EA041461B1

EA041461B1 - Ингибиторы тирозинкиназы брутона

Info

Publication number: EA041461B1
Application number: EA201891626
Authority: EA
Inventors: Ксибин Лиао; Ждиа Ли; Жиджиан Лю; Юбо Жоу; Анхуи Гао
Original assignee: Зибо Биополар Чангшенг Фармасьютикал Ко. Лтд.; Шанхай Инститьют Оф Материа Медика; Чайниз Академи Оф Сайнсес
Priority date: 2016-01-21
Filing date: 2017-01-17
Publication date: 2022-10-26

Description

Данная заявка испрашивает приоритет по предварительной заявке США № 62/281252, поданной 21 января 2016 г., которая включена посредством ссылки для всех целей, как если бы полностью была представлена в данном документе.

Область техники

В данном документе описаны ингибиторы тирозинкиназы Брутона, способы получения таких ингибиторов и фармацевтические композиции, содержащие такие ингибиторы.

Уровень техники

Тирозинкиназа Брутона (Btk) играет важную роль в сигнальной трансдукции в В-клетках и является фактором, дающим вклад в выживание, дифференциацию, пролиферацию и активацию В-клеток. На данный момент существует необходимость в способах лечения заболеваний, в которых принимают участие В-клетки или тучные клетки. Также известно, что Btk принимает участие в активации тучных клеток и в физиологических функциях тромбоцитов. Следовательно, ингибиторы Btk являются эффективными для лечения заболеваний, в которых принимают участие В-клетки или тучные клетки, например аллергических заболеваний, аутоиммунных заболеваний, воспалительных заболеваний, тромбозмболических заболеваний и раковых заболеваний.

Сущность изобретения

Ингибиторы Btk, описанные в данном документе имеют формулу (I)

где А представляет собой CR. 1;

каждый из В, С и D представляет собой N или С-Н при условии, что только один или два из А, В, С и D могут представлять собой N;

R¹ представляет собой водород, ОН, CN, NHOH или CONH2;

R² представляет собой

-Х-Е представляет собой одно из следующего:

(1) X представляет собой О, OCR^aR^b, CR^aR^bO, S(O), S(O)₂, CR^aR^b, NR^c(C=O), C=ONR^c или связь; и Е представляет собой водород, фенил, нафтил, тетрагидронафтил, инденил, дигидроинденил, замещенный одним-тремя заместителями R⁵; или 3-7-членное насыщенное или частично ненасыщенное карбоциклическое кольцо, 5-6-членное моноциклическое гетероарильное кольцо, содержащее 1-4 гетероатома, независимо выбранных из азота, кислорода или серы, 4-7-членное насыщенное или частично ненасыщенное гетероциклическое кольцо, содержащее 1-3 гетероатома, независимо выбранных из азота, кислорода или серы, или 7-10-членное бициклическое насыщенное или частично ненасыщенное гетероциклическое кольцо, содержащее 1-5 гетероатомов, независимо выбранных из азота, кислорода или серы; или (2) -Х-Е представляет собой водород, галоген, -OR^a, -O(CH2)1.4R^a, -CN, -NO2;

R⁴ и R⁵, каждый независимо, выбраны из группы, состоящей из водорода, галогена, гидрокси, циано, OCF₃, OCF2H, С1.₆алкила, необязательно замещенного одним-пятью атомами фтора, С₃.₆циклоалкила, необязательно замещенного одним-пятью атомами фтора, С1.₄алкокси, необязательно замещенного одним-пятью атомами фтора, С1.₄алкилтио, необязательно замещенного одним-пятью атомами фтора, C₁.₄алкилсульфонила, необязательно замещенного одним-пятью атомами фтора, карбокси, С1.₄алкилоксикарбонила и С1.₄алкилкарбонила;

R^a и R^b, каждый независимо, представляют собой водород, фтор или C₁.₃алкил, необязательно замещенный одним-пятью атомами фтора;

R^c представляет собой водород или C₁.₃алкил, необязательно замещенный одним-пятью атомами фтора;

R³ выбран из группы, состоящей из:

- 1 041461

где Y представляет собой С(=О), ОС(=О), NHC(=O), S=O, S(=O)₂ или NHS(=O)2; и R⁶, R⁷, R⁸, каждый независимо, представляют собой водород, галоген, CN, С_1-4алкил, С_1-6алкоксиалкил, С_1-8алкиламиноалкил или С_1-4алкилфенил; или R⁷ и R⁸, взятые вместе, образуют связь, или R³ выбран из группы, состоящей из:

Y представляет собой С(=О), ОС(=О), NHC(=O), S=O, S(=O)2 или NHS(=O)2;

R⁶, R⁷, R⁸, каждый независимо, представляют собой водород, галоген, CN, С_1-4 алкил, С_1-6алкоксиалкил, С_1-8алкиламиноалкил или С_1-4алкилфенил; и

R⁷ и R⁸ необязательно взяты вместе с образованием связи;

его изомер, или его таутомер.

В одном аспекте изобретения в формуле (I) E выбран из фенила, нафтила или дигидроинденила, каждый из которых необязательно замещен одним-тремя заместителями R⁵.

В другом аспекте изобретения в формуле (I) R³ выбран из группы, состоящей из:

В другом аспекте изобретения в формуле (I) один из В, С и D представляет собой N.

В другом аспекте изобретения в формуле (I) В представляет собой N, и С и D представляют собой С-Н.

В другом аспекте изобретения соединение выбрано из группы, состоящей из:

- 2 041461

- 3 041461

- 4 041461

- 5 041461

В другом аспекте изобретения, соединение выбрано из группы, состоящей из:

- 6 041461

- 7 041461

- 8 041461

Подробное описание сущности изобретения

Способы, описанные в данном документе, включают в себя введение субъекту, нуждающемуся в этом, композиции, содержащей терапевтически эффективное количество одного или большего количества соединений, ингибиторующих Btk, описанных в данном документе.

Пролекарство означает любое соединение, которое высвобождает активное исходное лекарственное средство в соответствии с формулой I in vivo, когда такое пролекарство вводят субъекту, относящемуся к млекопитающим. Пролекарства соединения формулы I получают путем изменения функциональных групп, присутствующих в соединении формулы I, таким образом, чтобы данные изменения можно было расщепить in vivo с высвобождением исходного соединения. Пролекарства могут быть получены путем изменения функциональных групп, присутствующих в соединениях, таким образом, чтобы эти изменения расщеплялись, как при рутинных операциях, так и in vivo, до исходных соединений.

Таутомеры означают соединения, образованные в результате явления, при котором протон одного атома молекулы сдвигается к другому атому. Таутомеры также относятся к одному из двух или большего количества структурных изомеров, которые существуют в равновесии и легко переходят из одной изомерной формы в другую. Специалист в данной области техники должен понимать, что возможны другие таутомерные расположения кольцевых атомов. Все такие изомерные формы этих соединений явно включены в данное описание.

Изомеры обозначают соединения, имеющие одинаковую молекулярную формулу, но отличающиеся природой или последовательностью связывания своих атомов или расположением своих атомов в

- 9 041461 пространстве. Изомеры, которые отличаются расположением своих атомов в пространстве, называются стереоизомерами. Стереоизомеры, которые не являются зеркальными отображениями друг друга, называют диастереомерами, а те, которые являются не совпадающими при наложении, зеркальными отображениями друг друга, называют энантиомерами. Когда соединение имеет асимметрический центр, например, оно связано с четырьмя различными группами, возможна пара энантиомеров. Хиральное соединение может существовать или в виде отдельного энантиомера, или в виде их смеси. Если не указано иное, предполагается, что описание включает в себя отдельные стереоизомеры, а также смеси.

Некоторые соединения по данному изобретению могут существовать в несольватированных формах, а также в сольватированных формах, включая гидратированные формы. Сольваты относятся к комплексу, полученному путем объединения молекул растворителя с соединением формулы I. Растворитель может представлять собой органическое соединение, неорганическое соединение или их смесь.

Фармацевтически приемлемые соли представляют те соли, которые в рамках медицинской оценки пригодны для применения в контакте с тканями людей и низших животных без нежелательной токсичности, раздражения, аллергической реакции и тому подобного и сопоставимы с разумным соотношением польза/риск. Они могут быть получены при заключительном выделении и очистке соединений по данному изобретению или отдельно путем приведения свободной основной функциональной группы в контакт с пригодной неорганической кислотой, такой как соляная кислота, фосфорная кислота или серная кислота, или с органической кислотой, такой как, например, аскорбиновая кислота, лимонная кислота, винная кислота, молочная кислота, малеиновая кислота, малоновая кислота, фумаровая кислота, гликолевая кислота, янтарная кислота, пропионовая кислота, уксусная кислота, метансульфоновая кислота и тому подобное. Кислотную функциональную группу можно приводить в контакт с органическим или неорганическим основанием, таким как гидроксид натрия, гидроксид калия или гидроксид лития.

Терапевтически эффективное количество означает количество соединения или композиции по данному изобретению, эффективное для ингибирования тирозинкиназы Брутона и получения таким образом требуемого терапевтического эффекта.

При использовании в данном документе, термин алкил относится к одновалентной неразветвленной или разветвленной цепи, насыщенному алифатическому углеводородному радикалу, имеющему несколько атомов углерода в определенной последовательности. Например, C₁.₆алкил относится в любому из изомеров алкила гексила и алкила пентила, а также к н-, изо-, втор- и трет-бутил-, н-и изо-пропилу, этилу и метилу. Алкил также включает в себя насыщенные алифатические углеводородные радикалы, в которых один или большее количество атомов водорода заменены дейтерием, например CD₃.

Термин разветвленный алкил относится к алкильной группе, как указано выше, за исключением того, что в указанном ряде исключены алкильные группы с неразветвленной цепью. Как указано в данном документе, разветвленный алкил включает в себя алкильные группы, в которых алкил присоединен к оставшейся части соединения через вторичный или третичный углерод. Например, изопропил представляет собой разветвленную алкильную группу.

Термин циклоалкил относится к любому моноциклическому кольцу алкана, содержащему несколько атомов углерода в определенной последовательности. Например, C₃.₆циклоалкил относится к циклопропилу, циклобутилу, циклопентилу и циклогексилу.

Термин галоген относится к фтору, хлору, брому и йоду (а альтернативном варианте именуемые фторо, хлоро, бромо и йодо).

Термин галогеналкил относится к алкильной группе, как указано выше, в которой один или большее количество атомов водорода заменены галогеном (т.е. F, Cl, Br и/или I). Например, C₁.₆галогеналкил относится к C1-C6 линейной или разветвленной алкильной группе, как указано выше, с одним или большим количеством галогенных заместителей. Термин фторалкил имеет аналогичное значение за исключением того, что галогенные заместители ограничены фтором. Пригодные фторалкилы включают в себя ряд (CH2)₀_₄CF₃.

Термин С(О) или СО относится к карбонилу. Термин S(O)2 или SO2 относится к сульфонилу. Термин S(O) или SO относится к сульфинилу.

Термин арил относится к фенилу, нафтилу, тетрагидронафтилу, инденилу, дигидроинденилу и тому подобному. Арилом, представляющим особый интерес, является фенил.

Термин гетероарил относится к (i) 5- или 6-членному гетероароматическому кольцу, содержащему от 1 до 4 гетероатомов, независимо выбранных из N, О и S, или (ii) представляет собой гетеробициклическое кольцо, выбранное из хинолинила, изохинолинила и хиноксалинила. Пригодные 5- и 6-членные гетероароматические кольца включают в себя, например, пиридил (также называемый пиридинилом), пирролил, пиразинил, пиримидинил, пиридазинил, триазинил, тиенил, фуранил, имидазолил, пиразолил, триазолил, тетразолил, оксазолил, изооксазолил, оксадиазолил, оксатриазолил, тиазолил, изотиазолил и тиадиазолил. Представляющий интерес класс гетероарилов состоит из (i) 5- и 6-членных гетероароматических колец, содержащих от 1 до 3 гетероатомов, независимо выбранных из N, О и S, и (ii) гетеробициклических колец, выбранных из хинолинила, изохинолинила и хиноксалинила. Гетероарилами, представляющими особый интерес, являются пирролил, имидазолил, пиридил, пиразинил, хинолинил (или хинолил), изохинолинил (или изохинолил) и хиноксалинил.

- 10 041461

Примеры 4-7-членных насыщенных гетероциклических колец в рамках данного изобретения включают в себя, например, азетидинил, пиперидинил, морфолинил, тиоморфолинил, тиазолидинил, изотиазолидинил, оксазолидинил, изоксазолидинил, пирролидинил, имидазолидинил, пиперазинил, тетрагидрофуранил, тетрагидротиенил, пиразолидинил, гексагидропиримидинил, тиазиналил, тиазепанил, азепанил, диазепанил, тетрагидропиранил, тетрагидротиопиранил и диоксанил. Примеры 4-7-членных ненасыщенных гетероциклических колец в рамках данного изобретения включают в себя мононенасыщенные гетероциклические кольца, соответствующие насыщенным гетероциклическим кольцам, перечисленным в предыдущем предложении, в которых одинарная связь заменена двойной связью (например, одинарная связь углерод-углерод заменена двойной связью углерод-углерод).

Понятно, что конкретные кольца, перечисленные выше, не накладывают ограничения на кольца, которые можно использовать в данном изобретении. Эти кольца являются только иллюстративными.

Синтетические способы получения соединений по данному изобретению проиллюстрированы на следующих схемах, способах и примерах. Исходные вещества коммерчески доступны или могут быть получены в соответствии с методиками, известными в данной области техники или описанными в данном документе. Соединения по данному изобретению проиллюстрированы с помощью конкретных примеров, показанных ниже. Однако эти конкретные примеры не следует истолковывать, как образующие единственный класс, который считается изобретением. Эти примеры дополнительно иллюстрируют подробности получения соединений по данному изобретению. Специалисты в данной области техники без труда поймут, что для получения таких соединений можно использовать известные изменения в условиях и способах.

Соединения, ингибирующие Btk, формулы I можно получить с помощью способов, хорошо известных в области органической химии. Исходные вещества, используемые для синтеза этих соединений, могут быть или синтезированы, или получены из коммерческих источников, таких как, но не ограничиваясь ими, химические компании Китая или Sigma-Aldrich Chemical Co. (Сент-Луис, Миссури) в Китае. Соединения, описанные в данном документе, и другие родственные соединения, имеющие различные заместители, необязательно синтезируют с использованием таких подходов и веществ, как описаны, например, в March, ADVANCED ORGANIC CHEMISTRY 4th Ed., (Wiley 1992); Carey and Sundberg, ADVANCED ORGANIC CHEMISTRY 4th Ed., Vols. A and В (Plenum 2000, 2001); Fieser and Fieser Reagents for Organic Synthesis, Volumes 1-17 (John Wiley and Sons, 1991); Rodd Chemistry of Carbon Compounds, Volumes 1-5 и Supplemental (Elsevier Science Publishers, 1989); Organic Reactions, Volumes 1-40 (John Wiley and Sons, 1991); и Larock Comprehensive Organic Transformations (VCH Publishers Inc., 1989). Другие способы синтеза соединений, описанных в данном документе, можно найти в публикации заявки на патент США № US 2011/0130429 A1, Burgey et al. Bioorganic& Medicinal Chemisty Letters 10 (2006) 50525056. Определения химических терминов, используемых в данной заявке, можно найти в этих источниках (если не определено иначе в данном документе). В качестве руководства можно использовать следующие способы синтеза.

В процессе синтеза может быть необходимо и/или желательно защищать чувствительные или реакционноспособные группы на любой из участвующих молекул. Это достигается с помощью традиционных защитных групп, таких как описанные в T.W Greene and P.G.M. Wutts Protective groups in Organic Synthesis 3rd Edition, John Wiley and Sons, 1999. Эти защитные группы необязательно удаляют на подходящей последующей стадии с использованием способов, хорошо известных в данной области техники. Продукты реакций необязательно выделяют и очищают. Если необходимо, используют, но не ограничиваясь ими, традиционные способы: фильтрование, перегонку, кристаллизацию, хроматографию и тому подобное. Такие вещества необязательно характеризуют с использованием традиционных способов, включая физические константы и данные спектров.

Соединения, описанные в данном документе, могут иметь один или большее количество стереоцентров, и каждый центр может существовать в R- или S-конфигурации. Соединения, представленные в данном документе, включают в себя все диастереомерные, энантиомерные и эпимерные формы, а также их подходящие смеси.

Соединения, ингибирующие Btk, формулы I могут представлять собой, например, производные 1Hпиразоло[4,3-с]пиридина. В частности, соединения, ингибирующие Btk, формулы I могут представлять собой, например, соединения F, где R₁-R₂ имеют ранее определенные значения. Неограничивающий пример синтетического подхода к получению соединений F может быть представлен общим путем синтеза, показанным на схеме I и схеме II.

- 11 041461

Схема I.

R₂ ‘ ‘

В соответствии со схемой I различные альдегиды (В), в которых FG представляет собой функциональную группу (например, сложный эфир, защищенные анилины, защищенные фенолы, бромид), могут быть присоединены к ряду замещенных o-галогенароматических соединений А с образованием спирта, с последующим окислением продукта С с помощью СгОз в ацетоне, что дает бензоил D. Замыкание цикла D с помощью (NH₂)₂-H₂O при нагревании с обратным холодильником приводит к получению ключевых промежуточных индазолов Е. Промежуточное соединение Е сочетают с R2OH по реакции Мицунобу или с R2OTs посредством замещения, что дает промежуточное соединение G, которое затем дериватизируют с помощью катализируемой металлом реакции кросс-сочетания с использованием подходяще замещенной фенилбороновой кислоты (можно также использовать соответствующие эфиры бороной кислоты), что непосредственно дает требуемые соединения F. В типичной методике используют смесь промежуточных соединений G, медного катализатора (например, Cu(OAc)₂), основания (например, TEA, ДИПЭА или тому подобного) и арилбороновой кислоты или сложного эфира арилбороновой кислоты в пригодном растворителе, таком как ДХМ или толуол, чтобы получить соединения F (FG превращают в группы, определенные для XAr).

