EA043054B1

EA043054B1 - N-ACETYLCYSTEINE FOR USE AS ANTIBACTERIAL AGENT

Info

Publication number: EA043054B1
Application number: EA201991331
Authority: EA
Inventors: Джан Мария РОССОЛИНИ; Лучия Паллекки; Франческо Серджо
Original assignee: Замбон С.П.А.
Priority date: 2016-12-15
Filing date: 2017-12-13
Publication date: 2023-04-20

Description

Изобретение относится к N-ацетилцистеину (далее в данном документе NAC) для применения для ингибирования или супрессии роста и/или уничтожения чувствительных штаммов патогенов, выбранных из комплекса Burkholderia cepacia (далее в данном документе ВСС) и Stenotrophomonas maltophilia (далее в данном документе S. maltophilia).The invention relates to N-acetylcysteine (hereinafter referred to as NAC) for use in inhibiting or suppressing the growth and/or killing susceptible strains of pathogens selected from the Burkholderia cepacia complex (hereinafter BCC) and Stenotrophomonas maltophilia (hereinafter S. maltophilia).

Более конкретно, настоящее изобретение относится к NAC для применения при лечении заболевания, вызванного, по меньшей мере частично, патогеном, выбранным из ВСС и штаммов S. maltophilia.More specifically, the present invention relates to NAC for use in the treatment of a disease caused at least in part by a pathogen selected from BCC and strains of S. maltophilia.

Уровень техники изобретенияState of the art invention

ВСС представляет незначительный медицинский риск для здоровых людей. Тем не менее, дыхательные пути индивидуумов с ослабленной иммунной системой или хроническим заболеванием легких, в частности, с муковисцидозом, могут быть более восприимчивыми к инфекциям ВСС. Инфекции, вызванные ВСС, могут вызывать обострения, ускоряя снижение функций легких, например, у пациентов с муковисцидозом.SCD poses little medical risk to otherwise healthy people. However, the respiratory tract of individuals with a weakened immune system or chronic lung disease, such as cystic fibrosis, may be more susceptible to SCD infections. SCD infections can exacerbate by accelerating the decline in lung function, such as in patients with cystic fibrosis.

Образование колоний ВСС имеет хронический характер, поэтому ВСС может также вызывать инфекции у пациентов с заболеванием легких, отличным от муковисцидоза, таким как хроническое обструктивное заболевание легких и хроническая гранулематозная болезнь.SCD colonization is chronic, so SCD can also cause infections in patients with lung disease other than cystic fibrosis, such as chronic obstructive pulmonary disease and chronic granulomatous disease.

Инфекции, вызванные S. maltophilia, встречаются главным образом, но не исключительно, у истощенных индивидуумов и пациентов с ослабленным иммунитетом. S. maltophilia обычно ассоциирована с инфекциями дыхательных путей у людей; например, S. maltophilia может вызывать обострения при хроническом обструктивном заболевании легких и муковисцидозе.S. maltophilia infections occur mainly, but not exclusively, in malnourished individuals and immunocompromised patients. S. maltophilia is commonly associated with respiratory tract infections in humans; for example, S. maltophilia can cause exacerbations in chronic obstructive pulmonary disease and cystic fibrosis.

Как ВСС, так и S. maltophilia имеют фенотип множественной лекарственной устойчивости и характеризуются способностью образовывать биопленки. В силу этих особенностей они ответственны за хронизацию образования колоний в легких у индивидуумов с ослабленной иммунной системой или хроническим заболеванием легких, в частности, с муковисцидозом, которая может продолжаться несколько месяцев или лет, и которую трудно или невозможно остановить с помощью современных стратегий терапии антибиотиками.Both BCC and S. maltophilia have a multidrug resistance phenotype and are characterized by the ability to form biofilms. Because of these features, they are responsible for the chronicity of colonization in the lungs in individuals with a weakened immune system or chronic lung disease, in particular cystic fibrosis, which can last for several months or years, and which is difficult or impossible to stop with current antibiotic therapy strategies.

