EA041089B1

EA041089B1 - SALT OF AMINOPYRIDINE DERIVATIVE COMPOUND, ITS CRYSTAL FORM AND METHOD OF OBTAINING

Info

Publication number: EA041089B1
Application number: EA201992501
Authority: EA
Inventors: Санг Хо Ох; Дзонг Гиун КИМ; Се-Воонг Ох; Тае Донг Хан; Соо Йонг Чунг; Сеонг Ран Ли; Киеонг Бае КИМ; Йоунг Сунг ЛИ; Воо Сеоб Шин; Хиун Дзу; Дзеонг Ки Канг; Су Мин Парк; Донг Киун Ким
Original assignee: Юхан Корпорейшн
Priority date: 2017-04-21
Filing date: 2018-04-18
Publication date: 2022-09-12

Description

Область техникиTechnical field

Изобретение относится к мезилатной (метансульфоновой) соли соединения N-(5-(4-(4((диметиламино)метил)-3-фенил-Ш-пиразол-1-ил)пиримидин-2-иламино)-4-метокси-2-морфолинофенил)акриламида в форме свободного основания, представленного нижеприведенной формулой 2, ее кристаллической форме и способу ее получения. Более конкретно, настоящее изобретение относится к мезилатной соли соединения, представленного нижеприведенной формулой 2, которая отличается превосходными стабильностью, растворимостью и биодоступностью и имеет высокую степень чистоты, ее кристаллической форме и способу ее получения.The invention relates to the mesylate (methanesulfonic) salt of the compound N-(5-(4-(4((dimethylamino)methyl)-3-phenyl-III-pyrazol-1-yl)pyrimidin-2-ylamino)-4-methoxy-2 -morpholinophenyl)acrylamide in the form of a free base represented by the following formula 2, its crystalline form and its production method. More specifically, the present invention relates to a mesylate salt of the compound represented by the following formula 2, which is excellent in stability, solubility and bioavailability and has a high degree of purity, its crystalline form, and a method for producing it.

Формула 2Formula 2

Уровень техникиState of the art

Во всем мире на рак легкого приходится около одной трети причин смерти от рака, а немелкоклеточный рак легкого составляет около 80% всех случаев рака легкого. Ожидается, что только некоторых пациентов, страдающих немелкоклеточным раком легкого, можно вылечить с помощью хирургического вмешательства, а у большинства пациентов диагностируют местнораспространенный рак или метастатический рак. Лечение распространенного немелкоклеточного рака легкого зависит от наличия или отсутствия молекулярных маркеров специфических мутаций. Если мутация рецептора эпидермального фактора роста (EGFR) является положительной, лечение первой линии состоит в применении ингибитора тирозинкиназы (ИТК) EGFR. Пациенты с такими мутациями восприимчивы к ИТК EGFR. Однако у большинства пациентов, реагирующих на ИТК EGFR (например, эрлотиниб и гефитиниб), в конечном итоге развивается резистентность к ним, а заболевание прогрессирует до распространенного рака легкого. Среди этих причин на Т790М, которая является точечной мутацией в остатке привратника домена тирозинкиназы (ТК), приходится от около 50 до 60% приобретенной резистентности. Таким образом, в настоящее время проводится разработка молекулярного нацеленного на эту мутацию терапевтического агента. Кроме того, хотя у около 50% пациентов, страдающих немелкоклеточным раком легкого с мутацией EGFR, развиваются метастазы в головной мозг в течение 3 лет после постановки диагноза, ИТК EGFR, разработанные на данный момент, имеют низкую степень проникновения в головной мозг, что ограничивает лечение метастатических поражений головного мозга.Worldwide, lung cancer accounts for about one third of cancer deaths, and non-small cell lung cancer accounts for about 80% of all lung cancer cases. It is expected that only some patients suffering from non-small cell lung cancer can be cured with surgery, and most patients are diagnosed with locally advanced cancer or metastatic cancer. Treatment of advanced non-small cell lung cancer depends on the presence or absence of molecular markers of specific mutations. If the epidermal growth factor receptor (EGFR) mutation is positive, first-line treatment is with an EGFR tyrosine kinase inhibitor (TKI). Patients with these mutations are susceptible to EGFR TKIs. However, most patients who respond to EGFR TKIs (eg, erlotinib and gefitinib) eventually develop resistance to them and progress to advanced lung cancer. Among these causes, T790M, which is a point mutation in the pylorus residue of the tyrosine kinase (TK) domain, accounts for about 50 to 60% of acquired resistance. Thus, a molecular therapeutic targeting this mutation is currently under development. In addition, although about 50% of patients with EGFR-mutated non-small cell lung cancer develop brain metastases within 3 years of diagnosis, EGFR TKIs currently developed have a low rate of penetration into the brain, which limits treatment. metastatic brain lesions.

Известно, что соединение N-(5-(4-(4-((диметиламино)метил)-3-фенил-1H-пиразол-1-ил)пиримидин2-иламино)-4-метокси-2-морфолинофенил)акриламида в форме свободного основания, как упоминалось выше, оказывает некоторое воздействие на EGFR дикого типа и является высокоселективным и необратимым ИТК EGFR с сильной ингибирующей активностью против единичной мутации Т790М и двойных мутаций (EGFRm). Ожидается, что соединение будет терапевтически эффективным при лечении пациентов с распространенным немелкоклеточным раком легкого как с первичным раком, так и с распространенным немелкоклеточным раком легкого с метастазами в головной мозг.It is known that the compound N-(5-(4-(4-((dimethylamino)methyl)-3-phenyl-1H-pyrazol-1-yl)pyrimidin2-ylamino)-4-methoxy-2-morpholinophenyl)acrylamide in the form The free base, as mentioned above, has some effect on wild-type EGFR and is a highly selective and irreversible EGFR TKI with strong inhibitory activity against T790M single mutation and double mutations (EGFRm). The compound is expected to be therapeutically effective in the treatment of advanced non-small cell lung cancer patients with both primary cancer and advanced non-small cell lung cancer with brain metastases.

В связи с этим в международной патентной публикации WO 2016060443 описано соединение, представленное вышеприведенной формулой 2, и способ его получения, причем данное соединение можно использовать в качестве лекарственного препарата для ингибирования активности опосредованных протеинкиназой расстройств, в частности с EGFR, имеющих одну или более мутаций по сравнению с EGFR дикого типа. Таким образом, данное соединение имеет потенциал в качестве кандидата для разработки лекарственных препаратов для лечения опосредованных протеинкиназой расстройств.In this regard, international patent publication WO 2016060443 describes a compound represented by the above formula 2 and a method for its preparation, and this compound can be used as a drug for inhibiting the activity of protein kinase-mediated disorders, in particular with EGFR, having one or more mutations at compared to wild-type EGFR. Thus, this compound has potential as a drug development candidate for the treatment of protein kinase-mediated disorders.

Описание изобретенияDescription of the invention

Техническая задачаTechnical task

При определении возможности разработки соединения в качестве лекарственного препарата высокая фармакологическая активность и хороший фармакологический профиль являются не единственными факторами, которые следует учитывать. Хороший кандидатный лекарственный препарат должен содержать небольшое количество примесей, быть физически и химически стабильным и демонстрировать допустимый уровень биодоступности. Поскольку соединение N-(5-(4-(4-((диметиламино)метил)-3-фенил1H-пирαзол-1-ил)пиримидин-2-иламино)-4-метокси-2-морфолинофенил)акриламида в форме свободного основания имеет не только низкую растворимость в воде, но также и низкую растворимость в кислой среде, недостатком этого соединения является то, что его растворимость и биодоступность являются неидеальными при его применении в качестве лекарственного препарата. Таким образом, задача состояла в получении лекарственной формы этого соединения с превосходными растворимостью и биодоступностью по сравнению с формой свободного основания.When determining whether a compound can be developed as a drug, high pharmacological activity and a good pharmacological profile are not the only factors to be considered. A good drug candidate should contain few impurities, be physically and chemically stable, and show an acceptable level of bioavailability. Since the compound N-(5-(4-(4-((dimethylamino)methyl)-3-phenyl1H-pyrαzol-1-yl)pyrimidin-2-ylamino)-4-methoxy-2-morpholinophenyl)acrylamide in free base form has not only low water solubility but also low acid solubility, the disadvantage of this compound is that its solubility and bioavailability are not ideal when used as a drug. Thus, the goal was to provide a dosage form of this compound with superior solubility and bioavailability compared to the free base form.

Соответственно, целью настоящего изобретения является обеспечение фармацевтически приемлемой соли соединения N-(5-(4-(4-((диметиламино)метил)-3-фенил-1H-пиразол-1-ил)пиримидин-2Accordingly, it is an object of the present invention to provide a pharmaceutically acceptable salt of the compound N-(5-(4-(4-((dimethylamino)methyl)-3-phenyl-1H-pyrazol-1-yl)pyrimidin-2

- 1 041089 иламино)-4-метокси-2-морфолинофенил)акриламида, у которой улучшены различные физикохимические параметры, такие как растворимость и гигроскопичность, с целью повышения растворимости и биодоступности соединения в форме свободного основания. Это означает, что по результатам исследования на животных соединения в виде свободного основания, имеющего низкую растворимость, существует проблема, заключающаяся в низком уровне абсорбции лекарственного препарата и вариациях в уровне абсорбции среди отдельных особей. Соответственно, для решения этой задачи целью настоящего изобретения является обеспечение фармацевтически приемлемой соли соединения в форме свободного основания и ее кристаллической формы с улучшенными растворимостью и биодоступностью.- 1 041089 ylamino)-4-methoxy-2-morpholinophenyl)acrylamide, in which various physicochemical parameters, such as solubility and hygroscopicity, are improved in order to increase the solubility and bioavailability of the compound in the form of a free base. This means that according to the results of the animal study of the compound in the form of a free base having low solubility, there is a problem that the level of absorption of the drug is low and the variation in the level of absorption among individuals. Accordingly, in order to achieve this objective, it is an object of the present invention to provide a pharmaceutically acceptable salt of the compound in free base form and a crystalline form thereof with improved solubility and bioavailability.

В то же время большинство пациентов, страдающих от опосредованных протеинкиназой расстройств, имеют сопутствующие заболевания желудочно-кишечного тракта, такие как рефлюксный эзофагит, диспепсия и гастрит. В таком случае для предотвращения стимуляции выработки желудочного сока в комбинации с лекарственным препаратом для лечения опосредованных протеинкиназой расстройств часто назначают лекарственный препарат, например, ингибитор протонного насоса, такой как эзомепразол, или антагонист Ш-рецептора, такой как циметидин.At the same time, most patients suffering from protein kinase-mediated disorders have gastrointestinal comorbidities such as reflux esophagitis, dyspepsia, and gastritis. In such a case, a drug such as a proton pump inhibitor such as esomeprazole or an III receptor antagonist such as cimetidine is often prescribed in combination with a drug to treat protein kinase mediated disorders to prevent stimulation of gastric acid production.

Однако в случае, когда лекарственный препарат для лечения опосредованных протеинкиназой расстройств вводят в комбинации с лекарственным препаратом для предотвращения стимуляции выработки желудочного сока, существует проблема, заключающаяся в том, что скорость абсорбции лекарственного препарата для лечения опосредованных протеинкиназой расстройств может меняться за счет взаимодействия между лекарственными препаратами.However, in the case where a drug for treating protein kinase-mediated disorders is administered in combination with a drug for preventing stimulation of gastric acid production, there is a problem that the rate of absorption of a drug for treating protein kinase-mediated disorders may be changed due to drug-drug interactions. .

В частности, когда лекарственный препарат для лечения опосредованных протеинкиназой расстройств вводят в комбинации с лекарственным препаратом для предотвращения стимуляции выработки желудочного сока, существует проблема, заключающаяся в том, что снижается концентрация в плазме лекарственного препарата для лечения опосредованных протеинкиназой расстройств так, что его концентрация в плазме оказывается ниже эффективного терапевтического диапазона.In particular, when a drug for treating protein kinase-mediated disorders is administered in combination with a drug for preventing stimulation of gastric acid production, there is a problem that the plasma concentration of the drug for treating protein kinase-mediated disorders is reduced so that its plasma concentration falls below the effective therapeutic range.

