EA040317B1 - Кристаллические полиморфные формы свободного основания 2-гидрокси-6-((2-(1-изопропил-1н-пиразол-5-ил)пиридин-3-ил)метокси)бензальдегида - Google Patents

Кристаллические полиморфные формы свободного основания 2-гидрокси-6-((2-(1-изопропил-1н-пиразол-5-ил)пиридин-3-ил)метокси)бензальдегида Download PDF

Info

Publication number
EA040317B1
EA040317B1 EA201791587 EA040317B1 EA 040317 B1 EA040317 B1 EA 040317B1 EA 201791587 EA201791587 EA 201791587 EA 040317 B1 EA040317 B1 EA 040317B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
free base
compound
substance
crystalline
temperature
Prior art date
Application number
EA201791587
Other languages
English (en)
Inventor
Чжэ Ли
Стефан Д. Пэрент
Тревис Хьюстон
Original Assignee
Глобал Блад Терапьютикс, Инк.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Глобал Блад Терапьютикс, Инк. filed Critical Глобал Блад Терапьютикс, Инк.
Publication of EA040317B1 publication Critical patent/EA040317B1/ru

Links

Description

Уровень техники
2-Гидрокси-6-((2-( 1 -изопропил-1 Н-пиразол-5-ил)пиридин-3 -ил)метокси)бензальдегид представляет собой соединение, имеющее формулу
Серповидноклеточная анемия представляет собой нарушение строения эритроцитов, встречающееся, в частности, у представителей африканского и средиземноморского происхождения. В основе серповидноклеточной анемии лежит гемоглобин серповидных эритроцитов (HbS), который содержит точечную мутацию относительно преобладающей последовательности пептида гемоглобина (Hb).
Гемоглобин (Hb) переносит молекулы кислорода от легких к разным тканям и органам по всему организму. Гемоглобин связывает и высвобождает кислород посредством конформационных изменений. Гемоглобин серповидных эритроцитов (HbS) содержит точечную мутацию, где глутаминовая кислота заменяется валином, позволяя HbS стать восприимчивым к полимеризации, чтобы придать HbS содержащим эритроцитам их характерную форму серпа. Серповидные клетки также являются более ригидными, чем нормальные эритроциты, и их недостаточная пластичность может привести к закупорке кровеносных сосудов. Существует потребность в терапевтических средствах, таких как 2-гидрокси-6-((2-(1изопропил-1Н-пиразол-5-ил)пиридин-3-ил)метокси)бензальдегид, которые могут лечить нарушения, опосредованные Hb или аномальным Hb, таким так HbS.
При применении для лечения людей, важно, чтобы кристаллическая форма терапевтического средства, такая как 2-гидрокси-6-((2-(1-изопропил-1Н-пиразол-5-ил)пиридин-3-ил)метокси)бензальдегид, или его соль, сохраняла полиморфную и химическую стабильность, растворимость и другие физикохимические свойства в течение долгого времени и среди различных промышленных партий средства. Если физико-химические свойства изменяются со временем и среди партий, введение терапевтически эффективной дозы становится проблематичным и может привести к токсичным побочным эффектам или неэффективной терапии, в особенности, если данный полиморф, до использования, распадается до менее активного, неактивного или токсичного соединения. Таким образом, важно выбрать форму кристаллического средства, которая является стабильной, производственно воспроизводимой и имеет физикохимические свойства, благоприятные для применения в качестве терапевтического средства.
Тем не менее, существующий уровень техники по-прежнему не дает прогнозов, какая кристаллическая форма агента будет иметь сочетание желаемых свойств и будет пригодна для введения человеку, и как получить средство в такой кристаллической форме.
Краткое описание изобретения
Десольваты.
Данное изобретение частично является результатом открытия, касающегося того, что соль HCl соединения 1 диспропорционирует или теряет HCl и диспропорционирование соли HCl соединения 1 в воде приводит к образованию свободного основания и реакция диспропорционирования была облегчена при воздействии повышенной влажности при влажном измельчении и в непосредственном контакте с водой (например, в суспензии). Соль сульфата соединения 1 также диспропорционирует из некоторых растворителей, таких как диметилсульфоксид и метанол при осаждении водой. Выпаривание HCl наблюдалось в течение нескольких часов при выдерживании в условиях высушивания. Например, частичное превращение в свободное основание наблюдалось в течение 12 ч при 30°С. Соответственно, свободное основание соединения 1 обладает более стабильной химической сущностью по сравнению с соответствующим хлоридом или сульфатом и подобной другой солью.
Было обнаружено, что 2-гидрокси-6-((2-(1-изопропил-1H-пиразол-5-ил)пиридин-3-ил)метокси)бензальдегид (или соединение 1), т.е. свободное основание соединения 1, может быть получено в виде одной или более десольватированных кристаллических форм, некоторые из которых рассматриваются здесь как кристаллическая форма I, форма II и вещество N. В предпочтительных вариантах реализации изобретения, свободное основание соединения 1 представляет собой кристаллический десольват, такой как кристаллическая безводная форма. Свободное основание соединения 1 может быть получено из соответствующей соли, такой как HCl-соль соединения 1.
Были определены три безводные кристаллические формы свободного основания, названные формы I, II и вещество N свободного основания. Было обнаружено, что образование формы I свободного основания вначале, преимущественно, происходит из суспензии. Увеличение времени нахождения в суспензии может вызывать трансформацию формы I свободного основания в форму II свободного основания, термодинамически более стабильную фазу по отношению к форме I. Кроме того, было обнаружено, что свободное основание вещества N может быть более стабильным по отношению к формам I и II при комнатной температуре.
Было обнаружено, что свободное основание вещества N энантиотропически более родственно фор- 1 040317 ме II и будет обратимо преобразовываться при определенной температуре перехода (по оценкам в данном документе при температуре примерно 40-42°С). При температуре выше температурного перехода, свободное основание формы II проявляет свойства наиболее стабильной формы по отношению к форме I и веществу N. Таким образом, при рабочих температурах ниже 40°С, например при 30°С, свободное основание соединения 1 существует, преимущественно, в виде вещества N, которое может иметь некоторое остаточное количество формы II. Таким образом, при рабочих температурах выше 40°С, например при 50°С, свободное основание соединения 1 существует преимущественно в виде формы II, которая может иметь некоторое остаточное количество вещества N. При температуре 40°С наблюдается незначительный уровень преобразования между веществом N и формой II. Предусматривается, что этот процесс может происходить для суспензий свободного основания в некоторых растворителях и в твердом состоянии. В одном варианте реализации изобретения, одна или более кристаллических форм свободного основания соединения 1 не претерпевают полиморфное превращение в условиях, подходящих для изготовления и хранения кристаллических форм.
Форма I.
В одном варианте реализации изобретения, кристаллическое свободное основание соединения 1 включает кристаллическую форму I, которая характеризуется эндотермическим пиком при 97±2°С, что было измерено методом дифференциальной сканирующей калориметрии. В другом варианте реализации изобретения кристаллическая форма I свободного основания кристаллического соединения 1 характеризуется существенным отсутствием тепловых событий при температурах ниже эндотермического пика при 97±2°С, что было измерено методом дифференциальной сканирующей калориметрии. В другом варианте реализации изобретения кристаллическая форма I свободного основания кристаллического соединения 1 характеризуется пиком порошковой рентгеновской дифракции (Cu Ka излучение) при одном или более из 12,82, 15,74, 16,03, 16,63, 17,60, 25,14, 25,82 и 26,44±0,2° 2θ. В другом варианте реализации изобретения кристаллическая форма I свободного основания кристаллического соединения 1 характеризуется порошковой рентгеновской дифракции (Cu Ka излучение) в значительной степени сходной с той, что показана на фиг. 3.
В другом варианте реализации изобретения кристаллическая форма I свободного основания кристаллического соединения 1 характеризуется по меньшей мере одним пиком порошковой рентгеновской дифракции (Cu Ka излучение), выбранным из 12,82, 15,74, 16,03, 16,63, 17,60, 25,14, 25,82 и 26,44° (каждое ±0,2° 2θ). В другом варианте реализации изобретения кристаллическая форма I свободного основания кристаллического соединения 1 характеризуется по меньшей мере двумя пиками порошковой рентгеновской дифракции (Cu Ka излучение), выбранными из 12,82, 15,74, 16,03, 16,63, 17,60, 25,14, 25,82 и 26,44° (каждое ±0,2° 2θ). В другом варианте реализации изобретения кристаллическая форма I свободного основания кристаллического соединения 1 характеризуется по меньшей мере тремя пиками порошковой рентгеновской дифракции (Cu Ka излучение), выбранными из 12,82, 15,74, 16,03, 16,63, 17,60, 25,14, 25,82 и 26,44° (каждое ±0,2° 2θ).
В другом варианте реализации изобретения форма I характеризуется наличием 1, 2, 3, 4 или более пиков представленных ниже в таблице.
Наблюдаемые пики для формы I, файл порошковой рентгеновской дифракции (XRPD) 609973.
°2Θ d расстояние (А) Интенсивность (%)
5,52 ±0,20 16,021 ± 0,602 68
12,82 ±0,20 6,906 ±0,109 74
15,03 ±0,20 5,897 ±0,079 38
15,74 ±0,20 5,629 ± 0,072 46
16,03 ± 0,20 5,530 ±0,069 46
16,63 ± 0,20 5,331 ±0,064 61
17,60 ±0,20 5,040 ±0,057 100
18,74 ±0,20 4,736 ±0,051 24
19,07 ±0,20 4,654 ± 0,049 17
19,35 ±0,20 4,587 ±0,047 23
20,32 ±0,20 4,370 ± 0,043 18
21,64 ±0,20 4,106 ±0,038 23
22,80 ±0,20 3,901 ±0,034 26
23,28 ± 0,20 3,821 ±0,033 34
25,14 ±0,20 3,543 ± 0,028 52
25,82 ±0,20 3,451 ±0,026 81
26,44 ± 0,20 3,371 ±0,025 51
27,91 ± 0,20 3,197 ±0,023 17
28,19 ±0,20 3,165 ±0,022 26
- 2 040317
Форма II.
В другом варианте реализации изобретения кристаллическое свободное основание соединения 1 включает кристаллическую форму II, которая характеризуется эндотермическим пиком при 97±2°С, что было измерено методом дифференциальной сканирующей калориметрии. В другом варианте реализации изобретения кристаллическая форма II свободного основания кристаллического соединения 1 характеризуется существенным отсутствием тепловых событий при температурах ниже эндотермического пика при 97±2°С, что было измерено методом дифференциальной сканирующей калориметрии. В другом варианте реализации изобретения кристаллическая форма II свободного основания кристаллического соединения 1 характеризуется пиком порошковой рентгеновской дифракции (Cu Ka излучение) при одном или более из 13,37, 14,37, 19,95 или 23,92° 2θ. В другом варианте реализации изобретения кристаллическая форма II свободного основания кристаллического соединения 1 характеризуется порошковой рентгеновской дифракцией (Cu Ka излучение) в значительной степени сходной с той, что показана на фиг. 5.
В другом варианте реализации изобретения кристаллическая форма II свободного основания кристаллического соединения 1 характеризуется по меньшей мере одним пиком порошковой рентгеновской дифракции (Cu Ka излучение), выбранным из 13,37, 14,37, 19,95 и 23,92° 2Θ (каждое ±0,2° 2θ). В другом варианте реализации изобретения кристаллическая форма II свободного основания кристаллического соединения 1 характеризуется по меньшей мере двумя пиками порошковой рентгеновской дифракции (Cu Ka излучение), выбранными из 13,37, 14,37, 19,95 и 23,92° 2Θ (каждое ±0,2° 2Θ). В другом варианте реализации изобретения кристаллическая форма II свободного основания кристаллического соединения 1 характеризуется по меньшей мере тремя пиками порошковой рентгеновской дифракции (Cu Ka излучение), выбранными из 13,37, 14,37, 19,95 и 23,92° 2Θ (каждое ±0,2° 2Θ).
В другом варианте реализации изобретения форма II характеризуется наличием 1, 2, 3, 4 или более пиков, представленных ниже в таблице.
Наблюдаемые пики для формы II, файл порошковой рентгеновской дифракции (XRPD) 613881.
°2Θ d расстояние (А) Интенсивность (%)
5,62 ± 0,20 15,735 ±0,581 24
12,85 ± 0,20 6,888 ±0,108 22
12,97 ±0,20 6,826 ±0,106 21
13,37 ±0,20 6,622 ±0,100 100
14,37 ±0,20 6,162 ±0,087 56
15,31 ±0,20 5,788 ±0,076 21
16,09 ±0,20 5,507 ±0,069 23
16,45 ± 0,20 5,390 ±0,066 69
16,75 ± 0,20 5,294 ± 0,064 32
16,96 ±0,20 5,227 ± 0,062 53
19,95 ± 0,20 4,450 ± 0,045 39
20,22 ± 0,20 4,391 ± 0,043 20
23,18 ±0,20 3,837 ±0,033 38
23,92 ± 0,20 3,721 ±0,031 41
24,40 ± 0,20 3,648 ±0,030 44
24,73 ± 0,20 3,600 ± 0,029 22
24,99 ± 0,20 3,564 ±0,028 50
25,12 ±0,20 3,545 ± 0,028 28
25,39 ±0,20 3,509 ±0,027 51
25,70 ±0,20 3,466 ± 0,027 21
26,19 ±0,20 3,403 ± 0,026 27
26,72 ± 0,20 3,336 ±0,025 30
27,02 ± 0,20 3,300 ±0,024 25
27,34 ± 0,20 3,262 ± 0,024 23
28,44 ± 0,20 3,138 ±0,022 20
В некоторых вариантах реализации свободное основание кристаллического соединения 1 включает кристаллическую форму II. В некоторых предпочтительных вариантах, свободное основание кристаллического соединения 1 включает кристаллическую форму II и менее чем 25, 10 или 5 мол.% кристаллической формы I, кристаллического вещества N или аморфных форм соединения 1.
В предпочтительном варианте реализации изобретения кристаллическую форму II получают из суспензии, содержащей свободное основание соединения 1 в гептане, из которой образуется и фильтруется кристаллическая форма II. Таким образом, в некоторых вариантах реализации изобретения, кристаллическая форма II содержит остаточный (1-500 частей на миллион) гептан. В другом предпочтительном вариан- 3 040317 те реализации изобретения, кристаллическую форму II получают из суспензии, содержащей свободное основание соединения 1 в воде, из которой образуется и фильтруется кристаллическая форма II.
Кристаллическая форма II обладает несколькими преимуществами по отношению к кристаллической форме I или веществу N. Например, кристаллическая форма II может быть получена из суспензии, содержащей свободное основание соединения 1 в гептане, которая является подходящей для протоколов надлежащей производственной практики (GMP). Кроме того, в наиболее предпочтительном варианте реализации изобретения, кристаллическая форма II может быть получена из суспензии, содержащей свободное основание соединения 1 в воде или HCl соли соединения 1 в воде, тем самым уменьшая или устраняя необходимость в растворителе при перекристаллизации. Таким образом, в некоторых вариантах реализации изобретения, кристаллическая форма II соединения 1 содержит менее 500, 100, менее 50 или менее 10 частей на миллион органического растворителя. Кроме того, форма II имеет меньшую, чем вещество N, склонность к агломерации при уменьшении размера, например, при измельчении. Таким образом, форма II имеет большую, чем вещество N, текучесть. Некоторые иллюстративные и не ограничивающие применение преимущества формы II по сравнению с веществом N (т.е. формой N) показаны в таблице ниже.
ДАННЫЕ/ИСПЫТАНИЕ РЕЗУЛЬТАТЫ/СТАТУС
Определение подходящего растворителя для масштабирования Форма N: • Ограниченное количество подходящих растворителей по сравнению с Формой II • Определен метил-трет-бутиловый эфир (MTBE) (подходит для GMP; III Класс растворителя) • Результаты масштабирования являются перспективными Форма II: • Больше вариантов для растворителей, чем для Формы N, включая Н2О • Текущий растворитель представляет собой гептан (подходит для GMP; III Класс растворителя) • производится на уровне 5 кг • Время формирования быстрее, чем для Формы N (что может привести к сокращению времени производства на 2-3 дня) • Лучше восстановление, чем для Формы N
Размер/Морфология Форм N и II • Игольчатая морфология наблюдается для Формы N; вещество, состоящее из мелких и крупных частиц • Агломераты являются проблемой для Формы N по отношению к Форме II (меньший уровень агломерации наблюдается с использованием метода понижения энергии)
Сравнение ФК Форм N и II • Введение крысам оральным путем Форм N и II GBT440 приводило к сопоставимому воздействию при 100 & 500 мг/кг
Вещество N.