Сущность изобретенияThe essence of the invention

Заявитель понимает, что возникновение инфекций ВСС и S. maltophilia может привести к эпизодам легочных обострений, способным еще сильнее ухудшить клинические состояния индивидуумов, страдающих хроническими заболеваниями, поражающими также нижние отделы дыхательной системы, такими как, например, муковисцидоз и хроническое обструктивное заболевание легких.The Applicant understands that the occurrence of SCD and S. maltophilia infections can lead to episodes of pulmonary exacerbations that can further worsen the clinical conditions of individuals suffering from chronic diseases that also affect the lower respiratory system, such as, for example, cystic fibrosis and chronic obstructive pulmonary disease.

Соответственно, перед заявителем стояла проблема лечения инфекций ВСС и/или S. maltophilia, которые вызывают, по меньшей мере частично, эпизоды легочных обострений у индивидуумов, страдающих хроническим заболеванием, поражающим также нижние отделы дыхательной системы, такими как, например, муковисцидоз и хроническое обструктивное заболевание легких.Accordingly, Applicant has faced the problem of treating SCD and/or S. maltophilia infections which cause, at least in part, episodes of pulmonary exacerbations in individuals suffering from a chronic disease also affecting the lower respiratory system, such as, for example, cystic fibrosis and chronic obstructive pulmonary disease. lung disease.

После длительного периода тестов и экспериментов заявитель неожиданно обнаружил, что NAC проявляет антимикробную активность в отношении постоянного количества клинических изолятов ВСС и S. maltophilia, что приводит даже к бактерицидному эффекту. Еще более поразительно то, что в in vitro моделях биопленок ВСС и S. maltophilia было обнаружено, что NAC обладает активностью, препятствующей образованию биопленок. Поэтому NAC может рассматриваться как терапевтическое средство, применяемое при лечении инфекций ВСС и/или S. maltophilia, способствующее улучшению состояния пациентов с серьезной клинической картиной, таких как вышеупомянутые пациенты. Способность NAC ингибировать образование биопленок ВСС и/или S. maltophilia предусматривает также, что NAC можно потенциально применять для профилактики образования этими патогенами колоний в легких, особенно у индивидуумов, страдающих хроническими заболеваниями, поражающими также нижние отделы дыхательной системы, такими как, например, муковисцидоз и хроническое обструктивное заболевание легких.After a long period of testing and experimentation, the Applicant unexpectedly found that NAC exhibits antimicrobial activity against a constant number of BCC and S. maltophilia clinical isolates, resulting in even a bactericidal effect. Even more strikingly, in in vitro biofilm models of BCC and S. maltophilia, NAC was found to have biofilm inhibiting activity. Therefore, NAC can be considered as a therapeutic agent for use in the treatment of SCD and/or S. maltophilia infections in order to improve the condition of patients with a serious clinical picture, such as the aforementioned patients. The ability of NAC to inhibit the formation of BCC and/or S. maltophilia biofilms also suggests that NAC can potentially be used to prevent these pathogens from colonizing the lungs, especially in individuals suffering from chronic diseases that also affect the lower respiratory system, such as, for example, cystic fibrosis. and chronic obstructive pulmonary disease.

Подробное описание изобретенияDetailed description of the invention

NAC является ацетилированным предшественником аминокислоты L-цистеина и восстановленного глутатиона (GSH). Исторически он применялся при ряде хронических респираторных заболеваний в качестве муколитического агента в сочетании с физиотерапией грудной клетки у пациентов с вязкой или густой слизью в дыхательных путях, также в качестве антидота при передозировке ацетаминофеном и как потенциальное лечение для заболеваний, характеризующихся свободными радикалами, окислительным повреждением.NAC is an acetylated precursor of the amino acid L-cysteine and reduced glutathione (GSH). Historically, it has been used in a number of chronic respiratory diseases as a mucolytic agent in combination with chest physiotherapy in patients with viscous or thick mucus in the airways, also as an antidote for acetaminophen overdose, and as a potential treatment for diseases characterized by free radicals, oxidative damage.

