EA043728B1 - Аналоги инкретина и их применение - Google Patents
Аналоги инкретина и их применение Download PDFInfo
- Publication number
- EA043728B1 EA043728B1 EA202091284 EA043728B1 EA 043728 B1 EA043728 B1 EA 043728B1 EA 202091284 EA202091284 EA 202091284 EA 043728 B1 EA043728 B1 EA 043728B1
- Authority
- EA
- Eurasian Patent Office
- Prior art keywords
- incretin
- analogue according
- equal
- incretin analogue
- acid
- Prior art date
Links
- MGXWVYUBJRZYPE-YUGYIWNOSA-N incretin Chemical class C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC=1NC=NC=1)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC=1NC=NC=1)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CC=1C=CC(O)=CC=1)[C@@H](C)O)[C@@H](C)CC)C1=CC=C(O)C=C1 MGXWVYUBJRZYPE-YUGYIWNOSA-N 0.000 title claims description 93
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 47
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 39
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims description 33
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims description 23
- 208000001072 type 2 diabetes mellitus Diseases 0.000 claims description 23
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 claims description 19
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 claims description 19
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 claims description 19
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 claims description 19
- 208000008338 non-alcoholic fatty liver disease Diseases 0.000 claims description 18
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims description 16
- -1 2-[2-(2-aminoethoxy)ethoxy]acetyl) fragments Chemical group 0.000 claims description 15
- 208000008589 Obesity Diseases 0.000 claims description 15
- 206010053219 non-alcoholic steatohepatitis Diseases 0.000 claims description 15
- 235000020824 obesity Nutrition 0.000 claims description 15
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 15
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 claims description 12
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 claims description 12
- 208000032928 Dyslipidaemia Diseases 0.000 claims description 9
- 208000017170 Lipid metabolism disease Diseases 0.000 claims description 9
- 208000001145 Metabolic Syndrome Diseases 0.000 claims description 9
- 201000000690 abdominal obesity-metabolic syndrome Diseases 0.000 claims description 9
- 208000010706 fatty liver disease Diseases 0.000 claims description 9
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 claims description 7
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 5
- 125000001301 ethoxy group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])O* 0.000 claims description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 3
- 125000001433 C-terminal amino-acid group Chemical group 0.000 claims description 2
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 claims description 2
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 2
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 claims description 2
- 229940126601 medicinal product Drugs 0.000 claims 2
- 125000000218 acetic acid group Chemical group C(C)(=O)* 0.000 claims 1
- 230000008520 organization Effects 0.000 claims 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 57
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 26
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 25
- 108010004460 Gastric Inhibitory Polypeptide Proteins 0.000 description 24
- 102100039994 Gastric inhibitory polypeptide Human genes 0.000 description 24
- DTHNMHAUYICORS-KTKZVXAJSA-N Glucagon-like peptide 1 Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(N)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CC=1N=CNC=1)[C@@H](C)O)[C@@H](C)O)C(C)C)C1=CC=CC=C1 DTHNMHAUYICORS-KTKZVXAJSA-N 0.000 description 22
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 22
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 22
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 22
- 102100040918 Pro-glucagon Human genes 0.000 description 21
- 101800000224 Glucagon-like peptide 1 Proteins 0.000 description 20
- MASNOZXLGMXCHN-ZLPAWPGGSA-N glucagon Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O)C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](N)CC=1NC=NC=1)[C@@H](C)O)[C@@H](C)O)C1=CC=CC=C1 MASNOZXLGMXCHN-ZLPAWPGGSA-N 0.000 description 19
- 102000051325 Glucagon Human genes 0.000 description 17
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 17
- 229960004666 glucagon Drugs 0.000 description 17
- 108010063919 Glucagon Receptors Proteins 0.000 description 16
- 102100040890 Glucagon receptor Human genes 0.000 description 14
- 125000005647 linker group Chemical group 0.000 description 14
- 108060003199 Glucagon Proteins 0.000 description 13
- FUOOLUPWFVMBKG-UHFFFAOYSA-N 2-Aminoisobutyric acid Chemical compound CC(C)(N)C(O)=O FUOOLUPWFVMBKG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 11
- 239000013559 triple agonist Substances 0.000 description 11
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 10
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 10
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 10
- 230000003442 weekly effect Effects 0.000 description 10
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 9
- 108010086246 Glucagon-Like Peptide-1 Receptor Proteins 0.000 description 8
- 102000007446 Glucagon-Like Peptide-1 Receptor Human genes 0.000 description 8
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 8
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 8
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 8
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 101000886866 Homo sapiens Gastric inhibitory polypeptide receptor Proteins 0.000 description 7
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 7
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 7
- ARSWQPLPYROOBG-ZETCQYMHSA-N 2-methylleucine Chemical compound CC(C)C[C@](C)(N)C(O)=O ARSWQPLPYROOBG-ZETCQYMHSA-N 0.000 description 6
- 101000886868 Homo sapiens Gastric inhibitory polypeptide Proteins 0.000 description 6
- 230000009471 action Effects 0.000 description 6
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 6
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 6
- 102000050325 human granulocyte inhibitory Human genes 0.000 description 6
- 239000000859 incretin Substances 0.000 description 6
- 230000008569 process Effects 0.000 description 6
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 6
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 5
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 description 5
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 5
- 102100039997 Gastric inhibitory polypeptide receptor Human genes 0.000 description 4
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000010933 acylation Effects 0.000 description 4
- 238000005917 acylation reaction Methods 0.000 description 4
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 4
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 4
- KEMQGTRYUADPNZ-UHFFFAOYSA-N heptadecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O KEMQGTRYUADPNZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- VKOBVWXKNCXXDE-UHFFFAOYSA-N icosanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O VKOBVWXKNCXXDE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical compound N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 4
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 description 3
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 3
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 3
- 101001040075 Homo sapiens Glucagon receptor Proteins 0.000 description 3
- 101001015516 Homo sapiens Glucagon-like peptide 1 receptor Proteins 0.000 description 3
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 3
- 230000008484 agonism Effects 0.000 description 3
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 3
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 3
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 3
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 3
- 239000005018 casein Substances 0.000 description 3
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 description 3
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 3
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 3
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 3
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 3
- 238000010494 dissociation reaction Methods 0.000 description 3
- 230000005593 dissociations Effects 0.000 description 3
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 3
- 230000005714 functional activity Effects 0.000 description 3
- 201000001421 hyperglycemia Diseases 0.000 description 3
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 3
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 3
- 230000003914 insulin secretion Effects 0.000 description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 3
- 239000002287 radioligand Substances 0.000 description 3
- 230000004044 response Effects 0.000 description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 3
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 3
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 3
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000004580 weight loss Effects 0.000 description 3
- 125000003088 (fluoren-9-ylmethoxy)carbonyl group Chemical group 0.000 description 2
- 208000024827 Alzheimer disease Diseases 0.000 description 2
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 2
- 108010011459 Exenatide Proteins 0.000 description 2
- 229940089838 Glucagon-like peptide 1 receptor agonist Drugs 0.000 description 2
- 101500028775 Homo sapiens Glucagon Proteins 0.000 description 2
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 description 2
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 description 2
- JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N N,N-Diisopropylethylamine (DIPEA) Chemical compound CCN(C(C)C)C(C)C JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102400000319 Oxyntomodulin Human genes 0.000 description 2
- 101800001388 Oxyntomodulin Proteins 0.000 description 2
- 208000018737 Parkinson disease Diseases 0.000 description 2
- NQRYJNQNLNOLGT-UHFFFAOYSA-N Piperidine Chemical compound C1CCNCC1 NQRYJNQNLNOLGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000021355 Stearic acid Nutrition 0.000 description 2
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 2
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 2
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 2
- 238000013262 cAMP assay Methods 0.000 description 2
- 239000008004 cell lysis buffer Substances 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 2
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N ethylene glycol Natural products OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960001519 exenatide Drugs 0.000 description 2
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 2
- 102000056448 human GLP1R Human genes 0.000 description 2
- WGCNASOHLSPBMP-UHFFFAOYSA-N hydroxyacetaldehyde Natural products OCC=O WGCNASOHLSPBMP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 2
- 230000001976 improved effect Effects 0.000 description 2
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 2
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 description 2
- 239000000543 intermediate Substances 0.000 description 2
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 2
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 2
- 125000003588 lysine group Chemical group [H]N([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 238000002483 medication Methods 0.000 description 2
- PXZWGQLGAKCNKD-DPNMSELWSA-N molport-023-276-326 Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O)[C@@H](C)O)C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](N)CC=1NC=NC=1)[C@@H](C)O)[C@@H](C)O)C1=CC=CC=C1 PXZWGQLGAKCNKD-DPNMSELWSA-N 0.000 description 2
- 150000002763 monocarboxylic acids Chemical class 0.000 description 2
- QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OQCDKBAXFALNLD-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Natural products CCCCCCCC(C)CCCCCCCCC(O)=O OQCDKBAXFALNLD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 2
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 description 2
