EA038648B1 - Radioprotective property of aminocaproic acid - Google Patents
Radioprotective property of aminocaproic acid Download PDFInfo
- Publication number
- EA038648B1 EA038648B1 EA201800585A EA201800585A EA038648B1 EA 038648 B1 EA038648 B1 EA 038648B1 EA 201800585 A EA201800585 A EA 201800585A EA 201800585 A EA201800585 A EA 201800585A EA 038648 B1 EA038648 B1 EA 038648B1
- Authority
- EA
- Eurasian Patent Office
- Prior art keywords
- radiation
- cells
- εaca
- aminocaproic acid
- protection
- Prior art date
Links
- 229960002684 aminocaproic acid Drugs 0.000 title claims abstract description 14
- SLXKOJJOQWFEFD-UHFFFAOYSA-N 6-aminohexanoic acid Chemical compound NCCCCCC(O)=O SLXKOJJOQWFEFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 12
- 230000004223 radioprotective effect Effects 0.000 title description 8
- 239000000718 radiation-protective agent Substances 0.000 claims abstract 2
- 230000005855 radiation Effects 0.000 abstract description 20
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 18
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 16
- 230000005865 ionizing radiation Effects 0.000 abstract description 10
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 abstract description 9
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 abstract description 9
- 230000004224 protection Effects 0.000 abstract description 8
- 238000001959 radiotherapy Methods 0.000 abstract description 8
- 230000006378 damage Effects 0.000 abstract description 7
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 abstract description 7
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 abstract description 5
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 abstract description 5
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 abstract description 4
- 230000002265 prevention Effects 0.000 abstract description 3
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 abstract description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 abstract description 2
- FEYJIFXFOHFGCC-UHFFFAOYSA-N 1-nitrohexane Chemical compound CCCCCC[N+]([O-])=O FEYJIFXFOHFGCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract 1
- 239000000543 intermediate Substances 0.000 abstract 1
- 238000011275 oncology therapy Methods 0.000 abstract 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 abstract 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 abstract 1
- 230000005180 public health Effects 0.000 abstract 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 50
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 17
- 210000005087 mononuclear cell Anatomy 0.000 description 14
- 239000003642 reactive oxygen metabolite Substances 0.000 description 14
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 13
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 13
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- JKOQGQFVAUAYPM-UHFFFAOYSA-N amifostine Chemical compound NCCCNCCSP(O)(O)=O JKOQGQFVAUAYPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 229960001097 amifostine Drugs 0.000 description 11
- 102000003972 Fibroblast growth factor 7 Human genes 0.000 description 10
- 108090000385 Fibroblast growth factor 7 Proteins 0.000 description 10
- 229960002404 palifermin Drugs 0.000 description 9
- 230000005778 DNA damage Effects 0.000 description 8
- 231100000277 DNA damage Toxicity 0.000 description 8
- 238000000034 method Methods 0.000 description 8
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 8
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 6
- 206010073306 Exposure to radiation Diseases 0.000 description 5
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 5
- 230000001120 cytoprotective effect Effects 0.000 description 5
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 5
- FWBHETKCLVMNFS-UHFFFAOYSA-N 4',6-Diamino-2-phenylindol Chemical compound C1=CC(C(=N)N)=CC=C1C1=CC2=CC=C(C(N)=N)C=C2N1 FWBHETKCLVMNFS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 4
- 239000000975 dye Substances 0.000 description 4
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 4
- 108090000672 Annexin A5 Proteins 0.000 description 3
- 102000004121 Annexin A5 Human genes 0.000 description 3
- 108010040476 FITC-annexin A5 Proteins 0.000 description 3
- 206010028116 Mucosal inflammation Diseases 0.000 description 3
- 201000010927 Mucositis Diseases 0.000 description 3
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 3
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 3
- 230000001640 apoptogenic effect Effects 0.000 description 3
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 3
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 3
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 3
- 230000003833 cell viability Effects 0.000 description 3
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 3
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 3
- 239000000137 peptide hydrolase inhibitor Substances 0.000 description 3
- 210000003819 peripheral blood mononuclear cell Anatomy 0.000 description 3
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 3
- 208000003265 stomatitis Diseases 0.000 description 3
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 3
- TZCPCKNHXULUIY-RGULYWFUSA-N 1,2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphoserine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP(O)(=O)OC[C@H](N)C(O)=O)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC TZCPCKNHXULUIY-RGULYWFUSA-N 0.000 description 2
- 102000053602 DNA Human genes 0.000 description 2
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- 208000010201 Exanthema Diseases 0.000 description 2
- ZWZWYGMENQVNFU-UHFFFAOYSA-N Glycerophosphorylserin Natural products OC(=O)C(N)COP(O)(=O)OCC(O)CO ZWZWYGMENQVNFU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010037660 Pyrexia Diseases 0.000 description 2
- 102100037486 Reverse transcriptase/ribonuclease H Human genes 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- GLNADSQYFUSGOU-GPTZEZBUSA-J Trypan blue Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[Na+].C1=C(S([O-])(=O)=O)C=C2C=C(S([O-])(=O)=O)C(/N=N/C3=CC=C(C=C3C)C=3C=C(C(=CC=3)\N=N\C=3C(=CC4=CC(=CC(N)=C4C=3O)S([O-])(=O)=O)S([O-])(=O)=O)C)=C(O)C2=C1N GLNADSQYFUSGOU-GPTZEZBUSA-J 0.000 description 2
- 238000000862 absorption spectrum Methods 0.000 description 2
- 230000000840 anti-viral effect Effects 0.000 description 2
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 2
- 238000010609 cell counting kit-8 assay Methods 0.000 description 2
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 2
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 description 2
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 2
- 229940042399 direct acting antivirals protease inhibitors Drugs 0.000 description 2
- 206010013781 dry mouth Diseases 0.000 description 2
- 238000000295 emission spectrum Methods 0.000 description 2
- 210000002919 epithelial cell Anatomy 0.000 description 2
- 201000005884 exanthem Diseases 0.000 description 2
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 2
- 201000005787 hematologic cancer Diseases 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 2
- 229940065223 kepivance Drugs 0.000 description 2
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 2
- 210000004379 membrane Anatomy 0.000 description 2
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 2
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 2
- 210000005259 peripheral blood Anatomy 0.000 description 2
- 239000011886 peripheral blood Substances 0.000 description 2
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 2
- 235000019419 proteases Nutrition 0.000 description 2
- 230000002633 protecting effect Effects 0.000 description 2
- 230000009396 radiation induced apoptosis Effects 0.000 description 2
- 230000002285 radioactive effect Effects 0.000 description 2
- 230000001950 radioprotection Effects 0.000 description 2
- 230000003537 radioprotector Effects 0.000 description 2
- 206010037844 rash Diseases 0.000 description 2
- 230000004044 response Effects 0.000 description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 2
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 2
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 2
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 2
- 241000701161 unidentified adenovirus Species 0.000 description 2
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 2
- 230000000007 visual effect Effects 0.000 description 2
- PGLFPEYYIQQJOP-UHFFFAOYSA-N 6-aminohexanoic acid Chemical compound NCCCCCC(O)=O.NCCCCCC(O)=O PGLFPEYYIQQJOP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920000936 Agarose Polymers 0.000 description 1
- 102000002260 Alkaline Phosphatase Human genes 0.000 description 1
- 108020004774 Alkaline Phosphatase Proteins 0.000 description 1
- 108050008874 Annexin Proteins 0.000 description 1
- 102000000412 Annexin Human genes 0.000 description 1
- 208000006820 Arthralgia Diseases 0.000 description 1
- 102000011727 Caspases Human genes 0.000 description 1
- 108010076667 Caspases Proteins 0.000 description 1
- 230000033616 DNA repair Effects 0.000 description 1
- 206010013975 Dyspnoeas Diseases 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 206010014950 Eosinophilia Diseases 0.000 description 1
- 206010015150 Erythema Diseases 0.000 description 1
- 206010016825 Flushing Diseases 0.000 description 1
- 208000032843 Hemorrhage Diseases 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 101001060261 Homo sapiens Fibroblast growth factor 7 Proteins 0.000 description 1
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 1
- 206010020772 Hypertension Diseases 0.000 description 1
- 208000013038 Hypocalcemia Diseases 0.000 description 1
- 206010021143 Hypoxia Diseases 0.000 description 1
- 206010025323 Lymphomas Diseases 0.000 description 1
- MSMKDUSAHXCISY-UHFFFAOYSA-N N[S+]=P([O-])(O)O Chemical group N[S+]=P([O-])(O)O MSMKDUSAHXCISY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010028813 Nausea Diseases 0.000 description 1
- 206010030216 Oesophagitis Diseases 0.000 description 1
- 208000002193 Pain Diseases 0.000 description 1
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 1
- 229940124158 Protease/peptidase inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 208000003251 Pruritus Diseases 0.000 description 1
- 206010061924 Pulmonary toxicity Diseases 0.000 description 1
- 239000012979 RPMI medium Substances 0.000 description 1
- 108010087230 Sincalide Proteins 0.000 description 1
- 108020004682 Single-Stranded DNA Proteins 0.000 description 1
- 206010041349 Somnolence Diseases 0.000 description 1
- 206010042674 Swelling Diseases 0.000 description 1
