EA003453B1 - АГОНИСТЫ β2-АДРЕНЕРГИЧЕСКОГО РЕЦЕПТОРА - Google Patents

АГОНИСТЫ β2-АДРЕНЕРГИЧЕСКОГО РЕЦЕПТОРА Download PDF

Info

Publication number
EA003453B1
EA003453B1 EA200100014A EA200100014A EA003453B1 EA 003453 B1 EA003453 B1 EA 003453B1 EA 200100014 A EA200100014 A EA 200100014A EA 200100014 A EA200100014 A EA 200100014A EA 003453 B1 EA003453 B1 EA 003453B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
group
hydroxy
compound
hydrogen
substituted
Prior art date
Application number
EA200100014A
Other languages
English (en)
Other versions
EA200100014A1 (ru
Inventor
Эдмунд Дж. Моран
Сеок-Ки Чои
Original Assignee
Тереванс Инк.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Тереванс Инк. filed Critical Тереванс Инк.
Priority claimed from PCT/US1999/011804 external-priority patent/WO1999064035A1/en
Publication of EA200100014A1 publication Critical patent/EA200100014A1/ru
Publication of EA003453B1 publication Critical patent/EA003453B1/ru

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/60—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D213/72—Nitrogen atoms
    • C07D213/74—Amino or imino radicals substituted by hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/54—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic compound
    • A61K47/55—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic compound the modifying agent being also a pharmacologically or therapeutically active agent, i.e. the entire conjugate being a codrug, i.e. a dimer, oligomer or polymer of pharmacologically or therapeutically active compounds
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C215/00—Compounds containing amino and hydroxy groups bound to the same carbon skeleton
    • C07C215/46—Compounds containing amino and hydroxy groups bound to the same carbon skeleton having hydroxy groups bound to carbon atoms of at least one six-membered aromatic ring and amino groups bound to acyclic carbon atoms or to carbon atoms of rings other than six-membered aromatic rings of the same carbon skeleton
    • C07C215/56—Compounds containing amino and hydroxy groups bound to the same carbon skeleton having hydroxy groups bound to carbon atoms of at least one six-membered aromatic ring and amino groups bound to acyclic carbon atoms or to carbon atoms of rings other than six-membered aromatic rings of the same carbon skeleton with amino groups linked to the six-membered aromatic ring, or to the condensed ring system containing that ring, by carbon chains further substituted by hydroxy groups
    • C07C215/58—Compounds containing amino and hydroxy groups bound to the same carbon skeleton having hydroxy groups bound to carbon atoms of at least one six-membered aromatic ring and amino groups bound to acyclic carbon atoms or to carbon atoms of rings other than six-membered aromatic rings of the same carbon skeleton with amino groups linked to the six-membered aromatic ring, or to the condensed ring system containing that ring, by carbon chains further substituted by hydroxy groups with hydroxy groups and the six-membered aromatic ring, or the condensed ring system containing that ring, bound to the same carbon atom of the carbon chain
    • C07C215/60—Compounds containing amino and hydroxy groups bound to the same carbon skeleton having hydroxy groups bound to carbon atoms of at least one six-membered aromatic ring and amino groups bound to acyclic carbon atoms or to carbon atoms of rings other than six-membered aromatic rings of the same carbon skeleton with amino groups linked to the six-membered aromatic ring, or to the condensed ring system containing that ring, by carbon chains further substituted by hydroxy groups with hydroxy groups and the six-membered aromatic ring, or the condensed ring system containing that ring, bound to the same carbon atom of the carbon chain the chain having two carbon atoms between the amino groups and the six-membered aromatic ring or the condensed ring system containing that ring
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C217/00—Compounds containing amino and etherified hydroxy groups bound to the same carbon skeleton
    • C07C217/02—Compounds containing amino and etherified hydroxy groups bound to the same carbon skeleton having etherified hydroxy groups and amino groups bound to acyclic carbon atoms of the same carbon skeleton
    • C07C217/04—Compounds containing amino and etherified hydroxy groups bound to the same carbon skeleton having etherified hydroxy groups and amino groups bound to acyclic carbon atoms of the same carbon skeleton the carbon skeleton being acyclic and saturated
    • C07C217/06—Compounds containing amino and etherified hydroxy groups bound to the same carbon skeleton having etherified hydroxy groups and amino groups bound to acyclic carbon atoms of the same carbon skeleton the carbon skeleton being acyclic and saturated having only one etherified hydroxy group and one amino group bound to the carbon skeleton, which is not further substituted
    • C07C217/08—Compounds containing amino and etherified hydroxy groups bound to the same carbon skeleton having etherified hydroxy groups and amino groups bound to acyclic carbon atoms of the same carbon skeleton the carbon skeleton being acyclic and saturated having only one etherified hydroxy group and one amino group bound to the carbon skeleton, which is not further substituted the oxygen atom of the etherified hydroxy group being further bound to an acyclic carbon atom
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C323/00—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups
    • C07C323/50—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups containing thio groups and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton
    • C07C323/62—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups containing thio groups and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton having the sulfur atom of at least one of the thio groups bound to a carbon atom of a six-membered aromatic ring of the carbon skeleton
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D211/00—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings
    • C07D211/04—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D211/06—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D211/36—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D211/40—Oxygen atoms
    • C07D211/42—Oxygen atoms attached in position 3 or 5
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D211/00—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings
    • C07D211/04—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D211/06—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D211/36—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D211/56—Nitrogen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/60—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D213/78—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms, with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C07D213/79—Acids; Esters
    • C07D213/80—Acids; Esters in position 3
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D263/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-oxazole or hydrogenated 1,3-oxazole rings
    • C07D263/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-oxazole or hydrogenated 1,3-oxazole rings not condensed with other rings
    • C07D263/30—Heterocyclic compounds containing 1,3-oxazole or hydrogenated 1,3-oxazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D263/32—Heterocyclic compounds containing 1,3-oxazole or hydrogenated 1,3-oxazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with only hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D263/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-oxazole or hydrogenated 1,3-oxazole rings
    • C07D263/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-oxazole or hydrogenated 1,3-oxazole rings not condensed with other rings
    • C07D263/30—Heterocyclic compounds containing 1,3-oxazole or hydrogenated 1,3-oxazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D263/34—Heterocyclic compounds containing 1,3-oxazole or hydrogenated 1,3-oxazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D265/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one nitrogen atom and one oxygen atom as the only ring hetero atoms
    • C07D265/28—1,4-Oxazines; Hydrogenated 1,4-oxazines
    • C07D265/30—1,4-Oxazines; Hydrogenated 1,4-oxazines not condensed with other rings
    • C07D265/32—1,4-Oxazines; Hydrogenated 1,4-oxazines not condensed with other rings with oxygen atoms directly attached to ring carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D277/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings
    • C07D277/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings
    • C07D277/20—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D277/22—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with only hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D277/24—Radicals substituted by oxygen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D277/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings
    • C07D277/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings
    • C07D277/20—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D277/22—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with only hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D277/28—Radicals substituted by nitrogen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D277/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings
    • C07D277/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings
    • C07D277/20—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D277/32—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D277/34—Oxygen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D413/06—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings linked by a carbon chain containing only aliphatic carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings
    • C07D417/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K1/00—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
    • C07K1/04—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length on carriers
    • C07K1/047—Simultaneous synthesis of different peptide species; Peptide libraries
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/94—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving narcotics or drugs or pharmaceuticals, neurotransmitters or associated receptors
    • G01N33/9406—Neurotransmitters
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07B—GENERAL METHODS OF ORGANIC CHEMISTRY; APPARATUS THEREFOR
    • C07B2200/00—Indexing scheme relating to specific properties of organic compounds
    • C07B2200/11—Compounds covalently bound to a solid support
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C40—COMBINATORIAL TECHNOLOGY
    • C40B—COMBINATORIAL CHEMISTRY; LIBRARIES, e.g. CHEMICAL LIBRARIES
    • C40B40/00—Libraries per se, e.g. arrays, mixtures
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
    • G01N2333/435—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans
    • G01N2333/575—Hormones
    • G01N2333/62—Insulins
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
    • G01N2333/435—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans
    • G01N2333/705—Assays involving receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • G01N2333/70578—NGF-receptor/TNF-receptor superfamily, e.g. CD27, CD30 CD40 or CD95
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
    • G01N2333/435—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans
    • G01N2333/705—Assays involving receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • G01N2333/72—Assays involving receptors, cell surface antigens or cell surface determinants for hormones
    • G01N2333/726—G protein coupled receptor, e.g. TSHR-thyrotropin-receptor, LH/hCG receptor, FSH
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2500/00—Screening for compounds of potential therapeutic value

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)

Abstract

Представлены соединения, способные к образованию множественных связей, которые являются агонистами β2-адренергического рецептора, и полезные при лечении и профилактике заболеваний органов дыхания, таких как астма, бронхит. Они также полезны при лечении поражений нервной системы и при преждевременных родах.

