DE3743129C2

DE3743129C2 - Use of a growth hormone release factor to increase the concentration of endogenous growth hormone in mammals

Info

Publication number: DE3743129C2
Application number: DE3743129A
Authority: DE
Inventors: Rodney Kenneth Mcguffey; Jack Fredrick Wagner
Original assignee: Eli Lilly and Co
Current assignee: Eli Lilly and Co
Priority date: 1986-12-22
Filing date: 1987-12-18
Publication date: 1997-05-07
Anticipated expiration: 2007-12-19
Also published as: HK35793A; GB2198643A; IT1223542B; DE3743129A1; NZ222982A; GB2198643B; AU8270087A; BE1000626A3; AU601532B2; FR2608430B1; JPS63166833A; IT8723101A0; GB8729492D0; ZA879528B; CA1317222C; JP2532117B2; FR2608430A1

Description

Die Erfindung bezieht sich auf die Erhöhung der Konzentration an endogenem Wachstumshormon im Blut von Nutzsäugern.The invention relates to the increase the concentration of endogenous growth hormone in the blood of useful mammals.

Ein wichtiger Teil der gegenwärtigen Explosion der Erforschung der Chemie der Peptide und des Einflusses von Proteinhormonen auf alle Lebensformen ist die Erforschung der Wachstumshormone. Das Studium der Bildung von Wachstumshormonen bei verschie denen Tieren hat ergeben, daß ein verhältnismäßig kleines Peptid, das als Faktor bekannt ist, welcher ein Wachstums hormon-Freisetzungsfaktor ist, eine größere Rolle bei der Bildung und Ausscheidung von Wachstumshormonen bei allen untersuchten Tierarten spielt. Interessanterweise ist der endogene Wachstumshormon-Freisetzungsfaktor (GRF) bei allen Tierarten, deren GRF sequenziert wurde, ein sehr ähnliches Peptid. Es stellt bei allen bekannten Arten ein Peptid aus 43 oder 44 Aminosäuren dar, wobei die endständige Säuregruppe dieses Peptids mit Ausnahme der Ratte bei allen bekannten Tierarten amidiert ist. Die Aminosäuresequenz bei den ver schiedenen endogenen Wachstumshormon-Freisetzungsfaktoren ist ziemlich ähnlich, wobei der GRF vom Rind sogar identisch ist mit dem GRF der Ziege.An important part of the current exploration explosion the chemistry of peptides and the influence of protein hormones on all life forms is the research of growth hormones. The study of growth hormone formation at various which animals has shown to be a relatively small Peptide known to be a factor in growth hormone release factor is playing a bigger role in that Formation and excretion of growth hormones in all examined animal species plays. Interestingly, the endogenous growth hormone release factor (GRF) in all A very similar animal species whose GRF was sequenced Peptide. It issues a peptide in all known species 43 or 44 amino acids, the terminal acid group this peptide with the exception of the rat in all known Animal species is amidated. The amino acid sequence in the ver different endogenous growth hormone release factors is quite similar, with the beef GRF even identical is with the goat's GRF.

In dieser Beschreibung werden die folgenden Begriffe verwendet. Der Begriff Wachstumshormon-Freisetzungsfaktor (GRF) bezieht sich auf irgendein Peptid, das bei einem Nutztier eine Erhö hung der Bildung und Freisetzung an Wachstumshormon ergibt. Der Begriff endogener GRF bezieht sich auf den durch ein Tier natürlich gebildeten GRF. Zur Kennzeichnung von auf synthe tischem oder rekombinantem Weg erzeugtem GRF wird ein Vor zeichen verwendet, welches die Art angibt, deren GRF dupli ziert wurde, so daß beispielsweise das Vorzeichen h für human steht und das Vorzeichen b für bovine (Rind) steht. Liegt ein GRF in Säureform vor, dann ist dies ebenfalls angegeben. The following terms are used in this description. The term growth hormone release factor (GRF) refers to any peptide that raises a farm animal growth and release of growth hormone. The term endogenous GRF refers to that used by an animal naturally educated GRF. To mark on synthe GRF generated table or recombinant way becomes a pre character used, which indicates the type whose GRF dupli was adorned, so that for example the sign h for human stands and the sign b stands for bovine (beef). Lies a GRF in acid form, then this is also given.

Ansonsten ist diese Säureform amidiert. Der Begriff Analoges bezieht sich auf Peptide, die die Funktion eines GRF haben, jedoch weniger Aminosäuren aufweisen als der endogene GRF oder über eine andere Sequenz verfügen. Ein synthetischer GRF, der weniger Aminosäuren als der endogene GRF enthält, wird durch eine Nummer gekennzeichnet. Die Abkürzung hGRF29 bedeutet bei spielsweise einen GRF, der aus den ersten 29 Aminosäuren von humanem endogenem GRF aufgebaut ist.Otherwise this acid form is amidated. The term analog refers to peptides that function as a GRF, but have fewer amino acids than the endogenous GRF or have a different sequence. A synthetic GRF that contains less amino acids than the endogenous GRF marked a number. The abbreviation hGRF29 means at for example a GRF consisting of the first 29 amino acids of human endogenous GRF.

Man weiß bereits ziemlich Bescheid über die sich durch Erhö hung der Konzentration an Wachstumshormon bei Nutztieren er gebenden Vorteile. Der bedeutendste Vorteil dieser Art ist die Erhöhung der Milchproduktion einer milchgebenden Kuh durch Erhöhung des Wachstumshormons. In der Literatur wird auch bereits über eine verbesserte Wachstumsgeschwindigkeit und Futtereffizienz von Schweinen und Schafen durch Erhöhung der Konzentration an Wachstumshormon berichtet. Über die gleichen günstigen Einflüsse bei Rindern wurde bisher allerdings nichts berichtet, doch ist hierbei zu bedenken, daß es sich beim Wachstumshormon und beim GRF um noch immer sehr begrenzt ver fügbare und teure Substanzen handelt, und dies dürfte auch die Ursache dafür sein, daß keines dieser Mittel bisher auch nur versuchsweise an Tiere verfüttert wurde. Seit einigen Jahren wird auch bereits versucht, die Wachstumsgeschwindigkeit abnormal kleiner Kinder durch direkte Verabreichung von Wachs tumshormon zu erhöhen, was infolge des schwierigen Zugangs zu diesem Hormon ziemlich teuer ist, und der Einsatz von Wachs tumshormon bei Nutztieren wurde daher bisher auch nicht aus reichend untersucht.You already know quite a bit about that by increasing the growth hormone concentration in farm animals giving advantages. The most significant advantage of this type is that Increase in the milk production of a dairy cow Increase in growth hormone. In the literature too already have an improved growth rate and Feed efficiency of pigs and sheep by increasing the Concentration of growth hormone reported. About the same So far, however, nothing has been beneficial to cattle reported, but it should be borne in mind here that the Growth hormone and the GRF is still very limited available and expensive substances, and this should also be the case be the reason why none of these means so far was only fed to animals on a trial basis. Since some For years now, the growth rate has been tried abnormally small children by direct wax administration increase hormone, which is due to difficult access to this hormone is quite expensive, and the use of wax So far, hormone hormones in farm animals have not been eliminated examined extensively.