Соответственно, другой целью настоящего изобретения является обеспечение фармацевтически приемлемой соли соединения в форме свободного основания и ее кристаллической формы, которые отличаются превосходной биодоступностью, даже при совместном введении с лекарственным препаратом, который в большинстве случаев вводят в комбинации с лекарственным препаратом для лечения опосредованных протеинкиназой расстройств, и которое предотвращает стимуляцию выработки желудочного сока (например, ингибитором протонного насоса или антагонистом H2-рецептора).Accordingly, another object of the present invention is to provide a pharmaceutically acceptable salt of the compound in free base form and a crystalline form thereof, which are excellent in bioavailability, even when co-administered with a drug, which in most cases is administered in combination with a drug for the treatment of protein kinase-mediated disorders, and which prevents stimulation of gastric acid production (eg by a proton pump inhibitor or an H2 receptor antagonist).

В результате достижения вышеуказанной цели возможно уменьшить воздействие пищи или антацида, принимаемых пациентом, на абсорбцию лекарственного препарата, что в ином случае может представлять проблему в клинической практике.As a result of achieving the above goal, it is possible to reduce the effect of the food or antacid taken by the patient on the absorption of the drug, which may otherwise be a problem in clinical practice.

Решение задачиThe solution of the problem

В соответствии с одним аспектом настоящего изобретения предложена мезилатная соль N-(5-(4-(4((диметиламино)метил)-3-фенил-1H-пиразол-1-ил)пиримидин-2-иламино)-4-метокси-2-морфолинофенил)акриламида, представленная нижеприведенной формулой 1In accordance with one aspect of the present invention, N-(5-(4-(4((dimethylamino)methyl)-3-phenyl-1H-pyrazol-1-yl)pyrimidin-2-ylamino)-4-methoxy- 2-morpholinophenyl)acrylamide represented by the following formula 1

Формула 1Formula 1

Кроме того, в соответствии с другим аспектом настоящего изобретения предложен способ получения мезилатной соли, представленной нижеприведенной формулой 1, который включает (1) смешивание соединения, представленного нижеприведенной формулой 2, и одного органического растворителя или смешанного растворителя с последующим добавлением метансульфоновой кислоты с получением смеси мезилатной соли, представленной формулой 1; и (2) добавление в смесь органического растворителя для кристаллизации мезилатной соли, представленной формулой 1In addition, according to another aspect of the present invention, there is provided a method for producing a mesylate salt represented by the following formula 1, which comprises (1) mixing a compound represented by the following formula 2 and one organic solvent or a mixed solvent, followed by adding methanesulfonic acid to obtain a mixture of mesylate salt represented by formula 1; and (2) adding to the organic solvent mixture to crystallize the mesylate salt represented by formula 1

- 2 041089- 2 041089

В соответствии с другим аспектом настоящего изобретения предложена фармацевтическая композиция для лечения опосредованного протеинкиназой расстройства, которая содержит мезилатную соль и фармацевтически приемлемую добавку.According to another aspect of the present invention, there is provided a pharmaceutical composition for the treatment of a protein kinase mediated disorder, which comprises a mesylate salt and a pharmaceutically acceptable additive.

Кроме того, в соответствии с другим аспектом настоящего изобретения предложена фармацевтическая композиция для ингибирования активности рецептора эпидермального фактора роста (EGFR), имеющего одну или более мутаций по сравнению с EGFR дикого типа, которая содержит мезилатную соль и фармацевтически приемлемую добавку.In addition, according to another aspect of the present invention, there is provided a pharmaceutical composition for inhibiting the activity of an epidermal growth factor receptor (EGFR) having one or more mutations compared to wild-type EGFR, which contains a mesylate salt and a pharmaceutically acceptable additive.

Преимущества изобретенияBenefits of the Invention

Соединение мезилатной соли и ее кристаллическая форма, предложенные в настоящем изобретении, имеют преимущества, заключающиеся в том, что они отличаются превосходными стабильностью, растворимостью и биодоступностью по сравнению с другими фармацевтически приемлемыми солями, имеют высокую степень чистоты и обеспечивают превосходную биодоступность, как упомянуто выше, при введении не только в монотерапии, но и в комбинации с антацидом. Кроме того, преимущество способа получения, предложенного в настоящем изобретении, заключается в том, что можно получать соединение мезилатной соли, имеющее вышеуказанные преимущества, в большом масштабе.The mesylate salt compound and its crystalline form of the present invention have the advantages that they are excellent in stability, solubility and bioavailability compared to other pharmaceutically acceptable salts, have a high degree of purity, and provide excellent bioavailability, as mentioned above, when administered not only in monotherapy, but also in combination with an antacid. Further, an advantage of the production method of the present invention is that a mesylate salt compound having the above advantages can be produced on a large scale.

Краткое описание графических материаловBrief description of graphic materials

На фиг. 1 представлен график по результатам порошковой рентгеновской дифракции (ПРД) соединения, полученного в примере 1 настоящего изобретения, на фиг. 2 - график по результатам дифференциальной сканирующей калориметрии (ДСК) соединения, полученного в примере 1 настоящего изобретения, на фиг. 3 - график, демонстрирующий результаты исследований растворимости для соединения, полученного в сравнительном примере 1 (слева), и результаты для соединения, полученного в примере 1 (справа) (FaSSGF: искусственный желудочный сок, FaSSIF: искусственный кишечный сок), на фиг. 4 - снимок, демонстрирующий результаты исследований стабильности, проводимых в стрессовых условиях, для соединения, полученного в примере 1 (исходный: в начале, 2 недели: через 2 недели, 4 недели: через 4 недели), на фиг. 5 - снимок, демонстрирующий результаты исследований стабильности, проводимых в стрессовых условиях, для соединения, полученного в сравнительном примере 2 (исходный: в начале, 2 недели: через 2 недели, 4 недели: через 4 недели), на фиг. 6 - снимок, демонстрирующий результаты исследований стабильности, проводимых в стрессовых условиях, для соединения, полученного в сравнительном примере 3 (исходный: в начале, 2 недели: через 2 недели, 4 недели: через 4 недели), на фиг. 7 - снимок, демонстрирующий результаты исследований стабильности, проводимых в стрессовых условиях, для соединения, полученного в сравнительном примере 4 (исходная: в начале, 2 недели: через 2 недели, 4 недели: через 4 недели), на фиг. 8 - снимок, демонстрирующий результаты исследований стабильности, проводимых в ускоренных условиях, для соединения, полученного в примере 1 (исходный: в начале, 1 месяц: через 1 месяц; 3 месяца: через 3 месяца; 6 месяцев: через 6 месяцев), на фиг. 9 - снимок, демонстрирующий результаты исследований стабильности, проводимых в ускоренных условиях, для соединения, полученного в сравнительном примере 2 (исходный: в начале, 1 месяц: через 1 месяц; 3 месяца: через 3 месяца; 6 месяцев: через 6 месяцев), на фиг. 10 - снимок, демонстрирующий результаты исследований стабильности, проводимых в ускоренных условиях, для соединения, полученного в сравнительном примере 3 (исходный: в начале, 1In FIG. 1 is a graph of X-ray powder diffraction (XRD) results of the compound obtained in Example 1 of the present invention, FIG. 2 is a graph of the results of differential scanning calorimetry (DSC) of the compound obtained in Example 1 of the present invention, FIG. 3 is a graph showing the results of solubility studies for the compound prepared in Comparative Example 1 (left) and the results for the compound prepared in Example 1 (right) (FaSSGF: artificial gastric juice, FaSSIF: artificial intestinal juice), FIG. 4 is a snapshot showing the results of stability studies under stress conditions for the compound prepared in Example 1 (baseline: at the beginning, 2 weeks: after 2 weeks, 4 weeks: after 4 weeks), FIG. 5 is a snapshot showing the results of stability studies under stress conditions for the compound obtained in Comparative Example 2 (baseline: at the beginning, 2 weeks: after 2 weeks, 4 weeks: after 4 weeks), FIG. 6 is a snapshot showing the results of stability studies under stress conditions for the compound obtained in Comparative Example 3 (baseline: at the beginning, 2 weeks: after 2 weeks, 4 weeks: after 4 weeks), FIG. 7 is a snapshot showing the results of stability studies under stress conditions for the compound obtained in Comparative Example 4 (baseline: at the beginning, 2 weeks: after 2 weeks, 4 weeks: after 4 weeks), FIG. 8 is a snapshot showing the results of stability studies carried out under accelerated conditions for the compound obtained in example 1 (initial: at the beginning, 1 month: after 1 month; 3 months: after 3 months; 6 months: after 6 months), on fig. 9 is a snapshot showing the results of stability studies carried out under accelerated conditions for the compound obtained in Comparative Example 2 (initial: at the beginning, 1 month: after 1 month; 3 months: after 3 months; 6 months: after 6 months), in fig. 10 is a snapshot showing the results of stability studies conducted under accelerated conditions for the compound obtained in Comparative Example 3 (original: at the beginning, 1

- 3 041089 месяц: через 1 месяц; 3 месяца: через 3 месяца; 6 месяцев: через 6 месяцев), на фиг. 11 - снимок, демонстрирующий результаты исследований стабильности, проводимых в ускоренных условиях, для соединения, полученного в сравнительном примере 4 (исходный: в начале, 1 месяц: через 1 месяц; 3 месяца: через 3 месяца; 6 месяцев: через 6 месяцев), на фиг. 12 - график, демонстрирующий результаты фармакокинетических сравнительных исследований, проводимых на здоровых крысах в тестовом примере 4, на фиг. 13 - график, демонстрирующий результаты фармакокинетических сравнительных исследований, проводимых на крысах, которым вводили эзомепразол в тестовом примере 4, на фиг. 14 - график, демонстрирующий результаты фармакокинетических сравнительных исследований, проводимых на собаках породы бигль в тестовом примере 5.- 3 041089 month: after 1 month; 3 months: after 3 months; 6 months: after 6 months), in Fig. 11 is a snapshot showing the results of stability studies carried out under accelerated conditions for the compound obtained in Comparative Example 4 (initial: at the beginning, 1 month: after 1 month; 3 months: after 3 months; 6 months: after 6 months), in fig. 12 is a graph showing the results of pharmacokinetic comparative studies conducted on healthy rats in Test Example 4, FIG. 13 is a graph showing the results of pharmacokinetic comparative studies conducted on rats administered with esomeprazole in Test Example 4, FIG. 14 is a graph showing the results of pharmacokinetic comparative studies conducted on beagle dogs in Test Example 5.

Наилучший вариант осуществления данного изобретенияBest Mode for Carrying out the Invention

Описание терминов.Description of terms.

Если не указано или не определено иное, все технические и научные термины, употребляемые в данном документе, имеют общепринятое значение, понятное любому специалисту в области техники, к которой относится данное изобретение.Unless otherwise indicated or defined, all technical and scientific terms used in this document have the common meaning understood by any person skilled in the art to which this invention pertains.

Если не указано иное, все проценты, доли и соотношения являются массовыми.Unless otherwise indicated, all percentages, parts and ratios are by weight.

В данном описании, если указано, что часть содержит элемент, следует понимать, что эта часть может также содержать и другие элементы, а не исключать другие элементы, если специально не указано иное.In this description, if it is indicated that a part contains an element, it should be understood that this part may also contain other elements, and not exclude other elements, unless specifically indicated otherwise.

Все числа, выражающие количества в связи с компонентами, свойствами, такими как молекулярная масса, условия реакции и т.п., употребляемые в данном документе, следует понимать как модифицируемые во всех случаях термином около.All numbers expressing amounts in connection with components, properties such as molecular weight, reaction conditions, and the like used herein are to be understood as being modified in all instances by the term about.

Далее настоящее изобретение будет описано подробно.Hereinafter, the present invention will be described in detail.

Настоящее изобретение относится к мезилатной соли N-(5-(4-(4-((диметиламино)метил)-3-фенил1H-пиразол-1-ил)пиримидин-2-иламино)-4-метокси-2-морфолинофенил)акриламида, представленной нижеприведенной формулой 1.The present invention relates to N-(5-(4-(4-((dimethylamino)methyl)-3-phenyl1H-pyrazol-1-yl)pyrimidin-2-ylamino)-4-methoxy-2-morpholinophenyl)acrylamide mesylate salt represented by formula 1 below.