- 238000004007 reversed phase HPLC Methods 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 2
- 239000008117 stearic acid Substances 0.000 description 2
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 2
- 125000000999 tert-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 2
- 125000003396 thiol group Chemical group [H]S* 0.000 description 2
- YPTNAIDIXCOZAJ-LHEWISCISA-N (2s)-2-(9h-fluoren-9-ylmethoxycarbonylamino)-6-[[(4-methylphenyl)-diphenylmethyl]amino]hexanoic acid Chemical compound C1=CC(C)=CC=C1C(C=1C=CC=CC=1)(C=1C=CC=CC=1)NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)OCC1C2=CC=CC=C2C2=CC=CC=C21 YPTNAIDIXCOZAJ-LHEWISCISA-N 0.000 description 1
- ZEQLLMOXFVKKCN-AWEZNQCLSA-N (2s)-2-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonylamino]-3-[4-[(2-methylpropan-2-yl)oxy]phenyl]propanoic acid Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(OC(C)(C)C)C=C1 ZEQLLMOXFVKKCN-AWEZNQCLSA-N 0.000 description 1
- GOPWHXPXSPIIQZ-FQEVSTJZSA-N (4s)-4-(9h-fluoren-9-ylmethoxycarbonylamino)-5-[(2-methylpropan-2-yl)oxy]-5-oxopentanoic acid Chemical compound C1=CC=C2C(COC(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)OC(C)(C)C)C3=CC=CC=C3C2=C1 GOPWHXPXSPIIQZ-FQEVSTJZSA-N 0.000 description 1
- BYEAHWXPCBROCE-UHFFFAOYSA-N 1,1,1,3,3,3-hexafluoropropan-2-ol Chemical compound FC(F)(F)C(O)C(F)(F)F BYEAHWXPCBROCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BDNKZNFMNDZQMI-UHFFFAOYSA-N 1,3-diisopropylcarbodiimide Chemical compound CC(C)N=C=NC(C)C BDNKZNFMNDZQMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XQPYRJIMPDBGRW-UHFFFAOYSA-N 2-[2-[2-(9h-fluoren-9-ylmethoxycarbonylamino)ethoxy]ethoxy]acetic acid Chemical compound C1=CC=C2C(COC(=O)NCCOCCOCC(=O)O)C3=CC=CC=C3C2=C1 XQPYRJIMPDBGRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000002237 B-cell of pancreatic islet Anatomy 0.000 description 1
- 108010001478 Bacitracin Proteins 0.000 description 1
- 208000010392 Bone Fractures Diseases 0.000 description 1
- 208000006386 Bone Resorption Diseases 0.000 description 1
- 208000020084 Bone disease Diseases 0.000 description 1
- ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N Chlorine atom Chemical compound [Cl] ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 1
- JJOJFIHJIRWASH-UHFFFAOYSA-N Eicosanedioic acid Natural products OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O JJOJFIHJIRWASH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HTQBXNHDCUEHJF-XWLPCZSASA-N Exenatide Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)NCC(=O)NCC(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CO)C(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCSC)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CC=1NC=NC=1)[C@@H](C)O)[C@@H](C)O)C(C)C)C1=CC=CC=C1 HTQBXNHDCUEHJF-XWLPCZSASA-N 0.000 description 1
- 108091008885 GPCRs class E Proteins 0.000 description 1
- 229920002527 Glycogen Polymers 0.000 description 1
- 101000676246 Homo sapiens 60S ribosomal protein L29 Proteins 0.000 description 1
- 101001021500 Homo sapiens Hedgehog-interacting protein Proteins 0.000 description 1
- 101000877314 Homo sapiens Histone-lysine N-methyltransferase EHMT1 Proteins 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 206010022489 Insulin Resistance Diseases 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YSDQQAXHVYUZIW-QCIJIYAXSA-N Liraglutide Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCCNC(=O)CC[C@H](NC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC)C(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CC=1NC=NC=1)[C@@H](C)O)[C@@H](C)O)C(C)C)C1=CC=C(O)C=C1 YSDQQAXHVYUZIW-QCIJIYAXSA-N 0.000 description 1
- 108010019598 Liraglutide Proteins 0.000 description 1
- OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N Malonic acid Chemical compound OC(=O)CC(O)=O OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 206010033307 Overweight Diseases 0.000 description 1
- 102000006437 Proprotein Convertases Human genes 0.000 description 1
- 108010044159 Proprotein Convertases Proteins 0.000 description 1
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-M Trifluoroacetate Chemical compound [O-]C(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 206010047700 Vomiting Diseases 0.000 description 1
- 239000005862 Whey Substances 0.000 description 1
- 102000007544 Whey Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010046377 Whey Proteins Proteins 0.000 description 1
- 159000000021 acetate salts Chemical class 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 239000000556 agonist Substances 0.000 description 1
- 125000003342 alkenyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000000304 alkynyl group Chemical group 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 239000012131 assay buffer Substances 0.000 description 1
- 238000003149 assay kit Methods 0.000 description 1
- 125000000852 azido group Chemical group *N=[N+]=[N-] 0.000 description 1
- 229960003071 bacitracin Drugs 0.000 description 1
- 229930184125 bacitracin Natural products 0.000 description 1
- CLKOFPXJLQSYAH-ABRJDSQDSA-N bacitracin A Chemical compound C1SC([C@@H](N)[C@@H](C)CC)=N[C@@H]1C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]1C(=O)N[C@H](CCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@@H](CC=2N=CNC=2)C(=O)N[C@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)NCCCC1 CLKOFPXJLQSYAH-ABRJDSQDSA-N 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 239000002981 blocking agent Substances 0.000 description 1
- 230000024279 bone resorption Effects 0.000 description 1
- 230000037118 bone strength Effects 0.000 description 1
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 1
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 1
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 1
- CREMABGTGYGIQB-UHFFFAOYSA-N carbon carbon Chemical compound C.C CREMABGTGYGIQB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000011203 carbon fibre reinforced carbon Substances 0.000 description 1
- 150000001732 carboxylic acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- JUFFVKRROAPVBI-PVOYSMBESA-N chembl1210015 Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(=O)N[C@H]1[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO[C@]3(O[C@@H](C[C@H](O)[C@H](O)CO)[C@H](NC(C)=O)[C@@H](O)C3)C(O)=O)O2)O)[C@@H](CO)O1)NC(C)=O)C(=O)NCC(=O)NCC(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CO)C(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCSC)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CC=1NC=NC=1)[C@@H](C)O)[C@@H](C)O)C(C)C)C1=CC=CC=C1 JUFFVKRROAPVBI-PVOYSMBESA-N 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 229910052801 chlorine Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000000460 chlorine Substances 0.000 description 1
- 230000002860 competitive effect Effects 0.000 description 1
- 238000003271 compound fluorescence assay Methods 0.000 description 1
- 239000004053 dental implant Substances 0.000 description 1
- 150000001991 dicarboxylic acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 1
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 1
- BGRWYRAHAFMIBJ-UHFFFAOYSA-N diisopropylcarbodiimide Natural products CC(C)NC(=O)NC(C)C BGRWYRAHAFMIBJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 238000006073 displacement reaction Methods 0.000 description 1
- AGDANEVFLMAYGL-UHFFFAOYSA-N docosanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O AGDANEVFLMAYGL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960005175 dulaglutide Drugs 0.000 description 1
- 108010005794 dulaglutide Proteins 0.000 description 1
- 230000002526 effect on cardiovascular system Effects 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- 230000005284 excitation Effects 0.000 description 1
- 238000013213 extrapolation Methods 0.000 description 1
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 1
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 1
- 125000005519 fluorenylmethyloxycarbonyl group Chemical group 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 1
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 1
- 108010036598 gastric inhibitory polypeptide receptor Proteins 0.000 description 1
- 230000014101 glucose homeostasis Effects 0.000 description 1
- 230000010030 glucose lowering effect Effects 0.000 description 1
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 1
- 230000002641 glycemic effect Effects 0.000 description 1
- 229940096919 glycogen Drugs 0.000 description 1
- 230000004116 glycogenolysis Effects 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 210000003494 hepatocyte Anatomy 0.000 description 1
- KYYWBEYKBLQSFW-UHFFFAOYSA-N hexadecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O.CCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O KYYWBEYKBLQSFW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002868 homogeneous time resolved fluorescence Methods 0.000 description 1
- 102000046159 human RPL29 Human genes 0.000 description 1
- LYOAURRGAXEXGO-GWSMSICGSA-N icosanoic acid;(5z,8z,11z,14z)-icosa-5,8,11,14-tetraenoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O.CCCCC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCC(O)=O LYOAURRGAXEXGO-GWSMSICGSA-N 0.000 description 1
- 238000000099 in vitro assay Methods 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 1
- PNDPGZBMCMUPRI-UHFFFAOYSA-N iodine Chemical compound II PNDPGZBMCMUPRI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 238000004895 liquid chromatography mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 229960002701 liraglutide Drugs 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 208000030159 metabolic disease Diseases 0.000 description 1
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 1
- 150000007522 mineralic acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000010807 negative regulation of binding Effects 0.000 description 1
- QVJXYCFQBBHRJN-UHFFFAOYSA-N nonadecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O QVJXYCFQBBHRJN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940126701 oral medication Drugs 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 1
- 230000000399 orthopedic effect Effects 0.000 description 1
- 230000011164 ossification Effects 0.000 description 1
- 230000001151 other effect Effects 0.000 description 1
- 150000002923 oximes Chemical class 0.000 description 1
- 238000011176 pooling Methods 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- GCYXWQUSHADNBF-AAEALURTSA-N preproglucagon 78-108 Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CC=1N=CNC=1)[C@@H](C)O)[C@@H](C)O)C(C)C)C1=CC=CC=C1 GCYXWQUSHADNBF-AAEALURTSA-N 0.000 description 1
- 150000003141 primary amines Chemical class 0.000 description 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 1
- 235000004252 protein component Nutrition 0.000 description 1
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 238000000611 regression analysis Methods 0.000 description 1
- 150000003335 secondary amines Chemical class 0.000 description 1
- 238000004088 simulation Methods 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 238000012289 standard assay Methods 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 230000002194 synthesizing effect Effects 0.000 description 1
- 230000002123 temporal effect Effects 0.000 description 1
- 238000010998 test method Methods 0.000 description 1
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 1
- ZGYICYBLPGRURT-UHFFFAOYSA-N tri(propan-2-yl)silicon Chemical compound CC(C)[Si](C(C)C)C(C)C ZGYICYBLPGRURT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000001493 tyrosinyl group Chemical group [H]OC1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 1
- 239000013585 weight reducing agent Substances 0.000 description 1
Description
Изобретение относится к аналогам инкретина, имеющим активность в отношении каждого из рецепторов глюкозозависимого инсулинотропного полипептида (ГИП), глюкагоноподобного пептида-1 (ГПП-1) и глюкагона. Аналоги инкретина, описанные в данном изобретении, могут иметь структурные особенности, которые обеспечивают сбалансированную активность и могут иметь увеличенную продолжительность действия в отношении каждого из этих рецепторов. Такие аналоги инкретина могут быть полезны для лечения расстройств, таких как сахарный диабет 2 типа (СД2), дислипидемия, метаболический синдром, неалкогольная жировая болезнь печени (НАЖБП), неалкогольный стеатогепатит (НАСГ) и/или ожирение.
