, USA). The concentration of ICOSL-Fc that produced the half-maximal MFI response (MFI EC50) or % positive cells (%(+) EC50) was determined.

В табл. 18 представлены результаты. Примерные аминокислотные замены, изображенные в табл. 18, обозначены номером аминокислотного положения, соответствующего аналогичной референсной (например, немодифицированной) последовательности ICOSL ECD, представленной в SEQ ID NO: 32. Для некоторых значений (например, связывание WT с CD28) невозможно получить EC50, поэтому значение 1000000 пМ было произвольно выбрано для целей форматирования данных. Подобно результатам, полученным в предыдущих анализах связывания, описанных в примере 10 выше, наблюдалась измененная аффинность связывания вариантной гибридной молекулы ICOSL ECD-Fc, по меньшей мере, для одного когнатного контрструктурного лиганда.In table 18 presents the results. Approximate amino acid substitutions shown in table. 18 are designated by the amino acid position number corresponding to the similar reference (eg, unmodified) ICOSL ECD sequence shown in SEQ ID NO: 32. For some values (eg, WT binding to CD28), an EC50 cannot be obtained, so a value of 1,000,000 pM was arbitrarily chosen for data formatting purposes. Similar to the results obtained in the previous binding assays described in Example 10 above, altered binding affinity of the variant ICOSL ECD-Fc hybrid molecule was observed for at least one cognate counterstructure ligand.

Таблица 18Table 18

EC50 по данным проточной цитометрии для вариантов ICOSLEC50 by flow cytometry for ICOSL variants

Мутация(ии) ICOSL ICOSL mutation(s) SEQ ID NO. (ECD) SEQ ID NO. (ECD) CD28 MFI EC50 [nM] CD28 MFI EC50 [nM] CD28 % (+) EC50 [nM] CD28%(+)EC50 [nM] CTLA-4 MFI EC50 [nM] CTLA-4 MFI EC50 [nM] CTLA-4 % (+) EC50 [nM] CTLA-4% (+) EC50 [nM] ICOS MFI EC50 [nM] ICOS MFI EC50 [nM] ICOS % (+) EC50 [nM] ICOS % (+) EC50 [nM] WT ICOSL WT ICOSL 32 32 100000 0 100000 0 1000000 1000000 1000000 1000000 1000000 1000000 10543 10543 762 762 N52H, I143T N52H, I143T 135 135 19147 19147 567 567 20259 20259 1891 1891 2666 2666 286 286 N52H, N57Y, Q100R, C198R N52H, N57Y, Q100R, C198R 365 365 950 950 159 159 73548 73548 422 422 1032 1032 179 179 N52H, N57Y, Q100R, V122A N52H, N57Y, Q100R, V122A 290 290 29701 29701 152 152 1008 1008 293 293 302 302 64 64 N52H, N57Y, Q100R, F172S N52H, N57Y, Q100R, F172S 291 291 1006 1006 231 231 1332 1332 396 396 779 779 130 130 N52 Y/N57 Y/F13 8L/L203P N52 Y/N57 Y/F13 8L/L203P 112 112 7844 7844 386 386 7457 7457 994 994 3104 3104 408 408 VI IE, N30D, N52H, N57Y, H94E, L96I, L98F, N194D, V210A, I218T VI IE, N30D, N52H, N57Y, H94E, L96I, L98F, N194D, V210A, I218T 308 308 5961 5961 595 595 6909 6909 1026 1026 5514 5514 852 852 N52H, N57Y, Q100R, L102R, V110D, H115R, C198R N52H, N57Y, Q100R, L102R, V110D, H115R, C198R 367 367 1034 1034 307 307 23328 23328 579 579 3172 3172 347 347 N52H, N57Y, Q100R N52H, N57Y, Q100R 283 283 1665 1665 238 238 11002 11002 533 533 383 383 131 131 N52H, Q100R N52H,Q100R 285 285 1305 1305 274 274 8593 8593 1997 1997 702 702 167 167

- 166 044346- 166 044346

N52H, N57Y, Q100R, V110D, C198R, S212G N52H, N57Y, Q100R, V110D, C198R, S212G 364 364 4987 4987 594 594 30382 30382 922 922 50219 50219 814 814 N52H, N57Y, Q100P N52H, N57Y, Q100P ИЗ FROM 21137 21137 402 402 22651 22651 758 758 4090 4090 320 320 E16V, N52H, N57Y, Q100R, V110D, H115R, Y152C, К156М, C198R E16V, N52H, N57Y, Q100R, V110D, H115R, Y152C, K156M, C198R 300 300 2508 2508 387 387 5399 5399 806 806 2381 2381 421 421 N30D, К42Е, N52S N30D, K42E, N52S 324 324 - - 3683800 3683800 8593 8593 1997 1997 3251 3251 558 558 N52S, F120S, I143V, I224V N52S, F120S, I143V, I224V 325 325 902400 902400 9060 9060 28126 28126 2948 2948 4366 4366 245 245 N52S, Е90А N52S, E90A 323 323 133970 0 133970 0 31302 31302 31419 31419 5828 5828 5225 5225 473 473 N52H, N57Y, V110A, C198R, R221I N52H, N57Y, V110A, C198R, R221I 317 317 1809 1809 426 426 7201 7201 841 841 1293 1293 433 433 N52S, N194D N52S, N194D 366 366 944669 944669 11876 11876 1254880 1254880 5170 5170 473 473 206 206 N52D N52D 111 111 288617 288617 17793 17793 396841 396841 3891 3891 2642 2642 137 137

В. Анализ связывания ForteBio.B. ForteBio binding assay.

Белок-белковые взаимодействия между рецепторами и иммуномодулирующими белками с вариантным доменом ICOSL дополнительно оценивали с использованием анализов связывания Fortebio. ICOS, CD28 и CTLA-4 загружали индивидуально на античеловеческие датчики захвата (ForteBio Octet АНС) и немодифицированную молекулу ICOSL ECD-Fc дикого типа, гибридную молекулу PD-L2 ED-Fc дикого типа или вариантные гибридные молекулы ICOSL Fc связывали с рецепторами в 4-точечных титрованиях. Каждое титрование было глобально подогнано для вычисления ассоциации (коп) и диссоциации (Kdis) каждого белка. Определяли ответ анти-человеческих датчиков захвата каждого тестируемого рецептора на вариантную гибридную молекулу ICOSL ECD-Fc. Константу диссоциации (KD) рассчитывали и сравнивали с диким типом, чтобы определить кратное значение улучшения (кратное улучш.).Protein-protein interactions between receptors and ICOSL variant domain immunomodulatory proteins were further assessed using Fortebio binding assays. ICOS, CD28, and CTLA-4 were loaded individually onto anti-human capture sensors (ForteBio Octet ANS) and unmodified wild-type ICOSL ECD-Fc molecule, wild-type PD-L2 ED-Fc fusion molecule, or variant ICOSL Fc fusion molecules were bound to receptors in 4- point titrations. Each titration was globally fitted to calculate the association (cop) and dissociation (Kdis) of each protein. The response of the anti-human uptake sensors of each receptor tested to the variant ICOSL ECD-Fc fusion molecule was determined. The dissociation constant (KD) was calculated and compared with the wild type to determine the fold improvement (fold improvement).

Результаты связывания с ICOS приведены в табл. 19, с CD28 - в табл. 20, а с CTLA-4 - в табл. 21. Примерные аминокислотные замены, изображенные в табл. 19-21, обозначены номером аминокислотного положения, соответствующего аналогичной исходной немодифицированной последовательности ICOSL ECD, представленной в SEQ ID NO: 32.The results of binding to ICOS are given in table. 19, with CD28 - in table. 20, and with CTLA-4 - in table. 21. Approximate amino acid substitutions shown in table. 19-21 are designated by the amino acid position number corresponding to the same original unmodified ICOSL ECD sequence shown in SEQ ID NO: 32.

Таблица 19Table 19

Анализ ForteBio связывания с ICOSForteBio ICOS Binding Assay

Мутация(ии) ICOSL ICOSL mutation(s) SEQ ID NO. (ECD) SEQ ID NO. (ECD) Ответ Answer KD (M) KD(M) Kon (1/Mc) Kon (1/Mc) Kdis (1/c) Kdis (1/c) Полны й R2 Full R2 Крат ное улуч ш. Multiple improvement. WT ICOSL WT ICOSL 32 32 0,73 0.73 8,83E-10 8.83E-10 l,78E+05 l,78E+05 l,58E-04 l,58E-04 0,9908 0.9908 - - N52H, I143T N52H, I143T 135 135 0,87 0.87 3,32E-10 3.32E-10 ЗДЗЕ+05 ZDZE+05 l,04E-04 l,04E-04 0,9683 0.9683 2,7 2.7 N52H, N57Y, Q100R, C198R N52H, N57Y, Q100R, C198R 365 365 0,74 0.74 4,92E-10 4.92E-10 3,85E+05 3.85E+05 l,89E-04 l,89E-04 0,9882 0.9882 1,8 1.8 N52H, N57Y, Q100R, V122A N52H, N57Y, Q100R, V122A 290 290 0,67 0.67 4,72E-10 4.72E-10 3,77E+05 3.77E+05 l,78E-04 l,78E-04 0,9775 0.9775 1,9 1.9 N52H, N57Y, Q100R, F172S N52H, N57Y, Q100R, F172S 291 291 0,68 0.68 4,20E-10 4.20E-10 4,34E+05 4.34E+05 l,82E-04 l,82E-04 0,9545 0.9545 2,1 2.1 N52 Y/N57 Y/F13 8L/L20 3P N52 Y/N57 Y/F13 8L/L20 3P 112 112 0,64 0.64 7,69E-10 7.69E-10 2,22E+05 2.22E+05 l,71E-04 l,71E-04 0,9782 0.9782 1,1 1.1 VI IE, N30D, N52H, N57Y, H94E, L96I, L98F, N194D, V210A, I218T VI IE, N30D, N52H, N57Y, H94E, L96I, L98F, N194D, V210A, I218T 308 308 0,67 0.67 3,62E-10 3.62E-10 3,55E+05 3.55E+05 l,29E-04 l,29E-04 0,9687 0.9687 2,4 2.4 N52H, N57Y, Q100R, L102R, V110D, H115R, C198R N52H, N57Y, Q100R, L102R, V110D, H115R, C198R 367 367 0,76 0.76 4,77E-10 4.77E-10 3,29E+05 3.29E+05 l,57E-04 l,57E-04 0,9616 0.9616 1,9 1.9 N52H, N57Y, Q100R N52H, N57Y, Q100R 283 283 0,74 0.74 3,69E-10 3.69E-10 2,87E+05 2.87E+05 l,06E-04 l,06E-04 0,9817 0.9817 2,4 2.4 N52H, Q100R N52H,Q100R 285 285 0,79 0.79 3,73E-10 3.73E-10 4,45E+05 4.45E+05 l,66E-04 l,66E-04 0,968 0.968 2,4 2.4 N52H, N57Y, Q100R, V110D, C198R, S212G N52H, N57Y, Q100R, V110D, C198R, S212G 364 364 0,60 0.60 l,29E-09 l,29E-09 l,66E+05 l,66E+05 2Д5Е-04 2D5E-04 0,9846 0.9846 0,7 0.7 N52H, N57Y, QI OOP N52H, N57Y, QI OOP 113 113 0,73 0.73 3,82E-10 3.82E-10 3,71 E+05 3.71 E+05 l,42E-04 l,42E-04 0,9729 0.9729 2,3 2.3 E16V, N52H, N57Y, Q100R, V110D, H115R, Y152C, K156M, C198R E16V, N52H, N57Y, Q100R, V110D, H115R, Y152C, K156M, C198R 300 300 0,75 0.75 5,43E-10 5.43E-10 2,65E+05 2.65E+05 144E-04 144E-04 0,9848 0.9848 1,6 1.6 N30D, K42E, N52S N30D, K42E, N52S 324 324 0,80 0.80 3,71E-10 3.71E-10 4,48E+05 4.48E+05 l,66E-04 l,66E-04 0,9651 0.9651 2,4 2.4 N52S, F120S, I143V, I224V N52S, F120S, I143V, I224V 325 325 0,80 0.80 3,llE-10 3.llE-10 5,03E+05 5.03E+05 l,56E-04 l,56E-04 0,9673 0.9673 2,8 2.8 N52S, E90A N52S, E90A 323 323 0,88 0.88 3,40E-10 3.40E-10 4,85E+05 4.85E+05 l,65E-04 l,65E-04 0,9792 0.9792 2,6 2.6 N52H, N57Y, VI10 A, C198R, R221I N52H, N57Y, VI10 A, C198R, R221I 317 317 0,68 0.68 4,77E-10 4.77E-10 ЗД5Е+05 ZD5E+05 l,50E-04 l,50E-04 0,976 0.976 1,9 1.9 N52S, N194D N52S, N194D 366 366 0,88 0.88 3,37E-10 3.37E-10 3,38E+05 3.38E+05 1Д4Е-04 1D4E-04 0,9723 0.9723 2,6 2.6 N52D N52D 111 111 0,87 0.87 3,38E-10 3.38E-10 3,91E+ 05 3.91E+ 05 l,32E-04 l,32E-04 0,9792 0.9792 2,6 2.6 Wildtype PD-L2 ED-Fc Wildtype PD-L2 ED-Fc - - 0,03 0.03

- 167044346- 167044346

Таблица 20Table 20

Анализ ForteBio связывания с CD28ForteBio CD28 Binding Assay

Мутация(ии) ICOSL ICOSL mutation(s) SEQ ID NO. (ECD) SEQ ID NO. (ECD) Ответ Answer KD (M) KD(M) Kon (1/Mc) Kon (1/Mc) Kdis (1/c) Kdis (1/c) Поли ый R2 Poly R2 Крат ное улуч ш. Multiple improvement. WT ICOSL WT ICOSL 32 32 0,33 0.33 l,39E-08 l,39E-08 6,69E+04 6.69E+04 9,29E-04 9.29E-04 0,9715 0.9715 - - N52H, I143T N52H, I143T 135 135 0,95 0.95 5,25E-10 5.25E-10 4,27E+05 4.27E+05 2,24E-04 2.24E-04 0,9877 0.9877 26,5 26.5 N52H, N57Y, Q100R, N52H, N57Y, Q100R, 365 365 1,14 1.14 4,47E-10 4.47E-10 4Д2Е+05 4D2E+05 l,84E-04 l,84E-04 0,9877 0.9877 31,0 31.0 C198R C198R N52H, N57Y, Q100R, V122A N52H, N57Y, Q100R, V122A 290 290 1,04 1.04 3,90E-10 3.90E-10 4,07E+05 4.07E+05 l,59E-04 l,59E-04 0,9878 0.9878 35,6 35.6 N52H, N57Y, Q100R, F172S N52H, N57Y, Q100R, F172S 291 291 1,06 1.06 2,93E-10 2.93E-10 4,26E+05 4.26E+05 l,25E-04 l,25E-04 0,9836 0.9836 47,3 47.3 N52Y/N57Y/F138L/L20 3P N52Y/N57Y/F138L/L20 3P 112 112 0,86 0.86 7,83E-10 7.83E-10 l,79E+05 l,79E+05 l,40E-04 l,40E-04 0,993 0.993 17,7 17.7 VI IE, N30D, N52H, N57Y, H94E, L96I, L98F, N194D, V210A, I218T VI IE, N30D, N52H, N57Y, H94E, L96I, L98F, N194D, V210A, I218T 308 308 0,92 0.92 5,53E-10 5.53E-10 2,54E+05 2.54E+05 l,40E-04 l,40E-04 0,9906 0.9906 25,1 25.1 N52H, N57Y, Q100R, L102R, V110D, H115R, C198R N52H, N57Y, Q100R, L102R, V110D, H115R, C198R 367 367 1,10 1.10 3,66E-10 3.66E-10 3,41 E+05 3.41 E+05 l,25E-04 l,25E-04 0,986 0.986 37,9 37.9 N52H, N57Y, Q100R N52H, N57Y, Q100R 283 283 1,04 1.04 3,68E-10 3.68E-10 3,72E+05 3.72E+05 l,37E-04 l,37E-04 0,983 0.983 37,7 37.7 N52H, Q100R N52H,Q100R 285 285 1,09 1.09 4,01E-10 4.01E-10 5,OSE+O5 5,OSE+O5 2,02E-04 2.02E-04 0,9938 0.9938 34,7 34.7 N52H, N57Y, Q100R, V110D, C198R, S212G N52H, N57Y, Q100R, V110D, C198R, S212G 364 364 0,94 0.94 8,96E-10 8.96E-10 l,78E+05 l,78E+05 l,60E-04 l,60E-04 0,9961 0.9961 15,5 15.5 N52H, N57Y, QI OOP N52H, N57Y, QI OOP 113 113 0,99 0.99 4,36E-10 4.36E-10 3,29E+05 3.29E+05 l,43E-04 l,43E-04 0,9835 0.9835 31,8 31.8 E16V, N52H, N57Y, Q100R, V110D, H115R, Y152C, K156M, C198R E16V, N52H, N57Y, Q100R, V110D, H115R, Y152C, K156M, C198R 300 300 1,06 1.06 5,03E-10 5.03E-10 3,06E+05 3.06E+05 l,54E-04 l,54E-04 0,9872 0.9872 27,6 27.6 N30D, K42E, N52S N30D, K42E, N52S 324 324 0,54 0.54 l,95E-09 l,95E-09 2,74E+05 2.74E+05 5,33E-04 5.33E-04 0,9772 0.9772 7,1 7.1 N52S, F120S, I143V, I224V N52S, F120S, I143V, I224V 325 325 0,84 0.84 9Д0Е-10 9D0E-10 4,51 E+05 4.51 E+05 4Д0Е-04 4D0E-04 0,9742 0.9742 15,3 15.3 N52S, E90A N52S, E90A 323 323 0,94 0.94 9,69E-10 9.69E-10 4,74E+05 4.74E+05 4,59E-04 4.59E-04 0,978 0.978 14,3 14.3 N52H, N57Y, V110A, C198R, R221I N52H, N57Y, V110A, C198R, R221I 317 317 0,94 0.94 5,63E-10 5.63E-10 2,63E+05 2.63E+05 l,48E-04 l,48E-04 0,9781 0.9781 24,7 24.7 N52S, N194D N52S, N194D 366 366 0,82 0.82 l,04E-09 l,04E-09 3,53E+05 3.53E+05 3,68E-04 3.68E-04 0,9887 0.9887 13,3 13.3 N52D N52D 111 111 0,86 0.86 1Д6Е-09 1D6E-09 3,36E+05 3.36E+05 3,90E-04 3.90E-04 0,989 0.989 И,9 I,9 wildtype PD-L2 ED-Fc wildtype PD-L2 ED-Fc - - -0,04 -0.04

Таблица 21Table 21

Анализ ForteBio связывания с CTLA-4ForteBio CTLA-4 Binding Assay

Мутация(ии) ICOSL ICOSL mutation(s) SEQ ID NO. (ECD) SEQ ID NO. (ECD) Ответ Answer KD (M) KD(M) Kon (1/Mc) Kon (1/Mc) Kdis (1/c) Kdis (1/c) Полный R2 Full R2 Кратное улуч. Multiple improvement WT ICOSL WT ICOSL 32 32 0,21 0.21 7,71E-08 7.71E-08 l,92E+04 l,92E+04 l,48E-03 l,48E-03 0,8919 0.8919 - - N52H, I143T N52H, I143T 135 135 0,96 0.96 6,78E-10 6.78E-10 7,26E+05 7.26E+05 4,92E-04 4.92E-04 0,9641 0.9641 113,8 113.8 N52H, N57Y, Q100R, C198R N52H, N57Y, Q100R, C198R 365 365 1,57 1.57 6,45E-10 6.45E-10 4,79E+05 4.79E+05 3,09E-04 3.09E-04 0,9875 0.9875 119,6 119.6 N52H, N57Y, Q100R, V122A N52H, N57Y, Q100R, V122A 290 290 1,43 1.43 5,76E-10 5.76E-10 4,73E+05 4.73E+05 2,72E-04 2.72E-04 0,9926 0.9926 133,9 133.9 N52H, N57Y, Q100R, F172S N52H, N57Y, Q100R, F172S 291 291 1,47 1.47 5,36E-10 5.36E-10 5ДЗЕ+05 5DZE+05 2,75E-04 2.75E-04 0,9924 0.9924 144,0 144.0

- 168 044346- 168 044346

N52Y/N57Y/F138L/L 203Р N52Y/N57Y/F138L/L 203Р 112 112 1,33 1.33 8,ЗЗЕ-10 8,ЗЗЭ-10 3,45Е+05 3.45E+05 2,87Е-04 2.87E-04 0,9943 0.9943 92,6 92.6 VI IE, N30D, N52H, N57Y, Н94Е, L96I, L98F, N194D, V210A, I218T N52H, N57Y, Q100R, VI IE, N30D, N52H, N57Y, H94E, L96I, L98F, N194D, V210A, I218T N52H, N57Y, Q100R, 308 308 1,50 1.50 6,48Е-10 6.48E-10 ЗД2Е+05 ZD2E+05 2,02Е-04 2.02E-04 0,9943 0.9943 119,0 119.0 L102R, V110D, H115R, C198R L102R, V110D, H115R, C198R 367 367 1,60 1.60 8,64Е-10 8.64E-10 4,79Е+05 4.79E+05 4Д4Е-04 4D4E-04 0,9825 0.9825 89,2 89.2 N52H, N57Y, Q100R N52H, N57Y, Q100R 283 283 1,65 1.65 7Д9Е-10 7D9E-10 4,28Е+05 4.28E+05 3,08Е-04 3.08E-04 0,9895 0.9895 107,2 107.2 N52H, Q100R N52H, N57Y, Q100R, N52H,Q100R N52H, N57Y, Q100R, 285 285 1,17 1.17 5,92Е-10 5.92E-10 8,37Е+05 8.37E+05 4,96Е-04 4.96E-04 0,9629 0.9629 130,3 130.3 V110D, C198R, S212G V110D, C198R, S212G 364 364 1,32 1.32 1,47Е-09 1.47E-09 2,34Е+05 2.34E+05 3,44Е-04 3.44E-04 0,9937 0.9937 52,6 52.6 N52H, N57Y, Q100P E16V, N52H, N57Y, N52H, N57Y, Q100P E16V, N52H, N57Y, ИЗ FROM 1,51 1.51 6,47Е-10 6.47E-10 3,61 Е+05 3.61 E+05 2,ЗЗЕ-04 2,ZZE-04 0,9911 0.9911 119,2 119.2 Q100R, V110D, H115R, Y152C, Q100R, V110D, H115R, Y152C, 300 300 1,58 1.58 1,06Е-09 1.06E-09 4,24Е+05 4.24E+05 4,49Е-04 4.49E-04 0,9779 0.9779 72,8 72.8 К156М, C198R N30D, К42Е, N52S K156M, C198R N30D, K42E, N52S 324 324 0,42 0.42 2,81Е-09 2.81E-09 2,42Е+05 2.42E+05 6,81Е-04 6.81E-04 0,9676 0.9676 27,4 27.4 N52S, F120S, I143V, I224V N52S, F120S, I143V, I224V 325 325 0,58 0.58 1,20Е-09 1.20E-09 ЗД0Е+05 ZD0E+05 3,72Е-04 3.72E-04 0,9283 0.9283 64,3 64.3 N52S, Е90А N52S, E90A 323 323 0,64 0.64 1Д2Е-09 1D2E-09 3,28Е+05 3.28E+05 3,68Е-04 3.68E-04 0,9184 0.9184 68,7 68.7 N52H, N57Y, V110A, C198R, R221I N52H, N57Y, V110A, C198R, R221I 317 317 1,44 1.44 1,07Е-09 1.07E-09 4,0SE+05 4.0SE+05 4,32Е-04 4.32E-04 0,9811 0.9811 72,3 72.3 N52S, N194D N52S, N194D 366 366 0,59 0.59 2,52Е-09 2.52E-09 2,66Е+05 2.66E+05 6,69Е-04 6.69E-04 0,9643 0.9643 30,6 30.6 N52D N52D 111 111 0,62 0.62 1,52Е-09 1.52E-09 4Д6Е+05 4D6E+05 6,32Е-04 6.32E-04 0,9234 0.9234 50,7 50.7 wildtype PD-L2 EDFc wildtype PD-L2 EDFc - - 0,00 0.00

D. Анализ коиммобилизации.D. Coimmobilization analysis.

Костимулирующую биоактивность гибридных вариантов ICOSL определяли в анализах коиммобилизации с анти-CD3, по существу, как описано в примере 6. Примерно 0,37 нМ, 1,3 нМ или 10 нМ мышиного антитела против CD3 человека (OKT3, Biolegends, США) разводили в PBS с помощью 10 нМ или 40 нМ вариантного ICOSL ECD Fc или ICOSL ECD-Fc дикого типа. Эту смесь добавляли к обработанным 96-луночным планшетам с плоским дном для тканевых культур, в течение ночи для облегчения прилипания стимулирующих белков к лункам планшета. На следующий день несвязанный белок промывали с планшетов и в каждую лунку добавляли 100000 очищенных пан T-клеток человека. Клетки культивировали за 3 дня до сбора культуральных надосадочных жидокстей и измерения уровней IFN-гамма человека с помощью набора ELISA.The costimulatory bioactivity of the ICOSL hybrid variants was determined in anti-CD3 coimmobilization assays essentially as described in Example 6. Approximately 0.37 nM, 1.3 nM, or 10 nM mouse anti-human CD3 antibody (OKT3, Biolegends, USA) was diluted in PBS with 10 nM or 40 nM variant ICOSL ECD Fc or wild type ICOSL ECD-Fc. This mixture was added to treated 96-well flat-bottom tissue culture plates overnight to facilitate adhesion of stimulatory proteins to the wells of the plate. The next day, unbound protein was washed from the plates and 100,000 purified human pan T cells were added to each well. Cells were cultured for 3 days before collecting culture supernatants and measuring human IFN-gamma levels using an ELISA kit.

В табл. 22 представлено количество IFN-гамма (пг/мл), продуцируемого клетками при различных условиях в анализе коиммобилизации с анти-CD3. В таблице представлены аминокислотные замены примерных вариантных гибридов ICOSL-Fc, которые обозначены номером положения аминокислоты, соответствующим немодифицированной последовательности ICOSL ECD, представленной в SEQ ID NO: 32, и соответствующим идентификатором SEQ ID NO для вариантного ECD для каждый вариантной гибридной молекулы ICOSL ECD-Fc. Показано соотношение IFN-гамма, полученное в присутствии каждого варианта ICOSL ECD-Fc в функциональном анализе по сравнению с присутствием соответствующего немодифицированного ECD-Fc (дикого типа) (кратность t WT). Как показано, костимулирующая сигнализация вариантных молекул ICOSL-ECD-Fc была значительно выше по сравнению с ICOSL дикого типа.In table 22 shows the amount of IFN-gamma (pg/ml) produced by cells under various conditions in an anti-CD3 coimmobilization assay. The table shows the amino acid substitutions of exemplary variant ICOSL-Fc hybrids, which are designated by the amino acid position number corresponding to the unmodified ICOSL ECD sequence shown in SEQ ID NO: 32, and the corresponding SEQ ID NO for the variant ECD for each variant ICOSL ECD-Fc hybrid molecule . The IFN-gamma ratio obtained in the presence of each ICOSL ECD-Fc variant in the functional assay compared to the presence of the corresponding unmodified ECD-Fc (wild type) is shown (fold t WT). As shown, co-stimulatory signaling of variant ICOSL-ECD-Fc molecules was significantly higher compared to wild-type ICOSL.

- 169 044346- 169 044346

Таблица 22Table 22

Оценка ответов IFN-гамма в анализе костимуляцииEvaluation of IFN-gamma responses in costimulation assays

Мутация(ии) ICOSL ICOSL mutation(s) SEQID NO. (ECD) SEQID NO. (ECD) IFN-гамма [пг/мл] 40 нМ лиганд IFN-gamma [pg/ml] 40 nM ligand 10 нМ лиганд 10 nM ligand 40 нМ лиганд 40 nM ligand 0,37 нМ OKT3 0.37 nM OKT3 10 мМ OKT3 10 mM OKT3 Кратно e $WT Multiple of e$WT 10 мМ OKT3 10 mM OKT3 Кратн oe $WT Multiple of oe $WT 10 мМ OKT3 10 mM OKT3 1,1 нМ OKT3 1.1 nM OKT3 E16V, N52H, N57Y, Q100R, V110D, H115R, Y152C, К156М, C198R E16V, N52H, N57Y, Q100R, V110D, H115R, Y152C, K156M, C198R 300 300 14372 14372 17,3 17.3 4903 4903 29,9 29.9 8379,2 8379.2 7422,8 7422.8 2893,7 2893.7 N52H, N57Y, Q100R, V122A N52H, N57Y, Q100R, V122A 290 290 10640 10640 12,8 12.8 6456 6456 39,4 39.4 5636,2 5636.2 4724,2 4724.2 2246,3 2246.3 N52H, N57Y, Q100R, F172S N52H, N57Y, Q100R, F172S 291 291 10379 10379 12,5 12.5 3741 3741 22,8 22.8 3979,7 3979.7 4067,7 4067.7 1415,5 1415.5 N52H, N57Y, Q100R, C198R N52H, N57Y, Q100R, C198R 365 365 9590 9590 H,5 H.5 4048 4048 24,7 24.7 4215,8 4215.8 2787,1 2787.1 1072,4 1072.4 N52H, N57Y, Q100R N52H, N57Y, N52H, N57Y, Q100R N52H, N57Y, 283 283 9568 9568 H,5 H.5 3270 3270 19,9 19.9 4412,3 4412.3 3862,0 3862.0 1820,0 1820.0 Q100R, L102R, V110D, H115R, C198R Q100R, L102R, V110D, H115R, C198R 367 367 6939 6939 8,4 8.4 3234 3234 19,7 19.7 5495,2 5495.2 4081,6 4081.6 1442,8 1442.8 N52S, F120S, I143V, I224V N52S, F120S, I143V, I224V 325 325 6567 6567 7,9 7.9 717 717 4,4 4.4 2145,4 2145.4 2185,7 2185.7 646,1 646.1 N52S, N194D N52S, N194D 366 366 5690 5690 6,8 6.8 272 272 1,7 1.7 2315,1 2315.1 1485,0 1485.0 1140,6 1140.6 VI IE, N30D, N52H, N57Y, Н94Е, L96I, L98F, N194D, VI IE, N30D, N52H, N57Y, H94E, L96I, L98F, N194D, 308 308 5345 5345 6,4 6.4 1152 1152 7,0 7.0 2747,0 2747.0 3383,4 3383.4 1701,2 1701.2 V210A, I218T N52S, Е90А V210A, I218T N52S, E90A 323 323 5097 5097 6,1 6.1 706 706 4,3 4.3 5019,8 5019.8 3036,4 3036.4 1482,4 1482.4 N52H, N57Y, V110A, C198R, R221I N52H, N57Y, V110A, C198R, R221I 317 317 4737 4737 5,7 5.7 520 520 3,2 3.2 2501,5 2501.5 1632,1 1632.1 937,5 937.5 N52H, Q100R N52H,Q100R 285 285 4122 4122 5,0 5.0 1466 1466 8,9 8.9 5782,1 5782.1 2861,4 2861.4 967,5 967.5 N30D, K42E, N52S N30D, K42E, N52S 324 324 4080 4080 4,9 4.9 273 273 1,7 1.7 1336,8 1336.8 1260,7 1260.7 541,1 541.1 N52H, N57Y, QI OOP N52H, N57Y, N52H, N57Y, QI OOP N52H, N57Y, 113 113 3344 3344 4,0 4.0 229 229 1,4 1.4 2525,4 2525.4 2439,5 2439.5 1233,9 1233.9 Q100R, V110D, C198R, S212G Q100R, V110D, C198R, S212G 364 364 3064 3064 3,7 3.7 1471 1471 9,0 9.0 2699,5 2699.5 2629,9 2629.9 678,2 678.2 N52Y, N57Y, F138L, L203P N52Y, N57Y, F138L, L203P 112 112 2177 2177 2,6 2.6 200 200 1,2 1.2 1889,5 1889.5 1757,9 1757.9 808,8 808.8 N52H, I143T N52H, I143T 135 135 1906 1906 2,3 2.3 138 138 0,8 0.8 1417,1 1417.1 1367,9 1367.9 275,2 275.2 WT ICOSL WT ICOSL 32 32 831 831 1,0 1.0 164 164 1,0 1.0 558,8 558.8 377,7 377.7 152,0 152.0 N52D N52D 111 111 88 88 0,1 0.1 231 231 1,4 1.4 1288,9 1288.9 1737,9 1737.9 289,0 289.0

E. Реакция смешанных лимфоцитов для оценки супрессии биореактивности.E. Mixed lymphocyte reaction to assess suppression of bioreactivity.

Модуляция активности T-клеток гибридными вариантами определяли в реакции смешанных лимфоцитов (MLR), по существу, как описано в примере 6. Человеческие моноциты инкубировали в течение 6 дней в присутствии IL-4 и GM-CSF и созревали в дендритные клетки при добавлении LPS в течение последних 24 часов. 1x104 дендритных клеток и 1 х 105 человеческих T-клеток, меченных CFSE, высевали на лунку и инкубировали в течение 4 дней в присутствии трех различных концентраций (40 нМ, 13,3 нМ или 4,4 нМ) дикого типа или рекомбинантной вариантной молекулы ICOSL ECD-Fc, разведенных в PBS. В качестве контролей использовали те же концентрации человеческого IgG, PD-L2-Fc или белатацепта (CTLA4-Fc, содержащий мутации L104E и A29Y). Надосадочные жидкости собирали, и ответы IFNгамма описывали с помощью ELISA.Modulation of T cell activity by the hybrid variants was determined in the mixed lymphocyte reaction (MLR), essentially as described in Example 6. Human monocytes were incubated for 6 days in the presence of IL-4 and GM-CSF and matured into dendritic cells when LPS was added to during the last 24 hours. 1 x 104 dendritic cells and 1 x 105 CFSE-labeled human T cells were seeded per well and incubated for 4 days in the presence of three different concentrations (40 nM, 13.3 nM, or 4.4 nM) of wild type or recombinant variant molecule ICOSL ECD-Fc diluted in PBS. The same concentrations of human IgG, PD-L2-Fc, or belatacept (CTLA4-Fc containing the L104E and A29Y mutations) were used as controls. Supernatants were collected and IFNγ responses were characterized by ELISA.

На фиг. 5 изображена выработка IFN-гамма при различных условиях. Уровни IFN-гамма, продуцируемые клетками в присутствии ICOSL дикого типа представлены горизонтальной линией. Не наблюдалось подавления образования IFN-гамма в присутствии белка отрицательного контроля PD-L2-Fc. Напротив, большинство тестируемых вариантов ICOSL проявили некоторую степень ингибирования продуцирования IFN-гамма в MLR. В некоторых воплощениях наблюдалось значительное ингибирование IFN-гамма от очень низкой до необнаруживаемой выработки IFN-гамма, полученной в культурах, даже при самой низкой протестированной концентрации 4,4 нМ. Процент супрессии MLR в присутствии 4.4 нМ варианта ECD ICOSL-Fc, приведен в табл. 23. В таблице отрицательные значения указывают на воспалительный эффект в анализе.In fig. 5 depicts the production of IFN-gamma under various conditions. The levels of IFN-gamma produced by cells in the presence of wild-type ICOSL are represented by the horizontal line. There was no suppression of IFN-γ production in the presence of the negative control protein PD-L2-Fc. In contrast, most ICOSL variants tested showed some degree of inhibition of IFN-γ production in the MLR. In some embodiments, significant inhibition of IFN-gamma was observed, with very low to undetectable IFN-gamma production obtained in cultures, even at the lowest concentration tested of 4.4 nM. The percentage of MLR suppression in the presence of 4.4 nM ECD variant ICOSL-Fc is given in table. 23. In the table, negative values indicate an inflammatory effect in the assay.

- 170 044346- 170 044346

Таблица 23Table 23

Данные костимулирующей биоактивности для ICOSL в MLRCostimulatory bioactivity data for ICOSL in MLR

Мутация(ии) ICOSL ICOSL mutation(s) SEQ ID NO. (ECD) SEQ ID NO. (ECD) % супрессии MLR (4.4 hM) % suppression MLR (4.4 hM) N52H, N57Y, Q100R, C198R N52H, N57Y, Q100R, C198R 365 365 93,6 93.6 N52H, N57Y, Q100R, V122A N52H, N57Y, Q100R, V122A 290 290 94,4 94.4 N52H, N57Y, Q100R, F172S N52H, N57Y, Q100R, F172S 291 291 100,0 100.0 N52 Y/N57 Y/F13 8L/L203P N52 Y/N57 Y/F13 8L/L203P 112 112 100,0 100.0 Vl IE, N30D, N52H, N57Y, Н94Е, L96I, L98F, N194D, V210A, Vl IE, N30D, N52H, N57Y, H94E, L96I, L98F, N194D, V210A, 308 308 100,0 100.0 I218T I218T N52H, N57Y, Q100R, L102R, V110D, H115R, C198R N52H, N57Y, Q100R, L102R, V110D, H115R, C198R 367 367 100,0 100.0 N52H, N57Y, Q100R N52H, N57Y, Q100R 283 283 98,2 98.2 N52H, Q100R N52H,Q100R 285 285 97,5 97.5 N52H, N57Y, Q100R, V110D, C198R, S212G N52H, N57Y, Q100R, V110D, C198R, S212G 364 364 90,4 90.4 N52H, N57Y, QI OOP N52H, N57Y, QI OOP 113 113 100,0 100.0 E16V, N52H, N57Y, Q100R, V110D, H115R, Y152C, K156M, E16V, N52H, N57Y, Q100R, V110D, H115R, Y152C, K156M, 300 300 100,0 100.0 C198R C198R N30D, K42E, N52S N30D, K42E, N52S 324 324 -38,8 -38.8 N52S, F120S, I143V, I224V N52S, F120S, I143V, I224V 325 325 -44,2 -44.2 N52S, E90A N52S, E90A 323 323 -30,4 -30.4 N52H, N57Y, V110A, C198R, R221I N52H, N57Y, V110A, C198R, R221I 317 317 100,0 100.0 N52S, N194D N52S, N194D 366 366 -22,3 -22.3 N52H, I143T N52H, I143T 135 135 -78,0 -78.0 N52D N52D 111 111 0,5 0.5

F. Оценка пролиферации и внутриклеточных цитокиновых маркеров проточной цитометрией.F. Assessment of proliferation and intracellular cytokine markers by flow cytometry.

Меченные карбоксифлуоресцеин сукцинимидиловым эфиром (CFSE) пан T-клетки из исследований MLR, как описано выше, которые инкубировали в течение 4 дней в присутствии молекул ICOSL ECD-Fc дикого типа или рекомбинантных вариантных молекул ICOSL ECD-Fc были дополнительно протестированы на предмет уровней цитокинов с помощью рестимуляции форболацетатмиристатом (РМА)/иономицином в течение 6 ч в присутствии ингибитора Гольджи (Golgi/Block/Plug). T-клетки из исследования MLR, которые были инкубированы с человеческим IgG, анти-CD28, анти-ICOSL, PD-L2-Fc или белатацептом (CTLA4-Fc, содержащим мутации L104E и A29Y), также были рестимулированы. Tклетки окрашивали для поверхностных маркеров CD4 или CD8, фиксировали, пермеабилизировали и внутриклеточно окрашивали по различным цитокинам, как указано в табл. 24 и 25.Carboxyfluorescein succinimidyl ester (CFSE)-labeled pan T cells from MLR studies as described above that were incubated for 4 days in the presence of wild-type ICOSL ECD-Fc molecules or recombinant variant ICOSL ECD-Fc molecules were further tested for cytokine levels with using restimulation with phorbol acetate myristate (PMA)/ionomycin for 6 hours in the presence of a Golgi inhibitor (Golgi/Block/Plug). T cells from the MLR study that were incubated with human IgG, anti-CD28, anti-ICOSL, PD-L2-Fc, or belatacept (CTLA4-Fc containing the L104E and A29Y mutations) were also restimulated. T cells were stained for surface markers CD4 or CD8, fixed, permeabilized, and intracellularly stained for various cytokines as indicated in Table 1. 24 and 25.

Процент (%) CD4 + и CD8 + T-клеток, которые были положительными в отношении специфических внутриклеточных цитокинов, представлены в табл. 24 соответственно. Результаты показали, что ряд вариантных молекул ICOSL ECD-Fc способен подавлять один или несколько цитокинов, в том числе в некоторых случаях большинство цитокинов. Суммарная оценка и средняя оценка рассчитывались для оценки суммарных эффектов отдельных молекул, проверенных по параметрам, рассмотренным в этом анализе. Также оценивали пролиферацию и процент клеток, которые вошли в деление, что определялось по разбавлению CFSE, что также показано в табл. 24 и 25. Из предлагаемых результатов результаты показывают, что определенные варианты демонстрируют сравнимую или лучшую активность, чем белатацепт, особенно на клетках CD8+.The percentage (%) of CD4 + and CD8 + T cells that were positive for specific intracellular cytokines are presented in Table 1. 24 respectively. The results showed that a number of variant ICOSL ECD-Fc molecules are capable of inhibiting one or more cytokines, including in some cases a majority of cytokines. The total score and mean score were calculated to evaluate the cumulative effects of the individual molecules tested across the parameters considered in this analysis. Proliferation and the percentage of cells that entered division were also assessed, as determined by CFSE dilution, which is also shown in Table. 24 and 25. From the proposed results, the results indicate that certain variants demonstrate comparable or better activity than belatacept, particularly on CD8+ cells.

- 171 044346- 171 044346

Таблица 24Table 24

Оценка пролиферации и внутриклеточных уровней цитокинов в . CD4+ T-клеткахAssessment of proliferation and intracellular cytokine levels in . CD4+ T cells

% Цитокина + % Cytokine + Вариант- Option- % % %IL4 %IL4 % % % % %TNF %TNF %IL2 %IL2 %IL10 %IL10 % % Общий General Сред- Medium ный SEQ ID NO (ECD) или Белок ny SEQ ID NO (ECD) or Protein Пролиф Prolif IFN g+ IFN g+ + + IL21 + IL21+ IL22 + IL22+ + + + + + + IL17A + IL17A+ балл point ний балл niy point 308 308 з,о h,o 9,9 9.9 3,0 3.0 1,0 1.0 1,3 1.3 34,9 34.9 31,3 31.3 0,1 0.1 0,2 0.2 41,0 41.0 4,6 4.6 300 300 2,7 2.7 и, 1 and, 1 3,4 3.4 1,1 1.1 1,4 1.4 38,0 38.0 35,0 35.0 0,0 0.0 0,1 0.1 63,0 63.0 7,0 7.0 317 317 2,9 2.9 10, 9 10, 9 3,3 3.3 1,1 1.1 1,5 1.5 37,3 37.3 34,1 34.1 0,1 0.1 0,2 0.2 65,0 65.0 7,2 7.2 291 291 3,2 3.2 8,1 8.1 2,5 2.5 0,6 0.6 1,1 1.1 27,9 27.9 24,1 24.1 0,9 0.9 1,3 1.3 66,0 66.0 7,3 7.3 283 283 3,3 3.3 9,2 9.2 3,0 3.0 0,8 0.8 1,4 1.4 31,1 31.1 26,3 26.3 0,8 0.8 1,3 1.3 70,0 70.0 7,8 7.8 364 364 3,4 3.4 10, 9 10, 9 3,3 3.3 1,0 1.0 1,6 1.6 36,5 36.5 32,3 32.3 0,5 0.5 0,9 0.9 89,0 89.0 9,9 9.9 390 390 3,6 3.6 9,5 9.5 3,1 3.1 0,9 0.9 1,5 1.5 33,8 33.8 29,4 29.4 0,8 0.8 1,4 1.4 92,0 92.0 10,2 10.2 367 367 2,8 2.8 12, 0 12, 0 3,5 3.5 1,1 1.1 1,6 1.6 40,9 40.9 38,5 38.5 0,1 0.1 0,3 0.3 92,0 92.0 10,2 10.2 CTLA-4Ig: L104E, A29Y (Белатацепт) CTLA-4Ig: L104E, A29Y (Belatacept) 10,7 10.7 10, 5 10.5 2,7 2.7 2,4 2.4 2,0 2.0 24,5 24.5 19,6 19.6 0,6 0.6 1,4 1.4 99,0 99.0 ιι,ο ιι,ο 112 112 3,5 3.5 12, 0 12, 0 3,8 3.8 1,3 1.3 1,6 1.6 41,3 41.3 36,7 36.7 0,2 0.2 0,4 0.4 109,0 109.0 12,1 12.1 285 285 4,4 4.4 9,8 9.8 3,2 3.2 1,2 1.2 1,7 1.7 32,7 32.7 29,3 29.3 0,9 0.9 1,4 1.4 114,0 114.0 12,7 12.7 ИЗ FROM з,о h,o 13, 2 13, 2 4,1 4.1 1,2 1.2 1,8 1.8 43,2 43.2 39,8 39.8 0,1 0.1 0,2 0.2 115,0 115.0 12,8 12.8 365 365 3,6 3.6 и, 3 and, 3 3,9 3.9 1,0 1.0 2,0 2.0 39,1 39.1 34,6 34.6 0,8 0.8 1,3 1.3 118,0 118.0 13,1 13.1 WT ICOSL WT ICOSL 12,7 12.7 16, 7 16, 7 5,8 5.8 4,9 4.9 4,7 4.7 36,2 36.2 29,2 29.2 0,2 0.2 0,4 0.4 127,0 127.0 14,1 14.1 ИЗ FROM 3,5 3.5 12, 3 12, 3 3,9 3.9 1,1 1.1 1,8 1.8 39,2 39.2 37,5 37.5 0,4 0.4 0,6 0.6 127,0 127.0 14,1 14.1 366 366 10,9 10.9 16, 0 16, 0 7,2 7.2 4,9 4.9 5,4 5.4 40,6 40.6 33,0 33.0 0,1 0.1 0,2 0.2 135,0 135.0 15,0 15.0 321 321 10,6 10.6 16, 7 16, 7 6,0 6.0 4,3 4.3 5,0 5.0 41,3 41.3 37,3 37.3 0,2 0.2 0,3 0.3 146,0 146.0 16,2 16.2 mlgG ctl mlgGctl 15,5 15.5 15, 6 15, 6 5,9 5.9 5,2 5.2 4,6 4.6 31,7 31.7 26,0 26.0 0,4 0.4 1,7 1.7 146,0 146.0 16,2 16.2 PDL2 PDL2 12,3 12.3 17, o 17, o 5,7 5.7 4,7 4.7 5,2 5.2 41,4 41.4 36,0 36.0 0,3 0.3 0,6 0.6 163,0 163.0 18,1 18.1 323 323 11,9 11.9 V 17, 7 V 17, 7 6,2 6.2 5,2 5.2 5,3 5.3 42,4 42.4 37,5 37.5 0,2 0.2 0,4 0.4 167,0 167.0 18,6 18.6 WT ICOSL WT ICOSL 12,8 12.8 17, л 17, l 6,3 6.3 5,4 5.4 5,6 5.6 38,9 38.9 32,1 32.1 0,3 0.3 0,6 0.6 167,0 167.0 18,6 18.6 Анти- ICOSL Anti- ICOSL 15,5 15.5 ч 16, h 16, 6,5 6.5 5,2 5.2 5,5 5.5 35,1 35.1 29,1 29.1 0,7 0.7 2,0 2.0 168,0 168.0 18,7 18.7 135 135 12,6 12.6 17, 4 17, 4 6,5 6.5 5,4 5.4 4,9 4.9 44,3 44.3 37,2 37.2 0,4 0.4 0,5 0.5 179,0 179.0 19,9 19.9 HuIgG HuIgG 12,7 12.7 17, 1 17, 1 6,3 6.3 5,9 5.9 4,9 4.9 41,1 41.1 32,4 32.4 0,7 0.7 1,3 1.3 181,0 181.0 20,1 20.1 АнтиCD28 AntiCD28 88,2 88.2 42, 9 42, 9 5,0 5.0 5,8 5.8 5,4 5.4 43,5 43.5 25,5 25.5 0,4 0.4 1,4 1.4 183,0 183.0 20,3 20.3 325 325 12,7 12.7 18, 7 18, 7 6,5 6.5 5,4 5.4 5,6 5.6 44,2 44.2 40,0 40.0 0,1 0.1 0,3 0.3 186,0 186.0 20,7 20.7 111 111 13,7 13.7 18, 18, 6,8 6.8 5,9 5.9 6,1 6.1 42,1 42.1 35,2 35.2 0,3 0.3 0,5 0.5 194,0 194.0 21,6 21.6

- 172 044346- 172 044346

Таблица 25Table 25

Оценка пролиферации и внутриклеточных уровней цитокинов в , CD8+ T-клеткахAssessment of proliferation and intracellular cytokine levels in CD8+ T cells

% Цитокина + % Cytokine + Вариант ный SEQ ID NO (ECD) или Белок Variant SEQ ID NO (ECD) or Protein Прол иф Prol if % IFN g+ % IFN g+ %IL 4+ %IL 4+ % IL2 1+ % IL2 1+ % IL2 2+ % IL2 2+ %TN F+ %TN F+ %IL 2+ %IL 2+ %IL1 0+ %IL1 0+ % IL17 A+ % IL17 A+ Общ ИЙ балл General II score Средн ИЙ балл Average score 308 308 4,2 4.2 8,4 8.4 1,6 1.6 2,2 2.2 47,2 47.2 7,6 7.6 8,0 8.0 0,2 0.2 0,1 0.1 67,0 67.0 7,4 7.4 300 300 3,8 3.8 8,5 8.5 2,0 2.0 2,2 2.2 47,2 47.2 8,1 8.1 9,1 9.1 0,1 0.1 0,0 0.0 69,0 69.0 7,7 7.7 317 317 3,9 3.9 8,8 8.8 2,0 2.0 1,7 1.7 45,6 45.6 8,4 8.4 9,0 9.0 0,1 0.1 0,1 0.1 64,0 64.0 7,1 7.1 291 291 3,8 3.8 7,0 7.0 1,4 1.4 1,8 1.8 46,6 46.6 5,9 5.9 5,9 5.9 1,1 1.1 1,1 1.1 78,0 78.0 8,7 8.7 283 283 4,3 4.3 8,4 8.4 1,9 1.9 1,7 1.7 50,2 50.2 7,1 7.1 6,6 6.6 1,1 1.1 1,1 1.1 98,0 98.0 10,9 10.9 364 364 4,1 4.1 9,0 9.0 1,8 1.8 1,8 1.8 46,4 46.4 8,2 8.2 8,5 8.5 0,7 0.7 0,8 0.8 87,0 87.0 9,7 9.7 390 390 4,1 4.1 7,9 7.9 1,8 1.8 1,8 1.8 49,8 49.8 7,3 7.3 7,2 7.2 1,0 1.0 1,2 1.2 93,0 93.0 10,3 10.3 367 367 3,5 3.5 9,0 9.0 1,7 1.7 2,0 2.0 47,3 47.3 8,6 8.6 10,4 10.4 0,2 0.2 0,2 0.2 78,0 78.0 8,7 8.7 CTLA-4Ig: L104E, A29Y (Белатац епт) CTLA-4Ig: L104E, A29Y (Belatac ept) 12,3 12.3 14,5 14.5 2,0 2.0 3,2 3.2 38,1 38.1 H,2 H,2 8,8 8.8 0,9 0.9 1,6 1.6 121,0 121.0 13,4 13.4 112 112 4,2 4.2 9,6 9.6 1,9 1.9 1,8 1.8 40,4 40.4 9,4 9.4 9,9 9.9 0,3 0.3 0,3 0.3 81,0 81.0 9,0 9.0 285 285 5,4 5.4 9,5 9.5 2,0 2.0 2,7 2.7 44,2 44.2 7,8 7.8 8,4 8.4 1,2 1.2 1,3 1.3 112,0 112.0 12,4 12.4 ИЗ FROM 3,7 3.7 9,5 9.5 1,9 1.9 1,3 1.3 44,4 44.4 9,4 9.4 10,5 10.5 0,1 0.1 0,1 0.1 62,0 62.0 6,9 6.9 365 365 4,1 4.1 9,6 9.6 2,3 2.3 1,8 1.8 46,8 46.8 9,0 9.0 9,3 9.3 0,9 0.9 1,0 1.0 122,0 122.0 13,6 13.6 ICOSL ICOSL 17,2 17.2 22,3 22.3 4,9 4.9 6,4 6.4 46,4 46.4 22,0 22.0 15,7 15.7 0,4 0.4 0,7 0.7 181,0 181.0 20,1 20.1 ИЗ FROM 4,2 4.2 9,5 9.5 2,0 2.0 2,1 2.1 45,6 45.6 8,9 8.9 10,7 10.7 0,5 0.5 0,5 0.5 110,0 110.0 12,2 12.2 366 366 14,5 14.5 19,4 19.4 5,6 5.6 4,8 4.8 48,4 48.4 19,2 19.2 13,8 13.8 0,1 0.1 0,2 0.2 142,0 142.0 15,8 15.8 321 321 13,4 13.4 18,9 18.9 4,3 4.3 5,0 5.0 46,3 46.3 18,4 18.4 15,4 15.4 0,3 0.3 0,6 0.6 138,0 138.0 15,3 15.3 mlgG ctl mlgGctl 20,2 20.2 25,0 25.0 4,4 4.4 4,1 4.1 35,5 35.5 24,6 24.6 15,8 15.8 0,7 0.7 1,8 1.8 174,0 174.0 19,3 19.3 PDL2 323 WT ICOSL АнтиICOSL 135 PDL2 323 WT ICOSL AntiICOSL 135 15,6 15,4 17,5 21,5 17,2 15.6 15.4 17.5 21.5 17.2 21,2 20,8 22,1 26,4 22,2 21.2 20.8 22.1 26.4 22.2 4,1 4,7 5,5 4,8 4,7 4.1 4.7 5.5 4.8 4.7 4,8 5,6 4,6 5,3 6,7 4.8 5.6 4.6 5.3 6.7 44,1 44,9 45,0 33,4 39,4 44.1 44.9 45.0 33.4 39.4 20,7 20,6 21,0 26,9 22,5 20.7 20.6 21.0 26.9 22.5 15,6 17,1 12,8 19,0 18,1 15.6 17.1 12.8 19.0 18.1 0,5 0,2 0,2 1,0 0,8 0.5 0.2 0.2 1.0 0.8 0,8 0,5 0,4 2,3 0,9 0.8 0.5 0.4 2.3 0.9 147,0 149,0 148,0 198,0 178,0 147.0 149.0 148.0 198.0 178.0 16,3 16,6 16,4 22,0 19,8 16.3 16.6 16.4 22.0 19.8 HuIgG HuIgG 15,9 15.9 21,5 21.5 4,4 4.4 6,4 6.4 41,6 41.6 21,4 21.4 15,1 15.1 1,4 1.4 1,7 1.7 179,0 179.0 19,9 19.9 АнтиCD28 AntiCD28 60,6 60.6 44,3 44.3 3,5 3.5 2,1 2.1 38,6 38.6 32,5 32.5 16,0 16.0 1,2 1.2 1,6 1.6 182,0 182.0 20,2 20.2 325 325 16,5 16.5 22,0 22.0 4,9 4.9 5,4 5.4 44,0 44.0 21,9 21.9 18,5 18.5 0,2 0.2 0,6 0.6 161,0 161.0 17,9 17.9 111 111 17,7 17.7 22,8 22.8 5,3 5.3 6,1 6.1 45,4 45.4 22,9 22.9 16,7 16.7 0,4 0.4 0,6 0.6 183,0 183.0 20,3 20.3

Пример 16.Example 16.

Оценка выработки цитокинов в совместной культуре B-T-клеток.Assessment of cytokine production in B-T cell co-culture.

B-клетки и CD4 + T-клетки очищали из одного донора, метили с помощь CSFE и высевали в 96луночные планшеты при соотношении клеток 1: 1 при 5х104 клеток на лунку каждых. Добавляли гибридные молекулы ICOSL ECD-Fc или белатацепт при конечной концентрации 40 нМ на лунку. Клетки либо не стимулировались, либо инкубировались с 100 нг/мл энтеротоксина B стафилококка (SEB), 1 (г/мл митогена фитолакки (PWM) или обоими в течение 7 дней при 37°C в конечном объеме 200 л/лунку.B cells and CD4 + T cells were purified from the same donor, labeled with CSFE, and seeded in 96-well plates at a 1:1 cell ratio of 5 x 10 4 cells per well each. ICOSL ECD-Fc fusion molecules or belatacept were added at a final concentration of 40 nM per well. Cells were either unstimulated or incubated with 100 ng/ml Staphylococcus enterotoxin B (SEB), 1 g/ml phytolacca mitogen (PWM), or both for 7 days at 37°C in a final volume of 200 L/well.

Клетки собирали и окрашивали их поверхность следующими маркерами B- и T-клеточных линий (IgM, IgD, CD38, CD138, CD27, CD19, CD4, CD3). Пролиферацию оценивали с помощью проточной цитометрии и культуральные надосадочные жидкости анализировали на цитокины IL-5, IL-13 или IL-21 с использованием набора для обнаружения цитокинов человека LEGENDplex (Biolegend, США).Cells were collected and their surface stained with the following markers of B and T cell lines (IgM, IgD, CD38, CD138, CD27, CD19, CD4, CD3). Proliferation was assessed by flow cytometry and culture supernatants were assayed for the cytokines IL-5, IL-13 or IL-21 using the LEGENDplex Human Cytokine Detection Kit (Biolegend, USA).

Как показано на фиг. 6A, количество делящихся B-клеток было уменьшено в совместных культурах B/T-клеток при инкубации в присутствии вариантных -Fc-гибридных молекул ICOSL ECD по сравнению с контролем без белка. Степень антагонистического эффекта для протестированных примерных вариантов была аналогична эффекту CTLA-4-Ig белатацепта (L104E, A29Y). Аналогично, как показано на фиг. 6B-6D, вариантные гибридные молекулы ICOSL ECD Fc ингибировали продукцию цитокинов в совместных культурах первичных B/T клеток человека in vitro в сравнении с контролем без белка, а также с культурами, содержащими контрольный ICOSL дикого типа. По сравнению с белатацептом, примерные протестированные вариантные гибридные молекулы ICOSL ECD Fc были более эффективными при блокировании выработки цитокинов в некоторых случаях.As shown in FIG. 6A, the number of dividing B cells was reduced in B/T cell co-cultures when incubated in the presence of variant -Fc fusion ICOSL ECD molecules compared to controls without protein. The magnitude of antagonistic effect for the exemplary variants tested was similar to that of CTLA-4-Ig belatacept (L104E, A29Y). Likewise, as shown in FIG. 6B-6D, variant ICOSL ECD Fc fusion molecules inhibited cytokine production in co-cultures of primary human B/T cells in vitro compared to protein-free controls as well as cultures containing wild-type ICOSL control. Compared to belatacept, exemplary ICOSL ECD Fc fusion variant molecules tested were more effective at blocking cytokine production in some cases.

Пример 17.Example 17.

Оценка активности выживания и заболевания в модели реакции трансплантат против хозяина (GvHD).Assessment of survival and disease activity in a graft-versus-host disease (GvHD) model.

Примерный вариантный белок ICOSL ECD-Fc, оценивали на предмет активности в модели реакции трансплантат против хозяина (GVHD). Самок мышей NSG (n=10 на группу) облучали (100 рад) и подкожно вводили 10 мг гамма-глобулина в День -1. В день 0 мыши получали 10 миллионов человеческихAn exemplary variant protein, ICOSL ECD-Fc, was evaluated for activity in a graft-versus-host disease (GVHD) model. Female NSG mice (n=10 per group) were irradiated (100 rad) and subcutaneously injected with 10 mg gamma globulin on Day -1. On day 0, mice received 10 million human

- 173 044346 мононуклеарных клеток периферической крови (PBMC) и внутрибрюшинную инъекцию либо 100 мкг WT-ICOSL ECD Fc, вариантной молекулы ICOSL ECD Fc N52H/I143T (ECD представлен в SEQ ID NO: 135), вариантной молекулы ICOSL ECD Fc N52H/N57Y/Q100P (ECD представлен в SEQ ID NO: 113), 75 мкг белатацепта (CTLA-4-Ig L104E/A29Y, публикация патентной заявки США № US20160271218) или физиологического раствора в качестве контроля. На 15-й день привитые человеческие клетки CD45 + были фенотипированы проточной цитометрией. После окончания исследования на 35-й день были оценены конечные показатели выживаемости, потери массы тела и активность заболевания.- 173 044346 peripheral blood mononuclear cells (PBMC) and intraperitoneal injection of either 100 μg WT-ICOSL ECD Fc, variant ICOSL ECD Fc molecule N52H/I143T (ECD presented in SEQ ID NO: 135), variant ICOSL ECD Fc molecule N52H/N57Y/ Q100P (ECD shown in SEQ ID NO: 113), 75 μg belatacept (CTLA-4-Ig L104E/A29Y, US Patent Application Publication No. US20160271218) or saline as control. On day 15, engrafted human CD45+ cells were phenotyped by flow cytometry. After study completion at day 35, endpoints of survival, weight loss, and disease activity were assessed.

На фиг. 7A показана выживаемость мышей GVHD, обработанных физиологическим раствором, WT ICOSL-ECD Fc, вариантной молекулой ICOSL ECD-Fc или белатацептом. Наблюдали существенное различие в выживаемости мышей, которым вводили вариантный ICOSL ECD-Fc N52H/N57Y/Q100P (ECD, представленный в SEQ ID NO: 113), по сравнению с мышами, которым вводили физиологический раствор или WT ICSOL ECD-Fc (p<0,0001 по критерию Кокса-Мантеля и критерию Гехана-БреслоуВилкоксона). На фиг. 7В показаны сходные различия между потерей массы тела мышей, обработанных физиологическим раствором, WT ICOSL ECD-Fc, вариантными молекулами ICOSL ECD-Fc или белатацептом в ходе исследования.In fig. 7A shows the survival of GVHD mice treated with saline, WT ICOSL-ECD Fc, ICOSL ECD-Fc variant molecule, or belatacept. There was a significant difference in survival of mice treated with the variant ICOSL ECD-Fc N52H/N57Y/Q100P (ECD represented in SEQ ID NO: 113) compared to mice treated with saline or WT ICSOL ECD-Fc (p<0 .0001 by Cox-Mantel test and Gehan-Breslow-Wilcoxon test). In fig. 7B shows similar differences between the body weight loss of mice treated with saline, WT ICOSL ECD-Fc, ICOSL ECD-Fc variant molecules, or belatacept over the course of the study.

Индекс активности заболевания (DAI) определяли три раза в неделю в течение исследования и оценивали на предмет потери массы, позы, активности, внешнего вида шерстного покрова и кожи мышей. Градация заболевания в течение исследования показана на фиг. 7C. Группы обработки, которые получали вариантный ICOSL Fc N52H/N57Y/Q100P (ECD, прелставленный в SEQ ID NO: 113) или белатацепт, показали значительно улучшенные баллы DAI. Процент человеческих T-клеток в периферической крови на 14-й день исследования также оценивали с помощью проточной цитометрии. Измерения усреднялись по группам обработки, а планки погрешностей представляли стандартную ошибку среднего (SEM). Фиг. 7D показывает процент живых CD3 +/CD4 + или CD3 +/CD8 + клеток в крови. Группы обработки, которые получали вариантный ICOSL ECD Fc с N52H/N57Y/Q100P (ECD, представленный в SEQ ID NO: 113) или белатацепт, показали значимо разные уровни CD4+ T-клеток по сравнению с группой обработки физраствором (p=0,008 и 0,006, соответственно, непарный критерий Стьюдента). Это исследование демонстрирует терапевтический эффект Вариантного белка ICOSL Fc на первичных T-клетках человека и GVHD на модели in vivo.Disease Activity Index (DAI) was determined three times per week during the study and assessed for weight loss, posture, activity, and coat and skin appearance of the mice. The gradation of the disease during the study is shown in Fig. 7C. Treatment groups that received the variant ICOSL Fc N52H/N57Y/Q100P (ECD set forth in SEQ ID NO: 113) or belatacept showed significantly improved DAI scores. The percentage of human T cells in peripheral blood on study day 14 was also assessed by flow cytometry. Measurements were averaged across treatment groups, and error bars represented standard error of the mean (SEM). Fig. 7D shows the percentage of live CD3+/CD4+ or CD3+/CD8+ cells in the blood. Treatment groups that received the variant ICOSL ECD Fc with N52H/N57Y/Q100P (ECD represented in SEQ ID NO: 113) or belatacept showed significantly different levels of CD4+ T cells compared to the saline treatment group (p=0.008 and 0.006, respectively, unpaired Student's t test). This study demonstrates the therapeutic effect of Variant ICOSL Fc protein in primary human T cells and GVHD in an in vivo model.

Аналогичное исследование было проведено с дополнительными вариантными ICOSL ECD-Fc гибридными молекулами, включая вариант ICOSL ECD-Fc N52H/N57Y/Q100R/C198R (ECD указан в SEQ ID NO: 365), N52H/N57Y/Q100R/F172S (набор ECD далее в SEQ ID NO: 291) и N52H/N57Y/Q100P (ECD указан в SEQ ID NO: 288). N52H/Q1o0r (ECD, представленный в SEQ ID NO: 285), который обладал пониженной активностью в исследованиях MLR in vitro, как показано выше, также был протестирован. Мышей NSG (н=9/группу) обрабатывали, как описано выше. В этом исследовании дозирование с помощью ICOSL-Fc или Белатацепта продолжалось 3 раза в неделю с 0 по 37 день, а выживших мышей убивали на 49 день. Для определения статистических различий в показателях выживаемости между группами данные анализировали с использованием критерия Мантеля-Кокса (лог-рангового критерия). Полученные кривые выживаемости показаны на фиг. 7E. Белатацепт и варианты ICOSL-Fc N52H/N57Y/Q100R/C198R (ECD указан в SEQ ID NO: 365), N52H/N57Y/Q100R/F172S (ECD указан в SEQ ID NO: 291) и N52H/N57Y/Q100P (ECD указан в SEQ ID NO: 288) значительно продлевают выживаемость по сравнению с физиологическим раствором и WT ICOSL-Fc (p<0,001). Средние баллы DAI наносили на временной график эксперимента, причем последнее наблюдение (т.е. средние баллы, собранные в дни окончания) переносили на график для тех групп, которые были терменированы до последнего запланированного дня исследования (день 49). Значительные различия между группами по данным во времени (то есть по баллам DAI) были определены с использованием двухсторонних повторных измерений ANOVA для эффектов обработки. Полученные баллы DAI показаны на фиг. 7F. Белатацепт и варианты ICOSL-Fc N52H/N57Y/Q100R/C198R (ECD указан в SEQ ID NO: 365), N52H/N57Y/Q100R/F172S (ECD указан в SEQ ID NO: 291) и N52H/N57Y/Q100P (ECD указан в SEQ ID NO: 288) значительно снижают баллы DAI по сравнению с солевым раствором и WT ICOSL-Fc (p<0.001), а также между белатацептом и вариантом ICOSL-Fc с N52H/N57Y/Q100R/C198R с помощью двухфакторного дисперсионного анализа для баллов DAI (p=0,035).A similar study was conducted with additional variant ICOSL ECD-Fc hybrid molecules, including the ICOSL ECD-Fc variant N52H/N57Y/Q100R/C198R (ECD set forth in SEQ ID NO: 365), N52H/N57Y/Q100R/F172S (ECD set further in SEQ ID NO: 291) and N52H/N57Y/Q100P (ECD listed in SEQ ID NO: 288). N52H/Q1o0r (ECD shown in SEQ ID NO: 285), which had reduced activity in in vitro MLR studies as shown above, was also tested. NSG mice (n=9/group) were treated as described above. In this study, dosing with ICOSL-Fc or Belatacept continued 3 times per week from days 0 to 37, and surviving mice were killed on day 49. To determine statistical differences in survival rates between groups, data were analyzed using the Mantel-Cox test (log-rank test). The resulting survival curves are shown in Fig. 7E. Belatacept and ICOSL-Fc variants N52H/N57Y/Q100R/C198R (ECD specified in SEQ ID NO: 365), N52H/N57Y/Q100R/F172S (ECD specified in SEQ ID NO: 291) and N52H/N57Y/Q100P (ECD specified in SEQ ID NO: 288) significantly prolonged survival compared to saline and WT ICOSL-Fc (p<0.001). Mean DAI scores were plotted on the experimental timeline, with the last observation (i.e., mean scores collected on termination days) plotted for those groups that were terminated before the last scheduled day of the study (day 49). Significant differences between groups across time data (i.e., DAI scores) were determined using two-way repeated measures ANOVA for treatment effects. The resulting DAI scores are shown in FIG. 7F. Belatacept and ICOSL-Fc variants N52H/N57Y/Q100R/C198R (ECD specified in SEQ ID NO: 365), N52H/N57Y/Q100R/F172S (ECD specified in SEQ ID NO: 291) and N52H/N57Y/Q100P (ECD specified in SEQ ID NO: 288) significantly reduced DAI scores compared to saline and WT ICOSL-Fc (p<0.001), and between belatacept and the N52H/N57Y/Q100R/C198R ICOSL-Fc variant using two-way ANOVA for DAI scores (p=0.035).

Активность вариантного ICOSL-Fc в некоторых случаях улучшалась по сравнению с обработкой белатацептом. Введение вариантов ICOSL-Fc защищало от эффектов GVHD, о чем свидетельствует повышенная выживаемость и замедленное развитие заболевания, на уровнях, сопоставимых или лучше, чем у белатацепта. Активность в этой модели коррелировала с активностью in vitro, поскольку WT ICOSL-Fc и вариант ICOSL-Fc с мутациями N52H/Q100R (ECD, представленный в SEQ ID NO: 285) не были столь эффективными в этой модели.The activity of the variant ICOSL-Fc was improved in some cases compared with belatacept treatment. Administration of ICOSL-Fc variants protected against the effects of GVHD, as evidenced by increased survival and delayed disease progression, at levels comparable to or better than belatacept. Activity in this model correlated with in vitro activity, as WT ICOSL-Fc and the ICOSL-Fc variant with N52H/Q100R mutations (ECD shown in SEQ ID NO: 285) were not as effective in this model.

Пример 18.Example 18.

Оценка активации стековыми молекулами.Evaluation of activation by stacking molecules.

Вариантные гибридные белки со стеком IGV Fc, содержащие домен NKp30 IGV в качестве локализирующего домена (обозначенный L) и домен ICOSL IgV в качестве костимулирующего домена (обозначенный C) получали и оценивали, по существу так, как описано в примере 8. В частности, констVariant IGV Fc stack fusion proteins containing the IGV NKp30 domain as the localization domain (designated L) and the IgV ICOSL domain as the co-stimulatory domain (designated C) were prepared and evaluated essentially as described in Example 8. Specifically, the const

- 174 044346 рукции, протестированные в этом эксперименте, включают: (1) стековую конструкцию с вариантным гибридным белком IgV Fc (vIgD CL), содержащим NKp30, состоящий из Ig с консенсусного варианта NKp30 (SEQ ID NO: 493) и домена IgV вариантного ICOSL N52H/N57Y/Q100P (ECD, представленный в SEQ ID NO: 113 и IgV, представленный в SEQ ID NO: 201); (2) стековуб конструкцию с доменом Ig домена NKp30 дикого типа (SEQ ID NO: 214) и V-доменом ICOSL дикого типа (WT CL) (SEQ ID NO: 196); (3) конструкцию с доменом ICOSL IgV дикого типа (домен WT C, SEQ ID NO: 196) и (3) конструкцию с доменом NKp30 дикого типа (домен WT L, SEQ ID NO: 214).- 174 044346 designs tested in this experiment include: (1) a variant IgV Fc fusion protein (vIgD CL) stack construct containing NKp30, consisting of the Ig from the NKp30 consensus variant (SEQ ID NO: 493) and the IgV variant ICOSL domain N52H/N57Y/Q100P (ECD represented in SEQ ID NO: 113 and IgV represented in SEQ ID NO: 201); (2) a stackovub construct with a wild-type NKp30 Ig domain (SEQ ID NO: 214) and a wild-type ICOSL V domain (WT CL) (SEQ ID NO: 196); (3) a wild-type ICOSL domain construct of IgV (WT C domain, SEQ ID NO: 196) and (3) a wild-type NKp30 domain construct (WT L domain, SEQ ID NO: 214).

Клетки CD32 + K562 были сконструированы для стабильного экспрессии B7-H6 на поверхности клетки. Затем клетки обрабатывали митомицином и рассевали с пан T-клетками в присутствии/отсутствии 10 нМ анти-CD3 и стековых вариантов или контрольных доменов при 100, 33, 11 или 3,7 нМ. Клетки культивировали за 3 дня до сбора культуральных надосадочных жидкостей и измерения уровней IFN-гамма человека с использованием ELISA.CD32+K562 cells were engineered to stably express B7-H6 on the cell surface. Cells were then treated with mitomycin and plated with pan T cells in the presence/absence of 10 nM anti-CD3 and stack variants or control domains at 100, 33, 11, or 3.7 nM. Cells were cultured for 3 days before collecting culture supernatants and measuring human IFN-gamma levels using ELISA.

Как показано на фиг. 8А, костимулирующие-локализующие доменные стеки, как вариантные, так и дикого типа, были способны локализоваться на сконструированных клетках K562 и доставлять костимулирующий сигнал в пан-Т-клетки, чтобы индуцировать секрецию IFN-гамма. Стековая конструкция с вариантным гибридным белком IgV Fc (vIgD C-L) показала результат с повышенной функциональной активностью во всех тестируемых концентрациях, в то время как индивидуальные доменные компоненты не оказывали воздействия, когда они не были объединены друг с другом.As shown in FIG. 8A, costimulatory-localizing domain stacks, both variant and wild type, were able to localize to engineered K562 cells and deliver a costimulatory signal to pan-T cells to induce IFN-gamma secretion. The stacking construct with a variant IgV Fc fusion protein (vIgD C-L) resulted in increased functional activity at all concentrations tested, while the individual domain components had no effect when not combined with each other.

Пример 19.Example 19.

Оценка гиперчувствительность замедленного типа in vivo.Assessment of delayed-type hypersensitivity in vivo.

Вариантные гибридные молекулы ICOSL ECD-Fc оценивали на противовоспалительную активность in vivo в мышиной модели гиперчувствительности замедленного типа (DTH). Иммунные реакции гиперчувствительности замедленного типа выявляли у мышей, сенсетизованных овальбумином (OVA), и оценивали ответ после провокационной пробы. Протестированные вариантные гибридные молекулы ICOSL ECD-Fc, содержали вариант ECD со следующими аминокислотными заменами: N52H/N57Y/Q100P (ECD, представленный в SEQ ID NO: 113), N52H/Q100R (ECD, представленный в SEQ ID NO: 285), или N52H/N57Y/Q100R/F172S (ECD, представленный в SEQ ID NO: 291). Варианты были слиты либо с каркасом Fc, содержащим мутации C220S/L234A/L235E/G237A по нумерации EU (обозначенным Fc # 1), который представлен в SEQ ID NO: 477), либо с каркасом Fc, содержащим мутации C220S/E233P/L234V/L235A/G236del/S267K по нумерации EU (обозначенным Fc # 2), который представлен в SEQ ID NO: 478), либо с линкером G4S (GGGGS), либо без него. В табл. 26 приведены протестированные конструкции:Variant ICOSL ECD-Fc fusion molecules were evaluated for in vivo anti-inflammatory activity in a mouse model of delayed-type hypersensitivity (DTH). Delayed hypersensitivity immune responses were detected in mice sensitized with ovalbumin (OVA) and the response was assessed after challenge. The ICOSL ECD-Fc variant fusion molecules tested contained an ECD variant with the following amino acid substitutions: N52H/N57Y/Q100P (ECD represented in SEQ ID NO: 113), N52H/Q100R (ECD represented in SEQ ID NO: 285), or N52H/N57Y/Q100R/F172S (ECD shown in SEQ ID NO: 291). The variants were fused to either an Fc backbone containing the EU numbering mutations C220S/L234A/L235E/G237A (designated Fc#1), which is represented in SEQ ID NO: 477, or an Fc backbone containing the mutations C220S/E233P/L234V/ L235A/G236del/S267K by EU numbering (designated Fc#2), which is presented in SEQ ID NO: 478), either with or without the G4S linker (GGGGS). In table 26 shows the tested designs:

Таблица 26Table 26

Гибридные Конструкции ICOSL ECD-FcHybrid Designs ICOSL ECD-Fc

ICOSL ECD (SEQ ID NO) ICOSL ECD (SEQ ID NO) Линкер G4S Linker G4S Fc (SEQ ID NO) Fc (SEQ ID NO) N52H/N57Y/Q100P (G4S)- Fc #1 N52H/N57Y/Q100P (G4S)- FC #1 113 113 + + 477 477 N52H/Q100R (G4S)-Fc #1 N52H/Q100R (G4S)-Fc #1 285 285 + + 477 477 N5 2H/N5 7 Y/Q100R/F172 S (G4S)-Fc N5 2H/N5 7 Y/Q100R/F172 S (G4S)-Fc 291 291 + + 478 478 N52H/N57Y/Q100R/F172S (G4S)-Fc N52H/N57Y/Q100R/F172S (G4S)-Fc 291 291 + + 477 477 N52H/N57Y/Q100R/F172SFc N52H/N57Y/Q100R/F172SFc 291 291 - - 477 477

Для сенсибилизации, 8-недельным самкам мышей линии BALB/C вводили подкожно 100 мкг OVA, эмульгированного в адъюванте Sigma (100 мкл; каталожный № S6322-1VL) в основание хвоста на 0-й день. В дни 1 и 4 мышам вводили вариантные гибридные белки ICOSL ECD-Fc, 75 мкг CTLA-4 Fc (абатацепт) или PBS в качестве отрицательного контроля путем внутрибрюшинной инъекции. На 7-й день за два-три часа перед провокационной дозой OVA мышам путем внутрибрюшинной инъекции дополнительно вводили PBS в качестве контроля, 75 мкг CTLA-4 Fc (абатоцепт из Orencia) или указанный вариантный полипептид ICOSL. Абатацепт и различные гибридные молекулы ICOSL-Fc дозировали в молярных эквивалентах.For sensitization, 8-week-old female BALB/C mice were injected subcutaneously with 100 μg of OVA emulsified in Sigma adjuvant (100 μl; catalog no. S6322-1VL) at the base of the tail on day 0. On days 1 and 4, mice were treated with ICOSL ECD-Fc variant fusion proteins, 75 μg CTLA-4 Fc (abatacept), or PBS as a negative control by intraperitoneal injection. On day 7, two to three hours before the OVA challenge, mice were additionally administered PBS control, 75 μg of CTLA-4 Fc (abatocept from Orencia), or the indicated ICOSL variant polypeptide by intraperitoneal injection. Abatacept and various ICOSL-Fc hybrid molecules were dosed in molar equivalents.

Для провокационной дозы OVA проводили внутрикожную инъекцию 10 мкг OVA в левой ушной раковине в объеме 10 мкл PBS под газовой изофлурановой анастезией за 2-3 часа перед терапевтической обработкой. Исходное значение толщины ушей измеряли перед провокационной дозой OVA.For a challenge dose of OVA, an intradermal injection of 10 μg of OVA was performed in the left ear in a volume of 10 μl of PBS under gas isoflurane anesthesia 2-3 hours before therapeutic treatment. Baseline ear thickness was measured before the challenge dose of OVA.

На 8-й день, толщину уха измеряли под изофлурановой анестезией с помощью штангенциркуля Mitutoyo, и определили изменение толщины уха до и после провокационной дозы OVA. Как показано на фиг. 9, мыши, обработанные указанными вариантными гибридными молекулами ICOSL ECD-Fc, показали значительно меньшее OVA-индуцированное набухание уха по сравнению с контролем PBS (<0,0001 по однофакторному дисперсионному анализу). Не было обнаружено существенных различий между толщиной ушей для мышей, обработанных абатацептом, по сравнению с любым из указанных вариантных гибридных молекул ICOSL ECD-Fc или между обработками вариантными ICOSL. Эти результаты показывают, что вариантные молекулы ICOSL могут снижать иммунные ответы in vivo.On day 8, ear thickness was measured under isoflurane anesthesia using a Mitutoyo caliper, and the change in ear thickness before and after the challenge dose of OVA was determined. As shown in FIG. 9, mice treated with the indicated variant ICOSL ECD-Fc fusion molecules showed significantly less OVA-induced ear swelling compared to PBS controls (<0.0001 by one-way ANOVA). There were no significant differences between ear thicknesses for mice treated with abatacept compared with any of the indicated variant ICOSL ECD-Fc fusion molecules or between variant ICOSL treatments. These results indicate that variant ICOSL molecules can reduce immune responses in vivo.

- 175 044346- 175 044346

Пример 20.Example 20.

Получение и оценка связывания и активности вариантных ICOSL IgSF-доменсодержащих молекул.Preparation and evaluation of binding and activity of variant ICOSL IgSF domain-containing molecules.

Дополнительные вариантные ICOSL IgSF (например, ECD) доменсодержащие молекулы, были получены, как описано ниже. В каждой из таблиц ниже в табл. указаны аминокислотные замены в ECD варианта ICOSL, обозначенные номером аминокислотного положения, соответствующим положениям аминокислот в соответствующей последовательности референсного (например, немодифицированного) внеклеточного домена ICOSL (ECD), представленной в SEQ ID NO: 32. В некоторых случаях удаление линкерной последовательности AAA варианта ICOSL ECD-Fc, обозначенной как '^AAA. В столбце 2 указан идентификатор SEQ ID NO для каждого вариантного домена ECD, содержащегося в вариантной гибридной молекуле ECD-Fc.Additional variant ICOSL IgSF (eg, ECD) domain-containing molecules were prepared as described below. In each of the tables below in table. amino acid substitutions in the ICOSL variant ECD are indicated, indicated by the amino acid position number corresponding to the amino acid positions in the corresponding reference (e.g., unmodified) ICOSL extracellular domain (ECD) sequence shown in SEQ ID NO: 32. In some cases, deletion of the ICOSL ECD variant AAA linker sequence -Fc, denoted by '^AAA. Column 2 lists the SEQ ID NO for each variant ECD domain contained in the variant ECD-Fc fusion molecule.

A. Получение дополнительных вариантов.A. Getting more options.

1. Варианты растворимости.1. Solubility options.

Из коллекции мутантов, содержащих представленные ниже мутации, включающие E16V, N30D, K42E, N52H, N52Y, N52S, N57Y, E90A, Q100R, Q100P, L102R, V110D, H115R, F120S, V122A, F138L, I143V, I143T, H152C, K156M, F172S, N194D, C198R, L203P, R221I, I224V, мутации H115R, F172S и C198R были идентифицированы как мутации, которые могут потенциально повысить растворимость белка или усилить экспрессию белка (мутации растворимости). Эти три мутации (H115R, F172S и C198R) случайным образом вводили сайт-направленным мутагенезом в один и тот же набор клонов для получения набора производных, которые содержат одну или несколько из этих мутаций растворимости. Поскольку реакция направленного мутагенеза была проведена с объединенными мутагенными олигонуклеотидами, которые реагировали с объединенными родительскими клонами в одной реакции, некоторые из клонов также содержат некоторые мутации из других родительских клонов. Полученные варианты содержат от 3 до 10 различных аминокислотных мутаций в различных комбинациях, описанных в табл. 27A.From a collection of mutants containing the mutations presented below, including E16V, N30D, K42E, N52H, N52Y, N52S, N57Y, E90A, Q100R, Q100P, L102R, V110D, H115R, F120S, V122A, F138L, I143V, I143T, H152C, K15 6M, F172S, N194D, C198R, L203P, R221I, I224V, H115R, F172S and C198R mutations have been identified as mutations that can potentially increase protein solubility or enhance protein expression (solubility mutations). These three mutations (H115R, F172S, and C198R) were randomly introduced by site-directed mutagenesis into the same set of clones to generate a set of derivatives that contain one or more of these solubility mutations. Because the site-directed mutagenesis reaction was performed with pooled mutagenic oligonucleotides that reacted with pooled parental clones in one reaction, some of the clones also contain some mutations from other parental clones. The resulting variants contain from 3 to 10 different amino acid mutations in various combinations described in table. 27A.

Таблица 27ATable 27A

Примерные вариантные полипептиды ICOSLExemplary ICOSL variant polypeptides

Мутация(и) Mutation(s) ECD SEQ ID NO ECD SEQ ID NO Дикий тип Wild type 32 32 N52H/N57Y/Q100R/H115R/C198R N52H/N57Y/Q100R/H115R/C198R 435 435 Ν52Η/Ν57 Y/Q100R/F172S/C198R Ν52Η/Ν57 Y/Q100R/F172S/C198R 436 436 N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/C198R N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/C198R 437 437 N52H/N57Y/Q100R/H115R/I143 V/F172S/C198R N52H/N57Y/Q100R/H115R/I143 V/F172S/C198R 438 438 N52H/N57Y/Q100R/L102R/H115R/F172S/C198R N52H/N57Y/Q100R/L102R/H115R/F172S/C198R 439 439 N52H/V122A/F172S/C198R N52H/V122A/F172S/C198R 440 440 N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/N194D N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/N194D 441 441 N52H/N57Y/H115R/F172S/C198R N52H/N57Y/H115R/F172S/C198R 442 442 N52H/N57Y/Q100R/H115R/C198R N52H/N57Y/Q100R/H115R/C198R 443 443 N52H/N57Y/H115R N52H/N57Y/H115R 444 444 N52H/N57Y/Q100R/H115R N52H/N57Y/Q100R/H115R 445 445 N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/I224V N52H/N57Y/Q100R/H115R/F172S/I224V 446 446 Ν52Η/Ν5 7 Y/Q 100R/H115R/F172 S Ν52Η/Ν5 7 Y/Q 100R/H115R/F172 S 447 447 N52H/N57Y/Q100R/F172S N52H/N57Y/Q100R/F172S 448 448 N52H/Q100R/H115R/1143 T/F172 S N52H/Q100R/H115R/1143 T/F172 S 449 449 N52H/N57Y/Q100Р/Н115R/F172S N52H/N57Y/Q100Р/Н115R/F172S 450 450 N52Y/N57Y/Q100P/F172S N52Y/N57Y/Q100P/F172S 451 451 E16V/N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/C198R E16V/N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/C198R 452 452 E16V/N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/Y152C/K156M/F172S/C198R E16V/N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/Y152C/K156M/F172S/C198R 453 453 N52S/E90A/H115R N52S/E90A/H115R 454 454 N30D/K42E N52S/H115R N30D/K42E N52S/H115R 455 455 N30D/K42E/N52S/H115R/C198R/R2211 N30D/K42E/N52S/H115R/C198R/R2211 456 456 N30D/K42E/N52S/H115R/C198R N30D/K42E/N52S/H115R/C198R 457 457 N30D/K42E/N52S/H115R/F172S/N194D N30D/K42E/N52S/H115R/F172S/N194D 458 458 N52S/H115R/F120S/I143V/C198R N52S/H115R/F120S/I143V/C198R 459 459 N52S/H115R/F172S/C198R N52S/H115R/F172S/C198R 460 460 Ν52Η/Ν57 Y/Q 1ООР/С198R Ν52Η/Ν57 Y/Q 1ООР/С198R 461 461 N52H/N57Y/Q1 OOP Hl 15R/F172S/C198R N52H/N57Y/Q1 OOP Hl 15R/F172S/C198R 462 462 N52H/N5 7 Y/Q 100P/F172 S/C198R N52H/N5 7 Y/Q 100P/F172 S/C198R 463 463 N52H/N57Y/Q100P/H115R N52H/N57Y/Q100P/H115R 464 464 N52H/N57Y/Q100Р/Н115R/C198R N52H/N57Y/Q100Р/Н115R/C198R 465 465 N52H/Q100R/C198R N52H/Q100R/C198R 466 466 N52H/Q100R/H115R/F172S N52H/Q100R/H115R/F172S 467 467 N52H/Q100R/H115X/F172S/C198R N52H/Q100R/H115X/F172S/C198R 468 468 N52H/Q100R/H115R/F172S/C198R N52H/Q100R/H115R/F172S/C198R 469 469 N52H/N57Y/Q100R /F172S/C198R N52H/N57Y/Q100R/F172S/C198R 470 470

- 176 044346- 176 044346

2. Обратные варианты.2. Reverse options.

Конкретные примеры мутаций, включая N52H, N52Y, N57Y, Q100R, Q100P, F138L, C198R, L203P, идентифицированные в отобранных вариантах, описанных в примере 6, были дополнительно объединены в ECD референсного (например, дикого типа) ICOSL относительно положений, предлагаемых в SEQ ID NO: 32 для создания дополнительных комбинированных вариантов. Полученные варианты, содержащие от 1 до 3 различных аминокислотных мутаций в различных комбинациях, представлены в табл. 27В.Specific examples of mutations, including N52H, N52Y, N57Y, Q100R, Q100P, F138L, C198R, L203P, identified in the selected variants described in Example 6 were further compiled into the reference (eg, wild-type) ICOSL ECD relative to the provisions proposed in SEQ ID NO: 32 to create additional combination options. The resulting variants, containing from 1 to 3 different amino acid mutations in various combinations, are presented in table. 27V.

Таблица 27В _____________Примерные вариантные полипептиды ICOSL_____________Table 27B _____________Exemplary ICOSL variant polypeptides_____________

Мутация(и) Mutation(s) ECD SEQ ID NO ECD SEQ ID NO Дикий тип Wild type 32 32 Q100R Q100R 427 427 F138L/L203P F138L/L203P 428 428 N52Y/F138L/L203P N52Y/F138L/L203P 429 429 N57Y/Q100R/C198R N57Y/Q100R/C198R 430 430 N57Y/F138L/L203P N57Y/F138L/L203P 431 431 N52H N52H 110 110 N57Y N57Y 121 121 N57Y/Q100P N57Y/Q100P 122 122 Q100R/F138L Q100R/F138L 432 432 L203P L203P 433 433

3. Варианты гликозилирования.3. Glycosylation options.

Примерные мутации гликозилирования, выбранные из N52H, N52Q, N84Q, N119Q, N155H, N155Q, N168Q, N207Q были объединены в различных комбинациях в ECD референсного (например, дикого типа) ICOSL относительно положений, предлагаемых в SEQ ID NO: 32, для получения дополнительных комбинированных вариантов. Полученные варианты содержат от 1 до 5 различных аминокислотных мутаций в различных комбинациях, предлагаемых в табл. 27C. Мутации, обозначенные символом X, обозначают либо N, либо Q в указанном положении.Exemplary glycosylation mutations selected from N52H, N52Q, N84Q, N119Q, N155H, N155Q, N168Q, N207Q were combined in various combinations in the reference (eg, wild type) ICOSL ECD relative to the positions proposed in SEQ ID NO: 32 to provide additional combined options. The resulting variants contain from 1 to 5 different amino acid mutations in various combinations proposed in table. 27C. Mutations indicated by X represent either N or Q at the position indicated.

Таблица 27C (глик.) ______________Примерные вариантные полипептиды ICOSL_____________Table 27C (glyc.) ______________Exemplary ICOSL variant polypeptides_____________

Мутация(и) Mutation(s) ECD SEQ ID NO ECD SEQ ID NO Дикий тип Wild type 32 32 N84Q N84Q 387 387 N119Q N119Q 388 388 N168Q N168Q 389 389 N207Q N207Q 390 390 N52Q/N207X N52Q/N207X 391 391 N168X/N207X N168X/N207X 392 392 N52Q/N168Q N52Q/N168Q 393 393 N84Q/N207Q N84Q/N207Q 394 394 N155Q/N207Q N155Q/N207Q 395 395 N119Q/N168Q N119Q/N168Q 396 396 N119Q/N207Q N119Q/N207Q 397 397 N119Q/N155X N119Q/N155X 398 398 N52Q/N84Q N52Q/N84Q 399 399 N52Q/N119Q N52Q/N119Q 400 400 N84Q/N119Q N84Q/N119Q 401 401 N52Q/N84Q/N168Q N52Q/N84Q/N168Q 402 402 N52Q/N84Q/N207Q N52Q/N84Q/N207Q 403 403 N84Q/N155Q/N168Q N84Q/N155Q/N168Q 404 404 N84Q/N168Q/N207Q N84Q/N168Q/N207Q 405 405 N84Q/N155H/N207Q N84Q/N155H/N207Q 406 406 N155Q/N168Q/N207Q N155Q/N168Q/N207Q 407 407 N119Q N155Q/N168Q N119Q N155Q/N168Q 408 408 N119Q/N168Q/N207Q N119Q/N168Q/N207Q 409 409 N84Q/N119Q/N207Q N84Q/N119Q/N207Q 410 410 N119Q/N155H/N207Q N119Q/N155H/N207Q 411 411 N84Q/N119Q/N155Q N84Q/N119Q/N155Q 412 412 N52Q/N119Q/N155Q N52Q/N119Q/N155Q 413 413 N52H/N84Q/N119Q N52H/N84Q/N119Q 414 414 N52H/N84Q/N168X/N207X N52H/N84Q/N168X/N207X 415 415 N52Q/N84Q/N155X/N168Х N52Q/N84Q/N155X/N168Х 416 416 N52Q/N84Q/N119Q/N168Q N52Q/N84Q/N119Q/N168Q 417 417

- 177 044346- 177 044346

N84Q/N119Q/N155Q/N168Q N84Q/N119Q/N155Q/N168Q 418 418 N84Q/N155Q/N168Q/N207Q N84Q/N155Q/N168Q/N207Q 419 419 N84Q/N119Q/N155Q/N207Q N84Q/N119Q/N155Q/N207Q 420 420 N52Q/N84Q/N119Q/N207Q N52Q/N84Q/N119Q/N207Q 421 421 N52Q/N84Q/N119Q/N155Q N52Q/N84Q/N119Q/N155Q 422 422 N52Q/N84Q/N119Q/N155Q/N207Q N52Q/N84Q/N119Q/N155Q/N207Q 423 423 N84Q/N119Q/N155Q/N168Q/N207Q N84Q/N119Q/N155Q/N168Q/N207Q 424 424

В. Связывание с контрструктурами, экспрессируемыми клетками.B. Binding to counterstructures expressed by cells.

Дополнительные варианты были отформатированы как Fc-гибридные белки, описанные в примере 4. Вариантные Fc-гибридные молекулы оценивали в исследованиях связывания для оценки специфичности и аффинности вариантных иммуномодулирующих белков с доменом ICOSL к когнатным партнерам связывания. В исследованиях связывания, описанных в примере 6, использовали клетки Expi293, трансфецированные когнатными партнерами связывания CD28, ICOS и CTLA4 человека. MFI определяли для каждого трансфектанта и сравнивали с соответствующим немодифицированным (родительским) ECD-Fc.Additional variants were formatted as Fc-fusion proteins described in Example 4. Variant Fc-fusion molecules were evaluated in binding studies to evaluate the specificity and affinity of the variant ICOSL domain immunomodulatory proteins for cognate binding partners. The binding studies described in Example 6 used Expi293 cells transfected with cognate binding partners of human CD28, ICOS and CTLA4. MFI was determined for each transfectant and compared with the corresponding unmodified (parental) ECD-Fc.

Результаты по связыванию для примерных вариантных гибридных молекул ICOSL ECD-Fc приведены в табл. 28А-С. Как показано в табл. 28А-С, варианты доменов ICOSL IgSF (например, ECD), полученные с различными комбинациями специфических мутаций, демонстрируют повышенное связывание, по меньшей мере, с одним, а в некоторых случаях более чем с одним, когнатным контрструктурным ли гандом.Binding results for exemplary variant ICOSL ECD-Fc hybrid molecules are shown in Table. 28A-S. As shown in table. 28A-C, IgSF ICOSL domain variants (eg, ECD) generated with various combinations of specific mutations exhibit increased binding to at least one, and in some cases more than one, cognate counterstructure ligand.

С. Характеристика биоактивности с помощью анализа коиммобилизации с анти-СОЗ.C. Characterization of bioactivity using co-immobilization assay with anti-POPs.

Костимулирующую биоактивность полученных вариантных Fc-гибридных молекул также оценивали в анализах коиммобилизации с анти-СОЗ, описанном в примере 6. В табл. 28А-С показано отношение IFN-гамма, продуцируемое каждым вариантом ECD-Fc в анализе, по сравнению с соответствующим немодифицированным ICOSL ECD-Fc (дикого типа). Мутации, обозначенные X, указывают на Q или остаток дикого типа, соответствующий указанному положению SEQ ID NO: 32 в указанном положении. Как показано, полученные вариантные Fc-гибридные молекулы демонстрируют улучшенные активности в отношении увеличения иммунологической активности.The costimulatory bioactivity of the resulting variant Fc-fusion molecules was also assessed in the co-immobilization assays with anti-POPs described in Example 6. Table. 28A-C show the IFN-gamma ratio produced by each ECD-Fc variant in the assay compared to the corresponding unmodified ICOSL ECD-Fc (wild type). Mutations designated X indicate a Q or wild-type residue corresponding to the indicated position of SEQ ID NO: 32 at the indicated position. As shown, the resulting variant Fc fusion molecules exhibit improved immunological enhancing activities.

Таблица 28АTable 28A

Последовательности молекул, данные связывания и данные костимулирующей биоактивности вариантных молекул ICOSL ECD-Fc, включающих отобранные мутацииMolecular sequences, binding data and co-stimulatory bioactivity data of ICOSL ECD-Fc variant molecules including selected mutations

Мутации ICOSL ICOSL mutations SEQ ID NO (ECD) SEQ ID NO (ECD) Связывание Binding Коиммоби ли-зация с антиCD3 Coimmobilization with antiCD3 ICOS MFI (исходное соотношение) ICOS MFI (original ratio) CD28 MFI (исходное соотношение) CD28 MFI (original ratio) CTLA-4 MFI (исходное соотношение) CTLA-4 MFI (original ratio) IFN-гамма пг/мл (исходное соотношение) IFN-gamma pg/ml (initial ratio) N52H, N57Y, Q100R, F172S, C198R N52H, N57Y, Q100R, F172S, C198R 436 436 118145 (1,33) 118145 (1.33) 59651 (29,60) 59651 (29.60) 178790 (41,12) 178790 (41.12) 5059 (37,90) 5059 (37.90) N52H, N57Y, Q100R, H115R, F172S, C198R N52H, N57Y, Q100R, H115R, F172S, C198R 437 437 125341 (1,41) 125341 (1.41) 51604 (25,60) 51604 (25.60) 211000 (48,53) 211000 (48.53) 8218 (61,57) 8218 (61.57) N52Y, N57Y, Q100P, F172S N52Y, N57Y, Q100P, F172S 451 451 121280 (1,37) 121280 (1.37) 63663 (31,59) 63663 (31.59) 174224 (40,07) 174224 (40.07) 8123 (60,86) 8123 (60.86) E16V, N52H, N57Y, Q100R, V110D, H115R, Y152C, К156М, F172S, C198R E16V, N52H, N57Y, Q100R, V110D, H115R, Y152C, K156M, F172S, C198R 453 453 107819 (1,22) 107819 (1.22) 68883 (34,18) 68883 (34.18) 170080 (39,12) 170080 (39.12) 8936 (66,95) 8936 (66.95) N52S, H115R, F120S, I143V, C198R N52S, H115R, F120S, I143V, C198R 459 459 116235 (1,31) 116235 (1.31) 25582 (12,69) 25582 (12.69) 22483 (5,17) 22483 (5.17) 125 (0,93) 125 (0.93) N52H, N57Y, Q100P, C198R N52H, N57Y, Q100P, C198R 461 461 107164 (1,21) 107164 (1.21) 56103 (27,84) 56103 (27.84) 172319 (39,63) 172319 (39.63) 1258 (9,43) 1258 (9.43) N52H, N57Y, Q100P, H115R, F172S, C198R N52H, N57Y, Q100P, H115R, F172S, C198R 462 462 120864 (1,36) 120864 (1.36) 54586 (27,08) 54586 (27.08) 176637 (40,63) 176637 (40.63) 5507 (41,26) 5507 (41.26) N52H, N57Y, Q100P, F172S, C198R N52H, N57Y, Q100P, F172S, C198R 463 463 117954 (1,33) 117954 (1.33) 59376 (29,46) 59376 (29.46) 151265 (34,79) 151265 (34.79) 3884 (29,10) 3884 (29.10) N52H, N57Y, Q100P, H115R N52H, N57Y, Q100P, H115R 464 464 126221 (1,42) 126221 (1.42) 53321 (26,46) 53321 (26.46) 178812 (41,13) 178812 (41.13) 4154 (31,13) 4154 (31.13) N52H, N57Y, Q100P, H115R, C198R N52H, N57Y, Q100P, H115R, C198R 465 465 137004 (1,55) 137004 (1.55) 55454 (27,51) 55454 (27.51) 148417 (34,14) 148417 (34.14) 5069 (37,98) 5069 (37.98) N52H, Q100R, C198R N52H, Q100R, C198R 466 466 111428 (1,26) 111428 (1.26) 58608 (29,08) 58608 (29.08) 116111 (26,71) 116111 (26.71) 3729 (27,94) 3729 (27.94) N52H, Q100R, H115R, F172S N52H, Q100R, H115R, F172S 467 467 105532 (1,19) 105532 (1.19) 58287 (28,92) 58287 (28.92) 106295 (24,45) 106295 (24.45) 5294 (39,67) 5294 (39.67)

- 178 044346- 178 044346

N52H, Q100R, H115X, F172S, C198R N52H, Q100R, H115R, F172S, C198R N52H, N57Y, Q100R, F172S, C198R N52H, N57Y, Q100R, H115R, F172S, C198R N52H, N57Y, Q100R, H115R, F172S N52H, N57Y, Q100R, H115R, F172S, C198R Q100R Q100R ΔΑΑΑ F138L, L203P F138L, L203P ΔΑΑΑ N52Y, F138L, L203P N52Y, F138L, L203P ΔΑΑΑ N57Y, Q100R, C198R N57Y, Q100R, C198R ΔΑΑΑ N57Y, F138L, L203P N57Y, F138L, L203P ΔΑΑΑ N52H N57Y N57Y, QI OOP Q100R, F138L N52H, Q100R, H115X, F172S, C198R N52H, Q100R, H115R, F172S, C198R N52H, N57Y, Q100R, F172S, C198R N52H, N57Y, Q100R, H115R, F172S, C198R N52H, N57Y, Q100R, H115R, F172S N52H, N57Y, Q100R, H115R, F172S, C198R Q100R Q100R ΔΑΑΑ F138L, L203P F138L, L203P ΔΑΑΑ N52Y, F138L, L203P N52Y, F138L, L203P ΔΑΑΑ N57Y, Q100R, C198R N57Y, Q100R, C198R ΔΑΑΑ N57Y, F138L, L203P N57Y, F138L, L203P ΔΑΑΑ N52H N57Y N57Y, QI OOP Q100R, F138L 468 469 470 437 447 437 427 427 428 428 429 429 430 430 431 431 110 121 122 432 468 469 470 437 447 437 427 427 428 428 429 429 430 430 431 431 110 121 122 432 106555 (1,20) 114223 (1,29) 99350 (1,12) 114057 (1,29) 136143 (1,54) 132970 (1,50) 62064 (8,31) 1594 (8,20) 53804 (0,75) 53044 (0,93) 99761 (23,50) 59576 (26,23) 58706 (28,65) 98514 (28,63) 109472 (20,98) 97777 (22,29) 91598 (28,91) 109031 (21,71) 72480 (29,85) 65974 (2,23) 106555 (1.20) 114223 (1.29) 99350 (1.12) 114057 (1.29) 136143 (1.54) 132970 (1.50) 62064 (8.31) 1594 (8.20) 53804 (0.75) 53044 (0.93) 99761 (23.50) 59576 (26.23) 58706 (28.65) 98514 (28.63) 109472 (20.98) 97777 (22.29) 91598 (28.91) 109031 (21.71) 72480 (29.85) 65974 (2.23) 73397 (36,42) 66686 (33,09) 61292 (30,41) 52011 (25,81) 66516 (33,00) 59633 (29,59) 16740 (8,31) 16535 (8,20) 1510 (0,75) 1882 (0,93) 47369 (23,50) 52865 (26,23) 57739 (28,65) 57694 (28,63) 42276 (20,98) 44924 (22,29) 58264 (28,91) 43754 (21,71) 60161 (29,85) 4485 (2,23) 73397 (36.42) 66686 (33.09) 61292 (30.41) 52011 (25.81) 66516 (33.00) 59633 (29.59) 16740 (8.31) 16535 (8.20) 1510 (0.75) 1882 (0.93) 47369 (23.50) 52865 (26.23) 57739 (28.65) 57694 (28.63) 42276 (20.98) 44924 (22.29) 58264 (28.91) 43754 (21.71) 60161 (29.85) 4485 (2.23) 171815 (39,52) 157154 (36,15) 182288 (41,93) 146471 (33,69) 177376 (40,80) 133247 (30,65) 29654 (8,31) 33457 (8,20) 2151 (0,75) 1623 (0,93) 67300 (23,50) 66553 (26,23) 99426 (28,65) 131458 (28,63) 64477 (20,98) 64742 (22,29) 103025 (28,91) 50683 (21,71) 109522 (29,85) 8136 (2,23) 171815 (39.52) 157154 (36.15) 182288 (41.93) 146471 (33.69) 177376 (40.80) 133247 (30.65) 29654 (8.31) 33457 (8.20) 2151 (0.75) 1623 (0.93) 67300 (23.50) 66553 (26.23) 99426 (28.65) 131458 (28.63) 64477 (20.98) 64742 (22.29) 103025 (28.91) 50683 (21.71) 109522 (29.85) 8136 (2.23) 6961 (52,16) 7592 (56,88) 9167 (68,68) 6545 (49,04) 8527 (63,89) 5999 (44,95) 35 (0,26) 87 (0,65) 35 (0,26) 35 (0,26) 1489 (11,16) 997 (7,47) 9962 (74,64) 6763 (50,67) 4979 (37,30) 6507 (48,75) 3393 (25,42) 4881 (36,57) 2797 (20,95) 685 (5,13) 6961 (52.16) 7592 (56.88) 9167 (68.68) 6545 (49.04) 8527 (63.89) 5999 (44.95) 35 (0.26) 87 (0.65) 35 (0.26) 35 (0.26) 1489 (11.16) 997 (7.47) 9962 (74.64) 6763 (50.67) 4979 (37.30) 6507 (48.75) 3393 (25.42) 4881 (36.57) 2797 (20.95) 685 (5.13) L203P L203P 433 433 61554 (0,76) 61554 (0.76) 1533 (0,76) 1533 (0.76) 2031 (0,76) 2031 (0.76) 2434 (18,24) 2434 (18.24) ECD из ICOSL дикого типа ECD from wild type ICOSL 32 32 88625 (1,00) 88625 (1.00) 2015 (1,00) 2015 (1.00) 4348 (1,00) 4348 (1.00) 133 (1,00) 133 (1.00)

- 179 044346- 179 044346

Таблица 28ВTable 28B

Последовательности молекул, данные связывания и данные костимулирующей биоактивности вариантных молекул ICOSL ECD-Fc, включающих отобранные мутацииMolecular sequences, binding data and co-stimulatory bioactivity data of ICOSL ECD-Fc variant molecules including selected mutations

Мутации ICOSL ICOSL mutations SEQ ID NO (ECD) SEQ ID NO (ECD) Связывание Binding Коиммобилизация с антиСОЗ IFNгамма пг/мл (исходное соотношение) Coimmobilization with anti-POP IFNgamma pg/ml (initial ratio) ICOS MFI (исходное соотношение) ICOS MFI (original ratio) CD28 MFI (исходное соотношение) CD28 MFI (original ratio) CTLA-4 MFI (исходное соотношение) CTLA-4 MFI (original ratio) N52H, N57Y, Q100R, N52H, N57Y, Q100R, 445 445 165027 165027 51666 51666 287581 287581 5858 5858 H115R H115R (1,97) (1.97) (9,89) (9.89) (60,27) (60.27) (20,36) (20.36) N52H, N57Y, Q100R, F172S N52H, N57Y, Q100R, F172S 448 448 184449 (2,20) 184449 (2.20) 51394 (9,84) 51394 (9.84) 182109 (38,16) 182109 (38.16) 3449 (11,99) 3449 (11.99) N52H, N57Y, Q100R, N52H, N57Y, Q100R, 446 446 165120 165120 46636 46636 274026 274026 2053 2053 H115R, F172S, I224V H115R, F172S, I224V (1,97) (1.97) (8,93) (8.93) (57,43) (57.43) (7,13) (7.13) N52H, N57Y, Q100R, N52H, N57Y, Q100R, 447 447 164750 164750 40046 40046 259351 259351 3722 3722 H115R, F172S H115R, F172S (1,97) (1.97) (7,67) (7.67) (54,35) (54.35) (12,93) (12.93) N52H, N57Y, Q100R, N52H, N57Y, Q100R, 435 435 186017 186017 39073 39073 200505 200505 3909 3909 H115R, C198R H115R, C198R (2,22) (2.22) (7,48) (7.48) (42,02) (42.02) (13,58) (13.58) N52H, N57Y, Q100R, N52H, N57Y, Q100R, 436 436 181118 181118 38233 38233 210709 210709 1199 1199 F172S, C198R F172S, C198R (2,16) (2.16) (7,32) (7.32) (44,16) (44.16) (4,17) (4.17) N52H, N57Y, Q100R, N52H, N57Y, Q100R, 437 437 155392 155392 28828 28828 169736 169736 3449 3449 H115R, F172S, C198R N52H, N57Y, Q100R, H115R, F172S, C198R N52H, N57Y, Q100R, 438 438 (1,85) (1.85) (5,52) (5.52) (35,57) 179089 (35.57) 179089 (11,99) 1620 (11.99) 1620 H115R, I143V, F172S, C198R H115R, I143V, F172S, C198R 139977 (1,67) 139977 (1.67) 31459 (6,02) 31459 (6.02) (37,53) (37.53) (5,63) (5.63) N52H, N57Y, Q100R, L102R N52H, N57Y, Q100R, L102R 439 439 146799 146799 29636 29636 200000 200000 2712 2712 H115R, F172S, C198R H115R, F172S, C198R (1,75) (1.75) (5,68) (5.68) (41,91) (41.91) (9,43) (9.43) N52H, N57Y, Q100R, N52H, N57Y, Q100R, 441 441 150863 150863 31304 31304 167783 167783 15607 15607 Hl 15R F172S, N194D Hl 15R F172S, N194D (1,80) (1.80) (5,99) (5.99) (35,16) (35.16) (54,24) (54.24) N52H, N57Y, H115R, N52H, N57Y, H115R, 442 442 126909 126909 35803 35803 152858 152858 5374 5374 F172S, C198R F172S, C198R (1,51) (1.51) (6,86) (6.86) (32,03) (32.03) (18,67) (18.67) N52H, N57Y, Q100R, N52H, N57Y, Q100R, 443 443 131730 131730 37595 37595 139041 139041 9306 9306 H115R, C198R H115R, C198R (1,57) (1.57) (7,20) (7.20) (29,14) (29.14) (32,34) (32.34) N52H, N57Y, H115R N52H, N57Y, H115R 444 444 162632 (1,94) 162632 (1.94) 49847 (9,55) 49847 (9.55) 266878 (55,93) 266878 (55.93) 2918 (10,14) 2918 (10.14) N52H, Q100R, H115R, N52H, Q100R, H115R, 449 449 132873 132873 52058 52058 186366 186366 3086 3086 I143TF172S I143TF172S (1,59) (1.59) (9,97) (9.97) (39,06) (39.06) (10,72) (10.72) N52H, N57Y, QI OOP, N52H, N57Y, QI OOP, 450 450 148160 148160 46851 46851 246636 246636 4987 4987 H115R, F172S H115R, F172S (1,77) (1.77) (8,97) (8.97) (51,69) (51.69) (17,33) (17.33) E16V, N52H, N57Y, Q100R, E16V, N52H, N57Y, Q100R, 452 452 154036 154036 48674 48674 212905 212905 5095 5095 V110D, H115R, C198R V110D, H115R, C198R (1,84) (1.84) (9,32) (9.32) (44,62) (44.62) (17,71) (17.71) N52S, E90A, H115R N52S, E90A, H115R 454 454 142963 (1,71) 142963 (1.71) 3597 (0,69) 3597 (0.69) 3772 (0,79) 3772 (0.79) 2241 (7,79) 2241 (7.79) N30D, K42E, N52S, H115R, C198R R221I N30D, K42E, N52S, H115R, C198R R221I 456 456 124095 (1,48) 124095 (1.48) 8066 (1,54) 8066 (1.54) 7751 (1,62) 7751 (1.62) 417(1,45) 417(1.45) N30D, K42E, N52S, H115R, C198R N30D, K42E, N52S, H115R, C198R 457 457 161734 (1,93) 161734 (1.93) 2791 (0,53) 2791 (0.53) 2919 (0,61) 2919 (0.61) 841 (2,92) 841 (2.92) N30D, K42E, N52S, H115R, N30D, K42E, N52S, H115R, 458 458 117880 117880 4395 4395 4941 4941 2904 2904 F172S, N194D F172S, N194D (1,41) (1.41) (0,84) (0.84) (1,04) (1.04) (10,09) (10.09) N30D, K42E, N52S, H115R, N30D, K42E, N52S, H115R, 455 455 114107 (1,36) 114107 (1.36) 2935 (0,56) 2935 (0.56) 2748 (0,58) 2748 (0.58) 549 (1,91) 549 (1.91) N52S, E90A, H115R, N52S, E90A, H115R, 454 454 120450 (1,44) 120450 (1.44) 12768 (2,45) 12768 (2.45) 23282 (4,88) 23282 (4.88) 2890 (10,04) 2890 (10.04) N30D, K42E, N52S, H115R N30D, K42E, N52S, H115R 455 455 115273 (1,38) 115273 (1.38) 11964 (2,29) 11964 (2.29) 22779 (4,77) 22779 (4.77) 2241 (7,79) 2241 (7.79) N52S, H115R, F172S, N52S, H115R, F172S, 460 460 95537 95537 7614 7614 21701 21701 1458 1458 C198R C198R (1,14) (1.14) (1,46) (1.46) (4,55) (4.55) (5,07) (5.07) Дикий тип Wild type 32 32 83813 (1,00) 83813 (1.00) 5222 (1,00) 5222 (1.00) 4772 (1,00) 4772 (1.00) 288 (1,00) 288 (1.00)

- 180 044346- 180 044346

Таблица 28CTable 28C

Последовательности молекул, данные связывания и данные костимулирующей биоактивности вариантных молекул ICOSL ECD-Fc, включающих мутации гликозилированияMolecular sequences, binding data and co-stimulatory bioactivity data of variant ICOSL ECD-Fc molecules including glycosylation mutations

Мутация(ии) ICOSL ICOSL mutation(s) SEQ ID NO (ECD) SEQ ID NO (ECD) Связывание Binding Коиммобилизац ия с антиСОЗ Coimmobilization with antiPOPs ICOS MFI (исходное соотношение) ICOS MFI (original ratio) CD28 MFI (исходное соотношение) CD28 MFI (original ratio) CTLA-4 MFI (исходное соотношение) CTLA-4 MFI (original ratio) IFNгамма пг/мл (исходное соотношение) IFNgamma pg/ml (initial ratio) N84Q N84Q 387 387 34426 (0,94) 34426 (0.94) 1755 (1,16) 1755 (1.16) 5757 (1,51) 5757 (1.51) 100 (2,03) 100 (2.03) N119Q N119Q 388 388 30806 (0,84) 30806 (0.84) 4102 (2,70) 4102 (2.70) 19836 (5,21) 19836 (5.21) 81 (1,66) 81 (1.66) N168Q N168Q 389 389 27041 (0,74) 27041 (0.74) 1410 (0,93) 1410 (0.93) 18641 (4,90) 18641 (4.90) 67 (1,36) 67 (1.36) N207Q N207Q 390 390 36516 (1,00) 36516 (1.00) 11923 (7,86) 11923 (7.86) 25701 (6,76) 25701 (6.76) 206 (4,20) 206 (4.20) N52Q, N207X N52Q, N207X 391 391 30216 (0,83) 30216 (0.83) 12086 (7,97) 12086 (7.97) 27952 (7,35) 27952 (7.35) 77 (1,56) 77 (1.56) N168X, N207X N168X, N207X 392 392 37191 (1,02) 37191 (1.02) 5787 (3,81) 5787 (3.81) 12280 (3,23) 12280 (3.23) 104 (2,12) 104 (2.12) N52Q, N168Q N52Q, N168Q 393 393 32576 (0,89) 32576 (0.89) 12638 (8,33) 12638 (8.33) 27167 (7,14) 27167 (7.14) 101 (2,06) 101 (2.06) N84Q, N207Q N84Q, N207Q 394 394 37176 (1,02) 37176 (1.02) 5292 (3,49) 5292 (3.49) 3153 (0,83) 3153 (0.83) 31 (0,63) 31 (0.63) N155Q, N207Q N155Q, N207Q 395 395 34884 (0,95) 34884 (0.95) 1489 (0,98) 1489 (0.98) 987 (0,26) 987 (0.26) 73 (1,48) 73 (1.48) N119Q, N168Q N119Q, N168Q 396 396 29099 (0,80) 29099 (0.80) 2534 (1,67) 2534 (1.67) 11289 (2,97) 11289 (2.97) 51 (1,05) 51 (1.05) N119Q, N207Q N119Q, N207Q 397 397 32603 (0,89) 32603 (0.89) 1861 (1,23) 1861 (1.23) 6795 (1,79) 6795 (1.79) 153 (3,12) 153 (3.12) N119QN155X N119QN155X 398 398 38516 (1,05) 38516 (1.05) 15318 (10,10) 15318 (10.10) 27498 (7,23) 27498 (7.23) 173 (3,52) 173 (3.52) N52Q, N84Q N52Q, N84Q 399 399 33988 (0,93) 33988 (0.93) 1675 (1,10) 1675 (1.10) 3525 (0,93) 3525 (0.93) 39 (0,80) 39 (0.80) N52Q,N119Q N52Q,N119Q 400 400 35729 (0,98) 35729 (0.98) 11040 (7,28) 11040 (7.28) 26139 (6,87) 26139 (6.87) 51 (1,03) 51 (1.03) N84Q, N119Q N84Q, N119Q 401 401 34777 (0,95) 34777 (0.95) 1493 (0,98) 1493 (0.98) 2877 (0,76) 2877 (0.76) 39 (0,80) 39 (0.80) N52Q, N84Q, N168Q N52Q, N84Q, N168Q 402 402 27021 (0,74) 27021 (0.74) 1584 (1,04) 1584 (1.04) 958 (0,25) 958 (0.25) 38 (0,78) 38 (0.78) N52Q, N84Q, N207Q N52Q, N84Q, N207Q 403 403 39942 (1,09) 39942 (1.09) 13396 (8,83) 13396 (8.83) 26360 (6,93) 26360 (6.93) 37 (0,76) 37 (0.76) N84Q, N155Q, N168Q N84Q, N155Q, N168Q 404 404 27812 27812 357 357 466 466 30 (0,61) 30 (0.61)

- 181 044346- 181 044346

(0,76) (0.76) (0,24) (0.24) (0,12) (0.12) N84Q, N168Q, N207Q N84Q, N168Q, N207Q 405 405 30659 (0,84) 30659 (0.84) 737 (0,49) 737 (0.49) 861 (0,23) 861 (0.23) 25 (0,52) 25 (0.52) N84Q, N155H, N207Q N84Q, N155H, N207Q 406 406 13557 (0,37) 13557 (0.37) 685 (0,45) 685 (0.45) 607 (0,16) 607 (0.16) 29 (0,59) 29 (0.59) N155Q, N168Q, N207Q N155Q, N168Q, N207Q 407 407 13999 (0,38) 13999 (0.38) 277 (0,18) 277 (0.18) 317 (0,08) 317 (0.08) 40 (0,82) 40 (0.82) N119Q, N155Q, N168Q N119Q, N155Q, N168Q 408 408 36896 (1,01) 36896 (1.01) 4094 (2,70) 4094 (2.70) 2179 (0,57) 2179 (0.57) 50 (1,02) 50 (1.02) N119Q, N168Q, N207Q N119Q, N168Q, N207Q 409 409 29543 (0,81) 29543 (0.81) 921 (0,61) 921 (0.61) 3744 (0,98) 3744 (0.98) 72 (1,47) 72 (1.47) N84Q, N119Q, N207Q N84Q, N119Q, N207Q 410 410 21357 (0,58) 21357 (0.58) 569 (0,38) 569 (0.38) 640 (0,17) 640 (0.17) 59 (1,20) 59 (1.20) N119Q, N155H, N207Q N119Q, N155H, N207Q 411 411 37310 (1,02) 37310 (1.02) 614 (0,40) 614 (0.40) 931 (0,24) 931 (0.24) 86 (1,75) 86 (1.75) N84Q, N119Q, N155Q N84Q, N119Q, N155Q 412 412 2675 (0,07) 2675 (0.07) 262 (0,17) 262 (0.17) 291 (0,08) 291 (0.08) 34 (0,70) 34 (0.70) N52Q, N119Q, N155Q N52Q, N119Q, N155Q 413 413 27853 (0,76) 27853 (0.76) 552 (0,36) 552 (0.36) 772 (0,20) 772 (0.20) 42 (0,87) 42 (0.87) N52H, N84Q, N119Q N52H, N84Q, N119Q 414 414 40700 (1,И) 40700 (1,I) 4580 (3,02) 4580 (3.02) 4601 (1,21) 4601 (1.21) 39 (0,80) 39 (0.80) N52H, N84Q, N168X, N207X N52H, N84Q, N168X, N207X 415 415 8796 (0,24) 8796 (0.24) 587 (0,39) 587 (0.39) 481 (0,13) 481 (0.13) 32 (0,66) 32 (0.66) N52Q, N84Q, N155X, N168X N52Q, N84Q, N155X, N168X 416 416 43521 (1,19) 43521 (1.19) 6605 (4,35) 6605 (4.35) 4811 (1,26) 4811 (1.26) 32 (0,66) 32 (0.66) N52Q, N84Q, N119Q, N168Q N52Q, N84Q, N119Q, N168Q 417 417 39342 (1,07) 39342 (1.07) 4519 (2,98) 4519 (2.98) 3300 (0,87) 3300 (0.87) 37 (0,76) 37 (0.76) N52Q, N84Q, N119Q, N207Q N52Q, N84Q, N119Q, N207Q 421 421 7011 (0,19) 7011 (0.19) 602 (0,40) 602 (0.40) 433 (0,И) 433 (0,I) 37 (0,75) 37 (0.75) ECD из ICOSL дикого типа ECD from wild type ICOSL 32 32 36602 (1,00) 36602 (1.00) 1517 (1,00) 1517 (1.00) 3804 (1,00) 3804 (1.00) 49 (1,00) 49 (1.00)

Пример 21.Example 21.

Получение и оценка гибридных молекул с помощью антитела, нацеленного на HER2.Generation and evaluation of hybrid molecules using an antibody targeting HER2.

Этот пример описывает получение и оценку вариантных гибридных молекул ICOSL ECD-Fc, конъюгированных с нацеливающим на опухоль агентом, для образования конъюгата (конъюгат vIgD).This example describes the preparation and evaluation of variant ICOSL ECD-Fc fusion molecules conjugated to a tumor-targeting agent to form a conjugate (vIgD conjugate).

V-домен отдельно из ICOSL vIgD (N52H/N57Y/Q100P; представленный в SEQ ID NO: 201) был слит с амино- и карбоксильными концами легкой цепи (фиг. 10A) и тяжелой цепи (фиг. 10B). антитела, нацеленного на HER2, с промежуточными линкерами GGGSGGGS. Примерные конфигурации конъюгатов vIgD показаны на фиг. 10C.The V domain separately from ICOSL vIgD (N52H/N57Y/Q100P; shown in SEQ ID NO: 201) was fused to the amino and carboxyl termini of the light chain (FIG. 10A) and heavy chain (FIG. 10B). HER2-targeting antibody with intermediate linkers GGGSGGGS. Exemplary vIgD conjugate configurations are shown in FIG. 10C.

Для оценки связывания с HER2, трансфектанты Expi293 с ДНК HER2 или пустым контролем окрашивали титруемыми количествами антитела, нацеленного на HER2, которое содержит конъюгат вариантного ICOSL (конъюгат vIgD N52H/N57Y/Q100P) в концентрациях от 100 пМ до 100 нМ. Были также протестированы контрольные белки, включая гибрид ICOSL ECD-Fc дикого типа, гибрид PD-L2 IgV-Fc дикого типа, и вариантную гибридную молекулу ICOSL ECD-Fc с мутациями в N52H/N57Y/Q100P. Для каждого трансфектанта определяли среднюю интенсивность флуоресценции (MFI) или процент положительных клеток, как описано в примере 6. Все конъюгаты IgSF, полученные, как показано на фиг. 11A-B, сохраняли связывание с HER2 по сравнению с эндогенным уровнем экспрессии HER2, наблюдаемым в клетках Expi293. Аналогично, конъюгаты vIgD также демонстрировали связывание с когнатными партнерами связывания ICOSL, включая CD28, CTLA-4 и ICOS.To assess binding to HER2, Expi293 transfectants with HER2 DNA or empty control were stained with titrated amounts of HER2-targeting antibody that contains a variant ICOSL conjugate (vIgD conjugate N52H/N57Y/Q100P) at concentrations ranging from 100 pM to 100 nM. Control proteins were also tested, including wild-type ICOSL ECD-Fc fusion, wild-type PD-L2 IgV-Fc fusion, and a variant ICOSL ECD-Fc fusion molecule with mutations at N52H/N57Y/Q100P. For each transfectant, the mean fluorescence intensity (MFI) or percentage of positive cells was determined as described in Example 6. All IgSF conjugates prepared as shown in FIG. 11A-B, retained binding to HER2 compared to the endogenous level of HER2 expression observed in Expi293 cells. Likewise, vIgD conjugates also exhibited binding to cognate binding partners of ICOSL, including CD28, CTLA-4, and ICOS.

Биологическую активность белка и пролиферацию человеческих первичных T-клеток в анализах in vitro также характеризовали, как описано в примере 6. Конъюгаты vIgD связывали в течение ночи с 96луночными планшетами при 30-0,1 нМ в присутствии 10 нМ анти-CD3. Планшеты промывали и 100 000 меченых CFSE пан T-клеток добавляли к планшетам и инкубировали в течение 72 ч. Уровни IFN-гамма в надосадочной жидкости анализировали с помощью ELISA. Как показано на фиг. 12, конъюгаты vIgD с указанными конфигурациями показали большую секрецию IFN-гамма и пролиферацию по сравнению с конъюгатом родительской гибридной молекулы ICOSL ECD-Fc дикого типа.Protein biological activity and proliferation of human primary T cells in in vitro assays were also characterized as described in Example 6. vIgD conjugates were coupled overnight to 96-well plates at 30-0.1 nM in the presence of 10 nM anti-CD3. The plates were washed and 100,000 CFSE-labeled pan T cells were added to the plates and incubated for 72 hours. IFN-γ levels in the supernatant were analyzed by ELISA. As shown in FIG. 12, vIgD conjugates with these configurations showed greater IFN-γ secretion and proliferation compared to the parent wild-type ICOSL ECD-Fc fusion molecule conjugate.

Пример 22.Example 22.

Транскрипционная сигнатура Nanostring первичных T-клеток человека.Nanostring transcriptional signature of primary human T cells.

Культуральные планшеты ткани покрывали 10 нМ анти-CD3 с 40 нМ контрольного белка Fc, ICOSL-Fc дикого типа, CD80-Fc дикого типа, обоими этими белками, или вариантными гибридными белками ICOSL Fc с указанными мутациями. Очищенные человеческие T-клетки затем высевали на планшеты, покрытые белком, и инкубировали при 37°C. Культуры из каждой обрабатываемой группы, описанной выше, собирали через 24, 48 и 72 ч, и выделяли общую РНК из каждого образца клеток. РНК переносили на Nanostring и чип Cancer Immune использовали для количественного определения трансTissue culture plates were coated with 10 nM anti-CD3 with 40 nM control Fc protein, wild-type ICOSL-Fc, wild-type CD80-Fc, both, or variant ICOSL Fc fusion proteins with the indicated mutations. Purified human T cells were then seeded onto protein-coated plates and incubated at 37°C. Cultures from each treatment group described above were harvested at 24, 48, and 72 h, and total RNA was isolated from each cell sample. RNA was transferred to Nanostring and the Cancer Immune chip was used to quantify trans

- 182 044346 криптов 750 генов в каждом образце. Значения транскриптов были нормализованы с использованием проприетарного программного обеспечения Nanostring, позволяющего сравнивать уровни транскрипции между группами обработки и в течение различных временных периодов. Как показано на фиг. 18 и фиг. 19, протестированные вариантные полипептиды ICOSL ECD-Fc продемонстрировали измененную воспалительную активность по сравнению с CD80 ECD-Fc дикого типа, ICOSL ECD-Fc дикого типа или их комбинации.- 182 044346 crypts 750 genes in each sample. Transcript values were normalized using proprietary Nanostring software allowing comparison of transcript levels between treatment groups and over different time periods. As shown in FIG. 18 and fig. 19, the ICOSL ECD-Fc variant polypeptides tested showed altered inflammatory activity compared to wild-type CD80 ECD-Fc, wild-type ICOSL ECD-Fc, or a combination thereof.

Пример 23.Example 23.

Получение и оценка гибридных молекул с помощью антитела, нацеленного на HER2.Generation and evaluation of hybrid molecules using an antibody targeting HER2.

Пролиферация человеческих T-клеток, культивируемых совместно с VmAb и целевыми клетками, экспрессирующими HER2, также была охарактеризована. CFSE-меченые пан-Т-клетки стимулировали в течение 72 ч с помощью искусственных клеток-мишеней, полученных из клеток K562, презентирующих анти-CD3 одноцепочечную Fv (OKT3) клеточной поверхности и HER2 в присутствии VmAb или контрольных белков. Пролиферацию измеряли с помощью проточного цитометрического анализа CFSEразведения на окрашенных CD4+ или CD8+ T-клетках. Vmab анализировали, изменяя либо количество клеток-мишеней, либо концентрацию используемого VmAb. В первом анализе клетки-мишени K562 титровали от 2500 до 78 клеток/лунку и добавляли к 100000 T-клеток для диапазона эффектор: мишень (E:T) от 40 до 1280:1. VmAb, родительский домен IgSF или WT ICOSL добавляли при 1000 пМ. Во втором анализе клетки-мишени K562 добавляли в количестве от 625 клеток/лунку до 100000 T-клеток для соотношения эффектор:мишень 160:1. VmAb или контрольные белки титровали и добавляли при 3000-37 пМ. Как показано на фиг. 20A и 20B, обе конфигурации анализа демонстрируют, что VmAb, содержащие конъюгат vIgD, обеспечивают превосходную пролиферацию по сравнению с родительским антителом, родительским доменом IgSF или WT ICOSL. Кроме того, vIgD-конъюгаты опосредуют пролиферацию при низких соотношениях E:T (1280:1) или при низких концентрациях белка (37 пМ).The proliferation of human T cells cocultured with VmAb and HER2-expressing target cells was also characterized. CFSE-labeled pan T cells were stimulated for 72 h with artificial target cells derived from K562 cells presenting cell surface anti-CD3 single-chain Fv (OKT3) and HER2 in the presence of VmAb or control proteins. Proliferation was measured using CFSE dilution flow cytometric analysis on stained CD4+ or CD8+ T cells. Vmab was analyzed by varying either the number of target cells or the concentration of VmAb used. In the first assay, K562 target cells were titrated from 2500 to 78 cells/well and added to 100,000 T cells for an effector:target (E:T) range of 40 to 1280:1. VmAb, IgSF parent domain, or WT ICOSL were added at 1000 pM. In the second assay, K562 target cells were added at levels ranging from 625 cells/well to 100,000 T cells for an effector:target ratio of 160:1. VmAb or control proteins were titrated and added at 3000-37 pM. As shown in FIG. 20A and 20B, both assay configurations demonstrate that VmAbs containing the vIgD conjugate provide superior proliferation compared to the parent antibody, parent IgSF domain, or WT ICOSL. In addition, vIgD conjugates mediate proliferation at low E:T ratios (1280:1) or at low protein concentrations (37 pM).

Пример 24.Example 24.

Получение и оценка сконструированных клеток, экспрессирующих трансмембранный иммуномодулирующий белок и T-клеточный рецептор.Generation and evaluation of engineered cells expressing transmembrane immunomodulatory protein and T-cell receptor.

В этом примере описывается экспрессия трансмембранных иммуномодулирующих белков (TIP), содержащих различные вариантные домены IgSF из ICOSL, с примерным рекомбинантным E6специфическим T-клеточным рецептором (TCR) в T-клетках человека и оценка пролиферации T-клеток.This example describes the expression of transmembrane immunomodulatory proteins (TIPs) containing various variant IgSF domains from ICOSL with an exemplary recombinant E6-specific T cell receptor (TCR) in human T cells and assessment of T cell proliferation.

HLA-A2 + T-клетки человека активировали в день 0 с помощью активирующих гранул антиCD3/анти-CD28 (ThermoFisher Scientific, США) и трансдуцировали в день 1 с помощью TCR, специфичного к HPV E6 (описанного в WO 2015/009606), и различных трансмембранных иммуномодулирующих белков (TIP), содержащих вариантные домены IgSF из ICSL. Примерные ICOSL-TIP имели модифицированный по аффинности домен IgSF, содержащий аминокислотные мутации, соответствующие либо E16V/N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/Y152C/K156M/C198R, либо N52H/N57Y/Q100R относительно положений во внеклеточном домене ICOSL, представленном в SEQ ID NO: 32. ICOSL TIP также включали трансмембранный и цитоплазматический домен, соответствующий остаткам 257-302 из SEQ ID NO: 5. Для сравнения, T-клетки также совместно трансдуцировали с TCR HPV E6 и либо с WT CD80-TIP (представлен в виде аминокислот 35-288 SEQ ID NO: 1 и кодируется последовательностью нуклеотидов, указанной в SEQ ID NO: 251) или WT ICOSL-TIP (указан как аминокислоты 19-302 из SEQ ID NO: 5 и кодируется последовательностью нуклеотидов, указанной в SEQ ID NO: 252). Для трансдукции клетки трансдуцировали вирусной векторной конструкцией, в которую был вставлен полинуклеотид, кодирующий последовательности цепи TIP и TCRa и TCRe, при этом каждая отделена друг от друга последовательностью, кодирующей последовательность рибосомального проскока P2A (SEQ ID NO: 863), для совместной экспрессии TIP и TCR, содержащих цепи TCRa и TCRe в сконструированных клетках. В частности, нуклеотидная конструкция имела следующую структуру: ICOSL - P2A1 - TCRe - P2A2 - TCRa, в которой каждая из нуклеотидных последовательностей P2A1 и P2A2 кодирует P2A, представленный в SEQ ID NO: 863, но отличается по нуклеотидной последовательности, чтобы избежать рекомбинации между последовательностями.Human HLA-A2+ T cells were activated on day 0 with anti-CD3/anti-CD28 activating beads (ThermoFisher Scientific, USA) and transduced on day 1 with HPV E6-specific TCR (described in WO 2015/009606), and various transmembrane immunomodulatory proteins (TIPs) containing variant IgSF domains from ICSL. Exemplary ICOSL-TIPs had an affinity modified IgSF domain containing amino acid mutations corresponding to either E16V/N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/Y152C/K156M/C198R or N52H/N57Y/Q100R relative to positions in the ICOSL extracellular domain represented in SEQ ID NO: 32. ICOSL TIPs also included a transmembrane and cytoplasmic domain corresponding to residues 257-302 of SEQ ID NO: 5. For comparison, T cells were also co-transduced with the HPV E6 TCR and either WT CD80-TIP (presented in form of amino acids 35-288 SEQ ID NO: 1 and encoded by the nucleotide sequence specified in SEQ ID NO: 251) or WT ICOSL-TIP (identified as amino acids 19-302 from SEQ ID NO: 5 and encoded by the nucleotide sequence specified in SEQ ID NO: 252). For transduction, cells were transduced with a viral vector construct into which a polynucleotide encoding the sequences of the TIP and TCRa and TCRe chains, each separated from each other by a sequence encoding the ribosomal slip sequence P2A (SEQ ID NO: 863), was inserted to co-express TIP and TCR containing TCRa and TCRe chains in engineered cells. Specifically, the nucleotide construct had the following structure: ICOSL - P2A1 - TCRe - P2A2 - TCRa, in which the nucleotide sequences P2A1 and P2A2 each encode the P2A shown in SEQ ID NO: 863, but differ in nucleotide sequence to avoid recombination between the sequences .

В качестве контроля T-клетки подвергались ложной трансдукции или трансдукции только с помощью примерного E6 TCR.As a control, T cells were mock transduced or transduced only with the approximate E6 TCR.

Гранулы активации T-клеток удаляли на 3-й день и добавляли в культуру цитокины IL-2, IL-7 и IL15. На 6-й день после трансдукции, экспрессию TIP и TCR на клеточной поверхности оценивали с помощью проточной цитометрии, причем 35-65% сконструированных клеток были положительными как по TCR, так и по TIP. Экспрессирующие TCR клетки размножали в присутствии пептида E6 HPV, что приводило к популяции клеток, которые были > 90% дважды положительными по TCR/TIP, согласно оценке на 14 день. На 14 день сконструированные клетки инкубировали с клетками, инфицированными HPV, либо с клеточной линией плоскоклеточной карциномы UPCI: SCC152 (ATCC® CRL-3240™; HPV+, HLA-A2+), либо с клетками эпидермоидной карциномы CaSki (ATCC® No. CRL-1550™; Клетки НРН+, HLA-A2+) или плоскоклеточной карциномы SiHa (ATCC® HTB-35™; HPV+, HLA-A2-). Пролиферацию сконструированных клеток оценивали на 3 день после начала совместного культивирования с клетками- 183 044346 мишенями. Как показано на фиг. 21, повышенная пролиферация T-клеток, сконструированных с помощью E6 TCR, наблюдалась в двух клеточных линиях HPV+, но незначительно в линии HPV-SiHa. Сконструированные клетки, которые совместно экспрессировали вариантные ICOSL и TIP, имели повышенную пролиферацию в ответ на клеточные линии HLA-A2 + HPV + SCC152-мишени и Caski.T cell activation beads were removed on day 3 and the cytokines IL-2, IL-7, and IL15 were added to the culture. At day 6 post-transduction, cell surface expression of TIP and TCR was assessed by flow cytometry, with 35–65% of engineered cells being positive for both TCR and TIP. TCR-expressing cells were expanded in the presence of HPV E6 peptide, resulting in a population of cells that were >90% TCR/TIP double positive as assessed at day 14. On day 14, the engineered cells were incubated with HPV-infected cells with either the UPCI: SCC152 squamous cell carcinoma cell line (ATCC® CRL-3240™; HPV+, HLA-A2+) or CaSki epidermoid carcinoma cells (ATCC® No. CRL-1550 ™; HPH+, HLA-A2+ cells) or SiHa squamous cell carcinoma (ATCC® HTB-35™; HPV+, HLA-A2-). The proliferation of the engineered cells was assessed on day 3 after the start of co-cultivation with target cells. As shown in FIG. 21, increased proliferation of E6 TCR engineered T cells was observed in two HPV+ cell lines but not significantly in the HPV-SiHa line. Engineered cells that co-expressed variant ICOSL and TIP had increased proliferation in response to HLA-A2 + HPV + SCC152-targeted cell lines and Caski.

Пример 25.Example 25.

Получение и оценка Fc-гибридных иммуномодулирующих белков.Production and evaluation of Fc-fusion immunomodulatory proteins.

Молекулы, содержащие домен IgOSF варианта ICOSL (например, ECD), форматировали в виде Fcгибридных белков, по существу, как описано в примере 4, за исключением применения различных линкеров и молекул Fc. Для получения иммуномодулирующих белков, которые являются Fc-гибридными белками, содержащими ECD из ICOSL, по меньшей мере, с одним доменом с модифицированной аффинностью (например, вариантный ICOSL ECD-Fc), кодирующую нуклеотидную молекулу получали для кодирования белка, спроектированного следующим образом: вариантный (мутантный) ECD связанный прямо или опосредованно через линкер с инертным Fc IgG1 человека. В частности, полученные иммуномодулирующие белки либо не содержали линкер (ни один), либо содержали линкер AAA или G4S (SEQ ID NO: 636). Инертный Fc IgG1 человека содержал следующие мутации по нумерации EU: C220S/R292C/N297G/V302C (SEQ ID NO: 476), C220S/E233P/L234V/L235A/G236del/S267K (SEQ ID NO: 478), C220S/L234A/L235E/G237A (SEQ ID NO: 477) или их аллотипы. Замена C220S была включена, потому что полученные белки не включают легкую цепь антитела, которая может образовывать ковалентную связь с помощью цистеина. Рекомбинантные вариантные Fc-гибридные белки продуцировали в клетках 293 и очищали с помощью протеина A, по существу, как описано в примере 5.Molecules containing the IgOSF domain of the ICOSL variant (eg, ECD) were formatted as Fc fusion proteins essentially as described in Example 4, except for the use of different linkers and Fc molecules. To produce immunomodulatory proteins that are Fc fusion proteins containing the ECD from ICOSL with at least one affinity modified domain (eg, variant ICOSL ECD-Fc), an encoding nucleotide molecule was prepared to encode a protein designed as follows: variant (mutant) ECD linked directly or indirectly through a linker to an inert human IgG1 Fc. Specifically, the resulting immunomodulatory proteins either contained no linker (none) or contained an AAA or G4S linker (SEQ ID NO: 636). Inert Fc human IgG1 contained the following mutations according to EU numbering: C220S/R292C/N297G/V302C (SEQ ID NO: 476), C220S/E233P/L234V/L235A/G236del/S267K (SEQ ID NO: 478), C220S/L234A/L235E /G237A (SEQ ID NO: 477) or allotypes thereof. The C220S substitution was included because the resulting proteins do not include the antibody light chain, which can form a covalent bond with a cysteine. Recombinant variant Fc fusion proteins were produced in 293 cells and purified using protein A essentially as described in Example 5.

Вариантные иммуномодулирующие белки ICOSL Fc оценивали в исследованиях по связыванию для оценки связывания с когнатными партнерами по связыванию. В исследованиях связывания, описанных в примере 6, использовали клетки Expi293, трансфецированные когнатными партнерами связывания CD28, ICOS и CTLA4 человека. Определяли MFI связывания вариантных гибридных иммуномодулирующих белков ICOSL Fc с клеткой-мишенью, экспрессирующей каждого партнера по связыванию, и сравнивали со связыванием соответствующего немодифицированного (дикого типа) ECD-Fc ICOSL с теми же клетками-мишенями. Модуляцию активности T-клеток вариантными гибридными иммуномодулирующими белками ICOSL Fc также определяли с использованием реакции смешанных лимфоцитов (MLR), по существу, как описано в примере 6.Variant immunomodulatory ICOSL Fc proteins were evaluated in binding studies to assess binding to cognate binding partners. The binding studies described in Example 6 used Expi293 cells transfected with cognate binding partners of human CD28, ICOS and CTLA4. The MFI of binding of variant ICOSL Fc fusion immunomodulatory proteins to a target cell expressing each binding partner was determined and compared with the binding of the corresponding unmodified (wild type) ICOSL ECD-Fc to the same target cells. Modulation of T cell activity by variant ICOSL Fc fusion proteins was also determined using the mixed lymphocyte reaction (MLR), essentially as described in Example 6.

Результаты связывания примерных вариантных гибридных иммуномодулирующих белков ICOSL ECD-Fc, содержащих различные линкеры и Fc-области, показаны в табл. 29. В таблице указаны аминокислотные замены в ECD варианта ICOSL, обозначенные номером аминокислотного положения, соответствующим положениям аминокислот в соответствующей последовательности референсного (например, немодифицированного) внеклеточного домена ICOSL (ECD), представленной в SEQ ID NO: 32. В столбце 1 также указан идентификатор SEQ ID NO для каждого вариантного домена ECD, содержащегося в вариантном гибриде ICOSL Fc. В столбце 2 указан линкер, используемый в Fc-гибридном белке и идентификатор SEQ ID NO для линкера. В столбце 3 приведены мутации в Fc с помощью нумерации EU и идентификатора SEQ ID NO для Fc, содержащегося в вариантном гибридном белке ICOSL Fc.The binding results of exemplary variant ICOSL ECD-Fc immunomodulatory hybrid proteins containing various linkers and Fc regions are shown in table. 29. The table shows amino acid substitutions in the ICOSL variant ECD, indicated by the amino acid position number corresponding to the amino acid positions in the corresponding reference (e.g., unmodified) ICOSL extracellular domain (ECD) sequence shown in SEQ ID NO: 32. Column 1 also indicates the identifier SEQ ID NO for each variant ECD domain contained in the variant ICOSL Fc hybrid. Column 2 indicates the linker used in the Fc fusion protein and the SEQ ID NO for the linker. Column 3 lists the mutations in Fc by EU numbering and SEQ ID NO for the Fc contained in the ICOSL Fc variant fusion protein.

Как показано в табл. 29, аналогичные результаты наблюдались для связывания с когнатными связывающими партнерами среди протестированных вариантных гибридных белков ICOSL Fc. Эти результаты показывают, что формат Fc-гибрида с разными молекулами Fc или разными линкерами не влиял на связывание вариантов домена IgSF из ICSL для их родственного связывающего партнера. Кроме того, все форматы Fc-гибридов, когда они представлены в виде двухвалентных молекул Fc в растворе в реакции MLR, проявляют антагонистическую активность по уменьшению активации T-клеток по сравнению с референсной (например, немодифицированной или дикого типа) молекулой ECD-Fc, не содержащей аминокислотную замену. В некоторых случаях в надосадочной жидкости не определяли детектируемый IFN-гамма, что согласуется с полной блокировкой взаимодействий костимулирующих партнеров, связывающих когнатный лиганд, с их лигандами для индукции секреции IFN-гамма.As shown in table. 29, similar results were observed for binding to cognate binding partners among the variant ICOSL Fc fusion proteins tested. These results indicate that the Fc fusion format with different Fc molecules or different linkers did not affect the binding of IgSF domain variants from ICSL to their cognate binding partner. In addition, all Fc hybrid formats, when presented as divalent Fc molecules in solution in an MLR reaction, exhibit antagonistic activity in reducing T cell activation compared to the reference (eg, unmodified or wild type) ECD-Fc molecule, not containing an amino acid substitution. In some cases, no detectable IFN-gamma was detected in the supernatant, consistent with complete blocking of interactions of cognate ligand-binding costimulatory partners with their ligands to induce IFN-gamma secretion.

- 184 044346- 184 044346

Таблица 29Table 29

Последовательности молекул, данные связывания и данные костимулирующей биоактивности вариантных молекул ICOSL ECD-FcMolecular sequences, binding data and co-stimulatory bioactivity data of ICOSL ECD-Fc variant molecules

Мутация(ии) ICOSL (SEQ ID NO) ICOSL Mutation(s) (SEQ ID NO) Линкер (SEQ ID NO) Linker (SEQ ID NO) Мутации Fc (SEQ ID NO) Fc Mutations (SEQ ID NO) Связывание Binding MLR IFNгамма пг/мл (AWT) MLR IFNgamma pg/ml (AWT) CD28 MFI (AWT) CD28 MFI (AWT) CTLA-4 MFI (AWT) CTLA-4 MFI (AWT) ICOS MFI (AWT) ICOS MFI (AWT) N52H/N57Y/Q100R/ F172S (291) N52H/N57Y/Q100R/ F172S (291) AAA AAA C220S/R292C/N297G/V302C (476) C220S/R292C/N297G/V302C (476) 67870 (13,0) 67870 (13.0) 213333 (22,7) 213333 (22.7) 120042 (1,5) 120042 (1.5) 3 (0,02) 3 (0.02) N52H/N57Y/Q100R/ F172S (291) N52H/N57Y/Q100R/ F172S (291) AAA AAA C220S/E233P/L234V/L235A/ G236del/S267K (478) C220S/E233P/L234V/L235A/ G236del/S267K (478) 57272 (10,9) 57272 (10.9) 192595 (20,5) 192595 (20.5) 103983 (1,3) 103983 (1.3) 0 (0,00) 0 (0.00) N52H/N57Y/Q100R/ F172S (291) N52H/N57Y/Q100R/ F172S (291) N52H/N57Y/Q100R/ F172S (291) N52H/N57Y/Q100R/ F172S (291) AAA G4S (636) AAA G4S (636) C220S/L234A/L235E/G237A (477) C220S/E233P/L234V/L235A/ G236del/S267K (478) C220S/L234A/L235E/G237A (477) C220S/E233P/L234V/L235A/ G236del/S267K (478) 65506 (12,5) 65506 (12.5) 193704 (20,6) 193704 (20.6) 105432 (1,3) 105432 (1.3) 0 (0,00) 0 (0.00) N52H/N57Y/Q100R/ N52H/N57Y/Q100R/ G4S G4S C220S/L234A/L235E/G237A C220S/L234A/L235E/G237A 67596 67596 212875 212875 106576 106576 0 (0,00) 0 (0.00) F172S (291) F172S (291) (636) (636) (477) (477) (12,9) (12.9) (22,7) (22.7) (1,4) (1.4) N52H/N57Y/Q100R/ F172S (291) N52H/N57Y/Q100R/ F172S (291) Нет No C220S/E233P/L234V/L235A/ G236del/S267K (478) C220S/E233P/L234V/L235A/ G236del/S267K (478) - - - - - - - - N52H/N57Y/Q100R/ F172S (291) N52H/N57Y/Q100R/ F172S (291) Нет No C220S/L234A/L235E/G237A (477) C220S/L234A/L235E/G237A (477) 59987 (11,5) 59987 (11.5) 210061 (22,4) 210061 (22.4) 106405 (1,4) 106405 (1.4) 0 (0,00) 0 (0.00) N52H/Q100R (285) N52H/Q100R (285) N52H/Q100R (285) N52H/Q100R (285) AAA AAA AAA AAA C220S/R292C/N297G/V302C (476) C220S/E233P/L234V/L235A/ G236del/S267K (478) C220S/R292C/N297G/V302C (476) C220S/E233P/L234V/L235A/ G236del/S267K (478) 57419 (11,0) 57419 (11.0) 190012 (20,2) 190012 (20.2) 86522 (1,1) 86522 (1.1) 30 (0,26) 30 (0.26) N52H/Q100R (285) N52H/Q100R (285) AAA AAA C220S/L234A/L235E/G237A (477) C220S/L234A/L235E/G237A (477) 58772 (11,2) 58772 (11.2) 211494 (22,5) 211494 (22.5) 88969 (1,1) 88969 (1.1) 25 (0,22) 25 (0.22) N52H/Q100R (285) N52H/Q100R (285) G4S G4S C220S/E233P/L234V/L235A/ C220S/E233P/L234V/L235A/ 62331 62331 207285 207285 110512 110512 31 31 (636) (636) G236del/S267K (478) G236del/S267K (478) (11,9) (11.9) (22,1) (22.1) (1,4) (1.4) (0,28) (0.28) N52H/Q100R (285) N52H/Q100R (285) G4S G4S C220S/L234A/L235E/G237A C220S/L234A/L235E/G237A 70142 70142 187699 187699 125505 125505 49 49 (636) (636) (477) (477) (13,4) (13.4) (20,0) (20.0) (1,6) (1.6) (0,44) (0.44) N52H/Q100R (285) N52H/Q100R (285) Нет No C220S/E233P/L234V/L235A/ G236del/S267K (478) C220S/E233P/L234V/L235A/ G236del/S267K (478) 58726 (11,2) 58726 (11.2) 206110 (21,9) 206110 (21.9) 110721 (1,4) 110721 (1.4) 54 (0,48) 54 (0.48) N52H/Q100R (285) N52H/Q100R (285) Нет No C220S/L234A/L235E/G237A (477) C220S/L234A/L235E/G237A (477) 62746 (12,0) 62746 (12.0) 198281 (21,1) 198281 (21.1) 96948 (1,2) 96948 (1,2) 16 (0,14) 16 (0.14) N52H/N57Y/Q100P (ИЗ) N52H/N57Y/Q100P (IZ) AAA AAA C220S/R292C/N297G/V302C (476) C220S/R292C/N297G/V302C (476) 79792 (15,3) 79792 (15.3) 193633 (20,6) 193633 (20.6) 91384 (1,2) 91384 (1,2) 1 (0,01) 1 (0.01) N52H/N57Y/Q100P (ИЗ) N52H/N57Y/Q100P (IZ) AAA AAA C220S/E233P/L234V/L235A/ G236del/S267K (478) C220S/E233P/L234V/L235A/ G236del/S267K (478) 69603 (13,3) 69603 (13.3) 314593 (33,5) 314593 (33.5) 103387 (1,3) 103387 (1.3) 0 (0,00) 0 (0.00) N52H/N57Y/Q100P (ИЗ) N52H/N57Y/Q100P (IZ) AAA AAA C220S/L234A/L235E/G237A (477) C220S/L234A/L235E/G237A (477) 68729 (13,1) 68729 (13.1) 171223 (18,2) 171223 (18.2) 97068 (1,2) 97068 (1,2) 0 (0,00) 0 (0.00) N52H/N57Y/Q100P N52H/N57Y/Q100P G4S G4S C220S/E233P/L234V/L235A/ C220S/E233P/L234V/L235A/ 67753 67753 188192 188192 93424 93424 1 (0,01) 1 (0.01) (ИЗ) (FROM) (636) (636) G236del/S267K (478) G236del/S267K (478) (13,0) (13.0) (20,0) (20.0) (1,2) (1,2) N52H/N57Y/Q100P N52H/N57Y/Q100P G4S G4S C220S/L234A/L235E/G237A C220S/L234A/L235E/G237A 69887 69887 160705 160705 104124 104124 0 (0,00) 0 (0.00) (ИЗ) (FROM) (636) (636) (477) (477) (13,4) (13.4) (17,1) (17.1) (1,3) (1.3) N52H/N57Y/Q100P (ИЗ) N52H/N57Y/Q100P (IZ) Нет No C220S/E233P/L234V/L235A/ G236del/S267K (478) C220S/E233P/L234V/L235A/ G236del/S267K (478) 68979 (13,2) 68979 (13.2) 184726 (19,7) 184726 (19.7) 98512 (1,3) 98512 (1.3) 0 (0,00) 0 (0.00) N52H/N57Y/Q100P (ИЗ) N52H/N57Y/Q100P (IZ) Нет No C220S/L234A/L235E/G237A (477) C220S/L234A/L235E/G237A (477) 67863 (13,0) 67863 (13.0) 154563 (16,5) 154563 (16.5) 97714 (1,2) 97714 (1,2) 0 (0,00) 0 (0.00) WT (32) WT (32) AAA AAA C220S/R292C/N297G/V302C (476) C220S/R292C/N297G/V302C (476) 5232 (1,0) 5232 (1.0) 9394 (1,0) 9394 (1.0) 78795 (1,0) 78795 (1.0) 113 (1,00) 113 (1.00)

Пример 26.Example 26.

Экспрессия вариантных молекул ICOSL в клетках CHO.Expression of variant ICOSL molecules in CHO cells.

В качестве альтернативы экспрессии вариантных гибридных белков ICOSL Fc в клетках Expi293, как описано в примере 5, для получения различных молекул ICOSL использовали клетки яичника китайского хомячка в суспензии (ExpiCHO-S). ДНК-конструкцию, кодирующую примерные вариантные ICOSL IgSF (например, ECD) Fc-гибридные белки, содержащие вариант (мутант) ECD N52H/N57Y/Q100R/F172S (SEQ ID NO: 291), связанный с инертным Fc, содержащим мутации C220S/L234A/L235E/G237A по нумерации EU, указанным в SEQ ID NO: 477, или его аллотипом, указанным в SEQ ID NO: 637, с линкером GSGGGGS (SEQ ID NO: 635) использовали для трансфекции клеток.As an alternative to expressing variant ICOSL Fc fusion proteins in Expi293 cells as described in Example 5, Chinese hamster ovary cells in suspension (ExpiCHO-S) were used to produce various ICOSL molecules. A DNA construct encoding exemplary variant ICOSL IgSF (e.g., ECD) Fc fusion proteins containing the ECD variant N52H/N57Y/Q100R/F172S (SEQ ID NO: 291) linked to an inert Fc containing the C220S/L234A mutations /L235E/G237A by EU numbering specified in SEQ ID NO: 477, or its allotype specified in SEQ ID NO: 637, with the linker GSGGGGS (SEQ ID NO: 635) was used to transfect cells.

Клетки ExpiCHO-S и реагенты для трансфекции с использованием системы экспрессии ExpiCHO™ были приобретены у ThermoFisher Scientific (номер по каталогу A29133). Клетки оттаивали и размножали в соответствии с протоколом, рекомендованным изготовителем. После, по меньшей мере, 2 пассажей клетки разделяли за 24 часа до трансфекции и давали возможность размножаться до высокой плотности. Затем клетки разводили до количества клеток для трансфекции, формировали комплекс ДНК с реагентом ExpiFectamine ™ CHO и добавляли к клеткам. Через день после добавления комплекса ДНК к культуре добавляли корм ExpiCHO ™ и Enhancer ExpiFectamine ™ CHO, который затем помещали в инкубатор при 32°C. Жизнеспособность клеток и клеточную массу контролировали, и собирали культуру, когда жизнеспособность падала ниже 80%. Затем культуру центрифугировали при низкой скорости, чтобыExpiCHO-S cells and transfection reagents using the ExpiCHO™ expression system were purchased from ThermoFisher Scientific (cat. no. A29133). Cells were thawed and expanded according to the protocol recommended by the manufacturer. After at least 2 passages, cells were separated 24 hours before transfection and allowed to expand to high density. The cells were then diluted to the number of cells to be transfected, the DNA complexed with ExpiFectamine™ CHO reagent and added to the cells. One day after adding the DNA complex, ExpiCHO™ and Enhancer ExpiFectamine™ CHO were added to the culture, which was then placed in a 32°C incubator. Cell viability and cell mass were monitored, and the culture was harvested when viability dropped below 80%. The culture was then centrifuged at low speed to

- 185 044346 удалить осадок клеток, и очищенную надосадочную жидкость подвергали стерильной фильтрации на 0,2 мкм. Белок очищали, как описано в примере 5.- 185 044346 remove the cell pellet and the cleared supernatant was subjected to 0.2 µm sterile filtration. The protein was purified as described in example 5.

A. Белковый анализ.A. Protein analysis.

Очищенный вариант гибридного белка ICOSL Fc прогоняли на SDS-PAGE и анализировали путем окрашивания белка. Множественные полосы наблюдали в клетках, получаемых из клеток CHO, но не из клеток 293, что согласуется с наблюдением, что при экспрессии в клетках CHO происходило протеолизное отсечение ICOSL. В табл. 30A показаны молекулярные массы неповрежденных, одноцепочечных и дважды укороченных белков, рассчитанные на основе аминокислотных последовательностей и потенциальных углеводов, наблюдемых с помощью SDS-PAGE. Наблюдали протеолиз Fc-слитых белков ICOSL, экспрессируемых в клетках, происходящих из ExpiCHO-S, на что указывает присутствие как восттановленных, так и невостановленных видов с более низкой молекулярной массой (одинарное и двойное укорочение). На основании размера наблюдаемых полос и масс-спектрометрического анализа эти результаты согласуются с потенциальным сайтом расщепления в ECD ICOSL, соответствующим последовательности LQQN/LT (/ обозначает потенциальный сайт расщепления), что приводит к расщеплению перед областью ствола ECD и удалению Fc-части последовательности в одной или обеих цепях белка Fcгибрида. Наблюдаемое расщепление протеазой может привести к гетерогенному белковому продукту при продуцировании в клетках CHO. Кроме того, для форматов, экспрессируемых в виде трансмембранных иммуномодулирующих белков, расщепление протеазой, происходящее в определенных клетках, может привести к высвобождению растворимого белка из клеток, тем самым уменьшая экспрессируемые на клеточной поверхности формы вариантного белка на сконструированных клетках.The purified ICOSL Fc fusion protein variant was run on SDS-PAGE and analyzed by protein staining. Multiple bands were observed in cells derived from CHO cells but not from 293 cells, consistent with the observation that proteolytic cut-off of ICOSL occurred when expressed in CHO cells. In table 30A shows the molecular weights of intact, single-stranded, and doubly truncated proteins calculated from amino acid sequences and potential carbohydrates observed by SDS-PAGE. Proteolysis of ICOSL Fc fusion proteins expressed in ExpiCHO-S-derived cells was observed, as indicated by the presence of both reduced and unreduced lower molecular weight species (single and double truncation). Based on the size of the observed bands and mass spectrometric analysis, these results are consistent with a potential cleavage site in the ICOSL ECD corresponding to the sequence LQQN/LT (/ denotes a potential cleavage site), resulting in cleavage upstream of the ECD stem region and removal of the Fc portion of the sequence in one or both chains of the Fc hybrid protein. The observed protease cleavage may result in a heterogeneous protein product when produced in CHO cells. Additionally, for formats expressed as transmembrane immunomodulatory proteins, protease cleavage occurring in certain cells may result in the release of soluble protein from the cells, thereby reducing the cell surface expressed forms of the variant protein on the engineered cells.

Таблица 30ATable 30A

Восстановленные/невостановленные виды, обнаруженные после захвата и элюирования колоночной хроматографии с протеином A с использованием SDS-PAGE для анализа протеолизаReduced/unreduced species detected after capture and elution by Protein A column chromatography using SDS-PAGE for proteolysis analysis

Рассчитанная MW Calculated MW Наблюдаемая (кажущаяся) MW 1 Observed (apparent) MW 1 Нево сстановленный Nevo installed Восстановленный Refurbished Невосстановленный Unrestored Восстановленный Refurbished Интактный Intact 105,6 кДа ак ~29 кДа углев, 135 кДа всего 105.6 kDa ak ~29 kDa carbon, 135 kDa total 52,8 кДа ак -14,5 кДа углев, 67,3 кДа всего 52.8 kDa ak -14.5 kDa coal, 67.3 kDa total 150 кДа 150 kDa 80 кДа 80 kDa Одиночное укорочение Single shortening 78,8 кДа ак -16,5 кДа углев, 95,3 кДа всего 78.8 kDa ak -16.5 kDa carbon, 95.3 kDa total 52,8 кДа ак -14,5 кДа углев, 67,3 кДа всего 26 кДа ак -2 кДа углев, 28 кДа всего 52.8 kDa ak -14.5 kDa coal, 67.3 kDa total 26 kDa ac -2 kDa carbon, 28 kDa total 100 кДа 100 kDa 80 кДа 37 кДа 80 kDa 37 kDa Double Clip Double Clip 52,1 кДа ак -4 кДа углев, 56,1 кДа всего 52.1 kDa ak -4 kDa carbon, 56.1 kDa total 26 кДа ак -2 кДа углев, 28 кДа всего 26 kDa ac -2 kDa carbon, 28 kDa total 65 КДа 65 KDa 37 кДа 37 kDa 1 Расчетная MW по SDS-PAGE относительно белковых маркеров MW 1 Calculated MW by SDS-PAGE relative to protein MW markers

Пример 27.Example 27.

Получение устойчивых к протеолизу вариантов молекул, содержащих домен ICOSL IgSF.Preparation of proteolysis-resistant variants of molecules containing the ICOSL domain of IgSF.

Для придания вариантным полипептидам ICOSL устойчивости к протеолизу при экспрессии в клетках, таких как клетки CHO, были получены различные дополнительные формы вариантных полипептидов ICOSL. Были получены следующие дополнительные модифицированные референсные последовательности ECD ICOSL: (1) различные укорочения ECD, в которых отсутствует весь сайт расщепления LQQN/LT или его часть (обозначены как Trunc #4, #5, #6, #7 или #8); (2) референсные последовательности вариантного ICOSL, содержащие мутации в сайте расщепления N207 и/или L208 относительно положений, указанных в SEQ ID NO: 32; или референсная последовательность только IgV из ICOSL, содержащая домен IgV в качестве единственного домена IgSF молекулы (приведена в SEQ ID NO: 545, соответствует аминокислотам 1-122 из SEQ ID NO: 32). В некоторых случаях комбинации вышеуказанных стратегий использовались в референсной последовательности ECD ICOSL. В табл. 30B ниже представлены различные сгенерированные референсные последовательности.To render variant ICOSL polypeptides resistant to proteolysis when expressed in cells such as CHO cells, various additional forms of variant ICOSL polypeptides have been produced. The following additional modified ICOSL ECD reference sequences were obtained: (1) various ECD truncations lacking all or part of the LQQN/LT cleavage site (designated Trunc #4, #5, #6, #7, or #8); (2) variant ICOSL reference sequences containing mutations in the N207 and/or L208 cleavage site relative to the positions indicated in SEQ ID NO: 32; or an IgV-only reference sequence from ICOSL containing the IgV domain as the sole domain of the IgSF molecule (provided in SEQ ID NO: 545, corresponding to amino acids 1-122 of SEQ ID NO: 32). In some cases, combinations of the above strategies have been used in the ICOSL ECD reference sequence. In table 30B below shows the various reference sequences generated.

Примерные мутации N52H/N57Y/Q100R/F172S относительно нумерации, приведенной в SEQ ID NO: 32, были введены в различные референсные последовательности. Поскольку референсный ICOSL IgV, представленный в SEQ ID NO: 545, не содержит положения, соответствующего F172S, вариантный ICOSL IgV не содержал мутацию F172S. Сгенерированные вариантные полипептиды ICOSL были отформатированы в виде Fc-гибридного белка, содержащего сгенерированный референсный домен ICSL IgSF, связанный через линкер (G4S) 2 (SEQ ID NO: 229) с инертным Fc, содержащим мутации C220S/L234A/L235E/G237A/K447del, согласно нумерации EU, указанным в SEQ ID NO: 633, или его алExemplary mutations N52H/N57Y/Q100R/F172S relative to the numbering given in SEQ ID NO: 32 were introduced into various reference sequences. Since the reference ICOSL IgV presented in SEQ ID NO: 545 does not contain a position corresponding to F172S, the variant ICOSL IgV did not contain the F172S mutation. The generated variant ICOSL polypeptides were formatted as an Fc fusion protein containing the generated ICSL IgSF reference domain linked via a linker (G4S) 2 (SEQ ID NO: 229) to an inert Fc containing the mutations C220S/L234A/L235E/G237A/K447del, according to the EU numbering specified in SEQ ID NO: 633, or its al

- 186 044346 лотипом, указанным в SEQ ID NO: 637.- 186 044346 lottype specified in SEQ ID NO: 637.

Таблица 30BTable 30B

Примерные референсные последовательности IgSF-содержащих доменов ICOSLApproximate reference sequences of IgSF-containing ICOSL domains

Референсная последовательность ICOSL Reference sequence ICOSL ...---------ECD---------------1--------Ствол------------------------------ ...---------ECD--------1--------Barrel----------- ------------------ Полный ECD (32) Full ECD (32) ...VmGCCIE^VCCQQ^CTVGSQTGNDIGERDKITENPVSTGEK NAAT ...VmGCCIE^VCCQQ^CTVGSQTGNDIGERDKITENPVSTGEK NAAT Укороченный вариант #2 (600) Short version #2 (600) ...VNIGCCIENVLLQQNL ...VNIGCCIENVLLQQNL Укороченный вариант #2 (601) Short version #2 (601) ...VNIGCCIENVLLQQNLTFGS2 ...VNIGCCIENVLLQQNLTFGS2 Укороченный вариант #4 (602) Short version #4 (602) ...VNIGCCIENVLLQQN ...VNIGCCIENVLLQQN Укороченный вариант #5 (603) Short version #5 (603) ...VNIGCCIENVLLQQ ...VNIGCCIENVLLQQ Укороченный вариант #6 (604) Short version #6 (604) ...VNIGCCIENVLL ...VNIGCCIENVLL Укороченный вариант #7 (605) Short version #7 (605) ...VNIGCCIEN ...VNIGCCIEN Укороченный вариант #8 с N207G/L208G (623) Short version #8 with N207G/L208G (623) ...VNIGCCIENVLLQQGGT ...VNIGCCIENVLLQQGGT ECD с N207A (624) ECD with N207A (624) ...ymGCCl^yCCQQACTyGSQTGNDIGERDKITENPVSTGEK NAAT ...ymGCCl^yCCQQACTyGSQTGNDIGERDKITENPVSTGEK NAAT ECD с N207G/L208G (628) ECD with N207G/L208G (628) ...yNlGCCTENyGLQQGGTVGSQTGNDIGERDKITENPVSTGEK NAAT ...yNlGCCTENyGLQQGGTVGSQTGNDIGERDKITENPVSTGEK NAAT IgV (545) IgV (545) ...HVAANFSV ...HVAANFSV

A. Оценка протеолиза.A. Assessment of proteolysis.

ДНК-конструкции, кодирующие описанные выше варианты ICOSL Fc-гибридных молекул, трансфицировали в клетки яичника китайского хомячка (ExpiCHO-S). Затем ICOSL Fc-гибридные белки очищали из надосадочных жидкостей с помощью протеина A с помощью аффинной хроматографии, как описано в примере 5. Очищенный белок анализировали аналитическим SEC.DNA constructs encoding the above-described variants of ICOSL Fc-fusion molecules were transfected into Chinese hamster ovary cells (ExpiCHO-S). ICOSL Fc fusion proteins were then purified from protein A supernatants using affinity chromatography as described in Example 5. The purified protein was analyzed by analytical SEC.

По данным SEC, интактный белок отображается в виде одного пика, в то время как укороченный белок отображается в виде нескольких пиков, включая виды с более низкой молекулярной массой. В соответствии с результатами SDS-PAGE, описанными в примере 26, протеолиз, оцененный с помощью SEC, наблюдался, когда вариантный белок ICOSL ECD Fc-гибридный белок экспрессировался в клетках, происходящих из ExpiCHO-S, что показано множественными пиками, показанными на фиг. 22A. Как показано на фиг. 22B-22G, одиночные пики наблюдали с помощью SEC-анализа вариантных гибридных белков ICOSL Fc, полученных с использованием модифицированных референсных полипептидов ICOSL, в которых предполагаемый сайт расщепления ECD-протеазой был удален или мутирован, что указывает на снижение расщепления белков. Однако в одной партии очистки виды с более низкой молекулярной массой наблюдали с помощью SEC-анализа варианта гибридного белка белка ICOSL Fc, полученного с использованием референсного полипептида ICOSL, представленного в SEQ ID NO: 604 (Trunc. № 5), хотя причины присутствия этих видов в этой партии и не были ясны. Как показано на фиг. 22G, получение видов с более низкой молекулярной массой и, следовательно, протеолиз, также не наблюдались с помощью SEC-анализа вариантных гибридных белков ICOSL Fc, полученных с использованием только референсной последовательности ICOSL IgV.According to SEC, the intact protein appears as a single peak, while the truncated protein appears as multiple peaks, including lower molecular weight species. Consistent with the SDS-PAGE results described in Example 26, proteolysis assessed by SEC was observed when the variant ICOSL ECD Fc fusion protein was expressed in ExpiCHO-S-derived cells, as shown by the multiple peaks shown in FIG. 22A. As shown in FIG. 22B-22G, single peaks were observed by SEC analysis of variant ICOSL Fc fusion proteins generated using modified ICOSL reference polypeptides in which the putative ECD protease cleavage site was deleted or mutated, indicating reduced protein cleavage. However, in one purification batch, lower molecular weight species were observed using SEC analysis of a variant ICOSL Fc protein fusion protein produced using the ICOSL reference polypeptide provided in SEQ ID NO: 604 (Trunc. No. 5), although the reasons for the presence of these species in this game were not clear. As shown in FIG. 22G, production of lower molecular weight species, and hence proteolysis, were also not observed by SEC analysis of variant ICOSL Fc fusion proteins generated using only the ICOSL IgV reference sequence.

B. Связывание и активность.B. Binding and activity.

Сравнивали связывание и активность белка, полученного и очищенного после трансфекции конструкциями ДНК, кодирующими вариантные гибридные иммуномодулирующие белки ICOSL Fc в различных референсных последовательностях, описанных выше в клетках CHO. В некоторых случаях очищенные клоны, которые были оценены ниже, позже обнаружили, что они содержат дополнительные мутации, помимо описанных выше, которые, как полагают, не влияют на иммуномодулирующую активность тестируемых белков.The binding and activity of the protein produced and purified after transfection with DNA constructs encoding variant ICOSL Fc immunomodulatory fusion proteins at the various reference sequences described above in CHO cells were compared. In some cases, purified clones that were evaluated below were later found to contain additional mutations beyond those described above, which are not believed to affect the immunomodulatory activity of the proteins tested.

Полученные очищенные вариантные гибридные иммуномодулирующие белки ICOSL Fc оценивали на связывание с когнатными партнерами по связыванию и на модуляцию активности T-клеток с использованием реакции смешанных лимфоцитов (MLR), по существу, как описано выше. В табл. 30C указаны аминокислотные замены в референсной последовательности ICOSL, обозначенные номером аминокислотного положения, соответствующим аминокислотным положениям в соответствующей референсной (например, немодифицированной) последовательности внеклеточного домена (ECD) ICOSL, указанного в SEQ ID NO: 32, и представлены идентификаторы SEQ ID NO для каждой референсной последовательности ICOSL. Как показано, активность связывания и антагониста MLR была в целом одинаковой для всех тестируемых форматов.The resulting purified variant ICOSL Fc fusion immunomodulatory proteins were assessed for binding to cognate binding partners and for modulation of T cell activity using the mixed lymphocyte response (MLR), essentially as described above. In table 30C shows amino acid substitutions in the ICOSL reference sequence, indicated by the amino acid position number corresponding to the amino acid positions in the corresponding reference (e.g., unmodified) ICOSL extracellular domain (ECD) sequence specified in SEQ ID NO: 32, and provides SEQ ID NOs for each reference ICOSL sequences. As shown, MLR binding and antagonist activity was generally similar for all formats tested.

- 187 044346- 187 044346

Таблица 30CTable 30C

Последовательности молекул, данные связывания и данные костимулирующей биоактивности вариантных молекул ICOSLMolecular sequences, binding data and co-stimulatory bioactivity data of variant ICOSL molecules

Описание Description Референсная последовательность SEQ ID NO Reference sequence SEQ ID NO Связывание Binding MLR MLR CD28 CD28 CTLA4 CTLA4 ICOS ICOS IFNгамма IFNgamma MFI (AWT) MFI (AWT) MFI (AWT) MFI (AWT) MFI (AWT) MFI (AWT) пг/мл (AWT) pg/ml (AWT) ICOSL ECD Укороченный вариант # 7 с N52H/N57Y/Q100R/F172S и F83S ICOSL ECD Short version #7 with N52H/N57Y/Q100R/F172S and F83S 605 605 88329 (51,1) 88329 (51.1) 206566 (27,3) 206566 (27.3) 106493 (1,1) 106493 (1.1) 12 (0,02) 12 (0.02) ICOSL ECD Укороченный вариант #6 с N52H/N57Y/Q100R/F172S ICOSL ECD Short version #6 with N52H/N57Y/Q100R/F172S 604 604 91273 (52,8) 91273 (52.8) 239746 (31,6) 239746 (31.6) 90074 (0,9) 90074 (0.9) 14 (0,02) 14 (0.02) ICOSL ECD Укороченный вариант # 4 с N52H/N57Y/Q100R/F172S и E200G ICOSL ECD Short version #4 with N52H/N57Y/Q100R/F172S and E200G 602 602 80555 (46,6) 80555 (46.6) 320229 (42,3) 320229 (42.3) 107957 (1,1) 107957 (1.1) 9 (0,01) 9 (0.01) ICOSL ECD Укороченный вариант #4 с N52H/N57Y/Q100R/F172S ICOSL ECD Short version #4 with N52H/N57Y/Q100R/F172S 602 602 68599 (39,7) 68599 (39.7) 377254 (49,8) 377254 (49.8) 132880 (1,3) 132880 (1.3) 2 (0,00) 2 (0.00) ICOSL ECD Укороченный вариант #8 с N207G/L208G и N52H/N57Y/Q100R/F172S ICOSL ECD Short version #8 with N207G/L208G and N52H/N57Y/Q100R/F172S 606 606 107837 (62,4) 107837 (62.4) 308427 (40,7) 308427 (40.7) 132654 (1,3) 132654 (1.3) 8 (0,01) 8 (0.01) ICOSL IgV с N52H/N57Y/Q100R и H48R/S54P ICOSL IgV with N52H/N57Y/Q100R and H48R/S54P 545 545 75304 (43,6) 75304 (43.6) 321613 (42,4) 321613 (42.4) 143141 (1,4) 143141 (1.4) 995 (1,31) 995 (1.31) ICOSL ECD с N52H/N57Y/Q100R/F172S ICOSL ECD with N52H/N57Y/Q100R/F172S 32 32 110407 (63,9) 110407 (63.9) 323219 (42,6) 323219 (42.6) 136060 (1,4) 136060 (1.4) 0 (0,00) 0 (0.00) ICOSL ECD Укороченный вариант #7 с N52H/N57Y/Q100R/C198R и E90K/E111G ICOSL ECD Short version #7 with N52H/N57Y/Q100R/C198R and E90K/E111G 605 605 38876 (22,5) 38876 (22.5) 83695 (11,0) 83695 (11.0) 54596 (0,5) 54596 (0.5) 761 (1,00) 761 (1.00) ICOSL ECD Укороченный вариант #6 с N52H/N57 Y/Q100R/C198R ICOSL ECD Short version #6 with N52H/N57 Y/Q100R/C198R 604 604 84566 (49,0) 84566 (49.0) 236011 (31,1) 236011 (31.1) 91357 (0,9) 91357 (0.9) 7 (0,01) 7 (0.01) ICOSL ECD Укороченный вариант #5 с N52H/N57 Y/Q100R/C198R ICOSL ECD Short version #5 with N52H/N57 Y/Q100R/C198R 603 603 86289 (50,0) 86289 (50.0) 216071 (28,5) 216071 (28.5) 110188 (1,1) 110188 (1.1) 9 (0,01) 9 (0.01) ICOSL ECD Укороченный вариант #8 с N207G/L208G и N52H/N57Y/Q100R/C198R и Y151H ICOSL ECD Short version #8 with N207G/L208G and N52H/N57Y/Q100R/C198R and Y151H 606 606 94156 (54,5) 94156 (54.5) 368471 (48,6) 368471 (48.6) 142900 (1,4) 142900 (1.4) 2 (0,00) 2 (0.00) ICOSL IgV с ICOSL IgV with 545 545 84594 84594 204840 204840 117707 117707 0 (0,00) 0 (0.00) N52H/N57Y/Q100R N52H/N57Y/Q100R (49,0) (49.0) (27,0) (27.0) (1,2) (1,2) ICOSL ECD с N52H/N57 Y/Q 100R/C198R ICOSL ECD with N52H/N57 Y/Q 100R/C198R 32 32 59179 (34,3) 59179 (34.3) 132894 (17,5) 132894 (17.5) 138555 (1,4) 138555 (1.4) 0 (0,00) 0 (0.00) ECD из ICOSL дикого типа ECD from wild type ICOSL 32 32 1727 (1,0) 1727 (1.0) 7579 (1,0) 7579 (1.0) 100466 (1,0) 100466 (1.0) 757 (1,00) 757 (1.00)

C. Связывание и активность белков, экспрессируемых в клетках 293 (Expi293) или CHO.C. Binding and activity of proteins expressed in 293 (Expi293) or CHO cells.

Вариантные гибридные белки ICOSL Fc, полученные на основе референсных последовательностей ICOSL, описанных выше, оценивали на связывание и активность после экспрессии в клетках 293 (Expi293) или CHO. Кроме того, ДНК-конструкцию, кодирующую типичные варианты домена IgSF из ICOSL N52H/N57Y/Q100R/C198R или N52H/Q100R, в примерных референсных последовательностях ICOSL, как указано в таблице 30D, также связанных с инертным Fc, содержащим мутации C220S/L234A/L235E/G237A по нумерации EU, представленным в SEQ ID NO: 477, продуцировали и очищали после трансфекции клеток клеток 293 или CHO данными ДНК-конструкциями. Кроме того, примерный вариантный иммуномодулирующий белок был получен в виде мономера, в котором клетки трансфицировали ДНК-конструкцией, кодирующей вариант вариантной референсной последовательности ECD ICOSL, но без слияния с последовательностью Fc.Variant ICOSL Fc fusion proteins derived from the ICOSL reference sequences described above were assessed for binding and activity after expression in 293 (Expi293) or CHO cells. In addition, a DNA construct encoding typical IgSF domain variants from ICOSL N52H/N57Y/Q100R/C198R or N52H/Q100R, in exemplary ICOSL reference sequences as listed in Table 30D, also associated with an inert Fc containing the C220S/L234A/ mutations L235E/G237A EU numbering shown in SEQ ID NO: 477 was produced and purified after transfection of 293 or CHO cells with these DNA constructs. In addition, an exemplary variant immunomodulatory protein was produced as a monomer in which cells were transfected with a DNA construct encoding a variant of the variant ICOSL ECD reference sequence, but without fusion to the Fc sequence.

Полученные очищенные вариантные гибридные белки ICOSL Fc или вариантные мономеры ICOSL оценивали на связывание с когнатными партнерами по связыванию и на модуляцию активности T-клеток с использованием реакции смешанных лимфоцитов (MLR), по существу, как описано выше. В табл. 30D указаны аминокислотные замены в референсной последовательности вариантного ICOSL, обозначенной номером положения аминокислоты, соответствующей аминокислотным положениям в соответствующей референсной (например, немодифицированной) последовательности внеклеточного домена (ECD) ICOSL, представленного в SEQ ID NO: 32. и представлены идентификаторы SEQ ID NO для каждой ре- 188 044346 ференсной последовательности ICOSL. Столбец 3 указывает тип клеток (ExpiCHO-S или Expi293), используемых для продуцирования белка ICOSL. Как продемонстрировано в табл. 30D, результаты показывают, по существу, сходное связывание и активность, независимо от того, продуцируется или нет вариантный иммуномодулирующий белок ICOSL в клетках CHO или 293.The resulting purified variant ICOSL Fc fusion proteins or variant ICOSL monomers were assessed for binding to cognate binding partners and for modulation of T cell activity using the mixed lymphocyte response (MLR), essentially as described above. In table 30D shows amino acid substitutions in the reference sequence of a variant ICOSL, designated by the amino acid position number corresponding to the amino acid positions in the corresponding reference (e.g., unmodified) ICOSL extracellular domain (ECD) sequence shown in SEQ ID NO: 32, and provides SEQ ID NOs for each 188 044346 ICOSL reference sequence. Column 3 indicates the cell type (ExpiCHO-S or Expi293) used to produce ICOSL protein. As demonstrated in Table. 30D, the results show substantially similar binding and activity whether or not the variant immunomodulatory protein ICOSL is produced in CHO or 293 cells.

Таблица 30DTable 30D

Последовательности молекул, данные о связывании и данные о костимулирующей биоактивности вариантных ICOSL ECD Fc-гибридных белков, полученных с использованием различных клетокMolecular sequences, binding data and co-stimulatory bioactivity data of variant ICOSL ECD Fc-fusion proteins produced using different cells

Описание Description Референсная последовательность SEQ ID NO Reference sequence SEQ ID NO Материал CHO или 293 Material CHO or 293 Связывание Binding MLR MLR CD28 CD28 CTLA4 CTLA4 ICOS ICOS IFNгамма IFNgamma MFI (AWT) MFI (AWT) MFI (AWT) MFI (AWT) MFI (AWT) MFI (AWT) пг/мл (AWT) pg/ml (AWT) ICOSL ECD с N52H/N57 Y/Q100R/C198R ICOSL ECD with N52H/N57 Y/Q100R/C198R 32 32 293 293 13710 (3,9) 13710 (3.9) 8715 (0,7) 8715 (0.7) 16746 (1,4) 16746 (1.4) 20 (0,02) 20 (0.02) ICOSL ECD с N52H/N57 Y/Q 100R/C198R ICOSL ECD with N52H/N57 Y/Q 100R/C198R 32 32 CHO CHO 12876 (3,6) 12876 (3.6) 8750 (0,7) 8750 (0.7) 7700 (0,7) 7700 (0.7) 16 (0,02) 16 (0.02) ICOSCL ECD c N52H/Q100R ICOSCL ECD c N52H/Q100R 32 32 293 293 11664 (3,3) 11664 (3.3) 13429 (1,1) 13429 (1.1) 10284 (0,9) 10284 (0.9) 168 (0,19) 168 (0.19) ICOSCL ECD c N52H/N57Y/Q100R/F172S ICOSCL ECD c N52H/N57Y/Q100R/F172S 32 32 293 293 12900 (3,6) 12900 (3.6) 8179 (0,7) 8179 (0.7) 15956 (1,4) 15956 (1.4) 14 (0,02) 14 (0.02) ICOSCL ECD c N52H/N57Y/Q100R/F172S ICOSCL ECD c N52H/N57Y/Q100R/F172S 32 32 CHO CHO 14437 (4,1) 14437 (4.1) 8708 (0,7) 8708 (0.7) 12610 (1,1) 12610 (1.1) 21 (0,02) 21 (0.02) ICOSCL IgV c N52H/N57Y/Q100R ICOSCL IgV c N52H/N57Y/Q100R 545 545 293 293 16618 (4,7) 16618 (4.7) 9674 (0,8) 9674 (0.8) 9377 (0,8) 9377 (0.8) 10 (0,01) 10 (0.01) ICOSCL IgV c N52H/N57Y/Q100R ICOSCL IgV c N52H/N57Y/Q100R 545 545 CHO CHO 17343 (4,9) 17343 (4.9) 9039 (0,7) 9039 (0.7) 8673 (0,7) 8673 (0.7) 14 (0,01) 14 (0.01) ICOSL ECD Укороченный вариант #4 с N52H/N57Y/Q100R/F172S ICOSL ECD Short version #4 with N52H/N57Y/Q100R/F172S 602 602 293 293 14710 (4,1) 14710 (4.1) 8841 (0,7) 8841 (0.7) 6893 (0,6) 6893 (0.6) 21 (0,02) 21 (0.02) ICOSL ECD Укороченный вариант #4 с N52H/N57Y/Q100R/F172S ICOSL ECD Short version #4 with N52H/N57Y/Q100R/F172S 602 602 CHO CHO 12743 (3,6) 12743 (3.6) 9000 (0,7) 9000 (0.7) 7606 (0,7) 7606 (0.7) 21 (0,02) 21 (0.02) ICOSL ECD Укороченный вариант #7 с N52H/N57Y/Q100R/F172S ICOSL ECD Short version #7 with N52H/N57Y/Q100R/F172S 605 605 293 293 12017 (3,4) 12017 (3.4) 9674 (0,8) 9674 (0.8) 7599 (0,7) 7599 (0.7) 15 (0,02) 15 (0.02) ICOSL ECD Укороченный вариант #7 с N52H/N57Y/Q100R/F172S ICOSL ECD Short version #7 with N52H/N57Y/Q100R/F172S 605 605 CHO CHO 13043 (3,7) 13043 (3.7) 9039 (0,7) 9039 (0.7) 8077 (0,7) 8077 (0.7) 7 (0,01) 7 (0.01) Мономер ICOSL ECD c N52H/N57Y/Q100R без Fc Monomer ICOSL ECD with N52H/N57Y/Q100R without Fc 32 32 293 293 20575 (5,8) 20575 (5.8) 19978 (1,6) 19978 (1.6) 11989 (1,0) 11989 (1.0) 133 (0,15) 133 (0.15) Димер ICOSL ECD c N52H/N57Y/Q100R без Fc Dimer ICOSL ECD c N52H/N57Y/Q100R without Fc 32 32 293 293 18477 (5,2) 18477 (5.2) 22361 (1,8) 22361 (1.8) 12913 (1,1) 12913 (1.1) 119 (0,13) 119 (0.13) ECD из ICOSL дикого типа ECD from wild type ICOSL 32 32 293 293 3556 (1,0) 3556 (1.0) 12121 (1,0) 12121 (1.0) 11690 (1,0) 11690 (1.0) 905 (1,00) 905 (1.00)

Пример 28.Example 28.

Создание вариантной библиотеки NNK из вариантных доменов ICOSL IgSF и оценка связывания и активности.Construction of a variant NNK library from variant ICOSL IgSF domains and assessment of binding and activity.

Дополнительные вариантные молекулы, содержащие домен ICSL IgSF, получали с мутациями в положениях 52, 57 и 100 относительно положений, указанных в SEQ ID NO: 32. Варианты получали из библиотеки NNK, где K=T или G, так что кодирующие кодоны кодируют все потенциальные аминокислоты, но предотвращают кодирование двух стоп-остатков TAA и TGA. ДНК библиотеки NNK вводили в дрожжи, по существу, как описано в примере 2, для создания дрожжевых библиотек. Библиотеки использовали для отбора дрожжей, экспрессирующих варианты ICOSL с модифицированной аффинностью, по существу так, как описано в примере 3.Additional variant IgSF ICSL domain-containing molecules were generated with mutations at positions 52, 57 and 100 relative to the positions specified in SEQ ID NO: 32. The variants were obtained from the NNK library, where K=T or G such that the coding codons encode all potential amino acids, but prevent the encoding of the two stop residues TAA and TGA. The NNK library DNA was introduced into yeast essentially as described in Example 2 to create yeast libraries. The libraries were used to screen for yeast expressing affinity modified ICOSL variants essentially as described in Example 3.

Отобранные молекулы, содержащие вариантные домены ICOSL IgSF, были отформатированы в виде Fc-гибридного белка, по существу так, как описано в примере 4, за исключением того, что сгенерированный домен ICSL IgSF, связан через линкер (G4S) 4 (SEQ ID NO: 635) с инертным Fc, содержащим мутации C220S/L234A/L235E/G237A/K447del, согласно нумерации EU, указанным в SEQ ID NO: 633, или его аллотипом, указанным в SEQ ID NO: 637.Selected molecules containing variant IgSF ICOSL domains were formatted as an Fc fusion protein essentially as described in Example 4, except that the generated IgSF ICSL domain was linked via linker (G4S) 4 (SEQ ID NO: 635) with an inert Fc containing the mutations C220S/L234A/L235E/G237A/K447del, according to the EU numbering specified in SEQ ID NO: 633, or its allotype specified in SEQ ID NO: 637.

Вариантные иммуномодулирующие белки ICOSL Fc оценивали в исследованиях по связыванию для оценки связывания с когнатными партнерами по связыванию. В исследованиях связывания, описанных в примере 6, использовали клетки Expi293, трансфецированные когнатными партнерами связывания CD28,Variant immunomodulatory ICOSL Fc proteins were evaluated in binding studies to assess binding to cognate binding partners. The binding studies described in Example 6 used Expi293 cells transfected with CD28 cognate binding partners.

- 189 044346- 189 044346

ICOS и CTLA4 человека. Определяли MFI связывания 100 нМ вариантных гибридных иммуномодулирующих белков ICOSL Fc с клеткой-мишенью, экспрессирующей каждого партнера по связыванию, и сравнивали со связыванием соответствующего референсного (например, немодифицированного или дикого типа) ICOSL IgV-Fc с теми же клетками-мишенями. Костимулирующую биоактивность полученных вариантных гибридных молекул ICOSL Fc также оценивали в анализах коиммобилизации с анти-CDS, описанном в примере 6. Модуляцию активности T-клеток вариантными гибридными иммуномодулирующими белками ICOSL Fc также определяли с использованием реакции смешанных лимфоцитов (MLR) с 1 нМ ICOSL-Fc, по существу, как описано в примере 6. Секрецию IFN-гамма определяли из лунок в трех повторах.Human ICOS and CTLA4. The MFI of binding of 100 nM variant ICOSL Fc fusion proteins to a target cell expressing each binding partner was determined and compared with the binding of the corresponding reference (eg, unmodified or wild type) ICOSL IgV-Fc to the same target cells. The costimulatory bioactivity of the resulting variant ICOSL Fc fusion molecules was also assessed in the anti-CDS coimmobilization assays described in Example 6. Modulation of T cell activity by the variant ICOSL Fc fusion protein fusions was also determined using a mixed lymphocyte reaction (MLR) with 1 nM ICOSL-Fc essentially as described in Example 6. IFN-γ secretion was determined from triplicate wells.

Результаты по связыванию и функциональной активности, основанные на костимулирующей биоактивности или активности в анализе MLR, для примерных вариантных гибридных молекул ICOSL IgVFc приведены в табл. 31. В таблице ниже указаны аминокислотные замены в вариантного ICOSL, обозначенные номером аминокислотного положения, соответствующим положениям аминокислот в соответствующей последовательности референсного (например, немодифицированного) внеклеточного домена ICOSL (ECD), представленной в SEQ ID NO: 32. В столбце 2 указан идентификатор SEQ ID NO для каждого вариантного домена IgV, содержащегося в вариантной гибридной молекуле IgV-Fc. Как показано, варианты домена ICOSL IgSF (например, IgV), полученные с различными комбинациями специфических мутаций в положениях 52, 57 и 100, демонстрировали измененное связывание, по меньшей мере, с одним, а в некоторых случаях более чем одним, когнатным связывающим партнером. Последние два столбца таблицы также изображают функциональную активность различных Fc-гибридных молекул для модуляции активности T-клеток на основе рассчитанных уровней IFN-гамма в культуральных надосадочных жидкостях (пг/мл), полученных либо i) с указанной вариантной гибридной растовримой молекулой IgV-Fc, коиммобилизованной с анти-CDS либо ii) с указанной вариантной гибридной молекулой IgVFc, в анализе MLR. В табл. также показано соотношение IFN-гамма, продуцируемого каждым вариантным ECD-Fc, по сравнению с соответствующим немодифицированным ECD-Fc (дикого типа) в обоих функциональных анализах. Вариантные Fc-гибридные белки также демонстрировали измененную иммунологическую активность. Прохождение костимулирующих сигналов некоторых вариантных молекул было значительно выше по сравнению с ICOSL дикого типа. Определенные варианты демонстрировали существенное ингибирование IFN-гамма от очень низкой до необнаруживаемой выработки IFN-гамма в культурах, в анализе MLR.Binding and functional activity results, based on co-stimulatory bioactivity or MLR assay activity, for exemplary variant ICOSL IgVFc fusion molecules are shown in Table. 31. The table below shows the amino acid substitutions in the variant ICOSL, indicated by the amino acid position number corresponding to the amino acid positions in the corresponding reference (eg, unmodified) ICOSL extracellular domain (ECD) sequence shown in SEQ ID NO: 32. Column 2 indicates the SEQ ID ID NO for each variant IgV domain contained in the variant IgV-Fc fusion molecule. As shown, ICOSL domain variants of IgSF (eg, IgV) generated with various combinations of specific mutations at positions 52, 57, and 100 exhibited altered binding to at least one, and in some cases more than one, cognate binding partner. The last two columns of the table also depict the functional activity of various Fc fusion molecules to modulate T cell activity based on calculated IFN-gamma levels in culture supernatants (pg/ml) prepared with either i) the indicated variant soluble IgV-Fc fusion molecule, coimmobilized with anti-CDS or ii) with the specified variant IgVFc fusion molecule, in an MLR assay. In table also shown is the ratio of IFN-gamma produced by each variant ECD-Fc compared to the corresponding unmodified ECD-Fc (wild type) in both functional assays. Variant Fc fusion proteins also showed altered immunological activity. The transmission of co-stimulatory signals of some variant molecules was significantly higher compared to wild-type ICOSL. Certain variants showed significant inhibition of IFN-gamma, with very low to undetectable IFN-gamma production in cultures, in the MLR assay.

Таблица 31Table 31

Дополнительные примерные вариантные полипептиды ICOSLAdditional exemplary ICOSL variant polypeptides

Мутации Mutations SEQ ID NO (IgV) SEQ ID NO (IgV) Связывание Binding Костим We cost MLR MLR CD28 CD28 CTLA-4 CTLA-4 ICOS ICOS IFNгамма IFNgamma IFNгамма IFNgamma MFI (AWT) MFI (AWT) MFI (AWT) MFI (AWT) MFI (AWT) MFI (AWT) пг/мл (AWT) pg/ml (AWT) пг/мл (AWT) pg/ml (AWT) N52A/N57F/Q100S N52A/N57F/Q100S 734 734 156589 (7,00) 156589 (7.00) 255078 (0,77) 255078 (0.77) 241891 (1,14) 241891 (1.14) 1119 (0,68) 1119 (0.68) 0 (0,00) 0 (0.00) N52A/N57H/Q100S N52A/N57H/Q100S 735 735 159363 (7,10) 159363 (7.10) 321437 (0,97) 321437 (0.97) 304600 (1,44) 304600 (1.44) 2972 (1,80) 2972 (1.80) 0 (0,00) 0 (0.00) N52A/N57Y/Q100A N52A/N57Y/Q100A 736 736 147258 (6,60) 147258 (6.60) 319745 (0,97) 319745 (0.97) 260713 (1,23) 260713 (1.23) 2978 (1,81) 2978 (1.81) 0 (0,00) 0 (0.00) N52D/N57A/Q100A N52D/N57A/Q100A 737 737 137882 (6,20) 137882 (6.20) 340186 (1,03) 340186 (1.03) 248975 (1,17) 248975 (1.17) 477 (0,29) 477 (0.29) 134 (0,60) 134 (0.60) N52D/Q100S N52D/Q100S 738 738 95731 (4,30) 95731 (4.30) 332743 (1,01) 332743 (1.01) 275097 (1,30) 275097 (1.30) 957 (0,58) 957 (0.58) 110 (0,49) 110 (0.49) N52G/Q100A N52G/Q100A 739 739 98652 (4,40) 98652 (4.40) 97118 (0,29) 97118 (0.29) 303229 (1,43) 303229 (1.43) 296 (0,18) 296 (0.18) 96 (0,43) 96 (0.43) N52H/Q100A N52H/Q100A 740 740 145762 (6,50) 145762 (6.50) 361334 (1,09) 361334 (1.09) 213008 (1,01) 213008 (1.01) 784 (0,48) 784 (0.48) 37 (0,17) 37 (0.17) N52M/N57H/Q100S N52M/N57H/Q100S 741 741 114743 (5,10) 114743 (5.10) 463404 (1,40) 463404 (1.40) 265637 (1,25) 265637 (1.25) 1333 (0,81) 1333 (0.81) 0 (0,00) 0 (0.00) N52M/N57W/Q100P N52M/N57W/Q100P 742 742 168057 (7,50) 168057 (7.50) 342659 (1,04) 342659 (1.04) 322277 (1,52) 322277 (1.52) 1865 (1,13) 1865 (1.13) 0 (0,00) 0 (0.00)

- 190 044346- 190 044346

N52Q/N57F N52Q/N57F 743 743 131301 (5,90) 131301 (5.90) 366714 (Ui) 366714 (UI) 192206 (0,91) 192206 (0.91) 1403 (0,85) 1403 (0.85) 0 (0,00) 0 (0.00) N52Q/N57S/Q100A N52Q/N57S/Q100A 744 744 91306 (4,10) 91306 (4.10) 315021 (0,95) 315021 (0.95) 262735 (1,24) 262735 (1.24) 290 (0,18) 290 (0.18) 123 (0,55) 123 (0.55) N52R/ N57L/Q100A N52R/N57L/Q100A 745 745 118803 (5,30) 118803 (5.30) 402961 (1,22) 402961 (1.22) 307965 (1,45) 307965 (1.45) 709 (0,43) 709 (0.43) 0 (0,00) 0 (0.00) N52R/N57Y/Q100P N52R/N57Y/Q100P 746 746 133283 (6,00) 133283 (6.00) 502179 (1,52) 502179 (1.52) 251264 (1,19) 251264 (1.19) 7380 (4,48) 7380 (4.48) 0 (0,00) 0 (0.00) N52R/N57Y/Q100S N52R/N57Y/Q100S 747 747 133454 (6,00) 133454 (6.00) 504037 (1,53) 504037 (1.53) 229271 (1,08) 229271 (1.08) 5841 (3,54) 5841 (3.54) 0 (0,00) 0 (0.00) N52S/N57A/Q100A N52S/N57A/Q100A 748 748 98153 (4,40) 98153 (4.40) 233184 (0,71) 233184 (0.71) 181297 (0,86) 181297 (0.86) 442 (0,27) 442 (0.27) 52 (0,23) 52 (0.23) N52S/N57H/Q100E N52S/N57H/Q100E 749 749 116821 (5,20) 116821 (5.20) 302383 (0,92) 302383 (0.92) 257518 (1,22) 257518 (1.22) 8412 (5,11) 8412 (5.11) 132 (0,59) 132 (0.59) N52S/N57L/Q100S N52S/N57L/Q100S 750 750 108133 (4,80) 108133 (4.80) 197064 (0,60) 197064 (0.60) 268940 (1,27) 268940 (1.27) 3120 (1,89) 3120 (1.89) 0 (0,00) 0 (0.00) N52S/ N57M/Q100S N52S/N57M/Q100S 751 751 133604 (6,00) 133604 (6.00) 227615 (0,69) 227615 (0.69) 312088 (1,47) 312088 (1.47) 349 (0,21) 349 (0.21) 199 (0,89) 199 (0.89) N52S/N57Y/Q100S N52S/N57Y/Q100S 752 752 161330 (7,20) 161330 (7.20) 204577 (0,62) 204577 (0.62) 223684 (1,06) 223684 (1.06) 7411 (4,50) 7411 (4.50) 0 (0,00) 0 (0.00) N52S/N57Y/Q100M N52S/N57Y/Q100M 753 753 156869 (7,00) 156869 (7.00) 395350 (1,20) 395350 (1.20) 302569 (1,43) 302569 (1.43) 2954 (1,79) 2954 (1.79) 0 (0,00) 0 (0.00) N52S/N57Y/Q100V N52S/N57Y/Q100V 754 754 126281 (5,70) 126281 (5.70) 304795 (0,92) 304795 (0.92) 218925 (1,03) 218925 (1.03) 1304 (0,79) 1304 (0.79) 0 (0,00) 0 (0.00) N52T/N57H/Q100S N52T/N57H/Q100S 755 755 143441 (6,40) 143441 (6.40) 377542 (1,14) 377542 (1.14) 258634 (1,22) 258634 (1.22) 6312 (3,83) 6312 (3.83) 0 (0,00) 0 (0.00) N52T/N57H/Q100A N52T/N57H/Q100A 756 756 112637 (5,00) 112637 (5.00) 350453 (1,06) 350453 (1.06) 220339 (1,04) 220339 (1.04) 2874 (1,74) 2874 (1.74) 0 (0,00) 0 (0.00) N52T/ N57Y/Q100A N52T/ N57Y/Q100A 757 757 161333 (7,20) 161333 (7.20) 340845 (1,03) 340845 (1.03) 239136 (1,13) 239136 (1.13) 442 (0,27) 442 (0.27) 0 (0,00) 0 (0.00) N52V/N57L/Q100A N52V/N57L/Q100A 758 758 132144 (5,90) 132144 (5.90) 252148 (0,76) 252148 (0.76) 181344 (0,86) 181344 (0.86) 518 (0,31) 518 (0.31) 159 (0,71) 159 (0.71) N52H/N57Y/Q100K N52H/N57Y/Q100K 759 759 141720 (6,30) 141720 (6.30) 393476 (1,19) 393476 (1.19) 214270 (1,01) 214270 (1.01) 12919 (7,84) 12919 (7.84) 0 (0,00) 0 (0.00) N52K/N57Y/Q100R N52K/N57Y/Q100R 760 760 140729 (6,30) 140729 (6.30) 233283 (0,71) 233283 (0.71) 198941 (0,94) 198941 (0.94) 12515 (7,60) 12515 (7.60) 0 (0,00) 0 (0.00) N52L/N57H/Q100R N52L/N57H/Q100R 761 761 140807 (6,30) 140807 (6.30) 352518 (1,07) 352518 (1.07) 250052 (1,18) 250052 (1.18) 12544 (7,61) 12544 (7.61) 0 (0,00) 0 (0.00) N52R/N57F/Q100N N52R/N57F/Q100N 762 762 161029 (7,20) 161029 (7.20) 233254 (0,71) 233254 (0.71) 252904 (1,19) 252904 (1.19) 448 (0,27) 448 (0.27) 106 (0,47) 106 (0.47) N52R/N57F/Q100P N52R/N57F/Q100P 763 763 153850 (6,90) 153850 (6.90) 503696 (1,52) 503696 (1.52) 296566 (1,40) 296566 (1.40) 1718 (1,04) 1718 (1.04) 0 (0,00) 0 (0.00) N52R/N57F/Q100R N52R/N57F/Q100R 764 764 185231 (8,30) 185231 (8.30) 463873 (1,40) 463873 (1.40) 234248 (1,11) 234248 (1.11) 11402 (6,92) 11402 (6.92) 0 (0,00) 0 (0.00)

- 191 044346- 191 044346

N52R/N57F/Q100T N52R/N57F/Q100T 765 765 126875 (5,70) 126875 (5.70) 357505 (1,08) 357505 (1.08) 270134 (1,27) 270134 (1.27) 272 (0,17) 272 (0.17) 0 (0,00) 0 (0.00) N52R/N57H/Q100K N52R/N57H/Q100K 766 766 - - - - - - - - - - N52R/N57L/Q100S N52R/N57L/Q100S 767 767 111704 (5,00) 111704 (5.00) 289326 (0,88) 289326 (0.88) 230617 (1,09) 230617 (1.09) 1292 (0,78) 1292 (0.78) 0 (0,00) 0 (0.00) N52R/N57W/Q100K N52R/N57W/Q100K 768 768 130875 (5,90) 130875 (5.90) 477268 (1,44) 477268 (1.44) 349316 (1,65) 349316 (1.65) 10056 (6,Ю) 10056 (6,Yu) 0 (0,00) 0 (0.00) N52R/N57W N52R/N57W 769 769 136967 (6,Ю) 136967 (6,Yu) 318199 (0,96) 318199 (0.96) 298850 (1,41) 298850 (1.41) 12652 (7,68) 12652 (7.68) 0 (0,00) 0 (0.00) N52R/N57Y/Q100R N52R/N57Y/Q100R 770 770 3285 (о,ю) 3285 (oh, yu) 4266 (0,01) 4266 (0.01) 6104 (0,03) 6104 (0.03) 349 (0,21) 349 (0.21) 347 (1,54) 347 (1.54) N52C/N57E/Q100S N52C/N57E/Q100S 771 771 13361 (0,60) 13361 (0.60) 10616 (0,03) 10616 (0.03) 125274 (0,59) 125274 (0.59) 296 (0,18) 296 (0.18) 372 (1,65) 372 (1.65) N52G/N57P/Q100D N52G/N57P/Q100D 772 772 5715 (0,30) 5715 (0.30) 10181 (0,03) 10181 (0.03) 274629 (1,30) 274629 (1.30) 254 (0,15) 254 (0.15) 343 (1,53) 343 (1.53) N52G/N57V/Q100G N52G/N57V/Q100G 773 773 23658 (1,Ю) 23658 (1,Yu) 14727 (0,04) 14727 (0.04) 260057 (1,23) 260057 (1.23) 325 (0,20) 325 (0.20) 245 (1,09) 245 (1.09) N52G/N57V N52G/N57V 774 774 69117 (3,Ю) 69117 (3,Yu) 52498 (0,16) 52498 (0.16) 332068 (1,57) 332068 (1.57) 847 (0,51) 847 (0.51) 327 (1,45) 327 (1.45) N52L/N57V N52L/N57V 775 775 54775 (2,50) 54775 (2.50) 150970 (0,46) 150970 (0.46) 256730 (1,21) 256730 (1.21) 986 (0,60) 986 (0.60) 270 (1,20) 270 (1.20) N52P/N57P N52P/N57P 776 776 21008 (0,90) 21008 (0.90) 27043 (0,08) 27043 (0.08) 222171 (1,05) 222171 (1.05) 260 (0,16) 260 (0.16) 478 (2,13) 478 (2.13) N52P/N57S/Q100G N52P/N57S/Q100G 777 777 6803 (0,30) 6803 (0.30) 5054 (0,02) 5054 (0.02) 143255 (0,68) 143255 (0.68) 110 (0,07) 110 (0.07) 481 (2,14) 481 (2.14) N52S/N57L/Q100G N52S/N57L/Q100G 778 778 71895 (3,20) 71895 (3.20) 79432 (0,24) 79432 (0.24) 275602 (1,30) 275602 (1.30) 726 (0,44) 726 (0.44) 513 (2,28) 513 (2.28) N52T/N57K/Q100P N52T/N57K/Q100P 779 779 88653 (4,00) 88653 (4.00) 78299 (0,24) 78299 (0.24) 312905 (1,48) 312905 (1.48) 116 (0,07) 116 (0.07) 395 (1,76) 395 (1.76) N52V/N57T/Q100L N52V/N57T/Q100L 780 780 6205 (0,30) 6205 (0.30) 11458 (0,03) 11458 (0.03) 29167 (0,14) 29167 (0.14) 85 (0,05) 85 (0.05) 562 (2,50) 562 (2.50) N57Q/Q100P N57Q/Q100P 781 781 15195 (0,70) 15195 (0.70) 69058 (0,21) 69058 (0.21) 204533 (0,97) 204533 (0.97) 159 (0,Ю) 159 (0,Yu) 432 (1,92) 432 (1.92) WT ICOSL WT ICOSL 545 545 22340 (1,00) 22340 (1.00) 330437 (1,00) 330437 (1.00) 211945 (1,00) 211945 (1.00) 1648 (1,00) 1648 (1.00) 225 (1,00) 225 (1.00) Полноразмерный N52H/N57Y/Q100R/F172S Full size N52H/N57Y/Q100R/F172S 291 291 138141 (6,20) 138141 (6.20) 605794 (1,83) 605794 (1.83) 237653 (1,12) 237653 (1.12) - - 0 (0,00) 0 (0.00) N52H/N57Y/Q100R N52H/N57Y/Q100R 565 565 142274 (6,40) 142274 (6.40) 817010 (2,47) 817010 (2.47) 199528 (0,94) 199528 (0.94) - - 0 (0,00) 0 (0.00) N52H/N57Y/Q100R N52H/N57Y/Q100R 283 283 - - - - 10362 (6,29) 10362 (6.29) - -

Пример 29.Example 29.

Оценка клеток K562, экспрессирующих трансмембранный иммуномодулирующий белок (TIP).Evaluation of K562 cells expressing transmembrane immunomodulatory protein (TIP).

Клетки K562 были сконструированы для экспрессии трансмембранного иммуномодулирующего белка (TIP), который содержал ECD доменов ICOSL vIgD, слитых с нативным трансмембранным и внутриклеточным доменом человеческого ICOSL WT, представленного в SEQ ID NO: 5. Примерный вариант ICOSL-TIP имел аффинно-модифицированный домен IgSF, содержащий аминокислотные мутации, соответствующие N52H/N57Y/Q100P (SEQ ID NO: 288), N52H/N57Y/Q100R (SEQ ID NO: 283) или E16V/N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/Y152C/K156M/C198R (SEQ ID NO: 300) относительно положений во внеклеточном домене ICOSL, представленном в SEQ ID NO: 32.K562 cells were engineered to express a transmembrane immunomodulatory protein (TIP) that contained the ECD domains of ICOSL vIgD fused to the native transmembrane and intracellular domain of human WT ICOSL shown in SEQ ID NO: 5. An exemplary variant of ICOSL-TIP had an affinity-modified IgSF domain , containing amino acid mutations corresponding to N52H/N57Y/Q100P (SEQ ID NO: 288), N52H/N57Y/Q100R (SEQ ID NO: 283) or E16V/N52H/N57Y/Q100R/V110D/H115R/Y152C/K156M/C198R ( SEQ ID NO: 300) relative to positions in the extracellular domain of ICOSL presented in SEQ ID NO: 32.

Клетки K562 (ATCC) метили CFSE, чтобы лучше отличать их от T-клеток в анализах совместного культивирования. Очищенные первичные T-клетки человека метили с помощью Cell Trace Far Red (оба от Thermo-Fisher) и помещали в 96-луночные планшеты с круглодонными лунками для культуры ткани с анти-CD3 антителом. Для обеспечения сигнала TCR для T-клеток, анти-CD3-антитело включали в растворимом формате в диапазоне концентраций, которые позволяли K562 презентировать это стимулирующее антитело через Fc-рецептор CD32, экспрессируемый клетками. Клетки инкубировали в течение 72 ч, и пролиферацию CD4+ (фиг. 23A) и CD8+ (фиг. 23B) контролировали и сообщали как процент клеток, разделенный по отношению к концентрации анти-CD3. Каждая точка представляет среднее значение трех повторов, а столбцы ошибок показывают стандартное отклонение.K562 cells (ATCC) were labeled with CFSE to better distinguish them from T cells in coculture assays. Purified primary human T cells were labeled with Cell Trace Far Red (both from Thermo-Fisher) and plated in 96-well round-bottom tissue culture plates with anti-CD3 antibody. To provide a TCR signal to T cells, the anti-CD3 antibody was included in a soluble format at a concentration range that allowed K562 to present this stimulatory antibody via the CD32 Fc receptor expressed by the cells. Cells were incubated for 72 hours and proliferation of CD4+ (FIG. 23A) and CD8+ (FIG. 23B) was monitored and reported as the percentage of cells divided by anti-CD3 concentration. Each point represents the mean of three replicates, and the error bars show the standard deviation.

Клетки дикого типа K562 стимулировали пролиферацию T-клеток при совместной инкубации с растворимым анти-CD3-антителом в зависимости от дозы, тогда как клетки K562 в отсутствие анти-CD3 этого не делали. Как показано на фиг. 23A и 23B, экспрессия WIP ICOSL TIP на поверхности усиливала ответы, но эффекты были больше, когда клетки K562 экспрессировали вариантные TIP ICOSL, что указывает на то, что эти молекулы, экспрессированные на поверхности клеток, обеспечивали превосходную костимуляцию для T-клеток.Wild-type K562 cells stimulated T cell proliferation when co-incubated with soluble anti-CD3 antibody in a dose-dependent manner, whereas K562 cells in the absence of anti-CD3 did not. As shown in FIG. 23A and 23B, surface expression of WIP ICOSL TIP enhanced responses, but the effects were greater when K562 cells expressed variant ICOSL TIPs, indicating that these cell surface expressed molecules provided superior co-stimulation for T cells.

Пример 30.Example 30.

Оценка связывающей и костимуляторной функции гибридных молекул с HER2-нацеливающим антителом.Evaluation of the binding and costimulatory function of hybrid molecules with a HER2-targeting antibody.

Примерный вариант ICCDL ECD, содержащий мутации N52H/N57Y/Q100R, был слит с N- или CAn exemplary ICCDL ECD variant containing the N52H/N57Y/Q100R mutations was fused to N- or C

- 192 044346 концевыми концами тяжелой или легкой цепи примерного aHTu-HER2 антитела, трастузумаба, как изображено в различных конфигурациях, показанных на фиг. 24A-24F. ДНК VmAb, кодирующая каждую из конструкций, предлагаемых на фиг. 24A-24F трансфицировали в клетки HEK-293 и секретированные белки очищали с помощью протеина A и эксклюзионной хроматографии. Полученные белки V-mAb затем оценивали на сохранение соответствующих свойств связывания. Клетки HEK-293 временно трансфицировали экспрессирующими векторами HER2, CD28 или ICOS, и каждый трансфектант затем инкубировали с отдельными белками V-mAb плюс вторичное антитело для обнаружения связанных реагентов. Как показано на фиг. 24A, связывание HER2 сохранялось всеми V-mAb, хотя величина связывания несколько снижалась. Более того, связывание V-mAb с CD28-трансфицированными клетками было в основном интактным, хотя некоторые формы показали некоторое снижение связывания (фиг. 24A). Эти данные указывают на то, что варианты ICOSL, слитые с тяжелыми и/или легкими цепями антитела с образованием гибридных белков, в значительной степени сохраняют контрструктуру и активность связывания антител.- 192 044346 heavy or light chain ends of an exemplary aHTu-HER2 antibody, trastuzumab, as depicted in the various configurations shown in FIG. 24A-24F. VmAb DNA encoding each of the constructs proposed in FIG. 24A-24F were transfected into HEK-293 cells and the secreted proteins were purified using protein A and size exclusion chromatography. The resulting V-mAb proteins were then assessed for retention of appropriate binding properties. HEK-293 cells were transiently transfected with HER2, CD28, or ICOS expression vectors, and each transfectant was then incubated with individual V-mAb proteins plus a secondary antibody to detect bound reagents. As shown in FIG. 24A, HER2 binding was maintained by all V-mAbs, although the magnitude of binding was slightly reduced. Moreover, V-mAb binding to CD28-transfected cells was largely intact, although some forms showed some reduction in binding (Fig. 24A). These data indicate that ICOSL variants fused to antibody heavy and/or light chains to form fusion proteins largely retain counterstructure and antibody binding activity.

Для того чтобы проверить, могут ли VmAb управлять целевой специфической костимуляцией Tклеток, была использована система трансфицированных клеток, включающая репортерную линию Tклеток для измерения костимуляции. Клетки Jurkat с люциферазным репортером на основе промотора IL-2 использовали для оценки костимулирующей функции. Для стимуляции клеток были сконструированы клетки K562 для применения в качестве искусственной антигенпрезентирующей клетки. В частности, клетки K562 трансдуцировали лентивирусом, кодирующим одноцепочечную Fv-версию анти-CD3 антитела OKT3 с трансдукцией или без нее, с отдельным лентивирусом, направляющим экспрессию HER2. Клетки K562, демонстрирующие одноцепочечное анти-CD3 Fv (OKT3) на клеточной поверхности с или без поверхностной экспрессии HER2, высевали в буфер для анализа Jurkat (RPMI1640 + 5% FBS) в 2х104 клеток/лунку. Клетки-мишени инкубировали с V-mAb, титрованными от 20000 до 6 пМ или контрольными белками в течение 20 мин при комнатной температуре. Эффекторные клетки Jurkat, экспрессирующие репортерный ген IL-2-люциферазы (Promega), добавляли в количестве 1x105 клеток/лунку, чтобы довести конечный объем/лунку до 100 мкл. Клетки-мишени и Jurkat инкубировали в течение 5 ч при 37°C. Планшеты извлекали из инкубатора и акклиматизировали до комнатной температуры в течение 15 мин. В каждую лунку добавляли 100 мкл раствора для лизиса клеток и субстрата люциферазы (реагент BioGlo люциферазы, Promega) и планшеты инкубировали на орбитальном шейкере в течение 10 мин. Люминесценцию измеряли с интеграцией 1 секунда на лунку с использованием устройства считывания изображений Cytation 3 (BioTek Instruments). Определяли и сообщали относительные значения люминесценции (RLU) для каждого тестируемого образца.To test whether VmAbs could drive target-specific costimulation of T cells, a transfected cell system was used that included a T cell reporter line to measure costimulation. Jurkat cells with an IL-2 promoter-based luciferase reporter were used to evaluate co-stimulatory function. To stimulate the cells, K562 cells were engineered for use as an artificial antigen presenting cell. Specifically, K562 cells were transduced with a lentivirus encoding a single-chain Fv version of the anti-CD3 antibody OKT3, with or without transduction, with a separate lentivirus directing HER2 expression. K562 cells displaying single chain anti-CD3 Fv (OKT3) on the cell surface with or without HER2 surface expression were seeded in Jurkat assay buffer (RPMI1640 + 5% FBS) at 2 x 10 4 cells/well. Target cells were incubated with V-mAbs titrated from 20,000 to 6 pM or control proteins for 20 min at room temperature. Jurkat effector cells expressing the IL-2-luciferase reporter gene (Promega) were added at 1x105 cells/well to bring the final volume/well to 100 μl. Target cells and Jurkat were incubated for 5 h at 37°C. The plates were removed from the incubator and acclimated to room temperature for 15 min. 100 μl of cell lysis solution and luciferase substrate (BioGlo luciferase reagent, Promega) was added to each well and the plates were incubated on an orbital shaker for 10 min. Luminescence was measured at 1 second integration per well using a Cytation 3 image reader (BioTek Instruments). Relative luminescence values (RLU) for each sample tested were determined and reported.

Как показано на фиг. 24B, включение нативного трастузумаба не влияло на индукцию люциферазы. Аналогично, включение вариантного белка ICOSL-Fc N52H/N57Y/Q100R (не слитого с трастузумабом) не влияло на показания (фиг. 24B). Однако включение нескольких V-mAb обеспечивало значительный костимулирующий сигнал в присутствии клеток HER2 + K562/OKT3, который был намного более устойчивым, чем с K562/OKT3, у которых отсутствовала экспрессия HER2 (фиг. 24C-24F). В некоторых случаях сигнал индуцировался в клетках K562/OKT3, в которых отсутствовал HER2, но это, скорее всего, было связано с Fc-доменом V-mAb, позволяющим CD32-опосредованную презентацию V-mAb. Результаты показывают, что слияние вариантного полипептида ICOSL с антителом может использоваться для доставки локализованного костимулирующего сигнала T-клеток.As shown in FIG. 24B, inclusion of native trastuzumab had no effect on luciferase induction. Likewise, inclusion of the variant protein ICOSL-Fc N52H/N57Y/Q100R (not fused to trastuzumab) had no effect on the reading (Figure 24B). However, inclusion of multiple V-mAbs provided a significant co-stimulatory signal in the presence of HER2 + K562/OKT3 cells, which was much more robust than with K562/OKT3, which lacked HER2 expression (Figures 24C-24F). In some cases, a signal was induced in K562/OKT3 cells lacking HER2, but this was most likely due to the Fc domain of the V-mAb allowing CD32-mediated presentation of the V-mAb. The results indicate that fusion of a variant ICOSL polypeptide with an antibody can be used to deliver a localized T cell co-stimulatory signal.

Пример 31.Example 31.

Получение и оценка стековых молекул, содержащих домены ICOSL и NKp30 с модифицированной аффинностью.Preparation and evaluation of stacking molecules containing affinity-modified ICOSL and NKp30 domains.

В этом примере описаны иммуномодулирующие белки, которые были получены в виде многодоменных стековых конструкций, содержащих домен IgV с модифицированной аффинностью из идентифицированных вариантных полипептидов ICOSL и идентифицированных вариантных полипептидов NKp30, описанных выше. В частности, примерный вариант ICOSL IgV (N52D, представленный в SEQ ID NO: 548; N52H/Q100R, представленный в SEQ ID NO: 567; N52H/N57Y/Q100R, представленный в SEQ ID NO: 565; N52L/N57H/Q100R, представленный в SEQ ID NO: 761), и примерная вариантная молекула NKp30 IgV L30V/A60V/S64P/S86G (SEQ ID NO: 504) были связаны вместе и слиты с инертным Fc (содержащим мутации L234A, L235E и L235E в Fc из IgG1 человека, например, представленном в SEQ ID NO: 637) в различных конфигурациях. Были получены конструкции гомодимерного стека, содержащие идентичные субъединицы Fc, в которых вариант ICOSL IgV и вариант NKp30 IgV по-разному связаны с N- или C-концом области Fc через пептидный линкер GSGGGS (SEQ ID NO: 635) и/или 3x GGGGS (SEQ ID NO: 228). Другие линкеры и области Fc также подходят для генерации стековых молекул. Примерные сгенерированные стеки изложены ниже.This example describes immunomodulatory proteins that were produced as multi-domain stacking constructs containing an affinity-modified IgV domain from the identified ICOSL variant polypeptides and the identified NKp30 variant polypeptides described above. In particular, an exemplary variant of ICOSL IgV (N52D, presented in SEQ ID NO: 548; N52H/Q100R, presented in SEQ ID NO: 567; N52H/N57Y/Q100R, presented in SEQ ID NO: 565; N52L/N57H/Q100R, presented in SEQ ID NO: 761), and an exemplary NKp30 IgV variant molecule L30V/A60V/S64P/S86G (SEQ ID NO: 504) were linked together and fused to an inert Fc (containing the L234A, L235E and L235E mutations in the Fc from human IgG1 , for example, presented in SEQ ID NO: 637) in various configurations. Homodimeric stack constructs containing identical Fc subunits were generated in which the ICOSL variant IgV and the NKp30 variant IgV are differentially linked to the N- or C-terminus of the Fc region via the peptide linker GSGGGS (SEQ ID NO: 635) and/or 3x GGGGS ( SEQ ID NO: 228). Other linkers and Fc regions are also suitable for generating stack molecules. Example stacks generated are outlined below.

Молекула нуклеиновой кислоты, кодирующая иммуномодулирующие белки, также содержала остатки, кодирующие типичный сигнальный пептид MGSTAILALLLAVLQGVSA (приведенный в SEQ ID NO: 225). Экспрессирующие конструкции, кодирующие представляющие интерес Fc-гибридных белков, были временно экспрессированы в клетках Expi293 HEK293 от Invitrogen с использованием коммерче- 193 044346 ских реактивов Expifectamine и среды производителя. Надосадочные жидкости собирали и белок собирали и элюировали из колонки с протеином A с использованием системы очистки белка AKTA.The nucleic acid molecule encoding immunomodulatory proteins also contained residues encoding the typical signal peptide MGSTAILALLLAVLQGVSA (set forth in SEQ ID NO: 225). Expression constructs encoding Fc fusion proteins of interest were transiently expressed in Expi293 HEK293 cells from Invitrogen using commercial Expifectamine reagents and the manufacturer's media. The supernatants were collected and the protein was collected and eluted from the protein A column using the AKTA protein purification system.

Кодирующая молекула нуклеиновой кислоты была разработана для получения гомодимерных стеков в различных конфигурациях последовательностей в порядке, представленном в табл. 32.The encoding nucleic acid molecule was designed to produce homodimer stacks in various sequence configurations in the order presented in Table. 32.

Таблица 32Table 32

Описание иммуномодулирующих белков ICOSL/NKp30Description of immunomodulatory proteins ICOSL/NKp30

Стек Stack SEQ ID NO белка (SEQ ID NO ДНК) SEQ ID NO of protein (SEQ ID NO of DNA) Описание Description ICOSL/NKp3Q Стек 1 ICOSL/NKp3Q Stack 1 912 (911) 912 (911) вариант ICOSL (SEQ ID NO: 548) - 3x GGGGS (SEQ ID NO: 228) - вариант NKp30 (SEQ ID NO: 504 ) - GSGGGGS (SEQ ID NO: 635) - Fc (SEQ ID NO: 637) variant ICOSL (SEQ ID NO: 548) - 3x GGGGS (SEQ ID NO: 228) - variant NKp30 (SEQ ID NO: 504) - GSGGGGS (SEQ ID NO: 635) - Fc (SEQ ID NO: 637) ICOSL/NKp30 Стек 2 ICOSL/NKp30 Stack 2 914 (913) 914 (913) вариант ICOSL (SEQ ID NO: 548) - 3x GGGGS (SEQ ID NO: 228) - вариант NKp30 (SEQ ID NO: 504 ) - 3x GGGGS (SEQ ID NO: 228) - вариант NKp30 (SEQ ID NO: 504 ) GSGGGGS (SEQ ID NO: 635) - Fc (SEQ ID NO: 637) variant ICOSL (SEQ ID NO: 548) - 3x GGGGS (SEQ ID NO: 228) - variant NKp30 (SEQ ID NO: 504) - 3x GGGGS (SEQ ID NO: 228) - variant NKp30 (SEQ ID NO: 504) GSGGGGS (SEQ ID NO: 635) - Fc (SEQ ID NO: 637) ICOSL/NKp30 Стек 3 ICOSL/NKp30 Stack 3 916 (915) 916 (915) вариант ICOSL (SEQ ID NO: 567) - 3x GGGGS (SEQ ID NO: 228) - вариант NKp30 (SEQ ID NO: 504) - GSGGGGS (SEQ ID NO: 635) - Fc (SEQ ID NO: 637) variant ICOSL (SEQ ID NO: 567) - 3x GGGGS (SEQ ID NO: 228) - variant NKp30 (SEQ ID NO: 504) - GSGGGGS (SEQ ID NO: 635) - Fc (SEQ ID NO: 637) ICOSL/NKp30 Стек 4 ICOSL/NKp30 Stack 4 918 (917) 918 (917) вариант ICOSL (SEQ ID NO: 567) - 3x GGGGS (SEQ ID NO: 228) - вариант NKp30 (SEQ ID NO: 504 ) - 3x GGGGS (SEQ ID NO: 228) - вариант NKp30 (SEQ ID NO: 504 ) GSGGGGS (SEQ ID NO: 635) - Fc (SEQ ID NO: 637) variant ICOSL (SEQ ID NO: 567) - 3x GGGGS (SEQ ID NO: 228) - variant NKp30 (SEQ ID NO: 504) - 3x GGGGS (SEQ ID NO: 228) - variant NKp30 (SEQ ID NO: 504) GSGGGGS (SEQ ID NO: 635) - Fc (SEQ ID NO: 637) ICOSL/NKp30 Стек 5 ICOSL/NKp30 Stack 5 920 (919) 920 (919) вариант ICOSL (SEQ ID NO: 565) - 3x GGGGS (SEQ ID NO: 228) - вариант NKp30 (SEQ ID NO: 504) - GSGGGGS (SEQ ID NO: 635) - Fc (SEQ ID NO: 637) variant ICOSL (SEQ ID NO: 565) - 3x GGGGS (SEQ ID NO: 228) - variant NKp30 (SEQ ID NO: 504) - GSGGGGS (SEQ ID NO: 635) - Fc (SEQ ID NO: 637) ICOSL/NKp30 Стек 6 ICOSL/NKp30 Stack 6 922 (921) 922 (921) вариант ICOSL (SEQ ID NO: 565) - 3x GGGGS (SEQ ID NO: 228) - вариант NKp30 (SEQ ID NO: 504) - 3x GGGGS (SEQ ID NO: 228) - вариант NKp30 (SEQ ID NO: 504) GSGGGGS (SEQ ID NO: 635) - Fc (SEQ ID NO: 637) variant ICOSL (SEQ ID NO: 565) - 3x GGGGS (SEQ ID NO: 228) - variant NKp30 (SEQ ID NO: 504) - 3x GGGGS (SEQ ID NO: 228) - variant NKp30 (SEQ ID NO: 504) GSGGGGS (SEQ ID NO: 635) - Fc (SEQ ID NO: 637) ICOSL/NKp30 Стек 7 ICOSL/NKp30 Stack 7 924 (923) 924 (923) вариант ICOSL (SEQ ID NO: 761) - 3x GGGGS (SEQ ID NO: 228) - вариант NKp30 (SEQ ID NO: 504) - GSGGGGS (SEQ ID NO: 635) - Fc (SEQ ID NO: 637) variant ICOSL (SEQ ID NO: 761) - 3x GGGGS (SEQ ID NO: 228) - variant NKp30 (SEQ ID NO: 504) - GSGGGGS (SEQ ID NO: 635) - Fc (SEQ ID NO: 637) ICOSL/NKp30 Стек 8 ICOSL/NKp30 Stack 8 926 (925) 926 (925) вариант ICOSL (SEQ ID NO: 761) - 3x GGGGS (SEQ ID NO: 228) - вариант NKp30 (SEQ ID NO: 504) - 3x GGGGS (SEQ ID NO: 228) - вариант NKp30 (SEQ ID NO: 504) GSGGGGS (SEQ ID NO: 635) - Fc (SEQ ID NO: 637) variant ICOSL (SEQ ID NO: 761) - 3x GGGGS (SEQ ID NO: 228) - variant NKp30 (SEQ ID NO: 504) - 3x GGGGS (SEQ ID NO: 228) - variant NKp30 (SEQ ID NO: 504) GSGGGGS (SEQ ID NO: 635) - Fc (SEQ ID NO: 637)

Пример 32.Example 32.

Оценка связывания с клеточно-экспрессированными контрструктурами и биологической активности доменных молекул, содержащих ICOSL и NKp30.Assessment of binding to cell-expressed counterstructures and biological activity of domain molecules containing ICOSL and NKp30.

В этом примере описаны исследования связывания, чтобы показать специфичность и аффинность типичных иммуномодулирующих белков стека ICOSL/NKp30, полученных в примере 31 для когнатных партнеров по связыванию. Типичные иммуномодулирующие белки стека ICOSL/NKp30, полученные в примере 31, также были оценены для определения характеристик биологической активности в первичных T-клетках человека в анализе in vitro.This example describes binding studies to demonstrate the specificity and affinity of the representative immunomodulatory proteins of the ICOSL/NKp30 stack obtained in Example 31 for cognate binding partners. Representative immunomodulatory ICOSL/NKp30 stack proteins obtained in Example 31 were also evaluated to determine bioactivity patterns in primary human T cells in an in vitro assay.

A. Связывание с контрструктурами, экспрессируемыми клетками.A. Binding to counterstructures expressed by cells.

Исследования связывания стека ICOSL/NKp30 проводили на клетках со стабильной или транзиторной экспрессией на клеточной поверхности когнатных партнеров связывания, специфичных для иммуномодулирующих белков с вариантным доменом ICOSL или NKp30-Fc.ICOSL/NKp30 stack binding studies were performed on cells with stable or transient cell surface expression of cognate binding partners specific for the ICOSL variant domain immunomodulatory proteins or NKp30-Fc.

Для оценки связывания с партнером по связыванию вариантных доменов ICOSL были использованы клетки яичника китайского хомячка (CHO), которые были трансдуцированы лентивирусом для поверхностной экспрессии полноразмерных CD28, CTLA-4 или ICOS человека.To evaluate binding partner binding of variant ICOSL domains, Chinese hamster ovary (CHO) cells were used that were transduced with lentivirus to surface express full-length human CD28, CTLA-4, or ICOS.

Для получения клеток, экспрессирующих когнатный партнер связывания для NKp30, полноразмерную конструкцию для поверхностной экспрессии у млекопитающих, содержащую человеческий B7-H6, клонировали в экспрессирующий вектор pcDNA3.1 (Life Technologies). Исследования связывания проводились с использованием системы транзиторной трансфекции Expi293F (Life Technologies, США). Вкратце, для 30 мл трансфекции приблизительно 75 миллионов клеток Expi293F инкубировали с 30 мкг экспрессирующей ДНК-конструкции и разведенным 1,5 мл реагентом ExpiFectamine 293 в течение 48 ч, после чего клетки собирали для окрашивания.To generate cells expressing the cognate binding partner for NKp30, a full-length mammalian surface expression construct containing human B7-H6 was cloned into the pcDNA3.1 expression vector (Life Technologies). Binding studies were performed using the Expi293F transient transfection system (Life Technologies, USA). Briefly, for 30 ml transfection, approximately 75 million Expi293F cells were incubated with 30 μg of expression DNA construct and diluted 1.5 ml ExpiFectamine 293 reagent for 48 h, after which the cells were collected for staining.

Для анализа проточной цитометрией 200000 клеток данной стабильной клеточной линии, транзиторной трансфекции или соответствующего отрицательного контроля высевали в 96-луночные круглодонные планшеты. Клетки центрифугировали и суспендировали в буфере для окрашивания (PBS (фосфатно-солевой буферный раствор), 1% BSA (бычий сывороточный альбумин) и 0,1% азида натрия) в течение 20 мин для блокирования неспецифического связывания. После этого клетки снова центрифугировали и суспендировали в окрашивающем буфере, содержащем от 100 нМ до 32 пМ стека ICOSL/NKp30 или контрольного белка в 50 мкл. Первичное окрашивание проводили в течение 45 мин, затем дваждыFor flow cytometry analysis, 200,000 cells of a given stable cell line, transient transfection, or corresponding negative control were seeded in 96-well round-bottom plates. Cells were centrifuged and suspended in staining buffer (PBS, 1% BSA, and 0.1% sodium azide) for 20 min to block nonspecific binding. Cells were then centrifuged again and suspended in staining buffer containing 100 nM to 32 pM ICOSL/NKp30 stack or control protein in 50 μl. Primary staining was carried out for 45 minutes, then twice

- 194 044346 промывали клетки в буфере для окрашивания. Связанный белок детектировали с PE-конъюгированным античеловеческим IgG (Jackson ImmunoResearch, США), разведенным 1:150 в 50 мкл окрашивающего буфера, и инкубировали в течение 30 мин. После заключительной инкубации клетки дважды промывали для удаления несвязанных конъюгированных антител, фиксировали в 2% формальдегиде/PBS и анализировали на проточном цитометре LSRII (Becton Dickinson, США). Среднюю интенсивность флуоресценции (MFI) рассчитывали для каждого образца с помощью программного обеспечения FlowJo Version 10 (FlowJo LLC, США).- 194 044346 cells were washed in staining buffer. Bound protein was detected with PE-conjugated anti-human IgG (Jackson ImmunoResearch, USA) diluted 1:150 in 50 μl of staining buffer and incubated for 30 min. After the final incubation, cells were washed twice to remove unbound conjugated antibodies, fixed in 2% formaldehyde/PBS and analyzed on an LSRII flow cytometer (Becton Dickinson, USA). Mean fluorescence intensity (MFI) was calculated for each sample using FlowJo Version 10 software (FlowJo LLC, USA).

Связывающую активность, измеренную с помощью MFI, оценивали для всех гибридных белков ICOSL-NKp30 Fc или контролей. Как показано на фиг. 25A-25D, типичные стековые белки связывают когнатные белки как ICOSL, так и NKp30 с высокой аффинностью.Binding activity measured by MFI was assessed for all ICOSL-NKp30 Fc fusion proteins or controls. As shown in FIG. 25A-25D, typical stack proteins bind both ICOSL and NKp30 cognate proteins with high affinity.

B. Оценка биоактивности молекул, содержащих домен IgSF со зрелой аффинностью.B. Assessment of the bioactivity of molecules containing an affinity mature IgSF domain.

Биологическую активность растворимого стекового белка ICOSL/NKp30 тестировали в совместной культуре с клетками B7-H6+ для индукции продуцирования цитокинов в первичных T-клетках человека. Клетки K562, которые эндогенно экспрессируют B7-H6, трансдуцировали лентивирусом для экспрессии одноцепочечного анти-CD3 Fv человека (OKT3) на клеточной поверхности с получением мишеней K562/OTK3. Первичные T-клетки человека совместно культивировали при соотношении эффектор/мишень (E:T) 2,5 или 10:1 со стеком ICOSL/Nkp30 или контрольными белками, титрованными от 100 нМ до 49 пМ в конечном объеме 200 мкл среды Ex-Vivo 15. На 3-5 день анализ прекращали и культуральные надосадочные жидкости тестировали с использованием наборов ELISA MAX для IL-2 и TNFальфа (Biolegend, США) Оптическую плотность измеряли на мультирежимном ридере для микропланшетов BioTek Cytation (BioTek Corp., США) и определяли по титрованным стандартам rIL-2 и rTNF-альфа, включенным в наборы ELISA.The biological activity of the soluble ICOSL/NKp30 stack protein was tested in co-culture with B7-H6+ cells to induce cytokine production in primary human T cells. K562 cells, which endogenously express B7-H6, were transduced with lentivirus to express human single-chain anti-CD3 Fv (OKT3) on the cell surface to generate K562/OTK3 targets. Primary human T cells were cocultured at an effector/target (E:T) ratio of 2.5 or 10:1 with ICOSL/Nkp30 stack or control proteins titrated from 100 nM to 49 pM in a final volume of 200 μl Ex-Vivo 15 media On days 3-5, the assay was stopped and culture supernatants were tested using ELISA MAX kits for IL-2 and TNFalpha (Biolegend, USA) Optical density was measured on a BioTek Cytation multimode microplate reader (BioTek Corp., USA) and determined from titrated rIL-2 and rTNF-alpha standards included in the ELISA kits.

Результаты исследований биоактивности примерных протестированных стековых белков ICOSL/NKp30 показаны на фиг. 26A и 26B, где приведены рассчитанные уровни IL-2 или IFN-гамма в культуральных надосадочных жидкостях (пг/мл). Идентификатор последовательности (SEQ ID NO) для каждого стекового белка представлен на фиг. 26A и 26B. Инкубация в присутствии примерных стековых белков ICOSL/NKp30 в этом анализе приводила к повышенным уровням индукции B7-H6-зависимого цитокина в первичных T-клетках человека, что демонстрируется увеличением выработки цитокинов с помощью стеков ICOSL/NKp30 по сравнению только с родительскими белками ICOSL или NKp30.Results from bioactivity studies of exemplary ICOSL/NKp30 stack proteins tested are shown in FIG. 26A and 26B, which show the calculated levels of IL-2 or IFN-gamma in culture supernatants (pg/ml). The sequence identifier (SEQ ID NO) for each stacked protein is presented in FIG. 26A and 26B. Incubation in the presence of exemplary ICOSL/NKp30 stack proteins in this assay resulted in increased levels of B7-H6-dependent cytokine induction in primary human T cells, as demonstrated by increased cytokine production by ICOSL/NKp30 stacks compared to parental ICOSL or NKp30 proteins alone .

C. Оценка пролиферации.C. Assessment of proliferation.

Была также охарактеризована пролиферация T-клеток человека, совместно культивированных со стековыми белками ICOSL/NKp30 и клетками B7-H6+. Меченные CFSE первичные T-клетки человека стимулировали в течение 3-5 дней с помощью K562/OKT3 в соотношении E:T от 2,5 до 10:1 в присутствии стековых белков ICOSL/NKp30 или контрольных белков. Примерные стековые белки ICOSL/NKp30 титровали от 100 нМ до 49 пМ в 200 мкл конечного объема среды Ex-Vivo 15. Пролиферацию измеряли с помощью проточной цитометрии при разведении CFSE на окрашенных CD4+ или CD8+ T-клетках с использованием проточного цитометра LSRII и программного обеспечения Flowjo, как описано выше.The proliferation of human T cells cocultured with ICOSL/NKp30 stack proteins and B7-H6+ cells was also characterized. CFSE-labeled primary human T cells were stimulated for 3 to 5 days with K562/OKT3 at E:T ratios of 2.5 to 10:1 in the presence of ICOSL/NKp30 stack proteins or control proteins. ICOSL/NKp30 exemplary stack proteins were titrated from 100 nM to 49 pM in a 200 μl final volume of Ex-Vivo 15 medium. Proliferation was measured by flow cytometry at CFSE dilution on stained CD4+ or CD8+ T cells using an LSRII flow cytometer and Flowjo software , as described above.

Как показано на фиг. 27, примерные протестированные стековые белки ICOSL/NKp30 стимулировали пролиферацию первичных CD4+ T-клеток человека зависимым от B7H6 способом, демонстрируемый увеличением пролиферации стека ICOSL/NKp30 по сравнению только с родительскими белками ICOSL или NKp30.As shown in FIG. 27, exemplary ICOSL/NKp30 stack proteins tested stimulated the proliferation of primary human CD4+ T cells in a B7H6-dependent manner, demonstrated by increased proliferation of the ICOSL/NKp30 stack compared to parental ICOSL or NKp30 proteins alone.

Пример 33.Example 33.

Оценка комбинации стековых молекул, содержащих домены ICOSL и NKp30 и анти-PD-1 антитела в опухолевой модели.Evaluation of a combination of stack molecules containing ICOSL and NKp30 domains and anti-PD-1 antibodies in a tumor model.

В этом примере описывается оценка противоопухолевой активности примерных стековых белков ICOSL/NKp30, полученных, как описано в примере 31, оцениваемых отдельно или в комбинации с моноклональным антителом против PD-1 мыши (mAD-1 mAb) у мышей, несущих клетки карциномы толстой кишки B7-H6 + CT26.This example describes the evaluation of the antitumor activity of exemplary ICOSL/NKp30 stack proteins, prepared as described in Example 31, evaluated alone or in combination with a mouse anti-PD-1 monoclonal antibody (mAD-1 mAb) in mice bearing B7 colon carcinoma cells -H6 + CT26.

Мышам имплантировали подкожно приблизительно 0,3x105 опухолевых клеток B7-H6 + CT26. Опухоли выращивали до 13 дня, у мышей определяли стадию, и измеряли средние объемы опухолей (от 80 до 120 мм3). Опухоли измеряли в двух измерениях электронными штангенциркулями, начиная с 6 дня после имплантации опухолевых клеток. Объем опухоли измеряли и определяли средний объем опухоли. Три мыши ну группу с наименьшими исходными опухолями (~ 75 мм3) исключили из анализа.Mice were implanted subcutaneously with approximately 0.3x105 B7-H6 + CT26 tumor cells. Tumors were grown until day 13, mice were staged, and mean tumor volumes were measured (80 to 120 mm 3 ). Tumors were measured in two dimensions with electronic calipers starting 6 days after tumor cell implantation. Tumor volume was measured and the mean tumor volume was determined. Three mice in the group with the smallest initial tumors (~75 mm 3 ) were excluded from the analysis.

Как показано на фиг. 28, комбинация тестируемого стекового белка ICOSL/NKp30 и mAb mPD-1 значительно снижала рост опухоли (средние объемы опухоли) с течением времени по сравнению с группами, получавшими контроль Fc, либо только ICOSL или NKp30, только стек ICOSL/NKp30, либо только анти-PD-1 mAb мыши. Различий в росте какой-либо группе обработки с родительскими опухолями CT26 (B7-H6-негативными) обнаружено не было. Противоопухолевая активность комбинации, как показано на фиг. 28 согласуется с выводом о том, что комбинация протестированного стекового белка ICOSL/NKp30 и анти-PD-1 антитела лучше, чем индивидуальные реагенты в отдельности.As shown in FIG. 28, the combination of the tested ICOSL/NKp30 stack protein and mPD-1 mAb significantly reduced tumor growth (mean tumor volumes) over time compared to groups receiving Fc control, either ICOSL or NKp30 alone, ICOSL/NKp30 stack only, or anti -mouse PD-1 mAb. There were no differences in growth of any treatment group with parental CT26 (B7-H6-negative) tumors. The antitumor activity of the combination as shown in FIG. 28 is consistent with the finding that the combination of the tested ICOSL/NKp30 stack protein and anti-PD-1 antibody is superior to the individual reagents alone.

Пример 34.Example 34.

Оценка дозирования и эффектов in vivo гибридных молекул ICOSL IgV-Fc на модели CIA.Evaluation of dosing and in vivo effects of ICOSL IgV-Fc hybrid molecules in a CIA model.

- 195 044346- 195 044346

Вариантные гибридные молекулы ICOSL IgV-Fc оценивали на противовоспалительную активность в модели коллаген-индуцированного артрита (CIA) с профилактическим или терапевтическим дозированием. Вариантную гибридную молекулу ICOSL IgV-Fc дозировали максимум 4 раза или до, или сразу после начала заболевания. Тестируемая вариантная гибридная молекула ICOSL IgV-Fc содержала вариантный ICOSL IgV с N52H/N57Y/Q100P, представленный в SEQ ID NO: 570, или N52H/N57Y/Q100R, представленный в SEQ ID NO: 565, слитый с инертным Fc (содержащим мутации L234A, L235E и L235E в Fc IgG1 человека, например, представленном в SEQ ID NO: 637).Variant IgV-Fc fusion molecules ICOSL were evaluated for anti-inflammatory activity in a collagen-induced arthritis (CIA) model with prophylactic or therapeutic dosing. The ICOSL IgV-Fc variant fusion molecule was dosed a maximum of 4 times either before or immediately after disease onset. The variant ICOSL IgV-Fc fusion molecule tested contained a variant ICOSL IgV with N52H/N57Y/Q100P, shown in SEQ ID NO: 570, or N52H/N57Y/Q100R, shown in SEQ ID NO: 565, fused to an inert Fc (containing the L234A mutations , L235E and L235E in human IgG1 Fc, for example, presented in SEQ ID NO: 637).

Для индукции воспаления суставов мышам вводили в день -18 или -21 день эмульсию коллагена II/CFA кур или коров в хвост и эмульсию коллагена II/IFA кур или коров (буст) в день 0. Для профилактического введения мышам вводили вариантную гибридную молекулу ICOSL IgV-Fc (N52H/N57Y/Q100P) четырьмя дозами, начиная со дня буста, до начала заболевания. Для терапевтической обработки/обработки с замеделнным высвобождением мышам вводили вариантную гибридную молекулу ICOSL IgV-Fc (N52H/N57Y/Q100R), когда наблюдаемый балл лапы была больше единицы, и введение дозы происходило каждые два дня в общей сложности четыре дозы. В качестве контроля были также протестированы только молекулы Fc и молекула CTLA-4-Fc (абатацепт). Балл лапы определяли на основании покраснения или отека. Сыворотку также собирали для измерения антител против коллагена (CII IgG) и провоспалительных цитокинов IL-6 и TNFa. Клетки из дренирующих лимфатических узлов собирали, окрашивали на CD4, CD8, CD44 или маркеры фолликулярных T-клеток-хелперов (TFH) (CD25-CD4+PD-1+CXCR5+). На фиг. 29A-29D показаны результаты для профилактического дозирования. У мышей, получавших вариантную гибридную молекулу ICOSL IgV-Fc при профилактической обработке, было выявлено подавленное заболевание в модели ревматоидного артрита у мышей CIA, о чем свидетельствует более низкий средний суммарный балл лапы (фиг. 29A), и уменьшенный сниженный IgG CII (фиг. 29B). * p<0,05 для ICOSL IgV-Fc относительно абатацепта ** p<0,001 ICOSL IgV-Fc относительно PBS (с помощью двухфакторного дисперсионного анализа с повторными измерениями). Более низкие уровни сывороточных цитокинов (фиг. 29C) и CD44+ активированных T-клеток или TFH-клеток (фиг. 29D) также наблюдали у мышей, получавших вариантную гибридную молекулу ICOSL IgV-Fc, по сравнению с контролем Fc; * p<0,05, ** p<0,01, *** p<0,001, **** p<0,0001 (с помощью однофакторного дисперсионного анализа). Фракция B-клеток в дренирующем лимфатическом узле также значительно снижалась в группе, получавшей ICOSL IgV-Fc, по сравнению с контрольной группой Fc (p<0,05) (фиг. 29E).To induce joint inflammation, mice were injected on day -18 or -21 with chicken or bovine collagen II/CFA emulsion in the tail and chicken or bovine collagen II/IFA emulsion (boost) on day 0. For prophylactic administration, mice were injected with a variant hybrid molecule ICOSL IgV -Fc (N52H/N57Y/Q100P) in four doses, starting from the day of the boost until the onset of the disease. For therapeutic/sustained-release treatment, mice were administered the ICOSL IgV-Fc variant fusion molecule (N52H/N57Y/Q100R) when the observed paw score was greater than one, and dosing occurred every two days for a total of four doses. As a control, only Fc molecules and the CTLA-4-Fc molecule (abatacept) were also tested. The paw score was determined based on redness or swelling. Serum was also collected to measure anti-collagen antibodies (CII IgG) and pro-inflammatory cytokines IL-6 and TNFa. Cells from draining lymph nodes were collected and stained for CD4, CD8, CD44, or follicular T helper (TFH) cell markers (CD25-CD4+PD-1+CXCR5+). In fig. 29A-29D show results for prophylactic dosing. Mice treated with the ICOSL IgV-Fc variant fusion molecule prophylactically showed suppressed disease in the CIA mouse model of rheumatoid arthritis, as evidenced by a lower mean paw total score (FIG. 29A), and reduced decreased CII IgG (FIG. 29B). * p<0.05 for ICOSL IgV-Fc versus abatacept ** p<0.001 ICOSL IgV-Fc versus PBS (by two-way repeated measures ANOVA). Lower levels of serum cytokines (FIG. 29C) and CD44+ activated T cells or TFH cells (FIG. 29D) were also observed in mice treated with the ICOSL IgV-Fc variant fusion molecule compared to Fc controls; * p<0.05, ** p<0.01, *** p<0.001, **** p<0.0001 (using one-way ANOVA). The B cell fraction in the draining lymph node was also significantly reduced in the ICOSL IgV-Fc group compared to the Fc control group (p<0.05) (FIG. 29E).

Фиг. 30A-30D показывают результаты для дозировки с замедленным высвобождением. Вариант ICOSL-IgV Fc приводил к наименьшему среднему значению среднего суммарного балла лапы (фиг. 30A) и наибольшему процентному изменению массы тела (фиг. 30B) по сравнению с другими группами, включая контрольный абатацепт. Как показано на фиг. 30C и фиг. 30D, сывороточные цитокины также подавлялись в терапевтической модели CIA у мышей, которых обрабатывали вариантом ICOS IgV-Fc. Статистическая значимость между группами: * p<0,05; ** p<0,01; *** p<0,001 по критерию Стьюдента для одной выборки. На фиг. 30C и фиг. 30D пунктирные горизонтальные линии показывают нижний предел количественного определения (LLOQ) для каждого цитокина.Fig. 30A-30D show results for sustained release dosage. The ICOSL-IgV Fc variant resulted in the lowest mean paw total score (FIG. 30A) and the largest percentage change in body weight (FIG. 30B) compared to the other groups, including the abatacept control. As shown in FIG. 30C and FIG. 30D, serum cytokines were also suppressed in a therapeutic model of CIA in mice treated with the ICOS IgV-Fc variant. Statistical significance between groups: * p<0.05; **p<0.01; *** p<0.001 by Student's one-sample t test. In fig. 30C and FIG. 30D dashed horizontal lines indicate the lower limit of quantitation (LLOQ) for each cytokine.

Вместе эти данные свидетельствуют о том, что пути CD28 и ICOS играют важную роль при воспалительном артрите. В частности, превосходная активность вариантного ICOSL двойного антагониста CD28/ICOS согласуется с наблюдением о том, что необходима блокада обоих путей и что только частичная блокировка приводит только к частичному преимуществу.Together, these data suggest that the CD28 and ICOS pathways play important roles in inflammatory arthritis. In particular, the superior activity of the variant CD28/ICOS dual antagonist ICOSL is consistent with the observation that blockade of both pathways is required and that only partial blockade results in only partial benefit.

Пример 35.Example 35.

Оценка in vivo эффектов гибридных молекул ICOSL IgV-Fc на модели EAE.In vivo assessment of the effects of ICOSL IgV-Fc hybrid molecules in an EAE model.

Вариантную гибридную молекулу ICOSL IgV-Fc оценивали на противовоспалительную активность в модели адоптивного переноса экспериментального аутоиммунного энцефаломиелита (EAE). Тестируемая вариантная гибридная молекула ICOSL IgV-Fc включает вариантный ICOSL IgV (N52H/N57Y/Q100R; SEQ ID NO: 565), слитый с инертным Fc (содержащим мутации L234A, L235E и L235E в Fc IgG1 человека).A variant IgV-Fc fusion molecule ICOSL was evaluated for anti-inflammatory activity in an adoptive transfer model of experimental autoimmune encephalomyelitis (EAE). The variant ICOSL IgV-Fc fusion molecule tested includes a variant ICOSL IgV (N52H/N57Y/Q100R; SEQ ID NO: 565) fused to an inert Fc (containing the L234A, L235E and L235E mutations in human IgG1 Fc).

Самкам мышей C57BL/6 подкожно инъецировали эмульсию MOG35-55/CFA. Через 11 дней клетки получали селезенки и культивировали с пептидом MOG35-55, IL-12 и анти-IFNy. Через три дня после культивирования энцефалитогенные T-клетки доставляли посредством внутрибрюшинной инъекции (день 0). Мышам вводили вариантную гибридную молекулу ICOSL IgV-Fc через день, начиная с дня 0, всего в количестве пяти доз. В качестве контроля были также протестированы молекулы Fc отдельно и молекула CTLA-4-Fc (абатацепт). В течение 20 дней после инъекции T-клеток мышей взвешивали, контролировали и оценивали на балл EAE, как описано в табл. 33. В конце исследования сыворотку собирали для анализа провоспалительных цитокинов, а клетки из дренирующих лимфатических узлов собирали для анализа проточной цитометрией.Female C57BL/6 mice were injected subcutaneously with MOG35-55/CFA emulsion. After 11 days, cells were obtained from spleens and cultured with MOG35-55 peptide, IL-12, and anti-IFNy. Three days after culture, encephalitogenic T cells were delivered via intraperitoneal injection (day 0). Mice were administered the ICOSL IgV-Fc variant fusion molecule every other day, starting on day 0, for a total of five doses. Fc molecules alone and the CTLA-4-Fc molecule (abatacept) were also tested as controls. For 20 days after T-cell injection, mice were weighed, monitored, and scored for EAE as described in Table 1. 33. At the end of the study, serum was collected for proinflammatory cytokine analysis, and cells from the draining lymph nodes were collected for flow cytometry analysis.

- 196 044346- 196 044346

Таблица 33 Балл EAETable 33 EAE Score

Балл Point Клинические наблюдения Clinical observations 0 0 Отсутствие явных изменений в двигательных функциях No obvious changes in motor functions 1 1 вялый хвост flaccid tail 2 2 вялый хвост и слабость задних ног flaccid tail and weak hind legs 3 3 Вялый хвост и полный паралич задних ног, ИЛИ вялый хвост с параличом одной передней и одной задней лапы, ИЛИ ВСЕ из: тяжелый тремор головы, 2) хотьба только по краям клетки, 3) толкание стенки клетки, 4) вращение, при удерживании за хвост. Limp tail and complete paralysis of the hind legs, OR limp tail with paralysis of one front and one hind leg, OR ALL of: severe head tremors, 2) walking only along the edges of the cage, 3) pushing against the cage wall, 4) spinning when held by the tail . 4 4 Вялый хвост, полный паралич задних ног или частичный передних Limp tail, complete paralysis of the hind legs or partial paralysis of the front legs 5 5 Полный паралич задних и полный паралич передних ног, отсутствие движения; ИЛИ мышь спонтанно кружится по клетке; ИЛИ мыши обнаруживаются мертвыми из-за паралича. Complete paralysis of the hind legs and complete paralysis of the front legs, lack of movement; OR the mouse spontaneously circles around the cage; OR mice are found dead due to paralysis.

Как показано на фиг. 31A, у мышей, обработанных вариантной гибридной молекулой ICOSL IgVFc, подавлялось заболевание в мышиной модели EAE, что подтверждено более низким показателем EAE, * p<0,0001 по однофакторному дисперсионному анализу площади под кривой (AUC); вариантная гибридная молекула ICOSL IgV-Fc по сравнению с контролем.As shown in FIG. 31A, mice treated with the ICOSL IgVFc variant fusion molecule suppressed disease in a mouse model of EAE, as demonstrated by lower EAE score, * p < 0.0001 by one-way analysis of variance area under the curve (AUC); variant ICOSL IgV-Fc hybrid molecule compared to control.

Для проточного цитометрического анализа T-клеток пахового лимфатического узла клетки окрашивали красителем для оценке жизнеспособности и анализировали с помощью анти-CD44, анти-CD62L, анти-CD4, анти-CD8 и оценивали процент жизнеспособных наивных (CD62L + CD44-) T-клеток и эффекторных T-клеток памяти (Tem) (CD62L-CD44+)CD4+ и CD8+. Как показано на фиг. 31С, CD4+ и CD8+ Tem клетки редуцировались при обработке гибридной молекулой ICOSL IgV-Fc (**** p<0,0001; *** p<0,001 по однофакторному дисперсионному анализу).For flow cytometric analysis of inguinal lymph node T cells, cells were stained with viability dye and analyzed with anti-CD44, anti-CD62L, anti-CD4, anti-CD8 and the percentage of viable naïve (CD62L + CD44 -) T cells and effector memory T cells (Tem) (CD62L-CD44+)CD4+ and CD8+. As shown in FIG. 31C, CD4+ and CD8+ Tem cells were reduced when treated with the ICOSL IgV-Fc hybrid molecule (**** p<0.0001; *** p<0.001 by one-way analysis of variance).

Цитокины сыворотки крови оценивали в День 0 (через 2 часа после 1 -й дозы) и в День 6 (за 1 час до 4-й дозы). Как показано на фиг. 31D, протестированная вариантная гибридная молекула ICOSL IgV-Fc приводит к снижению провоспалительных цитокинов в сыворотке крови в день 0, включая IL-5, IL-10, IL-12p70 и TNFa. На 6 день уровни IFN-гамма и IL-6 в сыворотке снижались при обработке вариантной гибридной молекулой ICOSL IgV-Fc по сравнению с контролем Fc.Serum cytokines were assessed on Day 0 (2 hours after 1st dose) and Day 6 (1 hour before 4th dose). As shown in FIG. 31D, the ICOSL IgV-Fc variant fusion molecule tested results in decreased serum proinflammatory cytokines at day 0, including IL-5, IL-10, IL-12p70, and TNFa. At day 6, serum IFN-γ and IL-6 levels were reduced by treatment with the ICOSL IgV-Fc variant fusion molecule compared with Fc control.

Пример 36.Example 36.

Исследование зависимости от дозы вариантного Fc ICOSL-IgV в модели трансплантат-противхозяина-болезнь (GvHD).Dose-response study of ICOSL-IgV Fc variant in a graft-versus-host-disease (GvHD) model.

Исследование диапазона дозирования проводили с 20, 100 или 500 мкг вариантной молекулы ICOSL IgV-Fc, содержащей вариантный ICOSL IgV (N52H/N57Y/Q100R; SEQ ID NO: 565), который слит с инертным Fc (содержащим мутации L234A, L235E и L235E в Fc IgG1 человека, например, как указано в SEQ ID NO: 637), на мышиной модели заболевания трансплантат против хозяина (GVHD). Активность вариантной молекулы ICOSL IgV-Fc сравнивали с белатацептом (CTLA-4-FcL104E/A29Y; публикация патентной заявки США № US2016/0271218).A dosage range study was performed with 20, 100, or 500 μg of a variant ICOSL IgV-Fc molecule containing a variant ICOSL IgV (N52H/N57Y/Q100R; SEQ ID NO: 565) that is fused to an inert Fc (containing the L234A, L235E, and L235E mutations in Human IgG1 Fc, for example as set forth in SEQ ID NO: 637), in a mouse model of graft-versus-host disease (GVHD). The activity of the variant ICOSL IgV-Fc molecule was compared with belatacept (CTLA-4-FcL104E/A29Y; US Patent Application Publication No. US2016/0271218).

Самкам мышей NSG (n=5 на группу для группы 1, без обработки; n=10 на группу для групп обработки 2-7) подкожно вводили 10 мг гамма-глобулина и затем облучали (100 сГр/рад) в день -1. В день 0 (в течение 24 ч после облучения) мышам в группах 2-7 вводили тестируемые изделия, как указано в табл. 34, и затем всем мышам после введения дозы вводили 1 х 107 человеческих PBMC, инъецированных в.в. через/в хвостовую вену.Female NSG mice (n=5 per group for group 1, no treatment; n=10 per group for treatment groups 2-7) were subcutaneously injected with 10 mg gamma globulin and then irradiated (100 cGy/rad) on day -1. On day 0 (within 24 hours after irradiation), mice in groups 2-7 were administered the test products, as indicated in Table. 34, and then all mice were post-dosed with 1 x 107 human PBMC injected i.v. through/into the tail vein.

Индекс активности заболевания (DAI) определяли путем оценки мышей три раза в неделю во время исследования и оценки заболевания на основе потери массы тела, осанки, активности, внешнего вида шерсти и кожи мышей. После прекращения исследования на 42 день, были оценены конечные показатели выживаемости, потери массы тела и активности заболевания. Были построены графики выживания Каплана-Мейера, представляющие процент выживших животных до конечной точки исследования, и сравнение кривых выживаемости анализировали с помощью тестов Мантеля-Кокса и Гехана-БреслоуУилкокса (95% CI). Образцы крови/сыворотки отбирали у выживших мышей в конце исследования (день 42) и клетки оценивали с помощью проточной цитометрии на маркеры T-клеток, включая маркеры мыши или человека, CD4, CD8, CD28, ICOS, маркеры активации или истощения (PD-1, Ki67) и FoxP3 (маркер Treg). Также оценивали уровни сывороточных провоспалительных цитокинов (например, IFN-гамма, IL10, IL-12 (p70), IL-17A, IL-4, IL-5 и TNFa).Disease Activity Index (DAI) was determined by assessing mice three times per week during the study and scoring disease based on body weight loss, posture, activity, and coat and skin appearance of the mice. After stopping the study at day 42, endpoints of survival, weight loss, and disease activity were assessed. Kaplan-Meier survival plots representing the percentage of animals surviving to the study endpoint were generated, and comparisons of survival curves were analyzed using Mantel-Cox and Gehan-Breslow-Wilcox tests (95% CI). Blood/serum samples were collected from surviving mice at the end of the study (day 42) and cells were assessed by flow cytometry for T cell markers, including mouse or human markers, CD4, CD8, CD28, ICOS, activation or exhaustion markers (PD-1 , Ki67) and FoxP3 (Treg marker). Serum levels of proinflammatory cytokines (eg, IFN-gamma, IL10, IL-12 (p70), IL-17A, IL-4, IL-5, and TNFa) were also assessed.

- 197 044346- 197 044346

Таблица 34 График дозированияTable 34 Dosing schedule

группа group N N Тестируемые изделия Products tested Доза (мкг) Dose (mcg) Объем дозы (мкл) Dose volume (µl) Путь Path Схема Scheme Начало дозирования Start of dosing 1 1 5 5 Без обработки No processing н/д n/a н/д n/a н/д n/a н/д n/a н/д n/a Выживание/DAI Survival/DAI 2 2 10 10 Солевой раствор Saline solution н/д n/a 100 100 в.б. v.b. 3 раза в неделю в течение 4 недель 3 times a week for 4 weeks День 0 Day 0 3 3 10 10 вариантный ICOSL IgV-Fc variant ICOSL IgV-Fc 500 500 100 100 в.б. v.b. 3 раза в неделю в течение 4 недель 3 times a week for 4 weeks День 0 Day 0 4 4 10 10 вариантный ICOSL IgV-Fc variant ICOSL IgV-Fc 100 100 100 100 в.б. v.b. 3 раза в неделю в течение 4 недель 3 times a week for 4 weeks День 0 Day 0 5 5 10 10 вариантный ICOSL IgV-Fc variant ICOSL IgV-Fc 20 20 100 100 в.б. v.b. 3 раза в неделю в течение 4 недель 3 times a week for 4 weeks День 0 Day 0 6 6 10 10 Белатацепт Belatacept 100 100 100 100 в.б. v.b. 3 раза в неделю в течение 4 недель 3 times a week for 4 weeks День 0 Day 0 РК/В ыжи ван ne//D АI RK/V yzhi van ne//D AI 7 7 9 9 вариантный ICOSL IgV-Fc variant ICOSL IgV-Fc 100 100 100 100 в.б. v.b. однократно День 1 once Day 1 День 1 Day 1

Фиг. 32A-32B показывают оценки выживаемости и DAI у мышей с GVHD, получавших лечение в соответствии с каждым режимом дозирования. Как показано, тестируемый вариантный ICOSL IgV-Fc (N52H/N57Y/Q100R) при всех тестируемых уровнях дозы значительно повышал выживаемость (фиг. 32A) и снижал показатели заболевания (фиг. 32B) по сравнению с мышами, получавшими белатацепт (т.е. 100% по сравнению с 40% выживаемости в день 42, соответственно; p<0,01 по лог-ранговому критерию МантеляКокса). Примечательно, что однократное (100 мкг) введение вариантного ICOSL IgV-Fc (N52H/N57Y/Q100R) приводило к такой же защите от заболевания, что и повторное введение 100 мкг белатацепта.Fig. 32A-32B show survival and DAI estimates in GVHD mice treated with each dosage regimen. As shown, the ICOSL IgV-Fc variant tested (N52H/N57Y/Q100R) at all dose levels tested significantly increased survival (Fig. 32A) and reduced disease scores (Fig. 32B) compared to belatacept-treated mice (i.e. 100% versus 40% survival at day 42, respectively; p < 0.01 by Mantel-Cox log-rank test). Notably, a single (100 μg) administration of the variant ICOSL IgV-Fc (N52H/N57Y/Q100R) resulted in the same protection against disease as repeated administration of 100 μg of belatacept.

Проточный цитометрический анализ крови, собранной в конце исследования, продемонстрировал, что тестируемый вариантный ICOSL IgV-Fc (N52H/N57Y/Q100R).Flow cytometric analysis of blood collected at the end of the study demonstrated that the ICOSL IgV-Fc variant tested (N52H/N57Y/Q100R).

эффективно подавлял размножение перенесенных T-клеток человека, что наблюдалось по уменьшенному соотношению клеток человека/клеток мыши (фиг. 33A) и значительно уменьшенному общему количеству T-клеток (фиг. 33B). Как показано на фиг. 33C-33F, проточная цитометрия крови, собранной в конце исследования CD4+ и CD8+ T-клеток, одновременно окрашенных по ICOS (фиг. 33C-33D) и CD28 (фиг. 33E-33F) продемонстрировала, по существу, отсутствие окрашивания в группах, обработанных вариантным ICOSL IgV-Fc (N52H/N57Y/Q100R), хотя CD4+ и CD8+ T-клетки, экспрессирующие ICOS, были легко обнаружимы у мышей, получавших белатацепт. Эти результаты согласуются с отсутствием T-клеток, остающихся у мышей, обработанных ICOSL IgV-Fc, а также со способностью вариантного ICOSL IgV-Fc (N52H/N57Y/Q100R) связывать молекулы-мишени CD28 и ICOS и блокировать их детекцию антителами проточной цитометрии. Связывание вариантного ICOSL IgV-Fc (N52H/N57Y/Q100R) с несколькими оставшимися T-клетками человека было подтверждено детекцией с использованием Fc против IgG человека. Примечательно, что хотя большинство перенесенных человеческих T-клеток первоначально экспрессировали CD28 и только 10-20% были ICOS+, активированные Tклетки, оставшиеся у мышей, получавших физиологический раствор или белатацепт, при завершении/в конце исследования составляли > 80% ICOS+.effectively suppressed the proliferation of transferred human T cells, as observed by a reduced human cell/mouse cell ratio (FIG. 33A) and a significantly reduced total number of T cells (FIG. 33B). As shown in FIG. 33C-33F, flow cytometry of blood collected at the end of the study of CD4+ and CD8+ T cells simultaneously stained for ICOS (FIGS. 33C-33D) and CD28 (FIGS. 33E-33F) demonstrated essentially no staining in the treatment groups variant ICOSL IgV-Fc (N52H/N57Y/Q100R), although CD4+ and CD8+ T cells expressing ICOS were readily detectable in belatacept-treated mice. These results are consistent with the lack of T cells remaining in mice treated with ICOSL IgV-Fc, as well as the ability of the variant ICOSL IgV-Fc (N52H/N57Y/Q100R) to bind target molecules CD28 and ICOS and block their detection by flow cytometry antibodies. Binding of the variant ICOSL IgV-Fc (N52H/N57Y/Q100R) to the few remaining human T cells was confirmed by detection using anti-human IgG Fc. Notably, although the majority of transferred human T cells initially expressed CD28 and only 10-20% were ICOS+, the activated T cells remaining in saline- or belatacept-treated mice at completion/end of the study were >80% ICOS+.

- 198 044346- 198 044346

Наличие маркеров активации или истощения T-клеток также подавлялось в группах, получавших вариантный ICOSL IgV-Fc (N52H/N57Y/Q100R), о чем свидетельствует более низкая экспрессия PD1 в CD4+ и CD8+ T-клетках и снижение экспрессии Ki67 в CD4+ T-клетках (фиг. 34A-3B). Отношение эффекторных T-клеток к Treg оставалось стабильным в группах, обработанных вариантным ICOSL IgV-Fc (N52H/N57Y/Q100R) по сравнению с белатацептом (фиг. 34C). Сывороточные провоспалительные цитокины также подавлялись в группах, получавших вариантный ICOSL IgV-Fc (N52H/N57Y/Q100R) по сравнению с белатацептом (фиг. 35A-35D).The presence of markers of T cell activation or exhaustion was also suppressed in groups treated with variant ICOSL IgV-Fc (N52H/N57Y/Q100R), as evidenced by lower PD1 expression in CD4+ and CD8+ T cells and decreased Ki67 expression in CD4+ T cells (Fig. 34A-3B). The ratio of effector T cells to Tregs remained stable in groups treated with variant ICOSL IgV-Fc (N52H/N57Y/Q100R) compared to belatacept (Figure 34C). Serum pro-inflammatory cytokines were also suppressed in the ICOSL IgV-Fc variant (N52H/N57Y/Q100R) treated groups compared to belatacept (Figures 35A-35D).

Также для мониторинга воздействия сывороточного варианта ICOSL IgV-Fc (N52H/N57Y/Q100R) проводили фармакокинетический (PK) анализ. Концентрации тестируемого изделия измеряли в образцах сыворотки мыши с помощью количественного PK-ELISA, используя захватывающее mAb антитело против ICOSL человека и Fc-специфические мышиные антитела против IgG человека в качестве детектирующего реагента.Pharmacokinetic (PK) analysis was also performed to monitor the effects of the serum ICOSL IgV-Fc variant (N52H/N57Y/Q100R). Test article concentrations were measured in mouse serum samples by quantitative PK-ELISA using anti-human ICOSL mAb capture antibody and Fc-specific mouse anti-human IgG antibody as the detection reagent.

Наблюдаемое сывороточное экспонирование вариантного ICOSL IgV-Fc (N52H/N57Y/Q100R) в модели GVHD было на 45% ниже, чем у нормальных мышей, определенных в отдельном исследовании (фиг. 35E). Более длительный период конечного полужизни вариантного ICOSL IgV-Fc (N52H/N57Y/Q100R) в модели GvHD может быть связан с уменьшением мишени (CD28, ICOS) в более поздние моменты времени при GvHD (когда исчезают T-клетки человека), и/или с образованием антител против лекарств (ADA) у нормальных мышей, которые могут мешать экспонированию лекарств. Наблюдение о том, что вариантный ICOSL IgV-Fc (N52H/N57Y/Q100R) имел более низкое сывороточное экспонирование по сравнению с нормальными мышами, может быть связано с мишень-опосредованным распределением лекарства (TMDD), в модели GvHD (т.е. его более высокая аффинность к CD28 и ICOS человека по сравнению с мышиными ортологами) и/или отсутствию FcRn у мышей NOD/SCID (NSG), используемых в этой модели.The observed serum exposure of the variant ICOSL IgV-Fc (N52H/N57Y/Q100R) in the GVHD model was 45% lower than in normal mice determined in a separate study (Fig. 35E). The longer terminal half-life of the variant ICOSL IgV-Fc (N52H/N57Y/Q100R) in the GvHD model may be due to target reduction (CD28, ICOS) at later time points in GvHD (when human T cells disappear), and/or with the formation of anti-drug antibodies (ADA) in normal mice, which may interfere with drug exposure. The observation that the variant ICOSL IgV-Fc (N52H/N57Y/Q100R) had lower serum exposure compared to normal mice may be due to target-mediated drug distribution (TMDD), in the GvHD model (i.e. higher affinity for human CD28 and ICOS compared to mouse orthologs) and/or lack of FcRn in the NOD/SCID (NSG) mice used in this model.

Вместе эти результаты согласуются с наблюдением, что вариантный ICOSL IgV-Fc (N52H/N57Y/Q100R) проявляет сильную антагонистическую активность, даже при использовании только одной дозы, и превосходную активность по сравнению с белатацептом. Это наблюдение может быть связано с вариантным ICOSL IgV-Fc (N52H/N57Y/Q100R), демонстрирующим превосходный контроль над ICOS+ T-клетками, которые иначе избегают одиночной блокады пути ICOS или CD28, такой как достигаемая белатацептом, антагонистом пути CD28.Together, these results are consistent with the observation that the IgV-Fc variant ICOSL (N52H/N57Y/Q100R) exhibits potent antagonistic activity, even when using only a single dose, and superior activity compared to belatacept. This observation may be due to the IgV-Fc variant ICOSL (N52H/N57Y/Q100R) demonstrating superior control of ICOS+ T cells that otherwise escape single blockade of the ICOS or CD28 pathway, such as that achieved by the CD28 pathway antagonist belatacept.

Пример 37.Example 37.

Оценка вариантного Fc ICOSL-IgV в модели колита, индуцированного CD4+CD45Rbhigh.Evaluation of variant ICOSL-IgV Fc in a CD4+CD45Rbhigh-induced colitis model.

Оценивали влияние примерного вариантного ICOSL IgV-Fc, содержащего вариантный ICOSL IgV (N52H/ N57Y/Q100R; SEQ ID NO: 565), слитый с инертным Fc (содержащим мутации L234A, L235E и L235E в Fc IgG1 человека, например, представлен в SEQ ID NO: 637) на развитие заболевания в модели колита, индуцированного CD4+CD45RBhigh.The effect of an exemplary variant ICOSL IgV-Fc containing a variant ICOSL IgV (N52H/N57Y/Q100R; SEQ ID NO: 565) fused to an inert Fc (containing the L234A, L235E and L235E mutations in the human IgG1 Fc, e.g. presented in SEQ ID) was assessed. NO: 637) on the development of the disease in the CD4+CD45RBhigh-induced colitis model.

Донорные клетки CD4+CD45RBhigh обогащали отрицательным отбором из суспензий клеток селезенки, полученных от 15 мышей-доноров BALB/C. В день 0 0,3 млн. CD4+CD25-CD45RBhigh (истощенных по Treg) донорных клеток инъецировали внутривенно мышам с дефицитом C.B17 (SCID) (n=12 или 21 на группу) для индукции колита. В качестве контроля 0,3 миллиона CD4+ клеток (содержащих клетки Treg), которые не вызывают развитие колита в этой модели, инъецировали реципиентам мышей SCID (n=12). В день переноса клеток мышам в каждой группе вводили вариантный ICOSL-IgV Fc или только Fc или контроли-носители. В табл. 35 приведены схемы лечения для тестируемых групп.Donor CD4+CD45RBhigh cells were enriched by negative selection from spleen cell suspensions obtained from 15 BALB/C donor mice. On day 0, 0.3 million CD4+CD25-CD45RBhigh (Treg-depleted) donor cells were injected intravenously into C.B17-deficient (SCID) mice (n=12 or 21 per group) to induce colitis. As a control, 0.3 million CD4+ cells (containing Treg cells), which do not cause colitis in this model, were injected into recipient SCID mice (n=12). On the day of cell transfer, mice in each group were injected with variant ICOSL-IgV Fc or Fc alone or vehicle controls. In table 35 shows treatment regimens for the tested groups.

Таблица 35 Схемы леченияTable 35 Treatment regimens

группа group # мыши # mice Клеток инъецировано Cells injected Обработка Treatment Доза Dose Путь Path Частота Frequency 1 1 12 12 CD4+ CD4+ PBS (стерильный) PBS (sterile) - - в.б. v.b. Зх/в неделю (Понедельник, Среда, Пятница) 3x/week (Monday, Wednesday, Friday) 2 2 12 12 CD4+CD45RBhigh CD4+CD45RBhigh PBS (стерильный) PBS (sterile) - - в.б. v.b. Зх/в неделю (Понедельник, Среда, Пятница) 3x/week (Monday, Wednesday, Friday) 3 3 21 21 CD4+CD45RBhigh CD4+CD45RBhigh Fc-контроль Fc control 300 мкг 300 mcg в.б. v.b. Зх/в неделю (Понедельник, Среда, Пятница) 3x/week (Monday, Wednesday, Friday) 5 5 12 12 CD4+CD45RBhigh CD4+CD45RBhigh вариантный ICOSL IgVFc variant ICOSL IgVFc 400 мкг 400 mcg в.б. v.b. Зх/в неделю (Понедельник, Среда, Пятница) 3x/week (Monday, Wednesday, Friday)

- 199 044346- 199 044346

Массу тела (измеряемую начиная с 0 дня) и показатель консистенции стула (измеряемый начиная с 10 дня) оценивали три раза в неделю. Суточный индекс активности заболевания (DAI) рассчитывали по баллам массе тела и стула. После того как исследование было прекращено в день 42, собирали толстую кишку для определения длины и массы и гистологического анализа. Статистический анализ конечной массы тела и конечной массы и длины толстой кишки оценивали для группы вариантного ICOSL-IgV Fc относительно группы носителя с использованием двустороннего критерия Стьюдента. Баллы стула и DAI сравнивались с использованием непараметрического T-критерия Уилкоксона.Body weight (measured from day 0) and stool consistency index (measured from day 10) were assessed three times a week. Daily disease activity index (DAI) was calculated from body and stool weight scores. After the study was terminated on day 42, colons were collected for length and weight determination and histological analysis. Statistical analysis of final body weight and final colon weight and length were assessed for the ICOSL-IgV Fc variant group relative to the vehicle group using a two-tailed Student's t test. Stool scores and DAI were compared using the nonparametric Wilcoxon T test.

