DK142285B - Analogifremgangsmåde til fremstilling af 2-hydroxymethylthiazol-5-carboxylsyrederivater. - Google Patents

Description

(11) FREMLÆGGELSESSKRIFT 142285 DANMARK ten im.a.3 • (21) Ansøgning nr. 4702/75 (22) Indleveret den 20 · Okt · 1975 (24) Løbedag 20 · okt . 1 97 5 (44) Ansøgningen fremlagt og ftomlseggeieesskriftet offentliggjort den D « okt. 19®0

Dl REKTORATET FOR

PATENT-OG VAREMÆRKEVÆSENET t30) Wontet begswet fra den

29. okt. 1974, 7456080, PR

(71) ROUSSEL-UCLAF S.A., 55, Boulevard des Invalides, 75007 Parle, PR.

(72) Opfinder: Andre Poittevin, 11, Allee dee Tilleuls, Pare de 1’Aulnay, 77560 Vairee-surname, PR: Michel Hardy, no. 5 Domaine du Chateau Gall= lard, 947ΟΟ Maieone-Alfort, PR.

(74) Fuldmægtig under sagens behandling:

Patentagentfirmaet Magnus Jensens Eftf.

(54) Analogifremgangs måde ''til fremstilling af 2-hydroxymethylthiazol-5-earboxylsyrederivater.

Opfindelsen angår en analogifremgangsmåde til fremstilling af hidtil ukendte 2-hydroxymethylthiazol-5-carboxylsyrederivater med den i kravets indledning angivne almene formel I eller salte deraf.

I formel I kan udtrykket alkyl med 1-4 oarbonatomer f.eks. betegne methyl, ethyl, n-propyl, isopropyl, n-butyl, isobutyl eller tert.-butyl.

Når R betegner en phenylgruppe substitueret med et eller flere halogenatomer såsom fluor, chlor eller brom, drejer det sig fortrinsvis om en phenylgruppe substitueret med et chloratom i o-, m-eller p-stillingen.

Fremgangsmåden ifølge opfindelsen er ejendommelig ved det i kravets kendetegnende del anførte.

2 142285

Under de foretrukne betingelser for iværksættelse af fremgangsmåden ifølge opfindelsen udføres den ovenfor beskrevne fremstil-lingmåde på følgende måde: a) Omsætningen af forbindelsen med formlen II med forbindelsen med formlen III udføres i et organisk opløsningsmiddel. Dette organiske opløsningsmiddel er f.eks.: dichlorethan, benzen, toluen, dioxan, cyclohexan, tetrahydrofuran eller ethylether.

•z b) Hydrolysen af forbindelsen med formlen IT, hvor Ir betegner en alkylgruppe med 1-4 earbonatomer, en phenylgruppe eller en phenylgruppe substitueret med et eller flere halogenatomer, udføres ved hjælp af en stærk alkalisk base. Hydrolysen udføres i nærværelse af et organisk opløsningsmiddel og ved opløsningsmidlets tilbagesvalingstemperatur. Det benyttede organiske opløsningsmiddel er f.eks.: methanol, ethanol, propanol, isopropanol, butanol, benzen, toluen eller cyclohexan.

c) Under fremstillingen af en forbindelse med formlen V, hvor Ir betegner et hydrogenatom, udføres hydrolysen af forbindelsen med 3 formlen IV, hvor Er betegner en alkylcarbonylgruppe med 2-5 carbon-atomer eller en benzoylgruppe, ved hjælp af en stærk alkalisk base i varmen.

d) Under fremstillingen af en forbindelse med formlen V, hvor 5 R betegner en alkylgruppe med 1-4 earbonatomer, udføres hydrolysen * 3 af forbindelsen med formlen IV, hvor R betegner en alkylcarbonylgruppe med 2-5 earbonatomer eller en benzoylgruppe, ved hjælp af en stærk alkalisk base ved stuetemperatur. Hydrolysen udføres i nærværelse af et organisk opløsningsmiddel som f.eks.: methanol, ethanol, propanol, isopropanol, butanol, benzen, toluen eller cyclohexan.