В последние несколько десятилетий распространенность диабета продолжает расти. Сахарный диабет 2 типа (СД2) является наиболее распространенной формой диабета, составляющей примерно 90% всех случаев диабета. СД2 характеризуется высоким уровнем глюкозы в крови, вызванным резистентностью к инсулину. Современный стандарт лечения СД2 включает диету и физические упражнения, а также лечение пероральными препаратами и инъекционными препаратами, снижающими уровень глюкозы, включая терапию на основе инкретина, такую как агонисты рецептора ГПП-1.
ГПП-1 представляет собой пептид из 36 аминокислот, основной биологически активный фрагмент которого продуцируется в виде С-концевого амидированного пептида из 30 аминокислот (ГПП-17.36; SEQ ID NO: 2), который стимулирует глюкозозависимую секрецию инсулина и предотвращает гипергликемию у диабетиков. В настоящее время доступны различные аналоги ГПП-1 для лечения СД2, включая дулаглутид, экзенатид и лираглутид. Однако дозировка многих продаваемых в настоящее время агонистов рецептора ГПП-1 ограничена побочными эффектами со стороны желудочно-кишечного тракта, такими как тошнота и рвота. Если лечение пероральными препаратами и терапией на основе инкретина является недостаточным, рассматривается лечение инсулином. Несмотря на доступные варианты лечения, значительное количество людей, получающих одобренную терапию, не достигают целей гликемического контроля (см., например, Casagrande et al. (2013) Diabetes Care 36:2271-2279).
Неконтролируемый диабет может привести к одному или более нарушениям, которые влияют на заболеваемость и смертность таких людей. Одним из основных факторов риска развития СД2 является ожирение, и большинство людей с СД2 (~90%) имеют избыточный вес или ожирение. Задокументировано, что уменьшение ожирения тела приведет к улучшению связанных с ожирением сопутствующих заболеваний, включая гипергликемию и осложнения со стороны сердечно-сосудистой системы. Таким образом, для лучшего управления ходом заболевания необходима терапия, эффективная в контролировании глюкозы и уменьшении веса.
Ввиду этого новые изучаемые методы лечения включают соединения, обладающие не только активностью в отношении рецептора ГПП-1, но также активностью в отношении одного или более других рецепторов, таких как рецепторы ГИП и/или глюкагона. В самом деле, определенные соединения были описаны как имеющие тройную агонистическую активность (т.е. активность в отношении каждого из рецепторов глюкагона, ГПП-1 и ГИП). Например, в публикации международной заявки на патент № WO 2015/067716 описаны аналоги глюкагона, имеющие тройную агонистическую активность. Аналогично, в международной заявке на патент № WO 2016/198624 описаны аналоги эксендина-4, который сам является аналогом ГПП-1 и обладает тройной агонистической активностью. Аналогично, каждая международная заявка на патент № WO 2014/049610 и WO 2017/116204 описывает различные аналоги, обладающие тройной агонистической активностью. Кроме того, в международной заявке на патент № WO 2017/153375 описаны коагонисты глюкагона и ГПП-1, которые также обладают активностью в отношении ГИП.
Тем не менее остается потребность в лечении, особенно СД2, которое способно обеспечить эффективный контроль глюкозы с преимуществами потери веса и благоприятным профилем побочных эффектов. Также существует потребность в доступных для применения терапевтических агентах с достаточно увеличенной продолжительностью действия, чтобы обеспечить введения доз так редко, как один раз в день, трижды в неделю, два раза в неделю или один раз в неделю.
Аналоги инкретина, описанные в данном изобретении, ориентированы на удовлетворение потребностей, указанных выше. Соответственно, это раскрытие описывает аналоги инкретина с активностью в отношении каждого из рецепторов
ГИП, ГПП-1 и глюкагона. Преимущественно, описанные в данном изобретении аналоги инкретина обладают сбалансированной активностью, позволяющей вводить дозы, которые обеспечивают достаточную активность в отношении каждого рецептора, чтобы обеспечить преимущества агонизма этого рецептора, избегая при этом нежелательных побочных эффектов, связанных со слишком большой активностью. Кроме того, описанные в данном изобретении аналоги инкретина имеют увеличенную продолжительность действия в отношении каждого из рецепторов ГИП, ГПП-1 и глюкагона, что позволяет дозировать их так редко, как один раз в день, трижды в неделю, два раза в неделю или один раз в неделю. Таким образом, аналоги инкретина приводят к улучшенному контролю глюкозы, метаболическим эффектам, таким как снижение массы тела и/или улучшение состава тела, липидным эффектам, таким как снижение пропротеиновой конвертазы субтилизин-кексинового типа 9 (PCSK9), и/или другим преимуществам, таким как увеличение костной массы или образование костной ткани, или уменьшение резорб- 1 043728 ции кости. В данном раскрытии также описаны эффективные способы лечения других расстройств или нарушений, включая ожирение, НАЖБП, НАСГ, дислипидемию и/или нарушение обмена веществ.
В одном варианте реализации изобретения предложен аналог инкретина, который имеет формулу:
YX2X3GTX6TSDYSIX13LDKX17AQX20AFIEYLLEGGPSSGAPPPS, где Х2 представляет собой Aib, Х3 представляет собой Q или Н, Х6 представляет собой aMeF или aMeF(2F), X13 представляет собой L или aMeL, Х17 представляет собой любую аминокислоту с функциональной группой, доступной для конъюгации, причем функциональная группа конъюгирована с C16C22-жuрной кислотой, Х20 представляет собой Aib, Q или Н (SEQ ID NO: 5), и С-концевая аминокислота необязательно амидирована; или его фармацевтически приемлемая соль.
В другом варианте реализации изобретения предложен способ лечения заболевания, такого как дислипидемия, жировая болезнь печени, метаболический синдром, НАСГ, ожирение и СД2. Такие способы могут включать по меньшей мере этап введения индивидууму, нуждающемуся в этом, эффективного количества аналога инкретина, описанного в данном изобретении. В некоторых случаях заболевание представляет собой жировую болезнь печени, ожирение, НАСГ или СД2.
В другом варианте реализации изобретения аналог инкретина, описанный в данном изобретении, предназначен для использования в терапии. Например, аналог инкретина, описанный в данном изобретении, предназначен для использования при лечении заболевания, такого как дислипидемия, жировая болезнь печени, метаболический синдром, НАСГ, ожирение и СД2. В некоторых случаях заболевание представляет собой жировую болезнь печени, ожирение, НАСГ или СД2.
В другом варианте реализации изобретения аналог инкретина, описанный в данном изобретении, предназначен для использования в производстве лекарственного средства для лечения дислипидемии, жировой болезни печени, метаболического синдрома, НАСГ, ожирения и СД2. В некоторых случаях заболевание представляет собой жировую болезнь печени, ожирение, НАСГ или СД2.
В другом варианте реализации изобретения предложена фармацевтическая композиция, которая содержит аналог инкретина, описанный в данном изобретении, и фармацевтически приемлемый носитель, разбавитель или наполнитель.
Если не указано иное, все технические и научные термины, используемые в данном изобретении, имеют то же значение, которое обычно понимается специалистом в данной области техники, к которой относится данное раскрытие. Хотя любые способы и материалы, аналогичные или эквивалентные описанным в данном изобретении, могут быть использованы в практической реализации или испытании аналогов инкретина, фармацевтических композиций и способов, ниже описаны предпочтительные способы и материалы.
Более того, ссылка на элемент с помощью единственного числа не исключает возможности присутствия более одного элемента, если только контекст явно не требует наличия одного и только одного элемента. Единственное число, как правило, означает по меньшей мере один.
ГИП представляет собой пептид из 42 аминокислот (SEQ ID NO: 4) и представляет собой инкретин, который играет физиологическую роль в гомеостазе глюкозы путем стимуляции секреции инсулина бета-клетками поджелудочной железы в присутствии глюкозы.
ГПП-1 представляет собой пептид из 36 аминокислот (SEQ ID NO: 2) и также является инкретином, который стимулирует глюкозозависимую секрецию инсулина и который, как было показано, предотвращает гипергликемию у диабетиков.
Глюкагон представляет собой пептид из 29 аминокислот (SEQ ID NO: 1), который помогает поддерживать уровень глюкозы в крови путем связывания и активации рецепторов глюкагона на гепатоцитах, заставляя печень высвобождать глюкозу, хранящуюся в форме гликогена, посредством процесса, называемого гликогенолизом.
Оксинтомодулин (ОКСМ) представляет собой пептид из 37 аминокислот, включающий не только последовательность из 29 аминокислот глюкагона, но также удлинение карбоксиконцевого октапептида (SEQ ID NO: 3), которое активирует рецепторы как глюкагона, так и ГПП-1, с незначительно более высокой активностью в отношении рецептора глюкагона по сравнению с рецептором ГЛП-1.
В дополнение к СД2 инкретины и их аналоги, обладающие активностью в отношении одного или более рецепторов ГИП, ГПП-1 и/или глюкагона, были описаны как обладающие потенциальным терапевтическим значением при ряде других нарушений, заболеваний или расстройств, включая, например, ожирение, НАЖБП и НАСГ, дислипидемию, метаболический синдром, костные расстройства, болезнь Альцгеймера и болезнь Паркинсона. См., например, Jall et al. (2017) Mol. Metab. 6:440-446; Carbone et al. (2016) J. Gastroenterol. Hepatol. 31:23-31; Finan et al. (2016) Trends Mol. Med. 22:359-376; Choi et al. (2017) Potent body weight loss and efficacy in a NASH animal model by a novel long-acting GLP-1/Glucagon/GIP triple-agonist (HM15211), ADA Poster 1139-P; Ding (2008) J. Bone Miner. Res. 23:536-543; Tai et al. (2018) Brain Res. 1678:64-74; Muller et al. (2017) Physiol. Rev. 97:721-766; Finan et al. (2013) Sci. Transl. Med. 5:209; Holscher (2014) Biochem. Soc. Trans. 42:593-600.