Description

Предпосылки создания изобретения Область изобретения
Настоящее изобретение относится к новым полисвязывающим (способным к образованию множественных связей) соединениям (веществам), которые являются агонистами р2адренергического рецептора, и фармацевтическим композициям, содержащим такие соединения. Соответственно, полисвязывающие соединения и фармацевтические композиции данного изобретения полезны для лечения и профилактики заболеваний дыхательных путей, таких как астма и хронический бронхит. Они также полезны при лечении поражений нервной системы и при преждевременных родах.
Литература
Публикации цитируются в данной заявке под следующими надстрочными номерами:
1 Нагйтап, ТС., ек а1. Тйе Рйагтасо1од1са1 Ва818 ок Тйегареик1С8, МсСтает-НШ, Ыеет Уогк, (1966) 2 8кго8Ьегд, Ά.Ό. 8кгискиге, Рипскюп, апй Кеди1акюп ок Айгепегщс Кесеркога Ртокеш 8ск 2, 1198-1209 (1993).
3 Веск-81скшдег, А.С. 8ктискиге Сйатаскепхайоп апй Вшйшд 8йе§ ок С-Ртокет-соир1ей Кесеркога ΌΌΤ, 1, 502-513, (1996).
4 Нет, Ь. & КоЬйка, В. К. Айгепегщс Кесерког 8щпа1 Ттапзйискюп апй Веди1акюп №иторЬагтасок, 34, 357-366, (1995).
5 ЗктокЬетд, Α.Ό. & Р1екп-К.оихе1, Р. Рипсйоп, апй Кеди1акюп ок в3-Айгепосерког Т1Р8, 17, 373-381, (1996).
6 Вагпез, РЛ. Сштепк Тйегар1е8 кот Азкйта СНЕ8Т, 111:178-268, (1997).
7 .Гаск, Ό.Α. А етау ок Ьоокшд ак Адопйт апй Апкадошзт: Ьезкопк кгот 8а1Ьикато1, 8а1текего1 апй окйег β-Айгепосерког адопйй Вг. ί. С1ш. Рйагтас. 31, 501-514, (1991).
8 1<Й5е1 Рйагтасеик1са1 Со. Ькй. 2-Атшо-1(4-йуйгоху-2-текйу1рйепу1)ргорапо1 йепуайуек кР-10152460 (РиЬйсакюп йаке .Типе 9, 1998).
Все вышеуказанные публикации включены сюда в качестве ссылок во всей полноте в такой же степени, как если бы было конкретно и отдельно указано, что каждая отдельная публикация включена в виде ссылки во всей полноте.
Исходный уровень техники
Рецептор представляет собой биологическую структуру с одним или более связывающих доменов, которые обратимо образуют комплексы с одним или более лигандов и, когда указанное комплексообразование имеет биологические последствия. Рецепторы могут находиться только снаружи клетки (внеклеточные рецепторы), в клеточной мембране (но причем части рецептора экспонированы в внеклеточную среду и цитозоль), или полностью внутри клетки (внутриклеточные рецепторы). Они могут также функционировать независимо от клетки (например, образование сгустка). Рецепторы внутри клеточной мембраны позволяют клетке поддерживать связь с окружающим пространством кнаружи от ее границ (т.е. сигналами), а также функционировать в отношении транспорта молекул и ионов в клетку и из клетки.
Лиганд является связывающим партнером для конкретного рецептора или разновидности рецепторов. Лиганд может представлять собой эндогенный лиганд для рецептора, или же иначе может представлять синтетический лиганд для рецептора, такой как лекарство, потенциальное лекарство (кандидат) или фармакологическое средство.
Большое семейство из семи трансмембранных белков (7-ТМ), также называемое рецепторами, связывающими протеин С (РСПС), представляет один из наиболее значительных классов рецепторов на границе мембраны, которые передают изменения, которые происходят кнаружи от границ клетки в ее внутреннее пространство, инициируя реакцию клетки, когда это уместно. Протеины С, когда они активированы, влияют на широкий крут подчиненных эффекторных систем как позитивно, так и негативно (например, ионные каналы, каскады протеинкиназ, транскрипция, трансмиграция белков адгезии и тому подобное).
Адренергические рецепторы (АР) относятся к группе связывающих С-протеин рецепторов, которые состоят из семейства из трех подтипов рецепторов: α1 (а,в,б), а2(А,В,С) и β(1,2,3)1-5. Эти рецепторы экспрессируются в тканях различных систем и органов млекопитающих, и количественное соотношение рецепторов α и β зависит от ткани. Например, ткани бронхиальных гладких мышц экспрессируют большей частью в2-АР, тогда как ткани кровеносных сосудов кожи содержат исключительно подтипы αАР.
Установлено, что подтип в2-АР участвует в патогенезе заболеваний дыхательных путей, таких как астма6, хронический бронхит, поражение центральной нервной системы и преждевременные роды8. В настоящее время для лечения астмы используется ряд лекарств, например, альбутерол, формотерол, изопротенолол или сальметерол, обладающие действием агонистов в2-АР. Однако указанные лекарственные средства имеют ограниченное применение, так как они или являются неселективными, вызывая тем самым неблагоприятные побочные эффекты, такие как тремор мышц, тахикардия, сильное сердцебиение и беспокойство6, или имеют короткую продолжительность действия и/или длительный срок начала действия7. Соответственно, существует потребность в в2-селективных агонистах АР, которые являются быстродействующими и обладают повышенной активностью и/или большей продолжительностью действия.
Полисвязывающие соединения данного изобретения удовлетворяют эту потребность.
Краткое изложение изобретения
Данное изобретение направлено на новые полисвязывающие соединения (вещества), которые являются агонистами или частичными агонистами 32-адренергического рецептора и поэтому полезны при лечении и профилактике заболеваний дыхательных путей, таких как астма и хронический бронхит. Они также полезны при лечении поражения нервной системы и при преждевременных родах.
Соответственно один из аспектов данного изобретения представляет полисвязывающее соединение формулы (I) (й)р(Х)ф (I) где р равно целому числу от 2 до 10; ц равно целому числу от 1 до 20;
Х является линкером и
Б является лигандом, причем один из лигандов Б выбран из соединений формулы (а) н2 Ν-νν-Аг2 (a) где Аг1 и Аг2 независимо выбраны из группы, состоящей из арила, гетероарила, циклоалкила, замещенного циклоалкила и гетероциклила, причем каждый из указанных заместителей Аг1 и Аг2 необязательно связывает лиганд с линкером;
К1 выбран из группы, состоящей из водорода, алкила и замещенного алкила, или К1 является ковалентной связью, соединяющей лиганд с линкером;
К2 выбран из группы, состоящей из водорода, алкила, аралкила, ацила, замещенного алкила, циклоакила и замещенного циклоалкила, или К2 является ковалентной связью, соединяющей лиганд с линкером;
является ковалентной связью, соединяющей -Ν [Б-группу с Аг2, алкиленом или замещенным алкиленом, где один или более атомов углерода в указанной алкиленовой или замещенной алкиленовой группе необязательно заменен(ы) заместителем, выбранным из -ΝΚα(где Ка является водородом, алкилом, ацилом или ковалентной связью, соединяющей лиганд с линкером), -О-, -8(О)П (где η равно целому числу от 0 до 2), -СО-, -РКЪ- (где КЪ является алкилом), -Р(О)2- и -О-Р(О)О- и, кроме того, указанная алкиленовая или замещенная алкиленовая группа необязательно связывает лиганд с линкером, при условии, что, по меньшей мере, один из Аг1, Аг2, К1, К2 или связывает лиганд с линкером; и другие лиганды независимо выбраны из соединений формулы (Ъ):
-р-Аг3 (b) где Аг3 выбран из группы, состоящей из арила, гетероарила, циклоалкила, замещенного цикло алкила и гетероциклила;
С), который связывает другой лиганд с линкером, выбран из группы, состоящей из ковалентной связи, алкиленовой или замещенной алкиленовой группы, причем один или более атомов углерода в указанной алкиленовой или замещенной алкиленовой группе необязательно заменен заместителем, выбранным из -\Ка- (где Ка является водородом, алкилом, ацилом или ковалентной связью, соединяющей лиганд с линкером), -О-, -8(О)П- (где η равно целому числу от 0 до 2), -СО, -РКЪ- (где КЪ является алкилом), -Р(О)2- и -О-Р(О)О- и их фармацевтически приемлемые соли, при условии, что (1) когда полисвязывающее соединение формулы (I) является соединением формулы
где Аг1 и Аг3 представляют собой арил, то и X, оба не являются алкиленом или алкилен-О-;
(ΐΐ) когда полисвязывающее соединение формулы (I) является соединением формулы
Аг1 является 4-гидрокси-2-метилфенилом,
Аг2 является арилом, Аг3 представляет собой арил или гетероциклил, является этиленом, О является ковалентной связью, К1 является алкилом, то линкер X не связан с Аг3 группой через атом кислорода; и (ϊΐϊ) когда полисвязывающее соединение формулы (I) является соединением формулы
где Аг1 и Аг3 являются арилом, является алкиленом, Аг2 представляет собой арил или циклоалкил, О является ковалентной связью, то Х не является -алкилен-О-.
Более предпочтительно, каждый линкер, X, в полисвязывающем соединении формулы (I) независимо имеет формулу
-Χα-Ζ-(Υα-Ζ)ω-Χαгде т равно целому числу от 0 до 20;
Ха в каждом отдельном случае выбран из группы, состоящей из -О-, -8-, -ΝΕ-, -С(О)-, -С(О)О-, -ОС(О)-, -С(О)Ж-, -ЫКС(О)-, С(8)-, -С(8)О-, -С(8^К-, -ХКС(8)- или ковалентной связи, где К определен ниже;
Ζ в каждом отдельном случае выбран из группы, состоящей из алкилена, замещенного алкилена, циклоалкилена, замещенного циклоалкилена, алкенилена, замещенного алкенилена, алкинилена, замещенного алкинилена, циклоалкенилена, замещенного циклоалкенилена, арилена, гетероарилена, гетероциклена или ковалентной связи;
каждый Υα в каждом отдельном случае выбран из группы, состоящей из -О-, -С(О)-,
-ОС(О)-, -С(О)О-, -ΝΚ-, -8(Θ)η-, -Ο(Θ)ΝΚ'-, -ΝΚΌ(Ο)-, -ΝΚΌ(Ο)ΝΚ'-, -ΝΚΌ(8)ΝΚ'-,
-Ο(=ΝΚ')-ΝΚ'-, -ΝΚ'-Ο(=ΝΚ')-, -ΟΟ(Θ)-ΝΚ'-,
-ΝΚ'-Ο(Ο)-Θ-, -Ν (|Χ1-ΝΚ-. -ΝΚ'-Ο(Χα)=Ν-, -Ρ(Ο)(ΟΚ')-Ο-, -Ο-Ρ(Ο)(ΟΚ')-, -8(Ο)ηΟΚ'Κ-,
-8(Ο)η-ΝΚ'-, -ΝΚ'-8(Ο)η-, -8-8- и ковалентной связи; где η равно 0, 1 или 2;
Κ, Κ' и Κ в каждом отдельном случае выбираются из группы, состоящей из водорода, алкила, замещенного алкила, циклоалкила, замещенного циклоалкила, алкенила, замещенного алкенила, циклоалкенила, замещенного циклоалкенила, алкинила, замещенного алкинила, арила, гетероарила и гетероциклила, и Ха определен выше.
Предпочтительно ς меньше р в полисвязывающих веществах этого изобретения.
Еще один из аспектов данного изобретения представляет фармацевтическую композицию, содержащую фармацевтически приемлемый носитель и эффективное количество полисвязывающего соединения формулы (I) (ШХ)ф (I) где р равно целому числу от 2 до 10;
ς равно целому числу от 1 до 20;
Х является линкером и
Ь является лигандом, причем один из лигандов Ь выбран из соединения формулы (а)
Н2 Ν-νν-Аг2
К' (а) где Аг1 и Аг2 независимо выбраны из группы, состоящей из арила, гетероарила, циклоалкила, замещенного циклоалкила и гетероциклила, где каждый из указанных заместителей Аг1 и Аг2 необязательно связывает лиганд с линкером;
Κ1 выбран из группы, состоящей из водорода, алкила, замещенного алкила, или Κ1 является ковалентной связью, соединяющей лиганд с линкером;
Κ2 выбран из водорода, алкила, аралкила, ацила, замещенного алкила, циклоалкила и замещенного циклоалкила, или Κ2 является ковалентной связью, соединяющей лиганд с линкером;
Ш является ковалентной связью, соединяющей -NΚ2-гρуппу с Аг2, алкиленом или замещенным алкиленом, причем один или более атомов углерода в указанных алкиленовой или замещенной алкиленовой группе необязательно заменен(ы) заместителем, выбранным из -ΝΚα(где Ка является водородом, алкилом, ацилом или ковалентной связью, соединяющей лиганд с линкером), -О-, -8(Ο)η- (где η равно целому числу от 0 до 2), -СО-, -РКЬ- (где Кь является алкилом), Φ(Ο)2- и -ΟΦ^Ο- и, кроме того, указанная алкиленовая или замещенная алкиленовая группа связывает лиганд с линкером, при усло вии, что, по меньшей мере, один из Аг1, Аг2, Κ1, Κ2 или Ш связывает лиганд с линкером; и другие лиганды независимо выбраны из соединения формулы (Ь)
-р-Аг3 (Ь) где Аг3 выбран из группы, состоящей из арила, гетероарила, циклоалкила, замещенного циклоалкила и гетероциклила;
Р, который связывает лиганд с линкером, выбран из группы, состоящей из ковалентной связи, алкиленовой или замещенной алкиленовой группы, причем один или более атомов углерода в указанной алкиленовой или замещенной алкиленовой группе необязательно заменен(ы) заместителем, выбранным из -ΝΚα- (где Ка является водородом, алкилом, ацилом или ковалентной связью, соединяющей лиганд с линкером), -О-, -8(Ο)η- (где η равно целому числу от 0 до 2), -СО-, -РКЬ- (где Кь является алкилом), -Р^^-и -Ο^Ο^-; и его фармацевтически приемлемой соли, при условии, что (1) когда полисвязывающее соединение формулы (I) является соединением формулы
где Аг1 и Аг3 являются арилом, то Ш и X, оба не являются алкиленом или алкилен-Ο-;
(11) когда полисвязывающее соединение формулы (I) является соединением формулы где Аг1
является 4-гидрокси-2-метилфенилом,
Аг2 является арилом, Аг3 представляет собой арил или гетероциклил, Ш является этиленом, Р является ковалентной связью, Κ1 является алкилом, то линкер X не связан с группой Аг3 через атом кислорода; и (ίίί) когда полисвязывающее соединение формулы (I) является соединением формулы
ОН £2 я1 где Аг1, Аг2, Аг3, Κ1, Κ2 определены выше, Ш является алкиленом и Р является ковалентной связью, то Х не является -алкилен-Ο-.
Более предпочтительно, каждый линкер Х в полисвязывающем соединении формулы I, независимо, имеет формулу
-Ха-/-(¥а-/)„,-Хагде т равно целому числу от 0 до 20;
Ха в каждом отдельном случае выбран из группы, состоящей из -О-, -8-, -ΝΚ-, -С^)-, ^(Ο)Ο-, -ОС(Р)-, -Ο(Ο)ΝΚ-, -ΝΚΠ(Ο)-, С(8), -ϋ(8)Ο-, -С( 8 )ΝΚ-, -ΝΚΠ(8)- или ковалентной связи, где Κ определен выше;
Ζ в каждом отдельном случае выбран из группы, состоящей из алкилена, замещенного алкилена, циклоалкилена, замещенного циклоалкилена, алкенилена, замещенного алкенилена, алкинилена, замещенного алкинилена, циклоалкенилена, замещенного циклоалкенилена, арилена, гетероарилена, гетероциклена или ковалентной связи;
каждый Уа в каждом отдельном случае выбран из группы, состоящей из -О-, -С(О)-, -ОС(О)-, -С(О)О-, -ΝΚ-, -8(Ο)η-, -ε(Θ)ΝΚ'-, -ΝΚ'ε(Θ)-, -ΝΚΌ(Ο)ΝΚ'-, -ΝΚΌ(8)ΝΚ'-,
-Ο(=ΝΚ')-ΝΚ'-, -ΝΚ'-Ο(=ΝΚ')-, -Ο^Ο)-ΝΚ'-, -ΝΚ'-ϋ(Θ)-Θ-, -Ν=^Χ)-ΝΚ'-, -\К'-С(Ха)\-,
-Ρ(Ο)(ΟΚ')-Ο-, -Ο-Ρ(Ο)(ΟΚ')-, -8(Ο)£Κ'Κ-, -8(Ο)η-ΝΚ'-, -ΝΚ'-8(Ο)η-, -8-8- и ковалентной связи; где η равно 0, 1 или 2;
Κ, Κ' и Κ в каждом отдельном случае выбраны из группы, состоящей из водорода, алкила, замещенного алкила, циклоалкила, замещен ного циклоалкила, алкенила, замещенного алкенила, циклоалкенила, замещенного циклоалкенила, алкинила, замещенного алкинила, арила, гетероарила и гетероциклила, и Ха имеет указанные выше значения.
Еще один из аспектов данного изобретения представляет способ лечения заболеваний, опосредуемых 32-адренергическими рецепторами, у млекопитающих, причем указанный способ включает введение указанному млекопитающему терапевтически эффективного количества фармацевтической композиции, состоящей из фармацевтически приемлемого носителя и полисвязывающего соединения формулы (I) (ЩХ)ч где р равно целому числу от 2 до 10;
ς равно целому числу от 1 до 20;
Х является линкером и
Ь является лигандом, причем один из лигандов Ь выбран из соединений формулы (а)
ОН к2 аДА*'-*2 К1 (а) где Аг1 и Аг2 независимо выбраны из группы, состоящей из арила, гетероарила, циклоалкила, замещенного циклоалкила и гетероциклила, где каждый из указанных заместителей Аг1 и Аг2 необязательно соединяет лиганд с линкером;
Κ1 выбран из группы, состоящей из водорода, алкила и замещенного алкила, или Κ1 является ковалентной связью, соединяющей лиганд с линкером;
Κ2 выбран из группы, состоящей из водорода алкила, аралкила, ацила, замещенного алкила, циклоалкила и замещенного циклоалкила, или Κ2 является ковалентной связью, соединяющей лиганд с линкером;
является ковалентной связью, соединяющей -Ν [У-группу с Аг2, алкиленом или замещенным алкиленом, причем один или более атомов углерода в указанных алкиленовой или замещенной алкиленовой группе необязательно заменен(ы) заместителем, выбранным из -ΝΚα (где Ка является водородом, алкилом, ацилом или ковалентной связью, соединяющей лиганд с линкером), -О-, -8(Θ)η- (где η равно целому числу от 0 до 2), -СО-, -РКЪ- (где КЪ является алкилом), ^(Ο)2- и -Θ^(Ο)Ο- и, кроме того, указанная алкиленовая или замещенная алкиленовая группа связывает лиганд с линкером, при условии, что, по меньшей мере, один из Аг1, Аг2, Κ1, Κ2 или связывает лиганд с линкером; и другие лиганды независимо выбраны из соединения формулы (Ъ)
-р-Аг3 (Ъ) где Аг3 выбран из группы, состоящей из арила, гетероарила, циклоалкила, замещенного циклоалкила и гетероциклила;
С), который соединяет лиганд с линкером, выбран из группы, состоящей из ковалентной связи, алкиленовой или замещенной алкиленовой группы, причем один или более атомов углерода в указанной алкиленовой или замещенной алкиленовой группе необязательно заменен(ы) заместителем, выбранным из -ΝΚα- (где Ка является водородом, алкилом, ацилом или ковалентной связью, соединяющей лиганд с линкером), -О-, -8(Ο)η- (где η равно целому числу от 0 до 2), -СО-, -РКЪ- (где КЪ является алкилом), -Р^)2-и -Ο^^Ο-; и его фармацевтически приемлемой соли, при условии, что (ΐ) когда полисвязывающее соединение формулы (I) является соединением формулы
где Аг1 и Аг3 являются арилом, то и X, оба не являются алкиленом или алкилен-Ο-;
(ΐΐ) когда полисвязывающее соединение формулы (I) является соединением формулы
где Аг1 является 4-гидрокси-2-метилфенилом, Аг2 является арилом, Аг3 представляет собой арил или гетероциклил, является этиленом, О является ковалентной связью, Κ1 является алкилом, то линкер Х не связан с группой Аг3 через атом кислорода; и (ϊΐϊ) когда полисвязывающее соединение формулы (I) является соединением формулы
ОН Ι-12 аР-^х-аг’Ал’-ю-аг’ н1 где Аг1, Аг2, Аг3, Κ1, Κ2 определены выше, является алкиленом и С) является ковалентной связью, то Х не является -алкилен-Ο-.
Более предпочтительно, когда каждый линкер, Χ, в полисвязывающем соединении формулы (I) независимо имеет формулу
-Ха-2-(Уа-2)т-Хагде т равно целому числу от 0 до 20;
Ха в каждом отдельном случае выбран из группы, состоящей из -О-, -8-, -ΝΚ-, -С(О)-, -С(О)О-, -ОС(О)-, -0(0)ΝΚ-, -ΝΚΟ(Ο)-, -С(8)-, -С(8)О-, -С(8)ЯК-, -ΝΚ€(8)- или ковалентной связи, где Я определен ниже;
Ζ в каждом отдельном случае выбран из группы, состоящей из алкилена, замещенного алкилена, циклоалкилена, замещенного циклоалкилена, алкенилена, замещенного алкенилена, алкинилена, замещенного алкинилена, циклоалкенилена, замещенного циклоалкенилена, арилена, гетероарилена, гетероциклена или ковалентной связи;
каждый Υ'1 в каждом отдельном случае выбран из группы, состоящей из -О-, -С(О)-, -ОС(О)-, -С(О)О-, -ΝΚ-, -8(О)п-, -φ№-, -ЫЯ'С(О)-, -Б1Я'С(О)МЯ'-, -ΝΚΌ(8)ΝΚ'-,
-^ΝΚΉΝΚ'-, -ΝΚ'-^ΝΚ1)-, -ОС(О)-Б1Я'-, -№'-С(О)-О-, -Ν=^Χα)-ΝΚ'-, -МЯ'-С(Ха)=№, -Р(О)(ОЯ')-О-, -О-Р(О)(ОЯ')-, -8(О)пСЯ'Я-, -8(О)п-КЯ'-, ^Я'-8(О)п-, -8-8- и ковалентной связи; где п равно 0, 1 или 2;
Я, Я' и Я в каждом отдельном случае выбраны из группы, состоящей из водорода, алкила, замещенного алкила, циклоалкила, замещенного циклоалкила, алкенила, замещенного алкенила, циклоалкенила, замещенного циклоалкенила, алкинила, замещенного алкинила, арила, гетероарила и гетероциклила, и Ха указано выше.
Еще один из аспектов данного изобретения относится к общим способам синтеза для получения больших библиотек (наборов) различных многомерных соединений, которые являются кандидатами на наличие свойств связывания с в2-адренергическим рецептором. Библиотеки различных многомерных соединений, получаемые по данному изобретению, синтезируются путем соединения линкера или линкеров с лигандом или лигандами для получения библиотеки многомерных соединений, причем линкер и лиганд, каждый, имеют комплементарные функциональные группы, дающие возможность образования ковалентной связи. Библиотека линкеров, предпочтительно, подбирается таким образом, чтобы они обладали различными свойствами, таким как валентность, длина линкера, геометрия линкера и жесткость, гидрофильность или гидрофобность, амфифильность, кислотные или основные свойства и поляризация. Библиотека лигандов, предпочтительно, подбирается таким образом, чтобы они имели различные точки связывания на одном и том же лиганде, различные функциональные группы на одном и том же сайте или одном и том же лиганде и тому подобное.
Данное изобретение также относится к библиотекам различных многомерных соединений, которые являются кандидатами на обладание свойствами полисвязывания в отношении в2-адренергического рецептора. Указанные библиотеки получают способами, описанными выше, и они дают возможность быстрой и эффективной оценки того, какие молекулярные связи придают свойства полисвязывания лиганду или классу лигандов, нацеленных на рецептор.
Соответственно однин из аспектов данного изобретения относится к способу идентификации многомерных лигандных соединений, обладающих свойствами полисвязывания в отношении в2-адренергического рецептора, который включает (a) идентификацию лиганда или смеси лигандов, где каждый лиганд содержит, по меньшей мере, одну реакционноспособную функциональность;
(b) идентификацию библиотеки (набора) линкеров, где каждый линкер в указанной библиотеке содержит, по меньшей мере, две функциональные группы, обладающие комплементарной реакционной способностью, по меньшей мере, к одной из реакционноспособных функциональных групп лиганда;
(c) получение библиотеки многомерных лигандных соединений путем объединения, по меньшей мере, двух стехиометрических эквивалентов лиганда или смеси лигандов, идентифицированных в (а), с библиотекой линкеров, идентифицированных в (Ь), в условиях, при которых комплементарные функциональные группы реагируют с образованием ковалентной связи между указанным линкером и, по меньшей мере, двумя указанными лигандами; и (б) тестирование (проверка) многомерных лигандных соединений, полученных выше в (с), для идентификации многомерных лигандных соединений, обладающих свойствами полисвязывания в отношении в2-адренергического рецептора.
Другой аспект данного изобретения относится к способу идентификации многомерных лигандных соединений, обладающих свойствами полисвязывания в отношении β2адренергического рецептора, который включает (a) определение библиотеки (набора) лигандов, где каждый лиганд содержит, по меньшей мере, одну реакционноспособную функциональность;
(b) определение линкера или смеси линкеров, где каждый линкер включает, по меньшей мере, две функциональные группы, обладающие комплементарной реакционной способностью, по меньшей мере, к одной из реакционноспособных функциональных групп лиганда;
(c) получение библиотеки многомерных лигандных соединений путем объединения, по меньшей мере, двух стехиометрических эквивалентов библиотеки лигандов, идентифицированной в (а), с линкером или смесью линкеров, идентифицированных в (Ь), в условиях, при которых комплементарные функциональные группы реагируют с образованием ковалентной связи между указанным линкером и, по меньшей мере, двумя указанными лигандами; и (б) тестирование многомерных лигандных соединений, полученных выше в (с), для идентификации многомерных лигандных соединений, обладающих свойствами полисвязывания в отношении в2-адренергического рецептора.
Получение библиотеки многомерных лигандных соединений достигается путем или последовательного или одновременного (параллельного) объединения двух или более стехиометрических эквивалентов лигандов, идентифицированных в (а), с линкерами, идентифицированными в (Ь). Предпочтительно последовательное присоединение, когда используется смесь различных лигандов для того, чтобы обеспечить получение гетеродимерных или многомерных соединений. Одновременное присоединение лигандов происходит, когда, по меньшей мере, часть полученных многомерных соединений представляет собой гомомногомерные соединения.
Методики тестирования, изложенные в (б), могут быть осуществлены на библиотеке многомерных лигандных соединений, полученной выше в (с), или предпочтительно каждый представитель библиотеки выделяется препаративной жидкостной хроматографией - массспектрометрией (ЖХМС).
Однин из аспектов данного изобретения относится к библиотеке многомерных лигандных соединений, которые могут обладать свойствами поливалентности в отношении β2адренергического рецептора, получаемой способом, включающим:
(a) идентификацию лиганда или смеси лигандов, где каждый лиганд содержит, по меньшей мере, одну реакционноспособную функциональность;
(b) идентификацию библиотеки линкеров, где каждый линкер в указанной библиотеке содержит, по меньшей мере, две функциональные группы, обладающие комплементарной реакционной способностью к, по меньшей мере, одной из реакционноспособных функциональных групп лиганда; и (c) получение библиотеки многомерных лигандных соединений объединением, по меньшей мере, двух стехиометрических эквивалентов лигандов или смеси лигандов, идентифицированных в (а), с библиотекой линкеров, идентифицированной в (Ь), в условиях, при которых комплементарные функциональные группы реагируют с образованием ковалентной связи между указанным линкером и, по меньшей мере, двумя указанными лигандами.
Другой аспект данного изобретения относится к библиотеке многомерных лигандных соединений, которые могут обладать свойствами поливалентности в отношении β2 адренергического рецептора, которую получают способом, включающим (a) идентификацию библиотеки лигандов, где каждый лиганд содержит, по меньшей мере, одну реакционноспособную функциональность;
(b) идентификацию линкера или смеси линкеров, где каждый линкер содержит, по меньшей мере, две функциональные группы, обладающие комплементарной реакционной способностью к, по меньшей мере, одной из реакционноспособных функциональных групп лиганда; и (c) получение библиотеки многомерных лигандных соединений объединением, по меньшей мере, двух стехиометрических эквивалентов библиотеки лигандов, идентифицированных в (а), с линкером или смесью линкеров, идентифицированными в (Ь), в условиях, при которых комплементарные функциональные группы реагируют с образованием ковалентной связи между указанным линкером и, по меньшей мере, двумя из указанными лигандами.
В предпочтительном осуществлении библиотека линкеров, используемых или в способах, или в библиотеках данного изобретения, выбрана из группы, включающей гибкие линкеры, жесткие линкеры, гидрофобные линкеры, гидрофильные линкеры, линкеры различной геометрии, кислотные линкеры, основные линкеры, линкеры различной поляризации и амфифильные линкеры. Например, в одном из осуществлении каждый из линкеров в библиотеке линкеров может включать линкеры с различной длиной цепи и/или имеющие различные комплементарные реакционноспособные группы. Длина таких линкеров может, предпочтительно, находиться в интервале от примерно 2 до 100 А.
В еще одном предпочтительном осуществлении лиганд или смесь лигандов выбирается так, чтобы у них имелись реакционноспособные функциональности в различных сайтах на указанных лигандах для того, чтобы получить ряд ориентации указанного лиганда на указанных многомерных лигандных соединениях. Такая реакционноспособная функциональность включает, например, карбоновые кислоты, галогенангидриды карбоновых кислот, эфиры карбоновых кислот, амины, галогениды, изоцианаты, винильную ненасыщенность, кетоны, альдегиды, тиолы, спирты, ангидриды и их предшественники. Разумеется, понятно, что реакционноспособную функциональность у лиганда выбирают так, чтобы она была комплементарной, по меньшей мере, одной из реакционноспособных групп на линкере, так чтобы между линкером и лигандом могла образовываться ковалентная связь.
В других осуществлениях многомерное лигандное соединение является гомомерным (состоящим из субъединиц одного типа) (т.е.
каждый из лигандов является одним и тем же, хотя они могут быть присоединены в разных точках) или гетеродимерным (т.е., по меньшей мере, один из лигандов является иным, чем другие лиганды).
В дополнение к комбинаторным способам, описанным здесь, данное изобретение представляет интеративный процесс для рациональной оценки того, какие молекулярные конструкции придают свойства полисвязывания классу многомерных соединений или лигандов, нацеленных на рецептор. Конкретно, данный аспект относится к способу идентификации многомерных лигандных соединений, обладающих свойствами полисвязывания в отношении β2адрегергического рецептора, который включает (a) получение первого набора или итерации многомерных соединений, которые получают путем контактирования, по меньшей мере, двух стехиометрических эквивалентов лиганда или смеси лигандов, нацеленных на рецептор, с линкером или смесью линкеров, причем указанный лиганд или смесь лигандов включает, по меньшей мере, одну реакционноспособную функциональность, и указанный линкер или смесь линкеров содержит, по меньшей мере, две функциональные группы, обладающие комплементарной реакционноспособностью к, по меньшей мере, одной из реакционноспособных функциональных групп лиганда, причем указанное контактирование проводится в условиях, в которых комплементарные функциональные группы реагируют с образованием ковалентной связи между указанным линкером и, по меньшей мере, двумя указанными лигандами;
(b) тестирование указанного первого набора или итерации многомерных соединений для оценки того, обладает ли какое-либо из указанных многомерных соединений свойствами полисвязывания в отношении в2-адренергического рецептора;
(c) повторение вышеуказанных процессов (а) и (Ь) до тех пор, пока не будет обнаружено что, по меньшей мере, одно соединение обладает свойствами полисвязывания в отношении β2адренергического рецептора;
(б) оценку того, какие молекулярные конструкции придают свойства полисвязывания в отношении в2-адренергического рецептора многомерному соединению или соединениям, обнаруженным в первой итерации, представленной выше в (а)-(с);
(е) создание второго набора или итерации многомерных соединений, который разрабатывается на основе конкретных молекулярных конструкций, придающих свойства полисвязывания многомерному(ым) соединению или соединениям, обнаруженным в указанной первой итерации;
(Г) оценку того, какие молекулярные конструкции придали усиленные свойства полисвязывания многомерному(ым) соединению или соединениям, обнаруженным во втором наборе или итерации, представленной выше в (е);
(д) необязательно, повторение стадий (е) и (Г) для дополнительной разработки на основе указанных молекулярных конструкций .
Предпочтительно, стадии (е) и (Г) повторяют, по меньшей мере, два раза, более предпочтительно от 2 до 50 раз, ещё более предпочтительно, от 3 до 50 раз, и ещё более предпочтительно, по меньшей мере, 5-50 раз.
Краткое описание рисунков
Фиг. 1 иллюстрирует примеры полисвязывающих соединений, содержащих 2 лиганда, связанных в разной форме с линкером.
Фиг. 2 иллюстрирует примеры полисвязывающих соединений, содержащих 3 лиганда, связанных в разной форме с линкером.
Фиг. 3 иллюстрирует примеры полисвязывающих соединений, содержащих 4 лиганда, связанных в разной форме с линкером.
Фиг. 4 иллюстрирует примеры полисвязывающих соединений, содержащих >4 лигандов, связанных в разной форме с линкером.
Фиг. 5-13 иллюстрируют синтез соединений формулы (I).
Детальное описание изобретения Определения
Данное изобретение относится к полисвязывающим соединениям, которые представляют собой агонисты в2-адренергического рецептора, фармацевтическим композициям, содержащим такие соединения и способам лечения заболеваний, опосредуемых в2-адренергическим рецептором, у млекопитающих. При обсуждении таких соединений, композиций или способов следующие термины имеют нижеследующие значения, если не указано иначе. Любые термины, не получившие определения, имеют их общепринятые в данной области знаний значения.
Термин «алкил» относится к разветвленной или прямой углеводородной цепи с одной свободной связью, предпочтительно имеющей от 1 до 40 атомов углерода, более предпочтительно, от 1 до 10 атомов углерода, и даже более предпочтительно, от 1 до 6 атомов углерода. Примерами для указанного термина являются такие группы, как метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, изобутил, н-гексил, н-децил, тетрадецил и тому подобное.
Термин «замещенный алкил» относится к алкильной группе, как указано выше, имеющей от 1 до 5 заместителей, и предпочтительно, от 1 до 3 заместителей, выбранных из группы, состоящей из алкокси, замещенного алкокси, циклоалкила, замещенного циклоалкила, циклоалкенила, замещенного циклоалкенила, ацила, ациламино, ацилокси, амино, замещенного амино, аминоацила, аминоацилокси, оксиаминоацила, азидо, циано, галогена, гидроксила, кето, тиокето, карбоксила, карбоксиалкила, тиоарилокси, тиогетероарилокси, тиогетероциклоокси, тиола, тиоалкокси, замещенного тиоалкокси, арила, арилокси, гетероарила, гетероарилокси, гетероциклила, гетероциклоокси, гидроксиамино, алкоксиамино, нитро, -8О-алкила, -8Θзамещенного алкила, -8О-арила, -8Огетероарила, -8О2-алкила, -8О2-замещенного алкила, -8О2-арила и -8О2-гетероарила. Примерами для указанного термина являются такие группы, как гидроксиметил, гидроксиэтил, гидроксипропил, 2-аминоэтил, 3-аминопропил, 2метиламиноэтил, 3-диметиламинопропил, 2сульфонамидоэтил, 2-карбоксиэтил и тому подобное.
Термин «алкилен» относится к радикалу с разветвленной или прямой насыщенной углеводородной цепью с двумя свободными связями, предпочтительно имеющей от 1 до 40 атомов углерода, более предпочтительно, от 1 до 10 атомов углерода, и даже более предпочтительно, от 1 до 6 атомов углерода. Примерами для указанного термина являются такие группы, как метилен (-СН2-), этилен (-СН2-СН2-), изомеры пропилена (например, -СН2-СН2-СН2- и -СН(СН3)СН2-) и тому подобное.
Термин «замещенный алкилен» относится к алкиленовой группе, которой дано определение выше, имеющей от 1 до 5 заместителей, и предпочтительно, от 1 до 3 заместителей, выбранных из группы, состоящей из алкокси, замещенного алкокси, циклоалкила, замещенного циклоалкила, циклоалкенила, замещенного циклоалкенила, ацила, ациламино, ацилокси, амино, замещенного амино, аминоацила, аминоацилокси, оксиаминоацила, азидо, циано, галогена, гидроксила, кето, тиокето, карбоксила, карбоксиалкила, тиоарилокси, тиогетероарилокси, тиогетероциклоокси, тиола, тиоалкокси, замещенного тиоалкокси, арила, арилокси, гетероарила, гетероарилокси, гетероциклила, гетероциклоокси, гидроксиамино, алкоксиамино, нитро, -8Оалкила, -8О-замещенного алкила, -8О-арила, -8О-гетероарила, -8О2-алкила, -8О2замещенного алкила, -8О2-арила и -8О2гетероарила. Дополнительно такие замещенные алкиленовые группы включают те, у которых 2 заместителя на алкиленовой группе сконденсированы с образованием одной или более циклоалкильной, замещенной циклоалкильной, циклоалкенильной, замещенной циклоалкенильной, арильной, гетероциклической или гетероарильной групп, конденсированных с алкиленовой группой. Предпочтительно, такие сконденсированные группы содержат от 1 до 3 конденсированных кольцевых структур.
Термин «алкарил» или «аралкил» относится к группам -алкилен-арил- и -замещенный алкилен-арил, где алкилен, замещенный алкилен и арил определены здесь выше. Примерами таких алкарильных групп являются бензил, фенетил и тому подобное.
Термин «гетероаралкил» относится к группам -алкилен-гетероарил и -замещенный алкилен-гетероарил, где алкилен, замещенный алкилен и гетероарил определены здесь выше. Примерами таких гетероаралкильных групп являются пиридин-3-илметил, пиридин-3илметилокси и тому подобное.
Термин «алкокси» относится к группам алкил-О-, алкенил-О-, циклоалкил-О-, циклоалкенил-О- и алкинил-О-, где алкил, алкенил, циклоалкил, циклоалкенил и алкинил определены выше. Предпочтительными алкокси группами являются алкил-О- и включают, например, метокси, этокси, н-пропокси, изопропокси, нбутокси, трет-бутокси, вторичный бутокси, нпентокси, н-гексокси, 1,2-диметилбутокси и тому подобное.
Термин «замещенный алкокси» относится к группам замещенный алкил-О-, замещенный алкенил-О-, замещенный циклоалкил-О-, замещенный циклоалкенил-О- и замещенный алкинил-О-, где замещенный алкил, замещенный алкенил, замещенный циклоалкил, замещенный циклоалкенил и замещенный алкинил определены выше.
Термин «алкенил» относится к радикалу из разветвленной или прямой ненасыщенной углеводородной группы с одной свободной связью, предпочтительно имеющей от 2 до 40 атомов углерода, более предпочтительно от 2 до 10 атомов углерода, и еще более предпочтительно от 2 до 6 атомов углерода, и имеющей, по меньшей мере, 1, а предпочтительно от 1 до 6 винильных ненасыщенностей. Предпочтительные алкенильные группы включают этенил (-СН=СН2), н-пропенил (-СН2СН=СН2), изопропенил (-С(СН3)=СН2) и тому подобное.
Термин «замещенный алкенил» относится к алкенильной группе, определенной выше, имеющей от 1 до 5 заместителей, а предпочтительно, от 1 до 3 заместителей, выбранных из группы, состоящей из алкокси, замещенного алкокси, циклоалкила, замещенного циклоалкила, циклоалкенила, замещенного циклоалкенила, ацила, ациламино, ацилокси, амино, замещенного амино, аминоацила, аминоацилокси, оксиаминоацила, азидо, циано, галогена, гидроксила, кето, тиокето, карбоксила, карбоксиалкила, тиоарилокси, тиогетероарилокси, тиогетероциклоокси, тиола, тиоалкокси, замещенного тиоалкокси, арила, арилокси, гетероарила, гетероарилокси, гетероциклила, гетероциклоокси, гидроксиамино, алкоксиамино, нитро, -8Оалкила, -8О-замещенного алкила, -8О-арила, -8О-гетероарила, -8О2-алкила, -8О2замещенного алкила, -8О2-арила и -8О2гетероарила.
Термин «алкенилен» относится к радикалу с разветвленной или прямой ненасыщенной углеводородной группы с двумя свободными связями, предпочтительно имеющей от 2 до 40 углеродных атомов, более предпочтительно от 2 до 10 углеродных атомов, и ещё более предпочтительно, от 2 до 6 углеродных атомов, и имеющих, по меньшей мере, 1, а предпочтительнее от 1 до 6 винильных ненасыщенностей. Примерами для этого термина являются такие группы, как этенилен (-СН=СН-), изомеры пропенилена (например, -СН2-СН=СН-,
-С(СН3)=СН-) и тому подобное.
Термин «замещенный алкенилен» относится к алкениленовой группе, определенной выше, имеющей от 1 до 5 заместителей, а предпочтительно, от 1 до 3 заместителей, выбранных из группы, состоящей из алкокси, замещенного алкокси, циклоалкила, замещенного циклоалкила, циклоалкенила, замещенного циклоалкенила, ацила, ациламино, ацилокси, амино, замещенного амино, аминоацила, аминоацилокси, оксиаминоацила, азидо, циано, галогена, гидроксила, кето, тиокето, карбоксила, карбоксилалкила, тиоарилокси, тиогетероарилокси, тиогетероциклоокси, тиола, тиоалкокси, замещенного тиоалкокси, арила, арилокси, гетероарила, гетероарилокси, гетероциклила, гетероциклоокси, гидроксиамино, алкоксиамино, нитро, -80алкила, -80-замещенного алкила, -80-арила, -80-гетероарила, -802-алкила, -8О2-замещенного алкила, -802-арила и -8О2-гетероарила. Дополнительно такие замещенные алкениловые группы включают те, где 2 заместителя у алкениленовой группы конденсированы с образованием одной или более циклоалкильной, замещенной циклоалкильной, циклоалкенильной, замещенной циклоалкенильной, арильной, гетероциклильной или гетероарильной групп, конденсированных с алкениленовой группой.
Термин «алкинил» относится к ненасыщенному углеводородному радикалу с одной свободной связью, предпочтительно, имеющему от 2 до 40 атомов углерода, более предпочтительно, от 2 до 20 атомов углерода, и ещё более предпочтительно, от 2 до 6 атомов углерода, и имеющему, по меньшей мере, 1, а предпочтительнее от 1 до 6 ацетиленовых (тройная связь) ненасыщенностей. Предпочтительные алкинильные группы включают этинил (-С^СН), пропаргил (-СН2С=СН) и тому подобное.
Термин «замещенный алкинил» относится к алкинильной группе, определенной выше, имеющей от 1 до 5 заместителей, а предпочтительнее, от 1 до 3 заместителей, выбранных из группы, состоящей из алкокси, замещенного алкокси, циклоалкила, замещенного циклоалкила, циклоалкенила, замещенного циклоалкенила, ацила, ациламино, ацилокси, амино, замещенного амино, аминоацила, аминоацилокси, оксиаминоацила, азидо, циано, галогена, гидроксила, кето, тиокето, карбоксила, карбоксилалкила, тиоарилокси, тиогетероарилокси, тиогетероциклоокси, тиола, тиоалкокси, замещенного тиоалкокси, арила, арилокси, гетероарила, гетероарилокси, гетероциклила, гетероциклоокси, гидроксиамино, алкоксиамино, нитро, -80алкила, -80-замещенного алкила, -80-арила,