Am eingehendsten wurde natürlich der GRF des Menschen unter sucht. Hierbei hat sich gezeigt, daß sich das Peptid des endogenen humanen GRF stark abwandeln läßt, ohne daß hier durch seine Wirksamkeit zur Erhöhung der Produktion und Ab scheidung von Wachstumshormon zerstört wird. Es wurden Analo ge von humanem GRF aus den Aminosäuren 23 bis 40 hergestellt, und zwar sowohl in der amidierten als auch der säureendständi gen Form, und alle diese Analogen haben sich als wirksam erwiesen. Weiter wurden beim endogenen Peptid verschiedene Veränderungen vorgenommen, wie ein Ersatz von Tyrosin in Stellung 1 des Peptids durch Histidin, 3-Methylhistidin oder N-Acetyltyrosin. Auch diese Substanzen sind wirksam.The GRF of humans was of course the most detailed is looking for. It has been shown here that the peptide of endogenous human GRF can be modified without here through its effectiveness to increase production and Ab divorce from growth hormone is destroyed. There were anal produced from human GRF from amino acids 23 to 40, both in the amidated and in the acid end stand form, and all of these analogs have proven effective proven. Furthermore, various endogenous peptides Changes made, such as a replacement of tyrosine Position 1 of the peptide by histidine, 3-methylhistidine or N-acetyltyrosine. These substances are also effective.

In Anbetracht der Ähnlichkeit der endogenen GRF bei verschie denen Tierarten ist es daher wohl nicht überraschend, daß diese bei den verschiedensten Tierarten wirksam sind. So wird in Domestic Animal Endocrinology 2, Seiten 133 bis 139 (1985) beispielsweise gezeigt, daß der endogene humane GRF und ein Analoges zum engonenen humanen GRF, welches 40 Aminosäuren aufweist und über eine freie endständige Säuregruppe verfügt (hGRF40 Säure) bei Ratten, Rhesusaffen, Hasen, Schafen, Rindern und Hühnern und auch bei Menschen wirksam sind.Given the similarity of the endogenous GRF in various it is therefore not surprising to the animal species that these are effective in a wide variety of animal species. So will in Domestic Animal Endocrinology 2, pages 133 to 139 (1985) shown, for example, that the endogenous human GRF and a Analogous to the engonene human GRF, which has 40 amino acids has and has a free terminal acid group (hGRF40 acid) in rats, rhesus monkeys, rabbits, sheep, Cattle and chickens are also effective in humans.

Beim Menschen dürfte GRF sowohl durch die Bauchspeicheldrüse als auch den Hypothalmus gebildet werden. Von beiden Organen werden identische Peptide erzeugt. Die ersten Arbeiten mit GRF wurden anhand eines Peptids durchgeführt, das von Tumoren an der menschlichen Bauchspeicheldrüse erzeugt wurde, wobei nun jedoch deutlich gezeigt werden konnte, daß die normale Bauchspeicheldrüse genauso wie der normale Hypothalmus das gleiche Peptid bildet, nämlich endogenen humanen GRF.In humans, GRF is likely to both through the pancreas as well as the hypothalm are formed. From both organs identical peptides are generated. The first work with GRF was performed using a peptide derived from tumors was produced on the human pancreas, whereby but it could now be clearly shown that the normal Pancreas just like the normal hypothalm forms the same peptide, namely endogenous human GRF.

Es gibt bereits umfangreiche Literaturarbeiten über GRF und dessen Zusammenhang mit der Produktion und Abscheidung von Wachstumshormon. Hierzu wird beispielsweise auf die folgenden Literaturstellen verwiesen:There is already extensive literature on GRF and its connection with the production and separation of Growth hormone. For this, for example, the following References:

Ann. Rev. Biochem. 54, Seiten 403 bis 423 (1985)
Neuroendocrinology 42, Seiten 273 bis 276 (1986)
Fed. Proc. 45, Seite 280 (1986)
Endocrinology 114, Seiten 1613 bis 1616 (1984)Ann. Rev. Biochem. 54, pages 403 to 423 (1985)
Neuroendocrinology 42, pages 273 to 276 (1986)
Fed. Proc. 45, page 280 (1986)
Endocrinology 114, pages 1613 to 1616 (1984)

Seit kurzem wird auch in der Patentliteratur über synthetisch hergestellte GRF von Rindern und Schafen berichtet. Hierzu wird beispielsweise auf US-A 4 585 756 und US-A 4 605 634 hinge wiesen. Recently, the patent literature has also been about synthetic produced GRF from cattle and sheep. To do this for example, to US-A 4,585,756 and US-A 4,605,634 grasslands.

Die Auffindung von humanem GRF hat sofort zu einer Erforschung seiner Anwendung bei unter einem Mangel an Wachstumshormon leidenden Kindern geführt. Bald darauf wandte sich die For schung einer Anwendung von GRF zur Erhöhung des Wachstums hormons bei Nutztieren zu. Darauf traten Schwierigkeiten und Unsicherheiten auf.The discovery of human GRF immediately led to an exploration its use in those with a lack of growth hormone suffering children. Soon after, the For turned application of GRF to increase growth hormones in farm animals too. Difficulties occurred and Uncertainties.

Man erkannte bald, daß die Konzentration an Wachstumshormon im Blut beim normalen Tier einer jeden Art in einer episodi schen Weise schwankte. Die Sekretion von Wachstumshormon in den Blutstrom erfolgt anscheinend stoßweise. Frequenz und Amplitude der Stöße sind alters abhängig, bei männlichen und weiblichen Tieren unterschiedlich und gelegentlich auch inner halb eines Tages verschieden, und sie erhöhen sich unter Streß bedingungen. Es wurde bald erkannt, daß die Verabreichung einer einzigen Dosis an GRF zwar eine verläßliche Erhöhung der Kon zentration an Wachstumshormon im Blutstrom während einer kur zen Zeitdauer ergibt, die Aufrechterhaltung einer erhöhten Konzentration an Wachstumshormon jedoch nicht einfach ist.It was soon recognized that the concentration of growth hormone in the blood of the normal animal of each species in an episodi swayed. The secretion of growth hormone in the blood flow apparently occurs intermittently. Frequency and Amplitude of the bumps are age-related, in males and female animals different and occasionally also inside half a day different, and they increase under stress conditions. It was soon recognized that the administration of a single dose of GRF a reliable increase in con concentration of growth hormone in the blood stream during a cure Zen period of time results in maintaining an increased However, growth hormone concentration is not easy.

In J. Clin. Endo. Metab. 60, Seiten 370 bis 375 (1985) werden Versuche über eine 6 Stunden dauernde Infusion von hGRF40 bei normalen Menschen und eine Injektion eines großen Bolus von GRF nach einer 5,5 Stunden dauernden Infusion beschrieben. Die Gesamtmenge an während der Versuchsdauer freigesetztem Wachs tumshormon unterschied sich dabei nicht von der Kontrolle einer jeden Dosis an GRF. Es ergab sich hierbei zwar bei den Infu sionen eine Antwort an Wachstumshormon, doch wurde die durch Verabreichung des Bolus bedingte Antwort so abgeschwächt, daß sich insgesamt kein Unterschied gegenüber den als Kontrolle dienenden Menschen ergab, welchen lediglich der Bolus injiziert wurde.In J. Clin. Endo. Metab. 60, pages 370 to 375 (1985) Try a 6 hour infusion of hGRF40 with normal people and an injection of a large bolus of GRF described after a 5.5 hour infusion. The Total amount of wax released during the test period Tumor hormone was no different from controlling one every dose of GRF. It was true for the Infu an answer to growth hormone, but the Administration of the bolus attenuated response so weak that overall no difference compared to that as a control serving people revealed which only the bolus injected has been.