Схема II.

В соответствии со схемой II соединения F можно получить другим путем с помощью селективного орто-литирования в сухом ТГФ с ЛДА, полученном in suitu, a затем приведения в контакт с ДМФА, чтобы получить альдегид Н, который реагирует с (NH₂)₂-H₂O при нагревании с обратным холодильником, что дает ключевые промежуточные индазолы I, затем региоселективного бромирования или йодирования с помощью Br₂/I₂ или БСИ/ИСИ (NBS/NIS), что дает соединение J. Реакция кросс-сочетания азота в положении 1 на индазоле с R2OH по реакции Мицунобу или с R2Ots посредством замещения дает промежуточное соединение K, которое затем дериватизируют с помощью катализируемой металлом реакции кросс-сочетания с использованием подходяще замещенной фенилбороновой кислоты (также можно использовать соответствующие эфиры бороновой кислоты), с получением ключевого промежуточного соединения G или с получением непосредственно требуемых соединений F. Превращение из G в F осуществляют подобным образом, как ранее было показано на схеме I.

Как альтернативный вариант, соединение F можно получить из соединений G, в которых FG представляет собой функциональную группу (например, сложный эфир, защищенные анилины, защищенные фенолы, бромид), которую легко можно превратить в группы, определенные для XAr. Неограничивающие примеры пригодных функциональных групп в соединениях G представляют собой бензиловый простой эфир, дибензиламин или метиловый сложный эфир, которые можно обработать основанием или Pd/C/H₂ с образованием ключевых промежуточных соединений G-1a, G-2a, G-3a, затем с получением соответствующих соединений F-1, F-2, F-3, F-4 на схеме III.

- 12 041461

Схема III.

Реакции снятия защиты для защитных групп соединения F на схеме IV известны и могут быть осуществлены способами, описанными ниже. Примеры в данном документе представляют собой (а) реакцию снятия защиты в кислотных условиях для защитной группы Boc и (b) реакции снятия защиты на основании гидрогенолиза бензильной защитной группы. После снятия защиты в этих условиях сочетание с, но не ограничиваясь им, хлорангидридом, таким как, но не ограничиваясь им, арилоилхлоридом, завершает синтез с получением соединения F-b.

Схема IV.

χ-Ar χ-Ar Х-Ar

Общие экспериментальные условия: препаративную тонкослойную хроматографию (ПТСХ) осуществляли на пластинках 20x20 см (силикагель с размером 500 мкм). Хроматографию на силикагеле осуществляли на системе для флэш-хроматографии Biotage Horizon. Спектры 1H ЯМР записывали на спектрометре Bruker Ascend TM 400 при 400 МГц при 298°K, и химические сдвиги даны в частях на миллион (м.д.) относительно остаточного сигнала протона в дейтерированных растворителях: CDCl3 при δ=7,26 м.д. и СН3ОН или CH3OD при δ=3,30 м.д. Спектры ЖХМС на спектрометре Agilent Technologies 1260 Infinity или 6120 Quadrupole. Подвижная фаза для ЖХ представляла собой ацетонитрил (А) и воду (В) с 0,01% муравьиной кислоты, и градиент элюента составлял 5-95% А за 6,0 мин, 60-95% А за 5,0 мин, 80100% А за 5,0 мин и 85-100% А за 10 мин с использованием капиллярной колонки SBC18 с размерами 50 ммх4,6 ммх2,7 мкм. Масс-спектр (МС) был получен с помощью электрораспылительной ионной массспектроскопии (ЭРИ). Все температуры приведены в градусах Цельсия, если не указано иное.

Условия аналитической ВЭЖХ с масс-спектрометрическим детектированием:

ЖХ1: колонка: SB-C18 50 ммх4,6 ммх2,7 мкм;

температура: 50°С;

элюент: 5:95 объем/объем ацетонитрил/вода+0,01% муравьиной кислоты за 6 мин.

- 13 041461

Скорость потока: 1,5 мл/мин, введение 5 мкл;

детектирование: детектор с фотодиодной матрицей (PDA), 200-600 нм;

МС: интервал мас. 150-750 а.е.м.; электрораспылительная ионизация в режиме положительных ионов;

ЖХ2: колонка: SB-C18 50 ммх4,6 ммх2,7 мкм;

температура: 50°С;

элюент: 5:95 до 95:5 объем/объем ацетонитрил/вода+0,05% ТФУ за 3,00 мин.

Скорость потока: 1,5 мл/мин, введение 5 мкл;

МС: интервал масс 150-750 а.е.м.; электрораспылительная ионизация в режиме положительных ионов;

ЖХ3: колонка: SB-C18 50 ммх4,6 ммх2,7 мкм;

температура: 50°С;

элюент: от 10:90 до 98:2 объем/объем ацетонитрил/вода+0,05% ТФУ за 3,75 мин.

Скорость потока: 1,0 мл/мин, введение 10 мкл;

МС: интервал масс 150-750 а.е.м.; электрораспылительная ионизация в режиме положительных ионов.

Перечень сокращений.

АсОН=уксусная кислота; Alk=алкил; Ar=арил; Boc=трет-бутоксикарбонил; ш.с.=широкий синглет; CH₂Cl₂=дихлорметан; д=дублет; дд=дублет дублетов; DBU=1,8-диазабицикло[5.4.0]ундец-7-ен; ДХМ=дихлорметан; DEAD=диэтилазодикарбоксилат; ДМФА=N,N-диметилформамид;

ДМСО=диметилсульфоксид; ЭА=этилацетат; ЭРИ=электрораспылительная ионизация; Et=этил; EtOAc=этилацетат; EtOH=этиловый спирт; ч=часы; НОАс=уксусная кислота; LiOH=гидроксид лития; м=мультиплет; Me=метил; MeCN=ацетонитрил; MeOH=метиловый спирт; MgSO₄=сульфат магния; мин=минуты; МС=масс-спектроскопия; NaCl=хлорид натрия; NaOH=гидроксид натрия; Na₂SO₄=сульфат натрия; ЯМР=спектроскопия ядерного магнитного резонанса; ПЭ=петролейный эфир; PG=защитная группа; Ph=фенил; кт=комнатная температура; с=синглет; т=триплет; ТФУ=трифторуксусная кислота; ТГФ=тетрагидрофуран; Ts=п-толуолсульфонил (тозил).

Соединения по данному изобретению можно получить в соответствии со следующими общими способами, подробно изложенными ниже. В некоторых вариантах реализации изобретения в данном документе представлены способы получения соединений, ингибирующих тирозинкиназу, описанных в данном документе. В некоторых вариантах реализации изобретения соединения, описанные в данном документе, синтезируют в соответствии со следующими схемами синтеза. В других вариантах реализации изобретения соединения синтезируют с использованием принципов, аналогичных описанным ниже, применяя подходящие альтернативные исходные вещества. Все ключевые промежуточные соединения получали в соответствии со следующими методиками.

Промежуточное соединение 1: (4-(2-хлор-3-метоксифенокси)фенил)бороновая кислота

2 3

Стадия А: 2-хлор-3-гидроксибензальдегид (1).

К суспензии 3-гидроксибензальдегида (5 г, 40,98 ммоль) в АсОН (10 мл) осторожно добавляли mpemBuOCl (5 мл, 45,08 ммоль) при перемешивании. Ей давали остыть и перемешивали в течение 16 ч, что давало белый осадок. Твердое вещество отфильтровывали, промывали Н₂О и сушили, что давало целевой продукт (3 г, 46,9%). 1Н-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ 10,66 (ш.с., 1H), 10,33 (с, 1H), 7,31-7,25 (м, 3Н).

Стадия В: 2-хлор-3-гидроксибензальдегид (2).

К раствору 2-хлор-3-гидроксибензальдегида 1 (3,4 г, 21,66 ммоль) в ДМФА (22 мл) добавляли K₂CO₃ (3,59 г, 26 ммоль), затем MeI (2 мл, 32,5 ммоль), и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч. После концентрирования в вакууме остаток перенесли в этилацетат, промывали Н2О,

- 14 041461 насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над Na2SO4 и концентрировали. Очистка с помощью колоночной хроматографии на силикагеле с этилацетатом/смесью изомеров гексана 1/5 давала целевой продукт (3,5 г, 95,1%). 1Н-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ 10,53 (с, 1H), 7,53 (д, J=7,6 Гц, 1H), 7,36-7,32 (м, 1H), 7,01 (д, J=8,8 Гц, 1H), 3,95 (с, 3Н).

Стадия С: 2-хлор-3-гидроксибензальдегид (3).

К раствору 2-хлор-3-метоксибензальдегида 2 (2 г, 11,7 ммоль) в ДХМ (50 мл) добавляли 3хлорнадбензойную кислоту (3 г, 17,5 ммоль). Смесь перемешивали в течение 12 ч при 40°С. После фильтрования остаток уплотняли до твердого вещества. Твердое вещество обессоливали в 18 мл МеОН, затем при охлаждении добавляли 5 мл 10%-ого NaOH. После перемешивания в течение 45 мин при 10°С смесь выдерживали при 30°С на роторном испарителе для удаления МеОН, затем добавляли 22 мл 5%-ого NaOH, и к раствору добавляли концентрированную HCl при охлаждении, затем экстрагировали (3x20) с помощью ЭА, промывали Н₂О, 5%-ным NaHCO₃, сушили над Na₂SO₄ и концентрировали в вакууме, что давало целевое соединение (1,2 г, 66,6%). ¹Н-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ 7,14-7,10 (м, 1H), 6,67 (д, J=8,4 Гц, 1H), 6,51 (д, J=8,4 Гц, 1H), 5,62 (с, 1H), 3,89 (с, 3Н).

Стадия D: 1-(4-бромфенокси)-2-хлор-3-метоксибензол (4).

К раствору 1-бром-4-йодбензола (2,68 г, 9,5 ммоль) в диоксене (40 мл) добавляли 3 (1,5 г, 9,5 ммоль), CuI (0,182 г, 0,95 ммоль), N,N-диметилглицинa гидрохлорид (0,396 г, 2,85 ммоль), Cs₂CO₃ (6,2 г, 19 ммоль). Смесь перемешивали при 105°С под N2 в течение 18 ч. Смесь фильтровали, уплотняли и экстрагировали ЭА. Органический слой промывали водой и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили с помощью безводного Na₂SO₄ и очищали с помощью флэш-хроматографии, что давало целевой продукт (1,2 г, 40,4%). 1Н-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ 7,43-7,39 (м, 2Н), 7,18-7,15 (м, 1H), 6,85-6,75 (м, 3Н), 6,65-6,15 (м, 1H), 3,93 (с, 3Н).

Стадия Е: 1-(4-бромфенокси)-2-хлор-3-метоксибензол (5).

Раствор 4 (1,2 г, 3,85 ммоль) в ТГФ (30 мл) охлаждали до -78°С под N2, добавляли по каплям н-BuLi (1,82 мл, 4,61 ммоль) при той же температуре. Смесь перемешивали в течение 30 мин при той же температуре. По каплям добавляли триизопропилборат (0,868 г, 4,61 ммоль) при той же температуре. Через 15 мин смеси давали охладиться до комнатной температуры и перемешивали в течение 2 ч, затем добавляли 2 н. HCl, чтобы установить рН=5, и перемешивали в течение 30 мин, затем смесь. Смесь экстрагировали ЭА. Органический слой промывали водой и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили с помощью безводного Na₂SO₄, что давало неочищенный целевой продукт (0,4 г неочищенного).

Пример 1: (R)-1-(3-(3-(4-феноксифенил)-1H-пиразоло[4,3-с]пиридин-1-ил)пирролидин-1-ил)проп-2ен-1-он

Н ОН

I ). »-BuI i. II Ф.-7Х - 0 ipa.ivcoH. n .' .

СЮ3. апстоп.

Q ^Вп 0-κι

Cl

О В^п

О

N ₍а '3

NHnNH; . н_:о _о Bn Eton, нафеилшш е обратным N х<™.ппышкт1 !'

О ^Вп

Ts ° , ; N Вос

-- - ‘ ............ - N

СбСОз.ДМФА

N бОфалусов

10%РФС.Н_:, _M ^N МеОН. кт ' X

N -------------N Си(ОАс),ТЕА,О2.

X МС. 4А, К1

ОДХМ/CFjCOOH, О ¹ N । ^N ~ Н А. ДХМ JI - kTN

Стадия А: (4-(бензилокси)фенил)(4-хлорпиридин-3-ил)метанол (2).

К раствору диизопропиламина (4,1 мл, 29,8 ммоль) в сухом ТГФ (64 мл) при -78°С добавляли раствор BuLi в гексане с концентрацией 2,5 М (15 мл, 29,8 ммоль). Смеси давали нагреться до 0°C и перемешивали в течение около 1 ч, затем раствор охлаждали до - 78°C и добавляли 4-хлорпиридин (3,07 г, 27,1 ммоль) в 10 мл сухого ТГФ. Реакционную смесь перемешивали в течение еще 4 ч, а затем добавляли соответствующий 4-(бензилокси)бензальдегид (5,75 г, 27,1 ммоль), и смесь перемешивали и давали нагреться до комнатной температуры в течение ночи. Реакционную смесь гасили Н₂О (25 мл) и смесь экст

- 15 041461 рагировали с помощью Et2O (3x50 мл). Органические фазы объединяли, сушили над Na₂SO₄. Летучие компоненты удаляли под вакуумом и остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (градиент: ДХМ/МеОН=200:1-50/1), что давало целевой продукт (2,5 г, выход 28,46%). 1Н-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ 8,86 (с, 1H), 8,36 (д, J=4,0 Гц, 1H), 7,39-7,23 (м, 8Н), 6,94 (д, J=8,0 Гц, 2Н), 6,12 (с, 1H), 5,03 (с, 2Н), 2,98 (с, 1H), 2,16 (с, 1H). ЖХМС: m/z=326, 328 [М+Н]+.

Стадия В: (4-(бензилокси)фенил)(4-хлорпиридин-3-ил)метанон (3).

Раствор (4-(бензилокси)феыил)(4-хлорпиридин-3-ил)метанола (2) (1 г, 3,07 ммоль) в сухом ацетоне (10 мл) охлаждали до 0°С и осторожно небольшими порциями добавляли CrO₃ (0,92 г, 9,23 ммоль). Полученный раствор перемешивали при комнатной температуре до полного потребления исходного вещества (3 ч), затем реакцию гасили 2-пропанолом (6 мл) и смесь перемешивали в течение 30 мин. В конце добавляли насыщенный раствор NaHCO₃ (50 мл) для осаждения солей хрома, которые отфильтровывали через целит и промывали CH₂Cl₂ (6x15 мл). Растворитель удаляли под вакуумом и остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (градиент: ДХМ/МеОН=200:1), что давало целевой продукт (0,7 г, выход 70,7%). 1Н-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ 8,61 (д, J=8,0 Гц, 1H), 8,58 (с, 1H), 7,79 (д, J=8,0 Гц, 2Н), 7,44-7,35 (м, 6Н), 7,04 (д, J=8,0 Гц, 2Н), 5,15 (с, 2Н). ЖХМС: m/z=324, 326 [М+Н]⁺.

Стадия С: 3-(4-(бензилокси)фенил)-1H-пиразоло[4,3-с]пиридин (4).

К раствору (4-(бензилокси)фенил)(4-хлорпиридин-3-ил)метанона (3) (0,7 г, 2,16 моль) в абсолютном этаноле (5 мл) при перемешивании добавляли гидразин (1,08 г, 17,3 моль). Раствор нагревали с обратным холодильником в течение 3 ч, затем охлаждали и продукт отфильтровывали и последовательно промывали водой и метанолом, что давало целевой продукт (0,54 г, выход 83%). ¹Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆): δ 13,48 (ш.с., 1H), 9,39 (с, 1H), 8,37 (д, J=8,0 Гц, 1H), 8,01 (д, J=8,0 Гц, 2Н), 7,56-7,35 (м, 6Н), 7,18 (д, J=8,0 Гц, 2Н), 5,20 (с, 2Н). ЖХМС: m/z=302 [М+Н]⁺.

Стадия D: (R)-трет-бутил-3 -(3-(4-(бензилокси)фенил)-1 Н-пиразоло[4,3-с]пиридин-1 -ил)пирролидин-1 карбоксилат (5).

В 3-горлую круглодонную колбу вместимостью 100 мл помещали раствор 3-(4-(бензилокси)фенил)1H-пиразоло[4,3-с]пиридина (4) (0,5 г, 1,66 ммоль) в N,N-диметилформамиде (41 мл), (S)-трет-бутил-3(тозилокси)пирролидин-1-карбоксилат (0,68 г, 1,99 ммоль) и Cs₂CO₃ (0,97 г, 2,98 ммоль). Полученный раствор перемешивали в течение 12 ч при 60°С, а затем гасили путем добавления 100 мл воды. Полученный раствор экстрагировали ЭА и органические слои объединяли. Органические фазы промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным NaHCO3. Растворитель удаляли под вакуумом и остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (градиент: ДХМ/МеОН=200:1-100:1), что давало целевой продукт (0,7 г, выход 89,7%). 1Н-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ 9,32 (ш.с., 1H), 8,45 (ш.с., 1H), 7,85-7,83 (м, 2Н), 7,37-7,36 (м, 1H), 7,04-7,02 (м, 2Н), 5,18-5,15 (м, 1H), 3,96-3,79 (м, 3Н), 3,63-3,59 (м, 1H), 2,89 (ш.с., 1H), 2,45 (ш.с., 1H), 1,47 (с, 9Н). ЖХМС: m/z=471 [М+Н]⁺.

