DE3724721A1 - Method for the enzymatic racemate resolution of 1-acyloxy-2-cyclopenten-4-one 2,2-dimethylpropanediol ketal - Google Patents
Method for the enzymatic racemate resolution of 1-acyloxy-2-cyclopenten-4-one 2,2-dimethylpropanediol ketalInfo
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Abstract
Description
Optisch aktive Racemat-Spaltprodukte von 1-Acyloxy-2-cyclopenten-4-on stellen eine Schlüsselsubstanz für vielfältige chemische Synthesen dar. Insbesondere kann die Acetoxy-Verbindung als chirales Synthon bei Prostaglandinsynthesen genutzt werden. Der Einsatz mikrobiologischer Umwandlungen zur Erzeugung optisch aktiver Strukturen auf diesem Gebiet wurde an unterschiedlichen Ausgangsprodukten oder Zwischenstufen untersucht [J. Jiu "Microbial Reactions in Prostaglandin Chemistry" Adv. Biochem. Engineer., Ed. A. Fiechter, Springer Verlag Berlin, Vol. 17, S. 37-62 (1980)].Optically active racemate cleavage products of 1-acyloxy-2-cyclopenten-4-one provide a key substance for manifold chemical syntheses. In particular, the Acetoxy compound as a chiral synthon Prostaglandin synthesis can be used. The stake microbiological conversions to produce optically active Structures in this area have been varied Starting products or intermediate stages examined [J. Jiu "Microbial Reactions in Prostaglandin Chemistry" Adv. Biochem. Engineer., Ed. A. Fiechter, Springer Verlag Berlin, Vol. 17, pp. 37-62 (1980)].
1976 beschrieb Takano erstmalig die Herstellung eines Lactons (3) als Prostaglandin-Zwischenstufe über den Weg einer mikrobiologischen Hydrolyse. Cis-(1,4)-Diacetoxy-2-cyclopenten (1) wurde durch Bacillus subtilis var. niger zu einem optisch aktiven Monoacetat (2a) in 56,1% Ausbeute hyrolysiert, welches in zwei Reaktionsstufen in das optisch aktive Lacton (3) überführt werden kann [S. Takano, K. Tanigawa, K. Ogasawara, J. Chem. Soc. Chem. Comm. S. 189 (1976)].In 1976, Takano first described the manufacture of a Lactons (3) as a prostaglandin intermediate on the way a microbiological hydrolysis. Cis- (1,4) -diacetoxy-2-cyclopentene (1) was caused by Bacillus subtilis var. Niger an optically active monoacetate (2a) in 56.1% yield hydrolyzed, which in two reaction stages in the optical active lactone (3) can be converted [p. Takano, K. Tanigawa, K. Ogasawara, J. Chem. Soc. Chem. Comm. P. 189 (1976)].
Die optische Reinheit des Lactons (3) beträgt jedoch nur 35%. However, the optical purity of the lactone (3) is only 35%.