Формула 1Formula 1

Авторы настоящего изобретения впервые синтезировали мезилатную соль соединения N-(5 -(4-(4((диметиламино)метил)-3-фенил-1H-пиразол-1-ил)пиримидин-2-иламино)-4-метокси-2-морфолинофенил)акриламида, которая отличается превосходными растворимостью и биодоступностью по сравнению с соединением N-(5-(4-(4-((диметиламино)метил)-3-фенил-1H-пирαзол-1-ил)пиримидин-2-иламино)-4метокси-2-морфолинофенил)акриламида в форме свободного основания, которая отличается превосходными стабильностью, растворимостью и биодоступностью по сравнению с другими фармацевтически приемлемыми солями этого соединения и которая имеет высокую степень чистоты, тем самым полностью осуществив настоящее изобретение.The present inventors synthesized for the first time the mesylate salt of the compound N-(5-(4-(4((dimethylamino)methyl)-3-phenyl-1H-pyrazol-1-yl)pyrimidin-2-ylamino)-4-methoxy-2- morpholinophenyl)acrylamide, which has superior solubility and bioavailability compared to the compound N-(5-(4-(4-((dimethylamino)methyl)-3-phenyl-1H-pyrazol-1-yl)pyrimidin-2-ylamino) -4-methoxy-2-morpholinophenyl)acrylamide in free base form, which is excellent in stability, solubility and bioavailability compared to other pharmaceutically acceptable salts of this compound, and which has a high degree of purity, thereby fully realizing the present invention.

В целом, на гидрохлоридные соли приходится наибольшая доля солей коммерчески доступных соединений, одобренных FDA. Далее большие доли приходятся на сульфаты, бромиды, хлориты, тартраты, фосфаты, цитраты и малаты в указанном порядке. На мезилатные соли приходится всего около 2%. Это означает, что мезилатная соль конкретного соединения в целом не является обычно выбираемой солью. Но авторы настоящего изобретения в ходе повторных исследований обнаружили, что мезилатная соль N(5-(4-(4-((диметиламино)метил)-3-фенил-1H-пиразол-1-ил)пиримидин-2-иламино)-4-метокси-2-морфолинофенил)акриламида отличается превосходными стабильностью, растворимостью и биодиступностью по сравнению с другими фармацевтически приемлемыми солями и имеет высокую степень чистоты. Кроме того, авторы настоящего изобретения провели множество исследований для ее получения в больших масштабах. В результате авторы настоящего изобретения полностью осуществили настоящее изобретение.In general, hydrochloride salts account for the largest proportion of salts of commercially available compounds approved by the FDA. Further large proportions are sulfates, bromides, chlorites, tartrates, phosphates, citrates and malates in that order. Mesylate salts account for only about 2%. This means that the mesylate salt of a particular compound is generally not the salt of choice. But the authors of the present invention in the course of repeated studies found that the mesylate salt of N(5-(4-(4-((dimethylamino)methyl)-3-phenyl-1H-pyrazol-1-yl)pyrimidin-2-ylamino)-4 -methoxy-2-morpholinophenyl)acrylamide is excellent in stability, solubility and bioavailability compared to other pharmaceutically acceptable salts and has a high degree of purity. In addition, the authors of the present invention conducted many studies to obtain it on a large scale. As a result, the inventors of the present invention have fully realized the present invention.

В одном аспекте настоящего изобретения мезилатная соль, представленная вышеприведенной формулой 1, отличается тем, что она находится в кристаллической форме, а кристаллическая форма входит в объем настоящего изобретения. Кристаллические формы фармацевтического соединения могут иметь важное значение при разработке подходящих лекарственных форм. Определенные кристаллические формы можно улучшать в отношении растворимости, стабильности и биодоступности, и они могут иметь высокую степень чистоты по сравнению с другими кристаллическими формами. Таким образом, их можно выбирать как хорошие кандидатные лекарственные препараты. Преимущество определенных кристаллических форм заключается в том, что они имеют улучшенную термодинамическую стабиль- 4 041089 ность.In one aspect of the present invention, the mesylate salt represented by the above formula 1 is characterized in that it is in crystalline form, and the crystalline form is within the scope of the present invention. Crystalline forms of a pharmaceutical compound can be important in the development of suitable dosage forms. Certain crystalline forms can be improved in terms of solubility, stability and bioavailability, and they can be of high purity compared to other crystalline forms. Thus, they can be selected as good drug candidates. The advantage of certain crystalline forms is that they have improved thermodynamic stability.

В одном аспекте настоящего изобретения кристаллическая форма мезилатной соли, представленной вышеприведенной формулой 1, может представлять собой кристаллическую форму (I). Предпочтительно, чтобы дифракционные пики на графике ПРД соответствовали углам 2Θ 5,614±0,2, 12,394±0,2, 14,086±0,2, 17,143±0,2, 18,020±0,2, 19,104±0,2, 21,585±0,2, 22,131±0,2 и 22,487±0,2°; и более предпочтительно, чтобы дифракционные пики на графике ПРД соответствовали углам 2θ 5,614, 12,394, 14,086, 17,143, 18,020, 19,104, 21,585, 22,131 и 22,487°. Но настоящее изобретение не ограничено этим.In one aspect of the present invention, the crystalline form of the mesylate salt represented by Formula 1 above may be crystalline form (I). It is preferable that the diffraction peaks on the PRD plot correspond to the angles 2Θ 5.614±0.2, 12.394±0.2, 14.086±0.2, 17.143±0.2, 18.020±0.2, 19.104±0.2, 21.585±0 .2, 22.131±0.2 and 22.487±0.2°; and more preferably, the diffraction peaks in the XRD plot correspond to 2θ angles of 5.614, 12.394, 14.086, 17.143, 18.020, 19.104, 21.585, 22.131, and 22.487°. But the present invention is not limited to this.

В другом аспекте настоящего изобретения кристаллическая форма (I) мезилатной соли, представленной вышеприведенной формулой 1, может иметь пиковое значение эндотермического перехода при 210-230°C, предпочтительно 217±2°C, на графике ДСК (дифференциальной сканирующей калориметрии); и предпочтительно, чтобы начало приходилось на 214±2°C. Но настоящее изобретение не ограничено этим.In another aspect of the present invention, the crystalline form (I) of the mesylate salt represented by the above formula 1 may have a peak endothermic value at 210-230°C, preferably 217±2°C, on a DSC (differential scanning calorimetry) graph; and preferably the onset is at 214±2°C. But the present invention is not limited to this.

Кроме того, настоящее изобретение относится к способу получения мезилатной соли, представленной нижеприведенной формулой 1, который включает:In addition, the present invention relates to a method for producing a mesylate salt represented by the following formula 1, which includes:

(1) смешивание соединения, представленного нижеприведенной формулой 2, и одного органического растворителя или смешанного растворителя с последующим добавлением метансульфоновой кислоты с получением смеси мезилатной соли, представленной формулой 1; и (2) добавление в смесь органического растворителя для кристаллизации мезилатной соли, представленной формулой 1(1) mixing the compound represented by the following formula 2 and one organic solvent or mixed solvent, followed by adding methanesulfonic acid to obtain a mixture of mesylate salt represented by formula 1; and (2) adding to the organic solvent mixture to crystallize the mesylate salt represented by formula 1

HN NHN N

Кристаллическую форму (I) мезилатной соли представленной вышеприведенной формулой 1, можно получать с помощью этого способа получения. Но настоящее изобретение не ограничено этим.The crystalline form (I) of the mesylate salt represented by the above formula 1 can be obtained using this production method. But the present invention is not limited to this.

В одном аспекте настоящего изобретения единственный органический растворитель на этапе (1) не имеет конкретных ограничений при условии, что он подходит для настоящего изобретения. И он предпочтительно выбран из группы, состоящей из ацетона, метилэтилкетона и этилацетата. При применении этого единственного органического растворителя преимуществом является то, что кристаллическую форму (I) мезилатной соли, представленной вышеприведенной формулой 1, можно получать стабильным образом.In one aspect of the present invention, the single organic solvent in step (1) is not particularly limited as long as it is suitable for the present invention. And it is preferably selected from the group consisting of acetone, methyl ethyl ketone and ethyl acetate. By using this single organic solvent, it is advantageous that the crystalline form (I) of the mesylate salt represented by the above formula 1 can be obtained in a stable manner.

В другом аспекте настоящего изобретения смешанный растворитель на этапе (1) может представлять собой смешанный растворитель из воды и по меньшей мере одного подходящего органического растворителя. В частности, он предпочтительно представляет собой смешанный растворитель из воды и по меньшей мере одного органического растворителя, выбранного из ацетона и метилэтилкетона. Но настоящее изобретение не ограничено этим. При применении этого растворителя преимуществом является то, что кристаллическую форму (I) мезилатной соли, представленной вышеприведенной формулой 1, можно получать стабильным образом.In another aspect of the present invention, the mixed solvent in step (1) may be a mixed solvent of water and at least one suitable organic solvent. In particular, it is preferably a mixed solvent of water and at least one organic solvent selected from acetone and methyl ethyl ketone. But the present invention is not limited to this. By using this solvent, it is advantageous that the crystalline form (I) of the mesylate salt represented by the above formula 1 can be obtained in a stable manner.

В другом аспекте настоящего изобретения соотношение воды и органического растворителя в смеси может составлять от 1:1 до 1:10, в частности от 1:4 до 1:6 по объему. Но настоящее изобретение не ограничено этим.In another aspect of the present invention, the ratio of water and organic solvent in the mixture may be from 1:1 to 1:10, in particular from 1:4 to 1:6 by volume. But the present invention is not limited to this.

В одном аспекте настоящего изобретения этап (1) можно проводить при температуре от 20 до 70°C, предпочтительно при температуре от 45 до 60°C. В пределах вышеприведенного температурного диапазона преимуществом является улучшение качества кристаллической формы (I) мезилатной соли, представленной вышеприведенной формулой 1.In one aspect of the present invention, step (1) can be carried out at a temperature of from 20 to 70°C, preferably at a temperature of from 45 to 60°C. Within the above temperature range, it is advantageous to improve the quality of the crystalline form (I) of the mesylate salt represented by the above formula 1.

При этом этап (2) представляет собой этап кристаллизации мезилатной соли, представленной формулой 1, путем добавления в смесь органического растворителя. В частности, на этапе (2) мезилатнуюWherein, step (2) is a step of crystallizing the mesylate salt represented by formula 1 by adding an organic solvent to the mixture. In particular, in step (2) the mesylate

- 5 041089 соль, представленную формулой 1, можно кристаллизовать путем добавления органического растворителя к смеси, перемешивания полученной в результате смеси, охлаждения и фильтрования смеси и сушки полученного в результате твердого вещества.The salt represented by formula 1 can be crystallized by adding an organic solvent to the mixture, stirring the resulting mixture, cooling and filtering the mixture, and drying the resulting solid.

В одном аспекте настоящего изобретения органический растворитель, применяемый на этапе (2), может быть таким же, как и единственный органический растворитель, применяемый на этапе (1), и отличаться от него. В частности, органический растворитель, применяемый на этапе (2), может представлять собой по меньшей мере один растворитель, выбранный из группы, состоящей из ацетона, метилэтилкетона и этилацетата. Но настоящее изобретение не ограничено этим.In one aspect of the present invention, the organic solvent used in step (2) may be the same as and different from the single organic solvent used in step (1). In particular, the organic solvent used in step (2) may be at least one solvent selected from the group consisting of acetone, methyl ethyl ketone and ethyl acetate. But the present invention is not limited to this.

Кроме того, на этапе (2) органический растворитель можно добавлять в объеме в диапазоне от 3 до 20 мл на 1 г соединения, представленного формулой 2. В частности, на этапе (2) органический растворитель можно добавлять в объеме в диапазоне от 5 до 20 мл, конкретнее в объеме в диапазоне от 5 до 10 мл на 1 г соединения, представленного формулой 2. Но настоящее изобретение не ограничено этим. Когда органический растворитель добавляют в указанном объеме, преимуществом является возможность минимизации снижения выхода кристаллической формы (I) мезилатной соли, представленной вышеприведенной формулой 1.In addition, in step (2), the organic solvent can be added in a volume in the range of 3 to 20 ml per 1 g of the compound represented by formula 2. In particular, in step (2), the organic solvent can be added in a volume in the range of 5 to 20 ml, more specifically in a volume in the range of 5 to 10 ml per 1 g of the compound represented by formula 2. But the present invention is not limited to this. When the organic solvent is added in the indicated volume, it is advantageous to be able to minimize the decrease in the yield of the crystalline form (I) of the mesylate salt represented by the above formula 1.

