DE4130689A1

DE4130689A1 - Dry immunological prepn(s). from colostral milk - contain malto:dextrin as solubiliser and have superior dissolution properties than known preparations

Info

Publication number: DE4130689A1
Application number: DE19914130689
Authority: DE
Inventors: Wolfgang Dipl Chem Dr Stephan; Wolfgang Dipl Chem Dr Moeller
Original assignee: Biotest Pharma GmbH
Current assignee: Biotest Pharma GmbH
Priority date: 1991-09-14
Filing date: 1991-09-14
Publication date: 1993-03-18
Also published as: DE4130689C2

Abstract

Maltodextrin-contg. dry immunological prepns. (A) from colostral milk are claimed. Pref. (A) are spray-dried or lyophilised prepns. contg. 1:1-10:1, esp. 2:1, by wt. maltodextrin. Further, the maltodextrin is Glucidex 19FD. In the prepn. of (A) maltodextrin is added to the immunoglobulin soln., which is then dried, or is added to the dried immunoglobulin powder. In the latter case, the addn. is pref. effected shortly before the prod. is administered. USE/ADVANTAGE - (A) are used for the treatment of diseases caused by bacteria and toxins, esp. diarrhoea associated with AIDS or rice diarrhoea, gastric and duodenal ulcers and Yersinia infections. The presence of the maltodextrin, which acts as a solubiliser, enables (A) to be dissolved readily in water, in contrast to the prepns. known from EP 85008, EP 338229, DE 2813984, DE 3432718, EP 102831 US 4051235, US 4784850 and US 4834974. E.g., (A) dissolve within 1 min. without mechanical mixing or stirring and do not form clumps or foam.

Description

Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur Beschleunigung des Auflösevorganges von Immunglobulinen aus Kolostralmilch.The invention relates to a method for accelerating the Dissolution of immunoglobulins from colostral milk.

Immunglobulin-Präparate aus Kolostralmilch immunisierter oder nicht immunisierter Säuger eignen sich besonders für die Behandlung von bakteriell- oder toxinbedingten Er krankungen, insbesondere von Diarrhö bei AIDS oder anderen immunologischen Defektzuständen, von Reisediarrhö und toxinbedingter Säuglingsdiarrhö, von Magen- und Darmulcera sowie von chronischen und akuten Yersinien-Infektionen.Immunoglobulin preparations from colostral milk immunized or non-immunized mammals are particularly suitable for the treatment of bacterial or toxin-related Er diseases, especially diarrhea in AIDS or others immunological defects, from traveler's diarrhea and toxin-related infant diarrhea, gastric and intestinal ulcers as well as chronic and acute Yersinia infections.

Es sind mehrere Verfahren zur Gewinnung solcher Immunglo bulin-Präparate für die orale Anwendung bekannt. Dabei werden sowohl chromatographische Verfahren, wie in dem Europäischen Patent EP-B1-00 85 005 beschrieben, als auch konventionelle milchtechnologische Verfahren, wie in der Europäischen Anmeldung EP-A1-03 38 229 beschrieben, ange wandt. There are several methods of obtaining such immunoglobulin bulin preparations known for oral use. Here are both chromatographic methods as in the European patent EP-B1-00 85 005 described as well conventional milk technology processes, as in the European application EP-A1-03 38 229 described turns.

Die DE-C-28 13 984, DE-C-34 32 718, EP-B1-01 02 831 sowie US-A 40 51 235, USA 47 84 850 und USA 48 34 974 beschreiben weitere Verfahren zur Herstellung von immunglobulinhaltigen Präparaten aus Kolostralmilch.DE-C-28 13 984, DE-C-34 32 718, EP-B1-01 02 831 and US-A 40 51 235, USA 47 84 850 and USA 48 34 974 describe further processes for the production of preparations from colostral milk containing immunoglobulin.