Zur gleichen Zeit untersuchten Miura et al. [S. Miura, S. Kurozomi, T. Toru, T. Tanaka, M. Kobayashi, S. Matsubara, S. Ishimoto, Tetrahedron 32, S. 1893 (1976)] die Hydrolyse eines Gemisches der cis- und trans-Isomeren (3 R), 5 R), (3 S, 5 S) und (3 R, 5 S) des Diacetates (1) mit Bäckerhefe. Man erhält jedoch nur ein auftrennbares Gemisch von trans-(3 R)-Acetoxy-(5 R)-hydroxy-cyclopenten mit 95% optischer Reinheit, optisch aktives (3 R, 5 R)-Di-acetoxy-cyclopenten und das Diol als 1 : 1 Mischung von (3 R, 5 R)- und (3 R, 5 S)-Dihydroxy-cyclopenten. Die zusätzlich geprüften Enzyme Weizenkeimlipase, Citrusacetylesterase und Lipase aus Aspergillus niger zeigten eine noch ungünstigere Stereoselektivität. Das enantiomerenreine trans-(1 S, 4 S)-Diacetat zeigte mit Bäckerhefe eine raschere Reaktion als der R-Acetat-Anteil des cis-trans-Gemisches.At the same time, Miura et al. [P. Miura, S. Kurozomi, T. Toru, T. Tanaka, M. Kobayashi, S. Matsubara, S. Ishimoto, Tetrahedron 32, p. 1893 (1976)] the hydrolysis a mixture of the cis and trans isomers (3 R), 5 R), (3 S, 5 S) and (3 R, 5 S) of the diacetate (1) with baker's yeast. Man however, only receives a separable mixture of trans- (3 R) -acetoxy- (5 R) -hydroxy-cyclopentene with 95% more optical Purity, optically active (3 R, 5 R) -di-acetoxy-cyclopentene and the diol as a 1: 1 mixture of (3 R, 5 R) - and (3 R, 5 S) -dihydroxy-cyclopentene. The additionally tested enzymes Wheat germ lipase, citrus acetylesterase and lipase Aspergillus niger showed an even less favorable one Stereoselectivity. The enantiomerically pure trans (1 S, 4 S) diacetate showed a faster reaction with baker's yeast than the R-acetate portion of the cis-trans mixture.
Der Arbeitskreis von Sih [Y. F. Wang, CH. S. Chen, G. Girdaukas, C. J. Sih "Bifunctional Chiral Synthons via Biochemical Methods. 3. Optical Purity Enhancement in Enzymatic Asymmetric Catalysis" J. Am. Chem. Soc. 106, S. 3695-3696 (1984)] verwendete zur Hydrolyse von enantiomerenreinem cis-1,4-Diacetat (1) erstmals Schweineleberesterase und erhielt das (1 S)-Acetoxy-(4 R)-hydroxy-2-cyclopenten in einer optischen Ausbeute von 80,3% bzw. nach Umkristallisieren von 96%. Die analytische Ausbeute betrug 83%.The Sih [Y. F. Wang, CH. S. Chen, G. Girdaukas, C.J. Sih "Bifunctional Chiral Synthons via Biochemical Methods. 3. Optical Purity Enhancement in Enzymatic Asymmetric Catalysis "J. Am. Chem. Soc. 106, Pp. 3695-3696 (1984)] used for the hydrolysis of enantiomerically pure cis-1,4-diacetate (1) for the first time Pig liver esterase and received the (1 S) -acetoxy- (4 R) -hydroxy-2-cyclopentene in an optical yield of 80.3% or after recrystallization from 96%. The analytical yield was 83%.
Mit dem gleichen Enzym und vergleichsweise mit α-Chymotrypsin, Acetylesterase und Bäckerhefe erhielten auch Laumen und Schneider optisch aktive Synthone mit Cyclopentenstruktur [K. Laumen und M. Schneider "Enzymatic Hydrolysis of Prochiral cis-1,4-diacyl-2-cyclopentenediols: Separation of (1 S, 4 R)- and (1 R, 4 S)-4-hydroxy-2-cyclopentenylderivatives, Versatile Building Blocks for Cyclopentanoid Natural Products" Tetrahedron Letters 25, 5875-5878 (1984)]. Die besten Werte ergeben sich mit der Schweineleberesterase mit einer optischen Ausbeute von 86% und einer chemischen Ausbeute von gleichfalls 86% nach Umkristallisieren 59%. Das Dipropionat und Dibutyrat anstelle des Diacetates zeigten signifikant ungünstigere optische und chemische Ausbeuten.With the same enzyme and comparatively with α- chymotrypsin, acetylesterase and baker's yeast, Läum and Schneider also received optically active synthons with a cyclopentene structure [K. Läum and M. Schneider "Enzymatic Hydrolysis of Prochiral cis-1,4-diacyl-2-cyclopentenediols: Separation of (1 S, 4 R) - and (1 R, 4 S) -4-hydroxy-2-cyclopentenyl derivatives, Versatile Building Blocks for Cyclopentanoid Natural Products "Tetrahedron Letters 25, 5875-5878 (1984)]. The best values are obtained with the pig liver esterase with an optical yield of 86% and a chemical yield of likewise 86% after recrystallization from 59%. The dipropionate and dibutyrate instead of the diacetate showed significantly less favorable optical and chemical yields.