Стадия Е: (R)-трет-бутил-3-(3-(4-гидроксифенил)-1 Н-пиразоло[4,3-с]пиридин-1 -ил)пирролидин-1 карбоксилат (6).

Суспензию (R)-трет-бутил-3-(3-(4-(бензилокси)фенил)-1 H-пиразоло[4,3-с]пиридин-1 ил)пирролидин-1-карбоксилата (5) (0,7 г, 1,48 ммоль) и 10% Pd/C (0,1 г) в МеОН (15 мл) гидрировали при 50 фунтов на квадратный дюйм Н₂ в течение 3 ч. Суспензию фильтровали через целит и концентрировали. Остаток сушили в вакууме, что давало целевой продукт (0,48 г, выход 85,7%). ЖХМС: m/z=381[М+Н]⁺.

Стадия F: (R)-трет-бутил-3-(3-(4-феноксифенил)-1Н-пиразоло[4,3-с]пиридин-1-ил)-пирролидин-1карбоксилат (7).

(R)-трет-бутил-3-(3-(4-гидроксифенил)-1H-пиразоло[4,3-с]пиридин-1-ил)пирролидин-1-карбоксилат (6) (50 мг, 0,1 ммоль), фенилбороновую кислоту (25,4 мг, 0,2 ммоль), TEA (21 мг, 0,2 ммоль) и молекулярные сита 4 А (0,1 г) добавляли к ДХМ (10 мл) во флаконе. Одной порцией добавляли ацетат меди (II) (18,8 мг, 0,1 ммоль). Смесь перемешивали в течение около 22 ч при комнатной температуре. Летучие компоненты удаляли под вакуумом до того, как вылить в Н₂О. Реакционную смесь экстрагировали ЭА, органическую фазу очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (градиент: ДХМ/МеОН=100/1-50/1), что давало целевой продукт (40 мг, выход 88,8%). ЖХМС: m/z=457 [М+Н]⁺.

Стадия G: (R)-1-(3-(3-(4-феноксифенил)-1H-пиразоло[4,3-с]пиридин-1-ил)пирролидин-1-ил)проп-2ен-1-он (8).

(R)-трет-бутил-3-(3-(4-феноксифенил)-1H-пиразоло[4,3-с]пиридин-1-ил)-пирролидин-1-карбоксилат (7) (40 мг, 0,087 ммоль) добавляли к CF₃COOH/ДХМ=4/1 (5 мл) одной порцией. Смесь перемешивали в течение около 1 ч при кт. Летучие компоненты удаляли под вакуумом, что давало неочищенный целевой продукт (30 мг), который непосредственно использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. ЖХМС: m/z=357 [М+Н]⁺.

Раствор акрилоилхлорида (8,7 мг, 0,095 ммоль) в ДХМ (1 мл) добавляли к раствору (R)-3 -(4феноксифенил)-1-(пирролидин-3-ил)-1Н-пиразоло[4,3-с]пиридина (8) (30 мг, 0,087 ммоль) и TEA (44 мг, 0,43 ммоль) в ДХМ (5 мл) при 0°С при перемешивании. Реакционную смесь перемешивали в течение 1 ч, выливали в насыщенный водный раствор хлорида натрия и экстрагировали ДХМ. Органический слой

- 16 041461 сушили, концентрировали и перекристаллизовывали из ДХМ/МеОН=100/1, что давало целевой продукт (16 мг, выход 45,7%). ¹Н-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ 9,35 (ш.с., 1H), 8,49 (ш.с., 1H), 7,95-7,91 (м, 2Н), 7,407,36 (м, 3Н), 7,15-7,08 (м, 5Н), 6,53-6,42 (м, 2Н), 5,76-5,71 (м, 1H), 5,27-5,15 (м, 1H), 4,17-4,03 (м, 3Н), 3,85-3,82 (м, 1H), 2,79-2,49 (м, 2Н). ЖХМС: m/z=411,2 [М+Н]+.

Пример 2: (R)-1 -(3 -(3 -(4-(2-хлор-3 -метоксифенокси)фенил)-1 Н-пиразоло[4,3-с]пиридин-1 _ЫВИ ил)пиперидин-1 -ил)проп-2-ен-1 -он

N % хс

АсОН, кг ,Ts

1), ТФУ, ДХМ, кт:

²>· ДХМ, TEA, 0-кг

Ра(РРЬ₃)₄,К₂СС>з№. диоксен, нагревание с обратным холодильником

I, нагревание с тным холодильником .₂СО₃, ДМФА.

градусов

N-BOC 7

С I

οι I

Вг θ' с р-% // '> ci

V^N-Boc

Стадия А: 1H-пиразоло[4,3-с]пиридин (2).

К раствору 1H-пиразоло[4,3-с]пиридина (1) (17 г, 0,12 моль) в абсолютном этаноле (120 мл) при перемешивании добавляли гидразин (80%) (75 г, 1,2 моль). Раствор нагревали с обратным холодильником в течение 5 ч, под вакуумом удаляли EtOH и смесь экстрагировали ЭА (10x100 мл). Органические фазы объединяли, сушили над Na₂SO₄. Летучие компоненты удаляли под вакуумом и остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (градиент: ДХМ/МеОН=200:1 -50/1), что давало целевой продукт (8 г, выход 57,1%). ¹Н-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ 13,48 (ш.с., 1H), 9,18 (с, 1H), 8,44 (д, J=6,0 Гц, 1H), 8,25 (с, 1H), 7,45 (д, J=6,0 Гц, 1H). ЖХМС: m/z=120 [М+Н]⁺.

Стадия В: 3-бром-1Н-пиразоло[4,3-с]пиридин (3).

К раствору 1H-пиразоло[4,3-c]пиридина (2) (8 г, 67,2 ммоль) в АсОН (100,0 мл) добавляли бром (5,1 мл, 0,1 моль) при комнатной температуре. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 72 ч и гасили 10%-ым NaOH (водн.) до рН 12. Органические фазы разделяли. Водный слой снова экстрагировали ЭА (10x100 мл). Органические фазы объединяли, сушили над Na₂SO₄, летучие компоненты удаляли под вакуумом и остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (градиент: ДХМ/МеОН=200:1-50/1), что давало целевой продукт (4,5 г, выход 34,3%). 1Н-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ 13,32 (ш.с., 1H), 9,06 (с, 1H), 8,54 (д, J=5,6 Гц, 1H), 7,43 (д, J=5,6 Гц, 1H). ЖХМС: m/z=198, 200 [М+Н]⁺.

Стадия D: (K)-трет-бутил-3-(3-бром-1Н-пиразоло[4,3-с]nиридин-1-ил)пиnеридин-1-карбоксилат (4).

В круглодонную колбу вместимостью 100 мл помещали раствор 3-бром-1Н-пиразоло[4,3с]пиридина (3) (2 г, 10 ммоль) в ДМФА (20 мл), (S)-mpem-бутuл-3-(тозилокси)пиперидин-1-карбоксилат (4,3 г, 12 ммоль) и Cs₂CO₃ (5,9 г, 18 ммоль). Полученный раствор перемешивали в течение 24 ч при 65°С, а затем гасили путем добавления 100 мл воды. Полученный раствор экстрагировали ЭА и органические слои объединяли. Органические фазы промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным NaHCO₃. Растворитель удаляли под вакуумом и остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (градиент: ДХМ/МеОН=200:1-100:1), что давало целевой продукт (0,8 г, выход 21,0%). 1Н-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ 8,97 (с, 1H), 8,48 (д, J=5,6 Гц, 1H), 7,36 (д, J=5,6 Гц, 1H), 4,43-4,38 (м, 3Н), 3,2 (ш.с., 1H), 2,88-2,81 (м, 1H), 2,30-2,17 (м, 2H), 1,95-1,91 (м, 1H),1,72-1,62 (м, 1H), 1,46 (с, 9H). ЖХМС: m/z=382 [М+Н]⁺.

Стадия Е: (R)-трет-бутил-3-(3-(4-(2-хлор-3-метоксuфенокси)фенил)-1H-пиразоло[4,3-с]пuрuдuн-1ил)пиперидин-1-карбоксилат (5).

К раствору 4 (100 мг, 0,262 ммоль) и (4-(2-хлор-3-метоксифенокси)фенил)бороновой кислоты (109,9 мг, 0,393 ммоль) в толуоле (5 мл) и воде (1 мл) добавляли K2CO3 (72 мг, 0,524 ммоль), после чего (Ph₃P)₄Pd (30 мг) под N2 при перемешивании. Смесь нагревали с обратным холодильником в течение 8 ч, пока вещество не исчезло. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры. Диоксан удаляли, испаряя на роторном испарителе. Остаток выливали в воду и экстрагировали ЭА. Органический слой сушили над Na₂SO₄, фильтровали и растворитель удаляли под вакуумом, остаток очищали с помощью флэш-хроматографии на силикагеле с использованием 100:1-50:1 ДХМ:МеОН, что давало целевой продукт (50 мг). ЖХМС: m/z=534,2 [М+Н]⁺.

- 17 041461

Стадия F: (R)-1 -(3 -(3 -(4-(2-хлор-3 -метоксифенокси)фенил)-1 H-пиразоло [4,3-с]пиридин-1 ил)пиперидин-1 -ил)проп-2-ен-1 -он (6).

Промежуточное соединение 5 (50 мг, 0,093 ммоль) добавляли к CF₃COOH/ДХМ=4/1 (5 мл) одной порцией. Смесь перемешивали в течение около 2 ч при кт. Летучие компоненты удаляли под вакуумом, что давало неочищенный целевой продукт, который непосредственно использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. Раствор акрилоилхлорида (8,5 мг, 0,095 ммоль) в ДХМ (1 мл) при перемешивании добавляли к раствору неочищенного остатка, TEA (44 мг, 0,43 ммоль) в ДХМ (5 мл) при 0°С. Реакционную смесь перемешивали в течение 1 ч, выливали в насыщенный водный раствор хлорида натрия и экстрагировали ДХМ. Органический слой сушили, концентрировали и перекристаллизовывали из ДХМ/МеОН= 100/1, что давало целевой продукт (29 мг, выход 65%). ¹Н-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ 9,35 (с, 1H), 8,45 (д, J=5,6 Гц, 1H), 7,93 (д, J=8,4 Гц, 2Н), 7,45-7,34 (м, 1H), 7,24-7,20 (м, 2Н), 7,11 (д, J=8,4 Гц, 2Н), 6,80 (д, J=8,4 Гц, 1H), 6,73 (д, J=8,4 Гц, 2Н), 26,68-6,53 (м, 1H), 6,38-6,34 (м, 1H), 5,77-5,69 (м, 1H), 4,94-4,91 (м, 0,5Н), 4,72-4,48 (ш.с., 1,4Н), 4,25-4,07 (м, 1H), 3,96 (с, 3Н), 3,80-3.3,78 (м, 0.6Н), 3,243,22 (м, 1H), 2,91 (ш.с., 0,4Н), 2,50-2,47 (м, 1H), 2,30-2,28 (м, 1H), 2,06-2,02 (м, 1H), 1,73-1,71 (м, 1H). ЖХМС: m/z=489,2 [М+Н]+.

Пример 3: (R)-1 -(3 -(3 -(4-(2-фтор-3 -метоксифенокси)фенил)-1 Н-пиразоло [4,3 -с]пиридин-1 ил)пирролидин-1 -ил)проп-2-ен-1 -он

t) ‘ Π ’ / ‘ » ⁰ , /' · :

PdFPhA.KaCOj ''

--с , м диоксан/вода н I Ν и N ₅

Стадия А: 1-(4-бромфенокси)-2-фтор-3-метоксибензол (1).

К раствору 1-бром-4-йодбензола (20,7 г, 73 ммоль, 1,0 экв.) в диоксене (180 мл) добавляли 2-фтор3-метоксифенол (10,4 г, 73 ммоль, 1,0 экв.), CuI (1,39 г, 7,3 ммоль, 0,1 экв.), Ν,Ν-диметилглицина гидрохлорид (2,03 г, 14,6 ммоль, 0,2 экв.), Cs₂CO₃ (35,9 г, 109,5 ммоль, 1,5 экв.). Смесь перемешивали при 100°С под N2 в течение 15 ч, затем смесь фильтровали, уплотняли и экстрагировали ЭА, органический слой промывали водой и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили с помощью безводного Na₂SO₄, концентрировали и остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле, что давало целевой продукт 1 (9,2 г, 42,4%). 1Н-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ 7,59 (д, J=7,6 Гц, 1H), 7,41 (д, J=8,0 Гц, 1H), 7,00-7,04 (м, 1H), 6,87 (д, J=8,0 Гц, 1H), 6,74-6,81 (м, 2Н), 6,62-6,66 (м, 1H), 3,92 (с, 3Н).

Стадия В: (4-(2-фтор-3-метоксифенокси)фенил)бороновая кислота.

Раствор 1 (9,2 г, 30,96 ммоль, 1,0 экв.) в ТГФ (100 мл) охлаждали до -78°С под N2, добавляли по каплям н-BuLi (16,1 мл, 40,25 ммоль, 1,3 экв.) при той же температуре. Смесь перемешивали в течение 50 мин при той же температуре. По каплям добавляли триизопропилборат (7,57 г, 40,25 ммоль, 1,3 экв.) при той же температуре. Через 15 мин смеси давали охладиться до комнатной температуры и перемешивали в течение 2 ч, затем добавляли 1 н. HCl, чтобы установить рН=5,0, и перемешивали в течение 30 мин, затем смесь экстрагировали ЭА. Органический слой промывали водой и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили с помощью безводного Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали, что давало неочищенный целевой продукт 2 (7,8 г, 95,8%).

Стадия C: (R)-трет-бутил-3-(3-бром-1Н-пиразоло[4,3-с]пиридин-1-ил)пирролидин-1-карбоксилат (3).

В круглодонную колбу вместимостью 100 мл помещали раствор 3-бром-1Н-пиразоло[4,3с]пиридина (2,45 г, 23,34 ммоль, 1,0 экв.) в ДМФА (40 мл), (Б)-трет-бутил-3-(тозилокси)пиперидин-1карбоксилат (5,06 г, 14,48 ммоль, 1,2 экв.) и Cs₂CO₃ (6,1 г, 18,55 ммоль, 1,5 экв.). Полученный раствор перемешивали в течение 12 ч при 65°С, а затем гасили путем добавления 100 мл воды. Полученный раствор экстрагировали ЭА (80 мл*3) и органические слои объединяли. Органические фазы промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным Na₂CO₃. Растворитель удаляли под вакуумом и остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (ДХМ/МеОН=200:1-100:1), что давало целевой продукт (3,5 г, выход 76,9%). 1Н-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ 8,98 (с, 1H), 8,50 (д, J=4,8 Гц, 1H), 7,32 (д, J=5,6 Гц, 1H), 3,91 (с, 1H), 3,76-3,80 (м, 2Н), 3,53-3,59 (м, 1H), 2,59 (с, 1H), 2,38-2,44 (м, 1H), 1,48 (с, 9Н). ЖХМС: m/z=367 [М+Н]⁺.

- 18 041461

Стадия D: (R)-трет-бутил-3-(3-(4-(2-фтор-3-метоксифенокси)фенил)-1Н-nирαзоло[4,3-с]пиридин-1ил)пирролидин-1-карбоксилат (4).

К раствору 3 (430 мг, 1,17 ммоль, 1,0 экв.) и 2 (460 мг, 1,76 ммоль, 1,5 экв.) в диоксане (20 мл) и воде (3 мл) добавляли K₂CO₃ (324 мг, 2,34 ммоль, 2,0 экв.) и (Ph₃P)₄Pd (30 мг) под N2 при перемешивании. Смесь нагревали с обратным холодильником в течение 6 ч, пока вещество не исчезло. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры. Диоксан удаляли, испаряя на роторном испарителе. Остаток выливали в воду и экстрагировали ЭА. Органический слой сушили над Na₂SO₄, фильтровали и растворитель удаляли, испаряя на роторном испарителе. Остаток очищали с помощью флэш-хроматографии на силикагеле (ДХМ:МеОН=100:1-50:1), что давало целевой продукт (0,5 г, выход 84,4%). 1Н-ЯМР (400

МГц, CDCl3): δ 9,33 (с, 1H), 8,46 (д, J=5,2 Гц, 1H), 7,94 (д, J=8,4 Гц, 2Н), 7,34 (д, J=5,6 Гц, 1H), 7,14 (д, J=8,8 Гц, 2Н), 7,03-7,08 (м, 1H), 6,80-6,84 (м, 1H), 6,71-6,75 (м, 1H), 5,18 (с, 1H), 3,94 (с, 6Н), 3,59 (с, 1H), 2,64 (с, 1H), 2,41-2,46 (м, 1H), 1,47 (с, 9Н). ЖХМС: m/z=505 [М+Н]+.

Стадия Е: (R)-1 -(3 -(3 -(4-(2-фтор-3 -метоксифенокси)фенил)-1 Н-пиразоло [4,3-с] пиридин-1 ил)пирролидин-1-ил)проп-2-ен-1-он (5).