В соответствии с настоящим изобретением заявитель неожиданно обнаружил, что NAC также эффективен для ингибирования или супрессии роста и/или уничтожения чувствительных штаммов ВСС и S. maltophilia, которые, как известно, по меньшей мере частично, ответственны за эпизоды легочных обострений, дальнейшее ухудшение клинического состояния у индивидуумов, страдающих хроническими заболеваниями, поражающими также нижние отделы дыхательной системы, такими как, например, муковисцидоз и хроническое обструктивное заболевание легких.In accordance with the present invention, Applicant has surprisingly found that NAC is also effective in inhibiting or suppressing growth and/or killing sensitive strains of BCC and S. maltophilia known to be at least partially responsible for episodes of pulmonary exacerbations, further worsening the clinical condition. in individuals suffering from chronic diseases also affecting the lower respiratory system, such as, for example, cystic fibrosis and chronic obstructive pulmonary disease.

Следовательно, целью настоящего изобретения является NAC для применения для ингибирования или супрессии роста и/или уничтожения чувствительного штамма патогена, выбранного из ВСС и S. mal- 1 043054 tophilia.Therefore, it is an object of the present invention to provide a NAC for use in inhibiting or suppressing growth and/or killing a susceptible strain of a pathogen selected from BCC and S. maltophilia.

Другой целью настоящего изобретения является NAC для применения при лечении бактериальной инфекции, вызванной чувствительным штаммом патогена, выбранного из ВСС и S. maltophilia.Another object of the present invention is NAC for use in the treatment of a bacterial infection caused by a susceptible strain of a pathogen selected from BCC and S. maltophilia.

Еще одной целью настоящего изобретения является NAC для применения при лечении эпизодов легочных обострений, вызванных, по меньшей мере частично, чувствительным штаммом патогена, выбранного из ВСС и S. maltophilia, у индивидуума, страдающего хроническим заболеванием, поражающим также нижние отделы дыхательной системы, такими как, например, муковисцидоз и хроническое обструктивное заболевание легких.Another object of the present invention is NAC for use in the treatment of episodes of pulmonary exacerbations caused, at least in part, by a susceptible strain of a pathogen selected from BCC and S. maltophilia, in an individual suffering from a chronic disease also affecting the lower respiratory system, such as such as cystic fibrosis and chronic obstructive pulmonary disease.

В конкретном аспекте настоящего изобретения индивидуумы, страдающие хроническим заболеванием, как описано выше, являются пациентами с ослабленным иммунитетом и/или госпитализированными пациентами.In a specific aspect of the present invention, individuals suffering from a chronic disease as described above are immunocompromised and/or hospitalized patients.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к NAC для применения для ингибирования образования биопленок ВСС и/или S. maltophilia и, в особенности, к NAC для применения в профилактике образования колоний микроорганизмов в легких путем ингибирования образования биопленок ВСС и/или S. maltophilia, в частности у индивидуумов, страдающих хроническими заболеваниями, поражающими также нижние отделы дыхательной системы, такими как, например, муковисцидоз и хроническое обструктивное заболевание легких.In another aspect, the present invention relates to NAC for use in inhibiting the formation of BCC and/or S. maltophilia biofilms and, in particular, to NAC for use in the prevention of colonization of microorganisms in the lungs by inhibiting the formation of BCC and/or S. maltophilia biofilms, in in particular in individuals suffering from chronic diseases that also affect the lower respiratory system, such as, for example, cystic fibrosis and chronic obstructive pulmonary disease.

Согласно настоящему изобретению термины индивидуум или пациент используются взаимозаменяемо для обозначения представителя вида млекопитающих, предпочтительно человека.According to the present invention, the terms individual or patient are used interchangeably to refer to a member of a mammalian species, preferably a human.

Согласно настоящему изобретению термин антибактериальный означает уменьшение вредного воздействия бактерий путем ингибирования, супрессии их роста и/или их уничтожения.According to the present invention, the term antibacterial means reducing the harmful effects of bacteria by inhibiting, suppressing their growth and/or killing them.

Согласно настоящему изобретению термин бактерицидный означает оказание разрушающего воздействия на бактерии.According to the present invention, the term bactericidal means having a destructive effect on bacteria.