В другом варианте реализации изобретения кристаллическое свободное основание соединения 1 включает кристаллическое вещество N, которое характеризуется эндотермическим пиком при 95±2°С, что было измерено методом дифференциальной сканирующей калориметрии. Термины вещество N, форма N и полиморфная форма N используются как взаимозаменяемые в настоящем изобретении. В другом варианте реализации изобретения кристаллическое вещество N свободного основания кристаллического соединения 1 характеризуется существенным отсутствием тепловых событий при температурах ниже эндотермического пика при 95±2°С, что было измерено методом дифференциальной сканирующей калориметрии. В другом варианте реализации изобретения кристаллическое вещество N свободного основания кристаллического соединения 1 характеризуется пиком порошковой рентгеновской дифракции (Cu Ka излучение) при одном или более из 11,65, 11,85, 12,08, 16,70, 19,65 или 23,48° 2θ. В другом варианте реализации изобретения кристаллическое вещество N свободного основания кристаллического соединения 1 характеризуется дифрактограммой порошка на рентгенограмме (Cu Ka излучение) в значительной степени сходной с той, что показана на фиг. 7.
В другом варианте реализации изобретения кристаллическое вещество N свободного основания кристаллического соединения 1 характеризуется по меньшей мере одним пиком порошковой рентгеновской дифракции (Cu Ka излучение), выбранным из 11,65, 11,85, 12,08, 16,70, 19,65 и 23,48° 2Θ (каждое ±0,2° 2θ). В другом варианте реализации изобретения кристаллическое вещество N свободного основания кристаллического соединения 1 характеризуется по меньшей мере двумя пиками порошковой рентгеновской дифракции (Cu Ka излучение), выбранными из 11,65, 11,85, 12,08, 16,70, 19,65 и 23,48° 2Θ (каждое ±0,2° 2Θ). В другом варианте реализации изобретения кристаллическое вещество N свободного основания кристаллического соединения 1 характеризуется по меньшей мере тремя пиками порошковой рентгеновской дифракции (Cu Ka излучение), выбранными из 11,65, 11,85, 12,08, 16,70, 19,65 и 23,48° 2Θ
- 4 040317 (каждое ±0,2° 2θ).
В другом варианте реализации изобретения вещество N характеризуется наличием 1, 2, 3, 4 или более пиков, представленных ниже в таблице.
Наблюдаемые пики для вещества N, файл порошковой рентгеновской дифракции (XRPD) 615765.
°2Θ d расстояние (А) Интенсивность (%)
5,55 ± 0,20 15,924 ±0,595 54
11,65 ±0,20 7,597 ±0,132 31
11,85 ±0,20 7,468 ±0,128 50
12,08 ± 0,20 7,324 ±0,123 31
12,67 ± 0,20 6,987 ±0,112 29
13,12 ±0,20 6,748 ±0,104 83
14,94 ± 0,20 5,929 ±0,080 34
15,19 ±0,20 5,832 ±0,077 56
15,76 ±0,20 5,623 ± 0,072 20
16,70 ±0,20 5,310 ±0,064 100
17,35 ±0,20 5,112 ± 0,059 52
19,65 ± 0,20 4,517 ±0,046 60
23,48 ± 0,20 3,789 ±0,032 72
23,68 ± 0,20 3,757 ±0,032 29
25,25 ± 0,20 3,527 ±0,028 20
25,47 ± 0,20 3,497 ± 0,027 20
25,70 ± 0,20 3,466 ± 0,027 85
26,04 ± 0,20 3,422 ± 0,026 35
26,37 ± 0,20 3,380 ±0,025 55
В некоторых предпочтительных вариантах реализации изобретения свободное основание кристаллического соединения 1 включает кристаллическое вещество N и менее чем 25, 10 или 5 мол.% кристаллических форм I или II или аморфных форм соединения 1.
В другом варианте реализации изобретения кристаллическое вещество N получают из суспензии, содержащей свободное основание соединения 1 в метил-трет-бутиловом эфире (МТВЕ), из которого образуется и фильтруется кристаллическое вещество N. Таким образом, в некоторых вариантах реализации изобретения кристаллическое вещество N содержит остаточный (1-500 частей на миллион) МТВЕ.
Кристаллическое вещество N обладает несколькими преимуществами по отношению к кристаллическим формам I или II. Например, кристаллическое вещество N может быть получено из суспензии, содержащей свободное основание соединения 1 в МТВЕ, которая является подходящей для протоколов надлежащей производственной практики (GMP).
В некоторых вариантах реализации изобретения кристаллические формы десольватов стабильны при контакте с водой, гептаном, изопропиловым эфиром (IPE), МТВЕ и толуолом и подобными другими растворителями.
В одном из вариантов реализации этой композиции настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции, включающей фармацевтически приемлемый наполнитель и кристаллическое свободное основание соединения 1, содержащее одну или более из формы I, формы II или вещества N.
В одном из вариантов реализации этого способа настоящее изобретение относится к способу получения твердого кристаллического свободного основания соединения 1, включающего, например, форму I, форму II и/или вещество N.
В еще одном из вариантов реализации этого способа предусмотрены способы увеличения сродства гемоглобина S к кислороду у субъекта, причем способ включает введение субъекту, нуждающемуся в этом, терапевтически эффективного количества кристаллического свободного основания соединения 1, включающего, например, форму I, форму II и/или вещество N.
В еще одном из вариантов реализации этого способа, предусмотрены способы для лечения кислородной недостаточности, связанной с серповидноклеточной анемией у субъекта, причем способ включает введение субъекту, нуждающемуся в этом, терапевтически эффективного количества кристаллического свободного основания соединения 1, включающего, например, форму I, форму II и/или вещество N.
Во всех случаях такого лечения, эффективное количество свободного основания соединения 1, включающего, например, форму I, форму II и/или вещество N, для пациента, проходящего лечение, уже раскрыты в данной области техники.
Сольваты.
Это изобретение частично является результатом открытия, в котором десольватированные полиморфы свободного основания соединения 1 формируют сольватированные полиморфы с различными
- 5 040317 растворителями, предпочтительно, отличными от некоторых углеводородных растворителей, воды и простых эфиров.
Сольваты кристаллического свободного основания соединения 1 (например, из ацетона, ацетонитрила, дихлорметана, диоксана, этанола, этилацетата, изопропилового спирта, метилэтилкетона (МЕК) и тетрагидрофурана), также рассматриваются для использования, например, в качестве промежуточных соединений для регенерации кристаллического свободного основания десольватированного соединения 1. Такие методы могут включать, без ограничения, подвергание сольвата условиям вакуума; и/или получение соли и ее диспропорционирование в воде с образованием десольвата; и/или суспендирование или промывка сольвата растворителем менее склонным к образованию сольвата, таким как гептан, диизопропиловый эфир (ТРЕ), метил-трет-бутиловый эфир (МТВЕ) и толуол.
В одном из вариантов реализации такой композиции, настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции, включающей фармацевтически приемлемый наполнитель и одну или более из сольватированных кристаллических форм, представленных в настоящем изобретении.
В одном из вариантов реализации этого способа, данное изобретение относится к способу получения сольватированных кристаллических форм, представленных в настоящем изобретении.
В еще одном из вариантов реализации этого способа, предусмотрены способы увеличения сродства гемоглобина S к кислороду у субъекта, причем способ включает введение субъекту, нуждающемуся в этом, терапевтически эффективного количества одной или более сольватированных кристаллических форм, представленных в настоящем изобретении.
В еще одном из вариантов реализации этого способа, предусмотрены способы для лечения кислородной недостаточности, связанной с серповидноклеточной анемией у субъекта, причем способ включает введение субъекту, нуждающемуся в этом, терапевтически эффективного количества одной или более сольватированных кристаллических форм, представленных в настоящем изобретении.
Во всех случаях такого лечения, эффективное количество свободного основания соединения 1 для пациента, проходящего лечение, уже раскрыты в данной области техники.
Краткое описание чертежей
Фиг. 1 представляет собой XRPD профиль кристаллической соли HCl до (вверху) и после (внизу) 5 мин суспендирования в воде.
Фиг. 2 представляет собой XRPD профиль свободного основания формы I (вверху), формы II (в центре) и вещества N (внизу).
Фиг. 3 представляет собой XRPD профиль и предполагаемое индексирование для свободного основания формы I.
Фиг. 4 представляет собой тепловую характеристику для свободного основания формы I.
Фиг. 5 представляет собой XRPD профиль и предполагаемое индексирование для свободного основания формы II.
Фиг. 6 представляет собой тепловую характеристику для свободного основания формы II.
Фиг. 7 представляет собой XRPD профиль для свободного основания вещества N.
Фиг. 8 представляет собой тепловую характеристику для свободного основания вещества N.
Фиг. 9 изображает диаграмму энергия-температура между формами I, II и веществом N свободного основания. Изобары энтальпии (Н) и свободной энергии (G) для каждой формы изображены как функции температуры. AHf представляет собой теплоту плавления; Т представляет собой температуру перехода; m представляет собой температуру плавления; индексы I, II, и N относятся к полиморфам. * В условиях испытаний не было доступно достаточное количество информации, чтобы наглядно представить изобару свободной энергии формы I ниже 6°С и выше предполагаемой температуры перехода TN’n; изобара скорее всего пересекает GL при температуре ниже mn, допуская возможность, что форма I может быть энантиотропной с формой II (где TI'II происходит ниже 6°С) и/или веществом N (где или TI-N происходит ниже TI'II или TN'I происходит выше TN'II, но не оба одновременно). Изобары свободной энергии пересекаются друг с другом только один раз.
Фиг. 10 изображает ЯМР спектр твердого состояния 13С для форм I (внизу), II (в центре) и вещества N (вверху) свободного основания. Форма I содержит одну молекулу на асимметричную единицу. Вещество N содержит четыре молекулы на асимметричную единицу. Как видно из ЯМР спектра твердого состояния 13С, формы II и N не подвергаются переходу более чем от 250 до 340 К. Химические сдвиги слегка изменяются при изменении температуры (графически не проиллюстрировано).
Фиг. 11 изображает ЯМР спектр твердого состояния 15N для форм I (внизу), II (в центре) и вещества N (вверху) свободного основания.
Фиг. 12 изображает кривую дифференциальной сканирующей калориметрии (DSC) для свободного основания вещества N.
Фиг. 13 изображает DSC кривую для свободного основания формы II.
Фиг. 14 изображает DSC кривую для свободного основания формы I.
Фиг. 15 изображает профиль XRPD экспериментов по созреванию для свободного основания соединения 1 при нескольких температурах.
Фиг. 16 изображает предполагаемый профиль XRPD для сольватированного вещества Е.
- 6 040317
Фиг. 17 изображает предполагаемый профиль XRPD для сольватированного вещества F.
Фиг. 18 изображает предполагаемый профиль XRPD для сольватированного вещества G.
Фиг. 19 изображает предполагаемый профиль XRPD для сольватированного вещества Н.
Фиг. 20 изображает предполагаемый профиль XRPD для сольватированного вещества J.
Фиг. 21 изображает предполагаемый профиль XRPD для сольватированного вещества K.
Фиг. 22 изображает предполагаемый профиль XRPD для сольватированного вещества L.
Фиг. 23 изображает предполагаемый профиль XRPD для сольватированного вещества М.
Фиг. 24 изображает предполагаемый профиль XRPD для сольватированного вещества О.
Фиг. 25 изображает сравнение XRPD профиля предполагаемых изоструктурных сольватов свободного основания соединения 1. Сверху вниз: вещество Е от ацетона; вещество F от ACN; вещество G от DCM; вещество Н от диоксана; вещество J от этанола; вещество K от IPA/воды (также получено от IPA) и вещество L от THF, вещество М от МЕК.
Подробное описание изобретения
Как отмечалось ранее, данное изобретение относится, в частности, к стабильному свободному основанию соединения 1 и, в частности, к форме I, форме II или веществу N свободного основания. Однако перед более подробным обсуждением данного изобретения будут даны определения следующим терминам.
Определения.
Используемые в настоящем изобретении следующие термины имеют следующие значения.
Формы единственного числа включают ссылки на формы множественного числа, если из контекста явно не следует иное. Так, например, ссылка на соединение включает в себя как одно соединение, так и множество различных соединений.
Термин примерно при использовании перед числовым обозначением, например, температуры, времени, количества и концентрации, в том числе диапазона, указывает приближения, которые могут варьироваться в пределах ±10, ±5 или ±1%.
Введение относится к введению вещества в тело пациента. Может быть введено терапевтическое количество, которое может быть определено лечащим врачом или подобным специалистом. Пероральный путь введения является предпочтительным. Соответствующие термины и фразы введение и применение, когда используются в отношении соединения или фармацевтической композиции (и их грамматические эквиваленты) обозначают как прямое введение, которое может быть введением пациенту медицинским работником, или самостоятельным введением пациентом, и/или непрямое введение, которое может быть действием в результате назначения препарата. Например, применению препарата пациентом соответствует ситуация, когда врач инструктирует пациента по самостоятельному введению препарата и/или предоставляет пациенту рецепт на препарат. В любом случае, применение влечет за собой доставку препарата в тело пациента.
Кристаллический десольват соединения 1 представляет собой кристаллическую твердую форму свободного основания 2-гидрокси-6-((2-( 1 -изопропил-1 H-пиразол-5-ил)пиридин-3 -ил)метокси)бензальдегида, такую как, например, кристаллическая форма I, форма II или вещество N, как описано в настоящем изобретении. Каждая из кристаллических решеток формы I, формы II или вещества N является, в значительной степени, свободной от растворителей для кристаллизации. Тем не менее, любой присутствующий растворитель не входит в кристаллическую решетку и случайным образом распределен вне кристаллической решетки. Таким образом, кристаллы формы I, формы II или вещества N, в значительной степени, могут содержать, вне кристаллической решетки, небольшие количества одного или нескольких растворителей, таких как растворители, используемые при их синтезе или кристаллизации. Используемое ранее в значительной степени не содержит и малые количества относятся к присутствию растворителей, предпочтительно менее 10000 частей на миллион (ppm) или более предпочтительно менее чем 500 частей на миллион.
Кристаллический сольват соединения 1 представляет собой кристаллическую твердую форму свободного основания 2-гидрокси-6-((2-(1-изопропил-1H-пиразол-5-ил)пиридин-3-ил)метокси)бензальдегида, где кристаллические решетки содержат один или более растворителей для кристаллизации.
Характеризация относится к получению данных, которые могут быть использованы для идентификации твердой формы соединения, например, для того, чтобы определить, является ли твердая форма аморфной или кристаллической и является ли она десольватированной или сольватированной. Способ, посредством которого характеризуются твердые формы, включает в себя анализ данных, собранных на полиморфных формах так, чтобы позволить любому обычному специалисту в данной области отличить одну твердую форму от других твердых форм, содержащих одно и то же вещество. Химическую идентичность твердых форм часто можно определить с использованием методов анализа в состояния раствора, таких как ЯМР 13С или ЯМР 1Н. Хотя они могут помочь идентифицировать вещество и молекулы растворителя для сольвата, такие методы анализа в состояния раствора сами по себе не могут предоставить информацию о твердом состоянии. Однако, существуют твердотельные аналитические методы, которые могут быть использованы для получения информации о твердотельной структуре и выявления различий полиморфных твердых форм между собой, таких как дифракция рентгеновских лучей на монокристал- 7 040317 лах, дифракция рентгеновских лучей на порошке (XRPD), твердотельный ядерный магнитный резонанс (SS-ЯМР) и инфракрасная и Рамановская спектроскопия и тепловые методы, такие как дифференциальная сканирующая калориметрия (DSC), твердотельный 13С-ЯМР, термогравиметрия (TG), точка плавления и микроскопия в горячем состоянии.
Для того чтобы охарактеризовать твердую форму соединения, можно, например, собирать данные о XRPD твердых форм соединения и сравнивать XRPD пики для форм. Например, когда сравниваются только три твердые формы, например, формы I и II и вещество N и образец формы I показывает пик под углом, при котором пики не появляются в случае образца формы II или вещества N, тогда этот пик для этого соединения отличает форму I от формы II и вещества N и, в дальнейшем, выступает для характеристики формы I. Набор пиков, которые отличают, например, форму I от других известных форм представляет собой набор пиков, которые могут быть использованы для характеристики формы I. Специалистам в данной области техники будет понятно, что зачастую существует несколько способов, в том числе несколько способов, использующих один и тот же аналитический метод, для характеристики твердых форм. Дополнительные пики также могут быть использованы, но они не являются необходимыми для того, чтобы охарактеризовать форму вплоть до целой дифракционной картины. Хотя все пики в пределах всего образца XRPD могут быть использованы для характеристики такой формы, подмножество этих данных может, и обычно используется, для характеристики формы.