-80-гетероарила, -802-алкила, -802-замещенного алкила, -802-арила и -8О2-гетероарила.
Термин «алкинилен» относится к незамещенному углеводородному радикалу с двумя свободными связями, предпочтительно имеющему от 2 до 40 атомов углерода, более предпочтительно от 2 до 10 атомов углерода, и еще более предпочтительнее от 2 до 6 атомов углерода, и имеющему, по меньшей мере, 1, а предпочтительнее от 1 до 6 ацетиленовых (тройная связь) ненасыщенностей. Предпочтительные алкиниленовые группы включают этинилен (-С=С-), пропаргилен (-СН2С=С-) и тому подобное.
Термин «замещенный алкинилен» относится к алкиниленовой группе, определенной выше, имеющей от 1 до 5 заместителей, а предпочтительнее от 1 до 3 заместителей, выбранных из группы, состоящей из алкокси, замещенного алкокси, циклоалкила, замещенного циклоалкила, циклоалкенила, замещенного циклоалкенила, ацила, ациламино, ацилокси, амино, замещенного амино, аминоацила, аминоацилокси, оксиаминоацила, азидо, циано, галогена, гидроксила, кето, тиокето, карбоксила, карбоксилалкила, тиоарилокси, тиогетероарилокси, тиогетероциклоокси, тиола, тиоалкокси, замещенного тиоалкокси, арила, арилокси, гетероарила, гетероарилокси, гетероциклила, гетероциклоокси, гидроксиамино, алкоксиамино, нитро, -80-алкила, -80-замещенного алкила, -80арила, -80-гетероарила, -8О2-алкила, -8О2замещенного алкила, -8О2-арила и -8О2гетероарила.
Термин «ацил» относится к группам НС(0)-, алкил-С(О)-, замещенный алкил-С(О)-, алкенил-С(О)-, замещенный алкенил-С(О)-, циклоалкил-С(О)-, замещенный циклоалкилС(О)-, циклоалкенил-С(0), замещенный циклоалкенил-С(О)-, арил-С(О)-, гетероарил-С(0)- и гетероциклил-С(О)-, где алкил, замещенный алкил, алкенил, замещенный алкенил, циклоалкил, замещенный циклоалкил, циклоалкенил, замещенный циклоалкенил, арил, гетероарил и гетероциклил определены выше.
Термин «ациламино» или «аминокарбонил» относится к группе -0(0)ΝΡΡ. где каждый К независимо представляет собой водород, алкил, замещенный алкил, арил, гетероарил, гетероциклил, или где обе группы К соединены с образованием гетероциклической группы (например, морфолино), где алкил, замещенный алкил, арил, гетероарил и гетероциклил определены выше.
Термин «сульфониламино» относится к группе -ΝΚ802Κα, где К является водородом, алкилом, замещенным алкилом, аралкилом или гетероаралкилом, а Ка представляет собой алкил, замещенный алкил, амино или замещенную амино, где алкил, замещенный алкил, аралкил, гетероаралкил и замещенная амино определены выше.
Термин «аминоацил» относится к группе -ЛК.С(О)К, где каждый К независимо представляет собой водород, алкил, замещенный алкил, алкенил, замещенный алкенил, амино, замещенная амино, арил, гетероарил или гетероциклил, где алкил, замещенный алкил, алкенил, замещенный алкенил, арил, гетероарил и гетероциклил определены выше.
Термин «аминоацилокси» или «алкоксикарбониламино» относится к группе -ЫКС(О)ОК, где каждый К независимо представляет собой водород, алкил, замещенный алкил, арил, гетероарил или гетероциклил, где алкил, замещенный алкил, арил, гетероарил или гетероциклил определены выше.
Термин «ацилокси» относится к группам алкил-С(О)О-, замещенный алкил-С(О)О-, циклоалкил-С(О)О-, замещенный циклоалкил-С(О) О-, арил-С(О)О-, гетероарил-С(О)О- или гетероциклил-С(О)О-, где алкил, замещенный алкил, циклоалкил, замещенный циклоалкил, арил, гетероарил и гетероциклил определены выше.
Термин «арил» относится к ненасыщенной ароматической карбоциклической группе, состоящей из от 6 до 20 атомов углерода, имеющей единственное кольцо (например, фенил) или сложные конденсированные (слитные) кольца (например, нафтил или антрил). Арильная группа может быть необязательно конденсирована с гетероциклической или циклоалкильной группой. Предпочтительные арилы включают фенил, нафтил и тому подобное. Если нет других ограничений для определения арильного заместителя, такие арильные группы необязательно могут быть замещены 1-5 заместителями, предпочтительнее 1-3 заместителями, выбранными из группы, состоящей из ацилокси, гидрокси, тиола, ацила, алкила, алкокси, алкенила, алкинила, циклоалкила, циклоалкенила, замещенного алкила, замещенного алкокси, замещенного алкенила, замещенного алкинила, замещенного циклоалкила, замещенного циклоалкенила, амино, замещенной амино, аминоацила, ациламино, сульфониламино, алкарила, арила, арилокси, азидо, карбоксила, карбоксилалкила, циано, галогена, нитро, гетероарила, гетероарилокси, гетероциклила, гетероциклоокси, аминоацилокси, оксиациламино, тиоалкокси, замещенного тиоалкокси, тиоарилокси, тиогетероарилокси, -8О-алкила, -8О-замещенного алкила, -8О-арила, -8О-гетероарила, -8О2-алкила, -8О2-замещенного алкила, -8О2-арила, -8О2гетероарила и тригалогенметила. Предпочтительные арильные заместители включают алкил, алкокси, галоген, циано, нитро, тригалогенметил и тиоалкокси .
Термин «арилокси» относится к группе арил-О-, где арильная группа определена выше, включая необязательно замещенные арильные группы, определенные выше.
Термин «арилен» относится к радикалу, производному от арила (включая замещенный арил) с двумя свободными связями, определенному выше, и примерами которого являются 1,2-фенилен, 1,3-фенилен, 1,4-фенилен, 1,2нафтилен и тому подобное.
Термин «амино» относится к группе -ΝΗ2.
Термин «замещенный амино» относится к группе -ΝΚΚ, где каждый К независимо выбран из группы, состоящей из водорода, алкила, замещенного алкила, ацила, циклоалкила, замещенного циклоалкила, алкенила, замещенного алкенила, циклоалкенила, замещенного циклоалкенила, алкинила, замещенного алкинила, арила, гетероарила или гетероциклила, при условии, что оба К не являются водородом.
Термин «карбоксиалкил» или «алкоксикарбонил» относится к группам -С(О)О-алкил, -С(О)О-замещенный алкил, -С(О)О-циклоалкил, -С(О)О-замещенный циклоалкил, -С(О)Оалкенил, -С(О)О-замещенный алкенил, -С(О)Оалкинил и -С(О)О-замещенный алкинил, где алкил, замещенный алкил, циклоалкил, замещенный циклоалкил, алкенил, замещенный алкенил, алкинил и замещенный алкинил определены выше.
Термин «циклоалкил» относится к циклическим алкильным группам, состоящим из 3-20 атомов углерода, имеющим одно циклическое кольцо или сложные конденсированные кольца, причем указанная циклоалкильная группа необязательно может быть конденсирована с арильной или гетероарильной группой. Такие циклоалкильные группы включают, например, однокольцевые структуры, такие как циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклооктил и тому подобное, или сложные кольцевые структуры, такие как адамантанил и тому подобное.
Термин «замещенный циклоалкил» относится к циклоалкильным группам, имеющим от 1 до 5 заместителей, а предпочтительнее, от 1 до 3 заместителей, выбранных из группы, состоящей из алкила, замещенного алкила, алкенила, замещенного алкенила, алкокси, замещенного алкокси, циклоалкила, замещенного циклоалкила, циклоалкенила, замещенного циклоалкенила, ацила, ациламино, ацилокси, амино, замещенного амино, аминоацила, аминоацилокси, оксиаминоацила, азидо, циано, галогена, гидроксила, кето, тиокето, карбоксила, карбоксиалкила, тиоарилокси, тиогетероарилокси, тиогетероциклоокси, тиола, тиоалкокси, замещенного тиоалкокси, арила, арилокси, гетероарила, гетероарилокси, гетероциклила, гетероциклоокси, гидроксиамино, алкоксиамино, нитро, -8Оалкила, -8О-замещенного алкила, -8О-арила,
-8О-гетероарила, -8О2-алкила, -8О2-замещенного алкила, -8О2-арила и -8О2-гетероарила.
Термин «циклоалкенил» относится к циклическим алкенильным группам, состоящим из от 4 до 20 углеродных атомов, имеющим единственное циклическое кольцо и, по меньшей мере, одну внутреннюю ненасыщенность. Примеры соответствующих циклоалкенильных групп включают, например, циклобут-2-енил, циклопент-3-енил, циклоокт-3-енил и тому подобное.
Термин «замещенный циклоалкенил» относится к циклоалкенильным группам, имеющим от 1 до 5 заместителей, а предпочтительнее, от 1 до 3 заместителей, выбранных из группы, состоящей из алкила, замещенного алкила, алкенила, замещенного алкенила, алкокси, замещенного алкокси, циклоалкила, замещенного циклоалкила, циклоалкенила, замещенного циклоалкенила, ацила, ациламино, ацилокси, амино, замещенного амино, аминоацила, аминоацилокси, оксиаминоацила, азидо, циано, галогена, гидроксила, кето, тиокето, карбоксила, карбоксиалкила, тиоарилокси, тиогетероарилокси, тиогетероциклоокси, тиола, тиоалкокси, замещенного тиоалкокси, арила, арилокси, гетероарила, гетероарилокси, гетероциклила, гетероциклоокси, гидроксиамино, алкоксиамино, нитро, -80алкила, -80-замещенного алкила, -80-арила, -80-гетероарила, -8О2-алкила, -8О2замещенного алкила, -802-арила и -8О2гетероарила.
Термин «гало» или «галоген» относится к фтору, хлору, брому и йоду.
Термин «гетероарил» относится к ароматической группе, состоящей из от 1 до 15 атомов углерода и от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из кислорода, азота и серы, в, по меньшей мере, одном кольце (если представлено более, чем одно кольцо). Гетероарильное кольцо может быть необязательно конденсировано с циклоалкильным или гетероциклическим кольцом. Если нет других ограничений в определении гетероарильного заместителя, такие гетероарильные группы могут быть необязательно замещены 1-5 заместителями, предпочтительно 13 заместителями, выбранными из группы, состоящей из ацилокси, гидрокси, тиола, ацила, алкила, алкокси, алкенила, алкинила, циклоалкила, циклоалкенила, замещенного алкила, замещенного алкокси, замещенного алкенила, замещенного алкинила, замещенного циклоалкила, замещенного циклоалкенила, амино, замещенного амино, аминоацила, ациламино, алкарила, арила, арилокси, азидо, карбоксила, карбоксилалкила, циано, галогена, нитро, гетероарила, гетероарилокси, гетероциклила, гетероциклоокси, аминоацилокси, оксиациламино, тиоалкокси, замещенного тиоалкокси, тиоарилокси, тиогетероарилокси, -80-алкила, -80-замещенного алкила, -80-арила, -80-гетероарила, -8О2-алкила, -802-замещенного алкила, -802арила, -8О2-гетероарила и тригалогенметила. Предпочтительные гетероарильные заместители включают алкил, алкокси, галоген, циано, нитро, тригалогенметил и тиоалкокси. Предпочтительные гетероарильные группы могут иметь единственное кольцо (например, пиридил или фурил) или сложные конденсированные кольца (например, индолизинил или бензотиенил). Предпочтительные гетероарилы включают пиридил, пирролил и фурил.
Термин «гетероарилокси» относится к группе гетероарил-0-.
Термин «гетероарилен» относится к радикальной группе, производной от гетероарила (включая замещенный гетероарил) с двумя свободными связями, как определено выше, и его примерами являются группы 2,6-пиридинилен,
2.4- пиридинилен, 1,2-хинолинилен, 1,8-хино- линилен, 1,4-бензофуранилен, 2,5-пиридинилен,
2.5- индоленилен и тому подобное.
Термин «циклоалкилен» относится к радикальной группе, производной от циклоалкила с двумя свободными связями, как определено выше, и его примерами являются группы 1,6циклогексилен, 1,3-циклопентилен и тому подобное.
Термин «замещенный циклоалкилен» относится к радикальной группе с двумя свободными связями, производной от замещенного циклоалкила, определенного выше.
Термин «циклоалкенилен» относится к радикальной группе с двумя свободными связями, производной от циклоалкила, определенного выше.
Термин «замещенный циклоалкенилен» относится к радикальной группе с двумя свободными связями, производной от замещенного циклоалкенила, определенного выше.
Термин «гетероцикл» или «гетероциклил» относится к насыщенной или ненасыщенной группе с одной свободной связью, имеющей единственное кольцо или несколько конденсированных колец, состоящей из 1-40 атомов углерода и 1-10 гетероатомов, предпочтительно, 1-4 гетероатомов, выбранных из азота, серы, фосфора и/или кислорода, в кольце, и кроме того, где один, два или три из атомов углерода в кольце могут быть необязательно заменены карбонильной группой (т.е. кетогруппой). Если нет других ограничений в определении гетероциклического заместителя, такие гетероциклические группы могут быть необязательно замещены 1-5, а предпочтительнее 1-3 заместителями, выбранными из группы, состоящей из алкокси, замещенного алкокси, циклоалкила, замещенного циклоалкила, циклоалкенила, замещенного циклоалкенила, ацила, ациламино, ацилокси, амино, замещенного амино, аминоацила, аминоацилокси, оксиаминоацила, азидо, циано, галогена, гидроксила, кето, тиокето, карбоксила, карбоксилалкила, тиоарилокси, тиогетероарилокси, тиогетероциклоокси, тиола, тиоалкокси, замещенного тиоалкокси, арила, арилокси, гетероарила, гетероарилокси, гетероциклила, гетероциклоокси, гидроксиамино, алкоксиамино, нитро, -80-алкила, -80-замещенного алкила, -80-арила, -80-гетероарила, -802алкила, -8О2-замещенного алкила, -8О2-арила и
-8О2-гетероарила. Такие гетероциклические группы могут иметь единственное кольцо или несколько конденсированных колец. Предпочтительные гетероциклилы включают морфолино, пиперидинил и тому подобное.
Примеры гетероарилов и гетероциклов включают, но не ограничиваются ими, пиррол, тиофен, фуран, имидазол, пиразол, пиридин, пиразин, пиримидин, пиридазин, индолизин, изоиндол, индол, индазол, пурин, хинолизин, изохинолин, хинолин, фталазин, нафтилпиридин, хиноксалин, хиназолин, циннолин, птеридин, карбазол, карболин, фенантридин, акридин, фенантролин, изотиазол, феназин, изоксазол, феноксазин, фенотиазин, имидазолидин, имидазолин, пирролидин, пиперидин, пиперазин, индолин, морфолин, тетрагидрофуранил, тетрагидротиофен и тому подобное, а также Νалкокси-азотсодержащие гетероциклы.
Термин «гетероциклоокси» относится к группе гетероциклил-О-.
Термин «тиогетероциклоокси» относится к группе гетероциклил-8-.
Термин «гетероциклен» относится к группе с двумя свободными связями, образованной из гетероцикла, определенного выше, и его примерами являются группы 2,6-морфолино, 2,5-морфолино и тому подобное.
Термин «оксиациламино» или «аминокарбонилокси» относится к группе -Οϋ(Ο)ΝΚΚ, где каждый К, независимо, представляет собой водород, алкил, замещенный алкил, арил, гетероарил или гетероциклил, где алкил, замещенный алкил, арил, гетероарил и гетероциклил определены выше.
Термин «спиро-присоединенная циклоалкильная группа» относится к циклоалкильной группе, соединенной с другим кольцом через один атом углерода, общий для обоих колец.
Термин «тиол» относится к группе -8Н.
Термин «тиоалкокси» или «алкилтио» относится к группе -8-алкил.
Термин «замещенный тиоалкокси» относится к группе -8-замещенный алкил.
Термин «тиоарилокси» относится к группе арил-δ-, где арильная групп определена выше, включая необязательно замещенные арильные группы, также определенные выше.
Термин «тиогетероарилокси» относится к группе гетероарил-δ-, где гетероарильная группа определена выше, включая необязательно замещенные арильные группы, также определенные выше.
Что касается вышеуказанных групп, которые содержат один или более заместителей, понятно, что, конечно, такие группы не имеют какого-либо замещения или форму замещения, которые стерически нецелесообразны и/или синтетически недостижимы. Кроме того, соединения данного изобретения включают все стереохимические изомеры, являющихся результатом замещения в указанных соединениях.
Термин «фармацевтически приемлемая соль» относится к солям, которые сохраняют биологическую эффективность и свойства полисвязывающих соединений данного изобретения, и которые не являются биологически или по другой причине нежелательными. Во многих случаях полисвязывающие соединения данного изобретения способны к образованию солей с кислотой и/или основанием в силу наличия амино и/или карбоксильных групп или сходных групп.
Фармацевтически приемлемые соли присоединения основания могут быть получены с неорганическими и органическими основаниями. Соли, полученные с неорганическими основаниями, включают, только в качестве примера, соли натрия, калия, лития, аммония, кальция и магния. Соли, полученные с органическим основаниями, включают, но не ограничиваются ими, соли первичных, вторичных и третичных аминов, таких как алкиламины, диалкиламины, триалкиламины, замещенные алкиламины, ди(замещенный алкил)амины, три(замещенный алкил)амины, алкениламины, диалкениламины, триалкениламины, замещенные алкениламины, ди(замещенный алкенил)амины, три(замещенный алкенил)амины, циклоалкиламины, ди(циклоалкил)амины, три(циклоалкил)амины, замещенные циклоалкиламины, дизамещенные циклоалкиламины, тризамещенные циклоалкиламины, циклоалкениламины, ди(циклоалкенил) амины, три(циклоалкенил)амины, замещенные циклоалкениламины, дизамещенные циклоалкениламины, тризамещенные циклоалкениламины, ариламины, диариламины, триариламины, гетероариламины, дигетероариламины, тригетероариламины, гетроциклические амины, дигетероциклические амины, тригетероциклические амины, смешанные ди- и триамины, где, по меньшей мере, два заместителя у амина являются различными, и выбраны из группы, состоящей из алкила, замещенного алкила, алкенила, замещенного алкенила, циклоалкила, замещенного циклоалкила, циклоалкенила, замещенного циклоалкенила, арила, гетероарила, гетероциклила и тому подобное. Сюда также включаются амины, у которых два или три заместителя вместе с азотом амина образуют гетероциклическую или гетероарильную группу. Примеры соответствующих аминов включают, только в качестве примера, изопропиламин, триметиламин, диэтиламин, три(изопропил)амин, три(н-пропил)амин, этаноламин, 2-диметиламиноэтанол, трометамин, лизин, аргинин, гистидин, каффеин, прокаин, гидрабамин, холин, бетаин, этилендиамин, глюкозамин, Ν-алкилглюкамины, теобромин, пурины, пиперазин, пиперидин, морфолин, Ν-этилпиперидин и тому подобное. Также должно быть понятно, что при осуществлении на практике данного изобретения были бы полезны и другие производные карбоновых кислот, например, амиды карбоновых кислот, включая карбоксамиды, низший алкилкарбоксамиды, диалкилкарбоксамиды и т. п.
Фармацевтически приемлемые соли присоединения кислоты могут быть получены с неорганическими и органическими кислотами. Соли, полученные с неорганическими кислотами, включают соли соляной кислоты, бромистоводородной кислоты, серной кислоты, азотной кислоты, фосфорной кислоты и тому подобное. Соли, полученные из органических кислот, включают соли уксусной кислоты, пропионовой кислоты, гликолевой кислоты, пировиноградной кислоты, щавелевой кислоты, яблочной кислоты, малоновой кислоты, янтарной кислоты, малеиновой кислоты, фумаровой кислоты, винной кислоты, лимонной кислоты, бензойной кислоты, коричной кислоты, миндальной кислоты, метансульфоновой кислоты, этансульфоновой кислоты, п-толуолсульфоновой кислоты, салициловой кислоты и т. п.
Термин «фармацевтически приемлемый катион» относится к катиону фармацевтически приемлемой соли.
Термин «библиотека» относится к, по меньшей мере, 3, предпочтительно от 102 до 109 и более предпочтительно, от 102 до 104 многомерных соединений. Предпочтительно эти соединения получают в виде множества соединений в одном растворе или реакционной смеси, что дает возможность их более лёгкого синтеза. В одном из осуществлений библиотека многомерных соединений может быть непосредственно испытана на свойства полисвязывания. В другом осуществлении каждый член библиотеки многомерных соединений сначала выделяют и, необязательно, определяют его характеристики. Этот представитель затем испытывают на свойства полисвязывания.
Термин «набор» относится к совокупности многомерных соединений, которые получают или последовательно или одновременно (например, комбинаторно). Набор состоит из, по меньшей мере, 2 членов; предпочтительнее, из от 2 до 109 членов, и еще более предпочтительнее из от 10 до 104 членов.
Термин «многомерное соединение» относится к соединениям, содержащим от 2 до 10 лигандов, ковалентно связанных через, по меньшей мере, один линкер, причем эти соединения могут обладать или не обладать свойствами полисвязывания (как здесь указано).
Термин «псевдогалогенид» относится к функциональным группам, которые реагируют в реакциях замещения подобно галогену. Такие функциональные группы включают, например, мезильную, тозильную, азидо- и цианогруппы.
Термин «защитная группа» или «блокирующая группа» относится к любой группе, которая, когда она связана с одной или более гидроксильной, тиольной, амино или карбоксильной группой соединений (включая промежуточные соединения) и предотвращает реакции, происходящие с данными группами, причем указанные защитные группы могут быть удале ны обычными химическими или ферментативными воздействиями для восстановления гидроксильной, тиольной, амино или карбоксильной группы (см. Т.^. Стееи апб Р.С.Н. \УШ5. Рго1ееЦуе Сгоирк ίη Отдаше 8уп1йе5щ, 2пб Еб.). Конкретная используемая удаляемая блокирующая группа не имеет принципиального значения, и предпочтительные удаляемые блокирующие гидроксил группы включают общепринятые заместители, такие как аллил, бензил, ацетил, хлорацетил, тиобензил, бензилидин, фенацил, т-бутилдифенилсилил и другие группы, которые могут быть химически введены на гидроксильную функциональную группу и позднее селективно удалены или химическими или ферментативными методами в мягких условиях, совместимых с природой продукта. Предпочтительные удаляемые блокирующие тиол группы включают дисульфидные группы, ацильные группы, бензильные группы и тому подобное.
Предпочтительные удаляемые блокирующие амино группы включают общепринятые заместители, такие как т-бутилоксикарбонил (тВОС), бензилоксикарбонил (СВ2), флуоренилметоксикарбонил (ЕМОС), аллилоксикарбонил (ЛЬОС) и т.п., которые могут быть удалены в обычных условиях, совместимых с природой продукта.
Предпочтительные карбоксилзащитные группы включают группы сложных эфиров, таких как метиловый, этиловый, пропиловый, тбутиловый и т.д., которые могут быть удалены в мягких условиях, совместимых с природой продукта.
Термин «необязательный» или «необязательно» означает, что описанное затем явление, условия или заместитель может присутствовать или не присутствовать, и что описание включает примеры, когда указанное явление или условие существует, и примеры, когда его нет.
Термин «лиганд» или «лиганды», как он использован здесь, обозначает соединение, которое является связывающим партнером для β2адренергического рецептора и связывается с ними по комплементарности. Предпочтительными лигандами являются те, которые являются или агонистами, или антагонистами β2адренергического рецептора. Специфическая область или области лиганда, которая(ые) распознается(ются) рецепторами, называется «доменом лиганда». Лиганд может быть способен связываться с рецептором или сам по себе, или для связывания может быть необходимо наличие одного или более нелигандных компонентов (например, Са+2, Мд+2 или молекула воды необходимы для связывания лиганда с различными сайтами связывания лиганда). Примеры лигандов, применимых в данном изобретении, описываются здесь. Опытные специалисты поймут значение того, что части структуры лиганда, которые не существенны для специфического распознавания молекул и связывающего действия, могут существенно изменяться, могут быть заменены или замещены неродственными структурами (например, вспомогательными группами, которым дано определение ниже) и, в некоторых случаях, полностью исключены, что не влияет на связывающее взаимодействие. Первое требование для лиганда состоит в том, чтобы у него имелся лигандный домен, которому дано определение выше. Понятно, что не предполагается, что термин лиганд ограничивается известными соединениями, которые применимы для связывания с в2-адренергическим рецептором (например, известные лекарственные средства). Специалисту в данной области понятно, что термин лиганд может одинаково применяться к молекуле, которая обычно не ассоциируется со свойствами связывания с β2адренергическим рецептором. Кроме того, необходимо отметить, что лиганды, которые проявляют минимальную активность или отсутствие полезной активности в виде мономеров, могут быть высокоактивны в виде поливалентных соединений благодаря преимуществам, придаваемым поливалентностью.
Термин «лиганд» или «лиганды», как он использован здесь, включает рацемические формы лигандов, а также отдельные энантиомеры и диастереомеры, и их нерацемические смеси.
Термин «полисвязывающее соединение или вещество» относится к соединению, которое способно к поливалентности, как указано ниже, и которое имеет 2-10 лигандов, ковалентно связанных с одним линкером или более. Во всех случаях каждый лиганд и линкер в полисвязывающем соединении независимо выбирается так, что полисвязывающее соединение включает как симметричные соединения (т.е. когда каждый лиганд, а также каждый линкер являются идентичными), так и асимметричные соединения (т.е. когда, по меньшей мере, один из лигандов отличается от других(ого) лигандов(а) и/или, по меньшей мере, один линкер отличается от другого(их) линкера(ов)). Полисвязывающие соединения дают больший биологический и/или терапевтический эффект, чем эквивалентные им, агрегаты из несвязанных лигандов, эквивалентные им, которые сделаны способными к связыванию. То есть биологический и/или терапевтический эффект лигандов, соединенных с полисвязывающим соединением больше, чем достигаемый с помощью того же самого количества несвязанных лигандов, которым доступно связывание с свитами связывания лигандов (рецепторами). Выражение «повышенный биологический или терапевтический эффект» включает, например, повышенное сродство, повышенную селективность в отношении мишени, повышенную специфичность для мишени, повышенную активность, повышенную эффективность, сниженную токсичность, увеличенную продолжительность активности или действия, повышенную способность убивать клетки, такие как клетки грибковых возбудителей, раковые клетки и т.д., сниженное побочное действие, повышенный терапевтический индекс, повышенную биодоступность, улучшенную фармакокинетику, улучшенный спектр активности и т.п. Полисвязывающие соединения данного изобретения будут проявлять, по меньшей мере, один, а предпочтительно более чем один, из вышеназванных эффектов.
Термин «одновалентность», как он использован здесь, относится к единственному связывающему взаимодействию между лигандом, которому дано определение здесь, с одним сайтом связывания лиганда, которому дано определение здесь. Нужно отметить, что соединение, имеющее многочисленные копии лиганда (или лигандов), проявляют одновалентность, когда только один лиганд является взаимодействующим с сайтом связывания лиганда. Примеры одновалентных взаимодействий изображены ниже.
Термин «поливалентность», как он использован здесь, относится к одновременному связыванию от 2 до 10 связанных лигандов (которые могут быть одинаковыми или разными) и двух или более соответствующих рецепторов (сайтов связывания лигандов), которые могут быть одинаковыми или разными.
Например, два лиганда, соединенные через линкер, которые связываются одновременно с двумя сайгами связывания, должны рассматриваться как двухвалентость; три лиганда, соединенные таким образом, должны быть примером трехвалентности. Пример трехвалентного связывания, иллюстрирующий полисвязывающее соединение, несущее три лиганда по сравнению с одновалентным связывающим взаимодействием, показан ниже
Должно быть понятно, что не все соединения, которые содержат множественные копии лигандов, связанных с линкером или с линкерами, обязательно проявляют феномен поливалентности, т.е. что биологический и/или терапевтический эффект полисвязывающего вещества больше эффекта суммы агрегата несвязанных лигандов, изготовленного так, что он способен связываться с сайтом связывания лиганда (рецептором). Чтобы поливалентность осуществилась, лиганды, которые соединены линкером или линкерами, должны быть направлены к их сайтам связывания лиганда с помощью линкера(ов) специфическим образом так, чтобы получить желаемый результат ориентации лигандов и получить таким образом фактическое полисвязывания.
Кроме того, полисвязывающее соединение данного изобретения может быть составлено из лигандов, которые все являются агонистами β2адренергического рецептора, или оно может быть составлено из лигандов, которые выбраны из агонистов и антагонистов в2-адренергического рецептора при условии, что полисвязывание дает общую агонистическую активность в отношении в2-адренергического рецептора.
Термин «активность» относится к минимальной концентрации, при которой лиганд способен обеспечить желаемый биологический или терапевтический эффект. Активность лиганда обычно пропорциональна его сродству к сайту связывания лиганда. В некоторых случаях активность может иметь нелинейную корреляцию с его сродством. При сравнении активности двух лекарств, например, полисвязывающего вещества и агрегата из его несвязанного лиганда, кривая зависимости реакции от дозы каждого строится в идентичных условиях испытания (например, при исследовании ίη νίίτο или ίη νίνο на соответствующей модели на животных, например, пациенте). Обнаружение того, что полисвязывающее вещество дает эквивалентный биологический или терапевтический эффект при более низкой концентрации, чем агрегат несвязанного лиганда является показателем повышенной активности.
Термин «селективность» или «специфичность» является мерой предпочтительности лиганда в отношении различных сайтов связывания лигандов (рецепторов). Селективность лиганда в отношении его целевого сайта связывания лиганда по отношению к другому сайту связывания лиганда показывает отношение соответствующих значений Ка (т.е. констант диссоциации для каждого комплекса лигандрецептор) или в случаях, когда биологический эффект наблюдается ниже Ка, отношение соответствующих ЕС50 (т.е. концентраций, которые вызывают 50% максимальной реакции по взаимодействию лиганда с двумя отдельными сайгами связывания лиганда (рецепторами)).
Термин «сайт связывания лиганда» означает сайт (место) на β-адренергическом рецепторе, которое распознает лигандный домен и представляет партнера связывания для лиганда. Сайт связывания лиганда может определяться мономерными или многомерными структурами. Это взаимодействие может быть способно вызывать уникальный биологический эффект, на пример, агонизм, антагонизм и модуляторный эффект, или оно может поддерживать продолжение биологического явления и т.п.
Следует признать, что сайты связывания лиганда рецептора, которые принимают участие во взаимодействиях биологического поливалентного связывания, построены в различной степени с помощью их внутримолекулярных и межмолекулярных ассоциаций. Например, сайты связывания лигандов могут быть ковалентно соединены в единую структуру, нековалентно связаны в многомерную структуру, размещаться в мембране или полимерной матрице и т.д., и поэтому имеют меньшую свободу перемещения и вращения, чем если бы те же структуры присутствовали бы в виде мономеров в растворе.
Термин «агонизм» и «антагонизм» хорошо известен специалистам. Термин «модуляторный эффект» относится к способности лиганда изменять активность агониста или антагониста посредством связывания лиганда с сайтом связывания лиганда.
Термин «инертный органический растворитель» или «инертный растворитель» означает растворитель, который является инертным в условиях реакции, включая, только в качестве примера, бензол, толуол, ацетонитрил, тетрагидрофуран, диметилформамид, хлороформ, дихлорметан, диэтиловый эфир, этилацетат, ацетон, метилэтилкетон, метанол, этанол, пропанол, изопропанол, трет-бутанол, диоксан, пиридин и т.п. Если не указано обратное, растворители, использованные при реакциях, описанных здесь, являются инертными растворителями.
Термин «лечение» относится к любому лечению патологического состояния у млекопитающего, в частности человека, и включает (ί) профилактику появления патологического состояния у субъекта, который может быть предрасположен к данному состоянию, но у которого указанное состояние еще не было диагностировано, и соответственно лечение является профилактическим лечением в отношении болезненного состояния;
(ίί) подавление патологического состояния, т.е. прекращение его развития;
(ш) облегчение патологического состояния, т. е. активация регрессии патологического состояния или (ίν) облегчение состояния, опосредованного патологическим состоянием.
Термин «патологическое состояние, которое модулируется лечением с помощью лиганда» охватывает все болезненные состояния (т.е. патологические состояния), которые в основном, как известно специалистам, практически лечатся с помощью лиганда для β2адренергического рецептора, и, как было обнаружено, такие же болезненные состояния успешно лечатся специфическим полисвязывающим соединением данного изобретения. Такие болезненные состояния включают только в качестве примера лечение млекопитающего, страдающего астмой, хроническим бронхитом и т.п.
Термин «терапевтически эффективное количество» относится к такому количеству полисвязывающего соединения, которое достаточно для осуществления лечения, которое описано выше, при введении млекопитающему, нуждающемуся в таком лечении. Терапевтически эффективное количество будет меняться в зависимости от состояния субъекта и заболевания, которое нужно лечить, веса и возраста субъекта, тяжести болезненного состояния, способа введения и т.п., что может быть легко определено обычным специалистом.
Термин «линкер», обозначаемый, где нужно символом 'X', относится к группе, которая ковалентно связана с 2 - 10 лигандами (определенные выше) таким образом, что приводит к соединению, способному к поливалентности. Среди других свойств, линкер является ориентирующей лиганд единицей, которая дает возможность связывания, по меньшей мере, двух копий лиганда (которые могут быть одинаковыми или различными) для этой цели. К тому же, линкер может быть или хиральной, или нехиральной молекулой. В некоторых случаях линкер может быть ковалентной связью, которая соединяет лиганды таким образом, что приводит к соединению, способному к поливалентности. Кроме того, в некоторых случаях линкер может быть сам по себе биологически активным. Термин «линкер», однако, не охватывает инертные носители, такие как гранулы, стеклянные частицы, волокна и т.п. Но понятно, что полисвязывающие соединения данного изобретения могут быть связаны с твердым носителем, если желательно. Например, такое связывание с твердыми носителями может быть произведено для использования в процессах разделения и очистки и сходном применении.
Степень, до которой реализуется поливалентное связывание, зависит от эффективности, с которой линкер или линкеры, соединяющий(е) лиганды, направляют указанные лиганды к совокупности свободных сайтов связывания лиганда. Помимо придания указанным лигандам поливалентного взаимодействия с сайтами связывания лигандов, линкер или линкеры пространственно заставляют данные взаимодействия произойти в объеме, определяемом линкером или линкерами. Таким образом, структурные характеристики линкера (валентность, геометрия, ориентация, размер, гибкость, химический состав и т.д.) являются характеристиками полисвязывающих веществ, которые играют важную роль в определении их активности.
Линкеры, используемые в данном изобретении, выбираются так, чтобы дать возможность поливалентного связывания лигандов с сайтами связывания лигандов в2-адренергического рецептора, располагаются ли такие сайты внутри, и как внутри, так и на периферии рецепторной структуры, или в каком-либо ее промежуточном положении.
Типичные представители соединений формулы (I):
I. Типичными представителями двухвалентых полисвязывающих соединений формулы (I), где Аг1 представляет собой 4-гидрокси-3гидроксиметилфенил, Аг2 представляет собой 1,4-фенилен, К1 и К2 являются водородом, X, О и Аг3, как указано ниже в табл. А, являются
1 ! Соел-е Стерео- при *С и X -0-Аг3 (**=стереохим.)
1А (КЗ) - ССНг) 2- связь -ИН-СН2-**СН {ОН} фенил* *= (5)
2 А (КЗ) -(СН2)2- связь -ΝΗ-СНг-* *СН (ОН 1 фенил* *= (В1
ЗА (КЗ) - (СН2) 2- связь -ΝΗ- СН2- * * СН(ОН) фенил* * ~ ( КЗ}
4А ί (КЗ) - (СНг)г- связь -ΝΗ-ΟΗ2-**ΟΗ (ОН) Н 4 гидрокси-3- тидроксиметил) ф©нид**= (Р.5)
5А (КЗ) -(СНг)вО- связь - (СНг) г-О- (СНг) 5-МН-СНг-** СН(ОН)-(4-гидрокси-3-гидроксиэтил) феНИл**=(К5)
ί 6Λ ί ΗΞ ) -сн2- Связь -НН-СН2- * * СН {ОН) - [ 4 - гидрокси - 3 гидроксмметил) фенил* *= (Р5)
1 7А (К) -(СН2)г- Связь -ЯН-СН2-**СН (ОН) фенил** = (3)
ЙА (к: -(СН2)2- Сйяэь -νη-οη2-**οη(он)фенил** = (П)
9Ά (КЗ) -(СНг)б-О- (СН2)з Связь -О- (СН2) Й-О- 14 - (3-гидроксилролил) ] - фенил
10А 1 (КЗ) -СН2*СН(ОН)- снг-о-*=нз Связь -о- (СНИ -** СН (ОН) - (СН?) -нн-сн -** СН(ОН)-(4-гидрокси-3-гидроксиметил) фенил* *={Н51
ΐ НА (КЗ) -(СН2)2- связь -ΝΗ-СНг-** СН(ОН)-0-нафт-1-ил **=(ΒΞ)
II. Типичными представителями полисвязывающих соединений формулы (I), где Аг1 представляет собой 4-гидрокси-3-гидроксиметилфенил, Аг2 представляет собой 1,4-фенилен, К1 и К2 представляют собой водород, X, О и Аг3, как указано в табл. В, ниже, являются
Таблица В
1 Соед. и Стерео- лри *С и X 0 -Аг3
1 3 (КЗ) связь Ο’(ρ-Ο6Ή4)-ΝΗ-0Η2- **СН(ОН»- **=(ΚΞ) связь 4-гидрокси- З-гидроксимётилфенил
2В (КЗ) связь -О- связь 4-аминофенил
зн (КЗ) -(СН2)е- О-(СН2)з- -О-(СН2)10О-{р-С6Н4)(СН2) з-О- (СН2) 6-νη-οη2**СН{ОН)*«=(Н5)стереохим. связь 4-гидрокси- 3-гидроксиметилфенил
4В 1 (КЗ) -(СН2)6- о-(сн2)3- -О-{СН2)10-О- {р-С6Н4)(СН2) э-О- ί СН2) ь-ын-сн2**СН(ОН)- **=(к5)стереохим. связь 4-11идрокси- 3-гидрсксиметилфенил
; 5В (КЗ) - (СН2)2- -0- (СН2) связь фенил
III. Типичными представителями двухвалентных полисвязывающих соединений формулы (I), где Аг1 представляет собой 4-гидрокси-3гидроксиметилфенил, К1 и К2 являются водоро33 дом, Аг3 представляет собой (4-гидрокси-3гидроксиметил)фенил, X, О и Аг2, как указано ниже в табл. С, являются
Таблица С
СоеД. ί 4 Стереонои *С и X -Аг3 1 с
1С (КЗ) Связь связь транс-1,4циклогексак -ΝΗ-СНг- **СН(СН) - **=(КЗ)
I ί 2С (КЗ) -сн2- СВЯЗЬ 1,3- циклогексан -сн2-мн-сн2-* + СН(ОН)- **=(ВЗ)
ЗС (КЗ) - (СН2) 3- связь 1,4-пиперазин - (СН2) 2-ЫН-СН2- **СН(ОН)- “(КЗ)
4С (КЗ) Связь связь п-ментан -νη-οη2-** СН(ОН)- + (КЗ)
5С (КЗ) Связь связь 1,2-фенилен -ΟΗ2-ΝΗ-ΟΗ2-** СН(ОН)- **=(КЗ)
IV. Типичными представителями двухвалентых полисвязывающих соединений формулы (I), у которых Аг1 и Аг3 представляют собой 4гидрокси-3-гидроксиметилфенил, К1 и К2 являются водородом, О является связью и Аг2 и X, как указано в табл. Ό, ниже, являются
Таблица Ό
ί ί Соед. 1 Стереохим. прк *С и Аг2 χ ί ί
1-------------------------------------- • 1[' (КЗ) Связь 1г4-циклогексан -(СН2)-(п-СбН1О)-ЫН-СН2- **СН(ОН)- ί I * *=()стереохим. |
V. Типичными представителями полисвязывающих соединений формулы (I), где Аг1 представляет собой фенил, К1 и К2 являются водородом, представляет собой -(СН2)2-, а Аг2 представляет собой 1,4-фенилен и О-А г3 представляет собой [2-гидрокси-2-фенил]этиламино, Х является связью, являются показанные в табл. Е, ниже
Таблица Е
Соед. № Стереохим. при *С Стереохим. при **С
1Е (КЗ) (КЗ)
2Е (К) (З)
3Е (К) (К)
VI. Неоднородные соединения
Предпочтительные воплощения
В то время как наиболее широкое определение данного изобретения представлено в «Кратком изложении изобретения», некоторые соединения формулы (I) являются предпочтительными.
(А) Предпочтительной группой являются соединения двухвалентые полисвязывающие формулы (II)
(ΐ) В этой группе (А) более предпочтительной группой соединений является та, в которой
Аг1 является арилом, более предпочтительно Аг1 является (а) фенильным кольцом формулы (с)
(с) где К4 представляет собой водород, алкил, галоген или алкокси, предпочтительно, водород, метил, фтор, хлор или метокси;