Промежуточное соединение 4 (870 мг, 1,73 ммоль, 1,0 экв.) растворяли в ДХМ (30 мл), одной порцией добавляли ТФУ (2,5 мл). Смесь перемешивали в течение около 1,5 ч при кт. Летучие компоненты удаляли под вакуумом, что давало неочищенный целевой продукт, который непосредственно использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. Неочищенный продукт растворяли в ДХМ (20 мл), к раствору добавляли TEA до РН= 8,0, затем к раствору по каплям добавляли акрилоилхлорид (187 мг, 2,07 ммоль, 1,2 экв.) в ДХМ (3,0 мл). Реакционную смесь перемешивали в течение 0,5 ч, выливали в воду и экстрагировали ДХМ. Органический слой сушили с помощью безводного Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали, остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (ДХМ/МеОН=200:1-50:1), что давало целевой продукт (400 мг, выход 50,6%). 1Н-ЯМР (400 МГц, CDCl₃):

δ 9,34 (д, J=4,4 Гц, 1H), 8,47-8,49 (м, 1H), 7,90-7,94 (м, 2Н), 7,34 (д, J=4,8 Гц, 1H), 7,12-7,14 (м, 2Н), 7,037,07 (м, 1H), 6,80-6,84 (м, 1H), 6,71-6,75 (м, 1H), 6,40-6,52 (м, 2Н), 5,69-5,75 (м, 1H), 5,20-5,23 (м, 1H), 4,06-4,17 (м, 3Н), 3,94 (с, 3Н), 3,81-3,85 (м, 1H), 2,47-2,78 (м, 2Н). ЖХМС: m/z=459,1 [М+Н]⁺.

Пример 4: (R)-1 -(3 -(3-(4-(2-хлор-3 -фторфенокси)фенил)-1 H-пиразоло [4,3-с] пиридин-1 ил)пирролидин-1 -ил)проп-2-ен-1 -он

X X ¹ с. ^F

Вг / -«

N ° N ТФУ. ОN ¹¹ ‘ n Мл>, ’ ' Ν ДХМ TEA, ДХМ .7- диоксан/вода'

ПU

ВосВас

1Ш

Стадия А: трет-бутил-(R)-3-(3-(4-(2-хлор-3-фторфенокси)фенил)-1H-nиразоло[4,3-с]пиридин-1ил)пирролидин-1-карбоксилат (2).

К раствору 1 (80 мг, 0,22 ммоль, 1,0 экв.) и соответствующей бороновой кислоты (88 мг, 0,33 ммоль, 1,5 экв.) в толуоле (10 мл) и воде (2 мл) добавляли K₂CO₃ (61 мг, 0,44 ммоль, 2,0 экв.) и (Ph₃P)₄Pd (25 мг, 0,1 экв.) под N₂ при перемешивании. Смесь нагревали с обратным холодильником в течение 6 ч, пока вещество не исчезло. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры. Толуол удаляли, испаряя на роторном испарителе. Остаток выливали в воду и экстрагировали ЭА. Органический слой сушили над Na2SO4, фильтровали и растворитель удаляли, испаряя на роторном испарителе. Продукт очищали с помощью флэш-хроматографии на силикагеле (ДХМ:МеОН=100:1-50:1), что давало целевой продукт (90 мг, выход 81%). ЖХМС: m/z=509 [М+Н]⁺.

Стадия В: (R)-1-(3-(3-(4-(2-хлор-3-фторфенокси)фенил)-1Н-nиразоло[4,3-с]пиридин-1ил)пирролидин-1-ил)проп-2-ен-1-он.

Промежуточное соединение 2 (90 мг, 0,18 ммоль, 1,0 экв.) растворяли в ДХМ (4 мл), одной порцией добавляли ТФУ (1 мл). Смесь перемешивали в течение около 1,5 ч при кт. Летучие компоненты удаляли под вакуумом, что давало неочищенный целевой продукт, который непосредственно использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. Неочищенный продукт растворяли в ДХМ (4 мл), к раствору добавляли TEA до РН= 8,0, затем к раствору по каплям добавляли акрилоилхлорид (16 мг, 0,18 ммоль, 1,0 экв.) в ДХМ (1,0 мл). Реакционную смесь перемешивали в течение 0,5 ч, выливали в воду и экстрагировали ДХМ. Органический слой сушили с помощью безводного Na2SO4, фильтровали и концентрировали, остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (ДХМ/МеОН=200:1-50:1), что давало целевой продукт (40 мг, выход 50%). ¹Н-ЯМР (400 МГц, CDC^): δ 9,35 (д,J=4,1 Гц, 1H), 8,49 (т, J=5,9 Гц, 1H), 7,96 (дд, J=8,2, 6,0 Гц, 2Н), 7,41-7,31 (м, 1H), 7,25-7,17 (м, 1H), 7,13 (дд, J=8,6, 2,5 Гц, 2Н), 7,00 (т, J=8,4 Гц, 1H), 6,87 (д, J=8,3 Гц, 1H), 6,48 (ддд, J=14,5, 13,7, 7,2 Гц, 2Н), 5,83-5,65 (м, 1H), 5,38-5,15 (м, 1H), 4,263,94 (м, 3Н), 3,95-3,69 (м, 1H), 2,85-2,42 (м, 2Н). ЖХМС: m/z=463,2 [М+Н]⁺.

- 19 041461

Пример 5: (R)-1-(3-(3-(4-(2-фтор-3-метоксифенокси) фенил)-7-метил-1H-пиразоло[4,3-с]пиридин-1ил) пирролидин-1 -ил)проп-2-ен-1 -он о

Стадия А: 4-(2-фтор-3-метоксифенокси)бензальдегид (1).

К раствору 4-бромбензальдегида (6,99 г, 38 ммоль, 1,2 экв.) в диоксене (100 мл) добавляли 2-фтор3-метоксифенол (4,5 г, 32 ммоль, 1,0 экв.), CuI (0,60 г, 3,2 ммоль, 0,1 экв.), N,N-диметилглицина гидрохлорид (1,32 г, 9,5 ммоль, 0,3 экв.), Cs₂CO₃(20,59 г, 60 ммоль, 2 экв.). Смесь перемешивали при 100°С под N₂ в течение 15 ч. Смесь фильтровали, уплотняли и экстрагировали EtOAc. Органический слой промывали водой и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили с помощью безводного Na₂SO₄ и очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле, что давало целевой продукт (4,1 г, 52,6%). ¹Н-ЯМР (400 МГц, CDCb): δ 9,9 (с, 1H), 7,85-7,83 (м, 2Н), 7,26-7,04 (м, 3Н), 6,89-6,85 (м, 1H), 6,77-6,73 (м, 1H), 3,92 (с, 3Н).

Стадия В: 4,5-дихлорпиридин-3-ил) (4-(2-фтор-3-метоксифенокси)фенил)метанол (2).

К раствору диизопропиламина (2,1 мл, 15,1 ммоль, 1,1 экв.) в сухом ТГФ (24 мл) при -78°С добавляли раствор BuLi в гексане с концентрацией 2,5 М (8,2 мл, 20,0 ммоль, 1,3 экв.). Смеси давали нагреться до 0°С и перемешивали в течение около 1 ч. Затем раствор охлаждали до -78°С и добавляли 3,4дихлорпиридин (2,0 г, 13,7 ммоль, 1 экв.) в 5 мл сухого ТГФ. Реакционную смесь перемешивали в течение еще 4 ч, а затем добавляли соответствующий 4-(2-фтор-3-метоксифенокси)бензальдегид (3,36 г, 13,7 ммоль, 1 экв.), и смесь перемешивали и давали нагреться до комнатной температуры в течение ночи. Избыток ЛДА разлагали с помощью Н₂О (25 мл), и смесь экстрагировали Et₂O (3x50 мл). Органические фазы объединяли, сушили над Na₂SO₄, летучие компоненты удаляли под вакуумом и остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (градиент: ДХМ/МеОН=200:1-50/1), что давало целевой продукт (4,5 г, выход 83,6%). 1Н-ЯМР (400 МГц, CDCb): δ 8,78 (с, 1H), 8,55 (с, 1H), 7,30 (д, J=8,0 Гц, 2Н), 7,02 (д, J=8,0 Гц, 2Н), 6,98-6,66 (м, 3Н), 6,12 (с, 1H), 3,93 (с, 3Н). ЖХМС: m/z=394,1 [М+Н]+.

Стадия С: (4,5-дихлорпиридин-3-ил)(4-(2-фтор-3-метоксифенокси)фенил)метанон (3).

Раствор (4,5-дихлорпиридин-3-ил)(4-(2-фтор-3-метоксифенокси)фенил)метанола (2) (1 г, 2,5 ммоль) в сухом ацетоне (10 мл) охлаждали до 0°С и осторожно небольшими порциями добавляли CrO₃ (0,92 г, 9,23 ммоль). Полученный раствор перемешивали при комнатной температуре до полного потребления исходного вещества (3 ч), после чего реакцию гасили 2-пропанолом (6 мл) и смесь перемешивали в течение 30 мин. В конце добавляли насыщенный раствор NaHCO3 (50 мл) для осаждения солей хрома, которые отфильтровывали через целит и промывали CH2Cl2 (6x15 мл). Растворитель удаляли под вакуумом и остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (градиент: ДХМ/МеОН=200:1), что давало целевой продукт (0,69 г, выход 70,7%). ЖХМС: m/z=392,1 [М+Н]⁺.

Стадия D: 7-хлор-3-(4-(2-фтор-3-метоксифенокси)фенил)-1H-пиразоло[4,3-с]пиридин (4).

К раствору (4-(бензилокси)фенил)(4-хлорпиридин-3-ил)метанона (3) (0,7 г, 1,77 моль) в абсолютном этаноле (5 мл) при перемешивании добавляли гидразин (1,08 г, 17,3 моль). Раствор нагревали с обратным холодильником в течение 3 ч, охлаждали, продукт отфильтровывали и последовательно промывали водой и метанолом, что давало целевой продукт (0,54 г, выход 83%). ¹Н-ЯМР (400 МГц, CD₃OD):δ 9,30 (с, 1H), 8,37 (с, 1H), 8,01 (д, J=8 Гц, 2H), 7,13-7,3,74 (м, 4Н), 7,18 (д, J=8 Гц, 2Н), 3,92 (с, 3Н). ЖХМС: m/z=370,1 [М+Н]⁺.

- 20 041461

Стадия Е: (R)-трет-бутил-3-(7-хлор-3-(4-(2-фтор-3-метоксифенокси)фенил)-1H-пиразоло[4,3с]пиридин-1-ил)пирролидин-1-карбоксилат (5).

В 3-горлую круглодонную колбу вместимостью 100 мл помещали раствор 3-(4-(бензилокси)фенил)1H-пиразоло[4,3-с]пиридина (4) (0,52 г, 1,41 ммоль) в N,N-диметилформамиде (41 мл), (S)-трет-бутил-3(тозилокси)пирролидин-1-карбоксилат (0,68 г, 1,99 ммоль) и Cs₂CO₃ (0,97 г, 2,98 ммоль). Полученный раствор перемешивали в течение 12 ч при 60°С, а затем гасили путем добавления 100 мл воды. Полученный раствор экстрагировали ЭА и органические слои объединяли. Органические фазы промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным NaHCO₃. Растворитель удаляли под вакуумом и остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (градиент: ДХМ/МеОН=200:1 - 100:1), что давало целевой продукт (0,68 г, выход 90%). ЖХМС: m/z=539,1 [М+Н]+.

Стадия F: ((R)-трет-бутил-3-(3-(4-(2-фтор-3-метоксифенокси)фенил)-7-метил-1H-пиразоло[4,3-с] пиридин-1-ил)пирролидин-1-карбоксилат (6).

К раствору (R)-трет-бутил-3-(7-хлор-3-(4-(2-фтор-3-метоксифенокси)фенил)-1H-пиразоло[4,3с]пиридин-1-ил)пирролидин-1-карбоксилата (100 мг, 0,18 ммоль), метилбороновой кислоты (12,2 мг, 0,20 ммоль), K₃PO₄. Н₂О (102 мг, 0,44 ммоль) и трициклогексилфосфина (10,09 мг, 0,036 ммоль) в толуоле (10,0 мл) и воде (2 мл) в атмосфере азота добавляли диацетоксипалладий (5 мг, 0,018 ммоль). Смесь нагревали до 100°С в течение ночи, а затем охлаждали до комнатной температуры. Добавляли воду (100 мл) и смесь экстрагировали EtOAc, объединенные органические фазы промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над MgSO₄ и концентрировали в вакууме, что давало неочищенное соединение. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (ДХМ/МеОН=200:1 - 50:1), что давало целевой продукт (25 мг, выход 26%). ЖХМС: m/z=519,1 [М+Н]⁺.

Стадия G: (R)-1-(3-(3-(4-(2-фтор-3-метоксифенокси)фенил)-7-метил-1H-пиразоло[4,3-с] пиридин-1ил)пирролидин-1-ил)проп-2-ен-1-он (7).

((R)-трет-бутия-3-(3 -(4-(2-фтор-3-метоксифенокси)фенил)-7-метил-1 H-пиразоло [4,3ю]пиридин-1 ил)пирролидин-1-карбоксилат (25 мг, 0,048 ммоль) одной порцией добавляли к CF₃COOH/ДХМ=4/1 (5 мл). Смесь перемешивали в течение около 1 ч при кт. Летучие компоненты удаляли под вакуумом, что давало неочищенный целевой продукт (20 мг), который непосредственно использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. ЖХМС: m/z=419 [М+Н]⁺.

Раствор акрилоилхлорида (4,3 мг, 0,048 ммоль) в ДХМ (1 мл) добавляли к раствору (R)-3-(4-(2-фтор3-метоксифенокси)фенил)-7-метил-1-(пирролидин-3-ил)-1H-пиразоло[4,3-c]пиридина (472-7) (20 мг, 0,048 ммоль) и TEA (44 мг, 0,43 ммоль) в ДХМ (5 мл) при 0°С при перемешивании. Реакционную смесь перемешивали в течение 1 ч, выливали в насыщенный водный раствор хлорида натрия и экстрагировали ДХМ. Органический слой сушили, концентрировали и перекристаллизовывали из ДХМ/МеОН=100/1, что давало целевой продукт (11 мг, выход 50%). ¹Н-ЯМР (400 МГц, CDCb): δ 9,18 (ш.с., 1H), 8,21 (ш.с., 1H), 7,89-7,86 (м, 2Н), 7,26-7,02 (м, 3Н), 6,83-6,49 (м, 2Н), 6,43-6,41 (м, 2Н), 5,74-5,71 (м, 1H), 5,34-5,29 (м, 1H), 4,13-3,93 (м, 6Н), 2,73-2,19 (м, 4Н), 2,04-2,00 (м, 2Н). ЖХМС: m/z=473,2 [М+Н]+.

Пример 6: (R)-1 -(3-(3-(4-(2-фтор-3-метоксифенокси)фенил)-7-метокси-1 H-пиразоло [4,3-с]пиридин1 -ил)пиперидин-1 -ил)проп-2-ен- 1-он

Стадия А: (4-хлор-5-фторпиридин-3-ил)(4-(2-фтор-3-этоксифенокси)фенил)метанол (1) К раствору 4-хлор-3-фторпиридина (6,4.0 г, 49 ммоль, 1,2 экв.) в безводном ТГФ (100 мл) медленно по каплям добавляли ЛДА (2 н., 25,6 мл) при -65° в атмосфере азота. После завершения добавления полученный раствор перемешивали при той же температуре в течение 4,0 ч. Затем осторожно при той же температуре добавляли раствор 4-(2-фтор-3-метоксифенокси)бензальдегида (10,0 г, 41 ммоль, 1,0 экв.) в безводном ТГФ (20 мл). После добавления реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре (15°) в течение 1,0 ч, за реакцией следили с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь гасили водой, затем выливали в воду, экстрагировали этилацетатом, промывали водой и насыщенным водным раствором

- 21 041461 хлорида натрия. Органический слой сушили над безводным Na₂SO₄, концентрировали под вакуумом, что давало неочищенный продукт 1, который использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. ЖХМС: m/z=378,1 [М+Н]+.

Стадия В: (4-хлор-5-фторпиридин-3-ил)(4-(2-фтор-3-метоксифенокси)фенил)метанон (2).

К раствору 1 (10,0 г (неочищенный), 26,53 ммоль, 1,0 экв.) в ДХМ медленно порциями на ледяной бане добавляли реактив Десса-Мартина (22,5 г, 53,05 ммоль, 2,0 экв.). Полученный раствор перемешивали при 15° в течение 4,0 ч, следили с помощью ТСХ и ЖХМС. К реакционной смеси добавляли насыщенный раствор NaHCO₃, затем фильтровали. Фильтрат выливали в воду, экстрагировали ДХМ, промывали насыщенными растворами NaHCO₃, Na₂SO₃, водой и насыщенным водным раствором хлорида натрия. Органический раствор сушили над безводным Na₂SO₄, концентрировали под вакуумом, что давало неочищенный продукт 2 (10,0 г), который использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. ЖХМС: m/z=376,1 [М+Н]⁺.

Стадия С: 7-фтор-3-(4-(2-фтор-3-метоксифенокси) фенил)-1Н-пиразоло[4,3-с]пиридин (3).

К раствору 2 (48 г, 128 ммоль, 1,0 экв.) в ЕЮН (300 мл) добавляли N2H4H2O (64 г, 1,28 моль, 10,0 экв.). Полученный раствор перемешивали при 90° в течение 2,5 ч. За реакцией следили с помощью ТСХ и ЖХМС, а реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, затем фильтровали. Осадок на фильтре промывали EtOH и ЭА, сушили под вакуумом, что давало чистый продукт 3 (33,3 г). 1Н-ЯМР (400 МГц, D6-ДМСО): δ 9,24-9,23 (д, J=2,0 Гц, 1H), 8,39-8,38 (д, J=2,4 Гц, 1H), 8,08-8,06 (д, J=8,8 Гц, 2Н), 7,22-7,17 (м, 1H), 7,14-7,06 (м, 3Н), 6,86-6,82 (м, 1H), 3,90 (с, 3Н). ЖХМС: m/z=354,1 [M+H]⁺.

Стадия D: (R)-трет-бутил-3-(7-фтор-3-(4-(2-фтор-3-метоксифенокси) фенил)-1Н-пиразоло[4,3-с] пиридин-1-ил)пиперидин-1-карбоксилат (4).