- 208000003443 Unconsciousness Diseases 0.000 description 1
- 208000036142 Viral infection Diseases 0.000 description 1
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 1
- 206010047700 Vomiting Diseases 0.000 description 1
- 230000006682 Warburg effect Effects 0.000 description 1
- 208000005946 Xerostomia Diseases 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 1
- 239000003513 alkali Substances 0.000 description 1
- 229940100198 alkylating agent Drugs 0.000 description 1
- 239000002168 alkylating agent Substances 0.000 description 1
- 230000001567 anti-fibrinolytic effect Effects 0.000 description 1
- 239000000504 antifibrinolytic agent Substances 0.000 description 1
- 238000003782 apoptosis assay Methods 0.000 description 1
- 230000004888 barrier function Effects 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 239000012148 binding buffer Substances 0.000 description 1
- 230000000740 bleeding effect Effects 0.000 description 1
- 230000036772 blood pressure Effects 0.000 description 1
- 230000005587 bubbling Effects 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 1
- 230000006727 cell loss Effects 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 230000005754 cellular signaling Effects 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 125000004218 chloromethyl group Chemical class [H]C([H])(Cl)* 0.000 description 1
- 230000000536 complexating effect Effects 0.000 description 1
- 230000002596 correlated effect Effects 0.000 description 1
- 230000000875 corresponding effect Effects 0.000 description 1
- 230000001086 cytosolic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 1
- 238000004925 denaturation Methods 0.000 description 1
- 230000036425 denaturation Effects 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 239000003599 detergent Substances 0.000 description 1
- 230000035487 diastolic blood pressure Effects 0.000 description 1
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 1
- 238000002845 discoloration Methods 0.000 description 1
- 208000002173 dizziness Diseases 0.000 description 1
- 208000006881 esophagitis Diseases 0.000 description 1
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 1
- 238000001502 gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 1
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 1
- 238000003306 harvesting Methods 0.000 description 1
- 201000010536 head and neck cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000014829 head and neck neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 208000024200 hematopoietic and lymphoid system neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 210000000777 hematopoietic system Anatomy 0.000 description 1
- 102000057239 human FGF7 Human genes 0.000 description 1
- 230000000705 hypocalcaemia Effects 0.000 description 1
- 230000007954 hypoxia Effects 0.000 description 1
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 239000000411 inducer Substances 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 238000009776 industrial production Methods 0.000 description 1
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 230000016507 interphase Effects 0.000 description 1
- 230000035987 intoxication Effects 0.000 description 1
- 231100000566 intoxication Toxicity 0.000 description 1
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 1
- 230000007803 itching Effects 0.000 description 1
- 210000002510 keratinocyte Anatomy 0.000 description 1
- 108010029560 keratinocyte growth factor receptor Proteins 0.000 description 1
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 1
- 231100000518 lethal Toxicity 0.000 description 1
- 230000001665 lethal effect Effects 0.000 description 1
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 description 1
- 231100000053 low toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 1
- 230000010534 mechanism of action Effects 0.000 description 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 1
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 1
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 1
- 238000007431 microscopic evaluation Methods 0.000 description 1
- 230000005012 migration Effects 0.000 description 1
- 238000013508 migration Methods 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 210000004400 mucous membrane Anatomy 0.000 description 1
- 230000008693 nausea Effects 0.000 description 1
- 230000006654 negative regulation of apoptotic process Effects 0.000 description 1
- 208000002154 non-small cell lung carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 239000008177 pharmaceutical agent Substances 0.000 description 1
- 150000003057 platinum Chemical class 0.000 description 1
- 230000004983 pleiotropic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000374 pneumotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 1
- 230000005522 programmed cell death Effects 0.000 description 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 1
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 1
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 201000001474 proteinuria Diseases 0.000 description 1
- 230000017854 proteolysis Effects 0.000 description 1
- 230000007047 pulmonary toxicity Effects 0.000 description 1
- 230000000693 radiobiological effect Effects 0.000 description 1
- 238000011127 radiochemotherapy Methods 0.000 description 1
- 230000006950 reactive oxygen species formation Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 210000002345 respiratory system Anatomy 0.000 description 1
- 238000012552 review Methods 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- IZTQOLKUZKXIRV-YRVFCXMDSA-N sincalide Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(N)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O)C1=CC=C(OS(O)(=O)=O)C=C1 IZTQOLKUZKXIRV-YRVFCXMDSA-N 0.000 description 1
- 231100000046 skin rash Toxicity 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 210000000278 spinal cord Anatomy 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 1
- 239000000021 stimulant Substances 0.000 description 1
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 1
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 238000011287 therapeutic dose Methods 0.000 description 1
- 150000003573 thiols Chemical class 0.000 description 1
- -1 thiophosphate compound Chemical class 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 208000029729 tumor suppressor gene on chromosome 11 Diseases 0.000 description 1
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 description 1
- 238000012800 visualization Methods 0.000 description 1
- 230000008673 vomiting Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
- A61K31/19—Carboxylic acids, e.g. valproic acid
- A61K31/195—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having an amino group
- A61K31/197—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having an amino group the amino and the carboxyl groups being attached to the same acyclic carbon chain, e.g. gamma-aminobutyric acid [GABA], beta-alanine, epsilon-aminocaproic acid or pantothenic acid
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к медицине, в частности к радиологии. Целью изобретения является обеспечение защиты медицинского персонала, вовлеченного в обслуживание аппаратов, излучающих радиацию; военного и гражданскою персонала, работающего с атомными реакторами, а также персонала космических станций от побочных эффектов, индуцированных радиацией. В качестве этого средства предлагается использовать ε-аминокапроновую кислоту (sACA).The invention relates to medicine, in particular to radiology. The aim of the invention is to ensure the protection of medical personnel involved in the maintenance of devices that emit radiation; military and civilian personnel working with nuclear reactors; and space station personnel from radiation-induced side effects. It is proposed to use ε-aminocaproic acid (sACA) as this agent.
В результате исследований была выявлена способность ε-аминокапроновой кислоты действовать в качестве радиопревентивного средства для подавления образования активных форм кислорода и последующего повреждения структуры ДНК, вызванных ионизирующей радиацией.As a result of the research, the ability of ε-aminocaproic acid to act as a radiopreventive agent to suppress the formation of reactive oxygen species and subsequent damage to the DNA structure caused by ionizing radiation was revealed.
К известным одобренным к настоящему времени радиозащитным соединениям относится препарат амифостин.The known approved to date radioprotective compounds include the drug amifostine.
Амифостин с формулой (I) представляет собой органическое тиофосфатное соединение с формулой, которое гидролизуется in vivo щелочной фосфатазой в активный цитопротекторный метаболит тиола, WR-1065Amifostine with formula (I) is an organic thiophosphate compound with the formula that is hydrolyzed in vivo by alkaline phosphatase to an active cytoprotective thiol metabolite, WR-1065
Амифостин обладает цитопротективным действием и комплексообразующей активностью. Внутри клеток амифостин детоксифицирует реактивные метаболиты платиновых и алкилирующих агентов, а также поглощает свободные радикалы [1, 2]. Другие возможные эффекты включают ускоренную репарацию ДНК [1], индукцию клеточной гипоксии, ингибирование апоптоза, изменение экспрессии гена и модификацию активности ферментов [2]. Считается, что амифостин обладает радиозащитными свойствами для нормальных тканей посредством эффектов Варбурга [3]. Амифостин назначается в дозировке 910 мг/м2 1 раз в сутки внутривенно. При комбинированной химиолучевой терапии немелкоклеточного рака легкого амифостин сокращает количество новых случаев развития эзофагита III-IV степени с 84,4 до 38,9% и острой легочной токсичности III-IV степени с 56,3 до 19,4% (не влияя на частоту ответов).Amifostine has a cytoprotective effect and complexing activity. Inside cells, amifostine detoxifies reactive metabolites of platinum and alkylating agents, and also absorbs free radicals [1, 2]. Other possible effects include accelerated DNA repair [1], induction of cellular hypoxia, inhibition of apoptosis, altered gene expression, and modification of enzyme activity [2]. It is believed that amifostine has radioprotective properties for normal tissues through the Warburg effects [3]. Amifostine administered in a dosage of 910 mg / m 2, 1 times a day intravenously. With combined chemoradiation therapy for non-small cell lung cancer, amifostine reduces the number of new cases of grade III-IV esophagitis from 84.4 to 38.9% and acute pulmonary toxicity III-IV from 56.3 to 19.4% (without affecting the response rate). ).