Die obige Arbeit ist typisch für zahlreiche Veröffentlichungen, wonach der Menge an Wachstumshormon, die ein normales Tier ausscheiden kann, in irgendeiner Weise Grenzen gesetzt sind, so daß sich durch eine Verabreichung von GRF keine Erhöhung der Gesamtausscheidung an Wachstumshormon in den Blutstrom über eine verhältnismäßig lange Zeitdauer erreichen läßt.The above work is typical of numerous publications, according to the amount of growth hormone that a normal animal can be eliminated, there are limits in any way, so that there is no increase by administration of GRF the total excretion of growth hormone in the bloodstream can be achieved over a relatively long period of time.

Weitere Arbeiten, die eine Erniedrigung an Wachstumshormon antwort bei Fortdauer der Verabreichung von GRF zeigen, gehen aus folgenden Veröffentlichungen hervor:
In J. Clin. Endo. Metab. 61, Seiten 223 bis 228 (1985) wird über eine intravenöse Verabreichung von hGRF in einer Dosis von 1 µg pro kg und Stunde an erwachsene Menschen berichtet. Nach einer anfänglichen Zunahme fiel die Konzentration an Wachstumshormon ab, und die Antwort auf die Injektion eines Bolus war am Ende der 4-stündigen Infusionsdauer wesentlich niedriger als bei den als Kontrolle dienenden Menschen.Further work that shows a decrease in growth hormone response with continued administration of GRF emerges from the following publications:
In J. Clin. Endo. Metab. 61, pages 223 to 228 (1985), an intravenous administration of hGRF in a dose of 1 ug per kg and hour to adults is reported. After an initial increase, the concentration of growth hormone dropped and the response to bolus injection at the end of the 4 hour infusion period was significantly lower than that of the controls.

Gemäß Acta. Endo. 107, Seiten 462 bis 470 (1984) wurde hGRF 11 gesunden Menschen während einer Zeitdauer von 2 oder 5 Stunden in einer Dosis von 100 µg pro Stunde infundiert. Die Plasmaspiegel an Wachstumshormon erhöhten sich sofort und fielen dann ab. Die Antwort auf die Injektion eines Bolus am Ende der Infusion war weniger stark ausgeprägt als die Antwort der Injektion eines Bolus am Anfang. Andere Patienten erhiel ten alle zwei Stunden durch Injektion eines Bolus eine Wirk stoffdosis von 50 µg, wobei die Antwort an Wachstumshormon bei jeder aufeinanderfolgenden Dosis abfiel.According to Acta. Endo. 107, pages 462 to 470 (1984) became hGRF 11 healthy people for a period of 2 or 5 Infused for hours at a dose of 100 µg per hour. The Plasma levels of growth hormone increased immediately and then fell off. The answer to a bolus injection on End of infusion was less pronounced than the answer the injection of a bolus at the beginning. Other patients would get Effective every two hours by injecting a bolus substance dose of 50 µg, the answer to growth hormone decreased with each successive dose.

In J. Clin. Invest. 75, Seiten 1584 bis 1590 (1985) wird über eine Verabreichung von hGRF40 an 6 normale Menschen während einer Zeitdauer von 24 Stunden in einer Dosis von 2 ng pro kg und Minute und die anschließende Verabreichung einer großen Bolusdosis berichtet. Die Sekretion an Wachstumshormon wurde durch die Infusion von GRF erhöht, wobei die Antwort auf die 24-stündige Verabfolgung mittels des Bolus bei den Kontrollen jedoch größer war. Insgesamt war die Menge an Wachstumshormon bei den behandelten Menschen gleich wie bei den Kontrollen.In J. Clin. Invest. 75, pages 1584 to 1590 (1985) is about administration of hGRF40 to 6 normal people during 24 hours at a dose of 2 ng per kg and minute and then administering a large one Bolus dose reported. The secretion of growth hormone was increased by infusion of GRF, the answer to the 24-hour bolus administration at controls however was larger. Overall, the amount of growth hormone was same for the treated people as for the controls.

Gemäß Endo. 114, Seiten 1613 bis 1616 (1984) wurde hGRF an Ratten 24 Stunden in einer Dosis von 15 µg pro Stunde verab reicht. Die Plasmakonzentration an Wachstumshormon stieg inner halb von zwei Stunden nach Beginn der Infusion an und fiel nach 6 Stunden wieder ab. Am Ende der Infusion reagierten die Ratten überhaupt nicht auf eine Bolusdosis an GRF.According to Endo. 114, pages 1613 to 1616 (1984) became hGRF Administer rats at a dose of 15 µg per hour for 24 hours enough. The plasma concentration of growth hormone rose internally half an hour after the start of the infusion and fell after 6 hours. They responded at the end of the infusion Rats did not take a bolus dose of GRF at all.

Die Clin. Res. 32, Seite 266A (1984) zeigt Versuche über eine intravenöse Infusion von GRF (Quelle nicht angegeben) ,während 6 Stunden an normale Menschen in einer Dosis von 10 ng/kg und Minute. Alle Patienten zeigen eine Erhöhung der Serumkonzen tration an Wachstumshormon, wobei das Maximum zwischen 1 und 4 Stunden liegt. Die Konzentration fiel dann ab, jedoch nicht so weit wie bei den Kontrollen. Die Konzentration an Wachstums hormon auf eine Bolusdosis während der Infusionen war halb so groß wie die Konzentration vor der Infusion.The clin. Res. 32, page 266A (1984) shows experiments on a intravenous infusion of GRF (source not specified) while 6 hours to normal people at a dose of 10 ng / kg and Minute. All patients show an increase in serum concentrations tration of growth hormone, the maximum between 1 and 4 hours. The concentration then dropped, but not as far as the controls. The concentration of growth hormone on a bolus dose during infusions was half that as large as the concentration before the infusion.

In Fed. Proc. 43, Seite 2019 (1984) wird über eine Injektion von GRF (Quelle nicht angegeben) an Schafe in einer Dosis von 0,065 nMol/kg berichtet. Die Konzentration an Wachstumshormon fiel bei jeder Injektion ab. Das gleiche Ergebnis wurde auch bei einer Dosis von 0,016 nMol/kg erzielt. 16 intravenöse Infusionen von GRF führten zu dosisabhängigen Konzentrationen innerhalb einer Stunde, wobei alle Konzentrationen mit fort laufender Infusion jedoch auf etwa die Hälfte abfielen.Fed. Proc. 43, page 2019 (1984) is about an injection of GRF (source not specified) to sheep at a dose of 0.065 nmol / kg reported. The concentration of growth hormone fell off with every injection. The same result has been achieved achieved at a dose of 0.016 nmol / kg. 16 intravenous Infusions of GRF resulted in dose-dependent concentrations within an hour, with all concentrations continuing infusion fell to about half.