Раствор 3 (20 г, 57 ммоль, 1,0 экв.) (S)-трет-бутил-3-(тозилокси)пиперидин-1-карбоксилата (40 г, 113 ммоль, 2,0 экв.), карбоната цезия (37 г, 113 ммоль, 2,0 экв.) в ДМФА (20 мл) перемешивали при 60° в течение 60 ч. За реакцией наблюдали с помощью ЖХМС. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, выливали в воду. Смесь экстрагировали этилацетатом, промывали водой и насыщенным водным раствором хлорида натрия. Органический слой сушили над безводным Na2SO4, концентрировали под вакуумом. Продукт очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (ДХМ:МеОН=200:1 до 150:1), что давало 4 (17 г). 1Н-ЯМР (400 МГц, CDC13): δ 9,09 (с, 1Н), 8,30-8,29 (д, J=3,2 Гц, 1Н), 7,91-7,89 (д, J=8,4 Гц, 2Н), 7,14-7,12 (д, J=8,4 Гц, 2Н), 7,08-7,03 (м, 1Н), 6,84-6,80 (м, 1Н), 6,74-6,71 (м, 1Н), 4,75-4,73 (м, 1Н), 4,13-4,11 (м, 3Н), 3,93 (с, 3Н), 3,41-3,38 (м, 1Н), 2,92-2,86 (м, 1Н), 2,44-2,29 (м, 2Н), 1,95-1,86 (м, 1Н), 1,73-1,70 (м, 1Н), 1,47-1,42 (м, 9Н). ЖХМС: m/z=537,2[М+Н]⁺.

Стадия Е: (R)-трет-бутил-3 -(3-(4-(2-фтор-3 -метоксифенокси)фенил)-7-метокси-1 Н-пиразоло[4,3 с]пиридин-1 -ил)пиперидин-1 -карбоксилат (5).

Раствор 4 (15 г, 28,0 ммоль, 1,0 экв.), MeONa (15 г, 280 ммоль, 10,0 экв.) в МеОН (120 мл) помещали в плотно закрывающуюся ампулу вместимостью 250 мл, которую перемешивали при 100° в течение ночи. За реакцией наблюдали с помощью ТСХ и ЖХМС. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, выливали в воду, экстрагировали этилацетатом, промывали водой и насыщенным водным раствором хлорида натрия. Органический слой сушили над безводным Na2SO4, концентрировали под вакуумом, что давало неочищенный продукт. Продукт очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (ДХМ:МеОН=150:1 до 100 :1), что давало 5 (13,2 г). 1Н-ЯМР (400 МГц, CDC13): δ 8,94 (с, 1Н), 7,99 (с, 1Н), 7,91-7,89 (д, J=8,8 Гц, 2Н), 7,13-7,11 (д, J=8,8 Гц, 2Н), 7,06-7,01 (м, 1Н), 6,82-6,78 (м, 1Н), 6,73-6,69 (м, 1Н), 5,06-5,04 (м, 1Н), 4,14-4,11 (м, 1Н), 4,08 (с, 3Н), 3,93 (с, 3Н), 3,37 (с, 1Н), 2,89-2,83 (м, 1Н), 2,30-2,24 (м, 2Н), 1,92 (с, 1Н), 1,70-1,67 (м, 1Н), 1,48-1,44 (м, 11Н). ЖХМС: m/z=549,2[М+Н]⁺.

Стадия F: (R)-3-(4-(2-фтор-3-метоксифенокси)фенил)-7-метокси-1 -(пиперидин-3 -ил)-1Нпиразоло[4,3-с]пиридин (6).

К раствору 5 (13 г, 23,7 ммоль) в ДХМ (100 мл) добавляли ТФУ (14 мл) при 18° в течение 4,0 ч, за реакцией следили с помощью ЖХМС и ТСХ. Реакционную смесь концентрировали под вакуумом, что давало неочищенный продукт 6 (5,5 г), который использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. ЖХМС: m/z=449,2[М+Н]⁺.

Стадия G: (R)-1-(3-(3-(4-(2-фтор-3-метоксифенокси)фенил)-7-метокси-1H-пиразоло[4,3-с] пиридин1-ил)пиперидин-1-ил)проп-2-ен-1-он (7).

К раствору 6 (5,5 г, неочищенный), TEA (2,2 г, 21,9 ммоль, 2,0 экв.) в безводном ДХМ (50 мл) добавляли акрилоилхлорид (40 мг/мл в безводном ДХМ) при -30°. Полученный раствор перемешивали при 18° в течение 30 мин, следили с помощью ЖХМС и ТСХ. Реакционную смесь гасили водой, а затем выливали в воду, экстрагировали ДХМ, промывали водой и насыщенным водным раствором хлорида натрия. Органический раствор сушили над безводным Na₂SO₄, концентрировали под вакуумом. Продукт очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (ДХМ:МеОН=200:1 до 150:1 до 100:1), что давало 7 (3,2 г). 1Н-ЯМР (400 МГц, CDCI3): δ 8,95 (с, 1Н), 8,00 (с, 1Н), 7,91-7,89 (д, J=8,8 Гц, 2Н), 7,14-7,11 (д, J=8,4 Гц, 2Н), 7,06-7,02 (м, 1Н), 6,83-6,79 (м, 1Н), 6,73-6,70 (м, 1Н), 6,64-6,61 (м, 1Н), 6,346,30 (м, 1Н), 5,73-5,67 (м, 1Н), 5,07-4,66 (м, 2Н), 4,29-4,06 (м, 4Н), 3,93 (м, 3Н), 3,625-2,82 (м, 2Н),2,321,72 (м, 4Н). ЖХМС: m/z=503,2[М+Н]⁺.

- 22 041461

Следующие дополнительные примеры 7-99, показанные в таблице ниже, были получены в соответствии с методиками, представленными в общих способах выше и подробно описанными в примерах 1-6.

Номе Р запис и	Структура	МС (рассч.) [М+Н]⁺/ МС (найд.)	Название

8	°C? о^} О	469,18/ 469,2	(R)-1 -(3 -(3 -(4-(бензо[0] [ 1,3 ] диоксол-4илокси)фенил)- 1Н-пиразоло[4,3 с] пиридин-1 -ил)пиперид ин-1 -ил)проп2-ен-1-он
9	о-О ci ^С\| ц JL <^N	459,15/ 459,2	(R)-1 -(3 -(3-(4 -(3 -хлорфенокси)фенил)1 Н-пиразоло[4,3 -с] пиридин-1 ил)пиперид ин-1 -ил)проп-2-ен-1 -он
10	ΆΓ	425,19/ 425,2	(R)-1 -(3 -(3 -(4-(л/-толилокси)фенил)-1Нпиразоло[4,3 -с] пиридин-1 ил)пирролидин-1 -ил)проп-2-ен-1 -он
И	Cl Ρ-Ό' CO	445,14/ 445,2	(R)-1 -(3 -(3 -(3 -хлор-4-феноксифенил)1 Н-пиразоло[4,3 -с] пиридин-1 ил)пирролидин-1 -ил)проп-2-ен-1 -он
12	CX p XUO	439,21/ 439,2	(R)-1-(3-(3-(4-(2,3- д иметилфенокси)фенил)-1Нпиразоло[4,3 -с] пиридин-1 ил)пирролидин-1 -ил)проп-2-ен-1 -он Точная масса: 438,21
13	ci-	475,15/ 475,2	(R)-1-(3-(3 -(4-(2-хлор-3метоксифенокси)фенил)-1Нпиразоло[4,3 -с] пиридин-1 ил)пирролидин-1 -ил)проп-2-ен-1 -он
14	F οϋ ci \^-~N	443,18/ 443,2	(R)-1-(3-(3-(4-(3 -фтор-2 метилфенокси)фенил)-1Нпиразоло[4,3 -с] пиридин-1 ил)пирролидин-1 -ил)проп-2-ен-1 -он
15	0 .	425,19/ 425,2	1 -(4-(3 -(4-феноксифенил)-1Нпиразоло[4,3 -с] пиридин-1 ил)пиперидин-1 -ил)проп-2-ен-1 -он
16	/=^z О %a Λ +) Π	457,20/ 457,2	(R)-1-(3-(3-(4-(3 -фтор-2 метилфенокси)фенил)-1Нпиразоло[4,3 -с] пиридин-1 ил)пиперидин-1 -ил)проп-2-ен-1 -он

- 23 041461

17	/=Z Μ (J ΑΧ Λ χ) Π	461,17/ 461,2	(R)-1-(3-(3-(4-(2,3дифторфенокси)фенил)- 1Hпиразоло[4,3 -с] пиридин-1 ил)пиперидин-1 -ил)проп-2-ен-1 -он
18	Ο AS cS	447,16/ 447,2	(R)-1-(3 -(3 -(4-(2,3дифторфенокси)фенил)- 1Нпиразоло[4,3 -с] пиридин-1 ил)пирролидин-1 -ил)проп-2-ен-1 -он
19	F. ,^CI o-SA cS О	463,13/ 463,1	(R)-1 -(3 -(3 -(4-(3 -хлор-2 фторфенокси)фенил)- 1Н-пиразоло[4,3 с] пиридин-1 -ил)пирролидин-1 ил)проп-2-ен-1 -он
20	7=z О л ^z 'A о	477,14/ 477,1	(R)-1-(3-(3-(4-(3 -хлор-2фторфенокси)фенил)- 1Н-пиразоло[4,3 с] пиридин-1 -ил)пиперид ин-1 -ил)проп2-ен-1-он
21	□A X X	425,19/ 425,2	1 -(3 -((3 -(4-феноксифенил)-1Нпиразоло[4,3 -с] пиридин-1 ил)метил)пирролидин-1 -ил)проп-2-ен1-он
22	oO cS rx> Ъ-~°^	433,16/ 433,2	N-(3-(3 -(4-феноксифенил)- 1Нпиразоло[4,3 -с] пиридин-1 ил)фенил)акриламид
23	€д M Z=/	483,23/ 483,2	(R)-1-(3-(3-(4-(3изопропоксифенокси)фенил)-1Нпиразоло[4,3 -с] пиридин-1 ил)пиперидин-1 -ил)проп-2-ен-1 -он

- 24 041461

24	°-Ci о	453,22/ 453,2	(R)-1-(3-(3-(4-(2,3- д иметилфенокси)фенил)-1Hпиразоло[4,3 -с] пиридин-1 ил)пиперидин-1 -ил)проп-2-ен-1 -он
25	/=Z О & Ολ Λ	501,16/ 501,2	(R)-1 -(3 -(3 -(4-(2-хлор-3 метоксифенокси)фенил)-1Нпиразоло[4,3 -с] пиридин-1 ил)пиперидин-1 -ил)бут-2-ин-1 -он
26	_F ^чо оЛ5 о чХху	485,19/ 485,2	1-(6-(3 -(4-(2-фтор-3 метоксифенокси)фенил)-1Нпиразоло[4,3 -с] пиридин-1 -ил)-2азаспиро[3.3]гептан-2-ил)проп-2-ен-1он
27	F °^ o-^5 з 03	493,14/ 493,1	(R)-1 -(3 -(7-хлор-3 -(4-(2-фтор-3 метоксифенокси)фенил)-1Нпиразоло[4,3 -с] пиридин-1 ил)пирролидин-1 -ил)проп-2-ен-1 -он
28	-. CN о	484,17/ 484,2	(R)-1 -(1 -акрилоилпирролидин-3 -ил)-3 (4-(2-фтор-3-метоксифенокси)фенил)1 Н-пиразоло[4,3 -с] пирид ин-7карбонитрил
29	Q м У	431,24/ 431,2	(R)-1-(3-(3-(4- (циклогексилокси)фенил)-1Нпиразоло[4,3 -с] пиридин-1 ил)пиперидин-1 -ил)проп-2-ен-1 -он

- 25 041461

30	/=^zо АСА ^Z Uo о \	501,16/ 501,2	1 -(6-(3 -(4-(2-хлор-3 метоксифенокси)фенил)-1Hпиразоло[4,3 -с] пиридин-1 -ил)-2азаспиро[3.3]гептан-2-ил)проп-2-ен-1он
31	°^o T и	451,21/ 451,2	(R)-1 -(3 -(3 -(4-((2,3 -дигидро-1 Н-инден4-ил)окси)фенил)- 1Н-пиразоло[4,3 с] пиридин-1 -ил)пирролидин-1 ил)проп-2-ен-1 -он
32	AX 4	458,18/ 458,2	(R)-1-(3-(3 -(4-(2-фтор-3метоксифенокси)фенил)-1Нпиразоло[3,4-с]пиридин-1ил)пирролидин-1 -ил)проп-2-ен-1 -он
33	z=Z о Λ 6	425,19/ 425,2	(R)-1 -(3 -(3 -(4-феноксифенил)-1Нпиразоло[4,3 -с] пиридин-1 ил)пиперидин-1 -ил)проп-2-ен-1 -он
34		460,11/460,1	(S)-l-(3-(3-(4-((3хлорфенил)тио)фенил)-1Нпиразоло[4,3 -с] пиридин-1 ил)пирролидин-1 -ил)проп-2-ен-1 -он
35	О X A	459,15/ 459,2	(S)-1 -(3 -(3 -(3 -хлор-4-феноксифенил)1 Н-пиразоло[4,3 -с] пиридин-1 ил)пиперидин-1 -ил)проп-2-ен-1 -он

- 26 041461

36	o-Ot °' о	445,14/ 445,1	(S)-1 -(3 -(3 -(4-(3 -хлорфенокси)фенил)1 Н-пиразоло[4,3 -с] пиридин-1 ил)пирролидин-1 -ил)проп-2-ен-1 -он
37	o-Q 0 ΪιΧΧν ο	439,21/ 439,2	(S)-1 -(3 -(3 -(4-(л/-толилокси)фенил)- 1Нпиразоло[4,3 -с] пиридин-1 ил)пиперидин-1 -ил)проп-2-ен-1 -он
38	Co X? 0	463,13/ 463,1	(R)-1-(3-(3-(4-(2 -хлор-3 фторфенокси)фенил)-2Н-пиразоло[4,3с] пирид ин-2-ил)пирролидин-1 ил)проп-2-ен-1 -он
39	ТФУ ¹ Ν Ν Ο	477,14/477,2	(R)-1-(3-(3 -(4-(2-хлор-3фторфенокси)фенил)-2Н-пиразоло[4,3с] пиридин-2-ил)пиперид ин-1 -ил)проп2-ен-1-он
40	φι ,Χ ТФУ Ν-,. ''^: ’ <>	477,14/477,2	(S)-l-(3-(3 -(4-(2-хлор-3 фторфенокси)фенил)- 1Н-пиразоло[4,3 с] пиридин-1 -ил)пиперид ин-1 -ил)проп2-ен-1-он
41	0 00 о=/ ЧЛо	479,10/479,1	(R)-l-(3-(3-(4-(2,3дихлорфенокси)фенил)-2Нпиразоло[4,3 -с] пиридин-2ил)пирролидин-1 -ил)проп-2-ен-1 -он

- 27 041461

42	< ! « ^π ~ . J 7 ; м тфу Ν к Ν о-	479,10/479,1	(S)-l-(3-(3-(4-(2,3дихлорфенокси)фенил)-1Нпиразоло[4,3 -с] пиридин-1 ил)пирролидин-1 -ил)проп-2-ен-1 -он
43	Cl. Г о-Х/ (А огСо о	493,11/493,1	(R)-1-(3-(3-(4-(2,3дихлорфенокси)фенил)-2Нпиразоло[4,3 -с] пиридин-2ил)пиперидин-1 -ил)проп-2-ен-1 -он
44	н ТФУ ' N V.....	493,11/493,1	(S)-l-(3-(3-(4-(2,3дихлорфенокси)фенил)-1Нпиразоло[4,3 -с] пиридин-1 ил)пиперидин-1 -ил)проп-2-ен-1 -он
45	о-О 0 ^{F /О}° ό> ^όχ	505,22/505,2	(R)-1 -(3 -(5 -ацетил-3 -(4-(2-фтор-3 метоксифенокси)фенил)-4,5,6,7тетрагидро-1Н-пиразоло[4,3с] пиридин-1 -ил)пирролидин-1 ил)проп-2-ен-1 -он
46	Р р °шо л	517,22/517,2	(R)-1 -(3 -(5 -акрилоил-3 -(4-(2-фтор-3 метоксифенокси)фенил)-4,5,6,7тетрагидро-1Н-пиразоло[4,3с] пиридин-1 -ил)пирролидин-1 ил)проп-2-ен-1 -он
47		443,18/443,2	(R)-1 -(3 -(3 -(4-(2-фтор-3 метилфенокси)фенил)-1Нпиразоло[4,3 -с] пиридин-1 ил)пирролидин-1 -ил)проп-2-ен-1 -он

