DE4421159C1 - Use of ferric oxide for treating immune deficiency - Google Patents
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Abstract
Description
Die Erfindung betrifft die Verwendung von Eisen(III)-oxid bei Immunschwäche, insbesondere Aquired Immune Deficiency Syndrome (AIDS) bzw. gegen durch das Human Immunodefi ciency Virus (HIV) hervorgerufene Immunschwäche.The invention relates to the use of Iron (III) oxide for immunodeficiency, especially aquired Immune Deficiency Syndrome (AIDS) or against by the Human Immunodefi ciency virus (HIV) caused immune deficiency.
Bekannt ist das Medikament Zidovodin (3′-Azido-3′-desoxi thymidin), das jedoch nur vorübergehend eine Verzögerung des Krankheitsverlaufes herbeizuführen vermag; eine kurative Be handlung muß ausgeschlossen werden. Die Verträglichkeit die ses auch unter der Bezeichnung AZT bekannte Präparat kann nicht bei jedem Patienten vorausgesetzt werden.The drug zidovodine (3'-azido-3'-deoxi thymidine), which, however, is only a temporary delay in Can bring about the course of the disease; a curative Be action must be excluded. The tolerance the This product can also be known as AZT not be required for every patient.
In der EP 0307914 kommen eine Vielzahl unterschiedlicher Kom ponenten in verschiedenen Zusammenstellungen zur Herstellung von Tabletten zur Anwendung, wobei nicht erkennbar ist, wel che Komponente auch nur näherungsweise die Wiedereinsetzung der körpereigenen Regelmechanismen für die Herbeiführung ei ner umfassenden Zellresistenz gegen das Virus bzw. den Bazil lus bewirkt. Ebensowenig kann diese Forderung durch die Ap plikation von eisengebundenen Eiweißstoffen wie Lactoferrin, Transferrin und Ovatransferrin erfüllt werden, wie sie in der EP 584558 beschrieben ist. Die Verwendung von dotiertem oder modifiziertem Eisenoxid für therapeutische Zwecke (EP 0516252), z. B. in der Chemotherapie, bewirkt allenfalls eine Belastung, insbesondere bei pathophysiologisch-bedenklichen Zuständen eines Patienten.EP 0307914 contains a large number of different com components in various combinations for production of tablets for use, it is not clear which wel che component only approximately the reinstatement the body's regulatory mechanisms for induction comprehensive cell resistance to the virus or the bazil lus causes. Nor can Ap application of iron-bound proteins such as lactoferrin, Transferrin and ovate transferrin are met as they are in the EP 584558 is described. The use of doped or modified iron oxide for therapeutic purposes (EP 0516252), e.g. B. in chemotherapy, causes at most one Stress, especially in the case of pathophysiologically questionable Conditions of a patient.
Die Aufgabe der Erfindung besteht in der Bereitstellung eines bevorzugt oral verabreichbaren, nichttoxischen Arzneimittels mit antiviraler Wirkung, das nach Feststellung einer zellulä ren Immunschwäche an Mensch und Tier bedenkenlos verabreicht werden kann und die Dosierung kein Kriterium darstellt.The object of the invention is to provide a preferably orally administrable, nontoxic drug with an antiviral effect, which after detection of a cellular ren immune deficiency administered to humans and animals without hesitation can and the dosage is not a criterion.
Darüber hinaus soll dieses uneingeschränkt verträgliche und nebenwirkungsfreie Arzneimittel als eine Prophylaxe gegen die meisten Erkrankungen durch Viren Verwendung finden können. In addition, this should be fully compatible and drug without side effects as a prophylaxis against the most diseases caused by viruses can be used.
Ein sich rasch entwickelndes Produkt aus einer Eisenverbin dung als Folge einer Resorption von oral appliziertem Eisen- (III)-oxid, z. B. Hämoglobin, führt zur Anreicherung der mole kularen Zellstruktur im Organismus, ohne daß bei Einnahme dieses Wirk-/Grundstoffes belastende Verbindungen mit der Magensäure befürchtet werden müssen. Aufgrund dieses Verhal tens wegen Unlöslichkeit von Eisen(III)-oxid gegenüber Säuren steht das Verabreichen dieser Verbindung nicht im Widerspruch zur Physis.A rapidly developing product from an iron compound as a result of absorption of orally administered iron (III) oxide, e.g. B. hemoglobin, leads to the accumulation of moles cellular cell structure in the organism without taking of this active substance / base substance with the Gastric acidity must be feared. Because of this behavior least because of the insolubility of iron (III) oxide against acids there is no contradiction in administering this compound to the physique.
Diese Aufgabe wird gelöst durch die anmeldungsgemäße Verwendung des in Lebensmitteln als Farbstoff zugelassenen Eisen(III)-oxids als Wirkstoff.This task is solved by the registration Use of the in Iron (III) oxide approved as a food coloring Active ingredient.