Недостатками использования амифостина являются повышение диастолического артериального давления, тошнота, рвота, гипокальциемия, головокружение, сонливость, аллергические реакции, такие как эозинофилия, кожная сыпь, гиперемия кожи лица, озноб и жар. При передозировке возможны выраженное снижение артериального давления, коллапс и потеря сознания.The disadvantages of using amifostine are increased diastolic blood pressure, nausea, vomiting, hypocalcemia, dizziness, drowsiness, allergic reactions such as eosinophilia, skin rash, facial flushing, chills and fever. In case of an overdose, a pronounced decrease in blood pressure, collapse and loss of consciousness are possible.
Существует препарат палифермин, который представляет собой фактор роста человеческого кератиноцита (ФРК) и является стимулятором роста клеток слизистой оболочки рта и кишечного тракта [4, 5]. Показано, что палифермин снижает частоту и продолжительность тяжелого орального мукозита у пациентов с раком крови (лейкемия и лимфома), получающих химиотерапию и лучевую терапию в высоких дозах, путем защиты эпителиальных клеток и стимуляции роста новых для создания слизистого барьера [6, 7, 8]. Механизм действия данного препарата заключается в связывании лекарственного средства с рецептором ФРК, при этом стимулируя пролиферацию, дифференцировку и усиление активности цитопротективных механизмов эпителиальных клеток [9].There is a drug palifermin, which is a human keratinocyte growth factor (KGF) and stimulates the growth of cells in the mucous membrane of the mouth and intestinal tract [4, 5]. Palifermin has been shown to reduce the frequency and duration of severe oral mucositis in patients with blood cancer (leukemia and lymphoma) receiving chemotherapy and high-dose radiation therapy by protecting epithelial cells and stimulating the growth of new ones to create a mucous barrier [6, 7, 8] ... The mechanism of action of this drug is the binding of the drug to the KGF receptor, while stimulating the proliferation, differentiation and increased activity of the cytoprotective mechanisms of epithelial cells [9].
Недостатками использования палифермина являются боли (включая боли в суставах), увеличение уровня ферментов поджелудочной железы в крови, повышение кровяного давления, протеинурия, затрудненное дыхание, покраснение/сыпь, отек, зуд, изменение цвета или толщины языка, изменение вкуса, лихорадка.Disadvantages of using palifermin are pain (including joint pain), increased levels of pancreatic enzymes in the blood, increased blood pressure, proteinuria, difficulty breathing, redness / rash, swelling, itching, discoloration or thickness of the tongue, change in taste, fever.
Несмотря на их использование оба препарата нельзя рассматривать как полную защиту от летальных биологических эффектов, опосредованных излучением. Основным показанием для амифостина является снижение ксеростомии (сухости во рту) для пациентов, проходящих лучевую терапию для лечения рака головы и шеи. Палифермин назначают для снижения частоты возникновения орального мукозита у пациентов, получающих лучевую терапию.Despite their use, both drugs cannot be considered complete protection against lethal biological effects mediated by radiation. The main indication for amifostine is to reduce xerostomia (dry mouth) in patients undergoing radiation therapy for head and neck cancer. Palifermin is prescribed to reduce the incidence of oral mucositis in patients receiving radiation therapy.
Другим перспективным профилактическим средством является аминофосфоротиоат (WR-3689), который продемонстрировал терапевтический потенциал в экспериментах со спинным мозгом крыс. Однако некоторые исследования не подтвердили радиозащитный эффект WR-3689. Кроме того, существует ряд других соединений с потенциальными радиозащитными свойствами, но большинство из них находятся в доклинических исследованиях.Another promising prophylactic agent is aminophosphorothioate (WR-3689), which has shown therapeutic potential in rat spinal cord experiments. However, some studies have not confirmed the radioprotective effect of WR-3689. In addition, there are a number of other compounds with potential radioprotective properties, but most of them are in preclinical studies.
Целью предлагаемого изобретения является повышение эффективности защиты белых кровяных клеток, которые являются наиболее высокочувствительными к ионизирующему излучению, от радиоактивного излучения за счет предотвращения воздействий, индуцированных радиацией, включая потерю клетками жизнеспособности, генерацию активных форм кислорода в клетках, повреждения структуры ДНК и апоптоза.The aim of the present invention is to increase the efficiency of protection of white blood cells, which are the most highly sensitive to ionizing radiation, from radioactive radiation by preventing radiation-induced effects, including cell loss of viability, generation of reactive oxygen species in cells, damage to DNA structure and apoptosis.
Поставленная цель достигается тем, что для защиты от радиоактивного излучения белых кровяных клеток используют ε-аминокапроновую кислоту (6-аминогексановая кислота) с формулой C6H13NO2 (II) 0 This goal is achieved by the fact that ε-aminocaproic acid (6-aminohexanoic acid) with the formula C 6 H 13 NO 2 (II) 0
H?N. .-.. .1H ? N. .- .. .1
- ... v..·· -......- он (цу- ... v .. ·· -......- he (tsu
Эффективность радиопротекторной способности ε-аминокапроновой кислоты была доказана наThe effectiveness of the radioprotective ability of ε-aminocaproic acid has been proven on
- 1 038648 культуре мононуклеарных клеток периферической крови человека (МНК) в концентрации 50 нг/мл (введенной за 12 ч до облучения).- 1 038648 culture of human peripheral blood mononuclear cells (MNC) at a concentration of 50 ng / ml (introduced 12 hours before irradiation).
Отличие предлагаемого способа от способа-прототипа заключается в том, что применение εаминокапроновой кислоты является малотоксичным даже при высоких дозах, а действие препарата проявляется уже через 15-20 мин при введении. Также предлагаемый способ в отличие от способа-прототипа показал положительные результаты в исследованиях in vitro на культуре МНК.The difference between the proposed method and the prototype method is that the use of εaminocaproic acid is low-toxic even at high doses, and the effect of the drug is manifested after 15-20 minutes after administration. Also, the proposed method, in contrast to the prototype method, showed positive results in in vitro studies on MNC culture.
В патентной и научно-технической литературе сведений об использовании ε-аминокапроновой кислоты в качестве способа защиты живых организмов от радиоактивного излучения не обнаружено.In the patent and scientific and technical literature, information on the use of ε-aminocaproic acid as a method of protecting living organisms from radioactive radiation was not found.
Известно, что εACA является ингибитором системы плазмин-плазминогена [10-12]. Этот препарат признан в качестве эффективного средства для контроля кровотечения. В дополнение к проверенному антифибринолитическому действию также продемонстрировано, что εACA способна ингибировать активность некоторых вирусов, в том числе и аденовирусов [13-15]. Противовирусный механизм связан со способностью εACA к подавлению протеолитического расщепления аденовирусных полипептидов в инфицированных клетках. В связи с этим εACA действует как эффективный ингибитор протеазы. Показано, что некоторые ингибиторы протеазы могут быть эффективно использованы в качестве радиопротекторов [16].It is known that εACA is an inhibitor of the plasmin-plasminogen system [10-12]. This drug is recognized as an effective bleeding control agent. In addition to the proven antifibrinolytic action, εACA has also been shown to be able to inhibit the activity of several viruses, including adenoviruses [13-15]. The antiviral mechanism is associated with the ability of εACA to suppress the proteolytic degradation of adenoviral polypeptides in infected cells. Therefore, εACA acts as an effective protease inhibitor. It was shown that some protease inhibitors can be effectively used as radioprotectors [16].
Способность ингибиторов протеазы понижать уровень апоптоза в белых кровяных клетках связана с подавлением активности каспазы, которая является ответственной за каскад апоптотических реакций. Необходимо отметить, что протеазы признаны ключевым компонентом инициации апоптоза [17-19]. Таким образом, мы можем предположить, что подавление протеазы с помощью εACA может быть использовано для защиты клеток от апоптоза, индуцированного радиацией.The ability of protease inhibitors to reduce the level of apoptosis in white blood cells is associated with the suppression of the activity of caspase, which is responsible for the cascade of apoptotic reactions. It should be noted that proteases are recognized as a key component of the initiation of apoptosis [17-19]. Thus, we can assume that the inhibition of protease by εACA can be used to protect cells from radiation-induced apoptosis.