- 28 041461

48	°-Q C5 ^F uACx О	457,20/457,2	(R)-1-(3-(3 -(4-(2-фтор-3метилфенокси)фенил)-1Hпиразоло[4,3 -с] пиридин-1 ил)пиперидин-1 -ил)проп-2-ен-1 -он
49	oX 7 % Ί1	459,18/459,2	(R)-1 -(3 -(3 -(4-(3 -фтор-2 метоксифенокси)фенил)-1Нпиразоло[4,3 -с] пиридин-1 ил)пирролидин-1 -ил)проп-2-ен-1 -он
50	□-О 6°^ ιιΑτχ Ь-с	473,19/473,2	(R)-1-(3-(3-(4-(3 -фтор-2 метоксифенокси)фенил)-1Нпиразоло[4,3 -с] пиридин-1 ил)пиперидин-1 -ил)проп-2-ен-1 -он
51	cA ή ό	443,18/443,2	(R)-1 -(3 -(3 -(3 -фтор-4-феноксифенил)1 Н-пиразоло[4,3 -с] пиридин-1 ил)пиперидин-1 -ил)проп-2-ен-1 -он
52	_o-0 Ox	397-16/397,2	1 -(3 -(3 -(4-феноксифенил)-1Нпиразоло[4,3 -с]пиридин-1 -ил)азетидин1 -ил)проп-2-ен-1 -он
53	o-O Cx ^Νθό Αχ 'Άα	439,21/439-2	1 -(3 -((3 -(4-феноксифенил)-1Нпиразоло[4,3 -с] пиридин-1 ил)метил)пиперид ин-1 -ил)проп-2-ен-1 он
54	Q о fS NH₂ 4==, C2aⁿ	425,19/425,2	(R)-1 -(3 -(4-амино-З -(4-феноксифенил)1 Н-инд азол-1 -ил)пирролидин-1 ил)проп-2-ен-1 -он

- 29 041461

55	Q о rS nh₂ 4=⁷ IO¥ⁿN	439,21/439-2	(R)-1 -(3 -(4-амино-З -(4-феноксифенил)1 Н-инд азол-1 -ил)пиперидин-1 ил)проп-2-ен-1 -он
56	°-O ό ^^Cl N о	473,17/473,2	(R)-1-(3-(3-(4-(3 -хлор-2 метилфенокси)фенил)-1Нпиразоло[4,3 -с] пиридин-1 ил)пиперидин-1 -ил)проп-2-ен-1 -он
57	d fy Z=J	469,22/469,2	(R)-1 -(3 -(3 -(4-(3 -метокси-2метилфенокси)фенил)-1Нпиразоло[4,3 -с] пиридин-1 ил)пиперидин-1 -ил)проп-2-ен-1 -он
58	ⁿ b T	445,14/445,1	(R)-1-(3-(3-(4-((3- фторф енил)тио)ф ени л)-1Нпиразоло[4,3 -с] пиридин-1 ил)пирролидин-1 -ил)проп-2-ен-1 -он
59	O'O о	455,20/455,2	(R)-1 -(3 -(3 -(4-(3 -метокси-2метилфенокси)фенил)-1Нпиразоло[4,3 -с] пиридин-1 ил)пирролидин-1 -ил)проп-2-ен-1 -он
60	_O-Q /^¹ гх> О	459,15/459,2	(R)-1-(3-(3-(4-(3 -хлор-2метилфенокси)фенил)-1Нпиразоло[4,3 -с] пиридин-1 ил)пирролидин-1 -ил)проп-2-ен-1 -он

- 30 041461

61		429,16/429,2	(К)-1-(3-(3-(3-фтор-4-феноксифенил)1Н-пиразоло[4,3-с]пиридин-1ил)пирролидин-1 -ил)проп-2-ен-1 -он
62	с	443,18/443,2	(R)-1-(3-(3-(4- (3-фторфен ок си)фенил)1Н-пиразоло[4,3-с]пиридин-1ил)пиперидин-1 -ил)проп-2-ен-1 -он
63		429,16/429,2	(R)-1-(3-(3-(4- (3-фторфен ок си)фенил)1Н-пиразоло[4,3-с]пиридин-1ил)пирролидин-1 -ил)проп-2-ен-1 -он
64		441,18/441,2	(R)-1-(3-(3-(4-(3метоксифенокси) фенил)-1Нпиразоло[4,3-с]пиридин-1 ил) пирролидин-1 -ил)проп-2-ен-1 -он
65	X	455,20/455,2	(R)-1-(3-(3-(4-(3метоксифенокси) фенил)- 1Нпиразоло[4,3-с]пиридин-1 ил)пиперидин-1 -ил)проп-2-ен-1 -он
66	О / <c⁼ // N г ^? 1 1 ^N I A. N О Г	429,46/429,1	((R)-1 -(3-(7- фтор-3-(4-феноксифенил)1Н-пиразоло [ 4,3-с] пиридин-1 -ил)пирролидин-1 ил)проп-2-ен-1-он

- 31 041461

67	pAJ ГЛ. f G' U ') ^rv CO “Уч ^ν'^Νγ-0 к	509,49/509,1	(К)-1-(3-(7-(дифторметил)-3-(4-(2-фтор3-метоксиф енокси) фенил) - 1Н-пиразоло[4,3-с]пиридин-1 ил) пирролидин-1 -ил)проп-2-ен-1 -он
68	rO / O' ' .7 -f<_₀r	493,93/493,2	R)-l-(3-(3-(4-(2-xnop-3метоксифенокси)фенил)-7-фтор-1Нпир азоло [ 4,3-с] пиридин-1 -ил)пирролидин-1 ил)проп-2 -ен-1 - он
69	Ci -^J _ “ d N _fJ	505,96/505,2	(R)-l-(3-(3-(4-(2-xnop-3- метоксиф енокси) фенил)-7-метокси-1Н- пиразоло[ 4,3-с] пиридин-1 - ил) пирролидин-1 -ил)проп-2-ен-1 -он
70	< /Οι Ь n ·. ¹ ·	491,5/491,1	(R)-l-(3-(7-φτop-3-(4-(2-φτop-3метоксиф енокси) фенил)-1Нпиразоло[4,3-с]пиридин-1 ил)пиперидин-1 -ил)проп-2-ен-1 -он
71	0-oо ц Л л ъ<	473,19/ 473,2	(R)-l-(3-¢3-(4-(2-φτop-3метоксиф енокси) фенил)-1Нпиразоло[4,3-с]пиридин-1 ил)пиперидин-1 -ил)проп-2-ен-1 -он
72	1 Ч _	523,52/523,2	(К)-1-(3-(7-(дифторметил)-3-(4-(2-фтор3-метоксиф енокси) фенил) - 1Н-пиразоло[4,3-с]пиридин-1 ил)пиперидин-1 -ил)проп-2-ен-1 -он

- 32 041461

73	р О о ' - / / ΐ hi 1 ' ^Γ N .°	517,56/517,2	(К)Л-(3-(7-этокси-3-(4-(2-фтор-3метоксифенокси)фенил)1 Н-пир азол о[ 4,3-с] пиридин-1 ил)пиперидин-1 -ил)проп-2-ен-1 -он
74	J' .ιό A J. Ц J¹ % %	726,83/726,3	(R)-(3-(3-(4-(2-φτop-3метоксиф енокси) фенил)- 7-метокси-1Нпир азоло [4,3-с]пиридин-1 -ил)пиперидин-1 ил)(2-тозил-2-азаспиро [3.3] гептан-6 ил)метанон
75	г 1 [ ’и 1 ⁰ N ,°	519,99/520,1	R)-l-(3-(3-(4-(2-хлор-Зметоксифенокси)фенил)-7-метокси1 Н-пир азол о[ 4,3-с] пиридин-1 ил)пиперидин-1 -ил)проп-2-ен-1 -он
76	О ? 1 i 1 “ * - n _t о s' . - ¹ N ,	545,62/545,2	(R)-l-(3-(7-бyτoκcи-3-(4-(2-φτop-3метоксифенокси)фенил)- 1 Н-пир азол о[ 4,3-с] пиридин-1 ил)пиперидин-1 -ил)проп-2-ен-1 -он
77	F °’ o^!l 7 __ J ΐ i 'n I ^v , .Ά° у и -^Q	531,59/531,1	(R)-1-(3-(3-(4-(2-фтор-3- метоксифенокси)фенил)-7-пропокси1 Н-пир азоло[4,3-с]пиридин-1ил)пиперидин-1 -ил)проп-2-ен-1 -он
78	di	487,54/487,1	(R)-l-(3-(3-(4-(2-φτop-3метоксиф енокси) фенил)- 4-метил1 Н-пир азоло[4,3-с]пиридин-1ил)пиперидин-1 -ил)проп-2-ен-1 -он

- 33 041461

79	о ^fJ ' ‘n ’ N ' N , О	489,51/489,2	(К)-1-(3-(3-(4-(2-фтор-3метоксифенокси)фенил)-7-метокси1Н-пиразоло[4,3-с]пиридин-1ил)пирролидин-1 -ил )проп-2-ен-1-он
80	О - % F ° Ί I ^jn j N о	503,54/503,2	(R)-l -(3-(7 -этокси-3-(4-(2-фтор-3метоксифенокси)фенил)1Н-пиразоло[4,3-с]пиридин-1ил)пирролидин-1 -ил )проп-2-ен-1-он
81	- J'j A ·. Z Г % ' 7/^г	534,01/534,1	(R)-1 -(3 -(3-(4 -(2-хл ор-3 метоксифенокси)фенил)-7-этокси1 Н-пиразол о[4,3-с]пиридин-1ил)пипери дин-1 -ил)проп-2-ен-1 -он
82	A A νγ	489,51/489,2	(R)-1 -(3 -(3-(4 -(2-фтор-З метоксифенокси)фенил)-7-гидрокси1Н-пиразоло[4,3-с]пиридин-1ил)пипери дин-1 -ил)проп-2-ен-1 -он
83	,u	548,04/548,1	(К)-1-(3-(3-(4-(2-хлор-3метоксифенокси)фенил)-7-пропокси1Н-пиразоло[4,3-с]пиридин-1ил)пипери дин-1 -ил)проп-2-ен-1 -он
84	o-O ό^αΓχΑ г'%	562,07/562,0	(К)-1-(3-(7-бутокси-3-(4-(2-хлор-3метоксифенокси)фенил)- 1 Н-пиразол о[4,3-с]пиридин-1ил)пипери дин-1 -ил)проп-2-ен-1 -он

- 34 041461

85	рЯ я г Ь/	548,04/548,1	(R)-l-(3-(3-(4-(2-xnop-3метоксифенокси)фенил)-7-изопропокси1Н-пиразоло[4,3-с]пиридин-1ил)пиперидин-1 -ил)проп-2-ен-1 -он
86	А«''ЧЧ О'	576,05/576,0	l-((3R)-3 -(3-(4 -(2-хлор-Зметоксифенокси)фенил)-7((тетрагидрофуран-3 -ил) окси)-1Н-пиразоло[4,3-с]пиридин-1ил)пиперидин-1 -ил)проп-2-ен-1 -он
87	1 к Ί V ! ' Ч	532,58/532,1	(R)-1 -(3 -(7-( 2-аминоэтокси)-3 -(4 -(2-фтор-З метоксифенокси)фенил) -1Н-пиразоло[4,3-с]пиридин-1ил)пипери дин-1 -ил)проп-2-ен-1 -он
88	/'Г# 'ТА. ' V о. —	571,68/571,2	(R)-l-(3-(3-(4-(3-MeTOKCH-2- пропоксифенокси)фенил)-7-пропокси1Н-пиразоло[4,3-с]пиридин-1ил)шшеридин-1-ил)проп-2-ен-1-он
89	X Чо	505,55/505,1	Щ)-1-(3-(3-(4-(2-фтор-3метоксифенокси)фенил)-7-метокси1 Н-пиразол о[4,3 -с]пиридин-1 ил)пиперидин-1 -ил)пропан-1 -он
90	Ί N * Г 1	584,65/584,2	(Я,Е)-2-(3-(3-(4-(2-фтор-3мет оксифен ок си)ф енил) -7-метокси-1 Н-пиразоло[4,3с]пиридин-1 -ил) пиперидин-1 -карбонил)-4,4диметилпент-2- еннитрил

- 35 041461

91	к	503,54/503,3	1 -(2-((3 -(4-(2-φτορ-3метоксифенокси)фенил)-7-метокси-1Ηпиразоло[4,3 -с] пиридин-1 ил)метил)пирролидин-1 -ил)про-2-ен-1 он
92	fS' Ογ° Д	584,65/584,3	(Е)-2-(2-((3 -(4-(2-фтор-3 метоксифенокси)фенил)-7-метокси-1Нпиразоло[4,3 -с] пиридин-1 ил)метил)пирролидин-1 -карбонил)-4,4диметилпент-2-еннитрил
93	Μ φί /όγ	560,63/560,2	(R)-1 -(3 -(7-(2 -(диметиламино)этокси) -3-(4(2-фтор-З -метоксифенокси) фенил)-1 Н-пиразо ло [4,3-е] пиридин-1 ил)пиперидин-1 -ил)проп-2-ен-1 -он
94	Μ 1! I ^Ν Αγ , Xь/ Ν 0	572,64/572,1	(R)-1 -(3 -(7-(2 -(диметиламино)этокси) -3-(4(2-фтор-З -метоксифенокси) фенил)-1 Н-пиразо ло [4,3-е] пиридин-1 ил)пиперидин-1 -ил)бут-2-ин-1 -он
95	уО 0 Οχ ъ<	435,53/435,1	(S)-1 -(3 -(3-(4-( 1 -фенилвинил)фенил)- 1Нпиразоло [4,3 -с] пиридин-1 -ил)пиперидин-1 -ил)проп2-СН-1-ОН
96	X ?£ Ύ 0^°	531,59/531,1	Щ)-1-(3-(3-(4-(2-фтор-3метоксифенокси)фенил)-7-изопропокси1 Н-пиразоло [4,3 -с] пиридин-1 ил)пиперидин-1 -ил)проп-2-ен-1 -он
97	ο-* ΟΙ ___/ 0^0=0 Ν00Ν Γ° Ο	519,99/520,0	Щ)-1-(3-(3-(4-(2-хлор-3метоксифенокси)фенил)-7-этокси1 Н-пиразо ло [4,3 -с] пиридин-1 ил)пирролидин-1 -ил)проп-2-ен-1 -он
98	\ V ^ΝΆ нет ο	533,56/533,1	Щ)-1-(3-(3-(4-(2-фтор-3метоксифенокси)фенил)-7-(2гидроксиэтокси) -1 Н-пиразо ло [4,3 -с] пиридин-1 ил)пиперидин-1 -ил)проп-2-ен-1 -он
99	°Α 0 ^F ° Μ~-Ν \ у CX-z^ ° ^/ л	559,6/559,3	l-((3R)-3-(3-(4-(2 -фтор-3 метоксифенокси) фенил) -7((тетрагидрофуран-3 -ил) окси) -1 Н-пиразо ло [4,3 -с] пиридин-1 ил)пиперидин-1 -ил)проп-2-ен-1 -он

- 36 041461

Пример 100: (R)-1-(3-(3-(4-((2-фторбензил)окси)фенил)-1H-пиразоло[4,3-c]пиридин-1ил)пирролидин-1 -ил)проп-2-ен-1 -он

..., h t θ* '

дхмхл.соон градусов

Ct

ТА, ДХМ У кт” ^N i N

N

Ν σ_νι - ._Ν ^Η

Λ·_Ί ' λ.

^Ν Вос Μ

Стадия А: (R)-тρет-бутил-3-(3-(4-((2-фторбензил)окси)фенил)-1H-пиразоло[4,3-с]пиридин-1ил)пирролидин-1-карбоксилат (1).

В круглодонную колбу вместимостью 100 мл помещали раствор (R)-трет-бутил-3 -(3-(4гидроксифенил)-1Н-пиразоло[4,3-с]пиридин-1-ил)пирролидин-1-карбоксилата (30 мг, 0,078 ммоль) в ДМФА (3 мл), 1-(бромметил)-2-фторбензол (22 мг, 0,117 ммоль) и Cs₂CO₃ (51,3 мг, 0,16 ммоль). Полученный раствор перемешивали в течение 3 ч при кт, а затем гасили путем добавления 100 мл воды. Полученный раствор экстрагировали EtOAc и органические слои объединяли. Органические фазы промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным Na₂SO₄. Растворитель удаляли под вакуумом и остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (градиент: ДХМ/МеОН=200:1-100:1), что давало целевой продукт (30 мг, выход 80%). ЖХМС: m/z=489,2 [М+Н]+.

Стадия В: (R)-1-(3-(3-(4-((2-фторбензил)окси)фенил)-1H-пиразоло[4,3-с]пиридин-1-ил)пирролидин1-ил)проп-2-ен-1-он (2).

((R)-трет-бутил-3-(3-(4-(2-фтор-3-метоксифенокси)фенил)-7-метил-1H-пиразоло[4,3-c]пиридин-1ил)пирролидин-1-карбоксилат (30 мг, 0,061 ммоль) одной порцией добавляли к CF₃COOH/ДХМ=4/1 (5 мл). Смесь перемешивали в течение около 1 ч при кт. Летучие компоненты удаляли под вакуумом, что давало неочищенный целевой продукт (24 мг), который непосредственно использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. ЖХМС: m/z=389,2 [М+Н]⁺.

’Вос

Раствор акрилоилхлорида (5,5 мг, 0,061 ммоль) в ДХМ (1 мл) добавляли к раствору (R)-3-(4-((2фторбензил)окси)фенил)-1-(пирролидин-3-ил)-1H-пиразоло[4,3-с]пиридина (24 мг, 0,061 ммоль) и TEA (44 мг, 0,43 ммоль) в ДХМ (5 мл) при 0°С при перемешивании. Реакционную смесь перемешивали в течение 1 ч, выливали в насыщенный водный раствор хлорида натрия и экстрагировали ДХМ. Органический слой сушили, концентрировали и перекристаллизовывали из ДХМ/МеОН=100/1, что давало целевой продукт (13 мг, выход 50%). 1Н-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ 9,18 (ш.с., 1H), 8,48 (ш.с., 1H), 7,93-7,89 (м, 2Н), 7,55-7,52 (м, 1H), 7,34-7,26 (м, 2H), 7,20-7,09 (м, 4Н), 6,52-6,40 (м, 2Н), 5,75-5,70 (м, 1H), 5,27-5,23 (м, 1H), 5,22 (с, 1H), 4,16-4,07 (м, 3Н), 3,82-3,80 (м, 1H), 2,89-2,49 (м, 2H). ЖХМС: m/z=443,2 [М+Н]⁺.