В другом аспекте настоящего изобретения смесь можно охлаждать до температуры от 0 до 30°C, предпочтительно до температуры от 0 до 10°C, на этапе (2). Если смесь охлаждают до вышеприведенного температурного диапазона, преимуществом является возможность минимизации снижения выхода кристаллической формы (I) мезилатной соли, представленной вышеприведенной формулой 1.In another aspect of the present invention, the mixture can be cooled to a temperature of 0 to 30°C, preferably to a temperature of 0 to 10°C, in step (2). If the mixture is cooled to the above temperature range, it is advantageous to be able to minimize the decrease in the yield of the crystalline form (I) of the mesylate salt represented by the above formula 1.

В другом аспекте настоящего изобретения остаточную смесь можно сушить при температуре от 30 до 70°C после охлаждения на этапе (2). Если остаточную смесь сушат в вышеприведенном температурном диапазоне, преимуществом является возможность эффективного удаления остатка растворителя.In another aspect of the present invention, the residual mixture can be dried at a temperature of from 30 to 70°C after cooling in step (2). If the residual mixture is dried in the above temperature range, it is advantageous to be able to efficiently remove the remaining solvent.

Дополнительно в настоящем изобретении предложена фармацевтическая композиция для лечения опосредованного протеинкиназой расстройства, которая содержит мезилатную соль, представленную вышеприведенной формулой 1, и фармацевтически приемлемую добавку.Additionally, the present invention provides a pharmaceutical composition for treating a protein kinase mediated disorder, which comprises a mesylate salt represented by Formula 1 above and a pharmaceutically acceptable additive.

Кроме того, в настоящем изобретении предложена фармацевтическая композиция для ингибирования рецептора эпидермального фактора роста (EGFR), имеющего одну или более мутаций по сравнению с EGFR дикого типа, которая содержит мезилатную соль, представленную вышеприведенной формулой 1, и фармацевтически приемлемую добавку.In addition, the present invention provides a pharmaceutical composition for inhibiting epidermal growth factor receptor (EGFR) having one or more mutations compared to wild-type EGFR, which contains a mesylate salt represented by the above formula 1 and a pharmaceutically acceptable additive.

В одном аспекте изобретения мутация может представлять собой Del E746-A750, L858R или Т790М и может представлять собой двойные мутации, выбранные из Del E746-A750/T790M или L858R/T790M.In one aspect of the invention, the mutation may be Del E746-A750, L858R, or T790M, and may be double mutations selected from Del E746-A750/T790M or L858R/T790M.

В одном аспекте настоящего изобретения фармацевтическую композицию можно применять для предотвращения или лечения отторжения аллотрансплантата, реакции трансплантат против хозяина, диабетической ретинопатии, хориоидальной неоваскуляризации вследствие возрастной макулярной дегенерации, псориаза, артрита, остеоартрита, ревматоидного артрита, образования синовиольного паннуса при артрите, рассеянного склероза, миастении гравис, сахарного диабета, диабетического сосудистого нарушения, ретинопатии недоношенных, младенческой гемангиомы, немелкоклеточного рака легкого, рака мочевого пузыря, рака головы и шеи, рака предстательной железы, рака молочной железы, рака яичника, рака желудка, рака поджелудочной железы, фиброза, атеросклероза, рестеноза, аутоиммунного расстройства, аллергии, респираторного расстройства, астмы, отторжения трансплантата, воспаления, тромбоза, пролиферации сосудов сетчатки, воспалительного заболевания кишечника, болезни Крона, язвенного колита, поражения костей, отторжения пересаженной ткани или трансплантата костного мозга, волчанки, хронического панкреатита, кахексии, септического шока, фибропролиферативного или дифференцирующего кожного заболевания или расстройства, расстройства центральной нервной системы, нейродегенеративного расстройства, болезни Альцгеймера, болезни Паркинсона, расстройства или состояния, связанного с повреждением нервов после травмы головного или спинного мозга или дегенерацией экзонов, острого или хронического рака, заболевания глаз, вирусной инфекции, сердечной недостаточности, легочной недостаточности или почечной недостаточности и бронхита. Предпочтительно фармацевтическую композицию можно применять для предотвращения или лечения острого или хронического рака, более предпочтительно рака легкого, наиболее предпочтительно немелкоклеточного рака легкого или немелкоклеточного рака легкого с метастазами в головной мозг, но применения не ограничиваются этим.In one aspect of the present invention, the pharmaceutical composition can be used to prevent or treat allograft rejection, graft versus host disease, diabetic retinopathy, choroidal neovascularization due to age-related macular degeneration, psoriasis, arthritis, osteoarthritis, rheumatoid arthritis, synovial pannus formation in arthritis, multiple sclerosis, myasthenia gravis gravis, diabetes mellitus, diabetic vascular disorder, retinopathy of prematurity, infantile hemangioma, non-small cell lung cancer, bladder cancer, head and neck cancer, prostate cancer, breast cancer, ovarian cancer, gastric cancer, pancreatic cancer, fibrosis, atherosclerosis, restenosis, autoimmune disorder, allergy, respiratory disorder, asthma, transplant rejection, inflammation, thrombosis, retinal vascular proliferation, inflammatory bowel disease, Crohn's disease, ulcerative colitis, bone disease, rejection graft or bone marrow transplant, lupus, chronic pancreatitis, cachexia, septic shock, fibroproliferative or differentiating skin disease or disorder, central nervous system disorder, neurodegenerative disorder, Alzheimer's disease, Parkinson's disease, disorder or condition associated with nerve damage after trauma brain or spinal cord or exon degeneration, acute or chronic cancer, eye disease, viral infection, heart failure, lung or kidney failure, and bronchitis. Preferably, the pharmaceutical composition can be used to prevent or treat acute or chronic cancer, more preferably lung cancer, most preferably non-small cell lung cancer or non-small cell lung cancer with brain metastases, but uses are not limited thereto.

В одном аспекте изобретения фармацевтическая композиция может ингибировать рецептор эпидермального фактора роста (EGFR), имеющий по меньшей мере одну мутацию по сравнению с EGFR дикого типа, и, таким образом, ее можно применять для предотвращения или лечения заболевания.In one aspect of the invention, the pharmaceutical composition can inhibit an epidermal growth factor receptor (EGFR) having at least one mutation compared to wild-type EGFR and thus can be used to prevent or treat a disease.

Соединение по настоящему изобретению можно вводить отдельно или как часть фармацевтической композиции в терапевтически эффективном количестве, а фармацевтическая композиция облегчает введение соединения в организм. Кроме того, соединение и композицию можно вводить отдельно или в комбинации с одним или более дополнительными терапевтическими агентами. Существуют различные способы введения соединения и композиции, которые включают внутривенное введение, ингаляцию, пероральное введение, ректальное введение, парентеральное введение, интравитреальное введение, подкожное введение, внутримышечное введение, интраназальное введение, трансдермальное введение, ме- 6 041089 стное введение, глазное введение, буккальное введение, трахеальное введение, бронхиальное введение, подъязычное введение или введение в зрительный нерв, но не ограничиваются этим. Соединение, предложенное в данном документе, вводят в виде общеизвестной фармацевтической формы выпуска, например таблетки, капсулы или эликсира для перорального введения, суппозитория для ректального введения, стерильного раствора или суспензии для парентерального или внутримышечного введения, лосьона, геля, мази или крема для местного применения и т.д.The compound of the present invention may be administered alone or as part of a pharmaceutical composition in a therapeutically effective amount, and the pharmaceutical composition facilitates administration of the compound to the body. Additionally, the compound and composition may be administered alone or in combination with one or more additional therapeutic agents. There are various routes of administration of the compound and composition, which include intravenous administration, inhalation, oral administration, rectal administration, parenteral administration, intravitreal administration, subcutaneous administration, intramuscular administration, intranasal administration, transdermal administration, topical administration, ophthalmic administration, buccal administration. administration, tracheal administration, bronchial administration, sublingual administration, or optic nerve administration, but are not limited to these. The compound provided herein is administered in a conventional pharmaceutical form, such as an oral tablet, capsule or elixir, a rectal suppository, a parenteral or intramuscular sterile solution or suspension, a topical lotion, gel, ointment or cream. etc.

Предпочтительная дозировка мезилатной соли, представленной формулой (1), содержащейся в фармацевтической композиции по настоящему изобретению, варьируется в зависимости от состояния и массы пациента, степени заболевания, типа лекарственного препарата, пути и продолжительности введения, но специалист в данной области техники может надлежащим образом выбрать дозировку. В общем случае предпочтительная дозировка мезилатной соли, представленной формулой (I), может находиться в диапазоне от около 10 до около 1000 мг/сутки.The preferred dosage of the mesylate salt represented by formula (1) contained in the pharmaceutical composition of the present invention varies depending on the condition and weight of the patient, the degree of disease, the type of drug, the route and duration of administration, but a person skilled in the art can appropriately select dosage. In general, the preferred dosage of the mesylate salt represented by formula (I) may be in the range of about 10 to about 1000 mg/day.

В качестве фармацевтически приемлемой добавки для применения в фармацевтической композиции по настоящему изобретению можно использовать по меньшей мере один обычно применяемый разбавитель или наполнитель, такой как смачивающий агент, разрыхлитель, смазывающее вещество, связующее вещество, поверхностно-активное вещество и т.п.As a pharmaceutically acceptable additive for use in the pharmaceutical composition of the present invention, at least one commonly used diluent or excipient such as a wetting agent, disintegrant, lubricant, binder, surfactant, and the like can be used.

Фармацевтически приемлемая добавка может включать коллидон, шеллак, аравийскую камедь, тальк, оксид титана, сахар (например, сахарный тростник), желатин, воду, полисахарид, такой как лактоза или глюкоза, парафин (например, нефтяную фракцию), растительное масло (например, арахисовое масло или кунжутное масло) и фармацевтически приемлемый органический растворитель, такой как спирт (например, этанол или глицерин), натуральный минеральный порошок (например, каолин, глину, тальк и мел), синтетический минеральный порошок (например, высокодисперсную кремниевую кислоту и силикат), эмульсификатор (например, лигнин, сульфитный щелок, метилцеллюлозу, крахмал и поливинилпирролидон), стеарат магния, стеариновую кислоту, лаурилсульфат натрия и т.п., но не ограничивается этим.A pharmaceutically acceptable additive may include collidone, shellac, gum arabic, talc, titanium oxide, sugar (e.g. sugar cane), gelatin, water, a polysaccharide such as lactose or glucose, paraffin (e.g., petroleum fraction), vegetable oil (e.g., peanut oil or sesame oil) and a pharmaceutically acceptable organic solvent such as alcohol (such as ethanol or glycerin), natural mineral powder (such as kaolin, clay, talc, and chalk), synthetic mineral powder (such as highly dispersed silicic acid and silicate) , emulsifier (for example, lignin, sulfite liquor, methylcellulose, starch and polyvinylpyrrolidone), magnesium stearate, stearic acid, sodium lauryl sulfate, and the like, but not limited to this.

В настоящем изобретении предложено применение мезилатной соли, представленной вышеприведенной формулой 1, для производства лекарственного препарата для лечения опосредованного протеинкиназой расстройства.The present invention provides the use of the mesylate salt represented by the above formula 1 for the manufacture of a medicament for the treatment of a protein kinase-mediated disorder.

Кроме того, в настоящем изобретении предложено применение мезилатной соли, представленной вышеприведенной формулой 1, для производства лекарственного средства для ингибирования активности рецептора эпидермального фактора роста (EGFR), имеющего по меньшей мере одну мутацию по сравнению с EGFR дикого типа.In addition, the present invention provides the use of the mesylate salt represented by the above formula 1 for the manufacture of a medicament for inhibiting the activity of an epidermal growth factor receptor (EGFR) having at least one mutation compared to wild-type EGFR.

Дополнительно в настоящем изобретении предложен способ лечения опосредованного протеинкиназой расстройства, который включает этап введения субъекту мезилатной соли, представленной вышеприведенной формулой 1.Additionally, the present invention provides a method for treating a protein kinase mediated disorder which comprises the step of administering to the subject a mesylate salt represented by Formula 1 above.