Используемый в данном изобретении термин около означает находящийся в пределах статистически значимого диапазона значения или значений, таких как, например, заявленная концентрация, длина,
- 2 043728 молекулярная масса, рН, идентичность последовательности, временные рамки, температура или объем.
Такое значение или диапазон может находиться в пределах порядка, как правило, в пределах 20%, более типично в пределах 10% и даже более типично в пределах 5% от данного значения или диапазона. Допустимое отклонение, охватываемое около, будет зависеть от конкретной исследуемой системы и может быть легко оценено специалистом в данной области.
Используемый в данном изобретении и в отношении одного или более рецепторов ГИП, ГПП-1 или глюкагона термин активность, активировать, активирование и тому подобное означает способность соединений, таких как описанные в данном изобретении аналоги инкретина, связываться и вызывать ответ у рецептора(ов), измеренный с использованием анализов, известных в данной области техники, таких как анализы in vitro, описанные ниже.
Используемый в данном изобретении термин аминокислота с функциональной группой, доступной для конъюгации означает любую природную или синтетическую аминокислоту с функциональной группой, которая может быть конъюгирована с жирной кислотой, например, с помощью линкера. Примеры таких функциональных групп включают, но не ограничиваются ими, алкинильные, алкенильные, амино, азидо, бром, карбоксильные, хлор, йод, и тиоловые группы. Примеры природных аминокислот, содержащих такие функциональные группы, включают K (амино), C (тиол), E (карбоксил) и D (карбоксил).
Используемый в данном изобретении термин C16-C22-жирная кислота означает карбоновую кислоту, имеющую от 16 до 22 атомов углерода. Подходящая для применения в данном изобретении C16C22-жирнαя кислота может представлять собой насыщенную монокарбоновую кислоту или насыщенную дикарбоновую кислоту. Используемый в данном изобретении термин насыщенный означает, что жирная кислота не содержит углерод-углеродных двойных или тройных связей.
Используемый в данном изобретении термин эффективное количество означает количество, концентрацию или дозу одного или более аналогов инкретина, описанных в данном изобретении, или их фармацевтически приемлемых солей; введение одной или нескольких доз индивидууму, нуждающемуся в этом, обеспечивает целевой эффект у такого индивидуума с диагнозом или лечением. Эффективное количество может быть без труда установлено специалистом в данной области техники с помощью известных технологий и наблюдения результатов, полученных при аналогичных обстоятельствах. При определении эффективного количества для индивидуума, рассматривается множество факторов, включая, но не ограничиваясь ими: особь пациента; его размер, возраст и общее состояние здоровья; конкретное вовлеченное заболевание или расстройство; степень, вовлеченность или тяжесть заболевания или расстройства; реакция отдельного индивидуума; конкретный вводимый аналог инкретина; способ введения; характеристики биодоступности вводимого препарата; выбранная схема введения; применение сопутствующих лекарственных препаратов; и другие имеющие значение обстоятельства.
Используемый в данном изобретении термин увеличенная продолжительность действия означает, что способность и активность связывания для аналога инкретина сохраняется в течение периода времени, превышающего врожденные человеческие пептиды ГИП, ГПП-1 и глюкагона, что позволяет вводить дозу по меньшей мере так редко, как один раз в день или даже трижды в неделю, дважды в неделю или раз в неделю. Профиль временного действия аналога инкретина может быть измерен с помощью известных методов фармакокинетических испытаний, таких как те, которые используются в приведенных ниже примерах.
Используемый в данном изобретении термин аналог инкретина означает соединение, имеющее структурное сходство с, но несколько отличий от каждого из ГИП, ГПП-1 и глюкагона, особенно человеческого ГИП (SEQ ID NO: 4), ГПП-1 (SEQ ID NO: 2) и глюкагона (SEQ ID NO: 1). Описанные в данном изобретении аналоги инкретина включают аминокислотные последовательности, приводящие к соединениям, обладающим способностью и активностью в отношении каждого из рецепторов ГИП, ГПП-1 и глюкагона (т.е. тройной агонистической активностью).
Используемый в данном изобретении термин индивидуум, нуждающийся в этом означает млекопитающее, такое как человек, с нарушением, заболеванием, расстройством или симптомом, требующим лечения или терапии, включая, например, перечисленные в данном изобретении.
Используемый в данном изобретении термин лечение, лечить и тому подобное означает сдерживание, замедление, остановку или изменение прогрессирования или тяжести существующего нарушения, заболевания, расстройства или симптома.
Используемый в данном описании со ссылкой на аналог инкретина термин тройная агонистическая активность означает аналог инкретина с активностью в отношении каждого из рецепторов ГИП, ГПП-1 и глюкагона, особенно аналог, имеющий сбалансированную и достаточную активность в отношении каждого рецептора, чтобы обеспечить преимущества агонизма этого рецептора, избегая при этом нежелательных побочных эффектов, связанных со слишком большой активностью. Кроме того, аналоги инкретина, обладающие тройной агонистической активностью, имеют увеличенную продолжительность действия в отношении каждого из рецепторов ГИП, ГПП-1 и глюкагона, что успешно позволяет вводить дозу так редко, как раз в день, трижды в неделю, дважды в неделю или один раз в неделю.
Используемый в данном изобретении термин лечение или лечить означает сдерживание, замед- 3 043728 ление, остановку или изменение прогрессирования или тяжести существующего нарушения, заболевания, расстройства или симптома.
Используемый в данном описании со ссылкой на аналог инкретина термин тройная агонистическая активность означает аналог инкретина с активностью в отношении каждого из рецепторов ГИП, ГПП-1 и глюкагона, особенно аналог, имеющий сбалансированную и достаточную активность в отношении каждого рецептора, чтобы обеспечить преимущества агонизма этого рецептора, избегая при этом нежелательных побочных эффектов, связанных со слишком большой активностью. Кроме того, аналоги инкретина, обладающие тройной агонистической активностью, имеют увеличенную продолжительность действия в отношении каждого из рецепторов глюкагона, ГИП и ГПП-1, что успешно позволяет вводить дозу так редко, как раз в день, трижды в неделю, дважды в неделю или один раз в неделю.
Структурные особенности аналогов инкретина, описанные в данном изобретении, дают аналоги, имеющие достаточную активность в отношении каждого из рецепторов ГИП, ГПП-1 и глюкагона, чтобы получить благоприятное влияние активности в отношении каждого рецептора (т.е. тройную агонистическую активность), но не такую большую активность в отношении любого одного рецептора, чтобы либо подавить активность в отношении любого из двух рецепторов, либо привести к нежелательным побочным эффектам при введении в дозе, достаточной для того, чтобы привести к активности в отношении всех трех рецепторах. Неограничивающие примеры таких структурных особенностей в определенных вариантах реализации изобретения со ссылкой на SEQ ID NO: 5 включают aMeF или aMeF(2F) в положении 6, который, как было обнаружено, способствует оптимальной активности глюкагона, L или aMeL в положении 13, который, как было обнаружено, способствует оптимальной активности глюкагона и ГИП; Aib в положении 20, который, как было установлено, способствует оптимальной активности ГИП; ацилирование в положении 17, которое, как было установлено, способствует оптимальной активности глюкагона; и Y в положении 25, которое, как было установлено, способствует оптимальной активности глюкагона и/или ГИП. Другие примеры таких структурных особенностей включают аминокислоты, описанные в данном изобретении, в позициях 22, 24 и 28-39, которые, как было обнаружено, способствуют оптимальному связыванию и активности в отношении всех трех рецепторов.
Структурные особенности аналогов инкретина, описанных в данном изобретении, также дают аналоги, имеющие многие другие полезные свойства, относящиеся к их способности иметь терапевтические воздействия, в том числе повышение растворимости аналогов в водных растворах, улучшение химической и физической стабильности препарата, расширение фармакокинетического профиля и минимизация потенциала в отношении иммуногенности. Неограничивающие примеры конкретных структурных особенностей, которые приводят к таким свойствам, включают ацилирование в положении 17 С20-жирной кислотой, которое способствует оптимальному фармакокинетическому (PK) профилю и способности к доработке; Aib или Н в положении 20, что способствует оптимальному профилю PK и способности к доработке; и аминокислоты, описанные в данном изобретении, в положениях 22, 24 и 28-39, которые способствуют оптимальному PK, иммуногенности, способности к доработке и стабильности.
Следует отметить, что вышеприведенные перечни структурных особенностей являются примерными, а не исчерпывающими, и что комбинация полезных характеристик примерных аналогов, описанных в данном изобретении, не является результатом какой-либо модификации в отдельности, а вместо этого достигается с помощью новых комбинаций структурных особенностей, описанных в данном изобретении. Кроме того, вышеописанные эффекты вышеприведенных перечней модификаций не являются уникальными, так как многие из этих модификаций также имеют другие эффекты, важные для характеристик описанных в данном изобретении соединений, как это описано ниже.