Von anderen Autoren wird dagegen berichtet, daß sie eine konti nuierliche Wirkung bei Verabreichung von GRF zeigen konnten, wobei über eine Erschöpfung der Hypophyse jedoch nichts berichtet wurde. Dies zeigen folgende Literaturstellen:
In Endo. Japan 32, Seiten 287 bis 293 (1985) wird über eine intravenöse Verabreichung von hGRF in einer Dosis von 40 µg pro Stunde an normale Menschen während 20 Stunden und eine anschließende intravenöse Verabreichung mittels eines Bolus in einer Dosis von 2 µg/kg berichtet. Die Gesamtmenge an aus geschiedenem Wachstumshormon während der Infusion betrug das Vierfache gegenüber der Kontrolle, wobei der Großteil der Patienten auf den Bolus reagierte. On the other hand, other authors report that they were able to show a continuous effect when GRF was administered, but no exhaustion of the pituitary gland was reported. The following references show this:
In Endo. Japan 32, pages 287 to 293 (1985) reports intravenous administration of hGRF at a dose of 40 µg per hour to normal people for 20 hours and subsequent intravenous administration by means of a bolus at a dose of 2 µg / kg. The total amount of growth hormone secreted during the infusion was four times that of the control, with the majority of patients responding to the bolus.

Gemäß J. An. Sci. 61, Referat 113 (1985) wurde eine Reihe an Analogen von GRF intravenös während 6 Stunden an Rinder ver abreicht. Der Hormonspiegel an Plasma erhöhte sich und blieb während der 6-stündigen Versuchsdauer erhöht.According to J. An. Sci. 61, Unit 113 (1985) was a series Analogs of GRF administered intravenously to cattle for 6 hours is enough. The level of hormones in plasma increased and remained increased during the 6-hour trial period.

In N.E.J. Med. 312, Seiten 4 bis 9 (1985) wird über eine sub kutane Verabreichung von GRF an unter einem Hormonmangel lei dende Kinder in einer Dosis von 1 bis 3 kg/kg alle 3 Stunden während einer Zeitdauer von 6 Monaten berichtet. Die Patienten reagierten durch erhöhte Spiegel an Wachstumshormon während der 6-monatigen Versuchsdauer.In N.E.J. Med. 312, pages 4 to 9 (1985) is a sub cutaneous administration of GRF to hormone deficiency children in a dose of 1 to 3 kg / kg every 3 hours reported over a period of 6 months. The patients responded by increasing levels of growth hormone during the 6-month trial period.

In Recent Progress in Hormone Research 42, Seiten 589 bis 640 (1986) wird auf Seite 612 berichtet, daß einige Patienten mit Tumoren an der Bauchspeicheldrüse eine stark erhöhte Bil dung von GRF zeigten, was zu einer langanhaltenden und abnor mal hohen Produktion an Wachstumshormon führte.In Recent Progress in Hormone Research 42, pages 589 to 640 (1986) reported on page 612 that some patients with tumors on the pancreas a greatly increased bil of GRF showed what resulted in a long lasting and abnormal times high production of growth hormone.

Gemäß J. Endo. 104, Seiten 433 bis 439 (1985) wurde GRF44 (Quelle nicht angegeben) intravenös 5 Tage an Rinder in einer Dosis von 3,6 mg pro Tag verabfolgt. Während der 5-tägigen Infusion erniedrigte sich der Gehalt an Wachstumshormon nicht.According to J. Endo. 104, pages 433 to 439 (1985) became GRF44 (Source not given) intravenously 5 days in cattle in one Dose of 3.6 mg administered per day. During the 5-day Infusion did not decrease the growth hormone content.

In J. Endo. 105, Seiten 189 bis 196 (1985) wird über Versuche berichtet, bei denen Ziegen alle 2 Stunden während 4 Tagen hGRF injiziert wurde. Die Ziegen reagierten durch eine erhöhte Konzentration an Wachstumshormon im Plasma und eine erhöhte Milchproduktion.In J. Endo. 105, pages 189 to 196 (1985) is about experiments reported goats every 2 hours for 4 days hGRF was injected. The goats responded by an increased Concentration of growth hormone in plasma and an increased Milk production.

In Therapeutic Agents Produced by Genetic Engineering, Symposium vom 29. bis 30. Mai 1985, M.E.D.S.I., Paris, Seiten 343 bis 358 wird über Versuche berichtet, bei denen milchge benden Kühen intravenös GRF (Quelle nicht angegeben) zweimal täglich während 10 Tagen verabreicht wurde. Die Verabreichung erfolgte jeweils in Dosen von 0,2 nMol/kg. Bei jeder Dosis ergab sich eine Reaktion auf das Wachstumshormon und eine um 4,8% erhöhte Milchproduktion. Bei einem anderen Versuch wurde entweder hGRF oder hGRF29 intravenös in der gleichen Dosis alle 4 Tage während 10 Tagen gespritzt, wobei sich eine Er höhung der Milchproduktion um 19,6% und um 16,1% ergab.In Therapeutic Agents Produced by Genetic Engineering, Symposium, May 29-30, 1985, M.E.D.S.I., Paris, pages Experiments are reported in 343 to 358 in which milk-based cows intravenously GRF (source not specified) twice was administered daily for 10 days. The administration each took place in doses of 0.2 nmol / kg. At every dose there was one response to the growth hormone and one around 4.8% increased milk production. Another attempt was made either hGRF or hGRF29 intravenously in the same dose injected every 4 days for 10 days, one Er milk production increased by 19.6% and by 16.1%.

Die Literatur über GRF ergibt in etwa, daß eine kontinuierli che Verabreichung von GRF weniger wirksam als eine periodische oder stoßweise Verabreichung ist. In Nature 314, Seiten 281 bis 283 (1985) wird über eine kontinuierliche Infusion von hGRF29 an weibliche Ratten in einer Konzentration von 8 µg pro Tag oder eine entsprechende Verabreichung mit 8 Stößen pro Tag in einer Menge von jeweils 1 µg berichtet. Die Behandlungen dauern 12 Tage. Die Ratten, welche die stoßweisen Dosen erhal ten, zeigen ein erhöhtes Wachstum und einen erhöhten Hormon gehalt in der Hypophyse. Bei den Tieren, denen der Wirk stoff durch kontinuierliche Infusion gegeben wird, können diese Wirkungen nicht festgestellt werden.The literature on GRF roughly shows that a continuous The administration of GRF is less effective than a periodic one or intermittent administration. In Nature 314, pages 281 to 283 (1985) is about a continuous infusion of hGRF29 to female rats at a concentration of 8 µg per Day or equivalent administration with 8 puffs per day reported in an amount of 1 µg each. The treatments last for 12 days. The rats receiving the intermittent cans ten, show increased growth and an increased hormone content in the pituitary gland. In the animals to whom the active given by continuous infusion, these can Effects are not determined.