Immunglobulinhaltige Präparate aus Kolostralmilch werden üblicherweise zur Stabilisierung im letzten Verfahrens schritt gefriergetrocknet oder sprühgetrocknet. Vor ihrer therapeutischen Anwendung müssen diese getrockneten pulver förmigen Immunglobuline wieder aufgelöst werden und für die orale Anwendung in eine trinkfertige Form gebracht werden. Üblicherweise werden die Präparate dabei so gelöst, daß 5- bzw. 10%ige Proteinlösungen entstehen.Preparations from colostral milk containing immunoglobulin usually for stabilization in the last procedure freeze-dried or spray-dried step. Before her These dried powders need therapeutic use shaped immunoglobulins to be dissolved again and for that oral application can be brought into a ready-to-drink form. The preparations are usually solved so that 5- or 10% protein solutions are formed.

Da diese getrockneten Immunglobuline aus Kolostralmilch sehr schlecht löslich sind, dauert dieser Auflösevorgang sehr lange.Because these dried immunoglobulins from colostral milk are very poorly soluble, this dissolution process takes very long.

Für die schlechte Löslichkeit ist zu einem gewissen Teil die Art der Trocknung verantwortlich. So löst sich z. B. ein sprühgetrocknetes Immunglobulin-Präparat aus Kolostralmilch deutlich schlechter als ein gefriergetrocknetes Präparat. Aber selbst unter schonendsten Gefriertrocknungsbedingungen im kleinen Maßstab haben die getrockneten Immunglobuline weiterhin eine mäßige bis schlechte Löslichkeit in Wasser.For the poor solubility is to some extent the type of drying responsible. So z. B. a spray-dried immunoglobulin preparation made from colostral milk significantly worse than a freeze-dried preparation. But even under the most gentle freeze-drying conditions on a small scale have the dried immunoglobulins moderate to poor solubility in water.

Ein unter großtechnischen Bedingungen sprühgetrocknetes Immunglobulin-Präparat aus Kolostralmilch ließ sich nur in auf 50°C erwärmtem Wasser unter Zuhilfenahme eines Hand mixers in etwa 15 Minuten zu einer wenigstens halbwegs klaren Lösung auflösen.A spray-dried under industrial conditions Immunoglobulin preparation from colostral milk could only be found in water heated to 50 ° C with the help of one hand mixers in about 15 minutes to at least halfway clear solution.

Ein unter großtechnischen Bedingungen gefriergetrocknetes Immunglobulin-Präparat aus Kolostralmilch ließ sich zwar auch bei Raumtemperatur lösen, allerdings trat beim Löse vorgang eine Verklumpung ein. Auch hier war die mechanische Bearbeitung des zähen Proteinklumpens mit einer Gabel not wendig, um in 15 Minuten eine klare Lösung zu erzielen.Freeze-dried under industrial conditions Immunoglobulin preparation from colostral milk was admittedly also solve at room temperature, but occurred when loosening a clumping process. Here too was the mechanical one Machining the tough lump of protein with a fork agile to achieve a clear solution in 15 minutes.

Das gefriergetrocknete Präparat löst sich in etwa 10 Minu ten, wenn man Immunglobulin-Pulver in Wasser gibt und in einem geschlossenen Gefäß kräftig schüttelt. Allerdings entsteht bei dieser Prozedur eine große Menge Schaum. Diese Schaumbildung ist für die Struktur der Proteine schädlich. Es kommt zur Denaturierung und damit zu Verlust von Anti körperaktivität. Außerdem behindert der Schaum das Trinken der Immunglobulin-Lösung.The freeze-dried preparation dissolves in about 10 minutes if you put immunoglobulin powder in water and in shake vigorously in a closed container. Indeed this procedure creates a large amount of foam. These Foaming is harmful to the structure of the proteins. Denaturation occurs and thus loss of anti physical activity. The foam also hinders drinking the immunoglobulin solution.