Gefunden wurde die antivirale Wirkung des in fester Form vor liegende Eisen(III)-oxid gegen die AIDS-Erreger HIV-1 und HIV-2. Dieses wird durch nachstehende Untersuchungsergebnisse veranschaulicht.The antiviral effect of the was found in solid form lying iron (III) oxide against the AIDS pathogen HIV-1 and HIV-2. This is confirmed by the following test results illustrated.
Da Phytohämagglutinin-aktivierte Lymphozyten aus dem Nabel schnurblut von Neugeborenen besser HIV-infizierbar sind als solche aus dem peripherem Blut von erwachsenen Spendern akti vierte Lymphozyten (PBL), bietet sich dem Untersuchenden ein empfindlicheres System. Zur Untersuchung wurden daher neben dem PBL Nabelschnurzellen Neugeborener eingesetzt.Because phytohemagglutinin-activated lymphocytes from the navel cord blood from newborns is more susceptible to HIV infection than those from the peripheral blood of adult donors acti fourth lymphocyte (PBL), offers itself to the examiner more sensitive system. For the investigation, therefore, were the PBL umbilical cord cells used in newborns.
Das Eisen(III)-oxid wurde durch Erhitzen im Autoklaven (134°C, 60 Min.) sterilisiert und nach dem Abkühlen in Kul turmedium suspendiert. Aliquots dieser Suspension wurden mit Phytohämagglutinin-aktivierten Lymphozyten aus peripherem Blut bzw. aus Nabelschnurblut versetzt (Endkonzentration 500.000 Zellen pro ml) und 24 h im Brutschrank bei 37°C/6% CO₂ vorinkubiert. Im Anschluß wurden die Kulturen mit den verschiedenen in Tabelle 1 angegebenen HIV-1- und HIV-2-Iso laten infiziert. The ferric oxide was obtained by heating in an autoclave (134 ° C, 60 min.) Sterilized and after cooling in cool turmedium suspended. Aliquots of this suspension were made with Phytohemagglutinin-activated peripheral lymphocytes Blood or from umbilical cord blood added (final concentration 500,000 cells per ml) and 24 h in the incubator at 37 ° C / 6% Pre-incubated CO₂. Subsequently, the cultures with the various HIV-1 and HIV-2 iso shown in Table 1 latent infected.
Positive Kontrollen: Versuchsdurchführung ohne Eisen(III)- oxid mit aktivierten Nabelschnurlymphozyten bzw. PBL, die mit den verschiedenen HIV-1- und HIV-2-Isolaten infiziert wurden.Positive controls: experiment without iron (III) - oxide with activated umbilical cord lymphocytes or PBL, which with the various HIV-1 and HIV-2 isolates were infected.
Negative Kontrollen: Versuchsdurchführung mit nichtinfizier ten Zellen bzw. deren Kulturüberständen.Negative controls: experimentation with non-infected cells or their culture supernatants.
Die Beurteilung der Kulturen erfolgte täglich im Lichtmikro skop (Untersuchung auf Entstehung eines cytopathischen Ef fekts (CPE) sowie durch Messung des Retrovirus-spezifischen Enzyms Reverse Transkriptase (RT).The cultures were assessed daily in the light micro skop (examination for the development of a cytopathic ef effect (CPE) and by measuring the retrovirus-specific Enzyme reverse transcriptase (RT).
In Tabelle 2 ist die lichtmikroskopische Beurteilung der Kul
turen aus drei parallel durchgeführten Versuchen mit PBL und
einem Versuch mit Nabelschnurlymphozyten zusammengefaßt.
Es bedeuten:
- kein sichtbarer cytopatischer Effekt
+ sichtbarer cytopatischer EffektTable 2 summarizes the light microscopic assessment of the cultures from three parallel tests with PBL and one test with umbilical cord lymphocytes.
It means:
- no visible cytopathic effect
+ visible cytopathic effect
In der Tabelle 2 konnte bei allen der untersuchten Eisen- (III)-oxidkonzentrationen die Bildung von Syncitien verhin dert werden. Damit konnte eine antivirale Wirkung von Eisen- (III)-oxid auf HIV-1 und HIV-2 eindeutig nachgewiesen werden. Dieses Ergebnis wurde sowohl mit aktivierten PBL als auch mit aktivierten Nabelschnurblut-Lymphozyten herbeigeführt.In Table 2, all of the iron (III) oxide concentrations prevent the formation of syncitia be changed. An antiviral effect of iron (III) oxide on HIV-1 and HIV-2 can be clearly demonstrated. This result was achieved with both PBL and activated umbilical cord blood lymphocytes.