Результаты DAI показаны в табл. 36 (DAI) и на фиг. 36A, в табл. 37 показаны измерения толстой кишки, а результаты гистологии толстой кишки показаны в табл. 38 и на фиг. 36B. Как показано, протестированный вариантный ICOSL IgV-Fc (N52H/N57Y/Q100R) демонстрировал значительно сниженное развитие колита в этой модели, что согласуется с полезностью этого двойного антагониста CD28/ICOS для эффективного лечения воспалительного заболевания кишечника (IBD).The DAI results are shown in Table. 36 (DAI) and in FIG. 36A, in table. 37 shows measurements of the colon, and the results of colon histology are shown in Table. 38 and in fig. 36B. As shown, the IgV-Fc variant ICOSL tested (N52H/N57Y/Q100R) demonstrated significantly reduced development of colitis in this model, consistent with the utility of this dual CD28/ICOS antagonist for the effective treatment of inflammatory bowel disease (IBD).

Таблица 36Table 36

Оценка активности заболеванияAssessment of disease activity

Обработка Treatment Конечный % массы тела +/- SD Final % body weight +/- SD рзначение value Конечный балл стула +/- SD Final Chair Score +/- SD рзначение value Конечный Балл DAI +/- SD Final Score DAI +/- SD рзначение value Колит не индуцируется/Носитель Colitis is not induced/carrier 112,3% +/3,9% 112.3% +/3.9% 0,3 +/- 0,5 0.3 +/- 0.5 0,3 +/- 0,5 0.3 +/- 0.5 Носитель Carrier 92,7% +/- 11,7% 92.7% +/- 11.7% <0,0001Л <0.0001 L 1,3 +/- 1,3 1.3 +/- 1.3 0,0016Л 0.0016 L 3,2 +/- 2,6 3.2 +/- 2.6 0,0003Л 0.0003 L Fc-контроль, 300 мкг Fc control, 300 µg 96,2% +/- 5,4% 96.2% +/- 5.4% 0,2656* 0.2656* 1,4+/- 1,4 1.4+/- 1.4 0,8836* 0.8836* 2,5 +/- 1,7 2.5 +/- 1.7 0,6948* 0.6948* ICOSL IgV-Fc (N52H/N57Y/Q100R), 400 мкг ICOSL IgV-Fc (N52H/N57Y/Q100R), 400 µg 109,6%+/4,0% 109.6%+/4.0% <0,0001- <0.0001- 0,1 +/- 0,3 0.1 +/- 0.3 0,0014- 0.0014- 0,1 +/- 0,3 0.1 +/- 0.3 <0,0001- <0.0001-

Л По сравнению с не индуцированным колитом/Носитель. L Compared with non-induced colitis/Vehicle.

* По сравнению с носителем.* Compared to the carrier.

~ По сравнению с Fc-контролем, 300 мкг.~ Compared to Fc control, 300 µg.

Таблица 37 Измерения толстой кишкиTable 37 Colon Measurements

Обработка Treatment Конечная масса толстой кишки (мг) +/- SD Final colon weight (mg) +/- SD рзначени е value Конечная длина толстой кишки (мм) +/- SD Final Colon Length (mm) +/- SD рзначен ие designated no Конечная масс а/длина толстой кишки +/- SD Final mass a/colon length +/- SD рзначение value Колит не индуцируется/Но ситель Colitis is not induced/But sitel 175,3 +/- 16,9 175.3 +/- 16.9 82,8 +/- 5,2 82.8 +/- 5.2 2,1 +/- 0,2 2.1 +/- 0.2 Носитель Carrier 323,1 +/78,0 323.1 +/78.0 <0,0001 <0.0001 77,7 +/- 7,5 77.7 +/- 7.5 0,0668Л 0.0668 L 4,2 +/- 1,2 4.2 +/- 1.2 <0,0001Л <0.0001 L Fc-контроль, 300 мкг Fc control, 300 µg 276,7 +/- 92,4 276.7 +/- 92.4 0,1602* 0.1602* 77,6 +/- 8,9 77.6 +/- 8.9 0,9911* 0.9911* 3,6 +/- 1,2 3.6 +/- 1.2 0,1843* 0.1843* ICOSL IgV-Fc (N52H/N57Y/Q100R), 400 мкг ICOSL IgV-Fc (N52H/N57Y/Q100R), 400 µg 160,8 +/- 24,4 160.8 +/- 24.4 0,0004- 0.0004- 79,4+/- 6,1 79.4+/- 6.1 0,5738- 0.5738- 2,0 +/- 0,3 2.0 +/- 0.3 0,0003- 0.0003-

л По сравнению с не индуцированным колитом/Носитель.l Compared with non-induced colitis/Vehicle.

* По сравнению с носителем.* Compared to the carrier.

~ По сравнению с Fc-контролем, 300 мкг.~ Compared to Fc control, 300 µg.

Таблица 38 Результаты гистологииTable 38 Histology results

Толстая кишка (swiss roll) Large intestine (swiss roll) группа group Клетка # Cell # Мышь # Mouse # Мышь ID# Mouse ID# Слизистая Mucous Подслизистая Submucosa Мышцы Muscles Общий балл Total score Колит не индуцируется/Носитель Colitis is not induced/carrier 1 1 1 1 1-1 1-1 0 0 0 0 0 0 0,0 0.0 2 2 1-2 1-2 0 0 0 0 0 0 0,0 0.0 3 3 1-3 1-3 0 0 0 0 0 0 0,0 0.0 4 4 1-4 1-4 0 0 0 0 0 0 0,0 0.0 2 2 1 1 2-1 2-1 1 1 1 1 0 0 2,0 2.0

- 200 044346- 200 044346

2 2 2-2 2-2 0 0 0 0 0 0 0,0 0.0 3 3 2-3 2-3 4 4 2-4 2-4 3 3 1 1 3-1 3-1 2 2 3-2 3-2 3 3 3-3 3-3 4 4 3-4 3-4 Среднее Average 0,2 0.2 0,2 0.2 0,0 0.0 0,2 0.2 Среднеквадратическое отклонение Standard deviation 0,4 0.4 0,4 0.4 0,0 0.0 0,4 0.4 SEM S.E.M. 0,2 0.2 0,2 0.2 0,0 0.0 0,2 0.2 Носитель Carrier 4 4 1 1 4-1 4-1 3 3 3 3 1 1 7,0 7.0 2 2 4-2 4-2 1 1 1 1 0 0 2,0 2.0 3 3 4-3 4-3 2 2 2 2 0 0 4,0 4.0 4 4 4-4 4-4 2 2 2 2 0 0 4,0 4.0 5 5 1 1 5-1 5-1 2 2 3 3 0 0 5,0 5.0 2 2 5-2 5-2 2 2 2 2 0 0 4,0 4.0 3 3 5-3 5-3 4 4 5-4 5-4 6а 6a 1 1 6а-1 6a-1 2 2 6а-2 6a-2 3 3 ба-3 ba-3 6Ь 6b 1 1 6Ь-1 6b-1 Среднее Average 2 2 2,2 2.2 0,2 0.2 2,0 2.0 Среднеквадратическое отклонение Standard deviation 0,6 0.6 0,8 0.8 0,4 0.4 0,6 0.6 SEM S.E.M. 0,3 0.3 о,з o, s 0,2 0.2 о,з o, s t-тест против Колит не индуцируется/Носитель t-test against Colitis not induced/Carrier 0,0001 0.0001 0,0002 0.0002 0,3409 0.3409 0,0001 0.0001 Fc-контроль, 300 мкг Fc control, 300 µg 6Ь 6b 2 2 6Ь-2 6b-2 2 2 1 1 0 0 з,о h,o 3 3 6Ь-3 6b-3 3 3 3 3 1 1 7,0 7.0 6с 6s 1 1 6с-1 6s-1 3 3 3 3 0 0 6,0 6.0 2 2 6с-2 6s-2 2 2 2 2 2 2 6,0 6.0 3 3 бс-3 BS-3 3 3 2 2 1 1 6,0 6.0 7 7 1 1 7-1 7-1 2 2 7-2 7-2 2 2 2 2 1 1 5,0 5.0 3 3 7-3 7-3 2 2 1 1 0 0 з,о h,o 4 4 7-4 7-4 2 2 3 3 0 0 5,0 5.0 8 8 1 1 8-1 8-1 2 2 1 1 0 0 з,о h,o 2 2 8-2 8-2 2 2 1 1 0 0 з,о h,o 3 3 8-3 8-3 4 4 8-4 8-4 1 1 1 1 0 0 2,0 2.0 9 9 1 1 9-1 9-1 2 2 9-2 9-2

- 201 044346- 201 044346

3 3 9-3 9-3 4 4 9-4 9-4 10 10 1 1 10-1 10-1 2 2 10-2 10-2 3 3 10-3 10-3 4 4 10-4 10-4 Среднее Average 2,2 2.2 1,8 1.8 0,5 0.5 2,2 2.2 Среднеквадратическое отклонение Standard deviation 0,6 0.6 0,9 0.9 0,7 0.7 0,6 0.6 SEM S.E.M. 0,2 0.2 о,з o, s 0,2 0.2 0,2 0.2 Т-тест против Носитель T-test vs. Carrier 0,5676 0.5676 0,4240 0.4240 0,3663 0.3663 0,5676 0.5676 ICOSL IgV -Fc (N52H/N57Y/Q100R), 400 мкг ICOSL IgV-Fc (N52H/N57Y/Q100R), 400 µg 14 14 1 1 14-1 14-1 0 0 0 0 0 0 о,о oh oh 2 2 14-2 14-2 0 0 0 0 0 0 о,о oh oh 3 3 14-3 14-3 0 0 0 0 0 0 о,о oh oh 4 4 14-4 14-4 0 0 0 0 0 0 о,о oh oh 15 15 1 1 15-1 15-1 0 0 0 0 0 0 о,о oh oh 2 2 15-2 15-2 0 0 0 0 0 0 о,о oh oh 3 3 15-3 15-3 4 4 15-4 15-4 6 6 1 1 16-1 16-1 2 2 16-2 16-2 3 3 16-3 16-3 4 4 16-4 16-4 Среднее Average о,о oh oh о,о oh oh 0,0 0.0 о,о oh oh Среднеквадратическое отклонение Standard deviation о,о oh oh о,о oh oh 0,0 0.0 о,о oh oh SEM S.E.M. о,о oh oh о,о oh oh 0,0 0.0 о,о oh oh t-тест против Fc-контроль t-test vs Fc-control 0,0000 0.0000 0,0002 0.0002 0,1315 0.1315 0,0000 0.0000

Настоящее изобретение не должно быть ограничено в объеме конкретными раскрытыми воплощениями, которые предоставляются, например, для иллюстрации различных аспектов настоящего изобретения. Различные модификации описанных композиций и способов станут очевидными из описания и положений настоящего изобретения. Такие вариации могут быть осуществлены на практике без отхода от истинного объема и духа раскрытия и предназначены для того, чтобы подпадать под объем настоящего раскрытия.The present invention is not to be limited in scope by the specific embodiments disclosed, which are provided, for example, to illustrate various aspects of the present invention. Various modifications to the described compositions and methods will become apparent from the description and teachings of the present invention. Such variations may be practiced without departing from the true scope and spirit of the disclosure and are intended to fall within the scope of the present disclosure.

Перечень последовательностей < 110> ЭЛПАЙН ИММЬЮН САЙЕНСИЗ, ИНК.Sequence Listing < 110> ELPINE IMMUNE SCIENCES, INC.

ЭВАНС ЛоуренсEVANS Lawrence

КОРНАКЕР, Майкл СВЕНСОН, Райан < 120> ВАРИАНТНЫЕ ИММУНОМОДУЛИРУЮЩИЕ БЕЛКИ ЛИГАНДА ICOS И СОПУТСТВУЮЩИЕ КОМПОЗИЦИИ И СПОСОБЫ <130> 761612002240 <150> 62/574,161 <151> 2017-10-18 < 160>933 < 170> Patentin version 3.5 < 210>1 < 211>288 < 212> БЕЛОК < 213> Homo sapiens <220>KORNAKER, Michael SWENSON, Ryan <120> VARIANT IMMUNOMODULATING ICOS LIGAND PROTEINS AND RELATED COMPOSITIONS AND METHODS <130> 761612002240 <150> 62/574,161 <151> 2017-10-18 <160> 933 <170> Patent version 3.5 <210> 1 < 211>288 <212> PROTEIN <213> Homo sapiens <220>

<221><221>

<223><223>

новая или редкая характеристика CD80 (В7-1)new or rare characteristic CD80 (B7-1)

-202 044346 <400> 1-202 044346 <400> 1

Met Gly His Thr Arg 1 5Met Gly His Thr Arg 1 5

Arg Gln Gly Thr SerArg Gln Gly Thr Ser

Pro Ser Lys Cys ProPro Ser Lys Cys Pro

Leu Asn Phe Phe GlnLeu Asn Phe Phe Gln

Leu Leu Val Leu AlaLeu Leu Val Leu Ala

Gly Leu Ser His Phe 30Gly Leu Ser His Phe 30

Ser Gly Val Ile His 35Ser Gly Val Ile His 35

Val Thr Lys Glu Val 40Val Thr Lys Glu Val 40

Lys Glu Val Ala Thr 45Lys Glu Val Ala Thr 45

Ser Cys Gly His Asn 50Ser Cys Gly His Asn 50

Val Ser Val Glu GluVal Ser Val Glu Glu

Leu Ala Gln Thr Arg 60Leu Ala Gln Thr Arg 60

Tyr Trp Gln Lys Glu 65Tyr Trp Gln Lys Glu 65

Lys Lys Met Val Leu 70Lys Lys Met Val Leu 70

Thr Met Met Ser Gly 75Thr Met Met Ser Gly 75

Met Asn Ile Trp Pro 85Met Asn Ile Trp Pro 85

Glu Tyr Lys Asn Arg 90Glu Tyr Lys Asn Arg 90

Thr Ile Phe Asp Ile 95Thr Ile Phe Asp Ile 95

Asn Asn Leu Ser IleAsn Asn Leu Ser Ile

100100

Val Ile Leu Ala LeuVal Ile Leu Ala Leu

105105

Arg Pro Ser Asp GluArg Pro Ser Asp Glu

110110

Thr Tyr Glu Cys Val 115Thr Tyr Glu Cys Val 115

Val Leu Lys Tyr Glu 120Val Leu Lys Tyr Glu 120

Lys Asp Ala Phe Lys 125Lys Asp Ala Phe Lys 125

Glu His Leu Ala GluGlu His Leu Ala Glu

130130

Val Thr Leu Ser ValVal Thr Leu Ser Val

135135

Lys Ala Asp Phe Pro 140Lys Ala Asp Phe Pro 140

Pro Ser Ile Ser Asp 145Pro Ser Ile Ser Asp 145

Phe Glu Ile Pro Thr 150Phe Glu Ile Pro Thr 150

Ser Asn Ile Arg Arg 155Ser Asn Ile Arg Arg 155

Ile Cys Ser Thr SerIle Cys Ser Thr Ser

165165

Gly Gly Phe Pro GluGly Gly Phe Pro Glu

170170

Pro His Leu Ser TrpPro His Leu Ser Trp

175175

Glu Asn Gly Glu GluGlu Asn Gly Glu Glu

180180

Leu Asn Ala Ile AsnLeu Asn Ala Ile Asn

185185

Thr Thr Val Ser GlnThr Thr Val Ser Gln

190190

Pro Glu Thr Glu LeuPro Glu Thr Glu Leu

195195

Tyr Ala Val Ser Ser 200Tyr Ala Val Ser Ser 200

Lys Leu Asp Phe AsnLys Leu Asp Phe Asn

205205

Thr Thr Asn His SerThr Thr Asn His Ser

210210

Phe Met Cys Leu Ile 215Phe Met Cys Leu Ile 215

Lys Tyr Gly His LeuLys Tyr Gly His Leu

220220

Val Asn Gln Thr Phe 225Val Asn Gln Thr Phe 225

Asn Trp Asn Thr Thr 230Asn Trp Asn Thr Thr 230

Lys Gln Glu His Phe 235Lys Gln Glu His Phe 235

TyrTyr

CysCys

LeuLeu

IleIle

Asp 80Asp 80

ThrThr

GlyGly

ArgArg

ThrThr

Ile 160Ile 160

LeuLeu

AspAsp

MetMet

ArgArg

Pro 240Pro 240

- 203 044346- 203 044346

Asp Asn Leu Leu ProAsp Asn Leu Leu Pro

245245

Ser Trp Ala Ile Thr Leu Ile Ser Val AsnSer Trp Ala Ile Thr Leu Ile Ser Val Asn

250 255250 255

Ile Phe Val Ile CysIle Phe Val Ile Cys

260260

Cys Leu Thr Tyr Cys Phe Ala Pro Arg CysCys Leu Thr Tyr Cys Phe Ala Pro Arg Cys

265 270265 270

Glu Arg Arg Arg AsnGlu Arg Arg Arg Asn

275275

Glu Arg Leu Arg Arg Glu Ser Val Arg ProGlu Arg Leu Arg Arg Glu Ser Val Arg Pro

280 285280 285

GlyGly

ArgArg

Val <210>Val <210>

<211><211>

<212><212>

329 БЕЛОК <213> Homo sapiens <220>329 PROTEIN <213> Homo sapiens <220>

<221> новая или редкая характеристика <223> CD86(B7-2) <400> 2<221> new or rare characteristic <223> CD86(B7-2) <400> 2

Met Asp Pro Gln Cys 1 5Met Asp Pro Gln Cys 1 5

Thr Met Gly Leu SerThr Met Gly Leu Ser

Asn Ile Leu Phe ValAsn Ile Leu Phe Val

Ala Phe Leu Leu SerAla Phe Leu Leu Ser

Gly Ala Ala Pro LeuGly Ala Ala Pro Leu

Lys Ile Gln Ala Tyr 30Lys Ile Gln Ala Tyr 30

Asn Glu Thr Ala Asp 35Asn Glu Thr Ala Asp 35

Leu Pro Cys Gln Phe 40Leu Pro Cys Gln Phe 40

Ala Asn Ser Gln AsnAla Asn Ser Gln Asn

Ser Leu Ser Glu Leu 50Ser Leu Ser Glu Leu 50

Val Val Phe Trp Gln 55Val Val Phe Trp Gln 55

Asp Gln Glu Asn Leu 60Asp Gln Glu Asn Leu 60

Leu Asn Glu Val Tyr 65Leu Asn Glu Val Tyr 65

Leu Gly Lys Glu Lys 70Leu Gly Lys Glu Lys 70

Phe Asp Ser Val His 75Phe Asp Ser Val His 75

Lys Tyr Met Gly Arg 85Lys Tyr Met Gly Arg 85

Thr Ser Phe Asp Ser 90Thr Ser Phe Asp Ser 90

Asp Ser Trp Thr Leu 95Asp Ser Trp Thr Leu 95

Leu His Asn Leu GlnLeu His Asn Leu Gln

100100

Ile Lys Asp Lys GlyIle Lys Asp Lys Gly

105105

Leu Tyr Gln Cys IleLeu Tyr Gln Cys Ile

110110

His His Lys Lys Pro Thr Gly MetHis His Lys Lys Pro Thr Gly Met

115 120115 120

Ile Arg Ile His Gln Met AsnIle Arg Ile His Gln Met Asn

125125

Glu Leu Ser Val Leu Ala Asn PheGlu Leu Ser Val Leu Ala Asn Phe

130 135130 135

Ser Gln Pro Glu Ile Val ProSer Gln Pro Glu Ile Val Pro

140140

Ser Asn Ile Thr Glu Asn Val TyrSer Asn Ile Thr Glu Asn Val Tyr

145 150145 150

Ile Asn Leu Thr Cys Ser SerIle Asn Leu Thr Cys Ser Ser

155155

MetMet

PhePhe

GlnGln

ValVal

Ser 80Ser 80

ArgArg

IleIle

SerSer

IleIle

Ile 160Ile 160

- 204 044346- 204 044346

His Gly Tyr Pro GluHis Gly Tyr Pro Glu

165165

Pro Lys Lys Met SerPro Lys Lys Met Ser

170170

Val Leu Leu Arg ThrVal Leu Leu Arg Thr

175175

Asn Ser Thr Ile GluAsn Ser Thr Ile Glu

180180

Tyr Asp Gly Val MetTyr Asp Gly Val Met

185185

Gln Lys Ser Gln AspGln Lys Ser Gln Asp

190190

Val Thr Glu Leu TyrVal Thr Glu Leu Tyr

195195

Asp Val Ser Ile Ser 200Asp Val Ser Ile Ser 200

Leu Ser Val Ser PheLeu Ser Val Ser Phe

205205

Asp Val Thr Ser AsnAsp Val Thr Ser Asn

210210

Met Thr Ile Phe Cys 215Met Thr Ile Phe Cys 215

Ile Leu Glu Thr AspIle Leu Glu Thr Asp

220220

Thr Arg Leu Leu Ser 225Thr Arg Leu Leu Ser 225

Ser Pro Phe Ser Ile 230Ser Pro Phe Ser Ile 230

Glu Leu Glu Asp Pro 235Glu Leu Glu Asp Pro 235

Pro Pro Pro Asp HisPro Pro Pro Asp His

245245

Ile Pro Trp Ile ThrIle Pro Trp Ile Thr

250250

Ala Val Leu Pro ThrAla Val Leu Pro Thr

255255

Ile Ile Cys Val MetIle Ile Cys Val Met

260260

Val Phe Cys Leu IleVal Phe Cys Leu Ile

265265

Leu Trp Lys Trp LysLeu Trp Lys Trp Lys

270270

Lys Lys Arg Pro ArgLys Lys Arg Pro Arg

275275

Asn Ser Tyr Lys Cys 280Asn Ser Tyr Lys Cys 280

Gly Thr Asn Thr MetGly Thr Asn Thr Met

285285

Arg Glu Glu Ser Glu 290Arg Glu Glu Ser Glu 290

Gln Thr Lys Lys ArgGln Thr Lys Lys Arg

295295

Glu Lys Ile His Ile 300Glu Lys Ile His Ile 300

Glu Arg Ser Asp Glu 305Glu Arg Ser Asp Glu 305

Ala Gln Arg Val Phe 310Ala Gln Arg Val Phe 310

Lys Ser Ser Lys Thr 315Lys Ser Ser Lys Thr 315

LysLys

AsnAsn

ProPro

LysLys

Gln 240Gln 240

ValVal

LysLys

GluGlu

ProPro

Ser 320Ser 320

Ser Cys Asp Lys SerSer Cys Asp Lys Ser

325325

Asp Thr Cys Phe <210> 3 <211> 290 < 212> БЕЛОК < 213> Homo sapiens <220>Asp Thr Cys Phe <210> 3 <211> 290 <212> PROTEIN <213> Homo sapiens <220>

< 221> новая или редкая характеристика < 223> CD274 (PD-L1, B7-H1) <400>3<221> new or rare characteristic <223> CD274 (PD-L1, B7-H1) <400>3

Met Arg Ile Phe Ala Val Phe Ile Phe Met Thr Tyr Trp His Leu 1 5 1015Met Arg Ile Phe Ala Val Phe Ile Phe Met Thr Tyr Trp His Leu 1 5 1015

Asn Ala Phe Thr Val Thr Val Pro Lys Asp Leu Tyr Val Val GluAsn Ala Phe Thr Val Thr Val Pro Lys Asp Leu Tyr Val Val Glu

25302530

LeuLeu

TyrTyr

- 205 044346- 205 044346

Gly Ser Asn Met Thr Ile Glu Cys LysGly Ser Asn Met Thr Ile Glu Cys Lys

4040

Asp Leu Ala Ala Leu Ile Val Tyr TrpAsp Leu Ala Ala Leu Ile Val Tyr Trp

5555

Ile Gln Phe Val His Gly Glu Glu Asp 65 70Ile Gln Phe Val His Gly Glu Glu Asp 65 70

Tyr Arg Gln Arg Ala Arg Leu Leu Lys 85Tyr Arg Gln Arg Ala Arg Leu Leu Lys 85

Ala Ala Leu Gln Ile Thr Asp Val LysAla Ala Leu Gln Ile Thr Asp Val Lys

100 105100 105

Arg Cys Met Ile Ser Tyr Gly Gly AlaArg Cys Met Ile Ser Tyr Gly Gly Ala

115 120115 120

Lys Val Asn Ala Pro Tyr Asn Lys IleLys Val Asn Ala Pro Tyr Asn Lys Ile

130 135130 135

Asp Pro Val Thr Ser Glu His Glu LeuAsp Pro Val Thr Ser Glu His Glu Leu

145 150145 150

Pro Lys Ala Glu Val Ile Trp Thr SerPro Lys Ala Glu Val Ile Trp Thr Ser

165165

Gly Lys Thr Thr Thr Thr Asn Ser LysGly Lys Thr Thr Thr Asn Ser Lys

180 185180 185

Val Thr Ser Thr Leu Arg Ile Asn ThrVal Thr Ser Thr Leu Arg Ile Asn Thr

195 200195 200

Cys Thr Phe Arg Arg Leu Asp Pro GluCys Thr Phe Arg Arg Leu Asp Pro Glu

210 215210 215

Val Ile Pro Glu Leu Pro Leu Ala HisVal Ile Pro Glu Leu Pro Leu Ala His

225 230225 230

Leu Val Ile Leu Gly Ala Ile Leu LeuLeu Val Ile Leu Gly Ala Ile Leu Leu

245245

Phe Ile Phe Arg Leu Arg Lys Gly ArgPhe Ile Phe Arg Leu Arg Lys Gly Arg

260 265260 265

Gly Ile Gln Asp Thr Asn Ser Lys LysGly Ile Gln Asp Thr Asn Ser Lys Lys

Pro Pro Val Val Glu 45 Glu 45 Lys Lys Gln Gln Leu Leu Met Met Glu 60 Glu 60 Asp Asp Lys Lys Asn Asn Ile Ile Lys 75 Lys 75 Val Val Gln Gln His His Ser Ser Ser 80 Ser 80 Gln Gln Leu Leu Ser Ser Leu Leu Gly 95 Gly 95 Asn Asn Gln Gln Asp Asp Ala Ala Gly 110 Gly 110 Val Val Tyr Tyr Tyr Tyr Lys Lys Arg 125 Arg 125 Ile Ile Thr Thr Val Val Gln Gln Arg 140 Arg 140 Ile Ile Leu Leu Val Val Val Val Cys 155 Cys 155 Gln Gln Ala Ala Glu Glu Gly Gly Tyr 160 Tyr 160 Asp Asp His His Gln Gln Val Val Leu 175 Leu 175 Ser Ser Glu Glu Glu Glu Lys Lys Leu 190 Leu 190 Phe Phe Asn Asn Thr Thr Asn Asn Glu 205 Glu 205 Ile Ile Phe Phe Tyr Tyr Asn Asn His 220 His 220 Thr Thr Ala Ala Glu Glu Leu Leu Pro 235 Pro 235 Asn Asn Glu Glu Arg Arg Thr Thr His 240 His 240 Leu Leu Gly Gly Val Val Ala Ala Leu 255 Leu 255 Thr Thr Met Met Asp Asp Val Val Lys 270 Lys 270 Lys Lys Cys Cys Ser Ser Asp Asp Thr Thr His His Leu Leu Glu Glu

- 206 044346- 206 044346

275275

280280

285285

Glu ThrGlu Thr

290 <210> 4 <211> 273 <212> БЕЛОК <213> Homo sapiens <220>290 <210> 4 <211> 273 <212> PROTEIN <213> Homo sapiens <220>

<221> новая или редкая характеристика <223> PDCD1LG2(PD-L2, CD273) <400> 4<221> new or rare characteristic <223> PDCD1LG2(PD-L2, CD273) <400> 4

Met Ile Phe Leu LeuMet Ile Phe Leu Leu

55

Leu Met Leu Ser Leu 10Leu Met Leu Ser Leu 10

Glu Leu Gln Leu HisGlu Leu Gln Leu His

Ile Ala Ala Leu PheIle Ala Ala Leu Phe

Thr Val Thr Val ProThr Val Thr Val Pro

Lys Glu Leu Tyr Ile 30Lys Glu Leu Tyr Ile 30

Glu His Gly Ser Asn 35Glu His Gly Ser Asn 35

Val Thr Leu Glu Cys 40Val Thr Leu Glu Cys 40

Asn Phe Asp Thr Gly 45Asn Phe Asp Thr Gly 45

His Val Asn Leu Gly 50His Val Asn Leu Gly 50

Ala Ile Thr Ala SerAla Ile Thr Ala Ser

Leu Gln Lys Val Glu 60Leu Gln Lys Val Glu 60

Asp Thr Ser Pro His 65Asp Thr Ser Pro His 65

Arg Glu Arg Ala Thr 70Arg Glu Arg Ala Thr 70

Leu Leu Glu Glu Gln 75Leu Leu Glu Glu Gln 75

Pro Leu Gly Lys Ala 85Pro Leu Gly Lys Ala 85

Ser Phe His Ile ProSer Phe His Ile Pro

Gln Val Gln Val Arg 95Gln Val Gln Val Arg 95

Glu Gly Gln Tyr GlnGlu Gly Gln Tyr Gln

100100

Cys Ile Ile Ile TyrCys Ile Ile Ile Tyr

105105

Gly Val Ala Trp AspGly Val Ala Trp Asp

110110

Lys Tyr Leu Thr Leu 115Lys Tyr Leu Thr Leu 115

Lys Val Lys Ala SerLys Val Lys Ala Ser

120120

Tyr Arg Lys Ile AsnTyr Arg Lys Ile Asn

125125

His Ile Leu Lys Val 130His Ile Leu Lys Val 130

Pro Glu Thr Asp GluPro Glu Thr Asp Glu

135135

Val Glu Leu Thr CysVal Glu Leu Thr Cys

140140

Ala Thr Gly Tyr Pro 145Ala Thr Gly Tyr Pro 145

Leu Ala Glu Val Ser 150Leu Ala Glu Val Ser 150

Trp Pro Asn Val Ser 155Trp Pro Asn Val Ser 155

Pro Ala Asn Thr SerPro Ala Asn Thr Ser

165165

His Ser Arg Thr ProHis Ser Arg Thr Pro

170170

Glu Gly Leu Tyr GlnGlu Gly Leu Tyr Gln

175175

GlnGln

IleIle

SerSer

AsnAsn

Leu 80Leu 80

AspAsp

TyrTyr

ThrThr

GlnGln

Val 160Val 160

ValVal

- 207 044346- 207 044346

Thr Ser Val Leu Arg Leu Lys Pro Pro Pro Gly Arg Asn Phe SerThr Ser Val Leu Arg Leu Lys Pro Pro Pro Gly Arg Asn Phe Ser

180 185 190180 185 190

Val Phe Trp Asn Thr His Val Arg Glu Leu Thr Leu Ala Ser IleVal Phe Trp Asn Thr His Val Arg Glu Leu Thr Leu Ala Ser Ile

195 200 205195 200 205

Leu Gln Ser Gln Met Glu Pro Arg Thr His Pro Thr Trp Leu LeuLeu Gln Ser Gln Met Glu Pro Arg Thr His Pro Thr Trp Leu Leu

210 215 220210 215 220

Ile Phe Ile Pro Phe Cys Ile Ile Ala Phe Ile Phe Ile Ala ThrIle Phe Ile Pro Phe Cys Ile Ile Ala Phe Ile Phe Ile Ala Thr

225 230 235225 230 235

Ile Ala Leu Arg Lys Gln Leu Cys Gln Lys Leu Tyr Ser Ser LysIle Ala Leu Arg Lys Gln Leu Cys Gln Lys Leu Tyr Ser Ser Lys

245 250 255245 250 255

Thr Thr Lys Arg Pro Val Thr Thr Thr Lys Arg Glu Val Asn SerThr Thr Lys Arg Pro Val Thr Thr Thr Lys Arg Glu Val Asn Ser

260 265 270260 265 270

CysCys

AspAsp

HisHis

Val 240Val 240

AspAsp

AlaAla

Ile <210> 5 <211> 302 < 212> БЕЛОК < 213> Homo sapiens <220>Ile <210> 5 <211> 302 <212> PROTEIN <213> Homo sapiens <220>

< 221> новая или редкая характеристика <223> ICOSLG(B7RP1, CD275, ICOSL, B7-H2) <400>5<221> new or rare characteristic <223> ICOSLG(B7RP1, CD275, ICOSL, B7-H2) <400>5

Met Arg Leu Gly Ser Pro Gly Leu Leu Phe Leu Leu Phe Ser Ser 1 5 1015Met Arg Leu Gly Ser Pro Gly Leu Leu Phe Leu Leu Phe Ser Ser 1 5 1015

Arg Ala Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly SerArg Ala Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser

25302530

Val Glu Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu 35 4045Val Glu Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu 35 4045

Asp Val Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val 50 5560Asp Val Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val 50 5560

Tyr His Ile Pro Gln Asn Ser Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg 65 7075Tyr His Ile Pro Gln Asn Ser Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg 65 7075

Arg Asn Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp 85 9095Arg Asn Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp 85 9095

LeuLeu

AspAsp

AsnAsn

ThrThr

Tyr 80Tyr 80

PhePhe

- 208 044346- 208 044346

Ser Leu ArgSer Leu Arg

Leu Phe Asn 100Leu Phe Asn 100

Val Thr ProVal Thr Pro

105105

Gln Asp GluGln Asp Glu

Gln Lys PheGln Lys Phe

110110

Cys Leu ValCys Leu Val

115115

Leu Ser GlnLeu Ser Gln

Ser Leu GlySer Leu Gly

120120

Phe Gln GluPhe Gln Glu

Val Leu Ser 125Val Leu Ser 125

Glu Val ThrGlu Val Thr

130130

Leu His ValLeu His Val

Ala Ala Asn 135Ala Ala Asn 135

Phe Ser ValPhe Ser Val

140140

Pro Val ValPro Val Val

Ala Pro His 145Ala Pro His 145

Ser Pro SerSer Pro Ser

150150

Gln Asp GluGln Asp Glu

Leu Thr PheLeu Thr Phe

155155

Thr Cys ThrThr Cys Thr

Ile Asn GlyIle Asn Gly

Tyr Pro ArgTyr Pro Arg

165165

Pro Asn ValPro Asn Val

Tyr Trp Ile 170Tyr Trp Ile 170

Asn Lys ThrAsn Lys Thr

175175

Asn Ser LeuAsn Ser Leu

Leu Asp Gln 180Leu Asp Gln 180

Ala Leu GlnAla Leu Gln

185185

Asn Asp ThrAsn Asp Thr

Val Phe LeuVal Phe Leu

190190

Met Arg GlyMet Arg Gly

195195

Leu Tyr AspLeu Tyr Asp

Val Val SerVal Val Ser

200200

Val Leu ArgVal Leu Arg

Ile Ala Arg 205Ile Ala Arg 205

Pro Ser ValPro Ser Val

210210

Asn Ile GlyAsn Ile Gly

Cys Cys Ile 215Cys Cys Ile 215

Glu Asn ValGlu Asn Val

220220

Leu Leu GlnLeu Leu Gln

Asn Leu Thr 225Asn Leu Thr 225

Val Gly SerVal Gly Ser

230230

Gln Thr GlyGln Thr Gly

Asn Asp IleAsn Asp Ile

235235

Gly Glu ArgGly Glu Arg

Lys Ile ThrLys Ile Thr

Glu Asn ProGlu Asn Pro

245245

Val Ser ThrVal Ser Thr

Gly Glu Lys 250Gly Glu Lys 250

Asn Ala AlaAsn Ala Ala

255255

Trp Ser IleTrp Ser Ile

Leu Ala Val 260Leu Ala Val 260

Leu Cys LeuLeu Cys Leu

265265

Leu Val ValLeu Val Val

Val Ala ValVal Ala Val

270270

Ile Gly TrpIle Gly Trp

275275

Val Cys ArgVal Cys Arg

Asp Arg CysAsp Arg Cys

280280

Leu Gln HisLeu Gln His

Ser Tyr Ala 285Ser Tyr Ala 285

HisHis

ValVal

SerSer

Ser 160Ser 160

AspAsp

AsnAsn

ThrThr

GlnGln

Asp 240Asp 240

ThrThr

AlaAla

GlyGly

Ala Trp AlaAla Trp Ala

290290

Val Ser ProVal Ser Pro

Glu Thr Glu 295Glu Thr Glu 295

Leu Thr GlyLeu Thr Gly

300300

His Val <210> 6 <211> 534 <212> БЕЛОК <213> Homo sapiens <220>His Val <210> 6 <211> 534 <212> PROTEIN <213> Homo sapiens <220>

<221> новая или редкая характеристика <223> CD276(B7-H3)<221> new or rare characteristic <223> CD276(B7-H3)

- 209 044346 <400> 6- 209 044346 <400> 6

Met Leu Arg Arg Arg 1 5Met Leu Arg Arg Arg 1 5

Gly Ser Pro Gly MetGly Ser Pro Gly Met

Gly Val His Val GlyGly Val His Val Gly

Ala Leu Gly Ala Leu 20Ala Leu Gly Ala Leu 20

Trp Phe Cys Leu Thr 25Trp Phe Cys Leu Thr 25

Gly Ala Leu Glu Val 30Gly Ala Leu Glu Val 30

Val Pro Glu Asp Pro 35Val Pro Glu Asp Pro 35

Val Val Ala Leu ValVal Val Ala Leu Val

Gly Thr Asp Ala Thr 45Gly Thr Asp Ala Thr 45

Cys Cys Ser Phe Ser 50Cys Cys Ser Phe Ser 50

Pro Glu Pro Gly Phe 55Pro Glu Pro Gly Phe 55

Ser Leu Ala Gln Leu 60Ser Leu Ala Gln Leu 60

Leu Ile Trp Gln Leu 65Leu Ile Trp Gln Leu 65

Thr Asp Thr Lys Gln 70Thr Asp Thr Lys Gln 70

Leu Val His Ser Phe 75Leu Val His Ser Phe 75

Glu Gly Gln Asp Gln 85Glu Gly Gln Asp Gln 85

Gly Ser Ala Tyr Ala 90Gly Ser Ala Tyr Ala 90

Asn Arg Thr Ala Leu 95Asn Arg Thr Ala Leu 95

Pro Asp Leu Leu AlaPro Asp Leu Leu Ala

100100

Gln Gly Asn Ala SerGln Gly Asn Ala Ser

105105

Leu Arg Leu Gln ArgLeu Arg Leu Gln Arg

110110

Arg Val Ala Asp Glu 115Arg Val Ala Asp Glu 115

Gly Ser Phe Thr Cys 120Gly Ser Phe Thr Cys 120

Phe Val Ser Ile Arg 125Phe Val Ser Ile Arg 125

Phe Gly Ser Ala AlaPhe Gly Ser Ala Ala

130130

Val Ser Leu Gln ValVal Ser Leu Gln Val

135135

Ala Ala Pro Tyr SerAla Ala Pro Tyr Ser

140140

Pro Ser Met Thr Leu 145Pro Ser Met Thr Leu 145

Glu Pro Asn Lys Asp 150Glu Pro Asn Lys Asp 150

Leu Arg Pro Gly Asp 155Leu Arg Pro Gly Asp 155

Val Thr Ile Thr CysVal Thr Ile Thr Cys

165165

Ser Ser Tyr Gln GlySer Ser Tyr Gln Gly

170170

Tyr Pro Glu Ala GluTyr Pro Glu Ala Glu

175175

Phe Trp Gln Asp GlyPhe Trp Gln Asp Gly

180180

Gln Gly Val Pro LeuGln Gly Val Pro Leu

185185

Thr Gly Asn Val ThrThr Gly Asn Val Thr

190190

Ser Gln Met Ala AsnSer Gln Met Ala Asn

195195

Glu Gln Gly Leu Phe 200Glu Gln Gly Leu Phe 200

Asp Val His Ser Ile 205Asp Val His Ser Ile 205

Arg Val Val Leu GlyArg Val Val Leu Gly

210210

Ala Asn Gly Thr TyrAla Asn Gly Thr Tyr

215215

Ser Cys Leu Val ArgSer Cys Leu Val Arg

220220

Pro Val Leu Gln Gln 225Pro Val Leu Gln Gln 225

Asp Ala His Ser Ser 230Asp Ala His Ser Ser 230

Val Thr Ile Thr Pro 235Val Thr Ile Thr Pro 235

Arg Ser Pro Thr GlyArg Ser Pro Thr Gly

Ala Val Glu Val GlnAla Val Glu Val Gln

Val Pro Glu Asp ProVal Pro Glu Asp Pro

AlaAla

GlnGln

LeuLeu

AsnAsn

Ala 80Ala 80

PhePhe

ValVal

AspAsp

LysLys

Thr 160Thr 160

ValVal

ThrThr

LeuLeu

AsnAsn

Gln 240Gln 240

ValVal

- 210 044346- 210 044346

255255

245245

250250

ValVal

GluGlu

AspAsp

Ser 305Ser 305

GlyGly

SerSer

SerSer

ProPro

Ser 385Ser 385

GlyGly

GlnGln

AsnAsn

AlaAla

Glu 465Glu 465

LeuLeu

Ala Leu Val Gly Thr 260Ala Leu Val Gly Thr 260

Pro Gly Phe Ser LeuPro Gly Phe Ser Leu

275275

Thr Lys Gln Leu Val 290Thr Lys Gln Leu Val 290

Ala Tyr Ala Asn ArgAla Tyr Ala Asn Arg

310310

Asn Ala Ser Leu ArgAsn Ala Ser Leu Arg

325325

Phe Thr Cys Phe Val 340Phe Thr Cys Phe Val 340

Leu Gln Val Ala AlaLeu Gln Val Ala Ala

355355

Asn Lys Asp Leu Arg 370Asn Lys Asp Leu Arg 370

Tyr Arg Gly Tyr ProTyr Arg Gly Tyr Pro

390390

Val Pro Leu Thr GlyVal Pro Leu Thr Gly

405405

Gly Leu Phe Asp Val 420Gly Leu Phe Asp Val 420

Gly Thr Tyr Ser CysGly Thr Tyr Ser Cys

435435

His Gly Ser Val Thr 450His Gly Ser Val Thr 450

Ala Leu Trp Val ThrAla Leu Trp Val Thr

470470

Val Ala Leu Ala PheVal Ala Leu Ala Phe

485485

Asp Ala Thr Leu ArgAsp Ala Thr Leu Arg

265265

Ala Gln Leu Asn LeuAla Gln Leu Asn Leu

280280

His Ser Phe Thr Glu 295His Ser Phe Thr Glu 295

Thr Ala Leu Phe ProThr Ala Leu Phe Pro

315315

Leu Gln Arg Val ArgLeu Gln Arg Val Arg

330330

Ser Ile Arg Asp PheSer Ile Arg Asp Phe

345345

Pro Tyr Ser Lys Pro 360Pro Tyr Ser Lys Pro 360

Pro Gly Asp Thr Val 375Pro Gly Asp Thr Val 375

Glu Ala Glu Val PheGlu Ala Glu Val Phe

395395

Asn Val Thr Thr SerAsn Val Thr Thr Ser

410410

His Ser Val Leu ArgHis Ser Val Leu Arg

425425

Leu Val Arg Asn Pro 440Leu Val Arg Asn Pro 440

Ile Thr Gly Gln Pro 455Ile Thr Gly Gln Pro 455

Val Gly Leu Ser ValVal Gly Leu Ser Val

475475

Val Cys Trp Arg LysVal Cys Trp Arg Lys

490490

Cys Ser Phe Ser Pro 270Cys Ser Phe Ser Pro 270

Ile Trp Gln Leu ThrIle Trp Gln Leu Thr

285285

Gly Arg Asp Gln Gly 300Gly Arg Asp Gln Gly 300

Asp Leu Leu Ala GlnAsp Leu Leu Ala Gln

320320

Val Ala Asp Glu GlyVal Ala Asp Glu Gly

335335

Gly Ser Ala Ala ValGly Ser Ala Ala Val

350350

Ser Met Thr Leu GluSer Met Thr Leu Glu

365365

Thr Ile Thr Cys Ser 380Thr Ile Thr Cys Ser 380

Trp Gln Asp Gly GlnTrp Gln Asp Gly Gln

400400

Gln Met Ala Asn GluGln Met Ala Asn Glu

415415

Val Val Leu Gly AlaVal Val Leu Gly Ala

430430

Val Leu Gln Gln Asp 445Val Leu Gln Gln Asp 445

Met Thr Phe Pro Pro 460Met Thr Phe Pro Pro 460

Cys Leu Ile Ala LeuCys Leu Ile Ala Leu

480480

Ile Lys Gln Ser CysIle Lys Gln Ser Cys

495495

- 211 044346- 211 044346

Glu GluGlu Glu

Glu Asn AlaGlu Asn Ala

500500

Gly Ala Glu Asp Gln Asp Gly Glu Gly GluGly Ala Glu Asp Gln Asp Gly Glu Gly Glu

505 510505 510

Ser LysSer Lys

Thr Ala Leu 515Thr Ala Leu 515

Gln Pro Leu Lys His Ser Asp Ser Lys GluGln Pro Leu Lys His Ser Asp Ser Lys Glu

520 525520 525

GlyGly

AspAsp

Asp Gly Gln Glu Ile AlaAsp Gly Gln Glu Ile Ala

530 <210> 7 <211> 282 <212> БЕЛОК <213> Homo sapiens <220>530 <210> 7 <211> 282 <212> PROTEIN <213> Homo sapiens <220>

<221> новая или редкая характеристика <223> VTCN1(B7-H4) <400> 7<221> new or rare characteristic <223> VTCN1(B7-H4) <400> 7

Met Ala Ser Leu 1Met Ala Ser Leu 1

Gly Gln Ile Leu Phe Trp Ser Ile Ile Ser Ile 5 10 15Gly Gln Ile Leu Phe Trp Ser Ile Ile Ser Ile 5 10 15

Ile Ile Leu AlaIle Ile Leu Ala

Gly Ala Ile Ala Leu Ile Ile Gly Phe Gly Ile 25 30Gly Ala Ile Ala Leu Ile Ile Gly Phe Gly Ile 25 30

Gly Arg His SerGly Arg His Ser

Ile Thr Val Thr Thr Val Ala Ser Ala Gly AsnIle Thr Val Thr Thr Val Ala Ser Ala Gly Asn

4545

Gly Glu Asp Gly 50Gly Glu Asp Gly 50

Ile Leu Ser Cys Thr Phe Glu Pro Asp Ile LysIle Leu Ser Cys Thr Phe Glu Pro Asp Ile Lys

6060

Ser Asp 65Ser Asp 65

His GluHis Glu

Ile Val IleIle Val Ile

Gln Trp Leu Lys Glu Gly Val Leu Gly Leu 70 75Gln Trp Leu Lys Glu Gly Val Leu Gly Leu 70 75

Phe ArgPhe Arg

Ala SerAla Ser

Lys CysLys Cys

130130

Tyr Lys 145Tyr Lys 145

Phe Lys GluPhe Lys Glu

Gly Arg ThrGly Arg Thr

100100

Leu Arg Leu 115Leu Arg Leu 115

Tyr Ile IleTyr Ile Ile

Thr Gly AlaThr Gly Ala

Gly Lys Asp Glu Leu Ser Glu Gln Asp Glu 90 95Gly Lys Asp Glu Leu Ser Glu Gln Asp Glu 90 95

Ala Val Phe Ala Asp Gln Val Ile Val GlyAla Val Phe Ala Asp Gln Val Ile Val Gly

105 110105 110

Lys Asn Val Gln Leu Thr Asp Ala Gly ThrLys Asn Val Gln Leu Thr Asp Ala Gly Thr

120 125120 125

Thr Ser Lys Gly Lys Gly Asn Ala Asn LeuThr Ser Lys Gly Lys Gly Asn Ala Asn Leu

135 140135 140

Phe Ser Met Pro Glu Val Asn Val Asp Tyr 150 155Phe Ser Met Pro Glu Val Asn Val Asp Tyr 150 155

IleIle

SerSer

IleIle

LeuLeu

Val 80Val 80

MetMet

AsnAsn

TyrTyr

GluGlu

Asn 160Asn 160

- 212 044346- 212 044346

Ala Ser Ser Glu ThrAla Ser Ser Glu Thr

165165

Leu Arg Cys Glu AlaLeu Arg Cys Glu Ala

170170

Pro Arg Trp Phe ProPro Arg Trp Phe Pro

175175

Pro Thr Val Val TrpPro Thr Val Val Trp

180180

Ala Ser Gln Val AspAla Ser Gln Val Asp

185185

Gln Gly Ala Asn PheGln Gly Ala Asn Phe

190190

Glu Val Ser Asn ThrGlu Val Ser Asn Thr

195195

Ser Phe Glu Leu AsnSer Phe Glu Leu Asn

200200

Ser Glu Asn Val ThrSer Glu Asn Val Thr

205205

Lys Val Val Ser ValLys Val Val Ser Val

210210

Leu Tyr Asn Val ThrLeu Tyr Asn Val Thr

215215

Ile Asn Asn Thr TyrIle Asn Asn Thr Tyr

220220

Cys Met Ile Glu Asn 225Cys Met Ile Glu Asn 225

Asp Ile Ala Lys Ala 230Asp Ile Ala Lys Ala 230

Thr Gly Asp Ile Lys 235Thr Gly Asp Ile Lys 235

Thr Glu Ser Glu IleThr Glu Ser Glu Ile

245245

Lys Arg Arg Ser HisLys Arg Arg Ser His

250250

Leu Gln Leu Leu AsnLeu Gln Leu Leu Asn

255255

Lys Ala Ser Leu CysLys Ala Ser Leu Cys

260260

Val Ser Ser Phe PheVal Ser Ser Phe Phe

265265

Ala Ile Ser Trp AlaAla Ile Ser Trp Ala

270270

GlnGln

SerSer

MetMet

SerSer

Val 240Val 240

SerSer

LeuLeu

Leu Pro Leu Ser ProLeu Pro Leu Ser Pro

275275

Tyr Leu Met Leu LysTyr Leu Met Leu Lys

280 <210> 8 <211> 220 < 212> БЕЛОК < 213> Homo sapiens <220>280 <210> 8 <211> 220 <212> PROTEIN <213> Homo sapiens <220>

< 221> новая или редкая характеристика <223> CD28 <400>8<221> new or rare characteristic <223> CD28 <400>8

Met Leu Arg Leu Leu Leu Ala Leu Asn Leu Phe Pro Ser Ile Gln 1 5 1015Met Leu Arg Leu Leu Leu Ala Leu Asn Leu Phe Pro Ser Ile Gln 1 5 1015

Thr Gly Asn Lys Ile Leu Val Lys Gln Ser Pro Met Leu Val AlaThr Gly Asn Lys Ile Leu Val Lys Gln Ser Pro Met Leu Val Ala

25302530

Asp Asn Ala Val Asn Leu Ser Cys Lys Tyr Ser Tyr Asn Leu Phe 35 4045Asp Asn Ala Val Asn Leu Ser Cys Lys Tyr Ser Tyr Asn Leu Phe 35 4045

Arg Glu Phe Arg Ala Ser Leu His Lys Gly Leu Asp Ser Ala Val 50 5560Arg Glu Phe Arg Ala Ser Leu His Lys Gly Leu Asp Ser Ala Val 50 5560

Val Cys Val Val Tyr Gly Asn Tyr Ser Gln Gln Leu Gln Val Tyr 65 7075Val Cys Val Val Tyr Gly Asn Tyr Ser Gln Gln Leu Gln Val Tyr 65 7075

ValVal

TyrTyr

SerSer

GluGlu

Ser 80Ser 80

- 213 044346- 213 044346

Lys Thr Gly Phe Asn 85Lys Thr Gly Phe Asn 85

Cys Asp Gly Lys Leu 90Cys Asp Gly Lys Leu 90

Gly Asn Glu Ser Val 95Gly Asn Glu Ser Val 95

Phe Tyr Leu Gln AsnPhe Tyr Leu Gln Asn

100100

Leu Tyr Val Asn GlnLeu Tyr Val Asn Gln

105105

Thr Asp Ile Tyr PheThr Asp Ile Tyr Phe

110110

Lys Ile Glu Val Met 115Lys Ile Glu Val Met 115

Tyr Pro Pro Pro TyrTyr Pro Pro Pro Tyr

120120

Leu Asp Asn Glu Lys 125Leu Asp Asn Glu Lys 125

Asn Gly Thr Ile Ile 130Asn Gly Thr Ile Ile 130

His Val Lys Gly LysHis Val Lys Gly Lys

135135

His Leu Cys Pro Ser 140His Leu Cys Pro Ser 140

Leu Phe Pro Gly Pro 145Leu Phe Pro Gly Pro 145

Ser Lys Pro Phe Trp 150Ser Lys Pro Phe Trp 150

Val Leu Val Val Val 155Val Leu Val Val Val 155

Gly Val Leu Ala CysGly Val Leu Ala Cys

165165

Tyr Ser Leu Leu ValTyr Ser Leu Leu Val

170170

Thr Val Ala Phe IleThr Val Ala Phe Ile

175175

Phe Trp Val Arg SerPhe Trp Val Arg Ser

180180

Lys Arg Ser Arg LeuLys Arg Ser Arg Leu

185185

Leu His Ser Asp TyrLeu His Ser Asp Tyr

190190

Asn Met Thr Pro Arg 195Asn Met Thr Pro Arg 195

Arg Pro Gly Pro Thr 200Arg Pro Gly Pro Thr 200

Arg Lys His Tyr Gln 205Arg Lys His Tyr Gln 205

ThrThr

CysCys

SerSer

ProPro

Gly 160Gly 160

IleIle

MetMet

ProPro

Tyr Ala Pro Pro ArgTyr Ala Pro Pro Arg

210210

Asp Phe Ala Ala TyrAsp Phe Ala Ala Tyr

215215

Arg SerArg Ser

220 <210> 9 <211> 223 <212> БЕЛОК <213> Homo sapiens <220>220 <210> 9 <211> 223 <212> PROTEIN <213> Homo sapiens <220>

<221> новая или редкая характеристика <223> CTLA4 <400> 9<221> new or rare characteristic <223> CTLA4 <400> 9

Met Ala Cys 1Met Ala Cys 1

Leu Gly Phe Gln Arg His Lys Ala Gln Leu Asn LeuLeu Gly Phe Gln Arg His Lys Ala Gln Leu Asn Leu

10 1510 15

Thr Arg ThrThr Arg Thr

Val Phe Cys 35Val Phe Cys 35

Ser Ser ArgSer Ser Arg

Trp Pro Cys 20Trp Pro Cys 20

Lys Ala MetLys Ala Met

Thr Leu Leu Phe Phe Leu Leu Phe IleThr Leu Leu Phe Phe Leu Leu Phe Ile

30thirty

His Val Ala Gln Pro Ala Val Val LeuHis Val Ala Gln Pro Ala Val Val Leu

4545

AlaAla

ProPro

AlaAla

GlyGly

Gly Ile AlaGly Ile Ala

Ser Phe Val Cys Glu Tyr Ala Ser ProSer Phe Val Cys Glu Tyr Ala Ser Pro

- 214 044346- 214 044346

Lys Ala Thr 65Lys Ala Thr 65

Glu Val ArgGlu Val Arg

Val Thr ValVal Thr Val

Leu Arg GlnLeu Arg Gln

Ala Asp SerAla Asp Ser

Val Thr GluVal Thr Glu

Val Cys Ala 85Val Cys Ala 85

Ala Thr TyrAla Thr Tyr

Met Met Gly 90Met Met Gly 90

Asn Glu LeuAsn Glu Leu

Phe Leu AspPhe Leu Asp

Asp Ser Ile 100Asp Ser Ile 100

Cys Thr GlyCys Thr Gly

105105

Thr Ser SerThr Ser Ser

Gly Asn GlnGly Asn Gln

110110

Asn Leu ThrAsn Leu Thr

115115

Ile Gln GlyIle Gln Gly

Leu Arg AlaLeu Arg Ala

120120

Met Asp ThrMet Asp Thr

Gly Leu Tyr 125Gly Leu Tyr 125

Cys Lys ValCys Lys Val

130130

Glu Leu MetGlu Leu Met

Tyr Pro Pro 135Tyr Pro Pro 135

Pro Tyr TyrPro Tyr Tyr

140140

Leu Gly IleLeu Gly Ile

Asn Gly Thr 145Asn Gly Thr 145

Gln Ile TyrGln Ile Tyr

150150

Val Ile AspVal Ile Asp

Pro Glu ProPro Glu Pro

155155

Cys Pro AspCys Pro Asp

Asp Phe LeuAsp Phe Leu

Leu Trp IleLeu Trp Ile

165165

Leu Ala AlaLeu Ala Ala

Val Ser Ser 170Val Ser Ser 170

Gly Leu PheGly Leu Phe

175175

Tyr Ser PheTyr Ser Phe

Leu Leu Thr 180Leu Leu Thr 180

Ala Val SerAla Val Ser

185185

Leu Ser LysLeu Ser Lys

Met Leu Lys 190Met Leu Lys 190

Arg Ser ProArg Ser Pro

195195

Leu Thr ThrLeu Thr Thr

Gly Val TyrGly Val Tyr

200200

Val Lys MetVal Lys Met

Pro Pro Thr 205Pro Pro Thr 205

Gln 80Gln 80

ThrThr

ValVal

IleIle

GlyGly

Ser 160Ser 160

PhePhe

LysLys

GluGlu

Pro Glu CysPro Glu Cys

210210

Glu Lys GlnGlu Lys Gln

Phe Gln Pro 215Phe Gln Pro 215

Tyr Phe IleTyr Phe Ile

220220

Pro Ile Asn <210> 10 <211> 288 < 212> БЕЛОК < 213> Homo sapiens <220>Pro Ile Asn <210> 10 <211> 288 <212> PROTEIN <213> Homo sapiens <220>

< 221> новая или редкая характеристика <223> PDCD1(PD-1) <400>10<221> new or rare characteristic <223> PDCD1(PD-1) <400>10

Met Gln Ile Pro Gln Ala Pro Trp Pro Val Val Trp Ala Val Leu 1 5 1015Met Gln Ile Pro Gln Ala Pro Trp Pro Val Val Trp Ala Val Leu 1 5 1015

Leu Gly Trp Arg Pro Gly Trp Phe Leu Asp Ser Pro Asp Arg ProLeu Gly Trp Arg Pro Gly Trp Phe Leu Asp Ser Pro Asp Arg Pro

25302530

GlnGln

TrpTrp

- 215 044346- 215 044346

AsnAsn

AsnAsn

Leu 65Leu 65

AlaAla

ValVal

AlaAla

AlaAla

Thr 145Thr 145

ArgArg

LeuLeu

SerSer

LeuLeu

Glu 225Glu 225

CysCys

MetMet

SerSer

Pro Pro Thr Phe SerPro Pro Thr Phe Ser

Pro Ala Leu Leu Val 40Pro Ala Leu Leu Val 40

Val Thr Glu Gly Asp 45Val Thr Glu Gly Asp 45

Ala Thr Phe Thr Cys 50Ala Thr Phe Thr Cys 50

Asn Trp Tyr Arg Met 70Asn Trp Tyr Arg Met 70

Phe Pro Glu Asp Arg 85Phe Pro Glu Asp Arg 85

Thr Gln Leu Pro AsnThr Gln Leu Pro Asn

100100

Arg Arg Asn Asp SerArg Arg Asn Asp Ser

115115

Pro Lys Ala Gln Ile 130Pro Lys Ala Gln Ile 130

Glu Arg Arg Ala GluGlu Arg Arg Ala Glu

150150

Pro Ala Gly Gln PhePro Ala Gly Gln Phe

165165

Leu Gly Ser Leu Val 180Leu Gly Ser Leu Val 180

Arg Ala Ala Arg Gly 195Arg Ala Ala Arg Gly 195

Lys Glu Asp Pro Ser 210Lys Glu Asp Pro Ser 210

Leu Asp Phe Gln TrpLeu Asp Phe Gln Trp

230230

Val Pro Glu Gln ThrVal Pro Glu Gln Thr

245245

Gly Thr Ser Ser Pro 260Gly Thr Ser Ser Pro 260

Ala Gln Pro Leu ArgAla Gln Pro Leu Arg

275275

Ser Phe Ser Asn Thr 55Ser Phe Ser Asn Thr 55

Ser Glu Ser Phe Val 60Ser Glu Ser Phe Val 60

Ser Pro Ser Asn GlnSer Pro Ser Asn Gln

Ser Gln Pro Gly Gln 90Ser Gln Pro Gly Gln 90

Gly Arg Asp Phe His 105Gly Arg Asp Phe His 105

Gly Thr Tyr Leu Cys 120Gly Thr Tyr Leu Cys 120

Lys Glu Ser Leu Arg 135Lys Glu Ser Leu Arg 135

Val Pro Thr Ala HisVal Pro Thr Ala His

155155

Gln Thr Leu Val ValGln Thr Leu Val Val

170170

Leu Leu Val Trp ValLeu Leu Val Trp Val

185185

Thr Ile Gly Ala ArgThr Ile Gly Ala Arg

200200

Ala Val Pro Val Phe 215Ala Val Pro Val Phe 215

Arg Glu Lys Thr ProArg Glu Lys Thr Pro

235235

Glu Tyr Ala Thr IleGlu Tyr Ala Thr Ile

250250

Ala Arg Arg Gly Ser 265Ala Arg Arg Gly Ser 265

Pro Glu Asp Gly His 280Pro Glu Asp Gly His 280

Thr Asp Lys Leu Ala 80Thr Asp Lys Leu Ala 80

Asp Cys Arg Phe Arg 95Asp Cys Arg Phe Arg 95

Met Ser Val Val Arg 110Met Ser Val Val Arg 110

Gly Ala Ile Ser LeuGly Ala Ile Ser Leu

125125

Ala Glu Leu Arg Val 140Ala Glu Leu Arg Val 140

Pro Ser Pro Ser ProPro Ser Pro Ser Pro

160160

Gly Val Val Gly GlyGly Val Val Gly Gly

175175

Leu Ala Val Ile Cys 190Leu Ala Val Ile Cys 190

Arg Thr Gly Gln ProArg Thr Gly Gln Pro

205205

Ser Val Asp Tyr Gly 220Ser Val Asp Tyr Gly 220

Glu Pro Pro Val ProGlu Pro Pro Val Pro

240240

Val Phe Pro Ser GlyVal Phe Pro Ser Gly

255255

Ala Asp Gly Pro ArgAla Asp Gly Pro Arg

270270

Cys Ser Trp Pro LeuCys Ser Trp Pro Leu

285285

- 216 044346 <210> 11 <211> 199 <212> БЕЛОК <213> Homo sapiens <220>- 216 044346 <210> 11 <211> 199 <212> PROTEIN <213> Homo sapiens <220>

<221> новая или редкая характеристика <223> ICOS <400> 11<221> new or rare characteristic <223> ICOS <400> 11

Met Lys Ser Gly Leu 1 5Met Lys Ser Gly Leu 1 5

Trp Tyr Phe Phe LeuTrp Tyr Phe Phe Leu

Phe Cys Leu Arg IlePhe Cys Leu Arg Ile

Val Leu Thr Gly GluVal Leu Thr Gly Glu

Ile Asn Gly Ser AlaIle Asn Gly Ser Ala

Asn Tyr Glu Met Phe 30Asn Tyr Glu Met Phe 30

Phe His Asn Gly Gly 35Phe His Asn Gly Gly 35

Val Gln Ile Leu Cys 40Val Gln Ile Leu Cys 40

Lys Tyr Pro Asp Ile 45Lys Tyr Pro Asp Ile 45

Gln Gln Phe Lys Met 50Gln Gln Phe Lys Met 50

Gln Leu Leu Lys Gly 55Gln Leu Leu Lys Gly 55

Gly Gln Ile Leu Cys 60Gly Gln Ile Leu Cys 60

Leu Thr Lys Thr Lys 65Leu Thr Lys Thr Lys 65

Gly Ser Gly Asn Thr 70Gly Ser Gly Asn Thr 70

Val Ser Ile Lys Ser 75Val Ser Ile Lys Ser 75

Lys Phe Cys His Ser 85Lys Phe Cys His Ser 85

Gln Leu Ser Asn AsnGln Leu Ser Asn Asn

Ser Val Ser Phe PheSer Val Ser Phe Phe

Tyr Asn Leu Asp HisTyr Asn Leu Asp His

100100

Ser His Ala Asn TyrSer His Ala Asn Tyr

105105

Tyr Phe Cys Asn LeuTyr Phe Cys Asn Leu

110110

Ile Phe Asp Pro ProIle Phe Asp Pro Pro

115115

Pro Phe Lys Val Thr 120Pro Phe Lys Val Thr 120

Leu Thr Gly Gly TyrLeu Thr Gly Gly Tyr

125125

His Ile Tyr Glu Ser 130His Ile Tyr Glu Ser 130

Gln Leu Cys Cys Gln 135Gln Leu Cys Cys Gln 135

Leu Lys Phe Trp Leu 140Leu Lys Phe Trp Leu 140

Ile Gly Cys Ala Ala 145Ile Gly Cys Ala Ala 145

Phe Val Val Val Cys 150Phe Val Val Val Cys 150

Ile Leu Gly Cys Ile 155Ile Leu Gly Cys Ile 155

Ile Cys Trp Leu ThrIle Cys Trp Leu Thr

165165

Lys Lys Lys Tyr SerLys Lys Lys Tyr Ser

170170

Ser Ser Val His AspSer Ser Val His Asp

175175

Asn Gly Glu Tyr MetAsn Gly Glu Tyr Met

180180

Phe Met Arg Ala ValPhe Met Arg Ala Val

185185

Asn Thr Ala Lys LysAsn Thr Ala Lys Lys

190190

LysLys

IleIle

ValVal

AspAsp

Leu 80Leu 80

LeuLeu

SerSer

LeuLeu

ProPro

Leu 160Leu 160

ProPro

SerSer

Arg Leu Thr Asp Val Thr Leu 195Arg Leu Thr Asp Val Thr Leu 195

- 217 044346 <210> 12 <211> 289 <212> БЕЛОК <213> Homo sapiens <220>- 217 044346 <210> 12 <211> 289 <212> PROTEIN <213> Homo sapiens <220>

<221> новая или редкая характеристика <223> BTLA(CD272) <400> 12<221> new or rare characteristic <223> BTLA(CD272) <400> 12

Met Lys Thr Leu Pro 1 5Met Lys Thr Leu Pro 1 5

Ala Met Leu Gly ThrAla Met Leu Gly Thr

Gly Lys Leu Phe TrpGly Lys Leu Phe Trp

Phe Phe Leu Ile ProPhe Phe Leu Ile Pro

Tyr Leu Asp Ile TrpTyr Leu Asp Ile Trp

Asn Ile His Gly Lys 30Asn Ile His Gly Lys 30

Ser Cys Asp Val Gln 35Ser Cys Asp Val Gln 35

Leu Tyr Ile Lys Arg 40Leu Tyr Ile Lys Arg 40

Gln Ser Glu His Ser 45Gln Ser Glu His Ser 45

Leu Ala Gly Asp Pro 50Leu Ala Gly Asp Pro 50

Phe Glu Leu Glu Cys 55Phe Glu Leu Glu Cys 55

Pro Val Lys Tyr Cys 60Pro Val Lys Tyr Cys 60

Asn Arg Pro His Val 65Asn Arg Pro His Val 65

Thr Trp Cys Lys Leu 70Thr Trp Cys Lys Leu 70

Asn Gly Thr Thr Cys 75Asn Gly Thr Thr Cys 75

Lys Leu Glu Asp Arg 85Lys Leu Glu Asp Arg 85

Gln Thr Ser Trp Lys 90Gln Thr Ser Trp Lys 90

Glu Glu Lys Asn Ile 95Glu Glu Lys Asn Ile 95

Phe Phe Ile Leu HisPhe Phe Ile Leu His

100100

Phe Glu Pro Val LeuPhe Glu Pro Val Leu

105105

Pro Asn Asp Asn GlyPro Asn Asp Asn Gly

110110

Tyr Arg Cys Ser Ala 115Tyr Arg Cys Ser Ala 115

Asn Phe Gln Ser AsnAsn Phe Gln Ser Asn

120120

Leu Ile Glu Ser HisLeu Ile Glu Ser His

125125

Thr Thr Leu Tyr ValThr Thr Leu Tyr Val

130130

Thr Asp Val Lys SerThr Asp Val Lys Ser

135135

Ala Ser Glu Arg Pro 140Ala Ser Glu Arg Pro 140

Lys Asp Glu Met Ala 145Lys Asp Glu Met Ala 145

Ser Arg Pro Trp Leu 150Ser Arg Pro Trp Leu 150

Leu Tyr Arg Leu Leu 155Leu Tyr Arg Leu Leu 155

Leu Gly Gly Leu ProLeu Gly Gly Leu Pro

165165

Leu Leu Ile Thr ThrLeu Leu Ile Thr Thr

170170

Cys Phe Cys Leu PheCys Phe Cys Leu Phe

175175

Cys Leu Arg Arg HisCys Leu Arg Arg His

180180

Gln Gly Lys Gln AsnGln Gly Lys Gln Asn

185185

Glu Leu Ser Asp ThrGlu Leu Ser Asp Thr

190190

Gly Arg Glu Ile AsnGly Arg Glu Ile Asn

Leu Val Asp Ala HisLeu Val Asp Ala His

Leu Lys Ser Glu GlnLeu Lys Ser Glu Gln

ValVal

GluGlu

IleIle

AlaAla

Val 80Val 80

SerSer

SerSer

SerSer

SerSer

Pro 160Pro 160

CysCys

AlaAla

ThrThr

- 218 044346- 218 044346

195195

200200

205205

Glu Ala Ser Thr Arg Gln Asn SerGlu Ala Ser Thr Arg Gln Asn Ser

210 215210 215

Gln Val Leu Leu Ser Glu Thr GlyGln Val Leu Leu Ser Glu Thr Gly

220220

Ile Tyr Asp Asn Asp Pro Asp LeuIle Tyr Asp Asn Asp Pro Asp Leu

225 230225 230

Cys Phe Arg Met Gln Glu Gly SerCys Phe Arg Met Gln Glu Gly Ser

235 240235 240

Glu Val Tyr Ser Asn Pro Cys LeuGlu Val Tyr Ser Asn Pro Cys Leu

245245

Glu Glu Asn Lys Pro Gly Ile ValGlu Glu Asn Lys Pro Gly Ile Val

250 255250 255

Tyr Ala Ser Leu Asn His Ser ValTyr Ala Ser Leu Asn His Ser Val

260260

Ile Gly Pro Asn Ser Arg Leu AlaIle Gly Pro Asn Ser Arg Leu Ala

265 270265 270

Arg Asn Val Lys Glu Ala Pro ThrArg Asn Val Lys Glu Ala Pro Thr

275 280275 280

Glu Tyr Ala Ser Ile Cys Val ArgGlu Tyr Ala Ser Ile Cys Val Arg

285285

Ser <210> 13 <211> 458 <212> БЕЛОК <213> Homo sapiens <220>Ser <210> 13 <211> 458 <212> PROTEIN <213> Homo sapiens <220>

<221> новая или редкая характеристика <223> CD4 <400> 13<221> new or rare characteristic <223> CD4 <400> 13

Met Asn Arg Gly Val 1 5Met Asn Arg Gly Val 1 5

Pro Phe Arg His LeuPro Phe Arg His Leu

Leu Leu Val Leu Gln LeuLeu Leu Val Leu Gln Leu

Ala Leu Leu Pro AlaAla Leu Leu Pro Ala

Ala Thr Gln Gly LysAla Thr Gln Gly Lys

Lys Val Val Leu Gly Lys 30Lys Val Val Leu Gly Lys 30

Lys Gly Asp Thr Val 35Lys Gly Asp Thr Val 35

Glu Leu Thr Cys Thr 40Glu Leu Thr Cys Thr 40

Ala Ser Gln Lys Lys Ser 45Ala Ser Gln Lys Lys Ser 45

Ile Gln Phe His Trp 50Ile Gln Phe His Trp 50

Lys Asn Ser Asn Gln 55Lys Asn Ser Asn Gln 55

Ile Lys Ile Leu Gly Asn 60Ile Lys Ile Leu Gly Asn 60

Gln Gly Ser Phe Leu 65Gln Gly Ser Phe Leu 65

Thr Lys Gly Pro Ser 70Thr Lys Gly Pro Ser 70

Lys Leu Asn Asp Arg Ala 75 80Lys Leu Asn Asp Arg Ala 75 80

Asp Ser Arg Arg Ser 85Asp Ser Arg Arg Ser 85

Leu Trp Asp Gln Gly 90Leu Trp Asp Gln Gly 90

Asn Phe Pro Leu Ile IleAsn Phe Pro Leu Ile Ile

- 219 044346- 219 044346

LysLys

AspAsp

SerSer

Ser 145Ser 145

LysLys

GlnGln

ValVal

SerSer

Leu 225Leu 225

GlnGln

LysLys

GlnGln

ProPro

Thr 305Thr 305

GlnGln

LysLys

Asn Leu Lys Ile Glu AspAsn Leu Lys Ile Glu Asp

100100

Gln Lys Glu Glu Val Gln 115Gln Lys Glu Glu Val Gln 115

Asp Thr His Leu Leu GlnAsp Thr His Leu Leu Gln

130 135130 135

Pro Pro Gly Ser Ser ProPro Pro Gly Ser Ser Pro

150150

Asn Ile Gln Gly GlyAsn Ile Gln Gly Gly

165165

Asp Ser Gly Thr Trp 180Asp Ser Gly Thr Trp 180

Glu Phe Lys Ile AspGlu Phe Lys Ile Asp

195195

Ile Val Tyr Lys Lys 210Ile Val Tyr Lys Lys 210

Ala Phe Thr Val GluAla Phe Thr Val Glu

230230

Ala Glu Arg Ala SerAla Glu Arg Ala Ser

245245

AsnAsn

MetMet

Gln 290Gln 290

GlyGly

LysLys

Glu 260Glu 260

ValVal

SerSer

Gly 275Gly 275

LysLys

LysLys

LeuLeu

TyrTyr

LysLys

AlaAla

LeuLeu

GlyGly

HisHis

SerSer

GlnGln

310310

Ser Asp Thr Tyr Ile Cys Glu ValSer Asp Thr Tyr Ile Cys Glu Val

105 110105 110

Leu Leu Val Phe Gly Leu Thr AlaLeu Leu Val Phe Gly Leu Thr Ala

120 125120 125

Gly Gln Ser Leu Thr Leu Thr LeuGly Gln Ser Leu Thr Leu Thr Leu

140140

Ser Val Gln Cys Arg Ser Pro ArgSer Val Gln Cys Arg Ser Pro Arg

155155

Lys Thr Leu Ser Val Ser Gln Leu GluLys Thr Leu Ser Val Ser Gln Leu Glu

170 175170 175

Thr Cys Thr Val Leu Gln Asn Gln LysThr Cys Thr Val Leu Gln Asn Gln Lys

185 190185 190

Ile Val Val Leu Ala Phe Gln Lys AlaIle Val Val Leu Ala Phe Gln Lys Ala

200 205200 205

Glu Gly Glu Gln Val Glu Phe Ser PheGlu Gly Glu Gln Val Glu Phe Ser Phe

215 220215 220

Lys Leu Thr Gly Ser Gly Glu Leu TrpLys Leu Thr Gly Ser Gly Glu Leu Trp

235235

Ser Ser Lys Ser Trp Ile Thr Phe AspSer Ser Lys Ser Trp Ile Thr Phe Asp

250 255250 255

ValVal

ProPro

Gly 295Gly 295

GluGlu

LysLys

LeuLeu

280280

AsnAsn

ValVal

Leu Leu Gln Gln Lys Lys Asn 325 Asn 325 Leu Leu Thr Thr Cys Cys Leu Leu Met Met Leu 340 Leu 340 Ser Ser Leu Leu Lys Lys Leu Leu

Arg 265Arg 265

ValVal

ThrThr

GlnGln

AspAsp

ProPro

270270

LysLys

HisHis

LeuLeu

ThrThr

LeuLeu

ProPro

285285

GlnGln

AlaAla

LeuLeu

ThrThr

LeuLeu

AlaAla

300300

LeuLeu

GluGlu

AlaAla

AsnAsn

LeuLeu

ValVal

315315

ValVal

MetMet

ArgArg

AlaAla

Glu Val Trp Gly Pro Thr SerGlu Val Trp Gly Pro Thr Ser

330 335330 335

Glu Asn Lys Glu Ala Lys ValGlu Asn Lys Glu Ala Lys Val

345 350345 350

GluGlu

AsnAsn

GluGlu

Gly 160Gly 160

LeuLeu

LysLys

SerSer

ProPro

Trp 240Trp 240

LeuLeu

LeuLeu

LeuLeu

LysLys

Thr 320Thr 320

ProPro

SerSer

- 220 044346- 220 044346

Lys Arg Glu Lys Ala Val Trp Val Leu Asn Pro Glu Ala Gly MetLys Arg Glu Lys Ala Val Trp Val Leu Asn Pro Glu Ala Gly Met

355 360 365355 360 365

Gln CysGln Cys

370370

Leu Leu Ser Asp Ser Gly Gln Val Leu Leu Glu Ser AsnLeu Leu Ser Asp Ser Gly Gln Val Leu Leu Glu Ser Asn

375 380375 380

Lys Val 385Lys Val 385

Leu Pro Thr Trp Ser Thr Pro Val Gln Pro Met Ala LeuLeu Pro Thr Trp Ser Thr Pro Val Gln Pro Met Ala Leu

390 395390 395

Val LeuVal Leu

Gly Gly Val Ala Gly Leu Leu Leu Phe Ile Gly Leu GlyGly Gly Val Ala Gly Leu Leu Leu Phe Ile Gly Leu Gly

405 410 415405 410 415

Phe PhePhe Phe

Cys Val Arg Cys Arg His Arg Arg Arg Gln Ala Glu ArgCys Val Arg Cys Arg His Arg Arg Arg Gln Ala Glu Arg

420 425 430420 425 430

Ser Gln Ile Lys Arg Leu Leu 435Ser Gln Ile Lys Arg Leu Leu 435

His Arg Phe Gln Lys Thr CysHis Arg Phe Gln Lys Thr Cys

450 455450 455

Ser Glu Lys Lys Thr Cys Gln Cys 440 445Ser Glu Lys Lys Thr Cys Gln Cys 440 445

Ser Pro IleSer Pro Ile

TrpTrp

IleIle

Ile 400Ile 400

IleIle

MetMet

Pro <210> 14 <211> 235 <212> БЕЛОК <213> Homo sapiens <220>Pro <210> 14 <211> 235 <212> PROTEIN <213> Homo sapiens <220>

<221> новая или редкая характеристика <223> CD8A(CD8-альфа) <400>14<221> new or rare characteristic <223> CD8A(CD8-alpha) <400>14

Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu 1 5 1015Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu 1 5 1015

His Ala Ala Arg Pro Ser Gln Phe Arg Val Ser Pro Leu Asp ArgHis Ala Ala Arg Pro Ser Gln Phe Arg Val Ser Pro Leu Asp Arg

25302530

Trp Asn Leu Gly Glu Thr Val Glu Leu Lys Cys Gln Val Leu Leu 35 4045Trp Asn Leu Gly Glu Thr Val Glu Leu Lys Cys Gln Val Leu Leu 35 4045

Asn Pro Thr Ser Gly Cys Ser Trp Leu Phe Gln Pro Arg Gly Ala 50 5560Asn Pro Thr Ser Gly Cys Ser Trp Leu Phe Gln Pro Arg Gly Ala 50 5560

Ala Ser Pro Thr Phe Leu Leu Tyr Leu Ser Gln Asn Lys Pro Lys 65 7075Ala Ser Pro Thr Phe Leu Leu Tyr Leu Ser Gln Asn Lys Pro Lys 65 7075

Ala Glu Gly Leu Asp Thr Gln Arg Phe Ser Gly Lys Arg Leu Gly 85 9095Ala Glu Gly Leu Asp Thr Gln Arg Phe Ser Gly Lys Arg Leu Gly 85 9095

LeuLeu

ThrThr

SerSer

AlaAla

Ala 80Ala 80

AspAsp

- 221 044346- 221 044346

Thr Phe Val Leu Thr Leu Ser Asp 100Thr Phe Val Leu Thr Leu Ser Asp 100

Tyr Phe Cys Ser Ala Leu Ser Asn 115 120Tyr Phe Cys Ser Ala Leu Ser Asn 115 120

Phe Arg Arg Glu Asn Glu Gly TyrPhe Arg Arg Glu Asn Glu Gly Tyr

105 110105 110

SerSer

Ile Met Tyr Phe Ser His PheIle Met Tyr Phe Ser His Phe

125125

Val Pro Val Phe Leu Pro Ala Lys Pro Thr Thr Thr Pro Ala Pro ArgVal Pro Val Phe Leu Pro Ala Lys Pro Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg

130 135140130 135140

Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu Ser Leu ArgPro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu Ser Leu Arg

145 150 155160145 150 155160

Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val His Thr Arg GlyPro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val His Thr Arg Gly

165 170175165 170175

Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu Ala Gly ThrLeu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu Ala Gly Thr

180 185190180 185190

Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr Cys Asn HisCys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr Cys Asn His

195 200205195 200205

Arg Asn Arg Arg Arg Val Cys Lys Cys Pro Arg Pro Val Val Lys SerArg Asn Arg Arg Arg Val Cys Lys Cys Pro Arg Pro Val Val Lys Ser

210 215220210 215220

Gly Asp Lys Pro Ser Leu Ser Ala Arg Tyr ValGly Asp Lys Pro Ser Leu Ser Ala Arg Tyr Val

225 230235 <210>15 <211>210 < 212> БЕЛОК < 213> Homo sapiens <220>225 230235 <210>15 <211>210 <212> PROTEIN <213> Homo sapiens <220>

<221> <223><221> <223>

<400><400>

Met Arg 1 новая или редкая характеристика CD8B(CD8-бета)Met Arg 1 new or rare characteristic CD8B(CD8-beta)

Pro ArgPro Arg

Leu Trp 5Leu Trp 5

Leu LeuLeu Leu

Leu AlaLeu Ala

Ala GlnAla Gln

Leu ThrLeu Thr

Val Leu 15Val Leu 15

His GlyHis Gly

Asn SerAsn Ser

Val LeuVal Leu

Gln GlnGln Gln

Thr Pro 25Thr Pro 25

Ala TyrAla Tyr

Ile Lys Val Gln 30Ile Lys Val Gln 30

Thr AsnThr Asn

Lys Met 35Lys Met 35

Val MetVal Met

Leu SerLeu Ser

Cys GluCys Glu

Ala LysAla Lys

Ile Ser 45Ile Ser 45

Leu SerLeu Ser

Asn Met Arg Ile Tyr Trp Leu Arg Gln Arg Gln Ala Pro Ser Ser AspAsn Met Arg Ile Tyr Trp Leu Arg Gln Arg Gln Ala Pro Ser Ser Asp

- 222 044346- 222 044346

Ser His His Glu Phe 65Ser His His Glu Phe 65

Leu Ala Leu Trp Asp 70Leu Ala Leu Trp Asp 70

Ser Ala Lys Gly Thr 75Ser Ala Lys Gly Thr 75

His Gly Glu Glu Val 85His Gly Glu Glu Val 85

Glu Gln Glu Lys Ile 90Glu Gln Glu Lys Ile 90

Ala Val Phe Arg Asp 95Ala Val Phe Arg Asp 95

Ser Arg Phe Ile LeuSer Arg Phe Ile Leu

100100

Asn Leu Thr Ser ValAsn Leu Thr Ser Val

105105

Lys Pro Glu Asp SerLys Pro Glu Asp Ser

110110

Ile Tyr Phe Cys Met 115Ile Tyr Phe Cys Met 115

Ile Val Gly Ser Pro 120Ile Val Gly Ser Pro 120

Glu Leu Thr Phe GlyGlu Leu Thr Phe Gly

125125

Gly Thr Gln Leu SerGly Thr Gln Leu Ser

130130

Val Val Asp Phe LeuVal Val Asp Phe Leu

135135

Pro Thr Thr Ala GlnPro Thr Thr Ala Gln

140140

Thr Lys Lys Ser Thr 145Thr Lys Lys Ser Thr 145

Leu Lys Lys Arg Val 150Leu Lys Lys Arg Val 150

Cys Arg Leu Pro Arg 155Cys Arg Leu Pro Arg 155

Glu Thr Gln Lys GlyGlu Thr Gln Lys Gly

165165

Pro Leu Cys Ser ProPro Leu Cys Ser Pro

170170

Ile Thr Leu Gly LeuIle Thr Leu Gly Leu

175175

Val Ala Gly Val LeuVal Ala Gly Val Leu

180180

Val Leu Leu Val SerVal Leu Leu Val Ser

185185

Leu Gly Val Ala IleLeu Gly Val Ala Ile

190190

Leu Cys Cys Arg ArgLeu Cys Cys Arg Arg

195195

Arg Arg Ala Arg Leu 200Arg Arg Ala Arg Leu 200

Arg Phe Met Lys Gln 205Arg Phe Met Lys Gln 205

Ile 80Ile 80

AlaAla

GlyGly

LysLys

ProPro

Pro 160Pro 160

LeuLeu

HisHis

PhePhe

Tyr LysTyr Lys

210 <210> 16 <211> 525 < 212> БЕЛОК < 213> Homo sapiens <220>210 <210> 16 <211> 525 <212> PROTEIN <213> Homo sapiens <220>

< 221> новая или редкая характеристика <223> LAG3 <400>16<221> new or rare characteristic <223> LAG3 <400>16

Met Trp Glu Ala Gln Phe Leu Gly Leu Leu Phe Leu Gln Pro Leu 1 5 1015Met Trp Glu Ala Gln Phe Leu Gly Leu Leu Phe Leu Gln Pro Leu 1 5 1015

Val Ala Pro Val Lys Pro Leu Gln Pro Gly Ala Glu Val Pro ValVal Ala Pro Val Lys Pro Leu Gln Pro Gly Ala Glu Val Pro Val

25302530

TrpTrp

ValVal

- 223 044346- 223 044346

TrpTrp

ProPro

His 65His 65

AlaAla

ArgArg

ArgArg

ArgArg

Gly 145Gly 145

ArgArg

GlyGly

ArgArg

GlyGly

Phe 225Phe 225

CysCys

LeuLeu

GlyGly

Ala GlnAla Gln

Leu Gln 50Leu Gln 50

Gln ProGlin Pro

Pro GlyPro Gly

Arg TyrArg Tyr

Leu ProLeu Pro

115115

Gly Asp 130Gly Asp 130

Glu TyrGlu Tyr

Leu ArgLeu Arg

Ser LeuSer Leu

Pro AspPro Asp

195195

Arg Val 210Arg Val 210

Leu PheLeu Phe

Ile LeuIle Leu

Thr ValThr Val

Ala GlyAla Gly

275275

Glu GlyGlu Gly

Asp LeuAsp Leu

Asp SerAsp Ser

Pro HisPro His

Thr Val 100Thr Val 100

Leu GlnLeu Gln

Phe SerPhe Ser

Arg AlaArg Ala

Leu ArgLeu Arg

165165

Arg Ala 180Arg Ala 180

Arg ProArg Pro

Pro ValPro Val

Leu ProLeu Pro

Thr TyrThr Tyr

245245

Leu Gly 260Leu Gly 260

Ser ArgSer Arg

Ala ProAla Pro

Ser LeuSer Leu

Gly Pro 70Gly Pro 70

Pro AlaPro Ala

Leu SerLeu Ser

Pro ArgPro Arg

Leu TrpLeu Trp

135135

Ala Val 150Ala Val 150

Leu GlyLeu Gly

Ser AspSer Asp

Ala SerAla Ser

Arg GluArg Glu

215215

Gln ValGln Val

230230

Arg AspArg Asp

Leu GluLeu Glu

Val GlyVal Gly

Ala Gln 40Ala Gln 40

Leu ArgLeu Arg

Pro AlaPro Ala

Ala ProAla Pro

Val GlyVal Gly

105105

Val Gln 120Val Gln 120

Leu ArgLeu Arg

His LeuHis Leu

Gln AlaGln Ala

Trp ValTrp Val

185185

Val His 200Val His 200

Ser ProSer Pro

Ser ProSer Pro

Gly PheGly Phe

Pro ProPro Pro

265265

Leu ProLeu Pro

280280

Leu ProLeu Pro

Arg AlaArg Ala

Ala AlaAla Ala

Ser Ser 90Ser Ser 90

Pro GlyPro Gly

Leu AspLeu Asp

Pro AlaPro Ala

Arg AspArg Asp

155155

Ser Met 170Ser Met 170

Ile LeuIle Leu

Trp PheTrp Phe

His HisHis His

Met AspMet Asp

235235

Asn Val 250Asn Val 250

Thr ProThr Pro

Cys ArgCysArg

Cys Ser 45Cys Ser 45

Gly Val 60Gly Val 60

Pro GlyPro Gly

Trp GlyTrp Gly

Gly LeuGly Leu

Glu ArgGlu Arg

125125

Arg Arg 140Arg Arg 140

Arg AlaArg Ala

Thr AlaThr Ala

Asn CysAsn Cys

Arg AsnArg Asn

205205

His Leu 220His Leu 220

Ser GlySer Gly

Ser IleSer Ile

Leu ThrLeu Thr

Leu ProLeu Pro

285285

Pro ThrPro Thr

Thr TrpThr Trp

His ProHis Pro

Pro Arg 95Pro Arg 95

Arg Ser 110Arg Ser 110

Gly ArgGly Arg

Ala AspAla Asp

Leu SerLeu Ser

Ser ProSer Pro

175175

Ser Phe 190Ser Phe 190

Arg GlyArg Gly

Ala GluAla Glu

Pro TrpProTrp

Met TyrMet Tyr

255255

Val Tyr 270Val Tyr 270

Ala GlyAla Gly

IleIle

GlnGln

Leu 80Leu 80

ProPro

GlyGly

GlnGln

AlaAla

Cys 160Cys 160

ProPro

SerSer

GlnGln

SerSer

Gly 240Gly 240

AsnAsn

AlaAla

ValVal

- 224 044346- 224 044346

Gly Thr Arg Ser Phe 290Gly Thr Arg Ser Phe 290

Leu Thr Ala Lys TrpLeu Thr Ala Lys Trp

295295

Thr Pro Pro Gly Gly 300Thr Pro Pro Gly Gly 300

Pro Asp Leu Leu Val 305Pro Asp Leu Leu Val 305

Thr Gly Asp Asn Gly 310Thr Gly Asp Asn Gly 310

Asp Phe Thr Leu Arg 315Asp Phe Thr Leu Arg 315

Glu Asp Val Ser GlnGlu Asp Val Ser Gln

325325

Ala Gln Ala Gly ThrAla Gln Ala Gly Thr

330330

Tyr Thr Cys His IleTyr Thr Cys His Ile

335335

Leu Gln Glu Gln GlnLeu Gln Glu Gln Gln

340340

Leu Asn Ala Thr ValLeu Asn Ala Thr Val

345345

Thr Leu Ala Ile IleThr Leu Ala Ile Ile

350350

Val Thr Pro Lys SerVal Thr Pro Lys Ser

355355

Phe Gly Ser Pro Gly 360Phe Gly Ser Pro Gly 360

Ser Leu Gly Lys LeuSer Leu Gly Lys Leu

365365

Cys Glu Val Thr ProCys Glu Val Thr Pro

370370

Val Ser Gly Gln GluVal Ser Gly Gln Glu

375375

Arg Phe Val Trp SerArg Phe Val Trp Ser

380380

Leu Asp Thr Pro Ser 385Leu Asp Thr Pro Ser 385

Gln Arg Ser Phe Ser 390Gln Arg Ser Phe Ser 390

Gly Pro Trp Leu Glu 395Gly Pro Trp Leu Glu 395

Gln Glu Ala Gln LeuGln Glu Ala Gln Leu

405405

Leu Ser Gln Pro TrpLeu Ser Gln Pro Trp

410410

Gln Cys Gln Leu TyrGln Cys Gln Leu Tyr

415415

Gly Glu Arg Leu LeuGly Glu Arg Leu Leu

420420

Gly Ala Ala Val TyrGly Ala Ala Val Tyr

425425

Phe Thr Glu Leu SerPhe Thr Glu Leu Ser

430430

Pro Gly Ala Gln ArgPro Gly Ala Gln Arg

435435

Ser Gly Arg Ala Pro 440Ser Gly Arg Ala Pro 440

Gly Ala Leu Pro Ala 445Gly Ala Leu Pro Ala 445

His Leu Leu Leu PheHis Leu Leu Leu Phe

450450

Leu Ile Leu Gly ValLeu Ile Leu Gly Val

455455

Leu Ser Leu Leu LeuLeu Ser Leu Leu Leu

460460

Val Thr Gly Ala Phe 465Val Thr Gly Ala Phe 465

Gly Phe His Leu Trp 470Gly Phe His Leu Trp 470

Arg Arg Gln Trp Arg 475Arg Arg Gln Trp Arg 475

Arg Arg Phe Ser AlaArg Arg Phe Ser Ala

485485

Leu Glu Gln Gly IleLeu Glu Gln Gly Ile

490490

His Pro Pro Gln AlaHis Pro Pro Gln Ala

495495

Ser Lys Ile Glu GluSer Lys Ile Glu Glu

500500

Leu Glu Gln Glu ProLeu Glu Gln Glu Pro

505505

Glu Pro Glu Pro GluGlu Pro Glu Pro Glu

510510

GlyGly

Leu 320Leu 320

HisHis

ThrThr

LeuLeu

SerSer

Ala 400Ala 400

GlnGln

SerSer

GlyGly

LeuLeu

Pro 480Pro 480

GlnGln

ProPro

Glu Pro Glu Pro GluGlu Pro Glu Pro Glu

515515

Pro Glu Pro Glu ProPro Glu Pro Glu Pro

520520

Glu Gln LeuGlu Gln Leu

525 <210> 17 <211> 301525 <210> 17 <211> 301

- 225 044346 <212> БЕЛОК <213> Homo sapiens <220>- 225 044346 <212> PROTEIN <213> Homo sapiens <220>

<221> новая или редкая характеристика <223> HAVCR2(TIM-3) <400> 17<221> new or rare characteristic <223> HAVCR2(TIM-3) <400> 17

Met Phe Ser His Leu 1 5Met Phe Ser His Leu 1 5

Pro Phe Asp Cys ValPro Phe Asp Cys Val

Leu Leu Leu Leu Leu 15Leu Leu Leu Leu Leu 15

Leu Leu Thr Arg SerLeu Leu Thr Arg Ser

Ser Glu Val Glu TyrSer Glu Val Glu Tyr

Arg Ala Glu Val GlyArg Ala Glu Val Gly

Asn Ala Tyr Leu Pro 35Asn Ala Tyr Leu Pro 35

Cys Phe Tyr Thr Pro 40Cys Phe Tyr Thr Pro 40

Ala Ala Pro Gly Asn 45Ala Ala Pro Gly Asn 45

Val Pro Val Cys Trp 50Val Pro Val Cys Trp 50

Gly Lys Gly Ala Cys 55Gly Lys Gly Ala Cys 55

Pro Val Phe Glu Cys 60Pro Val Phe Glu Cys 60

Asn Val Val Leu Arg 65Asn Val Val Leu Arg 65

Thr Asp Glu Arg Asp 70Thr Asp Glu Arg Asp 70

Val Asn Tyr Trp Thr 75Val Asn Tyr Trp Thr 75

Arg Tyr Trp Leu Asn 85Arg Tyr Trp Leu Asn 85

Gly Asp Phe Arg Lys 90Gly Asp Phe Arg Lys 90

Gly Asp Val Ser Leu 95Gly Asp Val Ser Leu 95

Ile Glu Asn Val ThrIle Glu Asn Val Thr

100100

Leu Ala Asp Ser GlyLeu Ala Asp Ser Gly

105105

Ile Tyr Cys Cys ArgIle Tyr Cys Cys Arg

110110

Gln Ile Pro Gly Ile 115Gln Ile Pro Gly Ile 115

Met Asn Asp Glu Lys 120Met Asn Asp Glu Lys 120

Phe Asn Leu Lys Leu 125Phe Asn Leu Lys Leu 125

Ile Lys Pro Ala LysIle Lys Pro Ala Lys

130130

Val Thr Pro Ala ProVal Thr Pro Ala Pro

135135

Thr Arg Gln Arg Asp 140Thr Arg Gln Arg Asp 140

Thr Ala Ala Phe Pro 145Thr Ala Ala Phe Pro 145

Arg Met Leu Thr Thr 150Arg Met Leu Thr Thr 150

Arg Gly His Gly Pro 155Arg Gly His Gly Pro 155

Glu Thr Gln Thr LeuGlu Thr Gln Thr Leu

165165

Gly Ser Leu Pro AspGly Ser Leu Pro Asp

170170

Ile Asn Leu Thr GlnIle Asn Leu Thr Gln

175175

Ser Thr Leu Ala AsnSer Thr Leu Ala Asn

180180

Glu Leu Arg Asp SerGlu Leu Arg Asp Ser

185185

Arg Leu Ala Asn AspArg Leu Ala Asn Asp

190190

Arg Asp Ser Gly Ala 195Arg Asp Ser Gly Ala 195

Thr Ile Arg Ile Gly 200Thr Ile Arg Ile Gly 200

Ile Tyr Ile Gly AlaIle Tyr Ile Gly Ala

205205

Ile Cys Ala Gly LeuIle Cys Ala Gly Leu

Ala Leu Ala Leu IleAla Leu Ala Leu Ile

Phe Gly Ala Leu IlePhe Gly Ala Leu Ile

LeuLeu

GlnGln

LeuLeu

GlyGly

Ser 80Ser 80

ThrThr

IleIle

ValVal

PhePhe

Ala 160Ala 160

IleIle

LeuLeu

GlyGly

PhePhe

- 226 044346- 226 044346

210210

215215

220220

Lys Trp Tyr Ser 225Lys Trp Tyr Ser 225

His Ser Lys Glu Lys Ile Gln Asn Leu Ser LeuHis Ser Lys Glu Lys Ile Gln Asn Leu Ser Leu

230 235230 235

Ser Leu Ala AsnSer Leu Ala Asn

Leu Pro Pro Ser Gly Leu Ala Asn Ala Val AlaLeu Pro Pro Ser Gly Leu Ala Asn Ala Val Ala

245 250 255245 250 255

Gly Ile Arg SerGly Ile Arg Ser

260260

Glu Glu Asn Ile Tyr Thr Ile Glu Glu Asn ValGlu Glu Asn Ile Tyr Thr Ile Glu Glu Asn Val

265 270265 270

Glu Val Glu GluGlu Val Glu Glu

275275

Pro Asn Glu Tyr Tyr Cys Tyr Val Ser Ser ArgPro Asn Glu Tyr Tyr Cys Tyr Val Ser Ser Arg

280 285280 285

Ile 240Ile 240

GluGlu

TyrTyr

GlnGln

Gln Pro Ser GlnGln Pro Ser Gln

290290

Pro Leu Gly Cys Arg Phe Ala Met ProPro Leu Gly Cys Arg Phe Ala Met Pro

295 300 <210> 18 <211> 526 <212> БЕЛОК <213> Homo sapiens <220>295 300 <210> 18 <211> 526 <212> PROTEIN <213> Homo sapiens <220>

<221> новая или редкая характеристика <223> CEACAM1 <400> 18<221> new or rare characteristic <223> CEACAM1 <400> 18

Met Gly His Leu Ser Ala Pro Leu His Arg Val Arg Val Pro Trp 1 5 10 15Met Gly His Leu Ser Ala Pro Leu His Arg Val Arg Val Pro Trp 1 5 10 15

Gly Leu Leu Leu Thr Ala Ser Leu Leu Thr Phe Trp Asn Pro ProGly Leu Leu Leu Thr Ala Ser Leu Leu Thr Phe Trp Asn Pro Pro

25 3025 30

Thr Ala Gln Leu Thr Thr Glu Ser Met Pro Phe Asn Val Ala GluThr Ala Gln Leu Thr Thr Glu Ser Met Pro Phe Asn Val Ala Glu

40 4540 45

Lys Glu Val Leu Leu Leu Val His Asn Leu Pro Gln Gln Leu Phe 50 55 60Lys Glu Val Leu Leu Leu Val His Asn Leu Pro Gln Gln Leu Phe 50 55 60

Tyr Ser Trp 65Tyr Ser Trp 65

Gly Tyr AlaGly Tyr Ala

TyrTyr

IleIle

Gly Arg GluGly Arg Glu

ThrThr

100100

Lys Gly Glu Arg Val Asp Gly Asn Arg Gln IleLys Gly Glu Arg Val Asp Gly Asn Arg Gln Ile

7575

Gly Thr Gln Gln Ala Thr Pro Gly Pro Ala Asn 85 90 95Gly Thr Gln Gln Ala Thr Pro Gly Pro Ala Asn 85 90 95

Ile Tyr Pro Asn Ala Ser Leu Leu Ile Gln AsnIle Tyr Pro Asn Ala Ser Leu Leu Ile Gln Asn

105 110105 110

GlnGln

ThrThr

GlyGly

GlyGly

Val 80Val 80

SerSer

ValVal

- 227 044346- 227 044346

Thr Gln Asn Asp Thr 115Thr Gln Asn Asp Thr 115

Gly Phe Tyr Thr LeuGly Phe Tyr Thr Leu

120120

Gln Val Ile Lys Ser 125Gln Val Ile Lys Ser 125

Leu Val Asn Glu GluLeu Val Asn Glu Glu

130130

Ala Thr Gly Gln PheAla Thr Gly Gln Phe

135135

His Val Tyr Pro GluHis Val Tyr Pro Glu

140140

Pro Lys Pro Ser Ile 145Pro Lys Pro Ser Ile 145

Ser Ser Asn Asn Ser 150Ser Ser Asn Asn Ser 150

Asn Pro Val Glu Asp 155Asn Pro Val Glu Asp 155

Asp Ala Val Ala PheAsp Ala Val Ala Phe

165165

Thr Cys Glu Pro GluThr Cys Glu Pro Glu

170170

Thr Gln Asp Thr ThrThr Gln Asp Thr Thr

175175

Leu Trp Trp Ile AsnLeu Trp Trp Ile Asn

180180

Asn Gln Ser Leu ProAsn Gln Ser Leu Pro

185185

Val Ser Pro Arg LeuVal Ser Pro Arg Leu

190190

Leu Ser Asn Gly Asn 195Leu Ser Asn Gly Asn 195

Arg Thr Leu Thr Leu 200Arg Thr Leu Thr Leu 200

Leu Ser Val Thr ArgLeu Ser Val Thr Arg

205205

Asp Thr Gly Pro TyrAsp Thr Gly Pro Tyr

210210

Glu Cys Glu Ile GlnGlu Cys Glu Ile Gln

215215

Asn Pro Val Ser AlaAsn Pro Val Ser Ala

220220

Arg Ser Asp Pro Val 225Arg Ser Asp Pro Val 225

Thr Leu Asn Val Thr 230Thr Leu Asn Val Thr 230

Tyr Gly Pro Asp Thr 235Tyr Gly Pro Asp Thr 235

Thr Ile Ser Pro SerThr Ile Ser Pro Ser

245245

Asp Thr Tyr Tyr ArgAsp Thr Tyr Tyr Arg

250250

Pro Gly Ala Asn LeuPro Gly Ala Asn Leu

255255

Leu Ser Cys Tyr AlaLeu Ser Cys Tyr Ala

260260

Ala Ser Asn Pro ProAla Ser Asn Pro Pro

265265

Ala Gln Tyr Ser TrpAla Gln Tyr Ser Trp

270270

Ile Asn Gly Thr PheIle Asn Gly Thr Phe

275275

Gln Gln Ser Thr GlnGln Gln Ser Thr Gln

280280

Glu Leu Phe Ile ProGlu Leu Phe Ile Pro

285285

Ile Thr Val Asn AsnIle Thr Val Asn Asn

290290

Ser Gly Ser Tyr ThrSer Gly Ser Tyr Thr

295295

Cys His Ala Asn AsnCys His Ala Asn Asn

300300

Val Thr Gly Cys Asn 305Val Thr Gly Cys Asn 305

Arg Thr Thr Val Lys 310Arg Thr Thr Val Lys 310

Thr Ile Ile Val Thr 315Thr Ile Ile Val Thr 315

Leu Ser Pro Val ValLeu Ser Pro Val Val

325325

Ala Lys Pro Gln IleAla Lys Pro Gln Ile

330330

Lys Ala Ser Lys ThrLys Ala Ser Lys Thr

335335

Val Thr Gly Asp LysVal Thr Gly Asp Lys

340340

Asp Ser Val Asn LeuAsp Ser Val Asn Leu

345345

Thr Cys Ser Thr AsnThr Cys Ser Thr Asn

350350

Thr Gly Ile Ser IleThr Gly Ile Ser Ile

355355

Arg Trp Phe Phe Lys 360Arg Trp Phe Phe Lys 360

Asn Gln Ser Leu ProAsn Gln Ser Leu Pro

365365

AspAsp

LeuLeu

Lys 160Lys 160

TyrTyr

GlnGln

AsnAsn

AsnAsn

Pro 240Pro 240

SerSer

LeuLeu

AsnAsn

SerSer

Glu 320Glu 320

ThrThr

AspAsp

SerSer

- 228 044346- 228 044346

Ser Glu ArgSer Glu Arg

370370

Met Lys LeuMet Lys Leu

Ser Gln Gly 375Ser Gln Gly 375

Asn Thr ThrAsn Thr Thr

380380

Leu Ser IleLeu Ser Ile

Pro Val Lys 385Pro Val Lys 385

Arg Glu AspArg Glu Asp

390390

Ala Gly ThrAla Gly Thr

Tyr Trp CysTyr Trp Cys

395395

Glu Val PheGlu Val Phe

Pro Ile SerPro Ile Ser

Lys Asn GlnLys Asn Gln

405405

Ser Asp ProSer Asp Pro

Ile Met Leu 410Ile Met Leu 410

Asn Val AsnAsn Val Asn

415415

Asn Ala LeuAsn Ala Leu

Pro Gln Glu 420Pro Gln Glu 420

Asn Gly LeuAsn Gly Leu

425425

Ser Pro GlySer Pro Gly

Ala Ile AlaAla Ile Ala

430430

Ile Val IleIle Val Ile

435435

Gly Val ValGly Val Val

Ala Leu ValAla Leu Val

440440

Ala Leu IleAla Leu Ile

Ala Val Ala 445Ala Val Ala 445

Ala Cys PheAla Cys Phe

450450

Leu His PheLeu His Phe

Gly Lys Thr 455Gly Lys Thr 455

Gly Arg AlaGly Arg Ala

460460

Ser Asp GlnSer Asp Gln

Asp Leu Thr 465Asp Leu Thr 465

Glu His LysGlu His Lys

470470

Pro Ser ValPro Ser Val

Ser Asn HisSer Asn His

475475

Thr Gln AspThr Gln Asp

Ser Asn AspSer Asn Asp

Pro Pro AsnPro Pro Asn

485485

Lys Met AsnLys Met Asn

Glu Val Thr 490Glu Val Thr 490

Tyr Ser ThrTyr Ser Thr

495495

Asn Phe GluAsn Phe Glu

Ala Gln Gln 500Ala Gln Gln 500

Pro Thr GlnPro Thr Gln

505505

Pro Thr SerPro Thr Ser

Ala Ser ProAla Ser Pro

510510

AsnAsn

Asn 400Asn 400

TyrTyr

GlyGly

LeuLeu

ArgArg

His 480His 480

LeuLeu

SerSer

Leu Thr AlaLeu Thr Ala

515515

Thr Glu IleThr Glu Ile

Ile Tyr SerIle Tyr Ser

520520

Glu Val LysGlu Val Lys

Lys Gln 525 <210> 19 <211> 244 <212> БЕЛОК <213> Homo sapiens <220>Lys Gln 525 <210> 19 <211> 244 <212> PROTEIN <213> Homo sapiens <220>

<221> новая или редкая характеристика <223> TIGIT <400> 19<221> new or rare characteristic <223> TIGIT <400> 19

MetMet

ArgArg

TrpTrp

CysCys

Leu 5Leu 5

LeuLeu

LeuLeu

IleIle

TrpTrp

Ala 10Ala 10

GlnGln

GlyGly

LeuLeu

ArgArg

Gln 15Gln 15

ProPro

LeuLeu

AlaAla

Ser 20Ser 20

GlyGly

MetMet

MetMet

ThrThr

Gly 25Gly 25

ThrThr

IleIle

GluGlu

ThrThr

Thr 30Thr 30

GlyGly

IleIle

SerSer

Ala 35Ala 35

GluGlu

LysLys

GlyGly

GlyGly

Ser 40Ser 40

IleIle

IleIle

LeuLeu

GlnGln

Cys 45Cys 45

HisHis

LeuLeu

AlaAla

AsnAsn

SerSer

- 229 044346- 229 044346

Ser Thr Thr Ala Gln 50Ser Thr Thr Ala Gln 50

Val Thr Gln Val AsnVal Thr Gln Val Asn

Trp Glu Gln Gln Asp 60Trp Glu Gln Gln Asp 60

Leu Leu Ala Ile Cys 65Leu Leu Ala Ile Cys 65

Asn Ala Asp Leu Gly 70Asn Ala Asp Leu Gly 70

Trp His Ile Ser Pro 75Trp His Ile Ser Pro 75

Phe Lys Asp Arg Val 85Phe Lys Asp Arg Val 85

Ala Pro Gly Pro Gly 90Ala Pro Gly Pro Gly 90

Leu Gly Leu Thr Leu 95Leu Gly Leu Thr Leu 95

Ser Leu Thr Val AsnSer Leu Thr Val Asn

100100

Asp Thr Gly Glu TyrAsp Thr Gly Glu Tyr

105105

Phe Cys Ile Tyr HisPhe Cys Ile Tyr His

110110

Tyr Pro Asp Gly Thr 115Tyr Pro Asp Gly Thr 115

Tyr Thr Gly Arg IleTyr Thr Gly Arg Ile

120120

Phe Leu Glu Val LeuPhe Leu Glu Val Leu

125125

Ser Ser Val Ala GluSer Ser Val Ala Glu

130130

His Gly Ala Arg PheHis Gly Ala Arg Phe

135135

Gln Ile Pro Leu LeuGln Ile Pro Leu Leu

140140

Ala Met Ala Ala Thr 145Ala Met Ala Ala Thr 145

Leu Val Val Ile Cys 150Leu Val Val Ile Cys 150

Thr Ala Val Ile Val 155Thr Ala Val Ile Val 155

Val Ala Leu Thr ArgVal Ala Leu Thr Arg

165165

Lys Lys Lys Ala LeuLys Lys Lys Ala Leu

170170

Arg Ile His Ser ValArg Ile His Ser Val

175175

Gly Asp Leu Arg ArgGly Asp Leu Arg Arg

180180

Lys Ser Ala Gly GlnLys Ser Ala Gly Gln

185185

Glu Glu Trp Ser ProGlu Glu Trp Ser Pro

190190

Ala Pro Ser Pro ProAla Pro Ser Pro Pro

195195

Gly Ser Cys Val Gln 200Gly Ser Cys Val Gln 200

Ala Glu Ala Ala ProAla Glu Ala Ala Pro

205205

Gly Leu Cys Gly Glu 210Gly Leu Cys Gly Glu 210

Gln Arg Gly Glu AspGln Arg Gly Glu Asp

215215

Cys Ala Glu Leu HisCys Ala Glu Leu His

220220

Tyr Phe Asn Val Leu 225Tyr Phe Asn Val Leu 225

Ser Tyr Arg Ser Leu 230Ser Tyr Arg Ser Leu 230

Gly Asn Cys Ser Phe 235Gly Asn Cys Ser Phe 235

GlnGln

Ser 80Ser 80

GlnGln

ThrThr

GluGlu

GlyGly

Val 160Val 160

GluGlu

SerSer

AlaAla

AspAsp

Phe 240Phe 240

Thr Glu Thr Gly <210> 20 <211> 417 <212> БЕЛОК <213> Homo sapiens <220>Thr Glu Thr Gly <210> 20 <211> 417 <212> PROTEIN <213> Homo sapiens <220>

<221> новая или редкая характеристика <223> PVR(CD155)<221> new or rare characteristic <223> PVR(CD155)

- 230 044346 <400> 20- 230 044346 <400> 20

Met Ala Arg Ala Met 1 5Met Ala Arg Ala Met 1 5

Ala Ala Ala Trp ProAla Ala Ala Trp Pro

Leu Leu Leu Val AlaLeu Leu Leu Val Ala

Leu Val Leu Ser TrpLeu Val Leu Ser Trp

Pro Pro Pro Gly ThrPro Pro Pro Gly Thr

Gly Asp Val Val Val 30Gly Asp Val Val Val 30

Ala Pro Thr Gln Val 35Ala Pro Thr Gln Val 35

Pro Gly Phe Leu Gly 40Pro Gly Phe Leu Gly 40

Asp Ser Val Thr Leu 45Asp Ser Val Thr Leu 45

Cys Tyr Leu Gln Val 50Cys Tyr Leu Gln Val 50

Pro Asn Met Glu ValPro Asn Met Glu Val

Thr His Val Ser Gln 60Thr His Val Ser Gln 60

Thr Trp Ala Arg His 65Thr Trp Ala Arg His 65

Gly Glu Ser Gly Ser 70Gly Glu Ser Gly Ser 70

Met Ala Val Phe His 75Met Ala Val Phe His 75

Thr Gln Gly Pro Ser 85Thr Gln Gly Pro Ser 85

Tyr Ser Glu Ser Lys 90Tyr Ser Glu Ser Lys 90

Arg Leu Glu Phe Val 95Arg Leu Glu Phe Val 95

Ala Arg Leu Gly AlaAla Arg Leu Gly Ala

100100

Glu Leu Arg Asn AlaGlu Leu Arg Asn Ala

105105

Ser Leu Arg Met PheSer Leu Arg Met Phe

110110

Leu Arg Val Glu Asp 115Leu Arg Val Glu Asp 115

Glu Gly Asn Tyr ThrGlu Gly Asn Tyr Thr

120120

Cys Leu Phe Val Thr 125Cys Leu Phe Val Thr 125

Pro Gln Gly Ser Arg 130Pro Gln Gly Ser Arg 130

Ser Val Asp Ile TrpSer Val Asp Ile Trp

135135

Leu Arg Val Leu AlaLeu Arg Val Leu Ala

140140

Pro Gln Asn Thr Ala 145Pro Gln Asn Thr Ala 145

Glu Val Gln Lys Val 150Glu Val Gln Lys Val 150

Gln Leu Thr Gly Glu 155Gln Leu Thr Gly Glu 155

Val Pro Met Ala ArgVal Pro Met Ala Arg

165165

Cys Val Ser Thr GlyCys Val Ser Thr Gly

170170

Gly Arg Pro Pro AlaGly Arg Pro Pro Ala

175175

Ile Thr Trp His SerIle Thr Trp His Ser

180180

Asp Leu Gly Gly MetAsp Leu Gly Gly Met

185185

Pro Asn Thr Ser GlnPro Asn Thr Ser Gln

190190

Pro Gly Phe Leu Ser 195Pro Gly Phe Leu Ser 195

Gly Thr Val Thr Val 200Gly Thr Val Thr Val 200

Thr Ser Leu Trp Ile 205Thr Ser Leu Trp Ile 205

Val Pro Ser Ser GlnVal Pro Ser Ser Gln

210210

Val Asp Gly Lys AsnVal Asp Gly Lys Asn

215215

Val Thr Cys Lys ValVal Thr Cys Lys Val

220220

His Glu Ser Phe Glu 225His Glu Ser Phe Glu 225

Lys Pro Gln Leu Leu 230Lys Pro Gln Leu Leu 230

Thr Val Asn Leu Thr 235Thr Val Asn Leu Thr 235

LeuLeu

GlnGln

ProPro

LeuLeu

Gln 80Gln 80

AlaAla

GlyGly

PhePhe

LysLys

Pro 160Pro 160

GlnGln

ValVal

LeuLeu

GluGlu

Val 240Val 240

- 231 044346- 231 044346

Tyr Tyr ProTyr Tyr Pro

Pro Glu ValPro Glu Val

245245

Ser Ile SerSer Ile Ser

Gly Tyr Asp 250Gly Tyr Asp 250

Asn Asn TrpAsn Asn Trp

255255

Leu Gly GlnLeu Gly Gln

Asn Glu Ala 260Asn Glu Ala 260

Thr Leu ThrThr Leu Thr

265265

Cys Asp AlaCys Asp Ala

Arg Ser AsnArg Ser Asn

270270

Glu Pro ThrGlu Pro Thr

275275

Gly Tyr AsnGly Tyr Asn

Trp Ser ThrTrp Ser Thr

280280

Thr Met GlyThr Met Gly

Pro Leu Pro 285Pro Leu Pro 285

Phe Ala ValPhe Ala Val

290290

Ala Gln GlyAla Gln Gly

Ala Gln Leu 295Ala Gln Leu 295

Leu Ile ArgLeu Ile Arg

300300

Pro Val AspPro Val Asp

Pro Ile Asn 305Pro Ile Asn 305

Thr Thr LeuThr Thr Leu

310310

Ile Cys AsnIle Cys Asn

Val Thr AsnVal Thr Asn

315315

Ala Leu GlyAla Leu Gly

Arg Gln AlaArg Gln Ala

Glu Leu ThrGlu Leu Thr

325325

Val Gln ValVal Gln Val

Lys Glu Gly 330Lys Glu Gly 330

Pro Pro SerPro Pro Ser

335335

His Ser GlyHis Ser Gly

Ile Ser Arg 340Ile Ser Arg 340

Asn Ala IleAsn Ala Ile

345345

Ile Phe LeuIle Phe Leu

Val Leu GlyVal Leu Gly

350350

Leu Val PheLeu Val Phe

355355

Leu Ile LeuLeu Ile Leu

Leu Gly IleLeu Gly Ile

360360

Gly Ile TyrGly Ile Tyr

Phe Tyr Trp 365Phe Tyr Trp 365

Lys Cys SerLys Cys Ser

370370

Arg Glu ValArg Glu Val

Leu Trp His 375Leu Trp His 375

Cys His LeuCys His Leu

380380

Cys Pro SerCys Pro Ser

Thr Glu His 385Thr Glu His 385

Ala Ser AlaAla Ser Ala

390390

Ser Ala AsnSer Ala Asn

Gly His ValGly His Val

395395

Ser Tyr SerSer Tyr Ser

Val Ser ArgVal Ser Arg

Glu Asn SerGlu Asn Ser

405405

Ser Ser GlnSer Ser Gln

Asp Pro Gln 410Asp Pro Gln 410

Thr Glu GlyThr Glu Gly

415415

TyrTyr

ProPro

ProPro

LysLys

Ala 320Ala 320

GluGlu

IleIle

SerSer

SerSer

Ala 400Ala 400

ThrThr

Arg <210> 21 <211> 538 <212> БЕЛОК <213> Homo sapiens <220>Arg <210> 21 <211> 538 <212> PROTEIN <213> Homo sapiens <220>

<221> новая или редкая характеристика <223> PVRL2(CD112) <400> 21<221> new or rare characteristic <223> PVRL2(CD112) <400> 21

Met Ala Arg Ala Ala Ala Leu Leu Pro Ser Arg Ser Pro Pro Thr 1 5 10 15Met Ala Arg Ala Ala Ala Leu Leu Pro Ser Arg Ser Pro Pro Thr 1 5 10 15

ProPro

- 232 044346- 232 044346

LeuLeu

AspAsp

ThrThr

Ile 65Ile 65

AsnAsn

LysLys

GlyGly

GlyGly

Phe 145Phe 145

LysLys

ProPro

ArgArg

ValVal

Leu 225Leu 225

GluGlu

ValVal

Leu TrpLeu Trp

Val ArgVal Arg

Val Glu 50Val Glu 50

Ser LeuSer Leu

Val AlaVal Ala

Pro GlyPro Gly

Gln AspGln Asp

115115

Leu Thr 130Leu Thr 130

Pro LysPro Lys

Pro LysPro Lys

Thr ThrThr Thr

Ile SerIle Ser

195195

Ser Gly 210Ser Gly 210

Val ProVal Pro

His GluHis Glu

Arg TyrArg Tyr

Pro Leu 20Pro Leu 20

Val GlnVal Gln

Leu ProLeu Pro

Val ThrVal Thr

Ala PheAla Phe

Ser Glu 100Ser Glu 100

Thr GluThr Glu

Val GluVal Glu

Gly SerGly Ser

Asn GlnAsn Gln

165165

Val Ala 180Val Ala 180

Trp LeuTrp Leu

Thr LeuThr Leu

Ser GlySer Gly

Ser PheSer Phe

245245

Pro Pro 260Pro Pro 260

Leu LeuLeu Leu

Val LeuVal Leu

Cys His 55Cys His 55

Trp Gln 70Trp Gln 70

His ProHis Pro

Arg LeuArg Leu

Ala GluAla Glu

Asp GluAsp Glu

135135

Val Arg 150Val Arg 150

Ala GluAla Glu

Leu CysLeu Cys

Ser SerSer Ser

Ala GlyAla Gly

215215

Arg Ala 230Arg Ala 230

Glu GluGlu Glu

Glu ValGlu Val

Leu LeuLeu Leu

Leu LeuLeu Leu

Glu ThrGlu Thr

Pro Glu 40Pro Glu 40

Leu LeuLeu Leu

Arg ProArg Pro

Lys MetLys Met

Ser PheSer Phe

105105

Leu Gln 120Leu Gln 120

Gly AsnGly Asn

Gly MetGly Met

Ala GlnAla Gln

Ile SerIle Ser

185185

Leu Asp 200Leu Asp 200

Thr ValThr Val

Asp GlyAsp Gly

Pro AlaPro Ala

Ser IleSer Ile

265265

Val ArgVal Arg

Pro ProPro Pro

Asp AlaAsp Ala

Gly Pro 90Gly Pro 90

Val SerVal Ser

Asp AlaAsp Ala

Tyr ThrTyr Thr

Thr TrpThr Trp

155155

Lys Val 170Lys Val 170

Lys GluLys Glu

Trp GluTrp Glu

Thr ValThr Val

Val ThrVal Thr

235235

Leu IleLeu Ile

250250

Ser GlySer Gly

Gly Gln 45Gly Gln 45

Val Pro 60Val Pro 60

Pro AlaPro Ala

Ser PheSer Phe

Ala LysAla Lys

Thr LeuThr Leu

125125

Cys Glu 140Cys Glu 140

Leu ArgLeu Arg

Thr PheThr Phe

Gly ArgGly Arg

Ala LysAla Lys

205205

Thr SerThr Ser

220220

Val ThrVal Thr

Pro ValPro Val

Tyr AspTyr Asp

Gly Ala 30Gly Ala 30

Leu GlyLeu Gly

Gly LeuGly Leu

Asn HisAsn His

Pro SerPro Ser

Gln Ser 110Gln Ser 110

Ala LeuAla Leu

Phe AlaPhe Ala

Val IleVal Ile

Ser GlnSer Gln

175175

Pro Pro 190Pro Pro 190

Glu ThrGlu Thr

Arg PheArg Phe

Cys LysCys Lys

Thr LeuThr Leu

255255

Asp Asn 270Asp Asn 270

GlnGln

GlyGly

TyrTyr

Gln 80Gln 80

ProPro

ThrThr

HisHis

ThrThr

Ala 160Ala 160

AspAsp

AlaAla

GlnGln

ThrThr

Val 240Val 240

SerSer

TrpTrp

- 233 044346- 233 044346

TyrTyr

ProPro

Thr 305Thr 305

SerSer

MetMet

AlaAla

IleIle

Gln 385Gln 385

GluGlu

AlaAla

SerSer

GlnGln

Gly 465Gly 465

ProPro

GluGlu

TyrTyr

Leu Gly ArgLeu Gly Arg

275275

Glu Pro Thr 290Glu Pro Thr 290

Ser Ala ValSer Ala Val

Leu Phe AsnLeu Phe Asn

Gly Arg AlaGly Arg Ala

340340

Gly Ala GlyGly Ala Gly

355355

Ile Ala Thr 370Ile Ala Thr 370

Arg Lys GluArg Lys Glu

Gly Pro ProGly Pro Pro

Gln Glu MetGln Glu Met

420420

Pro Leu LysPro Leu Lys

435435

Glu Met Pro 450Glu Met Pro 450

Pro Leu HisPro Leu His

Pro Gly ProPro Gly Pro

Glu Gly GluGlu Gly Glu

500500

Asp Ala LeuAsp Ala Leu

Thr Asp AlaThr Asp Ala

Gly Tyr AspGly Tyr Asp

295295

Ala Gln GlyAla Gln Gly

310310

Thr Thr Phe 325Thr Thr Phe 325

Glu Gln ValGlu Gln Val

Ala Thr GlyAla Thr Gly

Ala Val AlaAla Val Ala

375375

Gln Thr LeuGln Thr Leu

390390

Ser Tyr Lys 405Ser Tyr Lys 405

Pro Ser GlnPro Ser Gln

Thr Pro TyrThr Pro Tyr

Arg Tyr HisArg Tyr His

455455

Pro Gly AlaPro Gly Ala

470470

Pro Ala Val 485Pro Ala Val 485

Glu Glu GluGlu Glu Glu

Ser Tyr SerSer Tyr Ser

Thr Leu Ser 280Thr Leu Ser 280

Trp Ser ThrTrp Ser Thr

Ser Gln LeuSer Gln Leu

Val Cys ThrVal Cys Thr

330330

Ile Phe ValIle Phe Val

345345

Gly Ile Ile 360Gly Ile Ile 360

Ala Thr GlyAla Thr Gly

Gln Gly AlaGln Gly Ala

Pro Pro ThrPro Pro Thr

410410

Leu Phe ThrLeu Phe Thr

425425

Phe Asp Ala 440Phe Asp Ala 440

Glu Leu ProGlu Leu Pro

Thr Ser LeuThr Ser Leu

Glu Asp ValGlu Asp Val

490490

Glu Tyr LeuGlu Tyr Leu

505505

Ser Pro SerSer Pro Ser

Cys Asp ValCys Asp Val

285285

Thr Ser Gly 300Thr Ser Gly 300

Val Ile His 315Val Ile His 315

Val Thr AsnVal Thr Asn

Arg Glu ThrArg Glu Thr

Gly Gly IleGly Gly Ile

365365

Ile Leu IleIle Leu Ile

380380

Glu Glu Asp 395Glu Glu Asp 395

Pro Lys AlaPro Lys Ala

Leu Gly AlaLeu Gly Ala

Gly Ala SerGly Ala Ser

445445

Thr Leu GluThr Leu Glu

460460

Gly Ser Pro 475Gly Ser Pro 475

Ser Leu AspSer Leu Asp

Asp Lys IleAsp Lys Ile

Asp Ser TyrAsp Ser Tyr

Arg Ser AsnArg Ser Asn

Thr Phe ProThr Phe Pro

Ala Val AspAla Val Asp

320320

Ala Val GlyAla Val Gly

335335

Pro Asn Thr 350Pro Asn Thr 350

Ile Ala AlaIle Ala Ala

Cys Arg GlnCysArgGln

Glu Asp LeuGlu Asp Leu

400400

Lys Leu GluLys Leu Glu

415415

Ser Glu His 430Ser Glu His 430

Cys Thr GluCys Thr Glu

Glu Arg SerGlu Arg Ser

Ile Pro ValIle Pro Val

480480

Leu Glu AspLeu Glu Asp

495495

Asn Pro Ile 510Asn Pro Ile 510

Gln Gly LysGln Gly Lys

- 234 044346- 234 044346

515515

520520

525525

Gly Phe Val Met Ser Arg 530Gly Phe Val Met Ser Arg 530

Ala Met Tyr Val 535 <210> 22 <211> 336 < 212> БЕЛОК < 213> Homo sapiens <220>Ala Met Tyr Val 535 <210> 22 <211> 336 <212> PROTEIN <213> Homo sapiens <220>

< 221> новая или редкая характеристика < 223> CD226 <400> 22<221> new or rare characteristic <223> CD226 <400> 22

Met Asp Tyr Pro Thr 1 5Met Asp Tyr Pro Thr 1 5

Leu Leu Leu Ala LeuLeu Leu Leu Ala Leu

Leu His Val Tyr Arg 15Leu His Val Tyr Arg 15

Leu Cys Glu Glu Val 20Leu Cys Glu Glu Val 20

Leu Trp His Thr Ser 25Leu Trp His Thr Ser 25

Val Pro Phe Ala GluVal Pro Phe Ala Glu

Met Ser Leu Glu Cys 35Met Ser Leu Glu Cys 35

Val Tyr Pro Ser Met 40Val Tyr Pro Ser Met 40

Gly Ile Leu Thr Gln 45Gly Ile Leu Thr Gln 45

Glu Trp Phe Lys Ile 50Glu Trp Phe Lys Ile 50

Gly Thr Gln Gln Asp 55Gly Thr Gln Gln Asp 55

Ser Ile Ala Ile Phe 60Ser Ile Ala Ile Phe 60

Pro Thr His Gly Met 65Pro Thr His Gly Met 65

Val Ile Arg Lys Pro 70Val Ile Arg Lys Pro 70

Tyr Ala Glu Arg Val 75Tyr Ala Glu Arg Val 75

Phe Leu Asn Ser ThrPhe Leu Asn Ser Thr

Met Ala Ser Asn AsnMet Ala Ser Asn Asn

Met Thr Leu Phe PheMet Thr Leu Phe Phe

Asn Ala Ser Glu AspAsn Ala Ser Glu Asp

100100

Asp Val Gly Tyr TyrAsp Val Gly Tyr Tyr

105105

Ser Cys Ser Leu TyrSer Cys Ser Leu Tyr

110110

Tyr Pro Gln Gly Thr 115Tyr Pro Gln Gly Thr 115

Trp Gln Lys Val Ile 120Trp Gln Lys Val Ile 120

Gln Val Val Gln SerGln Val Val Gln Ser

125125

Ser Phe Glu Ala AlaSer Phe Glu Ala Ala

130130

Val Pro Ser Asn SerVal Pro Ser Asn Ser

135135

His Ile Val Ser GluHis Ile Val Ser Glu

140140

Gly Lys Asn Val Thr 145Gly Lys Asn Val Thr 145

Leu Thr Cys Gln Pro 150Leu Thr Cys Gln Pro 150

Gln Met Thr Trp Pro 155Gln Met Thr Trp Pro 155

Gln Ala Val Arg TrpGln Ala Val Arg Trp

165165

Glu Lys Ile Gln ProGlu Lys Ile Gln Pro

170170

Arg Gln Ile Asp LeuArg Gln Ile Asp Leu

175175

AlaAla

AsnAsn

ValVal

SerSer

Tyr 80Tyr 80

ArgArg

ThrThr

AspAsp

ProPro

Val 160Val 160

LeuLeu

- 235 044346- 235 044346

Thr Tyr Cys Asn LeuThr Tyr Cys Asn Leu

180180

Val His Gly Arg AsnVal His Gly Arg Asn

185185

Phe Thr Ser Lys PhePhe Thr Ser Lys Phe

190190

Arg Gln Ile Val Ser 195Arg Gln Ile Val Ser 195

Asn Cys Ser His Gly 200Asn Cys Ser His Gly 200

Arg Trp Ser Val IleArg Trp Ser Val Ile

205205

Ile Pro Asp Val ThrIle Pro Asp Val Thr

210210

Val Ser Asp Ser GlyVal Ser Asp Ser Gly

215215

Leu Tyr Arg Cys TyrLeu Tyr Arg Cys Tyr

220220

Gln Ala Ser Ala Gly 225Gln Ala Ser Ala Gly 225

Glu Asn Glu Thr Phe 230Glu Asn Glu Thr Phe 230

Val Met Arg Leu Thr 235Val Met Arg Leu Thr 235

Ala Glu Gly Lys ThrAla Glu Gly Lys Thr

245245

Asp Asn Gln Tyr ThrAsp Asn Gln Tyr Thr

250250

Leu Phe Val Ala GlyLeu Phe Val Ala Gly

255255

Thr Val Leu Leu LeuThr Val Leu Leu Leu

260260

Leu Phe Val Ile SerLeu Phe Val Ile Ser

265265

Ile Thr Thr Ile IleIle Thr Thr Ile Ile

270270

Ile Phe Leu Asn ArgIle Phe Leu Asn Arg

275275

Arg Arg Arg Arg GluArg Arg Arg Arg Glu

280280

Arg Arg Asp Leu PheArg Arg Asp Leu Phe

285285

Glu Ser Trp Asp ThrGlu Ser Trp Asp Thr

290290

Gln Lys Ala Pro AsnGln Lys Ala Pro Asn

295295

Asn Tyr Arg Ser Pro 300Asn Tyr Arg Ser Pro 300

Ser Thr Ser Gln Pro 305Ser Thr Ser Gln Pro 305

Thr Asn Gln Ser Met 310Thr Asn Gln Ser Met 310

Asp Asp Thr Arg Glu 315Asp Asp Thr Arg Glu 315

Ile Tyr Val Asn TyrIle Tyr Val Asn Tyr

325325

Pro Thr Phe Ser ArgPro Thr Phe Ser Arg

330330

Arg Pro Lys Thr ArgArg Pro Lys Thr Arg

335335

ProPro

ValVal

LeuLeu

Val 240Val 240

GlyGly

ValVal

ThrThr

IleIle

Asp 320Asp 320

Val <210> 23 <211> 351 <212> БЕЛОК <213> Homo sapiens <220>Val <210> 23 <211> 351 <212> PROTEIN <213> Homo sapiens <220>

<221> новая или редкая характеристика <223> CD2 <400> 23<221> new or rare characteristic <223> CD2 <400> 23

Met Ser Phe Pro 1Met Ser Phe Pro 1

Cys Lys Phe Val Ala Ser Phe Leu Leu Ile Phe 5 10 15Cys Lys Phe Val Ala Ser Phe Leu Leu Ile Phe 5 10 15

Val Ser Ser Lys 20Val Ser Ser Lys 20

Gly Ala Val Ser Lys Glu Ile Thr Asn Ala Leu 25 30Gly Ala Val Ser Lys Glu Ile Thr Asn Ala Leu 25 30

ThrThr

Trp Gly Ala Leu Gly Gln AspTrp Gly Ala Leu Gly Gln Asp

4040

Ile Asn Leu Asp Ile Pro Ser 45Ile Asn Leu Asp Ile Pro Ser 45

AsnAsn

GluGlu

PhePhe

- 236 044346- 236 044346

Gln Met Ser Asp Asp 50Gln Met Ser Asp Asp 50

Ile Asp Asp Ile Lys 55Ile Asp Asp Ile Lys 55

Trp Glu Lys Thr Ser 60Trp Glu Lys Thr Ser 60

Lys Lys Lys Ile Ala 65Lys Lys Lys Ile Ala 65

Gln Phe Arg Lys Glu 70Gln Phe Arg Lys Glu 70

Lys Glu Thr Phe Lys 75Lys Glu Thr Phe Lys 75

Lys Asp Thr Tyr Lys 85Lys Asp Thr Tyr Lys 85

Leu Phe Lys Asn Gly 90Leu Phe Lys Asn Gly 90

Thr Leu Lys Ile Lys 95Thr Leu Lys Ile Lys 95

Leu Lys Thr Asp AspLeu Lys Thr Asp Asp

100100

Gln Asp Ile Tyr LysGln Asp Ile Tyr Lys

105105

Val Ser Ile Tyr AspVal Ser Ile Tyr Asp

110110

Lys Gly Lys Asn Val 115Lys Gly Lys Asn Val 115

Leu Glu Lys Ile Phe 120Leu Glu Lys Ile Phe 120

Asp Leu Lys Ile Gln 125Asp Leu Lys Ile Gln 125

Arg Val Ser Lys Pro 130Arg Val Ser Lys Pro 130

Lys Ile Ser Trp Thr 135Lys Ile Ser Trp Thr 135

Cys Ile Asn Thr Thr 140Cys Ile Asn Thr Thr 140

Thr Cys Glu Val Met 145Thr Cys Glu Val Met 145

Asn Gly Thr Asp Pro 150Asn Gly Thr Asp Pro 150

Glu Leu Asn Leu Tyr 155Glu Leu Asn Leu Tyr 155

Asp Gly Lys His LeuAsp Gly Lys His Leu

165165

Lys Leu Ser Gln ArgLys Leu Ser Gln Arg

170170

Val Ile Thr His LysVal Ile Thr His Lys

175175

Thr Thr Ser Leu SerThr Thr Ser Leu Ser

180180

Ala Lys Phe Lys CysAla Lys Phe Lys Cys

185185

Thr Ala Gly Asn LysThr Ala Gly Asn Lys

190190

Ser Lys Glu Ser Ser 195Ser Lys Glu Ser Ser 195

Val Glu Pro Val SerVal Glu Pro Val Ser

200200

Cys Pro Glu Lys Gly 205Cys Pro Glu Lys Gly 205

Asp Ile Tyr Leu Ile 210Asp Ile Tyr Leu Ile 210

Ile Gly Ile Cys Gly 215Ile Gly Ile Cys Gly 215

Gly Gly Ser Leu LeuGly Gly Ser Leu Leu

220220

Val Phe Val Ala Leu 225Val Phe Val Ala Leu 225

Leu Val Phe Tyr Ile 230Leu Val Phe Tyr Ile 230

Thr Lys Arg Lys Lys 235Thr Lys Arg Lys Lys 235

Arg Ser Arg Arg AsnArg Ser Arg Arg Asn

245245

Asp Glu Glu Leu GluAsp Glu Glu Leu Glu

250250

Thr Arg Ala His ArgThr Arg Ala His Arg

255255

Ala Thr Glu Glu ArgAla Thr Glu Glu Arg

260260

Gly Arg Lys Pro HisGly Arg Lys Pro His

265265

Gln Ile Pro Ala SerGln Ile Pro Ala Ser

270270

Pro Gln Asn Pro AlaPro Gln Asn Pro Ala

275275

Thr Ser Gln His ProThr Ser Gln His Pro

280280

Pro Pro Pro Pro GlyPro Pro Pro Pro Gly

285285

Arg Ser Gln Ala Pro 290Arg Ser Gln Ala Pro 290

Ser His Arg Pro ProSer His Arg Pro Pro

295295

Pro Pro Gly His Arg 300Pro Pro Gly His Arg 300

AspAsp

Glu 80Glu 80

HisHis

ThrThr

GluGlu

LeuLeu

Gln 160Gln 160

TrpTrp

ValVal

LeuLeu

MetMet

Gln 240Gln 240

ValVal

ThrThr

HisHis

ValVal

- 237 044346- 237 044346

Gln His Gln Pro Gln 305Gln His Gln Pro Gln 305

Lys Arg Pro Pro Ala 310Lys Arg Pro Pro Ala 310

Pro Ser Gly Thr Gln 315Pro Ser Gly Thr Gln 315

His Gln Gln Lys GlyHis Gln Gln Lys Gly

325325

Pro Pro Leu Pro ArgPro Pro Leu Pro Arg

330330

Pro Arg Val Gln ProPro Arg Val Gln Pro

335335

Val 320Val 320

LysLys

Pro Pro His Gly AlaPro Pro His Gly Ala

340340

Ala Glu Asn Ser LeuAla Glu Asn Ser Leu

345345

Ser Pro Ser Ser AsnSer Pro Ser Ser Asn

350 <210> 24 <211> 180 < 212> БЕЛОК < 213> Homo sapiens <220>350 <210> 24 <211> 180 <212> PROTEIN <213> Homo sapiens <220>

< 221> новая или редкая характеристика <223>CD160 <400>24<221> new or rare characteristic <223>CD160 <400>24

Met Leu Leu Glu Pro Gly Arg Gly Cys Cys Ala Leu Ala Ile Leu 1 5 1015Met Leu Leu Glu Pro Gly Arg Gly Cys Cys Ala Leu Ala Ile Leu 1 5 1015

Ala Ile Val Asp Ile Gln Ser Gly Gly Cys Ile Asn Ile Thr SerAla Ile Val Asp Ile Gln Ser Gly Gly Cys Ile Asn Ile Thr Ser

25302530

Ala Ser Gln Glu Gly Thr Arg Leu Asn Leu Ile Cys Thr Val Trp 35 4045Ala Ser Gln Glu Gly Thr Arg Leu Asn Leu Ile Cys Thr Val Trp 35 4045

Lys Lys Glu Glu Ala Glu Gly Phe Val Val Phe Leu Cys Lys Asp 50 5560Lys Lys Glu Glu Ala Glu Gly Phe Val Val Phe Leu Cys Lys Asp 50 5560

Ser Gly Asp Cys Ser Pro Glu Thr Ser Leu Lys Gln Leu Arg Leu 65 7075Ser Gly Asp Cys Ser Pro Glu Thr Ser Leu Lys Gln Leu Arg Leu 65 7075

Arg Asp Pro Gly Ile Asp Gly Val Gly Glu Ile Ser Ser Gln Leu 85 9095Arg Asp Pro Gly Ile Asp Gly Val Gly Glu Ile Ser Ser Gln Leu 85 9095

Phe Thr Ile Ser Gln Val Thr Pro Leu His Ser Gly Thr Tyr GlnPhe Thr Ile Ser Gln Val Thr Pro Leu His Ser Gly Thr Tyr Gln

100 105110100 105110

Cys Ala Arg Ser Gln Lys Ser Gly Ile Arg Leu Gln Gly His PheCys Ala Arg Ser Gln Lys Ser Gly Ile Arg Leu Gln Gly His Phe

115 120125115 120125

Ser Ile Leu Phe Thr Glu Thr Gly Asn Tyr Thr Val Thr Gly LeuSer Ile Leu Phe Thr Glu Thr Gly Asn Tyr Thr Val Thr Gly Leu

130 135140130 135140

Gln Arg Gln His Leu Glu Phe Ser His Asn Glu Gly Thr Leu SerGln Arg Gln His Leu Glu Phe Ser His Asn Glu Gly Thr Leu Ser

LeuLeu

SerSer

HisHis

ArgArg

Lys 80Lys 80

MetMet

CysCys

PhePhe

LysLys

SerSer

- 238 044346- 238 044346

145145

150150

155155

160160

ValVal

Gly Phe Leu Gln Glu Lys Val Trp Val Met Leu Val Thr Ser LeuGly Phe Leu Gln Glu Lys Val Trp Val Met Leu Val Thr Ser Leu

165 170 175165 170 175

Ala Leu Gln AlaAla Leu Gln Ala

180 <210> 25 <211> 278 < 212> БЕЛОК < 213> Homo sapiens <220>180 <210> 25 <211> 278 <212> PROTEIN <213> Homo sapiens <220>

< 221> новая или редкая характеристика < 223> CD200 < 400> 25< 221> new or rare characteristic < 223> CD200 < 400> 25

Met Glu Arg Leu Val 1 5Met Glu Arg Leu Val 1 5

Ile Arg Met Pro PheIle Arg Met Pro Phe

Ser His Leu Ser ThrSer His Leu Ser Thr

Ser Leu Val Trp ValSer Leu Val Trp Val

Met Ala Ala Val ValMet Ala Ala Val Val

Leu Cys Thr Ala Gln 30Leu Cys Thr Ala Gln 30

Gln Val Val Thr GlnGln Val Val Thr Gln

Asp Glu Arg Glu Gln 40Asp Glu Arg Glu Gln 40

Leu Tyr Thr Pro Ala 45Leu Tyr Thr Pro Ala 45

Leu Lys Cys Ser Leu 50Leu Lys Cys Ser Leu 50

Gln Asn Ala Gln GluGln Asn Ala Gln Glu

Ala Leu Ile Val Thr 60Ala Leu Ile Val Thr 60

Gln Lys Lys Lys Ala 65Gln Lys Lys Lys Ala 65

Val Ser Pro Glu Asn 70Val Ser Pro Glu Asn 70

Met Val Thr Phe Ser 75Met Val Thr Phe Ser 75

Asn His Gly Val Val 85Asn His Gly Val Val 85

Ile Gln Pro Ala Tyr 90Ile Gln Pro Ala Tyr 90

Lys Asp Lys Ile Asn 95Lys Asp Lys Ile Asn 95

Thr Gln Leu Gly LeuThr Gln Leu Gly Leu

100100

Gln Asn Ser Thr IleGln Asn Ser Thr Ile

105105

Thr Phe Trp Asn IleThr Phe Trp Asn Ile

110110

Leu Glu Asp Glu Gly 115Leu Glu Asp Glu Gly 115

Cys Tyr Met Cys Leu 120Cys Tyr Met Cys Leu 120

Phe Asn Thr Phe Gly 125Phe Asn Thr Phe Gly 125

Gly Lys Ile Ser Gly 130Gly Lys Ile Ser Gly 130

Thr Ala Cys Leu ThrThr Ala Cys Leu Thr

135135

Val Tyr Val Gln ProVal Tyr Val Gln Pro

140140

Val Ser Leu His Tyr 145Val Ser Leu His Tyr 145

Lys Phe Ser Glu Asp 150Lys Phe Ser Glu Asp 150

His Leu Asn Ile Thr 155His Leu Asn Ile Thr 155

TyrTyr

ValVal

SerSer

TrpTrp

Glu 80Glu 80

IleIle

ThrThr

PhePhe

IleIle

Cys 160Cys 160

- 239 044346- 239 044346

Ser Ala Thr Ala ArgSer Ala Thr Ala Arg

165165

Pro Ala Pro Met ValPro Ala Pro Met Val

170170

Phe Trp Lys Val ProPhe Trp Lys Val Pro

175175

Ser Gly Ile Glu AsnSer Gly Ile Glu Asn

180180

Ser Thr Val Thr LeuSer Thr Val Thr Leu

185185

Ser His Pro Asn GlySer His Pro Asn Gly

190190

Thr Ser Val Thr SerThr Ser Val Thr Ser

195195

Ile Leu His Ile Lys 200Ile Leu His Ile Lys 200

Asp Pro Lys Asn Gln 205Asp Pro Lys Asn Gln 205

Gly Lys Glu Val IleGly Lys Glu Val Ile

210210

Cys Gln Val Leu HisCys Gln Val Leu His

215215

Leu Gly Thr Val ThrLeu Gly Thr Val Thr

220220

Phe Lys Gln Thr Val 225Phe Lys Gln Thr Val 225

Asn Lys Gly Tyr Trp 230Asn Lys Gly Tyr Trp 230

Phe Ser Val Pro Leu 235Phe Ser Val Pro Leu 235

Leu Ser Ile Val SerLeu Ser Ile Val Ser

245245

Leu Val Ile Leu LeuLeu Val Ile Leu Leu

250250

Val Leu Ile Ser IleVal Leu Ile Ser Ile

255255

Leu Tyr Trp Lys ArgLeu Tyr Trp Lys Arg

260260

His Arg Asn Gln AspHis Arg Asn Gln Asp

265265

Arg Gly Glu Leu SerArg Gly Glu Leu Ser

270270

ArgArg

ThrThr

ValVal

AspAsp

Leu 240Leu 240

LeuLeu

GlnGln

Gly Val Gln Lys MetGly Val Gln Lys Met

275275

Thr <210> 26 <211> 325 <212> БЕЛОК <213> Homo sapiens <220>Thr <210> 26 <211> 325 <212> PROTEIN <213> Homo sapiens <220>

< 221> новая или редкая характеристика <223> CD200R1(CD200R) <400>26<221> new or rare characteristic <223> CD200R1(CD200R) <400>26

Met Leu Cys Pro Trp Arg Thr Ala Asn Leu Gly Leu Leu Leu Ile 1 5 1015Met Leu Cys Pro Trp Arg Thr Ala Asn Leu Gly Leu Leu Leu Ile 1 5 1015

Thr Ile Phe Leu Val Ala Ala Ser Ser Ser Leu Cys Met Asp GluThr Ile Phe Leu Val Ala Ala Ser Ser Ser Leu Cys Met Asp Glu

25302530

Gln Ile Thr Gln Asn Tyr Ser Lys Val Leu Ala Glu Val Asn Thr 35 4045Gln Ile Thr Gln Asn Tyr Ser Lys Val Leu Ala Glu Val Asn Thr 35 4045

Trp Pro Val Lys Met Ala Thr Asn Ala Val Leu Cys Cys Pro Pro 50 5560Trp Pro Val Lys Met Ala Thr Asn Ala Val Leu Cys Cys Pro Pro 50 5560

Ala Leu Arg Asn Leu Ile Ile Ile Thr Trp Glu Ile Ile Leu Arg 65 7075Ala Leu Arg Asn Leu Ile Ile Ile Thr Trp Glu Ile Ile Leu Arg 65 7075

LeuLeu

LysLys

SerSer

IleIle

Gly 80Gly 80

- 240 044346- 240 044346

GlnGln

GluGlu

GlnGln

TyrTyr

Tyr 145Tyr 145

ArgArg

GlnGln

TrpTrp

HisHis

Lys 225Lys 225

AlaAla

IleIle

LysLys

GlnGln

Thr 305Thr 305

AspAsp

Pro Ser CysPro Ser Cys

Thr Asn CysThr Asn Cys

100100

Asn Ser AspAsn Ser Asp

115115

Tyr Arg Cys 130Tyr Arg Cys 130

His Leu GlnHis Leu Gln

Asn Arg ThrAsn Arg Thr

Ile Ser TrpIle Ser Trp

180180

Ser Asn GlySer Asn Gly

195195

Asn Val Ser 210Asn Val Ser 210

Ser Leu TyrSer Leu Tyr

Lys Leu TyrLys Leu Tyr

Val Gly PheVal Gly Phe

260260

Leu Asn LysLeu Asn Lys

275275

Pro Tyr Ala 290Pro Tyr Ala 290

Asn Lys ValAsn Lys Val

Thr Lys Ala 85Thr Lys Ala 85

Thr Asp GluThr Asp Glu

Leu Gln IleLeu Gln Ile

Ile Met ValIle Met Val

135135

Val Leu ValVal Leu Val

150150

Ala Val Cys 165Ala Val Cys 165

Ile Pro GluIle Pro Glu

Thr Val ThrThr Val Thr

Thr Val ThrThr Val Thr

215215

Ile Glu LeuIle Glu Leu

230230

Ile Pro Tyr 245Ile Pro Tyr 245

Ile Trp LeuIle Trp Leu

Thr Glu SerThr Glu Ser

Ser Tyr ThrSer Tyr Thr

295295

Lys Ala SerLys Ala Ser

310310

Tyr Arg Lys 90Tyr Arg Lys 90

Glu Thr AsnGlu Thr Asn

Glu Thr Lys 95Glu Thr Lys 95

Arg Ile Thr 105Arg Ile Thr 105

Arg Pro Val 120Arg Pro Val 120

Thr Pro AspThr Pro Asp

Thr Pro GluThr Pro Glu

Lys Ala ValLys Ala Val

170170

Gly Asp CysGly Asp Cys

185185

Val Lys Ser 200Val Lys Ser 200

Cys His ValCys His Val

Leu Pro ValLeu Pro Val

Ile Ile LeuIle Ile Leu

250250

Leu Lys ValLeu Lys Val

265265

Thr Pro Val 280Thr Pro Val 280

Glu Lys AsnGlu Lys Asn

Glu Ala LeuGlu Ala Leu

Trp Val SerTrp Val Ser

Ala Ile ThrAla Ile Thr

125125

Gly Asn PheGly Asn Phe

140140

Val Thr Leu 155Val Thr Leu 155

Ala Gly LysAla Gly Lys

Ala Thr LysAla Thr Lys

Thr Cys HisThr Cys His

205205

Ser His LeuSer His Leu

220220

Pro Gly Ala 235Pro Gly Ala 235

Thr Ile IleThr Ile Ile

Asn Gly CysAsn Gly Cys

Val Glu GluVal Glu Glu

285285

Asn Pro LeuAsn Pro Leu

300300

Gln Ser Glu 315Gln Ser Glu 315

Arg Pro Asp 110Arg Pro Asp 110

His Asp GlyHis Asp Gly

His Arg GlyHis Arg Gly

Phe Gln AsnPhe Gln Asn

160160

Pro Ala AlaPro Ala Ala

175175

Gln Glu Tyr 190Gln Glu Tyr 190

Trp Glu ValTrp Glu Val

Thr Gly AsnThr Gly Asn

Lys Lys SerLys Lys Ser

240240

Ile Leu ThrIle Leu Thr

255255

Arg Lys Tyr 270Arg Lys Tyr 270

Asp Glu MetAsp Glu Met

Tyr Asp ThrTyr Asp Thr

Val Asp ThrVal Asp Thr

320320

Leu His Thr LeuLeu His Thr Leu

325325

- 241 044346 <210> 27 <211> 201 <212> БЕЛОК <213> Homo sapiens <220>- 241 044346 <210> 27 <211> 201 <212> PROTEIN <213> Homo sapiens <220>

<221> новая или редкая характеристика <223> NC R3 (NKp30) <400> 27<221> new or rare characteristic <223> NC R3 (NKp30) <400> 27

Met Ala Trp Met Leu 1 5Met Ala Trp Met Leu 1 5

Leu Leu Ile Leu IleLeu Leu Ile Leu Ile

Met Val His Pro Gly 15Met Val His Pro Gly 15

Cys Ala Leu Trp Val 20Cys Ala Leu Trp Val 20

Ser Gln Pro Pro GluSer Gln Pro Pro Glu

Ile Arg Thr Leu Glu 30Ile Arg Thr Leu Glu 30

Ser Ser Ala Phe LeuSer Ser Ala Phe Leu

Pro Cys Ser Phe Asn 40Pro Cys Ser Phe Asn 40

Ala Ser Gln Gly Arg 45Ala Ser Gln Gly Arg 45

Ala Ile Gly Ser Val 50Ala Ile Gly Ser Val 50

Thr Trp Phe Arg Asp 55Thr Trp Phe Arg Asp 55

Glu Val Val Pro Gly 60Glu Val Val Pro Gly 60

Glu Val Arg Asn Gly 65Glu Val Arg Asn Gly 65

Thr Pro Glu Phe Arg 70Thr Pro Glu Phe Arg 70

Gly Arg Leu Ala Pro 75Gly Arg Leu Ala Pro 75

Ala Ser Ser Arg Phe 85Ala Ser Ser Arg Phe 85

Leu His Asp His Gln 90Leu His Asp His Gln 90

Ala Glu Leu His IleAla Glu Leu His Ile

Asp Val Arg Gly HisAsp Val Arg Gly His

100100

Asp Ala Ser Ile TyrAsp Ala Ser Ile Tyr

105105

Val Cys Arg Val GluVal Cys Arg Val Glu

110110

Leu Gly Leu Gly Val 115Leu Gly Leu Gly Val 115

Gly Thr Gly Asn Gly 120Gly Thr Gly Asn Gly 120

Thr Arg Leu Val ValThr Arg Leu Val Val

125125

Lys Glu His Pro Gln 130Lys Glu His Pro Gln 130

Leu Gly Ala Gly ThrLeu Gly Ala Gly Thr

135135

Val Leu Leu Leu ArgVal Leu Leu Leu Arg

140140

Gly Phe Tyr Ala Val 145Gly Phe Tyr Ala Val 145

Ser Phe Leu Ser Val 150Ser Phe Leu Ser Val 150

Ala Val Gly Ser Thr 155Ala Val Gly Ser Thr 155

Tyr Tyr Gln Gly LysTyr Tyr Gln Gly Lys

165165

Cys Leu Thr Trp LysCys Leu Thr Trp Lys

170170

Gly Pro Arg Arg GlnGly Pro Arg Arg Gln

175175

Pro Ala Val Val ProPro Ala Val Val Pro

180180

Ala Pro Leu Pro ProAla Pro Leu Pro Pro

185185

Pro Cys Gly Ser SerPro Cys Gly Ser Ser

190190

SerSer

GlyGly

LeuLeu

LysLys

Leu 80Leu 80

ArgArg

ValVal

GluGlu

AlaAla

Val 160Val 160

LeuLeu

AlaAla

His Leu Leu Pro ProHis Leu Leu Pro Pro

Val Pro Gly GlyVal Pro Gly Gly

- 242 044346- 242 044346

195195

200 <210> 28 <211> 208 <212> БЕЛОК <213> Homo sapiens <220>200 <210> 28 <211> 208 <212> PROTEIN <213> Homo sapiens <220>

<221> новая или редкая характеристика <223> CD80(B7-1) ECD <400> 28<221> new or rare characteristic <223> CD80(B7-1) ECD <400> 28

Val Ile His Val ThrVal Ile His Val Thr

55

Lys Glu Val Lys GluLys Glu Val Lys Glu

Val Ala Thr Leu SerVal Ala Thr Leu Ser

Gly His Asn Val Ser 20Gly His Asn Val Ser 20

Val Glu Glu Leu AlaVal Glu Glu Leu Ala

Gln Thr Arg Ile TyrGln Thr Arg Ile Tyr

Gln Lys Glu Lys Lys 35Gln Lys Glu Lys Lys 35

Met Val Leu Thr MetMet Val Leu Thr Met

Met Ser Gly Asp Met 45Met Ser Gly Asp Met 45

Ile Trp Pro Glu Tyr 50Ile Trp Pro Glu Tyr 50

Lys Asn Arg Thr Ile 55Lys Asn Arg Thr Ile 55

Phe Asp Ile Thr Asn 60Phe Asp Ile Thr Asn 60

Leu Ser Ile Val Ile 65Leu Ser Ile Val Ile 65

Leu Ala Leu Arg Pro 70Leu Ala Leu Arg Pro 70

Ser Asp Glu Gly Thr 75Ser Asp Glu Gly Thr 75

Glu Cys Val Val Leu 85Glu Cys Val Val Leu 85

Lys Tyr Glu Lys Asp 90Lys Tyr Glu Lys Asp 90

Ala Phe Lys Arg Glu 95Ala Phe Lys Arg Glu 95

Leu Ala Glu Val ThrLeu Ala Glu Val Thr

100100

Leu Ser Val Lys AlaLeu Ser Val Lys Ala

105105

Asp Phe Pro Thr ProAsp Phe Pro Thr Pro

110110

Ile Ser Asp Phe Glu 115Ile Ser Asp Phe Glu 115

Ile Pro Thr Ser AsnIle Pro Thr Ser Asn

120120

Ile Arg Arg Ile IleIle Arg Arg Ile Ile

125125

Ser Thr Ser Gly Gly 130Ser Thr Ser Gly Gly 130

Phe Pro Glu Pro HisPhe Pro Glu Pro His

135135

Leu Ser Trp Leu Glu 140Leu Ser Trp Leu Glu 140

Gly Glu Glu Leu Asn 145Gly Glu Glu Leu Asn 145

Ala Ile Asn Thr Thr 150Ala Ile Asn Thr Thr 150

Val Ser Gln Asp Pro 155Val Ser Gln Asp Pro 155

Thr Glu Leu Tyr AlaThr Glu Leu Tyr Ala

165165

Val Ser Ser Lys LeuVal Ser Ser Lys Leu

170170

Asp Phe Asn Met ThrAsp Phe Asn Met Thr

175175

Asn His Ser Phe MetAsn His Ser Phe Met

180180

Cys Leu Ile Lys TyrCys Leu Ile Lys Tyr

185185

Gly His Leu Arg ValGly His Leu Arg Val

190190

CysCys

TrpTrp

AsnAsn

AsnAsn

Tyr 80Tyr 80

HisHis

SerSer

CysCys

AsnAsn

Glu 160Glu 160

ThrThr

AsnAsn

- 243 044346- 243 044346

Gln Thr Phe Asn Trp Asn Thr Thr Lys Gln GluGln Thr Phe Asn Trp Asn Thr Thr Lys Gln Glu

195195

200200

His Phe Pro AspHis Phe Pro Asp

205205

Asn <210> 29 <211> 224 < 212> БЕЛОК < 213> Homo sapiens <220>Asn <210> 29 <211> 224 <212> PROTEIN <213> Homo sapiens <220>

< 221> новая или редкая характеристика < 223> CD86(B7-2) ECD <400> 29<221> new or rare characteristic <223> CD86(B7-2) ECD <400> 29

Ala Pro Leu Lys Ile 1 5Ala Pro Leu Lys Ile 1 5

Gln Ala Tyr Phe AsnGln Ala Tyr Phe Asn

Glu Thr Ala Asp LeuGlu Thr Ala Asp Leu

Cys Gln Phe Ala Asn 20Cys Gln Phe Ala Asn 20

Ser Gln Asn Gln SerSer Gln Asn Gln Ser

Leu Ser Glu Leu ValLeu Ser Glu Leu Val

Phe Trp Gln Asp Gln 35Phe Trp Gln Asp Gln 35

Glu Asn Leu Val LeuGlu Asn Leu Val Leu

Asn Glu Val Tyr Leu 45Asn Glu Val Tyr Leu 45

Lys Glu Lys Phe Asp 50Lys Glu Lys Phe Asp 50

Ser Val His Ser Lys 55Ser Val His Ser Lys 55

Tyr Met Gly Arg Thr 60Tyr Met Gly Arg Thr 60

Phe Asp Ser Asp Ser 65Phe Asp Ser Asp Ser 65

Trp Thr Leu Arg Leu 70Trp Thr Leu Arg Leu 70

His Asn Leu Gln Ile 75His Asn Leu Gln Ile 75

Asp Lys Gly Leu Tyr 85Asp Lys Gly Leu Tyr 85

Gln Cys Ile Ile His 90Gln Cys Ile Ile His 90

His Lys Lys Pro Thr 95His Lys Lys Pro Thr 95

Met Ile Arg Ile HisMet Ile Arg Ile His

100100

Gln Met Asn Ser GluGln Met Asn Ser Glu

105105

Leu Ser Val Leu AlaLeu Ser Val Leu Ala

110110

Phe Ser Gln Pro GluPhe Ser Gln Pro Glu

115115

Ile Val Pro Ile SerIle Val Pro Ile Ser

120120

Asn Ile Thr Glu AsnAsn Ile Thr Glu Asn

125125

Tyr Ile Asn Leu Thr 130Tyr Ile Asn Leu Thr 130

Cys Ser Ser Ile His 135Cys Ser Ser Ile His 135

Gly Tyr Pro Glu Pro 140Gly Tyr Pro Glu Pro 140

Lys Met Ser Val Leu 145Lys Met Ser Val Leu 145

Leu Arg Thr Lys Asn 150Leu Arg Thr Lys Asn 150

Ser Thr Ile Glu Tyr 155Ser Thr Ile Glu Tyr 155

Gly Val Met Gln LysGly Val Met Gln Lys

165165

Ser Gln Asp Asn ValSer Gln Asp Asn Val

170170

Thr Glu Leu Tyr AspThr Glu Leu Tyr Asp

175175

Ser Ile Ser Leu SerSer Ile Ser Leu Ser

180180

Val Ser Phe Pro AspVal Ser Phe Pro Asp

185185

Val Thr Ser Asn MetVal Thr Ser Asn Met

190190

ProPro

ValVal

GlyGly

SerSer

Lys 80Lys 80

GlyGly

AsnAsn

ValVal

LysLys

Asp 160Asp 160

ValVal

ThrThr

- 244 044346- 244 044346

Ile Phe Cys Ile Leu Glu Thr AspIle Phe Cys Ile Leu Glu Thr Asp

195 200195 200

Lys Thr Arg Leu Leu Ser SerLys Thr Arg Leu Leu Ser Ser

205205

Phe Ser Ile Glu Leu Glu Asp Pro Gln Pro Pro Pro Asp His IlePhe Ser Ile Glu Leu Glu Asp Pro Gln Pro Pro Pro Asp His Ile

210 215 220210 215 220

ProPro

Pro <210> 30 <211> 220 <212> БЕЛОК <213> Homo sapiens <220>Pro <210> 30 <211> 220 <212> PROTEIN <213> Homo sapiens <220>

<221> новая или редкая характеристика <223> CD274 (PD-L1, B7-H1) ECD <400> 30<221> new or rare characteristic <223> CD274 (PD-L1, B7-H1) ECD <400> 30

Phe Thr Val Thr ValPhe Thr Val Thr Val

55

Pro Lys Asp Leu TyrPro Lys Asp Leu Tyr

Val Val Glu Tyr GlyVal Val Glu Tyr Gly

Asn Met Thr Ile GluAsn Met Thr Ile Glu

Cys Lys Phe Pro ValCys Lys Phe Pro Val

Glu Lys Gln Leu AspGlu Lys Gln Leu Asp

Ala Ala Leu Ile ValAla Ala Leu Ile Val

Tyr Trp Glu Met GluTyr Trp Glu Met Glu

Asp Lys Asn Ile Ile 45Asp Lys Asn Ile Ile 45

Phe Val His Gly Glu 50Phe Val His Gly Glu 50

Glu Asp Leu Lys Val 55Glu Asp Leu Lys Val 55

Gln His Ser Ser Tyr 60Gln His Ser Ser Tyr 60

Gln Arg Ala Arg Leu 65Gln Arg Ala Arg Leu 65

Leu Lys Asp Gln Leu 70Leu Lys Asp Gln Leu 70

Ser Leu Gly Asn Ala 75Ser Leu Gly Asn Ala 75

Leu Gln Ile Thr AspLeu Gln Ile Thr Asp

Val Lys Leu Gln AspVal Lys Leu Gln Asp

Ala Gly Val Tyr ArgAla Gly Val Tyr Arg

Met Ile Ser Tyr GlyMet Ile Ser Tyr Gly

100100

Gly Ala Asp Tyr LysGly Ala Asp Tyr Lys

105105

Arg Ile Thr Val LysArg Ile Thr Val Lys

110110

Asn Ala Pro Tyr Asn 115Asn Ala Pro Tyr Asn 115

Lys Ile Asn Gln Arg 120Lys Ile Asn Gln Arg 120

Ile Leu Val Val AspIle Leu Val Val Asp

125125

Val Thr Ser Glu HisVal Thr Ser Glu His

130130

Glu Leu Thr Cys Gln 135Glu Leu Thr Cys Gln 135

Ala Glu Gly Tyr ProAla Glu Gly Tyr Pro

140140

Ala Glu Val Ile Trp 145Ala Glu Val Ile Trp 145

Thr Ser Ser Asp His 150Thr Ser Ser Asp His 150

Gln Val Leu Ser Gly 155Gln Val Leu Ser Gly 155

Thr Thr Thr Thr AsnThr Thr Thr Thr Asn

165165

Ser Lys Arg Glu GluSer Lys Arg Glu Glu

170170

Lys Leu Phe Asn ValLys Leu Phe Asn Val

175175

SerSer

LeuLeu

GlnGln

ArgArg

Ala 80Ala 80

CysCys

ValVal

ProPro

LysLys

Lys 160Lys 160

ThrThr

- 245 044346- 245 044346

Ser Thr Leu Arg Ile Asn 180Ser Thr Leu Arg Ile Asn 180

Phe Arg Arg Leu Asp Pro 195Phe Arg Arg Leu Asp Pro 195

Pro Glu Leu Pro Leu Ala 210Pro Glu Leu Pro Leu Ala 210

Thr Thr Thr AsnThr Thr Thr Asn

185185

Glu Glu Asn HisGlu Glu Asn His

200200

His Pro Pro Asn 215 <210> 31 <211> 201 <212> БЕЛОК <213> Homo sapiens <220>His Pro Pro Asn 215 <210> 31 <211> 201 <212> PROTEIN <213> Homo sapiens <220>

<221> новая или редкая характеристика <223> PDCD1LG2(PD-L2, CD273) ECD <400> 31<221> new or rare characteristic <223> PDCD1LG2(PD-L2, CD273) ECD <400> 31

Leu Phe Thr 1Leu Phe Thr 1

Ser Asn ValSer Asn Val

Leu Gly AlaLeu Gly Ala

Pro His Arg 50Pro His Arg 50

Lys Ala Ser 65Lys Ala Ser 65

Tyr Gln CysTyr Gln Cys

Thr Leu LysThr Leu Lys

Lys Val ProLys Val Pro

115115

Tyr Pro LeuTyr Pro Leu

130130

Thr Ser HisThr Ser His

Val Thr Val 5Val Thr Val 5

Thr Leu Glu 20Thr Leu Glu 20

Ile Thr AlaIle Thr Ala

Glu Arg AlaGlu Arg Ala

Phe His Ile 70Phe His Ile 70

Ile Ile Ile 85Ile Ile Ile 85

Val Lys Ala 100Val Lys Ala 100

Glu Thr AspGlu Thr Asp

Ala Glu ValAla Glu Val

Ser Arg ThrSer Arg Thr

Pro Lys GluPro Lys Glu

Cys Asn Phe 25Cys Asn Phe 25

Ser Leu GlnSer Leu Gln

Thr Leu Leu 55Thr Leu Leu 55

Pro Gln ValPro Gln Val

Tyr Gly ValTyr Gly Val

Ser Tyr ArgSer Tyr Arg

105105

Glu Val GluGlu Val Glu

120120

Ser Trp Pro 135Ser Trp Pro 135

Pro Glu GlyPro Glu Gly

Glu Ile Phe Tyr CysGlu Ile Phe Tyr Cys

190190

Thr Ala Glu Leu ValThr Ala Glu Leu Val

205205

Glu ArgGlu Arg

220220

Leu Tyr Ile 10Leu Tyr Ile 10

Asp Thr GlyAsp Thr Gly

Lys Val GluLys Val Glu

Glu Glu Gln 60Glu Glu Gln 60

Gln Val ArgGln Val Arg

Ala Trp Asp 90Ala Trp Asp 90

Lys Ile AsnLys Ile Asn

Leu Thr CysLeu Thr Cys

Asn Val SerAsn Val Ser

140140

Leu Tyr GlnLeu Tyr Gln

Ile Glu HisIle Glu His

Ser His ValSer His Val

Asn Asp Thr 45Asn Asp Thr 45

Leu Pro LeuLeu Pro Leu

Asp Glu GlyAsp Glu Gly

Tyr Lys TyrTyr Lys Tyr

Thr His IleThr His Ile

110110

Gln Ala Thr 125Gln Ala Thr 125

Val Pro AlaVal Pro Ala

Val Thr SerVal Thr Ser

ThrThr

IleIle

GlyGly

AsnAsn

SerSer

GlyGly

Gln 80Gln 80

LeuLeu

LeuLeu

GlyGly

AsnAsn

ValVal

- 246 044346- 246 044346

145 145 150 150 155 155 160 160 Leu Leu Arg Arg Leu Leu Lys Lys Pro 165 Pro 165 Pro Pro Pro Pro Gly Gly Arg Arg Asn 170 Asn 170 Phe Phe Ser Ser Cys Cys Val Val Phe 175 Phe 175 Trp Trp Asn Asn Thr Thr His His Val 180 Val 180 Arg Arg Glu Glu Leu Leu Thr Thr Leu 185 Leu 185 Ala Ala Ser Ser Ile Ile Asp Asp Leu 190 Leu 190 Gln Gln Ser Ser Gln Gln Met Met Glu 195 Glu 195 Pro Pro Arg Arg Thr Thr His His Pro 200 Pro 200 Thr Thr

<210> 32 <211> 238 <212> БЕЛОК <213> Homo sapiens <220><210> 32 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Homo sapiens <220>

<221> новая или редкая характеристика <223> ICOSLG(B7RP1, CD275, ICOSL, B7-H2) ECD <400>32<221> new or rare characteristic <223> ICOSLG(B7RP1, CD275, ICOSL, B7-H2) ECD <400>32

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val GluAsp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val Glu

5 10155 1015

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp Val 20 2530Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp Val 20 2530

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr His 35 4045Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr His 35 4045

Ile Pro Gln Asn Ser Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg Asn 50 5560Ile Pro Gln Asn Ser Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg Asn 50 5560

Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser Leu 65 70 7580Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser Leu 65 70 7580

Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys Leu 85 9095Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys Leu 85 9095

Val Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu ValVal Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu Val

100 105110100 105110

Thr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser Val Pro Val Val Ser Ala ProThr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser Val Pro Val Val Ser Ala Pro

115 120125115 120125

His Ser Pro Ser Gln Asp Glu Leu Thr Phe Thr Cys Thr Ser Ile AsnHis Ser Pro Ser Gln Asp Glu Leu Thr Phe Thr Cys Thr Ser Ile Asn

130 135140130 135140

- 247 044346- 247 044346

Gly Tyr 145Gly Tyr 145

Leu LeuLeu Leu

Pro ArgPro Arg

Pro AsnPro Asn

150150

Val TyrVal Tyr

Trp IleTrp Ile

Asp GlnAsp Gln

Ala Leu 165Ala Leu 165

Gln AsnGln Asn

Asp ThrAsp Thr

170170

Gly Leu Tyr Asp Val ValGly Leu Tyr Asp Val Val

180180

Ser ValSer Val

Leu Arg 185Leu Arg 185

Asn Lys 155Asn Lys 155

Val PheVal Phe

Ile AlaIle Ala

Thr AspThr Asp

Leu AsnLeu Asn

Arg ThrArg Thr

190190

Asn SerAsn Ser

160160

Met Arg 175Met Arg 175

Pro SerPro Ser

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn Val Leu Leu Gln Gln Asn LeuCys Ile Glu Asn Val Leu Leu Gln Gln Asn Leu

200 205200 205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp Ile Gly Glu Arg Asp Lys IleThr Gly Asn Asp Ile Gly Glu Arg Asp Lys Ile

215 220215 220

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys Asn Ala Ala ThrSer Thr Gly Glu Lys Asn Ala Ala Thr

230 235 <210> 33 <211> 438 <212> БЕЛОК <213> Homo sapiens <220>230 235 <210> 33 <211> 438 <212> PROTEIN <213> Homo sapiens <220>

< 221> новая или редкая характеристика < 223> CD276(B7-H3) ECD < 400> 33< 221> new or rare characteristic < 223> CD276(B7-H3) ECD < 400> 33

Leu Glu Val Gln Val Pro Glu Asp Pro Val Val Ala Leu Val Gly ThrLeu Glu Val Gln Val Pro Glu Asp Pro Val Val Ala Leu Val Gly Thr

5 10 155 10 15

Asp Ala Thr Leu 20Asp Ala Thr Leu 20

Ala Gln Leu Asn 35Ala Gln Leu Asn 35

His Ser Phe Ala 50His Ser Phe Ala 50

Cys Cys Ser Phe Ser Pro 25Cys Cys Ser Phe Ser Pro 25

Leu Ile Trp Gln Leu Thr 40Leu Ile Trp Gln Leu Thr 40

Glu Gly Gln Asp Gln Gly 55Glu Gly Gln Asp Gln Gly 55

Glu Pro Gly Phe Ser Leu 30Glu Pro Gly Phe Ser Leu 30

Asp Thr Lys Gln Leu Val 45Asp Thr Lys Gln Leu Val 45

Ser Ala Tyr Ala Asn Arg 60Ser Ala Tyr Ala Asn Arg 60

Thr Ala Leu Phe Pro Asp Leu Leu Ala 65 70Thr Ala Leu Phe Pro Asp Leu Leu Ala 65 70

Gln Gly Asn Ala Ser Leu ArgGln Gly Asn Ala Ser Leu Arg

8080

Leu Gln Arg Val Arg Val Ala Asp Glu 85Leu Gln Arg Val Arg Val Ala Asp Glu 85

Gly Ser Phe Thr Cys Phe Val 90 95Gly Ser Phe Thr Cys Phe Val 90 95

Ser Ile Arg Asp Phe Gly Ser Ala Ala Val SerSer Ile Arg Asp Phe Gly Ser Ala Ala Val Ser

100 105100 105

Leu Gln Val Ala AlaLeu Gln Val Ala Ala

110110

- 248 044346- 248 044346

ProPro

ProPro

Glu 145Glu 145

AsnAsn

HisHis

LeuLeu

IleIle

Glu 225Glu 225

SerSer

TrpTrp

ArgArg

LeuLeu

Ala 305Ala 305

SerSer

MetMet

IleIle

Tyr SerTyr Ser

115115

Gly Asp 130Gly Asp 130

Ala GluAla Glu

Val ThrVal Thr

Ser IleSer Ile

Val ArgVal Arg

195195

Thr ProThr Pro

210210

Asp ProAsp Pro

Phe SerPhe Ser

Gln LeuGln Leu

Asp GlnAsp Gln

275275

Leu AlaLeu Ala

290290

Asp GluAsp Glu

Ala AlaAla Ala

Thr LeuThr Leu

Thr CysThr Cys

355355

Lys ProLys Pro

Thr ValThr Val

Val PheVal Phe

Thr SerThr Ser

165165

Leu Arg 180Leu Arg 180

Asn ProAsn Pro

Gln ArgGln Arg

Val ValVal Val

Pro GluPro Glu

245245

Thr Asp 260Thr Asp 260

Gly SerGly Ser

Gln GlyGln Gly

Gly SerGly Ser

Val SerVal Ser

325325

Glu Pro 340Glu Pro 340

Ser SerSer Ser

Ser MetSerMet

Thr IleThr Ile

135135

Trp Gln 150Trp Gln 150

Gln MetGln Met

Val ValVal Val

Val LeuVal Leu

Ser ProSer Pro

215215

Ala Leu 230Ala Leu 230

Pro GlyPro Gly

Thr LysThr Lys

Ala TyrAla Tyr

Asn AlaAsn Ala

295295

Phe Thr 310Ph Thr 310

Leu GlnLeu Gln

Asn LysAsn Lys

Tyr ArgTyr Arg

Thr Leu 120Thr Leu 120

Thr CysThr Cys

Asp GlyAsp Gly

Ala AsnAla Asn

Leu GlyLeu Gly

185185

Gln GlnGln Gln

200200

Thr GlyThr Gly

Val GlyVal Gly

Phe SerPhe Ser

Gln LeuGln Leu

265265

Ala Asn 280Ala Asn 280

Ser LeuSer Leu

Cys PheCysPhe

Val AlaVal Ala

Asp LeuAsp Leu

345345

Gly Tyr 360Gly Tyr 360

Glu ProGlu Pro

Ser SerSer Ser

Gln GlyGln Gly

155155

Glu Gln 170Glu Gln 170

Ala AsnAla Asn

Asp AlaAsp Ala

Ala ValAla Val

Thr AspThr Asp

235235

Leu AlaLeu Ala

250250

Val HisVal His

Arg ThrArg Thr

Arg LeuArg Leu

Val SerVal Ser

315315

Ala Pro 330Ala Pro 330

Arg ProArg Pro

Pro GluPro Glu

Asn LysAsn Lys

125125

Asp LeuAsp Leu

Tyr Gln 140Tyr Gln 140

Gly TyrGly Tyr

Val ProVal Pro

Leu ThrLeu Thr

Gly LeuGly Leu

Gly ThrGly Thr

His SerHis Ser

205205

Glu ValGlu Val

220220

Ala ThrAla Thr

Gln LeuGln Leu

Ser PheSer Phe

Ala LeuAla Leu

285285

Gln Arg 300Gln Arg 300

Ile ArgIle Arg

Tyr SerTyr Ser

Gly AspGly Asp

Ala GluAla Glu

365365

Phe AspPhe Asp

175175

Tyr Ser 190Tyr Ser 190

Ser ValSer Val

Gln ValGln Val

Leu ArgLeu Arg

Asn LeuAsn Leu

255255

Thr GluThr Glu

270270

Phe ProPhe Pro

Val ArgVal Arg

Asp PheAsp Phe

Lys ProLys Pro

335335

Thr Val 350Thr Val 350

Val PheVal Phe

ArgArg

ProPro

Gly 160Gly 160

ValVal

CysCys

ThrThr

ProPro

Cys 240Cys 240

IleIle

GlyGly

AspAsp

ValVal

Gly 320Gly 320

SerSer

ThrThr

TrpTrp

- 249 044346- 249 044346

Gln Asp Gly Gln GlyGln Asp Gly Gln Gly

370370

Val Pro Leu Thr GlyVal Pro Leu Thr Gly

375375

Asn Val Thr Thr SerAsn Val Thr Thr Ser

380380

Met Ala Asn Glu Gln 385Met Ala Asn Glu Gln 385

Gly Leu Phe Asp Val 390Gly Leu Phe Asp Val 390

His Ser Val Leu Arg 395His Ser Val Leu Arg 395

Val Leu Gly Ala AsnVal Leu Gly Ala Asn

405405

Gly Thr Tyr Ser CysGly Thr Tyr Ser Cys

410410

Leu Val Arg Asn ProLeu Val Arg Asn Pro

415415

Leu Gln Gln Asp AlaLeu Gln Gln Asp Ala

420420

His Gly Ser Val ThrHis Gly Ser Val Thr

425425

Ile Thr Gly Gln ProIle Thr Gly Gln Pro

430430

GlnGln

Val 400Val 400

ValVal

MetMet

Thr Phe Pro Pro GluThr Phe Pro Pro Glu

435435

Ala <210> 34 <211> 235 <212> БЕЛОК <213> Homo sapiens <220>Ala <210> 34 <211> 235 <212> PROTEIN <213> Homo sapiens <220>

<221> новая или редкая характеристика <223> VTCN1(B7-H4) ECD <400> 34<221> new or rare characteristic <223> VTCN1(B7-H4) ECD <400> 34

Leu Ile Ile Gly Phe Gly Ile Ser Gly Arg His Ser Ile Thr Val 1 5 10 15Leu Ile Ile Gly Phe Gly Ile Ser Gly Arg His Ser Ile Thr Val 1 5 10 15

Thr Val Ala Ser Ala Gly Asn 20Thr Val Ala Ser Ala Gly Asn 20

Ile Gly Glu Asp Gly Ile Leu SerIle Gly Glu Asp Gly Ile Leu Ser

30thirty

Thr Phe Glu Pro Asp 35Thr Phe Glu Pro Asp 35

Ile Lys Leu Ser Asp 40Ile Lys Leu Ser Asp 40

Ile Val Ile Gln Trp 45Ile Val Ile Gln Trp 45

Lys Glu Gly Val Leu 50Lys Glu Gly Val Leu 50

Gly Leu Val His Glu 55Gly Leu Val His Glu 55

Phe Lys Glu Gly Lys 60Phe Lys Glu Gly Lys 60

Glu Leu Ser Glu Gln 65Glu Leu Ser Glu Gln 65

Asp Glu Met Phe Arg 70Asp Glu Met Phe Arg 70

Gly Arg Thr Ala Val 75Gly Arg Thr Ala Val 75

Ala Asp Gln Val Ile 85Ala Asp Gln Val Ile 85

Val Gly Asn Ala Ser 90Val Gly Asn Ala Ser 90

Leu Arg Leu Lys Asn 95Leu Arg Leu Lys Asn 95

Gln Leu Thr Asp AlaGln Leu Thr Asp Ala

100100

Gly Thr Tyr Lys CysGly Thr Tyr Lys Cys

105105

Tyr Ile Ile Thr SerTyr Ile Ile Thr Ser

110110

Gly Lys Gly Asn AlaGly Lys Gly Asn Ala

Asn Leu Glu Tyr LysAsn Leu Glu Tyr Lys

Thr Gly Ala Phe SerThr Gly Ala Phe Ser

ThrThr

CysCys

LeuLeu

AspAsp

Phe 80Phe 80

ValVal

LysLys

MetMet

- 250 044346- 250 044346

115115

120120

125125

Pro Glu Val Asn Val Asp Tyr Asn AlaPro Glu Val Asn Val Asp Tyr Asn Ala

130 135130 135

Ser Ser Glu Thr Leu Arg CysSer Ser Glu Thr Leu Arg Cys

140140

Glu Ala Pro Arg Trp Phe ProGlu Ala Pro Arg Trp Phe Pro

145 150145 150

Gln Pro Thr Val ValGln Pro Thr Val Val

155155

Trp Ala Ser GlnTrp Ala Ser Gln

160160

Val AspVal Asp

Gln Gly Ala Asn Phe Ser Glu 165Gln Gly Ala Asn Phe Ser Glu 165

Val Ser Asn Thr Ser Phe GluVal Ser Asn Thr Ser Phe Glu

170 175170 175

Leu AsnLeu Asn

Ser Glu Asn Val Thr Met LysSer Glu Asn Val Thr Met Lys

180 185180 185

Val Val Ser Val Leu Tyr AsnVal Val Ser Val Leu Tyr Asn

190190

Val ThrVal Thr

Ile Asn Asn Thr Tyr Ser CysIle Asn Asn Thr Tyr Ser Cys

195 200195 200

Met Ile Glu Asn Asp Ile AlaMet Ile Glu Asn Asp Ile Ala

205205

Lys AlaLys Ala

210210

Thr Gly Asp Ile Lys Val ThrThr Gly Asp Ile Lys Val Thr

215215

Glu Ser Glu Ile Lys Arg Arg 220Glu Ser Glu Ile Lys Arg Arg 220

Ser His Leu Gln Leu Leu Asn Ser Lys Ala SerSer His Leu Gln Leu Leu Asn Ser Lys Ala Ser

225 230235 <210>35 <211>134 <212> БЕЛОК <213> Homo sapiens <220>225 230235 <210>35 <211>134 <212> PROTEIN <213> Homo sapiens <220>

<221> новая или редкая характеристика <223> CD28 ECD <400> 35<221> new or rare characteristic <223> CD28 ECD <400> 35

Asn Lys Ile Leu Val Lys Gln Ser Pro Met Leu Val Ala Tyr Asp AsnAsn Lys Ile Leu Val Lys Gln Ser Pro Met Leu Val Ala Tyr Asp Asn

5 10 155 10 15

Ala Val Asn Leu SerAla Val Asn Leu Ser

Cys Lys Tyr Ser Tyr 25Cys Lys Tyr Ser Tyr 25

Asn Leu Phe Ser Arg Glu 30Asn Leu Phe Ser Arg Glu 30

Phe Arg Ala Ser Leu 35Phe Arg Ala Ser Leu 35

His Lys Gly Leu Asp 40His Lys Gly Leu Asp 40

Ser Ala Val Glu Val Cys 45Ser Ala Val Glu Val Cys 45

Val Val Tyr Gly Asn 50Val Val Tyr Gly Asn 50

Tyr Ser Gln Gln Leu 55Tyr Ser Gln Gln Leu 55

Gln Val Tyr Ser Lys Thr 60Gln Val Tyr Ser Lys Thr 60

Gly Phe Asn Cys Asp 65Gly Phe Asn Cys Asp 65

Gly Lys Leu Gly Asn 70Gly Lys Leu Gly Asn 70

Glu Ser Val Thr Phe Tyr 75 80Glu Ser Val Thr Phe Tyr 75 80

- 251 044346- 251 044346

LeuLeu

GlnGln

AsnAsn

LeuLeu

Tyr 85Tyr 85

ValVal

AsnAsn

GlnGln

ThrThr

Asp 90Asp 90

IleIle

TyrTyr

PhePhe

CysCys

Lys 95Lys 95

IleIle

GluGlu

ValVal

MetMet

Tyr 100Tyr 100

ProPro

ProPro

ProPro

TyrTyr

LeuLeu

105105

AspAsp

AsnAsn

GluGlu

LysLys

SerSer

110110

AsnAsn

GlyGly

ThrThr

IleIle

IleIle

115115

HisHis

ValVal

LysLys

GlyGly

Lys 120Lys 120

HisHis

LeuLeu

CysCys

ProPro

SerSer

125125

ProPro

LeuLeu

PhePhe

ProPro

Gly 130Gly 130

ProPro

SerSer

LysLys

Pro <210> 36 <211> 126 < 212> БЕЛОК < 213> Homo sapiens <220>Pro <210> 36 <211> 126 <212> PROTEIN <213> Homo sapiens <220>

< 221> новая или редкая характеристика < 223> CTLA4 ECD < 400>36< 221> new or rare characteristic < 223> CTLA4 ECD < 400>36

Lys Ala Met His Val Ala Gln Pro Ala Val Val Leu Ala Ser Ser ArgLys Ala Met His Val Ala Gln Pro Ala Val Val Leu Ala Ser Ser Arg

5 10155 1015

Gly Ile Ala Ser Phe Val Cys Glu Tyr Ala Ser Pro Gly Lys Ala Thr 20 2530Gly Ile Ala Ser Phe Val Cys Glu Tyr Ala Ser Pro Gly Lys Ala Thr 20 2530

Glu Val Arg Val Thr Val Leu Arg Gln Ala Asp Ser Gln Val Thr Glu 35 4045Glu Val Arg Val Thr Val Leu Arg Gln Ala Asp Ser Gln Val Thr Glu 35 4045

Val Cys Ala Ala Thr Tyr Met Met Gly Asn Glu Leu Thr Phe Leu Asp 50 5560Val Cys Ala Ala Thr Tyr Met Met Gly Asn Glu Leu Thr Phe Leu Asp 50 5560

Asp Ser Ile Cys Thr Gly Thr Ser Ser Gly Asn Gln Val Asn Leu Thr 65 70 7580Asp Ser Ile Cys Thr Gly Thr Ser Ser Gly Asn Gln Val Asn Leu Thr 65 70 7580

Ile Gln Gly Leu Arg Ala Met Asp Thr Gly Leu Tyr Ile Cys Lys Val 85 9095Ile Gln Gly Leu Arg Ala Met Asp Thr Gly Leu Tyr Ile Cys Lys Val 85 9095

Glu Leu Met Tyr Pro Pro Pro Tyr Tyr Leu Gly Ile Gly Asn Gly ThrGlu Leu Met Tyr Pro Pro Pro Tyr Tyr Leu Gly Ile Gly Asn Gly Thr

100 105110100 105110

Gln Ile Tyr Val Ile Asp Pro Glu Pro Cys Pro Asp Ser AspGln Ile Tyr Val Ile Asp Pro Glu Pro Cys Pro Asp Ser Asp

115 120125 <210>37 <211>150 <212> БЕЛОК115 120125 <210>37 <211>150 <212> PROTEIN

- 252 044346 < 213> Homo sapiens <220>- 252 044346 <213> Homo sapiens <220>

< 221> новая или редкая характеристика <223> PDCD1(PD-1) ECD <400>37<221> new or rare characteristic <223> PDCD1(PD-1) ECD <400>37

Pro Gly Trp Phe Leu Asp Ser Pro Asp Arg Pro Trp Asn Pro Pro 1 5 1015Pro Gly Trp Phe Leu Asp Ser Pro Asp Arg Pro Trp Asn Pro Pro 1 5 1015

Phe Ser Pro Ala Leu Leu Val Val Thr Glu Gly Asp Asn Ala ThrPhe Ser Pro Ala Leu Leu Val Val Thr Glu Gly Asp Asn Ala Thr

25302530

Thr Cys Ser Phe Ser Asn Thr Ser Glu Ser Phe Val Leu Asn Trp 35 4045Thr Cys Ser Phe Ser Asn Thr Ser Glu Ser Phe Val Leu Asn Trp 35 4045

Arg Met Ser Pro Ser Asn Gln Thr Asp Lys Leu Ala Ala Phe Pro 50 5560Arg Met Ser Pro Ser Asn Gln Thr Asp Lys Leu Ala Ala Phe Pro 50 5560

Asp Arg Ser Gln Pro Gly Gln Asp Cys Arg Phe Arg Val Thr Gln 65 7075Asp Arg Ser Gln Pro Gly Gln Asp Cys Arg Phe Arg Val Thr Gln 65 7075

Pro Asn Gly Arg Asp Phe His Met Ser Val Val Arg Ala Arg Arg 85 9095Pro Asn Gly Arg Asp Phe His Met Ser Val Val Arg Ala Arg Arg 85 9095

Asp Ser Gly Thr Tyr Leu Cys Gly Ala Ile Ser Leu Ala Pro LysAsp Ser Gly Thr Tyr Leu Cys Gly Ala Ile Ser Leu Ala Pro Lys

100 105110100 105110

Gln Ile Lys Glu Ser Leu Arg Ala Glu Leu Arg Val Thr Glu ArgGln Ile Lys Glu Ser Leu Arg Ala Glu Leu Arg Val Thr Glu Arg

115 120125115 120125

Ala Glu Val Pro Thr Ala His Pro Ser Pro Ser Pro Arg Pro AlaAla Glu Val Pro Thr Ala His Pro Ser Pro Ser Pro Arg Pro Ala

130 135140130 135140

Gln Phe Gln Thr Leu ValGln Phe Gln Thr Leu Val

145150 <210>38 <211>120 < 212> БЕЛОК < 213> Homo sapiens <220>145150 <210>38 <211>120 <212> PROTEIN <213> Homo sapiens <220>

< 221> новая или редкая характеристика <223> ICOS ECD <400> 38<221> new or rare feature <223> ICOS ECD <400> 38

Glu Ile Asn Gly Ser Ala Asn Tyr Glu Met Phe Ile Phe His Asn 1 5 10 15Glu Ile Asn Gly Ser Ala Asn Tyr Glu Met Phe Ile Phe His Asn 1 5 10 15

ThrThr

PhePhe

TyrTyr

GluGlu

Leu 80Leu 80

AsnAsn

AlaAla

ArgArg

GlyGly

GlyGly

- 253 044346- 253 044346

Gly Val Gln Ile LeuGly Val Gln Ile Leu

Cys Lys Tyr Pro AspCys Lys Tyr Pro Asp

Ile Val Gln Gln PheIle Val Gln Gln Phe

Met Gln Leu Leu Lys 35Met Gln Leu Leu Lys 35

Gly Gly Gln Ile Leu 40Gly Gly Gln Ile Leu 40

Cys Asp Leu Thr Lys 45Cys Asp Leu Thr Lys 45

Lys Gly Ser Gly Asn 50Lys Gly Ser Gly Asn 50

Thr Val Ser Ile Lys 55Thr Val Ser Ile Lys 55

Ser Leu Lys Phe Cys 60Ser Leu Lys Phe Cys 60

Ser Gln Leu Ser Asn 65Ser Gln Leu Ser Asn 65

Asn Ser Val Ser Phe 70Asn Ser Val Ser Phe 70

Phe Leu Tyr Asn Leu 75Phe Leu Tyr Asn Leu 75

His Ser His Ala AsnHis Ser His Ala Asn

Tyr Tyr Phe Cys Asn 90Tyr Tyr Phe Cys Asn 90

Leu Ser Ile Phe Asp 95Leu Ser Ile Phe Asp 95

Pro Pro Phe Lys ValPro Pro Phe Lys Val

100100

Thr Leu Thr Gly GlyThr Leu Thr Gly Gly

105105

Tyr Leu His Ile TyrTyr Leu His Ile Tyr

110110

LysLys

ThrThr

HisHis

Asp 80Asp 80

ProPro

GluGlu

Ser Gln Leu Cys Cys 115Ser Gln Leu Cys Cys 115

Gln Leu LysGln Leu Lys

120 <210> 39 <211> 127 <212> БЕЛОК <213> Homo sapiens <220>120 <210> 39 <211> 127 <212> PROTEIN <213> Homo sapiens <220>

<221> новая или редкая характеристика <223> BTLA(CD272) ECD <400>39<221> new or rare characteristic <223> BTLA(CD272) ECD <400>39

Lys Glu Ser Cys Asp Val Gln Leu Tyr Ile Lys Arg Gln Ser Glu 1 5 1015Lys Glu Ser Cys Asp Val Gln Leu Tyr Ile Lys Arg Gln Ser Glu 1 5 1015

Ser Ile Leu Ala Gly Asp Pro Phe Glu Leu Glu Cys Pro Val LysSer Ile Leu Ala Gly Asp Pro Phe Glu Leu Glu Cys Pro Val Lys

25302530

Cys Ala Asn Arg Pro His Val Thr Trp Cys Lys Leu Asn Gly Thr 35 4045Cys Ala Asn Arg Pro His Val Thr Trp Cys Lys Leu Asn Gly Thr 35 4045

Cys Val Lys Leu Glu Asp Arg Gln Thr Ser Trp Lys Glu Glu Lys 50 5560Cys Val Lys Leu Glu Asp Arg Gln Thr Ser Trp Lys Glu Glu Lys 50 5560

Ile Ser Phe Phe Ile Leu His Phe Glu Pro Val Leu Pro Asn Asp 65 7075Ile Ser Phe Phe Ile Leu His Phe Glu Pro Val Leu Pro Asn Asp 65 7075

Gly Ser Tyr Arg Cys Ser Ala Asn Phe Gln Ser Asn Leu Ile GluGly Ser Tyr Arg Cys Ser Ala Asn Phe Gln Ser Asn Leu Ile Glu

HisHis

TyrTyr

ThrThr

AsnAsn

Asn 80Asn 80

SerSer

- 254 044346- 254 044346

His Ser Thr ThrHis Ser Thr Thr

100100

Leu Tyr Val Thr Asp Val Lys Ser Ala Ser Glu ArgLeu Tyr Val Thr Asp Val Lys Ser Ala Ser Glu Arg

105 110105 110

Pro Ser Lys AspPro Ser Lys Asp

115115

Glu Met Ala Ser Arg Pro Trp Leu Leu Tyr ArgGlu Met Ala Ser Arg Pro Trp Leu Leu Tyr Arg

120 125 <210> 40 <211> 371 < 212> БЕЛОК < 213> Homo sapiens <220>120 125 <210> 40 <211> 371 <212> PROTEIN <213> Homo sapiens <220>

< 221> новая или редкая характеристика < 223> CD4 ECD <400> 40< 221> new or rare characteristic < 223> CD4 ECD <400> 40

Lys Lys Val Val 1Lys Lys Val Val 1

Leu Gly Lys 5Leu Gly Lys 5

Lys Gly Asp Thr Val Glu Leu Thr CysLys Gly Asp Thr Val Glu Leu Thr Cys

1515

Thr Ala Ser GlnThr Ala Ser Gln

Lys Lys SerLys Lys Ser

Ile Gln Phe His Trp Lys Asn Ser AsnIle Gln Phe His Trp Lys Asn Ser Asn

30thirty

Gln Ile Lys Ile 35Gln Ile Lys Ile 35

Leu Gly AsnLeu Gly Asn

Gln Gly Ser Phe Leu Thr Lys Gly Pro 40 45Gln Gly Ser Phe Leu Thr Lys Gly Pro 40 45

Ser Lys 50Ser Lys 50

Leu Asn Asp Arg Ala Asp 55Leu Asn Asp Arg Ala Asp 55

Ser Arg Arg Ser Leu Trp Asp Gln 60Ser Arg Arg Ser Leu Trp Asp Gln 60

Gly 65Gly 65

AsnAsn

PhePhe

ProPro

LeuLeu

Ile 70Ile 70

IleIle

LysLys

AsnAsn

LeuLeu

Lys 75Lys 75

IleIle

GluGlu

AspAsp

SerSer

Asp 80Asp 80

ThrThr

TyrTyr

IleIle

CysCys

Glu 85Glu 85

ValVal

GluGlu

AspAsp

GlnGln

Lys 90Lys 90

GluGlu

GluGlu

ValVal

GlnGln

Leu 95Leu 95

LeuLeu

ValVal

PhePhe

GlyGly

LeuLeu

100100

ThrThr

AlaAla

AsnAsn

SerSer

AspAsp

105105

ThrThr

HisHis

LeuLeu

LeuLeu

GlnGln

110110

GlyGly

GlnGln

Ser Leu Thr Leu Thr Leu Glu Ser ProSer Leu Thr Leu Thr Leu Glu Ser Pro

115 120115 120

Pro Gly Ser Ser ProPro Gly Ser Ser Pro

125125

Ser ValSer Val

Gln Cys Arg Ser Pro Arg Gly Lys AsnGln Cys Arg Ser Pro Arg Gly Lys Asn

130 135130 135

Ile Gln Gly Gly Lys 140Ile Gln Gly Gly Lys 140

Thr LeuThr Leu

Ser Val Ser Gln Leu Glu Leu Gln Asp 145 150Ser Val Ser Gln Leu Glu Leu Gln Asp 145 150

Ser Gly Thr Trp Thr 155Ser Gly Thr Trp Thr 155

Cys ThrCys Thr

160160

- 255 044346- 255 044346

Val Leu GlnVal Leu Gln

Asn Gln LysAsn Gln Lys

165165

Lys Val GluLys Val Glu

Phe Lys Ile 170Phe Lys Ile 170

Asp Ile ValAsp Ile Val

175175

Leu Ala PheLeu Ala Phe

Gln Lys Ala 180Gln Lys Ala 180

Ser Ser IleSer Ser Ile

185185

Val Tyr LysVal Tyr Lys

Lys Glu Gly 190Lys Glu Gly 190

Gln Val GluGln Val Glu

195195

Phe Ser PhePhe Ser Phe

Pro Leu AlaPro Leu Ala

200200

Phe Thr ValPhe Thr Val

Glu Lys Leu 205Glu Lys Leu 205

Gly Ser GlyGly Ser Gly

210210

Glu Leu TrpGlu Leu Trp

Trp Gln Ala 215Trp Gln Ala 215

Glu Arg AlaGlu Arg Ala

220220

Ser Ser SerSer Ser Ser

Ser Trp Ile 225Ser Trp Ile 225

Thr Phe AspThr Phe Asp

230230

Leu Lys AsnLeu Lys Asn

Lys Glu ValLys Glu Val

235235

Ser Val LysSer Val Lys

Val Thr GlnVal Thr Gln

Asp Pro LysAsp Pro Lys

245245

Leu Gln MetLeu Gln Met

Gly Lys Lys 250Gly Lys Lys 250

Leu Pro LeuLeu Pro Leu

255255

Leu Thr LeuLeu Thr Leu

Pro Gln Ala 260Pro Gln Ala 260

Leu Pro GlnLeu Pro Gln

265265

Tyr Ala GlyTyr Ala Gly

Ser Gly AsnSer Gly Asn

270270

Thr Leu AlaThr Leu Ala

275275

Leu Glu AlaLeu Glu Ala

Lys Thr GlyLys Thr Gly

280280

Lys Leu HisLys Leu His

Gln Glu Val 285Gln Glu Val 285

Leu Val ValLeu Val Val

290290

Met Arg AlaMet Arg Ala

Thr Gln Leu 295Thr Gln Leu 295

Gln Lys AsnGln Lys Asn

300300

Leu Thr CysLeu Thr Cys

Val Trp Gly 305Val Trp Gly 305

Pro Thr SerPro Thr Ser

310310

Pro Lys LeuPro Lys Leu

Met Leu SerMet Leu Ser

315315

Leu Lys LeuLeu Lys Leu

Asn Lys GluAsn Lys Glu

Ala Lys ValAla Lys Val

325325

Ser Lys ArgSer Lys Arg

Glu Lys Ala 330Glu Lys Ala 330

Val Trp ValVal Trp Val

335335

Asn Pro GluAsn Pro Glu

Ala Gly Met 340Ala Gly Met 340

Trp Gln CysTrp Gln Cys

345345

Leu Leu SerLeu Leu Ser

Asp Ser Gly 350Asp Ser Gly 350

Val Leu LeuVal Leu Leu

355355

Glu Ser AsnGlu Ser Asn

Ile Lys ValIle Lys Val

360360

Leu Pro ThrLeu Pro Thr

Trp Ser Thr 365Trp Ser Thr 365

ValVal

GluGlu

ThrThr

LysLys

Arg 240Arg 240

HisHis

LeuLeu

AsnAsn

GluGlu

Glu 320Glu 320

LeuLeu

GlnGln

ProPro

Val Gln ProVal Gln Pro

370 <210> 41 <211> 161 <212> БЕЛОК <213> Homo sapiens <220>370 <210> 41 <211> 161 <212> PROTEIN <213> Homo sapiens <220>

- 256 044346 <221> новая или редкая характеристика <223> CD8A(CD8-альфа) ECD <400>41- 256 044346 <221> new or rare characteristic <223> CD8A(CD8-alpha) ECD <400>41

Ser Gln Phe Arg Val Ser Pro Leu Asp Arg Thr Trp Asn Leu GlySer Gln Phe Arg Val Ser Pro Leu Asp Arg Thr Trp Asn Leu Gly

5 10155 1015

Thr Val Glu Leu Lys Cys Gln Val Leu Leu Ser Asn Pro Thr SerThr Val Glu Leu Lys Cys Gln Val Leu Leu Ser Asn Pro Thr Ser

25302530

Cys Ser Trp Leu Phe Gln Pro Arg Gly Ala Ala Ala Ser Pro Thr 35 4045Cys Ser Trp Leu Phe Gln Pro Arg Gly Ala Ala Ala Ser Pro Thr 35 4045

Leu Leu Tyr Leu Ser Gln Asn Lys Pro Lys Ala Ala Glu Gly Leu 50 5560Leu Leu Tyr Leu Ser Gln Asn Lys Pro Lys Ala Ala Glu Gly Leu 50 5560

Thr Gln Arg Phe Ser Gly Lys Arg Leu Gly Asp Thr Phe Val Leu 65 7075Thr Gln Arg Phe Ser Gly Lys Arg Leu Gly Asp Thr Phe Val Leu 65 7075

Leu Ser Asp Phe Arg Arg Glu Asn Glu Gly Tyr Tyr Phe Cys Ser 85 9095Leu Ser Asp Phe Arg Arg Glu Asn Glu Gly Tyr Tyr Phe Cys Ser 85 9095

Leu Ser Asn Ser Ile Met Tyr Phe Ser His Phe Val Pro Val PheLeu Ser Asn Ser Ile Met Tyr Phe Ser His Phe Val Pro Val Phe

100 105110100 105110

Pro Ala Lys Pro Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg Pro Pro Thr ProPro Ala Lys Pro Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro

115 120125115 120125

Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu Ser Leu Arg Pro Glu Ala CysPro Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys

130 135140130 135140

Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val His Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala 145 150155Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val His Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala 145 150155

GluGlu

GlyGly

PhePhe

AspAsp

Thr 80Thr 80

AlaAla

LeuLeu

AlaAla

ArgArg

Cys 160Cys 160

Asp <210>42 <211>149 < 212> БЕЛОК < 213> Homo sapiens <220>Asp <210>42 <211>149 <212> PROTEIN <213> Homo sapiens <220>

< 221> новая или редкая характеристика < 223> CD8B(CD8-бета) ECD <400> 42< 221> new or rare characteristic < 223> CD8B(CD8-beta) ECD <400> 42

Leu Gln Gln Thr Pro Ala Tyr Ile Lys Val Gln Thr Asn Lys Met 1 5 10 15Leu Gln Gln Thr Pro Ala Tyr Ile Lys Val Gln Thr Asn Lys Met 1 5 10 15

ValVal

- 257 044346- 257 044346

Met Leu Ser Cys Glu 20Met Leu Ser Cys Glu 20

Ala Lys Ile Ser LeuAla Lys Ile Ser Leu

Ser Asn Met Arg Ile 30Ser Asn Met Arg Ile 30

Trp Leu Arg Gln Arg 35Trp Leu Arg Gln Arg 35

Gln Ala Pro Ser SerGln Ala Pro Ser Ser

Asp Ser His His Glu 45Asp Ser His His Glu 45

Leu Ala Leu Trp Asp 50Leu Ala Leu Trp Asp 50

Ser Ala Lys Gly Thr 55Ser Ala Lys Gly Thr 55

Ile His Gly Glu Glu 60Ile His Gly Glu Glu 60

Glu Gln Glu Lys Ile 65Glu Gln Glu Lys Ile 65

Ala Val Phe Arg Asp 70Ala Val Phe Arg Asp 70

Ala Ser Arg Phe Ile 75Ala Ser Arg Phe Ile 75

Asn Leu Thr Ser ValAsn Leu Thr Ser Val

Lys Pro Glu Asp Ser 90Lys Pro Glu Asp Ser 90

Gly Ile Tyr Phe Cys 95Gly Ile Tyr Phe Cys 95

Ile Val Gly Ser ProIle Val Gly Ser Pro

100100

Glu Leu Thr Phe GlyGlu Leu Thr Phe Gly

105105

Lys Gly Thr Gln LeuLys Gly Thr Gln Leu

110110

Val Val Asp Phe LeuVal Val Asp Phe Leu

115115

Pro Thr Thr Ala GlnPro Thr Thr Ala Gln

120120

Pro Thr Lys Lys Ser 125Pro Thr Lys Lys Ser 125

Leu Lys Lys Arg Val 130Leu Lys Lys Arg Val 130

Cys Arg Leu Pro ArgCys Arg Leu Pro Arg

135135

Pro Glu Thr Gln Lys 140Pro Glu Thr Gln Lys 140

TyrTyr

PhePhe

ValVal

Leu 80Leu 80

MetMet

SerSer

ThrThr

GlyGly

Pro Leu Cys Ser Pro 145 <210> 43 <211> 422 <212> БЕЛОК <213> Homo sapiens <220>Pro Leu Cys Ser Pro 145 <210> 43 <211> 422 <212> PROTEIN <213> Homo sapiens <220>

<221> новая или редкая характеристика <223> LAG3 ECD <400> 43<221> new or rare characteristic <223> LAG3 ECD <400> 43

Val Pro Val Val Trp Ala Gln Glu Gly Ala Pro Ala Gln Leu Pro 1 5 10 15Val Pro Val Val Trp Ala Gln Glu Gly Ala Pro Ala Gln Leu Pro 1 5 10 15

Ser Pro ThrSer Pro Thr

Ile Pro 20Ile Pro 20

LeuLeu

Gln Asp Leu Ser Leu Leu Arg Arg AlaGln Asp Leu Ser Leu Leu Arg Arg Ala

30thirty

Val Thr Trp 35Val Thr Trp 35

Gly His ProGly His Pro

Gln HisGln His

Leu AlaLeu Ala

GlnGln

ProPro

Pro Asp Ser Gly Pro Pro Ala Ala AlaPro Asp Ser Gly Pro Pro Ala Ala Ala

4545

Gly Pro His Pro Ala Ala Pro Ser SerGly Pro His Pro Ala Ala Pro Ser Ser

CysCys

GlyGly

ProPro

TrpTrp

- 258 044346- 258 044346

Gly 65Gly 65

LeuLeu

ArgArg

ArgArg

AlaAla

Ala 145Ala 145

CysCys

AsnAsn

LeuLeu

GlyGly

Ile 225Ile 225

ThrThr

ProPro

ProPro

ThrThr

Pro Arg ProPro Arg Pro

Arg Arg Tyr 70Arg Arg Tyr 70

Thr Val LeuThr Val Leu

Ser Val Gly 75Ser Val Gly 75

Pro Gly Gly 80Pro Gly Gly 80

Arg Ser GlyArg Ser Gly

Arg Leu Pro 85Arg Leu Pro 85

Leu Gln ProLeu Gln Pro

Arg Val GlnArg Val Gln

Leu Asp Glu 95Leu Asp Glu 95

Gly Arg GlnGly Arg Gln

100100

Ala Asp AlaAla Asp Ala

115115

Leu Ser Cys 130Leu Ser Cys 130

Ser Pro ProSer Pro Pro

Ser Phe SerSer Phe Ser

Arg Gly GlnArg Gly Gln

180180

Ala Glu SerAla Glu Ser

195195

Pro Trp Gly 210Pro Trp Gly 210

Met Tyr AsnMet Tyr Asn

Val Tyr AlaVal Tyr Ala

Ala Gly ValAla Gly Val

260260

Gly Gly GlyGly Gly Gly

275275

Leu Arg Leu 290Leu Arg Leu 290

Arg Gly AspArg Gly Asp

Phe Ser LeuPhe Ser Leu

105105

Trp Leu ArgTrp Leu Arg

Pro Ala Arg 110Pro Ala Arg 110

Gly Glu TyrGly Glu Tyr

Arg Leu ArgArg Leu Arg

135135

Gly Ser LeuGly Ser Leu

150150

Arg Pro Asp 165Arg Pro Asp 165

Gly Arg ValGly Arg Val

Phe Leu PhePhe Leu Phe

Cys Ile LeuCys Ile Leu

215215

Leu Thr ValLeu Thr Val

230230

Gly Ala Gly 245Gly Ala Gly 245

Gly Thr ArgGly Thr Arg

Pro Asp LeuPro Asp Leu

Glu Asp ValGlu Asp Val

295295

Arg Ala Ala 120Arg Ala Ala 120

Val His LeuVal His Leu

125125

Arg Asp ArgArg Asp Arg

Leu Arg LeuLeu Arg Leu

Gly Gln AlaGly Gln Ala

140140

Ser Met ThrSer Met Thr

Arg Ala SerArg Ala Ser

Asp Trp Val 155Asp Trp Val 155

Ile Leu AsnIle Leu Asn

160160

Arg Pro AlaArg Pro Ala

170170

Pro Val ArgPro Val Arg

185185

Leu Pro Gln 200Leu Pro Gln 200

Thr Tyr ArgThr Tyr Arg

Leu Gly LeuLeu Gly Leu

Ser Arg ValSer Arg Val

250250

Ser Phe LeuSer Phe Leu

265265

Leu Val Thr 280Leu Val Thr 280

Ser Gln AlaSer Gln Ala

Ser Val HisSer Val His

Trp Phe ArgTrp Phe Arg

175175

Glu Ser ProGlu Ser Pro

His His His 190His His His 190

Val Ser ProVal Ser Pro

205205

Asp Gly PheAsp Gly Phe

220220

Glu Pro Pro 235Glu Pro Pro 235

Gly Leu ProGly Leu Pro

Thr Ala LysThr Ala Lys

Gly Asp AsnGly Asp Asn

285285

Gln Ala GlyGln Ala Gly

300300

Met Asp SerMet Asp Ser

Asn Val SerAsn Val Ser

Thr Pro LeuThr Pro Leu

240240

Cys Arg LeuCys Arg Leu

255255

Trp Thr Pro 270Trp Thr Pro 270

Gly Asp PheGly Asp Phe

Thr Tyr ThrThr Tyr Thr

- 259 044346- 259 044346

Cys His Ile His Leu 305Cys His Ile His Leu 305

Gln Glu Gln Gln Leu 310Gln Glu Gln Gln Leu 310

Asn Ala Thr Val Thr 315Asn Ala Thr Val Thr 315

Ala Ile Ile Thr ValAla Ile Ile Thr Val

325325

Thr Pro Lys Ser PheThr Pro Lys Ser Phe

330330

Gly Ser Pro Gly SerGly Ser Pro Gly Ser

335335

Gly Lys Leu Leu CysGly Lys Leu Leu Cys

340340

Glu Val Thr Pro ValGlu Val Thr Pro Val

345345

Ser Gly Gln Glu ArgSer Gly Gln Glu Arg

350350

Val Trp Ser Ser LeuVal Trp Ser Ser Leu

355355

Asp Thr Pro Ser Gln 360Asp Thr Pro Ser Gln 360

Arg Ser Phe Ser Gly 365Arg Ser Phe Ser Gly 365

Trp Leu Glu Ala GlnTrp Leu Glu Ala Gln

370370

Glu Ala Gln Leu LeuGlu Ala Gln Leu Leu

375375

Ser Gln Pro Trp GlnSer Gln Pro Trp Gln

380380

Gln Leu Tyr Gln Gly 385Gln Leu Tyr Gln Gly 385

Glu Arg Leu Leu Gly 390Glu Arg Leu Leu Gly 390

Ala Ala Val Tyr Phe 395Ala Ala Val Tyr Phe 395

Glu Leu Ser Ser ProGlu Leu Ser Ser Pro

405405

Gly Ala Gln Arg SerGly Ala Gln Arg Ser

410410

Gly Arg Ala Pro GlyGly Arg Ala Pro Gly

415415

Leu 320Leu 320

LeuLeu

PhePhe

ProPro

CysCys

Thr 400Thr 400

AlaAla

Leu Pro Ala Gly HisLeu Pro Ala Gly His

420420

Leu <210> 44 <211> 181 <212> БЕЛОК <213> Homo sapiens <220>Leu <210> 44 <211> 181 <212> PROTEIN <213> Homo sapiens <220>

<221> новая или редкая характеристика <223> HAVCR2(TIM-3) ECD <400>44<221> new or rare characteristic <223> HAVCR2(TIM-3) ECD <400>44

Ser Glu Val Glu Tyr Arg Ala Glu Val Gly Gln Asn Ala Tyr Leu 1 5 1015Ser Glu Val Glu Tyr Arg Ala Glu Val Gly Gln Asn Ala Tyr Leu 1 5 1015

Cys Phe Tyr Thr Pro Ala Ala Pro Gly Asn Leu Val Pro Val CysCys Phe Tyr Thr Pro Ala Ala Pro Gly Asn Leu Val Pro Val Cys

25302530

Gly Lys Gly Ala Cys Pro Val Phe Glu Cys Gly Asn Val Val Leu 35 4045Gly Lys Gly Ala Cys Pro Val Phe Glu Cys Gly Asn Val Val Leu 35 4045

Thr Asp Glu Arg Asp Val Asn Tyr Trp Thr Ser Arg Tyr Trp Leu 50 5560Thr Asp Glu Arg Asp Val Asn Tyr Trp Thr Ser Arg Tyr Trp Leu 50 5560

Gly Asp Phe Arg Lys Gly Asp Val Ser Leu Thr Ile Glu Asn Val 65 7075Gly Asp Phe Arg Lys Gly Asp Val Ser Leu Thr Ile Glu Asn Val 65 7075

ProPro

TrpTrp

ArgArg

AsnAsn

Thr 80Thr 80

- 260 044346- 260 044346

Leu Ala Asp Ser Gly 85Leu Ala Asp Ser Gly 85

Ile Tyr Cys Cys Arg 90Ile Tyr Cys Cys Arg 90

Ile Gln Ile Pro Gly 95Ile Gln Ile Pro Gly 95

Met Asn Asp Glu LysMet Asn Asp Glu Lys

100100

Phe Asn Leu Lys LeuPhe Asn Leu Lys Leu

105105

Val Ile Lys Pro AlaVal Ile Lys Pro Ala

110110

Val Thr Pro Ala ProVal Thr Pro Ala Pro

115115

Thr Arg Gln Arg AspThr Arg Gln Arg Asp

120120

Phe Thr Ala Ala PhePhe Thr Ala Ala Phe

125125

Arg Met Leu Thr Thr 130Arg Met Leu Thr Thr 130

Arg Gly His Gly ProArg Gly His Gly Pro

135135

Ala Glu Thr Gln ThrAla Glu Thr Gln Thr

140140

Gly Ser Leu Pro Asp 145Gly Ser Leu Pro Asp 145

Ile Asn Leu Thr Gln 150Ile Asn Leu Thr Gln 150

Ile Ser Thr Leu Ala 155Ile Ser Thr Leu Ala 155

Glu Leu Arg Asp SerGlu Leu Arg Asp Ser

165165

Arg Leu Ala Asn AspArg Leu Ala Asn Asp

170170

Leu Arg Asp Ser GlyLeu Arg Asp Ser Gly

175175

IleIle

LysLys

ProPro

LeuLeu

Asn 160Asn 160

AlaAla

Thr Ile Arg Ile GlyThr Ile Arg Ile Gly

180 <210> 45 <211> 394 <212> БЕЛОК < 213> Homo sapiens <220>180 <210> 45 <211> 394 <212> PROTEIN <213> Homo sapiens <220>

< 221> новая или редкая характеристика < 223> CEACAM1 ECD <400>45<221> new or rare characteristic <223> CEACAM1 ECD <400>45

Gln Leu Thr Thr Glu Ser Met Pro Phe Asn Val Ala Glu Gly Lys 1 5 1015Gln Leu Thr Thr Glu Ser Met Pro Phe Asn Val Ala Glu Gly Lys 1 5 1015

Val Leu Leu Leu Val His Asn Leu Pro Gln Gln Leu Phe Gly TyrVal Leu Leu Leu Val His Asn Leu Pro Gln Gln Leu Phe Gly Tyr

25302530

Trp Tyr Lys Gly Glu Arg Val Asp Gly Asn Arg Gln Ile Val Gly 35 4045Trp Tyr Lys Gly Glu Arg Val Asp Gly Asn Arg Gln Ile Val Gly 35 4045

Ala Ile Gly Thr Gln Gln Ala Thr Pro Gly Pro Ala Asn Ser Gly 50 5560Ala Ile Gly Thr Gln Gln Ala Thr Pro Gly Pro Ala Asn Ser Gly 50 5560

Glu Thr Ile Tyr Pro Asn Ala Ser Leu Leu Ile Gln Asn Val Thr 65 7075Glu Thr Ile Tyr Pro Asn Ala Ser Leu Leu Ile Gln Asn Val Thr 65 7075

Asn Asp Thr Gly Phe Tyr Thr Leu Gln Val Ile Lys Ser Asp Leu 85 9095Asn Asp Thr Gly Phe Tyr Thr Leu Gln Val Ile Lys Ser Asp Leu 85 9095

GluGlu

SerSer

TyrTyr

ArgArg

Gln 80Gln 80

ValVal

- 261 044346- 261 044346

AsnAsn

ProPro

ValVal

Trp 145Trp 145

AsnAsn

GlyGly

AspAsp

SerSer

Cys 225Cys 225

GlyGly

ValVal

GlyGly

ProPro

Gly 305Gly 305

IleIle

ArgArg

Glu Glu AlaGlu Glu Ala

100100

Thr Gly GlnThr Gly Gln

Phe His ValPhe His Val

105105

Tyr Pro GluTyr Pro Glu

Leu Pro Lys 110Leu Pro Lys 110

Ser Ile SerSer Ile Ser

115115

Ser Asn AsnSer Asn Asn

Ser Asn Pro 120Ser Asn Pro 120

Val Glu AspVal Glu Asp

125125

Lys Asp AlaLys Asp Ala

Ala Phe Thr 130Ala Phe Thr 130

Cys Glu ProCys Glu Pro

135135

Glu Thr GlnGlu Thr Gln

Asp Thr ThrAsp Thr Thr

140140

Tyr Leu TrpTyr Leu Trp

Ile Asn AsnIle Asn Asn

Gln Ser LeuGln Ser Leu

150150

Pro Val SerPro Val Ser

Pro Arg Leu 155Pro Arg Leu 155

Gln Leu SerGln Leu Ser

160160

Gly Asn ArgGly Asn Arg

Thr Leu Thr 165Thr Leu Thr 165

Leu Leu SerLeu Leu Ser

170170

Val Thr ArgVal Thr Arg

Asn Asp ThrAsn Asp Thr

175175

Pro Tyr GluPro Tyr Glu

180180

Pro Val ThrPro Val Thr

195195

Pro Ser Asp 210Pro Ser Asp 210

Tyr Ala AlaTyr Ala Ala

Thr Phe GlnThr Phe Gln

Asn Asn SerAsn Asn Ser

260260

Cys Asn ArgCys Asn Arg

275275

Val Val Ala 290Val Val Ala 290

Asp Lys AspAsp Lys Asp

Ser Ile ArgSer Ile Arg

Met Lys LeuMet Lys Leu

Cys Glu IleCys Glu Ile

Gln Asn ProGln Asn Pro

185185

Val Ser AlaVal Ser Ala

Asn Arg Ser 190Asn Arg Ser 190

Leu Asn ValLeu Asn Val

Thr Tyr TyrThr Tyr Tyr

215215

Ser Asn ProSer Asn Pro

230230

Gln Ser Thr 245Gln Ser Thr 245

Gly Ser TyrGly Ser Tyr

Thr Thr ValThr Thr Val

Lys Pro GlnLys Pro Gln

295295

Ser Val AsnSer Val Asn

310310

Trp Phe Phe 325Trp Phe Phe 325

Ser Gln GlySer Gln Gly

Thr Tyr Gly 200Thr Tyr Gly 200

Pro Asp ThrPro Asp Thr

205205

Pro Thr IlePro Thr Ile

Arg Pro GlyArg Pro Gly

Ala Asn LeuAla Asn Leu

220220

Ser Leu SerSer Leu Ser

Pro Ala GlnPro Ala Gln

Gln Glu LeuGln Glu Leu

250250

Thr Cys HisThr Cys His

265265

Lys Thr Ile 280Lys Thr Ile 280

Ile Lys AlaIle Lys Ala

Leu Thr CysLeu Thr Cys

Lys Asn GlnLys Asn Gln

330330

Asn Thr ThrAsn Thr Thr

Tyr Ser Trp 235Tyr Ser Trp 235

Leu Ile AsnLeu Ile Asn

240240

Phe Ile ProPhe Ile Pro

Asn Ile ThrAsn Ile Thr

255255

Ala Asn AsnAla Asn Asn

Ser Val Thr 270Ser Val Thr 270

Ile Val ThrIle Val Thr

285285

Ser Lys ThrSer Lys Thr

300300

Ser Thr Asn 315Ser Thr Asn 315

Ser Leu ProSer Leu Pro

Leu Ser IleLeu Ser Ile

Glu Leu SerGlu Leu Ser

Thr Val ThrThr Val Thr

Asp Thr GlyAsp Thr Gly

320320

Ser Ser GluSer Ser Glu

335335

Asn Pro ValAsn Pro Val

- 262 044346- 262 044346

340 345 350340 345 350

Lys Arg Glu Asp Ala Gly ThrLys Arg Glu Asp Ala Gly Thr

355355

Tyr Trp Cys Glu Val Phe Asn ProTyr Trp Cys Glu Val Phe Asn Pro

360 365360 365

Ser Lys Asn Gln Ser Asp ProSer Lys Asn Gln Ser Asp Pro

370 375370 375

Ile Met Leu Asn Val Asn Tyr AsnIle Met Leu Asn Val Asn Tyr Asn

380380

IleIle

AlaAla

Leu Pro Gln Glu Asn Gly LeuLeu Pro Gln Glu Asn Gly Leu

385390385390

Ser Pro Gly <210>46 <211>120 < 212> БЕЛОК < 213> Homo sapiens <220>Ser Pro Gly <210>46 <211>120 <212> PROTEIN <213> Homo sapiens <220>

< 221> новая или редкая характеристика < 223> TIGIT ECD <400>46<221> new or rare feature <223> TIGIT ECD <400>46

Met Met Thr Gly Thr Ile Glu Thr Thr Gly Asn Ile Ser Ala Glu 1 5 1015Met Met Thr Gly Thr Ile Glu Thr Thr Gly Asn Ile Ser Ala Glu 1 5 1015

Gly Gly Ser Ile Ile Leu Gln Cys His Leu Ser Ser Thr Thr Ala 20 2530Gly Gly Ser Ile Ile Leu Gln Cys His Leu Ser Ser Thr Thr Ala 20 2530

Val Thr Gln Val Asn Trp Glu Gln Gln Asp Gln Leu Leu Ala Ile 35 4045Val Thr Gln Val Asn Trp Glu Gln Gln Asp Gln Leu Leu Ala Ile 35 4045

Asn Ala Asp Leu Gly Trp His Ile Ser Pro Ser Phe Lys Asp Arg 50 5560Asn Ala Asp Leu Gly Trp His Ile Ser Pro Ser Phe Lys Asp Arg 50 5560

Ala Pro Gly Pro Gly Leu Gly Leu Thr Leu Gln Ser Leu Thr Val 65 7075Ala Pro Gly Pro Gly Leu Gly Leu Thr Leu Gln Ser Leu Thr Val 65 7075

Asp Thr Gly Glu Tyr Phe Cys Ile Tyr His Thr Tyr Pro Asp Gly 85 9095Asp Thr Gly Glu Tyr Phe Cys Ile Tyr His Thr Tyr Pro Asp Gly 85 9095

Tyr Thr Gly Arg Ile Phe Leu Glu Val Leu Glu Ser Ser Val AlaTyr Thr Gly Arg Ile Phe Leu Glu Val Leu Glu Ser Ser Val Ala

100 105110100 105110

LysLys

GlnGln

CysCys

ValVal

Asn 80Asn 80

ThrThr

GluGlu

His Gly Ala Arg Phe Gln Ile ProHis Gly Ala Arg Phe Gln Ile Pro

115120 <210>47 <211>323 < 212> БЕЛОК < 213> Homo sapiens115120 <210>47 <211>323 <212> PROTEIN <213> Homo sapiens

- 263 044346 <220>- 263 044346 <220>

<221> новая или редкая характеристика <223> PVR(CD155) ECD <400> 47<221> new or rare characteristic <223> PVR(CD155) ECD <400> 47

Trp Pro Pro Pro Gly 1 5Trp Pro Pro Pro Gly 1 5

Thr Gly Asp Val ValThr Gly Asp Val Val

Val Gln Ala Pro ThrVal Gln Ala Pro Thr

Val Pro Gly Phe LeuVal Pro Gly Phe Leu

Gly Asp Ser Val ThrGly Asp Ser Val Thr

Leu Pro Cys Tyr Leu 30Leu Pro Cys Tyr Leu 30

Val Pro Asn Met GluVal Pro Asn Met Glu

Val Thr His Val Ser 40Val Thr His Val Ser 40

Gln Leu Thr Trp Ala 45Gln Leu Thr Trp Ala 45

His Gly Glu Ser Gly 50His Gly Glu Ser Gly 50

Ser Met Ala Val PheSer Met Ala Val Phe

His Gln Thr Gln Gly 60His Gln Thr Gln Gly 60

Ser Tyr Ser Glu Ser 65Ser Tyr Ser Glu Ser 65

Lys Arg Leu Glu Phe 70Lys Arg Leu Glu Phe 70

Val Ala Ala Arg Leu 75Val Ala Ala Arg Leu 75

Ala Glu Leu Arg Asn 85Ala Glu Leu Arg Asn 85

Ala Ser Leu Arg Met 90Ala Ser Leu Arg Met 90

Phe Gly Leu Arg Val 95Phe Gly Leu Arg Val 95

Asp Glu Gly Asn TyrAsp Glu Gly Asn Tyr

100100

Thr Cys Leu Phe ValThr Cys Leu Phe Val

105105

Thr Phe Pro Gln GlyThr Phe Pro Gln Gly

110110

Arg Ser Val Asp Ile 115Arg Ser Val Asp Ile 115

Trp Leu Arg Val LeuTrp Leu Arg Val Leu

120120

Ala Lys Pro Gln Asn 125Ala Lys Pro Gln Asn 125

Ala Glu Val Gln Lys 130Ala Glu Val Gln Lys 130

Val Gln Leu Thr GlyVal Gln Leu Thr Gly

135135

Glu Pro Val Pro MetGlu Pro Val Pro Met

140140

Arg Cys Val Ser Thr 145Arg Cys Val Ser Thr 145

Gly Gly Arg Pro Pro 150Gly Gly Arg Pro Pro 150

Ala Gln Ile Thr Trp 155Ala Gln Ile Thr Trp 155

Ser Asp Leu Gly GlySer Asp Leu Gly Gly

165165

Met Pro Asn Thr SerMet Pro Asn Thr Ser

170170

Gln Val Pro Gly PheGln Val Pro Gly Phe

175175

Ser Gly Thr Val ThrSer Gly Thr Val Thr

180180

Val Thr Ser Leu TrpVal Thr Ser Leu Trp

185185

Ile Leu Val Pro SerIle Leu Val Pro Ser

190190

Gln Val Asp Gly Lys 195Gln Val Asp Gly Lys 195

Asn Val Thr Cys Lys 200Asn Val Thr Cys Lys 200

Val Glu His Glu SerVal Glu His Glu Ser

205205

Glu Lys Pro Gln LeuGlu Lys Pro Gln Leu

210210

Leu Thr Val Asn LeuLeu Thr Val Asn Leu

215215

Thr Val Tyr Tyr ProThr Val Tyr Tyr Pro

220220

GlnGln

GlnGln

ArgArg

ProPro

Gly 80Gly 80

GluGlu

SerSer

ThrThr

AlaAla

His 160His 160

LeuLeu

SerSer

PhePhe

ProPro

- 264 044346- 264 044346

Glu Val Ser Ile Ser 225Glu Val Ser Ile Ser 225

Gly Tyr Asp Asn Asn 230Gly Tyr Asp Asn Asn 230

Trp Tyr Leu Gly Gln 235Trp Tyr Leu Gly Gln 235

Glu Ala Thr Leu ThrGlu Ala Thr Leu Thr

245245

Cys Asp Ala Arg SerCys Asp Ala Arg Ser

250250

Asn Pro Glu Pro ThrAsn Pro Glu Pro Thr

255255

Tyr Asn Trp Ser ThrTyr Asn Trp Ser Thr

260260

Thr Met Gly Pro LeuThr Met Gly Pro Leu

265265

Pro Pro Phe Ala ValPro Pro Phe Ala Val

270270

Gln Gly Ala Gln LeuGln Gly Ala Gln Leu

275275

Leu Ile Arg Pro ValLeu Ile Arg Pro Val

280280

Asp Lys Pro Ile AsnAsp Lys Pro Ile Asn

285285

Thr Leu Ile Cys AsnThr Leu Ile Cys Asn

290290

Val Thr Asn Ala LeuVal Thr Asn Ala Leu

295295

Gly Ala Arg Gln Ala 300Gly Ala Arg Gln Ala 300

Leu Thr Val Gln Val 305Leu Thr Val Gln Val 305

Lys Glu Gly Pro Pro 310Lys Glu Gly Pro Pro 310

Ser Glu His Ser Gly 315Ser Glu His Ser Gly 315

Asn 240Asn 240

GlyGly

AlaAla

ThrThr

GluGlu

Ile 320Ile 320

Ser Arg Asn <210> 48 <211> 329 <212> БЕЛОК <213> Homo sapiens <220>Ser Arg Asn <210> 48 <211> 329 <212> PROTEIN <213> Homo sapiens <220>

<221> новая или редкая характеристика <223> PVRL2(CD112) ECD <400>48<221> new or rare characteristic <223> PVRL2(CD112) ECD <400>48

Gln Asp Val Arg Val Gln Val Leu Pro Glu Val Arg Gly Gln Leu 1 5 1015Gln Asp Val Arg Val Gln Val Leu Pro Glu Val Arg Gly Gln Leu 1 5 1015

Gly Thr Val Glu Leu Pro Cys His Leu Leu Pro Pro Val Pro GlyGly Thr Val Glu Leu Pro Cys His Leu Leu Pro Pro Val Pro Gly

25302530

Tyr Ile Ser Leu Val Thr Trp Gln Arg Pro Asp Ala Pro Ala Asn 35 4045Tyr Ile Ser Leu Val Thr Trp Gln Arg Pro Asp Ala Pro Ala Asn 35 4045

Gln Asn Val Ala Ala Phe His Pro Lys Met Gly Pro Ser Phe Pro 50 5560Gln Asn Val Ala Ala Phe His Pro Lys Met Gly Pro Ser Phe Pro 50 5560

Pro Lys Pro Gly Ser Glu Arg Leu Ser Phe Val Ser Ala Lys Gln 65 7075Pro Lys Pro Gly Ser Glu Arg Leu Ser Phe Val Ser Ala Lys Gln 65 7075

Thr Gly Gln Asp Thr Glu Ala Glu Leu Gln Asp Ala Thr Leu Ala 85 9095Thr Gly Gln Asp Thr Glu Ala Glu Leu Gln Asp Ala Thr Leu Ala 85 9095

GlyGly

LeuLeu

HisHis

SerSer

Ser 80Ser 80

LeuLeu

- 265 044346- 265 044346

His Gly Leu Thr ValHis Gly Leu Thr Val

100100

Glu Asp Glu Gly AsnGlu Asp Glu Gly Asn

105105

Tyr Thr Cys Glu PheTyr Thr Cys Glu Phe

110110

Thr Phe Pro Lys Gly 115Thr Phe Pro Lys Gly 115

Ser Val Arg Gly MetSer Val Arg Gly Met

120120

Thr Trp Leu Arg Val 125Thr Trp Leu Arg Val 125

Ala Lys Pro Lys Asn 130Ala Lys Pro Lys Asn 130

Gln Ala Glu Ala GlnGln Ala Glu Ala Gln

135135

Lys Val Thr Phe Ser 140Lys Val Thr Phe Ser 140

Asp Pro Thr Thr Val 145Asp Pro Thr Thr Val 145

Ala Leu Cys Ile Ser 150Ala Leu Cys Ile Ser 150

Lys Glu Gly Arg Pro 155Lys Glu Gly Arg Pro 155

Ala Arg Ile Ser TrpAla Arg Ile Ser Trp

165165

Leu Ser Ser Leu AspLeu Ser Ser Leu Asp

170170

Trp Glu Ala Lys GluTrp Glu Ala Lys Glu

175175

Gln Val Ser Gly ThrGln Val Ser Gly Thr

180180

Leu Ala Gly Thr ValLeu Ala Gly Thr Val

185185

Thr Val Thr Ser ArgThr Val Thr Ser Arg

190190

Thr Leu Val Pro SerThr Leu Val Pro Ser

195195

Gly Arg Ala Asp Gly 200Gly Arg Ala Asp Gly 200

Val Thr Val Thr CysVal Thr Val Thr Cys

205205

Val Glu His Glu SerVal Glu His Glu Ser

210210

Phe Glu Glu Pro AlaPhe Glu Glu Pro Ala

215215

Leu Ile Pro Val ThrLeu Ile Pro Val Thr

220220

Ser Val Arg Tyr Pro 225Ser Val Arg Tyr Pro 225

Pro Glu Val Ser Ile 230Pro Glu Val Ser Ile 230

Ser Gly Tyr Asp Asp 235Ser Gly Tyr Asp Asp 235

Trp Tyr Leu Gly ArgTrp Tyr Leu Gly Arg

245245

Thr Asp Ala Thr LeuThr Asp Ala Thr Leu

250250

Ser Cys Asp Val ArgSer Cys Asp Val Arg

255255

Asn Pro Glu Pro ThrAsn Pro Glu Pro Thr

260260

Gly Tyr Asp Trp SerGly Tyr Asp Trp Ser

265265

Thr Thr Ser Gly ThrThr Thr Ser Gly Thr

270270

Pro Thr Ser Ala ValPro Thr Ser Ala Val

275275

Ala Gln Gly Ser Gln 280Ala Gln Gly Ser Gln 280

Leu Val Ile His AlaLeu Val Ile His Ala

285285

Asp Ser Leu Phe Asn 290Asp Ser Leu Phe Asn 290

Thr Thr Phe Val CysThr Thr Phe Val Cys

295295

Thr Val Thr Asn AlaThr Val Thr Asn Ala

300300

Gly Met Gly Arg Ala 305Gly Met Gly Arg Ala 305

Glu Gln Val Ile Phe 310Glu Gln Val Ile Phe 310

Val Arg Glu Thr Pro 315Val Arg Glu Thr Pro 315

AlaAla

IleIle

GlnGln

Pro 160Pro 160

ThrThr

PhePhe

LysLys

LeuLeu

Asn 240Asn 240

SerSer

PhePhe

ValVal

ValVal

Asn 320Asn 320

Thr Ala Gly Ala GlyThr Ala Gly Ala Gly

325325

Ala Thr Gly Gly <210> 49Ala Thr Gly Gly <210> 49

- 266 044346 <211> 236 <212> БЕЛОК <213> Homo sapiens <220>- 266 044346 <211> 236 <212> PROTEIN <213> Homo sapiens <220>

<221> новая или редкая характеристика <223> CD226 ECD <400> 49<221> new or rare characteristic <223> CD226 ECD <400> 49

Glu Glu Val Leu Trp 1 5Glu Glu Val Leu Trp 1 5

His Thr Ser Val ProHis Thr Ser Val Pro

Phe Ala Glu Asn MetPhe Ala Glu Asn Met

Leu Glu Cys Val TyrLeu Glu Cys Val Tyr

Pro Ser Met Gly IlePro Ser Met Gly Ile

Leu Thr Gln Val GluLeu Thr Gln Val Glu

Phe Lys Ile Gly Thr 35Phe Lys Ile Gly Thr 35

Gln Gln Asp Ser Ile 40Gln Gln Asp Ser Ile 40

Ala Ile Phe Ser ProAla Ile Phe Ser Pro

His Gly Met Val Ile 50His Gly Met Val Ile 50

Arg Lys Pro Tyr Ala 55Arg Lys Pro Tyr Ala 55

Glu Arg Val Tyr Phe 60Glu Arg Val Tyr Phe 60

Asn Ser Thr Met Ala 65Asn Ser Thr Met Ala 65

Ser Asn Asn Met Thr 70Ser Asn Asn Met Thr 70

Leu Phe Phe Arg Asn 75Leu Phe Phe Arg Asn 75

Ser Glu Asp Asp Val 85Ser Glu Asp Asp Val 85

Gly Tyr Tyr Ser Cys 90Gly Tyr Tyr Ser Cys 90

Ser Leu Tyr Thr Tyr 95Ser Leu Tyr Thr Tyr 95

Gln Gly Thr Trp GlnGln Gly Thr Trp Gln

100100

Lys Val Ile Gln ValLys Val Ile Gln Val

105105

Val Gln Ser Asp SerVal Gln Ser Asp Ser

110110

Glu Ala Ala Val ProGlu Ala Ala Val Pro

115115

Ser Asn Ser His IleSer Asn Ser His Ile

120120

Val Ser Glu Pro GlyVal Ser Glu Pro Gly

125125

Asn Val Thr Leu ThrAsn Val Thr Leu Thr

130130

Cys Gln Pro Gln MetCys Gln Pro Gln Met

135135

Thr Trp Pro Val GlnThr Trp Pro Val Gln

140140

Val Arg Trp Glu Lys 145Val Arg Trp Glu Lys 145

Ile Gln Pro Arg Gln 150Ile Gln Pro Arg Gln 150

Ile Asp Leu Leu Thr 155Ile Asp Leu Leu Thr 155

Cys Asn Leu Val HisCys Asn Leu Val His

165165

Gly Arg Asn Phe ThrGly Arg Asn Phe Thr

170170

Ser Lys Phe Pro ArgSer Lys Phe Pro Arg

175175

Ile Val Ser Asn CysIle Val Ser Asn Cys

180180

Ser His Gly Arg TrpSer His Gly Arg Trp

185185

Ser Val Ile Val IleSer Val Ile Val Ile

190190

Asp Val Thr Val Ser 195Asp Val Thr Val Ser 195

Asp Ser Gly Leu Tyr 200Asp Ser Gly Leu Tyr 200

Arg Cys Tyr Leu GlnArg Cys Tyr Leu Gln

205205

SerSer

TrpTrp

ThrThr

LeuLeu

Ala 80Ala 80

ProPro

PhePhe

LysLys

AlaAla

Tyr 160Tyr 160

GlnGln

ProPro

AlaAla

- 267 044346- 267 044346

Ser Ala Gly Glu Asn Glu Thr PheSer Ala Gly Glu Asn Glu Thr Phe

210 215210 215

Val Met ArgVal Met Arg

Leu Thr Val Ala GluLeu Thr Val Ala Glu

220220

Gly Lys Thr Asp Asn Gln Tyr Thr Leu Phe Val AlaGly Lys Thr Asp Asn Gln Tyr Thr Leu Phe Val Ala

225 230235 <210>50 <211>185 <212> БЕЛОК <213> Homo sapiens <220>225 230235 <210>50 <211>185 <212> PROTEIN <213> Homo sapiens <220>

<221> новая или редкая характеристика <223> CD2 ECD <400> 50<221> new or rare characteristic <223> CD2 ECD <400> 50

Lys 1 Lys 1 Glu Glu Ile Ile Thr Thr Asn 5 Asn 5 Ala Ala Leu Leu Glu Glu Thr Thr Trp 10 Trp 10 Gly Gly Ala Ala Leu Leu Gly Gly Gln 15 Gln 15 Asp Asp Ile Ile Asn Asn Leu Leu Asp 20 Asp 20 Ile Ile Pro Pro Ser Ser Phe Phe Gln 25 Gln 25 Met Met Ser Ser Asp Asp Asp Asp Ile 30 Ile 30 Asp Asp Asp Asp Ile Ile Lys Lys Trp 35 Trp 35 Glu Glu Lys Lys Thr Thr Ser Ser Asp 40 Asp 40 Lys Lys Lys Lys Lys Lys Ile Ile Ala 45 Ala 45 Gln Gln Phe Phe Arg Arg Lys Lys Glu 50 Glu 50 Lys Lys Glu Glu Thr Thr Phe Phe Lys 55 Lys 55 Glu Glu Lys Lys Asp Asp Thr Thr Tyr 60 Tyr 60 Lys Lys Leu Leu Phe Phe Lys Lys Asn 65 Asn 65 Gly Gly Thr Thr Leu Leu Lys Lys Ile 70 Ile 70 Lys Lys His His Leu Leu Lys Lys Thr 75 Thr 75 Asp Asp Asp Asp Gln Gln Asp Asp Ile 80 Ile 80 Tyr Tyr Lys Lys Val Val Ser Ser Ile 85 Ile 85 Tyr Tyr Asp Asp Thr Thr Lys Lys Gly 90 Gly 90 Lys Lys Asn Asn Val Val Leu Leu Glu 95 Glu 95 Lys Lys Ile Ile Phe Phe Asp Asp Leu 100 Leu 100 Lys Lys Ile Ile Gln Gln Glu Glu Arg 105 Arg 105 Val Val Ser Ser Lys Lys Pro Pro Lys 110 Lys 110 Ile Ile Ser Ser Trp Trp Thr Thr Cys 115 Cys 115 Ile Ile Asn Asn Thr Thr Thr Thr Leu 120 Leu 120 Thr Thr Cys Cys Glu Glu Val Val Met 125 Met 125 Asn Asn Gly Gly Thr Thr Asp Asp Pro 130 Pro 130 Glu Glu Leu Leu Asn Asn Leu Leu Tyr 135 Tyr 135 Gln Gln Asp Asp Gly Gly Lys Lys His 140 His 140 Leu Leu Lys Lys Leu Leu Ser Ser Gln 145 Gln 145 Arg Arg Val Val Ile Ile Thr Thr His 150 His 150 Lys Lys Trp Trp Thr Thr Thr Thr Ser 155 Ser 155 Leu Leu Ser Ser Ala Ala Lys Lys Phe 160 Phe 160 Lys Lys Cys Cys Thr Thr Ala Ala Gly 165 Gly 165 Asn Asn Lys Lys Val Val Ser Ser Lys 170 Lys 170 Glu Glu Ser Ser Ser Ser Val Val Glu 175 Glu 175 Pro Pro

- 268 044346- 268 044346

Val Ser Cys Pro Glu Lys Gly Leu AspVal Ser Cys Pro Glu Lys Gly Leu Asp

180180

185 <210> 51 <211> 133 < 212> БЕЛОК < 213> Homo sapiens <220>185 <210> 51 <211> 133 <212> PROTEIN <213> Homo sapiens <220>

< 221> новая или редкая характеристика <223> CD160 ECD <400>51<221> new or rare feature <223> CD160 ECD <400>51

Ile Asn Ile Thr Ser Ser Ala Ser Gln Glu Gly Thr Arg Leu Asn Leu 1 5 1015Ile Asn Ile Thr Ser Ser Ala Ser Gln Glu Gly Thr Arg Leu Asn Leu 1 5 1015

Ile Cys Thr Val Trp His Lys Lys Glu Glu Ala Glu Gly Phe Val Val 20 2530Ile Cys Thr Val Trp His Lys Lys Glu Glu Ala Glu Gly Phe Val Val 20 2530

Phe LeuPhe Leu

Cys Lys Asp Arg Ser Gly AspCys Lys Asp Arg Ser Gly Asp

4040

Lys Gln 50Lys Gln 50

Leu Arg Leu Lys Arg Asp ProLeu Arg Leu Lys Arg Asp Pro

Ile Ser 65Ile Ser 65

Ser Gln Leu Met Phe Thr Ile 70Ser Gln Leu Met Phe Thr Ile 70

Cys Ser Pro Glu Thr Ser Leu 45Cys Ser Pro Glu Thr Ser Leu 45

Gly Ile Asp Gly Val Gly Glu 60Gly Ile Asp Gly Val Gly Glu 60

Ser Gln Val Thr Pro Leu His 75 80Ser Gln Val Thr Pro Leu His 75 80

Ser Gly Thr Tyr Gln Cys 85Ser Gly Thr Tyr Gln Cys 85

Leu Gln Gly His Phe Phe 100Leu Gln Gly His Phe Phe 100

Thr Val Thr Gly Leu Lys 115Thr Val Thr Gly Leu Lys 115

Cys Ala Arg Ser Gln Lys Ser Gly Ile ArgCys Ala Arg Ser Gln Lys Ser Gly Ile Arg

90959095

Ser Ile Leu Phe Thr Glu Thr Gly Asn TyrSer Ile Leu Phe Thr Glu Thr Gly Asn Tyr

105110105110

Gln Arg Gln His Leu Glu Phe Ser His AsnGln Arg Gln His Leu Glu Phe Ser His Asn

120125120125

Glu Gly Thr Leu SerGlu Gly Thr Leu Ser

130 <210>52 <211>202 <212> БЕЛОК <213> Homo sapiens <220>130 <210>52 <211>202 <212> PROTEIN <213> Homo sapiens <220>

<221> новая или редкая характеристика <223> CD200 ECD<221> new or rare feature <223> CD200 ECD

- 269 044346 <400> 52- 269 044346 <400> 52

Gln 1Gln 1

ValVal

GlnGln

ValVal

Val 5Val 5

ThrThr

GlnGln

AspAsp

GluGlu

Arg 10Arg 10

GluGlu

GlnGln

LeuLeu

TyrTyr

Thr 15Thr 15

AlaAla

SerSer

LeuLeu

Lys 20Lys 20

CysCys

SerSer

LeuLeu

GlnGln

Asn 25Asn 25

AlaAla

GlnGln

GluGlu

AlaAla

Leu 30Leu 30

IleIle

ThrThr

TrpTrp

Gln 35Gln 35

LysLys

LysLys

LysLys

AlaAla

Val 40Val 40

SerSer

ProPro

GluGlu

AsnAsn

Met 45Met 45

ValVal

ThrThr

SerSer

Glu 50Glu 50

AsnAsn

HisHis

GlyGly

ValVal

Val 55Val 55

IleIle

GlnGln

ProPro

AlaAla

Tyr 60Tyr 60

LysLys

AspAsp

LysLys

Asn 65Asn 65

IleIle

ThrThr

GlnGln

LeuLeu

Gly 70Gly 70

LeuLeu

GlnGln

AsnAsn

SerSer

Thr 75Thr 75

IleIle

ThrThr

PhePhe

TrpTrp

IleIle

ThrThr

LeuLeu

GluGlu

Asp 85Asp 85

GluGlu

GlyGly

CysCys

TyrTyr

Met 90Met 90

CysCys

LeuLeu

PhePhe

AsnAsn

Thr 95Thr 95

GlyGly

PhePhe

GlyGly

Lys 100Lys 100

IleIle

SerSer

GlyGly

ThrThr

AlaAla

105105

CysCys

LeuLeu

ThrThr

ValVal

Tyr 110Tyr 110

ValVal

ProPro

IleIle

ValVal

115115

SerSer

LeuLeu

HisHis

TyrTyr

Lys 120Lys 120

PhePhe

SerSer

GluGlu

AspAsp

HisHis

125125

LeuLeu

AsnAsn

ThrThr

CysCys

130130

SerSer

AlaAla

ThrThr

AlaAla

Arg 135Arg 135

ProPro

AlaAla

ProPro

MetMet

ValVal

140140

PhePhe

TrpTrp

LysLys

ProPro

145145

ArgArg

SerSer

GlyGly

IleIle

GluGlu

150150

AsnAsn

SerSer

ThrThr

ValVal

ThrThr

155155

LeuLeu

SerSer

HisHis

ProPro

GlyGly

ThrThr

ThrThr

SerSer

ValVal

165165

ThrThr

SerSer

IleIle

LeuLeu

HisHis

170170

IleIle

LysLys

AspAsp

ProPro

LysLys

175175

GlnGln

ValVal

GlyGly

Lys 180Lys 180

GluGlu

ValVal

IleIle

CysCys

GlnGln

185185

ValVal

LeuLeu

HisHis

LeuLeu

Gly 190Gly 190

ThrThr

ProPro

ValVal

PhePhe

IleIle

Asn 80Asn 80

PhePhe

GlnGln

IleIle

ValVal

Asn 160Asn 160

AsnAsn

ValVal

ThrThr

AspAsp

PhePhe

195195

LysLys

GlnGln

ThrThr

ValVal

AsnAsn

200200

LysLys

Gly <210> 53 <211> 215 <212> БЕЛОК <213> Homo sapiens <220>Gly <210> 53 <211> 215 <212> PROTEIN <213> Homo sapiens <220>

<221> новая или редкая характеристика <223> CD200R1(CD200R) ECD<221> new or rare feature <223> CD200R1(CD200R) ECD

- 270 044346 <400> 53- 270 044346 <400> 53

Met Asp Glu Lys Gln 1 5Met Asp Glu Lys Gln 1 5

Ile Thr Gln Asn TyrIle Thr Gln Asn Tyr

Ser Lys Val Leu AlaSer Lys Val Leu Ala

Val Asn Thr Ser TrpVal Asn Thr Ser Trp

Pro Val Lys Met AlaPro Val Lys Met Ala

Thr Asn Ala Val LeuThr Asn Ala Val Leu

Cys Pro Pro Ile Ala 35Cys Pro Pro Ile Ala 35

Leu Arg Asn Leu Ile 40Leu Arg Asn Leu Ile 40

Ile Ile Thr Trp Glu 45Ile Ile Thr Trp Glu 45

Ile Leu Arg Gly Gln 50Ile Leu Arg Gly Gln 50

Pro Ser Cys Thr Lys 55Pro Ser Cys Thr Lys 55

Ala Tyr Arg Lys Glu 60Ala Tyr Arg Lys Glu 60

Asn Glu Thr Lys Glu 65Asn Glu Thr Lys Glu 65

Thr Asn Cys Thr Asp 70Thr Asn Cys Thr Asp 70

Glu Arg Ile Thr Trp 75Glu Arg Ile Thr Trp 75

Ser Arg Pro Asp Gln 85Ser Arg Pro Asp Gln 85

Asn Ser Asp Leu Gln 90Asn Ser Asp Leu Gln 90

Ile Arg Pro Val Ala 95Ile Arg Pro Val Ala 95

Thr His Asp Gly TyrThr His Asp Gly Tyr

100100

Tyr Arg Cys Ile MetTyr Arg Cys Ile Met

105105

Val Thr Pro Asp GlyVal Thr Pro Asp Gly

110110

Phe His Arg Gly Tyr 115Phe His Arg Gly Tyr 115

His Leu Gln Val LeuHis Leu Gln Val Leu

120120

Val Thr Pro Glu ValVal Thr Pro Glu Val

125125

Leu Phe Gln Asn Arg 130Leu Phe Gln Asn Arg 130

Asn Arg Thr Ala ValAsn Arg Thr Ala Val

135135

Cys Lys Ala Val Ala 140Cys Lys Ala Val Ala 140

Lys Pro Ala Ala Gln 145Lys Pro Ala Ala Gln 145

Ile Ser Trp Ile Pro 150Ile Ser Trp Ile Pro 150

Glu Gly Asp Cys Ala 155Glu Gly Asp Cys Ala 155

Lys Gln Glu Tyr TrpLys Gln Glu Tyr Trp

165165

Ser Asn Gly Thr ValSer Asn Gly Thr Val

170170

Thr Val Lys Ser ThrThr Val Lys Ser Thr

175175

His Trp Glu Val HisHis Trp Glu Val His

180180

Asn Val Ser Thr ValAsn Val Ser Thr Val

185185

Thr Cys His Val SerThr Cys His Val Ser

190190

Leu Thr Gly Asn Lys 195Leu Thr Gly Asn Lys 195

Ser Leu Tyr Ile Glu 200Ser Leu Tyr Ile Glu 200

Leu Leu Pro Val ProLeu Leu Pro Val Pro

205205

GluGlu

CysCys

IleIle

ThrThr

Val 80Val 80

IleIle

AsnAsn

ThrThr

GlyGly

Thr 160Thr 160

CysCys

HisHis

GlyGly

Ala Lys Lys Ser Ala 210Ala Lys Lys Ser Ala 210

Lys LeuLys Leu

215 <210> 54 <211> 117 <212> БЕЛОК <213> Homo sapiens215 <210> 54 <211> 117 <212> PROTEIN <213> Homo sapiens

- 271 044346 <220>- 271 044346 <220>

<221> новая или редкая характеристика <223> NC R3 (NKp30) ECD <400>54<221> new or rare characteristic <223> NC R3 (NKp30) ECD <400>54

Leu Trp Val Ser Gln Pro Pro Glu Ile Arg Thr Leu Glu Gly Ser 1 5 1015Leu Trp Val Ser Gln Pro Pro Glu Ile Arg Thr Leu Glu Gly Ser 1 5 1015

Ala Phe Leu Pro Cys Ser Phe Asn Ala Ser Gln Gly Arg Leu AlaAla Phe Leu Pro Cys Ser Phe Asn Ala Ser Gln Gly Arg Leu Ala

25302530

Gly Ser Val Thr Trp Phe Arg Asp Glu Val Val Pro Gly Lys Glu 35 4045Gly Ser Val Thr Trp Phe Arg Asp Glu Val Val Pro Gly Lys Glu 35 4045

Arg Asn Gly Thr Pro Glu Phe Arg Gly Arg Leu Ala Pro Leu Ala 50 5560Arg Asn Gly Thr Pro Glu Phe Arg Gly Arg Leu Ala Pro Leu Ala 50 5560

Ser Arg Phe Leu His Asp His Gln Ala Glu Leu His Ile Arg Asp 65 7075Ser Arg Phe Leu His Asp His Gln Ala Glu Leu His Ile Arg Asp 65 7075

Arg Gly His Asp Ala Ser Ile Tyr Val Cys Arg Val Glu Val Leu 85 9095Arg Gly His Asp Ala Ser Ile Tyr Val Cys Arg Val Glu Val Leu 85 9095

Leu Gly Val Gly Thr Gly Asn Gly Thr Arg Leu Val Val Glu LysLeu Gly Val Gly Thr Gly Asn Gly Thr Arg Leu Val Val Glu Lys

100 105110100 105110

SerSer

IleIle

ValVal

SerSer

Val 80Val 80

GlyGly

GluGlu

His Pro Gln Leu Gly 115 <210>55 <211>208 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>His Pro Gln Leu Gly 115 <210>55 <211>208 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> CD80 v1 ECD <400> 55<223> CD80 v1 ECD <400> 55

Val Ile His Val 1Val Ile His Val 1

Gly His Asn Val 20Gly His Asn Val 20

Gln Lys Glu Lys 35Gln Lys Glu Lys 35

Ile Trp Pro GluIle Trp Pro Glu

Thr Lys Glu Val 5Thr Lys Glu Val 5

Ser Val Glu GluSer Val Glu Glu

Lys Met Val Leu 40Lys Met Val Leu 40

Tyr Lys Asn ArgTyr Lys Asn Arg

Lys Glu Val Ala Thr Leu SerLys Glu Val Ala Thr Leu Ser

1515

Leu Ala Gln Thr Arg Ile TyrLeu Ala Gln Thr Arg Ile Tyr

30thirty

Thr Met Met Ser Gly Asp Met 45Thr Met Met Ser Gly Asp Met 45

Thr Ile Phe Asp Ile Thr AsnThr Ile Phe Asp Ile Thr Asn

CysCys

TrpTrp

AsnAsn

AsnAsn

- 272 044346- 272 044346

Leu Ser Ile Val Ile 65Leu Ser Ile Val Ile 65

Gln Ala Leu Arg Pro 70Gln Ala Leu Arg Pro 70

Ser Asp Glu Gly Thr 75Ser Asp Glu Gly Thr 75

Glu Cys Val Val Leu 85Glu Cys Val Val Leu 85

Lys Tyr Glu Lys Asp 90Lys Tyr Glu Lys Asp 90

Gly Phe Lys Arg Glu 95Gly Phe Lys Arg Glu 95

Leu Ala Glu Val ThrLeu Ala Glu Val Thr

100100

Leu Ser Val Lys AlaLeu Ser Val Lys Ala

105105

Asp Phe Pro Thr ProAsp Phe Pro Thr Pro

110110

Ile Ser Asp Phe Glu 115Ile Ser Asp Phe Glu 115

Ile Pro Thr Ser AsnIle Pro Thr Ser Asn

120120

Ile Arg Arg Ile IleIle Arg Arg Ile Ile

125125

Ser Thr Ser Gly GlySer Thr Ser Gly Gly

130130

Phe Pro Glu Pro HisPhe Pro Glu Pro His

135135

Leu Ser Trp Leu Glu 140Leu Ser Trp Leu Glu 140

Gly Glu Glu Leu Asn 145Gly Glu Glu Leu Asn 145

Ala Ile Asn Thr Thr 150Ala Ile Asn Thr Thr 150

Val Ser Gln Asp Pro 155Val Ser Gln Asp Pro 155

Thr Glu Leu Tyr AlaThr Glu Leu Tyr Ala

165165

Val Ser Ser Lys LeuVal Ser Ser Lys Leu

170170

Asp Phe Asn Met ThrAsp Phe Asn Met Thr

175175

Asn His Ser Phe MetAsn His Ser Phe Met

180180

Cys Leu Ile Lys TyrCys Leu Ile Lys Tyr

185185

Gly His Leu Arg ValGly His Leu Arg Val

190190

Gln Thr Phe Asn Trp 195Gln Thr Phe Asn Trp 195

Asn Thr Thr Lys Gln 200Asn Thr Thr Lys Gln 200

Glu His Phe Pro AspGlu His Phe Pro Asp

205205

Tyr 80Tyr 80

HisHis

SerSer

CysCys

AsnAsn

Glu 160Glu 160

ThrThr

AsnAsn

Asn <210> 56 <211> 208 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Asn <210> 56 <211> 208 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> CD80 v2 ECD <400> 56<223> CD80 v2 ECD <400> 56

Val Ile His Val Thr Lys Glu Val 1 5Val Ile His Val Thr Lys Glu Val 1 5

Lys Glu Val Ala Thr Leu SerLys Glu Val Ala Thr Leu Ser

1515

Gly His Asn Val Ser Val Glu Glu 20Gly His Asn Val Ser Val Glu Glu 20

Leu Ala Gln Thr Arg Ile TyrLeu Ala Gln Thr Arg Ile Tyr

30thirty

Gln Lys Glu Lys Lys Met Val LeuGln Lys Glu Lys Lys Met Val Leu

4040

Thr Met Met Ser Gly Asp Met 45Thr Met Met Ser Gly Asp Met 45

Ile Trp Pro Glu Tyr Lys Asn ArgIle Trp Pro Glu Tyr Lys Asn Arg

5555

Thr Ile Phe Asp Ile Thr Asn 60Thr Ile Phe Asp Ile Thr Asn 60

CysCys

TrpTrp

AsnAsn

AsnAsn

- 273 044346- 273 044346

Leu Ser Ile Val Ile 65Leu Ser Ile Val Ile 65

Gln Ala Leu Arg Pro 70Gln Ala Leu Arg Pro 70

Ser Asp Glu Gly Thr 75Ser Asp Glu Gly Thr 75

Glu Cys Val Val Leu 85Glu Cys Val Val Leu 85

Lys Tyr Glu Lys Asp 90Lys Tyr Glu Lys Asp 90

Gly Phe Lys Arg Glu 95Gly Phe Lys Arg Glu 95

Leu Ala Glu Val ThrLeu Ala Glu Val Thr

100100

Leu Ser Val Lys AlaLeu Ser Val Lys Ala

105105

Asp Phe Pro Thr ProAsp Phe Pro Thr Pro

110110

Ile Ser Asp Phe Glu 115Ile Ser Asp Phe Glu 115

Ile Pro Thr Ser AsnIle Pro Thr Ser Asn

120120

Ile Arg Arg Ile IleIle Arg Arg Ile Ile

125125

Ser Ala Ser Gly Gly 130Ser Ala Ser Gly Gly 130

Phe Pro Glu Pro HisPhe Pro Glu Pro His

135135

Leu Ser Trp Leu Glu 140Leu Ser Trp Leu Glu 140

Gly Glu Glu Leu Asn 145Gly Glu Glu Leu Asn 145

Ala Ile Asn Thr Thr 150Ala Ile Asn Thr Thr 150

Val Ser Gln Asp Pro 155Val Ser Gln Asp Pro 155

Thr Glu Leu Tyr AlaThr Glu Leu Tyr Ala

165165

Val Ser Ser Lys LeuVal Ser Ser Lys Leu

170170

Asp Phe Asn Met ThrAsp Phe Asn Met Thr

175175

Asn His Ser Phe MetAsn His Ser Phe Met

180180

Cys Leu Ile Lys TyrCys Leu Ile Lys Tyr

185185

Gly His Leu Arg ValGly His Leu Arg Val

190190

Gln Thr Phe Asn Trp 195Gln Thr Phe Asn Trp 195

Asn Thr Thr Lys Gln 200Asn Thr Thr Lys Gln 200

Glu His Phe Pro AspGlu His Phe Pro Asp

205205

Tyr 80Tyr 80

HisHis

SerSer

CysCys

AsnAsn

Glu 160Glu 160

ThrThr

AsnAsn

Asn <210> 57 <211> 208 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Asn <210> 57 <211> 208 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> CD80 v3 ECD <400> 57<223> CD80 v3 ECD <400> 57

Val Ile His Val Thr Lys Glu Val 1 5Val Ile His Val Thr Lys Glu Val 1 5

Lys Glu Val Ala Thr Leu 10Lys Glu Val Ala Thr Leu 10

Gly His Asn Val Ser Val Glu Glu 20Gly His Asn Val Ser Val Glu Glu 20

Leu Ala Gln Thr Arg IleLeu Ala Gln Thr Arg Ile

30thirty

Gln Lys Glu Lys Lys Met Val LeuGln Lys Glu Lys Lys Met Val Leu

4040

Thr Met Met Ser Gly Asp 45Thr Met Met Ser Gly Asp 45

Ile Trp Pro Glu Tyr Lys Asn ArgIle Trp Pro Glu Tyr Lys Asn Arg

5555

Thr Ile Phe Asp Ile Thr 60Thr Ile Phe Asp Ile Thr 60

Ser 15Ser 15

TyrTyr

MetMet

AsnAsn

CysCys

TrpTrp

AsnAsn

AsnAsn

- 274 044346- 274 044346

Leu Ser Ile Val Ile 65Leu Ser Ile Val Ile 65

Gln Ala Leu Arg Pro 70Gln Ala Leu Arg Pro 70

Ser Asp Glu Gly Thr 75Ser Asp Glu Gly Thr 75

Glu Cys Val Val Leu 85Glu Cys Val Val Leu 85

Lys Tyr Glu Lys Asp 90Lys Tyr Glu Lys Asp 90

Gly Phe Lys Arg Glu 95Gly Phe Lys Arg Glu 95

Leu Ala Glu Val ThrLeu Ala Glu Val Thr

100100

Leu Ser Val Lys AlaLeu Ser Val Lys Ala

105105

Asp Phe Pro Thr ProAsp Phe Pro Thr Pro

110110

Ile Ser Asp Phe Glu 115Ile Ser Asp Phe Glu 115

Ala Pro Ser Ser AsnAla Pro Ser Ser Asn

120120

Ile Arg Arg Ile IleIle Arg Arg Ile Ile

125125

Ser Ala Ser Gly Gly 130Ser Ala Ser Gly Gly 130

Phe Pro Glu Pro HisPhe Pro Glu Pro His

135135

Leu Ser Trp Leu Glu 140Leu Ser Trp Leu Glu 140

Gly Glu Glu Leu Asn 145Gly Glu Glu Leu Asn 145

Ala Ile Asn Thr Thr 150Ala Ile Asn Thr Thr 150

Val Ser Gln Asp Pro 155Val Ser Gln Asp Pro 155

Thr Glu Leu Tyr AlaThr Glu Leu Tyr Ala

165165

Val Ser Ser Lys LeuVal Ser Ser Lys Leu

170170

Asp Phe Asn Met ThrAsp Phe Asn Met Thr

175175

Asn His Ser Phe MetAsn His Ser Phe Met

180180

Cys Leu Ile Lys TyrCys Leu Ile Lys Tyr

185185

Gly His Leu Arg ValGly His Leu Arg Val

190190

Gln Thr Phe Asn Trp 195Gln Thr Phe Asn Trp 195

Asn Thr Thr Lys Gln 200Asn Thr Thr Lys Gln 200

Glu His Phe Pro AspGlu His Phe Pro Asp

205205

Tyr 80Tyr 80

HisHis

SerSer

CysCys

AsnAsn

Glu 160Glu 160

ThrThr

AsnAsn

Asn <210> 58 <211> 208 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Asn <210> 58 <211> 208 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> CD80 v4 ECD <400> 58<223> CD80 v4 ECD <400> 58

Val Ile His Met Thr Lys Glu Val 1 5Val Ile His Met Thr Lys Glu Val 1 5

Lys Glu Val Ala Thr Leu SerLys Glu Val Ala Thr Leu Ser

1515

Gly His Asn Val Ser Val Glu Glu 20Gly His Asn Val Ser Val Glu Glu 20

Leu Ala Gln Thr Arg Ile TyrLeu Ala Gln Thr Arg Ile Tyr

30thirty

Gln Lys Glu Lys Lys Met Val LeuGln Lys Glu Lys Lys Met Val Leu

4040

Thr Met Met Ser Gly Asp Met 45Thr Met Met Ser Gly Asp Met 45

Ile Trp Pro Glu Tyr Lys Asn ArgIle Trp Pro Glu Tyr Lys Asn Arg

5555

Thr Ile Phe Asp Ile Thr Asn 60Thr Ile Phe Asp Ile Thr Asn 60

CysCys

TrpTrp

AsnAsn

AsnAsn

- 275 044346- 275 044346

Leu Ser Ile Val Ile 65Leu Ser Ile Val Ile 65

Gln Ala Leu Arg Pro 70Gln Ala Leu Arg Pro 70

Ser Asp Glu Gly Thr 75Ser Asp Glu Gly Thr 75

Glu Cys Val Val Leu 85Glu Cys Val Val Leu 85

Lys Tyr Glu Lys Asp 90Lys Tyr Glu Lys Asp 90

Gly Phe Lys Arg Glu 95Gly Phe Lys Arg Glu 95

Leu Ala Glu Val ThrLeu Ala Glu Val Thr

100100

Leu Ser Val Lys AlaLeu Ser Val Lys Ala

105105

Asp Phe Pro Thr ProAsp Phe Pro Thr Pro

110110

Ile Ser Asp Phe Glu 115Ile Ser Asp Phe Glu 115

Ile Pro Ser Ser AsnIle Pro Ser Ser Asn

120120

Ile Arg Arg Ile IleIle Arg Arg Ile Ile

125125

Ser Ala Ser Gly Gly 130Ser Ala Ser Gly Gly 130

Phe Pro Glu Pro HisPhe Pro Glu Pro His

135135

Leu Ser Trp Leu Glu 140Leu Ser Trp Leu Glu 140

Gly Glu Glu Leu Asn 145Gly Glu Glu Leu Asn 145

Ala Ile Asn Thr Thr 150Ala Ile Asn Thr Thr 150

Val Ser Gln Asp Pro 155Val Ser Gln Asp Pro 155

Thr Glu Leu Tyr AlaThr Glu Leu Tyr Ala

165165

Val Ser Ser Lys LeuVal Ser Ser Lys Leu

170170

Asp Phe Asn Met ThrAsp Phe Asn Met Thr

175175

Asn His Ser Phe MetAsn His Ser Phe Met

180180

Cys Leu Ile Lys TyrCys Leu Ile Lys Tyr

185185

Gly His Leu Arg ValGly His Leu Arg Val

190190

Gln Thr Phe Asn Trp 195Gln Thr Phe Asn Trp 195

Asn Thr Thr Lys Gln 200Asn Thr Thr Lys Gln 200

Glu His Phe Pro AspGlu His Phe Pro Asp

205205

Tyr 80Tyr 80

HisHis

SerSer

CysCys

AsnAsn

Glu 160Glu 160

ThrThr

AsnAsn

Asn <210> 59 <211> 208 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Asn <210> 59 <211> 208 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> CD80 v5 ECD <400> 59<223> CD80 v5 ECD <400> 59

Val Ile His Val 1Val Ile His Val 1

Thr Lys Glu Val Lys Glu Val Ala Thr Leu Ser 5 10 15Thr Lys Glu Val Lys Glu Val Ala Thr Leu Ser 5 10 15

Gly His Asn Val 20Gly His Asn Val 20

Ser Val Glu Glu Leu Ala Gln Thr Arg Ile Tyr 25 30Ser Val Glu Glu Leu Ala Gln Thr Arg Ile Tyr 25 30

Gln Lys Glu LysGln Lys Glu Lys

Lys Met Val Leu Thr Met Met Ser Gly Asp MetLys Met Val Leu Thr Met Met Ser Gly Asp Met

4545

Ile Trp Pro Glu 50Ile Trp Pro Glu 50

Tyr Lys Asn Arg Thr Ile Phe Asp Ile Thr Asn 55 60Tyr Lys Asn Arg Thr Ile Phe Asp Ile Thr Asn 55 60

Leu Ser Ile ValLeu Ser Ile Val

Ile Gln Ala Leu Arg Pro Ser Asp Glu Gly ThrIle Gln Ala Leu Arg Pro Ser Asp Glu Gly Thr

CysCys

TrpTrp

AsnAsn

AsnAsn

TyrTyr

- 276 044346- 276 044346

Glu Cys Val Val Leu 85Glu Cys Val Val Leu 85

Lys Tyr Glu Lys Asp 90Lys Tyr Glu Lys Asp 90

Gly Phe Lys Arg Glu 95Gly Phe Lys Arg Glu 95

Leu Ala Glu Val ThrLeu Ala Glu Val Thr

100100

Leu Ser Val Lys AlaLeu Ser Val Lys Ala

105105

Asp Phe Pro Thr ProAsp Phe Pro Thr Pro

110110

Ile Ser Asp Phe Glu 115Ile Ser Asp Phe Glu 115

Ile Pro Ser Ser AsnIle Pro Ser Ser Asn

120120

Ile Arg Arg Ile IleIle Arg Arg Ile Ile

125125

Ser Ala Ser Gly Gly 130Ser Ala Ser Gly Gly 130

Phe Pro Glu Pro HisPhe Pro Glu Pro His

135135

Leu Ser Trp Leu Glu 140Leu Ser Trp Leu Glu 140

Gly Glu Glu Leu Asn 145Gly Glu Glu Leu Asn 145

Ala Ile Asn Thr Thr 150Ala Ile Asn Thr Thr 150

Val Ser Gln Asp Pro 155Val Ser Gln Asp Pro 155

Thr Glu Leu Tyr AlaThr Glu Leu Tyr Ala

165165

Val Ser Ser Lys LeuVal Ser Ser Lys Leu

170170

Asp Phe Asn Met ThrAsp Phe Asn Met Thr

175175

Asn His Ser Phe MetAsn His Ser Phe Met

180180

Cys Leu Ile Lys TyrCys Leu Ile Lys Tyr

185185

Gly His Leu Arg ValGly His Leu Arg Val

190190

Gln Thr Phe Asn Trp 195Gln Thr Phe Asn Trp 195

Asn Thr Thr Lys Gln 200Asn Thr Thr Lys Gln 200

Glu His Phe Pro AspGlu His Phe Pro Asp

205205

HisHis

SerSer

CysCys

AsnAsn

Glu 160Glu 160

ThrThr

AsnAsn

Asn <210> 60 <211> 208 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Asn <210> 60 <211> 208 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> CD80 v6 ECD <400> 60<223> CD80 v6 ECD <400> 60

Val Ile His Val ThrVal Ile His Val Thr

55

Lys Glu Val Lys GluLys Glu Val Lys Glu

Val Ala Thr Leu SerVal Ala Thr Leu Ser

Gly His Asn Leu Ser 20Gly His Asn Leu Ser 20

Val Glu Glu Leu AlaVal Glu Glu Leu Ala

Gln Thr Arg Ile TyrGln Thr Arg Ile Tyr

Gln Lys Glu Lys Lys 35Gln Lys Glu Lys Lys 35

Met Val Leu Thr MetMet Val Leu Thr Met

Met Ser Gly Asp Met 45Met Ser Gly Asp Met 45

Ile Trp Pro Glu Tyr 50Ile Trp Pro Glu Tyr 50

Lys Asn Arg Thr Ile 55Lys Asn Arg Thr Ile 55

Phe Asp Ile Thr Asn 60Phe Asp Ile Thr Asn 60

Gln Ala Leu Arg Pro 70Gln Ala Leu Arg Pro 70

CysCys

TrpTrp

AsnAsn

AsnAsn

Tyr 80Tyr 80

Leu Ser Ile Val IleLeu Ser Ile Val Ile

Ser Asp Glu Gly ThrSer Asp Glu Gly Thr

- 277 044346- 277 044346

Glu Cys Val Val Leu Lys Tyr Glu 85Glu Cys Val Val Leu Lys Tyr Glu 85

Lys Asp Ser Phe Lys Arg Glu HisLys Asp Ser Phe Lys Arg Glu His

9595

Leu Ala Glu Val Thr Leu Ser ValLeu Ala Glu Val Thr Leu Ser Val

100100

Lys Ala Asp Phe Pro Thr Pro SerLys Ala Asp Phe Pro Thr Pro Ser

105 110105 110

Ile Ser Asp Phe Glu Ile Pro SerIle Ser Asp Phe Glu Ile Pro Ser

115 120115 120

Ser Asn Ile Arg Arg Ile Ile CysSer Asn Ile Arg Arg Ile Ile Cys

125125

Ser Ala Ser Gly Gly Phe Pro GluSer Ala Ser Gly Gly Phe Pro Glu

130 135130 135

Pro His Leu Ser Trp Leu Glu AsnPro His Leu Ser Trp Leu Glu Asn

140140

Gly Glu Glu Leu Asn Ala Ile AsnGly Glu Glu Leu Asn Ala Ile Asn

145 150145 150

Thr Thr Val Ser Gln Asp Pro GluThr Thr Val Ser Gln Asp Pro Glu

155 160155 160

Thr Glu Leu Tyr Ala Val Ser SerThr Glu Leu Tyr Ala Val Ser Ser

165165

Lys Leu Asp Phe Asn Met Thr ThrLys Leu Asp Phe Asn Met Thr Thr

170 175170 175

Asn His Ser Phe Met Cys Leu Ile 180Asn His Ser Phe Met Cys Leu Ile 180

Lys Tyr Gly His Leu Arg Val AsnLys Tyr Gly His Leu Arg Val Asn

185 190185 190

Gln Thr Phe Asn Trp Asn Thr ThrGln Thr Phe Asn Trp Asn Thr Thr

195 200195 200

Lys Gln Glu His Phe Pro Asp AsnLys Gln Glu His Phe Pro Asp Asn

205 <210> 61 <211> 208 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>205 <210> 61 <211> 208 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> CD80 v7 ECD <400> 61<223> CD80 v7 ECD <400> 61