Aufgrund ihrer Indikationen werden die Immunglobulin-Prä parate aus Kolostralmilch vorwiegend im Krankenhaus ange wendet werden müssen. Dem routinemäßigen Einsatz im Kranken hausbetrieb steht aber die schlechte Löslichkeit entgegen, wenn z. B. mehrere Applikationen für verschiedene Patienten gleichzeitig unter hohem personellen und mechanischen Auf wand gelöst werden sollen.Due to their indications, the immunoglobulin pr Prepared from colostral milk mainly in the hospital must be applied. Routine use in the sick but the poor solubility prevents if e.g. B. multiple applications for different patients at the same time with high personnel and mechanical stress wall to be solved.

Nicht vollständig gelöstes Immunglobulin ist im übrigen auch nicht voll aktiv in seiner Fähigkeit, Bakterien und Toxine im Magen und Darmtrakt zu neutralisieren.Incidentally, immunoglobulin is not completely dissolved also not fully active in its ability to bacteria and Neutralize toxins in the stomach and intestinal tract.

Ziel der Erfindung war es deshalb, ein verbessertes Auflösungsverfahren für Immunglobuline aus Kolostralmilch zu finden, mit dem sich unter großtechnischen Bedingungen sprüh- oder gefriergetrocknete Immunglobulin-Präparate schnell auflösen und in eine trinkfertige Zubereitung bringen lassen.The aim of the invention was therefore to provide an improved Dissolution process for immunoglobulins from colostral milk to find with yourself under large-scale conditions spray or freeze-dried immunoglobulin preparations dissolve quickly and into a ready-to-drink preparation let bring.

Überraschenderweise wurde nun gefunden, daß sich getrockne tes Immunglobulin-Pulver aus Kolostralmilch dann leicht in Wasser lösen läßt, wenn es vor dem Lösen mit Maltodextrin vermischt worden war. Surprisingly, it has now been found that dry colostral milk immunoglobulin powder Allow water to dissolve if it is before dissolving with maltodextrin had been mixed.

Die Auflösezeiten liegen unter 1 Minute, wobei man ohne Zuhilfenahme von mechanischen Misch- und Rührgeräten aus kommt.The dissolution times are less than 1 minute, one without With the help of mechanical mixing and stirring devices is coming.

Eine bevorzugte Ausführungsform besteht darin, daß man vor dem Lösen des Immunglobulin-Pulvers in Wasser das Pulver trocken im Gewichtsverhältnis 1:1 bis 10:1, vorzugsweise 2:1, mit Maltodextrin mischt und anschließend in Wasser einrührt oder das Wasser zu dem Pulvergemisch gibt. Durch einfaches Umschwenken läßt sich das Immunglobulin ohne Ver klumpen oder Schaumbildung lösen.A preferred embodiment is that one before dissolving the immunoglobulin powder in water dry in a weight ratio of 1: 1 to 10: 1, preferably 2: 1, mixed with maltodextrin and then in water stir in or add the water to the powder mixture. By the immunoglobulin can be simply swung around without Ver lump or loosen foam.

Besonders ausgeprägt war der lösungsvermittelnde Effekt bei einem Maltodextrin der Fa. Roquette, Glucidex 19FD, einer Mischung aus verwertbaren Kohlehydraten, die nach schonen der Hydrolyse durch Reinigung und Sprühtrocknung der Speise stärke erhalten wird. Glucidex 19FD wird durch enzymatische Hydrolyse erhalten und entspricht den Bestimmungen für Maltodextrine des Federal Register 21CFR April 1985, 4.1444. Bei Zusatz dieses Maltodextrins löst sich das Immunglobulin-Pulver praktisch sofort zu einer klaren Lösung.The solubilizing effect was particularly pronounced a maltodextrin from Roquette, Glucidex 19FD, one Mixture of usable carbohydrates that are gentle on hydrolysis by cleaning and spray drying the food strength is maintained. Glucidex 19FD is made by enzymatic Get hydrolysis and meets the requirements for Federal Register 21CFR Maltodextrins April 1985, 4.1444. With the addition of this maltodextrin, this resolves Immunoglobulin powder becomes clear almost immediately Solution.