Следующие дополнительные примеры 101, 102, показанные в таблице ниже, были получены в соответствии с методиками, представленными в общих способах выше и подробно описанными в примере

100.

МС (рассч.)

М+Н / МС (наид.) (R)-l-(3-(3-(4(феноксиметил)фенил)

-1 Н-инд азол-1 -ил)пиперидин-1 ил)проп-2-ен-1 -он (R)-l-(3-(3-(4-((2фторбензил)окси)фенил)-1Нпиразоло! 4,3 -cj пиридин-1 ил)пиперидин-1 -ил)проп-2-ен-1 -он

- 37 041461

Пример

103:

(R)-4-( 1-(1 -акрилоилпирролидин-3 -ил)-1 Н-пиразоло [4,3 -с] пиридин-3 -ил)-N-(3метоксибензил)бензамид .о ^н%о

Вг

НО он

PdfPPhjb KsCOj диоксан

UOH. ТГФ

ВОС

NBx

ЕЮН

\.-NBoc

Nil

ΙΙ,Ν

ЫН

HATU, TEA и

ТГФ II

ТФУ

ДХМ

TEA, ДХМ

Стадия А: (R)-трет-бутия-3-(3-(4-(метоксикарбонил)фенил)-1Н-пиразоло[4,3-с]пиридин-1ил)пирролидин-1-карбоксилат (1).

К раствору (R)-трет-бутил-3-(3-бром-1 H-пиразоло [4,3 -с] пиридин-1 -ил)пирролидин-1 -карбоксилата (105 мг, 0,286 ммоль, 1,0 экв.) и (4- (метоксикарбонил)фенил)бороновой кислоты (77 мг, 0,429 ммоль, 1,5 экв.) в диоксане (8,0 мл) и воде (1,0 мл) добавляли K₂CO₃ (79 мг, 0,572 ммоль, 2,0 экв.) и (Ph₃P)₄Pd (20 мг) под N2 при перемешивании. Смесь нагревали с обратным холодильником в течение 5,5 ч, пока вещество не исчезло. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры. Диоксан удаляли, испаряя на роторном испарителе. Остаток выливали в воду и экстрагировали ЭА. Органический слой сушили над Na₂SO₄, фильтровали и растворитель удаляли под вакуумом, а остаток очищали с помощью флэшхроматографии на силикагеле (ДХМ:МеОН=100:1-50:1), что давало целевой продукт (90 мг, выход 77,4%). ¹Н-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ 9,45 (с, 1H), 8,53 (с, 1H), 8,19 (д, J=8,4 Гц, 2Н), 8,04-8,11 (м, 3Н), 5,20 (с, 1H), 3,97 (с, 3Н), 3,93 (с, 3Н), 3,61 (с, 1H), 2,62-2,66 (м, 1H), 2,46 (д, J=6,0 Гц, 1H), 1,48 (с, 9Н). ЖХМС: m/z=423 [М+Н]+.

Стадия В: (R)-4-( 1-(1 -(трет-бутоксикарбонил)пирролидин-3 -ил)-1 H-пиразоло [4,3-с]пиридин-3ил)бензойная кислота (2).

К раствору 1 (90 мг, 0,213 ммоль, 1,0 экв.) в ТГФ (5,0 мл) и EtOH (5,0 мл) добавляли LiOH (45 мг, 1,067 ммоль, 5,0 экв.). Смесь перемешивали при комнатной температуре до исчезновения исходного вещества, добавляли воду, затем добавляли 1 н. НС1, чтобы установить рН=5,0, затем смесь экстрагировали ЭА. Органический слой промывали водой и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили с помощью безводного Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали, что давало неочищенный целевой продукт 2 (75 мг, 86,2%), который использовали на следующей стадии без очистки. ЖХМС: m/z=409 [М+Н]⁺.

Стадия С: (R)-трет-бутил-3 -(3 -(4-((3-метоксибензил)карбамоил)фенил)-1 H-пиразоло [4,3-с] пиридин1 -ил)пирролидин-1 -карбоксилат (3).

В круглодонную колбу вместимостью 50 мл помещали раствор 2 (75 мг, 0,184 ммоль, 1,0 экв.) в ТГФ (5,0 мл), (З-метоксифенил)метанамин (38 мг, 0,276 ммоль, 1,5 экв.) и TEA (47 мг, 0,460 ммоль, 2,5 экв.), HATU (84 мг, 0,221 ммоль, 1,2 экв.). Полученный раствор перемешивали в течение 1,5 ч при комнатной температуре. Реакционную смесь гасили 30 мл воды. Полученный раствор экстрагировали ЭА (20 мл*3), а органические слои объединяли и промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным Na₂SO₄. Растворитель удаляли под вакуумом и остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (ДХМ/МеОН=100:1-50:1), что давало целевой продукт (85 мг, выход 87,7%). 1Н-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ 9,37 (с, 1H), 8,48 (с, 1H), 8,07 (д, J=7,6 Гц, 1H), 7,94 (д, J=7,6 Гц, 1H), 7,38 (с, 1H), 7,26-7,32 (м, 1H), 6,94-6,99 (м, 2H), 6,86 (д, J=8,4 Гц, 1H), 6,48 (с, 1H), 5,19 (с, 1H), 4,67 (д, J=5,2 Гц, 2H), 3,78-3,93 (м, 6Н), 3,60 (с, 1H), 2,64 (д, J=6,0 Гц, 1H), 2,46 (д, J=7,6 Гц, 1H), 1,47 (с, 9Н). ЖХМС: m/z=528 [М+Н]⁺.

Стадия D: (R)-4-( 1-(1 -акрилоилпирролидин-3 -ил)-1 Н-пиразоло [4,3 -с] пиридин-3 -ил)-N-(Зметоксибензил)бензамид (4).

Промежуточное соединение 3 (85 мг, 0,157 ммоль, 1,0 экв.) растворяли в ДХМ (8,0 мл), одной пор

- 38 041461 цией добавляли ТФУ (1,5 мл). Смесь перемешивали в течение около 1,5 ч при кт. Летучие компоненты удаляли под вакуумом, что давало неочищенный целевой продукт в виде соли с ТФУ, который непосредственно использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. Неочищенный продукт растворяли в ДХМ (7,0 мл), к раствору добавляли TEA до РН=8,0, затем к раствору по каплям добавляли акрилоилхлорид (17 мг, 0,188 ммоль, 1,2 экв.) в ДХМ (1,0 мл). Реакционную смесь перемешивали в течение 0,5 ч, выливали в воду и экстрагировали ДХМ. Органический слой сушили с помощью безводного Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали, остаток очищали на пластинке с силикагелем (ДХМ/МеОН=50:1), что давало целевой продукт (20 мг, выход 25,8%). 1Н-ЯМР (400 МГц, CD3OD): δ 9,82 (с, 1H), 8,62 (с, 1H), 8,35 (д, J=6,0 Гц, 1H), 8,18 (д, J=8,0 Гц, 2Н), 8,08 (д, J=8,0 Гц, 2Н), 7,25-7,29 (м, 1H), 6,97 (д, J=8,0 Гц, 2Н), 6,84 (д, J=8,0 Гц, 1H), 6,61-6,79 (м, 1H), 6,32-6,38 (м, 1H), 5,77-5,85 (м, 2Н), 4,60 (с, 2Н), 4,28 (д, J=4,0 Гц, 1H), 4,00 (д, J=6,8 Гц, 1H), 3,80 (с, 3Н), 2,62-2,75 (м, 2Н). ЖХМС: m/z=482,2 [М+Н]+.

Следующие дополнительные примеры 104-105, показанные в таблице ниже, были получены в соответствии с методиками, представленными в общих способах выше и подробно описанными в примере 103.

Номер записи	Структура	МС (рассч.) [М+Н]⁺/ МС (найд.)	Название
104	°-^я ; □ Ί - N Ч N.A	496,23/ 496,2	(R)-4-( 1 -(1 -акрилоилпиперидин3-ил)-1Н-пиразоло[4,3с] пиридин-3 -ил)-М-(3 метоксибензил)бензамид
105	А %-ΝΗ А О	465,52/465,2	Щ)4-(1-(1-(бут-2иноил)пип ери дин-3 -ил)-1Нпиразоло [4,3-с]пиридин-3 -ил)-М-(пиридин2-ил)бензамид

Пример 106: (K)-1 -(3 -(3-(3 '-метил-[ 1,1 '-бифенил] -4-ил)-1 Н-пиразоло [4,3-с]тшрвдин-1 ил)пиперидин-1 -ил)проп-2-ен-1 -он

2

Стадия А: (R)-трет-бутил-3-(3-(3'-метил-[1,1'-бифенил]-4-ил)-1Н-пирαзоло[4,3-с]пиридин-1ил)пиперидин-1-карбоксилат (1).

К раствору (R)-трет-бутил-3 -(3-бром-1 H-пиразоло[4,3-с]пиридин-1 -ил)пиперидин-1 -карбоксилата (66,5 мг, 0,175 ммоль, 1,0 экв.) и (3'-метил-[1,1'-бифенил]-4-ил)бороновой кислоты (55,5 мг, 0,262 ммоль, 1,5 экв.) в диоксане (7,0 мл) и воде (1,0 мл) добавляли K2CO3 (60,4 мг, 0,436 ммоль, 2,0 экв.) и Pd[Ph₃P]₄(15 мг) под N₂ при перемешивании. Смесь нагревали с обратным холодильником в течение 6,0 ч и реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры. Диоксан удаляли, испаряя на роторном испарителе. Остаток выливали в воду и экстрагировали ЭА. Органический слой сушили над Na₂SO₄, фильтровали и растворитель удаляли, испаряя на роторном испарителе. Продукт очищали с помощью флэшхроматографии на силикагеле (ДХМ:МеОН=100:1-50:1), что давало целевой продукт (70 мг, выход 85,7%). ЖХМС: m/z=469 [M+H]⁺.

Стадия В: (R)-1 -(3 -(3 -(3 '-метил- [1,1 '-бифенил] -4-ил)-1 Н-пиразоло [4,3-с]пиридин-1 -ил)пиперидин-1 ил)проп-2-ен-1-он (2).

Промежуточное соединение 1 (70 мг, 0,15 ммоль, 1,0 экв.) растворяли в ДХМ (5,0 мл), одной порцией добавляли ТФУ (1,0 мл). Смесь перемешивали в течение около 1,5 ч при кт. Летучие компоненты удаляли под вакуумом, что давало неочищенный целевой продукт в виде соли с ТФУ, который непосредственно использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. Неочищенный продукт рас

- 39 041461 творяли в ДХМ (5,0 мл), к раствору добавляли TEA до РН=8,0, затем к раствору по каплям добавляли акрилоилхлорид (20 мг, 0,224 ммоль, 1,5 экв.) в ДХМ (1,0 мл). Реакционную смесь перемешивали в течение 0,5 ч, выливали в воду и экстрагировали ДХМ. Органический слой сушили с помощью безводного Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали, остаток очищали на пластинке с силикагелем (ДХМ/МеОН=50:1), что давало целевой продукт (20 мг, выход 31,7%). 1Н-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ 9,40 (с, 1H), 8,48 (с, 1H), 8,06 (д, J=8,0 Гц, 2Н), 7,76 (д, J=8,4 Гц, 2Н), 7,35-7,48 (м, 4Н), 7,20 (д, J=7,6 Гц, 1H), 6,56-6,69 (м, 1H), 6,34-6,39 (м, 1H), 5,70-5,78 (м, 1H), 4,95 (д, J=11,2 Гц, 0,5Н), 4,66 (д, J=7,2 Гц, 0,5Н), 4,50 (д, J=10,4 Гц, 1H), 4,08-4,23 (м, 1H), 3,84 (с, 0.5Н), 3,21-3,30 (м, 1H), 2,93 (с, 0,5), 2,30 (д, J=11,2 Гц, 1H), 1,74 (с, 1H). ЖХМС: m/z=423 [М+Н]+.

Следующие дополнительные примеры 107-115, показанные в таблице ниже, были получены в соответствии с методиками, представленными в общих способах выше и подробно описанными в примере 106.

Номе Р запис и	Структура	МС (рассч.) [М+Н]⁺/ МС (найд.)	Название
107	ч С) Z^	409,20/ 409,2	(R)-1 -(3 -(3 -(3 '-метил- [1,1 '-бифенил] 4-ил)-1 Н-пиразоло[4,3 -с] пиридин-1 ил)пирролидин-1 -ил)проп-2-ен-1 -он
108	-- О ^N X- f N '	409,20/ 409,2	(R)-1 -(3 -(3 -(3 '-метил- [1,1 '-бифенил] 4-ил)-2Н-пиразоло[4,3-с]пиридин-2ил)пирролидин-1 -ил)проп-2-ен-1 -он

- 40 041461

109 110 111 112 ИЗ 114	/ А ί l[ , Λ _ d _ А ” [ If ‘ * V Ον 1........-.. .....,-.. J Г \|[ » Λ ' '--И - ··' Vl J © / / ;> 'ί V \ J' r J L if “	431,55/431,1 499,66/499,3 449,54/449,1 417,52/417,1 461,57/461,3 446,56/446,1	(R)-1 -(3 -(3 -(4-(4-метилпиперазин-1 ил)фенил)-1 Н-пиразоло [4,3 -с] пиридин-1 -ил)пиперидин-1 ил)проп-2-ен-1 -он (R)-1 -(3 -(3 -(4-([ 1,4'-бипиперидин]1 '-ил)фенил)- 1Н-пиразоло [4,3 -с] пиридин-1 -ил)пиперидин-1 ил)проп-2-ен-1 -он (R)-1-(3-(3-(3-фтор-4-(4метилпиперазин-1 -ил)фенил)-1Нпиразоло[4,3 -с] пиридин-1 ил)пиперидин-1 -ил)проп-2-ен-1 -он (R)-1 -(3 -(3 -(4-(4-метилпиперазин-1 ил)фенил)-1 Н-пиразоло [4,3 -с] пиридин-1 -ил)пирролидин-1 ил)проп-2-ен-1 -он (R)-1 -(3 -(3 -(2-метокси-4-(4метилпиперазин-1 -ил)фенил)-1Нпиразоло[4,3 -с] пиридин-1 ил)пиперидин-1 -ил)проп-2-ен-1 -он (R)-1 -(3 -(3 -((4-(4-метилпиперазин- 1 -ил)фенил)амино)-1Нпиразоло[4,3 -с] пиридин-1 ил)пиперидин-1 -ил)проп-2-ен-1 -он
115	О 1 Up ~ k о	495,61/495,2	(R)-1-(3-(3-(4-(4(метилсульфонил)пиперазин-1 ил)фенил)-1Нпиразоло[4,3 -с] пиридин-1 ил)пиперидин-1 -ил)проп-2-ен-1 -он

Пример 116: N-{4-[1-(1-акрилоилпирролидин-3 -ил)-1Н-пиразоло[4,3-с]пиридин-3-ил]-фенил}-3трифторметилбензамид

- 41 041461

Стадия А: (R)-трет-бутил-3-(3-(4-аминофенил)-1Н-пиразоло[4,3-с]пиридин-1-ил)пирролидин-1карбоксилат (1).

К раствору (R)-трет-бутил-3-(3-бром-1H-пиразоло[4,3-с]пиридин-1-ил)пирролидин-1-карбоксилата (77 мг, 0,209 ммоль, 1,0 экв.) и (4-аминофенил)бороновой кислоты (57 мг, 0,418 ммоль, 2,0 экв.) в диоксане (8,0 мл) и воде (1,0 мл) добавляли K₂CO₃ (87 мг, 0,628 ммоль, 3,0 экв.) и (Ph₃P)₄Pd (20 мг) под N2 при перемешивании. Смесь нагревали с обратным холодильником в течение 5,5 ч, пока вещество не исчезло. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры. Диоксан удаляли, испаряя на роторном испарителе. Остаток выливали в воду и экстрагировали ЭА. Органический слой сушили над Na₂SO₄, фильтровали и растворитель удаляли под вакуумом, а остаток очищали с помощью флэш-хроматографии на силикагеле (ДХМ:МеОН=100:1-50:1), что давало целевой продукт (77 мг, выход 96,8%). ЖХМС: m/z=380 [М+Н]+.

Стадия В: (R)-трет-буmил-3-(3-(4-((3-(трифторметил)фенил)амино)фенил)-1H-пиразоло[4,3с]пиридин-1-ил)пирролидин-1-карбоксилат (2).

К раствору 1 (77 мг, 0,203 ммоль, 1,0 экв.) в ДХМ (5,0 мл) по каплям добавляли 3(трифторметил)бензоилхлорид (51 мг, 0,243 ммоль, 1,2 экв.), который был растворен в ДХМ (2,0 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2,0 ч, добавляли воду, затем смесь экстрагировали ДХМ. Органический слой промывали водой и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили с помощью безводного Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали. Продукт очищали с помощью флэш-хроматографии на силикагеле (ДХМ:МеОН=100:1-50:1), что давало целевой продукт (60 мг, 56,5%). ЖХМС: m/z=524 [М+Н]+.

Стадия С: (R)-1 -(3 -(3 -(4-((3 -(трифторметил)фенил)амино)фенил)-1 Н-пиразоло [4,3 -с] пиридин-1 ил)пирролидин-1-ил)проп-2-ен-1-он (3).