Также в настоящем изобретении предложен способ ингибирования рецептора эпидермального фактора роста (EGFR), имеющего одну мутацию по сравнению с EGFR дикого типа, который включает этап введения субъекту мезилатной соли, представленной вышеприведенной формулой 1.Also provided in the present invention is a method for inhibiting an epidermal growth factor receptor (EGFR) having a single mutation compared to wild-type EGFR, which comprises the step of administering to a subject a mesylate salt represented by the above formula 1.

Техническое осуществление изобретенияTechnical implementation of the invention

Ниже в данном документе представлены предпочтительные примеры настоящего изобретения для облегчения понимания настоящего изобретения. Однако эти примеры всего лишь иллюстрируют настоящее изобретение, и для специалиста в данной области техники очевидно, что в рамках объема настоящего изобретения и его технической идеи можно вносить различные изменения и модификации, и что такие вариации и модификации входят в объем прилагаемой формулы изобретения.Below in this document are the preferred examples of the present invention to facilitate understanding of the present invention. However, these examples are merely illustrative of the present invention, and it will be apparent to those skilled in the art that various changes and modifications may be made within the scope of the present invention and the technical idea thereof, and that such variations and modifications are within the scope of the appended claims.

Пример 1. Получение мезилатной соли N-(5-(4-(4-((диметиламино)метил)-3-фенил-1H-пиразол-1ил)пиримидин-2-иламино)-4-метокси-2-морфолинофенил)акриламида.Example 1 Preparation of N-(5-(4-(4-((dimethylamino)methyl)-3-phenyl-1H-pyrazol-1yl)pyrimidin-2-ylamino)-4-methoxy-2-morpholinophenyl)acrylamide mesylate salt .

Реактор наполняли N-(5-(4-(4-((диметиламино)метил)-3-фенил-1H-пиразол-1-ил)пиримидин-2иламино)-4-метокси-2-морфолинофенил)акриламидом (1100,0 г, 1983,2 ммоль), полученным способом, описанным в WO 2016060443, ацетоном (4,4 л) и очищенной водой (1,1 л), которые перемешивали при нагревании от 45 до 55°C. Метансульфоновую кислоту (186,8 г, 1943,6 ммоль) разводили в очищенной воде (0,55 л), которую по каплям добавляли к ней, поддерживая температуру 45°C или выше. Затем смесь перемешивали в течение 30 мин или более для получения смеси мезилатной соли N-(5-(4-(4((диметиламино)метил)-3-фенил-1H-пиразол-1-ил)пиримидин-2-иламино)-4-метокси-2-морфолинофенил)акриламида.The reactor was filled with N-(5-(4-(4-((dimethylamino)methyl)-3-phenyl-1H-pyrazol-1-yl)pyrimidin-2ylamino)-4-methoxy-2-morpholinophenyl)acrylamide (1100.0 g, 1983.2 mmol), obtained by the method described in WO 2016060443, with acetone (4.4 l) and purified water (1.1 l), which were stirred while heating from 45 to 55°C. Methanesulfonic acid (186.8 g, 1943.6 mmol) was diluted in purified water (0.55 L) which was added dropwise thereto while maintaining the temperature at 45° C. or higher. The mixture was then stirred for 30 minutes or more to obtain a mixture of N-(5-(4-(4((dimethylamino)methyl)-3-phenyl-1H-pyrazol-1-yl)pyrimidin-2-ylamino)- mesylate salt mixture. 4-methoxy-2-morpholinophenyl)acrylamide.

Затем для кристаллизации мезилатной соли в смеси по каплям добавляли ацетон (8,8 л) при 4050°C, перемешивали в течение 30 мин или более, охлаждали до 0-5°C и перемешивали в течение 3 ч или более. По каплям добавляли ацетон (8,8 л), поддерживая температуру от 40 до 50°C, и перемешивали смесь в течение 30 мин или более, охлаждали до 0-5°C и перемешивали в течение 3 ч или более. Реакционную смесь фильтровали при пониженном давлении, а влажный осадок затем промывали ацетоном (5,5 л). Полученное таким образом твердое вещество сушили в вакууме при 55°C с получением 1095,8 г указанного в заголовке соединения (выход: 84,9%).Then, to crystallize the mesylate salt in the mixture, acetone (8.8 L) was added dropwise at 4050°C, stirred for 30 minutes or more, cooled to 0-5°C, and stirred for 3 hours or more. Acetone (8.8 L) was added dropwise while maintaining the temperature at 40 to 50°C, and the mixture was stirred for 30 minutes or more, cooled to 0-5°C and stirred for 3 hours or more. The reaction mixture was filtered under reduced pressure and the wet cake was then washed with acetone (5.5 L). The solid thus obtained was dried under vacuum at 55° C. to obtain 1095.8 g of the title compound (yield: 84.9%).

Результаты измерений 1Н ЯМР для указанного в заголовке соединения (400 МГц, ДМСО-d₆) пред- 7 041089 ставлены ниже.1H NMR measurements for the title compound (400 MHz, DMSO-d ₆ ) are shown below.

¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆) δ 9,79 (с, 1H), 9,35 (с, 1H), 9,21 (с, 1H), 8,78 (с, 1H), 8,59 (д, 1H), 8,33 (с, 1H), 7,77 (д, 2H), 7,55 (м, 3H), 7,34 (д, 1H), 6,94 (с, 1H), 6,71-6,76 (кв, 1H), 6,28-6,31 (д, 1H), 5,81-5,83 (д, 1H), 4,48 (д, 2H), 3,90 (с, 3H), 3,81-3,83 (т, 4H), 2,86-2,88 (т, 4H), 2,66 (с, 6H), 2,35 (с, 3H). ¹ H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆ ) δ 9.79 (s, 1H), 9.35 (s, 1H), 9.21 (s, 1H), 8.78 (s, 1H), 8 .59 (d, 1H), 8.33 (s, 1H), 7.77 (d, 2H), 7.55 (m, 3H), 7.34 (d, 1H), 6.94 (s, 1H), 6.71-6.76(q, 1H), 6.28-6.31(d, 1H), 5.81-5.83(d, 1H), 4.48(d, 2H) , 3.90 (s, 3H), 3.81-3.83 (t, 4H), 2.86-2.88 (t, 4H), 2.66 (s, 6H), 2.35 (s , 3H).

Проводили измерения для указанного в заголовке соединения методом дифференциальной сканирующей калориметрии (ДСК). В результате график ДСК имел пик эндотермического перехода при температуре около 217°C. Измерения методом ДСК проводили, используя прибор Mettler Toledo DSC 1 Star (пробоотборник: герметичная алюминиевая кювета в условиях 99% азота и повышение температуры от 3θ до 300°C со скоростью 10°С/мин).Measurements were made for the title compound by differential scanning calorimetry (DSC). As a result, the DSC plot had an endothermic transition peak at about 217°C. DSC measurements were performed using a Mettler Toledo DSC 1 Star instrument (sampler: sealed aluminum cuvette under 99% nitrogen and temperature rise from 3θ to 300°C at a rate of 10°C/min).

Проводили измерения для указанного в заголовке соединения методом ПРД, которые выявили, что дифракционные пики на графике ПРД находились при углах 2θ 5,614, 12,394, 14,086, 17,143, 18,020, 19,104, 21,585, 22,131 и 22,487° (см. фиг. 1). Спектр ПРД для соединения был получен с помощью Bruker D8 advance (источник рентгеновского излучения: CuKa, рабочее напряжение лампы: 40 кВ/ток лампы: 40 мА, щель расходимости: 0,3 и щель рассеяния: 0,3).XRD measurements were made for the title compound, which revealed that the diffraction peaks on the XRD plot were at 2θ angles of 5.614, 12.394, 14.086, 17.143, 18.020, 19.104, 21.585, 22.131, and 22.487° (see Fig. 1). The XRD spectrum for the junction was acquired with a Bruker D8 advance (X-ray source: CuKa, lamp operating voltage: 40 kV/lamp current: 40 mA, divergence gap: 0.3 and scattering gap: 0.3).

Сравнительный пример 1. Получение N-(5-(4-(4-((диметиламино)метил)-3-фенил-1H-пиразол-1ил)пиримидин-2-иламино)-4-метокси-2-морфолинофенил)акриламида в форме свободного основания.Comparative Example 1 Preparation of N-(5-(4-(4-((dimethylamino)methyl)-3-phenyl-1H-pyrazol-1yl)pyrimidin-2-ylamino)-4-methoxy-2-morpholinophenyl)acrylamide in free base form.

N-(5-(4-(4-((диметиламино)метил)-3-фенил-1H-пиразол-1-ил)пиримидин-2-иламино)-4-метокси-2морфолинофенил)акриламид в форме свободного основания получали способом, описанным в WO 2016060443.N-(5-(4-(4-((dimethylamino)methyl)-3-phenyl-1H-pyrazol-1-yl)pyrimidin-2-ylamino)-4-methoxy-2morpholinophenyl)acrylamide in free base form was prepared by the method described in WO 2016060443.

Сравнительный пример 2. Получение гидрохлоридной соли К-(5-(4-(4-((диметиламино)метил)-3фенил-1H-пиразол-1-ил)пиримидин-2-иламино)-4-метокси-2-морфолинофенил)акриламида.Comparative Example 2 Preparation of K-(5-(4-(4-((dimethylamino)methyl)-3phenyl-1H-pyrazol-1-yl)pyrimidin-2-ylamino)-4-methoxy-2-morpholinophenyl) hydrochloride salt acrylamide.

Реактор наполняли N-(5-(4-(4-((диметиламино)метил)-3-фенил-1H-пиразол-1-ил)пиримидин-2иламино)-4-метокси-2-морфолинофенил)акриламидом (50,00 г, 90,1 ммоль), полученным способом, описанным в WO 2016060443, ацетоном (450 мл) и очищенной водой (50 мл), которые охлаждали до 0-5°C. Хлористоводородную кислоту (9,39 г, 90,1 ммоль) разводили в ацетоне (50 мл), который по каплям добавляли к ней, поддерживая при 0-5°C. Затем смесь доводили до 20-25°C и перемешивали в течение 2 ч или более. Реакционную смесь фильтровали при пониженном давлении, а полученное таким образом твердое вещество сушили в вакууме с получением 49,91 г указанного в заголовке соединения (выход: 93,7%).The reactor was filled with N-(5-(4-(4-((dimethylamino)methyl)-3-phenyl-1H-pyrazol-1-yl)pyrimidin-2ylamino)-4-methoxy-2-morpholinophenyl)acrylamide (50.00 g, 90.1 mmol), obtained by the method described in WO 2016060443, with acetone (450 ml) and purified water (50 ml), which were cooled to 0-5°C. Hydrochloric acid (9.39 g, 90.1 mmol) was diluted in acetone (50 ml) which was added dropwise thereto while maintaining at 0-5°C. The mixture was then brought to 20-25° C. and stirred for 2 hours or more. The reaction mixture was filtered under reduced pressure, and the solid thus obtained was dried under vacuum to obtain 49.91 g of the title compound (yield: 93.7%).

Измерения для указанного в заголовке соединения проводили в тех же условиях, что и в примере 1. Результаты измерений 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆) представлены ниже.Measurements for the title compound were carried out under the same conditions as in Example 1. 1H NMR measurements (400 MHz, DMSO-d ₆ ) are shown below.

¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6) δ 10,82 (с, 1H), 9,36 (с, 1H), 9,26 (с, 1H), 8,69 (с, 1H), 8,57 (д, 1H), 8,39 (с, 1H), 7,77 (д, 2H), 7,49-7,57 (м, 3H), 7,33 (д, 1H), 6,94 (с, 1H), 6,69-6,76 (кв, 1H), 6,28 (д, 1H), 5,78 (д, 1H), 4,42 (д, 2H), 3,89 (с, 3H), 3,81 (с, 4H), 2,88 (с, 4H), 2,58 (д, 6Н). ¹ H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.82 (s, 1H), 9.36 (s, 1H), 9.26 (s, 1H), 8.69 (s, 1H), 8, 57 (d, 1H), 8.39 (s, 1H), 7.77 (d, 2H), 7.49-7.57 (m, 3H), 7.33 (d, 1H), 6.94 (s, 1H), 6.69-6.76 (q, 1H), 6.28 (d, 1H), 5.78 (d, 1H), 4.42 (d, 2H), 3.89 ( s, 3H), 3.81 (s, 4H), 2.88 (s, 4H), 2.58 (d, 6H).