In der Literatur wird sowohl über eine intravenöse als auch eine subkutane Verabreichung von GRF berichtet. Ein Vergleich dieser Verabreichungsarten geht zusammen mit einer intranasa len Verabfolgung aus Recent Progress in Hormone Research 42, Seiten 621 bis 623 (1986) hervor. Hier ergibt sich bei Verab reichung von hGRF40, daß bei subkutaner Verabreichung eine um das 30-fache höhere Menge an GRF erforderlich ist als bei intravenöser Verabfolgung. Die nasale Dosis ist 300 mal höher als die intravenöse Dosis.In the literature, both intravenous and subcutaneous administration of GRF has been reported. A comparison these types of administration go together with an intranasa len administration from Recent Progress in Hormone Research 42, Pages 621 to 623 (1986). This is the case with hGRF40 that when subcutaneously administered a um 30 times the amount of GRF required as for intravenous administration. The nasal dose is 300 times higher than the intravenous dose.

Andere Autoren berichten dagegen, daß sich bei subkutaner und intravenöser Verabreichung vergleichbarere Ergebnisse einstel len. So wird beispielsweise in J. Dairy Sci. 67, Seiten 288 bis 296 (1984) angegeben, daß die Konzentration an Wachstums hormon bei subkutaner Verabreichung von 1 mg hGRF29 an Kühe etwa ein Drittel der Konzentration bei intravenöser Verabrei chung der gleichen Wirkstoffdosis beträgt. Dies wird durch Endo. Japan 31, Seiten 55 bis 61 (1984) bestätigt, wonach die Konzentration an Wachstumshormon bei subkutaner Verabreichung von hGRF an Rinder 37% der Konzentration bei intravenöser Verabreichung ausmacht. Other authors report that subcutaneous and intravenous administration set comparable results len. For example, in J. Dairy Sci. 67, pages 288 to 296 (1984) indicated that the concentration of growth hormone administered subcutaneously to cow 1 mg hGRF29 about a third of the concentration when administered intravenously the same dose of active ingredient. This is through Endo. Japan 31, pages 55 to 61 (1984) confirmed that the Concentration of growth hormone when administered subcutaneously of hGRF in cattle 37% of the concentration with intravenous Administration matters.

Aus der Literatur über GRF ergibt sich somit die allgemeine Lehre, daß die intravenöse Verabreichung am meisten bevorzugt ist und daß die günstigste Art der Verabreichung von GRF eine stoßweise Verabfolgung ist. Eine kontinuierliche Verabreichung wird demnach nicht als günstig angesehen. Sie wird bei ihrer Anwendung auch nur auf intravenösem Weg durchgeführt.From the literature on GRF, the general results Teach that intravenous administration is most preferred and that the cheapest way of administering GRF is one intermittent administration. Continuous administration is therefore not considered cheap. She will be with her Application also carried out intravenously.

Demgegenüber betrifft die Erfindung nun die Verwendung eines kontinuierlich subkutan zu verabreichenden Wachstumshormon- Freisetzungsfaktors zur Erhöhung der Konzentration an endogenem Wachstumshormon im Blut von Nutzsäugern.In contrast, the invention now relates to the use of a growth hormone continuously administered subcutaneously Release factor to increase the concentration of endogenous Growth hormone in the blood of farm mammals.

Die Erfindung läßt sich allgemein auf Nutzsäuger anwenden, und zwar insbesondere auf milchgebende Kühe. Rinder stellen die am meisten bevorzugte Klasse an Nutzsäugern dar, wobei auch Schweine bevorzugt sind. Zu einer dritten bevorzugten Klasse gehören die Schafe. Die Erfindung läßt sich auch auf andere Tiere anwenden, wie Ziegen, Kamele und Pferde, wobei diese Anwendungsart jedoch weniger wichtig ist.The invention is generally applicable to utility mammals, and especially on dairy cows. Cattle are the most preferred class of utility mammals, too Pigs are preferred. To a third preferred class belong to the sheep. The invention can also be applied to others Use animals like goats, camels and horses, however, this type of application is less important.

GRF von einer Art führt zu einer Erhöhung der Konzentration an Wachstumshormon bei einer anderen Art, wie dies oben bereits gezeigt worden ist. Die Durchführung der Erfindung erfordert daher nicht die Anwendung von lediglich GRF der zu behandeln den Tierart. Bevorzugt wird jedoch die Verabfolgung von GRF der gleichen Tierart, so daß man beispielsweise Rinder-GRF an Schafe verabreicht. Die Vorteile der Erfindung ergeben sich jedoch auch dann, wenn man GRF irgendeinem Nutzsäuger verabfolgt. So kann man beispielsweise Human-GRF an Schweine, Schafe oder Rinder verabreichen, wäh rend man Rinder-GRF Schafen oder Schweinen verabfolgen kann, Schweine-GRF Rindern oder Schafen verabreichen kann und so weiter, und zwar je nach wirtschaftlichen Überlegungen und Gegebenheiten, wobei sich immer die erfindungsgemäß erziel baren Vorteile ergeben. GRF of some kind leads to an increase in concentration of growth hormone in another species like this already above has been shown. Implementation of the invention requires therefore do not treat the application of just GRF's the species. However, the administration of GRF is preferred the same animal species, so that you can, for example, beef GRF Sheep administered. The advantages of the invention result however, even if you have GRF administered to any beneficial mammal. So you can, for example Administer human GRF to pigs, sheep or cattle can be administered to cattle GRF sheep or pigs, Pigs GRF can administer to cattle or sheep and such further, depending on economic considerations and Conditions, which are always achieved according to the invention real advantages.

Es kann natürlich aus Tierorganen isolierter GRF verwendet werden, doch ist es zweckmäßiger, den GRF synthetisch oder durch rekombinante Methoden herzustellen. Sowohl die synthe tische als auch die rekombinante Herstellung von Peptiden ist heute üblich, und es wurden hiernach auch schon die ver schiedensten Arten an GRF erzeugt. Eine Übersicht über den hierfür maßgeblichen Stand der Technik geht beispielsweise aus US-A 4 585 756 und US-A 4 605 643 hervor.GRF isolated from animal organs can of course be used but it is more convenient to use the GRF synthetically or by recombinant methods. Both the synthe tables as well as the recombinant production of peptides is common today, and after that the ver different types of GRF. An overview of the relevant state of the art goes for example from US-A 4 585 756 and US-A 4 605 643.

Es hat sich gezeigt, daß nicht nur die vollständigen GRF, sondern auch viele Analogen von GRF eine wirksame Erhöhung der Produktion und Freisetzung von Wachstumshormon ergeben. Es wurden beispielsweise die 23, 27, 29, 30, 31, 34, 37 und 40-Aminosäureanalogen von Human-GRF hergestellt und als wirk sam gefunden. Die ersten 29 Aminosäuren scheinen jedoch die stärkste Wirkung zu ergeben. Weiter haben sich sowohl die amidierten als auch die säureendständigen Analogen und die vollständigen GRF als wirksam erwiesen.It has been shown that not only the complete GRF, but also many analogs of GRF an effective increase the production and release of growth hormone. For example, 23, 27, 29, 30, 31, 34, 37 and 40-amino acid analogs made by human GRF and as active found sam. However, the first 29 amino acids seem like that to have the greatest effect. Both amidated as well as the acid terminal analogs and the full GRF has been shown to be effective.