К5 представляет собой водород, гидрокси, галоген, амино или -\ИЗО2Ка, где Ка представляет собой алкил, предпочтительно, водород, гидрокси, фтор, хлор, амино или -\НЗО2СН3; и
К6 представляет собой водород, галоген, гидрокси, алкокси, замещенный алкил, сульфониламино, аминоацил или ациламино; предпочтительно водород, хлор, фтор, гидрокси, метокси, гидроксиметил, -СН2ЗО2СН3, -\НЗО2СН3, -ΝΗΟΗΟ, -С'О\И3 или -ΝΗΟΟΝΗ2.
(ίί) Другой более предпочтительной группой соединений в группе (А) является та, в которой
Аг1 представляет гетероарил, более предпочтительно Аг1 является 2,8-дигидроксихинолин-5-илом или 3-бромизоксазол-5-илом.
(ΐΐΐ) Еще одной более предпочтительной группой соединений в группе (А) является та, в которой
Аг1 представляет собой гетероциклил, более предпочтительно, Аг1 является гетероциклилом, конденсированным с арильным кольцом, более предпочтительно, 6-фторхроман-2-илом;
представляет собой связь, соединяющую -ΝΚ2- группу с Аг2, алкиленовую или замещенную алкиленовую группу, в которой один или более из атомов углерода в алкиленовой группе необязательно заменен(ы) на -О-, предпочтительно, ковалентную связь, метилен, этилен, пропилен, -(СН2)6-О-(СН2)3-, -(СН2)6-О- или -СН2СН(ОН)СН2-О-, и
Аг2 представляет собой фенил, причем группы и Х связаны в положениях 1,2-, 1,3- и 1,4 фенильного кольца; циклогексил, необязательно замещенный метилом, и причем группы и Х присоединены в положениях 1,3 и 1,4 циклогексильного кольца; или пиперазин, причем группы и Х связаны в положениях 1,4 пиперазинового кольца, предпочтительно, 1,4фенилен.
В вышеуказанных более предпочтительных группах, еще более предпочтительными группами соединений являются те, в которых:
(a) Х представляет собой -О-, -О-алкилен,
-О-(арилен)^Н-(замещенный алкилен)-, -О(алкилен)-О-(арилен)-(алкилен)-О-(алкилен)КН-(замещенный алкилен)-, -О-(алкилен)-О(арилен)- или -(алкилен)-(циклоалкилен)-КН(замещенный алкилен)-, предпочтительно, -О(СН2)4-; -СН2-( 1,4-циклогексил)-NН-СН2-СН(ОН)-; -О-(1,4-фенилен)^-СН2-СН(ОН); -О-(СН2)10-О(1,4-фенилен)-(СН2)3-О-(СН2)6^-СН2-СН(ОН)-; -О-(СН2)6-О-(1,4-фенилен)-(СН2)3-О-(СН2)5^НСН2-СН(ОН)-; -О-(СН2)6-О-(1,4-фенилен)-, и С) является ковалентной связью, или (b) Х представляет собой связь; и
С) является замещенной алкиленовой группой, причем один или более атомов углерода в указанной замещенной алкиленовой группе необязательно заменен(ы) гетероатомом(ами), такими как -ΝΎ-( где Ка представляет собой водород, алкил или ацил) или -О-, предпочтительно, -Ж-СН2-СН(ОН)-; ^Н-СН2-СН(ОН)-СН2-О-;
^-СН(СН2ОН)-; -СН2^Н-СН2-СН(ОН)-;
-С(СЩ)2^Н-СН2-СН(ОН); -(ОДЬ^Н-ОДСН(ОН)-; -(СН2)3-О-(СН2)6^Н-СН2-СН(ОН)-; -(СН2^Н-СН2-СН(ОН); -О-(СН2)-СН(ОН)СН2^-СН2-СН(ОН)-; ^Н-СН2-СН(ОН)-СН2О-; более предпочтительно ^Н-СН2-*СН(ОН)-; -ΝΙ 1-*С11(С112(')Ι I)-; -(СН2)3-О-(СН2)6^Н-СН2*СН(ОН)-; ^-СН2-*СН(ОН)-СН2-О- (где * представляет собой К или 8 стереохимию);
В вышеуказанных предпочтительной, более предпочтительной группе соединений, осо бенно предпочтительной группах соединений являются те, в которых:
(ΐ) Аг3 является такой же, как и Аг1, определенной выше в предпочтительных воплощениях (А) (ΐ)-(ΐΐΐ).
Другой особенно предпочтительной группой соединений является та, в которой (ΐΐ) Аг3 представляет собой фенильное кольцо формулы (б)
Н7
7 Ю где К7 представляет собой водород, алкил, алкенил, замещенный алкил, галоген, алкокси, замещенный алкокси, гидрокси, аминоацил или гетероарил, предпочтительно, водород, метил, пропен-2-ил, фтор, хлор, метокси, -СН2СО2Ме, гидрокси, -СН2СΘNН2, -ЖСОСЩ, ^НСНО или имидазол-1-ил, 1-метил-4-трифторметилимидазол-2-ил и г>8
К является водородом, галогеном, алкокси, замещенной алкокси, ациламино, предпочтительно, водородом, фтором, хлором, метокси, -СН2СО2Ме, -ΝΙ1С1 Ю или -(ΌΝΙΑ (ΐΐΐ) Еще одной особенно предпочтительной группой соединений является та, в которой
Аг3 представляет собой нафтил, пиридил, бензимидазол-1-ил, индолил, 2-цианоиндилил, карбазолил, 4-метилинданил, 5-(СН3СО2СН2О-)-
1.2.3.4- тетрагидронафтил, 1Н-2-оксоиндол,
2.3.4- тригидротианафталин, 4-гидрокси-2- бензотиазолинон или 4-оксо-2,3-дигидротианафтален.
В вышеуказанных предпочтительной, более предпочтительной и особенно предпочтительной группах еще более предпочтительной группой является та, в которой
Аг1 представляет собой фенил, 4гидроксифенил, 3,4-дигидроксифенил, 3,4дихлорфенил, 3,5-дигидроксифенил, 2-хлор-3,4дигидроксифенил, 2-хлор-3,4-дигидроксифенил,
2- фтор-3,4-дигидроксифенил, 2-хлор-3,5- дигидроксифенил, 4-гидрокси-3-метоксифенил, 4-гидрокси-3-гидроксиметилфенил, 4-гидрокси-
3- (НСΘNН-)фенил, 4-гидрокси-3-^Н2СО-) фенил, 3-хлорфенил, 2,5-диметоксифенил, 4- (СН38О^Н-)фенил, 4-гидрокси-3-(СН38О2СН2-) фенил, 4-гидрокси-3-(СН38О^Н-)фенил, 4гидрокси-3-(NН2СΘNН-)фенил, 3,5 - дихлор-4аминофенил,
предпочтительно 4-гидрокси-3-гидроксиметилфенил, 4-гидрокси-3-(НСΘNН-)фенил,
3,5-дихлор-4-аминофенил или
и Аг3 представляет собой (X “ Н; ОМе. ОН)
предпочтительно фенил или 4-гидрокси-3гидроксиметилфенил.
Общая схема синтеза
Соединения данного изобретения могут быть получены способами, приведенными на схемах реакций, представленных ниже.
Исходные вещества и реагенты, используемые при получении указанных соединений, можно приобрести коммерчески у Ак.1пс11 Сйеш1еа1 Со., (МП^аикее, ^1зсопз1п, ϋ8Ά), Васкеш (Тоггапсе, СаНГогша, И8Л), ЕшкаСКепие или 81дта (81. Ьошз, М1ззоип, И8Л), или получить способами, известными специалистам в данной области, по следующим методикам, представленным в таких источниках, как Р1езег апб Р1езег'з РеацепД £ог 0гдашс 8упШез1з, Уо1ишез 1-15 (,1о11п ^11еу апб 8опз, 1991); Кобб'з Скеш181ту о£ СагЬоп Сошроипбз, Уо1ишез 1-5 апб 8ирр1ешеп1а1з (Е1зеу1ег 8с1епсе РиЬНзкегз, 1989), 0гдашс КеасЕопз, Уо1ишез 1-40 (,1о11п ^11еу апб 8опз, 1991), Магск'з Лбуапсеб 0гдашс Скеш1з1ту, (.1о11п ^11еу апб 8опз, 41Ь ЕбШоп) и Ьагоск'з Сошргекепз1уе 0гдашс ТгапзГогшаНопз (УСН РиЬНзкегз 1пс., 1989).
Исходные вещества и промежуточные соединения могут быть выделены и очищены, если желательно, с использованием общеприня тых методик, включая, но не ограничиваясь ими, фильтрацию, дистилляцию, кристаллизацию, хроматографию и тому подобное. Такие вещества могут быть охарактеризованы с ис пользованием общепринятых средств, включая физические константы и спектральные данные.
Кроме того, понятно, что когда даются типичные или предпочтительные условия процесса (т.е. температуры реакций, время реакций, молярные отношения реагентов, растворители, давление и т.д.), могут также применяться и другие условия процесса, если не указано иначе. Оптимальные условия реакции могут меняться в зависимости от использования конкретных реагентов и растворителей, но такие условия могут быть определены специалистом в данной области с помощью обычных методов оптимизации.
К тому же для специалистов в данной области будет очевидно, что могут быть необходимы общепринятые защитные группы, чтобы предотвратить участие определенных функциональных групп в нежелательных реакциях. Выбор подходящей защитной группы для конкретной функциональной группы, а также подходящие условия для создания защиты и ее удаления хорошо известны в данной области. Например, многочисленные защитные группы и их введение, и удаление описаны у Т.^. Сгеепе апб С.М. \\'и1з, Рго1ес11пд Сгоирз ш 0гдашс 8уп111ез1з, 8есопб ЕбШоп, ^11еу, Хе\\ Уогк, 1991, и в источниках, процитированные здесь.
Указанные схемы являются просто иллюстрацией некоторых методов, с помощью которых могут быть синтезированы соединения данного изобретения, и могут быть сделаны различные модификации указанных схем и предположены специалистом в данной области, обращаясь к данному описанию.
Получение полисвязывающего соединения формулы (I)
В основном, двухвалентые полисвязывающие соединения формулы (I) могут быть получены, как показано и описано на схемах АΌ, ниже.
Двухвалентое полисвязывающее соединение формулы (I) может быть получено путем ковалентного связывания лигандов Р, причем, по меньшей мере, один из лигандов выбирается из соединения формулы (а), как указано в «Кратком изложении изобретения», с линкером X, как показано ниже на схеме А.
Схема А
Способ (а)
1АР<3 + ЕС2---х--ре2 -------- и-----х-----к
Способ (Ь)
1-1 + ГС2 X—ГО-2РЗ . ί,-----X —ρθ2ρθ [промежуточное соед] (П) удаление зашиты • ·<***
----Ц---х — ΡΘ2 + —кг—ц---х---к
В способе (а) двухвалентое полисвязывающее соединение формулы (I) получают в одну стадию путем ковалентного связывания лигандов Ь, с линкером X, где РС1 и РС2 представляют собой функциональную группу, такую как галоген, амино, гидрокси, тио, альдегид, кетон, карбокси, карбокси производные, такие как галогенангидрид кислоты, сложный эфир, амидо и т.п. Данный способ является предпочтительным для получения соединений формулы (I) , где лиганды являются одинаковыми.
В способе (Ъ) соединения формулы (I) получают постадийно путем ковалентного связывания одного лиганда Ь1 с лигандом X, где ЕС1 и ЕС2 представляют собой функциональную группу, определенную выше, а ЕС2РС является защищенной функциональной группой, с получением промежуточного соединения формулы (II) . Затем удаление защиты второй функциональной группы на лиганде с последующей реакцией с лигандом Ь2, который может быть таким же или иным, чем лиганд Ь1, дает соединение формулы (I). Данный способ подходит для получения соединений формулы (I), когда лиганды неидентичны.
Лиганды ковалентно связывают с линкером, с использованием общепринятых химических методик, обеспечивающих ковалентное связывание лиганда с линкером. Химизм реакций, приводящих к получению таких связей, хорошо известен в данной области и включает использование комплементарных функциональных групп на линкере и лиганде, как показано в табл. 1 ниже.
Таблица 1
Типичные примеры химизма комплементарного связывания
Первая реакционноспособная группа Вторая реакционноспособная группа Связь
Карбоксил Амин Амид
Сульфонилгалогенид Амин Сульфонамид
Гидроксил Алкил/арилгалогенид Простой эфир
Гидроксил Изоцианат Уретан
Амин Эпоксид β-Г идроксиамин
Амин Алкил/арилгалогенид Алкиламин
Амин Изоцианат Мочевина
Гидроксил Карбоксил Сложный эфир
Амин Альдегид Амин
Реакция между карбоновой кислотой или линкера, или лиганда и первичным или вторичным амином или лиганда, или линкера в присутствии соответствующих, хорошо известных активирующих агентов, таких как дициклогексилкарбодиимид, приводит в результате к образованию амидной связи, ковалентно соединяющей лиганд с линкером; реакция между аминной группой или линкера, или лиганда и сульфонилгалогенанидом или лиганда, или линкера в присутствии такого основания, как триэтиламин, пиридин и т.п., приводит в результате к образованию сульфонамидной связи, ковалентно связывающей лиганд с линкером; и реакция между спиртовой или фенольной группой или линкера, или лиганда и алкил- или арилгалогенидом или лиганда, или линкера в присутствии такого основания, как триэтиламин, пиридин и т.п., приводит в результате к образованию связи простого эфира, соединяющей лиганд с линке ром.
Двухвалентое полисвязывающее соединение формулы (I), где второй лиганд Аг3 является таким же, как Аг1, X является связью, а О представляет собой 2-гидроксиэтиламиногруппу, и лиганды связаны через группу Аг2, может быть получено из ацетофенонового производного формулы 1, как показано ниже на схеме В.
Схема В о о°
2Аг!Ду°Н 4 Η3Ν-νν-Α?-ΝΗ2 ►
ОН
1аа
Конденсация ацетофенонового производного формулы 1 с диамином формулы 2 в растворе простого эфира, такого как тетрагидрофуран, дает имин формулы 3. Восстановление имина с помощью подходящего восстанавливающего агента, такого как боран, дает соединение формулы (I). Подходящими растворителями для реакции являются тетрагидрофуран и т.п. Соединение 1, где Аг1 является фенилом, получают путем нагревания ацетофенона в 48% растворе бромистоводородной кислоты в диметилсульфоксиде.
Соединения формулы 1 могут быть получены способами, известными в данной области. Например, а,а-дигидрокси-4-гидрокси-3-метоксикарбонилацетофенон может быть получен путем нагревания метилового эфира 5ацетилсалициловой кислоты в 48% бромистоводородной кислоте.
Альтернативно двухвалентое полисвязывающее соединение формулы (I), где второй лиганд Аг3 является таким же, как Аг1, Х является связью, а О представляет собой 2-гидро ксиэтил-аминогруппу, и лиганды связаны через группу Аг2, может быть получено из ацетофенонового производного формулы 1, как показано на схеме С ниже.
Схема С о , он н он
АгХ) * ^Ν-νγ-Α^-ΝΗ; ----~ Аг>Б^-'Л''А'2_НМУ''А1 3
А а (I) (Аг1 = Аг3)
Соединение формулы (I) может быть получено взаимодействием эпоксида формулы 4 с диамином формулы 2. Эпоксиды 4 или коммерчески доступны, или они могут быть получены способами, описанными в КлегЧеаб й.№. е! а1. ί. Меб. Сбет. 26, 1561-1569, (1983) или Ней, К. е! а1. Те!. Бей 35, 9345-9348 (1994).
По другому способу двухвалентое полисвязывающее соединение формулы (I), где второй лиганд Аг3 является таким же, как Аг1, Х является связью, а О представляет собой 2 гидроксиэтиламиногруппу, и лиганды связаны через группу Аг2, может быть получено из ацетофенонового производного формулы 1, как показано ниже на схеме Ό.
Схема Ό
О_0 О восстанов- ОН
Аг>к --. АгДОэ . Α,>%ΝΗ2
СНС13 § 8 ζ а + оно-νν
сно
(I) (Аг'-АГ3)
Бромирование ацетофенонового производного формулы 5 бромом в галогенированном органическом растворителе, таком как хлороформ, дает α-бромацетофеноновое производное формулы 6. Воздействие на соединение 6 азидом натрия с последующим восстановлением полученного азида 7 с помощью подходящего восстанавливающего агента, такого как литийалюмогидрид, дает этаноламинное производное формулы 8. Конденсация 2 эквивалентов соединения 8 с диальдегидным соединением 9 дает имин формулы 10, который превращают в соединение формулы (I), как указано выше на схеме А.
Любое соединение, которое является агонистом в2-адренергического рецептора, может быть использовано в качестве лиганда в настоящем изобретении. Обычно соединение, выбранное для использования в качестве лиганда, будет иметь, по меньшей мере, одну функциональную группу, такую как амино, гидроксильная, тиольная или карбоксильная группа и т.п., которая позволяет данному соединению легко соединяться с линкером. Соединения, имеющие такую функциональную группу или известны в данной области, или их можно получить путем обычной модификации известных соединений, используя общепринятые реагенты и методики.
Линкеры могут быть присоединены в различных положениях молекулы лиганда, чтобы получить различные ориентации доменов лигандов и тем самым облегчить достижение поливалентности. Поскольку ряд положений βадренергических модулирующих лигандов синтетически осуществимы в отношении связывания, предпочтительно сохранять те структуры лигандов, которые являются наиболее важными для лигандно-рецепторного связывания. В настоящее время предпочтительными точками связывания являются арильная группа и азот боковой цепи.
Специалисту в данной области очевидно, что вышеприведенные химические реакции не ограничиваются получением двухвалентых полисвязывающих соединений формулы (I) и могут использоваться для получения трех-, четы рехвалентных и т. д. полисвязывающих соединений формулы (I).
Линкер соединяется с лигандом в положении, которое сохраняет взаимодействие домена лиганда - связывающего лиганд сайта, и специфически, что дает возможность домену лиганда ориентироваться так, чтобы связывать лиганд с сайтом связывания лиганда. Такие положения и методики синтеза в отношении связывания хорошо известны в данной области. Термин «линкер» охватывает все, что не рассматривается как часть лиганда.
Относительная ориентация, в которой домены лигандов располагаются, зависит от соединения лигандов с линкером в конкретной точке или точках и от геометрии структуры. Определение того, где на лиганде могут быть сделаны приемлемые замещения, базируется на предшествующем знании зависимости между структурой и активностью (ЗСА) лиганда и/или соединений той же группы и/или информации о строении комплексов лиганд-рецептор (например, рентгенокристаллография, ЯМР и т.п.). Такие положения и методы синтеза для получения ковалентного связывания хорошо известны в данной области. После соединения с выбранным линкером (или соединения со значительной частью линкера, например, 2-10 атомами линкера) одновалентный конъюгат линкер-лиганд может быть испытан на сохранение активности в соответствующем тесте.
Линкер, когда он ковалентно связан с многочисленными копиями лигандов, дает биосовместимое, по существу, неиммуногенное полисвязывающее соединение. Биологическая активность полисвязывающего соединения высокочувствительна к валентности, геометрии, композиции, размеру, гибкости или жесткости и т. д. линкера, и в свою очередь, связана с общим строением полисвязывающего соединения, а также с наличием или отсутствием анионного или катионного заряда, относительной гидрофобностью/гидрофильностью и т.п. линкера. Соответственно, линкер, предпочтительно, выбирается так, чтобы получить максимальную биологическую активность полисвязывающего соединения. Линкер может быть выбран из любых органических молекул, строение которых ориентирует два или более лигандов по их сайгам связывания лиганда так, что дает возможность поливалентности. В этом отношении линкер можно рассматривать как «каркас», на котором лиганды располагаются в определенном порядке так, чтобы получить результат желаемой ориентации лиганда и, таким образом, создать полисвязывающее соединение.
Например, различные ориентации могут быть достигнуты путем включения в структуру групп, содержащих моно- или полициклические группы, включая арильные и/или гетероарильные группы, или структуры, включающие одну или более множественных связей между атома ми углерода (углерод-углерод) (алкенильные, алкениленовые, алкинильные или алкиниленовые группы). Другие группы могут также включать олигомеры и полимеры, которые представляют собой разновидности с прямой и разветвленной целью. При предпочтительном осуществлении жесткость придается наличием циклических групп (например, арильной, гетероарильной, циклоалкильной, гетероциклической и т.д.). При других предпочтительных воплощениях кольцо является шести- или десятичленным. При еще более предпочтительных воплощениях кольцо является ароматическим кольцом, таким как, например, фенил или нафтил.
Различные гидрофобные/гидрофильные характеристики линкера, так же как и наличие или отсутствие заряженных заместителей могут быть также легко отрегулированы опытным специалистом. Например, гидрофобная природа линкера, происходящая от гексаметилендиамина (Η2Ν^Η2)6ΝΗ2) или от родственных полиаминов, может быть модифицирована так, чтобы стать существенно более гидрофильной, путем замены алкиленовой группы поли(оксиалкилен) группой, которая коммерчески доступна «Дейаштез».
Для того чтобы обеспечить предпочтительные ориентации лигандов могут быть сконструированы различные структуры. Такие структуры могут быть представлены совокупностью точек (как показано ниже), причем каждая точка потенциально может быть атомом, таким как С, О, Ν, 8, Р, Н, Т, С1, Вг и Т, или точка, альтернативно, может показывать отсутствие атома в этом положении. Чтобы облегчить понимание каркасной структуры, каркас показан в виде двухмерной пространственной решетки (матрицы) на следующей диаграмме. Хотя на практике чисто каркасы представляют собой трехмерную пространственную решетку а····· ·.....
7«········.....
в········· .....
5········· .....
4· · » —
3········· .....
2····*···* .....
1····· · · .....
0····· ......
012 3 4 56 78
Каждая точка представляет собой или атом, выбранный из углерода, водорода, кислорода, азота, серы, фосфора или галогена, или точка является точкой в пространстве (т.е. отсутствие атома). Как очевидно для опытного специалиста, только некоторые атомы в решетке обладают способностью действовать как точки связывания для лигандов, а именно, С, О, Ν, 8 и Р.
Что касается условий химических связей, атомы могут быть соединены друг с другом свя зями (одинарными, двойными или тройными связями с приемлемыми резонансными и таутомерными формами). Лиганды могут быть присоединены к каркасу (каркасная структура) одинарными, двойными или тройными связями (с химически приемлемыми таутомерными и резонансными формами). Многочисленные лигандные группы (от 2 до 10) могут быть присоединены к каркасу так, что минимальное расстояние кратчайшего пути между соседними лигандными группами не превышает 100 атомов. Предпочтительно соединения линкера с лигандом выбирают таким образом, чтобы максимальное пространственное расстояние между соседними лигандами равно не более 100А.
Пример линкера, который представлен решеткой, показан ниже в отношении бифенильной конструкции.
Узлы (1,2), (2,0), (4,4), (5,2), (4,0), (6,2), (7,4), (9,4), (10,2), (9,0), (7,0), все представляют атомы углерода. Узел (10,0) представляет атом хлора. Все другие узлы (или точки) являются точками в пространстве (т.е. представляют отсутствие атомов).
Узлы (1,2) и (9,4) являются точками присоединения. Атомы водорода присоединены в узлах (2,4), (4,4), (4,0), (2,0), (7,4), (10,2) и (7,0). Узлы (5,2) и (6,2) соединены одинарной связью.
Присутствующие атомы углерода соединены или одинарной или двойной связями, с учетом принципа резонанса и/или таутомериз ма.
Точки пересечения каркаса (линкер) и лигандной группы и, конечно, самого каркаса (линкер) могут иметь много различных форм связывания. Примеры приемлемых форм расположения трех соседних атомов показаны на следующей диаграмме:
Специалист в данной области должен быть способен определить формы связывания, кото45 рые должны дать поливалентные соединения. Способы получения таких связывающих сочетаний описаны в Магсй, Лбуалсеб Огдатс С11ст151гу. 4'1' Ε6ίΙίοη, У11еу-1п1ег8с1епсе, Ыете Уогк, Ыете Уогк (1992). Данные сочетания изображены на решетке точек на представленной выше схеме. Показаны все возможные сочетания для пяти наиболее предпочтительных атомов. Каждый атом имеет ряд приемлемых состояний окисленности. Подчеркнутые связывающие сочетания менее приемлемы и не являются предпочтительными.
Примеры молекулярных структур, в которых вышеуказанные связывающие формы могли бы использоваться в качестве компонентов линкера, показаны ниже.
подходящей геометрии и
Определение размера каркасной структуры для подачи домена лиганда являются важными стадиями в конструировании полисвязывающего соединения с повышенной активностью. Для помощи в определении предпочтительных каркасных структур может быть использована стратегия систематических пространственных исследований посредством процесса интерации. Фиг. 3 иллюстрирует стратегию, подходящею для определения оптимальной экспонирующей ориентации каркасной структуры в отношении лигандных доменов. Специалисту в конструировании молекул известны и другие некоторые стратегии, и они могут быть использованы для получения соединений данного изобретения.
Как показано на фиг. 1, экспонирующие векторы вокруг похожих структур центрального ядра, таких как фенильная структура (панель А) и циклогексановая структура (панель В), могут меняться, так же как может меняться расстояние домена лиганда от структуры центрального ядра (т.е. длина соединяющей части). Необходимо отметить, что при определении оптимальной экспонирующей каркасной ориентации лигандов могут быть использованы другие структуры центрального ядра, а не те, которые показаны здесь. Данный процесс может потребовать использования многочисленных копий одной и той же структуры центрального ядра или комбинаций различных типов экспонирующих ядер.
Вышеописанный процесс может быть распространен и на тримеры (фиг. 2), и на соединения более высокой валентности (фиг. 3 и 4).
Исследования каждого из отдельных соединений совокупности, полученной, как описано выше, приведет к подмножеству соединений с желаемой повышенной активностью (например, возможностями, селективностью и т.д.). Анализ данного подмножества с использованием такой методики, как «совместная молекулярная динамика» (ЕпкетЫе Мо1еси1аг Эупаткк), даст ориентацию каркаса, которая благоприятна для целевых свойств. Коммерчески доступно широкое разнообразие линкеров (см., например, АуайаЫе Сйетка1 ЭпесФгу (АСИ)). Многие из таких линкеров, подходящих для использования в данном изобретении, попадают в эту категорию. Другие могут быть легко синтезированы способами, хорошо известными в данной области и/или описываемыми ниже.
После выбора предпочтительной геометрии каркасной структуры физические свойства линкера могут быть оптимизированы путем изменения его химического состава. Для достижения целевых физических свойств у полисвязывающего соединения химический состав линкера может быть изменен многочисленными путями.
Поэтому можно видеть, что существует масса возможностей в отношении состава линкера. Примеры линкеров включают алифатические части, ароматические части, стероидные части, пептиды и т.п. Конкретными примерами являются пептидные или полиамидные, углеводородные, ароматические группы, группы простых эфиров, липидные, катионные или анионные группы, или их комбинация.
Ниже представлены примеры, но должно быть понятно, что могут быть произведены различные изменения и эквивалентно заменены без изменения сущности и объема изобретения. Например, свойства линкера могут быть модифицированы путем включения вспомогательных групп в линкер или присоединения к линкеру, например, чтобы изменить растворимость полисвязывающих соединений (в воде, жирах, липидах, биологических жидкостях и т.д.), гидрофобность, гидрофильность, гибкость линкера, антигенность, стабильности и т.п. Например, присоединение или введение одной или более групп полиэтиленгликоля (ПЭГ) к линкеру или в линкер повышает гидрофильность и растворимость в воде полисвязывающего соединения, увеличивает как молекулярный вес, так и размер молекулы, и в зависимости от природы линкера без ПЭГ, может повышать время удерживания 1п νινο. Кроме того, ПЭГ может снижать антигенность и потенциально повышает общую устойчивость линкера.
Вспомогательные группы, которые повышают растворимость в воде/гидрофильность линкера и, соответственно, получаемые полисвязывающие соединения полезны в практическом осуществлении данного изобретения. Таким образом, в объем данного изобретения входит использование вспомогательных групп таких, как например, небольшие повторяющиеся звенья этиленгликолей, спиртов, полиолов (например, глицерин, глицеролпропоксилат, сахариды, включая моноолигосахариды, и т.д.), карбоксилатов (например, небольшие повторяющиеся звенья глютаминовой кислоты, акриловой кислоты и т.д.), аминов (например, тетраэтиленпентамин) и т.п., для усиления растворимости в воде и/или гидрофильности полисвязывающих соединений данного изобретения. При предпочтительных осуществлениях вспомогательная группа, использованная для улучшения растворимости в воде/гидрофильности, будет полиэфиром.
Включение липофильных вспомогательных групп в структуру линкера для увеличения липофильности и/или гидрофобности полисвязывающих соединений, описанных здесь, также входит в объем изобретения. Липофильные группы, используемые с линкерами данного изобретения, включают, только в качестве примера, арильные и гетероарильные группы, которые, как указано выше, могут быть или незамещенными, или замещенными другими группами, но являясь замещенными, по меньшей мере, группой, которая дает возможность их ковалентного связывания с линкером. Другие липофильные группы, используемые с линкерами данного изобретения, включают производные жирных кислот, которые не образуют бислои в водной среде до тех пор, пока не будут достигнуты более высокие концентрации.
В объем данного изобретения также входит использование вспомогательных групп, дающих в результате полисвязывающее соединение, которое может включаться или закрепляться на носителе или другой мембранной структуре, такой как липосома или мицелла. Термин «липид» относится к любому производному жирных кислот, которое способно к образованию бислоя или мицеллы так, что гидрофобная часть липидного вещества ориентируется в направлении бислоя, тогда как гидрофильная часть ориентируется в направлении водной фазы. Гидрофильные свойства являются следствием наличия фосфатных, карбоксильных, сульфатных, амино, сульфгидрильных, нитро и других подобных групп, хорошо известных специалистам. Гидрофобность можно придать путем включения групп, которые включают, но не ограничиваются ими, длинноцепочечные насыщенные и ненасыщенные алифатические углеводородные группы, содержащие до 20 атомов углерода, и такие группы, которые замещены одной или более арильной, гетероарильной, циклоалкильной и/или гетероциклической группой(ами). Предпочтительными липидами являются фосфоглицериды и сфинголипиды, типичные примеры которых, включающие фосфатидилхолин, фосфатидилэтаноламин, фосфатидилсерин, фосфатидилинозитол, фосфатидная кислота, пальмитоилеоилфосфатидилхолин, лизофосфатидилхолин, лизофосфатидилэтаноламин, дипальмитоилфосфатидилхолин, диолеоилфосфатидилхолин, дистеароилфосфатидилхолин или дилинолеоилфосфатидилхолин, могут быть использованы. Другие соединения, у которых отсутствует фосфор, такие как семейства сфинголипидов и гликосфинголипидов, также входят в группу, называемую липидами. Кроме того, амфипатические липиды, описанные выше, могут быть смешаны с другими лилидами, включающими триглицериды и стеролы.
Гибкость линкера можно регулировать путем включения вспомогательных групп, которые являются объемными и/или жесткими. Наличие объемных или жестких групп может затруднять свободное вращение вокруг связей в линкере или связей между линкером и вспомогательной(ыми) группой(ами), или связей между линкером и функциональными группами. Жесткие группы могут включать, например, те группы, конформационная лабильность которых сдерживается наличием колец и/или множественными связями с группой, например, арильной, гетероарильной, циклоалкильной, циклоалкенильной и гетероциклической группами. Другие группы, которые могут придавать жесткость, включают полипептидные группы, такие как олиго- или полипролиновые цепи.
Жесткость можно также придать электростатически. Таким образом, если вспомогательные группы являются или положительно, или отрицательно заряженными, одинаково заряженные вспомогательные группы будут втягивать представляющий линкер в конфигурацию, дающую максимальное расстояние между каждым из подобных заряде. Энергетические затраты приведения одинаково заряженных групп ближе одну к другой будет служить для удерживания линкера в конфигурации, которая сохраняет разобщение таких одинаково заряженных групп. Кроме того, вспомогательные группы, несущие противоположные заряды, будут иметь стремление притягиваться к их противоположно заряженным аналогам и, потенциально, могут входить как в меж-, так и во внутримолекулярные ионные связи. Этот нековалентный механизм будет служить для удерживания линкера в конформации, которая дает возможность связывания между противоположно заряженными группами. Введение вспомогательных групп, которые заряжены или альтернативно несут латентный заряд при удалении защиты после введения в линкер, включает депротонирование карбоксильной, гидроксильной, тиоль ной или аминогруппы путем изменения рН, окисление, восстановление или другие механизмы, известные в данной области, которые приводят в результате к удалению защитной группы, входит в объем данного изобретения.
Жесткость можно также придать внутренней водородной связью или путем гидрофобного сжатия.
Объемные группы могут, например, включать большие атомы, ионы (например, иода, серы, ионы металлов и т.д.) или группы, содержащие большие атомы, полициклические группы, включая ароматические группы, неароматические группы и структуры, включающие один или более углерод-углеродных множественных связей (т.е. алкены и алкины). Объемные группы могут также включать олигомеры и полимеры, которые представляют собой виды с разветвленной или прямой цепью. Виды, которые являются разветвленными, как предполагается, дают больший выигрыш в повышении жесткости структуры на единицу молекулярного веса, чем виды с прямой цепью.
При предпочтительных осуществлениях жесткость придается наличием циклических групп (например, арильной, гетероарильной, циклоалкильной, гетероциклической и т.д.). При других предпочтительных осушествлениях кольцо является арильной группой, такой как, например, фенильная или нафтильная.
Ввиду вышеуказанного очевидно, что соответствующий выбор линкерной группы, обеспечивающей соответствующую ориентацию, ограниченное/неограниченное вращение, желаемую степень гидрофобности/гидрофильности и т.д., хорошо известен в данной области. Устранение или снижение антигенности полисвязывающих соединений, описанных здесь, также входит в объем данного изобретения. В некоторых случаях антигенность полисвязывающего соединения может быть устранена или снижена путем применения таких групп, как, например, полиэтиленгликоль.
Как объяснено выше, полисвязывающие соединения, описанные здесь, содержат 2-10 лигандов, присоединенных к линкеру, к которому лиганды присоединяются таким образом, что они экспонируются по отношению к ферменту для осуществления поливалентного взаимодействия с сайтами связывания лигандов на нем/в нем. Линкер пространственно вынуждает указанные взаимодействия происходить в измерениях, определяемых линкером. Этот и другие факторы повышают биологическую активность полисвязывающего соединения по сравнению с таким же числом лигандов, доступных в моносвязывающей форме.
Соединения данного изобретения, предпочтительно, представлены формулой (Ь)р(Х)ф где Ь, X, р и μ определены выше. При этом подразумевается, что сюда включено несколько путей, с помощью которых лиганды могут быть связаны друг с другом с целью достижения поливалентности, и более детальное объяснение излагается ниже.
Как указано выше, линкер может рассматриваться в качестве каркаса, к которому присоединяются лиганды. Таким образом, должно быть понятно, что лиганды могут присоединяться в любом подходящем положении на данном каркасе, например, на конце линейной цепи или в любом промежуточном положении.
Наиболее простое и наиболее предпочтительное полисвязывающее соединение является двухвалентым соединением, которое может быть представлено как Ь-Х-Ь, где каждый Ь независимо представляет собой лиганд, который может быть тем же самым или другим, и каждый Х независимо представляет собой линкер. Примеры таких двухвалентых соединений представлены на фиг. 1, где каждый заштрихованный кружок представляет собой лиганд. Трехвалентное соединение могло бы быть представлено в линейном виде, т.е. в виде последовательности повторяющихся звеньев Ь-Х-Ь-Х-Ь, в которой Ь представляют собой лиганды и являются одинаковыми или различными в каждом отдельном случае, как может быть и X. Однако тример может быть также и полисвязывающим соединением с радиальным строением, содержащим три лиганда, присоединенных к центральному ядру, и таким образом, может быть представлен в виде (Ь)3Х, где линкер Х мог бы включать, например, арильную или циклоалкильную группу. Иллюстрации трехвалентных и четырехвалентных соединений данного изобретения находятся на фиг. 2 и 3, соответственно, где также заштрихованные кружки представляют собой лиганды. Четырехвалентные соединения могут быть представлены в линейном строении, например,
Ь-Х-Ь-Х-Ь-Х-Ь в разветвленном строении, например, Ь-Х-Ь-Х-Ь
I ь
(разветвленная конструкция, аналогичная изомерам бутана -н-бутилу, изобутилу, вторичному бутилу и трет-бутилу) или в тетраэдральном строении, например,
где Х и Ь определены выше. Альтернативно, его можно было бы представить в виде алкильного, арильного или циклоалкильного производного, как указано выше, с четырьмя (4) лигандами, присоединенными к ядру линкера.
Те же самые обсуждения применимы и к более высоко полисвязывающим веществам данного изобретения, содержащим 5-10 лигандов, как проиллюстрировано на фиг. 4, где заштрихованные кружки также представляют со бой лиганды. Однако в отношении полисвязывающих агентов, присоединенных к центральному линкеру, такому как арил или циклоалкил, существует самоочевидное условие, что должно существовать достаточное количество сайтов связывания на линкере для размещения определенного числа представляемых лигандов; например, на бензольном кольце не могло бы непосредственно разместиться более чем 6 лигандов, тогда как многокольцевой линкер (например, бифенил) мог бы вместить большее число лигандов.
Вышеописанные соединения могут быть альтернативно представлены в виде циклических цепей следующей формы:
и ее вариантов.
Все из вышеприведенных изменений, как подразумевается, входят в объем изобретения, определяемый формулой (Ь)р(Х)ч.
Учитывая вышеуказанное, предпочтительный линкер может быть представлен следующей формулой
-Ха^-(Уа^)т-Хагде т равно целому числу от 0 до 20;
Ха в каждом отдельном случае выбран из группы, состоящей из -О-, -8-, -ΝΚ-, -С(О)-, -С(О)О-, -ОС(О)-, -С(О)1Ж-, -1МЯС(О)-, -С(8)-, -С(8)О-, -С(8)МЯ-, -ΝΡ£(8)- или ковалентной связи, где Я определено ниже;
Ζ в каждом отдельном случае выбран из группы, состоящей из алкилена, замещенного алкилена, циклоалкилена, замещенного циклоалкилена, алкенилена, замещенного алкенилена, циклоалкенилена, замещенного циклоалкенилена, арилена, гетероарилена, гетероциклена или ковалентной связи;
каждый Υ'1 в каждом отдельном случае выбран из группы, состоящей из -О-, -С(О)-, -ОС(О)-, -С(О)О-, -ΝΚ-, -8(О)п-, -С(О)ЫЯ'-, -МЯ'С(О)-, -^Ν^-ΝΕ'-, -ЫЯ'-С(О)-О-, -Р(О)(ОЯ')-О-,
-8(О)п-МЯ'-, -ЫЯ'-8(О)п-, связи; где п равно 0, 1 или 2;
Я, Я' и Я в каждом отдельном случае выбраны из группы, состоящей из водорода, алкила, замещенного алкила, циклоалкила, замещенного циклоалкила, алкенила, замещенного алкенила, циклоалкенила, замещенного циклоалкенила, алкинила, замещенного алкинила, арила, гетероарила и гетероциклила.
Кроме того, линкерная часть может быть необязательно замещена у любого её атома, одним или более, алкилом, замещенным алкилом, циклоалкилом, замещенным циклоалкилом, алкенилом, замещенным алкенилом, циклоалкенилом, замещенным циклоалкенилом, алкини
-МЯ'С(8)ХЯ'-, -ОС(О)-МЯ'-, -ЫЯ'-С(Ха)=Х-, -8(О)пСЯ'Я-, и ковалентной
-ΝΚ'ϋ^ΝΚ'-,
-Ν^'-ϋ^ΝΚ1)-, -М=С(Ха)-МЯ'-,
-О-Р(О)(ОЯ')-,
-8-8лом, замещенным алкинилом, арилом, гетероарилом и гетероциклической группой.
Ввиду вышеприведенного описания линкера понятно, что термин «линкер», когда он применяется в сочетании с термином «полисвязывающее соединение», включает как ковалентно связанный единичный линкер (например, ЬХ-Ь), так и многочисленные ковалентно несвязанные линкеры (Ь-Х-Ь-Х-Ь) в полисвязывающем соединении.
Комбинаторные библиотеки
В способах, описанных выше, прибегают к комбинаторным подходам для идентификации многомерных соединений, которые обладают свойствами полисвязывания.
Конкретно такие факторы, как соответствующее непосредственное соседство отдельных лигандов полисвязывающего соединения в отношении значимой совокупности связывающих сайтов на мишени или мишенях является важным для оптимизации взаимодействия полисвязывающего соединения с мишенью(ями) и для получения максимума биологических преимуществ придаваемых поливалентностью. Один из подходов состоит в идентификации библиотеки кандидатов в полисвязывающие соединения со свойствами, включающими параметры полисвязывания, которые значимы в отношении конкретной мишени. Эти параметры включают: (1) отличительные особенности лиганда(ов), (2) ориентацию лиганда(ов), (3) валентность конструкции, (4) длину линкера, (5) геометрию линкера, (6) физические свойства линкера и (7) функциональные химические группы линкера.