Val Ile His Val 1Val Ile His Val 1

Thr Lys Glu Val 5Thr Lys Glu Val 5

Lys Glu Val Ala Thr Leu Ser CysLys Glu Val Ala Thr Leu Ser Cys

1515

Gly His Asn Val 20Gly His Asn Val 20

Ser Val Glu GluSer Val Glu Glu

Leu Ala Gln Thr Arg Ile Tyr TrpLeu Ala Gln Thr Arg Ile Tyr Trp

30thirty

Gln Lys Glu LysGln Lys Glu Lys

Lys Met Val Leu 40Lys Met Val Leu 40

Thr Met Met Pro Gly Asp Met Asn 45Thr Met Met Pro Gly Asp Met Asn 45

Ile Trp Pro Glu 50Ile Trp Pro Glu 50

Tyr Lys Asn ArgTyr Lys Asn Arg

Thr Ile Phe Asp Ile Thr Asn Asn 60Thr Ile Phe Asp Ile Thr Asn Asn 60

Leu Ser Ile Val 65Leu Ser Ile Val 65

Ile Gln Ala LeuIle Gln Ala Leu

Arg Pro Ser Asp Glu Gly Thr TyrArg Pro Ser Asp Glu Gly Thr Tyr

8080

- 278 044346- 278 044346

Glu Cys Val Val Leu 85Glu Cys Val Val Leu 85

Lys Tyr Glu Lys Asp 90Lys Tyr Glu Lys Asp 90

Gly Phe Lys Arg Glu 95Gly Phe Lys Arg Glu 95

Leu Ala Glu Val ThrLeu Ala Glu Val Thr

100100

Leu Ser Val Lys AlaLeu Ser Val Lys Ala

105105

Asp Phe Pro Thr ProAsp Phe Pro Thr Pro

110110

Ile Ser Asp Phe Glu 115Ile Ser Asp Phe Glu 115

Ile Pro Thr Ser AsnIle Pro Thr Ser Asn

120120

Ile Arg Arg Ile IleIle Arg Arg Ile Ile

125125

Ser Ala Ser Gly Gly 130Ser Ala Ser Gly Gly 130

Phe Pro Glu Pro HisPhe Pro Glu Pro His

135135

Leu Ser Trp Leu Glu 140Leu Ser Trp Leu Glu 140

Gly Glu Glu Leu Asn 145Gly Glu Glu Leu Asn 145

Ala Ile Asn Thr Thr 150Ala Ile Asn Thr Thr 150

Val Ser Gln Asp Pro 155Val Ser Gln Asp Pro 155

Thr Glu Leu Tyr AlaThr Glu Leu Tyr Ala

165165

Val Ser Ser Lys LeuVal Ser Ser Lys Leu

170170

Asp Phe Asn Met ThrAsp Phe Asn Met Thr

175175

Asn His Ser Phe MetAsn His Ser Phe Met

180180

Cys Leu Ile Lys TyrCys Leu Ile Lys Tyr

185185

Gly His Leu Arg ValGly His Leu Arg Val

190190

Gln Thr Phe Asn Trp 195Gln Thr Phe Asn Trp 195

Asn Thr Thr Lys Gln 200Asn Thr Thr Lys Gln 200

Glu His Phe Pro AspGlu His Phe Pro Asp

205205

HisHis

SerSer

CysCys

AsnAsn

Glu 160Glu 160

ThrThr

AsnAsn

Asn <210> 62 <211> 208 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Asn <210> 62 <211> 208 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> CD80 v8 ECD <400> 62<223> CD80 v8 ECD <400> 62

Val Ile His Val ThrVal Ile His Val Thr

55

Lys Glu Val Lys GluLys Glu Val Lys Glu

Val Ala Thr Leu SerVal Ala Thr Leu Ser

Gly His Asn Val Ser 20Gly His Asn Val Ser 20

Val Glu Glu Leu AlaVal Glu Glu Leu Ala

Gln Thr Arg Ile Tyr 30Gln Thr Arg Ile Tyr 30

Gln Lys Glu Lys Lys 35Gln Lys Glu Lys Lys 35

Met Val Leu Thr MetMet Val Leu Thr Met

Met Ser Gly Asp Met 45Met Ser Gly Asp Met 45

Ile Trp Pro Glu Tyr 50Ile Trp Pro Glu Tyr 50

Lys Asn Arg Thr Ile 55Lys Asn Arg Thr Ile 55

Phe Asp Ile Thr Asn 60Phe Asp Ile Thr Asn 60

Leu Ser Ile Val Ile 65Leu Ser Ile Val Ile 65

Gln Ala Leu Arg Pro 70Gln Ala Leu Arg Pro 70

CysCys

TrpTrp

AsnAsn

AsnAsn

Tyr 80Tyr 80

Ser Asp Glu Gly ThrSer Asp Glu Gly Thr

- 279 044346- 279 044346

Glu Cys Val Val Leu 85Glu Cys Val Val Leu 85

Lys Tyr Glu Lys Asp 90Lys Tyr Glu Lys Asp 90

Gly Phe Lys Arg Glu 95Gly Phe Lys Arg Glu 95

Leu Ala Glu Val ThrLeu Ala Glu Val Thr

100100

Leu Ser Val Lys AlaLeu Ser Val Lys Ala

105105

Asp Phe Pro Thr ProAsp Phe Pro Thr Pro

110110

Ile Ser Asp Phe Gly 115Ile Ser Asp Phe Gly 115

Ile Pro Ser Ser AsnIle Pro Ser Ser Asn

120120

Ile Arg Arg Ile IleIle Arg Arg Ile Ile

125125

Ser Ala Ser Gly Gly 130Ser Ala Ser Gly Gly 130

Phe Pro Glu Pro HisPhe Pro Glu Pro His

135135

Leu Ser Trp Leu Glu 140Leu Ser Trp Leu Glu 140

Gly Glu Glu Leu Asn 145Gly Glu Glu Leu Asn 145

Ala Ile Asn Thr Thr 150Ala Ile Asn Thr Thr 150

Val Ser Gln Asp Pro 155Val Ser Gln Asp Pro 155

Thr Glu Leu Tyr AlaThr Glu Leu Tyr Ala

165165

Val Ser Ser Lys LeuVal Ser Ser Lys Leu

170170

Asp Phe Asn Met ThrAsp Phe Asn Met Thr

175175

Asn His Ser Phe MetAsn His Ser Phe Met

180180

Cys Leu Ile Lys TyrCys Leu Ile Lys Tyr

185185

Gly His Leu Arg ValGly His Leu Arg Val

190190

Gln Thr Phe Asn Trp 195Gln Thr Phe Asn Trp 195

Asn Thr Thr Lys Gln 200Asn Thr Thr Lys Gln 200

Glu His Phe Pro AspGlu His Phe Pro Asp

205205

HisHis

SerSer

CysCys

AsnAsn

Glu 160Glu 160

ThrThr

AsnAsn

Asn <210> 63 <211> 208 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Asn <210> 63 <211> 208 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> CD80 v9 ECD <400> 63<223> CD80 v9 ECD <400> 63

Val Ile His Val ThrVal Ile His Val Thr

55

Lys Glu Val Lys GluLys Glu Val Lys Glu

Val Ala Thr Leu SerVal Ala Thr Leu Ser

Gly His Asn Val Ser 20Gly His Asn Val Ser 20

Val Glu Glu Leu AlaVal Glu Glu Leu Ala

Gln Thr Arg Ile Tyr 30Gln Thr Arg Ile Tyr 30

Gln Lys Glu Lys Lys 35Gln Lys Glu Lys Lys 35

Met Val Leu Thr MetMet Val Leu Thr Met

Met Ser Gly Asp Met 45Met Ser Gly Asp Met 45

Ile Trp Pro Glu Tyr 50Ile Trp Pro Glu Tyr 50

Lys Asn Arg Thr Ile 55Lys Asn Arg Thr Ile 55

Phe Asp Ile Thr Asn 60Phe Asp Ile Thr Asn 60

Leu Ser Ile Val Ile 65Leu Ser Ile Val Ile 65

Leu Ala Leu Arg Pro 70Leu Ala Leu Arg Pro 70

Ser Asp Glu Gly Thr 75Ser Asp Glu Gly Thr 75

CysCys

TrpTrp

AsnAsn

AsnAsn

Tyr 80Tyr 80

HisHis

Glu Cys Val Val LeuGlu Cys Val Val Leu

Lys Tyr Glu Lys AspLys Tyr Glu Lys Asp

Gly Phe Lys Arg GluGly Phe Lys Arg Glu

- 280 044346- 280 044346

Leu Ala Glu Val Thr Leu Ser ValLeu Ala Glu Val Thr Leu Ser Val

100100

Lys Ala Asp Phe Pro Thr Pro SerLys Ala Asp Phe Pro Thr Pro Ser

105 110105 110

Ile Ser Asp Phe Glu Ile Pro SerIle Ser Asp Phe Glu Ile Pro Ser

115 120115 120

Ser Asn Ile Arg Arg Ile Ile CysSer Asn Ile Arg Arg Ile Ile Cys

125125

Ser Ala Ser Gly Gly Phe Pro GluSer Ala Ser Gly Gly Phe Pro Glu

130 135130 135

Pro His Leu Ser Trp Leu Glu AsnPro His Leu Ser Trp Leu Glu Asn

140140

Gly Glu Glu Leu Asn Ala Ile AsnGly Glu Glu Leu Asn Ala Ile Asn

145 150145 150

Thr Thr Val Ser Gln Asp Pro GluThr Thr Val Ser Gln Asp Pro Glu

155 160155 160

Thr Glu Leu Tyr Ala Val Ser SerThr Glu Leu Tyr Ala Val Ser Ser

165165

Lys Leu Asp Phe Asn Met Thr ThrLys Leu Asp Phe Asn Met Thr Thr

170 175170 175

Asn His Ser Phe Met Cys Leu IleAsn His Ser Phe Met Cys Leu Ile

180180

Lys Tyr Gly His Leu Arg Val AsnLys Tyr Gly His Leu Arg Val Asn

185 190185 190

Gln Thr Phe Asn Trp Asn Thr ThrGln Thr Phe Asn Trp Asn Thr Thr

195 200195 200

Lys Gln Glu His Phe Pro Asp AsnLys Gln Glu His Phe Pro Asp Asn

205 <210> 64 <211> 208 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>205 <210> 64 <211> 208 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> CD80 v10 ECD <400> 64<223> CD80 v10 ECD <400> 64

Val Ile His Val Thr Lys Glu Val Lys Glu Val Ala Thr Leu Ser Cys 1 5 10 15Val Ile His Val Thr Lys Glu Val Lys Glu Val Ala Thr Leu Ser Cys 1 5 10 15

Gly His Asn Val 20Gly His Asn Val 20

Gln Lys Glu LysGln Lys Glu Lys

Ile Trp Pro Glu 50Ile Trp Pro Glu 50

Leu Ser Ile Val 65Leu Ser Ile Val 65

Ser Val Glu Glu Leu Ala 25Ser Val Glu Glu Leu Ala 25

Lys Met Val Leu Thr Met 40Lys Met Val Leu Thr Met 40

Tyr Lys Asn Arg Thr Ile 55Tyr Lys Asn Arg Thr Ile 55

Ile Arg Ala Leu Arg Pro 70Ile Arg Ala Leu Arg Pro 70

Gln Thr Arg Ile Tyr Trp 30Gln Thr Arg Ile Tyr Trp 30

Met Ser Gly Asp Met Asn 45Met Ser Gly Asp Met Asn 45

Phe Asp Ile Thr Asn Asn 60Phe Asp Ile Thr Asn Asn 60

Ser Asp Glu Gly Thr TyrSer Asp Glu Gly Thr Tyr

8080

Glu Cys Val Val Leu Lys Tyr Glu 85Glu Cys Val Val Leu Lys Tyr Glu 85

Lys Asp Gly Phe Lys Arg Glu HisLys Asp Gly Phe Lys Arg Glu His

9595

- 281 044346- 281 044346

Leu Ala Glu Val ThrLeu Ala Glu Val Thr

100100

Leu Ser Val Lys AlaLeu Ser Val Lys Ala

105105

Asp Phe Pro Thr ProAsp Phe Pro Thr Pro

110110

Ile Ser Asp Phe Glu 115Ile Ser Asp Phe Glu 115

Ile Pro Ser Ser AsnIle Pro Ser Ser Asn

120120

Ile Arg Arg Ile IleIle Arg Arg Ile Ile

125125

Ser Ala Ser Gly Gly 130Ser Ala Ser Gly Gly 130

Phe Pro Glu Pro HisPhe Pro Glu Pro His

135135

Leu Ser Trp Leu Glu 140Leu Ser Trp Leu Glu 140

Gly Glu Glu Leu Asn 145Gly Glu Glu Leu Asn 145

Ala Ile Asn Thr Thr 150Ala Ile Asn Thr Thr 150

Val Ser Gln Asp Pro 155Val Ser Gln Asp Pro 155

Thr Glu Leu Tyr AlaThr Glu Leu Tyr Ala

165165

Val Ser Ser Lys LeuVal Ser Ser Lys Leu

170170

Asp Phe Asn Met ThrAsp Phe Asn Met Thr

175175

Asn His Ser Phe MetAsn His Ser Phe Met

180180

Cys Leu Ile Lys TyrCys Leu Ile Lys Tyr

185185

Gly His Leu Arg ValGly His Leu Arg Val

190190

Gln Thr Phe Asn Trp 195Gln Thr Phe Asn Trp 195

Asn Thr Thr Lys Gln 200Asn Thr Thr Lys Gln 200

Glu His Phe Pro AspGlu His Phe Pro Asp

205205

SerSer

CysCys

AsnAsn

Glu 160Glu 160

ThrThr

AsnAsn

Asn <210> 65 <211> 208 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Asn <210> 65 <211> 208 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> CD80 v11 ECD <400> 65<223> CD80 v11 ECD <400> 65

Val Ile His Val Thr 1 5Val Ile His Val Thr 1 5

Lys Glu Val Lys GluLys Glu Val Lys Glu

Val Ala Thr Leu SerVal Ala Thr Leu Ser

Gly His Asn Val Ser 20Gly His Asn Val Ser 20

Val Glu Glu Leu AlaVal Glu Glu Leu Ala

Gln Thr Arg Ile TyrGln Thr Arg Ile Tyr

Gln Lys Glu Lys Lys 35Gln Lys Glu Lys Lys 35

Met Val Leu Thr MetMet Val Leu Thr Met

Met Ser Gly Asp Met 45Met Ser Gly Asp Met 45

Ile Trp Pro Glu Tyr 50Ile Trp Pro Glu Tyr 50

Lys Asn Arg Thr Ile 55Lys Asn Arg Thr Ile 55

Phe Asp Ile Thr Asn 60Phe Asp Ile Thr Asn 60

Leu Ser Ile Val Ile 65Leu Ser Ile Val Ile 65

Gln Ala Leu Arg Pro 70Gln Ala Leu Arg Pro 70

Ser Asp Glu Gly Thr 75Ser Asp Glu Gly Thr 75

Ala Cys Val Val Leu 85Ala Cys Val Val Leu 85

Lys Tyr Glu Lys Asp 90Lys Tyr Glu Lys Asp 90

Gly Phe Lys Arg Glu 95Gly Phe Lys Arg Glu 95

CysCys

TrpTrp

AsnAsn

AsnAsn

Tyr 80Tyr 80

HisHis

- 282 044346- 282 044346

Leu Ala Glu Val Thr Leu Ser ValLeu Ala Glu Val Thr Leu Ser Val

100100

Lys Ala Asp Phe Pro Thr Pro SerLys Ala Asp Phe Pro Thr Pro Ser

105 110105 110

Ile Ser Asp Phe Glu Ile Pro SerIle Ser Asp Phe Glu Ile Pro Ser

115 120115 120

Ser Asn Ile Arg Arg Ile Thr CysSer Asn Ile Arg Arg Ile Thr Cys

125125

Ser Ala Ser Gly Gly Phe Pro GluSer Ala Ser Gly Gly Phe Pro Glu

130 135130 135

Pro His Leu Ser Trp Leu Glu AsnPro His Leu Ser Trp Leu Glu Asn

140140

Gly Glu Glu Leu Asn Ala Ile AsnGly Glu Glu Leu Asn Ala Ile Asn

145 150145 150

Thr Thr Val Ser Gln Asp Pro GluThr Thr Val Ser Gln Asp Pro Glu

155 160155 160

Thr Glu Leu Tyr Ala Val Ser SerThr Glu Leu Tyr Ala Val Ser Ser

165165

Lys Leu Asp Phe Asn Met Thr ThrLys Leu Asp Phe Asn Met Thr Thr

170 175170 175

Asn His Ser Phe Met Cys Leu Ile 180Asn His Ser Phe Met Cys Leu Ile 180

Lys Tyr Gly His Leu Arg Val AsnLys Tyr Gly His Leu Arg Val Asn

185 190185 190

Gln Thr Phe Asn Trp Asn Thr ThrGln Thr Phe Asn Trp Asn Thr Thr

195 200195 200

Lys Gln Glu His Phe Pro Asp AsnLys Gln Glu His Phe Pro Asp Asn

205 <210> 66 <211> 208 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>205 <210> 66 <211> 208 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> CD80 v12 ECD <400> 66<223> CD80 v12 ECD <400> 66

Val Ile His Val Thr Lys Glu Val Lys Glu Val Ala Thr Leu Ser Cys 1 5 10 15Val Ile His Val Thr Lys Glu Val Lys Glu Val Ala Thr Leu Ser Cys 1 5 10 15

Gly His Asn Val 20Gly His Asn Val 20

Gln Lys Glu LysGln Lys Glu Lys

Ile Trp Pro Glu 50Ile Trp Pro Glu 50

Leu Ser Ile Val 65Leu Ser Ile Val 65

Ser Val Glu Glu Leu Ala 25Ser Val Glu Glu Leu Ala 25

Lys Met Val Leu Thr Met 40Lys Met Val Leu Thr Met 40

Tyr Lys Asn Arg Thr Ile 55Tyr Lys Asn Arg Thr Ile 55

Ile Gln Ala Leu Arg Pro 70Ile Gln Ala Leu Arg Pro 70

Gln Thr Arg Ile Tyr Trp 30Gln Thr Arg Ile Tyr Trp 30

Met Ser Gly Asp Met Asn 45Met Ser Gly Asp Met Asn 45

Phe Asp Ile Thr Asn Asn 60Phe Asp Ile Thr Asn Asn 60

Ser Asp Glu Gly Thr TyrSer Asp Glu Gly Thr Tyr

8080

Glu Cys Val Val Leu Lys Asn Glu 85Glu Cys Val Val Leu Lys Asn Glu 85

Lys Asp Gly Phe Lys Arg Glu HisLys Asp Gly Phe Lys Arg Glu His

9595

- 283 044346- 283 044346

Leu Ala Glu Val ThrLeu Ala Glu Val Thr

100100

Leu Ser Val Lys AlaLeu Ser Val Lys Ala

105105

Asp Phe Pro Thr ProAsp Phe Pro Thr Pro

110110

Ile Ser Asp Phe Glu 115Ile Ser Asp Phe Glu 115

Ile Pro Thr Ser AsnIle Pro Thr Ser Asn

120120

Ile Arg Arg Ile IleIle Arg Arg Ile Ile

125125

Ser Ala Ser Gly Gly 130Ser Ala Ser Gly Gly 130

Phe Pro Glu Pro HisPhe Pro Glu Pro His

135135

Leu Ser Trp Leu Glu 140Leu Ser Trp Leu Glu 140

Gly Glu Glu Leu Asn 145Gly Glu Glu Leu Asn 145

Ala Ile Asn Thr Thr 150Ala Ile Asn Thr Thr 150

Val Ser Gln Asp Pro 155Val Ser Gln Asp Pro 155

Thr Glu Leu Tyr AlaThr Glu Leu Tyr Ala

165165

Val Ser Ser Lys LeuVal Ser Ser Lys Leu

170170

Asp Phe Asn Met ThrAsp Phe Asn Met Thr

175175

Asn His Ser Phe MetAsn His Ser Phe Met

180180

Cys Leu Ile Lys TyrCys Leu Ile Lys Tyr

185185

Gly His Leu Arg ValGly His Leu Arg Val

190190

Gln Thr Phe Asn Trp 195Gln Thr Phe Asn Trp 195

Asn Thr Thr Lys Gln 200Asn Thr Thr Lys Gln 200

Glu His Phe Pro AspGlu His Phe Pro Asp

205205

SerSer

CysCys

AsnAsn

Glu 160Glu 160

ThrThr

AsnAsn

Asn <210> 67 <211> 208 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Asn <210> 67 <211> 208 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> CD80 v13 ECD < 400> 67<223> CD80 v13 ECD <400> 67

Val Ile His Val 1Val Ile His Val 1

Thr Lys Glu Val Lys Glu Val Ala Thr Leu Ser 5 10 15Thr Lys Glu Val Lys Glu Val Ala Thr Leu Ser 5 10 15

Gly His Asn Val 20Gly His Asn Val 20

Ser Val Glu Glu Leu Ala Gln Ser Arg Ile Tyr 25 30Ser Val Glu Glu Leu Ala Gln Ser Arg Ile Tyr 25 30

Gln Lys Glu Lys 35Gln Lys Glu Lys 35

Lys Met Val Leu Thr Met Met Ser Gly Asp MetLys Met Val Leu Thr Met Met Ser Gly Asp Met

4545

Ile Trp Pro Glu 50Ile Trp Pro Glu 50

Tyr Lys Asn Arg Thr Ile Phe Asp Ile Thr Asn 55 60Tyr Lys Asn Arg Thr Ile Phe Asp Ile Thr Asn 55 60

Leu Ser Ile Val 65Leu Ser Ile Val 65

Ile Gln Ala Leu Arg Pro Ser Asp Glu Gly ThrIle Gln Ala Leu Arg Pro Ser Asp Glu Gly Thr

7575

Glu Cys Val ValGlu Cys Val Val

Leu Lys Tyr Glu Lys Asp Gly Phe Lys Arg Lys 85 90 95Leu Lys Tyr Glu Lys Asp Gly Phe Lys Arg Lys 85 90 95

CysCys

TrpTrp

AsnAsn

AsnAsn

Tyr 80Tyr 80

HisHis

SerSer

Leu Ala Glu Val Thr Leu Ser ValLeu Ala Glu Val Thr Leu Ser Val

Lys Ala Asp Phe Pro Thr ProLys Ala Asp Phe Pro Thr Pro

- 284 044346- 284 044346

100100

105105

110110

Ile Ser Asp Phe Glu 115Ile Ser Asp Phe Glu 115

Ile Pro Ser Ser AsnIle Pro Ser Ser Asn

120120

Ile Arg Arg Ile IleIle Arg Arg Ile Ile

125125

Ser Ala Ser Gly Gly 130Ser Ala Ser Gly Gly 130

Phe Pro Glu Pro HisPhe Pro Glu Pro His

135135

Leu Ser Trp Leu Glu 140Leu Ser Trp Leu Glu 140

Gly Glu Glu Leu Asn 145Gly Glu Glu Leu Asn 145

Ala Ile Asn Thr Thr 150Ala Ile Asn Thr Thr 150

Val Ser Gln Asp Pro 155Val Ser Gln Asp Pro 155

Thr Glu Leu Tyr AlaThr Glu Leu Tyr Ala

165165

Val Ser Ser Lys LeuVal Ser Ser Lys Leu

170170

Asp Phe Asn Met ThrAsp Phe Asn Met Thr

175175

Asn His Ser Phe MetAsn His Ser Phe Met

180180

Cys Leu Ile Lys TyrCys Leu Ile Lys Tyr

185185

Gly His Leu Arg ValGly His Leu Arg Val

190190

Gln Thr Phe Asn Trp 195Gln Thr Phe Asn Trp 195

Asn Thr Thr Lys Gln 200Asn Thr Thr Lys Gln 200

Glu His Phe Pro AspGlu His Phe Pro Asp

205205

CysCys

AsnAsn

Glu 160Glu 160

ThrThr

AsnAsn

Asn <210> 68 <211> 208 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Asn <210> 68 <211> 208 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> CD80 v14 ECD < 400> 68<223> CD80 v14 ECD <400> 68

Val Ile His Val 1Val Ile His Val 1

Thr Lys Glu Val Lys Glu Val Ala Thr Leu Ser 5 10 15Thr Lys Glu Val Lys Glu Val Ala Thr Leu Ser 5 10 15

Gly His Asn Val 20Gly His Asn Val 20

Ser Val Glu Glu Leu Ala Gln Thr Arg Ile Tyr 25 30Ser Val Glu Glu Leu Ala Gln Thr Arg Ile Tyr 25 30

Gln Lys Glu Lys 35Gln Lys Glu Lys 35

Lys Met Val Leu Thr Met Met Ser Gly Asp MetLys Met Val Leu Thr Met Met Ser Gly Asp Met

4545

Ile Trp Pro Glu 50Ile Trp Pro Glu 50

Tyr Lys Asn Arg Thr Ile Phe Asp Ile Thr SerTyr Lys Asn Arg Thr Ile Phe Asp Ile Thr Ser

6060

Leu Ser Ile Val 65Leu Ser Ile Val 65

Ile Gln Ala Leu Arg Pro Ser Asp Glu Gly ThrIle Gln Ala Leu Arg Pro Ser Asp Glu Gly Thr

7575

Glu Cys Val ValGlu Cys Val Val

Leu Lys Tyr Glu Lys Asp Gly Phe Lys Arg Glu 85 90 95Leu Lys Tyr Glu Lys Asp Gly Phe Lys Arg Glu 85 90 95

Leu Ala Glu ValLeu Ala Glu Val

100100

Thr Leu Ser Val Lys Ala Asp Phe Pro Thr ProThr Leu Ser Val Lys Ala Asp Phe Pro Thr Pro

105 110105 110

CysCys

TrpTrp

AsnAsn

AsnAsn

Tyr 80Tyr 80

HisHis

SerSer

- 285 044346- 285 044346

Ile Ser Asp Phe Glu Ile Pro SerIle Ser Asp Phe Glu Ile Pro Ser

115 120115 120

Ser Asn Ile Arg Arg Ile Ile CysSer Asn Ile Arg Arg Ile Ile Cys

125125

Ser Ala Ser Gly Gly Phe Pro GluSer Ala Ser Gly Gly Phe Pro Glu

130 135130 135

Pro His Leu Ser Trp Leu Glu AsnPro His Leu Ser Trp Leu Glu Asn

140140

Gly Glu Glu Leu Asn Ala Ile AsnGly Glu Glu Leu Asn Ala Ile Asn

145 150145 150

Thr Thr Val Ser Gln Asp Pro GluThr Thr Val Ser Gln Asp Pro Glu

155 160155 160

Thr Glu Leu Tyr Ala Val Ser SerThr Glu Leu Tyr Ala Val Ser Ser

165165

Lys Leu Asp Phe Asn Met Thr ThrLys Leu Asp Phe Asn Met Thr Thr

170 175170 175

Asn His Ser Phe Met Cys Leu IleAsn His Ser Phe Met Cys Leu Ile

180180

Lys Tyr Gly His Leu Arg Val AsnLys Tyr Gly His Leu Arg Val Asn

185 190185 190

Gln Thr Phe Asn Trp Asn Thr ThrGln Thr Phe Asn Trp Asn Thr Thr

195 200195 200

Lys Gln Glu His Phe Pro Asp AsnLys Gln Glu His Phe Pro Asp Asn

205 <210> 69 <211> 208 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>205 <210> 69 <211> 208 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> CD80 v15 ECD <400> 69<223> CD80 v15 ECD <400> 69

Val Ile His Val Thr Lys Glu Val Lys Glu Val Ala Thr Leu Ser Cys 1 5 10 15Val Ile His Val Thr Lys Glu Val Lys Glu Val Ala Thr Leu Ser Cys 1 5 10 15

Gly His Asn Val 20Gly His Asn Val 20

Gln Lys Glu Glu 35Gln Lys Glu Glu 35

Ile Trp Pro Glu 50Ile Trp Pro Glu 50

Leu Ser Thr Val 65Leu Ser Thr Val 65

Ser Val Glu Glu Leu Ala 25Ser Val Glu Glu Leu Ala 25

Lys Met Val Leu Thr Met 40Lys Met Val Leu Thr Met 40

Tyr Lys Asn Arg Thr Ile 55Tyr Lys Asn Arg Thr Ile 55

Ile Gln Ala Leu Arg Pro 70Ile Gln Ala Leu Arg Pro 70

Gln Thr Arg Ile Tyr Trp 30Gln Thr Arg Ile Tyr Trp 30

Met Ser Gly Asp Met Asn 45Met Ser Gly Asp Met Asn 45

Phe Asp Ile Thr Asn Asn 60Phe Asp Ile Thr Asn Asn 60

Ser Asp Glu Gly Thr TyrSer Asp Glu Gly Thr Tyr

8080

Glu Cys Val ValGlu Cys Val Val

Leu Lys 85Leu Lys 85

Tyr Glu Lys Asp Gly Phe Lys Arg Glu HisTyr Glu Lys Asp Gly Phe Lys Arg Glu His

9595

Leu Ala Glu Val Thr Leu Ser ValLeu Ala Glu Val Thr Leu Ser Val

100100

Lys Ala Asp Phe Pro Thr Pro SerLys Ala Asp Phe Pro Thr Pro Ser

105 110105 110

- 286 044346- 286 044346

Ile Ser Asp Phe Glu 115Ile Ser Asp Phe Glu 115

Ile Pro Ser Ser AsnIle Pro Ser Ser Asn

120120

Ile Arg Arg Ile IleIle Arg Arg Ile Ile

125125

Ser Ala Ser Gly Gly 130Ser Ala Ser Gly Gly 130

Phe Pro Glu Pro HisPhe Pro Glu Pro His

135135

Leu Ser Trp Leu Glu 140Leu Ser Trp Leu Glu 140

Gly Glu Glu Leu Asn 145Gly Glu Glu Leu Asn 145

Ala Ile Thr Thr Thr 150Ala Ile Thr Thr Thr 150

Val Ser Gln Asp Pro 155Val Ser Gln Asp Pro 155

Thr Glu Leu Tyr AlaThr Glu Leu Tyr Ala

165165

Val Ser Ser Lys LeuVal Ser Ser Lys Leu

170170

Asp Phe Asn Met ThrAsp Phe Asn Met Thr

175175

Asn His Ser Phe MetAsn His Ser Phe Met

180180

Cys Leu Ile Lys TyrCys Leu Ile Lys Tyr

185185

Gly His Leu Arg ValGly His Leu Arg Val

190190

Gln Thr Phe Asn Trp 195Gln Thr Phe Asn Trp 195

Asn Thr Thr Lys Gln 200Asn Thr Thr Lys Gln 200

Glu His Phe Pro AspGlu His Phe Pro Asp

205205

CysCys

AsnAsn

Glu 160Glu 160

ThrThr

AsnAsn

Asn <210> 70 <211> 208 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Asn <210> 70 <211> 208 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> CD80 v16 ECD <400> 70<223> CD80 v16 ECD <400> 70

Val Ile His Val Thr 1 5Val Ile His Val Thr 1 5

Lys Glu Val Lys GluLys Glu Val Lys Glu

Val Ala Thr Leu SerVal Ala Thr Leu Ser

Gly His Asn Val Ser 20Gly His Asn Val Ser 20

Val Glu Glu Leu AlaVal Glu Glu Leu Ala

Gln Thr Arg Ile TyrGln Thr Arg Ile Tyr

Gln Lys Glu Lys Lys 35Gln Lys Glu Lys Lys 35

Met Val Leu Thr MetMet Val Leu Thr Met

Met Ser Gly Asp Met 45Met Ser Gly Asp Met 45

Ile Trp Pro Gly Tyr 50Ile Trp Pro Gly Tyr 50

Lys Asn Arg Thr Ile 55Lys Asn Arg Thr Ile 55

Phe Asp Ile Thr Asn 60Phe Asp Ile Thr Asn 60

Leu Ser Ile Val Ile 65Leu Ser Ile Val Ile 65

Gln Ala Leu Arg Pro 70Gln Ala Leu Arg Pro 70

Ser Asp Glu Gly Thr 75Ser Asp Glu Gly Thr 75

Glu Cys Val Val Leu Lys Tyr Glu 85Glu Cys Val Val Leu Lys Tyr Glu 85

Leu Ala Glu Val Thr Leu Ser Val 100Leu Ala Glu Val Thr Leu Ser Val 100

Lys Asp Gly Phe Lys Arg GluLys Asp Gly Phe Lys Arg Glu

9595

Lys Ala Asp Phe Pro Thr ProLys Ala Asp Phe Pro Thr Pro

105 110105 110

CysCys

TrpTrp

AsnAsn

AsnAsn

Tyr 80Tyr 80

HisHis

SerSer

- 287 044346- 287 044346

Ile Ser Asp Phe Glu 115Ile Ser Asp Phe Glu 115

Ile Pro Ser Ser AsnIle Pro Ser Ser Asn

120120

Ile Arg Arg Ile IleIle Arg Arg Ile Ile

125125

Ser Ala Ser Gly GlySer Ala Ser Gly Gly

130130

Phe Pro Glu Pro HisPhe Pro Glu Pro His

135135

Leu Ser Trp Leu Glu 140Leu Ser Trp Leu Glu 140

Gly Glu Glu Leu Asn 145Gly Glu Glu Leu Asn 145

Ala Ile Asn Thr Thr 150Ala Ile Asn Thr Thr 150

Val Ser Gln Asp Pro 155Val Ser Gln Asp Pro 155

Thr Glu Leu Tyr AlaThr Glu Leu Tyr Ala

165165

Val Ser Ser Lys LeuVal Ser Ser Lys Leu

170170

Asp Phe Asn Met ThrAsp Phe Asn Met Thr

175175

Asn His Ser Phe MetAsn His Ser Phe Met

180180

Cys Leu Ile Lys TyrCys Leu Ile Lys Tyr

185185

Gly His Leu Arg ValGly His Leu Arg Val

190190

Gln Thr Phe Asn Trp 195Gln Thr Phe Asn Trp 195

Asn Thr Thr Lys Gln 200Asn Thr Thr Lys Gln 200

Glu His Phe Pro AspGlu His Phe Pro Asp

205205

CysCys

AsnAsn

Glu 160Glu 160

ThrThr

AsnAsn

Asn <210> 71 <211> 208 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Asn <210> 71 <211> 208 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> CD80 v17 ECD < 400> 71<223> CD80 v17 ECD <400> 71

Val Ile His Val 1Val Ile His Val 1

Thr Lys Glu Val Lys Glu Val Ala Thr Leu Ser 5 10 15Thr Lys Glu Val Lys Glu Val Ala Thr Leu Ser 5 10 15

Gly His Asn Val 20Gly His Asn Val 20

Ser Val Glu Glu Leu Ala Gln Thr Arg Ile Tyr 25 30Ser Val Glu Glu Leu Ala Gln Thr Arg Ile Tyr 25 30

Gln Lys Glu Lys 35Gln Lys Glu Lys 35

Glu Met Val Leu Thr Met Met Ser Gly Asp MetGlu Met Val Leu Thr Met Met Ser Gly Asp Met

4545

Ile Trp Pro Glu 50Ile Trp Pro Glu 50

Tyr Lys Asn Arg Thr Ile Ser Asp Ile Thr Asn 55 60Tyr Lys Asn Arg Thr Ile Ser Asp Ile Thr Asn 55 60

Leu Ser Ile Val 65Leu Ser Ile Val 65

Ile Gln Ala Leu Arg Pro Ser Asp Glu Gly ThrIle Gln Ala Leu Arg Pro Ser Asp Glu Gly Thr

7575

Glu Cys Val ValGlu Cys Val Val

Leu Lys Tyr Glu Lys Asp Gly Phe Lys Arg Glu 85 90 95Leu Lys Tyr Glu Lys Asp Gly Phe Lys Arg Glu 85 90 95

Leu Ala Glu ValLeu Ala Glu Val

100100

Thr Leu Ser Val Lys Ala Asp Phe Pro Thr ProThr Leu Ser Val Lys Ala Asp Phe Pro Thr Pro

105 110105 110

Ile Ser Asp Phe Glu Ile Pro SerIle Ser Asp Phe Glu Ile Pro Ser

Ser Asn Ile Arg Arg Ile IleSer Asn Ile Arg Arg Ile Ile

CysCys

TrpTrp

AsnAsn

AsnAsn

Tyr 80Tyr 80

HisHis

SerSer

CysCys

- 288 044346- 288 044346

115115

120120

125125

Ser Ala Ser Gly Gly 130Ser Ala Ser Gly Gly 130

Phe Pro Glu Pro HisPhe Pro Glu Pro His

135135

Leu Ser Trp Leu Glu 140Leu Ser Trp Leu Glu 140

Gly Glu Glu Leu Asn 145Gly Glu Glu Leu Asn 145

Ala Ile Asn Thr Thr 150Ala Ile Asn Thr Thr 150

Val Ser Gln Asp Pro 155Val Ser Gln Asp Pro 155

Thr Glu Leu Tyr AlaThr Glu Leu Tyr Ala

165165

Val Ser Ser Lys LeuVal Ser Ser Lys Leu

170170

Asp Phe Asn Met ThrAsp Phe Asn Met Thr

175175

Asn His Ser Phe MetAsn His Ser Phe Met

180180

Cys Leu Ile Lys TyrCys Leu Ile Lys Tyr

185185

Gly His Leu Arg ValGly His Leu Arg Val

190190

Gln Thr Phe Asn TrpGln Thr Phe Asn Trp

195195

Asn Thr Thr Lys Gln 200Asn Thr Thr Lys Gln 200

Glu His Phe Pro Asp 205Glu His Phe Pro Asp 205

AsnAsn

Glu 160Glu 160

ThrThr

AsnAsn

Asn <210> 72 <211> 208 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Asn <210> 72 <211> 208 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> CD80 v18 ECD < 400> 72<223> CD80 v18 ECD <400> 72

Val 1Val 1

IleIle

HisHis

ValVal

Thr 5Thr 5

LysLys

GluGlu

ValVal

LysLys

Glu 10Glu 10

ValVal

AlaAla

ThrThr

LeuLeu

Ser 15Ser 15

GlyGly

HisHis

AsnAsn

Val 20Val 20

SerSer

ValVal

GluGlu

GluGlu

Leu 25Leu 25

AlaAla

GlnGln

ThrThr

ArgArg

Ile 30Ile 30

TyrTyr

GlnGln

LysLys

Glu 35Glu 35

LysLys

LysLys

MetMet

ValVal

Leu 40Leu 40

ThrThr

MetMet

MetMet

SerSer

Gly 45Gly 45

AspAsp

MetMet

IleIle

Trp 50Trp 50

ProPro

GluGlu

TyrTyr

LysLys

Asn 55Asn 55

ArgArg

ThrThr

IleIle

PhePhe

Asp 60Asp 60

IleIle

ThrThr

AsnAsn

Leu 65Leu 65

SerSer

IleIle

ValVal

IleIle

Leu 70Leu 70

AlaAla

LeuLeu

ArgArg

ProPro

Ser 75Ser 75

AspAsp

GluGlu

GlyGly

ThrThr

GluGlu

CysCys

ValVal

ValVal

Leu 85Leu 85

LysLys

TyrTyr

GluGlu

LysLys

Asp 90Asp 90

GlyGly

PhePhe

LysLys

ArgArg

Glu 95Glu 95

LeuLeu

AlaAla

GluGlu

ValVal

100100

ThrThr

LeuLeu

ProPro

ValVal

Lys 105Lys 105

AlaAla

AspAsp

PhePhe

ProPro

ThrThr

110110

ProPro

IleIle

SerSer

AspAsp

115115

PhePhe

GluGlu

IleIle

ProPro

ThrThr

120120

SerSer

AsnAsn

IleIle

ArgArg

Arg 125Arg 125

IleIle

IleIle

CysCys

TrpTrp

AsnAsn

AsnAsn

Tyr 80Tyr 80

HisHis

SerSer

CysCys

- 289 044346- 289 044346

Ser Thr Ser Gly Gly 130Ser Thr Ser Gly Gly 130

Phe Pro Glu Pro HisPhe Pro Glu Pro His

135135

Leu Ser Trp Leu Glu 140Leu Ser Trp Leu Glu 140

Gly Glu Glu Leu Asn 145Gly Glu Glu Leu Asn 145

Ala Ile Asn Thr Thr 150Ala Ile Asn Thr Thr 150

Val Ser Gln Asp Pro 155Val Ser Gln Asp Pro 155

Thr Glu Leu Tyr AlaThr Glu Leu Tyr Ala

165165

Val Ser Ser Lys LeuVal Ser Ser Lys Leu

170170

Asp Phe Asn Met ThrAsp Phe Asn Met Thr

175175

Asn His Ser Phe MetAsn His Ser Phe Met

180180

Cys Leu Ile Lys TyrCys Leu Ile Lys Tyr

185185

Gly His Leu Arg ValGly His Leu Arg Val

190190

Gln Thr Phe Asn Trp 195Gln Thr Phe Asn Trp 195

Asn Thr Thr Lys Gln 200Asn Thr Thr Lys Gln 200

Glu His Phe Pro AspGlu His Phe Pro Asp

205205

AsnAsn

Glu 160Glu 160

ThrThr

AsnAsn

Asn <210> 73 <211> 208 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Asn <210> 73 <211> 208 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> CD80 v19 ECD <400> 73<223> CD80 v19 ECD <400> 73

Val Ile His Val Thr 1 5Val Ile His Val Thr 1 5

Lys Glu Val Lys GluLys Glu Val Lys Glu

Val Ala Thr Leu SerVal Ala Thr Leu Ser

Gly His Asn Val Ser 20Gly His Asn Val Ser 20

Val Glu Glu Leu AlaVal Glu Glu Leu Ala

Gln Thr Arg Ile Tyr 30Gln Thr Arg Ile Tyr 30

Gln Lys Glu Lys Lys 35Gln Lys Glu Lys Lys 35

Met Val Leu Thr MetMet Val Leu Thr Met

Met Ser Gly Asp Met 45Met Ser Gly Asp Met 45

Ile Trp Pro Glu Tyr 50Ile Trp Pro Glu Tyr 50

Lys Asn Arg Thr Ile 55Lys Asn Arg Thr Ile 55

Phe Asp Ile Thr Asn 60Phe Asp Ile Thr Asn 60

Leu Ser Ile Val Ile 65Leu Ser Ile Val Ile 65

Leu Ala Leu Arg Pro 70Leu Ala Leu Arg Pro 70

Ser Asp Glu Gly Thr 75Ser Asp Glu Gly Thr 75

Glu Cys Val ValGlu Cys Val Val

Leu Lys Tyr Glu Glu Asp Ala Phe Lys Arg Glu 85 90 95Leu Lys Tyr Glu Glu Asp Ala Phe Lys Arg Glu 85 90 95

Leu Ala Glu ValLeu Ala Glu Val

100100

Thr Leu Ser Val Lys Ala Asp Phe Pro Thr ProThr Leu Ser Val Lys Ala Asp Phe Pro Thr Pro

105 110105 110

Ile Ser Asp PheIle Ser Asp Phe

115115

Glu Ile Pro Thr Ser Asn Ile Arg Arg Ile IleGlu Ile Pro Thr Ser Asn Ile Arg Arg Ile Ile

120 125120 125

CysCys

TrpTrp

AsnAsn

AsnAsn

Tyr 80Tyr 80

HisHis

SerSer

CysCys

- 290 044346- 290 044346

Ser Ser Ala 130 Ala 130 Ser Ser Gly Gly Gly Gly Phe Phe Pro 135 Pro 135 Glu Glu Pro Pro His His Leu Leu Ser 140 Ser 140 Trp Trp Leu Leu Glu Glu Asn Asn Gly 145 Gly 145 Glu Glu Glu Glu Leu Leu Asn Asn Ala 150 Ala 150 Ile Ile Asn Asn Thr Thr Thr Thr Val 155 Val 155 Ser Ser Gln Gln Asp Asp Pro Pro Glu 160 Glu 160 Thr Thr Glu Glu Leu Leu Tyr Tyr Ala 165 Ala 165 Val Val Ser Ser Ser Ser Lys Lys Leu 170 Leu 170 Asp Asp Phe Phe Asn Asn Met Met Thr 175 Thr 175 Thr Thr Asn Asn His His Ser Ser Phe 180 Phe 180 Met Met Cys Cys Leu Leu Ile Ile Lys 185 Lys 185 Tyr Tyr Gly Gly His His Leu Leu Arg 190 Arg 190 Val Val Asn Asn Gln Gln Thr Thr Phe 195 Phe 195 Asn Asn Trp Trp Asn Asn Thr Thr Thr 200 Thr 200 Lys Lys Gln Gln Glu Glu His His Phe 205 Phe 205 Pro Pro Asp Asp Asn Asn

<210> 74 <211> 208 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220><210> 74 <211> 208 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> CD80 v20 ECD <400> 74<223> CD80 v20 ECD <400> 74

Val Ile His Val 1Val Ile His Val 1

Thr Lys Glu Val 5Thr Lys Glu Val 5

Lys Glu Val Ala Thr Leu Ser CysLys Glu Val Ala Thr Leu Ser Cys

1515

Gly His Asn Val 20Gly His Asn Val 20

Ser Val Glu GluSer Val Glu Glu

Leu Ala Gln Thr Arg Ile Tyr Trp 25 30Leu Ala Gln Thr Arg Ile Tyr Trp 25 30

Gln Lys Glu LysGln Lys Glu Lys

Lys Met Val Leu 40Lys Met Val Leu 40

Thr Met Met Ser Gly Asp Met Asn 45Thr Met Met Ser Gly Asp Met Asn 45

Ile Trp Pro Glu 50Ile Trp Pro Glu 50

Tyr Lys Asn ArgTyr Lys Asn Arg

Thr Ile Phe Asp Ile Thr Asn Asn 60Thr Ile Phe Asp Ile Thr Asn Asn 60

Leu Ser Ile Val 65Leu Ser Ile Val 65

Glu Cys Val ValGlu Cys Val Val

Leu Ala Glu ValLeu Ala Glu Val

100100

IleIle

Leu 85Leu 85

ThrThr

Leu Ala Leu Arg Pro Ser Asp Glu Gly Thr Tyr 70 75 80Leu Ala Leu Arg Pro Ser Asp Glu Gly Thr Tyr 70 75 80

Lys Tyr Glu Lys Asp Gly Phe Lys Arg Glu His 90 95Lys Tyr Glu Lys Asp Gly Phe Lys Arg Glu His 90 95

Leu Ser Val Lys Ala Asp Phe Pro Thr Pro SerLeu Ser Val Lys Ala Asp Phe Pro Thr Pro Ser

105 110105 110

Ile Ser Asp Phe Glu 115Ile Ser Asp Phe Glu 115

Ile Pro ThrIle Pro Thr

120120

Ser Asn Ile Arg Arg Ile Ile CysSer Asn Ile Arg Arg Ile Ile Cys

125125

- 291 044346- 291 044346

Ser Thr Ser Gly Gly Phe Pro GluSer Thr Ser Gly Gly Phe Pro Glu

130 135130 135

Pro His Leu Ser Trp Leu Glu AsnPro His Leu Ser Trp Leu Glu Asn

140140

Gly Glu Glu Leu Asn Ala Ile AsnGly Glu Glu Leu Asn Ala Ile Asn

145 150145 150

Thr Thr Val Ser Gln Asp Pro GluThr Thr Val Ser Gln Asp Pro Glu

155 160155 160

Thr Glu Leu Tyr Ala Val Ser SerThr Glu Leu Tyr Ala Val Ser Ser

165165

Lys Leu Asp Phe Asn Met Thr ThrLys Leu Asp Phe Asn Met Thr Thr

170 175170 175

Asn His Ser Phe Met Cys Leu IleAsn His Ser Phe Met Cys Leu Ile

180180

Lys Tyr Gly His Leu Arg Val AsnLys Tyr Gly His Leu Arg Val Asn

185 190185 190

Gln Thr Phe Asn Trp Asn Thr ThrGln Thr Phe Asn Trp Asn Thr Thr

195 200195 200

Lys Gln Glu His Phe Pro Asp AsnLys Gln Glu His Phe Pro Asp Asn

205 <210> 75 < 211> 208 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>205 <210> 75 <211> 208 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> CD80 v21 ECD < 400> 75<223> CD80 v21 ECD <400> 75

Val Ile His Val 1Val Ile His Val 1

Thr Lys Glu Val 5Thr Lys Glu Val 5

Lys Glu Val Ala Thr Leu Ser CysLys Glu Val Ala Thr Leu Ser Cys

1515

Gly His Asn ValGly His Asn Val

Ser Val Glu GluSer Val Glu Glu

Leu Ala Gln Thr Arg Ile Tyr Trp 25 30Leu Ala Gln Thr Arg Ile Tyr Trp 25 30

Gln Lys Glu Lys 35Gln Lys Glu Lys 35

Lys Met Val Leu 40Lys Met Val Leu 40

Thr Met Met Ser Gly Asp Met Asn 45Thr Met Met Ser Gly Asp Met Asn 45

Ile Trp Pro Glu 50Ile Trp Pro Glu 50

Leu Ser Ile Val 65Leu Ser Ile Val 65

Glu Cys Val ValGlu Cys Val Val

Leu Ala Glu ValLeu Ala Glu Val

100100

TyrTyr

IleIle

Leu 85Leu 85

ThrThr

Lys Asn Arg Thr Ile Phe Val Ile Thr Asn AsnLys Asn Arg Thr Ile Phe Val Ile Thr Asn Asn

6060

Leu Ala Leu Arg Pro Ser Asp Glu Gly Thr Tyr 70 75 80Leu Ala Leu Arg Pro Ser Asp Glu Gly Thr Tyr 70 75 80

Lys Tyr Glu Lys Asp Gly Phe Lys Arg Glu His 90 95Lys Tyr Glu Lys Asp Gly Phe Lys Arg Glu His 90 95

Leu Ser Val Lys Ala Asp Phe Pro Thr Pro SerLeu Ser Val Lys Ala Asp Phe Pro Thr Pro Ser

105 110105 110

IleIle

SerSer

AspAsp

115115

PhePhe

GluGlu

IleIle

ProPro

SerSer

120120

SerSer

AsnAsn

IleIle

ArgArg

Arg 125Arg 125

IleIle

IleIle

CysCys

SerSer

AlaAla

SerSer

GlyGly

GlyGly

PhePhe

ProPro

GluGlu

ProPro

HisHis

LeuLeu

SerSer

TrpTrp

LeuLeu

GluGlu

AsnAsn

- 292 044346- 292 044346

130130

135135

140140

Gly Glu Glu Leu Asn AlaGly Glu Glu Leu Asn Ala

145 150145 150

Ile Asn Thr Thr Val Ser Gln Asp ProIle Asn Thr Thr Val Ser Gln Asp Pro

155155

Thr Glu Leu Tyr Ala Val 165Thr Glu Leu Tyr Ala Val 165

Asn His Ser Phe Met Cys 180Asn His Ser Phe Met Cys 180

Gln Thr Phe Asn Trp Asn 195Gln Thr Phe Asn Trp Asn 195

Ser Ser Lys Leu Asp Phe Asn Met ThrSer Ser Lys Leu Asp Phe Asn Met Thr

170 175170 175

Leu Ile Lys Tyr Gly His Leu Arg ValLeu Ile Lys Tyr Gly His Leu Arg Val

185 190185 190

Thr Thr Lys Gln Glu His Phe Pro AspThr Thr Lys Gln Glu His Phe Pro Asp

200 205200 205

Glu 160Glu 160

ThrThr

AsnAsn

Asn <210> 76 <211> 208 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Asn <210> 76 <211> 208 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> CD80 v22 ECD < 400> 76<223> CD80 v22 ECD <400> 76

Val Ile His Val ThrVal Ile His Val Thr

55

Lys Glu Val Lys GluLys Glu Val Lys Glu

Val Ala Thr Leu SerVal Ala Thr Leu Ser

Gly His Asn Val Ser 20Gly His Asn Val Ser 20

Val Glu Glu Leu AlaVal Glu Glu Leu Ala

Gln Thr Arg Ile Tyr 30Gln Thr Arg Ile Tyr 30

Gln Lys Glu Lys Lys 35Gln Lys Glu Lys Lys 35

Met Val Leu Thr MetMet Val Leu Thr Met

Met Ser Gly Asp Met 45Met Ser Gly Asp Met 45

Ile Trp Pro Glu Tyr 50Ile Trp Pro Glu Tyr 50

Met Asn Arg Thr Ile 55Met Asn Arg Thr Ile 55

Phe Asp Ile Thr Asn 60Phe Asp Ile Thr Asn 60

Leu Ser Ile Val Ile 65Leu Ser Ile Val Ile 65

Leu Ala Leu Arg Pro 70Leu Ala Leu Arg Pro 70

Ser Asp Glu Gly Thr 75Ser Asp Glu Gly Thr 75

Glu Cys Val Val Leu 85Glu Cys Val Val Leu 85

Lys Tyr Glu Lys Asp 90Lys Tyr Glu Lys Asp 90

Gly Phe Lys Arg Glu 95Gly Phe Lys Arg Glu 95

Leu Ala Glu Val ThrLeu Ala Glu Val Thr

100100

Leu Ser Val Lys AlaLeu Ser Val Lys Ala

105105

Asp Phe Pro Thr ProAsp Phe Pro Thr Pro

110110

Ile Ser Asp Phe Glu 115Ile Ser Asp Phe Glu 115

Ile Pro Ser Ser AsnIle Pro Ser Ser Asn

120120

Ile Arg Arg Ile IleIle Arg Arg Ile Ile

125125

Ser Thr Ser Gly Gly 130Ser Thr Ser Gly Gly 130

Phe Pro Glu Pro HisPhe Pro Glu Pro His

135135

Leu Ser Trp Leu Glu 140Leu Ser Trp Leu Glu 140

CysCys

TrpTrp

AsnAsn

AsnAsn

Tyr 80Tyr 80

HisHis

SerSer

CysCys

AsnAsn

- 293 044346- 293 044346

Gly Glu Glu Leu Asn Ala Ile AsnGly Glu Glu Leu Asn Ala Ile Asn

145 150145 150

Thr Thr Val Ser Gln Asp Pro 155Thr Thr Val Ser Gln Asp Pro 155

Thr Glu Leu Tyr Ala Val Ser SerThr Glu Leu Tyr Ala Val Ser Ser

165165

Lys Leu Asp Phe Asn Met ThrLys Leu Asp Phe Asn Met Thr

170 175170 175

Asn His Ser Phe Met Cys Leu IleAsn His Ser Phe Met Cys Leu Ile

180180

Lys Tyr Gly His Leu Arg ValLys Tyr Gly His Leu Arg Val

185 190185 190

Gln Thr Phe Asn Trp Asn Thr ThrGln Thr Phe Asn Trp Asn Thr Thr

195 200195 200

Lys Gln Glu His Phe Pro AspLys Gln Glu His Phe Pro Asp

205205

Glu 160Glu 160

ThrThr

AsnAsn

Asn <210> 77 <211> 208 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Asn <210> 77 <211> 208 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> CD80 v23 ECD < 400> 77<223> CD80 v23 ECD <400> 77

Val Ile His Val ThrVal Ile His Val Thr

55

Lys Glu Val Lys GluLys Glu Val Lys Glu

Val Ala Thr Leu SerVal Ala Thr Leu Ser

Gly His Asn Val Ser 20Gly His Asn Val Ser 20

Val Glu Glu Leu AlaVal Glu Glu Leu Ala

Gln Thr Arg Ile Tyr 30Gln Thr Arg Ile Tyr 30

Gln Lys Glu Lys Lys 35Gln Lys Glu Lys Lys 35

Thr Val Leu Thr MetThr Val Leu Thr Met

Met Ser Gly Asp Met 45Met Ser Gly Asp Met 45

Ile Trp Pro Glu Tyr 50Ile Trp Pro Glu Tyr 50

Lys Asn Arg Thr Ile 55Lys Asn Arg Thr Ile 55

Phe Asp Ile Thr Asn 60Phe Asp Ile Thr Asn 60

Leu Ser Ile Val Ile 65Leu Ser Ile Val Ile 65

Gln Ala Leu Arg Pro 70Gln Ala Leu Arg Pro 70

Ser Asp Gly Gly Thr 75Ser Asp Gly Gly Thr 75

Glu Cys Val Val Leu 85Glu Cys Val Val Leu 85

Lys Tyr Glu Lys Asp 90Lys Tyr Glu Lys Asp 90

Gly Phe Lys Arg Glu 95Gly Phe Lys Arg Glu 95

Leu Ala Glu Val ThrLeu Ala Glu Val Thr

100100

Leu Ser Val Lys AlaLeu Ser Val Lys Ala

105105

Asp Phe Pro Thr ProAsp Phe Pro Thr Pro

110110

Ile Ser Asp Phe GluIle Ser Asp Phe Glu

115115

Ile Pro Ser Ser AsnIle Pro Ser Ser Asn

120120

Ile Arg Arg Ile IleIle Arg Arg Ile Ile

125125

Ser Ala Ser Gly Gly 130Ser Ala Ser Gly Gly 130

Phe Pro Glu Pro HisPhe Pro Glu Pro His

135135

Leu Ser Trp Leu Glu 140Leu Ser Trp Leu Glu 140

CysCys

TrpTrp

AsnAsn

AsnAsn

Tyr 80Tyr 80

HisHis

SerSer

CysCys

AsnAsn

- 294 044346- 294 044346

Gly 145 Gly 145 Glu Glu Glu Glu Leu Leu Asn Asn Ala 150 Ala 150 Ile Ile Thr Thr Thr Thr Thr Thr Val 155 Val 155 Ser Ser Gln Gln Asp Asp Pro Pro Thr Thr Glu Glu Leu Leu Tyr Tyr Ala Ala Val Val Ser Ser Ser Ser Lys Lys Leu Leu Asp Asp Phe Phe Asn Asn Met Met Thr Thr 165 165 170 170 175 175 Asn Asn His His Ser Ser Phe Phe Met Met Cys Cys Leu Leu Ile Ile Lys Lys Tyr Tyr Gly Gly His His Leu Leu Arg Arg Val Val 180 180 185 185 190 190 Gln Gln Thr Thr Phe Phe Asn Asn Trp Trp Asn Asn Thr Thr Thr Thr Lys Lys Gln Gln Glu Glu His His Phe Phe Pro Pro Asp Asp 195 195 200 200 205 205

Glu 160Glu 160

ThrThr

AsnAsn

Asn <210> 78 < 211> 208 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Asn <210> 78 <211> 208 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> CD80 v24 ECD <400> 78<223> CD80 v24 ECD <400> 78

Val Ile His Val ThrVal Ile His Val Thr

55

Lys Glu Val Lys GluLys Glu Val Lys Glu

Val Ala Thr Leu SerVal Ala Thr Leu Ser

Gly His Asn Val Ser 20Gly His Asn Val Ser 20

Val Glu Glu Leu AlaVal Glu Glu Leu Ala

Gln Thr His Ile Tyr 30Gln Thr His Ile Tyr 30

Gln Lys Glu Lys Lys 35Gln Lys Glu Lys Lys 35

Met Val Leu Thr MetMet Val Leu Thr Met

Met Ser Gly Asp Met 45Met Ser Gly Asp Met 45

Ile Trp Pro Gly Tyr 50Ile Trp Pro Gly Tyr 50

Lys Asn Arg Thr Ile 55Lys Asn Arg Thr Ile 55

Phe Asp Ile Thr Asn 60Phe Asp Ile Thr Asn 60

Leu Ser Ile Val Ile 65Leu Ser Ile Val Ile 65

Arg Ala Leu Arg Pro 70Arg Ala Leu Arg Pro 70

Ser Asp Glu Gly Thr 75Ser Asp Glu Gly Thr 75

Glu Cys Val Val Leu 85Glu Cys Val Val Leu 85

Lys Tyr Gly Lys Asp 90Lys Tyr Gly Lys Asp 90

Gly Phe Lys Arg Glu 95Gly Phe Lys Arg Glu 95

Leu Ala Glu Val ThrLeu Ala Glu Val Thr

100100

Leu Ser Val Lys AlaLeu Ser Val Lys Ala

105105

Asp Phe Pro Thr ProAsp Phe Pro Thr Pro

110110

Ile Ser Asp Phe GluIle Ser Asp Phe Glu

115115

Ile Pro Thr Ser AsnIle Pro Thr Ser Asn

120120

Ile Arg Arg Ile IleIle Arg Arg Ile Ile

125125

Ser Ala Ser Gly GlySer Ala Ser Gly Gly

130130

Phe Pro Glu Pro HisPhe Pro Glu Pro His

135135

Leu Ser Trp Leu GluLeu Ser Trp Leu Glu

140140

CysCys

TrpTrp

AsnAsn

AsnAsn

Tyr 80Tyr 80

HisHis

SerSer

CysCys

AsnAsn

- 295 044346- 295 044346

Gly Glu Glu Leu Asn AlaGly Glu Glu Leu Asn Ala

145 150145 150

Thr Glu Leu Tyr Ala ValThr Glu Leu Tyr Ala Val

165165

Asn His Ser Phe Met CysAsn His Ser Phe Met Cys

180180

Gln Thr Phe Asn Trp AsnGln Thr Phe Asn Trp Asn

195195

Ile Ile Asn Asn Thr Thr Thr Thr Val 155 Val 155 Ser Ser Gln Gln Asp Asp Pro Pro Glu 160 Glu 160 Ser Ser Ser Ser Lys Lys Leu 170 Leu 170 Asp Asp Phe Phe Asn Asn Met Met Thr 175 Thr 175 Thr Thr Leu Leu Ile Ile Lys 185 Lys 185 Tyr Tyr Gly Gly His His Leu Leu Arg 190 Arg 190 Val Val Asn Asn Thr Thr Thr 200 Thr 200 Lys Lys Gln Gln Glu Glu His His Phe 205 Phe 205 Pro Pro Asp Asp Asn Asn

<210> 79 <211> 208 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220><210> 79 <211> 208 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> CD80 v25 ECD < 400> 79<223> CD80 v25 ECD <400> 79

Val Ile His Val 1Val Ile His Val 1

Thr Lys Glu Val 5Thr Lys Glu Val 5

Lys Glu Val Ala Thr Leu Ser CysLys Glu Val Ala Thr Leu Ser Cys

1515

Gly His Asn Val 20Gly His Asn Val 20

Ser Val Glu GluSer Val Glu Glu

Leu Ala Gln Thr Arg Ile His Trp 25 30Leu Ala Gln Thr Arg Ile His Trp 25 30

Gln Lys Glu LysGln Lys Glu Lys

Lys Met Val Leu 40Lys Met Val Leu 40

Gly Met Met Ser Gly Asp Met Asn 45Gly Met Met Ser Gly Asp Met Asn 45

Ile Trp Pro Glu 50Ile Trp Pro Glu 50

Tyr Lys Asn ArgTyr Lys Asn Arg

Thr Ile Phe Asp Ile Thr Asn Asn 60Thr Ile Phe Asp Ile Thr Asn Asn 60

Leu Ser Ile Val 65Leu Ser Ile Val 65

Glu Cys Val ValGlu Cys Val Val

Leu Ala Glu ValLeu Ala Glu Val

100100

IleIle

Leu 85Leu 85

ThrThr

Gln Ala Leu Arg Pro Ser Asp Glu Gly Thr Tyr 70 75 80Gln Ala Leu Arg Pro Ser Asp Glu Gly Thr Tyr 70 75 80

Lys Tyr Glu Lys Asp Gly Phe Lys Arg Glu His 90 95Lys Tyr Glu Lys Asp Gly Phe Lys Arg Glu His 90 95

Leu Ser Val Lys Ala Asp Phe Pro Thr Pro SerLeu Ser Val Lys Ala Asp Phe Pro Thr Pro Ser

105 110105 110

Ile Ser Asp Phe Glu Ile Pro Ser Ser Asn Ile Arg Arg Ile Ile CysIle Ser Asp Phe Glu Ile Pro Ser Ser Asn Ile Arg Arg Ile Ile Cys

115 120 125115 120 125

Ser Ala Ser Gly Gly Phe Pro Glu Pro His Leu Ser Trp Leu Glu AsnSer Ala Ser Gly Gly Phe Pro Glu Pro His Leu Ser Trp Leu Glu Asn

130 135 140130 135 140

Gly Glu Glu Leu Asn Ala Ile Asn Thr Thr ValGly Glu Glu Leu Asn Ala Ile Asn Thr Thr Val

Ser Gln Asp Pro GluSer Gln Asp Pro Glu

- 296 044346- 296 044346

145145

150150

155155

Thr Glu Leu Tyr Ala Val Ser Ser LysThr Glu Leu Tyr Ala Val Ser Ser Lys

165165

Leu Asp Phe Asn Met ThrLeu Asp Phe Asn Met Thr

170 175170 175

Asn His Ser Phe Met Cys Leu Ile LysAsn His Ser Phe Met Cys Leu Ile Lys

180 185180 185

Tyr Gly His Leu Arg ValTyr Gly His Leu Arg Val

190190

Gln Thr Phe Asn Trp Asn Thr Thr LysGln Thr Phe Asn Trp Asn Thr Thr Lys

195 200195 200

Gln Glu His Phe Pro AspGln Glu His Phe Pro Asp

205205

160160

ThrThr

AsnAsn

Asn <210> 80 <211> 208 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Asn <210> 80 <211> 208 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> CD80 v26 ECD < 400> 80< 223 > CD80 v26 ECD < 400 > 80

Val Ile His Val ThrVal Ile His Val Thr

55

Lys Glu Val Lys GluLys Glu Val Lys Glu

Val Ala Thr Leu SerVal Ala Thr Leu Ser

Gly His Asn Val Ser 20Gly His Asn Val Ser 20

Val Glu Glu Leu AlaVal Glu Glu Leu Ala

Gln Thr Arg Ile TyrGln Thr Arg Ile Tyr

Gln Lys Glu Lys Lys 35Gln Lys Glu Lys Lys 35

Met Val Leu Thr MetMet Val Leu Thr Met

Met Ser Gly Asp Met 45Met Ser Gly Asp Met 45

Ile Trp Pro Glu Tyr 50Ile Trp Pro Glu Tyr 50

Lys Asn Arg Thr Ile 55Lys Asn Arg Thr Ile 55

Phe Asp Ile Thr Asn 60Phe Asp Ile Thr Asn 60

Leu Ser Ile Ala Ile 65Leu Ser Ile Ala Ile 65

Leu Ala Leu Arg Pro 70Leu Ala Leu Arg Pro 70

Ser Asp Glu Gly Thr 75Ser Asp Glu Gly Thr 75

Glu Cys Val Val Leu 85Glu Cys Val Val Leu 85

Lys Tyr Glu Lys Asp 90Lys Tyr Glu Lys Asp 90

Ala Phe Lys Arg Glu 95Ala Phe Lys Arg Glu 95

Leu Ala Glu Val ThrLeu Ala Glu Val Thr

100100

Leu Ser Val Lys AlaLeu Ser Val Lys Ala

105105

Asp Phe Pro Ala ProAsp Phe Pro Ala Pro

110110

Ile Ser Asp Phe GluIle Ser Asp Phe Glu

115115

Ile Pro Thr Ser AsnIle Pro Thr Ser Asn

120120

Ile Arg Arg Ile IleIle Arg Arg Ile Ile

125125

Ser Thr Ser Gly Gly 130Ser Thr Ser Gly Gly 130

Phe Pro Glu Pro HisPhe Pro Glu Pro His

135135

Leu Ser Trp Leu Glu 140Leu Ser Trp Leu Glu 140

CysCys

TrpTrp

AsnAsn

AsnAsn

Tyr 80Tyr 80

HisHis

SerSer

CysCys

AsnAsn

GluGlu

160160

Gly Glu Glu Leu Asn 145Gly Glu Glu Leu Asn 145

Ala Ile Asn Thr Thr 150Ala Ile Asn Thr Thr 150

Val Ser Gln Asp ProVal Ser Gln Asp Pro

155155

- 297 044346- 297 044346

Thr Glu Leu Tyr Ala Val Ser Ser 165Thr Glu Leu Tyr Ala Val Ser Ser 165

Asn His Ser Phe Met Cys Leu Ile 180Asn His Ser Phe Met Cys Leu Ile 180

Gln Thr Phe Asn Trp Asn Thr Thr 195200Gln Thr Phe Asn Trp Asn Thr Thr 195200

Lys Leu Asp Phe Asn Met ThrLys Leu Asp Phe Asn Met Thr

170175170175

Lys Tyr Gly His Leu Arg ValLys Tyr Gly His Leu Arg Val

185190185190

Lys Gln Glu His Phe Pro AspLys Gln Glu His Phe Pro Asp

205205

ThrThr

AsnAsn

Asn <210> 81 < 211> 208 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Asn <210> 81 <211> 208 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> CD80 v27 ECD <400> 81<223> CD80 v27 ECD <400> 81

Val Ile His Val ThrVal Ile His Val Thr

55

Lys Glu Val Lys GluLys Glu Val Lys Glu

Val Ala Thr Leu SerVal Ala Thr Leu Ser

Gly His Asn Val Ser 20Gly His Asn Val Ser 20

Val Glu Glu Leu AlaVal Glu Glu Leu Ala

Gln Thr Arg Ile Tyr 30Gln Thr Arg Ile Tyr 30

Gln Lys Glu Lys Lys 35Gln Lys Glu Lys Lys 35

Met Val Leu Thr MetMet Val Leu Thr Met

Met Ser Gly Asp Met 45Met Ser Gly Asp Met 45

Ile Trp Pro Glu Tyr 50Ile Trp Pro Glu Tyr 50

Lys Asn Arg Thr Ile 55Lys Asn Arg Thr Ile 55

Phe Asp Ile Thr Asn 60Phe Asp Ile Thr Asn 60

Leu His Ile Val Ile 65Leu His Ile Val Ile 65

Leu Ala Leu Arg Pro 70Leu Ala Leu Arg Pro 70

Ser Asp Glu Gly Thr 75Ser Asp Glu Gly Thr 75

Glu Cys Val Val Leu 85Glu Cys Val Val Leu 85

Lys Tyr Glu Lys Gly 90Lys Tyr Glu Lys Gly 90

Ala Phe Lys Arg Glu 95Ala Phe Lys Arg Glu 95

Leu Ala Glu Val ThrLeu Ala Glu Val Thr

100100

Leu Ser Val Lys AlaLeu Ser Val Lys Ala

105105

Asp Phe Pro Ala ProAsp Phe Pro Ala Pro

110110

Ile Ser Asp Leu Glu 115Ile Ser Asp Leu Glu 115

Ile Pro Thr Ser AsnIle Pro Thr Ser Asn

120120

Ile Arg Arg Ile IleIle Arg Arg Ile Ile

125125

Ser Thr Ser Gly Gly 130Ser Thr Ser Gly Gly 130

Phe Pro Glu Pro HisPhe Pro Glu Pro His

135135

Leu Ser Trp Leu Glu 140Leu Ser Trp Leu Glu 140

CysCys

TrpTrp

AsnAsn

AsnAsn

Tyr 80Tyr 80

HisHis

SerSer

CysCys

AsnAsn

GluGlu

160160

Gly Glu Glu Leu Asn 145Gly Glu Glu Leu Asn 145

Ala Ile Asn Thr Thr 150Ala Ile Asn Thr Thr 150

Val Ser Gln Asp ProVal Ser Gln Asp Pro

155155

- 298 044346- 298 044346

Thr Glu Leu Tyr Ala Val Ser Ser LysThr Glu Leu Tyr Ala Val Ser Ser Lys

165165

Leu Asp Phe Asn Met ThrLeu Asp Phe Asn Met Thr

170 175170 175

Asn His Ser Phe Met Cys Leu Ile LysAsn His Ser Phe Met Cys Leu Ile Lys

180 185180 185

Tyr Gly His Leu Arg ValTyr Gly His Leu Arg Val

190190

Gln Thr Phe Asn Trp Asn Thr Thr LysGln Thr Phe Asn Trp Asn Thr Thr Lys

195 200195 200

Gln Glu His Phe Pro AspGln Glu His Phe Pro Asp

205205

ThrThr

AsnAsn

Asn <210> 82 <211> 208 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Asn <210> 82 <211> 208 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> CD80 v28 ECD < 400> 82<223>CD80 v28 ECD <400>82

Val Ile His Val ThrVal Ile His Val Thr

55

Lys Glu Val Lys GluLys Glu Val Lys Glu

Val Ala Thr Leu SerVal Ala Thr Leu Ser

Gly His Asn Val Ser 20Gly His Asn Val Ser 20

Val Glu Glu Leu AlaVal Glu Glu Leu Ala

Gln Thr His Ile Tyr 30Gln Thr His Ile Tyr 30

Gln Lys Glu Lys Lys 35Gln Lys Glu Lys Lys 35

Met Val Leu Thr MetMet Val Leu Thr Met

Met Ser Gly Asp Met 45Met Ser Gly Asp Met 45

Ile Trp Pro Gly Tyr 50Ile Trp Pro Gly Tyr 50

Lys Asn Arg Thr Ile 55Lys Asn Arg Thr Ile 55

Phe Asp Ile Thr Asn 60Phe Asp Ile Thr Asn 60

Leu Ser Ile Val Ile 65Leu Ser Ile Val Ile 65

Leu Ala Leu Arg Pro 70Leu Ala Leu Arg Pro 70

Ser Asp Glu Gly Thr 75Ser Asp Glu Gly Thr 75

Glu Cys Val Val Leu 85Glu Cys Val Val Leu 85

Lys Tyr Glu Lys Asp 90Lys Tyr Glu Lys Asp 90

Ala Phe Lys Arg Glu 95Ala Phe Lys Arg Glu 95

Leu Ala Glu Val ThrLeu Ala Glu Val Thr

100100

Leu Ser Val Lys AlaLeu Ser Val Lys Ala

105105

Asp Phe Pro Thr ProAsp Phe Pro Thr Pro

110110

Ile Ser Asp Phe GluIle Ser Asp Phe Glu

115115

Ile Pro Ser Ser AsnIle Pro Ser Ser Asn

120120

Ile Arg Arg Ile IleIle Arg Arg Ile Ile

125125

Ser Ala Ser Gly Gly 130Ser Ala Ser Gly Gly 130

Phe Pro Glu Pro HisPhe Pro Glu Pro His

135135

Leu Ser Trp Leu Glu 140Leu Ser Trp Leu Glu 140

CysCys

TrpTrp

AsnAsn

AsnAsn

Tyr 80Tyr 80

HisHis

SerSer

CysCys

AsnAsn

GluGlu

160160

Gly Glu Glu Leu Asn 145Gly Glu Glu Leu Asn 145

Ala Ile Asn Thr Thr 150Ala Ile Asn Thr Thr 150

Val Ser Gln Asp ProVal Ser Gln Asp Pro

155155

- 299 044346- 299 044346

Thr Glu Leu Tyr Ala Val Ser Ser LysThr Glu Leu Tyr Ala Val Ser Ser Lys

165165

Leu Asp Phe Asn Met ThrLeu Asp Phe Asn Met Thr

170 175170 175

Asn His Ser Phe Met Cys Leu Ile LysAsn His Ser Phe Met Cys Leu Ile Lys

180 185180 185

Tyr Gly His Leu Arg ValTyr Gly His Leu Arg Val

190190

Gln Thr Phe Asn Trp Asn Thr Thr LysGln Thr Phe Asn Trp Asn Thr Thr Lys

195 200195 200

Gln Glu His Phe Pro AspGln Glu His Phe Pro Asp

205205

ThrThr

AsnAsn

Asn <210> 83 <211> 208 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Asn <210> 83 <211> 208 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> CD80 v29 ECD < 400> 83<223>CD80 v29 ECD <400>83

Val Ile His Val ThrVal Ile His Val Thr

55

Lys Glu Val Lys GluLys Glu Val Lys Glu

Val Ala Thr Leu SerVal Ala Thr Leu Ser

Gly His Asn Val Ser 20Gly His Asn Val Ser 20

Val Glu Glu Leu AlaVal Glu Glu Leu Ala

Gln Thr Arg Ile Tyr 30Gln Thr Arg Ile Tyr 30

Gln Lys Glu Lys Lys 35Gln Lys Glu Lys Lys 35

Met Val Leu Thr MetMet Val Leu Thr Met

Met Ser Gly Asp Met 45Met Ser Gly Asp Met 45

Ile Trp Pro Glu Tyr 50Ile Trp Pro Glu Tyr 50

Lys Asn Arg Thr Ile 55Lys Asn Arg Thr Ile 55

Phe Asp Ile Thr Asn 60Phe Asp Ile Thr Asn 60

Leu Ser Ile Val Ile 65Leu Ser Ile Val Ile 65

Leu Ala Leu Arg Pro 70Leu Ala Leu Arg Pro 70

Ser Asp Glu Gly Thr 75Ser Asp Glu Gly Thr 75

Glu Cys Val Val Leu 85Glu Cys Val Val Leu 85

Lys Tyr Glu Lys Asp 90Lys Tyr Glu Lys Asp 90

Gly Phe Lys Arg Glu 95Gly Phe Lys Arg Glu 95

Leu Ala Glu Val ThrLeu Ala Glu Val Thr

100100

Ser Ser Val Lys AlaSer Ser Val Lys Ala

105105

Asp Phe Pro Thr ProAsp Phe Pro Thr Pro

110110

Ile Ser Asp Phe GluIle Ser Asp Phe Glu

115115

Ile Pro Thr Ser AsnIle Pro Thr Ser Asn

120120

Ile Arg Arg Ile IleIle Arg Arg Ile Ile

125125

Ser Thr Ser Gly GlySer Thr Ser Gly Gly

130130

Phe Pro Glu Pro HisPhe Pro Glu Pro His

135135

Leu Ser Trp Leu GluLeu Ser Trp Leu Glu

140140

Gly Glu Glu Leu Asn 145Gly Glu Glu Leu Asn 145

Ala Ile Asn Thr Thr 150Ala Ile Asn Thr Thr 150

Val Ser Gln Asp Pro 155Val Ser Gln Asp Pro 155

CysCys

TrpTrp

AsnAsn

AsnAsn

Tyr 80Tyr 80

HisHis

SerSer

CysCys

AsnAsn

Glu 160Glu 160

ThrThr

Thr Glu Leu Tyr AlaThr Glu Leu Tyr Ala

Val Ser Ser Lys LeuVal Ser Ser Lys Leu

Asp Phe Asn Met ThrAsp Phe Asn Met Thr

- 300 044346- 300 044346

165 165 170 170 175 175 Asn His Asn His Ser Phe Met Cys Leu Ser Phe Met Cys Leu Ile Lys Tyr Gly His Ile Lys Tyr Gly His Leu Arg Val Asn Leu Arg Val Asn 180 180 185 185 190 190 Gln Thr Gln Thr Phe Asn Trp Asn Thr Phe Asn Trp Asn Thr Thr Lys Gln Glu His Thr Lys Gln Glu His Phe Pro Asp Asn Phe Pro Asp Asn 195 195 200 200 205 205

<210> 84 <211> 208 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220><210> 84 <211> 208 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> CD80 v30 ECD <400> 84<223> CD80 v30 ECD <400> 84

Val Ile His Val 1Val Ile His Val 1

Thr Lys Glu Val 5Thr Lys Glu Val 5

Lys Glu Val Ala Thr Leu Ser CysLys Glu Val Ala Thr Leu Ser Cys

1515

Gly His Asn Val 20Gly His Asn Val 20

Ser Val Glu GluSer Val Glu Glu

Leu Ala Gln Thr Arg Ile Tyr Trp 25 30Leu Ala Gln Thr Arg Ile Tyr Trp 25 30

Gln Lys Glu LysGln Lys Glu Lys

Lys Met Val Leu 40Lys Met Val Leu 40

Ile Trp Pro Glu 50Ile Trp Pro Glu 50

Tyr Lys Asn ArgTyr Lys Asn Arg

Thr Met Met Ser Gly Asp Met Asn 45Thr Met Met Ser Gly Asp Met Asn 45

Thr Ile Phe Asp Ile Thr Asn Asn 60Thr Ile Phe Asp Ile Thr Asn Asn 60

Leu Ser Thr Val 65Leu Ser Thr Val 65

Glu Cys Val ValGlu Cys Val Val

Leu Ala Glu ValLeu Ala Glu Val

100100

IleIle

Leu 85Leu 85

ThrThr

Gln Ala Leu Arg Pro Ser Asp Glu Gly Thr Tyr 70 75 80Gln Ala Leu Arg Pro Ser Asp Glu Gly Thr Tyr 70 75 80

Lys Tyr Glu Lys Asp Gly Phe Lys Arg Glu His 90 95Lys Tyr Glu Lys Asp Gly Phe Lys Arg Glu His 90 95

Leu Ser Val Lys Ala Asp Phe Pro Thr Pro SerLeu Ser Val Lys Ala Asp Phe Pro Thr Pro Ser

105 110105 110

Ile Ser AspIle Ser Asp

115115

Phe Glu IlePhe Glu Ile

Pro Ser Ser Asn Ile Arg Arg Ile Ile CysPro Ser Ser Asn Ile Arg Arg Ile Ile Cys

120 125120 125

Ser Thr SerSer Thr Ser

130130

Gly Gly PheGly Gly Phe

Pro Glu Pro His Leu Ser Trp Leu Glu Asn 135 140Pro Glu Pro His Leu Ser Trp Leu Glu Asn 135 140

Gly Glu Glu 145Gly Glu Glu 145

Leu Asn AlaLeu Asn Ala

150150

Ile Asn Thr Thr Val Ser Gln Asp Pro GluIle Asn Thr Thr Val Ser Gln Asp Pro Glu

155 160155 160

Thr Glu LeuThr Glu Leu

Ser Ser Lys Leu Asp Phe Asn Met Thr ThrSer Ser Lys Leu Asp Phe Asn Met Thr Thr

170 175170 175

Tyr Ala ValTyr Ala Val

165165

- 301 044346- 301 044346

Asn His Ser Phe Met Cys Leu IleAsn His Ser Phe Met Cys Leu Ile

180180

Lys Tyr Gly His Leu Arg Val AsnLys Tyr Gly His Leu Arg Val Asn

185 190185 190

Gln Thr Phe Asn Trp Asn Thr ThrGln Thr Phe Asn Trp Asn Thr Thr

195195

200200

Lys Gln Glu His Phe Pro Asp AsnLys Gln Glu His Phe Pro Asp Asn

205 <210> 85 <211> 208 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>205 <210> 85 <211> 208 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> CD80 v31 ECD < 400> 85<223>CD80 v31 ECD <400>85

Val Ile His Val 1Val Ile His Val 1

Thr Lys Glu Val 5Thr Lys Glu Val 5

Lys Glu Val Ala Thr Leu Ser CysLys Glu Val Ala Thr Leu Ser Cys

1515

Gly His Asn Val 20Gly His Asn Val 20

Ser Val Glu GluSer Val Glu Glu

Leu Ala Gln Thr Arg Ile Tyr TrpLeu Ala Gln Thr Arg Ile Tyr Trp

30thirty

Gln Lys Glu Lys 35Gln Lys Glu Lys 35

Lys Met Val Leu 40Lys Met Val Leu 40

Thr Met Met Ser Gly Asp Met Asn 45Thr Met Met Ser Gly Asp Met Asn 45

Ile Trp Pro Glu 50Ile Trp Pro Glu 50

Leu Ser Ile Val 65Leu Ser Ile Val 65

Glu Cys Val ValGlu Cys Val Val

Leu Ala Glu ValLeu Ala Glu Val

100100

TyrTyr

IleIle

Leu 85Leu 85

ThrThr

Lys Asn Arg Thr Ile Phe Asp Ile Thr Asn AsnLys Asn Arg Thr Ile Phe Asp Ile Thr Asn Asn

6060

Gln Ala Leu Arg Pro Ser Asp Glu Gly Thr Tyr 70 75 80Gln Ala Leu Arg Pro Ser Asp Glu Gly Thr Tyr 70 75 80

Lys Tyr Glu Lys Asp Gly Phe Lys Arg Glu His 90 95Lys Tyr Glu Lys Asp Gly Phe Lys Arg Glu His 90 95

Leu Ser Val Lys Ala Asp Phe Pro Ala Pro SerLeu Ser Val Lys Ala Asp Phe Pro Ala Pro Ser

105 110105 110

Ile Ser Asp Phe Glu Ile Pro SerIle Ser Asp Phe Glu Ile Pro Ser

115 120115 120

Ser Ala Ser Gly Gly Phe Pro GluSer Ala Ser Gly Gly Phe Pro Glu

130 135130 135

Ser Asn Ile Arg Arg Ile Ile Cys 125Ser Asn Ile Arg Arg Ile Ile Cys 125

Pro His Leu Ser Trp Leu Glu Asn 140Pro His Leu Ser Trp Leu Glu Asn 140

Gly Glu Glu Leu Asn Ala Ile AsnGly Glu Glu Leu Asn Ala Ile Asn

145 150145 150

Thr Thr Val Ser Gln Asp Pro GluThr Thr Val Ser Gln Asp Pro Glu

155 160155 160

Thr Glu Leu Tyr Ala Val Ser SerThr Glu Leu Tyr Ala Val Ser Ser

165165

Lys Leu Asp Phe Asn Met Thr ThrLys Leu Asp Phe Asn Met Thr Thr

170 175170 175

- 302 044346- 302 044346

Asn His Ser Phe Met Cys Leu IleAsn His Ser Phe Met Cys Leu Ile

180180

Lys Tyr Gly His Leu Arg ValLys Tyr Gly His Leu Arg Val

185 190185 190

Gln Thr Phe Asn Trp Asn Thr Thr Lys Gln Glu His Phe Pro AspGln Thr Phe Asn Trp Asn Thr Thr Lys Gln Glu His Phe Pro Asp

195 200 205195 200 205

AsnAsn

Asn <210> 86 <211> 208 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Asn <210> 86 <211> 208 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> CD80 v32 ECD < 400> 86<223>CD80 v32 ECD <400>86

Val Ile His Val ThrVal Ile His Val Thr

55

Lys Glu Val Lys GluLys Glu Val Lys Glu

Val Ala Thr Leu SerVal Ala Thr Leu Ser

Gly His Asn Val Ser 20Gly His Asn Val Ser 20

Val Glu Glu Leu AlaVal Glu Glu Leu Ala

Gln Thr Arg Ile Tyr 30Gln Thr Arg Ile Tyr 30

Gln Lys Glu Lys Lys 35Gln Lys Glu Lys Lys 35

Val Val Leu Asp Met 40Val Val Leu Asp Met 40

Ile Ser Gly Asp Met 45Ile Ser Gly Asp Met 45

Ile Gly Pro Glu Tyr 50Ile Gly Pro Glu Tyr 50

Lys Asn Arg Thr Ile 55Lys Asn Arg Thr Ile 55

Phe Asp Ile Thr Asn 60Phe Asp Ile Thr Asn 60

Leu Ser Ile Val Ile 65Leu Ser Ile Val Ile 65

Leu Ala Leu Arg Pro 70Leu Ala Leu Arg Pro 70

Ser Gly Glu Gly Thr 75Ser Gly Glu Gly Thr 75

Glu Cys Ala Val Leu 85Glu Cys Ala Val Leu 85

Lys Tyr Glu Glu Asp 90Lys Tyr Glu Glu Asp 90

Ala Phe Lys Arg Glu 95Ala Phe Lys Arg Glu 95

Leu Ala Glu Val ThrLeu Ala Glu Val Thr

100100

Leu Ser Val Lys AlaLeu Ser Val Lys Ala

105105

Asp Phe Pro Thr ProAsp Phe Pro Thr Pro

110110

Ile Ser Asp Phe GluIle Ser Asp Phe Glu

115115

Ile Pro Ser Ser AsnIle Pro Ser Ser Asn

120120

Ile Arg Arg Ile IleIle Arg Arg Ile Ile

125125

Ser Ala Ser Gly Gly 130Ser Ala Ser Gly Gly 130

Phe Pro Glu Pro HisPhe Pro Glu Pro His

135135

Leu Ser Trp Leu Glu 140Leu Ser Trp Leu Glu 140

Gly Glu Glu Leu Asn 145Gly Glu Glu Leu Asn 145

Ala Ile Asn Thr Thr 150Ala Ile Asn Thr Thr 150

Val Ser Gln Asp Pro 155Val Ser Gln Asp Pro 155

Thr Glu Leu Tyr AlaThr Glu Leu Tyr Ala

165165

Val Ser Ser Lys LeuVal Ser Ser Lys Leu

170170

Asp Phe Asn Met ThrAsp Phe Asn Met Thr

175175

CysCys

TrpTrp

AsnAsn

AsnAsn

Tyr 80Tyr 80

HisHis

SerSer

CysCys

AsnAsn

Glu 160Glu 160

ThrThr

- 303 044346- 303 044346

Asn His Ser Phe Met Cys Leu IleAsn His Ser Phe Met Cys Leu Ile

180180

Lys Tyr Gly His Leu Arg ValLys Tyr Gly His Leu Arg Val

185 190185 190

Gln Thr Phe Asn Trp Asn Thr Thr Lys Gln Glu His Phe Pro AspGln Thr Phe Asn Trp Asn Thr Thr Lys Gln Glu His Phe Pro Asp

195 200 205195 200 205

AsnAsn

Asn <210> 87 <211> 208 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Asn <210> 87 <211> 208 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> CD80 v33 ECD < 400> 87<223> CD80 v33 ECD <400> 87

Val Ile His Val ThrVal Ile His Val Thr

55

Lys Glu Val Lys GluLys Glu Val Lys Glu

Val Ala Thr Leu SerVal Ala Thr Leu Ser

Gly His Asn Val Ser 20Gly His Asn Val Ser 20

Ala Glu Glu Leu AlaAla Glu Glu Leu Ala

Gln Thr Arg Ile Tyr 30Gln Thr Arg Ile Tyr 30

Gln Lys Glu Lys Lys 35Gln Lys Glu Lys Lys 35

Met Val Leu Thr MetMet Val Leu Thr Met

Met Ser Gly Asp Met 45Met Ser Gly Asp Met 45

Ile Trp Pro Glu Tyr 50Ile Trp Pro Glu Tyr 50

Lys Asn Arg Thr Ile 55Lys Asn Arg Thr Ile 55

Phe Asp Ile Thr Asn 60Phe Asp Ile Thr Asn 60

Leu Ser Ile Val Ile 65Leu Ser Ile Val Ile 65

Gln Ala Leu Arg Pro 70Gln Ala Leu Arg Pro 70

Ser Asp Glu Gly Thr 75Ser Asp Glu Gly Thr 75

Glu Cys Val Val Leu 85Glu Cys Val Val Leu 85

Lys Tyr Glu Lys Asp 90Lys Tyr Glu Lys Asp 90

Ala Phe Lys Arg Glu 95Ala Phe Lys Arg Glu 95

Leu Ala Glu Val ThrLeu Ala Glu Val Thr

100100

Leu Ser Val Lys AlaLeu Ser Val Lys Ala

105105

Asp Phe Pro Thr ProAsp Phe Pro Thr Pro

110110

Ile Ser Asp Phe GluIle Ser Asp Phe Glu

115115

Ile Pro Thr Pro AsnIle Pro Thr Pro Asn

120120

Ile Arg Arg Ile IleIle Arg Arg Ile Ile

125125

Ser Thr Ser Gly Gly 130Ser Thr Ser Gly Gly 130

Phe Pro Glu Pro HisPhe Pro Glu Pro His

135135

Leu Ser Trp Leu Glu 140Leu Ser Trp Leu Glu 140

Gly Glu Glu Leu Asn 145Gly Glu Glu Leu Asn 145

Ala Ile Asn Thr Thr 150Ala Ile Asn Thr Thr 150

Val Ser Gln Asp Pro 155Val Ser Gln Asp Pro 155

Thr Glu Leu Tyr AlaThr Glu Leu Tyr Ala

165165

Val Ser Ser Lys LeuVal Ser Ser Lys Leu

170170

Asp Phe Asn Met ThrAsp Phe Asn Met Thr

175175

CysCys

TrpTrp

AsnAsn

AsnAsn

Tyr 80Tyr 80

HisHis

SerSer

CysCys

AsnAsn

Glu 160Glu 160

ThrThr

AsnAsn

Asn His Ser Phe MetAsn His Ser Phe Met

Cys Leu Ile Lys TyrCys Leu Ile Lys Tyr

Gly His Leu Arg ValGly His Leu Arg Val

- 304 044346- 304 044346

180180

185185

190190

Gln Thr Phe Asn Trp Asn Thr Thr Lys Gln Glu His Phe Pro AspGln Thr Phe Asn Trp Asn Thr Thr Lys Gln Glu His Phe Pro Asp

195 200 205195 200 205

Asn <210> 88 <211> 208 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Asn <210> 88 <211> 208 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> CD80 v34 ECD < 400> 88<223>CD80 v34 ECD <400>88

Val Ile His Val ThrVal Ile His Val Thr

55

Lys Glu Val Lys GluLys Glu Val Lys Glu

Val Val Thr Leu PheVal Val Thr Leu Phe

Gly His Asn Val Ser 20Gly His Asn Val Ser 20

Val Glu Glu Leu AlaVal Glu Glu Leu Ala

Gln Thr Arg Ile His 30Gln Thr Arg Ile His 30

Gln Lys Glu Lys Lys 35Gln Lys Glu Lys Lys 35

Met Val Leu Gly Met 40Met Val Leu Gly Met 40

Met Ser Gly Asp Met 45Met Ser Gly Asp Met 45

Ile Trp Pro Glu Tyr 50Ile Trp Pro Glu Tyr 50

Lys Asn Arg Thr Ile 55Lys Asn Arg Thr Ile 55

Phe Asp Ile Thr Asn 60Phe Asp Ile Thr Asn 60

Leu Ser Ile Val Ile 65Leu Ser Ile Val Ile 65

Leu Ala Leu Arg Pro 70Leu Ala Leu Arg Pro 70

Ser Asp Glu Gly Thr 75Ser Asp Glu Gly Thr 75

Glu Cys Val Val Leu 85Glu Cys Val Val Leu 85

Lys Tyr Glu Lys Asp 90Lys Tyr Glu Lys Asp 90

Ala Phe Lys Arg Glu 95Ala Phe Lys Arg Glu 95

Leu Ala Glu Val ThrLeu Ala Glu Val Thr

100100

Leu Ser Val Lys AlaLeu Ser Val Lys Ala

105105

Asp Phe Pro Thr ProAsp Phe Pro Thr Pro

110110

Ile Ser Asp Phe Glu 115Ile Ser Asp Phe Glu 115

Ile Pro Thr Ser AsnIle Pro Thr Ser Asn

120120

Ile Arg Arg Ile IleIle Arg Arg Ile Ile

125125

Ser Ala Ser Gly GlySer Ala Ser Gly Gly

130130

Phe Pro Glu Leu HisPhe Pro Glu Leu His

135135

Leu Ser Trp Leu Glu 140Leu Ser Trp Leu Glu 140

Gly Glu Glu Leu Asn 145Gly Glu Glu Leu Asn 145

Ala Ile Thr Thr Thr 150Ala Ile Thr Thr Thr 150

Val Ser Gln Asp Pro 155Val Ser Gln Asp Pro 155

Thr Glu Leu Tyr AlaThr Glu Leu Tyr Ala

165165

Val Ser Ser Lys LeuVal Ser Ser Lys Leu

170170

Asp Phe Asn Met ThrAsp Phe Asn Met Thr

175175

Asn His Ser Phe MetAsn His Ser Phe Met

180180

Cys Leu Ile Lys TyrCys Leu Ile Lys Tyr

185185

Gly His Leu Arg ValGly His Leu Arg Val

190190

CysCys

TrpTrp

AsnAsn

AsnAsn

Tyr 80Tyr 80

HisHis

SerSer

CysCys

AsnAsn

Glu 160Glu 160

ThrThr

AsnAsn

- 305 044346- 305 044346

Gln Thr Phe Asn Trp Asn Thr Thr Lys Gln GluGln Thr Phe Asn Trp Asn Thr Thr Lys Gln Glu

His Phe Pro Asp AsnHis Phe Pro Asp Asn

195 200195 200

205 <210> 89 <211> 208 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>205 <210> 89 <211> 208 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> CD80 v35 ECD <400> 89<223> CD80 v35 ECD <400> 89

Val 1 Val 1 Ile Ile His His Val Val Thr 5 Thr 5 Lys Lys Glu Glu Val Val Lys Lys Glu 10 Glu 10 Val Val Ala Ala Thr Thr Leu Leu Ser 15 Ser 15 Cys Cys Gly Gly His His Asn Asn Val 20 Val 20 Ser Ser Val Val Glu Glu Glu Glu Leu 25 Leu 25 Ala Ala Gln Gln Thr Thr Arg Arg Ile 30 Ile 30 Tyr Tyr Trp Trp Gln Gln Lys Lys Glu 35 Glu 35 Lys Lys Lys Lys Met Met Val Val Leu 40 Leu 40 Thr Thr Met Met Met Met Ser Ser Gly 45 Gly 45 Asp Asp Met Met Asn Asn Ile Ile Trp 50 Trp 50 Pro Pro Glu Glu Tyr Tyr Lys Lys Asn 55 Asn 55 Arg Arg Thr Thr Ile Ile Phe Phe Asp 60 Asp 60 Ile Ile Thr Thr Asn Asn Asn Asn Leu 65 Leu 65 Ser Ser Phe Phe Val Val Ile Ile Arg 70 Arg 70 Ala Ala Leu Leu Arg Arg Pro Pro Ser 75 Ser 75 Asp Asp Glu Glu Gly Gly Thr Thr Tyr 80 Tyr 80 Glu Glu Cys Cys Val Val Val Val Leu 85 Leu 85 Lys Lys Tyr Tyr Gly Gly Lys Lys Asp 90 Asp 90 Gly Gly Phe Phe Lys Lys Arg Arg Glu 95 Glu 95 His His Leu Leu Ala Ala Glu Glu Val 100 Val 100 Thr Thr Leu Leu Ser Ser Val Val Lys 105 Lys 105 Ala Ala Asp Asp Phe Phe Pro Pro Thr 110 Thr 110 Pro Pro Ser Ser Ile Ile Ser Ser Asp 115 Asp 115 Phe Phe Glu Glu Ile Ile Pro Pro Ser 120 Ser 120 Ser Ser Asn Asn Ile Ile Arg Arg Arg 125 Arg 125 Ile Ile Ile Ile Cys Cys Ser Ser Ala 130 Ala 130 Ser Ser Gly Gly Gly Gly Phe Phe Pro 135 Pro 135 Glu Glu Pro Pro His His Leu Leu Ser 140 Ser 140 Trp Trp Leu Leu Glu Glu Asn Asn Gly 145 Gly 145 Glu Glu Glu Glu Leu Leu Asn Asn Ala 150 Ala 150 Ile Ile Asn Asn Thr Thr Thr Thr Val 155 Val 155 Ser Ser Gln Gln Asp Asp Pro Pro Glu 160 Glu 160 Thr Thr Glu Glu Leu Leu Tyr Tyr Ala 165 Ala 165 Val Val Ser Ser Ser Ser Lys Lys Leu 170 Leu 170 Asp Asp Phe Phe Asn Asn Met Met Thr 175 Thr 175 Thr Thr Asn Asn His His Ser Ser Phe 180 Phe 180 Met Met Cys Cys Leu Leu Ile Ile Lys 185 Lys 185 Tyr Tyr Gly Gly His His Leu Leu Arg 190 Arg 190 Val Val Asn Asn

- 306 044346- 306 044346

Gln Thr Phe Asn Trp Asn Thr Thr Lys Gln Glu His Phe Pro AspGln Thr Phe Asn Trp Asn Thr Thr Lys Gln Glu His Phe Pro Asp

195 200 205195 200 205

Asn <210> 90 <211> 208 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Asn <210> 90 <211> 208 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> CD80 v36 ECD < 400> 90< 223 > CD80 v36 ECD < 400 > 90

Val Ile His Val ThrVal Ile His Val Thr

55

Lys Glu Val Lys GluLys Glu Val Lys Glu

Val Ala Thr Leu SerVal Ala Thr Leu Ser

Gly His Asn Val Ser 20Gly His Asn Val Ser 20

Val Glu Gly Pro AlaVal Glu Gly Pro Ala

Gln Thr Arg Ile TyrGln Thr Arg Ile Tyr

Gln Lys Glu Lys Lys 35Gln Lys Glu Lys Lys 35

Met Val Leu Thr MetMet Val Leu Thr Met

Met Ser Gly Asp Met 45Met Ser Gly Asp Met 45

Ile Trp Pro Glu Tyr 50Ile Trp Pro Glu Tyr 50

Lys Asn Arg Thr Ile 55Lys Asn Arg Thr Ile 55

Phe Asp Ile Thr Asn 60Phe Asp Ile Thr Asn 60

Leu Ser Ile Val Ile 65Leu Ser Ile Val Ile 65

Gln Ala Leu Arg Pro 70Gln Ala Leu Arg Pro 70

Ser Asp Glu Gly Thr 75Ser Asp Glu Gly Thr 75

Glu Cys Val Val Leu 85Glu Cys Val Val Leu 85

Lys Tyr Glu Lys Asp 90Lys Tyr Glu Lys Asp 90

Ala Phe Lys Arg Glu 95Ala Phe Lys Arg Glu 95

Leu Ala Glu Val ThrLeu Ala Glu Val Thr

100100

Leu Ser Val Lys AlaLeu Ser Val Lys Ala

105105

Asp Phe Pro Thr ProAsp Phe Pro Thr Pro

110110

Ile Ser Asp Phe Glu 115Ile Ser Asp Phe Glu 115

Ile Pro Ser Ser AsnIle Pro Ser Ser Asn

120120

Ile Arg Arg Ile IleIle Arg Arg Ile Ile

125125

Ser Thr Ser Gly Gly 130Ser Thr Ser Gly Gly 130

Phe Pro Glu Pro HisPhe Pro Glu Pro His

135135

Leu Ser Trp Leu Glu 140Leu Ser Trp Leu Glu 140

Gly Glu Glu Leu Asn 145Gly Glu Glu Leu Asn 145

Ala Ile Asn Thr Thr 150Ala Ile Asn Thr Thr 150

Val Ser Gln Asp Pro 155Val Ser Gln Asp Pro 155

Thr Glu Leu Tyr AlaThr Glu Leu Tyr Ala

165165

Val Ser Ser Lys LeuVal Ser Ser Lys Leu

170170

Asp Phe Asn Met ThrAsp Phe Asn Met Thr

175175

Asn His Ser Phe MetAsn His Ser Phe Met

180180

Cys Leu Ile Lys TyrCys Leu Ile Lys Tyr

185185

Gly His Leu Arg ValGly His Leu Arg Val

190190

CysCys

TrpTrp

AsnAsn

AsnAsn

Tyr 80Tyr 80

HisHis

SerSer

CysCys

AsnAsn

Glu 160Glu 160

ThrThr

AsnAsn

- 307 044346- 307 044346

Gln Thr Phe Asn Trp Asn Thr Thr Lys Gln Glu His Phe Pro AspGln Thr Phe Asn Trp Asn Thr Thr Lys Gln Glu His Phe Pro Asp

195 200 205195 200 205

Asn <210> 91 <211> 208 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Asn <210> 91 <211> 208 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> CD80 v37 ECD < 400> 91<223> CD80 v37 ECD <400> 91

Val Ile His Val ThrVal Ile His Val Thr

55

Lys Glu Val Lys GluLys Glu Val Lys Glu

Val Ala Thr Leu SerVal Ala Thr Leu Ser

Gly His Asn Val Ser 20Gly His Asn Val Ser 20

Val Glu Glu Leu AlaVal Glu Glu Leu Ala

Gln Thr Arg Ile Tyr 30Gln Thr Arg Ile Tyr 30

Gln Lys Glu Lys Lys 35Gln Lys Glu Lys Lys 35

Met Val Leu Thr MetMet Val Leu Thr Met

Met Ser Gly Asp Met 45Met Ser Gly Asp Met 45

Ile Trp Pro Glu Tyr 50Ile Trp Pro Glu Tyr 50

Lys Asn Arg Thr Ile 55Lys Asn Arg Thr Ile 55

Phe Asp Ile Thr Asn 60Phe Asp Ile Thr Asn 60

Leu Ser Ile Val Ile 65Leu Ser Ile Val Ile 65

Leu Ala Leu Arg Pro 70Leu Ala Leu Arg Pro 70

Ser Asp Glu Gly Thr 75Ser Asp Glu Gly Thr 75

Glu Cys Val Val Leu 85Glu Cys Val Val Leu 85

Lys Tyr Glu Lys Asp 90Lys Tyr Glu Lys Asp 90

Gly Leu Lys Arg Glu 95Gly Leu Lys Arg Glu 95

Leu Ala Glu Val ThrLeu Ala Glu Val Thr

100100

Leu Ser Val Lys AlaLeu Ser Val Lys Ala

105105

Asp Leu Pro Thr ProAsp Leu Pro Thr Pro

110110

Ile Ser Asp Phe Glu 115Ile Ser Asp Phe Glu 115

Ile Pro Ser Ser AsnIle Pro Ser Ser Asn

120120

Ile Arg Arg Ile IleIle Arg Arg Ile Ile

125125

Ser Thr Ser Gly Gly 130Ser Thr Ser Gly Gly 130

Phe Pro Glu Pro HisPhe Pro Glu Pro His

135135

Leu Ser Trp Leu Glu 140Leu Ser Trp Leu Glu 140

Gly Glu Glu Leu Asn 145Gly Glu Glu Leu Asn 145

Ala Ile Asn Thr Thr 150Ala Ile Asn Thr Thr 150

Val Ser Gln Asp Pro 155Val Ser Gln Asp Pro 155

Thr Glu Leu Tyr AlaThr Glu Leu Tyr Ala

165165

Val Ser Ser Lys LeuVal Ser Ser Lys Leu

170170

Asp Phe Asn Met ThrAsp Phe Asn Met Thr

175175

Asn His Ser Phe MetAsn His Ser Phe Met

180180

Cys Leu Ile Lys TyrCys Leu Ile Lys Tyr

185185

Gly His Leu Arg ValGly His Leu Arg Val

190190

Gln Thr Phe Asn TrpGln Thr Phe Asn Trp

Asn Thr Thr Lys GlnAsn Thr Thr Lys Gln

Glu His Phe Pro AspGlu His Phe Pro Asp

CysCys

TrpTrp

AsnAsn

AsnAsn

Tyr 80Tyr 80

HisHis

SerSer

CysCys

AsnAsn

Glu 160Glu 160

ThrThr

AsnAsn

AsnAsn

- 308 044346- 308 044346

195195

200200

205 <210> 92 <211> 208 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>205 <210> 92 <211> 208 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> CD80 v38 ECD <400> 92<223> CD80 v38 ECD <400> 92

Val Ile His Val ThrVal Ile His Val Thr

55

Lys Glu Val Lys GluLys Glu Val Lys Glu

Val Ala Thr Leu SerVal Ala Thr Leu Ser

Gly His Asn Val Ser 20Gly His Asn Val Ser 20

Val Glu Glu Leu AlaVal Glu Glu Leu Ala

Gln Thr Asp Ile Leu 30Gln Thr Asp Ile Leu 30

His Lys Glu Gly Lys 35His Lys Glu Gly Lys 35

Ile Val Leu Ala MetIle Val Leu Ala Met

Arg Ser Gly Asp Thr 45Arg Ser Gly Asp Thr 45

Ile Trp Pro Glu Tyr 50Ile Trp Pro Glu Tyr 50

Lys Asn Arg Thr Ile 55Lys Asn Arg Thr Ile 55

Phe Asp Ile Thr Asn 60Phe Asp Ile Thr Asn 60

Leu Ser Ile Val Ile 65Leu Ser Ile Val Ile 65

Leu Ala Leu Arg Pro 70Leu Ala Leu Arg Pro 70

Ser Asp Glu Gly Thr 75Ser Asp Glu Gly Thr 75

Val Cys Val Val ArgVal Cys Val Val Arg

Lys Tyr Glu Asn Asp 90Lys Tyr Glu Asn Asp 90

Thr Pro Val Leu GluThr Pro Val Leu Glu

Leu Ala Glu Val ThrLeu Ala Glu Val Thr

100100

Leu Ser Val Lys AlaLeu Ser Val Lys Ala

105105

Asp Phe Pro Thr ProAsp Phe Pro Thr Pro

110110

Ile Ser Asp Phe Glu 115Ile Ser Asp Phe Glu 115

Thr Pro Thr Ser AsnThr Pro Thr Ser Asn

120120

Ile Arg Arg Ile IleIle Arg Arg Ile Ile

125125

Ser Thr Ser Gly Gly 130Ser Thr Ser Gly Gly 130

Phe Pro Glu Pro HisPhe Pro Glu Pro His

135135

Leu Ser Trp Leu Glu 140Leu Ser Trp Leu Glu 140

Gly Glu Glu Leu Ser 145Gly Glu Glu Leu Ser 145

Ala Ile Asn Thr Thr 150Ala Ile Asn Thr Thr 150

Val Ser Gln Asp Pro 155Val Ser Gln Asp Pro 155

Thr Glu Leu Tyr AlaThr Glu Leu Tyr Ala

165165

Val Ser Ser Lys LeuVal Ser Ser Lys Leu

170170

Asp Phe Asn Met ThrAsp Phe Asn Met Thr

175175

Asn His Ser Phe MetAsn His Ser Phe Met

180180

Cys Leu Ile Lys TyrCys Leu Ile Lys Tyr

185185

Gly His Leu Arg ValGly His Leu Arg Val

190190

Gln Thr Phe Asn Trp 195Gln Thr Phe Asn Trp 195

Asn Thr Thr Lys Gln 200Asn Thr Thr Lys Gln 200

Glu His Phe Pro AspGlu His Phe Pro Asp

205205

CysCys

TrpTrp

AsnAsn

AsnAsn

Tyr 80Tyr 80

HisHis

SerSer

CysCys

AsnAsn

Glu 160Glu 160

ThrThr

AsnAsn

AsnAsn

- 309 044346 <210> 93 <211> 208 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>- 309 044346 <210> 93 <211> 208 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> CD80 v39 ECD < 400> 93<223> CD80 v39 ECD <400> 93

Val Ile His Val 1Val Ile His Val 1

Thr Lys Glu Val 5Thr Lys Glu Val 5

Lys Glu Val Ala 10Lys Glu Val Ala 10

Thr Leu Ser Cys 15Thr Leu Ser Cys 15

Gly His Asn Val 20Gly His Asn Val 20

Ser Val Glu GluSer Val Glu Glu

Leu Ala Gln Thr 25Leu Ala Gln Thr 25

Asp Ile Leu Trp 30Asp Ile Leu Trp 30

His Lys Glu Gly 35His Lys Glu Gly 35

Lys Ile Val Leu 40Lys Ile Val Leu 40

Ala Met Arg SerAla Met Arg Ser

Gly Asp Thr Asn 45Gly Asp Thr Asn 45

Ile Trp Pro Glu 50Ile Trp Pro Glu 50

Tyr Lys Asn ArgTyr Lys Asn Arg

Thr Ile Phe Asp 60Thr Ile Phe Asp 60

Ile Thr Asn AsnIle Thr Asn Asn

Leu Ser Ile Val 65Leu Ser Ile Val 65

Ile Leu Ala LeuIle Leu Ala Leu

Arg Pro Ser AspArg Pro Ser Asp

Glu Gly Thr Tyr 80Glu Gly Thr Tyr 80

Val Cys Val ValVal Cys Val Val

Arg Lys Tyr Glu 85Arg Lys Tyr Glu 85

Asn Asp Thr Pro 90Asn Asp Thr Pro 90

Val Leu Glu HisVal Leu Glu His

Leu Ala Glu ValLeu Ala Glu Val

100100

Thr Leu Ser ValThr Leu Ser Val

Lys Ala Asp Phe 105Lys Ala Asp Phe 105

Pro Thr Pro SerPro Thr Pro Ser

110110

Ile Ser Asp PheIle Ser Asp Phe

115115

Glu Ile Pro ThrGlu Ile Pro Thr

120120

Ser Asn Ile ArgSer Asn Ile Arg

Arg Ile Ile Cys 125Arg Ile Ile Cys 125

Ser Thr Ser Gly 130Ser Thr Ser Gly 130

Gly Phe Pro GluGly Phe Pro Glu

135135

Pro His Leu SerPro His Leu Ser

140140

Trp Leu Glu SerTrp Leu Glu Ser

Gly Glu Glu Leu 145Gly Glu Glu Leu 145

Ser Ala Ile AsnSer Ala Ile Asn

150150

Thr Thr Val SerThr Thr Val Ser

155155

Gln Asp Pro GluGln Asp Pro Glu

160160

Thr Glu Leu TyrThr Glu Leu Tyr

Ala Val Ser Ser 165Ala Val Ser Ser 165

Lys Leu Asp Phe 170Lys Leu Asp Phe 170

Asn Met Thr ThrAsn Met Thr Thr

175175

Asn His Ser PheAsn His Ser Phe

180180

Met Cys Leu IleMet Cys Leu Ile

Lys Tyr Gly His 185Lys Tyr Gly His 185

Leu Arg Val Asn 190Leu Arg Val Asn 190

Gln Thr Phe AsnGln Thr Phe Asn

195195

Trp Asn Thr ThrTrp Asn Thr Thr

200200

Lys Gln Glu HisLys Gln Glu His

Phe Pro Asp Asn 205Phe Pro Asp Asn 205

- 310 044346 <210> 94 <211> 208 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>- 310 044346 <210> 94 <211> 208 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> CD80 v40 ECD <400> 94<223> CD80 v40 ECD <400> 94

Val Ile His Val ThrVal Ile His Val Thr

55

Lys Glu Val Lys GluLys Glu Val Lys Glu

Val Ala Thr Leu SerVal Ala Thr Leu Ser

Gly His Asn Val Ser 20Gly His Asn Val Ser 20

Val Glu Glu Leu AlaVal Glu Glu Leu Ala

Gln Thr Asp Ile Leu 30Gln Thr Asp Ile Leu 30

His Lys Glu Gly Lys 35His Lys Glu Gly Lys 35

Ile Val Leu Ala ThrIle Val Leu Ala Thr

Arg Ser Gly Asp Thr 45Arg Ser Gly Asp Thr 45

Ile Trp Pro Glu Tyr 50Ile Trp Pro Glu Tyr 50

Lys Asn Arg Thr Ile 55Lys Asn Arg Thr Ile 55

Phe Asp Ile Thr Asn 60Phe Asp Ile Thr Asn 60

Leu Ser Ile Val Ile 65Leu Ser Ile Val Ile 65

Leu Ala Leu Arg Pro 70Leu Ala Leu Arg Pro 70

Ser Asp Glu Gly Thr 75Ser Asp Glu Gly Thr 75

Val Cys Val Val ArgVal Cys Val Val Arg

Lys Tyr Glu Asn Asp 90Lys Tyr Glu Asn Asp 90

Thr Pro Val Leu GluThr Pro Val Leu Glu

Leu Ala Glu Val ThrLeu Ala Glu Val Thr

100100

Leu Ser Val Lys AlaLeu Ser Val Lys Ala

105105

Asp Phe Pro Thr ProAsp Phe Pro Thr Pro

110110

Ile Ser Asp Phe Glu 115Ile Ser Asp Phe Glu 115

Ile Pro Thr Ser AsnIle Pro Thr Ser Asn

120120

Ile Arg Arg Ile IleIle Arg Arg Ile Ile

125125

Ser Thr Ser Gly Gly 130Ser Thr Ser Gly Gly 130

Phe Pro Glu Pro HisPhe Pro Glu Pro His

135135

Leu Ser Trp Leu Glu 140Leu Ser Trp Leu Glu 140

Gly Glu Glu Ser Ser 145Gly Glu Glu Ser Ser 145

Ala Ile Asn Thr Thr 150Ala Ile Asn Thr Thr 150

Val Ser Gln Asp Pro 155Val Ser Gln Asp Pro 155

Thr Glu Leu Tyr AlaThr Glu Leu Tyr Ala

165165

Val Ser Ser Lys LeuVal Ser Ser Lys Leu

170170

Asp Phe Asn Met ThrAsp Phe Asn Met Thr

175175

Asn His Ser Phe MetAsn His Ser Phe Met

180180

Cys Leu Ile Lys TyrCys Leu Ile Lys Tyr

185185

Gly His Leu Arg ValGly His Leu Arg Val

190190

Gln Thr Phe Asn Trp 195Gln Thr Phe Asn Trp 195

Asn Thr Thr Lys Gln 200Asn Thr Thr Lys Gln 200

Glu His Phe Pro AspGlu His Phe Pro Asp

205205

CysCys

TrpTrp

AsnAsn

AsnAsn

Tyr 80Tyr 80

HisHis

SerSer

CysCys

AsnAsn

Glu 160Glu 160

ThrThr

AsnAsn

AsnAsn

- 311 044346 <210> 95 < 211> 208 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>- 311 044346 <210> 95 < 211> 208 < 212> PROTEIN < 213> Artificial sequence <220>

< 223> CD80 v41 ECD < 400> 95<223>CD80 v41 ECD <400>95

Val Ile His Val 1Val Ile His Val 1

Thr Lys Glu Val 5Thr Lys Glu Val 5

Lys Glu Val Ala 10Lys Glu Val Ala 10

Thr Leu Ser Cys 15Thr Leu Ser Cys 15

Gly His Asn Val 20Gly His Asn Val 20

Ser Val Glu GlySer Val Glu Gly

Leu Ala Gln Thr 25Leu Ala Gln Thr 25

Asp Ile Leu Trp 30Asp Ile Leu Trp 30

His Lys Glu Gly 35His Lys Glu Gly 35

Lys Ile Val Leu 40Lys Ile Val Leu 40

Ala Met Arg SerAla Met Arg Ser

Gly Asp Thr Asn 45Gly Asp Thr Asn 45

Ile Trp Pro Glu 50Ile Trp Pro Glu 50

Tyr Lys Asn ArgTyr Lys Asn Arg

Thr Ile Leu Asp 60Thr Ile Leu Asp 60

Ile Thr Asn AsnIle Thr Asn Asn

Leu Ser Ile Val 65Leu Ser Ile Val 65

Ile Leu Ala LeuIle Leu Ala Leu

Arg Pro Ser AspArg Pro Ser Asp

Glu Gly Thr Tyr 80Glu Gly Thr Tyr 80

Val Cys Val ValVal Cys Val Val

Arg Lys Tyr Glu 85Arg Lys Tyr Glu 85

Asn Asp Thr Pro 90Asn Asp Thr Pro 90

Val Leu Glu ArgVal Leu Glu Arg

Leu Ala Glu ValLeu Ala Glu Val

100100

Thr Leu Ser ValThr Leu Ser Val

Lys Ala Asp Phe 105Lys Ala Asp Phe 105

Pro Thr Pro SerPro Thr Pro Ser

110110

Ile Ser Asp PheIle Ser Asp Phe

115115

Glu Ile Pro ThrGlu Ile Pro Thr

120120

Ser Asn Ile ArgSer Asn Ile Arg

Arg Ile Ile Cys 125Arg Ile Ile Cys 125

Ser Thr Ser Gly 130Ser Thr Ser Gly 130

Gly Phe Pro GluGly Phe Pro Glu

135135

Pro His Leu SerPro His Leu Ser

140140

Trp Leu Glu AsnTrp Leu Glu Asn

Gly Glu Glu Leu 145Gly Glu Glu Leu 145

Ser Ala Ile AsnSer Ala Ile Asn

150150

Thr Thr Val SerThr Thr Val Ser

155155

Gln Asp Pro GluGln Asp Pro Glu

160160

Thr Glu Leu TyrThr Glu Leu Tyr

Ala Val Ser Ser 165Ala Val Ser Ser 165

Lys Leu Asp Phe 170Lys Leu Asp Phe 170

Asn Met Thr ThrAsn Met Thr Thr

175175

Asn His Ser PheAsn His Ser Phe

180180

Met Ser Leu IleMet Ser Leu Ile

Lys Tyr Gly His 185Lys Tyr Gly His 185

Leu Arg Val AsnLeu Arg Val Asn

190190

Gln Thr Phe AsnGln Thr Phe Asn

195195

Trp Asn Thr ThrTrp Asn Thr Thr

200200

Lys Gln Glu HisLys Gln Glu His

Phe Pro Asp Asn 205 <210> 96Phe Pro Asp Asn 205 <210> 96

- 312 044346 <211> 208 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>- 312 044346 <211> 208 < 212> PROTEIN < 213> Artificial sequence <220>

< 223> CD80 v42 ECD <400> 96<223> CD80 v42 ECD <400> 96

Val Ile His Val ThrVal Ile His Val Thr

55

Lys Glu Val Lys GluLys Glu Val Lys Glu

Val Ala Thr Leu SerVal Ala Thr Leu Ser

Gly His Asn Val SerGly His Asn Val Ser

Val Glu Glu Leu AlaVal Glu Glu Leu Ala

Gln Thr Asp Ile Leu 30Gln Thr Asp Ile Leu 30

His Lys Glu Gly Lys 35His Lys Glu Gly Lys 35

Ile Val Leu Ala MetIle Val Leu Ala Met

Arg Ser Gly Asp Thr 45Arg Ser Gly Asp Thr 45

Ile Trp Pro Glu Tyr 50Ile Trp Pro Glu Tyr 50

Lys Asn Arg Thr Ile 55Lys Asn Arg Thr Ile 55

Phe Asp Ile Thr Asn 60Phe Asp Ile Thr Asn 60

Leu Ser Ile Val Ile 65Leu Ser Ile Val Ile 65

Leu Ala Leu Arg Pro 70Leu Ala Leu Arg Pro 70

Ser Asp Glu Gly Thr 75Ser Asp Glu Gly Thr 75

Val Cys Val Val Arg 85Val Cys Val Val Arg 85

Lys Tyr Glu Asn Asp 90Lys Tyr Glu Asn Asp 90

Thr Pro Val Leu GluThr Pro Val Leu Glu

Leu Ala Glu Val ThrLeu Ala Glu Val Thr

100100

Leu Ser Val Lys AlaLeu Ser Val Lys Ala

105105

Asp Phe Pro Thr ProAsp Phe Pro Thr Pro

110110

Ile Ser Asp Phe Glu 115Ile Ser Asp Phe Glu 115

Ile Pro Thr Ser AsnIle Pro Thr Ser Asn

120120

Ile Arg Arg Ile IleIle Arg Arg Ile Ile

125125

Ser Thr Ser Gly Gly 130Ser Thr Ser Gly Gly 130

Phe Pro Glu Pro HisPhe Pro Glu Pro His

135135

Leu Ser Trp Leu Glu 140Leu Ser Trp Leu Glu 140

Gly Glu Glu Leu Ser 145Gly Glu Glu Leu Ser 145

Ala Ile Asn Thr Thr 150Ala Ile Asn Thr Thr 150

Val Ser Gln Asp Pro 155Val Ser Gln Asp Pro 155

Thr Glu Leu Tyr AlaThr Glu Leu Tyr Ala

165165

Val Ser Ser Lys LeuVal Ser Ser Lys Leu

170170

Asp Phe Asn Met ThrAsp Phe Asn Met Thr

175175

Asn His Ser Phe MetAsn His Ser Phe Met

180180

Cys Leu Ile Lys TyrCys Leu Ile Lys Tyr

185185

Gly His Leu Arg ValGly His Leu Arg Val

190190

Gln Thr Phe Asn Trp 195Gln Thr Phe Asn Trp 195

Asn Thr Thr Lys Gln 200Asn Thr Thr Lys Gln 200

Glu His Phe Pro AspGlu His Phe Pro Asp

205205

CysCys

TrpTrp

AsnAsn

AsnAsn

Tyr 80Tyr 80

HisHis

SerSer

CysCys

AsnAsn

Glu 160Glu 160

ThrThr

AsnAsn

Asn <210> 97 <211> 208Asn <210> 97 <211> 208

- 313 044346 <212> БЕЛОК <213> Искусственная <220>- 313 044346 <212> PROTEIN <213> Artificial <220>

<223> CD80 v43 ECD <400> 97<223> CD80 v43 ECD <400> 97

Val Ile His Val Thr 1 5 последовательностьVal Ile His Val Thr 1 5 sequence

Lys Glu Val Lys Glu 10Lys Glu Val Lys Glu 10

Val Ala Thr Leu SerVal Ala Thr Leu Ser

Gly His Asn Val Ser 20Gly His Asn Val Ser 20

Val Glu Glu Leu AlaVal Glu Glu Leu Ala

Gln Thr Val Ile Tyr 30Gln Thr Val Ile Tyr 30

Gln Lys Glu Lys Lys 35Gln Lys Glu Lys Lys 35

Met Val Leu Thr MetMet Val Leu Thr Met

Gln Ser Gly Asp Met 45Gln Ser Gly Asp Met 45

Ile Trp Pro Glu Tyr 50Ile Trp Pro Glu Tyr 50

Lys Asn Arg Thr Ile 55Lys Asn Arg Thr Ile 55

Phe Asp Ile Thr Asn 60Phe Asp Ile Thr Asn 60

Leu Ser Ile Val Ile 65Leu Ser Ile Val Ile 65

Leu Ala Leu Arg Pro 70Leu Ala Leu Arg Pro 70

Ser Asp Glu Gly Thr 75Ser Asp Glu Gly Thr 75

Arg Cys Val Val Ile 85Arg Cys Val Val Ile 85

Lys Tyr Glu Arg Leu 90Lys Tyr Glu Arg Leu 90

Glu Asn Gln Gly Glu 95Glu Asn Gln Gly Glu 95

Leu Ala Glu Val ThrLeu Ala Glu Val Thr

100100

Leu Ser Val Lys AlaLeu Ser Val Lys Ala

105105

Asp Phe Pro Thr ProAsp Phe Pro Thr Pro

110110

Ile Ser Asp Phe GluIle Ser Asp Phe Glu

115115

Ile Pro Thr Ser AsnIle Pro Thr Ser Asn

120120

Ile Arg Arg Ile IleIle Arg Arg Ile Ile

125125

Ser Thr Ser Gly Gly 130Ser Thr Ser Gly Gly 130

Phe Pro Glu Pro HisPhe Pro Glu Pro His

135135

Leu Ser Trp Leu Glu 140Leu Ser Trp Leu Glu 140

Gly Glu Glu Leu Asn 145Gly Glu Glu Leu Asn 145

Ala Ile Asn Thr Thr 150Ala Ile Asn Thr Thr 150

Val Ser Gln Asp Pro 155Val Ser Gln Asp Pro 155

Thr Glu Leu Tyr AlaThr Glu Leu Tyr Ala

165165

Val Ser Ser Lys LeuVal Ser Ser Lys Leu

170170

Asp Phe Asn Met ThrAsp Phe Asn Met Thr

175175

Asn His Ser Phe MetAsn His Ser Phe Met

180180

Cys Leu Ile Lys TyrCys Leu Ile Lys Tyr

185185

Gly His Leu Arg ValGly His Leu Arg Val

190190

Gln Thr Phe Asn TrpGln Thr Phe Asn Trp

195195

Asn Thr Thr Lys Gln 200Asn Thr Thr Lys Gln 200

Glu His Phe Pro Asp 205Glu His Phe Pro Asp 205

CysCys

TrpTrp

AsnAsn

AsnAsn

Tyr 80Tyr 80

HisHis

SerSer

CysCys

AsnAsn

Glu 160Glu 160

ThrThr

AsnAsn

Asn <210> 98 <211> 208 <212> БЕЛОКAsn <210> 98 <211> 208 <212> PROTEIN

- 314 044346 <213> Искусственная последовательность <220>- 314 044346 <213> Artificial sequence <220>

<223> CD80 v44 ECD <400> 98<223> CD80 v44 ECD <400> 98

Val Ile His Val 1Val Ile His Val 1

Thr Lys Glu Val 5Thr Lys Glu Val 5

Lys Glu Val Ala 10Lys Glu Val Ala 10

Thr Leu Ser Cys 15Thr Leu Ser Cys 15

Gly His Asn Val 20Gly His Asn Val 20

Ser Val Glu GluSer Val Glu Glu

Leu Ala Gln Thr 25Leu Ala Gln Thr 25

Arg Ile Tyr Trp 30Arg Ile Tyr Trp 30

Gln Lys Glu Lys 35Gln Lys Glu Lys 35

Lys Met Val Leu 40Lys Met Val Leu 40

Ile Met Met SerIle Met Met Ser

Gly Asp Met Asn 45Gly Asp Met Asn 45

Ile Trp Pro Glu 50Ile Trp Pro Glu 50

Tyr Lys Asn ArgTyr Lys Asn Arg

Thr Ile Phe Asp 60Thr Ile Phe Asp 60

Ile Thr Asn AsnIle Thr Asn Asn

Leu Ser Ile Val 65Leu Ser Ile Val 65

Ile Leu Ala LeuIle Leu Ala Leu

Arg Pro Ser AspArg Pro Ser Asp

Glu Gly Thr Tyr 80Glu Gly Thr Tyr 80

Glu Cys Val ValGlu Cys Val Val

Leu Lys Tyr Glu 85Leu Lys Tyr Glu 85

Lys Asp Gly Phe 90Lys Asp Gly Phe 90

Lys Arg Glu His 95Lys Arg Glu His 95

Leu Ala Glu ValLeu Ala Glu Val

100100

Thr Leu Ser ValThr Leu Ser Val

Lys Ala Asp Phe 105Lys Ala Asp Phe 105

Pro Thr Pro SerPro Thr Pro Ser

110110

Ile Ser Asp PheIle Ser Asp Phe

115115

Glu Ile Pro ThrGlu Ile Pro Thr

120120

Ser Asn Ile ArgSer Asn Ile Arg

Arg Ile Ile Cys 125Arg Ile Ile Cys 125

Ser Thr Ser Gly 130Ser Thr Ser Gly 130

Gly Phe Pro GluGly Phe Pro Glu

135135

Pro His Leu SerPro His Leu Ser

140140

Trp Leu Glu AsnTrp Leu Glu Asn

Gly Glu Glu Leu 145Gly Glu Glu Leu 145

Asn Ala Ile AsnAsn Ala Ile Asn

150150

Thr Thr Val SerThr Thr Val Ser

155155

Gln Asp Pro GluGln Asp Pro Glu

160160

Thr Glu Leu TyrThr Glu Leu Tyr

Ala Val Ser Ser 165Ala Val Ser Ser 165

Lys Leu Asp Phe 170Lys Leu Asp Phe 170

Asn Met Thr ThrAsn Met Thr Thr

175175

Asn His Ser PheAsn His Ser Phe

180180

Met Cys Leu IleMet Cys Leu Ile

Lys Tyr Gly His 185Lys Tyr Gly His 185

Leu Arg Val Asn 190Leu Arg Val Asn 190

Gln Thr Phe AsnGln Thr Phe Asn

195195

Trp Asn Thr ThrTrp Asn Thr Thr

200200

Lys Gln Glu HisLys Gln Glu His

Phe Pro Asp Asn 205 <210> 99 < 211> 208 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательностьPhe Pro Asp Asn 205 <210> 99 <211> 208 <212> PROTEIN <213> Artificial Sequence

- 315 044346 <220>- 315 044346 <220>

<223> CD80 v45 ECD <400> 99<223> CD80 v45 ECD <400> 99

Val Ile His Val Thr 1 5Val Ile His Val Thr 1 5

Lys Glu Val Lys GluLys Glu Val Lys Glu

Val Ala Thr Leu SerVal Ala Thr Leu Ser

Gly His Asn Val Ser 20Gly His Asn Val Ser 20

Val Glu Glu Leu AlaVal Glu Glu Leu Ala

Gln Thr Arg Ile Tyr 30Gln Thr Arg Ile Tyr 30

Gln Lys Glu Lys Lys 35Gln Lys Glu Lys Lys 35

Met Val Leu Thr MetMet Val Leu Thr Met

Met Ser Gly Asp Met 45Met Ser Gly Asp Met 45

Ile Trp Pro Glu Tyr 50Ile Trp Pro Glu Tyr 50

Lys Asn Arg Thr Ile 55Lys Asn Arg Thr Ile 55

Phe Asp Ile Thr Asn 60Phe Asp Ile Thr Asn 60

Leu Ser Ile Val Ile 65Leu Ser Ile Val Ile 65

Leu Ala Leu Arg Pro 70Leu Ala Leu Arg Pro 70

Ser Asp Glu Gly Thr 75Ser Asp Glu Gly Thr 75

Glu Cys Val Val Leu 85Glu Cys Val Val Leu 85

Lys Tyr Glu Arg Lys 90Lys Tyr Glu Arg Lys 90

Gly Tyr Arg Arg Glu 95Gly Tyr Arg Arg Glu 95

Leu Ala Glu Val ThrLeu Ala Glu Val Thr

100100

Leu Ser Val Lys AlaLeu Ser Val Lys Ala

105105

Asp Phe Pro Thr ProAsp Phe Pro Thr Pro

110110

Ile Ser Asp Phe GluIle Ser Asp Phe Glu

115115

Ile Pro Thr Ser SerIle Pro Thr Ser Ser

120120

Ile Arg Arg Ile IleIle Arg Arg Ile Ile

125125

Ser Thr Ser Gly Gly 130Ser Thr Ser Gly Gly 130

Phe Pro Glu Pro HisPhe Pro Glu Pro His

135135

Leu Ser Trp Leu Glu 140Leu Ser Trp Leu Glu 140

Gly Glu Glu Leu Asn 145Gly Glu Glu Leu Asn 145

Ala Ile Asn Thr Thr 150Ala Ile Asn Thr Thr 150

Val Ser Gln Asp Pro 155Val Ser Gln Asp Pro 155

Thr Glu Leu Tyr AlaThr Glu Leu Tyr Ala

165165

Val Ser Ser Lys LeuVal Ser Ser Lys Leu

170170

Asp Phe Asn Met ThrAsp Phe Asn Met Thr

175175

Ser His Ser Phe MetSer His Ser Phe Met

180180

Cys Leu Ile Lys TyrCys Leu Ile Lys Tyr

185185

Gly His Leu Arg ValGly His Leu Arg Val

190190

Gln Thr Phe Asn TrpGln Thr Phe Asn Trp

195195

Asn Thr Thr Lys Gln 200Asn Thr Thr Lys Gln 200

Glu His Phe Pro Asp 205Glu His Phe Pro Asp 205

CysCys

TrpTrp

AsnAsn

AsnAsn

Tyr 80Tyr 80

HisHis

SerSer

CysCys

AsnAsn

Glu 160Glu 160

ThrThr

AsnAsn

Asn <210> 100 <211> 208 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательностьAsn <210> 100 <211> 208 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence

- 316 044346 <220>- 316 044346 <220>

<223> CD80 v46 ECD <400> 100<223> CD80 v46 ECD <400> 100

Val Ile His Val Thr 1 5Val Ile His Val Thr 1 5

Lys Glu Val Lys GluLys Glu Val Lys Glu

Val Ala Thr Leu SerVal Ala Thr Leu Ser

Gly His Asn Val Ser 20Gly His Asn Val Ser 20

Val Glu Glu Leu AlaVal Glu Glu Leu Ala

Gln Thr Arg Ile TyrGln Thr Arg Ile Tyr

Gln Lys Glu Lys Lys 35Gln Lys Glu Lys Lys 35

Met Val Leu Thr MetMet Val Leu Thr Met

Met Ser Gly Asp Met 45Met Ser Gly Asp Met 45

Ile Trp Pro Glu Tyr 50Ile Trp Pro Glu Tyr 50

Lys Asn Arg Thr Ile 55Lys Asn Arg Thr Ile 55

Phe Asp Ile Thr Asn 60Phe Asp Ile Thr Asn 60

Leu Ser Ile Val Ile 65Leu Ser Ile Val Ile 65

Leu Ala Leu Arg Pro 70Leu Ala Leu Arg Pro 70

Ser Asp Glu Gly Thr 75Ser Asp Glu Gly Thr 75

Glu Cys Val Val Leu 85Glu Cys Val Val Leu 85

Lys Tyr Glu Arg Lys 90Lys Tyr Glu Arg Lys 90

Gly Tyr Arg Arg Glu 95Gly Tyr Arg Arg Glu 95

Leu Ala Glu Val ThrLeu Ala Glu Val Thr

100100

Leu Ser Val Lys AlaLeu Ser Val Lys Ala

105105

Asp Phe Pro Thr ProAsp Phe Pro Thr Pro

110110

Ile Ser Asp Phe GluIle Ser Asp Phe Glu

115115

Ile Pro Thr Ser AsnIle Pro Thr Ser Asn

120120

Ile Arg Arg Ile IleIle Arg Arg Ile Ile

125125

Ser Thr Ser Gly Gly 130Ser Thr Ser Gly Gly 130

Phe Pro Glu Pro HisPhe Pro Glu Pro His

135135

Leu Ser Trp Leu Glu 140Leu Ser Trp Leu Glu 140

Gly Glu Glu Leu Asn 145Gly Glu Glu Leu Asn 145

Ala Ile Asn Thr Thr 150Ala Ile Asn Thr Thr 150

Val Ser Gln Asp Pro 155Val Ser Gln Asp Pro 155

Thr Glu Leu Tyr AlaThr Glu Leu Tyr Ala

165165

Val Ser Ser Lys LeuVal Ser Ser Lys Leu

170170

Asp Phe Asn Met ThrAsp Phe Asn Met Thr

175175

Asn His Ser Phe MetAsn His Ser Phe Met

180180

Cys Leu Ile Lys TyrCys Leu Ile Lys Tyr

185185

Gly His Leu Arg ValGly His Leu Arg Val

190190

Gln Thr Phe Asn TrpGln Thr Phe Asn Trp

195195

Asn Thr Thr Lys Gln 200Asn Thr Thr Lys Gln 200

Glu His Phe Pro Asp 205Glu His Phe Pro Asp 205

CysCys

TrpTrp

AsnAsn

AsnAsn

Tyr 80Tyr 80

HisHis

SerSer

CysCys

AsnAsn

Glu 160Glu 160

ThrThr

AsnAsn

Asn <210> 101 <211> 208 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Asn <210> 101 <211> 208 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

- 317 044346 <223> CD80 v47 ECD <400> 101- 317 044346 <223> CD80 v47 ECD <400> 101

Val Ile His Val Thr 1 5Val Ile His Val Thr 1 5

Lys Glu Val Lys GluLys Glu Val Lys Glu

Val Ala Thr Leu SerVal Ala Thr Leu Ser

Gly His Asn Val Ser 20Gly His Asn Val Ser 20

Val Glu Glu Leu AlaVal Glu Glu Leu Ala

Gln Thr Arg Ile Tyr 30Gln Thr Arg Ile Tyr 30

Gln Lys Glu Gly Gln 35Gln Lys Glu Gly Gln 35

Ile Val Leu Thr MetIle Val Leu Thr Met

Met Ser Gly Asp Met 45Met Ser Gly Asp Met 45

Ile Trp Pro Glu Tyr 50Ile Trp Pro Glu Tyr 50

Lys Asn Arg Thr Ile 55Lys Asn Arg Thr Ile 55

Leu Asp Ile Thr Asn 60Leu Asp Ile Thr Asn 60

Leu Ser Ile Val Ile 65Leu Ser Ile Val Ile 65

Leu Ala Leu Arg Pro 70Leu Ala Leu Arg Pro 70

Ser Asp Glu Gly Thr 75Ser Asp Glu Gly Thr 75

Val Cys Val Val Arg 85Val Cys Val Val Arg 85

Lys Tyr Glu Asn Asp 90Lys Tyr Glu Asn Asp 90

Thr Pro Val Leu GluThr Pro Val Leu Glu

Leu Ala Gly Val ThrLeu Ala Gly Val Thr

100100

Leu Ser Val Lys AlaLeu Ser Val Lys Ala

105105

Asp Phe Pro Thr ProAsp Phe Pro Thr Pro

110110

Ile Ser Asp Phe Glu 115Ile Ser Asp Phe Glu 115

Ile Pro Thr Ser AsnIle Pro Thr Ser Asn

120120

Ile Arg Arg Ile IleIle Arg Arg Ile Ile

125125

Ser Ala Ser Gly Gly 130Ser Ala Ser Gly Gly 130

Phe Pro Glu Pro HisPhe Pro Glu Pro His

135135

Leu Ser Trp Leu Glu 140Leu Ser Trp Leu Glu 140

Gly Glu Glu Leu Ser 145Gly Glu Glu Leu Ser 145

Ala Ile Asn Thr Thr 150Ala Ile Asn Thr Thr 150

Val Ser Gln Asp Pro 155Val Ser Gln Asp Pro 155

Thr Glu Leu Tyr AlaThr Glu Leu Tyr Ala

165165

Val Ser Ser Lys LeuVal Ser Ser Lys Leu

170170

Asp Phe Asn Met ThrAsp Phe Asn Met Thr

175175

Asn His Ser Phe MetAsn His Ser Phe Met

180180

Cys Leu Ile Lys TyrCys Leu Ile Lys Tyr

185185

Gly His Leu Arg ValGly His Leu Arg Val

190190

Gln Thr Phe Asn Trp 195Gln Thr Phe Asn Trp 195

Asn Thr Thr Lys Gln 200Asn Thr Thr Lys Gln 200

Glu His Phe Pro AspGlu His Phe Pro Asp

205205

CysCys

TrpTrp

AsnAsn

AsnAsn

Tyr 80Tyr 80

HisHis

SerSer

CysCys

AsnAsn

Glu 160Glu 160

ThrThr

AsnAsn

Asn <210> 102 <211> 208 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Asn <210> 102 <211> 208 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> CD80 v48 ECD<223> CD80 v48 ECD

- 318 044346 <400> 102- 318 044346 <400> 102

Val Ile His Val ThrVal Ile His Val Thr

55

Lys Glu Val Lys GluLys Glu Val Lys Glu

Val Ala Thr Leu SerVal Ala Thr Leu Ser

Gly His Asn Val Ser 20Gly His Asn Val Ser 20

Val Glu Glu Leu AlaVal Glu Glu Leu Ala

Gln Thr Arg Ile Tyr 30Gln Thr Arg Ile Tyr 30

Gln Lys Glu Lys Lys 35Gln Lys Glu Lys Lys 35

Met Val Leu Thr MetMet Val Leu Thr Met

Met Ser Gly Asp Met 45Met Ser Gly Asp Met 45

Ile Trp Pro Glu Tyr 50Ile Trp Pro Glu Tyr 50

Lys Asn Arg Thr Ile 55Lys Asn Arg Thr Ile 55

Phe Asp Ile Thr Asn 60Phe Asp Ile Thr Asn 60

Leu Ser Ile Val Ile 65Leu Ser Ile Val Ile 65

Leu Ala Leu Arg Pro 70Leu Ala Leu Arg Pro 70

Ser Asp Glu Gly Thr 75Ser Asp Glu Gly Thr 75

Glu Cys Val Val Leu 85Glu Cys Val Val Leu 85

Lys Tyr Asp Arg Lys 90Lys Tyr Asp Arg Lys 90

Gly Tyr Arg Arg Glu 95Gly Tyr Arg Arg Glu 95

Leu Ala Glu Val ThrLeu Ala Glu Val Thr

100100

Leu Ser Val Lys AlaLeu Ser Val Lys Ala

105105

Asp Phe Pro Thr ProAsp Phe Pro Thr Pro

110110

Ile Ser Asp Phe Glu 115Ile Ser Asp Phe Glu 115

Ile Pro Thr Ser AsnIle Pro Thr Ser Asn

120120

Ile Arg Arg Ile IleIle Arg Arg Ile Ile

125125

Ser Thr Ser Gly Gly 130Ser Thr Ser Gly Gly 130

Phe Pro Glu Pro HisPhe Pro Glu Pro His

135135

Leu Ser Trp Leu Glu 140Leu Ser Trp Leu Glu 140

Gly Glu Glu Leu Asn 145Gly Glu Glu Leu Asn 145

Ala Ile Asn Thr Thr 150Ala Ile Asn Thr Thr 150

Val Ser Gln Asp Pro 155Val Ser Gln Asp Pro 155

Thr Glu Leu Tyr AlaThr Glu Leu Tyr Ala

165165

Val Ser Ser Lys LeuVal Ser Ser Lys Leu

170170

Asp Phe Asn Met ThrAsp Phe Asn Met Thr

175175

Asn His Ser Phe MetAsn His Ser Phe Met

180180

Cys Leu Ile Lys TyrCys Leu Ile Lys Tyr

185185

Gly His Leu Arg ValGly His Leu Arg Val

190190

Gln Thr Phe Asn Trp 195Gln Thr Phe Asn Trp 195

Asn Thr Thr Lys Gln 200Asn Thr Thr Lys Gln 200

Glu His Phe Pro AspGlu His Phe Pro Asp

205205

CysCys

TrpTrp

AsnAsn

AsnAsn

Tyr 80Tyr 80

HisHis

SerSer

CysCys

AsnAsn

Glu 160Glu 160

ThrThr

AsnAsn

Asn <210> 103 <211> 208 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Asn <210> 103 <211> 208 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> CD80 v49 ECD<223> CD80 v49 ECD

- 319 044346 <400> 103- 319 044346 <400> 103

Val Ile His Val ThrVal Ile His Val Thr

55

Lys Glu Val Lys GluLys Glu Val Lys Glu

Val Ala Thr Leu SerVal Ala Thr Leu Ser

Gly His Asn Val Ser 20Gly His Asn Val Ser 20

Val Glu Glu Leu AlaVal Glu Glu Leu Ala

Gln Thr Arg Ile Tyr 30Gln Thr Arg Ile Tyr 30

Gln Lys Glu Gly Gln 35Gln Lys Glu Gly Gln 35

Ile Val Met Thr MetIle Val Met Thr Met

Met Ser Gly Asp Met 45Met Ser Gly Asp Met 45

Ile Trp Pro Glu Tyr 50Ile Trp Pro Glu Tyr 50

Lys Asn Arg Thr Ile 55Lys Asn Arg Thr Ile 55

Phe Asp Ile Thr Asn 60Phe Asp Ile Thr Asn 60

Leu Ser Ile Val Ile 65Leu Ser Ile Val Ile 65

Leu Ala Leu Arg Pro 70Leu Ala Leu Arg Pro 70

Ser Asp Glu Gly Thr 75Ser Asp Glu Gly Thr 75

Glu Cys Val Val Leu 85Glu Cys Val Val Leu 85

Lys Tyr Glu Lys Asp 90Lys Tyr Glu Lys Asp 90

Ala Phe Lys Arg Glu 95Ala Phe Lys Arg Glu 95

Leu Ala Glu Val ThrLeu Ala Glu Val Thr

100100

Leu Ser Val Lys AlaLeu Ser Val Lys Ala

105105

Asp Phe Pro Thr ProAsp Phe Pro Thr Pro

110110

Ile Ser Asp Phe Glu 115Ile Ser Asp Phe Glu 115

Ile Pro Thr Ser AsnIle Pro Thr Ser Asn

120120

Ile Arg Arg Ile IleIle Arg Arg Ile Ile

125125

Ser Thr Ser Gly GlySer Thr Ser Gly Gly

130130

Phe Pro Glu Pro HisPhe Pro Glu Pro His

135135

Leu Ser Trp Leu Glu 140Leu Ser Trp Leu Glu 140

Gly Glu Glu Leu Asn 145Gly Glu Glu Leu Asn 145

Ala Ile Asn Thr Thr 150Ala Ile Asn Thr Thr 150

Val Ser Gln Asp Pro 155Val Ser Gln Asp Pro 155

Thr Glu Leu Tyr AlaThr Glu Leu Tyr Ala

165165

Val Ser Ser Lys LeuVal Ser Ser Lys Leu

170170

Asp Phe Asn Met ThrAsp Phe Asn Met Thr

175175

Asn His Ser Phe MetAsn His Ser Phe Met

180180

Cys Leu Ile Lys TyrCys Leu Ile Lys Tyr

185185

Gly His Leu Arg ValGly His Leu Arg Val

190190

Gln Thr Phe Asn Trp 195Gln Thr Phe Asn Trp 195

Asn Thr Thr Lys Gln 200Asn Thr Thr Lys Gln 200

Glu His Phe Pro AspGlu His Phe Pro Asp

205205

CysCys

TrpTrp

AsnAsn

AsnAsn

Tyr 80Tyr 80

HisHis

SerSer

CysCys

AsnAsn

Glu 160Glu 160

ThrThr

AsnAsn

Asn <210> 104 <211> 208 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Asn <210> 104 <211> 208 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> CD80 v50 ECD <400> 104<223> CD80 v50 ECD <400> 104

- 320 044346- 320 044346

Val Ile His Val ThrVal Ile His Val Thr

55

Lys Glu Val Lys GluLys Glu Val Lys Glu

Val Ala Thr Leu SerVal Ala Thr Leu Ser

Gly His Asn Val Ser 20Gly His Asn Val Ser 20

Val Glu Glu Leu AlaVal Glu Glu Leu Ala

Gln Thr Arg Ile Tyr 30Gln Thr Arg Ile Tyr 30

Gln Lys Glu Gly Lys 35Gln Lys Glu Gly Lys 35

Met Val Leu Thr MetMet Val Leu Thr Met

Met Ser Gly Asp Met 45Met Ser Gly Asp Met 45

Ile Trp Pro Glu Tyr 50Ile Trp Pro Glu Tyr 50

Lys Asn Arg Thr Ile 55Lys Asn Arg Thr Ile 55

Phe Asp Ile Thr Asn 60Phe Asp Ile Thr Asn 60

Leu Ser Ile Val Ile 65Leu Ser Ile Val Ile 65

Leu Ala Leu Arg Pro 70Leu Ala Leu Arg Pro 70

Ser Asp Glu Gly Thr 75Ser Asp Glu Gly Thr 75

Glu Cys Val Val Leu 85Glu Cys Val Val Leu 85

Lys Tyr Glu Lys Asp 90Lys Tyr Glu Lys Asp 90

Ala Phe Lys Arg Glu 95Ala Phe Lys Arg Glu 95

Leu Ala Glu Val ThrLeu Ala Glu Val Thr

100100

Leu Ser Val Lys AlaLeu Ser Val Lys Ala

105105

Asp Phe Pro Thr ProAsp Phe Pro Thr Pro

110110

Ile Ser Asp Phe Glu 115Ile Ser Asp Phe Glu 115

Ile Pro Thr Ser AsnIle Pro Thr Ser Asn

120120

Ile Arg Arg Ile IleIle Arg Arg Ile Ile

125125

Ser Thr Ser Gly Gly 130Ser Thr Ser Gly Gly 130

Phe Pro Glu Pro HisPhe Pro Glu Pro His

135135

Leu Ser Trp Leu Glu 140Leu Ser Trp Leu Glu 140

Gly Glu Glu Leu Asn 145Gly Glu Glu Leu Asn 145

Ala Ile Asn Thr Thr 150Ala Ile Asn Thr Thr 150

Val Ser Gln Asp Pro 155Val Ser Gln Asp Pro 155

Thr Glu Leu Tyr AlaThr Glu Leu Tyr Ala

165165

Val Ser Ser Lys LeuVal Ser Ser Lys Leu

170170

Asp Phe Asn Met ThrAsp Phe Asn Met Thr

175175

Asn His Ser Phe MetAsn His Ser Phe Met

180180

Cys Leu Ile Lys TyrCys Leu Ile Lys Tyr

185185

Gly His Leu Arg ValGly His Leu Arg Val

190190

Gln Thr Phe Asn Trp 195Gln Thr Phe Asn Trp 195

Asn Thr Thr Lys Gln 200Asn Thr Thr Lys Gln 200

Glu His Phe Pro AspGlu His Phe Pro Asp

205205

CysCys

TrpTrp

AsnAsn

AsnAsn

Tyr 80Tyr 80

HisHis

SerSer

CysCys

AsnAsn

Glu 160Glu 160

ThrThr

AsnAsn

Asn <210> 105 <211> 208 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Asn <210> 105 <211> 208 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> CD80 v51 ECD <400> 105<223> CD80 v51 ECD <400> 105

- 321 044346- 321 044346

Val Ile His Val ThrVal Ile His Val Thr

55

Lys Glu Val Lys GluLys Glu Val Lys Glu

Val Ala Thr Leu SerVal Ala Thr Leu Ser

Gly His Asn Val Ser 20Gly His Asn Val Ser 20

Val Glu Glu Leu AlaVal Glu Glu Leu Ala

Gln Thr His Ile HisGln Thr His Ile His

Gln Lys Glu Lys Lys 35Gln Lys Glu Lys Lys 35

Met Val Leu Gly Met 40Met Val Leu Gly Met 40

Met Ser Gly Asp Met 45Met Ser Gly Asp Met 45

Ile Trp Pro Glu Tyr 50Ile Trp Pro Glu Tyr 50

Lys Asn Arg Thr Ile 55Lys Asn Arg Thr Ile 55

Phe Asp Ile Thr Asn 60Phe Asp Ile Thr Asn 60

Leu Ser Ile Val Ile 65Leu Ser Ile Val Ile 65

Leu Ala Leu Arg Pro 70Leu Ala Leu Arg Pro 70

Ser Asp Glu Gly Thr 75Ser Asp Glu Gly Thr 75

Glu Cys Val Val Leu 85Glu Cys Val Val Leu 85

Lys Asn Gly Glu Asn 90Lys Asn Gly Glu Asn 90

Gly Phe Lys Arg Glu 95Gly Phe Lys Arg Glu 95

Leu Ala Glu Val ThrLeu Ala Glu Val Thr

100100

Leu Ser Val Lys AlaLeu Ser Val Lys Ala

105105

Asp Phe Ser Thr ProAsp Phe Ser Thr Pro

110110

Ile Ser Asp Phe Glu 115Ile Ser Asp Phe Glu 115

Ile Pro Thr Ser AsnIle Pro Thr Ser Asn

120120

Ile Arg Arg Ile IleIle Arg Arg Ile Ile

125125

Ser Thr Ser Gly Gly 130Ser Thr Ser Gly Gly 130

Phe Pro Glu Pro HisPhe Pro Glu Pro His

135135

Leu Ser Trp Leu Glu 140Leu Ser Trp Leu Glu 140

Gly Glu Glu Leu Asn 145Gly Glu Glu Leu Asn 145

Ala Ile Asn Thr Thr 150Ala Ile Asn Thr Thr 150

Val Ser Gln Asp Pro 155Val Ser Gln Asp Pro 155

Thr Glu Leu Tyr AlaThr Glu Leu Tyr Ala

165165

Val Ser Ser Lys LeuVal Ser Ser Lys Leu

170170

Asp Phe Asn Met ThrAsp Phe Asn Met Thr

175175

Asn His Ser Phe MetAsn His Ser Phe Met

180180

Cys Leu Ile Lys TyrCys Leu Ile Lys Tyr

185185

Gly His Leu Arg ValGly His Leu Arg Val

190190

Gln Thr Phe Asn Trp 195Gln Thr Phe Asn Trp 195

Asn Thr Thr Lys Gln 200Asn Thr Thr Lys Gln 200

Glu His Phe Pro AspGlu His Phe Pro Asp

205205

CysCys

TrpTrp

AsnAsn

AsnAsn

Tyr 80Tyr 80

HisHis

SerSer

CysCys

AsnAsn

Glu 160Glu 160

ThrThr

AsnAsn

Asn <210> 106 <211> 208 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Asn <210> 106 <211> 208 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> CD80 v52 ECD < 400> 106<223>CD80 v52 ECD <400>106

Val Ile His Val Thr Lys Glu Val Lys Glu Val Thr Thr Leu SerVal Ile His Val Thr Lys Glu Val Lys Glu Val Thr Thr Leu Ser

CysCys

- 322 044346- 322 044346

1515

Gly Leu Asn Val Ser 20Gly Leu Asn Val Ser 20

Val Glu Glu Leu AlaVal Glu Glu Leu Ala

Gln Thr Arg Ile Tyr 30Gln Thr Arg Ile Tyr 30

Gln Lys Glu Lys Lys 35Gln Lys Glu Lys Lys 35

Met Val Leu Thr MetMet Val Leu Thr Met

Val Ser Gly Asp Met 45Val Ser Gly Asp Met 45

Ile Trp Pro Glu Tyr 50Ile Trp Pro Glu Tyr 50

Lys Asn Arg Thr Ile 55Lys Asn Arg Thr Ile 55

Leu Asp Ile Thr Asn 60Leu Asp Ile Thr Asn 60

Leu Ser Ile Val Ile 65Leu Ser Ile Val Ile 65

Leu Ala Leu Arg Pro 70Leu Ala Leu Arg Pro 70

Ser Asp Lys Gly Thr 75Ser Asp Lys Gly Thr 75

Glu Cys Val Val Leu 85Glu Cys Val Val Leu 85

Lys Tyr Glu Lys Asp 90Lys Tyr Glu Lys Asp 90

Ala Phe Lys Arg Glu 95Ala Phe Lys Arg Glu 95

Leu Ala Glu Val ThrLeu Ala Glu Val Thr

100100

Leu Ser Val Lys AlaLeu Ser Val Lys Ala

105105

Asp Phe Ser Thr ProAsp Phe Ser Thr Pro

110110

Ile Ser Asp Phe Glu 115Ile Ser Asp Phe Glu 115

Thr Pro Thr Ser AsnThr Pro Thr Ser Asn

120120

Ile Arg Arg Ile IleIle Arg Arg Ile Ile

125125

Ser Thr Ser Gly Gly 130Ser Thr Ser Gly Gly 130

Phe Pro Glu Pro HisPhe Pro Glu Pro His

135135

Leu Ser Trp Leu Glu 140Leu Ser Trp Leu Glu 140

Gly Glu Glu Leu Asn 145Gly Glu Glu Leu Asn 145

Ala Ile Asn Thr Thr 150Ala Ile Asn Thr Thr 150

Val Ser Gln Asp Pro 155Val Ser Gln Asp Pro 155

Thr Glu Leu Tyr AlaThr Glu Leu Tyr Ala

165165

Val Ser Ser Lys LeuVal Ser Ser Lys Leu

170170

Asp Phe Asn Met ThrAsp Phe Asn Met Thr

175175

Asn His Ser Phe MetAsn His Ser Phe Met

180180

Cys Leu Ile Lys TyrCys Leu Ile Lys Tyr

185185

Gly His Leu Arg ValGly His Leu Arg Val

190190

Gln Thr Phe Asn Trp 195Gln Thr Phe Asn Trp 195

Asn Thr Thr Lys Gln 200Asn Thr Thr Lys Gln 200

Glu His Phe Pro AspGlu His Phe Pro Asp

205205

TrpTrp

AsnAsn

AsnAsn

Tyr 80Tyr 80

HisHis

SerSer

CysCys

AsnAsn

Glu 160Glu 160

ThrThr

AsnAsn

Asn <210> 107 <211> 208 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Asn <210> 107 <211> 208 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> CD80 v53 ECD <400> 107<223> CD80 v53 ECD <400> 107

Val Ile His Val Thr Lys Glu Val Lys Glu Val Ala Thr Leu SerVal Ile His Val Thr Lys Glu Val Lys Glu Val Ala Thr Leu Ser

5 10 155 10 15

CysCys

- 323 044346- 323 044346

Gly His Asn Val 20Gly His Asn Val 20

Ser Val Glu Glu Leu AlaSer Val Glu Glu Leu Ala

Gln Thr Val Ile Phe Trp 30Gln Thr Val Ile Phe Trp 30

Gln Lys Glu Gly 35Gln Lys Glu Gly 35

Lys Leu Val Leu Thr Met 40Lys Leu Val Leu Thr Met 40

Gln Ser Gly Asp Met Asn 45Gln Ser Gly Asp Met Asn 45

Ile Trp Pro Glu 50Ile Trp Pro Glu 50

Tyr Lys Asn Arg Thr Ile 55Tyr Lys Asn Arg Thr Ile 55

Phe Asp Ile Thr Asn Asn 60Phe Asp Ile Thr Asn Asn 60

Leu Ser Ile Val 65Leu Ser Ile Val 65

Ile Leu Ala Leu Arg Pro 70Ile Leu Ala Leu Arg Pro 70

Ser Asp Glu Gly Thr TyrSer Asp Glu Gly Thr Tyr

8080

Arg Cys Ile ValArg Cys Ile Val

Ile Lys Tyr Glu Arg LeuIle Lys Tyr Glu Arg Leu

9090

Glu Asn Gln Gly Glu His 95Glu Asn Gln Gly Glu His 95

Leu Ala Glu ValLeu Ala Glu Val

100100

Thr LeuThr Leu

Ser Val Lys Ala Asp Phe Pro Thr Pro SerSer Val Lys Ala Asp Phe Pro Thr Pro Ser

105 110105 110

Ile Ser Asp Phe GluIle Ser Asp Phe Glu

115115

Ile Pro Thr Ser Asn Ile Arg Arg Ile Ile CysIle Pro Thr Ser Asn Ile Arg Arg Ile Ile Cys

120 125120 125

Ser ThrSer Thr

130130

Gly Glu 145Gly Glu 145

Thr GluThr Glu

Ser Ser Gly Gly Gly Gly Phe Phe Pro 135 Pro 135 Glu Glu Pro Pro His His Leu Leu Ser 140 Ser 140 Trp Trp Leu Leu Glu Glu Asn Asn Glu Glu Leu Leu Asn Asn Ala 150 Ala 150 Ile Ile Asn Asn Thr Thr Thr Thr Val 155 Val 155 Ser Ser Gln Gln Asp Asp Pro Pro Glu 160 Glu 160 Leu Leu Tyr Tyr Ala 165 Ala 165 Val Val Ser Ser Ser Ser Lys Lys Leu 170 Leu 170 Asp Asp Phe Phe Asn Asn Met Met Thr 175 Thr 175 Thr Thr

Asn His Ser Phe Met Cys Leu Ile LysAsn His Ser Phe Met Cys Leu Ile Lys

180 185180 185

Tyr Gly His Leu Arg Val AsnTyr Gly His Leu Arg Val Asn

190190

Gln Thr Phe Asn Trp Asn Thr Thr LysGln Thr Phe Asn Trp Asn Thr Thr Lys

195 200195 200

Gln Glu His Phe Pro Asp AsnGln Glu His Phe Pro Asp Asn

205 <210> 108 <211> 208 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>205 <210> 108 <211> 208 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> CD80 v54 ECD <400> 108<223> CD80 v54 ECD <400> 108

Val Ile His Val Thr Lys Glu Val Lys Glu Val Ala Thr Leu Ser CysVal Ile His Val Thr Lys Glu Val Lys Glu Val Ala Thr Leu Ser Cys

5 10 155 10 15

- 324 044346- 324 044346

Gly His Asn Val Ser 20Gly His Asn Val Ser 20

Val Glu Glu Leu AlaVal Glu Glu Leu Ala

Gln Thr Arg Ile Tyr 30Gln Thr Arg Ile Tyr 30

Gln Lys Glu Lys Lys 35Gln Lys Glu Lys Lys 35

Met Val Leu Thr MetMet Val Leu Thr Met

Met Ser Gly Asp Met 45Met Ser Gly Asp Met 45

Ile Trp Pro Glu Tyr 50Ile Trp Pro Glu Tyr 50

Lys Asn Arg Thr Ile 55Lys Asn Arg Thr Ile 55

Phe Asp Ile Thr Asn 60Phe Asp Ile Thr Asn 60

Leu Ser Ile Met Ile 65Leu Ser Ile Met Ile 65

Pro Ala Pro Arg Pro 70Pro Ala Pro Arg Pro 70

Ser Asp Glu Gly Thr 75Ser Asp Glu Gly Thr 75

Glu Cys Val Val Leu 85Glu Cys Val Val Leu 85

Glu Tyr Glu Lys Asp 90Glu Tyr Glu Lys Asp 90

Ala Phe Lys Arg Glu 95Ala Phe Lys Arg Glu 95

Leu Ala Glu Val ThrLeu Ala Glu Val Thr

100100

Leu Ser Val Lys AlaLeu Ser Val Lys Ala

105105

Asp Phe Pro Thr ProAsp Phe Pro Thr Pro

110110

Ile Ser Asp Phe Glu 115Ile Ser Asp Phe Glu 115

Ile Pro Thr Ser AsnIle Pro Thr Ser Asn

120120

Ile Arg Arg Ile IleIle Arg Arg Ile Ile

125125

Ser Thr Ser Gly GlySer Thr Ser Gly Gly

130130

Phe Pro Glu Pro HisPhe Pro Glu Pro His

135135

Leu Ser Trp Leu Glu 140Leu Ser Trp Leu Glu 140

Gly Glu Glu Leu Asn 145Gly Glu Glu Leu Asn 145

Ala Ile Asn Thr Thr 150Ala Ile Asn Thr Thr 150

Val Ser Gln Asp Pro 155Val Ser Gln Asp Pro 155

Thr Glu Leu Tyr AlaThr Glu Leu Tyr Ala

165165

Val Ser Ser Lys LeuVal Ser Ser Lys Leu

170170

Asp Phe Asn Met ThrAsp Phe Asn Met Thr

175175

Asn His Ser Phe MetAsn His Ser Phe Met

180180

Cys Leu Ile Lys TyrCys Leu Ile Lys Tyr

185185

Gly His Leu Arg ValGly His Leu Arg Val

190190

Gln Thr Phe Asn Trp 195Gln Thr Phe Asn Trp 195

Asn Thr Thr Lys Gln 200Asn Thr Thr Lys Gln 200

Glu His Phe Pro AspGlu His Phe Pro Asp

205205

TrpTrp

AsnAsn

AsnAsn

Tyr 80Tyr 80

HisHis

SerSer

CysCys

AsnAsn

Glu 160Glu 160

ThrThr

AsnAsn

Asn <210> 109 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Asn <210> 109 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v1 ECD < 400> 109< 223> ICOSL v1 ECD < 400> 109

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15

GluGlu

- 325 044346- 325 044346

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Ser Ser 50Ile Pro Gln Ser Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 110 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 110 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v2 ECD<223> ICOSL v2 ECD

- 326 044346 <400> 110- 326 044346 <400> 110

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235Asn Ala Ala Thr 235

- 327 044346 <210> 111 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>- 327 044346 <210> 111 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v3 ECD < 400> 111< 223> ICOSL v3 ECD < 400> 111

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala CysLeu Ser Cys Ala Cys

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn AspPhe Asp Leu Asn Asp

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Asp Ser 50Ile Pro Gln Asp Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

- 328 044346- 328 044346

210 215 220210 215 220

Thr Glu Asn Pro Val Ser Thr Gly Glu Lys Asn Ala AlaThr Glu Asn Pro Val Ser Thr Gly Glu Lys Asn Ala Ala

225 230 235225 230 235

Thr <210> 112 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Thr <210> 112 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v4 ECD <400> 112<223> ICOSL v4 ECD <400> 112

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Tyr Ser 50Ile Pro Gln Tyr Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr LeuAsp Glu Leu Thr Leu

135135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

- 329 044346- 329 044346

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn Val Pro Leu Gln Gln AsnCys Ile Glu Asn Val Pro Leu Gln Gln Asn

200 205200 205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp Ile Gly Glu Arg Asp LysThr Gly Asn Asp Ile Gly Glu Arg Asp Lys

215 220215 220

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys Asn Ala Ala ThrSer Thr Gly Glu Lys Asn Ala Ala Thr

230 235 <210> 113 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>230 235 <210> 113 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v5 ECD < 400> 113< 223> ICOSL v5 ECD < 400> 113

Asp Thr Gln Glu LysAsp Thr Gln Glu Lys

55

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Pro SerVal Leu Ser Pro Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

- 330 044346- 330 044346

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 114 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 114 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v6 ECD < 400> 114< 223> ICOSL v6 ECD < 400> 114

AspAsp

ThrThr

GlnGln

GluGlu

Lys 5Lys 5

GluGlu

ValVal

ArgArg

AlaAla

Met 10Met 10

ValVal

GlyGly

SerSer

AspAsp

Val 15Val 15

LeuLeu

SerSer

CysCys

Ala 20Ala 20

CysCys

ProPro

GluGlu

GlyGly

Ser 25Ser 25

ArgArg

PhePhe

AspAsp

LeuLeu

Asn 30Asn 30

AspAsp

TyrTyr

ValVal

Tyr 35Tyr 35

TrpTrp

GlnGln

ThrThr

SerSer

Glu 40Glu 40

SerSer

LysLys

ThrThr

ValVal

Val 45Val 45

ThrThr

TyrTyr

IleIle

Pro 50Pro 50

GlnGln

SerSer

SerSer

SerSer

Leu 55Leu 55

GluGlu

AsnAsn

ValVal

AspAsp

Ser 60Ser 60

ArgArg

TyrTyr

ArgArg

Arg 65Arg 65

AlaAla

LeuLeu

MetMet

SerSer

Pro 70Pro 70

AlaAla

GlyGly

MetMet

LeuLeu

Arg 75Arg 75

GlyGly

AspAsp

PhePhe

SerSer

ArgArg

LeuLeu

PhePhe

AsnAsn

Val 85Val 85

ThrThr

ProPro

GlnGln

AspAsp

Glu 90Glu 90

GlnGln

LysLys

PhePhe

HisHis

Cys 95Cys 95

ValVal

LeuLeu

SerSer

GlnGln

100100

SerSer

LeuLeu

GlyGly

PhePhe

GlnGln

105105

GluGlu

ValVal

LeuLeu

SerSer

ValVal

110110

GluGlu

ThrThr

LeuLeu

HisHis

115115

ValVal

AlaAla

AlaAla

AsnAsn

PhePhe

120120

SerSer

ValVal

ProPro

ValVal

ValVal

125125

SerSer

AlaAla

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

- 331 044346- 331 044346

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr PheAsp Glu Leu Thr Phe

135135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Cys Pro Arg Pro 145Gly Cys Pro Arg Pro 145

Asn Val Cys Trp Ile 150Asn Val Cys Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 115 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 115 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v7 ECD < 400> 115< 223> ICOSL v7 ECD < 400> 115

Asp Thr Gln Glu LysAsp Thr Gln Glu Lys

Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp ValGlu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val

1515

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

- 332 044346- 332 044346

100100

105105

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Arg Ile Glu Asn Val 200Arg Ile Glu Asn Val 200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 116 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 116 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v8 ECD < 400> 116< 223> ICOSL v8 ECD < 400> 116

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala CysLeu Ser Cys Ala Cys

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn AspPhe Asp Leu Asn Asp

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

- 333 044346- 333 044346

Arg Leu PheArg Leu Phe

Asn Val ThrAsn Val Thr

Pro Gln AspPro Gln Asp

Glu Gln Lys 90Glu Gln Lys 90

Phe His CysPhe His Cys

Val Leu SerVal Leu Ser

Gln Ser Leu 100Gln Ser Leu 100

Gly Phe GlnGly Phe Gln

105105

Glu Val LeuGlu Val Leu

Ser Val GluSer Val Glu

110110

Thr Leu HisThr Leu His

115115

Val Ala AlaVal Ala Ala

Asn Phe SerAsn Phe Ser

120120

Val Pro ValVal Pro Val

Val Ser Ala 125Val Ser Ala 125

His Ser ProHis Ser Pro

130130

Ser Gln AspSer Gln Asp

Glu Leu Thr 135Glu Leu Thr 135

Phe Thr AspPhe Thr Asp

140140

Thr Ser IleThr Ser Ile

Gly Tyr Pro 145Gly Tyr Pro 145

Arg Pro AsnArg Pro Asn

150150

Val Tyr TrpVal Tyr Trp

Ile Asn LysIle Asn Lys

155155

Thr Asp AsnThr Asp Asn

Leu Leu AspLeu Leu Asp

Gln Ala LeuGln Ala Leu

165165

Gln Asn AspGln Asn Asp

Thr Val Phe 170Thr Val Phe 170

Leu Asn MetLeu Asn Met

175175

Gly Leu TyrGly Leu Tyr

Asp Val Val 180Asp Val Val 180

Ser Val LeuSer Val Leu

185185

Arg Ile AlaArg Ile Ala

Arg Thr ProArg Thr Pro

190190

Val Asn IleVal Asn Ile

195195

Gly Cys CysGly Cys Cys

Ile Glu AsnIle Glu Asn

200200

Val Leu LeuVal Leu Leu

Gln Gln Asn 205Gln Gln Asn 205

Thr Val GlyThr Val Gly

210210

Ser Gln ThrSer Gln Thr

Gly Asn Asp 215Gly Asn Asp 215

Ile Gly GluIle Gly Glu

220220

Arg Asp LysArg Asp Lys

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Ala Glu Asn 225Ala Glu Asn 225

Pro Val SerPro Val Ser

230230

Thr Gly GluThr Gly Glu

Lys Asn AlaLys Asn Ala

235235

Ala Thr <210> 117 <211> 238 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Ala Thr <210> 117 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v9 ECD <400> 117<223> ICOSL v9 ECD <400> 117

Asp Thr Gln Glu 1Asp Thr Gln Glu 1

Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 5 10 15Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 5 10 15

Leu Ser Cys Ala 20Leu Ser Cys Ala 20

Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp 25 30Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp 25 30

Tyr Val Tyr TrpTyr Val Tyr Trp

Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr TyrGln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr

4545

GluGlu

ValVal

HisHis

- 334 044346- 334 044346

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Arg Ile Glu Asn Val 200Arg Ile Glu Asn Val 200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Ala Glu Asn Pro Val 225Ala Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 118 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 118 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v10 ECD < 400> 118< 223> ICOSL v10 ECD < 400> 118

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15

GluGlu

- 335 044346- 335 044346

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Arg Phe His Cys 95Gln Arg Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 119 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 119 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v11 ECD<223> ICOSL v11 ECD

- 336 044346 <400> 119- 336 044346 <400> 119

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Gly Gln SerVal Leu Gly Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235Asn Ala Ala Thr 235

- 337 044346 <210> 120 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>- 337 044346 <210> 120 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v12 ECD < 400> 120< 223> ICOSL v12 ECD < 400> 120

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala CysLeu Ser Cys Ala Cys

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn AspPhe Asp Leu Asn Asp

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Tyr Ser 50Ile Pro Gln Tyr Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

- 338 044346- 338 044346

210 215 220210 215 220

Thr Glu Asn Pro Val Ser Thr Gly Glu Lys Asn Ala AlaThr Glu Asn Pro Val Ser Thr Gly Glu Lys Asn Ala Ala

225 230 235225 230 235

Thr <210> 121 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Thr <210> 121 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v13 ECD < 400> 121< 223> ICOSL v13 ECD < 400> 121

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn AspPhe Asp Leu Asn Asp

Tyr Val Tyr Trp GlnTyr Val Tyr Trp Gln

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Asn Ser 50Ile Pro Gln Asn Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr PheAsp Glu Leu Thr Phe

135135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

- 339 044346- 339 044346

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn Val Leu Leu Gln Gln AsnCys Ile Glu Asn Val Leu Leu Gln Gln Asn

200 205200 205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp Ile Gly Glu Arg Asp LysThr Gly Asn Asp Ile Gly Glu Arg Asp Lys

215 220215 220

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys Asn Ala Ala ThrSer Thr Gly Glu Lys Asn Ala Ala Thr

230 235 <210> 122 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>230 235 <210> 122 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v14 ECD < 400> 122< 223> ICOSL v14 ECD < 400> 122

Asp Thr Gln Glu LysAsp Thr Gln Glu Lys

55

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Asn Ser 50Ile Pro Gln Asn Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Pro SerVal Leu Ser Pro Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

- 340 044346- 340 044346

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 123 <211> 238 <212> БЕЛОК <213> Искусственная <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 123 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial <220>

<223> ICOSL v15 ECD <400> 123<223> ICOSL v15 ECD <400> 123

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5 последовательностьAsp Thr Gln Glu Lys 1 5 sequence

Glu Val Arg Ala Met 10Glu Val Arg Ala Met 10

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Ser Ser 50Ile Pro Gln Ser Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

- 341 044346- 341 044346

His Gly Pro Ser Gln 130His Gly Pro Ser Gln 130

Asp Glu Leu Thr PheAsp Glu Leu Thr Phe

135135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Cys Trp Ile 150Asn Val Cys Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 124 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 124 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v16 ECD <400>124<223> ICOSL v16 ECD <400>124

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp ValAsp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val

5 10155 1015

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn AspLeu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp

25302530

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 4045Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 4045

Ile Pro Gln Ser Ser Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr ArgIle Pro Gln Ser Ser Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg

55605560

Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 65 7075Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 65 7075

Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 85 9095Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 85 9095

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

Val Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu

- 342 044346- 342 044346

100100

105105

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Cys Trp Ile 150Asn Val Cys Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 125 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 125 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v17 ECD <400>125<223> ICOSL v17 ECD <400>125

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 1015Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 1015

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn AspLeu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp

25302530

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 4045Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 4045

Ile Pro Gln Ser Ser Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 5560Ile Pro Gln Ser Ser Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 5560

Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 65 7075Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 65 7075

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

- 343 044346- 343 044346

Arg Leu PheArg Leu Phe

Asn Val ThrAsn Val Thr

Pro Gln AspPro Gln Asp

Glu Gln Lys 90Glu Gln Lys 90

Phe His CysPhe His Cys

Val Leu SerVal Leu Ser

Gln Ser Leu 100Gln Ser Leu 100

Gly Phe GlnGly Phe Gln

105105

Glu Val LeuGlu Val Leu

Ser Val GluSer Val Glu

110110

Thr Leu HisThr Leu His

115115

Val Ala AlaVal Ala Ala

Asn Phe SerAsn Phe Ser

120120

Val Pro ValVal Pro Val

Val Ser Ala 125Val Ser Ala 125

His Ser ProHis Ser Pro

130130

Ser Gln AspSer Gln Asp

Glu Leu Thr 135Glu Leu Thr 135

Phe Thr CysPhe Thr Cys

140140

Thr Ser IleThr Ser Ile

Gly Tyr Pro 145Gly Tyr Pro 145

Arg Pro AsnArg Pro Asn

150150

Val Tyr TrpVal Tyr Trp

Ile Asn LysIle Asn Lys

155155

Thr Asp AsnThr Asp Asn

Leu Leu AspLeu Leu Asp

Gln Ala LeuGln Ala Leu

165165

Gln Asn AspGln Asn Asp

Thr Val Phe 170Thr Val Phe 170

Leu Asn MetLeu Asn Met

175175

Gly Leu TyrGly Leu Tyr

Asp Val Val 180Asp Val Val 180

Ser Val LeuSer Val Leu

185185

Arg Ile AlaArg Ile Ala

Arg Thr ProArg Thr Pro

190190

Val Asn IleVal Asn Ile

195195

Gly Cys ArgGly Cys Arg

Ile Glu AsnIle Glu Asn

200200

Val Leu LeuVal Leu Leu

Gln Gln Asn 205Gln Gln Asn 205

Thr Val GlyThr Val Gly

210210

Ser Gln ThrSer Gln Thr

Gly Asn Asp 215Gly Asn Asp 215

Ile Gly GluIle Gly Glu

220220

Arg Asp LysArg Asp Lys

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn 225Thr Glu Asn 225

Pro Val SerPro Val Ser

230230

Thr Gly GluThr Gly Glu

Lys Asn AlaLys Asn Ala

235235

Ala Thr <210> 126 <211> 238 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Ala Thr <210> 126 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v18 ECD <400> 126<223> ICOSL v18 ECD <400> 126

Asp Thr Gln Glu 1Asp Thr Gln Glu 1

Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 5 10 15Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 5 10 15

Leu Ser Cys Ala 20Leu Ser Cys Ala 20

Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp 25 30Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp 25 30

Tyr Val Tyr TrpTyr Val Tyr Trp

Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr TyrGln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr

4545

GluGlu

ValVal

HisHis

- 344 044346- 344 044346

Ile Pro Gln Tyr Ser 50Ile Pro Gln Tyr Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Cys Trp Ile 150Asn Val Cys Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 127 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 127 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v19 ECD < 400> 127< 223> ICOSL v19 ECD < 400> 127

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15

GluGlu

- 345 044346- 345 044346

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Tyr Ser 50Ile Pro Gln Tyr Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

Pro Ser Pro Ser GlnPro Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Arg Ile Glu Asn Val 200Arg Ile Glu Asn Val 200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 128 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 128 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v20 ECD<223> ICOSL v20 ECD

- 346 044346 <400> 128- 346 044346 <400> 128

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Pro Leu Asp Gln AlaPro Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Arg Ile Glu Asn Val 200Arg Ile Glu Asn Val 200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235Asn Ala Ala Thr 235

- 347 044346 <210> 129 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>- 347 044346 <210> 129 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v21 ECD < 400> 129< 223> ICOSL v21 ECD < 400> 129

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala CysLeu Ser Cys Ala Cys

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn AspPhe Asp Leu Asn Asp

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Ser Ser 50Ile Pro Gln Ser Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Glu Leu His Val AlaGlu Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

- 348 044346- 348 044346

210 215 220210 215 220

Thr Glu Asn Pro Val Ser Thr Gly Glu Lys Asn Ala AlaThr Glu Asn Pro Val Ser Thr Gly Glu Lys Asn Ala Ala

225 230 235225 230 235

Thr <210> 130 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Thr <210> 130 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v22 ECD < 400> 130< 223> ICOSL v22 ECD < 400> 130

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Asn Ser 50Ile Pro Gln Asn Ser 50

Ala Leu Glu Asn ValAla Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr PheAsp Glu Leu Thr Phe

135135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

- 349 044346- 349 044346

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn Val Leu Leu Gln Gln AsnCys Ile Glu Asn Val Leu Leu Gln Gln Asn

200 205200 205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp Ile Gly Glu Arg Asp LysThr Gly Asn Asp Ile Gly Glu Arg Asp Lys

215 220215 220

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys Asn Ala Ala ThrSer Thr Gly Glu Lys Asn Ala Ala Thr

230 235 <210> 131 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>230 235 <210> 131 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v23 ECD < 400> 131< 223> ICOSL v23 ECD < 400> 131

Asp Thr Gln Glu LysAsp Thr Gln Glu Lys

55

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Asp Ser 50Ile Pro Gln Asp Ser 50

Pro Leu Glu Asn ValPro Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

- 350 044346- 350 044346

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 132 <211> 238 <212> БЕЛОК <213> Искусственная <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 132 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial <220>

<223> ICOSL v24 ECD <400> 132<223> ICOSL v24 ECD <400> 132

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5 последовательностьAsp Thr Gln Glu Lys 1 5 sequence

Glu Val Arg Ala Met 10Glu Val Arg Ala Met 10

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Lys Ser 50Ile Pro Gln Lys Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

- 351 044346- 351 044346

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr PheAsp Glu Leu Thr Phe

135135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

ProPro

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 133 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 133 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v25 ECD <400>133<223> ICOSL v25 ECD <400>133

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 1015Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 1015

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn AspLeu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp

25302530

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 4045Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 4045

Ile Pro Gln Ser Ser Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 5560Ile Pro Gln Ser Ser Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 5560

Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 65 7075Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 65 7075

Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 85 9095Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 85 9095

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

Val Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu

- 352 044346- 352 044346

100100

105105

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val His Trp Ile 150Asn Val His Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 134 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 134 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v26 ECD <400>134<223> ICOSL v26 ECD <400>134

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp ValAsp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val

5 10155 1015

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn AspLeu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp

25302530

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 4045Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 4045

Ile Pro Gln Asp Ser Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 5560Ile Pro Gln Asp Ser Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 5560

Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 65 7075Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 65 7075

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

- 353 044346- 353 044346

Arg Leu PheArg Leu Phe

Asn Val ThrAsn Val Thr

Pro Gln AspPro Gln Asp

Glu Gln Lys 90Glu Gln Lys 90

Phe His CysPhe His Cys

Val Leu SerVal Leu Ser

Gln Ser Leu 100Gln Ser Leu 100

Gly Phe GlnGly Phe Gln

105105

Glu Val LeuGlu Val Leu

Ser Val GluSer Val Glu

110110

Thr Leu HisThr Leu His

115115

Val Ala AlaVal Ala Ala

Asn Phe SerAsn Phe Ser

120120

Val Pro ValVal Pro Val

Val Ser Ala 125Val Ser Ala 125

His Ser ProHis Ser Pro

130130

Ser Gln AspSer Gln Asp

Glu Leu Thr 135Glu Leu Thr 135

Phe Thr CysPhe Thr Cys

140140

Thr Ser IleThr Ser Ile

Gly Tyr Pro 145Gly Tyr Pro 145

Arg Pro AsnArg Pro Asn

150150

Ala Tyr TrpAla Tyr Trp

Ile Asn LysIle Asn Lys

155155

Thr Asp AsnThr Asp Asn

Leu Leu AspLeu Leu Asp

Gln Ala LeuGln Ala Leu

165165

Gln Asn AspGln Asn Asp

Thr Val Phe 170Thr Val Phe 170

Leu Asn MetLeu Asn Met

175175

Gly Leu TyrGly Leu Tyr

Asp Val Val 180Asp Val Val 180

Ser Val LeuSer Val Leu

185185

Arg Ile AlaArg Ile Ala

Arg Thr ProArg Thr Pro

190190

Val Asn IleVal Asn Ile

195195

Gly Cys CysGly Cys Cys

Ile Glu AsnIle Glu Asn

200200

Val Leu LeuVal Leu Leu

Gln Gln Asn 205Gln Gln Asn 205

Thr Val GlyThr Val Gly

210210

Ser Gln ThrSer Gln Thr

Gly Asn Asp 215Gly Asn Asp 215

Ile Gly GluIle Gly Glu

220220

Arg Asp LysArg Asp Lys

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn 225Thr Glu Asn 225

Pro Val SerPro Val Ser

230230

Thr Gly GluThr Gly Glu

Lys Asn AlaLys Asn Ala

235235

Ala Thr <210> 135 <211> 238 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Ala Thr <210> 135 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v27 ECD <400> 135<223> ICOSL v27 ECD <400> 135

Asp Thr Gln Glu 1Asp Thr Gln Glu 1

Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 5 10 15Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 5 10 15

Leu Ser Cys Ala 20Leu Ser Cys Ala 20

Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp 25 30Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp 25 30

Tyr Val Tyr TrpTyr Val Tyr Trp

Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr TyrGln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr

4545

GluGlu

ValVal

HisHis

- 354 044346- 354 044346

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Thr 140Thr Cys Thr Ser Thr 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 136 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 136 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v28 ECD < 400> 136< 223> ICOSL v28 ECD < 400> 136

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15

GluGlu

- 355 044346- 355 044346

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Ser Ser 50Ile Pro Gln Ser Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

ValVal

HisHis

AsnAsn

Pro 80Pro 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 137 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 137 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v29 ECD<223> ICOSL v29 ECD

- 356 044346 <400> 137- 356 044346 <400> 137

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Asn Ser 50Ile Pro Gln Asn Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Ser Ser ValAla Asn Ser Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val His Trp Ile 150Asn Val His Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Ser Val 200Cys Ile Glu Ser Val 200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235Asn Ala Ala Thr 235

- 357 044346 <210> 138 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>- 357 044346 <210> 138 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v30 ECD < 400> 138< 223> ICOSL v30 ECD < 400> 138

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala CysLeu Ser Cys Ala Cys

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn AspPhe Asp Leu Asn Asp

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Ser Ser 50Ile Pro Gln Ser Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Gln Gly Asp Phe Ser 75Gln Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Pro Leu Gln Gln AsnPro Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

- 358 044346- 358 044346

210 215 220210 215 220

Thr Glu Asn Pro Val Ser Thr Gly Glu Lys Asn Ala AlaThr Glu Asn Pro Val Ser Thr Gly Glu Lys Asn Ala Ala

225 230 235225 230 235

Thr <210> 139 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Thr <210> 139 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v31 ECD < 400> 139< 223> ICOSL v31 ECD < 400> 139

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn AspPhe Asp Leu Asn Asp

Tyr Val Tyr Trp GlnTyr Val Tyr Trp Gln

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Ser Ser 50Ile Pro Gln Ser Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr PheAsp Glu Leu Thr Phe

135135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Gly Asn 155Asn Lys Thr Gly Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

- 359 044346- 359 044346

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn Val Leu Leu Gln Gln AsnCys Ile Glu Asn Val Leu Leu Gln Gln Asn

200 205200 205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp Ile Gly Glu Arg Asp LysThr Gly Asn Asp Ile Gly Glu Arg Asp Lys

215 220215 220

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys Asn Ala Ala ThrSer Thr Gly Glu Lys Asn Ala Ala Thr

230 235 <210> 140 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>230 235 <210> 140 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v32 ECD < 400> 140< 223> ICOSL v32 ECD < 400> 140

Asp Thr Gln Glu LysAsp Thr Gln Glu Lys

55

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Asp Ser 50Ile Pro Gln Asp Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser HisHis Ser Pro Ser His

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

- 360 044346- 360 044346

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 141 <211> 238 <212> БЕЛОК <213> Искусственная <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 141 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial <220>

<223> ICOSL v33 ECD <400> 141<223> ICOSL v33 ECD <400> 141

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5 последовательностьAsp Thr Gln Glu Lys 1 5 sequence

Glu Val Arg Ala Met 10Glu Val Arg Ala Met 10

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Ser Ser 50Ile Pro Gln Ser Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe Asp Cys 95Gln Lys Phe Asp Cys 95

Val Phe Ser Arg SerVal Phe Ser Arg Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

PhePhe

ValVal

ProPro

- 361 044346- 361 044346

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr PheAsp Glu Leu Thr Phe

135135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 142 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 142 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v34 ECD <400>142<223> ICOSL v34 ECD <400>142

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp ValAsp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val

5 10155 1015

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn AspLeu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp

25302530

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 4045Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 4045

Ile Pro Gln Ser Ser Ser Leu Glu Tyr Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 5560Ile Pro Gln Ser Ser Ser Leu Glu Tyr Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 5560

Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 65 7075Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 65 7075

Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe Asp Cys 85 9095Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe Asp Cys 85 9095

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

PhePhe

ValVal

Val Phe Ser Arg Ser Leu Glu Phe Gln Glu Val Leu Ser Val GluVal Phe Ser Arg Ser Leu Glu Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu

- 362 044346- 362 044346

100100

105105

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Ser Ser ValAla Asn Ser Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 143 <211> 117 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 143 <211> 117 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> NKp30 v1 ECD < 400> 143<223>NKp30 v1 ECD <400>143

Leu Trp Val Ser Gln Pro Pro Glu Ile Arg Thr Leu Glu Gly Ser 1 5 10 15Leu Trp Val Ser Gln Pro Pro Glu Ile Arg Thr Leu Glu Gly Ser 1 5 10 15

Ala Phe Leu Pro Cys Ser Phe Asn Ala Ser Gln Gly Arg Val AlaAla Phe Leu Pro Cys Ser Phe Asn Ala Ser Gln Gly Arg Val Ala

25 3025 30

Gly Ser Val Thr Trp Phe Arg Asp Glu Val Val Pro Gly Lys Glu 35 40 45Gly Ser Val Thr Trp Phe Arg Asp Glu Val Val Pro Gly Lys Glu 35 40 45

Arg Asn Gly Thr Pro Glu Phe Arg Gly Arg Leu Val Pro Leu Ala 50 55 60Arg Asn Gly Thr Pro Glu Phe Arg Gly Arg Leu Val Pro Leu Ala 50 55 60

Ser Arg Phe Leu His Asp His Gln Ala Glu Leu His Ile Arg Asp 65 70 75Ser Arg Phe Leu His Asp His Gln Ala Glu Leu His Ile Arg Asp 65 70 75

SerSer

IleIle

ValVal

ProPro

Val 80Val 80

- 363 044346- 363 044346

Arg Gly His Asp Ala Gly Ile Tyr Val Cys Arg 85 90Arg Gly His Asp Ala Gly Ile Tyr Val Cys Arg 85 90

Val Glu Val Leu GlyVal Glu Val Leu Gly

Leu Gly Val Gly Thr Gly Asn Gly Thr Arg Leu Val Val Glu Lys GluLeu Gly Val Gly Thr Gly Asn Gly Thr Arg Leu Val Val Glu Lys Glu

100 105 110100 105 110

His Pro Gln Leu GlyHis Pro Gln Leu Gly

115 <210> 144 <211> 117 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>115 <210> 144 <211> 117 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> NKp30 v2 ECD < 400> 144<223>NKp30 v2 ECD <400>144

Leu Trp Val SerLeu Trp Val Ser

Gln Pro Pro Glu Ile Arg Thr 5 10Gln Pro Pro Glu Ile Arg Thr 5 10

Leu Glu Gly Ser SerLeu Glu Gly Ser Ser

Ala Phe Leu ProAla Phe Leu Pro

Cys Ser Phe Asn Ala Ser GlnCys Ser Phe Asn Ala Ser Gln

Gly Arg Val Ala Ile 30Gly Arg Val Ala Ile 30

Gly Ser Val Thr Trp Phe Arg Asp Glu Val Val Pro Gly Lys Glu Val 35 40 45Gly Ser Val Thr Trp Phe Arg Asp Glu Val Val Pro Gly Lys Glu Val 35 40 45

Arg Asn Gly Thr Pro Glu Phe Arg Gly Arg Leu Ala Pro Leu Ala Ser 50 55 60Arg Asn Gly Thr Pro Glu Phe Arg Gly Arg Leu Ala Pro Leu Ala Ser 50 55 60

Ser Arg Phe Leu His Asp His Gln Ala Glu Leu His Ile Arg Asp Val 65 70 75 80Ser Arg Phe Leu His Asp His Gln Ala Glu Leu His Ile Arg Asp Val 65 70 75 80

Arg Gly His Asp Ala Ser Ile Tyr Val Cys Arg Val Glu Val Leu Gly 85 90 95Arg Gly His Asp Ala Ser Ile Tyr Val Cys Arg Val Glu Val Leu Gly 85 90 95

Leu Gly Val Gly Thr Gly Asn Gly Thr Arg Leu Val Val Glu Lys GluLeu Gly Val Gly Thr Gly Asn Gly Thr Arg Leu Val Val Glu Lys Glu

100 105 110100 105 110

His Pro Gln Leu GlyHis Pro Gln Leu Gly

115 <210> 145 <211> 117 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>115 <210> 145 <211> 117 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> NKp30 v3 ECD<223> NKp30 v3 ECD

- 364 044346 <400> 145- 364 044346 <400> 145

Leu Trp Val Ser Gln Pro Pro Glu Ile Arg Thr Leu Glu Gly Ser Ser 1 5 10 15Leu Trp Val Ser Gln Pro Pro Glu Ile Arg Thr Leu Glu Gly Ser Ser 1 5 10 15

Ala Phe Leu Pro CysAla Phe Leu Pro Cys

Ser Phe Asn Ala Ser Gln Gly Arg Leu Ala IleSer Phe Asn Ala Ser Gln Gly Arg Leu Ala Ile

30thirty

Gly Ser Val ThrGly Ser Val Thr

Trp Phe Arg Asp Glu Val Val Pro 40Trp Phe Arg Asp Glu Val Val Pro 40

Gly Lys Glu Val 45Gly Lys Glu Val 45

Arg Asn Gly Thr 50Arg Asn Gly Thr 50

Pro Glu Phe Arg Gly Arg Leu ValPro Glu Phe Arg Gly Arg Leu Val

6060

Pro Leu Ala SerPro Leu Ala Ser

Ser Arg Phe Leu 65Ser Arg Phe Leu 65

His Asp His Gln Ala Glu Leu HisHis Asp His Gln Ala Glu Leu His

7575

Ile Arg Asp Val 80Ile Arg Asp Val 80

Arg Gly His AspArg Gly His Asp

Ala Ser Ile Tyr Val Cys Arg Val 85 90Ala Ser Ile Tyr Val Cys Arg Val 85 90

Glu Val Leu Gly 95Glu Val Leu Gly 95

Leu Gly ValLeu Gly Val

Gly Thr Gly Asn Gly Thr Arg Leu Val Val 100 105Gly Thr Gly Asn Gly Thr Arg Leu Val Val 100 105

Glu Lys Glu 110Glu Lys Glu 110

His Pro Gln Leu GlyHis Pro Gln Leu Gly

115 <210> 146 <211> 117 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>115 <210> 146 <211> 117 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> NKp30 v4 ECD <400> 146<223> NKp30 v4 ECD <400> 146

Leu Trp Val Ser Gln Pro Pro Glu Ile Arg Thr Leu Glu Gly Ser Ser 1 5 10 15Leu Trp Val Ser Gln Pro Pro Glu Ile Arg Thr Leu Glu Gly Ser Ser 1 5 10 15

Ala Phe Leu ProAla Phe Leu Pro

Cys SerCys Ser

Phe Asn Ala Ser Gln Gly Arg Leu Ala IlePhe Asn Ala Ser Gln Gly Arg Leu Ala Ile

30thirty

Gly Ser Val ThrGly Ser Val Thr

Trp PheTrp Phe

Arg Asp Glu Val Val Pro Gly Lys Glu ValArg Asp Glu Val Val Pro Gly Lys Glu Val

4545

Arg Asn Gly Thr 50Arg Asn Gly Thr 50

Pro GluPro Glu

Phe Arg Gly Arg Leu Ala Pro Leu Ala Pro 55 60Phe Arg Gly Arg Leu Ala Pro Leu Ala Pro 55 60

Ser Arg Phe Leu 65Ser Arg Phe Leu 65

His AspHis Asp

His Gln Ala Glu Leu His Ile Arg Asp Val 75 80His Gln Ala Glu Leu His Ile Arg Asp Val 75 80

- 365 044346- 365 044346

Arg Gly His AspArg Gly His Asp

Leu Gly Val GlyLeu Gly Val Gly

100100

Ala Ser Ile Tyr 85Ala Ser Ile Tyr 85

Thr Gly Asn GlyThr Gly Asn Gly

Val Cys Arg Val 90Val Cys Arg Val 90

Thr Arg Leu Val 105Thr Arg Leu Val 105

Glu Val Leu Gly 95Glu Val Leu Gly 95

Val Glu Lys Glu 110Val Glu Lys Glu 110

His Pro Gln Leu GlyHis Pro Gln Leu Gly

115 <210> 147 <211> 117 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>115 <210> 147 <211> 117 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> NKp30 v5 ECD <400> 147<223> NKp30 v5 ECD <400> 147

Leu Trp Val Ser 1Leu Trp Val Ser 1

Gln Pro Pro Glu Ile Arg Thr 5 10Gln Pro Pro Glu Ile Arg Thr 5 10

Leu Glu Gly Ser SerLeu Glu Gly Ser Ser

Ala Phe Leu ProAla Phe Leu Pro

Cys Ser Phe Asn Ala Ser GlnCys Ser Phe Asn Ala Ser Gln

Gly Arg Leu Ala IleGly Arg Leu Ala Ile

Gly Ser Val Thr Trp Phe Arg Asp Glu Val Val Pro Gly Lys Glu Val 35 4045Gly Ser Val Thr Trp Phe Arg Asp Glu Val Val Pro Gly Lys Glu Val 35 4045

Arg Asn Gly Thr Pro Glu Phe Arg Gly Arg Leu Ala Pro Leu Ala Ser 50 5560Arg Asn Gly Thr Pro Glu Phe Arg Gly Arg Leu Ala Pro Leu Ala Ser 50 5560

Ser Arg Phe Leu His Asp His Gln Ala Glu Leu His Ile Arg Asp Val 65 70 7580Ser Arg Phe Leu His Asp His Gln Ala Glu Leu His Ile Arg Asp Val 65 70 7580

Arg Gly His Asp Ala Gly Ile Tyr Val Cys Arg Val Glu Val Leu Gly 85 9095Arg Gly His Asp Ala Gly Ile Tyr Val Cys Arg Val Glu Val Leu Gly 85 9095

Leu Gly Val Gly Thr Gly Asn Gly Thr Arg Leu Val Val Glu Lys GluLeu Gly Val Gly Thr Gly Asn Gly Thr Arg Leu Val Val Glu Lys Glu

100 105110100 105110

His Pro Gln Leu GlyHis Pro Gln Leu Gly

115 <210>148 <211>224 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>115 <210>148 <211>224 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> CD86 v1 ECD<223> CD86 v1 ECD

- 366 044346 <400> 148- 366 044346 <400> 148

Ala Pro Leu Lys Ile 1 5Ala Pro Leu Lys Ile 1 5

Gln Ala Tyr Phe AsnGln Ala Tyr Phe Asn

Glu Thr Ala Asp LeuGlu Thr Ala Asp Leu

Cys Gln Phe Ala Asn 20Cys Gln Phe Ala Asn 20

Ser Gln Asn Gln SerSer Gln Asn Gln Ser

Leu Ser Glu Leu ValLeu Ser Glu Leu Val

Phe Trp His Asp Gln 35Phe Trp His Asp Gln 35

Glu Asn Leu Val LeuGlu Asn Leu Val Leu

Asn Glu Val Tyr Leu 45Asn Glu Val Tyr Leu 45

Lys Glu Lys Phe Asp 50Lys Glu Lys Phe Asp 50

Ser Val His Ser Lys 55Ser Val His Ser Lys 55

Tyr Met Gly Arg Thr 60Tyr Met Gly Arg Thr 60

Phe Asp Ser Asp Ser 65Phe Asp Ser Asp Ser 65

Trp Thr Leu Arg Leu 70Trp Thr Leu Arg Leu 70

His Asn Leu Gln Ile 75His Asn Leu Gln Ile 75

Asp Lys Gly Leu Tyr 85Asp Lys Gly Leu Tyr 85

Gln Cys Ile Ile Leu 90Gln Cys Ile Ile Leu 90

His Lys Lys Pro Thr 95His Lys Lys Pro Thr 95

Met Ile Arg Ile HisMet Ile Arg Ile His

100100

His Met Asn Ser GluHis Met Asn Ser Glu

105105

Leu Ser Val Leu AlaLeu Ser Val Leu Ala

110110

Phe Ser Gln Pro GluPhe Ser Gln Pro Glu

115115

Ile Val Pro Ile SerIle Val Pro Ile Ser

120120

Asn Ile Thr Glu AsnAsn Ile Thr Glu Asn

125125

Tyr Ile Asn Leu Thr 130Tyr Ile Asn Leu Thr 130

Cys Ser Ser Ile His 135Cys Ser Ser Ile His 135

Gly Tyr Pro Glu Pro 140Gly Tyr Pro Glu Pro 140

Lys Met Ser Val Leu 145Lys Met Ser Val Leu 145

Leu Arg Thr Lys Asn 150Leu Arg Thr Lys Asn 150

Ser Thr Ile Glu Tyr 155Ser Thr Ile Glu Tyr 155

Gly Val Met Gln LysGly Val Met Gln Lys

165165

Ser Gln Asp Asn ValSer Gln Asp Asn Val

170170

Thr Glu Leu Tyr AspThr Glu Leu Tyr Asp

175175

Ser Ile Ser Leu SerSer Ile Ser Leu Ser

180180

Val Ser Phe Pro AspVal Ser Phe Pro Asp

185185

Val Thr Ser Asn MetVal Thr Ser Asn Met

190190

Ile Phe Cys Ile Leu 195Ile Phe Cys Ile Leu 195

Glu Thr Asp Lys Thr 200Glu Thr Asp Lys Thr 200

Arg Leu Leu Ser Ser 205Arg Leu Leu Ser Ser 205

Phe Ser Ile Glu LeuPhe Ser Ile Glu Leu

210210

Glu Asp Pro Gln ProGlu Asp Pro Gln Pro

215215

Pro Pro Asp His Ile 220Pro Pro Asp His Ile 220

ProPro

ValVal

GlyGly

SerSer

Lys 80Lys 80

GlyGly

AsnAsn

ValVal

LysLys

Asp 160Asp 160

ValVal

ThrThr

ProPro

Pro <210> 149 <211> 224 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательностьPro <210> 149 <211> 224 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence

- 367 044346 <220>- 367 044346 <220>

<223><223>

CD86 v2 ECD <400>CD86 v2 ECD <400>

149149

Ala 1Ala 1

ProPro

LeuLeu

LysLys

IleIle

GlnGln

AlaAla

TyrTyr

PhePhe

AsnAsn

GluGlu

ThrThr

AlaAla

AspAsp

Leu 15Leu 15

CysCys

GlnGln

PhePhe

Ala 20Ala 20

AsnAsn

SerSer

GlnGln

AsnAsn

Gln 25Gln 25

SerSer

LeuLeu

SerSer

GluGlu

Leu 30Leu 30

ValVal

PhePhe

TrpTrp

His 35His 35

AspAsp

GlnGln

GluGlu

AsnAsn

Leu 40Leu 40

ValVal

LeuLeu

AsnAsn

GluGlu

Val 45Val 45

TyrTyr

LeuLeu

LysLys

Glu 50Glu 50

LysLys

PhePhe

AspAsp

SerSer

Val 55Val 55

HisHis

SerSer

LysLys

TyrTyr

Met 60Met 60

GlyGly

ArgArg

ThrThr

Phe 65Phe 65

AspAsp

SerSer

AspAsp

SerSer

Trp 70Trp 70

ThrThr

LeuLeu

ArgArg

LeuLeu

His 75His 75

AsnAsn

LeuLeu

GlnGln

IleIle

AspAsp

LysLys

GlyGly

LeuLeu

Tyr 85Tyr 85

GlnGln

CysCys

IleIle

IleIle

His 90His 90

HisHis

LysLys

LysLys

ProPro

Thr 95Thr 95

MetMet

IleIle

ArgArg

IleIle

100100

HisHis

GlnGln

MetMet

AsnAsn

SerSer

105105

GluGlu

LeuLeu

SerSer

ValVal

LeuLeu

110110

AlaAla

PhePhe

SerSer

GlnGln

115115

ProPro

GluGlu

IleIle

ValVal

ProPro

120120

IleIle

SerSer

AsnAsn

IleIle

ThrThr

125125

GluGlu

AsnAsn

TyrTyr

IleIle

130130

AsnAsn

LeuLeu

ThrThr

CysCys

SerSer

135135

SerSer

IleIle

HisHis

GlyGly

Tyr 140Tyr 140

ProPro

GluGlu

ProPro

LysLys

145145

MetMet

SerSer

ValVal

LeuLeu

LeuLeu

150150

ArgArg

ThrThr

LysLys

AsnAsn

SerSer

155155

ThrThr

IleIle

GluGlu

TyrTyr

GlyGly

ValVal

MetMet

GlnGln

Lys 165Lys 165

SerSer

GlnGln

AspAsp

AsnAsn

ValVal

170170

ThrThr

GluGlu

LeuLeu

TyrTyr

AspAsp

175175

SerSer

IleIle

SerSer

LeuLeu

180180

SerSer

ValVal

SerSer

PhePhe

ProPro

185185

AspAsp

ValVal

ThrThr

SerSer

AsnAsn

190190

MetMet

IleIle

PhePhe

CysCys

195195

IleIle

LeuLeu

GluGlu

ThrThr

Asp 200Asp 200

LysLys

ThrThr

ArgArg

LeuLeu

LeuLeu

205205

SerSer

SerSer

PhePhe

Ser 210Ser 210

IleIle

GluGlu

LeuLeu

GluGlu

Asp 215Asp 215

ProPro

GlnGln

ProPro

ProPro

ProPro

220220

AspAsp

HisHis

IleIle

ProPro

ValVal

GlyGly

SerSer

Lys 80Lys 80

GlyGly

AsnAsn

ValVal

LysLys

Asp 160Asp 160

ValVal

ThrThr

ProPro

Pro <210> 150Pro <210> 150

- 368 044346 <211> 224 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>- 368 044346 <211> 224 < 212> PROTEIN < 213> Artificial sequence <220>

< 223> CD86 v3 ECD < 400> 150< 223 > CD86 v3 ECD < 400 > 150

Ala Pro Leu LysAla Pro Leu Lys

Ile Gln Ala Tyr 5Ile Gln Ala Tyr 5

Phe Asn Glu ThrPhe Asn Glu Thr

Ala Asp Leu ProAla Asp Leu Pro

Cys Gln Phe AlaCys Gln Phe Ala

Asn Ser Gln AsnAsn Ser Gln Asn

Gln Ser Leu Ser 25Gln Ser Leu Ser 25

Glu Leu Val ValGlu Leu Val Val

Phe Trp Gln Asp 35Phe Trp Gln Asp 35

Gln Glu Asn LeuGln Glu Asn Leu

Val Leu Asn GluVal Leu Asn Glu

Val Tyr Leu Gly 45Val Tyr Leu Gly 45

Lys Glu Lys Phe 50Lys Glu Lys Phe 50

Asp Ser Val His 55Asp Ser Val His 55

Ser Lys Tyr Met 60Ser Lys Tyr Met 60

Gly Arg Thr SerGly Arg Thr Ser

Phe Asp Ser Asp 65Phe Asp Ser Asp 65

Ser Trp Thr Leu 70Ser Trp Thr Leu 70

Arg Leu His Asn 75Arg Leu His Asn 75

Leu Gln Ile Lys 80Leu Gln Ile Lys 80

Asp Lys Gly LeuAsp Lys Gly Leu

Tyr Gln Cys Ile 85Tyr Gln Cys Ile 85

Ile Leu His Lys 90Ile Leu His Lys 90

Lys Pro Thr Gly 95Lys Pro Thr Gly 95

Met Ile Arg IleMet Ile Arg Ile

100100

His Gln Met AsnHis Gln Met Asn

Ser Glu Leu Ser 105Ser Glu Leu Ser 105

Val Leu Ala AsnVal Leu Ala Asn

110110

Phe Ser Gln ProPhe Ser Gln Pro

115115

Glu Ile Val ProGlu Ile Val Pro

120120

Ile Ser Asn IleIle Ser Asn Ile

Thr Glu Asn ValThr Glu Asn Val

125125

Tyr Ile Asn Leu 130Tyr Ile Asn Leu 130

Thr Cys Ser SerThr Cys Ser Ser

135135

Ile His Gly TyrIle His Gly Tyr

140140

Pro Glu Pro LysPro Glu Pro Lys

Lys Met Ser Val 145Lys Met Ser Val 145

Leu Leu Arg Thr 150Leu Leu Arg Thr 150

Lys Asn Ser ThrLys Asn Ser Thr

155155

Ile Glu Tyr AspIle Glu Tyr Asp

160160

Gly Val Met GlnGly Val Met Gln

Lys Ser Gln Asp 165Lys Ser Gln Asp 165

Asn Val Thr GluAsn Val Thr Glu

170170

Leu Tyr Asp ValLeu Tyr Asp Val

175175

Ser Ile Ser LeuSer Ile Ser Leu

180180

Ser Val Ser PheSer Val Ser Phe

Pro Asp Val Thr 185Pro Asp Val Thr 185

Ser Asn Met ThrSer Asn Met Thr

190190

Ile Phe Cys IleIle Phe Cys Ile

195195

Leu Glu Thr AspLeu Glu Thr Asp

200200

Lys Thr Arg LeuLys Thr Arg Leu

Leu Ser Ser Pro 205Leu Ser Ser Pro 205

Phe Ser Ile GluPhe Ser Ile Glu

210210

Leu Glu Asp ProLeu Glu Asp Pro

215215

Gln Pro Pro ProGln Pro Pro Pro

220220

Asp His Ile ProAsp His Ile Pro

- 369 044346 <210> 151 <211> 224 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>- 369 044346 <210> 151 <211> 224 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> CD86 v4 ECD <400> 151<223> CD86 v4 ECD <400> 151

Ala Pro Leu Lys Ile 1 5Ala Pro Leu Lys Ile 1 5

Gln Ala Tyr Phe AsnGln Ala Tyr Phe Asn

Glu Thr Ala Asp LeuGlu Thr Ala Asp Leu

Cys Gln Phe Ala Asn 20Cys Gln Phe Ala Asn 20

Ser Gln Asn Gln SerSer Gln Asn Gln Ser

Leu Ser Glu Leu ValLeu Ser Glu Leu Val

Phe Trp Gln Asp Gln 35Phe Trp Gln Asp Gln 35

Glu Asn Leu Val LeuGlu Asn Leu Val Leu

Asn Glu Val Tyr Leu 45Asn Glu Val Tyr Leu 45

Lys Glu Lys Phe Asp 50Lys Glu Lys Phe Asp 50

Ser Val His Ser Lys 55Ser Val His Ser Lys 55

Tyr Met Gly Arg Thr 60Tyr Met Gly Arg Thr 60

Phe Asp Ser Asp Ser 65Phe Asp Ser Asp Ser 65

Trp Thr Leu Arg Leu 70Trp Thr Leu Arg Leu 70

His Asn Leu Gln Ile 75His Asn Leu Gln Ile 75

Asp Lys Gly Leu Tyr 85Asp Lys Gly Leu Tyr 85

Gln Cys Ile Ile His 90Gln Cys Ile Ile His 90

His Lys Lys Pro Thr 95His Lys Lys Pro Thr 95

Met Ile Arg Ile HisMet Ile Arg Ile His

100100

His Met Asn Ser GluHis Met Asn Ser Glu

105105

Leu Ser Val Leu AlaLeu Ser Val Leu Ala

110110

Phe Ser Gln Pro GluPhe Ser Gln Pro Glu

115115

Ile Val Pro Ile SerIle Val Pro Ile Ser

120120

Asn Ile Thr Glu AsnAsn Ile Thr Glu Asn

125125

Tyr Ile Asn Leu ThrTyr Ile Asn Leu Thr

130130

Cys Ser Ser Ile His 135Cys Ser Ser Ile His 135

Gly Tyr Pro Glu ProGly Tyr Pro Glu Pro

140140

Lys Met Ser Val Leu 145Lys Met Ser Val Leu 145

Leu Arg Thr Lys Asn 150Leu Arg Thr Lys Asn 150

Ser Thr Ile Glu Tyr 155Ser Thr Ile Glu Tyr 155

Gly Val Met Gln LysGly Val Met Gln Lys

165165

Ser Gln Asp Asn ValSer Gln Asp Asn Val

170170

Thr Glu Leu Tyr AspThr Glu Leu Tyr Asp

175175

Ser Ile Ser Leu SerSer Ile Ser Leu Ser

180180

Val Ser Phe Pro AspVal Ser Phe Pro Asp

185185

Val Thr Ser Asn MetVal Thr Ser Asn Met

190190

Ile Phe Cys Ile Leu 195Ile Phe Cys Ile Leu 195

Glu Thr Asp Lys Thr 200Glu Thr Asp Lys Thr 200

Arg Leu Leu Ser Ser 205Arg Leu Leu Ser Ser 205

ProPro

ValVal

GlyGly

SerSer

Lys 80Lys 80

GlyGly

AsnAsn

ValVal

LysLys

Asp 160Asp 160

ValVal

ThrThr

ProPro

- 370 044346- 370 044346

Phe Ser Ile Glu Leu Glu Asp ProPhe Ser Ile Glu Leu Glu Asp Pro

210 215210 215

Gln Pro Pro Pro Asp His IleGln Pro Pro Pro Asp His Ile

220220

Pro <210>152 <211>101 <212> БЕЛОК <213> Homo sapiens <400>152Pro <210>152 <211>101 <212> PROTEIN <213> Homo sapiens <400>152

Val Ile His Val Thr 15Val Ile His Val Thr 15

Lys Glu Val Lys GluLys Glu Val Lys Glu

Val Ala Thr Leu SerVal Ala Thr Leu Ser

Gly His Asn Val Ser 20Gly His Asn Val Ser 20

Val Glu Glu Leu AlaVal Glu Glu Leu Ala

Gln Thr Arg Ile Tyr 30Gln Thr Arg Ile Tyr 30

Gln Lys Glu Lys Lys 35Gln Lys Glu Lys Lys 35

Met Val Leu Thr MetMet Val Leu Thr Met

Met Ser Gly Asp Met 45Met Ser Gly Asp Met 45

Ile Trp Pro Glu Tyr 50Ile Trp Pro Glu Tyr 50

Lys Asn Arg Thr Ile 55Lys Asn Arg Thr Ile 55

Phe Asp Ile Thr Asn 60Phe Asp Ile Thr Asn 60

Leu Ser Ile Val Ile 65Leu Ser Ile Val Ile 65

Leu Ala Leu Arg Pro 70Leu Ala Leu Arg Pro 70

Ser Asp Glu Gly Thr 75Ser Asp Glu Gly Thr 75

Glu Cys Val Val Leu 85Glu Cys Val Val Leu 85

Lys Tyr Glu Lys Asp 90Lys Tyr Glu Lys Asp 90

Ala Phe Lys Arg Glu 95Ala Phe Lys Arg Glu 95

CysCys

TrpTrp

AsnAsn

AsnAsn

Tyr 80Tyr 80

HisHis

Leu Ala Glu Val ThrLeu Ala Glu Val Thr

100 <210> 153 <211> 101 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>100 <210> 153 <211> 101 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> CD80 v1 IgV <400> 153<223> CD80 v1 IgV <400> 153

Val Ile His Val 1Val Ile His Val 1

Gly His Asn Val 20Gly His Asn Val 20

Gln Lys Glu Lys 35Gln Lys Glu Lys 35

Ile Trp Pro GluIle Trp Pro Glu

Thr Lys Glu Val 5Thr Lys Glu Val 5

Ser Val Glu GluSer Val Glu Glu

Lys Met Val Leu 40Lys Met Val Leu 40

Tyr Lys Asn ArgTyr Lys Asn Arg

Lys Glu Val Ala Thr Leu SerLys Glu Val Ala Thr Leu Ser

1515

Leu Ala Gln Thr Arg Ile TyrLeu Ala Gln Thr Arg Ile Tyr

30thirty

Thr Met Met Ser Gly Asp Met 45Thr Met Met Ser Gly Asp Met 45

Thr Ile Phe Asp Ile Thr AsnThr Ile Phe Asp Ile Thr Asn

CysCys

TrpTrp

AsnAsn

AsnAsn

- 371 044346- 371 044346

Leu Ser Ile Val 65Leu Ser Ile Val 65

Glu Cys Val ValGlu Cys Val Val

Ile Gln Ala Leu Arg Pro Ser Asp Glu Gly ThrIle Gln Ala Leu Arg Pro Ser Asp Glu Gly Thr

70757075

Leu Lys Tyr Glu Lys Asp Gly Phe Lys Arg Glu 85 9095Leu Lys Tyr Glu Lys Asp Gly Phe Lys Arg Glu 85 9095

Tyr 80Tyr 80

HisHis

Leu Ala Glu Val ThrLeu Ala Glu Val Thr

100 <210>154 <211>101 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>100 <210>154 <211>101 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> CD80 v4 IgV <400> 154<223> CD80 v4 IgV <400> 154

Val Ile His Met Thr 1 5Val Ile His Met Thr 1 5

Lys Glu Val Lys GluLys Glu Val Lys Glu

Val Ala Thr Leu SerVal Ala Thr Leu Ser

Gly His Asn Val Ser 20Gly His Asn Val Ser 20

Val Glu Glu Leu AlaVal Glu Glu Leu Ala

Gln Thr Arg Ile TyrGln Thr Arg Ile Tyr

Gln Lys Glu Lys Lys 35Gln Lys Glu Lys Lys 35

Met Val Leu Thr MetMet Val Leu Thr Met

Met Ser Gly Asp Met 45Met Ser Gly Asp Met 45

Ile Trp Pro Glu Tyr 50Ile Trp Pro Glu Tyr 50

Lys Asn Arg Thr Ile 55Lys Asn Arg Thr Ile 55

Phe Asp Ile Thr Asn 60Phe Asp Ile Thr Asn 60

Leu Ser Ile Val Ile 65Leu Ser Ile Val Ile 65

Gln Ala Leu Arg Pro 70Gln Ala Leu Arg Pro 70

Ser Asp Glu Gly Thr 75Ser Asp Glu Gly Thr 75

Glu Cys Val Val Leu 85Glu Cys Val Val Leu 85

Lys Tyr Glu Lys Asp 90Lys Tyr Glu Lys Asp 90

Gly Phe Lys Arg Glu 95Gly Phe Lys Arg Glu 95

CysCys

TrpTrp

AsnAsn

AsnAsn

Tyr 80Tyr 80

HisHis

Leu Ala Glu Val ThrLeu Ala Glu Val Thr

100 <210> 155 <211> 101 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>100 <210> 155 <211> 101 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> CD80 v6 IgV <400> 155<223> CD80 v6 IgV <400> 155

- 372 044346- 372 044346

Val Ile His Val Thr Lys Glu Val 1 5Val Ile His Val Thr Lys Glu Val 1 5

Lys Glu Val Ala Thr Leu SerLys Glu Val Ala Thr Leu Ser

1515

Gly His Asn Leu 20Gly His Asn Leu 20

Ser Val Glu Glu Leu Ala Gln Thr Arg Ile Tyr 25 30Ser Val Glu Glu Leu Ala Gln Thr Arg Ile Tyr 25 30

Gln Lys Glu Lys 35Gln Lys Glu Lys 35

Lys Met Val Leu Thr Met Met Ser Gly Asp MetLys Met Val Leu Thr Met Met Ser Gly Asp Met

4545

Ile Trp Pro Glu 50Ile Trp Pro Glu 50

Tyr Lys Asn Arg Thr Ile Phe Asp Ile Thr Asn 55 60Tyr Lys Asn Arg Thr Ile Phe Asp Ile Thr Asn 55 60

Leu Ser Ile Val 65Leu Ser Ile Val 65

Ile Gln Ala Leu Arg Pro Ser Asp Glu Gly ThrIle Gln Ala Leu Arg Pro Ser Asp Glu Gly Thr

7575

Glu Cys Val ValGlu Cys Val Val

Leu Lys Tyr Glu Lys Asp Ser Phe Lys Arg Glu 85 90 95Leu Lys Tyr Glu Lys Asp Ser Phe Lys Arg Glu 85 90 95

CysCys

TrpTrp

AsnAsn

AsnAsn

Tyr 80Tyr 80

HisHis

Leu Ala Glu Val ThrLeu Ala Glu Val Thr

100 <210> 156 <211> 101 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>100 <210> 156 <211> 101 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> CD80 v7 IgV <400> 156<223> CD80 v7 IgV <400> 156

Val Ile His Val Thr 1 5Val Ile His Val Thr 1 5

Lys Glu Val Lys GluLys Glu Val Lys Glu

Val Ala Thr Leu SerVal Ala Thr Leu Ser

Gly His Asn Val Ser 20Gly His Asn Val Ser 20

Val Glu Glu Leu AlaVal Glu Glu Leu Ala

Gln Thr Arg Ile Tyr 30Gln Thr Arg Ile Tyr 30

Gln Lys Glu Lys Lys 35Gln Lys Glu Lys Lys 35

Met Val Leu Thr MetMet Val Leu Thr Met

Met Pro Gly Asp Met 45Met Pro Gly Asp Met 45

Ile Trp Pro Glu Tyr 50Ile Trp Pro Glu Tyr 50

Lys Asn Arg Thr Ile 55Lys Asn Arg Thr Ile 55

Phe Asp Ile Thr Asn 60Phe Asp Ile Thr Asn 60

Leu Ser Ile Val Ile 65Leu Ser Ile Val Ile 65

Gln Ala Leu Arg Pro 70Gln Ala Leu Arg Pro 70

Ser Asp Glu Gly Thr 75Ser Asp Glu Gly Thr 75

Glu Cys Val Val Leu 85Glu Cys Val Val Leu 85

Lys Tyr Glu Lys Asp 90Lys Tyr Glu Lys Asp 90

Gly Phe Lys Arg Glu 95Gly Phe Lys Arg Glu 95

CysCys

TrpTrp

AsnAsn

AsnAsn

Tyr 80Tyr 80

HisHis

Leu Ala Glu Val ThrLeu Ala Glu Val Thr

- 373 044346- 373 044346

100 <210> 157 <211> 101 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>100 <210> 157 <211> 101 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> CD80 v9 IgV <400> 157<223> CD80 v9 IgV <400> 157

Val Ile His Val Thr 1 5Val Ile His Val Thr 1 5

Lys Glu Val Lys GluLys Glu Val Lys Glu

Val Ala Thr Leu SerVal Ala Thr Leu Ser

Gly His Asn Val Ser 20Gly His Asn Val Ser 20

Val Glu Glu Leu AlaVal Glu Glu Leu Ala

Gln Thr Arg Ile Tyr 30Gln Thr Arg Ile Tyr 30

Gln Lys Glu Lys Lys 35Gln Lys Glu Lys Lys 35

Met Val Leu Thr MetMet Val Leu Thr Met

Met Ser Gly Asp Met 45Met Ser Gly Asp Met 45

Ile Trp Pro Glu Tyr 50Ile Trp Pro Glu Tyr 50

Lys Asn Arg Thr Ile 55Lys Asn Arg Thr Ile 55

Phe Asp Ile Thr Asn 60Phe Asp Ile Thr Asn 60

Leu Ser Ile Val Ile 65Leu Ser Ile Val Ile 65

Leu Ala Leu Arg Pro 70Leu Ala Leu Arg Pro 70

Ser Asp Glu Gly Thr 75Ser Asp Glu Gly Thr 75

Glu Cys Val Val Leu 85Glu Cys Val Val Leu 85

Lys Tyr Glu Lys Asp 90Lys Tyr Glu Lys Asp 90

Gly Phe Lys Arg Glu 95Gly Phe Lys Arg Glu 95

CysCys

TrpTrp

AsnAsn

AsnAsn

Tyr 80Tyr 80

HisHis

Leu Ala Glu Val ThrLeu Ala Glu Val Thr

100 <210> 158 <211> 101 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>100 <210> 158 <211> 101 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> CD80 v10 IgV <400> 158<223> CD80 v10 IgV <400> 158

Val Ile His Val 1Val Ile His Val 1

Thr Lys Glu Val Lys Glu Val Ala Thr Leu Ser 5 10 15Thr Lys Glu Val Lys Glu Val Ala Thr Leu Ser 5 10 15

Gly His Asn ValGly His Asn Val

Ser Val Glu Glu Leu Ala Gln Thr Arg Ile Tyr 25 30Ser Val Glu Glu Leu Ala Gln Thr Arg Ile Tyr 25 30

Gln Lys Glu LysGln Lys Glu Lys

Lys Met Val Leu Thr Met Met Ser Gly Asp MetLys Met Val Leu Thr Met Met Ser Gly Asp Met

4545

CysCys

TrpTrp

AsnAsn

- 374 044346- 374 044346

Ile Trp Pro Glu 50Ile Trp Pro Glu 50

Tyr Lys Asn Arg Thr Ile Phe Asp Ile Thr Asn 55 60Tyr Lys Asn Arg Thr Ile Phe Asp Ile Thr Asn 55 60

Leu Ser Ile Val 65Leu Ser Ile Val 65

Ile Arg Ala Leu Arg Pro Ser Asp Glu Gly ThrIle Arg Ala Leu Arg Pro Ser Asp Glu Gly Thr

7575

Glu Cys Val ValGlu Cys Val Val

Leu Lys Tyr Glu Lys Asp Gly Phe Lys Arg Glu 85 90 95Leu Lys Tyr Glu Lys Asp Gly Phe Lys Arg Glu 85 90 95

AsnAsn

Tyr 80Tyr 80

HisHis

Leu Ala Glu Val ThrLeu Ala Glu Val Thr

100 <210> 159 <211> 101 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>100 <210> 159 <211> 101 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> CD80 v11 IgV <400> 159<223> CD80 v11 IgV <400> 159

Val Ile His Val Thr 1 5Val Ile His Val Thr 1 5

Lys Glu Val Lys GluLys Glu Val Lys Glu

Val Ala Thr Leu SerVal Ala Thr Leu Ser

Gly His Asn Val Ser 20Gly His Asn Val Ser 20

Val Glu Glu Leu AlaVal Glu Glu Leu Ala

Gln Thr Arg Ile Tyr 30Gln Thr Arg Ile Tyr 30

Gln Lys Glu Lys Lys 35Gln Lys Glu Lys Lys 35

Met Val Leu Thr MetMet Val Leu Thr Met

Met Ser Gly Asp Met 45Met Ser Gly Asp Met 45

Ile Trp Pro Glu Tyr 50Ile Trp Pro Glu Tyr 50

Lys Asn Arg Thr Ile 55Lys Asn Arg Thr Ile 55

Phe Asp Ile Thr Asn 60Phe Asp Ile Thr Asn 60

Leu Ser Ile Val Ile 65Leu Ser Ile Val Ile 65

Gln Ala Leu Arg Pro 70Gln Ala Leu Arg Pro 70

Ser Asp Glu Gly Thr 75Ser Asp Glu Gly Thr 75

Ala Cys Val Val Leu 85Ala Cys Val Val Leu 85

Lys Tyr Glu Lys Asp 90Lys Tyr Glu Lys Asp 90

Gly Phe Lys Arg Glu 95Gly Phe Lys Arg Glu 95

CysCys

TrpTrp

AsnAsn

AsnAsn

Tyr 80Tyr 80

HisHis

Leu Ala Glu Val ThrLeu Ala Glu Val Thr

100 <210> 160 <211> 101 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>100 <210> 160 <211> 101 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> CD80 v12 IgV <400> 160<223> CD80 v12 IgV <400> 160

- 375 044346- 375 044346

Val Ile His Val 1Val Ile His Val 1

Thr Lys Glu Val 5Thr Lys Glu Val 5

Lys Glu Val Ala Thr Leu Ser CysLys Glu Val Ala Thr Leu Ser Cys

1515

Gly His Asn Val 20Gly His Asn Val 20

Ser Val Glu GluSer Val Glu Glu

Leu Ala Gln Thr Arg Ile Tyr Trp 25 30Leu Ala Gln Thr Arg Ile Tyr Trp 25 30

Gln Lys Glu LysGln Lys Glu Lys

Lys Met Val Leu 40Lys Met Val Leu 40

Ile Trp Pro Glu 50Ile Trp Pro Glu 50

Tyr Lys Asn ArgTyr Lys Asn Arg

Thr Met Met Ser Gly Asp Met Asn 45Thr Met Met Ser Gly Asp Met Asn 45

Thr Ile Phe Asp Ile Thr Asn Asn 60Thr Ile Phe Asp Ile Thr Asn Asn 60

Leu Ser Ile Val 65Leu Ser Ile Val 65

Glu Cys Val ValGlu Cys Val Val

Ile Gln AlaIle Gln Ala

Leu Lys Asn 85Leu Lys Asn 85

Leu Arg Pro Ser Asp Glu Gly Thr Tyr 75 80Leu Arg Pro Ser Asp Glu Gly Thr Tyr 75 80

Glu Lys Asp Gly Phe Lys Arg Glu His 90 95Glu Lys Asp Gly Phe Lys Arg Glu His 90 95

Leu Ala Glu Val ThrLeu Ala Glu Val Thr

100 <210> 161 <211> 101 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>100 <210> 161 <211> 101 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> CD80 v13 IgV <400> 161<223> CD80 v13 IgV <400> 161

Val Ile His Val 1Val Ile His Val 1

Thr Lys 5Thr Lys 5

Glu Val Lys Glu Val Ala Thr Leu Ser CysGlu Val Lys Glu Val Ala Thr Leu Ser Cys

1515

Gly His Asn Val 20Gly His Asn Val 20

Ser ValSer Val

Glu Glu Leu Ala Gln Ser Arg Ile Tyr TrpGlu Glu Leu Ala Gln Ser Arg Ile Tyr Trp

30thirty

Gln Lys Glu Lys 35Gln Lys Glu Lys 35

Lys MetLys Met

Val Leu Thr Met Met Ser Gly Asp Met AsnVal Leu Thr Met Met Ser Gly Asp Met Asn

4545

Ile Trp Pro Glu 50Ile Trp Pro Glu 50

Tyr LysTyr Lys

Asn Arg Thr Ile Phe Asp Ile Thr Asn Asn 55 60Asn Arg Thr Ile Phe Asp Ile Thr Asn Asn 55 60

Leu Ser Ile Val 65Leu Ser Ile Val 65

Ile GlnIle Gln

Ala Leu Arg Pro Ser Asp Glu Gly Thr Tyr 75 80Ala Leu Arg Pro Ser Asp Glu Gly Thr Tyr 75 80

Glu Cys Val Val Leu Lys Tyr Glu 85Glu Cys Val Val Leu Lys Tyr Glu 85

Lys Asp Gly Phe Lys Arg Lys HisLys Asp Gly Phe Lys Arg Lys His

9595

- 376 044346- 376 044346

Leu Ala Glu Val ThrLeu Ala Glu Val Thr

100 <210> 162 <211> 101 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>100 <210> 162 <211> 101 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> CD80 v14 IgV <400> 162<223> CD80 v14 IgV <400> 162

Val Ile His Val Thr 1 5Val Ile His Val Thr 1 5

Lys Glu Val Lys GluLys Glu Val Lys Glu

Val Ala Thr Leu SerVal Ala Thr Leu Ser

Gly His Asn Val Ser 20Gly His Asn Val Ser 20

Val Glu Glu Leu AlaVal Glu Glu Leu Ala

Gln Thr Arg Ile Tyr 30Gln Thr Arg Ile Tyr 30

Gln Lys Glu Lys Lys 35Gln Lys Glu Lys Lys 35

Met Val Leu Thr MetMet Val Leu Thr Met

Met Ser Gly Asp MetMet Ser Gly Asp Met

Ile Trp Pro Glu Tyr 50Ile Trp Pro Glu Tyr 50

Lys Asn Arg Thr Ile 55Lys Asn Arg Thr Ile 55

Phe Asp Ile Thr Ser 60Phe Asp Ile Thr Ser 60

Leu Ser Ile Val Ile 65Leu Ser Ile Val Ile 65

Gln Ala Leu Arg Pro 70Gln Ala Leu Arg Pro 70

Ser Asp Glu Gly Thr 75Ser Asp Glu Gly Thr 75

Glu Cys Val Val Leu 85Glu Cys Val Val Leu 85

Lys Tyr Glu Lys Asp 90Lys Tyr Glu Lys Asp 90

Gly Phe Lys Arg Glu 95Gly Phe Lys Arg Glu 95

CysCys

TrpTrp

AsnAsn

AsnAsn

Tyr 80Tyr 80

HisHis

Leu Ala Glu Val ThrLeu Ala Glu Val Thr

100 <210> 163 <211> 101 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>100 <210> 163 <211> 101 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> CD80 v15 IgV <400> 163<223> CD80 v15 IgV <400> 163

Val Ile His Val 1Val Ile His Val 1

Thr Lys Glu Val Lys Glu Val Ala Thr Leu Ser 5 10 15Thr Lys Glu Val Lys Glu Val Ala Thr Leu Ser 5 10 15

Gly His Asn Val 20Gly His Asn Val 20

Ser Val Glu Glu Leu Ala Gln Thr Arg Ile Tyr 25 30Ser Val Glu Glu Leu Ala Gln Thr Arg Ile Tyr 25 30

Gln Lys Glu Glu 35Gln Lys Glu Glu 35

Lys Met Val Leu Thr Met Met Ser Gly Asp MetLys Met Val Leu Thr Met Met Ser Gly Asp Met

4545

CysCys

TrpTrp

AsnAsn

- 377 044346- 377 044346

Ile Trp Pro Glu 50Ile Trp Pro Glu 50

Tyr Lys Asn Arg Thr Ile Phe AspTyr Lys Asn Arg Thr Ile Phe Asp

6060

Ile Thr Asn AsnIle Thr Asn Asn

Leu Ser Thr Val 65Leu Ser Thr Val 65

Ile Gln Ala Leu Arg Pro Ser AspIle Gln Ala Leu Arg Pro Ser Asp

7575

Glu Gly Thr Tyr 80Glu Gly Thr Tyr 80

Glu Cys Val ValGlu Cys Val Val

Leu Lys Tyr Glu Lys Asp Gly Phe 85 90Leu Lys Tyr Glu Lys Asp Gly Phe 85 90

Lys Arg Glu His 95Lys Arg Glu His 95

Leu Ala Glu Val ThrLeu Ala Glu Val Thr

100 <210> 164 <211> 101 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>100 <210> 164 <211> 101 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> CD80 v16 IgV <400> 164<223> CD80 v16 IgV <400> 164

Val Ile His Val 1Val Ile His Val 1

Thr Lys Glu Val Lys Glu 5 10Thr Lys Glu Val Lys Glu 5 10

Val Ala Thr Leu Ser CysVal Ala Thr Leu Ser Cys

Gly His Asn Val 20Gly His Asn Val 20

Ser Val Glu Glu Leu AlaSer Val Glu Glu Leu Ala

Gln Thr Arg Ile Tyr Trp 30Gln Thr Arg Ile Tyr Trp 30

Gln Lys Glu Lys 35Gln Lys Glu Lys 35

Lys Met Val Leu Thr Met 40Lys Met Val Leu Thr Met 40

Met Ser Gly Asp Met Asn 45Met Ser Gly Asp Met Asn 45

Ile Trp Pro Gly 50Ile Trp Pro Gly 50

Tyr Lys Asn Arg Thr Ile 55Tyr Lys Asn Arg Thr Ile 55

Phe Asp Ile Thr Asn Asn 60Phe Asp Ile Thr Asn Asn 60

Leu Ser Ile Val 65Leu Ser Ile Val 65

Ile Gln Ala Leu Arg Pro 70Ile Gln Ala Leu Arg Pro 70

Ser Asp Glu Gly Thr TyrSer Asp Glu Gly Thr Tyr

8080

Glu Cys Val ValGlu Cys Val Val

Leu Lys Tyr Glu Lys Asp 85 90Leu Lys Tyr Glu Lys Asp 85 90

Gly Phe Lys Arg Glu His 95Gly Phe Lys Arg Glu His 95

Leu Ala Glu Val ThrLeu Ala Glu Val Thr

100 <210> 165 <211> 101 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>100 <210> 165 <211> 101 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> CD80 v17 IgV<223> CD80 v17 IgV

- 378 044346 <400> 165- 378 044346 <400> 165

ValVal

IleIle

HisHis

ValVal

Thr 5Thr 5

LysLys

GluGlu

ValVal

LysLys

GluGlu

ValVal

AlaAla

ThrThr

LeuLeu

SerSer

GlyGly

HisHis

AsnAsn

ValVal

SerSer

ValVal

GluGlu

GluGlu

LeuLeu

AlaAla

GlnGln

ThrThr

ArgArg

Ile 30Ile 30

TyrTyr

GlnGln

LysLys

Glu 35Glu 35

LysLys

GluGlu

MetMet

ValVal

Leu 40Leu 40

ThrThr

MetMet

MetMet

SerSer

Gly 45Gly 45

AspAsp

MetMet

IleIle

Trp 50Trp 50

ProPro

GluGlu

TyrTyr

LysLys

Asn 55Asn 55

ArgArg

ThrThr

IleIle

SerSer

Asp 60Asp 60

IleIle

ThrThr

AsnAsn

Leu 65Leu 65

SerSer

IleIle

ValVal

IleIle

Gln 70Gln 70

AlaAla

LeuLeu

ArgArg

ProPro

Ser 75Ser 75

AspAsp

GluGlu

GlyGly

ThrThr

GluGlu

CysCys

ValVal

ValVal

Leu 85Leu 85

LysLys

TyrTyr

GluGlu

LysLys

Asp 90Asp 90

GlyGly

PhePhe

LysLys

ArgArg

Glu 95Glu 95

CysCys

TrpTrp

AsnAsn

AsnAsn

Tyr 80Tyr 80

HisHis

LeuLeu

AlaAla

GluGlu

ValVal

100100

Thr <210>Thr <210>

<211><211>

<212><212>

<213><213>

166166

101101

БЕЛОКPROTEIN

Искусственная последовательность <220>Artificial sequence <220>

<223><223>

CD80 v19CD80 v19

IgV <400>IgV <400>

66

ValVal

IleIle

HisHis

ValVal

Thr 5Thr 5

LysLys

GluGlu

ValVal

LysLys

GluGlu

ValVal

AlaAla

ThrThr

LeuLeu

SerSer

GlyGly

HisHis

AsnAsn

ValVal

SerSer

ValVal

GluGlu

GluGlu

LeuLeu

AlaAla

GlnGln

ThrThr

ArgArg

Ile 30Ile 30

TyrTyr

GlnGln

LysLys

Glu 35Glu 35

LysLys

LysLys

MetMet

ValVal

Leu 40Leu 40

ThrThr

MetMet

MetMet

SerSer

Gly 45Gly 45

AspAsp

MetMet

IleIle

Trp 50Trp 50

ProPro

GluGlu

TyrTyr

LysLys

Asn 55Asn 55

ArgArg

ThrThr

IleIle

PhePhe

Asp 60Asp 60

IleIle

ThrThr

AsnAsn

Leu 65Leu 65

SerSer

IleIle

ValVal

IleIle

Leu 70Leu 70

AlaAla

LeuLeu

ArgArg

ProPro

Ser 75Ser 75

AspAsp

GluGlu

GlyGly

ThrThr

GluGlu

CysCys

ValVal

ValVal

Leu 85Leu 85

LysLys

TyrTyr

GluGlu

GluGlu

Asp 90Asp 90

AlaAla

PhePhe

LysLys

ArgArg

Glu 95Glu 95

CysCys

TrpTrp

AsnAsn

AsnAsn

Tyr 80Tyr 80

HisHis

- 379 044346- 379 044346

Leu Ala Glu Val ThrLeu Ala Glu Val Thr

100 <210> 167 <211> 101 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>100 <210> 167 <211> 101 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> CD80 v21 IgV <400> 167<223> CD80 v21 IgV <400> 167

Val Ile His Val Thr 1 5Val Ile His Val Thr 1 5

Lys Glu Val Lys GluLys Glu Val Lys Glu

Val Ala Thr Leu SerVal Ala Thr Leu Ser

Gly His Asn Val Ser 20Gly His Asn Val Ser 20

Val Glu Glu Leu AlaVal Glu Glu Leu Ala

Gln Thr Arg Ile TyrGln Thr Arg Ile Tyr

Gln Lys Glu Lys Lys 35Gln Lys Glu Lys Lys 35

Met Val Leu Thr MetMet Val Leu Thr Met

Met Ser Gly Asp Met 45Met Ser Gly Asp Met 45

Ile Trp Pro Glu Tyr 50Ile Trp Pro Glu Tyr 50

Lys Asn Arg Thr Ile 55Lys Asn Arg Thr Ile 55

Phe Val Ile Thr AsnPhe Val Ile Thr Asn

Leu Ser Ile Val Ile 65Leu Ser Ile Val Ile 65

Leu Ala Leu Arg Pro 70Leu Ala Leu Arg Pro 70

Ser Asp Glu Gly Thr 75Ser Asp Glu Gly Thr 75

Glu Cys Val Val Leu 85Glu Cys Val Val Leu 85

Lys Tyr Glu Lys Asp 90Lys Tyr Glu Lys Asp 90

Gly Phe Lys Arg Glu 95Gly Phe Lys Arg Glu 95

CysCys

TrpTrp

AsnAsn

AsnAsn

Tyr 80Tyr 80

HisHis

Leu Ala Glu Val ThrLeu Ala Glu Val Thr

100 <210> 168 <211> 101 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>100 <210> 168 <211> 101 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> CD80 v22 IgV <400> 168<223> CD80 v22 IgV <400> 168

Val Ile His Val 1Val Ile His Val 1

Thr Lys Glu Val 5Thr Lys Glu Val 5

Lys Glu Val Ala Thr Leu SerLys Glu Val Ala Thr Leu Ser

1515

Gly His Asn Val 20Gly His Asn Val 20

Ser Val Glu GluSer Val Glu Glu

Leu Ala Gln Thr Arg Ile TyrLeu Ala Gln Thr Arg Ile Tyr

30thirty

Gln Lys Glu Lys 35Gln Lys Glu Lys 35

Lys Met Val Leu 40Lys Met Val Leu 40

Thr Met Met Ser Gly Asp Met 45Thr Met Met Ser Gly Asp Met 45

CysCys

TrpTrp

AsnAsn

- 380 044346- 380 044346

Ile Trp Pro Glu Tyr Met Asn ArgIle Trp Pro Glu Tyr Met Asn Arg

5555

Leu Ser Ile Val Ile Leu Ala LeuLeu Ser Ile Val Ile Leu Ala Leu

7070

Glu Cys Val Val Leu Lys Tyr Glu 85Glu Cys Val Val Leu Lys Tyr Glu 85

Thr Ile Phe Asp Ile Thr Asn Asn 60Thr Ile Phe Asp Ile Thr Asn Asn 60

Arg Pro Ser Asp Glu Gly Thr Tyr 75 80Arg Pro Ser Asp Glu Gly Thr Tyr 75 80

Lys Asp Gly Phe Lys Arg Glu His 90 95Lys Asp Gly Phe Lys Arg Glu His 90 95

Leu Ala Glu Val ThrLeu Ala Glu Val Thr

100 <210> 169 <211> 101 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>100 <210> 169 <211> 101 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> CD80 v23 IgV <400> 169<223> CD80 v23 IgV <400> 169

Val Ile His Val 1Val Ile His Val 1

Thr Lys 5Thr Lys 5

Glu Val Lys Glu Val Ala Thr Leu Ser CysGlu Val Lys Glu Val Ala Thr Leu Ser Cys

1515

Gly His Asn Val 20Gly His Asn Val 20

Ser ValSer Val

Glu Glu Leu Ala Gln Thr Arg Ile Tyr TrpGlu Glu Leu Ala Gln Thr Arg Ile Tyr Trp

30thirty

Gln Lys Glu Lys 35Gln Lys Glu Lys 35

Lys ThrLys Thr

Val Leu Thr Met Met Ser Gly Asp Met AsnVal Leu Thr Met Met Ser Gly Asp Met Asn

4545

Ile Trp Pro Glu 50Ile Trp Pro Glu 50

Tyr LysTyr Lys

Asn Arg Thr Ile Phe Asp Ile Thr Asn Asn 55 60Asn Arg Thr Ile Phe Asp Ile Thr Asn Asn 55 60

Leu Ser Ile Val 65Leu Ser Ile Val 65

Ile GlnIle Gln

Ala Leu Arg Pro Ser Asp Gly Gly Thr Tyr 75 80Ala Leu Arg Pro Ser Asp Gly Gly Thr Tyr 75 80

Glu Cys Val ValGlu Cys Val Val

Leu Lys 85Leu Lys 85

Tyr Glu Lys Asp Gly Phe Lys Arg Glu HisTyr Glu Lys Asp Gly Phe Lys Arg Glu His

9595

Leu Ala Glu Val ThrLeu Ala Glu Val Thr

100 <210> 170 <211> 101 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>100 <210> 170 <211> 101 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> CD80 v24 IgV<223> CD80 v24 IgV

- 381 044346 <400> 170- 381 044346 <400> 170

Val Ile His Val ThrVal Ile His Val Thr

55

Lys Glu Val Lys GluLys Glu Val Lys Glu

Val Ala Thr Leu SerVal Ala Thr Leu Ser

Gly His Asn Val Ser 20Gly His Asn Val Ser 20

Val Glu Glu Leu AlaVal Glu Glu Leu Ala

Gln Thr His Ile Tyr 30Gln Thr His Ile Tyr 30

Gln Lys Glu Lys Lys 35Gln Lys Glu Lys Lys 35

Met Val Leu Thr MetMet Val Leu Thr Met

Met Ser Gly Asp Met 45Met Ser Gly Asp Met 45

Ile Trp Pro Gly Tyr 50Ile Trp Pro Gly Tyr 50

Lys Asn Arg Thr Ile 55Lys Asn Arg Thr Ile 55

Phe Asp Ile Thr Asn 60Phe Asp Ile Thr Asn 60

Leu Ser Ile Val Ile 65Leu Ser Ile Val Ile 65

Arg Ala Leu Arg Pro 70Arg Ala Leu Arg Pro 70

Ser Asp Glu Gly Thr 75Ser Asp Glu Gly Thr 75

Glu Cys Val Val Leu 85Glu Cys Val Val Leu 85

Lys Tyr Gly Lys Asp 90Lys Tyr Gly Lys Asp 90

Gly Phe Lys Arg Glu 95Gly Phe Lys Arg Glu 95

CysCys

TrpTrp

AsnAsn

AsnAsn

Tyr 80Tyr 80

HisHis

Leu Ala Glu Val ThrLeu Ala Glu Val Thr

100 <210> 171 <211> 101 <212> БЕЛОК <213> Искусственная <220>100 <210> 171 <211> 101 <212> PROTEIN <213> Artificial <220>

<223> CD80 v25 IgV <400> 171<223> CD80 v25 IgV <400> 171

Val Ile His Val Thr 1 5 последовательностьVal Ile His Val Thr 1 5 sequence

Lys Glu Val Lys Glu 10Lys Glu Val Lys Glu 10

Val Ala Thr Leu SerVal Ala Thr Leu Ser

Gly His Asn Val Ser 20Gly His Asn Val Ser 20

Val Glu Glu Leu AlaVal Glu Glu Leu Ala

Gln Thr Arg Ile His 30Gln Thr Arg Ile His 30

Gln Lys Glu Lys Lys 35Gln Lys Glu Lys Lys 35

Met Val Leu Gly Met 40Met Val Leu Gly Met 40

Met Ser Gly Asp Met 45Met Ser Gly Asp Met 45

Ile Trp Pro Glu Tyr 50Ile Trp Pro Glu Tyr 50

Lys Asn Arg Thr Ile 55Lys Asn Arg Thr Ile 55

Phe Asp Ile Thr Asn 60Phe Asp Ile Thr Asn 60

Leu Ser Ile Val Ile 65Leu Ser Ile Val Ile 65

Gln Ala Leu Arg Pro 70Gln Ala Leu Arg Pro 70

Ser Asp Glu Gly Thr 75Ser Asp Glu Gly Thr 75

CysCys

TrpTrp

AsnAsn

AsnAsn

Tyr 80Tyr 80

HisHis

Glu Cys Val Val Leu 85Glu Cys Val Val Leu 85

Lys Tyr Glu Lys Asp 90Lys Tyr Glu Lys Asp 90

Gly Phe Lys Arg GluGly Phe Lys Arg Glu

- 382 044346- 382 044346

Leu Ala Glu Val ThrLeu Ala Glu Val Thr

100 <210> 172 <211> 101 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>100 <210> 172 <211> 101 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> CD80 v26 IgV <400> 172<223> CD80 v26 IgV <400> 172

Val Ile His Val Thr 1 5Val Ile His Val Thr 1 5

Lys Glu Val Lys GluLys Glu Val Lys Glu

Val Ala Thr Leu SerVal Ala Thr Leu Ser

Gly His Asn Val Ser 20Gly His Asn Val Ser 20

Val Glu Glu Leu AlaVal Glu Glu Leu Ala

Gln Thr Arg Ile Tyr 30Gln Thr Arg Ile Tyr 30

Gln Lys Glu Lys Lys 35Gln Lys Glu Lys Lys 35

Met Val Leu Thr MetMet Val Leu Thr Met

Met Ser Gly Asp Met 45Met Ser Gly Asp Met 45

Ile Trp Pro Glu Tyr 50Ile Trp Pro Glu Tyr 50

Lys Asn Arg Thr Ile 55Lys Asn Arg Thr Ile 55

Phe Asp Ile Thr Asn 60Phe Asp Ile Thr Asn 60

Leu Ser Ile Ala Ile 65Leu Ser Ile Ala Ile 65

Leu Ala Leu Arg Pro 70Leu Ala Leu Arg Pro 70

Ser Asp Glu Gly Thr 75Ser Asp Glu Gly Thr 75

Glu Cys Val Val Leu 85Glu Cys Val Val Leu 85

Lys Tyr Glu Lys Asp 90Lys Tyr Glu Lys Asp 90

Ala Phe Lys Arg Glu 95Ala Phe Lys Arg Glu 95

CysCys

TrpTrp

AsnAsn

AsnAsn

Tyr 80Tyr 80

HisHis

Leu Ala Glu Val ThrLeu Ala Glu Val Thr

100 <210> 173 <211> 101 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>100 <210> 173 <211> 101 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> CD80 v27 IgV <400> 173<223> CD80 v27 IgV <400> 173

Val Ile His Val 1Val Ile His Val 1

Thr Lys Glu Val 5Thr Lys Glu Val 5

Lys Glu Val Ala Thr Leu SerLys Glu Val Ala Thr Leu Ser

1515

Gly His Asn Val 20Gly His Asn Val 20

Ser Val Glu GluSer Val Glu Glu

Leu Ala Gln Thr Arg Ile TyrLeu Ala Gln Thr Arg Ile Tyr

30thirty

CysCys

TrpTrp

AsnAsn

Gln Lys Glu LysGln Lys Glu Lys

Lys Met Val LeuLys Met Val Leu

Thr Met Met Ser Gly Asp MetThr Met Met Ser Gly Asp Met

- 383 044346- 383 044346

Ile Trp Pro Glu 50Ile Trp Pro Glu 50

Tyr Lys Asn Arg Thr Ile Phe Asp Ile Thr Asn 55 60Tyr Lys Asn Arg Thr Ile Phe Asp Ile Thr Asn 55 60

Leu His Ile Val 65Leu His Ile Val 65

Ile Leu Ala Leu Arg Pro Ser Asp Glu Gly ThrIle Leu Ala Leu Arg Pro Ser Asp Glu Gly Thr

7575

Glu Cys Val ValGlu Cys Val Val

Leu Lys Tyr Glu Lys Gly Ala Phe Lys Arg Glu 85 90 95Leu Lys Tyr Glu Lys Gly Ala Phe Lys Arg Glu 85 90 95

AsnAsn

Tyr 80Tyr 80

HisHis

Leu Ala Glu Val ThrLeu Ala Glu Val Thr

100 <210> 174 <211> 101 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>100 <210> 174 <211> 101 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> CD80 v28 IgV <400> 174<223> CD80 v28 IgV <400> 174

Val Ile His Val Thr 1 5Val Ile His Val Thr 1 5

Lys Glu Val Lys GluLys Glu Val Lys Glu

Val Ala Thr Leu SerVal Ala Thr Leu Ser

Gly His Asn Val Ser 20Gly His Asn Val Ser 20

Val Glu Glu Leu AlaVal Glu Glu Leu Ala

Gln Thr His Ile Tyr 30Gln Thr His Ile Tyr 30

Gln Lys Glu Lys Lys 35Gln Lys Glu Lys Lys 35

Met Val Leu Thr MetMet Val Leu Thr Met

Met Ser Gly Asp Met 45Met Ser Gly Asp Met 45

Ile Trp Pro Gly Tyr 50Ile Trp Pro Gly Tyr 50

Lys Asn Arg Thr Ile 55Lys Asn Arg Thr Ile 55

Phe Asp Ile Thr Asn 60Phe Asp Ile Thr Asn 60

Leu Ser Ile Val Ile 65Leu Ser Ile Val Ile 65

Leu Ala Leu Arg Pro 70Leu Ala Leu Arg Pro 70

Ser Asp Glu Gly Thr 75Ser Asp Glu Gly Thr 75

Glu Cys Val Val Leu 85Glu Cys Val Val Leu 85

Lys Tyr Glu Lys Asp 90Lys Tyr Glu Lys Asp 90

Ala Phe Lys Arg Glu 95Ala Phe Lys Arg Glu 95

CysCys

TrpTrp

AsnAsn

AsnAsn

Tyr 80Tyr 80

HisHis

Leu Ala Glu Val ThrLeu Ala Glu Val Thr

100 <210> 175 <211> 101 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>100 <210> 175 <211> 101 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

- 384 044346 <223> CD80 v30 IgV <400> 175- 384 044346 <223> CD80 v30 IgV <400> 175

Val Ile His Val Thr 1 5Val Ile His Val Thr 1 5

Lys Glu Val Lys GluLys Glu Val Lys Glu

Val Ala Thr Leu SerVal Ala Thr Leu Ser

Gly His Asn Val Ser 20Gly His Asn Val Ser 20

Val Glu Glu Leu AlaVal Glu Glu Leu Ala

Gln Thr Arg Ile Tyr 30Gln Thr Arg Ile Tyr 30

Gln Lys Glu Lys Lys 35Gln Lys Glu Lys Lys 35

Met Val Leu Thr MetMet Val Leu Thr Met

Met Ser Gly Asp Met 45Met Ser Gly Asp Met 45

Ile Trp Pro Glu Tyr 50Ile Trp Pro Glu Tyr 50

Lys Asn Arg Thr Ile 55Lys Asn Arg Thr Ile 55

Phe Asp Ile Thr Asn 60Phe Asp Ile Thr Asn 60

Leu Ser Thr Val Ile 65Leu Ser Thr Val Ile 65

Gln Ala Leu Arg Pro 70Gln Ala Leu Arg Pro 70

Ser Asp Glu Gly Thr 75Ser Asp Glu Gly Thr 75

Glu Cys Val Val Leu 85Glu Cys Val Val Leu 85

Lys Tyr Glu Lys Asp 90Lys Tyr Glu Lys Asp 90

Gly Phe Lys Arg Glu 95Gly Phe Lys Arg Glu 95

CysCys

TrpTrp

AsnAsn

AsnAsn

Tyr 80Tyr 80

HisHis

Leu Ala Glu Val ThrLeu Ala Glu Val Thr

100 <210>100 <210>

<211><211>

<212><212>

176176

101 БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>101 PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> CD80 v32 IgV <400> 176<223> CD80 v32 IgV <400> 176

Val Ile His Val Thr 1 5Val Ile His Val Thr 1 5

Lys Glu Val Lys GluLys Glu Val Lys Glu

Val Ala Thr Leu SerVal Ala Thr Leu Ser

Gly His Asn Val Ser 20Gly His Asn Val Ser 20

Val Glu Glu Leu AlaVal Glu Glu Leu Ala

Gln Thr Arg Ile Tyr 30Gln Thr Arg Ile Tyr 30

Gln Lys Glu Lys Lys 35Gln Lys Glu Lys Lys 35

Val Val Leu Asp Met 40Val Val Leu Asp Met 40

Ile Ser Gly Asp Met 45Ile Ser Gly Asp Met 45

Ile Gly Pro Glu Tyr 50Ile Gly Pro Glu Tyr 50

Lys Asn Arg Thr Ile 55Lys Asn Arg Thr Ile 55

Phe Asp Ile Thr Asn 60Phe Asp Ile Thr Asn 60

Leu Ser Ile Val Ile 65Leu Ser Ile Val Ile 65

Leu Ala Leu Arg Pro 70Leu Ala Leu Arg Pro 70

Ser Gly Glu Gly Thr 75Ser Gly Glu Gly Thr 75

CysCys

TrpTrp

AsnAsn

AsnAsn

Tyr 80Tyr 80

HisHis

Glu Cys Ala Val LeuGlu Cys Ala Val Leu

Lys Tyr Glu Glu AspLys Tyr Glu Glu Asp

Ala Phe Lys Arg GluAla Phe Lys Arg Glu

- 385 044346- 385 044346

90959095

Leu Ala Glu Val ThrLeu Ala Glu Val Thr

100 <210>177 <211>101 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>100 <210>177 <211>101 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> CD80 v33 IgV <400>177<223> CD80 v33 IgV <400>177

Val Ile His Val Thr Lys Glu Val Lys Glu Val Ala Thr Leu Ser 1 5 1015Val Ile His Val Thr Lys Glu Val Lys Glu Val Ala Thr Leu Ser 1 5 1015

Gly His Asn Val Ser Ala Glu Glu Leu Ala Gln Thr Arg Ile TyrGly His Asn Val Ser Ala Glu Glu Leu Ala Gln Thr Arg Ile Tyr

25302530

Gln Lys Glu Lys Lys Met Val Leu Thr Met Met Ser Gly Asp Met 35 4045Gln Lys Glu Lys Lys Met Val Leu Thr Met Met Ser Gly Asp Met 35 4045

Ile Trp Pro Glu Tyr Lys Asn Arg Thr Ile Phe Asp Ile Thr Asn 50 5560Ile Trp Pro Glu Tyr Lys Asn Arg Thr Ile Phe Asp Ile Thr Asn 50 5560

Leu Ser Ile Val Ile Gln Ala Leu Arg Pro Ser Asp Glu Gly Thr 65 7075Leu Ser Ile Val Ile Gln Ala Leu Arg Pro Ser Asp Glu Gly Thr 65 7075

Glu Cys Val Val Leu Lys Tyr Glu Lys Asp Ala Phe Lys Arg Glu 85 9095Glu Cys Val Val Leu Lys Tyr Glu Lys Asp Ala Phe Lys Arg Glu 85 9095

CysCys

TrpTrp

AsnAsn

AsnAsn

Tyr 80Tyr 80

HisHis

Leu Ala Glu Val ThrLeu Ala Glu Val Thr

100 <210> 178 <211> 101 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>100 <210> 178 <211> 101 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> CD80 v34 IgV <400> 178<223> CD80 v34 IgV <400> 178

Val Ile His Val Thr Lys Glu Val Lys Glu Val Val Thr Leu Phe 1 5 10 15Val Ile His Val Thr Lys Glu Val Lys Glu Val Val Thr Leu Phe 1 5 10 15

Gly His Asn Val Ser Val Glu Glu Leu 20 25Gly His Asn Val Ser Val Glu Glu Leu 20 25

Ala GlnAla Gln

Thr Arg Ile His 30Thr Arg Ile His 30

CysCys

TrpTrp

- 386 044346- 386 044346

Gln Lys Glu Lys 35Gln Lys Glu Lys 35

Lys Met Val Leu Gly Met Met Ser 40Lys Met Val Leu Gly Met Met Ser 40

Gly Asp Met Asn 45Gly Asp Met Asn 45

Ile Trp Pro Glu 50Ile Trp Pro Glu 50

Tyr Lys Asn Arg Thr Ile Phe AspTyr Lys Asn Arg Thr Ile Phe Asp

6060

Ile Thr Asn AsnIle Thr Asn Asn

Leu Ser Ile Val 65Leu Ser Ile Val 65

Ile Leu Ala Leu Arg Pro Ser AspIle Leu Ala Leu Arg Pro Ser Asp

7575

Glu Gly Thr Tyr 80Glu Gly Thr Tyr 80

Glu Cys Val ValGlu Cys Val Val

Leu Lys Tyr Glu Lys Asp Ala Phe 85 90Leu Lys Tyr Glu Lys Asp Ala Phe 85 90

Lys Arg Glu His 95Lys Arg Glu His 95

Leu Ala Glu Val ThrLeu Ala Glu Val Thr

100 <210> 179 <211> 101 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>100 <210> 179 <211> 101 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> CD80 v35 IgV <400> 179<223> CD80 v35 IgV <400> 179

Val Ile His Val 1Val Ile His Val 1

Thr Lys Glu Val Lys Glu 5 10Thr Lys Glu Val Lys Glu 5 10

Gly His Asn Val 20Gly His Asn Val 20

Ser Val Glu Glu Leu AlaSer Val Glu Glu Leu Ala

Gln Lys Glu Lys 35Gln Lys Glu Lys 35

Lys Met Val Leu Thr Met 40Lys Met Val Leu Thr Met 40

Ile Trp Pro Glu 50Ile Trp Pro Glu 50

Tyr Lys Asn Arg Thr Ile 55Tyr Lys Asn Arg Thr Ile 55

Val Ala Thr Leu Ser Cys 15Val Ala Thr Leu Ser Cys 15

Gln Thr Arg Ile Tyr Trp 30Gln Thr Arg Ile Tyr Trp 30

Met Ser Gly Asp Met Asn 45Met Ser Gly Asp Met Asn 45

Phe Asp Ile Thr Asn Asn 60Phe Asp Ile Thr Asn Asn 60

Leu Ser Phe Val 65Leu Ser Phe Val 65

Ile Arg Ala Leu Arg Pro 70Ile Arg Ala Leu Arg Pro 70

Ser Asp Glu Gly Thr TyrSer Asp Glu Gly Thr Tyr

8080

Glu Cys Val ValGlu Cys Val Val

Leu Lys Tyr Gly Lys Asp 85 90Leu Lys Tyr Gly Lys Asp 85 90

Gly Phe Lys Arg Glu HisGly Phe Lys Arg Glu His

Leu Ala Glu Val ThrLeu Ala Glu Val Thr

100 <210> 180 <211> 101 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность100 <210> 180 <211> 101 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence

- 387 044346 <220>- 387 044346 <220>

<223> CD80 v36 IgV <400> 180<223> CD80 v36 IgV <400> 180

Val Ile His Val 1Val Ile His Val 1

Thr Lys Glu Val Lys Glu Val Ala Thr Leu Ser 5 10 15Thr Lys Glu Val Lys Glu Val Ala Thr Leu Ser 5 10 15

Gly His Asn Val 20Gly His Asn Val 20

Ser Val Glu Gly Pro Ala Gln Thr Arg Ile Tyr 25 30Ser Val Glu Gly Pro Ala Gln Thr Arg Ile Tyr 25 30

Gln Lys Glu Lys 35Gln Lys Glu Lys 35

Lys Met Val Leu Thr Met Met Ser Gly Asp MetLys Met Val Leu Thr Met Met Ser Gly Asp Met

4545

Ile Trp Pro Glu 50Ile Trp Pro Glu 50

Tyr Lys Asn Arg Thr Ile Phe Asp Ile Thr Asn 55 60Tyr Lys Asn Arg Thr Ile Phe Asp Ile Thr Asn 55 60

Leu Ser Ile Val 65Leu Ser Ile Val 65

Ile Gln Ala Leu Arg Pro Ser Asp Glu Gly ThrIle Gln Ala Leu Arg Pro Ser Asp Glu Gly Thr

7575

Glu Cys Val ValGlu Cys Val Val

Leu Lys Tyr Glu Lys Asp Ala Phe Lys Arg Glu 85 90 95Leu Lys Tyr Glu Lys Asp Ala Phe Lys Arg Glu 85 90 95

CysCys

TrpTrp

AsnAsn

AsnAsn

Tyr 80Tyr 80

HisHis

Leu Ala Glu Val ThrLeu Ala Glu Val Thr

100 <210> 181 <211> 101 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>100 <210> 181 <211> 101 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> CD80 v37 IgV <400> 181<223> CD80 v37 IgV <400> 181

Val Ile His Val Thr 1 5Val Ile His Val Thr 1 5

Lys Glu Val Lys GluLys Glu Val Lys Glu

Val Ala Thr Leu SerVal Ala Thr Leu Ser

Gly His Asn Val Ser 20Gly His Asn Val Ser 20

Val Glu Glu Leu AlaVal Glu Glu Leu Ala

Gln Thr Arg Ile Tyr 30Gln Thr Arg Ile Tyr 30

Gln Lys Glu Lys Lys 35Gln Lys Glu Lys Lys 35

Met Val Leu Thr MetMet Val Leu Thr Met

Met Ser Gly Asp Met 45Met Ser Gly Asp Met 45

Ile Trp Pro Glu Tyr 50Ile Trp Pro Glu Tyr 50

Lys Asn Arg Thr Ile 55Lys Asn Arg Thr Ile 55

Phe Asp Ile Thr Asn 60Phe Asp Ile Thr Asn 60

CysCys

TrpTrp

AsnAsn

AsnAsn

TyrTyr

Leu Ser Ile Val Ile 65Leu Ser Ile Val Ile 65

Leu Ala Leu Arg Pro 70Leu Ala Leu Arg Pro 70

Ser Asp Glu Gly Thr 75Ser Asp Glu Gly Thr 75

- 388 044346- 388 044346

Glu Cys Val ValGlu Cys Val Val

Leu Lys Tyr Glu Lys Asp Gly 85 90Leu Lys Tyr Glu Lys Asp Gly 85 90

Leu Lys Arg Glu HisLeu Lys Arg Glu His

Leu Ala Glu Val ThrLeu Ala Glu Val Thr

100 <210> 182 <211> 101 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>100 <210> 182 <211> 101 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> CD80 v38 IgV <400> 182<223> CD80 v38 IgV <400> 182

Val Ile His 1Val Ile His 1

Val Thr Lys Glu Val Lys Glu Val AlaVal Thr Lys Glu Val Lys Glu Val Ala

1010

Thr Leu Ser Cys 15Thr Leu Ser Cys 15

Gly His AsnGly His Asn

Val Ser Val Glu Glu Leu Ala Gln Thr 20 25Val Ser Val Glu Glu Leu Ala Gln Thr 20 25

Asp Ile Leu Trp 30Asp Ile Leu Trp 30

His Lys Glu 35His Lys Glu 35

Gly Lys Ile Val Leu Ala Met Arg Ser 40Gly Lys Ile Val Leu Ala Met Arg Ser 40

Gly Asp Thr Asn 45Gly Asp Thr Asn 45

Ile Trp Pro 50Ile Trp Pro 50

Leu Ser Ile 65Leu Ser Ile 65

Val Cys ValVal Cys Val

Glu Tyr Lys Asn Arg Thr Ile Phe Asp 5560Glu Tyr Lys Asn Arg Thr Ile Phe Asp 5560

Val Ile Leu Ala Leu Arg Pro Ser Asp 7075Val Ile Leu Ala Leu Arg Pro Ser Asp 7075

Val Arg Lys Tyr Glu Asn Asp Thr Pro 8590Val Arg Lys Tyr Glu Asn Asp Thr Pro 8590

Ile Thr Asn AsnIle Thr Asn Asn

Glu Gly Thr Tyr 80Glu Gly Thr Tyr 80

Val Leu Glu HisVal Leu Glu His

Leu Ala Glu Val ThrLeu Ala Glu Val Thr

100100

<210> <211> <212> <213> <210> <211> <212> <213> 183 101 БЕЛОК Искусственная 183 101 PROTEIN Artificial последовательность subsequence <220> <220> <223> <223> CD80 v40 IgV CD80 v40 IgV <400> <400> 183 183 Val Ile Val Ile His Val Thr His Val Thr Lys Glu Val Lys Glu Val Ala Thr Leu Ser Cys Lys Glu Val Lys Glu Val Ala Thr Leu Ser Cys 1 1 5 5 10 15 10 15 Gly His Gly His Asn Val Ser Asn Val Ser Val Glu Glu Leu Ala Gln Thr Asp Ile Leu Trp Val Glu Glu Leu Ala Gln Thr Asp Ile Leu Trp 20 20 25 30 25 30

- 389 044346- 389 044346

His Lys Glu Gly Lys 35His Lys Glu Gly Lys 35

Ile Trp Pro Glu Tyr 50Ile Trp Pro Glu Tyr 50

Leu Ser Ile Val Ile 65Leu Ser Ile Val Ile 65

Val Cys Val Val Arg 85Val Cys Val Val Arg 85

Ile Ile Val Val Leu 40 Leu 40 Ala Ala Thr Thr Arg Arg Ser Ser Gly 45 Gly 45 Asp Asp Thr Thr Lys Lys Asn 55 Asn 55 Arg Arg Thr Thr Ile Ile Phe Phe Asp 60 Asp 60 Ile Ile Thr Thr Asn Asn Leu 70 Leu 70 Ala Ala Leu Leu Arg Arg Pro Pro Ser 75 Ser 75 Asp Asp Glu Glu Gly Gly Thr Thr Lys Lys Tyr Tyr Glu Glu Asn Asn Asp 90 Asp 90 Thr Thr Pro Pro Val Val Leu Leu Glu 95 Glu 95

AsnAsn

AsnAsn

Tyr 80Tyr 80

HisHis

Leu Ala Glu Val ThrLeu Ala Glu Val Thr

100 <210> 184 <211> 101 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>100 <210> 184 <211> 101 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> CD80 v41 IgV <400> 184<223> CD80 v41 IgV <400> 184

Val Ile His Val Thr 1 5Val Ile His Val Thr 1 5

Lys Glu Val Lys GluLys Glu Val Lys Glu

Val Ala Thr Leu SerVal Ala Thr Leu Ser

Gly His Asn Val Ser 20Gly His Asn Val Ser 20

Val Glu Gly Leu AlaVal Glu Gly Leu Ala

Gln Thr Asp Ile Leu 30Gln Thr Asp Ile Leu 30

His Lys Glu Gly Lys 35His Lys Glu Gly Lys 35

Ile Val Leu Ala MetIle Val Leu Ala Met

Arg Ser Gly Asp Thr 45Arg Ser Gly Asp Thr 45

Ile Trp Pro Glu Tyr 50Ile Trp Pro Glu Tyr 50

Lys Asn Arg Thr Ile 55Lys Asn Arg Thr Ile 55

Leu Asp Ile Thr Asn 60Leu Asp Ile Thr Asn 60

Leu Ser Ile Val Ile 65Leu Ser Ile Val Ile 65

Leu Ala Leu Arg Pro 70Leu Ala Leu Arg Pro 70

Ser Asp Glu Gly Thr 75Ser Asp Glu Gly Thr 75

Val Cys Val Val Arg 85Val Cys Val Val Arg 85

Lys Tyr Glu Asn Asp 90Lys Tyr Glu Asn Asp 90

Thr Pro Val Leu GluThr Pro Val Leu Glu

CysCys

TrpTrp

AsnAsn

AsnAsn

Tyr 80Tyr 80

ArgArg

Leu Ala Glu Val ThrLeu Ala Glu Val Thr

100 <210> 185 <211> 101 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность100 <210> 185 <211> 101 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence

- 390 044346 <220>- 390 044346 <220>

<223> CD80 v43 IgV <400> 185<223> CD80 v43 IgV <400> 185

Val Ile His Val 1Val Ile His Val 1

Thr Lys Glu Val Lys Glu Val Ala Thr Leu Ser 5 10 15Thr Lys Glu Val Lys Glu Val Ala Thr Leu Ser 5 10 15

Gly His Asn Val 20Gly His Asn Val 20

Ser Val Glu Glu Leu Ala Gln Thr Val Ile Tyr 25 30Ser Val Glu Glu Leu Ala Gln Thr Val Ile Tyr 25 30

Gln Lys Glu LysGln Lys Glu Lys

Lys Met Val Leu Thr Met Gln Ser Gly Asp MetLys Met Val Leu Thr Met Gln Ser Gly Asp Met

4545

Ile Trp Pro Glu 50Ile Trp Pro Glu 50

Tyr Lys Asn Arg Thr Ile Phe Asp Ile Thr Asn 55 60Tyr Lys Asn Arg Thr Ile Phe Asp Ile Thr Asn 55 60

Leu Ser Ile Val 65Leu Ser Ile Val 65

Ile Leu Ala Leu Arg Pro Ser Asp Glu Gly ThrIle Leu Ala Leu Arg Pro Ser Asp Glu Gly Thr

7575

Arg Cys Val ValArg Cys Val Val

Ile Lys Tyr Glu Arg Leu Glu Asn Gln Gly GluIle Lys Tyr Glu Arg Leu Glu Asn Gln Gly Glu

90 9590 95

CysCys

TrpTrp

AsnAsn

AsnAsn

Tyr 80Tyr 80

HisHis

Leu Ala Glu Val ThrLeu Ala Glu Val Thr

100 <210> 186 <211> 101 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>100 <210> 186 <211> 101 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> CD80 v44 IgV <400>186<223> CD80 v44 IgV <400>186

Val Ile His Val Thr Lys Glu Val Lys Glu Val Ala Thr Leu Ser 1 5 1015Val Ile His Val Thr Lys Glu Val Lys Glu Val Ala Thr Leu Ser 1 5 1015

Gly His Asn Val Ser Val Glu Glu Leu Ala Gln Thr Arg Ile TyrGly His Asn Val Ser Val Glu Glu Leu Ala Gln Thr Arg Ile Tyr

25302530

Gln Lys Glu Lys Lys Met Val Leu Ile Met Met Ser Gly Asp Met 35 4045Gln Lys Glu Lys Lys Met Val Leu Ile Met Met Ser Gly Asp Met 35 4045

Ile Trp Pro Glu Tyr Lys Asn Arg Thr Ile Phe Asp Ile Thr Asn 50 5560Ile Trp Pro Glu Tyr Lys Asn Arg Thr Ile Phe Asp Ile Thr Asn 50 5560

CysCys

TrpTrp

AsnAsn

AsnAsn

TyrTyr

Leu Ser Ile Val Ile Leu Ala Leu Arg Pro Ser Asp Glu Gly Thr 65 7075Leu Ser Ile Val Ile Leu Ala Leu Arg Pro Ser Asp Glu Gly Thr 65 7075

- 391 044346- 391 044346

Glu Cys Val Val Leu Lys Tyr Glu Lys Asp Gly Phe Lys Arg Glu 85 9095Glu Cys Val Val Leu Lys Tyr Glu Lys Asp Gly Phe Lys Arg Glu 85 9095

HisHis

Leu Ala Glu Val ThrLeu Ala Glu Val Thr

100 <210>187 <211>101 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>100 <210>187 <211>101 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> CD80 v45 IgV <400> 187<223> CD80 v45 IgV <400> 187

Val Ile His Val Thr 1 5Val Ile His Val Thr 1 5

Lys Glu Val Lys GluLys Glu Val Lys Glu

Val Ala Thr Leu SerVal Ala Thr Leu Ser

Gly His Asn Val Ser 20Gly His Asn Val Ser 20

Val Glu Glu Leu AlaVal Glu Glu Leu Ala

Gln Thr Arg Ile Tyr 30Gln Thr Arg Ile Tyr 30

Gln Lys Glu Lys Lys 35Gln Lys Glu Lys Lys 35

Met Val Leu Thr MetMet Val Leu Thr Met

Met Ser Gly Asp Met 45Met Ser Gly Asp Met 45

Ile Trp Pro Glu Tyr 50Ile Trp Pro Glu Tyr 50

Lys Asn Arg Thr Ile 55Lys Asn Arg Thr Ile 55

Phe Asp Ile Thr Asn 60Phe Asp Ile Thr Asn 60

Leu Ser Ile Val Ile 65Leu Ser Ile Val Ile 65

Leu Ala Leu Arg Pro 70Leu Ala Leu Arg Pro 70

Ser Asp Glu Gly Thr 75Ser Asp Glu Gly Thr 75

Glu Cys Val Val Leu 85Glu Cys Val Val Leu 85

Lys Tyr Glu Arg Lys 90Lys Tyr Glu Arg Lys 90

Gly Tyr Arg Arg Glu 95Gly Tyr Arg Arg Glu 95

CysCys

TrpTrp

AsnAsn

AsnAsn

Tyr 80Tyr 80

HisHis

Leu Ala Glu Val ThrLeu Ala Glu Val Thr

100 <210> 188 <211> 101 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>100 <210> 188 <211> 101 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> CD80 v47 IgV <400>188<223> CD80 v47 IgV <400>188

Val Ile His Val Thr Lys Glu Val Lys Glu Val Ala Thr Leu Ser 1 5 1015Val Ile His Val Thr Lys Glu Val Lys Glu Val Ala Thr Leu Ser 1 5 1015

Gly His Asn Val Ser Val Glu Glu Leu Ala GlnGly His Asn Val Ser Val Glu Glu Leu Ala Gln

20252025

Thr Arg Ile Tyr 30Thr Arg Ile Tyr 30

CysCys

TrpTrp

- 392 044346- 392 044346

Gln Lys Glu Gly 35Gln Lys Glu Gly 35

Gln Ile Val LeuGln Ile Val Leu

Thr Met Met SerThr Met Met Ser

Gly Asp Met Asn 45Gly Asp Met Asn 45

Ile Trp Pro Glu 50Ile Trp Pro Glu 50

Tyr Lys Asn ArgTyr Lys Asn Arg

Thr Ile Leu Asp 60Thr Ile Leu Asp 60

Ile Thr Asn AsnIle Thr Asn Asn

Leu Ser Ile Val 65Leu Ser Ile Val 65

Ile Leu Ala LeuIle Leu Ala Leu

Arg Pro Ser AspArg Pro Ser Asp

Glu Gly Thr Tyr 80Glu Gly Thr Tyr 80

Val Cys Val ValVal Cys Val Val

Arg Lys Tyr Glu 85Arg Lys Tyr Glu 85

Asn Asp Thr Pro 90Asn Asp Thr Pro 90

Val Leu Glu HisVal Leu Glu His

Leu Ala Gly ValLeu Ala Gly Val

100100

Thr <210> 189 <211> 101 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Thr <210> 189 <211> 101 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> CD80 v48 IgV <400> 189<223> CD80 v48 IgV <400> 189

Val Ile His Val 1Val Ile His Val 1

Thr Lys 5Thr Lys 5

Glu Val Lys Glu Val Ala Thr Leu Ser CysGlu Val Lys Glu Val Ala Thr Leu Ser Cys

1515

Gly His Asn Val 20Gly His Asn Val 20

Ser ValSer Val

Glu Glu Leu Ala Gln Thr Arg Ile Tyr TrpGlu Glu Leu Ala Gln Thr Arg Ile Tyr Trp

30thirty

Gln Lys Glu Lys 35Gln Lys Glu Lys 35

Lys MetLys Met

Val Leu Thr Met Met Ser Gly Asp Met AsnVal Leu Thr Met Met Ser Gly Asp Met Asn

4545

Ile Trp Pro Glu 50Ile Trp Pro Glu 50

Tyr LysTyr Lys

Asn Arg Thr Ile Phe Asp Ile Thr Asn Asn 55 60Asn Arg Thr Ile Phe Asp Ile Thr Asn Asn 55 60

Leu Ser Ile Val 65Leu Ser Ile Val 65

Ile LeuIle Leu

Ala Leu Arg Pro Ser Asp Glu Gly Thr Tyr 75 80Ala Leu Arg Pro Ser Asp Glu Gly Thr Tyr 75 80

Glu Cys Val ValGlu Cys Val Val

Leu Lys 85Leu Lys 85

Tyr Asp Arg Lys Gly Tyr Arg Arg Glu HisTyr Asp Arg Lys Gly Tyr Arg Arg Glu His

9595

Leu Ala Glu Val ThrLeu Ala Glu Val Thr

100 <210> 190 <211> 101 <212> БЕЛОК100 <210> 190 <211> 101 <212> PROTEIN

- 393 044346 <213> Искусственная последовательность <220>- 393 044346 <213> Artificial sequence <220>

<223> CD80 v49 IgV <400>190<223> CD80 v49 IgV <400>190

Val Ile His Val Thr Lys Glu Val Lys Glu Val Ala Thr Leu SerVal Ile His Val Thr Lys Glu Val Lys Glu Val Ala Thr Leu Ser

5 10155 1015

Gly His Asn Val Ser Val Glu Glu Leu Ala Gln Thr Arg Ile TyrGly His Asn Val Ser Val Glu Glu Leu Ala Gln Thr Arg Ile Tyr