Forbindelserne med formlen I som defineret ovenfor og alkalimetal-, jordalkalimetal- og aluminiumsaltene af forbindelserne med formlen I, hvor R’ betegner et hydrogenatom, har interessante farmakologiske egenskaber. De har en kraftig hypolipemisk virkning samt en tydelig vasodilatatorisk virkning. Visse har ligeledes en hypocfcolesterolemisk virkning.

Disse egenskaber retfærdiggør anvendelsen som medikamenter . i terapien af forbindelserne med formlen I som defineret ovenfor og alkalimetal-, jordalkalimetal- og aluminiumsaltene af disse forbindelser med formlen I, hvor R’ betegner et hydrogenatom, når disse salte er terapeutisk acceptable.

3 142285

Disse forbindelser kan anvendee som lægemidler, som er meget nyttige i den humane og veterinære terapi, især til behandlingen af akut eller kronisk hyperlipemi, coronarinsuffioiens, hjerteinsufficiens af atheromatøs oprindelse, kroniske anginøse tilstande og hyper-cholesterolemi.

Den sædvanlige dosis, som afhænger af den benyttede forbindelse, det behandlede individ og den pågældende lidelse, kan f.eks. være 0,1-2,5 g pr. dag hos voksne ad oral vej.

Forbindelserne med formlen I som defineret ovenfor og de farmaceutisk acceptable alkalimetal-, jordalkalimetal- og aluminiumsalte af forbindelserne med formlen I, hvor R' betegner et hydrogen-atom, kan benyttes til fremstilling af farmaceutiske produkter, der som aktiv bestanddel indeholder i det mindste en af nævnte forbindelser eller et af de nævnte salte.

Disse produkter kan fremstilles, så at de kan administreres ad fordøjelsesvejen eller parenteralt. De kan være faste eller flydende og foreligge i de i den humane og veterinære medicin gængs benyttede farmaceutiske former.

Nedenstående eksempler illustrerer nærmere fremgangsmåden ifølge opfindelsen.

Forbindelserne med formlen II samt fremgangsmåden til deres fremstilling er for størstedelen beskrevet. De, som ikke er kendte, kan fremstilles efter fremgangsmåderne ifølge: - Beilstein, 4. supplement, bd, 9, side 856, - J. Org. Chem. 1£, 694-9 (1950) og - Helvetica Chimica Acta j>l, 652 (1948).

Eksempel 1.

2-benzoyloxymeth.ylthiazol-5-oarbox,vlsyreethylester.

Man blander 9,14 g 2-benzoyloxythioacetamid og 9 g oc-for-mylchloreddikesyreethylester i 100 ml dichlorethan og opvarmer til tilbagesvaling i 4 timer. Man tilsætter 4,5 g β-fonnylehlor-eddikesyreethylester og holder på tilbagesvalingstemperatur i 2 timer. Man afkøler, vasker med en vandig natrluncarbonatopløsning og derefter med vand, tørrer, afdamper opløsningsmidlet og får U g råprodukt. Man renser ved chronatografi på silicagel under eiuering med en blanding af benzen og eibylacetat og får 12,5 g ,?-benzoyloxymetfcylthiazol-5~carboxylsyreethyleeter i form af en olie.

4 142285

Eksempel, 2.

2-hydrox.vmeth?lthiazol-5 -carboxylsyre.

Man blander 13,5 g 2-benzoyloxymetbyltbiazol-5-carboxyl- syreethy lester fremstillet som angivet i eksempel 1 med 135 ml vand og 8 ml kaliumhydroxidopløsning, lian omrører og opvarmer til 95°C i 1 time, afkøler og ekstraherer med ether. Den vandige fase syr-nes, mættes med natriumchloyid og ekstrahere? med ethylacetat. lian vasker den organiske fase med vand, tørrer, afdamper opløsningsmidlet og får 11,5 g råprodukt, som man renser ved chromatografi på silicagel under eluering ired en blanding af methylenchlorid og ethanol i forholdet 8:2 tilsat 2y& eddikesyre. Der fås 6 g krystallinsk 2-hydroxymethylthiazol-5-carboxylsyre i krystallinsk tilstand, som man omkrystalliserer af en blanding af methanol og ethylacetat i forholdet 1:3. Der fås 5,Q4 g 2-hydroxyæethyltbiazol-5-carboxylsyre med smp. 193°C.