Помимо активации протеазы инициация апоптоза также связана с генерацией активных форм кислорода (АФК) как ответ на внешние стимуляторы, такие как ионизирующее излучение [20, 21].In addition to activating protease, the initiation of apoptosis is also associated with the generation of reactive oxygen species (ROS) as a response to external stimulants such as ionizing radiation [20, 21].
Данные радиобиологических исследований ε-аминокапроновой кислоты на мононуклеарных клетках периферической крови человека показали, что данное вещество подтверждает вышеописанное и обладает радиозащитным потенциалом при различных дозах рентгеновского облучения культуры МНК.The data of radiobiological studies of ε-aminocaproic acid on mononuclear cells of human peripheral blood have shown that this substance confirms the above and has a radioprotective potential at various doses of X-ray irradiation of the MNC culture.
Исследования радиозащитных свойств ε-аминокапроновой кислоты проводили на базе Лаборатории Трансляционной Медицины и Технологий Наук о Жизни, Центра Наук о Жизни, ЧУ National Laboratory Astana, ОАО Назарбаев Университет, г. Астана.Studies of the radioprotective properties of ε-aminocaproic acid were carried out at the Laboratory of Translational Medicine and Life Sciences Technologies, Center for Life Sciences, ChU National Laboratory Astana, JSC Nazarbayev University, Astana.
Исследования проведены на мононуклеарных клетках периферической крови человека (МНК), полученных от здорового донора. Культуру клеток подразделяли на следующие группы: 1) контрольные клетки (без воздействия радиации и без добавления εACA); 2) группа клетки+пероксид водорода (H2O2) (без воздействия радиации); 3) группа клетки+εACA (50 нг/мл)+Н2О2 (без воздействия радиации); 4) группа клетки+рентгеновское облучение 22.62 mGv; 5) группа клетки+εACA (50 нг/мл)+рентгеновское облучение 22.62 mGv; 6) группа клетки+рентгеновское облучение 45.27 mGv; 7) группа клетки+εACA (50 нг/мл)+рентгеновское облучение 45.27 mGv; 8) группа клетки+рентгеновское облучение 67.88 mGv; 9) группа клетки+εACA (50 нг/мл)+рентгеновское облучение 67.88 mGv.The studies were carried out on human peripheral blood mononuclear cells (MNCs) obtained from a healthy donor. The cell culture was subdivided into the following groups: 1) control cells (without exposure to radiation and without the addition of εACA); 2) group of cells + hydrogen peroxide (H 2 O 2 ) (without exposure to radiation); 3) cell group + εACA (50 ng / ml) + Н 2 О 2 (without exposure to radiation); 4) cell group + X-ray irradiation 22.62 mGv; 5) cell group + εACA (50 ng / ml) + X-ray irradiation 22.62 mGv; 6) cell group + X-ray irradiation 45.27 mGv; 7) cell group + εACA (50 ng / ml) + X-ray irradiation 45.27 mGv; 8) cell group + X-ray irradiation 67.88 mGv; 9) cell group + εACA (50 ng / ml) + X-ray irradiation 67.88 mGv.
Группы № 3, 5, 7, 9 преинкубировали с добавлением εACA в течение 12 ч при 37°C, 5% CO2 и влажности 85% до начала воздействия рентгеновского облучения с концентрацией εACA 50 нг/мл (εACA растворяли в питательной среде для культивирования МНК), являющейся нетоксичной для клеток. После этого клетки подвергались облучению рентгеновскими лучами в 100 kVp (Philips, Нидерланды) в дозах 22.62, 45.27 и 67.88 mGv в поле излучения 12x12x13 см. Время экспозиции 1 мин с расстоянием 30 см источник-поверхность. Обработка пероксидом водорода использовалась в качестве положительного контроля повреждения структуры ДНК и апоптоза. После иррадиации МНК подвергались анализам на жизнеспособность, продукцию активных форм кислорода (АФК), апоптоз и повреждение ДНК.Groups 3, 5, 7, 9 were preincubated with the addition of εACA for 12 h at 37 ° C, 5% CO 2 and 85% humidity before exposure to X-ray irradiation with an εACA concentration of 50 ng / ml (εACA was dissolved in a nutrient medium for cultivation MNC), which is non-toxic to cells. After that, the cells were irradiated with X-rays at 100 kVp (Philips, Netherlands) at doses of 22.62, 45.27, and 67.88 mGv in a radiation field of 12x12x13 cm. The exposure time was 1 min with a source-surface distance of 30 cm. Hydrogen peroxide treatment was used as a positive control for DNA structural damage and apoptosis. After irradiation, MNCs were analyzed for viability, production of reactive oxygen species (ROS), apoptosis, and DNA damage.
Мононуклеарные клетки (МНК) периферической крови выделяли из образцов крови, взятых у добровольцев мужского пола (условно здоровых; не курящих; до 28 лет) в Республиканском Исследовательском Центре Неотложной Помощи, Астана, Казахстан. Все протоколы, касающиеся человеческих субъектов, были одобрены Этическим Комитетом Назарбаев Университета, Астана, Казахстан.Peripheral blood mononuclear cells (MNCs) were isolated from blood samples taken from male volunteers (conditionally healthy; non-smokers; under 28 years old) at the Republican Research Center for Emergency Aid, Astana, Kazakhstan. All protocols concerning human subjects were approved by the Ethics Committee of Nazarbayev University, Astana, Kazakhstan.
Все процедуры проводились в стерильных условиях в ламинарных боксах и в CO2-инкубаторах. МНК изолировались из стабилизированной гепарином крови с использованием одноступенчатого градиента Histopaque (Histopaque, Sigma, объем 1,077 г/см3). Клетки были выделены с помощью центрифугирования при 400 g в течение 30 мин.All procedures were performed under sterile conditions in laminar flow hoods and CO 2 incubators. MNCs were isolated from heparin-stabilized blood using a Histopaque one-step gradient (Histopaque, Sigma, volume 1.077 g / cm 3 ). The cells were isolated by centrifugation at 400 g for 30 min.
Интерфазное кольцо МНК собирали с использованием стерильных пипеток и промывали трижды фосфатным буферным солевым раствором (PBS, Sigma Aldrich). После каждого сбора клетки центрифугировались при 250 g в течение 10 мин. Промытые клетки ресуспендировались добавлением 5 мл среды RPMI.The MNC interphase ring was collected using sterile pipettes and washed three times with phosphate buffered saline (PBS, Sigma Aldrich). After each harvest, the cells were centrifuged at 250 g for 10 min. The washed cells were resuspended by adding 5 ml of RPMI medium.
Для определения жизнеспособности клеток использовали метод окрашивания трипановым синим. К 10 мкл клеточной суспензии добавлялось 10 мкл 0.4% трипанового синего. Подсчет клеток осуществлялся с использованием кассетного цитометра и автоматического счетчика клеток (TC20 автоматическийTrypan blue staining was used to determine cell viability. To 10 μL of the cell suspension, 10 μL of 0.4% trypan blue was added. Cells were counted using a cassette cytometer and an automatic cell counter (TC20 automatic
- 2 038648 счетчик клеток, Bio-Rad Laboratories, USA).- 2 038648 cell counter, Bio-Rad Laboratories, USA).
Цитотоксичность εACA тестировали следующим образом: МНК периферической крови засевали на 96-луночный планшет (Corning® Costar® 96-Well Cell Culture Plates, USA) и инкубировали в течение 24 ч. После чего их обрабатывали εACA в следующих концентрациях: 50, 100, 150, 200 и 250 нг/мл. После 12 ч количество жизнеспособных клеток подсчитывали с использованием Cell Counting Kit-8 (CCK-8, Sigma-Aldrich, USA) и мультифункционального микропланшетный ридера Synergy HI Hybrid (BioTek, USA). Процент живых клеток подсчитывали и сравнивали с контрольной группой.The cytotoxicity of εACA was tested as follows: peripheral blood MNCs were plated onto a 96-well plate (Corning® Costar® 96-Well Cell Culture Plates, USA) and incubated for 24 hours.Then they were treated with εACA at the following concentrations: 50, 100, 150 , 200 and 250 ng / ml. After 12 h, the number of viable cells was counted using a Cell Counting Kit-8 (CCK-8, Sigma-Aldrich, USA) and a Synergy HI Hybrid multifunctional microplate reader (BioTek, USA). The percentage of living cells was counted and compared with the control group.