Получают библиотеки многомерных соединений, потенциально обладающих свойствами полисвязывания (т.е. кандидатов в полисвязывающие соединения) и включающие множество таких разновидностей, и эти библиотеки затем оценивают с помощью общепринятых исследований, соответствующих выбранному лиганду и желаемым параметрам полисвязывания. Соображения, имеющие отношение к каждому из этих вариантов, представлены ниже: Выбор лиганда(ов)
Выбирается (выбираются) единичный лиганд (или набор лигандов) для включения в библиотеки кандидатов в полисвязывающие соединения, библиотека которых направлена на конкретную биологическую мишень или мишени, например, на в2-адренергический рецептор. Единственным требованием к выбранным лигандам является то, что они должны быть способны к взаимодействию с выбранной(ыми) мишенью(ями). Таким образом, лиганды могут быть известными лекарствами, модифицированными формами известных лекарств, подструктурами известных лекарств (которые достаточны для взаимодействия с мишенью) или другими соединениями. Лиганды, предпочтительно, выбираются по известным подходящим свойствам, которые, как можно спрогнозиро вать, пролонгируются или усиливаются в полисвязывающих формах. Благоприятные свойства включают демонстрируемую безопасность и эффективность у пациентов, соответствующие характеристики (ΡΚ/ΆΌΜΕ) ФК/АРМВ (всасывание, распределение, метаболизм, выделение), доступность синтеза и желаемые физические свойства, такие как растворимость, 1од Ρ и т.д. Однако необходимо отметить, что ключевым моментом является то, что лиганды, которые проявляют неблагоприятное свойство, одно из вышеперечисленных, могут получить более благоприятное свойство в процессе образования полисвязывающего соединения; т. е. лиганды не должны обязательно исключаться на таком основании.
Например, лиганд, который недостаточно активен в отношении конкретной мишени для того, чтобы быть эффективным у больных людей, может стать высокоактивным и эффективным, когда присутствует в полисвязывающей форме. Лиганд, который активен и эффективен, но который неприменим из-за несвязанного с механизмом действия токсического побочного эффекта, может приобрести повышенный терапевтический индекс (повышенную активность по отношению к токсичности) в виде полисвязывающего соединения. Соединения, которые проявляют короткие полупериоды существования ίη νίνο, могут приобрести удлиненные полупериоды существования в виде полисвязывающих соединений. Физические свойства лигандов, которые ограничивают их использование (например, плохая биодоступность из-за низкой растворимости, гидрофобности, гидрофильности) могут быть рационально изменены в полисвязывающих формах, обеспечивая соединения физическими свойствами, совместимыми с целевым применением.
Ориентация: выбор точек связывания лигандов и химизма связывания
Для каждого лиганда выбираются несколько точек для связывания лиганда с линкером. Выбранные точки для связывания на лиганде/линкере функционализированы так, чтобы они содержали комплементарные реакционноспособные функциональные группы. Это дает возможность исследования эффектов представления лигандов их рецепторам при многочисленных соответственных ориентациях, важного параметра конструирования полисвязывания. Исключительным требованием в отношении выбора точек для связывания (присоединение) является то, чтобы присоединение к, по меньшей мере, одной из указанных точек не устраняло активности лиганда. Такие точки для связывания могут быть идентифицированы с помощью информации о структуре, когда она доступна. Например, рассмотрение сокристаллической структуры ингибитора протеазы, связанного с его мишенью, дает возможность идентифицировать один или более сайтов, где присоеди нение линкера не будет мешать взаимодействию фермент: ингибитор. Альтернативно, оценка связывания лиганд/ мишень с помощью ядерного магнитного резонанса даст возможность идентификации сайтов, несущественных для связывания лиганд/ мишень. См., например, Ре81к, еί а1., И.8. Ρаίеηί Νο. 5891643. Когда такая структурная информация недоступна, использование зависимости структура-активность (ЗСА; 8ΆΚ) в отношении лигандов будет подсказывать положения, где возможны и где невозможны существенные структурные изменения. В отсутствии как информации о структуре, так и информации о ЗСА просто выбирается библиотека со многими точками связывания, чтобы дать возможность представления лиганда во многих различных отдельных ориентациях. Последующая оценка данной библиотеки покажет, какие положения подходят для присоединения.
Важно подчеркнуть, что положения присоединения, которые не устраняют активность мономерного лиганда, могут также быть успешно включены кандидатами в полисвязывающие соединения в библиотеку при условии, что такие соединения несут, по меньшей мере, один лиганд, связанный методом, который не устраняет присущей им активности. Такая селекция происходит в результате, например, гетеродвухвалентых взаимодействий в окружении единственной молекулы-мишени. Например, рассматривается лиганд-антагонист рецептора, связанный с его рецептором-мишенью, и затем рассматривается модификация данного лиганда, произведенная путем присоединения второй копии того же лиганда к линкеру, который дает возможность второму лиганду взаимодействовать с той же рецепторной молекулой в сайтах, ближайших к сайту связывания антагониста, который включает элементы рецептора, являющиеся частью внешнего сайта связывания антагониста, и/или элементы матрицы, окружающей рецептор, такой как мембрана. В этот момент может быть достигнута наиболее благоприятная ориентация для взаимодействия второй молекулы лиганда с рецептором/матрицей путем присоединения его к линкеру в положение, которое аннулирует активность лиганда во внешнем сайте связывания антагониста. Другой путь рассмотрения состоит в том, что ЗСА отдельных лигандов в окружении полисвязывающей структуры часто отличается от ЗСА для тех же самых лигандов в мономерной форме.
Предшествующее обсуждение фокусировалось на двухвалентых взаимодействиях димерных соединений, несущих две копии одного и того же лиганда, связанного с единственным линкером в разных точках связывания, одна из которых может аннулировать связывание/активность мономерного лиганда. Необходимо также понять, что преимущество двухвалентости может быть также достигнуто с помощью гетеродимерных конструкций, несущих два различных лиганда, которые связаны с общими или различными мишенями. Например, антагонист 5НТ4-рецепторов и антагонист мускариновых М3, селективных для мочевого пузыря рецепторов, могут быть присоединены к линкеру через точки связывания, которые не аннулируют сродства связывания мономерных лигандов с соответствующим сайтом рецептора. У димерного соединения может быть достигнуто повышенное сродство к обоим рецепторам благодаря благоприятным взаимодействиям между 5НТ4-лигандом и элементами М3-рецепторов, ближайших к внешнему сайту связывания антагониста М3, и элементами 5НТ4-рецепторов, ближайшими к внешнему сайту связывания антагониста 5НТ4. Таким образом, димерное соединение может быть более сильным и селективным антагонистом повышенной активности мочевого пузыря и превосходным терапевтическим средством для лечения изнуряющего недержания мочи.
Когда точки присоединения лигандов уже выбраны, определяют типы химических связей, которые возможны в указанных точках. Наиболее предпочтительными типами химических связей являются те, которые совместимы с общей структурой лиганда (или защищенных форм лиганда), образуются легко и обычным путем, устойчивы и по природе тосиоик в обычных химических и физиологических условиях, и совместимы с большим числом доступных линкеров. Амидные связи, простые эфиры, амины, карбаматы, мочевины и сульфонамиды представляют только несколько примеров предпочтительных связей.
Линкеры: определение значимых параметров полисвязывания посредством выбора валентности, длины линкера, геометрии линкера, жесткости, физических свойств и химических функциональных групп.
В библиотеке линкеров, использованных для получения библиотеки кандидатов в полисвязывающие соединения, при выборе используемых в данной библиотеке линкеров учитываются следующие факторы.
Валентность
В большинстве примеров библиотека линкеров начинается с двухвалентых линкеров. Выбор лигандов и подходящего соседства двух лигандов, родственных по их сайтам связывания, позволяет таким молекулам проявлять сродство связывания с мишенями и специфичность более, чем достаточные для придания биологического преимущества. Кроме того, двухвалентые линкеры или конструкции также обычно имеют скромный размер, так что они сохраняют желаемые свойства биораспределения небольших молекул.
Длина линкера
Линкеры выбираются длиной в интервале, который позволяет включить диапазон межлигандных расстояний, который охватывает рас стояние, предпочтительное для данного двухвалентого взаимодействия. В некоторых примерах предпочтительное расстояние может быть установлено довольно точно по информации о строении мишеней с высоким разрешением, обычно ферментов и мишеней растворимых рецепторов. В других примерах, когда недоступна информация о строении с высоким разрешением (как в отношении объединенных 7ТМ С-протеиновых рецепторов), можно использовать простые модели для того, чтобы установить максимальное расстояние между сайтами связывания или на соседних рецепторах, или в разных положениях одинаковых рецепторов. В ситуациях, когда сайты связывания присутствуют на одной и той же мишени (или субъединице мишени для состоящих из многих субъединиц мишеней), предпочтительные линкерные расстояния равны 2-20А с наиболее предпочтительными линкерными расстояниями, равными 3-12А. В ситуациях, когда два сайта связывания находятся в разделенных сайтах мишенях (например, белок), предпочтительные линкерные расстояния равны 20-100А, с более предпочтительными расстояниями, равными 30-70А.
Геометрия линкера и жесткость
Сочетание сайта связывания лиганда, длины линкера, геометрии линкера и жесткости линкера определяет возможные пути, которыми лиганды кандидата в полисвязывающие вещества могут быть размещены в трех измерениях и тем самым представлены к их сайтам связывания. Геометрия линкера и жесткость номинально определяется химическим составом и характером связей, которые могут регулироваться и систематически изменяться, как и другая функция для соединения в полисвязывающем множестве. Например, геометрия линкера изменяется путем присоединения двух лигандов в орто-, мета- и пара-положениях бензольного кольца, или в цис- или транс-формах в 1,1-, 1,2-, 1,3-, 1,4-положениях вокруг циклогексанового ядра, или в цис- или транс-формах в точке этиленовой ненасыщенности. Линкерная жесткость изменяется путем регулирования числа и относительных энергий различных конформационных состояний, возможных для линкера. Например, двухвалентое соединение, несущее два лиганда, соединенных 1,8-октильным линкером, имеет намного больше степеней свободы, и поэтому менее жесткое, чем соединение, в котором два лиганда присоединены в 4,4'-положениях бифенильного линкера.
Физические свойства линкера
Физические свойства линкеров номинально определяются химическим строением и характером связей линкера, и физические свойства линкера оказывают воздействие на общие физические свойства кандидата в полисвязывающие соединения, в который они включены. Диапазон композиций линкера обычно выбирается так, чтобы обеспечить ряд физических свойств (гид рофобность, гидрофильность, амплифильность, поляризация, кислотность или основность) у кандидата в полисвязывающие соединения. Конкретный выбор физических свойств линкера производится в контексте физических свойств лигандов, которые они соединяют, и, предпочтительно, целью является получение молекул с благоприятными ФК/ВРМВ свойствами. Например, линкеры могут быть выбраны так, чтобы исключались те, которые слишком гидрофильны или слишком гидрофобны для того, чтобы легко абсорбироваться и/или распределяться ίη νίνο.
Химические функциональные группы линкера
Химические функциональные группы линкера выбираются так, чтобы быть совместимыми с химизмом, выбранным для соединения линкеров с лигандами, и чтобы придать ряд физических свойств, достаточных для обеспечения первоначальной оценки данного параметра.
Комбинаторный синтез
Выбрав набор из η лигандов (причем η определяется суммой ряда различных точек связывания для каждого выбранного лиганда) и т линкеров, с помощью способа, изложенного выше, получают библиотеку из (п!)т кандидатов в двухвалентые полисвязывающие соединения, которая охватывает значимые параметры полисвязывающей конструкции для конкретной мишени. Например, множество, полученное из двух лигандов, один из которых имеет две точки присоединения (А1, А2), и один из которых имеет три точки присоединения (В1, В2, В3), связанные во всевозможных комбинациях с получением, по меньшей мере, 15 возможных комбинаций полисвязывающих соединений.
А1-А1 А1-А2 А1-В1 А1-В2 А1-В3 А2-А2 А2-В1 А2-В2 А2-В3 В1-В1 В1-В2 В1-В3 В2-В2 В2-В3 В3-В3
Когда каждая из указанных комбинаций связана 10 различными линкерами, в результате получается библиотека из 150 кандидатов в полисвязывающие соединения.
Принимая во внимание комбинаторную природу библиотеки, для связывания реакционноспособных функциональностей на лигандах с комплементарными реакционноспособными функциональностями на линкерах, предпочтительно используются обычные химические реакции. Поэтому для библиотеки подходят эффективные параллельные методы синтеза. Для комбинаторной библиотеки можно использовать химические реакции в твердой фазе, хорошо известные в данной области, при которых лиганд и/или линкер соединяется с твердым носителем. Альтернативно и предпочтительно, комбинаторную библиотеку получают в растворе. После синтеза кандидат в полисвязывающие соединения необязательно подвергают очистке перед исследованиями на активность, например, хроматографическими методами (например, ВЭЖХ).
Биохимические, аналитические, фармакологические и вычислительные методы анализа множества
Для характеристики свойств и активности кандидата в полисвязывающие соединения в библиотеке используются различные методы с целью определения, какие соединения обладают свойствами полисвязывания. Могут определяться физические константы, такие как растворимость в различных растворителях, и могут быть определены значения 1одО/с1одЭ. Сочетание ЯМР спектроскопии и расчетных методов используется для определения низкоэнергетических конформаций кандидатов в полисвязывающие соединения в жидкой среде. Способность отдельных представителей библиотеки связываться с целевой мишенью и другими мишенями определяется различными стандартными методами, которые включают количественный анализ радиолигандного замещения для рецептора и мишеней ионных каналов и анализ кинетического подавления в отношении многих ферментов-мишеней. Может быть также определена эффективность ίη νίίτο, как, например, в отношении активности как агонистов и антагонистов рецепторов, блокаторов ионных каналов и антимикробной активности. На соответствующих моделях могут быть определены фармакологические данные, включая всасывание при пероральном введении, обратное проникновение в кишечник, другие фармакокинетические параметры и данные по эффективности. Таким путем получают ключевую зависимость активности от структуры в отношении параметров конструирования полисвязывания, которые затем используются для выбора дальнейшего направления работы.
Отдельные представители библиотеки, которые проявляют свойства полисвязывания, как указано выше, могут быть легко определены общепринятыми методами. В первую очередь указанные отдельные представители, которые проявляют свойства полисвязывания, идентифицируют обычными способами, как описано выше, включая общепринятые исследования (как ίη νίίτο, так и ίη νίνο).
Во вторых, выяснение структуры тех соединений, которые проявляют свойства полисвязывания, может быть выполнено посредством известных в данной области процедур. Например, каждый член библиотеки может быть зашифрован или маркирован с соответствующей информацией, дающей возможность определения структуры значимых представителей в более позднее время. См., например, Όο\\όγ. с1 а1., публикация международной заявки № νΟ93/06121; Вгеппег. с1 а1., Ргос. №11. Асай. 8с1., И8А, 89:5181 (1992); Са^р, е1 а1., и.8. Ра1еп1 Νο. 5 846 839; каждый из которых включен сюда в качестве ссылки во всей полноте. Альтернативно, структуру имеющего значение поливалентного соединения можно определить по растворимым и немаркированным библиотекам кандидатов в поливалентные соединения способами, известными в данной области, такими как описано Ηίπάδβαιιΐ. е1 а1., СапаШап Ра1еп1 ΆρρίίсаОоп Νο. 2240325, опубликованной 11 июля 1998г. Такие способы объединяют фронтальную аффинную хроматографию с масс-спектроскопией для определения как структуры, так и относительного сродства связывания кандидатов в полисвязывающие соединения с рецепторами.
Процесс, представленный выше в отношении кандидатов в димерные полисвязывающие соединения, может быть, конечно, распространен на кандидаты в трехмерные соединения и более высокие их аналоги.
Последующий синтез и анализ дополнительных(ого) множеств(а)
На основе информации, полученной из анализа первоначальной библиотеки, необязательным компонентом процесса является определение одного или более обещающих полисвязывающих «лидерных» соединений, которые определяются конкретными относительными ориентациями лигандов, длинами линкеров, геометрией линкеров и т.д. От таких «лидеров» могут быть затем получены дополнительные библиотеки для получения дальнейшей информации, касающейся зависимости между структурой и активностью. В множествах обычно имеются более нацеленные изменения в структуре линкера в качестве усилий по дальнейшей оптимизации сродства к мишени и/или активности на мишени (антагонизм, частичный агонизм и т.д.), и/или изменения физических свойств. Путем многократного повторного конструирования/анализа с использованием новых принципов конструирования полисвязывания по классическим подходам медицинской химии, био химии и фармакологии, можно получить и идентифицировать оптимальные полисвязывающие соединения, которые проявляют биологические преимущества в отношении их мишеней и в качестве терапевтических средств.
Чтобы далее работать по данной методике подходящие двухвалентные линкеры включают, только в качестве примера, те, которые являются производными дикарбоновых кислот, дисульфонилгалогенидов, диальдегидов, дикетонов, дигалогенидов, диизоцианатов, диаминов, диолов, смесей карбоновых кислот, сульфонилгалогенангидридов, альдегидов, кетонов, галогенидов, изоцианатов, аминов и диолов. В каждом случае функциональная группа карбоновой кислоты, сульфонилгалогенангидрида, альдегида, кетона, галогенида, изоцианата, амина и диола реагирует с комплементарной функциональностью на лиганде с образованием ковалентной связи. Такая комплементарная функциональность хорошо известна в данной области и иллюстрируется в следующей таблице:
Химизм комплементарного связывания
Первая реакционноспособная группа Вторая реакционноспособная группа Связь
Гидроксил Изоцианат Уретан
Амин Эпоксид β-Г идроксиамин
Гидроксиамин Сульфонилгалогенид Сульфонамид
Карбоновая кислота Амин Амид
Гидроксил Алкил/ар илгалоге нид Простой эфир
Альдегид Амии ХаСЛВП, Амин
Кетон Амин№С№Н3 Амин
Амин Изоцианат Мочевина
Примеры линкеров включают следующие линкеры, обозначенные с Х-1 по Х-418, как представлено ниже:
Типичные представители лигандов для использования в данном изобретении включают, например, Ь-1 и Ь-2, которые определены выше, где Ь-1 выбран из соединений формулы (а), а Ь2 выбран из соединений формулы (Ь).
Сочетания лигандов (Ь) и линкеров (Х) в данном изобретении включают, только в качестве примера, гомо- и гетеро-димеры, где первый лиганд выбран из Ь-1, а второй лиганд и линкер выбраны из следующих:
Ь-2/Χ-ΙБ-2/Х-2Ε-2/Χ-3ί-2/Χ·4Ь-2/Х-5ί-2/Х-бЦ-2/Х-7Ь-2/Х-8Ы/Х-91.-2/Χ-Ι0Ь-2/Χ-ΗΕ-2/Χ-Ι2Ь-2/Х-13Ь-2/Х-14»
Ь2/Х-13Ь2/Х-|6.
Е-2/Х-17Е-2/Х-181.-2/Χ-Ι9·
1Л/Х-20Ы/Х-21Ь2/Х-22«
Е-2/Х-231.-2/Х-24Ц-2/Х-25Ь-2/Х-26Ь2/Х-27· ί·2/Χ-28>
Ь-2/Х-291-2/Х-30Ь-2/Х-З)Ь-2/Х-32Ь-2/Х-ЗЗЕ-2/Х-34Ц-2/Х-35Ь-З/Х-ЗбЬ-2/Х-37Ь2/Х-38Ι.-2/Χ-39Ь2/Х-4ОЬ2/Х-411_-2/Х^2Ы/Х-43Ь.2/Х-44иг/х-45*
Ь-2/Х-46Ь-2/Х-471-2/Х-481.-2/Х-49ь-га-зоЬ2/Х-31Ь-2/Х-52Е-2/Х-331.-2/Х-54·
Ь2/Х-551-2/Х-56·
Ь2/Х-57Ь-2/Х-58·
Ы/Х-59ЬЗ/Х-бОЬ-2/Х-бЬ
Ь-2/Х-бЗ·
Ь-2/Х-бЗ1.-2/Х-64Ь2/Х-65ьз/х-ббЬ-2/Х-67·
Ь-З/Х-68Ь-2/Х-691_-2/Х-7О1-2/Х-711.-3/Х-73·
Ι.-2/Χ-73Ь-2/Х-74Ь2/Х-751.-2/Х-76Б-2/Х-77Ь-З/Х-78Е-2/Х-79Б-2/Х-80Ь-З/Х-81Е-2/Х-82Ь-2/Х-831-2/Х-84.
Ь-2/Х-85Ь-2/Х-87·
1.-2/Х-88·
Ь-2/Х-89Ь-2/Х-90·
Ь-2/Х-95Е-2/Х-96Ь-2/Х»94·
Ь-2/Х-93Е-2/Х-92Ь-2/Х-ЯЕ-З/Х-100* иг/х-юь
Ι.-2/Χ-Ι02·
Б-2/Х-98Е-2/Х-99Ь-2/Х-97Ц-2/Х-1О8Ь-З/Х-ЮбБ-2/Х-107Ь-2/Х-104*
Ь-2/Х-105Ь-З/Х-103-
Ц-2/Х-365· Ь-2/Х-Збб- Ь2/Х-367- Е-2/Х-368- 1.-2/Х-369· Ь-2/Х-370-
Ь2/Х-371- Ь-2/Х-372- ЫГХ-373- Ь-2/Х-374- Ь-2/Х-375· Ь-2/Х-376-
Ь-2/Х-377- Ь-2/Х-378- Ь-2/Х-379- ь-г/х-зао- Ь2/Х-38Ь Ь-2/Х-382-
Ь-2/Х-383- Б-2/Х-384- Ь-2/Х-385- Е-2/Х-386- Ь-2/Х-387- ί-2/Χ-388-
Е-3/Х-389· Ь-2/Х-39О- Ь-2/Х-391- Е-3/Х-392- Ь-2/Х-393- Ь-2/Х-394-
ί-2/Χ·395· Ь-2/Х-396- Ь2/Х-397- Е2/Х-398- Ь2/Х-399- Ь-2/Х-400·
1.-2/Х-401- ί-2/Χ-402· Ь2/Х-403- Ь-2/Х-404- Ь-2/Х-405- 1.-2/Х-406-
Ь-2/Х-4О7- Ь2/Х-408- Ь-2/Х-409- Ь-2/Х-410- Ь2/Х-4И· Ь2/Х-412.
Ь2/Х-413- Ь2/Х-414· Ь-2/Х-415- Е-2/Х-416- 1.-2/Х-417- Е-2/Х-418-
и так далее.
Применение, испытание и введение Применение
Полисвязывающие соединения данного изобретения являются агонистами β2адренергического рецептора. Соответственно полисвязывающие соединения и фармацевтические композиции данного изобретения полезны для лечения и профилактики заболеваний, опосредуемых в2-адренергическим рецептором, таких как астма, бронхит и т.п. Они также полезны при лечении поражения нервной системы и при преждевременных родах. Также предполагается, что соединения этого изобретения полезны для лечения метаболических расстройств, таких как ожирение, диабет и т. п.
Испытание
Агонистическая активность соединений формулы (I) в отношении в2-адренергического рецептора может быть продемонстрирована с помощью ряда исследований ιη νίίτο, известных в данной области, таких как исследования, описанные в биологических примерах 1 и 2. Они могут быть также испытаны в тестах ех νίνο, описанных у Ва11, Ό.Σ., еί а1., 8а1те!его1 а №ус1, Ьопд-асйпд Ъе!а 2-Абгепегд1с Адоп18!: СНагас(еи/аПои о£ РНагтасо1од1са1 ДсНуНу ίη νίίτο апб ίη νίνΌ Вг. 1. РЬагтасо1., 104, 665-671 (1991); ЬМет, А. е! а1., 8а1те!его1, Тогто1его1, апб 8а1Ъи!ато1 ίη !8о1а!еб 6шпеа-Р1§ Тгасйеа: ϋίί&Γепсе8 ίη Мах1тит Ке1ахап! Е£Тес! апб РоИепсу Ъи! по! ίη Типс!1опа1 Ап!адоп18т. Тйогах, 48, 547553, (1993); и В1а18, А.Т. е! а1., Ни^НдаНогд т!о Тас!огз Эе^ппттд (Не Оигабоп о£ Асбоп о£ (Не Ве!а 2-Абгепосер!ог Адошз!, 8а1те!его1. Вг. Т РНагтасо1., 108, 505-515 (1993); или в исследованиях ίη ν^ таких, как описаны у Ва11, ϋ.Σ. е! а1., 8а1те!его1 а №ус1, Ьопд-асбпд Ъе!а 2Абгепегдк Адошз!: СТагас^п/аНоп о£ РНагтасо1о§1са1 Ас!М!у ίη νίύΌ апб ίη ^уо Вг. I РНагтасо1., 104, 665-671 (1991); К1кка^а, Н. е! а1., КА-2005, А №ус1, Ьопд-асбпд, апб 8е1ес!ке Ве!а 2-Абгепосер!ог Адошз!: СТагас^п/аНоп о£ ί!δ ίη νί\Ό Вгопсбобйабпд Асбоп ίη бшпеа Р1§8 апб Са!8 ίη Сотраб8оп λνΠΗ о!Нег Ве!а 2Адош8!8, Вю1. РНагт. Ви11., 17, 1047-1052 (1994); и Апбег8оп, С.Р., Тогте!его1: РНагтасо1оду, Мо1еси1аг Ъа818 о£ Адоп18т апб МесНап18т о£ Ьопд Оигабоп о£ а Н1дН1у Ро!еп! апб 8е1ес!ке Ве!а 2-Абгепосер!ог Адоп18! Вгопсбобйа!ог, Ьйе 8с1епсе8, 52, 2145-2160, (1993).
Фармацевтические лекарственные формы
Когда они используются в качестве фармацевтических препаратов, соединения данного изобретения обычно вводят в виде фармацевтических композиций. Указанные соединения можно вводить различными путями, включая пероральный, ректальный, трансдермальный, подкожный, внутривенный, внутримышечный и интраназальный. Данные соединения эффективны в качестве инъекционных, ингаляционных и пероральных композиций. Такие композиции изготавливают способом, хорошо известным в фармацевтической технологии, и они содержат, по меньшей мере, одно активное соединение.
Данное изобретение также включает фармацевтические композиции, которые содержат в качестве активного ингредиента одно или более из соединений, описанных здесь, в сочетании с фармацевтически приемлемыми носителями. При изготовлении композиций данного изобретения активный ингредиент обычно смешивают с эксципиентом (основа), разбавляют эксципиентом или помещают в такой носитель, который может быть в форме капсулы, саше, бумажного или другого контейнера. Когда эксципиент служит в качестве разбавителя, он может быть твердым, полутвердым или жидким материалом, который служит средством для переноса, носителем или средой для активного ингредиента. Таким образом, композиции могут быть в форме таблеток, пилюль, порошков, лепешек, пакетиков, эликсиров, суспензий, эмульсий, растворов, сиропов, аэрозолей (как в твердой, так и в жидкой среде), мазей, содержащих, например, до 10% по весу активного соединения, мягких или твердых желатиновых капсул, суппозиториев, стерильных инъекционных растворов и стерильных упакованных порошков.
При изготовлении лекарственной формы может быть необходимо измельчить активное соединение для получения частиц подходящего размера перед объединением с другими ингредиентами. Если активное соединение является, по существу, нерастворимым, его обычно измельчают до частиц размером менее чем 200 меш. Если вещество, по существу, растворимо в воде, размер частиц обычно доводится до того, чтобы обеспечить, по существу, равномерное распределение в лекарственной форме, например, примерно 40 меш.
Некоторые примеры подходящих эксципиентов включают лактозу, декстрозу, сахарозу, сорбит, маннит, крахмал, камедь акации, фосфат кальция, альгинаты, трагакант, желатин, силикат кальция, микрокристаллическую целлюлозу, поливинилпирролидон, целлюлозу, стерильную воду, сироп и метилцеллюлозу. Лекарственные формы могут дополнительно включать смазывающие вещества, такие как тальк, стеарат магния и минеральное масло; увлажняющие вещества; эмульгирующие и суспендирующие вещества; консерванты, такие как метил- и пропилгидроксибензоаты; подсластители и ароматизаторы. Композиции данного изобретения могут быть изготовлены так, чтобы обеспечить быстрое, длительное или замедленное высвобождение активного ингредиента после введения пациенту с помощью применения процедур, известных в данной области.
Композиции, предпочтительно, составляют в виде стандартной дозированной формы, причем каждая доза, содержит от примерно 0,001 до примерно 1 г, чаще, от примерно 1 до примерно 30 мг, активного ингредиента. Термин «стандартная дозированная форма» относится к физически дискретным элементам, пригодным в качестве однократных доз для людей и других млекопитающих, причем каждый элемент со держит заранее определенное количество активного вещества, рассчитанное так, чтобы вызывать желаемый терапевтический эффект в сочетании с подходящим фармацевтическим эксципиентом. Предпочтительно, указанное выше соединение формулы (I) применяется в концентрации не более примерно 20 вес.% от фармацевтической композиции, более предпочтительно не более примерно 15 вес.%, причем остальное составляет(ют) инертный(ые) носитель(и).
Активное соединение эффективно в широком интервале доз, и его обычно вводят в фармацевтически эффективном количестве. Будет понятно, однако, что количество фактически вводимого соединения будет определяться врачом в свете имеющих отношение к этому обстоятельств, включая патологическое состояние, которое нужно лечить, выбранный путь введения, фактически вводимое вещество и его относительную активность, возраст, вес и реакцию конкретного пациента, тяжесть симптомов у пациента и т. п.
Для получения твердых композиций, таких как таблетки, главный активный ингредиент смешивают с фармацевтическим эксципиентом с образованием предварительной композиции твердой лекарственной формы (композициязаготовка), содержащей гомогенную смесь с соединением данного изобретения. Когда о композициях-заготовках говорится как о гомогенных, это означает, что активный ингредиент равномерно распределен по композиции так, что такая композиция может быть легко подразделена на одинаково эффективные элементы дозированной формы, такие как таблетки, пилюли и капсулы. Твердую композицию-заготовку затем подразделяют на элементы дозированной формы типа, описанных выше, содержащих, например, от примерно 0,1 до примерно 500 мг активного ингредиента настоящего изобретения.
Таблетки или пилюли данного изобретения могут быть покрыты или же составлены так, чтобы получилась дозированная форма, дающая преимущество пролонгированного действия. Например, таблетка или пилюля может содержать компонент внутренней дозы и наружной дозы, причем последний находится в форме оболочки поверх первого. Два компонента могут быть разделены энтеральным слоем, который служит для устойчивости к распадаемости в желудке, и позволяет внутреннему компоненту пройти интактным в двенадцатиперстную кишку или замедляет его выделение. Для таких энтеральных слоев или покрытий может использоваться ряд материалов, такие материалы включают ряд полимерных кислот и смесей полимерных кислот с такими материалами, как шеллак, цетиловый спирт и ацетатцеллюлоза.
Жидкие лекарственные формы, в которые новые композиции данного изобретения могут быть включены для перорального введения или с помощью инъекции, включают водные растворы, соответствующими образом ароматизированные сиропы, водные или масляные суспензии и эмульсии, ароматизированные пищевыми маслами, такими как кукурузное масло, масло из семян хлопчатника, кунжутное масло, кокосовое масло, арахисовое масло, а также эликсиры и подобные фармацевтические носители.
Композиции для ингаляции или инсуффляции включают растворы и суспензии в фармацевтически приемлемых водных или органических растворителях или их смесях, и порошки. Жидкие и твердые композиции могут содержать подходящие фармацевтически приемлемые эксципиенты, описанные выше. Предпочтительно, композиции вводят пероральным или назально-респираторным путем для получения местного или системного эффекта. Композиции в предпочтительных фармацевтически приемлемых растворителях могут распыляться с использованием инертных газов. Распыляемые растворы можно вдыхать непосредственно из распыляющего устройства, или распыляющее устройство может быть связано с лицевой маской или дыхательным аппаратом с пульсирующим положительным давлением. Композиции в виде раствора, суспензии или порошка можно вводить, предпочтительно, перорально или назально из устройств, которые доставляют лекарственный препарат соответствующим образом.
Примеры
Следующее способы получения и примеры представлены для того, чтобы предоставить специалистам возможность ясно понять и осуществить на практике данное изобретение. Они должны рассматриваться не как ограничивающие объем данного изобретения, а просто как иллюстративные и типичные его примеры.
В примерах нижеследующие сокращения имеют следующие значения. Если не указано иначе, все температуры представлены в градусах Цельсия. Если сокращению не дано определение, оно имеет его общепринятое значение.
А Ангстрем
см сантиметр
ДЦК (ОСС) дициклогексилкарбодиимид
ДМФ (ΌΜΡ) Ν,Ν-диметилформамид
ДМСО (ΌΜ80) диметилсульфоксид
г грамм
ВЭЖХ (НРЬС) Высокоэффективная жидкостная хроматография
МОС (ΜΕΜ) минимальная основная среда
мг миллиграмм
МПК (М1С) минимальная подавляющая концентрация
мин минута
мл миллилитр
мм миллиметр
ммоль миллимоль
Ν нормальная
ТГФ (ТНР) мкл (рБ) мкм (рш) кт (γϊ)
Кг
ЯМР (ΝΜΚ)
ЭРМС (Ε8Μ8) мд (ррм) тетрагидрофуран микролитр микрон комнатная температура удерживание ядерный магнитный резонанс масс-спектр с электрораспылени ем миллионная доля
Примеры синтеза
Пример 1. Синтез транс-1,4-бис{№[2-(4гидрокси-3-гидроксиметилфенил)-2гидроксиэтил]амино}циклогексан (следуя фиг. 5).
Стадия 1.
К раствору метилового эфира 5ацетилсалициловой кислоты 11 (5,0 г, 25,7 моль) в диметилсульфоксиде (44 мл) добавляют 48% бромисто-водородной кислоты. Полученную смесь перемешивают при 55°С в течение 24 ч и выливают в густую суспензию лед-вода (~200 мл), причем выпадает осадок бледного желтого твердого вещества. Твердое вещество отфильтровывают, промывают водой (200 мл) и сушат с получением а,а-дигидрокси-4-гидрокси-3-метоксикарбонилацетофенона 12. Продукт ресуспендируют в этиловом эфире (~200 мл), фильтруют и сушат с получением (3,41 г, 59%) чистого продукта. К=0,8(10% Ме0Н/СН2С12).
Н2-ЯМР (4/1 СВС13/СВ30В, 299,96 МГц): δ (мд) 8,73-8,72 (д, 1Н), 8,28-8,24 (дд, 1Н), 7,087,05 (д, 1Н), 5,82 (с, 1Н), 4,01 (с, 3Н).
Стадия 2.
К суспензии а,а-дигидрокси-4-гидрокси-3метоксикарбонил-ацетофенона 12 (0,3 г, 1,33 ммоль) в ТГФ (10 мл) добавляют раствор транс1,4-диаминоциклогексана (76 мг, 0,66 ммоль) в ТГФ (5 мл). Полученную суспензию перемешивают в течение 3 ч при комнатной температуре в атмосфере азота, до завершения образования имина, судя по анализу ТСХ. После охлаждения полученного раствора на ледяной бане к предыдущему раствору добавляют избыточное количество 2М ВН3-Ме28 в гексане (4 мл, 8 ммоль). Полученную смесь медленно нагревают до кт и кипятят с обратным холодильником в течение 4 ч в токе Ν2. После охлаждения реакционной смеси добавляют МеОН (5 мл), чтобы погасить избыточное количество 2М ВН3-Ме28. После перемешивания в течение 30 мин конечный раствор (или мутный раствор) выпаривают в вакууме, получая бледно-коричневое твердое вещество. Твердое вещество промывают в смеси ЕЮЛс/гексан (1/2; 20 мл) и сушат. Неочищенный продукт растворяют в смеси 50% МеСЖН20, содержащей 0,5% ТФУК, и очища ют препаративной высокоэффективной жидкостной хроматографией (ВЭЖХ), используя линейный градиент (5 до 50% МеСЫ/Н2О в течение 50 мин, 20 мл/мин; определение при 254 нМ). Фракции с УФ-поглощением анализируют ЖХ-МС для выделения транс-1,4-бис{Ы-[2-(4гидрокси-3-гидроксиметилфенил)-2-гидроксиэтил] амино} циклогексана 13.
Н2-ЯМР (СО3ОП, 299,96 МГц): δ (мд) 7,35 (д, 2Н), 7,18 (дд, 2Н), 6,80-6,78 (д, 2Н), 4,88-4,86 (м, 2Н), 4,65 (с, 4Н), 3,15 (шир.с, 4Н), 2,89 (м, 2Н), 1,68-1,55 (шир.м., 4Н);
ЭРМС (С24Н34Ы2О6): вычислено: 446,5, найдено: 447,5 [М+Н]-.
Соединение 14.
Действуя, как описано выше, но с заменой транс-1,4-диаминоциклогексана на 4,4'-метиленбис(циклогексиламин), получают бис-{4,4'-[Ы[2-(4-гидрокси-3-гидроксиметилфенил)-2-гидроксиэтил]амино]циклогексан}метан.
ЭРМС (С31Н46Ы2О6): вычислено: 542,7, найдено: 543,6 [М+Н]-.
Соединение 15.
Действуя, как описано выше, но с заменой транс-1,4-диаминоциклогексана на 1,3-циклогексанбис(метиламин), получают 1,3-бис{Ы-[2(4-гидрокси-3-гидроксиметилфенил)-2-гидроксиэтил] аминометил} циклогексан.
ЭРМС (С27Н38Ы2О6): вычислено: 474,6, найдено: 475,3 [М+Н]-.
Соединение 16.
Действуя, как описано выше, но с заменой транс-1,4-диаминоциклогексана на 1,8-диаминоп-метан, получают 1,8-бис {Ы-[2-(4-гидрокси-3гидроксиметилфенил)-2-гидроксиэтил]амино}п-метан.
ЭРМС (С28Н42Ы2О6): вычислено: 502,6, найдено: 503,3 [М+Н]-.
Соединение 17.
Действуя, как описано выше, но с заменой транс-1,4-диаминоциклогексана на 1,4-бис(3аминопропил)пиперазин, получают 1,4-бис{3[[Ы-2-(4-гидрокси-3-гидроксиметилфенил)-2-гидроксиэтил]амино]пропил}пиперазин.
ЭРМС (С28Н44Ы4О6): вычислено: 532,6, найдено: 533,3 [М+Н]-, 555,0 [М+Ыа]-.
Соединение 18.
Действуя, как описано выше, но с заменой транс-1,4-диаминоциклогексана на п-ксилилендиамин, получают 1,4-бис {Ы-[2-(4-гидрокси-3гидроксиметилфенил)-2-гидроксиэтил]аминометил} бензол.
ЭРМС (С26Н32Ы2О6): вычислено: 468,5, найдено: 469,3 [М+Н]-, 492,0 [М+Ыа]-.
Соединение 19.
Действуя, как описано выше, но с заменой транс-1,4-диаминоциклогексана на м-ксилилендиамин, получают 1, 3-бис{Ы-[2-(4-гидрокси-3гидроксиметилфенил)-2-гидроксиэтил]аминометил} бензол.
ЭРМС (С26Н32Ы2О6): вычислено: 468,5, найдено: 469,3 [М+Н]+, 492,0 [М+Ыа]-.
Соединение 20.
Действуя, как описано выше, но с заменой транс-1,4-диаминоциклогексана на 2-аминобензиламин, получают 1-{Ы-[2-(4-гидрокси-3-гидроксиметилфенил)-2-гидроксиэтил]аминометил}-2-{Ы-[2-(4-гидрокси-3-гидроксиметилфенил)-2-гидроксиэтил]амино}бензол.
ЭРМС (С25Н30Ы2О6): вычислено: 454,5, найдено: 455,3 [М+Н]-.
Соединение 21.
Действуя, как описано выше, но с заменой транс-1,4-диаминоциклогексана на 2-(4-аминофенил)этиламин, получают 1-{2-[Ы-2-[(4-гидрокси-3-гидроксиметилфенил)-2-гидроксиэтил] амино]этил}-2-{Ы-[2-(4-гидрокси-3-гидроксиметилфенил)-2-гидроксиэтил]амино}бензол.
ЭРМС (С26Н32Ы2О6): вычислено: 468,5, найдено: 469,3[М+Н]+.
Соединение 22.
Действуя, как описано выше, но с заменой транс-1,4-диаминоциклогексана на 4,4'-оксидианилин, получают 4,4'-бис{Ы-[2-(4-гидрокси-3гидроксиметилфенил)-2-гидроксиэтил]амино} фениловый простой эфир.
ЭРМС (С30Н32Ы4О7): вычислено: 532,6, найдено: 533,3 [М+Н]+, 556,1 [М+Ыа]-.
Соединение 23.
Действуя, как описано выше, но с заменой транс-1,4-диаминоциклогексана на 2-аминобензиламин, получают 1-{Ы-[2-(4-гидрокси-3гидроксиметилфенил)-2-гидроксиэтил]-аминометил}-4-{Ы-[2-(4-гидрокси-3-гидроксиметилфенил)-2-гидроксиэтил]амино}бензол.
ЭРМС (С25Н30Ы2О6): вычислено: 454,5, найдено: 455,5 [М+Н]+, 477,3 [М+Ыа]-.
Пример 2.
Синтез 1-{2-[Ы-2-[(4-гидрокси-3-гидроксиметилфенил)-2-гидроксиэтил]амино]этил}-4{N-[2-фенил-2-гидроксиэтил] амино} бензола (следуя фиг. 6).
К суспензии а,а-дигидрокси-4-гидрокси-3метоксикарбонилацетофенона 12, полученного выше в примере 1, стадия 1, (0,3 г, 1,33 ммоль) в ТГФ (10 мл) добавляют раствор 2-(4аминофенил)этиламина 25 (0,181 г, 1,33 ммоль) в ТГФ (5 мл). Полученную суспензию перемешивают в течение 3 ч при комнатной температуре в атмосфере азота с последующим добавлением α,α-дигидроксиацетофенона 24 (0,2 г, 1,32 ммоль). Реакционную смесь перемешивают в течение 3 ч при кт до завершения образования имина, судя по анализу ТСХ. Реакционную смесь охлаждают на ледяной бане и добавляют избыточное количество 2М ВН3-Ме28 в гексане (9 мл, 18 ммоль). Полученную смесь медленно нагревают до кт и кипятят с обратным холодильником в течение 4 ч в токе Ы2. После охла ждения добавляют МеОН (10 мл), чтобы погасить избыточное количество ВН3-Ме28. После перемешивания в течение 30 мин при кт конечный раствор (или мутную суспензию) выпаривают в вакууме с получением бледнокоричневого твердого вещества. Твердое вещество промывают смесью ЕЮЛс/гексан (1/2; 20 мл) и сушат. Неочищенный продукт растворяют в смеси 50% МеСЦ/Н2О, содержащей 0,5% ТФУК, и очищают препаративной высокоэффективной жидкостной хроматографией (ВЭЖХ), используя линейный градиент (5 до 50% МеСЦ/Н2О в течение 50 мин, 20 мл/мин; определение при 254 нМ). Фракции с УФпоглощением анализируют ЖХ-МС для обнаружения 1 - { 2- [N-2- [(4-гидрокси-3-гидроксиметилфенил)-2-гидроксиэтил]амино]этил}-4-{Ц[2-фенил-2-гидроксиэтил] амино } бензола 26.
ЭРМС (С25Н30^О4): вычислено: 422,5, найдено: 423,3 [М+Н]-.
Соединение 27.
Действуя, как описано выше, но с заменой а,а-дигидрокси-4-гидрокси-3-метоксикарбонилацетофенона на α,α-дигидроксиацетофенон, получают 1 -{2-[№2-фенил-2-гидроксиэтил] аминоэтил }-4- [№(2-фенил-2-гидроксиэтил)амино]бензол.
ЭРМС (С24Н2^2О8): вычислено: 376,5, найдено: 377,0 [М+Н]-.
Пример 3.
Синтез 1-{2-[Ж2-(4-гидрокси-3-гидроксиметилфенил)-2-гидроксиэтиламино]этил}-4-[№ (2-фенил-2-гидроксиэтил)амино]бензола (следуя
К раствору 4-(2-аминоэтил)анилина 25 (20 г, 147 ммоль) в метаноле (250 мл) добавляют (Вос)2О (32,4 г, 148 ммоль) в метаноле (50 мл) при кт. После перемешивания в течение 24 ч реакционную смесь концентрируют досуха с получением бледно-желтого маслянистого остатка. Маслянистое вещество медленно отвердевает; тогда его растворяют в 5% МеОН/СН2С12 и затем наносят на колонку двуокиси кремния для флэш-хроматографии (3 10% МеОН/СН2С12). После очистки получают 4(№ВОС-2-аминоэтил)анилин 28 в виде бледножелтого твердого вещества (32,95 г, 95%): 1% 0,6 в 10% МеОН/СН2С12.
Н1-ЯМР (СП3ОП, 299,96 МГц): δ (мд) 6,96-