25302530

Gln Lys Glu Gly Gln Ile Val Met Thr Met Met Ser Gly Asp Met 35 4045Gln Lys Glu Gly Gln Ile Val Met Thr Met Met Ser Gly Asp Met 35 4045

Ile Trp Pro Glu Tyr Lys Asn Arg Thr Ile Phe Asp Ile Thr Asn 50 5560Ile Trp Pro Glu Tyr Lys Asn Arg Thr Ile Phe Asp Ile Thr Asn 50 5560

Leu Ser Ile Val Ile Leu Ala Leu Arg Pro Ser Asp Glu Gly Thr 65 7075Leu Ser Ile Val Ile Leu Ala Leu Arg Pro Ser Asp Glu Gly Thr 65 7075

Glu Cys Val Val Leu Lys Tyr Glu Lys Asp Ala Phe Lys Arg Glu 85 9095Glu Cys Val Val Leu Lys Tyr Glu Lys Asp Ala Phe Lys Arg Glu 85 9095

CysCys

TrpTrp

AsnAsn

AsnAsn

Tyr 80Tyr 80

HisHis

Leu Ala Glu Val ThrLeu Ala Glu Val Thr

100 <210>191 <211>101 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>100 <210>191 <211>101 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> CD80 v50 IgV <400> 191<223> CD80 v50 IgV <400> 191

Val Ile His Val Thr 1 5Val Ile His Val Thr 1 5

Lys Glu Val Lys GluLys Glu Val Lys Glu

Val Ala Thr Leu SerVal Ala Thr Leu Ser

Gly His Asn Val Ser 20Gly His Asn Val Ser 20

Val Glu Glu Leu AlaVal Glu Glu Leu Ala

Gln Thr Arg Ile TyrGln Thr Arg Ile Tyr

Gln Lys Glu Gly Lys 35Gln Lys Glu Gly Lys 35

Met Val Leu Thr MetMet Val Leu Thr Met

Met Ser Gly Asp Met 45Met Ser Gly Asp Met 45

Ile Trp Pro Glu Tyr 50Ile Trp Pro Glu Tyr 50

Lys Asn Arg Thr Ile 55Lys Asn Arg Thr Ile 55

Phe Asp Ile Thr Asn 60Phe Asp Ile Thr Asn 60

CysCys

TrpTrp

AsnAsn

AsnAsn

TyrTyr

Leu Ser Ile Val Ile 65Leu Ser Ile Val Ile 65

Leu Ala Leu Arg Pro 70Leu Ala Leu Arg Pro 70

Ser Asp Glu Gly ThrSer Asp Glu Gly Thr

- 394 044346- 394 044346

Glu Cys Val Val Leu Lys Tyr Glu Lys Asp Ala Phe Lys Arg Glu 85 9095Glu Cys Val Val Leu Lys Tyr Glu Lys Asp Ala Phe Lys Arg Glu 85 9095

HisHis

Leu Ala Glu Val ThrLeu Ala Glu Val Thr

100 <210>192 <211>101 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>100 <210>192 <211>101 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> CD80 v51 IgV <400> 192<223> CD80 v51 IgV <400> 192

Val Ile His Val Thr 1 5Val Ile His Val Thr 1 5

Lys Glu Val Lys GluLys Glu Val Lys Glu

Val Ala Thr Leu SerVal Ala Thr Leu Ser

Gly His Asn Val Ser 20Gly His Asn Val Ser 20

Val Glu Glu Leu AlaVal Glu Glu Leu Ala

Gln Thr His Ile HisGln Thr His Ile His

Gln Lys Glu Lys Lys 35Gln Lys Glu Lys Lys 35

Met Val Leu Gly Met 40Met Val Leu Gly Met 40

Met Ser Gly Asp Met 45Met Ser Gly Asp Met 45

Ile Trp Pro Glu Tyr 50Ile Trp Pro Glu Tyr 50

Lys Asn Arg Thr Ile 55Lys Asn Arg Thr Ile 55

Phe Asp Ile Thr Asn 60Phe Asp Ile Thr Asn 60

Leu Ser Ile Val Ile 65Leu Ser Ile Val Ile 65

Leu Ala Leu Arg Pro 70Leu Ala Leu Arg Pro 70

Ser Asp Glu Gly Thr 75Ser Asp Glu Gly Thr 75

Glu Cys Val Val Leu 85Glu Cys Val Val Leu 85

Lys Asn Gly Glu Asn 90Lys Asn Gly Glu Asn 90

Gly Phe Lys Arg Glu 95Gly Phe Lys Arg Glu 95

CysCys

TrpTrp

AsnAsn

AsnAsn

Tyr 80Tyr 80

HisHis

Leu Ala Glu Val ThrLeu Ala Glu Val Thr

100 <210> 193 <211> 101 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>100 <210> 193 <211> 101 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> CD80 v52 IgV <400> 193<223> CD80 v52 IgV <400> 193

Val Ile His Val Thr Lys Glu Val Lys Glu Val Thr Thr Leu SerVal Ile His Val Thr Lys Glu Val Lys Glu Val Thr Thr Leu Ser

5 10 155 10 15

CysCys

TrpTrp

Gly Leu Asn Val Ser Val Glu Glu Leu Ala Gln Thr Arg Ile TyrGly Leu Asn Val Ser Val Glu Glu Leu Ala Gln Thr Arg Ile Tyr

- 395 044346- 395 044346

Gln Lys Glu Lys 35Gln Lys Glu Lys 35

Lys Met Val Leu Thr Met Val Ser Gly Asp MetLys Met Val Leu Thr Met Val Ser Gly Asp Met

4545

Ile Trp Pro Glu 50Ile Trp Pro Glu 50

Tyr Lys Asn Arg Thr Ile Leu Asp Ile Thr Asn 55 60Tyr Lys Asn Arg Thr Ile Leu Asp Ile Thr Asn 55 60

Leu Ser Ile Val 65Leu Ser Ile Val 65

Ile Leu Ala Leu Arg Pro Ser Asp Lys Gly ThrIle Leu Ala Leu Arg Pro Ser Asp Lys Gly Thr

7575

Glu Cys Val ValGlu Cys Val Val

Leu Lys Tyr Glu Lys Asp Ala Phe Lys Arg Glu 85 90 95Leu Lys Tyr Glu Lys Asp Ala Phe Lys Arg Glu 85 90 95

AsnAsn

AsnAsn

Tyr 80Tyr 80

HisHis

Leu Ala Glu Val ThrLeu Ala Glu Val Thr

100 <210> 194 <211> 101 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>100 <210> 194 <211> 101 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> CD80 v53 IgV <400> 194<223> CD80 v53 IgV <400> 194

Val Ile His Val Thr 1 5Val Ile His Val Thr 1 5

Lys Glu Val Lys GluLys Glu Val Lys Glu

Val Ala Thr Leu SerVal Ala Thr Leu Ser

Gly His Asn Val Ser 20Gly His Asn Val Ser 20

Val Glu Glu Leu AlaVal Glu Glu Leu Ala

Gln Thr Val Ile PheGln Thr Val Ile Phe

Gln Lys Glu Gly Lys 35Gln Lys Glu Gly Lys 35

Leu Val Leu Thr MetLeu Val Leu Thr Met

Gln Ser Gly Asp Met 45Gln Ser Gly Asp Met 45

Ile Trp Pro Glu Tyr 50Ile Trp Pro Glu Tyr 50

Lys Asn Arg Thr Ile 55Lys Asn Arg Thr Ile 55

Phe Asp Ile Thr Asn 60Phe Asp Ile Thr Asn 60

Leu Ser Ile Val Ile 65Leu Ser Ile Val Ile 65

Leu Ala Leu Arg Pro 70Leu Ala Leu Arg Pro 70

Ser Asp Glu Gly Thr 75Ser Asp Glu Gly Thr 75

Arg Cys Ile Val Ile 85Arg Cys Ile Val Ile 85

Lys Tyr Glu Arg Leu 90Lys Tyr Glu Arg Leu 90

Glu Asn Gln Gly Glu 95Glu Asn Gln Gly Glu 95

CysCys

TrpTrp

AsnAsn

AsnAsn

Tyr 80Tyr 80

HisHis

Leu Ala Glu Val ThrLeu Ala Glu Val Thr

100 <210> 195 <211> 101100 <210> 195 <211> 101

- 396 044346 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>- 396 044346 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> CD80 v54 IgV <400>195<223> CD80 v54 IgV <400>195

Val Ile His Val Thr Lys Glu Val Lys Glu Val Ala Thr Leu SerVal Ile His Val Thr Lys Glu Val Lys Glu Val Ala Thr Leu Ser

5 10155 1015

Gly His Asn Val Ser Val Glu Glu Leu Ala Gln Thr Arg Ile TyrGly His Asn Val Ser Val Glu Glu Leu Ala Gln Thr Arg Ile Tyr

25302530

Gln Lys Glu Lys Lys Met Val Leu Thr Met Met Ser Gly Asp Met 35 4045Gln Lys Glu Lys Lys Met Val Leu Thr Met Met Ser Gly Asp Met 35 4045

Ile Trp Pro Glu Tyr Lys Asn Arg Thr Ile Phe Asp Ile Thr Asn 50 5560Ile Trp Pro Glu Tyr Lys Asn Arg Thr Ile Phe Asp Ile Thr Asn 50 5560

Leu Ser Ile Met Ile Pro Ala Pro Arg Pro Ser Asp Glu Gly Thr 65 7075Leu Ser Ile Met Ile Pro Ala Pro Arg Pro Ser Asp Glu Gly Thr 65 7075

Glu Cys Val Val Leu Glu Tyr Glu Lys Asp Ala Phe Lys Arg Glu 85 9095Glu Cys Val Val Leu Glu Tyr Glu Lys Asp Ala Phe Lys Arg Glu 85 9095

CysCys

TrpTrp

AsnAsn

AsnAsn

Tyr 80Tyr 80

HisHis

Leu Ala Glu Val ThrLeu Ala Glu Val Thr

100 <210>196 <211>111 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>100 <210>196 <211>111 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL WT IgV < 400> 196< 223> ICOSL WT IgV < 400> 196

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn AspLeu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp

25 3025 30

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 40 45Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 40 45

Ile Pro Gln Asn Ser Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 55 60Ile Pro Gln Asn Ser Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 55 60

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

LeuLeu

Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe SerArg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser

- 397 044346- 397 044346

Arg Leu Phe Asn ValArg Leu Phe Asn Val

Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys Leu 90 95Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys Leu 90 95

Val Leu Ser GlnVal Leu Ser Gln

100100

Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val GluSer Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu

105 110 <210> 197 <211> 111 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>105 110 <210> 197 <211> 111 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v1 IgV <400> 197<223> ICOSL v1 IgV <400> 197

Asp Thr Gln Glu LysAsp Thr Gln Glu Lys

Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val GluGlu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val Glu

1515

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp Val 20 25 30Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp Val 20 25 30

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr His 35 40 45Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr His 35 40 45

Ile Pro Gln Ser Ser Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg Asn 50 55 60Ile Pro Gln Ser Ser Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg Asn 50 55 60

Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser Leu 65 70 75 80Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser Leu 65 70 75 80

Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys Leu 85 90 95Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys Leu 85 90 95

Val Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu

100 105 110 <210> 198 <211> 111 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>100 105 110 <210> 198 <211> 111 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v2 IgV <400> 198<223> ICOSL v2 IgV <400> 198

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val GluAsp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val Glu

5 10 155 10 15

- 398 044346- 398 044346

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110 <210> 199 <211> 111 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>110 <210> 199 <211> 111 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v3 IgV < 400> 199< 223> ICOSL v3 IgV < 400> 199

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn AspLeu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp

25 3025 30

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 40 45Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 40 45

Ile Pro Gln Asp Ser Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 55 60Ile Pro Gln Asp Ser Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 55 60

Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met 65 70Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met 65 70

Leu Arg Gly Asp Phe Ser 75Leu Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp 85Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp 85

Glu Gln Lys Phe His Cys 90 95Glu Gln Lys Phe His Cys 90 95

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

Val Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe GlnVal Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe Gln

100 105100 105

Glu Val Leu Ser Val GluGlu Val Leu Ser Val Glu

110 <210> 200110 <210> 200

- 399 044346 <211> 111 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>- 399 044346 <211> 111 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v4 IgV <400>200<223> ICOSL v4 IgV <400>200

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val Glu 1 5 1015Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val Glu 1 5 1015

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp Val 20 2530Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp Val 20 2530

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr His 35 4045Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr His 35 4045

Ile Pro Gln Tyr Ser Ser Leu Glu Tyr Val Asp Ser Arg Tyr Arg Asn 50 5560Ile Pro Gln Tyr Ser Ser Leu Glu Tyr Val Asp Ser Arg Tyr Arg Asn 50 5560

Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser Leu 65 70 7580Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser Leu 65 70 7580

Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys Leu 85 9095Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys Leu 85 9095

Val Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu

100 105110 <210>201 <211>111 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>100 105110 <210>201 <211>111 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v5 <400> 201<223> ICOSL v5 <400> 201

Asp Thr Gln Glu 1Asp Thr Gln Glu 1

IgVIgV

Lys Glu Val Arg 5Lys Glu Val Arg 5

Ala Met Val GlyAla Met Val Gly

Ser Asp Val GluSer Asp Val Glu

Leu Ser Cys AlaLeu Ser Cys Ala

Cys Pro Glu GlyCys Pro Glu Gly

Ser Arg Phe Asp 25Ser Arg Phe Asp 25

Leu Asn Asp Val 30Leu Asn Asp Val 30

Tyr Val Tyr TrpTyr Val Tyr Trp

Gln Thr Ser GluGln Thr Ser Glu

Ser Lys Thr ValSer Lys Thr Val

Val Thr Tyr His 45Val Thr Tyr His 45

Ile Pro Gln His 50Ile Pro Gln His 50

Ser Ser Leu GluSer Ser Leu Glu

Tyr Val Asp Ser 60Tyr Val Asp Ser 60

Arg Tyr Arg AsnArg Tyr Arg Asn

- 400 044346- 400 044346

Arg Ala 65Arg Ala 65

Arg LeuArg Leu

Val LeuVal Leu

Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg 7075Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg 7075

Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln 8590Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln 8590

Ser Pro Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val 100105Ser Pro Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val 100105

Gly Asp Phe SerGly Asp Phe Ser

Lys Phe His Cys 95Lys Phe His Cys 95

Leu Ser Val Glu 110Leu Ser Val Glu 110

Leu 80Leu 80

Leu <210> 202 <211> 111 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Leu <210> 202 <211> 111 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v10 IgV < 400> 202< 223> ICOSL v10 IgV < 400> 202

Asp 1 Asp 1 Thr Thr Gln Gln Glu Glu Lys 5 Lys 5 Glu Glu Val Val Arg Arg Ala Ala Met 10 Met 10 Val Val Gly Gly Ser Ser Asp Asp Val 15 Val 15 Leu Leu Ser Ser Cys Cys Ala 20 Ala 20 Cys Cys Pro Pro Glu Glu Gly Gly Ser 25 Ser 25 Arg Arg Phe Phe Asp Asp Leu Leu Asn 30 Asn 30 Asp Asp Tyr Tyr Val Val Tyr 35 Tyr 35 Trp Trp Gln Gln Thr Thr Ser Ser Glu 40 Glu 40 Ser Ser Lys Lys Thr Thr Val Val Val 45 Val 45 Thr Thr Tyr Tyr Ile Ile Pro 50 Pro 50 Gln Gln His His Ser Ser Ser Ser Leu 55 Leu 55 Glu Glu Asn Asn Val Val Asp Asp Ser 60 Ser 60 Arg Arg Tyr Tyr Arg Arg Arg 65 Arg 65 Ala Ala Leu Leu Met Met Ser Ser Pro 70 Pro 70 Ala Ala Gly Gly Met Met Leu Leu Arg 75 Arg 75 Gly Gly Asp Asp Phe Phe Ser Ser Arg Arg Leu Leu Phe Phe Asn Asn Val 85 Val 85 Thr Thr Pro Pro Gln Gln Asp Asp Glu 90 Glu 90 Gln Gln Arg Arg Phe Phe His His Cys 95 Cys 95 Val Val Leu Leu Ser Ser Gln 100 Gln 100 Ser Ser Leu Leu Gly Gly Phe Phe Gln 105 Gln 105 Glu Glu Val Val Leu Leu Ser Ser Val 110 Val 110 Glu Glu

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

Leu <210> 203 <211> 111 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Leu <210> 203 <211> 111 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v11 IgV <400> 203<223> ICOSL v11 IgV <400> 203

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp ValAsp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val

5 10 155 10 15

GluGlu

- 401 044346- 401 044346

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

Val Leu Gly Gln SerVal Leu Gly Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110 <210> 204 <211> 111 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>110 <210> 204 <211> 111 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v12 IgV < 400> 204< 223> ICOSL v12 IgV < 400> 204

Asp Thr 1Asp Thr 1

Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp ValGln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val

10 1510 15

Leu SerLeu Ser

Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn AspCys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp

25 3025 30

Tyr ValTyr Val

Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 40 45Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 40 45

Ile ProIle Pro

Gln Tyr Ser Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg 55 60Gln Tyr Ser Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg 55 60

Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met 65 70Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met 65 70

Leu Arg Gly Asp Phe Ser 75Leu Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp 85Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp 85

Glu Gln Lys Phe His Cys 90 95Glu Gln Lys Phe His Cys 90 95

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

Val Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe GlnVal Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe Gln

100 105100 105

Glu Val Leu Ser Val GluGlu Val Leu Ser Val Glu

110110

- 402 044346 <210> 205 < 211> 111 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>- 402 044346 <210> 205 <211> 111 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v13 IgV <400>205<223> ICOSL v13 IgV <400>205

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val Glu 1 5 1015Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val Glu 1 5 1015

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp Val 20 2530Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp Val 20 2530

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr His 35 4045Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr His 35 4045

Ile Pro Gln Asn Ser Ser Leu Glu Tyr Val Asp Ser Arg Tyr Arg Asn 50 5560Ile Pro Gln Asn Ser Ser Leu Glu Tyr Val Asp Ser Arg Tyr Arg Asn 50 5560

Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser Leu 65 70 7580Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser Leu 65 70 7580

Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys Leu 85 9095Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys Leu 85 9095

Val Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu

100 105110 <210>206 <211>111 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>100 105110 <210>206 <211>111 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v14 IgV <400> 206<223> ICOSL v14 IgV <400> 206

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Ile Pro Gln Asn Ser 50Ile Pro Gln Asn Ser 50

Glu Val Arg Ala Met 10Glu Val Arg Ala Met 10

Pro Glu Gly Ser Arg 25Pro Glu Gly Ser Arg 25

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Val Gly Ser Asp Val Glu 15Val Gly Ser Asp Val Glu 15

Phe Asp Leu Asn Asp Val 30Phe Asp Leu Asn Asp Val 30

Thr Val Val Thr Tyr His 45Thr Val Val Thr Tyr His 45

Asp Ser Arg Tyr Arg Asn 60Asp Ser Arg Tyr Arg Asn 60

- 403 044346- 403 044346

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu Arg 70 75Pro Ala Gly Met Leu Arg 70 75

Gly Asp Phe SerGly Asp Phe Ser

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu Gln 90Thr Pro Gln Asp Glu Gln 90

Val Leu Ser Pro SerVal Leu Ser Pro Ser

100100

Leu Gly Phe Gln Glu ValLeu Gly Phe Gln Glu Val

105105

Lys Phe His Cys 95Lys Phe His Cys 95

Leu Ser Val Glu 110Leu Ser Val Glu 110

Leu 80Leu 80

Leu <210> 207 <211> 111 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Leu <210> 207 <211> 111 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v22 IgV <400> 207<223> ICOSL v22 IgV <400> 207

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn AspLeu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp

25 3025 30

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 40 45Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 40 45

Ile Pro Gln Asn Ser Ala Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 55 60Ile Pro Gln Asn Ser Ala Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 55 60

Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 65 70 75Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 65 70 75

Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 85 90 95Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 85 90 95

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

Val Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu

100 105110 <210>208 <211>111 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>100 105110 <210>208 <211>111 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v23 IgV < 400> 208< 223> ICOSL v23 IgV < 400> 208

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15

GluGlu

- 404 044346- 404 044346

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly 20Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly 20

Ser Arg Phe Asp Leu Asn AspSer Arg Phe Asp Leu Asn Asp

30thirty

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 40 45Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 40 45

Ile Pro Gln Asp Ser 50Ile Pro Gln Asp Ser 50

Pro Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr ArgPro Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg

6060

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 70 75Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 70 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 90 95Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 90 95

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val GluLeu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu

105 110 <210> 209 <211> 111 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>105 110 <210> 209 <211> 111 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v24 IgV < 400> 209< 223> ICOSL v24 IgV < 400> 209

Asp Thr Gln Glu LysAsp Thr Gln Glu Lys

Glu Val Arg Ala Met ValGlu Val Arg Ala Met Val

Gly Ser Asp Val 15Gly Ser Asp Val 15

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn AspLeu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp

25 3025 30

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 40 45Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 40 45

Ile Pro Gln Lys Ser Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 55 60Ile Pro Gln Lys Ser Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 55 60

Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 65 70 75Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 65 70 75

Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 85 90 95Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 85 90 95

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

Val Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu

100 105 110100 105 110

- 405 044346 <210> 210 < 211> 111 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>- 405 044346 <210> 210 <211> 111 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v28 IgV <400> 210<223> ICOSL v28 IgV <400> 210

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg 1 5Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg 1 5

Ala Met Val Gly Ser Asp Val GluAla Met Val Gly Ser Asp Val Glu

1515

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly 20Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly 20

Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp Val 25 30Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp Val 25 30

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser GluTyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu

4040

Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr His 45Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr His 45

Ile Pro Gln Ser Ser Ser Leu GluIle Pro Gln Ser Ser Ser Leu Glu

5555

Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg Asn 60Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg Asn 60

Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly 65 70Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly 65 70

Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser ProMet Leu Arg Gly Asp Phe Ser Pro

8080

Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln 85Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln 85

Asp Glu Gln Lys Phe His Cys LeuAsp Glu Gln Lys Phe His Cys Leu

9595

Val Leu Ser Gln Ser Leu Gly PheVal Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe

100100

Gln Glu Val Leu Ser Val GluGln Glu Val Leu Ser Val Glu

105 110 <210> 211 <211> 111 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>105 110 <210> 211 <211> 111 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v30 IgV <400> 211<223> ICOSL v30 IgV <400> 211

Asp Thr Gln Glu LysAsp Thr Gln Glu Lys

55

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Ile Pro Gln Ser Ser 50Ile Pro Gln Ser Ser 50

Glu Val Arg Ala Met 10Glu Val Arg Ala Met 10

Pro Glu Gly Ser Arg 25Pro Glu Gly Ser Arg 25

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Ser Leu Glu Asn Val 55Ser Leu Glu Asn Val 55

Val Gly Ser Asp Val Glu 15Val Gly Ser Asp Val Glu 15

Phe Asp Leu Asn Asp Val 30Phe Asp Leu Asn Asp Val 30

Thr Val Val Thr Tyr His 45Thr Val Val Thr Tyr His 45

Asp Ser Arg Tyr Arg Asn 60Asp Ser Arg Tyr Arg Asn 60

- 406 044346- 406 044346

Arg 65Arg 65

AlaAla

LeuLeu

MetMet

SerSer

Pro 70Pro 70

AlaAla

GlyGly

MetMet

LeuLeu

Gln 75Gln 75

Gly Asp Phe SerGly Asp Phe Ser

ArgArg

LeuLeu

PhePhe

AsnAsn

Val 85Val 85

ThrThr

ProPro

GlnGln

AspAsp

Glu 90Glu 90

GlnGln

ValVal

LeuLeu

SerSer

GlnGln

100100

SerSer

LeuLeu

GlyGly

PhePhe

GlnGln

105105

GluGlu

ValVal

Lys Phe His Cys 95Lys Phe His Cys 95

Leu Ser Val Glu 110Leu Ser Val Glu 110

Leu 80Leu 80

Leu <210> 212 <211> 111 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Leu <210> 212 <211> 111 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v33 IgV <400> 212<223> ICOSL v33 IgV <400> 212

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn AspLeu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp

25 3025 30

Tyr ValTyr Val

Ile ProIle Pro

Tyr 35Tyr 35

GlnGln

Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 40 45Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 40 45

Ser Ser Ser Leu Glu Tyr Val Asp Ser Arg Tyr Arg 55 60Ser Ser Ser Leu Glu Tyr Val Asp Ser Arg Tyr Arg 55 60

Arg Ala 65Arg Ala 65

Arg LeuArg Leu

Val PheVal Phe

Leu Met Ser Pro Ala Gly Met 70Leu Met Ser Pro Ala Gly Met 70

Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp 85Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp 85

Ser Arg Ser Leu Gly Phe GlnSer Arg Ser Leu Gly Phe Gln

100 105100 105

Leu Arg Gly Asp Phe Ser 75Leu Arg Gly Asp Phe Ser 75

Glu Gln Lys Phe Asp Cys 90 95Glu Gln Lys Phe Asp Cys 90 95

Glu Val Leu Ser Val GluGlu Val Leu Ser Val Glu

110110

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

Phe <210> 213 <211> 111 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Phe <210> 213 <211> 111 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v34 IgV < 400> 213< 223> ICOSL v34 IgV < 400> 213

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp ValAsp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val

GluGlu

- 407 044346- 407 044346

1515

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu 20Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu 20

Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn AspGly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp

30thirty

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser 35Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser 35

Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 40 45Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 40 45

Ile Pro Gln Ser Ser Ser LeuIle Pro Gln Ser Ser Ser Leu

5555

Glu Tyr Val Asp Ser Arg Tyr Arg 60Glu Tyr Val Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser Pro AlaArg Ala Leu Met Ser Pro Ala

7070

Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 75Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro 85Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro 85

Gln Asp Glu Gln Lys Phe Asp CysGln Asp Glu Gln Lys Phe Asp Cys

9595

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

PhePhe

Val Phe Ser Arg Ser Leu Glu Phe Gln Glu Val Leu Ser Val GluVal Phe Ser Arg Ser Leu Glu Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu

100 105 110 <210> 214 <211> 108 <212> БЕЛОК <213> Homo sapiens <220>100 105 110 <210> 214 <211> 108 <212> PROTEIN <213> Homo sapiens <220>

<221> новая или редкая характеристика <223> NKp30 WT IgC-подобный <400> 214<221> new or rare characteristic <223> NKp30 WT IgC-like <400> 214

Leu Trp Val Ser Gln 1 5Leu Trp Val Ser Gln 1 5

Pro Pro Glu Ile Arg Thr Leu Glu Gly SerPro Pro Glu Ile Arg Thr Leu Glu Gly Ser

1515

Ala Phe Leu Pro Cys 20Ala Phe Leu Pro Cys 20

Ser Phe Asn Ala Ser Gln Gly Arg Leu AlaSer Phe Asn Ala Ser Gln Gly Arg Leu Ala

30thirty

Gly Ser Val Thr Trp 35Gly Ser Val Thr Trp 35

Phe Arg Asp Glu Val Val Pro Gly Lys Glu 40 45Phe Arg Asp Glu Val Val Pro Gly Lys Glu 40 45

Arg Asn Gly Thr Pro 50Arg Asn Gly Thr Pro 50

Glu Phe Arg Gly Arg Leu Ala Pro Leu AlaGlu Phe Arg Gly Arg Leu Ala Pro Leu Ala

6060

Ser Arg Phe Leu His 65Ser Arg Phe Leu His 65

Asp His Gln Ala Glu Leu His Ile Arg Asp 70 75Asp His Gln Ala Glu Leu His Ile Arg Asp 70 75

Arg Gly His Asp Ala 85Arg Gly His Asp Ala 85

Ser Ile Tyr Val Cys Arg Val Glu Val Leu 90 95Ser Ile Tyr Val Cys Arg Val Glu Val Leu 90 95

SerSer

IleIle

ValVal

SerSer

Val 80Val 80

GlyGly

- 408 044346- 408 044346

Leu Gly Val Gly Thr Gly Asn Gly Thr Arg Leu ValLeu Gly Val Gly Thr Gly Asn Gly Thr Arg Leu Val

100100

105 <210> 215 <211> 108 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>105 <210> 215 <211> 108 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> NKp30 v1 IgC <400> 215<223> NKp30 v1 IgC <400> 215

Leu Trp Val Ser Gln 1 5 подобныйLeu Trp Val Ser Gln 1 5 similar

Pro Pro Glu Ile ArgPro Pro Glu Ile Arg

Thr Leu Glu Gly SerThr Leu Glu Gly Ser

Ala Phe Leu Pro Cys 20Ala Phe Leu Pro Cys 20

Ser Phe Asn Ala SerSer Phe Asn Ala Ser

Gln Gly Arg Val Ala 30Gln Gly Arg Val Ala 30

Gly Ser Val Thr Trp 35Gly Ser Val Thr Trp 35

Phe Arg Asp Glu Val 40Phe Arg Asp Glu Val 40

Val Pro Gly Lys Glu 45Val Pro Gly Lys Glu 45

Arg Asn Gly Thr Pro 50Arg Asn Gly Thr Pro 50

Glu Phe Arg Gly Arg 55Glu Phe Arg Gly Arg 55

Leu Val Pro Leu Ala 60Leu Val Pro Leu Ala 60

Ser Arg Phe Leu His 65Ser Arg Phe Leu His 65

Asp His Gln Ala Glu 70Asp His Gln Ala Glu 70

Leu His Ile Arg Asp 75Leu His Ile Arg Asp 75

Arg Gly His Asp Ala 85Arg Gly His Asp Ala 85

Gly Ile Tyr Val Cys 90Gly Ile Tyr Val Cys 90

Arg Val Glu Val Leu 95Arg Val Glu Val Leu 95

SerSer

IleIle

ValVal

ProPro

Val 80Val 80

GlyGly

Leu Gly Val Gly ThrLeu Gly Val Gly Thr

100100

Gly Asn Gly Thr ArgGly Asn Gly Thr Arg

105105

Leu Val <210>Leu Val <210>

<211><211>

<212><212>

216216

108 БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>108 PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> NKp30 v2 IgC-подобный <400> 216<223> NKp30 v2 IgC-like <400> 216

Leu Trp Val Ser 1Leu Trp Val Ser 1

Gln Pro Pro Glu Ile Arg Thr Leu Glu Gly Ser 5 10 15Gln Pro Pro Glu Ile Arg Thr Leu Glu Gly Ser 5 10 15

Ala Phe Leu ProAla Phe Leu Pro

Cys Ser Phe Asn Ala Ser Gln Gly Arg Val Ala 25 30Cys Ser Phe Asn Ala Ser Gln Gly Arg Val Ala 25 30

Gly Ser Val ThrGly Ser Val Thr

Trp Phe Arg Asp Glu Val Val Pro Gly Lys GluTrp Phe Arg Asp Glu Val Val Pro Gly Lys Glu

4545

SerSer

IleIle

ValVal

- 409 044346- 409 044346

Arg Asn Gly Thr 50Arg Asn Gly Thr 50

Pro Glu Phe Arg 55Pro Glu Phe Arg 55

Gly Arg Leu Ala 60Gly Arg Leu Ala 60

Pro Leu Ala SerPro Leu Ala Ser

Ser Arg Phe Leu 65Ser Arg Phe Leu 65

His Asp His Gln 70His Asp His Gln 70

Ala Glu Leu HisAla Glu Leu His

Ile Arg Asp Val 80Ile Arg Asp Val 80

Arg Gly His AspArg Gly His Asp

Ala Ser Ile Tyr 85Ala Ser Ile Tyr 85

Val Cys Arg Val 90Val Cys Arg Val 90

Glu Val Leu Gly 95Glu Val Leu Gly 95

Leu Gly Val GlyLeu Gly Val Gly

100100

Thr Gly Asn GlyThr Gly Asn Gly

Thr Arg Leu Val 105 <210> 217 <211> 108 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Thr Arg Leu Val 105 <210> 217 <211> 108 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> NKp30 v3 IgC-подобный <400> 217<223> NKp30 v3 IgC-like <400> 217

Leu Trp Val Ser Gln Pro Pro Glu Ile Arg Thr Leu Glu Gly Ser Ser 1 5 10 15Leu Trp Val Ser Gln Pro Pro Glu Ile Arg Thr Leu Glu Gly Ser Ser 1 5 10 15

Ala Phe Leu ProAla Phe Leu Pro

Cys SerCys Ser

Phe Asn Ala Ser Gln Gly Arg Leu AlaPhe Asn Ala Ser Gln Gly Arg Leu Ala

30thirty

Gly Ser Val ThrGly Ser Val Thr

Trp PheTrp Phe

Arg Asp Glu Val Val Pro Gly Lys GluArg Asp Glu Val Val Pro Gly Lys Glu

4545

Arg Asn Gly Thr 50Arg Asn Gly Thr 50

Pro GluPro Glu

Phe Arg Gly Arg Leu Val Pro Leu Ala 55 60Phe Arg Gly Arg Leu Val Pro Leu Ala 55 60

Ser Arg Phe Leu 65Ser Arg Phe Leu 65

Arg Gly His AspArg Gly His Asp

His Asp 70His Asp 70

Ala Ser 85Ala Ser 85

His Gln Ala Glu Leu His Ile Arg Asp 75His Gln Ala Glu Leu His Ile Arg Asp 75

Ile Tyr Val Cys Arg Val Glu Val Leu 90 95Ile Tyr Val Cys Arg Val Glu Val Leu 90 95

IleIle

ValVal

SerSer

Val 80Val 80

GlyGly

Leu Gly Val Gly Thr Gly Asn Gly Thr Arg Leu ValLeu Gly Val Gly Thr Gly Asn Gly Thr Arg Leu Val

100105 <210>218 <211>108 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>100105 <210>218 <211>108 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> NKp30 v4 IgC-подобный<223> NKp30 v4 IgC-like

- 410 044346 <400> 218- 410 044346 <400> 218

Leu Trp Val Ser Gln 1 5Leu Trp Val Ser Gln 1 5

Pro Pro Glu Ile ArgPro Pro Glu Ile Arg

Thr Leu Glu Gly SerThr Leu Glu Gly Ser

Ala Phe Leu Pro Cys 20Ala Phe Leu Pro Cys 20

Ser Phe Asn Ala SerSer Phe Asn Ala Ser

Gln Gly Arg Leu Ala 30Gln Gly Arg Leu Ala 30

Gly Ser Val Thr Trp 35Gly Ser Val Thr Trp 35

Phe Arg Asp Glu Val 40Phe Arg Asp Glu Val 40

Val Pro Gly Lys Glu 45Val Pro Gly Lys Glu 45

Arg Asn Gly Thr Pro 50Arg Asn Gly Thr Pro 50

Glu Phe Arg Gly Arg 55Glu Phe Arg Gly Arg 55

Leu Ala Pro Leu Ala 60Leu Ala Pro Leu Ala 60

Ser Arg Phe Leu His 65Ser Arg Phe Leu His 65

Asp His Gln Ala Glu 70Asp His Gln Ala Glu 70

Leu His Ile Arg Asp 75Leu His Ile Arg Asp 75

Arg Gly His Asp Ala 85Arg Gly His Asp Ala 85

Ser Ile Tyr Val Cys 90Ser Ile Tyr Val Cys 90

Arg Val Glu Val Leu 95Arg Val Glu Val Leu 95

SerSer

IleIle

ValVal

ProPro

Val 80Val 80

GlyGly

Leu Gly Val Gly ThrLeu Gly Val Gly Thr

100100

Gly Asn Gly Thr ArgGly Asn Gly Thr Arg

105105

Leu Val <210> 219 <211> 108 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Leu Val <210> 219 <211> 108 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> NKp30 v5 IgC-подобный <400> 219<223> NKp30 v5 IgC-like <400> 219

Leu Trp Val Ser Gln Pro Pro Glu 1 5Leu Trp Val Ser Gln Pro Pro Glu 1 5

Ile Arg Thr Leu Glu Gly SerIle Arg Thr Leu Glu Gly Ser

1515

Ala Phe Leu Pro Cys Ser Phe Asn 20Ala Phe Leu Pro Cys Ser Phe Asn 20

Ala Ser Gln Gly Arg Leu Ala 25 30Ala Ser Gln Gly Arg Leu Ala 25 30

Gly Ser Val Thr Trp Phe Arg AspGly Ser Val Thr Trp Phe Arg Asp

4040

Glu Val Val Pro Gly Lys Glu 45Glu Val Val Pro Gly Lys Glu 45

Arg Asn Gly Thr Pro Glu Phe ArgArg Asn Gly Thr Pro Glu Phe Arg

5555

Gly Arg Leu Ala Pro Leu Ala 60Gly Arg Leu Ala Pro Leu Ala 60

Ser Arg Phe Leu His Asp His Gln 65 70Ser Arg Phe Leu His Asp His Gln 65 70

Ala Glu Leu His Ile Arg Asp 75Ala Glu Leu His Ile Arg Asp 75

Arg Gly His Asp Ala Gly Ile Tyr 85Arg Gly His Asp Ala Gly Ile Tyr 85

Val Cys Arg Val Glu Val LeuVal Cys Arg Val Glu Val Leu

9595

SerSer

IleIle

ValVal

SerSer

Val 80Val 80

GlyGly

- 411 044346- 411 044346

Leu Gly Val Gly Thr Gly Asn Gly Thr ArgLeu Gly Val Gly Thr Gly Asn Gly Thr Arg

Leu ValLeu Val

100100

105 <210> 220 <211> 99 < 212> БЕЛОК < 213> Homo Sapiens <220>105 <210> 220 <211> 99 <212> PROTEIN <213> Homo Sapiens <220>

<221> новая или редкая характеристика <223> CD86 WT IgV <400> 220<221> new or rare characteristic <223> CD86 WT IgV <400> 220

Asn Glu Thr Ala Asp Leu Pro Cys Gln Phe Ala Asn Ser Gln AsnAsn Glu Thr Ala Asp Leu Pro Cys Gln Phe Ala Asn Ser Gln Asn

5 10 155 10 15

Ser Leu Ser Glu LeuSer Leu Ser Glu Leu

Val Val Phe Trp GlnVal Val Phe Trp Gln

Asp Gln Glu Asn Leu 30Asp Gln Glu Asn Leu 30

Leu Asn Glu Val Tyr 35Leu Asn Glu Val Tyr 35

Leu Gly Lys Glu Lys 40Leu Gly Lys Glu Lys 40

Phe Asp Ser Val His 45Phe Asp Ser Val His 45

Lys Tyr Met Gly Arg 50Lys Tyr Met Gly Arg 50

Thr Ser Phe Asp Ser 55Thr Ser Phe Asp Ser 55

Asp Ser Trp Thr Leu 60Asp Ser Trp Thr Leu 60

Leu His Asn Leu Gln 65Leu His Asn Leu Gln 65

Ile Lys Asp Lys Gly 70Ile Lys Asp Lys Gly 70

Leu Tyr Gln Cys Ile 75Leu Tyr Gln Cys Ile 75

His His Lys Lys Pro 85His His Lys Lys Pro 85

Thr Gly Met Ile Arg 90Thr Gly Met Ile Arg 90

Ile His Gln Met AsnIle His Gln Met Asn

GlnGln

ValVal

SerSer

ArgArg

Ile 80Ile 80

SerSer

Glu Leu Ser <210> 221 <211> 99 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Glu Leu Ser <210> 221 <211> 99 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> CD86 v1 IgV <400>221<223>CD86 v1 IgV <400>221

Asn Glu Thr Ala Asp Leu Pro Cys Gln Phe Ala Asn Ser Gln AsnAsn Glu Thr Ala Asp Leu Pro Cys Gln Phe Ala Asn Ser Gln Asn

5 10155 1015

Ser Leu Ser Glu Leu Val Val Phe Trp His Asp Gln Glu Asn LeuSer Leu Ser Glu Leu Val Val Phe Trp His Asp Gln Glu Asn Leu

25302530

GlnGln

ValVal

- 412 044346- 412 044346

Leu Asn Glu Val Tyr 35Leu Asn Glu Val Tyr 35

Leu Gly Lys Glu Lys 40Leu Gly Lys Glu Lys 40

Phe Asp Ser Val His 45Phe Asp Ser Val His 45

Lys Tyr Met Gly Arg 50Lys Tyr Met Gly Arg 50

Thr Ser Phe Asp Ser 55Thr Ser Phe Asp Ser 55

Asp Ser Trp Thr Leu 60Asp Ser Trp Thr Leu 60

Leu His Asn Leu Gln 65Leu His Asn Leu Gln 65

Ile Lys Asp Lys Gly 70Ile Lys Asp Lys Gly 70

Leu Tyr Gln Cys Ile 75Leu Tyr Gln Cys Ile 75

Leu His Lys Lys Pro 85Leu His Lys Lys Pro 85

Thr Gly Met Ile Arg 90Thr Gly Met Ile Arg 90

Ile His His Met AsnIle His His Met Asn

SerSer

ArgArg

Ile 80Ile 80

SerSer

Glu Leu Ser <210> 222 <211> 99 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Glu Leu Ser <210> 222 <211> 99 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> CD86 <400> 222<223> CD86 <400> 222

Asn Glu Thr 1Asn Glu Thr 1

Ser Leu SerSer Leu Ser

Leu Asn Glu 35Leu Asn Glu 35

Lys Tyr Met 50Lys Tyr Met 50

Leu His Asn 65Leu His Asn 65

His His Lys v2 IgVHis His Lys v2 IgV

Ala Asp Leu 5Ala Asp Leu 5

Glu Leu Val 20Glu Leu Val 20

Val Tyr LeuVal Tyr Leu

Gly Arg ThrGly Arg Thr

Leu Gln IleLeu Gln Ile

Lys Pro ThrLys Pro Thr

Pro Cys GlnPro Cys Gln

Val Phe Trp 25Val Phe Trp 25

Gly Lys Glu 40Gly Lys Glu 40

Ser Phe Asp 55Ser Phe Asp 55

Lys Asp LysLys Asp Lys

Gly Met IleGly Met Ile

Phe Ala Asn 10Phe Ala Asn 10

His Asp GlnHis Asp Gln

Lys Phe AspLys Phe Asp

Ser Asp SerSer Asp Ser

Gly Leu Tyr 75Gly Leu Tyr 75

Arg Ile His 90Arg Ile His 90

Glu Leu Ser <210> 223 <211> 99 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательностьGlu Leu Ser <210> 223 <211> 99 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence

Ser Gln AsnSer Gln Asn

Glu Asn LeuGlu Asn Leu

Ser Val His 45Ser Val His 45

Trp Thr LeuTrp Thr Leu

Gln Cys IleGln Cys Ile

Gln Met AsnGln Met Asn

GlnGln

ValVal

SerSer

ArgArg

Ile 80Ile 80

SerSer

- 413 044346- 413 044346

Ser Gln Asn Gln <220>Ser Gln Asn Gln <220>

<223> CD86 v3 IgV <400> 223<223> CD86 v3 IgV <400> 223

Asn Glu Thr Ala 1Asn Glu Thr Ala 1

Asp Leu Pro Cys 5Asp Leu Pro Cys 5

Gln Phe Ala AsnGln Phe Ala Asn

Ser Leu Ser GluSer Leu Ser Glu

Leu Val Val PheLeu Val Val Phe

Trp Gln Asp Gln 25Trp Gln Asp Gln 25

Glu Asn Leu ValGlu Asn Leu Val

Leu Asn Glu ValLeu Asn Glu Val

Tyr Leu Gly Lys 40Tyr Leu Gly Lys 40

Glu Lys Phe AspGlu Lys Phe Asp

Ser Val His Ser 45Ser Val His Ser 45

Lys Tyr Met Gly 50Lys Tyr Met Gly 50

Arg Thr Ser Phe 55Arg Thr Ser Phe 55

Asp Ser Asp Ser 60Asp Ser Asp Ser 60

Trp Thr Leu ArgTrp Thr Leu Arg

Leu His Asn Leu 65Leu His Asn Leu 65

Gln Ile Lys Asp 70Gln Ile Lys Asp 70

Lys Gly Leu Tyr 75Lys Gly Leu Tyr 75

Gln Cys Ile Ile 80Gln Cys Ile Ile 80

Leu His Lys LysLeu His Lys Lys

Pro Thr Gly Met 85Pro Thr Gly Met 85

Ile Arg Ile His 90Ile Arg Ile His 90

Gln Met Asn SerGln Met Asn Ser

Glu Leu Ser <210> 224 <211> 99 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Glu Leu Ser <210> 224 <211> 99 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> CD86 v4 IgV <400> 224<223> CD86 v4 IgV <400> 224

Asn Glu Thr Ala Asp Leu Pro Cys 1 5Asn Glu Thr Ala Asp Leu Pro Cys 1 5

Gln Phe Ala Asn Ser Gln Asn GlnGln Phe Ala Asn Ser Gln Asn Gln

1515

Ser Leu Ser Glu Leu Val Val PheSer Leu Ser Glu Leu Val Val Phe

Trp Gln Asp Gln Glu Asn Leu Val 25 30Trp Gln Asp Gln Glu Asn Leu Val 25 30

Leu Asn Glu Val Tyr Leu Gly LysLeu Asn Glu Val Tyr Leu Gly Lys

4040

Glu Lys Phe Asp Ser Val His Ser 45Glu Lys Phe Asp Ser Val His Ser 45

Lys Tyr Met Gly Arg Thr Ser PheLys Tyr Met Gly Arg Thr Ser Phe

5555

Asp Ser Asp Ser Trp Thr Leu Arg 60Asp Ser Asp Ser Trp Thr Leu Arg 60

Leu His Asn Leu Gln Ile Lys Asp 65 70Leu His Asn Leu Gln Ile Lys Asp 65 70

Lys Gly Leu Tyr Gln Cys Ile IleLys Gly Leu Tyr Gln Cys Ile Ile

8080

- 414 044346- 414 044346

His His Lys Lys Pro Thr Gly Met Ile Arg IleHis His Lys Lys Pro Thr Gly Met Ile Arg Ile

His His Met AsnHis His Met Asn

SerSer

Glu Leu Ser <210> 225 <211> 19 < 212> БЕЛОК < 213> Homo sapiens <220>Glu Leu Ser <210> 225 <211> 19 <212> PROTEIN <213> Homo sapiens <220>

< 221> новая или редкая характеристика <223> сигнальный пептид VH <400>225<221> new or rare characteristic <223> VH signal peptide <400>225

Met Gly Ser Thr Ala Ile Leu Ala Leu Leu Leu Ala Val Leu Gln 1 5 1015Met Gly Ser Thr Ala Ile Leu Ala Leu Leu Leu Ala Val Leu Gln 1 5 1015

GlyGly

Val Ser Ala <210>226 <211>232 < 212> БЕЛОК < 213> Homo sapiens <220>Val Ser Ala <210>226 <211>232 <212> PROTEIN <213> Homo sapiens <220>

< 221> новая или редкая характеристика < 223> IgG1 Fc < 400>226<221>new or rare characteristic <223>IgG1 Fc <400>226

Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro 1 5 1015Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro 1 5 1015

Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro LysPro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys

25302530

Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val 35 4045Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val 35 4045

Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp TyrVal Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr

55605560

Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu 65 7075Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu 65 7075

Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His 85 9095Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His 85 9095

AlaAla

ProPro

ValVal

ValVal

Gln 80Gln 80

GlnGln

- 415 044346- 415 044346

Asp Trp Leu Asn GlyAsp Trp Leu Asn Gly

100100

Lys Glu Tyr Lys CysLys Glu Tyr Lys Cys

105105

Lys Val Ser Asn LysLys Val Ser Asn Lys

110110

Leu Pro Ala Pro IleLeu Pro Ala Pro Ile

115115

Glu Lys Thr Ile Ser 120Glu Lys Thr Ile Ser 120

Lys Ala Lys Gly GlnLys Ala Lys Gly Gln

125125

Arg Glu Pro Gln ValArg Glu Pro Gln Val

130130

Tyr Thr Leu Pro ProTyr Thr Leu Pro Pro

135135

Ser Arg Glu Glu MetSer Arg Glu Glu Met

140140

Lys Asn Gln Val Ser 145Lys Asn Gln Val Ser 145

Leu Thr Cys Leu Val 150Leu Thr Cys Leu Val 150

Lys Gly Phe Tyr Pro 155Lys Gly Phe Tyr Pro 155

Asp Ile Ala Val GluAsp Ile Ala Val Glu

165165

Trp Glu Ser Asn GlyTrp Glu Ser Asn Gly

170170

Gln Pro Glu Asn AsnGln Pro Glu Asn Asn

175175

Lys Thr Thr Pro ProLys Thr Thr Pro Pro

180180

Val Leu Asp Ser AspVal Leu Asp Ser Asp

185185

Gly Ser Phe Phe LeuGly Ser Phe Phe Leu

190190

Ser Lys Leu Thr ValSer Lys Leu Thr Val

195195

Asp Lys Ser Arg Trp 200Asp Lys Ser Arg Trp 200

Gln Gln Gly Asn ValGln Gln Gly Asn Val

205205

Ser Cys Ser Val MetSer Cys Ser Val Met

210210

His Glu Ala Leu HisHis Glu Ala Leu His

215215

Asn His Tyr Thr Gln 220Asn His Tyr Thr Gln 220

AlaAla

ProPro

ThrThr

Ser 160Ser 160

TyrTyr

TyrTyr

PhePhe

LysLys

Ser Leu Ser Leu Ser 225Ser Leu Ser Leu Ser 225

Pro Gly Lys 230 <210> 227 <211> 235 <212> БЕЛОК <213> Homo sapiens <220>Pro Gly Lys 230 <210> 227 <211> 235 <212> PROTEIN <213> Homo sapiens <220>

<221> новая или редкая характеристика <223> IgG2 Fc <400> 227<221> new or rare characteristic <223> IgG2 Fc <400> 227

Thr Lys Val Asp Lys Thr Val Glu Arg Lys Cys Cys Val Glu Cys 1 5 10 15Thr Lys Val Asp Lys Thr Val Glu Arg Lys Cys Cys Val Glu Cys 1 5 10 15

Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala Gly ProPro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala Gly Pro

2525

Ser Val Phe Leu PheSer Val Phe Leu Phe

Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu MetPro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met

4040

Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val 45Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val 45

Cys Val Val Val Asp Val Ser HisCys Val Val Val Asp Val Ser His

5555

Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe 60Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe 60

ProPro

ProPro

ThrThr

AsnAsn

- 416 044346- 416 044346

Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val 65 70Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val 65 70

His Asn Ala Lys Thr Lys Pro ArgHis Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg

8080

Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Phe Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val 85 9095Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Phe Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val 85 9095

Val His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val SerVal His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser

100 105110100 105110

Asn Lys Gly Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Thr LysAsn Lys Gly Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Thr Lys

115 120125115 120125

Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg GluGly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu

130 135140130 135140

Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly PheGlu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe

145 150 155160145 150 155160

Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro GluTyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu

165 170175165 170175

Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Met Leu Asp Ser Asp Gly Ser PheAsn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Met Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe

180 185190180 185190

Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln GlyPhe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly

195 200205195 200205

Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His TyrAsn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr

210 215220210 215220

Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly LysThr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys

225 230235 < 210>228 < 211>15 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>225 230235 < 210>228 < 211>15 < 212> PROTEIN < 213> Artificial sequence <220>

< 223> линкер IgV-IgV < 400>228< 223> IgV-IgV linker < 400>228

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser 1 5 1015 <210>229 <211>10 <212> БЕЛОКGly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser 1 5 1015 <210>229 <211>10 <212> PROTEIN

- 417 044346 <213> Искусственная последовательность <220>- 417 044346 <213> Artificial sequence <220>

<223> IgV-Fc линкер 1 <400>229<223> IgV-Fc linker 1 <400>229

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly SerGly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser

510 <210>230 <211>13 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>510 <210>230 <211>13 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> IgV-Fc линкер 2 < 400>230<223>IgV-Fc linker 2 <400>230

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Ala Ala AlaGly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Ala Ala Ala

510 < 210>231 < 211>15 < 212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>510 <210>231 <211>15 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> CD80 WT линкер 1 <400>231<223> CD80 WT linker 1 <400>231

Lys Ala Asp Phe Pro Thr Pro Ser Ile Ser Asp Phe Glu Ile Pro 1 5 1015 <210>232 <211>10 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Lys Ala Asp Phe Pro Thr Pro Ser Ile Ser Asp Phe Glu Ile Pro 1 5 1015 <210>232 <211>10 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> CD80 WT линкер 2 <400>232<223> CD80 WT linker 2 <400>232

Thr Thr Lys Gln Glu His Phe Pro Asp AsnThr Thr Lys Gln Glu His Phe Pro Asp Asn

510 <210>233 <211>11 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>510 <210>233 <211>11 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL WT линкер 1 <400> 233<223> ICOSL WT linker 1 <400> 233

- 418 044346- 418 044346

Val Thr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser Val <210> 234 <211> 29 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Val Thr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser Val <210> 234 <211> 29 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL WT линкер 2 <400> 234<223> ICOSL WT linker 2 <400> 234

Val Gly Ser Gln Thr Gly Asn Asp Ile Gly Glu Arg Asp Lys Ile 1 5 10 15Val Gly Ser Gln Thr Gly Asn Asp Ile Gly Glu Arg Asp Lys Ile 1 5 10 15

ThrThr

Glu Asn Pro ValGlu Asn Pro Val

Ser Thr Gly Glu Lys Asn Ala Ala Thr 25 <210> 235 <211> 9 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Ser Thr Gly Glu Lys Asn Ala Ala Thr 25 <210> 235 <211> 9 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> NKp30 WT линкер 1 <400> 235<223> NKp30 WT linker 1 <400> 235

Val Glu Lys Glu His Pro Gln Leu GlyVal Glu Lys Glu His Pro Gln Leu Gly

5 <210> 236 <211> 9 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>5 <210> 236 <211> 9 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> CD86 WT линкер 1 <400> 236<223> CD86 WT linker 1 <400> 236

Ala Pro Leu Lys Ile Gln Ala Tyr PheAla Pro Leu Lys Ile Gln Ala Tyr Phe

5 <210> 237 <211> 18 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>5 <210> 237 <211> 18 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> CD86 WT линкер 2 <400> 237<223> CD86 WT linker 2 <400> 237

Val Leu Ala Asn Phe Ser Gln Pro Glu Ile Val Pro Ile Ser Asn 1 5 10 15Val Leu Ala Asn Phe Ser Gln Pro Glu Ile Val Pro Ile Ser Asn 1 5 10 15

IleIle

- 419 044346- 419 044346

Thr Glu <210> 238 <211> 22 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Thr Glu <210> 238 <211> 22 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> CD8 6 WT линкер 3 <400>238<223> CD8 6 WT linker 3 <400>238

Arg Leu Leu Ser Ser Pro Phe Ser Ile Glu Leu Glu Asp Pro Gln 1 5 1015Arg Leu Leu Ser Ser Pro Phe Ser Ile Glu Leu Glu Asp Pro Gln 1 5 1015

ProPro

Pro Pro Asp His Ile Pro <210>239 <211>238 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Pro Pro Asp His Ile Pro <210>239 <211>238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v35 ECD <400> 239<223> ICOSL v35 ECD <400> 239

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Ser Ser 50Ile Pro Gln Ser Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Glu Phe Gln GluLeu Glu Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

- 420 044346- 420 044346

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr PheAsp Glu Leu Thr Phe

135135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 240 <211> 111 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 240 <211> 111 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v35 IgV < 400> 240< 223> ICOSL v35 IgV < 400> 240

Asp Thr Gln 1Asp Thr Gln 1

Glu Lys Glu Val 5Glu Lys Glu Val 5

Arg Ala Met Val Gly 10Arg Ala Met Val Gly 10

Ser Asp ValSer Asp Val

Leu Ser CysLeu Ser Cys

Ala Cys Pro Glu 20Ala Cys Pro Glu 20

Gly Ser Arg Phe Asp 25Gly Ser Arg Phe Asp 25

Leu Asn Asp 30Leu Asn Asp 30

Tyr Val TyrTyr Val Tyr

Trp Gln Thr SerTrp Gln Thr Ser

Glu Ser Lys Thr Val 40Glu Ser Lys Thr Val 40

Val Thr Tyr 45Val Thr Tyr 45

Ile Pro GlnIle Pro Gln

Ser Ser Ser LeuSer Ser Ser Leu

Glu Asn Val Asp Ser 60Glu Asn Val Asp Ser 60

Arg Tyr ArgArg Tyr Arg

Arg Ala Leu 65Arg Ala Leu 65

Met Ser Pro AlaMet Ser Pro Ala

Gly Met Leu Arg GlyGly Met Leu Arg Gly

Asp Phe SerAsp Phe Ser

Arg Leu PheArg Leu Phe

Asn Val Thr ProAsn Val Thr Pro

Gln Asp Glu Gln Lys 90Gln Asp Glu Gln Lys 90

Phe His CysPhe His Cys

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

- 421 044346- 421 044346

Val Leu Ser Gln Ser Leu Glu Phe Gln Glu ValVal Leu Ser Gln Ser Leu Glu Phe Gln Glu Val

Leu Ser Val GluLeu Ser Val Glu

100 105 110 <210> 241 <211> 254 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>100 105 110 <210> 241 <211> 254 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> CD80-TIP I67T/L70Q/A91G/T120S < 400> 241< 223> CD80-TIP I67T/L70Q/A91G/T120S < 400> 241

Val Ile His Val ThrVal Ile His Val Thr

55

Lys Glu Val Lys GluLys Glu Val Lys Glu

Val Ala Thr Leu SerVal Ala Thr Leu Ser

Gly His Asn Val Ser 20Gly His Asn Val Ser 20

Val Glu Glu Leu AlaVal Glu Glu Leu Ala

Gln Thr Arg Ile TyrGln Thr Arg Ile Tyr

Gln Lys Glu Lys Lys 35Gln Lys Glu Lys Lys 35

Met Val Leu Thr MetMet Val Leu Thr Met

Met Ser Gly Asp Met 45Met Ser Gly Asp Met 45

Ile Trp Pro Glu Tyr 50Ile Trp Pro Glu Tyr 50

Lys Asn Arg Thr Ile 55Lys Asn Arg Thr Ile 55

Phe Asp Ile Thr Asn 60Phe Asp Ile Thr Asn 60

Leu Ser Thr Val Ile 65Leu Ser Thr Val Ile 65

Gln Ala Leu Arg Pro 70Gln Ala Leu Arg Pro 70

Ser Asp Glu Gly Thr 75Ser Asp Glu Gly Thr 75

Glu Cys Val Val Leu 85Glu Cys Val Val Leu 85

Lys Tyr Glu Lys Asp 90Lys Tyr Glu Lys Asp 90

Gly Phe Lys Arg Glu 95Gly Phe Lys Arg Glu 95

Leu Ala Glu Val ThrLeu Ala Glu Val Thr

100100

Leu Ser Val Lys AlaLeu Ser Val Lys Ala

105105

Asp Phe Pro Thr ProAsp Phe Pro Thr Pro

110110

Ile Ser Asp Phe GluIle Ser Asp Phe Glu

115115

Ile Pro Ser Ser AsnIle Pro Ser Ser Asn

120120

Ile Arg Arg Ile IleIle Arg Arg Ile Ile

125125

Ser Thr Ser Gly Gly 130Ser Thr Ser Gly Gly 130

Phe Pro Glu Pro HisPhe Pro Glu Pro His

135135

Leu Ser Trp Leu Glu 140Leu Ser Trp Leu Glu 140

Gly Glu Glu Leu Asn 145Gly Glu Glu Leu Asn 145

Ala Ile Asn Thr Thr 150Ala Ile Asn Thr Thr 150

Val Ser Gln Asp Pro 155Val Ser Gln Asp Pro 155

Thr Glu Leu Tyr AlaThr Glu Leu Tyr Ala

165165

Val Ser Ser Lys LeuVal Ser Ser Lys Leu

170170

Asp Phe Asn Met ThrAsp Phe Asn Met Thr

175175

Asn His Ser Phe MetAsn His Ser Phe Met

180180

Cys Leu Ile Lys TyrCys Leu Ile Lys Tyr

185185

Gly His Leu Arg ValGly His Leu Arg Val

190190

CysCys

TrpTrp

AsnAsn

AsnAsn

Tyr 80Tyr 80

HisHis

SerSer

CysCys

AsnAsn

Glu 160Glu 160

ThrThr

AsnAsn

- 422 044346- 422 044346

Gln Thr Phe Asn Trp Asn Thr ThrGln Thr Phe Asn Trp Asn Thr Thr

195200195200

Leu Leu Pro Ser Trp Ala Ile ThrLeu Leu Pro Ser Trp Ala Ile Thr

210215210215

Val Ile Cys Cys Leu Thr Tyr CysVal Ile Cys Cys Leu Thr Tyr Cys

225230225230

Arg Arg Asn Glu Arg Leu Arg ArgArg Arg Asn Glu Arg Leu Arg Arg

245245

Lys Gln Glu His Phe Pro Asp Asn 205Lys Gln Glu His Phe Pro Asp Asn 205

Leu Ile Ser Val Asn Gly Ile Phe 220Leu Ile Ser Val Asn Gly Ile Phe 220

Phe Ala Pro Arg Cys Arg Glu Arg 235 240Phe Ala Pro Arg Cys Arg Glu Arg 235 240

Glu Ser Val Arg Pro ValGlu Ser Val Arg Pro Val

250 <210> 242 <211> 867 <212> DNA <213> Искусственная последовательность <220>250 <210> 242 <211> 867 <212> DNA <213> Artificial sequence <220>

<223> CD80-TIP I67T/L70Q/A91G/T120S <400> 242<223> CD80-TIP I67T/L70Q/A91G/T120S <400> 242

atgggccaca atggggccaca cacggaggca cagggaggca gggaacatca gggaacatca ccatccaagt ccatccaagt gtccatacct gtccacatacct caatttcttt caatttcttt 60 60 cagctcttgg cagctcttgg tgctggctgg tgctggctgg tctttctcac tctttctcac ttctgttcag ttctgttcag gtgttatcca gtgttatcca cgtgaccaag cgtgaccaag 120 120 gaagtgaaag gaagtgaaag aagtggcaac aagtggcaac gctgtcctgt gctgtcctgt ggtcacaatg ggtcacaatg tttctgttga tttctgttga agagctggca agagctggca 180 180 caaactcgca caaactcgca tctactggca tctactggca aaaggagaag aaaggagaag aaaatggtgc aaaatggtgc tgactatgat tgactatgat gtctggggac gtctggggac 240 240 atgaatatat atgaatatat ggcccgagta ggcccgagta caagaaccgg caagaaccgg accatctttg accatctttg atatcactaa atatcactaa taacctctcc taacctctcc 300 300 acagtgatcc acagtgatcc aagctctgcg aagctctgcg cccatctgac cccatctgac gagggcacat gagggcacat acgagtgtgt acgagtgtgt tgttctgaag tgttctgaag 360 360 tatgaaaaag tatgaaaaag acggcttcaa acggcttcaa gcgggaacac gcgggaacac ctggctgaag ctggctgaag tgacgttatc tgacgttatc agtcaaagct agtcaaagct 420 420 gacttcccta gacttcccta cacctagtat cacctagtat atctgacttt atctgacttt gaaattccat gaaattccat cttctaatat cttctaatat tagaaggata tagaaggata 480 480 atttgctcaa atttgctcaa cctctggagg cctctggagg ttttccagag ttttccagag cctcacctct cctcacctct cctggttgga cctggttgga aaatggagaa aaatggagaa 540 540 gaattaaatg gaattaaatg ccatcaacac ccatcaacac aacagtttcc aacagtttcc caagatcctg caagatcctg aaactgagct aaactgagct ctatgctgtt ctatgctgtt 600 600 agcagcaaac agcagcaaac tggatttcaa tggatttcaa tatgacaacc tatgacaacc aaccacagct aaccacagct tcatgtgtct tcatgtgtct catcaagtat catcaagtat 660 660 ggacatttaa ggacattaa gagtgaatca gagtgaatca gaccttcaac gaccttcaac tggaatacaa tggaatacaa ccaagcaaga ccaagcaaga gcattttcct gcattttcct 720 720 gataacctgc gataacctgc tcccatcctg tcccatcctg ggccattacc ggccattacc ttaatctcag ttaatctcag taaatggaat taaatggaat ttttgtgata ttttgtgata 780 780 tgctgcctga tgctgcctga cctactgctt cctactgctt tgccccaaga tgccccaaga tgcagagaga tgcagagaga gaaggaggaa gaaggaggaa tgagagattg tgagagattg 840 840 agaagggaaa agaagggaaa gtgtacgccc gtgtacgccc tgtataa tgtataa 867 867

<210> 243 <211> 284 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220><210> 243 <211> 284 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL-TIP N52H/I143T< 223> ICOSL-TIP N52H/I143T

- 423 044346 <400> 243- 423 044346 <400> 243

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Thr 140Thr Cys Thr Ser Thr 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

SerSer

240240

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr Trp 235Asn Ala Ala Thr Trp 235

- 424 044346- 424 044346

Ile Leu Ala Val Leu Cys LeuIle Leu Ala Val Leu Cys Leu

245245

Trp Val Cys Arg Asp Arg CysTrp Val Cys Arg Asp Arg Cys

260260

Leu Val Val Val Ala Val Ala Ile GlyLeu Val Val Val Ala Val Ala Ile Gly

250255250255

Leu Gln His Ser Tyr Ala Gly Ala TrpLeu Gln His Ser Tyr Ala Gly Ala Trp

265270265270

Ala Val Ser Pro Glu Thr GluAla Val Ser Pro Glu Thr Glu

275275

Leu Thr Gly His ValLeu Thr Gly His Val

280 <210>244 <211>909 < 212> DNA < 213> Искусственная последовательность <220>280 <210>244 <211>909 <212> DNA <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL-TIP N52H/I143T < 400>244 atgcggctgg gcagtcctgg actgctcttc ctgctcttca gcagccttcg agctgatact60 caggagaagg aagtcagagc gatggtaggc agcgacgtgg agctcagctg cgcttgccct120 gaaggaagcc gttttgattt aaatgatgtt tacgtatatt ggcaaaccag tgagtcgaaa180 accgtggtga cctaccacat cccacagcac agctccttgg aaaacgtgga cagccgctac240 cggaaccgag ccctgatgtc accggccggc atgctgcggg gcgacttctc cctgcgcttg300 ttcaacgtca ccccccagga cgagcagaag tttcactgcc tggtgttgag ccaatccctg360 ggattccagg aggttttgag cgttgaggtt acactgcatg tggcagcaaa cttcagcgtg420 cccgtcgtca gcgcccccca cagcccctcc caggatgagc tcaccttcac gtgtacatcc480 accaacggct accccaggcc caacgtgtac tggatcaata agacggacaa cagcctgctg540 gaccaggctc tgcagaatga caccgtcttc ttgaacatgc ggggcttgta tgacgtggtc600 agcgtgctga ggatcgcacg gacccccagc gtgaacattg gctgctgcat agagaacgtg660 cttctgcagc agaacctgac tgtcggcagc cagacaggaa atgacatcgg agagagagac720 aagatcacag agaatccagt cagtaccggc gagaaaaacg cggccacgtg gagcatcctg780 gctgtcctgt gcctgcttgt ggtcgtggcg gtggccatag gctgggtgtg cagggaccga840 tgcctccaac acagctatgc aggtgcctgg gctgtgagtc cggagacaga gctcactggc900 cacgtttga909 < 210>245 < 211>248 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>< 223> ICOSL-TIP N52H/I143T < 400>244 atgcggctgg gcagtcctgg actgctcttc ctgctcttca gcagccttcg agctgatact60 caggagaagg aagtcagagc gatggtaggc agcgacgtgg agctcagctg cgcttgccct120 gaaggaagcc gttttgattt aaatgatgtt tacgtatatt ggcaaaccag tgagtcgaaa180 accgtggtga cctaccacat cccacagcac agctccttgg aaaacgtgga cagccgctac240 cggaaccgag ccctgatgtc accggccggc atgctgcggg gcgacttctc cctgcgcttg 300 ttcaacgtca ccccccagga cgagcagaag tttcactgcc tggtgttgag ccaatccctg360 ggattccagg aggttttgag cgttgaggtt acactgcatg tggcagcaaa cttcagcgtg420 cccgtcgtca gcgcccccca cagcccctcc caggatgagc tcaccttcac gtgtacatcc480 accaacggct accccaggcc caacgtgtac tggatcaata agacggacaa cagcctgctg540 gaccaggctc tgcagaatga caccgtcttc ttgaacatgc ggggcttgta tgacgtggtc600 agcgtgctga ggatcgcacg gacccccagc gtgaacattg gctgctgcat agagaacgtg660 cttctgcagc agaacctgac tgtcggcagc cagacaggaa atgacatcgg agaga gagac720 aagatcacag agaatccagt cagtaccggc gagaaaaacg cggccacgtg gagcatcctg780 gctgtcctgt gcctgcttgt ggtcgtggcg gtggccatag gctgggtgtg cagggaccga840 tgcctccaac acagctatgc aggtgcctgg gctgtgagtc cggagacaga gctcactggc900 cacgtttga909 < 210>245 < 211>248 < 212> PROTEIN < 213> Artificial sequence <220>

<223> Ahtu-CD19 scFv <400> 245<223> Ahtu-CD19 scFv <400> 245

- 425 044346- 425 044346

Asp 1Asp 1

AspAsp

LeuLeu

TyrTyr

Ser 65Ser 65

GluGlu

ThrThr

SerSer

LeuLeu

Val 145Val 145

TrpTrp

TrpTrp

ThrThr

SerSer

Tyr 225Tyr 225

ValVal

Ile GlnIle Gln

Arg ValArg Val

Asn TrpAsn Trp

His Thr 50His Thr 50

Gly SerGly Ser

Asp IleAsp Ile

Phe GlyPhe Gly

Gly LysGly Lys

115115

Gln Glu 130Gln Glu 130

Thr CysThr Cys

Ile ArgIle Arg

Gly SerGly Ser

Ile IleIle Ile

195195

Leu GlnLeu Gln

210210

Tyr GlyTyr Gly

Met Thr 5Met Thr 5

Thr Ile 20Thr Ile 20

Tyr GlnTyr Gln

Ser ArgSer Arg

Gly ThrGly Thr

Ala ThrAla Thr

Gly Gly 100Gly Gly 100

Pro GlyPro Gly

Ser GlySer Gly

Thr ValThr Val

Gln ProGlin Pro

165165

Glu Thr 180Glu Thr 180

Lys AspLys Asp

Thr AspThr Asp

Gly SerGly Ser

Gln ThrGln Thr

Ser CysSer Cys

Gln LysGln Lys

Leu HisLeu His

Asp Tyr 70Asp Tyr 70

Tyr PheTyr Phe

Thr LysThr Lys

Ser GlySer Gly

Pro GlyPro Gly

135135

Ser Gly 150Ser Gly 150

Pro ArgPro Arg

Thr TyrThr Tyr

Asn SerAsn Ser

Asp ThrAsp Thr

215215

Tyr Ala 230Tyr Ala 230

Thr SerThr Ser

Arg Ala 25Arg Ala 25

Pro Asp 40Pro Asp 40

Ser GlySer Gly

Ser LeuSer Leu

Cys GlnCys Gln

Leu GluLeu Glu

105105

Glu Gly 120Glu Gly 120

Leu ValLeu Val

Val SerVal Ser

Lys GlyLys Gly

Tyr AsnTyr Asn

185185

Lys Ser 200Lys Ser 200

Ala IleAla Ile

Met AspMet Asp

Thr Val Ser Ser Ala Ala AlaThr Val Ser Ser Ala Ala Ala

245245

Ser Leu 10Ser Leu 10

Ser GlnSer Gln

Gly ThrGly Thr

Val ProVal Pro

Thr IleThr Ile

Gln Gly 90Gln Gly 90

Ile ThrIle Thr

Ser ThrSer Thr

Ala ProAla Pro

Leu ProLeu Pro

155155

Leu Glu 170Leu Glu 170

Ser AlaSer Ala

Gln ValGln Val

Tyr TyrTyr Tyr

Tyr TrpTyr Trp

235235

Ser AlaSer Ala

Asp IleAsp Ile

Val Lys 45Val Lys 45

Ser Arg 60Ser Arg 60

Ser AsnSer Asn

Asn ThrAsn Thr

Gly SerGly Ser

Lys GlyLys Gly

125125

Ser Gln 140Ser Gln 140

Asp TyrAsp Tyr

Trp LeuTrp Leu

Leu LysLeu Lys

Phe LeuPhe Leu

205205

Cys Ala 220Cys Ala 220

Gly GlnGly Gln

Ser LeuSer Leu

Ser Lys 30Ser Lys 30

Leu LeuLeu Leu

Phe SerPhe Ser

Leu GluLeu Glu

Leu ProLeu Pro

Thr Ser 110Thr Ser 110

Glu ValGlu Val

Ser LeuSer Leu

Gly ValGly Val

Gly ValGly Val

175175

Ser Arg 190Ser Arg 190

Lys MetLys Met

Lys HisLys His

Gly ThrGly Thr

GlyGly

TyrTyr

IleIle

GlyGly

Gln 80Gln 80

TyrTyr

GlyGly

LysLys

SerSer

Ser 160Ser 160

IleIle

LeuLeu

AsnAsn

TyrTyr

Ser 240Ser 240

- 426 044346 <210> 246 <211> 71 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>- 426 044346 <210> 246 <211> 71 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> шарнир из CD8 и трансмембранный домен <400>246<223> CD8 hinge and transmembrane domain <400>246

Lys 1 Lys 1 Pro Pro Thr Thr Thr Thr Thr 5 Thr 5 Pro Pro Ala Ala Pro Pro Arg Arg Pro 10 Pro 10 Pro Pro Thr Thr Pro Pro Ala Ala Pro 15 Pro 15 Thr Thr Ile Ile Ala Ala Ser Ser Gln 20 Gln 20 Pro Pro Leu Leu Ser Ser Leu Leu Arg 25 Arg 25 Pro Pro Glu Glu Ala Ala Ser Ser Arg 30 Arg 30 Pro Pro Ala Ala Ala Ala Gly Gly Gly 35 Gly 35 Ala Ala Val Val His His Thr Thr Arg 40 Arg 40 Gly Gly Leu Leu Asp Asp Phe Phe Ala 45 Ala 45 Ser Ser Asp Asp Ile Ile Tyr Tyr Ile 50 Ile 50 Trp Trp Ala Ala Pro Pro Leu Leu Ala 55 Ala 55 Gly Gly Thr Thr Cys Cys Gly Gly Val 60 Val 60 Leu Leu Leu Leu Leu Leu Ser Ser Leu Leu Val Val Ile Ile Thr Thr Leu Leu Tyr Tyr Cys Cys

70 <210>247 <211>112 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>70 <210>247 <211>112 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> внутриклеточный сигнальный домен CD3-дзета < 400> 247<223> intracellular signaling domain CD3-zeta <400> 247

Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala 1 5Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala 1 5

Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln GlyAsp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly

1515

Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu 20Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu 20

Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr 25 30Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr 25 30

Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg GlyAsp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly

4040

Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys 45Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys 45

Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln GluPro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu

5555

Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys 60Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys 60

Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser 65 70Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser 65 70

Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu ArgGlu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg

8080

Arg Arg Gly Lys Gly His Asp GlyArg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly

Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr AlaLeu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala

- 427 044346- 427 044346

90959095

Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro ArgThr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg

100 105110 <210>248 <211>1356 < 212> DNA < 213> Искусственная последовательность <220>100 105110 <210>248 <211>1356 <212> DNA <213> Artificial sequence <220>

< 223> Химерный антигенный рецептор aнтиCD19x8z <220><223> Chimeric antigen receptor antiCD19x8z <220>

< 221> новая или редкая характеристика <223> нуклеотид химерного антигенного рецептора aнтиCD19x8z <400> 248<221> new or rare characteristic <223> nucleotide of the chimeric antigen receptor antiCD19x8z <400> 248

atggccttac atggccttac cagtgaccgc cagtgaccgc cttgctcctg cttgctcctg ccgctggcct ccgctggcct tgctgctcca tgctgctcca cgccgccagg cgccgccagg 60 60 ccggacatcc ccggacatcc agatgacaca agatgacaca gactacatcc gactacatcc tccctgtctg tccctgtctg cctctctggg cctctctggg agacagagtc agacagagtc 120 120 accatcagtt accatcagtt gcagggcaag gcagggcaag tcaggacatt tcaggacatt agtaaatatt agtaaatatt taaattggta taaattggta tcagcagaaa tcagcagaaa 180 180 ccagatggaa ccagatggaa ctgttaaact ctgttaaact cctgatctac cctgatctac catacatcaa catacatcaa gattacactc gattacactc aggagtccca aggagtccca 240 240 tcaaggttca tcaaggttca gtggcagtgg gtggcagtgg gtctggaaca gtctggaaca gattattctc gattattctc tcaccattag tcaccattag caacctggag caacctggag 300 300 caagaagata caagagata ttgccactta ttgccactta cttttgccaa cttttgccaa cagggtaata cagggtaata cgcttccgta cgcttccgta cacgttcgga cacgttcgga 360 360 ggggggacta ggggggacta agttggaaat agttggaaat aacaggctcc aacaggctcc acctctggat acctctggat ccggcaagcc ccggcaagcc cggatctggc cggatctggc 420 420 gagggatcca gagggatcca ccaagggcga ccaagggcga ggtgaaactg ggtgaaactg caggagtcag caggagtcag gacctggcct gacctggcct ggtggcgccc ggtggcgccc 480 480 tcacagagcc tcacagagcc tgtccgtcac tgtccgtcac atgcactgtc atgcactgtc tcaggggtct tcaggggtct cattacccga cattacccga ctatggtgta ctatggtgta 540 540 agctggattc agctggattc gccagcctcc gccagcctcc acgaaagggt acgaaagggt ctggagtggc ctggagtggc tgggagtaat tgggagtaat atggggtagt atggggtagt 600 600 gaaaccacat gaaaccacat actataattc actataattc agctctcaaa agctctcaaa tccagactga tccagactga ccatcatcaa ccatcatcaa ggacaactcc ggacaactcc 660 660 aagagccaag aagagccaag ttttcttaaa ttttcttaaa aatgaacagt aatgaacagt ctgcaaactg ctgcaaactg atgacacagc atgacacagc catttactac cattactac 720 720 tgtgccaaac tgtgccaaac attattacta attattacta cggtggtagc cggtggtagc tatgctatgg tatgctatgg actactgggg actactgggg tcaaggaacc tcaaggaacc 780 780 tcagtcaccg tcagtcaccg tctcctcagc tctcctcagc ggccgcaaag ggccgcaaag cccaccacga cccaccacga cgccagcgcc cgccagcgcc gcgaccacca gcgaccacca 840 840 acaccggcgc acaccggcgc ccaccatcgc cccacatcgc gtcgcagccc gtcgcagccc ctgtccctgc ctgtccctgc gcccagaggc gccagaggc gagccggcca gagccggcca 900 900 gcggcggggg gcggcggggg gcgcagtgca gcgcagtgca cacgaggggg cacgagggggg ctggacttcg ctggacttcg ccagtgatat ccagtgatat ctacatctgg ctacatctgg 960 960 gcgcccctgg gcgcccctgg ccgggacttg ccggggacttg tggggtcctt tggggtcctt ctcctgtcac ctcctgtcac tggttatcac tggttatcac cctttactgc cctttactgc 1020 1020 agagtgaagt agagtgaagt tcagcaggag tcagcaggag cgcagacgcc cgcagacgcc cccgcgtacc cccgcgtacc agcagggcca agcaggcca gaaccagctc gaaccagctc 1080 1080 tataacgagc tataacgagc tcaatctagg tcaatctagg acgaagagag acgaagag gagtacgatg gagtacgatg ttttggacaa ttttggacaa gagacgtggc gagacgtggc 1140 1140 cgggaccctg cggggaccctg agatgggggg agatgggggg aaagccgaga aaagccgaga aggaagaacc aggaagaacc ctcaggaagg ctcaggaagg cctgtacaat cctgtacaat 1200 1200

- 428 044346 gaactgcaga aagataagat cggaggggca aggggcacga tacgacgccc ttcacatgca <210> 249 <211> 63 <212> DNA <213> Искусственная <220>- 428 044346 gaactgcaga aagataagat cggaggggca aggggcacga tacgacgccc ttcacatgca <210> 249 <211> 63 <212> DNA <213> Artificial <220>

<223> T2A <400> 249 ggcagtggcg agggcagagg cca ggcggaggcc tacagtgaga tggcctttac cagggtctca ggccctgccc cctcgc последовательность aagtctgcta acatgcggtg ttgggatgaa aggcgagcgc gtacagccac caaggacacc acgtcgagga gaatcctggc<223> T2A <400> 249 ggcagtggcg agggcagagg cca ggcggaggcc tacagtgaga tggcctttac cagggtctca ggccctgccc cctcgc sequence aagtctgcta acatgcggtg ttgggatgaa aggcgagcgc gtacagccac caaggacacc acgtcgagga ga atcctggc

12601260

13201320

1356 <210> 250 <211> 21 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>1356 <210> 250 <211> 21 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> T2A <400>250<223> T2A <400>250

Gly Ser Gly Glu Gly Arg Gly Ser Leu Leu Thr Cys Gly Asp Val GluGly Ser Gly Glu Gly Arg Gly Ser Leu Leu Thr Cys Gly Asp Val Glu

5 10155 1015

Glu Asn Pro Gly Pro 20 <210>251 <211>867 <212> DNA <213> Homo sapiens <220>Glu Asn Pro Gly Pro 20 <210>251 <211>867 <212> DNA <213> Homo sapiens <220>

<221> новая или редкая характеристика <223> CD80 <400> 251 atgggccaca cagctcttgg gaagtgaaag caaactcgca atgaatatat attgtgatcc tatgaaaaag cacggaggca tgctggctgg aagtggcaac tctactggca ggcccgagta tggctctgcg acgctttcaa gggaacatca tctttctcac gctgtcctgt aaaggagaag caagaaccgg cccatctgac gcgggaacac ccatccaagt ttctgttcag ggtcacaatg aaaatggtgc accatctttg gagggcacat ctggctgaag gtccatacct gtgttatcca tttctgttga tgactatgat atatcactaa acgagtgtgt tgacgttatc caatttcttt cgtgaccaag agagctggca gtctggggac taacctctcc tgttctgaag agtcaaagct<221> new or rare characteristic <223> CD80 <400> 251 atgggccaca cagctcttgg gaagtgaaag caaactcgca atgaatatat attgtgatcc tatgaaaaag cacggaggca tgctggctgg aagtggcaac tctactggca ggcccgagta tggctctgcg acgctttcaa gggaacatca tctttctcac gctgtcctgt aaaggagaag caagaaccgg cccatctgac gcgggaacac ccatccaagt ttctgttcag ggtcacaatg aaaatggtgc accatctttg gagggcacat ctggctgaag gtccatacct gtgttatcca tttctgttga tgactatgat atatcactaa acgagtgtgt tgacgttatc caatttcttt cgtgaccaag agagctggca gtctggggac taacctctcc tgttctgaag agtcaaagct

120120

180180

240240

300300

360360

420420

- 429 044346- 429 044346

gacttcccta gacttcccta cacctagtat cacctagtat atctgacttt atctgacttt gaaattccaa gaaattccaa cttctaatat cttctaatat tagaaggata tagaaggata 480 480 atttgctcaa atttgctcaa cctctggagg cctctggagg ttttccagag ttttccagag cctcacctct cctcacctct cctggttgga cctggttgga aaatggagaa aaatggagaa 540 540 gaattaaatg gaattaaatg ccatcaacac ccatcaacac aacagtttcc aacagtttcc caagatcctg caagatcctg aaactgagct aaactgagct ctatgctgtt ctatgctgtt 600 600 agcagcaaac agcagcaaac tggatttcaa tggatttcaa tatgacaacc tatgacaacc aaccacagct aaccacagct tcatgtgtct tcatgtgtct catcaagtat catcaagtat 660 660 ggacatttaa ggacattaa gagtgaatca gagtgaatca gaccttcaac gaccttcaac tggaatacaa tggaatacaa ccaagcaaga ccaagcaaga gcattttcct gcattttcct 720 720 gataacctgc gataacctgc tcccatcctg tcccatcctg ggccattacc ggccattacc ttaatctcag ttaatctcag taaatggaat taaatggaat ttttgtgata ttttgtgata 780 780 tgctgcctga tgctgcctga cctactgctt cctactgctt tgccccaaga tgccccaaga tgcagagaga tgcagagaga gaaggaggaa gaaggaggaa tgagagattg tgagagattg 840 840 agaagggaaa agaagggaaa gtgtacgccc gtgtacgccc tgtataa tgtataa 867 867

<210> 252 <211> 909 <212> DNA <213> Homo sapiens <220><210> 252 <211> 909 <212> DNA <213> Homo sapiens <220>

<221> новая или редкая характеристика <223> ICOSL <400>252 atgcggctgg gcagtcctgg actgctcttc ctgctcttca gcagccttcg agctgatact60 caggagaagg aagtcagagc gatggtaggc agcgacgtgg agctcagctg cgcttgccct120 gaaggaagcc gttttgattt aaatgatgtt tacgtatatt ggcaaaccag tgagtcgaaa180 accgtggtga cctaccacat cccacagaac agctccttgg aaaacgtgga cagccgctac240 cggaaccgag ccctgatgtc accggccggc atgctgcggg gcgacttctc cctgcgcttg300 ttcaacgtca ccccccagga cgagcagaag tttcactgcc tggtgttgag ccaatccctg360 ggattccagg aggttttgag cgttgaggtt acactgcatg tggcagcaaa cttcagcgtg420 cccgtcgtca gcgcccccca cagcccctcc caggatgagc tcaccttcac gtgtacatcc480 ataaacggct accccaggcc caacgtgtac tggatcaata agacggacaa cagcctgctg540 gaccaggctc tgcagaatga caccgtcttc ttgaacatgc ggggcttgta tgacgtggtc600 agcgtgctga ggatcgcacg gacccccagc gtgaacattg gctgctgcat agagaacgtg660 cttctgcagc agaacctgac tgtcggcagc cagacaggaa atgacatcgg agagagagac720 aagatcacag agaatccagt cagtaccggc gagaaaaacg cggccacgtg gagcatcctg780 gctgtcctgt gcctgcttgt ggtcgtggcg gtggccatag gctgggtgtg cagggaccga840 tgcctccaac acagctatgc aggtgcctgg gctgtgagtc cggagacaga gctcactggc900 cacgtttga<221> new or rare characteristic <223> ICOSL <400>252 atgcggctgg gcagtcctgg actgctcttc ctgctcttca gcagccttcg agctgatact60 caggagaagg aagtcagagc gatggtaggc agcgacgtgg agctcagctg cgcttgccct120 gaaggaagcc gtt ttgattt aaatgatgtt tacgtatatt ggcaaaccag tgagtcgaaa180 accgtggtga cctaccacat cccacagaac agctccttgg aaaacgtgga cagccgctac240 cggaaccgag ccctgatgtc accggccggc atgctgcggg gcgacttctc cctgcgcttg300 t tcaacgtca ccccccagga cgagcagaag tttcactgcc tggtgttgag ccaatccctg360 ggattccagg aggttttgag cgttgaggtt acactgcatg tggcagcaaa cttcagcgtg420 cccgtcgtca gcgcccccca cagcccctcc caggatgagc tcaccttcac gtgtacatcc480 ataaacggct accccaggcc caacgtgtac tggatcaata agac ggacaa cagcctgctg540 gaccaggctc tgcagaatga caccgtcttc ttgaacatgc ggggcttgta tgacgtggtc600 agcgtgctga ggatcgcacg gacccccagc gtgaacattg gctgctgcat agagaacgtg660 cttctgcagc agaacctgac tgtcggcag c cagacaggaa atgacatcgg agagagagac720 aagatcacag agaatccagt cagtaccggc gagaaaaacg cggccacgtg gagcatcctg780 gctgtcctgt gcctgcttgt ggtcgtggcg gtggccatag gctgggtgtg cagggaccga840 tgcctccaac acagctatgc aggtgcctgg gctgtgagtc cggagacaga gctcactggc900 cacgtttga

909 <210> 253909 <210> 253

- 430 044346 <211> 254 <212> БЕЛОК <213> Homo sapiens <220>- 430 044346 <211> 254 <212> PROTEIN <213> Homo sapiens <220>

<221> новая или редкая характеристика <223> Зрелый CD80(B7-1) <400> 253<221> new or rare characteristic <223> Mature CD80(B7-1) <400> 253

Val Ile His Val ThrVal Ile His Val Thr

55

Lys Glu Val Lys GluLys Glu Val Lys Glu

Val Ala Thr Leu SerVal Ala Thr Leu Ser

Gly His Asn Val SerGly His Asn Val Ser

Val Glu Glu Leu AlaVal Glu Glu Leu Ala

Gln Thr Arg Ile Tyr 30Gln Thr Arg Ile Tyr 30

Gln Lys Glu Lys Lys 35Gln Lys Glu Lys Lys 35

Met Val Leu Thr MetMet Val Leu Thr Met

Met Ser Gly Asp Met 45Met Ser Gly Asp Met 45

Ile Trp Pro Glu Tyr 50Ile Trp Pro Glu Tyr 50

Lys Asn Arg Thr Ile 55Lys Asn Arg Thr Ile 55

Phe Asp Ile Thr Asn 60Phe Asp Ile Thr Asn 60

Leu Ser Ile Val Ile 65Leu Ser Ile Val Ile 65

Leu Ala Leu Arg Pro 70Leu Ala Leu Arg Pro 70

Ser Asp Glu Gly Thr 75Ser Asp Glu Gly Thr 75

Glu Cys Val Val Leu 85Glu Cys Val Val Leu 85

Lys Tyr Glu Lys Asp 90Lys Tyr Glu Lys Asp 90

Ala Phe Lys Arg Glu 95Ala Phe Lys Arg Glu 95

Leu Ala Glu Val ThrLeu Ala Glu Val Thr

100100

Leu Ser Val Lys AlaLeu Ser Val Lys Ala

105105

Asp Phe Pro Thr ProAsp Phe Pro Thr Pro

110110

Ile Ser Asp Phe Glu 115Ile Ser Asp Phe Glu 115

Ile Pro Thr Ser AsnIle Pro Thr Ser Asn

120120

Ile Arg Arg Ile IleIle Arg Arg Ile Ile

125125

Ser Thr Ser Gly Gly 130Ser Thr Ser Gly Gly 130

Phe Pro Glu Pro HisPhe Pro Glu Pro His

135135

Leu Ser Trp Leu Glu 140Leu Ser Trp Leu Glu 140

Gly Glu Glu Leu Asn 145Gly Glu Glu Leu Asn 145

Ala Ile Asn Thr Thr 150Ala Ile Asn Thr Thr 150

Val Ser Gln Asp Pro 155Val Ser Gln Asp Pro 155

Thr Glu Leu Tyr AlaThr Glu Leu Tyr Ala

165165

Val Ser Ser Lys LeuVal Ser Ser Lys Leu

170170

Asp Phe Asn Met ThrAsp Phe Asn Met Thr

175175

Asn His Ser Phe MetAsn His Ser Phe Met

180180

Cys Leu Ile Lys TyrCys Leu Ile Lys Tyr

185185

Gly His Leu Arg ValGly His Leu Arg Val

190190

Gln Thr Phe Asn Trp 195Gln Thr Phe Asn Trp 195

Asn Thr Thr Lys Gln 200Asn Thr Thr Lys Gln 200

Glu His Phe Pro AspGlu His Phe Pro Asp

205205

CysCys

TrpTrp

AsnAsn

AsnAsn

Tyr 80Tyr 80

HisHis

SerSer

CysCys

AsnAsn

Glu 160Glu 160

ThrThr

AsnAsn

AsnAsn

- 431 044346- 431 044346

Leu Leu Pro Ser TrpLeu Leu Pro Ser Trp

210210

Ala Ile Thr Leu IleAla Ile Thr Leu Ile

215215

Ser Val Asn Gly IleSer Val Asn Gly Ile

220220

PhePhe

Val Ile Cys Cys Leu 225Val Ile Cys Cys Leu 225

Thr Tyr Cys Phe Ala 230Thr Tyr Cys Phe Ala 230

Pro Arg Cys Arg Glu 235Pro Arg Cys Arg Glu 235

Arg 240Arg 240

Arg Arg Asn Glu ArgArg Arg Asn Glu Arg

245245

Leu Arg Arg Glu SerLeu Arg Arg Glu Ser

250250

Val Arg Pro Val <210> 254 <211> 306 <212> БЕЛОК <213> Homo sapiens <220>Val Arg Pro Val <210> 254 <211> 306 <212> PROTEIN <213> Homo sapiens <220>

<221> новая или редкая характеристика <223> Зрелый CD86(B7-2) <400> 254<221> new or rare characteristic <223> Mature CD86(B7-2) <400> 254

Ala Pro Leu Lys Ile 1 5Ala Pro Leu Lys Ile 1 5

Gln Ala Tyr Phe AsnGln Ala Tyr Phe Asn

Glu Thr Ala Asp LeuGlu Thr Ala Asp Leu

ProPro

Cys Gln Phe Ala Asn 20Cys Gln Phe Ala Asn 20

Ser Gln Asn Gln SerSer Gln Asn Gln Ser

Leu Ser Glu Leu ValLeu Ser Glu Leu Val

ValVal

Phe Trp Gln Asp Gln 35Phe Trp Gln Asp Gln 35

Glu Asn Leu Val LeuGlu Asn Leu Val Leu

Asn Glu Val Tyr Leu 45Asn Glu Val Tyr Leu 45

Lys Glu Lys Phe Asp 50Lys Glu Lys Phe Asp 50

Ser Val His Ser Lys 55Ser Val His Ser Lys 55

Tyr Met Gly Arg Thr 60Tyr Met Gly Arg Thr 60

Phe Asp Ser Asp Ser 65Phe Asp Ser Asp Ser 65

Trp Thr Leu Arg Leu 70Trp Thr Leu Arg Leu 70

His Asn Leu Gln Ile 75His Asn Leu Gln Ile 75

Asp Lys Gly Leu Tyr 85Asp Lys Gly Leu Tyr 85

Gln Cys Ile Ile His 90Gln Cys Ile Ile His 90

His Lys Lys Pro Thr 95His Lys Lys Pro Thr 95

Met Ile Arg Ile HisMet Ile Arg Ile His

100100

Gln Met Asn Ser GluGln Met Asn Ser Glu

105105

Leu Ser Val Leu AlaLeu Ser Val Leu Ala

110110

Phe Ser Gln Pro GluPhe Ser Gln Pro Glu

115115

Ile Val Pro Ile SerIle Val Pro Ile Ser

120120

Asn Ile Thr Glu AsnAsn Ile Thr Glu Asn

125125

GlyGly

SerSer

Lys 80Lys 80

GlyGly

AsnAsn

ValVal

Tyr Ile Asn Leu Thr 130Tyr Ile Asn Leu Thr 130

Cys Ser Ser Ile His 135Cys Ser Ser Ile His 135

Gly Tyr Pro Glu Pro 140Gly Tyr Pro Glu Pro 140

LysLys

Lys Met Ser Val Leu 145Lys Met Ser Val Leu 145

Leu Arg Thr Lys Asn 150Leu Arg Thr Lys Asn 150

Ser Thr Ile Glu TyrSer Thr Ile Glu Tyr

155155

AspAsp

160160

- 432 044346- 432 044346

Gly Val Met Gln LysGly Val Met Gln Lys

165165

Ser Gln Asp Asn ValSer Gln Asp Asn Val

170170

Thr Glu Leu Tyr AspThr Glu Leu Tyr Asp

175175

Ser Ile Ser Leu SerSer Ile Ser Leu Ser

180180

Val Ser Phe Pro AspVal Ser Phe Pro Asp

185185

Val Thr Ser Asn MetVal Thr Ser Asn Met

190190

Ile Phe Cys Ile Leu 195Ile Phe Cys Ile Leu 195

Glu Thr Asp Lys Thr 200Glu Thr Asp Lys Thr 200

Arg Leu Leu Ser SerArg Leu Leu Ser Ser

205205

Phe Ser Ile Glu LeuPhe Ser Ile Glu Leu

210210

Glu Asp Pro Gln ProGlu Asp Pro Gln Pro

215215

Pro Pro Asp His Ile 220Pro Pro Asp His Ile 220

Trp Ile Thr Ala Val 225Trp Ile Thr Ala Val 225

Leu Pro Thr Val Ile 230Leu Pro Thr Val Ile 230

Ile Cys Val Met Val 235Ile Cys Val Met Val 235

Cys Leu Ile Leu TrpCys Leu Ile Leu Trp

245245

Lys Trp Lys Lys LysLys Trp Lys Lys Lys

250250

Lys Arg Pro Arg AsnLys Arg Pro Arg Asn

255255

Tyr Lys Cys Gly ThrTyr Lys Cys Gly Thr

260260

Asn Thr Met Glu ArgAsn Thr Met Glu Arg

265265

Glu Glu Ser Glu GlnGlu Glu Ser Glu Gln

270270

Lys Lys Arg Glu LysLys Lys Arg Glu Lys

275275

Ile His Ile Pro GluIle His Ile Pro Glu

280280

Arg Ser Asp Glu AlaArg Ser Asp Glu Ala

285285

Arg Val Phe Lys Ser 290Arg Val Phe Lys Ser 290

Ser Lys Thr Ser SerSer Lys Thr Ser Ser

295295

Cys Asp Lys Ser AspCys Asp Lys Ser Asp

300300

ValVal

ThrThr

ProPro

ProPro

Phe 240Phe 240

SerSer

ThrThr

GlnGln

ThrThr

Cys Phe 305 <210> 255 <211> 272 <212> БЕЛОК <213> Homo sapiens <220>Cys Phe 305 <210> 255 <211> 272 <212> PROTEIN <213> Homo sapiens <220>

<221> новая или редкая характеристика <223> Зрелый CD274 (PD-L1, B7-H1) <400> 255<221> new or rare characteristic <223> Mature CD274 (PD-L1, B7-H1) <400> 255

Phe Thr Val Thr Val Pro Lys Asp Leu Tyr Val Val Glu Tyr Gly 1 5 10 15Phe Thr Val Thr Val Pro Lys Asp Leu Tyr Val Val Glu Tyr Gly 1 5 10 15

Asn MetAsn Met

ThrThr

Ile Glu Cys Lys Phe Pro Val GluIle Glu Cys Lys Phe Pro Val Glu

2525

Ala AlaAla Ala

Leu 35Leu 35

Ile Val Tyr Trp Glu Met Glu Asp 40Ile Val Tyr Trp Glu Met Glu Asp 40

Lys Gln Leu Asp 30Lys Gln Leu Asp 30

Lys Asn Ile Ile 45Lys Asn Ile Ile 45

SerSer

LeuLeu

GlnGln

- 433 044346- 433 044346

Phe Val His Gly Glu 50Phe Val His Gly Glu 50

Glu Asp Leu Lys Val 55Glu Asp Leu Lys Val 55

Gln His Ser Ser Tyr 60Gln His Ser Ser Tyr 60

Gln Arg Ala Arg Leu 65Gln Arg Ala Arg Leu 65

Leu Lys Asp Gln Leu 70Leu Lys Asp Gln Leu 70

Ser Leu Gly Asn Ala 75Ser Leu Gly Asn Ala 75

Leu Gln Ile Thr Asp 85Leu Gln Ile Thr Asp 85

Val Lys Leu Gln Asp 90Val Lys Leu Gln Asp 90

Ala Gly Val Tyr Arg 95Ala Gly Val Tyr Arg 95

Met Ile Ser Tyr GlyMet Ile Ser Tyr Gly

100100

Gly Ala Asp Tyr LysGly Ala Asp Tyr Lys

105105

Arg Ile Thr Val LysArg Ile Thr Val Lys

110110

Asn Ala Pro Tyr Asn 115Asn Ala Pro Tyr Asn 115

Lys Ile Asn Gln Arg 120Lys Ile Asn Gln Arg 120

Ile Leu Val Val AspIle Leu Val Val Asp

125125

Val Thr Ser Glu HisVal Thr Ser Glu His

130130

Glu Leu Thr Cys Gln 135Glu Leu Thr Cys Gln 135

Ala Glu Gly Tyr Pro 140Ala Glu Gly Tyr Pro 140

Ala Glu Val Ile Trp 145Ala Glu Val Ile Trp 145

Thr Ser Ser Asp His 150Thr Ser Ser Asp His 150

Gln Val Leu Ser Gly 155Gln Val Leu Ser Gly 155

Thr Thr Thr Thr AsnThr Thr Thr Thr Asn

165165

Ser Lys Arg Glu GluSer Lys Arg Glu Glu

170170

Lys Leu Phe Asn ValLys Leu Phe Asn Val

175175

Ser Thr Leu Arg IleSer Thr Leu Arg Ile

180180

Asn Thr Thr Thr AsnAsn Thr Thr Thr Asn

185185

Glu Ile Phe Tyr CysGlu Ile Phe Tyr Cys

190190

Phe Arg Arg Leu Asp 195Phe Arg Arg Leu Asp 195

Pro Glu Glu Asn HisPro Glu Glu Asn His

200200

Thr Ala Glu Leu ValThr Ala Glu Leu Val

205205

Pro Glu Leu Pro LeuPro Glu Leu Pro Leu

210210

Ala His Pro Pro AsnAla His Pro Pro Asn

215215

Glu Arg Thr His LeuGlu Arg Thr His Leu

220220

Ile Leu Gly Ala Ile 225Ile Leu Gly Ala Ile 225

Leu Leu Cys Leu Gly 230Leu Leu Cys Leu Gly 230

Val Ala Leu Thr Phe 235Val Ala Leu Thr Phe 235

Phe Arg Leu Arg LysPhe Arg Leu Arg Lys

245245

Gly Arg Met Met AspGly Arg Met Met Asp

250250

Val Lys Lys Cys GlyVal Lys Lys Cys Gly

255255

Gln Asp Thr Asn SerGln Asp Thr Asn Ser

260260

Lys Lys Gln Ser AspLys Lys Gln Ser Asp

265265

Thr His Leu Glu GluThr His Leu Glu Glu

270270

ArgArg

Ala 80Ala 80

CysCys

ValVal

ProPro

LysLys

Lys 160Lys 160

ThrThr

ThrThr

IleIle

ValVal

Ile 240Ile 240

IleIle

Thr <210> 256 <211> 254 <212> БЕЛОК <213> Homo sapiensThr <210> 256 <211> 254 <212> PROTEIN <213> Homo sapiens

- 434 044346 <220>- 434 044346 <220>

<221> новая или редкая характеристика <223> Зрелый PDCD1LG2(PD-L2, CD273) <400> 256<221> new or rare characteristic <223> Mature PDCD1LG2(PD-L2, CD273) <400> 256

Leu Phe Thr Val ThrLeu Phe Thr Val Thr

55

Val Pro Lys Glu LeuVal Pro Lys Glu Leu

Tyr Ile Ile Glu His 15Tyr Ile Ile Glu His 15

Ser Asn Val Thr LeuSer Asn Val Thr Leu

Glu Cys Asn Phe Asp 25Glu Cys Asn Phe Asp 25

Thr Gly Ser His Val 30Thr Gly Ser His Val 30

Leu Gly Ala Ile Thr 35Leu Gly Ala Ile Thr 35

Ala Ser Leu Gln Lys 40Ala Ser Leu Gln Lys 40

Val Glu Asn Asp Thr 45Val Glu Asn Asp Thr 45

Pro His Arg Glu Arg 50Pro His Arg Glu Arg 50

Ala Thr Leu Leu GluAla Thr Leu Leu Glu

Glu Gln Leu Pro Leu 60Glu Gln Leu Pro Leu 60

Lys Ala Ser Phe His 65Lys Ala Ser Phe His 65

Ile Pro Gln Val Gln 70Ile Pro Gln Val Gln 70

Val Arg Asp Glu Gly 75Val Arg Asp Glu Gly 75

Tyr Gln Cys Ile Ile 85Tyr Gln Cys Ile Ile 85

Ile Tyr Gly Val Ala 90Ile Tyr Gly Val Ala 90

Trp Asp Tyr Lys Tyr 95Trp Asp Tyr Lys Tyr 95

Thr Leu Lys Val LysThr Leu Lys Val Lys

100100

Ala Ser Tyr Arg LysAla Ser Tyr Arg Lys

105105

Ile Asn Thr His IleIle Asn Thr His Ile

110110

Lys Val Pro Glu Thr 115Lys Val Pro Glu Thr 115

Asp Glu Val Glu Leu 120Asp Glu Val Glu Leu 120

Thr Cys Gln Ala Thr 125Thr Cys Gln Ala Thr 125

Tyr Pro Leu Ala GluTyr Pro Leu Ala Glu

130130

Val Ser Trp Pro AsnVal Ser Trp Pro Asn

135135

Val Ser Val Pro AlaVal Ser Val Pro Ala

140140

Thr Ser His Ser Arg 145Thr Ser His Ser Arg 145

Thr Pro Glu Gly Leu 150Thr Pro Glu Gly Leu 150

Tyr Gln Val Thr Ser 155Tyr Gln Val Thr Ser 155

Leu Arg Leu Lys ProLeu Arg Leu Lys Pro

165165

Pro Pro Gly Arg AsnPro Pro Gly Arg Asn

170170

Phe Ser Cys Val PhePhe Ser Cys Val Phe

175175

Asn Thr His Val ArgAsn Thr His Val Arg

180180

Glu Leu Thr Leu AlaGlu Leu Thr Leu Ala

185185

Ser Ile Asp Leu GlnSer Ile Asp Leu Gln

190190

Gln Met Glu Pro ArgGln Met Glu Pro Arg

195195

Thr His Pro Thr Trp 200Thr His Pro Thr Trp 200

Leu Leu His Ile PheLeu Leu His Ile Phe

205205

Pro Phe Cys Ile Ile 210Pro Phe Cys Ile Ile 210

Ala Phe Ile Phe IleAla Phe Ile Phe Ile

215215

Ala Thr Val Ile AlaAla Thr Val Ile Ala

220220

GlyGly

AsnAsn

SerSer

GlyGly

Gln 80Gln 80

LeuLeu

LeuLeu

GlyGly

AsnAsn

Val 160Val 160

TrpTrp

SerSer

IleIle

LeuLeu

- 435 044346- 435 044346

Arg Lys Gln Leu Cys 225Arg Lys Gln Leu Cys 225

Gln Lys Leu Tyr Ser 230Gln Lys Leu Tyr Ser 230

Ser Lys Asp Thr Thr 235Ser Lys Asp Thr Thr 235

Lys 240Lys 240

Arg Pro Val Thr Thr Thr Lys Arg Glu Val Asn Ser Ala IleArg Pro Val Thr Thr Thr Lys Arg Glu Val Asn Ser Ala Ile

245 250 <210> 257 <211> 284 <212> БЕЛОК <213> Homo sapiens <220>245 250 <210> 257 <211> 284 <212> PROTEIN <213> Homo sapiens <220>

<221> новая или редкая характеристика <223> Зрелый ICOSLG(B7RP1, CD275, ICOSL, B7-H2) <400> 257<221> new or rare characteristic <223> Mature ICOSLG(B7RP1, CD275, ICOSL, B7-H2) <400> 257

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala CysLeu Ser Cys Ala Cys

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn AspPhe Asp Leu Asn Asp

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Asn Ser 50Ile Pro Gln Asn Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

- 436 044346- 436 044346

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr Trp 235Asn Ala Ala Thr Trp 235

Ile Leu Ala Val LeuIle Leu Ala Val Leu

245245

Cys Leu Leu Val ValCys Leu Leu Val Val

250250

Val Ala Val Ala IleVal Ala Val Ala Ile

255255

Trp Val Cys Arg AspTrp Val Cys Arg Asp

260260

Arg Cys Leu Gln HisArg Cys Leu Gln His

265265

Ser Tyr Ala Gly AlaSer Tyr Ala Gly Ala

270270

SerSer

LeuLeu

IleIle

Ser 240Ser 240

GlyGly

TrpTrp

Ala Val Ser Pro GluAla Val Ser Pro Glu

275275

Thr Glu Leu Thr Gly 280Thr Glu Leu Thr Gly 280

His Val <210> 258 <211> 506 <212> БЕЛОК <213> Homo sapiens <220>His Val <210> 258 <211> 506 <212> PROTEIN <213> Homo sapiens <220>

<221> новая или редкая характеристика <223> Зрелый CD276(B7-H3) <400>258<221> new or rare characteristic <223> Mature CD276(B7-H3) <400>258

Leu Glu Val Gln Val Pro Glu Asp Pro Val Val Ala Leu Val Gly 1 5 1015Leu Glu Val Gln Val Pro Glu Asp Pro Val Val Ala Leu Val Gly 1 5 1015

Asp Ala Thr Leu Cys Cys Ser Phe Ser 2025Asp Ala Thr Leu Cys Cys Ser Phe Ser 2025

Ala Gln Leu Asn Leu Ile Trp Gln Leu 3540Ala Gln Leu Asn Leu Ile Trp Gln Leu 3540

His Ser Phe Ala Glu Gly Gln Asp Gln 5055His Ser Phe Ala Glu Gly Gln Asp Gln 5055

Thr Ala Leu Phe Pro Asp Leu Leu Ala 6570Thr Ala Leu Phe Pro Asp Leu Leu Ala 6570

Leu Gln Arg Val Arg Val Ala Asp Glu 85Leu Gln Arg Val Arg Val Ala Asp Glu 85

Pro Glu Pro Gly Phe Ser 30Pro Glu Pro Gly Phe Ser 30

Thr Asp Thr Lys Gln Leu 45Thr Asp Thr Lys Gln Leu 45

Gly Ser Ala Tyr Ala Asn 60Gly Ser Ala Tyr Ala Asn 60

Gln Gly Asn Ala Ser Leu 75Gln Gly Asn Ala Ser Leu 75

Gly Ser Phe Thr Cys Phe 90 95Gly Ser Phe Thr Cys Phe 90 95

ThrThr

LeuLeu

ValVal

ArgArg

Arg 80Arg 80

ValVal

- 437 044346- 437 044346

Ser Ile Arg Asp PheSer Ile Arg Asp Phe

100100

Gly Ser Ala Ala ValGly Ser Ala Ala Val

105105

Ser Leu Gln Val AlaSer Leu Gln Val Ala

110110

Pro Tyr Ser Lys Pro 115Pro Tyr Ser Lys Pro 115

Ser Met Thr Leu GluSer Met Thr Leu Glu

120120

Pro Asn Lys Asp Leu 125Pro Asn Lys Asp Leu 125

Pro Gly Asp Thr Val 130Pro Gly Asp Thr Val 130

Thr Ile Thr Cys Ser 135Thr Ile Thr Cys Ser 135

Ser Tyr Gln Gly Tyr 140Ser Tyr Gln Gly Tyr 140

Glu Ala Glu Val Phe 145Glu Ala Glu Val Phe 145

Trp Gln Asp Gly Gln 150Trp Gln Asp Gly Gln 150

Gly Val Pro Leu Thr 155Gly Val Pro Leu Thr 155

Asn Val Thr Thr SerAsn Val Thr Thr Ser

165165

Gln Met Ala Asn GluGln Met Ala Asn Glu

170170

Gln Gly Leu Phe AspGln Gly Leu Phe Asp

175175

His Ser Ile Leu ArgHis Ser Ile Leu Arg

180180

Val Val Leu Gly AlaVal Val Leu Gly Ala

185185

Asn Gly Thr Tyr SerAsn Gly Thr Tyr Ser

190190

Leu Val Arg Asn Pro 195Leu Val Arg Asn Pro 195

Val Leu Gln Gln AspVal Leu Gln Gln Asp

200200

Ala His Ser Ser ValAla His Ser Ser Val

205205

Ile Thr Pro Gln ArgIle Thr Pro Gln Arg

210210

Ser Pro Thr Gly AlaSer Pro Thr Gly Ala

215215

Val Glu Val Gln ValVal Glu Val Gln Val

220220

Glu Asp Pro Val Val 225Glu Asp Pro Val Val 225

Ala Leu Val Gly Thr 230Ala Leu Val Gly Thr 230

Asp Ala Thr Leu Arg 235Asp Ala Thr Leu Arg 235

Ser Phe Ser Pro GluSer Phe Ser Pro Glu

245245

Pro Gly Phe Ser LeuPro Gly Phe Ser Leu

250250

Ala Gln Leu Asn LeuAla Gln Leu Asn Leu

255255

Trp Gln Leu Thr AspTrp Gln Leu Thr Asp

260260

Thr Lys Gln Leu ValThr Lys Gln Leu Val

265265

His Ser Phe Thr GluHis Ser Phe Thr Glu

270270

Arg Asp Gln Gly SerArg Asp Gln Gly Ser

275275

Ala Tyr Ala Asn ArgAla Tyr Ala Asn Arg

280280

Thr Ala Leu Phe ProThr Ala Leu Phe Pro

285285

Leu Leu Ala Gln GlyLeu Leu Ala Gln Gly

290290

Asn Ala Ser Leu ArgAsn Ala Ser Leu Arg

295295

Leu Gln Arg Val Arg 300Leu Gln Arg Val Arg 300

Ala Asp Glu Gly Ser 305Ala Asp Glu Gly Ser 305

Phe Thr Cys Phe Val 310Phe Thr Cys Phe Val 310

Ser Ile Arg Asp Phe 315Ser Ile Arg Asp Phe 315

Ser Ala Ala Val SerSer Ala Ala Val Ser

325325

Leu Gln Val Ala AlaLeu Gln Val Ala Ala

330330

Pro Tyr Ser Lys ProPro Tyr Ser Lys Pro

335335

AlaAla

ArgArg

ProPro

Gly 160Gly 160

ValVal

CysCys

ThrThr

ProPro

Cys 240Cys 240

IleIle

GlyGly

AspAsp

ValVal

Gly 320Gly 320

SerSer

ThrThr

Met Thr Leu Glu ProMet Thr Leu Glu Pro

Asn Lys Asp Leu ArgAsn Lys Asp Leu Arg

Pro Gly Asp Thr ValPro Gly Asp Thr Val

- 438 044346- 438 044346

340340

345345

350350

Ile Thr Cys Ser Ser Tyr ArgIle Thr Cys Ser Ser Tyr Arg

355355

Gly Tyr Pro Glu Ala Glu Val Phe TrpGly Tyr Pro Glu Ala Glu Val Phe Trp

360 365360 365

Gln Asp Gly Gln Gly Val ProGln Asp Gly Gln Gly Val Pro

370 375370 375

Leu Thr Gly Asn Val Thr Thr Ser Gln 380Leu Thr Gly Asn Val Thr Thr Ser Gln 380

Met Ala Asn Glu Gln Gly LeuMet Ala Asn Glu Gln Gly Leu

385 390385 390

Phe Asp Val His Ser Val Leu Arg ValPhe Asp Val His Ser Val Leu Arg Val

395 400395 400

Val Leu Gly Ala Asn Gly Thr 405Val Leu Gly Ala Asn Gly Thr 405

Tyr Ser Cys Leu Val Arg Asn Pro ValTyr Ser Cys Leu Val Arg Asn Pro Val

410 415410 415

Leu Gln Gln Asp Ala His GlyLeu Gln Gln Asp Ala His Gly

420420

Ser Val Thr Ile Thr Gly Gln Pro MetSer Val Thr Ile Thr Gly Gln Pro Met

425 430425 430

ThrThr

LeuLeu

Lys 465Lys 465

GluGlu

Phe ProPhe Pro

435435

Ile AlaIle Ala

450450

Gln SerGln Ser

Gly GluGly Glu

Pro Glu Ala Leu Trp Val Thr Val 440Pro Glu Ala Leu Trp Val Thr Val 440

Leu Leu Val Ala Leu Ala Phe ValLeu Leu Val Ala Leu Ala Phe Val

455455

Cys Glu Glu Glu Asn Ala Gly AlaCys Glu Glu Glu Asn Ala Gly Ala

470 475470 475

Gly Ser Lys Thr Ala Leu Gln ProGly Ser Lys Thr Ala Leu Gln Pro

485 490485 490

Gly Leu Ser Val Cys 445Gly Leu Ser Val Cys 445

Cys Trp Arg Lys Ile 460Cys Trp Arg Lys Ile 460

Glu Asp Gln Asp GlyGlu Asp Gln Asp Gly

480480

Leu Lys His Ser AspLeu Lys His Ser Asp

495495

Ser Lys Glu Asp Asp Gly Gln Glu Ile AlaSer Lys Glu Asp Asp Gly Gln Glu Ile Ala

500505 <210>259 <211>258 <212> БЕЛОК <213> Homo sapiens <220>500505 <210>259 <211>258 <212> PROTEIN <213> Homo sapiens <220>

<221> новая или редкая характеристика <223> Зрелый VTCN1(B7-H4) <400>259<221> new or rare characteristic <223> Mature VTCN1(B7-H4) <400>259

Leu Ile Ile Gly Phe Gly Ile Ser Gly Arg His Ser Ile Thr Val ThrLeu Ile Ile Gly Phe Gly Ile Ser Gly Arg His Ser Ile Thr Val Thr

5 10155 1015

Thr Val Ala Ser Ala Gly Asn Ile Gly Glu Asp Gly Ile Leu Ser Cys 20 2530Thr Val Ala Ser Ala Gly Asn Ile Gly Glu Asp Gly Ile Leu Ser Cys 20 2530

- 439 044346- 439 044346

Thr Phe Glu Pro Asp 35Thr Phe Glu Pro Asp 35

Ile Lys Leu Ser Asp 40Ile Lys Leu Ser Asp 40

Ile Val Ile Gln Trp 45Ile Val Ile Gln Trp 45

Lys Glu Gly Val Leu 50Lys Glu Gly Val Leu 50

Gly Leu Val His Glu 55Gly Leu Val His Glu 55

Phe Lys Glu Gly Lys 60Phe Lys Glu Gly Lys 60

Glu Leu Ser Glu Gln 65Glu Leu Ser Glu Gln 65

Asp Glu Met Phe Arg 70Asp Glu Met Phe Arg 70

Gly Arg Thr Ala Val 75Gly Arg Thr Ala Val 75

Ala Asp Gln Val Ile 85Ala Asp Gln Val Ile 85

Val Gly Asn Ala Ser 90Val Gly Asn Ala Ser 90

Leu Arg Leu Lys Asn 95Leu Arg Leu Lys Asn 95

Gln Leu Thr Asp AlaGln Leu Thr Asp Ala

100100

Gly Thr Tyr Lys CysGly Thr Tyr Lys Cys

105105

Tyr Ile Ile Thr SerTyr Ile Ile Thr Ser

110110

Gly Lys Gly Asn Ala 115Gly Lys Gly Asn Ala 115

Asn Leu Glu Tyr Lys 120Asn Leu Glu Tyr Lys 120

Thr Gly Ala Phe Ser 125Thr Gly Ala Phe Ser 125

Pro Glu Val Asn ValPro Glu Val Asn Val

130130

Asp Tyr Asn Ala SerAsp Tyr Asn Ala Ser

135135

Ser Glu Thr Leu ArgSer Glu Thr Leu Arg

140140

Glu Ala Pro Arg Trp 145Glu Ala Pro Arg Trp 145

Phe Pro Gln Pro Thr 150Phe Pro Gln Pro Thr 150

Val Val Trp Ala Ser 155Val Val Trp Ala Ser 155

Val Asp Gln Gly AlaVal Asp Gln Gly Ala

165165

Asn Phe Ser Glu ValAsn Phe Ser Glu Val

170170

Ser Asn Thr Ser PheSer Asn Thr Ser Phe

175175

Leu Asn Ser Glu AsnLeu Asn Ser Glu Asn

180180

Val Thr Met Lys ValVal Thr Met Lys Val

185185

Val Ser Val Leu TyrVal Ser Val Leu Tyr

190190

Val Thr Ile Asn AsnVal Thr Ile Asn Asn

195195

Thr Tyr Ser Cys Met 200Thr Tyr Ser Cys Met 200

Ile Glu Asn Asp Ile 205Ile Glu Asn Asp Ile 205

Lys Ala Thr Gly AspLys Ala Thr Gly Asp

210210

Ile Lys Val Thr GluIle Lys Val Thr Glu

215215

Ser Glu Ile Lys ArgSer Glu Ile Lys Arg

220220

Ser His Leu Gln Leu 225Ser His Leu Gln Leu 225

Leu Asn Ser Lys Ala 230Leu Asn Ser Lys Ala 230

Ser Leu Cys Val Ser 235Ser Leu Cys Val Ser 235

Phe Phe Ala Ile SerPhe Phe Ala Ile Ser

245245

Trp Ala Leu Leu ProTrp Ala Leu Leu Pro

250250

Leu Ser Pro Tyr LeuLeu Ser Pro Tyr Leu

255255

LeuLeu

AspAsp

Phe 80Phe 80

ValVal

LysLys

MetMet

CysCys

Gln 160Gln 160

GluGlu

AsnAsn

AlaAla

ArgArg

Ser 240Ser 240

MetMet

Leu Lys <210> 260 <211> 202 <212> БЕЛОКLeu Lys <210> 260 <211> 202 <212> PROTEIN

- 440 044346 <213> Homo sapiens <220>- 440 044346 <213> Homo sapiens <220>

<221> новая или редкая характеристика <223> Зрелый CD28 <400> 260<221> new or rare characteristic <223> Mature CD28 <400> 260

Asn Lys Ile Leu ValAsn Lys Ile Leu Val

55

Lys Gln Ser Pro MetLys Gln Ser Pro Met

Leu Val Ala Tyr AspLeu Val Ala Tyr Asp

Ala Val Asn Leu SerAla Val Asn Leu Ser

Cys Lys Tyr Ser Tyr 25Cys Lys Tyr Ser Tyr 25

Asn Leu Phe Ser Arg 30Asn Leu Phe Ser Arg 30

Phe Arg Ala Ser Leu 35Phe Arg Ala Ser Leu 35

His Lys Gly Leu Asp 40His Lys Gly Leu Asp 40

Ser Ala Val Glu ValSer Ala Val Glu Val

Val Val Tyr Gly Asn 50Val Val Tyr Gly Asn 50

Tyr Ser Gln Gln Leu 55Tyr Ser Gln Gln Leu 55

Gln Val Tyr Ser Lys 60Gln Val Tyr Ser Lys 60

Gly Phe Asn Cys Asp 65Gly Phe Asn Cys Asp 65

Gly Lys Leu Gly Asn 70Gly Lys Leu Gly Asn 70

Glu Ser Val Thr Phe 75Glu Ser Val Thr Phe 75

Leu Gln Asn Leu Tyr 85Leu Gln Asn Leu Tyr 85

Val Asn Gln Thr AspVal Asn Gln Thr Asp

Ile Tyr Phe Cys Lys 95Ile Tyr Phe Cys Lys 95

Glu Val Met Tyr ProGlu Val Met Tyr Pro

100100

Pro Pro Tyr Leu AspPro Pro Tyr Leu Asp

105105

Asn Glu Lys Ser AsnAsn Glu Lys Ser Asn

110110

Thr Ile Ile His ValThr Ile Ile His Val

115115

Lys Gly Lys His Leu 120Lys Gly Lys His Leu 120

Cys Pro Ser Pro LeuCys Pro Ser Pro Leu

125125

Pro Gly Pro Ser Lys 130Pro Gly Pro Ser Lys 130

Pro Phe Trp Val LeuPro Phe Trp Val Leu

135135

Val Val Val Gly GlyVal Val Val Gly Gly

140140

Leu Ala Cys Tyr Ser 145Leu Ala Cys Tyr Ser 145

Leu Leu Val Thr Val 150Leu Leu Val Thr Val 150

Ala Phe Ile Ile Phe 155Ala Phe Ile Ile Phe 155

Val Arg Ser Lys ArgVal Arg Ser Lys Arg

165165

Ser Arg Leu Leu HisSer Arg Leu Leu His

170170

Ser Asp Tyr Met AsnSer Asp Tyr Met Asn

175175

Thr Pro Arg Arg ProThr Pro Arg Arg Pro

180180

Gly Pro Thr Arg LysGly Pro Thr Arg Lys

185185

His Tyr Gln Pro TyrHis Tyr Gln Pro Tyr

190190

AsnAsn

GluGlu

CysCys

ThrThr

Tyr 80Tyr 80

IleIle

GlyGly

PhePhe

ValVal

Trp 160Trp 160

MetMet

AlaAla

Pro Pro Arg Asp Phe 195Pro Pro Arg Asp Phe 195

Ala Ala Tyr Arg Ser 200 <210> 261 <211> 188Ala Ala Tyr Arg Ser 200 <210> 261 <211> 188

- 441 044346 <212> БЕЛОК <213> Homo sapiens <220>- 441 044346 <212> PROTEIN <213> Homo sapiens <220>

<221> новая или редкая характеристика <223> Зрелый CTLA4 <400> 261<221> new or rare characteristic <223> Mature CTLA4 <400> 261

Lys Ala Met His Val 1 5Lys Ala Met His Val 1 5

Ala Gln Pro Ala ValAla Gln Pro Ala Val

Val Leu Ala Ser SerVal Leu Ala Ser Ser

Gly Ile Ala Ser PheGly Ile Ala Ser Phe

Val Cys Glu Tyr AlaVal Cys Glu Tyr Ala

Ser Pro Gly Lys Ala 30Ser Pro Gly Lys Ala 30

Glu Val Arg Val Thr 35Glu Val Arg Val Thr 35

Val Leu Arg Gln Ala 40Val Leu Arg Gln Ala 40

Asp Ser Gln Val Thr 45Asp Ser Gln Val Thr 45

Val Cys Ala Ala Thr 50Val Cys Ala Ala Thr 50

Tyr Met Met Gly Asn 55Tyr Met Met Gly Asn 55

Glu Leu Thr Phe Leu 60Glu Leu Thr Phe Leu 60

Asp Ser Ile Cys Thr 65Asp Ser Ile Cys Thr 65

Gly Thr Ser Ser Gly 70Gly Thr Ser Ser Gly 70

Asn Gln Val Asn Leu 75Asn Gln Val Asn Leu 75

Ile Gln Gly Leu Arg 85Ile Gln Gly Leu Arg 85

Ala Met Asp Thr Gly 90Ala Met Asp Thr Gly 90

Leu Tyr Ile Cys Lys 95Leu Tyr Ile Cys Lys 95

Glu Leu Met Tyr ProGlu Leu Met Tyr Pro

100100

Pro Pro Tyr Tyr LeuPro Pro Tyr Tyr Leu

105105

Gly Ile Gly Asn GlyGly Ile Gly Asn Gly

110110

Gln Ile Tyr Val Ile 115Gln Ile Tyr Val Ile 115

Asp Pro Glu Pro Cys 120Asp Pro Glu Pro Cys 120

Pro Asp Ser Asp Phe 125Pro Asp Ser Asp Phe 125

Leu Trp Ile Leu AlaLeu Trp Ile Leu Ala

130130

Ala Val Ser Ser GlyAla Val Ser Ser Gly

135135

Leu Phe Phe Tyr Ser 140Leu Phe Phe Tyr Ser 140

Leu Leu Thr Ala Val 145Leu Leu Thr Ala Val 145

Ser Leu Ser Lys Met 150Ser Leu Ser Lys Met 150

Leu Lys Lys Arg Ser 155Leu Lys Lys Arg Ser 155

Leu Thr Thr Gly ValLeu Thr Thr Gly Val

165165

Tyr Val Lys Met ProTyr Val Lys Met Pro

170170

Pro Thr Glu Pro GluPro Thr Glu Pro Glu

175175

ArgArg

ThrThr

GluGlu

AspAsp

Thr 80Thr 80

ValVal

ThrThr

LeuLeu

PhePhe

Pro 160Pro 160

CysCys

Glu Lys Gln Phe GlnGlu Lys Gln Phe Gln

180180

Pro Tyr Phe Ile ProPro Tyr Phe Ile Pro

185185

Ile Asn <210> 262 <211> 268 <212> БЕЛОК <213> Homo sapiensIle Asn <210> 262 <211> 268 <212> PROTEIN <213> Homo sapiens

- 442 044346 <220>- 442 044346 <220>

<221> новая или редкая характеристика <223> Зрелый PDCD1(PD-1) <400> 262<221> new or rare characteristic <223> Mature PDCD1(PD-1) <400> 262

Pro Gly Trp Phe Leu Asp Ser Pro Asp Arg Pro Trp Asn Pro Pro 1 5 10 15Pro Gly Trp Phe Leu Asp Ser Pro Asp Arg Pro Trp Asn Pro Pro 1 5 10 15

Phe Ser Pro Ala Leu Leu Val Val Thr Glu Gly Asp Asn Ala ThrPhe Ser Pro Ala Leu Leu Val Val Thr Glu Gly Asp Asn Ala Thr

25 3025 30

Thr Cys Ser Phe Ser Asn Thr Ser Glu Ser Phe Val Leu Asn Trp 35 40 45Thr Cys Ser Phe Ser Asn Thr Ser Glu Ser Phe Val Leu Asn Trp 35 40 45

Arg Met Ser Pro Ser Asn Gln Thr Asp Lys Leu Ala Ala Phe Pro 50 55 60Arg Met Ser Pro Ser Asn Gln Thr Asp Lys Leu Ala Ala Phe Pro 50 55 60

Asp Arg Ser Gln Pro Gly Gln Asp Cys Arg Phe Arg Val Thr Gln 65 70 75Asp Arg Ser Gln Pro Gly Gln Asp Cys Arg Phe Arg Val Thr Gln 65 70 75

Pro Asn Gly Arg Asp Phe His Met Ser Val Val Arg Ala Arg Arg 85 90 95Pro Asn Gly Arg Asp Phe His Met Ser Val Val Arg Ala Arg Arg 85 90 95

Asp Ser Gly Thr Tyr Leu Cys Gly Ala Ile Ser Leu Ala Pro LysAsp Ser Gly Thr Tyr Leu Cys Gly Ala Ile Ser Leu Ala Pro Lys

100 105 110100 105 110

Gln Ile Lys Glu Ser Leu Arg Ala Glu Leu Arg Val Thr Glu ArgGln Ile Lys Glu Ser Leu Arg Ala Glu Leu Arg Val Thr Glu Arg

115 120 125115 120 125

Ala Glu Val Pro Thr Ala His Pro Ser Pro Ser Pro Arg Pro AlaAla Glu Val Pro Thr Ala His Pro Ser Pro Ser Pro Arg Pro Ala

130 135 140130 135 140

Gln Phe Gln Thr Leu Val Val Gly Val Val Gly Gly Leu Leu GlyGln Phe Gln Thr Leu Val Val Gly Val Val Gly Gly Leu Leu Gly

145 150 155145 150 155

Leu Val Leu Leu Val Trp Val Leu Ala Val Ile Cys Ser Arg AlaLeu Val Leu Leu Val Trp Val Leu Ala Val Ile Cys Ser Arg Ala

165 170 175165 170 175

Arg Gly Thr Ile Gly Ala Arg Arg Thr Gly Gln Pro Leu Lys GluArg Gly Thr Ile Gly Ala Arg Arg Thr Gly Gln Pro Leu Lys Glu

180 185 190180 185 190

Pro Ser Ala Val Pro Val Phe Ser Val Asp Tyr Gly Glu Leu AspPro Ser Ala Val Pro Val Phe Ser Val Asp Tyr Gly Glu Leu Asp

195 200 205195 200 205

Gln Trp Arg Glu Lys Thr Pro Glu Pro Pro Val Pro Cys Val ProGln Trp Arg Glu Lys Thr Pro Glu Pro Pro Val Pro Cys Val Pro

210 215 220210 215 220

ThrThr

PhePhe

TyrTyr

GluGlu

Leu 80Leu 80

AsnAsn

AlaAla

ArgArg

GlyGly

Ser 160Ser 160

AlaAla

AspAsp

PhePhe

GluGlu

- 443 044346- 443 044346

Gln Thr Glu Tyr Ala 225Gln Thr Glu Tyr Ala 225

Thr Ile Val Phe Pro 230Thr Ile Val Phe Pro 230

Ser Gly Met Gly Thr 235Ser Gly Met Gly Thr 235

Ser Pro Ala Arg ArgSer Pro Ala Arg Arg

245245

Gly Ser Ala Asp GlyGly Ser Ala Asp Gly

250250

Pro Arg Ser Ala GlnPro Arg Ser Ala Gln

255255

Ser 240Ser 240

ProPro

Leu Arg Pro Glu AspLeu Arg Pro Glu Asp

260260

Gly His Cys Ser TrpGly His Cys Ser Trp

265265

Pro Leu <210> 263 <211> 179 <212> БЕЛОК <213> Homo sapiens <220>Pro Leu <210> 263 <211> 179 <212> PROTEIN <213> Homo sapiens <220>

<221> новая или редкая характеристика <223> Зрелый ICOS <400> 263<221> new or rare characteristic <223> Mature ICOS <400> 263

Glu Ile Asn Gly Ser 1 5Glu Ile Asn Gly Ser 1 5

Ala Asn Tyr Glu MetAla Asn Tyr Glu Met

Phe Ile Phe His AsnPhe Ile Phe His Asn

Gly Val Gln Ile LeuGly Val Gln Ile Leu

Cys Lys Tyr Pro AspCys Lys Tyr Pro Asp

Ile Val Gln Gln PheIle Val Gln Gln Phe

Met Gln Leu Leu Lys 35Met Gln Leu Leu Lys 35

Gly Gly Gln Ile Leu 40Gly Gly Gln Ile Leu 40

Cys Asp Leu Thr Lys 45Cys Asp Leu Thr Lys 45

Lys Gly Ser Gly Asn 50Lys Gly Ser Gly Asn 50

Thr Val Ser Ile Lys 55Thr Val Ser Ile Lys 55

Ser Leu Lys Phe Cys 60Ser Leu Lys Phe Cys 60

Ser Gln Leu Ser Asn 65Ser Gln Leu Ser Asn 65

Asn Ser Val Ser Phe 70Asn Ser Val Ser Phe 70

Phe Leu Tyr Asn Leu 75Phe Leu Tyr Asn Leu 75

His Ser His Ala AsnHis Ser His Ala Asn

Tyr Tyr Phe Cys Asn 90Tyr Tyr Phe Cys Asn 90

Leu Ser Ile Phe Asp 95Leu Ser Ile Phe Asp 95

Pro Pro Phe Lys ValPro Pro Phe Lys Val

100100

Thr Leu Thr Gly GlyThr Leu Thr Gly Gly

105105

Tyr Leu His Ile TyrTyr Leu His Ile Tyr

110110

Ser Gln Leu Cys Cys 115Ser Gln Leu Cys Cys 115

Gln Leu Lys Phe TrpGln Leu Lys Phe Trp

120120

Leu Pro Ile Gly Cys 125Leu Pro Ile Gly Cys 125

Ala Phe Val Val ValAla Phe Val Val Val

130130

Cys Ile Leu Gly Cys 135Cys Ile Leu Gly Cys 135

Ile Leu Ile Cys Trp 140Ile Leu Ile Cys Trp 140

GlyGly

LysLys

ThrThr

HisHis

Asp 80Asp 80

ProPro

GluGlu

AlaAla

LeuLeu

TyrTyr

160160

Thr Lys Lys Lys Tyr 145Thr Lys Lys Lys Tyr 145

Ser Ser Ser Val His 150Ser Ser Ser Val His 150

Asp Pro Asn Gly GluAsp Pro Asn Gly Glu

155155

- 444 044346- 444 044346

Met Phe Met Arg Ala Val Asn Thr Ala Lys Lys Ser Arg Leu ThrMet Phe Met Arg Ala Val Asn Thr Ala Lys Lys Ser Arg Leu Thr

165 170 175165 170 175

AspAsp

Val Thr Leu <210> 264 <211> 259 < 212> БЕЛОК < 213> Homo sapiens <220>Val Thr Leu <210> 264 <211> 259 <212> PROTEIN <213> Homo sapiens <220>

< 221> новая или редкая характеристика < 223> Зрелый BTLA(CD272) <400> 264<221> new or rare characteristic <223> Mature BTLA(CD272) <400> 264

Lys Glu Ser Cys Asp 1 5Lys Glu Ser Cys Asp 1 5

Val Gln Leu Tyr IleVal Gln Leu Tyr Ile

Lys Arg Gln Ser GluLys Arg Gln Ser Glu

Ser Ile Leu Ala GlySer Ile Leu Ala Gly

Asp Pro Phe Glu LeuAsp Pro Phe Glu Leu

Glu Cys Pro Val Lys 30Glu Cys Pro Val Lys 30

Cys Ala Asn Arg Pro 35Cys Ala Asn Arg Pro 35

His Val Thr Trp Cys 40His Val Thr Trp Cys 40

Lys Leu Asn Gly Thr 45Lys Leu Asn Gly Thr 45

Cys Val Lys Leu Glu 50Cys Val Lys Leu Glu 50

Asp Arg Gln Thr Ser 55Asp Arg Gln Thr Ser 55

Trp Lys Glu Glu Lys 60Trp Lys Glu Glu Lys 60

Ile Ser Phe Phe Ile 65Ile Ser Phe Phe Ile 65

Leu His Phe Glu Pro 70Leu His Phe Glu Pro 70

Val Leu Pro Asn Asp 75Val Leu Pro Asn Asp 75

Gly Ser Tyr Arg Cys 85Gly Ser Tyr Arg Cys 85

Ser Ala Asn Phe GlnSer Ala Asn Phe Gln

Ser Asn Leu Ile GluSer Asn Leu Ile Glu

His Ser Thr Thr LeuHis Ser Thr Thr Leu

100100

Tyr Val Thr Asp ValTyr Val Thr Asp Val

105105

Lys Ser Ala Ser GluLys Ser Ala Ser Glu

110110

Pro Ser Lys Asp Glu 115Pro Ser Lys Asp Glu 115

Met Ala Ser Arg Pro 120Met Ala Ser Arg Pro 120

Trp Leu Leu Tyr ArgTrp Leu Leu Tyr Arg

125125

Leu Pro Leu Gly Gly 130Leu Pro Leu Gly Gly 130

Leu Pro Leu Leu IleLeu Pro Leu Leu Ile

135135

Thr Thr Cys Phe Cys 140Thr Thr Cys Phe Cys 140

Phe Cys Cys Leu Arg 145Phe Cys Cys Leu Arg 145

Arg His Gln Gly Lys 150Arg His Gln Gly Lys 150

Gln Asn Glu Leu Ser 155Gln Asn Glu Leu Ser 155

Thr Ala Gly Arg GluThr Ala Gly Arg Glu

165165

Ile Asn Leu Val AspIle Asn Leu Val Asp

170170

Ala His Leu Lys SerAla His Leu Lys Ser

175175

HisHis

TyrTyr

ThrThr

AsnAsn

Asn 80Asn 80

SerSer

ArgArg

LeuLeu

LeuLeu

Asp 160Asp 160

GluGlu

- 445 044346- 445 044346

Gln Thr Glu Ala Ser Thr Arg Gln Asn SerGln Thr Glu Ala Ser Thr Arg Gln Asn Ser

180 185180 185

Gln Val Leu Leu SerGln Val Leu Leu Ser

190190

Thr Gly Ile Tyr Asp Asn Asp Pro Asp LeuThr Gly Ile Tyr Asp Asn Asp Pro Asp Leu

195 200195 200

Cys Phe Arg Met GlnCys Phe Arg Met Gln

205205

Gly Ser Glu Val Tyr Ser Asn Pro Cys LeuGly Ser Glu Val Tyr Ser Asn Pro Cys Leu

210 215210 215

Glu Glu Asn Lys ProGlu Glu Asn Lys Pro

220220

Ile Val Tyr Ala Ser Leu Asn His Ser ValIle Val Tyr Ala Ser Leu Asn His Ser Val

225 230225 230

Ile Gly Pro Asn Ser 235Ile Gly Pro Asn Ser 235

Leu Ala Arg Asn Val Lys Glu Ala Pro ThrLeu Ala Arg Asn Val Lys Glu Ala Pro Thr

245 250245 250

Glu Tyr Ala Ser IleGlu Tyr Ala Ser Ile

255255

GluGlu

GluGlu

GlyGly

Arg 240Arg 240

CysCys

Val Arg Ser <210> 265 <211> 433 <212> БЕЛОК <213> Homo sapiens <220>Val Arg Ser <210> 265 <211> 433 <212> PROTEIN <213> Homo sapiens <220>

<221> новая или редкая характеристика <223> Зрелый CD4 <400> 265<221> new or rare characteristic <223> Mature CD4 <400> 265

Lys Lys Val Val Leu Gly Lys Lys Gly Asp Thr Val Glu Leu Thr 1 5 10 15Lys Lys Val Val Leu Gly Lys Lys Gly Asp Thr Val Glu Leu Thr 1 5 10 15

Thr Ala Ser Gln Lys Lys 20Thr Ala Ser Gln Lys Lys 20

Ser Ile Gln Phe His Trp Lys Asn SerSer Ile Gln Phe His Trp Lys Asn Ser

30thirty

Gln Ile LysGln Ile Lys

Ile Leu Gly Asn Gln Gly Ser Phe Leu Thr Lys Gly 40 45Ile Leu Gly Asn Gln Gly Ser Phe Leu Thr Lys Gly 40 45

Ser Lys Leu Asn Asp 50Ser Lys Leu Asn Asp 50

Arg Ala Asp Ser Arg 55Arg Ala Asp Ser Arg 55

Arg Ser Leu Trp Asp 60Arg Ser Leu Trp Asp 60

Gly Asn Phe Pro Leu 65Gly Asn Phe Pro Leu 65

Ile Ile Lys Asn Leu 70Ile Ile Lys Asn Leu 70

Lys Ile Glu Asp Ser 75Lys Ile Glu Asp Ser 75

Thr Tyr Ile Cys Glu 85Thr Tyr Ile Cys Glu 85

Val Glu Asp Gln Lys 90Val Glu Asp Gln Lys 90

Glu Glu Val Gln LeuGlu Glu Val Gln Leu

CysCys

AsnAsn

ProPro

GlnGln

Asp 80Asp 80

LeuLeu

GlnGln

Val Phe Gly Leu ThrVal Phe Gly Leu Thr

Ala Asn Ser Asp ThrAla Asn Ser Asp Thr

His Leu Leu Gln GlyHis Leu Leu Gln Gly

- 446 044346- 446 044346

100100

105105

110110

SerSer

GlnGln

Ser 145Ser 145

ValVal

LeuLeu

GlnGln

GlyGly

Ser 225Ser 225

ValVal

LeuLeu

ThrThr

LeuLeu

Val 305Val 305

AsnAsn

AsnAsn

Leu Thr LeuLeu Thr Leu

115115

Cys Arg Ser 130Cys Arg Ser 130

Val Ser GlnVal Ser Gln

Leu Gln AsnLeu Gln Asn

Ala Phe GlnAla Phe Gln

180180

Val Glu PheVal Glu Phe

195195

Ser Gly Glu 210Ser Gly Glu 210

Trp Ile ThrTrp Ile Thr

Thr Gln AspThr Gln Asp

Thr Leu ProThr Leu Pro

260260

Leu Ala LeuLeu Ala Leu

275275

Val Val Met 290Val Val Met 290

Trp Gly ProTrp Gly Pro

Lys Glu AlaLys Glu Ala

Pro Glu AlaPro Glu Ala

340340

Thr Leu GluThr Leu Glu

Pro Arg GlyPro Arg Gly

135135

Leu Glu LeuLeu Glu Leu

150150

Gln Lys Lys 165Gln Lys Lys 165

Lys Ala SerLys Ala Ser

Ser Phe ProSer Phe Pro

Leu Trp TrpLeu Trp Trp

215215

Phe Asp LeuPhe Asp Leu

230230

Pro Lys Leu 245Pro Lys Leu 245

Gln Ala LeuGln Ala Leu

Glu Ala LysGlu Ala Lys

Arg Ala ThrArg Ala Thr

295295

Thr Ser ProThr Ser Pro

310310

Lys Val Ser 325Lys Val Ser 325

Gly Met TrpGly Met Trp

Ser Pro Pro 120Ser Pro Pro 120

Gly Ser SerGly Ser Ser

125125

Lys Asn IleLys Asn Ile

Gln Gly GlyGln Gly Gly

140140

Gln Asp SerGln Asp Ser

Gly Thr Trp 155Gly Thr Trp 155

Val Glu PheVal Glu Phe

170170

Lys Ile AspLys Ile Asp

Ser Ile ValSer Ile Val

185185

Leu Ala Phe 200Leu Ala Phe 200

Gln Ala GluGln Ala Glu

Lys Asn LysLys Asn Lys

Gln Met GlyGln Met Gly

250250

Pro Gln TyrPro Gln Tyr

265265

Thr Gly Lys 280Thr Gly Lys 280

Gln Leu GlnGln Leu Gln

Lys Leu MetLys Leu Met

Lys Arg GluLys Arg Glu

330330

Gln Cys LeuGln CysLeu

345345

Tyr Lys LysTyr Lys Lys

Thr Val GluThr Val Glu

205205

Arg Ala SerArg Ala Ser

220220

Glu Val Ser 235Glu Val Ser 235

Lys Lys LeuLys Lys Leu

Ala Gly SerAla Gly Ser

Leu His GlnLeu His Gln

285285

Lys Asn LeuLys Asn Leu

300300

Leu Ser Leu 315Leu Ser Leu 315

Lys Ala ValLys Ala Val

Leu Ser AspLeu Ser Asp

Pro Ser ValPro Ser Val

Lys Thr LeuLys Thr Leu

Thr Cys Thr 160Thr Cys Thr 160

Ile Val Val 175Ile Val Val 175

Glu Gly Glu 190Glu Gly Glu 190

Lys Leu ThrLys Leu Thr

Ser Ser LysSer Ser Lys

Val Lys ArgVal Lys Arg

240240

Pro Leu HisPro Leu His

255255

Gly Asn Leu 270Gly Asn Leu 270

Glu Val AsnGlu Val Asn

Thr Cys GluThr Cys Glu

Lys Leu GluLys Leu Glu

320320

Trp Val LeuTrp Val Leu

335335

Ser Gly Gln 350Ser Gly Gln 350

- 447 044346- 447 044346

Val Leu Leu Glu SerVal Leu Leu Glu Ser

355355

Asn Ile Lys Val Leu 360Asn Ile Lys Val Leu 360

Pro Thr Trp Ser ThrPro Thr Trp Ser Thr

365365

Val Gln Pro Met AlaVal Gln Pro Met Ala

370370

Leu Ile Val Leu GlyLeu Ile Val Leu Gly

375375

Gly Val Ala Gly LeuGly Val Ala Gly Leu

380380

Leu Phe Ile Gly Leu 385Leu Phe Ile Gly Leu 385

Gly Ile Phe Phe Cys 390Gly Ile Phe Phe Cys 390

Val Arg Cys Arg His 395Val Arg Cys Arg His 395

Arg Arg Gln Ala GluArg Arg Gln Ala Glu

405405

Arg Met Ser Gln IleArg Met Ser Gln Ile

410410

Lys Arg Leu Leu SerLys Arg Leu Leu Ser

415415

Lys Lys Thr Cys GlnLys Lys Thr Cys Gln

420420

Cys Pro His Arg PheCys Pro His Arg Phe

425425

Gln Lys Thr Cys SerGln Lys Thr Cys Ser

430430

ProPro

LeuLeu

Arg 400Arg 400

GluGlu

ProPro

Ile <210> 266 <211> 214 <212> БЕЛОК <213> Homo sapiens <220>Ile <210> 266 <211> 214 <212> PROTEIN <213> Homo sapiens <220>

<221> новая или редкая характеристика <223> Зрелый CD8A(CD8-альфа) <400> 266<221> new or rare characteristic <223> Mature CD8A(CD8-alpha) <400> 266

Ser Gln Phe Arg Val 1 5Ser Gln Phe Arg Val 1 5

Ser Pro Leu Asp Arg Thr Trp Asn Leu GlySer Pro Leu Asp Arg Thr Trp Asn Leu Gly

1515

Thr Val Glu Leu Lys 20Thr Val Glu Leu Lys 20

Cys Gln Val Leu LeuCys Gln Val Leu Leu

Ser Asn Pro Thr SerSer Asn Pro Thr Ser

Cys Ser Trp Leu Phe 35Cys Ser Trp Leu Phe 35

Gln Pro Arg Gly Ala 40Gln Pro Arg Gly Ala 40

Ala Ala Ser Pro ThrAla Ala Ser Pro Thr

Leu Leu Tyr Leu Ser 50Leu Leu Tyr Leu Ser 50

Gln Asn Lys Pro Lys 55Gln Asn Lys Pro Lys 55

Ala Ala Glu Gly Leu 60Ala Ala Glu Gly Leu 60

Thr Gln Arg Phe Ser 65Thr Gln Arg Phe Ser 65

Gly Lys Arg Leu Gly 70Gly Lys Arg Leu Gly 70

Asp Thr Phe Val Leu 75Asp Thr Phe Val Leu 75

Leu Ser Asp Phe Arg 85Leu Ser Asp Phe Arg 85

Arg Glu Asn Glu Gly 90Arg Glu Asn Glu Gly 90

Tyr Tyr Phe Cys Ser 95Tyr Tyr Phe Cys Ser 95

Leu Ser Asn Ser IleLeu Ser Asn Ser Ile

100100

Met Tyr Phe Ser HisMet Tyr Phe Ser His

105105

Phe Val Pro Val PhePhe Val Pro Val Phe

110110

GluGlu

GlyGly

PhePhe

AspAsp

Thr 80Thr 80

AlaAla

LeuLeu

- 448 044346- 448 044346

Pro Ala Lys Pro Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg Pro Pro Thr ProPro Ala Lys Pro Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro

115 120 125115 120 125

Pro Thr Ile AlaPro Thr Ile Ala

130130

Ser Gln Pro Leu Ser Leu Arg Pro Glu Ala CysSer Gln Pro Leu Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys

135 140135 140

Pro Ala Ala Gly 145Pro Ala Ala Gly 145

Gly Ala Val His Thr Arg Gly Leu Asp Phe AlaGly Ala Val His Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala

150 155150 155

Asp Ile Tyr IleAsp Ile Tyr Ile

Trp Ala Pro Leu Ala Gly Thr Cys Gly Val LeuTrp Ala Pro Leu Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu

165 170 175165 170 175

Leu Ser Leu ValLeu Ser Leu Val

180180

Ile Thr Leu Tyr Cys Asn His Arg Asn Arg ArgIle Thr Leu Tyr Cys Asn His Arg Asn Arg Arg

185 190185 190

Val Cys Lys CysVal Cys Lys Cys

195195

Pro Arg Pro Val Val Lys Ser Gly Asp Lys ProPro Arg Pro Val Val Lys Ser Gly Asp Lys Pro

200 205200 205

AlaAla

ArgArg

Cys 160Cys 160

LeuLeu

ArgArg

SerSer

Leu Ser Ala Arg Tyr ValLeu Ser Ala Arg Tyr Val

210 <210> 267 <211> 189 <212> БЕЛОК <213> Homo sapiens <220>210 <210> 267 <211> 189 <212> PROTEIN <213> Homo sapiens <220>

<221> новая или редкая характеристика <223> Зрелый CD8B(CD8-бета) <400> 267<221> new or rare characteristic <223> Mature CD8B(CD8-beta) <400> 267

Leu Gln Gln Thr ProLeu Gln Gln Thr Pro

55

Ala Tyr Ile Lys ValAla Tyr Ile Lys Val

Gln Thr Asn Lys MetGln Thr Asn Lys Met

Met Leu Ser Cys Glu 20Met Leu Ser Cys Glu 20

Ala Lys Ile Ser LeuAla Lys Ile Ser Leu

Ser Asn Met Arg Ile 30Ser Asn Met Arg Ile 30

Trp Leu Arg Gln Arg 35Trp Leu Arg Gln Arg 35

Gln Ala Pro Ser SerGln Ala Pro Ser Ser

Asp Ser His His Glu 45Asp Ser His His Glu 45

Leu Ala Leu Trp Asp 50Leu Ala Leu Trp Asp 50

Ser Ala Lys Gly Thr 55Ser Ala Lys Gly Thr 55

Ile His Gly Glu Glu 60Ile His Gly Glu Glu 60

Glu Gln Glu Lys Ile 65Glu Gln Glu Lys Ile 65

Ala Val Phe Arg Asp 70Ala Val Phe Arg Asp 70

Ala Ser Arg Phe Ile 75Ala Ser Arg Phe Ile 75

Asn Leu Thr Ser ValAsn Leu Thr Ser Val

Lys Pro Glu Asp Ser 90Lys Pro Glu Asp Ser 90

Gly Ile Tyr Phe Cys 95Gly Ile Tyr Phe Cys 95

ValVal

TyrTyr

PhePhe

ValVal

Leu 80Leu 80

MetMet

- 449 044346- 449 044346

Ile Val Gly Ser ProIle Val Gly Ser Pro

100100

Glu Leu Thr Phe GlyGlu Leu Thr Phe Gly

105105

Lys Gly Thr Gln LeuLys Gly Thr Gln Leu

110110

Val Val Asp Phe Leu 115Val Val Asp Phe Leu 115

Pro Thr Thr Ala GlnPro Thr Thr Ala Gln

120120

Pro Thr Lys Lys Ser 125Pro Thr Lys Lys Ser 125

Leu Lys Lys Arg Val 130Leu Lys Lys Arg Val 130

Cys Arg Leu Pro ArgCys Arg Leu Pro Arg

135135

Pro Glu Thr Gln Lys 140Pro Glu Thr Gln Lys 140

Pro Leu Cys Ser Pro 145Pro Leu Cys Ser Pro 145

Ile Thr Leu Gly Leu 150Ile Thr Leu Gly Leu 150

Leu Val Ala Gly Val 155Leu Val Ala Gly Val 155

Val Leu Leu Val SerVal Leu Leu Val Ser

165165

Leu Gly Val Ala IleLeu Gly Val Ala Ile

170170

His Leu Cys Cys ArgHis Leu Cys Cys Arg

175175

SerSer

ThrThr

GlyGly

Leu 160Leu 160

ArgArg

Arg Arg Ala Arg LeuArg Arg Ala Arg Leu

180180

Arg Phe Met Lys GlnArg Phe Met Lys Gln

185185

Phe Tyr Lys <210> 268 <211> 497 < 212> БЕЛОК < 213> Homo sapiens <220>Phe Tyr Lys <210> 268 <211> 497 <212> PROTEIN <213> Homo sapiens <220>

< 221> новая или редкая характеристика < 223> Зрелый LAG3 <400>268<221> new or rare characteristic <223> Mature LAG3 <400>268

Val Pro Val Val Trp Ala Gln Glu Gly Ala Pro Ala Gln Leu ProVal Pro Val Val Trp Ala Gln Glu Gly Ala Pro Ala Gln Leu Pro

5 10155 1015

Ser Pro Thr Ile Pro Leu Gln Asp Leu Ser Leu Leu Arg Arg AlaSer Pro Thr Ile Pro Leu Gln Asp Leu Ser Leu Leu Arg Arg Ala

25302530

Val Thr Trp Gln His Gln Pro Asp Ser Gly Pro Pro Ala Ala Ala 35 4045Val Thr Trp Gln His Gln Pro Asp Ser Gly Pro Pro Ala Ala Ala 35 4045

Gly His Pro Leu Ala Pro Gly Pro His Pro Ala Ala Pro Ser Ser 50 5560Gly His Pro Leu Ala Pro Gly Pro His Pro Ala Ala Pro Ser Ser 50 5560

Gly Pro Arg Pro Arg Arg Tyr Thr Val Leu Ser Val Gly Pro Gly 65 7075Gly Pro Arg Pro Arg Arg Tyr Thr Val Leu Ser Val Gly Pro Gly 65 7075

Leu Arg Ser Gly Arg Leu Pro Leu Gln Pro Arg Val Gln Leu Asp 85 9095Leu Arg Ser Gly Arg Leu Pro Leu Gln Pro Arg Val Gln Leu Asp 85 9095

CysCys

GlyGly

ProPro

TrpTrp

Gly 80Gly 80

GluGlu

ArgArg

Arg Gly Arg Gln Arg Gly Asp Phe Ser Leu Trp Leu Arg Pro AlaArg Gly Arg Gln Arg Gly Asp Phe Ser Leu Trp Leu Arg Pro Ala

- 450 044346- 450 044346

100100

105105

110110

Arg Ala Asp Ala Gly 115Arg Ala Asp Ala Gly 115

Glu Tyr Arg Ala AlaGlu Tyr Arg Ala Ala

120120

Val His Leu Arg AspVal His Leu Arg Asp

125125

Ala Leu Ser Cys Arg 130Ala Leu Ser Cys Arg 130

Leu Arg Leu Arg LeuLeu Arg Leu Arg Leu

135135

Gly Gln Ala Ser Met 140Gly Gln Ala Ser Met 140

Ala Ser Pro Pro Gly 145Ala Ser Pro Pro Gly 145

Ser Leu Arg Ala Ser 150Ser Leu Arg Ala Ser 150

Asp Trp Val Ile Leu 155Asp Trp Val Ile Leu 155

Cys Ser Phe Ser ArgCys Ser Phe Ser Arg

165165

Pro Asp Arg Pro AlaPro Asp Arg Pro Ala

170170

Ser Val His Trp PheSer Val His Trp Phe

175175

Asn Arg Gly Gln GlyAsn Arg Gly Gln Gly

180180

Arg Val Pro Val ArgArg Val Pro Val Arg

185185

Glu Ser Pro His HisGlu Ser Pro His His

190190

Leu Ala Glu Ser PheLeu Ala Glu Ser Phe

195195

Leu Phe Leu Pro GlnLeu Phe Leu Pro Gln

200200

Val Ser Pro Met AspVal Ser Pro Met Asp

205205

Gly Pro Trp Gly Cys 210Gly Pro Trp Gly Cys 210

Ile Leu Thr Tyr ArgIle Leu Thr Tyr Arg

215215

Asp Gly Phe Asn Val 220Asp Gly Phe Asn Val 220

Ile Met Tyr Asn Leu 225Ile Met Tyr Asn Leu 225

Thr Val Leu Gly Leu 230Thr Val Leu Gly Leu 230

Glu Pro Pro Thr Pro 235Glu Pro Pro Thr Pro 235

Thr Val Tyr Ala GlyThr Val Tyr Ala Gly

245245

Ala Gly Ser Arg ValAla Gly Ser Arg Val

250250

Gly Leu Pro Cys ArgGly Leu Pro Cys Arg

255255

Pro Ala Gly Val GlyPro Ala Gly Val Gly

260260

Thr Arg Ser Phe LeuThr Arg Ser Phe Leu

265265

Thr Ala Lys Trp ThrThr Ala Lys Trp Thr

270270

Pro Gly Gly Gly ProPro Gly Gly Gly Pro

275275

Asp Leu Leu Val Thr 280Asp Leu Leu Val Thr 280

Gly Asp Asn Gly AspGly Asp Asn Gly Asp

285285

Thr Leu Arg Leu GluThr Leu Arg Leu Glu

290290

Asp Val Ser Gln AlaAsp Val Ser Gln Ala

295295

Gln Ala Gly Thr Tyr 300Gln Ala Gly Thr Tyr 300

Cys His Ile His Leu 305Cys His Ile His Leu 305

Gln Glu Gln Gln Leu 310Gln Glu Gln Gln Leu 310

Asn Ala Thr Val Thr 315Asn Ala Thr Val Thr 315

Ala Ile Ile Thr ValAla Ile Ile Thr Val

325325

Thr Pro Lys Ser PheThr Pro Lys Ser Phe

330330

Gly Ser Pro Gly SerGly Ser Pro Gly Ser

335335

Gly Lys Leu Leu CysGly Lys Leu Leu Cys

340340

Glu Val Thr Pro ValGlu Val Thr Pro Val

345345

Ser Gly Gln Glu ArgSer Gly Gln Glu Arg

350350

ArgArg

ThrThr

Asn 160Asn 160

ArgArg

HisHis

SerSer

SerSer

Leu 240Leu 240

LeuLeu

ProPro

PhePhe

ThrThr

Leu 320Leu 320

LeuLeu

PhePhe

- 451 044346- 451 044346

Val Trp Ser Ser LeuVal Trp Ser Ser Leu

355355

Asp Thr Pro Ser Gln 360Asp Thr Pro Ser Gln 360

Arg Ser Phe Ser Gly 365Arg Ser Phe Ser Gly 365

Trp Leu Glu Ala GlnTrp Leu Glu Ala Gln

370370

Glu Ala Gln Leu LeuGlu Ala Gln Leu Leu

375375

Ser Gln Pro Trp GlnSer Gln Pro Trp Gln

380380

Gln Leu Tyr Gln Gly 385Gln Leu Tyr Gln Gly 385

Glu Arg Leu Leu Gly 390Glu Arg Leu Leu Gly 390

Ala Ala Val Tyr Phe 395Ala Ala Val Tyr Phe 395

Glu Leu Ser Ser ProGlu Leu Ser Ser Pro

405405

Gly Ala Gln Arg SerGly Ala Gln Arg Ser

410410

Gly Arg Ala Pro GlyGly Arg Ala Pro Gly

415415

Leu Pro Ala Gly HisLeu Pro Ala Gly His

420420

Leu Leu Leu Phe LeuLeu Leu Leu Phe Leu

425425

Ile Leu Gly Val LeuIle Leu Gly Val Leu

430430

Leu Leu Leu Leu ValLeu Leu Leu Leu Val

435435

Thr Gly Ala Phe Gly 440Thr Gly Ala Phe Gly 440

Phe His Leu Trp Arg 445Phe His Leu Trp Arg 445

Gln Trp Arg Pro ArgGln Trp Arg Pro Arg

450450

Arg Phe Ser Ala LeuArg Phe Ser Ala Leu

455455

Glu Gln Gly Ile His 460Glu Gln Gly Ile His 460

Pro Gln Ala Gln Ser 465Pro Gln Ala Gln Ser 465

Lys Ile Glu Glu Leu 470Lys Ile Glu Glu Leu 470

Glu Gln Glu Pro Glu 475Glu Gln Glu Pro Glu 475

Glu Pro Glu Pro GluGlu Pro Glu Pro Glu

485485

Pro Glu Pro Glu ProPro Glu Pro Glu Pro

490490

Glu Pro Glu Pro GluGlu Pro Glu Pro Glu

495495

ProPro

CysCys

Thr 400Thr 400

AlaAla

SerSer

ArgArg

ProPro

Pro 480Pro 480

GlnGln

Leu <210> 269 <211> 280 <212> БЕЛОК <213> Homo sapiens <220>Leu <210> 269 <211> 280 <212> PROTEIN <213> Homo sapiens <220>

<221> новая или редкая характеристика <223> Зрелый HAVCR2(TIM-3) <400> 269<221> new or rare characteristic <223> Mature HAVCR2(TIM-3) <400> 269

Ser Glu Val 1Ser Glu Val 1

Glu Tyr Arg Ala Glu Val Gly Gln Asn Ala Tyr LeuGlu Tyr Arg Ala Glu Val Gly Gln Asn Ala Tyr Leu

10 1510 15

Cys Phe Tyr Thr Pro Ala Ala Pro 20Cys Phe Tyr Thr Pro Ala Ala Pro 20

Gly Lys Gly Ala Cys Pro Val Phe 35 40Gly Lys Gly Ala Cys Pro Val Phe 35 40

Gly Asn Leu Val Pro Val CysGly Asn Leu Val Pro Val Cys

30thirty

Glu Cys Gly Asn Val Val Leu 45Glu Cys Gly Asn Val Val Leu 45

ProPro

TrpTrp

ArgArg

- 452 044346- 452 044346

Thr Asp Glu Arg Asp 50Thr Asp Glu Arg Asp 50

Val Asn Tyr Trp Thr 55Val Asn Tyr Trp Thr 55

Ser Arg Tyr Trp Leu 60Ser Arg Tyr Trp Leu 60

Gly Asp Phe Arg Lys 65Gly Asp Phe Arg Lys 65

Gly Asp Val Ser Leu 70Gly Asp Val Ser Leu 70

Thr Ile Glu Asn Val 75Thr Ile Glu Asn Val 75

Leu Ala Asp Ser Gly 85Leu Ala Asp Ser Gly 85

Ile Tyr Cys Cys Arg 90Ile Tyr Cys Cys Arg 90

Ile Gln Ile Pro Gly 95Ile Gln Ile Pro Gly 95

Met Asn Asp Glu LysMet Asn Asp Glu Lys

100100

Phe Asn Leu Lys LeuPhe Asn Leu Lys Leu

105105

Val Ile Lys Pro AlaVal Ile Lys Pro Ala

110110

Val Thr Pro Ala ProVal Thr Pro Ala Pro

115115

Thr Arg Gln Arg AspThr Arg Gln Arg Asp

120120

Phe Thr Ala Ala PhePhe Thr Ala Ala Phe

125125

Arg Met Leu Thr Thr 130Arg Met Leu Thr Thr 130

Arg Gly His Gly ProArg Gly His Gly Pro

135135

Ala Glu Thr Gln ThrAla Glu Thr Gln Thr

140140

Gly Ser Leu Pro Asp 145Gly Ser Leu Pro Asp 145

Ile Asn Leu Thr Gln 150Ile Asn Leu Thr Gln 150

Ile Ser Thr Leu Ala 155Ile Ser Thr Leu Ala 155

Glu Leu Arg Asp SerGlu Leu Arg Asp Ser

165165

Arg Leu Ala Asn AspArg Leu Ala Asn Asp

170170

Leu Arg Asp Ser GlyLeu Arg Asp Ser Gly

175175

Thr Ile Arg Ile GlyThr Ile Arg Ile Gly

180180

Ile Tyr Ile Gly AlaIle Tyr Ile Gly Ala

185185

Gly Ile Cys Ala GlyGly Ile Cys Ala Gly

190190

Ala Leu Ala Leu IleAla Leu Ala Leu Ile

195195

Phe Gly Ala Leu Ile 200Phe Gly Ala Leu Ile 200

Phe Lys Trp Tyr Ser 205Phe Lys Trp Tyr Ser 205

Ser Lys Glu Lys Ile 210Ser Lys Glu Lys Ile 210

Gln Asn Leu Ser LeuGln Asn Leu Ser Leu

215215

Ile Ser Leu Ala AsnIle Ser Leu Ala Asn

220220

Pro Pro Ser Gly Leu 225Pro Pro Ser Gly Leu 225

Ala Asn Ala Val Ala 230Ala Asn Ala Val Ala 230

Glu Gly Ile Arg Ser 235Glu Gly Ile Arg Ser 235

Glu Asn Ile Tyr ThrGlu Asn Ile Tyr Thr

245245

Ile Glu Glu Asn ValIle Glu Glu Asn Val

250250

Tyr Glu Val Glu GluTyr Glu Val Glu Glu

255255

Asn Glu Tyr Tyr CysAsn Glu Tyr Tyr Cys

260260

Tyr Val Ser Ser ArgTyr Val Ser Ser Arg

265265

Gln Gln Pro Ser GlnGln Gln Pro Ser Gln

270270

AsnAsn

Thr 80Thr 80

IleIle

LysLys

ProPro

LeuLeu

Asn 160Asn 160

AlaAla

LeuLeu

HisHis

LeuLeu

Glu 240Glu 240

ProPro

ProPro

Leu Gly Cys Arg PheLeu Gly Cys Arg Phe

275275

Ala Met ProAla Met Pro

280 <210> 270 <211> 492280 <210> 270 <211> 492

- 453 044346 <212> БЕЛОК <213> Homo sapiens <220>- 453 044346 <212> PROTEIN <213> Homo sapiens <220>

<221> новая или редкая характеристика <223> Зрелый CEACAM1 <400> 270<221> new or rare characteristic <223> Mature CEACAM1 <400> 270

Gln Leu Thr Thr 1Gln Leu Thr Thr 1

Glu Ser Met Pro 5Glu Ser Met Pro 5

Phe Asn Val AlaPhe Asn Val Ala

Glu Gly Lys Glu 15Glu Gly Lys Glu 15

Val Leu Leu LeuVal Leu Leu Leu

Val His Asn LeuVal His Asn Leu

Pro Gln Gln Leu 25Pro Gln Gln Leu 25

Phe Gly Tyr Ser 30Phe Gly Tyr Ser 30

Trp Tyr Lys Gly 35Trp Tyr Lys Gly 35

Glu Arg Val Asp 40Glu Arg Val Asp 40

Gly Asn Arg GlnGly Asn Arg Gln

Ile Val Gly Tyr 45Ile Val Gly Tyr 45

Ala Ile Gly Thr 50Ala Ile Gly Thr 50

Gln Gln Ala ThrGln Gln Ala Thr

Pro Gly Pro Ala 60Pro Gly Pro Ala 60

Asn Ser Gly ArgAsn Ser Gly Arg

Glu Thr Ile Tyr 65Glu Thr Ile Tyr 65

Pro Asn Ala SerPro Asn Ala Ser

Leu Leu Ile GlnLeu Leu Ile Gln

Asn Val Thr GlnAsn Val Thr Gln

Asn Asp Thr Gly Phe Tyr Thr Leu Gln Val 8590Asn Asp Thr Gly Phe Tyr Thr Leu Gln Val 8590

Ile Lys Ser Asp Leu Val 95Ile Lys Ser Asp Leu Val 95

Asn Glu Glu Ala Thr Gly Gln Phe His Val Tyr Pro Glu Leu Pro LysAsn Glu Glu Ala Thr Gly Gln Phe His Val Tyr Pro Glu Leu Pro Lys

100 105110100 105110

Pro Ser Ile Ser Ser Asn Asn Ser Asn Pro Val Glu Asp Lys Asp AlaPro Ser Ile Ser Ser Asn Asn Ser Asn Pro Val Glu Asp Lys Asp Ala

115 120125115 120125

Val Ala Phe Thr Cys Glu Pro Glu Thr Gln Asp Thr Thr Tyr Leu TrpVal Ala Phe Thr Cys Glu Pro Glu Thr Gln Asp Thr Thr Tyr Leu Trp

130 135140130 135140

Trp Ile Asn Asn Gln Ser Leu Pro Val Ser Pro Arg Leu Gln Leu SerTrp Ile Asn Asn Gln Ser Leu Pro Val Ser Pro Arg Leu Gln Leu Ser

145 150 155160145 150 155160

Asn Gly Asn Arg Thr Leu Thr Leu Leu Ser Val Thr Arg Asn Asp ThrAsn Gly Asn Arg Thr Leu Thr Leu Leu Ser Val Thr Arg Asn Asp Thr

165 170175165 170175

Gly Pro Tyr Glu Cys Glu Ile Gln Asn Pro Val Ser Ala Asn Arg SerGly Pro Tyr Glu Cys Glu Ile Gln Asn Pro Val Ser Ala Asn Arg Ser

180 185190180 185190

Asp Pro Val Thr Leu Asn Val Thr Tyr Gly Pro Asp Thr Pro Thr IleAsp Pro Val Thr Leu Asn Val Thr Tyr Gly Pro Asp Thr Pro Thr Ile

195 200205195 200205

Ser Pro Ser Asp Thr Tyr Tyr Arg Pro Gly Ala Asn Leu Ser Leu SerSer Pro Ser Asp Thr Tyr Tyr Arg Pro Gly Ala Asn Leu Ser Leu Ser

- 454 044346- 454 044346

210210

215215

220220

Cys Tyr Ala Ala Ser 225Cys Tyr Ala Ala Ser 225

Asn Pro Pro Ala Gln 230Asn Pro Pro Ala Gln 230

Tyr Ser Trp Leu Ile 235Tyr Ser Trp Leu Ile 235

Gly Thr Phe Gln GlnGly Thr Phe Gln Gln

245245

Ser Thr Gln Glu LeuSer Thr Gln Glu Leu

250250

Phe Ile Pro Asn IlePhe Ile Pro Asn Ile

255255

Val Asn Asn Ser GlyVal Asn Asn Ser Gly

260260

Ser Tyr Thr Cys HisSer Tyr Thr Cys His

265265

Ala Asn Asn Ser ValAla Asn Asn Ser Val

270270

Gly Cys Asn Arg ThrGly Cys Asn Arg Thr

275275

Thr Val Lys Thr Ile 280Thr Val Lys Thr Ile 280

Ile Val Thr Glu LeuIle Val Thr Glu Leu

285285

Pro Val Val Ala LysPro Val Val Ala Lys

290290

Pro Gln Ile Lys AlaPro Gln Ile Lys Ala

295295

Ser Lys Thr Thr ValSer Lys Thr Thr Val

300300

Gly Asp Lys Asp Ser 305Gly Asp Lys Asp Ser 305

Val Asn Leu Thr Cys 310Val Asn Leu Thr Cys 310

Ser Thr Asn Asp Thr 315Ser Thr Asn Asp Thr 315

Ile Ser Ile Arg TrpIle Ser Ile Arg Trp

325325

Phe Phe Lys Asn GlnPhe Phe Lys Asn Gln

330330

Ser Leu Pro Ser SerSer Leu Pro Ser Ser

335335

Arg Met Lys Leu SerArg Met Lys Leu Ser

340340

Gln Gly Asn Thr ThrGln Gly Asn Thr Thr

345345

Leu Ser Ile Asn ProLeu Ser Ile Asn Pro

350350

Lys Arg Glu Asp AlaLys Arg Glu Asp Ala

355355

Gly Thr Tyr Trp CysGly Thr Tyr Trp Cys

360360

Glu Val Phe Asn ProGlu Val Phe Asn Pro

365365

Ser Lys Asn Gln SerSer Lys Asn Gln Ser

370370

Asp Pro Ile Met LeuAsp Pro Ile Met Leu

375375

Asn Val Asn Tyr AsnAsn Val Asn Tyr Asn

380380

Leu Pro Gln Glu Asn 385Leu Pro Gln Glu Asn 385

Gly Leu Ser Pro Gly 390Gly Leu Ser Pro Gly 390

Ala Ile Ala Gly Ile 395Ala Ile Ala Gly Ile 395

Ile Gly Val Val AlaIle Gly Val Val Ala

405405

Leu Val Ala Leu IleLeu Val Ala Leu Ile

410410

Ala Val Ala Leu AlaAla Val Ala Leu Ala

415415

Phe Leu His Phe GlyPhe Leu His Phe Gly

420420

Lys Thr Gly Arg AlaLys Thr Gly Arg Ala

425425

Ser Asp Gln Arg AspSer Asp Gln Arg Asp

430430

Thr Glu His Lys Pro 435Thr Glu His Lys Pro 435

Ser Val Ser Asn HisSer Val Ser Asn His

440440

Thr Gln Asp His Ser 445Thr Gln Asp His Ser 445

Asp Pro Pro Asn LysAsp Pro Pro Asn Lys

450450

Met Asn Glu Val ThrMet Asn Glu Val Thr

455455

Tyr Ser Thr Leu AsnTyr Ser Thr Leu Asn

460460

Asn 240Asn 240

ThrThr

ThrThr

SerSer

ThrThr

Gly 320Gly 320

GluGlu

ValVal

IleIle

AlaAla

Val 400Val 400

CysCys

LeuLeu

AsnAsn

PhePhe

- 455 044346- 455 044346

Glu Ala Gln Gln Pro Thr Gln Pro Thr Ser AlaGlu Ala Gln Gln Pro Thr Gln Pro Thr Ser Ala

Ser Pro Ser Leu ThrSer Pro Ser Leu Thr

465 470 475 480465 470 475 480

Ala Thr Glu Ile Ile TyrAla Thr Glu Ile Ile Tyr

485485

Ser Glu Val Lys Lys GlnSer Glu Val Lys Lys Gln

490 <210> 271 <211> 222 <212> БЕЛОК <213> Homo sapiens <220>490 <210> 271 <211> 222 <212> PROTEIN <213> Homo sapiens <220>

<221> новая или редкая характеристика <223> Зрелый TIGIT <400> 271<221> new or rare characteristic <223> Mature TIGIT <400> 271

MetMet

ThrThr

GlyGly

ThrThr

IleIle

GluGlu

ThrThr

ThrThr

GlyGly

AsnAsn

IleIle

SerSer

AlaAla

GluGlu

Lys 15Lys 15

GlyGly

GlyGly

SerSer

IleIle

Ile 20Ile 20

LeuLeu

GlnGln

CysCys

HisHis

Leu 25Leu 25

SerSer

SerSer

ThrThr

ThrThr

Ala 30Ala 30

GlnGln

ValVal

ThrThr

GlnGln

Val 35Val 35

AsnAsn

TrpTrp

GluGlu

GlnGln

Gln 40Gln 40

AspAsp

GlnGln

LeuLeu

LeuLeu

Ala 45Ala 45

IleIle

CysCys

AsnAsn

AlaAla

Asp 50Asp 50

LeuLeu

GlyGly

TrpTrp

HisHis

Ile 55Ile 55

SerSer

ProPro

SerSer

PhePhe

Lys 60Lys 60

AspAsp

ArgArg

ValVal

AlaAla

Pro Gly Pro Gly Leu 65Pro Gly Pro Gly Leu 65

Gly Leu Thr Leu Gln Ser Leu Thr Val Asn Asp 70 75 80Gly Leu Thr Leu Gln Ser Leu Thr Val Asn Asp 70 75 80

Thr Gly Glu Tyr Phe 85Thr Gly Glu Tyr Phe 85

Cys Ile Tyr His Thr Tyr Pro Asp Gly Thr Tyr 90 95Cys Ile Tyr His Thr Tyr Pro Asp Gly Thr Tyr 90 95

Thr Gly Arg Ile PheThr Gly Arg Ile Phe

100100

Leu Glu Val Leu Glu Ser Ser Val Ala Glu HisLeu Glu Val Leu Glu Ser Ser Val Ala Glu His

105 110105 110

Gly Ala Arg Phe Gln 115Gly Ala Arg Phe Gln 115

Ile Pro Leu Leu Gly Ala Met Ala Ala Thr LeuIle Pro Leu Leu Gly Ala Met Ala Ala Thr Leu

120 125120 125

Val Val Ile Cys Thr Ala ValVal Val Ile Cys Thr Ala Val

130 135130 135

Ile Val Val Val Ala Leu Thr Arg LysIle Val Val Val Ala Leu Thr Arg Lys

140140

Lys Lys Ala Leu Arg Ile HisLys Lys Ala Leu Arg Ile His

145 150145 150

Ser Ala Gly Gln Glu Glu Trp 165Ser Ala Gly Gln Glu Glu Trp 165

Ser Val Glu Gly Asp Leu Arg Arg Lys 155 160Ser Val Glu Gly Asp Leu Arg Arg Lys 155 160

Ser Pro Ser Ala Pro Ser Pro Pro Gly 170 175Ser Pro Ser Ala Pro Ser Pro Pro Gly 170 175

- 456 044346- 456 044346

Ser Cys Val Gln Ala Glu Ala Ala Pro AlaSer Cys Val Gln Ala Glu Ala Ala Pro Ala

180 185180 185

Gly Leu Cys Gly GluGly Leu Cys Gly Glu

190190

Arg Gly Glu Asp Cys Ala Glu Leu His AspArg Gly Glu Asp Cys Ala Glu Leu His Asp

195 200195 200

Tyr Phe Asn Val LeuTyr Phe Asn Val Leu

205205

GlnGln

SerSer

Tyr Arg Ser Leu Gly Asn Cys Ser Phe PheTyr Arg Ser Leu Gly Asn Cys Ser Phe Phe

210 215210 215

Thr Glu Thr GlyThr Glu Thr Gly

220 <210> 272 <211> 397 <212> БЕЛОК <213> Homo sapiens <220>220 <210> 272 <211> 397 <212> PROTEIN <213> Homo sapiens <220>

<221> новая или редкая характеристика <223> Зрелый PVR(CD155) <400> 272<221> new or rare characteristic <223> Mature PVR(CD155) <400> 272

Trp Pro Pro Pro Gly Thr Gly Asp Val Val Val 1 5 10Trp Pro Pro Pro Gly Thr Gly Asp Val Val Val 1 5 10

Gln Ala Pro ThrGln Ala Pro Thr

ValVal

ValVal

HisHis

Ser 65Ser 65

AlaAla

Pro Gly Phe Leu Gly Asp Ser 20Pro Gly Phe Leu Gly Asp Ser 20

Pro Asn Met Glu Val Thr His 35 40Pro Asn Met Glu Val Thr His 35 40

Gly Glu Ser Gly Ser Met AlaGly Glu Ser Gly Ser Met Ala

5555

Tyr Ser Glu Ser Lys Arg Leu 70Tyr Ser Glu Ser Lys Arg Leu 70

Glu Leu Arg Asn Ala Ser Leu 85Glu Leu Arg Asn Ala Ser Leu 85

Asp Glu Gly AsnAsp Glu Gly Asn

100100

Arg Ser Val AspArg Ser Val Asp

115115

Ala Glu Val GlnAla Glu Val Gln

130130

Arg Cys Val Ser 145Arg Cys Val Ser 145

Val Thr Leu Pro Cys Tyr Leu 25 30Val Thr Leu Pro Cys Tyr Leu 25 30

Val Ser Gln Leu Thr Trp Ala 45Val Ser Gln Leu Thr Trp Ala 45

Val Phe His Gln Thr Gln Gly 60Val Phe His Gln Thr Gln Gly 60

Glu Phe Val Ala Ala Arg Leu 75Glu Phe Val Ala Ala Arg Leu 75

Arg Met Phe Gly Leu Arg Val 90 95Arg Met Phe Gly Leu Arg Val 90 95

Tyr Thr Cys Leu Phe Val Thr Phe Pro Gln Gly 105110Tyr Thr Cys Leu Phe Val Thr Phe Pro Gln Gly 105110

Ile Trp Leu Arg Val Leu Ala Lys Pro Gln Asn 120125Ile Trp Leu Arg Val Leu Ala Lys Pro Gln Asn 120125

Lys Val Gln Leu Thr Gly Glu Pro Val Pro Met 135140Lys Val Gln Leu Thr Gly Glu Pro Val Pro Met 135140

Thr Gly Gly Arg Pro Pro Ala Gln Ile Thr Trp 150155Thr Gly Gly Arg Pro Pro Ala Gln Ile Thr Trp 150155

GlnGln

GlnGln

ArgArg

ProPro

Gly 80Gly 80

GluGlu

SerSer

ThrThr

AlaAla

HisHis

160160

- 457 044346- 457 044346

Ser Asp Leu Gly GlySer Asp Leu Gly Gly

165165

Met Pro Asn Thr SerMet Pro Asn Thr Ser

170170

Gln Val Pro Gly PheGln Val Pro Gly Phe

175175

Ser Gly Thr Val ThrSer Gly Thr Val Thr

180180

Val Thr Ser Leu TrpVal Thr Ser Leu Trp

185185

Ile Leu Val Pro SerIle Leu Val Pro Ser

190190

Gln Val Asp Gly Lys 195Gln Val Asp Gly Lys 195

Asn Val Thr Cys Lys 200Asn Val Thr Cys Lys 200

Val Glu His Glu SerVal Glu His Glu Ser

205205

Glu Lys Pro Gln LeuGlu Lys Pro Gln Leu

210210

Leu Thr Val Asn LeuLeu Thr Val Asn Leu

215215

Thr Val Tyr Tyr ProThr Val Tyr Tyr Pro

220220

Glu Val Ser Ile Ser 225Glu Val Ser Ile Ser 225

Gly Tyr Asp Asn Asn 230Gly Tyr Asp Asn Asn 230

Trp Tyr Leu Gly Gln 235Trp Tyr Leu Gly Gln 235

Glu Ala Thr Leu ThrGlu Ala Thr Leu Thr

245245

Cys Asp Ala Arg SerCys Asp Ala Arg Ser

250250

Asn Pro Glu Pro ThrAsn Pro Glu Pro Thr

255255

Tyr Asn Trp Ser ThrTyr Asn Trp Ser Thr

260260

Thr Met Gly Pro LeuThr Met Gly Pro Leu

265265

Pro Pro Phe Ala ValPro Pro Phe Ala Val

270270

Gln Gly Ala Gln LeuGln Gly Ala Gln Leu

275275

Leu Ile Arg Pro ValLeu Ile Arg Pro Val

280280

Asp Lys Pro Ile AsnAsp Lys Pro Ile Asn

285285

Thr Leu Ile Cys AsnThr Leu Ile Cys Asn

290290

Val Thr Asn Ala LeuVal Thr Asn Ala Leu

295295

Gly Ala Arg Gln AlaGly Ala Arg Gln Ala

300300

Leu Thr Val Gln Val 305Leu Thr Val Gln Val 305

Lys Glu Gly Pro Pro 310Lys Glu Gly Pro Pro 310

Ser Glu His Ser Gly 315Ser Glu His Ser Gly 315

Ser Arg Asn Ala IleSer Arg Asn Ala Ile

325325

Ile Phe Leu Val LeuIle Phe Leu Val Leu

330330

Gly Ile Leu Val PheGly Ile Leu Val Phe

335335

Ile Leu Leu Gly IleIle Leu Leu Gly Ile

340340

Gly Ile Tyr Phe TyrGly Ile Tyr Phe Tyr

345345

Trp Ser Lys Cys SerTrp Ser Lys Cys Ser

350350

Glu Val Leu Trp HisGlu Val Leu Trp His

355355

Cys His Leu Cys Pro 360Cys His Leu Cys Pro 360

Ser Ser Thr Glu HisSer Ser Thr Glu His

365365

Ser Ala Ser Ala AsnSer Ala Ser Ala Asn

370370

Gly His Val Ser TyrGly His Val Ser Tyr

375375

Ser Ala Val Ser ArgSer Ala Val Ser Arg

380380

LeuLeu

SerSer

PhePhe

ProPro

Asn 240Asn 240

GlyGly

AlaAla

ThrThr

GluGlu

Ile 320Ile 320

LeuLeu

ArgArg

AlaAla

GluGlu

Asn Ser Ser Ser Gln 385Asn Ser Ser Ser Gln 385

Asp Pro Gln Thr Glu 390Asp Pro Gln Thr Glu 390

Gly Thr Arg 395 <210> 273Gly Thr Arg 395 <210> 273

- 458 044346 <211> 507 < 212> БЕЛОК < 213> Homo sapiens <220>- 458 044346 <211> 507 <212> PROTEIN <213> Homo sapiens <220>

< 221> новая или редкая характеристика <223> Зрелый PVRL2(CD112) <400> 273<221> new or rare characteristic <223> Mature PVRL2(CD112) <400> 273

Gln Asp Val Arg Val Gln Val Leu 1 5Gln Asp Val Arg Val Gln Val Leu 1 5

Pro Glu Val Arg Gly Gln Leu GlyPro Glu Val Arg Gly Gln Leu Gly

1515

Gly Thr Val Glu Leu Pro Cys HisGly Thr Val Glu Leu Pro Cys His

Leu Leu Pro Pro Val Pro Gly Leu 25 30Leu Leu Pro Pro Val Pro Gly Leu 25 30

Tyr Ile Ser Leu Val Thr Trp GlnTyr Ile Ser Leu Val Thr Trp Gln

4040

Arg Pro Asp Ala Pro Ala Asn His 45Arg Pro Asp Ala Pro Ala Asn His 45

Gln Asn Val Ala Ala Phe His ProGln Asn Val Ala Ala Phe His Pro

5555

Lys Met Gly Pro Ser Phe Pro Ser 60Lys Met Gly Pro Ser Phe Pro Ser 60

Pro Lys Pro Gly Ser Glu Arg Leu 65 70Pro Lys Pro Gly Ser Glu Arg Leu 65 70

Ser Phe Val Ser Ala Lys Gln SerSer Phe Val Ser Ala Lys Gln Ser

8080

Thr Gly Gln Asp Thr Glu Ala Glu 85Thr Gly Gln Asp Thr Glu Ala Glu 85

Leu Gln Asp Ala Thr Leu Ala LeuLeu Gln Asp Ala Thr Leu Ala Leu

9595

His Gly Leu Thr Val Glu Asp GluHis Gly Leu Thr Val Glu Asp Glu

100100

Gly Asn Tyr Thr Cys Glu Phe AlaGly Asn Tyr Thr Cys Glu Phe Ala

105 110105 110

Thr Phe Pro Lys Gly Ser Val ArgThr Phe Pro Lys Gly Ser Val Arg

115 120115 120

Gly Met Thr Trp Leu Arg Val IleGly Met Thr Trp Leu Arg Val Ile

125125

Ala Lys Pro Lys Asn Gln Ala GluAla Lys Pro Lys Asn Gln Ala Glu

130 135130 135

Ala Gln Lys Val Thr Phe Ser GlnAla Gln Lys Val Thr Phe Ser Gln

140140

Asp Pro Thr Thr Val Ala Leu CysAsp Pro Thr Thr Val Ala Leu Cys

145 150145 150

Ile Ser Lys Glu Gly Arg Pro ProIle Ser Lys Glu Gly Arg Pro Pro

155 160155 160

Ala Arg Ile Ser Trp Leu Ser SerAla Arg Ile Ser Trp Leu Ser Ser

165165

Leu Asp Trp Glu Ala Lys Glu ThrLeu Asp Trp Glu Ala Lys Glu Thr

170 175170 175

Gln Val Ser Gly Thr Leu Ala GlyGln Val Ser Gly Thr Leu Ala Gly

180180

Thr Val Thr Val Thr Ser Arg PheThr Val Thr Val Thr Ser Arg Phe

185 190185 190

Thr Leu Val Pro Ser Gly Arg AlaThr Leu Val Pro Ser Gly Arg Ala

195 200195 200

Asp Gly Val Thr Val Thr Cys LysAsp Gly Val Thr Val Thr Cys Lys

205205

- 459 044346- 459 044346

Val Glu His Glu SerVal Glu His Glu Ser

210210

Phe Glu Glu Pro AlaPhe Glu Glu Pro Ala

215215

Leu Ile Pro Val ThrLeu Ile Pro Val Thr

220220

Ser Val Arg Tyr Pro 225Ser Val Arg Tyr Pro 225

Pro Glu Val Ser Ile 230Pro Glu Val Ser Ile 230

Ser Gly Tyr Asp Asp 235Ser Gly Tyr Asp Asp 235

Trp Tyr Leu Gly ArgTrp Tyr Leu Gly Arg

245245

Thr Asp Ala Thr LeuThr Asp Ala Thr Leu

250250

Ser Cys Asp Val ArgSer Cys Asp Val Arg

255255

Asn Pro Glu Pro ThrAsn Pro Glu Pro Thr

260260

Gly Tyr Asp Trp SerGly Tyr Asp Trp Ser

265265

Thr Thr Ser Gly ThrThr Thr Ser Gly Thr

270270

Pro Thr Ser Ala ValPro Thr Ser Ala Val

275275

Ala Gln Gly Ser Gln 280Ala Gln Gly Ser Gln 280

Leu Val Ile His AlaLeu Val Ile His Ala

285285

Asp Ser Leu Phe Asn 290Asp Ser Leu Phe Asn 290

Thr Thr Phe Val CysThr Thr Phe Val Cys

295295

Thr Val Thr Asn AlaThr Val Thr Asn Ala

300300

Gly Met Gly Arg Ala 305Gly Met Gly Arg Ala 305

Glu Gln Val Ile Phe 310Glu Gln Val Ile Phe 310

Val Arg Glu Thr Pro 315Val Arg Glu Thr Pro 315

Thr Ala Gly Ala GlyThr Ala Gly Ala Gly

325325

Ala Thr Gly Gly IleAla Thr Gly Gly Ile

330330

Ile Gly Gly Ile IleIle Gly Gly Ile Ile

335335

Ala Ile Ile Ala ThrAla Ile Ile Ala Thr

340340

Ala Val Ala Ala ThrAla Val Ala Ala Thr

345345

Gly Ile Leu Ile CysGly Ile Leu Ile Cys

350350

Gln Gln Arg Lys GluGln Gln Arg Lys Glu

355355

Gln Thr Leu Gln Gly 360Gln Thr Leu Gln Gly 360

Ala Glu Glu Asp Glu 365Ala Glu Glu Asp Glu 365

Leu Glu Gly Pro ProLeu Glu Gly Pro Pro

370370

Ser Tyr Lys Pro ProSer Tyr Lys Pro Pro

375375

Thr Pro Lys Ala LysThr Pro Lys Ala Lys

380380

Glu Ala Gln Glu Met 385Glu Ala Gln Glu Met 385

Pro Ser Gln Leu Phe 390Pro Ser Gln Leu Phe 390

Thr Leu Gly Ala Ser 395Thr Leu Gly Ala Ser 395

His Ser Pro Leu LysHis Ser Pro Leu Lys

405405

Thr Pro Tyr Phe AspThr Pro Tyr Phe Asp

410410

Ala Gly Ala Ser CysAla Gly Ala Ser Cys

415415

Glu Gln Glu Met ProGlu Gln Glu Met Pro

420420

Arg Tyr His Glu LeuArg Tyr His Glu Leu

425425

Pro Thr Leu Glu GluPro Thr Leu Glu Glu

430430

Ser Gly Pro Leu HisSer Gly Pro Leu His

435435

Pro Gly Ala Thr SerPro Gly Ala Thr Ser

440440

Leu Gly Ser Pro Ile 445Leu Gly Ser Pro Ile 445

Val Pro Pro Gly ProVal Pro Pro Gly Pro

450450

Pro Ala Val Glu Asp 455Pro Ala Val Glu Asp 455

Val Ser Leu Asp LeuVal Ser Leu Asp Leu

460460

LeuLeu

Asn 240Asn 240

SerSer

PhePhe

ValVal

ValVal

Asn 320Asn 320

AlaAla

ArgArg

AspAsp

LeuLeu

Glu 400Glu 400

ThrThr

ArgArg

ProPro

GluGlu

- 460 044346- 460 044346

Asp Glu Glu Gly Glu 465Asp Glu Glu Gly Glu 465

Glu Glu Glu Glu Tyr Leu Asp Lys Ile Asn 470 475Glu Glu Glu Glu Tyr Leu Asp Lys Ile Asn 470 475

Ile Tyr Asp Ala LeuIle Tyr Asp Ala Leu

485485

Ser Tyr Ser Ser Pro Ser Asp Ser Tyr GlnSer Tyr Ser Ser Pro Ser Asp Ser Tyr Gln

490 495490 495

Pro 480Pro 480

GlyGly

Lys Gly Phe Val MetLys Gly Phe Val Met

500500

Ser Arg Ala Met Tyr ValSer Arg Ala Met Tyr Val

505 <210> 274 <211> 318 <212> БЕЛОК <213> Homo sapiens <220>505 <210> 274 <211> 318 <212> PROTEIN <213> Homo sapiens <220>

<221> новая или редкая характеристика <223> Зрелый CD226 <400> 274<221> new or rare characteristic <223> Mature CD226 <400> 274

Glu Glu Val Leu Trp His Thr Ser Val Pro Phe Ala Glu Asn MetGlu Glu Val Leu Trp His Thr Ser Val Pro Phe Ala Glu Asn Met

5 10 155 10 15

Leu Glu Cys Val Tyr Pro Ser Met Gly Ile Leu Thr Gln Val GluLeu Glu Cys Val Tyr Pro Ser Met Gly Ile Leu Thr Gln Val Glu

25 3025 30

Phe Lys Ile Gly Thr Gln Gln Asp Ser Ile Ala Ile Phe Ser Pro 35 40 45Phe Lys Ile Gly Thr Gln Gln Asp Ser Ile Ala Ile Phe Ser Pro 35 40 45

His Gly Met Val Ile Arg Lys Pro Tyr Ala Glu Arg Val Tyr Phe 50 55 60His Gly Met Val Ile Arg Lys Pro Tyr Ala Glu Arg Val Tyr Phe 50 55 60

Asn Ser Thr Met Ala 65Asn Ser Thr Met Ala 65

Ser Asn Asn Met Thr Leu Phe Phe Arg Asn 70 75Ser Asn Asn Met Thr Leu Phe Phe Arg Asn 70 75

Ser Glu Asp Asp Val 85Ser Glu Asp Asp Val 85

Gly Tyr Tyr Ser Cys Ser Leu Tyr Thr Tyr 90 95Gly Tyr Tyr Ser Cys Ser Leu Tyr Thr Tyr 90 95

Gln Gly Thr Trp GlnGln Gly Thr Trp Gln

100100

Lys Val Ile Gln Val Val Gln Ser Asp SerLys Val Ile Gln Val Val Gln Ser Asp Ser

105 110105 110

Glu Ala Ala Val ProGlu Ala Ala Val Pro

115115

Ser Asn Ser His Ile Val Ser Glu Pro GlySer Asn Ser His Ile Val Ser Glu Pro Gly

120 125120 125

Asn Val Thr Leu ThrAsn Val Thr Leu Thr

130130

Cys Gln Pro Gln Met Thr Trp Pro Val GlnCys Gln Pro Gln Met Thr Trp Pro Val Gln

135 140135 140

SerSer

TrpTrp

ThrThr

LeuLeu

Ala 80Ala 80

ProPro

PhePhe

LysLys

AlaAla

TyrTyr

160160

Val Arg Trp Glu Lys 145Val Arg Trp Glu Lys 145

Ile Gln Pro Arg Gln Ile Asp Leu Leu ThrIle Gln Pro Arg Gln Ile Asp Leu Leu Thr

150 155150 155

- 461 044346- 461 044346

Cys Asn LeuCys Asn Leu

Val His GlyVal His Gly

165165

Arg Asn PheArg Asn Phe

Thr Ser Lys 170Thr Ser Lys 170

Phe Pro ArgPhe Pro Arg

175175

Ile Val SerIle Val Ser

Asn Cys Ser 180Asn Cys Ser 180

His Gly ArgHis Gly Arg

185185

Trp Ser ValTrp Ser Val

Ile Val IleIle Val Ile

190190

Asp Val ThrAsp Val Thr

195195

Val Ser AspVal Ser Asp

Ser Gly LeuSer Gly Leu

200200

Tyr Arg CysTyr Arg Cys

Tyr Leu Gln 205Tyr Leu Gln 205

Ser Ala GlySer Ala Gly

210210

Glu Asn GluGlu Asn Glu

Thr Phe Val 215Thr Phe Val 215

Met Arg LeuMet Arg Leu

220220

Thr Val AlaThr Val Ala

Gly Lys Thr 225Gly Lys Thr 225

Asp Asn GlnAsp Asn Gln

230230

Tyr Thr LeuTyr Thr Leu

Phe Val AlaPhe Val Ala

235235

Gly Gly ThrGly Gly Thr

Leu Leu LeuLeu Leu Leu

Leu Phe ValLeu Phe Val

245245

Ile Ser IleIle Ser Ile

Thr Thr Ile 250Thr Thr Ile 250

Ile Val IleIle Val Ile

255255

Leu Asn ArgLeu Asn Arg

Arg Arg Arg 260Arg Arg Arg 260

Arg Glu ArgArg Glu Arg

265265

Arg Asp LeuArg Asp Leu

Phe Thr GluPhe Thr Glu

270270

Trp Asp ThrTrp Asp Thr

275275

Gln Lys AlaGln Lys Ala

Pro Asn AsnPro Asn Asn

280280

Tyr Arg SerTyr Arg Ser

Pro Ile Ser 285Pro Ile Ser 285

Ser Gln ProSer Gln Pro

290290

Thr Asn GlnThr Asn Gln

Ser Met Asp 295Ser Met Asp 295

Asp Thr ArgAsp Thr Arg

300300

Glu Asp IleGlu Asp Ile

GlnGln

ProPro

AlaAla

GluGlu

Val 240Val 240

PhePhe

SerSer

ThrThr

TyrTyr

Val Asn Tyr 305Val Asn Tyr 305

Pro Thr PhePro Thr Phe

310310

Ser Arg ArgSer Arg Arg

Pro Lys ThrPro Lys Thr

315315

Arg Val <210> 275 <211> 327 < 212> БЕЛОК < 213> Homo sapiens <220>Arg Val <210> 275 <211> 327 <212> PROTEIN <213> Homo sapiens <220>

< 221> новая или редкая характеристика < 223> Зрелый CD2 <400>275<221> new or rare characteristic <223> Mature CD2 <400>275

Lys Glu Ile Thr Asn Ala Leu Glu Thr Trp Gly Ala Leu Gly Gln 1 5 1015Lys Glu Ile Thr Asn Ala Leu Glu Thr Trp Gly Ala Leu Gly Gln 1 5 1015

Ile Asn Leu Asp 20Ile Asn Leu Asp 20

Ile Pro Ser Phe Gln Met Ser Asp Asp Ile Asp 2530Ile Pro Ser Phe Gln Met Ser Asp Asp Ile Asp 2530

AspAsp

AspAsp

ArgArg

Ile Lys Trp Glu Lys Thr Ser Asp Lys Lys LysIle Lys Trp Glu Lys Thr Ser Asp Lys Lys Lys

Ile Ala Gln PheIle Ala Gln Phe

- 462 044346- 462 044346

Lys Glu Lys Glu Thr 50Lys Glu Lys Glu Thr 50

Phe Lys Glu Lys Asp 55Phe Lys Glu Lys Asp 55

Thr Tyr Lys Leu Phe 60Thr Tyr Lys Leu Phe 60

Asn Gly Thr Leu Lys 65Asn Gly Thr Leu Lys 65

Ile Lys His Leu Lys 70Ile Lys His Leu Lys 70

Thr Asp Asp Gln Asp 75Thr Asp Asp Gln Asp 75

Tyr Lys Val Ser IleTyr Lys Val Ser Ile

Tyr Asp Thr Lys Gly 90Tyr Asp Thr Lys Gly 90

Lys Asn Val Leu Glu 95Lys Asn Val Leu Glu 95

Ile Phe Asp Leu LysIle Phe Asp Leu Lys

100100

Ile Gln Glu Arg ValIle Gln Glu Arg Val

105105

Ser Lys Pro Lys IleSer Lys Pro Lys Ile

110110

Trp Thr Cys Ile Asn 115Trp Thr Cys Ile Asn 115

Thr Thr Leu Thr Cys 120Thr Thr Leu Thr Cys 120

Glu Val Met Asn GlyGlu Val Met Asn Gly

125125

Asp Pro Glu Leu Asn 130Asp Pro Glu Leu Asn 130

Leu Tyr Gln Asp GlyLeu Tyr Gln Asp Gly

135135

Lys His Leu Lys Leu 140Lys His Leu Lys Leu 140

Gln Arg Val Ile Thr 145Gln Arg Val Ile Thr 145

His Lys Trp Thr Thr 150His Lys Trp Thr Thr 150

Ser Leu Ser Ala Lys 155Ser Leu Ser Ala Lys 155

Lys Cys Thr Ala GlyLys Cys Thr Ala Gly

165165

Asn Lys Val Ser LysAsn Lys Val Ser Lys

170170

Glu Ser Ser Val GluGlu Ser Ser Val Glu

175175

Val Ser Cys Pro GluVal Ser Cys Pro Glu

180180

Lys Gly Leu Asp IleLys Gly Leu Asp Ile

185185

Tyr Leu Ile Ile GlyTyr Leu Ile Ile Gly

190190

Cys Gly Gly Gly SerCys Gly Gly Gly Ser

195195

Leu Leu Met Val PheLeu Leu Met Val Phe

200200

Val Ala Leu Leu ValVal Ala Leu Leu Val

205205

Tyr Ile Thr Lys ArgTyr Ile Thr Lys Arg

210210

Lys Lys Gln Arg SerLys Lys Gln Arg Ser

215215

Arg Arg Asn Asp Glu 220Arg Arg Asn Asp Glu 220

Leu Glu Thr Arg Ala 225Leu Glu Thr Arg Ala 225

His Arg Val Ala Thr 230His Arg Val Ala Thr 230

Glu Glu Arg Gly Arg 235Glu Glu Arg Gly Arg 235

Pro His Gln Ile ProPro His Gln Ile Pro

245245

Ala Ser Thr Pro GlnAla Ser Thr Pro Gln

250250

Asn Pro Ala Thr SerAsn Pro Ala Thr Ser

255255

His Pro Pro Pro ProHis Pro Pro Pro Pro

260260

Pro Gly His Arg SerPro Gly His Arg Ser

265265

Gln Ala Pro Ser HisGln Ala Pro Ser His

270270

Pro Pro Pro Pro GlyPro Pro Pro Pro Gly

275275

His Arg Val Gln HisHis Arg Val Gln His

280280

Gln Pro Gln Lys ArgGln Pro Gln Lys Arg

285285

LysLys

Ile 80Ile 80

LysLys

SerSer

ThrThr

SerSer

Phe 160Phe 160

ProPro

IleIle

PhePhe

GluGlu

Lys 240Lys 240

GlnGln

ArgArg

ProPro

- 463 044346- 463 044346

Pro Ala Pro Ser Gly Thr Gln ValPro Ala Pro Ser Gly Thr Gln Val

290 295290 295

His Gln Gln Lys Gly Pro Pro 300His Gln Gln Lys Gly Pro Pro 300

Pro Arg Pro Arg Val Gln Pro LysPro Arg Pro Arg Val Gln Pro Lys

305 310305 310

Pro Pro His Gly Ala Ala Glu 315Pro Pro His Gly Ala Ala Glu 315

LeuLeu

Asn 320Asn 320

Ser Leu Ser Pro Ser Ser AsnSer Leu Ser Pro Ser Ser Asn

325 <210> 276 <211> 154 <212> БЕЛОК <213> Homo sapiens <220>325 <210> 276 <211> 154 <212> PROTEIN <213> Homo sapiens <220>

<221> новая или редкая характеристика <223> Зрелый CD160 <400> 276<221> new or rare characteristic <223> Mature CD160 <400> 276

Ile Asn Ile Thr SerIle Asn Ile Thr Ser

55

Ser Ala Ser Gln GluSer Ala Ser Gln Glu

Gly Thr Arg Leu AsnGly Thr Arg Leu Asn

Ile Cys Thr Val Trp 20Ile Cys Thr Val Trp 20

His Lys Lys Glu Glu 25His Lys Lys Glu Glu 25

Ala Glu Gly Phe Val 30Ala Glu Gly Phe Val 30

Phe Leu Cys Lys Asp 35Phe Leu Cys Lys Asp 35

Arg Ser Gly Asp Cys 40Arg Ser Gly Asp Cys 40

Ser Pro Glu Thr SerSer Pro Glu Thr Ser

Lys Gln Leu Arg Leu 50Lys Gln Leu Arg Leu 50

Lys Arg Asp Pro Gly 55Lys Arg Asp Pro Gly 55

Ile Asp Gly Val Gly 60Ile Asp Gly Val Gly 60

Ile Ser Ser Gln Leu 65Ile Ser Ser Gln Leu 65

Met Phe Thr Ile Ser 70Met Phe Thr Ile Ser 70

Gln Val Thr Pro Leu 75Gln Val Thr Pro Leu 75

Ser Gly Thr Tyr Gln 85Ser Gly Thr Tyr Gln 85

Cys Cys Ala Arg Ser 90Cys Cys Ala Arg Ser 90

Gln Lys Ser Gly Ile 95Gln Lys Ser Gly Ile 95

Leu Gln Gly His PheLeu Gln Gly His Phe

100100

Phe Ser Ile Leu PhePhe Ser Ile Leu Phe

105105

Thr Glu Thr Gly AsnThr Glu Thr Gly Asn

110110

Thr Val Thr Gly Leu 115Thr Val Thr Gly Leu 115

Lys Gln Arg Gln His 120Lys Gln Arg Gln His 120

Leu Glu Phe Ser HisLeu Glu Phe Ser His

125125

Glu Gly Thr Leu Ser 130Glu Gly Thr Leu Ser 130

Ser Gly Phe Leu GlnSer Gly Phe Leu Gln

135135

Glu Lys Val Trp Val 140Glu Lys Val Trp Val 140

LeuLeu

ValVal

LeuLeu

GluGlu

His 80His 80

ArgArg

TyrTyr

AsnAsn

MetMet

Leu Val Thr Ser Leu 145Leu Val Thr Ser Leu 145

Val Ala Leu Gln Ala 150Val Ala Leu Gln Ala 150

- 464 044346 <210> 277 < 211> 248 < 212> БЕЛОК < 213> Homo sapiens <220>- 464 044346 <210> 277 <211> 248 <212> PROTEIN <213> Homo sapiens <220>

< 221> новая или редкая характеристика <223> Зрелый CD200 <400> 277<221> new or rare characteristic <223> Mature CD200 <400> 277

Gln Val Gln Val Val Thr Gln Asp 1 5Gln Val Gln Val Val Thr Gln Asp 1 5

Glu Arg Glu Gln Leu Tyr Thr ProGlu Arg Glu Gln Leu Tyr Thr Pro

1515

Ala Ser Leu Lys Cys Ser Leu Gln 20Ala Ser Leu Lys Cys Ser Leu Gln 20

Asn Ala Gln Glu Ala Leu Ile ValAsn Ala Gln Glu Ala Leu Ile Val

30thirty

Thr Trp Gln Lys Lys Lys Ala ValThr Trp Gln Lys Lys Lys Ala Val

4040

Ser Pro Glu Asn Met Val Thr PheSer Pro Glu Asn Met Val Thr Phe

Ser Glu Asn His Gly Val Val IleSer Glu Asn His Gly Val Val Ile

5555

Gln Pro Ala Tyr Lys Asp Lys Ile 60Gln Pro Ala Tyr Lys Asp Lys Ile 60

Asn Ile Thr Gln Leu Gly Leu Gln 65 70Asn Ile Thr Gln Leu Gly Leu Gln 65 70

Asn Ser Thr Ile Thr Phe Trp AsnAsn Ser Thr Ile Thr Phe Trp Asn

8080

Ile Thr Leu Glu Asp Glu Gly Cys 85Ile Thr Leu Glu Asp Glu Gly Cys 85

Tyr Met Cys Leu Phe Asn Thr PheTyr Met Cys Leu Phe Asn Thr Phe

9595

Gly Phe Gly Lys Ile Ser Gly ThrGly Phe Gly Lys Ile Ser Gly Thr

100100

Ala Cys Leu Thr Val Tyr Val GlnAla Cys Leu Thr Val Tyr Val Gln

105 110105 110

Pro Ile Val Ser Leu His Tyr LysPro Ile Val Ser Leu His Tyr Lys

115 120115 120

Phe Ser Glu Asp His Leu Asn IlePhe Ser Glu Asp His Leu Asn Ile

125125

Thr Cys Ser Ala Thr Ala Arg ProThr Cys Ser Ala Thr Ala Arg Pro

130 135130 135

Ala Pro Met Val Phe Trp Lys ValAla Pro Met Val Phe Trp Lys Val

140140

Pro Arg Ser Gly Ile Glu Asn SerPro Arg Ser Gly Ile Glu Asn Ser

145 150145 150

Thr Val Thr Leu Ser His Pro AsnThr Val Thr Leu Ser His Pro Asn

155 160155 160

Gly Thr Thr Ser Val Thr Ser IleGly Thr Thr Ser Val Thr Ser Ile

165165

Leu His Ile Lys Asp Pro Lys AsnLeu His Ile Lys Asp Pro Lys Asn

170 175170 175

Gln Val Gly Lys Glu Val Ile Cys 180Gln Val Gly Lys Glu Val Ile Cys 180

Gln Val Leu His Leu Gly Thr ValGln Val Leu His Leu Gly Thr Val

185 190185 190

Thr Asp Phe Lys Gln Thr Val AsnThr Asp Phe Lys Gln Thr Val Asn

195 200195 200

Lys Gly Tyr Trp Phe Ser Val ProLys Gly Tyr Trp Phe Ser Val Pro

205205

- 465 044346- 465 044346

Leu Leu Leu Ser Ile Val Ser LeuLeu Leu Leu Ser Ile Val Ser Leu

210 215210 215

Val Ile Leu Leu Val Leu IleVal Ile Leu Leu Val Leu Ile

220220

Ile Leu Leu Tyr Trp Lys Arg HisIle Leu Leu Tyr Trp Lys Arg His

225 230225 230

Arg Asn Gln Asp Arg Gly Glu 235Arg Asn Gln Asp Arg Gly Glu 235

SerSer

LeuLeu

240240

Ser Gln Gly Val Gln Lys Met ThrSer Gln Gly Val Gln Lys Met Thr

245 <210> 278 <211> 297 <212> БЕЛОК <213> Homo sapiens <220>245 <210> 278 <211> 297 <212> PROTEIN <213> Homo sapiens <220>

<221> новая или редкая характеристика <223> Зрелый CD200R1(CD200R) <400> 278<221> new or rare characteristic <223> Mature CD200R1(CD200R) <400> 278

Met Asp Glu Lys Gln 1 5Met Asp Glu Lys Gln 1 5

Ile Thr Gln Asn TyrIle Thr Gln Asn Tyr

Ser Lys Val Leu AlaSer Lys Val Leu Ala

Val Asn Thr Ser TrpVal Asn Thr Ser Trp

Pro Val Lys Met AlaPro Val Lys Met Ala

Thr Asn Ala Val LeuThr Asn Ala Val Leu

Cys Pro Pro Ile Ala 35Cys Pro Pro Ile Ala 35

Leu Arg Asn Leu Ile 40Leu Arg Asn Leu Ile 40

Ile Ile Thr Trp Glu 45Ile Ile Thr Trp Glu 45

Ile Leu Arg Gly Gln 50Ile Leu Arg Gly Gln 50

Pro Ser Cys Thr Lys 55Pro Ser Cys Thr Lys 55

Ala Tyr Arg Lys Glu 60Ala Tyr Arg Lys Glu 60

Asn Glu Thr Lys Glu 65Asn Glu Thr Lys Glu 65

Thr Asn Cys Thr Asp 70Thr Asn Cys Thr Asp 70

Glu Arg Ile Thr Trp 75Glu Arg Ile Thr Trp 75

Ser Arg Pro Asp Gln 85Ser Arg Pro Asp Gln 85

Asn Ser Asp Leu Gln 90Asn Ser Asp Leu Gln 90

Ile Arg Pro Val Ala 95Ile Arg Pro Val Ala 95

Thr His Asp Gly TyrThr His Asp Gly Tyr

100100

Tyr Arg Cys Ile MetTyr Arg Cys Ile Met

105105

Val Thr Pro Asp GlyVal Thr Pro Asp Gly

110110

Phe His Arg Gly Tyr 115Phe His Arg Gly Tyr 115

His Leu Gln Val LeuHis Leu Gln Val Leu

120120

Val Thr Pro Glu ValVal Thr Pro Glu Val

125125

Leu Phe Gln Asn Arg 130Leu Phe Gln Asn Arg 130

Asn Arg Thr Ala ValAsn Arg Thr Ala Val

135135

Cys Lys Ala Val Ala 140Cys Lys Ala Val Ala 140

GluGlu

CysCys

IleIle

ThrThr

Val 80Val 80

IleIle

AsnAsn

ThrThr

GlyGly

ThrThr

Lys Pro Ala Ala GlnLys Pro Ala Ala Gln

Ile Ser Trp Ile ProIle Ser Trp Ile Pro

Glu Gly Asp Cys AlaGlu Gly Asp Cys Ala

- 466 044346- 466 044346

145145

150150

155155

160160

Lys Gln Glu Tyr Trp Ser Asn GlyLys Gln Glu Tyr Trp Ser Asn Gly

165165

Thr Val Thr Val Lys Ser Thr CysThr Val Thr Val Lys Ser Thr Cys

170 175170 175

His Trp Glu Val His Asn Val Ser 180His Trp Glu Val His Asn Val Ser 180

Thr Val Thr Cys His Val Ser HisThr Val Thr Cys His Val Ser His

185 190185 190

Leu Thr Gly Asn Lys Ser Leu TyrLeu Thr Gly Asn Lys Ser Leu Tyr

195 200195 200

Ile Glu Leu Leu Pro Val Pro GlyIle Glu Leu Leu Pro Val Pro Gly

205205

Ala Lys Lys Ser Ala Lys Leu TyrAla Lys Lys Ser Ala Lys Leu Tyr

210 215210 215

Ile Pro Tyr Ile Ile Leu Thr IleIle Pro Tyr Ile Ile Leu Thr Ile

220220

Ile Ile Leu Thr Ile Val Gly PheIle Ile Leu Thr Ile Val Gly Phe

225 230225 230

Ile Trp Leu Leu Lys Val Asn GlyIle Trp Leu Leu Lys Val Asn Gly

235 240235 240

Cys Arg Lys Tyr Lys Leu Asn LysCys Arg Lys Tyr Lys Leu Asn Lys

245245

Thr Glu Ser Thr Pro Val Val GluThr Glu Ser Thr Pro Val Val Glu

250 255250 255

Glu Asp Glu Met Gln Pro Tyr AlaGlu Asp Glu Met Gln Pro Tyr Ala

260260

Ser Tyr Thr Glu Lys Asn Asn ProSer Tyr Thr Glu Lys Asn Asn Pro

265 270265 270

Leu Tyr Asp Thr Thr Asn Lys ValLeu Tyr Asp Thr Thr Asn Lys Val

275 280275 280

Lys Ala Ser Glu Ala Leu Gln SerLys Ala Ser Glu Ala Leu Gln Ser

285285

Glu Val Asp Thr Asp Leu His Thr LeuGlu Val Asp Thr Asp Leu His Thr Leu

290295 <210>279 <211>183 <212> БЕЛОК < 213> Homo sapiens <220>290295 <210>279 <211>183 <212> PROTEIN <213> Homo sapiens <220>

< 221> новая или редкая характеристика < 223> Зрелый NC R3 (NKp30) < 400>279<221>new or rare characteristic <223>Mature NC R3 (NKp30) <400>279

Leu Trp Val Ser Gln Pro Pro Glu Ile Arg Thr Leu Glu Gly SerSerLeu Trp Val Ser Gln Pro Pro Glu Ile Arg Thr Leu Glu Gly SerSer

5 10155 1015

Ala Phe Leu Pro Cys Ser Phe Asn Ala Ser Gln Gly Arg Leu AlaIleAla Phe Leu Pro Cys Ser Phe Asn Ala Ser Gln Gly Arg Leu AlaIle

25302530

Gly Ser Val Thr Trp Phe Arg Asp Glu Val Val Pro Gly Lys Glu Val 35 4045Gly Ser Val Thr Trp Phe Arg Asp Glu Val Val Pro Gly Lys Glu Val 35 4045

- 467 044346- 467 044346

Arg Asn Gly Thr Pro Glu 50Arg Asn Gly Thr Pro Glu 50

Phe Arg Gly Arg Leu Ala Pro Leu Ala Ser 55 60Phe Arg Gly Arg Leu Ala Pro Leu Ala Ser 55 60

Ser Arg Phe Leu His Asp 65 70Ser Arg Phe Leu His Asp 65 70

His Gln Ala Glu Leu His Ile Arg Asp Val 75 80His Gln Ala Glu Leu His Ile Arg Asp Val 75 80

Arg Gly His Asp Ala Ser 85Arg Gly His Asp Ala Ser 85

Ile Tyr Val Cys Arg Val Glu Val Leu GlyIle Tyr Val Cys Arg Val Glu Val Leu Gly

9595

Leu Gly Val GlyLeu Gly Val Gly

100100

Thr Gly Asn Gly Thr Arg Leu Val Val GluThr Gly Asn Gly Thr Arg Leu Val Val Glu

105 110105 110

Lys GluLys Glu

His Pro Gln LeuHis Pro Gln Leu

115115

Gly Ala Gly Thr Val Leu Leu Leu Arg AlaGly Ala Gly Thr Val Leu Leu Leu Arg Ala

120 125120 125

Gly PheGly Phe

Tyr Ala Val SerTyr Ala Val Ser

130130

Phe Leu Ser Val Ala Val Gly Ser Thr ValPhe Leu Ser Val Ala Val Gly Ser Thr Val

135 140135 140

Tyr TyrTyr Tyr

Gln Gly Lys Cys 145Gln Gly Lys Cys 145

Leu Thr Trp Lys Gly Pro Arg Arg Gln LeuLeu Thr Trp Lys Gly Pro Arg Arg Gln Leu

150 155150 155

Pro AlaPro Ala

160160

Val Val Pro AlaVal Val Pro Ala

Pro Leu Pro Pro Pro Cys Gly Ser Ser Ala 165 170Pro Leu Pro Pro Pro Cys Gly Ser Ser Ala 165 170

His Leu 175His Leu 175

Leu Pro Pro Val Pro Gly Gly 180 <210> 280 <211> 238 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Leu Pro Pro Val Pro Gly Gly 180 <210> 280 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial Sequence <220>

<223> ICOSL v36 <400> 280<223> ICOSL v36 <400> 280

Asp Thr Gln Glu 1Asp Thr Gln Glu 1

Leu Ser Cys Ala 20Leu Ser Cys Ala 20

Tyr Val Tyr TrpTyr Val Tyr Trp

Ile Pro Gln His 50Ile Pro Gln His 50

ECDECD

Lys Glu Val Arg 5Lys Glu Val Arg 5

Cys Pro Glu GlyCys Pro Glu Gly

Gln Thr Ser Glu 40Gln Thr Ser Glu 40

Ser Ser Leu Glu 55Ser Ser Leu Glu 55

Ser Pro Ala GlySer Pro Ala Gly

Ala Met Val Gly 10Ala Met Val Gly 10

Ser Arg Phe Asp 25Ser Arg Phe Asp 25

Ser Lys Thr ValSer Lys Thr Val

Asn Val Asp Ser 60Asn Val Asp Ser 60

Ser Asp Val Glu 15Ser Asp Val Glu 15

Leu Asn Asp Val 30Leu Asn Asp Val 30

Val Thr Tyr His 45Val Thr Tyr His 45

Arg Tyr Arg AsnArg Tyr Arg Asn

Arg Ala Leu MetArg Ala Leu Met

Met Leu Arg GlyMet Leu Arg Gly

Asp Leu Ser LeuAsp Leu Ser Leu

- 468 044346- 468 044346

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Arg SerVal Leu Ser Arg Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 281 <211> 238 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 281 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v37 ECD <400> 281<223> ICOSL v37 ECD <400> 281

Asp Thr Gln Glu 1Asp Thr Gln Glu 1

Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 5 10 15Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 5 10 15

Leu Ser Cys Ala 20Leu Ser Cys Ala 20

Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp 25 30Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp 25 30

Tyr Val Tyr TrpTyr Val Tyr Trp

Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr TyrGln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr

4545

GluGlu

ValVal

HisHis

- 469 044346- 469 044346

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Arg SerVal Leu Ser Arg Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Asp GluVal Leu Ser Asp Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 282 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 282 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v38 ECD <400> 282<223> ICOSL v38 ECD <400> 282

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp ValAsp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val

5 10 155 10 15

GluGlu

- 470 044346- 470 044346

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Gln Gly Asp Phe Ser 75Gln Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Arg SerVal Leu Ser Arg Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Asp GluVal Leu Ser Asp Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr PheAsp Glu Leu Thr Phe

135135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 283 <211> 238 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 283 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

- 471 044346 <223> ICOSL v39 ECD <400> 283- 471 044346 <223> ICOSL v39 ECD <400> 283

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala Met 10Glu Val Arg Ala Met 10

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Arg SerVal Leu Ser Arg Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235Asn Ala Ala Thr 235

- 472 044346 <210> 284 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>- 472 044346 <210> 284 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v40 ECD <400> 284<223> ICOSL v40 ECD <400> 284

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Gln 70Pro Ala Gly Met Gln 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Arg SerVal Leu Ser Arg Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Asp GluVal Leu Ser Asp Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

- 473 044346- 473 044346

Thr Val Gly Ser Gln Thr Gly AsnThr Val Gly Ser Gln Thr Gly Asn

210 215210 215

Asp Ile GlyAsp Ile Gly

Glu Arg Asp Lys 220Glu Arg Asp Lys 220

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val SerThr Glu Asn Pro Val Ser

225 230225 230

Thr Gly Glu Lys Asn Ala Ala ThrThr Gly Glu Lys Asn Ala Ala Thr

235 <210> 285 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>235 <210> 285 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v41 ECD < 400> 285< 223> ICOSL v41 ECD < 400> 285

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Arg SerVal Leu Ser Arg Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

- 474 044346- 474 044346

180180

185185

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp Lys 220Gly Glu Arg Asp Lys 220

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 286 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 286 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v42 ECD < 400> 286< 223> ICOSL v42 ECD < 400> 286

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala CysLeu Ser Cys Ala Cys

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn AspPhe Asp Leu Asn Asp

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Gly Val 120Ala Asn Phe Gly Val 120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

Asn Lys Thr Asp AsnAsn Lys Thr Asp Asn

155155

- 475 044346- 475 044346

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 287 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 287 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v43 ECD <400>287<223>ICOSL v43 ECD <400>287

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp ValAsp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val

5 10155 1015

Leu Ser Cys Val Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn AspLeu Ser Cys Val Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp

25302530

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 4045Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 4045

Ile Pro Gln His Ser Ser Leu Glu Tyr Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 5560Ile Pro Gln His Ser Ser Leu Glu Tyr Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 5560

Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 65 7075Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 65 7075

Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 85 9095Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 85 9095

Val Leu Ser Arg Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Gly Val GluVal Leu Ser Arg Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Gly Val Glu

100 105110100 105110

Thr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser Val Pro Val Val Ser AlaThr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser Val Pro Val Val Ser Ala

115 120125115 120125

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

- 476 044346- 476 044346

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr PheAsp Glu Leu Thr Phe

135135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 288 <211> 238 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 288 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v44 ECD <400> 288<223> ICOSL v44 ECD <400> 288

Asp Thr Gln Glu LysAsp Thr Gln Glu Lys

55

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

- 477 044346- 477 044346

Val Leu Ser Pro Ser Leu Gly PheVal Leu Ser Pro Ser Leu Gly Phe

100100

Gln Glu Val Leu Ser Val GluGln Glu Val Leu Ser Val Glu

105 110105 110

Thr Leu His Val Ala Ala Asn PheThr Leu His Val Ala Ala Asn Phe

115 120115 120

Ser Val Pro Val Val Ser AlaSer Val Pro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser Gln Asp Glu LeuHis Ser Pro Ser Gln Asp Glu Leu

130 135130 135

Thr Phe Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Phe Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 289 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 289 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v45 ECD <400>289<223>ICOSL v45 ECD <400>289

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 1015Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 1015

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn AspLeu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp

25302530

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 4045Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 4045

Ile Pro Gln His Ser Ser Leu Glu Tyr Val Asp Ser Ser Tyr Arg 50 5560Ile Pro Gln His Ser Ser Leu Glu Tyr Val Asp Ser Ser Tyr Arg 50 5560

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

LeuLeu

Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe SerArg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser

- 478 044346- 478 044346

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Arg SerVal Leu Ser Arg Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Asp GluVal Leu Ser Asp Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Ser Asn MetVal Phe Ser Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 290 <211> 238 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 290 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v46 ECD <400> 290<223> ICOSL v46 ECD <400> 290

Asp Thr Gln Glu 1Asp Thr Gln Glu 1

Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 5 10 15Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 5 10 15

Leu Ser Cys Ala 20Leu Ser Cys Ala 20

Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp 25 30Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp 25 30

Tyr Val Tyr TrpTyr Val Tyr Trp

Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr TyrGln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr

4545

GluGlu

ValVal

HisHis

- 479 044346- 479 044346

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Arg SerVal Leu Ser Arg Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser AlaAla Asn Phe Ser Ala

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 291 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 291 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v47 ECD < 400> 291< 223> ICOSL v47 ECD < 400> 291

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15

GluGlu

- 480 044346- 480 044346

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Arg SerVal Leu Ser Arg Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr PheAsp Glu Leu Thr Phe

135135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Ser Leu Asn MetVal Ser Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 292 <211> 238 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 292 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

- 481 044346 <223> ICOSL v48 ECD <400> 292- 481 044346 <223> ICOSL v48 ECD <400> 292

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala Met 10Glu Val Arg Ala Met 10

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235Asn Ala Ala Thr 235

- 482 044346 <210> 293 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>- 482 044346 <210> 293 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v49 ECD <400> 293<223> ICOSL v49 ECD <400> 293

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Ser Ser 50Ile Pro Gln Ser Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Ser Ser ValAla Asn Ser Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

- 483 044346- 483 044346

Thr Val Gly Ser Gln Thr Gly AsnThr Val Gly Ser Gln Thr Gly Asn

210 215210 215

Asp Ile GlyAsp Ile Gly

Glu Arg Asp Lys 220Glu Arg Asp Lys 220

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val SerThr Glu Asn Pro Val Ser

225 230225 230

Thr Gly Glu Lys Asn Ala Ala ThrThr Gly Glu Lys Asn Ala Ala Thr

235 <210> 294 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>235 <210> 294 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v50 ECD < 400> 294< 223> ICOSL v50 ECD < 400> 294

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Ser Ser 50Ile Pro Gln Ser Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Ala Leu Ser Gln SerAla Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

- 484 044346- 484 044346

180180

185185

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp Lys 220Gly Glu Arg Asp Lys 220

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 295 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 295 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v51 ECD < 400> 295< 223> ICOSL v51 ECD < 400> 295

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala CysLeu Ser Cys Ala Cys

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn AspPhe Asp Leu Asn Asp

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Ser Ser 50Ile Pro Gln Ser Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Arg Met Leu 70Pro Ala Arg Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

Asn Lys Thr Asp AsnAsn Lys Thr Asp Asn

155155

- 485 044346- 485 044346

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 296 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 296 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v52 ECD <400>296<223>ICOSL v52 ECD <400>296

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 1015Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 1015

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn AspLeu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp

25302530

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 4045Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 4045

Ile Pro Gln Ser Ser Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 5560Ile Pro Gln Ser Ser Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 5560

Arg Ala Leu Met Ser Pro Thr Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 65 7075Arg Ala Leu Met Ser Pro Thr Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 65 7075

Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 85 9095Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 85 9095

Val Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu

100 105110100 105110

Thr Leu His Val Thr Ala Asn Phe Ser Val Pro Val Val Ser AlaThr Leu His Val Thr Ala Asn Phe Ser Val Pro Val Val Ser Ala

115 120125115 120125

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

- 486 044346- 486 044346

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr PheAsp Glu Leu Thr Phe

135135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 297 <211> 238 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 297 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v53 ECD <400> 297<223> ICOSL v53 ECD <400> 297

Asp Thr Gln Glu LysAsp Thr Gln Glu Lys

55

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Ser Ser 50Ile Pro Gln Ser Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

- 487 044346- 487 044346

Val Leu Ser Gln Ser Leu Gly PheVal Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe

100100

Gln Glu Val Leu Ser Val GluGln Glu Val Leu Ser Val Glu

105 110105 110

Thr Leu His Val Ala Ala Asn PheThr Leu His Val Ala Ala Asn Phe

115 120115 120

Ser Val Pro Val Val Ser AlaSer Val Pro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser Gln Asp Glu LeuHis Ser Pro Ser Gln Asp Glu Leu

130 135130 135

Thr Phe Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Phe Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Gly Arg Asp LysGly Gly Arg Asp Lys

220220

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 298 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 298 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v54 ECD <400>298<223>ICOSL v54 ECD <400>298

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 1015Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 1015

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn AspLeu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp

25302530

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr His 35 4045Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr His 35 4045

Ile Pro Gln Ser Ser Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 5560Ile Pro Gln Ser Ser Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 5560

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

LeuLeu

Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe SerArg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser

- 488 044346- 488 044346

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Ala Leu Ser Val GluAla Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Ser Ser ValAla Asn Ser Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 299 <211> 238 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 299 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v55 ECD <400> 299<223> ICOSL v55 ECD <400> 299

Asp Thr Gln Glu 1Asp Thr Gln Glu 1

Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 5 10 15Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 5 10 15

Leu Ser Cys Ala 20Leu Ser Cys Ala 20

Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp 25 30Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp 25 30

Tyr Val Tyr TrpTyr Val Tyr Trp

Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr TyrGln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr

4545

GluGlu

ValVal

HisHis

- 489 044346- 489 044346

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Arg SerVal Leu Ser Arg Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Asp GluVal Leu Ser Asp Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Phe GlnHis Ser Pro Phe Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn ThrVal Phe Leu Asn Thr

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 300 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 300 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v56 ECD <400> 300<223> ICOSL v56 ECD <400> 300

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp ValAsp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val

5 10 155 10 15

ValVal

- 490 044346- 490 044346

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Arg SerVal Leu Ser Arg Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Asp GluVal Leu Ser Asp Glu

110110

Thr Leu Arg Val Ala 115Thr Leu Arg Val Ala 115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr PheAsp Glu Leu Thr Phe

135135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Cys Trp Ile 150Asn Val Cys Trp Ile 150

Asn Met Thr Asp Asn 155Asn Met Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Arg Ile Glu Asn Val 200Arg Ile Glu Asn Val 200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 301 <211> 238 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 301 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

- 491 044346 <223> ICOSL v57 ECD <400> 301- 491 044346 <223> ICOSL v57 ECD <400> 301

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala Met 10Glu Val Arg Ala Met 10

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Arg 35Tyr Val Tyr Trp Arg 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Arg SerVal Leu Ser Arg Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Asn GluVal Leu Ser Asn Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Phe Ile 140Thr Cys Thr Phe Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Arg Ile Glu Asn Val 200Arg Ile Glu Asn Val 200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Val IleThr Gly Asn Val Ile

215215

Gly Glu Gly Asp LysGly Glu Gly Asp Lys

220220

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235Asn Ala Ala Thr 235

- 492 044346 <210> 302 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>- 492 044346 <210> 302 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v58 ECD <400> 302<223> ICOSL v58 ECD <400> 302

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Arg SerVal Leu Ser Arg Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Asp GluVal Leu Ser Asp Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Arg Ile Glu Asn Val 200Arg Ile Glu Asn Val 200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

- 493 044346- 493 044346

Thr Val Gly Ser Gln Thr Gly AsnThr Val Gly Ser Gln Thr Gly Asn

210 215210 215

Asp Ile GlyAsp Ile Gly

Glu Arg Asp Lys 220Glu Arg Asp Lys 220

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val SerThr Glu Asn Pro Val Ser

225 230225 230

Thr Gly Glu Lys Asn Ala Ala ThrThr Gly Glu Lys Asn Ala Ala Thr

235 <210> 303 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>235 <210> 303 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v59 ECD < 400> 303< 223> ICOSL v59 ECD < 400> 303

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Arg SerVal Leu Ser Arg Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Asp GluVal Leu Ser Asp Glu

110110

Thr Leu His Ala AlaThr Leu His Ala Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Met Leu Asp Gln AlaMet Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Ser Leu Asn MetVal Ser Leu Asn Met

175175

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

GlyGly

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

- 494 044346- 494 044346

180180

185185

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Arg Ile Glu Asn Val 200Arg Ile Glu Asn Val 200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp Lys 220Gly Glu Arg Asp Lys 220

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 304 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 304 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v60 ECD < 400> 304< 223> ICOSL v60 ECD < 400> 304

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala CysLeu Ser Cys Ala Cys

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Ser Asp Leu Asn Asp 30Ser Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Asn GluVal Leu Ser Asn Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

Asn Lys Thr Asp AsnAsn Lys Thr Asp Asn

155155

- 495 044346- 495 044346

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 305 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 305 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v61 ECD <400>305<223> ICOSL v61 ECD <400>305

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 1015Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 1015

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn AspLeu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp

25302530

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 4045Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 4045

Ile Pro Gln Ser Ser Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 5560Ile Pro Gln Ser Ser Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 5560

Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 65 7075Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 65 7075

Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe Glu Cys 85 9095Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe Glu Cys 85 9095

Val Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Asn Val GluVal Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Asn Val Glu

100 105110100 105110

Thr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser Val Pro Val Val Ser AlaThr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser Val Pro Val Val Ser Ala

115 120125115 120125

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

IleIle

ValVal

ProPro

- 496 044346- 496 044346

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr PheAsp Glu Leu Thr Phe

135135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Gln Gln Asn Asp ThrGln Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 306 <211> 238 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 306 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v62 ECD <400> 306<223> ICOSL v62 ECD <400> 306

Asp Thr Gln Glu LysAsp Thr Gln Glu Lys

55

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Arg Cys Ala Cys 20Leu Arg Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Ser Ser 50Ile Pro Gln Ser Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Leu His Cys 95Gln Lys Leu His Cys 95

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

- 497 044346- 497 044346

Val Leu Ser Gln Ser Leu Gly PheVal Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe

100100

Gln Glu Val Leu Ser Val GluGln Glu Val Leu Ser Val Glu

105 110105 110

Thr Leu His Val Ala Ala Asn PheThr Leu His Val Ala Ala Asn Phe

115 120115 120

Ser Val Pro Val Val Ser AlaSer Val Pro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser Gln Asp Glu LeuHis Ser Pro Ser Gln Asp Glu Leu

130 135130 135

Thr Phe Thr Cys Thr Ser ValThr Phe Thr Cys Thr Ser Val

140140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Gly Asp LysGly Glu Gly Asp Lys

220220

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 307 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 307 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v63 ECD <400>307<223>ICOSL v63 ECD <400>307

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 1015Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 1015

Leu Ser Cys Thr Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn AspLeu Ser Cys Thr Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp

25302530

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 4045Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 4045

Ile Pro Gln Asp Ser Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 5560Ile Pro Gln Asp Ser Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 5560

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

LeuLeu

Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe SerArg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser

- 498 044346- 498 044346

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Cys Pro Arg Pro 145Gly Cys Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Leu AlaLeu Leu Asp Leu Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 308 <211> 238 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 308 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v64 ECD <400> 308<223> ICOSL v64 ECD <400> 308

Asp Thr Gln Glu 1Asp Thr Gln Glu 1

Lys Glu Val Arg Ala Met Glu Gly Ser Asp Val 5 10 15Lys Glu Val Arg Ala Met Glu Gly Ser Asp Val 5 10 15

Leu Ser Cys Ala 20Leu Ser Cys Ala 20

Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asp Asp 25 30Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asp Asp 25 30

Tyr Val Tyr TrpTyr Val Tyr Trp

Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr TyrGln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr

4545

GluGlu

ValVal

HisHis

- 499 044346- 499 044346

Ile Pro GlnIle Pro Gln

His Ser SerHis Ser Ser

Leu Glu Tyr 55Leu Glu Tyr 55

Val Asp SerVal Asp Ser

Arg Tyr ArgArg Tyr Arg

Arg Ala Leu 65Arg Ala Leu 65

Met Ser ProMet Ser Pro

Ala Gly MetAla Gly Met

Leu Arg GlyLeu Arg Gly

Asp Phe SerAsp Phe Ser

Arg Leu PheArg Leu Phe

Asn Val ThrAsn Val Thr

Pro Gln AspPro Gln Asp

Glu Gln Lys 90Glu Gln Lys 90

Phe Glu Cys 95Phe Glu Cys 95

Val Phe SerVal Phe Ser

Gln Ser Leu 100Gln Ser Leu 100

Gly Phe GlnGly Phe Gln

105105

Glu Val LeuGlu Val Leu

Ser Val GluSer Val Glu

110110

Thr Leu HisThr Leu His

115115

Val Ala AlaVal Ala Ala

Asn Phe SerAsn Phe Ser

120120

Val Pro ValVal Pro Val

Val Ser Ala 125Val Ser Ala 125

His Ser ProHis Ser Pro

130130

Ser Gln AspSer Gln Asp

Glu Leu Thr 135Glu Leu Thr 135

Phe Thr CysPhe Thr Cys

140140

Thr Ser IleThr Ser Ile

Gly Tyr Pro 145Gly Tyr Pro 145

Arg Pro AsnArg Pro Asn

150150

Val Tyr TrpVal Tyr Trp

Ile Asn LysIle Asn Lys

155155

Thr Asp AsnThr Asp Asn

Leu Leu AspLeu Leu Asp

Gln Ala LeuGln Ala Leu

165165

Gln Asn AspGln Asn Asp

Thr Val Phe 170Thr Val Phe 170

Leu Asn MetLeu Asn Met

175175

Gly Leu TyrGly Leu Tyr

Asp Val Val 180Asp Val Val 180

Ser Val LeuSer Val Leu

185185

Arg Ile AlaArg Ile Ala

Arg Thr ProArg Thr Pro

190190

Val Asp IleVal Asp Ile

195195

Gly Cys CysGly Cys Cys

Ile Glu AsnIle Glu Asn

200200

Val Leu LeuVal Leu Leu

Gln Gln Asn 205Gln Gln Asn 205

Thr Ala GlyThr Ala Gly

210210

Ser Gln ThrSer Gln Thr

Gly Asn Asp 215Gly Asn Asp 215

Thr Gly GluThr Gly Glu

220220

Arg Asp LysArg Asp Lys

AsnAsn

Leu 80Leu 80

IleIle

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn 225Thr Glu Asn 225

Pro Val SerPro Val Ser

230230

Thr Gly GluThr Gly Glu

Lys Asn AlaLys Asn Ala

235235

Ala Thr <210> 309 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Ala Thr <210> 309 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v65 ECD < 400> 309< 223> ICOSL v65 ECD < 400> 309

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15

GluGlu

- 500 044346- 500 044346

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Ser Ser 50Ile Pro Gln Ser Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe Glu Cys 95Gln Lys Phe Glu Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser MetAla Asn Phe Ser Met

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr PheAsp Glu Leu Thr Phe

135135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

IleIle

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 310 <211> 238 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 310 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

- 501 044346 <223> ICOSL v66 ECD <400> 310- 501 044346 <223> ICOSL v66 ECD <400> 310

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala Met 10Glu Val Arg Ala Met 10

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe Glu Cys 95Gln Lys Phe Glu Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Ile Ser ValAla Asn Ile Ser Val

120120

Pro Val Val Thr AlaPro Val Val Thr Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Arg Ile 150Asn Val Tyr Arg Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp AsnThr Gly Asn Asp Asn

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

IleIle

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235Asn Ala Ala Thr 235

- 502 044346 <210> 311 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>- 502 044346 <210> 311 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v67 ECD <400> 311<223> ICOSL v67 ECD <400> 311

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala ValGlu Val Arg Ala Val

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Arg Cys Ala Cys 20Leu Arg Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asp Asp 30Phe Asp Leu Asp Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Ser Ser 50Ile Pro Gln Ser Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Arg AlaPro Val Val Arg Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Ser Cys Thr Ser Ile 140Ser Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Phe Leu Gln Gln AsnPhe Leu Gln Gln Asn

205205

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

- 503 044346- 503 044346

Thr Val Gly Ser Gln Thr Gly AsnThr Val Gly Ser Gln Thr Gly Asn

210 215210 215

Asp Ile GlyAsp Ile Gly

Glu Arg Asp Lys 220Glu Arg Asp Lys 220

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val SerThr Glu Asn Pro Val Ser

225 230225 230

Thr Gly Glu Lys Asn Ala Ala ThrThr Gly Glu Lys Asn Ala Ala Thr

235 <210> 312 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>235 <210> 312 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v68 ECD < 400> 312< 223> ICOSL v68 ECD < 400> 312

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Gly ArgPro Glu Gly Gly Arg

Phe Asp Leu Asp Asp 30Phe Asp Leu Asp Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Ser Ser 50Ile Pro Gln Ser Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Ser Ser ValAla Asn Ser Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

- 504 044346- 504 044346

180 185 190180 185 190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn Val Leu Leu Gln Gln AsnCys Ile Glu Asn Val Leu Leu Gln Gln Asn

200 205200 205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp Ile Gly Glu Arg Asp LysThr Gly Asn Asp Ile Gly Glu Arg Asp Lys

215 220215 220

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Lys Pro Val 225Thr Glu Lys Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys Asn Ala Ala ThrSer Thr Gly Glu Lys Asn Ala Ala Thr

230 235 <210> 313 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>230 235 <210> 313 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v69 ECD < 400> 313< 223> ICOSL v69 ECD < 400> 313

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala CysLeu Ser Cys Ala Cys

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asp AspPhe Asp Leu Asp Asp

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Ser Ser 50Ile Pro Gln Ser Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Pro Met Ser 65Arg Ala Pro Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Lys SerVal Leu Ser Lys Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

Asn Lys Thr Asp AsnAsn Lys Thr Asp Asn

155155

- 505 044346- 505 044346

Leu Leu Asp Gln Ala Leu Gln Asn 165Leu Leu Asp Gln Ala Leu Gln Asn 165

Gly Leu Tyr Asp Val Val Ser Val 180Gly Leu Tyr Asp Val Val Ser Val 180

Asp Thr Val Phe Leu Asn Met ArgAsp Thr Val Phe Leu Asn Met Arg

170 175170 175

Leu Arg Ile Ala Arg Thr Pro SerLeu Arg Ile Ala Arg Thr Pro Ser

185 190185 190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn Val Leu Leu Gln Gln Asn LeuCys Ile Glu Asn Val Leu Leu Gln Gln Asn Leu

200 205200 205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Gly Ile Gly Glu Lys Asp Lys IleThr Gly Asn Gly Ile Gly Glu Lys Asp Lys Ile

215 220215 220

Ser Glu Asn Pro Val 225Ser Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys Asn Ala Ala ThrSer Thr Gly Glu Lys Asn Ala Ala Thr

230 235 <210> 314 <211> 238 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>230 235 <210> 314 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v70 ECD <400> 314<223> ICOSL v70 ECD <400> 314

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val Glu 1 5 10 15Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val Glu 1 5 10 15

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp Val 20 25 30Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp Val 20 25 30

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr His 35 40 45Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr His 35 40 45

Ile Pro Gln His Ser Ser Leu Glu Tyr Val Asp Ser Arg Tyr Arg Asn 50 55 60Ile Pro Gln His Ser Ser Leu Glu Tyr Val Asp Ser Arg Tyr Arg Asn 50 55 60

Arg Ala 65Arg Ala 65

Arg LeuArg Leu

Val LeuVal Leu

Thr LeuThr Leu

Leu Leu Met Met Ser Ser Pro 70 Pro 70 Ala Ala Gly Gly Met Met Leu Leu Arg 75 Arg 75 Gly Gly Asp Asp Phe Phe Ser Ser Leu 80 Leu 80 Phe Phe Asn Asn Val Val Thr Thr Pro Pro Gln Gln Asp Asp Glu Glu Gln Gln Lys Lys Phe Phe His His Cys Cys Leu Leu 85 85 90 90 95 95 Ser Ser Arg Arg Ser Ser Leu Leu Gly Gly Phe Phe Gln Gln Glu Glu Val Val Leu Leu Ser Ser Asp Asp Glu Glu Val Val 100 100 105 105 110 110 His His Val Val Thr Thr Ala Ala Asn Asn Phe Phe Ser Ser Val Val Pro Pro Val Val Val Val Ser Ser Ala Ala Pro Pro 115 115 120 120 125 125

- 506 044346- 506 044346

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr PheAsp Glu Leu Thr Phe

135135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Ser ProIle Ala Arg Ser Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Arg Ile Glu Asn Val 200Arg Ile Glu Asn Val 200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 315 <211> 238 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 315 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v71 ECD <400> 315<223> ICOSL v71 ECD <400> 315

Asp Thr Gln Glu LysAsp Thr Gln Glu Lys

55

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

- 507 044346- 507 044346

Val Leu Ser Arg Ser Leu Gly PheVal Leu Ser Arg Ser Leu Gly Phe

100100

Gln Glu Val Leu Ser Asp GluGln Glu Val Leu Ser Asp Glu

105 110105 110

Thr Leu His Val Ala Ala Asn PheThr Leu His Val Ala Ala Asn Phe

115 120115 120

Ser Val Pro Val Val Ser AlaSer Val Pro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser Gln Asp Glu LeuHis Ser Pro Ser Gln Asp Glu Leu

130 135130 135

Thr Phe Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Phe Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Ser Leu Asn MetVal Ser Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Arg Ile Glu Asn Val 200Arg Ile Glu Asn Val 200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 316 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 316 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v72 ECD <400>316<223>ICOSL v72 ECD <400>316

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp ValAsp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val

5 10155 1015

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Gly Arg Cys Asp Leu Asn AspLeu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Gly Arg Cys Asp Leu Asn Asp

25302530

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 4045Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 4045

Ile Pro Gln His Ser Ser Leu Glu Tyr Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 5560Ile Pro Gln His Ser Ser Leu Glu Tyr Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 5560

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

LeuLeu

Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe SerArg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser

- 508 044346- 508 044346

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Arg SerVal Leu Ser Arg Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Asp GluVal Leu Ser Asp Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Lys Leu Thr Phe 135Asp Lys Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Ser Asn MetVal Phe Ser Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Arg Ile Glu Asn Val 200Arg Ile Glu Asn Val 200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 317 <211> 238 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 317 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v73 ECD <400> 317<223> ICOSL v73 ECD <400> 317

Asp Thr Gln Glu 1Asp Thr Gln Glu 1

Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 5 10 15Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 5 10 15

Leu Ser Cys Ala 20Leu Ser Cys Ala 20

Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp 25 30Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp 25 30

Tyr Val Tyr TrpTyr Val Tyr Trp

Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr TyrGln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr

4545

GluGlu

ValVal

HisHis

- 509 044346- 509 044346

Ile Pro GlnIle Pro Gln

His Ser SerHis Ser Ser

Leu Glu Tyr 55Leu Glu Tyr 55

Val Asp SerVal Asp Ser

Arg Tyr ArgArg Tyr Arg

Arg Ala Leu 65Arg Ala Leu 65

Met Ser ProMet Ser Pro

Ala Gly MetAla Gly Met

Leu Arg GlyLeu Arg Gly

Asp Phe SerAsp Phe Ser

Arg Leu PheArg Leu Phe

Asn Val ThrAsn Val Thr

Pro Gln AspPro Gln Asp

Glu Gln Lys 90Glu Gln Lys 90

Phe His CysPhe His Cys

Val Leu SerVal Leu Ser

Gln Ser Leu 100Gln Ser Leu 100

Gly Phe GlnGly Phe Gln

105105

Glu Val LeuGlu Val Leu

Ser Ala GluSer Ala Glu

110110

Thr Leu HisThr Leu His

115115

Val Ala AlaVal Ala Ala

Asn Phe SerAsn Phe Ser

120120

Val Pro ValVal Pro Val

Val Ser Ala 125Val Ser Ala 125

His Ser ProHis Ser Pro

130130

Ser Gln AspSer Gln Asp

Glu Leu Thr 135Glu Leu Thr 135

Phe Thr CysPhe Thr Cys

140140

Thr Ser IleThr Ser Ile

Gly Tyr Pro 145Gly Tyr Pro 145

Arg Pro AsnArg Pro Asn

150150

Val Tyr TrpVal Tyr Trp

Ile Asn LysIle Asn Lys

155155

Thr Asp AsnThr Asp Asn

Leu Leu AspLeu Leu Asp

Gln Ala LeuGln Ala Leu

165165

Gln Asn AspGln Asn Asp

Thr Val Phe 170Thr Val Phe 170

Leu Asn MetLeu Asn Met

175175

Gly Leu TyrGly Leu Tyr

Asp Val Val 180Asp Val Val 180

Ser Val LeuSer Val Leu

185185

Arg Ile AlaArg Ile Ala

Arg Thr ProArg Thr Pro

190190

Val Asn IleVal Asn Ile

195195

Gly Cys ArgGly Cys Arg

Ile Glu AsnIle Glu Asn

200200

Val Leu LeuVal Leu Leu

Gln Gln Asn 205Gln Gln Asn 205

Thr Val GlyThr Val Gly

210210

Ser Gln ThrSer Gln Thr

Gly Asn Asp 215Gly Asn Asp 215

Ile Gly GluIle Gly Glu

220220

Ile Asp LysIle Asp Lys

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn 225Thr Glu Asn 225

Pro Val SerPro Val Ser

230230

Thr Gly GluThr Gly Glu

Lys Asn AlaLys Asn Ala

235235

Ala Thr <210> 318 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Ala Thr <210> 318 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v74 ECD <400> 318<223> ICOSL v74 ECD <400> 318

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Ile Val Gly Gly Asp Val 1 5 10 15Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Ile Val Gly Gly Asp Val 1 5 10 15

GluGlu

- 510 044346- 510 044346

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Gly Phe Ser 75Arg Gly Gly Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Ala GluVal Leu Ser Ala Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

Pro Ser Pro Ser GlnPro Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr PheAsp Glu Leu Thr Phe

135135

Thr Cys Thr Ser ValThr Cys Thr Ser Val

140140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Ser Leu Asn MetVal Ser Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Met Asn Ile Gly Cys 195Met Asn Ile Gly Cys 195

Arg Ile Glu Asn Val 200Arg Ile Glu Asn Val 200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 319 <211> 238 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 319 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

- 511 044346 <223> ICOSL v75 ECD <400> 319- 511 044346 <223> ICOSL v75 ECD <400> 319

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala Met 10Glu Val Arg Ala Met 10

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Asp Ser Cys Phe Arg 60Asp Ser Cys Phe Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Arg SerVal Leu Ser Arg Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Asn GluVal Leu Ser Asn Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Ser Ser ValAla Asn Ser Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Arg Ile Glu Asn Val 200Arg Ile Glu Asn Val 200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235Asn Ala Ala Thr 235

- 512 044346 <210> 320 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>- 512 044346 <210> 320 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v76 ECD <400> 320<223> ICOSL v76 ECD <400> 320

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Arg SerVal Leu Ser Arg Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Asp GluVal Leu Ser Asp Glu

110110

Thr Leu Arg Val Ala 115Thr Leu Arg Val Ala 115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Arg Ile Glu Asn Val 200Arg Ile Glu Asn Val 200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

- 513 044346- 513 044346

Thr Val Gly Ser Gln Thr Gly AsnThr Val Gly Ser Gln Thr Gly Asn

210 215210 215

Asp Ile GlyAsp Ile Gly

Glu Arg Asp Lys 220Glu Arg Asp Lys 220

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val SerThr Glu Asn Pro Val Ser

225 230225 230

Thr Gly Glu Lys Asn Ala Ala ThrThr Gly Glu Lys Asn Ala Ala Thr

235 <210> 321 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>235 <210> 321 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v77 ECD < 400> 321< 223> ICOSL v77 ECD < 400> 321

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Arg SerVal Leu Ser Arg Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Asp GluVal Leu Ser Asp Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Ser Leu Asn MetVal Ser Leu Asn Met

175175

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AspAsp

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

- 514 044346- 514 044346

180180

185185

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Arg Ile Glu Asn Val 200Arg Ile Glu Asn Val 200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp Lys 220Gly Glu Arg Asp Lys 220

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 322 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 322 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v78 ECD < 400> 322< 223> ICOSL v78 ECD < 400> 322

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala CysLeu Ser Cys Ala Cys

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn AspPhe Asp Leu Asn Asp

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Ser Ser 50Ile Pro Gln Ser Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe Glu Cys 95Gln Lys Phe Glu Cys 95

Val Phe Ser Arg SerVal Phe Ser Arg Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

Asn Lys Thr Asp AsnAsn Lys Thr Asp Asn

155155

- 515 044346- 515 044346

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 323 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 323 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v79 ECD <400>323<223> ICOSL v79 ECD <400>323

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp ValAsp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val

5 10155 1015

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn AspLeu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp

25302530

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 4045Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 4045

Ile Pro Gln Ser Ser Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 5560Ile Pro Gln Ser Ser Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 5560

Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 65 7075Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 65 7075

Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Ala Gln Lys Phe His Cys 85 9095Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Ala Gln Lys Phe His Cys 85 9095

Val Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu

100 105110100 105110

Thr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser Val Pro Val Val Ser AlaThr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser Val Pro Val Val Ser Ala

115 120125115 120125

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

- 516 044346- 516 044346

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr PheAsp Glu Leu Thr Phe

135135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 324 <211> 238 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 324 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v80 ECD <400> 324<223> ICOSL v80 ECD <400> 324

Asp Thr Gln Glu LysAsp Thr Gln Glu Lys

55

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asp Asp 30Phe Asp Leu Asp Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser GluThr Ser Glu Ser Glu

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Ser Ser 50Ile Pro Gln Ser Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

- 517 044346- 517 044346

Val Leu Ser Gln Ser Leu Gly PheVal Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe

100100

Gln Glu Val Leu Ser Val GluGln Glu Val Leu Ser Val Glu

105 110105 110

Thr Leu His Val Ala Ala Asn PheThr Leu His Val Ala Ala Asn Phe

115 120115 120

Ser Val Pro Val Val Ser AlaSer Val Pro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser Gln Asp Glu LeuHis Ser Pro Ser Gln Asp Glu Leu

130 135130 135

Thr Phe Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Phe Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 325 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 325 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v81 ECD <400>325<223> ICOSL v81 ECD <400>325

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp ValAsp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val

5 10155 1015

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn AspLeu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp

25302530

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 4045Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 4045

Ile Pro Gln Ser Ser Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 5560Ile Pro Gln Ser Ser Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 5560

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

LeuLeu

Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe SerArg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser

- 518 044346- 518 044346

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Ser Ser ValAla Asn Ser Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Val 140Thr Cys Thr Ser Val 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

ValVal

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 326 <211> 111 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 326 <211> 111 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v36 IgV <400> 326<223> ICOSL v36 IgV <400> 326

Asp Thr Gln Glu 1Asp Thr Gln Glu 1

Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 5 10 15Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 5 10 15

Leu Ser Cys Ala 20Leu Ser Cys Ala 20

Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp 25 30Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp 25 30

Tyr Val Tyr TrpTyr Val Tyr Trp

Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr TyrGln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr

4545

GluGlu

ValVal

HisHis

- 519 044346- 519 044346

Ile Pro Gln His Ser Ser Leu Glu Asn Val AspIle Pro Gln His Ser Ser Leu Glu Asn Val Asp

5555

Ser Arg Tyr Arg 60Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg 65 70 75Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg 65 70 75

Gly Asp Leu SerGly Asp Leu Ser

Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln 85 90Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln 85 90

Lys Phe His Cys 95Lys Phe His Cys 95

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

Val Leu Ser Arg Ser Leu Gly Phe Gln Glu ValVal Leu Ser Arg Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val

100105100105

Leu Ser Val GluLeu Ser Val Glu

110 <210>327 <211>111 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>110 <210>327 <211>111 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v37 IgV <400> 327<223> ICOSL v37 IgV <400> 327

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

Val Leu Ser Arg SerVal Leu Ser Arg Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Asp GluVal Leu Ser Asp Glu

110 <210> 328 <211> 111 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>110 <210> 328 <211> 111 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v38 IgV<223> ICOSL v38 IgV

- 520 044346 <400> 328- 520 044346 <400> 328

AspAsp

ThrThr

GlnGln

GluGlu

Lys 5Lys 5

GluGlu

ValVal

ArgArg

AlaAla

Met 10Met 10

ValVal

GlyGly

SerSer

AspAsp

Val 15Val 15

LeuLeu

SerSer

CysCys

Ala 20Ala 20

CysCys

ProPro

GluGlu

GlyGly

Ser 25Ser 25

ArgArg

PhePhe

AspAsp

LeuLeu

Asn 30Asn 30

AspAsp

TyrTyr

ValVal

Tyr 35Tyr 35

TrpTrp

GlnGln

ThrThr

SerSer

Glu 40Glu 40

SerSer

LysLys

ThrThr

ValVal

Val 45Val 45

ThrThr

TyrTyr

IleIle

Pro 50Pro 50

GlnGln

HisHis

SerSer

SerSer

Leu 55Leu 55

GluGlu

TyrTyr

ValVal

AspAsp

Ser 60Ser 60

ArgArg

TyrTyr

ArgArg

Arg 65Arg 65

AlaAla

LeuLeu

MetMet

SerSer

Pro 70Pro 70

AlaAla

GlyGly

MetMet

LeuLeu

Gln 75Gln 75

GlyGly

AspAsp

PhePhe

SerSer

ArgArg

LeuLeu

PhePhe

AsnAsn

Val 85Val 85

ThrThr

ProPro

GlnGln

AspAsp

Glu 90Glu 90

GlnGln

LysLys

PhePhe

HisHis

Cys 95Cys 95

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

LeuLeu

SerSer

Arg 100Arg 100

SerSer

LeuLeu

GlyGly

PhePhe

GlnGln

105105

GluGlu

ValVal

LeuLeu

SerSer

AspAsp

110110

Glu <210> 329 <211> 111 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Glu <210> 329 <211> 111 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v39 IgV < 400> 329< 223> ICOSL v39 IgV < 400> 329

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

- 521 044346- 521 044346

Val Leu Ser Arg Ser Leu Gly Phe Gln Glu ValVal Leu Ser Arg Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val

100100

Leu Ser Val GluLeu Ser Val Glu

110110

105 <210> 330 <211> 111 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>105 <210> 330 <211> 111 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v40 IgV <400> 330<223> ICOSL v40 IgV <400> 330

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Gln 70Pro Ala Gly Met Gln 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

Val Leu Ser Arg SerVal Leu Ser Arg Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Asp GluVal Leu Ser Asp Glu

110 <210> 331 <211> 111 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>110 <210> 331 <211> 111 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v41 IgV<223> ICOSL v41 IgV

<400> <400> 331 331 Asp Thr 1 Asp Thr 1 Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 5 10 15 Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 5 10 15 Leu Ser Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp 20 25 30 Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp 20 25 30 Tyr Val Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr

GluGlu

ValVal

HisHis

- 522 044346- 522 044346

Ile Pro Gln 50Ile Pro Gln 50

Arg Ala Leu 65Arg Ala Leu 65

Arg Leu PheArg Leu Phe

Val Leu SerVal Leu Ser

His Ser SerHis Ser Ser

Met Ser ProMet Ser Pro

Asn Val ThrAsn Val Thr

Arg Ser Leu 100Arg Ser Leu 100

Leu Glu Asn 55Leu Glu Asn 55

Ala Gly MetAla Gly Met

Pro Gln AspPro Gln Asp

Gly Phe GlnGly Phe Gln

105105

Val Asp SerVal Asp Ser

Leu Arg GlyLeu Arg Gly

Glu Gln Lys 90Glu Gln Lys 90

Glu Val Leu <210> 332 <211> 111 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Glu Val Leu <210> 332 <211> 111 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v43 IgV < 400> 332< 223> ICOSL v43 IgV < 400> 332

Asp Thr Gln Glu LysAsp Thr Gln Glu Lys

55

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Arg Tyr ArgArg Tyr Arg

Asp Phe SerAsp Phe Ser

Phe His Cys 95Phe His Cys 95

Ser Val Glu 110Ser Val Glu 110

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Val Cys 20Leu Ser Cys Val Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Arg SerVal Leu Ser Arg Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Gly Val GluVal Leu Gly Val Glu

110 <210> 333 <211> 111 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>110 <210> 333 <211> 111 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

- 523 044346 <223> ICOSL v44 IgV <400> 333- 523 044346 <223> ICOSL v44 IgV <400> 333

Asp Thr Gln Glu LysAsp Thr Gln Glu Lys

55

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

Val Leu Ser Pro SerVal Leu Ser Pro Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110 <210> 334 <211> 111 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>110 <210> 334 <211> 111 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v48 IgV <400>334<223> ICOSL v48 IgV <400>334

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 1015Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 1015

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn AspLeu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp

25302530

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 4045Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 4045

Ile Pro Gln His Ser Ser Leu Glu Tyr Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 5560Ile Pro Gln His Ser Ser Leu Glu Tyr Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 5560

Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 65 7075Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 65 7075

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His CysArg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys

- 524 044346- 524 044346

Val Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu

100 105 110 <210> 335 <211> 111 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>100 105 110 <210> 335 <211> 111 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v50 IgV < 400> 335< 223> ICOSL v50 IgV < 400> 335

Asp Thr Gln Glu LysAsp Thr Gln Glu Lys

Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp ValGlu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val

1515

Leu SerLeu Ser

Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn AspCys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp

25 3025 30

Tyr ValTyr Val

Tyr Trp Gln 35Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 40 45Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 40 45

Ile ProIle Pro

Gln Ser SerGln Ser Ser

Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr ArgSer Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg

6060

Arg Ala 65Arg Ala 65

Leu Met SerLeu Met Ser

Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 70 75Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 70 75

Arg LeuArg Leu

Phe Asn ValPhe Asn Val

Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 90 95Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 90 95

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

Ala LeuAla Leu

Ser Gln SerSer Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val GluLeu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu

105 110 <210> 336 <211> 111 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>105 110 <210> 336 <211> 111 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v51 IgV <400> 336<223> ICOSL v51 IgV <400> 336

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly SerLeu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser

Arg Phe Asp Leu Asn AspArg Phe Asp Leu Asn Asp

GluGlu

ValVal

- 525 044346- 525 044346

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 40 45Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 40 45

Ile Pro Gln Ser Ser 50Ile Pro Gln Ser Ser 50

Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr ArgSer Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg

6060

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Arg Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 70 75Pro Ala Arg Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 70 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 90 95Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 90 95

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val GluLeu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu

105110 <210>337 <211>111 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>105110 <210>337 <211>111 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v60 IgV <400> 337<223> ICOSL v60 IgV <400> 337

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala CysLeu Ser Cys Ala Cys

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Ser Asp Leu Asn Asp 30Ser Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Asn GluVal Leu Ser Asn Glu

110 <210> 338 <211> 111 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность110 <210> 338 <211> 111 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence

- 526 044346 <220>- 526 044346 <220>

<223> ICOSL v78 IgV <400> 338<223> ICOSL v78 IgV <400> 338

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn AspLeu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp

25 3025 30

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 40 45Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 40 45

Ile Pro Gln Ser Ser Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 55 60Ile Pro Gln Ser Ser Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 55 60

Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 65 70 75Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 65 70 75

Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe Glu Cys 85 90 95Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe Glu Cys 85 90 95

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

Val Phe Ser Arg Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val GluVal Phe Ser Arg Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu

100 105 110 <210> 339 <211> 111 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>100 105 110 <210> 339 <211> 111 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v79 IgV <400> 339<223> ICOSL v79 IgV <400> 339

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15

Leu Ser Cys Ala 20Leu Ser Cys Ala 20

Cys Pro GluCys Pro Glu

Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn AspGly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp

30thirty

Tyr Val Tyr TrpTyr Val Tyr Trp

Gln Thr SerGln Thr Ser

Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 40 45Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 40 45

Ile Pro Gln SerIle Pro Gln Ser

Ser Ser LeuSer Ser Leu

Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg 60Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg 60

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

LeuLeu

Arg Ala Leu Met 65Arg Ala Leu Met 65

Ser Pro AlaSer Pro Ala

Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 75Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 75

- 527 044346- 527 044346

Arg Leu Phe AsnArg Leu Phe Asn

Val Thr Pro Gln Asp AlaVal Thr Pro Gln Asp Ala

GlnGln

LysLys

PhePhe

HisHis

Cys 95Cys 95

LeuLeu

Val Leu Ser GlnVal Leu Ser Gln

100100

Ser Leu Gly Phe Gln GluSer Leu Gly Phe Gln Glu

105105

ValVal

LeuLeu

SerSer

ValVal

110110

Glu <210>Glu <210>

<211><211>

<212><212>

<213><213>

340340

111111

БЕЛОКPROTEIN

Искусственная последовательность <220>Artificial sequence <220>

<223><223>

ICOSL v80 IgV <400>ICOSL v80 IgV <400>

340340

AspAsp

ThrThr

GlnGln

GluGlu

Lys 5Lys 5

GluGlu

ValVal

ArgArg

AlaAla

MetMet

ValVal

GlyGly

SerSer

AspAsp

ValVal

LeuLeu

SerSer

CysCys

AlaAla

CysCys

ProPro

GluGlu

GlyGly

SerSer

ArgArg

PhePhe

AspAsp

LeuLeu

Asp 30Asp 30

AspAsp

TyrTyr

ValVal

Tyr 35Tyr 35

TrpTrp

GlnGln

ThrThr

SerSer

Glu 40Glu 40

SerSer

GluGlu

ThrThr

ValVal

Val 45Val 45

ThrThr

TyrTyr

IleIle

Pro 50Pro 50

GlnGln

SerSer

SerSer

SerSer

Leu 55Leu 55

GluGlu

AsnAsn

ValVal

AspAsp

Ser 60Ser 60

ArgArg

TyrTyr

ArgArg

Arg 65Arg 65

AlaAla

LeuLeu

MetMet

SerSer

Pro 70Pro 70

AlaAla

GlyGly

MetMet

LeuLeu

Arg 75Arg 75

GlyGly

AspAsp

PhePhe

SerSer

ArgArg

LeuLeu

PhePhe

AsnAsn

Val 85Val 85

ThrThr

ProPro

GlnGln

AspAsp

Glu 90Glu 90

GlnGln

LysLys

PhePhe

HisHis

Cys 95Cys 95

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

LeuLeu

SerSer

GlnGln

100100

SerSer

LeuLeu

GlyGly

PhePhe

GlnGln

105105

GluGlu

ValVal

LeuLeu

SerSer

ValVal

110110

Glu <210>Glu <210>

<211><211>

<212><212>

<213><213>

341341

414414

БЕЛОКPROTEIN

Homo sapiens <220>Homo sapiens <220>

<221><221>

<223><223>

новая или редкаяnew or rare

VSIG8 характеристика <400>VSIG8 characteristic <400>

341341

Met Arg Val 1Met Arg Val 1

GlyGly

Gly Ala 5Gly Ala 5

Phe His Leu LeuPhe His Leu Leu

LeuLeu

ValVal

CysCys

LeuLeu

SerSer

ProPro

LeuLeu

Ala Leu LeuAla Leu Leu

SerSer

Ala ValAla Val

Arg Ile Asn GlyArg Ile Asn Gly

AspAsp

GlyGly

GlnGln

GluGlu

ValVal

- 528 044346- 528 044346

Tyr Leu Ala Glu Gly 35Tyr Leu Ala Glu Gly 35

Asp Asn Val Arg Leu 40Asp Asn Val Arg Leu 40

Gly Cys Pro Tyr Val 45Gly Cys Pro Tyr Val 45

Asp Pro Glu Asp Tyr 50Asp Pro Glu Asp Tyr 50

Gly Pro Asn Gly Leu 55Gly Pro Asn Gly Leu 55

Asp Ile Glu Trp Met 60Asp Ile Glu Trp Met 60

Val Asn Ser Asp Pro 65Val Asn Ser Asp Pro 65

Ala His His Arg Glu 70Ala His His Arg Glu 70

Asn Val Phe Leu Ser 75Asn Val Phe Leu Ser 75

Gln Asp Lys Arg Ile 85Gln Asp Lys Arg Ile 85

Asn His Gly Ser Leu 90Asn His Gly Ser Leu 90

Pro His Leu Gln GlnPro His Leu Gln Gln

Val Arg Phe Ala AlaVal Arg Phe Ala Ala

100100

Ser Asp Pro Ser GlnSer Asp Pro Ser Gln

105105

Tyr Asp Ala Ser IleTyr Asp Ala Ser Ile

110110

Leu Met Asn Leu GlnLeu Met Asn Leu Gln

115115

Val Ser Asp Thr AlaVal Ser Asp Thr Ala

120120

Thr Tyr Glu Cys ArgThr Tyr Glu Cys Arg

125125

Lys Lys Thr Thr Met 130Lys Lys Thr Thr Met 130

Ala Thr Arg Lys ValAla Thr Arg Lys Val

135135

Ile Val Thr Val GlnIle Val Thr Val Gln

140140

Arg Pro Ala Val Pro 145Arg Pro Ala Val Pro 145

Met Cys Trp Thr Glu 150Met Cys Trp Thr Glu 150

Gly His Met Thr Tyr 155Gly His Met Thr Tyr 155

Asn Asp Val Val LeuAsn Asp Val Val Leu

165165

Lys Cys Tyr Ala SerLys Cys Tyr Ala Ser

170170

Gly Gly Ser Gln ProGly Gly Ser Gln Pro

175175

Ser Tyr Lys Trp AlaSer Tyr Lys Trp Ala

180180

Lys Ile Ser Gly HisLys Ile Ser Gly His

185185

His Tyr Pro Tyr ArgHis Tyr Pro Tyr Arg

190190

Gly Ser Tyr Thr Ser 195Gly Ser Tyr Thr Ser 195

Gln His Ser Tyr His 200Gln His Ser Tyr His 200

Ser Glu Leu Ser Tyr 205Ser Glu Leu Ser Tyr 205

Glu Ser Phe His SerGlu Ser Phe His Ser

210210

Ser Ile Asn Gln GlySer Ile Asn Gln Gly

215215

Leu Asn Asn Gly AspLeu Asn Asn Gly Asp

220220

Val Leu Lys Asp Ile 225Val Leu Lys Asp Ile 225

Ser Arg Ala Asp Asp 230Ser Arg Ala Asp Asp 230

Gly Leu Tyr Gln Cys 235Gly Leu Tyr Gln Cys 235

Val Ala Asn Asn ValVal Ala Asn Asn Val

245245

Gly Tyr Ser Val CysGly Tyr Ser Val Cys

250250

Val Val Glu Val LysVal Val Glu Val Lys

255255

Ser Asp Ser Arg ArgSer Asp Ser Arg Arg

260260

Ile Gly Val Ile IleIle Gly Val Ile Ile

265265

Gly Ile Val Leu GlyGly Ile Val Leu Gly

270270

LeuLeu

GlnGln

Tyr 80Tyr 80

ArgArg

AsnAsn

ValVal

AlaAla

Gly 160Gly 160

LeuLeu

AlaAla

GlnGln

LeuLeu

Thr 240Thr 240

ValVal

SerSer

- 529 044346- 529 044346

Leu Leu Ala Leu Gly Cys Leu Ala Val Gly Ile Trp Gly Leu Val CysLeu Leu Ala Leu Gly Cys Leu Ala Val Gly Ile Trp Gly Leu Val Cys

275 280285275 280285

Cys Cys Cys Gly Gly Ser Gly Ala Gly Gly Ala Arg Gly Ala Phe GlyCys Cys Cys Gly Gly Ser Gly Ala Gly Gly Ala Arg Gly Ala Phe Gly

290 295300290 295300

Tyr Gly Asn Gly Gly Gly Val Gly Gly Gly Ala Cys Gly Asp Leu AlaTyr Gly Asn Gly Gly Gly Val Gly Gly Gly Ala Cys Gly Asp Leu Ala

305 310 315320305 310 315320

Ser Glu Ile Arg Glu Asp Ala Val Ala Pro Gly Cys Lys Ala Ser GlySer Glu Ile Arg Glu Asp Ala Val Ala Pro Gly Cys Lys Ala Ser Gly

325 330335325 330335

Arg Gly Ser Arg Val Thr His Leu Leu Gly Tyr Pro Thr Gln Asn ValArg Gly Ser Arg Val Thr His Leu Leu Gly Tyr Pro Thr Gln Asn Val

340 345350340 345350

Ser Arg Ser Leu Arg Arg Lys Tyr Ala Pro Pro Pro Cys Gly Gly ProSer Arg Ser Leu Arg Arg Lys Tyr Ala Pro Pro Pro Cys Gly Gly Pro

355 360365355 360365

Glu Asp Val Ala Leu Ala Pro Cys Thr Ala Ala Ala Ala Cys Glu AlaGlu Asp Val Ala Leu Ala Pro Cys Thr Ala Ala Ala Ala Cys Glu Ala

370 375380370 375380

Gly Pro Ser Pro Val Tyr Val Lys Val Lys Ser Ala Glu Pro Ala AspGly Pro Ser Pro Val Tyr Val Lys Val Lys Ser Ala Glu Pro Ala Asp

385 390 395400385 390 395400

Cys Ala Glu Gly Pro Val Gln Cys Lys Asn Gly Leu Leu ValCys Ala Glu Gly Pro Val Gln Cys Lys Asn Gly Leu Leu Val

405410 <210>342 <211>393 < 212> БЕЛОК < 213> Homo sapiens <220>405410 <210>342 <211>393 <212> PROTEIN <213> Homo sapiens <220>

< 221> новая или редкая характеристика < 223> Зрелый VSIG8 <400>342<221> new or rare characteristic <223> Mature VSIG8 <400>342

Val Arg Ile Asn Gly Asp Gly Gln Glu Val Leu Tyr Leu Ala Glu GlyVal Arg Ile Asn Gly Asp Gly Gln Glu Val Leu Tyr Leu Ala Glu Gly

5 10155 1015

Asp Asn Val Arg Leu Gly Cys Pro Tyr Val Leu Asp Pro Glu Asp Tyr 20 2530Asp Asn Val Arg Leu Gly Cys Pro Tyr Val Leu Asp Pro Glu Asp Tyr 20 2530

Gly Pro Asn Gly Leu Asp Ile Glu Trp Met Gln Val Asn Ser Asp Pro 35 4045Gly Pro Asn Gly Leu Asp Ile Glu Trp Met Gln Val Asn Ser Asp Pro 35 4045

Ala His His Arg Glu Asn Val Phe Leu Ser Tyr Gln Asp Lys Arg Ile 50 5560Ala His His Arg Glu Asn Val Phe Leu Ser Tyr Gln Asp Lys Arg Ile 50 5560

- 530 044346- 530 044346

Asn His Gly Ser Leu 65Asn His Gly Ser Leu 65

Pro His Leu Gln Gln 70Pro His Leu Gln Gln 70

Arg Val Arg Phe Ala 75Arg Val Arg Phe Ala 75

Ser Asp Pro Ser Gln 85Ser Asp Pro Ser Gln 85

Tyr Asp Ala Ser Ile 90Tyr Asp Ala Ser Ile 90

Asn Leu Met Asn Leu 95Asn Leu Met Asn Leu 95

Val Ser Asp Thr AlaVal Ser Asp Thr Ala

100100

Thr Tyr Glu Cys ArgThr Tyr Glu Cys Arg

105105

Val Lys Lys Thr ThrVal Lys Lys Thr Thr

110110

Ala Thr Arg Lys Val 115Ala Thr Arg Lys Val 115

Ile Val Thr Val GlnIle Val Thr Val Gln

120120

Ala Arg Pro Ala Val 125Ala Arg Pro Ala Val 125

Met Cys Trp Thr Glu 130Met Cys Trp Thr Glu 130

Gly His Met Thr Tyr 135Gly His Met Thr Tyr 135

Gly Asn Asp Val Val 140Gly Asn Asp Val Val 140

Lys Cys Tyr Ala Ser 145Lys Cys Tyr Ala Ser 145

Gly Gly Ser Gln Pro 150Gly Gly Ser Gln Pro 150

Leu Ser Tyr Lys Trp 155Leu Ser Tyr Lys Trp 155

Lys Ile Ser Gly HisLys Ile Ser Gly His

165165

His Tyr Pro Tyr ArgHis Tyr Pro Tyr Arg

170170

Ala Gly Ser Tyr ThrAla Gly Ser Tyr Thr

175175

Gln His Ser Tyr HisGln His Ser Tyr His

180180

Ser Glu Leu Ser TyrSer Glu Leu Ser Tyr

185185

Gln Glu Ser Phe HisGln Glu Ser Phe His

190190

Ser Ile Asn Gln Gly 195Ser Ile Asn Gln Gly 195

Leu Asn Asn Gly Asp 200Leu Asn Asn Gly Asp 200

Leu Val Leu Lys AspLeu Val Leu Lys Asp

205205

Ser Arg Ala Asp AspSer Arg Ala Asp Asp

210210

Gly Leu Tyr Gln CysGly Leu Tyr Gln Cys

215215

Thr Val Ala Asn AsnThr Val Ala Asn Asn

220220

Gly Tyr Ser Val Cys 225Gly Tyr Ser Val Cys 225

Val Val Glu Val Lys 230Val Val Glu Val Lys 230

Val Ser Asp Ser Arg 235Val Ser Asp Ser Arg 235

Ile Gly Val Ile IleIle Gly Val Ile Ile

245245

Gly Ile Val Leu GlyGly Ile Val Leu Gly

250250

Ser Leu Leu Ala LeuSer Leu Leu Ala Leu

255255

Cys Leu Ala Val GlyCys Leu Ala Val Gly

260260

Ile Trp Gly Leu ValIle Trp Gly Leu Val

265265

Cys Cys Cys Cys GlyCys Cys Cys Cys Gly

270270

Ser Gly Ala Gly GlySer Gly Ala Gly Gly

275275

Ala Arg Gly Ala Phe 280Ala Arg Gly Ala Phe 280

Gly Tyr Gly Asn GlyGly Tyr Gly Asn Gly

285285

Gly Val Gly Gly GlyGly Val Gly Gly Gly

290290

Ala Cys Gly Asp LeuAla Cys Gly Asp Leu

295295

Ala Ser Glu Ile Arg 300Ala Ser Glu Ile Arg 300

Ala 80Ala 80

GlnGln

MetMet

ProPro

LeuLeu

Ala 160Ala 160

SerSer

SerSer

IleIle

ValVal

Arg 240Arg 240

GlyGly

GlyGly

GlyGly

GluGlu

ValVal

320320

Asp Ala Val Ala Pro 305Asp Ala Val Ala Pro 305

Gly Cys Lys Ala Ser 310Gly Cys Lys Ala Ser 310

Gly Arg Gly Ser ArgGly Arg Gly Ser Arg

315315

- 531 044346- 531 044346

Thr His Leu Leu Gly Tyr Pro Thr Gln Asn Val 325330Thr His Leu Leu Gly Tyr Pro Thr Gln Asn Val 325330