Acht Tage nach Infektion der aktivierten Zellen wurden von allen Kulturen je 1 ml zellfreier Überstand entnommen. Das Virus wurde in einer Ultrazentrifuge pelletiert und anschlie ßend einem Test auf das Retrovirus-spezifische Enzym Reverse Transkriptase (RT) unterzogen. Die Enzymaktivität ist ein grobes Maß für die Virusmenge im Überstand der Zellen, jedoch nicht identisch mit der Menge infektiöser Viruspartikel. Be stimmt wird sie über den Einbau von radioaktivem Thymidin in die DNS. Die Ergebnisse dieses Versuches werden daher in cpm/ml Kulturüberstand pro 90 Minuten angegeben.Eight days after infection, the activated cells were from 1 ml of cell-free supernatant was removed from each culture. The Virus was pelleted in an ultracentrifuge and then a test for the retrovirus-specific enzyme reverse Transcriptase (RT) subjected. The enzyme activity is a rough measure of the amount of virus in the supernatant of the cells, however not identical to the amount of infectious virus particles. Be it is true about the incorporation of radioactive thymidine in the DNS. The results of this experiment are therefore in cpm / ml culture supernatant per 90 minutes.
Aus der Tabelle 3 wird ersichtlich, daß im Kulturüberstand bei allen Verdünnungsstufen der Testsubstanz das Retrovirus spezifische Enzym Reverse Transkriptase (RT) praktisch nicht mehr nachgewiesen werden konnte. Die Enzymaktivitäten liegen erheblich unter dem Wert der Positivkontrolle.From Table 3 it can be seen that in the culture supernatant the retrovirus at all dilution levels of the test substance specific enzyme reverse transcriptase (RT) practically not could be demonstrated more. The enzyme activities lie significantly below the value of the positive control.
Eine Übereinstimmung dieses Ergebnisses mit dem einer licht mikroskopischen Untersuchung auf das Nichtauftreten cytopati scher Effekte wurde deutlich.A match of this result with that of a light microscopic examination for the non-appearance cytopati effects became clear.
Die Untersuchungsergebnisse zeigten zweifelsfrei eine antivi rale Wirksamkeit des Eisen(III)-oxids gegenüber den unter schiedlichen HIV-Stämmen.The test results undoubtedly showed an antivi Efficacy of the iron (III) oxide compared to the below different strains of HIV.
Darüber hinaus konnte die Nichttoxizität im Bereich der ver wendeten Konzentrationen einwandfrei nachgewiesen werden.In addition, the non-toxicity in the area of ver the concentrations used can be detected without any problems.
Als Ausgangsmaterial zur Herstellung geeigneter Medikamente dient Eisen(III)-oxid in feinstkörniger Form und/oder dessen Hydrat.As a starting material for the production of suitable medicines serves iron (III) oxide in the finest granular form and / or its Hydrate.
Das Eisen(III)-oxid kann als solches oder in Form von unbe teiligten, nichttoxischen, festen oder flüssigen Streck- oder Trägerstoffen enthaltenen Präparate, die in fester oder flüs siger Form, z. B. als Kapseln, Dragees, Mikrokapseln, Supposi torien, Suspensionen, Emulsionen vorliegen können, zur Anwen dung kommen.The iron (III) oxide as such or in the form of unbe divided, non-toxic, solid or liquid stretching or Preparations containing excipients that are in solid or liquid siger shape, e.g. B. as capsules, dragees, microcapsules, supposi toria, suspensions, emulsions may be present for use come.
Die p.o.-anwendbaren Präparate wie Kapseln oder Dragees sind zu bevorzugen. Die Herstellung erfolgt in an sich bekannter Weise.The p.o.-applicable preparations such as capsules or coated tablets are to prefer. The production takes place in a manner known per se Wise.
Die zu verabreichende Dosis von Eisen(III)-oxid hängt weitge hend vom Anwendungsgebiet und der Art der Formulierung ab. In den folgenden, nachgereichten Beispielen beinhaltetThe dose of ferric oxide to be administered depends widely depending on the area of application and the type of formulation. In the following, subsequently submitted examples
- 1. eine vorzugsweise magenlösliche Gelatinekapsel 400 Millig ramm feinkörniges Eisen(III)-oxid mit einer Körnung von ca. 5 Mikrometer, bestimmt für die tägliche Therapie durch Oralap plikation bei Immunschwäche oder1. a preferably stomach-soluble gelatin capsule 400 milligrams ramm fine-grained iron (III) oxide with a grain size of approx. 5 Micrometer intended for daily therapy by Oralap in case of immunodeficiency or
- 2. denselben unter 1. genannten Wirkstoff mit einer Träger substanz zu Pillen verpreßt.2. the same active ingredient mentioned under 1. with a carrier substance pressed into pills.
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