6,93 (д, 2Н), 6,69-6,65 (д, 2Н), 3,20-3,13 (кв, 2Н), 2,63-2,58 (т, 2Н), 1,41 (с, 9Н).
Стадия 2.
4-(№ВОС-2-аминоэтил)анилин 28 (1,25 г, 5,29 ммоль) растворяют в метаноле (30 мл) с последующим добавлением фенилглиоксаля 24 (0,708 г, 5,28 ммоль). Реакционную смесь пере мешивают в течение 1 ч при кт перед добавлением NаСNВН3 (0,665 г, 10,6 ммоль). Конечную смесь перемешивают в течение 12 ч при кт, концентрируют и очищают флэш-хроматографией на колонке из двуокиси кремния (25% МеОН/СН2С12) с получением \'-(2-фенил-2гидроксиэтил)-4-(№ВОС-2-аминоэтил)анилина в виде бледно-желтого масла (1,71 г, 91%): Κί=0,18 в 5% МеОН/СН2С12.
Н1-ЯМР (СП3ОП, 299,96 МГц): δ (мд) 7,4-
7,25 (м, 5Н), 7,0-6,95 (д, 2Н), 6,63-6,60 (д, 2Н), 4,85-4,79 (дд, 1Н), 3,3-3,21 (т, 2Н), 3,2-3,15 (м, 2Н), 2,64-2,5 (т, 2Н), 1,42 (с, 9Н).
Стадия 3.
Раствор \'-(2-фени.1-2-гидроксиэти.1 )-4-(ΝВОС-2-аминоэтил) анилина (1,7 г, 4,77 ммоль) в метиленхлориде (10 мл) охлаждают на ледяной бане и медленно добавляют ТФУК (10 мл) в потоке газообразного азота. Реакционную смесь перемешивают в течение 1 ч и концентрируют с получением бледно-желтого масла. Неочищенный материал очищают ВЭЖХ с обращенной фазой (с 10 до 40% МеСЖН2О в течение 50 мин; 20 мл/мин) с получением \'-(2-фенил-2гидроксиэтил)-4-(2-аминоэтил)анилина 29 в виде соли ТФУК (1,1 г).
Н1-ЯМР (СП3ОП, 299,96 МГц): δ (мд) 7,42-
7,3 (м, 5Н), 7,29-7,25 (д, 2Н), 7,12-7,25 (д, 2Н),
7,12-7,0 (д, 2Н), 4,85-4,82 (м, 1Н), 3,45-3,35 (м, 2Н), 3,18-3,1 (т, 2Н), 2,98-2,94 (т, 2Н); ЭРМС (С16Н20^О1): вычислено: 256,4, найдено: 257,1 [М+Н]+, 278,8 [М+Να]-, 513,4 [М+Н]+.
Стадия 4.
К раствору трифторуксусной соли N-(2фенил-2-гидроксиэтил)-4-(2-аминоэтил)анилина 29 (1,1 г, 2,3 ммоль) в метаноле (10 мл) добавляют 5 М раствор Να()Ι I (0,93 мл). После перемешивания в течение 10 мин раствор концентрируют досуха. Остаток растворяют в ТГФ (25 мл) и добавляют а,а-дигидрокси-4-гидрокси-3метоксикарбонилацетофенон 12 (0,514 г, 2,27 ммоль). Реакционную смесь перемешивают в течение 12 ч при кт, охлаждают до 0°С и добавляют ВН3/Ме28 (1,14 мл, 10 М) в атмосфере азота. Реакционную смесь постепенно нагревают до кт, перемешивают в течение 2 ч при кт и кипятят с обратным холодильником в течение 4 ч. Реакционную смесь охлаждают и медленно добавляют метанол (10 мл). После перемешивания в течение 30 мин при кт реакционную смесь концентрируют с получением твердого остатка, который растворяют в МеОН (20 мл), содержащем 10% ТФУК. Выпаривание органического растворителя дает бледно-желтое масло, которое очищают ВЭЖХ с обращенной фазой: с 10 до 30% МеСЖН2О в течение 50 мин; 20 мл/мин с получением 1-{2-[№2-(4-гидрокси-3-гидроксиметилфенил)-2-гидроксиэтиламино]этил}-4[№(2-фенил-2-гидроксиэтил)амино]бензола 30 в виде соли ТФУК (0,65 г).
Н1-ЯМР (СОзОЭ, 299,96 МГц): δ (мд) 7,42-
7,3 (м, 6Н), 7,28-7,24 (д, 2Н), 7,18-7,14 (дд, 1Н), 7,1-7,07 (д, 2Н), 6,80-6,77 (д, 1Н), 4,86-4,82 (м, 2Н), 4,65 (с, 2Н), 3,44-3,34 (м, 2Н), 3,28-3,22 (м, 2Н), 3,20-3,14 (м, 2Н), 3,04-2,96 (м, 2Н); ЭРМС (С251 13оМО.|): вычислено: 422,5, найдено: 423,1 [М+Н]-, 404,7 [М-1Н2О]-, 387,1 [М-2Н2О]-.
Пример 4.
Синтез 1- {2-[№2-(4-гидрокси-3-гидроксиметилфенил)-2-гидроксиэтил]аминоэтил}-4-[№ (2-фенил-2-(8)-гидроксиэтил)амино]бензол
Раствор 4-(№ВОС-2-аминоэтил)анилина (7,0 г, 29,6 ммоль) в этаноле (100 мл) и (К)стиролоксид (3,56 г, 29,6 ммоль) кипятят с обратным холодильником в течение 24 ч. Органические вещества удаляют с получением бледножелтого твердого вещества. №(2-фенил-2-(8)гидроксиэтил)-4-(№ВОС-2-аминоэтил)анилин отделяют флеш-хроматографией на колонке двуокиси кремния: от 1/2 ЕЮАс/гексан до 3/1 ЕЮАс/гексан до 3% МеОН в 3/1 ЕЮАс/гексан:
К=0,39 в 3% МеОН/СН2С12.
Стадия 2.
Раствор №(2-фенил-2-(8)-гидроксиэтил)-4(№ВОС-2-аминоэтил)анилина (2,5 г, 7,0 ммоль) в СН2С12 (15 мл) охлаждают на ледяной бане в токе азота и медленно добавляют ТФУК (15 мл). Реакционную смесь перемешивают в течение 2 ч при 0°С и затем концентрируют в вакууме. Неочищенный продукт растворяют в 20% МеСШ12О и очищают препаративной ВЭЖХ с обращенной фазой (от 5 до 2% МеС% Н2О в течение 50 мин; 254 нм; 20 мл/мин) с получением трифторуксусной соли №(2-фенил-2-(8)гидроксиэтил)-4-(2-аминоэтил)анилина 31 в виде бесцветного масла.
Н1-ЯМР (СО3ОЦ 299,96 МГц): δ (мд) 7,45-
7,25 (м, 9Н), 4,9 (дд, 1Н), 3,55-3,45 (м, 2Н), 3,21-
3,15 (т, 2н), 3,05-2,95 (т, 2Н). ЭРМС (С1бН2^2О1): вычислено: 256,4, найдено: 257,1[М+Н]+, 280,2 [Μ+Να]+.
Стадия 3.
К раствору трифторацетата №(2-фенил-2(8)-гидроксиэтил)-4-(2-аминоэтил)анилина 31 (0,144 г, 0,3 ммоль) в метаноле (10 мл) добавляют водный раствор №О11 (1,0 М, 0,625 мл). Раствор концентрируют досуха и остаток растворяют в безводном ТГФ (5 мл). Добавляют α,αдигидрокси-4-гидрокси-3-метоксикарбонилацетофенон 12 (0,067 г, 0,3 ммоль) и реакционную смесь перемешивают в течение 12 ч при кт. Добавляют ВН3/Ме28 (0,2 мл, 2М) при 0°С и реакционную смесь нагревают при 75°С в течение 6 ч. После охлаждения реакционной смеси на ледяной бане к ней медленно добавляют МеОН (5 мл), чтобы погасить реакцию, и реакционную смесь перемешивают в течение 30 мин при кт. Органические растворители удаляют и остаток растворяют в ТФУК/МеОН (1/9; 20 мл) и концентрируют. Неочищенный продукт растворяют в 20% МеС% Н2О и очищают препаративной ВЭЖХ: с 5 до 20% МеСК/Н2О (20 мл/мин; 254 нм) с получением 1-{2-[№2-(4-гидрокси-3-гидроксиметилфенил)-2-гидроксиэтил]аминоэтил}4-[№(2-фенил-2-(8)-гидроксиэтил)амино] бензола 33.
Н1-ЯМР (СО3ОО, 299,96 МГц): δ (мд) 7,42-
7,29 (м, 8Н), 7,22-7,18 (д, 2Н), 7,17-7,14 (дд, 1Н),
6,80-6,77 (д, 1Н), 4,9-4,85 (м, 2Н), 4,65 (с, 2Н),
3,5-3,34 (м, 2Н), 3,28-3,25 (м, 2Н), 3,19-3,14 (м, 2Н), 3,04-2,98 (м, 2Н); ЭРМС (С25Н30^О4): вычислено: 422,5, найдено: 423,1 [М+Н]+, 446,1 [М+№]+.
Действуя, как описано в примере 4, выше, но с заменой (К)-стиролоксида на (8)-стиролоксид, получают 1-{2-[№2-(4-гидрокси-3гидроксиметилфенил)-2-гидроксиэтил]аминоэтил}-4-[№(2-фенил-2-(К)-гидроксиэтил)амино] бензол 34.
Н1-ЯМР (СО3ОО, 299,96 МГц): δ (мд) 7,42-
7,28 (м, 8Н), 7,20-7,1(м, 3Н), 6,80-6,77(д, 1Н), 4,9-4,85(м, 2Н), 4,65(с, 2Н), 3,45-3,34 (м, 2Н),
3,28-3,25 (м, 2Н), 3,19-3,15 (м, 2Н), 3,04-2,98 (м, 2Н); ЭРМС (С25Н30^О4): вычислено: 422,5, найдено: 423,1 [М+Н]+, 446,1 |М'\а|'.
Пример 5. Синтез 1,6-бис{4-(№[2-(4-гидрокси-3-гидроксиметилфенил)-2-гидроксиэтил] аминогексилоксипропил)фенокси} гексан (следуя фиг. 9).
Стадия 1.
Раствор 3-(4-гидроксифенил)-1-пропанола 35 (3,3 г, 21,7 ммоль) и 1,6-дийодгексана (3,5 г, 8,88 ммоль) в диметилсульфоксиде (40 мл) дегазируют, насыщают Ν2 газом и добавляют карбонат калия (4,5 г, 32,56 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при 80°С в течение 18 ч в атмосфере азота и затем гасят насыщенным раствором соли (150 мл). Продукт экстрагируют ЕЮАс (200 мл) и органические экстракты промывают 0,1 М Να()11 и насыщенным раствором соли и сушат Мд8О4. Органические растворители удаляют в вакууме с получением бледно-коричневого твердого вещества. Твердое вещество очищают флэш-хроматографией на колонке двуокиси кремния: с 4/1 гексан/ЕЮАс до 5% МеОН в 1/1 гексан/ЕЮАс, с получением 1,6бис[4-(3-гидроксипропил)фенок-си] гексана 36 (Κί=0,17 в 1/1 гексан/ЕЮАс) с 65% выходом (2,23 г)·
Н1-ЯМР (СВ3ОВ, 299,96 МГц): δ (мд) 7,087,05 (д, 4Н), 6,80-6,77 (д, 4Н), 3,93-3,89 (т, 4Н), 3,56-3,52 (т, 4Н), 2,64-2,56 (т, 4Н), 1,81-1,69 (м, 8Н), 1,44-1,21 (м, 4Н).
Стадия 2.
Раствор 1,6-бис[4-(3-гидроксипропил)фенокси]гексан 36 (2,2 г, 5,69 ммоль) в ДМФ (10 мл) добавляют к раствору ДМФ (40 мл), содержащем \а!1 (0,57 г; 60% дисперсия в минеральном масле) при 0°С в атмосфере азота и реакционную смесь нагревают при 50°С. Через 1 ч добавляют 6-бромгексаннитрил (2,26 мл, 17 ммоль) и реакционную смесь нагревают при 80°С в течение 24 ч. Реакционную смесь гасят насыщенным раствором соли (100 мл) и экстрагируют Е!ОАс (250 мл). Органическую фазу промывают насыщенным раствором соли, сушат Мд8О4 и выпаривают в вакууме с получением бледно-желтого масла. Очистка флэшхроматографией на колонке двуокиси кремния: с 4/1 до 1/1 гексан/Е!ОАс дает продукт - 1,6бис[4-(5-цианопентилоксипропил)фенокси]гексан 37 (К1=0,6 в 1/1 Е!ОАс/гексан).
Н1-ЯМР (СВС13, 299,96 МГц): δ (мд) 7,097,06 (д, 4Н), 6,82-6,79 (д, 4Н), 3,94-3,90 (т, 4Н),
3.42- 3,37 (м, 8Н), 2,64-2,58 (т, 4Н), 2,40-2,32 (м, 8Н), 1,90-1,26 (м, 24Н).
Стадия 3.
1,6-бис[4-(5-Цианопентилоксипропил)фенокси]гексан 37(0,278 г, 0,48 ммоль), полученный выше на стадии 2, добавляют к смеси концентрированной НС1 (10 мл) и АсОН (2 мл) и реакционную смесь нагревают при 90°С. Через 15 мин реакционную смесь разбавляют насыщенным раствором соли (50 мл), экстрагируют Е!ОАс (100 мл) и сушат Мд8О4. Выпаривание органической фазы дает 1,6-бис[4-(5-карбоксипентилоксипропил)фенокси]гексан 38 в виде бледно-желтого маслянистого остатка, который используют на следующей стадии без дополнительной очистки.
Н1-ЯМР (СРС13, 299,96 МГц): δ (мд) 7,097,07 (д, 4Н), 6,82-6,79 (д, 4Н), 3,96-3,92 (т, 4Н),
3.42- 3,56 (м, 8Н), 2,64-2,59 (т, 4Н), 2,39-2,32 (м, 4Н), 1,91-1,40 (м, 24Н).
Стадия 4.
К раствору 2-гидрокси-2-(4-бензилокси-3гидроксиметилфенил)этиламина 39 (0,263 г, 0,96 ммоль) в ДМФ (8 мл) добавляют 1,6-бис[4(5-карбоксипентилоксипропил)фенокси]гексан (~0,48 ммоль), полученный выше на стадии 3, НОВ! (0,13 г, 0,96 ммоль), ОПАЛ (0,21 мл, 1,20 ммоль) и РуВОР (0,502 г, 0,96 ммоль). После перемешивания в течение 24 ч при кт реакционную смесь разбавляют насыщенным раствором соли (20 мл) и экстрагируют Е!ОАс (50 мл). Органический слой промывают 0,1 М \аО11, 0,1 М НС1 и насыщенным раствором соли и сушат над Мд8О4. Органические растворители удаляют в вакууме с получением 1,6-бис[4-(5-амидопен тилоксипропил)фенокси]гексана в виде бледножелтого масляного остатка (0,45 г).
Стадия 5.
Раствор 1,6-бис[4-(5-амидопентилоксипропил)фенокси]гексана (0,45 г, 0,4 ммоль), полученного выше на стадии 4, в безводном ТГФ (10 мл) добавляют к раствору Б1А1Н4 (0,16 г, 4,22 ммоль) в безводном ТГФ (40 мл) при 0°С. Реакционную смесь перемешивают в течение 4 ч при 80°С в атмосфере азота и затем гасят 10% \аО11 (1 мл) при 0°С. Через 30 мин реакционную смесь фильтруют и осадок промывают 10% МеОН в ТГФ (50 мл). Фильтраты объединяют и выпаривают в вакууме с получением бледножелтого маслянистого остатка. Очистка флэшхроматографией на колонке из двуокиси кремния: с 5% МеОН/СН2С12 до 3% изо-Рг\Н; в 10% МеОН/СН2С12, дает 1,6-бис[4-(6-аминогексилоксипропил)фенокси]гексан.
Н1-ЯМР (СПС13, 299,96 МГц): δ (мд) 7,40-
7,25 (м, 12Н), 7,22-7,18 (д, 2Н), 7,09-7,02 (д, 4Н), 6,91-6,88 (д, 2Н), 6,81-6,75 (д, 4Н), 5,01 (с, 4Н),
4,8-4,75 (м, 2Н), 4,70 (с, 4Н) , 3,96-3,83 (кв, 4Н),
3,42-3,34 (м, 8Н), 2,84-2,64 (м, 8Н), 2,62-2,56 (т, 4Н), 1,84-1,75 (м, 8Н), 1,57-1,50 (м, 10Н), 1,34-
1,23 (м, 10Н).
Стадия 6.
Раствор 1,6-бис[4 -(6-аминогексилоксипролил)фенокси]гексана (0,16 г, 0,15 моль), полученного выше на стадии 5, в Е!ОН (40 мл) гидрируют в атмосфере Н2 (1 атм) с 10% Рб/С катализатором (100 мг) при кт в течение 24 ч. Катализатор отфильтровывают и фильтрат концентрируют с получением неочищенного продукта в виде бледно-желтого масла. Очистка ВЭЖХ с обращенной фазой: с 10 до 50% \-1еС\ Н2О в течение 40 мин; 20 мл/мин; 254 нм, дает 1,6бис{4-(\-[2-(4-гидрокси-3-гидроксиметилфенил)-2-гидроксиэтил]аминогексилоксипропил) фенокси}гексан 40.
Н1-ЯМР (СВ3ОВ, 299,96 МГц): δ (мд) 7,35 (м, 2Н), 7,18-7,15 (дд, 2Н), 7,08-7,05 (д, 4Н), 6,82-6,77 (м, 6Н), 4,65 (с, 4Н), 3,96-3,92 (т, 4Н), 3,45-3,34 (м, 8Н), 3,12-3,01 (м, 6Н), 2,94-2,89 (т, 2Н), 2,62-2,57 (т, 4н), 1,86-1,43 (м, 28Н); ЭРМС (С54Н80\2О10): вычислено: 917,1, найдено: 917,5 [М]+, 940,8 [М+\а]+.
Пример 6. Синтез 1-{2-[\-2-(4-гидрокси-3гидроксиметилфенил)-2-(К)-гидроксиэтил]аминоэтил }-4-[\-(2-фенил-2-(8)-гидроксиэтил)амино]фенила (следуя фиг. 10).
Стадия 1.
Смесь 4-(\-ВОС-2-аминоэтил)анилина 28 (10 г, 42,34 ммоль), бензальдегида (4,52 мл, 44,47 ммоль) и молекулярного сита 4 А (10 г) в толуоле (100 мл) кипятят с обратным холодиль ником при 95°С в течение 15 ч. Реакционную смесь фильтруют и фильтрат концентрируют в вакууме с получением бесцветного масла. Масло растворяют в МеОН (150 мл) и добавляют АсОН (0,5 мл) и МОВН3 (2,79 г, 44,4 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при 0°С в течение 1 ч и при кт в течение 2 ч, и затем концентрируют в вакууме с получением бледножелтого масляного остатка. Очистка флэшхроматографией на колонке двуокиси кремния: 1/1 гексан/ЕЮЛс, давала №бензид-4-Щ-ВОС-2аминоэтил)анилина 41 в виде бесцветного масла (11,5 г, 83%). К(=0,75 в 1/1 гексан/ЕЮЛс.
Н!-ЯМР (СЭ3ОЭ, 299,96 МГц): δ (мд) 7,38-
7,2 (м, 5Н), 6,87-6,84 (д, 2Н), 6,58-6,55 (д, 2Н),
4,27 (с, 2Н), 3,2-3,15 (м, 2Н), 2,6-2,56 (т, 2Н), 1,41 (с, 9Н); ЭРМС (С20Н2(Х2О2): вычислено: 326,4, найдено: 328 [М+Н]+.
Стадия 2.
Смесь №бензил-4-Щ-ВОС-2-аминоэтил) анилина 41 (10 г, 30,7 ммоль) и (К)стиролоксида (3,51 мл, 30,7 ммоль) в Е(ОН (100 мл) кипятят с обратным холодильником в течение 48 ч. Небольшой образец реакционной смеси отбирают для анализа жидкостной хроматографией, который показывает, что образовался целевой аддукт 2-[Щ-бензил-4-2-№ВОСаминоэтил)анилино]-1-фенилэтанол в виде второстепенного продукта вместе с другим региоизомером 2-[Щ-бензил-4-2-№ВОС-аминоэтил) анилино]-2-фенилэтанолом в соотношении ~1/2. Выпаривание раствора дает густое бледножелтое масло, которое очищают флэшхроматографией на колонке двуокиси кремния: от 4/1 до 2/1 гексан/ЕЮЛс. После повторной хроматографии получают 2-[Щ-бензил-4-2-к ВОС-аминоэтил)анилино]-1-фенилэтанол в виде бесцветного масла (4,01 г, 29%) (К(=0,76 в 2/1 гексан/ЕЮЛс).
Н'-ЯМР (СЭ3ОЭ, 299,96 МГц): δ (мд) 7,4-
7,1 (м, 10Н), 7,1-7,06 (д, 2Н), 6,68-6,65 (д, 2Н),
5,0 (т, 1Н), 4,52-4,46 (д, 1Н), 4,26-4,22 (д, 1Н),
3,76-3,68 (дд, 1Н), 3,56-3,48 (дд, 1Н), 3,22-3,12 (м, 2Н), 2,68-2,56 (м, 2Н), 1,41 (с, 9Н); ЭРМС (С28Н34^О3): вычислено: 446,6, найдено: 447,1 [М+Н]-, 893,4 [2М+Н]+.
Стадия 3.
К раствору 2-[Щ-бензил-4-2-№ВОСаминоэтил)анилино]-1-фенилэтанола (4,01 г, 8,99 ммоль) в СН2С12 (15 мл), выдерживаемому на ледяной бане, добавляют ТФУК (15 мл) в токе азота. После перемешивания при 0°С в течение 30 мин реакционную смесь концентрируют в вакууме, получая бледно-желтое масло. Очистка флэш-хроматографией на колонке из двуокиси кремния: (1/2 гексан/ЕЮЛс до 5% изоР1МН2 в 1/2 гексан/ЕЮЛс) дает 2-[Щ-бензил-42-аминоэтил)анилино]-1-фенилэтанол 42 в виде бледно-желтого масла из таких фракций с К£ 0,2 (5% изо-Р1МН2 в 1/2 гексан/ЕЮЛс) С 74% выходом (2,29 г).
Н!-ЯМР (СЭ3ОЭ, 299,96 МГц): δ (мд) 7,387,06 (м, 10Н), 7,01-6,98 (д, 2Н), 6,71-6,68 (д, 2Н), 5,02-4,96 (дд, 1Н), 4,54-4,48 (д, 1Н), 4,29-4,23 (д, 1Н), 3,76-3,67 (дд, 1Н), 3,58-3,50 (дд, 1Н), 2,82-
2,74 (т, 2Н), 2,64-2,59 (т, 2Н); ЭРМС (С23Н26^О1): вычислено: 346,5, найдено: 346,3 [Μ]+.
Стадия 4.
Смесь 2-[Щ-бензил-4-[2-аминоэтил])анилино]-1-фенилэтанола 42 (2,28 г, 6,59 ммоль), бензальдегида (0,74 мл, 7,28 ммоль) и молекулярного сита 4А (4 г) в толуоле (40 мл) нагревают при 90°С в течение 14 ч. Реакционную смесь охлаждают и фильтруют, и сита промывают толуолом. Объединенные фильтраты концентрируют с получением маслянистого остатка, который промывают гексаном и сушат. Остаток растворяют в МеОН (40 мл), содержащем АсОН (0,4 мл), и реакционную смесь охлаждают на ледяной бане. Добавляют кОВН (0,62 г, 9,87 ммоль) и реакционную смесь перемешивают в течение 2 ч при кт и затем концентрируют. Маслянистый остаток растворяют в 60% МеС№Н2О и очищают препаративной жидкостной хроматографией с обращенной фазой (с 40 до 80% МеС№Н2О в течение 30 мин: 30 мл/мин) с получением 2-[Щ-бензил-4-2-№бензиламиноэтил)анилино]-1-фенилэтанола в виде соли ТФУК. Продукт обрабатывают щелочным концентрированным раствором соли и экстрагируют эфиром (200 мл). Органический слой сушат №128О4 и концентрируют с получением 2-[(Νбензил-4-2-№бензиламиноэтиланилино]-1фенилэтанола 43 в виде бесцветного масла (1,36 г).
Н!-ЯМР (СЭ3ОЭ, 299,96 МГц): δ (мд) 7,367,06 (м, 15Н), 6,98-6,95 (д, 2Н), 6,69-6,60 (д, 2Н), 5,01-4,96 (т, 1Н), 4,54-4,47 (д, 1Н), 4,29-4,24 (д, 1Н), 3,73 (с, 2Н), 3,72-3,68 (дд, 1Н), 3,59-3,54 (дд, 1Н), 2,80-2,74 (м, 2Н), 2,70-2,64 (м, 2Н); ЭРМС (С30Н32к2О£): вычислено: 436,6, найдено:
437,2 [М+Н]-.
Стадия 5.
Концентрированный раствор 2-[Щ-бензил4-[2-№бензиламиноэтил])анилино]-1-фенилэтанола (1,36 г, 3,12 ммоль) и соединения (8)-4бензилокси-3-метоксикарбонилстиролоксида 44 (0,887 г, 3,12 ммоль; ~95% ее) (полученного, как описано в К. Ней, К. 81аге, Р. Не1с.|Ш5Е Те!. Ьей., 35, 9375-9378, (1994)) в толуоле (1 мл) нагревают при 105°С в течение 72 ч в атмосфере азота. Реакционную смесь очищают флэшхроматографией на колонке двуокиси кремния: (2/1 гексан/ЕЮЛс до 3% МеОН в 1/1 гексан/ЕЮЛс) с получением 1-{2-Щ-бензил-№ 2-(4-бензилокси-3-метоксикарбонилфенил)-2(К)-гидрокси]этиламиноэтил}-4-Щ-(2-фенил-2(8)-гидрокси)этиламино]бензола 45 (К(=0,62 в 3% МеОН) в 1/1 гексан/ЕЮЛс в виде бледножелтой пены (2,0 г, 89%).
Н'-ЯМР (СО.ОО, 299,96 МГц): δ (мд) 7,67-
7,66 (д, 1Н), 7,49-7,42 (м, 2Н), 7,38-7,0 (м, 20 Н), 6,88-6,85 (д, 2Н), 6,65-6,62 (д, 2Н), 5,15 (с, 2Н), 5,05-4,98 (т, 1Н), 4,6-4,54 (т, 1Н), 4,53-4,46 (д, 1Н), 4,28-4,22 (д, 1Н), 3,84 (с, 3Н), 3,72-3,64 (м, 3Н), 3,56-3,46 (дд, 1Н), 2,74-2,56 (м, 6Н); ЭРМС (С47Н48М2О5): вычислено: 720,9, найдено: 721,4 [М+Н]+, 743,3 [М+Ыа]+.
Стадия 6.
К суспензии Ь1А1Н4 (0,211 г, 5,56 ммоль) в ТГФ (40 мл) охлажденной на ледяной бане добавляют 1-{2-[Ы-бензил-М-2-(4-бензилокси-3метоксикарбонилфенил)-2-(К)-гидрокси]этиламиноэтил}-4-[Ы-(2-фенил-2-(8)-гидроксиэтил) амино]бензол 45 (2,0 г, 2,78 ммоль) в ТГФ (10 мл) в атмосфере азота. Реакционную смесь медленно нагревают до кт и перемешивание продолжают в течение 5 ч. Реакционную смесь охлаждают до 0°С и медленно добавляют 10% №ОН (0,5 мл). Через 30 мин образуется плотный гель. Гель разбавляют ТГФ (300 мл), фильтруют и твердую массу промывают ТГФ (50 мл). Фильтраты объединяют и концентрируют в вакууме, что дает маслянистый остаток. Остаток очищают флэш-хроматографией на колонке из двуокиси кремния: (2/1 гексан/ЕкОАс до 3% МеОН в 1/1 гексан/ЕкОАс) с получением 1-{2-[Ы-бензил-М-2-(4-бензилокси-3-гидроксиметилфенил)-2-(К)-гидроксиэтил] аминоэтил }-4[Ы-(2-фенил-2-(8)-гидроксиэтил)амино]бензол в виде бесцветного масла (1,28 г, 67%).
Н'-ЯМР (СО.ОО, 299,96 МГц): δ (мд) 7,47,0 (м, 22Н), 6,85-6,82 (м, 3Н), 6,63-6,60 (д, 2Н), 5,02-4,94 (м, 3Н), 4,66 (с, 2Н), 4,59-4,54 (дд, 1Н), 4,48-4,4 (д, 1Н), 4,24-4,16 (д, 1Н), 3,76-3,7 (д, 1Н), 3,69-3,62 (дд, 1Н), 3,58-3,52 (д, 1Н), 3,50-
3,44 (дд, 1Н), 2,76-2,54 (м, 6Н); ЭРМС (С46Н48Ы2О4): вычислено: 692,90, найдено: 693,5 [М+Н]+.
Стадия 7.
Раствор 1-{2-[Ы-бензил-М-2-(4-бензилокси-3-гидроксиметилфенил)-2-(К)-гидроксиэтил] аминоэтил}-4-[Ы-(2-фенил-2-(8)-гидроксиэтил) амино]бензол (1,28 г, 1,85 ммоль) в ЕкОН (80 мл) гидрируют Н2 (1 атм) с 10% Рй/С (0,6 г) в течение 36 ч. После фильтрования и промывания катализатора ЕкОН (50 мл), фильтраты объединяют и упаривают в вакууме, получая бледно-желтую пену, которую растворяют в 10% МеСЫ/Н2О и очищают препаративной жидкостной хроматографией с обращенной фазой (от 10 до 30% МеСЫ/Н2О, содержащем 0,3% ТФУК) в течение 50 мин (30 мл/мин; 254 нм) с получением 1-{2-[Ν-2-(4 -гидрокси-3 -гидроксиметилфенил)-2-(К)-гидроксиэтил]аминоэтил}-4-[Ы-(2фенил-2-(8)-гидроксиэтил)амино]бензола в виде соли ТФУК (0,6 г, 50%). Оптическая чистота 1{2-Щ-2-(4-гидрокси-3-гидроксиметилфенил)-2(К)-гидроксиэтил] аминоэтил }-4-Щ-(2-фенил-2(8)-гидроксиэтил)амино]бензола 46, которую анализируют с помощью капиллярного элек трофореза с использованием хиральной среды, как установлено, составляет ~93%.
Н!-ЯМР (СО.ОО, 299,96 МГц): δ (мд) 7,42-
7,28 (м, 8Н), 7,26-7,22 (д, 2Н), 7,18-7,14 (дд, 1Н),
6,80-6,77 (д, 1Н), 4,88-4,82 (м, 2Н), 4,65 (с, 2Н),
3,5-3,43 (м, 2Н), 3,29-3,26 (м, 2Н), 3,19-4,14 (м, 2Н), 3,06-3,0 (м, 2Н); ЭРМС (С25Н3(Ц2О4): вычислено: 422,5, найдено: 423,1 [М+Н]+, 445,4 |М+№-1|'.
Пример 7. Синтез 1-{6-Щ-2-(4-гидрокси-3гидроксиметилфенил)-2-[гидроксиэтил]амино]гексилокси}-4-{6-Щ-[2-(4-гидрокси-3-гидроксиметилфенил)-2-гидроксиэтил]амино]гексилоксипропил}бензол (следуя фиг. 11).
н н?
Стадия 1.
Раствор 3 -(4-гидроксифенил)-1 -пропанола (2,0 г, 13,1 ммоль) в ДМФ (5 мл) добавляют к раствору ДМФ (35 мл), содержащему NаН (1,31 г, 60% в минеральном масле) при 0°С в атмосфере азота. Реакционную смесь медленно нагревают до 80°С. После перемешивания в течение 1 ч при 80° С реакционную смесь охлаждают до 0°С и добавляют 6-бромгексаннитрил (5,78 г, 32,83 ммоль). Конечную смесь снова нагревают до 80°С и перемешивают в течение 24 ч. Реакционную смесь гасят насыщенным раствором №-1С1 (200 мл) и продукт экстрагируют ЕкОАс (300 мл). Органический слой промывают насыщенным раствором соли, сушат №28О4 и выпаривают досуха остатка, получая бледно-желтое твердое вещество. Очистка неочищенного продукта флэш-хроматографией на колонке двуокиси кремния: от 4/1 до 1/1 гексан/ЕкОАс, дает 6-{3-[4-(5-цианопентилокси)фенил]пропокси}гексаннитрил с 30% выходом (1,33 г). Кк=0,63 в 1/1 ЕкОАс/гексане.
'Н-ЯМР (СВС13, 299,96 МГц): δ (мд) 7,097,07 (д, 2Н), 6,81-6,78 (д, 2Н), 3,96-3,92 (т, 2Н),
3,42-3,37 (м, 4Н), 2,64-2,58 (т, 2Н), 2,39-2,32 (м, 4Н), 1,87-1,52 (м, 14Н).
Стадия 2.
Раствор 6-{3-[4-(5-цианопентилокси)фенил]пропокси}гексаннитрила (1,33 г, 3,88 ммоль) в ТГФ (10 мл) добавляют к раствору Ь1А1Н4 (0,442 г, 11,65 ммоль) в ТГФ (50 мл) при 0°С в атмосфере азота. Реакционную смесь медленно нагревают до кипения с обратным холодильником и перемешивают в течение 2 ч. Реакционную смесь охлаждают до 0°С и медленно добавляют 10% раствор №ЮН (5 мл). Через 30 мин реакционную смесь фильтруют и собранные твердые вещества промывают ТГФ (100 мл). Фильтрат концентрируют с получением бледно-желтого масла, которое очищают флэшхроматографией на колонке двуокиси кремния: 5% МеОН/СН2С12 до 3% изо-Рт^2/20% МеОН/СН2С12 с получением 6-{3-[4-(6-амино гексилокси)фенил]пропокси}гексиламина в виде бесцветного масла (0,5 г, 37%), которое превращают в целевое соединение, действуя, как описано выше в примере 1, стадия 2. Неочищенный продукт очищают препаративной ВЭЖХ с обращенной фазой: с 10 до 4% ΜοΟ’Ν/Η2Ο в течение 40 мин; 20 мл/мин; 254 нм. ЭРМС (ϋ39Η58Ν2Ο8): вычислено: 682,8, найдено: 683,6[М+Н]-, 797,5 [М+СЕ3СО2Н]+.
Пример 8. Синтез бис{2-{2-(4-гидрокси-3гидроксиметилфенил)-2-гидроксиэтиламино}-2гидроксиэтокси}бензол (следуя фиг. 12).
Стадия 1.
К насыщенному Ν2 раствору ацетонитрила (300 мл), содержащему метил 5-ацетилсалицилат 50 (20 г, 0,1 моль) и бензилбромид (13,5 мл, 0,11 моль) добавляют К2СО3 (28,5 г, 0,21 моль). Реакционную смесь перемешивают при 90°С в течение 5 ч. После охлаждения реакционную смесь фильтруют и фильтрат концентрируют в вакууме, что дает белое твердое вещество, которое суспендируют в гексане (300 мл) и собирают на воронке Бюхнера с получением метил О-бензил-5-ацетилсалицилата 51 в виде бесцветных или белых кристаллов (28,1 г, 96%). К£=0,69 в 1/1 ЕЮАс/гексан.
Н!-ЯМР (СПС13, 299,96 МГц): δ (мд) 8,43-
8,42 (д, 1Н), 8,1-8,04 (дд, 1Н), 7,5-7,28 (м, 5Н), 7,08-7,04 (д, 1Н), 5,27 (с, 2Н), 3,93(с, 3Н), 2,58 (с, 3Н).
Стадия 2.
К раствору метил О-бензил-5-ацетилсалицилата 51 (14,15 г, 0,05 моль) в СНС13 (750 мл) добавляют бром (2,70 мл, 0,052 моль). Реакционную смесь перемешивают при кт. При перемешивании реакционная смесь постепенно превращается из красно-коричневой в бесцветную. Смесь перемешивают в течение 2 ч при кт и гасят добавлением насыщенного раствора соли (300 мл). После встряхивания смеси в разделительной воронке органический слой собирают, промывают насыщенным раствором соли и сушат под №ь8О4. Органический раствор концентрируют в вакууме, получая белое твердое вещество. Его промывают эфиром (200 мл). После высушивания на воздухе получают 15 г (83%) метил О-бензил-5-(бромацетил)салицилата 52. К(=0,76 в 1/1 ЕЮАс/гексан.
Н'-ЯМР (СПС13, 299,96 МГц): δ (мд) 8,488,46 (д, 1Н), 8,14-8,08 (дд, 1Н), 7,51-7,3 (м, 5Н),
7,12-7,09 (д, 1Н), 5,29 (с, 2Н), 4,42 (с, 2Н), 3,94 (с, 3Н).
Стадия 3.
К раствору ДМФ (60 мл), содержащему метил О-бензил-5-(бромацетил)салицилат 52 (7,08 г, 0,019 моль) добавляют ΝαΝ3 (1,9 г, 0,029 моль). После перемешивания при кт в течение 24 ч в темноте смесь разбавляют ЕЮАс (200 мл) и промывают насыщенным раствором соли (3х200 мл) в разделительной воронке. Органическую фазу сушат под Мд§О4 и концентрируют с получением бледно-красного твердого вещества. Его очищают флэш-хроматографией на колонке из двуокиси кремния: с 10 до 50% ЕЮАс в гексане. Целевой продукт, метил Обензил-5-(азидоацетил)салицилат 53 получают в виде белых кристаллов (4,7 г, 74%). К(=0,68 в 1/1 ЕЮАс/гексан.
Н'-ЯМР (СПС13, 299,96 МГц): δ (мд) 8,388,36 (д, 1Н), 8,08-8,04 (дд, 1Н), 7,5-7,3 (м, 5Н),
7,12-7,09 (д, 1Н), 5,29 (с, 2Н), 4,53 (с, 2Н), 3,94 (с, 3Н).
Стадия 4.
К серой суспензии ЫА1Н4 (2,74 г, 0,072 моль) в ТГФ (400 мл), охлаждаемой на ледяной бане, добавляют метил О-бензил-5(азидоацетил)салицилат 53 (4,7 г, 0,014 моль) в атмосфере азота. Реакционную смесь перемешивают при 0°С в течение 1 ч и постепенно нагревают до кт. После перемешивания в течение 16 ч при кт смесь нагревают при 75°С в течение 3 ч. Реакционную смесь охлаждают на ледяной бане и гасят медленным добавлением 10% №ЮН (10 мл). После перемешивания в течение 1 ч осадок отфильтровывают и промывают 5% МеОН в ТГФ (200 мл). Фильтраты объединяют и концентрируют в вакууме, что дает бледножелтый маслянистый остаток. Неочищенный продукт очищают флэш-хроматографией на колонке двуокиси кремния: 10% МеОН/СН2С12 до 5% изо-РгМН2 в 30% МеОН/СН2С12 с получением 2-(4-бензилокси-3 -гидроксиметилфенил)-2гидроксиэтиламин 39 в виде бледно-желтого твердого вещества (2,6 г, 66%). К(=0,63 в изоΕ1ΝΉ; в 30% МеОН/СН2С12.
Н!-ЯМР ((7)4)1)- 299,96 МГц): δ (мд) 7,46-
7,28 (м, 6Н), 7,24-7,20 (дд, 1Н), 7,0-6,96 (д, 1Н),
5,11 (с, 2Н), 4,70 (с, 2Н), 4,65-4,60 (т, 1Н), 2,832,81 (д, 2Н); ЭРМС (С1бН19^О3) : вычислено:
273,3, найдено: 274,7 [М+Н]-, 547,3 [2М+Н]+.
Стадия 5.
К раствору ЕЮН (15 мл), содержащему соединение 2-(4-бензилокси-3-гидроксиметилфенил)-2-гидроксиэтиламин 39 (0,3 г, 1,1 ммоль), добавляют резорциндиглицидиловый эфир (0,122 г, 0,55 ммоль), растворенный в ЕЮН (5 мл). Реакционную смесь нагревают с обратным холодильником в течение 20 ч. После охлаждения до кт реакционную смесь дегазируют азотом и гидрируют с 10% Рй/С (0,3 г, 10%) в атмосфере Н2 (1 атм) в течение 24 ч. После отфильтровывания катализатора фильтрат концентрируют досуха, получая бесцветный маслянистый остаток, который очищают препаративной ВЭЖХ с обращенной фазой (с 10 до 50% МеС№^Н2О в течение 40 мин; 20 мл/мин; 254 нм) с получением бис{2-{2-(4-гидрокси-3-гидроксиметилфенил)-2-гидроксиэтиламино } -2-гидроксиэтокси} бензола 54. ЭРМС (С3011.|(МО|0): вычислено: 588,6, найдено: 589,4 [М+Н]+, 610,7 [М+№]+.
Пример 9. Синтез 1-{2-[№2-(4-гидрокси-3гидроксиметилфенил)-2-гидроксиэтил]аминоэтил }-4-[№(2-нафт-1 -илоксиметил-2-гидроксиэтил)амино]бензола (следуя фиг. 13).
Стадия 1.
Раствор Ε1ΟΗ (50 мл), содержащий 4-(ΝВΟС-2-аминоэтил) анилин 28 (0,4 г, 1,69 ммоль) и 3-(1-нафтокси)-1,2-эпоксипропан 55 (0,33 г, 1,65 ммоль) кипятят с обратным холодильником в течение 18 ч и концентрируют в вакууме досуха, что дает бледно-желтое масло. Его растворяют в 10 мл СН2С12, охлаждают на ледяной бане и обрабатывают ТФУК (5 мл). После перемешивания в течение 2 ч при 0°С смесь упаривают, получая бледно-красное масло. Его растворяют в 30% водном ацетонитриле и очищают препаративной ВЭЖХ: с 10 до 30% МеСНЛ^ в течение 30 мин; 20 мл/мин; 254 нм. Продукт 56 получают в виде бесцветного масла (260 мг; соль ТФУК).
Н^ЯМР ^Ό3ΟΌ, 299,96 МГц): δ (мд) 8,88-
8,25 (дд, 1Н), 7,82-7,79 (дд, 1Н), 7,51-7,42 (м, 3Н), 7,39-7,38 (д, 1Н), 7,33-7,30 (д, 2Н), 7,25-7,23 (д, 2Н), 6,91-6,89 (д, 1Н), 4,37-4,31 (м, 1Н), 4,22-
4,19 (м, 2Н), 3,69-3,63 (дд, 1Н), 3,67-3,54 (дд, 1Н), 3,17-3,11 (т, 2Н), 2,96-2,91 (т, 2Н); ЭРМС (^ιΗ24Ν2Ο2): вычислено: 336,4, найдено: 337,5 [М+Н]-, 359,6 [М+№]+, 673,4 [2М+Н]+.
Стадия 2.
К раствору соединения 56 (0,13 г, 0,023 ммоль; соль ТФУК) в 5 мл МеОН добавляют 1,0 М ΝηΟΙΙ (1,0 М, 0,46 мл). После гомогенного перемешивания раствор выпаривают досуха. Остаток растворяют в ТГФ (10 мл) с последующим добавлением глиоксаля 12 (52 мг, 0,023 ммоль). Полученную суспензию перемешивают в течение 4 ч при температуре окружающей среды (тос) в атмосфере азота. После охлаждения полученного раствора на ледяной бане к предшествующему реакционному раствору добавляют избыточное количество 2М ВН3Ме28 в ТГФ (3 мл, 6 ммоль). Полученную смесь медленно кипятят до кт и нагревают с обратным холодильником в течение 4 ч в токе Ν2. После охлаждения горячего раствора к охлажденной смеси добавляют 5 мл МеОН в атмосфере азота, чтобы погасить реакционную смесь. После перемешивания в течение 30 мин при кт конечный раствор выпаривают в вакууме, получая бледнокоричневое твердое вещество. Его промывают ЕЮАс/гексаном (1/2; 20 мл) и сушат. Неочищенный продукт растворяют в 50% МеСЖН^, содержащем 0,5% ТФУК и очищают препаративной высокоэффективной жидкостной хроматографией (ВЭЖХ), применяя линейный градиент (с 5 до 50% МеСЖН2О в течение 50 мин, 20 мл/мин; определение при 254 нм). Фракции с УФ абсорбцией анализируют ЖХ-МС, для определения целевого продукта, 1-{2-[Ν-2-(4гидрокси-3-гидроксиметилфенил)-2-гидроксиэтиламино]этил}-4-[№(2-нафт-1-илоксиметил2-гидроксиэтил)амино]бензола 57. ЭРМС (^0Η34Ν2Ο5): вычислено: 502,6, найдено:
503,2[М+Н]-, 525,6 [М+№]+.
Пример 10. Синтез 1,4,7-трис {Ν-|2-(4гидрокси-3-гидроксиметилфенил)-2-
К суспензии а,а-дигидрокси-4-гидрокси-3метоксикарбонилацетофенона 12 (0,45 г, 1,99 ммоль) в тетрагидрофуране (15 мл) добавляют раствор 4-(аминометил)-1,8-октадиамин (115 мг, 0,66 ммоль) в тетрагидрофуране (5 мл). Полученную суспензию перемешивают в течение 12 ч при тос в атмосфере азота. После охлаждения полученного раствора на ледяной бане добавляют избыточное количество 2М ВН3-Ме28 в гексане (6 мл, 12 ммоль). Полученную смесь медленно нагревают до кт и кипятят с обратным холодильником в течение 6 ч в атмосфере азота. После охлаждения реакционную смесь гасят метанолом (5 мл). Полученный раствор перемешивают при кт в течение 30 мин и затем концентрируют в вакууме с получением бледнокоричневого твердого вещества. Твердое вещество промывают смесью этилацетат: гексан (1:2) и затем сушат. Неочищенный продукт растворяют в смеси 50% ацетонитрил/вода, содержащем 0,5% ТФУК и очищают ВЭЖХ, применяя линейный градиент (с 5 до 50% МеСЖН^ в течение 50 мин, 20 мл/мин; определение при 254 нм). Фракции с УФ-поглощением анализируют путем ЖХ-МС, для обнаружения целевого продукта. ЭРМС (^6Η53Ν3Ο9): вычислено: 671,8, найдено: 671,7.
Примеры лекарственных форм
Пример 1.
Получают твердые желатиновые капсулы, содержащие следующие ингредиенты:
Ингредиент Количество, мг/капсула
Активный ингредиент 30,0
Крахмал 305,0
Стеарат магния 5,0
Вышеприведенные ингредиенты смешивают и заполняют ими твердые желатиновые капсулы в количестве 340 мг на капсулу.
Пример 2.
Состав таблеток готовят, используя ингредиенты, указанные ниже:
Ингредиент Количество, мг/таблетка
Активный ингредиент 25,0
Целлюлоза микрокристаллическая 200,0
Коллоидная двуокись кремния 10,0
Стеариновая кислота 5,0
Компоненты смешивают и прессуют, чтобы сформировать таблетки, каждая весом 240 мг.
Пример 3.
Готовят сухую порошковую ингаляционную лекарственную форму, содержащую следующие компоненты:
Ингредиент Вес.%
Активный ингредиент 5
Лактоза 95
Активный ингредиент смешивают с лактозой и смесь добавляют к сухому порошку для ингаляционного применения.
Пример 4.
Таблетки, каждая из которых содержит 30 мг активного ингредиента, получают следующим образом:
Ингредиент Количество, мг/таблетка
Активный ингредиент 30,0 мг
Крахмал 45,0 мг
Микрокристаллическая целлюлоза 35,0 мг
Поливинилпирролидон(в виде 10% раствора в стерильной воде) 4,0 мг
Натрийкарбоксиметилкрахмал 4,5 мг
Стеарат магния 0,5 мг
Тальк 1,0 мг
Всего 120,0 мг
Активный ингредиент, крахмал и целлюлозу пропускают через сито Νο.20 и.8. и тщательно смешивают. Раствор поливинилпирролидона смешивают с полученными порошками, после чего их пропускают через сито 16 меш. и.8. Гранулы, полученные таким образом, сушат при 50-60°С и пропускают через сито 16 меш. и. 8. Натрийкарбоксиметилкрахмал, стеарат магния и тальк, предварительно пропущенные через сито Νο.30 меш. и.8. добавляют затем к гранулам, которые после смешивания прессуют на таблеточной машине с получением таблеток, весом 120 мг каждая.
Пример 5.
Капсулы, каждая с содержанием 40 мг лекарственного вещества, готовят следующим образом:
Ингредиент Количество, мг/капсула
Активный ингредиент 40,0 мг
Крахмал 109,0 мг
Стеарат магния 1,0 мг
Всего 150,0 мг
Активный ингредиент, крахмал и стеарат магния смешивают, пропускают через сито Νο. 20 меш. и.8. и заполняют твердые желатиновые капсулы количеством 150 мг смеси в каждую.
Пример 6.
Суппозитории, с содержанием активного ингредиента 25 мг в каждом, готовят следующим образом:
Ингредиент Количество
Активный ингредиент 25 мг
Глицериды насыщенных жирных кислот до 2000 мг
Активный ингредиент пропускают через сито Νο. 60 меш. и.8. и суспендируют в триглицеридах насыщенных жирных кислот, предварительно расплавленных с применением минимально необходимого нагревания. Затем смесь выливают в форму для суппозиториев номинальным объемом 2,0 г и дают остыть.
Пример 7.
Суспензии, каждая из которых содержит 50 мг лекарственного вещества в 5 мл дозе, готовят следующим образом:
Ингредиент Количество
Активный ингредиент 50,0 мг
Ксантановая камедь 4,0 мг
Натрийкарбоксиметилцеллюлоза (11%) 4,5 мг
Микрокристаллическая целлюлоза (89%) 50,0 мг
Сахароза 1,75 г
Бензоат натрия 10,0 мг
Ароматизатор и краситель дост. кол-во
Очищенная вода до 5,0 мл
Активный ингредиент, сахарозу и ксантановую камедь смешивают, пропускают через сито Νο.10 меш. и.8. и затем смешивают с ранее приготовленным раствором микрокристаллической целлюлозы и натрийкарбоксиметилцеллюлозы в воде. Бензоат натрия, ароматизатор и краситель разводят в некотором количестве воды и добавляют при перемешивании. Затем добавляют количество воды, достаточное для получения нужного объема.
Пример 8.
Лекарственная форма может быть приготовлена следующим образом:
Ингредиент Количество, мг/капсула
Активный ингредиент 15,0 мг
Крахмал 407,0 мг
Стеарат магния 3,0 мг
Всего 425,0 мг
Активный ингредиент, крахмал и стеарат магния смешивают, пропускают через сито Νο. 20 меш. и.8., и смесью в количестве 425,0 мг заполняют твердые желатиновые капсулы.
Пример 9.
Лекарственную форму готовят следующим образом:
Ингредиент Количество
Активный ингредиент 5,0 мг
Кукурузное масло 1,0 мл
Пример 10.
Лекарственную форму для местного применения готовят следующим образом:
Ингредиент Количество
Активный ингредиент 1-10 г
Эмульгирующий воск 30 г
Жидкий парафин 20 г
Белый мягкий парафин до 100 г
Белый мягкий парафин нагревают до расплавления. Вводят жидкий парафин и эмульгирующий воск и перемешивают до растворения . Добавляют активный ингредиент и перемешивание продолжают до получения дисперсии. Смесь затем охлаждают до отверждения.
В другой предпочтительной лекарственной форме, используемой в способах данного изобретения, применяются приспособления для трансдермальной доставки («пластыри»). Такие трансдермальные пластыри могут использоваться для обеспечения непрерывного или прерывистого введения соединений данного изобретения в регулируемых количествах. Создание и использование трансдермальных пластырей для доставки фармацевтических препаратов хорошо известно в данной области. См., например, патент США 5023252, опубликованный 11 июня 1991г., включенный сюда в качестве ссылки во всей полноте. Такие пластыри могут быть сконструированы для получения непрерывной, пульсирующей или по требованию доставки фармацевтических препаратов.
Другие лекарственные формы, подходящие для использования в данном изобретении, можно найти в Кеш1пд1ои'8 РБагтасеи11са1 Зс1спес5. изданной Ε/Ψ. Майю (Маск РиЫщЫид Сотраиу, 18'1' еб., 1990).
Биологические примеры
Пример 1. Функциональное исследование в отношении в2-адренергического рецептора ίη νίΐτο.
Функциональную активность соединений данного изобретения в отношении β2адренергического рецептора испытывали следующим образом.
Посев клеток и их рост
Клетки гладких мышц первичных бронхов от 21-летнего мужчины (С1оие11с8, Зап П1едо, СА) засевают при плотности 50000 клеток/лунка 24-луночные планшеты для культивирования. Используемая среда представляет собой С1опе0с'5 ЗтВМ-2, дополненную чЭФР (ΗΕ6Ε), инсулином, чФРФ (БЕСЕ) и плодной телячьей сывороткой. Клетки выращивают два дня при 37°С, 5% СО2 до появления видимых слитых монослоев.
Стимуляция клеток агонистами
Среду отсасывают из каждой лунки и заменяют 250 мл свежей среды, содержащей 1 мМ ШМХ, ингибитора фосфодиэстеразы (З1дта, 3ΐ. Ьош8, МО). Клетки инкубируют в течение 15 мин при 37°С и затем добавляют 250 мл агони ста в соответствующей концентрации. Затем клетки дополнительно инкубируют в течение 10 мин. Среду отсасывают и к клеткам добавляют 500 мл холодного 70% ΕΐΟΗ, и затем через примерно 5 мин перемещают в пустой 96-луночный планшет с глубокими ячейками. Эту стадию повторяют. Планшет с глубокими лунками затем помещают в ток высокоскоростного вакуумного насоса до высыхания всего ΕΐΟΗ с образованием сухих лепешек осадка. цАМФ (пмоль/лунка) определяют количественно, используя набор ΕΜ3Α для цАМФ от З1га1адепе (Ьа 1о11а, СА). Кривые ΕС50 строят, используя соответствующее уравнение по 4 параметрам: у=(а-б)/(1+(х/с)Ь)+б, где у=счет/мин а=общее связывание с=!С50 х=[соединение] б=НС связывание
Ь=наклон
Устанавливают НС связывание и позволяют изменяться всем другим параметрам.
Пример 2. Тест на связывание радиолиганда 32-адренергическими рецепторами ш тбго.
Активность соединений данного изобретения по связыванию с в2-адренергическими рецепторами может быть испытана следующим образом. Мембраны клеток ЗЕ9, содержащие β1 или в2-адренергические рецепторы (ΝΕΝ, Во§1огт МА) инкубируют с 0,07 нМ 125Ь йодоцианопиндололом (ΝΕΝ, Войоп, МА) в буфере для связывания, содержащем 75 мМ Трис-НС1 (рН 7,4), 12,5 мМ М§С12 и 2 мМ ЭДТК (ЕЭТА) и различные концентрации испытуемых соединений или только с буфером (контроль) в 96-луночном планшете. Планшеты инкубируют при комнатной температуре, встряхивая в течение 1 ч. Радиолиганды, связанные с рецепторами, собирают фильтрованием на 96-луночные фильтровальные планшеты СЕ/В (Раскагб, Мепбеп, СТ), предварительно блокированные 0,3% полиэтиленимином и дважды промытые 200 мкл ФБФР(РВЗ), используя устройство для сбора клеток. Фильтры промывают трижды 200 мкл ФБФР, используя устройство для сбора клеток, и затем снова суспендируют в 40 мкл сцинтилляционного коктейля. Связанную с фильтром радиоактивность измеряют с помощью сцинтилляционного счетчика и кривые !С50 строят по 4 параметрам, используя стандартное уравнение, описанное выше.
Вышеизложенное изобретение было описано довольно детально с помощью иллюстраций и примеров в целях ясности и лучшего понимания. Для специалиста в данной области будет ясно, что при практическом осуществлении в рамках прилагаемой формулы изобретения могут быть сделаны изменения и модификации. Поэтому должно быть понятно, что вышеприведенное описание предназначено для того, чтобы быть иллюстративным, но не ограничивающим. Объем изобретения поэтому должен определяться не со ссылками на вышеизложенное описание, а должен определяться с обращением к нижеследующей прилагаемой формуле изобретения, вместе с полным объемом эквивалентов, на которые такая формула дает право.
Все патенты, патентные заявки и публикации, процитированные в данной заявке, представлены таким образом в качестве ссылок во всей полноте для всех целей в такой же степени, как если бы каждый отдельный патент, патентная заявка или публикация была бы представлена отдельно.