XRPD образец является х-у графиком с дифракционным углом (обычно ° 2θ) на оси абсцисс и интенсивностью на оси ординат. Пики в пределах этого образца могут быть использованы для характеристики кристаллической твердой формы. Как и с любым измерением данных, присутствует вариабельность в данных XRPD. Часто данные представлены исключительно в виде угла дифракции пиков, вместо того, чтобы включать интенсивность пиков, поскольку интенсивность пика может быть особенно чувствительной к подготовке проб (например, размеру частиц, содержанию влаги, содержанию растворителя и предпочтительным эффектам ориентации, которые влияют на чувствительность), таким образом, пробы одного и того же материала, подготовленные при различных условиях, могут приводить к получению незначительно различных дифрактограмм; эта вариабельность, как правило, является большей, чем вариабельность в углах дифракции. Вариабельность угла дифракции также может быть чувствительной к подготовке проб. Другие источники вариабельности происходят из параметров инструмента и обработки исходных данных рентгенограммы: различные рентгеновские приборы работают с использованием различных параметров и это может привести к незначительно различным дифрактограммам одной и той же твердой формы аналогично тому, как различные программные пакеты обрабатывают данные рентгенограмм по-разному, что также приводит к вариабельности. Эти и другие источники вариабельности известны специалистам в области фармацевтики. Согласно этим источникам вариабельности, уровень вариабельности обычно присваивается на уровне ±0,2° 2θ по отношению к углам дифракции в XRPD образцах.
Содержащий или включающий означает, что композиции и способы включают перечисленные элементы, но не исключают другие. Состоящий по существу из, при использовании для определения композиций и способов, означает исключение других элементов, имеющих какое-либо существенное значения для комбинации, для достижения заявленной цели. Таким образом, композиция, по существу, состоящая из элементов, как определено в настоящем изобретении, не исключает другие вещества или этапы, которые не оказывают существенного влияния на основную(ые) и новую(ые) характеристику(и) заявленного изобретения. Состоящий из означает исключение более чем на уровне микроэлементов других ингредиентов и существенных этапов способа. Варианты реализации, определенные каждым из этих связующих терминов, находятся в пределах объема настоящего изобретения.
Форма II и вещество N являются энантиотропными при температуре перехода (приблизительно при температуре 42°С). Ниже этой температуры перехода, вещество N свободного основания соединения 1 является термодинамически более стабильной формой по отношению к формам I и II. Выше этой температуры перехода, форма II свободного основания соединения 1 является термодинамически более стабильной формой по отношению к форме I и веществу N.
Комнатная температура относится к температуре 22±5°С.
Терапевтически эффективное количество или терапевтическое количество относится к количеству лекарственного средства или вещества, которое при введении пациенту, страдающему от состояния, будет оказывать желаемый терапевтический эффект, например облегчение, улучшение, смягчение или устранение одного или более проявлений состояния у пациента. Терапевтически эффективное количество будет варьироваться в зависимости от субъекта и состояния, подлежащего лечению, массы и возраста субъекта, тяжести состояния, конкретного состава или выбранного наполнителя, режима дозирования, которому необходимо следовать, регулярности введения, способа введения и т.п., все из вышеперечисленных факторов могут быть легко определены специалистом в данной области. Появление полного терапевтического эффекта не обязательно происходит при введении одной дозы и может происходить только после введения серии доз. Таким образом, терапевтически эффективное количество может быть введено в один или несколько приемов. Например, но без ограничения расстройств, терапевтически эф- 8 040317 фективное количество агента, в контексте лечения нарушений, связанных с гемоглобином S, относится к количеству агента, который облегчает, улучшает, смягчает или устраняет одно или более проявлений расстройств, связанных с гемоглобином S, у пациента.
Лечение, обработка и лечить определяются как действия в отношении заболевания, расстройства или состояния с использованием вещества для уменьшения или смягчения вредоносного или любых других нежелательных последствий заболевания, расстройства или состояния и/или их симптомов. Лечение, в контексте использования в настоящем изобретении, охватывает лечение пациента-человека и включает (а) снижение риска возникновения состояния у пациента с выявленной предрасположенностью к заболеванию, но еще не диагностированной как состояние, (b) препятствование развитию состояния и/или (с) облегчение состояния, т.е. регрессия состояния и/или облегчение одного или более симптомов состояния. Для достижения целей по настоящему изобретению, благоприятные или желаемые клинические результаты включают, но не ограничиваются ими, улучшение общих гематологических показателей, уменьшение числа необходимых переливаний крови, снижение количества инфекций, уменьшение частоты возникновения кровотечений и т.п.
Выявление форм I, II и вещества N.
Когда HCl-соль соединения 1 подвергалась воздействию различных стрессовых условий, наблюдалось диспропорционирование гидрохлорида в воде с образованием свободного основания. Были определены по меньшей мере три безводные кристаллические формы свободного основания, названные формы I, II и вещество N свободного основания. Было обнаружено, что, обычно, в первую очередь происходит образование формы I свободного основания и увеличение времени нахождения в суспензии индуцирует превращение формы I свободного основания в форму II свободного основания, более термодинамически стабильную фазу по отношению к форме I. Кроме того, было обнаружено, что вещество N свободного основания является, по-видимому, наиболее стабильной формой по отношению к формам I и II при комнатной температуре. Было обнаружено, что вещество N свободного основания энантиотропически активно относительно формы II и будет обратимо преобразовываться при определенной температуре перехода (по оценкам согласно настоящей заявке при температуре примерно 40-42°С). Выше температуры перехода, форма II свободного основания, по-видимому, является наиболее стабильной формой по отношению к форме I и веществу N.
Частично основываясь на данных твердотельного ядерного магнитного резонанса было выявлено, что все три формы являются кристаллическими и имеют различные полиморфные формы. См. фиг. 10 и 11. Форма I содержит одну молекулу на асимметричную единицу, форма II содержит две молекулы на асимметричную единицу и форма N содержит четыре молекулы на асимметричную единицу. См. спектры 15N на фиг. 11.
Десольваты форм I, II и вещества N.
В одном варианте реализации изобретения, настоящее изобретение предусматривает кристаллический десольват свободного основания соединения 1. Свободное основание кристаллического десольвата соединения 1 может включать в себя одну или более полиморфов формы I, формы II и/или вещества N. В некоторых вариантах реализации изобретения свободное основание кристаллического десольвата соединения 1 может включать полиморф формы II. Предпочтительно свободное основание кристаллического десольвата соединения 1 может включать в себя полиморфы формы II и/или вещества N. Более предпочтительно, свободное основание кристаллического десольвата соединения 1 может включать полиморф вещества N. Еще более предпочтительно, свободное основание кристаллического десольвата соединения 1, по существу, свободно от сольватированного полиморфа свободного основания соединения 1. Кроме того, еще более предпочтительно, свободное основание кристаллического десольвата соединения 1, по существу, свободно от других десольватированных полиморфов свободного основания соединения 1. Свободный по существу от компонента, как используется в настоящем изобретении, относится к содержанию до примерно 5%, более предпочтительно до примерно 3%, и еще более предпочтительно до примерно 1% от компонента. Используемый в настоящем изобретении сольват, также, включает в себя гидратированную форму.
Сольваты соединения 1.
В одном аспекте изобретения предоставляется кристаллический сольват соединения 1
Соединение 1
В некоторых вариантах реализации изобретения кристаллический сольват, по существу, свободен от десольватированного полиморфа соединения 1.
Многие из экспериментов по растворимости и просеиванию с использованием свободного основания соединения 1 приводили к осаждению твердых частиц и были охарактеризованы как формирование
- 9 040317 сольвата с некоторыми растворителями. При определенных условиях не наблюдалось формирование сольватов из свободного основания соединения 1 с использованием четырех растворителей, в том числе гептана, диизопропилового эфира (IPE), метил-трет-бутилового эфира (МТВЕ) и толуола. Формирование сольватов из свободного основания соединения 1 наблюдалось в девяти растворителях, включая ацетон (вещество Е), ацетонитрил (вещество F), дихлорметан (вещество G), диоксан (вещество Н), этанол (вещество J), изопропиловый спирт или смесь воды и изопропилового спирта (вещество K), тетрагидрофуран (вещество L), метилэтилкетон МЕК (вещество М), этилацетат (вещество О) и диметилсульфоксид DMSO (вещество Р). Большинство из сольватов (т.е. вещества Е-Н, J-M, О и Р) рассматриваются как изоструктурные. В некоторых вариантах реализации изобретения кристаллический сольват включает в себя один или более из вещества Е, вещества F, вещества G, вещества Н, вещества J, вещества K, вещества L, вещества М, вещества О или вещества Р.
Вещество Е может быть охарактеризовано по меньшей мере одним пиком порошковой рентгеновской дифракции (Cu Ka излучение), выбранным из 8,69, 11,73, 12,10, 15,26, 16,11, 17,45, 22,39, 22,55 и 23,70±0,20. Вещество F может быть охарактеризовано по меньшей мере одним пиком порошковой рентгеновской дифракции (Cu Ka излучение), выбранным из 8,47, 8,81, 12,75, 13,17, 14,92, 15,63, 17,01 23,73 и 24,07±0,20. Вещество G может быть охарактеризовано по меньшей мере одним пиком порошковой рентгеновской дифракции (Cu Ka излучение), выбранным из 8,47, 11,45, 12,62, 14,66, 15,69, 17,01, 18,47, 20,32, 22,61, 23,08, 23,43 и 23,70±0,20. Вещество Н может быть охарактеризовано по меньшей мере одним пиком порошковой рентгеновской дифракции (Cu Ka излучение), выбранным из 8,61, 11,67, 15,33, 16,28, 17,28, 22,58, 23,51 и 25,77±0,20. Вещество J может быть охарактеризовано по меньшей мере одним пиком порошковой рентгеновской дифракции (Cu Ka излучение), выбранным из 8,52, 8,88, 12,79, 15,04, 15,61, 17,11, 22,81, 23,87, 24,17, 24,62 и 26,44±0,20. Вещество K может быть охарактеризовано по меньшей мере одним пиком порошковой рентгеновской дифракции (Cu Ka излучение), выбранным из 8,52; 8,83, 11,35, 15,04, 15,74, 17,11, 23,46, 23,58, 24,08 и 25,99±0,20. Вещество L может быть охарактеризовано по меньшей мере одним пиком порошковой рентгеновской дифракции (Cu Ka излучение), выбранным из 8,61, 8,78, 11,67, 14,94, 15,28, 16,14, 17,30, 22,75, 23,71 и 26,05±0,20; и вещество М может быть охарактеризовано по меньшей мере одним пиком порошковой рентгеновской дифракции (Cu Ka излучение), выбранным из 7,74, 10,05, 12,82, 15,33, 16,80, 20,82, 21,14, 25,80 и 26,97±0,20.
Сольваты (такие как ацетон, ацетонитрил, дихлорметан, диоксан, этанол, этилацетат, изопропиловый спирт, МЕК, тетрагидрофуран или DMSO) могут быть использованы, например, в качестве промежуточных соединений для регенерации кристаллического десольвата свободного основания соединения 1 с помощью нескольких способов, в том числе, подвергая сольват воздействию условий вакуума; и/или регенерацией соли HCl и диспропорционированием HCl; и/или промывкой сольвата растворителем менее склонным к образованию сольвата, таким как гептан, диизопропиловый эфир (IPE), метил-третбутиловый эфир (МТВЕ) и толуол.
Таблица 1
Данные, относящиеся к сольватам свободного основания соединения 1
Наименование Растворитель ДЛЯ кристаллизации Объем (А3/Ячейка) Число формульных единиц в ячейке Объем формульной единицы * (А3) Индексированный результат
Вещество Е ацетон 968 2 484 ФИГ. 1
Вещество F ACN 947 2 473 ФИГ. 2
Вещество G DCM 959 2 480 ФИГ. 3
Вещество Н диоксан 977 2 488 ФИГ. 4
Вещество J EtOH 943 2 472 ФИГ. 5
Вещество К IPA 963 2 481 ФИГ. 6
Вещество L THF 972 2 486 ФИГ. 7
Вещество М МЕК 3956 8 494 ФИГ. 8
Вещество О EtOAc - - - ФИГ. 9
Вещество Р** DMSO - - - -
* Значение, полученное делением объема ячейки, происходящей от предварительной индексации раствора, на число формульных единиц в ячейке.
** Вещество Р наблюдали в виде смеси с сульфатом формы I.
Некоторые предполагаемые пики различных сольватов, предусмотренных в настоящем изобретении, представлены ниже в таблице. Некоторые пики, которые являются предпочтительно не пересекающимися, пики малых углов, пики с сильной интенсивностью не были определены. Пики были определены с расчетом на то, что состояние предпочтительной ориентации в образцах было неизвестно.