Man kann das Maltodextrin der Immunglobulin-Lösung auch vor deren Trocknung zugeben und erhält dann nach dem Trocknen ein Präparat mit ausgezeichneter Löslichkeit.You can also pre-maltodextrin the immunoglobulin solution add their drying and then get after drying a preparation with excellent solubility.

example 1

Ein nach dem Europäischen Patent EP-B1-03 38 229 hergestell tes Immunglobulin-Präparat aus Kolostralmilch wurde vor der Gefriertrocknung mit Maltodextrin Glucidex 19FD (Fa. Roquette) im Gewichtsverhältnis 2 Teile Trockenmasse im Immunglobulin-Präparat zu 1 Teil Maltodextrin gemischt. Nach der Gefriertrocknung löste sich das Präparat nach Zu gabe von Wasser unverzüglich zu einer Immunglobulin-Lösung auf, die leicht auf den gewünschten Immunglobulin-Gehalt (10%) eingestellt werden konnte.A manufactured according to the European patent EP-B1-03 38 229 The immunoglobulin preparation from colostral milk was prepared before Freeze drying with maltodextrin Glucidex 19FD (Fa. Roquette) in a weight ratio of 2 parts dry matter in Immunoglobulin preparation mixed with 1 part maltodextrin. After freeze-drying, the preparation dissolved after Zu Add water to an immunoglobulin solution immediately on that easily on the desired immunoglobulin content (10%) could be set.

Ein Vergleichspräparat ohne Zusatz von Maltodextrin löste sich dagegen nach der Gefriertrocknung erst nach 15 Minuten auf, wobei ein intensives Rühren mit der Gabel notwendig war.A comparative preparation without the addition of maltodextrin solved however, after freeze-drying, it takes 15 minutes with intensive stirring with a fork was.

Example 2

10 g eines nach dem Europäischen Patent EP-B1-03 38 229 hergestellten Immunglobulin-Präparates aus Kolostralmilch wurde nach der Gefriertrocknung mit 5 g Maltodextrin Glucidex 19FD (Fa. Roquette) trocken vermischt. Anschließend wurde es mit Wasser zu einer 10%igen Immunglobulin- Lösung rekonstituiert.10 g of one according to European patent EP-B1-03 38 229 prepared immunoglobulin preparation from colostral milk after freeze-drying with 5 g of maltodextrin Glucidex 19FD (Roquette) dry mixed. Subsequently it became a 10% immunoglobulin with water Solution reconstituted.

Die Lösezeit war mit ca. 15 Sekunden deutlich besser als bei einem Vergleichspräparat ohne den Maltodextrin-Zusatz. Dort dauerte der Lösevorgang wie im Beispiel 1 ca. 15 Minu ten.The release time was significantly better than at about 15 seconds in a comparative preparation without the addition of maltodextrin. There, the dissolving process took about 15 minutes as in Example 1 ten.

Claims

1. A process for the preparation of a readily soluble getrock Neten immunoglobulin preparation from colostrum, characterized in that the preparation is added maltodextrin as a solubilizer.

2. The method according to claim 1, characterized in that this solubilizer maltodextrin Glucidex 19FD the Roquette is.

3. The method according to claim 1 or 2, characterized net that the mixing ratio of dried immune globulin to solubilizer 1: 1 to 10: 1, preferably 2: 1.

4. The method according to any one of claims 1 to 3, characterized ge indicates that the maltodextrin before drying the Immunoglobulin solution is added.

5. The method according to claim 4, characterized in that the immunoglobulin solution is spray dried.

6. The method according to claim 4, characterized in that the immunoglobulin solution is freeze-dried.

7. The method according to any one of claims 1 to 3, characterized characterized in that the maltodextrin in dry State is added to the immunoglobulin powder.

8. The method according to claim 7, characterized in that the immunoglobulin powder and the solubilizer Malto dextrin should only be mixed shortly before dissolving.

9. Dried immunoglobulin preparation from colostral milk, characterized in that it contains maltodextrin.

10. A preparation according to claim 9, produced according to one of the Claims 1 to 8.