Arg Lys Tyr Ala Pro Pro Pro Cys Gly Gly Pro 340345Arg Lys Tyr Ala Pro Pro Pro Cys Gly Gly Pro 340345

Ala Pro Cys Thr Ala Ala Ala Ala Cys Glu Ala 355360Ala Pro Cys Thr Ala Ala Ala Ala Cys Glu Ala 355360

Tyr Val Lys Val Lys Ser Ala Glu Pro Ala Asp 370375Tyr Val Lys Val Lys Ser Ala Glu Pro Ala Asp 370375

Ser Arg Ser LeuSer Arg Ser Leu

335335

Glu Asp Val AlaGlu Asp Val Ala

350350

Gly Pro Ser ProGly Pro Ser Pro

365365

Cys Ala Glu Gly 380Cys Ala Glu Gly 380

ArgArg

LeuLeu

ValVal

ProPro

Val Gln Cys Lys Asn Gly Leu Leu Val 385390 <210>343 <211>242 <212> БЕЛОК <213> Homo sapiens <220>Val Gln Cys Lys Asn Gly Leu Leu Val 385390 <210>343 <211>242 <212> PROTEIN <213> Homo sapiens <220>

<221> новая или редкая характеристика <223> VSIG8 ECD <400> 343<221> new or rare characteristic <223> VSIG8 ECD <400> 343

Val Arg Ile Asn Gly Asp Gly Gln Glu Val Leu Tyr Leu Ala Glu 1 5 10 15Val Arg Ile Asn Gly Asp Gly Gln Glu Val Leu Tyr Leu Ala Glu 1 5 10 15

Asp Asn Val Arg Leu Gly Cys Pro 20Asp Asn Val Arg Leu Gly Cys Pro 20

Gly Pro Asn Gly Leu Asp Ile Glu 35 40Gly Pro Asn Gly Leu Asp Ile Glu 35 40

Ala His His Arg Glu Asn Val Phe 50 55Ala His His Arg Glu Asn Val Phe 50 55

Tyr Val 25Tyr Val 25

Leu Asp Pro Glu AspLeu Asp Pro Glu Asp

Asn His Gly Ser Leu Pro His Leu 65 70Asn His Gly Ser Leu Pro His Leu 65 70

Ser Asp Pro Ser Gln Tyr Asp Ala 85Ser Asp Pro Ser Gln Tyr Asp Ala 85

Trp Met Gln Val Asn Ser Asp 45Trp Met Gln Val Asn Ser Asp 45

Leu Ser Tyr Gln Asp Lys Arg 60Leu Ser Tyr Gln Asp Lys Arg 60

Gln Gln Arg Val Arg Phe Ala 75Gln Gln Arg Val Arg Phe Ala 75

Ser Ile Asn Leu Met Asn Leu 90 95Ser Ile Asn Leu Met Asn Leu 90 95

Val Ser Asp Thr Ala Thr Tyr Glu Cys Arg ValVal Ser Asp Thr Ala Thr Tyr Glu Cys Arg Val

100 105100 105

Lys Lys Thr ThrLys Lys Thr Thr

110110

GlyGly

TyrTyr

ProPro

IleIle

Ala 80Ala 80

GlnGln

MetMet

ProPro

Ala Thr Arg Lys Val Ile Val Thr ValAla Thr Arg Lys Val Ile Val Thr Val

Gln Ala Arg Pro Ala ValGln Ala Arg Pro Ala Val

- 532 044346- 532 044346

115115

120120

125125

Met Cys Trp Thr Glu 130Met Cys Trp Thr Glu 130

Gly His Met Thr Tyr 135Gly His Met Thr Tyr 135

Gly Asn Asp Val Val 140Gly Asn Asp Val Val 140

Lys Cys Tyr Ala Ser 145Lys Cys Tyr Ala Ser 145

Gly Gly Ser Gln Pro 150Gly Gly Ser Gln Pro 150

Leu Ser Tyr Lys Trp 155Leu Ser Tyr Lys Trp 155

Lys Ile Ser Gly HisLys Ile Ser Gly His

165165

His Tyr Pro Tyr ArgHis Tyr Pro Tyr Arg

170170

Ala Gly Ser Tyr ThrAla Gly Ser Tyr Thr

175175

Gln His Ser Tyr HisGln His Ser Tyr His

180180

Ser Glu Leu Ser TyrSer Glu Leu Ser Tyr

185185

Gln Glu Ser Phe HisGln Glu Ser Phe His

190190

Ser Ile Asn Gln GlySer Ile Asn Gln Gly

195195

Leu Asn Asn Gly AspLeu Asn Asn Gly Asp

200200

Leu Val Leu Lys AspLeu Val Leu Lys Asp

205205

Ser Arg Ala Asp AspSer Arg Ala Asp Asp

210210

Gly Leu Tyr Gln CysGly Leu Tyr Gln Cys

215215

Thr Val Ala Asn AsnThr Val Ala Asn Asn

220220

Gly Tyr Ser Val Cys 225Gly Tyr Ser Val Cys 225

Val Val Glu Val Lys 230Val Val Glu Val Lys 230

Val Ser Asp Ser Arg 235Val Ser Asp Ser Arg 235

LeuLeu

Ala 160Ala 160

SerSer

SerSer

IleIle

ValVal

Arg 240Arg 240

Ile Gly <210> 344 <211> 16 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Ile Gly <210> 344 <211> 16 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> CD33 Сигнальный пептид <400>344<223>CD33 Signal peptide <400>344

Met Pro Leu Leu Leu Leu Leu Pro Leu Leu Trp Ala Gly Ala Leu 1 5 1015 <210>345 < 211>22 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Met Pro Leu Leu Leu Leu Leu Pro Leu Leu Trp Ala Gly Ala Leu 1 5 1015 <210>345 <211>22 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> легкая цепь IgG каппа <400> 345<223> light chain IgG kappa <400> 345

Met Asp Met Arg Val Leu Ala Gln Leu Leu Gly Leu Leu Leu Leu 1 5 10 15Met Asp Met Arg Val Leu Ala Gln Leu Leu Gly Leu Leu Leu Leu 1 5 10 15

AlaAla

CysCys

- 533 044346- 533 044346

Phe Pro Gly Ala Arg Cys 20 <210> 346 <211> 18 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Phe Pro Gly Ala Arg Cys 20 <210> 346 <211> 18 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> HSA сигнальный пептид <400>346<223> HSA signal peptide <400>346

Met Lys Trp Val Thr Phe Ile Ser Leu Leu Phe Leu Phe Ser Ser AlaMet Lys Trp Val Thr Phe Ile Ser Leu Leu Phe Leu Phe Ser Ser Ala

5 10155 1015

Tyr Ser <210>347 <211>22 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Tyr Ser <210>347 <211>22 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> легкая цепь Ig каппа <400>347<223> light chain Ig kappa <400>347

Met Asp Met Arg Ala Pro Ala Gly Ile Phe Gly Phe Leu Leu Val LeuMet Asp Met Arg Ala Pro Ala Gly Ile Phe Gly Phe Leu Leu Val Leu

5 10155 1015

Phe Pro Gly Tyr Arg Ser <210>348 <211>19 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Phe Pro Gly Tyr Arg Ser <210>348 <211>19 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> сигнальная последовательность препротеина азуроцидина человека <400>348<223> human azurocidin preprotein signal sequence <400>348

Met Thr Arg Leu Thr Val Leu Ala Leu Leu Ala Gly Leu Leu Ala SerMet Thr Arg Leu Thr Val Leu Ala Leu Leu Ala Gly Leu Leu Ala Ser

5 10155 1015

Ser Arg Ala <210>349 <211>19 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательностьSer Arg Ala <210>349 <211>19 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence

- 534 044346 <220>- 534 044346 <220>

<223> сигнальный пептид тяжелой цепи IgG <400>349<223> IgG heavy chain signal peptide <400>349

Met Glu Leu Gly Leu Ser Trp Ile Phe Leu Leu Ala Ile Leu Lys Gly 1 5 1015Met Glu Leu Gly Leu Ser Trp Ile Phe Leu Leu Ala Ile Leu Lys Gly 1 5 1015

Val Gln Cys <210>350 <211>19 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Val Gln Cys <210>350 <211>19 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> сигнальный пептид тяжелой цепи IgG <400>350<223> IgG heavy chain signal peptide <400>350

Met Glu Leu Gly Leu Arg Trp Val Phe Leu Val Ala Ile Leu Glu Gly 1 5 1015Met Glu Leu Gly Leu Arg Trp Val Phe Leu Val Ala Ile Leu Glu Gly 1 5 1015

Val Gln Cys <210>351 <211>19 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Val Gln Cys <210>351 <211>19 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> сигнальный пептид тяжелой цепи IgG <400>351<223> IgG heavy chain signal peptide <400>351

Met Lys His Leu Trp Phe Phe Leu Leu Leu Val Ala Ala Pro Arg Trp 1 5 1015Met Lys His Leu Trp Phe Phe Leu Leu Leu Val Ala Ala Pro Arg Trp 1 5 1015

Val Leu Ser <210>352 <211>19 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Val Leu Ser <210>352 <211>19 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> сигнальный пептид тяжелой цепи IgG < 400> 352<223>IgG heavy chain signal peptide <400>352

Met Asp Trp Thr Trp Arg Ile Leu Phe Leu Val Ala Ala Ala Thr Gly 1 5 10 15Met Asp Trp Thr Trp Arg Ile Leu Phe Leu Val Ala Ala Ala Thr Gly 1 5 10 15

- 535 044346- 535 044346

Ala His Ser < 210> 353 < 211> 19 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Ala His Ser <210> 353 <211> 19 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> сигнальный пептид тяжелой цепи IgG < 400>353<223>IgG heavy chain signal peptide <400>353

Met Asp Trp Thr Trp Arg Phe Leu Phe Val Val Ala Ala Ala Thr GlyMet Asp Trp Thr Trp Arg Phe Leu Phe Val Val Ala Ala Ala Thr Gly

5 10155 1015

Val Gln Ser < 210>354 < 211>19 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Val Gln Ser < 210>354 < 211>19 < 212> PROTEIN < 213> Artificial sequence <220>

< 223> сигнальный пептид тяжелой цепи IgG < 400>354<223>IgG heavy chain signal peptide <400>354

Met Glu Phe Gly Leu Ser Trp Leu Phe Leu Val Ala Ile Leu Lys GlyMet Glu Phe Gly Leu Ser Trp Leu Phe Leu Val Ala Ile Leu Lys Gly

5 10155 1015

Val Gln Cys < 210>355 < 211>19 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Val Gln Cys < 210 > 355 < 211 > 19 < 212 > PROTEIN < 213 > Artificial sequence < 220 >

< 223> сигнальный пептид тяжелой цепи IgG < 400>355<223>IgG heavy chain signal peptide <400>355

Met Glu Phe Gly Leu Ser Trp Val Phe Leu Val Ala Leu Phe Arg GlyMet Glu Phe Gly Leu Ser Trp Val Phe Leu Val Ala Leu Phe Arg Gly

5 10155 1015

Val Gln Cys <210>356 <211>26 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательностьVal Gln Cys <210>356 <211>26 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence

- 536 044346 <220>- 536 044346 <220>

<223> сигнальный пептид тяжелой цепи IgG <400>356<223> IgG heavy chain signal peptide <400>356

Met Asp Leu Leu His Lys Asn Met Lys His Leu Trp Phe Phe Leu LeuMet Asp Leu Leu His Lys Asn Met Lys His Leu Trp Phe Phe Leu Leu

5 10155 1015

Leu Val Ala Ala Pro Arg Trp Val Leu SerLeu Val Ala Ala Pro Arg Trp Val Leu Ser

2025 <210>357 <211>22 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>2025 <210>357 <211>22 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> сигнальные пептиды легкой цепи IgG каппа <400>357<223> IgG kappa light chain signal peptides <400>357

Met Asp Met Arg Val Pro Ala Gln Leu Leu Gly Leu Leu Leu Leu TrpMet Asp Met Arg Val Pro Ala Gln Leu Leu Gly Leu Leu Leu Leu Trp

5 10155 1015

Leu Ser Gly Ala Arg Cys <210>358 <211>22 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Leu Ser Gly Ala Arg Cys <210>358 <211>22 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> сигнальные пептиды легкой цепи IgG каппа <400>358<223> IgG kappa light chain signal peptides <400>358

Met Lys Tyr Leu Leu Pro Thr Ala Ala Ala Gly Leu Leu Leu Leu AlaMet Lys Tyr Leu Leu Pro Thr Ala Ala Ala Gly Leu Leu Leu Leu Ala

5 10155 1015

Ala Gln Pro Ala Met Ala <210>359 <211>17 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Ala Gln Pro Ala Met Ala <210>359 <211>17 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> люцифераза Gaussia < 400> 359< 223 > Gaussia luciferase < 400 > 359

Met Gly Val Lys Val Leu Phe Ala Leu Ile Cys Ile Ala Val Ala GluMet Gly Val Lys Val Leu Phe Ala Leu Ile Cys Ile Ala Val Ala Glu

5 10 155 10 15

- 537 044346- 537 044346

Ala <210> 360 <211> 18 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Ala <210> 360 <211> 18 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> альбумин человека <400>360<223>human albumin <400>360

Met Lys Trp Val Thr Phe Ile Ser Leu Leu Phe Leu Phe Ser Ser 1 5 1015Met Lys Trp Val Thr Phe Ile Ser Leu Leu Phe Leu Phe Ser Ser 1 5 1015

Tyr Ser <210>361 < 211>18 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Tyr Ser <210>361 <211>18 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> химотрипсиноген человека <400>361<223>human chymotrypsinogen <400>361

Met Ala Phe Leu Trp Leu Leu Ser Cys Trp Ala Leu Leu Gly Thr 1 5 1015Met Ala Phe Leu Trp Leu Leu Ser Cys Trp Ala Leu Leu Gly Thr 1 5 1015

AlaAla

ThrThr

Phe Gly <210>362 < 211>14 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Phe Gly <210>362 <211>14 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> интерлейкин-2 человека <400>362<223>human interleukin-2 <400>362

Met Gln Leu Leu Ser Cys Ile Ala Leu Ile Leu Ala Leu ValMet Gln Leu Leu Ser Cys Ile Ala Leu Ile Leu Ala Leu Val

510 < 210>363 < 211>15 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>510 < 210 > 363 < 211 > 15 < 212 > PROTEIN < 213 > Artificial sequence < 220 >

< 223> трипсиноген-2 человека <400> 363<223> human trypsinogen-2 <400> 363

- 538 044346- 538 044346

Met Asn Leu Leu Leu Ile Leu Thr Phe Val Ala Ala Ala Val Ala 1 5 10 15 <210> 364 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Met Asn Leu Leu Leu Ile Leu Thr Phe Val Ala Ala Ala Val Ala 1 5 10 15 <210> 364 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v81 ECD < 400> 364< 223> ICOSL v81 ECD < 400> 364

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala CysLeu Ser Cys Ala Cys

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn AspPhe Asp Leu Asn Asp

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Arg SerVal Leu Ser Arg Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Asp GluVal Leu Ser Asp Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

- 539 044346- 539 044346

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Arg Ile Glu Asn Val 200Arg Ile Glu Asn Val 200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Gly GlnThr Val Gly Gly Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 365 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 365 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v82 ECD < 400> 365< 223> ICOSL v82 ECD < 400> 365

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Arg SerVal Leu Ser Arg Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr PheAsp Glu Leu Thr Phe

135135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

- 540 044346- 540 044346

175175

165165

170170

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Arg Ile Glu Asn Val 200Arg Ile Glu Asn Val 200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 366 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 366 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v83 ECD < 400> 366< 223> ICOSL v83 ECD < 400> 366

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn AspLeu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp

25 3025 30

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 40 45Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 40 45

Ile Pro Gln Ser Ser Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 55 60Ile Pro Gln Ser Ser Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 55 60

Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 65 70 75Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 65 70 75

Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 85 90 95Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 85 90 95

Val Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu

100 105 110100 105 110

Thr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser Val Pro Val Val Ser AlaThr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser Val Pro Val Val Ser Ala

115 120 125115 120 125

His Ser Pro Ser Gln Asp Glu Leu Thr Phe Thr Cys Thr Ser IleHis Ser Pro Ser Gln Asp Glu Leu Thr Phe Thr Cys Thr Ser Ile

130 135 140130 135 140

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

- 541 044346- 541 044346

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asp Ile Gly CysVal Asp Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 367 <211> 238 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 367 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v84 ECD <400> 367<223> ICOSL v84 ECD <400> 367

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Arg SerVal Leu Ser Arg Ser

100100

Arg Gly Phe Gln GluArg Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Asp GluVal Leu Ser Asp Glu

110110

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

- 542 044346- 542 044346

Thr Leu Arg Val Ala 115Thr Leu Arg Val Ala 115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Arg Ile Glu Asn Val 200Arg Ile Glu Asn Val 200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 368 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 368 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v85 ECD <400>368<223>ICOSL v85 ECD <400>368

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 1015Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 1015

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn AspLeu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp

25302530

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 4045Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 4045

Ile Pro Gln Ser Ser Pro Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 5560Ile Pro Gln Ser Ser Pro Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 5560

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

LeuLeu

Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 65 7075Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 65 7075

- 543 044346- 543 044346

Arg Leu PheArg Leu Phe

Asn Val ThrAsn Val Thr

Pro Gln AspPro Gln Asp

Glu Gln Lys 90Glu Gln Lys 90

Phe His CysPhe His Cys

Val Leu SerVal Leu Ser

Gln Ser Leu 100Gln Ser Leu 100

Gly Phe GlnGly Phe Gln

105105

Glu Val LeuGlu Val Leu

Ser Val GluSer Val Glu

110110

Thr Leu HisThr Leu His

115115

Val Ala AlaVal Ala Ala

Asn Phe SerAsn Phe Ser

120120

Val Pro ValVal Pro Val

Val Ser Ala 125Val Ser Ala 125

His Ser ProHis Ser Pro

130130

Ser Gln AspSer Gln Asp

Glu Leu Thr 135Glu Leu Thr 135

Phe Thr CysPhe Thr Cys

140140

Thr Ser IleThr Ser Ile

Gly Tyr Pro 145Gly Tyr Pro 145

Arg Pro AsnArg Pro Asn

150150

Val Tyr TrpVal Tyr Trp

Ile Asn LysIle Asn Lys

155155

Thr Asp AsnThr Asp Asn

Leu Leu AspLeu Leu Asp

Gln Ala LeuGln Ala Leu

165165

Gln Asn AspGln Asn Asp

Thr Val Phe 170Thr Val Phe 170

Leu Asn MetLeu Asn Met

175175

Gly Leu TyrGly Leu Tyr

Asp Val Val 180Asp Val Val 180

Ser Val LeuSer Val Leu

185185

Arg Ile AlaArg Ile Ala

Arg Thr ProArg Thr Pro

190190

Val Asn IleVal Asn Ile

195195

Gly Cys CysGly Cys Cys

Ile Glu AsnIle Glu Asn

200200

Val Leu LeuVal Leu Leu

Gln Gln Asn 205Gln Gln Asn 205

Thr Val GlyThr Val Gly

210210

Ser Gln ThrSer Gln Thr

Gly Asn Asp 215Gly Asn Asp 215

Ile Gly GluIle Gly Glu

220220

Arg Asp LysArg Asp Lys

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn 225Thr Glu Asn 225

Pro Val SerPro Val Ser

230230

Thr Gly GluThr Gly Glu

Lys Asn AlaLys Asn Ala

235235

Ala Thr <210> 369 <211> 238 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Ala Thr <210> 369 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v86 ECD <400> 369<223> ICOSL v86 ECD <400> 369

Asp Thr Gln Glu 1Asp Thr Gln Glu 1

Lys Glu 5Lys Glu 5

Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp ValVal Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val

1515

Leu Ser Cys Ala 20Leu Ser Cys Ala 20

Cys ProCys Pro

Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn AspGlu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp

30thirty

Tyr Val Tyr TrpTyr Val Tyr Trp

Gln ProGlin Pro

Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr TyrSer Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr

4545

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Ile Pro Gln SerIle Pro Gln Ser

Ser SerSer Ser

Leu Glu Asp Val Asp Ser Arg Tyr ArgLeu Glu Asp Val Asp Ser Arg Tyr Arg

- 544 044346- 544 044346

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr PheAsp Glu Leu Thr Phe

135135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 370 <211> 237 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 370 <211> 237 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v87 ECD <400> 370<223> ICOSL v87 ECD <400> 370

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn AspLeu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp

25 3025 30

GluGlu

ValVal

- 545 044346- 545 044346

Tyr Val TyrTyr Val Tyr

Trp Gln ThrTrp Gln Thr

Ser Glu SerSer Glu Ser

Lys Thr ValLys Thr Val

Val Thr Tyr 45Val Thr Tyr 45

Ile Pro GlnIle Pro Gln

Asn Ser SerAsn Ser Ser

Leu Glu Asn 55Leu Glu Asn 55

Val Asp SerVal Asp Ser

Arg Tyr ArgArg Tyr Arg

Arg Ala Leu 65Arg Ala Leu 65

Met Ser ProMet Ser Pro

Ala Gly MetAla Gly Met

Leu Arg GlyLeu Arg Gly

Asp Phe SerAsp Phe Ser

Arg Leu PheArg Leu Phe

Asn Val ThrAsn Val Thr

Pro Gln AspPro Gln Asp

Glu Gln Lys 90Glu Gln Lys 90

Phe His CysPhe His Cys

Val Leu SerVal Leu Ser

Gln Ser Leu 100Gln Ser Leu 100

Gly Phe GlnGly Phe Gln

105105

Glu Val LeuGlu Val Leu

Ser Val ValSer Val Val

110110

Leu His ValLeu His Val

115115

Ala Ala AsnAla Ala Asn

Phe Ser ValPhe Ser Val

120120

Pro Val ValPro Val Val

Ser Ala Pro 125Ser Ala Pro 125

Ser Pro SerSer Pro Ser

130130

Gln Asp GluGln Asp Glu

Leu Thr Phe 135Leu Thr Phe 135

Thr Cys ThrThr Cys Thr

140140

Ser Ile AsnSer Ile Asn

Tyr Pro Arg 145Tyr Pro Arg 145

Pro Asn ValPro Asn Val

150150

Tyr Trp IleTyr Trp Ile

Asn Lys Thr 155Asn Lys Thr 155

Asp Asn SerAsp Asn Ser

Leu Asp GlnLeu Asp Gln

Ala Leu GlnAla Leu Gln

165165

Asn Asp ThrAsn Asp Thr

Val Phe Leu 170Val Phe Leu 170

Asn Met ArgAsn Met Arg

175175

Leu Tyr AspLeu Tyr Asp

Val Val Ser 180Val Val Ser 180

Val Leu ArgVal Leu Arg

185185

Ile Ala ArgIle Ala Arg

Thr Pro SerThr Pro Ser

190190

Asn Ile GlyAsn Ile Gly

195195

Cys Cys IleCys Cys Ile

Glu Asn ValGlu Asn Val

200200

Leu Leu GlnLeu Leu Gln

Gln Asn Leu 205Gln Asn Leu 205

Val Gly SerVal Gly Ser

210210

Gln Thr GlyGln Thr Gly

Asn Asp Ile 215Asn Asp Ile 215

Gly Glu ArgGly Glu Arg

220220

Asp Lys IleAsp Lys Ile

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ThrThr

HisHis

GlyGly

Leu 160Leu 160

GlyGly

ValVal

ThrThr

ThrThr

Glu Asn Pro 225Glu Asn Pro 225

Val Ser ThrVal Ser Thr

230230

Gly Glu LysGly Glu Lys

Asn Ala AlaAsn Ala Ala

235235

Thr <210> 371 <211> 237 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Thr <210> 371 <211> 237 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v88 ECD <400> 371<223> ICOSL v88 ECD <400> 371

- 546 044346- 546 044346

Asp 1Asp 1

LeuLeu

ValVal

ProPro

Ala 65Ala 65

LeuLeu

LeuLeu

LeuLeu

SerSer

Tyr 145Tyr 145

LeuLeu

LeuLeu

AsnAsn

ValVal

Glu 225Glu 225

Thr Gln Glu Lys Glu 5Thr Gln Glu Lys Glu 5

Ser Cys Ala Cys Pro 20Ser Cys Ala Cys Pro 20

Tyr Trp Gln Thr Ser 35Tyr Trp Gln Thr Ser 35

Gln Asn Ser Ser Leu 50Gln Asn Ser Ser Leu 50

Leu Met Ser Pro AlaLeu Met Ser Pro Ala

Phe Asn Val Thr ProPhe Asn Val Thr Pro

Ser Gln Ser Leu Gly 100Ser Gln Ser Leu Gly 100

His Val Ala Ala AsnHis Val Ala Ala Asn

115115

Pro Ser Gln Asp Glu 130Pro Ser Gln Asp Glu 130

Pro Arg Pro Asn ValPro Arg Pro Asn Val

150150

Asp Gln Ala Leu GlnAsp Gln Ala Leu Gln

165165

Tyr Asp Val Val SerTyr Asp Val Val Ser

180180

Ile Gly Cys Cys IleIle Gly Cys Cys Ile

195195

Gly Ser Gln Thr Gly 210Gly Ser Gln Thr Gly 210

Asn Pro Val Ser ThrAsn Pro Val Ser Thr

230230

Val Arg Ala Met ValVal Arg Ala Met Val

Glu Gly Ser Arg Phe 25Glu Gly Ser Arg Phe 25

Glu Ser Lys Thr Val 40Glu Ser Lys Thr Val 40

Glu Asn Val Asp Ser 55Glu Asn Val Asp Ser 55

Gly Met Leu Arg GlyGly Met Leu Arg Gly

Gln Asp Glu Gln LysGln Asp Glu Gln Lys

Phe Gln Glu Val LeuPhe Gln Glu Val Leu

105105

Phe Ser Val Pro ValPhe Ser Val Pro Val

120120

Leu Thr Phe Thr Cys 135Leu Thr Phe Thr Cys 135

Tyr Trp Ile Asn LysTyr Trp Ile Asn Lys

155155

Asn Asp Thr Val PheAsn Asp Thr Val Phe

170170

Val Leu Arg Ile AlaVal Leu Arg Ile Ala

185185

Glu Asn Val Leu LeuGlu Asn Val Leu Leu

200200

Asn Asp Ile Gly Glu 215Asn Asp Ile Gly Glu 215

Gly Glu Lys Asn AlaGly Glu Lys Asn Ala

235235

Gly Ser Asp Val GluGly Ser Asp Val Glu

Asp Leu Asn Asp Val 30Asp Leu Asn Asp Val 30

Val Thr Tyr His Ile 45Val Thr Tyr His Ile 45

Arg Tyr Arg Asn Arg 60Arg Tyr Arg Asn Arg 60

Asp Phe Ser Leu Arg 80Asp Phe Ser Leu Arg 80

Phe His Cys Leu Val 95Phe His Cys Leu Val 95

Ser Val Glu Val ThrSer Val Glu Val Thr

110110

Val Ser Ala Pro HisVal Ser Ala Pro His

125125

Thr Ser Ile Asn Gly 140Thr Ser Ile Asn Gly 140

Thr Asp Asn Ser LeuThr Asp Asn Ser Leu

160160

Leu Asn Met Arg GlyLeu Asn Met Arg Gly

175175

Arg Thr Pro Ser Val 190Arg Thr Pro Ser Val 190

Gln Gln Asn Leu ThrGln Gln Asn Leu Thr

205205

Arg Asp Lys Ile Thr 220Arg Asp Lys Ile Thr 220

Ala Thr <210> 372 <211> 237Ala Thr <210> 372 <211> 237

- 547 044346 <212> БЕЛОК <213> Искусственная <220>- 547 044346 <212> PROTEIN <213> Artificial <220>

<223> ICOSL v89 ECD <400> 372<223> ICOSL v89 ECD <400> 372

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5 последовательностьAsp Thr Gln Glu Lys 1 5 sequence

Glu Val Arg Ala Met 10Glu Val Arg Ala Met 10

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Thr Ser Ile AsnThr Thr Ser Ile Asn

140140

Tyr Pro Arg Pro Asn 145Tyr Pro Arg Pro Asn 145

Val Tyr Trp Ile Asn 150Val Tyr Trp Ile Asn 150

Lys Thr Asp Asn Ser 155Lys Thr Asp Asn Ser 155

Leu Asp Gln Ala LeuLeu Asp Gln Ala Leu

165165

Gln Asn Asp Thr ValGln Asn Asp Thr Val

170170

Phe Leu Asn Met ArgPhe Leu Asn Met Arg

175175

Leu Tyr Asp Val ValLeu Tyr Asp Val Val

180180

Ser Val Leu Arg IleSer Val Leu Arg Ile

185185

Ala Arg Thr Pro SerAla Arg Thr Pro Ser

190190

Asn Ile Gly Cys Cys 195Asn Ile Gly Cys Cys 195

Ile Glu Asn Val LeuIle Glu Asn Val Leu

200200

Leu Gln Gln Asn LeuLeu Gln Gln Asn Leu

205205

Val Gly Ser Gln Thr 210Val Gly Ser Gln Thr 210

Gly Asn Asp Ile GlyGly Asn Asp Ile Gly

215215

Glu Arg Asp Lys IleGlu Arg Asp Lys Ile

220220

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

GlyGly

Leu 160Leu 160

GlyGly

ValVal

ThrThr

AlaAla

- 548 044346- 548 044346

Glu Asn Pro Val Ser Thr Gly Glu Lys Asn Ala Ala ThrGlu Asn Pro Val Ser Thr Gly Glu Lys Asn Ala Ala Thr

225 230 235 <210> 373 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>225 230 235 <210> 373 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v90 ECD < 400> 373< 223> ICOSL v90 ECD < 400> 373

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala CysLeu Ser Cys Ala Cys

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn AspPhe Asp Leu Asn Asp

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Leu Ser 75Arg Gly Asp Leu Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Arg SerVal Leu Ser Arg Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

- 549 044346- 549 044346

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Arg Ile Glu Asn Val 200Arg Ile Glu Asn Val 200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 374 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 374 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v91 ECD < 400> 374< 223> ICOSL v91 ECD < 400> 374

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Gln Gly Asp Phe Ser 75Gln Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Pro SerVal Leu Ser Pro Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Asp GluVal Leu Ser Asp Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr PheAsp Glu Leu Thr Phe

135135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

- 550 044346- 550 044346

175175

165165

170170

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 375 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 375 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v92 ECD < 400> 375< 223> ICOSL v92 ECD < 400> 375

Asp Thr Gln Glu LysAsp Thr Gln Glu Lys

55

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Gln 70Pro Ala Gly Met Gln 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Asp GluVal Leu Ser Asp Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

- 551 044346- 551 044346

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

Ser 160Ser 160

ArgArg

GlyGly

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 376 <211> 238 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 376 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v93 ECD <400> 376<223> ICOSL v93 ECD <400> 376

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

- 552 044346- 552 044346

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Gly Val 120Ala Asn Phe Gly Val 120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Arg Ile Glu Asn Val 200Arg Ile Glu Asn Val 200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 377 <211> 238 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 377 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v94 ECD <400> 377<223> ICOSL v94 ECD <400> 377

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp ValGlu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val

1515

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn AspPro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp

30thirty

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 40 45Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 40 45

Ile Pro Gln Ser Ser 50Ile Pro Gln Ser Ser 50

Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr ArgSer Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg

6060

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

LeuLeu

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 70 75Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 70 75

- 553 044346- 553 044346

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Ser Ser ValAla Asn Ser Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Lys Pro Val 225Thr Glu Lys Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 378 <211> 238 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 378 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v96 ECD <400> 378<223> ICOSL v96 ECD <400> 378

Asp Thr Gln Glu 1Asp Thr Gln Glu 1

Lys Glu 5Lys Glu 5

Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp ValVal Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val

1515

Leu Ser Cys Ala 20Leu Ser Cys Ala 20

Cys ProCys Pro

Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn AspGlu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp

30thirty

Tyr Val Tyr TrpTyr Val Tyr Trp

Gln ThrGln Thr

Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr TyrSer Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr

4545

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Ile Pro Gln SerIle Pro Gln Ser

Ser SerSer Ser

Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr ArgLeu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg

- 554 044346- 554 044346

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Thr Gly Met Leu 70Pro Thr Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val ThrThr Leu His Val Thr

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr PheAsp Glu Leu Thr Phe

135135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Ala ProIle Ala Arg Ala Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Arg Ile Glu Asn Val 200Arg Ile Glu Asn Val 200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 379 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 379 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v96 ECD <400> 379<223> ICOSL v96 ECD <400> 379

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn AspLeu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp

25 3025 30

GluGlu

ValVal

- 555 044346- 555 044346

Tyr Val TyrTyr Val Tyr

Trp Gln ThrTrp Gln Thr

Ser Glu SerSer Glu Ser

Lys Ala ValLys Ala Val

Val Thr Tyr 45Val Thr Tyr 45

Ile Pro GlnIle Pro Gln

His Ser SerHis Ser Ser

Leu Glu Tyr 55Leu Glu Tyr 55

Val Asp SerVal Asp Ser

Arg Tyr ArgArg Tyr Arg

Arg Ala Leu 65Arg Ala Leu 65

Met Ser ProMet Ser Pro

Ala Gly MetAla Gly Met

Gln Arg GlyGln Arg Gly

Asp Phe SerAsp Phe Ser

Arg Leu PheArg Leu Phe

Asn Val ThrAsn Val Thr

Pro Gln GlyPro Gln Gly

Glu Gln Lys 90Glu Gln Lys 90

Phe His CysPhe His Cys

Val Leu SerVal Leu Ser

Gln Ser Leu 100Gln Ser Leu 100

Gly Phe GlnGly Phe Gln

105105

Glu Val LeuGlu Val Leu

Ser Asp GluSer Asp Glu

110110

Thr Leu HisThr Leu His

115115

Val Ala AlaVal Ala Ala

Asn Phe SerAsn Phe Ser

120120

Val Pro ValVal Pro Val

Val Ser Ala 125Val Ser Ala 125

His Ser ProHis Ser Pro

130130

Ser Gln AspSer Gln Asp

Glu Leu Thr 135Glu Leu Thr 135

Phe Thr CysPhe Thr Cys

140140

Thr Ser IleThr Ser Ile

Gly Tyr Pro 145Gly Tyr Pro 145

Arg Pro AsnArg Pro Asn

150150

Val Tyr TrpVal Tyr Trp

Ile Asn LysIle Asn Lys

155155

Thr Asp AsnThr Asp Asn

Leu Leu AspLeu Leu Asp

Gln Ala LeuGln Ala Leu

165165

Gln Asn AspGln Asn Asp

Thr Val Ser 170Thr Val Ser 170

Leu Asn MetLeu Asn Met

175175

Gly Leu TyrGly Leu Tyr

Asp Val Val 180Asp Val Val 180

Ser Val LeuSer Val Leu

185185

Arg Ile AlaArg Ile Ala

Arg Thr ProArg Thr Pro

190190

Val Asn IleVal Asn Ile

195195

Gly Cys CysGly Cys Cys

Ile Glu AsnIle Glu Asn

200200

Val Leu LeuVal Leu Leu

Gln Gln Asn 205Gln Gln Asn 205

Thr Val GlyThr Val Gly

210210

Ser Gln ThrSer Gln Thr

Gly Asn Asp 215Gly Asn Asp 215

Ile Gly GluIle Gly Glu

220220

Arg Asp LysArg Asp Lys

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn 225Thr Glu Asn 225

Pro Val SerPro Val Ser

230230

Thr Gly GluThr Gly Glu

Lys Asn AlaLys Asn Ala

235235

Ala Thr <210> 380 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Ala Thr <210> 380 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v97 ECD <400> 380<223> ICOSL v97 ECD <400> 380

- 556 044346- 556 044346

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Arg SerVal Leu Ser Arg Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Asp GluVal Leu Ser Asp Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Phe GlnHis Ser Pro Phe Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn ThrVal Phe Leu Asn Thr

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 381 <211> 238Asn Ala Ala Thr 235 <210> 381 <211> 238

- 557 044346 <212> БЕЛОК <213> Искусственная <220>- 557 044346 <212> PROTEIN <213> Artificial <220>

<223> ICOSL v98 ECD <400> 381<223> ICOSL v98 ECD <400> 381

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5 последовательностьAsp Thr Gln Glu Lys 1 5 sequence

Glu Val Arg Ala Met 10Glu Val Arg Ala Met 10

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Arg SerVal Leu Ser Arg Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Ile Leu Ser Asp GluIle Leu Ser Asp Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Phe 150Asn Val Tyr Trp Phe 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Arg Ile Glu Asn Val 200Arg Ile Glu Asn Val 200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Gly Asp LysGly Glu Gly Asp Lys

220220

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

- 558 044346- 558 044346

Thr Glu Asn Pro Val Ser Thr Gly Glu Lys Asn Ala Ala ThrThr Glu Asn Pro Val Ser Thr Gly Glu Lys Asn Ala Ala Thr

225 230235 <210>382 <211>111 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>225 230235 <210>382 <211>111 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v85 IgV <400> 382<223> ICOSL v85 IgV <400> 382

Asp Thr 1Asp Thr 1

Gln GluGln Glu

Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 5 10 15Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 5 10 15

Leu SerLeu Ser

Cys Ala 20Cys Ala 20

Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp 25 30Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp 25 30

Tyr ValTyr Val

Tyr Trp 35Tyr Trp 35

Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr TyrGln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr

4545

Ile ProIle Pro

Gln Ser SerGln Ser Ser

Pro Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr ArgPro Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg

6060

Arg Ala 65Arg Ala 65

Leu Met SerLeu Met Ser

Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 70 75Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 70 75

Arg LeuArg Leu

Phe Asn ValPhe Asn Val

Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 90 95Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 90 95

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

Val LeuVal Leu

Ser Gln SerSer Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val GluLeu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu

105110 <210>383 <211>111 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>105110 <210>383 <211>111 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v86 IgV <400> 383<223> ICOSL v86 IgV <400> 383

Asp Thr Gln Glu 1Asp Thr Gln Glu 1

Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 5 10 15Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 5 10 15

Leu Ser Cys Ala 20Leu Ser Cys Ala 20

Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp 25 30Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp 25 30

GluGlu

ValVal

HisHis

Tyr Val Tyr TrpTyr Val Tyr Trp

Gln Pro Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr TyrGln Pro Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr

4545

- 559 044346- 559 044346

Ile Pro Gln SerIle Pro Gln Ser

Ser Ser Leu GluSer Ser Leu Glu

Asp Val Asp Ser 60Asp Val Asp Ser 60

Arg Tyr Arg AsnArg Tyr Arg Asn

Arg Ala Leu Met 65Arg Ala Leu Met 65

Ser Pro Ala Gly 70Ser Pro Ala Gly 70

Met Leu Arg GlyMet Leu Arg Gly

Asp Phe Ser Leu 80Asp Phe Ser Leu 80

Arg Leu Phe AsnArg Leu Phe Asn

Val Thr Pro Gln 85Val Thr Pro Gln 85

Asp Glu Gln Lys 90Asp Glu Gln Lys 90

Phe His Cys Leu 95Phe His Cys Leu 95

Val Leu Ser GlnVal Leu Ser Gln

100100

Ser Leu Gly PheSer Leu Gly Phe

Gln Glu Val Leu 105Gln Glu Val Leu 105

Ser Val GluSer Val Glu

110 <210> 384 <211> 110 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>110 <210> 384 <211> 110 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v87 IgV < 400> 384<223> ICOSL v87 IgV <400> 384

Asp Thr Gln Glu LysAsp Thr Gln Glu Lys

Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val GluGlu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val Glu

1515

Leu SerLeu Ser

Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp ValCys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp Val

25 3025 30

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser 35Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser 35

Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr His 40 45Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr His 40 45

Ile Pro Gln Asn Ser Ser LeuIle Pro Gln Asn Ser Ser Leu

5555

Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg Asn 60Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg Asn 60

Arg Ala Leu Met Ser Pro AlaArg Ala Leu Met Ser Pro Ala

7070

Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser Leu 75 80Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser Leu 75 80

Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro 85Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro 85

Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys LeuGln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys Leu

9595

Val Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser ValVal Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val

100 105 110 <210> 385 <211> 110 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>100 105 110 <210> 385 <211> 110 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v88 IgV<223> ICOSL v88 IgV

- 560 044346 <400> 385- 560 044346 <400> 385

Asp Thr Gln Glu LysAsp Thr Gln Glu Lys

Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp ValGlu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val

1515

Leu Ser Cys Ala Cys Pro 20Leu Ser Cys Ala Cys Pro 20

Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn AspGlu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp

30thirty

Val Tyr Trp Gln Thr Ser 35Val Tyr Trp Gln Thr Ser 35

Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr HisGlu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr His

4545

Pro Gln Asn Ser Ser LeuPro Gln Asn Ser Ser Leu

Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg Asn 55 60Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg Asn 55 60

Ala Leu Met Ser Pro AlaAla Leu Met Ser Pro Ala

7070

Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser Leu 75Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser Leu 75

Leu Phe Asn Val Thr ProLeu Phe Asn Val Thr Pro

Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys Leu 90 95Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys Leu 90 95

GluGlu

ValVal

IleIle

ArgArg

Arg 80Arg 80

ValVal

Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val GluLeu Ser Gln Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu

100 105 110 <210> 386 <211> 111 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>100 105 110 <210> 386 <211> 111 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v91 IgV < 400> 386< 223> ICOSL v91 IgV < 400> 386

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Gln Gly Asp Phe Ser 75Gln Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

- 561 044346- 561 044346

Val Leu Ser Pro Ser Leu Gly Phe Gln Glu ValVal Leu Ser Pro Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val

100100

105105

Leu Ser Asp GluLeu Ser Asp Glu

110 <210> 387 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>110 <210> 387 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v99 ECD < 400> 387< 223> ICOSL v99 ECD < 400> 387

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Asn Ser 50Ile Pro Gln Asn Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Gln Val 85Arg Leu Phe Gln Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

- 562 044346- 562 044346

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn Val Leu Leu Gln Gln AsnCys Ile Glu Asn Val Leu Leu Gln Gln Asn

200 205200 205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp Ile Gly Glu Arg Asp LysThr Gly Asn Asp Ile Gly Glu Arg Asp Lys

215 220215 220

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys Asn Ala Ala ThrSer Thr Gly Glu Lys Asn Ala Ala Thr

230 235 <210> 388 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>230 235 <210> 388 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v100 ECD < 400> 388< 223> ICOSL v100 ECD < 400> 388

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Asn Ser 50Ile Pro Gln Asn Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Gln Phe Ser ValAla Gln Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

- 563 044346- 563 044346

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 389 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 389 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v101 ECD < 400> 389< 223> ICOSL v101 ECD < 400> 389

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala CysLeu Ser Cys Ala Cys

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn AspPhe Asp Leu Asn Asp

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Asn Ser 50Ile Pro Gln Asn Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

Asp Glu Leu Thr PheAsp Glu Leu Thr Phe

Thr Cys Thr Ser IleThr Cys Thr Ser Ile

- 564 044346- 564 044346

130130

135135

140140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Gln Asp ThrLeu Gln Gln Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 390 <211> 238 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 390 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v102 ECD <400>390<223> ICOSL v102 ECD <400>390

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp ValAsp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val

5 10155 1015

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn AspLeu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp

25302530

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 4045Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 4045

Ile Pro Gln Asn Ser Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 5560Ile Pro Gln Asn Ser Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 5560

Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 65 7075Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 65 7075

Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 85 9095Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 85 9095

Val Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu

100 105110100 105110

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

- 565 044346- 565 044346

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln GlnLeu Leu Gln Gln Gln

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 391 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 391 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v103 ECD <220><223> ICOSL v103 ECD <220>

<221> ВАРИАНТ <222> (207)..(207) <223> X = N или Q <400> 391<221> OPTION <222> (207)..(207) <223> X = N or Q <400> 391

Asp Thr Gln Glu LysAsp Thr Gln Glu Lys

Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp ValGlu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val

1515

Leu SerLeu Ser

Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn AspCys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp

25 3025 30

Tyr ValTyr Val

Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 40 45Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 40 45

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Ile Pro Gln Gln Ser Ser Leu Glu Asn Val AspIle Pro Gln Gln Ser Ser Leu Glu Asn Val Asp

Ser Arg Tyr ArgSer Arg Tyr Arg

- 566 044346- 566 044346

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr PheAsp Glu Leu Thr Phe

135135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln XaaLeu Leu Gln Gln Xaa

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 392 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 392 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v104 ECD <220><223> ICOSL v104 ECD <220>

<221> ВАРИАНТ < 222> (168)..(168) < 223> X = N или Q <220><221> OPTION < 222> (168)..(168) < 223> X = N or Q <220>

< 221> ВАРИАНТ<221>OPTION

- 567 044346 <222> (207) . . (207) <223> X = N или Q <400> 392- 567 044346 <222> (207) . . (207) <223> X = N or Q <400> 392

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala CysLeu Ser Cys Ala Cys

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn AspPhe Asp Leu Asn Asp

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Asn Ser 50Ile Pro Gln Asn Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Xaa Asp ThrLeu Gln Xaa Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln XaaLeu Leu Gln Gln Xaa

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235Asn Ala Ala Thr 235

- 568 044346 <210> 393 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>- 568 044346 <210> 393 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v105 ECD <400> 393<223> ICOSL v105 ECD <400> 393

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Gln Ser 50Ile Pro Gln Gln Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr PheAsp Glu Leu Thr Phe

135135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Gln Asp ThrLeu Gln Gln Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

- 569 044346- 569 044346

Thr Val Gly Ser Gln Thr Gly AsnThr Val Gly Ser Gln Thr Gly Asn

210 215210 215

Asp Ile GlyAsp Ile Gly

Glu Arg Asp Lys 220Glu Arg Asp Lys 220

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val SerThr Glu Asn Pro Val Ser

225 230225 230

Thr Gly Glu Lys Asn Ala Ala ThrThr Gly Glu Lys Asn Ala Ala Thr

235 <210> 394 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>235 <210> 394 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v106 ECD < 400> 394< 223> ICOSL v106 ECD < 400> 394

Asp Thr Gln Glu LysAsp Thr Gln Glu Lys

55

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Asn Ser 50Ile Pro Gln Asn Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Gln Val 85Arg Leu Phe Gln Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

- 570 044346- 570 044346

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln GlnLeu Leu Gln Gln Gln

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 395 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 395 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v107 ECD < 400> 395< 223> ICOSL v107 ECD < 400> 395

Asp Thr Gln Glu LysAsp Thr Gln Glu Lys

Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp ValGlu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val

1515

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn AspLeu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp

25 3025 30

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 40 45Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 40 45

Ile Pro Gln Asn Ser Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 55 60Ile Pro Gln Asn Ser Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 55 60

Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 65 70 75Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 65 70 75

Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 85 90 95Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 85 90 95

Val Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu

100 105 110100 105 110

Thr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser Val Pro Val Val Ser AlaThr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser Val Pro Val Val Ser Ala

115 120 125115 120 125

His Ser Pro Ser Gln Asp Glu Leu Thr Phe Thr Cys Thr Ser IleHis Ser Pro Ser Gln Asp Glu Leu Thr Phe Thr Cys Thr Ser Ile

130 135 140130 135 140

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

SerSer

Gly Tyr Pro Arg Pro Asn Val Tyr Trp Ile Gln Lys Thr Asp AsnGly Tyr Pro Arg Pro Asn Val Tyr Trp Ile Gln Lys Thr Asp Asn

- 571 044346- 571 044346

145145

150150

155155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln GlnLeu Leu Gln Gln Gln

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

160160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 396 <211> 238 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 396 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v108 ECD <400> 396<223> ICOSL v108 ECD <400> 396

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Asn Ser 50Ile Pro Gln Asn Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Gln Phe Ser ValAla Gln Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

- 572 044346- 572 044346

His Ser Pro Ser Gln Asp Glu LeuHis Ser Pro Ser Gln Asp Glu Leu

130135130135

Gly Tyr Pro Arg Pro Asn Val TyrGly Tyr Pro Arg Pro Asn Val Tyr

145150145150

Thr Phe Thr Cys Thr Ser Ile Asn 140Thr Phe Thr Cys Thr Ser Ile Asn 140

Trp Ile Asn Lys Thr Asp Asn Ser 155160Trp Ile Asn Lys Thr Asp Asn Ser 155160

Leu Leu Asp Gln Ala Leu 165Leu Leu Asp Gln Ala Leu 165

Gly Leu Tyr Asp Val Val 180Gly Leu Tyr Asp Val Val 180

Gln Gln Asp Thr Val Phe Leu Asn Met ArgGln Gln Asp Thr Val Phe Leu Asn Met Arg

170 175170 175

Ser Val Leu Arg Ile Ala Arg Thr Pro SerSer Val Leu Arg Ile Ala Arg Thr Pro Ser

185 190185 190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn Val Leu Leu Gln Gln Asn LeuCys Ile Glu Asn Val Leu Leu Gln Gln Asn Leu

200 205200 205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp Ile Gly Glu Arg Asp Lys IleThr Gly Asn Asp Ile Gly Glu Arg Asp Lys Ile

215 220215 220

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys Asn Ala Ala ThrSer Thr Gly Glu Lys Asn Ala Ala Thr

230 235 <210> 397 < 211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>230 235 <210> 397 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v109 ECD < 400> 397< 223> ICOSL v109 ECD < 400> 397

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg 1 5Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg 1 5

Ala Met Val Gly Ser Asp Val GluAla Met Val Gly Ser Asp Val Glu

1515

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly 20Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly 20

Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp Val 25 30Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp Val 25 30

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser GluTyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu

4040

Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr His 45Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr His 45

Ile Pro Gln Asn Ser Ser Leu GluIle Pro Gln Asn Ser Ser Leu Glu

5555

Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg Asn 60Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg Asn 60

Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly 65 70Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly 65 70

Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser LeuMet Leu Arg Gly Asp Phe Ser Leu

8080

Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln 85Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln 85

Asp Glu Gln Lys Phe His Cys LeuAsp Glu Gln Lys Phe His Cys Leu

9595

- 573 044346- 573 044346

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Gln Phe Ser ValAla Gln Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr PheAsp Glu Leu Thr Phe

135135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln GlnLeu Leu Gln Gln Gln

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 398 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 398 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v110 ECD <220><223> ICOSL v110 ECD <220>

<221> ВАРИАНТ <222> (155) .. (155) < 223> X = N или Q <400>398<221> OPTION <222> (155) .. (155) < 223> X = N or Q <400>398

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 1015Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 1015

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn AspLeu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp

25302530

GluGlu

ValVal

HisHis

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 4045Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 4045

- 574 044346- 574 044346

Ile Pro Gln Asn Ser 50Ile Pro Gln Asn Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Gln Phe Ser ValAla Gln Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Xaa Lys Thr Asp Asn 155Xaa Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 399 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 399 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v111 ECD < 400> 399< 223> ICOSL v111 ECD < 400> 399

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15

GluGlu

- 575 044346- 575 044346

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Gln Ser 50Ile Pro Gln Gln Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Gln Val 85Arg Leu Phe Gln Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr PheAsp Glu Leu Thr Phe

135135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 400 <211> 238 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 400 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

- 576 044346 <223> ICOSL v112 ECD <400> 400- 576 044346 <223> ICOSL v112 ECD <400> 400

Asp Thr Gln Glu LysAsp Thr Gln Glu Lys

55

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Gln Ser 50Ile Pro Gln Gln Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Gln Phe Ser ValAla Gln Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235Asn Ala Ala Thr 235

- 577 044346 <210> 401 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>- 577 044346 <210> 401 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v113 ECD <400> 401<223> ICOSL v113 ECD <400> 401

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Asn Ser 50Ile Pro Gln Asn Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Gln Val 85Arg Leu Phe Gln Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Gln Phe Ser ValAla Gln Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

- 578 044346- 578 044346

Thr Val Gly Ser Gln Thr Gly AsnThr Val Gly Ser Gln Thr Gly Asn

210 215210 215

Asp Ile GlyAsp Ile Gly

Glu Arg Asp Lys 220Glu Arg Asp Lys 220

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val SerThr Glu Asn Pro Val Ser

225 230225 230

Thr Gly Glu Lys Asn Ala Ala ThrThr Gly Glu Lys Asn Ala Ala Thr

235 <210> 402 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>235 <210> 402 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> Искусственная последовательность < 400> 402< 223> Artificial sequence < 400> 402

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Gln Ser 50Ile Pro Gln Gln Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Gln Val 85Arg Leu Phe Gln Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Gln Asp ThrLeu Gln Gln Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

- 579 044346- 579 044346

180180

185185

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp Lys 220Gly Glu Arg Asp Lys 220

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 403 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 403 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v115 ECD < 400> 403< 223> ICOSL v115 ECD < 400> 403

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala CysLeu Ser Cys Ala Cys

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn AspPhe Asp Leu Asn Asp

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Gln Ser 50Ile Pro Gln Gln Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Gln Val 85Arg Leu Phe Gln Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

Asn Lys Thr Asp AsnAsn Lys Thr Asp Asn

155155

- 580 044346- 580 044346

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln GlnLeu Leu Gln Gln Gln

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 404 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 404 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v116 ECD <400>404<223> ICOSL v116 ECD <400>404

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp ValAsp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val

5 10155 1015

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn AspLeu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp

25302530

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 4045Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 4045

Ile Pro Gln Asn Ser Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 5560Ile Pro Gln Asn Ser Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 5560

Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 65 7075Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 65 7075

Arg Leu Phe Gln Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 85 9095Arg Leu Phe Gln Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 85 9095

Val Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu

100 105110100 105110

Thr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser Val Pro Val Val Ser AlaThr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser Val Pro Val Val Ser Ala

115 120125115 120125

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

- 581 044346- 581 044346

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr PheAsp Glu Leu Thr Phe

135135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Gln Lys Thr Asp Asn 155Gln Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Gln Asp ThrLeu Gln Gln Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 405 <211> 238 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 405 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v117 ECD <400> 405<223> ICOSL v117 ECD <400> 405

Asp Thr Gln Glu LysAsp Thr Gln Glu Lys

55

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Asn Ser 50Ile Pro Gln Asn Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Gln Val 85Arg Leu Phe Gln Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

- 582 044346- 582 044346

Val Leu Ser Gln Ser Leu Gly PheVal Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe

100100

Gln Glu Val Leu Ser Val GluGln Glu Val Leu Ser Val Glu

105 110105 110

Thr Leu His Val Ala Ala Asn PheThr Leu His Val Ala Ala Asn Phe

115 120115 120

Ser Val Pro Val Val Ser AlaSer Val Pro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser Gln Asp Glu LeuHis Ser Pro Ser Gln Asp Glu Leu

130 135130 135

Thr Phe Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Phe Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Gln Asp ThrLeu Gln Gln Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln GlnLeu Leu Gln Gln Gln

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 406 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 406 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v118 ECD <400>406<223>ICOSL v118 ECD <400>406

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp ValAsp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val

5 10155 1015

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn AspLeu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp

25302530

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 4045Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 4045

Ile Pro Gln Asn Ser Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 5560Ile Pro Gln Asn Ser Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 5560

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

LeuLeu

Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe SerArg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser

- 583 044346- 583 044346

Arg Leu Phe Gln Val 85Arg Leu Phe Gln Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

His Lys Thr Asp Asn 155His Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln GlnLeu Leu Gln Gln Gln

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 407 <211> 238 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 407 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v119 ECD <400> 407<223> ICOSL v119 ECD <400> 407

Asp Thr Gln Glu 1Asp Thr Gln Glu 1

Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 5 10 15Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 5 10 15

Leu Ser Cys Ala 20Leu Ser Cys Ala 20

Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp 25 30Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp 25 30

Tyr Val Tyr TrpTyr Val Tyr Trp

Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr TyrGln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr

4545

GluGlu

ValVal

HisHis

- 584 044346- 584 044346

Ile Pro Gln Asn Ser 50Ile Pro Gln Asn Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Gln Lys Thr Asp Asn 155Gln Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Gln Asp ThrLeu Gln Gln Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln GlnLeu Leu Gln Gln Gln

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 408 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 408 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v120 ECD <400> 408<223> ICOSL v120 ECD <400> 408

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp ValAsp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val

5 10 155 10 15

GluGlu

- 585 044346- 585 044346

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Asn Ser 50Ile Pro Gln Asn Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Gln Phe Ser ValAla Gln Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr PheAsp Glu Leu Thr Phe

135135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Gln Lys Thr Asp Asn 155Gln Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Gln Asp ThrLeu Gln Gln Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 409 <211> 238 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 409 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

- 586 044346 <223> ICOSL v121 ECD <400> 409- 586 044346 <223> ICOSL v121 ECD <400> 409

Asp Thr Gln Glu LysAsp Thr Gln Glu Lys

55

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Asn Ser 50Ile Pro Gln Asn Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Gln Phe Ser ValAla Gln Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Gln Asp ThrLeu Gln Gln Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln GlnLeu Leu Gln Gln Gln

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235Asn Ala Ala Thr 235

- 587 044346 <210> 410 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>- 587 044346 <210> 410 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v122 ECD <400> 410<223> ICOSL v122 ECD <400> 410

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Asn Ser 50Ile Pro Gln Asn Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Gln Val 85Arg Leu Phe Gln Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Gln Phe Ser ValAla Gln Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln GlnLeu Leu Gln Gln Gln

205205

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

- 588 044346- 588 044346

Thr Val Gly Ser Gln Thr Gly AsnThr Val Gly Ser Gln Thr Gly Asn

210 215210 215

Asp Ile GlyAsp Ile Gly

Glu Arg Asp Lys 220Glu Arg Asp Lys 220

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val SerThr Glu Asn Pro Val Ser

225 230225 230

Thr Gly Glu Lys Asn Ala Ala ThrThr Gly Glu Lys Asn Ala Ala Thr

235 <210> 411 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>235 <210> 411 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v123 ECD < 400> 411< 223> ICOSL v123 ECD < 400> 411

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Asn Ser 50Ile Pro Gln Asn Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Gln Phe Ser ValAla Gln Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

His Lys Thr Asp Asn 155His Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

- 589 044346- 589 044346

180180

185185

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln GlnLeu Leu Gln Gln Gln

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp Lys 220Gly Glu Arg Asp Lys 220

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 412 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 412 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v124 ECD < 400> 412< 223> ICOSL v124 ECD < 400> 412

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala CysLeu Ser Cys Ala Cys

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn AspPhe Asp Leu Asn Asp

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Asn Ser 50Ile Pro Gln Asn Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Gln Val 85Arg Leu Phe Gln Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Gln Phe Ser ValAla Gln Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

Gln Lys Thr Asp AsnGln Lys Thr Asp Asn

155155

- 590 044346- 590 044346

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 413 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 413 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v125 ECD <400>413<223> ICOSL v125 ECD <400>413

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp ValAsp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val

5 10155 1015

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn AspLeu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp

25302530

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 4045Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 4045

Ile Pro Gln Gln Ser Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 5560Ile Pro Gln Gln Ser Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 5560

Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 65 7075Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 65 7075

Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 85 9095Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 85 9095

Val Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu

100 105110100 105110

Thr Leu His Val Ala Ala Gln Phe Ser Val Pro Val Val Ser AlaThr Leu His Val Ala Ala Gln Phe Ser Val Pro Val Val Ser Ala

115 120125115 120125

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

- 591 044346- 591 044346

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr PheAsp Glu Leu Thr Phe

135135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Gln Lys Thr Asp Asn 155Gln Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 414 <211> 238 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 414 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v126 ECD <400> 414<223> ICOSL v126 ECD <400> 414

Asp Thr Gln Glu LysAsp Thr Gln Glu Lys

55

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Gln Val 85Arg Leu Phe Gln Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

- 592 044346- 592 044346

Val Leu Ser Gln Ser Leu 100Val Leu Ser Gln Ser Leu 100

Thr Leu His Val Ala Ala 115Thr Leu His Val Ala Ala 115

His Ser Pro Ser Gln Asp 130His Ser Pro Ser Gln Asp 130

Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val GluGly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu

105 110105 110

Gln Phe Ser Val Pro Val Val Ser AlaGln Phe Ser Val Pro Val Val Ser Ala

120 125120 125

Glu Leu Thr Phe Thr Cys Thr Ser Ile 135 140Glu Leu Thr Phe Thr Cys Thr Ser Ile 135 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 415 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 415 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v127 ECD <220><223> ICOSL v127 ECD <220>

< 221> ВАРИАНТ < 222> (168)..(168) < 223> X = N или Q <220>< 221> OPTION < 222> (168)..(168) < 223> X = N or Q <220>

< 221> ВАРИАНТ < 222> (207)..(207) < 223> X = N или Q <400>415< 221> OPTION < 222> (207)..(207) < 223> X = N or Q <400>415

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp ValAsp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val

5 10155 1015

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn AspLeu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp

25302530

GluGlu

ValVal

- 593 044346- 593 044346

Tyr Val TyrTyr Val Tyr

Trp Gln ThrTrp Gln Thr

Ser Glu SerSer Glu Ser

Lys Thr ValLys Thr Val

Val Thr Tyr 45Val Thr Tyr 45

Ile Pro GlnIle Pro Gln

His Ser SerHis Ser Ser

Leu Glu Asn 55Leu Glu Asn 55

Val Asp SerVal Asp Ser

Arg Tyr ArgArg Tyr Arg

Arg Ala Leu 65Arg Ala Leu 65

Met Ser ProMet Ser Pro

Ala Gly MetAla Gly Met

Leu Arg GlyLeu Arg Gly

Asp Phe SerAsp Phe Ser

Arg Leu PheArg Leu Phe

Gln Val ThrGln Val Thr

Pro Gln AspPro Gln Asp

Glu Gln Lys 90Glu Gln Lys 90

Phe His CysPhe His Cys

Val Leu SerVal Leu Ser

Gln Ser Leu 100Gln Ser Leu 100

Gly Phe GlnGly Phe Gln

105105

Glu Val LeuGlu Val Leu

Ser Val GluSer Val Glu

110110

Thr Leu HisThr Leu His

115115

Val Ala AlaVal Ala Ala

Asn Phe SerAsn Phe Ser

120120

Val Pro ValVal Pro Val

Val Ser Ala 125Val Ser Ala 125

His Ser ProHis Ser Pro

130130

Ser Gln AspSer Gln Asp

Glu Leu Thr 135Glu Leu Thr 135

Phe Thr CysPhe Thr Cys

140140

Thr Ser IleThr Ser Ile

Gly Tyr Pro 145Gly Tyr Pro 145

Arg Pro AsnArg Pro Asn

150150

Val Tyr TrpVal Tyr Trp

Ile Asn LysIle Asn Lys

155155

Thr Asp AsnThr Asp Asn

Leu Leu AspLeu Leu Asp

Gln Ala LeuGln Ala Leu

165165

Gln Xaa AspGln Xaa Asp

Thr Val Phe 170Thr Val Phe 170

Leu Asn MetLeu Asn Met

175175

Gly Leu TyrGly Leu Tyr

Asp Val Val 180Asp Val Val 180

Ser Val LeuSer Val Leu

185185

Arg Ile AlaArg Ile Ala

Arg Thr ProArg Thr Pro

190190

Val Asn IleVal Asn Ile

195195

Gly Cys CysGly Cys Cys

Ile Glu AsnIle Glu Asn

200200

Val Leu LeuVal Leu Leu

Gln Gln Xaa 205Gln Gln Xaa 205

Thr Val GlyThr Val Gly

210210

Ser Gln ThrSer Gln Thr

Gly Asn Asp 215Gly Asn Asp 215

Ile Gly GluIle Gly Glu

220220

Arg Asp LysArg Asp Lys

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn 225Thr Glu Asn 225

Pro Val SerPro Val Ser

230230

Thr Gly GluThr Gly Glu

Lys Asn AlaLys Asn Ala

235235

Ala Thr <210> 416 <211> 238 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Ala Thr <210> 416 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v128 ECD<223> ICOSL v128 ECD

- 594 044346 <220>- 594 044346 <220>

<221> ВАРИАНТ < 222> (155) .. (155) < 223> X = N или Q <220><221> OPTION < 222> (155) .. (155) < 223> X = N or Q <220>

< 221> ВАРИАНТ <222> (168)..(168) <223> X = N или Q <400> 416< 221> OPTION <222> (168)..(168) <223> X = N or Q <400> 416

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Gln Ser 50Ile Pro Gln Gln Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Gln Val 85Arg Leu Phe Gln Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr PheAsp Glu Leu Thr Phe

135135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Xaa Lys Thr Asp Asn 155Xaa Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Xaa Asp ThrLeu Gln Xaa Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

- 595 044346- 595 044346

Thr Val Gly Ser Gln Thr Gly AsnThr Val Gly Ser Gln Thr Gly Asn

210 215210 215

Asp Ile GlyAsp Ile Gly

Glu Arg Asp Lys 220Glu Arg Asp Lys 220

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val SerThr Glu Asn Pro Val Ser

225 230225 230

Thr Gly Glu Lys Asn Ala Ala ThrThr Gly Glu Lys Asn Ala Ala Thr

235 <210> 417 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>235 <210> 417 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v129 ECD < 400> 417< 223> ICOSL v129 ECD < 400> 417

Asp Thr Gln Glu LysAsp Thr Gln Glu Lys

55

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Gln Ser 50Ile Pro Gln Gln Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Gln Val 85Arg Leu Phe Gln Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Gln Phe Ser ValAla Gln Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Gln Asp ThrLeu Gln Gln Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

- 596 044346- 596 044346

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 418 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 418 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v131 ECD < 400> 418< 223> ICOSL v131 ECD < 400> 418

Asp Thr Gln Glu LysAsp Thr Gln Glu Lys

Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp ValGlu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val

1515

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn AspLeu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp

25 3025 30

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 40 45Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 40 45

Ile Pro Gln Asn Ser Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 55 60Ile Pro Gln Asn Ser Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 55 60

Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 65 70 75Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 65 70 75

Arg Leu Phe Gln Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 85 90 95Arg Leu Phe Gln Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 85 90 95

Val Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu

100 105 110100 105 110

Thr Leu His Val Ala Ala Gln Phe Ser Val Pro Val Val Ser AlaThr Leu His Val Ala Ala Gln Phe Ser Val Pro Val Val Ser Ala

115 120 125115 120 125

His Ser Pro Ser Gln Asp Glu Leu Thr Phe Thr Cys Thr Ser IleHis Ser Pro Ser Gln Asp Glu Leu Thr Phe Thr Cys Thr Ser Ile

130 135 140130 135 140

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

SerSer

Gly Tyr Pro Arg Pro Asn Val Tyr Trp Ile Gln Lys Thr Asp AsnGly Tyr Pro Arg Pro Asn Val Tyr Trp Ile Gln Lys Thr Asp Asn

- 597 044346- 597 044346

145145

150150

155155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Gln Asp ThrLeu Gln Gln Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

160160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 419 <211> 238 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 419 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v131 ECD <400> 419<223> ICOSL v131 ECD <400> 419

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Asn Ser 50Ile Pro Gln Asn Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Gln Val 85Arg Leu Phe Gln Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

- 598 044346- 598 044346

His Ser Pro Ser Gln Asp Glu LeuHis Ser Pro Ser Gln Asp Glu Leu

130135130135

Gly Tyr Pro Arg Pro Asn Val TyrGly Tyr Pro Arg Pro Asn Val Tyr

145150145150

Thr Phe Thr Cys Thr Ser Ile Asn 140Thr Phe Thr Cys Thr Ser Ile Asn 140

Trp Ile Gln Lys Thr Asp Asn Ser 155160Trp Ile Gln Lys Thr Asp Asn Ser 155160

Leu Leu Asp Gln Ala Leu 165Leu Leu Asp Gln Ala Leu 165

Gly Leu Tyr Asp Val Val 180Gly Leu Tyr Asp Val Val 180

Gln Gln Asp Thr Val Phe Leu Asn Met ArgGln Gln Asp Thr Val Phe Leu Asn Met Arg

170 175170 175

Ser Val Leu Arg Ile Ala Arg Thr Pro SerSer Val Leu Arg Ile Ala Arg Thr Pro Ser

185 190185 190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn Val Leu Leu Gln Gln Gln LeuCys Ile Glu Asn Val Leu Leu Gln Gln Gln Leu

200 205200 205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp Ile Gly Glu Arg Asp Lys IleThr Gly Asn Asp Ile Gly Glu Arg Asp Lys Ile

215 220215 220

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys Asn Ala Ala ThrSer Thr Gly Glu Lys Asn Ala Ala Thr

230 235 <210> 420 < 211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>230 235 <210> 420 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v132 ECD < 400> 420< 223> ICOSL v132 ECD < 400> 420

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg 1 5Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg 1 5

Ala Met Val Gly Ser Asp Val GluAla Met Val Gly Ser Asp Val Glu

1515

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly 20Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly 20

Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp Val 25 30Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp Val 25 30

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser GluTyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu

4040

Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr His 45Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr His 45

Ile Pro Gln Asn Ser Ser Leu GluIle Pro Gln Asn Ser Ser Leu Glu

5555

Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg Asn 60Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg Asn 60

Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly 65 70Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly 65 70

Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser LeuMet Leu Arg Gly Asp Phe Ser Leu

8080

Arg Leu Phe Gln Val Thr Pro Gln 85Arg Leu Phe Gln Val Thr Pro Gln 85

Asp Glu Gln Lys Phe His Cys LeuAsp Glu Gln Lys Phe His Cys Leu

9595

- 599 044346- 599 044346

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Gln Phe Ser ValAla Gln Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr PheAsp Glu Leu Thr Phe

135135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Gln Lys Thr Asp Asn 155Gln Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln GlnLeu Leu Gln Gln Gln

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 421 <211> 238 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 421 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL <400> 421<223> ICOSL <400> 421

Asp Thr Gln 1Asp Thr Gln 1

Leu Ser CysLeu Ser Cys

Tyr Val TyrTyr Val Tyr

Ile Pro Gln v133 ECDIle Pro Gln v133 ECD

Glu Lys Glu 5Glu Lys Glu 5

Ala Cys Pro 20Ala Cys Pro 20

Trp Gln ThrTrp Gln Thr

Gln Ser SerGln Ser Ser

Val Arg AlaVal Arg Ala

Glu Gly SerGlu Gly Ser

Ser Glu SerSer Glu Ser

Leu Glu Asn 55Leu Glu Asn 55

Met Val Gly 10Met Val Gly 10

Arg Phe AspArg Phe Asp

Lys Thr ValLys Thr Val

Val Asp Ser 60Val Asp Ser 60

Ser Asp ValSer Asp Val

Leu Asn Asp 30Leu Asn Asp 30

Val Thr Tyr 45Val Thr Tyr 45

Arg Tyr ArgArg Tyr Arg

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

- 600 044346- 600 044346

Arg Ala Leu Met Ser Pro AlaArg Ala Leu Met Ser Pro Ala

7070

Gly Met Leu Arg 75Gly Met Leu Arg 75

Arg Leu Phe Gln Val Thr Pro 85Arg Leu Phe Gln Val Thr Pro 85

Gln AspGln Asp

Glu Gln 90Glu Gln 90

Gly Asp Phe Ser Leu 80Gly Asp Phe Ser Leu 80

Lys Phe His Cys Leu 95Lys Phe His Cys Leu 95

ValVal

LeuLeu

SerSer

GlnGln

100100

SerSer

LeuLeu

GlyGly

PhePhe

GlnGln

105105

GluGlu

ValVal

LeuLeu

SerSer

ValVal

110110

GluGlu

ValVal

ThrThr

LeuLeu

HisHis

115115

ValVal

AlaAla

AlaAla

GlnGln

PhePhe

120120

SerSer

ValVal

ProPro

ValVal

ValVal

125125

SerSer

AlaAla

ProPro

HisHis

SerSer

130130

ProPro

SerSer

GlnGln

AspAsp

GluGlu

135135

LeuLeu

ThrThr

PhePhe

ThrThr

Cys 140Cys 140

ThrThr

SerSer

IleIle

AsnAsn

Gly Tyr 145Gly Tyr 145

Leu LeuLeu Leu

Pro ArgPro Arg

Pro AsnPro Asn

150150

Val TyrVal Tyr

Trp IleTrp Ile

Asp GlnAsp Gln

Ala Leu 165Ala Leu 165

Gln AsnGln Asn

Asp ThrAsp Thr

170170

Gly Leu Tyr Asp Val ValGly Leu Tyr Asp Val Val

180180

Ser ValSer Val

Leu Arg 185Leu Arg 185

Asn Lys 155Asn Lys 155

Val PheVal Phe

Ile AlaIle Ala

Thr AspThr Asp

Leu AsnLeu Asn

Arg ThrArg Thr

190190

Asn SerAsn Ser

160160

Met Arg 175Met Arg 175

Pro SerPro Ser

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn Val Leu Leu Gln Gln Gln LeuCys Ile Glu Asn Val Leu Leu Gln Gln Gln Leu

200 205200 205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp Ile Gly Glu Arg Asp Lys IleThr Gly Asn Asp Ile Gly Glu Arg Asp Lys Ile

215 220215 220

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys Asn Ala Ala ThrSer Thr Gly Glu Lys Asn Ala Ala Thr

230 235 <210> 422 <211> 238 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>230 235 <210> 422 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v134 ECD <400> 422<223> ICOSL v134 ECD <400> 422

Asp Thr Gln Glu 1Asp Thr Gln Glu 1

Leu Ser Cys AlaLeu Ser Cys Ala

Tyr Val Tyr TrpTyr Val Tyr Trp

Lys Glu Val Arg 5Lys Glu Val Arg 5

Cys Pro Glu GlyCys Pro Glu Gly

Ala Met Val Gly 10Ala Met Val Gly 10

Ser Asp Val GluSer Asp Val Glu

Ser Arg Phe Asp 25Ser Arg Phe Asp 25

Leu Asn Asp Val 30Leu Asn Asp Val 30

Gln Thr Ser GluGln Thr Ser Glu

Ser Lys Thr ValSer Lys Thr Val

Val Thr Tyr HisVal Thr Tyr His

- 601 044346- 601 044346

Ile Pro Gln Gln Ser 50Ile Pro Gln Gln Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Gln Val 85Arg Leu Phe Gln Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Gln Phe Ser ValAla Gln Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Gln Lys Thr Asp Asn 155Gln Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 423 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 423 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v135 ECD < 400> 423< 223> ICOSL v135 ECD < 400> 423

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15

GluGlu

- 602 044346- 602 044346

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Gln Ser 50Ile Pro Gln Gln Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Gln Val 85Arg Leu Phe Gln Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Gln Phe Ser ValAla Gln Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Gln Lys Thr Asp Asn 155Gln Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln GlnLeu Leu Gln Gln Gln

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 424 <211> 238 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательностьAsn Ala Ala Thr 235 <210> 424 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence

- 603 044346 <220>- 603 044346 <220>

<223> ICOSL v136 ECD <400> 424<223> ICOSL v136 ECD <400> 424

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala CysLeu Ser Cys Ala Cys

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn AspPhe Asp Leu Asn Asp

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Asn Ser 50Ile Pro Gln Asn Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Gln Val 85Arg Leu Phe Gln Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Gln Phe Ser ValAla Gln Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Gln Lys Thr Asp Asn 155Gln Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Gln Asp ThrLeu Gln Gln Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln GlnLeu Leu Gln Gln Gln

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235Asn Ala Ala Thr 235

- 604 044346 <210> 425 < 211> 111 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>- 604 044346 <210> 425 <211> 111 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v99 IgV <400> 425<223> ICOSL v99 IgV <400> 425

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg 1 5Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg 1 5

Ala Met Val Gly Ser Asp Val GluAla Met Val Gly Ser Asp Val Glu

1515

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly 20Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly 20

Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp Val 25 30Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp Val 25 30

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser GluTyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu

4040

Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr His 45Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr His 45

Ile Pro Gln Asn Ser Ser Leu GluIle Pro Gln Asn Ser Ser Leu Glu

5555

Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg Asn 60Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg Asn 60

Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly 65 70Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly 65 70

Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser LeuMet Leu Arg Gly Asp Phe Ser Leu

8080

Arg Leu Phe Gln Val Thr Pro Gln 85Arg Leu Phe Gln Val Thr Pro Gln 85

Asp Glu Gln Lys Phe His Cys LeuAsp Glu Gln Lys Phe His Cys Leu

9595

Val Leu Ser Gln Ser Leu Gly PheVal Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe

100100

Gln Glu Val Leu Ser Val GluGln Glu Val Leu Ser Val Glu

105 110 <210> 426 <211> 111 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>105 110 <210> 426 <211> 111 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v111 IgV <400>426<223> ICOSL v111 IgV <400>426

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val Glu 1 5 1015Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val Glu 1 5 1015

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp Val 20 2530Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp Val 20 2530

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr His 35 4045Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr His 35 4045

Ile Pro Gln Gln Ser Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg AsnIle Pro Gln Gln Ser Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg Asn

- 605 044346- 605 044346

55 6055 60

Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met 65 70Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met 65 70

Leu Arg Gly Asp Phe Ser 75Leu Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Gln Val Thr Pro Gln Asp 85Arg Leu Phe Gln Val Thr Pro Gln Asp 85

Glu Gln Lys Phe His Cys 90 95Glu Gln Lys Phe His Cys 90 95

Leu 80Leu 80

LeuLeu

Val Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe GlnVal Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe Gln

100 105100 105

Glu Val Leu Ser Val GluGlu Val Leu Ser Val Glu

110 <210> 427 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>110 <210> 427 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v137 ECD < 400> 427< 223> ICOSL v137 ECD < 400> 427

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala CysLeu Ser Cys Ala Cys

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn AspPhe Asp Leu Asn Asp

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Asn Ser 50Ile Pro Gln Asn Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Arg SerVal Leu Ser Arg Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

Asn Lys Thr Asp AsnAsn Lys Thr Asp Asn

155155

- 606 044346- 606 044346

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 428 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 428 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v138 ECD <400>428<223>ICOSL v138 ECD <400>428

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 1015Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 1015

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn AspLeu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp

25302530

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 4045Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 4045

Ile Pro Gln Asn Ser Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 5560Ile Pro Gln Asn Ser Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 5560

Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 65 7075Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 65 7075

Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 85 9095Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 85 9095

Val Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu

100 105110100 105110

Thr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser Val Pro Val Val Ser AlaThr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser Val Pro Val Val Ser Ala

115 120125115 120125

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

- 607 044346- 607 044346

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr LeuAsp Glu Leu Thr Leu

135135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Pro Leu Gln Gln AsnPro Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 429 <211> 238 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 429 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v139 ECD <400> 429<223> ICOSL v139 ECD <400> 429

Asp Thr Gln Glu LysAsp Thr Gln Glu Lys

55

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Tyr Ser 50Ile Pro Gln Tyr Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

- 608 044346- 608 044346

Val Leu Ser Gln Ser Leu Gly PheVal Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe

100100

Gln Glu Val Leu Ser Val GluGln Glu Val Leu Ser Val Glu

105 110105 110

Thr Leu His Val Ala Ala Asn PheThr Leu His Val Ala Ala Asn Phe

115 120115 120

Ser Val Pro Val Val Ser AlaSer Val Pro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser Gln Asp Glu LeuHis Ser Pro Ser Gln Asp Glu Leu

130 135130 135

Thr Leu Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Leu Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Pro Leu Gln Gln AsnPro Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 430 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 430 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v140 ECD <400>430<223>ICOSL v140 ECD <400>430

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp ValAsp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val

5 10155 1015

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn AspLeu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp

25302530

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 4045Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 4045

Ile Pro Gln Asn Ser Ser Leu Glu Tyr Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 5560Ile Pro Gln Asn Ser Ser Leu Glu Tyr Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 5560

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

LeuLeu

Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe SerArg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser

- 609 044346- 609 044346

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Arg SerVal Leu Ser Arg Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Arg Ile Glu Asn Val 200Arg Ile Glu Asn Val 200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 431 <211> 238 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 431 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v141 ECD <400> 431<223> ICOSL v141 ECD <400> 431

Asp Thr Gln Glu 1Asp Thr Gln Glu 1

Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 5 10 15Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 5 10 15

Leu Ser Cys Ala 20Leu Ser Cys Ala 20

Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp 25 30Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp 25 30

Tyr Val Tyr TrpTyr Val Tyr Trp

Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr TyrGln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr

4545

GluGlu

ValVal

HisHis

- 610 044346- 610 044346

Ile Pro Gln Asn Ser 50Ile Pro Gln Asn Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr LeuAsp Glu Leu Thr Leu

135135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Pro Leu Gln Gln AsnPro Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 432 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 432 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v142 ECD < 400> 432< 223> ICOSL v142 ECD < 400> 432

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15

GluGlu

- 611 044346- 611 044346

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Asn Ser 50Ile Pro Gln Asn Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Arg SerVal Leu Ser Arg Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr LeuAsp Glu Leu Thr Leu

135135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 433 <211> 238 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 433 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

- 612 044346 <223> ICOSL v143 ECD <400> 433- 612 044346 <223> ICOSL v143 ECD <400> 433

Asp Thr Gln Glu LysAsp Thr Gln Glu Lys

55

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Asn Ser 50Ile Pro Gln Asn Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Pro Leu Gln Gln AsnPro Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235Asn Ala Ala Thr 235

- 613 044346 < 210> 434 < 211> 111 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>- 613 044346 <210> 434 <211> 111 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v137 IgV < 400> 434< 223> ICOSL v137 IgV < 400> 434

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg 1 5Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg 1 5

Ala Met Val Gly Ser Asp Val GluAla Met Val Gly Ser Asp Val Glu

1515

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly 20Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly 20

Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp Val 25 30Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp Val 25 30

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser GluTyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu

4040

Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr His 45Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr His 45

Ile Pro Gln Asn Ser Ser Leu GluIle Pro Gln Asn Ser Ser Leu Glu

5555

Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg Asn 60Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg Asn 60

Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly 65 70Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly 65 70

Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser LeuMet Leu Arg Gly Asp Phe Ser Leu

8080

Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln 85Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln 85

Asp Glu Gln Lys Phe His Cys LeuAsp Glu Gln Lys Phe His Cys Leu

9595

Val Leu Ser Arg Ser Leu Gly PheVal Leu Ser Arg Ser Leu Gly Phe

100100

Gln Glu Val Leu Ser Val GluGln Glu Val Leu Ser Val Glu

105 110 < 210> 435 < 211> 238 < 212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>105 110 <210> 435 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v144 ECD <400> 435<223> ICOSL v144 ECD <400> 435

Asp Thr Gln Glu LysAsp Thr Gln Glu Lys

55

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Glu Val Arg Ala Met 10Glu Val Arg Ala Met 10

Pro Glu Gly Ser Arg 25Pro Glu Gly Ser Arg 25

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Val Gly Ser Asp Val Glu 15Val Gly Ser Asp Val Glu 15

Phe Asp Leu Asn Asp Val 30Phe Asp Leu Asn Asp Val 30

Thr Val Val Thr Tyr His 45Thr Val Val Thr Tyr His 45

Asp Ser Arg Tyr Arg Asn 60Asp Ser Arg Tyr Arg Asn 60

- 614 044346- 614 044346

Arg Ala Leu 65Arg Ala Leu 65

Met Ser ProMet Ser Pro

Ala Gly MetAla Gly Met

Leu Arg GlyLeu Arg Gly

Asp Phe SerAsp Phe Ser

Arg Leu PheArg Leu Phe

Asn Val ThrAsn Val Thr

Pro Gln AspPro Gln Asp

Glu Gln Lys 90Glu Gln Lys 90

Phe His CysPhe His Cys

Val Leu SerVal Leu Ser

Arg Ser Leu 100Arg Ser Leu 100

Gly Phe GlnGly Phe Gln

105105

Glu Val LeuGlu Val Leu

Ser Val GluSer Val Glu

110110

Thr Leu ArgThr Leu Arg

115115

Val Ala AlaVal Ala Ala

Asn Phe SerAsn Phe Ser

120120

Val Pro ValVal Pro Val

Val Ser Ala 125Val Ser Ala 125

His Ser ProHis Ser Pro

130130

Ser Gln AspSer Gln Asp

Glu Leu Thr 135Glu Leu Thr 135

Phe Thr CysPhe Thr Cys

140140

Thr Ser IleThr Ser Ile

Gly Tyr Pro 145Gly Tyr Pro 145

Arg Pro AsnArg Pro Asn

150150

Val Tyr TrpVal Tyr Trp

Ile Asn LysIle Asn Lys

155155

Thr Asp AsnThr Asp Asn

Leu Leu AspLeu Leu Asp

Gln Ala LeuGln Ala Leu

165165

Gln Asn AspGln Asn Asp

Thr Val Phe 170Thr Val Phe 170

Leu Asn MetLeu Asn Met

175175

Gly Leu TyrGly Leu Tyr

Asp Val Val 180Asp Val Val 180

Ser Val LeuSer Val Leu

185185

Arg Ile AlaArg Ile Ala

Arg Thr ProArg Thr Pro

190190

Val Asn IleVal Asn Ile

195195

Gly Cys ArgGly Cys Arg

Ile Glu AsnIle Glu Asn

200200

Val Leu LeuVal Leu Leu

Gln Gln Asn 205Gln Gln Asn 205

Thr Val GlyThr Val Gly

210210

Ser Gln ThrSer Gln Thr

Gly Asn Asp 215Gly Asn Asp 215

Ile Gly GluIle Gly Glu

220220

Arg Asp LysArg Asp Lys

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn 225Thr Glu Asn 225

Pro Val SerPro Val Ser

230230

Thr Gly GluThr Gly Glu

Lys Asn AlaLys Asn Ala

235235

Ala Thr <210> 436 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Ala Thr <210> 436 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v145 ECD<223> ICOSL v145 ECD

<400> <400> 436 436 Asp 1 Asp 1 Thr Thr Gln Gln Glu Glu Lys 5 Lys 5 Glu Glu Val Val Arg Arg Ala Ala Met 10 Met 10 Val Val Gly Gly Ser Ser Asp Asp Val 15 Val 15 Leu Leu Ser Ser Cys Cys Ala 20 Ala 20 Cys Cys Pro Pro Glu Glu Gly Gly Ser 25 Ser 25 Arg Arg Phe Phe Asp Asp Leu Leu Asn 30 Asn 30 Asp Asp

GluGlu

ValVal

- 615 044346- 615 044346

Tyr Val TyrTyr Val Tyr

Trp Gln ThrTrp Gln Thr

Ser Glu SerSer Glu Ser

Lys Thr ValLys Thr Val

Val Thr Tyr 45Val Thr Tyr 45

Ile Pro GlnIle Pro Gln

His Ser SerHis Ser Ser

Leu Glu Tyr 55Leu Glu Tyr 55

Val Asp SerVal Asp Ser

Arg Tyr ArgArg Tyr Arg

Arg Ala Leu 65Arg Ala Leu 65

Met Ser ProMet Ser Pro

Ala Gly MetAla Gly Met

Leu Arg GlyLeu Arg Gly

Asp Phe SerAsp Phe Ser

Arg Leu PheArg Leu Phe

Asn Val ThrAsn Val Thr

Pro Gln AspPro Gln Asp

Glu Gln Lys 90Glu Gln Lys 90

Phe His CysPhe His Cys

Val Leu SerVal Leu Ser

Arg Ser Leu 100Arg Ser Leu 100

Gly Phe GlnGly Phe Gln

105105

Glu Val LeuGlu Val Leu

Ser Val GluSer Val Glu

110110

Thr Leu HisThr Leu His

115115

Val Ala AlaVal Ala Ala

Asn Phe SerAsn Phe Ser

120120

Val Pro ValVal Pro Val

Val Ser Ala 125Val Ser Ala 125

His Ser ProHis Ser Pro

130130

Ser Gln AspSer Gln Asp

Glu Leu Thr 135Glu Leu Thr 135

Phe Thr CysPhe Thr Cys

140140

Thr Ser IleThr Ser Ile

Gly Tyr Pro 145Gly Tyr Pro 145

Arg Pro AsnArg Pro Asn

150150

Val Tyr TrpVal Tyr Trp

Ile Asn LysIle Asn Lys

155155

Thr Asp AsnThr Asp Asn

Leu Leu AspLeu Leu Asp

Gln Ala LeuGln Ala Leu

165165

Gln Asn AspGln Asn Asp

Thr Val Ser 170Thr Val Ser 170

Leu Asn MetLeu Asn Met

175175

Gly Leu TyrGly Leu Tyr

Asp Val Val 180Asp Val Val 180

Ser Val LeuSer Val Leu

185185

Arg Ile AlaArg Ile Ala

Arg Thr ProArg Thr Pro

190190

Val Asn IleVal Asn Ile

195195

Gly Cys ArgGly Cys Arg

Ile Glu AsnIle Glu Asn

200200

Val Leu LeuVal Leu Leu

Gln Gln Asn 205Gln Gln Asn 205

Thr Val GlyThr Val Gly

210210

Ser Gln ThrSer Gln Thr

Gly Asn Asp 215Gly Asn Asp 215

Ile Gly GluIle Gly Glu

220220

Arg Asp LysArg Asp Lys

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn 225Thr Glu Asn 225

Pro Val SerPro Val Ser

230230

Thr Gly GluThr Gly Glu

Lys Asn AlaLys Asn Ala

235235

Ala Thr <210> 437 <211> 238 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Ala Thr <210> 437 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v146 ECD <400> 437<223> ICOSL v146 ECD <400> 437

- 616 044346- 616 044346

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala CysLeu Ser Cys Ala Cys

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn AspPhe Asp Leu Asn Asp

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Arg SerVal Leu Ser Arg Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu Arg Val Ala 115Thr Leu Arg Val Ala 115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Ser Leu Asn MetVal Ser Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Arg Ile Glu Asn Val 200Arg Ile Glu Asn Val 200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 438 <211> 238 <212> БЕЛОКAsn Ala Ala Thr 235 <210> 438 <211> 238 <212> PROTEIN

- 617 044346 <213> Искусственная последовательность <220>- 617 044346 <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v147 ECD <400> 438<223> ICOSL v147 ECD <400> 438

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Arg SerVal Leu Ser Arg Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu Arg Val Ala 115Thr Leu Arg Val Ala 115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr PheAsp Glu Leu Thr Phe

135135

Thr Cys Thr Ser ValThr Cys Thr Ser Val

140140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Ser Leu Asn MetVal Ser Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Arg Ile Glu Asn Val 200Arg Ile Glu Asn Val 200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

- 618 044346- 618 044346

Thr Glu Asn Pro Val Ser Thr Gly Glu Lys Asn Ala Ala ThrThr Glu Asn Pro Val Ser Thr Gly Glu Lys Asn Ala Ala Thr

225 230 235 <210> 439 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>225 230 235 <210> 439 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v148 ECD <400> 439<223> ICOSL v148 ECD <400> 439

Asp Thr Gln Glu LysAsp Thr Gln Glu Lys

55

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Arg SerVal Leu Ser Arg Ser

100100

Arg Gly Phe Gln GluArg Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu Arg Val Ala 115Thr Leu Arg Val Ala 115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Ser Leu Asn MetVal Ser Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

Arg Ile Glu Asn ValArg Ile Glu Asn Val

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

- 619 044346- 619 044346

195195

200200

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp Lys 220Gly Glu Arg Asp Lys 220

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 440 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 440 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v149 ECD < 400> 440< 223> ICOSL v149 ECD < 400> 440

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser AlaAla Asn Phe Ser Ala

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Ser Leu Asn MetVal Ser Leu Asn Met

175175

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

- 620 044346- 620 044346

Gly Leu Tyr Asp Val ValGly Leu Tyr Asp Val Val

180180

Ser Val Leu Arg Ile Ala Arg Thr ProSer Val Leu Arg Ile Ala Arg Thr Pro

185 190185 190

Val Asn Ile Gly Cys ArgVal Asn Ile Gly Cys Arg

195195

Ile Glu Asn Val Leu Leu Gln Gln AsnIle Glu Asn Val Leu Leu Gln Gln Asn

200 205200 205

Thr Val Gly Ser Gln ThrThr Val Gly Ser Gln Thr

210210

Gly Asn Asp Ile Gly Glu Arg Asp LysGly Asn Asp Ile Gly Glu Arg Asp Lys

215 220215 220

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val SerThr Glu Asn Pro Val Ser

225 230225 230

Thr Gly Glu Lys Asn Ala Ala ThrThr Gly Glu Lys Asn Ala Ala Thr

235 <210> 441 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>235 <210> 441 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v150 ECD < 400> 441< 223> ICOSL v150 ECD < 400> 441

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Arg SerVal Leu Ser Arg Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu Arg Val Ala 115Thr Leu Arg Val Ala 115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

- 621 044346- 621 044346

Gly Tyr Pro Arg Pro Asn Val TyrGly Tyr Pro Arg Pro Asn Val Tyr

145 150145 150

Trp Ile Asn Lys Thr Asp Asn SerTrp Ile Asn Lys Thr Asp Asn Ser

155 160155 160

Leu Leu Asp Gln Ala LeuLeu Leu Asp Gln Ala Leu

165165

Gln Asn Asp Thr ValGln Asn Asp Thr Val

170170

Ser Leu Asn Met ArgSer Leu Asn Met Arg

175175

Gly Leu Tyr Asp Val ValGly Leu Tyr Asp Val Val

180180

Ser Val Leu Arg IleSer Val Leu Arg Ile

185185

Ala Arg Thr Pro Ser 190Ala Arg Thr Pro Ser 190

Val Asp Ile Gly Cys CysVal Asp Ile Gly Cys Cys

195195

Ile Glu Asn Val LeuIle Glu Asn Val Leu

200200

Leu Gln Gln Asn LeuLeu Gln Gln Asn Leu

205205

Thr Val Gly Ser Gln ThrThr Val Gly Ser Gln Thr

210210

Gly Asn Asp Ile Gly 215Gly Asn Asp Ile Gly 215

Glu Arg Asp Lys Ile 220Glu Arg Asp Lys Ile 220

Thr Glu Asn Pro Val SerThr Glu Asn Pro Val Ser

225230225230

Thr Gly Glu Lys AsnThr Gly Glu Lys Asn

235235

Ala Ala Thr <210>442 < 211>238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Ala Ala Thr <210>442 <211>238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v151 ECD < 400> 442< 223> ICOSL v151 ECD < 400> 442

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg 1 5Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg 1 5

Ala Met Val Gly Ser Asp Val GluAla Met Val Gly Ser Asp Val Glu

1515

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly 20Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly 20

Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp Val 25 30Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp Val 25 30

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser GluTyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu

4040

Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr His 45Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr His 45

Ile Pro Gln His Ser Ser Leu GluIle Pro Gln His Ser Ser Leu Glu

5555

Tyr Val Asp Ser Arg Tyr Arg Asn 60Tyr Val Asp Ser Arg Tyr Arg Asn 60

Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly 65 70Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly 65 70

Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser LeuMet Leu Arg Gly Asp Phe Ser Leu

8080

Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln 85Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln 85

Asp Glu Gln Lys Phe His Cys LeuAsp Glu Gln Lys Phe His Cys Leu

9595

Val Leu Ser Gln Ser Leu Gly PheVal Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe

100100

Gln Glu Val Leu Ser Val Glu ValGln Glu Val Leu Ser Val Glu Val

105 110105 110

- 622 044346- 622 044346

Thr Leu Arg Val Ala 115Thr Leu Arg Val Ala 115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr PheAsp Glu Leu Thr Phe

135135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Ser Leu Asn MetVal Ser Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Arg Ile Glu Asn Val 200Arg Ile Glu Asn Val 200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 443 <211> 238 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 443 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v152 ECD <400> 443<223> ICOSL v152 ECD <400> 443

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

Arg Leu Phe Asn ValArg Leu Phe Asn Val

Thr Pro Gln Asp GluThr Pro Gln Asp Glu

Gln Lys Phe His CysGln Lys Phe His Cys

- 623 044346- 623 044346

Val Leu Ser Arg Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Arg Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu

100 105 110100 105 110

Thr Leu Arg Val Ala Ala Asn Phe Ser Val Pro Val Val Ser AlaThr Leu Arg Val Ala Ala Asn Phe Ser Val Pro Val Val Ser Ala

115 120 125115 120 125

His Ser Pro Ser Gln Asp Glu Leu Thr Phe Thr Cys Thr Ser IleHis Ser Pro Ser Gln Asp Glu Leu Thr Phe Thr Cys Thr Ser Ile

130 135 140130 135 140

Gly Tyr Pro Arg Pro Asn Val Tyr Trp Ile Asn Lys Thr Asp AsnGly Tyr Pro Arg Pro Asn Val Tyr Trp Ile Asn Lys Thr Asp Asn

145 150 155145 150 155

Leu Leu Asp Gln Ala Leu Gln Asn Asp Thr Val Phe Leu Asn MetLeu Leu Asp Gln Ala Leu Gln Asn Asp Thr Val Phe Leu Asn Met

165 170 175165 170 175

Gly Leu Tyr Asp Val Val Ser Val Leu Arg Ile Ala Arg Thr ProGly Leu Tyr Asp Val Val Ser Val Leu Arg Ile Ala Arg Thr Pro

180 185 190180 185 190

Val Asn Ile Gly Cys Arg Ile Glu Asn Val Leu Leu Gln Gln AsnVal Asn Ile Gly Cys Arg Ile Glu Asn Val Leu Leu Gln Gln Asn

195 200 205195 200 205

Thr Val Gly Ser Gln Thr Gly Asn Asp Ile Gly Glu Arg Asp LysThr Val Gly Ser Gln Thr Gly Asn Asp Ile Gly Glu Arg Asp Lys

210 215 220210 215 220

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val Ser Thr Gly Glu Lys Asn Ala Ala ThrThr Glu Asn Pro Val Ser Thr Gly Glu Lys Asn Ala Ala Thr

225 230 235 <210> 444 <211> 238 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>225 230 235 <210> 444 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL <400> 444<223> ICOSL <400> 444

Asp Thr Gln 1Asp Thr Gln 1

Leu Ser CysLeu Ser Cys

Tyr Val TyrTyr Val Tyr

Ile Pro Gln v153 ECDIle Pro Gln v153 ECD

Glu Lys Glu 5Glu Lys Glu 5

Ala Cys Pro 20Ala Cys Pro 20

Trp Gln ThrTrp Gln Thr

His Ser SerHis Ser Ser

Val Arg AlaVal Arg Ala

Glu Gly SerGlu Gly Ser

Ser Glu SerSer Glu Ser

Leu Glu Tyr 55Leu Glu Tyr 55

Met Val Gly 10Met Val Gly 10

Arg Phe AspArg Phe Asp

Lys Thr ValLys Thr Val

Val Asp Ser 60Val Asp Ser 60

Ser Asp ValSer Asp Val

Leu Asn Asp 30Leu Asn Asp 30

Val Thr Tyr 45Val Thr Tyr 45

Arg Tyr ArgArg Tyr Arg

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

- 624 044346- 624 044346

Arg Ala Leu 65Arg Ala Leu 65

Met Ser ProMet Ser Pro

Ala Gly MetAla Gly Met

Leu Arg GlyLeu Arg Gly

Asp Phe SerAsp Phe Ser

Arg Leu PheArg Leu Phe

Asn Val ThrAsn Val Thr

Pro Gln AspPro Gln Asp

Glu Gln Lys 90Glu Gln Lys 90

Phe His CysPhe His Cys

Val Leu SerVal Leu Ser

Gln Ser Leu 100Gln Ser Leu 100

Gly Phe GlnGly Phe Gln

105105

Glu Val LeuGlu Val Leu

Ser Val GluSer Val Glu

110110

Thr Leu ArgThr Leu Arg

115115

Val Ala AlaVal Ala Ala

Asn Phe SerAsn Phe Ser

120120

Val Pro ValVal Pro Val

Val Ser Ala 125Val Ser Ala 125

His Ser ProHis Ser Pro

130130

Ser Gln AspSer Gln Asp

Glu Leu Thr 135Glu Leu Thr 135

Phe Thr CysPhe Thr Cys

140140

Thr Ser IleThr Ser Ile

Gly Tyr Pro 145Gly Tyr Pro 145

Arg Pro AsnArg Pro Asn

150150

Val Tyr TrpVal Tyr Trp

Ile Asn LysIle Asn Lys

155155

Thr Asp AsnThr Asp Asn

Leu Leu AspLeu Leu Asp

Gln Ala LeuGln Ala Leu

165165

Gln Asn AspGln Asn Asp

Thr Val Phe 170Thr Val Phe 170

Leu Asn MetLeu Asn Met

175175

Gly Leu TyrGly Leu Tyr

Asp Val Val 180Asp Val Val 180

Ser Val LeuSer Val Leu

185185

Arg Ile AlaArg Ile Ala

Arg Thr ProArg Thr Pro

190190

Val Asn IleVal Asn Ile

195195

Gly Cys CysGly Cys Cys

Ile Glu AsnIle Glu Asn

200200

Val Leu LeuVal Leu Leu

Gln Gln Asn 205Gln Gln Asn 205

Thr Val GlyThr Val Gly

210210

Ser Gln ThrSer Gln Thr

Gly Asn Asp 215Gly Asn Asp 215

Ile Gly GluIle Gly Glu

220220

Arg Asp LysArg Asp Lys

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn 225Thr Glu Asn 225

Pro Val SerPro Val Ser

230230

Thr Gly GluThr Gly Glu

Lys Asn AlaLys Asn Ala

235235

Ala Thr <210> 445 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Ala Thr <210> 445 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v154 ECD<223> ICOSL v154 ECD

<400> <400> 445 445 Asp 1 Asp 1 Thr Thr Gln Gln Glu Glu Lys 5 Lys 5 Glu Glu Val Val Arg Arg Ala Ala Met 10 Met 10 Val Val Gly Gly Ser Ser Asp Asp Val 15 Val 15 Leu Leu Ser Ser Cys Cys Ala 20 Ala 20 Cys Cys Pro Pro Glu Glu Gly Gly Ser 25 Ser 25 Arg Arg Phe Phe Asp Asp Leu Leu Asn 30 Asn 30 Asp Asp

GluGlu

ValVal

- 625 044346- 625 044346

Tyr Val TyrTyr Val Tyr

Trp Gln ThrTrp Gln Thr

Ser Glu SerSer Glu Ser

Lys Thr ValLys Thr Val

Val Thr Tyr 45Val Thr Tyr 45

Ile Pro GlnIle Pro Gln

His Ser SerHis Ser Ser

Leu Glu Tyr 55Leu Glu Tyr 55

Val Asp SerVal Asp Ser

Arg Tyr ArgArg Tyr Arg

Arg Ala Leu 65Arg Ala Leu 65

Met Ser ProMet Ser Pro

Ala Gly MetAla Gly Met

Leu Arg GlyLeu Arg Gly

Asp Phe SerAsp Phe Ser

Arg Leu PheArg Leu Phe

Asn Val ThrAsn Val Thr

Pro Gln AspPro Gln Asp

Glu Gln Lys 90Glu Gln Lys 90

Phe His CysPhe His Cys

Val Leu SerVal Leu Ser

Arg Ser Leu 100Arg Ser Leu 100

Gly Phe GlnGly Phe Gln

105105

Glu Val LeuGlu Val Leu

Ser Val GluSer Val Glu

110110

Thr Leu ArgThr Leu Arg

115115

Val Ala AlaVal Ala Ala

Asn Phe SerAsn Phe Ser

120120

Val Pro ValVal Pro Val

Val Ser Ala 125Val Ser Ala 125

His Ser ProHis Ser Pro

130130

Ser Gln AspSer Gln Asp

Glu Leu Thr 135Glu Leu Thr 135

Phe Thr CysPhe Thr Cys

140140

Thr Ser IleThr Ser Ile

Gly Tyr Pro 145Gly Tyr Pro 145

Arg Pro AsnArg Pro Asn

150150

Val Tyr TrpVal Tyr Trp

Ile Asn LysIle Asn Lys

155155

Thr Asp AsnThr Asp Asn

Leu Leu AspLeu Leu Asp

Gln Ala LeuGln Ala Leu

165165

Gln Asn AspGln Asn Asp

Thr Val Phe 170Thr Val Phe 170

Leu Asn MetLeu Asn Met

175175

Gly Leu TyrGly Leu Tyr

Asp Val Val 180Asp Val Val 180

Ser Val LeuSer Val Leu

185185

Arg Ile AlaArg Ile Ala

Arg Thr ProArg Thr Pro

190190

Val Asn IleVal Asn Ile

195195

Gly Cys CysGly Cys Cys

Ile Glu AsnIle Glu Asn

200200

Val Leu LeuVal Leu Leu

Gln Gln Asn 205Gln Gln Asn 205

Thr Val GlyThr Val Gly

210210

Ser Gln ThrSer Gln Thr

Gly Asn Asp 215Gly Asn Asp 215

Ile Gly GluIle Gly Glu

220220

Arg Asp LysArg Asp Lys

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn 225Thr Glu Asn 225

Pro Val SerPro Val Ser

230230

Thr Gly GluThr Gly Glu

Lys Asn AlaLys Asn Ala

235235

Ala Thr <210> 446 <211> 238 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Ala Thr <210> 446 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v155 ECD <400> 446<223> ICOSL v155 ECD <400> 446

- 626 044346- 626 044346

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala CysLeu Ser Cys Ala Cys

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn AspPhe Asp Leu Asn Asp

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Arg SerVal Leu Ser Arg Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu Arg Val Ala 115Thr Leu Arg Val Ala 115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Ser Leu Asn MetVal Ser Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

ValVal

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 447 <211> 238 <212> БЕЛОКAsn Ala Ala Thr 235 <210> 447 <211> 238 <212> PROTEIN

- 627 044346 <213> Искусственная последовательность <220>- 627 044346 <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v156 ECD <400> 447<223> ICOSL v156 ECD <400> 447

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Arg SerVal Leu Ser Arg Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu Arg Val Ala 115Thr Leu Arg Val Ala 115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr PheAsp Glu Leu Thr Phe

135135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Ser Leu Asn MetVal Ser Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

- 628 044346- 628 044346

Thr Glu Asn Pro Val Ser Thr Gly Glu Lys Asn Ala Ala ThrThr Glu Asn Pro Val Ser Thr Gly Glu Lys Asn Ala Ala Thr

225 230 235 <210> 448 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>225 230 235 <210> 448 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v157 ECD <400> 448<223> ICOSL v157 ECD <400> 448

Asp Thr Gln Glu LysAsp Thr Gln Glu Lys

55

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Arg SerVal Leu Ser Arg Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Ser Leu Asn MetVal Ser Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

- 629 044346- 629 044346

195195

200200

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp Lys 220Gly Glu Arg Asp Lys 220

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 449 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 449 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v158 ECD < 400> 449< 223> ICOSL v158 ECD < 400> 449

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Arg SerVal Leu Ser Arg Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu Arg Val Ala 115Thr Leu Arg Val Ala 115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Thr 140Thr Cys Thr Ser Thr 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Ser Leu Asn MetVal Ser Leu Asn Met

175175

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

- 630 044346- 630 044346

Gly Leu Tyr Asp Val ValGly Leu Tyr Asp Val Val

180180

Ser Val Leu Arg Ile Ala Arg Thr ProSer Val Leu Arg Ile Ala Arg Thr Pro

185 190185 190

Val Asn Ile Gly Cys CysVal Asn Ile Gly Cys Cys

195195

Ile Glu Asn Val Leu Leu Gln Gln AsnIle Glu Asn Val Leu Leu Gln Gln Asn

200 205200 205

Thr Val Gly Ser Gln ThrThr Val Gly Ser Gln Thr

210210

Gly Asn Asp Ile Gly Glu Arg Asp LysGly Asn Asp Ile Gly Glu Arg Asp Lys

215 220215 220

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val SerThr Glu Asn Pro Val Ser

225 230225 230

Thr Gly Glu Lys Asn Ala Ala ThrThr Gly Glu Lys Asn Ala Ala Thr

235 <210> 450 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>235 <210> 450 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v159 ECD < 400> 450< 223> ICOSL v159 ECD < 400> 450

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Pro SerVal Leu Ser Pro Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu Arg Val Ala 115Thr Leu Arg Val Ala 115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

- 631 044346- 631 044346

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Ser Leu Asn MetVal Ser Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 451 <211> 238 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 451 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v160 ECD <400> 451<223> ICOSL v160 ECD <400> 451

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala CysLeu Ser Cys Ala Cys

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn AspPhe Asp Leu Asn Asp

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Tyr Ser 50Ile Pro Gln Tyr Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Pro SerVal Leu Ser Pro Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

- 632 044346- 632 044346

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr PheAsp Glu Leu Thr Phe

135135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Ser Leu Asn MetVal Ser Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 452 <211> 238 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 452 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v161 ECD <400> 452<223> ICOSL v161 ECD <400> 452

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

ValVal

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

Arg Leu Phe Asn ValArg Leu Phe Asn Val

Thr Pro Gln Asp GluThr Pro Gln Asp Glu

Gln Lys Phe His CysGln Lys Phe His Cys

- 633 044346- 633 044346

Val Leu Ser Arg Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Asp GluVal Leu Ser Arg Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Asp Glu

100 105 110100 105 110

Thr Leu Arg Val Ala Ala Asn Phe Ser Val Pro Val Val Ser AlaThr Leu Arg Val Ala Ala Asn Phe Ser Val Pro Val Val Ser Ala

115 120 125115 120 125

His Ser Pro Ser Gln Asp Glu Leu Thr Phe Thr Cys Thr Ser IleHis Ser Pro Ser Gln Asp Glu Leu Thr Phe Thr Cys Thr Ser Ile

130 135 140130 135 140

Gly Tyr Pro Arg Pro Asn Val Tyr Trp Ile Asn Lys Thr Asp AsnGly Tyr Pro Arg Pro Asn Val Tyr Trp Ile Asn Lys Thr Asp Asn

145 150 155145 150 155

Leu Leu Asp Gln Ala Leu Gln Asn Asp Thr Val Phe Leu Asn MetLeu Leu Asp Gln Ala Leu Gln Asn Asp Thr Val Phe Leu Asn Met

165 170 175165 170 175

Gly Leu Tyr Asp Val Val Ser Val Leu Arg Ile Ala Arg Thr ProGly Leu Tyr Asp Val Val Ser Val Leu Arg Ile Ala Arg Thr Pro

180 185 190180 185 190

Val Asn Ile Gly Cys Arg Ile Glu Asn Val Leu Leu Gln Gln AsnVal Asn Ile Gly Cys Arg Ile Glu Asn Val Leu Leu Gln Gln Asn

195 200 205195 200 205

Thr Val Gly Ser Gln Thr Gly Asn Asp Ile Gly Glu Arg Asp LysThr Val Gly Ser Gln Thr Gly Asn Asp Ile Gly Glu Arg Asp Lys

210 215 220210 215 220

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val Ser Thr Gly Glu Lys Asn Ala Ala ThrThr Glu Asn Pro Val Ser Thr Gly Glu Lys Asn Ala Ala Thr

225 230 235 <210> 453 <211> 238 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>225 230 235 <210> 453 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL <400> 453<223> ICOSL <400> 453

Asp Thr Gln 1Asp Thr Gln 1

Leu Ser CysLeu Ser Cys

Tyr Val TyrTyr Val Tyr

Ile Pro Gln v162 ECDIle Pro Gln v162 ECD

Glu Lys Glu 5Glu Lys Glu 5

Ala Cys Pro 20Ala Cys Pro 20

Trp Gln ThrTrp Gln Thr

His Ser SerHis Ser Ser

Val Arg AlaVal Arg Ala

Glu Gly SerGlu Gly Ser

Ser Glu SerSer Glu Ser

Leu Glu Tyr 55Leu Glu Tyr 55

Met Val Gly 10Met Val Gly 10

Arg Phe AspArg Phe Asp

Lys Thr ValLys Thr Val

Val Asp Ser 60Val Asp Ser 60

Ser Asp ValSer Asp Val

Leu Asn Asp 30Leu Asn Asp 30

Val Thr Tyr 45Val Thr Tyr 45

Arg Tyr ArgArg Tyr Arg

ValVal

ValVal

HisHis

AsnAsn

- 634 044346- 634 044346

Arg Ala Leu 65Arg Ala Leu 65

Met Ser ProMet Ser Pro

Ala Gly MetAla Gly Met

Leu Arg GlyLeu Arg Gly

Asp Phe SerAsp Phe Ser

Arg Leu PheArg Leu Phe

Asn Val ThrAsn Val Thr

Pro Gln AspPro Gln Asp

Glu Gln Lys 90Glu Gln Lys 90

Phe His CysPhe His Cys

Val Leu SerVal Leu Ser

Arg Ser Leu 100Arg Ser Leu 100

Gly Phe GlnGly Phe Gln

105105

Glu Val LeuGlu Val Leu

Ser Asp GluSer Asp Glu

110110

Thr Leu ArgThr Leu Arg

115115

Val Ala AlaVal Ala Ala

Asn Phe SerAsn Phe Ser

120120

Val Pro ValVal Pro Val

Val Ser Ala 125Val Ser Ala 125

His Ser ProHis Ser Pro

130130

Ser Gln AspSer Gln Asp

Glu Leu Thr 135Glu Leu Thr 135

Phe Thr CysPhe Thr Cys

140140

Thr Ser IleThr Ser Ile

Gly Tyr Pro 145Gly Tyr Pro 145

Arg Pro AsnArg Pro Asn

150150

Val Cys TrpVal Cys Trp

Ile Asn MetIle Asn Met

155155

Thr Asp AsnThr Asp Asn

Leu Leu AspLeu Leu Asp

Gln Ala LeuGln Ala Leu

165165

Gln Asn AspGln Asn Asp

Thr Val Ser 170Thr Val Ser 170

Leu Asn MetLeu Asn Met

175175

Gly Leu TyrGly Leu Tyr

Asp Val Val 180Asp Val Val 180

Ser Val LeuSer Val Leu

185185

Arg Ile AlaArg Ile Ala

Arg Thr ProArg Thr Pro

190190

Val Asn IleVal Asn Ile

195195

Gly Cys ArgGly Cys Arg

Ile Glu AsnIle Glu Asn

200200

Val Leu LeuVal Leu Leu

Gln Gln Asn 205Gln Gln Asn 205

Thr Val GlyThr Val Gly

210210

Ser Gln ThrSer Gln Thr

Gly Asn Asp 215Gly Asn Asp 215

Ile Gly GluIle Gly Glu

220220

Arg Asp LysArg Asp Lys

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn 225Thr Glu Asn 225

Pro Val SerPro Val Ser

230230

Thr Gly GluThr Gly Glu

Lys Asn AlaLys Asn Ala

235235

Ala Thr <210> 454 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Ala Thr <210> 454 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v163 ECD <400> 454<223> ICOSL v163 ECD <400> 454

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp ValAsp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val

5 10 155 10 15

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly SerLeu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser

Arg Phe Asp Leu Asp AspArg Phe Asp Leu Asp Asp

GluGlu

ValVal

- 635 044346- 635 044346

Tyr Val TyrTyr Val Tyr

Trp Gln ThrTrp Gln Thr

Ser Glu SerSer Glu Ser

Glu Thr ValGlu Thr Val

Val Thr Tyr 45Val Thr Tyr 45

Ile Pro GlnIle Pro Gln

Ser Ser SerSer Ser Ser

Leu Glu Asn 55Leu Glu Asn 55

Val Asp SerVal Asp Ser

Arg Tyr ArgArg Tyr Arg

Arg Ala Leu 65Arg Ala Leu 65

Met Ser ProMet Ser Pro

Ala Gly MetAla Gly Met

Leu Arg GlyLeu Arg Gly

Asp Phe SerAsp Phe Ser

Arg Leu PheArg Leu Phe

Asn Val ThrAsn Val Thr

Pro Gln AspPro Gln Asp

Glu Gln Lys 90Glu Gln Lys 90

Phe His CysPhe His Cys

Val Leu SerVal Leu Ser

Gln Ser Leu 100Gln Ser Leu 100

Gly Phe GlnGly Phe Gln

105105

Glu Val LeuGlu Val Leu

Ser Val GluSer Val Glu

110110

Thr Leu ArgThr Leu Arg

115115

Val Ala AlaVal Ala Ala

Asn Phe SerAsn Phe Ser

120120

Val Pro ValVal Pro Val

Val Ser Ala 125Val Ser Ala 125

His Ser ProHis Ser Pro

130130

Ser Gln AspSer Gln Asp

Glu Leu Thr 135Glu Leu Thr 135

Phe Thr CysPhe Thr Cys

140140

Thr Ser IleThr Ser Ile

Gly Tyr Pro 145Gly Tyr Pro 145

Arg Pro AsnArg Pro Asn

150150

Val Tyr TrpVal Tyr Trp

Ile Asn LysIle Asn Lys

155155

Thr Asp AsnThr Asp Asn

Leu Leu AspLeu Leu Asp

Gln Ala LeuGln Ala Leu

165165

Gln Asn AspGln Asn Asp

Thr Val Phe 170Thr Val Phe 170

Leu Asn MetLeu Asn Met

175175

Gly Leu TyrGly Leu Tyr

Asp Val Val 180Asp Val Val 180

Ser Val LeuSer Val Leu

185185

Arg Ile AlaArg Ile Ala

Arg Thr ProArg Thr Pro

190190

Val Asn IleVal Asn Ile

195195

Gly Cys CysGly Cys Cys

Ile Glu AsnIle Glu Asn

200200

Val Leu LeuVal Leu Leu

Gln Gln Asn 205Gln Gln Asn 205

Thr Val GlyThr Val Gly

210210

Ser Gln ThrSer Gln Thr

Gly Asn Asp 215Gly Asn Asp 215

Ile Gly GluIle Gly Glu

220220

Arg Asp LysArg Asp Lys

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn 225Thr Glu Asn 225

Pro Val SerPro Val Ser

230230

Thr Gly GluThr Gly Glu

Lys Asn AlaLys Asn Ala

235235

Ala Thr <210> 455 <211> 238 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Ala Thr <210> 455 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v164 ECD <400> 455<223> ICOSL v164 ECD <400> 455

- 636 044346- 636 044346

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala CysLeu Ser Cys Ala Cys

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asp AspPhe Asp Leu Asp Asp

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser GluThr Ser Glu Ser Glu

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Ser Ser 50Ile Pro Gln Ser Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu Arg Val Ala 115Thr Leu Arg Val Ala 115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 456 <211> 238 <212> БЕЛОКAsn Ala Ala Thr 235 <210> 456 <211> 238 <212> PROTEIN

- 637 044346 <213> Искусственная последовательность <220>- 637 044346 <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v165 ECD <400> 456<223> ICOSL v165 ECD <400> 456

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asp Asp 30Phe Asp Leu Asp Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser GluThr Ser Glu Ser Glu

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Ser Ser 50Ile Pro Gln Ser Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu Arg Val Ala 115Thr Leu Arg Val Ala 115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr PheAsp Glu Leu Thr Phe

135135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Arg Ile Glu Asn Val 200Arg Ile Glu Asn Val 200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Ile Asp LysGly Glu Ile Asp Lys

220220

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

- 638 044346- 638 044346

Thr Glu Asn Pro Val Ser Thr Gly Glu Lys Asn Ala Ala ThrThr Glu Asn Pro Val Ser Thr Gly Glu Lys Asn Ala Ala Thr

225 230 235 <210> 457 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>225 230 235 <210> 457 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v166 ECD <400> 457<223> ICOSL v166 ECD <400> 457

Asp Thr Gln Glu LysAsp Thr Gln Glu Lys

55

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asp Asp 30Phe Asp Leu Asp Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser GluThr Ser Glu Ser Glu

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Ser Ser 50Ile Pro Gln Ser Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu Arg Val Ala 115Thr Leu Arg Val Ala 115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

Arg Ile Glu Asn ValArg Ile Glu Asn Val

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

- 639 044346- 639 044346

195195

200200

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp Lys 220Gly Glu Arg Asp Lys 220

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 458 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 458 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v167 ECD < 400> 458< 223> ICOSL v167 ECD < 400> 458

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asp Asp 30Phe Asp Leu Asp Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser GluThr Ser Glu Ser Glu

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Ser Ser 50Ile Pro Gln Ser Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu Arg Val Ala 115Thr Leu Arg Val Ala 115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Ser Leu Asn MetVal Ser Leu Asn Met

175175

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

- 640 044346- 640 044346

Gly Leu Tyr Asp Val ValGly Leu Tyr Asp Val Val

180180

Ser Val Leu Arg Ile Ala Arg Thr ProSer Val Leu Arg Ile Ala Arg Thr Pro

185 190185 190

Val Asp Ile Gly Cys CysVal Asp Ile Gly Cys Cys

195195

Ile Glu Asn Val Leu Leu Gln Gln AsnIle Glu Asn Val Leu Leu Gln Gln Asn

200 205200 205

Thr Val Gly Ser Gln ThrThr Val Gly Ser Gln Thr

210210

Gly Asn Asp Ile Gly Glu Arg Asp LysGly Asn Asp Ile Gly Glu Arg Asp Lys

215 220215 220

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val SerThr Glu Asn Pro Val Ser

225 230225 230

Thr Gly Glu Lys Asn Ala Ala ThrThr Gly Glu Lys Asn Ala Ala Thr

235 <210> 459 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>235 <210> 459 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v168 ECD < 400> 459< 223> ICOSL v168 ECD < 400> 459

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn AspLeu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp

25 3025 30

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 40 45Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 40 45

Ile Pro Gln Ser Ser Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 55 60Ile Pro Gln Ser Ser Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 55 60

Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 65 70 75Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 65 70 75

Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 85 90 95Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 85 90 95

Val Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu

100 105 110100 105 110

Thr Leu Arg Val Ala Ala Asn Ser Ser Val Pro Val Val Ser AlaThr Leu Arg Val Ala Ala Asn Ser Ser Val Pro Val Val Ser Ala

115 120 125115 120 125

His Ser Pro Ser Gln Asp Glu Leu Thr Phe Thr Cys Thr Ser ValHis Ser Pro Ser Gln Asp Glu Leu Thr Phe Thr Cys Thr Ser Val

130 135 140130 135 140

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

- 641 044346- 641 044346

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Arg Ile Glu Asn Val 200Arg Ile Glu Asn Val 200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 460 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 460 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v169 ECD <400>460<223> ICOSL v169 ECD <400>460

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp ValAsp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val

5 10155 1015

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn AspLeu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp

25302530

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 4045Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 4045

Ile Pro Gln Ser Ser Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 5560Ile Pro Gln Ser Ser Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 5560

Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 65 7075Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 65 7075

Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 85 9095Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 85 9095

Val Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu

100 105110100 105110

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

- 642 044346- 642 044346

Thr Leu Arg Val Ala 115Thr Leu Arg Val Ala 115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr PheAsp Glu Leu Thr Phe

135135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Ser Leu Asn MetVal Ser Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Arg Ile Glu Asn Val 200Arg Ile Glu Asn Val 200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 461 <211> 238 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 461 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v170 ECD <400> 461<223> ICOSL v170 ECD <400> 461

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

Arg Leu Phe Asn ValArg Leu Phe Asn Val

Thr Pro Gln Asp GluThr Pro Gln Asp Glu

Gln Lys Phe His CysGln Lys Phe His Cys

- 643 044346- 643 044346

Val Leu Ser Pro Ser Leu Gly PheVal Leu Ser Pro Ser Leu Gly Phe

100100

Gln Glu Val Leu Ser Val GluGln Glu Val Leu Ser Val Glu

105 110105 110

Thr Leu His Val Ala Ala Asn PheThr Leu His Val Ala Ala Asn Phe

115 120115 120

Ser Val Pro Val Val Ser AlaSer Val Pro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser Gln Asp Glu LeuHis Ser Pro Ser Gln Asp Glu Leu

130 135130 135

Thr Phe Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Phe Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Arg Ile Glu Asn Val 200Arg Ile Glu Asn Val 200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 462 <211> 238 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 462 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL <400> 462<223> ICOSL <400> 462

Asp Thr Gln 1Asp Thr Gln 1

Leu Ser CysLeu Ser Cys

Tyr Val TyrTyr Val Tyr

Ile Pro Gln v171 ECDIle Pro Gln v171 ECD

Glu Lys Glu 5Glu Lys Glu 5

Ala Cys Pro 20Ala Cys Pro 20

Trp Gln ThrTrp Gln Thr

His Ser SerHis Ser Ser

Val Arg AlaVal Arg Ala

Glu Gly SerGlu Gly Ser

Ser Glu SerSer Glu Ser

Leu Glu Tyr 55Leu Glu Tyr 55

Met Val Gly 10Met Val Gly 10

Arg Phe AspArg Phe Asp

Lys Thr ValLys Thr Val

Val Asp Ser 60Val Asp Ser 60

Ser Asp ValSer Asp Val

Leu Asn Asp 30Leu Asn Asp 30

Val Thr Tyr 45Val Thr Tyr 45

Arg Tyr ArgArg Tyr Arg

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

- 644 044346- 644 044346

Arg Ala Leu 65Arg Ala Leu 65

Met Ser ProMet Ser Pro

Ala Gly MetAla Gly Met

Leu Arg GlyLeu Arg Gly

Asp Phe SerAsp Phe Ser

Arg Leu PheArg Leu Phe

Asn Val ThrAsn Val Thr

Pro Gln AspPro Gln Asp

Glu Gln Lys 90Glu Gln Lys 90

Phe His CysPhe His Cys

Val Leu SerVal Leu Ser

Pro Ser Leu 100Pro Ser Leu 100

Gly Phe GlnGly Phe Gln

105105

Glu Val LeuGlu Val Leu

Ser Val GluSer Val Glu

110110

Thr Leu ArgThr Leu Arg

115115

Val Ala AlaVal Ala Ala

Asn Phe SerAsn Phe Ser

120120

Val Pro ValVal Pro Val

Val Ser Ala 125Val Ser Ala 125

His Ser ProHis Ser Pro

130130

Ser Gln AspSer Gln Asp

Glu Leu Thr 135Glu Leu Thr 135

Phe Thr CysPhe Thr Cys

140140

Thr Ser IleThr Ser Ile

Gly Tyr Pro 145Gly Tyr Pro 145

Arg Pro AsnArg Pro Asn

150150

Val Tyr TrpVal Tyr Trp

Ile Asn LysIle Asn Lys

155155

Thr Asp AsnThr Asp Asn

Leu Leu AspLeu Leu Asp

Gln Ala LeuGln Ala Leu

165165

Gln Asn AspGln Asn Asp

Thr Val Ser 170Thr Val Ser 170

Leu Asn MetLeu Asn Met

175175

Gly Leu TyrGly Leu Tyr

Asp Val Val 180Asp Val Val 180

Ser Val LeuSer Val Leu

185185

Arg Ile AlaArg Ile Ala

Arg Thr ProArg Thr Pro

190190

Val Asn IleVal Asn Ile

195195

Gly Cys ArgGly Cys Arg

Ile Glu AsnIle Glu Asn

200200

Val Leu LeuVal Leu Leu

Gln Gln Asn 205Gln Gln Asn 205

Thr Val GlyThr Val Gly

210210

Ser Gln ThrSer Gln Thr

Gly Asn Asp 215Gly Asn Asp 215

Ile Gly GluIle Gly Glu

220220

Arg Asp LysArg Asp Lys

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn 225Thr Glu Asn 225

Pro Val SerPro Val Ser

230230

Thr Gly GluThr Gly Glu

Lys Asn AlaLys Asn Ala

235235

Ala Thr <210> 463 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Ala Thr <210> 463 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v172 ECD<223> ICOSL v172 ECD

<400> <400> 463 463 Asp 1 Asp 1 Thr Thr Gln Gln Glu Glu Lys 5 Lys 5 Glu Glu Val Val Arg Arg Ala Ala Met 10 Met 10 Val Val Gly Gly Ser Ser Asp Asp Val 15 Val 15 Leu Leu Ser Ser Cys Cys Ala 20 Ala 20 Cys Cys Pro Pro Glu Glu Gly Gly Ser 25 Ser 25 Arg Arg Phe Phe Asp Asp Leu Leu Asn 30 Asn 30 Asp Asp

GluGlu

ValVal

- 645 044346- 645 044346

Tyr Val TyrTyr Val Tyr

Trp Gln ThrTrp Gln Thr

Ser Glu SerSer Glu Ser

Lys Thr ValLys Thr Val

Val Thr Tyr 45Val Thr Tyr 45

Ile Pro GlnIle Pro Gln

His Ser SerHis Ser Ser

Leu Glu Tyr 55Leu Glu Tyr 55

Val Asp SerVal Asp Ser

Arg Tyr ArgArg Tyr Arg

Arg Ala Leu 65Arg Ala Leu 65

Met Ser ProMet Ser Pro

Ala Gly MetAla Gly Met

Leu Arg GlyLeu Arg Gly

Asp Phe SerAsp Phe Ser

Arg Leu PheArg Leu Phe

Asn Val ThrAsn Val Thr

Pro Gln AspPro Gln Asp

Glu Gln Lys 90Glu Gln Lys 90

Phe His CysPhe His Cys

Val Leu SerVal Leu Ser

Pro Ser Leu 100Pro Ser Leu 100

Gly Phe GlnGly Phe Gln

105105

Glu Val LeuGlu Val Leu

Ser Val GluSer Val Glu

110110

Thr Leu HisThr Leu His

115115

Val Ala AlaVal Ala Ala

Asn Phe SerAsn Phe Ser

120120

Val Pro ValVal Pro Val

Val Ser Ala 125Val Ser Ala 125

His Ser ProHis Ser Pro

130130

Ser Gln AspSer Gln Asp

Glu Leu Thr 135Glu Leu Thr 135

Phe Thr CysPhe Thr Cys

140140

Thr Ser IleThr Ser Ile

Gly Tyr Pro 145Gly Tyr Pro 145

Arg Pro AsnArg Pro Asn

150150

Val Tyr TrpVal Tyr Trp

Ile Asn LysIle Asn Lys

155155

Thr Asp AsnThr Asp Asn

Leu Leu AspLeu Leu Asp

Gln Ala LeuGln Ala Leu

165165

Gln Asn AspGln Asn Asp

Thr Val Ser 170Thr Val Ser 170

Leu Asn MetLeu Asn Met

175175

Gly Leu TyrGly Leu Tyr

Asp Val Val 180Asp Val Val 180

Ser Val LeuSer Val Leu

185185

Arg Ile AlaArg Ile Ala

Arg Thr ProArg Thr Pro

190190

Val Asn IleVal Asn Ile

195195

Gly Cys ArgGly Cys Arg

Ile Glu AsnIle Glu Asn

200200

Val Leu LeuVal Leu Leu

Gln Gln Asn 205Gln Gln Asn 205

Thr Val GlyThr Val Gly

210210

Ser Gln ThrSer Gln Thr

Gly Asn Asp 215Gly Asn Asp 215

Ile Gly GluIle Gly Glu

220220

Arg Asp LysArg Asp Lys

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn 225Thr Glu Asn 225

Pro Val SerPro Val Ser

230230

Thr Gly GluThr Gly Glu

Lys Asn AlaLys Asn Ala

235235

Ala Thr <210> 464 <211> 238 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Ala Thr <210> 464 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v173 ECD <400> 464<223> ICOSL v173 ECD <400> 464

- 646 044346- 646 044346

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala CysLeu Ser Cys Ala Cys

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn AspPhe Asp Leu Asn Asp

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Pro SerVal Leu Ser Pro Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu Arg Val Ala 115Thr Leu Arg Val Ala 115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 465 <211> 238 <212> БЕЛОКAsn Ala Ala Thr 235 <210> 465 <211> 238 <212> PROTEIN

- 647 044346 <213> Искусственная последовательность <220>- 647 044346 <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v174 ECD <400> 465<223> ICOSL v174 ECD <400> 465

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Pro SerVal Leu Ser Pro Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu Arg Val Ala 115Thr Leu Arg Val Ala 115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr PheAsp Glu Leu Thr Phe

135135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Arg Ile Glu Asn Val 200Arg Ile Glu Asn Val 200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

- 648 044346- 648 044346

Thr Glu Asn Pro Val Ser Thr Gly Glu Lys Asn Ala Ala ThrThr Glu Asn Pro Val Ser Thr Gly Glu Lys Asn Ala Ala Thr

225 230 235 <210> 466 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>225 230 235 <210> 466 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v175 ECD <400> 466<223> ICOSL v175 ECD <400> 466

Asp Thr Gln Glu LysAsp Thr Gln Glu Lys

55

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Arg SerVal Leu Ser Arg Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

Arg Ile Glu Asn ValArg Ile Glu Asn Val

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

- 649 044346- 649 044346

195195

200200

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp Lys 220Gly Glu Arg Asp Lys 220

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 467 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 467 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v176 ECD < 400> 467< 223> ICOSL v176 ECD < 400> 467

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Arg SerVal Leu Ser Arg Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu Arg Val Ala 115Thr Leu Arg Val Ala 115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Ser Leu Asn MetVal Ser Leu Asn Met

175175

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

- 650 044346- 650 044346

Gly Leu Tyr AspGly Leu Tyr Asp

180180

Val Val Ser ValVal Val Ser Val

Leu Arg Ile Ala 185Leu Arg Ile Ala 185

Arg Thr Pro Ser 190Arg Thr Pro Ser 190

Val Asn Ile GlyVal Asn Ile Gly

195195

Cys Cys Ile GluCys Cys Ile Glu

200200

Asn Val Leu LeuAsn Val Leu Leu

Gln Gln Asn Leu 205Gln Gln Asn Leu 205

Thr Val Gly SerThr Val Gly Ser

210210

Gln Thr Gly AsnGln Thr Gly Asn

215215

Asp Ile Gly GluAsp Ile Gly Glu

220220

Arg Asp Lys IleArg Asp Lys Ile

Thr Glu Asn Pro 225Thr Glu Asn Pro 225

Val Ser Thr GlyVal Ser Thr Gly

230230

Glu Lys Asn AlaGlu Lys Asn Ala

235235

Ala Thr <210> 468 <211> 238 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Ala Thr <210> 468 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v177 ECD <220><223> ICOSL v177 ECD <220>

< 221> ВАРИАНТ < 222> (115) .. (115) <223> X представляет собой H или Q <400>468<221>OPTION <222> (115) .. (115) <223> X is H or Q <400>468

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val GluAsp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val Glu

5 10155 1015

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp Val 20 2530Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp Val 20 2530

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr His 35 4045Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr His 35 4045

Ile Pro Gln His Ser Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg Asn 50 5560Ile Pro Gln His Ser Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg Asn 50 5560

Arg 65 Arg 65 Ala Ala Leu Leu Met Met Ser Ser Pro 70 Pro 70 Ala Ala Gly Gly Met Met Arg Arg Leu Leu Phe Phe Asn Asn Val 85 Val 85 Thr Thr Pro Pro Gln Gln Asp Asp Val Val Leu Leu Ser Ser Arg 100 Arg 100 Ser Ser Leu Leu Gly Gly Phe Phe Gln 105 Gln 105

Leu Arg Gly Asp Phe Ser LeuLeu Arg Gly Asp Phe Ser Leu

8080

Glu Gln Lys Phe His Cys Leu 90 95Glu Gln Lys Phe His Cys Leu 90 95

Glu Val Leu Ser Val Glu ValGlu Val Leu Ser Val Glu Val

110110

Thr Leu Xaa Val Ala Ala Asn PheThr Leu Xaa Val Ala Ala Asn Phe

Ser Val Pro Val Val Ser Ala ProSer Val Pro Val Val Ser Ala Pro

- 651 044346- 651 044346

115115

120120

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr PheAsp Glu Leu Thr Phe

135135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Ser Leu Asn MetVal Ser Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Arg Ile Glu Asn Val 200Arg Ile Glu Asn Val 200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 469 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 469 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v178 ECD <400>469<223>ICOSL v178 ECD <400>469

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp ValAsp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val

5 10155 1015

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn AspLeu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp

25302530

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 4045Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 4045

Ile Pro Gln His Ser Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 5560Ile Pro Gln His Ser Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 5560

Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 65 7075Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 65 7075

Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 85 9095Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 85 9095

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

- 652 044346- 652 044346

Val Leu Ser Arg Ser Leu Gly Phe Gln Glu ValVal Leu Ser Arg Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val

100 105100 105

Leu Ser Val Glu ValLeu Ser Val Glu Val

110110

Thr Leu Arg Val Ala Ala Asn Phe Ser Val Pro Val ValThr Leu Arg Val Ala Ala Asn Phe Ser Val Pro Val Val

115 120 125115 120 125

Ser Ala ProSer Ala Pro

HisHis

Gly 145Gly 145

LeuLeu

GlyGly

Ser Pro Ser 130Ser Pro Ser 130

Tyr Pro ArgTyr Pro Arg

Leu Asp GlnLeu Asp Gln

Leu Tyr Asp 180Leu Tyr Asp 180

Gln Asp GluGln Asp Glu

135135

Pro Asn ValPro Asn Val

150150

Ala Leu Gln 165Ala Leu Gln 165

Val Val SerVal Val Ser

Leu Thr PheLeu Thr Phe

Tyr Trp IleTyr Trp Ile

Asn Asp ThrAsn Asp Thr

170170

Val Leu ArgVal Leu Arg

185185

Thr Cys ThrThr Cys Thr

140140

Ser Ile AsnSer Ile Asn

Asn Lys Thr 155Asn Lys Thr 155

Asp Asn SerAsp Asn Ser

160160

Val Ser LeuVal Ser Leu

Asn Met ArgAsn Met Arg

175175

Ile Ala ArgIle Ala Arg

Thr Pro Ser 190Thr Pro Ser 190

Val Asn Ile Gly Cys ArgVal Asn Ile Gly Cys Arg

195195

Ile Glu Asn Val Leu Leu Gln Gln Asn LeuIle Glu Asn Val Leu Leu Gln Gln Asn Leu

200 205200 205

Thr Val Gly Ser Gln ThrThr Val Gly Ser Gln Thr

210210

Gly Asn Asp Ile Gly Glu Arg Asp Lys IleGly Asn Asp Ile Gly Glu Arg Asp Lys Ile

215 220215 220

Thr Glu Asn Pro Val SerThr Glu Asn Pro Val Ser

225 230225 230

Thr Gly Glu Lys Asn Ala Ala ThrThr Gly Glu Lys Asn Ala Ala Thr

235 <210> 470 <211> 238 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>235 <210> 470 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v179 ECD <400> 470<223> ICOSL v179 ECD <400> 470

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Glu Val Arg Ala Met 10Glu Val Arg Ala Met 10

Pro Glu Gly Ser Arg 25Pro Glu Gly Ser Arg 25

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Val Gly Ser Asp Val Glu 15Val Gly Ser Asp Val Glu 15

Phe Asp Leu Asn Asp Val 30Phe Asp Leu Asn Asp Val 30

Thr Val Val Thr Tyr His 45Thr Val Val Thr Tyr His 45

Asp Ser Arg Tyr Arg Asn 60Asp Ser Arg Tyr Arg Asn 60

- 653 044346- 653 044346

Arg Ala Leu 65Arg Ala Leu 65

Met Ser ProMet Ser Pro

Ala Gly MetAla Gly Met

Leu Arg GlyLeu Arg Gly

Asp Phe SerAsp Phe Ser

Arg Leu PheArg Leu Phe

Asn Val ThrAsn Val Thr

Pro Gln AspPro Gln Asp

Glu Gln Lys 90Glu Gln Lys 90

Phe His CysPhe His Cys

Val Leu SerVal Leu Ser

Arg Ser Leu 100Arg Ser Leu 100

Gly Phe GlnGly Phe Gln

105105

Glu Val LeuGlu Val Leu

Ser Val GluSer Val Glu

110110

Thr Leu HisThr Leu His

115115

Val Ala AlaVal Ala Ala

Asn Phe SerAsn Phe Ser

120120

Val Pro ValVal Pro Val

Val Ser Ala 125Val Ser Ala 125

His Ser ProHis Ser Pro

130130

Ser Gln AspSer Gln Asp

Glu Leu Thr 135Glu Leu Thr 135

Phe Thr CysPhe Thr Cys

140140

Thr Ser IleThr Ser Ile

Gly Tyr Pro 145Gly Tyr Pro 145

Arg Pro AsnArg Pro Asn

150150

Val Tyr TrpVal Tyr Trp

Ile Asn LysIle Asn Lys

155155

Thr Asp AsnThr Asp Asn

Leu Leu AspLeu Leu Asp

Gln Ala LeuGln Ala Leu

165165

Gln Asn AspGln Asn Asp

Thr Val Ser 170Thr Val Ser 170

Leu Asn MetLeu Asn Met

175175

Gly Leu TyrGly Leu Tyr

Asp Val Val 180Asp Val Val 180

Ser Val LeuSer Val Leu

185185

Arg Ile AlaArg Ile Ala

Arg Thr ProArg Thr Pro

190190

Val Asn IleVal Asn Ile

195195

Gly Cys ArgGly Cys Arg

Ile Glu AsnIle Glu Asn

200200

Val Leu LeuVal Leu Leu

Gln Gln Asn 205Gln Gln Asn 205

Thr Val GlyThr Val Gly

210210

Ser Gln ThrSer Gln Thr

Gly Asn Asp 215Gly Asn Asp 215

Ile Gly GluIle Gly Glu

220220

Arg Asp LysArg Asp Lys

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn 225Thr Glu Asn 225

Pro Val SerPro Val Ser

230230

Thr Gly GluThr Gly Glu

Lys Asn AlaLys Asn Ala

235235

Ala Thr <210> 471 <211> 18 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Ala Thr <210> 471 <211> 18 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> CD80 WT линкер 1 (включая первые 3 ак) <400> 471<223> CD80 WT linker 1 (including first 3 aa) <400> 471

Leu Ser Val Lys Ala Asp Phe Pro Thr Pro Ser Ile Ser Asp Phe 1 5 10 15Leu Ser Val Lys Ala Asp Phe Pro Thr Pro Ser Ile Ser Asp Phe 1 5 10 15

GluGlu

Ile ProIle Pro

- 654 044346 <210> 472 <211> 232 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>- 654 044346 <210> 472 <211> 232 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> Fc с выступом < 400> 472< 223> Fc with projection < 400> 472

Glu Pro Lys Ser Ser 1 5Glu Pro Lys Ser Ser 1 5

Asp Lys Thr His ThrAsp Lys Thr His Thr

Cys Pro Pro Cys ProCys Pro Pro Cys Pro

Pro Glu Ala Glu GlyPro Glu Ala Glu Gly

Ala Pro Ser Val PheAla Pro Ser Val Phe

Leu Phe Pro Pro Lys 30Leu Phe Pro Pro Lys 30

Lys Asp Thr Leu Met 35Lys Asp Thr Leu Met 35

Ile Ser Arg Thr Pro 40Ile Ser Arg Thr Pro 40

Glu Val Thr Cys Val 45Glu Val Thr Cys Val 45

Val Asp Val Ser His 50Val Asp Val Ser His 50

Glu Asp Pro Glu Val 55Glu Asp Pro Glu Val 55

Lys Phe Asn Trp Tyr 60Lys Phe Asn Trp Tyr 60

Asp Gly Val Glu Val 65Asp Gly Val Glu Val 65

His Asn Ala Lys Thr 70His Asn Ala Lys Thr 70

Lys Pro Arg Glu Glu 75Lys Pro Arg Glu Glu 75

Tyr Asn Ser Thr Tyr 85Tyr Asn Ser Thr Tyr 85

Arg Val Val Ser Val 90Arg Val Val Ser Val 90

Leu Thr Val Leu HisLeu Thr Val Leu His

Asp Trp Leu Asn GlyAsp Trp Leu Asn Gly

100100

Lys Glu Tyr Lys CysLys Glu Tyr Lys Cys

105105

Lys Val Ser Asn LysLys Val Ser Asn Lys

110110

Leu Pro Ala Pro IleLeu Pro Ala Pro Ile

115115

Glu Lys Thr Ile Ser 120Glu Lys Thr Ile Ser 120

Lys Ala Lys Gly GlnLys Ala Lys Gly Gln

125125

Arg Glu Pro Gln ValArg Glu Pro Gln Val

130130

Tyr Thr Leu Pro ProTyr Thr Leu Pro Pro

135135

Cys Arg Glu Glu Met 140Cys Arg Glu Glu Met 140

Lys Asn Gln Val Ser 145Lys Asn Gln Val Ser 145

Leu Trp Cys Leu Val 150Leu Trp Cys Leu Val 150

Lys Gly Phe Tyr Pro 155Lys Gly Phe Tyr Pro 155

Asp Ile Ala Val GluAsp Ile Ala Val Glu

165165

Trp Glu Ser Asn GlyTrp Glu Ser Asn Gly

170170

Gln Pro Glu Asn AsnGln Pro Glu Asn Asn

175175

Lys Thr Thr Pro ProLys Thr Thr Pro Pro

180180

Val Leu Asp Ser AspVal Leu Asp Ser Asp

185185

Gly Ser Phe Phe LeuGly Ser Phe Phe Leu

190190

Ser Lys Leu Thr ValSer Lys Leu Thr Val

195195

Asp Lys Ser Arg Trp 200Asp Lys Ser Arg Trp 200

Gln Gln Gly Asn ValGln Gln Gly Asn Val

205205

AlaAla

ProPro

ValVal

ValVal

Gln 80Gln 80

GlnGln

AlaAla

ProPro

ThrThr

Ser 160Ser 160

TyrTyr

TyrTyr

PhePhe

LysLys

Ser Cys Ser Val MetSer Cys Ser Val Met

His Glu Ala Leu HisHis Glu Ala Leu His

Asn His Tyr Thr GlnAsn His Tyr Thr Gln

- 655 044346- 655 044346

210210

215215

220220

Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly LysSer Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys

225225

230 <210> 473 < 211> 232 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>230 <210> 473 <211> 232 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> Fc с углублением < 400> 473< 223> Fc with recess < 400> 473

Glu 1Glu 1

ProPro

LysLys

SerSer

SerSer

AspAsp

LysLys

ThrThr

HisHis

Thr 10Thr 10

CysCys

ProPro

ProPro

CysCys

Pro 15Pro 15

AlaAla

ProPro

GluGlu

AlaAla

Glu 20Glu 20

GlyGly

AlaAla

ProPro

SerSer

Val 25Val 25

PhePhe

LeuLeu

PhePhe

ProPro

Pro 30Pro 30

LysLys

ProPro

LysLys

AspAsp

Thr 35Thr 35

LeuLeu

MetMet

IleIle

SerSer

Arg 40Arg 40

ThrThr

ProPro

GluGlu

ValVal

Thr 45Thr 45

CysCys

ValVal

ValVal

ValVal

Asp 50Asp 50

ValVal

SerSer

HisHis

GluGlu

Asp 55Asp 55

ProPro

GluGlu

ValVal

LysLys

Phe 60Phe 60

AsnAsn

TrpTrp

TyrTyr

ValVal

Asp 65Asp 65

GlyGly

ValVal

GluGlu

ValVal

His 70His 70

AsnAsn

AlaAla

LysLys

ThrThr

Lys 75Lys 75

ProPro

ArgArg

GluGlu

GluGlu

Gln 80Gln 80

TyrTyr

AsnAsn

SerSer

ThrThr

Tyr 85Tyr 85

ArgArg

ValVal

ValVal

SerSer

Val 90Val 90

LeuLeu

ThrThr

ValVal

LeuLeu

His 95His 95

GlnGln

AspAsp

TrpTrp

LeuLeu

AsnAsn

100100

GlyGly

LysLys

GluGlu

TyrTyr

Lys 105Lys 105

CysCys

LysLys

ValVal

SerSer

AsnAsn

110110

LysLys

AlaAla

LeuLeu

ProPro

AlaAla

115115

ProPro

IleIle

GluGlu

LysLys

ThrThr

120120

IleIle

SerSer

LysLys

AlaAla

Lys 125Lys 125

GlyGly

GlnGln

ProPro

ArgArg

GluGlu

130130

ProPro

GlnGln

ValVal

CysCys

ThrThr

135135

LeuLeu

ProPro

ProPro

SerSer

ArgArg

140140

GluGlu

GluGlu

MetMet

ThrThr

LysLys

145145

AsnAsn

GlnGln

ValVal

SerSer

LeuLeu

150150

SerSer

CysCys

AlaAla

ValVal

LysLys

155155

GlyGly

PhePhe

TyrTyr

ProPro

SerSer

160160

AspAsp

IleIle

AlaAla

ValVal

GluGlu

165165

TrpTrp

GluGlu

SerSer

AsnAsn

Gly 170Gly 170

GlnGln

ProPro

GluGlu

AsnAsn

AsnAsn

175175

TyrTyr

ProPro

180180

ProPro

ValVal

LeuLeu

AspAsp

SerSer

185185

AspAsp

GlyGly

SerSer

PhePhe

PhePhe

190190

LeuLeu

ValVal

LysLys

ThrThr

ThrThr

- 656 044346- 656 044346

Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp GlnSer Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln

195 200195 200

Gln Gly Asn ValGln Gly Asn Val

205205

Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His AsnSer Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn

210 215210 215

His Tyr Thr Gln 220His Tyr Thr Gln 220

PhePhe

LysLys

Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly LysSer Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys

225 230 <210> 474 <211> 232 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>225 230 <210> 474 <211> 232 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> Fc-область <400> 474<223> Fc region <400> 474

Glu Pro Lys Ser SerGlu Pro Lys Ser Ser

55

Asp Lys Thr His ThrAsp Lys Thr His Thr

Cys Pro Pro Cys ProCys Pro Pro Cys Pro

Pro Glu Ala Glu GlyPro Glu Ala Glu Gly

Ala Pro Ser Val PheAla Pro Ser Val Phe

Leu Phe Pro Pro Lys 30Leu Phe Pro Pro Lys 30

Lys Asp Thr Leu Met 35Lys Asp Thr Leu Met 35

Ile Ser Arg Thr Pro 40Ile Ser Arg Thr Pro 40

Glu Val Thr Cys Val 45Glu Val Thr Cys Val 45

Val Asp Val Ser His 50Val Asp Val Ser His 50

Glu Asp Pro Glu Val 55Glu Asp Pro Glu Val 55

Lys Phe Asn Trp Tyr 60Lys Phe Asn Trp Tyr 60

Asp Gly Val Glu Val 65Asp Gly Val Glu Val 65

His Asn Ala Lys Thr 70His Asn Ala Lys Thr 70

Lys Pro Arg Glu Glu 75Lys Pro Arg Glu Glu 75

Tyr Asn Ser Thr Tyr 85Tyr Asn Ser Thr Tyr 85

Arg Val Val Ser Val 90Arg Val Val Ser Val 90

Leu Thr Val Leu HisLeu Thr Val Leu His

Asp Trp Leu Asn GlyAsp Trp Leu Asn Gly

100100

Lys Glu Tyr Lys CysLys Glu Tyr Lys Cys

105105

Lys Val Ser Asn LysLys Val Ser Asn Lys

110110

Leu Pro Ala Pro IleLeu Pro Ala Pro Ile

115115

Glu Lys Thr Ile Ser 120Glu Lys Thr Ile Ser 120

Lys Ala Lys Gly GlnLys Ala Lys Gly Gln

125125

Arg Glu Pro Gln Val 130Arg Glu Pro Gln Val 130

Tyr Thr Leu Pro ProTyr Thr Leu Pro Pro

135135

Ser Arg Asp Glu Leu 140Ser Arg Asp Glu Leu 140

Lys Asn Gln Val Ser 145Lys Asn Gln Val Ser 145

Leu Thr Cys Leu Val 150Leu Thr Cys Leu Val 150

AlaAla

ProPro

ValVal

ValVal

Gln 80Gln 80

GlnGln

AlaAla

ProPro

ThrThr

Ser 160Ser 160

Lys Gly Phe Tyr ProLys Gly Phe Tyr Pro

155155

- 657 044346- 657 044346

Asp Ile Ala Val GluAsp Ile Ala Val Glu

165165

Lys Thr Thr Pro ProLys Thr Thr Pro Pro

180180

Ser Lys Leu Thr ValSer Lys Leu Thr Val

195195

Ser Cys Ser Val MetSer Cys Ser Val Met

210210

Trp Glu Ser Asn Gly Gln 170Trp Glu Ser Asn Gly Gln 170

Val Leu Asp Ser Asp Gly 185Val Leu Asp Ser Asp Gly 185

Asp Lys Ser Arg Trp Gln 200Asp Lys Ser Arg Trp Gln 200

His Glu Ala Leu His Asn 215His Glu Ala Leu His Asn 215

Pro Glu Asn Asn TyrPro Glu Asn Asn Tyr

175175

Ser Phe Phe Leu Tyr 190Ser Phe Phe Leu Tyr 190

Gln Gly Asn Val PheGln Gly Asn Val Phe

205205

His Tyr Thr Gln Lys 220His Tyr Thr Gln Lys 220

Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly LysSer Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys

225230 <210>475 < 211>8 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>225230 <210>475 <211>8 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> Stuffer < 400>475<223>Stuffer <400>475

His Met Ser Ser Val Ser Ala Gln <210>476 <211>232 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>His Met Ser Ser Val Ser Ala Gln <210>476 <211>232 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> Fc (C5S (C220S), R77C, (R292C), N82G (N297G), V87C (V302C)) <400>476<223> Fc (C5S (C220S), R77C, (R292C), N82G (N297G), V87C (V302C)) <400>476

Glu Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala 1 5 1015Glu Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala 1 5 1015

Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro 20 2530Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro 20 2530

Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val 35 4045Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val 35 4045

Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val 50 5560Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val 50 5560

Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Cys Glu Glu Gln 65 70 7580Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Cys Glu Glu Gln 65 70 7580

- 658 044346- 658 044346

Tyr Gly Ser Thr Tyr 85Tyr Gly Ser Thr Tyr 85

Arg Cys Val Ser Val 90Arg Cys Val Ser Val 90

Leu Thr Val Leu HisLeu Thr Val Leu His

Asp Trp Leu Asn GlyAsp Trp Leu Asn Gly

100100

Lys Glu Tyr Lys CysLys Glu Tyr Lys Cys

105105

Lys Val Ser Asn LysLys Val Ser Asn Lys

110110

Leu Pro Ala Pro IleLeu Pro Ala Pro Ile

115115

Glu Lys Thr Ile Ser 120Glu Lys Thr Ile Ser 120

Lys Ala Lys Gly GlnLys Ala Lys Gly Gln

125125

Arg Glu Pro Gln ValArg Glu Pro Gln Val

130130

Tyr Thr Leu Pro ProTyr Thr Leu Pro Pro

135135

Ser Arg Glu Glu MetSer Arg Glu Glu Met

140140

Lys Asn Gln Val Ser 145Lys Asn Gln Val Ser 145

Leu Thr Cys Leu Val 150Leu Thr Cys Leu Val 150

Lys Gly Phe Tyr Pro 155Lys Gly Phe Tyr Pro 155

Asp Ile Ala Val GluAsp Ile Ala Val Glu

165165

Trp Glu Ser Asn GlyTrp Glu Ser Asn Gly

170170

Gln Pro Glu Asn AsnGln Pro Glu Asn Asn

175175

Lys Thr Thr Pro ProLys Thr Thr Pro Pro

180180

Val Leu Asp Ser AspVal Leu Asp Ser Asp

185185

Gly Ser Phe Phe LeuGly Ser Phe Phe Leu

190190

Ser Lys Leu Thr ValSer Lys Leu Thr Val

195195

Asp Lys Ser Arg Trp 200Asp Lys Ser Arg Trp 200

Gln Gln Gly Asn ValGln Gln Gly Asn Val

205205

Ser Cys Ser Val MetSer Cys Ser Val Met

210210

His Glu Ala Leu HisHis Glu Ala Leu His

215215

Asn His Tyr Thr Gln 220Asn His Tyr Thr Gln 220

GlnGln

AlaAla

ProPro

ThrThr

Ser 160Ser 160

TyrTyr

TyrTyr

PhePhe

LysLys

Ser Leu Ser Leu Ser 225Ser Leu Ser Leu Ser 225

Pro Gly Lys 230 <210> 477 <211> 232 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Pro Gly Lys 230 <210> 477 <211> 232 <212> PROTEIN <213> Artificial Sequence <220>

<223> Fc с C220S/L234A/L235E/G237A <400> 477<223> Fc with C220S/L234A/L235E/G237A <400> 477

Glu Pro Lys 1Glu Pro Lys 1

Ser Ser Asp Lys Thr His ThrSer Ser Asp Lys Thr His Thr

1010

Cys Pro Pro Cys ProCys Pro Pro Cys Pro

Pro Glu AlaPro Glu Ala

Glu Gly Ala Pro Ser Val PheGlu Gly Ala Pro Ser Val Phe

2525

Leu Phe Pro Pro Lys 30Leu Phe Pro Pro Lys 30

Lys Asp ThrLys Asp Thr

Leu Met Ile Ser Arg Thr ProLeu Met Ile Ser Arg Thr Pro

Glu Val Thr Cys Val 45Glu Val Thr Cys Val 45

AlaAla

ProPro

ValVal

- 659 044346- 659 044346

Val Asp Val 50Val Asp Val 50

Ser His GluSer His Glu

Asp Pro Glu 55Asp Pro Glu 55

Val Lys PheVal Lys Phe

Asn Trp TyrAsn Trp Tyr

Asp Gly Val 65Asp Gly Val 65

Glu Val HisGlu Val His

Asn Ala LysAsn Ala Lys

Thr Lys Pro 75Thr Lys Pro 75

Arg Glu GluArg Glu Glu

Tyr Asn SerTyr Asn Ser

Thr Tyr ArgThr Tyr Arg

Val Val SerVal Val Ser

Val Leu Thr 90Val Leu Thr 90

Val Leu HisVal Leu His

Asp Trp LeuAsp Trp Leu

Asn Gly Lys 100Asn Gly Lys 100

Glu Tyr LysGlu Tyr Lys

105105

Cys Lys ValCys Lys Val

Ser Asn LysSer Asn Lys

110110

Leu Pro AlaLeu Pro Ala

115115

Pro Ile GluPro Ile Glu

Lys Thr IleLys Thr Ile

120120

Ser Lys AlaSer Lys Ala

Lys Gly Gln 125Lys Gly Gln 125

Arg Glu ProArg Glu Pro

130130

Gln Val TyrGln Val Tyr

Thr Leu Pro 135Thr Leu Pro 135

Pro Ser ArgPro Ser Arg

140140

Glu Glu MetGlu Glu Met

Lys Asn Gln 145Lys Asn Gln 145

Val Ser LeuVal Ser Leu

150150

Thr Cys LeuThr Cys Leu

Val Lys GlyVal Lys Gly

155155

Phe Tyr ProPhe Tyr Pro

Asp Ile AlaAsp Ile Ala

Val Glu TrpVal Glu Trp

165165

Glu Ser AsnGlu Ser Asn

Gly Gln Pro 170Gly Gln Pro 170

Glu Asn AsnGlu Asn Asn

175175

Lys Thr ThrLys Thr Thr

Pro Pro Val 180Pro Pro Val 180

Leu Asp SerLeu Asp Ser

185185

Asp Gly SerAsp Gly Ser

Phe Phe LeuPhe Phe Leu

190190

Ser Lys LeuSer Lys Leu

195195

Thr Val AspThr Val Asp

Lys Ser ArgLys Ser Arg

200200

Trp Gln GlnTrp Gln Gln

Gly Asn Val 205Gly Asn Val 205

Ser Cys SerSer Cys Ser

210210

Val Met HisVal Met His

Glu Ala Leu 215Glu Ala Leu 215

His Asn HisHis Asn His

220220

Tyr Thr GlnTyr Thr Gln

ValVal

Gln 80Gln 80

GlnGln

AlaAla

ProPro

ThrThr

Ser 160Ser 160

TyrTyr

TyrTyr

PhePhe

LysLys

Ser Leu Ser 225Ser Leu Ser 225

Leu Ser ProLeu Ser Pro

230230

Gly Lys <210> 478 <211> 231 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Gly Lys <210> 478 <211> 231 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> Fc с C220S/E233P/L234V/L235A/G236del/S267K < 400> 478< 223> Fc with C220S/E233P/L234V/L235A/G236del/S267K < 400> 478

Glu Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro 1 5 10 15Glu Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro 1 5 10 15

AlaAla

- 660 044346- 660 044346

Pro Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys 20 25 30Pro Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys 20 25 30

Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val 35 40 45Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val 35 40 45

Asp Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp 50 55 60Asp Val Lys His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp 50 55 60

Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr 65 70 75 80Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr 65 70 75 80

Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp 85 90 95Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp 85 90 95

Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala LeuTrp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu

100 105 110100 105 110

Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro ArgPro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg

115 120 125115 120 125

Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr LysGlu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys

130 135 140130 135 140

Asn Gln Val Ser Leu 145Asn Gln Val Ser Leu 145

Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser AspThr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp

150 155 160150 155 160

Ile Ala Val Glu TrpIle Ala Val Glu Trp

165165

Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr LysGlu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys

170 175170 175

Thr Thr Pro Pro ValThr Thr Pro Pro Val

180180

Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr SerLeu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser

185 190185 190

Lys Leu Thr Val AspLys Leu Thr Val Asp

195195

Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe SerLys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser

200 205200 205

Cys Ser Val Met HisCys Ser Val Met His

210210

Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys SerGlu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser

215 220215 220

Leu Ser Leu Ser Pro Gly LysLeu Ser Leu Ser Pro Gly Lys

225 230 <210> 479 <211> 431 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>225 230 <210> 479 <211> 431 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> химерный антигенный рецептор antiCD19z<223> chimeric antigen receptor antiCD19z

- 661 044346 <400> 479- 661 044346 <400> 479

Asp Ile Gln Met Thr 1 5Asp Ile Gln Met Thr 1 5

Gln Thr Thr Ser SerGln Thr Thr Ser Ser

Leu Ser Ala Ser LeuLeu Ser Ala Ser Leu

Asp Arg Val Thr IleAsp Arg Val Thr Ile

Ser Cys Arg Ala SerSer Cys Arg Ala Ser

Gln Asp Ile Ser Lys 30Gln Asp Ile Ser Lys 30

Leu Asn Trp Tyr Gln 35Leu Asn Trp Tyr Gln 35

Gln Lys Pro Asp Gly 40Gln Lys Pro Asp Gly 40

Thr Val Lys Leu Leu 45Thr Val Lys Leu Leu 45

Tyr His Thr Ser Arg 50Tyr His Thr Ser Arg 50

Leu His Ser Gly Val 55Leu His Ser Gly Val 55

Pro Ser Arg Phe Ser 60Pro Ser Arg Phe Ser 60

Ser Gly Ser Gly Thr 65Ser Gly Ser Gly Thr 65

Asp Tyr Ser Leu Thr 70Asp Tyr Ser Leu Thr 70

Ile Ser Asn Leu Glu 75Ile Ser Asn Leu Glu 75

Glu Asp Ile Ala Thr 85Glu Asp Ile Ala Thr 85

Tyr Phe Cys Gln Gln 90Tyr Phe Cys Gln Gln 90

Gly Asn Thr Leu Pro 95Gly Asn Thr Leu Pro 95

Thr Phe Gly Gly GlyThr Phe Gly Gly Gly

100100

Thr Lys Leu Glu IleThr Lys Leu Glu Ile

105105

Thr Gly Ser Thr SerThr Gly Ser Thr Ser

110110

Ser Gly Lys Pro Gly 115Ser Gly Lys Pro Gly 115

Ser Gly Glu Gly Ser 120Ser Gly Glu Gly Ser 120

Thr Lys Gly Glu Val 125Thr Lys Gly Glu Val 125

Leu Gln Glu Ser Gly 130Leu Gln Glu Ser Gly 130

Pro Gly Leu Val AlaPro Gly Leu Val Ala

135135

Pro Ser Gln Ser LeuPro Ser Gln Ser Leu

140140

Val Thr Cys Thr Val 145Val Thr Cys Thr Val 145

Ser Gly Val Ser Leu 150Ser Gly Val Ser Leu 150

Pro Asp Tyr Gly Val 155Pro Asp Tyr Gly Val 155

Trp Ile Arg Gln ProTrp Ile Arg Gln Pro

165165

Pro Arg Lys Gly LeuPro Arg Lys Gly Leu

170170

Glu Trp Leu Gly ValGlu Trp Leu Gly Val

175175

Trp Gly Ser Glu ThrTrp Gly Ser Glu Thr

180180

Thr Tyr Tyr Asn SerThr Tyr Tyr Asn Ser

185185

Ala Leu Lys Ser ArgAla Leu Lys Ser Arg

190190

Thr Ile Ile Lys Asp 195Thr Ile Ile Lys Asp 195

Asn Ser Lys Ser Gln 200Asn Ser Lys Ser Gln 200

Val Phe Leu Lys MetVal Phe Leu Lys Met

205205

Ser Leu Gln Thr AspSer Leu Gln Thr Asp

210210

Asp Thr Ala Ile TyrAsp Thr Ala Ile Tyr

215215

Tyr Cys Ala Lys HisTyr Cys Ala Lys His

220220

GlyGly

TyrTyr

IleIle

GlyGly

Gln 80Gln 80

TyrTyr

GlyGly

LysLys

SerSer

Ser 160Ser 160

IleIle

LeuLeu

AsnAsn

TyrTyr

SerSer

240240

Tyr Tyr Gly Gly Ser 225Tyr Tyr Gly Gly Ser 225

Tyr Ala Met Asp Tyr 230Tyr Ala Met Asp Tyr 230

Trp Gly Gln Gly Thr 235Trp Gly Gln Gly Thr 235

- 662 044346- 662 044346

Val Thr ValVal Thr Val

Ser Ser AlaSer Ser Ala

245245

Ala Ala LysAla Ala Lys

Pro Thr Thr 250Pro Thr Thr 250

Thr Pro AlaThr Pro Ala

255255

Arg Pro ProArg Pro Pro

Thr Pro Ala 260Thr Pro Ala 260

Pro Thr IlePro Thr Ile

265265

Ala Ser GlnAla Ser Gln

Pro Leu SerPro Leu Ser

270270

Arg Pro GluArg Pro Glu

275275

Gly Leu AspGly Leu Asp

290290

Ala Ser ArgAla Ser Arg

Pro Ala AlaPro Ala Ala

280280

Gly Gly AlaGly Gly Ala

Val His Thr 285Val His Thr 285

Phe Ala SerPhe Ala Ser

Asp Ile Tyr 295Asp Ile Tyr 295

Ile Trp AlaIle Trp Ala

300300

Pro Leu AlaPro Leu Ala

Thr Cys Gly 305Thr Cys Gly 305

Val Leu LeuVal Leu Leu

310310

Leu Ser LeuLeu Ser Leu

Val Ile ThrVal Ile Thr

315315

Leu Tyr CysLeu Tyr Cys

Val Lys PheVal Lys Phe

Asn Gln LeuAsn Gln Leu

Val Leu Asp 355Val Leu Asp 355

Arg Arg Lys 370Arg Arg Lys 370

Lys Met Ala 385Lys Met Ala 385

Arg Gly LysArg Gly Lys

Ser Arg SerSer Arg Ser

325325

Tyr Asn Glu 340Tyr Asn Glu 340

Lys Arg ArgLys Arg Arg

Asn Pro GlnAsn Pro Gln

Glu Ala TyrGlu Ala Tyr

390390

Gly His AspGly His Asp

405405

Ala Asp AlaAla Asp Ala

Pro Ala Tyr 330Pro Ala Tyr 330

Gln Gln GlyGln Gln Gly

335335

Leu Asn LeuLeu Asn Leu

345345

Gly Arg ArgGly Arg Arg

Glu Glu TyrGlu Glu Tyr

350350

Gly Arg AspGly Arg Asp

360360

Glu Gly Leu 375Glu Gly Leu 375

Ser Glu IleSer Glu Ile

Gly Leu TyrGly Leu Tyr

Pro Glu MetPro Glu Met

Gly Gly Lys 365Gly Gly Lys 365

Tyr Asn GluTyr Asn Glu

380380

Leu Gln LysLeu Gln Lys

Gly Met LysGly Met Lys

395395

Gly Glu ArgGly Glu Arg

Gln Gly Leu 410Gln Gly Leu 410

Ser Thr AlaSer Thr Ala

415415

ProPro

LeuLeu

ArgArg

GlyGly

Arg 320Arg 320

GlnGln

AspAsp

ProPro

AspAsp

Arg 400Arg 400

ThrThr

Lys Asp ThrLys Asp Thr

Tyr Asp Ala 420Tyr Asp Ala 420

Leu His MetLeu His Met

425425

Gln Ala LeuGln Ala Leu

Pro Pro ArgPro Pro Arg

430 <210> 480 <211> 21 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>430 <210> 480 <211> 21 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> сигнальная последовательность, полученная из CD8 <400> 480<223> signal sequence derived from CD8 <400> 480

Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu 1 5 10 15Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu 1 5 10 15

LeuLeu

His Ala Ala Arg ProHis Ala Ala Arg Pro

- 663 044346 <210> 481 <211> 23 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>- 663 044346 <210> 481 <211> 23 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> сигнальная последовательность, полученная из CD8 <400>481<223> signal sequence derived from CD8 <400>481

Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu 1 5 1015Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu 1 5 1015

LeuLeu

His Ala Ala Arg Pro Gly Ser < 210>482 < 211>245 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>His Ala Ala Arg Pro Gly Ser < 210 > 482 < 211 > 245 < 212 > PROTEIN < 213 > Artificial sequence < 220 >

< 223> анти-CD19 scFv < 400> 482< 223 > anti-CD19 scFv < 400 > 482

Asp Ile Gln Met Thr 1 5Asp Ile Gln Met Thr 1 5

Gln Thr Thr Ser SerGln Thr Thr Ser Ser

Leu Ser Ala Ser LeuLeu Ser Ala Ser Leu

Asp Arg Val Thr Ile 20Asp Arg Val Thr Ile 20

Ser Cys Arg Ala SerSer Cys Arg Ala Ser

Gln Asp Ile Ser Lys 30Gln Asp Ile Ser Lys 30

Leu Asn Trp Tyr Gln 35Leu Asn Trp Tyr Gln 35

Gln Lys Pro Asp Gly 40Gln Lys Pro Asp Gly 40

Thr Val Lys Leu Leu 45Thr Val Lys Leu Leu 45

Tyr His Thr Ser Arg 50Tyr His Thr Ser Arg 50

Leu His Ser Gly Val 55Leu His Ser Gly Val 55

Pro Ser Arg Phe Ser 60Pro Ser Arg Phe Ser 60

Ser Gly Ser Gly Thr 65Ser Gly Ser Gly Thr 65

Asp Tyr Ser Leu Thr 70Asp Tyr Ser Leu Thr 70

Ile Ser Asn Leu Glu 75Ile Ser Asn Leu Glu 75

Glu Asp Ile Ala Thr 85Glu Asp Ile Ala Thr 85

Tyr Phe Cys Gln Gln 90Tyr Phe Cys Gln Gln 90

Gly Asn Thr Leu Pro 95Gly Asn Thr Leu Pro 95

Thr Phe Gly Gly GlyThr Phe Gly Gly Gly

100100

Thr Lys Leu Glu IleThr Lys Leu Glu Ile

105105

Thr Gly Ser Thr SerThr Gly Ser Thr Ser

110110

Ser Gly Lys Pro Gly 115Ser Gly Lys Pro Gly 115

Ser Gly Glu Gly Ser 120Ser Gly Glu Gly Ser 120

Thr Lys Gly Glu ValThr Lys Gly Glu Val

125125

GlyGly

TyrTyr

IleIle

GlyGly

Gln 80Gln 80

TyrTyr

GlyGly

LysLys

- 664 044346- 664 044346

Leu Gln Glu Ser Gly 130Leu Gln Glu Ser Gly 130

Pro Gly Leu Val AlaPro Gly Leu Val Ala

135135

Pro Ser Gln Ser LeuPro Ser Gln Ser Leu

140140

Val Thr Cys Thr Val 145Val Thr Cys Thr Val 145

Ser Gly Val Ser Leu 150Ser Gly Val Ser Leu 150

Pro Asp Tyr Gly Val 155Pro Asp Tyr Gly Val 155

Trp Ile Arg Gln ProTrp Ile Arg Gln Pro

165165

Pro Arg Lys Gly LeuPro Arg Lys Gly Leu

170170

Glu Trp Leu Gly ValGlu Trp Leu Gly Val

175175

Trp Gly Ser Glu ThrTrp Gly Ser Glu Thr

180180

Thr Tyr Tyr Asn SerThr Tyr Tyr Asn Ser

185185

Ala Leu Lys Ser ArgAla Leu Lys Ser Arg

190190

Thr Ile Ile Lys Asp 195Thr Ile Ile Lys Asp 195

Asn Ser Lys Ser Gln 200Asn Ser Lys Ser Gln 200

Val Phe Leu Lys MetVal Phe Leu Lys Met

205205

Ser Leu Gln Thr AspSer Leu Gln Thr Asp

210210

Asp Thr Ala Ile TyrAsp Thr Ala Ile Tyr

215215

Tyr Cys Ala Lys HisTyr Cys Ala Lys His

220220

Tyr Tyr Gly Gly Ser 225Tyr Tyr Gly Gly Ser 225

Tyr Ala Met Asp Tyr 230Tyr Ala Met Asp Tyr 230

Trp Gly Gln Gly Thr 235Trp Gly Gln Gly Thr 235

SerSer

Ser 160Ser 160

IleIle

LeuLeu

AsnAsn

TyrTyr

Ser 240Ser 240

Val Thr Val Ser SerVal Thr Val Ser Ser

245 <210> 483 <211> 69 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>245 <210> 483 <211> 69 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> шарнир из CD8 и трансмембранный домен <400> 483<223> CD8 hinge and transmembrane domain <400> 483

Ala Lys Pro 1Ala Lys Pro 1

Thr Ile AlaThr Ile Ala

Ala Ala GlyAla Ala Gly

Ile Tyr Ile 50Ile Tyr Ile 50

Thr Thr Thr 5Thr Thr Thr 5

Ser Gln Pro 20Ser Gln Pro 20

Gly Ala ValGly Ala Val

Trp Ala ProTrp Ala Pro

Pro Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala 10 15Pro Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala 10 15

Leu Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys ArgLeu Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg

30thirty

His Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala CysHis Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys

4545

Leu Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu 55 60Leu Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu 55 60

ProPro

ProPro

AspAsp

LeuLeu

Ser Leu Val Ile Thr 65 <210> 484Ser Leu Val Ile Thr 65 <210> 484

- 665 044346 <211> 42 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>- 665 044346 <211> 42 < 212> PROTEIN < 213> Artificial sequence <220>

< 223> костимулирующий домен, полученный из 4-1BB < 400>484<223>costimulatory domain derived from 4-1BB <400>484

Lys Arg Gly Arg Lys Lys Leu Leu Tyr Ile Phe Lys Gln Pro PheMetLys Arg Gly Arg Lys Lys Leu Leu Tyr Ile Phe Lys Gln Pro PheMet

5 10155 1015

Arg Pro Val Gln Thr Thr Gln Glu Glu Asp Gly Cys Ser Cys ArgPheArg Pro Val Gln Thr Thr Gln Glu Glu Asp Gly Cys Ser Cys ArgPhe

25302530

Pro Glu Glu Glu Glu Gly Gly Cys Glu LeuPro Glu Glu Glu Glu Gly Gly Cys Glu Leu

3540 < 210>485 < 211>40 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность < 220>3540 < 210 > 485 < 211 > 40 < 212 > PROTEIN < 213 > Artificial sequence < 220 >

< 223> костимулирующий домен, полученный из CD28 <400>485<223> CD28-derived co-stimulatory domain <400>485

Ser Lys Arg Ser Arg Leu Leu His Ser Asp Tyr Met Asn Met Thr ProSer Lys Arg Ser Arg Leu Leu His Ser Asp Tyr Met Asn Met Thr Pro

5 10155 1015

Arg Arg ProArg Arg Pro

Gly Pro Thr Arg Lys His Tyr Gln Pro Tyr Ala Pro Pro 20 2530Gly Pro Thr Arg Lys His Tyr Gln Pro Tyr Ala Pro Pro 20 2530

Arg Asp Phe Ala Ala Tyr Arg 35Arg Asp Phe Ala Ala Tyr Arg 35

Ser <210>486 <211>41 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Ser <210>486 <211>41 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> костимулирующий домен, полученный из CD28 <400>486<223> co-stimulatory domain derived from CD28 <400>486

Arg Ser Lys Arg Ser Arg Leu Leu His Ser Asp Tyr Met Asn MetThrArg Ser Lys Arg Ser Arg Leu Leu His Ser Asp Tyr Met Asn MetThr

5 10155 1015

Pro Arg Arg Pro Gly Pro Thr Arg Lys His Tyr Gln Pro Tyr AlaProPro Arg Arg Pro Gly Pro Thr Arg Lys His Tyr Gln Pro Tyr AlaPro

25302530

Pro Arg Asp Phe Ala Ala Tyr Arg SerPro Arg Asp Phe Ala Ala Tyr Arg Ser

35403540

- 666 044346 <210> 487 <211> 44 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>- 666 044346 <210> 487 <211> 44 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> костимулирующий домен, полученный из CD28 <400> 487<223> CD28-derived co-stimulatory domain <400> 487

Phe Trp Val Arg Ser Lys Arg Ser Arg 1 5Phe Trp Val Arg Ser Lys Arg Ser Arg 1 5

Asn Met Thr Pro Arg Arg Pro Gly Pro 20 25Asn Met Thr Pro Arg Arg Pro Gly Pro 20 25

Tyr Ala Pro Pro Arg Asp Phe Ala AlaTyr Ala Pro Pro Arg Asp Phe Ala Ala

4040

Leu Leu His 10Leu Leu His 10

Thr Arg LysThr Arg Lys

Tyr Arg SerTyr Arg Ser

Ser Asp Tyr MetSer Asp Tyr Met

His Tyr Gln Pro 30 <210> 488 <211> 20 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>His Tyr Gln Pro 30 <210> 488 <211> 20 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> белок T2A < 400>488<223>T2A protein <400>488

Ser Gly Glu Gly Arg Gly Ser Leu Leu Thr CysSer Gly Glu Gly Arg Gly Ser Leu Leu Thr Cys

Gly Asp Val Glu GluGly Asp Val Glu Glu

Asn Pro Gly Pro <210>489 <211>232 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Asn Pro Gly Pro <210>489 <211>232 <212> PROTEIN <213> Artificial Sequence <220>

<223> синий флуоресцентный белок <400>489<223> blue fluorescent protein <400>489

Ser Glu Leu Ile Lys Glu Asn Met His Met Lys Leu Tyr Met GluGlySer Glu Leu Ile Lys Glu Asn Met His Met Lys Leu Tyr Met GluGly

5 10155 1015

Thr Val Asp Asn His His Phe Lys Cys Thr Ser Glu Gly Glu GlyLysThr Val Asp Asn His His Phe Lys Cys Thr Ser Glu Gly Glu GlyLys

25302530

Pro Tyr Glu Gly Thr Gln Thr Met Arg Ile Lys Val Val Glu Gly Gly 35 4045Pro Tyr Glu Gly Thr Gln Thr Met Arg Ile Lys Val Val Glu Gly Gly 35 4045

- 667 044346- 667 044346

ProPro

Ser 65Ser 65

GlnGln

AspAsp

Leu Pro Phe Ala Phe Asp 50 55Leu Pro Phe Ala Phe Asp 50 55

Lys Thr Phe Ile Asn His 70Lys Thr Phe Ile Asn His 70

Ser Phe Pro Glu Gly Phe 85Ser Phe Pro Glu Gly Phe 85

Gly Gly Val Leu Thr Ala 100Gly Gly Val Leu Thr Ala 100

Ile Leu Ala Thr Ser Phe Leu Tyr Gly 60Ile Leu Ala Thr Ser Phe Leu Tyr Gly 60

Thr Gln Gly Ile Pro Asp Phe Phe Lys 7580Thr Gln Gly Ile Pro Asp Phe Phe Lys 7580

Thr Trp Glu Arg Val Thr Thr Tyr Glu 9095Thr Trp Glu Arg Val Thr Thr Tyr Glu 9095

Thr Gln Asp Thr Ser Leu Gln Asp Gly 105110Thr Gln Asp Thr Ser Leu Gln Asp Gly 105110

Cys Leu Ile Tyr Asn Val Lys Ile Arg Gly Val Asn Phe Thr Ser AsnCys Leu Ile Tyr Asn Val Lys Ile Arg Gly Val Asn Phe Thr Ser Asn

115 120 125115 120 125

Gly Pro Val Met Gln Lys Lys Thr Leu Gly Trp Glu Ala Phe Thr GluGly Pro Val Met Gln Lys Lys Thr Leu Gly Trp Glu Ala Phe Thr Glu

130 135 140130 135 140

Thr 145Thr 145

LeuLeu

TyrTyr

TyrTyr

TyrTyr

Leu Tyr Pro Ala AspLeu Tyr Pro Ala Asp

150150

Lys Leu Val Gly GlyLys Leu Val Gly Gly

165165

Arg Ser Lys Lys Pro 180Arg Ser Lys Lys Pro 180

Val Asp Tyr Arg LeuVal Asp Tyr Arg Leu

195195

Val Glu Gln His Glu 210Val Glu Gln His Glu 210

Gly Gly Leu Glu GlyGly Gly Leu Glu Gly

155155

Ser His Leu Ile AlaSer His Leu Ile Ala

170170

Ala Lys Asn Leu Lys 185Ala Lys Asn Leu Lys 185

Glu Arg Ile Lys GluGlu Arg Ile Lys Glu

200200

Val Ala Val Ala Arg 215Val Ala Val Ala Arg 215

Arg Asn Asp Met AlaArg Asn Asp Met Ala

160160

Asn Ile Lys Thr ThrAsn Ile Lys Thr Thr

175175

Met Pro Gly Val Tyr 190Met Pro Gly Val Tyr 190

Ala Asn Asn Glu ThrAla Asn Asn Glu Thr

205205

Tyr Cys Asp Leu Pro 220Tyr Cys Asp Leu Pro 220

Ser Lys Leu Gly His Lys Leu AsnSer Lys Leu Gly His Lys Leu Asn

225230 <210>490 <211>472 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>225230 <210>490 <211>472 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> CAR 2-го поколения (без сигнальной последовательности или T2A или BFP) <400> 490<223> 2nd generation CAR (no signal sequence or T2A or BFP) <400> 490

Asp Ile Gln Met Thr Gln Thr Thr Ser Ser Leu Ser Ala Ser Leu GlyAsp Ile Gln Met Thr Gln Thr Thr Ser Ser Leu Ser Ala Ser Leu Gly

5 10 155 10 15

- 668 044346- 668 044346

AspAsp

LeuLeu

TyrTyr

Ser 65Ser 65

GluGlu

ThrThr

SerSer

LeuLeu

Val 145Val 145

TrpTrp

TrpTrp

ThrThr

SerSer

Tyr 225Tyr 225

ValVal

ArgArg

Arg ValArg Val

Asn TrpAsn Trp

His Thr 50His Thr 50

Gly SerGly Ser

Asp IleAsp Ile

Phe GlyPhe Gly

Gly LysGly Lys

115115

Gln Glu 130Gln Glu 130

Thr CysThr Cys

Ile ArgIle Arg

Gly SerGly Ser

Ile IleIle Ile

195195

Leu GlnLeu Gln

210210

Tyr GlyTyr Gly

Thr ValThr Val

Pro ProPro Pro

Thr Ile 20Thr Ile 20

Tyr GlnTyr Gln

Ser ArgSer Arg

Gly ThrGly Thr

Ser CysSer Cys

Gln LysGln Lys

Leu HisLeu His

Asp Tyr 70Asp Tyr 70

Ala ThrAla Thr

Gly Gly 100Gly Gly 100

Pro GlyPro Gly

Ser GlySer Gly

Thr ValThr Val

Gln ProGlin Pro

165165

Glu Thr 180Glu Thr 180

Lys AspLys Asp

Thr AspThr Asp

Gly SerGly Ser

Ser SerSer Ser

245245

Thr ProThr Pro

260260

Tyr PheTyr Phe

Thr LysThr Lys

Ser GlySer Gly

Pro GlyPro Gly

135135

Ser Gly 150Ser Gly 150

Pro ArgPro Arg

Thr TyrThr Tyr

Asn SerAsn Ser

Asp ThrAsp Thr

215215

Tyr Ala 230Tyr Ala 230

Ala SerAla Ser

Ala ProAla Pro

Arg Ala 25Arg Ala 25

Pro Asp 40Pro Asp 40

Ser GlySer Gly

Ser LeuSer Leu

Cys GlnCys Gln

Leu GluLeu Glu

105105

Glu Gly 120Glu Gly 120

Leu ValLeu Val

Val SerVal Ser

Lys GlyLys Gly

Tyr AsnTyr Asn

185185

Lys Ser 200Lys Ser 200

Ala IleAla Ile

Met AspMet Asp

Ala LysAla Lys

Thr IleThr Ile

265265

Ser GlnSer Gln

Gly ThrGly Thr

Val ProVal Pro

Thr IleThr Ile

Gln Gly 90Gln Gly 90

Ile ThrIle Thr

Ser ThrSer Thr

Ala ProAla Pro

Leu ProLeu Pro

155155

Leu Glu 170Leu Glu 170

Ser AlaSer Ala

Gln ValGln Val

Tyr TyrTyr Tyr

Tyr TrpTyr Trp

235235

Pro Thr 250Pro Thr 250

Ala SerAla Ser

Asp IleAsp Ile

Val Lys 45Val Lys 45

Ser Arg 60Ser Arg 60

Ser AsnSer Asn

Asn ThrAsn Thr

Gly SerGly Ser

Lys GlyLys Gly

125125

Ser Gln 140Ser Gln 140

Asp TyrAsp Tyr

Trp LeuTrp Leu

Leu LysLeu Lys

Phe LeuPhe Leu

205205

Cys Ala 220Cys Ala 220

Gly GlnGly Gln

Thr ThrThr Thr

Gln ProGlin Pro

Ser Lys 30Ser Lys 30

Leu LeuLeu Leu

Phe SerPhe Ser

Leu GluLeu Glu

Leu ProLeu Pro

Thr Ser 110Thr Ser 110

Glu ValGlu Val

Ser LeuSer Leu

Gly ValGly Val

Gly ValGly Val

175175

Ser Arg 190Ser Arg 190

Lys MetLys Met

Lys HisLys His

Gly ThrGly Thr

Pro AlaPro Ala

255255

Leu SerLeu Ser

270270

TyrTyr

IleIle

GlyGly

Gln 80Gln 80

TyrTyr

GlyGly

LysLys

SerSer

Ser 160Ser 160

IleIle

LeuLeu

AsnAsn

TyrTyr

Ser 240Ser 240

ProPro

LeuLeu

- 669 044346- 669 044346

Arg Pro GluArg Pro Glu

275275

Ala Cys ArgAla Cys Arg

Pro Ala AlaPro Ala Ala

280280

Gly Gly AlaGly Gly Ala

Val His Thr 285Val His Thr 285

Gly Leu AspGly Leu Asp

290290

Phe Ala CysPhe Ala Cys

Asp Ile Tyr 295Asp Ile Tyr 295

Ile Trp AlaIle Trp Ala

300300

Pro Leu AlaPro Leu Ala

Thr Cys Gly 305Thr Cys Gly 305

Val Leu LeuVal Leu Leu

310310

Leu Ser LeuLeu Ser Leu

Val Ile ThrVal Ile Thr

315315

Met His LysMet His Lys

Gly Arg LysGly Arg Lys

Lys Leu LeuLys Leu Leu

325325

Tyr Ile PheTyr Ile Phe

Lys Gln Pro 330Lys Gln Pro 330

Phe Met ArgPhe Met Arg

335335

Val Gln ThrVal Gln Thr

Thr Gln Glu 340Thr Gln Glu 340

Glu Asp GlyGlu Asp Gly

345345

Cys Ser CysCys Ser Cys

Arg Phe ProArg Phe Pro

350350

Glu Glu GluGlu Glu Glu

355355

Gly Gly CysGly Gly Cys

Glu Leu ArgGlu Leu Arg

360360

Val Lys PheVal Lys Phe

Ser Arg Ser 365Ser Arg Ser 365

Asp Ala ProAsp Ala Pro

370370

Ala Tyr GlnAla Tyr Gln

Gln Gly Gln 375Gln Gly Gln 375

Asn Gln LeuAsn Gln Leu

380380

Tyr Asn GluTyr Asn Glu

Asn Leu Gly 385Asn Leu Gly 385

Arg Arg GluArg Arg Glu

390390

Glu Tyr AspGlu Tyr Asp

Val Leu AspVal Leu Asp

395395

Lys Arg ArgLys Arg Arg

Arg Asp ProArg Asp Pro

Glu Met GlyGlu Met Gly

405405

Gly Lys ProGly Lys Pro

Arg Arg Lys 410Arg Arg Lys 410

Asn Pro GlnAsn Pro Gln

415415

Gly Leu TyrGly Leu Tyr

Asn Glu Leu 420Asn Glu Leu 420

Gln Lys AspGln Lys Asp

425425

Lys Met AlaLys Met Ala

Glu Ala TyrGlu Ala Tyr

430430

Glu Ile GlyGlu Ile Gly

435435

Met Lys GlyMet Lys Gly

Glu Arg ArgGlu Arg Arg

440440

Arg Gly LysArg Gly Lys

Gly His Asp 445Gly His Asp 445

Leu Tyr GlnLeu Tyr Gln

450450

Gly Leu SerGly Leu Ser

Thr Ala Thr 455Thr Ala Thr 455

Lys Asp ThrLys Asp Thr

460460

Tyr Asp AlaTyr Asp Ala

ArgArg

GlyGly

Arg 320Arg 320

ProPro

GluGlu

AlaAla

LeuLeu

Gly 400Gly 400

GluGlu

SerSer

GlyGly

LeuLeu

His Met Gln 465His Met Gln 465

Ala Leu ProAla Leu Pro

470470

Pro Arg <210> 491 <211> 497 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Pro Arg <210> 491 <211> 497 <212> PROTEIN <213> Artificial Sequence <220>

< 223> CAR 2-го поколения с T2A <400> 491<223> 2nd generation CAR with T2A <400> 491

- 670 044346- 670 044346

Asp 1Asp 1

AspAsp

LeuLeu

TyrTyr

Ser 65Ser 65

GluGlu

ThrThr

SerSer

LeuLeu

Val 145Val 145

TrpTrp

TrpTrp

ThrThr

SerSer

Tyr 225Tyr 225

ValVal

Ile GlnIle Gln

Arg ValArg Val

Asn TrpAsn Trp

His Thr 50His Thr 50

Gly SerGly Ser

Asp IleAsp Ile

Phe GlyPhe Gly

Gly LysGly Lys

115115

Gln Glu 130Gln Glu 130

Thr CysThr Cys

Ile ArgIle Arg

Gly SerGly Ser

Ile IleIle Ile

195195

Leu GlnLeu Gln

210210

Tyr GlyTyr Gly

Thr ValThr Val

Met Thr 5Met Thr 5

Thr Ile 20Thr Ile 20

Tyr GlnTyr Gln

Ser ArgSer Arg

Gly ThrGly Thr

Ala ThrAla Thr

Gly Gly 100Gly Gly 100

Pro GlyPro Gly

Ser GlySer Gly

Thr ValThr Val

Gln ProGlin Pro

165165

Glu Thr 180Glu Thr 180

Lys AspLys Asp

Thr AspThr Asp

Gly SerGly Ser

Ser SerSer Ser

245245

Gln ThrGln Thr

Ser CysSer Cys

Gln LysGln Lys

Leu HisLeu His

Asp Tyr 70Asp Tyr 70

Tyr PheTyr Phe

Thr LysThr Lys

Ser GlySer Gly

Pro GlyPro Gly

135135

Ser Gly 150Ser Gly 150

Pro ArgPro Arg

Thr TyrThr Tyr

Asn SerAsn Ser

Asp ThrAsp Thr

215215

Tyr Ala 230Tyr Ala 230

Ala SerAla Ser

Thr SerThr Ser

Arg Ala 25Arg Ala 25

Pro Asp 40Pro Asp 40

Ser GlySer Gly

Ser LeuSer Leu

Cys GlnCys Gln

Leu GluLeu Glu

105105

Glu Gly 120Glu Gly 120

Leu ValLeu Val

Val SerVal Ser

Lys GlyLys Gly

Tyr AsnTyr Asn

185185

Lys Ser 200Lys Ser 200

Ala IleAla Ile

Met AspMet Asp

Ala LysAla Lys

Ser Leu 10Ser Leu 10

Ser GlnSer Gln

Gly ThrGly Thr

Val ProVal Pro

Thr IleThr Ile

Gln Gly 90Gln Gly 90

Ile ThrIle Thr

Ser ThrSer Thr

Ala ProAla Pro

Leu ProLeu Pro

155155

Leu Glu 170Leu Glu 170

Ser AlaSer Ala

Gln ValGln Val

Tyr TyrTyr Tyr

Tyr TrpTyr Trp

235235

Pro Thr 250Pro Thr 250

Ser AlaSer Ala

Asp IleAsp Ile

Val Lys 45Val Lys 45

Ser Arg 60Ser Arg 60

Ser AsnSer Asn

Asn ThrAsn Thr

Gly SerGly Ser

Lys GlyLys Gly

125125

Ser Gln 140Ser Gln 140

Asp TyrAsp Tyr

Trp LeuTrp Leu

Leu LysLeu Lys

Phe LeuPhe Leu

205205

Cys Ala 220Cys Ala 220

Gly GlnGly Gln

Thr ThrThr Thr

Ser LeuSer Leu

Ser Lys 30Ser Lys 30

Leu LeuLeu Leu

Phe SerPhe Ser

Leu GluLeu Glu

Leu ProLeu Pro

Thr Ser 110Thr Ser 110

Glu ValGlu Val

Ser LeuSer Leu

Gly ValGly Val

Gly ValGly Val

175175

Ser Arg 190Ser Arg 190

Lys MetLys Met

Lys HisLys His

Gly ThrGly Thr

Pro AlaPro Ala

255255

GlyGly

TyrTyr

IleIle

GlyGly

Gln 80Gln 80

TyrTyr

GlyGly

LysLys

SerSer

Ser 160Ser 160

IleIle

LeuLeu

AsnAsn

TyrTyr

Ser 240Ser 240

ProPro

- 671 044346- 671 044346

ArgArg

ArgArg

GlyGly

Thr 305Thr 305

GlyGly

ValVal

GluGlu

AspAsp

Asn 385Asn 385

ArgArg

GlyGly

GluGlu

LeuLeu

His 465His 465

GlyGly

ArgArg

Pro ProPro Pro

Pro GluPro Glu

275275

Leu Asp 290Leu Asp 290

Cys GlyCys Gly

Arg LysArg Lys

Gln ThrGln Thr

Glu GluGlu Glu

355355

Ala Pro 370Ala Pro 370

Leu GlyLeu Gly

Asp ProAsp Pro

Leu TyrLeu Tyr

Ile GlyIle Gly

435435

Tyr Gln 450Tyr Gln 450

Met GlnMet Gln

Ser LeuSer Leu

Thr Pro 260Thr Pro 260

Ala CysAla Cys

Phe AlaPhe Ala

Val LeuVal Leu

Ala ProAla Pro

Arg ProArg Pro

Cys AspCys Asp

295295

Leu Leu 310Leu Leu 310

Lys LeuLys Leu

325325

Thr Gln 340Thr Gln 340

Gly GlyGly Gly

Ala TyrAla Tyr

Arg ArgArg Arg

Glu MetGluMet

405405

Asn Glu 420Asn Glu 420

Met LysMet Lys

Gly LeuGly Leu

Ala LeuAla Leu

Leu ThrLeu Thr

485485

Leu TyrLeu Tyr

Glu GluGlu Glu

Cys GluCys Glu

Gln GlnGln Gln

375375

Glu Glu 390Glu Glu 390

Gly GlyGly Gly

Leu GlnLeu Gln

Gly GluGly Glu

Ser ThrSer Thr

455455

Pro Pro 470Pro Pro 470

Cys GlyCys Gly

Thr IleThr Ile

265265

Ala Ala 280Ala Ala 280

Ile TyrIle Tyr

Ser LeuSer Leu

Ile PheIle Phe

Asp GlyAsp Gly

345345

Leu Arg 360Leu Arg 360

Gly GlnGly Gln

Tyr AspTyr Asp

Lys ProLys Pro

Lys AspLys Asp

425425

Arg Arg 440Arg Arg 440

Ala ThrAla Thr

Arg GlyArg Gly

Asp ValAsp Val

Ala SerAla Ser

Gly GlyGly Gly

Ile TrpIle Trp

Val IleVal Ile

315315

Lys Gln 330Lys Gln 330

Cys SerCys Ser

Val LysVal Lys

Asn GlnAsn Gln

Val LeuVal Leu

395395

Arg Arg 410Arg Arg 410

Lys MetLys Met

Arg GlyArg Gly

Lys AspLys Asp

Gly ArgGly Arg

475475

Glu Glu 490Glu Glu 490

Gln ProGlin Pro

Ala ValAla Val

285285

Ala Pro 300Ala Pro 300

Thr MetThr Met

Pro PhePro Phe

Cys ArgCysArg

Phe SerPhe Ser

365365

Leu Tyr 380Leu Tyr 380

Asp LysAsp Lys

Lys AsnLys Asn

Ala GluAla Glu

Lys GlyLys Gly

445445

Thr Tyr 460Thr Tyr 460

Ser GlySer Gly

Asn ProAsn Pro

Leu Ser 270Leu Ser 270

His ThrHis Thr

Leu AlaLeu Ala

His LysHis Lys

Met ArgMet Arg

335335

Phe Pro 350Phe Pro 350

Arg SerArg Ser

Asn GluAsn Glu

Arg ArgArg Arg

Pro GlnPro Gln

415415

Ala Tyr 430Ala Tyr 430

His AspHis Asp

Asp AlaAsp Ala

Glu GlyGlu Gly

Gly ProGly Pro

495495

LeuLeu

ArgArg

GlyGly

Arg 320Arg 320

ProPro

GluGlu

AlaAla

LeuLeu

Gly 400Gly 400

GluGlu

SerSer

GlyGly

LeuLeu

Arg 480Arg 480

SerSer

- 672 044346 <210> 492 <211> 471 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>- 672 044346 <210> 492 <211> 471 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> CAR 2-го поколения с костимулирующим доменом, полученным из CD28 (без сигнальной последовательности или T2A или BFP) < 400> 492<223>2nd generation CAR with CD28-derived co-stimulatory domain (no signal sequence or T2A or BFP) <400>492

Asp Ile Gln Met Thr Gln Thr Thr 1 5Asp Ile Gln Met Thr Gln Thr Thr 1 5

Ser Ser Leu Ser Ala Ser Leu GlySer Ser Leu Ser Ala Ser Leu Gly

1515

Asp Arg Val Thr Ile Ser Cys Arg 20Asp Arg Val Thr Ile Ser Cys Arg 20

Ala Ser Gln Asp Ile Ser Lys Tyr 25 30Ala Ser Gln Asp Ile Ser Lys Tyr 25 30

Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys ProLeu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro

4040

Asp Gly Thr Val Lys Leu Leu Ile 45Asp Gly Thr Val Lys Leu Leu Ile 45

Tyr His Thr Ser Arg Leu His SerTyr His Thr Ser Arg Leu His Ser

5555

Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 60Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Ser Leu Thr Ile Ser Asn Leu Glu Gln 65 70 75 80Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Ser Leu Thr Ile Ser Asn Leu Glu Gln 65 70 75 80

Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Phe Cys 85Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Phe Cys 85

Gln Gln Gly Asn Thr Leu Pro TyrGln Gln Gly Asn Thr Leu Pro Tyr

9595

Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys LeuThr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu

100100

Glu Ile Thr Gly Ser Thr Ser GlyGlu Ile Thr Gly Ser Thr Ser Gly

105 110105 110

Ser Gly Lys Pro Gly Ser Gly GluSer Gly Lys Pro Gly Ser Gly Glu

115 120115 120

Gly Ser Thr Lys Gly Glu Val LysGly Ser Thr Lys Gly Glu Val Lys

125125

Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly LeuLeu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu

130 135130 135

Val Ala Pro Ser Gln Ser Leu SerVal Ala Pro Ser Gln Ser Leu Ser

140140

Val Thr Cys Thr Val Ser Gly ValVal Thr Cys Thr Val Ser Gly Val

145 150145 150

Ser Leu Pro Asp Tyr Gly Val SerSer Leu Pro Asp Tyr Gly Val Ser

155 160155 160

Trp Ile Arg Gln Pro Pro Arg LysTrp Ile Arg Gln Pro Pro Arg Lys

165165

Gly Leu Glu Trp Leu Gly Val IleGly Leu Glu Trp Leu Gly Val Ile

170 175170 175

Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr 180Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr 180

Asn Ser Ala Leu Lys Ser Arg LeuAsn Ser Ala Leu Lys Ser Arg Leu

185 190185 190

- 673 044346- 673 044346

ThrThr

SerSer

Tyr 225Tyr 225

ValVal

ArgArg

ArgArg

GlyGly

Thr 305Thr 305

LysLys

ArgArg

AspAsp

AlaAla

Leu 385Leu 385

AspAsp

LeuLeu

IleIle

Ile Ile LysIle Ile Lys

195195

Leu Gln Thr 210Leu Gln Thr 210

Tyr Gly GlyTyr Gly Gly

Thr Val SerThr Val Ser

Pro Pro ThrPro Pro Thr

260260

Pro Glu AlaPro Glu Ala

275275

Leu Asp Phe 290Leu Asp Phe 290

Cys Gly ValCys Gly Val

Arg Ser ArgArg Ser Arg

Pro Gly ProPro Gly Pro

340340

Phe Ala AlaPhe Ala Ala

355355

Pro Ala Tyr 370Pro Ala Tyr 370

Gly Arg ArgGly Arg Arg

Pro Glu MetPro Glu Met

Tyr Asn GluTyr Asn Glu

420420

Gly Met LysGly Met Lys

435435

Asp Asn SerAsp Asn Ser

Asp Asp ThrAsp Asp Thr

215215

Ser Tyr AlaSer Tyr Ala

230230

Ser Ala Ser 245Ser Ala Ser 245

Pro Ala ProPro Ala Pro

Cys Arg ProCys Arg Pro

Ala Cys AspAla Cys Asp

295295

Leu Leu LeuLeu Leu Leu

310310

Leu Leu His 325Leu Leu His 325

Thr Arg LysThr Arg Lys

Tyr Arg SerTyr Arg Ser

Gln Gln GlyGln Gln Gly

375375

Glu Glu TyrGlu Glu Tyr

390390

Gly Gly Lys 405Gly Gly Lys 405

Leu Gln LysLeu Gln Lys

Gly Glu ArgGly Glu Arg

Lys Ser Gln 200Lys Ser Gln 200

Ala Ile TyrAla Ile Tyr

Met Asp TyrMet Asp Tyr

Ala Lys ProAla Lys Pro

250250

Thr Ile AlaThr Ile Ala

265265

Ala Ala Gly 280Ala Ala Gly 280

Ile Tyr IleIle Tyr Ile

Ser Leu ValSer Leu Val

Ser Asp TyrSer Asp Tyr

330330

His Tyr GlnHis Tyr Gln

345345

Arg Val Lys 360Arg Val Lys 360

Gln Asn GlnGln Asn Gln

Asp Val LeuAsp Val Leu

Pro Arg ArgPro Arg Arg

410410

Asp Lys MetAsp Lys Met

425425

Arg Arg Gly 440Arg Arg Gly 440

Val Phe LeuVal Phe Leu

205205

Tyr Cys AlaTyr Cys Ala

220220

Trp Gly Gln 235Trp Gly Gln 235

Thr Thr ThrThr Thr Thr

Ser Gln ProSer Gln Pro

Gly Ala ValGly Ala Val

285285

Trp Ala ProTrp Ala Pro

300300

Ile Thr Met 315Ile Thr Met 315

Met Asn MetMet Asn Met

Pro Tyr AlaPro Tyr Ala

Phe Ser ArgPhe Ser Arg

365365

Leu Tyr AsnLeu Tyr Asn

380380

Asp Lys Arg 395Asp Lys Arg 395

Lys Asn ProLys Asn Pro

Ala Glu AlaAla Glu Ala

Lys Gly His 445Lys Gly His 445

Lys Met AsnLys Met Asn

Lys His TyrLys His Tyr

Gly Thr SerGly Thr Ser

240240

Pro Ala ProPro Ala Pro

255255

Leu Ser Leu 270Leu Ser Leu 270

His Thr ArgHis Thr Arg

Leu Ala GlyLeu Ala Gly

His Arg SerHis Arg Ser

320320

Thr Pro ArgThr Pro Arg

335335

Pro Pro Arg 350Pro Pro Arg 350

Ser Ala AspSer Ala Asp

Glu Leu AsnGlu Leu Asn

Arg Gly ArgArg Gly Arg

400400

Gln Glu Gly 415Gln Glu Gly 415

Tyr Ser Glu 430Tyr Ser Glu 430

Asp Gly LeuAsp Gly Leu

- 674 044346- 674 044346

Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp ThrTyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr

450 455450 455

Tyr Asp Ala Leu 460Tyr Asp Ala Leu 460

HisHis

Met Gln Ala Leu Pro Pro ArgMet Gln Ala Leu Pro Pro Arg

465 470 <210> 493 <211> 270 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>465 470 <210> 493 <211> 270 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> стек Nkp30 < 400> 493< 223 > Nkp30 stack < 400 > 493

Asp Thr Gln Glu LysAsp Thr Gln Glu Lys

55

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Pro SerVal Leu Ser Pro Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Gly Gly Gly Gly SerGly Gly Gly Gly Ser

125125

Gly Gly Gly Ser Gly 130Gly Gly Gly Ser Gly 130

Gly Gly Gly Ser LeuGly Gly Gly Ser Leu

135135

Trp Val Ser Gln Pro 140Trp Val Ser Gln Pro 140

Glu Ile Arg Thr Leu 145Glu Ile Arg Thr Leu 145

Glu Gly Ser Ser Ala 150Glu Gly Ser Ser Ala 150

Phe Leu Pro Cys Ser 155Phe Leu Pro Cys Ser 155

Asn Ala Ser Gln GlyAsn Ala Ser Gln Gly

165165

Arg Val Ala Ile GlyArg Val Ala Ile Gly

170170

Ser Val Thr Trp PheSer Val Thr Trp Phe

175175

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

GlyGly

ProPro

Phe 160Phe 160

ArgArg

- 675 044346- 675 044346

Asp Glu Val Val ProAsp Glu Val Val Pro

180180

Gly Lys Glu Val Arg Asn Gly Thr Pro Glu PheGly Lys Glu Val Arg Asn Gly Thr Pro Glu Phe

185 190185 190

Arg Gly Arg Leu Val 195Arg Gly Arg Leu Val 195

Pro Leu Ala Pro Ser Arg Phe Leu His Asp HisPro Leu Ala Pro Ser Arg Phe Leu His Asp His

200 205200 205

Gln Ala Glu Leu HisGln Ala Glu Leu His

210210

Ile Arg Asp Val Arg Gly His Asp Ala Gly IleIle Arg Asp Val Arg Gly His Asp Ala Gly Ile

215 220215 220

Tyr Val Cys Arg Val 225Tyr Val Cys Arg Val 225

Glu Val Leu Gly Leu Gly Val Gly Thr Gly AsnGlu Val Leu Gly Leu Gly Val Gly Thr Gly Asn

230 235 240230 235 240

Gly Thr Arg Leu Val Val Glu Lys Glu His ProGly Thr Arg Leu Val Val Glu Lys Glu His Pro

245 250245 250

Gln Leu Gly Gly GlyGln Leu Gly Gly Gly

255255

Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Ala Ala AlaGly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Ala Ala Ala

260 265260 265

Glu Pro LysGlu Pro Lys

270 <210> 494 <211> 302 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>270 <210> 494 <211> 302 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> TIP v1 <400> 494<223> TIP v1 <400> 494

Met Arg Leu Gly 1Met Arg Leu Gly 1

Ser Pro Gly 5Ser Pro Gly 5

Arg Ala Asp Thr 20Arg Ala Asp Thr 20

Val Glu Leu SerVal Glu Leu Ser

Asp Val Tyr Val 50Asp Val Tyr Val 50

Tyr His Ile Pro 65Tyr His Ile Pro 65

Arg Asn Arg AlaArg Asn Arg Ala

Ser Leu Arg LeuSer Leu Arg Leu

100100

Gln Glu LysGln Glu Lys

Cys Ala CysCys Ala Cys

Tyr Trp Gln 55Tyr Trp Gln 55

Gln Asn Ser 70Gln Asn Ser 70

Leu Met Ser 85Leu Met Ser 85

Phe Asn ValPhe Asn Val

Leu Leu Phe Leu Leu Phe Ser Ser LeuLeu Leu Phe Leu Leu Phe Ser Ser Leu

1515

Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser AspGlu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp

30thirty

Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn 40 45Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn 40 45

Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr 60Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr 60

Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr 75 80Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr 75 80

Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp PhePro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe

9595

Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe HisThr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His

105 110105 110

Cys Leu Val LeuCys Leu Val Leu

Ser Gln SerSer Gln Ser

Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser ValLeu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val

- 676 044346- 676 044346

115115

120120

125125

Glu Val Thr Leu HisGlu Val Thr Leu His

130130

Val Ala Ala Asn PheVal Ala Ala Asn Phe

135135

Ser Val Pro Val ValSer Val Pro Val Val

140140

Ala Pro His Ser Pro 145Ala Pro His Ser Pro 145

Ser Gln Asp Glu Leu 150Ser Gln Asp Glu Leu 150

Thr Phe Thr Cys Thr 155Thr Phe Thr Cys Thr 155

Ile Asn Gly Tyr ProIle Asn Gly Tyr Pro

165165

Arg Pro Asn Val TyrArg Pro Asn Val Tyr

170170

Trp Ile Asn Lys ThrTrp Ile Asn Lys Thr

175175

Asn Ser Leu Leu AspAsn Ser Leu Leu Asp

180180

Gln Ala Leu Gln AsnGln Ala Leu Gln Asn

185185

Asp Thr Val Phe LeuAsp Thr Val Phe Leu

190190

Met Arg Gly Leu TyrMet Arg Gly Leu Tyr

195195

Asp Val Val Ser Val 200Asp Val Val Ser Val 200

Leu Arg Ile Ala ArgLeu Arg Ile Ala Arg

205205

Pro Ser Val Asn IlePro Ser Val Asn Ile

210210

Gly Cys Cys Ile Glu 215Gly Cys Cys Ile Glu 215

Asn Val Leu Leu GlnAsn Val Leu Leu Gln

220220

Asn Leu Thr Val Gly 225Asn Leu Thr Val Gly 225

Ser Gln Thr Gly Asn 230Ser Gln Thr Gly Asn 230

Asp Ile Gly Glu Arg 235Asp Ile Gly Glu Arg 235

Lys Ile Thr Glu AsnLys Ile Thr Glu Asn

245245

Pro Val Ser Thr GlyPro Val Ser Thr Gly

250250

Glu Lys Asn Ala AlaGlu Lys Asn Ala Ala

255255

Trp Ser Ile Leu AlaTrp Ser Ile Leu Ala

260260

Val Leu Cys Leu LeuVal Leu Cys Leu Leu

265265

Val Val Val Ala ValVal Val Val Ala Val

270270

Ile Gly Trp Val CysIle Gly Trp Val Cys

275275

Arg Asp Arg Cys LeuArg Asp Arg Cys Leu

280280

Gln His Ser Tyr AlaGln His Ser Tyr Ala

285285

SerSer

Ser 160Ser 160

AspAsp

AsnAsn

ThrThr

GlnGln

Asp 240Asp 240

ThrThr

AlaAla

GlyGly

Ala Trp Ala Val SerAla Trp Ala Val Ser

290290

Pro Glu Thr Glu LeuPro Glu Thr Glu Leu

295295

Thr Gly His Val 300 <210> 495 <211> 284 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Thr Gly His Val 300 <210> 495 <211> 284 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> TIP v1 без сигнального пептида <400>495<223> TIP v1 without signal peptide <400>495

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp ValAsp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val

5 10155 1015

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn AspLeu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp

25302530

GluGlu

ValVal

- 677 044346- 677 044346

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Asn Ser 50Ile Pro Gln Asn Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr Trp 235Asn Ala Ala Thr Trp 235

Ile Leu Ala Val LeuIle Leu Ala Val Leu

245245

Cys Leu Leu Val ValCys Leu Leu Val Val

250250

Val Ala Val Ala IleVal Ala Val Ala Ile

255255

Trp Val Cys Arg AspTrp Val Cys Arg Asp

260260

Arg Cys Leu Gln HisArg Cys Leu Gln His

265265

Ser Tyr Ala Gly AlaSer Tyr Ala Gly Ala

270270

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Ser 240Ser 240

GlyGly

TrpTrp

Ala Val Ser Pro GluAla Val Ser Pro Glu

Thr Glu Leu Thr GlyThr Glu Leu Thr Gly

His ValHis Val

- 678 044346- 678 044346

275275

280 <210> 496 <211> 302 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>280 <210> 496 <211> 302 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> TIP v2 < 400> 496<223>TIP v2 <400>496

Met Arg Leu Gly Ser 1 5Met Arg Leu Gly Ser 1 5

Pro Gly Leu Leu PhePro Gly Leu Leu Phe

Leu Leu Phe Ser SerLeu Leu Phe Ser Ser

Arg Ala Asp Thr Gln 20Arg Ala Asp Thr Gln 20

Glu Lys Glu Val ArgGlu Lys Glu Val Arg

Ala Met Val Gly Ser 30Ala Met Val Gly Ser 30

Val Glu Leu Ser Cys 35Val Glu Leu Ser Cys 35

Ala Cys Pro Glu Gly 40Ala Cys Pro Glu Gly 40

Ser Arg Phe Asp Leu 45Ser Arg Phe Asp Leu 45

Asp Val Tyr Val Tyr 50Asp Val Tyr Val Tyr 50

Trp Gln Thr Ser Glu 55Trp Gln Thr Ser Glu 55

Ser Lys Thr Val Val 60Ser Lys Thr Val Val 60

Tyr His Ile Pro Gln 65Tyr His Ile Pro Gln 65

Asp Ser Ser Leu Glu 70Asp Ser Ser Leu Glu 70

Asn Val Asp Ser Arg 75Asn Val Asp Ser Arg 75

Arg Asn Arg Ala Leu 85Arg Asn Arg Ala Leu 85

Met Ser Pro Ala Gly 90Met Ser Pro Ala Gly 90

Met Leu Arg Gly Asp 95Met Leu Arg Gly Asp 95

Ser Leu Arg Leu PheSer Leu Arg Leu Phe

100100

Asn Val Thr Pro GlnAsn Val Thr Pro Gln

105105

Asp Glu Gln Lys PheAsp Glu Gln Lys Phe

110110

Cys Leu Val Leu Ser 115Cys Leu Val Leu Ser 115

Gln Ser Leu Gly PheGln Ser Leu Gly Phe

120120

Gln Glu Val Leu SerGln Glu Val Leu Ser

125125

Glu Val Thr Leu HisGlu Val Thr Leu His

130130

Val Ala Ala Asn PheVal Ala Ala Asn Phe

135135

Ser Val Pro Val ValSer Val Pro Val Val

140140

Ala Pro His Ser Pro 145Ala Pro His Ser Pro 145

Ser Gln Asp Glu Leu 150Ser Gln Asp Glu Leu 150

Thr Phe Thr Cys Thr 155Thr Phe Thr Cys Thr 155

Ile Asn Gly Tyr ProIle Asn Gly Tyr Pro

165165

Arg Pro Asn Val TyrArg Pro Asn Val Tyr

170170

Trp Ile Asn Lys ThrTrp Ile Asn Lys Thr

175175

Asn Ser Leu Leu AspAsn Ser Leu Leu Asp

180180

Gln Ala Leu Gln AsnGln Ala Leu Gln Asn

185185

Asp Thr Val Phe LeuAsp Thr Val Phe Leu

190190

Met Arg Gly Leu Tyr 195Met Arg Gly Leu Tyr 195

Asp Val Val Ser Val 200Asp Val Val Ser Val 200

Leu Arg Ile Ala ArgLeu Arg Ile Ala Arg

205205

LeuLeu

AspAsp

AsnAsn

ThrThr

Tyr 80Tyr 80

PhePhe

HisHis

ValVal

SerSer

Ser 160Ser 160

AspAsp

AsnAsn

ThrThr

- 679 044346- 679 044346

Pro Ser Val Asn Ile Gly Cys CysPro Ser Val Asn Ile Gly Cys Cys

210 215210 215

Ile Glu Asn Val Leu Leu Gln GlnIle Glu Asn Val Leu Leu Gln Gln

220220

Asn Leu Thr Val Gly Ser Gln ThrAsn Leu Thr Val Gly Ser Gln Thr

225 230225 230

Gly Asn Asp Ile Gly Glu Arg AspGly Asn Asp Ile Gly Glu Arg Asp

235 240235 240

Lys Ile Thr Glu Asn Pro Val SerLys Ile Thr Glu Asn Pro Val Ser

245245

Thr Gly Glu Lys Asn Ala Ala ThrThr Gly Glu Lys Asn Ala Ala Thr

250 255250 255

Trp Ser Ile Leu Ala Val Leu CysTrp Ser Ile Leu Ala Val Leu Cys

260260

Leu Leu Val Val Val Ala Val AlaLeu Leu Val Val Val Ala Val Ala

265 270265 270

Ile Gly Trp Val Cys Arg Asp ArgIle Gly Trp Val Cys Arg Asp Arg

275 280275 280

Cys Leu Gln His Ser Tyr Ala GlyCys Leu Gln His Ser Tyr Ala Gly

285285

Ala Trp Ala Val Ser Pro Glu ThrAla Trp Ala Val Ser Pro Glu Thr

290295290295

Glu Leu Thr Gly His ValGlu Leu Thr Gly His Val

300 <210>497 <211>284 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>300 <210>497 <211>284 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> TIP v2 без сигнального пептида <400> 497<223> TIP v2 without signal peptide <400> 497

Asp Thr Gln Glu LysAsp Thr Gln Glu Lys

Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val GluGlu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val Glu

1515

LeuLeu

SerSer

CysCys

Ala 20Ala 20

CysCys

ProPro

GluGlu

GlyGly

Ser 25Ser 25

ArgArg

PhePhe

AspAsp

LeuLeu

Asn 30Asn 30

AspAsp

ValVal

TyrTyr

ValVal

Tyr 35Tyr 35

TrpTrp

GlnGln

ThrThr

SerSer

Glu 40Glu 40

SerSer

LysLys

ThrThr

ValVal

Val 45Val 45

ThrThr

TyrTyr

HisHis

IleIle

Pro 50Pro 50

GlnGln

AspAsp

SerSer

SerSer

Leu 55Leu 55

GluGlu

AsnAsn

ValVal

AspAsp

Ser 60Ser 60

ArgArg

TyrTyr

ArgArg

AsnAsn

Arg Ala Leu Met 65Arg Ala Leu Met 65

Ser Pro Ala Gly 70Ser Pro Ala Gly 70

Met Leu Arg GlyMet Leu Arg Gly

Asp Phe Ser Leu 80Asp Phe Ser Leu 80

Arg Leu Phe AsnArg Leu Phe Asn

Val Thr Pro Gln 85Val Thr Pro Gln 85

Asp Glu Gln Lys 90Asp Glu Gln Lys 90

Phe His Cys Leu 95Phe His Cys Leu 95

Val Leu Ser GlnVal Leu Ser Gln

100100

Ser Leu Gly PheSer Leu Gly Phe

Gln Glu Val Leu 105Gln Glu Val Leu 105

Ser Val Glu ValSer Val Glu Val

110110

- 680 044346- 680 044346

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr Trp 235Asn Ala Ala Thr Trp 235

Ile Leu Ala Val LeuIle Leu Ala Val Leu

245245

Cys Leu Leu Val ValCys Leu Leu Val Val

250250

Val Ala Val Ala IleVal Ala Val Ala Ile

255255

Trp Val Cys Arg AspTrp Val Cys Arg Asp

260260

Arg Cys Leu Gln HisArg Cys Leu Gln His

265265

Ser Tyr Ala Gly AlaSer Tyr Ala Gly Ala

270270

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Ser 240Ser 240

GlyGly

TrpTrp

Ala Val Ser Pro GluAla Val Ser Pro Glu

275275

Thr Glu Leu Thr Gly 280Thr Glu Leu Thr Gly 280

His Val <210> 498 <211> 302 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>His Val <210> 498 <211> 302 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> TIP v3 <400> 498<223> TIP v3 <400> 498

Met Arg Leu Gly Ser Pro Gly Leu Leu Phe Leu Leu Phe Ser Ser 1 5 10 15Met Arg Leu Gly Ser Pro Gly Leu Leu Phe Leu Leu Phe Ser Ser 1 5 10 15

Arg Ala AspArg Ala Asp

Thr Gln Glu Lys Glu ValThr Gln Glu Lys Glu Val

2525

Arg Ala Met Val Gly Ser 30Arg Ala Met Val Gly Ser 30

LeuLeu

AspAsp

- 681 044346- 681 044346

ValVal

AspAsp

Tyr 65Tyr 65

ArgArg

SerSer

CysCys

GluGlu

Ala 145Ala 145

IleIle

AsnAsn

MetMet

ProPro

Asn 225Asn 225

LysLys

TrpTrp

IleIle

Glu Leu Ser Cys Ala 35Glu Leu Ser Cys Ala 35

Cys Pro Glu Gly Ser 40Cys Pro Glu Gly Ser 40

Arg Phe Asp Leu Asn 45Arg Phe Asp Leu Asn 45

Val Tyr Val Tyr Trp 50Val Tyr Val Tyr Trp 50

His Ile Pro Gln HisHis Ile Pro Gln His

Asn Arg Ala Leu Met 85Asn Arg Ala Leu Met 85

Leu Arg Leu Phe AsnLeu Arg Leu Phe Asn

100100

Leu Val Leu Ser ProLeu Val Leu Ser Pro

115115

Val Thr Leu His Val 130Val Thr Leu His Val 130

Pro His Ser Pro SerPro His Ser Pro Ser

150150

Asn Gly Tyr Pro ArgAsn Gly Tyr Pro Arg

165165

Ser Leu Leu Asp Gln 180Ser Leu Leu Asp Gln 180

Arg Gly Leu Tyr Asp 195Arg Gly Leu Tyr Asp 195

Ser Val Asn Ile Gly 210Ser Val Asn Ile Gly 210

Leu Thr Val Gly SerLeu Thr Val Gly Ser

230230

Ile Thr Glu Asn ProIle Thr Glu Asn Pro

245245

Ser Ile Leu Ala ValSer Ile Leu Ala Val

260260

Gly Trp Val Cys ArgGly Trp Val Cys Arg

275275

Gln Thr Ser Glu Ser 55Gln Thr Ser Glu Ser 55

Lys Thr Val Val Thr 60Lys Thr Val Val Thr 60

Ser Ser Leu Glu TyrSer Ser Leu Glu Tyr

Ser Pro Ala Gly Met 90Ser Pro Ala Gly Met 90

Val Thr Pro Gln AspVal Thr Pro Gln Asp

105105

Ser Leu Gly Phe Gln 120Ser Leu Gly Phe Gln 120

Ala Ala Asn Phe Ser 135Ala Ala Asn Phe Ser 135

Gln Asp Glu Leu ThrGln Asp Glu Leu Thr

155155

Pro Asn Val Tyr TrpPro Asn Val Tyr Trp

170170

Ala Leu Gln Asn Asp 185Ala Leu Gln Asn Asp 185

Val Val Ser Val LeuVal Val Ser Val Leu

200200

Cys Cys Ile Glu Asn 215Cys Cys Ile Glu Asn 215

Gln Thr Gly Asn AspGln Thr Gly Asn Asp

235235

Val Ser Thr Gly GluVal Ser Thr Gly Glu

250250

Leu Cys Leu Leu ValLeu Cys Leu Leu Val

265265

Asp Arg Cys Leu Gln 280Asp Arg Cys Leu Gln 280

Val Asp Ser Arg Tyr 80Val Asp Ser Arg Tyr 80

Leu Arg Gly Asp Phe 95Leu Arg Gly Asp Phe 95

Glu Gln Lys Phe His 110Glu Gln Lys Phe His 110

Glu Val Leu Ser ValGlu Val Leu Ser Val

125125

Val Pro Val Val Ser 140Val Pro Val Val Ser 140

Phe Thr Cys Thr SerPhe Thr Cys Thr Ser

160160

Ile Asn Lys Thr AspIle Asn Lys Thr Asp

175175

Thr Val Phe Leu AsnThr Val Phe Leu Asn

190190

Arg Ile Ala Arg ThrArg Ile Ala Arg Thr

205205

Val Leu Leu Gln Gln 220Val Leu Leu Gln Gln 220

Ile Gly Glu Arg AspIle Gly Glu Arg Asp

240240

Lys Asn Ala Ala ThrLys Asn Ala Ala Thr

255255

Val Val Ala Val AlaVal Val Ala Val Ala

270270

His Ser Tyr Ala GlyHis Ser Tyr Ala Gly

285285

- 682 044346- 682 044346

Ala Trp Ala Val Ser Pro Glu Thr Glu Leu Thr Gly His ValAla Trp Ala Val Ser Pro Glu Thr Glu Leu Thr Gly His Val

290 295 300 <210> 499 <211> 284 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>290 295 300 <210> 499 <211> 284 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> TIP v3 без сигнального пептида <400> 499<223> TIP v3 without signal peptide <400> 499

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala CysLeu Ser Cys Ala Cys

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn AspPhe Asp Leu Asn Asp

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Pro SerVal Leu Ser Pro Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

- 683 044346- 683 044346

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr Trp 235Asn Ala Ala Thr Trp 235

Ile Leu Ala Val LeuIle Leu Ala Val Leu

245245

Cys Leu Leu Val ValCys Leu Leu Val Val

250250

Val Ala Val Ala IleVal Ala Val Ala Ile

255255

Trp Val Cys Arg AspTrp Val Cys Arg Asp

260260

Arg Cys Leu Gln HisArg Cys Leu Gln His

265265

Ser Tyr Ala Gly AlaSer Tyr Ala Gly Ala

270270

LeuLeu

IleIle

Ser 240Ser 240

GlyGly

TrpTrp

Ala Val Ser Pro GluAla Val Ser Pro Glu

275275

Thr Glu Leu Thr Gly 280Thr Glu Leu Thr Gly 280

His Val <210> 500 <211> 302 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>His Val <210> 500 <211> 302 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> TIP v4 <400> 500<223> TIP v4 <400> 500

Met Arg Leu Gly 1Met Arg Leu Gly 1

Ser Pro Gly Leu Leu Phe Leu Leu Phe Ser SerSer Pro Gly Leu Leu Phe Leu Leu Phe Ser Ser

10 1510 15

Arg Ala Asp Thr 20Arg Ala Asp Thr 20

Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser 25 30Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser 25 30

Val Val Leu SerVal Val Leu Ser

Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp LeuCys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu

4545

Asp Val Tyr Val 50Asp Val Tyr Val 50

Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val ValTyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val

6060

Tyr His Ile Pro 65Tyr His Ile Pro 65

Gln His Ser Ser Leu Glu Tyr Val Asp Ser ArgGln His Ser Ser Leu Glu Tyr Val Asp Ser Arg

7575

Arg Asn Arg AlaArg Asn Arg Ala

Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp 85 90 95Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp 85 90 95

Ser Leu Arg LeuSer Leu Arg Leu

100100

Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys PhePhe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe

105 110105 110

LeuLeu

AspAsp

AsnAsn

ThrThr

Tyr 80Tyr 80

PhePhe

HisHis

AspAsp

Cys Leu Val LeuCys Leu Val Leu

Ser Arg Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu SerSer Arg Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser

- 684 044346- 684 044346

115115

120120

125125

Glu Val Thr Leu Arg 130Glu Val Thr Leu Arg 130

Val Ala Ala Asn PheVal Ala Ala Asn Phe

135135

Ser Val Pro Val ValSer Val Pro Val Val

140140

Ala Pro His Ser Pro 145Ala Pro His Ser Pro 145

Ser Gln Asp Glu Leu 150Ser Gln Asp Glu Leu 150

Thr Phe Thr Cys Thr 155Thr Phe Thr Cys Thr 155

Ile Asn Gly Tyr ProIle Asn Gly Tyr Pro

165165

Arg Pro Asn Val CysArg Pro Asn Val Cys

170170

Trp Ile Asn Met ThrTrp Ile Asn Met Thr

175175

Asn Ser Leu Leu AspAsn Ser Leu Leu Asp

180180

Gln Ala Leu Gln AsnGln Ala Leu Gln Asn

185185

Asp Thr Val Phe LeuAsp Thr Val Phe Leu

190190

Met Arg Gly Leu Tyr 195Met Arg Gly Leu Tyr 195

Asp Val Val Ser Val 200Asp Val Val Ser Val 200

Leu Arg Ile Ala ArgLeu Arg Ile Ala Arg

205205

Pro Ser Val Asn IlePro Ser Val Asn Ile

210210

Gly Cys Arg Ile GluGly Cys Arg Ile Glu

215215

Asn Val Leu Leu GlnAsn Val Leu Leu Gln

220220

Asn Leu Thr Val Gly 225Asn Leu Thr Val Gly 225

Ser Gln Thr Gly Asn 230Ser Gln Thr Gly Asn 230

Asp Ile Gly Glu Arg 235Asp Ile Gly Glu Arg 235

Lys Ile Thr Glu AsnLys Ile Thr Glu Asn

245245

Pro Val Ser Thr GlyPro Val Ser Thr Gly

250250

Glu Lys Asn Ala AlaGlu Lys Asn Ala Ala

255255

Trp Ser Ile Leu AlaTrp Ser Ile Leu Ala

260260

Val Leu Cys Leu LeuVal Leu Cys Leu Leu

265265

Val Val Val Ala ValVal Val Val Ala Val

270270

Ile Gly Trp Val CysIle Gly Trp Val Cys

275275

Arg Asp Arg Cys Leu 280Arg Asp Arg Cys Leu 280

Gln His Ser Tyr AlaGln His Ser Tyr Ala

285285

SerSer

Ser 160Ser 160

AspAsp

AsnAsn

ThrThr

GlnGln

Asp 240Asp 240

ThrThr

AlaAla

GlyGly

Ala Trp Ala Val SerAla Trp Ala Val Ser

290290

Pro Glu Thr Glu LeuPro Glu Thr Glu Leu

295295

Thr Gly His Val 300 <210> 501 <211> 284 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Thr Gly His Val 300 <210> 501 <211> 284 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> TIP v4 без сигнального пептида<223> TIP v4 without signal peptide

<400> <400> 501 501 Asp 1 Asp 1 Thr Thr Gln Gln Glu Glu Lys 5 Lys 5 Glu Glu Val Val Arg Arg Ala Ala Met 10 Met 10 Val Val Gly Gly Ser Ser Asp Asp Val 15 Val 15 Leu Leu Ser Ser Cys Cys Ala 20 Ala 20 Cys Cys Pro Pro Glu Glu Gly Gly Ser 25 Ser 25 Arg Arg Phe Phe Asp Asp Leu Leu Asn 30 Asn 30 Asp Asp

ValVal

ValVal

- 685 044346- 685 044346

Tyr Tyr Val Val Tyr 35 Tyr 35 Trp Trp Gln Gln Thr Thr Ser Ser Glu 40 Glu 40 Ser Ser Lys Lys Thr Thr Val Val Val 45 Val 45 Thr Thr Tyr Tyr His His Ile Ile Pro 50 Pro 50 Gln Gln His His Ser Ser Ser Ser Leu 55 Leu 55 Glu Glu Tyr Tyr Val Val Asp Asp Ser 60 Ser 60 Arg Arg Tyr Tyr Arg Arg Asn Asn Arg 65 Arg 65 Ala Ala Leu Leu Met Met Ser Ser Pro 70 Pro 70 Ala Ala Gly Gly Met Met Leu Leu Arg 75 Arg 75 Gly Gly Asp Asp Phe Phe Ser Ser Leu 80 Leu 80 Arg Arg Leu Leu Phe Phe Asn Asn Val 85 Val 85 Thr Thr Pro Pro Gln Gln Asp Asp Glu 90 Glu 90 Gln Gln Lys Lys Phe Phe His His Cys 95 Cys 95 Leu Leu Val Val Leu Leu Ser Ser Arg 100 Arg 100 Ser Ser Leu Leu Gly Gly Phe Phe Gln 105 Gln 105 Glu Glu Val Val Leu Leu Ser Ser Asp 110 Asp 110 Glu Glu Val Val Thr Thr Leu Leu Arg 115 Arg 115 Val Val Ala Ala Ala Ala Asn Asn Phe 120 Phe 120 Ser Ser Val Val Pro Pro Val Val Val 125 Val 125 Ser Ser Ala Ala Pro Pro His His Ser 130 Ser 130 Pro Pro Ser Ser Gln Gln Asp Asp Glu 135 Glu 135 Leu Leu Thr Thr Phe Phe Thr Thr Cys 140 Cys 140 Thr Thr Ser Ser Ile Ile Asn Asn Gly 145 Gly 145 Tyr Tyr Pro Pro Arg Arg Pro Pro Asn 150 Asn 150 Val Val Cys Cys Trp Trp Ile Ile Asn 155 Asn 155 Met Met Thr Thr Asp Asp Asn Asn Ser 160 Ser 160 Leu Leu Leu Leu Asp Asp Gln Gln Ala 165 Ala 165 Leu Leu Gln Gln Asn Asn Asp Asp Thr 170 Thr 170 Val Val Phe Phe Leu Leu Asn Asn Met 175 Met 175 Arg Arg Gly Gly Leu Leu Tyr Tyr Asp 180 Asp 180 Val Val Val Val Ser Ser Val Val Leu 185 Leu 185 Arg Arg Ile Ile Ala Ala Arg Arg Thr 190 Thr 190 Pro Pro Ser Ser Val Val Asn Asn Ile 195 Ile 195 Gly Gly Cys Cys Arg Arg Ile Ile Glu 200 Glu 200 Asn Asn Val Val Leu Leu Leu Leu Gln 205 Gln 205 Gln Gln Asn Asn Leu Leu Thr Thr Val 210 Val 210 Gly Gly Ser Ser Gln Gln Thr Thr Gly 215 Gly 215 Asn Asn Asp Asp Ile Ile Gly Gly Glu 220 Glu 220 Arg Arg Asp Asp Lys Lys Ile Ile Thr 225 Thr 225 Glu Glu Asn Asn Pro Pro Val Val Ser 230 Ser 230 Thr Thr Gly Gly Glu Glu Lys Lys Asn 235 Asn 235 Ala Ala Ala Ala Thr Thr Trp Trp Ser 240 Ser 240 Ile Ile Leu Leu Ala Ala Val Val Leu 245 Leu 245 Cys Cys Leu Leu Leu Leu Val Val Val 250 Val 250 Val Val Ala Ala Val Val Ala Ala Ile 255 Ile 255 Gly Gly Trp Trp Val Val Cys Cys Arg 260 Arg 260 Asp Asp Arg Arg Cys Cys Leu Leu Gln 265 Gln 265 His His Ser Ser Tyr Tyr Ala Ala Gly 270 Gly 270 Ala Ala Trp Trp

Ala Val Ser Pro Glu Thr Glu Leu Thr Gly His ValAla Val Ser Pro Glu Thr Glu Leu Thr Gly His Val

- 686 044346- 686 044346

275275

280 <210> 502 <211> 302 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>280 <210> 502 <211> 302 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> TIP v5 <400> 502<223>TIP v5 <400>502

Met Arg Leu Gly Ser 1 5Met Arg Leu Gly Ser 1 5

Pro Gly Leu Leu PhePro Gly Leu Leu Phe

Leu Leu Phe Ser SerLeu Leu Phe Ser Ser

Arg Ala Asp Thr Gln 20Arg Ala Asp Thr Gln 20

Glu Lys Glu Val ArgGlu Lys Glu Val Arg

Ala Met Val Gly Ser 30Ala Met Val Gly Ser 30

Val Glu Leu Ser Cys 35Val Glu Leu Ser Cys 35

Ala Cys Pro Glu Gly 40Ala Cys Pro Glu Gly 40

Ser Arg Phe Asp Leu 45Ser Arg Phe Asp Leu 45

Asp Val Tyr Val Tyr 50Asp Val Tyr Val Tyr 50

Trp Gln Thr Ser Glu 55Trp Gln Thr Ser Glu 55

Ser Lys Thr Val Val 60Ser Lys Thr Val Val 60

Tyr His Ile Pro Gln 65Tyr His Ile Pro Gln 65

His Ser Ser Leu Glu 70His Ser Ser Leu Glu 70

Tyr Val Asp Ser Arg 75Tyr Val Asp Ser Arg 75

Arg Asn Arg Ala Leu 85Arg Asn Arg Ala Leu 85

Met Ser Pro Ala Gly 90Met Ser Pro Ala Gly 90

Met Leu Arg Gly Asp 95Met Leu Arg Gly Asp 95

Ser Leu Arg Leu PheSer Leu Arg Leu Phe

100100

Asn Val Thr Pro GlnAsn Val Thr Pro Gln

105105

Asp Glu Gln Lys PheAsp Glu Gln Lys Phe

110110

Cys Leu Val Leu Ser 115Cys Leu Val Leu Ser 115

Arg Ser Leu Gly Phe 120Arg Ser Leu Gly Phe 120

Gln Glu Val Leu SerGln Glu Val Leu Ser

125125

Glu Val Thr Leu HisGlu Val Thr Leu His

130130

Val Ala Ala Asn PheVal Ala Ala Asn Phe

135135

Ser Val Pro Val ValSer Val Pro Val Val

140140

Ala Pro His Ser Pro 145Ala Pro His Ser Pro 145

Ser Gln Asp Glu Leu 150Ser Gln Asp Glu Leu 150

Thr Phe Thr Cys Thr 155Thr Phe Thr Cys Thr 155

Ile Asn Gly Tyr ProIle Asn Gly Tyr Pro

165165

Arg Pro Asn Val TyrArg Pro Asn Val Tyr

170170

Trp Ile Asn Lys ThrTrp Ile Asn Lys Thr

175175

Asn Ser Leu Leu AspAsn Ser Leu Leu Asp

180180

Gln Ala Leu Gln AsnGln Ala Leu Gln Asn

185185

Asp Thr Val Phe LeuAsp Thr Val Phe Leu

190190

Met Arg Gly Leu Tyr 195Met Arg Gly Leu Tyr 195

Asp Val Val Ser Val 200Asp Val Val Ser Val 200

Leu Arg Ile Ala ArgLeu Arg Ile Ala Arg

205205

LeuLeu

AspAsp

AsnAsn

ThrThr

Tyr 80Tyr 80

PhePhe

HisHis

ValVal

SerSer

Ser 160Ser 160

AspAsp

AsnAsn

ThrThr

- 687 044346- 687 044346

Pro Ser Val Asn IlePro Ser Val Asn Ile

210210

Gly Cys Cys Ile Glu 215Gly Cys Cys Ile Glu 215

Asn Val Leu Leu GlnAsn Val Leu Leu Gln

220220

Asn Leu Thr Val Gly 225Asn Leu Thr Val Gly 225

Ser Gln Thr Gly Asn 230Ser Gln Thr Gly Asn 230

Asp Ile Gly Glu Arg 235Asp Ile Gly Glu Arg 235

Lys Ile Thr Glu AsnLys Ile Thr Glu Asn

245245

Pro Val Ser Thr GlyPro Val Ser Thr Gly

250250

Glu Lys Asn Ala AlaGlu Lys Asn Ala Ala

255255

Trp Ser Ile Leu AlaTrp Ser Ile Leu Ala

260260

Val Leu Cys Leu LeuVal Leu Cys Leu Leu

265265

Val Val Val Ala ValVal Val Val Ala Val

270270

Ile Gly Trp Val CysIle Gly Trp Val Cys

275275

Arg Asp Arg Cys Leu 280Arg Asp Arg Cys Leu 280

Gln His Ser Tyr AlaGln His Ser Tyr Ala

285285

GlnGln

Asp 240Asp 240

ThrThr

AlaAla

GlyGly

Ala Trp Ala Val SerAla Trp Ala Val Ser

290290

Pro Glu Thr Glu LeuPro Glu Thr Glu Leu

295295

Thr Gly His Val 300 <210> 503 <211> 284 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Thr Gly His Val 300 <210> 503 <211> 284 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> TIP v5 без сигнального пептида <400> 503<223> TIP v5 without signal peptide <400> 503

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Arg SerVal Leu Ser Arg Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

- 688 044346- 688 044346

Thr Leu HisThr Leu His

115115

Val Ala AlaVal Ala Ala

Asn Phe SerAsn Phe Ser

120120

Val Pro ValVal Pro Val

Val Ser Ala 125Val Ser Ala 125

His Ser ProHis Ser Pro

130130

Ser Gln AspSer Gln Asp

Glu Leu Thr 135Glu Leu Thr 135

Phe Thr CysPhe Thr Cys

140140

Thr Ser IleThr Ser Ile

Gly Tyr Pro 145Gly Tyr Pro 145

Arg Pro AsnArg Pro Asn

150150

Val Tyr TrpVal Tyr Trp

Ile Asn LysIle Asn Lys

155155

Thr Asp AsnThr Asp Asn

Leu Leu AspLeu Leu Asp

Gln Ala LeuGln Ala Leu

165165

Gln Asn AspGln Asn Asp

Thr Val Phe 170Thr Val Phe 170

Leu Asn MetLeu Asn Met

175175

Gly Leu TyrGly Leu Tyr

Asp Val Val 180Asp Val Val 180

Ser Val LeuSer Val Leu

185185

Arg Ile AlaArg Ile Ala

Arg Thr ProArg Thr Pro

190190

Val Asn IleVal Asn Ile

195195

Gly Cys CysGly Cys Cys

Ile Glu AsnIle Glu Asn

200200

Val Leu LeuVal Leu Leu

Gln Gln Asn 205Gln Gln Asn 205

Thr Val GlyThr Val Gly

210210

Ser Gln ThrSer Gln Thr

Gly Asn Asp 215Gly Asn Asp 215

Ile Gly GluIle Gly Glu

220220

Arg Asp LysArg Asp Lys

Thr Glu Asn 225Thr Glu Asn 225

Pro Val SerPro Val Ser

230230

Thr Gly GluThr Gly Glu

Lys Asn AlaLys Asn Ala

235235

Ala Thr TrpAla Thr Trp

Ile Leu AlaIle Leu Ala

Val Leu CysVal Leu Cys

245245

Leu Leu ValLeu Leu Val

Val Val Ala 250Val Val Ala 250

Val Ala IleVal Ala Ile

255255

Trp Val CysTrp Val Cys

Arg Asp Arg 260Arg Asp Arg 260

Cys Leu GlnCys Leu Gln

265265

His Ser TyrHis Ser Tyr

Ala Gly AlaAla Gly Ala

270270

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Ser 240Ser 240

GlyGly

TrpTrp

Ala Val SerAla Val Ser

275275

Pro Glu ThrPro Glu Thr

Glu Leu ThrGlu Leu Thr

280280

Gly His Val <210> 504 <211> 116 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Gly His Val <210> 504 <211> 116 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> NKp30 v1 IgV-подобный < 400>504<223>NKp30 v1 IgV-like <400>504

Leu Trp Val Ser Gln Pro Pro Glu Ile Arg Thr Leu Glu Gly Ser 1 5 1015Leu Trp Val Ser Gln Pro Pro Glu Ile Arg Thr Leu Glu Gly Ser 1 5 1015

Ala Phe Leu Pro Cys Ser Phe Asn Ala 2025Ala Phe Leu Pro Cys Ser Phe Asn Ala 2025

Ser Gln Gly Arg Val Ala 30Ser Gln Gly Arg Val Ala 30

SerSer

IleIle

- 689 044346- 689 044346

Gly Ser Val Thr Trp 35Gly Ser Val Thr Trp 35

Phe Arg Asp Glu Val Val Pro Gly Lys Glu 40 45Phe Arg Asp Glu Val Val Pro Gly Lys Glu 40 45

Arg Asn Gly Thr Pro 50Arg Asn Gly Thr Pro 50

Glu Phe Arg Gly Arg Leu Val Pro Leu AlaGlu Phe Arg Gly Arg Leu Val Pro Leu Ala

6060

Ser Arg Phe Leu His 65Ser Arg Phe Leu His 65

Asp His Gln Ala Glu Leu His Ile Arg Asp 70 75Asp His Gln Ala Glu Leu His Ile Arg Asp 70 75

Arg Gly His Asp Ala 85Arg Gly His Asp Ala 85

Gly Ile Tyr Val Cys Arg Val Glu Val Leu 90 95Gly Ile Tyr Val Cys Arg Val Glu Val Leu 90 95

Leu Gly Val Gly ThrLeu Gly Val Gly Thr

100100

Gly Asn Gly Thr Arg Leu Val Val Glu LysGly Asn Gly Thr Arg Leu Val Val Glu Lys

105 110105 110

ValVal

ProPro

Val 80Val 80

GlyGly

GluGlu

His Pro Gln LeuHis Pro Gln Leu

115 <210> 505 <211> 229 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>115 <210> 505 <211> 229 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> IgG4 Fc <400> 505<223> IgG4 Fc <400> 505

Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro 1 5Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro 1 5

Cys Pro Ser Cys Pro Ala Pro GluCys Pro Ser Cys Pro Ala Pro Glu

1515

Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe 20Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe 20

Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys AspLeu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp

30thirty

Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro 35Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro 35

Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp 40 45Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp 40 45

Ser Gln Glu Asp Pro 50Ser Gln Glu Asp Pro 50

Glu ValGlu Val

Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly 60Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly 60

Glu Val His Asn Ala 65Glu Val His Asn Ala 65

Lys Thr 70Lys Thr 70

Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn 75Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn 75

Thr Tyr Arg Val Val 85Thr Tyr Arg Val Val 85

Ser ValSer Val

Leu Thr Val Leu His Gln Asp TrpLeu Thr Val Leu His Gln Asp Trp

9595

Asn Gly Lys Glu TyrAsn Gly Lys Glu Tyr

100100

Lys CysLys Cys

Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu ProLys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro

105 110105 110

PhePhe

ThrThr

ValVal

ValVal

Ser 80Ser 80

LeuLeu

SerSer

ProPro

Ser Ile Glu Lys ThrSer Ile Glu Lys Thr

Ile SerIle Ser

Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg GluLys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu

- 690 044346- 690 044346

115115

120120

125125

Gln ValGln Val

130130

Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys AsnTyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn

135 140135 140

Val Ser Leu 145Val Ser Leu 145

Val Glu TrpVal Glu Trp

Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr ProThr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro

150 155150 155

Ser Asp IleSer Asp Ile

Pro Pro ValPro Pro Val

Thr Val AspThr Val Asp

195195

Val Met HisVal Met His

210210

Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn AsnGlu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn

165 170165 170

Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu 180 185Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu 180 185

Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn ValLys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val

200200

Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr GlnGlu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln

215 220215 220

Leu Ser Leu Gly LysLeu Ser Leu Gly Lys

225 <210> 506 <211> 229 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>225 <210> 506 <211> 229 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> IgG4 <400> 506<223> IgG4 <400> 506

Glu Ser Lys 1Glu Ser Lys 1

Leu Gly GlyLeu Gly Gly

Leu Met IleLeu Met Ile

Fc S228PFC S228P

Tyr Gly Pro 5Tyr Gly Pro 5

Pro Ser Val 20Pro Ser Val 20

Ser Arg ThrSer Arg Thr

Pro Cys ProPro Cys Pro

Phe Leu PhePhe Leu Phe

Pro Glu ValPro Glu Val

Pro Cys Pro 10Pro Cys Pro 10

Pro Pro LysPro Pro Lys

Thr Cys ValThr Cys Val

Tyr Lys ThrTyr Lys Thr

175175

Tyr Ser ArgTyr Ser Arg

190190

Phe Ser Cys 205Phe Ser Cys 205

Lys Ser LeuLys Ser Leu

Ala Pro GluAla Pro Glu

Pro Lys Asp 30Pro Lys Asp 30

Val Val Asp 45Val Val Asp 45

Ser Gln Glu Asp Pro 50Ser Gln Glu Asp Pro 50

Glu ValGlu Val

Glu Val His Asn Ala 65Glu Val His Asn Ala 65

Lys Thr 70Lys Thr 70

Thr Tyr Arg Val ValThr Tyr Arg Val Val

Ser ValSer Val

Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly 60Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly 60

Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn 75Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn 75

Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp 90 95Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp 90 95

GlnGln

Ala 160Ala 160

ThrThr

LeuLeu

SerSer

SerSer

PhePhe

ThrThr

ValVal

ValVal

Ser 80Ser 80

LeuLeu

- 691 044346- 691 044346

Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys 100Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys 100

Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys 115 120Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys 115 120

Val Ser Asn 105Val Ser Asn 105

Ala Lys GlyAla Lys Gly

Lys Gly Leu ProLys Gly Leu Pro

110110

Gln Pro Arg GluGln Pro Arg Glu

125125

Gln Val TyrGln Val Tyr

130130

Val Ser Leu 145Val Ser Leu 145

Val Glu TrpVal Glu Trp

Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met 135140Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met 135140

Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro 150155Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro 150155

Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn 165170Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn 165170

Thr Lys AsnThr Lys Asn

Ser Asp IleSer Asp Ile

Tyr Lys ThrTyr Lys Thr

175175

Pro Pro ValPro Pro Val

Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu 180 185Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu 180 185

Tyr Ser ArgTyr Ser Arg

190190

Thr Val AspThr Val Asp

195195

Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val PheLys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe

200 205200 205

Ser CysSer Cys

Val Met HisVal Met His

210210

Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln LysGlu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys

215 220215 220

Ser LeuSer Leu

SerSer

ProPro

GlnGln

Ala 160Ala 160

ThrThr

LeuLeu

SerSer

SerSer

Leu Ser Leu Gly LysLeu Ser Leu Gly Lys

225 <210> 507 <211> 232 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>225 <210> 507 <211> 232 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> IgG1 Fc C220S <400> 507<223> IgG1 Fc C220S <400> 507

Glu Pro Lys 1Glu Pro Lys 1

Ser Ser Asp Lys Thr His ThrSer Ser Asp Lys Thr His Thr

1010

Cys Pro Pro Cys ProCys Pro Pro Cys Pro

Pro Glu LeuPro Glu Leu

Leu Gly Gly Pro Ser Val PheLeu Gly Gly Pro Ser Val Phe

2525

Leu Phe Pro Pro Lys 30Leu Phe Pro Pro Lys 30

Lys Asp ThrLys Asp Thr

Leu Met Ile Ser Arg Thr ProLeu Met Ile Ser Arg Thr Pro

Glu Val Thr Cys Val 45Glu Val Thr Cys Val 45

Val Asp Val 50Val Asp Val 50

Ser His Glu Asp Pro Glu Val 55Ser His Glu Asp Pro Glu Val 55

Lys Phe Asn Trp Tyr 60Lys Phe Asn Trp Tyr 60

AlaAla

ProPro

ValVal

ValVal

- 692 044346- 692 044346

Asp Gly Val Glu Val 65Asp Gly Val Glu Val 65

His Asn Ala Lys Thr 70His Asn Ala Lys Thr 70

Lys Pro Arg Glu Glu 75Lys Pro Arg Glu Glu 75

Tyr Asn Ser Thr Tyr 85Tyr Asn Ser Thr Tyr 85

Arg Val Val Ser Val 90Arg Val Val Ser Val 90

Leu Thr Val Leu HisLeu Thr Val Leu His

Asp Trp Leu Asn GlyAsp Trp Leu Asn Gly

100100

Lys Glu Tyr Lys CysLys Glu Tyr Lys Cys

105105

Lys Val Ser Asn LysLys Val Ser Asn Lys

110110

Leu Pro Ala Pro IleLeu Pro Ala Pro Ile

115115

Glu Lys Thr Ile Ser 120Glu Lys Thr Ile Ser 120

Lys Ala Lys Gly GlnLys Ala Lys Gly Gln

125125

Arg Glu Pro Gln Val 130Arg Glu Pro Gln Val 130

Tyr Thr Leu Pro ProTyr Thr Leu Pro Pro

135135

Ser Arg Glu Glu Met 140Ser Arg Glu Glu Met 140

Lys Asn Gln Val Ser 145Lys Asn Gln Val Ser 145

Leu Thr Cys Leu Val 150Leu Thr Cys Leu Val 150

Lys Gly Phe Tyr Pro 155Lys Gly Phe Tyr Pro 155

Asp Ile Ala Val GluAsp Ile Ala Val Glu

165165

Trp Glu Ser Asn GlyTrp Glu Ser Asn Gly

170170

Gln Pro Glu Asn AsnGln Pro Glu Asn Asn

175175

Lys Thr Thr Pro ProLys Thr Thr Pro Pro

180180

Val Leu Asp Ser AspVal Leu Asp Ser Asp

185185

Gly Ser Phe Phe LeuGly Ser Phe Phe Leu

190190

Ser Lys Leu Thr ValSer Lys Leu Thr Val

195195

Asp Lys Ser Arg Trp 200Asp Lys Ser Arg Trp 200

Gln Gln Gly Asn ValGln Gln Gly Asn Val

205205

Ser Cys Ser Val MetSer Cys Ser Val Met

210210

His Glu Ala Leu HisHis Glu Ala Leu His

215215

Asn His Tyr Thr Gln 220Asn His Tyr Thr Gln 220

Gln 80Gln 80

GlnGln

AlaAla

ProPro

ThrThr

Ser 160Ser 160

TyrTyr

TyrTyr

PhePhe

LysLys

Ser Leu Ser Leu Ser 225Ser Leu Ser Leu Ser 225

Pro Gly Lys 230 <210> 508 <211> 208 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Pro Gly Lys 230 <210> 508 <211> 208 <212> PROTEIN <213> Artificial Sequence <220>

< 223> CD80 v55 ECD <400>508<223>CD80 v55 ECD <400>508

Val Ile His Val Thr Lys Glu Val Lys Glu Val Ala Thr Leu Ser 1 5 1015Val Ile His Val Thr Lys Glu Val Lys Glu Val Ala Thr Leu Ser 1 5 1015

Gly His Asn Val Ser Val Glu Glu Leu Ala GlnGly His Asn Val Ser Val Glu Glu Leu Ala Gln

20252025

Thr Arg Ile Tyr 30Thr Arg Ile Tyr 30

CysCys

TrpTrp

- 693 044346- 693 044346

Gln Lys Glu Lys Lys 35Gln Lys Glu Lys Lys 35

Met Val Leu Thr MetMet Val Leu Thr Met

Met Ser Gly Asp Met 45Met Ser Gly Asp Met 45

Ile Trp Pro Glu Tyr 50Ile Trp Pro Glu Tyr 50

Lys Asn Arg Thr Ile 55Lys Asn Arg Thr Ile 55

Phe Asp Ile Thr Asn 60Phe Asp Ile Thr Asn 60

Leu Ser Ile Val Ile 65Leu Ser Ile Val Ile 65

Gln Ala Leu Arg Pro 70Gln Ala Leu Arg Pro 70

Ser Asp Glu Gly Thr 75Ser Asp Glu Gly Thr 75

Glu Cys Val Val Leu 85Glu Cys Val Val Leu 85

Lys Tyr Glu Lys Asp 90Lys Tyr Glu Lys Asp 90

Gly Phe Lys Arg Glu 95Gly Phe Lys Arg Glu 95

Leu Ala Glu Val ThrLeu Ala Glu Val Thr

100100

Leu Ser Val Lys AlaLeu Ser Val Lys Ala

105105

Asp Phe Pro Thr ProAsp Phe Pro Thr Pro

110110

Ile Ser Asp Phe Glu 115Ile Ser Asp Phe Glu 115

Ile Pro Thr Ser AsnIle Pro Thr Ser Asn

120120

Ile Arg Arg Ile IleIle Arg Arg Ile Ile

125125

Ser Thr Ser Gly GlySer Thr Ser Gly Gly

130130

Phe Pro Glu Pro HisPhe Pro Glu Pro His

135135

Leu Ser Trp Leu Glu 140Leu Ser Trp Leu Glu 140

Gly Glu Glu Leu Asn 145Gly Glu Glu Leu Asn 145

Ala Ile Asn Thr Thr 150Ala Ile Asn Thr Thr 150

Val Ser Gln Asp Pro 155Val Ser Gln Asp Pro 155

Thr Glu Leu Tyr AlaThr Glu Leu Tyr Ala

165165

Val Ser Ser Lys LeuVal Ser Ser Lys Leu

170170

Asp Phe Asn Met ThrAsp Phe Asn Met Thr

175175

Asn His Ser Phe MetAsn His Ser Phe Met

180180

Cys Leu Ile Lys TyrCys Leu Ile Lys Tyr

185185

Gly His Leu Arg ValGly His Leu Arg Val

190190

Gln Thr Phe Asn Trp 195Gln Thr Phe Asn Trp 195

Asn Thr Thr Lys Gln 200Asn Thr Thr Lys Gln 200

Glu His Phe Pro AspGlu His Phe Pro Asp

205205

AsnAsn

AsnAsn

Tyr 80Tyr 80

HisHis

SerSer

CysCys

AspAsp

Glu 160Glu 160

ThrThr

AsnAsn

Asn <210> 509 <211> 208 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Asn <210> 509 <211> 208 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> CD80 v56 ECD <400> 509<223> CD80 v56 ECD <400> 509

Val Ile His Val 1Val Ile His Val 1

Thr Lys Glu Val 5Thr Lys Glu Val 5

Lys Glu Val Ala Thr Leu SerLys Glu Val Ala Thr Leu Ser

1515

Gly His Asn Val 20Gly His Asn Val 20

Ser Val Glu GluSer Val Glu Glu

Leu Ala Gln Thr Arg Ile TyrLeu Ala Gln Thr Arg Ile Tyr

30thirty

CysCys

TrpTrp

AsnAsn

Gln Lys Glu LysGln Lys Glu Lys

Lys Met Val LeuLys Met Val Leu

Thr Met Met Ser Gly Asp MetThr Met Met Ser Gly Asp Met

- 694 044346- 694 044346

Ile Trp Pro Glu Tyr 50Ile Trp Pro Glu Tyr 50

Lys Asn Arg Thr Ile 55Lys Asn Arg Thr Ile 55

Phe Asp Ile Thr Asn 60Phe Asp Ile Thr Asn 60

Leu Ser Ile Val Ile 65Leu Ser Ile Val Ile 65

Gln Ala Leu Arg Pro 70Gln Ala Leu Arg Pro 70

Ser Asp Glu Gly Thr 75Ser Asp Glu Gly Thr 75

Glu Cys Val Val Leu 85Glu Cys Val Val Leu 85

Lys Tyr Glu Lys Asp 90Lys Tyr Glu Lys Asp 90

Gly Phe Lys Arg Glu 95Gly Phe Lys Arg Glu 95

Leu Ala Glu Val ThrLeu Ala Glu Val Thr

100100

Leu Ser Val Lys AlaLeu Ser Val Lys Ala

105105

Asp Phe Pro Thr ProAsp Phe Pro Thr Pro

110110

Ile Ser Asp Phe Glu 115Ile Ser Asp Phe Glu 115

Ala Pro Ser Ser AsnAla Pro Ser Ser Asn

120120

Ile Arg Arg Ile IleIle Arg Arg Ile Ile

125125

Ser Ala Ser Gly Gly 130Ser Ala Ser Gly Gly 130

Phe Pro Glu Pro HisPhe Pro Glu Pro His

135135

Leu Ser Trp Leu Glu 140Leu Ser Trp Leu Glu 140

Gly Glu Glu Leu Asn 145Gly Glu Glu Leu Asn 145

Ala Ile Asn Thr Thr 150Ala Ile Asn Thr Thr 150

Val Ser Gln Asp Pro 155Val Ser Gln Asp Pro 155

Thr Glu Leu Tyr AlaThr Glu Leu Tyr Ala

165165

Val Ser Ser Glu LeuVal Ser Ser Glu Leu

170170

Asp Phe Asn Met ThrAsp Phe Asn Met Thr

175175

Asn His Ser Phe MetAsn His Ser Phe Met

180180

Cys Leu Ile Lys TyrCys Leu Ile Lys Tyr

185185

Gly His Leu Arg ValGly His Leu Arg Val

190190

Gln Thr Phe Asn Trp 195Gln Thr Phe Asn Trp 195

Asn Thr Thr Lys Gln 200Asn Thr Thr Lys Gln 200

Glu His Phe Pro AspGlu His Phe Pro Asp

205205

AsnAsn

Tyr 80Tyr 80

HisHis

SerSer

CysCys

AsnAsn

Glu 160Glu 160

ThrThr

AsnAsn

Asn <210> 510 <211> 208 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Asn <210> 510 <211> 208 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> CD80 v57 ECD <400> 510<223> CD80 v57 ECD <400> 510

Val Ile His Met 1Val Ile His Met 1

Thr Lys Glu Val Lys Glu Val Ala Thr Leu Ser 5 10 15Thr Lys Glu Val Lys Glu Val Ala Thr Leu Ser 5 10 15

Gly His Asn Val 20Gly His Asn Val 20

Ser Val Glu Glu Leu Ala Gln Thr Arg Ile Tyr 25 30Ser Val Glu Glu Leu Ala Gln Thr Arg Ile Tyr 25 30

Gln Lys Glu Lys 35Gln Lys Glu Lys 35

Lys Met Val Leu Thr Met Met Ser Gly Asp MetLys Met Val Leu Thr Met Met Ser Gly Asp Met

4545

CysCys

TrpTrp

AsnAsn

- 695 044346- 695 044346

Ile Trp Pro Glu Tyr 50Ile Trp Pro Glu Tyr 50

Lys Asn Arg Thr Ile 55Lys Asn Arg Thr Ile 55

Phe Asp Ile Thr Asn 60Phe Asp Ile Thr Asn 60

Leu Ser Ile Val Ile 65Leu Ser Ile Val Ile 65

Gln Ala Leu Arg Pro 70Gln Ala Leu Arg Pro 70

Ser Asp Glu Gly Thr 75Ser Asp Glu Gly Thr 75

Glu Cys Val Val Leu 85Glu Cys Val Val Leu 85

Lys Tyr Glu Lys Asp 90Lys Tyr Glu Lys Asp 90

Gly Phe Lys Arg Glu 95Gly Phe Lys Arg Glu 95

Leu Ala Glu Val ThrLeu Ala Glu Val Thr

100100

Leu Ser Val Lys AlaLeu Ser Val Lys Ala

105105

Asp Phe Pro Thr ProAsp Phe Pro Thr Pro

110110

Ile Ser Asp Phe Glu 115Ile Ser Asp Phe Glu 115

Val Pro Ser Ser AsnVal Pro Ser Ser Asn

120120

Ile Arg Arg Ile IleIle Arg Arg Ile Ile

125125

Ser Ala Ser Gly Gly 130Ser Ala Ser Gly Gly 130

Phe Pro Glu Pro HisPhe Pro Glu Pro His

135135

Leu Ser Trp Leu Glu 140Leu Ser Trp Leu Glu 140

Gly Glu Glu Leu Asn 145Gly Glu Glu Leu Asn 145

Ala Ile Asn Thr Thr 150Ala Ile Asn Thr Thr 150

Val Ser Gln Asp Pro 155Val Ser Gln Asp Pro 155

Thr Glu Leu Tyr AlaThr Glu Leu Tyr Ala

165165

Val Ser Ser Glu LeuVal Ser Ser Glu Leu

170170

Asp Phe Asn Met ThrAsp Phe Asn Met Thr

175175

Asn His Ser Phe MetAsn His Ser Phe Met

180180

Cys Leu Ile Lys TyrCys Leu Ile Lys Tyr

185185

Gly His Leu Arg ValGly His Leu Arg Val

190190

Gln Thr Phe Asn Trp 195Gln Thr Phe Asn Trp 195

Asn Thr Thr Lys Gln 200Asn Thr Thr Lys Gln 200

Glu His Phe Pro AspGlu His Phe Pro Asp

205205

AsnAsn

Tyr 80Tyr 80

HisHis

SerSer

CysCys

AsnAsn

Glu 160Glu 160

ThrThr

AsnAsn

Asn <210>Asn <210>

<211><211>

<212><212>

511511

208 БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>208 PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> CD80 v58 ECD <400> 511<223> CD80 v58 ECD <400> 511

Val Ile His Val 1Val Ile His Val 1

Thr Lys Glu Val Lys Glu Val Ala Thr Leu Ser 5 10 15Thr Lys Glu Val Lys Glu Val Ala Thr Leu Ser 5 10 15

Gly His Asn ValGly His Asn Val

Ser Val Glu Glu Leu Ala Gln Thr Arg Ile Tyr 25 30Ser Val Glu Glu Leu Ala Gln Thr Arg Ile Tyr 25 30

Gln Lys Glu Lys 35Gln Lys Glu Lys 35

Lys Met Val Leu Thr Met Met Ser Gly Asp MetLys Met Val Leu Thr Met Met Ser Gly Asp Met

4545

CysCys

TrpTrp

AsnAsn

- 696 044346- 696 044346

Ile Trp Pro Glu Tyr 50Ile Trp Pro Glu Tyr 50

Lys Asn Arg Thr Ile 55Lys Asn Arg Thr Ile 55

Phe Asp Ile Thr Asn 60Phe Asp Ile Thr Asn 60

Leu Ser Ile Val Ile 65Leu Ser Ile Val Ile 65

Gln Ala Leu Arg Pro 70Gln Ala Leu Arg Pro 70

Ser Asp Glu Gly Thr 75Ser Asp Glu Gly Thr 75

Glu Cys Val Val Leu 85Glu Cys Val Val Leu 85

Lys Tyr Glu Lys Asp 90Lys Tyr Glu Lys Asp 90

Gly Phe Lys Arg Glu 95Gly Phe Lys Arg Glu 95

Leu Ala Glu Val ThrLeu Ala Glu Val Thr

100100

Leu Ser Val Lys AlaLeu Ser Val Lys Ala

105105

Asp Phe Pro Thr ProAsp Phe Pro Thr Pro

110110

Ile Ser Asp Phe Glu 115Ile Ser Asp Phe Glu 115

Val Pro Ser Ser AsnVal Pro Ser Ser Asn

120120

Ile Arg Arg Ile IleIle Arg Arg Ile Ile

125125

Ser Ala Ser Gly Gly 130Ser Ala Ser Gly Gly 130

Phe Pro Glu Pro HisPhe Pro Glu Pro His

135135

Leu Ser Trp Leu Glu 140Leu Ser Trp Leu Glu 140

Gly Glu Glu Leu Asn 145Gly Glu Glu Leu Asn 145

Ala Ile Asn Thr Thr 150Ala Ile Asn Thr Thr 150

Val Ser Gln Asp Pro 155Val Ser Gln Asp Pro 155

Thr Glu Leu Tyr AlaThr Glu Leu Tyr Ala

165165

Val Ser Ser Glu LeuVal Ser Ser Glu Leu

170170

Asp Phe Asn Met ThrAsp Phe Asn Met Thr

175175

Asn His Ser Phe MetAsn His Ser Phe Met

180180

Cys Leu Ile Lys TyrCys Leu Ile Lys Tyr

185185

Gly His Leu Arg ValGly His Leu Arg Val

190190

Gln Thr Phe Asn Trp 195Gln Thr Phe Asn Trp 195

Asn Thr Thr Lys Gln 200Asn Thr Thr Lys Gln 200

Glu His Phe Pro AspGlu His Phe Pro Asp

205205

AsnAsn

Tyr 80Tyr 80

HisHis

SerSer

CysCys

AsnAsn

Glu 160Glu 160

ThrThr

AsnAsn

Asn <210> 512 <211> 208 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Asn <210> 512 <211> 208 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> CD80 v59 ECD <400> 512<223> CD80 v59 ECD <400> 512

Val Ile His Val 1Val Ile His Val 1

Thr Lys Glu Val Lys Glu Val Ala Thr Leu Ser 5 10 15Thr Lys Glu Val Lys Glu Val Ala Thr Leu Ser 5 10 15

Gly His Asn ValGly His Asn Val

Ser Val Glu Glu Leu Ala Gln Thr Arg Ile Tyr 25 30Ser Val Glu Glu Leu Ala Gln Thr Arg Ile Tyr 25 30

Gln Lys Glu LysGln Lys Glu Lys

Lys Met Val Leu Thr Met Met Ser Gly Asp MetLys Met Val Leu Thr Met Met Ser Gly Asp Met

4545

CysCys

TrpTrp

AsnAsn

- 697 044346- 697 044346

Ile Trp Pro Glu Tyr 50Ile Trp Pro Glu Tyr 50

Lys Asn Arg Thr Ile 55Lys Asn Arg Thr Ile 55

Phe Asp Ile Thr Asn 60Phe Asp Ile Thr Asn 60

Leu Ser Ile Val Ile 65Leu Ser Ile Val Ile 65

Gln Ala Leu Arg Pro 70Gln Ala Leu Arg Pro 70

Ser Asp Glu Gly Thr 75Ser Asp Glu Gly Thr 75

Glu Cys Val Val Leu 85Glu Cys Val Val Leu 85

Lys Tyr Glu Lys Asp 90Lys Tyr Glu Lys Asp 90

Gly Phe Lys Arg Glu 95Gly Phe Lys Arg Glu 95

Leu Ala Glu Val ThrLeu Ala Glu Val Thr

100100

Leu Ser Val Lys AlaLeu Ser Val Lys Ala

105105

Asp Phe Pro Thr ProAsp Phe Pro Thr Pro

110110

Ile Ser Asp Phe Glu 115Ile Ser Asp Phe Glu 115

Val Pro Ser Ser AsnVal Pro Ser Ser Asn

120120

Ile Arg Arg Ile IleIle Arg Arg Ile Ile

125125

Ser Ala Ser Gly Gly 130Ser Ala Ser Gly Gly 130

Phe Pro Glu Pro HisPhe Pro Glu Pro His

135135

Leu Ser Trp Leu Glu 140Leu Ser Trp Leu Glu 140

Gly Glu Glu Leu Asn 145Gly Glu Glu Leu Asn 145

Ala Ile Asn Thr Thr 150Ala Ile Asn Thr Thr 150

Val Ser Gln Asp Pro 155Val Ser Gln Asp Pro 155

Thr Glu Leu Tyr AlaThr Glu Leu Tyr Ala

165165

Val Ser Ser Lys LeuVal Ser Ser Lys Leu

170170

Asp Phe Asn Met ThrAsp Phe Asn Met Thr

175175

Asn His Ser Phe MetAsn His Ser Phe Met

180180

Cys Leu Ile Lys TyrCys Leu Ile Lys Tyr

185185

Gly His Leu Arg ValGly His Leu Arg Val

190190

Gln Thr Phe Asn Trp 195Gln Thr Phe Asn Trp 195

Asn Thr Thr Lys Gln 200Asn Thr Thr Lys Gln 200

Glu His Phe Pro AspGlu His Phe Pro Asp

205205

AsnAsn

Tyr 80Tyr 80

HisHis

SerSer

CysCys

AsnAsn

Glu 160Glu 160

ThrThr

SerSer

Asn <210> 513 <211> 208 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Asn <210> 513 <211> 208 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> CD80 v60 ECD <400> 513<223> CD80 v60 ECD <400> 513

Val Ile His Val 1Val Ile His Val 1

Gly His Asn Leu 20Gly His Asn Leu 20

Gln Lys Glu Lys 35Gln Lys Glu Lys 35

Thr Lys Glu Val 5Thr Lys Glu Val 5

Ser Val Glu GluSer Val Glu Glu

Lys Met Val Leu 40Lys Met Val Leu 40

Tyr Lys Asn ArgTyr Lys Asn Arg

Lys Glu Val Ala Thr Leu SerLys Glu Val Ala Thr Leu Ser

1515

Leu Ala Gln Thr Arg Ile TyrLeu Ala Gln Thr Arg Ile Tyr

30thirty

Thr Met Met Ser Gly Asp Met 45Thr Met Met Ser Gly Asp Met 45

CysCys

TrpTrp

AsnAsn

AsnAsn

Ile Trp Pro GluIle Trp Pro Glu

Thr Ile Phe Asp Ile Thr AsnThr Ile Phe Asp Ile Thr Asn

- 698 044346- 698 044346

Leu Ser Ile Val Ile 65Leu Ser Ile Val Ile 65

Gln Ala Leu Arg Pro 70Gln Ala Leu Arg Pro 70

Ser Asp Glu Gly Thr 75Ser Asp Glu Gly Thr 75

Glu Cys Val Val Leu 85Glu Cys Val Val Leu 85

Lys Tyr Glu Lys Asp 90Lys Tyr Glu Lys Asp 90

Gly Phe Lys Arg Glu 95Gly Phe Lys Arg Glu 95

Leu Ala Glu Val ThrLeu Ala Glu Val Thr

100100

Leu Ser Val Lys AlaLeu Ser Val Lys Ala

105105

Asp Phe Pro Thr ProAsp Phe Pro Thr Pro

110110

Ile Ser Asp Phe Glu 115Ile Ser Asp Phe Glu 115

Val Pro Ser Ser AsnVal Pro Ser Ser Asn

120120

Ile Arg Arg Ile IleIle Arg Arg Ile Ile

125125

Ser Ala Ser Gly GlySer Ala Ser Gly Gly

130130

Phe Pro Glu Pro HisPhe Pro Glu Pro His

135135

Leu Ser Trp Leu Glu 140Leu Ser Trp Leu Glu 140

Gly Glu Glu Leu Asn 145Gly Glu Glu Leu Asn 145

Ala Ile Asn Thr Thr 150Ala Ile Asn Thr Thr 150

Val Ser Gln Asp Pro 155Val Ser Gln Asp Pro 155

Thr Glu Leu Tyr AlaThr Glu Leu Tyr Ala

165165

Val Ser Ser Lys LeuVal Ser Ser Lys Leu

170170

Asp Phe Asn Met ThrAsp Phe Asn Met Thr

175175

Asn His Ser Phe MetAsn His Ser Phe Met

180180

Cys Leu Ile Lys TyrCys Leu Ile Lys Tyr

185185

Gly His Leu Arg ValGly His Leu Arg Val

190190

Gln Thr Phe Asn Trp 195Gln Thr Phe Asn Trp 195

Asn Thr Thr Lys Gln 200Asn Thr Thr Lys Gln 200

Glu His Phe Pro AspGlu His Phe Pro Asp

205205

Tyr 80Tyr 80

HisHis

SerSer

CysCys

AsnAsn

Glu 160Glu 160

ThrThr

AsnAsn

Asn <210> 514 <211> 208 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Asn <210> 514 <211> 208 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> CD80 v61 ECD <400> 514<223> CD80 v61 ECD <400> 514

Val Ile His Val Thr Lys Glu Val 1 5Val Ile His Val Thr Lys Glu Val 1 5

Lys Glu Val Ala Thr Leu SerLys Glu Val Ala Thr Leu Ser

1515

Gly His Asn Val Ser Val Glu Glu 20Gly His Asn Val Ser Val Glu Glu 20

Leu Ala Gln Thr Arg Ile TyrLeu Ala Gln Thr Arg Ile Tyr

30thirty

Gln Lys Glu Lys Lys Met Val LeuGln Lys Glu Lys Lys Met Val Leu

4040

Thr Met Met Ser Gly Asp Met 45Thr Met Met Ser Gly Asp Met 45

Ile Trp Pro Glu Tyr Lys Asn ArgIle Trp Pro Glu Tyr Lys Asn Arg

5555

Thr Ile Phe Asp Ile Thr Asn 60Thr Ile Phe Asp Ile Thr Asn 60

CysCys

TrpTrp

AsnAsn

AsnAsn

- 699 044346- 699 044346

Leu Ser Ile Val Ile 65Leu Ser Ile Val Ile 65

Gln Ala Leu Arg Pro 70Gln Ala Leu Arg Pro 70

Ser Asp Glu Gly Thr 75Ser Asp Glu Gly Thr 75

Glu Cys Val Val Leu 85Glu Cys Val Val Leu 85

Lys Tyr Glu Lys Asp 90Lys Tyr Glu Lys Asp 90

Gly Phe Lys Arg Glu 95Gly Phe Lys Arg Glu 95

Leu Ala Glu Val ThrLeu Ala Glu Val Thr

100100

Leu Ser Val Lys AlaLeu Ser Val Lys Ala

105105

Asp Phe Pro Thr ProAsp Phe Pro Thr Pro

110110

Ile Ser Asp Phe Gly 115Ile Ser Asp Phe Gly 115

Val Pro Ser Ser AsnVal Pro Ser Ser Asn

120120

Ile Arg Arg Ile IleIle Arg Arg Ile Ile

125125

Ser Ala Ser Gly Gly 130Ser Ala Ser Gly Gly 130

Phe Pro Glu Pro HisPhe Pro Glu Pro His

135135

Leu Ser Trp Leu Glu 140Leu Ser Trp Leu Glu 140

Gly Glu Glu Leu Asn 145Gly Glu Glu Leu Asn 145

Ala Ile Asn Thr Thr 150Ala Ile Asn Thr Thr 150

Val Ser Gln Asp Pro 155Val Ser Gln Asp Pro 155

Thr Glu Leu Tyr AlaThr Glu Leu Tyr Ala

165165

Val Ser Ser Lys LeuVal Ser Ser Lys Leu

170170

Asp Phe Asn Met ThrAsp Phe Asn Met Thr

175175

Asn His Ser Phe MetAsn His Ser Phe Met

180180

Cys Leu Ile Lys TyrCys Leu Ile Lys Tyr

185185

Gly His Leu Arg ValGly His Leu Arg Val

190190

Gln Thr Phe Asn Trp 195Gln Thr Phe Asn Trp 195

Asn Thr Thr Lys Gln 200Asn Thr Thr Lys Gln 200

Glu His Phe Pro AspGlu His Phe Pro Asp

205205

Tyr 80Tyr 80

HisHis

SerSer

CysCys

AsnAsn

Glu 160Glu 160

ThrThr

AsnAsn

Asn <210> 515 <211> 208 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Asn <210> 515 <211> 208 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> CD80 v62 ECD <400> 515<223> CD80 v62 ECD <400> 515

Val Ile His Val Thr Lys Glu Val 1 5Val Ile His Val Thr Lys Glu Val 1 5

Lys Glu Val Ala Thr Leu SerLys Glu Val Ala Thr Leu Ser

1515

Gly His Asn Val Ser Val Glu Glu 20Gly His Asn Val Ser Val Glu Glu 20

Leu Ala Gln Thr Arg Ile TyrLeu Ala Gln Thr Arg Ile Tyr

30thirty

Gln Lys Glu Lys Lys Met Val LeuGln Lys Glu Lys Lys Met Val Leu

4040

Thr Met Met Ser Gly Asp Met 45Thr Met Met Ser Gly Asp Met 45

Ile Trp Pro Glu Tyr Lys Asn ArgIle Trp Pro Glu Tyr Lys Asn Arg

5555

Thr Ile Phe Asp Ile Thr Asn 60Thr Ile Phe Asp Ile Thr Asn 60

CysCys

TrpTrp

AsnAsn

AsnAsn

- 700 044346- 700 044346

Leu Ser Ile Val Ile 65Leu Ser Ile Val Ile 65

Leu Ala Leu Arg Pro 70Leu Ala Leu Arg Pro 70

Ser Asp Glu Gly Thr 75Ser Asp Glu Gly Thr 75

Glu Cys Val Val Leu 85Glu Cys Val Val Leu 85

Lys Tyr Glu Lys Asp 90Lys Tyr Glu Lys Asp 90

Gly Phe Lys Arg Glu 95Gly Phe Lys Arg Glu 95

Leu Ala Glu Val ThrLeu Ala Glu Val Thr

100100

Leu Ser Val Lys AlaLeu Ser Val Lys Ala

105105

Asp Phe Pro Thr ProAsp Phe Pro Thr Pro

110110

Ile Ser Asp Phe Glu 115Ile Ser Asp Phe Glu 115

Val Pro Ser Ser AsnVal Pro Ser Ser Asn

120120

Ile Arg Arg Ile IleIle Arg Arg Ile Ile

125125

Ser Ala Ser Gly Gly 130Ser Ala Ser Gly Gly 130

Phe Pro Glu Pro HisPhe Pro Glu Pro His

135135

Leu Ser Trp Leu Glu 140Leu Ser Trp Leu Glu 140

Gly Glu Glu Leu Asn 145Gly Glu Glu Leu Asn 145

Ala Ile Asn Thr Thr 150Ala Ile Asn Thr Thr 150

Val Ser Gln Asp Pro 155Val Ser Gln Asp Pro 155

Thr Glu Leu Tyr AlaThr Glu Leu Tyr Ala

165165

Val Ser Ser Lys LeuVal Ser Ser Lys Leu

170170

Asp Phe Asn Met ThrAsp Phe Asn Met Thr

175175

Asn His Ser Phe MetAsn His Ser Phe Met

180180

Cys Leu Ile Lys TyrCys Leu Ile Lys Tyr

185185

Gly His Leu Arg ValGly His Leu Arg Val

190190

Gln Thr Phe Asn Trp 195Gln Thr Phe Asn Trp 195

Asn Thr Thr Lys Gln 200Asn Thr Thr Lys Gln 200

Glu His Phe Pro AspGlu His Phe Pro Asp

205205

Tyr 80Tyr 80

HisHis

SerSer

CysCys

AsnAsn

Glu 160Glu 160

ThrThr

AsnAsn

Asn <210>Asn <210>

<211><211>

<212><212>

516516

208 БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>208 PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> CD80 v63 ECD <400> 516<223> CD80 v63 ECD <400> 516