- 10 040317
Наблюдаемые пики для вещества Е
Таблица 2
°20 d расстояние (А) Интенсивность (%)
8,41 ±0,20 10,517 ±0,256 13
8,69 ± 0,20 10,174 ±0,239 100
11,73 ±0,20 7,543 ±0,130 17
12,10 ±0,20 7,314 ±0,122 20
13,00 ±0,20 6,809 ±0,106 15
14,02 ± 0,20 6,316 ±0,091 5
14,77 ± 0,20 5,996 ±0,082 16
15,26 ±0,20 5,807 ±0,077 34
15,81 ±0,20 5,605 ±0,071 7
16,11 ±0,20 5,501 ±0,069 20
16,48 ±0,20 5,379 ±0,066 И
16,65 ± 0,20 5,326 ±0,064 И
16,88 ±0,20 5,253 ± 0,063 3
17,26 ±0,20 5,136 ±0,060 9
17,45 ± 0,20 5,083 ±0,058 32
20,02 ± 0,20 4,435 ± 0,044 2
20,92 ± 0,20 4,246 ±0,041 13
21,91 ±0,20 4,057 ±0,037 20
22,39 ± 0,20 3,970 ±0,035 49
22,55 ± 0,20 3,944 ±0,035 37
22,81 ±0,20 3,898 ±0,034 16
23,36 ±0,20 3,807 ±0,032 12
23,70 ±0,20 3,755 ±0,032 61
24,37 ± 0,20 3,653 ±0,030 12
24,85 ± 0,20 3,583 ± 0,029 5
25,42 ± 0,20 3,504 ±0,027 2
25,89 ±0,20 3,442 ± 0,026 8
26,19 ±0,20 3,403 ± 0,026 40
26,97 ± 0,20 3,306 ±0,024 3
27,61 ± 0,20 3,231 ±0,023 16
28,24 ± 0,20 3,160 ±0,022 2
28,48 ± 0,20 3,134 ±0,022 5
28,69 ± 0,20 3,111 ±0,021 7
29,83 ± 0,20 2,995 ± 0,020 4
Таблица 3
Наблюдаемые пики для вещества F
°20 d расстояние (А) Интенсивность (%)
8,47 ± 0,20 10,434 ±0,252 100
8,81 ±0,20 10,039 ±0,233 49
11,42 ±0,20 7,752 ±0,138 15
12,75 ± 0,20 6,942 ±0,110 27
13,17 ±0,20 6,723 ± 0,103 21
13,87 ±0,20 6,384 ±0,093 7
14,61 ± 0,20 6,064 ±0,084 13
- 11 040317
14,92 ±0,20 5,936 ±0,080 43
15,51 ±0,20 5,713 ±0,074 24
15,63 ±0,20 5,671 ±0,073 43
15,96 ±0,20 5,553 ±0,070 15
17,01 ±0,20 5,212 ±0,062 31
17,26 ±0,20 5,136 ±0,060 4
17,70 ±0,20 5,011 ±0,057 9
18,17 ±0,20 4,883 ± 0,054 4
18,79 ±0,20 4,724 ± 0,050 10
19,35 ±0,20 4,587 ±0,047 4
19,49 ±0,20 4,555 ± 0,047 3
20,02 ± 0,20 4,435 ±0,044 4
20,29 ± 0,20 4,377 ±0,043 9
21,06 ±0,20 4,219 ±0,040 И
21,33 ±0,20 4,167 ±0,039 4
22,71 ± 0,20 3,915 ±0,034 27
23,11 ±0,20 3,848 ±0,033 15
23,73 ± 0,20 3,749 ±0,031 42
24,07 ± 0,20 3,698 ±0,031 59
24,65 ± 0,20 3,612 ±0,029 87
24,95 ± 0,20 3,569 ±0,028 6
25,20 ±0,20 3,534 ±0,028 5
25,69 ±0,20 3,468 ± 0,027 15
26,52 ±0,20 3,361 ±0,025 61
26,79 ± 0,20 3,328 ±0,025 10
27,02 ± 0,20 3,300 ±0,024 9
Таблица 4
Наблюдаемые пики для вещества G
°2Θ d расстояние (А)
8,47 ± 0,20 10,434 ±0,252 45
8,76 ± 0,20 10,096 ±0,235 12
11,45 ±0,20 7,729 ±0,137 76
12,62 ±0,20 7,015 ±0,113 36
13,09 ±0,20 6,765 ±0,105 10
13,87 ±0,20 6,384 ±0,093 5
14,66 ±0,20 6,044 ± 0,083 39
14,92 ± 0,20 5,936 ±0,080 26
15,33 ±0,20 5,782 ±0,076 7
15,69 ±0,20 5,647 ± 0,072 88
16,01 ±0,20 5,536 ±0,070 8
16,76 ±0,20 5,289 ±0,063 15
17,01 ±0,20 5,212 ±0,062 29
17,50 ±0,20 5,068 ±0,058 5
17,60 ±0,20 5,040 ±0,057 4
18,13 ±0,20 4,892 ±0,054 5
18,47 ±0,20 4,804 ±0,052 21
19,55 ±0,20 4,540 ± 0,046 4
20,01 ± 0,20 4,439 ± 0,044 5
20,32 ± 0,20 4,370 ± 0,043 20
21,11 ±0,20 4,209 ± 0,040 15
22,61 ± 0,20 3,932 ±0,035 42
Интенсивность (%)
- 12 040317
22,88 ± 0,20 3,887 ±0,034 9
23,08 ± 0,20 3,854 ±0,033 28
23,43 ± 0,20 3,797 ±0,032 56
23,70 ±0,20 3,755 ±0,032 48
24,12 ±0,20 3,690 ±0,030 13
24,42 ± 0,20 3,646 ±0,030 100
25,05 ± 0,20 3,555 ±0,028 7
25,40 ± 0,20 3,506 ±0,027 26
26,36 ±0,20 3,382 ±0,025 50
26,57 ±0,20 3,355 ±0,025 7
26,82 ± 0,20 3,324 ±0,025 27
27,07 ± 0,20 3,294 ± 0,024 10
Таблица 5
Наблюдаемые пики для вещества Н
Интенсивность (%)
°20 d расстояние (А)
8,61 ± 0,20 10,273 ± 0,244 48
8,81 ±0,20 10,039 ±0,233 20
11,67 ±0,20 7,586 ±0,132 32
12,10 ±0,20 7,314 ±0,122 И
12,79 ±0,20 6,924 ±0,110 9
14,56 ±0,20 6,085 ± 0,084 4
14,87 ±0,20 5,956 ±0,081 22
15,33 ±0,20 5,782 ± 0,076 42
15,76 ±0,20 5,623 ± 0,072 18
16,28 ±0,20 5,445 ± 0,067 51
16,73 ±0,20 5,299 ± 0,064 9
17,28 ±0,20 5,132 ±0,060 61
17,68 ± 0,20 5,016 ±0,057 3
20,47 ± 0,20 4,338 ± 0,042 12
21,38 ±0,20 4,157 ±0,039 7
21,83 ±0,20 4,072 ± 0,037 4
22,23 ± 0,20 3,999 ±0,036 9
22,58 ± 0,20 3,938 ±0,035 100
22,95 ± 0,20 3,876 ±0,034 6
23,11 ±0,20 3,848 ±0,033 14
23,51 ±0,20 3,783 ± 0,032 88
24,37 ± 0,20 3,653 ±0,030 13
24,65 ± 0,20 3,612 ±0,029 10
25,77 ± 0,20 3,457 ±0,027 41
26,67 ± 0,20 3,342 ±0,025 7
26,97 ± 0,20 3,306 ±0,024 5
27,66 ± 0,20 3,225 ± 0,023 3
28,11 ±0,20 3,174 ±0,022 4
28,61 ± 0,20 3,120 ±0,022 6
28,96 ± 0,20 3,083 ± 0,021 4
29,23 ± 0,20 3,055 ±0,021 3
29,63 ± 0,20 3,015 ±0,020 3
Таблица 6
Наблюдаемые пики для вещества J
Интенсивность (%)
°20 d расстояние (А)
8,52 ±0,20 10,373 ± 0,249 100
8,88 ± 0,20 9,964 ± 0,229 39
11,33 ±0,20 7,809 ±0,140 22
12,79 ±0,20 6,924 ±0,110 25
- 13 040317
13,12 ±0,20 6,748 ±0,104 24
13,94 ±0,20 6,354 ±0,092 4
14,47 ± 0,20 6,120 ±0,085 14
15,04 ±0,20 5,890 ±0,079 42
15,61 ±0,20 5,677 ± 0,073 56
15,84 ±0,20 5,594 ±0,071 16
17,11 ±0,20 5,181 ±0,061 33
17,40 ±0,20 5,097 ±0,059 4
17,82 ±0,20 4,979 ± 0,056 8
18,12 ±0,20 4,897 ±0,054 3
18,90 ±0,20 4,695 ± 0,050 И
19,39 ±0,20 4,579 ± 0,047 5
19,62 ±0,20 4,525 ± 0,046 4
20,16 ±0,20 4,406 ± 0,044 8
20,96 ± 0,20 4,239 ± 0,040 12
22,81 ±0,20 3,898 ±0,034 27
23,15 ±0,20 3,843 ± 0,033 9
23,28 ± 0,20 3,821 ±0,033 7
23,87 ±0,20 3,729 ±0,031 34
24,17 ±0,20 3,683 ±0,030 52
24,62 ± 0,20 3,616 ±0,029 95
25,20 ± 0,20 3,534 ±0,028 5
25,77 ±0,20 3,457 ±0,027 13
26,44 ± 0,20 3,371 ±0,025 70
26,71 ± 0,20 3,338 ±0,025 10
27,21 ± 0,20 3,278 ± 0,024 7
Таблица 7
Наблюдаемые пики для GBT 000440, вещество K
Интенсивность (%)
°20 d расстояние (А)
8,52 ±0,20 10,373 ± 0,249 75
8,83 ± 0,20 10,020 ±0,232 33
11,35 ±0,20 7,797 ±0,139 29
12,52 ±0,20 7,071 ±0,114 21
12,90 ±0,20 6,861 ±0,108 24
13,92 ±0,20 6,361 ± 0,092 4
- 14 040317
14,49 ± 0,20 6,113 ±0,085 18
15,04 ±0,20 5,890 ±0,079 41
15,34 ±0,20 5,775 ± 0,076 17
15,74 ±0,20 5,629 ± 0,072 57
15,93 ±0,20 5,564 ±0,070 13
16,61 ±0,20 5,336 ±0,065 7
17,11 ±0,20 5,181 ±0,061 33
17,70 ±0,20 5,011 ±0,057 7
18,00 ±0,20 4,928 ± 0,055 4
18,38 ±0,20 4,826 ±0,053 13
19,04 ±0,20 4,662 ± 0,049 4
19,74 ±0,20 4,498 ± 0,046 5
20,21 ± 0,20 4,395 ± 0,043 И
20,99 ± 0,20 4,232 ± 0,040 12
22,70 ± 0,20 3,918 ±0,034 22
22,90 ± 0,20 3,884 ±0,034 17
23,46 ± 0,20 3,791 ±0,032 45
23,58 ±0,20 3,773 ± 0,032 70
24,08 ± 0,20 3,695 ± 0,030 100
24,75 ± 0,20 3,597 ±0,029 6
25,19 ±0,20 3,536 ±0,028 21
25,99 ±0,20 3,429 ±0,026 71
26,71 ± 0,20 3,338 ±0,025 И
27,36 ±0,20 3,260 ±0,024 9
28,11 ±0,20 3,174 ±0,022 4
28,69 ± 0,20 3,111 ±0,021 9
Таблица 8
Наблюдаемые пики для вещества L
°20 d расстояние (А)
8,61 ± 0,20 10,273 ± 0,244 79
8,78 ± 0,20 10,077 ±0,235 38
11,67 ±0,20 7,586 ±0,132 35
12,17 ±0,20 7,274 ±0,121 19
12,94 ±0,20 6,844 ±0,107 14
14,07 ±0,20 6,293 ± 0,090 3
14,62 ± 0,20 6,057 ±0,084 5
14,94 ± 0,20 5,929 ±0,080 25
15,28 ±0,20 5,800 ±0,076 50
15,93 ±0,20 5,564 ±0,070 18
16,14 ±0,20 5,490 ± 0,068 49
16,33 ± 0,20 5,429 ± 0,067 9
16,70 ±0,20 5,310 ±0,064 9
16,85 ± 0,20 5,263 ± 0,063 6
17,30 ±0,20 5,127 ±0,060 52
17,63 ± 0,20 5,030 ±0,057 6
18,37 ±0,20 4,830 ±0,053 3
20,14 ±0,20 4,409 ± 0,044 5
Интенсивность (%)
- 15 040317
20,59 ±0,20 4,314 ±0,042 14
21,53 ±0,20 4,128 ±0,038 И
22,01 ±0,20 4,038 ±0,037 3
22,44 ± 0,20 3,961 ±0,035 27
22,75 ± 0,20 3,910 ±0,034 72
23,10 ±0,20 3,851 ±0,033 20
23,31 ±0,20 3,816 ±0,033 19
23,48 ± 0,20 3,789 ±0,032 12
23,71 ±0,20 3,752 ±0,031 100
24,48 ± 0,20 3,636 ±0,029 20
24,70 ± 0,20 3,604 ± 0,029 4
24,93 ± 0,20 3,571 ±0,028 3
25,59 ±0,20 3,482 ± 0,027 5
25,72 ±0,20 3,464 ± 0,027 5
26,05 ± 0,20 3,420 ± 0,026 62
26,59 ±0,20 3,352 ±0,025 6
27,14 ±0,20 3,286 ± 0,024 8
27,83 ± 0,20 3,206 ± 0,023 8
28,38 ±0,20 3,145 ±0,022 3
28,78 ±0,20 3,102 ±0,021 8
29,05 ± 0,20 3,074 ±0,021 4
29,36 ±0,20 3,042 ± 0,020 3
Таблица 9
Наблюдаемые пики для вещества М °2Θ d расстояние (А) Интенсивность (%)
7,74 ± 0,20 11,424 ±0,303 100
8,34 ±0,20 10,601 ±0,260 4
10,05 ± 0,20 8,806 ±0,178 17
12,82 ±0,20 6,906 ±0,109 46
13,05 ±0,20 6,783 ±0,105 4
14,17 ±0,20 6,249 ± 0,089 2
14,54 ±0,20 6,092 ± 0,085 6
14,99 ±0,20 5,910 ±0,079 16
15,33 ±0,20 5,782 ±0,076 47
15,53 ±0,20 5,707 ± 0,074 21
16,80 ±0,20 5,278 ± 0,063 27
18,33 ±0,20 4,839 ±0,053 3
19,17 ±0,20 4,630 ±0,048 22
- 16 040317
20,19 ±0,20 4,399 ± 0,044 23
20,82 ± 0,20 4,266 ±0,041 32
21,14 ±0,20 4,202 ± 0,040 27
21,29 ±0,20 4,173 ±0,039 14
22,01 ± 0,20 4,038 ±0,037 13
22,28 ± 0,20 3,991 ±0,036 23
22,93 ± 0,20 3,879 ±0,034 6
23,35 ± 0,20 3,810 ±0,032 И
24,00 ± 0,20 3,708 ±0,031 14
24,25 ± 0,20 3,670 ±0,030 3
24,88 ± 0,20 3,578 ±0,029 И
25,54 ±0,20 3,488 ± 0,027 9
25,80 ±0,20 3,453 ± 0,027 94
26,97 ± 0,20 3,306 ±0,024 27
27,63 ± 0,20 3,229 ± 0,023 2
28,41 ± 0,20 3,142 ±0,022 7
28,54 ±0,20 3,127 ±0,022 8
29,03 ± 0,20 3,076 ±0,021 3
29,30 ±0,20 3,049 ± 0,020 7
29,63 ± 0,20 3,015 ±0,020 15
Фармацевтические композиции.
В других вариантах реализации этой композиции, настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции, включающей фармацевтически приемлемый наполнитель и кристаллическое свободное основание соединения 1, предпочтительно, содержащее один или более полиморфов формы I, формы II и/или вещества N.
Такие композиции могут быть составлены для различных путей введения. Хотя композиции, подходящие для перорального введения, вероятно, будут использоваться чаще, другие пути введения могут быть использованы, включая внутривенный, внутриартериальный, легочный, ректальный, назальный, вагинальный, лингвальный, внутримышечный, внутрибрюшинный внутрикожный, внутричерепной, подкожный и трансдермальный пути. Подходящие лекарственные формы для введения любого из соединений, описанных в настоящем изобретении, включают таблетки, капсулы, пилюли, порошки, аэрозоли, суппозитории, парентеральные и пероральные жидкости включая суспензии, растворы и эмульсии. Можно также применять лекарственные формы с замедленным высвобождением, например, в форме трансдермального пластыря. Все лекарственные формы могут быть получены с использованием способов, которые являются стандартными в данной области техники (см., например, Remington's Pharmaceutical Sciences, 16th ed., A. Oslo editor, Easton Pa. 1980).
Фармацевтически приемлемые наполнители являются нетоксичными, облегчают введение и не оказывают отрицательного влияния на терапевтическую пользу соединения по настоящему изобретению. Такие наполнители могут быть любыми: твердыми, жидкими, полутвердыми или, в случае аэрозольной композиции, газообразным наполнителем, который является общедоступным специалисту в данной области техники. Фармацевтические композиции в соответствии с настоящим изобретением получают при помощи традиционных средств с использованием способов, известных из уровня техники.
Композиции, раскрытые в настоящем изобретении, можно применять в сочетании с каким-либо из носителей и наполнителей, обычно применяемых в фармацевтических препаратах, например, тальком, гуммиарабиком, лактозой, крахмалом, стеаратом магния, маслом какао, водными или неводными растворителями, маслами, производными парафина, гликолями и т. д. К препаратам, в частности к препаратам для перорального введения, также можно добавлять красители и ароматизаторы. Растворы могут быть получены с использованием воды или физиологически совместимых органических растворителей, таких как этанол, 1,2-пропиленгликоль, полигликоли, диметилсульфоксид, жирные спирты, триглицериды, частичные эфиры глицерина и т.п.
Твердые фармацевтические наполнители включают крахмал, целлюлозу, гидроксипропилцеллюлозу, тальк, глюкозу, лактозу, сахарозу, желатин, солод, рис, муку, мел, силикагель, стеарат магния, стеарат натрия, глицеролмоностеарат, хлорид натрия, сухое обезжиренное молоко и т. п. Жидкие и полужидкие наполнители могут быть выбраны из глицерина, пропиленгликоля, воды, этанола и различных масел, в том числе масел нефтяного, животного, растительного или синтетического происхождения, например, арахисового масла, соевого масла, минерального масла, кунжутного масла и т. д. В определенных вариантах реализации изобретения композиции, предусмотренные в настоящем изобретении, содержат один или более из α-токоферола, гуммиарабика и/или гидроксипропилцеллюлозы.
- 17 040317
В одном варианте реализации настоящее изобретение предусматривает составы с замедленным высвобождением, такие как депонированные лекарственные средства или пластыри, содержащие эффективное количество соединения, представленного в настоящем изобретении. В другом варианте реализации пластырь дополнительно содержит гуммиарабик или гидроксипропилцеллюлозу отдельно или в комбинации в присутствии альфа-токоферола. Предпочтительно, гидроксипропилцеллюлоза имеет среднюю молекулярную массу от 10000 до 100000. В более предпочтительном варианте реализации изобретения, гидроксипропилцеллюлоза имеет среднюю молекулярную массу от 5000 до 50000.
Соединения и фармацевтические композиции по настоящему изобретению можно применять отдельно или в комбинации с другими соединениями. При введении с другим средством совместное введение может осуществляться любым образом, при котором фармакологические эффекты обоих средств проявляются у пациента в одно и то же время. Таким образом, совместное введение не требует, чтобы для введения как соединения по настоящему изобретению, так и другого средства использовали одну фармацевтическую композицию, ту же лекарственную форму или даже тот же путь введения, или чтобы два средства вводились точно в одно и то же время.
Однако, по существу, совместное введение будет наиболее удобным при одновременном использовании той же лекарственной формы и того же способа введения. Очевидно, такое введение, преимущественно, происходит при помощи доставки обоих активных ингредиентов одновременно в новой фармацевтической композиции в соответствии с настоящим изобретением.
Способы подготовки и лечения.
Десольваты.
В другом аспекте настоящее изобретение относится к способу получения кристаллического десольвата свободного основания соединения 1. В одном варианте реализации изобретения, представленного в настоящем изобретении, предлагается способ получения кристаллического свободного основания соединения 1, включающий суспендирование или контактирование HCl соли соединения 1 с водой и диссоциацию HCl с целью получения свободного основания соединения 1. В одном варианте реализации изобретения подготовленный кристаллический десольват свободного основания соединения 1 включает одну или более из формы I, формы II и вещества N.
В еще одном из вариантов реализации этого способа представлены способы увеличения сродства гемоглобина S к кислороду у субъекта, причем способ включает введение субъекту, нуждающемуся в этом, терапевтически эффективного количества кристаллического свободного основания соединения 1. В некоторых вариантах реализации изобретения кристаллическое свободное основание соединения 1 является десольватом. В одном варианте реализации изобретения кристаллическое свободное основание соединения 1 включает одну или более из формы I, формы II и вещества N.