Claims (19)

  1. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
    1. Соединение формулы (II) ^^μΧ^Η-νν-Ατ^-Χ-α-Ατ’
    1 3 <И) где Аг1 и Аг3 независимо выбирают из труппы, включающей арил, гетероарил и гетероциклил;
    Аг2 выбирают из группы, включающей фенилен, где группы и Х присоединены в 1,2-, 1,3 и 1,4 положениях фениленового кольца;
    циклогексилен, необязательно замещенный метилом, где группы и Х присоединены в 1,3 и 1,4 положениях циклогексиленового кольца, и пиперазинилен, где группы и Х присоединены в 1,4 положениях пиперазиниленового кольца;
    0 представляет группу -ХНСН2СН(ОН)-; представляет алкиленовую или замещенную алкиленовую группу;
    Х представляет ковалентную связь, и его фармацевтически приемлемые соли.
  2. 2. Соединение по п.1, в котором Аг1 представляет фенильное кольцо формулы (с)
    Н* (О где К4 выбирают из группы, включающей водород, алкил, галоген и алкокси;
    К5 выбирают из группы, включающей водород, гидрокси, галоген, амино и -ΝΗ802ΚΗ, где Ка представляет алкил, и
    К6 выбирают из группы, включающей водород, галоген, гидрокси, алкокси, замещенный алкил, сульфониламино, аминоацил и ациламино.
  3. 3. Соединение по п.2, где К4 выбирают из группы, включающей водород, метил, фтор, хлор и метокси;
    К5 выбирают из группы, включающей водород, гидрокси, фтор, хлор, амино и -Ж8О2СН3, и
    К6 выбирают из группы, включающей водород, хлор, фтор, гидрокси, метокси, гидро ксиметил, -СН28О2СН3, -ΝΗ80^Η3, ·ΝΗ(Ή0, ^0ΝΗ2 и -Ν 1С0\112.
  4. 4. Соединение по п.1, где Аг1 представляет группу формулы
  5. 5. Соединение по любому из пп.2, 3 или 4, где Аг3 выбирают из группы, включающей (ΐ) фенильное кольцо формулы (с)
    Й4 (с) где К4 выбирают из группы, включающей водород, алкил, галоген и алкокси;
    К5 выбирают из группы, включающей водород, гидрокси, галоген, амино и -ΝΗ802ΚΗ, где Ка представляет алкил, и
    К6 выбирают из группы, включающей водород, галоген, гидрокси, алкокси, замещенный алкил, сульфониламино, аминоацил и ациламино;
    (ΐΐ) фенильное кольцо формулы (б) (Ф где К7 выбирают из группы, включающей водород, алкил, алкенил, замещенный алкил, галоген, алкокси, замещенный алкокси, гидрокси, аминоацил и гетероарил; и К8 выбирают из группы, включающей водород, галоген, алкокси, замещенный алкокси, ациламино;
    (ϊϊΐ) нафтил;
    (ΐν) пиридил;
    (ν) бензимидазол-1-ил;
    (νΐ) индолил;
    (νΐΐ) 2-цианоиндолил;
    (νΐΐΐ) карбазолил;
    (ΐχ) 4-метилинданил;
    (х) 5-(СН3СО2СН2О-)-1,2,3,4-тетрагидронафтил;
    (χΐ) Ш-2-оксоиндол;
    (χΐΐ) 2,3,4-тригидротианафталин и (χΐΐΐ) 4-оксо-2,3-дигидротианафталин.
  6. 6. Соединение по п.5, в котором Аг3 представляет собой (1) фенильное кольцо формулы (с), где К4 выбирают из группы, включающей водород, метил, фтор, хлор и метокси;
    К5 выбирают из группы, включающей водород, гидрокси, фтор, хлор, амино и -ΝΗ802^3, и
    К6 выбирают из группы, включающей водород, хлор, фтор, гидрокси, метокси, гидро
    100 метокси, -СН2С0ЯН2, и 1-метил-4ксиметил, -СН28О2СН3, -МН802СН3, -Χ1ΚΊΙ0. -С0ЯН2 и -МНС0ЯН2, или (ίί) фенильное кольцо формулы (б), где К7 выбирают из группы, включающей водород, метил, пропен-2-ил, фтор, хлор, -ОСН2СО2Ме, гидрокси,
    -ЯНС0СН3, имидазол-1-ил трифторметилимидазол-2-ил, и К8 выбирают из группы, включающей водород, фтор, хлор, метокси, -ОСН2СО2Ме и -С0Х1Н2.
  7. 7. Соединение по п.6, где Аг2 представляет 1,4-фенилен и где представляет метилен, этилен или пропилен.
  8. 8. Соединение по п.1, где Аг2 представляет 1,4-фенилен;
    Аг3 выбирают из группы, включающей представляет метилен, этилен или пропилен, и его фармацевтически приемлемые соли.
  9. 9. Соединение по п.8, где Аг1 выбирают из группы, включающей фенил, 4-гидроксифенил, 3,4-дигидроксифенил, 3,4-дихлорфенил, 2-хлор3,4-дигидроксифенил, 2-фтор-3,4-дигидрокси- фенил, 2-хлор-3,5-дигидроксифенил, 2-фтор-3,5дигидроксифенил, 4-гидрокси-3-метоксифенил, 4-гидрокси-3 -гидроксиметилфенил, 4-гидрокси3-(НС0ХН-)фенил, 4-гидрокси-3-(ЫН2С0-)фенил, 3-хлорфенил, 2,5-диметоксифенил, 4-(СН3802МН-) фенил, 4-гидрокси-3-(СН3802СН2-)фенил, 4гидрокси-3 -(СН3802ЯН-)фенил, 4-гидрокси-3(ЫН2С0МН-)фенил и 3,5-дихлор-4-аминофенил, о
  10. 10. Соединение по п.9, где представляет этилен.
  11. 11. Соединение по п.10, где Аг1 выбирают из группы, включающей 4-гидрокси-3гидроксиметилфенил, 4-гидрокси-3 -(НС0ЯН-) фенил, 3,5-дихлор-4-аминофенил и о
  12. 12. Соединение по п.11, где Аг3 представляет фенил или 4-гидрокси-3-гидроксиметилфенил.
  13. 13. Соединение по п.9 общей формулы где стереохимия у *С и **С представляет (К8) и (К8); (К8) и (К); (К8) и (8); (К) и (8); (К) и (К), и его фармацевтически приемлемые соли.
  14. 14. Соединение по п.13, где стереохимия у *С и **С представляет (К) и (К).
  15. 15. Фармацевтическая композиция, включающая фармацевтически приемлемый носитель и терапевтически эффективное количество соединения по любому из пп.1-14.
  16. 16. Способ лечения заболевания или состояния у млекопитающего, связанного с активностью β2 рецептора, включающий введение млекопитающему терапевтически эффективного количества фармацевтической композиции по п.15.
  17. 17. Способ по п.16, где заболевание или состояние является астмой или хроническим застойным легочным заболеванием.
  18. 18. Применение соединения по любому из пп.1-14 для производства лекарственного средства для лечения заболевания или состояния, связанного с активностью β2 рецептора у млекопитающих.
  19. 19. Применение по п.18, где заболевание или состояние является астмой или хроническим застойным легочным заболеванием.
EA200100014A 1998-06-08 1999-06-07 АГОНИСТЫ β2-АДРЕНЕРГИЧЕСКОГО РЕЦЕПТОРА EA003453B1 (ru)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US8846698P 1998-06-08 1998-06-08
US9293898P 1998-07-15 1998-07-15
PCT/US1999/011804 WO1999064035A1 (en) 1998-06-08 1999-06-07 β2-ADRENERGIC RECEPTOR AGONISTS