Val Ile His Val Thr Lys Glu Val 1 5Val Ile His Val Thr Lys Glu Val 1 5

Lys Glu Val Ala Thr Leu SerLys Glu Val Ala Thr Leu Ser

1515

Gly His Asn Val Ser Val Glu GluGly His Asn Val Ser Val Glu Glu

Leu Ala Gln Thr Arg Ile TyrLeu Ala Gln Thr Arg Ile Tyr

30thirty

Gln Lys Glu Lys Lys Met Val LeuGln Lys Glu Lys Lys Met Val Leu

4040

Thr Met Met Ser Gly Asp Met 45Thr Met Met Ser Gly Asp Met 45

Ile Trp Pro Glu Tyr Lys Asn ArgIle Trp Pro Glu Tyr Lys Asn Arg

5555

Thr Ile Phe Asp Ile Thr Asn 60Thr Ile Phe Asp Ile Thr Asn 60

CysCys

TrpTrp

AsnAsn

AsnAsn

- 701 044346- 701 044346

Leu Ser Ile Val Ile 65Leu Ser Ile Val Ile 65

Arg Ala Leu Arg Pro 70Arg Ala Leu Arg Pro 70

Ser Asp Glu Gly Thr 75Ser Asp Glu Gly Thr 75

Glu Cys Val Val Leu 85Glu Cys Val Val Leu 85

Lys Tyr Glu Lys Asp 90Lys Tyr Glu Lys Asp 90

Gly Phe Lys Arg Glu 95Gly Phe Lys Arg Glu 95

Leu Ala Glu Val ThrLeu Ala Glu Val Thr

100100

Leu Ser Val Lys AlaLeu Ser Val Lys Ala

105105

Asp Phe Pro Thr ProAsp Phe Pro Thr Pro

110110

Ile Ser Asp Phe Glu 115Ile Ser Asp Phe Glu 115

Val Pro Ser Ser AsnVal Pro Ser Ser Asn

120120

Ile Arg Arg Ile IleIle Arg Arg Ile Ile

125125

Ser Ala Ser Gly Gly 130Ser Ala Ser Gly Gly 130

Phe Pro Glu Pro HisPhe Pro Glu Pro His

135135

Leu Ser Trp Leu Glu 140Leu Ser Trp Leu Glu 140

Gly Glu Glu Leu Asn 145Gly Glu Glu Leu Asn 145

Ala Ile Asn Thr Thr 150Ala Ile Asn Thr Thr 150

Val Ser Gln Asp Pro 155Val Ser Gln Asp Pro 155

Thr Glu Leu Tyr AlaThr Glu Leu Tyr Ala

165165

Val Ser Ser Lys LeuVal Ser Ser Lys Leu

170170

Asp Phe Asn Met ThrAsp Phe Asn Met Thr

175175

Asn His Ser Phe MetAsn His Ser Phe Met

180180

Cys Leu Ile Lys TyrCys Leu Ile Lys Tyr

185185

Gly His Leu Arg ValGly His Leu Arg Val

190190

Gln Thr Phe Asn Trp 195Gln Thr Phe Asn Trp 195

Asn Ser Thr Lys Gln 200Asn Ser Thr Lys Gln 200

Glu His Phe Pro AspGlu His Phe Pro Asp

205205

Tyr 80Tyr 80

HisHis

SerSer

CysCys

AsnAsn

Glu 160Glu 160

ThrThr

AsnAsn

Asn <210> 517 <211> 208 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Asn <210> 517 <211> 208 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> CD80 v64 ECD <400> 517<223> CD80 v64 ECD <400> 517

Val Ile His Val 1Val Ile His Val 1

Thr Lys Glu Val Lys Glu Val Ala Thr Leu Ser 5 10 15Thr Lys Glu Val Lys Glu Val Ala Thr Leu Ser 5 10 15

Gly His Asn Val 20Gly His Asn Val 20

Ser Val Glu Glu Leu Ala Gln Thr Arg Ile Tyr 25 30Ser Val Glu Glu Leu Ala Gln Thr Arg Ile Tyr 25 30

Gln Lys Glu LysGln Lys Glu Lys

Lys Met Val Leu Thr Met Met Ser Gly Asp MetLys Met Val Leu Thr Met Met Ser Gly Asp Met

4545

Ile Trp Pro Glu 50Ile Trp Pro Glu 50

Tyr Lys Asn Arg Thr Ile Phe Asp Ile Thr Asn 55 60Tyr Lys Asn Arg Thr Ile Phe Asp Ile Thr Asn 55 60

CysCys

TrpTrp

AsnAsn

AsnAsn

TyrTyr

Leu Ser Ile ValLeu Ser Ile Val

Ile Gln Ala Leu Arg Pro Ser Asp Glu Gly ThrIle Gln Ala Leu Arg Pro Ser Asp Glu Gly Thr

- 702 044346- 702 044346

Ala Cys Val Val Leu 85Ala Cys Val Val Leu 85

Lys Tyr Glu Lys Asp 90Lys Tyr Glu Lys Asp 90

Gly Phe Lys Arg Glu 95Gly Phe Lys Arg Glu 95

Leu Ala Glu Val ThrLeu Ala Glu Val Thr

100100

Leu Ser Val Lys AlaLeu Ser Val Lys Ala

105105

Asp Phe Pro Thr ProAsp Phe Pro Thr Pro

110110

Ile Ser Asp Phe Glu 115Ile Ser Asp Phe Glu 115

Val Pro Ser Ser AsnVal Pro Ser Ser Asn

120120

Ile Arg Arg Ile ThrIle Arg Arg Ile Thr

125125

Ser Ala Ser Gly Gly 130Ser Ala Ser Gly Gly 130

Phe Pro Glu Pro HisPhe Pro Glu Pro His

135135

Leu Ser Trp Leu Glu 140Leu Ser Trp Leu Glu 140

Gly Glu Glu Leu Asn 145Gly Glu Glu Leu Asn 145

Ala Ile Asn Thr Thr 150Ala Ile Asn Thr Thr 150

Val Ser Gln Asp Pro 155Val Ser Gln Asp Pro 155

Thr Glu Leu Tyr AlaThr Glu Leu Tyr Ala

165165

Val Ser Ser Lys LeuVal Ser Ser Lys Leu

170170

Asp Phe Asn Met ThrAsp Phe Asn Met Thr

175175

Asn His Ser Phe MetAsn His Ser Phe Met

180180

Cys Leu Ile Lys TyrCys Leu Ile Lys Tyr

185185

Gly His Leu Arg ValGly His Leu Arg Val

190190

Gln Thr Phe Asn Trp 195Gln Thr Phe Asn Trp 195

Asn Thr Thr Lys Gln 200Asn Thr Thr Lys Gln 200

Glu His Phe Pro AspGlu His Phe Pro Asp

205205

HisHis

SerSer

CysCys

AsnAsn

Glu 160Glu 160

ThrThr

AsnAsn

Asn <210> 518 <211> 208 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Asn <210> 518 <211> 208 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> CD80 v65 ECD <400> 518<223> CD80 v65 ECD <400> 518

Val Ile His Val Thr 1 5Val Ile His Val Thr 1 5

Lys Glu Val Lys GluLys Glu Val Lys Glu

Val Ala Thr Leu SerVal Ala Thr Leu Ser

Gly His Asn Val Ser 20Gly His Asn Val Ser 20

Val Glu Glu Leu AlaVal Glu Glu Leu Ala

Gln Ser Arg Ile TyrGln Ser Arg Ile Tyr

Gln Lys Glu Lys Lys 35Gln Lys Glu Lys Lys 35

Met Val Leu Thr MetMet Val Leu Thr Met

Met Ser Gly Asp Met 45Met Ser Gly Asp Met 45

Ile Trp Pro Glu Tyr 50Ile Trp Pro Glu Tyr 50

Lys Asn Arg Thr Ile 55Lys Asn Arg Thr Ile 55

Phe Asp Ile Thr Asn 60Phe Asp Ile Thr Asn 60

CysCys

TrpTrp

AsnAsn

AsnAsn

TyrTyr

Gln Ala Leu Arg Pro 70Gln Ala Leu Arg Pro 70

Leu Ser Ile Val IleLeu Ser Ile Val Ile

Ser Asp Glu Gly ThrSer Asp Glu Gly Thr

- 703 044346- 703 044346

Glu Cys Val ValGlu Cys Val Val

Leu Lys Tyr Glu 85Leu Lys Tyr Glu 85

Lys Asp Gly Phe Lys Arg Lys HisLys Asp Gly Phe Lys Arg Lys His

9595

Leu Ala Glu Val Thr Leu Ser ValLeu Ala Glu Val Thr Leu Ser Val

100100

Lys Ala Asp Phe Pro Thr Pro SerLys Ala Asp Phe Pro Thr Pro Ser

105 110105 110

Ile Ser Asp Phe Glu Val Pro SerIle Ser Asp Phe Glu Val Pro Ser

115 120115 120

Ser Asn Ile Arg Arg Val Ile CysSer Asn Ile Arg Arg Val Ile Cys

125125

Ser Ala Ser Gly Gly Phe Pro GluSer Ala Ser Gly Gly Phe Pro Glu

130 135130 135

Pro His Leu Ser Trp Leu Glu AsnPro His Leu Ser Trp Leu Glu Asn

140140

Gly Glu Glu Leu Asn Ala Ile AsnGly Glu Glu Leu Asn Ala Ile Asn

145 150145 150

Thr Thr Val Ser Gln Asp Pro GluThr Thr Val Ser Gln Asp Pro Glu

155 160155 160

Thr Glu Leu Tyr Ala Val Ser AsnThr Glu Leu Tyr Ala Val Ser Asn

165165

Lys Leu Asp Phe Asn Met Thr ThrLys Leu Asp Phe Asn Met Thr Thr

170 175170 175

Asn His Ser Phe Met Cys Leu IleAsn His Ser Phe Met Cys Leu Ile

180180

Lys Tyr Gly His Leu Arg Val AsnLys Tyr Gly His Leu Arg Val Asn

185 190185 190

Gln Thr Phe Asn Trp Asn Thr ThrGln Thr Phe Asn Trp Asn Thr Thr

195 200195 200

Lys Gln Glu His Phe Pro Asp AsnLys Gln Glu His Phe Pro Asp Asn

205 <210> 519 <211> 208 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>205 <210> 519 <211> 208 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> CD80 v66 <400> 519<223> CD80 v66 <400> 519

Val Ile His Val 1Val Ile His Val 1

ECDECD

Thr Lys Glu Val 5Thr Lys Glu Val 5

Lys Glu Val Ala 10Lys Glu Val Ala 10

Thr Leu Ser Cys 15Thr Leu Ser Cys 15

Gly His Asn Val 20Gly His Asn Val 20

Ser Val Glu GluSer Val Glu Glu

Leu Ala Gln Thr 25Leu Ala Gln Thr 25

Arg Ile Tyr Trp 30Arg Ile Tyr Trp 30

Gln Lys Glu LysGln Lys Glu Lys

Lys Met Val Leu 40Lys Met Val Leu 40

Thr Met Met SerThr Met Met Ser

Gly Asp Met Asn 45Gly Asp Met Asn 45

Ile Trp Pro Glu 50Ile Trp Pro Glu 50

Tyr Lys Asn ArgTyr Lys Asn Arg

Thr Ile Phe Asp 60Thr Ile Phe Asp 60

Ile Thr Ser AsnIle Thr Ser Asn

Leu Ser Ile Val 65Leu Ser Ile Val 65

Ile Gln Ala LeuIle Gln Ala Leu

Arg Pro Ser AspArg Pro Ser Asp

Glu Gly Thr Tyr 80Glu Gly Thr Tyr 80

- 704 044346- 704 044346

Glu Cys Val Val Leu 85Glu Cys Val Val Leu 85

Lys Tyr Glu Lys Asp 90Lys Tyr Glu Lys Asp 90

Gly Phe Lys Arg Glu 95Gly Phe Lys Arg Glu 95

Leu Ala Glu Val ThrLeu Ala Glu Val Thr

100100

Leu Ser Val Lys AlaLeu Ser Val Lys Ala

105105

Asp Phe Pro Thr ProAsp Phe Pro Thr Pro

110110

Ile Thr Asp Phe GluIle Thr Asp Phe Glu

115115

Val Pro Ser Ser AsnVal Pro Ser Ser Asn

120120

Ile Arg Arg Ile IleIle Arg Arg Ile Ile

125125

Ser Ala Ser Gly Gly 130Ser Ala Ser Gly Gly 130

Phe Pro Glu Pro HisPhe Pro Glu Pro His

135135

Leu Ser Trp Leu Glu 140Leu Ser Trp Leu Glu 140

Gly Glu Glu Leu Asn 145Gly Glu Glu Leu Asn 145

Ala Ile Asn Thr Thr 150Ala Ile Asn Thr Thr 150

Val Ser Gln Asp Pro 155Val Ser Gln Asp Pro 155

Thr Glu Leu Tyr AlaThr Glu Leu Tyr Ala

165165

Val Ser Ser Lys LeuVal Ser Ser Lys Leu

170170

Asp Phe Asn Met ThrAsp Phe Asn Met Thr

175175

Asn His Ser Phe MetAsn His Ser Phe Met

180180

Cys Leu Ile Lys TyrCys Leu Ile Lys Tyr

185185

Gly Asp Leu Arg ValGly Asp Leu Arg Val

190190

Gln Thr Phe Asn Trp 195Gln Thr Phe Asn Trp 195

Asn Thr Thr Lys Gln 200Asn Thr Thr Lys Gln 200

Glu His Phe Pro AspGlu His Phe Pro Asp

205205

HisHis

SerSer

CysCys

AsnAsn

Glu 160Glu 160

ThrThr

AsnAsn

Asn <210> 520 <211> 208 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Asn <210> 520 <211> 208 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> CD80 v67 ECD <400> 520<223> CD80 v67 ECD <400> 520

Val Ile His Val Thr 1 5Val Ile His Val Thr 1 5

Lys Glu Val Lys GluLys Glu Val Lys Glu

Val Ala Thr Leu SerVal Ala Thr Leu Ser

Gly His Asn Val Ser 20Gly His Asn Val Ser 20

Val Glu Glu Leu AlaVal Glu Glu Leu Ala

Gln Thr Arg Ile Tyr 30Gln Thr Arg Ile Tyr 30

Gln Lys Glu Glu Lys 35Gln Lys Glu Glu Lys 35

Met Val Leu Thr MetMet Val Leu Thr Met

Met Ser Gly Asp Met 45Met Ser Gly Asp Met 45

Ile Trp Pro Glu Tyr 50Ile Trp Pro Glu Tyr 50

Lys Asn Arg Thr Ile 55Lys Asn Arg Thr Ile 55

Phe Asp Ile Thr Asn 60Phe Asp Ile Thr Asn 60

CysCys

TrpTrp

AsnAsn

AsnAsn

TyrTyr

Leu Ser Thr Val Ile 65Leu Ser Thr Val Ile 65

Gln Ala Leu Arg Pro 70Gln Ala Leu Arg Pro 70

Ser Asp Glu Gly Thr 75Ser Asp Glu Gly Thr 75

- 705 044346- 705 044346

Glu Cys Val Val Leu 85Glu Cys Val Val Leu 85

Lys Tyr Glu Lys Asp 90Lys Tyr Glu Lys Asp 90

Gly Phe Lys Arg Glu 95Gly Phe Lys Arg Glu 95

Leu Ala Glu Val ThrLeu Ala Glu Val Thr

100100

Leu Ser Val Lys AlaLeu Ser Val Lys Ala

105105

Asp Phe Pro Thr ProAsp Phe Pro Thr Pro

110110

Ile Ser Asp Phe Glu 115Ile Ser Asp Phe Glu 115

Val Pro Ser Ser AsnVal Pro Ser Ser Asn

120120

Ile Arg Arg Ile IleIle Arg Arg Ile Ile

125125

Ser Ala Ser Gly Gly 130Ser Ala Ser Gly Gly 130

Phe Pro Glu Pro HisPhe Pro Glu Pro His

135135

Leu Ser Trp Leu Glu 140Leu Ser Trp Leu Glu 140

Gly Glu Glu Leu Asn 145Gly Glu Glu Leu Asn 145

Ala Ile Thr Thr Thr 150Ala Ile Thr Thr Thr 150

Val Ser Gln Asp Pro 155Val Ser Gln Asp Pro 155

Thr Glu Leu Tyr AlaThr Glu Leu Tyr Ala

165165

Val Ser Ser Lys LeuVal Ser Ser Lys Leu

170170

Asp Phe Asn Met ThrAsp Phe Asn Met Thr

175175

Asn His Ser Phe MetAsn His Ser Phe Met

180180

Cys Leu Ile Lys TyrCys Leu Ile Lys Tyr

185185

Gly His Leu Arg ValGly His Leu Arg Val

190190

Gln Thr Phe Asn Trp 195Gln Thr Phe Asn Trp 195

Asn Thr Thr Lys Gln 200Asn Thr Thr Lys Gln 200

Glu His Phe Pro AspGlu His Phe Pro Asp

205205

HisHis

SerSer

CysCys

AsnAsn

Glu 160Glu 160

ThrThr

AsnAsn

Asn <210> 521 <211> 208 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Asn <210> 521 <211> 208 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> CD80 v68 ECD <400> 521<223> CD80 v68 ECD <400> 521

Val Ile His Val Thr 1 5Val Ile His Val Thr 1 5

Lys Glu Val Lys GluLys Glu Val Lys Glu

Val Ala Thr Leu SerVal Ala Thr Leu Ser

Gly His Asn Val Ser 20Gly His Asn Val Ser 20

Val Glu Glu Leu AlaVal Glu Glu Leu Ala

Gln Thr Arg Ile Tyr 30Gln Thr Arg Ile Tyr 30

Gln Lys Glu Lys Lys 35Gln Lys Glu Lys Lys 35

Met Val Leu Thr MetMet Val Leu Thr Met

Met Ser Gly Asp Met 45Met Ser Gly Asp Met 45

Ile Trp Pro Gly Tyr 50Ile Trp Pro Gly Tyr 50

Lys Asn Arg Thr Ile 55Lys Asn Arg Thr Ile 55

Phe Asp Ile Thr Asn 60Phe Asp Ile Thr Asn 60

Leu Ser Ile Val Ile 65Leu Ser Ile Val Ile 65

Gln Ala Leu Arg Pro 70Gln Ala Leu Arg Pro 70

Ser Asp Glu Gly Thr 75Ser Asp Glu Gly Thr 75

CysCys

TrpTrp

AsnAsn

AsnAsn

Tyr 80Tyr 80

HisHis

Glu Cys Val Val LeuGlu Cys Val Val Leu

Lys Tyr Glu Lys AspLys Tyr Glu Lys Asp

Gly Phe Lys Arg GluGly Phe Lys Arg Glu

- 706 044346- 706 044346

Leu Ala Glu Val Thr Leu Ser ValLeu Ala Glu Val Thr Leu Ser Val

100100

Lys Ala Asn Phe Pro Thr Pro SerLys Ala Asn Phe Pro Thr Pro Ser

105 110105 110

Ile Ser Asp Phe Glu Val Pro SerIle Ser Asp Phe Glu Val Pro Ser

115 120115 120

Ser Asn Ile Arg Arg Ile Ile CysSer Asn Ile Arg Arg Ile Ile Cys

125125

Ser Ala Ser Gly Gly Phe Pro GluSer Ala Ser Gly Gly Phe Pro Glu

130 135130 135

Pro His Leu Ser Trp Leu Glu AsnPro His Leu Ser Trp Leu Glu Asn

140140

Gly Glu Glu Leu Asn Ala Ile AsnGly Glu Glu Leu Asn Ala Ile Asn

145 150145 150

Thr Thr Val Ser Gln Asp Pro GluThr Thr Val Ser Gln Asp Pro Glu

155 160155 160

Thr Glu Leu Tyr Ala Val Ser SerThr Glu Leu Tyr Ala Val Ser Ser

165165

Glu Leu Asp Phe Asn Met Thr ThrGlu Leu Asp Phe Asn Met Thr Thr

170 175170 175

Asn His Ser Phe Met Cys Leu IleAsn His Ser Phe Met Cys Leu Ile

180180

Lys Tyr Gly His Leu Arg Val AsnLys Tyr Gly His Leu Arg Val Asn

185 190185 190

Gln Thr Phe Asn Trp Asn Thr ThrGln Thr Phe Asn Trp Asn Thr Thr

195 200195 200

Lys Gln Glu His Phe Pro Asp AsnLys Gln Glu His Phe Pro Asp Asn

205 <210> 522 <211> 208 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>205 <210> 522 <211> 208 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> CD80 v69 ECD <400> 522<223> CD80 v69 ECD <400> 522

Val Ile His Val 1Val Ile His Val 1

Thr Lys Glu 5Thr Lys Glu 5

Val Lys Glu Val Ala Thr Leu Ser CysVal Lys Glu Val Ala Thr Leu Ser Cys

1515

Gly His Asn Val 20Gly His Asn Val 20

Ser Val GluSer Val Glu

Glu Leu Ala Gln Thr Arg Ile Tyr TrpGlu Leu Ala Gln Thr Arg Ile Tyr Trp

30thirty

Gln Lys Glu LysGln Lys Glu Lys

Glu Met ValGlu Met Val

Leu Thr Met Met Ser Gly Asp Met Asn 40 45Leu Thr Met Met Ser Gly Asp Met Asn 40 45

Ile Trp Pro Glu 50Ile Trp Pro Glu 50

Tyr Lys AsnTyr Lys Asn

Arg Thr Ile Ser Asp Ile Thr Asn Asn 60Arg Thr Ile Ser Asp Ile Thr Asn Asn 60

Leu Ser Ile Val 65Leu Ser Ile Val 65

Ile Gln AlaIle Gln Ala

Leu Arg Pro Ser Asp Glu Gly Thr Tyr 75 80Leu Arg Pro Ser Asp Glu Gly Thr Tyr 75 80

Glu Cys Val Val Leu Lys Tyr Glu 85Glu Cys Val Val Leu Lys Tyr Glu 85

Lys Asp Gly Phe Lys Arg Glu HisLys Asp Gly Phe Lys Arg Glu His

9595

- 707 044346- 707 044346

Leu Ala Glu Val ThrLeu Ala Glu Val Thr

100100

Leu Ser Val Lys AlaLeu Ser Val Lys Ala

105105

Asp Phe Pro Thr ProAsp Phe Pro Thr Pro

110110

Ile Ser Asp Phe Glu 115Ile Ser Asp Phe Glu 115

Val Pro Ser Ser AsnVal Pro Ser Ser Asn

120120

Ile Arg Arg Ile IleIle Arg Arg Ile Ile

125125

Ser Ala Ser Gly Gly 130Ser Ala Ser Gly Gly 130

Phe Pro Glu Pro HisPhe Pro Glu Pro His

135135

Leu Ser Trp Leu Glu 140Leu Ser Trp Leu Glu 140

Gly Glu Glu Leu Asn 145Gly Glu Glu Leu Asn 145

Ala Ile Asn Thr Thr 150Ala Ile Asn Thr Thr 150

Val Ser Gln Asp Pro 155Val Ser Gln Asp Pro 155

Thr Glu Leu Tyr AlaThr Glu Leu Tyr Ala

165165

Val Ser Ser Lys LeuVal Ser Ser Lys Leu

170170

Asp Phe Asn Met ThrAsp Phe Asn Met Thr

175175

Asn His Ser Phe MetAsn His Ser Phe Met

180180

Cys Leu Ile Glu TyrCys Leu Ile Glu Tyr

185185

Gly His Leu Arg ValGly His Leu Arg Val

190190

Gln Thr Phe Asn Trp 195Gln Thr Phe Asn Trp 195

Asn Thr Thr Lys Gln 200Asn Thr Thr Lys Gln 200

Glu His Phe Pro AspGlu His Phe Pro Asp

205205

SerSer

CysCys

AsnAsn

Glu 160Glu 160

ThrThr

AsnAsn

Asn <210> 523 <211> 208 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Asn <210> 523 <211> 208 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> CD80 v70 ECD <400> 523<223> CD80 v70 ECD <400> 523

Val Ile His Val Thr 1 5Val Ile His Val Thr 1 5

Lys Glu Val Lys GluLys Glu Val Lys Glu

Val Ala Thr Leu SerVal Ala Thr Leu Ser

Gly His Asn Val Ser 20Gly His Asn Val Ser 20

Val Glu Glu Leu AlaVal Glu Glu Leu Ala

Gln Thr Arg Ile TyrGln Thr Arg Ile Tyr

Gln Lys Glu Lys Lys 35Gln Lys Glu Lys Lys 35

Met Val Leu Thr MetMet Val Leu Thr Met

Met Ser Gly Asp Met 45Met Ser Gly Asp Met 45

Ile Trp Pro Glu Tyr 50Ile Trp Pro Glu Tyr 50

Lys Asn Arg Thr Ile 55Lys Asn Arg Thr Ile 55

Phe Val Ile Thr Asn 60Phe Val Ile Thr Asn 60

Leu Ser Ile Val Ile 65Leu Ser Ile Val Ile 65

Leu Ala Leu Arg Pro 70Leu Ala Leu Arg Pro 70

Ser Asp Glu Gly Thr 75Ser Asp Glu Gly Thr 75

Glu Cys Val Val Leu 85Glu Cys Val Val Leu 85

Lys Tyr Glu Lys Asp 90Lys Tyr Glu Lys Asp 90

CysCys

TrpTrp

AsnAsn

AsnAsn

Tyr 80Tyr 80

HisHis

Gly Phe Lys Arg GluGly Phe Lys Arg Glu

- 708 044346- 708 044346

Leu Ala Glu Val Thr Leu Ser ValLeu Ala Glu Val Thr Leu Ser Val

100100

Lys Ala Asp Phe Pro Thr Pro SerLys Ala Asp Phe Pro Thr Pro Ser

105 110105 110

Ile Ser Asp Phe Glu Val Pro SerIle Ser Asp Phe Glu Val Pro Ser

115 120115 120

Ser Asn Ile Arg Arg Ile Ile CysSer Asn Ile Arg Arg Ile Ile Cys

125125

Ser Ala Ser Gly Gly Phe Pro GluSer Ala Ser Gly Gly Phe Pro Glu

130 135130 135

Pro His Leu Ser Trp Leu Glu AsnPro His Leu Ser Trp Leu Glu Asn

140140

Gly Glu Glu Leu Asn Ala Ile AsnGly Glu Glu Leu Asn Ala Ile Asn

145 150145 150

Thr Thr Val Ser Gln Asp Pro GluThr Thr Val Ser Gln Asp Pro Glu

155 160155 160

Thr Glu Leu Tyr Ala Val Ser SerThr Glu Leu Tyr Ala Val Ser Ser

165165

Glu Leu Asp Phe Asn Met Thr ThrGlu Leu Asp Phe Asn Met Thr Thr

170 175170 175

Asn His Ser Phe Met Cys Leu Ile 180Asn His Ser Phe Met Cys Leu Ile 180

Lys Tyr Gly His Leu Arg Val AsnLys Tyr Gly His Leu Arg Val Asn

185 190185 190

Gln Thr Phe Asn Trp Asn Thr ThrGln Thr Phe Asn Trp Asn Thr Thr

195 200195 200

Lys Gln Glu His Phe Pro Asp AsnLys Gln Glu His Phe Pro Asp Asn

205 <210> 524 <211> 208 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>205 <210> 524 <211> 208 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> CD80 v71 ECD <400> 524<223> CD80 v71 ECD <400> 524

Val Ile His Val 1Val Ile His Val 1

Thr Lys 5Thr Lys 5

Glu Val Lys Glu Val Ala Thr Leu Ser CysGlu Val Lys Glu Val Ala Thr Leu Ser Cys

1515

Gly His Asn Val 20Gly His Asn Val 20

Ser ValSer Val

Glu Glu Leu Ala Gln Thr Arg Ile Tyr TrpGlu Glu Leu Ala Gln Thr Arg Ile Tyr Trp

30thirty

Gln Lys Glu LysGln Lys Glu Lys

Lys MetLys Met

Val Leu Thr Met Met Ser Gly Asp Met AsnVal Leu Thr Met Met Ser Gly Asp Met Asn

4545

Ile Trp Pro Glu 50Ile Trp Pro Glu 50

Tyr MetTyr Met

Asn Arg Thr Ile Phe Asp Ile Thr Asn Asn 55 60Asn Arg Thr Ile Phe Asp Ile Thr Asn Asn 55 60

Leu Ser Ile Val 65Leu Ser Ile Val 65

Ile GlnIle Gln

Ala Leu Arg Pro Ser Asp Glu Gly Thr Tyr 75 80Ala Leu Arg Pro Ser Asp Glu Gly Thr Tyr 75 80

Glu Cys Val Val Leu Lys Tyr Glu 85Glu Cys Val Val Leu Lys Tyr Glu 85

Lys Asp Gly Phe Lys Arg Glu HisLys Asp Gly Phe Lys Arg Glu His

9595

- 709 044346- 709 044346

Leu Ala Glu Val ThrLeu Ala Glu Val Thr

100100

Leu Ser Val Lys AlaLeu Ser Val Lys Ala

105105

Asp Phe Pro Thr ProAsp Phe Pro Thr Pro

110110

Ile Ser Asp Phe Glu 115Ile Ser Asp Phe Glu 115

Ile Pro Thr Ser AsnIle Pro Thr Ser Asn

120120

Ile Arg Arg Ile IleIle Arg Arg Ile Ile

125125

Ser Thr Ser Gly Gly 130Ser Thr Ser Gly Gly 130

Phe Pro Glu Pro HisPhe Pro Glu Pro His

135135

Leu Ser Trp Leu Glu 140Leu Ser Trp Leu Glu 140

Gly Glu Glu Leu Asn 145Gly Glu Glu Leu Asn 145

Ala Ile Asn Thr Thr 150Ala Ile Asn Thr Thr 150

Val Ser Gln Asp Pro 155Val Ser Gln Asp Pro 155

Thr Glu Leu His AlaThr Glu Leu His Ala

165165

Val Ser Ser Lys LeuVal Ser Ser Lys Leu

170170

Asp Phe Asn Met ThrAsp Phe Asn Met Thr

175175

Asn His Ser Phe MetAsn His Ser Phe Met

180180

Cys Leu Ile Lys TyrCys Leu Ile Lys Tyr

185185

Gly Asp Leu Arg ValGly Asp Leu Arg Val

190190

Gln Thr Phe Asn Trp 195Gln Thr Phe Asn Trp 195

Asn Thr Thr Lys Gln 200Asn Thr Thr Lys Gln 200

Glu His Phe Pro AspGlu His Phe Pro Asp

205205

SerSer

CysCys

AsnAsn

Glu 160Glu 160

ThrThr

AsnAsn

Asn <210> 525 <211> 208 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Asn <210> 525 <211> 208 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> CD80 <400> 525<223> CD80 <400> 525

Val Ile His 1Val Ile His 1

Gly His AsnGly His Asn

Gln Lys Glu 35Gln Lys Glu 35

Ile Trp Pro 50Ile Trp Pro 50

Leu Ser Ile 65 v72 ECDLeu Ser Ile 65 v72 ECD

Val Thr Lys 5Val Thr Lys 5

Val Ser Val 20Val Ser Val 20

Lys Lys ThrLys Lys Thr

Glu Tyr LysGlu Tyr Lys

Val Ile Gln 70Val Ile Gln 70

Glu Val LysGlu Val Lys

Glu Val Ala 10Glu Val Ala 10

Thr Leu SerThr Leu Ser

Glu Cys Val ValGlu Cys Val Val

Glu Glu LeuGlu Glu Leu

Ala Gln ThrAla Gln Thr

Arg Ile Tyr 30Arg Ile Tyr 30

Val Leu ThrVal Leu Thr

Asn Arg Thr 55Asn Arg Thr 55

Ala Leu ArgAla Leu Arg

Met Met SerMet Met Ser

Gly Asp Met 45Gly Asp Met 45

Ile Phe AspIle Phe Asp

Ile Thr AsnIle Thr Asn

Pro Ser AspPro Ser Asp

Gly Gly ThrGly Gly Thr

Leu Lys Tyr Glu Lys Asp Gly Phe Lys Arg Glu 85 90 95Leu Lys Tyr Glu Lys Asp Gly Phe Lys Arg Glu 85 90 95

Thr Leu Ser Val Lys Ala Asp Phe Pro Thr ProThr Leu Ser Val Lys Ala Asp Phe Pro Thr Pro

CysCys

TrpTrp

AsnAsn

AsnAsn

Tyr 80Tyr 80

HisHis

SerSer

Leu Ala Glu ValLeu Ala Glu Val

- 710 044346- 710 044346

100100

105105

110110

Ile Ser Asp Phe Glu 115Ile Ser Asp Phe Glu 115

Val Pro Ser Ser AsnVal Pro Ser Ser Asn

120120

Ile Arg Arg Ile IleIle Arg Arg Ile Ile

125125

Ser Ala Ser Gly Gly 130Ser Ala Ser Gly Gly 130

Phe Pro Glu Pro HisPhe Pro Glu Pro His

135135

Leu Ser Trp Leu Glu 140Leu Ser Trp Leu Glu 140

Gly Glu Glu Leu Asn 145Gly Glu Glu Leu Asn 145

Ala Ile Thr Thr Thr 150Ala Ile Thr Thr Thr 150

Val Ser Gln Asp Pro 155Val Ser Gln Asp Pro 155

Thr Glu Leu Tyr AlaThr Glu Leu Tyr Ala

165165

Val Ser Ser Lys LeuVal Ser Ser Lys Leu

170170

Asp Phe Asn Met ThrAsp Phe Asn Met Thr

175175

Asn His Ser Phe MetAsn His Ser Phe Met

180180

Cys Leu Ile Lys TyrCys Leu Ile Lys Tyr

185185

Gly His Leu Arg ValGly His Leu Arg Val

190190

Gln Thr Phe Asn Trp 195Gln Thr Phe Asn Trp 195

Asn Thr Thr Lys Gln 200Asn Thr Thr Lys Gln 200

Glu His Phe Pro AspGlu His Phe Pro Asp

205205

CysCys

AsnAsn

Glu 160Glu 160

ThrThr

AsnAsn

Asn <210> 526 <211> 208 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Asn <210> 526 <211> 208 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223><223>

CD80 v73CD80 v73

ECD <400>ECD <400>

526526

Val 1Val 1

IleIle

HisHis

ValVal

Thr 5Thr 5

LysLys

GluGlu

ValVal

LysLys

Glu 10Glu 10

ValVal

AlaAla

ThrThr

LeuLeu

Ser 15Ser 15

GlyGly

HisHis

AsnAsn

Val 20Val 20

SerSer

ValVal

GluGlu

GluGlu

Leu 25Leu 25

AlaAla

GlnGln

ThrThr

ArgArg

Ile 30Ile 30

HisHis

GlnGln

LysLys

Glu 35Glu 35

LysLys

LysLys

MetMet

ValVal

Leu 40Leu 40

GlyGly

MetMet

LeuLeu

SerSer

Gly 45Gly 45

AspAsp

MetMet

IleIle

Trp 50Trp 50

ProPro

GluGlu

TyrTyr

LysLys

Asn 55Asn 55

ArgArg

ThrThr

IleIle

PhePhe

Asp 60Asp 60

IleIle

ThrThr

AsnAsn

Leu 65Leu 65

SerSer

IleIle

ValVal

IleIle

Gln 70Gln 70

AlaAla

LeuLeu

ArgArg

ProPro

Ser 75Ser 75

AspAsp

GluGlu

GlyGly

ThrThr

GluGlu

CysCys

ValVal

ValVal

Leu 85Leu 85

LysLys

TyrTyr

GluGlu

LysLys

Asp 90Asp 90

GlyGly

PhePhe

LysLys

ArgArg

Glu 95Glu 95

ValVal

100100

ThrThr

LeuLeu

SerSer

ValVal

Lys 105Lys 105

AlaAla

AspAsp

PhePhe

ProPro

ThrThr

110110

ProPro

CysCys

TrpTrp

AsnAsn

AsnAsn

Tyr 80Tyr 80

HisHis

SerSer

LeuLeu

AlaAla

GluGlu

- 711 044346- 711 044346

Ile Ser AspIle Ser Asp

115115

Ser Ala SerSer Ala Ser

130130

Gly Glu Glu 145Gly Glu Glu 145

Thr Glu LeuThr Glu Leu

Asn His SerAsn His Ser

Gln Thr PheGln Thr Phe

195195

Phe Glu ValPhe Glu Val

Gly Gly PheGly Gly Phe

Leu Asn Ala 150Leu Asn Ala 150

Tyr Ala Val 165Tyr Ala Val 165

Phe Met Cys 180Phe Met Cys 180

Asn Trp AsnAsn Trp Asn

Pro Ser SerPro Ser Ser

120120

Pro Glu Pro 135Pro Glu Pro 135

Ile Asn ThrIle Asn Thr

Ser Ser LysSer Ser Lys

Leu Ile LysLeu Ile Lys

185185

Thr Thr LysThr Thr Lys

200200

Asn Ile ArgAsn Ile Arg

His Leu Ser 140His Leu Ser 140

Thr Val Ser 155Thr Val Ser 155

Leu Asp Phe 170Leu Asp Phe 170

Tyr Gly HisTyr Gly His

Gln Glu HisGln Glu His

Arg Val Ile 125Arg Val Ile 125

Trp Leu GluTrp Leu Glu

Gln Asp ProGln Asp Pro

Asn Met ThrAsn Met Thr

175175

Leu Arg ValLeu Arg Val

190190

Phe Pro Asp 205Phe Pro Asp 205

CysCys

AsnAsn

Glu 160Glu 160

ThrThr

AsnAsn

Asn <210> 527 <211> 208 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Asn <210> 527 <211> 208 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> CD80 v74 ECD <400> 527<223> CD80 v74 ECD <400> 527

Val Ile His Val Thr 1 5Val Ile His Val Thr 1 5

Lys Glu Val Lys GluLys Glu Val Lys Glu

Val Ala Thr Leu SerVal Ala Thr Leu Ser

Gly His Asn Val Ser 20Gly His Asn Val Ser 20

Val Glu Glu Leu AlaVal Glu Glu Leu Ala

Gln Thr Arg Ile Tyr 30Gln Thr Arg Ile Tyr 30

Gln Lys Glu Lys Lys 35Gln Lys Glu Lys Lys 35

Met Val Leu Thr MetMet Val Leu Thr Met

Met Ser Gly Asp Met 45Met Ser Gly Asp Met 45

Ile Trp Pro Glu Tyr 50Ile Trp Pro Glu Tyr 50

Lys Asn Arg Thr Ile 55Lys Asn Arg Thr Ile 55

Phe Asp Ile Thr Asn 60Phe Asp Ile Thr Asn 60

His Ser Ile Val Ile 65His Ser Ile Val Ile 65

Leu Ala Leu Arg Pro 70Leu Ala Leu Arg Pro 70

Ser Asp Glu Gly Thr 75Ser Asp Glu Gly Thr 75

Glu Cys Val Val Leu 85Glu Cys Val Val Leu 85

Lys Tyr Glu Lys Gly 90Lys Tyr Glu Lys Gly 90

Ala Phe Lys Arg Glu 95Ala Phe Lys Arg Glu 95

Leu Ala Glu Val Thr Leu Ser ValLeu Ala Glu Val Thr Leu Ser Val

100100

Lys Ala Asp Phe Pro Ala ProLys Ala Asp Phe Pro Ala Pro

105 110105 110

CysCys

TrpTrp

AsnAsn

AsnAsn

Tyr 80Tyr 80

HisHis

SerSer

- 712 044346- 712 044346

Ile Ser Asp Leu Glu 115Ile Ser Asp Leu Glu 115

Ile Pro Thr Ser AsnIle Pro Thr Ser Asn

120120

Ile Arg Arg Ile IleIle Arg Arg Ile Ile

125125

Ser Thr Ser Gly Gly 130Ser Thr Ser Gly Gly 130

Phe Pro Glu Pro HisPhe Pro Glu Pro His

135135

Leu Ser Trp Leu Glu 140Leu Ser Trp Leu Glu 140

Gly Glu Glu Leu Asn 145Gly Glu Glu Leu Asn 145

Ala Ile Asn Thr Thr 150Ala Ile Asn Thr Thr 150

Val Ser Gln Asp Pro 155Val Ser Gln Asp Pro 155

Thr Glu Leu Tyr AlaThr Glu Leu Tyr Ala

165165

Val Ser Ser Lys LeuVal Ser Ser Lys Leu

170170

Asp Phe Asn Met ThrAsp Phe Asn Met Thr

175175

Asn His Ser Phe MetAsn His Ser Phe Met

180180

Cys Leu Ile Lys TyrCys Leu Ile Lys Tyr

185185

Gly His Leu Arg ValGly His Leu Arg Val

190190

Gln Thr Phe Asn Trp 195Gln Thr Phe Asn Trp 195

Asn Thr Thr Lys Gln 200Asn Thr Thr Lys Gln 200

Glu His Phe Pro AspGlu His Phe Pro Asp

205205

CysCys

AsnAsn

Glu 160Glu 160

ThrThr

AsnAsn

Asn <210> 528 <211> 208 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Asn <210> 528 <211> 208 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> CD80 v75 ECD <400> 528<223> CD80 v75 ECD <400> 528

Val Ile His Val Thr 1 5Val Ile His Val Thr 1 5

Lys Glu Val Lys GluLys Glu Val Lys Glu

Val Ala Thr Leu SerVal Ala Thr Leu Ser

Gly His Asn Val Ser 20Gly His Asn Val Ser 20

Val Glu Glu Leu AlaVal Glu Glu Leu Ala

Gln Thr His Ile Tyr 30Gln Thr His Ile Tyr 30

Gln Lys Glu Lys Lys 35Gln Lys Glu Lys Lys 35

Met Val Leu Thr MetMet Val Leu Thr Met

Met Ser Gly Asp Met 45Met Ser Gly Asp Met 45

Ile Trp Pro Gly Tyr 50Ile Trp Pro Gly Tyr 50

Lys Asn Arg Thr Ile 55Lys Asn Arg Thr Ile 55

Phe Asp Ile Thr Asn 60Phe Asp Ile Thr Asn 60

Leu Ser Ile Val Ile 65Leu Ser Ile Val Ile 65

Leu Ala Leu Arg Pro 70Leu Ala Leu Arg Pro 70

Ser Asp Glu Gly Thr 75Ser Asp Glu Gly Thr 75

Glu Cys Val Val Leu Lys Tyr Glu 85Glu Cys Val Val Leu Lys Tyr Glu 85

Leu Ala Glu Val Thr Leu Ser Val 100Leu Ala Glu Val Thr Leu Ser Val 100

Lys Asn Ala Phe Lys Arg GluLys Asn Ala Phe Lys Arg Glu

9595

Lys Ala Asp Phe Pro Thr ProLys Ala Asp Phe Pro Thr Pro

105 110105 110

CysCys

TrpTrp

AsnAsn

AsnAsn

Tyr 80Tyr 80

HisHis

SerSer

- 713 044346- 713 044346

Ile Ser Asp Phe Glu 115Ile Ser Asp Phe Glu 115

Val Pro Ser Ser AsnVal Pro Ser Ser Asn

120120

Ile Arg Arg Ile IleIle Arg Arg Ile Ile

125125

Ser Ala Ser Gly GlySer Ala Ser Gly Gly

130130

Phe Pro Glu Pro HisPhe Pro Glu Pro His

135135

Leu Ser Trp Leu Glu 140Leu Ser Trp Leu Glu 140

Gly Glu Glu Leu Asn 145Gly Glu Glu Leu Asn 145

Ala Ile Asn Thr Thr 150Ala Ile Asn Thr Thr 150

Val Ser Gln Asp Pro 155Val Ser Gln Asp Pro 155

Thr Glu Leu Tyr AlaThr Glu Leu Tyr Ala

165165

Val Ser Ser Lys LeuVal Ser Ser Lys Leu

170170

Asp Phe Asn Met ThrAsp Phe Asn Met Thr

175175

Asn His Ser Phe MetAsn His Ser Phe Met

180180

Cys Leu Ile Lys TyrCys Leu Ile Lys Tyr

185185

Gly His Leu Arg ValGly His Leu Arg Val

190190

Gln Thr Phe Asn Trp 195Gln Thr Phe Asn Trp 195

Asn Thr Thr Lys Gln 200Asn Thr Thr Lys Gln 200

Glu His Phe Pro AspGlu His Phe Pro Asp

205205

CysCys

AsnAsn

Glu 160Glu 160

ThrThr

AsnAsn

Asn <210> 529 <211> 208 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Asn <210> 529 <211> 208 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> CD80 v76 ECD <400> 529<223> CD80 v76 ECD <400> 529

Val Ile His Val Thr 1 5Val Ile His Val Thr 1 5

Lys Glu Val Lys GluLys Glu Val Lys Glu

Val Ala Thr Leu SerVal Ala Thr Leu Ser

Gly His Asn Val Ser 20Gly His Asn Val Ser 20

Val Glu Glu Leu AlaVal Glu Glu Leu Ala

Gln Thr His Ile Tyr 30Gln Thr His Ile Tyr 30

Gln Lys Glu Lys Lys 35Gln Lys Glu Lys Lys 35

Met Val Leu Thr MetMet Val Leu Thr Met

Met Ser Gly Asp Met 45Met Ser Gly Asp Met 45

Ile Trp Pro Gly Tyr 50Ile Trp Pro Gly Tyr 50

Lys Asn Arg Thr Ile 55Lys Asn Arg Thr Ile 55

Phe Asp Ile Thr Asn 60Phe Asp Ile Thr Asn 60

Leu Ser Ile Val Ile 65Leu Ser Ile Val Ile 65

Leu Ala Leu Arg Pro 70Leu Ala Leu Arg Pro 70

Ser Asp Glu Gly Thr 75Ser Asp Glu Gly Thr 75

Glu Cys Val Val Leu 85Glu Cys Val Val Leu 85

Lys Tyr Glu Lys Asn 90Lys Tyr Glu Lys Asn 90

Ala Phe Lys Arg Glu 95Ala Phe Lys Arg Glu 95

Leu Ala Glu Val ThrLeu Ala Glu Val Thr

100100

Leu Ser Val Lys AlaLeu Ser Val Lys Ala

105105

Asp Phe Pro Thr ProAsp Phe Pro Thr Pro

110110

CysCys

TrpTrp

AsnAsn

AsnAsn

Tyr 80Tyr 80

HisHis

SerSer

CysCys

Ile Ser Asp Phe Glu Val Pro SerIle Ser Asp Phe Glu Val Pro Ser

Ser Asn Ile Arg Arg Ile IleSer Asn Ile Arg Arg Ile Ile

- 714 044346- 714 044346

115115

120120

125125

Ser Ala Ser Gly Gly 130Ser Ala Ser Gly Gly 130

Phe Pro Glu Pro HisPhe Pro Glu Pro His

135135

Leu Ser Trp Leu Glu 140Leu Ser Trp Leu Glu 140

Gly Glu Glu Leu Asn 145Gly Glu Glu Leu Asn 145

Ala Ile Asn Thr Thr 150Ala Ile Asn Thr Thr 150

Val Ser Gln Asp Pro 155Val Ser Gln Asp Pro 155

Thr Glu Leu Tyr AlaThr Glu Leu Tyr Ala

165165

Val Ser Ser Lys LeuVal Ser Ser Lys Leu

170170

Asp Phe Asn Met ThrAsp Phe Asn Met Thr

175175

Asn His Ser Phe MetAsn His Ser Phe Met

180180

Cys Leu Ile Lys TyrCys Leu Ile Lys Tyr

185185

Gly His Leu Arg ValGly His Leu Arg Val

190190

Gln Thr Phe Asn TrpGln Thr Phe Asn Trp

195195

Asn Thr Thr Lys Gln 200Asn Thr Thr Lys Gln 200

Glu His Phe Pro Asp 205Glu His Phe Pro Asp 205

AsnAsn

Glu 160Glu 160

ThrThr

AsnAsn

Asn <210> 530 <211> 208 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Asn <210> 530 <211> 208 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> CD80 v77 ECD <400> 530<223> CD80 v77 ECD <400> 530

Val Ile His Val 1Val Ile His Val 1

Thr Lys Glu Val Lys Glu Val Ala Thr Leu Ser 5 10 15Thr Lys Glu Val Lys Glu Val Ala Thr Leu Ser 5 10 15

Gly His Asn Val 20Gly His Asn Val 20

Ser Val Glu Glu Leu Ala Gln Thr Arg Ile Tyr 25 30Ser Val Glu Glu Leu Ala Gln Thr Arg Ile Tyr 25 30

Gln Lys Glu Lys 35Gln Lys Glu Lys 35

Lys Met Val Leu Thr Met Met Ser Gly Asp MetLys Met Val Leu Thr Met Met Ser Gly Asp Met

4545

Ile Trp Pro Glu 50Ile Trp Pro Glu 50

Tyr Lys Asn Arg Thr Ile Phe Asp Ile Thr Asn 55 60Tyr Lys Asn Arg Thr Ile Phe Asp Ile Thr Asn 55 60

Leu Ser Thr Val 65Leu Ser Thr Val 65

Ile Gln Ala Leu Arg Pro Ser Asp Glu Gly ThrIle Gln Ala Leu Arg Pro Ser Asp Glu Gly Thr

7575

Glu Cys Val ValGlu Cys Val Val

Leu Lys Tyr Glu Lys Asp Gly Phe Lys Arg Glu 85 90 95Leu Lys Tyr Glu Lys Asp Gly Phe Lys Arg Glu 85 90 95

Leu Ala Glu ValLeu Ala Glu Val

100100

Thr Leu Ser Val Lys Ala Asp Phe Pro Thr ProThr Leu Ser Val Lys Ala Asp Phe Pro Thr Pro

105 110105 110

Ile Ser Asp Phe Glu Val Pro Ser Ser Asn Ile Arg Arg Ile IleIle Ser Asp Phe Glu Val Pro Ser Ser Asn Ile Arg Arg Ile Ile

115 120 125115 120 125

CysCys

TrpTrp

AsnAsn

AsnAsn

Tyr 80Tyr 80

HisHis

SerSer

CysCys

- 715 044346- 715 044346

Ser Thr Ser Gly Gly 130Ser Thr Ser Gly Gly 130

Phe Pro Glu Pro HisPhe Pro Glu Pro His

135135

Leu Ser Trp Leu Glu 140Leu Ser Trp Leu Glu 140

Gly Glu Glu Leu Asn 145Gly Glu Glu Leu Asn 145

Ala Ile Asn Thr Thr 150Ala Ile Asn Thr Thr 150

Val Ser Gln Asp Pro 155Val Ser Gln Asp Pro 155

Thr Glu Leu Tyr AlaThr Glu Leu Tyr Ala

165165

Val Ser Ser Lys LeuVal Ser Ser Lys Leu

170170

Asp Phe Asn Met ThrAsp Phe Asn Met Thr

175175

Asn His Ser Phe MetAsn His Ser Phe Met

180180

Cys Leu Ile Lys TyrCys Leu Ile Lys Tyr

185185

Gly His Leu Arg ValGly His Leu Arg Val

190190

Gln Thr Phe His Trp 195Gln Thr Phe His Trp 195

Asn Thr Thr Lys Gln 200Asn Thr Thr Lys Gln 200

Glu His Phe Pro AspGlu His Phe Pro Asp

205205

AsnAsn

Glu 160Glu 160

ThrThr

AsnAsn

Asn <210> 531 <211> 208 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Asn <210> 531 <211> 208 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> CD80 v78 ECD <400> 531<223> CD80 v78 ECD <400> 531

Val Ile His Val Thr 1 5Val Ile His Val Thr 1 5

Lys Glu Val Lys GluLys Glu Val Lys Glu

Val Ala Thr Leu SerVal Ala Thr Leu Ser

Gly His Asn Val Ser 20Gly His Asn Val Ser 20

Val Glu Glu Leu AlaVal Glu Glu Leu Ala

Gln Thr Arg Ile Tyr 30Gln Thr Arg Ile Tyr 30

Gln Lys Glu Lys Lys 35Gln Lys Glu Lys Lys 35

Met Val Leu Thr MetMet Val Leu Thr Met

Met Ser Gly Asp Met 45Met Ser Gly Asp Met 45

Ile Trp Pro Glu Tyr 50Ile Trp Pro Glu Tyr 50

Lys Asn Arg Thr Ile 55Lys Asn Arg Thr Ile 55

Phe Asp Ile Thr Asn 60Phe Asp Ile Thr Asn 60

Leu Ser Ile Val Ile 65Leu Ser Ile Val Ile 65

Gln Ala Leu Arg Pro 70Gln Ala Leu Arg Pro 70

Ser Asp Glu Gly Thr 75Ser Asp Glu Gly Thr 75

Glu Cys Val Val Leu 85Glu Cys Val Val Leu 85

Lys Tyr Glu Lys Asp 90Lys Tyr Glu Lys Asp 90

Gly Phe Lys Arg Glu 95Gly Phe Lys Arg Glu 95

Leu Ala Glu Val ThrLeu Ala Glu Val Thr

100100

Leu Ser Val Lys AlaLeu Ser Val Lys Ala

105105

Asp Phe Pro Ala ProAsp Phe Pro Ala Pro

110110

Ile Ser Asp Phe Glu 115Ile Ser Asp Phe Glu 115

Val Pro Ser Ser AsnVal Pro Ser Ser Asn

120120

Ile Arg Arg Ile IleIle Arg Arg Ile Ile

125125

CysCys

TrpTrp

AsnAsn

AsnAsn

Tyr 80Tyr 80

HisHis

SerSer

CysCys

- 716 044346- 716 044346

Ser Ser Ala 130 Ala 130 Ser Ser Gly Gly Gly Gly Phe Phe Pro 135 Pro 135 Glu Glu Pro Pro His His Leu Leu Ser 140 Ser 140 Trp Trp Leu Leu Glu Glu Gly 145 Gly 145 Glu Glu Glu Glu Leu Leu Asn Asn Ala 150 Ala 150 Ile Ile Asn Asn Thr Thr Thr Thr Val 155 Val 155 Ser Ser Gln Gln Asp Asp Pro Pro Thr Thr Glu Glu Leu Leu Tyr Tyr Ala 165 Ala 165 Val Val Ser Ser Ser Ser Lys Lys Leu 170 Leu 170 Asp Asp Phe Phe Asn Asn Met Met Thr 175 Thr 175 Asn Asn His His Ser Ser Phe 180 Phe 180 Met Met Cys Cys Leu Leu Ile Ile Lys 185 Lys 185 Tyr Tyr Gly Gly His His Leu Leu Arg 190 Arg 190 Val Val Gln Gln Thr Thr Phe 195 Phe 195 Asn Asn Trp Trp Asn Asn Thr Thr Thr 200 Thr 200 Lys Lys Gln Gln Glu Glu His His Phe 205 Phe 205 Pro Pro Asp Asp

AsnAsn

Glu 160Glu 160

ThrThr

AsnAsn

Asn <210> 532 <211> 208 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Asn <210> 532 <211> 208 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> CD80 <400> 532<223> CD80 <400> 532

Val Ile His 1Val Ile His 1

Gly His AsnGly His Asn

Gln Lys GluGln Lys Glu

Ile Gly Pro 50Ile Gly Pro 50

Leu Ser Ile 65 v79 ECDLeu Ser Ile 65 v79 ECD

Val Thr Lys 5Val Thr Lys 5

Val Ser Val 20Val Ser Val 20

Lys Lys ValLys Lys Val

Glu Tyr LysGlu Tyr Lys

Val Ile Leu 70Val Ile Leu 70

Glu Val LysGlu Val Lys

Glu Glu LeuGlu Glu Leu

Val Leu AspVal Leu Asp

Asn Arg Thr 55Asn Arg Thr 55

Ala Leu ArgAla Leu Arg

Glu Cys Ala Val Leu Lys Tyr Glu 85Glu Cys Ala Val Leu Lys Tyr Glu 85

Leu Ala Glu Val Thr Leu Ser Val 100Leu Ala Glu Val Thr Leu Ser Val 100

Ile Ser Asp Phe Glu Val Pro Ser 115 120Ile Ser Asp Phe Glu Val Pro Ser 115 120

Glu Val Ala 10Glu Val Ala 10

Thr Leu SerThr Leu Ser

Ala Gln ThrAla Gln Thr

Arg Ile Tyr 30Arg Ile Tyr 30

Met Ile SerMet Ile Ser

Gly Asp Met 45Gly Asp Met 45

Ile Phe AspIle Phe Asp

Ile Thr AsnIle Thr Asn

Pro Ser Gly 75Pro Ser Gly 75

Glu Gly ThrGlu Gly Thr

Glu Asp Ala Phe Lys Arg GluGlu Asp Ala Phe Lys Arg Glu

9595

Lys Ala Asp Phe Pro Thr ProLys Ala Asp Phe Pro Thr Pro

105 110105 110

Ser Asn Ile Arg Arg Val IleSer Asn Ile Arg Arg Val Ile

125125

CysCys

TrpTrp

AsnAsn

AsnAsn

Tyr 80Tyr 80

HisHis

SerSer

CysCys

- 717 044346- 717 044346

Ser Ser Ala 130 Ala 130 Ser Ser Gly Gly Gly Gly Phe Phe Pro 135 Pro 135 Glu Glu Pro Pro His His Leu Leu Ser 140 Ser 140 Trp Trp Leu Leu Glu Glu Asn Asn Gly 145 Gly 145 Glu Glu Glu Glu Leu Leu Asn Asn Ala 150 Ala 150 Ile Ile Asn Asn Thr Thr Thr Thr Val 155 Val 155 Ser Ser Gln Gln Asp Asp Pro Pro Glu 160 Glu 160 Thr Thr Glu Glu Leu Leu Tyr Tyr Ala 165 Ala 165 Val Val Ser Ser Ser Ser Lys Lys Leu 170 Leu 170 Asp Asp Phe Phe Asn Asn Met Met Thr 175 Thr 175 Thr Thr Asn Asn His His Ser Ser Phe 180 Phe 180 Met Met Cys Cys Leu Leu Ile Ile Lys 185 Lys 185 Tyr Tyr Gly Gly His His Leu Leu Arg 190 Arg 190 Val Val Asn Asn Gln Gln Thr Thr Phe 195 Phe 195 Asn Asn Trp Trp Asn Asn Thr Thr Thr 200 Thr 200 Lys Lys Gln Gln Glu Glu His His Phe 205 Phe 205 Pro Pro Asp Asp Asn Asn

<210> 533 <211> 208 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220><210> 533 <211> 208 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> CD80 v80 ECD <400> 533<223> CD80 v80 ECD <400> 533

Val Ile His Val 1Val Ile His Val 1

Thr Lys 5Thr Lys 5

Glu Val Lys Glu Val Val Thr Leu Phe CysGlu Val Lys Glu Val Val Thr Leu Phe Cys

1515

Gly His Asn Val 20Gly His Asn Val 20

Ser ValSer Val

Glu Glu Leu Ala Gln Thr Arg Ile His TrpGlu Glu Leu Ala Gln Thr Arg Ile His Trp

30thirty

Gln Lys Glu Lys 35Gln Lys Glu Lys 35

Lys LeuLys Leu

Val Leu Gly Met Leu Ser Gly Asp Met AsnVal Leu Gly Met Leu Ser Gly Asp Met Asn

4545

Ile Trp Pro Glu 50Ile Trp Pro Glu 50

Tyr LysTyr Lys

Asn Arg Thr Ile Phe Asp Ile Thr Asn Asn 55 60Asn Arg Thr Ile Phe Asp Ile Thr Asn Asn 55 60

Leu Ser Ile Val 65Leu Ser Ile Val 65

Ile LeuIle Leu

Ala Leu Arg Pro Ser Asp Glu Gly Thr Tyr 75 80Ala Leu Arg Pro Ser Asp Glu Gly Thr Tyr 75 80

Glu Cys Val ValGlu Cys Val Val

Leu Lys 85Leu Lys 85

Tyr Glu Lys Asn Ala Phe Lys Arg Glu HisTyr Glu Lys Asn Ala Phe Lys Arg Glu His

9595

Leu Ala Glu ValLeu Ala Glu Val

100100

Thr LeuThr Leu

Ser Val Lys Ala Asp Phe Pro Thr Pro SerSer Val Lys Ala Asp Phe Pro Thr Pro Ser

105 110105 110

IleIle

SerSer

AspAsp

115115

PhePhe

GluGlu

IleIle

ProPro

ThrThr

120120

SerSer

AsnAsn

IleIle

ArgArg

Arg 125Arg 125

IleIle

IleIle

CysCys

SerSer

AlaAla

SerSer

GlyGly

GlyGly

PhePhe

ProPro

GluGlu

LeuLeu

HisHis

LeuLeu

SerSer

TrpTrp

LeuLeu

GluGlu

AsnAsn

- 718 044346- 718 044346

Gln Asp ProGln Asp Pro

130130

135135

140140

Gly Glu Glu 145Gly Glu Glu 145

Thr Glu LeuThr Glu Leu

Asn His SerAsn His Ser

Gln Thr Phe 195Gln Thr Phe 195

Leu Asp AlaLeu Asp Ala

150150

Tyr Ala ValTyr Ala Val

165165

Phe Met Cys 180Phe Met Cys 180

Asn Trp AsnAsn Trp Asn

Ile Thr ThrIle Thr Thr

Ser Ser LysSer Ser Lys

Leu Ile Lys 185Leu Ile Lys 185

Thr Thr Lys 200Thr Thr Lys 200

Thr Val SerThr Val Ser

155155

Leu Asp Phe 170Leu Asp Phe 170

Tyr Gly HisTyr Gly His

Gln Glu His <210> 534 <211> 208 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Gln Glu His <210> 534 <211> 208 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> CD80 v81 ECD < 400> 534<223>CD80 v81 ECD <400>534

Val Ile His Val ThrVal Ile His Val Thr

55

Lys Glu Val Lys GluLys Glu Val Lys Glu

Gly His Asn Val Ser 20Gly His Asn Val Ser 20

Val Glu Glu Leu AlaVal Glu Glu Leu Ala

Gln Lys Glu Lys Lys 35Gln Lys Glu Lys Lys 35

Met Val Leu Thr MetMet Val Leu Thr Met

Ile Trp Pro Glu Tyr 50Ile Trp Pro Glu Tyr 50

Lys Asn Arg Thr Ile 55Lys Asn Arg Thr Ile 55

Leu Ser Phe Val Ile 65Leu Ser Phe Val Ile 65

Arg Ala Leu Arg Pro 70Arg Ala Leu Arg Pro 70

Asn Met ThrAsn Met Thr

175175

Leu Arg ValLeu Arg Val

190190

Phe Pro Asp 205Phe Pro Asp 205

Val Ala Thr Leu SerVal Ala Thr Leu Ser

Gln Thr Arg Ile Tyr 30Gln Thr Arg Ile Tyr 30

Met Ser Gly Asp Met 45Met Ser Gly Asp Met 45

Phe Asp Ile Thr Asn 60Phe Asp Ile Thr Asn 60

Ser Asp Glu Gly Thr 75Ser Asp Glu Gly Thr 75

Glu Cys Val Val Leu 85Glu Cys Val Val Leu 85

Lys Tyr Gly Lys Asp 90Lys Tyr Gly Lys Asp 90

Gly Phe Lys Arg Glu 95Gly Phe Lys Arg Glu 95

Leu Ala Glu Val ThrLeu Ala Glu Val Thr

100100

Leu Ser Val Lys AlaLeu Ser Val Lys Ala

105105

Asp Phe Pro Thr ProAsp Phe Pro Thr Pro

110110

Ile Ser Asp Phe Glu 115Ile Ser Asp Phe Glu 115

Val Pro Ser Ser AsnVal Pro Ser Ser Asn

120120

Ile Arg Arg Ile IleIle Arg Arg Ile Ile

125125

Ser Ala Ser Gly Gly 130Ser Ala Ser Gly Gly 130

Phe Pro Glu Pro HisPhe Pro Glu Pro His

135135

Leu Ser Trp Leu Glu 140Leu Ser Trp Leu Glu 140

Glu 160Glu 160

ThrThr

AsnAsn

AsnAsn

CysCys

TrpTrp

AsnAsn

AsnAsn

Tyr 80Tyr 80

HisHis

SerSer

CysCys

AsnAsn

- 719 044346- 719 044346

Gly Glu Glu Leu Asn Ala Ile AsnGly Glu Glu Leu Asn Ala Ile Asn

145 150145 150

Thr Thr Val Ser Gln Asp Pro 155Thr Thr Val Ser Gln Asp Pro 155

Thr Glu Leu Tyr Ala Val Ser SerThr Glu Leu Tyr Ala Val Ser Ser

165165

Lys Leu Asp Phe Asn Met ThrLys Leu Asp Phe Asn Met Thr

170 175170 175

Asn His Ser Phe Met Cys Leu IleAsn His Ser Phe Met Cys Leu Ile

180180

Lys Tyr Gly His Leu Arg ValLys Tyr Gly His Leu Arg Val

185 190185 190

Gln Thr Phe Asn Trp Asn Thr ThrGln Thr Phe Asn Trp Asn Thr Thr

195 200195 200

Lys Gln Glu His Phe Pro AspLys Gln Glu His Phe Pro Asp

205205

Glu 160Glu 160

ThrThr

AsnAsn

Asn <210> 535 <211> 208 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Asn <210> 535 <211> 208 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> CD80 v82 ECD < 400> 535< 223 > CD80 v82 ECD < 400 > 535

Val Ile His Val ThrVal Ile His Val Thr

55

Lys Glu Val Lys GluLys Glu Val Lys Glu

Val Ala Thr Leu SerVal Ala Thr Leu Ser

Gly His Asn Val Ser 20Gly His Asn Val Ser 20

Val Glu Gly Pro AlaVal Glu Gly Pro Ala

Gln Thr Arg Ile Tyr 30Gln Thr Arg Ile Tyr 30

Gln Lys Glu Lys Lys 35Gln Lys Glu Lys Lys 35

Met Val Leu Thr MetMet Val Leu Thr Met

Met Ser Gly Asp Met 45Met Ser Gly Asp Met 45

Ile Trp Pro Glu Tyr 50Ile Trp Pro Glu Tyr 50

Lys Asn Arg Thr Ile 55Lys Asn Arg Thr Ile 55

Phe Asp Ile Thr Asn 60Phe Asp Ile Thr Asn 60

Leu Ser Ile Val Ile 65Leu Ser Ile Val Ile 65

Gln Ala Leu Arg Pro 70Gln Ala Leu Arg Pro 70

Ser Asp Glu Gly Thr 75Ser Asp Glu Gly Thr 75

Glu Cys Val Val Leu 85Glu Cys Val Val Leu 85

Lys Tyr Glu Lys Asp 90Lys Tyr Glu Lys Asp 90

Gly Phe Lys Arg Glu 95Gly Phe Lys Arg Glu 95

Leu Ala Glu Val ThrLeu Ala Glu Val Thr

100100

Leu Ser Val Lys AlaLeu Ser Val Lys Ala

105105

Asp Phe Pro Thr ProAsp Phe Pro Thr Pro

110110

Ile Ser Asp Phe GluIle Ser Asp Phe Glu

115115

Val Pro Ser Ser AsnVal Pro Ser Ser Asn

120120

Ile Arg Arg Ile IleIle Arg Arg Ile Ile

125125

Ser Thr Ser Gly Gly 130Ser Thr Ser Gly Gly 130

Phe Pro Glu Pro HisPhe Pro Glu Pro His

135135

Leu Ser Trp Leu Glu 140Leu Ser Trp Leu Glu 140

CysCys

TrpTrp

AsnAsn

AsnAsn

Tyr 80Tyr 80

HisHis

SerSer

CysCys

AsnAsn

- 720 044346- 720 044346

Gly 145 Gly 145 Glu Glu Glu Glu Leu Leu Asn Asn Ala 150 Ala 150 Ile Ile Thr Thr Thr Thr Thr Thr Val 155 Val 155 Ser Ser Gln Gln Asp Asp Pro Pro Glu 160 Glu 160 Thr Thr Glu Glu Leu Leu Tyr Tyr Ala 165 Ala 165 Val Val Ser Ser Ser Ser Lys Lys Leu 170 Leu 170 Asp Asp Phe Phe Asn Asn Met Met Thr 175 Thr 175 Thr Thr Asn Asn His His Ser Ser Phe 180 Phe 180 Met Met Cys Cys Leu Leu Ile Ile Lys 185 Lys 185 Tyr Tyr Gly Gly His His Leu Leu Arg 190 Arg 190 Val Val Asn Asn Gln Gln Thr Thr Phe 195 Phe 195 Asn Asn Trp Trp Asn Asn Thr Thr Thr 200 Thr 200 Lys Lys Gln Gln Glu Glu His His Phe 205 Phe 205 Pro Pro Asp Asp Asn Asn

<210> 536 <211> 208 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220><210> 536 <211> 208 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> CD80 v83 ECD <400>536<223> CD80 v83 ECD <400>536

Val Ile His Val Thr Lys Glu Val Lys Glu Val Ala Thr Leu Ser CysVal Ile His Val Thr Lys Glu Val Lys Glu Val Ala Thr Leu Ser Cys

5 10155 1015

Gly His Asn Val Ser Val Glu Glu Leu Ala Gln Thr Arg Ile Tyr Trp 20 2530Gly His Asn Val Ser Val Glu Glu Leu Ala Gln Thr Arg Ile Tyr Trp 20 2530

Gln Lys Glu Lys Lys Met Val Leu Thr Met Met Ser Gly Asp Met Asn 35 4045Gln Lys Glu Lys Lys Met Val Leu Thr Met Met Ser Gly Asp Met Asn 35 4045

Ile Trp Pro Glu Tyr Lys Asn Arg Thr Ile Phe Asp Ile Thr Asn Asn 50 5560Ile Trp Pro Glu Tyr Lys Asn Arg Thr Ile Phe Asp Ile Thr Asn Asn 50 5560

Leu Ser Ile Val Ile Leu Ala Leu Arg Pro Ser Asp Glu Gly Thr Tyr 65 70 7580Leu Ser Ile Val Ile Leu Ala Leu Arg Pro Ser Asp Glu Gly Thr Tyr 65 70 7580

Glu Cys Val Val Leu Lys Tyr Glu Lys Asp Gly Leu Lys Arg Glu His 85 9095Glu Cys Val Val Leu Lys Tyr Glu Lys Asp Gly Leu Lys Arg Glu His 85 9095

Leu Ala Glu Val Thr Leu Ser Val Lys Ala Asp Leu Pro Thr Pro SerLeu Ala Glu Val Thr Leu Ser Val Lys Ala Asp Leu Pro Thr Pro Ser

100 105110100 105110

Ile Ser Asp Phe Glu Val Pro Ser Ser Asn Ile Arg Arg Ile Ile CysIle Ser Asp Phe Glu Val Pro Ser Ser Asn Ile Arg Arg Ile Ile Cys

115 120125115 120125

Ser Thr Ser Gly Gly Phe Pro Glu Pro His Leu Ser Trp Leu Glu AsnSer Thr Ser Gly Gly Phe Pro Glu Pro His Leu Ser Trp Leu Glu Asn

130 135140130 135140

- 721 044346- 721 044346

Gly 145 Gly 145 Glu Glu Glu Glu Leu Leu Asn Asn Ala 150 Ala 150 Ile Ile Asn Asn Thr Thr Thr Thr Val 155 Val 155 Ser Ser Gln Gln Asp Asp Pro Pro Glu 160 Glu 160 Thr Thr Glu Glu Leu Leu Tyr Tyr Ala 165 Ala 165 Val Val Ser Ser Ser Ser Lys Lys Leu 170 Leu 170 Asp Asp Phe Phe Asn Asn Met Met Thr 175 Thr 175 Thr Thr Asn Asn His His Ser Ser Phe 180 Phe 180 Met Met Cys Cys Leu Leu Ile Ile Lys 185 Lys 185 Tyr Tyr Gly Gly His His Leu Leu Arg 190 Arg 190 Val Val Asn Asn Gln Gln Thr Thr Phe 195 Phe 195 Asn Asn Trp Trp Asn Asn Thr Thr Thr 200 Thr 200 Lys Lys Gln Gln Glu Glu His His Phe 205 Phe 205 Pro Pro Asp Asp Asn Asn

<210> 537 <211> 208 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220><210> 537 <211> 208 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> CD80 v84 ECD <400>537<223>CD80 v84 ECD <400>537

Val Ile His Val Thr Lys Glu Val Lys Glu Val Ala Thr Leu Ser Cys 1 5 1015Val Ile His Val Thr Lys Glu Val Lys Glu Val Ala Thr Leu Ser Cys 1 5 1015

Gly His Asn Val Ser Val Glu Glu Leu Ala Gln Thr Arg Ile Tyr Trp 20 2530Gly His Asn Val Ser Val Glu Glu Leu Ala Gln Thr Arg Ile Tyr Trp 20 2530

Gln Lys Glu Lys Lys Met Val Leu Thr Met Met Ser Gly Asp Met Asn 35 4045Gln Lys Glu Lys Lys Met Val Leu Thr Met Met Ser Gly Asp Met Asn 35 4045

Ile Trp Pro Glu Tyr Lys Asn Arg Thr Ile Phe Asp Ile Thr Asn Asn 50 5560Ile Trp Pro Glu Tyr Lys Asn Arg Thr Ile Phe Asp Ile Thr Asn Asn 50 5560

Leu Ser Ile Val Ile Leu Ala Leu Arg Pro Ser Asp Glu Gly Thr Tyr 65 70 7580Leu Ser Ile Val Ile Leu Ala Leu Arg Pro Ser Asp Glu Gly Thr Tyr 65 70 7580

Glu Cys Val Val Leu Lys Tyr Asp Arg Lys Gly Tyr Arg Arg Glu His 85 9095Glu Cys Val Val Leu Lys Tyr Asp Arg Lys Gly Tyr Arg Arg Glu His 85 9095

Leu Ala Glu Val Thr Leu Ser Val Lys Ala Asp Phe Pro Thr Pro SerLeu Ala Glu Val Thr Leu Ser Val Lys Ala Asp Phe Pro Thr Pro Ser

100 105110100 105110

Ile Ser Asp Phe Glu Ile Pro Thr Ser Ser Ile Arg Arg Ile Ile CysIle Ser Asp Phe Glu Ile Pro Thr Ser Ser Ile Arg Arg Ile Ile Cys

115 120125115 120125

Ser Thr Ser Gly Gly Phe Pro Glu Pro His Leu Ser Trp Leu Glu AsnSer Thr Ser Gly Gly Phe Pro Glu Pro His Leu Ser Trp Leu Glu Asn

130 135140130 135140

Gly Glu Glu Leu Asn Ala Ile Asn Thr Thr Val Ser Gln Asp Pro GluGly Glu Glu Leu Asn Ala Ile Asn Thr Thr Val Ser Gln Asp Pro Glu

- 722 044346- 722 044346

145145

150150

155155

Thr Glu Leu Tyr Ala Val Ser Ser LysThr Glu Leu Tyr Ala Val Ser Ser Lys

165165

Leu Asp Phe Asn Met ThrLeu Asp Phe Asn Met Thr

170 175170 175

Ser His Ser Phe Met Cys Leu Ile LysSer His Ser Phe Met Cys Leu Ile Lys

180 185180 185

Tyr Gly His Leu Arg ValTyr Gly His Leu Arg Val

190190

Gln Thr Phe Asn Trp Asn Thr Thr LysGln Thr Phe Asn Trp Asn Thr Thr Lys

195 200195 200

Gln Glu His Phe Pro AspGln Glu His Phe Pro Asp

205205

160160

ThrThr

AsnAsn

Asn <210> 538 <211> 208 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Asn <210> 538 <211> 208 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> CD80 v85 ECD < 400> 538< 223 > CD80 v85 ECD < 400 > 538

Val Ile His Val ThrVal Ile His Val Thr

55

Lys Glu Val Lys GluLys Glu Val Lys Glu

Val Ala Thr Leu SerVal Ala Thr Leu Ser

Gly His Asn Val Ser 20Gly His Asn Val Ser 20

Val Glu Glu Leu AlaVal Glu Glu Leu Ala

Gln Thr Arg Ile TyrGln Thr Arg Ile Tyr

Gln Lys Glu Lys Lys 35Gln Lys Glu Lys Lys 35

Met Val Leu Thr MetMet Val Leu Thr Met

Met Ser Gly Asp Met 45Met Ser Gly Asp Met 45

Ile Trp Pro Glu Tyr 50Ile Trp Pro Glu Tyr 50

Lys Asn Arg Thr Ile 55Lys Asn Arg Thr Ile 55

Phe Asp Ile Thr Asn 60Phe Asp Ile Thr Asn 60

Leu Ser Ile Val Ile 65Leu Ser Ile Val Ile 65

Leu Ala Leu Arg Pro 70Leu Ala Leu Arg Pro 70

Ser Asp Glu Gly Thr 75Ser Asp Glu Gly Thr 75

Glu Cys Val Val Leu 85Glu Cys Val Val Leu 85

Lys Tyr Asp Arg Lys 90Lys Tyr Asp Arg Lys 90

Gly Tyr Arg Arg Glu 95Gly Tyr Arg Arg Glu 95

Leu Ala Glu Val ThrLeu Ala Glu Val Thr

100100

Leu Ser Val Lys AlaLeu Ser Val Lys Ala

105105

Asp Phe Pro Thr ProAsp Phe Pro Thr Pro

110110

Ile Ser Asp Phe Glu 115Ile Ser Asp Phe Glu 115

Ile Pro Thr Ser AsnIle Pro Thr Ser Asn

120120

Ile Arg Arg Ile IleIle Arg Arg Ile Ile

125125

Ser Thr Ser Gly Gly 130Ser Thr Ser Gly Gly 130

Phe Pro Glu Pro HisPhe Pro Glu Pro His

135135

Leu Ser Trp Leu Glu 140Leu Ser Trp Leu Glu 140

CysCys

TrpTrp

AsnAsn

AsnAsn

Tyr 80Tyr 80

HisHis

SerSer

CysCys

AsnAsn

GluGlu

160160

Gly Glu Glu Leu Asn 145Gly Glu Glu Leu Asn 145

Ala Ile Asn Thr Thr 150Ala Ile Asn Thr Thr 150

Val Ser Gln Asp ProVal Ser Gln Asp Pro

155155

- 723 044346- 723 044346

Thr Glu Leu Tyr Ala Val Ser Ser 165Thr Glu Leu Tyr Ala Val Ser Ser 165

Asn His Ser Phe Met Cys Leu Ile 180Asn His Ser Phe Met Cys Leu Ile 180

Gln Thr Phe Asn Trp Asn Thr Thr 195200Gln Thr Phe Asn Trp Asn Thr Thr 195200

Lys Leu Asp Phe Asn Met ThrLys Leu Asp Phe Asn Met Thr

170175170175

Lys Tyr Gly His Leu Arg ValLys Tyr Gly His Leu Arg Val

185190185190

Lys Gln Glu His Phe Pro AspLys Gln Glu His Phe Pro Asp

205205

ThrThr

AsnAsn

Asn <210> 539 < 211> 208 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Asn <210> 539 <211> 208 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> CD80 v86 ECD < 400> 539<223>CD80 v86 ECD <400>539

Val Ile His Val ThrVal Ile His Val Thr

55

Lys Glu Val Lys GluLys Glu Val Lys Glu

Val Ala Thr Leu SerVal Ala Thr Leu Ser

Gly His Asn Val Ser 20Gly His Asn Val Ser 20

Val Glu Glu Leu AlaVal Glu Glu Leu Ala

Gln Thr Arg Ile Tyr 30Gln Thr Arg Ile Tyr 30

Gln Lys Glu Gly Gln 35Gln Lys Glu Gly Gln 35

Ile Val Met Thr MetIle Val Met Thr Met

Met Ser Gly Asp Met 45Met Ser Gly Asp Met 45

Ile Trp Pro Glu Tyr 50Ile Trp Pro Glu Tyr 50

Lys Asn Arg Thr Ile 55Lys Asn Arg Thr Ile 55

Leu Asp Ile Thr Asn 60Leu Asp Ile Thr Asn 60

Leu Ser Ile Val Ile 65Leu Ser Ile Val Ile 65

Leu Ala Leu Arg Pro 70Leu Ala Leu Arg Pro 70

Ser Asp Glu Gly Thr 75Ser Asp Glu Gly Thr 75

Val Cys Val Val Arg 85Val Cys Val Val Arg 85

Lys Tyr Glu Asn Asp 90Lys Tyr Glu Asn Asp 90

Thr Pro Val Leu GluThr Pro Val Leu Glu

Leu Ala Gly Val ThrLeu Ala Gly Val Thr

100100

Leu Ser Val Lys AlaLeu Ser Val Lys Ala

105105

Asp Phe Pro Thr ProAsp Phe Pro Thr Pro

110110

Ile Ser Asp Phe Glu 115Ile Ser Asp Phe Glu 115

Ile Pro Thr Ser AsnIle Pro Thr Ser Asn

120120

Ile Arg Arg Ile IleIle Arg Arg Ile Ile

125125

Ser Ala Ser Gly Gly 130Ser Ala Ser Gly Gly 130

Phe Pro Glu Pro HisPhe Pro Glu Pro His

135135

Leu Ser Trp Leu Glu 140Leu Ser Trp Leu Glu 140

CysCys

TrpTrp

AsnAsn

AsnAsn

Tyr 80Tyr 80

HisHis

SerSer

CysCys

AsnAsn

GluGlu

160160

Gly Glu Glu Leu Ser 145Gly Glu Glu Leu Ser 145

Ala Ile Asn Thr Thr 150Ala Ile Asn Thr Thr 150

Val Ser Gln Asp ProVal Ser Gln Asp Pro

155155

- 724 044346- 724 044346

Thr Glu Leu Tyr Ala Val Ser Ser LysThr Glu Leu Tyr Ala Val Ser Ser Lys

165165

Leu Asp Phe Asn Met ThrLeu Asp Phe Asn Met Thr

170 175170 175

Asn His Ser Phe Met Cys Leu Ile LysAsn His Ser Phe Met Cys Leu Ile Lys

180 185180 185

Tyr Gly His Leu Arg ValTyr Gly His Leu Arg Val

190190

Gln Thr Phe Asn Trp Asn Thr Thr LysGln Thr Phe Asn Trp Asn Thr Thr Lys

195 200195 200

Gln Glu His Phe Pro AspGln Glu His Phe Pro Asp

205205

ThrThr

AsnAsn

Asn <210> 540 <211> 208 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Asn <210> 540 <211> 208 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> CD80 v87 ECD < 400> 540< 223 > CD80 v87 ECD < 400 > 540

Val Ile His Val ThrVal Ile His Val Thr

55

Lys Glu Val Lys GluLys Glu Val Lys Glu

Val Ala Thr Leu SerVal Ala Thr Leu Ser

Gly His Asn Val Ser 20Gly His Asn Val Ser 20

Val Glu Glu Leu AlaVal Glu Glu Leu Ala

Gln Thr Arg Ile Tyr 30Gln Thr Arg Ile Tyr 30

Gln Lys Glu Gly Lys 35Gln Lys Glu Gly Lys 35

Met Val Met Thr MetMet Val Met Thr Met

Met Ser Gly Asp Met 45Met Ser Gly Asp Met 45

Ile Trp Pro Glu Tyr 50Ile Trp Pro Glu Tyr 50

Lys Asn Arg Thr Ile 55Lys Asn Arg Thr Ile 55

Phe Asp Ile Thr Asn 60Phe Asp Ile Thr Asn 60

Leu Ser Ile Val Ile 65Leu Ser Ile Val Ile 65

Leu Ala Leu Arg Pro 70Leu Ala Leu Arg Pro 70

Ser Asp Glu Gly Thr 75Ser Asp Glu Gly Thr 75

Glu Cys Val Val Leu 85Glu Cys Val Val Leu 85

Lys Tyr Glu Lys Asp 90Lys Tyr Glu Lys Asp 90

Ala Phe Lys Arg Glu 95Ala Phe Lys Arg Glu 95

Leu Ala Glu Val ThrLeu Ala Glu Val Thr

100100

Leu Ser Val Lys AlaLeu Ser Val Lys Ala

105105

Asp Phe Pro Thr ProAsp Phe Pro Thr Pro

110110

Ile Ser Asp Phe GluIle Ser Asp Phe Glu

115115

Ile Pro Thr Ser AsnIle Pro Thr Ser Asn

120120

Ile Arg Arg Ile IleIle Arg Arg Ile Ile

125125

Ser Thr Ser Gly Gly 130Ser Thr Ser Gly Gly 130

Phe Pro Glu Pro HisPhe Pro Glu Pro His

135135

Leu Ser Trp Leu Glu 140Leu Ser Trp Leu Glu 140

CysCys

TrpTrp

AsnAsn

AsnAsn

Tyr 80Tyr 80

HisHis

SerSer

CysCys

AsnAsn

GluGlu

160160

Gly Glu Glu Leu Asn 145Gly Glu Glu Leu Asn 145

Ala Ile Asn Thr Thr 150Ala Ile Asn Thr Thr 150

Val Ser Gln Asp ProVal Ser Gln Asp Pro

155155

- 725 044346- 725 044346

Thr Glu Leu Tyr Ala Val Ser Ser LysThr Glu Leu Tyr Ala Val Ser Ser Lys

165165

Leu Asp Phe Asn Met ThrLeu Asp Phe Asn Met Thr

170 175170 175

Asn His Ser Phe Met Cys Leu Ile LysAsn His Ser Phe Met Cys Leu Ile Lys

180 185180 185

Tyr Gly His Leu Arg ValTyr Gly His Leu Arg Val

190190

Gln Thr Phe Asn Trp Asn Thr Thr LysGln Thr Phe Asn Trp Asn Thr Thr Lys

195 200195 200

Gln Glu His Phe Pro AspGln Glu His Phe Pro Asp

205205

ThrThr

AsnAsn

Asn <210> 541 <211> 101 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Asn <210> 541 <211> 101 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> CD80 v85 IgV <400> 541<223> CD80 v85 IgV <400> 541

Val Ile His Val Thr 1 5Val Ile His Val Thr 1 5

Lys Glu Val Lys GluLys Glu Val Lys Glu

Val Ala Thr Leu SerVal Ala Thr Leu Ser

Gly His Asn Val Ser 20Gly His Asn Val Ser 20

Val Glu Glu Leu AlaVal Glu Glu Leu Ala

Gln Thr Arg Ile Tyr 30Gln Thr Arg Ile Tyr 30

Gln Lys Glu Lys Lys 35Gln Lys Glu Lys Lys 35

Met Val Leu Thr MetMet Val Leu Thr Met

Met Ser Gly Asp Met 45Met Ser Gly Asp Met 45

Ile Trp Pro Glu Tyr 50Ile Trp Pro Glu Tyr 50

Lys Asn Arg Thr Ile 55Lys Asn Arg Thr Ile 55

Phe Asp Ile Thr Asn 60Phe Asp Ile Thr Asn 60

Leu Ser Ile Val Ile 65Leu Ser Ile Val Ile 65

Leu Ala Leu Arg Pro 70Leu Ala Leu Arg Pro 70

Ser Asp Glu Gly Thr 75Ser Asp Glu Gly Thr 75

Glu Cys Val Val Leu 85Glu Cys Val Val Leu 85

Lys Tyr Asp Arg Lys 90Lys Tyr Asp Arg Lys 90

Gly Tyr Arg Arg Glu 95Gly Tyr Arg Arg Glu 95

CysCys

TrpTrp

AsnAsn

AsnAsn

Tyr 80Tyr 80

HisHis

Leu Ala Glu Val ThrLeu Ala Glu Val Thr

100 <210> 542 <211> 101 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>100 <210> 542 <211> 101 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> CD80 v87 IgV <220><223> CD80 v87 IgV <220>

< 221> ВАРИАНТ < 222> (94) .. (94) < 223> X представляет собой R или Q< 221> OPTION < 222> (94) .. (94) < 223> X represents R or Q

- 726 044346 <400> 542- 726 044346 <400> 542

ValVal

IleIle

HisHis

ValVal

Thr 5Thr 5

LysLys

GluGlu

ValVal

LysLys

GluGlu

ValVal

AlaAla

ThrThr

LeuLeu

SerSer

GlyGly

HisHis

AsnAsn

ValVal

SerSer

ValVal

GluGlu

GluGlu

LeuLeu

AlaAla

GlnGln

ThrThr

ArgArg

Ile 30Ile 30

TyrTyr

GlnGln

LysLys

Glu 35Glu 35

GlyGly

LysLys

MetMet

ValVal

Met 40Met 40

ThrThr

MetMet

MetMet

SerSer

Gly 45Gly 45

AspAsp

MetMet

IleIle

Trp 50Trp 50

ProPro

GluGlu

TyrTyr

LysLys

Asn 55Asn 55

ArgArg

ThrThr

IleIle

PhePhe

Asp 60Asp 60

IleIle

ThrThr

AsnAsn

Leu 65Leu 65

SerSer

IleIle

ValVal

IleIle

Leu 70Leu 70

AlaAla

LeuLeu

ArgArg

ProPro

Ser 75Ser 75

AspAsp

GluGlu

GlyGly

ThrThr

GluGlu

CysCys

ValVal

ValVal

Leu 85Leu 85

LysLys

TyrTyr

GluGlu

LysLys

Asp 90Asp 90

AlaAla

PhePhe

LysLys

ArgArg

Glu 95Glu 95

CysCys

TrpTrp

AsnAsn

AsnAsn

Tyr 80Tyr 80

HisHis

LeuLeu

AlaAla

GluGlu

ValVal

100100

Thr <210>Thr <210>

<211><211>

<212><212>

<213><213>

543543

107107

БЕЛОКPROTEIN

Искусственная последовательность <220>Artificial sequence <220>

<223><223>

CD80 v85CD80 v85

IgV <400>IgV <400>

543543

ValVal

IleIle

HisHis

ValVal

Thr 5Thr 5

LysLys

GluGlu

ValVal

LysLys

GluGlu

ValVal

AlaAla

ThrThr

LeuLeu

SerSer

GlyGly

HisHis

AsnAsn

ValVal

SerSer

ValVal

GluGlu

GluGlu

LeuLeu

AlaAla

GlnGln

ThrThr

ArgArg

Ile 30Ile 30

TyrTyr

GlnGln

LysLys

Glu 35Glu 35

LysLys

LysLys

MetMet

ValVal

Leu 40Leu 40

ThrThr

MetMet

MetMet

SerSer

Gly 45Gly 45

AspAsp

MetMet

IleIle

Trp 50Trp 50

ProPro

GluGlu

TyrTyr

LysLys

Asn 55Asn 55

ArgArg

ThrThr

IleIle

PhePhe

Asp 60Asp 60

IleIle

ThrThr

AsnAsn

Leu 65Leu 65

SerSer

IleIle

ValVal

IleIle

Leu 70Leu 70

AlaAla

LeuLeu

ArgArg

ProPro

Ser 75Ser 75

AspAsp

GluGlu

GlyGly

ThrThr

CysCys

TrpTrp

AsnAsn

AsnAsn

Tyr 80Tyr 80

HisHis

GluGlu

CysCys

ValVal

ValVal

Leu 85Leu 85

LysLys

TyrTyr

AspAsp

ArgArg

Lys 90Lys 90

GlyGly

TyrTyr

ArgArg

ArgArg

Glu 95Glu 95

- 727 044346- 727 044346

Leu Ala Glu Val Thr Leu Ser Val Lys Ala AspLeu Ala Glu Val Thr Leu Ser Val Lys Ala Asp

100105 <210>544 <211>107 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>100105 <210>544 <211>107 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> CD80 v87 IgV <400>544<223> CD80 v87 IgV <400>544

Val Ile His Val Thr Lys Glu Val Lys Glu Val Ala Thr Leu Ser CysVal Ile His Val Thr Lys Glu Val Lys Glu Val Ala Thr Leu Ser Cys

5 10155 1015

Gly His Asn Val Ser Val Glu Glu Leu Ala Gln Thr Arg Ile Tyr Trp 20 2530Gly His Asn Val Ser Val Glu Glu Leu Ala Gln Thr Arg Ile Tyr Trp 20 2530

Gln Lys Glu Gly Lys Met Val Met Thr Met Met Ser Gly Asp Met Asn 35 4045Gln Lys Glu Gly Lys Met Val Met Thr Met Met Ser Gly Asp Met Asn 35 4045

Ile Trp Pro Glu Tyr Lys Asn Arg Thr Ile Phe Asp Ile Thr Asn Asn 50 5560Ile Trp Pro Glu Tyr Lys Asn Arg Thr Ile Phe Asp Ile Thr Asn Asn 50 5560

Leu Ser Ile Val Ile Leu Ala Leu Arg Pro Ser Asp Glu Gly Thr Tyr 65 70 7580Leu Ser Ile Val Ile Leu Ala Leu Arg Pro Ser Asp Glu Gly Thr Tyr 65 70 7580

Glu Cys Val Val Leu Lys Tyr Glu Lys Asp Ala Phe Lys Arg Glu His 85 9095Glu Cys Val Val Leu Lys Tyr Glu Lys Asp Ala Phe Lys Arg Glu His 85 9095

Leu Ala Glu Val Thr Leu Ser Val Lys Ala AspLeu Ala Glu Val Thr Leu Ser Val Lys Ala Asp

100105 <210>545 <211>122 <212> БЕЛОК <213> Homo sapiens <400>545100105 <210>545 <211>122 <212> PROTEIN <213> Homo sapiens <400>545

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val GluAsp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val Glu

5 10155 1015

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp Val 20 2530Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp Val 20 2530

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr His 35 4045Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr His 35 4045

- 728 044346- 728 044346

Ile Pro Gln Asn Ser Ser LeuIle Pro Gln Asn Ser Ser Leu

50555055

Arg Ala Leu Met Ser Pro AlaArg Ala Leu Met Ser Pro Ala

65706570

Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro 85Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro 85

Glu Glu Asn Asn Val Val Asp Asp Ser 60 Ser 60 Arg Arg Tyr Tyr Arg Arg Asn Asn Gly Gly Met Met Leu Leu Arg 75 Arg 75 Gly Gly Asp Asp Phe Phe Ser Ser Leu 80 Leu 80 Gln Gln Asp Asp Glu 90 Glu 90 Gln Gln Lys Lys Phe Phe His His Cys 95 Cys 95 Leu Leu

Val Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe Gln Glu ValVal Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val

100105100105

Leu Ser Val Glu ValLeu Ser Val Glu Val

110110

Thr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser ValThr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser Val

115120 <210>546 <211>122 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>115120 <210>546 <211>122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v1 IgV <400>546<223> ICOSL v1 IgV <400>546

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val Glu 1 5 1015Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val Glu 1 5 1015

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp Val 20 2530Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp Val 20 2530

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr His 35 4045Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr His 35 4045

Ile Pro Gln Ser Ser Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg Asn 50 5560Ile Pro Gln Ser Ser Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg Asn 50 5560

Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser Leu 65 70 7580Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser Leu 65 70 7580

Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys Leu 85 9095Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys Leu 85 9095

Val Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu ValVal Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu Val

100 105110100 105110

Thr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser ValThr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser Val

115120 <210> 547115120 <210> 547

- 729 044346 <211> 122 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>- 729 044346 <211> 122 < 212> PROTEIN < 213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v2 IgV <400> 547<223> ICOSL v2 IgV <400> 547

Asp Thr Gln Glu LysAsp Thr Gln Glu Lys

55

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala CysLeu Ser Cys Ala Cys

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120 <210> 548 <211> 122 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>120 <210> 548 <211> 122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v3 IgV <400> 548<223> ICOSL v3 IgV <400> 548

Asp Thr Gln GluAsp Thr Gln Glu

Lys Glu Val Arg Ala 5Lys Glu Val Arg Ala 5

Met Val Gly Ser Asp ValMet Val Gly Ser Asp Val

1515

Leu Ser Cys AlaLeu Ser Cys Ala

Cys Pro Glu Gly SerCys Pro Glu Gly Ser

Arg Phe Asp Leu Asn AspArg Phe Asp Leu Asn Asp

Tyr Val Tyr TrpTyr Val Tyr Trp

Gln Thr Ser Glu SerGln Thr Ser Glu Ser

GluGlu

ValVal

HisHis

Lys Thr Val Val Thr TyrLys Thr Val Val Thr Tyr

- 730 044346- 730 044346

Ile Pro Gln Asp Ser 50Ile Pro Gln Asp Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120 <210> 549 <211> 122 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>120 <210> 549 <211> 122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v5 IgV < 400> 549< 223> ICOSL v5 IgV < 400> 549

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala CysLeu Ser Cys Ala Cys

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn AspPhe Asp Leu Asn Asp

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Pro SerVal Leu Ser Pro Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120 <210> 550120 <210> 550

- 731 044346 <211> 122 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>- 731 044346 <211> 122 < 212> PROTEIN < 213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v10 IgV <400> 550<223> ICOSL v10 IgV <400> 550

Asp Thr Gln Glu LysAsp Thr Gln Glu Lys

55

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala CysLeu Ser Cys Ala Cys

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Arg Phe His Cys 95Gln Arg Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120 <210> 551 <211> 122 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>120 <210> 551 <211> 122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v11 IgV <400> 551<223> ICOSL v11 IgV <400> 551

Asp Thr Gln GluAsp Thr Gln Glu

Lys Glu Val Arg Ala 5Lys Glu Val Arg Ala 5

Met Val Gly Ser Asp ValMet Val Gly Ser Asp Val

1515

Leu Ser Cys AlaLeu Ser Cys Ala

Cys Pro Glu Gly SerCys Pro Glu Gly Ser

Arg Phe Asp Leu Asn AspArg Phe Asp Leu Asn Asp

Tyr Val Tyr TrpTyr Val Tyr Trp

Gln Thr Ser Glu SerGln Thr Ser Glu Ser

GluGlu

ValVal

HisHis

Lys Thr Val Val Thr TyrLys Thr Val Val Thr Tyr

- 732 044346- 732 044346

Ile Pro Gln His Ser Ser LeuIle Pro Gln His Ser Ser Leu

50555055

Arg Ala Leu Met Ser Pro AlaArg Ala Leu Met Ser Pro Ala

65706570

Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro 85Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro 85

Glu Glu Asn Asn Val Val Asp Asp Ser 60 Ser 60 Arg Arg Tyr Tyr Arg Arg Asn Asn Gly Gly Met Met Leu Leu Arg 75 Arg 75 Gly Gly Asp Asp Phe Phe Ser Ser Leu 80 Leu 80 Gln Gln Asp Asp Glu 90 Glu 90 Gln Gln Lys Lys Phe Phe His His Cys 95 Cys 95 Leu Leu

Val Leu Gly Gln Ser Leu Gly Phe Gln Glu ValVal Leu Gly Gln Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val

100105100105

Leu Ser Val Glu ValLeu Ser Val Glu Val

110110

Thr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser ValThr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser Val

115120 <210>552 <211>122 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>115120 <210>552 <211>122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v12 IgV <400> 552<223> ICOSL v12 IgV <400> 552

Asp Thr 1Asp Thr 1

GlnGln

GluGlu

Lys 5Lys 5

GluGlu

ValVal

ArgArg

AlaAla

Met 10Met 10

ValVal

GlyGly

SerSer

AspAsp

Val 15Val 15

GluGlu

Leu SerLeu Ser

CysCys

Ala 20Ala 20

CysCys

ProPro

GluGlu

GlyGly

Ser 25Ser 25

ArgArg

PhePhe

AspAsp

LeuLeu

Asn 30Asn 30

AspAsp

ValVal

Tyr ValTyr Val

Tyr 35Tyr 35

TrpTrp

GlnGln

ThrThr

SerSer

Glu 40Glu 40

SerSer

LysLys

ThrThr

ValVal

Val 45Val 45

ThrThr

TyrTyr

HisHis

Ile Pro Gln Tyr 50Ile Pro Gln Tyr 50

Ser Ser Leu Glu Asn Val Asp 55Ser Ser Leu Glu Asn Val Asp 55

Ser Arg Tyr Arg AsnSer Arg Tyr Arg Asn

Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met 6570Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met 6570

Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp 85Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp 85

Val Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe GlnVal Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe Gln

100105100105

Leu Leu Arg 75 Arg 75 Gly Gly Asp Asp Phe Phe Ser Ser Leu 80 Leu 80 Glu 90 Glu 90 Gln Gln Lys Lys Phe Phe His His Cys 95 Cys 95 Leu Leu Glu Glu Val Val Leu Leu Ser Ser Val 110 Val 110 Glu Glu Val Val

Thr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser ValThr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser Val

115120 <210> 553115120 <210> 553

- 733 044346 <211> 122 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>- 733 044346 <211> 122 < 212> PROTEIN < 213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v13 IgV <400> 553<223> ICOSL v13 IgV <400> 553

Asp Thr Gln Glu LysAsp Thr Gln Glu Lys

55

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala CysLeu Ser Cys Ala Cys

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Asn Ser 50Ile Pro Gln Asn Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120 <210> 554 <211> 122 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>120 <210> 554 <211> 122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v14 IgV <400> 554<223> ICOSL v14 IgV <400> 554

Asp Thr Gln GluAsp Thr Gln Glu

Lys Glu Val Arg Ala 5Lys Glu Val Arg Ala 5

Met Val Gly Ser Asp ValMet Val Gly Ser Asp Val

1515

Leu Ser Cys AlaLeu Ser Cys Ala

Cys Pro Glu Gly SerCys Pro Glu Gly Ser

Arg Phe Asp Leu Asn AspArg Phe Asp Leu Asn Asp

Tyr Val Tyr TrpTyr Val Tyr Trp

Gln Thr Ser Glu SerGln Thr Ser Glu Ser

GluGlu

ValVal

HisHis

Lys Thr Val Val Thr TyrLys Thr Val Val Thr Tyr

- 734 044346- 734 044346

Ile Pro Gln Asn Ser Ser LeuIle Pro Gln Asn Ser Ser Leu

50555055

Arg Ala Leu Met Ser Pro AlaArg Ala Leu Met Ser Pro Ala

65706570

Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro 85Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro 85

Glu Glu Tyr Tyr Val Val Asp Asp Ser 60 Ser 60 Arg Arg Tyr Tyr Arg Arg Asn Asn Gly Gly Met Met Leu Leu Arg 75 Arg 75 Gly Gly Asp Asp Phe Phe Ser Ser Leu 80 Leu 80 Gln Gln Asp Asp Glu 90 Glu 90 Gln Gln Lys Lys Phe Phe His His Cys 95 Cys 95 Leu Leu

Val Leu Ser Pro Ser Leu Gly Phe Gln Glu ValVal Leu Ser Pro Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val

100105100105

Leu Ser Val Glu ValLeu Ser Val Glu Val

110110

Thr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser ValThr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser Val

115120 <210>555 <211>122 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>115120 <210>555 <211>122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v21 IgV <400>555<223> ICOSL v21 IgV <400>555

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val Glu 1 5 1015Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val Glu 1 5 1015

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp Val 20 2530Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp Val 20 2530

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr His 35 4045Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr His 35 4045

Ile Pro Gln Ser Ser Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg Asn 50 5560Ile Pro Gln Ser Ser Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg Asn 50 5560

Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser Leu 65 70 7580Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser Leu 65 70 7580

Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys Leu 85 9095Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys Leu 85 9095

Val Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu ValVal Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu Val

100 105110100 105110

Glu Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser ValGlu Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser Val

115120 <210> 556115120 <210> 556

- 735 044346 <211> 122 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>- 735 044346 <211> 122 < 212> PROTEIN < 213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v22 IgV <400> 556<223> ICOSL v22 IgV <400> 556

Asp Thr Gln Glu LysAsp Thr Gln Glu Lys

55

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala CysLeu Ser Cys Ala Cys

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Asn Ser 50Ile Pro Gln Asn Ser 50

Ala Leu Glu Asn ValAla Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120 <210> 557 <211> 122 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>120 <210> 557 <211> 122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v23 IgV <400> 557<223> ICOSL v23 IgV <400> 557

Asp Thr Gln GluAsp Thr Gln Glu

Lys Glu Val Arg Ala 5Lys Glu Val Arg Ala 5

Met Val Gly Ser Asp ValMet Val Gly Ser Asp Val

1515

Leu Ser Cys AlaLeu Ser Cys Ala

Cys Pro Glu Gly SerCys Pro Glu Gly Ser

Arg Phe Asp Leu Asn AspArg Phe Asp Leu Asn Asp

Tyr Val Tyr TrpTyr Val Tyr Trp

Gln Thr Ser Glu SerGln Thr Ser Glu Ser

GluGlu

ValVal

HisHis

Lys Thr Val Val Thr TyrLys Thr Val Val Thr Tyr

- 736 044346- 736 044346

Ile Pro Gln Asp Ser Pro LeuIle Pro Gln Asp Ser Pro Leu

50555055

Arg Ala Leu Met Ser Pro AlaArg Ala Leu Met Ser Pro Ala

65706570

Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro 85Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro 85

Glu Glu Asn Asn Val Val Asp Asp Ser 60 Ser 60 Arg Arg Tyr Tyr Arg Arg Asn Asn Gly Gly Met Met Leu Leu Arg 75 Arg 75 Gly Gly Asp Asp Phe Phe Ser Ser Leu 80 Leu 80 Gln Gln Asp Asp Glu 90 Glu 90 Gln Gln Lys Lys Phe Phe His His Cys 95 Cys 95 Leu Leu

Val Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe Gln Glu ValVal Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val

100105100105

Leu Ser Val Glu ValLeu Ser Val Glu Val

110110

Thr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser ValThr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser Val

115120 <210>558 <211>122 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>115120 <210>558 <211>122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v28 IgV <400>558<223>ICOSL v28 IgV <400>558

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val Glu 1 5 1015Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val Glu 1 5 1015

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp Val 20 2530Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp Val 20 2530

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr His 35 4045Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr His 35 4045

Ile Pro Gln Ser Ser Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg Asn 50 5560Ile Pro Gln Ser Ser Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg Asn 50 5560

Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser Pro 65 70 7580Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser Pro 65 70 7580

Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys Leu 85 9095Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys Leu 85 9095

Val Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu ValVal Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu Val

100 105110100 105110

Thr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser ValThr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser Val

115120 <210> 559115120 <210> 559

- 737 044346 <211> 122 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>- 737 044346 <211> 122 < 212> PROTEIN < 213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v33 IgV <400> 559<223> ICOSL v33 IgV <400> 559

Asp Thr Gln Glu LysAsp Thr Gln Glu Lys

55

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala CysLeu Ser Cys Ala Cys

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Ser Ser 50Ile Pro Gln Ser Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe Asp Cys 95Gln Lys Phe Asp Cys 95

Val Phe Ser Arg SerVal Phe Ser Arg Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

PhePhe

ValVal

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120 <210> 560 <211> 122 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>120 <210> 560 <211> 122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v34 IgV <400> 560<223> ICOSL v34 IgV <400> 560

Asp Thr Gln GluAsp Thr Gln Glu

Lys Glu Val Arg Ala 5Lys Glu Val Arg Ala 5

Met Val Gly Ser Asp ValMet Val Gly Ser Asp Val

1515

Leu Ser Cys AlaLeu Ser Cys Ala

Cys Pro Glu Gly SerCys Pro Glu Gly Ser

Arg Phe Asp Leu Asn AspArg Phe Asp Leu Asn Asp

Tyr Val Tyr TrpTyr Val Tyr Trp

Gln Thr Ser Glu SerGln Thr Ser Glu Ser

GluGlu

ValVal

HisHis

Lys Thr Val Val Thr TyrLys Thr Val Val Thr Tyr

- 738 044346- 738 044346

Ile Pro Gln Ser Ser Ser LeuIle Pro Gln Ser Ser Ser Leu

50555055

Arg Ala Leu Met Ser Pro AlaArg Ala Leu Met Ser Pro Ala

65706570

Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro 85Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro 85

Glu Glu Tyr Tyr Val Val Asp Asp Ser 60 Ser 60 Arg Arg Tyr Tyr Arg Arg Asn Asn Gly Gly Met Met Leu Leu Arg 75 Arg 75 Gly Gly Asp Asp Phe Phe Ser Ser Leu 80 Leu 80 Gln Gln Asp Asp Glu 90 Glu 90 Gln Gln Lys Lys Phe Phe Asp Asp Cys 95 Cys 95 Phe Phe

Val Phe Ser Arg Ser Leu Glu Phe Gln Glu ValVal Phe Ser Arg Ser Leu Glu Phe Gln Glu Val

100105100105

Leu Ser Val Glu ValLeu Ser Val Glu Val

110110

Thr Leu His Val Ala Ala Asn Ser Ser ValThr Leu His Val Ala Ala Asn Ser Ser Val

115120 <210>561 <211>122 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>115120 <210>561 <211>122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v35 IgV <400> 561<223> ICOSL v35 IgV <400> 561

Asp Thr 1Asp Thr 1

GlnGln

GluGlu

Lys 5Lys 5

GluGlu

ValVal

ArgArg

AlaAla

Met 10Met 10

ValVal

GlyGly

SerSer

AspAsp

Val 15Val 15

GluGlu

Leu SerLeu Ser

CysCys

Ala 20Ala 20

CysCys

ProPro

GluGlu

GlyGly

Ser 25Ser 25

ArgArg

PhePhe

AspAsp

LeuLeu

Asn 30Asn 30

AspAsp

ValVal

Tyr ValTyr Val

Tyr 35Tyr 35

TrpTrp

GlnGln

ThrThr

SerSer

Glu 40Glu 40

SerSer

LysLys

ThrThr

ValVal

Val 45Val 45

ThrThr

TyrTyr

HisHis

Ile Pro Gln Ser Ser Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg Asn 50 5560Ile Pro Gln Ser Ser Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg Asn 50 5560

Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met 6570Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met 6570

Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp 85Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp 85

Val Leu Ser Gln Ser Leu Glu Phe GlnVal Leu Ser Gln Ser Leu Glu Phe Gln

100105100105

Leu Leu Arg 75 Arg 75 Gly Gly Asp Asp Phe Phe Ser Ser Leu 80 Leu 80 Glu 90 Glu 90 Gln Gln Lys Lys Phe Phe His His Cys 95 Cys 95 Leu Leu Glu Glu Val Val Leu Leu Ser Ser Val 110 Val 110 Glu Glu Val Val

Thr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser ValThr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser Val

115120 <210> 562115120 <210> 562

- 739 044346 <211> 122 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>- 739 044346 <211> 122 < 212> PROTEIN < 213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v36 IgV <400> 562<223> ICOSL v36 IgV <400> 562

Asp Thr Gln Glu LysAsp Thr Gln Glu Lys

55

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala CysLeu Ser Cys Ala Cys

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Leu Ser 75Arg Gly Asp Leu Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Arg SerVal Leu Ser Arg Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120 <210> 563 <211> 122 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>120 <210> 563 <211> 122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v37 IgV <400> 563<223> ICOSL v37 IgV <400> 563

Asp Thr Gln GluAsp Thr Gln Glu

Lys Glu Val Arg Ala 5Lys Glu Val Arg Ala 5

Met Val Gly Ser Asp ValMet Val Gly Ser Asp Val

1515

Leu Ser Cys AlaLeu Ser Cys Ala

Cys Pro Glu Gly SerCys Pro Glu Gly Ser

Arg Phe Asp Leu Asn AspArg Phe Asp Leu Asn Asp

Tyr Val Tyr TrpTyr Val Tyr Trp

Gln Thr Ser Glu SerGln Thr Ser Glu Ser

GluGlu

ValVal

HisHis

Lys Thr Val Val Thr TyrLys Thr Val Val Thr Tyr

- 740 044346- 740 044346

Ile Pro Gln His Ser Ser LeuIle Pro Gln His Ser Ser Leu

50555055

Arg Ala Leu Met Ser Pro AlaArg Ala Leu Met Ser Pro Ala

65706570

Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro 85Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro 85

Glu Glu Tyr Tyr Val Val Asp Asp Ser 60 Ser 60 Arg Arg Tyr Tyr Arg Arg Asn Asn Gly Gly Met Met Leu Leu Arg 75 Arg 75 Gly Gly Asp Asp Phe Phe Ser Ser Leu 80 Leu 80 Gln Gln Asp Asp Glu 90 Glu 90 Gln Gln Lys Lys Phe Phe His His Cys 95 Cys 95 Leu Leu

Val Leu Ser Arg Ser Leu Gly Phe Gln Glu ValVal Leu Ser Arg Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val

100105100105

Leu Ser Asp Glu Val 110Leu Ser Asp Glu Val 110

Thr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser ValThr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser Val

115120 <210>564 <211>122 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>115120 <210>564 <211>122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v38 IgV <400>564<223>ICOSL v38 IgV <400>564

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val Glu 1 5 1015Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val Glu 1 5 1015

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp Val 20 2530Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp Val 20 2530

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr His 35 4045Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr His 35 4045

Ile Pro Gln His Ser Ser Leu Glu Tyr Val Asp Ser Arg Tyr Arg Asn 50 5560Ile Pro Gln His Ser Ser Leu Glu Tyr Val Asp Ser Arg Tyr Arg Asn 50 5560

Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Gln Gly Asp Phe Ser Leu 65 70 7580Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Gln Gly Asp Phe Ser Leu 65 70 7580

Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys Leu 85 9095Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys Leu 85 9095

Val Leu Ser Arg Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Asp Glu ValVal Leu Ser Arg Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Asp Glu Val

100 105110100 105110

Thr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser ValThr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser Val

115120 <210> 565115120 <210> 565

- 741 044346 <211> 122 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>- 741 044346 <211> 122 < 212> PROTEIN < 213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v39 IgV <400> 565<223> ICOSL v39 IgV <400> 565

Asp Thr Gln Glu LysAsp Thr Gln Glu Lys

55

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala CysLeu Ser Cys Ala Cys

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Arg SerVal Leu Ser Arg Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120 <210> 566 <211> 122 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>120 <210> 566 <211> 122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v40 IgV <400> 566<223> ICOSL v40 IgV <400> 566

Asp Thr Gln GluAsp Thr Gln Glu

Lys Glu Val Arg Ala 5Lys Glu Val Arg Ala 5

Met Val Gly Ser Asp ValMet Val Gly Ser Asp Val

1515

Leu Ser Cys AlaLeu Ser Cys Ala

Cys Pro Glu Gly SerCys Pro Glu Gly Ser

Arg Phe Asp Leu Asn AspArg Phe Asp Leu Asn Asp

Tyr Val Tyr TrpTyr Val Tyr Trp

Gln Thr Ser Glu SerGln Thr Ser Glu Ser

GluGlu

ValVal

HisHis

Lys Thr Val Val Thr TyrLys Thr Val Val Thr Tyr

- 742 044346- 742 044346

Ile Pro Gln His Ser Ser LeuIle Pro Gln His Ser Ser Leu

50555055

Arg Ala Leu Met Ser Pro AlaArg Ala Leu Met Ser Pro Ala

65706570

Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro 85Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro 85

Glu Glu Tyr Tyr Val Val Asp Asp Ser 60 Ser 60 Arg Arg Tyr Tyr Arg Arg Asn Asn Gly Gly Met Met Gln Gln Arg 75 Arg 75 Gly Gly Asp Asp Phe Phe Ser Ser Leu 80 Leu 80 Gln Gln Asp Asp Glu 90 Glu 90 Gln Gln Lys Lys Phe Phe His His Cys 95 Cys 95 Leu Leu

Val Leu Ser Arg Ser Leu Gly Phe Gln Glu ValVal Leu Ser Arg Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val

100105100105

Leu Ser Asp Glu Val 110Leu Ser Asp Glu Val 110

Thr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser ValThr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser Val

115120 <210>567 <211>122 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>115120 <210>567 <211>122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v41 IgV <400> 567<223> ICOSL v41 IgV <400> 567

Asp ThrAsp Thr

GlnGln

GluGlu

Lys 5Lys 5

GluGlu

ValVal

ArgArg

AlaAla

MetMet

ValVal

GlyGly

SerSer

AspAsp

ValVal

GluGlu

Leu SerLeu Ser

CysCys

Ala 20Ala 20

CysCys

ProPro

GluGlu

GlyGly

Ser 25Ser 25

ArgArg

PhePhe

AspAsp

LeuLeu

Asn 30Asn 30

AspAsp

ValVal

Tyr ValTyr Val

Tyr 35Tyr 35

TrpTrp

GlnGln

ThrThr

SerSer

GluGlu

SerSer

LysLys

ThrThr

ValVal

ValVal

ThrThr

TyrTyr

HisHis

Ile ProIle Pro

GlnGln

HisHis

SerSer

SerSer

Leu 55Leu 55

GluGlu

AsnAsn

ValVal

AspAsp

Ser 60Ser 60

ArgArg

TyrTyr

ArgArg

AsnAsn

Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met 6570Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met 6570

Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp 85Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp 85

Val Leu Ser Arg Ser Leu Gly Phe GlnVal Leu Ser Arg Ser Leu Gly Phe Gln

100105100105

Leu Leu Arg 75 Arg 75 Gly Gly Asp Asp Phe Phe Ser Ser Leu 80 Leu 80 Glu 90 Glu 90 Gln Gln Lys Lys Phe Phe His His Cys 95 Cys 95 Leu Leu Glu Glu Val Val Leu Leu Ser Ser Val 110 Val 110 Glu Glu Val Val

Thr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser ValThr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser Val

115120 <210> 568115120 <210> 568

- 743 044346 <211> 122 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>- 743 044346 <211> 122 < 212> PROTEIN < 213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v42 IgV <400> 568<223> ICOSL v42 IgV <400> 568

Asp Thr Gln Glu LysAsp Thr Gln Glu Lys

55

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala CysLeu Ser Cys Ala Cys

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Gly Val 120 <210> 569 <211> 122 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Ala Asn Phe Gly Val 120 <210> 569 <211> 122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v43 IgV <400> 569<223> ICOSL v43 IgV <400> 569

Asp Thr Gln GluAsp Thr Gln Glu

Lys Glu Val Arg Ala 5Lys Glu Val Arg Ala 5

Met Val Gly Ser Asp ValMet Val Gly Ser Asp Val

1515

Leu Ser Cys ValLeu Ser Cys Val

Cys Pro Glu Gly SerCys Pro Glu Gly Ser

Arg Phe Asp Leu Asn AspArg Phe Asp Leu Asn Asp

Tyr Val Tyr TrpTyr Val Tyr Trp

Gln Thr Ser Glu SerGln Thr Ser Glu Ser

GluGlu

ValVal

HisHis

Lys Thr Val Val Thr TyrLys Thr Val Val Thr Tyr

- 744 044346- 744 044346

Ile Pro Gln His Ser Ser LeuIle Pro Gln His Ser Ser Leu

50555055

Arg Ala Leu Met Ser Pro AlaArg Ala Leu Met Ser Pro Ala

65706570

Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro 85Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro 85

Glu Glu Tyr Tyr Val Val Asp Asp Ser 60 Ser 60 Arg Arg Tyr Tyr Arg Arg Asn Asn Gly Gly Met Met Leu Leu Arg 75 Arg 75 Gly Gly Asp Asp Phe Phe Ser Ser Leu 80 Leu 80 Gln Gln Asp Asp Glu 90 Glu 90 Gln Gln Lys Lys Phe Phe His His Cys 95 Cys 95 Leu Leu

Val Leu Ser Arg Ser Leu Gly Phe Gln Glu ValVal Leu Ser Arg Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val

100105100105

Leu Gly Val Glu Val 110Leu Gly Val Glu Val 110

Thr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser ValThr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser Val

115120 <210>570 <211>122 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>115120 <210>570 <211>122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v44 IgV <400>570<223> ICOSL v44 IgV <400>570

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val Glu 1 5 1015Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val Glu 1 5 1015

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp Val 20 2530Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp Val 20 2530

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr His 35 4045Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr His 35 4045

Ile Pro Gln His Ser Ser Leu Glu Tyr Val Asp Ser Arg Tyr Arg Asn 50 5560Ile Pro Gln His Ser Ser Leu Glu Tyr Val Asp Ser Arg Tyr Arg Asn 50 5560

Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met 6570Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met 6570

Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp 85Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp 85

Val Leu Ser Pro Ser Leu Gly Phe GlnVal Leu Ser Pro Ser Leu Gly Phe Gln

100105100105

Leu Leu Arg 75 Arg 75 Gly Gly Asp Asp Phe Phe Ser Ser Leu 80 Leu 80 Glu 90 Glu 90 Gln Gln Lys Lys Phe Phe His His Cys 95 Cys 95 Leu Leu Glu Glu Val Val Leu Leu Ser Ser Val 110 Val 110 Glu Glu Val Val

Thr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser ValThr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser Val

115120 <210> 571115120 <210> 571

- 745 044346 <211> 122 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>- 745 044346 <211> 122 < 212> PROTEIN < 213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v46 IgV <400> 571<223> ICOSL v46 IgV <400> 571

Asp Thr Gln Glu LysAsp Thr Gln Glu Lys

55

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala CysLeu Ser Cys Ala Cys

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Arg SerVal Leu Ser Arg Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser AlaAla Asn Phe Ser Ala

120 <210> 572 <211> 122 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>120 <210> 572 <211> 122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v48 IgV <400> 572<223> ICOSL v48 IgV <400> 572

Asp Thr Gln GluAsp Thr Gln Glu

Lys Glu Val Arg Ala 5Lys Glu Val Arg Ala 5

Met Val Gly Ser Asp ValMet Val Gly Ser Asp Val

1515

Leu Ser Cys AlaLeu Ser Cys Ala

Cys Pro Glu Gly SerCys Pro Glu Gly Ser

Arg Phe Asp Leu Asn AspArg Phe Asp Leu Asn Asp

Tyr Val Tyr TrpTyr Val Tyr Trp

Gln Thr Ser Glu SerGln Thr Ser Glu Ser

GluGlu

ValVal

HisHis

Lys Thr Val Val Thr TyrLys Thr Val Val Thr Tyr

- 746 044346- 746 044346

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120 <210> 573 <211> 122 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>120 <210> 573 <211> 122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v49 IgV < 400> 573< 223> ICOSL v49 IgV < 400> 573

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala CysLeu Ser Cys Ala Cys

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn AspPhe Asp Leu Asn Asp

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Ser Ser 50Ile Pro Gln Ser Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Ser Ser ValAla Asn Ser Ser Val

120 <210> 574120 <210> 574

- 747 044346 <211> 122 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>- 747 044346 <211> 122 < 212> PROTEIN < 213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v50 IgV <400> 574<223> ICOSL v50 IgV <400> 574

Asp Thr Gln Glu LysAsp Thr Gln Glu Lys

55

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala CysLeu Ser Cys Ala Cys

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Ser Ser 50Ile Pro Gln Ser Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Ala Leu Ser Gln SerAla Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120 <210> 575 <211> 122 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>120 <210> 575 <211> 122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v51 IgV <400> 575<223> ICOSL v51 IgV <400> 575

Asp Thr Gln GluAsp Thr Gln Glu

Lys Glu Val Arg Ala 5Lys Glu Val Arg Ala 5

Met Val Gly Ser Asp ValMet Val Gly Ser Asp Val

1515

Leu Ser Cys AlaLeu Ser Cys Ala

Cys Pro Glu Gly SerCys Pro Glu Gly Ser

Arg Phe Asp Leu Asn AspArg Phe Asp Leu Asn Asp

Tyr Val Tyr TrpTyr Val Tyr Trp

Gln Thr Ser Glu SerGln Thr Ser Glu Ser

GluGlu

ValVal

HisHis

Lys Thr Val Val Thr TyrLys Thr Val Val Thr Tyr

- 748 044346- 748 044346

Ile Pro Gln Ser Ser 50Ile Pro Gln Ser Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Arg Met Leu 70Pro Ala Arg Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120 <210> 576 <211> 122 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>120 <210> 576 <211> 122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v52 IgV < 400> 576< 223> ICOSL v52 IgV < 400> 576

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala CysLeu Ser Cys Ala Cys

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn AspPhe Asp Leu Asn Asp

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Ser Ser 50Ile Pro Gln Ser Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Thr Gly Met Leu 70Pro Thr Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

Thr Leu His Val ThrThr Leu His Val Thr

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120 <210> 577120 <210> 577

- 749 044346 <211> 122 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>- 749 044346 <211> 122 < 212> PROTEIN < 213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v54 IgV <400> 577<223> ICOSL v54 IgV <400> 577

Asp Thr Gln Glu LysAsp Thr Gln Glu Lys

55

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala CysLeu Ser Cys Ala Cys

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr HisThr Val Val Thr His

Ile Pro Gln Ser Ser 50Ile Pro Gln Ser Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Ala Leu Ser Val GluAla Leu Ser Val Glu

110110

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Ser Ser ValAla Asn Ser Ser Val

120 <210> 578 <211> 122 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>120 <210> 578 <211> 122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v60 IgV <400> 578<223> ICOSL v60 IgV <400> 578

Asp Thr Gln GluAsp Thr Gln Glu

Lys Glu Val Arg Ala 5Lys Glu Val Arg Ala 5

Met Val Gly Ser Asp ValMet Val Gly Ser Asp Val

1515

Leu Ser Cys AlaLeu Ser Cys Ala

Cys Pro Glu Gly SerCys Pro Glu Gly Ser

Arg Ser Asp Leu Asn Asp 30Arg Ser Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr TrpTyr Val Tyr Trp

Gln Thr Ser Glu SerGln Thr Ser Glu Ser

GluGlu

ValVal

HisHis

Lys Thr Val Val Thr TyrLys Thr Val Val Thr Tyr

- 750 044346- 750 044346

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Asn GluVal Leu Ser Asn Glu

110110

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120 <210> 579 <211> 122 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>120 <210> 579 <211> 122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v65 IgV < 400> 579< 223> ICOSL v65 IgV < 400> 579

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala CysLeu Ser Cys Ala Cys

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn AspPhe Asp Leu Asn Asp

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Ser Ser 50Ile Pro Gln Ser Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe Glu Cys 95Gln Lys Phe Glu Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

IleIle

ValVal

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser MetAla Asn Phe Ser Met

120 <210> 580120 <210> 580

- 751 044346 <211> 122 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>- 751 044346 <211> 122 < 212> PROTEIN < 213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v78 IgV <400> 580<223> ICOSL v78 IgV <400> 580

Asp Thr Gln Glu LysAsp Thr Gln Glu Lys

55

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala CysLeu Ser Cys Ala Cys

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Ser Ser 50Ile Pro Gln Ser Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe Glu Cys 95Gln Lys Phe Glu Cys 95

Val Phe Ser Arg SerVal Phe Ser Arg Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120 <210> 581 <211> 122 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>120 <210> 581 <211> 122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v79 IgV <400> 581<223> ICOSL v79 IgV <400> 581

Asp Thr Gln GluAsp Thr Gln Glu

Lys Glu Val Arg Ala 5Lys Glu Val Arg Ala 5

Met Val Gly Ser Asp ValMet Val Gly Ser Asp Val

1515

Leu Ser Cys AlaLeu Ser Cys Ala

Cys Pro Glu Gly SerCys Pro Glu Gly Ser

Arg Phe Asp Leu Asn AspArg Phe Asp Leu Asn Asp

Tyr Val Tyr TrpTyr Val Tyr Trp

Gln Thr Ser Glu SerGln Thr Ser Glu Ser

GluGlu

ValVal

HisHis

Lys Thr Val Val Thr TyrLys Thr Val Val Thr Tyr

- 752 044346- 752 044346

Ile Pro Gln Ser Ser Ser LeuIle Pro Gln Ser Ser Ser Leu

50555055

Arg Ala Leu Met Ser Pro AlaArg Ala Leu Met Ser Pro Ala

65706570

Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro 85Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro 85

Glu Glu Asn Asn Val Val Asp Asp Ser 60 Ser 60 Arg Arg Tyr Tyr Arg Arg Asn Asn Gly Gly Met Met Leu Leu Arg 75 Arg 75 Gly Gly Asp Asp Phe Phe Ser Ser Leu 80 Leu 80 Gln Gln Asp Asp Ala 90 Ala 90 Gln Gln Lys Lys Phe Phe His His Cys 95 Cys 95 Leu Leu

Val Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe Gln Glu ValVal Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val

100105100105

Leu Ser Val Glu ValLeu Ser Val Glu Val

110110

Thr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser ValThr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser Val

115120 <210>582 <211>122 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>115120 <210>582 <211>122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v80 IgV <400>582<223>ICOSL v80 IgV <400>582

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val Glu 1 5 1015Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val Glu 1 5 1015

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asp Asp Val 20 2530Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asp Asp Val 20 2530

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Glu Thr Val Val Thr Tyr His 35 4045Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Glu Thr Val Val Thr Tyr His 35 4045

Ile Pro Gln Ser Ser Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg Asn 50 5560Ile Pro Gln Ser Ser Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg Asn 50 5560

Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser Leu 65 70 7580Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser Leu 65 70 7580

Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys Leu 85 9095Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys Leu 85 9095

Val Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu ValVal Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu Val

100 105110100 105110

Thr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser ValThr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser Val

115120 <210> 583115120 <210> 583

- 753 044346 <211> 122 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>- 753 044346 <211> 122 < 212> PROTEIN < 213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v85 IgV <400> 583<223> ICOSL v85 IgV <400> 583

Asp Thr Gln Glu LysAsp Thr Gln Glu Lys

55

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala CysLeu Ser Cys Ala Cys

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Ser Ser 50Ile Pro Gln Ser Ser 50

Pro Leu Glu Asn ValPro Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120 <210> 584 <211> 122 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>120 <210> 584 <211> 122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v86 IgV <400> 584<223> ICOSL v86 IgV <400> 584

Asp Thr Gln GluAsp Thr Gln Glu

Lys Glu Val Arg Ala 5Lys Glu Val Arg Ala 5

Met Val Gly Ser Asp ValMet Val Gly Ser Asp Val

1515

Leu Ser Cys AlaLeu Ser Cys Ala

Cys Pro Glu Gly SerCys Pro Glu Gly Ser

Arg Phe Asp Leu Asn AspArg Phe Asp Leu Asn Asp

Tyr Val Tyr TrpTyr Val Tyr Trp

Gln Pro Ser Glu SerGln Pro Ser Glu Ser

GluGlu

ValVal

HisHis

Lys Thr Val Val Thr TyrLys Thr Val Val Thr Tyr

- 754 044346- 754 044346

Ile Pro Gln Ser Ser 50Ile Pro Gln Ser Ser 50

Ser Leu Glu Asp Val 55Ser Leu Glu Asp Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120 <210> 585 <211> 121 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>120 <210> 585 <211> 121 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v87 IgV < 400> 585< 223> ICOSL v87 IgV < 400> 585

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala CysLeu Ser Cys Ala Cys

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn AspPhe Asp Leu Asn Asp

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Asn Ser 50Ile Pro Gln Asn Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val ValVal Leu Ser Val Val

110110

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ThrThr

Leu His Val Ala AlaLeu His Val Ala Ala

115115

Asn Phe Ser ValAsn Phe Ser Val

120 <210> 586120 <210> 586

- 755 044346 <211> 121 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>- 755 044346 <211> 121 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v88 IgV <400>586<223> ICOSL v88 IgV <400>586

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val GluAsp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val Glu

5 10155 1015

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp Val 20 2530Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp Val 20 2530

Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr His IleVal Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr His Ile

40454045

Pro Gln Asn Ser Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg Asn Arg 50 5560Pro Gln Asn Ser Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg Asn Arg 50 5560

Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser Leu Arg 65 70 7580Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser Leu Arg 65 70 7580

Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys Leu Val 85 9095Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys Leu Val 85 9095

Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu Val ThrLeu Ser Gln Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu Val Thr

100 105110100 105110

Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser ValLeu His Val Ala Ala Asn Phe Ser Val

115120 <210>587 <211>122 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>115120 <210>587 <211>122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v91 <400> 587<223> ICOSL v91 <400> 587

Asp Thr Gln GluAsp Thr Gln Glu

IgVIgV

Lys Glu Val Arg 5Lys Glu Val Arg 5

Ala Met Val GlyAla Met Val Gly

Ser Asp Val GluSer Asp Val Glu

Leu Ser Cys AlaLeu Ser Cys Ala

Cys Pro Glu GlyCys Pro Glu Gly

Ser Arg Phe Asp 25Ser Arg Phe Asp 25

Leu Asn Asp Val 30Leu Asn Asp Val 30

Tyr Val Tyr TrpTyr Val Tyr Trp

Gln Thr Ser GluGln Thr Ser Glu

Ser Lys Thr ValSer Lys Thr Val

Val Thr Tyr His 45Val Thr Tyr His 45

- 756 044346- 756 044346

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Gln 70Pro Ala Gly Met Gln 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Asp GluVal Leu Ser Asp Glu

110110

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120 <210> 588 <211> 122 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>120 <210> 588 <211> 122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v99 IgV < 400> 588< 223> ICOSL v99 IgV < 400> 588

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala CysLeu Ser Cys Ala Cys

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn AspPhe Asp Leu Asn Asp

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Asn Ser 50Ile Pro Gln Asn Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Gln Val 85Arg Leu Phe Gln Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120 <210> 589120 <210> 589

- 757 044346 <211> 122 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>- 757 044346 <211> 122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v100 IgV <400> 589<223> ICOSL v100 IgV <400> 589

Asp Thr Gln Glu LysAsp Thr Gln Glu Lys

55

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala CysLeu Ser Cys Ala Cys

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Asn Ser 50Ile Pro Gln Asn Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Gln Phe Ser ValAla Gln Phe Ser Val

120 <210> 590 <211> 122 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>120 <210> 590 <211> 122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v111 IgV <400> 590<223> ICOSL v111 IgV <400> 590

Asp Thr Gln GluAsp Thr Gln Glu

Lys Glu Val Arg Ala 5Lys Glu Val Arg Ala 5

Met Val Gly Ser Asp ValMet Val Gly Ser Asp Val

1515

Leu Ser Cys AlaLeu Ser Cys Ala

Cys Pro Glu Gly SerCys Pro Glu Gly Ser

Arg Phe Asp Leu Asn AspArg Phe Asp Leu Asn Asp

Tyr Val Tyr TrpTyr Val Tyr Trp

Gln Thr Ser Glu SerGln Thr Ser Glu Ser

GluGlu

ValVal

HisHis

Lys Thr Val Val Thr TyrLys Thr Val Val Thr Tyr

- 758 044346- 758 044346

Ile Pro Gln Gln Ser Ser LeuIle Pro Gln Gln Ser Ser Leu

50555055

Arg Ala Leu Met Ser Pro AlaArg Ala Leu Met Ser Pro Ala

65706570

Arg Leu Phe Gln Val Thr Pro 85Arg Leu Phe Gln Val Thr Pro 85

Glu Glu Asn Asn Val Val Asp Asp Ser 60 Ser 60 Arg Arg Tyr Tyr Arg Arg Asn Asn Gly Gly Met Met Leu Leu Arg 75 Arg 75 Gly Gly Asp Asp Phe Phe Ser Ser Leu 80 Leu 80 Gln Gln Asp Asp Glu 90 Glu 90 Gln Gln Lys Lys Phe Phe His His Cys 95 Cys 95 Leu Leu

Val Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe Gln Glu ValVal Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val

100105100105

Leu Ser Val Glu ValLeu Ser Val Glu Val

110110

Thr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser ValThr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser Val

115120 <210>591 <211>122 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>115120 <210>591 <211>122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v112 IgV <400>591<223> ICOSL v112 IgV <400>591

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val Glu 1 5 1015Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val Glu 1 5 1015

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp Val 20 2530Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp Val 20 2530

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr His 35 4045Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr His 35 4045

Ile Pro Gln Gln Ser Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg Asn 50 5560Ile Pro Gln Gln Ser Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg Asn 50 5560

Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser Leu 65 70 7580Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser Leu 65 70 7580

Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys Leu 85 9095Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys Leu 85 9095

Val Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu ValVal Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu Val

100 105110100 105110

Thr Leu His Val Ala Ala Gln Phe Ser ValThr Leu His Val Ala Ala Gln Phe Ser Val

115120 <210> 592115120 <210> 592

- 759 044346 <211> 122 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>- 759 044346 <211> 122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v113 IgV <400> 592<223> ICOSL v113 IgV <400> 592

Asp Thr Gln Glu LysAsp Thr Gln Glu Lys

55

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala CysLeu Ser Cys Ala Cys

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Asn Ser 50Ile Pro Gln Asn Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Gln Val 85Arg Leu Phe Gln Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Gln Phe Ser ValAla Gln Phe Ser Val

120 <210> 593 <211> 122 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>120 <210> 593 <211> 122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v126 IgV <400> 593<223> ICOSL v126 IgV <400> 593

Asp Thr Gln GluAsp Thr Gln Glu

Lys Glu Val Arg Ala 5Lys Glu Val Arg Ala 5

Met Val Gly Ser Asp ValMet Val Gly Ser Asp Val

1515

Leu Ser Cys AlaLeu Ser Cys Ala

Cys Pro Glu Gly SerCys Pro Glu Gly Ser

Arg Phe Asp Leu Asn AspArg Phe Asp Leu Asn Asp

Tyr Val Tyr TrpTyr Val Tyr Trp

Gln Thr Ser Glu SerGln Thr Ser Glu Ser

GluGlu

ValVal

HisHis

Lys Thr Val Val Thr TyrLys Thr Val Val Thr Tyr

- 760 044346- 760 044346

Ile Pro Gln His Ser Ser LeuIle Pro Gln His Ser Ser Leu

50555055

Arg Ala Leu Met Ser Pro AlaArg Ala Leu Met Ser Pro Ala

65706570

Arg Leu Phe Gln Val Thr Pro 85Arg Leu Phe Gln Val Thr Pro 85

Glu Glu Asn Asn Val Val Asp Asp Ser 60 Ser 60 Arg Arg Tyr Tyr Arg Arg Asn Asn Gly Gly Met Met Leu Leu Arg 75 Arg 75 Gly Gly Asp Asp Phe Phe Ser Ser Leu 80 Leu 80 Gln Gln Asp Asp Glu 90 Glu 90 Gln Gln Lys Lys Phe Phe His His Cys 95 Cys 95 Leu Leu

Val Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe Gln Glu ValVal Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val

100105100105

Leu Ser Val Glu ValLeu Ser Val Glu Val

110110

Thr Leu His Val Ala Ala Gln Phe Ser ValThr Leu His Val Ala Ala Gln Phe Ser Val

115120 <210>594 <211>122 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>115120 <210>594 <211>122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v137 IgV <400>594<223> ICOSL v137 IgV <400>594

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val Glu 1 5 1015Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val Glu 1 5 1015

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp Val 20 2530Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp Val 20 2530

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr His 35 4045Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr His 35 4045

Ile Pro Gln Asn Ser Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg Asn 50 5560Ile Pro Gln Asn Ser Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg Asn 50 5560

Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser Leu 65 70 7580Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser Leu 65 70 7580

Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys Leu 85 9095Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys Leu 85 9095

Val Leu Ser Arg Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu ValVal Leu Ser Arg Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu Val

100 105110100 105110

Thr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser ValThr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser Val

115120 <210> 595115120 <210> 595

- 761 044346 <211> 122 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>- 761 044346 <211> 122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v153 IgV <400> 595<223> ICOSL v153 IgV <400> 595

Asp Thr Gln Glu LysAsp Thr Gln Glu Lys

55

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala CysLeu Ser Cys Ala Cys

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

Thr Leu Arg Val Ala 115Thr Leu Arg Val Ala 115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120 <210> 596 <211> 122 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>120 <210> 596 <211> 122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v154 IgV <400> 596<223> ICOSL v154 IgV <400> 596

Asp Thr Gln GluAsp Thr Gln Glu

Lys Glu Val Arg Ala 5Lys Glu Val Arg Ala 5

Met Val Gly Ser Asp ValMet Val Gly Ser Asp Val

1515

Leu Ser Cys AlaLeu Ser Cys Ala

Cys Pro Glu Gly SerCys Pro Glu Gly Ser

Arg Phe Asp Leu Asn AspArg Phe Asp Leu Asn Asp

Tyr Val Tyr TrpTyr Val Tyr Trp

Gln Thr Ser Glu SerGln Thr Ser Glu Ser

GluGlu

ValVal

HisHis

Lys Thr Val Val Thr TyrLys Thr Val Val Thr Tyr

- 762 044346- 762 044346

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Arg SerVal Leu Ser Arg Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

Thr Leu Arg Val Ala 115Thr Leu Arg Val Ala 115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120 <210> 597 <211> 122 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>120 <210> 597 <211> 122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v163 IgV < 400> 597<223> ICOSL v163 IgV <400> 597

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala CysLeu Ser Cys Ala Cys

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asp AspPhe Asp Leu Asp Asp

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser GluThr Ser Glu Ser Glu

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Ser Ser 50Ile Pro Gln Ser Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

Thr Leu Arg Val Ala 115Thr Leu Arg Val Ala 115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120 <210> 598120 <210> 598

- 763 044346 <211> 122 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>- 763 044346 <211> 122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v164 IgV <400> 598<223> ICOSL v164 IgV <400> 598

Asp Thr Gln Glu LysAsp Thr Gln Glu Lys

55

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala CysLeu Ser Cys Ala Cys

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asp Asp 30Phe Asp Leu Asp Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser GluThr Ser Glu Ser Glu

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Ser Ser 50Ile Pro Gln Ser Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

Thr Leu Arg Val Ala 115Thr Leu Arg Val Ala 115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120 <210> 599 <211> 122 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>120 <210> 599 <211> 122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v173 IgV <400> 599<223> ICOSL v173 IgV <400> 599

Asp Thr Gln GluAsp Thr Gln Glu

Lys Glu Val Arg Ala 5Lys Glu Val Arg Ala 5

Met Val Gly Ser Asp ValMet Val Gly Ser Asp Val

1515

Leu Ser Cys AlaLeu Ser Cys Ala

Cys Pro Glu Gly SerCys Pro Glu Gly Ser

Arg Phe Asp Leu Asn AspArg Phe Asp Leu Asn Asp

Tyr Val Tyr TrpTyr Val Tyr Trp

Gln Thr Ser Glu SerGln Thr Ser Glu Ser

GluGlu

ValVal

HisHis

Lys Thr Val Val Thr TyrLys Thr Val Val Thr Tyr

- 764 044346- 764 044346

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Pro SerVal Leu Ser Pro Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

Thr Leu Arg Val Ala 115Thr Leu Arg Val Ala 115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120 <210> 600 <211> 208 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>120 <210> 600 <211> 208 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL WT ECD <400> 600<223> ICOSL WT ECD <400> 600

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Укороченный вариантShort version

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala CysLeu Ser Cys Ala Cys

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn AspPhe Asp Leu Asn Asp

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Asn Ser 50Ile Pro Gln Asn Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

Asp Glu Leu Thr PheAsp Glu Leu Thr Phe

Thr Cys Thr Ser IleThr Cys Thr Ser Ile

- 765 044346- 765 044346

130130

135135

140140

Gly Tyr Pro 145Gly Tyr Pro 145

Leu Leu AspLeu Leu Asp

Arg Pro AsnArg Pro Asn

150150

Val Tyr Trp Ile Asn Lys Thr Asp AsnVal Tyr Trp Ile Asn Lys Thr Asp Asn

155155

Gly Leu TyrGly Leu Tyr

Val Asn IleVal Asn Ile

195195

Gln Ala LeuGln Ala Leu

165165

Asp Val Val 180Asp Val Val 180

Gly Cys CysGly Cys Cys

Gln Asn Asp Thr Val Phe Leu Asn Met 170175Gln Asn Asp Thr Val Phe Leu Asn Met 170175

Ser Val Leu Arg Ile Ala Arg Thr Pro 185190Ser Val Leu Arg Ile Ala Arg Thr Pro 185190

Ile Glu Asn Val Leu Leu Gln Gln AsnIle Glu Asn Val Leu Leu Gln Gln Asn

200205200205

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

Leu <210> 601 <211> 213 <212> БЕЛОК <213> Искусственная <220>Leu <210> 601 <211> 213 <212> PROTEIN <213> Artificial <220>

<223> ICOSL WT ECD <400> 601<223> ICOSL WT ECD <400> 601

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5 последовательностьAsp Thr Gln Glu Lys 1 5 sequence

Укороченный вариантShort version

Glu Val Arg Ala Met 10Glu Val Arg Ala Met 10

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Asn Ser 50Ile Pro Gln Asn Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

- 766 044346- 766 044346

Gly Tyr Pro Arg Pro Asn Val TyrGly Tyr Pro Arg Pro Asn Val Tyr

145 150145 150

Trp Ile Asn Lys Thr Asp Asn 155Trp Ile Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln Ala Leu Gln AsnLeu Leu Asp Gln Ala Leu Gln Asn

165165

Asp Thr Val Phe Leu Asn MetAsp Thr Val Phe Leu Asn Met

170 175170 175

Gly Leu Tyr Asp Val Val Ser Val 180Gly Leu Tyr Asp Val Val Ser Val 180

Leu Arg Ile Ala Arg Thr ProLeu Arg Ile Ala Arg Thr Pro

185 190185 190

Val Asn Ile Gly Cys Cys Ile GluVal Asn Ile Gly Cys Cys Ile Glu

195 200195 200

Asn Val Leu Leu Gln Gln AsnAsn Val Leu Leu Gln Gln Asn

205205

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210 <210> 602 <211> 207 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>210 <210> 602 <211> 207 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL WT ECD Укороченный вариант 4 <400>602<223> ICOSL WT ECD Short version 4 <400>602

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp ValAsp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val

5 10155 1015

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn AspLeu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp

25302530

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 4045Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 4045

Ile Pro Gln Asn Ser Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 5560Ile Pro Gln Asn Ser Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 5560

Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 65 7075Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 65 7075

Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 85 9095Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 85 9095

Val Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu

100 105110100 105110

Thr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser Val Pro Val Val Ser AlaThr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser Val Pro Val Val Ser Ala

115 120125115 120125

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

- 767 044346- 767 044346

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr PheAsp Glu Leu Thr Phe

135135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205 <210> 603 <211> 206 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>205 <210> 603 <211> 206 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL WT ECD Укороченный вариант 5 <400>603<223> ICOSL WT ECD Short version 5 <400>603

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp ValAsp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val

5 10155 1015

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn AspLeu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp

25302530

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 4045Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 4045

Ile Pro Gln Asn Ser Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 5560Ile Pro Gln Asn Ser Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 5560

Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 65 7075Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 65 7075

Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 85 9095Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 85 9095

Val Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu

100 105110100 105110

Thr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser Val Pro Val Val Ser AlaThr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser Val Pro Val Val Ser Ala

115 120125115 120125

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

- 768 044346- 768 044346

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr PheAsp Glu Leu Thr Phe

135135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln GlnLeu Leu Gln Gln

205 <210> 604 <211> 204 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>205 <210> 604 <211> 204 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL WT ECD <400> 604<223> ICOSL WT ECD <400> 604

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Укороченный вариантShort version

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala CysLeu Ser Cys Ala Cys

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn AspPhe Asp Leu Asn Asp

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Asn Ser 50Ile Pro Gln Asn Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

Asp Glu Leu Thr PheAsp Glu Leu Thr Phe

Thr Cys Thr Ser IleThr Cys Thr Ser Ile

- 769 044346- 769 044346

130130

135135

140140

Gly Tyr Pro Arg Pro AsnGly Tyr Pro Arg Pro Asn

145 150145 150

Val Tyr Trp Ile Asn Lys Thr Asp AsnVal Tyr Trp Ile Asn Lys Thr Asp Asn

155155

Leu Leu Asp Gln Ala LeuLeu Leu Asp Gln Ala Leu

165165

Gly Leu Tyr Asp Val ValGly Leu Tyr Asp Val Val

180180

Val Asn Ile Gly Cys CysVal Asn Ile Gly Cys Cys

195195

Gln Asn Asp Thr Val Phe Leu Asn Met 170 175Gln Asn Asp Thr Val Phe Leu Asn Met 170 175

Ser Val Leu Arg Ile Ala Arg Thr Pro 185 190Ser Val Leu Arg Ile Ala Arg Thr Pro 185 190

Ile Glu Asn Val Leu LeuIle Glu Asn Val Leu Leu

200200

Ser 160Ser 160

ArgArg

Ser <210> 605 <211> 201 <212> БЕЛОК <213> Искусственная <220>Ser <210> 605 <211> 201 <212> PROTEIN <213> Artificial <220>

<223> ICOSL WT ECD <400> 605<223> ICOSL WT ECD <400> 605

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5 последовательностьAsp Thr Gln Glu Lys 1 5 sequence

Укороченный вариантShort version

Glu Val Arg Ala Met 10Glu Val Arg Ala Met 10

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Asn Ser 50Ile Pro Gln Asn Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr PheAsp Glu Leu Thr Phe

135135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

- 770 044346- 770 044346

Gly Tyr Pro Arg Pro Asn Val TyrGly Tyr Pro Arg Pro Asn Val Tyr

145 150145 150

Trp Ile Asn Lys Thr Asp Asn 155Trp Ile Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln Ala Leu Gln Asn 165Leu Leu Asp Gln Ala Leu Gln Asn 165

Gly Leu Tyr Asp Val Val Ser Val 180Gly Leu Tyr Asp Val Val Ser Val 180

Asp Thr Val Phe Leu Asn MetAsp Thr Val Phe Leu Asn Met

170 175170 175

Leu Arg Ile Ala Arg Thr ProLeu Arg Ile Ala Arg Thr Pro

185 190185 190

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

Val Asn Ile Gly Cys CysVal Asn Ile Gly Cys Cys

195195

Ile Glu AsnIle Glu Asn

200 <210> 606 <211> 209 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>200 <210> 606 <211> 209 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL WT ECD <400> 606<223> ICOSL WT ECD <400> 606

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Укороченный вариантShort version

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Asn Ser 50Ile Pro Gln Asn Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr PheAsp Glu Leu Thr Phe

135135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

- 771 044346- 771 044346

Gly Tyr Pro Arg Pro Asn Val TyrGly Tyr Pro Arg Pro Asn Val Tyr

145 150145 150

Leu Leu Asp Gln Ala Leu Gln AsnLeu Leu Asp Gln Ala Leu Gln Asn

165165

Gly Leu Tyr Asp Val Val Ser Val 180Gly Leu Tyr Asp Val Val Ser Val 180

Val Asn Ile Gly Cys Cys Ile GluVal Asn Ile Gly Cys Cys Ile Glu

195 200195 200

Trp Trp Ile Ile Asn 155 Asn 155 Lys Lys Thr Thr Asp Asp Asn Asn Asp Asp Thr 170 Thr 170 Val Val Phe Phe Leu Leu Asn Asn Met 175 Met 175 Leu 185 Leu 185 Arg Arg Ile Ile Ala Ala Arg Arg Thr 190 Thr 190 Pro Pro Asn Asn Val Val Leu Leu Leu Leu Gln 205 Gln 205 Gln Gln Asn Asn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

Thr <210> 607 <211> 208 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Thr <210> 607 <211> 208 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL N207A ECD Укороченный вариант 2 < 400> 607< 223> ICOSL N207A ECD Short version 2 < 400> 607

AspAsp

ThrThr

GlnGln

GluGlu

Lys 5Lys 5

GluGlu

ValVal

ArgArg

AlaAla

Met 10Met 10

ValVal

GlyGly

SerSer

AspAsp

Val 15Val 15

LeuLeu

SerSer

CysCys

Ala 20Ala 20

CysCys

ProPro

GluGlu

GlyGly

Ser 25Ser 25

ArgArg

PhePhe

AspAsp

LeuLeu

Asn 30Asn 30

AspAsp

TyrTyr

ValVal

Tyr 35Tyr 35

TrpTrp

GlnGln

ThrThr

SerSer

Glu 40Glu 40

SerSer

LysLys

ThrThr

ValVal

Val 45Val 45

ThrThr

TyrTyr

IleIle

Pro 50Pro 50

GlnGln

AsnAsn

SerSer

SerSer

Leu 55Leu 55

GluGlu

AsnAsn

ValVal

AspAsp

Ser 60Ser 60

ArgArg

TyrTyr

ArgArg

Arg 65Arg 65

AlaAla

LeuLeu

MetMet

SerSer

Pro 70Pro 70

AlaAla

GlyGly

MetMet

LeuLeu

Arg 75Arg 75

GlyGly

AspAsp

PhePhe

SerSer

ArgArg

LeuLeu

PhePhe

AsnAsn

Val 85Val 85

ThrThr

ProPro

GlnGln

AspAsp

Glu 90Glu 90

GlnGln

LysLys

PhePhe

HisHis

Cys 95Cys 95

ValVal

LeuLeu

SerSer

GlnGln

100100

SerSer

LeuLeu

GlyGly

PhePhe

GlnGln

105105

GluGlu

ValVal

LeuLeu

SerSer

ValVal

110110

GluGlu

ThrThr

LeuLeu

HisHis

115115

ValVal

AlaAla

AlaAla

AsnAsn

PhePhe

120120

SerSer

ValVal

ProPro

ValVal

ValVal

125125

SerSer

AlaAla

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

- 772 044346- 772 044346

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr PheAsp Glu Leu Thr Phe

135135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AlaLeu Leu Gln Gln Ala

205205

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

Leu <210> 608 <211> 208 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Leu <210> 608 <211> 208 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL N207G ECD Укороченный вариант 2 < 400> 608< 223> ICOSL N207G ECD Short version 2 < 400> 608

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala CysLeu Ser Cys Ala Cys

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn AspPhe Asp Leu Asn Asp

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Asn Ser 50Ile Pro Gln Asn Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

Asp Glu Leu Thr PheAsp Glu Leu Thr Phe

Thr Cys Thr Ser IleThr Cys Thr Ser Ile

- 773 044346- 773 044346

ThrThr

AspAsp

AsnAsn

130130

135135

140140

Gly 145Gly 145

TyrTyr

ProPro

ArgArg

ProPro

AsnAsn

150150

ValVal

TyrTyr

TrpTrp

IleIle

AsnAsn

155155

LysLys

LeuLeu

LeuLeu

AspAsp

GlnGln

AlaAla

165165

LeuLeu

GlnGln

AsnAsn

AspAsp

ThrThr

170170

ValVal

PhePhe

LeuLeu

AsnAsn

MetMet

175175

GlyGly

LeuLeu

TyrTyr

AspAsp

180180

ValVal

ValVal

SerSer

ValVal

LeuLeu

185185

ArgArg

IleIle

AlaAla

ArgArg

ThrThr

190190

ProPro

ValVal

AsnAsn

IleIle

195195

GlyGly

CysCys

CysCys

IleIle

Glu 200Glu 200

AsnAsn

ValVal

LeuLeu

LeuLeu

GlnGln

205205

GlnGln

GlyGly

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

Leu <210> 609 <211> 208 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Leu <210> 609 <211> 208 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL L208G ECD Укороченный вариант 2 <400> 609<223> ICOSL L208G ECD Short version 2 <400> 609

Asp Thr Gln Glu LysAsp Thr Gln Glu Lys

55

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Asn Ser 50Ile Pro Gln Asn Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

- 774 044346- 774 044346

Gly Tyr Pro Arg Pro Asn Val TyrGly Tyr Pro Arg Pro Asn Val Tyr

145 150145 150

Trp Ile Asn Lys Thr Asp Asn 155Trp Ile Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln Ala Leu Gln AsnLeu Leu Asp Gln Ala Leu Gln Asn

165165

Asp Thr Val Phe Leu Asn MetAsp Thr Val Phe Leu Asn Met

170 175170 175

Gly Leu Tyr Asp Val Val Ser Val 180Gly Leu Tyr Asp Val Val Ser Val 180

Leu Arg Ile Ala Arg Thr ProLeu Arg Ile Ala Arg Thr Pro

185 190185 190

Val Asn Ile Gly Cys Cys Ile GluVal Asn Ile Gly Cys Cys Ile Glu

195 200195 200

Asn Val Leu Leu Gln Gln AsnAsn Val Leu Leu Gln Gln Asn

205205

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

Gly <210> 610 <211> 213 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Gly <210> 610 <211> 213 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL N207A ECD Укороченный вариант 3 <400> 610<223> ICOSL N207A ECD Short version 3 <400> 610

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala CysLeu Ser Cys Ala Cys

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Asn Ser 50Ile Pro Gln Asn Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr PheAsp Glu Leu Thr Phe

135135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

- 775 044346- 775 044346

Gly Tyr Pro 145Gly Tyr Pro 145

Arg Pro AsnArg Pro Asn

150150

Leu Leu AspLeu Leu Asp

Gln Ala LeuGln Ala Leu

165165

Gly Leu TyrGly Leu Tyr

Asp Val Val 180Asp Val Val 180

Val Asn IleVal Asn Ile

195195

Gly Cys CysGly Cys Cys

Val Tyr TrpVal Tyr Trp

Gln Asn AspGln Asn Asp

Ser Val LeuSer Val Leu

185185

Ile Glu AsnIle Glu Asn

200200

Ile Asn LysIle Asn Lys

155155

Thr Val Phe 170Thr Val Phe 170

Arg Ile AlaArg Ile Ala

Val Leu LeuVal Leu Leu

Thr Asp AsnThr Asp Asn

Leu Asn MetLeu Asn Met

175175

Arg Thr ProArg Thr Pro

190190

Gln Gln Ala 205Gln Gln Ala 205

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

Thr Val GlyThr Val Gly

210210

Ser Gln <210> 611 <211> 213 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Ser Gln <210> 611 <211> 213 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL N207G ECD Укороченный вариант 3 < 400> 611< 223> ICOSL N207G ECD Short version 3 < 400> 611

AspAsp

ThrThr

GlnGln

GluGlu

Lys 5Lys 5

GluGlu

ValVal

ArgArg

AlaAla

Met 10Met 10

ValVal

GlyGly

SerSer

AspAsp

Val 15Val 15

LeuLeu

SerSer

CysCys

AlaAla

CysCys

ProPro

GluGlu

GlyGly

SerSer

ArgArg

PhePhe

AspAsp

LeuLeu

Asn 30Asn 30

AspAsp

TyrTyr

ValVal

Tyr 35Tyr 35

TrpTrp

GlnGln

ThrThr

SerSer

Glu 40Glu 40

SerSer

LysLys

ThrThr

ValVal

Val 45Val 45

ThrThr

TyrTyr

IleIle

Pro 50Pro 50

GlnGln

AsnAsn

SerSer

SerSer

Leu 55Leu 55

GluGlu

AsnAsn

ValVal

AspAsp

Ser 60Ser 60

ArgArg

TyrTyr

ArgArg

Arg 65Arg 65

AlaAla

LeuLeu

MetMet

SerSer

Pro 70Pro 70

AlaAla

GlyGly

MetMet

LeuLeu

Arg 75Arg 75

GlyGly

AspAsp

PhePhe

SerSer

ArgArg

LeuLeu

PhePhe

AsnAsn

Val 85Val 85

ThrThr

ProPro

GlnGln

AspAsp

Glu 90Glu 90

GlnGln

LysLys

PhePhe

HisHis

Cys 95Cys 95

ValVal

LeuLeu

SerSer

GlnGln

100100

SerSer

LeuLeu

GlyGly

PhePhe

GlnGln

105105

GluGlu

ValVal

LeuLeu

SerSer

ValVal

110110

GluGlu

ThrThr

LeuLeu

HisHis

115115

ValVal

AlaAla

AlaAla

AsnAsn

PhePhe

120120

SerSer

ValVal

ProPro

ValVal

ValVal

125125

SerSer

AlaAla

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

- 776 044346- 776 044346

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr PheAsp Glu Leu Thr Phe

135135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln GlyLeu Leu Gln Gln Gly

205205

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210 <210> 612 <211> 213 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>210 <210> 612 <211> 213 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL L208G ECD Укороченный вариант 3 <400> 612<223> ICOSL L208G ECD Short version 3 <400> 612

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn AspLeu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp

25 3025 30

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 40 45Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 40 45

Ile Pro Gln Asn Ser Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 55 60Ile Pro Gln Asn Ser Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 55 60

Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 65 70 75Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 65 70 75

Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 85 90 95Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 85 90 95

Val Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu

100 105 110100 105 110

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

Thr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser Val Pro Val Val Ser AlaThr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser Val Pro Val Val Ser Ala

- 777 044346- 777 044346

115115

120120

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr PheAsp Glu Leu Thr Phe

135135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

GlyGly

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210 <210>210 <210>

<211><211>

<212><212>

613613

207 БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>207 PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL N207A ECD Укороченный вариант 4 <400>613<223> ICOSL N207A ECD Short version 4 <400>613

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp ValAsp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val

5 10155 1015

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn AspLeu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp

25302530

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 4045Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 4045

Ile Pro Gln Asn Ser Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 5560Ile Pro Gln Asn Ser Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 5560

Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 65 7075Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 65 7075

Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 85 9095Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 85 9095

Val Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu

100 105110100 105110

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

- 778 044346- 778 044346

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AlaLeu Leu Gln Gln Ala

205 <210> 614 <211> 207 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>205 <210> 614 <211> 207 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL N207G ECD Укороченный вариант 4 <400> 614<223> ICOSL N207G ECD Short version 4 <400> 614

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Asn Ser 50Ile Pro Gln Asn Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

- 779 044346- 779 044346

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln GlyLeu Leu Gln Gln Gly

205 <210> 615 <211> 209 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>205 <210> 615 <211> 209 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL N207A ECD Укороченный вариант 8 <400> 615< 223> ICOSL N207A ECD Short version 8 <400> 615

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala CysLeu Ser Cys Ala Cys

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn AspPhe Asp Leu Asn Asp

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Asn Ser 50Ile Pro Gln Asn Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

- 780 044346- 780 044346

Thr Leu His ValThr Leu His Val

115115

His Ser Pro SerHis Ser Pro Ser

130130

Gly Tyr Pro Arg 145Gly Tyr Pro Arg 145

Ala Ala Asn Phe 120Ala Ala Asn Phe 120

Gln Asp Glu Leu 135Gln Asp Glu Leu 135

Pro Asn Val Tyr 150Pro Asn Val Tyr 150

Ser Val Pro ValSer Val Pro Val

Thr Phe Thr CysThr Phe Thr Cys

140140

Trp Ile Asn LysTrp Ile Asn Lys

155155

Val Ser Ala Pro 125Val Ser Ala Pro 125

Thr Ser Ile AsnThr Ser Ile Asn

Thr Asp Asn SerThr Asp Asn Ser

160160

Leu Leu Asp GlnLeu Leu Asp Gln

Ala Leu Gln Asn 165Ala Leu Gln Asn 165

Asp Thr Val Phe 170Asp Thr Val Phe 170

Leu Asn Met ArgLeu Asn Met Arg

175175

Gly Leu Tyr AspGly Leu Tyr Asp

180180

Val Val Ser ValVal Val Ser Val

Leu Arg Ile Ala 185Leu Arg Ile Ala 185

Arg Thr Pro Ser 190Arg Thr Pro Ser 190

Val Asn Ile GlyVal Asn Ile Gly

195195

Cys Cys Ile GluCys Cys Ile Glu

200200

Asn Val Leu LeuAsn Val Leu Leu

Gln Gln Ala Leu 205Gln Gln Ala Leu 205

Thr <210> 616 <211> 209 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Thr <210> 616 <211> 209 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL N207G ECD Укороченный вариант 8 < 400> 616< 223> ICOSL N207G ECD Short version 8 < 400> 616

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg 1 5Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg 1 5

Ala Met Val Gly Ser Asp Val GluAla Met Val Gly Ser Asp Val Glu

1515

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly 20Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly 20

Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp Val 25 30Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp Val 25 30

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser GluTyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu

4040

Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr His 45Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr His 45

Ile Pro Gln Asn Ser Ser Leu GluIle Pro Gln Asn Ser Ser Leu Glu

5555

Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg Asn 60Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg Asn 60

Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly 65 70Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly 65 70

Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser LeuMet Leu Arg Gly Asp Phe Ser Leu

8080

Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln 85Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln 85

Asp Glu Gln Lys Phe His Cys LeuAsp Glu Gln Lys Phe His Cys Leu

9595

Val Leu Ser Gln Ser Leu Gly PheVal Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe

Gln Glu Val Leu Ser Val Glu ValGln Glu Val Leu Ser Val Glu Val

- 781 044346- 781 044346

100100

105105

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln GlyLeu Leu Gln Gln Gly

205205

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

Thr <210> 617 <211> 209 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Thr <210> 617 <211> 209 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL L208G ECD Укороченный вариант 8 <400> 617< 223> ICOSL L208G ECD Short version 8 <400> 617

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Asn Ser 50Ile Pro Gln Asn Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

- 782 044346- 782 044346

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

GlyGly

Thr <210> 618 <211> 208 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Thr <210> 618 <211> 208 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL N207A/L208G ECD Укороченный вариант 2 < 400> 618< 223> ICOSL N207A/L208G ECD Short version 2 < 400> 618

Asp Thr Gln Glu LysAsp Thr Gln Glu Lys

55

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Asn Ser 50Ile Pro Gln Asn Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

LeuLeu

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe SerArg Gly Asp Phe Ser

- 783 044346- 783 044346

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AlaLeu Leu Gln Gln Ala

205205

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

Gly <210> 619 <211> 208 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Gly <210> 619 <211> 208 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL N207G/L208G ECD Укороченный вариант 2 < 400> 619< 223> ICOSL N207G/L208G ECD Short version 2 < 400> 619

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Asn Ser 50Ile Pro Gln Asn Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

LeuLeu

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

- 784 044346- 784 044346

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln GlyLeu Leu Gln Gln Gly

205205

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

Gly <210> 620 <211> 213 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Gly <210> 620 <211> 213 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL N207A/L208G ECD Укороченный вариант 3 <400> 620< 223> ICOSL N207A/L208G ECD Short version 3 <400> 620

Asp Thr Gln 1Asp Thr Gln 1

Leu Ser CysLeu Ser Cys

Tyr Val TyrTyr Val Tyr

Ile Pro GlnIle Pro Gln

Arg Ala Leu 65Arg Ala Leu 65

Glu Lys Glu 5Glu Lys Glu 5

Ala Cys Pro 20Ala Cys Pro 20

Trp Gln ThrTrp Gln Thr

Asn Ser SerAsn Ser Ser

Met Ser Pro 70Met Ser Pro 70

Asn Val ThrAsn Val Thr

Val Arg AlaVal Arg Ala

Glu Gly Ser 25Glu Gly Ser 25

Ser Glu Ser 40Ser Glu Ser 40

Leu Glu Asn 55Leu Glu Asn 55

Ala Gly MetAla Gly Met

Pro Gln AspPro Gln Asp

Met Val Gly 10Met Val Gly 10

Arg Phe AspArg Phe Asp

Lys Thr ValLys Thr Val

Val Asp Ser 60Val Asp Ser 60

Leu Arg Gly 75Leu Arg Gly 75

Glu Gln LysGlu Gln Lys

Ser Asp Val 15Ser Asp Val 15

Leu Asn Asp 30Leu Asn Asp 30

Val Thr Tyr 45Val Thr Tyr 45

Arg Tyr ArgArg Tyr Arg

Asp Phe SerAsp Phe Ser

Phe His CysPhe His Cys

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

Arg Leu PheArg Leu Phe

- 785 044346- 785 044346

90 9590 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AlaLeu Leu Gln Gln Ala

205205

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

GlyGly

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210 <210> 621 <211> 213 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>210 <210> 621 <211> 213 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL N207G/L208G ECD Укороченный вариант 3 < 400> 621< 223> ICOSL N207G/L208G ECD Short version 3 < 400> 621

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala CysLeu Ser Cys Ala Cys

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn AspPhe Asp Leu Asn Asp

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Asn Ser 50Ile Pro Gln Asn Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

LeuLeu

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe SerArg Gly Asp Phe Ser

- 786 044346- 786 044346

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr PheAsp Glu Leu Thr Phe

135135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln GlyLeu Leu Gln Gln Gly

205205

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

GlyGly

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210 <210> 622 <211> 209 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>210 <210> 622 <211> 209 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL N207A/L208G ECD Укороченный вариант 8 <400> 622<223> ICOSL N207A/L208G ECD Short version 8 <400> 622

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val 1 5Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val 1 5

Arg Ala Met Val Gly Ser Asp ValArg Ala Met Val Gly Ser Asp Val

1515

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu 20Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu 20

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser 35Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser 35

Ile Pro Gln Asn Ser Ser Leu 50 55Ile Pro Gln Asn Ser Ser Leu 50 55

Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn AspGly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp

30thirty

Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 40 45Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 40 45

Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg 60Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg 60

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

- 787 044346- 787 044346

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AlaLeu Leu Gln Gln Ala

205205

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

GlyGly

Thr <210> 623 <211> 209 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Thr <210> 623 <211> 209 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL N207G/L208G ECD Укороченный вариант 8 <400> 623<223> ICOSL N207G/L208G ECD Short version 8 <400> 623

Asp Thr Gln Glu 1Asp Thr Gln Glu 1

Lys Glu Val Arg Ala 5Lys Glu Val Arg Ala 5

Met Val Gly Ser Asp Val 10 15Met Val Gly Ser Asp Val 10 15

Leu Ser Cys AlaLeu Ser Cys Ala

Cys Pro Glu Gly SerCys Pro Glu Gly Ser

Arg Phe Asp Leu Asn AspArg Phe Asp Leu Asn Asp

Tyr Val Tyr TrpTyr Val Tyr Trp

Gln Thr Ser Glu SerGln Thr Ser Glu Ser

GluGlu

ValVal

HisHis

Lys Thr Val Val Thr TyrLys Thr Val Val Thr Tyr

- 788 044346- 788 044346

Ile Pro Gln Asn Ser 50Ile Pro Gln Asn Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln GlyLeu Leu Gln Gln Gly

205205

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

GlyGly

Thr <210> 624 <211> 238 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Thr <210> 624 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL N207A Полноразмерный ECD <400> 624<223> ICOSL N207A Full Size ECD <400> 624

Asp Thr Gln Glu 1Asp Thr Gln Glu 1

Lys Glu 5Lys Glu 5

Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp ValVal Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val

1515

Leu Ser Cys Ala 20Leu Ser Cys Ala 20

Cys ProCys Pro

Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn AspGlu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp

30thirty

GluGlu

ValVal

HisHis

Tyr Val Tyr TrpTyr Val Tyr Trp

Gln ThrGln Thr

Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr TyrSer Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr

- 789 044346- 789 044346

40 4540 45

Ile Pro Gln Asn Ser 50Ile Pro Gln Asn Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AlaLeu Leu Gln Gln Ala

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 625 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 625 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL N207G Полноразмерный ECD < 400> 625< 223> ICOSL N207G Full size ECD < 400> 625

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15

GluGlu

- 790 044346- 790 044346

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Asn Ser 50Ile Pro Gln Asn Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr PheAsp Glu Leu Thr Phe

135135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln GlyLeu Leu Gln Gln Gly

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 626 <211> 238 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательностьAsn Ala Ala Thr 235 <210> 626 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence

- 791 044346 <220>- 791 044346 <220>

<223> ICOSL L208G <400> 626<223> ICOSL L208G <400> 626

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Полноразмерный ECDFull size ECD

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala CysLeu Ser Cys Ala Cys

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn AspPhe Asp Leu Asn Asp

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Asn Ser 50Ile Pro Gln Asn Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

GlyGly

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu 230Ser Thr Gly Glu 230

Lys Asn Ala Ala ThrLys Asn Ala Ala Thr

235235

- 792 044346 <210> 627 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>- 792 044346 <210> 627 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL N207A/L208G Полноразмерный ECD < 400> 627< 223> ICOSL N207A/L208G Full size ECD < 400> 627

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Asn Ser 50Ile Pro Gln Asn Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr PheAsp Glu Leu Thr Phe

135135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AlaLeu Leu Gln Gln Ala

205205

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

GlyGly

- 793 044346- 793 044346

Thr Val Gly Ser Gln Thr Gly AsnThr Val Gly Ser Gln Thr Gly Asn

210 215210 215

Asp Ile GlyAsp Ile Gly

Glu Arg Asp Lys 220Glu Arg Asp Lys 220

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val Ser Thr Gly Glu Lys Asn Ala Ala ThrThr Glu Asn Pro Val Ser Thr Gly Glu Lys Asn Ala Ala Thr

225 230 235 <210> 628 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>225 230 235 <210> 628 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL N207G/L208G Полноразмерный ECD < 400> 628< 223> ICOSL N207G/L208G Full size ECD < 400> 628

Asp Thr Gln Glu LysAsp Thr Gln Glu Lys

55

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Asn Ser 50Ile Pro Gln Asn Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

- 794 044346- 794 044346

Gly Gly Leu Leu Tyr Tyr Asp 180 Asp 180 Val Val Val Val Ser Ser Val Val Leu 185 Leu 185 Arg Arg Ile Ile Ala Ala Arg Arg Thr 190 Thr 190 Pro Pro Ser Ser Val Val Asn Asn Ile 195 Ile 195 Gly Gly Cys Cys Cys Cys Ile Ile Glu 200 Glu 200 Asn Asn Val Val Leu Leu Leu Leu Gln 205 Gln 205 Gln Gln Gly Gly Gly Gly Thr Thr Val 210 Val 210 Gly Gly Ser Ser Gln Gln Thr Thr Gly 215 Gly 215 Asn Asn Asp Asp Ile Ile Gly Gly Glu 220 Glu 220 Arg Arg Asp Asp Lys Lys Ile Ile Thr 225 Thr 225 Glu Glu Asn Asn Pro Pro Val Val Ser 230 Ser 230 Thr Thr Gly Gly Glu Glu Lys Lys Asn 235 Asn 235 Ala Ala Ala Ala Thr Thr

<210> 629 <211> 5 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220><210> 629 <211> 5 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> линкер EAAAK <400>629<223> linker EAAAK <400>629

Glu Ala Ala Ala Lys <210>630 <211>15 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Glu Ala Ala Ala Lys <210>630 <211>15 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> 3x линкер EAAAK <400>630<223> 3x linker EAAAK <400>630

Glu Ala Ala Ala Lys Glu Ala Ala Ala Lys Glu Ala Ala Ala Lys 1 5 1015 <210>631 <211>25 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Glu Ala Ala Ala Lys Glu Ala Ala Ala Lys Glu Ala Ala Ala Lys 1 5 1015 <210>631 <211>25 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> 5x линкер EAAAK <400>631<223> 5x linker EAAAK <400>631

Glu Ala Ala Ala Lys Glu Ala Ala Ala Lys Glu Ala Ala Ala Lys GluGlu Ala Ala Ala Lys Glu Ala Ala Ala Lys Glu Ala Ala Ala Lys Glu

5 10155 1015

Ala Ala Ala Lys Glu Ala Ala Ala Lys 2025 <210> 632Ala Ala Ala Lys Glu Ala Ala Ala Lys 2025 <210> 632

- 795 044346 <211> 231 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>- 795 044346 <211> 231 < 212> PROTEIN < 213> Artificial sequence <220>

< 223> Fc (C5S (C220S), R77C, (R292C), N82G (N297G), V87C (V302C), L232del (K447del)) < 400> 632< 223> Fc (C5S (C220S), R77C, (R292C), N82G (N297G), V87C (V302C), L232del (K447del)) < 400 > 632

GluGlu

ProPro

LysLys

SerSer

SerSer

AspAsp

LysLys

ThrThr

HisHis

ThrThr

CysCys

ProPro

ProPro

CysCys

ProPro

AlaAla

ProPro

GluGlu

LeuLeu

LeuLeu

GlyGly

GlyGly

ProPro

SerSer

ValVal

PhePhe

LeuLeu

PhePhe

ProPro

Pro 30Pro 30

LysLys

ProPro

LysLys

AspAsp

Thr 35Thr 35

LeuLeu

MetMet

IleIle

SerSer

Arg 40Arg 40

ThrThr

ProPro

GluGlu

ValVal

Thr 45Thr 45

CysCys

ValVal

ValVal

ValVal

Asp 50Asp 50

ValVal

SerSer

HisHis

GluGlu

Asp 55Asp 55

ProPro

GluGlu

ValVal

LysLys

Phe 60Phe 60

AsnAsn

TrpTrp

TyrTyr

ValVal

Asp 65Asp 65

GlyGly

ValVal

GluGlu

ValVal

His 70His 70

AsnAsn

AlaAla

LysLys

ThrThr

Lys 75Lys 75

ProPro

CysCys

GluGlu

GluGlu

Gln 80Gln 80

TyrTyr

GlyGly

SerSer

ThrThr

Tyr 85Tyr 85

ArgArg

CysCys

ValVal

SerSer

Val 90Val 90

LeuLeu

ThrThr

ValVal

LeuLeu

His 95His 95

GlnGln

AspAsp

TrpTrp

LeuLeu

AsnAsn

100100

GlyGly

LysLys

GluGlu

TyrTyr

LysLys

105105

CysCys

LysLys

ValVal

SerSer

AsnAsn

110110

LysLys

AlaAla

LeuLeu

ProPro

AlaAla

115115

ProPro

IleIle

GluGlu

LysLys

ThrThr

120120

IleIle

SerSer

LysLys

AlaAla

LysLys

125125

GlyGly

GlnGln

ProPro

ArgArg

GluGlu

130130

ProPro

GlnGln

ValVal

TyrTyr

ThrThr

135135

LeuLeu

ProPro

ProPro

SerSer

Arg 140Arg 140

GluGlu

GluGlu

MetMet

ThrThr

LysLys

145145

AsnAsn

GlnGln

ValVal

SerSer

LeuLeu

150150

ThrThr

CysCys

LeuLeu

ValVal

LysLys

155155

GlyGly

PhePhe

TyrTyr

ProPro

SerSer

160160

AspAsp

IleIle

AlaAla

ValVal

GluGlu

165165

TrpTrp

GluGlu

SerSer

AsnAsn

Gly 170Gly 170

GlnGln

ProPro

GluGlu

AsnAsn

AsnAsn

175175

TyrTyr

LysLys

ThrThr

ThrThr

ProPro

180180

ProPro

ValVal

LeuLeu

AspAsp

SerSer

185185

AspAsp

GlyGly

SerSer

PhePhe

PhePhe

190190

LeuLeu

TyrTyr

SerSer

LysLys

LeuLeu

195195

ThrThr

ValVal

AspAsp

LysLys

SerSer

200200

ArgArg

TrpTrp

GlnGln

GlnGln

Gly 205Gly 205

AsnAsn

ValVal

PhePhe

SerSer

CysCys

SerSer

ValVal

MetMet

HisHis

GluGlu

AlaAla

LeuLeu

HisHis

AsnAsn

HisHis

TyrTyr

ThrThr

GlnGln

LysLys

- 796 044346- 796 044346

210 215 220210 215 220

Ser Leu Ser Leu Ser Pro GlySer Leu Ser Leu Ser Pro Gly

225225

230 <210> 633 <211> 231 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>230 <210> 633 <211> 231 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> Fc с C220S/L234A/L235E/G237A/K447del <400> 633<223> Fc with C220S/L234A/L235E/G237A/K447del <400> 633

Glu Pro Lys Ser Ser 1 5Glu Pro Lys Ser Ser 1 5

Asp Lys Thr His ThrAsp Lys Thr His Thr

Cys Pro Pro Cys ProCys Pro Pro Cys Pro

Pro Glu Ala Glu GlyPro Glu Ala Glu Gly

Ala Pro Ser Val PheAla Pro Ser Val Phe

Leu Phe Pro Pro Lys 30Leu Phe Pro Pro Lys 30

Lys Asp Thr Leu Met 35Lys Asp Thr Leu Met 35

Ile Ser Arg Thr Pro 40Ile Ser Arg Thr Pro 40

Glu Val Thr Cys Val 45Glu Val Thr Cys Val 45

Val Asp Val Ser His 50Val Asp Val Ser His 50

Glu Asp Pro Glu Val 55Glu Asp Pro Glu Val 55

Lys Phe Asn Trp Tyr 60Lys Phe Asn Trp Tyr 60

Asp Gly Val Glu Val 65Asp Gly Val Glu Val 65

His Asn Ala Lys Thr 70His Asn Ala Lys Thr 70

Lys Pro Arg Glu Glu 75Lys Pro Arg Glu Glu 75

Tyr Asn Ser Thr Tyr 85Tyr Asn Ser Thr Tyr 85

Arg Val Val Ser Val 90Arg Val Val Ser Val 90

Leu Thr Val Leu HisLeu Thr Val Leu His

Asp Trp Leu Asn GlyAsp Trp Leu Asn Gly

100100

Lys Glu Tyr Lys CysLys Glu Tyr Lys Cys

105105

Lys Val Ser Asn LysLys Val Ser Asn Lys

110110

Leu Pro Ala Pro IleLeu Pro Ala Pro Ile

115115

Glu Lys Thr Ile Ser 120Glu Lys Thr Ile Ser 120

Lys Ala Lys Gly GlnLys Ala Lys Gly Gln

125125

Arg Glu Pro Gln ValArg Glu Pro Gln Val

130130

Tyr Thr Leu Pro ProTyr Thr Leu Pro Pro

135135

Ser Arg Glu Glu MetSer Arg Glu Glu Met

140140

Lys Asn Gln Val Ser 145Lys Asn Gln Val Ser 145

Leu Thr Cys Leu Val 150Leu Thr Cys Leu Val 150

Lys Gly Phe Tyr Pro 155Lys Gly Phe Tyr Pro 155

Asp Ile Ala Val GluAsp Ile Ala Val Glu

165165

Trp Glu Ser Asn GlyTrp Glu Ser Asn Gly

170170

Gln Pro Glu Asn AsnGln Pro Glu Asn Asn

175175

Lys Thr Thr Pro ProLys Thr Thr Pro Pro

180180

Val Leu Asp Ser AspVal Leu Asp Ser Asp

185185

Gly Ser Phe Phe LeuGly Ser Phe Phe Leu

190190

AlaAla

ProPro

ValVal

ValVal

Gln 80Gln 80

GlnGln

AlaAla

ProPro

ThrThr

Ser 160Ser 160

TyrTyr

TyrTyr

- 797 044346- 797 044346

Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys 195Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys 195

Ser Cys Ser Val Met His GluSer Cys Ser Val Met His Glu

210 215210 215

Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn ValSer Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val

200 205200 205

Ala Leu His Asn His Tyr Thr GlnAla Leu His Asn His Tyr Thr Gln

220220

PhePhe

LysLys

Ser Leu Ser Leu Ser Pro GlySer Leu Ser Leu Ser Pro Gly

225230 <210>634 <211>230 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>225230 <210>634 <211>230 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> Fc с C220S/E233P/L234V/L235A/G236del/S267K/K447del <400> 634<223> Fc with C220S/E233P/L234V/L235A/G236del/S267K/K447del <400> 634

Glu Pro Lys Ser Ser 1 5Glu Pro Lys Ser Ser 1 5

Asp Lys Thr His ThrAsp Lys Thr His Thr

Cys Pro Pro Cys ProCys Pro Pro Cys Pro

Pro Pro Val Ala GlyPro Pro Val Ala Gly

Pro Ser Val Phe LeuPro Ser Val Phe Leu

Phe Pro Pro Lys Pro 30Phe Pro Pro Lys Pro 30

Asp Thr Leu Met Ile 35Asp Thr Leu Met Ile 35

Ser Arg Thr Pro Glu 40Ser Arg Thr Pro Glu 40

Val Thr Cys Val Val 45Val Thr Cys Val Val 45

Asp Val Lys His Glu 50Asp Val Lys His Glu 50

Asp Pro Glu Val Lys 55Asp Pro Glu Val Lys 55

Phe Asn Trp Tyr Val 60Phe Asn Trp Tyr Val 60

Gly Val Glu Val His 65Gly Val Glu Val His 65

Asn Ala Lys Thr Lys 70Asn Ala Lys Thr Lys 70

Pro Arg Glu Glu Gln 75Pro Arg Glu Glu Gln 75

Asn Ser Thr Tyr Arg 85Asn Ser Thr Tyr Arg 85

Val Val Ser Val LeuVal Val Ser Val Leu

Thr Val Leu His GlnThr Val Leu His Gln

Trp Leu Asn Gly LysTrp Leu Asn Gly Lys

100100

Glu Tyr Lys Cys LysGlu Tyr Lys Cys Lys

105105

Val Ser Asn Lys AlaVal Ser Asn Lys Ala

110110

Pro Ala Pro Ile GluPro Ala Pro Ile Glu

115115

Lys Thr Ile Ser Lys 120Lys Thr Ile Ser Lys 120

Ala Lys Gly Gln Pro 125Ala Lys Gly Gln Pro 125

Glu Pro Gln Val TyrGlu Pro Gln Val Tyr

130130

Thr Leu Pro Pro SerThr Leu Pro Pro Ser

135135

Arg Glu Glu Met Thr 140Arg Glu Glu Met Thr 140

AlaAla

LysLys

ValVal

AspAsp

Tyr 80Tyr 80

AspAsp

LeuLeu

ArgArg

LysLys

AspAsp

160160

Asn Gln Val Ser Leu 145Asn Gln Val Ser Leu 145

Thr Cys Leu Val Lys 150Thr Cys Leu Val Lys 150

Gly Phe Tyr Pro SerGly Phe Tyr Pro Ser

155155

- 798 044346- 798 044346

Ile Ala Val Glu TrpIle Ala Val Glu Trp

165165

Glu Ser Asn Gly GlnGlu Ser Asn Gly Gln

170170

Thr Thr Pro Pro ValThr Thr Pro Pro Val

180180

Leu Asp Ser Asp GlyLeu Asp Ser Asp Gly

185185

Lys Leu Thr Val AspLys Leu Thr Val Asp

195195

Lys Ser Arg Trp GlnLys Ser Arg Trp Gln

200200

Cys Ser Val Met HisCys Ser Val Met His

210210

Glu Ala Leu His AsnGlu Ala Leu His Asn

215215

Pro Glu Asn Asn Tyr Lys 175Pro Glu Asn Asn Tyr Lys 175

Ser Phe Phe Leu Tyr Ser 190Ser Phe Phe Leu Tyr Ser 190

Gln Gly Asn Val Phe Ser 205Gln Gly Asn Val Phe Ser 205

His Tyr Thr Gln Lys Ser 220His Tyr Thr Gln Lys Ser 220

Leu Ser Leu Ser Pro GlyLeu Ser Leu Ser Pro Gly

225230 <210>635 <211>7 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>225230 <210>635 <211>7 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> Linker < 400>635<223> Linker <400>635

Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser <210>636 <211>5 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser <210>636 <211>5 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> 4GS Linker < 400>636<223>4GS Linker <400>636

Gly Gly Gly Gly Ser <210>637 <211>231 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Gly Gly Gly Gly Ser <210>637 <211>231 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> Fc-область < 400> 637< 223 > Fc region < 400 > 637

Glu Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro AlaGlu Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala

5 10 155 10 15

- 799 044346- 799 044346

Pro Glu Ala Glu GlyPro Glu Ala Glu Gly

Ala Pro Ser Val PheAla Pro Ser Val Phe

Leu Phe Pro Pro Lys 30Leu Phe Pro Pro Lys 30

Lys Asp Thr Leu Met 35Lys Asp Thr Leu Met 35

Ile Ser Arg Thr Pro 40Ile Ser Arg Thr Pro 40

Glu Val Thr Cys Val 45Glu Val Thr Cys Val 45

Val Asp Val Ser His 50Val Asp Val Ser His 50

Glu Asp Pro Glu Val 55Glu Asp Pro Glu Val 55

Lys Phe Asn Trp Tyr 60Lys Phe Asn Trp Tyr 60

Asp Gly Val Glu Val 65Asp Gly Val Glu Val 65

His Asn Ala Lys Thr 70His Asn Ala Lys Thr 70

Lys Pro Arg Glu Glu 75Lys Pro Arg Glu Glu 75

Tyr Asn Ser Thr Tyr 85Tyr Asn Ser Thr Tyr 85

Arg Val Val Ser Val 90Arg Val Val Ser Val 90

Leu Thr Val Leu HisLeu Thr Val Leu His

Asp Trp Leu Asn GlyAsp Trp Leu Asn Gly

100100

Lys Glu Tyr Lys CysLys Glu Tyr Lys Cys

105105

Lys Val Ser Asn LysLys Val Ser Asn Lys

110110

Leu Pro Ala Pro IleLeu Pro Ala Pro Ile

115115

Glu Lys Thr Ile Ser 120Glu Lys Thr Ile Ser 120

Lys Ala Lys Gly GlnLys Ala Lys Gly Gln

125125

Arg Glu Pro Gln ValArg Glu Pro Gln Val

130130

Tyr Thr Leu Pro ProTyr Thr Leu Pro Pro

135135

Ser Arg Asp Glu Leu 140Ser Arg Asp Glu Leu 140

Lys Asn Gln Val Ser 145Lys Asn Gln Val Ser 145

Leu Thr Cys Leu Val 150Leu Thr Cys Leu Val 150

Lys Gly Phe Tyr Pro 155Lys Gly Phe Tyr Pro 155

Asp Ile Ala Val GluAsp Ile Ala Val Glu

165165

Trp Glu Ser Asn GlyTrp Glu Ser Asn Gly

170170

Gln Pro Glu Asn AsnGln Pro Glu Asn Asn

175175

Lys Thr Thr Pro ProLys Thr Thr Pro Pro

180180

Val Leu Asp Ser AspVal Leu Asp Ser Asp

185185

Gly Ser Phe Phe LeuGly Ser Phe Phe Leu

190190

Ser Lys Leu Thr ValSer Lys Leu Thr Val

195195

Asp Lys Ser Arg Trp 200Asp Lys Ser Arg Trp 200

Gln Gln Gly Asn ValGln Gln Gly Asn Val

205205

Ser Cys Ser Val MetSer Cys Ser Val Met

210210

His Glu Ala Leu HisHis Glu Ala Leu His

215215

Asn His Tyr Thr Gln 220Asn His Tyr Thr Gln 220

ProPro

ValVal

ValVal

Gln 80Gln 80

GlnGln

AlaAla

ProPro

ThrThr

Ser 160Ser 160

TyrTyr

TyrTyr

PhePhe

LysLys

Ser Leu Ser Leu Ser 225Ser Leu Ser Leu Ser 225

Pro Gly 230 <210> 638 <211> 238 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Pro Gly 230 <210> 638 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial Sequence <220>

<223> ICOSL v180 ECD<223> ICOSL v180 ECD

- 800 044346 <400> 638- 800 044346 <400> 638

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Ala Ser 50Ile Pro Gln Ala Ser 50

Ser Leu Glu Phe ValSer Leu Glu Phe Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Ser SerVal Leu Ser Ser Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235Asn Ala Ala Thr 235

- 801 044346 <210> 639 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>- 801 044346 <210> 639 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v181 ECD < 400> 639< 223> ICOSL v181 ECD < 400> 639

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala CysLeu Ser Cys Ala Cys

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn AspPhe Asp Leu Asn Asp

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Ala SerIle Pro Gln Ala Ser

Ser Leu Glu His ValSer Leu Glu His Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Ser SerVal Leu Ser Ser Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

- 802 044346- 802 044346

210 215 220210 215 220

Thr Glu Asn Pro Val Ser Thr Gly Glu Lys Asn Ala AlaThr Glu Asn Pro Val Ser Thr Gly Glu Lys Asn Ala Ala

225 230 235225 230 235

Thr <210> 640 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Thr <210> 640 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v182 ECD < 400> 640< 223> ICOSL v182 ECD < 400> 640

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn AspLeu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp

25 3025 30

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 40 45Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 40 45

Ile Pro Gln Ala Ser Ser Leu Glu Tyr Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 55 60Ile Pro Gln Ala Ser Ser Leu Glu Tyr Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 55 60

Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 65 70 75Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 65 70 75

Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 85 90 95Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 85 90 95

Val Leu Ser Ala Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Ala Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu

100 105 110100 105 110

Thr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser Val Pro Val Val Ser AlaThr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser Val Pro Val Val Ser Ala

115 120 125115 120 125

His Ser Pro Ser Gln Asp Glu Leu Thr Phe Thr Cys Thr Ser IleHis Ser Pro Ser Gln Asp Glu Leu Thr Phe Thr Cys Thr Ser Ile

130 135 140130 135 140

Gly Tyr Pro Arg Pro Asn Val Tyr Trp Ile Asn Lys Thr Asp AsnGly Tyr Pro Arg Pro Asn Val Tyr Trp Ile Asn Lys Thr Asp Asn

145 150 155145 150 155

Leu Leu Asp Gln Ala Leu Gln Asn Asp Thr Val Phe Leu Asn MetLeu Leu Asp Gln Ala Leu Gln Asn Asp Thr Val Phe Leu Asn Met

165 170 175165 170 175

Gly Leu Tyr Asp Val Val Ser Val Leu Arg Ile Ala Arg Thr ProGly Leu Tyr Asp Val Val Ser Val Leu Arg Ile Ala Arg Thr Pro

180 185 190180 185 190

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

- 803 044346- 803 044346

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn Val Leu Leu Gln Gln AsnCys Ile Glu Asn Val Leu Leu Gln Gln Asn

200 205200 205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp Ile Gly Glu Arg Asp LysThr Gly Asn Asp Ile Gly Glu Arg Asp Lys

215 220215 220

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys Asn Ala Ala ThrSer Thr Gly Glu Lys Asn Ala Ala Thr

230 235 <210> 641 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>230 235 <210> 641 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v183 ECD < 400> 641< 223> ICOSL v183 ECD < 400> 641

Asp Thr Gln Glu LysAsp Thr Gln Glu Lys

55

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Asp Ser 50Ile Pro Gln Asp Ser 50

Ser Leu Glu Ala ValSer Leu Glu Ala Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Ala SerVal Leu Ser Ala Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

Asn Lys Thr Asp AsnAsn Lys Thr Asp Asn

155155

- 804 044346- 804 044346

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 642 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 642 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v184 ECD < 400> 642< 223> ICOSL v184 ECD < 400> 642

AspAsp

ThrThr

GlnGln

GluGlu

Lys 5Lys 5

GluGlu

ValVal

ArgArg

AlaAla

Met 10Met 10

ValVal

GlyGly

SerSer

AspAsp

Val 15Val 15

LeuLeu

SerSer

CysCys

Ala 20Ala 20

CysCys

ProPro

GluGlu

GlyGly

Ser 25Ser 25

ArgArg

PhePhe

AspAsp

LeuLeu

Asn 30Asn 30

AspAsp

TyrTyr

ValVal

Tyr 35Tyr 35

TrpTrp

GlnGln

ThrThr

SerSer

Glu 40Glu 40

SerSer

LysLys

ThrThr

ValVal

Val 45Val 45

ThrThr

TyrTyr

IleIle

Pro 50Pro 50

GlnGln

AspAsp

SerSer

SerSer

Leu 55Leu 55

GluGlu

AsnAsn

ValVal

AspAsp

Ser 60Ser 60

ArgArg

TyrTyr

ArgArg

Arg 65Arg 65

AlaAla

LeuLeu

MetMet

SerSer

Pro 70Pro 70

AlaAla

GlyGly

MetMet

LeuLeu

Arg 75Arg 75

GlyGly

AspAsp

PhePhe

SerSer

ArgArg

LeuLeu

PhePhe

AsnAsn

Val 85Val 85

ThrThr

ProPro

GlnGln

AspAsp

Glu 90Glu 90

GlnGln

LysLys

PhePhe

HisHis

Cys 95Cys 95

ValVal

LeuLeu

SerSer

SerSer

100100

SerSer

LeuLeu

GlyGly

PhePhe

GlnGln

105105

GluGlu

ValVal

LeuLeu

SerSer

ValVal

110110

GluGlu

ThrThr

LeuLeu

HisHis

115115

ValVal

AlaAla

AlaAla

AsnAsn

PhePhe

120120

SerSer

ValVal

ProPro

ValVal

ValVal

125125

SerSer

AlaAla

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

- 805 044346- 805 044346

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr PheAsp Glu Leu Thr Phe

135135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 643 <211> 238 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 643 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v185 ECD <400>643<223> ICOSL v185 ECD <400>643

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp ValAsp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val

5 10155 1015

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn AspLeu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp

25302530

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 4045Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 4045

Ile Pro Gln Gly Ser Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 5560Ile Pro Gln Gly Ser Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 5560

Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 65 7075Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 65 7075

Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 85 9095Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 85 9095

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

Val Leu Ser Ala Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Ala Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu

- 806 044346- 806 044346

100100

105105

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 644 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 644 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v186 ECD <400>644<223> ICOSL v186 ECD <400>644

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp ValAsp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val

5 10155 1015

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn AspLeu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp

25302530

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 4045Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 4045

Ile Pro Gln His Ser Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 5560Ile Pro Gln His Ser Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 5560

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

LeuLeu

Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 65 7075Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 65 7075

- 807 044346- 807 044346

Arg Leu PheArg Leu Phe

Asn Val ThrAsn Val Thr

Pro Gln AspPro Gln Asp

Glu Gln Lys 90Glu Gln Lys 90

Phe His CysPhe His Cys

Val Leu SerVal Leu Ser

Ala Ser Leu 100Ala Ser Leu 100

Gly Phe GlnGly Phe Gln

105105

Glu Val LeuGlu Val Leu

Ser Val GluSer Val Glu

110110

Thr Leu HisThr Leu His

115115

Val Ala AlaVal Ala Ala

Asn Phe SerAsn Phe Ser

120120

Val Pro ValVal Pro Val

Val Ser Ala 125Val Ser Ala 125

His Ser ProHis Ser Pro

130130

Ser Gln AspSer Gln Asp

Glu Leu Thr 135Glu Leu Thr 135

Phe Thr CysPhe Thr Cys

140140

Thr Ser IleThr Ser Ile

Gly Tyr Pro 145Gly Tyr Pro 145

Arg Pro AsnArg Pro Asn

150150

Val Tyr TrpVal Tyr Trp

Ile Asn LysIle Asn Lys

155155

Thr Asp AsnThr Asp Asn

Leu Leu AspLeu Leu Asp

Gln Ala LeuGln Ala Leu

165165

Gln Asn AspGln Asn Asp

Thr Val Phe 170Thr Val Phe 170

Leu Asn MetLeu Asn Met

175175

Gly Leu TyrGly Leu Tyr

Asp Val Val 180Asp Val Val 180

Ser Val LeuSer Val Leu

185185

Arg Ile AlaArg Ile Ala

Arg Thr ProArg Thr Pro

190190

Val Asn IleVal Asn Ile

195195

Gly Cys CysGly Cys Cys

Ile Glu AsnIle Glu Asn

200200

Val Leu LeuVal Leu Leu

Gln Gln Asn 205Gln Gln Asn 205

Thr Val GlyThr Val Gly

210210

Ser Gln ThrSer Gln Thr

Gly Asn Asp 215Gly Asn Asp 215

Ile Gly GluIle Gly Glu

220220

Arg Asp LysArg Asp Lys

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn 225Thr Glu Asn 225

Pro Val SerPro Val Ser

230230

Thr Gly GluThr Gly Glu

Lys Asn AlaLys Asn Ala

235235

Ala Thr <210> 645 <211> 238 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Ala Thr <210> 645 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v187 ECD <400> 645<223> ICOSL v187 ECD <400> 645

Asp Thr Gln Glu 1Asp Thr Gln Glu 1

Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 5 10 15Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 5 10 15

Leu Ser Cys Ala 20Leu Ser Cys Ala 20

Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp 25 30Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp 25 30

Tyr Val Tyr TrpTyr Val Tyr Trp

Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr TyrGln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr

4545

GluGlu

ValVal

HisHis

- 808 044346- 808 044346

Ile Pro Gln Met Ser 50Ile Pro Gln Met Ser 50

Ser Leu Glu His ValSer Leu Glu His Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Ser SerVal Leu Ser Ser Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 646 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 646 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v188 ECD < 400> 646< 223> ICOSL v188 ECD < 400> 646

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15

GluGlu

- 809 044346- 809 044346

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Met Ser 50Ile Pro Gln Met Ser 50

Ser Leu Glu Trp Val 55Ser Leu Glu Trp Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Pro SerVal Leu Ser Pro Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 647 <211> 238 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 647 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v189 ECD<223> ICOSL v189 ECD

- 810 044346 <400> 647- 810 044346 <400> 647

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Gln Ser 50Ile Pro Gln Gln Ser 50

Ser Leu Glu Phe ValSer Leu Glu Phe Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235Asn Ala Ala Thr 235

- 811 044346 <210> 648 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>- 811 044346 <210> 648 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v190 ECD < 400> 648< 223> ICOSL v190 ECD < 400> 648

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala CysLeu Ser Cys Ala Cys

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn AspPhe Asp Leu Asn Asp

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Gln Ser 50Ile Pro Gln Gln Ser 50

Ser Leu Glu Ser ValSer Leu Glu Ser Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Ala SerVal Leu Ser Ala Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

- 812 044346- 812 044346

210 215 220210 215 220

Thr Glu Asn Pro Val Ser Thr Gly Glu Lys Asn Ala AlaThr Glu Asn Pro Val Ser Thr Gly Glu Lys Asn Ala Ala

225 230 235225 230 235

Thr <210> 649 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Thr <210> 649 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v191 ECD <400> 649<223> ICOSL v191 ECD <400> 649

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Arg Ser 50Ile Pro Gln Arg Ser 50

Ser Leu Glu Leu ValSer Leu Glu Leu Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Ala SerVal Leu Ser Ala Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr PheAsp Glu Leu Thr Phe

135135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

- 813 044346- 813 044346

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn Val Leu Leu Gln Gln AsnCys Ile Glu Asn Val Leu Leu Gln Gln Asn

200 205200 205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp Ile Gly Glu Arg Asp LysThr Gly Asn Asp Ile Gly Glu Arg Asp Lys

215 220215 220

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys Asn Ala Ala ThrSer Thr Gly Glu Lys Asn Ala Ala Thr

230 235 <210> 650 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>230 235 <210> 650 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v192 ECD < 400> 650< 223> ICOSL v192 ECD < 400> 650

Asp Thr Gln Glu LysAsp Thr Gln Glu Lys

55

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Arg Ser 50Ile Pro Gln Arg Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Pro SerVal Leu Ser Pro Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

Asn Lys Thr Asp AsnAsn Lys Thr Asp Asn

155155

- 814 044346- 814 044346

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 651 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 651 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v193 ECD < 400> 651< 223> ICOSL v193 ECD < 400> 651

AspAsp

ThrThr

GlnGln

GluGlu

Lys 5Lys 5

GluGlu

ValVal

ArgArg

AlaAla

Met 10Met 10

ValVal

GlyGly

SerSer

AspAsp

Val 15Val 15

LeuLeu

SerSer

CysCys

Ala 20Ala 20

CysCys

ProPro

GluGlu

GlyGly

Ser 25Ser 25

ArgArg

PhePhe

AspAsp

LeuLeu

Asn 30Asn 30

AspAsp

TyrTyr

ValVal

Tyr 35Tyr 35

TrpTrp

GlnGln

ThrThr

SerSer

Glu 40Glu 40

SerSer

LysLys

ThrThr

ValVal

Val 45Val 45

ThrThr

TyrTyr

IleIle

Pro 50Pro 50

GlnGln

ArgArg

SerSer

SerSer

Leu 55Leu 55

GluGlu

TyrTyr

ValVal

AspAsp

Ser 60Ser 60

ArgArg

TyrTyr

ArgArg

Arg 65Arg 65

AlaAla

LeuLeu

MetMet

SerSer

Pro 70Pro 70

AlaAla

GlyGly

MetMet

LeuLeu

Arg 75Arg 75

GlyGly

AspAsp

PhePhe

SerSer

ArgArg

LeuLeu

PhePhe

AsnAsn

Val 85Val 85

ThrThr

ProPro

GlnGln

AspAsp

Glu 90Glu 90

GlnGln

LysLys

PhePhe

HisHis

Cys 95Cys 95

ValVal

LeuLeu

SerSer

SerSer

100100

SerSer

LeuLeu

GlyGly

PhePhe

GlnGln

105105

GluGlu

ValVal

LeuLeu

SerSer

ValVal

110110

GluGlu

ThrThr

LeuLeu

HisHis

115115

ValVal

AlaAla

AlaAla

AsnAsn

PhePhe

120120

SerSer

ValVal

ProPro

ValVal

ValVal

125125

SerSer

AlaAla

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

- 815 044346- 815 044346

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr PheAsp Glu Leu Thr Phe

135135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 652 <211> 238 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 652 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v194 ECD <400>652<223> ICOSL v194 ECD <400>652

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 1015Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 1015

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn AspLeu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp

25302530

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 4045Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 4045

Ile Pro Gln Ser Ser Ser Leu Glu Ala Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 5560Ile Pro Gln Ser Ser Ser Leu Glu Ala Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 5560

Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 65 7075Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 65 7075

Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 85 9095Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 85 9095

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

Val Leu Ser Ala Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Ala Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu

- 816 044346- 816 044346

100100

105105

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 653 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 653 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v195 ECD <400>653<223> ICOSL v195 ECD <400>653

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 1015Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 1015

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn AspLeu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp

25302530

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 4045Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 4045

Ile Pro Gln Ser Ser Ser Leu Glu His Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 5560Ile Pro Gln Ser Ser Ser Leu Glu His Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 5560

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

LeuLeu

Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 65 7075Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 65 7075

- 817 044346- 817 044346

Arg Leu PheArg Leu Phe

Asn Val ThrAsn Val Thr

Pro Gln AspPro Gln Asp

Glu Gln Lys 90Glu Gln Lys 90

Phe His CysPhe His Cys

Val Leu SerVal Leu Ser

Glu Ser Leu 100Glu Ser Leu 100

Gly Phe GlnGly Phe Gln

105105

Glu Val LeuGlu Val Leu

Ser Val GluSer Val Glu

110110

Thr Leu HisThr Leu His

115115

Val Ala AlaVal Ala Ala

Asn Phe SerAsn Phe Ser

120120

Val Pro ValVal Pro Val

Val Ser Ala 125Val Ser Ala 125

His Ser ProHis Ser Pro

130130

Ser Gln AspSer Gln Asp

Glu Leu Thr 135Glu Leu Thr 135

Phe Thr CysPhe Thr Cys

140140

Thr Ser IleThr Ser Ile

Gly Tyr Pro 145Gly Tyr Pro 145

Arg Pro AsnArg Pro Asn

150150

Val Tyr TrpVal Tyr Trp

Ile Asn LysIle Asn Lys

155155

Thr Asp AsnThr Asp Asn

Leu Leu AspLeu Leu Asp

Gln Ala LeuGln Ala Leu

165165

Gln Asn AspGln Asn Asp

Thr Val Phe 170Thr Val Phe 170

Leu Asn MetLeu Asn Met

175175

Gly Leu TyrGly Leu Tyr

Asp Val Val 180Asp Val Val 180

Ser Val LeuSer Val Leu

185185

Arg Ile AlaArg Ile Ala

Arg Thr ProArg Thr Pro

190190

Val Asn IleVal Asn Ile

195195

Gly Cys CysGly Cys Cys

Ile Glu AsnIle Glu Asn

200200

Val Leu LeuVal Leu Leu

Gln Gln Asn 205Gln Gln Asn 205

Thr Val GlyThr Val Gly

210210

Ser Gln ThrSer Gln Thr

Gly Asn Asp 215Gly Asn Asp 215

Ile Gly GluIle Gly Glu

220220

Arg Asp LysArg Asp Lys

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn 225Thr Glu Asn 225

Pro Val SerPro Val Ser

230230

Thr Gly GluThr Gly Glu

Lys Asn AlaLys Asn Ala

235235

Ala Thr <210> 654 <211> 238 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Ala Thr <210> 654 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v196 ECD <400> 654<223> ICOSL v196 ECD <400> 654

Asp Thr Gln Glu 1Asp Thr Gln Glu 1

Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 5 10 15Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 5 10 15

Leu Ser Cys Ala 20Leu Ser Cys Ala 20

Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp 25 30Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp 25 30

Tyr Val Tyr TrpTyr Val Tyr Trp

Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr TyrGln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr

4545

GluGlu

ValVal

HisHis

- 818 044346- 818 044346

Ile Pro Gln Ser Ser 50Ile Pro Gln Ser Ser 50

Ser Leu Glu Leu ValSer Leu Glu Leu Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Ser SerVal Leu Ser Ser Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 655 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 655 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v197 ECD < 400> 655< 223> ICOSL v197 ECD < 400> 655

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15

GluGlu

- 819 044346- 819 044346

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Ser Ser 50Ile Pro Gln Ser Ser 50

Ser Leu Glu Met ValSer Leu Glu Met Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Ser SerVal Leu Ser Ser Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 656 <211> 238 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 656 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v198 ECD<223> ICOSL v198 ECD

- 820 044346 <400> 656- 820 044346 <400> 656

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Ser Ser 50Ile Pro Gln Ser Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Ser SerVal Leu Ser Ser Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235Asn Ala Ala Thr 235

- 821 044346 <210> 657 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>- 821 044346 <210> 657 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v199 ECD <400> 657<223> ICOSL v199 ECD <400> 657

Asp Thr 1Asp Thr 1

Gln Glu Lys Glu Val 5Gln Glu Lys Glu Val 5

Arg Ala Met Val Gly 10Arg Ala Met Val Gly 10

Ser Asp Val Glu 15Ser Asp Val Glu 15

Leu SerLeu Ser

Cys Ala Cys Pro Glu 20Cys Ala Cys Pro Glu 20

Gly Ser Arg Phe Asp 25Gly Ser Arg Phe Asp 25

Leu Asn Asp Val 30Leu Asn Asp Val 30

Tyr ValTyr Val

Tyr Trp Gln Thr Ser 35Tyr Trp Gln Thr Ser 35

Glu Ser Lys Thr Val 40Glu Ser Lys Thr Val 40

Val Thr Tyr His 45Val Thr Tyr His 45

Ile Pro GlnIle Pro Gln

Ser SerSer Ser

Ser Leu Glu Tyr Val Asp Ser Arg Tyr Arg AsnSer Leu Glu Tyr Val Asp Ser Arg Tyr Arg Asn

6060

Arg Ala Leu Met 65Arg Ala Leu Met 65

Ser Pro Ala Gly 70Ser Pro Ala Gly 70

Met Leu Arg GlyMet Leu Arg Gly

Asp Phe Ser Leu 80Asp Phe Ser Leu 80

Arg Leu Phe AsnArg Leu Phe Asn

Val Thr Pro Gln 85Val Thr Pro Gln 85

Asp Glu Gln Lys 90Asp Glu Gln Lys 90

Phe His Cys Leu 95Phe His Cys Leu 95

Val Leu Ser MetVal Leu Ser Met

100100

Ser Leu Gly PheSer Leu Gly Phe

Gln Glu Val Leu 105Gln Glu Val Leu 105

Ser Val Glu ValSer Val Glu Val

110110

Thr Leu His ValThr Leu His Val

115115

Ala Ala Asn PheAla Ala Asn Phe

120120

Ser Val Pro ValSer Val Pro Val

Val Ser Ala Pro 125Val Ser Ala Pro 125

His Ser Pro SerHis Ser Pro Ser

130130

Gln Asp Glu LeuGln Asp Glu Leu

135135

Thr Phe Thr CysThr Phe Thr Cys

140140

Thr Ser Ile AsnThr Ser Ile Asn

Gly Tyr Pro Arg 145Gly Tyr Pro Arg 145

Pro Asn Val Tyr 150Pro Asn Val Tyr 150

Trp Ile Asn LysTrp Ile Asn Lys

155155

Thr Asp Asn SerThr Asp Asn Ser

160160

Leu Leu Asp GlnLeu Leu Asp Gln

Ala Leu Gln Asn 165Ala Leu Gln Asn 165

Asp Thr Val Phe 170Asp Thr Val Phe 170

Leu Asn Met ArgLeu Asn Met Arg

175175

Gly Leu Tyr Asp Val Val 180Gly Leu Tyr Asp Val Val 180

Val Asn Ile Gly Cys Cys 195Val Asn Ile Gly Cys Cys 195

Ser Ser Val Val Leu 185 Leu 185 Arg Arg Ile Ile Ala Ala Arg Arg Thr 190 Thr 190 Pro Pro Ser Ser Ile Ile Glu 200 Glu 200 Asn Asn Val Val Leu Leu Leu Leu Gln 205 Gln 205 Gln Gln Asn Asn Leu Leu

Thr Val Gly Ser Gln Thr Gly Asn AspThr Val Gly Ser Gln Thr Gly Asn Asp

Ile Gly Glu Arg Asp Lys IleIle Gly Glu Arg Asp Lys Ile

- 822 044346- 822 044346

210 215 220210 215 220

Thr Glu Asn Pro Val Ser Thr Gly Glu Lys Asn Ala AlaThr Glu Asn Pro Val Ser Thr Gly Glu Lys Asn Ala Ala

225 230 235225 230 235

Thr <210> 658 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Thr <210> 658 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v200 ECD < 400> 658< 223> ICOSL v200 ECD < 400> 658

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn AspLeu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp

25 3025 30

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 40 45Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 40 45

Ile Pro Gln Ser Ser Ser Leu Glu Tyr Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 55 60Ile Pro Gln Ser Ser Ser Leu Glu Tyr Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 55 60

Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 65 70 75Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 65 70 75

Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 85 90 95Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 85 90 95

Val Leu Ser Val Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu

100 105 110100 105 110

Thr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser Val Pro Val Val Ser AlaThr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser Val Pro Val Val Ser Ala

115 120 125115 120 125

His Ser Pro Ser Gln Asp Glu Leu Thr Phe Thr Cys Thr Ser IleHis Ser Pro Ser Gln Asp Glu Leu Thr Phe Thr Cys Thr Ser Ile

130 135 140130 135 140

Gly Tyr Pro Arg Pro Asn Val Tyr Trp Ile Asn Lys Thr Asp AsnGly Tyr Pro Arg Pro Asn Val Tyr Trp Ile Asn Lys Thr Asp Asn

145 150 155145 150 155

Leu Leu Asp Gln Ala Leu Gln Asn Asp Thr Val Phe Leu Asn MetLeu Leu Asp Gln Ala Leu Gln Asn Asp Thr Val Phe Leu Asn Met

165 170 175165 170 175

Gly Leu Tyr Asp Val Val Ser Val Leu Arg Ile Ala Arg Thr ProGly Leu Tyr Asp Val Val Ser Val Leu Arg Ile Ala Arg Thr Pro

180 185 190180 185 190

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

- 823 044346- 823 044346

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn Val Leu Leu Gln Gln AsnCys Ile Glu Asn Val Leu Leu Gln Gln Asn

200 205200 205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp Ile Gly Glu Arg Asp LysThr Gly Asn Asp Ile Gly Glu Arg Asp Lys

215 220215 220

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys Asn Ala Ala ThrSer Thr Gly Glu Lys Asn Ala Ala Thr

230 235 <210> 659 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>230 235 <210> 659 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v201 ECD < 400> 659< 223> ICOSL v201 ECD < 400> 659

Asp Thr Gln Glu LysAsp Thr Gln Glu Lys

55

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Thr Ser 50Ile Pro Gln Thr Ser 50

Ser Leu Glu His ValSer Leu Glu His Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Ser SerVal Leu Ser Ser Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

Asn Lys Thr Asp AsnAsn Lys Thr Asp Asn

155155

- 824 044346- 824 044346

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 660 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 660 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v202 ECD < 400> 660< 223 > ICOSL v202 ECD < 400 > 660

AspAsp

ThrThr

GlnGln

GluGlu

Lys 5Lys 5

GluGlu

ValVal

ArgArg

AlaAla

Met 10Met 10

ValVal

GlyGly

SerSer

AspAsp

Val 15Val 15

LeuLeu

SerSer

CysCys

Ala 20Ala 20

CysCys

ProPro

GluGlu

GlyGly

Ser 25Ser 25

ArgArg

PhePhe

AspAsp

LeuLeu

Asn 30Asn 30

AspAsp

TyrTyr

ValVal

Tyr 35Tyr 35

TrpTrp

GlnGln

ThrThr

SerSer

Glu 40Glu 40

SerSer

LysLys

ThrThr

ValVal

Val 45Val 45

ThrThr

TyrTyr

IleIle

Pro 50Pro 50

GlnGln

ThrThr

SerSer

SerSer

Leu 55Leu 55

GluGlu

HisHis

ValVal

AspAsp

Ser 60Ser 60

ArgArg

TyrTyr

ArgArg

Arg 65Arg 65

AlaAla

LeuLeu

MetMet

SerSer

Pro 70Pro 70

AlaAla

GlyGly

MetMet

LeuLeu

Arg 75Arg 75

GlyGly

AspAsp

PhePhe

SerSer

ArgArg

LeuLeu

PhePhe

AsnAsn

Val 85Val 85

ThrThr

ProPro

GlnGln

AspAsp

Glu 90Glu 90

GlnGln

LysLys

PhePhe

HisHis

Cys 95Cys 95

ValVal

LeuLeu

SerSer

AlaAla

100100

SerSer

LeuLeu

GlyGly

PhePhe

GlnGln

105105

GluGlu

ValVal

LeuLeu

SerSer

ValVal

110110

GluGlu

ThrThr

LeuLeu

HisHis

115115

ValVal

AlaAla

AlaAla

AsnAsn

PhePhe

120120

SerSer

ValVal

ProPro

ValVal

ValVal

125125

SerSer

AlaAla

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

- 825 044346- 825 044346

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr PheAsp Glu Leu Thr Phe

135135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 661 <211> 238 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 661 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v203 ECD <400>661<223> ICOSL v203 ECD <400>661

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp ValAsp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val

5 10155 1015

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn AspLeu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp

25302530

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 4045Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 4045

Ile Pro Gln Thr Ser Ser Leu Glu Tyr Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 5560Ile Pro Gln Thr Ser Ser Leu Glu Tyr Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 5560

Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 65 7075Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 65 7075

Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 85 9095Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 85 9095

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

Val Leu Ser Ala Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Ala Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu

- 826 044346- 826 044346

100100

105105

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 662 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 662 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v204 ECD <400>662<223> ICOSL v204 ECD <400>662

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 1015Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 1015

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn AspLeu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp

25302530

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 4045Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 4045

Ile Pro Gln Val Ser Ser Leu Glu Leu Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 5560Ile Pro Gln Val Ser Ser Leu Glu Leu Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 5560

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

LeuLeu

Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 65 7075Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 65 7075

- 827 044346- 827 044346

Arg Leu PheArg Leu Phe

Asn Val ThrAsn Val Thr

Pro Gln AspPro Gln Asp

Glu Gln Lys 90Glu Gln Lys 90

Phe His CysPhe His Cys

Val Leu SerVal Leu Ser

Ala Ser Leu 100Ala Ser Leu 100

Gly Phe GlnGly Phe Gln

105105

Glu Val LeuGlu Val Leu

Ser Val GluSer Val Glu

110110

Thr Leu HisThr Leu His

115115

Val Ala AlaVal Ala Ala

Asn Phe SerAsn Phe Ser

120120

Val Pro ValVal Pro Val

Val Ser Ala 125Val Ser Ala 125

His Ser ProHis Ser Pro

130130

Ser Gln AspSer Gln Asp

Glu Leu Thr 135Glu Leu Thr 135

Phe Thr CysPhe Thr Cys

140140

Thr Ser IleThr Ser Ile

Gly Tyr Pro 145Gly Tyr Pro 145

Arg Pro AsnArg Pro Asn

150150

Val Tyr TrpVal Tyr Trp

Ile Asn LysIle Asn Lys

155155

Thr Asp AsnThr Asp Asn

Leu Leu AspLeu Leu Asp

Gln Ala LeuGln Ala Leu

165165

Gln Asn AspGln Asn Asp

Thr Val Phe 170Thr Val Phe 170

Leu Asn MetLeu Asn Met

175175

Gly Leu TyrGly Leu Tyr

Asp Val Val 180Asp Val Val 180

Ser Val LeuSer Val Leu

185185

Arg Ile AlaArg Ile Ala

Arg Thr ProArg Thr Pro

190190

Val Asn IleVal Asn Ile

195195

Gly Cys CysGly Cys Cys

Ile Glu AsnIle Glu Asn

200200

Val Leu LeuVal Leu Leu

Gln Gln Asn 205Gln Gln Asn 205

Thr Val GlyThr Val Gly

210210

Ser Gln ThrSer Gln Thr

Gly Asn Asp 215Gly Asn Asp 215

Ile Gly GluIle Gly Glu

220220

Arg Asp LysArg Asp Lys

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn 225Thr Glu Asn 225

Pro Val SerPro Val Ser

230230

Thr Gly GluThr Gly Glu

Lys Asn AlaLys Asn Ala

235235

Ala Thr <210> 663 <211> 238 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Ala Thr <210> 663 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v205 ECD <400> 663<223> ICOSL v205 ECD <400> 663

Asp Thr Gln Glu 1Asp Thr Gln Glu 1

Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 5 10 15Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 5 10 15

Leu Ser Cys Ala 20Leu Ser Cys Ala 20

Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp 25 30Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp 25 30

Tyr Val Tyr TrpTyr Val Tyr Trp

Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr TyrGln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr

4545

GluGlu

ValVal

HisHis

- 828 044346- 828 044346

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Lys SerVal Leu Ser Lys Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 664 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 664 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v206 ECD < 400> 664< 223> ICOSL v206 ECD < 400> 664

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15

GluGlu

- 829 044346- 829 044346

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Lys Ser 50Ile Pro Gln Lys Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Arg SerVal Leu Ser Arg Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 665 <211> 238 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 665 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v207 ECD<223> ICOSL v207 ECD

- 830 044346 <400> 665- 830 044346 <400> 665

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Leu Ser 50Ile Pro Gln Leu Ser 50

Ser Leu Glu His ValSer Leu Glu His Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Arg SerVal Leu Ser Arg Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235Asn Ala Ala Thr 235

- 831 044346 <210> 666 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>- 831 044346 <210> 666 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v208 ECD < 4 0 0> 6 6 6< 223> ICOSL v208 ECD < 4 0 0> 6 6 6

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala CysLeu Ser Cys Ala Cys

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn AspPhe Asp Leu Asn Asp

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Arg Ser 50Ile Pro Gln Arg Ser 50

Ser Leu Glu Phe ValSer Leu Glu Phe Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Asn SerVal Leu Ser Asn Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

- 832 044346- 832 044346

210 215 220210 215 220

Thr Glu Asn Pro Val Ser Thr Gly Glu Lys Asn Ala AlaThr Glu Asn Pro Val Ser Thr Gly Glu Lys Asn Ala Ala

225 230 235225 230 235

Thr <210> 667 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Thr <210> 667 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v209 ECD < 400> 667< 223> ICOSL v209 ECD < 400> 667

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Arg Ser 50Ile Pro Gln Arg Ser 50

Ser Leu Glu Phe ValSer Leu Glu Phe Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Pro SerVal Leu Ser Pro Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr PheAsp Glu Leu Thr Phe

135135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

- 833 044346- 833 044346

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn Val Leu Leu Gln Gln AsnCys Ile Glu Asn Val Leu Leu Gln Gln Asn

200 205200 205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp Ile Gly Glu Arg Asp LysThr Gly Asn Asp Ile Gly Glu Arg Asp Lys

215 220215 220

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys Asn Ala Ala ThrSer Thr Gly Glu Lys Asn Ala Ala Thr

230 235 <210> 668 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>230 235 <210> 668 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> N52R, N57F, Q100R < 400> 668< 223 > N52R, N57F, Q100R < 400 > 668

Asp Thr Gln Glu LysAsp Thr Gln Glu Lys

55

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Arg Ser 50Ile Pro Gln Arg Ser 50

Ser Leu Glu Phe ValSer Leu Glu Phe Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Arg SerVal Leu Ser Arg Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

Asn Lys Thr Asp AsnAsn Lys Thr Asp Asn

155155

- 834 044346- 834 044346

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 669 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 669 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v211 ECD < 400> 669< 223> ICOSL v211 ECD < 400> 669

AspAsp

ThrThr

GlnGln

GluGlu

Lys 5Lys 5

GluGlu

ValVal

ArgArg

AlaAla

Met 10Met 10

ValVal

GlyGly

SerSer

AspAsp

Val 15Val 15

LeuLeu

SerSer

CysCys

Ala 20Ala 20

CysCys

ProPro

GluGlu

GlyGly

Ser 25Ser 25

ArgArg

PhePhe

AspAsp

LeuLeu

Asn 30Asn 30

AspAsp

TyrTyr

ValVal

Tyr 35Tyr 35

TrpTrp

GlnGln

ThrThr

SerSer

Glu 40Glu 40

SerSer

LysLys

ThrThr

ValVal

Val 45Val 45

ThrThr

TyrTyr

IleIle

Pro 50Pro 50

GlnGln

ArgArg

SerSer

SerSer

Leu 55Leu 55

GluGlu

PhePhe

ValVal

AspAsp

Ser 60Ser 60

ArgArg

TyrTyr

ArgArg

Arg 65Arg 65

AlaAla

LeuLeu

MetMet

SerSer

Pro 70Pro 70

AlaAla

GlyGly

MetMet

LeuLeu

Arg 75Arg 75

GlyGly

AspAsp

PhePhe

SerSer

ArgArg

LeuLeu

PhePhe

AsnAsn

Val 85Val 85

ThrThr

ProPro

GlnGln

AspAsp

Glu 90Glu 90

GlnGln

LysLys

PhePhe

HisHis

Cys 95Cys 95

ValVal

LeuLeu

SerSer

ThrThr

100100

SerSer

LeuLeu

GlyGly

PhePhe

GlnGln

105105

GluGlu

ValVal

LeuLeu

SerSer

ValVal

110110

GluGlu

ThrThr

LeuLeu

HisHis

115115

ValVal

AlaAla

AlaAla

AsnAsn

PhePhe

120120

SerSer

ValVal

ProPro

ValVal

ValVal

125125

SerSer

AlaAla

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

- 835 044346- 835 044346

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr PheAsp Glu Leu Thr Phe

135135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 670 <211> 238 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 670 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v212 ECD <400>670<223> ICOSL v212 ECD <400>670

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 1015Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 1015

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn AspLeu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp

25302530

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 4045Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 4045

Ile Pro Gln Arg Ser Ser Leu Glu His Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 5560Ile Pro Gln Arg Ser Ser Leu Glu His Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 5560

Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 65 7075Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 65 7075

Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 85 9095Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 85 9095

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

Val Leu Ser Lys Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Lys Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu

- 836 044346- 836 044346

100100

105105

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 671 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 671 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v213 ECD <400>671<223> ICOSL v213 ECD <400>671

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 1015Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 1015

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn AspLeu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp

25302530

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 4045Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 4045

Ile Pro Gln Arg Ser Ser Leu Glu Leu Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 5560Ile Pro Gln Arg Ser Ser Leu Glu Leu Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 5560

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

LeuLeu

Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 65 7075Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 65 7075

- 837 044346- 837 044346

Arg Leu PheArg Leu Phe

Asn Val ThrAsn Val Thr

Pro Gln AspPro Gln Asp

Glu Gln Lys 90Glu Gln Lys 90

Phe His CysPhe His Cys

Val Leu SerVal Leu Ser

Ser Ser Leu 100Ser Ser Leu 100

Gly Phe GlnGly Phe Gln

105105

Glu Val LeuGlu Val Leu

Ser Val GluSer Val Glu

110110

Thr Leu HisThr Leu His

115115

Val Ala AlaVal Ala Ala

Asn Phe SerAsn Phe Ser

120120

Val Pro ValVal Pro Val

Val Ser Ala 125Val Ser Ala 125

His Ser ProHis Ser Pro

130130

Ser Gln AspSer Gln Asp

Glu Leu Thr 135Glu Leu Thr 135

Phe Thr CysPhe Thr Cys

140140

Thr Ser IleThr Ser Ile

Gly Tyr Pro 145Gly Tyr Pro 145

Arg Pro AsnArg Pro Asn

150150

Val Tyr TrpVal Tyr Trp

Ile Asn LysIle Asn Lys

155155

Thr Asp AsnThr Asp Asn

Leu Leu AspLeu Leu Asp

Gln Ala LeuGln Ala Leu

165165

Gln Asn AspGln Asn Asp

Thr Val Phe 170Thr Val Phe 170

Leu Asn MetLeu Asn Met

175175

Gly Leu TyrGly Leu Tyr

Asp Val Val 180Asp Val Val 180

Ser Val LeuSer Val Leu

185185

Arg Ile AlaArg Ile Ala

Arg Thr ProArg Thr Pro

190190

Val Asn IleVal Asn Ile

195195

Gly Cys CysGly Cys Cys

Ile Glu AsnIle Glu Asn

200200

Val Leu LeuVal Leu Leu

Gln Gln Asn 205Gln Gln Asn 205

Thr Val GlyThr Val Gly

210210

Ser Gln ThrSer Gln Thr

Gly Asn Asp 215Gly Asn Asp 215

Ile Gly GluIle Gly Glu

220220

Arg Asp LysArg Asp Lys

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn 225Thr Glu Asn 225

Pro Val SerPro Val Ser

230230

Thr Gly GluThr Gly Glu

Lys Asn AlaLys Asn Ala

235235

Ala Thr <210> 672 <211> 238 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Ala Thr <210> 672 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v214 ECD <400> 672<223> ICOSL v214 ECD <400> 672

Asp Thr Gln Glu 1Asp Thr Gln Glu 1

Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 5 10 15Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 5 10 15

Leu Ser Cys Ala 20Leu Ser Cys Ala 20

Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp 25 30Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp 25 30

Tyr Val Tyr TrpTyr Val Tyr Trp

Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr TyrGln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr

4545

GluGlu

ValVal

HisHis

- 838 044346- 838 044346

Ile Pro Gln Arg Ser 50Ile Pro Gln Arg Ser 50

Ser Leu Glu Trp Val 55Ser Leu Glu Trp Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Lys SerVal Leu Ser Lys Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 673 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 673 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v215 ECD < 400> 673< 223> ICOSL v215 ECD < 400> 673

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15

GluGlu

- 839 044346- 839 044346

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Arg Ser 50Ile Pro Gln Arg Ser 50

Ser Leu Glu Trp Val 55Ser Leu Glu Trp Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr PheAsp Glu Leu Thr Phe

135135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 674 <211> 238 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 674 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v216 ECD<223> ICOSL v216 ECD

- 840 044346 <400> 674- 840 044346 <400> 674

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Arg Ser 50Ile Pro Gln Arg Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Arg SerVal Leu Ser Arg Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235Asn Ala Ala Thr 235

- 841 044346 <210> 675 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>- 841 044346 <210> 675 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v217 ECD < 400> 675< 223> ICOSL v217 ECD < 400> 675

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala CysLeu Ser Cys Ala Cys

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn AspPhe Asp Leu Asn Asp

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Cys Ser 50Ile Pro Gln Cys Ser 50

Ser Leu Glu Glu ValSer Leu Glu Glu Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Ser SerVal Leu Ser Ser Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

- 842 044346- 842 044346

210 215 220210 215 220

Thr Glu Asn Pro Val Ser Thr Gly Glu Lys Asn Ala AlaThr Glu Asn Pro Val Ser Thr Gly Glu Lys Asn Ala Ala

225 230 235225 230 235

Thr <210> 676 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Thr <210> 676 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v218 ECD < 400> 676< 223> ICOSL v218 ECD < 400> 676

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Gly Ser 50Ile Pro Gln Gly Ser 50

Ser Leu Glu Pro ValSer Leu Glu Pro Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Asp SerVal Leu Ser Asp Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr PheAsp Glu Leu Thr Phe

135135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

- 843 044346- 843 044346

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn Val Leu Leu Gln Gln AsnCys Ile Glu Asn Val Leu Leu Gln Gln Asn

200 205200 205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp Ile Gly Glu Arg Asp LysThr Gly Asn Asp Ile Gly Glu Arg Asp Lys

215 220215 220

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys Asn Ala Ala ThrSer Thr Gly Glu Lys Asn Ala Ala Thr

230 235 <210> 677 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>230 235 <210> 677 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v219 ECD < 400> 677<223> ICOSL v219 ECD <400> 677

Asp Thr Gln Glu LysAsp Thr Gln Glu Lys

55

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Gly Ser 50Ile Pro Gln Gly Ser 50

Ser Leu Glu Val ValSer Leu Glu Val Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gly SerVal Leu Ser Gly Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

Asn Lys Thr Asp AsnAsn Lys Thr Asp Asn

155155

- 844 044346- 844 044346

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 678 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 678 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v220 ECD < 400> 678< 223> ICOSL v220 ECD < 400> 678

AspAsp

ThrThr

GlnGln

GluGlu

Lys 5Lys 5

GluGlu

ValVal

ArgArg

AlaAla

Met 10Met 10

ValVal

GlyGly

SerSer

AspAsp

Val 15Val 15

LeuLeu

SerSer

CysCys

Ala 20Ala 20

CysCys

ProPro

GluGlu

GlyGly

Ser 25Ser 25

ArgArg

PhePhe

AspAsp

LeuLeu

Asn 30Asn 30

AspAsp

TyrTyr

ValVal

Tyr 35Tyr 35

TrpTrp

GlnGln

ThrThr

SerSer

Glu 40Glu 40

SerSer

LysLys

ThrThr

ValVal

Val 45Val 45

ThrThr

TyrTyr

IleIle

Pro 50Pro 50

GlnGln

GlyGly

SerSer

SerSer

Leu 55Leu 55

GluGlu

ValVal

ValVal

AspAsp

Ser 60Ser 60

ArgArg

TyrTyr

ArgArg

Arg 65Arg 65

AlaAla

LeuLeu

MetMet

SerSer

Pro 70Pro 70

AlaAla

GlyGly

MetMet

LeuLeu

Arg 75Arg 75

GlyGly

AspAsp

PhePhe

SerSer

ArgArg

LeuLeu

PhePhe

AsnAsn

Val 85Val 85

ThrThr

ProPro

GlnGln

AspAsp

Glu 90Glu 90

GlnGln

LysLys

PhePhe

HisHis

Cys 95Cys 95

ValVal

LeuLeu

SerSer

GlnGln

100100

SerSer

LeuLeu

GlyGly

PhePhe

GlnGln

105105

GluGlu

ValVal

LeuLeu

SerSer

ValVal

110110

GluGlu

ThrThr

LeuLeu

HisHis

115115

ValVal

AlaAla

AlaAla

AsnAsn

PhePhe

120120

SerSer

ValVal

ProPro

ValVal

ValVal

125125

SerSer

AlaAla

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

- 845 044346- 845 044346

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr PheAsp Glu Leu Thr Phe

135135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 679 <211> 238 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 679 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v221 ECD <400>679<223> ICOSL v221 ECD <400>679

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 1015Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 1015

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn AspLeu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp

25302530

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 4045Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 4045

Ile Pro Gln Leu Ser Ser Leu Glu Val Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 5560Ile Pro Gln Leu Ser Ser Leu Glu Val Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 5560

Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 65 7075Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 65 7075

Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 85 9095Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 85 9095

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

Val Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu

- 846 044346- 846 044346

100100

105105

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 680 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 680 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v222 ECD <400>680<223> ICOSL v222 ECD <400>680

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp ValAsp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val

5 10155 1015

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn AspLeu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp

25302530

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 4045Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 4045

Ile Pro Gln Pro Ser Ser Leu Glu Pro Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 5560Ile Pro Gln Pro Ser Ser Leu Glu Pro Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 5560

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

LeuLeu

Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 65 7075Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 65 7075

- 847 044346- 847 044346

Arg Leu PheArg Leu Phe

Asn Val ThrAsn Val Thr

Pro Gln AspPro Gln Asp

Glu Gln Lys 90Glu Gln Lys 90

Phe His CysPhe His Cys

Val Leu SerVal Leu Ser

Gln Ser Leu 100Gln Ser Leu 100

Gly Phe GlnGly Phe Gln

105105

Glu Val LeuGlu Val Leu

Ser Val GluSer Val Glu

110110

Thr Leu HisThr Leu His

115115

Val Ala AlaVal Ala Ala

Asn Phe SerAsn Phe Ser

120120

Val Pro ValVal Pro Val

Val Ser Ala 125Val Ser Ala 125

His Ser ProHis Ser Pro

130130

Ser Gln AspSer Gln Asp

Glu Leu Thr 135Glu Leu Thr 135

Phe Thr CysPhe Thr Cys

140140

Thr Ser IleThr Ser Ile

Gly Tyr Pro 145Gly Tyr Pro 145

Arg Pro AsnArg Pro Asn

150150

Val Tyr TrpVal Tyr Trp

Ile Asn LysIle Asn Lys

155155

Thr Asp AsnThr Asp Asn

Leu Leu AspLeu Leu Asp

Gln Ala LeuGln Ala Leu

165165

Gln Asn AspGln Asn Asp

Thr Val Phe 170Thr Val Phe 170

Leu Asn MetLeu Asn Met

175175

Gly Leu TyrGly Leu Tyr

Asp Val Val 180Asp Val Val 180

Ser Val LeuSer Val Leu

185185

Arg Ile AlaArg Ile Ala

Arg Thr ProArg Thr Pro

190190

Val Asn IleVal Asn Ile

195195

Gly Cys CysGly Cys Cys

Ile Glu AsnIle Glu Asn

200200

Val Leu LeuVal Leu Leu

Gln Gln Asn 205Gln Gln Asn 205

Thr Val GlyThr Val Gly

210210

Ser Gln ThrSer Gln Thr

Gly Asn Asp 215Gly Asn Asp 215

Ile Gly GluIle Gly Glu

220220

Arg Asp LysArg Asp Lys

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn 225Thr Glu Asn 225

Pro Val SerPro Val Ser

230230

Thr Gly GluThr Gly Glu

Lys Asn AlaLys Asn Ala

235235

Ala Thr <210> 681 <211> 238 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Ala Thr <210> 681 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v223 ECD <400> 681<223> ICOSL v223 ECD <400> 681

Asp Thr Gln Glu 1Asp Thr Gln Glu 1

Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 5 10 15Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 5 10 15

Leu Ser Cys Ala 20Leu Ser Cys Ala 20

Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp 25 30Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp 25 30

Tyr Val Tyr TrpTyr Val Tyr Trp

Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr TyrGln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr

4545

GluGlu

ValVal

HisHis

- 848 044346- 848 044346

Ile Pro Gln Pro SerIle Pro Gln Pro Ser

Ser Leu Glu Ser ValSer Leu Glu Ser Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gly SerVal Leu Ser Gly Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 682 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 682 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v224 ECD < 400> 682< 223> ICOSL v224 ECD < 400> 682

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15

GluGlu

- 849 044346- 849 044346

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Ser Ser 50Ile Pro Gln Ser Ser 50

Ser Leu Glu Leu ValSer Leu Glu Leu Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gly SerVal Leu Ser Gly Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 683 <211> 238 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 683 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v225 ECD<223> ICOSL v225 ECD

- 850 044346 <400> 683- 850 044346 <400> 683

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Thr Ser 50Ile Pro Gln Thr Ser 50

Ser Leu Glu Lys Val 55Ser Leu Glu Lys Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Pro SerVal Leu Ser Pro Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235Asn Ala Ala Thr 235

- 851 044346 <210> 684 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>- 851 044346 <210> 684 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v226 ECD < 400> 684< 223> ICOSL v226 ECD < 400> 684

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala CysLeu Ser Cys Ala Cys

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn AspPhe Asp Leu Asn Asp

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Val SerIle Pro Gln Val Ser

Ser Leu Glu Thr ValSer Leu Glu Thr Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Leu SerVal Leu Ser Leu Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

- 852 044346- 852 044346

210 215 220210 215 220

Thr Glu Asn Pro Val Ser Thr Gly Glu Lys Asn Ala AlaThr Glu Asn Pro Val Ser Thr Gly Glu Lys Asn Ala Ala

225 230 235225 230 235

Thr <210> 685 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Thr <210> 685 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v227 ECD < 400> 685< 223> ICOSL v227 ECD < 400> 685

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Asn Ser 50Ile Pro Gln Asn Ser 50

Ser Leu Glu Gln ValSer Leu Glu Gln Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Pro SerVal Leu Ser Pro Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr PheAsp Glu Leu Thr Phe

135135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

- 853 044346- 853 044346

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn Val Leu Leu Gln Gln Asn LeuCys Ile Glu Asn Val Leu Leu Gln Gln Asn Leu

200 205200 205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp Ile Gly Glu Arg Asp Lys IleThr Gly Asn Asp Ile Gly Glu Arg Asp Lys Ile

215 220215 220

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys Asn Ala Ala ThrSer Thr Gly Glu Lys Asn Ala Ala Thr

230 235 <210> 686 <211> 111 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>230 235 <210> 686 <211> 111 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v180 IgV < 400> 686<223> ICOSL v180 IgV <400> 686

Asp Thr 1Asp Thr 1

Gln GluGln Glu

Lys 5Lys 5

Leu SerLeu Ser

Cys Ala 20Cys Ala 20

CysCys

Tyr ValTyr Val

Tyr Trp 35Tyr Trp 35

GlnGln

Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val Glu 1015Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val Glu 1015

Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp Val 2530Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp Val 2530

Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr His 4045Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr His 4045

Ile Pro Gln Ala Ser Ser LeuIle Pro Gln Ala Ser Ser Leu

5555

Arg Ala Leu Met Ser Pro AlaArg Ala Leu Met Ser Pro Ala

7070

Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro 85Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro 85

Glu Phe Val Asp Ser Arg Tyr Arg Asn 60Glu Phe Val Asp Ser Arg Tyr Arg Asn 60

Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser Leu 75 80Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser Leu 75 80

Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys Leu 90 95Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys Leu 90 95

Val Leu Ser Ser Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Ser Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu

100 105110 <210>687 <211>111 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>100 105110 <210>687 <211>111 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v181 IgV < 400> 687<223> ICOSL v181 IgV <400> 687

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val GluAsp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val Glu

- 854 044346- 854 044346

Leu SerLeu Ser

Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn AspCys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp

25 3025 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 40 45Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 40 45

Ile Pro Gln Ala Ser 50Ile Pro Gln Ala Ser 50

Ser Leu Glu His Val Asp Ser Arg Tyr ArgSer Leu Glu His Val Asp Ser Arg Tyr Arg

6060

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 70 75Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 70 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 90 95Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 90 95

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

Val Leu Ser Ser SerVal Leu Ser Ser Ser

100100

Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val GluLeu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu

105 110 <210> 688 <211> 111 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>105 110 <210> 688 <211> 111 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v182 IgV < 400> 688<223> ICOSL v182 IgV <400> 688

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn AspLeu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp

25 3025 30

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 40 45Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 40 45

Ile Pro Gln Ala Ser Ser Leu Glu Tyr Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 55 60Ile Pro Gln Ala Ser Ser Leu Glu Tyr Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 55 60

Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 65 70 75Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 65 70 75

Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 85 90 95Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 85 90 95

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

Val Leu Ser Ala Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Ala Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu

100 105 110100 105 110

- 855 044346 < 210> 689 < 211> 111 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>- 855 044346 <210> 689 <211> 111 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v183 IgV <400> 689<223> ICOSL v183 IgV <400> 689

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg 1 5Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg 1 5

Ala Met Val Gly Ser Asp Val GluAla Met Val Gly Ser Asp Val Glu

1515

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly 20Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly 20

Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp Val 25 30Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp Val 25 30

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser GluTyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu

4040

Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr His 45Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr His 45

Ile Pro Gln Asp Ser Ser Leu GluIle Pro Gln Asp Ser Ser Leu Glu

5555

Ala Val Asp Ser Arg Tyr Arg Asn 60Ala Val Asp Ser Arg Tyr Arg Asn 60

Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly 65 70Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly 65 70

Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser LeuMet Leu Arg Gly Asp Phe Ser Leu

8080

Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln 85Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln 85

Asp Glu Gln Lys Phe His Cys LeuAsp Glu Gln Lys Phe His Cys Leu

9595

Val Leu Ser Ala Ser Leu Gly PheVal Leu Ser Ala Ser Leu Gly Phe

100100

Gln Glu Val Leu Ser Val GluGln Glu Val Leu Ser Val Glu

105 110 <210> 690 <211> 111 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>105 110 <210> 690 <211> 111 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v184 IgV <400> 690<223> ICOSL v184 IgV <400> 690

Asp Thr Gln Glu 1Asp Thr Gln Glu 1

Lys Glu 5Lys Glu 5

ValVal

Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val GluArg Ala Met Val Gly Ser Asp Val Glu

1515

Leu Ser Cys Ala 20Leu Ser Cys Ala 20

Cys ProCys Pro

GluGlu

Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp ValGly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp Val

30thirty

Tyr Val Tyr TrpTyr Val Tyr Trp

Gln ThrGln Thr

SerSer

Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr His 40 45Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr His 40 45

Ile Pro Gln AspIle Pro Gln Asp

Ser SerSer Ser

LeuLeu

Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg AsnGlu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg Asn

- 856 044346- 856 044346

55 6055 60

Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met 65 70Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met 65 70

Leu Arg Gly Asp Phe Ser LeuLeu Arg Gly Asp Phe Ser Leu

8080

Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp 85Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp 85

Glu Gln Lys Phe His Cys Leu 90 95Glu Gln Lys Phe His Cys Leu 90 95

Val Leu Ser Ser Ser Leu Gly Phe GlnVal Leu Ser Ser Ser Leu Gly Phe Gln

100 105100 105

Glu Val Leu Ser Val GluGlu Val Leu Ser Val Glu

110 < 210> 691 < 211> 111 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>110 < 210> 691 < 211> 111 < 212> PROTEIN < 213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v185 IgV < 400> 691<223> ICOSL v185 IgV <400> 691

AspAsp

ThrThr

GlnGln

GluGlu

Lys 5Lys 5

GluGlu

ValVal

ArgArg

AlaAla

Met 10Met 10

ValVal

GlyGly

SerSer

AspAsp

Val 15Val 15

GluGlu

LeuLeu

SerSer

CysCys

Ala 20Ala 20

CysCys

ProPro

GluGlu

GlyGly

Ser 25Ser 25

ArgArg

PhePhe

AspAsp

LeuLeu

Asn 30Asn 30

AspAsp

ValVal

TyrTyr

ValVal

Tyr 35Tyr 35

TrpTrp

GlnGln

ThrThr

SerSer

Glu 40Glu 40

SerSer

LysLys

ThrThr

ValVal

Val 45Val 45

ThrThr

TyrTyr

HisHis

Ile ProIle Pro

Gln Gly SerGln Gly Ser

Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg AsnSer Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg Asn

6060

Arg Ala 65Arg Ala 65

Leu Met SerLeu Met Ser

Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser Leu 70 75 80Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser Leu 70 75 80

Arg LeuArg Leu

Phe Asn ValPhe Asn Val

Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys Leu 90 95Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys Leu 90 95

Val LeuVal Leu

Ser Ala SerSer Ala Ser

100100

Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val GluLeu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu

105 110 < 210> 692 < 211> 111 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>105 110 <210> 692 <211> 111 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v186 IgV <400> 692<223> ICOSL v186 IgV <400> 692

- 857 044346- 857 044346

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala CysLeu Ser Cys Ala Cys

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn AspPhe Asp Leu Asn Asp

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

Val Leu Ser Ala SerVal Leu Ser Ala Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110 <210> 693 <211> 111 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>110 <210> 693 <211> 111 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v187 IgV < 400> 693<223> ICOSL v187 IgV <400> 693

Asp Thr Gln Glu LysAsp Thr Gln Glu Lys

Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp ValGlu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val

1515

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Met Ser 50Ile Pro Gln Met Ser 50

Ser Leu Glu His ValSer Leu Glu His Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

Val Leu Ser Ser SerVal Leu Ser Ser Ser

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

- 858 044346- 858 044346

100100

105105

110 <210> 694 <211> 111 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>110 <210> 694 <211> 111 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v188 IgV <400> 694<223> ICOSL v188 IgV <400> 694

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Met Ser 50Ile Pro Gln Met Ser 50

Ser Leu Glu Trp Val 55Ser Leu Glu Trp Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

Val Leu Ser Pro SerVal Leu Ser Pro Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110 <210> 695 <211> 111 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>110 <210> 695 <211> 111 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v189 IgV <400> 695<223> ICOSL v189 IgV <400> 695

Asp Thr Gln Glu 1Asp Thr Gln Glu 1

Lys Glu Val Arg Ala 5Lys Glu Val Arg Ala 5

Met Val Gly Ser Asp Val 10 15Met Val Gly Ser Asp Val 10 15

Leu Ser Cys Ala 20Leu Ser Cys Ala 20

Cys Pro Glu Gly SerCys Pro Glu Gly Ser

Arg Phe Asp Leu Asn AspArg Phe Asp Leu Asn Asp

Tyr Val Tyr TrpTyr Val Tyr Trp

Gln Thr Ser Glu SerGln Thr Ser Glu Ser

GluGlu

ValVal

HisHis

Lys Thr Val Val Thr TyrLys Thr Val Val Thr Tyr

- 859 044346- 859 044346

Ile Ile Pro 50 Pro 50 Gln Gln Gln Gln Ser Ser Ser Ser Leu 55 Leu 55 Glu Glu Phe Phe Val Val Asp Asp Ser 60 Ser 60 Arg Arg Tyr Tyr Arg Arg Arg 65 Arg 65 Ala Ala Leu Leu Met Met Ser Ser Pro 70 Pro 70 Ala Ala Gly Gly Met Met Leu Leu Arg 75 Arg 75 Gly Gly Asp Asp Phe Phe Ser Ser Arg Arg Leu Leu Phe Phe Asn Asn Val 85 Val 85 Thr Thr Pro Pro Gln Gln Asp Asp Glu 90 Glu 90 Gln Gln Lys Lys Phe Phe His His Cys 95 Cys 95 Val Val Leu Leu Ser Ser Gln 100 Gln 100 Ser Ser Leu Leu Gly Gly Phe Phe Gln 105 Gln 105 Glu Glu Val Val Leu Leu Ser Ser Val 110 Val 110 Glu Glu

AsnAsn

Leu 80Leu 80

Leu <210> 696 <211> 111 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Leu <210> 696 <211> 111 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v190 IgV < 400> 696<223> ICOSL v190 IgV <400> 696

Asp Thr Gln Glu LysAsp Thr Gln Glu Lys

Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp ValGlu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val

1515

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu 20Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu 20

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser 35Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser 35

Ile Pro Gln Gln Ser Ser Leu 50 55Ile Pro Gln Gln Ser Ser Leu 50 55

Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn AspGly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp

30thirty

Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 40 45Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 40 45

Glu Ser Val Asp Ser Arg Tyr Arg 60Glu Ser Val Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser Pro AlaArg Ala Leu Met Ser Pro Ala

7070

Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 75Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro 85Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro 85

Gln Asp Glu Gln Lys Phe His CysGln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys

9595

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

Val Leu Ser Ala Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Ala Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu

100 105110 < 210>697 < 211>111 < 212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>100 105110 < 210>697 < 211>111 < 212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v191 IgV <400> 697<223> ICOSL v191 IgV <400> 697

- 860 044346- 860 044346

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met ValAsp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val

510510

Gly Ser Asp Val 15Gly Ser Asp Val 15

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn AspLeu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp

25302530

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 4045Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 4045

Ile Pro Gln Arg Ser Ser Leu Glu Leu Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 5560Ile Pro Gln Arg Ser Ser Leu Glu Leu Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 5560

Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 65 7075Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 65 7075

Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 85 9095Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 85 9095

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

Val Leu Ser Ala Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Ala Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu

100 105110 <210>698 <211>111 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>100 105110 <210>698 <211>111 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v192 IgV <400> 698<223> ICOSL v192 IgV <400> 698

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu 20Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu 20

Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn AspGly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp

30thirty

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser 35Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser 35

Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 40 45Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 40 45

Ile Pro Gln Arg Ser Ser LeuIle Pro Gln Arg Ser Ser Leu

5555

Glu Tyr Val Asp Ser Arg Tyr Arg 60Glu Tyr Val Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser Pro AlaArg Ala Leu Met Ser Pro Ala

7070

Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 75Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro 85Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro 85

Gln Asp Glu Gln Lys Phe His CysGln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys

9595

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

- 861 044346- 861 044346

Val Leu Ser Pro Ser Leu Gly Phe Gln Glu ValVal Leu Ser Pro Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val

100100

Leu Ser Val GluLeu Ser Val Glu

110110

105 <210> 699 <211> 111 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>105 <210> 699 <211> 111 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v193 IgV <400> 699<223> ICOSL v193 IgV <400> 699

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg 1 5Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg 1 5

Ala Met Val Gly Ser Asp Val GluAla Met Val Gly Ser Asp Val Glu

1515

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly 20Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly 20

Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp Val 25 30Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp Val 25 30

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser GluTyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu

4040

Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr His 45Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr His 45

Ile Pro Gln Arg Ser Ser Leu GluIle Pro Gln Arg Ser Ser Leu Glu

5555

Tyr Val Asp Ser Arg Tyr Arg Asn 60Tyr Val Asp Ser Arg Tyr Arg Asn 60

Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly 65 70Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly 65 70

Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser LeuMet Leu Arg Gly Asp Phe Ser Leu

8080

Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln 85Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln 85

Asp Glu Gln Lys Phe His Cys LeuAsp Glu Gln Lys Phe His Cys Leu

9595

Val Leu Ser Ser Ser Leu Gly PheVal Leu Ser Ser Ser Leu Gly Phe

100100

Gln Glu Val Leu Ser Val GluGln Glu Val Leu Ser Val Glu

105 110 <210> 700 <211> 111 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>105 110 <210> 700 <211> 111 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v194 IgV <400> 700<223> ICOSL v194 IgV <400> 700

Asp Thr Gln Glu 1Asp Thr Gln Glu 1

Lys Glu 5Lys Glu 5

Leu Ser Cys Ala 20Leu Ser Cys Ala 20

Cys ProCys Pro

Tyr Val Tyr TrpTyr Val Tyr Trp

Gln ThrGln Thr

Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val Glu 1015Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val Glu 1015

Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp Val 2530Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp Val 2530

Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr His 4045Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr His 4045

- 862 044346- 862 044346

Ile Pro Gln SerIle Pro Gln Ser

Ser Ser Leu GluSer Ser Leu Glu

Ala Val Asp Ser 60Ala Val Asp Ser 60

Arg Tyr Arg AsnArg Tyr Arg Asn

Arg Ala Leu Met 65Arg Ala Leu Met 65

Ser Pro Ala Gly 70Ser Pro Ala Gly 70

Met Leu Arg GlyMet Leu Arg Gly

Asp Phe Ser Leu 80Asp Phe Ser Leu 80

Arg Leu Phe AsnArg Leu Phe Asn

Val Thr Pro Gln 85Val Thr Pro Gln 85

Asp Glu Gln Lys 90Asp Glu Gln Lys 90

Phe His Cys Leu 95Phe His Cys Leu 95

Val Leu Ser AlaVal Leu Ser Ala

100100

Ser Leu Gly PheSer Leu Gly Phe

Gln Glu Val Leu 105Gln Glu Val Leu 105

Ser Val GluSer Val Glu

110 <210> 701 <211> 111 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>110 <210> 701 <211> 111 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v195 IgV < 400> 701< 223> ICOSL v195 IgV < 400> 701

Asp Thr Gln Glu LysAsp Thr Gln Glu Lys

Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val GluGlu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val Glu

1515

Leu SerLeu Ser

Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp ValCys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp Val

25 3025 30

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser 35Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser 35

Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr His 40 45Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr His 40 45

Ile Pro Gln Ser Ser Ser LeuIle Pro Gln Ser Ser Ser Leu

5555

Glu His Val Asp Ser Arg Tyr Arg Asn 60Glu His Val Asp Ser Arg Tyr Arg Asn 60

Arg Ala Leu Met Ser Pro AlaArg Ala Leu Met Ser Pro Ala

7070

Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro 85Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro 85

Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser Leu 75 80Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser Leu 75 80

Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys Leu 90 95Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys Leu 90 95

Val Leu Ser Glu Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Glu Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu

100 105 110 <210> 702 <211> 111 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>100 105 110 <210> 702 <211> 111 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v196 IgV<223> ICOSL v196 IgV

- 863 044346 <400> 702- 863 044346 <400> 702

Asp Thr Gln Glu LysAsp Thr Gln Glu Lys

Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val GluGlu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val Glu

1515

Leu SerLeu Ser

Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp ValCys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp Val

25 3025 30

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser 35Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser 35

Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr His 40 45Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr His 40 45

Ile Pro Gln Ser Ser Ser LeuIle Pro Gln Ser Ser Ser Leu

5555

Glu Leu Val Asp Ser Arg Tyr Arg Asn 60Glu Leu Val Asp Ser Arg Tyr Arg Asn 60

Arg Ala Leu Met Ser Pro AlaArg Ala Leu Met Ser Pro Ala

7070

Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser Leu 75 80Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser Leu 75 80

Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro 85Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro 85

Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys LeuGln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys Leu

9595

Val Leu SerVal Leu Ser

Ser Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val GluSer Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu

100 105 110 <210> 703 <211> 111 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>100 105 110 <210> 703 <211> 111 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v197 IgV <400> 703<223> ICOSL v197 IgV <400> 703

Asp Thr 1Asp Thr 1

Gln Glu Lys Glu Val 5Gln Glu Lys Glu Val 5

Arg Ala Met Val Gly 10Arg Ala Met Val Gly 10

Ser Asp Val Glu 15Ser Asp Val Glu 15

Leu SerLeu Ser

Cys Ala Cys Pro Glu 20Cys Ala Cys Pro Glu 20

Gly Ser Arg Phe Asp 25Gly Ser Arg Phe Asp 25

Leu Asn Asp Val 30Leu Asn Asp Val 30

Tyr ValTyr Val

Tyr Trp Gln Thr Ser 35Tyr Trp Gln Thr Ser 35

Glu Ser Lys Thr Val 40Glu Ser Lys Thr Val 40

Val Thr Tyr His 45Val Thr Tyr His 45

Ile Pro Gln Ser Ser Ser LeuIle Pro Gln Ser Ser Ser Leu

5555

Arg Ala Leu Met Ser Pro AlaArg Ala Leu Met Ser Pro Ala

7070

Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro 85Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro 85

Glu Met Val Asp Ser Arg Tyr Arg Asn 60Glu Met Val Asp Ser Arg Tyr Arg Asn 60

Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser Leu 75 80Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser Leu 75 80

Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys Leu 90 95Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys Leu 90 95

- 864 044346- 864 044346

Val Leu Ser Ser Ser Leu Gly Phe Gln Glu ValVal Leu Ser Ser Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val

100100

Leu Ser Val GluLeu Ser Val Glu

110110

105 <210> 704 <211> 111 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>105 <210> 704 <211> 111 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v198 IgV <400> 704<223> ICOSL v198 IgV <400> 704

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg 1 5Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg 1 5

Ala Met Val Gly Ser Asp Val GluAla Met Val Gly Ser Asp Val Glu

1515

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly 20Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly 20

Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp Val 25 30Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp Val 25 30

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser GluTyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu

4040

Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr His 45Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr His 45

Ile Pro Gln Ser Ser Ser Leu GluIle Pro Gln Ser Ser Ser Leu Glu

5555

Tyr Val Asp Ser Arg Tyr Arg Asn 60Tyr Val Asp Ser Arg Tyr Arg Asn 60

Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly 65 70Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly 65 70

Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser LeuMet Leu Arg Gly Asp Phe Ser Leu

8080

Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln 85Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln 85

Asp Glu Gln Lys Phe His Cys LeuAsp Glu Gln Lys Phe His Cys Leu

9595

Val Leu Ser Ser Ser Leu Gly PheVal Leu Ser Ser Ser Leu Gly Phe

100100

Gln Glu Val Leu Ser Val GluGln Glu Val Leu Ser Val Glu

105 110 <210> 705 <211> 111 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>105 110 <210> 705 <211> 111 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v199 IgV <400> 705<223> ICOSL v199 IgV <400> 705

Asp Thr Gln Glu 1Asp Thr Gln Glu 1

Lys Glu 5Lys Glu 5

Leu Ser Cys Ala 20Leu Ser Cys Ala 20

Cys ProCys Pro

Tyr Val Tyr TrpTyr Val Tyr Trp

Gln ThrGln Thr

Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val Glu 1015Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val Glu 1015

Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp Val 2530Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp Val 2530

Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr His 4045Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr His 4045

- 865 044346- 865 044346

Ile Pro Gln Ser Ser Ser Leu Glu Tyr Val AspIle Pro Gln Ser Ser Ser Leu Glu Tyr Val Asp

5555

Ser Arg Tyr Arg 60Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg 65 70 75Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg 65 70 75

Gly Asp Phe SerGly Asp Phe Ser

Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln 85 90Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln 85 90

Lys Phe His Cys 95Lys Phe His Cys 95

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

Val Leu Ser Met Ser Leu Gly Phe Gln Glu ValVal Leu Ser Met Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val

100105100105

Leu Ser Val GluLeu Ser Val Glu

110 <210>706 <211>111 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>110 <210>706 <211>111 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v200 IgV < 400> 706< 223> ICOSL v200 IgV < 400> 706

Asp Thr Gln Glu LysAsp Thr Gln Glu Lys

Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp ValGlu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val

1515

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn AspLeu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp

25 3025 30

Tyr ValTyr Val

Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 40 45Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 40 45

Ile ProIle Pro

Gln Ser Ser Ser Leu Glu Tyr Val Asp Ser Arg Tyr Arg 55 60Gln Ser Ser Ser Leu Glu Tyr Val Asp Ser Arg Tyr Arg 55 60

Arg Ala 65Arg Ala 65

Leu Met Ser Pro Ala Gly Met 70Leu Met Ser Pro Ala Gly Met 70

Leu Arg Gly Asp Phe Ser 75Leu Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg LeuArg Leu

Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp 85Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp 85

Glu Gln Lys Phe His Cys 90 95Glu Gln Lys Phe His Cys 90 95

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

Val LeuVal Leu

Ser Val Ser Leu Gly Phe GlnSer Val Ser Leu Gly Phe Gln

100105100105

Glu Val Leu Ser Val GluGlu Val Leu Ser Val Glu

110 <210>707 <211>111 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>110 <210>707 <211>111 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v201 IgV<223> ICOSL v201 IgV

- 866 044346 <400> 707- 866 044346 <400> 707

AspAsp

ThrThr

GlnGln

GluGlu

Lys 5Lys 5

GluGlu

ValVal

ArgArg

AlaAla

Met 10Met 10

ValVal

GlyGly

SerSer

AspAsp

Val 15Val 15

LeuLeu

SerSer

CysCys

Ala 20Ala 20

CysCys

ProPro

GluGlu

GlyGly

Ser 25Ser 25

ArgArg

PhePhe

AspAsp

LeuLeu

Asn 30Asn 30

AspAsp

TyrTyr

ValVal

Tyr 35Tyr 35

TrpTrp

GlnGln

ThrThr

SerSer

Glu 40Glu 40

SerSer

LysLys

ThrThr

ValVal

Val 45Val 45

ThrThr

TyrTyr

IleIle

Pro 50Pro 50

GlnGln

ThrThr

SerSer

SerSer

Leu 55Leu 55

GluGlu

HisHis

ValVal

AspAsp

Ser 60Ser 60

ArgArg

TyrTyr

ArgArg

Arg 65Arg 65

AlaAla

LeuLeu

MetMet

SerSer

Pro 70Pro 70

AlaAla

GlyGly

MetMet

LeuLeu

Arg 75Arg 75

GlyGly

AspAsp

PhePhe

SerSer

ArgArg

LeuLeu

PhePhe

AsnAsn

Val 85Val 85

ThrThr

ProPro

GlnGln

AspAsp

Glu 90Glu 90

GlnGln

LysLys

PhePhe

HisHis

Cys 95Cys 95

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

LeuLeu

SerSer

SerSer

100100

SerSer

LeuLeu

GlyGly

PhePhe

GlnGln

105105

GluGlu

ValVal

LeuLeu

SerSer

ValVal

110110

Glu <210> 708 <211> 111 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Glu <210> 708 <211> 111 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v202 IgV < 400> 708< 223> ICOSL v202 IgV < 400> 708

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn AspPro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp

30thirty

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr TyrThr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr

4545

Ile Pro Gln Thr Ser 50Ile Pro Gln Thr Ser 50

Ser Leu Glu His Val Asp Ser Arg Tyr ArgSer Leu Glu His Val Asp Ser Arg Tyr Arg

6060

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 70 75Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 70 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 90 95Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 90 95

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

- 867 044346- 867 044346

Val Leu Ser Ala Ser Leu Gly Phe Gln Glu ValVal Leu Ser Ala Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val

100100

Leu Ser Val GluLeu Ser Val Glu

110110

105 < 210> 709 < 211> 111 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>105 <210> 709 <211> 111 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v203 IgV <400> 709<223> ICOSL v203 IgV <400> 709

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg 1 5Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg 1 5

Ala Met Val Gly Ser Asp Val GluAla Met Val Gly Ser Asp Val Glu

1515

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly 20Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly 20

Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp Val 25 30Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp Val 25 30

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser GluTyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu

4040

Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr His 45Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr His 45

Ile Pro Gln Thr Ser Ser Leu GluIle Pro Gln Thr Ser Ser Leu Glu

5555

Tyr Val Asp Ser Arg Tyr Arg Asn 60Tyr Val Asp Ser Arg Tyr Arg Asn 60

Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly 65 70Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly 65 70

Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser LeuMet Leu Arg Gly Asp Phe Ser Leu

8080

Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln 85Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln 85

Asp Glu Gln Lys Phe His Cys LeuAsp Glu Gln Lys Phe His Cys Leu

9595

Val Leu Ser Ala Ser Leu Gly PheVal Leu Ser Ala Ser Leu Gly Phe

100100

Gln Glu Val Leu Ser Val GluGln Glu Val Leu Ser Val Glu

105 110 <210> 710 <211> 111 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>105 110 <210> 710 <211> 111 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v204 IgV<223> ICOSL v204 IgV

<400> <400> 710 710 Asp 1 Asp 1 Thr Thr Gln Gln Glu Glu Lys 5 Lys 5 Glu Glu Val Val Arg Arg Ala Ala Met 10 Met 10 Val Val Gly Gly Ser Ser Asp Asp Val 15 Val 15 Glu Glu Leu Leu Ser Ser Cys Cys Ala 20 Ala 20 Cys Cys Pro Pro Glu Glu Gly Gly Ser 25 Ser 25 Arg Arg Phe Phe Asp Asp Leu Leu Asn 30 Asn 30 Asp Asp Val Val Tyr Tyr Val Val Tyr Tyr Trp Trp Gln Gln Thr Thr Ser Ser Glu Glu Ser Ser Lys Lys Thr Thr Val Val Val Val Thr Thr Tyr Tyr His His

- 868 044346- 868 044346

Ile Pro Gln Val SerIle Pro Gln Val Ser

Ser Leu Glu Leu Val Asp Ser Arg Tyr ArgSer Leu Glu Leu Val Asp Ser Arg Tyr Arg

6060

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 70 75Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 70 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 90 95Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 90 95

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

Val Leu Ser Ala SerVal Leu Ser Ala Ser

100100

Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val GluLeu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu

105110 <210>711 <211>111 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>105110 <210>711 <211>111 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v205 IgV <400> 711<223> ICOSL v205 IgV <400> 711

Asp Thr Gln Glu LysAsp Thr Gln Glu Lys

55

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

Val Leu Ser Lys SerVal Leu Ser Lys Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110 <210> 712 <211> 111 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>110 <210> 712 <211> 111 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

- 869 044346 <223> ICOSL v206 IgV <400> 712- 869 044346 <223> ICOSL v206 IgV <400> 712

Asp Thr Gln Glu LysAsp Thr Gln Glu Lys

55

Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp ValGlu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val

1515

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn AspPro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp

30thirty

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 40 45Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 40 45

Ile Pro Gln Lys Ser 50Ile Pro Gln Lys Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val Asp Ser Arg Tyr ArgSer Leu Glu Tyr Val Asp Ser Arg Tyr Arg

6060

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 70 75Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 70 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 90 95Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 90 95

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

Val Leu Ser Arg SerVal Leu Ser Arg Ser

100100

Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val GluLeu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu

105 110 <210> 713 <211> 111 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>105 110 <210> 713 <211> 111 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v207 IgV <400> 713<223> ICOSL v207 IgV <400> 713

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu 20Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu 20

Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn AspGly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp

30thirty

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser 35Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser 35

Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 40 45Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 40 45

Ile Pro Gln Leu Ser Ser LeuIle Pro Gln Leu Ser Ser Leu

5555

Glu His Val Asp Ser Arg Tyr Arg 60Glu His Val Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser Pro AlaArg Ala Leu Met Ser Pro Ala

7070

Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 75Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 75

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

Arg Leu Phe Asn Val Thr ProArg Leu Phe Asn Val Thr Pro

Gln Asp Glu Gln Lys Phe His CysGln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys

- 870 044346- 870 044346

Val Leu Ser Arg Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Arg Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu

100 105 110 <210> 714 <211> 111 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>100 105 110 <210> 714 <211> 111 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v208 IgV < 400> 714<223> ICOSL v208 IgV <400> 714

Asp Thr Gln Glu LysAsp Thr Gln Glu Lys

Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp ValGlu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val

1515

Leu SerLeu Ser

Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn AspCys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp

25 3025 30

Tyr ValTyr Val

Ile ProIle Pro

Tyr Trp Gln 35Tyr Trp Gln 35

Gln Arg SerGln Arg Ser

Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 40 45Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 40 45

Ser Leu Glu Phe Val Asp Ser Arg Tyr ArgSer Leu Glu Phe Val Asp Ser Arg Tyr Arg

6060

Arg Ala 65Arg Ala 65

Leu Met SerLeu Met Ser

Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 70 75Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 70 75

Arg LeuArg Leu

Phe Asn ValPhe Asn Val

Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 90 95Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 90 95

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

Val LeuVal Leu

Ser Asn SerSer Asn Ser

100100

Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val GluLeu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu

105 110 <210> 715 <211> 111 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>105 110 <210> 715 <211> 111 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v209 IgV <400> 715<223> ICOSL v209 IgV <400> 715

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly SerLeu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser

Arg Phe Asp Leu Asn AspArg Phe Asp Leu Asn Asp

GluGlu

ValVal

- 871 044346- 871 044346

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 40 45Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 40 45

Ile Pro Gln Arg Ser 50Ile Pro Gln Arg Ser 50

Ser Leu Glu Phe Val Asp Ser Arg Tyr ArgSer Leu Glu Phe Val Asp Ser Arg Tyr Arg

6060

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 70 75Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 70 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 90 95Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 90 95

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

Val Leu Ser Pro SerVal Leu Ser Pro Ser

100100

Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val GluLeu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu

105 110 <210> 716 <211> 111 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>105 110 <210> 716 <211> 111 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v210 IgV < 400> 716< 223> ICOSL v210 IgV < 400> 716

Asp Thr 1Asp Thr 1

Gln GluGln Glu

Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 5 10 15Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 5 10 15

Leu SerLeu Ser

Cys Ala 20Cys Ala 20

Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp 25 30Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp 25 30

Tyr ValTyr Val

Tyr Trp 35Tyr Trp 35

Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr TyrGln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr

4545

Ile ProIle Pro

Gln ArgGln Arg

Ser Ser Leu Glu Phe Val Asp Ser Arg Tyr Arg 55 60Ser Ser Leu Glu Phe Val Asp Ser Arg Tyr Arg 55 60

Arg 65 Arg 65 Ala Ala Leu Leu Met Met Ser Ser Pro 70 Pro 70 Ala Ala Gly Gly Met Met Arg Arg Leu Leu Phe Phe Asn Asn Val 85 Val 85 Thr Thr Pro Pro Gln Gln Asp Asp Val Val Leu Leu Ser Ser Arg 100 Arg 100 Ser Ser Leu Leu Gly Gly Phe Phe Gln 105 Gln 105

Leu Arg Gly Asp Phe Ser 75Leu Arg Gly Asp Phe Ser 75

Glu Gln Lys Phe His Cys 90 95Glu Gln Lys Phe His Cys 90 95

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

Glu Val Leu Ser Val GluGlu Val Leu Ser Val Glu

110 <210> 717 <211> 111 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность110 <210> 717 <211> 111 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence

- 872 044346 <220>- 872 044346 <220>

<223> ICOSL v211 IgV <400> 717<223> ICOSL v211 IgV <400> 717

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp ValGlu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val

1515

Leu Ser Cys Ala CysLeu Ser Cys Ala Cys

Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn AspPro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp

30thirty

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 40 45Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 40 45

Ile Pro Gln Arg Ser 50Ile Pro Gln Arg Ser 50

Ser Leu Glu Phe Val Asp Ser Arg Tyr ArgSer Leu Glu Phe Val Asp Ser Arg Tyr Arg

6060

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 70 75Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 70 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 90 95Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 90 95

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

Val Leu Ser Thr SerVal Leu Ser Thr Ser

100100

Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val GluLeu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu

105 110 <210> 718 <211> 111 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>105 110 <210> 718 <211> 111 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v212 IgV <400> 718<223> ICOSL v212 IgV <400> 718

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu 20Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu 20

Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn AspGly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp

30thirty

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser 35Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser 35

Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 40 45Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 40 45

Ile Pro Gln Arg Ser Ser LeuIle Pro Gln Arg Ser Ser Leu

5555

Glu His Val Asp Ser Arg Tyr Arg 60Glu His Val Asp Ser Arg Tyr Arg 60

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

LeuLeu

Arg Ala Leu Met Ser Pro AlaArg Ala Leu Met Ser Pro Ala

7070

Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 75Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 75

- 873 044346- 873 044346

Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu GlnArg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln

Lys Phe His Cys 95Lys Phe His Cys 95

LeuLeu

Val Leu Ser Lys Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Lys Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu

100 105 110 <210> 719 <211> 111 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>100 105 110 <210> 719 <211> 111 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v213 IgV < 400> 719<223> ICOSL v213 IgV <400> 719

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn AspLeu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp

25 3025 30

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 40 45Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 40 45

Ile Pro Gln Arg Ser Ser Leu Glu Leu Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 55 60Ile Pro Gln Arg Ser Ser Leu Glu Leu Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 55 60

Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 65 70 75Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 65 70 75

Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 85 90 95Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 85 90 95

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

Val Leu Ser Ser Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Ser Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu

100 105 110 <210> 720 <211> 111 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>100 105 110 <210> 720 <211> 111 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v214 IgV <400> 720<223> ICOSL v214 IgV <400> 720

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly SerLeu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser

Arg Phe Asp Leu Asn AspArg Phe Asp Leu Asn Asp

GluGlu

ValVal

- 874 044346- 874 044346

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 40 45Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 40 45

Ile Pro Gln Arg Ser 50Ile Pro Gln Arg Ser 50

Ser Leu Glu Trp Val Asp Ser Arg Tyr ArgSer Leu Glu Trp Val Asp Ser Arg Tyr Arg

6060

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 70 75Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 70 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 90 95Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 90 95

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

Val Leu Ser Lys SerVal Leu Ser Lys Ser

100100

Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val GluLeu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu

105110 <210>721 <211>111 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>105110 <210>721 <211>111 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v215 IgV <400> 721<223> ICOSL v215 IgV <400> 721

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn AspLeu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp

25 3025 30

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 40 45Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 40 45

Ile Pro Gln Arg Ser Ser Leu Glu Trp Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 55 60Ile Pro Gln Arg Ser Ser Leu Glu Trp Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 55 60

Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 65 70 75Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 65 70 75

Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 85 90 95Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 85 90 95

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

Val Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu

100 105110 <210>722 <211>111 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность100 105110 <210>722 <211>111 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence

- 875 044346 <220>- 875 044346 <220>

<223> ICOSL v216 IgV <400> 722<223> ICOSL v216 IgV <400> 722

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp ValGlu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val

1515

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn AspPro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp

30thirty

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr TyrThr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr

4545

Ile Pro Gln Arg Ser 50Ile Pro Gln Arg Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val Asp Ser Arg Tyr ArgSer Leu Glu Tyr Val Asp Ser Arg Tyr Arg

6060

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 70 75Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 70 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 90 95Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 90 95

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

Val Leu Ser Arg SerVal Leu Ser Arg Ser

100100

Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val GluLeu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu

105 110 <210> 723 <211> 111 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>105 110 <210> 723 <211> 111 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL <400> 723<223> ICOSL <400> 723

Asp Thr Gln 1Asp Thr Gln 1

Leu Ser CysLeu Ser Cys

Tyr Val TyrTyr Val Tyr

Ile Pro Gln v217 IgVIle Pro Gln v217 IgV

Glu Lys Glu 5Glu Lys Glu 5

Ala Cys Pro 20Ala Cys Pro 20

Trp Gln ThrTrp Gln Thr

Cys Ser SerCys Ser Ser

Val Arg AlaVal Arg Ala

Glu Gly SerGlu Gly Ser

Ser Glu SerSer Glu Ser

Leu Glu Glu 55Leu Glu Glu 55

Met Val Gly 10Met Val Gly 10

Arg Phe AspArg Phe Asp

Lys Thr ValLys Thr Val

Val Asp Ser 60Val Asp Ser 60

Ser Asp ValSer Asp Val

Leu Asn Asp 30Leu Asn Asp 30

Val Thr Tyr 45Val Thr Tyr 45

Arg Tyr ArgArg Tyr Arg

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

LeuLeu

Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met 65 70Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met 65 70

Leu Arg Gly Asp Phe Ser 75Leu Arg Gly Asp Phe Ser 75

- 876 044346- 876 044346

Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu GlnArg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln

Lys Phe His Cys LeuLys Phe His Cys Leu

Val Leu Ser Ser Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Ser Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu

100 105110 <210>724 <211>111 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>100 105110 <210>724 <211>111 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v218 IgV <400> 724<223> ICOSL v218 IgV <400> 724

Asp Thr Gln Glu LysAsp Thr Gln Glu Lys

55

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Ile Pro Gln Gly Ser 50Ile Pro Gln Gly Ser 50

Glu Val Arg Ala Met 10Glu Val Arg Ala Met 10

Pro Glu Gly Ser Arg 25Pro Glu Gly Ser Arg 25

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Ser Leu Glu Pro Val 55Ser Leu Glu Pro Val 55

Val Gly Ser Asp Val Glu 15Val Gly Ser Asp Val Glu 15

Phe Asp Leu Asn Asp Val 30Phe Asp Leu Asn Asp Val 30

Thr Val Val Thr Tyr His 45Thr Val Val Thr Tyr His 45

Asp Ser Arg Tyr Arg Asn 60Asp Ser Arg Tyr Arg Asn 60

Arg Ala 65Arg Ala 65

Arg LeuArg Leu

Val LeuVal Leu

Leu Met Ser Pro Ala Gly Met 70Leu Met Ser Pro Ala Gly Met 70

Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp 85Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp 85

Ser Asp Ser Leu Gly Phe GlnSer Asp Ser Leu Gly Phe Gln

100105100105

Leu Arg Gly Asp Phe Ser LeuLeu Arg Gly Asp Phe Ser Leu

75807580

Glu Gln Lys Phe His Cys Leu 9095Glu Gln Lys Phe His Cys Leu 9095

Glu Val Leu Ser Val GluGlu Val Leu Ser Val Glu

110 <210> 725 <211> 111 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>110 <210> 725 <211> 111 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v219 IgV <400> 725<223> ICOSL v219 IgV <400> 725

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met ValAsp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val

Gly Ser Asp Val GluGly Ser Asp Val Glu

5 105 10

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp Val 20 25 30Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp Val 20 25 30

- 877 044346- 877 044346

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 40 45Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 40 45

Ile Pro Gln Gly Ser 50Ile Pro Gln Gly Ser 50

Ser Leu Glu Val Val Asp Ser Arg Tyr ArgSer Leu Glu Val Val Asp Ser Arg Tyr Arg

6060

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 70 75Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 70 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 90 95Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 90 95

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

Val Leu Ser Gly SerVal Leu Ser Gly Ser

100100

Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val GluLeu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu

105 110 <210> 726 <211> 111 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>105 110 <210> 726 <211> 111 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v220 IgV < 400> 726< 223> ICOSL v220 IgV < 400> 726

Asp Thr Gln Glu LysAsp Thr Gln Glu Lys

Glu Val Arg Ala Met ValGlu Val Arg Ala Met Val

Gly Ser Asp Val 15Gly Ser Asp Val 15

Leu SerLeu Ser

Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn AspCys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp

25 3025 30

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 40 45Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 40 45

Ile Pro Gln Gly Ser Ser Leu Glu Val Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 55 60Ile Pro Gln Gly Ser Ser Leu Glu Val Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 55 60

Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 65 70 75Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 65 70 75

Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 85 90 95Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 85 90 95

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

Val Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu

100 105 110 <210> 727 <211> 111 <212> БЕЛОК100 105 110 <210> 727 <211> 111 <212> PROTEIN

- 878 044346 <213> Искусственная последовательность <220>- 878 044346 <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v221 IgV <400> 727<223> ICOSL v221 IgV <400> 727

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg 1 5Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg 1 5

Ala Met Val Gly Ser Asp Val GluAla Met Val Gly Ser Asp Val Glu

1515

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly 20Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly 20

Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp Val 25 30Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp Val 25 30

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser GluTyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu

4040

Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr His 45Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr His 45

Ile Pro Gln Leu Ser Ser Leu GluIle Pro Gln Leu Ser Ser Leu Glu

5555

Val Val Asp Ser Arg Tyr Arg Asn 60Val Val Asp Ser Arg Tyr Arg Asn 60

Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly 65 70Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly 65 70

Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser LeuMet Leu Arg Gly Asp Phe Ser Leu

8080

Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln 85Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln 85

Asp Glu Gln Lys Phe His Cys LeuAsp Glu Gln Lys Phe His Cys Leu

9595

Val Leu Ser Gln Ser Leu Gly PheVal Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe

100100

Gln Glu Val Leu Ser Val GluGln Glu Val Leu Ser Val Glu

105 110 <210> 728 <211> 111 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>105 110 <210> 728 <211> 111 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v222 IgV <400> 728<223> ICOSL v222 IgV <400> 728

Asp Thr Gln Glu 1Asp Thr Gln Glu 1

Lys Glu Val Arg 5Lys Glu Val Arg 5

Leu Ser Cys Ala 20Leu Ser Cys Ala 20

Cys Pro Glu GlyCys Pro Glu Gly

Tyr Val Tyr TrpTyr Val Tyr Trp

Gln Thr Ser GluGln Thr Ser Glu

Ile Pro Gln ProIle Pro Gln Pro

Ser Ser Leu GluSer Ser Leu Glu

Arg Ala Leu Met 65Arg Ala Leu Met 65

Ser Pro Ala Gly 70Ser Pro Ala Gly 70

AlaAla

Ser 25Ser 25

SerSer

ProPro

MetMet

Met Val Gly Ser Asp Val GluMet Val Gly Ser Asp Val Glu

1515

Arg Phe Asp Leu Asn Asp Val 30Arg Phe Asp Leu Asn Asp Val 30

Lys Thr Val Val Thr Tyr His 45Lys Thr Val Val Thr Tyr His 45

Val Asp Ser Arg Tyr Arg Asn 60Val Asp Ser Arg Tyr Arg Asn 60

Leu Arg Gly Asp Phe Ser LeuLeu Arg Gly Asp Phe Ser Leu

8080

- 879 044346- 879 044346

Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu GlnArg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln

Lys Phe His Cys 95Lys Phe His Cys 95

LeuLeu

Val Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu

100 105110 <210>729 <211>111 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>100 105110 <210>729 <211>111 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v223 IgV < 400> 729<223> ICOSL v223 IgV <400> 729

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn AspLeu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp

25 3025 30

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 40 45Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 40 45

Ile Pro Gln Pro Ser Ser Leu Glu Ser Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 55 60Ile Pro Gln Pro Ser Ser Leu Glu Ser Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 55 60

Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 65 70 75Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 65 70 75

Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 85 90 95Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 85 90 95

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

Val Leu Ser Gly Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Gly Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu

100 105110 <210>730 <211>111 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>100 105110 <210>730 <211>111 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v224 IgV <400> 730<223> ICOSL v224 IgV <400> 730

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15

GluGlu

ValVal

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn AspLeu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp

- 880 044346- 880 044346

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 40 45Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 40 45

Ile Pro Gln Ser Ser 50Ile Pro Gln Ser Ser 50

Ser Leu Glu Leu Val Asp Ser Arg Tyr ArgSer Leu Glu Leu Val Asp Ser Arg Tyr Arg

6060

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 70 75Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 70 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 90 95Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 90 95

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

Val Leu Ser Gly SerVal Leu Ser Gly Ser

100100

Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val GluLeu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu

105 110 <210> 731 <211> 111 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>105 110 <210> 731 <211> 111 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v225 IgV < 400> 731<223> ICOSL v225 IgV <400> 731

Asp Thr Gln Glu LysAsp Thr Gln Glu Lys

Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp ValGlu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val

1515

Leu SerLeu Ser

Cys Ala 20Cys Ala 20

Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp 25 30Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp 25 30

Tyr ValTyr Val

Ile ProIle Pro

Tyr 35Tyr 35

GlnGln

TrpTrp

ThrThr

Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr TyrGln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr

4545

Ser Ser Leu Glu Lys Val Asp Ser Arg Tyr Arg 55 60Ser Ser Leu Glu Lys Val Asp Ser Arg Tyr Arg 55 60

Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met 65 70Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met 65 70

Leu Arg Gly Asp Phe Ser 75Leu Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp 85Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp 85

Glu Gln Lys Phe His Cys 90 95Glu Gln Lys Phe His Cys 90 95

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

Val Leu Ser Pro Ser Leu Gly Phe GlnVal Leu Ser Pro Ser Leu Gly Phe Gln

100 105100 105

Glu Val Leu Ser Val GluGlu Val Leu Ser Val Glu

110 <210> 732 <211> 111110 <210> 732 <211> 111

- 881 044346 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>- 881 044346 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v226 IgV <400>732<223> ICOSL v226 IgV <400>732

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp ValAsp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val

5 10155 1015

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn AspLeu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp

25302530

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 4045Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 4045

Ile Pro Gln Val Ser Ser Leu Glu Thr Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 5560Ile Pro Gln Val Ser Ser Leu Glu Thr Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 5560

Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 65 7075Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 65 7075

Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 85 9095Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 85 9095

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

Val Leu Ser Leu Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Leu Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu

100 105110 <210>733 <211>111 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>100 105110 <210>733 <211>111 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v227 IgV <400>733<223> ICOSL v227 IgV <400>733

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp ValAsp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val

5 10155 1015

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn AspLeu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp

25302530

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 4045Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 4045

Ile Pro Gln Asn Ser Ser Leu Glu Gln Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 5560Ile Pro Gln Asn Ser Ser Leu Glu Gln Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 5560

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

LeuLeu

Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe SerArg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser

- 882 044346- 882 044346

70 7570 75

Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 85 9095Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 85 9095

LeuLeu

Val Leu Ser Pro Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Pro Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu

100 105110 < 210>734 <211>122 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>100 105110 <210>734 <211>122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v180 IgV <400> 734<223> ICOSL v180 IgV <400> 734

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Ala Ser 50Ile Pro Gln Ala Ser 50

Ser Leu Glu Phe ValSer Leu Glu Phe Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Ser SerVal Leu Ser Ser Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120 <210> 735 <211> 122 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>120 <210> 735 <211> 122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v181 IgV <400> 735<223> ICOSL v181 IgV <400> 735

- 883 044346- 883 044346

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala CysLeu Ser Cys Ala Cys

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn AspPhe Asp Leu Asn Asp

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Ala Ser 50Ile Pro Gln Ala Ser 50

Ser Leu Glu His ValSer Leu Glu His Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Ser SerVal Leu Ser Ser Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120 <210> 736 <211> 122 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>120 <210> 736 <211> 122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v182 IgV <400> 736<223> ICOSL v182 IgV <400> 736

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp ValAsp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val

5 10 155 10 15

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu 20Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu 20

Gly SerGly Ser

Arg Phe Asp Leu Asn AspArg Phe Asp Leu Asn Asp

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser 35Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser 35

Glu Ser 40Glu Ser 40

Lys Thr Val Val Thr Tyr 45Lys Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Ala Ser Ser LeuIle Pro Gln Ala Ser Ser Leu

5555

Glu TyrGlu Tyr

Val Asp Ser Arg Tyr Arg 60Val Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser Pro AlaArg Ala Leu Met Ser Pro Ala

7070

Gly MetGly Met

Leu Arg Gly Asp Phe Ser 75Leu Arg Gly Asp Phe Ser 75

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

Arg Leu Phe Asn Val Thr ProArg Leu Phe Asn Val Thr Pro

Gln AspGln Asp

Glu Gln Lys Phe His CysGlu Gln Lys Phe His Cys

- 884 044346- 884 044346

Val Leu Ser AlaVal Leu Ser Ala

100100

Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val GluSer Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu

105 110105 110

ValVal

Thr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser ValThr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser Val

115115

120 <210> 737 <211> 122 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>120 <210> 737 <211> 122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v183 IgV < 400> 737<223> ICOSL v183 IgV <400> 737

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Asp Ser 50Ile Pro Gln Asp Ser 50

Ser Leu Glu Ala ValSer Leu Glu Ala Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Ala SerVal Leu Ser Ala Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120 <210> 738 <211> 122 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>120 <210> 738 <211> 122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v184 IgV <400> 738<223> ICOSL v184 IgV <400> 738

- 885 044346- 885 044346

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala CysLeu Ser Cys Ala Cys

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn AspPhe Asp Leu Asn Asp

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Asp Ser 50Ile Pro Gln Asp Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Ser SerVal Leu Ser Ser Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120 <210> 739 <211> 122 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>120 <210> 739 <211> 122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v185 IgV <400> 739<223> ICOSL v185 IgV <400> 739

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp ValAsp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val

5 10 155 10 15

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu 20Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu 20

Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn AspGly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp

30thirty

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser 35Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser 35

Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 40 45Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 40 45

Ile Pro Gln Gly Ser Ser LeuIle Pro Gln Gly Ser Ser Leu

5555

Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg 60Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser Pro AlaArg Ala Leu Met Ser Pro Ala

7070

Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 75Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 75

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

Arg Leu Phe Asn Val Thr ProArg Leu Phe Asn Val Thr Pro

Gln Asp Glu Gln Lys Phe His CysGln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys

- 886 044346- 886 044346

Val Leu Ser AlaVal Leu Ser Ala

100100

Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val GluSer Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu

105 110105 110

ValVal

Thr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser ValThr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser Val

115115

120 <210> 740 <211> 122 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>120 <210> 740 <211> 122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v186 IgV < 400> 740< 223> ICOSL v186 IgV < 400> 740

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Ala SerVal Leu Ser Ala Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120 <210> 741 <211> 122 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>120 <210> 741 <211> 122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v187 IgV <400> 741<223> ICOSL v187 IgV <400> 741

- 887 044346- 887 044346

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala CysLeu Ser Cys Ala Cys

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn AspPhe Asp Leu Asn Asp

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Met Ser 50Ile Pro Gln Met Ser 50

Ser Leu Glu His ValSer Leu Glu His Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Ser SerVal Leu Ser Ser Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120 <210> 742 <211> 122 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>120 <210> 742 <211> 122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v188 IgV <400> 742<223> ICOSL v188 IgV <400> 742

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Met Ser 50Ile Pro Gln Met Ser 50

Ser Leu Glu Trp Val 55Ser Leu Glu Trp Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

Arg Leu Phe Asn ValArg Leu Phe Asn Val

Thr Pro Gln Asp GluThr Pro Gln Asp Glu

Gln Lys Phe His CysGln Lys Phe His Cys

- 888 044346- 888 044346

Val Leu Ser ProVal Leu Ser Pro

100100

Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val GluSer Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu

105 110105 110

ValVal

Thr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser ValThr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser Val

115115

120 <210> 743 <211> 122 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>120 <210> 743 <211> 122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v189 IgV < 400> 743<223> ICOSL v189 IgV <400> 743

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Gln Ser 50Ile Pro Gln Gln Ser 50

Ser Leu Glu Phe ValSer Leu Glu Phe Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120 <210> 744 <211> 122 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>120 <210> 744 <211> 122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v190 IgV <400> 744<223> ICOSL v190 IgV <400> 744

- 889 044346- 889 044346

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala CysLeu Ser Cys Ala Cys

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn AspPhe Asp Leu Asn Asp

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Gln Ser 50Ile Pro Gln Gln Ser 50

Ser Leu Glu Ser ValSer Leu Glu Ser Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Ala SerVal Leu Ser Ala Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120 <210> 745 <211> 122 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>120 <210> 745 <211> 122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v191 IgV <400> 745<223> ICOSL v191 IgV <400> 745

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu 20Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu 20

Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn AspGly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp

30thirty

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser 35Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser 35

Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 40 45Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 40 45

Ile Pro Gln Arg Ser Ser LeuIle Pro Gln Arg Ser Ser Leu

5555

Glu Leu Val Asp Ser Arg Tyr Arg 60Glu Leu Val Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser Pro AlaArg Ala Leu Met Ser Pro Ala

7070

Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 75Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 75

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

Arg Leu Phe Asn Val Thr ProArg Leu Phe Asn Val Thr Pro

Gln Asp Glu Gln Lys Phe His CysGln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys

- 890 044346- 890 044346

Val Leu Ser AlaVal Leu Ser Ala

100100

Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val GluSer Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu

105 110105 110

ValVal

Thr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser ValThr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser Val

115115

120 <210> 746 <211> 122 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>120 <210> 746 <211> 122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v192 IgV < 400> 746<223> ICOSL v192 IgV <400> 746

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Arg Ser 50Ile Pro Gln Arg Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Pro SerVal Leu Ser Pro Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120 <210> 747 <211> 122 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>120 <210> 747 <211> 122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v193 IgV <400> 747<223> ICOSL v193 IgV <400> 747

- 891 044346- 891 044346

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala CysLeu Ser Cys Ala Cys

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn AspPhe Asp Leu Asn Asp

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Arg Ser 50Ile Pro Gln Arg Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Ser SerVal Leu Ser Ser Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120 <210> 748 <211> 122 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>120 <210> 748 <211> 122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v194 IgV <400> 748<223> ICOSL v194 IgV <400> 748

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu 20Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu 20

Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn AspGly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp

30thirty

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser 35Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser 35

Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 40 45Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 40 45

Ile Pro Gln Ser Ser Ser LeuIle Pro Gln Ser Ser Ser Leu

5555

Glu Ala Val Asp Ser Arg Tyr Arg 60Glu Ala Val Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser Pro AlaArg Ala Leu Met Ser Pro Ala

7070

Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 75Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 75

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

Arg Leu Phe Asn Val Thr ProArg Leu Phe Asn Val Thr Pro

Gln Asp Glu Gln Lys Phe His CysGln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys

- 892 044346- 892 044346

Val Leu Ser AlaVal Leu Ser Ala

100100

Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val GluSer Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu

105 110105 110

ValVal

Thr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser ValThr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser Val

115115

120 <210> 749 <211> 122 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>120 <210> 749 <211> 122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v195 IgV < 400> 749<223> ICOSL v195 IgV <400> 749

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Ser Ser 50Ile Pro Gln Ser Ser 50

Ser Leu Glu His ValSer Leu Glu His Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Glu SerVal Leu Ser Glu Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120 <210> 750 <211> 122 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>120 <210> 750 <211> 122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v196 IgV <400> 750<223> ICOSL v196 IgV <400> 750

- 893 044346- 893 044346

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala CysLeu Ser Cys Ala Cys

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn AspPhe Asp Leu Asn Asp

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Ser Ser 50Ile Pro Gln Ser Ser 50

Ser Leu Glu Leu ValSer Leu Glu Leu Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Ser SerVal Leu Ser Ser Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120 <210> 751 <211> 122 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>120 <210> 751 <211> 122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v197 IgV <400> 751<223> ICOSL v197 IgV <400> 751

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu 20Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu 20

Gly SerGly Ser

Arg Phe Asp Leu Asn AspArg Phe Asp Leu Asn Asp

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser 35Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser 35

Glu Ser 40Glu Ser 40

Lys Thr Val Val Thr Tyr 45Lys Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Ser Ser Ser LeuIle Pro Gln Ser Ser Ser Leu

5555

Glu MetGluMet

Val Asp Ser Arg Tyr Arg 60Val Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser Pro AlaArg Ala Leu Met Ser Pro Ala

7070

Gly MetGly Met

Leu Arg Gly Asp Phe Ser 75Leu Arg Gly Asp Phe Ser 75

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

Arg Leu Phe Asn Val Thr ProArg Leu Phe Asn Val Thr Pro

Gln AspGln Asp

Glu Gln Lys Phe His CysGlu Gln Lys Phe His Cys

- 894 044346- 894 044346

Val Leu Ser SerVal Leu Ser Ser

100100

Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val GluSer Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu

105 110105 110

ValVal

Thr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser ValThr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser Val

115115

120 <210> 752 <211> 122 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>120 <210> 752 <211> 122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v198 IgV < 400> 752<223> ICOSL v198 IgV <400> 752

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Ser Ser 50Ile Pro Gln Ser Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Ser SerVal Leu Ser Ser Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120 <210> 753 <211> 122 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>120 <210> 753 <211> 122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v199 IgV <400> 753<223> ICOSL v199 IgV <400> 753

- 895 044346- 895 044346

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala CysLeu Ser Cys Ala Cys

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn AspPhe Asp Leu Asn Asp

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Ser Ser 50Ile Pro Gln Ser Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Met SerVal Leu Ser Met Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120 <210> 754 <211> 122 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>120 <210> 754 <211> 122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v200 IgV <400> 754<223> ICOSL v200 IgV <400> 754

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu 20Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu 20

Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn AspGly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp

30thirty

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser 35Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser 35

Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 40 45Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 40 45

Ile Pro Gln Ser Ser Ser LeuIle Pro Gln Ser Ser Ser Leu

5555

Glu Tyr Val Asp Ser Arg Tyr Arg 60Glu Tyr Val Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser Pro AlaArg Ala Leu Met Ser Pro Ala

7070

Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 75Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 75

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

Arg Leu Phe Asn Val Thr ProArg Leu Phe Asn Val Thr Pro

Gln Asp Glu Gln Lys Phe His CysGln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys

- 896 044346- 896 044346

Val Leu Ser ValVal Leu Ser Val

100100

Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val GluSer Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu

105 110105 110

ValVal

Thr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser ValThr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser Val

115115

120 <210> 755 <211> 122 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>120 <210> 755 <211> 122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v201 IgV < 400> 755< 223> ICOSL v201 IgV < 400> 755

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Thr SerIle Pro Gln Thr Ser

Ser Leu Glu His ValSer Leu Glu His Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Ser SerVal Leu Ser Ser Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120 <210> 756 <211> 122 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>120 <210> 756 <211> 122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v202 IgV <400> 756<223> ICOSL v202 IgV <400> 756

- 897 044346- 897 044346

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala CysLeu Ser Cys Ala Cys

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn AspPhe Asp Leu Asn Asp

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Thr Ser 50Ile Pro Gln Thr Ser 50

Ser Leu Glu His ValSer Leu Glu His Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Ala SerVal Leu Ser Ala Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120 <210> 757 <211> 122 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>120 <210> 757 <211> 122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v203 IgV <400> 757<223> ICOSL v203 IgV <400> 757

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp ValAsp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val

5 10 155 10 15

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu 20Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu 20

Gly SerGly Ser

Arg Phe Asp Leu Asn AspArg Phe Asp Leu Asn Asp

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser 35Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser 35

Glu Ser 40Glu Ser 40

Lys Thr Val Val Thr Tyr 45Lys Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Thr Ser Ser LeuIle Pro Gln Thr Ser Ser Leu

5555

Glu TyrGlu Tyr

Val Asp Ser Arg Tyr Arg 60Val Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser Pro AlaArg Ala Leu Met Ser Pro Ala

7070

Gly MetGly Met

Leu Arg Gly Asp Phe Ser 75Leu Arg Gly Asp Phe Ser 75

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

Arg Leu Phe Asn Val Thr ProArg Leu Phe Asn Val Thr Pro

Gln AspGln Asp

Glu Gln Lys Phe His CysGlu Gln Lys Phe His Cys

- 898 044346- 898 044346

Val Leu Ser AlaVal Leu Ser Ala

100100

Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val GluSer Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu

105 110105 110

ValVal

Thr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser ValThr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser Val

115115

120 <210> 758 <211> 122 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>120 <210> 758 <211> 122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v204 IgV < 400> 758<223> ICOSL v204 IgV <400> 758

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Val SerIle Pro Gln Val Ser

Ser Leu Glu Leu ValSer Leu Glu Leu Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Ala SerVal Leu Ser Ala Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120 <210> 759 <211> 122 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>120 <210> 759 <211> 122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v205 IgV <400> 759<223> ICOSL v205 IgV <400> 759

- 899 044346- 899 044346

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala CysLeu Ser Cys Ala Cys

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn AspPhe Asp Leu Asn Asp

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Lys SerVal Leu Ser Lys Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120 <210> 760 <211> 122 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>120 <210> 760 <211> 122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v206 IgV <400> 760<223> ICOSL v206 IgV <400> 760

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu 20Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu 20

Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn AspGly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp

30thirty

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser 35Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser 35

Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 40 45Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 40 45

Ile Pro Gln Lys Ser Ser LeuIle Pro Gln Lys Ser Ser Leu

5555

Glu Tyr Val Asp Ser Arg Tyr Arg 60Glu Tyr Val Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser Pro AlaArg Ala Leu Met Ser Pro Ala

7070

Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 75Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 75

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

Arg Leu Phe Asn Val Thr ProArg Leu Phe Asn Val Thr Pro

Gln Asp Glu Gln Lys Phe His CysGln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys

- 900 044346- 900 044346

Val Leu Ser Arg Ser Leu Gly Phe Gln Glu ValVal Leu Ser Arg Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val

100 105100 105

Leu Ser Val GluLeu Ser Val Glu

110110

ValVal

Thr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser ValThr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser Val

115115

120 <210> 761 <211> 122 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>120 <210> 761 <211> 122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v207 IgV < 400> 761<223> ICOSL v207 IgV <400> 761

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Leu SerIle Pro Gln Leu Ser

Ser Leu Glu His ValSer Leu Glu His Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Arg SerVal Leu Ser Arg Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120 <210> 762 <211> 122 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>120 <210> 762 <211> 122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v208 IgV <400> 762<223> ICOSL v208 IgV <400> 762

- 901 044346- 901 044346

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala CysLeu Ser Cys Ala Cys

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn AspPhe Asp Leu Asn Asp

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Arg Ser 50Ile Pro Gln Arg Ser 50

Ser Leu Glu Phe ValSer Leu Glu Phe Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Asn SerVal Leu Ser Asn Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120 <210> 763 <211> 122 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>120 <210> 763 <211> 122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v209 IgV <400> 763<223> ICOSL v209 IgV <400> 763

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp ValAsp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val

5 10 155 10 15

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu 20Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu 20

Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn AspGly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp

30thirty

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser 35Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser 35

Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 40 45Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 40 45

Ile Pro Gln Arg Ser Ser LeuIle Pro Gln Arg Ser Ser Leu

5555

Glu Phe Val Asp Ser Arg Tyr Arg 60Glu Phe Val Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser Pro AlaArg Ala Leu Met Ser Pro Ala

7070

Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 75Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 75

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

Arg Leu Phe Asn Val Thr ProArg Leu Phe Asn Val Thr Pro

Gln Asp Glu Gln Lys Phe His CysGln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys

- 902 044346- 902 044346

Val Leu Ser ProVal Leu Ser Pro

100100

Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val GluSer Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu

105 110105 110

ValVal

Thr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser ValThr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser Val

115115

120 <210> 764 <211> 122 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>120 <210> 764 <211> 122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v210 IgV < 400> 764<223> ICOSL v210 IgV <400> 764

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Arg Ser 50Ile Pro Gln Arg Ser 50

Ser Leu Glu Phe ValSer Leu Glu Phe Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Arg SerVal Leu Ser Arg Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120 <210> 765 <211> 122 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>120 <210> 765 <211> 122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v211 IgV <400> 765<223> ICOSL v211 IgV <400> 765

- 903 044346- 903 044346

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala CysLeu Ser Cys Ala Cys

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn AspPhe Asp Leu Asn Asp

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Arg Ser 50Ile Pro Gln Arg Ser 50

Ser Leu Glu Phe ValSer Leu Glu Phe Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Thr SerVal Leu Ser Thr Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120 <210> 766 <211> 122 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>120 <210> 766 <211> 122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v212 IgV <400> 766<223> ICOSL v212 IgV <400> 766

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu 20Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu 20

Gly SerGly Ser

Arg Phe Asp Leu Asn AspArg Phe Asp Leu Asn Asp

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser 35Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser 35

Glu Ser 40Glu Ser 40

Lys Thr Val Val Thr Tyr 45Lys Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Arg Ser Ser LeuIle Pro Gln Arg Ser Ser Leu

5555

Glu HisGlu His

Val Asp Ser Arg Tyr Arg 60Val Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser Pro AlaArg Ala Leu Met Ser Pro Ala

7070

Gly MetGly Met

Leu Arg Gly Asp Phe Ser 75Leu Arg Gly Asp Phe Ser 75

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

Arg Leu Phe Asn Val Thr ProArg Leu Phe Asn Val Thr Pro

Gln AspGln Asp

Glu Gln Lys Phe His CysGlu Gln Lys Phe His Cys

- 904 044346- 904 044346

Val Leu Ser LysVal Leu Ser Lys

100100

Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val GluSer Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu

105 110105 110

ValVal

Thr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser ValThr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser Val

115115

120 <210> 767 <211> 122 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>120 <210> 767 <211> 122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v213 IgV < 400> 767<223> ICOSL v213 IgV <400> 767

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Arg Ser 50Ile Pro Gln Arg Ser 50

Ser Leu Glu Leu ValSer Leu Glu Leu Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Ser SerVal Leu Ser Ser Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120 <210> 768 <211> 122 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>120 <210> 768 <211> 122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v214 IgV <400> 768<223> ICOSL v214 IgV <400> 768

- 905 044346- 905 044346

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala CysLeu Ser Cys Ala Cys

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn AspPhe Asp Leu Asn Asp

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Arg Ser 50Ile Pro Gln Arg Ser 50

Ser Leu Glu Trp Val 55Ser Leu Glu Trp Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Lys SerVal Leu Ser Lys Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120 <210> 769 <211> 122 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>120 <210> 769 <211> 122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v215 IgV <400> 769<223> ICOSL v215 IgV <400> 769

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu 20Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu 20

Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn AspGly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp

30thirty

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser 35Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser 35

Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 40 45Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 40 45

Ile Pro Gln Arg Ser Ser LeuIle Pro Gln Arg Ser Ser Leu

5555

Glu Trp Val Asp Ser Arg Tyr Arg 60Glu Trp Val Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser Pro AlaArg Ala Leu Met Ser Pro Ala

7070

Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 75Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 75

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

Arg Leu Phe Asn Val Thr ProArg Leu Phe Asn Val Thr Pro

Gln Asp Glu Gln Lys Phe His CysGln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys

- 906 044346- 906 044346

Val Leu Ser GlnVal Leu Ser Gln

100100

Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val GluSer Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu

105 110105 110

ValVal

Thr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser ValThr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser Val

115115

120 <210> 770 <211> 122 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>120 <210> 770 <211> 122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v216 IgV < 400> 770< 223> ICOSL v216 IgV < 400> 770

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Arg Ser 50Ile Pro Gln Arg Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Arg SerVal Leu Ser Arg Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120 <210> 771 <211> 122 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>120 <210> 771 <211> 122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v217 IgV <400> 771<223> ICOSL v217 IgV <400> 771

- 907 044346- 907 044346

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala CysLeu Ser Cys Ala Cys

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn AspPhe Asp Leu Asn Asp

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Cys Ser 50Ile Pro Gln Cys Ser 50

Ser Leu Glu Glu ValSer Leu Glu Glu Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Ser SerVal Leu Ser Ser Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120 <210> 772 <211> 122 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>120 <210> 772 <211> 122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v218 IgV <400> 772<223> ICOSL v218 IgV <400> 772

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp ValAsp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val

5 10 155 10 15

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu 20Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu 20

Gly SerGly Ser

Arg Phe Asp Leu Asn AspArg Phe Asp Leu Asn Asp

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser 35Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser 35

Glu Ser 40Glu Ser 40

Lys Thr Val Val Thr Tyr 45Lys Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Gly Ser Ser LeuIle Pro Gln Gly Ser Ser Leu

5555

Glu ProGlu Pro

Val Asp Ser Arg Tyr Arg 60Val Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser Pro AlaArg Ala Leu Met Ser Pro Ala

7070

Gly MetGly Met

Leu Arg Gly Asp Phe Ser 75Leu Arg Gly Asp Phe Ser 75

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

Arg Leu Phe Asn Val Thr ProArg Leu Phe Asn Val Thr Pro

Gln AspGln Asp

Glu Gln Lys Phe His CysGlu Gln Lys Phe His Cys

- 908 044346- 908 044346

Val Leu Ser AspVal Leu Ser Asp

100100

Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val GluSer Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu

105 110105 110

ValVal

Thr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser ValThr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser Val

115115

120 <210> 773 <211> 122 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>120 <210> 773 <211> 122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v219 IgV < 400> 773<223> ICOSL v219 IgV <400> 773

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Gly Ser 50Ile Pro Gln Gly Ser 50

Ser Leu Glu Val ValSer Leu Glu Val Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gly SerVal Leu Ser Gly Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120 <210> 774 <211> 122 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>120 <210> 774 <211> 122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v220 IgV <400> 774<223> ICOSL v220 IgV <400> 774

- 909 044346- 909 044346

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala CysLeu Ser Cys Ala Cys

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn AspPhe Asp Leu Asn Asp

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Gly Ser 50Ile Pro Gln Gly Ser 50

Ser Leu Glu Val ValSer Leu Glu Val Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120 <210> 775 <211> 122 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>120 <210> 775 <211> 122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v221 IgV <400> 775<223> ICOSL v221 IgV <400> 775

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp ValAsp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val

5 10 155 10 15

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu 20Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu 20

Gly SerGly Ser

Arg Phe Asp Leu Asn AspArg Phe Asp Leu Asn Asp

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser 35Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser 35

Glu Ser 40Glu Ser 40

Lys Thr Val Val Thr Tyr 45Lys Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Leu Ser Ser LeuIle Pro Gln Leu Ser Ser Leu

5555

Glu ValGlu Val

Val Asp Ser Arg Tyr Arg 60Val Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser Pro AlaArg Ala Leu Met Ser Pro Ala

7070

Gly MetGly Met

Leu Arg Gly Asp Phe Ser 75Leu Arg Gly Asp Phe Ser 75

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

Arg Leu Phe Asn Val Thr ProArg Leu Phe Asn Val Thr Pro

Gln AspGln Asp

Glu Gln Lys Phe His CysGlu Gln Lys Phe His Cys

- 910 044346- 910 044346

Val Leu Ser GlnVal Leu Ser Gln

100100

Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val GluSer Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu

105 110105 110

ValVal

Thr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser ValThr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser Val

115115

120 <210> 776 <211> 122 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>120 <210> 776 <211> 122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v222 IgV < 400> 776<223> ICOSL v222 IgV <400> 776

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Pro SerIle Pro Gln Pro Ser

Ser Leu Glu Pro ValSer Leu Glu Pro Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120 <210> 777 <211> 122 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>120 <210> 777 <211> 122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v223 IgV <400> 777<223> ICOSL v223 IgV <400> 777

- 911 044346- 911 044346

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala CysLeu Ser Cys Ala Cys

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn AspPhe Asp Leu Asn Asp

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Pro SerIle Pro Gln Pro Ser

Ser Leu Glu Ser ValSer Leu Glu Ser Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gly SerVal Leu Ser Gly Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120 <210> 778 <211> 122 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>120 <210> 778 <211> 122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v224 IgV <400> 778<223> ICOSL v224 IgV <400> 778

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp ValAsp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val

5 10 155 10 15

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu 20Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu 20

Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn AspGly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp

30thirty

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser 35Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser 35

Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 40 45Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 40 45

Ile Pro Gln Ser Ser Ser LeuIle Pro Gln Ser Ser Ser Leu

5555

Glu Leu Val Asp Ser Arg Tyr Arg 60Glu Leu Val Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser Pro AlaArg Ala Leu Met Ser Pro Ala

7070

Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 75Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 75

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

Arg Leu Phe Asn Val Thr ProArg Leu Phe Asn Val Thr Pro

Gln Asp Glu Gln Lys Phe His CysGln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys

- 912 044346- 912 044346

Val Leu Ser Gly Ser Leu Gly Phe Gln Glu ValVal Leu Ser Gly Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val

100 105100 105

Leu Ser Val GluLeu Ser Val Glu

110110

ValVal

Thr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser ValThr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser Val

115115

120 <210> 779 <211> 122 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>120 <210> 779 <211> 122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v225 IgV < 400> 779<223> ICOSL v225 IgV <400> 779

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Thr SerIle Pro Gln Thr Ser

Ser Leu Glu Lys Val 55Ser Leu Glu Lys Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Pro SerVal Leu Ser Pro Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120 <210> 780 <211> 122 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>120 <210> 780 <211> 122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v226 IgV <400> 780<223> ICOSL v226 IgV <400> 780

- 913 044346- 913 044346

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala CysLeu Ser Cys Ala Cys

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn AspPhe Asp Leu Asn Asp

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Val SerIle Pro Gln Val Ser

Ser Leu Glu Thr ValSer Leu Glu Thr Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Leu SerVal Leu Ser Leu Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120 <210> 781 <211> 122 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>120 <210> 781 <211> 122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v227 IgV <400> 781<223> ICOSL v227 IgV <400> 781

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu 20Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu 20

Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn AspGly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp

30thirty

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser 35Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser 35

Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 40 45Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 40 45

Ile Pro Gln Asn Ser Ser LeuIle Pro Gln Asn Ser Ser Leu

5555

Glu Gln Val Asp Ser Arg Tyr Arg 60Glu Gln Val Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser Pro AlaArg Ala Leu Met Ser Pro Ala

7070

Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 75Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 75

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

Arg Leu Phe Asn Val Thr ProArg Leu Phe Asn Val Thr Pro

Gln Asp Glu Gln Lys Phe His CysGln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys

- 914 044346- 914 044346

Val Leu Ser ProVal Leu Ser Pro

100100

Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val GluSer Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu

105 110105 110

ValVal

Thr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser ValThr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser Val

115115

120 <210> 782 <211> 111 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>120 <210> 782 <211> 111 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v4 IgV < 400> 782< 223> ICOSL v4 IgV < 400> 782

Asp Thr Gln Glu LysAsp Thr Gln Glu Lys

Glu Val Arg Ala Met ValGlu Val Arg Ala Met Val

Gly Ser Asp Val 15Gly Ser Asp Val 15

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn AspLeu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp

25 3025 30

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 40 45Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 40 45

Ile Pro Gln Tyr Ser Ser Leu Glu Tyr Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 55 60Ile Pro Gln Tyr Ser Ser Leu Glu Tyr Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 55 60

Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 65 70 75Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 65 70 75

Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 85 90 95Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 85 90 95

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

Val Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu

100 105110 <210>783 <211>122 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>100 105110 <210>783 <211>122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v4 IgV < 400> 783< 223> ICOSL v4 IgV < 400> 783

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15

GluGlu

- 915 044346- 915 044346

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Tyr Ser 50Ile Pro Gln Tyr Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120 <210> 784 <211> 111 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>120 <210> 784 <211> 111 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v21 IgV < 400> 784<223> ICOSL v21 IgV <400> 784

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn AspLeu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp

25 3025 30

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 40 45Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 40 45

Ile Pro Gln Ser Ser Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 55 60Ile Pro Gln Ser Ser Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 55 60

Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 65 70 75Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 65 70 75

Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 85 90 95Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 85 90 95

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

Val Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu

- 916 044346- 916 044346

100100

105105

110 < 210> 785 < 211> 111 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>110 < 210> 785 < 211> 111 < 212> PROTEIN < 213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v24 IgV < 400> 785<223> ICOSL v24 IgV <400> 785

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg 1 5Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg 1 5

Ala Met Val Gly Ser Asp Val GluAla Met Val Gly Ser Asp Val Glu

1515

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly 20Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly 20

Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp Val 25 30Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp Val 25 30

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser GluTyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu

4040

Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr His 45Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr His 45

Ile Pro Gln Lys Ser Ser Leu GluIle Pro Gln Lys Ser Ser Leu Glu

5555

Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg Asn 60Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg Asn 60

Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly 65 70Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly 65 70

Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser LeuMet Leu Arg Gly Asp Phe Ser Leu

8080

Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln 85Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln 85

Asp Glu Gln Lys Phe His Cys LeuAsp Glu Gln Lys Phe His Cys Leu

9595

Val Leu Ser Gln Ser Leu Gly PheVal Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe

100100

Gln Glu Val Leu Ser Val GluGln Glu Val Leu Ser Val Glu

105 110 < 210> 786 < 211> 122 < 212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>105 110 <210> 786 <211> 122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v24 <400> 786<223> ICOSL v24 <400> 786

Asp Thr Gln Glu 1Asp Thr Gln Glu 1

IgVIgV

Lys Glu Val Arg 5Lys Glu Val Arg 5

Ala Met Val Gly 10Ala Met Val Gly 10

Ser Asp Val Glu 15Ser Asp Val Glu 15

Leu Ser Cys Ala 20Leu Ser Cys Ala 20

Cys Pro Glu GlyCys Pro Glu Gly

Ser Arg Phe Asp 25Ser Arg Phe Asp 25

Leu Asn Asp Val 30Leu Asn Asp Val 30

Tyr Val Tyr TrpTyr Val Tyr Trp

Gln Thr Ser GluGln Thr Ser Glu

Ser Lys Thr ValSer Lys Thr Val

Val Thr Tyr His 45Val Thr Tyr His 45

- 917 044346- 917 044346

Ile Pro Gln Lys Ser Ser LeuIle Pro Gln Lys Ser Ser Leu

50555055

Arg Ala Leu Met Ser Pro AlaArg Ala Leu Met Ser Pro Ala

65706570

Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro 85Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro 85

Glu Glu Asn Asn Val Val Asp Asp Ser 60 Ser 60 Arg Arg Tyr Tyr Arg Arg Asn Asn Gly Gly Met Met Leu Leu Arg 75 Arg 75 Gly Gly Asp Asp Phe Phe Ser Ser Leu 80 Leu 80 Gln Gln Asp Asp Glu 90 Glu 90 Gln Gln Lys Lys Phe Phe His His Cys 95 Cys 95 Leu Leu

Val Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe Gln Glu ValVal Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val

100105100105

Leu Ser Val Glu ValLeu Ser Val Glu Val

110110

Thr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser ValThr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser Val

115120 <210>787 <211>111 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>115120 <210>787 <211>111 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v30 IgV <400>787<223> ICOSL v30 IgV <400>787

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val Glu 1 5 1015Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val Glu 1 5 1015

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp Val 20 2530Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp Val 20 2530

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr His 35 4045Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr His 35 4045

Ile Pro Gln Ser Ser Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg Asn 50 5560Ile Pro Gln Ser Ser Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg Asn 50 5560

Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Gln Gly Asp Phe Ser Leu 65 70 7580Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Gln Gly Asp Phe Ser Leu 65 70 7580

Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys Leu 85 9095Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys Leu 85 9095

Val Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu

100 105110 <210>788 <211>122 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность100 105110 <210>788 <211>122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence

- 918 044346 <220>- 918 044346 <220>

<223> ICOSL v30 IgV <400> 788<223> ICOSL v30 IgV <400> 788

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala CysLeu Ser Cys Ala Cys

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn AspPhe Asp Leu Asn Asp

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Ser Ser 50Ile Pro Gln Ser Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Gln Gly Asp Phe Ser 75Gln Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120 <210> 789 <211> 111 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>120 <210> 789 <211> 111 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL <400> 789<223> ICOSL <400> 789

Asp Thr Gln 1Asp Thr Gln 1

Leu Ser CysLeu Ser Cys

Tyr Val TyrTyr Val Tyr

Ile Pro Gln v34 IgVIle Pro Gln v34 IgV

Glu Lys Glu 5Glu Lys Glu 5

Ala Cys Pro 20Ala Cys Pro 20

Trp Gln ThrTrp Gln Thr

Ser Ser SerSer Ser Ser

Val Arg AlaVal Arg Ala

Glu Gly SerGlu Gly Ser

Ser Glu SerSer Glu Ser

Leu Glu Tyr 55Leu Glu Tyr 55

Met Val Gly 10Met Val Gly 10

Arg Phe AspArg Phe Asp

Lys Thr ValLys Thr Val

Val Asp Ser 60Val Asp Ser 60

Ser Asp ValSer Asp Val

Leu Asn Asp 30Leu Asn Asp 30

Val Thr Tyr 45Val Thr Tyr 45

Arg Tyr ArgArg Tyr Arg

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

- 919 044346- 919 044346

Arg Ala 65Arg Ala 65

Arg LeuArg Leu

Val PheVal Phe

Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg 7075Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg 7075

Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln 8590Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln 8590

Ser Arg Ser Leu Glu Phe Gln Glu Val 100105Ser Arg Ser Leu Glu Phe Gln Glu Val 100105

Gly Asp Phe SerGly Asp Phe Ser

Lys Phe Asp Cys 95Lys Phe Asp Cys 95

Leu Ser Val Glu 110Leu Ser Val Glu 110

Leu 80Leu 80

Phe <210> 790 <211> 111 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Phe <210> 790 <211> 111 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v96 IgV < 400> 790< 223> ICOSL v96 IgV < 400> 790

Asp 1 Asp 1 Thr Thr Gln Gln Glu Glu Lys 5 Lys 5 Glu Glu Val Val Arg Arg Ala Ala Met 10 Met 10 Val Val Gly Gly Ser Ser Asp Asp Val 15 Val 15 Leu Leu Ser Ser Cys Cys Ala 20 Ala 20 Cys Cys Pro Pro Glu Glu Gly Gly Ser 25 Ser 25 Arg Arg Phe Phe Asp Asp Leu Leu Asn 30 Asn 30 Asp Asp Tyr Tyr Val Val Tyr 35 Tyr 35 Trp Trp Gln Gln Thr Thr Ser Ser Glu 40 Glu 40 Ser Ser Lys Lys Ala Ala Val Val Val 45 Val 45 Thr Thr Tyr Tyr Ile Ile Pro 50 Pro 50 Gln Gln His His Ser Ser Ser Ser Leu 55 Leu 55 Glu Glu Tyr Tyr Val Val Asp Asp Ser 60 Ser 60 Arg Arg Tyr Tyr Arg Arg Arg 65 Arg 65 Ala Ala Leu Leu Met Met Ser Ser Pro 70 Pro 70 Ala Ala Gly Gly Met Met Gln Gln Arg 75 Arg 75 Gly Gly Asp Asp Phe Phe Ser Ser Arg Arg Leu Leu Phe Phe Asn Asn Val 85 Val 85 Thr Thr Pro Pro Gln Gln Gly Gly Glu 90 Glu 90 Gln Gln Lys Lys Phe Phe His His Cys 95 Cys 95 Val Val Leu Leu Ser Ser Gln 100 Gln 100 Ser Ser Leu Leu Gly Gly Phe Phe Gln 105 Gln 105 Glu Glu Val Val Leu Leu Ser Ser Asp 110 Asp 110 Glu Glu

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

Leu <210> 791 <211> 111 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Leu <210> 791 <211> 111 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v45 IgV <400> 791<223> ICOSL v45 IgV <400> 791

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15

GluGlu

- 920 044346- 920 044346

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Asp Ser Ser Tyr Arg 60Asp Ser Ser Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

Val Leu Ser Arg SerVal Leu Ser Arg Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Asp GluVal Leu Ser Asp Glu

110 <210> 792 <211> 122 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>110 <210> 792 <211> 122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v45 IgV < 400> 792< 223> ICOSL v45 IgV < 400> 792

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala CysLeu Ser Cys Ala Cys

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn AspPhe Asp Leu Asn Asp

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Asp Ser Ser Tyr Arg 60Asp Ser Ser Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Arg SerVal Leu Ser Arg Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Asp GluVal Leu Ser Asp Glu

110110

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

- 921 044346- 921 044346

Thr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser ValThr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser Val

115115

120 < 210> 793 < 211> 111 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>120 < 210> 793 < 211> 111 < 212> PROTEIN < 213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v52 IgV < 400> 793<223> ICOSL v52 IgV <400> 793

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg 1 5Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg 1 5

Ala Met Val Gly Ser Asp Val GluAla Met Val Gly Ser Asp Val Glu

1515

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly 20Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly 20

Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp Val 25 30Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp Val 25 30

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser GluTyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu

4040

Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr His 45Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr His 45

Ile Pro Gln Ser Ser Ser Leu GluIle Pro Gln Ser Ser Ser Leu Glu

5555

Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg Asn 60Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg Asn 60

Arg Ala Leu Met Ser Pro Thr Gly 65 70Arg Ala Leu Met Ser Pro Thr Gly 65 70

Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser LeuMet Leu Arg Gly Asp Phe Ser Leu

8080

Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln 85Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln 85

Asp Glu Gln Lys Phe His Cys LeuAsp Glu Gln Lys Phe His Cys Leu

9595

Val Leu Ser Gln Ser Leu Gly PheVal Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe

100100

Gln Glu Val Leu Ser Val GluGln Glu Val Leu Ser Val Glu

105 110 < 210> 794 < 211> 111 < 212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>105 110 <210> 794 <211> 111 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v54 <400> 794<223> ICOSL v54 <400> 794

Asp Thr Gln Glu 1Asp Thr Gln Glu 1

IgVIgV

Lys Glu Val Arg 5Lys Glu Val Arg 5

Ala Met Val Gly 10Ala Met Val Gly 10

Ser Asp Val Glu 15Ser Asp Val Glu 15

Leu Ser Cys Ala 20Leu Ser Cys Ala 20

Cys Pro Glu GlyCys Pro Glu Gly

Ser Arg Phe Asp 25Ser Arg Phe Asp 25

Leu Asn Asp Val 30Leu Asn Asp Val 30

Tyr Val Tyr TrpTyr Val Tyr Trp

Gln Thr Ser GluGln Thr Ser Glu

Ser Lys Thr ValSer Lys Thr Val

Val Thr His His 45Val Thr His His 45

- 922 044346- 922 044346

Ile Ile Pro 50 Pro 50 Gln Gln Ser Ser Ser Ser Ser Ser Leu 55 Leu 55 Glu Glu Asn Asn Val Val Asp Asp Arg 65 Arg 65 Ala Ala Leu Leu Met Met Ser Ser Pro 70 Pro 70 Ala Ala Gly Gly Met Met Leu Leu Arg 75 Arg 75 Arg Arg Leu Leu Phe Phe Asn Asn Val 85 Val 85 Thr Thr Pro Pro Gln Gln Asp Asp Glu 90 Glu 90 Gln Gln Val Val Leu Leu Ser Ser Gln 100 Gln 100 Ser Ser Leu Leu Gly Gly Phe Phe Gln 105 Gln 105 Glu Glu Ala Ala

Ser Arg Tyr Arg 60Ser Arg Tyr Arg 60

Gly Asp Phe SerGly Asp Phe Ser

Lys Phe His Cys 95Lys Phe His Cys 95

Leu Ser Val GluLeu Ser Val Glu

110110

AsnAsn

Leu 80Leu 80

Leu <210> 795 <211> 111 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Leu <210> 795 <211> 111 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v56 IgV <400> 795<223> ICOSL v56 IgV <400> 795

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

ValVal

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

Val Leu Ser Arg SerVal Leu Ser Arg Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Asp GluVal Leu Ser Asp Glu

110 <210> 796 <211> 122 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>110 <210> 796 <211> 122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v56 IgV<223> ICOSL v56 IgV

- 923 044346 <400> 796- 923 044346 <400> 796

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Arg SerVal Leu Ser Arg Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Asp GluVal Leu Ser Asp Glu

110110

ValVal

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

Thr Leu Arg Val Ala 115Thr Leu Arg Val Ala 115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120 <210> 797 <211> 111 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>120 <210> 797 <211> 111 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v57 IgV <400> 797<223> ICOSL v57 IgV <400> 797

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn AspLeu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp

25 3025 30

Tyr ValTyr Val

Tyr Trp Arg Thr Ser 35Tyr Trp Arg Thr Ser 35

Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 40 45Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 40 45

Ile ProIle Pro

Gln His Ser Ser LeuGln His Ser Ser Leu

Glu Tyr Val Asp Ser Arg Tyr Arg 60Glu Tyr Val Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala 65Arg Ala 65

Leu Met Ser Pro AlaLeu Met Ser Pro Ala

Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 75Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 75

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

- 924 044346- 924 044346

Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu GlnArg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln

Lys Phe His Cys 95Lys Phe His Cys 95

LeuLeu

Val Leu Ser Arg Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Asn GluVal Leu Ser Arg Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Asn Glu

100 105110 <210>798 <211>122 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>100 105110 <210>798 <211>122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v57 IgV <400> 798<223> ICOSL v57 IgV <400> 798

Asp Thr Gln Glu LysAsp Thr Gln Glu Lys

55

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Arg 35Tyr Val Tyr Trp Arg 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Arg SerVal Leu Ser Arg Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Asn GluVal Leu Ser Asn Glu

110110

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120 <210> 799 <211> 111 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>120 <210> 799 <211> 111 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v59 IgV < 400> 799< 223> ICOSL v59 IgV < 400> 799

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15

GluGlu

- 925 044346- 925 044346

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

Val Leu Ser Arg SerVal Leu Ser Arg Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Asp GluVal Leu Ser Asp Glu

110 <210> 800 <211> 122 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>110 <210> 800 <211> 122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v59 IgV < 400> 800< 223 > ICOSL v59 IgV < 400 > 800

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Arg SerVal Leu Ser Arg Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Asp GluVal Leu Ser Asp Glu

110110

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

- 926 044346- 926 044346

Thr Leu His Ala Ala Ala Asn Phe Ser ValThr Leu His Ala Ala Ala Asn Phe Ser Val

115115

120 <210> 801 <211> 111 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>120 <210> 801 <211> 111 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v61 IgV <400> 801<223> ICOSL v61 IgV <400> 801

Asp Thr 1Asp Thr 1

Gln GluGln Glu

Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 5 10 15Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 5 10 15

Leu SerLeu Ser

Cys Ala 20Cys Ala 20

Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp 25 30Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp 25 30

Tyr ValTyr Val

Tyr Trp 35Tyr Trp 35

Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr TyrGln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr

4545

Ile ProIle Pro

Gln Ser SerGln Ser Ser

Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr ArgSer Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg

6060

Arg Ala 65Arg Ala 65

Leu Met SerLeu Met Ser

Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 70 75Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 70 75

Arg LeuArg Leu

Phe Asn ValPhe Asn Val

Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe Glu Cys 90 95Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe Glu Cys 90 95

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

IleIle

Val LeuVal Leu

Ser Gln SerSer Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Asn Val GluLeu Gly Phe Gln Glu Val Leu Asn Val Glu

105110 <210>802 <211>122 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>105110 <210>802 <211>122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v61 IgV <400> 802<223> ICOSL v61 IgV <400> 802

Asp Thr Gln Glu 1Asp Thr Gln Glu 1

Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 5 10 15Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 5 10 15

Leu Ser Cys Ala 20Leu Ser Cys Ala 20

Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp 25 30Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp 25 30

GluGlu

ValVal

HisHis

Tyr Val Tyr TrpTyr Val Tyr Trp

Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr TyrGln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr

4545

- 927 044346- 927 044346

Ile Pro Gln Ser Ser Ser Leu Glu Asn Val AspIle Pro Gln Ser Ser Ser Leu Glu Asn Val Asp

5555

Ser Arg Tyr Arg AsnSer Arg Tyr Arg Asn

Arg Ala Leu Met 65Arg Ala Leu Met 65

Ser Pro Ala Gly MetSer Pro Ala Gly Met

Leu Arg Gly Asp Phe Ser LeuLeu Arg Gly Asp Phe Ser Leu

8080

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Val Leu Ser Gln Ser 100Val Leu Ser Gln Ser 100

Thr Pro Gln AspThr Pro Gln Asp

Leu Gly Phe GlnLeu Gly Phe Gln

105105

Glu Gln Lys Phe Glu Cys Ile 90 95Glu Gln Lys Phe Glu Cys Ile 90 95

Glu Val Leu Asn Val Glu ValGlu Val Leu Asn Val Glu Val

110110

Thr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser ValThr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser Val

115 120 <210> 803 <211> 111 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>115 120 <210> 803 <211> 111 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v62 IgV <400> 803<223> ICOSL v62 IgV <400> 803

Asp Thr Gln Glu LysAsp Thr Gln Glu Lys

Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val GluGlu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val Glu

1515

Leu Arg Cys Ala 20Leu Arg Cys Ala 20

Cys ProCys Pro

Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp ValGlu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp Val

30thirty

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Ile Pro Gln Ser Ser 50Ile Pro Gln Ser Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Thr Val Val Thr Tyr His 45Thr Val Val Thr Tyr His 45

Asp Ser Arg Tyr Arg Asn 60Asp Ser Arg Tyr Arg Asn 60

Arg 65 Arg 65 Ala Ala Leu Leu Met Met Ser Ser Pro 70 Pro 70 Ala Ala Gly Gly Met Met Arg Arg Leu Leu Phe Phe Asn Asn Val 85 Val 85 Thr Thr Pro Pro Gln Gln Asp Asp Val Val Leu Leu Ser Ser Gln 100 Gln 100 Ser Ser Leu Leu Gly Gly Phe Phe Gln 105 Gln 105

Leu Leu Arg 75 Arg 75 Gly Gly Asp Asp Phe Phe Ser Ser Leu 80 Leu 80 Glu 90 Glu 90 Gln Gln Lys Lys Leu Leu His His Cys 95 Cys 95 Leu Leu Glu Glu Val Val Leu Leu Ser Ser Val 110 Val 110 Glu Glu

<210> 804 <211> 122 <212> БЕЛОК<210> 804 <211> 122 <212> PROTEIN

- 928 044346 <213> Искусственная последовательность <220>- 928 044346 <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v62 IgV <400> 804<223> ICOSL v62 IgV <400> 804

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Arg Cys Ala Cys 20Leu Arg Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Ser Ser 50Ile Pro Gln Ser Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Leu His Cys 95Gln Lys Leu His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120 <210> 805 <211> 111 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>120 <210> 805 <211> 111 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v63 IgV <400> 805<223> ICOSL v63 IgV <400> 805

Asp Thr Gln Glu 1Asp Thr Gln Glu 1

Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 5 10 15Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 5 10 15

Leu Ser Cys Thr 20Leu Ser Cys Thr 20

Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp 25 30Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp 25 30

Tyr Val Tyr TrpTyr Val Tyr Trp

Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr TyrGln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr

4545

Ile Pro Gln Asp 50Ile Pro Gln Asp 50

Ser Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg 55 60Ser Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg 55 60

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

- 929 044346- 929 044346

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu Arg 70 75Pro Ala Gly Met Leu Arg 70 75

Gly Asp Phe SerGly Asp Phe Ser

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu Gln 90Thr Pro Gln Asp Glu Gln 90

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln Glu ValLeu Gly Phe Gln Glu Val

105105

Lys Phe His Cys 95Lys Phe His Cys 95

Leu Ser Val Glu 110Leu Ser Val Glu 110

Leu 80Leu 80

Leu <210> 806 <211> 122 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Leu <210> 806 <211> 122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v63 IgV < 400> 806< 223> ICOSL v63 IgV < 400> 806

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15

Leu Ser Cys Thr Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn AspLeu Ser Cys Thr Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp

25 3025 30

Tyr ValTyr Val

Ile ProIle Pro

Tyr Trp Gln 35Tyr Trp Gln 35

Gln Asp SerGln Asp Ser

Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 40 45Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 40 45

Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr ArgSer Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg

6060

Arg Ala 65Arg Ala 65

Leu Met SerLeu Met Ser

Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 70 75Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 70 75

Arg LeuArg Leu

Phe Asn ValPhe Asn Val

Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 90 95Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 90 95

Val LeuVal Leu

Ser Gln SerSer Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val GluLeu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu

105 110105 110

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

Thr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser ValThr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser Val

115120 <210>807 <211>111 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>115120 <210>807 <211>111 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v64 IgV<223> ICOSL v64 IgV

- 930 044346 <400> 807- 930 044346 <400> 807

AspAsp

ThrThr

GlnGln

GluGlu

Lys 5Lys 5

GluGlu

ValVal

ArgArg

AlaAla

Met 10Met 10

GluGlu

GlyGly

SerSer

AspAsp

Val 15Val 15

LeuLeu

SerSer

CysCys

Ala 20Ala 20

CysCys

ProPro

GluGlu

GlyGly

Ser 25Ser 25

ArgArg

PhePhe

AspAsp

LeuLeu

Asp 30Asp 30

AspAsp

TyrTyr

ValVal

Tyr 35Tyr 35

TrpTrp

GlnGln

ThrThr

SerSer

Glu 40Glu 40

SerSer

LysLys

ThrThr

ValVal

Val 45Val 45

ThrThr

TyrTyr

IleIle

Pro 50Pro 50

GlnGln

HisHis

SerSer

SerSer

Leu 55Leu 55

GluGlu

TyrTyr

ValVal

AspAsp

Ser 60Ser 60

ArgArg

TyrTyr

ArgArg

Arg 65Arg 65

AlaAla

LeuLeu

MetMet

SerSer

Pro 70Pro 70

AlaAla

GlyGly

MetMet

LeuLeu

Arg 75Arg 75

GlyGly

AspAsp

PhePhe

SerSer

ArgArg

LeuLeu

PhePhe

AsnAsn

Val 85Val 85

ThrThr

ProPro

GlnGln

AspAsp

Glu 90Glu 90

GlnGln

LysLys

PhePhe

GluGlu

Cys 95Cys 95

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

IleIle

ValVal

PhePhe

SerSer

GlnGln

100100

SerSer

LeuLeu

GlyGly

PhePhe

GlnGln

105105

GluGlu

ValVal

LeuLeu

SerSer

ValVal

110110

Glu <210> 808 <211> 122 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Glu <210> 808 <211> 122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v64 IgV <400>808<223> ICOSL v64 IgV <400>808

Asp Thr Gln Glu LysAsp Thr Gln Glu Lys

Glu Val Arg Ala Met Glu Gly Ser Asp ValGlu Val Arg Ala Met Glu Gly Ser Asp Val

10151015

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asp AspLeu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asp Asp

25302530

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 4045Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 4045

Ile Pro Gln His Ser Ser Leu Glu Tyr Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 5560Ile Pro Gln His Ser Ser Leu Glu Tyr Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 5560

Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 65 7075Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 65 7075

Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe Glu Cys 85 9095Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe Glu Cys 85 9095

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

IleIle

- 931 044346- 931 044346

Val Phe Ser Gln Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val GluVal Phe Ser Gln Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu

100 105110100 105110

ValVal

Thr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser ValThr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser Val

115115

120 <210>809 <211>111 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>120 <210>809 <211>111 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v65 IgV < 400> 809< 223> ICOSL v65 IgV < 400> 809

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn AspLeu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp

25 3025 30

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 40 45Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 40 45

Ile Pro Gln Ser Ser Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 55 60Ile Pro Gln Ser Ser Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 55 60

Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 65 70 75Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 65 70 75

Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe Glu Cys 85 90 95Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe Glu Cys 85 90 95

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

IleIle

Val Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu

100 105110 <210>810 <211>111 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>100 105110 <210>810 <211>111 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v66 IgV <400> 810<223> ICOSL v66 IgV <400> 810

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp ValAsp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val

5 10 155 10 15

GluGlu

ValVal

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg PheLeu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe

Asp Leu Asn AspAsp Leu Asn Asp

- 932 044346- 932 044346

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe Glu Cys 95Gln Lys Phe Glu Cys 95

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

IleIle

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110 <210> 811 <211> 122 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>110 <210> 811 <211> 122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v66 IgV < 400> 811< 223> ICOSL v66 IgV < 400> 811

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe Glu Cys 95Gln Lys Phe Glu Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

IleIle

ValVal

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Ile Ser ValAla Asn Ile Ser Val

120120

- 933 044346 < 210> 812 < 211> 111 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>- 933 044346 <210> 812 <211> 111 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v67 IgV <400> 812<223> ICOSL v67 IgV <400> 812

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg 1 5Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg 1 5

Ala Val Val Gly Ser Asp Val GluAla Val Val Gly Ser Asp Val Glu

1515

Leu Arg Cys Ala Cys Pro Glu Gly 20Leu Arg Cys Ala Cys Pro Glu Gly 20

Ser Arg Phe Asp Leu Asp Asp Val 25 30Ser Arg Phe Asp Leu Asp Asp Val 25 30

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser GluTyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu

4040

Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr His 45Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr His 45

Ile Pro Gln Ser Ser Ser Leu GluIle Pro Gln Ser Ser Ser Leu Glu

5555

Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg Asn 60Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg Asn 60

Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly 65 70Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly 65 70

Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser LeuMet Leu Arg Gly Asp Phe Ser Leu

8080

Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln 85Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln 85

Asp Glu Gln Lys Phe His Cys LeuAsp Glu Gln Lys Phe His Cys Leu

9595

Val Leu Ser Gln Ser Leu Gly PheVal Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe

100100

Gln Glu Val Leu Ser Val GluGln Glu Val Leu Ser Val Glu

105 110 <210> 813 <211> 122 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>105 110 <210> 813 <211> 122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v67 IgV <400> 813<223> ICOSL v67 IgV <400> 813

Asp Thr Gln Glu 1Asp Thr Gln Glu 1

Lys Glu 5Lys Glu 5

ValVal

Arg Ala Val Val Gly Ser Asp Val GluArg Ala Val Val Gly Ser Asp Val Glu

1515

Leu Arg Cys Ala 20Leu Arg Cys Ala 20

Cys ProCys Pro

GluGlu

Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asp Asp ValGly Ser Arg Phe Asp Leu Asp Asp Val

30thirty

Tyr Val Tyr TrpTyr Val Tyr Trp

Gln ThrGln Thr

SerSer

Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr His 40 45Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr His 40 45

Ile Pro Gln SerIle Pro Gln Ser

Ser SerSer Ser

LeuLeu

Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg AsnGlu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg Asn

- 934 044346- 934 044346

Asp Phe SerAsp Phe Ser

Arg Ala Leu 65Arg Ala Leu 65

Arg Leu PheArg Leu Phe

Val Leu SerVal Leu Ser

Thr Leu HisThr Leu His

115115

Met Ser ProMet Ser Pro

Asn Val ThrAsn Val Thr

Gln Ser Leu 100Gln Ser Leu 100

Val Ala AlaVal Ala Ala

Ala Gly MetAla Gly Met

Pro Gln AspPro Gln Asp

Gly Phe Gln 105Gly Phe Gln 105

Asn Phe Ser 120Asn Phe Ser 120

Leu Arg Gly 75Leu Arg Gly 75

Glu Gln Lys 90Glu Gln Lys 90

Glu Val LeuGlu Val Leu

ValVal

Phe His CysPhe His Cys

Ser Val GluSer Val Glu

110110

Leu 80Leu 80

LeuLeu

Val <210> 814 <211> 111 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Val <210> 814 <211> 111 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v68 IgV < 400> 814< 223> ICOSL v68 IgV < 400> 814

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Gly Arg Phe Asp Leu Asp AspLeu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Gly Arg Phe Asp Leu Asp Asp

25 3025 30

Tyr ValTyr Val

Tyr Trp Gln 35Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 40 45Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 40 45

Ile ProIle Pro

Gln Ser SerGln Ser Ser

Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr ArgSer Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg

6060

Arg Ala 65Arg Ala 65

Leu Met SerLeu Met Ser

Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 70 75Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 70 75

Arg LeuArg Leu

Phe Asn ValPhe Asn Val

Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 90 95Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 90 95

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

Val LeuVal Leu

Ser Gln SerSer Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val GluLeu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu

105 110 <210> 815 <211> 122 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>105 110 <210> 815 <211> 122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

- 935 044346 <223> ICOSL v68 IgV <400> 815- 935 044346 <223> ICOSL v68 IgV <400> 815

Asp Thr Gln Glu LysAsp Thr Gln Glu Lys

55

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Gly ArgPro Glu Gly Gly Arg

Phe Asp Leu Asp Asp 30Phe Asp Leu Asp Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Ser Ser 50Ile Pro Gln Ser Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Ser Ser ValAla Asn Ser Ser Val

120 <210> 816 <211> 111 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>120 <210> 816 <211> 111 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v69 IgV <400> 816<223> ICOSL v69 IgV <400> 816

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp ValAsp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val

5 10 155 10 15

Leu Ser Cys Ala 20Leu Ser Cys Ala 20

Tyr Val Tyr TrpTyr Val Tyr Trp

Ile Pro Gln SerIle Pro Gln Ser

Cys Pro GluCys Pro Glu

Gln Thr SerGln Thr Ser

Ser Ser Leu 55Ser Ser Leu 55

Ser Pro AlaSer Pro Ala

Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asp AspGly Ser Arg Phe Asp Leu Asp Asp

30thirty

Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 40 45Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 40 45

Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg 60Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg 60

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

LeuLeu

Arg Ala Pro MetArg Ala Pro Met

Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe SerGly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser

- 936 044346- 936 044346

7070

Arg Leu Phe Asn ValArg Leu Phe Asn Val

Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys Leu 90 95Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys Leu 90 95

Val Leu Ser LysVal Leu Ser Lys

100100

Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val 105Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val 105

Leu Ser Val GluLeu Ser Val Glu

110 <210> 817 <211> 122 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>110 <210> 817 <211> 122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v69 IgV < 400> 817<223> ICOSL v69 IgV <400> 817

AspAsp

ThrThr

GlnGln

GluGlu

Lys 5Lys 5

GluGlu

ValVal

ArgArg

AlaAla

Met 10Met 10

ValVal

GlyGly

SerSer

AspAsp

Val 15Val 15

GluGlu

LeuLeu

SerSer

CysCys

Ala 20Ala 20

CysCys

ProPro

GluGlu

GlyGly

Ser 25Ser 25

ArgArg

PhePhe

AspAsp

LeuLeu

Asp 30Asp 30

AspAsp

ValVal

TyrTyr

ValVal

Tyr 35Tyr 35

TrpTrp

GlnGln

ThrThr

SerSer

Glu 40Glu 40

SerSer

LysLys

ThrThr

ValVal

Val 45Val 45

ThrThr

TyrTyr

HisHis

IleIle

Pro 50Pro 50

GlnGln

SerSer

SerSer

SerSer

Leu 55Leu 55

GluGlu

AsnAsn

ValVal

AspAsp

Ser 60Ser 60

ArgArg

TyrTyr

ArgArg

AsnAsn

Arg 65Arg 65

AlaAla

ProPro

MetMet

SerSer

Pro 70Pro 70

AlaAla

GlyGly

MetMet

LeuLeu

Arg 75Arg 75

GlyGly

AspAsp

PhePhe

SerSer

Leu 80Leu 80

ArgArg

LeuLeu

PhePhe

AsnAsn

Val 85Val 85

ThrThr

ProPro

GlnGln

AspAsp

Glu 90Glu 90

GlnGln

LysLys

PhePhe

HisHis

Cys 95Cys 95

LeuLeu

ValVal

LeuLeu

SerSer

Lys 100Lys 100

SerSer

LeuLeu

GlyGly

PhePhe

GlnGln

105105

GluGlu

ValVal

LeuLeu

SerSer

ValVal

110110

GluGlu

ValVal

ThrThr

LeuLeu

HisHis

115115

ValVal

AlaAla

AlaAla

AsnAsn

PhePhe

120120

SerSer

Val <210> 818 <211> 122 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Val <210> 818 <211> 122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v70 IgV < 400> 818< 223> ICOSL v70 IgV < 400> 818

- 937 044346- 937 044346

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala CysLeu Ser Cys Ala Cys

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn AspPhe Asp Leu Asn Asp

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Arg SerVal Leu Ser Arg Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Asp GluVal Leu Ser Asp Glu

110110

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

Thr Leu His Val ThrThr Leu His Val Thr

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120 <210> 819 <211> 111 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>120 <210> 819 <211> 111 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v72 IgV <400>819<223>ICOSL v72 IgV <400>819

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp ValAsp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val

5 10155 1015

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Gly Arg Cys Asp Leu Asn AspLeu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Gly Arg Cys Asp Leu Asn Asp

25302530

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 4045Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 4045

Ile Pro Gln His Ser Ser Leu Glu Tyr Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 5560Ile Pro Gln His Ser Ser Leu Glu Tyr Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 5560

Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 65 7075Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 65 7075

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His CysArg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys

- 938 044346- 938 044346

Val Leu Ser Arg Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Asp GluVal Leu Ser Arg Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Asp Glu

100 105110 <210>820 <211>122 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>100 105110 <210>820 <211>122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v72 IgV <400> 820<223> ICOSL v72 IgV <400> 820

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Gly ArgPro Glu Gly Gly Arg

Cys Asp Leu Asn Asp 30Cys Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Arg SerVal Leu Ser Arg Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Asp GluVal Leu Ser Asp Glu

110110

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120 <210> 821 <211> 111 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>120 <210> 821 <211> 111 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v73 IgV < 400> 821< 223> ICOSL v73 IgV < 400> 821

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Ile Val Gly Gly Asp Val 1 5 10 15Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Ile Val Gly Gly Asp Val 1 5 10 15

GluGlu

- 939 044346- 939 044346

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Gly Phe Ser 75Arg Gly Gly Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Ala GluVal Leu Ser Ala Glu

110 <210> 822 <211> 122 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>110 <210> 822 <211> 122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v73 IgV < 400> 822< 223> ICOSL v73 IgV < 400> 822

Asp Thr Gln Glu LysAsp Thr Gln Glu Lys

55

Glu Val Arg Ala IleGlu Val Arg Ala Ile

Val Gly Gly Asp ValVal Gly Gly Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Gly Phe Ser 75Arg Gly Gly Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Ala GluVal Leu Ser Ala Glu

110110

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

Thr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser ValThr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser Val

- 940 044346- 940 044346

115115

120 <210> 823 <211> 111 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>120 <210> 823 <211> 111 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v74 IgV <400> 823<223> ICOSL v74 IgV <400> 823

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala IleGlu Val Arg Ala Ile

Val Gly Gly Asp ValVal Gly Gly Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Gly Phe Ser 75Arg Gly Gly Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Ala GluVal Leu Ser Ala Glu

110 <210> 824 <211> 122 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>110 <210> 824 <211> 122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v74 IgV <400> 824<223> ICOSL v74 IgV <400> 824

Asp Thr Gln Glu 1Asp Thr Gln Glu 1

Lys Glu Val Arg Ala 5Lys Glu Val Arg Ala 5

Ile Val Gly Gly Asp ValIle Val Gly Gly Asp Val

1515

Leu Ser Cys Ala 20Leu Ser Cys Ala 20

Cys Pro Glu Gly SerCys Pro Glu Gly Ser

Arg Phe Asp Leu Asn AspArg Phe Asp Leu Asn Asp

Tyr Val Tyr TrpTyr Val Tyr Trp

Gln Thr Ser Glu SerGln Thr Ser Glu Ser

GluGlu

ValVal

HisHis

Lys Thr Val Val Thr TyrLys Thr Val Val Thr Tyr

- 941 044346- 941 044346

Ile Pro Gln His Ser Ser LeuIle Pro Gln His Ser Ser Leu

50555055

Arg Ala Leu Met Ser Pro AlaArg Ala Leu Met Ser Pro Ala

65706570

Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro 85Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro 85

Glu Glu Tyr Tyr Val Val Asp Asp Ser 60 Ser 60 Arg Arg Tyr Tyr Arg Arg Asn Asn Gly Gly Met Met Leu Leu Arg 75 Arg 75 Gly Gly Gly Gly Phe Phe Ser Ser Leu 80 Leu 80 Gln Gln Asp Asp Glu 90 Glu 90 Gln Gln Lys Lys Phe Phe His His Cys 95 Cys 95 Leu Leu

Val Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe Gln Glu ValVal Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val

100105100105

Leu Ser Ala Glu ValLeu Ser Ala Glu Val

110110

Thr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser ValThr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser Val

115120 <210>825 <211>111 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>115120 <210>825 <211>111 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v75 IgV <400> 825<223> ICOSL v75 IgV <400> 825

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Leu Ser Cys Ala CysLeu Ser Cys Ala Cys

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Glu Val Arg Ala Met 10Glu Val Arg Ala Met 10

Pro Glu Gly Ser Arg 25Pro Glu Gly Ser Arg 25

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Val Gly Ser Asp Val Glu 15Val Gly Ser Asp Val Glu 15

Phe Asp Leu Asn Asp Val 30Phe Asp Leu Asn Asp Val 30

Thr Val Val Thr Tyr His 45Thr Val Val Thr Tyr His 45

Asp Ser Cys Phe Arg Asn 60Asp Ser Cys Phe Arg Asn 60

Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met 65 70Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met 65 70

Leu Arg Gly Asp Phe Ser LeuLeu Arg Gly Asp Phe Ser Leu

8080

Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp 85Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp 85

Glu Gln Lys Phe His Cys Leu 90 95Glu Gln Lys Phe His Cys Leu 90 95

Val Leu Ser Arg Ser Leu Gly Phe GlnVal Leu Ser Arg Ser Leu Gly Phe Gln

100 105100 105

Glu Val Leu Ser Asn GluGlu Val Leu Ser Asn Glu

110 <210> 826 <211> 122 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность110 <210> 826 <211> 122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence

- 942 044346 <220>- 942 044346 <220>

<223> ICOSL v75 IgV <400> 826<223> ICOSL v75 IgV <400> 826

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala CysLeu Ser Cys Ala Cys

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn AspPhe Asp Leu Asn Asp

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Asp Ser Cys Phe Arg 60Asp Ser Cys Phe Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Arg SerVal Leu Ser Arg Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Asn GluVal Leu Ser Asn Glu

110110

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Ser Ser ValAla Asn Ser Ser Val

120 <210> 827 <211> 122 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>120 <210> 827 <211> 122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL <400> 827<223> ICOSL <400> 827

Asp Thr Gln 1Asp Thr Gln 1

Leu Ser CysLeu Ser Cys

Tyr Val TyrTyr Val Tyr

Ile Pro Gln v76 IgVIle Pro Gln v76 IgV

Glu Lys Glu 5Glu Lys Glu 5

Ala Cys Pro 20Ala Cys Pro 20

Trp Gln ThrTrp Gln Thr

His Ser SerHis Ser Ser

Val Arg AlaVal Arg Ala

Glu Gly SerGlu Gly Ser

Ser Glu SerSer Glu Ser

Leu Glu Tyr 55Leu Glu Tyr 55

Met Val Gly 10Met Val Gly 10

Arg Phe AspArg Phe Asp

Lys Thr ValLys Thr Val

Val Asp Ser 60Val Asp Ser 60

Ser Asp ValSer Asp Val

Leu Asn Asp 30Leu Asn Asp 30

Val Thr Tyr 45Val Thr Tyr 45

Arg Tyr ArgArg Tyr Arg

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

- 943 044346- 943 044346

Arg 65 Arg 65 Ala Ala Leu Leu Met Met Ser Ser Pro 70 Pro 70 Ala Ala Gly Gly Met Met Leu Leu Arg 75 Arg 75 Gly Gly Asp Asp Phe Phe Ser Ser Arg Arg Leu Leu Phe Phe Asn Asn Val 85 Val 85 Thr Thr Pro Pro Gln Gln Asp Asp Glu 90 Glu 90 Gln Gln Lys Lys Phe Phe His His Cys 95 Cys 95 Val Val Leu Leu Ser Ser Arg 100 Arg 100 Ser Ser Leu Leu Gly Gly Phe Phe Gln 105 Gln 105 Glu Glu Val Val Leu Leu Ser Ser Asp 110 Asp 110 Glu Glu Thr Thr Leu Leu Arg 115 Arg 115 Val Val Ala Ala Ala Ala Asn Asn Phe 120 Phe 120 Ser Ser Val Val

Leu 80Leu 80

LeuLeu

Val <210> 828 <211> 111 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Val <210> 828 <211> 111 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v81 IgV < 400> 828< 223> ICOSL v81 IgV < 400> 828

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

Val Leu Ser Arg SerVal Leu Ser Arg Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Asp GluVal Leu Ser Asp Glu

110 < 210> 829 < 211> 122 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>110 < 210> 829 < 211> 122 < 212> PROTEIN < 213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v81 IgV <400> 829<223> ICOSL v81 IgV <400> 829

- 944 044346- 944 044346

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Arg SerVal Leu Ser Arg Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Asp GluVal Leu Ser Asp Glu

110110

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120 <210> 830 <211> 111 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>120 <210> 830 <211> 111 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v84 IgV < 400> 830< 223> ICOSL v84 IgV < 400> 830

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

LeuLeu

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

- 945 044346- 945 044346

Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu GlnArg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln

Lys Phe His Cys LeuLys Phe His Cys Leu

Val Leu Ser Arg Ser Arg Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Asp GluVal Leu Ser Arg Ser Arg Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Asp Glu

100 105 110 <210> 831 <211> 122 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>100 105 110 <210> 831 <211> 122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v84 IgV <400> 831<223> ICOSL v84 IgV <400> 831

Asp Thr Gln Glu LysAsp Thr Gln Glu Lys

Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val GluGlu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val Glu

1515

Leu SerLeu Ser

Cys Ala 20Cys Ala 20

Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp ValCys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp Val

30thirty

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser 35Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser 35

Ile Pro Gln His Ser Ser LeuIle Pro Gln His Ser Ser Leu

5555

Arg Ala Leu Met Ser Pro AlaArg Ala Leu Met Ser Pro Ala

7070

Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro 85Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro 85

Glu 40 Glu 40 Ser Ser Lys Lys Thr Thr Val Val Val 45 Val 45 Thr Thr Tyr Tyr His His Glu Glu Tyr Tyr Val Val Asp Asp Ser 60 Ser 60 Arg Arg Tyr Tyr Arg Arg Asn Asn Gly Gly Met Met Leu Leu Arg 75 Arg 75 Gly Gly Asp Asp Phe Phe Ser Ser Leu 80 Leu 80 Gln Gln Asp Asp Glu 90 Glu 90 Gln Gln Lys Lys Phe Phe His His Cys 95 Cys 95 Leu Leu

Val Leu Ser Arg Ser Arg Gly Phe Gln Glu ValVal Leu Ser Arg Ser Arg Gly Phe Gln Glu Val

100105100105

Leu Ser Asp Glu Val 110Leu Ser Asp Glu Val 110

Thr Leu Arg Val Ala Ala Asn Phe Ser ValThr Leu Arg Val Ala Ala Asn Phe Ser Val

115120 <210>832 <211>111 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>115120 <210>832 <211>111 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v92 IgV <400> 832<223> ICOSL v92 IgV <400> 832

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val GluAsp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val Glu

5 10 155 10 15

- 946 044346- 946 044346

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Gln 70Pro Ala Gly Met Gln 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Asp GluVal Leu Ser Asp Glu

110 <210> 833 <211> 122 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>110 <210> 833 <211> 122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v92 IgV < 400> 833< 223> ICOSL v92 IgV < 400> 833

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala CysLeu Ser Cys Ala Cys

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn AspPhe Asp Leu Asn Asp

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Gln 70Pro Ala Gly Met Gln 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Asp GluVal Leu Ser Asp Glu

110110

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

- 947 044346- 947 044346

Thr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser ValThr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser Val

115115

120 <210> 834 <211> 122 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>120 <210> 834 <211> 122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v96 IgV <400> 834<223> ICOSL v96 IgV <400> 834

Asp Thr Gln Glu LysAsp Thr Gln Glu Lys

55

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Ala Val Val Thr Tyr 45Ala Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Gln 70Pro Ala Gly Met Gln 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Gly Glu 90Thr Pro Gln Gly Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Asp GluVal Leu Ser Asp Glu

110110

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120 <210> 835 <211> 111 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>120 <210> 835 <211> 111 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v98 IgV<223> ICOSL v98 IgV

<400> <400> 835 835 Asp 1 Asp 1 Thr Thr Gln Gln Glu Glu Lys 5 Lys 5 Glu Glu Val Val Arg Arg Ala Ala Met 10 Met 10 Val Val Gly Gly Ser Ser Asp Asp Val 15 Val 15 Leu Leu Ser Ser Cys Cys Ala 20 Ala 20 Cys Cys Pro Pro Glu Glu Gly Gly Ser 25 Ser 25 Arg Arg Phe Phe Asp Asp Leu Leu Asn 30 Asn 30 Asp Asp

GluGlu

ValVal

- 948 044346- 948 044346

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

Val Leu Ser Arg SerVal Leu Ser Arg Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Ile Leu Ser Asp GluIle Leu Ser Asp Glu

110 <210> 836 <211> 122 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>110 <210> 836 <211> 122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v98 IgV < 400> 836< 223> ICOSL v98 IgV < 400> 836

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Arg SerVal Leu Ser Arg Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Ile Leu Ser Asp GluIle Leu Ser Asp Glu

110110

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

- 949 044346 <210> 837 < 211> 111 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>- 949 044346 <210> 837 <211> 111 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v103 IgV <400>837<223>ICOSL v103 IgV <400>837

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val Glu 1 5 1015Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val Glu 1 5 1015

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp Val 20 2530Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp Val 20 2530

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr His 35 4045Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr His 35 4045

Ile Pro Gln Gln Ser Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg Asn 50 5560Ile Pro Gln Gln Ser Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg Asn 50 5560

Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser Leu 65 70 7580Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser Leu 65 70 7580

Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys Leu 85 9095Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys Leu 85 9095

Val Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu

100 105110 <210>838 <211>122 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>100 105110 <210>838 <211>122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v103 IgV <400> 838<223> ICOSL v103 IgV <400> 838

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Ile Pro Gln Gln Ser 50Ile Pro Gln Gln Ser 50

Glu Val Arg Ala Met 10Glu Val Arg Ala Met 10

Pro Glu Gly Ser Arg 25Pro Glu Gly Ser Arg 25

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Ser Leu Glu Asn Val 55Ser Leu Glu Asn Val 55

Val Gly Ser Asp Val Glu 15Val Gly Ser Asp Val Glu 15

Phe Asp Leu Asn Asp Val 30Phe Asp Leu Asn Asp Val 30

Thr Val Val Thr Tyr His 45Thr Val Val Thr Tyr His 45

Asp Ser Arg Tyr Arg Asn 60Asp Ser Arg Tyr Arg Asn 60

- 950 044346- 950 044346

Arg 65Arg 65

AlaAla

LeuLeu

MetMet

SerSer

Pro 70Pro 70

AlaAla

GlyGly

MetMet

LeuLeu

Arg 75Arg 75

GlyGly

AspAsp

PhePhe

SerSer

ArgArg

LeuLeu

PhePhe

AsnAsn

Val 85Val 85

ThrThr

ProPro

GlnGln

AspAsp

Glu 90Glu 90

GlnGln

LysLys

PhePhe

HisHis

Cys 95Cys 95

ValVal

LeuLeu

SerSer

GlnGln

100100

SerSer

LeuLeu

GlyGly

PhePhe

GlnGln

105105

GluGlu

ValVal

LeuLeu

SerSer

ValVal

110110

GluGlu

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ThrThr

LeuLeu

HisHis

115115

ValVal

AlaAla

AlaAla

AsnAsn

PhePhe

120120

SerSer

Val <210> 839 <211> 111 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Val <210> 839 <211> 111 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v126 IgV <400> 839<223> ICOSL v126 IgV <400> 839

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Gln Val 85Arg Leu Phe Gln Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110 <210> 840 <211> 122 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>110 <210> 840 <211> 122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v106 IgV<223> ICOSL v106 IgV

- 951 044346 <400> 840- 951 044346 <400> 840

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Asn Ser 50Ile Pro Gln Asn Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Gln Val 85Arg Leu Phe Gln Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120 <210> 841 <211> 122 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>120 <210> 841 <211> 122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v127 IgV <400> 841<223> ICOSL v127 IgV <400> 841

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

- 952 044346- 952 044346

Arg Leu Phe Gln Val Thr Pro Gln 85Arg Leu Phe Gln Val Thr Pro Gln 85

Asp Glu Gln Lys 90Asp Glu Gln Lys 90

Phe His CysPhe His Cys

Val Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val LeuVal Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu

100 105100 105

Ser Val GluSer Val Glu

110110

LeuLeu

ValVal

Thr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser ValThr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser Val

115120 <210>842 <211>122 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>115120 <210>842 <211>122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v108 IgV <400> 842<223> ICOSL v108 IgV <400> 842

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Asn Ser 50Ile Pro Gln Asn Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Gln Phe Ser ValAla Gln Phe Ser Val

120 <210> 843 <211> 122 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>120 <210> 843 <211> 122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v129 IgV<223> ICOSL v129 IgV

- 953 044346 <400> 843- 953 044346 <400> 843

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Gln Ser 50Ile Pro Gln Gln Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Gln Val 85Arg Leu Phe Gln Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Gln Phe Ser ValAla Gln Phe Ser Val

120 <210> 844 <211> 111 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>120 <210> 844 <211> 111 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL <400> 844<223> ICOSL <400> 844

Asp Thr Gln 1Asp Thr Gln 1

Leu Ser CysLeu Ser Cys

Tyr Val TyrTyr Val Tyr

Ile Pro Gln v140 IgVIle Pro Gln v140 IgV

Glu Lys Glu 5Glu Lys Glu 5

Ala Cys Pro 20Ala Cys Pro 20

Trp Gln ThrTrp Gln Thr

Asn Ser SerAsn Ser Ser

Val Arg AlaVal Arg Ala

Glu Gly SerGlu Gly Ser

Ser Glu SerSer Glu Ser

Leu Glu Tyr 55Leu Glu Tyr 55

Met Val Gly 10Met Val Gly 10

Arg Phe AspArg Phe Asp

Lys Thr ValLys Thr Val

Val Asp Ser 60Val Asp Ser 60

Ser Asp ValSer Asp Val

Leu Asn Asp 30Leu Asn Asp 30

Val Thr Tyr 45Val Thr Tyr 45

Arg Tyr ArgArg Tyr Arg

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

LeuLeu

Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met 65 70Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met 65 70

Leu Arg Gly Asp Phe Ser 75Leu Arg Gly Asp Phe Ser 75

- 954 044346- 954 044346

Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu GlnArg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln

Lys Phe His Cys 95Lys Phe His Cys 95

LeuLeu

Val Leu Ser Arg Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Arg Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu

100 105110 <210>845 <211>122 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>100 105110 <210>845 <211>122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v140 IgV <400> 845<223> ICOSL v140 IgV <400> 845

Asp Thr Gln Glu LysAsp Thr Gln Glu Lys

55

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Asn Ser 50Ile Pro Gln Asn Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Arg SerVal Leu Ser Arg Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120 <210> 846 <211> 111 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>120 <210> 846 <211> 111 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v142 IgV < 400> 846<223> ICOSL v142 IgV <400> 846

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15

GluGlu

- 955 044346- 955 044346

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly 20Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly 20

Ser Arg Phe Asp Leu Asn AspSer Arg Phe Asp Leu Asn Asp

30thirty

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 40 45Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 40 45

Ile Pro Gln Asn Ser 50Ile Pro Gln Asn Ser 50

Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr ArgSer Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg

6060

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 70 75Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 70 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 90 95Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 90 95

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

Val Leu Ser Arg SerVal Leu Ser Arg Ser

100100

Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val GluLeu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu

105 110 <210> 847 <211> 122 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>105 110 <210> 847 <211> 122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v142 IgV < 400> 847<223> ICOSL v142 IgV <400> 847

Asp Thr Gln Glu LysAsp Thr Gln Glu Lys

Glu Val Arg Ala Met ValGlu Val Arg Ala Met Val

Gly Ser Asp Val 15Gly Ser Asp Val 15

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn AspLeu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp

25 3025 30

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 40 45Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 40 45

Ile Pro Gln Asn Ser Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 55 60Ile Pro Gln Asn Ser Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 55 60

Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 65 70 75Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 65 70 75

Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 85 90 95Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 85 90 95

Val Leu Ser Arg Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Arg Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu

100 105 110100 105 110

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

- 956 044346- 956 044346

Thr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser ValThr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser Val

115115

120 <210> 848 <211> 122 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>120 <210> 848 <211> 122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v177 IgV <220><223> ICOSL v177 IgV <220>

<221> ВАРИАНТ <222> (115) .. (115) <223> x представляет собой H или Q <400> 848<221> OPTION <222> (115) .. (115) <223> x is H or Q <400> 848

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Arg SerVal Leu Ser Arg Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

Thr Leu Xaa Val Ala Ala Asn Phe Ser ValThr Leu Xaa Val Ala Ala Asn Phe Ser Val

115120 <210>849 <211>111 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>115120 <210>849 <211>111 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v148 IgV <400> 849<223> ICOSL v148 IgV <400> 849

- 957 044346- 957 044346

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala CysLeu Ser Cys Ala Cys

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn AspPhe Asp Leu Asn Asp

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

Val Leu Ser Arg SerVal Leu Ser Arg Ser

100100

Arg Gly Phe Gln GluArg Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110 <210> 850 <211> 122 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>110 <210> 850 <211> 122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v148 IgV < 400> 850< 223> ICOSL v148 IgV < 400> 850

Asp Thr Gln Glu LysAsp Thr Gln Glu Lys

Glu Val Arg Ala Met ValGlu Val Arg Ala Met Val

Gly Ser Asp Val 15Gly Ser Asp Val 15

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

Val Leu Ser Arg SerVal Leu Ser Arg Ser

Arg Gly Phe Gln GluArg Gly Phe Gln Glu

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

- 958 044346- 958 044346

100100

105105

110110

Thr Leu Arg Val Ala Ala Asn Phe Ser ValThr Leu Arg Val Ala Ala Asn Phe Ser Val

115115

120 <210> 851 <211> 122 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>120 <210> 851 <211> 122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v149 IgV <400> 851<223> ICOSL v149 IgV <400> 851

AspAsp

ThrThr

GlnGln

GluGlu

Lys 5Lys 5

GluGlu

ValVal

ArgArg

AlaAla

Met 10Met 10

ValVal

GlyGly

SerSer

AspAsp

Val 15Val 15

GluGlu

LeuLeu

SerSer

CysCys

Ala 20Ala 20

CysCys

ProPro

GluGlu

GlyGly

Ser 25Ser 25

ArgArg

PhePhe

AspAsp

LeuLeu

Asn 30Asn 30

AspAsp

ValVal

TyrTyr

ValVal

Tyr 35Tyr 35

TrpTrp

GlnGln

ThrThr

SerSer

Glu 40Glu 40

SerSer

LysLys

ThrThr

ValVal

Val 45Val 45

ThrThr

TyrTyr

HisHis

IleIle

Pro 50Pro 50

GlnGln

HisHis

SerSer

SerSer

Leu 55Leu 55

GluGlu

AsnAsn

ValVal

AspAsp

Ser 60Ser 60

ArgArg

TyrTyr

ArgArg

AsnAsn

Arg 65Arg 65

AlaAla

LeuLeu

MetMet

SerSer

Pro 70Pro 70

AlaAla

GlyGly

MetMet

LeuLeu

Arg 75Arg 75

GlyGly

AspAsp

PhePhe

SerSer

Leu 80Leu 80

ArgArg

LeuLeu

PhePhe

AsnAsn

Val 85Val 85

ThrThr

ProPro

GlnGln

AspAsp

Glu 90Glu 90

GlnGln

LysLys

PhePhe

HisHis

Cys 95Cys 95

LeuLeu

ValVal

LeuLeu

SerSer

GlnGln

100100

SerSer

LeuLeu

GlyGly

PhePhe

GlnGln

105105

GluGlu

ValVal

LeuLeu

SerSer

ValVal

110110

GluGlu

ValVal

ThrThr

LeuLeu

HisHis

115115

ValVal

AlaAla

AlaAla

AsnAsn

PhePhe

120120

SerSer

Ala <210> 852 <211> 122 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Ala <210> 852 <211> 122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v158 IgV < 400> 852<223> ICOSL v158 IgV <400> 852

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val Glu 1 5 10 15Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val Glu 1 5 10 15

- 959 044346- 959 044346

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Arg SerVal Leu Ser Arg Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

Thr Leu Arg Val Ala 115Thr Leu Arg Val Ala 115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120 <210> 853 <211> 122 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>120 <210> 853 <211> 122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v169 IgV < 400> 853<223> ICOSL v169 IgV <400> 853

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn AspLeu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp

25 3025 30

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 40 45Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 40 45

Ile Pro Gln Ser Ser Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 55 60Ile Pro Gln Ser Ser Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 55 60

Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 65 70 75Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 65 70 75

Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 85 90 95Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 85 90 95

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

Val Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu

- 960 044346- 960 044346

100100

105105

110110

Thr Leu Arg Val Ala Ala Asn Phe Ser ValThr Leu Arg Val Ala Ala Asn Phe Ser Val

115115

120 <210> 854 <211> 111 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>120 <210> 854 <211> 111 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v160 IgV < 400> 854<223> ICOSL v160 IgV <400> 854

Asp Thr Gln Glu LysAsp Thr Gln Glu Lys

Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp ValGlu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val

1515

Leu SerLeu Ser

Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn AspCys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp

25 3025 30

Tyr ValTyr Val

Ile ProIle Pro

Tyr Trp Gln 35Tyr Trp Gln 35

Gln Tyr SerGln Tyr Ser

Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 40 45Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 40 45

Ser Leu Glu Tyr Val Asp Ser Arg Tyr ArgSer Leu Glu Tyr Val Asp Ser Arg Tyr Arg

6060

Arg Ala 65Arg Ala 65

Leu Met SerLeu Met Ser

Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 70 75Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 70 75

Arg LeuArg Leu

Phe Asn ValPhe Asn Val

Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 90 95Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 90 95

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

Val LeuVal Leu

Ser Pro SerSer Pro Ser

100100

Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val GluLeu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu

105 110 <210> 855 <211> 122 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>105 110 <210> 855 <211> 122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v160 IgV <400> 855<223> ICOSL v160 IgV <400> 855

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp ValAsp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val

5 10 155 10 15

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly SerLeu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser

Arg Phe Asp Leu Asn AspArg Phe Asp Leu Asn Asp

GluGlu

ValVal

- 961 044346- 961 044346

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Tyr Ser 50Ile Pro Gln Tyr Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Pro SerVal Leu Ser Pro Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120 <210> 856 <211> 111 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>120 <210> 856 <211> 111 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v164 IgV < 400> 856< 223> ICOSL v164 IgV < 400> 856

AspAsp

Thr Gln GluThr Gln Glu

Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 5 10 15Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 5 10 15

LeuLeu

Ser Cys Ala 20Ser Cys Ala 20

Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asp Asp 25 30Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asp Asp 25 30

Tyr ValTyr Val

Ile ProIle Pro

Tyr 35Tyr 35

GlnGln

TrpTrp

SerSer

Gln Thr Ser Glu Ser Glu Thr Val Val Thr TyrGln Thr Ser Glu Ser Glu Thr Val Val Thr Tyr

4545

Ser Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg 55 60Ser Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg 55 60

Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met 65 70Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met 65 70

Leu Arg Gly Asp Phe Ser 75Leu Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp 85Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp 85

Glu Gln Lys Phe His Cys 90 95Glu Gln Lys Phe His Cys 90 95

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

Val Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe GlnVal Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe Gln

100 105100 105

Glu Val Leu Ser Val GluGlu Val Leu Ser Val Glu

110 <210> 857110 <210> 857

- 962 044346 <211> 122 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>- 962 044346 <211> 122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v168 IgV <400> 857<223> ICOSL v168 IgV <400> 857

Asp Thr Gln Glu LysAsp Thr Gln Glu Lys

55

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala CysLeu Ser Cys Ala Cys

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Ser Ser 50Ile Pro Gln Ser Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

Thr Leu Arg Val Ala 115Thr Leu Arg Val Ala 115

Ala Asn Ser Ser ValAla Asn Ser Ser Val

120 <210> 858 <211> 237 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>120 <210> 858 <211> 237 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> eGFP <400> 858<223> eGFP <400> 858

Ser Lys Gly Glu Glu Leu Phe Thr 15Ser Lys Gly Glu Glu Leu Phe Thr 15

Leu Asp Gly Asp Val Asn Gly HisLeu Asp Gly Asp Val Asn Gly His

Glu Gly Asp Ala Thr Tyr Gly LysGlu Gly Asp Ala Thr Tyr Gly Lys

35403540

Gly Val Val Pro Ile Leu ValGly Val Val Pro Ile Leu Val

10151015

Lys Phe Ser Val Ser Gly GluLys Phe Ser Val Ser Gly Glu

25302530

Leu Thr Leu Lys Phe Ile CysLeu Thr Leu Lys Phe Ile Cys

GluGlu

GlyGly

ThrThr

- 963 044346- 963 044346

Thr Gly Lys Leu Pro 50Thr Gly Lys Leu Pro 50

Val Pro Trp Pro Thr 55Val Pro Trp Pro Thr 55

Leu Val Thr Thr Leu 60Leu Val Thr Thr Leu 60

Tyr Gly Val Gln Cys 65Tyr Gly Val Gln Cys 65

Phe Ser Arg Tyr Pro 70Phe Ser Arg Tyr Pro 70

Asp His Met Lys Gln 75Asp His Met Lys Gln 75

Asp Phe Phe Lys Ser 85Asp Phe Phe Lys Ser 85

Ala Met Pro Glu Gly 90Ala Met Pro Glu Gly 90

Tyr Val Gln Glu Arg 95Tyr Val Gln Glu Arg 95

Ile Phe Phe Lys AspIle Phe Phe Lys Asp

100100

Asp Gly Asn Tyr LysAsp Gly Asn Tyr Lys

105105

Thr Arg Ala Glu ValThr Arg Ala Glu Val

110110

Phe Glu Gly Asp Thr 115Phe Glu Gly Asp Thr 115

Leu Val Asn Arg IleLeu Val Asn Arg Ile

120120

Glu Leu Lys Gly Ile 125Glu Leu Lys Gly Ile 125

Phe Lys Glu Asp GlyPhe Lys Glu Asp Gly

130130

Asn Ile Leu Gly His 135Asn Ile Leu Gly His 135

Lys Leu Glu Tyr Asn 140Lys Leu Glu Tyr Asn 140

Asn Ser His Asn Val 145Asn Ser His Asn Val 145

Tyr Ile Met Ala Asp 150Tyr Ile Met Ala Asp 150

Lys Gln Lys Asn Gly 155Lys Gln Lys Asn Gly 155

Lys Val Asn Phe LysLys Val Asn Phe Lys

165165

Ile Arg His Asn IleIle Arg His Asn Ile

170170

Glu Asp Gly Ser ValGlu Asp Gly Ser Val

175175

Leu Ala Asp His TyrLeu Ala Asp His Tyr

180180

Gln Gln Asn Thr ProGln Gln Asn Thr Pro

185185

Ile Gly Asp Gly ProIle Gly Asp Gly Pro

190190

Leu Leu Pro Asp Asn 195Leu Leu Pro Asp Asn 195

His Tyr Leu Ser Thr 200His Tyr Leu Ser Thr 200

Gln Ser Ala Leu SerGln Ser Ala Leu Ser

205205

Asp Pro Asn Glu Lys 210Asp Pro Asn Glu Lys 210

Arg Asp His Met Val 215Arg Asp His Met Val 215

Leu Leu Glu Phe ValLeu Leu Glu Phe Val

220220

ThrThr

His 80His 80

ThrThr

LysLys

AspAsp

TyrTyr

Ile 160Ile 160

GlnGln

ValVal

LysLys

ThrThr

Ala Ala Gly Ile Thr 225Ala Ala Gly Ile Thr 225

His Gly Met Asp Glu 230His Gly Met Asp Glu 230

Leu Tyr Lys 235 <210> 859 <211> 237 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Leu Tyr Lys 235 <210> 859 <211> 237 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> Зеленый флуоресцентный белок < 400> 859<223>Green fluorescent protein <400>859

Ser Lys Gly Glu Glu Leu Phe Thr Gly Val Val Pro Ile Leu Val 1 5 10 15Ser Lys Gly Glu Glu Leu Phe Thr Gly Val Val Pro Ile Leu Val 1 5 10 15

GluGlu

GlyGly

Leu Asp Gly Asp Val Asn Gly His Lys Phe Ser Val Ser Gly GluLeu Asp Gly Asp Val Asn Gly His Lys Phe Ser Val Ser Gly Glu

- 964 044346- 964 044346

Ile Cys ThrIle Cys Thr

Glu Gly Asp Ala Thr Tyr Gly Lys Leu Thr Leu Lys PheGlu Gly Asp Ala Thr Tyr Gly Lys Leu Thr Leu Lys Phe

40454045

Thr Gly Lys Leu Pro Val Pro Trp Pro Thr Leu Val Thr Thr Phe Ser 50 5560Thr Gly Lys Leu Pro Val Pro Trp Pro Thr Leu Val Thr Thr Phe Ser 50 5560

Tyr Gly Val Gln Cys Phe Ser Arg Tyr Pro Asp His Met Lys Gln His 65 70 7580Tyr Gly Val Gln Cys Phe Ser Arg Tyr Pro Asp His Met Lys Gln His 65 70 7580

Asp Phe Phe Lys Ser Ala Met Pro Glu Gly Tyr Val Gln Glu Arg Thr 85 9095Asp Phe Phe Lys Ser Ala Met Pro Glu Gly Tyr Val Gln Glu Arg Thr 85 9095

Ile Phe Phe Lys Asp Asp Gly Asn Tyr Lys Thr Arg Ala Glu Val LysIle Phe Phe Lys Asp Asp Gly Asn Tyr Lys Thr Arg Ala Glu Val Lys

100 105110100 105110

Phe Glu Gly Asp Thr Leu Val Asn Arg Ile Glu Leu Lys Gly Ile AspPhe Glu Gly Asp Thr Leu Val Asn Arg Ile Glu Leu Lys Gly Ile Asp

115 120125115 120125

Phe Lys Glu Asp Gly Asn Ile Leu Gly His Lys Leu Glu Tyr Asn TyrPhe Lys Glu Asp Gly Asn Ile Leu Gly His Lys Leu Glu Tyr Asn Tyr

130 135140130 135140

Asn Ser His Asn Val Tyr Ile Met Ala Asp Lys Gln Lys Asn Gly IleAsn Ser His Asn Val Tyr Ile Met Ala Asp Lys Gln Lys Asn Gly Ile

145 150 155160145 150 155160

Lys Val Asn Phe Lys Ile Arg His Asn Ile Glu Asp Gly Ser Val GlnLys Val Asn Phe Lys Ile Arg His Asn Ile Glu Asp Gly Ser Val Gln

165 170175165 170175

Leu Ala Asp His Tyr Gln Gln Asn Thr Pro Ile Gly Asp Gly Pro ValLeu Ala Asp His Tyr Gln Gln Asn Thr Pro Ile Gly Asp Gly Pro Val

180 185190180 185190

Leu Leu Pro Asp Asn His Tyr Leu Ser Thr Gln Ser Ala Leu Ser LysLeu Leu Pro Asp Asn His Tyr Leu Ser Thr Gln Ser Ala Leu Ser Lys

195 200205195 200205

Asp Pro Asn Glu Lys Arg Asp His Met Val Leu Leu Glu Phe Val ThrAsp Pro Asn Glu Lys Arg Asp His Met Val Leu Leu Glu Phe Val Thr

210 215220210 215220

Ala Ala Gly Ile Thr His Gly Met Asp Glu Leu Tyr LysAla Ala Gly Ile Thr His Gly Met Asp Glu Leu Tyr Lys

225 230235 <210>860 <211>20 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>225 230235 <210>860 <211>20 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> белок T2A<223> T2A protein

- 965 044346 <400>860- 965 044346 <400>860

Ser Gly Glu Gly Arg Gly Ser Leu Leu Thr Cys Gly Asp Val Glu 1 5 1015Ser Gly Glu Gly Arg Gly Ser Leu Leu Thr Cys Gly Asp Val Glu 1 5 1015

Asn Pro Gly Pro <210>861 <211>21 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Asn Pro Gly Pro <210>861 <211>21 <212> PROTEIN <213> Artificial Sequence <220>

<223> белок T2A <400>861<223> T2A protein <400>861

Gly Ser Gly Glu Gly Arg Gly Ser Leu Leu Thr Cys Gly Asp Val 1 5 1015Gly Ser Gly Glu Gly Arg Gly Ser Leu Leu Thr Cys Gly Asp Val 1 5 1015

Glu Asn Pro Gly Pro <210>862 <211>18 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Glu Asn Pro Gly Pro <210>862 <211>18 <212> PROTEIN <213> Artificial Sequence <220>

<223> белок T2A <400>862<223> T2A protein <400>862

Glu Gly Arg Gly Ser Leu Leu Thr Cys Gly Asp Val Glu Glu Asn 1 5 1015Glu Gly Arg Gly Ser Leu Leu Thr Cys Gly Asp Val Glu Glu Asn 1 5 1015

Gly Pro <210>863 <211>22 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Gly Pro <210>863 <211>22 <212> PROTEIN <213> Artificial Sequence <220>

<223> Белок P2A <400> 863<223> Protein P2A <400> 863

Gly Ser Gly Ala Thr Asn Phe Ser Leu Leu Lys Gln Ala Gly Asp 1 5 10 15Gly Ser Gly Ala Thr Asn Phe Ser Leu Leu Lys Gln Ala Gly Asp 1 5 10 15

Glu Glu Asn ProGlu Glu Asn Pro

Gly ProGly Pro

GluGlu

GluGlu

ProPro

ValVal

- 966 044346 <210> 864 <211> 6 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>- 966 044346 <210> 864 <211> 6 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> His-метка < 400>864<223>His tag <400>864

His His His His His His <210>865 <211>8 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>His His His His His His <210>865 <211>8 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> Flag-метка < 400>865< 223> Flag tag < 400>865

Asp Tyr Lys Asp Asp Asp Asp Lys 15 < 210>866 < 211>448 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Asp Tyr Lys Asp Asp Asp Asp Lys 15 < 210>866 < 211>448 < 212> PROTEIN < 213> Artificial sequence <220>

< 223> Тяжелая цепь атезолизумаба < 400> 866< 223 > Atezolizumab heavy chain < 400 > 866

Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly 1 5Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly 1 5

Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly GlyGly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly

1515

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala 20Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala 20

Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Ser 25 30Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Ser 25 30

Trp Ile His Trp Val Arg Gln AlaTrp Ile His Trp Val Arg Gln Ala

4040

Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 45Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 45

Ala Trp Ile Ser Pro Tyr Gly GlyAla Trp Ile Ser Pro Tyr Gly Gly

5555

Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 60Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Ala 65 70Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Ala 65 70

Asp Thr Ser Lys Asn Thr Ala TyrAsp Thr Ser Lys Asn Thr Ala Tyr

8080

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala 85Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala 85

Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr CysGlu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

9595

- 967 044346- 967 044346

Ala Arg Arg His TrpAla Arg Arg His Trp

100100

Pro Gly Gly Phe AspPro Gly Gly Phe Asp

105105

Tyr Trp Gly Gln GlyTyr Trp Gly Gln Gly

110110

Leu Val Thr Val SerLeu Val Thr Val Ser

115115

Ser Ala Ser Thr LysSer Ala Ser Thr Lys

120120

Gly Pro Ser Val PheGly Pro Ser Val Phe

125125

Leu Ala Pro Ser SerLeu Ala Pro Ser Ser

130130

Lys Ser Thr Ser Gly 135Lys Ser Thr Ser Gly 135

Gly Thr Ala Ala Leu 140Gly Thr Ala Ala Leu 140

Cys Leu Val Lys Asp 145Cys Leu Val Lys Asp 145

Tyr Phe Pro Glu Pro 150Tyr Phe Pro Glu Pro 150

Val Thr Val Ser Trp 155Val Thr Val Ser Trp 155

Ser Gly Ala Leu ThrSer Gly Ala Leu Thr

165165

Ser Gly Val His ThrSer Gly Val His Thr

170170

Phe Pro Ala Val LeuPhe Pro Ala Val Leu

175175

Ser Ser Gly Leu TyrSer Ser Gly Leu Tyr

180180

Ser Leu Ser Ser ValSer Leu Ser Ser Val

185185

Val Thr Val Pro SerVal Thr Val Pro Ser

190190

Ser Leu Gly Thr GlnSer Leu Gly Thr Gln

195195

Thr Tyr Ile Cys Asn 200Thr Tyr Ile Cys Asn 200

Val Asn His Lys ProVal Asn His Lys Pro

205205

Asn Thr Lys Val Asp 210Asn Thr Lys Val Asp 210

Lys Lys Val Glu ProLys Lys Val Glu Pro

215215

Lys Ser Cys Asp LysLys Ser Cys Asp Lys

220220

His Thr Cys Pro Pro 225His Thr Cys Pro Pro 225

Cys Pro Ala Pro Glu 230Cys Pro Ala Pro Glu 230

Leu Leu Gly Gly Pro 235Leu Leu Gly Gly Pro 235

Val Phe Leu Phe ProVal Phe Leu Phe Pro

245245

Pro Lys Pro Lys AspPro Lys Pro Lys Asp

250250

Thr Leu Met Ile SerThr Leu Met Ile Ser

255255

Thr Pro Glu Val ThrThr Pro Glu Val Thr

260260

Cys Val Val Val AspCys Val Val Val Asp

265265

Val Ser His Glu AspVal Ser His Glu Asp

270270

Glu Val Lys Phe AsnGlu Val Lys Phe Asn

275275

Trp Tyr Val Asp GlyTrp Tyr Val Asp Gly

280280

Val Glu Val His AsnVal Glu Val His Asn

285285

Lys Thr Lys Pro ArgLys Thr Lys Pro Arg

290290

Glu Glu Gln Tyr AlaGlu Glu Gln Tyr Ala

295295

Ser Thr Tyr Arg ValSer Thr Tyr Arg Val

300300

Ser Val Leu Thr Val 305Ser Val Leu Thr Val 305

Leu His Gln Asp Trp 310Leu His Gln Asp Trp 310

Leu Asn Gly Lys Glu 315Leu Asn Gly Lys Glu 315

Lys Cys Lys Val SerLys Cys Lys Val Ser

325325

Asn Lys Ala Leu ProAsn Lys Ala Leu Pro

330330

Ala Pro Ile Glu LysAla Pro Ile Glu Lys

335335

Ile Ser Lys Ala LysIle Ser Lys Ala Lys

340340

Gly Gln Pro Arg GluGly Gln Pro Arg Glu

345345

Pro Gln Val Tyr ThrPro Gln Val Tyr Thr

350350

ThrThr

ProPro

GlyGly

Asn 160Asn 160

GlnGln

SerSer

SerSer

ThrThr

Ser 240Ser 240

ArgArg

ProPro

AlaAla

ValVal

Tyr 320Tyr 320

ThrThr

LeuLeu

- 968 044346- 968 044346

Pro Pro Ser Arg GluPro Pro Ser Arg Glu

355355

Glu Met Thr Lys Asn 360Glu Met Thr Lys Asn 360

Gln Val Ser Leu ThrGln Val Ser Leu Thr

365365

Leu Val Lys Gly PheLeu Val Lys Gly Phe

370370

Tyr Pro Ser Asp IleTyr Pro Ser Asp Ile

375375

Ala Val Glu Trp GluAla Val Glu Trp Glu

380380

Asn Gly Gln Pro Glu 385Asn Gly Gln Pro Glu 385

Asn Asn Tyr Lys Thr 390Asn Asn Tyr Lys Thr 390

Thr Pro Pro Val Leu 395Thr Pro Pro Val Leu 395

Ser Asp Gly Ser PheSer Asp Gly Ser Phe

405405

Phe Leu Tyr Ser LysPhe Leu Tyr Ser Lys

410410

Leu Thr Val Asp LysLeu Thr Val Asp Lys

415415

Arg Trp Gln Gln GlyArg Trp Gln Gln Gly

420420

Asn Val Phe Ser CysAsn Val Phe Ser Cys

425425

Ser Val Met His GluSer Val Met His Glu

430430

Leu His Asn His TyrLeu His Asn His Tyr

435435

Thr Gln Lys Ser Leu 440Thr Gln Lys Ser Leu 440

Ser Leu Ser Pro Gly 445Ser Leu Ser Pro Gly 445

CysCys

SerSer

Asp 400Asp 400

SerSer

AlaAla

Lys <210> 867 <211> 214 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Lys <210> 867 <211> 214 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> Легкая цепь атезолизумаба <400> 867<223> Atezolizumab light chain <400> 867

Asp Ile Gln Met 1Asp Ile Gln Met 1

Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val 5 10 15Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val 5 10 15

Asp Arg Val Thr 20Asp Arg Val Thr 20

Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp Val Ser Thr 25 30Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp Val Ser Thr 25 30

Val Ala Trp TyrVal Ala Trp Tyr

Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu LeuGln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu

4545

Tyr Ser Ala Ser Phe 50Tyr Ser Ala Ser Phe 50

Leu Tyr Ser Gly Val 55Leu Tyr Ser Gly Val 55

Pro Ser Arg Phe Ser 60Pro Ser Arg Phe Ser 60

Ser Gly Ser Gly Thr 65Ser Gly Ser Gly Thr 65

Asp Phe Thr Leu Thr 70Asp Phe Thr Leu Thr 70

Ile Ser Ser Leu Gln 75Ile Ser Ser Leu Gln 75

Glu Asp Phe Ala Thr 85Glu Asp Phe Ala Thr 85

Tyr Tyr Cys Gln Gln 90Tyr Tyr Cys Gln Gln 90

Tyr Leu Tyr His Pro 95Tyr Leu Tyr His Pro 95

Thr Phe Gly Gln GlyThr Phe Gly Gln Gly

100100

Thr Lys Val Glu IleThr Lys Val Glu Ile

105105

Lys Arg Thr Val AlaLys Arg Thr Val Ala

110110

GlyGly

AlaAla

IleIle

GlyGly

Pro 80Pro 80

AlaAla

AlaAla

- 969 044346- 969 044346

Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp GluPro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu

115 120115 120

Gln Leu Lys Ser 125Gln Leu Lys Ser 125

Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn PheThr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe

130 135130 135

Tyr Pro Arg Glu 140Tyr Pro Arg Glu 140

Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu GlnLys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln

145 150 155145 150 155

Ser Gly Asn SerSer Gly Asn Ser

Glu Ser Val ThrGlu Ser Val Thr

Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser LeuGlu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu

165 170 175165 170 175

Ser ThrSer Thr

Leu ThrLeu Thr

180180

Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys ValLeu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val

185 190185 190

Ala CysAla Cys

Glu Val 195Glu Val 195

Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr LysThr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys

200 205200 205

GlyGly

AlaAla

Gln 160Gln 160

SerSer

TyrTyr

SerSer

Phe Asn Arg Gly Glu CysPhe Asn Arg Gly Glu Cys

210 <210> 868 <211> 580 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>210 <210> 868 <211> 580 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL WT IgV - Атезолизумаб HC <400>868<223> ICOSL WT IgV - Atezolizumab HC <400>868

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 1015Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 1015

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn AspLeu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp

25302530

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 4045Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 4045

Ile Pro Gln Asn Ser Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 5560Ile Pro Gln Asn Ser Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 5560

Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 65 7075Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 65 7075

Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 85 9095Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 85 9095

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

Val Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu

- 970 044346- 970 044346

100100

105105

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Gly Gly Gly Gly SerGly Gly Gly Gly Ser

125125

Gly Gly Gly Ser Glu 130Gly Gly Gly Ser Glu 130

Val Gln Leu Val GluVal Gln Leu Val Glu

135135

Ser Gly Gly Gly LeuSer Gly Gly Gly Leu

140140

Gln Pro Gly Gly Ser 145Gln Pro Gly Gly Ser 145

Leu Arg Leu Ser Cys 150Leu Arg Leu Ser Cys 150

Ala Ala Ser Gly Phe 155Ala Ala Ser Gly Phe 155

Phe Ser Asp Ser TrpPhe Ser Asp Ser Trp

165165

Ile His Trp Val ArgIle His Trp Val Arg

170170

Gln Ala Pro Gly LysGln Ala Pro Gly Lys

175175

Leu Glu Trp Val AlaLeu Glu Trp Val Ala

180180

Trp Ile Ser Pro TyrTrp Ile Ser Pro Tyr

185185

Gly Gly Ser Thr TyrGly Gly Ser Thr Tyr

190190

Ala Asp Ser Val Lys 195Ala Asp Ser Val Lys 195

Gly Arg Phe Thr Ile 200Gly Arg Phe Thr Ile 200

Ser Ala Asp Thr Ser 205Ser Ala Asp Thr Ser 205

Asn Thr Ala Tyr Leu 210Asn Thr Ala Tyr Leu 210

Gln Met Asn Ser LeuGln Met Asn Ser Leu

215215

Arg Ala Glu Asp Thr 220Arg Ala Glu Asp Thr 220

Val Tyr Tyr Cys Ala 225Val Tyr Tyr Cys Ala 225

Arg Arg His Trp Pro 230Arg Arg His Trp Pro 230

Gly Gly Phe Asp Tyr 235Gly Gly Phe Asp Tyr 235

Gly Gln Gly Thr LeuGly Gln Gly Thr Leu

245245

Val Thr Val Ser SerVal Thr Val Ser Ser

250250

Ala Ser Thr Lys GlyAla Ser Thr Lys Gly

255255

Ser Val Phe Pro LeuSer Val Phe Pro Leu

260260

Ala Pro Ser Ser LysAla Pro Ser Ser Lys

265265

Ser Thr Ser Gly GlySer Thr Ser Gly Gly

270270

Ala Ala Leu Gly CysAla Ala Leu Gly Cys

275275

Leu Val Lys Asp Tyr 280Leu Val Lys Asp Tyr 280

Phe Pro Glu Pro ValPhe Pro Glu Pro Val

285285

Val Ser Trp Asn SerVal Ser Trp Asn Ser

290290

Gly Ala Leu Thr SerGly Ala Leu Thr Ser

295295

Gly Val His Thr Phe 300Gly Val His Thr Phe 300

Ala Val Leu Gln Ser 305Ala Val Leu Gln Ser 305

Ser Gly Leu Tyr Ser 310Ser Gly Leu Tyr Ser 310

Leu Ser Ser Val Val 315Leu Ser Ser Val Val 315

Val Pro Ser Ser SerVal Pro Ser Ser Ser

325325

Leu Gly Thr Gln ThrLeu Gly Thr Gln Thr

330330

Tyr Ile Cys Asn ValTyr Ile Cys Asn Val

335335

His Lys Pro Ser AsnHis Lys Pro Ser Asn

340340

Thr Lys Val Asp LysThr Lys Val Asp Lys

345345

Lys Val Glu Pro LysLys Val Glu Pro Lys

350350

GlyGly

ValVal

Thr 160Thr 160

GlyGly

TyrTyr

LysLys

AlaAla

Trp 240Trp 240

ProPro

ThrThr

ThrThr

ProPro

Thr 320Thr 320

AsnAsn

SerSer

- 971 044346- 971 044346

Cys Asp Lys ThrCys Asp Lys Thr

355355

His Thr CysHis Thr Cys

Pro Pro Cys 360Pro Pro Cys 360

Pro Ala ProPro Ala Pro

365365

Glu Leu LeuGlu Leu Leu

Gly Gly Pro SerGly Gly Pro Ser

370370

Val Phe LeuVal Phe Leu

375375

Phe Pro ProPhe Pro Pro

Lys Pro LysLys Pro Lys

380380

Asp Thr LeuAsp Thr Leu

Met Ile Ser Arg 385Met Ile Ser Arg 385

Thr Pro GluThr Pro Glu

390390

Val Thr CysVal Thr Cys

Val Val Val 395Val Val Val 395

Asp Val SerAsp Val Ser

400400

His Glu Asp ProHis Glu Asp Pro

Glu Val Lys 405Glu Val Lys 405

Phe Asn TrpPhe Asn Trp

410410

Tyr Val AspTyr Val Asp

Gly Val GluGly Val Glu

415415

Val His Asn AlaVal His Asn Ala

420420

Lys Thr LysLys Thr Lys

Pro Arg GluPro Arg Glu

425425

Glu Gln TyrGlu Gln Tyr

Ala Ser Thr 430Ala Ser Thr 430

Tyr Arg Val ValTyr Arg Val Val

435435

Ser Val LeuSer Val Leu

Thr Val Leu 440Thr Val Leu 440

His Gln AspHis Gln Asp

445445

Trp Leu AsnTrp Leu Asn

Gly Lys Glu TyrGly Lys Glu Tyr

450450

Lys Cys LysLys Cys Lys

455455

Val Ser AsnVal Ser Asn

Lys Ala LeuLys Ala Leu

460460

Pro Ala ProPro Ala Pro

Ile Glu Lys Thr 465Ile Glu Lys Thr 465

Ile Ser LysIle Ser Lys

470470

Ala Lys GlyAla Lys Gly

Gln Pro Arg 475Gln Pro Arg 475

Glu Pro GlnGlu Pro Gln

480480

Val Tyr Thr LeuVal Tyr Thr Leu

Pro Pro Ser 485Pro Pro Ser 485

Arg Glu GluArg Glu Glu

490490

Met Thr LysMet Thr Lys

Asn Gln ValAsn Gln Val

495495

Ser Leu Thr CysSer Leu Thr Cys

500500

Leu Val LysLeu Val Lys

Gly Phe TyrGly Phe Tyr

505505

Pro Ser AspPro Ser Asp

Ile Ala Val 510Ile Ala Val 510

Glu Trp Glu SerGlu Trp Glu Ser

515515

Asn Gly GlnAsn Gly Gln

Pro Glu Asn 520Pro Glu Asn 520

Asn Tyr LysAsn Tyr Lys

525525

Thr Thr ProThr Thr Pro

Pro Val Leu AspPro Val Leu Asp

530530

Ser Asp GlySer Asp Gly

535535

Ser Phe PheSer Phe Phe

Leu Tyr SerLeu Tyr Ser

540540

Lys Leu ThrLys Leu Thr

Val Asp Lys Ser 545Val Asp Lys Ser 545

Arg Trp GlnArg Trp Gln

550550

Gln Gly AsnGln Gly Asn

Val Phe Ser 555Val Phe Ser 555

Cys Ser ValCys Ser Val

560560

Met His Glu AlaMet His Glu Ala

Leu His Asn 565Leu His Asn 565

His Tyr ThrHis Tyr Thr

570570

Gln Lys SerGln Lys Ser

Leu Ser LeuLeu Ser Leu

575575

Ser Pro Gly LysSer Pro Gly Lys

580 <210> 869 <211> 580 <212> БЕЛОК580 <210> 869 <211> 580 <212> PROTEIN

- 972 044346 <213> Искусственная последовательность <220>- 972 044346 <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v56 IgV - Атезолизумаб HC <400> 869<223> ICOSL v56 IgV - Atezolizumab HC <400> 869

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Arg SerVal Leu Ser Arg Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Asp GluVal Leu Ser Asp Glu

110110

Thr Leu Arg Val Ala 115Thr Leu Arg Val Ala 115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Gly Gly Gly Gly SerGly Gly Gly Gly Ser

125125

Gly Gly Gly Ser GluGly Gly Gly Ser Glu

130130

Val Gln Leu Val GluVal Gln Leu Val Glu

135135

Ser Gly Gly Gly LeuSer Gly Gly Gly Leu

140140

Gln Pro Gly Gly Ser 145Gln Pro Gly Gly Ser 145

Leu Arg Leu Ser Cys 150Leu Arg Leu Ser Cys 150

Ala Ala Ser Gly Phe 155Ala Ala Ser Gly Phe 155

Phe Ser Asp Ser TrpPhe Ser Asp Ser Trp

165165

Ile His Trp Val ArgIle His Trp Val Arg

170170

Gln Ala Pro Gly LysGln Ala Pro Gly Lys

175175

Leu Glu Trp Val AlaLeu Glu Trp Val Ala

180180

Trp Ile Ser Pro TyrTrp Ile Ser Pro Tyr

185185

Gly Gly Ser Thr TyrGly Gly Ser Thr Tyr

190190

Ala Asp Ser Val Lys 195Ala Asp Ser Val Lys 195

Gly Arg Phe Thr Ile 200Gly Arg Phe Thr Ile 200

Ser Ala Asp Thr Ser 205Ser Ala Asp Thr Ser 205

Asn Thr Ala Tyr LeuAsn Thr Ala Tyr Leu

210210

Gln Met Asn Ser LeuGln Met Asn Ser Leu

215215

Arg Ala Glu Asp ThrArg Ala Glu Asp Thr

220220

ValVal

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

GlyGly

ValVal

Thr 160Thr 160

GlyGly

TyrTyr

LysLys

AlaAla

- 973 044346- 973 044346

Val 225Val 225

GlyGly

SerSer

AlaAla

ValVal

Ala 305Ala 305

ValVal

HisHis

CysCys

GlyGly

Met 385Met 385

HisHis

ValVal

TyrTyr

GlyGly

Ile 465Ile 465

Tyr Tyr CysTyr Tyr Cys

Gln Gly ThrGln Gly Thr

Val Phe ProVal Phe Pro

260260

Ala Leu GlyAla Leu Gly

275275

Ser Trp Asn 290Ser Trp Asn 290

Val Leu GlnVal Leu Gln

Pro Ser SerPro Ser Ser

Lys Pro SerLys Pro Ser

340340

Asp Lys ThrAsp Lys Thr

355355

Gly Pro Ser 370Gly Pro Ser 370

Ile Ser ArgIle Ser Arg

Glu Asp ProGlu Asp Pro

His Asn AlaHis Asn Ala

420420

Arg Val ValArg Val Val

435435

Lys Glu Tyr 450Lys Glu Tyr 450

Glu Lys ThrGlu Lys Thr

Ala Arg ArgAla Arg Arg

230230

His Trp ProHis Trp Pro

Gly Gly Phe 235Gly Gly Phe 235

Asp Tyr TrpAsp Tyr Trp

240240

Leu Val Thr 245Leu Val Thr 245

Leu Ala ProLeu Ala Pro

Cys Leu ValCys Leu Val

Ser Gly AlaSer Gly Ala

295295

Ser Ser Gly 310Ser Ser Gly 310

Ser Leu Gly 325Ser Leu Gly 325

Asn Thr LysAsn Thr Lys

His Thr CysHis Thr Cys

Val Phe LeuVal Phe Leu

375375

Thr Pro GluThr Pro Glu

390390

Glu Val Lys 405Glu Val Lys 405

Lys Thr LysLys Thr Lys

Ser Val LeuSer Val Leu

Lys Cys LysLys Cys Lys

455455

Ile Ser LysIle Ser Lys

470470

Val Ser SerVal Ser Ser

250250

Ala Ser ThrAla Ser Thr

Lys Gly ProLys Gly Pro

255255

Ser Ser LysSer Ser Lys

265265

Ser Thr SerSer Thr Ser

Gly Gly Thr 270Gly Gly Thr 270

Lys Asp Tyr 280Lys Asp Tyr 280

Leu Thr SerLeu Thr Ser

Leu Tyr SerLeu Tyr Ser

Thr Gln ThrThr Gln Thr

330330

Val Asp LysVal Asp Lys

345345

Pro Pro Cys 360Pro Pro Cys 360

Phe Pro ProPhe Pro Pro

Val Thr CysVal Thr Cys

Phe Asn TrpPhe Asn Trp

410410

Pro Arg GluPro Arg Glu

425425

Thr Val Leu 440Thr Val Leu 440

Val Ser AsnVal Ser Asn

Ala Lys GlyAla Lys Gly

Phe Pro GluPhe Pro Glu

285285

Pro Val ThrPro Val Thr

Gly Val HisGly Val His

300300

Leu Ser Ser 315Leu Ser Ser 315

Tyr Ile CysTyr Ile Cys

Lys Val GluLys Val Glu

Pro Ala ProPro Ala Pro

365365

Lys Pro LysLys Pro Lys

380380

Val Val Val 395Val Val Val 395

Tyr Val AspTyr Val Asp

Glu Gln TyrGlu Gln Tyr

His Gln AspHis Gln Asp

445445

Lys Ala LeuLys Ala Leu

460460

Gln Pro Arg 475Gln Pro Arg 475

Thr Phe ProThr Phe Pro

Val Val ThrVal Val Thr

320320

Asn Val AsnAsn Val Asn

335335

Pro Lys Ser 350Pro Lys Ser 350

Glu Leu LeuGlu Leu Leu

Asp Thr LeuAsp Thr Leu

Asp Val SerAsp Val Ser

400400

Gly Val GluGly Val Glu

415415

Ala Ser Thr 430Ala Ser Thr 430

Trp Leu AsnTrp Leu Asn

Pro Ala ProPro Ala Pro

Glu Pro GlnGlu Pro Gln

480480

- 974 044346- 974 044346

Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu MetVal Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met

485 490485 490

Thr Lys Asn Gln ValThr Lys Asn Gln Val

495495

Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys 500Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys 500

Gly Phe Tyr Pro Ser AspGly Phe Tyr Pro Ser Asp

505505

Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln 515Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln 515

Pro Val Leu Asp Ser Asp GlyPro Val Leu Asp Ser Asp Gly

530 535530 535

Pro Glu Asn Asn Tyr LysPro Glu Asn Asn Tyr Lys

520 525520 525

Ser Phe Phe Leu Tyr SerSer Phe Phe Leu Tyr Ser

540540

Val Asp Lys Ser Arg Trp GlnVal Asp Lys Ser Arg Trp Gln

545 550545 550

Gln Gly Asn Val Phe SerGln Gly Asn Val Phe Ser

555555

Met His Glu Ala Leu His AsnMet His Glu Ala Leu His Asn

565565

His Tyr Thr Gln Lys Ser 570His Tyr Thr Gln Lys Ser 570

Ser Pro Gly LysSer Pro Gly Lys

580 <210> 870 <211> 580 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>580 <210> 870 <211> 580 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v39 IgV - Атезолизумаб HC < 400> 870<223> ICOSL v39 IgV - Atezolizumab HC <400> 870

Ile Ala Val 510Ile Ala Val 510

Thr Thr ProThr Thr Pro

Lys Leu ThrLys Leu Thr

Cys Ser ValCys Ser Val

560560

Leu Ser LeuLeu Ser Leu

575575

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg 1 5Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg 1 5

Ala Met Val Gly Ser Asp Val GluAla Met Val Gly Ser Asp Val Glu

1515

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly 20Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly 20

Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp Val 25 30Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp Val 25 30

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser GluTyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu

4040

Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr His 45Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr His 45

Ile Pro Gln His Ser Ser Leu GluIle Pro Gln His Ser Ser Leu Glu

5555

Tyr Val Asp Ser Arg Tyr Arg Asn 60Tyr Val Asp Ser Arg Tyr Arg Asn 60

Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly 65 70Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly 65 70

Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser LeuMet Leu Arg Gly Asp Phe Ser Leu

8080

Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln 85Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln 85

Asp Glu Gln Lys Phe His Cys LeuAsp Glu Gln Lys Phe His Cys Leu

9595

- 975 044346- 975 044346

ValVal

ThrThr

GlyGly

Gln 145Gln 145

PhePhe

LeuLeu

AlaAla

AsnAsn

Val 225Val 225

GlyGly

SerSer

AlaAla

ValVal

Ala 305Ala 305

ValVal

HisHis

Leu Ser ArgLeu Ser Arg

100100

Leu His ValLeu His Val

115115

Gly Gly Ser 130Gly Gly Ser 130

Pro Gly GlyPro Gly Gly

Ser Asp SerSer Asp Ser

Glu Trp ValGlu Trp Val

180180

Asp Ser ValAsp Ser Val

195195

Thr Ala Tyr 210Thr Ala Tyr 210

Tyr Tyr CysTyr Tyr Cys

Gln Gly ThrGln Gly Thr

Val Phe ProVal Phe Pro

260260

Ala Leu GlyAla Leu Gly

275275

Ser Trp Asn 290Ser Trp Asn 290

Val Leu GlnVal Leu Gln

Pro Ser SerPro Ser Ser

Lys Pro SerLys Pro Ser

340340

Ser Leu GlySer Leu Gly

Ala Ala AsnAla Ala Asn

Glu Val GlnGlu Val Gln

135135

Ser Leu ArgSer Leu Arg

150150

Trp Ile His 165Trp Ile His 165

Ala Trp IleAla Trp Ile

Lys Gly ArgLys Gly Arg

Leu Gln MetLeu Gln Met

215215

Ala Arg ArgAla Arg Arg

230230

Leu Val Thr 245Leu Val Thr 245

Leu Ala ProLeu Ala Pro

Cys Leu ValCys Leu Val

Ser Gly AlaSer Gly Ala

295295

Ser Ser Gly 310Ser Ser Gly 310

Ser Leu Gly 325Ser Leu Gly 325

Asn Thr LysAsn Thr Lys

Phe Gln GluPhe Gln Glu

105105

Phe Ser Val 120Phe Ser Val 120

Leu Val GluLeu Val Glu

Leu Ser CysLeu Ser Cys

Trp Val ArgTrp Val Arg

170170

Ser Pro TyrSer Pro Tyr

185185

Phe Thr Ile 200Ph Thr Ile 200

Asn Ser LeuAsn Ser Leu

His Trp ProHis Trp Pro

Val Ser SerVal Ser Ser

250250

Ser Ser LysSer Ser Lys

265265

Lys Asp Tyr 280Lys Asp Tyr 280

Leu Thr SerLeu Thr Ser

Leu Tyr SerLeu Tyr Ser

Thr Gln ThrThr Gln Thr

330330

Val Asp LysVal Asp Lys

345345

Val Leu SerVal Leu Ser

Val Glu Val 110Val Glu Val 110

Gly Gly GlyGly Gly Gly

125125

Gly Ser GlyGly Ser Gly

Ser Gly GlySer Gly Gly

140140

Gly Leu ValGly Leu Val

Ala Ala Ser 155Ala Ala Ser 155

Gly Phe ThrGly Phe Thr

160160

Gln Ala ProGln Ala Pro

Gly Lys GlyGly Lys Gly

175175

Gly Gly SerGly Gly Ser

Thr Tyr Tyr 190Thr Tyr Tyr 190

Ser Ala AspSer Ala Asp

205205

Thr Ser LysThr Ser Lys

Arg Ala GluArg Ala Glu

220220

Asp Thr AlaAsp Thr Ala

Gly Gly Phe 235Gly Gly Phe 235

Asp Tyr TrpAsp Tyr Trp

240240

Ala Ser ThrAla Ser Thr

Lys Gly ProLys Gly Pro

255255

Ser Thr SerSer Thr Ser

Gly Gly Thr 270Gly Gly Thr 270

Phe Pro GluPhe Pro Glu

285285

Pro Val ThrPro Val Thr

Gly Val HisGly Val His

300300

Leu Ser Ser 315Leu Ser Ser 315

Tyr Ile CysTyr Ile Cys

Lys Val GluLys Val Glu

Thr Phe ProThr Phe Pro

Val Val ThrVal Val Thr

320320

Asn Val AsnAsn Val Asn

335335

Pro Lys Ser 350Pro Lys Ser 350

- 976 044346- 976 044346

CysCys

GlyGly

Met 385Met 385

HisHis

ValVal

TyrTyr

GlyGly

Ile 465Ile 465

ValVal

SerSer

GluGlu

ProPro

Val 545Val 545

MetMet

SerSer

Asp Lys Thr His Thr 355Asp Lys Thr His Thr 355

Gly Pro Ser Val Phe 370Gly Pro Ser Val Phe 370

Ile Ser Arg Thr ProIle Ser Arg Thr Pro

390390

Glu Asp Pro Glu ValGlu Asp Pro Glu Val

405405

His Asn Ala Lys Thr 420His Asn Ala Lys Thr 420

Arg Val Val Ser ValArg Val Val Ser Val

435435

Lys Glu Tyr Lys Cys 450Lys Glu Tyr Lys Cys 450

Glu Lys Thr Ile SerGlu Lys Thr Ile Ser

470470

Tyr Thr Leu Pro ProTyr Thr Leu Pro Pro

485485

Leu Thr Cys Leu Val 500Leu Thr Cys Leu Val 500

Trp Glu Ser Asn Gly 515Trp Glu Ser Asn Gly 515

Val Leu Asp Ser Asp 530Val Leu Asp Ser Asp 530

Asp Lys Ser Arg TrpAsp Lys Ser Arg Trp

550550

His Glu Ala Leu HisHis Glu Ala Leu His

565565

Pro Gly LysPro Gly Lys

580 <210> 871 <211> 346580 <210> 871 <211> 346

Cys Pro Pro Cys ProCys Pro Pro Cys Pro

360360

Leu Phe Pro Pro Lys 375Leu Phe Pro Pro Lys 375

Glu Val Thr Cys ValGlu Val Thr Cys Val

395395

Lys Phe Asn Trp TyrLys Phe Asn Trp Tyr

410410

Lys Pro Arg Glu GluLys Pro Arg Glu Glu

425425

Leu Thr Val Leu HisLeu Thr Val Leu His

440440

Lys Val Ser Asn Lys 455Lys Val Ser Asn Lys 455

Lys Ala Lys Gly GlnLys Ala Lys Gly Gln

475475

Ser Arg Glu Glu MetSer Arg Glu Glu Met

490490

Lys Gly Phe Tyr ProLys Gly Phe Tyr Pro

505505

Gln Pro Glu Asn AsnGln Pro Glu Asn Asn

520520

Gly Ser Phe Phe Leu 535Gly Ser Phe Phe Leu 535

Gln Gln Gly Asn ValGln Gln Gly Asn Val

555555

Asn His Tyr Thr GlnAsn His Tyr Thr Gln

570570

Ala Pro Glu Leu LeuAla Pro Glu Leu Leu

365365

Pro Lys Asp Thr Leu 380Pro Lys Asp Thr Leu 380

Val Val Asp Val SerVal Val Asp Val Ser

400400

Val Asp Gly Val GluVal Asp Gly Val Glu

415415

Gln Tyr Ala Ser Thr 430Gln Tyr Ala Ser Thr 430

Gln Asp Trp Leu Asn 445Gln Asp Trp Leu Asn 445

Ala Leu Pro Ala Pro 460Ala Leu Pro Ala Pro 460

Pro Arg Glu Pro GlnPro Arg Glu Pro Gln

480480

Thr Lys Asn Gln ValThr Lys Asn Gln Val

495495

Ser Asp Ile Ala Val 510Ser Asp Ile Ala Val 510

Tyr Lys Thr Thr ProTyr Lys Thr Thr Pro

525525

Tyr Ser Lys Leu Thr 540Tyr Ser Lys Leu Thr 540

Phe Ser Cys Ser ValPhe Ser Cys Ser Val

560560

Lys Ser Leu Ser LeuLys Ser Leu Ser Leu

575575

- 977 044346 <212> БЕЛОК <213> Искусственная <220>- 977 044346 <212> PROTEIN <213> Artificial <220>

<223> ICOSL WT IgV <400> 871<223> ICOSL WT IgV <400> 871

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5 последовательностьAsp Thr Gln Glu Lys 1 5 sequence

- Атезолизумаб LC- Atezolizumab LC

Glu Val Arg Ala Met 10Glu Val Arg Ala Met 10

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Asn Ser 50Ile Pro Gln Asn Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Gly Gly Gly Gly SerGly Gly Gly Gly Ser

125125

Gly Gly Gly Ser Asp 130Gly Gly Gly Ser Asp 130

Ile Gln Met Thr GlnIle Gln Met Thr Gln

135135

Ser Pro Ser Ser LeuSer Pro Ser Ser Leu

140140

Ala Ser Val Gly Asp 145Ala Ser Val Gly Asp 145

Arg Val Thr Ile Thr 150Arg Val Thr Ile Thr 150

Cys Arg Ala Ser Gln 155Cys Arg Ala Ser Gln 155

Val Ser Thr Ala ValVal Ser Thr Ala Val

165165

Ala Trp Tyr Gln GlnAla Trp Tyr Gln Gln

170170

Lys Pro Gly Lys AlaLys Pro Gly Lys Ala

175175

Lys Leu Leu Ile TyrLys Leu Leu Ile Tyr

180180

Ser Ala Ser Phe LeuSer Ala Ser Phe Leu

185185

Tyr Ser Gly Val ProTyr Ser Gly Val Pro

190190

Arg Phe Ser Gly Ser 195Arg Phe Ser Gly Ser 195

Gly Ser Gly Thr Asp 200Gly Ser Gly Thr Asp 200

Phe Thr Leu Thr IlePhe Thr Leu Thr Ile

205205

Ser Leu Gln Pro GluSer Leu Gln Pro Glu

210210

Asp Phe Ala Thr Tyr 215Asp Phe Ala Thr Tyr 215

Tyr Cys Gln Gln TyrTyr Cys Gln Gln Tyr

220220

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

GlyGly

SerSer

Asp 160Asp 160

ProPro

SerSer

SerSer

LeuLeu

- 978 044346- 978 044346

Tyr His Pro Ala Thr 225Tyr His Pro Ala Thr 225

Phe Gly Gln Gly Thr 230Phe Gly Gln Gly Thr 230

Lys Val Glu Ile Lys 235Lys Val Glu Ile Lys 235

Thr Val Ala Ala ProThr Val Ala Ala Pro

245245

Ser Val Phe Ile PheSer Val Phe Ile Phe

250250

Pro Pro Ser Asp GluPro Pro Ser Asp Glu

255255

Leu Lys Ser Gly ThrLeu Lys Ser Gly Thr

260260

Ala Ser Val Val CysAla Ser Val Val Cys

265265

Leu Leu Asn Asn PheLeu Leu Asn Asn Phe

270270

Pro Arg Glu Ala LysPro Arg Glu Ala Lys

275275

Val Gln Trp Lys ValVal Gln Trp Lys Val

280280

Asp Asn Ala Leu GlnAsp Asn Ala Leu Gln

285285

Gly Asn Ser Gln Glu 290Gly Asn Ser Gln Glu 290

Ser Val Thr Glu GlnSer Val Thr Glu Gln

295295

Asp Ser Lys Asp Ser 300Asp Ser Lys Asp Ser 300

Tyr Ser Leu Ser Ser 305Tyr Ser Leu Ser Ser 305

Thr Leu Thr Leu Ser 310Thr Leu Thr Leu Ser 310

Lys Ala Asp Tyr Glu 315Lys Ala Asp Tyr Glu 315

His Lys Val Tyr AlaHis Lys Val Tyr Ala

325325

Cys Glu Val Thr HisCys Glu Val Thr His

330330

Gln Gly Leu Ser SerGln Gly Leu Ser Ser

335335

Arg 240Arg 240

GlnGln

TyrTyr

SerSer

ThrThr

Lys 320Lys 320

ProPro

Val Thr Lys Ser PheVal Thr Lys Ser Phe

340340

Asn Arg Gly Glu CysAsn Arg Gly Glu Cys

345 <210> 872 <211> 346 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>345 <210> 872 <211> 346 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v56 IgV - Атезолизумаб LC <400> 872<223> ICOSL v56 IgV - Atezolizumab LC <400> 872

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp ValAsp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val

5 10 155 10 15

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

ValVal

ValVal

HisHis

AsnAsn

LeuLeu

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

- 979 044346- 979 044346

ArgArg

ValVal

ThrThr

GlyGly

Ala 145Ala 145

ValVal

LysLys

ArgArg

SerSer

Tyr 225Tyr 225

ThrThr

LeuLeu

ProPro

GlyGly

Tyr 305Tyr 305

HisHis

Leu Phe AsnLeu Phe Asn

Leu Ser ArgLeu Ser Arg

100100

Leu Arg Val 115Leu Arg Val 115

Gly Gly Ser 130Gly Gly Ser 130

Ser Val GlySer Val Gly

Ser Thr AlaSer Thr Ala

Leu Leu IleLeu Leu Ile

180180

Phe Ser Gly 195Phe Ser Gly 195

Leu Gln Pro 210Leu Gln Pro 210

His Pro AlaHis Pro Ala

Val Ala AlaVal Ala Ala

Lys Ser GlyLys Ser Gly

260260

Arg Glu AlaArg Glu Ala

275275

Asn Ser Gln 290Asn Ser Gln 290

Ser Leu SerSer Leu Ser

Lys Val TyrLys Val Tyr

Val Thr Pro 85Val Thr Pro 85

Ser Leu GlySer Leu Gly

Ala Ala AsnAla Ala Asn

Asp Ile GlnAsp Ile Gln

135135

Asp Arg ValAsp Arg Val

150150

Val Ala Trp 165Val Ala Trp 165

Tyr Ser AlaTyr Ser Ala

Ser Gly SerSer Gly Ser

Glu Asp PheGlu Asp Phe

215215

Thr Phe GlyThr Phe Gly

230230

Pro Ser Val 245Pro Ser Val 245

Thr Ala SerThr Ala Ser

Lys Val GlnLys Val Gln

Glu Ser ValGlu Ser Val

295295

Ser Thr LeuSer Thr Leu

310310

Ala Cys Glu 325Ala Cys Glu 325

Gln Asp GluGln Asp Glu

Gln Lys PheGln Lys Phe

His Cys Leu 95His Cys Leu 95

Phe Gln GluPhe Gln Glu

105105

Phe Ser Val 120Phe Ser Val 120

Met Thr GlnMet Thr Gln

Thr Ile ThrThr Ile Thr

Tyr Gln GlnTyr Gln Gln

170170

Ser Phe LeuSer Phe Leu

185185

Gly Thr Asp 200Gly Thr Asp 200

Ala Thr TyrAla Thr Tyr

Gln Gly ThrGln Gly Thr

Phe Ile PhePhe Ile Phe

250250

Val Val CysVal Val Cys

265265

Trp Lys Val 280Trp Lys Val 280

Thr Glu GlnThr Glu Gln

Thr Leu SerThr Leu Ser

Val Thr HisVal Thr His

330330

Val Leu SerVal Leu Ser

Asp Glu Val 110Asp Glu Val 110

Gly Gly GlyGly Gly Gly

125125

Gly Ser GlyGly Ser Gly

Ser Pro SerSer Pro Ser

140140

Ser Leu SerSer Leu Ser

Cys Arg Ala 155Cys Arg Ala 155

Lys Pro GlyLys Pro Gly

Tyr Ser GlyTyr Ser Gly

Phe Thr LeuPhe Thr Leu

205205

Tyr Cys GlnTyr Cys Gln

220220

Lys Val Glu 235Lys Val Glu 235

Pro Pro SerPro Pro Ser

Leu Leu AsnLeu Leu Asn

Asp Asn AlaAsp Asn Ala

285285

Asp Ser LysAsp Ser Lys

300300

Lys Ala Asp 315Lys Ala Asp 315

Gln Gly LeuGln Gly Leu

Ser Gln AspSer Gln Asp

160160

Lys Ala ProLys Ala Pro

175175

Val Pro Ser 190Val Pro Ser 190

Thr Ile SerThr Ile Ser

Gln Tyr LeuGln Tyr Leu

Ile Lys ArgIle Lys Arg

240240

Asp Glu GlnAsp Glu Gln

255255

Asn Phe Tyr 270Asn Phe Tyr 270

Leu Gln SerLeu Gln Ser

Asp Ser ThrAsp Ser Thr

Tyr Glu LysTyr Glu Lys

320320

Ser Ser ProSer Ser Pro

335335

- 980 044346- 980 044346

Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu CysVal Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys

340340

345 <210> 873 <211> 346 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>345 <210> 873 <211> 346 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v39 IgV - Атезолизумаб LC < 400> 873<223> ICOSL v39 IgV - Atezolizumab LC <400> 873

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala CysLeu Ser Cys Ala Cys

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn AspPhe Asp Leu Asn Asp

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Arg SerVal Leu Ser Arg Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Gly Gly Gly Gly SerGly Gly Gly Gly Ser

125125

Gly Gly Gly Ser Asp 130Gly Gly Gly Ser Asp 130

Ile Gln Met Thr GlnIle Gln Met Thr Gln

135135

Ser Pro Ser Ser LeuSer Pro Ser Ser Leu

140140

Ala Ser Val Gly Asp 145Ala Ser Val Gly Asp 145

Arg Val Thr Ile Thr 150Arg Val Thr Ile Thr 150

Cys Arg Ala Ser Gln 155Cys Arg Ala Ser Gln 155

Val Ser Thr Ala ValVal Ser Thr Ala Val

165165

Ala Trp Tyr Gln GlnAla Trp Tyr Gln Gln

170170

Lys Pro Gly Lys AlaLys Pro Gly Lys Ala

175175

Lys Leu Leu Ile TyrLys Leu Leu Ile Tyr

180180

Ser Ala Ser Phe LeuSer Ala Ser Phe Leu

185185

Tyr Ser Gly Val ProTyr Ser Gly Val Pro

190190

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

GlyGly

SerSer

Asp 160Asp 160

ProPro

SerSer

- 981 044346- 981 044346

Arg Phe Ser Gly Ser 195Arg Phe Ser Gly Ser 195

Gly Ser Gly Thr Asp 200Gly Ser Gly Thr Asp 200

Phe Thr Leu Thr IlePhe Thr Leu Thr Ile

205205

Ser Leu Gln Pro GluSer Leu Gln Pro Glu

210210

Asp Phe Ala Thr TyrAsp Phe Ala Thr Tyr

215215

Tyr Cys Gln Gln TyrTyr Cys Gln Gln Tyr

220220

Tyr His Pro Ala Thr 225Tyr His Pro Ala Thr 225

Phe Gly Gln Gly Thr 230Phe Gly Gln Gly Thr 230

Lys Val Glu Ile Lys 235Lys Val Glu Ile Lys 235

Thr Val Ala Ala ProThr Val Ala Ala Pro

245245

Ser Val Phe Ile PheSer Val Phe Ile Phe

250250

Pro Pro Ser Asp GluPro Pro Ser Asp Glu

255255

Leu Lys Ser Gly ThrLeu Lys Ser Gly Thr

260260

Ala Ser Val Val CysAla Ser Val Val Cys

265265

Leu Leu Asn Asn PheLeu Leu Asn Asn Phe

270270

Pro Arg Glu Ala LysPro Arg Glu Ala Lys

275275

Val Gln Trp Lys ValVal Gln Trp Lys Val

280280

Asp Asn Ala Leu GlnAsp Asn Ala Leu Gln

285285

Gly Asn Ser Gln GluGly Asn Ser Gln Glu

290290

Ser Val Thr Glu GlnSer Val Thr Glu Gln

295295

Asp Ser Lys Asp SerAsp Ser Lys Asp Ser

300300

Tyr Ser Leu Ser Ser 305Tyr Ser Leu Ser Ser 305

Thr Leu Thr Leu Ser 310Thr Leu Thr Leu Ser 310

Lys Ala Asp Tyr Glu 315Lys Ala Asp Tyr Glu 315

His Lys Val Tyr AlaHis Lys Val Tyr Ala

325325

Cys Glu Val Thr HisCys Glu Val Thr His

330330

Gln Gly Leu Ser SerGln Gly Leu Ser Ser

335335

SerSer

LeuLeu

Arg 240Arg 240

GlnGln

TyrTyr

SerSer

ThrThr

Lys 320Lys 320

ProPro

Val Thr Lys Ser PheVal Thr Lys Ser Phe

340340

Asn Arg Gly Glu CysAsn Arg Gly Glu Cys

345 <210> 874 <211> 580 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>345 <210> 874 <211> 580 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> Атезолизумаб HC - ICOSL WT IgV <400> 874<223> Atezolizumab HC - ICOSL WT IgV <400> 874

Glu Val Gln 1Glu Val Gln 1

Ser Leu ArgSer Leu Arg

Trp Ile His 35Trp Ile His 35

Ala Trp IleAla Trp Ile

Leu Val Glu 5Leu Val Glu 5

Leu Ser Cys 20Leu Ser Cys 20

Trp Val ArgTrp Val Arg

Ser Pro TyrSer Pro Tyr

Ser Gly GlySer Gly Gly

Ala Ala Ser 25Ala Ala Ser 25

Gln Ala Pro 40Gln Ala Pro 40

Gly Gly SerGly Gly Ser

Gly Leu Val 10Gly Leu Val 10

Gly Phe ThrGly Phe Thr

Gly Lys GlyGly Lys Gly

Thr Tyr TyrThr Tyr Tyr

Gln Pro Gly 15Gln Pro Gly 15

Phe Ser Asp 30Phe Ser Asp 30

Leu Glu Trp 45Leu Glu Trp 45

GlyGly

SerSer

ValVal

ValVal

Ala Asp SerAla Asp Ser

- 982 044346- 982 044346

Lys 65Lys 65

LeuLeu

AlaAla

LeuLeu

LeuLeu

Cys 145Cys 145

SerSer

SerSer

SerSer

AsnAsn

His 225His 225

ValVal

ThrThr

GluGlu

LysLys

Gly ArgGly Arg

Gln MetGln Met

Arg ArgArg Arg

Val ThrVal Thr

115115

Ala Pro 130Ala Pro 130

Leu ValLeu Val

Gly AlaGly Ala

Ser GlySer Gly

Leu GlyLeu Gly

195195

Thr Lys 210Thr Lys 210

Thr CysThr Cys

Phe LeuPhe Leu

Pro GluPro Glu

Val LysVal Lys

275275

Thr Lys 290Thr Lys 290

Phe ThrPhe Thr

Asn SerAsn Ser

His Trp 100His Trp 100

Val SerVal Ser

Ile Ser 70Ile Ser 70

Leu ArgLeu Arg

Pro GlyPro Gly

Ser AlaSer Ala

Ala AspAla Asp

Ala GluAla Glu

Gly PheGly Phe

105105

Ser Thr 120Ser Thr 120

Ser SerSer Ser

Lys SerLys Ser

135135

Thr SerThr Ser

Thr Ser 75Thr Ser 75

Asp Thr 90Asp Thr 90

Asp TyrAsp Tyr

Lys GlyLys Gly

Gly GlyGly Gly

Lys AsnLys Asn

Thr AlaThr Ala

Lys AspLys Asp

Leu ThrLeu Thr

165165

Leu Tyr 180Leu Tyr 180

Thr GlnThr Gln

Val AspVal Asp

Pro ProPro Pro

Phe ProPhe Pro

245245

Val Thr 260Val Thr 260

Phe AsnPhe Asn

Pro ArgPro Arg

Ala ValAla Val

Tyr TyrTyr Tyr

Trp GlyTrp Gly

Gln Gly 110Gln Gly 110

Tyr Phe 150Tyr Phe 150

Pro GluPro Glu

Pro ValPro Val

155155

Ser GlySer Gly

Ser LeuSer Leu

Thr TyrThr Tyr

Lys LysLys Lys

215215

Cys Pro 230Cys Pro 230

Pro LysPro Lys

Cys ValCys Val

Trp TyrTrp Tyr

Glu GluGlu Glu

295295

Val HisVal His

Thr Phe 170Thr Phe 170

Ser SerSer Ser

185185

Ile Cys 200Ile Cys 200

Val GluVal Glu

Ala ProAla Pro

Pro LysPro Lys

Val ValVal Val

265265

Val Asp 280Val Asp 280

Gln TyrGln Tyr

Val ValVal Val

Asn ValAsn Val

Pro LysPro Lys

Glu LeuGlu Leu

235235

Asp Thr 250Asp Thr 250

Asp ValAsp Val

Gly ValGly Val

Ala SerAla Ser

Pro SerPro Ser

125125

Thr Ala 140Thr Ala 140

Thr ValThr Val

Pro AlaPro Ala

Thr ValThr Val

Asn HisAsn His

205205

Ser Cys 220Ser Cys 220

Leu GlyLeu Gly

Leu MetLeu Met

Ser HisSer His

Glu ValGlu Val

285285

Thr Tyr 300Thr Tyr 300

Val PheVal Phe

Ala LeuAla Leu

Ser TrpSer Trp

Val LeuVal Leu

175175

Pro Ser 190Pro Ser 190

Lys ProLys Pro

Asp LysAsp Lys

Gly ProGly Pro

Ile SerIle Ser

255255

Glu Asp 270Glu Asp 270

His AsnHis Asn

Arg ValArg Val

Tyr 80Tyr 80

CysCys

ThrThr

ProPro

GlyGly

Asn 160Asn 160

GlnGln

SerSer

SerSer

ThrThr

Ser 240Ser 240

ArgArg

ProPro

AlaAla

ValVal

- 983 044346- 983 044346

Ser Val Leu Thr Val 305Ser Val Leu Thr Val 305

Leu His Gln Asp Trp 310Leu His Gln Asp Trp 310

Leu Asn Gly Lys Glu 315Leu Asn Gly Lys Glu 315

Lys Cys Lys Val SerLys Cys Lys Val Ser

325325

Asn Lys Ala Leu ProAsn Lys Ala Leu Pro

330330

Ala Pro Ile Glu LysAla Pro Ile Glu Lys

335335

Ile Ser Lys Ala LysIle Ser Lys Ala Lys

340340

Gly Gln Pro Arg GluGly Gln Pro Arg Glu

345345

Pro Gln Val Tyr ThrPro Gln Val Tyr Thr

350350

Pro Pro Ser Arg GluPro Pro Ser Arg Glu

355355

Glu Met Thr Lys Asn 360Glu Met Thr Lys Asn 360

Gln Val Ser Leu ThrGln Val Ser Leu Thr

365365

Leu Val Lys Gly PheLeu Val Lys Gly Phe

370370

Tyr Pro Ser Asp IleTyr Pro Ser Asp Ile

375375

Ala Val Glu Trp GluAla Val Glu Trp Glu

380380

Asn Gly Gln Pro Glu 385Asn Gly Gln Pro Glu 385

Asn Asn Tyr Lys Thr 390Asn Asn Tyr Lys Thr 390

Thr Pro Pro Val Leu 395Thr Pro Pro Val Leu 395

Ser Asp Gly Ser PheSer Asp Gly Ser Phe

405405

Phe Leu Tyr Ser LysPhe Leu Tyr Ser Lys

410410

Leu Thr Val Asp LysLeu Thr Val Asp Lys

415415

Arg Trp Gln Gln GlyArg Trp Gln Gln Gly

420420

Asn Val Phe Ser CysAsn Val Phe Ser Cys

425425

Ser Val Met His GluSer Val Met His Glu

430430

Leu His Asn His TyrLeu His Asn His Tyr

435435

Thr Gln Lys Ser Leu 440Thr Gln Lys Ser Leu 440

Ser Leu Ser Pro Gly 445Ser Leu Ser Pro Gly 445

Gly Gly Gly Gly Ser 450Gly Gly Gly Gly Ser 450

Gly Gly Gly Gly Ser 455Gly Gly Gly Gly Ser 455

Asp Thr Gln Glu Lys 460Asp Thr Gln Glu Lys 460

Val Arg Ala Met Val 465Val Arg Ala Met Val 465

Gly Ser Asp Val Glu 470Gly Ser Asp Val Glu 470

Leu Ser Cys Ala Cys 475Leu Ser Cys Ala Cys 475

Glu Gly Ser Arg PheGlu Gly Ser Arg Phe

485485

Asp Leu Asn Asp ValAsp Leu Asn Asp Val

490490

Tyr Val Tyr Trp GlnTyr Val Tyr Trp Gln

495495

Ser Glu Ser Lys ThrSer Glu Ser Lys Thr

500500

Val Val Thr Tyr HisVal Val Thr Tyr His

505505

Ile Pro Gln Asn SerIle Pro Gln Asn Ser

510510

Leu Glu Asn Val Asp 515Leu Glu Asn Val Asp 515

Ser Arg Tyr Arg Asn 520Ser Arg Tyr Arg Asn 520

Arg Ala Leu Met SerArg Ala Leu Met Ser

525525

Ala Gly Met Leu ArgAla Gly Met Leu Arg

530530

Gly Asp Phe Ser LeuGly Asp Phe Ser Leu

535535

Arg Leu Phe Asn ValArg Leu Phe Asn Val

540540

Tyr 320Tyr 320

ThrThr

LeuLeu

CysCys

SerSer

Asp 400Asp 400

SerSer

AlaAla

LysLys

GluGlu

Pro 480Pro 480

ThrThr

SerSer

ProPro

ThrThr

LeuLeu

560560

Pro Gln Asp Glu Gln 545Pro Gln Asp Glu Gln 545

Lys Phe His Cys Leu 550Lys Phe His Cys Leu 550

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

555555

- 984 044346- 984 044346

Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu Val Thr Leu His Val AlaGly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu Val Thr Leu His Val Ala

565 570 575565 570 575

AlaAla

Asn Phe Ser ValAsn Phe Ser Val

580 <210> 875 <211> 580 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>580 <210> 875 <211> 580 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> Атезолизумаб HC - ICOSL v56 IgV < 400> 875< 223> Atezolizumab HC - ICOSL v56 IgV < 400> 875

Glu Val Gln Leu ValGlu Val Gln Leu Val

55

Glu Ser Gly Gly GlyGlu Ser Gly Gly Gly

Leu Val Gln Pro GlyLeu Val Gln Pro Gly

Ser Leu Arg Leu Ser 20Ser Leu Arg Leu Ser 20

Cys Ala Ala Ser GlyCys Ala Ala Ser Gly

Phe Thr Phe Ser Asp 30Phe Thr Phe Ser Asp 30

Trp Ile His Trp Val 35Trp Ile His Trp Val 35

Arg Gln Ala Pro Gly 40Arg Gln Ala Pro Gly 40

Lys Gly Leu Glu Trp 45Lys Gly Leu Glu Trp 45

Ala Trp Ile Ser Pro 50Ala Trp Ile Ser Pro 50

Tyr Gly Gly Ser Thr 55Tyr Gly Gly Ser Thr 55

Tyr Tyr Ala Asp Ser 60Tyr Tyr Ala Asp Ser 60

Lys Gly Arg Phe Thr 65Lys Gly Arg Phe Thr 65

Ile Ser Ala Asp Thr 70Ile Ser Ala Asp Thr 70

Ser Lys Asn Thr Ala 75Ser Lys Asn Thr Ala 75

Leu Gln Met Asn SerLeu Gln Met Asn Ser

Leu Arg Ala Glu Asp 90Leu Arg Ala Glu Asp 90

Thr Ala Val Tyr Tyr 95Thr Ala Val Tyr Tyr 95

Ala Arg Arg His TrpAla Arg Arg His Trp

100100

Pro Gly Gly Phe AspPro Gly Gly Phe Asp

105105

Tyr Trp Gly Gln GlyTyr Trp Gly Gln Gly

110110

Leu Val Thr Val SerLeu Val Thr Val Ser

115115

Ser Ala Ser Thr LysSer Ala Ser Thr Lys

120120

Gly Pro Ser Val PheGly Pro Ser Val Phe

125125

Leu Ala Pro Ser SerLeu Ala Pro Ser Ser

130130

Lys Ser Thr Ser Gly 135Lys Ser Thr Ser Gly 135

Gly Thr Ala Ala Leu 140Gly Thr Ala Ala Leu 140

Cys Leu Val Lys Asp 145Cys Leu Val Lys Asp 145

Tyr Phe Pro Glu Pro 150Tyr Phe Pro Glu Pro 150

Val Thr Val Ser Trp 155Val Thr Val Ser Trp 155

Ser Gly Ala Leu ThrSer Gly Ala Leu Thr

165165

Ser Gly Val His ThrSer Gly Val His Thr

170170

Phe Pro Ala Val LeuPhe Pro Ala Val Leu

175175

GlyGly

SerSer

ValVal

ValVal

Tyr 80Tyr 80

CysCys

ThrThr

ProPro

GlyGly

Asn 160Asn 160

GlnGln

- 985 044346- 985 044346

SerSer

SerSer

AsnAsn

His 225His 225

ValVal

ThrThr

GluGlu

LysLys

Ser 305Ser 305

LysLys

IleIle

ProPro

LeuLeu

Asn 385Asn 385

SerSer

ArgArg

Ser Gly LeuSer Gly Leu

180180

Leu Gly ThrLeu Gly Thr

195195

Thr Lys Val 210Thr Lys Val 210

Thr Cys ProThr Cys Pro

Phe Leu PhePhe Leu Phe

Pro Glu ValPro Glu Val

260260

Val Lys PheVal Lys Phe

275275

Thr Lys Pro 290Thr Lys Pro 290

Val Leu ThrVal Leu Thr

Cys Lys ValCys Lys Val

Ser Lys AlaSer Lys Ala

340340

Pro Ser ArgPro Ser Arg

355355

Val Lys Gly 370Val Lys Gly 370

Gly Gln ProGly Gln Pro

Asp Gly SerAsp Gly Ser

Trp Gln GlnTrp Gln Gln

420420

Tyr Ser LeuTyr Ser Leu

Gln Thr TyrGln Thr Tyr

Asp Lys LysAsp Lys Lys

215215

Pro Cys ProPro Cys Pro

230230

Pro Pro Lys 245Pro Pro Lys 245

Thr Cys ValThr Cys Val

Asn Trp TyrAsn Trp Tyr

Arg Glu GluArg Glu Glu

295295

Val Leu HisVal Leu His

310310

Ser Asn Lys 325Ser Asn Lys 325

Lys Gly GlnLys Gly Gln

Glu Glu MetGlu Glu Met

Phe Tyr ProPhe Tyr Pro

375375

Glu Asn AsnGlu Asn Asn

390390

Phe Phe Leu 405Phe Phe Leu 405

Gly Asn ValGly Asn Val

Ser Ser ValSer Ser Val

185185

Ile Cys Asn 200Ile Cys Asn 200

Val Glu ProVal Glu Pro

Ala Pro GluAla Pro Glu

Pro Lys AspPro Lys Asp

250250

Val Val AspVal Val Asp

265265

Val Asp Gly 280Val Asp Gly 280

Gln Tyr AlaGln Tyr Ala

Gln Asp TrpGln Asp Trp

Ala Leu ProAla Leu Pro

330330

Pro Arg GluPro Arg Glu

345345

Thr Lys Asn 360Thr Lys Asn 360

Ser Asp IleSer Asp Ile

Tyr Lys ThrTyr Lys Thr

Tyr Ser LysTyr Ser Lys

410410

Phe Ser Cys 425Phe Ser Cys 425

Val Thr ValVal Thr Val

Val Asn HisVal Asn His

205205

Lys Ser CysLys Ser Cys

220220

Leu Leu Gly 235Leu Leu Gly 235

Thr Leu MetThr Leu Met

Val Ser HisVal Ser His

Val Glu ValVal Glu Val

285285

Ser Thr TyrSer Thr Tyr

300300

Leu Asn Gly 315Leu Asn Gly 315

Ala Pro IleAla Pro Ile

Pro Gln ValPro Gln Val

Gln Val SerGln Val Ser

365365

Ala Val GluAla Val Glu

380380

Thr Pro Pro 395Thr Pro Pro 395

Leu Thr ValLeu Thr Val

Ser Val MetSer Val Met

Pro Ser Ser 190Pro Ser Ser 190

Lys Pro SerLys Pro Ser

Asp Lys ThrAsp Lys Thr

Gly Pro SerGly Pro Ser

240240

Ile Ser ArgIle Ser Arg

255255

Glu Asp Pro 270Glu Asp Pro 270

His Asn AlaHis Asn Ala

Arg Val ValArg Val Val

Lys Glu TyrLys Glu Tyr

320320

Glu Lys ThrGlu Lys Thr

335335

Tyr Thr Leu 350Tyr Thr Leu 350

Leu Thr CysLeu Thr Cys

Trp Glu SerTrp Glu Ser

Val Leu AspVal Leu Asp

400400

Asp Lys Ser 415Asp Lys Ser 415

His Glu Ala 430His Glu Ala 430

- 986 044346- 986 044346

Leu His Asn His TyrLeu His Asn His Tyr

435435

Thr Gln Lys Ser Leu 440Thr Gln Lys Ser Leu 440

Ser Leu Ser Pro Gly 445Ser Leu Ser Pro Gly 445

Gly Gly Gly Gly Ser 450Gly Gly Gly Gly Ser 450

Gly Gly Gly Gly Ser 455Gly Gly Gly Gly Ser 455

Asp Thr Gln Glu Lys 460Asp Thr Gln Glu Lys 460

Val Arg Ala Met Val 465Val Arg Ala Met Val 465

Gly Ser Asp Val Val 470Gly Ser Asp Val Val 470

Leu Ser Cys Ala Cys 475Leu Ser Cys Ala Cys 475

Glu Gly Ser Arg PheGlu Gly Ser Arg Phe

485485

Asp Leu Asn Asp ValAsp Leu Asn Asp Val

490490

Tyr Val Tyr Trp GlnTyr Val Tyr Trp Gln

495495

Ser Glu Ser Lys ThrSer Glu Ser Lys Thr

500500

Val Val Thr Tyr HisVal Val Thr Tyr His

505505

Ile Pro Gln His SerIle Pro Gln His Ser

510510

Leu Glu Tyr Val AspLeu Glu Tyr Val Asp

515515

Ser Arg Tyr Arg Asn 520Ser Arg Tyr Arg Asn 520

Arg Ala Leu Met Ser 525Arg Ala Leu Met Ser 525

Ala Gly Met Leu ArgAla Gly Met Leu Arg

530530

Gly Asp Phe Ser LeuGly Asp Phe Ser Leu

535535

Arg Leu Phe Asn ValArg Leu Phe Asn Val

540540

Pro Gln Asp Glu Gln 545Pro Gln Asp Glu Gln 545

Lys Phe His Cys Leu 550Lys Phe His Cys Leu 550

Val Leu Ser Arg Ser 555Val Leu Ser Arg Ser 555

Gly Phe Gln Glu ValGly Phe Gln Glu Val

565565

Leu Ser Asp Glu ValLeu Ser Asp Glu Val

570570

Thr Leu Arg Val AlaThr Leu Arg Val Ala

575575

LysLys

GluGlu

Pro 480Pro 480

ThrThr

SerSer

ProPro

ThrThr

Leu 560Leu 560

AlaAla

Asn Phe Ser ValAsn Phe Ser Val

580 <210> 876 <211> 580 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>580 <210> 876 <211> 580 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> Атезолизумаб HC - ICOSL v39 IgV <400> 876<223> Atezolizumab HC - ICOSL v39 IgV <400> 876

Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly 1 5Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly 1 5

Gly Leu Val Gln Pro Gly 10 15Gly Leu Val Gln Pro Gly 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser 20 25Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser 20 25

Trp Ile His Trp Val Arg Gln Ala ProTrp Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro

4040

Gly Phe Thr Phe Ser Asp 30Gly Phe Thr Phe Ser Asp 30

Gly Lys Gly Leu Glu Trp 45Gly Lys Gly Leu Glu Trp 45

GlyGly

SerSer

ValVal

- 987 044346- 987 044346

Ala Trp Ile Ser Pro 50Ala Trp Ile Ser Pro 50

Tyr Gly Gly Ser Thr 55Tyr Gly Gly Ser Thr 55

Tyr Tyr Ala Asp Ser 60Tyr Tyr Ala Asp Ser 60

Lys Gly Arg Phe Thr 65Lys Gly Arg Phe Thr 65

Ile Ser Ala Asp Thr 70Ile Ser Ala Asp Thr 70

Ser Lys Asn Thr Ala 75Ser Lys Asn Thr Ala 75

Leu Gln Met Asn SerLeu Gln Met Asn Ser

Leu Arg Ala Glu Asp 90Leu Arg Ala Glu Asp 90

Thr Ala Val Tyr Tyr 95Thr Ala Val Tyr Tyr 95

Ala Arg Arg His TrpAla Arg Arg His Trp

100100

Pro Gly Gly Phe AspPro Gly Gly Phe Asp

105105

Tyr Trp Gly Gln GlyTyr Trp Gly Gln Gly

110110

Leu Val Thr Val SerLeu Val Thr Val Ser

115115

Ser Ala Ser Thr LysSer Ala Ser Thr Lys

120120

Gly Pro Ser Val PheGly Pro Ser Val Phe

125125

Leu Ala Pro Ser SerLeu Ala Pro Ser Ser

130130

Lys Ser Thr Ser Gly 135Lys Ser Thr Ser Gly 135

Gly Thr Ala Ala Leu 140Gly Thr Ala Ala Leu 140

Cys Leu Val Lys Asp 145Cys Leu Val Lys Asp 145

Tyr Phe Pro Glu Pro 150Tyr Phe Pro Glu Pro 150

Val Thr Val Ser Trp 155Val Thr Val Ser Trp 155

Ser Gly Ala Leu ThrSer Gly Ala Leu Thr

165165

Ser Gly Val His ThrSer Gly Val His Thr

170170

Phe Pro Ala Val LeuPhe Pro Ala Val Leu

175175

Ser Ser Gly Leu TyrSer Ser Gly Leu Tyr

180180

Ser Leu Ser Ser ValSer Leu Ser Ser Val

185185

Val Thr Val Pro SerVal Thr Val Pro Ser

190190

Ser Leu Gly Thr GlnSer Leu Gly Thr Gln

195195

Thr Tyr Ile Cys Asn 200Thr Tyr Ile Cys Asn 200

Val Asn His Lys ProVal Asn His Lys Pro

205205

Asn Thr Lys Val Asp 210Asn Thr Lys Val Asp 210

Lys Lys Val Glu ProLys Lys Val Glu Pro

215215

Lys Ser Cys Asp LysLys Ser Cys Asp Lys

220220

His Thr Cys Pro Pro 225His Thr Cys Pro Pro 225

Cys Pro Ala Pro Glu 230Cys Pro Ala Pro Glu 230

Leu Leu Gly Gly Pro 235Leu Leu Gly Gly Pro 235

Val Phe Leu Phe ProVal Phe Leu Phe Pro

245245

Pro Lys Pro Lys AspPro Lys Pro Lys Asp

250250

Thr Leu Met Ile SerThr Leu Met Ile Ser

255255

Thr Pro Glu Val ThrThr Pro Glu Val Thr

260260

Cys Val Val Val AspCys Val Val Val Asp

265265

Val Ser His Glu AspVal Ser His Glu Asp

270270

Glu Val Lys Phe AsnGlu Val Lys Phe Asn

275275

Trp Tyr Val Asp Gly 280Trp Tyr Val Asp Gly 280

Val Glu Val His AsnVal Glu Val His Asn

285285

Lys Thr Lys Pro ArgLys Thr Lys Pro Arg

290290

Glu Glu Gln Tyr AlaGlu Glu Gln Tyr Ala

295295

Ser Thr Tyr Arg ValSer Thr Tyr Arg Val

300300

ValVal

Tyr 80Tyr 80

CysCys

ThrThr

ProPro

GlyGly

Asn 160Asn 160

GlnGln

SerSer

SerSer

ThrThr

Ser 240Ser 240

ArgArg

ProPro

AlaAla

ValVal

- 988 044346- 988 044346

Ser 305Ser 305

LysLys

IleIle

ProPro

LeuLeu

Asn 385Asn 385

SerSer

ArgArg

LeuLeu

GlyGly

Val 465Val 465

GluGlu

SerSer

LeuLeu

AlaAla

Pro 545Pro 545

Val Leu ThrVal Leu Thr

Cys Lys ValCys Lys Val

Ser Lys AlaSer Lys Ala

340340

Pro Ser ArgPro Ser Arg

355355

Val Lys Gly 370Val Lys Gly 370

Gly Gln ProGly Gln Pro

Asp Gly SerAsp Gly Ser

Trp Gln GlnTrp Gln Gln

420420

His Asn HisHis Asn His

435435

Gly Gly Gly 450Gly Gly Gly 450

Arg Ala MetArg Ala Met

Gly Ser ArgGly Ser Arg

Glu Ser LysGlu Ser Lys

500500

Glu Tyr ValGlu Tyr Val

515515

Gly Met Leu 530Gly Met Leu 530

Gln Asp GluGln Asp Glu

Val Leu HisVal Leu His

310310

Gln Asp TrpGln Asp Trp

Leu Asn Gly 315Leu Asn Gly 315

Lys Glu TyrLys Glu Tyr

320320

Ser Asn Lys 325Ser Asn Lys 325

Lys Gly GlnLys Gly Gln

Glu Glu MetGlu Glu Met

Phe Tyr ProPhe Tyr Pro

375375

Glu Asn AsnGlu Asn Asn

390390

Phe Phe Leu 405Phe Phe Leu 405

Gly Asn ValGly Asn Val

Tyr Thr GlnTyr Thr Gln

Ser Gly GlySer Gly Gly

455455

Val Gly SerVal Gly Ser

470470

Phe Asp Leu 485Phe Asp Leu 485

Thr Val ValThr Val Val

Asp Ser ArgAsp Ser Arg

Arg Gly AspArg Gly Asp

535535

Gln Lys PheGln Lys Phe

550550

Ala Leu ProAla Leu Pro

330330

Ala Pro IleAla Pro Ile

Glu Lys ThrGlu Lys Thr

335335

Pro Arg GluPro Arg Glu

345345

Pro Gln ValPro Gln Val

Tyr Thr Leu 350Tyr Thr Leu 350

Thr Lys Asn 360Thr Lys Asn 360

Gln Val SerGln Val Ser

365365

Leu Thr CysLeu Thr Cys

Ser Asp IleSer Asp Ile

Tyr Lys ThrTyr Lys Thr

Tyr Ser LysTyr Ser Lys

410410

Phe Ser Cys 425Phe Ser Cys 425

Lys Ser Leu 440Lys Ser Leu 440

Gly Gly SerGly Gly Ser

Asp Val GluAsp Val Glu

Asn Asp ValAsn Asp Val

490490

Thr Tyr HisThr Tyr His

505505

Tyr Arg Asn 520Tyr Arg Asn 520

Phe Ser LeuPhe Ser Leu

His Cys LeuHis Cys Leu

Ala Val GluAla Val Glu

380380

Thr Pro Pro 395Thr Pro Pro 395

Leu Thr ValLeu Thr Val

Ser Val MetSer Val Met

Ser Leu SerSer Leu Ser

445445

Asp Thr GlnAsp Thr Gln

460460

Leu Ser Cys 475Leu Ser Cys 475

Tyr Val TyrTyr Val Tyr

Ile Pro GlnIle Pro Gln

Arg Ala LeuArg Ala Leu

525525

Arg Leu PheArg Leu Phe

540540

Val Leu Ser 555Val Leu Ser 555

Trp Glu SerTrp Glu Ser

Val Leu AspVal Leu Asp

400400

Asp Lys Ser 415Asp Lys Ser 415

His Glu Ala 430His Glu Ala 430

Pro Gly LysPro Gly Lys

Glu Lys GluGlu Lys Glu

Ala Cys ProAla Cys Pro

480480

Trp Gln ThrTrp Gln Thr

495495

His Ser Ser 510His Ser Ser 510

Met Ser ProMet Ser Pro

Asn Val ThrAsn Val Thr

Arg Ser LeuArg Ser Leu

560560

- 989 044346- 989 044346

Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu Val Thr Leu His Val AlaGly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu Val Thr Leu His Val Ala

565 570 575565 570 575

AlaAla

Asn Phe Ser ValAsn Phe Ser Val

580 <210> 877 <211> 346 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>580 <210> 877 <211> 346 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> Атезолизумаб LC - ICOSL WT IgV < 400> 877< 223> Atezolizumab LC - ICOSL WT IgV < 400> 877

Asp Ile Gln Met Thr 1 5Asp Ile Gln Met Thr 1 5

Gln Ser Pro Ser SerGln Ser Pro Ser Ser

Leu Ser Ala Ser ValLeu Ser Ala Ser Val

Asp Arg Val Thr IleAsp Arg Val Thr Ile

Thr Cys Arg Ala SerThr Cys Arg Ala Ser

Gln Asp Val Ser Thr 30Gln Asp Val Ser Thr 30

Val Ala Trp Tyr Gln 35Val Ala Trp Tyr Gln 35

Gln Lys Pro Gly Lys 40Gln Lys Pro Gly Lys 40

Ala Pro Lys Leu Leu 45Ala Pro Lys Leu Leu 45

Tyr Ser Ala Ser Phe 50Tyr Ser Ala Ser Phe 50

Leu Tyr Ser Gly Val 55Leu Tyr Ser Gly Val 55

Pro Ser Arg Phe Ser 60Pro Ser Arg Phe Ser 60

Ser Gly Ser Gly Thr 65Ser Gly Ser Gly Thr 65

Asp Phe Thr Leu Thr 70Asp Phe Thr Leu Thr 70

Ile Ser Ser Leu Gln 75Ile Ser Ser Leu Gln 75

Glu Asp Phe Ala Thr 85Glu Asp Phe Ala Thr 85

Tyr Tyr Cys Gln Gln 90Tyr Tyr Cys Gln Gln 90

Tyr Leu Tyr His Pro 95Tyr Leu Tyr His Pro 95

Thr Phe Gly Gln GlyThr Phe Gly Gln Gly

100100

Thr Lys Val Glu IleThr Lys Val Glu Ile

105105

Lys Arg Thr Val AlaLys Arg Thr Val Ala

110110

Pro Ser Val Phe IlePro Ser Val Phe Ile

115115

Phe Pro Pro Ser AspPhe Pro Pro Ser Asp

120120

Glu Gln Leu Lys Ser 125Glu Gln Leu Lys Ser 125

Thr Ala Ser Val ValThr Ala Ser Val Val

130130

Cys Leu Leu Asn AsnCys Leu Leu Asn Asn

135135

Phe Tyr Pro Arg Glu 140Phe Tyr Pro Arg Glu 140

Lys Val Gln Trp Lys 145Lys Val Gln Trp Lys 145

Val Asp Asn Ala Leu 150Val Asp Asn Ala Leu 150

Gln Ser Gly Asn Ser 155Gln Ser Gly Asn Ser 155

Glu Ser Val Thr GluGlu Ser Val Thr Glu

165165

Gln Asp Ser Lys AspGln Asp Ser Lys Asp

170170

Ser Thr Tyr Ser LeuSer Thr Tyr Ser Leu

175175

GlyGly

AlaAla

IleIle

GlyGly

Pro 80Pro 80

AlaAla

AlaAla

GlyGly

AlaAla

Gln 160Gln 160

SerSer

- 990 044346- 990 044346

Ser Thr LeuSer Thr Leu

Thr Leu Ser 180Thr Leu Ser 180

Lys Ala AspLys Ala Asp

185185

Tyr Glu LysTyr Glu Lys

His Lys ValHis Lys Val

190190

Ala Cys GluAla Cys Glu

195195

Val Thr HisVal Thr His

Gln Gly LeuGln Gly Leu

200200

Ser Ser ProSer Ser Pro

Val Thr Lys 205Val Thr Lys 205

Phe Asn ArgPhe Asn Arg

210210

Gly Glu CysGly Glu Cys

Gly Gly Gly 215Gly Gly Gly 215

Gly Ser GlyGly Ser Gly

220220

Gly Gly GlyGly Gly Gly

Asp Thr Gln 225Asp Thr Gln 225

Glu Lys GluGlu Lys Glu

230230

Val Arg AlaVal Arg Ala

Met Val GlyMet Val Gly

235235

Ser Asp ValSer Asp Val

Leu Ser CysLeu Ser Cys

Ala Cys ProAla Cys Pro

245245

Glu Gly SerGlu Gly Ser

Arg Phe Asp 250Arg Phe Asp 250

Leu Asn AspLeu Asn Asp

255255

Tyr Val TyrTyr Val Tyr

Trp Gln Thr 260Trp Gln Thr 260

Ser Glu SerSer Glu Ser

265265

Lys Thr ValLys Thr Val

Val Thr TyrVal Thr Tyr

270270

Ile Pro GlnIle Pro Gln

275275

Asn Ser SerAsn Ser Ser

Leu Glu AsnLeu Glu Asn

280280

Val Asp SerVal Asp Ser

Arg Tyr Arg 285Arg Tyr Arg 285

Arg Ala LeuArg Ala Leu

290290

Met Ser ProMet Ser Pro

Ala Gly Met 295Ala Gly Met 295

Leu Arg GlyLeu Arg Gly

300300

Asp Phe SerAsp Phe Ser

Arg Leu Phe 305Arg Leu Phe 305

Asn Val ThrAsn Val Thr

310310

Pro Gln AspPro Gln Asp

Glu Gln LysGlu Gln Lys

315315

Phe His CysPhe His Cys

Val Leu SerVal Leu Ser

Gln Ser LeuGln Ser Leu

325325

Gly Phe GlnGly Phe Gln

Glu Val Leu 330Glu Val Leu 330

Ser Val GluSer Val Glu

335335

TyrTyr

SerSer

SerSer

Glu 240Glu 240

ValVal

HisHis

AsnAsn

LeuLeu

Leu 320Leu 320

ValVal

Thr Leu HisThr Leu His

Val Ala Ala 340Val Ala Ala 340

Asn Phe SerAsn Phe Ser

345345

Val <210> 878 <211> 346 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Val <210> 878 <211> 346 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> Атезолизумаб LC - ICOSL v56 IgV <400> 878<223> Atezolizumab LC - ICOSL v56 IgV <400> 878

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser ValAsp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val

5 10 155 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala 20 25Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala 20 25

Ser Gln Asp ValSer Gln Asp Val

Ser Thr 30Ser Thr 30

GlyGly

AlaAla

- 991 044346- 991 044346

Val Ala Trp Tyr Gln 35Val Ala Trp Tyr Gln 35

Gln Lys Pro Gly Lys 40Gln Lys Pro Gly Lys 40

Ala Pro Lys Leu Leu 45Ala Pro Lys Leu Leu 45

Tyr Ser Ala Ser Phe 50Tyr Ser Ala Ser Phe 50

Leu Tyr Ser Gly Val 55Leu Tyr Ser Gly Val 55

Pro Ser Arg Phe Ser 60Pro Ser Arg Phe Ser 60

Ser Gly Ser Gly Thr 65Ser Gly Ser Gly Thr 65

Asp Phe Thr Leu Thr 70Asp Phe Thr Leu Thr 70

Ile Ser Ser Leu Gln 75Ile Ser Ser Leu Gln 75

Glu Asp Phe Ala Thr 85Glu Asp Phe Ala Thr 85

Tyr Tyr Cys Gln Gln 90Tyr Tyr Cys Gln Gln 90

Tyr Leu Tyr His Pro 95Tyr Leu Tyr His Pro 95

Thr Phe Gly Gln GlyThr Phe Gly Gln Gly

100100

Thr Lys Val Glu IleThr Lys Val Glu Ile

105105

Lys Arg Thr Val AlaLys Arg Thr Val Ala

110110

Pro Ser Val Phe IlePro Ser Val Phe Ile

115115

Phe Pro Pro Ser Asp 120Phe Pro Pro Ser Asp 120

Glu Gln Leu Lys Ser 125Glu Gln Leu Lys Ser 125

Thr Ala Ser Val ValThr Ala Ser Val Val

130130

Cys Leu Leu Asn AsnCys Leu Leu Asn Asn

135135

Phe Tyr Pro Arg GluPhe Tyr Pro Arg Glu

140140

Lys Val Gln Trp Lys 145Lys Val Gln Trp Lys 145

Val Asp Asn Ala Leu 150Val Asp Asn Ala Leu 150

Gln Ser Gly Asn Ser 155Gln Ser Gly Asn Ser 155

Glu Ser Val Thr GluGlu Ser Val Thr Glu

165165

Gln Asp Ser Lys AspGln Asp Ser Lys Asp

170170

Ser Thr Tyr Ser LeuSer Thr Tyr Ser Leu

175175

Ser Thr Leu Thr LeuSer Thr Leu Thr Leu

180180

Ser Lys Ala Asp TyrSer Lys Ala Asp Tyr

185185

Glu Lys His Lys ValGlu Lys His Lys Val

190190

Ala Cys Glu Val Thr 195Ala Cys Glu Val Thr 195

His Gln Gly Leu Ser 200His Gln Gly Leu Ser 200

Ser Pro Val Thr LysSer Pro Val Thr Lys

205205

Phe Asn Arg Gly GluPhe Asn Arg Gly Glu

210210

Cys Gly Gly Gly GlyCys Gly Gly Gly Gly

215215

Ser Gly Gly Gly GlySer Gly Gly Gly Gly

220220

Asp Thr Gln Glu Lys 225Asp Thr Gln Glu Lys 225

Glu Val Arg Ala Met 230Glu Val Arg Ala Met 230

Val Gly Ser Asp Val 235Val Gly Ser Asp Val 235

Leu Ser Cys Ala CysLeu Ser Cys Ala Cys

245245

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

250250

Phe Asp Leu Asn AspPhe Asp Leu Asn Asp

255255

Tyr Val Tyr Trp GlnTyr Val Tyr Trp Gln

260260

Thr Ser Glu Ser LysThr Ser Glu Ser Lys

265265

Thr Val Val Thr TyrThr Val Val Thr Tyr

270270

Ile Pro Gln His SerIle Pro Gln His Ser

275275

Ser Leu Glu Tyr ValSer Leu Glu Tyr Val

280280

Asp Ser Arg Tyr ArgAsp Ser Arg Tyr Arg

285285

IleIle

GlyGly

Pro 80Pro 80

AlaAla

AlaAla

GlyGly

AlaAla

Gln 160Gln 160

SerSer

TyrTyr

SerSer

SerSer

Val 240Val 240

ValVal

HisHis

AsnAsn

- 992 044346- 992 044346

Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu ArgArg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg

290 295290 295

Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu GlnArg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln

305 310 315305 310 315

Gly Asp Phe Ser 300Gly Asp Phe Ser 300

Lys Phe His CysLys Phe His Cys

Val Leu Ser Arg Ser Leu Gly Phe Gln Glu ValVal Leu Ser Arg Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val

325 330325 330

Leu Ser Asp GluLeu Ser Asp Glu

335335

LeuLeu

Leu 320Leu 320

ValVal

Thr Leu Arg Val Ala Ala Asn Phe Ser ValThr Leu Arg Val Ala Ala Asn Phe Ser Val

340 345 <210> 879 <211> 346 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>340 345 <210> 879 <211> 346 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> Атезолизумаб LC - ICOSL v39 IgV < 400> 879< 223> Atezolizumab LC - ICOSL v39 IgV < 400> 879

Asp Ile Gln Met Thr 1 5Asp Ile Gln Met Thr 1 5

Gln Ser Pro Ser SerGln Ser Pro Ser Ser

Leu Ser Ala Ser ValLeu Ser Ala Ser Val

Asp Arg Val Thr IleAsp Arg Val Thr Ile

Thr Cys Arg Ala SerThr Cys Arg Ala Ser

Gln Asp Val Ser Thr 30Gln Asp Val Ser Thr 30

Val Ala Trp Tyr Gln 35Val Ala Trp Tyr Gln 35

Gln Lys Pro Gly Lys 40Gln Lys Pro Gly Lys 40

Ala Pro Lys Leu Leu 45Ala Pro Lys Leu Leu 45

Tyr Ser Ala Ser Phe 50Tyr Ser Ala Ser Phe 50

Leu Tyr Ser Gly Val 55Leu Tyr Ser Gly Val 55

Pro Ser Arg Phe Ser 60Pro Ser Arg Phe Ser 60

Ser Gly Ser Gly Thr 65Ser Gly Ser Gly Thr 65

Asp Phe Thr Leu Thr 70Asp Phe Thr Leu Thr 70

Ile Ser Ser Leu Gln 75Ile Ser Ser Leu Gln 75

Glu Asp Phe Ala Thr 85Glu Asp Phe Ala Thr 85

Tyr Tyr Cys Gln Gln 90Tyr Tyr Cys Gln Gln 90

Tyr Leu Tyr His Pro 95Tyr Leu Tyr His Pro 95

Thr Phe Gly Gln GlyThr Phe Gly Gln Gly

100100

Thr Lys Val Glu IleThr Lys Val Glu Ile

105105

Lys Arg Thr Val AlaLys Arg Thr Val Ala

110110

Pro Ser Val Phe IlePro Ser Val Phe Ile

115115

Phe Pro Pro Ser Asp 120Phe Pro Pro Ser Asp 120

Glu Gln Leu Lys Ser 125Glu Gln Leu Lys Ser 125

Thr Ala Ser Val ValThr Ala Ser Val Val

130130

Cys Leu Leu Asn AsnCys Leu Leu Asn Asn

135135

Phe Tyr Pro Arg GluPhe Tyr Pro Arg Glu

140140

GlyGly

AlaAla

IleIle

GlyGly

Pro 80Pro 80

AlaAla

AlaAla

GlyGly

AlaAla

- 993 044346- 993 044346

Lys Val Gln 145Lys Val Gln 145

Trp Lys ValTrp Lys Val

150150

Asp Asn AlaAsp Asn Ala

Leu Gln SerLeu Gln Ser

155155

Gly Asn SerGly Asn Ser

Glu Ser ValGlu Ser Val

Thr Glu GlnThr Glu Gln

165165

Asp Ser LysAsp Ser Lys

Asp Ser Thr 170Asp Ser Thr 170

Tyr Ser LeuTyr Ser Leu

175175

Ser Thr LeuSer Thr Leu

Thr Leu Ser 180Thr Leu Ser 180

Lys Ala AspLys Ala Asp

185185

Tyr Glu LysTyr Glu Lys

His Lys ValHis Lys Val

190190

Ala Cys GluAla Cys Glu

195195

Val Thr HisVal Thr His

Gln Gly LeuGln Gly Leu

200200

Ser Ser ProSer Ser Pro

Val Thr Lys 205Val Thr Lys 205

Phe Asn ArgPhe Asn Arg

210210

Gly Glu CysGly Glu Cys

Gly Gly Gly 215Gly Gly Gly 215

Gly Ser GlyGly Ser Gly

220220

Gly Gly GlyGly Gly Gly

Asp Thr Gln 225Asp Thr Gln 225

Glu Lys GluGlu Lys Glu

230230

Val Arg AlaVal Arg Ala

Met Val GlyMet Val Gly

235235

Ser Asp ValSer Asp Val

Leu Ser CysLeu Ser Cys

Ala Cys ProAla Cys Pro

245245

Glu Gly SerGlu Gly Ser

Arg Phe Asp 250Arg Phe Asp 250

Leu Asn AspLeu Asn Asp

255255

Tyr Val TyrTyr Val Tyr

Trp Gln Thr 260Trp Gln Thr 260

Ser Glu SerSer Glu Ser

265265

Lys Thr ValLys Thr Val

Val Thr TyrVal Thr Tyr

270270

Ile Pro GlnIle Pro Gln

275275

His Ser SerHis Ser Ser

Leu Glu TyrLeu Glu Tyr

280280

Val Asp SerVal Asp Ser

Arg Tyr Arg 285Arg Tyr Arg 285

Arg Ala LeuArg Ala Leu

290290

Met Ser ProMet Ser Pro

Ala Gly Met 295Ala Gly Met 295

Leu Arg GlyLeu Arg Gly

300300

Asp Phe SerAsp Phe Ser

Arg Leu Phe 305Arg Leu Phe 305

Asn Val ThrAsn Val Thr

310310

Pro Gln AspPro Gln Asp

Glu Gln LysGlu Gln Lys

315315

Phe His CysPhe His Cys

Val Leu SerVal Leu Ser

Arg Ser LeuArg Ser Leu

325325

Gly Phe GlnGly Phe Gln

Glu Val Leu 330Glu Val Leu 330

Ser Val GluSer Val Glu

335335

Gln 160Gln 160

SerSer

TyrTyr

SerSer

SerSer

Glu 240Glu 240

ValVal

HisHis

AsnAsn

LeuLeu

Leu 320Leu 320

ValVal

Thr Leu HisThr Leu His

Val Ala Ala 340Val Ala Ala 340

Asn Phe SerAsn Phe Ser

345345

Val <210> 880 <211> 696 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Val <210> 880 <211> 696 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL WT ECD - Атезолизумаб HC < 400> 880< 223> ICOSL WT ECD - Atezolizumab HC < 400> 880

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp ValAsp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val

GluGlu

- 994 044346- 994 044346

1515

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln Asn Ser 50Ile Pro Gln Asn Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr PheAsp Glu Leu Thr Phe

135135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

195195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr Gly 235Asn Ala Ala Thr Gly 235

Gly Gly Ser Gly GlyGly Gly Ser Gly Gly

245245

Gly Gly Ser Glu ValGly Gly Ser Glu Val

250250

Gln Leu Val Glu SerGln Leu Val Glu Ser

255255

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Gly 240Gly 240

GlyGly

- 995 044346- 995 044346

GlyGly

SerSer

ProPro

Ser 305Ser 305

AspAsp

GluGlu

PhePhe

ThrThr

Ser 385Ser 385

GluGlu

HisHis

SerSer

CysCys

Glu 465Glu 465

ProPro

LysLys

Gly Leu ValGly Leu Val

260260

Gly Phe ThrGly Phe Thr

275275

Gly Lys Gly 290Gly Lys Gly 290

Thr Tyr TyrThr Tyr Tyr

Thr Ser LysThr Ser Lys

Asp Thr AlaAsp Thr Ala

340340

Asp Tyr TrpAsp Tyr Trp

355355

Lys Gly Pro 370Lys Gly Pro 370

Gly Gly ThrGly Gly Thr

Pro Val ThrPro Val Thr

Thr Phe ProThr Phe Pro

420420

Val Val ThrVal Val Thr

435435

Asn Val Asn 450Asn Val Asn 450

Pro Lys SerPro Lys Ser

Glu Leu LeuGlu Leu Leu

Asp Thr LeuAsp Thr Leu

500500

Gln Pro GlyGln Pro Gly

Phe Ser AspPhe Ser Asp

Leu Glu TrpLeu Glu Trp

295295

Ala Asp SerAla Asp Ser

310310

Asn Thr Ala 325Asn Thr Ala 325

Val Tyr TyrVal Tyr Tyr

Gly Gln GlyGly Gln Gly

Ser Val PheSer Val Phe

375375

Ala Ala LeuAla Ala Leu

390390

Val Ser Trp 405Val Ser Trp 405

Ala Val LeuAla Val Leu

Val Pro SerVal Pro Ser

His Lys Pro 455His Lys Pro 455

Cys Asp LysCys Asp Lys

470470

Gly Gly Pro 485Gly Gly Pro 485

Met Ile SerMet Ile Ser

Gly Ser LeuGly Ser Leu

265265

Ser Trp Ile 280Ser Trp Ile 280

Val Ala TrpVal Ala Trp

Val Lys GlyVal Lys Gly

Tyr Leu GlnTyr Leu Gln

330330

Cys Ala ArgCys Ala Arg

345345

Thr Leu Val 360Thr Leu Val 360

Pro Leu AlaPro Leu Ala

Gly Cys LeuGly Cys Leu

Asn Ser GlyAsn Ser Gly

410410

Gln Ser SerGln Ser Ser

425425

Ser Ser Leu 440Ser Ser Leu 440

Ser Asn ThrSer Asn Thr

Thr His ThrThr His Thr

Ser Val PheSer Val Phe

490490

Arg Thr ProArg Thr Pro

505505

Arg Leu SerArg Leu Ser

His Trp ValHis Trp Val

285285

Ile Ser ProIle Ser Pro

300300

Arg Phe Thr 315Arg Phe Thr 315

Met Asn SerMet Asn Ser

Arg His TrpArg His Trp

Thr Val SerThr Val Ser

365365

Pro Ser SerPro Ser Ser

380380

Val Lys Asp 395Val Lys Asp 395

Ala Leu ThrAla Leu Thr

Gly Leu TyrGly Leu Tyr

Gly Thr GlnGly Thr Gln

445445

Lys Val AspLys Val Asp

460460

Cys Pro Pro 475Cys Pro Pro 475

Leu Phe ProLeu Phe Pro

Glu Val ThrGlu Val Thr

Cys Ala Ala 270Cys Ala Ala 270

Arg Gln AlaArg Gln Ala

Tyr Gly GlyTyr Gly Gly

Ile Ser AlaIle Ser Ala

320320

Leu Arg AlaLeu Arg Ala

335335

Pro Gly Gly 350Pro Gly Gly 350

Ser Ala SerSer Ala Ser

Lys Ser ThrLys Ser Thr

Tyr Phe ProTyr Phe Pro

400400

Ser Gly ValSer Gly Val

415415

Ser Leu Ser 430Ser Leu Ser 430

Thr Tyr IleThr Tyr Ile

Lys Lys ValLys Lys Val

Cys Pro AlaCys Pro Ala

480480

Pro Lys ProPro Lys Pro

495495

Cys Val Val 510Cys Val Val 510

- 996 044346- 996 044346

Val Asp Val Ser His 515Val Asp Val Ser His 515

Glu Asp Pro Glu ValGlu Asp Pro Glu Val

520520

Lys Phe Asn Trp TyrLys Phe Asn Trp Tyr

525525

Asp Gly Val Glu ValAsp Gly Val Glu Val

530530

His Asn Ala Lys ThrHis Asn Ala Lys Thr

535535

Lys Pro Arg Glu GluLys Pro Arg Glu Glu

540540

Tyr Ala Ser Thr Tyr 545Tyr Ala Ser Thr Tyr 545

Arg Val Val Ser Val 550Arg Val Val Ser Val 550

Leu Thr Val Leu His 555Leu Thr Val Leu His 555

Asp Trp Leu Asn GlyAsp Trp Leu Asn Gly

565565

Lys Glu Tyr Lys CysLys Glu Tyr Lys Cys

570570

Lys Val Ser Asn LysLys Val Ser Asn Lys

575575

Leu Pro Ala Pro IleLeu Pro Ala Pro Ile

580580

Glu Lys Thr Ile SerGlu Lys Thr Ile Ser

585585

Lys Ala Lys Gly GlnLys Ala Lys Gly Gln

590590

Arg Glu Pro Gln ValArg Glu Pro Gln Val

595595

Tyr Thr Leu Pro Pro 600Tyr Thr Leu Pro Pro 600

Ser Arg Glu Glu Met 605Ser Arg Glu Glu Met 605

Lys Asn Gln Val Ser 610Lys Asn Gln Val Ser 610

Leu Thr Cys Leu ValLeu Thr Cys Leu Val

615615

Lys Gly Phe Tyr ProLys Gly Phe Tyr Pro

620620

Asp Ile Ala Val Glu 625Asp Ile Ala Val Glu 625

Trp Glu Ser Asn Gly 630Trp Glu Ser Asn Gly 630

Gln Pro Glu Asn Asn 635Gln Pro Glu Asn Asn 635

Lys Thr Thr Pro ProLys Thr Thr Pro Pro

645645

Val Leu Asp Ser AspVal Leu Asp Ser Asp

650650

Gly Ser Phe Phe LeuGly Ser Phe Phe Leu

655655

Ser Lys Leu Thr ValSer Lys Leu Thr Val

660660

Asp Lys Ser Arg Trp 6 65Asp Lys Ser Arg Trp 6 65

Gln Gln Gly Asn ValGln Gln Gly Asn Val

670670

Ser Cys Ser Val MetSer Cys Ser Val Met

675675

His Glu Ala Leu HisHis Glu Ala Leu His

680680

Asn His Tyr Thr Gln 685Asn His Tyr Thr Gln 685

ValVal

GlnGln

Gln 560Gln 560

AlaAla

ProPro

ThrThr

SerSer

Tyr 640Tyr 640

TyrTyr

PhePhe

LysLys

Ser Leu Ser Leu SerSer Leu Ser Leu Ser

690690

Pro Gly LysPro Gly Lys

695 <210> 881 <211> 696 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>695 <210> 881 <211> 696 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v56 ECD - Атезолизумаб HC < 400> 881< 223> ICOSL v56 ECD - Atezolizumab HC < 400> 881

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15

ValVal

- 997 044346- 997 044346

LeuLeu

TyrTyr

IleIle

Arg 65Arg 65

ArgArg

ValVal

ThrThr

HisHis

Gly 145Gly 145

LeuLeu

GlyGly

ValVal

ThrThr

Thr 225Thr 225

GlyGly

GlyGly

Ser Cys Ala Cys Pro 20Ser Cys Ala Cys Pro 20

Glu Gly Ser Arg Phe 25Glu Gly Ser Arg Phe 25

Asp Leu Asn Asp Val 30Asp Leu Asn Asp Val 30

Val Tyr Trp Gln ThrVal Tyr Trp Gln Thr

Pro Gln His Ser Ser 50Pro Gln His Ser Ser 50

Ala Leu Met Ser ProAla Leu Met Ser Pro

Leu Phe Asn Val ThrLeu Phe Asn Val Thr

Leu Ser Arg Ser LeuLeu Ser Arg Ser Leu

100100

Leu Arg Val Ala Ala 115Leu Arg Val Ala Ala 115

Ser Pro Ser Gln Asp 130Ser Pro Ser Gln Asp 130

Tyr Pro Arg Pro AsnTyr Pro Arg Pro Asn

150150

Leu Asp Gln Ala LeuLeu Asp Gln Ala Leu

165165

Leu Tyr Asp Val Val 180Leu Tyr Asp Val Val 180

Asn Ile Gly Cys ArgAsn Ile Gly Cys Arg

195195

Val Gly Ser Gln Thr 210Val Gly Ser Gln Thr 210

Glu Asn Pro Val SerGlu Asn Pro Val Ser

230230

Gly Ser Gly Gly GlyGly Ser Gly Gly Gly

245245

Gly Leu Val Gln Pro 260Gly Leu Val Gln Pro 260

Ser Glu Ser Lys Thr 40Ser Glu Ser Lys Thr 40

Leu Glu Tyr Val Asp 55Leu Glu Tyr Val Asp 55

Ala Gly Met Leu ArgAla Gly Met Leu Arg

Pro Gln Asp Glu Gln 90Pro Gln Asp Glu Gln 90

Gly Phe Gln Glu Val 105Gly Phe Gln Glu Val 105

Asn Phe Ser Val ProAsn Phe Ser Val Pro

120120

Glu Leu Thr Phe Thr 135Glu Leu Thr Phe Thr 135

Val Cys Trp Ile AsnVal Cys Trp Ile Asn

155155

Gln Asn Asp Thr ValGln Asn Asp Thr Val

170170

Ser Val Leu Arg IleSer Val Leu Arg Ile

185185

Ile Glu Asn Val LeuIle Glu Asn Val Leu

200200

Gly Asn Asp Ile Gly 215Gly Asn Asp Ile Gly 215

Thr Gly Glu Lys AsnThr Gly Glu Lys Asn

235235

Gly Ser Glu Val GlnGly Ser Glu Val Gln

250250

Gly Gly Ser Leu ArgGly Gly Ser Leu Arg

265265

Val Val Thr Tyr His 45Val Val Thr Tyr His 45

Ser Arg Tyr Arg Asn 60Ser Arg Tyr Arg Asn 60

Gly Asp Phe Ser Leu 80Gly Asp Phe Ser Leu 80

Lys Phe His Cys Leu 95Lys Phe His Cys Leu 95

Leu Ser Asp Glu Val 110Leu Ser Asp Glu Val 110

Val Val Ser Ala ProVal Val Ser Ala Pro

125125

Cys Thr Ser Ile Asn 140Cys Thr Ser Ile Asn 140

Met Thr Asp Asn SerMet Thr Asp Asn Ser

160160

Phe Leu Asn Met ArgPhe Leu Asn Met Arg

175175

Ala Arg Thr Pro Ser 190Ala Arg Thr Pro Ser 190

Leu Gln Gln Asn LeuLeu Gln Gln Asn Leu

205205

Glu Arg Asp Lys Ile 220Glu Arg Asp Lys Ile 220

Ala Ala Thr Gly GlyAla Ala Thr Gly Gly

240240

Leu Val Glu Ser GlyLeu Val Glu Ser Gly

255255

Leu Ser Cys Ala AlaLeu Ser Cys Ala Ala

270270

- 998 044346- 998 044346

SerSer

ProPro

Ser 305Ser 305

AspAsp

GluGlu

PhePhe

ThrThr

Ser 385Ser 385

GluGlu

HisHis

SerSer

CysCys

Glu 465Glu 465

ProPro

LysLys

ValVal

Gly Phe Thr Phe SerGly Phe Thr Phe Ser

275275

Gly Lys Gly Leu Glu 290Gly Lys Gly Leu Glu 290

Thr Tyr Tyr Ala AspThr Tyr Tyr Ala Asp

310310

Thr Ser Lys Asn ThrThr Ser Lys Asn Thr

325325

Asp Thr Ala Val Tyr 340Asp Thr Ala Val Tyr 340

Asp Tyr Trp Gly GlnAsp Tyr Trp Gly Gln

355355

Lys Gly Pro Ser Val 370Lys Gly Pro Ser Val 370

Gly Gly Thr Ala AlaGly Gly Thr Ala Ala

390390

Pro Val Thr Val SerPro Val Thr Val Ser

405405

Thr Phe Pro Ala ValThr Phe Pro Ala Val

420420

Val Val Thr Val ProVal Val Thr Val Pro

435435

Asn Val Asn His Lys 450Asn Val Asn His Lys 450

Pro Lys Ser Cys AspPro Lys Ser Cys Asp

470470

Glu Leu Leu Gly GlyGlu Leu Leu Gly Gly

485485

Asp Thr Leu Met Ile 500Asp Thr Leu Met Ile 500

Asp Val Ser His Glu 515Asp Val Ser His Glu 515

Asp Ser Trp Ile His 280Asp Ser Trp Ile His 280

Trp Val Ala Trp Ile 295Trp Val Ala Trp Ile 295

Ser Val Lys Gly ArgSer Val Lys Gly Arg

315315

Ala Tyr Leu Gln MetAla Tyr Leu Gln Met

330330

Tyr Cys Ala Arg Arg 345Tyr Cys Ala Arg Arg 345

Gly Thr Leu Val ThrGly Thr Leu Val Thr

360360

Phe Pro Leu Ala Pro 375Phe Pro Leu Ala Pro 375

Leu Gly Cys Leu ValLeu Gly Cys Leu Val

395395

Trp Asn Ser Gly AlaTrp Asn Ser Gly Ala

410410

Leu Gln Ser Ser Gly 425Leu Gln Ser Ser Gly 425

Ser Ser Ser Leu Gly 440Ser Ser Ser Leu Gly 440

Pro Ser Asn Thr Lys 455Pro Ser Asn Thr Lys 455

Lys Thr His Thr CysLys Thr His Thr Cys

475475

Pro Ser Val Phe LeuPro Ser Val Phe Leu

490490

Ser Arg Thr Pro GluSer Arg Thr Pro Glu

505505

Asp Pro Glu Val LysAsp Pro Glu Val Lys

520520

Trp Val Arg Gln AlaTrp Val Arg Gln Ala

285285

Ser Pro Tyr Gly Gly 300Ser Pro Tyr Gly Gly 300

Phe Thr Ile Ser AlaPhe Thr Ile Ser Ala

320320

Asn Ser Leu Arg AlaAsn Ser Leu Arg Ala

335335

His Trp Pro Gly Gly 350His Trp Pro Gly Gly 350

Val Ser Ser Ala SerVal Ser Ser Ala Ser

365365

Ser Ser Lys Ser Thr 380Ser Ser Lys Ser Thr 380

Lys Asp Tyr Phe ProLys Asp Tyr Phe Pro

400400

Leu Thr Ser Gly ValLeu Thr Ser Gly Val

415415

Leu Tyr Ser Leu Ser 430Leu Tyr Ser Leu Ser 430

Thr Gln Thr Tyr Ile 445Thr Gln Thr Tyr Ile 445

Val Asp Lys Lys Val 460Val Asp Lys Lys Val 460

Pro Pro Cys Pro AlaPro Pro Cys Pro Ala

480480

Phe Pro Pro Lys ProPhe Pro Pro Lys Pro

495495

Val Thr Cys Val ValVal Thr Cys Val Val

510510

Phe Asn Trp Tyr ValPhe Asn Trp Tyr Val

525525

- 999 044346- 999 044346

Asp Gly Val Glu ValAsp Gly Val Glu Val

530530

His Asn Ala Lys ThrHis Asn Ala Lys Thr

535535

Lys Pro Arg Glu GluLys Pro Arg Glu Glu

540540

Tyr Ala Ser Thr Tyr 545Tyr Ala Ser Thr Tyr 545

Arg Val Val Ser Val 550Arg Val Val Ser Val 550

Leu Thr Val Leu His 555Leu Thr Val Leu His 555

Asp Trp Leu Asn GlyAsp Trp Leu Asn Gly

565565

Lys Glu Tyr Lys CysLys Glu Tyr Lys Cys

570570

Lys Val Ser Asn LysLys Val Ser Asn Lys

575575

Leu Pro Ala Pro IleLeu Pro Ala Pro Ile

580580

Glu Lys Thr Ile SerGlu Lys Thr Ile Ser

585585

Lys Ala Lys Gly GlnLys Ala Lys Gly Gln

590590

Arg Glu Pro Gln ValArg Glu Pro Gln Val

595595

Tyr Thr Leu Pro Pro 600Tyr Thr Leu Pro Pro 600

Ser Arg Glu Glu Met 605Ser Arg Glu Glu Met 605

Lys Asn Gln Val Ser 610Lys Asn Gln Val Ser 610

Leu Thr Cys Leu ValLeu Thr Cys Leu Val

615615

Lys Gly Phe Tyr ProLys Gly Phe Tyr Pro

620620

Asp Ile Ala Val Glu 625Asp Ile Ala Val Glu 625

Trp Glu Ser Asn Gly 630Trp Glu Ser Asn Gly 630

Gln Pro Glu Asn Asn 635Gln Pro Glu Asn Asn 635

Lys Thr Thr Pro ProLys Thr Thr Pro Pro

645645

Val Leu Asp Ser AspVal Leu Asp Ser Asp

650650

Gly Ser Phe Phe LeuGly Ser Phe Phe Leu

655655

Ser Lys Leu Thr ValSer Lys Leu Thr Val

660660

Asp Lys Ser Arg TrpAsp Lys Ser Arg Trp

665665

Gln Gln Gly Asn ValGln Gln Gly Asn Val

670670

Ser Cys Ser Val MetSer Cys Ser Val Met

675675

His Glu Ala Leu HisHis Glu Ala Leu His

680680

Asn His Tyr Thr Gln 685Asn His Tyr Thr Gln 685

GlnGln

Gln 560Gln 560

AlaAla

ProPro

ThrThr

SerSer

Tyr 640Tyr 640

TyrTyr

PhePhe

LysLys

Ser Leu Ser Leu SerSer Leu Ser Leu Ser

690690

Pro Gly LysPro Gly Lys

695 <210> 882 <211> 696 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>695 <210> 882 <211> 696 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v39 ECD - Атезолизумаб HC <400> 882<223> ICOSL v39 ECD - Atezolizumab HC <400> 882

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp ValAsp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val

5 10 155 10 15

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg PheLeu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe

Asp Leu Asn Asp 30Asp Leu Asn Asp 30

GluGlu

ValVal

- 1000 044346- 1000 044346

TyrTyr

IleIle

Arg 65Arg 65

ArgArg

ValVal

ThrThr

HisHis

Gly 145Gly 145

LeuLeu

GlyGly

ValVal

ThrThr

Thr 225Thr 225

GlyGly

GlyGly

SerSer

Val Tyr Trp Gln Thr 35Val Tyr Trp Gln Thr 35

Pro Gln His Ser Ser 50Pro Gln His Ser Ser 50

Ala Leu Met Ser ProAla Leu Met Ser Pro

Leu Phe Asn Val ThrLeu Phe Asn Val Thr

Leu Ser Arg Ser LeuLeu Ser Arg Ser Leu

100100

Leu His Val Ala AlaLeu His Val Ala Ala

115115

Ser Pro Ser Gln Asp 130Ser Pro Ser Gln Asp 130

Tyr Pro Arg Pro AsnTyr Pro Arg Pro Asn

150150

Leu Asp Gln Ala LeuLeu Asp Gln Ala Leu

165165

Leu Tyr Asp Val Val 180Leu Tyr Asp Val Val 180

Asn Ile Gly Cys Cys 195Asn Ile Gly Cys Cys 195

Val Gly Ser Gln Thr 210Val Gly Ser Gln Thr 210

Glu Asn Pro Val SerGlu Asn Pro Val Ser

230230

Gly Ser Gly Gly GlyGly Ser Gly Gly Gly

245245

Gly Leu Val Gln Pro 260Gly Leu Val Gln Pro 260

Gly Phe Thr Phe SerGly Phe Thr Phe Ser

275275

Ser Glu Ser Lys Thr 40Ser Glu Ser Lys Thr 40

Leu Glu Tyr Val Asp 55Leu Glu Tyr Val Asp 55

Ala Gly Met Leu ArgAla Gly Met Leu Arg

Pro Gln Asp Glu GlnPro Gln Asp Glu Gln

Gly Phe Gln Glu Val 105Gly Phe Gln Glu Val 105

Asn Phe Ser Val ProAsn Phe Ser Val Pro

120120

Glu Leu Thr Phe Thr 135Glu Leu Thr Phe Thr 135

Val Tyr Trp Ile AsnVal Tyr Trp Ile Asn

155155

Gln Asn Asp Thr ValGln Asn Asp Thr Val

170170

Ser Val Leu Arg IleSer Val Leu Arg Ile

185185

Ile Glu Asn Val LeuIle Glu Asn Val Leu

200200

Gly Asn Asp Ile Gly 215Gly Asn Asp Ile Gly 215

Thr Gly Glu Lys AsnThr Gly Glu Lys Asn

235235

Gly Ser Glu Val GlnGly Ser Glu Val Gln

250250

Gly Gly Ser Leu ArgGly Gly Ser Leu Arg

265265

Asp Ser Trp Ile His 280Asp Ser Trp Ile His 280

Val Val Thr Tyr His 45Val Val Thr Tyr His 45

Ser Arg Tyr Arg Asn 60Ser Arg Tyr Arg Asn 60

Gly Asp Phe Ser Leu 80Gly Asp Phe Ser Leu 80

Lys Phe His Cys Leu 95Lys Phe His Cys Leu 95

Leu Ser Val Glu ValLeu Ser Val Glu Val

110110

Val Val Ser Ala ProVal Val Ser Ala Pro

125125

Cys Thr Ser Ile Asn 140Cys Thr Ser Ile Asn 140

Lys Thr Asp Asn SerLys Thr Asp Asn Ser

160160

Phe Leu Asn Met ArgPhe Leu Asn Met Arg

175175

Ala Arg Thr Pro Ser 190Ala Arg Thr Pro Ser 190

Leu Gln Gln Asn LeuLeu Gln Gln Asn Leu

205205

Glu Arg Asp Lys Ile 220Glu Arg Asp Lys Ile 220

Ala Ala Thr Gly GlyAla Ala Thr Gly Gly

240240

Leu Val Glu Ser GlyLeu Val Glu Ser Gly

255255

Leu Ser Cys Ala AlaLeu Ser Cys Ala Ala

270270

Trp Val Arg Gln AlaTrp Val Arg Gln Ala

285285

- 1001 044346- 1001 044346

ProPro

Ser 305Ser 305

AspAsp

GluGlu

PhePhe

ThrThr

Ser 385Ser 385

GluGlu

HisHis

SerSer

CysCys

Glu 465Glu 465

ProPro

LysLys

ValVal

AspAsp

Gly Lys 290Gly Lys 290

Thr TyrThr Tyr

Thr SerThr Ser

Asp ThrAsp Thr

Asp Tyr 355Asp Tyr 355

Lys Gly 370Lys Gly 370

Gly GlyGly Gly

Pro ValPro Val

Thr PheThr Phe

Val Val 435Val Val 435

Asn Val 450Asn Val 450

Pro LysPro Lys

Glu LeuGlu Leu

Asp ThrAsp Thr

Asp Val 515Asp Val 515

Gly ValGly Val

Gly LeuGly Leu

Tyr AlaTyr Ala

Lys AsnLys Asn

325325

Ala Val 340Ala Val 340

Trp GlyTrp Gly

Pro SerPro Ser

Thr AlaThr Ala

Thr ValThr Val

405405

Pro Ala 420Pro Ala 420

Thr ValThr Val

Asn HisAsn His

Ser CysSer Cys

Leu GlyLeu Gly

485485

Leu Met 500Leu Met 500

Ser HisSer His

Glu ValGlu Val

Glu TrpGlu Trp

295295

Asp Ser 310Asp Ser 310

Thr AlaThr Ala

Tyr TyrTyr Tyr

Gln GlyGln Gly

Val PheVal Phe

375375

Ala Leu 390Ala Leu 390

Ser TrpSer Trp

Val LeuVal Leu

Pro SerPro Ser

Lys ProLys Pro

455455

Asp Lys 470Asp Lys 470

Gly ProGly Pro

Ile SerIle Ser

Glu AspGlu Asp

His AsnHis Asn

Val AlaVal Ala

Val LysVal Lys

Tyr LeuTyr Leu

Cys Ala 345Cys Ala 345

Thr Leu 360Thr Leu 360

Pro LeuProLeu

Gly CysGly Cys

Asn SerAsn Ser

Gln SerGln Ser

425425

Ser SerSer Ser

440440

Ser AsnSer Asn

Thr HisThr His

Ser ValSer Val

Arg ThrArg Thr

505505

Pro Glu 520Pro Glu 520

Ala LysAla Lys

Trp IleTrp Ile

Gly ArgGly Arg

315315

Gln Met 330Gln Met 330

Arg ArgArg Arg

Val ThrVal Thr

Ala ProAla Pro

Leu ValLeu Val

395395

Gly Ala 410Gly Ala 410

Ser GlySer Gly

Leu GlyLeu Gly

Thr LysThr Lys

Thr CysThr Cys

475475

Phe Leu 490Phe Leu 490

Pro GluPro Glu

Val LysVal Lys

Thr LysThr Lys

Ser Pro 300Ser Pro 300

Phe ThrPhe Thr

Asn SerAsn Ser

His TrpHis Trp

Val Ser 365Val Ser 365

Ser Ser 380Ser Ser 380

Lys AspLys Asp

Leu ThrLeu Thr

Leu TyrLeu Tyr

Thr Gln 445Thr Gln 445

Val Asp 460Val Asp 460

Pro ProPro Pro

Phe ProPhe Pro

Val ThrVal Thr

Phe AsnPhe Asn

525525

Pro ArgPro Arg

Tyr GlyTyr Gly

Ile SerIle Ser

Leu ArgLeu Arg

335335

Pro Gly 350Pro Gly 350

Ser AlaSer Ala

Lys SerLys Ser

Tyr PheTyr Phe

Ser GlySer Gly

415415

Ser LeuSer Leu

430430

Thr TyrThr Tyr

Lys LysLys Lys

Cys ProCys Pro

Pro LysPro Lys

495495

Cys Val 510Cys Val 510

Trp TyrTrp Tyr

Glu GluGlu Glu

GlyGly

Ala 320Ala 320

AlaAla

GlyGly

SerSer

ThrThr

Pro 400Pro 400

ValVal

SerSer

IleIle

ValVal

Ala 480Ala 480

ProPro

ValVal

ValVal

GlnGln

- 1002 044346- 1002 044346

530530

535535

540540

Tyr Ala Ser Thr Tyr 545Tyr Ala Ser Thr Tyr 545

Arg Val Val Ser Val 550Arg Val Val Ser Val 550

Leu Thr Val Leu His 555Leu Thr Val Leu His 555

Asp Trp Leu Asn GlyAsp Trp Leu Asn Gly

565565

Lys Glu Tyr Lys CysLys Glu Tyr Lys Cys

570570

Lys Val Ser Asn LysLys Val Ser Asn Lys

575575

Leu Pro Ala Pro IleLeu Pro Ala Pro Ile

580580

Glu Lys Thr Ile SerGlu Lys Thr Ile Ser

585585

Lys Ala Lys Gly GlnLys Ala Lys Gly Gln

590590

Arg Glu Pro Gln Val 595Arg Glu Pro Gln Val 595

Tyr Thr Leu Pro Pro 600Tyr Thr Leu Pro Pro 600

Ser Arg Glu Glu Met 605Ser Arg Glu Glu Met 605

Lys Asn Gln Val SerLys Asn Gln Val Ser

610610

Leu Thr Cys Leu ValLeu Thr Cys Leu Val

615615

Lys Gly Phe Tyr ProLys Gly Phe Tyr Pro

620620

Asp Ile Ala Val Glu 625Asp Ile Ala Val Glu 625

Trp Glu Ser Asn Gly 630Trp Glu Ser Asn Gly 630

Gln Pro Glu Asn Asn 635Gln Pro Glu Asn Asn 635

Lys Thr Thr Pro ProLys Thr Thr Pro Pro

645645

Val Leu Asp Ser AspVal Leu Asp Ser Asp

650650

Gly Ser Phe Phe LeuGly Ser Phe Phe Leu

655655

Ser Lys Leu Thr ValSer Lys Leu Thr Val

660660

Asp Lys Ser Arg Trp 6 65Asp Lys Ser Arg Trp 6 65

Gln Gln Gly Asn ValGln Gln Gly Asn Val

670670

Ser Cys Ser Val MetSer Cys Ser Val Met

675675

His Glu Ala Leu HisHis Glu Ala Leu His

680680

Asn His Tyr Thr Gln 685Asn His Tyr Thr Gln 685

Gln 560Gln 560

AlaAla

ProPro

ThrThr

SerSer

Tyr 640Tyr 640

TyrTyr

PhePhe

LysLys

Ser Leu Ser Leu SerSer Leu Ser Leu Ser

690690

Pro Gly LysPro Gly Lys

695 <210> 883 <211> 462 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>695 <210> 883 <211> 462 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL WT ECD - Атезолизумаб LC <400> 883<223> ICOSL WT ECD - Atezolizumab LC <400> 883

Asp Thr Gln Glu 1Asp Thr Gln Glu 1

Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 5 10 15Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 5 10 15

Leu Ser Cys Ala 20Leu Ser Cys Ala 20

Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp 25 30Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp 25 30

GluGlu

ValVal

HisHis

Tyr Val Tyr TrpTyr Val Tyr Trp

Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr TyrGln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr

4545

- 1003 044346- 1003 044346

IleIle

Arg 65Arg 65

ArgArg

ValVal

ThrThr

HisHis

Gly 145Gly 145

LeuLeu

GlyGly

ValVal

ThrThr

Thr 225Thr 225

GlyGly

SerSer

AlaAla

GlyGly

Pro Gln Asn Ser Ser 50Pro Gln Asn Ser Ser 50

Leu Glu Asn Val Asp 55Leu Glu Asn Val Asp 55

Ser Arg Tyr Arg Asn 60Ser Arg Tyr Arg Asn 60

Ala Leu Met Ser ProAla Leu Met Ser Pro

Ala Gly Met Leu ArgAla Gly Met Leu Arg

Gly Asp Phe Ser Leu 80Gly Asp Phe Ser Leu 80

Leu Phe Asn Val ThrLeu Phe Asn Val Thr

Leu Ser Gln Ser LeuLeu Ser Gln Ser Leu

100100

Leu His Val Ala AlaLeu His Val Ala Ala

115115

Ser Pro Ser Gln Asp 130Ser Pro Ser Gln Asp 130

Tyr Pro Arg Pro AsnTyr Pro Arg Pro Asn

150150

Leu Asp Gln Ala LeuLeu Asp Gln Ala Leu

165165

Leu Tyr Asp Val ValLeu Tyr Asp Val Val

180180

Asn Ile Gly Cys Cys 195Asn Ile Gly Cys Cys 195

Val Gly Ser Gln Thr 210Val Gly Ser Gln Thr 210

Glu Asn Pro Val SerGlu Asn Pro Val Ser

230230

Gly Ser Gly Gly GlyGly Ser Gly Gly Gly

245245

Ser Leu Ser Ala SerSer Leu Ser Ala Ser

260260

Ser Gln Asp Val SerSer Gln Asp Val Ser

275275

Pro Gln Asp Glu GlnPro Gln Asp Glu Gln

Gly Phe Gln Glu Val 105Gly Phe Gln Glu Val 105

Asn Phe Ser Val ProAsn Phe Ser Val Pro

120120

Glu Leu Thr Phe Thr 135Glu Leu Thr Phe Thr 135

Val Tyr Trp Ile AsnVal Tyr Trp Ile Asn

155155

Gln Asn Asp Thr ValGln Asn Asp Thr Val

170170

Ser Val Leu Arg IleSer Val Leu Arg Ile

185185

Ile Glu Asn Val LeuIle Glu Asn Val Leu

200200

Gly Asn Asp Ile Gly 215Gly Asn Asp Ile Gly 215

Thr Gly Glu Lys AsnThr Gly Glu Lys Asn

235235

Gly Ser Asp Ile GlnGly Ser Asp Ile Gln

250250

Val Gly Asp Arg ValVal Gly Asp Arg Val

265265

Thr Ala Val Ala TrpThr Ala Val Ala Trp

280280

Lys Phe His Cys Leu 95Lys Phe His Cys Leu 95

Leu Ser Val Glu ValLeu Ser Val Glu Val

110110

Val Val Ser Ala ProVal Val Ser Ala Pro

125125

Cys Thr Ser Ile Asn 140Cys Thr Ser Ile Asn 140

Lys Thr Asp Asn SerLys Thr Asp Asn Ser

160160

Phe Leu Asn Met ArgPhe Leu Asn Met Arg

175175

Ala Arg Thr Pro Ser 190Ala Arg Thr Pro Ser 190

Leu Gln Gln Asn LeuLeu Gln Gln Asn Leu

205205

Glu Arg Asp Lys Ile 220Glu Arg Asp Lys Ile 220

Ala Ala Thr Gly GlyAla Ala Thr Gly Gly

240240

Met Thr Gln Ser ProMet Thr Gln Ser Pro

255255

Thr Ile Thr Cys ArgThr Ile Thr Cys Arg

270270

Tyr Gln Gln Lys ProTyr Gln Gln Lys Pro

285285

Lys Ala Pro Lys LeuLys Ala Pro Lys Leu

Leu Ile Tyr Ser AlaLeu Ile Tyr Ser Ala

Ser Phe Leu Tyr SerSer Phe Leu Tyr Ser

- 1004 044346- 1004 044346

290290

295295

300300

Gly Val Pro 305Gly Val Pro 305

Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp PheSer Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe

310 315310 315

LeuLeu

ThrThr

IleIle

SerSer

SerSer

325325

LeuLeu

GlnGln

ProPro

GluGlu

Asp 330Asp 330

PhePhe

AlaAla

ThrThr

TyrTyr

TyrTyr

335335

GlnGln

GlnGln

TyrTyr

LeuLeu

340340

TyrTyr

HisHis

ProPro

AlaAla

ThrThr

345345

PhePhe

GlyGly

GlnGln

GlyGly

ThrThr

350350

LysLys

Glu IleGlu Ile

Ser AspSer Asp

370370

Lys Arg 355Lys Arg 355

Glu GlnGlu Gln

Asn Asn 385Asn Asn 385

Phe TyrPhe Tyr

Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro 360365Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro 360365

Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu 375380Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu 375380

Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp 390395Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp 390395

Ala LeuAla Leu

Gln Ser Gly Asn Ser 405Gln Ser Gly Asn Ser 405

Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln AspGln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp

410 415410 415

Lys AspLys Asp

Ser Thr Tyr Ser Leu 420Ser Thr Tyr Ser Leu 420

Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser LysSer Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys

425 430425 430

Asp TyrAsp Tyr

Glu Lys His Lys Val 435Glu Lys His Lys Val 435

Tyr Ala Cys Glu Val Thr His GlnTyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln

440 445440 445

Thr 320Thr 320

CysCys

ValVal

ProPro

LeuLeu

Asn 400Asn 400

SerSer

AlaAla

GlyGly

LeuLeu

Ser 450Ser 450

Ser Pro Val Thr LysSer Pro Val Thr Lys

455455

Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 460 <210> 884 <211> 462 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 460 <210> 884 <211> 462 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v56 ECD - Атезолизумаб LC <400> 884<223> ICOSL v56 ECD - Atezolizumab LC <400> 884

Asp Thr Gln Glu 1Asp Thr Gln Glu 1

Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 5 10 15Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 5 10 15

Leu Ser Cys Ala 20Leu Ser Cys Ala 20

Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp 25 30Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp 25 30

ValVal

ValVal

HisHis

Tyr Val Tyr TrpTyr Val Tyr Trp

Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr TyrGln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr

4545

- 1005 044346- 1005 044346

IleIle

Arg 65Arg 65

ArgArg

ValVal

ThrThr

HisHis

Gly 145Gly 145

LeuLeu

GlyGly

ValVal

ThrThr

Thr 225Thr 225

GlyGly

SerSer

AlaAla

GlyGly

Pro Gln His Ser Ser 50Pro Gln His Ser Ser 50

Leu Glu Tyr Val Asp 55Leu Glu Tyr Val Asp 55

Ser Arg Tyr Arg Asn 60Ser Arg Tyr Arg Asn 60

Ala Leu Met Ser ProAla Leu Met Ser Pro

Ala Gly Met Leu ArgAla Gly Met Leu Arg

Gly Asp Phe Ser Leu 80Gly Asp Phe Ser Leu 80

Leu Phe Asn Val ThrLeu Phe Asn Val Thr

Leu Ser Arg Ser LeuLeu Ser Arg Ser Leu

100100

Leu Arg Val Ala Ala 115Leu Arg Val Ala Ala 115

Ser Pro Ser Gln Asp 130Ser Pro Ser Gln Asp 130

Tyr Pro Arg Pro AsnTyr Pro Arg Pro Asn

150150

Leu Asp Gln Ala LeuLeu Asp Gln Ala Leu

165165

Leu Tyr Asp Val ValLeu Tyr Asp Val Val

180180

Asn Ile Gly Cys Arg 195Asn Ile Gly Cys Arg 195

Val Gly Ser Gln Thr 210Val Gly Ser Gln Thr 210

Glu Asn Pro Val SerGlu Asn Pro Val Ser

230230

Gly Ser Gly Gly GlyGly Ser Gly Gly Gly

245245

Ser Leu Ser Ala SerSer Leu Ser Ala Ser

260260

Ser Gln Asp Val SerSer Gln Asp Val Ser

275275

Pro Gln Asp Glu Gln 90Pro Gln Asp Glu Gln 90

Gly Phe Gln Glu Val 105Gly Phe Gln Glu Val 105

Asn Phe Ser Val ProAsn Phe Ser Val Pro

120120

Glu Leu Thr Phe Thr 135Glu Leu Thr Phe Thr 135

Val Cys Trp Ile AsnVal Cys Trp Ile Asn

155155

Gln Asn Asp Thr ValGln Asn Asp Thr Val

170170

Ser Val Leu Arg IleSer Val Leu Arg Ile

185185

Ile Glu Asn Val LeuIle Glu Asn Val Leu

200200

Gly Asn Asp Ile Gly 215Gly Asn Asp Ile Gly 215

Thr Gly Glu Lys AsnThr Gly Glu Lys Asn

235235

Gly Ser Asp Ile GlnGly Ser Asp Ile Gln

250250

Val Gly Asp Arg ValVal Gly Asp Arg Val

265265

Thr Ala Val Ala TrpThr Ala Val Ala Trp

280280

Lys Phe His Cys Leu 95Lys Phe His Cys Leu 95

Leu Ser Asp Glu ValLeu Ser Asp Glu Val

110110

Val Val Ser Ala ProVal Val Ser Ala Pro

125125

Cys Thr Ser Ile Asn 140Cys Thr Ser Ile Asn 140

Met Thr Asp Asn SerMet Thr Asp Asn Ser

160160

Phe Leu Asn Met ArgPhe Leu Asn Met Arg

175175

Ala Arg Thr Pro Ser 190Ala Arg Thr Pro Ser 190

Leu Gln Gln Asn LeuLeu Gln Gln Asn Leu

205205

Glu Arg Asp Lys Ile 220Glu Arg Asp Lys Ile 220

Ala Ala Thr Gly GlyAla Ala Thr Gly Gly

240240

Met Thr Gln Ser ProMet Thr Gln Ser Pro

255255

Thr Ile Thr Cys ArgThr Ile Thr Cys Arg

270270

Tyr Gln Gln Lys ProTyr Gln Gln Lys Pro

285285

Lys Ala Pro Lys LeuLys Ala Pro Lys Leu

Leu Ile Tyr Ser AlaLeu Ile Tyr Ser Ala

Ser Phe Leu Tyr SerSer Phe Leu Tyr Ser

- 1006 044346- 1006 044346

290290

295295

300300

Gly Val Pro 305Gly Val Pro 305

Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp PheSer Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe

310 315310 315

LeuLeu

ThrThr

IleIle

SerSer

SerSer

325325

LeuLeu

GlnGln

ProPro

GluGlu

Asp 330Asp 330

PhePhe

AlaAla

ThrThr

TyrTyr

TyrTyr

335335

GlnGln

GlnGln

TyrTyr

LeuLeu

340340

TyrTyr

HisHis

ProPro

AlaAla

ThrThr

345345

PhePhe

GlyGly

GlnGln

GlyGly

ThrThr

350350

LysLys

Glu IleGlu Ile

Ser AspSer Asp

370370

Lys Arg 355Lys Arg 355

Glu GlnGlu Gln

Asn Asn 385Asn Asn 385

Phe TyrPhe Tyr

Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro 360365Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro 360365

Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu 375380Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu 375380

Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp 390395Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp 390395

Ala LeuAla Leu

Gln Ser Gly Asn Ser 405Gln Ser Gly Asn Ser 405

Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln AspGln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp

410 415410 415

Lys AspLys Asp

Ser Thr Tyr Ser Leu 420Ser Thr Tyr Ser Leu 420

Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser LysSer Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys

425 430425 430

Asp TyrAsp Tyr

Glu Lys His Lys Val 435Glu Lys His Lys Val 435

Tyr Ala Cys Glu Val Thr His GlnTyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln

440 445440 445

Thr 320Thr 320

CysCys

ValVal

ProPro

LeuLeu

Asn 400Asn 400

SerSer

AlaAla

GlyGly

LeuLeu

Ser 450Ser 450

Ser Pro Val Thr LysSer Pro Val Thr Lys

455455

Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 460 <210> 885 <211> 462 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 460 <210> 885 <211> 462 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v39 ECD - Атезолизумаб LC <400> 885<223> ICOSL v39 ECD - Atezolizumab LC <400> 885

Asp Thr Gln Glu 1Asp Thr Gln Glu 1

Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 5 10 15Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 5 10 15

Leu Ser Cys Ala 20Leu Ser Cys Ala 20

Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp 25 30Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp 25 30

GluGlu

ValVal

HisHis

Tyr Val Tyr TrpTyr Val Tyr Trp

Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr TyrGln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr

4545

- 1007 044346- 1007 044346

IleIle

Arg 65Arg 65

ArgArg

ValVal

ThrThr

HisHis

Gly 145Gly 145

LeuLeu

GlyGly

ValVal

ThrThr

Thr 225Thr 225

GlyGly

SerSer

AlaAla

GlyGly

Pro Gln His Ser Ser 50Pro Gln His Ser Ser 50

Leu Glu Tyr Val Asp 55Leu Glu Tyr Val Asp 55

Ser Arg Tyr Arg Asn 60Ser Arg Tyr Arg Asn 60

Ala Leu Met Ser ProAla Leu Met Ser Pro

Ala Gly Met Leu ArgAla Gly Met Leu Arg

Gly Asp Phe Ser Leu 80Gly Asp Phe Ser Leu 80

Leu Phe Asn Val ThrLeu Phe Asn Val Thr

Leu Ser Arg Ser LeuLeu Ser Arg Ser Leu

100100

Leu His Val Ala AlaLeu His Val Ala Ala

115115

Ser Pro Ser Gln Asp 130Ser Pro Ser Gln Asp 130

Tyr Pro Arg Pro AsnTyr Pro Arg Pro Asn

150150

Leu Asp Gln Ala LeuLeu Asp Gln Ala Leu

165165

Leu Tyr Asp Val ValLeu Tyr Asp Val Val

180180

Asn Ile Gly Cys Cys 195Asn Ile Gly Cys Cys 195

Val Gly Ser Gln Thr 210Val Gly Ser Gln Thr 210

Glu Asn Pro Val SerGlu Asn Pro Val Ser

230230

Gly Ser Gly Gly GlyGly Ser Gly Gly Gly

245245

Ser Leu Ser Ala SerSer Leu Ser Ala Ser

260260

Ser Gln Asp Val SerSer Gln Asp Val Ser

275275

Pro Gln Asp Glu Gln 90Pro Gln Asp Glu Gln 90

Gly Phe Gln Glu Val 105Gly Phe Gln Glu Val 105

Asn Phe Ser Val ProAsn Phe Ser Val Pro

120120

Glu Leu Thr Phe Thr 135Glu Leu Thr Phe Thr 135

Val Tyr Trp Ile AsnVal Tyr Trp Ile Asn

155155

Gln Asn Asp Thr ValGln Asn Asp Thr Val

170170

Ser Val Leu Arg IleSer Val Leu Arg Ile

185185

Ile Glu Asn Val LeuIle Glu Asn Val Leu

200200

Gly Asn Asp Ile Gly 215Gly Asn Asp Ile Gly 215

Thr Gly Glu Lys AsnThr Gly Glu Lys Asn

235235

Gly Ser Asp Ile GlnGly Ser Asp Ile Gln

250250

Val Gly Asp Arg ValVal Gly Asp Arg Val

265265

Thr Ala Val Ala TrpThr Ala Val Ala Trp

280280

Lys Phe His Cys Leu 95Lys Phe His Cys Leu 95

Leu Ser Val Glu ValLeu Ser Val Glu Val

110110

Val Val Ser Ala ProVal Val Ser Ala Pro

125125

Cys Thr Ser Ile Asn 140Cys Thr Ser Ile Asn 140

Lys Thr Asp Asn SerLys Thr Asp Asn Ser

160160

Phe Leu Asn Met ArgPhe Leu Asn Met Arg

175175

Ala Arg Thr Pro Ser 190Ala Arg Thr Pro Ser 190

Leu Gln Gln Asn LeuLeu Gln Gln Asn Leu

205205

Glu Arg Asp Lys Ile 220Glu Arg Asp Lys Ile 220

Ala Ala Thr Gly GlyAla Ala Thr Gly Gly

240240

Met Thr Gln Ser ProMet Thr Gln Ser Pro

255255

Thr Ile Thr Cys ArgThr Ile Thr Cys Arg

270270

Tyr Gln Gln Lys ProTyr Gln Gln Lys Pro

285285

Lys Ala Pro Lys LeuLys Ala Pro Lys Leu

Leu Ile Tyr Ser AlaLeu Ile Tyr Ser Ala

Ser Phe Leu Tyr SerSer Phe Leu Tyr Ser

- 1008 044346- 1008 044346

290290

295295

300300

Gly Val Pro 305Gly Val Pro 305

Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp PheSer Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe

310 315310 315

LeuLeu

ThrThr

IleIle

SerSer

SerSer

325325

LeuLeu

GlnGln

ProPro

GluGlu

Asp 330Asp 330

PhePhe

AlaAla

ThrThr

TyrTyr

TyrTyr

335335

GlnGln

GlnGln

TyrTyr

LeuLeu

340340

TyrTyr

HisHis

ProPro

AlaAla

ThrThr

345345

PhePhe

GlyGly

GlnGln

GlyGly

ThrThr

350350

LysLys

Glu IleGlu Ile

Ser AspSer Asp

370370

Lys Arg 355Lys Arg 355

Glu GlnGlu Gln

Asn Asn 385Asn Asn 385

Phe TyrPhe Tyr

Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro 360365Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro 360365

Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu 375380Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu 375380

Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp 390395Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp 390395

Ala LeuAla Leu

Gln Ser Gly Asn Ser 405Gln Ser Gly Asn Ser 405

Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln AspGln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp

410 415410 415

Lys AspLys Asp

Ser Thr Tyr Ser Leu 420Ser Thr Tyr Ser Leu 420

Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser LysSer Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys

425 430425 430

Asp TyrAsp Tyr

Glu Lys His Lys Val 435Glu Lys His Lys Val 435

Tyr Ala Cys Glu Val Thr His GlnTyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln

440 445440 445

Thr 320Thr 320

CysCys

ValVal

ProPro

LeuLeu

Asn 400Asn 400

SerSer

AlaAla

GlyGly

LeuLeu

Ser 450Ser 450

Ser Pro Val Thr LysSer Pro Val Thr Lys

455455

Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 460 <210> 886 <211> 696 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 460 <210> 886 <211> 696 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> Атезолизумаб HC - ICOSL WT ECD < 400>886< 223> Atezolizumab HC - ICOSL WT ECD < 400>886

Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro GlyGlu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly

5 10155 1015

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser AspSer Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp

25302530

Trp Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp 35 4045Trp Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp 35 4045

GlyGly

SerSer

ValVal

- 1009 044346- 1009 044346

AlaAla

Lys 65Lys 65

LeuLeu

AlaAla

LeuLeu

LeuLeu

Cys 145Cys 145

SerSer

SerSer

SerSer

AsnAsn

His 225His 225

ValVal

ThrThr

GluGlu

LysLys

Trp Ile Ser Pro Tyr 50Trp Ile Ser Pro Tyr 50

Gly Arg Phe Thr Ile 70Gly Arg Phe Thr Ile 70

Gln Met Asn Ser LeuGln Met Asn Ser Leu

Arg Arg His Trp Pro 100Arg Arg His Trp Pro 100

Val Thr Val Ser SerVal Thr Val Ser Ser

115115

Ala Pro Ser Ser Lys 130Ala Pro Ser Ser Lys 130

Leu Val Lys Asp TyrLeu Val Lys Asp Tyr

150150

Gly Ala Leu Thr SerGly Ala Leu Thr Ser

165165

Ser Gly Leu Tyr SerSer Gly Leu Tyr Ser

180180

Leu Gly Thr Gln Thr 195Leu Gly Thr Gln Thr 195

Thr Lys Val Asp Lys 210Thr Lys Val Asp Lys 210

Thr Cys Pro Pro CysThr Cys Pro Pro Cys

230230

Phe Leu Phe Pro ProPhe Leu Phe Pro Pro

245245

Pro Glu Val Thr CysPro Glu Val Thr Cys

260260

Val Lys Phe Asn TrpVal Lys Phe Asn Trp

275275

Thr Lys Pro Arg GluThr Lys Pro Arg Glu

Gly Gly Ser Thr Tyr 55Gly Gly Ser Thr Tyr 55

Tyr Ala Asp Ser Val 60Tyr Ala Asp Ser Val 60

Ser Ala Asp Thr Ser 75Ser Ala Asp Thr Ser 75

Lys Asn Thr Ala Tyr 80Lys Asn Thr Ala Tyr 80

Arg Ala Glu Asp ThrArg Ala Glu Asp Thr

Ala Val Tyr Tyr Cys 95Ala Val Tyr Tyr Cys 95

Gly Gly Phe Asp Tyr 105Gly Gly Phe Asp Tyr 105

Trp Gly Gln Gly ThrTrp Gly Gln Gly Thr

110110

Ala Ser Thr Lys Gly 120Ala Ser Thr Lys Gly 120

Pro Ser Val Phe ProPro Ser Val Phe Pro

125125

Ser Thr Ser Gly Gly 135Ser Thr Ser Gly Gly 135

Thr Ala Ala Leu Gly 140Thr Ala Ala Leu Gly 140

Phe Pro Glu Pro ValPhe Pro Glu Pro Val

155155

Thr Val Ser Trp AsnThr Val Ser Trp Asn

160160

Gly Val His Thr PheGly Val His Thr Phe

170170

Leu Ser Ser Val ValLeu Ser Ser Val Val

185185

Tyr Ile Cys Asn ValTyr Ile Cys Asn Val

200200

Lys Val Glu Pro Lys 215Lys Val Glu Pro Lys 215

Pro Ala Pro Glu LeuPro Ala Pro Glu Leu

235235

Lys Pro Lys Asp ThrLys Pro Lys Asp Thr

250250

Val Val Val Asp ValVal Val Val Asp Val

265265

Tyr Val Asp Gly ValTyr Val Asp Gly Val

280280

Glu Gln Tyr Ala SerGlu Gln Tyr Ala Ser

Pro Ala Val Leu GlnPro Ala Val Leu Gln

175175

Thr Val Pro Ser SerThr Val Pro Ser Ser

190190

Asn His Lys Pro Ser 205Asn His Lys Pro Ser 205

Ser Cys Asp Lys Thr 220Ser Cys Asp Lys Thr 220

Leu Gly Gly Pro SerLeu Gly Gly Pro Ser

240240

Leu Met Ile Ser ArgLeu Met Ile Ser Arg

255255

Ser His Glu Asp Pro 270Ser His Glu Asp Pro 270

Glu Val His Asn AlaGlu Val His Asn Ala

285285

Thr Tyr Arg Val ValThr Tyr Arg Val Val

- 1010 044346- 1010 044346

Lys Glu TyrLys Glu Tyr

320320

290290

295295

300300

Ser 305Ser 305

LysLys

IleIle

ProPro

LeuLeu

Asn 385Asn 385

SerSer

ArgArg

LeuLeu

GlyGly

Val 465Val 465

GluGlu

SerSer

LeuLeu

AlaAla

Val Leu ThrVal Leu Thr

Val Leu HisVal Leu His

310310

Gln Asp TrpGln Asp Trp

Leu Asn Gly 315Leu Asn Gly 315

Cys Lys ValCys Lys Val

Ser Lys AlaSer Lys Ala

340340

Pro Ser ArgPro Ser Arg

355355

Val Lys Gly 370Val Lys Gly 370

Gly Gln ProGly Gln Pro

Asp Gly SerAsp Gly Ser

Trp Gln GlnTrp Gln Gln

420420

His Asn HisHis Asn His

435435

Gly Gly Gly 450Gly Gly Gly 450

Arg Ala MetArg Ala Met

Gly Ser ArgGly Ser Arg

Glu Ser LysGlu Ser Lys

500500

Glu Asn ValGlu Asn Val

515515

Gly Met Leu 530Gly Met Leu 530

Ser Asn Lys 325Ser Asn Lys 325

Lys Gly GlnLys Gly Gln

Glu Glu MetGlu Glu Met

Phe Tyr ProPhe Tyr Pro

375375

Glu Asn AsnGlu Asn Asn

390390

Phe Phe Leu 405Phe Phe Leu 405

Gly Asn ValGly Asn Val

Tyr Thr GlnTyr Thr Gln

Ser Gly GlySer Gly Gly

455455

Val Gly SerVal Gly Ser

470470

Phe Asp Leu 485Phe Asp Leu 485

Thr Val ValThr Val Val

Asp Ser ArgAsp Ser Arg

Arg Gly AspArg Gly Asp

535535

Ala Leu ProAla Leu Pro

330330

Ala Pro IleAla Pro Ile

Glu Lys ThrGlu Lys Thr

335335

Pro Arg GluPro Arg Glu

345345

Pro Gln ValPro Gln Val

Tyr Thr Leu 350Tyr Thr Leu 350

Thr Lys Asn 360Thr Lys Asn 360

Gln Val SerGln Val Ser

365365

Leu Thr CysLeu Thr Cys

Ser Asp IleSer Asp Ile

Tyr Lys ThrTyr Lys Thr

Tyr Ser LysTyr Ser Lys

410410

Phe Ser Cys 425Phe Ser Cys 425

Lys Ser Leu 440Lys Ser Leu 440

Gly Gly SerGly Gly Ser

Asp Val GluAsp Val Glu

Asn Asp ValAsn Asp Val

490490

Thr Tyr HisThr Tyr His

505505

Tyr Arg Asn 520Tyr Arg Asn 520

Phe Ser LeuPhe Ser Leu

Ala Val GluAla Val Glu

380380

Thr Pro Pro 395Thr Pro Pro 395

Leu Thr ValLeu Thr Val

Ser Val MetSer Val Met

Ser Leu SerSer Leu Ser

445445

Asp Thr GlnAsp Thr Gln

460460

Leu Ser Cys 475Leu Ser Cys 475

Tyr Val TyrTyr Val Tyr

Ile Pro GlnIle Pro Gln

Arg Ala LeuArg Ala Leu

525525

Arg Leu PheArg Leu Phe

540540

Trp Glu SerTrp Glu Ser

Val Leu AspVal Leu Asp

400400

Asp Lys Ser 415Asp Lys Ser 415

His Glu Ala 430His Glu Ala 430

Pro Gly LysPro Gly Lys

Glu Lys GluGlu Lys Glu

Ala Cys ProAla Cys Pro

480480

Trp Gln ThrTrp Gln Thr

495495

Asn Ser Ser 510Asn Ser Ser 510

Met Ser ProMet Ser Pro

Asn Val ThrAsn Val Thr

- 1011 044346- 1011 044346

Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys Leu Val Leu Ser Gln SerPro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys Leu Val Leu Ser Gln Ser

545 550 555545 550 555

Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu Val Thr Leu His Val AlaGly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu Val Thr Leu His Val Ala

565 570 575565 570 575

Asn Phe Ser Val Pro Val Val Ser Ala Pro His Ser Pro Ser GlnAsn Phe Ser Val Pro Val Val Ser Ala Pro His Ser Pro Ser Gln

580 585 590580 585 590

Glu Leu Thr Phe Thr Cys Thr Ser Ile Asn Gly Tyr Pro Arg ProGlu Leu Thr Phe Thr Cys Thr Ser Ile Asn Gly Tyr Pro Arg Pro

595 600 605595 600 605

Val Tyr Trp Ile Asn Lys Thr Asp Asn Ser Leu Leu Asp Gln AlaVal Tyr Trp Ile Asn Lys Thr Asp Asn Ser Leu Leu Asp Gln Ala

610 615 620610 615 620

Gln Asn Asp Thr Val Phe Leu Asn Met Arg Gly Leu Tyr Asp ValGln Asn Asp Thr Val Phe Leu Asn Met Arg Gly Leu Tyr Asp Val

625 630 635625 630 635

Ser Val Leu Arg Ile Ala Arg Thr Pro Ser Val Asn Ile Gly CysSer Val Leu Arg Ile Ala Arg Thr Pro Ser Val Asn Ile Gly Cys

645 650 655645 650 655

Ile Glu Asn Val Leu Leu Gln Gln Asn Leu Thr Val Gly Ser GlnIle Glu Asn Val Leu Leu Gln Gln Asn Leu Thr Val Gly Ser Gln

660 665 670660 665 670

Gly Asn Asp Ile Gly Glu Arg Asp Lys Ile Thr Glu Asn Pro ValGly Asn Asp Ile Gly Glu Arg Asp Lys Ile Thr Glu Asn Pro Val

675 680 685675 680 685

Leu 560Leu 560

AlaAla

AspAsp

AsnAsn

LeuLeu

Val 640Val 640

CysCys

ThrThr

SerSer

Thr Gly Glu Lys Asn Ala Ala ThrThr Gly Glu Lys Asn Ala Ala Thr

690695 <210>887 <211>696 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>690695 <210>887 <211>696 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> Атезолизумаб HC - ICOSL v56 ECD < 400>887< 223> Atezolizumab HC - ICOSL v56 ECD < 400>887

Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro GlyGlu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly

5 10155 1015

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser AspSer Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp

25302530

Trp Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp 35 4045Trp Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp 35 4045

GlyGly

SerSer

ValVal

ValVal

Ala Trp Ile Ser Pro Tyr Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp SerAla Trp Ile Ser Pro Tyr Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser

- 1012 044346- 1012 044346

Lys 65Lys 65

LeuLeu

AlaAla

LeuLeu

LeuLeu

Cys 145Cys 145

SerSer

SerSer

SerSer

AsnAsn

His 225His 225

ValVal

ThrThr

GluGlu

LysLys

Gly ArgGly Arg

Gln MetGln Met

Arg ArgArg Arg

Val ThrVal Thr

115115

Ala Pro 130Ala Pro 130

Leu ValLeu Val

Gly AlaGly Ala

Ser GlySer Gly

Leu GlyLeu Gly

195195

Thr Lys 210Thr Lys 210

Thr CysThr Cys

Phe LeuPhe Leu

Pro GluPro Glu

Val LysVal Lys

275275

Thr Lys 290Thr Lys 290

Phe ThrPhe Thr

Asn SerAsn Ser

His Trp 100His Trp 100

Val SerVal Ser

Ile Ser 70Ile Ser 70

Leu ArgLeu Arg

Pro GlyPro Gly

Ser AlaSer Ala

Ala AspAla Asp

Ala GluAla Glu

Gly PheGly Phe

105105

Ser Thr 120Ser Thr 120

Ser SerSer Ser

Lys SerLys Ser

135135

Thr SerThr Ser

Thr Ser 75Thr Ser 75

Asp Thr 90Asp Thr 90

Asp TyrAsp Tyr

Lys GlyLys Gly

Gly GlyGly Gly

Lys AsnLys Asn

Thr AlaThr Ala

Lys AspLys Asp

Leu ThrLeu Thr

165165

Leu Tyr 180Leu Tyr 180

Thr GlnThr Gln

Val AspVal Asp

Pro ProPro Pro

Phe ProPhe Pro

245245

Val Thr 260Val Thr 260

Phe AsnPhe Asn

Pro ArgPro Arg

Ala ValAla Val

Tyr TyrTyr Tyr

Trp GlyTrp Gly

Gln Gly 110Gln Gly 110

Tyr Phe 150Tyr Phe 150

Pro GluPro Glu

Pro ValPro Val

155155

Ser GlySer Gly

Ser LeuSer Leu

Thr TyrThr Tyr

Lys LysLys Lys

215215

Cys Pro 230Cys Pro 230

Pro LysPro Lys

Cys ValCys Val

Trp TyrTrp Tyr

Glu GluGlu Glu

295295

Val HisVal His

Thr Phe 170Thr Phe 170

Ser SerSer Ser

185185

Ile Cys 200Ile Cys 200

Val GluVal Glu

Ala ProAla Pro

Pro LysPro Lys

Val ValVal Val

265265

Val Asp 280Val Asp 280

Gln TyrGln Tyr

Val ValVal Val

Asn ValAsn Val

Pro LysPro Lys

Glu LeuGlu Leu

235235

Asp Thr 250Asp Thr 250

Asp ValAsp Val

Gly ValGly Val

Ala SerAla Ser

Pro SerPro Ser

125125

Thr Ala 140Thr Ala 140

Thr ValThr Val

Pro AlaPro Ala

Thr ValThr Val

Asn HisAsn His

205205

Ser Cys 220Ser Cys 220

Leu GlyLeu Gly

Leu MetLeu Met

Ser HisSer His

Glu ValGlu Val

285285

Thr Tyr 300Thr Tyr 300

Val PheVal Phe

Ala LeuAla Leu

Ser TrpSer Trp

Val LeuVal Leu

175175

Pro Ser 190Pro Ser 190

Lys ProLys Pro

Asp LysAsp Lys

Gly ProGly Pro

Ile SerIle Ser

255255

Glu Asp 270Glu Asp 270

His AsnHis Asn

Arg ValArg Val

Tyr 80Tyr 80

CysCys

ThrThr

ProPro

GlyGly

Asn 160Asn 160

GlnGln

SerSer

SerSer

ThrThr

Ser 240Ser 240

ArgArg

ProPro

AlaAla

ValVal

- 1013 044346- 1013 044346

Ser Val Leu Thr Val 305Ser Val Leu Thr Val 305

Leu His Gln Asp Trp 310Leu His Gln Asp Trp 310

Leu Asn Gly Lys Glu 315Leu Asn Gly Lys Glu 315

Lys Cys Lys Val SerLys Cys Lys Val Ser

325325

Asn Lys Ala Leu ProAsn Lys Ala Leu Pro

330330

Ala Pro Ile Glu LysAla Pro Ile Glu Lys

335335

Ile Ser Lys Ala LysIle Ser Lys Ala Lys

340340

Gly Gln Pro Arg GluGly Gln Pro Arg Glu

345345

Pro Gln Val Tyr ThrPro Gln Val Tyr Thr

350350

Pro Pro Ser Arg GluPro Pro Ser Arg Glu

355355

Glu Met Thr Lys Asn 360Glu Met Thr Lys Asn 360

Gln Val Ser Leu ThrGln Val Ser Leu Thr

365365

Leu Val Lys Gly PheLeu Val Lys Gly Phe

370370

Tyr Pro Ser Asp IleTyr Pro Ser Asp Ile

375375

Ala Val Glu Trp GluAla Val Glu Trp Glu

380380

Asn Gly Gln Pro Glu 385Asn Gly Gln Pro Glu 385

Asn Asn Tyr Lys Thr 390Asn Asn Tyr Lys Thr 390

Thr Pro Pro Val Leu 395Thr Pro Pro Val Leu 395

Ser Asp Gly Ser PheSer Asp Gly Ser Phe

405405

Phe Leu Tyr Ser LysPhe Leu Tyr Ser Lys

410410

Leu Thr Val Asp LysLeu Thr Val Asp Lys

415415

Arg Trp Gln Gln GlyArg Trp Gln Gln Gly

420420

Asn Val Phe Ser CysAsn Val Phe Ser Cys

425425

Ser Val Met His GluSer Val Met His Glu

430430

Leu His Asn His TyrLeu His Asn His Tyr

435435

Thr Gln Lys Ser Leu 440Thr Gln Lys Ser Leu 440

Ser Leu Ser Pro Gly 445Ser Leu Ser Pro Gly 445

Gly Gly Gly Gly Ser 450Gly Gly Gly Gly Ser 450

Gly Gly Gly Gly Ser 455Gly Gly Gly Gly Ser 455

Asp Thr Gln Glu Lys 460Asp Thr Gln Glu Lys 460

Val Arg Ala Met Val 465Val Arg Ala Met Val 465

Gly Ser Asp Val Val 470Gly Ser Asp Val Val 470

Leu Ser Cys Ala Cys 475Leu Ser Cys Ala Cys 475

Glu Gly Ser Arg PheGlu Gly Ser Arg Phe

485485

Asp Leu Asn Asp ValAsp Leu Asn Asp Val

490490

Tyr Val Tyr Trp GlnTyr Val Tyr Trp Gln

495495

Ser Glu Ser Lys ThrSer Glu Ser Lys Thr

500500

Val Val Thr Tyr HisVal Val Thr Tyr His

505505

Ile Pro Gln His SerIle Pro Gln His Ser

510510

Leu Glu Tyr Val AspLeu Glu Tyr Val Asp

515515

Ser Arg Tyr Arg Asn 520Ser Arg Tyr Arg Asn 520

Arg Ala Leu Met SerArg Ala Leu Met Ser

525525

Ala Gly Met Leu ArgAla Gly Met Leu Arg

530530

Gly Asp Phe Ser LeuGly Asp Phe Ser Leu

535535

Arg Leu Phe Asn ValArg Leu Phe Asn Val

540540

Pro Gln Asp Glu Gln 545Pro Gln Asp Glu Gln 545

Lys Phe His Cys Leu 550Lys Phe His Cys Leu 550

Val Leu Ser Arg Ser 555Val Leu Ser Arg Ser 555

Tyr 320Tyr 320

ThrThr

LeuLeu

CysCys

SerSer

Asp 400Asp 400

SerSer

AlaAla

LysLys

GluGlu

Pro 480Pro 480

ThrThr

SerSer

ProPro

ThrThr

Leu 560Leu 560

- 1014 044346- 1014 044346

Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Asp 565Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Asp 565

Glu Val Thr Leu Arg Val Ala AlaGlu Val Thr Leu Arg Val Ala Ala

570 575570 575

Asn Phe Ser Val Pro Val Val SerAsn Phe Ser Val Pro Val Val Ser

580580

Ala Pro His Ser Pro Ser Gln AspAla Pro His Ser Pro Ser Gln Asp

585 590585 590

Glu Leu Thr Phe Thr Cys Thr SerGlu Leu Thr Phe Thr Cys Thr Ser

595 600595 600

Ile Asn Gly Tyr Pro Arg Pro Asn 605Ile Asn Gly Tyr Pro Arg Pro Asn 605

Val Cys Trp Ile Asn Met Thr AspVal Cys Trp Ile Asn Met Thr Asp

610 615610 615

Asn Ser Leu Leu Asp Gln Ala Leu 620Asn Ser Leu Leu Asp Gln Ala Leu 620

Gln Asn Asp Thr Val Phe Leu AsnGln Asn Asp Thr Val Phe Leu Asn

625 630625 630

Met Arg Gly Leu Tyr Asp Val ValMet Arg Gly Leu Tyr Asp Val Val

635 640635 640

Ser Val Leu Arg Ile Ala Arg Thr 645Ser Val Leu Arg Ile Ala Arg Thr 645

Ile Glu Asn Val Leu Leu Gln Gln 660Ile Glu Asn Val Leu Leu Gln Gln 660

Gly Asn Asp Ile Gly Glu Arg Asp 675680Gly Asn Asp Ile Gly Glu Arg Asp 675680

Pro Ser Val Asn Ile Gly Cys ArgPro Ser Val Asn Ile Gly Cys Arg

650655650655

Asn Leu Thr Val Gly Ser Gln ThrAsn Leu Thr Val Gly Ser Gln Thr

665670665670

Lys Ile Thr Glu Asn Pro Val Ser 685Lys Ile Thr Glu Asn Pro Val Ser 685

Thr Gly Glu Lys Asn Ala Ala ThrThr Gly Glu Lys Asn Ala Ala Thr

690695 <210>888 <211>696 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>690695 <210>888 <211>696 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> Атезолизумаб HC - ICOSL v39 ECD <400>888<223> Atezolizumab HC - ICOSL v39 ECD <400>888

Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly 15Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly 15

Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly GlyGly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly

10151015

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala 20Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala 20

Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Ser 25 30Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Ser 25 30

Trp Ile His Trp Val Arg Gln AlaTrp Ile His Trp Val Arg Gln Ala

4040

Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 45Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 45

Ala Trp Ile Ser Pro Tyr Gly GlyAla Trp Ile Ser Pro Tyr Gly Gly

5555

Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 60Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 60

- 1015 044346- 1015 044346

Lys 65Lys 65

LeuLeu

AlaAla

LeuLeu

LeuLeu

Cys 145Cys 145

SerSer

SerSer

SerSer

AsnAsn

His 225His 225

ValVal

ThrThr

GluGlu

LysLys

Ser 305Ser 305

Gly Arg PheGly Arg Phe

Gln Met AsnGln Met Asn

Arg Arg HisArg Arg His

100100

Val Thr ValVal Thr Val

115115

Ala Pro Ser 130Ala Pro Ser 130

Leu Val LysLeu Val Lys

Gly Ala LeuGly Ala Leu

Ser Gly LeuSer Gly Leu

180180

Leu Gly ThrLeu Gly Thr

195195

Thr Lys Val 210Thr Lys Val 210

Thr Cys ProThr Cys Pro

Phe Leu PhePhe Leu Phe

Pro Glu ValPro Glu Val

260260

Val Lys PheVal Lys Phe

275275

Thr Lys Pro 290Thr Lys Pro 290

Val Leu ThrVal Leu Thr

Thr Ile SerThr Ile Ser

Ser Leu Arg 85Ser Leu Arg 85

Trp Pro GlyTrp Pro Gly

Ser Ser AlaSer Ser Ala

Ser Lys SerSer Lys Ser

135135

Asp Tyr PheAsp Tyr Phe

150150

Thr Ser Gly 165Thr Ser Gly 165

Tyr Ser LeuTyr Ser Leu

Gln Thr TyrGln Thr Tyr

Asp Lys LysAsp Lys Lys

215215

Pro Cys ProPro Cys Pro

230230

Pro Pro Lys 245Pro Pro Lys 245

Thr Cys ValThr Cys Val

Asn Trp TyrAsn Trp Tyr

Arg Glu GluArg Glu Glu

295295

Val Leu HisVal Leu His

310310

Ala Asp ThrAla Asp Thr

Ala Glu AspAla Glu Asp

Gly Phe AspGly Phe Asp

105105

Ser Thr Lys 120Ser Thr Lys 120

Thr Ser GlyThr Ser Gly

Pro Glu ProPro Glu Pro

Val His ThrVal His Thr

170170

Ser Ser ValSer Ser Val

185185

Ile Cys Asn 200Ile Cys Asn 200

Val Glu ProVal Glu Pro

Ala Pro GluAla Pro Glu

Pro Lys AspPro Lys Asp

250250

Val Val AspVal Val Asp

265265

Val Asp Gly 280Val Asp Gly 280

Gln Tyr AlaGln Tyr Ala

Gln Asp TrpGln Asp Trp

Ser Lys Asn 75Ser Lys Asn 75

Thr Ala ValThr Ala Val

Tyr Trp GlyTyr Trp Gly

Gly Pro SerGly Pro Ser

125125

Gly Thr AlaGly Thr Ala

140140

Val Thr Val 155Val Thr Val 155

Phe Pro AlaPhe Pro Ala

Val Thr ValVal Thr Val

Val Asn HisVal Asn His

205205

Lys Ser CysLys Ser Cys

220220

Leu Leu Gly 235Leu Leu Gly 235

Thr Leu MetThr Leu Met

Val Ser HisVal Ser His

Val Glu ValVal Glu Val

285285

Ser Thr TyrSer Thr Tyr

300300

Leu Asn Gly 315Leu Asn Gly 315

Thr Ala TyrThr Ala Tyr

Tyr Tyr Cys 95Tyr Tyr Cys 95

Gln Gly Thr 110Gln Gly Thr 110

Val Phe ProVal Phe Pro

Ala Leu GlyAla Leu Gly

Ser Trp AsnSer Trp Asn

160160

Val Leu GlnVal Leu Gln

175175

Pro Ser Ser 190Pro Ser Ser 190

Lys Pro SerLys Pro Ser

Asp Lys ThrAsp Lys Thr

Gly Pro SerGly Pro Ser

240240

Ile Ser ArgIle Ser Arg

255255

Glu Asp Pro 270Glu Asp Pro 270

His Asn AlaHis Asn Ala

Arg Val ValArg Val Val

Lys Glu TyrLys Glu Tyr

320320

- 1016 044346- 1016 044346

LysLys

IleIle

ProPro

LeuLeu

Asn 385Asn 385

SerSer

ArgArg

LeuLeu

GlyGly

Val 465Val 465

GluGlu

SerSer

LeuLeu

AlaAla

Pro 545Pro 545

GlyGly

Cys Lys ValCys Lys Val

Ser Lys AlaSer Lys Ala

340340

Pro Ser ArgPro Ser Arg

355355

Val Lys Gly 370Val Lys Gly 370

Gly Gln ProGly Gln Pro

Asp Gly SerAsp Gly Ser

Trp Gln GlnTrp Gln Gln

420420

His Asn HisHis Asn His

435435

Gly Gly Gly 450Gly Gly Gly 450

Arg Ala MetArg Ala Met

Gly Ser ArgGly Ser Arg

Glu Ser LysGlu Ser Lys

500500

Glu Tyr ValGlu Tyr Val

515515

Gly Met Leu 530Gly Met Leu 530

Gln Asp GluGln Asp Glu

Phe Gln GluPhe Gln Glu

Ser Asn Lys 325Ser Asn Lys 325

Lys Gly GlnLys Gly Gln

Glu Glu MetGlu Glu Met

Phe Tyr ProPhe Tyr Pro

375375

Glu Asn AsnGlu Asn Asn

390390

Phe Phe Leu 405Phe Phe Leu 405

Gly Asn ValGly Asn Val

Tyr Thr GlnTyr Thr Gln

Ser Gly GlySer Gly Gly

455455

Val Gly SerVal Gly Ser

470470

Phe Asp Leu 485Phe Asp Leu 485

Thr Val ValThr Val Val

Asp Ser ArgAsp Ser Arg

Arg Gly AspArg Gly Asp

535535

Gln Lys PheGln Lys Phe

550550

Val Leu Ser 565Val Leu Ser 565

Ala Leu ProAla Leu Pro

330330

Ala Pro IleAla Pro Ile

Glu Lys ThrGlu Lys Thr

335335

Pro Arg GluPro Arg Glu

345345

Pro Gln ValPro Gln Val

Tyr Thr Leu 350Tyr Thr Leu 350

Thr Lys Asn 360Thr Lys Asn 360

Gln Val SerGln Val Ser

365365

Leu Thr CysLeu Thr Cys

Ser Asp IleSer Asp Ile

Tyr Lys ThrTyr Lys Thr

Tyr Ser LysTyr Ser Lys

410410

Phe Ser Cys 425Phe Ser Cys 425

Lys Ser Leu 440Lys Ser Leu 440

Gly Gly SerGly Gly Ser

Asp Val GluAsp Val Glu

Asn Asp ValAsn Asp Val

490490

Thr Tyr HisThr Tyr His

505505

Tyr Arg Asn 520Tyr Arg Asn 520

Phe Ser LeuPhe Ser Leu

His Cys LeuHis Cys Leu

Val Glu ValVal Glu Val

570570

Ala Val GluAla Val Glu

380380

Thr Pro Pro 395Thr Pro Pro 395

Leu Thr ValLeu Thr Val

Ser Val MetSer Val Met

Ser Leu SerSer Leu Ser

445445

Asp Thr GlnAsp Thr Gln

460460

Leu Ser Cys 475Leu Ser Cys 475

Tyr Val TyrTyr Val Tyr

Ile Pro GlnIle Pro Gln

Arg Ala LeuArg Ala Leu

525525

Arg Leu PheArg Leu Phe

540540

Val Leu Ser 555Val Leu Ser 555

Thr Leu HisThr Leu His

Trp Glu SerTrp Glu Ser

Val Leu AspVal Leu Asp

400400

Asp Lys Ser 415Asp Lys Ser 415

His Glu Ala 430His Glu Ala 430

Pro Gly LysPro Gly Lys

Glu Lys GluGlu Lys Glu

Ala Cys ProAla Cys Pro

480480

Trp Gln ThrTrp Gln Thr

495495

His Ser Ser 510His Ser Ser 510

Met Ser ProMet Ser Pro

Asn Val ThrAsn Val Thr

Arg Ser LeuArg Ser Leu

560560

Val Ala AlaVal Ala Ala

575575

- 1017 044346- 1017 044346

AsnAsn

PhePhe

SerSer

ValVal

580580

ProPro

ValVal

ValVal

SerSer

AlaAla

585585

ProPro

HisHis

SerSer

ProPro

Ser 590Ser 590

GlnGln

GluGlu

LeuLeu

ThrThr

595595

PhePhe

ThrThr

CysCys

ThrThr

SerSer

600600

IleIle

AsnAsn

GlyGly

TyrTyr

ProPro

605605

ArgArg

ProPro

ValVal

Tyr 610Tyr 610

TrpTrp

IleIle

AsnAsn

LysLys

ThrThr

615615

AspAsp

AsnAsn

SerSer

LeuLeu

LeuLeu

620620

AspAsp

GlnGln

AlaAla

GlnGln

625625

AsnAsn

AspAsp

ThrThr

ValVal

PhePhe

630630

LeuLeu

AsnAsn

MetMet

ArgArg

Gly 635Gly 635

LeuLeu

TyrTyr

AspAsp

ValVal

SerSer

ValVal

LeuLeu

ArgArg

IleIle

645645

AlaAla

ArgArg

ThrThr

ProPro

SerSer

650650

ValVal

AsnAsn

IleIle

GlyGly

Cys 655Cys 655

IleIle

GluGlu

AsnAsn

ValVal

660660

LeuLeu

LeuLeu

GlnGln

GlnGln

AsnAsn

665665

LeuLeu

ThrThr

ValVal

GlyGly

SerSer

670670

GlnGln

GlyGly

AsnAsn

Asp 675Asp 675

IleIle

GlyGly

GluGlu

ArgArg

Asp 680Asp 680

LysLys

IleIle

ThrThr

GluGlu

AsnAsn

685685

ProPro

ValVal

AspAsp

AsnAsn

LeuLeu

Val 640Val 640

CysCys

ThrThr

SerSer

ThrThr

Gly 690Gly 690

GluGlu

LysLys

AsnAsn

AlaAla

AlaAla

695695

Thr <210> 889 <211> 462 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Thr <210> 889 <211> 462 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> Атезолизумаб <400> 889<223> Atezolizumab <400> 889

Asp Ile Gln Met Thr 1 5Asp Ile Gln Met Thr 1 5

LC - ICOSL WT ECDLC - ICOSL WT ECD

Gln Ser Pro Ser SerGln Ser Pro Ser Ser

Leu Ser Ala Ser ValLeu Ser Ala Ser Val

Asp Arg Val Thr IleAsp Arg Val Thr Ile

Thr Cys Arg Ala SerThr Cys Arg Ala Ser

Gln Asp Val Ser Thr 30Gln Asp Val Ser Thr 30

Val Ala Trp Tyr Gln 35Val Ala Trp Tyr Gln 35

Gln Lys Pro Gly Lys 40Gln Lys Pro Gly Lys 40

Ala Pro Lys Leu Leu 45Ala Pro Lys Leu Leu 45

Tyr Ser Ala Ser Phe 50Tyr Ser Ala Ser Phe 50

Leu Tyr Ser Gly Val 55Leu Tyr Ser Gly Val 55

Pro Ser Arg Phe Ser 60Pro Ser Arg Phe Ser 60

Asp Phe Thr Leu Thr 70Asp Phe Thr Leu Thr 70

GlyGly

AlaAla

IleIle

GlyGly

Pro 80Pro 80

Ser Gly Ser Gly ThrSer Gly Ser Gly Thr

Ile Ser Ser Leu GlnIle Ser Ser Leu Gln

- 1018 044346- 1018 044346

GluGlu

ThrThr

ProPro

ThrThr

Lys 145Lys 145

GluGlu

SerSer

AlaAla

PhePhe

Asp 225Asp 225

LeuLeu

TyrTyr

IleIle

ArgArg

Arg 305Arg 305

ValVal

Asp Phe AlaAsp Phe Ala

Phe Gly GlnPhe Gly Gln

100100

Ser Val PheSer Val Phe

115115

Ala Ser Val 130Ala Ser Val 130

Val Gln TrpVal Gln Trp

Ser Val ThrSer Val Thr

Thr Leu ThrThr Leu Thr

180180

Cys Glu ValCys Glu Val

195195

Asn Arg Gly 210Asn Arg Gly 210

Thr Gln GluThr Gln Glu

Ser Cys AlaSer Cys Ala

Val Tyr TrpVal Tyr Trp

260260

Pro Gln AsnPro Gln Asn

275275

Ala Leu Met 290Ala Leu Met 290

Leu Phe AsnLeu Phe Asn

Leu Ser GlnLeu Ser Gln

Thr Tyr Tyr 85Thr Tyr Tyr 85

Gly Thr LysGly Thr Lys

Ile Phe ProIle Phe Pro

Val Cys LeuVal Cys Leu

135135

Lys Val AspLys Val Asp

150150

Glu Gln Asp 165Glu Gln Asp 165

Leu Ser LysLeu Ser Lys

Thr His GlnThr His Gln

Glu Cys GlyGlu Cys Gly

215215

Lys Glu ValLys Glu Val

230230

Cys Pro Glu 245Cys Pro Glu 245

Gln Thr SerGln Thr Ser

Ser Ser LeuSer Ser Leu

Ser Pro AlaSer Pro Ala

295295

Val Thr ProVal Thr Pro

310310

Ser Leu Gly 325Ser Leu Gly 325

Cys Gln Gln 90Cys Gln Gln 90

Tyr Leu TyrTyr Leu Tyr

His Pro AlaHis Pro Ala

Val Glu IleVal Glu Ile

105105

Pro Ser Asp 120Pro Ser Asp 120

Leu Asn AsnLeu Asn Asn

Asn Ala LeuAsn Ala Leu

Ser Lys AspSer Lys Asp

170170

Ala Asp TyrAla Asp Tyr

185185

Gly Leu Ser 200Gly Leu Ser 200

Gly Gly GlyGly Gly Gly

Arg Ala MetArg Ala Met

Gly Ser ArgGly Ser Arg

250250

Glu Ser LysGlu Ser Lys

265265

Glu Asn Val 280Glu Asn Val 280

Gly Met LeuGly Met Leu

Gln Asp GluGln Asp Glu

Phe Gln GluPhe Gln Glu

330330

Lys Arg ThrLys Arg Thr

Glu Gln LeuGlu Gln Leu

125125

Phe Tyr ProPhe Tyr Pro

140140

Gln Ser Gly 155Gln Ser Gly 155

Ser Thr TyrSer Thr Tyr

Glu Lys HisGlu Lys His

Ser Pro ValSer Pro Val

205205

Ser Gly GlySer Gly Gly

220220

Val Gly Ser 235Val Gly Ser 235

Phe Asp LeuPhe Asp Leu

Thr Val ValThr Val Val

Asp Ser ArgAsp Ser Arg

285285

Arg Gly AspArg Gly Asp

300300

Gln Lys Phe 315Gln Lys Phe 315

Val Leu SerVal Leu Ser

Val Ala Ala 110Val Ala Ala 110

Lys Ser GlyLys Ser Gly

Arg Glu AlaArg Glu Ala

Asn Ser GlnAsn Ser Gln

160160

Ser Leu SerSer Leu Ser

175175

Lys Val Tyr 190Lys Val Tyr 190

Thr Lys SerThr Lys Ser

Gly Gly SerGly Gly Ser

Asp Val GluAsp Val Glu

240240

Asn Asp ValAsn Asp Val

255255

Thr Tyr His 270Thr Tyr His 270

Tyr Arg AsnTyr Arg Asn

Phe Ser LeuPhe Ser Leu

His Cys LeuHis Cys Leu

320320

Val Glu ValVal Glu Val

335335

- 1019 044346- 1019 044346

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

340340

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

345345

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

350350

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

355355

Asp Glu Leu Thr Phe 360Asp Glu Leu Thr Phe 360

Thr Cys Thr Ser Ile 365Thr Cys Thr Ser Ile 365

Gly Tyr Pro Arg ProGly Tyr Pro Arg Pro

370370

Asn Val Tyr Trp IleAsn Val Tyr Trp Ile

375375

Asn Lys Thr Asp Asn 380Asn Lys Thr Asp Asn 380

Leu Leu Asp Gln Ala 385Leu Leu Asp Gln Ala 385

Leu Gln Asn Asp Thr 390Leu Gln Asn Asp Thr 390

Val Phe Leu Asn Met 395Val Phe Leu Asn Met 395

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

405405

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

410410

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

415415

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

420420

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

425425

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

430430

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

435435

Thr Gly Asn Asp Ile 440Thr Gly Asn Asp Ile 440

Gly Glu Arg Asp Lys 445Gly Glu Arg Asp Lys 445

ProPro

AsnAsn

SerSer

Arg 400Arg 400

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro ValThr Glu Asn Pro Val

450450

Ser Thr Gly Glu LysSer Thr Gly Glu Lys

455455

Asn Ala Ala ThrAsn Ala Ala Thr

460 <210> 890 <211> 462 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>460 <210> 890 <211> 462 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> Атезолизумаб <400> 890<223> Atezolizumab <400> 890