Lipasen aus Candida cylindracea und aus Rhizopus sp. hydrolisieren im Gegensatz zu den Esterasen bevorzugt das S-Acetat mit der Bildung von (1 R, 4 S)-4-Hydroxy-2-cyclopentenyl-acetat (50% ee; 82% chem. Ausbeute).Lipases from Candida cylindracea and from Rhizopus sp. in contrast to the esterases, this preferentially hydrolyzes S-acetate with the formation of (1 R, 4 S) -4-hydroxy-2-cyclopentenyl acetate (50% ee; 82% chemical yield).
Schweineleberesterase wurde später auch an ®Eupergit (Phenol/Formaldehyd-Harz) immobilisiert zur Hydrolyse des cis-Diacetats (1) eingesetzt, wobei in 68% Ausbeute das 1 S-Monoacetat (2a) mit optischer Reinheit von 98% ee gewonnen wurde [K. Laumen, E. H. Reimerdes, M. Schneider "Immobilized Porcine Liver Esterase: A Convenient Reagent for the Preparation of Chiral Building Blocks" Tetrahedron Letters 26, 407-410 (1985)].Pork liver esterase was later used on ®Eupergit (Phenol / formaldehyde resin) immobilized for the hydrolysis of the cis-diacetate (1) used, which in 68% yield 1 S-monoacetate (2a) with an optical purity of 98% ee was won [K. Läum, E. H. Reimerdes, M. Schneider "Immobilized Porcine Liver Esterase: A Convenient Reagent for the Preparation of Chiral Building Blocks "tetrahedron Letters 26, 407-410 (1985)].
Nach der Prüfung zahlreicher Enzyme fanden Deardorff et al. [D. R. Deardorff, A. J. Matthews, D. S. McKeekin and C. L. Craney "A Highly Enantioselective Hydrolysis of cis-3,5-Diacetoxycyclopent-1-ene. An Enzymatic Preparation of 3 (R)-Acetoxy-5(S)-hydroxycyclopent-1-ene" Tetrahedron Letters 27, 1255-1256 (1986)], daß Acetylcholinesterase wiederum in gleicher Weise wie Lipasen, (1 R, 4 S)-4-Hydroxy-2-cyclopentenylacetat bildet, wobei das Produkt in hoher optischer Reinheit (<99% ee) in chemischen Ausbeuten von 94% entsteht.After testing numerous enzymes, Deardorff et al. [D. R. Deardorff, A. J. Matthews, D. S. McKeekin and C. L. Craney "A Highly Enantioselective Hydrolysis of cis-3,5-Diacetoxycyclopent-1-ene. An Enzymatic Preparation of 3 (R) -acetoxy-5 (S) -hydroxycyclopent-1-ene "tetrahedron Letters 27, 1255-1256 (1986)] that acetylcholinesterase again in the same way as lipases, (1 R, 4 S) -4-hydroxy-2-cyclopentenyl acetate forms, the product in high optical purity (<99% ee) in chemical Yields of 94% arise.
Die auf diesen Wegen herstellbaren optisch aktiven 4-Hydroxy-2-cyclopentenylacetate erfordern eine anschließende chemische Oxidation zu dem chiralen Synthon 1-Acetoxy-2-cyclopenten-4-on. Diese Oxidation wird jedoch trotz milder Bedingungen von unerwünschten Nebenreaktionen begleitet, was mit einer gewissen Instabilität des 1-Acetoxy-2-cyclopenten-4-on, das nur bei niedrigen Temperaturen aufbewahrt und transportiert werden kann, zusammenhängt.The optically active 4-hydroxy-2-cyclopentenylacetates that can be prepared in this way require a subsequent chemical oxidation to the chiral synthon 1-acetoxy-2-cyclopenten-4-one. However, this oxidation becomes milder Conditions accompanied by undesirable side reactions, what with a certain instability of 1-acetoxy-2-cyclopenten-4-one, only at low temperatures can be stored and transported.