Сравнительный пример 3. Получение цитратной соли К-(5-(4-(4-((диметиламино)метил)-3-фенил1H-пиразол-1-ил)пиримидин-2-иламино)-4-метокси-2-морфолинофенил)акриламида.Comparative Example 3 Preparation of K-(5-(4-(4-((dimethylamino)methyl)-3-phenyl1H-pyrazol-1-yl)pyrimidin-2-ylamino)-4-methoxy-2-morpholinophenyl) citrate salt acrylamide.

Реактор наполняли N-(5-(4-(4-((диметиламино)метил)-3-фенил-1H-пиразол-1-ил)пиримидин-2иламино)-4-метокси-2-морфолинофенил)акриламидом (15,00 г, 27,0 ммоль), полученным способом, описанным в WO 2016060443, и этилацетатом (600 мл), которые перемешивали с обратным холодильником для растворения реакционной смеси. Лимонную кислоту (5,68 г, 29,6 ммоль) разводили в ацетоне (25 мл), который по каплям добавляли к ней, поддерживая при 50-70°C. Затем реакционную смесь охлаждали до 20-30°C и перемешивали в течение 2 ч или более. Реакционную смесь фильтровали при пониженном давлении, а влажный осадок затем промывали этилацетатом (300 л). Полученное таким образом твердое вещество сушили в вакууме с получением 20,15 г К-(5-(4-(4-((диметиламино)метил)-3-фенил1H-пиразол-1-ил)пиримидин-2-иламино)-4-метокси-2-морфолинофенил)акриламид 2-гидроксипропан1,2,3-трикарбоновой соли в виде неочищенного соединения (выход: 99,8%).The reactor was filled with N-(5-(4-(4-((dimethylamino)methyl)-3-phenyl-1H-pyrazol-1-yl)pyrimidin-2ylamino)-4-methoxy-2-morpholinophenyl)acrylamide (15.00 g, 27.0 mmol), obtained by the method described in WO 2016060443, and ethyl acetate (600 ml), which were stirred under reflux to dissolve the reaction mixture. Citric acid (5.68 g, 29.6 mmol) was diluted in acetone (25 ml) which was added dropwise thereto while maintaining at 50-70°C. Then the reaction mixture was cooled to 20-30°C and stirred for 2 hours or more. The reaction mixture was filtered under reduced pressure and the wet cake was then washed with ethyl acetate (300 L). The solid thus obtained was dried in vacuo to give 20.15 g of K-(5-(4-(4-((dimethylamino)methyl)-3-phenyl1H-pyrazol-1-yl)pyrimidin-2-ylamino)-4 -methoxy-2-morpholinophenyl)acrylamide of 2-hydroxypropane 1,2,3-tricarboxylic salt as crude compound (yield: 99.8%).

Реактор наполняли N-(5-(4-(4-((диметиламино)метил)-3-фенил-1H-пиразол-1-ил)пиримидин-2иламино)-4-метокси-2-морфолинофенил)акриламид 2-гидроксипропан-1,2,3-трикарбоновой солью (18,70 г) и очищенной водой (187 мл), которые перемешивали при 20-30°C в течение 2 ч или более. Реакционную смесь фильтровали при пониженном давлении, а полученное таким образом твердое вещество сушили в вакууме с получением 15,67 г указанного в заголовке соединения (выход: 83,8%).The reactor was filled with N-(5-(4-(4-((dimethylamino)methyl)-3-phenyl-1H-pyrazol-1-yl)pyrimidin-2ylamino)-4-methoxy-2-morpholinophenyl)acrylamide 2-hydroxypropan- 1,2,3-tricarboxylic salt (18.70 g) and purified water (187 ml), which were stirred at 20-30° C. for 2 hours or more. The reaction mixture was filtered under reduced pressure, and the solid thus obtained was dried under vacuum to obtain 15.67 g of the title compound (yield: 83.8%).

¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆) δ 9,22 (с, 1H), 9,17 (с, 1H), 8,97 (с, 1H), 8,54 (д, 1H), 8,24 (с, 1H), 7,93 (д, 2H), 7,43-7,53 (м, 3H), 7,33 (д, 1H), 6,95 (с, 1H), 6,71-6,78 (кв, 1H), 6,36 (д, 1H), 5,82 (д, 1H), 3,90 (с, 3H), 3,82 (с, 6H), 2,86 (с, 4H), 2,50-2,71 (д, 4H), 2,37 (с, 6Н). ¹ H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆ ) δ 9.22 (s, 1H), 9.17 (s, 1H), 8.97 (s, 1H), 8.54 (d, 1H), 8 .24 (s, 1H), 7.93 (d, 2H), 7.43-7.53 (m, 3H), 7.33 (d, 1H), 6.95 (s, 1H), 6, 71-6.78(q, 1H), 6.36(d, 1H), 5.82(d, 1H), 3.90(s, 3H), 3.82(s, 6H), 2.86 (s, 4H), 2.50-2.71 (d, 4H), 2.37 (s, 6H).

Сравнительный пример 4. Получение эзилатной соли К-(5-(4-(4-((диметиламино)метил)-3-фенил1H-пиразол-1-ил)пиримидин-2-иламино)-4-метокси-2-морфолинофенил)акриламида.Comparative Example 4 Preparation of K-(5-(4-(4-((dimethylamino)methyl)-3-phenyl1H-pyrazol-1-yl)pyrimidin-2-ylamino)-4-methoxy-2-morpholinophenyl) esylate salt acrylamide.

Реактор наполняли N-(5-(4-(4-((диметиламино)метил)-3-фенил-1H-пиразол-1-ил)пиримидин-2иламино)-4-метокси-2-морфолинофенил)акриламидом (15,00 г, 27,0 ммоль), полученным способом, описанным в WO 2016060443, и тетрагидрофураном (300 мл), которые перемешивали. ЭтансульфоновуюThe reactor was filled with N-(5-(4-(4-((dimethylamino)methyl)-3-phenyl-1H-pyrazol-1-yl)pyrimidin-2ylamino)-4-methoxy-2-morpholinophenyl)acrylamide (15.00 g, 27.0 mmol), obtained by the method described in WO 2016060443, and tetrahydrofuran (300 ml), which were stirred. ethanesulfonic

- 8 041089 кислоту (2,98 г, 27,1 ммоль) разводили в тетрагидрофуране (45 мл), который по каплям добавляли к ней, поддерживая при 20-25°C. Затем реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 11 ч или более. Реакционную смесь фильтровали при пониженном давлении, а полученный таким образом твердый остаток сушили в вакууме с получением 16,20 г эзилатной соли N-(5-(4-(4((диметиламино)метил)-3-фенил-Ш-пиразол-1-ил)пиримидин-2-иламино)-4-метокси-2-морфолинофенил)акриламида (выход: 90,1%) в виде указанного в заголовке соединения.- 8 041089 acid (2.98 g, 27.1 mmol) was diluted in tetrahydrofuran (45 ml) which was added dropwise thereto while maintaining at 20-25°C. The reaction mixture was then stirred at room temperature for 11 hours or more. The reaction mixture was filtered under reduced pressure, and the solid residue thus obtained was dried in vacuo to give 16.20 g of N-(5-(4-(4((dimethylamino)methyl)-3-phenyl-III-pyrazole-1) esylate salt -yl)pyrimidin-2-ylamino)-4-methoxy-2-morpholinophenyl)acrylamide (yield: 90.1%) as the title compound.

Измерения для указанного в заголовке соединения N-(5-(4-(4-((диметиламино)метил)-3-фенил-1Hпиразол-1-ил)пиримидин-2-иламино)-4-метокси-2-морфолинофенил)акриламида эзилата проводили в тех же условиях, что и в примере 1. Результаты измерений 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆) представлены ниже.Measurements for the title compound N-(5-(4-(4-((dimethylamino)methyl)-3-phenyl-1Hpyrazol-1-yl)pyrimidin-2-ylamino)-4-methoxy-2-morpholinophenyl)acrylamide esylate was carried out under the same conditions as in example 1. The results of measurements 1H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆ ) are presented below.

1Н ЯМ Р (400 МГц, ДМСО-d6) δ 9,69 (с, 1H), 9,34 (с, 1H), 9,22 (с, 1H), 8,75 (с, 1H), 8,58 (д, 1H), 8,36 (с, 1H), 7,77 (д, 2H), 7,52-7,58 (кв, 3H), 7,33 (д, 1H), 6,94 (с, 1H), 6,69-6,76 (кв, 1H), 6,26 (д, 1H), 5,80 (д, 1H), 4,46 (с, 2H), 3,89 (с, 3H), 3,82 (с, 4H), 2,87 (с, 4H), 2,65 (с, 6H), 2,34-2,39 (кв, 2H), 1,03-1,06 (т, 3H).1H NM R (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.69 (s, 1H), 9.34 (s, 1H), 9.22 (s, 1H), 8.75 (s, 1H), 8, 58 (d, 1H), 8.36 (s, 1H), 7.77 (d, 2H), 7.52-7.58 (q, 3H), 7.33 (d, 1H), 6.94 (s, 1H), 6.69-6.76 (q, 1H), 6.26 (d, 1H), 5.80 (d, 1H), 4.46 (s, 2H), 3.89 ( s, 3H), 3.82 (s, 4H), 2.87 (s, 4H), 2.65 (s, 6H), 2.34-2.39 (q, 2H), 1.03-1 .06 (t, 3H).

Тестовый пример 1. Исследование растворимости.Test case 1. Solubility study.

Соединения, полученные в примере 1 и сравнительном примере 1, исследовали в отношении растворимости в зависимости от рН и сравнивали значения растворимости в искусственном желудочном соке, искусственном кишечном соке, воде и этаноле.The compounds obtained in Example 1 and Comparative Example 1 were examined for solubility as a function of pH, and the solubility values in artificial gastric juice, artificial intestinal juice, water and ethanol were compared.

120 мг соединения (что соответствует 100 мг в виде соединения формулы 2), полученного в примере 1, добавляли в 5 мл буферного раствора, имеющего каждое из значений рН, описанных в табл. 1 ниже, искусственный желудочный сок, искусственный кишечный сок, воду или этанол, которые перемешивали на водяной бане при 37°C в условиях 50 об/мин в течение 12 ч. Кроме того, 100 мг соединения, полученного в сравнительном примере 1, исследовали в тех же условиях, что описаны выше. После перемешивания измеряли концентрацию растворенного соединения, представленного формулой 2, и проводили относительное сравнение значений растворимости соединений, полученных в примере 1 и сравнительном примере 1. Результаты представлены на фиг. 3 и в табл. 1 ниже.120 mg of the compound (corresponding to 100 mg as a compound of formula 2) obtained in example 1 was added to 5 ml of a buffer solution having each of the pH values described in table. 1 below, artificial gastric juice, artificial intestinal juice, water or ethanol, which were stirred in a water bath at 37°C under 50 rpm for 12 hours. the same conditions as described above. After stirring, the concentration of the dissolved compound represented by formula 2 was measured, and the solubility values of the compounds obtained in Example 1 and Comparative Example 1 were compared relative to each other. The results are shown in FIG. 3 and in table. 1 below.

Таблица 1Table 1

Растворимость (мг/мл) Solubility (mg/ml) pH 1,2 pH 1.2 pH 2,0 pH 2.0 pH 3,0 pH 3.0 pH 4,0 pH 4.0 pH 5,0 pH 5.0 pH 6,0 pH 6.0 pH 7,0 pH 7.0 Искусственный желудочный сок (FaSSGF) Artificial gastric juice (FaSSGF) Искусственный кишечный сок (FaSSIF) Artificial intestinal juice (FaSSIF) Вода Water Этанол ethanol С. Пр. 1 S. Pr. 1 4,4 4.4 3,7 3.7 1,9 1.9 1,0 1.0 0,01 0.01 0,003 0.003 0,001 0.001 1,5 1.5 0,027 0.027 0,001 0.001 0,599 0.599 Пр. 1 Etc. 1 14,9 14.9 14,1 14.1 17,9 17.9 20,9 20.9 18,4 18.4 1,2 1.2 0,018 0.018 10,1 10.1 0,68 0.68 21,6 21.6 17,3 17.3

Как показано на фиг. 3 и в табл. 1 выше, соединение в форме мезилатной соли, полученное в примере 1, имело растворимость, по меньшей мере в 20000 раз большую в воде, растворимость, в около 10 раз большую в искусственном желудочном соке (FaSSGF), и растворимость, в около 25 раз большую в искусственном кишечном соке (FaSSIF), чем соединение в форме свободного основания, полученное в сравнительном примере 1.As shown in FIG. 3 and in table. 1 above, the mesylate salt form compound obtained in Example 1 had a solubility of at least 20,000 times greater in water, a solubility of about 10 times greater in artificial gastric juice (FaSSGF), and a solubility of about 25 times greater in artificial intestinal juice (FaSSIF) than the free base compound prepared in Comparative Example 1.