Согласно настоящему изобретению бактериальная инфекция относится к любой ситуации, в которой присутствие микробной популяции (микробных популяций) наносит ущерб млекопитающемухозяину. Таким образом, индивидуум страдает от микробной инфекции, когда в теле или на теле индивидуума присутствует чрезмерное число микробных популяций или, когда из-за присутствия микробной популяции (микробных популяций) происходит разрушение клеток или тканей индивидуума.According to the present invention, a bacterial infection refers to any situation in which the presence of a microbial population(s) is detrimental to the mammalian host. Thus, an individual suffers from a microbial infection when an excessive number of microbial populations are present in or on the body of the individual, or when the cell or tissue of the individual is destroyed due to the presence of the microbial population(s).

Согласно настоящему изобретению термин обострение (обострения) относится к увеличению тяжести заболевания или любого из его признаков или симптомов. В частности, легочные обострения могут быть идентифицированы как периодические эпизоды острого ухудшения респираторных симптомов пациента, выходящие за рамки суточных колебаний, приводящие к изменениям в лекарственной терапии, часто вызывающие осложнения, госпитализацию, смертельный исход и оказывающие сильное влияние на качество жизни, обусловленное состоянием здоровья.According to the present invention, the term exacerbation(s) refers to an increase in the severity of a disease or any of its signs or symptoms. In particular, pulmonary exacerbations can be identified as recurrent episodes of acute worsening of a patient's respiratory symptoms that go beyond diurnal fluctuations, lead to changes in drug therapy, often cause complications, hospitalization, death, and have a strong impact on health-related quality of life.

Согласно настоящему изобретению термин лечить или лечение относится к сокращению, уменьшению, ослаблению, ограничению или уменьшению интенсивности, выраженности, степени бактериальной инфекции или связанных с ней симптомов, вызванных чувствительным штаммом ВСС и S. maltophilia у индивидуумов, страдающих хроническим заболеванием, поражающим также нижние отделы дыхательной системы.According to the present invention, the term treat or treatment refers to the reduction, reduction, attenuation, limitation or reduction of the intensity, severity, extent of bacterial infection or associated symptoms caused by a susceptible strain of BCC and S. maltophilia in individuals suffering from a chronic disease that also affects the lower parts of the body. respiratory system.

NAC коммерчески доступен и может быть также синтезирован способами, известными в данной области техники.NAC is commercially available and can also be synthesized by methods known in the art.

Фармацевтические композиции, содержащие NAC для применения в соответствии с настоящим изобретением вместе с носителем, подходящим для фармацевтического применения, состоящим из одного или нескольких эксципиентов, также включены в объем настоящего изобретения.Pharmaceutical compositions containing NAC for use in accordance with the present invention together with a carrier suitable for pharmaceutical use, consisting of one or more excipients, are also included in the scope of the present invention.

Согласно настоящему изобретению термин носитель включает любое вещество, которое может использоваться в качестве несущей среды для осуществления доставки NAC в нужный сайт in vivo или in vitro.According to the present invention, the term carrier includes any substance that can be used as a carrier medium to effect delivery of NAC to the desired site in vivo or in vitro.

Согласно настоящему изобретению термин эксципиент включает любое инертное вещество, добавляемое в фармацевтическую композицию, чтобы дополнительно облегчить введение активного ингредиента.According to the present invention, the term excipient includes any inert substance added to a pharmaceutical composition to further facilitate the administration of the active ingredient.

Для композиций по настоящему изобретению можно использовать любой подходящий способ введения, включая пероральный, парентеральный (подкожный, внутримышечный или внутривенный) и ингаляционный способ введения.Any suitable route of administration may be used for the compositions of the present invention, including oral, parenteral (subcutaneous, intramuscular, or intravenous) and inhalation routes.

В соответствии с настоящим изобретением термины пероральный или перорально относятся к введению в организм через рот, при этом абсорбция происходит в одной или нескольких из следующих областей тела: рот, желудок, тонкий кишечник и мелкие кровеносные сосуды слизистой оболочки полости рта.In accordance with the present invention, the terms oral or oral refers to the introduction into the body through the mouth, with absorption occurring in one or more of the following areas of the body: mouth, stomach, small intestine and small blood vessels of the oral mucosa.