Аминокислотные последовательности аналогов инкретина, описанных в данном изобретении, включают встречающиеся в природе аминокислоты, как правило, изображаемые в данном изобретении с использованием стандартных однобуквенных кодов (например, L = лейцин), а также альфаметилзамещенные остатки природных аминокислот (например, a-метил-лейцин (aMeL), a-метил-лизин (aMeK), a-метил-фенилаланин (aMeF) и а-метил-2-фторфенилаланин (aMeF(2F)) и некоторые другие синтетические аминокислоты, такие как альфа-аминоизомасляная кислота (Aib). Структуры этих аминокислот изображены ниже:
Как было отмечено выше, аналоги инкретина, описанные в данном изобретении, имеют структурное сходство, но также многие структурные отличия от любого из природных пептидов человека. Например, при сравнении с врожденным человеческим ГИП (SEQ ID NO: 4) аналоги инкретина, описанные
- 4 043728 в данном изобретении, включают модификации в одном или нескольких положениях 2, 3, 6, 7, 13, 14, 17, 18-21, 23-25, 28-29 и 30-42. В некоторых случаях описанные в данном изобретении аналоги инкретина включают модификации аминокислот врожденного человеческого ГИП (SEQ ID NO: 4) в каждом из положений 2, 3, 6, 7, 13, 14, 17, 18, 21, 23-25, 29 и 30-42. В определенных случаях, аналоги инкретина, описанные в данном изобретении, включают следующие аминокислотные модификации: Aib в положении 2; Q или Н в положении 3; aMeF или aMeF(2F) в положении 6; Т в положении 7; L или aMeL в положении 13; L в положении 14; модифицированный остаток K в положении 17, который модифицирован путем конъюгирования с эпсилон-аминогруппой боковой K-цепи с C16-C22-жирной кислотой, необязательно, с помощью линкера; А в положении 18; Q в положении 19; Aib, Q или Н в положении 20; А в положении 21; I в положении 23; Е в положении 24; Y в положении 25; Е в положении 28; G в положении 29; и замену аминокислот в положениях 30-42 следующей аминокислотной последовательностью: GPSSGAPPPS (SEQ ID NO: 12) (и укороченные аналоги хвоста). В других случаях, аналоги инкретина, описанные в данном изобретении, являются амидированными. В дополнение к описанным в данном изобретении модификациям аналоги инкретина, описанные в данном изобретении, могут включать одну или более дополнительных модификаций аминокислот, однако, при условии, что аналоги остаются способными связываться и активировать каждый из рецепторов ГИП, ГПП-1 и глюкагона.
Как было отмечено выше, аналоги инкретина, описанные в данном изобретении, включают фрагмент молекулы жирной кислоты, конъюгированный, например, посредством линкера с природной или синтетической аминокислотой с функциональной группой, доступной для конъюгации. Такая конъюгация иногда именуется ацилированием. В определенных случаях, аминокислота с функциональной группой, доступной для конъюгации, может представлять собой K, C, E и D. В особых случаях, аминокислота с функциональной группой, доступной для конъюгации, представляет собой K, причем конъюгация происходит с эпсилон-аминогруппой боковой K-цепи.
Ацилирование аналогов инкретина, описанных в данном изобретении, происходит в положении 17 в SEQ ID NO: 5, которое, как было определено, является оптимальным местом для присоединения этой структуры. Жирная кислота и, в некоторых вариантах реализации изобретения, линкер действуют как связующее для альбумина и обеспечивают потенциал для образования соединений длительного действия.
В описанных в данном изобретении аналогах инкретина используется C16-C22-жирная кислота, химически конъюгированная с функциональной группой аминокислоты либо прямым соединением, либо линкером. Длина и состав жирных кислот влияет на период полувыведения аналогов инкретина, их активность в моделях на животных in vivo, а также их растворимость и стабильность. Конъюгирование с насыщенной жирной монокарбоновой или дикарбоновой С16-С22-кислотой приводит к получению аналогов инкретина, которые демонстрируют целевой период полувыведения, целевую активность в моделях на животных in vivo и целевые характеристики растворимости и стабильности.
Примеры насыщенных жирных С16-С22-кислот для применения по данному документу включают, но не ограничиваются ими, пальмитиновую кислоту (гексадекановую кислоту) (монокарбоновую C16кислоту), гексадекандионовую кислоту (дикарбонвую С16-кислоту), маргариновую кислоту (гептадекановую кислоту) (монокарбоновую С17-кислоту), гептадекандионовую кислоту (дикарбоновую C17кислоту), стеариновую кислоту (монокарбоновую С18-кислоту), октадекандионовую кислоту (дикарбоновую С18-кислоту), нонадециловую кислоту (нонадекановую кислоту) (монокарбоновую С19-кислоту), нонадекандионовую кислоту (дикарбоновую С19-кислоту), арахидоновую кислоту (эйкозановую кислоту) (монокарбоновую С20-кислоту), эйкозандиовую кислоту (дикарбоновую С20-кислоту), геникозиловую кислоту (генэйкозановую кислоту) (монокарбоновую С21-кислоту), геникозадионовую кислоту (дикарбоновую С21-кислоту), бегеновую кислоту (докозановую кислоту) (монокарбоновую С22-кислоту), докозадионовую кислоту (дикарбоновую С22-кислоту), включая их разветвленные и замещенные производные.
В определенных случаях, жирная C16-C22-кислота может представлять собой насыщенную C18монокарбоновую кислоту, насыщенную С18-дикарбоновую кислоту, насыщенную С19-монокарбоновую кислоту, насыщенную С19-дикарбоновую кислоту, насыщенную С20-монокарбоновую кислоту, насыщенную С20-дикарбоновую кислоты, и их разветвленные и замещенные производные. В более конкретных случаях, жирная C16-C22-кислота может представлять собой стеариновую кислоту, арахадиновую кислоту или эйкозандионовую кислоту, особенно арахадиновую кислоту.
В некоторых случаях, линкер может содержать от одной до четырех аминокислот, аминополиэтиленгликоля карбоксилат, или их смеси. В определенных случаях, аминополиэтиленгликоля карбоксилат имеет следующую структуру:
H-{NH-CH2-CH2-[O-CH2-CH2]m-O-(CH2)p-CO}n-OH, где m равен любому целому числу от 1 до 12, n равен любому целому числу от 1 до 12, и р равен 1 или 2.
В определенных случаях, линкер может содержать один или более (2-[2-(2амино)этокси]ацетильных) фрагментов, необязательно в комбинации с от одной до четырех аминокислот.
В тех случаях, когда линкер содержит по меньшей мере одну аминокислоту, аминокислота может
- 5 043728 представлять собой от одного до четырех аминокислотных остатков Glu или yGIu. В некоторых случаях линкер может содержать один или два аминокислотных остатка Glu или yGlu, включая их D-формы. Например, линкер может содержать либо один, либо два аминокислотных остатка yGlu. В альтернативном варианте, линкер может содержать от одного до четырех аминокислотных остатков (таких как, например, аминокислоты Glu или yGlu), используемых в комбинации с вплоть до тридцати шести (2-[2-(2аминоэтокси)этокси]ацетильных) фрагментов. Конкретно, линкер может представлять собой комбинации от одной до четырех Е или уЕ-аминокислот и от одного до четырех (2-[2-(2аминоэтокси)этокси]ацетильных) фрагментов. В других случаях линкер может представлять собой комбинации одной или двух аминокислот yGlu и одного или двух (2-[2-(2-аминоэтокси)этокси]ацетильных) фрагментов.
В конкретном случае аналоги инкретина, описанные в данном изобретении, содержат такие компоненты, как линкер и жирную кислоту, и имеют структуру следующей формулы:
(2-[2-(2-аминоэтокси)этокси]ацетил)а-(уО1и)Ь-СО-(СН2)с-СО2Н, где, а равно 0, 1 или 2, b равно 1 или 2 и с равно 16 или 18. В конкретном случае а равно 2, b равно 1 и с равно 18, структура которого изображена ниже:
В другом конкретном случае а равно 1, b равно 2 и с равно 18, структура которого изображена ниже:
В другом конкретном случае а равно 0, b равно 2 и с равно 18, структура которого изображена ниже:
о^он
В другом конкретном случае а равно 1, b равно 1 и с равно 18, структура которого изображена ниже:
Как показано в химических структурах из примеров 1-6 ниже, фрагменты линкер-жирная кислота, описанные выше, могут быть связаны с эпсилон(г)-амино-группой боковой цепи лизина (К).
Сродство описанных в данном изобретении аналогов инкретина к каждому из рецепторов ГИП, ГПП-1 и глюкагона может быть измерено с помощью методик, известных в данной области техники, для измерения уровней связывания с рецептором, включая, например, методики, описанные в приведенных ниже примерах, и его, как правило, выражают как величину константы ингибирования (Ki). Активность аналогов инкретина, описанных в данном изобретении, в отношении каждого из рецепторов также может быть измерена с использованием методик, известных в данной области техники, включая, например, анализы активности in vitro, описанные ниже, и ее, как правило, выражают в виде величины эффективной концентрации 50 (EC50), которая представляет собой концентрацию соединения, вызывающую полумаксимальное симулирование на кривой доза-ответ.
Аналоги инкретина, описанные в данном изобретении, могут быть приготовлены в виде фармацевтических композиций, которые могут быть введены парентеральным путем (например, подкожным, внутривенным, внутрибрюшинным, внутримышечным или трансдермальным). Такие фармацевтические композиции и способы их получения хорошо известны в данной области техники. См., например, Remington: the Science and Practice of Pharmacy (Troy, Ed., 21st Edition, Lippincott, Williams & Wilkins, 2006). В определенных случаях аналоги инкретина вводят подкожно.
Аналоги инкретина, описанные в данном изобретении, могут вступать в реакцию с любой из целого ряда неорганических и органических кислот/оснований для образования фармацевтически приемлемых солей присоединения кислоты/основания. Фармацевтически приемлемые соли и стандартные методики их получения известны в данной области техники (см., например, Stahl, et al. Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection and Use, 2nd Revised Edition (Wiley-VCH, 2011)). Фармацевтически приемлемые соли для применения по данному изобретению включают соли натрия, трифторацетат, гидрохлорид и ацетат.
В раскрытии также предложены и, следовательно, охвачены новые промежуточные соединения и способы синтеза аналогов инкретина, описанных в данном изобретении, или их фармацевтически приемлемые соли. Промежуточные соединения и аналоги инкретина, описанные в данном изобретении, могут
- 6 043728 быть получены различными способами, известными в данной области техники. Например, способ с использованием химического синтеза проиллюстрирован в приведенных ниже примерах. Конкретные стадии синтеза для каждого из описанных путей можно объединять различным образом для получения соединений, описанных в данном изобретении. Реагенты и исходные вещества легко доступны специалистам в данной области техники.
Определенные аналоги инкретина, описанные в данном изобретении, как правило, эффективны в широком диапазоне доз. Например, дозы для введения один раз в неделю могут находиться в диапазоне от около 0,01 до около 30, в диапазоне от около 0,1 до около 10 или даже в диапазоне от около 0,1 до около 3 мг/человек/неделя. Таким образом, аналоги инкретина, описанные в данном изобретении, могут вводиться один раз в день, три раза в неделю, два раза в неделю или один раз в неделю, особенно один раз в неделю.