В еще одном из вариантов реализации этого способа представлены способы для лечения кислородной недостаточности, связанной с серповидноклеточной анемией у субъекта, причем способ включает введение субъекту, нуждающемуся в этом, терапевтически эффективного количества кристаллического свободного основания соединения 1. В некоторых вариантах реализации изобретения кристаллическое свободное основание соединения 1 является десольватом. В одном варианте реализации изобретения кристаллическое свободное основание соединения 1 включает одну или более из формы I, формы II и вещества N.
В дополнительных аспектах настоящего изобретения представлен способ для лечения заболевания серповидноклеточной анемии, причем способ включает введение субъекту, нуждающемуся в этом, терапевтически эффективного количества кристаллического свободного основания соединения 1. В некоторых вариантах реализации изобретения кристаллическое свободное основание соединения 1 является десольватом. В одном варианте реализации изобретения кристаллическое свободное основание соединения 1 включает одну или более из формы I, формы II и вещества N. В дополнительных аспектах настоящего изобретения предоставляется способ лечения рака, легочного расстройства, инсульта, боязни высоты, язвы, пролежней, болезни Альцгеймера, синдрома острого респираторного заболевания и ран, при этом, способ включает введение субъекту, нуждающемуся в этом, терапевтически эффективного количества кристаллического свободного основания соединения 1. В некоторых вариантах реализации изобретения кристаллическое свободное основание соединения 1 является десольватом. В одном варианте реализации изобретения кристаллическое свободное основание соединения 1 включает одну или более из формы I, формы II и вещества N.
Во всех случаях такого лечения дозировка кристаллического свободного основания соединения 1 для пациента, проходящего лечение, уже раскрыто в данной области техники.
Сольваты.
В другом аспекте настоящее изобретение относится к способу получения кристаллического сольвата свободного основания соединения 1. В некоторых вариантах реализации изобретения десольват свободного основания соединения 1, описанный в настоящем изобретении, (например, полученный путем суспендирования HCl соли соединения 1 в воде) вступает в контакт с растворителем, как это предусмотрено в настоящем изобретении, включая смеси растворителей для приготовления сольвата, растворитель или смесь растворителей. Таким образом, в качестве растворителя может быть один растворитель, или по
- 18 040317 существу один растворитель, или смесь растворителей. При использовании смеси растворителей сольват может быть получен при наличии одного или более отдельных составляющих смеси растворителей. В некоторых вариантах реализации изобретения растворитель включает спиртовые растворители, такие как моно-, ди- или более спирты или алканолы. В некоторых вариантах реализации изобретения растворитель включает хлорированные растворители, такие как дихлорметан, хлороформ и так далее. В некоторых вариантах реализации изобретения растворитель включает кетоновые растворители, такие как алканоны и циклоалканоны. Некоторые растворители включают, без ограничения, метанол, этанол, 2пропанол, 2-метил-1-пропанол, 1-бутанол, ацетонитрил, ацетон, дихлорметан, диоксан, тетрагидрофуран или их комбинации, необязательно включающие воду.
В еще одном из вариантов реализации этого способа представлен способ увеличения сродства гемоглобина S к кислороду у субъекта, причем способ включает введение субъекту, нуждающемуся в этом, терапевтически эффективного количества кристаллического сольвата соединения 1.
В еще одном из вариантов реализации этого способа представлен способ для лечения кислородной недостаточности, связанной с серповидноклеточной анемией, причем способ включает введение субъекту, нуждающемуся в этом, терапевтически эффективного количества кристаллического сольвата соединения 1.
Примеры
Следующие примеры описывают получение, характеристику и свойства десольвата формы I свободного основания соединения 1. Если не указано иное, все значения температур указаны в градусах Цельсия (°С), а нижеупомянутые аббревиатуры имеют следующие значения:
DSC - дифференциальная сканирующая калориметрия;
DVS - динамическая сорбция паров;
HPLC - высокоэффективная жидкостная хроматография;
NA - не применимо;
ND - не определялось;
Q - процент растворенного в единицу времени;
RH - относительная влажность;
RSD - остаточное стандартное отклонение;
RRT - относительное время удерживания;
SS-ЯМР - твердотельный ядерный магнитный резонанс;
TGA - термогравиметрический анализ;
TG-IR - термогравиметрический инфракрасный анализ;
XRPD - порошковая рентгеновская дифракция;
VT-XRPD - порошковая рентгеновская дифракция при переменной температуре.
Пути для получения синтетического соединения 1.
Соединение формулы (I) было синтезировано согласно схематическому описанию ниже и затем процедура была тщательно отработана.
R WtDA RBuUSW,24-10Х
1 u 0‘С 83%
Orgl нН 14{10) 2516-2519 201?
NaH
ОН
ОМОМ
2
ИЛИ
84%
R TMEDA RBuli S Ме(СН2ИМек.т’-10 С
-10 С 24 -10'0 -Ю’С С
0‘С 1 Ч ОХ
R НС) S Н2О
Bull. DMF
ОМОМ
Пример 1: синтез соединения 15
К раствору 2-бромбензола-1,3-диола (5 г, 26,45 ммоль) в DCM (50 мл) при температуре 0°С добавляли DIPEA (11,54 мл, 66,13 ммоль) и MOMCl (4,42 мл, 58,19 ммоль). Смесь перемешивали при температуре 0°С в течение 1,5 ч, а затем нагревали до комнатной температуры. Раствор разбавляли DCM, про- 19 040317 мывали насыщ. NaHCO3, насыщенным солевым раствором, высушивали и концентрировали для получения неочищенного продукта, который очищали с помощью колонки (гексан/EtOAc=4:1) с целью получения 15,58 г (90%) целевого продукта.
Пример 2: синтез соединения 13 из 15 омом омом /ЛуBr BuLi, DMF 0уСНО ^^ОМОМ -78 to 0 °C ^ТЭМОМ ало/, 13
К раствору 2-бром-1,3-бис-(метоксиметокси)бензола (15) (19,9 г, 71,8 ммоль) в THF (150 мл) при температуре -78°С добавляли по каплям BuLi (2,5 М, 31,6 мл, 79,0 ммоль). Раствор перемешивали при температуре -78°С в течение 25 мин (получая белую мутную смесь), затем ее нагревали до 0°С и перемешивали в течение 25 мин. Реакционная смесь медленно становится однородной. К раствору добавляли DMF при температуре 0°С. Через 25 мин HPLC показала завершение реакции. Смесь гасили насыщ. NH4Cl (150 мл), разбавляли эфиром (300 мл). Органический слой отделяли, водный слой дополнительно экстрагировали эфиром (2x200 мл) и объединяли с органическим слоем, промывали насыщенным солевым раствором, высушивали и концентрировали с целью получения неочищенного продукта, который растирали для получения 14,6 г желаемого продукта. Затем фильтрат концентрировали и очищали на колонке с целью дополнительного получения 0,7 г, таким образом, суммарная масса составляла 15,3 г.
Пример 3: синтез соединения 13 из резорцина 11
он А . NaH MOMCI омом 1.1 R.TMEDA, R:BuLi, S:THF, 2h, -10’C 1.2 1 h, 0”C; 83% OrgLett 14(10), 2516-2519; 2012 ИЛИ ОМОМ A CHO
эфир/DMF 93% Υί^ΟΜΟΜ 1,1 R:TMEDA, R:BuLi, S:Me{CH2)4Me.K.T? -10X 1 Λ ОМОМ
4 4 1.2 -10X; 2 4f-lO°C;-10°C?aX
11 12 1.3 0C; 1ч,0’С 13
1.4 R:HCI, S:H2O
84%
Journal of Organic Chemistry. 74(11), 4311-4317: 2009
В трехгорлую круглодонную колбу, снабженную механической мешалкой, помещали 0,22 моль NaH (50% суспензия в минеральном масле) в атмосфере азота. NaH промывали 2-мя порциями (100 мл) н-гексана и затем 300 мл сухого диэтилового эфира; затем добавляли 80 мл безводного DMF. Затем 0,09 моль резорцина 11, растворенного в 100 мл диэтилового эфира, добавляли по каплям и оставляли смесь при перемешивании при комнатной температуре на 30 мин. Затем медленно добавляли 0,18 моль MOMCl. Через 1 ч при перемешивании при комнатной температуре добавляли 250 мл воды и экстрагировали органический слой диэтиловым эфиром. Полученные экстракты промывали насыщенным солевым раствором, высушивали (Na2SO4), затем концентрировали с целью получения неочищенного продукта, который очищали путем хроматографии на силикагеле для получения соединения 12 (выход 93%).
В трехгорлую круглодонную колбу помещали 110 мл н-гексана, 0,79 моль BuLi и 9,4 мл тетраметилэтилендиамина (TMEDA) в атмосфере азота. Смесь охлаждали при температуре -10°С и медленно добавляли 0,079 моль бис-фенилового эфира 12. Полученную смесь оставляли при перемешивании на магнитной мешалке при температуре -10°С в течение 2 ч. Затем температуру повышали до 0°С и добавляли 0,067 моль DMF по каплям. Через 1 ч водный HCl добавляли до момента, пока рН не становился кислым; затем смесь экстрагировали этиловым эфиром. Объединенные экстракты промывали солевым раствором, высушивали (Na2SO4) и концентрировали с целью получения альдегида 13 (84%).
2,6-бис-(Метоксиметокси)бензальдегид (13): т.пл. 58-59°С (н-гексан); IR (KBr) n: 1685 (С=О) см-1;
1Н-ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 3,51 (s, 6H, 2 OCH3), 5,28 (s, 4H, 2 ОСН2О), 6,84 (d, 2H, J=8,40 Гц, Н-3, Н-5), 7,41 (t, 1H, J=8,40 Гц, Н-4), 10,55 (s, 1H, СНО);
MS, m/e (относительная интенсивность) 226 (М+, 3), 180 (4), 164 (14), 122 (2), 92 (2), 45 (100); аналитический элементный анализ для С11Н14О5: C, 58.40; H, 6.24. Найдено: С, 57.98; Н, 6.20. Пример 4: синтез соединения 16 омом он
81% 1Ь
К раствору 2,6-бис-(метоксиметокси)бензальдегида (13) (15,3 г, 67,6 ммоль) в THF (105 мл) (растворитель продували N2) добавляли конц. HCl (12N, 7 мл) в атмосфере N2, затем дополнительно перемешивали в атмосфере N2 в течение 1,5 ч. К раствору добавляли соляной раствор (100 мл) и эфир (150 мл). Органический слой отделяли и водный слой дополнительно экстрагировали эфиром (2x200 мл). Органический слой объединяли, промывали солевым раствором, высушивали и концентрировали с целью получения неочищенного продукта, который очищали с помощью колонки (300 г, гексан/EtOAc=85:15) для получения целевого продукта 16 (9,9 г) в виде желтой жидкости.
- 20 040317
Пример 5: синтез соединения 17
К раствору 2-гидрокси-6-(метоксиметокси)бензальдегида (16) (10,88 г, 59,72 ммоль) в DMF (120 мл) (раствор DMF продували N2 в течение 10 мин) добавляли K2CO3 (32,05 г, 231,92 ммоль) и 3-(хлорметил)2-(1-изопропил-1H-пиразол-5-ил)пиридина гидрохлорид (10) (15,78 г, 57,98 ммоль). Смесь нагревали при 65°С в течение 1,5 ч, охлаждали до комнатной температуры, вливали в ледяную воду (800 мл). Осажденное твердое вещество отделяли фильтрованием, мого продукта 17 (18 г).
Пример 6: синтез соединения (I) высушивали и концентрировали для получения желае-
К раствору 2-((2-( 1 -изопропил-1 Н-пиразол-5 -ил)пиридин-3 -ил)метокси)-6-(метоксиметокси)бензальдегида (17) (18 г, 47,19 ммоль) в THF (135 мл, раствор продували N2) добавляли конц. HCl (12 н, 20 мл). Раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч до момента, когда HPLC показала, что реакция завершена. Смесь добавляли к раствору NaHCO3 (15 г) в воде (1,2 л) и полученный в результате осадок собирали фильтрованием, высушивали для получения неочищенного твердого вещества, которое дополнительно очищали с помощью колонки (DCM/EtOAc=60:40) для получения чистого продукта (15,3 г).
Пример 7: синтез соединения I (свободного основания) и его соли HCl.
Свободное основание соединения (I) (40 г) получали из смеси промежуточного спиртового соединения 7 и 2,6-дигидроксибензальдегида 9 в условиях реакции Мицунобу. Процедура также приведена ниже
Пример 8: синтез соединения (I) в условиях реакции Мицунобу.
В трехгорлую круглодонную колбу на 2000 мл, которую продували и в которой поддерживали наличие инертной атмосферы азота, помещали раствор [2-[1-(пропан-2-ил)-1Н-пиразол-5-ил]пиридин-3ил]метанола (7) (70 г, 322,18 ммоль, 1,00 экв.) в тетрагидрофуране (1000 мл). 2,6Дигидроксибензальдегид (9) (49,2 г, 356,21 ммоль, 1,10 экв.) и PPh3 (101 г, 385,07 ммоль, 1,20 экв.) добавляли в реакционную смесь. Затем следовало добавление раствора DIAD (78,1 г, 386,23 ммоль, 1,20 экв.) в тетрагидрофуране (200 мл) по каплям при перемешивании. Полученный в результате раствор перемешивали на протяжении ночи при комнатной температуре. Полученный раствор разбавляли добавлением 500 мл H2O. Полученный раствор экстрагировали 3x500 мл дихлорметаном и объединенные органические слои высушивали над сульфатом натрия и концентрировали под вакуумом. Остаток наносили на колонку с силикагелем с ЕА:РЕ (1:50-1:3) в качестве элюента для получения неочищенного продукта. Неочищенный продукт перекристаллизовывали из изопропанол/H2O в соотношении 1/1,5. Это приводило к получению 40 г (37%) 2-гидрокси-6-([2-[1-(пропан-2-ил)-1H-пиразол-5-ил]пиридин-3-ил]метокси)бензальдегида в виде светло-желтого твердого вещества. Соединение проявляло температуру плавления 80-82°С. MS (ES, масса/заряд): 338,1 [М+1].
1H ЯМР (300 МГц, DMSO-d6) δ 11,72 (s, 1H), 10,21 (s, 1H), 8,76 (d, J=3,6 Гц, 1H), 8,24 (d, J=2,7 Гц, 1H),7,55 (m, 3Н), 6,55 (m, 3Н), 5,21 (s, 2Н), 4,65 (m, 1H), 1,37 (d, J=5,1 Гц, 6Н).
1H ЯМР (400 МГц, CDCl) δ 11,96 (s, 1H), 10,40 (s, 1H), 8,77 (dd, J=4,8, 1,5 Гц, 1H), 8,00 (d, J=7,8 Гц,
1H), 7,63 (d, J=1,8 Гц, 1H), 7,49-7,34 (m, 2H), 6,59 (d, J=8,5 Гц, 1H), 6,37 (d, J=1,8 Гц, 1H), 6,29 (d, J=8,2 Гц,
1H), 5,10 (s, 2Н), 4,67 (sep, J=6,7 Гц, 1H), 1,50 (d, J=6,6 Гц, 6Н).
При использовании другого подхода, несколько партий свободного основания соединения (I) получают в мультиграммовых количествах (20 г). Преимуществом этого пути получения является использование монозащищенного 2,6-дигидроксибензальдегида (16), который эффективно исключает возможность бис-алкилирования побочного продукта. Моно-МОМ простой эфир 2,6-дигидроксибензальдегида (16) может быть получен из двух стартовых точек, броморесорцинола (14) или резорцина (11) [при по- 21 040317 мощи процедур, описанных в Journal of Organic Chemistry 74 (11), 4311-4317; 2009]. Все стадии и процедуры приведены ниже. В связи с наличием фенольной альдегидной группы, меры предосторожности (т.е.
выполнение всех реакции в атмосфере инертного газа, например азота) должны быть соблюдены во избежание окисления фенола и/или альдегидной группы.
Получение соли HCl соединения I: раствор соединения I (55,79 г, 165,55 ммоль) в ацетонитриле (275 мл) продували азотом в течение 10 мин, а затем к этому раствору добавляли 3N водный раствор HCl (62 мл) при комнатной температуре. Смесь перемешивали в течение дополнительных 10 мин, после добавления, большую часть ацетонитрила (200 мл) удаляли выпариванием на роторном испарителе при температуре примерно 32°С, оставшийся раствор замораживали при охлаждении на бане с сухим льдом и ацетоном и лиофилизовали для получения HCl соли соединения I (59,4 г).
Пример 9: характеристика соли HCl соединения 1.
Технология Подробная информация Результат
XRPD проиндексировано соль НС1 Соединения 1
Микроскопический анализ - бледно-желтые твердые, тонкие диски/таблетки, двулучепреломляющие
Ή ямр DMSO-d6 соответствует нужной структуре, <0,01 моль МЕК
XRPD - соль НС1 Соединения 1
DVS - 0,03% прирост при уравновешивании на 5% RH 0,10% прирост при RH от 5 до 95% 0,09% потеря при RH от 95 до 5%
после XRPD HCl I + Форма I Свободного Основания
Пример 10: физическая стабильность соли HCl соединения 1 при контакте с водой.