Для детекции уровня АФК в культуре клеток, подверженных обработке εACA и рентгеновскому облучению, использовали CM-H2DCFDA (No C6827, Life Technologies, USA). CM-H2DCFDA - это флуоресцентный краситель (производное хлорометила), который используется для детекции АФК, включая пероксид водорода, гидроксильные радикалы и пероксинитриты [22, 23].To detect the ROS level in the culture of cells exposed to εACA treatment and X-ray irradiation, CM-H2DCFDA (No.C6827, Life Technologies, USA) was used. CM-H2DCFDA is a fluorescent dye (chloromethyl derivative) that is used to detect ROS, including hydrogen peroxide, hydroxyl radicals, and peroxynitrites [22, 23].
CM-H2DCFDA растворялся в 34.6 мкл диметилсульфоксида (ДМСО). К облученной клеточной суспензии добавляли раствор CM-H2DCFDA (10 мкл красителя к 90 мкл клеточной суспензии). Полученную смесь ресуспендировали без образования пузырьков и инкубировали при 37°C в течение 30 мин. После инкубации уровень АФК замерялся с помощью мультифункционального микроплашечного ридера Synergy H1 Hybrid (BioTek, USA). Пероксид водорода, стандартный индуктор апоптоза и АФК, использовался в качестве позитивного контроля (в конечной концентрации 0.5 мМ).CM-H2DCFDA was dissolved in 34.6 μL of dimethyl sulfoxide (DMSO). A CM-H2DCFDA solution (10 μl of the dye to 90 μl of the cell suspension) was added to the irradiated cell suspension. The resulting mixture was resuspended without bubbling and incubated at 37 ° C for 30 min. After incubation, the ROS level was measured using a Synergy H1 Hybrid multifunctional microplate reader (BioTek, USA). Hydrogen peroxide, a standard inducer of apoptosis and ROS, was used as a positive control (at a final concentration of 0.5 mM).
Повреждения структуры ДНК клеток определяли с помощью метода ДНК-комет. Клетки дважды промывали фосфатным буферным солевым раствором, центрифугировали при 700 g в течение 15 мин и затем ресуспендировали до 1х104 в 30 мкл 1%-го (вес./об.) низкоплавкой агарозы (Sigma-Aldrich). Суспензия клеток помещалась на кометслайды со специально обработанной поверхностью (Amsbio), покрывалась покровным стеклом и инкубировалась при 4°C в течение 10 мин. После чего покровные стекла удалялись, а слайды помещались в предварительно охлажденный лизисный раствор (Amsbio) на 60 мин при 4°C либо на ночь для удаления белков.Damage to the DNA structure of cells was determined using the DNA comet method. Cells were washed twice with phosphate buffered saline, centrifuged at 700 g for 15 min, and then resuspended to 1x10 4 in 30 μl of 1% (w / v) low-melting agarose (Sigma-Aldrich). The cell suspension was placed on comets slides with a specially treated surface (Amsbio), covered with a coverslip, and incubated at 4 ° C for 10 min. Then the coverslips were removed, and the slides were placed in a pre-cooled lysis solution (Amsbio) for 60 min at 4 ° C or overnight to remove proteins.
После лизиса слайды помещались в камеру для гель электрофореза, а затем инкубировались в щелочном электрофорезном буфере для денатурации ДНК (на 1 л буфера добавляется 30 мл хлорида натрия (NaOH) и 5 мл ЭДТА, взятых из стоковых растворов 10 Н NaOH и 200 мМ Na2 EDTA, Ph 13) в течение 20 мин при комнатной температуре. После инкубации проводили электрофорез при 24 В и 300 мА (1 В на 1 см длины платформы для слайдов в камере для электрофореза) в течение 20 мин при комнатной температуре. Все процедуры будут производились в темноте для минимизации повреждения структуры ДНК.After lysis, the slides were placed in a chamber for gel electrophoresis, and then incubated in an alkaline electrophoresis buffer for DNA denaturation (30 ml of sodium chloride (NaOH) and 5 ml of EDTA, taken from stock solutions of 10 N NaOH and 200 mM Na 2 EDTA, Ph 13) for 20 min at room temperature. After incubation, electrophoresis was performed at 24 V and 300 mA (1 V per 1 cm length of the slide platform in the electrophoresis chamber) for 20 min at room temperature. All procedures will be performed in the dark to minimize damage to the DNA structure.
После электрофореза слайды фиксировались и промывались в течение 10 мин для удаления щелочи и детергентов, а затем их сушили в темноте. Слайды окрашивали красителем SYBR Green (Amsbio) в течение 2 мин и сушили при комнатной температуре в темноте.After electrophoresis, the slides were fixed and washed for 10 min to remove alkali and detergents, and then they were dried in the dark. Slides were stained with SYBR Green (Amsbio) for 2 min and dried at room temperature in the dark.
Подсчет повреждений ДНК.DNA damage counting.
Слайды были протестированы при 200х увеличении с использованием тринокулярного флуоресцентного микроскопа Olympus (Olympus BX53, Япония). Визуальный и компьютезированный анализ повреждения ДНК проводился с использованием программного обеспечения TriTek CometScore™ (TriTek Corp., США). Визуальный анализ 100 случайно подобранных непересекающихся клеток основывался на миграции длины хвоста и относительной пропорции ДНК в хвосте кометы. Индекс % ДНК в хвосте кометы определялся количеством низкомолекулярных ДНК фрагментов, образованных из щелочных неустойчивых разрывов ДНК сегментов и мигрировавших электрофорезом в направлении к аноду.The slides were tested at 200x magnification using an Olympus trinocular fluorescence microscope (Olympus BX53, Japan). Visual and computer-aided analysis of DNA damage was performed using TriTek CometScore ™ software (TriTek Corp., USA). Visual analysis of 100 randomly selected non-overlapping cells was based on tail length migration and the relative proportion of DNA in the comet's tail. The% DNA index in the comet's tail was determined by the number of low-molecular-weight DNA fragments formed from alkaline unstable breaks in DNA segments and migrated by electrophoresis towards the anode.
Для детекции апоптоза использовался набор для детекции раннего апоптоза Annexin V-FITC (Cell Signaling Technology, USA). Аннексин V обладает сродством с фосфатидилсерином, который находится в цитоплазматической поверхности клеточной мембраны. В ранней фазе апоптоза фосфатидилсерин транспонируется на внешней стороне клеточной мембраны, где и может быть детектирован и окрашен аннексином.An Annexin V-FITC kit for early apoptosis detection (Cell Signaling Technology, USA) was used to detect apoptosis. Annexin V has an affinity for phosphatidylserine, which is located in the cytoplasmic surface of the cell membrane. In the early phase of apoptosis, phosphatidylserine is transposed on the outside of the cell membrane, where it can be detected and stained with annexin.
После облучения рентгеновскими лучами клетки инкубировались в течение 6 ч при 37°C. Затем клетки были собраны и промыты PBS. После чего к клеточной суспензии был добавлен 1X аннексин V, связывающий буфер и конъюгат аннексин V-FITC. Ранний апоптоз в МНК был идентифицирован путем прямой визуализации окрашенных зеленым цветом мембран с использованием инвертированного моторизованного флуоресцентного микроскопа Olympus IX83 (Япония) и камеры Olympus XM-10 (Япония). Для окрашивания общего количества клеток использовался краситель DAPI (4',6-диамидино-2фенилиндол). Клетки были проанализированы и подсчитаны с помощью программного обеспечения MetaMorph 7.8 (Molecular Devices, LLC, США). Краситель DAPI добавляли в конечной концентрации 300 нМ перед подсчетом клеток для идентификации МНК, потерявших целостность мембраны. Спектр поглощения DAPI находится при длине волны 360 нм, а спектр эмиссии - 460 нм, в то время как спектры поглощения и эмиссии Annexin V-FITC находятся на 494 и 518 нм соответственно.After exposure to X-rays, the cells were incubated for 6 h at 37 ° C. The cells were then harvested and washed with PBS. After that, 1X annexin V, a binding buffer, and annexin V-FITC conjugate were added to the cell suspension. Early apoptosis in MNCs was identified by direct visualization of green-stained membranes using an Olympus IX83 inverted motorized fluorescence microscope (Japan) and an Olympus XM-10 camera (Japan). DAPI (4 ', 6-diamidino-2phenylindole) dye was used to stain the total number of cells. Cells were analyzed and counted using MetaMorph 7.8 software (Molecular Devices, LLC, USA). DAPI dye was added at a final concentration of 300 nM prior to cell counting to identify MNCs that have lost membrane integrity. The DAPI absorption spectrum is at 360 nm and the emission spectrum is 460 nm, while the Annexin V-FITC absorption and emission spectra are at 494 and 518 nm, respectively.