Аналоги инкретина, описанные в данном изобретении, могут быть использованы для лечения различных нарушений, расстройств, заболеваний или симптомов. В частности, предложены способы лечения СД2 у индивидуума, причем такие способы включают по меньшей мере этап введения индивидууму, нуждающемуся в таком лечении, эффективного количества аналога инкретина, описанного в данном изобретении, или его фармацевтически приемлемой соли.
Кроме того, предложены способы лечения ожирения у индивидуума, причем такие способы включают по меньшей мере этап введения индивидууму, нуждающемуся в таком лечении, эффективного количества аналога инкретина, описанного в данном изобретении, или его фармацевтически приемлемой соли.
Кроме того, предложены способы стимулирования нетерапевтической потери веса у индивидуума, причем такие способы включают по меньшей мере этап введения индивидууму, нуждающемуся в таком лечении, эффективного количества аналога инкретина, описанного в данном изобретении, или его фармацевтически приемлемой соли.
Кроме того, предложены способы лечения метаболического синдрома у индивидуума, причем такие способы включают по меньшей мере этап введения индивидууму, нуждающемуся в таком лечении, эффективного количества аналога инкретина, описанного в данном изобретении, или его фармацевтически приемлемой соли.
Кроме того, предложены способы лечения НАСГ у индивидуума, причем такие способы включают по меньшей мере этап введения индивидууму, нуждающемуся в таком лечении, эффективного количества аналога инкретина, описанного в данном изобретении, или его фармацевтически приемлемой соли.
Кроме того, предложены способы лечения ЖБП у индивидуума, причем такие способы включают по меньшей мере этап введения субъекту, нуждающемуся в таком лечении, эффективного количества аналога инкретина, описанного в данном изобретении, или его фармацевтически приемлемой соли.
В этих способах эффективность аналогов инкретина можно оценить, например, наблюдая значительное снижение уровня глюкозы в крови, наблюдая значительное повышение инсулина, наблюдая значительное снижение HbAlc и/или наблюдая значительное снижение массы тела.
В альтернативном варианте, аналоги инкретина, описанные в данном изобретении, или их фармацевтически приемлемые соли могут быть использованы для улучшения прочности костной ткани у индивидуума, нуждающегося в этом. В некоторых случаях, человек, нуждающийся в этом, страдает от гипоостоза или гипоостеоидоза, или выздоравливает после перелома кости, ортопедической процедуры, протезирования, установки зубного имплантата и/или спондилодеза. Описанные в данном изобретении аналоги инкретина также можно использовать для лечения других расстройств, таких как болезнь Паркинсона или болезнь Альцгеймера.
Синтез пептидов.
Пример 1.
Пример 1 представляет собой соединение, представленное следующим описанием: ¥-А1Ь-РОТ-аМеР-Т8В¥811ХОКК((2-[2-(2-аминоэтокси)этокси]ацетил)2-(уО1и)CO-(CH2)i8-CO2H)AQ-Aib-AFIEYLLEGGPSSGAPPPS-NH2 (SEQ ID NO:6).
Ниже приведено изображение структуры примера 1 с использованием стандартных однобуквенных аминокислотных кодов, за исключением остатков Aib2, aMeF6, K17 и Aib20, для которых структуры этих аминокислотных остатков были расширены:
Пептидный остов примера 1 синтезируют с помощью такого химического состава, как флуоренил- 7 043728 метилоксикарбонил (Fmoc)/трет-бутил (t-Bu), на установке для синтеза пептидов Symphony X (Protein
Technologies, Inc., Тускон, Аризона).
Смола состоит из 1% сшитого полистирола-ДВБ (смола Fmoc-Rink-MBHA, с низкой нагрузкой 100200 меш, EMD Millipore) при замещении 0,3-0,4 мэкв/г. Используются стандартные защитные группы боковых цепей. Fmoc-Lys(Mtt)-OH) используется для лизина в положении 17, a Boc-Tyr(tBu)-OH) используется для тирозина в положении 1. Группы Fmoc удаляют перед каждым этапом сочетания (2x7 мин) с помощью 20 % пиперидина в ДМФ. Все стандартные аминокислотные сочетания проводят в течение 1 ч до получения первичного амина и в течение 3 ч до получения вторичного амина, используя равные молярные соотношения аминокислоты Fmoc (0,3 мМ), диизопропилкарбодиимида (0,9 мМ) и оксима (0,9 мМ) при 9-кратном молярном избытке по сравнению с теоретическим наполнением пептидом. Исключением являются сочетания с Са-метилированными аминокислотами, для которых сочетание проходит в течение 3 ч. После завершения синтеза пептидного остова смолу 6 раз тщательно промывают ДХМ для удаления остаточного ДМФ. Защитная группа Mtt на лизине в положении 17 селективно удаляется из пептидной смолы с помощью двух обработок 30%-ным гексафторизопропанолом (Oakwood Chemicals) в ДХМ (2х40-минутная обработка).
Последующее присоединение фрагмента линкер-жирная кислота осуществляют путем сочетания 2[2-(2-Fmoc-аминоэтокси)этокси]уксусной кислоты (Fmoc-AEEA-OH, ChemPep, Inc.), трет-бутилового эфира Fmoc-глутаминовой кислоты a(Fmoc-Glu-OtBu, Ark Pharm, Inc.), моно-OtBu-эйкозандионовой кислоты (WuXi AppTec, Шанхай, Китай). Для каждого сочетания, которое длится 1 ч, используют 3кратный избыток реагентов (АА: РуАОР: ДИПЭА = 1:1:1 моль/моль).
После завершения синтеза пептидную смолу промывают ДХМ, и затем тщательно высушивают на воздухе. Сухую смолу обрабатывают 10 мл раствора для отщепления продукта (трифторуксусная кислота: вода: триизопропилсилан, 95:2,5:2,5 об./об.) в течение 2 ч при комнатной температуре. Смолу отфильтровывают, дважды промывают 2 мл чистой ТФУ, и объединенные фильтраты обрабатывают 5кратным количеством холодного диэтилового эфира (-20°C) для осаждения неочищенного пептида. Затем суспензию пептида/эфира центрифугируют при 3500 об/мин в течение 2 мин с образованием твердого осадка, надосадочную жидкость сцеживают, и твердый осадок растирают с эфиром два дополнительных раза и сушат в вакууме. Неочищенный пептид растворяют в 20% ацетонитрила/20% уксусной кислоты/60% воды и очищают с помощью ОФ-ВЭЖХ на препаративной колонке Luna 5 мкм с фенилгексилом (21x250 мм, Phenomenex) с линейными градиентами 100% ацетонитрила и 0,1% буферной системы ТФУ/вода (30-50% ацетонитрила за 60 мин). Чистота пептида оценивается с помощью аналитической ОФ-ВЭЖХ, а критерии объединения составляют >95%. Найдено, что чистота основного пула в примере 1 составляет 99,2%. Последующая лиофилизация пула конечного основного продукта дает соль ТФУ лиофилизированного пептида. Молекулярную массу определяют методом ЖХ-МС (наблюдаемая: М+4Н+/4=1219,9; рассчётная М+4Н+/4=1220,1).
Пример 2.
Пример 2 представляет собой соединение, представленное следующим описанием:
Y - Aib-QGT-aMeF-T SD YSI-aMeL-LDKK((2- [2-(2-аминоэтокси)этокси] ацетилД(yGlu)-CO-(CH2)i8-CO2H)AQ-Aib-AFIEYLLEGGPSSGAPPPS-NH2 (SEQ Ш NO:7).
Ниже приведено изображение структуры примера 2 с помощью стандартных однобуквенных аминокислотных кодов, за исключением остатков Aib2, aMeF6, aMeL3, K17 и Aib20, для которых структуры аминокислотных остатков были расширены:
о
Процессы, аналогичные описанным выше для примера 1, используются для синтеза пептидного остова, для конъюгирования фрагмента линкер-жирная кислота, для проверки чистоты и для подтверждения молекулярной массы примера 2.
Пример 3.
Пример 3 представляет собой соединение, представленное следующим описанием:
У-А1Ь-ЕЮТ-аМеР(2Р)-Т8ПУ81ЕЕОКК((2-[2-(2-аминоэтокси)этокси]ацетил)2(yGlu)-CO-(CH2)i8-CO2H)AQ-Aib-AFIEYLLEGGPSSGAPPPS-NH2 (SEQ Ш NO:8).
Ниже приведено изображение структуры примера 3 с помощью стандартных однобуквенных аминокислотных кодов, за исключением остатков Aib2, aMeF(2F)6, K17 и Aib20, для которых структуры аминокислотных остатков были расширены:
- 8 043728
Процессы, аналогичные описанным выше для примера 1, используются для синтеза пептидного остова, для конъюгирования фрагмента линкер-жирная кислота, для проверки чистоты и для подтверждения молекулярной массы примера 3.
Пример 4.
Пример 4 представляет собой соединение, представленное следующим описанием:
А-А1Ь-0ОТ-аМеЕ(2Е)-Т8ПА81ЕЕОКК((2-[2-(2-аминоэтокси)этокси]ацетил)-(уО1и)CO-(CH2)i8-CO2H)AQ-Aib-AFIEYLLEGGPSSGAPPPS-NH2 (SEQ ГО NO:9).
Ниже приведено изображение структуры примера 4 с помощью стандартных однобуквенных амиAib2, aMeF(2F)6, K17 и Aib20, для которых структуры нокислотных кодов, за исключением остатков аминокислотных остатков были расширены:
Процессы, аналогичные описанным выше для примера 1, используются для синтеза пептидного остова, для конъюгирования фрагмента линкер-жирная кислота, для проверки чистоты и для подтверждения молекулярной массы примера 4.
Пример 5.
Пример 5 представляет собой соединение, представленное следующим описанием:
Y-Aib-QGT-aMeF(2F)-TSDYSILLDKK((2-[2-(2-aMHHO3TOKCH)3TOKCH]aL[eTHn)-(YGlu)CO-(CH2)18-CO2H)AQQAFIEYLLEGGPSSGAPPPS-NH2 (SEQ Ш NO: 10).