Состояние Время (все временные показатели являются приблизительными) Наблюдение Результат XRPD
контакт с водой - формирование слоя после 5 мин -
Водная суспензия примерно 5 мин Плавающие твердые частицы преобразовались в белые твердые частицы при изолировании Свободное основание (FB)I (проиндексированное)
высушенное под вакуумом примерно 1 день пребывание в прежнем состоянии FB I
Водная суспензия примерно 6 дней белые, тонкие диски, двулучепреломляющие FB I + FB II
(В)
Пример 11: физическая стабильность соли HCl соединения 1 при измельчении.
Состояние Время Наблюдение Результат XRPD
измельчение, высушивание 30 мин от белесого до бледно-желтого HCl I
измельчения, увлажнение 30 мин от белесой до бледно-желтой пасты HC1I + FB I
- 22 040317
Пример 12: физическая стабильность соли HCl соединения 1 при воздействии высоких температур и/или вакуума.
Состояние Время Наблюдение Результат XRPD
комнатная температура, вакуум 6 дней бледно-желтые, диски/пластины, В HC1I + FB I
30°С 6 часов бледно-желтые, диски/пластины, В НС11
12 часов бледно-желтые, диски/пластины, В HC1I + FB I
24 часа бледно-желтые, диски/пластины, В HC1I + FB I
40°С 6 часов бледно-желтые, диски/пластины, В HC1I + FB I
12 часов бледно-желтые, диски/пластины, В HC1I + FB I
24 часа бледно-желтые, диски/пластины, В HC1I + FB I
40°С, вакуум 6 часов бледно-желтые, диски/пластины, В HCl I + FB I
12 часов бледно-желтые, диски/пластины, В HCl I + FB I
24 часа бледно-желтые, диски/пластины, В HC1I + FB I
60°С 6 дней бледно-желтые, диски, В HC1I + FB I
60°С, вакуум 6 дней бледно-желтые, диски, В; HCl I + FB I + другая форма
нерегулярный осадок свободного основания
от 100 до 125°С 20 мин pH индикаторной бумаги, расположенной выше образца, указывает на наличие кислотных летучих веществ HCl I + FB I + другая форма свободного основания
Пример 13: получение свободного основания соединения 1 при помощи диспропорционирования соли HCl соединения 1 в воде (исходное вещество является HCl солью соединения 1).
Способ Наблюдение Результат XRPD
1. контакт с водой 2. обработка ультразвуком 3. фильтрование и промывка водой 4. высушивание в атмосфере N2 в течение 10 минут 5. вакуум при комнатной температуре в течение ночи 1. бледно-желтые, плохо смачиваемые 2. белые 3. - 4. - 5. - FBI
1. контакт с водой 2. обработка ультразвуком в течении 5 минут 3. суспендирование в течении 10 минут 4. фильтрование и промывка водой 5. высушивание в атмосфере N2 в течение 10 минут 6. вакуум при комнатной температуре в течение ночи 7. хранение в морозильной камере 1. - 2. бледно-желтые, преобразовались в белые 3. - 4. - 5. белые 6. - 7. - FB I + другая форма свободного основания
1. суспендирование в воде, комнатная температура, 8 дней; в качестве затравки использовали FB II 2. фильтрование и промывка водой 3. вакуум при комнатной 1. густая белая суспензия 2. - 3. - FB II
- 23 040317
температуре в течение ночи
2. навеска суспензии 3. промывка водой 2. - 3. - FB II (проиндексированная)
Пример 14: характеристика формы I свободного основания соединения 1.
Технология Подробная информация Результат
XRPD проиндексировано Форма I Свободного Основания
XRPD - Форма I свободного основания
TGA от 25 до 350°С 0,2% потери веса при температуре до 100°С
DSC от 25 до 350°С эндотермическое событие, которое наступает при температуре примерно 97°С
Микроскопия в горячем состоянии 22,7°С вид изначального продукта, мелко измельченный, двулучепреломляющий
91,2°С увеличение размера частиц и двулучепреломления
94,2°С увеличение размера частиц и двулучепреломления
95,7°С начальная стадия плавления, более крупные частицы в сравнении с первоначальным нагреванием
96,1 °C продолжение плавления
96,3°С завершение плавления, отсутствие кристаллизации при плавлении
68,7°С свежая подготовка, больший коэффициент увеличения
91,1°С увеличение двулучепреломления
94,8°С начальная стадия плавления, более крупные частицы, двулучепреломление
95,4°С продолжение плавления
95,9°С остаются только несколько кристаллов, охлажденных до 92,6°С
92,6°С выдерживают в течение периода от 2 до 3 минут роста кристаллов до более крупных дисков, - начало нагрева
96,3°С завершение плавления
Ή ЯМР DMSO-d6 соответствует структуре
DVS - 0,02% потеря при уравновешивании при RH 5% 0,22% прирост при RH от 5 до 95% 0,22% потеря при RH от 95 до 5%
после XRPD Форма I свободного основания + другое вещество свободного основания
Пример 15: характеристика формы II свободного основания соединения 1.
Технология Подробная информация Результат
XRPD проиндексировано Форма II свободного основания
XRPD изначально Форма II свободного основания
после 7 дней Форма II свободного основания
TGA от 25 до 350°С 0,1% потери веса при температуре до 100°С
DSC от 25 до 350°С эндотермическое событие, которое наступает при температуре примерно 97°С
Ή ЯМР DMSO-d6 соответствует структуре
- 24 040317
Пример 16: характеристика вещества N свободного основания соединения 1.
Технология Подробная информация Результат
XRPD - Вещество N свободного основания
TGA от 25 до 350°С 0,2% потери веса при температуре до 100°С
DSC от 25 до350°С эндотермическое событие, которое наступает при температуре примерно 94°С
'Н ЯМР DMSO-d6 соответствует структуре, никакой остаточной реакции растворителя не наблюдалось
Пример 17: конкурентное взаимопревращение суспензий между формами I и II свободного основания.
Состояние Растворитель Наблюдение Результат XRPD
6°С, 6 дней вода белый FBII
6°С, 6 дней гептан белый FB II
6°С, 6 дней ГРЕ слабый бледно-желтый FBN
комнатная температура, 6 дней вода белый FB ГГ
комнатная температура, 6 дней гептан белесый FB ГГ
комнатная температура, 6 дней ГРЕ бледно-желтый FBN
комнатная температура, 6 дней толуол бледно-желтый FBN
57°С, 2 дня вода мелко измельченный, белесый, В FB ГГ + FB Г
57°С, в течение ночи гептан диски и таблетки, В FB ГГ
57°С, в течение ночи ГРЕ диски, ламинированные, бледно-желтые, В FB ГГ
Пример 18: конкурентное взаимопревращение суспензий между формой II и веществом N.
Состояние
35°C, 3 дня гептан бледно-желтый, мелко измельченный, В FBN
57°С, 3 дня гептан крупные диски и розетки из дисков, В FB П
Пример 19: отдельные экспериментальные методы.
Индексирование: дифрактограммы индексируются с помощью запатентованного программного обеспечения SSCI. Соответствие между разрешенными положениями пиков, отмеченными полосками красного цвета в пределах фигур, и наблюдаемыми пиками указывает на согласованное определение элементарной ячейки. Индексирование и обработка информации о структуре представляют собой вычислительные исследования, которые выполнялись в соответствии с Процедурами для SSCI без соблюдения процедур существующей надлежащей производственной практики (cGMP). Для подтверждения предварительного индексирования необходимо определить молекулярные мотивы укладки в кристаллографических элементарных ячейках. Не было попыток определения молекулярной укладки.
Дифференциальная сканирующая калориметрия (DSC): DSC проводили с использованием дифференциального сканирующего калориметра Q2000 от ТА Instruments. Калибровку температуры проводили с использованием индия, что отслеживалось NIST (Национальным институтом стандартов и технологии). Образец помещали в алюминиевый тигель для DSC, закрывали крышкой и записывали точной вес. Взвешенный тигель, сконфигурированный таким же образом, как и экспериментальный образец, помещали в ячейку, которая использовалась в качестве эталонной. Параметры сбора данных и конфигурация тигля для каждой термограммы отображалась в составе картинки в разделе данных отчета. Способ кодирования термограмм представляет собой аббревиатуру для начальной и конечной температуры, а также скорость нагрева; например -30-250-10 означает интервал температур от -30 до 250°С при повышении температуры на 10°С/мин. Ниже приведены сокращения, используемые в каждом изображении для конфигураций тигля: нулевая температура обжатого тигля (Т0С); крышка не обжата (NC).
Динамическая сорбция паров (DVS): данные динамической сорбции паров (DVS) были получены на
- 25 040317 анализаторе сорбции паров VTI SGA-100. NaCl и PVP были использованы в качестве калибровочных стандартов. Образцы не были высушены перед анализом. Данные по адсорбции и десорбции были получены в диапазоне от 5 до 95% RH с шагом в 10% RH при продувке азотом. Критерий равновесия, используемый для анализа, составлял меньше чем 0,0100% изменения веса в течение 5 мин с максимальным временем уравновешивания 3 ч. Данные не были скорректированы на начальную влажность образцов.
Микроскопия.
Микроскопия в горячем состоянии: микроскопию в горячем состоянии проводили с использованием камеры для горячей микроскопии Linkam (FTIR 600), установленной на микроскоп Leica DM LP, оснащенный цветной цифровой камерой SPOT Insight™. Калибровка температур была выполнена с использованием стандартов точки плавления, соответствующих стандартам USP. Образцы помещали на покровное стекло, а второе покровное стекло помещали сверху образца. При достижении этапа нагрева каждый образец визуально оценивали с использованием объектива 20х с цифровой апертурой 0,40 для работы на большом расстоянии от цели со скрещенными поляризаторами и красным компенсатором первого порядка. Изображения получали с помощью программного обеспечения SPOT (версия 4.5.9).
Микроскопия в поляризованном свете: образцы, полученные в ходе экспериментов, наблюдали с использованием поляризационного микроскопа в режиме перекрестной поляризации для выявления морфологии и двулучепреломления. Образцы наблюдали визуально при 40-кратном увеличении.
1Н ядерный магнитный резонанс раствора (1H ЯМР).
SSCI: образцы готовили для ЯМР-спектроскопии в виде растворов ~5-50 мг в соответствующем дейтерированном растворителе. Специфические полученные параметры перечислены на графике первого полного спектра каждого образца в разделе данных для образцов, обработанных при помощи SSCI.
Решения спектральных данных: для отбора образцов с использованием сервиса для решений спектральных данных (субподрядчика) 1H ЯМР спектры растворов были получены при температуре окружающей среды на спектрометре Varian unityINOVA-400 (1H частота ларморовой прецессии=399,8 МГц). Специфические полученные параметры указаны в спектральном техпаспорте и на каждом графике полученных спектральных данных образца.
Термогравиметрический анализ (TGA).
TG анализ проводили с использованием термогравиметрического анализатора ТА Instruments 2950. Температурную калибровку проводили с использованием никеля и Алюмеля™. Каждый образец помещали в алюминиевый лоток и помещали в печь TG. Печь нагревали в потоке азота. Параметры сбора данных отображались над каждой термограммой в Разделе данных данного отчета. Способ кодирования термограмм представляет собой аббревиатуру для начальной и конечной температуры, а также скорость нагрева; например, 25-350-10 означает интервал температур от 25 до 350°С при повышении температуры на 10°С/мин. Использование 0 в качестве начальной температуры указывает на начало анализа образца от температуры окружающей среды.
Анализ XRPD.
INEL: дифрактограммы были получены с использованием дифрактометра Inel XRG-3000. Падающий луч Cu Κα-излучения был создан с использованием трубки тонкой фокусировки и параболического многослойного зеркала. Перед анализом, кремниевый стандарт (NIST SRM 640d) был проанализирован для подтверждения позиции 111 пика Si. Фрагмент образца был помещен в тонкостенный стеклянный капилляр, а заслонка первичного пучка была использована для минимизации фона от воздуха. Была получена пропускная геометрия дифрактограмм с использованием версии 6.6 программного обеспечения WinDiff и изогнутого позиционно-чувствительного детектора Equinox с диапазоном 2θ 120°. Параметры сбора данных каждой дифрактограммы показаны над картинкой в разделе данных этого отчета.
Измерение дифракции на просвет с использованием дифрактометра PANalytical: дифрактограммы были получены при помощи дифрактометра PANalytical X'Pert PRO MPD использующего падающий луч от излучения Cu, произведенного с помощью источника точной фокусировки Optix long. Эллиптическое многослойное зеркало было использовано для фокусировки Cu Κα рентгеновских лучей через образец и на детектор. Перед анализом кремниевый стандарт (NIST SRM 640d) был проанализирован для подтверждения позиции 111 пика Si. Фрагмент образца был помещен между пленками 3 мкм толщиной и проанализирован по пропускной геометрии. Заслонка первичного пучка, короткое антирассеивающее расширение и антирассеивающая опорная призма были использованы для минимизации фона, созданного воздухом. Щели Соллера для падающих и отраженных лучей были использованы для минимизации расширения от осевого расхождения. Дифрактограммы были получены с помощью сканирующего позиционно-чувствительного детектора (X'Celerator), расположенного на 240 мм от образца, и программного обеспечения для сбора данных, версия 2.2b. Параметры полученных данных для каждой дифрактограммы представлены над изображением в разделе данных этого отчета, включая отклоняющую щель (DS) перед зеркалом и антирассеивающую щель для падающего луча (SS).
Измерение дифракции на отражение с использованием дифрактометра PANalytical: дифрактограммы были получены при помощи дифрактометра PANalytical X'Pert PRO MPD, использующего падающий луч Cu от Κα- излучения, производимый с помощью источника точной фокусировки и никелевого филь- 26 040317 тра. Дифрактометр был настроен с использованием симметричной геометрии Брэгга-Брентано. Перед анализом, кремниевый стандарт (NIST SRM 640d) был проанализирован для подтверждения позиции 111 пика Si в соответствии с положением, сертифицированным NIST. Фрагмент образца был приготовлен в виде тонкого круглого слоя, центрированного на кремниевой подложке с нулевым фоном. Антирассеивающие щели (SS) были использованы для минимизации фона, созданного воздухом. Щели Соллера для падающих и отраженных лучей были использованы для минимизации расширения от осевого расхождения. Дифрактограммы были получены с помощью сканирующего позиционно-чувствительного детектора (X'Celerator), расположенного на 240 мм от образца, и программного обеспечения для сбора данных, версия 2.2b. Параметры полученных данных для каждой дифрактограммы представлены над изображением в разделе данных этого отчета, включая отклоняющую щель (DS) и антирассеивающую щель падающего луча (SS).
Приблизительная растворимость: взвешенный образец обрабатывали аликвотами тестируемого растворителя при комнатной температуре. Смесь обрабатывали ультразвуком между добавлениями для улучшения растворения. Полное растворение испытываемого вещества определяли путем визуального осмотра. Растворимость была рассчитана на основании общего количества используемого растворителя для реализации полного растворения. Затем некоторые образцы нагревали и оценивали визуально на предмет полного растворения. Фактическая растворимость может быть больше, чем определенное значение из-за использования слишком больших аликвот растворителей или из-за медленной скорости растворения. Растворимость выражается как величина меньше чем, если растворение не происходит в течение эксперимента.
Если полное растворение было достигнуто в результате добавления лишь одной аликвоты, то растворимость выражается как больше чем.
Добавления антирастворителя: соединению 1/растворам органических растворителей обеспечивали контакт с растворителями, которые характеризуются плохим растворением или отсутствием растворения в них соединения 1. Эти добавки антирастворителей добавлялись для снижения растворимости систем растворителя и стимулирования кристаллизации.
Охлаждение, медленное охлаждение: растворы готовили в выбранном растворителе или системе растворитель/антирастворитель. Эти растворы охлаждали ниже комнатной температуры в холодильнике в течение различных периодов времени пытаясь вызвать процесс образования соответствующих веществ. Отмечалось наличие или отсутствие твердых частиц. На основании наблюдения твердых частиц в количествах, достаточных для анализа, проводилось выделение веществ. Если присутствовали недостаточные для выделения количества, проводили дальнейшее охлаждение в морозильной камере. Образцы выделяли для анализа в виде влажных или сухих порошков.
Прессование: отдельные образцы спрессовывали с использованием пресс-формы из KBr и гидравлического пресса Carver. К матричному валу была приложена нагрузка в 4,53 т в течение приблизительно 20 мин.
Кристаллизация из раствора: насыщенные растворы были получены при температуре окружающей среды, а затем закупорены. При оценке свободного основания соединения 1 было обнаружено образование кристаллов из этих систем.
Быстрое испарение: в выбранных растворителях были подготовлены растворы и перемешаны между дополнительными аликвотами для способствования растворению. После того как смесь достигала полного растворения, о чем можно судить при визуальном наблюдении, раствор испаряли при температуре окружающей среды в открытом флаконе или при температуре окружающей среды в атмосфере азота. Образовавшиеся твердые вещества выделяли для оценки.