Для статистического анализа влияния ионизирующего излучения на жизнеспособность клеток, продукцию АФК, повреждение ДНК и апоптоз в МНК применялся односторонний факториальный анализ вариаций с повторностями. Анализ применялся для каждой тестируемой вариации. ЭкспериментальныеFor statistical analysis of the effect of ionizing radiation on cell viability, ROS production, DNA damage, and apoptosis in MNCs, a one-way factorial analysis of variations with replicates was used. The analysis was applied for each test variation. Experimental
- 3 038648 данные представлены как среднее от трех независимых повторностей образцов и соответствующая стандартная ошибка среднего.- 3,038648 data are presented as the mean of three independent replicates of the samples and the corresponding standard error of the mean.
Исследования показали, что обработка клеток εACA защищает их от действия ионизирующего излучения. Во всех группах клеток, обработанных εACA и подверженных облучению дозами рентгеновского облучения 22.62 и 45.27 mGv, наблюдался защитный эффект и сохранение большего количества жизнеспособных клеток в сравнении с группами клеток, не обработанных εACA, а также клеток, обработанных пероксидом водорода. Также обработка клеток εACA способствовало их защите от ионизирующего излучения при максимальной дозе в 67.88 mGv. При этом повышение концентрации εACA не приводило к значительному понижению жизнеспособности клеток, что свидетельствует о низкой токсичности препарата.Studies have shown that treatment of cells with εACA protects them from the effects of ionizing radiation. In all groups of cells treated with εACA and exposed to X-ray doses of 22.62 and 45.27 mGv, a protective effect and preservation of a larger number of viable cells was observed in comparison with the groups of cells not treated with εACA, as well as cells treated with hydrogen peroxide. Also, treatment of cells with εACA promoted their protection from ionizing radiation at a maximum dose of 67.88 mGv. At the same time, an increase in the concentration of εACA did not lead to a significant decrease in cell viability, which indicates the low toxicity of the drug.
Наши данные также показали, что рентгеновское излучение вызывает продукцию внутриклеточных АФК. Результаты экспериментов позволили отметить, что уровень АФК повышается вместе с повышением дозы воздействия облучения. Максимальный уровень АФК в клетках наблюдался при самой высокой дозе радиации - 67.88 mGv. Результаты экспериментов показали, что обработка клеток аминокапроновой кислотой привела к понижению уровня АФК во всех группах обработанных клеток.Our data also showed that X-ray radiation induces the production of intracellular ROS. The results of the experiments made it possible to note that the level of ROS increases along with an increase in the dose of exposure to radiation. The maximum ROS level in cells was observed at the highest radiation dose - 67.88 mGv. The experimental results showed that the treatment of cells with aminocaproic acid led to a decrease in the level of ROS in all groups of treated cells.
Также наши данные показали, что при воздействии рентгеновского облучения на клетки, не обработанные εACA, с повышением дозы облучения повышался и процент одно- и двухцепочечных повреждений ДНК в клетках. А добавление εACA к культуре клеток позволило почти полностью снизить процент ДНК повреждений в группе '67.88 mGv+εACA' до уровня контрольной группы.Our data also showed that when cells that were not treated with εACA were exposed to X-ray irradiation, the percentage of single- and double-stranded DNA damage in cells increased with increasing radiation dose. And the addition of εACA to the cell culture made it possible to almost completely reduce the percentage of DNA damage in the '67 .88 mGv + εACA 'group to the level of the control group.
Предварительная обработка клеток с помощью εACA привела к значительному подавлению апоптоза, индуцированного радиацией. Аналогичные результаты были обнаружены в группе положительного контроля (с добавлением перекиси водорода и εACA). Увеличение числа клеток в ранней апоптотической фазе коррелировала с увеличением дозы облучения, где максимальный эффект был обнаружен в группе, облученной 67.88 mGv (85.60±0.032%, p<0.001). Было обнаружено, что εACA способна ингибировать апоптоз в группе, облученной дозой 67.88 mGv, самой высокой в наших экспериментах (уровень апоптоза 29.67±0.025%, p<0.001 против контроля).Pretreatment of cells with εACA resulted in a significant suppression of radiation-induced apoptosis. Similar results were found in the positive control group (supplemented with hydrogen peroxide and εACA). An increase in the number of cells in the early apoptotic phase correlated with an increase in the radiation dose, where the maximum effect was found in the group irradiated with 67.88 mGv (85.60 ± 0.032%, p <0.001). It was found that εACA is able to inhibit apoptosis in the group irradiated with a dose of 67.88 mGv, the highest in our experiments (apoptosis level 29.67 ± 0.025%, p <0.001 versus control).
Микроскопический анализ показал наличие в клетках, подвергшихся рентгеновскому излучению, морфологических признаков ранней стадии апоптоза (запрограммированной гибели клеток),такие как увеличение размеров клетки, образование апоптотического тела и разрывы клеток. Максимальное количество клеток, окрашенных красителем-индикатором апоптоза (аннексин V), наблюдалось в группе, подверженной наибольшей дозе облучения 67,88 mGv, в то время как клетки из групп с введенной εACA продемонстрировали сохранение морфологической целостности и отсутствие признаков апоптоза.Microscopic analysis showed the presence of morphological signs of an early stage of apoptosis (programmed cell death) in cells exposed to X-rays, such as an increase in cell size, the formation of an apoptotic body and cell rupture. The maximum number of cells stained with an apoptosis indicator dye (annexin V) was observed in the group exposed to the highest irradiation dose of 67.88 mGv, while cells from the groups with εACA injected showed preservation of morphological integrity and no signs of apoptosis.
Данные наших экспериментов показали терапевтический потенциал εACA для предотвращения радиационно-опосредованного повреждения ДНК в лейкоцитах, которые очень чувствительны к ионизирующей радиации. Радиозащита белых клеток крови является очень важной задачей для национальных служб здравоохранения, особенно для защиты больных раком, которые регулярно проходят лучевую терапию как жизненно важный компонент противоракового лечения. Более того, антивирусный потенциал εACA также был бы полезен для применения в онкологических клиниках. Хорошо известно, что химиотерапия вызывает подавление иммунной системы, что увеличивает риск вирусных инфекций, которые преимущественно поражают дыхательные пути, и приводит к повышению летальности. В этом отношении синергетическая активность εACA против аденовирусов и радиационно-индуцированных эффектов может быть использована для пациентов, проходящих химиотерапию.Our experimental data showed the therapeutic potential of εACA to prevent radiation-mediated DNA damage in leukocytes, which are highly sensitive to ionizing radiation. Radioprotection of white blood cells is a very important task for national health services, especially for the protection of cancer patients who regularly receive radiation therapy as a vital component of cancer treatment. Moreover, the antiviral potential of εACA would also be useful for use in cancer clinics. It is well known that chemotherapy suppresses the immune system, which increases the risk of viral infections, which mainly affect the respiratory tract, and leads to increased mortality. In this regard, the synergistic activity of εACA against adenoviruses and radiation-induced effects can be used for patients undergoing chemotherapy.
Помимо очевидных преимуществ для лечения рака также существует высокая потребность в эффективном фармацевтическом агенте для профилактики радиационной опосредованной токсичности тканей среди персонала, обслуживающего ядерные реакторы/станции. Кроме того, такой препарат был бы полезен для космонавтов, особенно для тех, кто участвует в длинных космических полетах, включая миссии Международной Космической Станции (МКС). Уже сообщалось о чувствительности белых кровяных клеток космонавтов к повреждению ДНК, вызванному гамма-излучением [24]. В более широком смысле безопасный и эффективный радиозащитник может потенциально использоваться для защиты населения в регионах, подверженных ядерным авариям.In addition to the obvious benefits for cancer treatment, there is also a high demand for an effective pharmaceutical agent for the prevention of radiation-mediated tissue toxicity among personnel serving nuclear reactors / plants. In addition, such a drug would be useful for astronauts, especially those who participate in long space missions, including missions to the International Space Station (ISS). The sensitivity of white blood cells of astronauts to DNA damage caused by gamma radiation has already been reported [24]. More broadly, a safe and effective radioprotector can potentially be used to protect populations in regions prone to nuclear accidents.
Следует отметить, что εACA признана безопасным лекарством, которое использовалось в качестве антифибринолитического средства в больницах в течение последних шести десятилетий. В наших экспериментах εACA продемонстрировала способность уменьшать последствия радиационного облучения даже в низких дозах, что свидетельствует о возможности использования безопасности интоксикации и побочных эффектов.It should be noted that εACA has been recognized as a safe drug that has been used as an antifibrinolytic agent in hospitals for the past six decades. In our experiments, εACA demonstrated the ability to reduce the effects of radiation exposure even at low doses, which indicates the possibility of using the safety of intoxication and side effects.