Es dürfte demnach anerkannt sein, daß die vollständigen GRF und auch die GRF-Analogen sowohl in amidierter als auch in säureendständiger Form eine Erhöhung an Wachstumshormon bei den homologen Arten und auch bei anderen Arten ergeben. Erfindungsgemäß werden daher unter dem Begriff Wachstumshormon- Freisetzungsfaktor (GRF) alle Säugetier-GRF und alle wirksamen Analogen dieser GRF in sowohl amidierter als auch saurer Form verstanden. Die Auswahl des jeweils wirksamen Analogen und der von einer bestimmten Art an GRF zu verabreichenden Dosis, durch welche sich ein optimales Ergebnis bei der jeweiligen Tierart ergibt, liegt im Rahmen des üblichen fachmännischen Könnens.It should therefore be recognized that the full GRF and also the GRF analogues in both amidated and in acidic form an increase in growth hormone the homologous species and also in other species. According to the invention, the term growth hormone Release factor (GRF) of all mammalian GRF and all effective Analogs of this GRF in both amidated and acidic forms Roger that. The selection of the effective analogue and the of a certain type of dose to be administered to GRF, through which an optimal result with the respective Animal species results, is within the usual professional Can s.

Das Wesentliche der Erfindung besteht darin, daß man den in Rede stehenden Wirkstoff kontinuierlich während einer langen Zeitdauer verabreicht. Unter einer solchen kontinuierlichen Verabreichung wird eine Verab folgung verstanden, bei der die Dosis an GRF im behandelten Tier praktisch konstant bleibt. Dies läßt sich beispielsweise durch häufige Stöße an GRF erreichen. Die Halbwertszeit von GRF im Körper ist verhältnismäßig kurz - sie beträgt beim Menschen bei spielsweise 48 Minuten - und eine stoßartige Verabfolgung muß daher sehr häufig durchgeführt werden, damit sich eine prak tisch kontinuierliche Wirksamkeit ergibt. Erfindungsgemäß läßt sich GRF beispielsweise stoßartig in Zeitabständen im Bereich von 15 Minuten oder darunter verabreichen. Stöße in Zeitabständen von mehr als 30 Minuten ergeben zweifels ohne keinen praktisch kontinuierlichen Effekt mehr.The essence of the invention is that one in The active ingredient in question is continuous administered for a long period of time. Under one continuous administration is an administration understood the following, in which the dose of GRF in the treated Animal remains practically constant. This can be, for example, by frequent Get bumps on GRF. The half-life of GRF in the body is relatively short - it is in humans for example 48 minutes - and a sudden administration must therefore be carried out very frequently, so that a prak table gives continuous effectiveness. According to the invention can GRF, for example, abruptly at intervals in the Administer range of 15 minutes or less. Bumps in Intervals of more than 30 minutes result in doubt without a practically continuous effect.

Vorzugsweise wird GRF erfindungsgemäß jedoch in einer Weise verabreicht, die möglichst nahe an eine wirkliche kontinuier liche Verabreichung herankommt. Die bevorzugteste Methode der Verabreichung wird mittels einer implantierten osmotischen oder mechanischen Pumpe oder einer implantierten Diffusions vorrichtung durchgeführt, welche eine Abgabe des Peptids GRF in den Körper in Form von praktisch einem Molekül zur jeweili gen Zeit ermöglicht.However, according to the invention, GRF is preferably used in a manner administered as close as possible to a real continuous administration is approaching. The most preferred method of Administration is by means of an implanted osmotic or mechanical pump or an implanted diffusion device carried out which a delivery of the peptide GRF into the body in the form of practically one molecule for each time.

Erfindungsgemäß erfolgt die Verabfolgung von GRF während einer wirtschaftlich signifikanten Zeitdauer. Hierunter wird eine Verabreichung von GRF während einer so langen Zeitdauer ver standen, daß sich der wirtschaftliche Vorteil einer Erhöhung der Konzentration an Wachstumshormon ergibt. Die Verabfolgung an GRF erfolgt am besten während eines Lebensabschnitts des zu behandelnden Tieres. Im Falle milchgebender Kühe wird die Verabreichung am besten während einer ganzen Laktationsdauer durchgeführt. Im Falle von Mastrindern wird die Verabfolgung am besten während der Wachstumsphase und der abschließenden Stufe der Reifezeit der Tiere vorgenommen.According to the invention, GRF is administered during a economically significant period of time. Below is one Administration of GRF for such a long period of time stood that the economic advantage of an increase the concentration of growth hormone. The administration at GRF is best done during a lifetime of the animal to be treated. In the case of dairy cows Best administered during a whole lactation period carried out. In the case of beef cattle, the administration preferably during the growth phase and the final one Level of maturation of the animals made.

Die bevorzugteste Anwendungszeit der Erfindung beträgt daher wenigstens 90 Tage. Eine weitere bevorzugte Anwendungs zeit liegt bei wenigstens 30 Tagen, da diese Zeitdauer durchweg lang genug sein dürfte, damit die Wirkung von GRF zur Geltung kommt und sich beim behandelten Tier ein wirt schaftlicher Nutzen ergibt. Die erfindungsgemäße Verabreichung von GRF soll wenigstens 13 Tage fortgeführt werden, um sicher zustellen, daß sich die erfindungsgemäßen Vorteile einstellen.The most preferred application time of the invention is therefore at least 90 days. Another preferred application time is at least 30 days because of this period should be consistently long enough for the effect of GRF comes into its own and is treated with the treated animal results in economic benefits. The administration according to the invention GRF should continue for at least 13 days to be sure to deliver that the advantages according to the invention arise.

Der sich durch die Erfindung ergebende besondere Vorteil liegt in einer erhöhten Konzentration an Wachstumshormon im Blut der behandelten Tiere. Das Wachstumshormon dürfte solange im Körper nicht wirksam werden, bis es von der dieses produ zierenden Hypophyse ausgeschieden wird und in den Blut strom gelangt. Die günstige Wirkung der Erfindung beruht daher eher auf der Konzentration an Wachstumshormon im Blutstrom als auf der reinen Produktion von Wachstumshormon.The particular advantage resulting from the invention lies in an increased concentration of growth hormone in the Blood of treated animals. The growth hormone should last as long will not take effect in the body until it gets rid of this produ Ornamental pituitary gland is excreted in the blood electricity arrives. The beneficial effect of the invention is therefore based rather on the concentration of growth hormone in the bloodstream than on the pure production of growth hormone.