Тестовые примеры 2 и 3. Исследование стабильности.Test cases 2 and 3. Stability study.

Каждое из соединений, полученных в примере 1 и сравнительных примерах 2-4, исследовали в отношении стабильности. Пять соединений исследовали в отношении стабильности в стрессовых условиях и в ускоренных условиях. Два варианта условий специально приведены в табл. 2 ниже.Each of the compounds obtained in Example 1 and Comparative Examples 2-4 was examined for stability. Five compounds were tested for stability under stress conditions and under accelerated conditions. Two variants of the conditions are specifically given in Table. 2 below.

Таблица 2table 2

Стрессовые условия stressful conditions Ускоренные условия Accelerated Conditions Температура Temperature 60 ± 2°С 60 ± 2°C 40 ± 2°С 40 ± 2°С Влажность Humidity 75 ± 5% (относительная влажность) 75±5% (relative humidity) 75 ± 5% (относительная влажность) 75 ± 5% (relative humidity) Контейнер Container Стеклянный флакон объемом 10 мл с резиновой крышкой 10 ml glass bottle with rubber cap Двойной полиэтиленовый пакет и бутылка из полиэтилена высокой плотности (ПЭВП); Double polybag and high density polyethylene (HDPE) bottle; Время отбора образцов Sampling time В начале и через две и четыре недели At the beginning and after two and four weeks В начале и через 1, Зи 6 месяцев At the beginning and after 1, Zee 6 months

- 9 041089- 9 041089

Тестовый пример 2. Исследование стабильности соединений, полученных в примере 1 и сравнительных примерах 2-4 в стрессовых условиях.Test Example 2 Stability study of the compounds obtained in Example 1 and Comparative Examples 2-4 under stress conditions.

Каждое из соединений, полученных в примере 1 и сравнительных примерах 2-4, исследовали в отношении стабильности в стрессовых условиях, приведенных в табл. 2 выше. Результаты представлены на фиг. 4-7 и в табл. 3 и 4 ниже. Условия для измерений ПРД и ДСК являются такими же, как описаны вEach of the compounds obtained in example 1 and comparative examples 2-4, investigated in relation to the stability under stress conditions shown in table. 2 above. The results are shown in FIG. 4-7 and in table. 3 and 4 below. Conditions for XRD and DSC measurements are the same as described in

примере 1. example 1. Таблица 3 Table 3

Профиль ПРД Profile DRP Начало ДСК (°C) Start DSC (°C) Внешний вид (цвет) Appearance (color) Начало Start 2 недели 2 weeks 4 недели 4 weeks Начало Start 2 недели 2 weeks 4 недели 4 weeks Начало Start 2 недели 2 weeks 4 недели 4 weeks Пр. 1 Etc. 1 — — Такой же профиль same profile Такой же профиль same profile 214 214 214 214 214 214 Белый White Белый White Белый White С. Пр. 2 S. Pr. 2 Измененны й профиль Changed Profile Измененн ый профиль Changed profile 267 267 269 269 269 269 Желтый Yellow Светло- коричнев ый Light brown От светлосерого до фиолетовог о From light gray to purple С. Пр. 3 S. Pr. 3 Измененны й профиль Changed Profile Измененн ый профиль Changed profile 182 182 182 182 181 181 Светложелтый Light yellow Светложелтый Light yellow Светложелтый Light yellow С. Пр. 4 S. Pr. 4 Такой же профиль same profile Измененн ый профиль Changed profile 223 223 222, 227 222, 227 172, 193, 219 172, 193, 219 Желтый Yellow Светложелтый Light yellow Фиолетовы й Violet

Кроме того, результаты измерения методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) приведены в табл. 4 ниже, а условия измерения были следующими: буфер подвижной фазы: 250 мм ацетата аммония в воде (подвижная фаза А: буфер/вода/ацетонитрил, подвижная фаза В: ацетонит-In addition, the measurement results by high performance liquid chromatography (HPLC) are shown in table. 4 below, and the measurement conditions were as follows: mobile phase buffer: 250 mM ammonium acetate in water (mobile phase A: buffer/water/acetonitrile, mobile phase B: acetonitrile-

рил, колонка: Xbridge ВЕН С18 ХР). reel, column: Xbridge VEN C18 XP). Таблица 4 Table 4

Чистота (%) Purity (%) Содержание (%) Content (%) Содержание воды (%) Water content (%) Начал о Start 2 недели 2 weeks 4 недел и 4 weeks and Изме нени е Change Начало Start 2 недел и 2 weeks and 4 недели 4 weeks Изме нени е Change Начал о Start 2 недел и 2 weeks and 4 недел и 4 weeks and Изме нение Change Пр. 1 Etc. 1 99,2 99.2 99,3 99.3 99,3 99.3 +0,1 +0.1 98,8 98.8 97,7 97.7 98,9 98.9 +0,1 +0.1 2,48 2.48 2,71 2.71 2,70 2.70 +0,22 +0.22 С. Пр. 2 WITH. Etc. 2 99,0 99.0 99,1 99.1 99,1 99.1 +0,1 +0.1 97,4 97.4 96,2 96.2 95,2 95.2 -2,2 -2.2 0,86 0.86 1,23 1.23 1,44 1.44 +0,58 +0.58 С. Пр. 3 WITH. Etc. 3 99,2 99.2 98,8 98.8 98,7 98.7 -0,5 -0.5 100,0 100.0 98,9 98.9 98,6 98.6 -1,4 -1.4 0,65 0.65 0,62 0.62 1,47 1.47 +0,82 +0.82 С. Пр. 4 WITH. Etc. 4 99,5 99.5 99,0 99.0 98,9 98.9 -0,6 -0.6 96,5 96.5 94,7 94.7 89,5 89.5 -7 -7 1,15 1.15 1,37 1.37 3,81 3.81 +2,03 +2.03

Тестовый пример 3. Исследование стабильности соединений, полученных в примере 1 и сравнительных примерах 2-4 в ускоренных условиях.Test Example 3 Stability study of the compounds obtained in Example 1 and Comparative Examples 2-4 under accelerated conditions.

Каждое из соединений, полученных в примере 1 и сравнительных примерах 2-4, исследовали в отношении стабильности в ускоренных условиях, приведенных в табл. 2 выше. Результаты представлены на фиг. 8-11 и в табл. 5 и 6 ниже. Условия для измерений ПРД и ДСК являются такими же, как описаны в примере 1.Each of the compounds obtained in Example 1 and Comparative Examples 2-4 was tested for stability under the accelerated conditions shown in Table 1. 2 above. The results are shown in FIG. 8-11 and in table. 5 and 6 below. Conditions for measurements of XRD and DSC are the same as described in example 1.

- 10 041089- 10 041089

Таблица 5Table 5

Профиль ПРД Profile DRP Начало ДСК (°C) Start DSC (°C) Внешний вид (цвет) Appearance (color) Начало Start 1 месяц 1 month 3 месяца 3 months 6 месяцев 6 months Начало Start 1 мес. 1 months 3 мес. 3 months 6 мес. 6 months Начало Start 1 мес. 1 months 3 мес. 3 months 6 мес. 6 months Пр. 1 Etc. 1 Такой же профиль same profile Такой же профиль same profile Такой же профиль same profile 214 214 214 214 214 214 214 214 Б B Б B Б B Б B С. Пр. 2 S. Pr. 2 Изменен ный профиль Changed Profile Изменен ный профиль Changed Profile Изменен ный профиль Changed Profile 267 267 272 272 271 271 271 271 Ж AND Ж AND Ж AND СЖ SJ С. Пр. 3 S. Pr. 3 Такой же профиль same profile Изменен ный профиль Changed Profile Изменен ный профиль Changed Profile 182 182 182 182 180 180 183 183 СЖ SJ СЖ SJ СЖ SJ СЖ SJ С. Пр. 4 S. Pr. 4 Такой же профиль same profile Такой же профиль same profile Такой же профиль same profile 223 223 222 222 219 219 218 218 Ж AND СЖ SJ СФ SF Ф F

Б: белый, Ж: желтый, СЖ: светло-желтый, Ф: фиолетовый, СФ: светло-фиолетовый.B: white, Y: yellow, SJ: light yellow, F: purple, SF: light purple.

Кроме того, результаты измерения методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) приведены в табл. 6 ниже, а условия измерения были такими же, как описаны в тестовом примере 2.In addition, the measurement results by high performance liquid chromatography (HPLC) are shown in table. 6 below, and the measurement conditions were the same as described in Test Case 2.

Чистота (%) Purity (%) Содеря Soderya Начал 0 Began 0 1 мес. 1 months 3 мес. 3 months 6 мес. 6 months Изме нение Change Начал 0 Began 0 1 мес 1 months Пр. 1 Etc. 1 99,2 99.2 99,3 99.3 99,3 99.3 99,3 99.3 +0,1 +0.1 98,8 98.8 98,9 98.9 С. Пр. 2 WITH. Etc. 2 99,0 99.0 99,0 99.0 98,9 98.9 98,8 98.8 -0,2 -0.2 97,4 97.4 97,0 97.0 С. Пр. 3 WITH. Etc. 3 99,2 99.2 98,9 98.9 98,9 98.9 97,7 97.7 -1,5 -1.5 100,0 100.0 100, 5 100.5 С. Пр. 4 WITH. Etc. 4 99,5 99.5 99,1 99.1 99,0 99.0 98,4 98.4 -1,1 -1.1 96,5 96.5 96,1 96.1

кание (%) caning (%) Содержание воды (%) Water content (%) 3 мес 3 months 6 мес 6 months Изме нение Change Начал 0 Started 0 1 мес 1 months 3 мес. 3 months 6 мес 6 months Измене ние Change 98, 9 98.9 99,1 99.1 +0,3 +0.3 2,48 2.48 2,7 3 2.7 3 3,19 3.19 3,01 3.01 +0,53 +0.53 98, 3 98.3 97,6 97.6 +0,2 +0.2 0,86 0.86 0,9 8 0.9 8 1,47 1.47 1,28 1.28 +0,42 +0.42 101 ,0 101 .0 98,7 98.7 -1,3 -1.3 0,65 0.65 0,8 3 0.8 3 3,05 3.05 3,50 3.50 +2,85 +2.85 95, 1 95, 1 91,4 91.4 -5,1 -5.1 1,15 1.15 2,4 8 2.4 8 2,98 2.98 3,17 3.17 +2,02 +2.02

Таблица 6Table 6

По результатам вышеописанного исследования стабильности соединение, полученное в примере 1, отличалось превосходной стабильностью, поскольку оно продемонстрировало небольшие изменения чистоты и содержания воды в начале и в конце исследования стабильности, отсутствие изменений в профиле ПРД и отсутствие изменений внешнего вида, определяемых по цвету. В противоположность этому, соединения сравнительных примеров 2-4 имели плохую стабильность, поскольку они демонстрировали большие изменения чистоты и содержания воды, чем соединение, полученное в примере 1, и также наблюдали некоторые изменения в профиле ПРД и внешнем виде.According to the results of the stability study described above, the compound obtained in Example 1 was excellent in stability as it showed little change in purity and water content at the beginning and end of the stability study, no change in the PDP profile, and no change in appearance as determined by color. In contrast, the compounds of Comparative Examples 2-4 had poor stability because they exhibited greater changes in purity and water content than the compound obtained in Example 1, and also observed some changes in VDP profile and appearance.

Тестовый пример 4. Фармакокинетическое сравнительное исследование для соединений, полученных в примере 1 и сравнительном примере 1, у здоровых крыс и крыс, которым вводили эзомепразол.Test Example 4 Comparative pharmacokinetic study for the compounds obtained in Example 1 and Comparative Example 1 in healthy rats and esomeprazole administered rats.