Analyse: beregnet: Cfi 37,73 H# 3,16 rø 8,80 20,14 fundet: 37,8 3,3 8,8 20,3

Eksempel 3 - 2-(p-chlorphenoxymethyl)-thiazol-5-carboxylsyre.

Trin A: 2-(p-chlorphenoxymethyl)-thiazol-5-carboxylsyreethylester.

Man blander 10,4 g p-chlorphenoxythioacetamid og 7,65 g α-formylchloreddikesyreethylester i 104 ml dichlorethan og opvarmer til tilbagesvaling i 2 timer 30 minutter. Man tilsætter 3,18 g β-formylchloreddikesyreethylester og holder under tiIbagesvaling i 4 timer. Man afkøler, vasker med en vandig natriumcarbonatopløsning og derefter med vand, tørrer og får 15,5 g råprodukt. Man renser ved chromatografi på silicagel under eluering med en blanding af benzen og ethylacetat og får 10,9 g 2-(p-ehlcrphenoxymethyl)-thiazol-5-carboxylsyreethylester med smp. 70°C.

Trin E: 2-(p-chlorpheroxymethyl)-thiazol-5-carboxylsyre.

Man blander 10,9 g 2-(p-chlorphenoxymethyl)-thiazol-5--carboxylsyreethylester med 165 ml methanol, 10 ml kaliumhydroxid os· 20 ml vand. Man opvarmer til tilbagesvaling i 30 minutter, afkøler og ekstraherer med etbylace-at. Den vandige fase syrnes. 2-(p-chlQrphenoxymethyl)-thiazcl-5^ca^boxylsyre ekstraheres med 5 142285 ethylacetat og derefter med en blanding af chloroform og methanol« Ekstrakterne forenes, tørres og Inddampes til tørhed, og man får 7,9 g krystallinsk rest. Efter omkrystallisation af Isopropanol får man 6,92 g 2-(p-cklorphenoxymethyl)-thiazol-5-carboxylsyre, som man renser ved ehromatografi af dens triethylaminsalt på sili-cagel under eluering med en blanding af chloroform og ethylacetat i forholdet 1:1 og derefter med en blanding af methylenchlorid, ethylacetat og eddikesyre i forholdet 90:10:1, og man får 6,7 g råprodukt. P/Ian renser ved sublimation ved 190°C under vakuum og krystallisation af isopropanol tilsat 10$ vand og -får 5,23 g 2-(p-chlorphenoxymethyl)-thiazol-5-carboxylsyre med smp. 215°C. Analyse: O^HgO^lISCl beregnet: C$ 48,98 H$ 2,98 N$ 5,19 S$ 11,88 Cl$ 13,14 fundet: 49,0 3,0 5,3 12,0 13,1

Eksempel 4.

2-methox.vmethylthiazol-5 -carboxylsyre.

Trin A: 2-methoxymethylthiazol-5-carboxylsyreethylester.

Man blander 12,61 g 2-methoxythioacetamid og 150 ml d±-chlorethan, afdestillerer 10 ml opløsningsmiddel, tilsætter 18 g a-formylchloreddikesyreethyleater, opvarmer til tilbagesvaling, tilsætter efter 3 timers forløb 5,7 g chlorformyleddikesyreethyl-ester og opvarmer i endnu 2 timer til tilbagesvaling. Man afkøler, vasker med en opløsning af natriumcarbonat og derefter med vand, tørrer og destillerer til tørhed. Der fås 27,6 g råprodukt, som man chromatograferer på silicagel undeT eluering med en blanding af benzen og ethylacetat i forholdet 8:2 og får 22,5 g 2-methoxy-methylthiazol-5~carboxylsyreethylester med smp. 30°C.