Измельчение: выбранные вещества измельчали с использованием измельчителя Reitch. Материал был загружен в агатовую чашу для измельчения с последующим применением агатового пестика. Затем сосуд помещали на измельчитель и измельчали в течение примерно 30 мин при частоте 1/30 с. Измельчение останавливали примерно каждые 10 мин и вещество удалялось со стенок перед дальнейшим измельчением.
Суспензия: растворы готовили путем добавления достаточного количества твердых веществ к имеющемуся растворителю таким образом, чтобы присутствовал избыток твердых частиц. Затем смесь перемешивали в герметичной пробирке при температуре окружающей среды или при повышенной температуре. По прошествии определенного времени твердые вещества выделяли для анализа.
Стресс воздействия температуры и относительной влажности: выбранные вещества подвергали стрессу при повышенной относительной влажности и/или температуре. Сосуды с относительной влажностью (для получения желаемой относительной влажности использовали насыщенные солевые растворы) были использованы для хранения выбранных образцов. При оценке были использованы следующие сосуды относительной влажности: 75% RH (NaCl) и 60% (NaBr) для исследования влияния влажности. Использовались температуры окружающей среды, 30, 40, 60 и 100-125°С.
Вакуум: выбранные вещества подвергались стрессовому воздействию при пониженном давлении в течение определенного периода времени. Первоначальное стрессовое воздействие проводилось во внутренней вакуумной системе при показаниях абсолютного давления <500 милиторр, как правило, от 30 до
- 27 040317 милиторр (0,030 до 0,05 мм рт.ст.). Дополнительное стрессовое воздействие проводилось при 48 мм рт.ст. используя портативный лабораторный вакуумный насос и пускатель для имитации условий, подобных тем, которые ожидаются в процессе.
Пример 20: диспропорционирование соли HCl.
Диспропорционирование соли HCl в воде было использовано для получения свободного основания. В первую очередь происходит образование формы I свободного основания. Увеличение времени нахождения в суспензии запускает превращение в более термодинамически стабильную по отношению к форме I фазу - форму II свободного основания.
Были определены три безводных вещества свободного основания; формы I, II и вещество N свободного основания. Вещество N свободного основания, по-видимому, является наиболее стабильной формой, по отношению к формам I и II, при комнатной температуре. Вещество N свободного основания энантиотропно по отношению к форме II и будет обратимо преобразовываться при определенной температуре перехода (по оценкам согласно настоящей заявке при температуре примерно 40-42°С). Выше температуры перехода, форма II свободного основания, по-видимому, является наиболее стабильной формой по отношению к форме I и веществу N.
Соль HCl (названная форма I HCl) подвергалась воздействию различных стрессовых условий и контролировалась при помощи XRPD для оценки физической стабильности. Как уже обсуждалось, диспропорционирование происходило во время проведения эксперимента по DVS соли HCl, указывающего на наличие нестабильности при воздействии повышенной влажности. Диспропорционирование далее наблюдалось с использованием мокрого измельчения или в непосредственном контакте с водой (например, суспензии), как следует из присутствия форм I или II свободного основания, определенных при помощи XRPD. Испарение и потеря HCl при нагревании и/или условиях вакуума представлены наличием формы I свободного основания, определенной при помощи XRPD и указывающей на нестабильность при этих условиях.
Контакт с водой приводил к визуальному изменению цвета вещества от бледно-желтого до белого; физические изменения также наблюдались под микроскопом. Происходит незамедлительное диспропорционирование. Полученное из водной суспензии вещество было определено при помощи XRPD анализа (~ 5 мин) как форма I свободного основания. Также определение формы II свободного основания становится возможным, если время пребывания в суспензии увеличивается.
Выпаривание HCl наблюдалось в течение нескольких часов при выдерживании в условиях высушивания. Преобразование в форму I свободного основания наблюдалось при помощи XRPD при 30°С (после 12 ч), при 40°С (после 6 ч) и при 40°С/48 мм рт.ст. (после 6 ч).
Определение вещества С свободного основания становится возможным в более экстремальных условиях, связанных с повышенными температурами. Нагревание формы I HCl до 125°С вызывает потерю кислотных летучих веществ (визуально оцененных с использованием рН индикаторной бумаги помещенной над образцом). При помощи XRPD анализа полученный образец определяется как смесь формы I HCl, формы I свободного основания и вещества С свободного основания. Выдерживание соли HCl при температуре до 60°С под вакуумом в течение 6 дней обеспечивает такой же результат. Природа вещества С не определена.
Было показано, что соль HCl незамедлительно диспропорционирует при контакте с водой. Это явление было использовано для получения свободного основания. В первую очередь происходит образование формы I свободного основания. Увеличение времени нахождения в суспензии запускает превращение в более термодинамически стабильную по отношению к форме I фазу - форму II свободного основания.
Ампулу на 20 мл нагружали 266,4 мг формы I HCl и обеспечивали контакт с 10 мл воды. Образец обрабатывали ультразвуком до тех пор, пока бледно-желтый материал не изменял цвет на белый. Полученные твердые вещества собирали путем фильтрации (удаление воды) и промывали 10 мл воды. Образец продували азотом в течение приблизительно 10 мин перед тем, как поместить под вакуум на ночь для высушивания при температуре окружающей среды. Полученное вещество анализировали при помощи XRPD и было установлено, что это вещество представляет собой форму I свободного основания.
Коническую колбу Эрленмейерана на 250 мл нагружали 6,0250 г формы I HCl и обеспечивали контакт с 220 мл воды. Образец обрабатывали ультразвуком в течение примерно 5 мин, чтобы диспергировать вещество. Желтое вещество изменило цвет на белый при обработке ультразвуком. При помощи магнита для перемешивания пробу перемешивали при 700 об/мин в течение приблизительно 10 мин. Твердые вещества собирали фильтрованием и промывали 220 мл воды, затем следовала продувка азотом над образцом в течение приблизительно 10 мин перед воздействием вакуума при температуре окружающей среды. Образец высушивали при таких условиях в течение приблизительно 24 ч, получая при этом 5,1834 г вещества. Полученный материал был проанализирован при помощи XRPD и идентифицирован как смесь формы I свободного основания и вещества D свободного основания (природа вещества D не установлена).
Процедура, использованная для получения формы II свободного основания, описана ниже.
Ампулу на 20 мл нагружали 477,5 мг формы I HCl номер 20 и обеспечивали контакт с 20 мл воды.
- 28 040317
Образец обрабатывали ультразвуком до тех пор, пока бледно-желтый материал не изменял цвет на белый. Небольшое количество образца (смесь формы I и II свободного основания) было добавлено в качестве затравки. При помощи магнита для перемешивания пробу перемешивали при 200 об/мин в течение 8 дней. Полученные твердые вещества собирали путем фильтрации (удаление воды) и промывали 15 мл воды. Образец экспонировали под вакуумом при температуре окружающей среды в течение ночи для высушивания. Полученное вещество анализировали при помощи XRPD, и было установлено, что вещество являлось формой II свободного основания.
Пример 21: дополнительные процедуры по получению формы I, формы II и формы N свободного основания.
Превращение свободного основания соединения 1 в соль HCl.
Основная процедура: медленно добавить концентрированную HCl (1,5 экв.) в раствор свободного основания соединения 1 в MEK (5 объемов). Охладить полученную суспензию до 0-5°С в течение 1 ч и профильтровать. Промыть твердое вещество MEK (1 объем). Высушить под вакуумом при температуре 30-35°С.
Процедура получения А: следуя основной процедуре, описанной выше, 35 г необработанного соединения 1 было обработано с целью получения соли HCl в виде бледно-желтого твердого вещества (32,4 г, выход 82, 99,8% чистоты по данным HPLC).
Получение формы I свободного основания из соли HCl соединения 1.
Основная процедура: энергично перемешивают суспензию соли HCl соединения 1 в DIW (10 объемов) в течение периода времени от 5 мин до 2 ч. Фильтруют суспензию, промывают DIW (2x1 объем), сушат на воронке, затем дополнительно сушат под вакуумом при температуре 30-35°С.
Процедура получения А: следуя основной процедуре, описанной выше, после перемешивания в течение 1 ч, 32 г соли HCl соединения 1 было обработано с целью получения свободного основания в виде бледно-желтого твердого вещества (27,3 г, выход 95, 99,8 чистоты по данным HPLC, DSC идентифицировала форму I).
Процедура получения В: следуя основной процедуре, описанной выше, после перемешивания в течение 1 ч, 39 г соли HCl соединения 1 было обработано с целью получения свободного основания в виде бледно-желтого твердого вещества (31,8 г, выход 90%, >99,9% чистоты по данным HPLC).
Процедура получения С: таким образом, соль HCl соединения 1 (134 г) энергично перемешивали в воде (10 объемов) до тех пор, пока вещество не приобрело вид мелкодисперсной белой суспензии. После фильтрования и высушивания, было получено кристаллическое вещество белого цвета (116 г, 96% выход, >99,9% чистоты по данным HPLC).
Процедура получения D: целью этого эксперимента было получение свободного основание из гидрохлорида соединения 1. Таким образом, соль HCl соединения 1 (65,3 г) энергично перемешивали в воде (10 объемов) до тех пор, пока вещество не приобрело вид мелкодисперсной белой суспензии. После фильтрования и высушивания, было получено кристаллическое вещество белого цвета (57,5 г, 97,6% выход, >99,9% чистоты по данным HPLC).
Получение GBT000440 формы II свободного основания из GBT000440 формы I свободного основания.
Основная процедура: суспензию свободного основания соединения 1 формы I перемешивают в соответствующем растворителе (например, гептане или воде) (10 объемов) в течение 1-7 дней. Суспензию фильтруют, промывают DIW (2x1 объему), высушивают на воронке, затем дополнительно просушивают под вакуумом при температуре 30-35°С.
Процедура получения А: таким образом, форму I свободного основания соединения 1 (114 г) перемешивают в n-гептане (10 объемов) при температуре 35°С. По прошествии 4 дней при помощи XRPD была выявлена форма II. Суспензию фильтровали и высушивали с получением 110 г белесого твердого вещества.
Процедура получения В: свободное основание соединения 1 (5 г) суспендировали в гептане (10 объемов, 50 мл) при комнатной температуре. По прошествии 4 дней суспензию фильтровали с получением белесого твердого вещества.
Процедура получения С: свободное основание соединения 1 (5,8 кг) суспендировали в гептане (10 объемов) при комнатной температуре. По прошествии 2 дней суспензию фильтровали и промывали 2x2 объемами n-гептана с получением 4,745 кг формы II в виде белесого твердого вещества.
Процедура получения D: свободное основание соединения 1 (5 г) суспендировали в воде. По прошествии 4 дней суспензию фильтровали с получением белесого твердого вещества.
Получение GBT000440 формы N свободного основания из GBT000440 формы I или II свободного основания.
Основная процедура: суспензию свободного основания соединения 1 формы I в МТВЕ (4 объема) перемешивают при комнатной температуре по меньшей мере в течение 4 дней. По прошествии 4 дней суспензию фильтруют с получением белесого твердого вещества. Получают XRPD для подтверждения того, что полиморф является веществом N.
- 29 040317
Процедура получения А: следуя описанной выше основной процедуре, 27 г формы I (48TRS079) свободного основания соединения 1 перемешивали в МТВЕ при температуре 18-23°С в течение 4 дней.
Результаты DSC указывают на то, что должно получиться вещество N. Выделено 22,2 г твердого вещества кремового цвета (восстановление 82%, 99,9% чистоты по результатам HPLC). Запланирован анализ
XRPD.
Процедура получения В: следуя описанной выше основной процедуре, 31 г формы I свободного основания соединения 1 перемешивали в 3 объемах МТВЕ при температуре 18-23°С в течение 4 дней.
Процедура получения С: форму I (13KWB023, 1 г), свободного основания соединения 1 суспендировали в МТВЕ (5 объемов) при комнатной температуре. В суспензию добавляли вещество N в качестве затравки (50 мг). По прошествии 4 дней суспензию фильтровали с получением белесого твердого вещества. Определенная при помощи DSC точка плавления была такой же, как и для вещества N.
Процедура получения D: целью этого эксперимента было превращение формы II свободного основания соединения 1 в вещество N. Таким образом, свободное основание соединения 1 (0,5 г) перемешивали в 5 объемах ди-п-пропилового эфира при температуре 18-23°С. После 2 дней результаты DSC соответствовали образцу, наблюдаемому для вещества N. XRPD анализ подтвердил образование вещества N.
Процедура получения Е: к форме II свободного основания соединения 1 (5 г) добавляли диизопропиловый эфир (5 объемов, 25 мл) при комнатной температуре. По прошествии 4 дней суспензию фильтровали с получением белесого твердого вещества. Результаты DSC подтвердили наличие вещества N.
Пример 22: процедуры предварительного отбора на основании растворителя.
Быстрые процедуры, основанные на использовании растворителей, были проведены с целью определения наиболее стабильной формы свободного основания соединения 1. Исследование также обеспечивает проведение предварительной оценки склонности этих веществ существовать в различных кристаллических формах. Образуемые твердые вещества наблюдали при помощи микроскопии в поляризованном свете (PLM) и/или анализировали с помощью рентгеновского анализа твердого вещества (XRPD), сравнивая полученные дифрактограммы с известными образцами для соединения 1.
Если это возможно, дифрактограммы индексируют. Индексирование - это процесс определения размера и формы кристаллографической ячейки, учитывая позиции пиков в дифрактограмме. Термин получил свое название от присвоения кристаллографического индекса Миллера для отдельных пиков. Индексирование XRPD служит нескольким целям. Если все пики в образце индексируются одной элементарной ячейкой, это служит убедительным доказательством того, что образец содержит одну кристаллическую фазу. Учитывая решение индексирования, объем элементарной ячейки может быть вычислен непосредственно и использован для определения их состояния сольватации. Индексирование также является надежным способом описания кристаллической формы и обеспечения краткого обобщения всех имеющихся положений пиков для этой фазы в определенной точке термодинамического состояния.
Веществам, обладающим уникальными кристаллическими дифрактограммами, основанными на визуальной оценке пиков, связанных с этими веществами, присваивали буквенные обозначения. Буквенное обозначение ориентировочно ассоциировано со словом Вещество, если доступно недостаточное количество данных характеристики. Номенклатура используется только в целях облегчения идентификации уникальных дифрактограмм и не означает, что стехиометрия, чистота кристаллической фазы или химическая чистота вещества известны. Далее вещества указываются как обозначения формы с римской цифрой (т.е. вещество А свободного основания = форма I свободного основания), когда определены чистота фазы (полученная при помощи индексирования рентгенограммы или выяснения кристаллической структуры) и химическая идентичность/чистота (полученные с помощью спектроскопии протонного магнитного резонанса) материала.
Были определены три безводных вещества: формы I, II и вещество N. Вещество N, по-видимому, является наиболее стабильной формой, по отношению к формам I и II, при комнатной температуре. Вещество N энантиотропно по отношению к форме II и будет обратимо преобразовываться при определенной температуре перехода (по оценкам при температуре примерно 42°С). Выше температуры перехода, форма II, по-видимому, является наиболее стабильной формой по отношению к форме I и веществу N.
Вещества С и D используются для идентификации нескольких дополнительных пиков низкой интенсивности, преимущественно наблюдаемых в дифрактограммах формы I свободного основания соединения 1 или смесей формы I HCl и формы I свободного основания соединения 1.
Пример 23: формы безводных десольватов.
Форма I.
Форма I свободного основания является метастабильной, безводной фазой свободного основания, которая незамедлительно образуется при диспропорционировании HCl соли в воде. Иллюстративная дифрактограмма формы I была успешно индексирована, и объем элементарной ячейки согласуется с безводным свободным основанием. Визуальное сравнение дифрактограммы с предоставленными фактическими данными свободного основания указывает на то, что вещество может быть подобным; однако, картина фактических данных предоставляет дополнительные пики для потенциальной смеси.
Спектр 1Н-ЯМР согласуется с химической структурой соединения 1. Химический сдвиг приблизительно на 2,5 части на миллион объясняется наличием DMSO (из-за остаточных протонов в растворителе
- 30 040317 для проведения ЯМР). Пики, которые могут быть связаны с наличием остаточных растворителей, не были видны, что соответствует объему безводной элементарной ячейки, определенному по индексированию раствора без и с учетом незначительной потери массового %, наблюдаемой при проведении TGA, обсуждаемого ниже.
Данные термограммы (TG) показывают незначительную потерю веса, 0,2%, при температуре до 100°С, что соответствует безводной форме. DSC показывает одну эндотерму с наступлением примерно 97°С (аналогично тому, что наблюдается для формы II). Эндотерма согласуется с плавлением при помощи микроскопии в горячем состоянии. Однако изменения в размере частиц и двулучепреломления были очевидны до момента плавления; возможным является фазовый переход. Следовательно, если произошла смена фазы и была выявлена эндотерма, аналогичная форме II свободного основания, можно сделать вывод о том, что наблюдаемое плавление является характерным для формы I, и полученная фаза, скорее всего, является формой II.