Каждое из соединений, полученных в примере 1 и сравнительном примере 1, исследовали в отношении фармакокинетики у здоровых крыс и крыс, которым вводили эзомепразол, который представляет собой ингибитор протонного насоса. В частности, сравнивали максимальную концентрацию в плазме (Смаке) ^и площадь под кривой концентрации в плазме (ППК_посл) у здоровых крыс и крыс, которым вводили эзомепразол, чтобы оценить абсорбцию лекарственных препаратов у реальных животных.Each of the compounds prepared in Example 1 and Comparative Example 1 was studied for pharmacokinetics in healthy rats and rats treated with esomeprazole, which is a proton pump inhibitor. In particular, peak plasma concentration (Cmax) ^and plasma area under the curve (AUC _auc ) were compared in healthy rats and esomeprazole-treated rats to evaluate drug absorption in real animals.

Для сравнения фармакокинетических параметров в качестве подопытных животных использовали 8-недельных самцов крыс (крыс SD) с массой тела около 250 г. Каждое из соединений, полученных в примере 1 и сравнительном примере 1, суспендировали в 0,5% метилцеллюлозе и перорально вводили здоровым крысам в дозе 30 мг/5 мл/кг.For comparison of pharmacokinetic parameters, 8-week-old male rats (SD rats) with a body weight of about 250 g were used as experimental animals. Each of the compounds obtained in Example 1 and Comparative Example 1 was suspended in 0.5% methylcellulose and orally administered to healthy rats. at a dose of 30 mg / 5 ml / kg.

При этом эзомепразол (эзомепразол магния дигидрат, Sigma Aldrich) вводили внутривенно 8недельным самцам крыс с массой тела около 250 г в дозе 5 мг/2 мл/кг в течение 3 суток, а каждое из соединений, полученных в примере 1 и сравнительном примере 1, перорально вводили крысам в той же дозе, что и здоровым крысам (т.е. 30 мг/5 мл/кг). Результаты сравнения фармакокинетических парамет- 11 041089 ров (т.е. максимальной концентрации в плазме и площади под кривой концентрации в плазме), рассчитанные по полученным данным, приведены в табл. 7 и на фиг. 12 и 13.Meanwhile, esomeprazole (esomeprazole magnesium dihydrate, Sigma Aldrich) was administered intravenously to 8 weeks old male rats weighing about 250 g at a dose of 5 mg/2 ml/kg for 3 days, and each of the compounds obtained in example 1 and comparative example 1, orally administered to rats at the same dose as healthy rats (ie 30 mg/5 ml/kg). The results of comparison of pharmacokinetic parameters (i.e., maximum plasma concentration and area under the plasma concentration curve), calculated from the data obtained, are given in Table. 7 and in FIG. 12 and 13.

_________________________________________________________________ Таблица 7_______________________________________________________________ Table 7

Фармакокинетический параметр Pharmacokinetic parameter Здоровые крысы healthy rats Крысы, которым вводили эзомепразол Rats injected with esomeprazole Пр. 1 Etc. 1 С. Пр. 1 S. Pr. 1 Пр. 1 Etc. 1 С. Пр. 1 S. Pr. 1 Максимальная концентрация в плазме (С_макс, нг/мл)Maximum plasma concentration ( _Cmax , ng/ml) 815, 6 815.6 725, 7 725.7 427,5 427.5 223, 0 223.0 Площадь под кривой концентрации в плазме (ППК_посл_, нг·ч/мл)Area under the plasma concentration curve (AUC _last _, ng h / ml) 8139,0 8139.0 7293,6 7293.6 5210,9 5210.9 2636,7 2636.7

Как показано в вышеприведенных результатах, максимальная концентрация в плазме и площадь под кривой концентрации в плазме соединения в форме свободного основания (сравнительный пример 1) у здоровых крыс были ниже, чем у соединения в форме мезилатной соли (пример 1) на 11,0 и 10,4% соответственно. Максимальная концентрация в плазме и площадь под кривой концентрации в плазме первого соединения у крыс, которым вводили эзомепразол, были ниже, чем у последнего соединения на 47,8 и 49,4% соответственно. Таким образом, было подтверждено, что соединение, полученное в сравнительном примере 1, имеет меньшее воздействие на крыс, чем соединение, полученное в примере 1.As shown in the above results, the maximum plasma concentration and plasma area under the concentration curve of the free base compound (Comparative Example 1) in healthy rats were lower than that of the mesylate salt compound (Example 1) by 11.0 and 10 .4% respectively. The maximum plasma concentration and the area under the plasma concentration curve of the first compound in esomeprazole-treated rats were lower than those of the last compound by 47.8% and 49.4%, respectively. Thus, it was confirmed that the compound obtained in Comparative Example 1 has less effect on rats than the compound obtained in Example 1.

Кроме того, максимальная концентрация в плазме и площадь под кривой концентрации в плазме соединения, полученного в примере 1, были снижены у крыс, которым вводили эзомепразол, на 47,6 и 36,0%, соответственно, по сравнению со здоровыми крысами. В противоположность этому, максимальная концентрация в плазме и площадь под кривой концентрации в плазме соединения, полученного в сравнительном примере 1, были снижены у крыс, которым вводили эзомепразол, на 69,3 и 63,8%, соответственно, по сравнению со здоровыми крысами. Эти результаты подтвердили, что соединение, полученное в примере 1, характеризуется меньшими изменениями фармакокинетики вследствие введения эзомепразола по сравнению с соединениями, полученными в сравнительном примере 1; следовательно, первое соединение сохраняет высокую концентрацию в плазме у крыс.In addition, the maximum plasma concentration and the area under the plasma concentration curve of the compound obtained in example 1 were reduced in esomeprazole-treated rats by 47.6% and 36.0%, respectively, compared with healthy rats. In contrast, the maximum plasma concentration and the area under the plasma concentration curve of the compound obtained in Comparative Example 1 were reduced in esomeprazole-treated rats by 69.3% and 63.8%, respectively, compared to healthy rats. These results confirmed that the compound obtained in Example 1 has less change in pharmacokinetics due to the administration of esomeprazole compared to the compounds obtained in Comparative Example 1; therefore, the first compound maintains a high plasma concentration in rats.

Тестовый пример 5. Фармакокинетическое сравнительное исследование для соединений, полученных в примере 1 и сравнительном примере 1, у собак породы бигль.Test Example 5 Comparative Pharmacokinetic Study for Compounds Prepared in Example 1 and Comparative Example 1 in Beagle Dogs.

Для сравнения фармакокинетических параметров в качестве подопытных животных использовали 15-17-месячных самцов собак породы бигль с массой тела около 10 кг, а каждое из соединений, полученных в примере 1 и сравнительном примере 1, суспендировали в 0,5% метилцеллюлозы и перорально вводили собакам породы бигль в дозе 5 мг/2 мл/кг. Сравнение фармакокинетических параметров (т.е. максимальной концентрации в плазме и площади под кривой концентрации в плазме), рассчитанных по полученным данным, приведены в табл. 8 и на фиг. 14.For comparison of pharmacokinetic parameters, 15-17-month-old male beagle dogs with a body weight of about 10 kg were used as experimental animals, and each of the compounds obtained in example 1 and comparative example 1 was suspended in 0.5% methylcellulose and orally administered to dogs beagle breeds at a dose of 5 mg/2 ml/kg. Comparison of pharmacokinetic parameters (i.e. maximum plasma concentration and area under the plasma concentration curve), calculated from the data obtained, are given in table. 8 and in FIG. 14.

Таблица 8Table 8

Пр. 1 Etc. 1 С. Пр. 1 WITH. Etc. 1 Максимальная концентрация в плазме (С_макс, нг/мл)Maximum plasma concentration ( _Cmax , ng/ml) 134,7 134.7 80,7 80.7 Площадь под кривой концентрации в плазме (ППК_посл_, нг-ч/мл)Area under the plasma concentration curve (AUC _seq _, ng-h / ml) 811,5 811.5 379, 1 379, 1

Как показано в вышеприведенных результатах, максимальная концентрация в плазме и площадь под кривой концентрации в плазме соединения в форме свободного основания (сравнительный пример 1) у собак породы бигль были ниже, чем у соединения в форме мезилатной соли (пример 1) на 40,1 и 50,4% соответственно. Эти результаты подтвердили, что соединение, полученное в примере 1, демонстрировало более высокий уровень воздействия, чем соединение, полученное в сравнительном примере 1, у собак породы бигль.As shown in the above results, the maximum plasma concentration and plasma area under the concentration curve of the free base compound (Comparative Example 1) in beagle dogs were lower than that of the mesylate salt compound (Example 1) by 40.1 and 50.4% respectively. These results confirmed that the compound prepared in Example 1 showed a higher level of effect than the compound prepared in Comparative Example 1 in beagle dogs.

Как описано выше, мезилатная соль соединения N-(5-(4-(4-((диметиламино)метил)-3-фенил-1Hпиразол-1-ил)пиримидин-2-иламино)-4-метокси-2-морфолинофенил)акриламида в соответствии с настоящим изобретением отличается превосходными характеристиками в том, что она имеет превосходные растворимость и биодоступность по сравнению с формой свободного основания соединения N-(5-(4-(4((диметиламино)метил)-3-фенuл-1H-пиразол-1-ил)пирuмидин-2-иламино)-4-метокси-2-морфолuнофенил)акриламида и отличается улучшенными стабильностью, растворимостью и биодоступностью поAs described above, the mesylate salt of N-(5-(4-(4-((dimethylamino)methyl)-3-phenyl-1Hpyrazol-1-yl)pyrimidin-2-ylamino)-4-methoxy-2-morpholinophenyl) acrylamide according to the present invention is excellent in that it has excellent solubility and bioavailability compared to the free base form of the compound N-(5-(4-(4((dimethylamino)methyl)-3-phenyl-1H-pyrazole -1-yl)pyrimidin-2-ylamino)-4-methoxy-2-morpholunophenyl)acrylamide and has improved stability, solubility and bioavailability according to

--

Claims

compared to other pharmaceutically acceptable salts of this compound and has a high degree of purity.

In this document, the present invention has been explained based on a preferred example. However, for a person skilled in the art it is obvious that various changes and modifications are possible without deviating from the technical idea of the present invention described in the claims, by adding, modifying and deleting constituent elements, and that such variations and modifications are included in the scope of the present invention.

CLAIM

1. N-(5-(4-(4-((dimethylamino)methyl)-3-phenyl-1H-n-nirazol-1-yl)pyrimidin-2ylamino)-4-methoxy-2-morpholinophenyl)acrylamide mesylate salt represented by formula 1 below which is in crystalline form (I) characterized by diffraction peaks on the PXR (powder X-ray diffraction) graph corresponding to 2Θ angles of 5.614±0.2, 12.394±0.2, 14.086±0.2, 17.143±0.2 , 18.020±0.2, 19.104±0.2, 21.585±0.2, 22.131±0.2 and 22.487±0.2°.

2. The mesylate salt according to claim 1, characterized in that the crystalline form has diffraction peaks on the XRD plot corresponding to 2Θ angles of 5.614, 12.394, 14.086, 17.143, 18.020, 19.104, 21.585, 22.131 and 22.487°.

3. Mesylate salt according to claim 1, characterized in that the crystalline form has a peak value of the endothermic transition at a temperature of from 210 to 230°C on a DSC (differential scanning calorimetry) graph.

4. Mesylate salt according to claim 1, characterized in that the crystalline form has a peak value of the endothermic transition at 217±2°C on the DSC graph.

5. A method for producing a mesylate salt according to any one of claims 1 to 4 represented by formula 1 below, which includes:

(1) mixing the compound represented by the following formula 2 and one organic solvent selected from the group consisting of acetone, methyl ethyl ketone and ethyl acetate, or a mixed solvent of water and at least one organic solvent selected from acetone and methyl ethyl ketone, followed by adding methanesulfonic acid to obtain a mixture of mesylate salt represented by formula 1; where stage (1) is carried out at a temperature of from 20 to 70°C; and (2) adding to the mixture an organic solvent, which is at least one solvent selected from the group consisting of acetone, methyl ethyl ketone and ethyl acetate, to crystallize the mesylate salt represented by formula 1

HN^N^N'4

6. The method according to claim 5, characterized in that the ratio of water and organic solvent in the mixture is from 1:1 to 1:10 by volume.

-