Как медицинский препарат ε-аминокапроновая кислота (εACA) хорошо известна более 60 лет. Ее промышленное производство хорошо налажено во многих странах мира. Цитопротекторные препараты на базе εACA согласно изобретению могут быть легко изготовлены промышленным путем и использованы для профилактики и амбулаторного или клинического лечения поражений кроветворительной системы, индуцированных ионизирующей радиацией. Такие препараты будут обладать цитопротекторнойAs a medicine, ε-aminocaproic acid (εACA) has been well known for over 60 years. Its industrial production is well established in many countries of the world. The εACA cytoprotective preparations according to the invention can be easily manufactured industrially and used for the prophylaxis and outpatient or clinical treatment of lesions of the hematopoietic system induced by ionizing radiation. Such drugs will have cytoprotective
- 4 038648 активностью, легко усваиваются и в терапевтических дозах практически безвредны для человека.- 4 038648 activity, easily assimilated and in therapeutic doses practically harmless to humans.
Использованная литература.References.
1. Kouvaris JR, Kouloulias VE, Vlahos LJ (June 2007). Amifostine:1. Kouvaris JR, Kouloulias VE, Vlahos LJ (June 2007). Amifostine:
the first selective-target and broad-spectrum radioprotector. Oncologist. 12 (6):the first selective-target and broad-spectrum radioprotector. Oncologist. 12 (6):
738-47. PMID 17602063. doi:10.1634/theoncologist.l2-6-738.738-47. PMID 17602063. doi: 10.1634 / theoncologist.l2-6-738.
2. Amifostine : BC Cancer Agency. British Columbia Cancer Agency. 2006-03-01. Retrieved 2011-01-01.2. Amifostine: BC Cancer Agency. British Columbia Cancer Agency. 2006-03-01. Retrieved 2011-01-01.
3. Koukourakis, Michael I.; Giatromanolaki, Alexandra; Zois, Christos E.; Kalamida, Dimitra; Pouliliou, Stamatia; Karagounis, Ilias V.; Yeh, Tzu-Lan; Abboud, Martine I.; Claridge, Timothy D. W. (2016-08-10). Normal tissue radioprotection by amifostine via Warburg-type effects. Scientific Reports. 6. ISSN 20452322. PMC 4978965. PMID 27507219. doi:10.1038/srep309863. Koukourakis, Michael I .; Giatromanolaki, Alexandra; Zois, Christos E .; Kalamida, Dimitra; Pouliliou, Stamatia; Karagounis, Ilias V .; Yeh, Tzu-Lan; Abboud, Martine I .; Claridge, Timothy D. W. (2016-08-10). Normal tissue radioprotection by amifostine via Warburg-type effects. Scientific Reports. 6. ISSN 20452322. PMC 4978965. PMID 27507219. doi: 10.1038 / srep30986
4. Beaven AW, Shea TC (September 2007). The effect of palifermin on chemotherapyand radiation therapy-induced mucositis: a review of the current literature. Support Cancer Ther. 4 (4): 188-97. PMID 18632516. doi:10.3816/SCT.2007. n.014.4. Beaven AW, Shea TC (September 2007). The effect of palifermin on chemotherapyand radiation therapy-induced mucositis: a review of the current literature. Support Cancer Ther. 4 (4): 188-97. PMID 18632516.doi: 10.3816 / SCT.2007. n.014.
5. Kepivance entry in the public domain NCI Dictionary of Cancer Terms5. Kepivance entry in the public domain NCI Dictionary of Cancer Terms
6. Blijlevens N, Sonis S (May 2007). Palifermin (recombinant keratinocyte growth factor-1): a pleiotropic growth factor with multiple biological activities in preventing chemotherapy- and radiotherapy-induced mucositis. Ann. Oncol. 18 (5): 817-26. PMID 17030544. doi:10.1093/annonc/md!332.6. Blijlevens N, Sonis S (May 2007). Palifermin (recombinant keratinocyte growth factor-1): a pleiotropic growth factor with multiple biological activities in preventing chemotherapy- and radiotherapy-induced mucositis. Ann. Oncol. 18 (5): 817-26. PMID 17030544.doi: 10.1093 / annonc / md! 332.
7. Spielberger R. Stiff P, Bensinger W, et al. (December 2004). Palifermin for oral mucositis after intensive therapy for hematologic cancers.7. Spielberger R. Stiff P, Bensinger W, et al. (December 2004). Palifermin for oral mucositis after intensive therapy for hematologic cancers.
N. Engl. J. Med. 351 (25): 2590-8. PMID 15602019.N. Engl. J. Med. 351 (25): 2590-8. PMID 15602019.
doi: 10.1056/NEJMoa040125.doi: 10.1056 / NEJMoa040125.
8. McDonnell AM, Lenz KL (January 2007). Palifermin: role in the prevention of chemotherapy- and radiation-induced mucositis. Ann Pharmacothcr. 41 (1): 86-94. PMID 17190850. doi:10.1345/aph.lG473.8. McDonnell AM, Lenz KL (January 2007). Palifermin: role in the prevention of chemotherapy- and radiation-induced mucositis. Ann Pharmacothcr. 41 (1): 86-94. PMID 17190850. doi: 10.1345 / aph.lG473.
9. Kepivance (Palifermin) Drug. RxList. June 2013.9. Kepivance (Palifermin) Drug. RxList. June 2013.
10. Griffin, J.D. and L. Ellman, Epsilon-Aminocaproic Acid (Eaca). Seminars in Thrombosis and Hemostasis, 1978. 5(1): p. 27-39.10. Griffin, J.D. and L. Ellman, Epsilon-Aminocaproic Acid (Eaca). Seminars in Thrombosis and Hemostasis, 1978.5 (1): p. 27-39.
1. Messmore, H.L., et al., Invitro Effects of Epsilon Aminocaproic Acid (Eaca) and Aprotinin (Trasylol) on Coagulation Parameters. Federation Proceedings, 1976. 35(3): p. 804-804.1. Messmore, H. L., et al., Invitro Effects of Epsilon Aminocaproic Acid (Eaca) and Aprotinin (Trasylol) on Coagulation Parameters. Federation Proceedings, 1976.35 (3): p. 804-804.
12. Warren, J.W., Jr. and K.E. Stanley, Jr., New anti-hemorrhagic agent, epsilon aminocaproic acid for control of hemorrhage after transurethral prostatic resection: a control study. The Journal of the Kansas Medical Society, 1969. 70(4): p. 173-6.12. Warren, J.W., Jr. and K.E. Stanley, Jr., New anti-hemorrhagic agent, epsilon aminocaproic acid for control of hemorrhage after transurethral prostatic resection: a control study. The Journal of the Kansas Medical Society, 1969.70 (4): p. 173-6.
- 5 038648- 5 038648
13. Lozitsky, V.P., L.E. Puzis, and R. Polyak, Resistance of mice to reinfection after E-aminocaproic acid treatment of primary influenza virus infection. Acta Virologica, 1988. 32(2): p. 117-22.13. Lozitsky, V.P., L.E. Puzis, and R. Polyak, Resistance of mice to reinfection after E-aminocaproic acid treatment of primary influenza virus infection. Acta Virologica, 1988.32 (2): p. 117-22.
14. Nosach, L., et al., Inhibition of proteolytic processing of adenoviral proteins by epsilon-aminocaproic acid and ambenum in adenovirus-infected cells. Acta Biochimica Polonica, 2002. 49(4): p. 1005-1012.14. Nosach, L., et al., Inhibition of proteolytic processing of adenoviral proteins by epsilon-aminocaproic acid and ambenum in adenovirus-infected cells. Acta Biochimica Polonica, 2002.49 (4): p. 1005-1012.
15. Serkedjieva, J., E. Nikolova, and N. Kirilov, Synergistic inhibition of Influenza A virus replication by a plant polyphenol-rich extract and epsilonaminocaproic acid in vitro and in vivo. Acta Virologica, 2010. 54(2): p. 137-145.15. Serkedjieva, J., E. Nikolova, and N. Kirilov, Synergistic inhibition of Influenza A virus replication by a plant polyphenol-rich extract and epsilonaminocaproic acid in vitro and in vivo. Acta Virologica, 2010.54 (2): p. 137-145.
16. Dittmann, K., ct al., The radioprotector Bowman-Birk proteinase inhibitor stimulates DNA repair via epidermal growth factor receptor phosphorytation and nuclear transport. Radiotherapy and Oncology, 2008. 86(3): p. 375-382.16. Dittmann, K., ct al., The radioprotector Bowman-Birk proteinase inhibitor stimulates DNA repair via epidermal growth factor receptor phosphorytation and nuclear transport. Radiotherapy and Oncology, 2008.86 (3): p. 375-382.