Изотерма DVS указывает на то, что форма I не является гигроскопичной. Незначительное увеличение и потеря веса на 0,2% наблюдали при сорбции/десорбции. По результатам XRPD, материал, восстановленный из эксперимента по DVS, был преимущественно в форме I свободного основания с несколькими дополнительными пиками. Дополнительные пики были обозначены веществом D свободного основания. Природа вещества D неизвестна; однако появление других фаз(ы) означает, что форма I вряд ли является физически стабильной при условиях повышенной влажности (при температуре окружающей среды).
Форма II.
Форма II свободного основания является безводной фазой свободного основания. Форма II является энантиотропически связанной с веществом N, которое является термодинамически стабильной формой при температуре выше предполагаемой температуры перехода в 42°С. Форма II может быть получена в растворителях, которые не образуют известные сольваты, таких как гептан, IPE, МТВЕ или толуол, за счет кратковременных превращений формы I в суспензии (где кинетика кристаллизации замедляет образование более стабильной формы) или повышения температуры суспензий (выше 42°С). Иллюстративная дифрактограмма формы II была успешно индексирована, и объем элементарной ячейки согласуется с безводным свободным основанием соединения 1.
Спектр 1Н-ЯМР согласуется с химической структурой соединения 1. Химический сдвиг приблизительно на 2,5 части на миллион объясняется наличием DMSO (из-за остаточных протонов в растворителе для проведения ЯМР). Пики, которые могут быть связаны с наличием остаточных количеств растворителей, не были видны, что согласовывалось с объемом безводной элементарной ячейки, определенным по индексированию раствора без и с учетом незначительной потери массового %, наблюдаемой при проведении обсуждаемого ниже TGA.
Данные термограммы (TG) показывают незначительную потерю веса, 0,1%, при температуре до 100°С, что соответствует безводной форме. Результаты DSC показывают одну эндотерму (80,1 Дж/г) с началом при температуре примерно 97°С.
Форма II остается без изменений после 7 дней хранения при комнатной температуре, что было показано путем повторного XRPD анализа. Форма, как известно, является термодинамически метастабильной по отношению к веществу N при этом состоянии; однако кинетика превращения полиморфа может быть медленной в условиях окружающей среды в твердом состоянии.
Вещество N.
Вещество N свободного основания является безводной фазой свободного основания. Вещество N энантиотропически связано с формой II, которое является термодинамически стабильной формой при температуре ниже предполагаемой температуры перехода в 42°С. При наличии возможности, вещество N может быть получено с помощью суспензий в растворителях, которые не образуют известные сольваты, таких как гептан, IPE, МТВЕ или толуол, при температурах ниже 42°С. Ниже приведен пример процедуры, которая используется для получения вещества N свободного основания в лабораторном масштабе.
53,0 мг формы I свободного основания были добавлены к 2 мл смеси IPE/раствора свободного основания (концентрация 13 мг/мл). При помощи магнита для перемешивания пробу перемешивали в течение 7 дней при температуре окружающей среды. Раствор декантировали из образца, а оставшуюся твердую фазу быстро высушили в атмосфере азота. Данные характеристики указывают на то, что вещество N является уникальной кристаллической фазой.
Спектр 1Н-ЯМР согласуется с химической структурой соединения 1. Химический сдвиг приблизительно на 2,5 части на миллион объясняется наличием DMSO (из-за остаточных протонов в растворителе для проведения ЯМР). Пики, которые могут быть связаны с наличием остаточных количеств растворителей, не были видны, что согласовывалось с незначительной потерей массового %, наблюдаемой при проведении обсуждаемого ниже TGA.
Данные термограммы (TG) показывают незначительную потерю веса, 0,2%, при температуре до 100°С, что согласуется с безводной формой. Результаты DSC показывают одну эндотерму (82,8 Дж/г) с началом при температуре примерно 94°С.
- 31 040317
Предварительное определение термодинамической взаимосвязи между формами I, II и веществом N свободного основания.
Данные характеристики показывают, что формы I, II и вещество N являются уникальными кристаллическими фазами; однако, только дифрактограммы форм I и II были успешно индексированы для подтверждения чистоты фазы. Таким образом, любая предложенная термодинамическая взаимосвязь между этими материалами является рабочей гипотезой, где чистота фазы вещества N является предположительной.
Фазовые переходы твердых тел могут быть термодинамически обратимыми или необратимыми. Кристаллические формы, которые обратимо преобразуются при определенной температуре перехода (Tp), называются энантиотропными полиморфами. Если кристаллические формы являются не взаимопревращаемыми в этих условиях, система является монотропной (одна термодинамически стабильная форма). Несколько правил были разработаны с целью получения возможности предсказывать относительную термодинамическую устойчивость полиморфов и взаимосвязь между полиморфами (энантиотропная или монотропная). В данном исследовании применяется правило температур при слиянии. Правило температур при слиянии утверждает, что если форма с более высокой температурой плавления имеет более низкую температуру для слияния, то две формы являются энантиотропными, в противном случае они являются монотропными.
Вещество N, по-видимому, является наиболее стабильной формой, по отношению к формам I и II, при комнатной температуре. На основании температур при слиянии и плавлении, определенных с использованием DSC, вещество N является энантиотропным по отношению к форме II и будет обратимо преобразовываться при определенной температуре перехода (TN-II). Из-за возможного изменения фаз формы I в форму II, которое происходит до момента наблюдения эндотермы в DSC, взаимосвязь формы I с веществом N или формой II не может быть окончательно определена посредством правила температур при слиянии. Тем не менее, посредством различных взаимопревращений суспензий было показано, что форма I является наименее термодинамически стабильной формой в температурном диапазоне между 6°С и TN-II. Кроме того, из предположения, что форма I самопроизвольно преобразуется в форму II при проведении DSC при повышенных температурах (до момента наблюдения плавления), должно следовать то, что форма II также более стабильна, чем форма I выше температуры TN-II.
Пример 24: расчетная температура перехода.
Расчетная температура перехода между двумя энантиотропически родственными формами может быть вычислена из температуры начала плавления и температуры слияния на основании уравнения, представленного ниже.
AHf.2
Tf.2 ’ TfJ (
Где (Cp.liq -Cp.l)= ΔΗΠ и k=ο,οοδ
Уравнение оценивает температуру перехода при 42°С между веществом N и формой II. Подводя итог, относительная стабильность форм от наиболее до наименее стабильной показана ниже.
Диапазон температур* Относительная стабильность Комментарии
Ниже 6°С N>II Взаимосвязь с Формой I не установлена ниже этой температуры
Между 6°С и Т^' II N > II -
Выше Т^'11 (II > N) и (II > I) Взаимосвязь между Формой I и Веществом N не установлена выше этой температуры
* TN-II ориентировочно равна 42°С.
Пример 25: диаграмма температура-энергия.
Диаграмма температура-энергия фиг. 17 является полуколичественным графическим решением уравнения Гиббса-Гельмгольца, где изобары энтальпии (H) и свободной энергии (G) для каждой формы представлены в виде функции от температуры.
Пример 26: эксперименты по конкурентному взаимопревращению суспензий.
Эксперименты по взаимопревращению проиллюстрированы при помощи диаграмм температураэнергия и проводились для подтверждения термодинамической взаимосвязи между полиморфами. Эксперименты по взаимопревращению или конкуренции между суспензиями представляют собой опосредованный растворами процесс, который обеспечивает возможность для менее растворимого (более стабильного) кристалла расти за счет более растворимой формы кристалла. За пределами формирования сольвата или деградации, предполагается, что полученный в результате более стабильный полиморф из эксперимента по взаимопревращению не зависит от используемого растворителя, так как более термодинамически стабильный полиморф имеет более низкую энергию и, следовательно, более низкую раство- 32 040317 римость. Выбор растворителя влияет на кинетику превращения полиморфа и не влияет на термодинамические взаимоотношения между полиморфными формами.
Результаты исследований по взаимопревращению согласуются с предварительной диаграммой энергия - температура, приведенной в настоящем изобретении. Двойные растворы были приготовлены при температуре окружающей среды, 6 и 57°С с использованием форм I и II. Форма II, полученная в результате большинства этих экспериментов, подтверждает, что форма II является более стабильной по отношению к форме I в пределах этого диапазона температур.
Некоторые из экспериментов, проведенные при температуре окружающей среды и 6°С, приводили к образованию вещества N. Хотя эти эксперименты не представляют конкретных разъяснений в отношении отличий между формами I и II, они представляют доказательства того, что вещество N является наиболее устойчивой формой по отношению к обеим формам I и II при этих температурах (эксперименты проводились при температурах ниже расчетной температуры перехода, которая составляет 42°С). Дополнительные взаимопревращения суспензий между формой II и веществом N были реализованы при температурах, которые не соответствуют расчетной температуре перехода, и подтвердили, что форма II и вещество N являются энантиотропически взаимосвязанными.
Пример 27: твердотельный ЯМР.
13С и 15N спектры были получены для трех полиморфных форм I, II и вещества N. См. фиг. 10 и 11. Спектры были получены при 253K для предотвращения низкотемпературных переходов, возникающих в процессе измерения параметров, и получения параметров, оптимизированных для каждой полиморфной формы.
На основании данных твердотельного ядерного магнитного резонанса все три формы являются кристаллическими и являются различными полиморфными формами. Форма I содержит одну молекулу на асимметричную единицу, форма II содержит две молекулы на асимметричную единицу, а форма N содержит четыре молекулы на асимметричную единицу. См. спектры 15N на фиг. 11.
Пример 28: химическая и физическая стабильность формы I свободного основания соединения 1.
Смесь, преимущественно состоящая из формы I свободного основания (с веществом D свободного основания), подвергалась воздействию устойчивых условий для оценки физической и химической стабильности. Были использованы три условия: открытое состояние, температура до 25°С/60% RH; открытое состояние, температура до 40°С/75% RH; закрытое состояние, температура до 60°С. Физическая стабильность была оценена при помощи XRPD. Химическая стабильность была определена с использованием UPLC и 1H ЯМР в тех случаях, когда это было возможно. Вещества протестировали после 1, 7 и 14 дней воздействия.
Химическая стабильность формы I свободного основания.
Для образца по исследованию стабильности свободного соединения UPLC показала очень низкие уровни присутствующих примесей. Уровень примесей существенно не увеличился после 14-дневного хранения. Скорее всего, это указывает на хорошую химическую стабильность при условиях, используемых для оценки стабильности. Спектры 1H ЯМР образцов, которые подвергались воздействию температуры 60°С (14 дней), также соответствуют этому выводу.
Физическая стабильность формы I свободного основания.
По результатам XRPD, свободное основание соединения 1 оставалось неизменным при температуре 25°С/60% RH. Тем не менее, различия наблюдались при двух других условиях. Несколько минорных пиков, приписываемых веществу D свободного основания, не наблюдались, что свидетельствует о том, что вещество D является метастабильным и не устойчиво при повышенных температурах. Кроме того, была обнаружена форма II свободного основания после 7 дней хранения. Это соответствует выводам, рассматриваемым в настоящем изобретении, в соответствии с которыми форма II свободного основания является более стабильной по отношению к форме I свободного основания при этих значениях температуры.
Пример 29: оценка физической стабильности формы II и вещества N (форма N) свободного основания соединения 1.
При проведении DSC температура модулировалась при низкой скорости нагрева с последующим рентгеновским дифракционным анализом порошка. Использованная скорость нагрева составляла 0,02°С мин-1. Температура составляла 80°С для форма N и 90°С для формы П°С. Экспозиция была по существу изотермической, охватывающей чувствительный диапазон температур для обнаружения изменений в физической форме. Полученные материалы были проанализированы с использованием рентгеновского дифракционного анализа порошка. Никаких изменений в физической форме не наблюдалось ни для полиморфной формы II ни для полиморфной формы N (т.е. материала N).
Формы II и N подвергались воздействию 40°С/75% относительной влажности (RH), 80°С, 80°С/80% RH в течение 9 дней с последующим рентгеновским дифракционным анализом порошка. Никаких изменений в физической форме не наблюдалось ни для полиморфной формы II, ни для полиморфной формы N.
Термодинамический барьер для взаимопревращения между полиморфной формой II и формой N является высоким, и физическая стабильность является хорошей для обеих форм. Термоиндуцированное
-

Claims (11)

  1. взаимопревращение между формой II и формой N маловероятны.
    Пример 30: относительная термодинамическая стабильность полиморфных форм II и N.
    Развернутые исследования по влиянию растворителя на формирование молекул проводили с использованием смесей 1:1 вес./вес. полиморфной формы II и формы N. Гексан обеспечивает наличие благоприятной среды для оценки растворителей. Температуры, которые применяли, включают -20, -10, 0, 10, 20, 30, 40 и 50°С. Значительно более высокая растворимость наблюдалась при 30, 40 и 50°С. Твердые вещества, полученные путем формирования при температурах -20, -10, 0, 10, 20°С, анализировали рентгеновским дифракционным анализом порошка. В каждом из случаев наблюдалось значительное преобразование в форму N.
    Форма N является термодинамически более стабильной, чем форма II при температуре 20°С и ниже. Энантиотропные взаимоотношения между двумя формами, вероятно, являются эквивалентными в отношении термодинамической стабильности при диапазоне температур 30-40°С.
    Пример 31: морфология формы N.
    Первоначальная оценка партии полиморфной формы N указывает на ее игольчатую морфологию.
    Несмотря на то что настоящее изобретение было описано вместе с конкретными вариантами реализации изобретения и примерами, рядовому специалисту в данной области будет понятно с учетом квалификации и представленного описания, что эквиваленты конкретно описанных материалов и способов также можно применять для настоящего изобретения; и такие эквиваленты также будут включены в последующую формулу изобретения.
    ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
    1. Кристаллический десольват соединения 1
    Соединение 1 характеризующийся по меньшей мере тремя пиками порошковой рентгеновской дифракции (Cu Ka излучение), выбранными из 11,65, 11,85, 12,08, 16,70, 19,65 и 23,48° 2Θ (каждый ±0,2° 2θ).
  2. 2. Кристаллический десольват по п.1, характеризующийся эндотермическим пиком при 95±2°С, измеренным методом дифференциальной сканирующей калориметрии.
  3. 3. Фармацевтическая композиция, содержащая фармацевтически приемлемый наполнитель и кристаллический десольват соединения 1
    Соединение 1 характеризующийся по меньшей мере тремя пиками порошковой рентгеновской дифракции (Cu Ka излучение), выбранными из 11,65, 11,85, 12,08, 16,70, 19,65 и 23,48° 2Θ (каждый ±0,2° 2θ).
  4. 4. Фармацевтическая композиция по п.3, в которой кристаллический десольват соединения 1 характеризуется эндотермическим пиком при 95±2°С, измеренным методом дифференциальной сканирующей калориметрии.
  5. 5. Применение кристаллического десольвата по любому из пп.1, 2 для повышения сродства гемоглобина S к кислороду у субъекта.
  6. 6. Применение кристаллического десольвата по любому из пп.1, 2 для лечения серповидноклеточной анемии.
  7. 7. Применение кристаллического десольвата по любому из пп.1, 2 для лечения нарушения, опосредованного гемоглобином.
  8. 8. Применение фармацевтической композиции по любому из пп.3, 4 для повышения сродства гемоглобина S к кислороду у субъекта.
  9. 9. Применение фармацевтической композиции по любому из пп.3, 4 для лечения серповидноклеточной анемии.
  10. 10. Применение фармацевтической композиции по любому из пп.3, 4 для лечения нарушения, опосредованного гемоглобином.
  11. 11. Применение по п.7 или 10, в котором гемоглобин представляет собой гемоглобин серповидных эритроцитов.
    -
EA201791587 2014-02-07 2015-02-05 Кристаллические полиморфные формы свободного основания 2-гидрокси-6-((2-(1-изопропил-1н-пиразол-5-ил)пиридин-3-ил)метокси)бензальдегида EA040317B1 (ru)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US61/937,404 2014-02-07
US61/937,393 2014-02-07

Publications (1)

Publication Number Publication Date
EA040317B1 true EA040317B1 (ru) 2022-05-19

Family

ID=

Similar Documents

Publication Publication Date Title
AU2022203213B2 (en) Crystalline polymorphs of the free base of 2-hydroxy-6-((2-(1-isopropyl-1h-pyrazol-5-yl)pyridin-3-yl)methoxy)benzaldehyde
EA040317B1 (ru) Кристаллические полиморфные формы свободного основания 2-гидрокси-6-((2-(1-изопропил-1н-пиразол-5-ил)пиридин-3-ил)метокси)бензальдегида
OA17658A (en) Crystalline polymorphs of the free base of 2hydroxy-6-((2-(1-isopropyl-1H-pyrazol-5-yl)pyridin3-yl)methoxy)benzaldehyde.