Неограничивающие примеры лекарственных форм NAC для перорального введения включают, например, таблетки, таблетки, покрытые оболочкой, гранулы, пилюли, капсулы, жидкости, гели, сиропы, суспензии и тому подобное, для перорального приема внутрь индивидуумом. Подходящие носители для перорального введения хорошо известны в данной области техники.Non-limiting examples of oral dosage forms of NAC include, for example, tablets, coated tablets, granules, pills, capsules, liquids, gels, syrups, suspensions, and the like, for oral ingestion by an individual. Suitable carriers for oral administration are well known in the art.

Для парентерального введения NAC может быть составлен в виде водных растворов, например, вFor parenteral administration, NAC can be formulated as aqueous solutions, for example in

- 2 043054 физиологически совместимых буферах или физиологическом солевом буфере (физиологическом растворе). Лекарственные формы для инъекций могут представлять собой единичные дозированные формы, например, ампулы, или контейнеры с множественными дозами с необязательно добавленным консервантом.- 2 043054 physiologically compatible buffers or physiological saline buffer (saline). Dosage forms for injection may be in unit dosage forms, for example, ampoules, or multi-dose containers with an optionally added preservative.

Для введения путем ингаляции NAC обычно может быть составлен в виде водных растворов и распыляться с помощью обычных распылителей, изготовленных из пластика или стекла, так что пациент получает оптимальное количество частиц подходящего размера. NAC также можно вводить прямой инстилляций в нижние дыхательные пути путем интратрахеального введения или введения через слизистую; или прямую инстилляцию NAC можно осуществлять с помощью внутрилегочного аэрозольного распылителя или микроформатного аэрозольного распылителя.For administration by inhalation, NAC can typically be formulated in aqueous solutions and sprayed using conventional nebulizers made of plastic or glass so that the patient receives an optimal amount of appropriately sized particles. NAC can also be administered by direct instillation into the lower respiratory tract by intratracheal or mucosal administration; or direct instillation of NAC can be done with an intrapulmonary nebulizer or a microformat nebulizer.

Фармацевтические композиции по настоящему изобретению могут быть изготовлены обычными способами, в соответствии с процессами, хорошо известными в данной области техники.Pharmaceutical compositions of the present invention can be manufactured by conventional methods, in accordance with processes well known in the art.

Предпочтительными фармацевтическими композициями по настоящему изобретению являются таблетки и флаконы.Preferred pharmaceutical compositions of the present invention are tablets and vials.

Количество NAC для применения в соответствии с настоящим изобретением может варьировать в зависимости от способа введения, выбранного вида композиции, индивидуальных характеристик пациента, продолжительности лечения и вида сопутствующей терапии.The amount of NAC for use in accordance with the present invention may vary depending on the route of administration, the type of composition chosen, the individual characteristics of the patient, the duration of treatment and the type of concomitant therapy.

Например, эффективное количество NAC может вызывать сокращение, уменьшение, ослабление, ограничение или уменьшение интенсивности, выраженности, степени бактериальной инфекции или связанных с ней симптомов, вызванных чувствительным штаммом ВСС и S. maltophilia у индивидуумов, страдающих хроническим заболеванием, поражающим также нижние отделы дыхательной системы, таким как, например, муковисцидоз и хроническое обструктивное заболевание легких.For example, an effective amount of NAC can cause reduction, reduction, reduction, limitation, or reduction in the intensity, severity, extent, bacterial infection or associated symptoms caused by a susceptible strain of BCC and S. maltophilia in individuals suffering from a chronic disease that also affects the lower respiratory system. such as, for example, cystic fibrosis and chronic obstructive pulmonary disease.