17. Grabarek, J., et al., Sequential Activation of Caspases and Serine Proteases (Serpases) During Apoptosis. Cell Cycle, 2002. 1(2): p. 124-131.17. Grabarek, J., et al., Sequential Activation of Caspases and Serine Proteases (Serpases) During Apoptosis. Cell Cycle, 2002.1 (2): p. 124-131.
18. Jiang, X., et al., Activation of mitochondrial protease 0MA1 by Bax and Bak promotes cytochrome c release during apoptosis. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America, 2014. 111(41): p. 14782-14787.18. Jiang, X., et al., Activation of mitochondrial protease 0MA1 by Bax and Bak promotes cytochrome c release during apoptosis. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America, 2014.111 (41): p. 14782-14787.
19. Martin, S.J. and D.R. Green, Protease Activation during Apoptosis Death by 1000 Cuts. Cell, 1995. 82(3): p. 349-352.19. Martin, S.J. and D.R. Green, Protease Activation during Apoptosis Death by 1000 Cuts. Cell, 1995.82 (3): p. 349-352.
20. Mates, J.M. and F.M. Sanchez-Jimenez, Role of reactive oxygen species in apoptosis: implications for cancer therapy. International Journal of Biochemistry & Cell Biology, 2000. 32(2): p. 157-170.20. Mates, J.M. and F.M. Sanchez-Jimenez, Role of reactive oxygen species in apoptosis: implications for cancer therapy. International Journal of Biochemistry & Cell Biology, 2000.32 (2): p. 157-170.
21. Ogawa, Y., et al., Reactive oxygen species-producing site in radiation-induced apoptosis of human peripheral T cells: Involvement of lysosomal membrane destabilization. International Journal of Molecular Medicine, 2004. 13(1): p. 69-73.21. Ogawa, Y., et al., Reactive oxygen species-producing site in radiation-induced apoptosis of human peripheral T cells: Involvement of lysosomal membrane destabilization. International Journal of Molecular Medicine, 2004.13 (1): p. 69-73.
22. Voloboueva LA, Liu J, Suh JH, et al. (R)-alpha-lipoic acid protects retinal pigment epithelial cells from oxidative damage. Invest Ophth Vis Sci 2005;46(l 1):4302-10.22. Voloboueva LA, Liu J, Suh JH, et al. (R) -alpha-lipoic acid protects retinal pigment epithelial cells from oxidative damage. Invest Ophth Vis Sci 2005; 46 (l 1): 4302-10.
23. Bao L, Avshalumov MV, Rice ME. Partial mitochondrial inhibition causes striatal dopamine release suppression and medium spiny neuron depolarization via H2O2 elevation, not ATP depletion. J Neurosci 2005;25(43): 10029-40.23. Bao L, Avshalumov MV, Rice ME. Partial mitochondrial inhibition causes striatal dopamine release suppression and medium spiny neuron depolarization via H2O2 elevation, not ATP depletion. J Neurosci 2005; 25 (43): 10029-40.
24. Vorobyova, N.Y., A.N. Osipova, and 1.1. Pelevina, Sensitivity of peripheral blood lymphocytes of pilots and astronauts to gamma-radiation: Induction of double-stranded DNA breaks. Bulletin of experimental biology and medicine, 2007. 144(4): p. 523-526.24. Vorobyova, N.Y., A.N. Osipova, and 1.1. Pelevina, Sensitivity of peripheral blood lymphocytes of pilots and astronauts to gamma-radiation: Induction of double-stranded DNA breaks. Bulletin of experimental biology and medicine, 2007.144 (4): p. 523-526.
Claims (1)
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KZ20180528 | 2018-07-31 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| EA201800585A1 EA201800585A1 (en) | 2020-02-28 |
| EA038648B1 true EA038648B1 (en) | 2021-09-29 |
Family
ID=69636650
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| EA201800585A EA038648B1 (en) | 2018-07-31 | 2018-09-25 | Radioprotective property of aminocaproic acid |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| EA (1) | EA038648B1 (en) |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2005029490A (en) * | 2003-07-10 | 2005-02-03 | Sosin:Kk | Tyrosinase inhibitor, active oxygen retarder and skin care preparation for external use |
| RU2323722C2 (en) * | 2005-12-26 | 2008-05-10 | Валентин Викторович Петров | Pharmaceutical composition for photodynamic treatment and method of treatment of oncology diseases with use of composition |
-
2018
- 2018-09-25 EA EA201800585A patent/EA038648B1/en unknown
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2005029490A (en) * | 2003-07-10 | 2005-02-03 | Sosin:Kk | Tyrosinase inhibitor, active oxygen retarder and skin care preparation for external use |
| RU2323722C2 (en) * | 2005-12-26 | 2008-05-10 | Валентин Викторович Петров | Pharmaceutical composition for photodynamic treatment and method of treatment of oncology diseases with use of composition |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| DITTMANN K. et al. The radioprotector Bowman-Birk proteinase inhibitor stimulates DNA repair via epidermal growth factor receptor phosphorylation and nuclear transport. Radiotherapy and Oncology 86 (2008) 375-382, весь текст * |
| Z. Hruby et al. Mechanism of antinephritic effect of proteinase inhibitors in experimental anti-GBM glomerulopathy. Research in Experimental Medicine 199 (2000) 295-307, весь текст * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EA201800585A1 (en) | 2020-02-28 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Singh et al. | A review of radiation countermeasures focusing on injury-specific medicinals and regulatory approval status: part III. Countermeasures under early stages of development along with ‘standard of care’medicinal and procedures not requiring regulatory approval for use | |
| Benković et al. | Evaluation of the radioprotective effects of propolis and flavonoids in gamma-irradiated mice: the alkaline comet assay study | |
| Coura et al. | A critical review on Chagas disease chemotherapy | |
| Marini | Oxygen radicals induce stress proteins and tolerance to oxidative stress in human lymphocytes | |
| Yacoub et al. | MDA-7 regulates cell growth and radiosensitivity in vitro of primary (non-established) human glioma cells | |
| Shankar et al. | Sensitization of TRAIL-resistant LNCaP cells by resveratrol (3, 4', 5 tri-hydroxystilbene): molecular mechanisms and therapeutic potential | |
| Yamamoto et al. | Pretreatment with ascorbic acid prevents lethal gastrointestinal syndrome in mice receiving a massive amount of radiation | |
| JP2555174B2 (en) | Novel synthetic bioactive compounds and methods for producing bioactive effects | |
| Dagnino et al. | Phloroglucinol derivatives from Hypericum species trigger mitochondrial dysfunction in Leishmania amazonensis | |
| LV13745B (en) | Silver/water, silver gels and silver based compositions, and methods for making and using the same | |
| EP2922573B1 (en) | Pharmaceutical composition used for reducing damage caused by free radicals | |
| US5824664A (en) | Suppression of HIV expression by organic thiophosphate | |
| CN108309982A (en) | The purposes of 5H- [1,2,4] triazine [5,6-b] indole derivatives of 3 substitutions | |
| de Sousa et al. | Antileishmanial activity of 2-amino-thiophene derivative SB-200 | |
| Whittaker et al. | Neutrophil function in chronic granulocytic leukaemia before and after busulphan treatment | |
| Tsai et al. | Suppression of Fas ligand expression on endothelial cells by arsenite through reactive oxygen species | |
| Habashy et al. | Identification of effective anti-HCV and anti-HIV royal jelly constituents and their acute toxicity evaluation in Albino rats | |
| Hu et al. | Apoptosis as an underlying mechanism in lymphocytes induced by riboflavin and ultraviolet light | |
| EA038648B1 (en) | Radioprotective property of aminocaproic acid | |
| Rahgoshai et al. | Evaluating the radioprotective effect of Cimetidine, IMOD, and hybrid radioprotectors agents: an in-vitro study | |
| Urban et al. | Neutrophil function and glutathione-peroxidase (GSH-px) activity in healthy individuals after treatment with N-acetyl-L-cysteine | |
| Ahmed et al. | Bradykinin-potentiating activity of a gamma-Irradiated bioactive fraction isolated from scorpion (Leiurus quinquestriatus) venom in rats with doxorubicin-induced acute cardiotoxicity: favorable modulation of oxidative stress and inflammatory, fibrogenic and apoptotic pathways | |
| Sieber et al. | Effects of hycanthone on rapidly proliferating cells | |
| dos Santos Petry et al. | In vitro and in vivo trypanocidal activity of a benzofuroxan derivative against Trypanosoma cruzi | |
| CZ308873B6 (en) | Use of heme arginate for manufacturing a medicament for reducing the size of the latent HIV-1 reservoir in vivo |