Trin B: 2-methoxymethylthiazol-5-carboxylsyre.

Man blander 21 g 2-metboxymethylthiazol-5-carboxylsyreethyl-ester, 100 ml methanol, 25 ml kaliumhydroxidopløsning og 25 ml vand, opvarnrr til tilbagesvaling i 40 minutter, afkøler, fortynder med vand og ekstraherer med methylenchlorid. Man syrner den alkalieke vandige fase med saltsyre og ekstraherer med chloroform. Man tørrer der opnåede ekstrakt, inddamper til tørhed og får 18 g krystaller, som man opløser i en blanding af 50 ml methylenchlorid og 5 ml triethylamin. Opløsningen chromatograferes på silicagel. Man eluerer successivt med methylenchlorid og derefter med en blanding af benzen og ethylacetat i forholdet 1:1 tilsat 3$ eddikesyre. Man kry- 6 142285

stalliserer produktet af ether og derefter af isopropylether og får 14,08 g 2-methoxymethylthiazol-5-carboxylsyre aed smp. 131°C. Analyse: GgHyO^HS

beregnet: C$ 41,61 H$ 4,07 N$ 8,08 S$ 18,51 fundet: 41,8 4,1 7,9 18,3

Farmakologisk undersøgelse af 2-h.ydroxymethylthiazol-5-oarboxyl-syre.

1) Bestemmelse af akut toksicitet.

Den akutte toksicitet bestemmes på et hold på 10 mus på 18-22 g, Forbindelsen indgives i suspension i carboxymethylcellulose ad intraperitoneal vej.

Dyrene holdes under observation 1 uge. Den dødelige dosis 50, DI^q, findes, at være ca. 350 mg/kg.

2) Bestemmelse af hypolipemisk virkning.

Bestemmelse af frie fede syrer i plasma.

Hanrotter af stammen Sprague Dawley S.P.F. på 180-200 g, som har været fastende i 24 timer, modtager produktet ad oral vej.

1 time efter indgiften aflives dyrene ved overskæring af carotis, og på de udtagne blodprøver bestemmer man de frie fede syrer.

Ekstraktionen af de frie fede syrer foretages ifølge W.P.

Dole (J. Clin. Invest. 38, 1544-1554, (l959))som modificeret af D,L, Trout, E.H. Estes jr. og S.J. Friedberg (J. lipid. Res, I960, 1, 199-202).

Den for phospholipider befriede plasmaekstrakt analyseres kolorimetrisk ifølge A. Anthonis (J. Idpid. Res. 1965, j5, 307-312).

Uhder forsøgsbetingelserne er den dosis af 2-hydroxymethyl-thiazol-5-carboxylsyre, som reducerer værdien for frie fede syrer hos de behandlede dyr i forhold til kontroldyrene, med 50$, DA^-q, på 1,5 mg/kg.

3) Perifer vasodilatatorisk virkning.

Den perifere vasodilatatoriske virkning bestemmes på albino-marsvin. Den viser sig ved fremkomsten efter en vis latenstid af en rødme ved ørerne*

Produktet indgives ad oral vej på de fastende dyr.

Man bestemmer tiden for fremkomsten af rødme på ørerne, varigheden deraf samt intensiteten. Intensiteten noteres efter en subjektiv skala fra 1 til 3.

142285 7

Man får følgende resultater 1 2-hydroxymethyl- Doels Latenstid Varighed Intensitet thiazol-5-carboxylsyre 20 mg/kg 29 min. 40 min. '2,4

Den vasodilatatoriske virkning viser sig ved doser, som er langt større end ved den hypolipemiske virkning, og den optræder først efter en ret betydelig latenstid.

Yderligere farmakologiske undersøgelser.