В конкретном аспекте эффективное количество NAC может уменьшать частоту, продолжительность или смягчать/ослаблять/ уменьшать тяжесть эпизодов легочных обострений, вызванных, по меньшей мере частично, чувствительным штаммом ВСС и S. maltophilia у индивидуума, страдающего хроническим заболеванием, поражающим также нижние отделы дыхательной системы, таким как, например, муковисцидоз и хроническое обструктивное заболевание легких, и/или ускорять улучшение симптомов указанных эпизодов.In a specific aspect, an effective amount of NAC can reduce the frequency, duration, or alleviate/attenuate/reduce the severity of episodes of pulmonary exacerbations caused, at least in part, by a susceptible strain of SCD and S. maltophilia in an individual suffering from a chronic disease that also affects the lower respiratory system, such as, for example, cystic fibrosis and chronic obstructive pulmonary disease, and/or accelerate the improvement of the symptoms of these episodes.

В соответствии с одним из вариантов осуществления эффективное количество NAC может варьировать от 100 до 5800 мг/день для введения в однократной дозе или в повторных дозах. Предпочтительно, эффективное количество NAC может варьировать от 100 до 4600 мг/день.According to one embodiment, an effective amount of NAC may range from 100 to 5800 mg/day for administration in a single dose or in repeated doses. Preferably, the effective amount of NAC may vary from 100 to 4600 mg/day.

В Европейском Союзе и Соединенных Штатах коммерчески доступны различные лекарственные формы, содержащие NAC, с различными показаниями к применению. Фармацевтические композиции, содержащие NAC, продаются, например, в Италии под торговым знаком FLUIMUCIL®.In the European Union and the United States, various formulations containing NAC are commercially available for various indications. Pharmaceutical compositions containing NAC are sold, for example, in Italy under the trademark FLUIMUCIL®.

Точный состав, способ введения и дозировка могут быть выбраны лечащим врачом с учетом состояния пациента.The exact composition, route of administration and dosage can be selected by the attending physician, taking into account the condition of the patient.

Изобретение будет ниже дополнительно проиллюстрировано следующим неограничивающим примером.The invention will be further illustrated below by the following non-limiting example.

ПримерыExamples

Материалы/способы: Минимальные ингибирующие концентрации (MIC) NAC для 16 клинических изолятов S. maltophilia и 16 клинических изолятов ВСС (а именно, В. cepacia, В. cenocepacia, В. multivorans, В. metallica, В. seminalis, В. stabilis) определяли способом микроразведений в бульоне. Антимикробную активность и активность NAC, препятствующую образованию биопленок, дополнительно исследовали на восьми отобранных штаммах (4 изолята S. maltophilia и 4 изолята ВСС), для которых MIC составила 16 мг/мл. Антимикробную активность оценивали, отслеживая влияние субминимальных ингибирующих концентраций (суб-MIC) (т.е. 4 и 8 мг/мл) на кривые роста, и анализируя активность по времени гибели (в концентрациях 16 и 32 мг/мл). Способность NAC ингибировать образование биопленок (в концентрациях 4, 8 и 16 мг/мл) исследовали с использованием высокопроизводительного МВЕС анализа и оценивали по количеству жизнеспособных клеток (VCC).Materials/methods: Minimum inhibitory concentrations (MICs) of NAC for 16 clinical isolates of S. maltophilia and 16 clinical isolates of BCC (namely, B. cepacia, B. cenocepacia, B. multivorans, B. metallica, B. seminalis, B. stabilis ) was determined by the broth microdilution method. The antimicrobial and biofilm-inhibiting activity of NAC was further investigated in eight selected strains (4 S. maltophilia isolates and 4 BCC isolates) for which the MIC was 16 mg/mL. Antimicrobial activity was assessed by monitoring the effect of sub-minimum inhibitory concentrations (sub-MICs) (ie 4 and 8 mg/mL) on growth curves and by analyzing activity by time of death (at 16 and 32 mg/mL concentrations). The ability of NAC to inhibit biofilm formation (at concentrations of 4, 8 and 16 mg/ml) was examined using a high throughput MBEC assay and assessed by viable cell count (VCC).