Промежуточное соединение 2 (60 мг, 0,115 ммоль, 1,0 экв.) растворяли в ДХМ (8,0 мл), одной порцией добавляли ТФУ (1,0 мл). Смесь перемешивали в течение около 1,5 ч при кт. Летучие компоненты удаляли под вакуумом, что давало неочищенный целевой продукт в виде соли с ТФУ, который непосредственно использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. Неочищенный продукт растворяли в ДХМ (5,0 мл), добавляли TEA до РН=8,0, затем к раствору по каплям добавляли акрилоилхлорид (12 мг, 0,133 ммоль, 1,2 экв.) в ДХМ (1,0 мл). Реакционную смесь перемешивали в течение 0,5 ч, выливали в воду и экстрагировали ДХМ. Органический слой сушили с помощью безводного Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали, остаток очищали на пластинке с силикагелем (ДХМ/МеОН=50:1), что давало целевой продукт (19 мг, выход 34,7%). ¹Н-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ 9,34 (д, J=14,0 Гц, 1H), 9,09 (д, J=6,0 Гц, 1H), 8,15-8,47 (м, 3Н), 7,77-7,95 (м, 5Н), 7,58-7,62 (м, 1H), 7,35-7,39 (м, 1H), 6,37-6,54 (м, 2Н), 5,69-5,75 (м, 1H), 5,21-5,30 (м, 1H), 4,38 (д, J=9,6 Гц, 1H), 4,01-4,18 (м, 3Н), 3,80-3,85 (м, 1H), 2,47-2,75 (м, 2Н). ЖХМС: m/z=506,2 [М+Н]+.

Следующий дополнительный пример 117, показанный в таблице ниже, был получен в соответствии с методиками, представленными в общих способах выше и подробно описанными в примере 116.

Номе Р запис и	Структура	МС (рассч.) [М+Н]⁺/ МС (найд.)	Название
117	%’ _rCF₃ -Ί Ό '.....Γ'ν Ν Й-/	520,19/ 520,2	(R)-N-(4-(l-(lакрилоилпиперидин-3-ил)-1Нпиразоло[4,3-с]пиридин-3ил)фенил)-3(трифторметил)бензамид

Следующие дополнительные примеры 118-123 в таблице ниже были получены в соответствии с методиками, представленными в общих способах выше или опубликованными в литературе.

- 42 041461

Номе Р запис и	Структура	МС (рассч.) [М+Н]⁺/ МС (найд.)	Название
118	с Г 'г/ а	521,55/521,1	1-((К)-3-(3-(4-(2-фтор-3мет оксифенокси) фенил)-7мeτoκcи-lH-πиpaзoлo[4,3с]пиридин-1 -ил)пиперидин-1 ил)-2 -гидроксипропан-1 - он
119	/ < Cxi- J К, ^ж; ' ί 1	521,51/521,2	(R)-2-(3-(3-(4-(2-фтор-3метоксиф енокси) фенил) -7-метокси-1 Н-пиразоло [4,3 с]пиридин -1 -ил)пиперидин-1 -ил)-2оксоуксусная кислота
120	О_л Л Т г Д с Г-. ‘У ' Уу'	520,52/520,5	(К)-2-(3-(3-(4-(2-фтор-3метоксифенокси) фенил)-7метокси-1Н-пиразоло[4,3с]пиридин-1 -ил)пиперидин-1 ил)-2-оксоацетамид
121	/У ^rJ' ;'ό О	492,51/492,2	(3Κ)-3-(3-(4-(2-φτορ-3метоксиф енокси) фенил) -7-метокси-1 Н-пиразоло[4,3-с] пиридин-1ил)циклогексанкарбоновая кислота
122	Л- Н	492,51/492,2	4-(3-(4-(2-фтор-3- мет оксифенокси) фенил)-7мeτoκcи-lH-πиpaзoлo[4,3с]пиридин-1ил)циклогексанкарбоновая кислота
123	О HN^ г^;» N z...... о ^^СН	441,49/441,0	4 -(3 -(4-бензаиидофенил)-1Н пиразоло[4,3-с] пиридин-1ил)цикпогексанкарбоновая кислота
124	[1 ^Т N --...........К мг/ ^м	398,47/398,1	4-(3-([1,Г-бифенил]-4-ил)-1Нпиразоло[4,3-с] пиридин-1ил)циклогексанкарбоновая кислота

- 43 041461

125	ft О ci	428,50/428,2	4-(3-(4-(бензилокси)фенил)-1Нпиразоло[4,3-с] пиридин-1ил)цикпогексанкарбоновая кислота
126	ГУ ft А / Д он V/ < О	414,47/414,1	3-(3-(4-феноксифенил)-1Нпиразоло[4,3-с] пиридин-1ил)цикпогексанк арбой овая кислота

Анализ киназы Btk и анализ других киназ.

Активность киназы Btk определяли с использованием гомогенной флуоресценции с временным разрешением (HTRF). Измерения выполняли при объеме реакционной смеси, составляющем 15 мкл, с использованием 384-луночного аналитического планшета. Киназный фермент, ингибитор, АТФ и 1 мкМ пептидного субстрата инкубировали в реакционном буферном растворе, состоящем из Hepes, 50 мМ (рН 7,0), NaN3, 0,02%, БСА, 0,01%, ортованадата, 0,1 мМ. Через один час реакцию киназы гасили путем добавления антитела, меченого Εμ, и XL-665 в буферном растворе для обнаружения (1х), содержащем 60 мМ ЭДТУ (Cisbio), и смесь оставляли для инкубации в течение одного часа. Сигнал HTRF измеряли на многорежимном ридере для планшетов (многорежимный ридер EnVision®, Perkin Elmer) с длиной волны возбуждения (λ,_Εχ), составляющей 330 нм, и длинами волн детектирования (X_Em), составляющими 615 и 665 нм. Активность определяли как отношение флуоресценции при 665 нм к флуоресценции при 615 нм. Для каждого соединения активность фермента определяли при различных концентрациях соединения, реакции отрицательного контроля осуществляли в отсутствие ингибитора в двух повторениях, а восемь неферментных контрольных образцов использовали для определения исходных уровней флуоресценции. Значения IC₅₀ получали в соответствии с уравнением:

Y=Ю0/(1+10^Λ((LogIC50-X)*угловой коэффициент Хилла)).

Для анализа BTK, [АТФ]=80 мкМ, BTK=3,4 нМ.

Для анализа LYN, [АТФ]=20 мкМ, LYN=0,12 нМ.

Для анализа LCK, [АТФ]=20 мкМ, LCK=0,2 нМ.

Для анализа BLK, [АТФ]=20 мкМ, BLK=0,6 нМ.

Пример 127.

В следующей таблице показана активность выбранных соединений по данному изобретению в анализе ингибирования BTK. Номера соединений соответствуют номерам соединений в предыдущих таблицах. Соединения, имеющие активность, обозначенную как А, характеризовались IC 50<10 нМ; соединения, имеющие активность, обозначенную как В, характеризовались IC₅₀ 10-100 нМ; соединения, имеющие активность, обозначенную как С, характеризовались IC₅₀ 100-1000 нМ; соединения, имеющие активность, обозначенную как D, характеризовались IC₅₀ 1000-10000 нМ; соединения, имеющие активность, обозначенную как Е, характеризовались IC₅₀> 10000 нМ.

- 44 041461

Данные об ингибировании ВТК

№ соединен ИЯ	Ингибирова ние ВТК	№ соединен ия	Ингибирова ние ВТК	№ соединен ия	Ингибирова ние ВТК	№ соединен ия	Ингибирова ние ВТК
1	А	2	А	3	А	4	А
5	А	6	А	7	В	8	С
9	В	10	В	11	А	12	В
13	А	14	В	15	С	16	В
17	А	18	А	19	А	20	А
21	В	22	В	23	В	24	А
25	С	26	А	27	В	28	А
29	В	30	С	31	В	32	В
33	А	34	С	35	в	36	В
37	В	38	В	39	в	40	в
41	А	42	А	43	А	44	А
45	D	46	Е	47	А	48	В
49	В	50	В	51	В	52	в
53	В	54	В	55	в	56	в
57	В	58	А	59	в	60	в
61	А	62	А	63	А	64	А
65	В	66	А	67	А	68	А
69	А	70	А	71	А	72	В
73	А	74	С	75	А	76	А
77	А	78	А	79	А	80	А
81	А	82	А	83	А	84	А
85	А	86	А	87	В	88	В
89	С	90	В	91	А	92	В
93	А	94	В	95	В	96	в
97	А	98	А	99	А	100	в
101	В	102	В	103	С	104	с
105	С	106	С	107	В	108	с
109	С	ПО	В	111	С	112	с
113	с	114	D	115	с	116	в
117	в	118	В	119	в	120	в
121	в	122	А	123	Е	124	Е
125	и. д.	126	и. д.

Пример 128.

В следующей Таблице показана активность выбранных соединений по данному изобретению в анализе ингибирования ВТК, BLK, LYN, LCK. Номера соединений соответствуют номерам соединений в предыдущих таблицах. Соединения, имеющие активность, обозначенную как А, характеризовались IC₅₀<10 нМ; соединения, имеющие активность, обозначенную как В, характеризовались IC50 10-100 нМ; соединения, имеющие активность, обозначенную как С, характеризовались IC50 100-1000 нМ; соединения, имеющие активность, обозначенную как D, характеризовались IC50 1000-10000 нМ; соединения, имеющие активность, обозначенную как Е, характеризовались IC₅₀> 10000 нМ; н.д. - нет данных.

Таблица 2

Соединение	1С₅о для ВТК	1С₅о для BLK	1С₅о для LYN	1С₅о для LCK	1С₅о для EGFR
1	А	А	Е	D	С
6	А	В	D	D	С

Определения потока кальция.

Определение потока кальция с помощью флуоресценции осуществляли на флуориметрическом планшет-ридере aFDSS7000EX (Hamamatsu Photonics) в соответствии с инструкциями производителя. Анализируемые соединения растворяли в ДМСО, разбавляли до необходимых концентраций в интервале от 0 до 10 мкМ в Са²⁺ буферном растворе (коэффициент разбавления 0,1), добавляли 5 мкл (6 X) в каждую лунку (конечная концентрация ДМСО составляла 0,1% в каждой лунке). Затем в каждую лунку 384луночного планшета добавляли 12,5 мкл раствора, содержащего краситель (2Х) (наборы для определения кальция Fluo-4 NW, Invitrogen). После этого активно растущие клетки Ramos (АТСС) в среде RPM1640, дополненной 10% ФБС (Invitrogen), промывали и повторно наносили на планшет в буферном растворе для анализа (из наборов для определения кальция Fluo-4 NW, Invitrogen) до приблизительно 6,4х106/мл (80000 клеток/12,5 мкл в 384-луночных планшетах). Планшеты инкубировали при 37°С в течение 30 мин, затем при комнатной температуре в течение еще 30 мин. Теперь планшеты были готовы для использования в эксперименте. Непосредственно после переноса и записи исходной флуоресценции в течение 10 с, клетки, обработанные соединением, стимулировали с помощью антитела козы к человеческому IgM (10 мкг/мл; Jackson Immuno Research) и считывали с помощью FDSS в течение 240 с. Различие между сигналом и исходным уровнем, выраженное в скорректированных относительных единицах флуоресценции, рассчитывали путем использования собственного шаблона Excel (Microsoft, Редмонд, Вашингтон), для определения притока кальция, вызванного IgM, и его ингибирования с помощью соединений. Таблица ниже демонстрирует результат. Соединения, имеющие активность, обозначенную как А, характеризо

-

Claims

вались IC₅₀<10 нМ; соединения, имеющие активность, обозначенную как В характеризовались IC₅₀10-100 нМ; соединения, имеющие активность, обозначенную как С, характеризовались IC₅₀ 100-1000 нМ.

Таблица 3

Соединение Поток Са (нМ) в Ramos

Пример 1 В

Пример 2 В

Пример 3 В

Пример 4 в

Пример 6 в

Пример 11 с

Пример 17 в

Пример 18 в

Пример 19 в

Пример 20 в

Пример 41 в

Пример 43 в

Пример 58 в

Пример 61 с

Пример 62 с

Пример 63 с

Пример 64 в

Занятость сайтов связывания Btk в клеточных анализах.

Для мечения В-клеток человека с помощью PCI-33380, 10⁶ клеток Jeko-1 предварительно инкубировали с соединением в течение 1,5 ч до мечения. Затем клетки обрабатывали PCI-33380 при 5 мкМ в течение 1 ч. Промывали, подвергали лизису в буферном растворе Ripa, содержащем агент, восстанавливающий образец, и анализировали с помощью SDS/PAGE (электрофореза белков в полиакриламидом геле в присутствии додецилсульфата натрия) и считывания флуоресценции геля с использованием сканера Typhoon 9500 (GE Healthcare) (возбуждение 532 нм; эмиссия 555 нм). Затем гель блоттировали и определяли общие уровни Btk с помощью стандартного вестерн-блоттинга с антителом к Btk (CST). Путем использования флуоресцентно меченого производного PCI-33380 мы обнаружили, что 25 нМ соединения 77; 50 нМ соединения 3, 78, 79, 80, 83, 100 нМ соединения 2, 4, 17, 41, 43, 69, 71, 73, 98 и 99 было достаточно для того, чтобы полностью занять активный сайты Btk в линиях клеток мантийноклеточной лимфомы человека Jeko-1 в культуре. Занятость сайтов связывания Btk in vivo

Анализ занятости сайтов связывания Btk у мышей Babc/L проводили после перорального введения соединений через 4 часа. У мышей Babc/L забирали мононуклеарные клетки, выделенные из периферической крови (РВМС) с помощью набора для разделения периферической крови мышей (Нао Yang Biological Manufacture CO., LTD, Тяньцзинь) (1 мл крови от двух мышей). Селезенки превращали в спленоциты с последующей инкубацией в буферном растворе для лизиса эритроцитов в течение 5 мин (из набора для разделения периферической крови мышей). РВМС или спленоциты затем метили с помощью PCI33380 и лизаты анализировали путем считывания флуоресценции геля, как описано в клеточных анализах. Для соединений 2, 3, 4, 71 достигалась полная занятость при однократной пероральной дозе 10 мг/кг для всех мышей Babc/L. Для соединений 73, 91 достигалась полная занятость при однократной пероральной дозе 5 мг/кг для всех мышей Babc/L.

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

1. Соединение формулы (I)

где А представляет собой CR¹;

каждый из В, С и D представляет собой N или С-Н при условии, что только один или два из А, В, С и D могут представлять собой N;

R¹ представляет собой водород, ОН, CN, NHOH или CONH2;

R² представляет собой

- 46 041461

-Х-Е представляет собой одно из следующего:

(1) X представляет собой О, OCR^aR^b, CR^aR^bO, S(O), S(O)₂, CR^aR^b, NR^c(C=O), C=ONR^c или связь; и Е представляет собой водород, фенил, нафтил, тетрагидронафтил, инденил, дигидроинденил, замещенный одним-тремя заместителями R⁵; или 3-7-членное насыщенное или частично ненасыщенное карбоциклическое кольцо, 5-6-членное моноциклическое гетероарильное кольцо, содержащее 1-4 гетероатома, независимо выбранных из азота, кислорода или серы, 4-7-членное насыщенное или частично ненасыщенное гетероциклическое кольцо, содержащее 1-3 гетероатома, независимо выбранных из азота, кислорода или серы, или 7-10-членное бициклическое насыщенное или частично ненасыщенное гетероциклическое кольцо, содержащее 1-5 гетероатомов, независимо выбранных из азота, кислорода или серы; или (2) -Х-Е представляет собой водород, галоген, -OR^a, -O(CH₂)1.₄R^a, -CN, -NO2;

R⁴ и R⁵, каждый независимо, выбраны из группы, состоящей из водорода, галогена, гидрокси, циано, OCF3, OCF2H, С1.₆алкила, необязательно замещенного одним-пятью атомами фтора, С₃.₆циклоалкила, необязательно замещенного одним-пятью атомами фтора, С1.₄алкокси, необязательно замещенного одним-пятью атомами фтора, С1.₄алкилтио, необязательно замещенного одним-пятью атомами фтора, C₁.₄алкилсульфонила, необязательно замещенного одним-пятью атомами фтора, карбокси, С1.₄алкилоксикарбонила и С1.₄алкилкарбонила;

R^a и R^b, каждый независимо, представляют собой водород, фтор или C₁.₃алкил, необязательно замещенный одним-пятью атомами фтора;

R^c представляет собой водород или C_1-3алкuл, необязательно замещенный одним-пятью атомами фтора;

R³ выбран из группы, состоящей из:

где Y представляет собой С(=О), ОС(=О), NHC(=O), S=O, S(=O)2 или NHS(=O)2; и

R⁶, R⁷, R⁸, каждый независимо, представляют собой водород, галоген, CN, С_1-4алкил, С1.₆алкоксиалкил, С1-₈алкиламиноалкил или С1.₄алкилфенил; или R⁷ и R⁸, взятые вместе, образуют связь, или R³ выбран из группы, состоящей из:

Y представляет собой С(=О), ОС(=О), NHC(=O), S=O, S(=O)2 или NHS(=O)2;

R⁶, R⁷, R⁸, каждый независимо, представляют собой водород, галоген, CN, С1-4алкил, С1.₆алкоксиалкил, С1-₈алкиламиноалкил или С_1-4алкилфенил; и

R⁷ и R⁸ необязательно взяты вместе с образованием связи;

его изомер, или его таутомер.
2. Соединение по п.1, где Е выбран из фенила, нафтила или дигидроинденила, каждый из которых необязательно замещен одним-тремя заместителями R⁵.

- 47 041461
3. Соединение по п.1, где R³ выбран из группы, состоящей из:
4. Соединение по п.1, где один из В, С и D представляет собой N.

и D представляют собой С-Н.
5. Соединение по п.1, где В представляет собой N, и С
6. Соединение, выбранное из группы, состоящей из:

- 48 041461

- 49 041461

- 50 041461

- 51 041461
7. Соединение, выбранное из группы, состоящей из:

- 52 041461

- 53 041461

Евразийская патентная организация, ЕАПВ

Россия, 109012, Москва, Малый Черкасский пер., 2