Die Verabreichung von GRF läßt sich nach ver schiedenen Wegen erreichen. Zuerst verdünnt man das Peptid auf ein geeignetes Volumen, vorzugsweise in Wasser, und ver abreicht diese Wirkstofflösung dann durch subkutane Injektion mittels einer mechanischen Pumpe. Solche Pumpen werden auch bei den späteren Ausführungsbeispielen verwendet und sind in einer Anzahl unterschiedlicher Typen im Handel erhältlich. Alles was man hierzu braucht, ist eine an geeigneter Stelle unter der Haut permanent angeordnete Injektionsnadel. Der gleiche Effekt ergibt sich auch mit einer implantierten Pumpe, die durch eine Batterie oder auch auf chemischem Weg ange trieben wird und permanent unter der Haut des jeweiligen Tieres angeordnet ist.The administration of GRF can be ver reach different ways. First you dilute the peptide to a suitable volume, preferably in water, and ver then delivers this drug solution by subcutaneous injection by means of a mechanical pump. Such pumps will also used in the later embodiments and are in a number of different types are commercially available. All you need is a suitable place Injection needle permanently located under the skin. Of the the same effect also results with an implanted pump, which is supplied by a battery or by chemical means is driven and permanently under the skin of each Animal is arranged.

Eine ziemlich bequeme und eine langsame Wirkstoffabgabe erge bende Form von GRF erhält man durch Zubereitung einer Formu lierung des Peptids in einem Gemisch aus Öl und Wachs. Ähn liche Formulierungen sind bereits seit vielen Jahren aus US-A-2 493 202 für die Verabreichung von Penicillinen bekannt. In J. Dairy Sci. 66, Seiten 1980 bis 1982 (1983) wird die Verabreichung von Wachstumshormon an Schafe unter Verwendung von Zusammensetzungen auf Basis von Öl und Wachs beschrieben. Solche Zusammensetzungen enthalten im allgemeinen etwa 5 bis 10% Wachs in einem Pflanzenöl. Zu geeigneten Wachsen gehören Carnaubawachs und Bienenwachs, und die am häufigsten verwendeten Öle sind Ernußöl und Sesamöl. Die Kon zentration an GRF in der Formulierung und die zu injizierende Menge an Formulierung läßt sich aus der gewünschten Tagesdosis an GRF natürlich ohne weiteres berechnen.A fairly convenient and slow drug delivery result The form of GRF is obtained by preparing a form the peptide in a mixture of oil and wax. Similar Formulations have been out for many years US-A-2 493 202 is known for the administration of penicillins. In J. Dairy Sci. 66, pages 1980 to 1982 (1983) Administration of growth hormone to sheep using of compositions based on oil and wax. Such compositions generally contain about 5 to 10% wax in a vegetable oil. Suitable waxes include Carnauba wax and beeswax, and the most Commonly used oils are nut oil and sesame oil. The con concentration of GRF in the formulation and the one to be injected The amount of formulation can be determined from the desired daily dose to GRF of course calculate easily.

GRF kann auch in Form von Mikrokapseln verab reicht werden. Die Mikroeinkapselung von Wirkstoffen und son stigen Substanzen ist bereits seit vielen Jahren üblich.GRF can also be administered in the form of microcapsules be enough. The microencapsulation of active ingredients and son other substances has been common for many years.

Aus US-A 4 487 758 ist die Mikroeinkapselung von lebendem Gewebe oder von Zellen zum Zwecke einer Implantation unter Verwendung von Kapseln bekannt, die aus semipermeablen Mem branen gebildet werden, wofür Alginate bevorzugt sind. Ent sprechendes geht auch aus US-A 4 352 883 und US-A 4 409 331 hervor.From US-A 4,487,758 the microencapsulation is live Tissue or cells for implantation purposes Use of capsules known from semipermeable mem branches are formed, for which alginates are preferred. Ent speaking also from US-A 4,352,883 and US-A 4,409,331 forth.

Die Verwendung von Polymilchsäure und Polyglycolsäure zur Her stellung von Mikrokapseln wird in US-A 4 479 911 und in der PCT-Veröffentlichung WO-A 83 03061 beschrieben.The use of polylactic acid and polyglycolic acid The provision of microcapsules is described in US-A 4,479,911 and in PCT publication WO-A 83 03061.

Zu den am meisten verbreiteten Arten an Mikrokapseln dürften solche auf Basis von Celluloseestern gehören, wie auf Basis von Celluloseacetat oder Cellulosebutyrat. Hierzu wird bei spielsweise auf US-A 3 954 678, US-A 3 859 228 und GB-B 1 297 476 verwiesen.The most common types of microcapsules are believed to be those based on cellulose esters belong as on of cellulose acetate or cellulose butyrate. This is done at for example, to US-A 3 954 678, US-A 3 859 228 and GB-B 1 297 476.

Eine weitere und besonders bequeme Methode zur Verabreichung des Wirkstoffs macht von einer auf Diffusion beruhenden implan tierbaren Vorrichtung Gebrauch. Solche Vorrichtungen finden bereits breite Anwendung bei Tieren, um diesen beispielsweise ein Steroid zu verabreichen. Das Konzept dieser Vorrichtungen besteht in einer Vermischung des Wirkstoffs mit einem Polymer, in welchem das Peptid löslich ist, wobei sich durch Diffusion des Peptids durch das Polymer die gewünschte Freisetzungs geschwindigkeit ergibt. Entsprechende Zusammensetzungen zur Herstellung solcher Diffusionsimplantate für Peptide sind bereits bekannt. In US-A 4 452 775 wird eine Matrix beschrieben, die aus Cholesterin und geeigneten Bindemitteln und Gleit mitteln zusammengesetzt ist. Aus US-A 4 526 938 ist ein hydrogelbildendes Polymer bekannt, das außer anderen Peptiden auch die Freisetzung von GRF in verläßlicher und steuerbarer Weise ermöglicht.Another and particularly convenient method of administration of the active ingredient makes of an implan based on diffusion animal device use. Find such devices already widely used in animals, for example to administer a steroid. The concept of these devices consists of mixing the active ingredient with a polymer, in which the peptide is soluble, with diffusion of the peptide by the polymer the desired release speed results. Appropriate compositions for Manufacture of such diffusion implants for peptides already known. US-A 4 452 775 describes a matrix that of cholesterol and suitable binders and lubricants is composed of means. From US-A 4 526 938 is a hydrogel-forming polymer known, besides other peptides also the release of GRF in a more reliable and controllable way Way.

In der Veterinärmedizin ist auch bereits die Anwendung von durch den osmotischen Druck getriebenen Pumpen weit verbreitet. Solche Pumpen sind beispielsweise von der Alza Corporation erhältlich. Sie können auch zur Anwendung der Erfindung verwen det werden. Im allgemeinen beruhen solche Vorrichtungen auf der Anwendung einer semipermeablen Membran, um so ein Reservoir an Werkstoff vom Körper zu trennen und die Freigabegeschwin digkeit des Wirkstoffs zu steuern.In veterinary medicine, the use of pumps driven by osmotic pressure. Such pumps are for example from Alza Corporation available. They can also be used to practice the invention be det. Such devices are generally based on using a semipermeable membrane to create such a reservoir to separate material from the body and the release rate to control the effectiveness of the active ingredient.