Publications (2)

Publication Number Publication Date
EA200100014A1 EA200100014A1 (ru) 2001-06-25
EA003453B1 true EA003453B1 (ru) 2003-06-26

Family

ID=22272856

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA200100014A EA003453B1 (ru) 1998-06-08 1999-06-07 АГОНИСТЫ β2-АДРЕНЕРГИЧЕСКОГО РЕЦЕПТОРА

Country Status (2)

Country Link
AU (1) AU750366B2 (ru)
EA (1) EA003453B1 (ru)

Also Published As

Publication number Publication date
EA200100014A1 (ru) 2001-06-25
AU750366B2 (en) 2002-07-18
AU4818199A (en) 1999-12-30

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US6541669B1 (en) β2-adrenergic receptor agonists
US6683115B2 (en) β2-adrenergic receptor agonists
JP4703081B2 (ja) βアドレナリン作用性レセプターアゴニスト
AU781466B2 (en) Beta2-adrenergic receptor agonists
US7211695B2 (en) β2-adrenergic receptor agonists
US6593497B1 (en) β2-adrenergic receptor agonists
EA003453B1 (ru) АГОНИСТЫ β2-АДРЕНЕРГИЧЕСКОГО РЕЦЕПТОРА
CZ20003651A3 (cs) Vícevazná sloučenina vážící beta2-adrenergní receptory, bivalentní vícevazná sloučenina, farmaceutický prostředek, způsob léčení, způsob identifikace multimerních ligandů a knihovna multimerních ligandů
MXPA00009351A (en) &amp;bgr;2-ADRENERGIC RECEPTOR AGONISTS
ZA200004565B (en) β2-Adrenergic receptor agonists.

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): AM AZ BY KG MD TJ TM

MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): KZ RU