Asp Ile Gln Met Thr 1 5Asp Ile Gln Met Thr 1 5

LC - ICOSL v56 ECDLC - ICOSL v56 ECD

Gln Ser Pro Ser SerGln Ser Pro Ser Ser

Leu Ser Ala Ser ValLeu Ser Ala Ser Val

Asp Arg Val Thr IleAsp Arg Val Thr Ile

Thr Cys Arg Ala SerThr Cys Arg Ala Ser

Gln Asp Val Ser Thr 30Gln Asp Val Ser Thr 30

Val Ala Trp Tyr Gln 35Val Ala Trp Tyr Gln 35

Gln Lys Pro Gly Lys 40Gln Lys Pro Gly Lys 40

Ala Pro Lys Leu Leu 45Ala Pro Lys Leu Leu 45

Tyr Ser Ala Ser Phe 50Tyr Ser Ala Ser Phe 50

Leu Tyr Ser Gly Val 55Leu Tyr Ser Gly Val 55

Pro Ser Arg Phe Ser 60Pro Ser Arg Phe Ser 60

Asp Phe Thr Leu Thr 70Asp Phe Thr Leu Thr 70

GlyGly

AlaAla

IleIle

GlyGly

Pro 80Pro 80

Ser Gly Ser Gly ThrSer Gly Ser Gly Thr

Ile Ser Ser Leu GlnIle Ser Ser Leu Gln

- 1020 044346- 1020 044346

Glu Asp Phe Ala Thr 85Glu Asp Phe Ala Thr 85

Tyr Tyr Cys Gln Gln 90Tyr Tyr Cys Gln Gln 90

Tyr Leu Tyr His Pro 95Tyr Leu Tyr His Pro 95

Thr Phe Gly Gln GlyThr Phe Gly Gln Gly

100100

Thr Lys Val Glu IleThr Lys Val Glu Ile

105105

Lys Arg Thr Val AlaLys Arg Thr Val Ala

110110

Pro Ser Val Phe IlePro Ser Val Phe Ile

115115

Phe Pro Pro Ser AspPhe Pro Pro Ser Asp

120120

Glu Gln Leu Lys Ser 125Glu Gln Leu Lys Ser 125

Thr Ala Ser Val ValThr Ala Ser Val Val

130130

Cys Leu Leu Asn AsnCys Leu Leu Asn Asn

135135

Phe Tyr Pro Arg Glu 140Phe Tyr Pro Arg Glu 140

Lys Val Gln Trp Lys 145Lys Val Gln Trp Lys 145

Val Asp Asn Ala Leu 150Val Asp Asn Ala Leu 150

Gln Ser Gly Asn Ser 155Gln Ser Gly Asn Ser 155

Glu Ser Val Thr GluGlu Ser Val Thr Glu

165165

Gln Asp Ser Lys AspGln Asp Ser Lys Asp

170170

Ser Thr Tyr Ser LeuSer Thr Tyr Ser Leu

175175

Ser Thr Leu Thr LeuSer Thr Leu Thr Leu

180180

Ser Lys Ala Asp TyrSer Lys Ala Asp Tyr

185185

Glu Lys His Lys ValGlu Lys His Lys Val

190190

Ala Cys Glu Val Thr 195Ala Cys Glu Val Thr 195

His Gln Gly Leu Ser 200His Gln Gly Leu Ser 200

Ser Pro Val Thr LysSer Pro Val Thr Lys

205205

Phe Asn Arg Gly Glu 210Phe Asn Arg Gly Glu 210

Cys Gly Gly Gly GlyCys Gly Gly Gly Gly

215215

Ser Gly Gly Gly GlySer Gly Gly Gly Gly

220220

Asp Thr Gln Glu Lys 225Asp Thr Gln Glu Lys 225

Glu Val Arg Ala Met 230Glu Val Arg Ala Met 230

Val Gly Ser Asp Val 235Val Gly Ser Asp Val 235

Leu Ser Cys Ala CysLeu Ser Cys Ala Cys

245245

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

250250

Phe Asp Leu Asn AspPhe Asp Leu Asn Asp

255255

Tyr Val Tyr Trp GlnTyr Val Tyr Trp Gln

260260

Thr Ser Glu Ser LysThr Ser Glu Ser Lys

265265

Thr Val Val Thr TyrThr Val Val Thr Tyr

270270

Ile Pro Gln His SerIle Pro Gln His Ser

275275

Ser Leu Glu Tyr ValSer Leu Glu Tyr Val

280280

Asp Ser Arg Tyr ArgAsp Ser Arg Tyr Arg

285285

Arg Ala Leu Met Ser 290Arg Ala Leu Met Ser 290

Pro Ala Gly Met LeuPro Ala Gly Met Leu

295295

Arg Gly Asp Phe Ser 300Arg Gly Asp Phe Ser 300

Arg Leu Phe Asn Val 305Arg Leu Phe Asn Val 305

Thr Pro Gln Asp Glu 310Thr Pro Gln Asp Glu 310

Gln Lys Phe His Cys 315Gln Lys Phe His Cys 315

Val Leu Ser Arg SerVal Leu Ser Arg Ser

325325

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

330330

Val Leu Ser Asp GluVal Leu Ser Asp Glu

335335

AlaAla

AlaAla

GlyGly

AlaAla

Gln 160Gln 160

SerSer

TyrTyr

SerSer

SerSer

Val 240Val 240

ValVal

HisHis

AsnAsn

LeuLeu

Leu 320Leu 320

ValVal

- 1021 044346- 1021 044346

Thr Leu Arg Val Ala Ala Asn Phe 340Thr Leu Arg Val Ala Ala Asn Phe 340

Ser Val Pro Val Val Ser Ala ProSer Val Pro Val Val Ser Ala Pro

345 350345 350

His Ser Pro Ser Gln Asp Glu Leu Thr Phe Thr Cys Thr SerHis Ser Pro Ser Gln Asp Glu Leu Thr Phe Thr Cys Thr Ser

355 360 365355 360 365

Ile AsnIle Asn

GlyGly

Tyr 370Tyr 370

ProPro

ArgArg

ProPro

AsnAsn

ValVal

375375

CysCys

TrpTrp

IleIle

AsnAsn

MetMet

380380

ThrThr

AspAsp

AsnAsn

SerSer

LeuLeu

385385

LeuLeu

AspAsp

GlnGln

AlaAla

LeuLeu

390390

GlnGln

AsnAsn

AspAsp

ThrThr

ValVal

395395

PhePhe

LeuLeu

AsnAsn

MetMet

Arg 400Arg 400

GlyGly

LeuLeu

TyrTyr

AspAsp

ValVal

405405

ValVal

SerSer

ValVal

LeuLeu

Arg 410Arg 410

IleIle

AlaAla

ArgArg

ThrThr

ProPro

415415

SerSer

Val Asn Ile Gly Cys Arg 420Val Asn Ile Gly Cys Arg 420

Thr Val Gly Ser Gln Thr 435Thr Val Gly Ser Gln Thr 435

Thr Glu Asn Pro Val Ser 450Thr Glu Asn Pro Val Ser 450

Ile Glu Asn Val Leu Leu Gln Gln AsnIle Glu Asn Val Leu Leu Gln Gln Asn

425 430425 430

Gly Asn Asp Ile Gly Glu Arg Asp LysGly Asn Asp Ile Gly Glu Arg Asp Lys

440 445440 445

Thr Gly Glu Lys Asn Ala Ala ThrThr Gly Glu Lys Asn Ala Ala Thr

455 460455 460

LeuLeu

Ile <210> 891 <211> 462 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Ile <210> 891 <211> 462 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> Атезолизумаб LC - ICOSL v39 ECD <400>891<223> Atezolizumab LC - ICOSL v39 ECD <400>891

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser ProAsp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro

Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val GlySer Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

10151015

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg 20Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg 20

Ala Ser Gln Asp Val Ser Thr Ala 25 30Ala Ser Gln Asp Val Ser Thr Ala 25 30

Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys ProVal Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro

4040

Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 45Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 45

Tyr Ser Ala Ser Phe Leu Tyr SerTyr Ser Ala Ser Phe Leu Tyr Ser

5555

Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 60Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr 65 70Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr 65 70

Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln ProLeu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro

8080

- 1022 044346- 1022 044346

Glu Asp Phe Ala Thr 85Glu Asp Phe Ala Thr 85

Tyr Tyr Cys Gln Gln 90Tyr Tyr Cys Gln Gln 90

Tyr Leu Tyr His Pro 95Tyr Leu Tyr His Pro 95

Thr Phe Gly Gln GlyThr Phe Gly Gln Gly

100100

Thr Lys Val Glu IleThr Lys Val Glu Ile

105105

Lys Arg Thr Val AlaLys Arg Thr Val Ala

110110

Pro Ser Val Phe IlePro Ser Val Phe Ile

115115

Phe Pro Pro Ser AspPhe Pro Pro Ser Asp

120120

Glu Gln Leu Lys Ser 125Glu Gln Leu Lys Ser 125

Thr Ala Ser Val ValThr Ala Ser Val Val

130130

Cys Leu Leu Asn AsnCys Leu Leu Asn Asn

135135

Phe Tyr Pro Arg Glu 140Phe Tyr Pro Arg Glu 140

Lys Val Gln Trp Lys 145Lys Val Gln Trp Lys 145

Val Asp Asn Ala Leu 150Val Asp Asn Ala Leu 150

Gln Ser Gly Asn Ser 155Gln Ser Gly Asn Ser 155

Glu Ser Val Thr GluGlu Ser Val Thr Glu

165165

Gln Asp Ser Lys AspGln Asp Ser Lys Asp

170170

Ser Thr Tyr Ser LeuSer Thr Tyr Ser Leu

175175

Ser Thr Leu Thr LeuSer Thr Leu Thr Leu

180180

Ser Lys Ala Asp TyrSer Lys Ala Asp Tyr

185185

Glu Lys His Lys ValGlu Lys His Lys Val

190190

Ala Cys Glu Val Thr 195Ala Cys Glu Val Thr 195

His Gln Gly Leu Ser 200His Gln Gly Leu Ser 200

Ser Pro Val Thr LysSer Pro Val Thr Lys

205205

Phe Asn Arg Gly Glu 210Phe Asn Arg Gly Glu 210

Cys Gly Gly Gly GlyCys Gly Gly Gly Gly

215215

Ser Gly Gly Gly GlySer Gly Gly Gly Gly

220220

Asp Thr Gln Glu Lys 225Asp Thr Gln Glu Lys 225

Glu Val Arg Ala Met 230Glu Val Arg Ala Met 230

Val Gly Ser Asp Val 235Val Gly Ser Asp Val 235

Leu Ser Cys Ala CysLeu Ser Cys Ala Cys

245245

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

250250

Phe Asp Leu Asn AspPhe Asp Leu Asn Asp

255255

Tyr Val Tyr Trp GlnTyr Val Tyr Trp Gln

260260

Thr Ser Glu Ser LysThr Ser Glu Ser Lys

265265

Thr Val Val Thr TyrThr Val Val Thr Tyr

270270

Ile Pro Gln His SerIle Pro Gln His Ser

275275

Ser Leu Glu Tyr ValSer Leu Glu Tyr Val

280280

Asp Ser Arg Tyr ArgAsp Ser Arg Tyr Arg

285285

Arg Ala Leu Met Ser 290Arg Ala Leu Met Ser 290

Pro Ala Gly Met LeuPro Ala Gly Met Leu

295295

Arg Gly Asp Phe Ser 300Arg Gly Asp Phe Ser 300

Arg Leu Phe Asn Val 305Arg Leu Phe Asn Val 305

Thr Pro Gln Asp Glu 310Thr Pro Gln Asp Glu 310

Gln Lys Phe His Cys 315Gln Lys Phe His Cys 315

Val Leu Ser Arg SerVal Leu Ser Arg Ser

325325

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

330330

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

335335

AlaAla

AlaAla

GlyGly

AlaAla

Gln 160Gln 160

SerSer

TyrTyr

SerSer

SerSer

Glu 240Glu 240

ValVal

HisHis

AsnAsn

LeuLeu

Leu 320Leu 320

ValVal

- 1023 044346- 1023 044346

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

340340

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

345345

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

350350

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

355355

Asp Glu Leu Thr Phe 360Asp Glu Leu Thr Phe 360

Thr Cys Thr Ser Ile 365Thr Cys Thr Ser Ile 365

Gly Tyr Pro Arg ProGly Tyr Pro Arg Pro

370370

Asn Val Tyr Trp IleAsn Val Tyr Trp Ile

375375

Asn Lys Thr Asp Asn 380Asn Lys Thr Asp Asn 380

Leu Leu Asp Gln Ala 385Leu Leu Asp Gln Ala 385

Leu Gln Asn Asp Thr 390Leu Gln Asn Asp Thr 390

Val Phe Leu Asn Met 395Val Phe Leu Asn Met 395

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

405405

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

410410

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

415415

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

420420

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

425425

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

430430

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

435435

Thr Gly Asn Asp Ile 440Thr Gly Asn Asp Ile 440

Gly Glu Arg Asp Lys 445Gly Glu Arg Asp Lys 445

ProPro

AsnAsn

SerSer

Arg 400Arg 400

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro ValThr Glu Asn Pro Val

450450

Ser Thr Gly Glu LysSer Thr Gly Glu Lys

455455

Asn Ala Ala ThrAsn Ala Ala Thr

460 <210> 892 <211> 582 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>460 <210> 892 <211> 582 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v5 IgV <400> 892<223> ICOSL v5 IgV <400> 892

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

- Атезолизумаб HC- Atezolizumab HC

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

LeuLeu

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

- 1024 044346- 1024 044346

ArgArg

ValVal

ThrThr

SerSer

Leu 145Leu 145

PhePhe

LysLys

TyrTyr

SerSer

Thr 225Thr 225

TyrTyr

GlyGly

GlyGly

ValVal

Phe 305Phe 305

ValVal

Leu Phe AsnLeu Phe Asn

Leu Ser ProLeu Ser Pro

100100

Leu His ValLeu His Val

115115

Gly Gly Gly 130Gly Gly Gly 130

Val Gln ProVal Gln Pro

Thr Phe SerThr Phe Ser

Gly Leu GluGly Leu Glu

180180

Tyr Ala AspTyr Ala Asp

195195

Lys Asn Thr 210Lys Asn Thr 210

Ala Val TyrAla Val Tyr

Trp Gly GlnTrp Gly Gln

Pro Ser ValPro Ser Val

260260

Thr Ala AlaThr Ala Ala

275275

Thr Val Ser 290Thr Val Ser 290

Pro Ala ValPro Ala Val

Thr Val ProThr Val Pro

Val Thr Pro 85Val Thr Pro 85

Ser Leu GlySer Leu Gly

Ala Ala AsnAla Ala Asn

Gly Ser GluGly Ser Glu

135135

Gly Gly SerGly Gly Ser

150150

Asp Ser Trp 165Asp Ser Trp 165

Trp Val AlaTrp Val Ala

Ser Val LysSer Val Lys

Ala Tyr LeuAla Tyr Leu

215215

Tyr Cys AlaTyr Cys Ala

230230

Gly Thr Leu 245Gly Thr Leu 245

Phe Pro LeuPhe Pro Leu

Leu Gly CysLeu Gly Cys

Trp Asn SerTrp Asn Ser

295295

Leu Gln SerLeu Gln Ser

310310

Ser Ser Ser 325Ser Ser Ser 325

Gln Asp GluGln Asp Glu

Gln Lys PheGln Lys Phe

His Cys Leu 95His Cys Leu 95

Phe Gln GluPhe Gln Glu

105105

Phe Ser Val 120Phe Ser Val 120

Val Gln LeuVal Gln Leu

Leu Arg LeuLeu Arg Leu

Ile His TrpIle His Trp

170170

Trp Ile SerTrp Ile Ser

185185

Gly Arg Phe 200Gly Arg Phe 200

Gln Met AsnGln Met Asn

Arg Arg HisArg Arg His

Val Thr ValVal Thr Val

250250

Ala Pro SerAla Pro Ser

265265

Leu Val Lys 280Leu Val Lys 280

Gly Ala LeuGly Ala Leu

Ser Gly LeuSer Gly Leu

Leu Gly ThrLeu Gly Thr

330330

Val Leu SerVal Leu Ser

Val Glu Val 110Val Glu Val 110

Gly Ser GlyGly Ser Gly

125125

Gly Gly GlyGly Gly Gly

Val Glu SerVal Glu Ser

140140

Gly Gly GlyGly Gly Gly

Ser Cys Ala 155Ser Cys Ala 155

Ala Ser GlyAla Ser Gly

160160

Val Arg GlnVal Arg Gln

Ala Pro GlyAla Pro Gly

175175

Pro Tyr GlyPro Tyr Gly

Thr Ile SerThr Ile Ser

205205

Ser Leu ArgSer Leu Arg

220220

Trp Pro Gly 235Trp Pro Gly 235

Ser Ser AlaSer Ser Ala

Ser Lys SerSer Lys Ser

Asp Tyr PheAsp Tyr Phe

285285

Thr Ser Gly 300Thr Ser Gly 300

Tyr Ser Leu 315Tyr Ser Leu 315

Gln Thr TyrGln Thr Tyr

Gly Ser Thr 190Gly Ser Thr 190

Ala Asp ThrAla Asp Thr

Ala Glu AspAla Glu Asp

Gly Phe AspGly Phe Asp

240240

Ser Thr LysSer Thr Lys

255255

Thr Ser Gly 270Thr Ser Gly 270

Pro Glu ProPro Glu Pro

Val His ThrVal His Thr

Ser Ser ValSer Ser Val

320320

Ile Cys AsnIle Cys Asn

335335

- 1025 044346- 1025 044346

ValVal

LysLys

LeuLeu

Thr 385Thr 385

ValVal

ValVal

SerSer

LeuLeu

Ala 465Ala 465

ProPro

GlnGln

AlaAla

ThrThr

Leu 545Leu 545

SerSer

SerSer

Asn HisAsn His

Ser CysSer Cys

355355

Leu Gly 370Leu Gly 370

Leu MetLeu Met

Ser HisSer His

Glu ValGlu Val

Thr TyrThr Tyr

435435

Asn Gly 450Asn Gly 450

Pro IlePro Ile

Gln ValGln Val

Val SerVal Ser

Val GluVal Glu

515515

Pro Pro 530Pro Pro 530

Thr ValThr Val

Val MetVal Met

Leu SerLeu Ser

Lys Pro 340Lys Pro 340

Asp LysAsp Lys

Gly ProGly Pro

Ile SerIle Ser

Glu AspGlu Asp

405405

His Asn 420His Asn 420

Arg ValArg Val

Lys GluLys Glu

Glu LysGlu Lys

Tyr ThrTyr Thr

485485

Leu Thr 500Leu Thr 500

Trp GluTrp Glu

Val LeuVal Leu

Asp LysAsp Lys

His GluHis Glu

565565

Pro GlyPro Gly

Ser AsnSer Asn

Thr HisThr His

Ser ValSer Val

375375

Arg Thr 390Arg Thr 390

Pro GluPro Glu

Ala LysAla Lys

Val SerVal Ser

Tyr LysTyr Lys

455455

Thr Ile 470Thr Ile 470

Leu ProLeu Pro

Cys LeuCys Leu

Ser AsnSer Asn

Asp SerAsp Ser

535535

Ser Arg 550Ser Arg 550

Ala LeuAla Leu

LysLys

Thr LysThr Lys

345345

Thr Cys 360Thr Cys 360

Phe LeuPhe Leu

Pro GluPro Glu

Val LysVal Lys

Thr LysThr Lys

425425

Val Leu 440Val Leu 440

Cys LysCys Lys

Ser LysSer Lys

Pro SerPro Ser

Val LysVal Lys

505505

Gly Gln 520Gly Gln 520

Asp GlyAsp Gly

Trp GlnTrp Gln

His AsnHis Asn

Val AspVal Asp

Pro ProPro Pro

Phe ProPhe Pro

Val ThrVal Thr

395395

Phe AsnPhe Asn

410410

Pro ArgPro Arg

Thr ValThr Val

Val SerVal Ser

Ala LysAla Lys

475475

Arg Glu 490Arg Glu 490

Gly PheGly Phe

Pro GluPro Glu

Ser PheSer Phe

Gln GlyGln Gly

555555

His Tyr 570His Tyr 570

Lys LysLys Lys

Cys ProCys Pro

365365

Pro Lys 380Pro Lys 380

Cys ValCys Val

Trp TyrTrp Tyr

Glu GluGlu Glu

Leu HisLeu His

445445

Asn Lys 460Asn Lys 460

Gly GlnGly Gln

Glu MetGluMet

Tyr ProTyr Pro

Asn AsnAsn Asn

525525

Phe Leu 540Phe Leu 540

Asn ValAsn Val

Thr GlnThr Gln

Val Glu 350Val Glu 350

Ala ProAla Pro

Pro LysPro Lys

Val ValVal Val

Val AspVal Asp

415415

Gln Tyr 430Gln Tyr 430

Gln AspGln Asp

Ala LeuAla Leu

Pro ArgPro Arg

Thr LysThr Lys

495495

Ser Asp 510Ser Asp 510

Tyr LysTyr Lys

Tyr SerTyr Ser

Phe SerPhe Ser

Lys SerLys Ser

575575

ProPro

GluGlu

AspAsp

Asp 400Asp 400

GlyGly

AlaAla

TrpTrp

ProPro

Glu 480Glu 480

AsnAsn

IleIle

ThrThr

LysLys

Cys 560Cys 560

LeuLeu

- 1026 044346- 1026 044346

580 <210> 893 <211> 580 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>580 <210> 893 <211> 580 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> Атезолизумаб HC - ICOSL v5 IgV < 400> 893< 223> Atezolizumab HC - ICOSL v5 IgV < 400> 893

Glu Val Gln Leu ValGlu Val Gln Leu Val

55

Glu Ser Gly Gly GlyGlu Ser Gly Gly Gly

Leu Val Gln Pro GlyLeu Val Gln Pro Gly

Ser Leu Arg Leu Ser 20Ser Leu Arg Leu Ser 20

Cys Ala Ala Ser GlyCys Ala Ala Ser Gly

Phe Thr Phe Ser Asp 30Phe Thr Phe Ser Asp 30

Trp Ile His Trp Val 35Trp Ile His Trp Val 35

Arg Gln Ala Pro Gly 40Arg Gln Ala Pro Gly 40

Lys Gly Leu Glu Trp 45Lys Gly Leu Glu Trp 45

Ala Trp Ile Ser Pro 50Ala Trp Ile Ser Pro 50

Tyr Gly Gly Ser Thr 55Tyr Gly Gly Ser Thr 55

Tyr Tyr Ala Asp Ser 60Tyr Tyr Ala Asp Ser 60

Lys Gly Arg Phe Thr 65Lys Gly Arg Phe Thr 65

Ile Ser Ala Asp Thr 70Ile Ser Ala Asp Thr 70

Ser Lys Asn Thr Ala 75Ser Lys Asn Thr Ala 75

Leu Gln Met Asn SerLeu Gln Met Asn Ser

Leu Arg Ala Glu Asp 90Leu Arg Ala Glu Asp 90

Thr Ala Val Tyr Tyr 95Thr Ala Val Tyr Tyr 95

Ala Arg Arg His TrpAla Arg Arg His Trp

100100

Pro Gly Gly Phe AspPro Gly Gly Phe Asp

105105

Tyr Trp Gly Gln GlyTyr Trp Gly Gln Gly

110110

Leu Val Thr Val SerLeu Val Thr Val Ser

115115

Ser Ala Ser Thr LysSer Ala Ser Thr Lys

120120

Gly Pro Ser Val PheGly Pro Ser Val Phe

125125

Leu Ala Pro Ser SerLeu Ala Pro Ser Ser

130130

Lys Ser Thr Ser Gly 135Lys Ser Thr Ser Gly 135

Gly Thr Ala Ala Leu 140Gly Thr Ala Ala Leu 140

Cys Leu Val Lys Asp 145Cys Leu Val Lys Asp 145

Tyr Phe Pro Glu Pro 150Tyr Phe Pro Glu Pro 150

Val Thr Val Ser Trp 155Val Thr Val Ser Trp 155

Ser Gly Ala Leu ThrSer Gly Ala Leu Thr

165165

Ser Gly Val His ThrSer Gly Val His Thr

170170

Phe Pro Ala Val LeuPhe Pro Ala Val Leu

175175

Ser Ser Gly Leu TyrSer Ser Gly Leu Tyr

180180

Ser Leu Ser Ser ValSer Leu Ser Ser Val

185185

Val Thr Val Pro SerVal Thr Val Pro Ser

190190

Ser Leu Gly Thr GlnSer Leu Gly Thr Gln

195195

Thr Tyr Ile Cys Asn 200Thr Tyr Ile Cys Asn 200

Val Asn His Lys ProVal Asn His Lys Pro

205205

GlyGly

SerSer

ValVal

ValVal

Tyr 80Tyr 80

CysCys

ThrThr

ProPro

GlyGly

Asn 160Asn 160

GlnGln

SerSer

SerSer

- 1027 044346- 1027 044346

AsnAsn

His 225His 225

ValVal

ThrThr

GluGlu

LysLys

Ser 305Ser 305

LysLys

IleIle

ProPro

LeuLeu

Asn 385Asn 385

SerSer

ArgArg

LeuLeu

GlyGly

Thr Lys Val 210Thr Lys Val 210

Thr Cys ProThr Cys Pro

Phe Leu PhePhe Leu Phe

Pro Glu ValPro Glu Val

260260

Val Lys PheVal Lys Phe

275275

Thr Lys Pro 290Thr Lys Pro 290

Val Leu ThrVal Leu Thr

Cys Lys ValCys Lys Val

Ser Lys AlaSer Lys Ala

340340

Pro Ser ArgPro Ser Arg

355355

Val Lys Gly 370Val Lys Gly 370

Gly Gln ProGly Gln Pro

Asp Gly SerAsp Gly Ser

Trp Gln GlnTrp Gln Gln

420420

His Asn HisHis Asn His

435435

Gly Gly GlyGly Gly Gly

Asp Lys LysAsp Lys Lys

215215

Val Glu ProVal Glu Pro

Lys Ser CysLys Ser Cys

220220

Asp Lys ThrAsp Lys Thr

Pro Cys ProPro Cys Pro

230230

Pro Pro Lys 245Pro Pro Lys 245

Thr Cys ValThr Cys Val

Asn Trp TyrAsn Trp Tyr

Arg Glu GluArg Glu Glu

295295

Val Leu HisVal Leu His

310310

Ser Asn Lys 325Ser Asn Lys 325

Lys Gly GlnLys Gly Gln

Glu Glu MetGlu Glu Met

Phe Tyr ProPhe Tyr Pro

375375

Glu Asn AsnGlu Asn Asn

390390

Phe Phe Leu 405Phe Phe Leu 405

Gly Asn ValGly Asn Val

Tyr Thr GlnTyr Thr Gln

Ser Gly GlySer Gly Gly

Ala Pro GluAla Pro Glu

Pro Lys AspPro Lys Asp

250250

Val Val AspVal Val Asp

265265

Val Asp Gly 280Val Asp Gly 280

Gln Tyr AlaGln Tyr Ala

Gln Asp TrpGln Asp Trp

Ala Leu ProAla Leu Pro

330330

Pro Arg GluPro Arg Glu

345345

Thr Lys Asn 360Thr Lys Asn 360

Ser Asp IleSer Asp Ile

Tyr Lys ThrTyr Lys Thr

Tyr Ser LysTyr Ser Lys

410410

Phe Ser Cys 425Phe Ser Cys 425

Lys Ser Leu 440Lys Ser Leu 440

Gly Gly SerGly Gly Ser

Leu Leu Gly 235Leu Leu Gly 235

Gly Pro SerGly Pro Ser

240240

Thr Leu MetThr Leu Met

Ile Ser ArgIle Ser Arg

255255

Val Ser HisVal Ser His

Val Glu ValVal Glu Val

285285

Ser Thr TyrSer Thr Tyr

300300

Leu Asn Gly 315Leu Asn Gly 315

Ala Pro IleAla Pro Ile

Pro Gln ValPro Gln Val

Gln Val SerGln Val Ser

365365

Ala Val GluAla Val Glu

380380

Thr Pro Pro 395Thr Pro Pro 395

Leu Thr ValLeu Thr Val

Ser Val MetSer Val Met

Ser Leu SerSer Leu Ser

445445

Asp Thr GlnAsp Thr Gln

Glu Asp Pro 270Glu Asp Pro 270

His Asn AlaHis Asn Ala

Arg Val ValArg Val Val

Lys Glu TyrLys Glu Tyr

320320

Glu Lys ThrGlu Lys Thr

335335

Tyr Thr Leu 350Tyr Thr Leu 350

Leu Thr CysLeu Thr Cys

Trp Glu SerTrp Glu Ser

Val Leu AspVal Leu Asp

400400

Asp Lys Ser 415Asp Lys Ser 415

His Glu Ala 430His Glu Ala 430

Pro Gly LysPro Gly Lys

Glu Lys GluGlu Lys Glu

- 1028 044346- 1028 044346

Cys Ala CysCys Ala Cys

450 455 460450 455 460

Val Arg Ala 465Val Arg Ala 465

Glu Gly SerGlu Gly Ser

Met Val Gly Ser Asp Val Glu Leu SerMet Val Gly Ser Asp Val Glu Leu Ser

470 475470 475

Arg Phe Asp Leu Asn Asp Val Tyr ValArg Phe Asp Leu Asn Asp Val Tyr Val

485 490485 490

Tyr Trp GlnTyr Trp Gln

495495

Ser Glu SerSer Glu Ser

Lys Thr Val Val Thr Tyr His Ile ProLys Thr Val Val Thr Tyr His Ile Pro

500 505500 505

Gln His SerGln His Ser

510510

Leu Glu TyrLeu Glu Tyr

515515

Val Asp Ser Arg Tyr Arg Asn Arg Ala 520Val Asp Ser Arg Tyr Arg Asn Arg Ala 520

Leu Met Ser 525Leu Met Ser 525

Ala Gly MetAla Gly Met

530530

Leu Arg Gly Asp PheLeu Arg Gly Asp Phe

535535

Ser Leu Arg Leu Phe Asn Val 540Ser Leu Arg Leu Phe Asn Val 540

Pro Gln Asp 545Pro Gln Asp 545

Glu Gln Lys Phe HisGlu Gln Lys Phe His

550550

Cys Leu Val Leu Ser Pro SerCys Leu Val Leu Ser Pro Ser

555555

Gly Phe GlnGly Phe Gln

Glu Val Leu Ser ValGlu Val Leu Ser Val

565565

Glu Val Thr Leu His Val AlaGlu Val Thr Leu His Val Ala

570 575570 575

Pro 480Pro 480

ThrThr

SerSer

ProPro

ThrThr

Leu 560Leu 560

AlaAla

Asn Phe Ser ValAsn Phe Ser Val

580 <210> 894 <211> 348 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>580 <210> 894 <211> 348 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v5 IgV - Атезолизумаб LC <400>894<223> ICOSL v5 IgV - Atezolizumab LC <400>894

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp ValAsp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val

5 10155 1015

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn AspLeu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp

25302530

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 4045Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 35 4045

Ile Pro Gln His Ser Ser Leu Glu Tyr Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 5560Ile Pro Gln His Ser Ser Leu Glu Tyr Val Asp Ser Arg Tyr Arg 50 5560

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

LeuLeu

Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 65 7075Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 65 7075

- 1029 044346- 1029 044346

ArgArg

ValVal

ThrThr

SerSer

Leu 145Leu 145

GlnGln

AlaAla

ProPro

IleIle

Tyr 225Tyr 225

LysLys

GluGlu

PhePhe

GlnGln

Ser 305Ser 305

GluGlu

Leu Phe AsnLeu Phe Asn

Leu Ser ProLeu Ser Pro

100100

Leu His ValLeu His Val

115115

Gly Gly Gly 130Gly Gly Gly 130

Ser Ala SerSer Ala Ser

Asp Val SerAsp Val Ser

Pro Lys LeuPro Lys Leu

180180

Ser Arg PheSer Arg Phe

195195

Ser Ser Leu 210Ser Ser Leu 210

Leu Tyr HisLeu Tyr His

Arg Thr ValArg Thr Val

Gln Leu LysGln Leu Lys

260260

Tyr Pro ArgTyr Pro Arg

275275

Ser Gly Asn 290Ser Gly Asn 290

Thr Tyr SerThr Tyr Ser

Lys His LysLys His Lys

Val Thr Pro 85Val Thr Pro 85

Ser Leu GlySer Leu Gly

Ala Ala AsnAla Ala Asn

Gly Ser AspGly Ser Asp

135135

Val Gly AspVal Gly Asp

150150

Thr Ala Val 165Thr Ala Val 165

Leu Ile TyrLeu Ile Tyr

Ser Gly SerSer Gly Ser

Gln Pro GluGln Pro Glu

215215

Pro Ala ThrPro Ala Thr

230230

Ala Ala Pro 245Ala Ala Pro 245

Ser Gly ThrSer Gly Thr

Glu Ala LysGlu Ala Lys

Ser Gln GluSer Gln Glu

295295

Leu Ser SerLeu Ser Ser

310310

Val Tyr AlaVal Tyr Ala

Gln Asp GluGln Asp Glu

Gln Lys PheGln Lys Phe

His Cys Leu 95His Cys Leu 95

Phe Gln GluPhe Gln Glu

105105

Phe Ser Val 120Phe Ser Val 120

Ile Gln MetIle Gln Met

Arg Val ThrArg Val Thr

Ala Trp TyrAla Trp Tyr

170170

Ser Ala SerSer Ala Ser

185185

Gly Ser Gly 200Gly Ser Gly 200

Asp Phe AlaAsp Phe Ala

Phe Gly GlnPhe Gly Gln

Ser Val PheSer Val Phe

250250

Ala Ser ValAla Ser Val

265265

Val Gln Trp 280Val Gln Trp 280

Ser Val ThrSer Val Thr

Thr Leu ThrThr Leu Thr

Cys Glu ValCys Glu Val

Val Leu SerVal Leu Ser

Val Glu Val 110Val Glu Val 110

Gly Ser GlyGly Ser Gly

125125

Thr Gln SerThr Gln Ser

140140

Ile Thr Cys 155Ile Thr Cys 155

Gln Gln LysGln Gln Lys

Phe Leu TyrPhe Leu Tyr

Thr Asp PheThr Asp Phe

205205

Thr Tyr TyrThr Tyr Tyr

220220

Gly Thr Lys 235Gly Thr Lys 235

Ile Phe ProIle Phe Pro

Val Cys LeuVal Cys Leu

Lys Val AspLys Val Asp

285285

Glu Gln AspGlu Gln Asp

300300

Leu Ser Lys 315Leu Ser Lys 315

Thr His GlnThr His Gln

Gly Gly GlyGly Gly Gly

Pro Ser SerPro Ser Ser

Arg Ala SerArg Ala Ser

160160

Pro Gly LysPro Gly Lys

175175

Ser Gly Val 190Ser Gly Val 190

Thr Leu ThrThr Leu Thr

Cys Gln GlnCys Gln Gln

Val Glu IleVal Glu Ile

240240

Pro Ser AspPro Ser Asp

255255

Leu Asn Asn 270Leu Asn Asn 270

Asn Ala LeuAsn Ala Leu

Ser Lys AspSer Lys Asp

Ala Asp TyrAla Asp Tyr

320320

Gly Leu SerGly Leu Ser

- 1030 044346- 1030 044346

325 330 335325 330 335

Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu CysSer Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys

340340

345 <210> 895 <211> 346 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>345 <210> 895 <211> 346 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> Атезолизумаб LC - ICOSL v5 IgV < 400> 895< 223> Atezolizumab LC - ICOSL v5 IgV < 400> 895

Asp Ile Gln Met Thr 1 5Asp Ile Gln Met Thr 1 5

Gln Ser Pro Ser SerGln Ser Pro Ser Ser

Leu Ser Ala Ser ValLeu Ser Ala Ser Val

Asp Arg Val Thr Ile 20Asp Arg Val Thr Ile 20

Thr Cys Arg Ala SerThr Cys Arg Ala Ser

Gln Asp Val Ser Thr 30Gln Asp Val Ser Thr 30

Val Ala Trp Tyr Gln 35Val Ala Trp Tyr Gln 35

Gln Lys Pro Gly Lys 40Gln Lys Pro Gly Lys 40

Ala Pro Lys Leu Leu 45Ala Pro Lys Leu Leu 45

Tyr Ser Ala Ser Phe 50Tyr Ser Ala Ser Phe 50

Leu Tyr Ser Gly Val 55Leu Tyr Ser Gly Val 55

Pro Ser Arg Phe Ser 60Pro Ser Arg Phe Ser 60

Ser Gly Ser Gly Thr 65Ser Gly Ser Gly Thr 65

Asp Phe Thr Leu Thr 70Asp Phe Thr Leu Thr 70

Ile Ser Ser Leu Gln 75Ile Ser Ser Leu Gln 75

Glu Asp Phe Ala Thr 85Glu Asp Phe Ala Thr 85

Tyr Tyr Cys Gln Gln 90Tyr Tyr Cys Gln Gln 90

Tyr Leu Tyr His Pro 95Tyr Leu Tyr His Pro 95

Thr Phe Gly Gln GlyThr Phe Gly Gln Gly

100100

Thr Lys Val Glu IleThr Lys Val Glu Ile

105105

Lys Arg Thr Val AlaLys Arg Thr Val Ala

110110

Pro Ser Val Phe IlePro Ser Val Phe Ile

115115

Phe Pro Pro Ser AspPhe Pro Pro Ser Asp

120120

Glu Gln Leu Lys Ser 125Glu Gln Leu Lys Ser 125

Thr Ala Ser Val ValThr Ala Ser Val Val

130130

Cys Leu Leu Asn AsnCys Leu Leu Asn Asn

135135

Phe Tyr Pro Arg GluPhe Tyr Pro Arg Glu

140140

Lys Val Gln Trp Lys 145Lys Val Gln Trp Lys 145

Val Asp Asn Ala Leu 150Val Asp Asn Ala Leu 150

Gln Ser Gly Asn Ser 155Gln Ser Gly Asn Ser 155

Glu Ser Val Thr GluGlu Ser Val Thr Glu

165165

Gln Asp Ser Lys AspGln Asp Ser Lys Asp

170170

Ser Thr Tyr Ser LeuSer Thr Tyr Ser Leu

175175

Ser Thr Leu Thr LeuSer Thr Leu Thr Leu

180180

Ser Lys Ala Asp TyrSer Lys Ala Asp Tyr

185185

Glu Lys His Lys ValGlu Lys His Lys Val

190190

GlyGly

AlaAla

IleIle

GlyGly

Pro 80Pro 80

AlaAla

AlaAla

GlyGly

AlaAla

Gln 160Gln 160

SerSer

TyrTyr

- 1031 044346- 1031 044346

Ala Cys Glu Val Thr 195Ala Cys Glu Val Thr 195

His Gln Gly Leu Ser 200His Gln Gly Leu Ser 200

Ser Pro Val Thr LysSer Pro Val Thr Lys

205205

Phe Asn Arg Gly Glu 210Phe Asn Arg Gly Glu 210

Cys Gly Gly Gly GlyCys Gly Gly Gly Gly

215215

Ser Gly Gly Gly GlySer Gly Gly Gly Gly

220220

Asp Thr Gln Glu Lys 225Asp Thr Gln Glu Lys 225

Glu Val Arg Ala Met 230Glu Val Arg Ala Met 230

Val Gly Ser Asp Val 235Val Gly Ser Asp Val 235

Leu Ser Cys Ala CysLeu Ser Cys Ala Cys

245245

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

250250

Phe Asp Leu Asn AspPhe Asp Leu Asn Asp

255255

Tyr Val Tyr Trp GlnTyr Val Tyr Trp Gln

260260

Thr Ser Glu Ser LysThr Ser Glu Ser Lys

265265

Thr Val Val Thr TyrThr Val Val Thr Tyr

270270

Ile Pro Gln His SerIle Pro Gln His Ser

275275

Ser Leu Glu Tyr ValSer Leu Glu Tyr Val

280280

Asp Ser Arg Tyr ArgAsp Ser Arg Tyr Arg

285285

Arg Ala Leu Met Ser 290Arg Ala Leu Met Ser 290

Pro Ala Gly Met LeuPro Ala Gly Met Leu

295295

Arg Gly Asp Phe Ser 300Arg Gly Asp Phe Ser 300

Arg Leu Phe Asn Val 305Arg Leu Phe Asn Val 305

Thr Pro Gln Asp Glu 310Thr Pro Gln Asp Glu 310

Gln Lys Phe His Cys 315Gln Lys Phe His Cys 315

Val Leu Ser Pro SerVal Leu Ser Pro Ser

325325

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

330330

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

335335

SerSer

SerSer

Glu 240Glu 240

ValVal

HisHis

AsnAsn

LeuLeu

Leu 320Leu 320

ValVal

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

340340

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

345 <210> 896 <211> 239 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>345 <210> 896 <211> 239 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> eGFP <400> 896<223> eGFP <400> 896

Met Val Ser Lys Gly Glu Glu Leu 1 5Met Val Ser Lys Gly Glu Glu Leu 1 5

Phe ThrPhe Thr

Gly Val Val Pro IleGly Val Val Pro Ile

Val Glu Leu Asp Gly Asp Val Asn 20Val Glu Leu Asp Gly Asp Val Asn 20

Gly His 25Gly His 25

Lys Phe Ser Val Ser 30Lys Phe Ser Val Ser 30

Glu Gly Glu Gly Asp Ala Thr TyrGlu Gly Glu Gly Asp Ala Thr Tyr

4040

Gly LysGly Lys

Leu Thr Leu Lys Phe 45Leu Thr Leu Lys Phe 45

LeuLeu

GlyGly

IleIle

- 1032 044346- 1032 044346

Cys Thr Thr Gly Lys 50Cys Thr Thr Gly Lys 50

Leu Pro Val Pro Trp 55Leu Pro Val Pro Trp 55

Pro Thr Leu Val Thr 60Pro Thr Leu Val Thr 60

Leu Thr Tyr Gly Val 65Leu Thr Tyr Gly Val 65

Gln Cys Phe Ser Arg 70Gln Cys Phe Ser Arg 70

Tyr Pro Asp His Met 75Tyr Pro Asp His Met 75

Gln His Asp Phe Phe 85Gln His Asp Phe Phe 85

Lys Ser Ala Met Pro 90Lys Ser Ala Met Pro 90

Glu Gly Tyr Val Gln 95Glu Gly Tyr Val Gln 95

Arg Thr Ile Phe PheArg Thr Ile Phe Phe

100100

Lys Asp Asp Gly AsnLys Asp Asp Gly Asn

105105

Tyr Lys Thr Arg AlaTyr Lys Thr Arg Ala

110110

Val Lys Phe Glu Gly 115Val Lys Phe Glu Gly 115

Asp Thr Leu Val Asn 120Asp Thr Leu Val Asn 120

Arg Ile Glu Leu Lys 125Arg Ile Glu Leu Lys 125

Ile Asp Phe Lys GluIle Asp Phe Lys Glu

130130

Asp Gly Asn Ile LeuAsp Gly Asn Ile Leu

135135

Gly His Lys Leu Glu 140Gly His Lys Leu Glu 140

Asn Tyr Asn Ser His 145Asn Tyr Asn Ser His 145

Asn Val Tyr Ile Met 150Asn Val Tyr Ile Met 150

Ala Asp Lys Gln Lys 155Ala Asp Lys Gln Lys 155

Gly Ile Lys Val AsnGly Ile Lys Val Asn

165165

Phe Lys Ile Arg HisPhe Lys Ile Arg His

170170

Asn Ile Glu Asp GlyAsn Ile Glu Asp Gly

175175

Val Gln Leu Ala AspVal Gln Leu Ala Asp

180180

His Tyr Gln Gln AsnHis Tyr Gln Gln Asn

185185

Thr Pro Ile Gly AspThr Pro Ile Gly Asp

190190

Pro Val Leu Leu ProPro Val Leu Leu Pro

195195

Asp Asn His Tyr Leu 200Asp Asn His Tyr Leu 200

Ser Thr Gln Ser AlaSer Thr Gln Ser Ala

205205

Ser Lys Asp Pro AsnSer Lys Asp Pro Asn

210210

Glu Lys Arg Asp HisGlu Lys Arg Asp His

215215

Met Val Leu Leu GluMet Val Leu Leu Glu

220220

ThrThr

Lys 80Lys 80

GluGlu

GluGlu

GlyGly

TyrTyr

Asn 160Asn 160

SerSer

GlyGly

LeuLeu

PhePhe

Val Thr Ala Ala Gly 225Val Thr Ala Ala Gly 225

Ile Thr Leu Gly Met 230Ile Thr Leu Gly Met 230

Asp Glu Leu Tyr Lys 235 <210> 897 <211> 68 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Asp Glu Leu Tyr Lys 235 <210> 897 <211> 68 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> шарнир и трансмембранный домен CD8 < 400> 897<223> CD8 hinge and transmembrane domain <400> 897

Lys Pro Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro 1 5 10 15Lys Pro Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro 1 5 10 15

ThrThr

- 1033 044346- 1033 044346

Ile Ala Ser Gln Pro 20Ile Ala Ser Gln Pro 20

Ala Gly Gly Ala Val 35Ala Gly Gly Ala Val 35

Tyr Ile Trp Ala Pro 50Tyr Ile Trp Ala Pro 50

Leu Ser Leu Arg 25Leu Ser Leu Arg 25

His Thr Arg Gly 40His Thr Arg Gly 40

Leu Ala Gly Thr 55Leu Ala Gly Thr 55

Pro Glu Ala Cys Arg Pro 30Pro Glu Ala Cys Arg Pro 30

Leu Asp Phe Ala Cys Asp 45Leu Asp Phe Ala Cys Asp 45

Cys Gly Val Leu Leu Leu 60Cys Gly Val Leu Leu Leu 60

AlaAla

IleIle

SerSer

Leu Val Ile Thr 65 <210> 898 <211> 431 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Leu Val Ile Thr 65 <210> 898 <211> 431 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> aнти-CD19 химерный антигенный рецептор CAR-2 < 400> 898<223>anti-CD19 chimeric antigen receptor CAR-2 <400>898

Asp Ile Gln Met Thr 1 5Asp Ile Gln Met Thr 1 5

Gln Thr Thr Ser SerGln Thr Thr Ser Ser

Leu Ser Ala Ser LeuLeu Ser Ala Ser Leu

Asp Arg Val Thr IleAsp Arg Val Thr Ile

Ser Cys Arg Ala SerSer Cys Arg Ala Ser

Gln Asp Ile Ser Lys 30Gln Asp Ile Ser Lys 30

Leu Asn Trp Tyr Gln 35Leu Asn Trp Tyr Gln 35

Gln Lys Pro Asp Gly 40Gln Lys Pro Asp Gly 40

Thr Val Lys Leu Leu 45Thr Val Lys Leu Leu 45

Tyr His Thr Ser Arg 50Tyr His Thr Ser Arg 50

Leu His Ser Gly Val 55Leu His Ser Gly Val 55

Pro Ser Arg Phe Ser 60Pro Ser Arg Phe Ser 60

Ser Gly Ser Gly Thr 65Ser Gly Ser Gly Thr 65

Asp Tyr Ser Leu Thr 70Asp Tyr Ser Leu Thr 70

Ile Ser Asn Leu Glu 75Ile Ser Asn Leu Glu 75

Glu Asp Ile Ala Thr 85Glu Asp Ile Ala Thr 85

Tyr Phe Cys Gln Gln 90Tyr Phe Cys Gln Gln 90

Gly Asn Thr Leu Pro 95Gly Asn Thr Leu Pro 95

Thr Phe Gly Gly GlyThr Phe Gly Gly Gly

100100

Thr Lys Leu Glu IleThr Lys Leu Glu Ile

105105

Thr Gly Ser Thr SerThr Gly Ser Thr Ser

110110

Ser Gly Lys Pro Gly 115Ser Gly Lys Pro Gly 115

Ser Gly Glu Gly Ser 120Ser Gly Glu Gly Ser 120

Thr Lys Gly Glu ValThr Lys Gly Glu Val

125125

Leu Gln Glu Ser Gly 130Leu Gln Glu Ser Gly 130

Pro Gly Leu Val AlaPro Gly Leu Val Ala

135135

Pro Ser Gln Ser LeuPro Ser Gln Ser Leu

140140

GlyGly

TyrTyr

IleIle

GlyGly

Gln 80Gln 80

TyrTyr

GlyGly

LysLys

SerSer

SerSer

Val Thr Cys Thr ValVal Thr Cys Thr Val

Ser Gly Val Ser LeuSer Gly Val Ser Leu

Pro Asp Tyr Gly ValPro Asp Tyr Gly Val

- 1034 044346- 1034 044346

150150

155155

Gly ValGly Val

175175

145145

TrpTrp

TrpTrp

ThrThr

SerSer

Tyr 225Tyr 225

ValVal

ArgArg

ArgArg

GlyGly

Thr 305Thr 305

ValVal

AsnAsn

ValVal

ArgArg

Lys 385Lys 385

Ile ArgIle Arg

Gly SerGly Ser

Ile IleIle Ile

195195

Leu GlnLeu Gln

210210

Tyr GlyTyr Gly

Thr ValThr Val

Pro ProPro Pro

Pro GluPro Glu

275275

Leu Asp 290Leu Asp 290

Cys GlyCys Gly

Lys PheLys Phe

Gln LeuGln Leu

Leu AspLeu Asp

355355

Arg Lys 370Arg Lys 370

Met AlaMet Ala

Gln ProGlin Pro

165165

Glu Thr 180Glu Thr 180

Lys AspLys Asp

Thr AspThr Asp

Gly SerGly Ser

Ser SerSer Ser

245245

Thr ProThr Pro

260260

Ala SerAla Ser

Phe AlaPhe Ala

Val LeuVal Leu

Ser ArgSer Arg

325325

Tyr Asn 340Tyr Asn 340

Lys ArgLys Arg

Asn ProAsn Pro

Glu AlaGlu Ala

Pro ArgPro Arg

Thr TyrThr Tyr

Asn SerAsn Ser

Asp ThrAsp Thr

215215

Tyr Ala 230Tyr Ala 230

Ala SerAla Ser

Ala ProAla Pro

Arg ProArg Pro

Ser AspSer Asp

295295

Leu Leu 310Leu Leu 310

Ser AlaSer Ala

Glu LeuGlu Leu

Arg GlyArg Gly

Gln GluGln Glu

375375

Tyr Ser 390Tyr Ser 390

Lys GlyLys Gly

Tyr AsnTyr Asn

185185

Lys Ser 200Lys Ser 200

Ala IleAla Ile

Met AspMet Asp

Ala LysAla Lys

Thr IleThr Ile

265265

Ala Ala 280Ala Ala 280

Ile TyrIle Tyr

Ser LeuSer Leu

Asp AlaAsp Ala

Asn LeuAsn Leu

345345

Arg Asp 360Arg Asp 360

Gly LeuGly Leu

Glu IleGlu Ile

Leu Glu 170Leu Glu 170

Ser AlaSer Ala

Gln ValGln Val

Tyr TyrTyr Tyr

Tyr TrpTyr Trp

235235

Pro Thr 250Pro Thr 250

Ala SerAla Ser

Gly GlyGly Gly

Ile TrpIle Trp

Val IleVal Ile

315315

Pro Ala 330Pro Ala 330

Gly ArgGly Arg

Pro GluPro Glu

Tyr AsnTyr Asn

Gly MetGly Met

395395

Trp LeuTrp Leu

Leu LysLeu Lys

Phe LeuPhe Leu

205205

Cys Ala 220Cys Ala 220

Gly GlnGly Gln

Thr ThrThr Thr

Gln ProGlin Pro

Ala ValAla Val

285285

Ala Pro 300Ala Pro 300

Thr LeuThr Leu

Tyr GlnTyr Gln

Arg GluArg Glu

Met GlyMet Gly

365365

Glu Leu 380Glu Leu 380

Lys GlyLys Gly

Ser Arg 190Ser Arg 190

Lys MetLys Met

Lys HisLys His

Gly ThrGly Thr

Pro AlaPro Ala

255255

Leu SerLeu Ser

270270

His ThrHis Thr

Leu AlaLeu Ala

Tyr CysTyr Cys

Gln GlyGln Gly

335335

Glu Tyr 350Glu Tyr 350

Gly LysGly Lys

Gln LysGln Lys

Glu ArgGlu Arg

160160

IleIle

LeuLeu

AsnAsn

TyrTyr

Ser 240Ser 240

ProPro

LeuLeu

ArgArg

GlyGly

Arg 320Arg 320

GlnGln

AspAsp

ProPro

AspAsp

Arg 400Arg 400

- 1035 044346- 1035 044346

Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr AlaArg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala

405 410 415405 410 415

ThrThr

Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro ArgLys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg

420 425 430 <210> 899 <211> 707 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>420 425 430 <210> 899 <211> 707 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> aнти-CD19 химерный антигенный рецептор CAR-2 < 400> 899<223>anti-CD19 chimeric antigen receptor CAR-2 <400>899

Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu 1 5 10 15Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu 1 5 10 15

His Ala Ala Arg Pro Asp Ile Gln Met Thr Gln Thr Thr Ser SerHis Ala Ala Arg Pro Asp Ile Gln Met Thr Gln Thr Thr Ser Ser

25 3025 30

Ser Ala Ser Leu Gly Asp Arg Val Thr Ile Ser Cys Arg Ala Ser 35 40 45Ser Ala Ser Leu Gly Asp Arg Val Thr Ile Ser Cys Arg Ala Ser 35 40 45

Asp Ile Ser 50Asp Ile Ser 50

Val Lys Leu 65Val Lys Leu 65

Ser Arg PheSer Arg Phe

Lys Tyr Leu Asn Trp Tyr 55Lys Tyr Leu Asn Trp Tyr 55

Leu Ile Tyr His Thr Ser 70Leu Ile Tyr His Thr Ser 70

Ser Gly Ser Gly Ser Gly 85Ser Gly Ser Gly Ser Gly 85

Gln Gln Lys Pro Asp Gly 60Gln Gln Lys Pro Asp Gly 60

Arg Leu His Ser Gly Val 75Arg Leu His Ser Gly Val 75

Thr Asp Tyr Ser Leu Thr 90 95Thr Asp Tyr Ser Leu Thr 90 95

Ser Asn Leu Glu Gln Glu AspSer Asn Leu Glu Gln Glu Asp

100100

Ile Ala Thr Tyr Phe Cys Gln GlnIle Ala Thr Tyr Phe Cys Gln Gln

105 110105 110

Asn Thr Leu Pro Tyr Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu IleAsn Thr Leu Pro Tyr Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile

115 120 125115 120 125

Gly Ser Thr Ser 130Gly Ser Thr Ser 130

Gly Ser Gly Lys Pro Gly Ser Gly Glu Gly SerGly Ser Gly Lys Pro Gly Ser Gly Glu Gly Ser

135 140135 140

Lys Gly Glu Val 145Lys Gly Glu Val 145

Lys Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val AlaLys Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Ala

150 155150 155

Ser Gln Ser LeuSer Gln Ser Leu

Ser Val Thr Cys Thr Val Ser Gly Val Ser LeuSer Val Thr Cys Thr Val Ser Gly Val Ser Leu

165 170 175165 170 175

LeuLeu

LeuLeu

GlnGln

ThrThr

Pro 80Pro 80

IleIle

GlyGly

ThrThr

ThrThr

Pro 160Pro 160

ProPro

GluGlu

Asp Tyr Gly Val Ser Trp Ile ArgAsp Tyr Gly Val Ser Trp Ile Arg

Gln Pro Pro Arg Lys Gly LeuGln Pro Pro Arg Lys Gly Leu

- 1036 044346- 1036 044346

180180

185185

190190

Trp Leu Gly Val IleTrp Leu Gly Val Ile

195195

Trp Gly Ser Glu Thr 200Trp Gly Ser Glu Thr 200

Thr Tyr Tyr Asn SerThr Tyr Tyr Asn Ser

205205

Leu Lys Ser Arg LeuLeu Lys Ser Arg Leu

210210

Thr Ile Ile Lys AspThr Ile Ile Lys Asp

215215

Asn Ser Lys Ser Gln 220Asn Ser Lys Ser Gln 220

Phe Leu Lys Met Asn 225Phe Leu Lys Met Asn 225

Ser Leu Gln Thr Asp 230Ser Leu Gln Thr Asp 230

Asp Thr Ala Ile Tyr 235Asp Thr Ala Ile Tyr 235

Cys Ala Lys His TyrCys Ala Lys His Tyr

245245

Tyr Tyr Gly Gly SerTyr Tyr Gly Gly Ser

250250

Tyr Ala Met Asp TyrTyr Ala Met Asp Tyr

255255

Gly Gln Gly Thr SerGly Gln Gly Thr Ser

260260

Val Thr Val Ser SerVal Thr Val Ser Ser

265265

Ala Ser Ala Lys ProAla Ser Ala Lys Pro

270270

Thr Thr Pro Ala ProThr Thr Pro Ala Pro

275275

Arg Pro Pro Thr ProArg Pro Pro Thr Pro

280280

Ala Pro Thr Ile AlaAla Pro Thr Ile Ala

285285

Gln Pro Leu Ser LeuGln Pro Leu Ser Leu

290290

Arg Pro Glu Ala SerArg Pro Glu Ala Ser

295295

Arg Pro Ala Ala Gly 300Arg Pro Ala Ala Gly 300

Ala Val His Thr Arg 305Ala Val His Thr Arg 305

Gly Leu Asp Phe Ala 310Gly Leu Asp Phe Ala 310

Ser Asp Ile Tyr Ile 315Ser Asp Ile Tyr Ile 315

Ala Pro Leu Ala GlyAla Pro Leu Ala Gly

325325

Thr Cys Gly Val LeuThr Cys Gly Val Leu

330330

Leu Leu Ser Leu ValLeu Leu Ser Leu Val

335335

Thr Leu Tyr Cys ArgThr Leu Tyr Cys Arg

340340

Val Lys Phe Ser ArgVal Lys Phe Ser Arg

345345

Ser Ala Asp Ala ProSer Ala Asp Ala Pro

350350

Tyr Gln Gln Gly GlnTyr Gln Gln Gly Gln

355355

Asn Gln Leu Tyr Asn 360Asn Gln Leu Tyr Asn 360

Glu Leu Asn Leu GlyGlu Leu Asn Leu Gly

365365

Arg Glu Glu Tyr AspArg Glu Glu Tyr Asp

370370

Val Leu Asp Lys ArgVal Leu Asp Lys Arg

375375

Arg Gly Arg Asp Pro 380Arg Gly Arg Asp Pro 380

Met Gly Gly Lys Pro 385Met Gly Gly Lys Pro 385

Arg Arg Lys Asn Pro 390Arg Arg Lys Asn Pro 390

Gln Glu Gly Leu Tyr 395Gln Glu Gly Leu Tyr 395

Glu Leu Gln Lys AspGlu Leu Gln Lys Asp

405405

Lys Met Ala Glu AlaLys Met Ala Glu Ala

410410

Tyr Ser Glu Ile GlyTyr Ser Glu Ile Gly

415415

Lys Gly Glu Arg ArgLys Gly Glu Arg Arg

420420

Arg Gly Lys Gly HisArg Gly Lys Gly His

425425

Asp Gly Leu Tyr GlnAsp Gly Leu Tyr Gln

430430

AlaAla

ValVal

Tyr 240Tyr 240

TrpTrp

ThrThr

SerSer

GlyGly

Trp 320Trp 320

IleIle

AlaAla

ArgArg

GluGlu

Asn 400Asn 400

MetMet

GlyGly

- 1037 044346- 1037 044346

LeuLeu

LeuLeu

Gly 465Gly 465

GluGlu

HisHis

GlnGln

PhePhe

Asn 545Asn 545

GlyGly

ThrThr

ValVal

LysLys

Asp 625Asp 625

GlyGly

ProPro

LeuLeu

Ser Thr AlaSer Thr Ala

435435

Thr Lys AspThr Lys Asp

Thr Tyr Asp 440Thr Tyr Asp 440

Ala Leu HisAla Leu His

445445

Met Gln AlaMet Gln Ala

Pro Pro Arg 450Pro Pro Arg 450

Gly Ser GlyGly Ser Gly

455455

Glu Gly ArgGlu Gly Arg

Gly Ser LeuGly Ser Leu

460460

Leu Thr CysLeu Thr Cys

Asp Val GluAsp Val Glu

Asn Met HisAsn Met His

Phe Lys CysPhe Lys Cys

500500

Thr Met ArgThr Met Arg

515515

Asp Ile Leu 530Asp Ile Leu 530

His Thr GlnHis Thr Gln

Phe Thr TrpPhe Thr Trp

Ala Thr GlnAla Thr Gln

580580

Lys Ile ArgLys Ile Arg

595595

Lys Thr Leu 610Lys Thr Leu 610

Gly Gly LeuGly Gly Leu

Ser His LeuSer His Leu

Ala Lys AsnAla Lys Asn

660660

Glu Arg IleGlu Arg Ile

675675

Glu Asn ProGlu Asn Pro

470470

Gly Pro SerGly Pro Ser

Arg Ser Glu 475Arg Ser Glu 475

Leu Ile LysLeu Ile Lys

480480

Met Lys Leu 485Met Lys Leu 485

Tyr Met GluTyr Met Glu

490490

Gly Thr ValGly Thr Val

Asp Asn HisAsp Asn His

495495

Thr Ser GluThr Ser Glu

Gly Glu GlyGly Glu Gly

505505

Lys Pro TyrLys Pro Tyr

Glu Gly Thr 510Glu Gly Thr 510

Ile Lys ValIle Lys Val

Ala Thr SerAla Thr Ser

535535

Gly Ile ProGly Ile Pro

550550

Glu Arg Val 565Glu Arg Val 565

Asp Thr SerAsp Thr Ser

Gly Val AsnGly Val Asn

Gly Trp GluGly Trp Glu

615615

Glu Gly ArgGlu Gly Arg

630630

Ile Ala Asn 645Ile Ala Asn 645

Leu Lys MetLeu Lys Met

Lys Glu AlaLys Glu Ala

Val Glu Gly 520Val Glu Gly 520

Phe Leu TyrPhe Leu Tyr

Asp Phe PheAsp Phe Phe

Thr Thr TyrThr Thr Tyr

570570

Leu Gln AspLeu Gln Asp

585585

Phe Thr Ser 600Phe Thr Ser 600

Ala Phe ThrAla Phe Thr

Asn Asp MetAsn Asp Met

Ile Lys ThrIle Lys Thr

650650

Pro Gly Val 6 65Pro Gly Val 6 65

Asn Asn Glu 680Asn Asn Glu 680

Gly Pro LeuGly Pro Leu

525525

Gly Ser LysGly Ser Lys

540540

Lys Gln Ser 555Lys Gln Ser 555

Glu Asp GlyGlu Asp Gly

Gly Cys LeuGly Cys Leu

Asn Gly ProAsn Gly Pro

605605

Glu Thr LeuGlu Thr Leu

620620

Ala Leu Lys 635Ala Leu Lys 635

Thr Tyr ArgThr Tyr Arg

Tyr Tyr ValTyr Tyr Val

Thr Tyr ValThr Tyr Val

685685

Pro Phe AlaPro Phe Ala

Thr Phe IleThr Phe Ile

Phe Pro GluPhe Pro Glu

560560

Gly Val LeuGly Val Leu

575575

Ile Tyr Asn 590Ile Tyr Asn 590

Val Met GlnVal Met Gln

Tyr Pro AlaTyr Pro Ala

Leu Val GlyLeu Val Gly

640640

Ser Lys LysSer Lys Lys

655655

Asp Tyr Arg 670Asp Tyr Arg 670

Glu Gln HisGlu Gln His

- 1038 044346- 1038 044346

Glu Val Ala Val Ala Arg Tyr Cys Asp Leu Pro Ser Lys Leu Gly HisGlu Val Ala Val Ala Arg Tyr Cys Asp Leu Pro Ser Lys Leu Gly His

690 695700690 695700

Lys Leu Asn 705 <210>900 <211>8708 <212> DNA <213> Искусственная последовательностьLys Leu Asn 705 <210>900 <211>8708 <212> DNA <213> Artificial sequence

<220> <223> aнти-CD19 химерный антигенный рецептор CAR-2 <220> <223> anti-CD19 chimeric antigen receptor CAR-2 <400> 900 agcttaatgt <400> 900 agcttaatgt agtcttatgc agtcttatgc aatactcttg aatactcttg tagtcttgca tagtcttgca acatggtaac acatggtaac gatgagttag gatgagttag 60 60 caacatgcct caacatgcct tacaaggaga tacaaggaga gaaaaagcac gaaaaagcac cgtgcatgcc cgtgcatgcc gattggtgga gattggtgga agtaaggtgg agtaaggtgg 120 120 tacgatcgtg tacgatcgtg ccttattagg ccttattagg aaggcaacag aaggcaacag acgggtctga acggggtctga catggattgg catggattgg acgaaccact acgaaccact 180 180 gaattgccgc gaattgccgc attgcagaga attgcagaga tattgtattt tattgtattt aagtgcctag aagtgcctag ctcgatacaa ctcgatacaa taaacgggtc taaacgggtc 240 240 tctctggtta tctctggtta gaccagatct gaccagatct gagcctggga gagcctggga gctctctggc gctctctggc taactaggga taactagga acccactgct acccactgct 300 300 taagcctcaa taagcctcaa taaagcttgc taaagcttgc cttgagtgct cttgagtgct tcaagtagtg tcaagtagtg tgtgcccgtc tgtgcccgtc tgttgtgtga tgttgtgtga 360 360 ctctggtaac ctctggtaac tagagatccc tagagatccc tcagaccctt tcagaccctt ttagtcagtg ttagtcagtg tggaaaatct tggaaaatct ctagcagtgg ctagcagtgg 420 420 cgcccgaaca cgcccgaaca gggacttgaa gggacttgaa agcgaaaggg agcgaaaggg aaaccagagg aaaccagagg agctctctcg agctctctcg acgcaggact acgcaggact 480 480 cggcttgctg cggcttgctg aagcgcgcac aagcgcgcac ggcaagaggc ggcaagaggc gaggggcggc gagggcggc gactggtgag gactggtgag tacgccaaaa tacgccaaaa 540 540 attttgacta attttgacta gcggaggcta gcggaggcta gaaggagaga gaaggagaga gatgggtgcg gatgggtgcg agagcgtcag agagcgtcag tattaagcgg tattaagcgg 600 600 gggagaatta gggagaatta gatcgcgatg gatcgcgatg ggaaaaaatt ggaaaaaatt cggttaaggc cggttaaggc cagggggaaa cagggggaaa gaaaaaatat gaaaaaatat 660 660 aaattaaaac aaattaaaac atatagtatg atatagtatg ggcaagcagg ggcaagcagg gagctagaac gagctagaac gattcgcagt gattcgcagt taatcctggc taatcctggc 720 720 ctgttagaaa ctgttagaaa catcagaagg catcagaagg ctgtagacaa ctgtagacaa atactgggac atactggac agctacaacc agctacaacc atcccttcag atcccttcag 780 780 acaggatcag acaggatcag aagaacttag aagaacttag atcattatat atcattatat aatacagtag aatacagtag caaccctcta caaccctta ttgtgtgcat ttgtgtgcat 840 840 caaaggatag caaaggatag agataaaaga agataaaaga caccaaggaa caccaaggaa gctttagaca gcttttagaca agatagagga agatagagga agagcaaaac agagcaaaac 900 900 aaaagtaaga aaaagtaaga ccaccgcaca ccaccgcaca gcaagcggcc gcaagcggcc gctgatcttc gctgatcttc agacctggag agacctggag gaggagatat gaggagatat 960 960 gagggacaat gagggacaat tggagaagtg tggagaagtg aattatataa aattatataa atataaagta atataaagta gtaaaaattg gtaaaaattg aaccattagg aaccatagg 1020 1020 agtagcaccc agtagcacc accaaggcaa accaaggcaa agagaagagt agagaagagt ggtgcagaga ggtgcagaga gaaaaaagag gaaaaaagag cagtgggaat cagtgggaat 1080 1080 aggagctttg aggagctttg ttccttgggt ttccttggggt tcttgggagc tcttggggagc agcaggaagc agcaggaagc actatgggcg actatggggcg cagcctcaat cagcctcaat 1140 1140 gacgctgacg gacgctgacg gtacaggcca gtacaggcca gacaattatt gacaattatt gtctggtata gtctggtata gtgcagcagc gtgcagcagc agaacaattt agaacaattt 1200 1200 gctgagggct gctgaggct attgaggcgc attgaggcgc aacagcatct aacagcatct gttgcaactc gttgcaactc acagtctggg acagtctggg gcatcaagca gcatcaagca 1260 1260 gctccaggca gctccaggca agaatcctgg agaatcctgg ctgtggaaag ctgtggaaag atacctaaag atacctaaag gatcaacagc gatcaacagc tcctggggat tcctggggat 1320 1320 ttggggttgc ttggggttgc tctggaaaac tctggaaaac tcatttgcac tcatttgcac cactgctgtg cactgctgtg ccttggaatg ccttggaatg ctagttggag ctagttggag 1380 1380

- 1039 044346 taataaatct ctggaacaga tttggaatca cacgacctgg atggagtggg acagagaaat 1440 taacaattac acaagcttaa tacactcctt aattgaagaa tcgcaaaacc agcaagaaaa1500 gaatgaacaa gaattattgg aattagataa atgggcaagt ttgtggaatt ggtttaacat1560 aacaaattgg ctgtggtata taaaattatt cataatgata gtaggaggct tggtaggttt1620 aagaatagtt tttgctgtac tttctatagt gaatagagtt aggcagggat attcaccatt1680 atcgtttcag acccacctcc caaccccgag gggacccgac aggcccgaag gaatagaaga1740 agaaggtgga gagagagaca gagacagatc cattcgatta gtgaacggat ctcgacggta1800 tcggttaact tttaaaagaa aaggggggat tggggggtac agtgcagggg aaagaatagt1860 agacataata gcaacagaca tacaaactaa agaattacaa aaacaaatta caaaaattca1920 aaattttatc gatcacgaga ctagcctcga gaagcttgat atcgaattcc cacggggttg1980 gacgcgtagg aacagagaaa caggagaata tgggccaaac aggatatctg tggtaagcag2040 ttcctgcccc ggctcagggc caagaacagt tggaacagca gaatatgggc caaacaggat2100 atctgtggta agcagttcct gccccggctc agggccaaga acagatggtc cccagatgcg2160 gtcccgccct cagcagtttc tagagaacca tcagatgttt ccagggtgcc ccaaggacct2220 gaaatgaccc tgtgccttat ttgaactaac caatcagttc gcttctcgct tctgttcgcg2280 cgcttctgct ccccgagctc tatataagca gagctcgttt agtgaaccgt cagatcgcct2340 ggagacgcca tccacgctgt tttgacttcc atagaaggat cccctgcagg taatacgact2400 cactataggg tccactgccg ccaccatggc tctgcctgtg acagctctgc tgctgcctct2460 ggccctgctg ctccatgccg ccagacccgg atccgatatc cagatgaccc agaccaccag2520 cagcctgagc gccagcctgg gcgatagagt gaccatcagc tgcagagcca gccaggacat2580 cagcaagtac ctgaactggt atcagcagaa acccgacggc accgtgaagc tgctgatcta2640 ccacaccagc agactgcaca gcggcgtgcc cagcagattt tctggcagcg gctccggcac2700 cgactacagc ctgaccatct ccaacctgga acaggaagat atcgctacct acttctgtca2760 gcaaggcaac accctgccct acaccttcgg cggaggcacc aagctggaaa tcaccggcag2820 cacaagcggc agcggcaagc ctggatctgg cgagggaagc accaagggcg aagtgaaact2880 gcaggaaagc ggccctggac tggtggcccc aagccagtct ctgagcgtga cctgtaccgt2940 gtccggcgtg tccctgcctg actatggcgt gtcctggatc agacagccac ccagaaaggg3000 cctggaatgg ctgggagtga tctggggcag cgagacaacc tactacaaca gcgccctgaa3060 gtcccggctg accatcatca aggacaactc caagagccag gtgttcctga agatgaacag3120 cctgcagacc gacgacaccg ccatctacta ctgcgccaag cactactact acggcggcag3180 ctacgccatg gactactggg gccagggcac aagcgtgacc gtgtccagcg ctagcgccaa3240- 1039 044346 taataaatct ctggaacaga tttggaatca cacgacctgg atggagtggg acagagaaat 1440 taacaattac acaagcttaa tacactcctt aattgaagaa tcgcaaaacc agcaagaaaa1500 gaatgaacaa gaattattgg aattagataa atgggcaagt ttgt ggaatt ggtttaacat1560 aacaaattgg ctgtggtata taaaattatt cataatgata gtaggaggct tggtaggttt1620 aagaatagtt tttgctgtac tttctatagt gaatagagtt aggcagggat attcaccatt1680 atcgtttcag acccacctcc caaccccgag gggacccgac agg cccgaag gaatagaaga1740 agaaggtgga gagagagaca gagacagatc cattcgatta gtgaacggat ctcgacggta1800 tcggttaact tttaaaagaa aaggggggat tggggggtac agtgcagggg aaagaatagt1860 agacataata gcaacagaca tacaaactaa agaattacaa aaacaaatta caaaaattca1920 aaattttatc gatcacgaga ctagcctcga gaagcttgat atcgaattcc cacggggttg1980 gacgcgtagg aacagagaaa caggagaata tgggccaaac aggatatctg tggtaagcag2040 ttcctgcccc ggctcagggc caagaacagt tggaacagca gaatatgggc caaacaggat2100 atctgtggta agcagttcct gccccggctc agggccaaga acagatggtc cccagatgcg2160 gtcccgccct cagcagtttc tagagaacca tcagat gttt ccagggtgcc ccaaggacct2220 gaaatgaccc tgtgccttat ttgaactaac caatcagttc gcttctcgct tctgttcgcg2280 cgcttctgct ccccgagctc tatataagca gagctcgttt agtgaaccgt cagatcgcct2340 ggagacgcca tccacgctgt tttgacttcc atagaaggat cccctgcagg taatacgact2400 cactataggg tccactgccg ccaccatggc tctgcctgtg acagctctgc tgctgcctct2460 ggccctgctg ctccatgccg ccagacccgg atccgatatc cagatgaccc agaccaccag25 20 cagcctgagc gccagcctgg gcgatagagt gaccatcagc tgcagagcca gccaggacat2580 cagcaagtac ctgaactggt atcagcagaa acccgacggc accgtgaagc tgctgatcta2640 ccacaccagc agactgcaca gcggcgtgcc cagcagattt tctggcagcg gctccggcac 2700 cgactacagc ctgaccatct ccaacctgga acaggaagat atcgctacct acttctgtca2760 gcaaggcaac accctgccct acaccttcgg cggaggcacc aagctggaaa tcaccggcag2820 cacaagcggc agcggcaagc ctggatctgg cgagggaagc accaagggcg aagtgaaact2880 gcaggaaagc ggccctggac tggtggcccc aagccagtct ctgagcgtga cctgtaccgt2940 gtccggcgtg tccctgcctg actatggcgt gtcctggatc agacagccac ccagaaaggg3000 cctggaatgg ctggggagtga tctggggcag cgagacaacc tactacaaca gcgccctgaa3060 gtcccggctg accatcatca aggacaactc caagagccag gtgttcctga agatgaacag3120 cctgcagacc gacgacaccg ccatctacta ctgcgccaag cactactact acggcggcag3180 ctacgccatg gactact ggg gccagggcac aagcgtgacc gtgtccagcg ctagcgccaa3240

- 1040 044346- 1040 044346

gcccaccacg gccaccacg acgccagcgc acgccagcgc cgcgaccacc cgcgaccacc aacaccggcg aacaccggcg cccaccatcg cccaccatcg cgtcgcagcc cgtcgcagcc 3300 3300 cctgtccctg cctgtccctg cgcccagagg cgcccagagg cgagccggcc cgagccggcc agcggcgggg agcggcgggg ggcgcagtgc ggcgcagtgc acacgagggg acacgagggg 3360 3360 gctggacttc gctggacttc gccagtgata gccagtgata tctacatctg tctacatctg ggcgcccctg ggcgcccctg gccgggactt gccggggactt gtggggtcct gtggggtcct 3420 3420 tctcctgtca tctcctgtca ctggttatca ctggttatca ccctttactg ccctttactg cagagtgaag cagagtgaag ttcagcagga ttcagcagga gcgcagacgc gcgcagacgc 3480 3480 ccccgcgtac ccccgcgtac cagcagggcc cagcaggggcc agaaccagct agaaccagct ctataacgag ctataacgag ctcaatctag ctcaatctag gacgaagaga gacgaagaga 3540 3540 ggagtacgat ggagtacgat gttttggaca gttttggaca agagacgtgg agagacgtgg ccgggaccct ccggggaccct gagatggggg gagatgggggg gaaagccgag gaaagccgag 3600 3600 aaggaagaac aaggaagaac cctcaggaag cctcaggaag gcctgtacaa gcctgtacaa tgaactgcag tgaactgcag aaagataaga aaagataaga tggcggaggc tggcggaggc 3660 3660 ctacagtgag ctacagtgag attgggatga attgggatga aaggcgagcg aaggcgagcg ccggaggggc ccggaggggc aaggggcacg aaggggcacg atggccttta atggccttta 3720 3720 ccagggtctc ccagggtctc agtacagcca agtacagcca ccaaggacac ccaaggacac ctacgacgcc ctacgacgcc cttcacatgc cttcacatgc aggccctgcc aggccctgcc 3780 3780 ccctcgcggc ccctcgcggc agtggcgagg agtggcgagg gcagaggaag gcagaggaag tctgctaaca tctgctaaca tgcggtgacg tgcggtgacg tggaggagaa tggagaggagaa 3840 3840 tccgggcccc tccggggcccc tctagaagcg tctagaagcg agctgattaa agctgattaa ggagaacatg ggagaacatg cacatgaagc cacatgaagc tgtacatgga tgtacatgga 3900 3900 gggcaccgtg gggcaccgtg gacaaccatc gacaaccatc acttcaagtg acttcaagtg cacatccgag cacatccgag ggcgaaggca ggcgaaggca agccctacga agccctacga 3960 3960 gggcacccag gggcacccag accatgagaa accatgagaa tcaaggtggt tcaaggtggt cgagggcggc cgaggcggc cctctcccct cctctcccct tcgccttcga tcgccttcga 4020 4020 catcctggct catcctggct actagcttcc actagcttcc tctacggcag tctacggcag caagaccttc caagaccttc atcaaccaca atcaaccaca cccagggcat cccaggggcat 4080 4080 ccccgacttc ccccgacttc ttcaagcagt ttcaagcagt ccttccctga ccttccctga gggcttcaca gggcttcaca tgggagagag tggggagag tcaccacata tcaccacata 4140 4140 cgaagacggg cgaagacggg ggcgtgctga ggcgtgctga ccgctaccca ccgctaccca ggacaccagc ggacaccagc ctccaggacg ctccaggacg gctgcctcat gctgcctcat 4200 4200 ctacaacgtc ctacaacgtc aagatcagag aagatcagag gggtgaactt gggtgaactt cacatccaac cacatccaac ggccctgtga ggccctgtga tgcagaagaa tgcagaagaa 4260 4260 aacactcggc aacactcggc tgggaggcct tgggaggcct tcaccgagac tcaccgagac gctgtacccc gctgtacccc gctgacggcg gctgacggcg gcctggaagg gcctggaagg 4320 4320 cagaaacgac cagaaacgac atggccctga atggccctga agctcgtggg agctcgtggg cgggagccat cggggagccat ctgatcgcaa ctgatcgcaa acatcaagac acatcaagac 4380 4380 cacatataga cacatataga tccaagaaac tccaagaaac ccgctaagaa ccgctaagaa cctcaagatg cctcaagatg cctggcgtct cctggcgtct actatgtgga actatgtgga 4440 4440 ctacagactg ctacagactg gaaagaatca gaaagaatca aggaggccaa aggaggccaa caacgagacc caacgagacc tacgtcgagc tacgtcgagc agcacgaggt agcacgaggt 4500 4500 ggcagtggcc ggcagtggcc agatactgcg agatactgcg acctccctag acctccctag caaactgggg caaactgggg cacaagctta cacaagctta attgagtcga attgagtcga 4560 4560 caatcaacct caatcaacct ctggattaca ctggattaca aaatttgtga aaatttgtga aagattgact aagattgact ggtattctta ggtattctta actatgttgc actatgttgc 4620 4620 tccttttacg tccttttacg ctatgtggat ctatgtggat acgctgcttt acgctgcttt aatgcctttg aatgcctttg tatcatgcta tatcatgcta ttgcttcccg ttgcttcccg 4680 4680 tatggctttc tatggctttc attttctcct attttctcct ccttgtataa ccttgtataa atcctggttg atcctggttg ctgtctcttt ctgtctcttt atgaggagtt atgaggagtt 4740 4740 gtggcccgtt gtggcccgtt gtcaggcaac gtcaggcaac gtggcgtggt gtggcgtggt gtgcactgtg gtgcactgtg tttgctgacg tttgctgacg caacccccac caaccccacc 4800 4800 tggttggggc tggttggggc attgccacca attgccacca cctgtcagct cctgtcagct cctttccggg cctttccggg actttcgctt actttcgctt tccccctccc tccccctccc 4860 4860 tattgccacg tattgccacg gcggaactca gcggaactca tcgccgcctg tcgccgcctg ccttgcccgc ccttgcccgc tgctggacag tgctggacag gggctcggct gggctcggct 4920 4920 gttgggcact gttggggcact gacaattccg gacaattccg tggtgttgtc tggtgttgtc ggggaagctg ggggaagctg acgtcctttc acgtcctttc catggctgct catggctgct 4980 4980 cgcctgtgtt cgcctgtgtt gccacctgga gccacctgga ttctgcgcgg ttctgcgcgg gacgtccttc gacgtccttc tgctacgtcc tgctacgtcc cttcggccct cttcggccct 5040 5040 caatccagcg caatccagcg gaccttcctt gaccttcctt cccgcggcct cccgcggcct gctgccggct gctgccggct ctgcggcctc ctgcggcctc ttccgcgtct ttccgcgtct 5100 5100 tcgccttcgc tcgccttcgc cctcagacga cctcagacga gtcggatctc gtcggatctc cctttgggcc cctttggggcc gcctccccgc gcctccccgc ctggaattcg ctggaattcg 5160 5160

- 1041 044346- 1041 044346

agctcggtac agctcggtac ctttaagacc ctttaagacc aatgacttac aatgacttac aaggcagctg aaggcagctg tagatcttag tagatcttag ccacttttta ccacttttta 5220 5220 aaagaaaagg aaagaaaagg ggggactgga ggggactgga agggctaatt agggctaatt cactcccaac cactcccaac gaagacaaga gaagacaaga tctgcttttt tctgcttttt 5280 5280 gcttgtactg gcttgtactg ggtctctctg ggtctctctg gttagaccag gttagaccag atctgagcct atctgagcct gggagctctc ggggagctctc tggctaacta tggctacta 5340 5340 gggaacccac gggaacccac tgcttaagcc tgcttaagcc tcaataaagc tcaataaagc ttgccttgag ttgccttgag tgcttcaagt tgcttcaagt agtgtgtgcc agtgtgtgcc 5400 5400 cgtctgttgt cgtctgttgt gtgactctgg gtgactctgg taactagaga taactagaga tccctcagac tccctcagac ccttttagtc ccttttagtc agtgtggaaa agtgtggaaa 5460 5460 atctctagca atctctagca gtagtagttc gtagtagttc atgtcatctt atgtcatctt attattcagt attattcagt atttataact atttataact tgcaaagaaa tgcaaagaaa 5520 5520 tgaatatcag tgaatatcag agagtgagag agagtgagag gaacttgttt gaacttgttt attgcagctt attgcagctt ataatggtta ataatggtta caaataaagc caaataaagc 5580 5580 aatagcatca aatagcatca caaatttcac caaatttcac aaataaagca aaataaagca tttttttcac tttttttcac tgcattctag tgcattctag ttgtggtttg ttgtggtttg 5640 5640 tccaaactca tccaaactca tcaatgtatc tcaatgtatc ttatcatgtc ttatcatgtc tggctctagc tggctctagc tatcccgccc tatcccgccc ctaactccgc ctaactccgc 5700 5700 ccagttccgc ccagttccgc ccattctccg ccattctccg ccccatggct ccccatggct gactaatttt gactaatttt ttttatttat ttttatttat gcagaggccg gcagaggccg 5760 5760 aggccgcctc aggccgcctc ggcctctgag ggcctctgag ctattccaga ctattccaga agtagtgagg agtagtgagg aggctttttt aggctttttt ggaggcctag ggaggcctag 5820 5820 gcttttgcgt gcttttgcgt cgagacgtac cgagacgtac ccaattcgcc ccaattcgcc ctatagtgag ctatagtgag tcgtattacg tcgtattacg cgcgctcact cgcgctcact 5880 5880 ggccgtcgtt ggccgtcgtt ttacaacgtc ttacaacgtc gtgactggga gtgactggga aaaccctggc aaaccctggc gttacccaac gttacccaac ttaatcgcct ttaatcgcct 5940 5940 tgcagcacat tgcagcacat ccccctttcg ccccctttcg ccagctggcg ccagctggcg taatagcgaa taatagcgaa gaggcccgca gaggcccgca ccgatcgccc ccgatcgccc 6000 6000 ttcccaacag ttcccaacag ttgcgcagcc ttgcgcagcc tgaatggcga tgaatggcga atggcgcgac atggcgcgac gcgccctgta gcgccctgta gcggcgcatt gcggcgcatt 6060 6060 aagcgcggcg aagcgcggcg ggtgtggtgg ggtgtggtgg ttacgcgcag ttacgcgcag cgtgaccgct cgtgaccgct acacttgcca acacttgcca gcgccctagc gcgccctagc 6120 6120 gcccgctcct gcccgctcct ttcgctttct ttcgctttct tcccttcctt tcccttcctt tctcgccacg tctcgccacg ttcgccggct ttcgccggct ttccccgtca ttccccgtca 6180 6180 agctctaaat agctctaaat cgggggctcc cggggggctcc ctttagggtt ctttagggtt ccgatttagt ccgatttagt gctttacggc gctttacggc acctcgaccc acctcgaccc 6240 6240 caaaaaactt caaaaaactt gattagggtg gattagggtg atggttcacg atggttcacg tagtgggcca tagtggggcca tcgccctgat tcgccctgat agacggtttt agacggtttt 6300 6300 tcgccctttg tcgccctttg acgttggagt acgttggagt ccacgttctt ccacgttctt taatagtgga taatagtgga ctcttgttcc ctcttgttcc aaactggaac aaactggaac 6360 6360 aacactcaac aacactcaac cctatctcgg cctatctcgg tctattcttt tctattcttt tgatttataa tgatttataa gggattttgc gggattttgc cgatttcggc cgatttcggc 6420 6420 ctattggtta ctattggtta aaaaatgagc aaaaatgagc tgatttaaca tgatttaaca aaaatttaac aaaatttaac gcgaatttta gcgaatttta acaaaatatt acaaaatatt 6480 6480 aacgtttaca aacgtttaca atttcccagg atttcccagg tggcactttt tggcactttt cggggaaatg cggggaaatg tgcgcggaac tgcgcggaac ccctatttgt ccctatttgt 6540 6540 ttatttttct ttatttttct aaatacattc aaatacattc aaatatgtat aaatatgtat ccgctcatga ccgctcatga gacaataacc gacaataacc ctgataaatg ctgataaatg 6600 6600 cttcaataat cttcaataat attgaaaaag attgaaaaag gaagagtatg gaagagtatg agtattcaac agtattcaac atttccgtgt atttccgtgt cgcccttatt cgcccttatt 6 6 60 6 6 60 cccttttttg cccttttttg cggcattttg cggcattttg ccttcctgtt ccttcctgtt tttgctcacc tttgctcacc cagaaacgct cagaaacgct ggtgaaagta ggtgaaagta 6720 6720 aaagatgctg aaagatgctg aagatcagtt aagatcagtt gggtgcacga gggtgcacga gtgggttaca gtggggttaca tcgaactgga tcgaactgga tctcaacagc tctcaacagc 6780 6780 ggtaagatcc ggtaagatcc ttgagagttt ttgagagttt tcgccccgaa tcgccccgaa gaacgttttc gaacgttttc caatgatgag caatgatgag cacttttaaa cacttttaaa 6840 6840 gttctgctat gttctgctat gtggcgcggt gtggcgcggt attatcccgt attatcccgt attgacgccg attgacgccg ggcaagagca ggcaagagca actcggtcgc actcggtcgc 6900 6900 cgcatacact cgcatacact attctcagaa attctcagaa tgacttggtt tgacttggtt gagtactcac gagtactcac cagtcacaga cagtcacaga aaagcatctt aaagcatctt 6960 6960 acggatggca acggatggca tgacagtaag tgacagtaag agaattatgc agaattatgc agtgctgcca agtgctgcca taaccatgag taaccatgag tgataacact tgataacact 7020 7020

- 1042 044346- 1042 044346

gcggccaact gcggccaact tacttctgac tacttctgac aacgatcgga aacgatcgga ggaccgaagg ggaccgaagg agctaaccgc agctaaccgc ttttttgcac ttttttgcac 7080 7080 aacatggggg aacatgggggg atcatgtaac atcatgtaac tcgccttgat tcgccttgat cgttgggaac cgttgggaac cggagctgaa cggagctgaa tgaagccata tgaagccata 7140 7140 ccaaacgacg ccaaacgacg agcgtgacac agcgtgacac cacgatgcct cacgatgcct gtagcaatgg gtagcaatgg caacaacgtt caacaacgtt gcgcaaacta gcgcaaacta 7200 7200 ttaactggcg ttaactggcg aactacttac aactacttac tctagcttcc tctagcttcc cggcaacaat cggcaacaat taatagactg taatagactg gatggaggcg gatggaggcg 7260 7260 gataaagttg gataaagttg caggaccact caggaccact tctgcgctcg tctgcgctcg gcccttccgg gcccttccgg ctggctggtt ctggctggtt tattgctgat tattgctgat 7320 7320 aaatctggag aaatctggag ccggtgagcg ccggtgagcg tgggtctcgc tgggtctcgc ggtatcattg ggtatcattg cagcactggg cagcactggg gccagatggt gccagatggt 7380 7380 aagccctccc aagccctccc gtatcgtagt gtatcgtagt tatctacacg tatctacacg acggggagtc acggggagtc aggcaactat aggcaactat ggatgaacga ggatgaacga 7440 7440 aatagacaga aatagacaga tcgctgagat tcgctgagat aggtgcctca aggtgcctca ctgattaagc ctgattaagc attggtaact attggtaact gtcagaccaa gtcagaccaa 7500 7500 gtttactcat gtttactcat atatacttta atatacttta gattgattta gattgattta aaacttcatt aaacttcatt tttaatttaa tttaatttaa aaggatctag aaggatctag 7560 7560 gtgaagatcc gtgaagatcc tttttgataa tttttgataa tctcatgacc tctcatgacc aaaatccctt aaaatccctt aacgtgagtt aacgtgagtt ttcgttccac ttcgttccac 7620 7620 tgagcgtcag tgagcgtcag accccgtaga accccgtaga aaagatcaaa aaagatcaaa ggatcttctt ggatcttctt gagatccttt gagatccttt ttttctgcgc ttttctgcgc 7680 7680 gtaatctgct gtaatctgct gcttgcaaac gcttgcaaac aaaaaaacca aaaaaaacca ccgctaccag ccgctaccag cggtggtttg cggtggtttg tttgccggat tttgccggat 7740 7740 caagagctac caagagctac caactctttt caactctttt tccgaaggta tccgaaggta actggcttca actggcttca gcagagcgca gcagagcgca gataccaaat gataccaaat 7800 7800 actgtccttc actngtccttc tagtgtagcc tagtgtagcc gtagttaggc gtagttagggc caccacttca caccacttca agaactctgt agaactctgt agcaccgcct agcaccgcct 7860 7860 acatacctcg acatacctcg ctctgctaat ctctgctaat cctgttacca cctgttacca gtggctgctg gtggctgctg ccagtggcga ccagtggcga taagtcgtgt taagtcgtgt 7920 7920 cttaccgggt cttaccggggt tggactcaag tggactcaag acgatagtta acgatagtta ccggataagg ccggataagg cgcagcggtc cgcagcggtc gggctgaacg gggctgaacg 7980 7980 gggggttcgt ggggggttcgt gcacacagcc gcacacagcc cagcttggag cagcttggag cgaacgacct cgaacgacct acaccgaact acaccgaact gagataccta gagataccta 8040 8040 cagcgtgagc cagcgtgagc tatgagaaag tatgagaaag cgccacgctt cgccacgctt cccgaaggga cccgaaggga gaaaggcgga gaaaggcgga caggtatccg caggtatccg 8100 8100 gtaagcggca gtaagcggca gggtcggaac gggtcggaac aggagagcgc aggagagcgc acgagggagc acgagggagc ttccaggggg ttccagggggg aaacgcctgg aaacgcctgg 8160 8160 tatctttata tatcttttata gtcctgtcgg gtcctgtcgg gtttcgccac gtttcgccac ctctgacttg ctctgacttg agcgtcgatt agcgtcgatt tttgtgatgc tttgtgatgc 8220 8220 tcgtcagggg tcgtcagggg ggcggagcct ggcggagcct atggaaaaac atggaaaaac gccagcaacg gccagcaacg cggccttttt cggccttttt acggttcctg acggttcctg 8280 8280 gccttttgct gccttttgct ggccttttgc ggccttttgc tcacatgttc tcacatgttc tttcctgcgt tttcctgcgt tatcccctga tatcccctga ttctgtggat ttctgtggat 8340 8340 aaccgtatta aaccgtatta ccgcctttga ccgcctttga gtgagctgat gtgagctgat accgctcgcc accgctcgcc gcagccgaac gcagccgaac gaccgagcgc gaccgagcgc 8400 8400 agcgagtcag agcgagtcag tgagcgagga tgagcgagga agcggaagag agcggaagag cgcccaatac cgcccaatac gcaaaccgcc gcaaaccgcc tctccccgcg tctccccgcg 8460 8460 cgttggccga cgttggccga ttcattaatg ttcattaatg cagctggcac cagctggcac gacaggtttc gacaggtttc ccgactggaa ccgactggaa agcgggcagt agcggggcagt 8520 8520 gagcgcaacg gagcgcaacg caattaatgt caattaatgt gagttagctc gagttagctc actcattagg actcattagg caccccaggc caccccaggc tttacacttt tttacacttt 8580 8580 atgcttccgg atgcttccgg ctcgtatgtt ctcgtatgtt gtgtggaatt gtgtggaatt gtgagcggat gtgagcggat aacaatttca aacaatttca cacaggaaac cacaggaaac 8640 8640 agctatgacc agctatgacc atgattacgc atgattacgc caagcgcgca caagcgcgca attaaccctc attaaccctc actaaaggga actaaaggga acaaaagctg acaaaagctg 8700 8700 gagctgca gagctgca 8708 8708

<210> 901 <211> 428 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность<210> 901 <211> 428 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence

- 1043 044346 <220>- 1043 044346 <220>

<223> аанти-СБ19 химерный антигенный рецептор CAR-1 <400> 901<223> anti-CB19 chimeric antigen receptor CAR-1 <400> 901

Asp Ile Gln Met Thr 1 5Asp Ile Gln Met Thr 1 5

Gln Thr Thr Ser SerGln Thr Thr Ser Ser

Leu Ser Ala Ser LeuLeu Ser Ala Ser Leu

Asp Arg Val Thr Ile 20Asp Arg Val Thr Ile 20

Ser Cys Arg Ala SerSer Cys Arg Ala Ser

Gln Asp Ile Ser Lys 30Gln Asp Ile Ser Lys 30

Leu Asn Trp Tyr Gln 35Leu Asn Trp Tyr Gln 35

Gln Lys Pro Asp Gly 40Gln Lys Pro Asp Gly 40

Thr Val Lys Leu Leu 45Thr Val Lys Leu Leu 45

Tyr His Thr Ser Arg 50Tyr His Thr Ser Arg 50

Leu His Ser Gly Val 55Leu His Ser Gly Val 55

Pro Ser Arg Phe Ser 60Pro Ser Arg Phe Ser 60

Ser Gly Ser Gly Thr 65Ser Gly Ser Gly Thr 65

Asp Tyr Ser Leu Thr 70Asp Tyr Ser Leu Thr 70

Ile Ser Asn Leu Glu 75Ile Ser Asn Leu Glu 75

Glu Asp Ile Ala Thr 85Glu Asp Ile Ala Thr 85

Tyr Phe Cys Gln Gln 90Tyr Phe Cys Gln Gln 90

Gly Asn Thr Leu Pro 95Gly Asn Thr Leu Pro 95

Thr Phe Gly Gly GlyThr Phe Gly Gly Gly

100100

Thr Lys Leu Glu IleThr Lys Leu Glu Ile

105105

Thr Gly Ser Thr SerThr Gly Ser Thr Ser

110110

Ser Gly Lys Pro Gly 115Ser Gly Lys Pro Gly 115

Ser Gly Glu Gly Ser 120Ser Gly Glu Gly Ser 120

Thr Lys Gly Glu ValThr Lys Gly Glu Val

125125

Leu Gln Glu Ser Gly 130Leu Gln Glu Ser Gly 130

Pro Gly Leu Val AlaPro Gly Leu Val Ala

135135

Pro Ser Gln Ser LeuPro Ser Gln Ser Leu

140140

Val Thr Cys Thr Val 145Val Thr Cys Thr Val 145

Ser Gly Val Ser Leu 150Ser Gly Val Ser Leu 150

Pro Asp Tyr Gly Val 155Pro Asp Tyr Gly Val 155

Trp Ile Arg Gln ProTrp Ile Arg Gln Pro

165165

Pro Arg Lys Gly LeuPro Arg Lys Gly Leu

170170

Glu Trp Leu Gly ValGlu Trp Leu Gly Val

175175

Trp Gly Ser Glu ThrTrp Gly Ser Glu Thr

180180

Thr Tyr Tyr Asn SerThr Tyr Tyr Asn Ser

185185

Ala Leu Lys Ser ArgAla Leu Lys Ser Arg

190190

Thr Ile Ile Lys Asp 195Thr Ile Ile Lys Asp 195

Asn Ser Lys Ser Gln 200Asn Ser Lys Ser Gln 200

Val Phe Leu Lys MetVal Phe Leu Lys Met

205205

Ser Leu Gln Thr AspSer Leu Gln Thr Asp

210210

Asp Thr Ala Ile TyrAsp Thr Ala Ile Tyr

215215

Tyr Cys Ala Lys HisTyr Cys Ala Lys His

220220

GlyGly

TyrTyr

IleIle

GlyGly

Gln 80Gln 80

TyrTyr

GlyGly

LysLys

SerSer

Ser 160Ser 160

IleIle

LeuLeu

AsnAsn

TyrTyr

SerSer

Tyr Tyr Gly Gly SerTyr Tyr Gly Gly Ser

Tyr Ala Met Asp TyrTyr Ala Met Asp Tyr

Trp Gly Gln Gly ThrTrp Gly Gln Gly Thr

- 1044 044346- 1044 044346

225225

230230

235235

Val Thr Val Ser SerVal Thr Val Ser Ser

245245

Ala Ser Ala Lys ProAla Ser Ala Lys Pro

250250

Thr Thr Thr Pro AlaThr Thr Thr Pro Ala

255255

Arg Pro Pro Thr ProArg Pro Pro Thr Pro

260260

Ala Pro Thr Ile AlaAla Pro Thr Ile Ala

265265

Ser Gln Pro Leu SerSer Gln Pro Leu Ser

270270

Arg Pro Glu Ala CysArg Pro Glu Ala Cys

275275

Arg Pro Ala Ala GlyArg Pro Ala Ala Gly

280280

Gly Ala Val His ThrGly Ala Val His Thr

285285

Gly Leu Asp Phe Ala 290Gly Leu Asp Phe Ala 290

Cys Asp Ile Tyr IleCys Asp Ile Tyr Ile

295295

Trp Ala Pro Leu Ala 300Trp Ala Pro Leu Ala 300

Thr Cys Gly Val Leu 305Thr Cys Gly Val Leu 305

Leu Leu Ser Leu Val 310Leu Leu Ser Leu Val 310

Ile Thr Arg Val Lys 315Ile Thr Arg Val Lys 315

Ser Arg Ser Ala AspSer Arg Ser Ala Asp

325325

Ala Pro Ala Tyr GlnAla Pro Ala Tyr Gln

330330

Gln Gly Gln Asn GlnGln Gly Gln Asn Gln

335335

Tyr Asn Glu Leu AsnTyr Asn Glu Leu Asn

340340

Leu Gly Arg Arg GluLeu Gly Arg Arg Glu

345345

Glu Tyr Asp Val LeuGlu Tyr Asp Val Leu

350350

Lys Arg Arg Gly ArgLys Arg Arg Gly Arg

355355

Asp Pro Glu Met Gly 360Asp Pro Glu Met Gly 360

Gly Lys Pro Arg ArgGly Lys Pro Arg Arg

365365

Asn Pro Gln Glu GlyAsn Pro Gln Glu Gly

370370

Leu Tyr Asn Glu LeuLeu Tyr Asn Glu Leu

375375

Gln Lys Asp Lys Met 380Gln Lys Asp Lys Met 380

Glu Ala Tyr Ser Glu 385Glu Ala Tyr Ser Glu 385

Ile Gly Met Lys Gly 390Ile Gly Met Lys Gly 390

Glu Arg Arg Arg Gly 395Glu Arg Arg Arg Gly 395

Gly His Asp Gly LeuGly His Asp Gly Leu

405405

Tyr Gln Gly Leu SerTyr Gln Gly Leu Ser

410410

Thr Ala Thr Lys AspThr Ala Thr Lys Asp

415415

240240

ProPro

LeuLeu

ArgArg

GlyGly

Phe 320Phe 320

LeuLeu

AspAsp

LysLys

AlaAla

Lys 400Lys 400

ThrThr

Tyr Asp Ala Leu HisTyr Asp Ala Leu His

420420

Met Gln Ala Leu ProMet Gln Ala Leu Pro

425425

Pro Arg <210> 902 <211> 706 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Pro Arg <210> 902 <211> 706 <212> PROTEIN <213> Artificial Sequence <220>

< 223> aнти-CD19 химерный антигенный рецептор CAR-1 < 400> 902<223>anti-CD19 chimeric antigen receptor CAR-1 <400>902

Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu 1 5 10 15Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu 1 5 10 15

LeuLeu

- 1045 044346- 1045 044346

HisHis

SerSer

SerSer

Gly 65Gly 65

ValVal

ThrThr

GlnGln

IleIle

Ser 145Ser 145

AlaAla

LeuLeu

LeuLeu

SerSer

Gln 225Gln 225

TyrTyr

TyrTyr

Ala Ala Arg Pro Gly Ser Asp Ile Gln Met Thr Gln Thr ThrAla Ala Arg Pro Gly Ser Asp Ile Gln Met Thr Gln Thr Thr

25 3025 30

Leu Ser Ala Ser Leu Gly Asp Arg Val Thr Ile Ser Cys ArgLeu Ser Ala Ser Leu Gly Asp Arg Val Thr Ile Ser Cys Arg

40 4540 45

Gln Asp Ile Ser Lys Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro 50 55 60Gln Asp Ile Ser Lys Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro 50 55 60

Thr Val Lys Leu Leu Ile Tyr His Thr Ser Arg Leu His Ser 70 75Thr Val Lys Leu Leu Ile Tyr His Thr Ser Arg Leu His Ser 70 75

Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Ser 85 90 95Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Ser 85 90 95

Ile Ser Asn Leu Glu Gln Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Phe CysIle Ser Asn Leu Glu Gln Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Phe Cys

100 105 110100 105 110

Gly Asn Thr Leu Pro Tyr Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys LeuGly Asn Thr Leu Pro Tyr Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu

115 120 125115 120 125

Thr Gly Ser Thr Ser Gly Ser Gly Lys Pro Gly Ser Gly Glu 130 135 140Thr Gly Ser Thr Ser Gly Ser Gly Lys Pro Gly Ser Gly Glu 130 135 140

Thr Lys Gly Glu Val Lys Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly LeuThr Lys Gly Glu Val Lys Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu

150 155150 155

Pro Ser Gln Ser Leu Ser Val Thr Cys Thr Val Ser Gly ValPro Ser Gln Ser Leu Ser Val Thr Cys Thr Val Ser Gly Val

165 170 175165 170 175

Pro Asp Tyr Gly Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Arg LysPro Asp Tyr Gly Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Arg Lys

180 185 190180 185 190

Glu Trp Leu Gly Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr TyrGlu Trp Leu Gly Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr

195 200 205195 200 205

Ala Leu Lys Ser Arg Leu Thr Ile Ile Lys Asp Asn Ser Lys 210 215 220Ala Leu Lys Ser Arg Leu Thr Ile Ile Lys Asp Asn Ser Lys 210 215 220

Val Phe Leu Lys Met Asn Ser Leu Gln Thr Asp Asp Thr AlaVal Phe Leu Lys Met Asn Ser Leu Gln Thr Asp Asp Thr Ala

230 235230 235

Tyr Cys Ala Lys His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala MetTyr Cys Ala Lys His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met

245 250 255245 250 255

SerSer

AlaAla

AspAsp

Gly 80Gly 80

LeuLeu

GlnGln

GluGlu

GlyGly

Val 160Val 160

SerSer

GlyGly

AsnAsn

SerSer

Ile 240Ile 240

AspAsp

LysLys

Trp Gly Gln Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser Ala Ser AlaTrp Gly Gln Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Ala

- 1046 044346- 1046 044346

260260

265265

270270

ProPro

AlaAla

Gly 305Gly 305

IleIle

ValVal

GlnGln

GluGlu

Gly 385Gly 385

LeuLeu

GlyGly

SerSer

ProPro

Cys 465Cys 465

LysLys

HisHis

ThrThr

ThrThr

275275

ThrThr

ProPro

AlaAla

ProPro

Arg 280Arg 280

ProPro

ProPro

ThrThr

ProPro

AlaAla

285285

ProPro

ThrThr

IleIle

Ser 290Ser 290

GlnGln

ProPro

LeuLeu

SerSer

LeuLeu

295295

ArgArg

ProPro

GluGlu

AlaAla

Cys 300Cys 300

ArgArg

ProPro

AlaAla

AlaAla

GlyGly

TrpTrp

IleIle

GlnGln

GluGlu

370370

GlyGly

GlnGln

GluGlu

ThrThr

ProPro

450450

GlyGly

GluGlu

HisHis

AlaAla

ValVal

HisHis

ThrThr

310310

ArgArg

GlyGly

LeuLeu

AspAsp

PhePhe

315315

AlaAla

CysCys

AspAsp

IleIle

Tyr 320Tyr 320

AlaAla

ProPro

LeuLeu

325325

AlaAla

GlyGly

ThrThr

CysCys

Gly 330Gly 330

ValVal

LeuLeu

LeuLeu

LeuLeu

SerSer

335335

LeuLeu

ThrThr

Gly 355Gly 355

TyrTyr

LysLys

LysLys

ArgArg

AlaAla

435435

ArgArg

AspAsp

AsnAsn

PhePhe

Arg 340Arg 340

ValVal

LysLys

PhePhe

SerSer

Arg 345Arg 345

SerSer

AlaAla

AspAsp

AlaAla

ProPro

350350

AlaAla

TyrTyr

GlnGln

AsnAsn

GlnGln

LeuLeu

Tyr 360Tyr 360

AsnAsn

GluGlu

LeuLeu

AsnAsn

LeuLeu

365365

GlyGly

ArgArg

ArgArg

AspAsp

ValVal

LeuLeu

Asp 375Asp 375

LysLys

ArgArg

ArgArg

GlyGly

Arg 380Arg 380

AspAsp

ProPro

GluGlu

MetMet

ProPro

ArgArg

Arg 390Arg 390

LysLys

AsnAsn

ProPro

GlnGln

GluGlu

395395

GlyGly

LeuLeu

TyrTyr

AsnAsn

GluGlu

400400

AspAsp

Arg 420Arg 420

ThrThr

GlyGly

ValVal

MetMet

Lys 500Lys 500

Lys 405Lys 405

MetMet

AlaAla

GluGlu

AlaAla

Tyr 410Tyr 410

SerSer

GluGlu

IleIle

GlyGly

MetMet

415415

LysLys

ArgArg

GlyGly

LysLys

GlyGly

HisHis

425425

AspAsp

GlyGly

LeuLeu

TyrTyr

GlnGln

430430

GlyGly

LeuLeu

LysLys

GlyGly

GluGlu

HisHis

485485

CysCys

AspAsp

ArgArg

GluGlu

470470

MetMet

ThrThr

ThrThr

Tyr 440Tyr 440

AspAsp

AlaAla

LeuLeu

HisHis

MetMet

445445

GlnGln

AlaAla

LeuLeu

SerSer

455455

GlyGly

GluGlu

GlyGly

ArgArg

Gly 460Gly 460

SerSer

LeuLeu

LeuLeu

ThrThr

AsnAsn

ProPro

GlyGly

ProPro

SerSer

475475

ArgArg

SerSer

GluGlu

LeuLeu

IleIle

480480

LysLys

LeuLeu

TyrTyr

MetMet

490490

GluGlu

GlyGly

ThrThr

ValVal

AspAsp

495495

AsnAsn

SerSer

GluGlu

Gly 505Gly 505

GluGlu

GlyGly

LysLys

ProPro

Tyr 510Tyr 510

GluGlu

GlyGly

- 1047 044346- 1047 044346

Thr Gln ThrThr Gln Thr

515515

Ala Phe AspAla Phe Asp

530530

Ile Asn His 545Ile Asn His 545

Glu Gly PheGlu Gly Phe

Met Arg Ile Lys Val Val 520Met Arg Ile Lys Val Val 520

Ile Leu Ala Thr Ser Phe 535Ile Leu Ala Thr Ser Phe 535

Thr Gln Gly Ile Pro Asp 550Thr Gln Gly Ile Pro Asp 550

Thr Trp Glu Arg Val Thr 565Thr Trp Glu Arg Val Thr 565

Glu Gly Gly ProGlu Gly Gly Pro

525525

Leu Tyr Gly SerLeu Tyr Gly Ser

540540

Phe Phe Lys Gln 555Phe Phe Lys Gln 555

Thr Tyr Glu Asp 570Thr Tyr Glu Asp 570

Leu ProLeu Pro

Lys ThrLys Thr

Ser PheSer Phe

Gly GlyGly Gly

575575

Leu Thr Ala Thr Gln Asp Thr 580Leu Thr Ala Thr Gln Asp Thr 580

Ser LeuSer Leu

585585

Gln Asp Gly CysGln Asp Gly Cys

Leu Ile 590Leu Ile 590

Asn Val Lys IleAsn Val Lys Ile

595595

Arg Gly Val Asn Phe Thr Ser Asn Gly Pro ValArg Gly Val Asn Phe Thr Ser Asn Gly Pro Val

600 605600 605

Gln Lys Lys Thr 610Gln Lys Lys Thr 610

Leu Trp Glu Ala Phe Thr Glu Thr Leu Tyr ProLeu Trp Glu Ala Phe Thr Glu Thr Leu Tyr Pro

615 620615 620

Asp Gly Gly Leu 625Asp Gly Gly Leu 625

Glu Gly Arg Asn Asp Met Ala Leu Lys Leu ValGlu Gly Arg Asn Asp Met Ala Leu Lys Leu Val

630 635630 635

Gly Ser His LeuGly Ser His Leu

Ile Ala Asn Ile Lys Thr Thr Tyr Arg Ser LysIle Ala Asn Ile Lys Thr Thr Tyr Arg Ser Lys

645 650 655645 650 655

Pro Ala Lys AsnPro Ala Lys Asn

660660

Leu Lys Met Pro Gly Val Tyr Tyr Val Asp TyrLeu Lys Met Pro Gly Val Tyr Tyr Val Asp Tyr

665 670665 670

Leu Glu Arg IleLeu Glu Arg Ile

675675

Lys Glu Ala Asn Asn Glu Thr Tyr Val Glu GlnLys Glu Ala Asn Asn Glu Thr Tyr Val Glu Gln

680 685680 685

Glu Val Ala AlaGlu Val Ala Ala

690690

Arg Tyr Cys Asp Leu Pro Ser Lys Leu Gly HisArg Tyr Cys Asp Leu Pro Ser Lys Leu Gly His

695 700695 700

PhePhe

PhePhe

Pro 560Pro 560

ValVal

TyrTyr

MetMet

AlaAla

Gly 640Gly 640

LysLys

ArgArg

HisHis

LysLys

Leu Asn 705 <210> 903 <211> 232 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Leu Asn 705 <210> 903 <211> 232 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> синий флуоресцентный белок < 400> 903<223>blue fluorescent protein <400>903

Ser Arg Ser Glu Leu Ile Lys Glu Asn Met His Met Lys Leu TyrSer Arg Ser Glu Leu Ile Lys Glu Asn Met His Met Lys Leu Tyr

MetMet

- 1048 044346- 1048 044346

GluGlu

GlyGly

ThrThr

Val 20Val 20

AspAsp

AsnAsn

HisHis

HisHis

Phe 25Phe 25

LysLys

CysCys

ThrThr

SerSer

Glu 30Glu 30

GlyGly

GlyGly

LysLys

Pro 35Pro 35

TyrTyr

GluGlu

GlyGly

ThrThr

Gln 40Gln 40

ThrThr

MetMet

ArgArg

IleIle

Lys 45Lys 45

ValVal

ValVal

GlyGly

Gly 50Gly 50

ProPro

LeuLeu

ProPro

PhePhe

Ala 55Ala 55

PhePhe

AspAsp

IleIle

LeuLeu

Ala 60Ala 60

ThrThr

SerSer

PhePhe

Tyr 65Tyr 65

GlyGly

SerSer

LysLys

ThrThr

Phe 70Phe 70

IleIle

AsnAsn

HisHis

ThrThr

Gln 75Gln 75

GlyGly

IleIle

ProPro

AspAsp

PhePhe

LysLys

GlnGln

SerSer

Phe 85Phe 85

ProPro

GluGlu

GlyGly

PhePhe

Thr 90Thr 90

TrpTrp

GluGlu

ArgArg

ValVal

Thr 95Thr 95

TyrTyr

GluGlu

AspAsp

Gly 100Gly 100

GlyGly

ValVal

LeuLeu

ThrThr

AlaAla

105105

ThrThr

GlnGln

AspAsp

ThrThr

SerSer

110110

LeuLeu

AspAsp

GlyGly

CysCys

115115

LeuLeu

IleIle

TyrTyr

AsnAsn

ValVal

120120

LysLys

IleIle

ArgArg

GlyGly

ValVal

125125

AsnAsn

PhePhe

SerSer

AsnAsn

130130

GlyGly

ProPro

ValVal

MetMet

GlnGln

135135

LysLys

LysLys

ThrThr

LeuLeu

Trp 140Trp 140

GluGlu

AlaAla

PhePhe

GluGlu

145145

ThrThr

LeuLeu

TyrTyr

ProPro

AlaAla

150150

AspAsp

GlyGly

GlyGly

LeuLeu

GluGlu

155155

GlyGly

ArgArg

AsnAsn

AspAsp

AlaAla

LeuLeu

LysLys

LeuLeu

ValVal

165165

GlyGly

GlyGly

SerSer

HisHis

LeuLeu

170170

IleIle

AlaAla

AsnAsn

IleIle

LysLys

175175

ThrThr

TyrTyr

ArgArg

SerSer

180180

LysLys

LysLys

ProPro

AlaAla

Lys 185Lys 185

AsnAsn

LeuLeu

LysLys

MetMet

ProPro

190190

GlyGly

TyrTyr

TyrTyr

ValVal

195195

AspAsp

TyrTyr

ArgArg

LeuLeu

Glu 200Glu 200

ArgArg

IleIle

LysLys

GluGlu

AlaAla

205205

AsnAsn

AsnAsn

ThrThr

Tyr 210Tyr 210

ValVal

GluGlu

GlnGln

HisHis

GluGlu

215215

ValVal

AlaAla

AlaAla

ArgArg

Tyr 220Tyr 220

CysCys

AspAsp

LeuLeu

GluGlu

GluGlu

LeuLeu

Phe 80Phe 80

ThrThr

GlnGln

ThrThr

ThrThr

Met 160Met 160

ThrThr

ValVal

GluGlu

ProPro

Ser Lys Leu Gly His Lys Leu AsnSer Lys Leu Gly His Lys Leu Asn

225 230 <210> 904 <211> 400 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность225 230 <210> 904 <211> 400 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence

- 1049 044346- 1049 044346

Pro Ala <220>Pro Ala <220>

<223> PAS <400> 904<223> PAS <400> 904

Ala Ser Pro 1Ala Ser Pro 1

Ser Ala ProSer Ala Pro

Ala Pro AlaAla Pro Ala

Ala Ser ProAla Ser Pro

Ala Pro Ala 65Ala Pro Ala 65

Ala Ala 5Ala Ala 5

Ala Ala 20Ala Ala 20

Pro SerPro Ser

Ala AlaAla Ala

Pro AlaPro Ala

Pro AlaPro Ala

Ser ProSer Pro

Ala ProAla Pro

Pro AlaPro Ala

Ser Pro 70Ser Pro 70

Pro AlaPro Ala

Ala AlaAla Ala

Ala Ala 40Ala Ala 40

Pro SerPro Ser

Ala AlaAla Ala

Ala Ser ProAla Ser Pro

Ala AlaAla Ala

Pro AlaPro Ala

Pro AlaPro Ala

Ser Ala ProSer Ala Pro

Ala Ala 100Ala Ala 100

Ser ProSer Pro

Ala AlaAla Ala

105105

Ala Pro AlaAla Pro Ala

115115

Pro SerPro Ser

Ala ProAla Pro

Ala Ala 120Ala Ala 120

Ala Ser ProAla Ser Pro

130130

Ala AlaAla Ala

Pro AlaPro Ala

135135

Pro SerPro Ser

Ala Pro Ala 145Ala Pro Ala 145

Pro AlaPro Ala

Ser Pro 150Ser Pro 150

Ala AlaAla Ala

Ala Ser ProAla Ser Pro

Ala AlaAla Ala

165165

Pro AlaPro Ala

Pro AlaPro Ala

Ser Ala ProSer Ala Pro

Ala Ala 180Ala Ala 180

Ala Pro AlaAla Pro Ala

195195

Pro SerPro Ser

Ala Ser ProAla Ser Pro

210210

Ala AlaAla Ala

Ala Pro AlaAla Pro Ala

Pro AlaPro Ala

Ser ProSer Pro

Ala ProAla Pro

Pro AlaPro Ala

215215

Ser ProSer Pro

Ala AlaAla Ala

185185

Ala Ala 200Ala Ala 200

Pro SerPro Ser

Ala AlaAla Ala

Ser Pro 10Ser Pro 10

Pro AlaPro Ala

Ser ProSer Pro

Ala ProAla Pro

Ala AlaAla Ala

Pro AlaPro Ala

Ala AlaAla Ala

Ala Ala 60Ala Ala 60

Ser Pro 30Ser Pro 30

Pro AlaPro Ala

Ser ProSer Pro

Pro AlaPro Ala

Pro SerPro Ser

Ala ProAla Pro

Ser Pro 90Ser Pro 90

Pro AlaPro Ala

Ser ProSer Pro

Ala ProAla Pro

Pro AlaPro Ala

155155

Ser Pro 170Ser Pro 170

Pro AlaPro Ala

Ser ProSer Pro

Ala ProAla Pro

Pro AlaPro Ala

Ala AlaAla Ala

Pro AlaPro Ala

Pro AlaPro Ala

Ala AlaAla Ala

125125

Ala Ala 140Ala Ala 140

Pro SerPro Ser

Ala AlaAla Ala

Pro AlaPro Ala

Ala AlaAla Ala

205205

Ala Ala 220Ala Ala 220

Pro SerPro Ser

Ser Pro 110Ser Pro 110

Pro AlaPro Ala

Ser ProSer Pro

Ala ProAla Pro

Pro AlaPro Ala

175175

Ser Pro 190Ser Pro 190

Pro AlaPro Ala

Ser ProSer Pro

Ala ProAla Pro

ProPro

AlaAla

ProPro

AlaAla

Ala 80Ala 80

ProPro

AlaAla

ProPro

AlaAla

Ala 160Ala 160

ProPro

AlaAla

ProPro

AlaAla

AlaAla

- 1050 044346- 1050 044346

225225

230230

235235

240240

Ala Ser Pro Ala Ala Pro Ala Pro AlaAla Ser Pro Ala Ala Pro Ala Pro Ala

245245

Ser Pro Ala Ala Pro Ala ProSer Pro Ala Ala Pro Ala Pro

250 255250 255

Ser AlaSer Ala

Pro AlaPro Ala

260260

Ala SerAla Ser

Pro AlaPro Ala

Ala ProAla Pro

Ala Pro 275Ala Pro 275

Ser AlaSer Ala

Pro AlaPro Ala

280280

Ala SerAla Ser

290290

Pro AlaPro Ala

Ala ProAla Pro

Ala Pro 295Ala Pro 295

Ala Pro 305Ala Pro 305

Ala ProAla Pro

Ala SerAla Ser

310310

Pro AlaPro Ala

Ala SerAla Ser

Pro AlaPro Ala

Ala Pro 325Ala Pro 325

Ala ProAla Pro

Ser AlaSer Ala

Pro AlaPro Ala

340340

Ala SerAla Ser

Pro AlaPro Ala

Ala ProAla Pro

Ala Pro 355Ala Pro 355

Ser AlaSer Ala

Pro AlaPro Ala

360360

Ala SerAla Ser

370370

Pro AlaPro Ala

Ala ProAla Pro

Ala Pro 375Ala Pro 375

Ala Pro 385Ala Pro 385

Ala ProAla Pro

Ala SerAla Ser

390390

Pro AlaPro Ala

Ala Pro 265Ala Pro 265

Ala SerAla Ser

Ser AlaSer Ala

Ala ProAla Pro

Ala Ser 330Ala Ser 330

Ala Pro 345Ala Pro 345

Ala SerAla Ser

Ser AlaSer Ala

Ala ProAla Pro

Ala ProAla Pro

Pro AlaPro Ala

Pro AlaPro Ala

300300

Ala Pro 315Ala Pro 315

Pro AlaPro Ala

Ala ProAla Pro

Pro AlaPro Ala

Pro AlaPro Ala

380380

Ala Pro 395Ala Pro 395

Ala SerAla Ser

270270

Ala Pro 285Ala Pro 285

Ala SerAla Ser

Ser AlaSer Ala

Ala ProAla Pro

Ala SerAla Ser

350350

Ala Pro 365Ala Pro 365

Ala SerAla Ser

Ser AlaSer Ala

Pro AlaPro Ala

Ala ProAla Pro

Pro AlaPro Ala

Pro AlaPro Ala

320320

Ala Pro 335Ala Pro 335

Pro AlaPro Ala

Ala ProAla Pro

Pro AlaPro Ala

Pro AlaPro Ala

400400

<210> <211> <212> <213> <210> <211> <212> <213> 905 238 БЕЛОК Искусственная 905 238 PROTEIN Artificial последовательность subsequence <220> <223> <400> <220> <223> <400> ICOSL v228 ECD 905 ICOSL v228 ECD 905 Asp Thr 1 Asp Thr 1 Gln Glu Lys 5 Gln Glu Lys 5 Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val Glu 10 15 Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val Glu 10 15 Leu Ser Leu Ser Cys Ala Cys 20 Cys Ala Cys 20 Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp Val 25 30 Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp Val 25 30 Tyr Val Tyr Val Tyr Trp Gln 35 Tyr Trp Gln 35 Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr His 40 45 Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr His 40 45

- 1051 044346- 1051 044346

Ile Pro Gln Asn Ser 50Ile Pro Gln Asn Ser 50

Phe Leu Glu Asn ValPhe Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Thr Phe 135Asp Glu Leu Thr Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Ala Asn Ile Gly Cys 195Ala Asn Ile Gly Cys 195

Cys Ile Glu Asn ValCys Ile Glu Asn Val

200200

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp LysGly Glu Arg Asp Lys

220220

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 906 <211> 111 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 906 <211> 111 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v228 IgV < 400> 906< 223> ICOSL v228 IgV < 400> 906

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15

GluGlu

- 1052 044346- 1052 044346

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly 20Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly 20

Ser Arg Phe Asp Leu Asn AspSer Arg Phe Asp Leu Asn Asp

30thirty

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 40 45Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr 40 45

Ile Pro Gln Asn Ser 50Ile Pro Gln Asn Ser 50

Phe Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr ArgPhe Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg

6060

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 70 75Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser 70 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 90 95Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys 90 95

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val GluLeu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu

105 110 <210> 907 <211> 122 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>105 110 <210> 907 <211> 122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v228 IgV < 400> 907< 223> ICOSL v228 IgV < 400> 907

Asp Thr 1Asp Thr 1

Gln GluGln Glu

Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 5 10 15Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 5 10 15

Leu SerLeu Ser

Cys Ala 20Cys Ala 20

Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp 25 30Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp 25 30

Tyr ValTyr Val

Tyr Trp 35Tyr Trp 35

Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr TyrGln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr

4545

Ile ProIle Pro

Arg Ala 65Arg Ala 65

Arg LeuArg Leu

Val LeuVal Leu

Gln Asn Ser Phe Leu Glu Asn Val Asp 55Gln Asn Ser Phe Leu Glu Asn Val Asp 55

Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg 7075Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg 7075

Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln 8590Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln 8590

Ser Gln Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val 100105Ser Gln Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val 100105

Ser Arg Tyr Arg 60Ser Arg Tyr Arg 60

Gly Asp Phe SerGly Asp Phe Ser

Lys Phe His Cys 95Lys Phe His Cys 95

Leu Ser Val GluLeu Ser Val Glu

110110

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

- 1053 044346- 1053 044346

Thr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser ValThr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser Val

115115

120 <210> 908 <211> 238 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>120 <210> 908 <211> 238 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL v229 ECD <400> 908<223> ICOSL v229 ECD <400> 908

Asp Thr Gln Glu LysAsp Thr Gln Glu Lys

55

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser SerPro Glu Gly Ser

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Asp GluVal Leu Ser Asp Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Pro Val Val Ser AlaPro Val Val Ser Ala

125125

His Ser Pro Ser GlnHis Ser Pro Ser Gln

130130

Asp Glu Leu Ala Phe 135Asp Glu Leu Ala Phe 135

Thr Cys Thr Ser Ile 140Thr Cys Thr Ser Ile 140

Gly Tyr Pro Arg Pro 145Gly Tyr Pro Arg Pro 145

Asn Val Tyr Trp Ile 150Asn Val Tyr Trp Ile 150

Asn Lys Thr Asp Asn 155Asn Lys Thr Asp Asn 155

Leu Leu Asp Gln AlaLeu Leu Asp Gln Ala

165165

Leu Gln Asn Asp ThrLeu Gln Asn Asp Thr

170170

Val Phe Leu Asn MetVal Phe Leu Asn Met

175175

Gly Leu Tyr Asp ValGly Leu Tyr Asp Val

180180

Val Ser Val Leu ArgVal Ser Val Leu Arg

185185

Ile Ala Arg Thr ProIle Ala Arg Thr Pro

190190

Val Asn Ile Gly CysVal Asn Ile Gly Cys

Arg Ile Glu Asn ValArg Ile Glu Asn Val

Leu Leu Gln Gln AsnLeu Leu Gln Gln Asn

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

ProPro

AsnAsn

Ser 160Ser 160

ArgArg

SerSer

LeuLeu

- 1054 044346- 1054 044346

195195

200200

205205

Thr Val Gly Ser GlnThr Val Gly Ser Gln

210210

Thr Gly Asn Asp IleThr Gly Asn Asp Ile

215215

Gly Glu Arg Asp Lys 220Gly Glu Arg Asp Lys 220

IleIle

Thr Glu Asn Pro Val 225Thr Glu Asn Pro Val 225

Ser Thr Gly Glu Lys 230Ser Thr Gly Glu Lys 230

Asn Ala Ala Thr 235 <210> 909 <211> 111 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Asn Ala Ala Thr 235 <210> 909 <211> 111 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v229 IgV <400> 909<223> ICOSL v229 IgV <400> 909

Asp Thr Gln Glu Lys 1 5Asp Thr Gln Glu Lys 1 5

Glu Val Arg Ala MetGlu Val Arg Ala Met

Val Gly Ser Asp ValVal Gly Ser Asp Val

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser SerPro Glu Gly Ser

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

Val Leu Ser Gln SerVal Leu Ser Gln Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Asp GluVal Leu Ser Asp Glu

110 <210> 910 <211> 122 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>110 <210> 910 <211> 122 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL v229 IgV <400> 910<223> ICOSL v229 IgV <400> 910

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15

GluGlu

- 1055 044346- 1055 044346

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly 20Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly 20

Ser Ser Phe Asp Leu Asn Asp Val 25 30Ser Ser Phe Asp Leu Asn Asp Val 25 30

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser GluTyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu

4040

Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr His 45Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr His 45

Ile Pro Gln His Ser Ser Leu GluIle Pro Gln His Ser Ser Leu Glu

5555

Tyr Val Asp Ser Arg Tyr Arg Asn 60Tyr Val Asp Ser Arg Tyr Arg Asn 60

Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly 65 70Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly 65 70

Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser LeuMet Leu Arg Gly Asp Phe Ser Leu

8080

Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln 85Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln 85

Asp Glu Gln Lys Phe His Cys LeuAsp Glu Gln Lys Phe His Cys Leu

9595

Val Leu Ser Gln Ser Leu Gly PheVal Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe

100100

Gln Glu Val Leu Ser Asp Glu ValGln Glu Val Leu Ser Asp Glu Val

105 110105 110

Thr Leu His Val Ala Ala Asn PheThr Leu His Val Ala Ala Asn Phe

115120115120

Ser Val <210>911 <211>1530 < 212> DNA < 213> Искусственная последовательность <220>Ser Val <210>911 <211>1530 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220>

< 223> ICOSL/NKp30 стек 1 <400>911 atggggtcaa ccgccatcct cgccctcctc ctggctgttc tccaaggagt cagcgctgat60 actcaggaga aggaagtcag agcgatggta ggcagcgacg tggagctcag ctgcgcttgc120 cctgaaggaa gccgttttga tttaaatgat gtttacgtat attggcaaac cagtgagtcg180 aaaaccgtgg tgacctacca catcccacag gacagctcct tggaaaacgt ggacagccgc240 taccggaacc gagccctgat gtcaccggcc ggcatgctgc ggggcgactt ctccctgcgc300 ttgttcaacg tcacccccca ggacgagcag aagtttcact gcctggtgtt gagccaatcc360 ctgggattcc aggaggtttt gagcgttgag gttacactgc atgtggcagc aaacttcagc420 gtgggaggtg gtggatcagg cggtggaggt tccggaggag gtggatctct ctgggtgtcc480 cagccccctg agattcgtac cctggaagga tcctctgcct tcctgccctg ctccttcaat540 gccagccaag ggagagtggc cattggctcc gtcacgtggt tccgagatga ggtggttcca600 gggaaggagg tgaggaatgg aaccccagag ttcaggggcc gcctggtccc acttgctccc660 tcccgtttcc tccatgacca ccaggctgag ctgcacatcc gggacgtgcg aggccatgac720 gccggtatct acgtgtgcag agtggaggtg ctgggccttg gtgtcgggac agggaatggg780< 223> ICOSL/NKp30 stack 1 <400>911 atggggtcaa ccgccatcct cgccctcctc ctggctgttc tccaaggagt cagcgctgat60 actcaggaga aggaagtcag agcgatggta ggcagcgacg tggagctcag ctgcgcttgc120 cctgaaggaa gccg ttttga tttaaatgat gtttacgtat attggcaaac cagtgagtcg180 aaaaccgtgg tgacctacca catcccacag gacagctcct tggaaaacgt ggacagccgc240 taccggaacc gagccctgat gtcaccggcc ggcatgctgc ggggcgactt ctccctgcgc300 ttg ttcaacg tcacccccca ggacgagcag aagtttcact gcctggtgtt gagccaatcc360 ctgggattcc aggaggtttt gagcgttgag gttacactgc atgtggcagc aaacttcagc420 gtgggaggtg gtggatcagg cggtggaggt tccggaggag gtggatctct ctgggtgtcc480 cagccccctg agattcgtac cctggaagga tcctctgcct tcctgccctg ctccttcaat540 gccagcca ag ggagagtggc cattggctcc gtcacgtggt tccgagatga ggtggttcca600 gggaaggagg tgaggaatgg aaccccagag ttcaggggcc gcctggtccc acttgctccc660 tcccgtttcc tccatgacca ccaggctgag ctgcacatcc gggacgtgcg aggccatgac720 gccggtat ct acgtgtgcag agtggaggtg ctgggccttg gtgtcgggac agggaatggg780

- 1056 044346- 1056 044346

actcggctgg actcggctgg tggtggagaa tggtggagaa agaacatcct agaacatcct cagctaggat cagctaggat ccggtggagg ccggtggagg agggtcagag agggtcagag 840 840 cccaaaagct cccaaaagct ccgacaagac ccgacaagac tcacacatgc tcacacatgc cccccttgtc cccccttgtc cagcgcctga cagcgcctga agctgagggt agctgaggt 900 900 gcgccctctg gcgccctctg tcttcctttt tcttcctttt cccccctaag cccccctaag ccgaaagata ccgaaagata ccctgatgat ccctgatgat ctcccgcact ctcccgcact 960 960 cccgaagtca cccgaagtca catgtgttgt catgtgttgt tgtcgacgta tgtcgacgta tctcatgaag tctcatgaag atcctgaggt atcctgaggt gaaattcaac gaaattcaac 1020 1020 tggtatgtag tggtatgtag acggggtcga acggggtcga agttcataat agttcataat gctaagacta gctaagacta agccacgaga agccacgaga agagcaatac agagcaatac 1080 1080 aactcaacgt aactcaacgt atcgggtggt atcggggtggt gagcgttctg gagcgttctg acggttctgc acggttctgc accaagattg accaagattg gcttaatgga gcttaatgga 1140 1140 aaagagtata aaagagtata agtgcaaggt agtgcaaggt gtccaacaag gtccaacaag gctcttccgg gctcttccgg cacccatcga cacccatcga aaagacgatt aaagacgatt 1200 1200 tccaaagcga tccaaagcga aaggccaacc aaggccaacc tagggaaccg tagggaaccg caagtttaca caagtttaca ctttgccccc ctttgccccc gtcaagagac gtcaagagac 1260 1260 gaacttacca gaacttacca agaatcaagt agaatcaagt ttccctgacg ttccctgacg tgccttgtga tgccttgtga agggcttcta agggcttcta ccctagcgat ccctagcgat 1320 1320 atagcagttg atagcagttg agtgggaatc agtgggaatc taacggccag taacggccag cccgaaaata cccgaaaata attataagac attataagac tactccgccc tactccgccc 1380 1380 gtgctggaca gtgctggac gtgatggttc gtgatggttc atttttcctg atttttcctg tattcaaaac tattcaaaac tcactgtgga tcactgtgga caaatctaga caaatctaga 1440 1440 tggcagcagg tggcagcagg gtaatgtgtt gtaatgtgtt ctcttgttca ctcttgttca gttatgcacg gttatgcacg aggcattgca aggcattgca caatcactat caatcactat 1500 1500 acgcaaaaaa acgcaaaaaa gtttgtctct gtttgtctct ctctccgggg ctctccgggg 1530 1530

<210> 912 <211> 491 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220><210> 912 <211> 491 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL/NKp30 стек 1 <400>912<223> ICOSL/NKp30 stack 1 <400>912

Asp Thr Gln Glu LysAsp Thr Gln Glu Lys

Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val GluGlu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val Glu

10151015

Leu SerLeu Ser

Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp ValCys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp Val

25302530

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser 35Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser 35

Ile Pro Gln Asp Ser Ser LeuIle Pro Gln Asp Ser Ser Leu

5555

Arg Ala Leu Met Ser Pro AlaArg Ala Leu Met Ser Pro Ala

7070

Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro 85Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro 85

Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr His 4045Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr His 4045

Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg Asn 60Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg Asn 60

Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser Leu 7580Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser Leu 7580

Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys LeuGln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys Leu

90959095

Val Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe Gln Glu ValVal Leu Ser Gln Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val

100105100105

Leu Ser Val Glu ValLeu Ser Val Glu Val

110110

- 1057 044346- 1057 044346

ThrThr

GlyGly

Glu 145Glu 145

AsnAsn

AspAsp

ArgArg

GlnGln

Tyr 225Tyr 225

GlyGly

GlyGly

ProPro

ProPro

Thr 305Thr 305

AsnAsn

ArgArg

ValVal

Leu His ValLeu His Val

115115

Gly Gly Ser 130Gly Gly Ser 130

Ile Arg ThrIle Arg Thr

Ala Ser GlnAla Ser Gln

Glu Val ValGlu Val Val

180180

Gly Arg LeuGly Arg Leu

195195

Ala Glu Leu 210Ala Glu Leu 210

Val Cys ArgVal Cys Arg

Thr Arg LeuThr Arg Leu

Gly Gly SerGly Gly Ser

260260

Cys Pro AlaCys Pro Ala

275275

Pro Lys Pro 290Pro Lys Pro 290

Cys Val ValCys Val Val

Trp Tyr ValTrp Tyr Val

Glu Glu GlnGlu Glu Gln

340340

Leu His GlnLeu His Gln

Ala Ala AsnAla Ala Asn

Phe Ser Val 120Phe Ser Val 120

Gly Gly GlyGly Gly Gly

125125

Gly Ser GlyGly Ser Gly

Gly Gly GlyGly Gly Gly

135135

Leu Glu GlyLeu Glu Gly

150150

Gly Arg Val 165Gly Arg Val 165

Pro Gly LysPro Gly Lys

Val Pro LeuVal Pro Leu

His Ile ArgHis Ile Arg

215215

Val Glu ValVal Glu Val

230230

Val Val Glu 245Val Val Glu 245

Glu Pro LysGlu Pro Lys

Pro Glu AlaPro Glu Ala

Lys Asp ThrLys Asp Thr

295295

Val Asp ValVal Asp Val

310310

Asp Gly Val 325Asp Gly Val 325

Tyr Asn SerTyr Asn Ser

Asp Trp LeuAsp Trp Leu

Gly Ser LeuGly Ser Leu

Trp Val SerTrp Val Ser

140140

Gln Pro ProGln Pro Pro

Ser Ser AlaSer Ser Ala

Phe Leu Pro 155Phe Leu Pro 155

Cys Ser PheCys Ser Phe

160160

Ala Ile GlyAla Ile Gly

170170

Glu Val ArgGlu Val Arg

185185

Ala Pro Ser 200Ala Pro Ser 200

Asp Val ArgAsp Val Arg

Leu Gly LeuLeu Gly Leu

Lys Glu HisLys Glu His

250250

Ser Ser AspSer Ser Asp

265265

Glu Gly Ala 280Glu Gly Ala 280

Leu Met IleLeu Met Ile

Ser His GluSer His Glu

Glu Val HisGlu Val His

330330

Thr Tyr ArgThr Tyr Arg

345345

Asn Gly LysAsn Gly Lys

Ser Val ThrSer Val Thr

Trp Phe ArgTrp Phe Arg

175175

Asn Gly ThrAsn Gly Thr

Arg Phe LeuArg Phe Leu

205205

Gly His AspGly His Asp

220220

Gly Val Gly 235Gly Val Gly 235

Pro Gln LeuPro Gln Leu

Lys Thr HisLys Thr His

Pro Ser ValPro Ser Val

285285

Ser Arg ThrSer Arg Thr

300300

Asp Pro Glu 315Asp Pro Glu 315

Asn Ala LysAsn Ala Lys

Val Val SerVal Val Ser

Glu Tyr LysGlu Tyr Lys

Pro Glu Phe 190Pro Glu Phe 190

His Asp HisHis Asp His

Ala Gly IleAla Gly Ile

Thr Gly AsnThr Gly Asn

240240

Gly Ser GlyGly Ser Gly

255255

Thr Cys Pro 270Thr Cys Pro 270

Phe Leu PhePhe Leu Phe

Pro Glu ValPro Glu Val

Val Lys PheVal Lys Phe

320320

Thr Lys ProThr Lys Pro

335335

Val Leu Thr 350Val Leu Thr 350

Cys Lys ValCys Lys Val

- 1058 044346- 1058 044346

Ile SerIle Ser

Lys AlaLys Ala

355355

360360

365365

Ser AsnSer Asn

370370

Lys AlaLys Ala

Leu ProLeu Pro

Lys Gly 385Lys Gly 385

Gln ProGlin Pro

Arg GluArg Glu

390390

Asp GluAsp Glu

Leu ThrLeu Thr

Lys Asn 405Lys Asn 405

Phe TyrPhe Tyr

Pro SerPro Ser

420420

Asp IleAsp Ile

Glu AsnGlu Asn

Asn Tyr 435Asn Tyr 435

Lys ThrLys Thr

Phe PhePhe Phe

450450

Leu TyrLeu Tyr

Ser LysSer Lys

Gly Asn 465Gly Asn 465

Val PheVal Phe

Ser CysSer Cys

470470

Tyr ThrTyr Thr

Gln LysGln Lys

Ser LeuSer Leu

485485

Ala Pro 375Ala Pro 375

Pro GlnPro Gln

Gln ValGln Val

Ala ValAla Val

Thr Pro 440Thr Pro 440

Leu Thr 455Leu Thr 455

Ser ValSer Val

Ser LeuSer Leu

Ile GluIle Glu

Lys ThrLys Thr

380380

Val TyrVal Tyr

Thr Leu 395Thr Leu 395

Pro ProPro Pro

Ser ArgSer Arg

400400

Ser LeuSer Leu

410410

Thr CysThr Cys

Leu ValLeu Val

Lys Gly 415Lys Gly 415

Glu Trp 425Glu Trp 425

Glu SerGlu Ser

Asn GlyAsn Gly

430430

Gln ProGlin Pro

Pro ValPro Val

Leu AspLeu Asp

Ser Asp 445Ser Asp 445

Gly SerGly Ser

Val AspVal Asp

Met HisMet His

Ser ProSer Pro

490490

Lys SerLys Ser

460460

Glu Ala 475Glu Ala 475

GlyGly

Arg TrpArg Trp

Gln GlnGln Gln

Leu HisLeu His

Asn HisAsn His

480 <210> 913 <211> 1923 <212> DNA <213> Искусственная последовательность <220>480 <210> 913 <211> 1923 <212> DNA <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL/NKp30 стек 2 <400> 913 atggggtcaa actcaggaga cctgaaggaa aaaaccgtgg taccggaacc ttgttcaacg ctgggattcc gtgggaggtg cagccccctg gccagccaag ccgccatcct aggaagtcag gccgttttga tgacctacca gagccctgat tcacccccca aggaggtttt gtggatcagg agattcgtac ggagagtggc cgccctcctc agcgatggta tttaaatgat catcccacag gtcaccggcc ggacgagcag gagcgttgag cggtggaggt cctggaagga cattggctcc ctggctgttc ggcagcgacg gtttacgtat gacagctcct ggcatgctgc aagtttcact gttacactgc tccggaggag tcctctgcct gtcacgtggt tccaaggagt tggagctcag attggcaaac tggaaaacgt ggggcgactt gcctggtgtt atgtggcagc gtggatctct tcctgccctg tccgagatga cagcgctgat ctgcgcttgc cagtgagtcg ggacagccgc ctccctgcgc gagccaatcc aaacttcagc ctgggtgtcc ctccttcaat ggtggttcca<223> ICOSL/NKp30 stack 2 <400> 913 atggggtcaa actcaggaga cctgaaggaa aaaaccgtgg taccggaacc ttgttcaacg ctgggattcc gtgggaggtg cagccccctg gccagccaag ccgccatcct aggaagtcag gccgttttga tgacctacca gagccctgat tcacc cccca aggaggtttt gtggatcagg agattcgtac ggagagtggc cgccctcctc agcgatggta tttaaatgat catcccacag gtcaccggcc ggacgagcag gagcgttgag cggtggaggt cctggaagga cattggctcc ctggctgttc ggcagcgacg gtttacgtat gacagct cct ggcatgctgc aagtttcact gttacactgc tccggaggag tcctctgcct gtcacgtggt tccaaggagt tggagctcag attggcaaac tggaaaacgt ggggcgactt gcctggtgtt atgtggcagc gtggatctct tcctgccctg tccgagatga cagcgctgat ctgcgcttgc cagtgagtcg ggacagccgc ctccctgcgc g agccaatcc aaacttcagc ctgggtgtcc ctccttcaat ggtggttcca

120120

180180

240240

300300

360360

420420

480480

540540

600600

- 1059 044346- 1059 044346

gggaaggagg gggaaggagg tgaggaatgg tgaggaatgg aaccccagag aaccccagag ttcaggggcc ttcaggggcc gcctggtccc gcctggtccc acttgctccc acttgctccc 660 660 tcccgtttcc tcccgtttcc tccatgacca tccatgacca ccaggctgag ccaggctgag ctgcacatcc ctgcacatcc gggacgtgcg gggacgtgcg aggccatgac aggccatgac 720 720 gccggtatct gccggtatct acgtgtgcag acgtgtgcag agtggaggtg agtggaggtg ctgggccttg ctggggccttg gtgtcgggac gtgtcggggac agggaatggg agggaatggg 780 780 actcggctgg actcggctgg tggtggagaa tggtggagaa agaacatcct agaacatcct cagctaggtg cagctaggtg gaggaggtag gaggaggtag cgggggagga cggggggaga 840 840 ggcagcggtg ggcagcggtg gtggcgggtc gtggcgggtc attgtgggtt attgtgggtt tcacagcctc tcacagcctc cagaaatacg cagaaatacg gaccctcgag gaccctcgag 900 900 ggttcctctg ggttcctctg cttttctgcc cttttctgcc ctgtagcttt ctgtagcttt aatgcttctc aatgcttctc agggacgcgt agggacgcgt ggctattggc ggctattggc 960 960 tccgttacgt tccgttacgt ggtttcggga ggtttcggga cgaggtggtc cgaggtggtc cctgggaagg cctgggaagg aggtacggaa aggtacggaa tggaacacct tggaacacct 1020 1020 gagtttcggg gagtttcggg gccgcctcgt gccgcctcgt tccgctcgct tccgctcgct ccaagccgct ccaagccgct tccttcacga tccttcacga ccaccaagcg ccaccaagcg 1080 1080 gaacttcata gaacttcata taagggacgt taagggacgt gagggggcat gagggggcat gacgcgggta gacgcgggta tatatgtctg tatatgtctg ccgcgtcgag ccgcgtcgag 1140 1140 gtgctgggtc gtgctgggtc ttggggtggg ttggggtggg tacgggcaat tacggggcaat ggcacccgat ggcacccgat tggtcgttga tggtcgttga gaaagaacac gaaagaacac 1200 1200 cctcagctgg cctcagctgg gatccggtgg gatccggtgg aggagggtca aggagggtca gagcccaaaa gagcccaaaa gctccgacaa gctccgacaa gactcacaca gactcacaca 1260 1260 tgcccccctt tgcccccctt gtccagcgcc gtccagcgcc tgaagctgag tgaagctgag ggtgcgccct ggtgcgccct ctgtcttcct ctgtcttcct tttcccccct tttcccccct 1320 1320 aagccgaaag aagccgaaag ataccctgat ataccctgat gatctcccgc gatctcccgc actcccgaag actcccgaag tcacatgtgt tcacatgtgt tgttgtcgac tgttgtcgac 1380 1380 gtatctcatg gtatctcatg aagatcctga aagatcctga ggtgaaattc ggtgaaattc aactggtatg aactggtatg tagacggggt tagacggggt cgaagttcat cgaagttcat 1440 1440 aatgctaaga aatgctaaga ctaagccacg ctaagccacg agaagagcaa agaagagcaa tacaactcaa tacaactcaa cgtatcgggt cgtatcgggt ggtgagcgtt ggtgagcgtt 1500 1500 ctgacggttc ctgacggttc tgcaccaaga tgcaccaaga ttggcttaat ttggcttaat ggaaaagagt ggaaaagagt ataagtgcaa ataagtgcaa ggtgtccaac ggtgtccaac 1560 1560 aaggctcttc aaggctcttc cggcacccat cggcacccat cgaaaagacg cgaaaagacg atttccaaag atttccaaag cgaaaggcca cgaaaggcca acctagggaa acctagggaa 1620 1620 ccgcaagttt ccgcaagttt acactttgcc acactttgcc cccgtcaaga cccgtcaaga gacgaactta gacgaactta ccaagaatca ccaagaatca agtttccctg agtttccctg 1680 1680 acgtgccttg acgtgccttg tgaagggctt tgaagggctt ctaccctagc ctaccctagc gatatagcag gatatagcag ttgagtggga ttgagtggga atctaacggc atctaacggc 1740 1740 cagcccgaaa cagcccgaaa ataattataa ataattataa gactactccg gactactccg cccgtgctgg cccgtgctgg acagtgatgg acagtgatgg ttcatttttc ttcatttttc 1800 1800 ctgtattcaa ctgtattcaa aactcactgt aactcactgt ggacaaatct ggacaaatct agatggcagc agatggcagc agggtaatgt agggtaatgt gttctcttgt gttctcttgt 1860 1860 tcagttatgc tcagttatgc acgaggcatt acgaggcatt gcacaatcac gcacaatcac tatacgcaaa tatacgcaaa aaagtttgtc aaagtttgtc tctctctccg tctctctccg 1920 1920

gggggg

1923 <210> 914 <211> 622 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>1923 <210> 914 <211> 622 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL/NKp30 стек 2 < 400> 914< 223> ICOSL/NKp30 stack 2 < 400> 914

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val GluAsp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val Glu

5 10 155 10 15

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp ValLeu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp Val

- 1060 044346- 1060 044346

ThrThr

TyrTyr

TyrTyr

ValVal

Tyr 35Tyr 35

TrpTrp

GlnGln

ThrThr

SerSer

Glu 40Glu 40

SerSer

LysLys

ThrThr

ValVal

Val 45Val 45

IleIle

Pro 50Pro 50

GlnGln

AspAsp

SerSer

SerSer

Leu 55Leu 55

GluGlu

AsnAsn

ValVal

AspAsp

Ser 60Ser 60

ArgArg

TyrTyr

ArgArg

Arg 65Arg 65

AlaAla

LeuLeu

MetMet

SerSer

Pro 70Pro 70

AlaAla

GlyGly

MetMet

LeuLeu

Arg 75Arg 75

GlyGly

AspAsp

PhePhe

SerSer

ArgArg

LeuLeu

PhePhe

AsnAsn

Val 85Val 85

ThrThr

ProPro

GlnGln

AspAsp

Glu 90Glu 90

GlnGln

LysLys

PhePhe

HisHis

Cys 95Cys 95

ValVal

LeuLeu

SerSer

GlnGln

100100

SerSer

LeuLeu

GlyGly

PhePhe

GlnGln

105105

GluGlu

ValVal

LeuLeu

SerSer

ValVal

110110

GluGlu

ThrThr

LeuLeu

HisHis

115115

ValVal

AlaAla

AlaAla

AsnAsn

PhePhe

120120

SerSer

ValVal

GlyGly

GlyGly

Gly 125Gly 125

GlyGly

SerSer

GlyGly

Gly 130Gly 130

GlyGly

SerSer

GlyGly

GlyGly

Gly 135Gly 135

GlyGly

SerSer

LeuLeu

TrpTrp

ValVal

140140

SerSer

GlnGln

ProPro

GluGlu

145145

IleIle

ArgArg

ThrThr

LeuLeu

GluGlu

150150

GlyGly

SerSer

SerSer

AlaAla

PhePhe

155155

LeuLeu

ProPro

CysCys

SerSer

AsnAsn

AlaAla

SerSer

GlnGln

Gly 165Gly 165

ArgArg

ValVal

AlaAla

IleIle

Gly 170Gly 170

SerSer

ValVal

ThrThr

TrpTrp

PhePhe

175175

AspAsp

GluGlu

ValVal

ValVal

180180

ProPro

GlyGly

LysLys

GluGlu

ValVal

185185

ArgArg

AsnAsn

GlyGly

ThrThr

ProPro

190190

GluGlu

ArgArg

GlyGly

Arg 195Arg 195

LeuLeu

ValVal

ProPro

LeuLeu

AlaAla

200200

ProPro

SerSer

ArgArg

PhePhe

LeuLeu

205205

HisHis

AspAsp

GlnGln

AlaAla

210210

GluGlu

LeuLeu

HisHis

IleIle

Arg 215Arg 215

AspAsp

ValVal

ArgArg

GlyGly

HisHis

220220

AspAsp

AlaAla

GlyGly

Tyr 225Tyr 225

ValVal

CysCys

ArgArg

ValVal

GluGlu

230230

ValVal

LeuLeu

GlyGly

LeuLeu

Gly 235Gly 235

ValVal

GlyGly

ThrThr

GlyGly

GlyGly

ThrThr

ArgArg

LeuLeu

ValVal

245245

ValVal

GluGlu

LysLys

GluGlu

HisHis

250250

ProPro

GlnGln

LeuLeu

GlyGly

Gly 255Gly 255

GlyGly

SerSer

GlyGly

Gly 260Gly 260

GlyGly

GlyGly

SerSer

GlyGly

Gly 265Gly 265

GlyGly

GlyGly

SerSer

LeuLeu

Trp 270Trp 270

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

GlyGly

ProPro

Phe 160Phe 160

ArgArg

PhePhe

HisHis

IleIle

Asn 240Asn 240

GlyGly

SerSer

- 1061 044346- 1061 044346

GlnGln

CysCys

Trp 305Trp 305

ProPro

HisHis

AlaAla

ThrThr

Gly 385Gly 385

ThrThr

PhePhe

ProPro

ValVal

Thr 465Thr 465

ValVal

CysCys

SerSer

Pro ProPro Pro

275275

Ser Phe 290Ser Phe 290

Phe ArgPhe Arg

Glu PheGlu Phe

Asp HisAsp His

Gly IleGly Ile

355355

Gly Asn 370Gly Asn 370

Ser GlySer Gly

Cys ProCys Pro

Leu PheLeu Phe

Glu ValGlu Val

435435

Lys Phe 450Lys Phe 450

Lys ProLys Pro

Leu ThrLeu Thr

Lys ValLys Val

Lys AlaLys Ala

515515

Glu IleGlu Ile

Asn AlaAsn Ala

Asp GluAsp Glu

Arg GlyArg Gly

325325

Gln Ala 340Gln Ala 340

Tyr ValTyr Val

Gly ThrGly Thr

Gly GlyGly Gly

Pro CysPro Cys

405405

Pro Pro 420Pro Pro 420

Thr CysThr Cys

Asn TrpAsn Trp

Arg GluArg Glu

Val LeuVal Leu

485485

Ser AsnSer Asn

500500

Lys GlyLys Gly

Arg ThrArg Thr

Ser GlnSer Gln

295295

Val Val 310Val Val 310

Arg LeuArg Leu

Glu LeuGlu Leu

Cys ArgCysArg

Arg LeuArg Leu

375375

Gly Ser 390Gly Ser 390

Pro AlaPro Ala

Lys ProLys Pro

Val ValVal Val

Tyr ValTyr Val

455455

Glu Gln 470Glu Gln 470

His GlnHis Gln

Lys AlaLys Ala

Gln ProGlin Pro

Leu Glu 280Leu Glu 280

Gly ArgGly Arg

Pro GlyPro Gly

Val ProVal Pro

His IleHis Ile

345345

Val Glu 360Val Glu 360

Val ValVal Val

Glu ProGlu Pro

Pro GluPro Glu

Lys AspLys Asp

425425

Val Asp 440Val Asp 440

Asp GlyAsp Gly

Tyr AsnTyr Asn

Asp TrpAsp Trp

Leu ProLeu Pro

505505

Arg Glu 520Arg Glu 520

Gly SerGly Ser

Val AlaVal Ala

Lys GluLys Glu

315315

Leu Ala 330Leu Ala 330

Arg AspArg Asp

Val LeuVal Leu

Glu LysGlu Lys

Lys SerLys Ser

395395

Ala Glu 410Ala Glu 410

Thr LeuThr Leu

Val SerVal Ser

Val GluVal Glu

Ser ThrSer Thr

475475

Leu Asn 490Leu Asn 490

Ala ProAla Pro

Pro GlnPro Gln

Ser AlaSer Ala

285285

Ile Gly 300Ile Gly 300

Val ArgVal Arg

Pro SerPro Ser

Val ArgVal Arg

Gly LeuGly Leu

365365

Glu His 380Glu His 380

Ser AspSer Asp

Gly AlaGly Ala

Met IleMet Ile

His GluHis Glu

445445

Val His 460Val His 460

Tyr ArgTyr Arg

Gly LysGly Lys

Ile GluIle Glu

Val TyrVal Tyr

525525

Phe LeuPhe Leu

Ser ValSer Val

Asn GlyAsn Gly

Arg PheArg Phe

335335

Gly His 350Gly His 350

Gly ValGly Val

Pro GlnPro Gln

Lys ThrLys Thr

Pro SerPro Ser

415415

Ser Arg 430Ser Arg 430

Asp ProAsp Pro

Asn AlaAsn Ala

Val ValVal Val

Glu TyrGlu Tyr

495495

Lys Thr 510Lys Thr 510

Thr LeuThr Leu

ProPro

ThrThr

Thr 320Thr 320

LeuLeu

AspAsp

GlyGly

LeuLeu

His 400His 400

ValVal

ThrThr

GluGlu

LysLys

Ser 480Ser 480

LysLys

IleIle

ProPro

- 1062 044346- 1062 044346

Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys LeuPro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu

530 535540530 535540

Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser AsnVal Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn

545 550 555560545 550 555560

Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp SerGly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser

565 570575565 570575

Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser ArgAsp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg

580 585590580 585590

Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala LeuTrp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu

595 600605595 600605

His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro GlyHis Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly

610 615620 <210>915 <211>1530 <212> DNA <213> Искусственная последовательность <220>610 615620 <210>915 <211>1530 <212> DNA <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL/NKp30 стек 3 <400> 915<223> ICOSL/NKp30 stack 3 <400> 915

atggggtcaa atggggtcaa ccgccatcct ccgccatcct cgccctcctc cgccctcctc ctggctgttc ctggctgttc tccaaggagt tccaaggagt cagcgctgat cagcgctgat 60 60 actcaggaga actcaggaga aggaagtcag aggaagtcag agcgatggta agcgatggta ggcagcgacg ggcagcgacg tggagctcag tggagctcag ctgcgcttgc ctgcgcttgc 120 120 cctgaaggaa cctgaaggaa gccgttttga gccgttttga tttaaatgat tttaaatgat gtttacgtat gtttacgtat attggcaaac attggcaaac cagtgagtcg cagtgagtcg 180 180 aaaaccgtgg aaaaccgtgg tgacctacca tgacctacca catcccacag catccacag cacagctcct cacagctcct tggaaaacgt tggaaaacgt ggacagccgc ggacagccgc 240 240 taccggaacc taccggaacc gagccctgat gagccctgat gtcaccggcc gtcaccggcc ggcatgctgc ggcatgctgc ggggcgactt ggggcgactt ctccctgcgc ctccctgcgc 300 300 ttgttcaacg ttgttcaacg tcacccccca tcacccccca ggacgagcag ggacgagcag aagtttcact aagtttcact gcctggtgtt gcctggtgtt gagccgatcc gagccgatcc 360 360 ctgggattcc ctggggattcc aggaggtttt aggaggtttt gagcgttgag gagcgttgag gttacactgc gttacactgc atgtggcagc atgtggcagc aaacttcagc aaacttcagc 420 420 gtgggaggtg gtgggaggtg gtggatcagg gtggatcagg cggtggaggt cggtggaggt tccggaggag tccggagggag gtggatctct gtggatctct ctgggtgtcc ctgggtgtcc 480 480 cagccccctg cagccccctg agattcgtac agattcgtac cctggaagga cctggaagga tcctctgcct tcctctgcct tcctgccctg tcctgccctg ctccttcaat ctccttcaat 540 540 gccagccaag gccagccaag ggagagtggc gggagagtggc cattggctcc cattggctcc gtcacgtggt gtcacgtggt tccgagatga tccgagatga ggtggttcca ggtggttcca 600 600 gggaaggagg gggaaggagg tgaggaatgg tgaggaatgg aaccccagag aaccccagag ttcaggggcc ttcaggggcc gcctggtccc gcctggtccc acttgctccc acttgctccc 660 660 tcccgtttcc tcccgtttcc tccatgacca tccatgacca ccaggctgag ccaggctgag ctgcacatcc ctgcacatcc gggacgtgcg gggacgtgcg aggccatgac aggccatgac 720 720 gccggtatct gccggtatct acgtgtgcag acgtgtgcag agtggaggtg agtggaggtg ctgggccttg ctggggccttg gtgtcgggac gtgtcggggac agggaatggg agggaatggg 780 780 actcggctgg actcggctgg tggtggagaa tggtggagaa agaacatcct agaacatcct cagctaggat cagctaggat ccggtggagg ccggtggagg agggtcagag agggtcagag 840 840 cccaaaagct cccaaaagct ccgacaagac ccgacaagac tcacacatgc tcacacatgc cccccttgtc cccccttgtc cagcgcctga cagcgcctga agctgagggt agctgaggt 900 900

- 1063 044346 gcgccctctg cccgaagtca tggtatgtag aactcaacgt aaagagtata tccaaagcga gaacttacca atagcagttg gtgctggaca tggcagcagg acgcaaaaaa tcttcctttt catgtgttgt acggggtcga atcgggtggt agtgcaaggt aaggccaacc agaatcaagt agtgggaatc gtgatggttc gtaatgtgtt gtttgtctct cccccctaag tgtcgacgta agttcataat gagcgttctg gtccaacaag tagggaaccg ttccctgacg taacggccag atttttcctg ctcttgttca ctctccgggg ccgaaagata tctcatgaag gctaagacta acggttctgc gctcttccgg caagtttaca tgccttgtga cccgaaaata tattcaaaac gttatgcacg ccctgatgat atcctgaggt agccacgaga accaagattg cacccatcga ctttgccccc agggcttcta attataagac tcactgtgga aggcattgca ctcccgcact gaaattcaac agagcaatac gcttaatgga aaagacgatt gtcaagagac ccctagcgat tactccgccc caaatctaga caatcactat- 1063 044346 gcgccctctg cccgaagtca tggtatgtag aactcaacgt aaagagtata tccaaagcga gaacttacca atagcagttg gtgctggaca tggcagcagg acgcaaaaaa tcttcctttt catgtgtttt acggggtcga atcgggtggt agtgcaaggt aa ggccaacc agaatcaagt agtgggaatc gtgatggttc gtaatgtgtt gtttgtctct cccccctaag tgtcgacgta agttcataat gagcgttctg gtccaacaag tagggaaccg ttccctgacg taacggccag atttttcctg ctcttgttca ctctccgggg ccgaaagata tct catgaag gctaagacta acggttctgc gctcttccgg caagtttaca tgccttgtga cccgaaaata tattcaaaac gttatgcacg ccctgatgat atcctgaggt agccacgaga accaagattg cacccatcga ctttgccccc agggcttcta attataagac tcactgtgga aggcattgca ctcccgcact gaaattcaac agagcaatac gcttaatgga aaagacgatt gtcaagagac ccctagcgat tactccgccc caaatctaga caatcactat

960960

10201020

10801080

11401140

12001200

12601260

13201320

13801380

14401440

15001500

1530 <210> 916 <211> 491 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>1530 <210> 916 <211> 491 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL/NKp30 стек 3 < 400> 916< 223> ICOSL/NKp30 stack 3 < 400> 916

Asp Thr 1Asp Thr 1

Gln GluGln Glu

Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val Glu 5 10 15Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val Glu 5 10 15

Leu SerLeu Ser

Cys Ala 20Cys Ala 20

Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp ValCys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp Val

30thirty

Tyr ValTyr Val

Tyr Trp 35Tyr Trp 35

Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr His 40 45Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr His 40 45

Ile ProIle Pro

Gln HisGln His

Ser Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg Asn 55 60Ser Ser Leu Glu Asn Val Asp Ser Arg Tyr Arg Asn 55 60

Arg Ala 65Arg Ala 65

Arg LeuArg Leu

Val LeuVal Leu

Thr LeuThr Leu

Leu MetLeu Met

Phe AsnPhe Asn

Ser ArgSer Arg

100100

His ValHis Val

Ser ProSer Pro

Ala GlyAla Gly

Met LeuMet Leu

Val Thr 85Val Thr 85

Pro GlnPro Gln

Asp GluAsp Glu

Ser LeuSer Leu

Gly PheGly Phe

Gln Glu 105Gln Glu 105

Ala AlaAla Ala

Asn PheAsn Phe

Ser ValSer Val

Arg Gly 75Arg Gly 75

Gln LysGln Lys

Val LeuVal Leu

Gly GlyGly Gly

Asp PheAsp Phe

Phe HisPhe His

Ser ValSer Val

110110

Gly GlyGly Gly

Ser LeuSer Leu

Cys Leu 95Cys Leu 95

Glu ValGlu Val

Ser GlySer Gly

- 1064 044346- 1064 044346

Gln Pro ProGln Pro Pro

115115

120120

125125

GlyGly

Glu 145Glu 145

AsnAsn

AspAsp

ArgArg

GlnGln

Tyr 225Tyr 225

GlyGly

GlyGly

ProPro

ProPro

Thr 305Thr 305

AsnAsn

ArgArg

ValVal

Gly Gly Ser 130Gly Gly Ser 130

Gly Gly GlyGly Gly Gly

135135

Gly Ser LeuGly Ser Leu

Trp Val SerTrp Val Ser

140140

Ile Arg ThrIle Arg Thr

Leu Glu GlyLeu Glu Gly

150150

Ser Ser AlaSer Ser Ala

Phe Leu Pro 155Phe Leu Pro 155

Cys Ser PheCys Ser Phe

160160

Ala Ser GlnAla Ser Gln

Glu Val ValGlu Val Val

180180

Gly Arg LeuGly Arg Leu

195195

Ala Glu Leu 210Ala Glu Leu 210

Val Cys ArgVal Cys Arg

Thr Arg LeuThr Arg Leu

Gly Gly SerGly Gly Ser

260260

Cys Pro AlaCys Pro Ala

275275

Pro Lys Pro 290Pro Lys Pro 290

Cys Val ValCys Val Val

Trp Tyr ValTrp Tyr Val

Glu Glu GlnGlu Glu Gln

340340

Leu His GlnLeu His Gln

355355

Gly Arg Val 165Gly Arg Val 165

Pro Gly LysPro Gly Lys

Val Pro LeuVal Pro Leu

His Ile ArgHis Ile Arg

215215

Val Glu ValVal Glu Val

230230

Val Val Glu 245Val Val Glu 245

Glu Pro LysGlu Pro Lys

Pro Glu AlaPro Glu Ala

Lys Asp ThrLys Asp Thr

295295

Val Asp ValVal Asp Val

310310

Asp Gly Val 325Asp Gly Val 325

Tyr Asn SerTyr Asn Ser

Asp Trp LeuAsp Trp Leu

Ala Ile GlyAla Ile Gly

170170

Glu Val ArgGlu Val Arg

185185

Ala Pro Ser 200Ala Pro Ser 200

Asp Val ArgAsp Val Arg

Leu Gly LeuLeu Gly Leu

Lys Glu HisLys Glu His

250250

Ser Ser AspSer Ser Asp

265265

Glu Gly Ala 280Glu Gly Ala 280

Leu Met IleLeu Met Ile

Ser His GluSer His Glu

Glu Val HisGlu Val His

330330

Thr Tyr ArgThr Tyr Arg

345345

Asn Gly Lys 360Asn Gly Lys 360

Ser Val ThrSer Val Thr

Trp Phe ArgTrp Phe Arg

175175

Asn Gly ThrAsn Gly Thr

Arg Phe LeuArg Phe Leu

205205

Gly His AspGly His Asp

220220

Gly Val Gly 235Gly Val Gly 235

Pro Gln LeuPro Gln Leu

Lys Thr HisLys Thr His

Pro Ser ValPro Ser Val

285285

Ser Arg ThrSer Arg Thr

300300

Asp Pro Glu 315Asp Pro Glu 315

Asn Ala LysAsn Ala Lys

Val Val SerVal Val Ser

Glu Tyr LysGlu Tyr Lys

365365

Pro Glu Phe 190Pro Glu Phe 190

His Asp HisHis Asp His

Ala Gly IleAla Gly Ile

Thr Gly AsnThr Gly Asn

240240

Gly Ser GlyGly Ser Gly

255255

Thr Cys Pro 270Thr Cys Pro 270

Phe Leu PhePhe Leu Phe

Pro Glu ValPro Glu Val

Val Lys PheVal Lys Phe

320320

Thr Lys ProThr Lys Pro

335335

Val Leu Thr 350Val Leu Thr 350

Cys Lys ValCys Lys Val

- 1065 044346- 1065 044346

Ser AsnSer Asn

370370

Lys AlaLys Ala

Leu ProLeu Pro

Lys Gly 385Lys Gly 385

Gln ProGlin Pro

Arg GluArg Glu

390390

Asp GluAsp Glu

Leu ThrLeu Thr

Lys Asn 405Lys Asn 405

Phe TyrPhe Tyr

Pro SerPro Ser

420420

Asp IleAsp Ile

Glu AsnGlu Asn

Asn Tyr 435Asn Tyr 435

Lys ThrLys Thr

Phe PhePhe Phe

450450

Leu TyrLeu Tyr

Ser LysSer Lys

Gly Asn 465Gly Asn 465

Val PheVal Phe

Ser CysSer Cys

470470

Tyr ThrTyr Thr

Gln LysGln Lys

Ser LeuSer Leu

485485

Ala Pro 375Ala Pro 375

Pro GlnPro Gln

Gln ValGln Val

Ala ValAla Val

Thr Pro 440Thr Pro 440

Leu Thr 455Leu Thr 455

Ser ValSer Val

Ser LeuSer Leu

Ile GluIle Glu

Val TyrVal Tyr

Ser LeuSer Leu

410410

Glu Trp 425Glu Trp 425

Pro ValPro Val

Val AspVal Asp

Met HisMet His

Ser ProSer Pro

490490

Lys ThrLys Thr

380380

Thr Leu 395Thr Leu 395

Thr CysThr Cys

Glu SerGlu Ser

Leu AspLeu Asp

Lys SerLys Ser

460460

Glu Ala 475Glu Ala 475

GlyGly

Ile SerIle Ser

Pro ProPro Pro

Leu ValLeu Val

Asn GlyAsn Gly

430430

Ser Asp 445Ser Asp 445

Arg TrpArg Trp

Leu HisLeu His

Lys AlaLys Ala

Ser ArgSer Arg

400400

Lys Gly 415Lys Gly 415

Gln ProGlin Pro

Gly SerGly Ser

Gln GlnGln Gln

Asn HisAsn His

480 <210> 917 <211> 1923 <212> DNA <213> Искусственная последовательность <220>480 <210> 917 <211> 1923 <212> DNA <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL/NKp30 стек 4 <400> 917 atggggtcaa actcaggaga cctgaaggaa aaaaccgtgg taccggaacc ttgttcaacg ctgggattcc gtgggaggtg cagccccctg gccagccaag gggaaggagg ccgccatcct aggaagtcag gccgttttga tgacctacca gagccctgat tcacccccca aggaggtttt gtggatcagg agattcgtac ggagagtggc tgaggaatgg cgccctcctc agcgatggta tttaaatgat catcccacag gtcaccggcc ggacgagcag gagcgttgag cggtggaggt cctggaagga cattggctcc aaccccagag ctggctgttc ggcagcgacg gtttacgtat cacagctcct ggcatgctgc aagtttcact gttacactgc tccggaggag tcctctgcct gtcacgtggt ttcaggggcc tccaaggagt tggagctcag attggcaaac tggaaaacgt ggggcgactt gcctggtgtt atgtggcagc gtggatctct tcctgccctg tccgagatga gcctggtccc cagcgctgat ctgcgcttgc cagtgagtcg ggacagccgc ctccctgcgc gagccgatcc aaacttcagc ctgggtgtcc ctccttcaat ggtggttcca acttgctccc<223> ICOSL/NKp30 stack 4 <400> 917 atggggtcaa actcaggaga cctgaaggaa aaaaccgtgg taccggaacc ttgttcaacg ctgggattcc gtgggaggtg cagccccctg gccagccaag gggaaggagg ccgccatcct aggaagtcag gccgttttga tgacctacca gagcc ctgat tcacccccca aggaggtttt gtggatcagg agattcgtac ggagagtggc tgaggaatgg cgccctcctc agcgatggta tttaaatgat catcccacag gtcaccggcc ggacgagcag gagcgttgag cggtggaggt cctggaagga cattggctcc aaccccagag ctggctgttc ggca gcgacg gtttacgtat cacagctcct ggcatgctgc aagtttcact gttacactgc tccggaggag tcctctgcct gtcacgtggt ttcaggggcc tccaaggagt tggagctcag attggcaaac tggaaaacgt ggggcgactt gcctggtgtt atgtggcagc gtggatctct tcctgccctg tccgagatga gcctggtccc cagcgctgat ctgcgcttgc cagtgagtcg ggacagccgc ctccctgcgc gagccgatcc aaacttcagc ctgggtgtcc ctccttcaat ggtggttcca acttgctccc

120120

180180

240240

300300

360360

420420

480480

540540

600600

660660

- 1066 044346- 1066 044346

tcccgtttcc tcccgtttcc tccatgacca tccatgacca ccaggctgag ccaggctgag ctgcacatcc ctgcacatcc gggacgtgcg gggacgtgcg aggccatgac aggccatgac 720 720 gccggtatct gccggtatct acgtgtgcag acgtgtgcag agtggaggtg agtggaggtg ctgggccttg ctggggccttg gtgtcgggac gtgtcggggac agggaatggg agggaatggg 780 780 actcggctgg actcggctgg tggtggagaa tggtggagaa agaacatcct agaacatcct cagctaggtg cagctaggtg gaggaggtag gaggaggtag cgggggagga cggggggaga 840 840 ggcagcggtg ggcagcggtg gtggcgggtc gtggcgggtc attgtgggtt attgtgggtt tcacagcctc tcacagcctc cagaaatacg cagaaatacg gaccctcgag gaccctcgag 900 900 ggttcctctg ggttcctctg cttttctgcc cttttctgcc ctgtagcttt ctgtagcttt aatgcttctc aatgcttctc agggacgcgt agggacgcgt ggctattggc ggctattggc 960 960 tccgttacgt tccgttacgt ggtttcggga ggtttcggga cgaggtggtc cgaggtggtc cctgggaagg cctgggaagg aggtacggaa aggtacggaa tggaacacct tggaacacct 1020 1020 gagtttcggg gagtttcggg gccgcctcgt gccgcctcgt tccgctcgct tccgctcgct ccaagccgct ccaagccgct tccttcacga tccttcacga ccaccaagcg ccaccaagcg 1080 1080 gaacttcata gaacttcata taagggacgt taagggacgt gagggggcat gagggggcat gacgcgggta gacgcgggta tatatgtctg tatatgtctg ccgcgtcgag ccgcgtcgag 1140 1140 gtgctgggtc gtgctgggtc ttggggtggg ttggggtggg tacgggcaat tacggggcaat ggcacccgat ggcacccgat tggtcgttga tggtcgttga gaaagaacac gaaagaacac 1200 1200 cctcagctgg cctcagctgg gatccggtgg gatccggtgg aggagggtca aggagggtca gagcccaaaa gagcccaaaa gctccgacaa gctccgacaa gactcacaca gactcacaca 1260 1260 tgcccccctt tgcccccctt gtccagcgcc gtccagcgcc tgaagctgag tgaagctgag ggtgcgccct ggtgcgccct ctgtcttcct ctgtcttcct tttcccccct tttcccccct 1320 1320 aagccgaaag aagccgaaag ataccctgat ataccctgat gatctcccgc gatctcccgc actcccgaag actcccgaag tcacatgtgt tcacatgtgt tgttgtcgac tgttgtcgac 1380 1380 gtatctcatg gtatctcatg aagatcctga aagatcctga ggtgaaattc ggtgaaattc aactggtatg aactggtatg tagacggggt tagacggggt cgaagttcat cgaagttcat 1440 1440 aatgctaaga aatgctaaga ctaagccacg ctaagccacg agaagagcaa agaagagcaa tacaactcaa tacaactcaa cgtatcgggt cgtatcgggt ggtgagcgtt ggtgagcgtt 1500 1500 ctgacggttc ctgacggttc tgcaccaaga tgcaccaaga ttggcttaat ttggcttaat ggaaaagagt ggaaaagagt ataagtgcaa ataagtgcaa ggtgtccaac ggtgtccaac 1560 1560 aaggctcttc aaggctcttc cggcacccat cggcacccat cgaaaagacg cgaaaagacg atttccaaag atttccaaag cgaaaggcca cgaaaggcca acctagggaa acctagggaa 1620 1620 ccgcaagttt ccgcaagttt acactttgcc acactttgcc cccgtcaaga cccgtcaaga gacgaactta gacgaactta ccaagaatca ccaagaatca agtttccctg agtttccctg 1680 1680 acgtgccttg acgtgccttg tgaagggctt tgaagggctt ctaccctagc ctaccctagc gatatagcag gatatagcag ttgagtggga ttgagtggga atctaacggc atctaacggc 1740 1740 cagcccgaaa cagcccgaaa ataattataa ataattataa gactactccg gactactccg cccgtgctgg cccgtgctgg acagtgatgg acagtgatgg ttcatttttc ttcatttttc 1800 1800 ctgtattcaa ctgtattcaa aactcactgt aactcactgt ggacaaatct ggacaaatct agatggcagc agatggcagc agggtaatgt agggtaatgt gttctcttgt gttctcttgt 1860 1860 tcagttatgc tcagttatgc acgaggcatt acgaggcatt gcacaatcac gcacaatcac tatacgcaaa tatacgcaaa aaagtttgtc aaagtttgtc tctctctccg tctctctccg 1920 1920

gggggg

1923 <210> 918 <211> 622 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>1923 <210> 918 <211> 622 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL/NKp30 стек 4 <400>918<223> ICOSL/NKp30 stack 4 <400>918

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val GluAsp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val Glu

5 10155 1015

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg PheLeu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe

20252025

Asp Leu Asn Asp ValAsp Leu Asn Asp Val

- 1067 044346- 1067 044346

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Asn ValSer Leu Glu Asn Val

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Arg SerVal Leu Ser Arg Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Gly Gly Gly Gly SerGly Gly Gly Gly Ser

125125

Gly Gly Gly Ser GlyGly Gly Gly Ser Gly

130130

Gly Gly Gly Ser LeuGly Gly Gly Ser Leu

135135

Trp Val Ser Gln ProTrp Val Ser Gln Pro

140140

Glu Ile Arg Thr Leu 145Glu Ile Arg Thr Leu 145

Glu Gly Ser Ser Ala 150Glu Gly Ser Ser Ala 150

Phe Leu Pro Cys Ser 155Phe Leu Pro Cys Ser 155

Asn Ala Ser Gln GlyAsn Ala Ser Gln Gly

165165

Arg Val Ala Ile GlyArg Val Ala Ile Gly

170170

Ser Val Thr Trp PheSer Val Thr Trp Phe

175175

Asp Glu Val Val ProAsp Glu Val Val Pro

180180

Gly Lys Glu Val ArgGly Lys Glu Val Arg

185185

Asn Gly Thr Pro GluAsn Gly Thr Pro Glu

190190

Arg Gly Arg Leu Val 195Arg Gly Arg Leu Val 195

Pro Leu Ala Pro SerPro Leu Ala Pro Ser

200200

Arg Phe Leu His Asp 205Arg Phe Leu His Asp 205

Gln Ala Glu Leu HisGln Ala Glu Leu His

210210

Ile Arg Asp Val ArgIle Arg Asp Val Arg

215215

Gly His Asp Ala Gly 220Gly His Asp Ala Gly 220

Tyr Val Cys Arg Val 225Tyr Val Cys Arg Val 225

Glu Val Leu Gly Leu 230Glu Val Leu Gly Leu 230

Gly Val Gly Thr Gly 235Gly Val Gly Thr Gly 235

Gly Thr Arg Leu ValGly Thr Arg Leu Val

245245

Val Glu Lys Glu HisVal Glu Lys Glu His

250250

Pro Gln Leu Gly GlyPro Gln Leu Gly Gly

255255

Gly Ser Gly Gly GlyGly Ser Gly Gly Gly

260260

Gly Ser Gly Gly GlyGly Ser Gly Gly Gly

265265

Gly Ser Leu Trp ValGly Ser Leu Trp Val

270270

Gln Pro Pro Glu IleGln Pro Pro Glu Ile

275275

Arg Thr Leu Glu GlyArg Thr Leu Glu Gly

280280

Ser Ser Ala Phe LeuSer Ser Ala Phe Leu

285285

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

GlyGly

ProPro

Phe 160Phe 160

ArgArg

PhePhe

HisHis

IleIle

Asn 240Asn 240

GlyGly

SerSer

ProPro

- 1068 044346- 1068 044346

CysCys

Trp 305Trp 305

ProPro

HisHis

AlaAla

ThrThr

Gly 385Gly 385

ThrThr

PhePhe

ProPro

ValVal

Thr 465Thr 465

ValVal

CysCys

SerSer

ProPro

Ser Phe Asn 290Ser Phe Asn 290

Phe Arg AspPhe Arg Asp

Glu Phe ArgGlu Phe Arg

Asp His GlnAsp His Gln

340340

Gly Ile TyrGly Ile Tyr

355355

Gly Asn Gly 370Gly Asn Gly 370

Ser Gly GlySer Gly Gly

Cys Pro ProCys Pro Pro

Leu Phe ProLeu Phe Pro

420420

Glu Val ThrGlu Val Thr

435435

Lys Phe Asn 450Lys Phe Asn 450

Lys Pro ArgLys Pro Arg

Leu Thr ValLeu Thr Val

Lys Val SerLys Val Ser

500500

Lys Ala LysLys Ala Lys

515515

Ser Arg Asp 530Ser Arg Asp 530

Ala Ser GlnAla Ser Gln

295295

Glu Val ValGlu Val Val

310310

Gly Arg Leu 325Gly Arg Leu 325

Ala Glu LeuAla Glu Leu

Val Cys ArgVal Cys Arg

Thr Arg LeuThr Arg Leu

375375

Gly Gly SerGly Gly Ser

390390

Cys Pro Ala 405Cys Pro Ala 405

Pro Lys ProPro Lys Pro

Cys Val ValCys Val Val

Trp Tyr ValTrp Tyr Val

455455

Glu Glu GlnGlu Glu Gln

470470

Leu His Gln 485Leu His Gln 485

Asn Lys AlaAsn Lys Ala

Gly Gln ProGly Gln Pro

Glu Leu ThrGlu Leu Thr

535535

Gly Arg ValGly Arg Val

Pro Gly LysPro Gly Lys

Val Pro LeuVal Pro Leu

330330

His Ile ArgHis Ile Arg

345345

Val Glu Val 360Val Glu Val 360

Val Val GluVal Val Glu

Glu Pro LysGlu Pro Lys

Pro Glu AlaPro Glu Ala

410410

Lys Asp ThrLys Asp Thr

425425

Val Asp Val 440Val Asp Val 440

Asp Gly ValAsp Gly Val

Tyr Asn SerTyr Asn Ser

Asp Trp LeuAsp Trp Leu

490490

Leu Pro AlaLeu Pro Ala

505505

Arg Glu Pro 520Arg Glu Pro 520

Lys Asn GlnLys Asn Gln

Ala Ile Gly 300Ala Ile Gly 300

Glu Val Arg 315Glu Val Arg 315

Ala Pro SerAla Pro Ser

Asp Val ArgAsp Val Arg

Leu Gly LeuLeu Gly Leu

365365

Lys Glu HisLys Glu His

380380

Ser Ser Asp 395Ser Ser Asp 395

Glu Gly AlaGlu Gly Ala

Leu Met IleLeu Met Ile

Ser His GluSer His Glu

445445

Glu Val HisGlu Val His

460460

Thr Tyr Arg 475Thr Tyr Arg 475

Asn Gly LysAsn Gly Lys

Pro Ile GluPro Ile Glu

Gln Val TyrGln Val Tyr

525525

Val Ser LeuVal Ser Leu

540540

Ser Val ThrSer Val Thr

Asn Gly ThrAsn Gly Thr

320320

Arg Phe LeuArg Phe Leu

335335

Gly His Asp 350Gly His Asp 350

Gly Val GlyGly Val Gly

Pro Gln LeuPro Gln Leu

Lys Thr HisLys Thr His

400400

Pro Ser ValPro Ser Val

415415

Ser Arg Thr 430Ser Arg Thr 430

Asp Pro GluAsp Pro Glu

Asn Ala LysAsn Ala Lys

Val Val SerVal Val Ser

480480

Glu Tyr LysGlu Tyr Lys

495495

Lys Thr Ile 510Lys Thr Ile 510

Thr Leu ProThr Leu Pro

Thr Cys LeuThr Cys Leu

- 1069 044346- 1069 044346

Val Lys Gly Phe 545Val Lys Gly Phe 545

Tyr Pro Ser AspTyr Pro Ser Asp

550550

Ile Ala Val GluIle Ala Val Glu

555555

Trp Glu Ser AsnTrp Glu Ser Asn

560560

Gly Gln Pro GluGly Gln Pro Glu

Asn Asn Tyr Lys 565Asn Asn Tyr Lys 565

Thr Thr Pro ProThr Thr Pro Pro

570570

Val Leu Asp SerVal Leu Asp Ser

575575

Asp Gly Ser PheAsp Gly Ser Phe

580580

Phe Leu Tyr SerPhe Leu Tyr Ser

Lys Leu Thr Val 585Lys Leu Thr Val 585

Asp Lys Ser Arg 590Asp Lys Ser Arg 590

Trp Gln Gln GlyTrp Gln Gln Gly

595595

Asn Val Phe SerAsn Val Phe Ser

600600

Cys Ser Val MetCys Ser Val Met

His Glu Ala Leu 605His Glu Ala Leu 605

His Asn His Tyr 610His Asn His Tyr 610

Thr Gln Lys SerThr Gln Lys Ser

615615

Leu Ser Leu SerLeu Ser Leu Ser

620620

Pro Gly <210> 919 <211> 1530 <212> DNA <213> Искусственная последовательность <220>Pro Gly <210> 919 <211> 1530 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220>

<223> ICOSL/NKp30 стек 5 <400> 919<223> ICOSL/NKp30 stack 5 <400> 919

atggggtcaa atggggtcaa ccgccatcct ccgccatcct cgccctcctc cgccctcctc ctggctgttc ctggctgttc tccaaggagt tccaaggagt cagcgctgat cagcgctgat 60 60 actcaggaga actcaggaga aggaagtcag aggaagtcag agcgatggta agcgatggta ggcagcgacg ggcagcgacg tggagctcag tggagctcag ctgcgcttgc ctgcgcttgc 120 120 cctgaaggaa cctgaaggaa gccgttttga gccgttttga tttaaatgat tttaaatgat gtttacgtat gtttacgtat attggcaaac attggcaaac cagtgagtcg cagtgagtcg 180 180 aagaccgtgg aagaccgtgg tgacctacca tgacctacca catcccacag catccacag cacagctcct cacagctcct tggaatacgt tggaatacgt ggacagccgc ggacagccgc 240 240 taccggaacc taccggaacc gagccctgat gagccctgat gtcaccggcc gtcaccggcc ggcatgctgc ggcatgctgc ggggcgactt ggggcgactt ctccctgcgc ctccctgcgc 300 300 ttgttcaacg ttgttcaacg tcacccccca tcacccccca ggacgagcag ggacgagcag aagtttcact aagtttcact gcctggtgtt gcctggtgtt gagccgatcc gagccgatcc 360 360 ctgggattcc ctggggattcc aggaggtttt aggaggtttt gagcgttgag gagcgttgag gttacactgc gttacactgc atgtggcagc atgtggcagc aaacttcagc aaacttcagc 420 420 gtgggaggtg gtgggaggtg gtggatcagg gtggatcagg cggtggaggt cggtggaggt tccggaggag tccggagggag gtggatctct gtggatctct ctgggtgtcc ctgggtgtcc 480 480 cagccccctg cagccccctg agattcgtac agattcgtac cctggaagga cctggaagga tcctctgcct tcctctgcct tcctgccctg tcctgccctg ctccttcaat ctccttcaat 540 540 gccagccaag gccagccaag ggagagtggc gggagagtggc cattggctcc cattggctcc gtcacgtggt gtcacgtggt tccgagatga tccgagatga ggtggttcca ggtggttcca 600 600 gggaaggagg gggaaggagg tgaggaatgg tgaggaatgg aaccccagag aaccccagag ttcaggggcc ttcaggggcc gcctggtccc gcctggtccc acttgctccc acttgctccc 660 660 tcccgtttcc tcccgtttcc tccatgacca tccatgacca ccaggctgag ccaggctgag ctgcacatcc ctgcacatcc gggacgtgcg gggacgtgcg aggccatgac aggccatgac 720 720 gccggtatct gccggtatct acgtgtgcag acgtgtgcag agtggaggtg agtggaggtg ctgggccttg ctggggccttg gtgtcgggac gtgtcggggac agggaatggg agggaatggg 780 780 actcggctgg actcggctgg tggtggagaa tggtggagaa agaacatcct agaacatcct cagctaggat cagctaggat ccggtggagg ccggtggagg agggtcagag agggtcagag 840 840 cccaaaagct cccaaaagct ccgacaagac ccgacaagac tcacacatgc tcacacatgc cccccttgtc cccccttgtc cagcgcctga cagcgcctga agctgagggt agctgaggt 900 900 gcgccctctg gcgccctctg tcttcctttt tcttcctttt cccccctaag cccccctaag ccgaaagata ccgaaagata ccctgatgat ccctgatgat ctcccgcact ctcccgcact 960 960

- 1070 044346- 1070 044346

cccgaagtca cccgaagtca catgtgttgt catgtgttgt tgtcgacgta tgtcgacgta tctcatgaag tctcatgaag atcctgaggt atcctgaggt gaaattcaac gaaattcaac 1020 1020 tggtatgtag tggtatgtag acggggtcga acggggtcga agttcataat agttcataat gctaagacta gctaagacta agccacgaga agccacgaga agagcaatac agagcaatac 1080 1080 aactcaacgt aactcaacgt atcgggtggt atcggggtggt gagcgttctg gagcgttctg acggttctgc acggttctgc accaagattg accaagattg gcttaatgga gcttaatgga 1140 1140 aaagagtata aaagagtata agtgcaaggt agtgcaaggt gtccaacaag gtccaacaag gctcttccgg gctcttccgg cacccatcga cacccatcga aaagacgatt aaagacgatt 1200 1200 tccaaagcga tccaaagcga aaggccaacc aaggccaacc tagggaaccg tagggaaccg caagtttaca caagtttaca ctttgccccc ctttgccccc gtcaagagac gtcaagagac 1260 1260 gaacttacca gaacttacca agaatcaagt agaatcaagt ttccctgacg ttccctgacg tgccttgtga tgccttgtga agggcttcta agggcttcta ccctagcgat ccctagcgat 1320 1320 atagcagttg atagcagttg agtgggaatc agtgggaatc taacggccag taacggccag cccgaaaata cccgaaaata attataagac attataagac tactccgccc tactccgccc 1380 1380 gtgctggaca gtgctggac gtgatggttc gtgatggttc atttttcctg atttttcctg tattcaaaac tattcaaaac tcactgtgga tcactgtgga caaatctaga caaatctaga 1440 1440 tggcagcagg tggcagcagg gtaatgtgtt gtaatgtgtt ctcttgttca ctcttgttca gttatgcacg gttatgcacg aggcattgca aggcattgca caatcactat caatcactat 1500 1500 acgcaaaaaa acgcaaaaaa gtttgtctct gtttgtctct ctctccgggg ctctccgggg 1530 1530

<210> 920 <211> 491 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220><210> 920 <211> 491 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL/NKp30 стек 5 <400>920<223> ICOSL/NKp30 stack 5 <400>920

Asp Thr Gln Glu LysAsp Thr Gln Glu Lys

Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val GluGlu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val Glu

10151015

Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp Val 20 2530Leu Ser Cys Ala Cys Pro Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp Val 20 2530

Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr His 35 4045Tyr Val Tyr Trp Gln Thr Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr His 35 4045

Ile Pro Gln His Ser Ser Leu Glu Tyr Val Asp Ser Arg Tyr Arg Asn 50 5560Ile Pro Gln His Ser Ser Leu Glu Tyr Val Asp Ser Arg Tyr Arg Asn 50 5560

Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser Leu 65 70 7580Arg Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg Gly Asp Phe Ser Leu 65 70 7580

Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys Leu 85 9095Arg Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln Lys Phe His Cys Leu 85 9095

Val Leu Ser Arg Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu ValVal Leu Ser Arg Ser Leu Gly Phe Gln Glu Val Leu Ser Val Glu Val

100 105110100 105110

Thr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser Val Gly Gly Gly Gly Ser GlyThr Leu His Val Ala Ala Asn Phe Ser Val Gly Gly Gly Gly Ser Gly

115 120125115 120125

- 1071 044346- 1071 044346

GlyGly

Glu 145Glu 145

AsnAsn

AspAsp

ArgArg

GlnGln

Tyr 225Tyr 225

GlyGly

GlyGly

ProPro

ProPro

Thr 305Thr 305

AsnAsn

ArgArg

ValVal

SerSer

Gly Gly Ser 130Gly Gly Ser 130

Ile Arg ThrIle Arg Thr

Ala Ser GlnAla Ser Gln

Glu Val ValGlu Val Val

180180

Gly Arg LeuGly Arg Leu

195195

Ala Glu Leu 210Ala Glu Leu 210

Val Cys ArgVal Cys Arg

Thr Arg LeuThr Arg Leu

Gly Gly SerGly Gly Ser

260260

Cys Pro AlaCys Pro Ala

275275

Pro Lys Pro 290Pro Lys Pro 290

Cys Val ValCys Val Val

Trp Tyr ValTrp Tyr Val

Glu Glu GlnGlu Glu Gln

340340

Leu His GlnLeu His Gln

355355

Asn Lys Ala 370Asn Lys Ala 370

Gly Gly GlyGly Gly Gly

135135

Leu Glu GlyLeu Glu Gly

150150

Gly Arg Val 165Gly Arg Val 165

Pro Gly LysPro Gly Lys

Val Pro LeuVal Pro Leu

His Ile ArgHis Ile Arg

215215

Val Glu ValVal Glu Val

230230

Val Val Glu 245Val Val Glu 245

Glu Pro LysGlu Pro Lys

Pro Glu AlaPro Glu Ala

Lys Asp ThrLys Asp Thr

295295

Val Asp ValVal Asp Val

310310

Asp Gly Val 325Asp Gly Val 325

Tyr Asn SerTyr Asn Ser

Asp Trp LeuAsp Trp Leu

Leu Pro AlaLeu Pro Ala

375375

Gly Ser LeuGly Ser Leu

Ser Ser AlaSer Ser Ala

Ala Ile GlyAla Ile Gly

170170

Glu Val ArgGlu Val Arg

185185

Ala Pro Ser 200Ala Pro Ser 200

Asp Val ArgAsp Val Arg

Leu Gly LeuLeu Gly Leu

Lys Glu HisLys Glu His

250250

Ser Ser AspSer Ser Asp

265265

Glu Gly Ala 280Glu Gly Ala 280

Leu Met IleLeu Met Ile

Ser His GluSer His Glu

Glu Val HisGlu Val His

330330

Thr Tyr ArgThr Tyr Arg

345345

Asn Gly Lys 360Asn Gly Lys 360

Pro Ile GluPro Ile Glu

Trp Val SerTrp Val Ser

140140

Gln Pro ProGln Pro Pro

Phe Leu Pro 155Phe Leu Pro 155

Cys Ser PheCys Ser Phe

160160

Ser Val ThrSer Val Thr

Trp Phe ArgTrp Phe Arg

175175

Asn Gly ThrAsn Gly Thr

Arg Phe LeuArg Phe Leu

205205

Gly His AspGly His Asp

220220

Gly Val Gly 235Gly Val Gly 235

Pro Gln LeuPro Gln Leu

Lys Thr HisLys Thr His

Pro Ser ValPro Ser Val

285285

Ser Arg ThrSer Arg Thr

300300

Asp Pro Glu 315Asp Pro Glu 315

Asn Ala LysAsn Ala Lys

Val Val SerVal Val Ser

Glu Tyr LysGlu Tyr Lys

365365

Lys Thr IleLys Thr Ile

380380

Pro Glu Phe 190Pro Glu Phe 190

His Asp HisHis Asp His

Ala Gly IleAla Gly Ile

Thr Gly AsnThr Gly Asn

240240

Gly Ser GlyGly Ser Gly

255255

Thr Cys Pro 270Thr Cys Pro 270

Phe Leu PhePhe Leu Phe

Pro Glu ValPro Glu Val

Val Lys PheVal Lys Phe

320320

Thr Lys ProThr Lys Pro

335335

Val Leu Thr 350Val Leu Thr 350

Cys Lys ValCys Lys Val

Ser Lys AlaSer Lys Ala

- 1072 044346- 1072 044346

Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser ArgLys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg

385 390 395400385 390 395400

Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys GlyAsp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly

405 410415405 410415

Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln ProPhe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro

420 425430420 425430

Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly SerGlu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser

435 440445435 440445

Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln GlnPhe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln

450 455460450 455460

Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn HisGly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His

465 470 475480465 470 475480

Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro GlyTyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly

485490485490

<210> 921 <210> 921 <211> 1923 <212> DNA <213> Искусственная последовательность <220> <223> ICOSL/NKp30 стек 6 <400> 921 atggggtcaa ccgccatcct cgccctcctc ctggctgttc <211> 1923 <212> DNA <213> Artificial sequence <220> <223> ICOSL/NKp30 stack 6 <400> 921 atggggtcaa ccgccatcct cgccctcctc ctggctgttc tccaaggagt tccaaggagt cagcgctgat cagcgctgat 60 60 actcaggaga actcaggaga aggaagtcag aggaagtcag agcgatggta agcgatggta ggcagcgacg ggcagcgacg tggagctcag tggagctcag ctgcgcttgc ctgcgcttgc 120 120 cctgaaggaa cctgaaggaa gccgttttga gccgttttga tttaaatgat tttaaatgat gtttacgtat gtttacgtat attggcaaac attggcaaac cagtgagtcg cagtgagtcg 180 180 aagaccgtgg aagaccgtgg tgacctacca tgacctacca catcccacag catccacag cacagctcct cacagctcct tggaatacgt tggaatacgt ggacagccgc ggacagccgc 240 240 taccggaacc taccggaacc gagccctgat gagccctgat gtcaccggcc gtcaccggcc ggcatgctgc ggcatgctgc ggggcgactt ggggcgactt ctccctgcgc ctccctgcgc 300 300 ttgttcaacg ttgttcaacg tcacccccca tcacccccca ggacgagcag ggacgagcag aagtttcact aagtttcact gcctggtgtt gcctggtgtt gagccgatcc gagccgatcc 360 360 ctgggattcc ctggggattcc aggaggtttt aggaggtttt gagcgttgag gagcgttgag gttacactgc gttacactgc atgtggcagc atgtggcagc aaacttcagc aaacttcagc 420 420 gtgggaggtg gtgggaggtg gtggatcagg gtggatcagg cggtggaggt cggtggaggt tccggaggag tccggagggag gtggatctct gtggatctct ctgggtgtcc ctgggtgtcc 480 480 cagccccctg cagccccctg agattcgtac agattcgtac cctggaagga cctggaagga tcctctgcct tcctctgcct tcctgccctg tcctgccctg ctccttcaat ctccttcaat 540 540 gccagccaag gccagccaag ggagagtggc gggagagtggc cattggctcc cattggctcc gtcacgtggt gtcacgtggt tccgagatga tccgagatga ggtggttcca ggtggttcca 600 600 gggaaggagg gggaaggagg tgaggaatgg tgaggaatgg aaccccagag aaccccagag ttcaggggcc ttcaggggcc gcctggtccc gcctggtccc acttgctccc acttgctccc 660 660 tcccgtttcc tcccgtttcc tccatgacca tccatgacca ccaggctgag ccaggctgag ctgcacatcc ctgcacatcc gggacgtgcg gggacgtgcg aggccatgac aggccatgac 720 720 gccggtatct gccggtatct acgtgtgcag acgtgtgcag agtggaggtg agtggaggtg ctgggccttg ctggggccttg gtgtcgggac gtgtcggggac agggaatggg agggaatggg 780 780

- 1073 044346- 1073 044346

actcggctgg actcggctgg tggtggagaa tggtggagaa agaacatcct agaacatcct cagctaggtg cagctaggtg gaggaggtag gaggaggtag cgggggagga cggggggaga 840 840 ggcagcggtg ggcagcggtg gtggcgggtc gtggcgggtc attgtgggtt attgtgggtt tcacagcctc tcacagcctc cagaaatacg cagaaatacg gaccctcgag gaccctcgag 900 900 ggttcctctg ggttcctctg cttttctgcc cttttctgcc ctgtagcttt ctgtagcttt aatgcttctc aatgcttctc agggacgcgt agggacgcgt ggctattggc ggctattggc 960 960 tccgttacgt tccgttacgt ggtttcggga ggtttcggga cgaggtggtc cgaggtggtc cctgggaagg cctgggaagg aggtacggaa aggtacggaa tggaacacct tggaacacct 1020 1020 gagtttcggg gagtttcggg gccgcctcgt gccgcctcgt tccgctcgct tccgctcgct ccaagccgct ccaagccgct tccttcacga tccttcacga ccaccaagcg ccaccaagcg 1080 1080 gaacttcata gaacttcata taagggacgt taagggacgt gagggggcat gagggggcat gacgcgggta gacgcgggta tatatgtctg tatatgtctg ccgcgtcgag ccgcgtcgag 1140 1140 gtgctgggtc gtgctgggtc ttggggtggg ttggggtggg tacgggcaat tacggggcaat ggcacccgat ggcacccgat tggtcgttga tggtcgttga gaaagaacac gaaagaacac 1200 1200 cctcagctgg cctcagctgg gatccggtgg gatccggtgg aggagggtca aggagggtca gagcccaaaa gagcccaaaa gctccgacaa gctccgacaa gactcacaca gactcacaca 1260 1260 tgcccccctt tgcccccctt gtccagcgcc gtccagcgcc tgaagctgag tgaagctgag ggtgcgccct ggtgcgccct ctgtcttcct ctgtcttcct tttcccccct tttcccccct 1320 1320 aagccgaaag aagccgaaag ataccctgat ataccctgat gatctcccgc gatctcccgc actcccgaag actcccgaag tcacatgtgt tcacatgtgt tgttgtcgac tgttgtcgac 1380 1380 gtatctcatg gtatctcatg aagatcctga aagatcctga ggtgaaattc ggtgaaattc aactggtatg aactggtatg tagacggggt tagacggggt cgaagttcat cgaagttcat 1440 1440 aatgctaaga aatgctaaga ctaagccacg ctaagccacg agaagagcaa agaagagcaa tacaactcaa tacaactcaa cgtatcgggt cgtatcgggt ggtgagcgtt ggtgagcgtt 1500 1500 ctgacggttc ctgacggttc tgcaccaaga tgcaccaaga ttggcttaat ttggcttaat ggaaaagagt ggaaaagagt ataagtgcaa ataagtgcaa ggtgtccaac ggtgtccaac 1560 1560 aaggctcttc aaggctcttc cggcacccat cggcacccat cgaaaagacg cgaaaagacg atttccaaag atttccaaag cgaaaggcca cgaaaggcca acctagggaa acctagggaa 1620 1620 ccgcaagttt ccgcaagttt acactttgcc acactttgcc cccgtcaaga cccgtcaaga gacgaactta gacgaactta ccaagaatca ccaagaatca agtttccctg agtttccctg 1680 1680 acgtgccttg acgtgccttg tgaagggctt tgaagggctt ctaccctagc ctaccctagc gatatagcag gatatagcag ttgagtggga ttgagtggga atctaacggc atctaacggc 1740 1740 cagcccgaaa cagcccgaaa ataattataa ataattataa gactactccg gactactccg cccgtgctgg cccgtgctgg acagtgatgg acagtgatgg ttcatttttc ttcatttttc 1800 1800 ctgtattcaa ctgtattcaa aactcactgt aactcactgt ggacaaatct ggacaaatct agatggcagc agatggcagc agggtaatgt agggtaatgt gttctcttgt gttctcttgt 1860 1860 tcagttatgc tcagttatgc acgaggcatt acgaggcatt gcacaatcac gcacaatcac tatacgcaaa tatacgcaaa aaagtttgtc aaagtttgtc tctctctccg tctctctccg 1920 1920

gggggg

1923 <210> 922 <211> 622 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>1923 <210> 922 <211> 622 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL/NKp30 стек 6 <400> 922<223> ICOSL/NKp30 stack 6 <400> 922

Asp Thr Gln Glu 1Asp Thr Gln Glu 1

Lys Glu 5Lys Glu 5

Leu Ser Cys Ala 20Leu Ser Cys Ala 20

Cys ProCys Pro

Tyr Val Tyr TrpTyr Val Tyr Trp

Gln ThrGln Thr

Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val Glu 1015Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val Glu 1015

Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp Val 2530Glu Gly Ser Arg Phe Asp Leu Asn Asp Val 2530

Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr His 4045Ser Glu Ser Lys Thr Val Val Thr Tyr His 4045

- 1074 044346- 1074 044346

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Arg SerVal Leu Ser Arg Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Gly Gly Gly Gly SerGly Gly Gly Gly Ser

125125

Gly Gly Gly Ser Gly 130Gly Gly Gly Ser Gly 130

Gly Gly Gly Ser LeuGly Gly Gly Ser Leu

135135

Trp Val Ser Gln Pro 140Trp Val Ser Gln Pro 140

Glu Ile Arg Thr Leu 145Glu Ile Arg Thr Leu 145

Glu Gly Ser Ser Ala 150Glu Gly Ser Ser Ala 150

Phe Leu Pro Cys Ser 155Phe Leu Pro Cys Ser 155

Asn Ala Ser Gln GlyAsn Ala Ser Gln Gly

165165

Arg Val Ala Ile GlyArg Val Ala Ile Gly

170170

Ser Val Thr Trp PheSer Val Thr Trp Phe

175175

Asp Glu Val Val ProAsp Glu Val Val Pro

180180

Gly Lys Glu Val ArgGly Lys Glu Val Arg

185185

Asn Gly Thr Pro GluAsn Gly Thr Pro Glu

190190

Arg Gly Arg Leu Val 195Arg Gly Arg Leu Val 195

Pro Leu Ala Pro SerPro Leu Ala Pro Ser

200200

Arg Phe Leu His Asp 205Arg Phe Leu His Asp 205

Gln Ala Glu Leu HisGln Ala Glu Leu His

210210

Ile Arg Asp Val ArgIle Arg Asp Val Arg

215215

Gly His Asp Ala Gly 220Gly His Asp Ala Gly 220

Tyr Val Cys Arg Val 225Tyr Val Cys Arg Val 225

Glu Val Leu Gly Leu 230Glu Val Leu Gly Leu 230

Gly Val Gly Thr Gly 235Gly Val Gly Thr Gly 235

Gly Thr Arg Leu ValGly Thr Arg Leu Val

245245

Val Glu Lys Glu HisVal Glu Lys Glu His

250250

Pro Gln Leu Gly GlyPro Gln Leu Gly Gly

255255

Gly Ser Gly Gly GlyGly Ser Gly Gly Gly

260260

Gly Ser Gly Gly GlyGly Ser Gly Gly Gly

265265

Gly Ser Leu Trp ValGly Ser Leu Trp Val

270270

Gln Pro Pro Glu IleGln Pro Pro Glu Ile

275275

Arg Thr Leu Glu GlyArg Thr Leu Glu Gly

280280

Ser Ser Ala Phe LeuSer Ser Ala Phe Leu

285285

Cys Ser Phe Asn AlaCys Ser Phe Asn Ala

290290

Ser Gln Gly Arg ValSer Gln Gly Arg Val

295295

Ala Ile Gly Ser ValAla Ile Gly Ser Val

300300

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

GlyGly

ProPro

Phe 160Phe 160

ArgArg

PhePhe

HisHis

IleIle

Asn 240Asn 240

GlyGly

SerSer

ProPro

ThrThr

- 1075 044346- 1075 044346

Trp 305Trp 305

ProPro

HisHis

AlaAla

ThrThr

Gly 385Gly 385

ThrThr

PhePhe

ProPro

ValVal

Thr 465Thr 465

ValVal

CysCys

SerSer

ProPro

ValVal

Phe Arg AspPhe Arg Asp

Glu Phe ArgGlu Phe Arg

Asp His GlnAsp His Gln

340340

Gly Ile TyrGly Ile Tyr

355355

Gly Asn Gly 370Gly Asn Gly 370

Ser Gly GlySer Gly Gly

Cys Pro ProCys Pro Pro

Leu Phe ProLeu Phe Pro

420420

Glu Val ThrGlu Val Thr

435435

Lys Phe Asn 450Lys Phe Asn 450

Lys Pro ArgLys Pro Arg

Leu Thr ValLeu Thr Val

Lys Val SerLys Val Ser

500500

Lys Ala LysLys Ala Lys

515515

Ser Arg Asp 530Ser Arg Asp 530

Lys Gly PheLys Gly Phe

Glu Val ValGlu Val Val

310310

Gly Arg Leu 325Gly Arg Leu 325

Ala Glu LeuAla Glu Leu

Val Cys ArgVal Cys Arg

Thr Arg LeuThr Arg Leu

375375

Gly Gly SerGly Gly Ser

390390

Cys Pro Ala 405Cys Pro Ala 405

Pro Lys ProPro Lys Pro

Cys Val ValCys Val Val

Trp Tyr ValTrp Tyr Val

455455

Glu Glu GlnGlu Glu Gln

470470

Leu His Gln 485Leu His Gln 485

Asn Lys AlaAsn Lys Ala

Gly Gln ProGly Gln Pro

Glu Leu ThrGlu Leu Thr

535535

Tyr Pro SerTyr Pro Ser

Pro Gly LysPro Gly Lys

Glu Val Arg 315Glu Val Arg 315

Asn Gly ThrAsn Gly Thr

320320

Val Pro LeuVal Pro Leu

330330

Ala Pro SerAla Pro Ser

Arg Phe LeuArg Phe Leu

335335

His Ile ArgHis Ile Arg

345345

Val Glu Val 360Val Glu Val 360

Val Val GluVal Val Glu

Glu Pro LysGlu Pro Lys

Pro Glu AlaPro Glu Ala

410410

Lys Asp ThrLys Asp Thr

425425

Val Asp Val 440Val Asp Val 440

Asp Gly ValAsp Gly Val

Tyr Asn SerTyr Asn Ser

Asp Trp LeuAsp Trp Leu

490490

Leu Pro AlaLeu Pro Ala

505505

Arg Glu Pro 520Arg Glu Pro 520

Lys Asn GlnLys Asn Gln

Asp Ile AlaAsp Ile Ala

Asp Val ArgAsp Val Arg

Leu Gly LeuLeu Gly Leu

365365

Lys Glu HisLys Glu His

380380

Ser Ser Asp 395Ser Ser Asp 395

Glu Gly AlaGlu Gly Ala

Leu Met IleLeu Met Ile

Ser His GluSer His Glu

445445

Glu Val HisGlu Val His

460460

Thr Tyr Arg 475Thr Tyr Arg 475

Asn Gly LysAsn Gly Lys

Pro Ile GluPro Ile Glu

Gln Val TyrGln Val Tyr

525525

Val Ser LeuVal Ser Leu

540540

Val Glu TrpVal Glu Trp

Gly His Asp 350Gly His Asp 350

Gly Val GlyGly Val Gly

Pro Gln LeuPro Gln Leu

Lys Thr HisLys Thr His

400400

Pro Ser ValPro Ser Val

415415

Ser Arg Thr 430Ser Arg Thr 430

Asp Pro GluAsp Pro Glu

Asn Ala LysAsn Ala Lys

Val Val SerVal Val Ser

480480

Glu Tyr LysGlu Tyr Lys

495495

Lys Thr Ile 510Lys Thr Ile 510

Thr Leu ProThr Leu Pro

Thr Cys LeuThr Cys Leu

Glu Ser AsnGlu Ser Asn

- 1076 044346- 1076 044346

545 550 555 560545 550 555 560

Gly Gln Pro GluGly Gln Pro Glu

Asn Asn Tyr Lys 565Asn Asn Tyr Lys 565

Thr Thr Pro ProThr Thr Pro Pro

570570

Val Leu Asp SerVal Leu Asp Ser

575575

Asp Gly Ser PheAsp Gly Ser Phe

580580

Phe Leu Tyr SerPhe Leu Tyr Ser

Lys Leu Thr Val 585Lys Leu Thr Val 585

Asp Lys Ser Arg 590Asp Lys Ser Arg 590

Trp Gln Gln GlyTrp Gln Gln Gly

595595

Asn Val Phe SerAsn Val Phe Ser

600600

Cys Ser Val MetCys Ser Val Met

His Glu Ala Leu 605His Glu Ala Leu 605

His Asn His Tyr 610His Asn His Tyr 610

Thr Gln Lys SerThr Gln Lys Ser

615615

Leu Ser Leu SerLeu Ser Leu Ser

620620

Pro Gly <210> 923 <211> 1530 <212> DNA <213> Искусственная последовательность <220>Pro Gly <210> 923 <211> 1530 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220>

<223> ICOSL/NKp30 стек 7<223> ICOSL/NKp30 stack 7

<400> 923 atggggtcaa <400> 923 atggggtcaa ccgccatcct ccgccatcct cgccctcctc cgccctcctc ctggctgttc ctggctgttc tccaaggagt tccaaggagt cagcgctgat cagcgctgat 60 60 actcaggaga actcaggaga aggaagtcag aggaagtcag agcgatggta agcgatggta ggcagcgacg ggcagcgacg tggagctcag tggagctcag ctgcgcttgc ctgcgcttgc 120 120 cctgaaggaa cctgaaggaa gccgttttga gccgttttga tttaaatgat tttaaatgat gtttacgtat gtttacgtat attggcaaac attggcaaac cagtgagtcg cagtgagtcg 180 180 aaaaccgtgg aaaaccgtgg tgacctacca tgacctacca catcccacag catccacag ctgagctcct ctgagctcct tggaacatgt tggaacatgt ggacagccgc ggacagccgc 240 240 taccggaacc taccggaacc gagccctgat gagccctgat gtcaccggcc gtcaccggcc ggcatgctgc ggcatgctgc ggggcgactt ggggcgactt ctccctgcgc ctccctgcgc 300 300 ttgttcaacg ttgttcaacg tcacccccca tcacccccca ggacgagcag ggacgagcag aagtttcact aagtttcact gcctggtgtt gcctggtgtt gagccggtcc gagccggtcc 360 360 ctgggattcc ctggggattcc aggaggtttt aggaggtttt gagcgttgag gagcgttgag gttacactgc gttacactgc atgtggcagc atgtggcagc aaacttcagc aaacttcagc 420 420 gtgggaggtg gtgggaggtg gtggatcagg gtggatcagg cggtggaggt cggtggaggt tccggaggag tccggagggag gtggatctct gtggatctct ctgggtgtcc ctgggtgtcc 480 480 cagccccctg cagccccctg agattcgtac agattcgtac cctggaagga cctggaagga tcctctgcct tcctctgcct tcctgccctg tcctgccctg ctccttcaat ctccttcaat 540 540 gccagccaag gccagccaag ggagagtggc gggagagtggc cattggctcc cattggctcc gtcacgtggt gtcacgtggt tccgagatga tccgagatga ggtggttcca ggtggttcca 600 600 gggaaggagg gggaaggagg tgaggaatgg tgaggaatgg aaccccagag aaccccagag ttcaggggcc ttcaggggcc gcctggtccc gcctggtccc acttgctccc acttgctccc 660 660 tcccgtttcc tcccgtttcc tccatgacca tccatgacca ccaggctgag ccaggctgag ctgcacatcc ctgcacatcc gggacgtgcg gggacgtgcg aggccatgac aggccatgac 720 720 gccggtatct gccggtatct acgtgtgcag acgtgtgcag agtggaggtg agtggaggtg ctgggccttg ctggggccttg gtgtcgggac gtgtcggggac agggaatggg agggaatggg 780 780 actcggctgg actcggctgg tggtggagaa tggtggagaa agaacatcct agaacatcct cagctaggat cagctaggat ccggtggagg ccggtggagg agggtcagag agggtcagag 840 840 cccaaaagct cccaaaagct ccgacaagac ccgacaagac tcacacatgc tcacacatgc cccccttgtc cccccttgtc cagcgcctga cagcgcctga agctgagggt agctgaggt 900 900 gcgccctctg gcgccctctg tcttcctttt tcttcctttt cccccctaag cccccctaag ccgaaagata ccgaaagata ccctgatgat ccctgatgat ctcccgcact ctcccgcact 960 960 cccgaagtca cccgaagtca catgtgttgt catgtgttgt tgtcgacgta tgtcgacgta tctcatgaag tctcatgaag atcctgaggt atcctgaggt gaaattcaac gaaattcaac 1020 1020 tggtatgtag tggtatgtag acggggtcga acggggtcga agttcataat agttcataat gctaagacta gctaagacta agccacgaga agccacgaga agagcaatac agagcaatac 1080 1080

- 1077 044346 aactcaacgt aaagagtata tccaaagcga gaacttacca atagcagttg gtgctggaca tggcagcagg acgcaaaaaa atcgggtggt agtgcaaggt aaggccaacc agaatcaagt agtgggaatc gtgatggttc gtaatgtgtt gtttgtctct gagcgttctg gtccaacaag tagggaaccg ttccctgacg taacggccag atttttcctg ctcttgttca ctctccgggg acggttctgc gctcttccgg caagtttaca tgccttgtga cccgaaaata tattcaaaac gttatgcacg accaagattg cacccatcga ctttgccccc agggcttcta attataagac tcactgtgga aggcattgca gcttaatgga aaagacgatt gtcaagagac ccctagcgat tactccgccc caaatctaga caatcactat- 1077 044346 aactcaacgt aaagagtata tccaaagcga gaacttacca atagcagttg gtgctggaca tggcagcagg acgcaaaaaa atcgggtggt agtgcaaggt aaggccaacc agaatcaagt agtgggaatc gtgatggttc gtaatgtgtt gtttgtctct g agcgttctg gtccaacaag tagggaaccg ttccctgacg taacggccag atttttcctg ctcttgttca ctctccgggg acggttctgc gctcttccgg caagtttaca tgccttgtga cccgaaaata tattcaaaac gttatgcacg accaagattg cacccatcga ctttgccccc agggctt cta attataagac tcactgtgga aggcattgca gcttaatgga aaagacgatt gtcaagagac ccctagcgat tactccgccc caaatctaga caatcactat

11401140

12001200

12601260

13201320

13801380

14401440

15001500

1530 <210> 924 <211> 491 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>1530 <210> 924 <211> 491 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> ICOSL/NKp30 стек 7 < 400> 924< 223 > ICOSL/NKp30 stack 7 < 400 > 924

Asp Thr Gln Glu LysAsp Thr Gln Glu Lys

Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val GluGlu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val Glu

1515

Leu SerLeu Ser

Cys Ala 20Cys Ala 20

Cys ProCys Pro

Glu GlyGlu Gly

Tyr ValTyr Val

Tyr Trp 35Tyr Trp 35

Gln ThrGln Thr

Ser GluSer Glu

Ile ProIle Pro

Gln LeuGln Leu

Ser SerSer Ser

Leu Glu 55Leu Glu 55

Arg Ala 65Arg Ala 65

Leu MetLeu Met

Ser ProSer Pro

Ala GlyAla Gly

Ser Arg 25Ser Arg 25

Ser LysSer Lys

His ValHis Val

Met LeuMet Leu

Phe AspPhe Asp

Thr ValThr Val

Asp Ser 60Asp Ser 60

Arg Gly 75Arg Gly 75

Arg LeuArg Leu

Phe AsnPhe Asn

Val Thr 85Val Thr 85

Pro GlnPro Gln

Asp GluAsp Glu

Gln LysGln Lys

Leu Asn 30Leu Asn 30

Val Thr 45Val Thr 45

Arg TyrArg Tyr

Asp PheAsp Phe

Phe HisPhe His

Asp ValAsp Val

Tyr HisTyr His

Arg AsnArg Asn

Ser LeuSer Leu

Cys Leu 95Cys Leu 95

Val LeuVal Leu

Ser ArgSer Arg

100100

Ser LeuSer Leu

Gly PheGly Phe

Gln Glu 105Gln Glu 105

Val LeuVal Leu

Ser ValSer Val

110110

Glu ValGlu Val

Thr LeuThr Leu

His Val 115His Val 115

Ala AlaAla Ala

Asn PheAsn Phe

120120

Ser ValSer Val

Gly GlyGly Gly

Gly Gly 125Gly Gly 125

Ser GlySer Gly

Gly GlyGly Gly

130130

Gly SerGly Ser

Gly GlyGly Gly

Gly Gly 135Gly Gly 135

Ser LeuSer Leu

Trp ValTrp Val

140140

Ser GlnSer Gln

Pro ProPro Pro

- 1078 044346- 1078 044346

Glu 145Glu 145

AsnAsn

AspAsp

ArgArg

GlnGln

Tyr 225Tyr 225

GlyGly

GlyGly

ProPro

ProPro

Thr 305Thr 305

AsnAsn

ArgArg

ValVal

SerSer

Lys 385Lys 385

Ile Arg ThrIle Arg Thr

Ala Ser GlnAla Ser Gln

Glu Val ValGlu Val Val

180180

Gly Arg LeuGly Arg Leu

195195

Ala Glu Leu 210Ala Glu Leu 210

Val Cys ArgVal Cys Arg

Thr Arg LeuThr Arg Leu

Gly Gly SerGly Gly Ser

260260

Cys Pro AlaCys Pro Ala

275275

Pro Lys Pro 290Pro Lys Pro 290

Cys Val ValCys Val Val

Trp Tyr ValTrp Tyr Val

Glu Glu GlnGlu Glu Gln

340340

Leu His GlnLeu His Gln

355355

Asn Lys Ala 370Asn Lys Ala 370

Gly Gln ProGly Gln Pro

Leu Glu GlyLeu Glu Gly

150150

Gly Arg Val 165Gly Arg Val 165

Pro Gly LysPro Gly Lys

Val Pro LeuVal Pro Leu

His Ile ArgHis Ile Arg

215215

Val Glu ValVal Glu Val

230230

Val Val Glu 245Val Val Glu 245

Glu Pro LysGlu Pro Lys

Pro Glu AlaPro Glu Ala

Lys Asp ThrLys Asp Thr

295295

Val Asp ValVal Asp Val

310310

Asp Gly Val 325Asp Gly Val 325

Tyr Asn SerTyr Asn Ser

Asp Trp LeuAsp Trp Leu

Leu Pro AlaLeu Pro Ala

375375

Arg Glu ProArg Glu Pro

390390

Ser Ser AlaSer Ser Ala

Phe Leu Pro 155Phe Leu Pro 155

Cys Ser PheCys Ser Phe

160160

Ala Ile GlyAla Ile Gly

170170

Glu Val ArgGlu Val Arg

185185

Ala Pro Ser 200Ala Pro Ser 200

Asp Val ArgAsp Val Arg

Leu Gly LeuLeu Gly Leu

Lys Glu HisLys Glu His

250250

Ser Ser AspSer Ser Asp

265265

Glu Gly Ala 280Glu Gly Ala 280

Leu Met IleLeu Met Ile

Ser His GluSer His Glu

Glu Val HisGlu Val His

330330

Thr Tyr ArgThr Tyr Arg

345345

Asn Gly Lys 360Asn Gly Lys 360

Pro Ile GluPro Ile Glu

Gln Val TyrGln Val Tyr

Ser Val ThrSer Val Thr

Trp Phe ArgTrp Phe Arg

175175

Asn Gly ThrAsn Gly Thr

Arg Phe LeuArg Phe Leu

205205

Gly His AspGly His Asp

220220

Gly Val Gly 235Gly Val Gly 235

Pro Gln LeuPro Gln Leu

Lys Thr HisLys Thr His

Pro Ser ValPro Ser Val

285285

Ser Arg ThrSer Arg Thr

300300

Asp Pro Glu 315Asp Pro Glu 315

Asn Ala LysAsn Ala Lys

Val Val SerVal Val Ser

Glu Tyr LysGlu Tyr Lys

365365

Lys Thr IleLys Thr Ile

380380

Thr Leu Pro 395Thr Leu Pro 395

Pro Glu Phe 190Pro Glu Phe 190

His Asp HisHis Asp His

Ala Gly IleAla Gly Ile

Thr Gly AsnThr Gly Asn

240240

Gly Ser GlyGly Ser Gly

255255

Thr Cys Pro 270Thr Cys Pro 270

Phe Leu PhePhe Leu Phe

Pro Glu ValPro Glu Val

Val Lys PheVal Lys Phe

320320

Thr Lys ProThr Lys Pro

335335

Val Leu Thr 350Val Leu Thr 350

Cys Lys ValCys Lys Val

Ser Lys AlaSer Lys Ala

Pro Ser ArgPro Ser Arg

400400

- 1079 044346- 1079 044346

Asp Glu Leu ThrAsp Glu Leu Thr

Lys Asn Gln Val 405Lys Asn Gln Val 405

Ser Leu Thr CysSer Leu Thr Cys

410410

Leu Val Lys GlyLeu Val Lys Gly

415415

Phe Tyr Pro SerPhe Tyr Pro Ser

420420

Asp Ile Ala ValAsp Ile Ala Val

Glu Trp Glu Ser 425Glu Trp Glu Ser 425

Asn Gly Gln Pro 430Asn Gly Gln Pro 430

Glu Asn Asn TyrGlu Asn Asn Tyr

435435

Lys Thr Thr ProLys Thr Thr Pro

440440

Pro Val Leu AspPro Val Leu Asp

Ser Asp Gly Ser 445Ser Asp Gly Ser 445

Phe Phe Leu TyrPhe Phe Leu Tyr

450450

Ser Lys Leu ThrSer Lys Leu Thr

455455

Val Asp Lys SerVal Asp Lys Ser

460460

Arg Trp Gln GlnArg Trp Gln Gln

Gly Asn Val Phe 465Gly Asn Val Phe 465

Ser Cys Ser ValSer Cys Ser Val

470470

Met His Glu AlaMet His Glu Ala

475475

Leu His Asn HisLeu His Asn His

480480

Tyr Thr Gln LysTyr Thr Gln Lys

Ser Leu Ser Leu 485Ser Leu Ser Leu 485

Ser Pro GlySer Pro Gly

490490

<210> 925 <210> 925 <211> 1923 <212> DNA <213> Искусственная последовательность <220> <223> ICOSL/NKp30 стек 8 <400> 925 atggggtcaa ccgccatcct cgccctcctc ctggctgttc <211> 1923 <212> DNA <213> Artificial sequence <220> <223> ICOSL/NKp30 stack 8 <400> 925 atggggtcaa ccgccatcct cgccctcctc ctggctgttc tccaaggagt tccaaggagt cagcgctgat cagcgctgat 60 60 actcaggaga actcaggaga aggaagtcag aggaagtcag agcgatggta agcgatggta ggcagcgacg ggcagcgacg tggagctcag tggagctcag ctgcgcttgc ctgcgcttgc 120 120 cctgaaggaa cctgaaggaa gccgttttga gccgttttga tttaaatgat tttaaatgat gtttacgtat gtttacgtat attggcaaac attggcaaac cagtgagtcg cagtgagtcg 180 180 aaaaccgtgg aaaaccgtgg tgacctacca tgacctacca catcccacag catccacag ctgagctcct ctgagctcct tggaacatgt tggaacatgt ggacagccgc ggacagccgc 240 240 taccggaacc taccggaacc gagccctgat gagccctgat gtcaccggcc gtcaccggcc ggcatgctgc ggcatgctgc ggggcgactt ggggcgactt ctccctgcgc ctccctgcgc 300 300 ttgttcaacg ttgttcaacg tcacccccca tcacccccca ggacgagcag ggacgagcag aagtttcact aagtttcact gcctggtgtt gcctggtgtt gagccggtcc gagccggtcc 360 360 ctgggattcc ctggggattcc aggaggtttt aggaggtttt gagcgttgag gagcgttgag gttacactgc gttacactgc atgtggcagc atgtggcagc aaacttcagc aaacttcagc 420 420 gtgggaggtg gtgggaggtg gtggatcagg gtggatcagg cggtggaggt cggtggaggt tccggaggag tccggagggag gtggatctct gtggatctct ctgggtgtcc ctgggtgtcc 480 480 cagccccctg cagccccctg agattcgtac agattcgtac cctggaagga cctggaagga tcctctgcct tcctctgcct tcctgccctg tcctgccctg ctccttcaat ctccttcaat 540 540 gccagccaag gccagccaag ggagagtggc gggagagtggc cattggctcc cattggctcc gtcacgtggt gtcacgtggt tccgagatga tccgagatga ggtggttcca ggtggttcca 600 600 gggaaggagg gggaaggagg tgaggaatgg tgaggaatgg aaccccagag aaccccagag ttcaggggcc ttcaggggcc gcctggtccc gcctggtccc acttgctccc acttgctccc 660 660 tcccgtttcc tcccgtttcc tccatgacca tccatgacca ccaggctgag ccaggctgag ctgcacatcc ctgcacatcc gggacgtgcg gggacgtgcg aggccatgac aggccatgac 720 720 gccggtatct gccggtatct acgtgtgcag acgtgtgcag agtggaggtg agtggaggtg ctgggccttg ctggggccttg gtgtcgggac gtgtcggggac agggaatggg agggaatggg 780 780 actcggctgg actcggctgg tggtggagaa tggtggagaa agaacatcct agaacatcct cagctaggtg cagctaggtg gaggaggtag gaggaggtag cgggggagga cggggggaga 840 840

- 1080 044346- 1080 044346

ggcagcggtg ggcagcggtg gtggcgggtc gtggcgggtc attgtgggtt attgtgggtt tcacagcctc tcacagcctc cagaaatacg cagaaatacg gaccctcgag gaccctcgag 900 900 ggttcctctg ggttcctctg cttttctgcc cttttctgcc ctgtagcttt ctgtagcttt aatgcttctc aatgcttctc agggacgcgt agggacgcgt ggctattggc ggctattggc 960 960 tccgttacgt tccgttacgt ggtttcggga ggtttcggga cgaggtggtc cgaggtggtc cctgggaagg cctgggaagg aggtacggaa aggtacggaa tggaacacct tggaacacct 1020 1020 gagtttcggg gagtttcggg gccgcctcgt gccgcctcgt tccgctcgct tccgctcgct ccaagccgct ccaagccgct tccttcacga tccttcacga ccaccaagcg ccaccaagcg 1080 1080 gaacttcata gaacttcata taagggacgt taagggacgt gagggggcat gagggggcat gacgcgggta gacgcgggta tatatgtctg tatatgtctg ccgcgtcgag ccgcgtcgag 1140 1140 gtgctgggtc gtgctgggtc ttggggtggg ttggggtggg tacgggcaat tacggggcaat ggcacccgat ggcacccgat tggtcgttga tggtcgttga gaaagaacac gaaagaacac 1200 1200 cctcagctgg cctcagctgg gatccggtgg gatccggtgg aggagggtca aggagggtca gagcccaaaa gagcccaaaa gctccgacaa gctccgacaa gactcacaca gactcacaca 1260 1260 tgcccccctt tgcccccctt gtccagcgcc gtccagcgcc tgaagctgag tgaagctgag ggtgcgccct ggtgcgccct ctgtcttcct ctgtcttcct tttcccccct tttcccccct 1320 1320 aagccgaaag aagccgaaag ataccctgat ataccctgat gatctcccgc gatctcccgc actcccgaag actcccgaag tcacatgtgt tcacatgtgt tgttgtcgac tgttgtcgac 1380 1380 gtatctcatg gtatctcatg aagatcctga aagatcctga ggtgaaattc ggtgaaattc aactggtatg aactggtatg tagacggggt tagacggggt cgaagttcat cgaagttcat 1440 1440 aatgctaaga aatgctaaga ctaagccacg ctaagccacg agaagagcaa agaagagcaa tacaactcaa tacaactcaa cgtatcgggt cgtatcgggt ggtgagcgtt ggtgagcgtt 1500 1500 ctgacggttc ctgacggttc tgcaccaaga tgcaccaaga ttggcttaat ttggcttaat ggaaaagagt ggaaaagagt ataagtgcaa ataagtgcaa ggtgtccaac ggtgtccaac 1560 1560 aaggctcttc aaggctcttc cggcacccat cggcacccat cgaaaagacg cgaaaagacg atttccaaag atttccaaag cgaaaggcca cgaaaggcca acctagggaa acctagggaa 1620 1620 ccgcaagttt ccgcaagttt acactttgcc acactttgcc cccgtcaaga cccgtcaaga gacgaactta gacgaactta ccaagaatca ccaagaatca agtttccctg agtttccctg 1680 1680 acgtgccttg acgtgccttg tgaagggctt tgaagggctt ctaccctagc ctaccctagc gatatagcag gatatagcag ttgagtggga ttgagtggga atctaacggc atctaacggc 1740 1740 cagcccgaaa cagcccgaaa ataattataa ataattataa gactactccg gactactccg cccgtgctgg cccgtgctgg acagtgatgg acagtgatgg ttcatttttc ttcatttttc 1800 1800 ctgtattcaa ctgtattcaa aactcactgt aactcactgt ggacaaatct ggacaaatct agatggcagc agatggcagc agggtaatgt agggtaatgt gttctcttgt gttctcttgt 1860 1860 tcagttatgc tcagttatgc acgaggcatt acgaggcatt gcacaatcac gcacaatcac tatacgcaaa tatacgcaaa aaagtttgtc aaagtttgtc tctctctccg tctctctccg 1920 1920

gggggg

1923 <210> 926 <211> 622 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>1923 <210> 926 <211> 622 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> ICOSL/NKp30 стек 8 <400> 926<223> ICOSL/NKp30 stack 8 <400> 926

Asp Thr Gln Glu LysAsp Thr Gln Glu Lys

55

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Ile Pro Gln Leu SerIle Pro Gln Leu Ser

Glu Val Arg Ala Met 10Glu Val Arg Ala Met 10

Pro Glu Gly Ser Arg 25Pro Glu Gly Ser Arg 25

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Ser Leu Glu His Val 55Ser Leu Glu His Val 55

Val Gly Ser Asp Val Glu 15Val Gly Ser Asp Val Glu 15

Phe Asp Leu Asn Asp Val 30Phe Asp Leu Asn Asp Val 30

Thr Val Val Thr Tyr His 45Thr Val Val Thr Tyr His 45

Asp Ser Arg Tyr Arg Asn 60Asp Ser Arg Tyr Arg Asn 60

- 1081 044346- 1081 044346

Arg 65Arg 65

ArgArg

ValVal

ThrThr

GlyGly

Glu 145Glu 145

AsnAsn

AspAsp

ArgArg

GlnGln

Tyr 225Tyr 225

GlyGly

GlyGly

GlnGln

CysCys

TrpTrp

Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg 70 75Ala Leu Met Ser Pro Ala Gly Met Leu Arg 70 75

Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln 85 90Leu Phe Asn Val Thr Pro Gln Asp Glu Gln 85 90

Leu Ser Arg Ser Leu Gly Phe 100Leu Ser Arg Ser Leu Gly Phe 100

Leu His Val Ala Ala Asn PheLeu His Val Ala Ala Asn Phe

115 120115 120

Gly Gly Ser Gly Gly Gly GlyGly Gly Ser Gly Gly Gly Gly

130 135130 135

Ile Arg Thr Leu Glu Gly Ser Ser Ala Phe Leu Pro CysIle Arg Thr Leu Glu Gly Ser Ser Ala Phe Leu Pro Cys

150 155150 155

Ser PheSer Phe

160160

Ala Ser Gln Gly Arg Val AlaAla Ser Gln Gly Arg Val Ala

165165

Glu Val Val ProGlu Val Val Pro

180180

Gly Arg Leu ValGly Arg Leu Val

195195

Ala Glu Leu His 210Ala Glu Leu His 210

Gly Lys Glu Val Arg Asn 185Gly Lys Glu Val Arg Asn 185

Pro Leu Ala Pro Ser Arg 200Pro Leu Ala Pro Ser Arg 200

Ile Arg Asp Val Arg Gly 215Ile Arg Asp Val Arg Gly 215

ValVal

Cys Arg Val Glu ValCys Arg Val Glu Val

230230

Thr Arg Leu Val Val GluThr Arg Leu Val Val Glu

245245

Ser Gly Gly Gly Gly SerSer Gly Gly Gly Gly Ser

260260

Pro Pro Glu Ile Arg ThrPro Pro Glu Ile Arg Thr

275275

Ser Phe Asn Ala Ser GlnSer Phe Asn Ala Ser Gln

290 295290 295

Gly Asp Phe Ser Leu 80Gly Asp Phe Ser Leu 80

Lys Phe His Cys Leu 95Lys Phe His Cys Leu 95

Gln Glu Val Leu Ser Val Glu ValGln Glu Val Leu Ser Val Glu Val

105 110105 110

Ser Val Gly Gly Gly Gly Ser GlySer Val Gly Gly Gly Gly Ser Gly

125125

Ser Leu Trp Val Ser Gln Pro ProSer Leu Trp Val Ser Gln Pro Pro

140140

Ile Gly Ser Val Thr Trp Phe ArgIle Gly Ser Val Thr Trp Phe Arg

170 175170 175

Gly Thr Pro Glu PheGly Thr Pro Glu Phe

190190

Phe Leu His Asp HisPhe Leu His Asp His

205205

His Asp Ala Gly Ile 220His Asp Ala Gly Ile 220

Leu Gly Leu Gly Val Gly Thr Gly AsnLeu Gly Leu Gly Val Gly Thr Gly Asn

235 240235 240

Lys Glu His Pro Gln Leu Gly Gly GlyLys Glu His Pro Gln Leu Gly Gly Gly

250 255250 255

Gly Gly Gly Gly Ser Leu Trp Val SerGly Gly Gly Gly Ser Leu Trp Val Ser

265 270265 270

Leu Glu Gly Ser Ser Ala Phe Leu ProLeu Glu Gly Ser Ser Ala Phe Leu Pro

280 285280 285

Gly Arg Val Ala Ile Gly Ser Val Thr 300Gly Arg Val Ala Ile Gly Ser Val Thr 300

Phe Arg Asp Glu Val Val ProPhe Arg Asp Glu Val Val Pro

Gly Lys Glu Val Arg Asn Gly ThrGly Lys Glu Val Arg Asn Gly Thr

- 1082 044346- 1082 044346

305305

310310

315315

Pro Glu Phe Arg GlyPro Glu Phe Arg Gly

325325

Arg Leu Val Pro LeuArg Leu Val Pro Leu

330330

Ala Pro Ser Arg PheAla Pro Ser Arg Phe

335335

His Asp His Gln AlaHis Asp His Gln Ala

340340

Glu Leu His Ile ArgGlu Leu His Ile Arg

345345

Asp Val Arg Gly HisAsp Val Arg Gly His

350350

Ala Gly Ile Tyr ValAla Gly Ile Tyr Val

355355

Cys Arg Val Glu ValCys Arg Val Glu Val

360360

Leu Gly Leu Gly ValLeu Gly Leu Gly Val

365365

Thr Gly Asn Gly ThrThr Gly Asn Gly Thr

370370

Arg Leu Val Val GluArg Leu Val Val Glu

375375

Lys Glu His Pro GlnLys Glu His Pro Gln

380380

Gly Ser Gly Gly Gly 385Gly Ser Gly Gly Gly 385

Gly Ser Glu Pro Lys 390Gly Ser Glu Pro Lys 390

Ser Ser Asp Lys Thr 395Ser Ser Asp Lys Thr 395

Thr Cys Pro Pro CysThr Cys Pro Pro Cys

405405

Pro Ala Pro Glu AlaPro Ala Pro Glu Ala

410410

Glu Gly Ala Pro SerGlu Gly Ala Pro Ser

415415

Phe Leu Phe Pro ProPhe Leu Phe Pro Pro

420420

Lys Pro Lys Asp ThrLys Pro Lys Asp Thr

425425

Leu Met Ile Ser ArgLeu Met Ile Ser Arg

430430

Pro Glu Val Thr Cys 435Pro Glu Val Thr Cys 435

Val Val Val Asp ValVal Val Val Asp Val

440440

Ser His Glu Asp Pro 445Ser His Glu Asp Pro 445

Val Lys Phe Asn TrpVal Lys Phe Asn Trp

450450

Tyr Val Asp Gly ValTyr Val Asp Gly Val

455455

Glu Val His Asn AlaGlu Val His Asn Ala

460460

Thr Lys Pro Arg Glu 465Thr Lys Pro Arg Glu 465

Glu Gln Tyr Asn Ser 470Glu Gln Tyr Asn Ser 470

Thr Tyr Arg Val Val 475Thr Tyr Arg Val Val 475

Val Leu Thr Val LeuVal Leu Thr Val Leu

485485

His Gln Asp Trp LeuHis Gln Asp Trp Leu

490490

Asn Gly Lys Glu TyrAsn Gly Lys Glu Tyr

495495

Cys Lys Val Ser AsnCys Lys Val Ser Asn

500500

Lys Ala Leu Pro AlaLys Ala Leu Pro Ala

505505

Pro Ile Glu Lys ThrPro Ile Glu Lys Thr

510510

Ser Lys Ala Lys Gly 515Ser Lys Ala Lys Gly 515

Gln Pro Arg Glu Pro 520Gln Pro Arg Glu Pro 520

Gln Val Tyr Thr LeuGln Val Tyr Thr Leu

525525

Pro Ser Arg Asp Glu 530Pro Ser Arg Asp Glu 530

Leu Thr Lys Asn GlnLeu Thr Lys Asn Gln

535535

Val Ser Leu Thr Cys 540Val Ser Leu Thr Cys 540

Val Lys Gly Phe Tyr 545Val Lys Gly Phe Tyr 545

Pro Ser Asp Ile Ala 550Pro Ser Asp Ile Ala 550

Val Glu Trp Glu Ser 555Val Glu Trp Glu Ser 555

320320

LeuLeu

AspAsp

GlyGly

LeuLeu

His 400His 400

ValVal

ThrThr

GluGlu

LysLys

Ser 480Ser 480

LysLys

IleIle

ProPro

LeuLeu

Asn 560Asn 560

- 1083 044346- 1083 044346

Gly Gln ProGly Gln Pro

Asp Gly SerAsp Gly Ser

Trp Gln Gln 595Trp Gln Gln 595

His Asn His 610His Asn His 610

Glu Asn AsnGlu Asn Asn

565565

Phe Phe Leu 580Phe Phe Leu 580

Gly Asn ValGly Asn Val

Tyr Thr GlnTyr Thr Gln

Tyr Lys ThrTyr Lys Thr

Tyr Ser LysTyr Ser Lys

585585

Phe Ser Cys 600Phe Ser Cys 600

Lys Ser Leu 615Lys Ser Leu 615

Thr Pro Pro 570Thr Pro Pro 570

Leu Thr ValLeu Thr Val

Ser Val MetSer Val Met

Ser Leu Ser 620Ser Leu Ser 620

Val Leu AspVal Leu Asp

575575

Asp Lys Ser 590Asp Lys Ser 590

His Glu Ala 605His Glu Ala 605

Pro GlyPro Gly

SerSer

ArgArg

Leu <210> 927 <211> 231 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>Leu <210> 927 <211> 231 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> Fc с C220S/E356D/M358L/K447del < 400>927< 223> Fc with C220S/E356D/M358L/K447del < 400>927

Glu Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro 1 5 1015Glu Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro 1 5 1015

Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro LysPro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys

25302530

Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val 35 4045Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val 35 4045

Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp TyrVal Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr

55605560

Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu 65 7075Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu 65 7075

Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His 85 9095Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His 85 9095

Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn LysAsp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys

100 105110100 105110

Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly GlnLeu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln

115 120125115 120125

Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu LeuArg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu

130 135140130 135140

Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr ProLys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro

AlaAla

ProPro

ValVal

ValVal

Gln 80Gln 80

GlnGln

AlaAla

ProPro

ThrThr

SerSer

- 1084 044346- 1084 044346

145145

150150

155155

Asp Ile Ala Val GluAsp Ile Ala Val Glu

165165

Trp Glu Ser Asn GlyTrp Glu Ser Asn Gly

170170

Gln Pro Glu Asn AsnGln Pro Glu Asn Asn

175175

Lys Thr Thr Pro ProLys Thr Thr Pro Pro

180180

Val Leu Asp Ser AspVal Leu Asp Ser Asp

185185

Gly Ser Phe Phe LeuGly Ser Phe Phe Leu

190190

Ser Lys Leu Thr ValSer Lys Leu Thr Val

195195

Asp Lys Ser Arg Trp 200Asp Lys Ser Arg Trp 200

Gln Gln Gly Asn ValGln Gln Gly Asn Val

205205

Ser Cys Ser Val MetSer Cys Ser Val Met

210210

His Glu Ala Leu HisHis Glu Ala Leu His

215215

Asn His Tyr Thr Gln 220Asn His Tyr Thr Gln 220

160160

TyrTyr

TyrTyr

PhePhe

LysLys

Ser Leu Ser Leu Ser 225Ser Leu Ser Leu Ser 225

Pro Gly 230 <210> 928 <211> 363 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>Pro Gly 230 <210> 928 <211> 363 <212> PROTEIN <213> Artificial Sequence <220>

<223> Вариантный ICOSL IgV-Fc <400> 928<223> Variant ICOSL IgV-Fc <400> 928

Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15Asp Thr Gln Glu Lys Glu Val Arg Ala Met Val Gly Ser Asp Val 1 5 10 15

Leu Ser Cys Ala Cys 20Leu Ser Cys Ala Cys 20

Pro Glu Gly Ser ArgPro Glu Gly Ser Arg

Phe Asp Leu Asn Asp 30Phe Asp Leu Asn Asp 30

Tyr Val Tyr Trp Gln 35Tyr Val Tyr Trp Gln 35

Thr Ser Glu Ser Lys 40Thr Ser Glu Ser Lys 40

Thr Val Val Thr Tyr 45Thr Val Val Thr Tyr 45

Ile Pro Gln His Ser 50Ile Pro Gln His Ser 50

Ser Leu Glu Tyr Val 55Ser Leu Glu Tyr Val 55

Asp Ser Arg Tyr Arg 60Asp Ser Arg Tyr Arg 60

Arg Ala Leu Met Ser 65Arg Ala Leu Met Ser 65

Pro Ala Gly Met Leu 70Pro Ala Gly Met Leu 70

Arg Gly Asp Phe Ser 75Arg Gly Asp Phe Ser 75

Arg Leu Phe Asn Val 85Arg Leu Phe Asn Val 85

Thr Pro Gln Asp Glu 90Thr Pro Gln Asp Glu 90

Gln Lys Phe His Cys 95Gln Lys Phe His Cys 95

Val Leu Ser Arg SerVal Leu Ser Arg Ser

100100

Leu Gly Phe Gln GluLeu Gly Phe Gln Glu

105105

Val Leu Ser Val GluVal Leu Ser Val Glu

110110

Thr Leu His Val AlaThr Leu His Val Ala

115115

Ala Asn Phe Ser ValAla Asn Phe Ser Val

120120

Gly Gly Gly Gly SerGly Gly Gly Gly Ser

125125

GluGlu

ValVal

HisHis

AsnAsn

Leu 80Leu 80

LeuLeu

ValVal

GlyGly

- 1085 044346- 1085 044346

Gly Gly Gly Ser Glu 130Gly Gly Gly Ser Glu 130

Pro Lys Ser Ser AspPro Lys Ser Ser Asp

135135

Lys Thr His Thr Cys 140Lys Thr His Thr Cys 140

Pro Cys Pro Ala Pro 145Pro Cys Pro Ala Pro 145

Glu Ala Glu Gly Ala 150Glu Ala Glu Gly Ala 150

Pro Ser Val Phe Leu 155Pro Ser Val Phe Leu 155

Pro Pro Lys Pro LysPro Pro Lys Pro Lys

165165

Asp Thr Leu Met IleAsp Thr Leu Met Ile

170170

Ser Arg Thr Pro GluSer Arg Thr Pro Glu

175175

Thr Cys Val Val ValThr Cys Val Val Val

180180

Asp Val Ser His GluAsp Val Ser His Glu

185185

Asp Pro Glu Val LysAsp Pro Glu Val Lys

190190

Asn Trp Tyr Val Asp 195Asn Trp Tyr Val Asp 195

Gly Val Glu Val His 200Gly Val Glu Val His 200

Asn Ala Lys Thr Lys 205Asn Ala Lys Thr Lys 205

Arg Glu Glu Gln Tyr 210Arg Glu Glu Gln Tyr 210

Asn Ser Thr Tyr ArgAsn Ser Thr Tyr Arg

215215

Val Val Ser Val LeuVal Val Ser Val Leu

220220

Val Leu His Gln Asp 225Val Leu His Gln Asp 225

Trp Leu Asn Gly Lys 230Trp Leu Asn Gly Lys 230

Glu Tyr Lys Cys Lys 235Glu Tyr Lys Cys Lys 235

Ser Asn Lys Ala LeuSer Asn Lys Ala Leu

245245

Pro Ala Pro Ile GluPro Ala Pro Ile Glu

250250

Lys Thr Ile Ser LysLys Thr Ile Ser Lys

255255

Lys Gly Gln Pro ArgLys Gly Gln Pro Arg

260260

Glu Pro Gln Val TyrGlu Pro Gln Val Tyr

265265

Thr Leu Pro Pro SerThr Leu Pro Pro Ser

270270

Asp Glu Leu Thr LysAsp Glu Leu Thr Lys

275275

Asn Gln Val Ser LeuAsn Gln Val Ser Leu

280280

Thr Cys Leu Val LysThr Cys Leu Val Lys

285285

Phe Tyr Pro Ser Asp 290Phe Tyr Pro Ser Asp 290

Ile Ala Val Glu TrpIle Ala Val Glu Trp

295295

Glu Ser Asn Gly GlnGlu Ser Asn Gly Gln

300300

Glu Asn Asn Tyr Lys 305Glu Asn Asn Tyr Lys 305

Thr Thr Pro Pro Val 310Thr Thr Pro Pro Val 310

Leu Asp Ser Asp Gly 315Leu Asp Ser Asp Gly 315

Phe Phe Leu Tyr SerPhe Phe Leu Tyr Ser

325325

Lys Leu Thr Val AspLys Leu Thr Val Asp

330330

Lys Ser Arg Trp GlnLys Ser Arg Trp Gln

335335

Gly Asn Val Phe SerGly Asn Val Phe Ser

340340

Cys Ser Val Met HisCys Ser Val Met His

345345

Glu Ala Leu His AsnGlu Ala Leu His Asn

350350

ProPro

Phe 160Phe 160

ValVal

PhePhe

ProPro

ThrThr

Val 240Val 240

AlaAla

ArgArg

GlyGly

ProPro

Ser 320Ser 320

GlnGln

HisHis

Tyr Thr Gln Lys SerTyr Thr Gln Lys Ser

355355

Leu Ser Leu Ser ProLeu Ser Leu Ser Pro

360360

Gly <210> 929Gly <210> 929

- 1086 044346 <211> 116 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>- 1086 044346 <211> 116 < 212> PROTEIN < 213> Artificial sequence <220>

< 223> NKp30 WT IgV-подобный <400> 929<223> NKp30 WT IgV-like <400> 929

Leu Trp Val Ser Gln Pro Pro Glu Ile Arg Thr Leu Glu Gly Ser 1 5 10 15Leu Trp Val Ser Gln Pro Pro Glu Ile Arg Thr Leu Glu Gly Ser 1 5 10 15

Ala Phe Leu Pro Cys Ser Phe Asn Ala Ser Gln Gly Arg Leu AlaAla Phe Leu Pro Cys Ser Phe Asn Ala Ser Gln Gly Arg Leu Ala

25 3025 30

Gly Ser Val Thr Trp Phe Arg Asp Glu Val Val Pro Gly Lys Glu 35 40 45Gly Ser Val Thr Trp Phe Arg Asp Glu Val Val Pro Gly Lys Glu 35 40 45

Arg Asn Gly Thr Pro Glu Phe Arg Gly Arg Leu Ala Pro Leu Ala 50 55 60Arg Asn Gly Thr Pro Glu Phe Arg Gly Arg Leu Ala Pro Leu Ala 50 55 60

Ser Arg Phe Leu His Asp His Gln Ala Glu Leu His Ile Arg Asp 65 70 75Ser Arg Phe Leu His Asp His Gln Ala Glu Leu His Ile Arg Asp 65 70 75

Arg Gly His Asp Ala Ser Ile Tyr Val Cys Arg Val Glu Val Leu 85 90 95Arg Gly His Asp Ala Ser Ile Tyr Val Cys Arg Val Glu Val Leu 85 90 95

Leu Gly Val Gly Thr Gly Asn Gly Thr Arg Leu Val Val Glu LysLeu Gly Val Gly Thr Gly Asn Gly Thr Arg Leu Val Val Glu Lys

100 105 110100 105 110

SerSer

IleIle

ValVal

SerSer

Val 80Val 80

GlyGly

GluGlu

His Pro Gln LeuHis Pro Gln Leu

115 <210> 930 <211> 116 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>115 <210> 930 <211> 116 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> NKp30 v2 IgV-подобный <400> 930<223> NKp30 v2 IgV-like <400> 930

Leu Trp Val Ser 1Leu Trp Val Ser 1

Gln Pro Pro Glu Ile Arg Thr Leu Glu Gly Ser 5 10 15Gln Pro Pro Glu Ile Arg Thr Leu Glu Gly Ser 5 10 15

Ala Phe Leu ProAla Phe Leu Pro

Cys Ser Phe Asn Ala Ser Gln Gly Arg Val Ala 25 30Cys Ser Phe Asn Ala Ser Gln Gly Arg Val Ala 25 30

Gly Ser Val ThrGly Ser Val Thr

Trp Phe Arg Asp Glu Val Val Pro Gly Lys GluTrp Phe Arg Asp Glu Val Val Pro Gly Lys Glu

4545

SerSer

IleIle

ValVal

- 1087 044346- 1087 044346

Arg Asn Gly Thr Pro 50Arg Asn Gly Thr Pro 50

Glu Phe Arg Gly Arg Leu Ala Pro Leu AlaGlu Phe Arg Gly Arg Leu Ala Pro Leu Ala

6060

Ser Arg Phe Leu His 65Ser Arg Phe Leu His 65

Asp His Gln Ala Glu Leu His Ile Arg Asp 70 75Asp His Gln Ala Glu Leu His Ile Arg Asp 70 75

Arg Gly His Asp Ala 85Arg Gly His Asp Ala 85

Ser Ile Tyr Val Cys Arg Val Glu Val Leu 90 95Ser Ile Tyr Val Cys Arg Val Glu Val Leu 90 95

Leu Gly Val Gly ThrLeu Gly Val Gly Thr

100100

Gly Asn Gly Thr Arg Leu Val Val Glu LysGly Asn Gly Thr Arg Leu Val Val Glu Lys

105 110105 110

SerSer

Val 80Val 80

GlyGly

GluGlu

His Pro Gln LeuHis Pro Gln Leu

115 <210> 931 <211> 116 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>115 <210> 931 <211> 116 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

< 223> NKp30 v3 IgV-подобный < 400> 931<223> NKp30 v3 IgV-like <400> 931

Leu Trp Val 1Leu Trp Val 1

Ser Gln Pro Pro GluSer Gln Pro Pro Glu

Ile Arg Thr Leu Glu Gly SerIle Arg Thr Leu Glu Gly Ser

1515

Ala Phe Leu ProAla Phe Leu Pro

CysCys

Gly Ser Val ThrGly Ser Val Thr

TrpTrp

Arg Asn Gly Thr 50Arg Asn Gly Thr 50

ProPro

Ser Phe Asn Ala Ser Gln Gly Arg Leu Ala 2530Ser Phe Asn Ala Ser Gln Gly Arg Leu Ala 2530

Phe Arg Asp Glu Val Val Pro Gly Lys Glu 4045Phe Arg Asp Glu Val Val Pro Gly Lys Glu 4045

Glu Phe Arg Gly Arg Leu Val Pro Leu Ala 5560Glu Phe Arg Gly Arg Leu Val Pro Leu Ala 5560

Ser Arg Phe Leu His Asp His 65 70Ser Arg Phe Leu His Asp His 65 70

Gln Ala Glu Leu His Ile Arg Asp 75Gln Ala Glu Leu His Ile Arg Asp 75

Arg Gly His Asp Ala Ser Ile 85Arg Gly His Asp Ala Ser Ile 85

Tyr Val Cys Arg Val Glu Val LeuTyr Val Cys Arg Val Glu Val Leu

9595

Leu Gly Val Gly Thr Gly AsnLeu Gly Val Gly Thr Gly Asn

100100

Gly Thr Arg Leu Val Val Glu LysGly Thr Arg Leu Val Val Glu Lys

105 110105 110

SerSer

IleIle

ValVal

SerSer

Val 80Val 80

GlyGly

GluGlu

His Pro Gln LeuHis Pro Gln Leu

115 <210> 932115 <210> 932

- 1088 044346 <211> 116 < 212> БЕЛОК < 213> Искусственная последовательность <220>- 1088 044346 <211> 116 < 212> PROTEIN < 213> Artificial sequence <220>

< 223> NKp30 v4 IgV-подобный <400> 932<223> NKp30 v4 IgV-like <400> 932

Leu Trp Val Ser Gln Pro Pro Glu Ile Arg Thr Leu Glu Gly Ser 1 5 10 15Leu Trp Val Ser Gln Pro Pro Glu Ile Arg Thr Leu Glu Gly Ser 1 5 10 15

Ala Phe Leu Pro Cys Ser Phe Asn Ala Ser Gln Gly Arg Leu AlaAla Phe Leu Pro Cys Ser Phe Asn Ala Ser Gln Gly Arg Leu Ala

25 3025 30

Gly Ser Val Thr Trp Phe Arg Asp Glu Val Val Pro Gly Lys Glu 35 40 45Gly Ser Val Thr Trp Phe Arg Asp Glu Val Val Pro Gly Lys Glu 35 40 45

Arg Asn Gly Thr Pro Glu Phe Arg Gly Arg Leu Ala Pro Leu Ala 50 55 60Arg Asn Gly Thr Pro Glu Phe Arg Gly Arg Leu Ala Pro Leu Ala 50 55 60

Ser Arg Phe Leu His Asp His Gln Ala Glu Leu His Ile Arg Asp 65 70 75Ser Arg Phe Leu His Asp His Gln Ala Glu Leu His Ile Arg Asp 65 70 75

Arg Gly His Asp Ala Ser Ile Tyr Val Cys Arg Val Glu Val Leu 85 90 95Arg Gly His Asp Ala Ser Ile Tyr Val Cys Arg Val Glu Val Leu 85 90 95

Leu Gly Val Gly Thr Gly Asn Gly Thr Arg Leu Val Val Glu LysLeu Gly Val Gly Thr Gly Asn Gly Thr Arg Leu Val Val Glu Lys

100 105 110100 105 110

SerSer

IleIle

ValVal

ProPro

Val 80Val 80

GlyGly

GluGlu

His Pro Gln LeuHis Pro Gln Leu

115 <210> 933 <211> 116 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>115 <210> 933 <211> 116 <212> PROTEIN <213> Artificial sequence <220>

<223> NKp30 v5 IgV-подобный <400> 933<223> NKp30 v5 IgV-like <400> 933

Leu Trp Val Ser 1Leu Trp Val Ser 1

Gln Pro Pro Glu Ile Arg Thr Leu Glu Gly Ser 5 10 15Gln Pro Pro Glu Ile Arg Thr Leu Glu Gly Ser 5 10 15

Ala Phe Leu ProAla Phe Leu Pro

Cys Ser Phe Asn Ala Ser Gln Gly Arg Leu Ala 25 30Cys Ser Phe Asn Ala Ser Gln Gly Arg Leu Ala 25 30

Gly Ser Val ThrGly Ser Val Thr

Trp Phe Arg Asp Glu Val Val Pro Gly Lys GluTrp Phe Arg Asp Glu Val Val Pro Gly Lys Glu

4545

SerSer

IleIle

ValVal

- 1089 044346- 1089 044346

Arg Asn Gly Thr Pro 50Arg Asn Gly Thr Pro 50

Glu PheGlu Phe

Ser Arg Phe Leu His 65Ser Arg Phe Leu His 65

Asp His 70Asp His 70

Arg Gly His Asp Ala 85Arg Gly His Asp Ala 85

Gly IleGly Ile

Leu Gly Val Gly ThrLeu Gly Val Gly Thr

100100

Gly AsnGly Asn

Arg Gly Arg Leu Ala Pro Leu Ala Ser 60Arg Gly Arg Leu Ala Pro Leu Ala Ser 60

Gln Ala Glu Leu His Ile Arg Asp Val 7580Gln Ala Glu Leu His Ile Arg Asp Val 7580

Tyr Val Cys Arg Val Glu Val Leu Gly 9095Tyr Val Cys Arg Val Glu Val Leu Gly 9095

Gly Thr Arg Leu Val Val Glu Lys Glu 105110Gly Thr Arg Leu Val Val Glu Lys Glu 105110

His Pro Gln LeuHis Pro Gln Leu

115115

Claims (40)

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯCLAIM 1. Иммуномодулирующий гибридный белок ICOSL-Fc, содержащий вариантный полипептид ICOSL, состоящий из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 565, где вариантный ICOSL связан с Fc-областью иммуноглобулина.1. An ICOSL-Fc immunomodulatory fusion protein comprising a variant ICOSL polypeptide consisting of the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 565, where the variant ICOSL is linked to the Fc region of an immunoglobulin. 2. Иммуномодулирующий белок по п.1, где иммуномодулирующий белок является димером.2. Immunomodulatory protein according to claim 1, wherein the immunomodulatory protein is a dimer. 3. Иммуномодулирующий белок по п.2, где димер является гомодимером.3. Immunomodulatory protein according to claim 2, where the dimer is a homodimer. 4. Иммуномодулирующий белок по любому из пп.1-3, в котором Fc-область представляет собой Fcобласть IgG1 человека или представляет собой вариантную Fc-область, содержащую одну или несколько аминокислотных замен по сравнению с IgG1 человека дикого типа.4. The immunomodulatory protein according to any one of claims 1 to 3, wherein the Fc region is the Fc region of human IgG1 or is a variant Fc region containing one or more amino acid substitutions compared to wild-type human IgG1. 5. Иммуномодулирующий белок по любому из пп.1-4, где Fc-область включает аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 226, или ее вариант, который демонстрирует по меньшей мере 97, 98 или 99% идентичности последовательности с SEQ ID NO: 226.5. An immunomodulatory protein according to any one of claims 1 to 4, wherein the Fc region comprises the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 226, or a variant thereof that exhibits at least 97, 98, or 99% sequence identity to SEQ ID NO: : 226. 6. Иммуномодулирующий белок по любому из пп.1-5, в котором Fc-область представляет собой вариантную Fc-область, которая проявляет одну или несколько сниженных эффекторных функций по сравнению с Fc из IgG1 человека дикого типа.6. The immunomodulatory protein according to any one of claims 1 to 5, wherein the Fc region is a variant Fc region that exhibits one or more reduced effector functions compared to the Fc from wild-type human IgG1. 7. Иммуномодулирующий белок по п.6, в котором вариант Fc-области включает одну или несколько аминокислотных замен, выбранных из N297G, E233P/L234V/L235A/G236del/S267K или L234A/L235E/G237A, где остаток пронумерован в соответствии с индексом EU по Kabat.7. The immunomodulatory protein according to claim 6, wherein the Fc region variant includes one or more amino acid substitutions selected from N297G, E233P/L234V/L235A/G236del/S267K or L234A/L235E/G237A, where the residue is numbered according to the EU index by Kabat. 8. Иммуномодулирующий белок по п.7, в котором вариантная Fc-область дополнительно включает аминокислотную замену C220S, где остатки пронумерованы в соответствии с индексом EU по Kabat/или, и в котором Fc-область включает K447del, где остаток пронумерован в соответствии с индексом EU по Kabat.8. The immunomodulatory protein of claim 7, wherein the variant Fc region further includes the amino acid substitution C220S, wherein the residues are numbered according to the Kabat/or EU index, and wherein the Fc region includes K447del, wherein the residue is numbered according to the index EU by Kabat. 9. Иммуномодулирующий белок по п.7 или 8, в котором Fc-область включает аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 632, SEQ ID NO: 633, SEQ ID NO: 634 или SEQ ID NO: 637.9. The immunomodulatory protein of claim 7 or 8, wherein the Fc region comprises the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 632, SEQ ID NO: 633, SEQ ID NO: 634, or SEQ ID NO: 637. 10. Иммуномодулирующий белок по любому из пп.7-9, где Fc область содержит последовательность аминокислот, представленную в SEQ ID NO: 637.10. An immunomodulatory protein according to any one of claims 7 to 9, wherein the Fc region contains the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 637. 11. Иммуномодулирующий белок по любому из пп.1-10, в котором вариантный полипептид ICOSL связан через линкер с Fc-областью.11. The immunomodulatory protein according to any one of claims 1 to 10, wherein the variant ICOSL polypeptide is linked via a linker to the Fc region. 12. Иммуномодулирующий белок по п.11, в котором линкер является пептидным линкером и содержит от 1 до 10 аминокислот.12. Immunomodulatory protein according to claim 11, in which the linker is a peptide linker and contains from 1 to 10 amino acids. 13. Иммуномодулирующий белок по п.11 или 12, в котором линкер представляет собой AAA, G4S (SEQ ID NO: 636), (G4S)2 (SEQ ID NO: 229), 3x GGGGS (SEQ ID NO: 228) или GSGGGGS (SEQ ID NO: 635).13. The immunomodulatory protein according to claim 11 or 12, wherein the linker is AAA, G4S (SEQ ID NO: 636), (G 4 S) 2 (SEQ ID NO: 229), 3x GGGGS (SEQ ID NO: 228) or GSGGGGS (SEQ ID NO: 635). 14. Иммуномодулирующий белок по пп.11-13, в котором линкер представлен в SEQ ID NO: 635.14. Immunomodulatory protein according to claims 11-13, in which the linker is presented in SEQ ID NO: 635. 15. Иммуномодулирующий белок по пп.1-14, где гибридный белок ICOSL-Fc содержит аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 928.15. The immunomodulatory protein according to claims 1 to 14, wherein the ICOSL-Fc fusion protein contains the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 928. 16. Слитый белок, который содержит аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 928.16. A fusion protein that contains the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 928. 17. Слитый белок, который представляет собой гомодимер полипептида, содержащего аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 928.17. A fusion protein that is a homodimer of a polypeptide containing the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO: 928. 18. Молекула нуклеиновой кислоты, кодирующая иммуномодулирующий белок по любому из пп.1-17.18. A nucleic acid molecule encoding an immunomodulatory protein according to any one of claims 1 to 17. - 1090 044346- 1090 044346 19. Вектор, включающий молекулу нуклеиновой кислоты по п.18.19. A vector comprising a nucleic acid molecule according to claim 18. 20. Клетка, содержащая молекулу нуклеиновой кислоты по п.18.20. A cell containing a nucleic acid molecule according to claim 18. 21. Клетка, содержащая вектор по п.19.21. A cell containing the vector according to claim 19. 22. Клетка по п.21, где клетка представляет собой клетку яичника китайского хомячка (CHO) или ее производное.22. The cell of claim 21, wherein the cell is a Chinese hamster ovary (CHO) cell or a derivative thereof. 23. Клетка по п.22, где клетка представляет собой CHO DG44.23. The cell according to claim 22, where the cell is CHO DG44. 24. Способ получения иммуномодулирующего белка, содержащего вариантный полипептид ICOSL, включающий введение молекулы нуклеиновой кислоты по п.18 или вектора по п.19 в клетку-хозяина, например клетку млекопитающего, в условиях экспрессии белка в клетке.24. A method of producing an immunomodulatory protein containing a variant ICOSL polypeptide, comprising introducing a nucleic acid molecule according to claim 18 or a vector according to claim 19 into a host cell, for example a mammalian cell, under conditions of expression of the protein in the cell. 25. Способ по п.24, где клетка является клеткой яичника китайского хомячка (CHO) или ее производным.25. The method of claim 24, wherein the cell is a Chinese hamster ovary (CHO) cell or a derivative thereof. 26. Способ по п.25, где клетка представляет собой CHO DG44.26. The method according to claim 25, where the cell is CHO DG44. 27. Способ по п.24 или 25, дополнительно включающий выделение или очистку белка из клетки.27. The method according to claim 24 or 25, further comprising isolating or purifying the protein from the cell. 28. Белок, полученный способом по любому из пп.24-27.28. Protein obtained by the method according to any one of claims 24-27. 29. Композиция, содержащая иммуномодулирующий белок по любому из пп.1-15, в которой, по меньшей мере, 95, 96, 97, 98, 99% отдельных последовательностей белка или иммуномодулирующего белка в композиции имеют идентичную длину последовательности.29. A composition comprising an immunomodulatory protein according to any one of claims 1 to 15, wherein at least 95, 96, 97, 98, 99% of the individual protein or immunomodulatory protein sequences in the composition have identical sequence length. 30. Композиция по п.29, в которой белок или иммуномодулирующий белок очищают из клеток яичника китайского хомяка или их производного.30. The composition according to claim 29, wherein the protein or immunomodulatory protein is purified from Chinese hamster ovary cells or a derivative thereof. 31. Фармацевтическая композиция, включающая иммуномодулирующий белок по любому из пп.115 и необязательно включающая фармацевтически приемлемый эксципиент.31. A pharmaceutical composition comprising the immunomodulatory protein according to any one of claims 115 and optionally including a pharmaceutically acceptable excipient. 32. Флакон для хранения композиции, включающий фармацевтическую композицию по п.31, где флакон предназначен для хранения композиции.32. A bottle for storing the composition, including the pharmaceutical composition according to claim 31, where the bottle is for storing the composition. 33. Набор, включающий композицию по п.31, или флакон по п.32, и инструкции по применению, где набор предназначен для использования при введении иммуномодулятора с целью модуляции имунного ответа у субъекта.33. A kit comprising the composition of claim 31, or the vial of claim 32, and instructions for use, wherein the kit is for use in administering an immunomodulator for the purpose of modulating an immune response in a subject. 34. Способ модуляции иммунного ответа у объекта, включающий введение фармацевтической композиции по п.31 объекту.34. A method for modulating the immune response in a subject, comprising administering a pharmaceutical composition according to claim 31 of the subject. 35. Способ лечения заболевания или состояния у объекта, включающий введение фармацевтической композиции по п.31 объекту.35. A method of treating a disease or condition in a subject, comprising administering a pharmaceutical composition according to claim 31 of the subject. 36. Способ по любому из пп.34 или 35, в котором введение снижает иммунный ответ у субъекта.36. The method of any one of claims 34 or 35, wherein administration reduces the immune response in the subject. 37. Способ по п.35 или 36, в котором заболевание или состояние являются воспалительным или аутоиммунным заболеванием или состоянием.37. The method of claim 35 or 36, wherein the disease or condition is an inflammatory or autoimmune disease or condition. 38. Способ по любому из пп.35-37, где заболевание или состояние представляют собой болезнь Аддисона, аллергии, гнездную алопецию, болезнь Альцгеймера, васкулит, ассоциированный с антинейтрофильными цитоплазматическими антителами (ANCA), анкилозирующий спондилит, антифосфолипидный синдром (синдром Хьюза), астму, атеросклероз, ревматоидный артрит, аутоиммунную гемолитическую анемию, аутоиммунный гепатит, аутоиммунный синдром внутреннего уха, аутоиммунный лимфопролиферативный синдром, аутоиммунный миокардит, аутоиммунный оофорит, аутоиммунный орхит, азооспермию, болезнь Бехчета, болезнь Бергера, буллезный пемфигоид, кардиомиопатию, сердечнососудистые заболевания, целиакию-спру/глютеновую энтеропатию, синдром хронической усталостной иммунной дисфункции (CFIDS), хронический идиопатический полиневрит, хроническую воспалительную демиелинизацию, полирадикулонейропатию (CIDP), хроническую рецидивирующую полинейропатию (синдром Гийена-Барре), синдром Чарга-Стросса (CSS), рубцовый пемфигоид, болезнь холодовых агглютининов (CAD), COPD (хроническую обструктивную болезнь легких), синдром CREST, болезнь Крона, дерматит, герпетиформ, дерматомиозит, диабет, дискоидную волчанку, экзему, буллезный эпидермоз, существенную смешанную криоглобулинемию, синдром Эвана, экзофтальм, фибромиалгию, синдром Гудпасчера, Болезнь Грейвса, тиреоидит Хашимото, идиопатический фиброз легких, идиопатическую тромбоцитопеническую пурпуру (ITP), нефропатию IgA, иммунопролиферативное заболевание или расстройство, воспалительное заболевание кишечника (IBD), интерстициальную болезнь легких, ювенильный артрит, ювенильный идиопатический артрит (JIA), болезнь Кавасаки, миастенический синдром Ламберт-Итона, красный плоский лишай, волчаночный нефрит, лимфоцитарный липофизит, болезнь Меньера, синдром Миллера-Фишера/острую диссеминированную энцефаломиелорадикулопатию, смешанную болезнь соединительной ткани, рассеянный склероз (MS), мышечный ревматизм, миалгический энцефаломиелит (ME), миастению, воспаление глаз, листовидную пузырчатку, обыкновенную пузырчатку, злокачественную анемию, нодозный полиартериит, полихондрию, полигландулярные синдромы (синдром Витакера), ревматическую полимиалгию, полимиозит, первичную агаммаглобулинемию, первичный билиарный цирроз/аутоиммунную холангиопатию, псориаз, псориатический артрит, феномен Рейно, синдром Рейтера/реактивный артрит, рестеноз, ревматическую лихорадку, ревматическое заболевание, саркоидоз, синдром Шмидта, склеродермию, синдром Шегрена, синдром жесткого человека, системную красную волчанку (SLE), системную склеродермию, артерит Такаюсу, височный артериит/гигантский клеточный артериит, тиреоидит, диабет 1 типа, язвенный колит, увеит, васкулит, витили-38. The method according to any one of claims 35 to 37, wherein the disease or condition is Addison's disease, allergies, alopecia areata, Alzheimer's disease, antineutrophil cytoplasmic antibody (ANCA) associated vasculitis, ankylosing spondylitis, antiphospholipid syndrome (Hughes syndrome), asthma, atherosclerosis, rheumatoid arthritis, autoimmune hemolytic anemia, autoimmune hepatitis, autoimmune inner ear syndrome, autoimmune lymphoproliferative syndrome, autoimmune myocarditis, autoimmune oophoritis, autoimmune orchitis, azoospermia, Behçet's disease, Berger's disease, bullous pemphigoid, cardiomyopathy, cardiovascular diseases, celiac disease ju- sprue/celiac enteropathy, chronic fatigue immune dysfunction syndrome (CFIDS), chronic idiopathic polyneuritis, chronic inflammatory demyelination, polyradiculoneuropathy (CIDP), chronic relapsing polyneuropathy (Guillain-Barré syndrome), Churg-Strauss syndrome (CSS), cicatricial pemphigoid, cold weather disease agglutinins (CAD), COPD (chronic obstructive pulmonary disease), CREST syndrome, Crohn's disease, dermatitis, herpetiformis, dermatomyositis, diabetes, discoid lupus, eczema, epidermos bullosa, significant mixed cryoglobulinemia, Evan's syndrome, proptosis, fibromyalgia, Goodpasture's syndrome, Disease Graves', Hashimoto's thyroiditis, idiopathic pulmonary fibrosis, idiopathic thrombocytopenic purpura (ITP), IgA nephropathy, immunoproliferative disease or disorder, inflammatory bowel disease (IBD), interstitial lung disease, juvenile arthritis, juvenile idiopathic arthritis (JIA), Kawasaki disease, myasthenic syndrome Lambert-Eaton, lichen planus, lupus nephritis, lymphocytic lipophysitis, Meniere's disease, Miller-Fisher syndrome/acute disseminated encephalomyeloradiculopathy, mixed connective tissue disease, multiple sclerosis (MS), muscular rheumatism, myalgic encephalomyelitis (ME), myasthenia gravis, ocular inflammation , pemphigus foliaceus, pemphigus vulgaris, pernicious anemia, polyarteritis nodosa, polychondria, polyglandular syndromes (Whitaker syndrome), polymyalgia rheumatica, polymyositis, primary agammaglobulinemia, primary biliary cirrhosis/autoimmune cholangiopathy, psoriasis, psoriatic arthritis, Raynaud's phenomenon , Reiter's syndrome/reactive arthritis , restenosis, rheumatic fever, rheumatic disease, sarcoidosis, Schmidt's syndrome, scleroderma, Sjögren's syndrome, stiff man's syndrome, systemic lupus erythematosus (SLE), systemic scleroderma, Takayusu arteritis, temporal arteritis/giant cell arteritis, thyroiditis, type 1 diabetes, ulcerative colitis, uveitis, vasculitis, vitiligo - 1091 044346 го, интерстициальное заболевание кишечника или гранулематоз Вегенера.- 1091 044346, interstitial intestinal disease or Wegener's granulomatosis. 39. Способ по любому из пп.35-38, где заболевание или состояние представляют собой системную красную волчанку.39. The method according to any one of claims 35 to 38, wherein the disease or condition is systemic lupus erythematosus. 40. Способ по любому из пп.35-38, где заболевание или состояние представляют собой воспалительное заболевание кишечника (IBD), заболевание или расстройство, связанное с IBD, например интерстициальную болезнь легких (ILD), болезнь трансплантат против хозяина (GVHD), необязательно острый GVHD (aGVHD), псориатический артрит (PsA), ревматоидный артрит, аутоимунное состояние, связанное с трансплантацией органов, или синдром Шегрена.40. The method of any one of claims 35 to 38, wherein the disease or condition is inflammatory bowel disease (IBD), a disease or disorder associated with IBD, such as interstitial lung disease (ILD), graft-versus-host disease (GVHD), optionally acute GVHD (aGVHD), psoriatic arthritis (PsA), rheumatoid arthritis, organ transplant-associated autoimmune condition, or Sjögren's syndrome.
EA202090974 2017-10-18 2018-10-17 VARIANT IMMUNOMODULATING PROTEINS OF ICOS LIGAND AND RELATED COMPOSITIONS AND METHODS EA044346B1 (en)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US62/574,161 2017-10-18

Publications (1)

Publication Number Publication Date
EA044346B1 true EA044346B1 (en) 2023-08-18

Family

ID=

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US11479609B2 (en) CD80 variant immunomodulatory proteins and uses thereof
US20210188995A1 (en) Icos ligand variant immunomodulatory proteins and uses thereof
US11613566B2 (en) Variant ICOS ligand immunomodulatory proteins and related compositions and methods
JP2023058027A (en) CD80 variant immunomodulatory proteins and uses thereof
JP2023076828A (en) PD-L1 variant immunomodulatory proteins and uses thereof
WO2018022946A1 (en) Cd155 variant immunomodulatory proteins and uses thereof
JP2023060855A (en) PD-L2 variant immunomodulatory proteins and uses thereof
WO2018022945A1 (en) Cd112 variant immunomodulatory proteins and uses thereof
US20220372106A1 (en) Cd86 variant immunomodulatory proteins and uses thereof
EA044346B1 (en) VARIANT IMMUNOMODULATING PROTEINS OF ICOS LIGAND AND RELATED COMPOSITIONS AND METHODS
EA044356B1 (en) VARIANT IMMUNOMODULATING PROTEINS OF ICOS LIGAND AND THEIR APPLICATION