Результаты: MIC NAC составила 16 мг/мл для девяти и семи изолятов S. maltophilia и ВСС, соответственно, и 32 мг/мл для оставшихся изолятов. В суб-MIC концентрациях NAC замедлял рост всех тестируемых изолятов. В исследовании активности по времени гибели NAC в концентрации 32 мг/мл обладал бактерицидной активностью (т.е. уменьшение бактериального инокулята составило 3 log и более) в отношении S. maltophilia и одного изолята ВСС, а для трех дополнительных изолятов (два S. maltophilia и один ВСС) уменьшение составило 1,1-1,7 log КОЕ/мл, при этом для оставшихся изолятов уменьшение составило <1 log КОЕ/мл. Увеличение биопленки составило 6,7-7,1 log КОЕ/стержень планшета (peg) и 5,1-6,6 log КОЕ/стержень планшета (peg) для S. maltophilia и ВСС, соответственно. Было обнаружено, что NAC ингибирует образование биопленок S. maltophilia и двумя изолятами ВСС дозозависимым образом. Alog КОЕ/стержень планшета (peg) в сравнении с контролем варьирует от 0,75 до 3,8 log КОЕ/стержень планшета (peg) и от 2,5 до 5,8 log КОЕ/стержень планшета (peg) при концентрациях NAC 8 мг/мл и 16 мг/мл, соответственно.Results: The MIC of NAC was 16 mg/ml for nine and seven isolates of S. maltophilia and BCC, respectively, and 32 mg/ml for the remaining isolates. At sub-MIC concentrations, NAC retarded the growth of all tested isolates. In a time-of-death activity study, NAC at 32 mg/mL had bactericidal activity (i.e. bacterial inoculum reduction of 3 log or more) against S. maltophilia and one BCC isolate, and for three additional isolates (two S. maltophilia and one BCC) the reduction was 1.1-1.7 log CFU/mL, with the remaining isolates decreasing by <1 log CFU/mL. The increase in biofilm was 6.7-7.1 log cfu/plate rod (peg) and 5.1-6.6 log cfu/plate rod (peg) for S. maltophilia and BCC, respectively. NAC was found to inhibit biofilm formation by S. maltophilia and two BCC isolates in a dose-dependent manner. Alog cfu/plate stem (peg) compared to control ranges from 0.75 to 3.8 log cfu/plate stem (peg) and 2.5 to 5.8 log cfu/plate stem (peg) at NAC concentrations of 8 mg/ml and 16 mg/ml, respectively.

- 3 043054- 3 043054

В заключение, для NAC было показано наличие характерной антимикробной активности в отношении штаммов ВСС и S. maltophilia. Помимо того, что NAC ингибирует рост в концентрациях >16 мг/мл и замедляет скорость роста в субминимальных ингибирующих концентрациях, также было обнаружено, что NAC обладает некоторой цитотоксичной активностью в отношении ВСС и S. maltophilia, иногда достигая бактерицидного эффекта (т.е. условно определенного как уменьшение бактериального инокулята на 3 log и более). Поразительно, что была показана также многообещающая эффективность NAC в профилактике образования этими патогенами биопленок.In conclusion, NAC has been shown to have characteristic antimicrobial activity against strains of BCC and S. maltophilia. In addition to inhibiting growth at concentrations >16 mg/ml and slowing growth rate at sub-minimal inhibitory concentrations, NAC has also been found to have some cytotoxic activity against BCC and S. maltophilia, sometimes reaching a bactericidal effect (i.e. conventionally defined as a reduction in bacterial inoculum of 3 log or more). Strikingly, NAC has also shown promising efficacy in preventing biofilm formation by these pathogens.

Claims

1. Use of N-acetylcysteine (NAC) to inhibit or suppress growth and/or kill sensitive strains selected from the complex of Burkholderia cepacia (BCC) and Stenotrophomonas maltophilia (S. maltophilia).

2. The use of NAC according to claim 1 for the treatment of a pulmonary bacterial infection caused by a susceptible pathogen strain selected from a complex of BCC and S. maltophilia.

3. The use of NAC according to claim 2 for the treatment of episodes of pulmonary exacerbations caused by a susceptible pathogen strain selected from BCC and S. maltophilia in an individual suffering from a chronic disease, in which the chronic disease is cystic fibrosis or chronic obstructive pulmonary disease (COPD).

4. Use according to claim 3, wherein the NAC is administered by inhalation.