Man bestemmer den akutte toksicitet af andre ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen fremstillede forbindelser ved samme metode som ovenfor, og man får følgende resultater:

Produkter _DI^q__ 2-(p-chlorphenoxymethyl)-thiazol-5-carboxylsyre 400 ng/kg 2-methoxymethylthiazol-5-carboxylsyre 300 mgAg

Efter den ovenfor beskrevne fremgangsmåde bestemmer man den hypolipemiske virkning af ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen fremstillede forbindelser, og man får følgende resultat*

Produkter DAcr, ____ _22_ 2-methoxymethylthiazol-5-carboxylsyre oa. 50 mgAg

Sammenligningsforsøg.

Der er udført sammenligningsforsøg mellem en forbindelse fremstillet ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen (eksempel 2) og en forbindelse, som er beskrevet i tysk offentliggørelsee-skrift nr. 1.936.695, og som har formlen N-- hvilken forbindelse skal betegnes "forbindelse A".

8 142285

Som nedenstående resultater viser, har forbindelsen ifølge eksempel 2 en større hypolipemisk virkning end forbindelse A;

Bestemmelse af frie fede syrer i plasma.

Hanrotter af stammen Sprague Barley S.P.F. på 180-200 g, som har været fastende i 24 timer, modtager den undersøgte forbindelse ad oral vej. 1 time efter indgiften aflives dyrene ved carotissnit, og på de udtagne blodprøver bestemmer man frie fede syrer.

Ekstraktionen af de frie fede syrer foretages ifølge V.P. Dole (J. Clin. Invest. 58. 1544-1554» 1959)» modificeret af D.L. Trout, Η.Ξ. Estes jun. og S.J. Friedberg (J. Lipid. Res.

1960, 1, 199-202).

Den for phospholipider befriede plasmaekstrakt analyseres kolorimetrisk ved metoden ifølge A. Anthonis (J, Idpid. Res. 1965» 6, 307-512).

Forbindelse DA^Q mg/kg, oralt

Forbindelse ifølge eksempel 2 1,5 forbindelse A 4 1

Claims (1)

1. 9 1Λ2285 P a t e n t k r a v. Analogifremgangsmåde til fremstilling af 2-hydroxymethyl-thiazol-5-carboxylsyrederivater med formlen I N-ch o R-O-ChJ. X-c-OR’ 2 \s/ Cl) hvor R betegner et hydrogenatom, en alkylgruppe med 1-4 carbonato-mer, en alkylcarbonylgruppe med 2-5 carbonatomer, en benzoylgrappe, en phenylgruppe eller en phenylgruppe substitueret med et eller flere halogenatomer, og R* betegner et hydrogenatom eller en alkylgruppe med 1-4 carbonatomer, eller alkalimetal-, 3°rdalkalimetal- og ålu-miniumsalte af forbindelserne med formlen I, hvor R’ betegner et hydrogenatom, kendetegnet ved, at man omsætter en forbindelse med formlen II R^-O-CH^-ra, (II) s hvor R' betegner en alkylgruppe med 1-4 carbonatomer, en alkylcarbonylgruppe med 2-5 carbonatomer, en benzoylgruppe, en phenylgruppe eller en phenylgruppe substitueret med et eller flere halogenatomer, med en forbindelse med formlen III Hal-CH-C00R4 CHO A hvor Hal betegner et halogenatom, og R betegner en alkylgruppe med 1-4 carbonatomer, til opnåelse af en forbindelse med formlen IV r5-o-gh2-g I (iv) -C-COOR4- som svarer til en forbindelse med formlen I, hvor R betegner R^, og R' 4 betegner R , hvilken forbindelse med formlen TV man om ønsket - enten, når R^ betegner en alkylgruppe med 1-4 carbonatomer, en phenylgruppe eller en phenylgruppe substitueret med et eller flere halogenatomer, hydrolyserer til opnåelse af en forbindelse med formlen I, hvor R betegner en alkylgruppe med 1-4 carbonatomer, en