Ниже приведено изображение структуры примера 5 с помощью стандартных однобуквенных аминокислотных кодов, за исключением остатков Aib2, aMeF(2F)6 и K17, для которых структуры аминокислотных остатков были расширены:
Процессы, аналогичные описанным выше для примера 1, используются для синтеза пептидного остова, для конъюгирования фрагмента линкер-жирная кислота, для проверки чистоты и для подтверждения молекулярной массы примера 5.
Пример 6.
Пример 6 представляет собой соединение, представленное следующим описанием:
Y-Aib-QGT-aMeF(2F)-TSDYSILLDKK((2-[2-(2-aMnHO3TOKcn)3TOKcn]aLieTHn)-(YGlu)CO-(CH2)18-CO2H)AQHAFIEYLLEGGPSSGAPPPS-NH2 (SEQ ГО NO: И).
Ниже приведено изображение структуры примера 6 с помощью стандартных однобуквенных аминокислотных кодов, за исключением остатков Aib2, aMeF(2F)6 и K17, для которых структуры аминокислотных остатков были расширены:
- 9 043728
Процессы, аналогичные описанным выше для примера 1, используются для синтеза пептидного остова, для конъюгирования фрагмента линкер-жирная кислота, для проверки чистоты и для подтверждения молекулярной массы примера 6.
Функционирование in vitro.
Связывающая способность.
Испытания конкурентного связывания радиолиганда проводят для определения константы равновесной диссоциации для соединений из примеров и сравнительных молекул. В таком анализе используют методы сцинтилляционного анализа сближения (САС) и мембраны, полученные из трансфицированных клеток НЕК293 сверхэкспрессирующих рецептор ГИП человека (ГИПР), рецептор ГПП-1 (ГПП-1Р) или рецептор глюкагона человека (ГкгР).
Анализы проводят в присутствии бацитрацина в качестве неспецифического блокирующего агента для предотвращения связывания ацилированных фрагментов исследуемых аналогов с белковыми компонентами, используемыми в стандартных аналитических буферах (например, альбумин).
Кривые конкуренции представлены в виде процента удельного ингибирования (ось Y) от логарифмической концентрации соединения (ось X) и проанализированы с помощью четырехпараметрической нелинейной регрессионной аппроксимации с переменным наклоном (ABase или Genedata). Значения Ki рассчитывают в соответствии с уравнением Ki=IC50/(1+(D/Kd)), где IC50 представляет собой концентрацию соединения, приводящую к 50%-ому ингибированию связывания, D представляет собой концентрацию радиолиганда, используемого в анализе, и Kd представляет собой константу равновесной диссоциации для рецептора и радиолиганда, определенную из анализа насыщения соединения (приведено в табл. 1 ниже).
Таблица 1
Константы равновесной диссоциации (Kd), определенные из анализа насыщения соединения
| Кд, нМ | ||
| ГПП-1Р | ГктР | ГИПР |
| 1,2 | 3,9 | 0,14 |
Значения Ki аналогов из примеров и сравнительных молекул приведены в табл. 2.
Таблица 2
Связывающая способность in vitro (Ki) примеров и компараторов ______________для человеческого ГИПР, ГПП-1Р и ГкгР_____________
| Ki, нМ (РЭМ, и) | |||
| Молекула | ГкгР | ГИПР | ГПП-1Р |
| чГкг | 3,1 (0,5,4) | ||
| чГИП | 0,12(0,02, 4) | ||
| чГПП-1 | 1,2 (0,2, 4) | ||
| Пример 1 | 0,955 (0,182, 3) | 0,0278 (0,00297, 3) | 2,51 (0,930, 3) |
| Пример 2 | 1,49 (0,201, 3) | 0,0413 (0,0129, 3) | 2,41 (se=0,720, 3) |
| Пример 3 | 0,469 (0,121, 5) | 0,0684 (0,0193, 5) | 1,66 (se=0.950, 5) |
| Пример 4 | 0,637(0,0319, 3) | 0,0832 (0,0273, 3) | 1,21 (se=0.0737, 3) |
| Пример 5 | 0,419 (0,0430, 4) | 0,0347 (0,0112, 4) | 1,17 (se=0.674, 4) |
| Пример 6 | 0,382 (0,0587, 4) | 0,0388 (0,00813,4) | 0,822 (se=0.379, 4) |
Примечание. Определитель (>) указывает, что данные не достигли 50%го ингибирования относительно максимального связывания, в результате чего Ki рассчитывали с использованием самой высокой концентрации, исследованной в анализе, и=1/х означает, что только одно значение из общего числа повторов (х) используется для выражения среднего значения. РЭМ рассчитывается только при наличии n=2 или более независимых результатов.
Как видно из табл. 2, аналоги из примеров имеют связывающую способность в отношении каждого из рецепторов ГИП, ГПП-1 и Гкг.
Функциональная активность.
- 10 043728
Функциональную активность определяют в клональных клеточных линиях HEK-293, экспрессирующих ГИП-Р-, ГПП-1Р- и ГкгР. Каждую сверхэкспрессирующую рецептор клеточную линию обрабатывают пептидом (20-точечная CRC, 2,75-кратное прямое разбавление Labcyte Echo) в DMEM (Gibco Cat # 31053) с добавлением 1X GlutaMAX™ (Gibco Cat # 35050), 0,25% ФБС (фетальной бычьей сыворотки, Gibco Cat # 26400), 0,05 % фракции V БСА (бычьего сывороточного альбумина, Gibco Cat # 15260), 250 мкМ ИБМК и 20 мМ ГЭПЭС (Gibco Cat # 15630) в анализируемом объеме 20 мкл.
После 60-минутной инкубации при комнатной температуре результирующее увеличение внутриклеточного цАМФ количественно определяют с помощью набора для анализа CisBio cAMP Dynamic 2 HTRF (62AM4PEJ). Вкратце, уровни цАМФ в клетке определяют путем добавления конъюгата цАМФ-d2 в буфер для лизиса клеток с последующим добавлением антитела анти-цАМФ-Eu3+-криптата, также в буфере для лизиса клеток. Полученный образец для анализа конкуренции инкубируют в течение по меньшей мере 60 мин при комнатной температуре и затем определяют с помощью прибора PerkinElmer Envision® с возбуждением при 320 нм и излучением при 665 и 620 нм. Единицы измерения Envision (излучение при 665 нм/620 нмх 10000) были обратно пропорциональны количеству присутствующего цАМФ и преобразованы в нМ цАМФ в лунке с помощью стандартной кривой цАМФ.
Количество вырабатываемого цАМФ (нМ) в каждой лунке преобразуют в процент от максимального ответа, наблюдаемого с человеческим ΓΠΠ-1(7-36)ΝΗ2, человеческим Гкг или человеческим ГИП(142)NH2. Относительное значение EC50 получают путем нелинейного регрессионного анализа с помощью процентного максимального отклика от концентрации добавляемого пептида, адаптированного к логистическому уравнению с четырьмя параметрами.
Данные для аналогов из примеров и чГИП(1-42)NH2, 4ΓΠΠ-1(7-36)ΝΗ2 и чГкг приведены в табл. 3 ниже.
Таблица 3
Функциональная активность цАМФ (EC50) для аналогов из примеров и компараторов в присутствии ФБС и БСА.
| цАМФ ЕС5о, нМ (РЭМ, н) | |||
| ГкгР | ГИПР | ГПП-1Р | |
| чГкг | 0,0114(0,0014, 12) | ||
| амид чГИП | 0,0979 (0,0088, 12) | ||
| амид чПП1-1 | 0,0424 (0,0043, 12) | ||
| Пример 1 | 6,33 (0,905, 3) | 1,82 (0,332, 3) | 12,6(1,42, 3) |
| Пример 2 | 4,75 (0,827, 3) | 1,34 (0,216, 3) | 11,6(2,26, 3) |
| Пример 3 | 3,46 (0,835, 7) | 1,37(0,518, 7) | 13,1 (3,06, 7) |
| Пример 4 | 1,78 (0,400, 5) | 1,37 (0,422, 5) | 10,6 (3,29, 5) |
| Пример 5 | 1,87 (0,254, 5) | 1,91 (0,618, 5) | 13,0 (2,59, 5) |
| Пример 6 | 1,76 (0,218, 4) | 1,41 (0,363, 4) | 8,94 (2,76, 4) |
Примечание: определение EC50 человеческого rnn-1(7-36)NH2 на человеческом ГПП-1Р, человеческого Гкг на человеческом ГкгР и человеческого ГИП(1-42)NH2 на человеческом ГИП-Р: диапазоны концентрации пептидов составляли от 448 пМ до 99,5 нМ. Определение EC50 для примеров на человеческом ГПП-1Р, человеческом ГкгР и человеческом ГИП-Р: диапазоны концентраций пептида составляли от 51,5 фМ до 11,4 мкМ.
Как видно из табл. 3, в присутствии ФБС и БСА типичные аналоги обладают агонистической активностью, которая определяется с помощью анализов цАМФ человеческого ГИП-Р, ГПП-1Р и ГкгР, которые ниже, чем у нативных лигандов.
Дополнительный ряд анализов цАМФ проводят в клетках HEK293, экспрессирующих рецепторы человеческого ГПП-1, ГИП и глюкагона. С помощью методов гомогенной флуорисценции с временным разрешением проводили анализы для определения присущей активности аналогов из примеров и сравнительных молекул в присутствии казеина (вместо сывороточного альбумина) в качестве неспецифического блокатора, который не взаимодействует с фрагментами жирной кислоты анализируемых молекул.
Внутриклеточные уровни цАМФ определяются путем экстраполяции с использованием стандартной кривой. Кривые доза-эффект соединений представлены в виде процентного соотношения стимуляции, нормализованной к минимальным (только буфер) и максимальным (максимальная концентрация каждого контрольного лиганда) значениям, и проанализированы с использованием четырехпараметрической нелениейной регрессионной аппроксимации с переменным наклоном (Genedata Screener 13). ЕС50 представляет собой концентрацию соединения, вызывающую полумаксимальную стимуляцию на кривой доза-эффект.