Die vorteilhafte Erhöhung der Konzentration an Wachstumshormon läßt sich er reichen, indem man dem jeweiligen Tier eine für eine wirksame Erhöhung der Konzentration an Wachstumshormon ausreichende Menge an GRF verabfolgt. Die wirksamen Mengen an GRF liegen im allgemeinen im Bereich von 0,5 bis 3 mg pro Tag bei Schafen, Ziegen oder Schweinen, und im Bereich von 3 bis 12 mg pro Tag bei Rindern. Die hier angegebenen Dosen und Dosierungsbereiche sind als tägliche Dosen zu ver stehen, wobei jedoch zu beachten ist, daß die jeweilige Tages dosis praktisch kontinuierlich während 24 Stunden verabfolgt werden muß. Stärker bevorzugte Dosen liegen im Bereich von 1 bis 2 mg GRF pro Tag für Schafe, Rinder oder Ziegen, und im Bereich von 4 bis 8 mg pro Tag für Rinder. Die Erforschung von GRF ist natürlich noch voll im Gang, so daß auch noch stärkere Analoge von GRF gefunden werden können. Die bevorzugten Dosen der stärkeren Analogen sind natürlich niedriger all die oben angegebenen Dosen. Die für ein bestimm tes Tier jeweils günstigste Dosis schwankt natürlich in Ab hängigkeit von der Größe des Tieres, seinem Gesundheitszustand und seiner Ernährung, der gewünschten Erhöhung des Wachstums und der Milchproduktion sowie der Art des jeweils verwendeten GRF. Durch einfache Versuche lassen sich die Dosierungsge schwindigkeiten der verschiedenen GRF und ihre optimalen Tages dosen ermitteln. Die Erfindung wird im folgenden anhand eines Beispiels weiter beschrieben.The beneficial increase in the concentration of growth hormone he lets himself suffice by giving the animal an effective one Sufficient increase in growth hormone concentration Amount of GRF administered. The effective amounts of GRF are generally in the range of 0.5 to 3 mg per day in sheep, goats or pigs, and in the range of 3 to 12 mg per day in cattle. The specified here Doses and dosage ranges are to be verified as daily doses stand, but it should be noted that the respective day dose administered practically continuously for 24 hours must become. More preferred doses are in the range of 1 to 2 mg GRF per day for sheep, cattle or goats, and in the range of 4 to 8 mg per day for cattle. Research into GRF is of course still in progress, so that even stronger analogs of GRF can be found. The preferred doses of the stronger analogs are natural lower all of the above doses. The one for a certain The most favorable dose for each animal naturally fluctuates in Ab dependence on the size of the animal, its state of health and its diet, the desired increase in growth and the milk production and the type of each used GRF. The dosage level can be determined by simple experiments speeds of the different GRF and their optimal day determine cans. The invention is based on a Example further described.

example

Die bei diesem Versuch verwendeten Tiere sind Hereford-Ochsen mit einem Gewicht von etwa 270 kg. Pro Behandlung werden 4 Ochsen eingesetzt. Die Tiere werden auf Stoffwechselbedingun gen akklimatisiert und mit Kanülen (Silastic) in eine Jugular vene sowie subkutan über die Rippen kanüliert. Jeweils 4 Tieren infundiert man subkutan 6 mg hGRF pro Tag und 12 mg hGRF pro Tag, das man durch rekombinante Synthese erhalten hat und das sich vom natürlichen Peptid dadurch unterscheidet, daß es in Stellung 27 anstelle von Methionin einen Serinrest ent hält. Der dritten Gruppe von 4 Ochsen infundiert man lediglich physiologische Kochsalzlösung.The animals used in this experiment are Hereford oxen weighing about 270 kg. 4 per treatment Oxen used. The animals are on metabolic conditions acclimated and cannulated (silastic) into a jugular vein and cannulated via the ribs. 4 each Animals are subcutaneously infused with 6 mg hGRF per day and 12 mg hGRF per day obtained by recombinant synthesis and which differs from the natural peptide in that there is a serine residue in position 27 instead of methionine holds. The third group of 4 oxen is only infused physiological saline.

Die Infusionen dauern 13 Tage. Den Infusionen geht eine 5-tägi ge Einstellzeit voraus. Die Tiere werden täglich mit 5,5 kg (12 lb) eines hochenergiereichen und hochproteinhaltigen Futters auf Maisbasis gefüttert, das man ihnen zweimal pro Tag in einem Abstand von etwa 12 Stunden gibt.The infusions last 13 days. The infusions go 5 days setting time ahead. The animals weigh 5.5 kg daily (12 lb) of a high energy and high protein one Fed corn-based feed, which you give them twice per Day at a distance of about 12 hours.

Jedem Tier werden am Morgen Blutproben entnommen, und zwar 2 Proben kurz vor dem Füttern und 2 Proben kurz nach dem Füttern. Die Entnahme von Blutproben wird noch einen Tag nach Beendigung der Infusion fortgesetzt. Die Blutproben werden heparinisiert und zentrifugiert, und durch Analyse des Blut plasmas wird der Gehalt an Rinderwachstumshormon ermittelt.Blood samples are taken from each animal in the morning 2 samples shortly before feeding and 2 samples shortly after Feed. Blood samples will be taken one day after Infusion continued. The blood samples will be heparinized and centrifuged, and by blood analysis the content of cattle growth hormone is determined by plasma.

Während der gesamten Versuchsdauer wird auch der gesamte Harn gesammelt, und die Gesamtmenge an über den Harn ausgeschie denem Stickstoff wird gemessen. Die diesbezüglichen Werte gehen aus der folgenden Tabelle hervor. Der erniedrigte Stick stoffgehalt im Harn der behandelten Tiere zeigt, daß sie mehr Protein zurückhalten als die Vergleichstiere. During the entire test period, the entire urine is also collected, and the total amount excreted in the urine The nitrogen is measured. The relevant values are shown in the following table. The humiliated stick Substance content in the urine of the treated animals shows that they are more Retain protein than the control animals.

Die mit dem Wachstumshormon erhalten Ergebnisse sind in der Tabelle I als Mittelwerte aller vorgenommenen Analysen zusam mengefaßt, wobei die Versuche vor dem Füttern und nach dem Füttern eines jeden Tages gemittelt sind. Einige der mit 6 mg GRF pro Tag behandelten Tiere haben zum Ende des Versuchs ihre Blutkanülen verloren, so daß die späteren Ergebnisse für diese Tiere lediglich auf einigen Versuchsergebnissen beruhen. Die Daten sind in ng/ml angegeben.The results obtained with the growth hormone are in the Table I together as mean values of all analyzes carried out quantified, the experiments before feeding and after Feeding every day are averaged. Some of the 6 mg Animals treated with GRF per day had theirs at the end of the experiment Blood cannulas are lost, so the later results for this Animals are based only on some experimental results. The Data are given in ng / ml.

Tabelle I Table I

Konzentration an Wachstumshormon im Blutplasma in ng/ml Concentration of growth hormone in blood plasma in ng / ml

Stickstoffgehalt im Harn in g pro Tag Urine nitrogen content in g per day

Claims

1. Use a continuously subcutaneously administering growth hormone release factor to increase the concentration of endogenous Growth hormone in the blood of farm mammals.

2. Use according to claim 1, characterized in that the useful mammal is a beef, pork or sheep.

3. Use according to claim 1, characterized in that the utility mammal is a milk-giving cow.

4. Use according to one of claims 1 to 3, characterized in that the growth hormone release factor is identical to that of the endogenous growth hormone releasing factor of the respective beneficial mammal.

5. Use according to claim 4, characterized in that the growth hormone release factor is cattle growth hormone release factor.