Данные приведены ниже в табл. 4.
- 11 043728
Таблица 4
Функциональная активация чГПП-1Р, чГИПР, чГкгР в присутствии 0,1 % казеина
| цАМФ ЕС5о, нМ (РЭМ, н) | |||
| ГкгР | ГИПР | ГПП-1Р | |
| чГкг | 0,0119 (0,00356, 163) | ||
| амид чГИП | 0,154 (0,037, 118) | ||
| амид чГ1П1-1 | 0,063 (0,022, 197) | ||
| Пример 1 | 0,158 (0,0464, 6) | 0,0226 (0,00787, 5) | 0,112 (0,0250, 5) |
| Пример 2 | 0,0960 (0,0295, 7) | 0,0329 (0,0136, 7) | 0,106 (0,0155, 7) |
| Пример 3 | 0,0301 (0,00811, 5) | 0,0215 (0,00338, 4) | 0,104 (0,0300, 4) |
| Пример 4 | 0,0296 (0,00628, 5) | 0,0321 (0,0110, 4) | 0,145 (0,0309, 4) |
| Пример 5 | 0,0343 (0,00555, 4) | 0,0306 (0,00998, 5) | 0,103 (0,0263,4) |
| Пример 6 | 0,0293 (0,00562, 4) | 0,0349 (0,00643, 4) | 0,115 (0,0305,4) |
Как видно из табл. 4, типичные аналоги стимулируют цАМФ рецепторов человеческого ГИП, ГПП1 и глюкагона в присутствии 0,1% казеина.
SEQ Ш NO: 1 - человеческий глюкагон
HSQGTFTSDYSKYLDSRRAQDFVQWLMNT
SEQ Ш NO:2 - Амид ПП1-1 (7-36) человека
HAEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVKGRG
SEQ Ш NO:3 - ОК СМ человека (HSQGTFTSDYSKYLDSRRAQDFVQWLMNTKRNRNNIA)
SEQ ID NO:4 - ГИП для человека
YAEGTFISDYSIAMDKIHQQDFVNWLLAQKGKKNDWKHNITQ
SEQ ID NO:5 - Аналог инкретина
YX2X3GTX6TSDYSIX13LDKX17AQX20AFIEYLLEGGPSSGAPPPS где Х2 представляет собой Aib;
Х3 представляет собой Q или Н;
Х6 представляет собой aMeF или aMeF(2F);
Х13 представляет собой L или aMeL;
Х17 представляет собой любую аминокислоту с функциональной группой, доступной для конъюгации, причем функциональная группа конъюгирована с С16-С22-жирной кислотой;
Х20 представляет собой Aib, Q или Н.
SEQ ID NO:6 - Аналог инкретина
Y-Aib-QGT-aMeF-TSDYSILLDKK((2-[2-(2-aMHHO3TOKCH)3TOKCH]aneTHa)2-(YGlu)CO-(CH2)i8-CO2H)AQ-Aib-AFIEYLLEGGPSSGAPPPS-NH2
SEQ ID NO :7 - Аналог инкретина
Y - Aib -QGT -aMeF-T SD YS I-aMeL-LDKK((2- [2-(2-аминоэтокси)этокси] ацетил)2(YGlu)-CO-(CH2)i8-CO2H)AQ-Aib-AFIEYLLEGGPSSGAPPPS-NH2
SEQ ID NO :8 - Аналог инкретина
А-А1Ь-НОТ-аМеЕ(2Е)-Т8ОА81ЕЕОКК((2-[2-(2-аминоэтокси)этокси]ацетил)2(YGlu)-CO-(CH2)i8-CO2H)AQ-Aib-AFIEYLLEGGPSSGAPPPS-NH2
SEQ ID NO :9 - Аналог инкретина
А-А1Ь-0ОТ-аМеЕ(2Е)-Т8ОА8ППЛЖК((2-[2-(2-аминоэтокси)этокси]ацетил)2(YGlu)-CO-(CH2)i8-CO2H)AQ-Aib-AFIEYLLEGGPSSGAPPPS-NH2
SEQ ID NO: 10 - Аналог инкретина
-
Claims (26)
- Y-Aib-QGT-αMeF(2F)-TSDYSILLDKK((2-[2-(2-aминoэτoκcи)эτoκcи]aцeτил)-(γGlu)CO-(CH2)i8-CO2H) AQQAFIEYLLEGGPSSGAPPPS-NH2SEQ ID NO: 11 - Аналог инкретинаУ-А1Ь-0ОТ-аМеЕ(2Е)-Т8ОУ81ЕЕОКК((2-[2-(2-аминоэтокси)этокси]ацетил)-(уО1и)CO-(CH2)i8-CO2H) AQHAFIEYLLEGGPSSGAPPPS-NH2SEQ ID NO: 12 - Искусственная последовательностьGPSSGAPPPSФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ1. Аналог инкретина, содержащий:YX2X3GTX6TSDYSIX13LDKX17AQX20AFIEYLLEGGPSSGAPPPS, где Х2 представляет собой Aib,Х3 представляет собой Q или Н,Х6 представляет собой aMeF или aMeF(2F),Х13 представляет собой L или aMeL,Х17 представляет собой аминокислоту K с функциональной группой, доступной для конъюгации, и функциональная группа конъюгирована с С16-С22-жирной кислотой,Х20 представляет собой Aib, Q или Н, (SEQ ID NO: 5), и С-концевая аминокислота необязательно амидирована;или его фармацевтически приемлемая соль.
- 2. Аналог инкретина по п.1, отличающийся тем, что аминокислота с функциональной группой, доступной для конъюгации в положении Х17, и C16-C22-жирная кислота конъюгированы с помощью линкера между аминокислотой и жирной кислотой.
- 3. Аналог инкретина по п.2, отличающийся тем, что линкер содержит от одной до четырех аминокислот.
- 4. Аналог инкретина по п.3, отличающийся тем, что аминокислоты представляют собой Glu или YGlu.
- 5. Аналог инкретина по любому из пп.2-4, отличающийся тем, что линкер дополнительно содержит следующую структуру:Н- {NH-CH2-CH2-[O-CH2-CH2]m-O-(CH2)p-CO} п-ОН где m равен любому целому числу от 1 до 12, n равен любому целому числу от 1 до 12, и р равен 1 или 2.
- 6. Аналог инкретина по любому из пп.2-5, отличающийся тем, что линкер дополнительно содержит от одного до четырех (2-[2-(2-аминоэтокси)этокси]ацетильных) фрагментов.
- 7. Аналог инкретина по п.1, отличающийся тем, что Х17 представляет собой K, химически модифицированный путем конъюгации с эпсилон-аминогруппой боковой K-цепи со следующей структурой: (2[2-(2-аминоэтокси)этокси]ацетuл)а-(γGlu)b-СО-(СН2)с-СО2Н, где а равен 0, 1 или 2; b равен 1 или 2; и с равен целому числу от 16 до 18.
- 8. Аналог инкретина по п.7, отличающийся тем, что а равно 1.
- 9. Аналог инкретина по п.7, отличающийся тем, что а равно 2.
- 10. Аналог инкретина по любому из пп.7-9, отличающийся тем, что b равно 1.
- 11. Аналог инкретина по любому из пп.7-9, отличающийся тем, что b равно 2.
- 12. Аналог инкретина по любому из пп.7-11, отличающийся тем, что с равно 18.
- 13. Аналог инкретина по любому из пп.1-12, отличающийся тем, что Х13 представляет собой aMeL.
- 14. Аналог инкретина по любому из пп.1-12, отличающийся тем, что Х13 представляет собой L.
- 15. Аналог инкретина по любому из пп.1-14, отличающийся тем, что Х3 представляет собой Q.
- 16. Аналог инкретина по любому из пп.1-14, отличающийся тем, что Х3 представляет собой Н.
- 17. Аналог инкретина по любому из пп.1-16, отличающийся тем, что Х6 представляет собой aMeF.
- 18. Аналог инкретина по любому из пп.1-16, отличающийся тем, что Х6 представляет собой aMeF(2F).
- 19. Аналог инкретина, имеющий формулу, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 5-11.
- 20. Способ лечения заболевания, выбранного из группы, состоящей из СД2, ожирения, жировой болезни печени, НАСГ, дислипидемии и метаболического синдрома, причем способ включает в себя этап:введения индивидууму, нуждающемуся в этом, эффективного количества аналога инкретина по любому из пп.1-19.
- 21. Способ лечения сахарного диабета II типа, включающий этап:- 13 043728 введения индивидууму, нуждающемуся в этом, эффективного количества аналога инкретина по любому из пп.1-19.
- 22. Фармацевтическая композиция, содержащая:аналог инкретина по любому из пп.1-19; и фармацевтически приемлемый носитель, разбавитель или наполнитель.
- 23. Применение аналога инкретина по любому из пп.1-19 для лечения заболевания, выбранного из группы, состоящей из сахарного диабета, дислипидемии, жировой болезни печени, метаболического синдрома, неалкогольного стеатогепатита и ожирения.
- 24. Применение аналога инкретина по любому из пп.1-19 для лечения сахарного диабета типа II.
- 25. Применение аналога инкретина по любому из пп.1-19 в производстве лекарственного средства для лечения заболевания, выбранного из группы, состоящей из сахарного диабета, дислипидемии, жировой болезни печени, метаболического синдрома, неалкогольного стеатогепатита и ожирения.
- 26. Применение аналога инкретина по любому из пп.1-19 в производстве лекарственного средства для лечения сахарного диабета II типа.Евразийская патентная организация, ЕАПВРоссия, 109012, Москва, Малый Черкасский пер., 2
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US62/608,644 | 2017-12-21 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| EA043728B1 true EA043728B1 (ru) | 2023-06-16 |
Family
ID=
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| AU2018388895B2 (en) | Incretin analogs and uses thereof | |
| AU2018388962B2 (en) | Incretin analogs and uses thereof | |
| AU2020408139B2 (en) | Incretin analogs and uses thereof | |
| EA043728B1 (ru) | Аналоги инкретина и их применение | |
| EA043950B1 (ru) | Аналоги инкретина и их применение |