Demgegenüber stellt die Verbindung mit einem Schutz der Ketogruppe durch Ketalbildung und damit verbundener Blockierung jeder Isomerisierung einen wesentlichen Vorteil dar. So stellt ein Acyl-2-cyclopenten-4-on[2,2-dimethyl-propandiol]-ketal eine stabile Verbindung dar. Selbst der entsprechende Alkohol ist deutlich stabiler als das relativ instabile 1-Hydroxy-2-cyclopenten-4-on. Ein derartiges racemisches Acetat ist durch einfache chemische Synthese leicht zugänglich. Beispielsweise erhält man das Cyclopentendiol bzw. das entsprechende Diketon als erste Vorstufen gemäß Organic Synthesis Vol. V, S. 324 bzw. S. 414. Danach kann das Diketon mit 2,2,5,5-Tetramethyl-1,3-dioxan unter BF₃-Etheratkatalyse zum Monoketal umgesetzt werden. Anschließend kann die verbleibende Ketogruppe mit NaBH₄ nach Luche reduziert (JACS 100, 2226) und die Acetylierung mit Acetanhydrid/Pyridin durchgeführt werden. Dabei bietet die Herstellung des ketalgeschützten Ketoacetats trotz höherer Stufenzahl aufgrund der besseren Stabilität und der höheren Ausbeute Vorteile gegenüber der Synthese eines cis-Diacetates. In contrast, the connection with a protection of Keto group through ketal formation and associated Blocking any isomerization is a major advantage So represents an acyl-2-cyclopenten-4-one [2,2-dimethyl-propanediol] ketal a stable connection. Even the corresponding alcohol is much more stable than that relatively unstable 1-hydroxy-2-cyclopenten-4-one. A such racemic acetate is by simple chemical Synthesis easily accessible. For example, you get that Cyclopentenediol or the corresponding diketone first Precursors according to Organic Synthesis Vol. V, p. 324 or p. 414. Then the diketone can with 2,2,5,5-tetramethyl-1,3-dioxane under BF₃ etherate catalysis be converted to the monoketal. Then the remaining keto group reduced with NaBH₄ according to Luche (JACS 100, 2226) and acetylation with acetic anhydride / pyridine be performed. The manufacturing offers of the ketal-protected ketoacetate despite the higher number of stages due to the better stability and the higher yield Advantages over the synthesis of a cis-diacetate.
Zur Herstellung einer optisch aktiven Komponente des Ketals als chirales, stabiles Synthon ist ebenfalls eine Racemattrennung erforderlich.For the production of an optically active component of the ketal as a chiral, stable synthon is also one Racemate separation required.
Unter den zahlreichen Literatur-Beispielen [J. B. Jones "Enzymes in Organic Synthesis" Tetrahedron 42, 3351-3403 (1986)] war bisher die enzymatische Racemattrennung eines 1-Acyloxy-2-cyclopenten-4-on[2,2-dimethylpropandiol]ketals oder eines strukturanalogen Substrats nicht beschrieben.Among the numerous literature examples [J. B. Jones "Enzymes in Organic Synthesis" Tetrahedron 42, 3351-3403 (1986)] was previously the enzymatic separation of racemates 1-acyloxy-2-cyclopenten-4-one [2,2-dimethylpropanediol] ketal or a structurally analogous substrate described.
Lediglich eine Acylhydrolyse von racemischen 2-substituierten 3-Acyloxy-5-oxo-1-cyclopenten-1-heptansäurederivaten (4) mit Saccharomyces cerevisiae ist bekannt (F. B. Colton, W. J. Marsheeck, M. Miano "Verfahren zur Herstellung von 2-substituierten-3-α-hydroxy-5-oxo-1-cyclopenten-1-heptansäurederivaten (5) durch stereospezifische mikrobiologische Hydrolyse" DE 2 31 859).Only acyl hydrolysis of racemic 2-substituted 3-acyloxy-5-oxo-1-cyclopenten-1-heptanoic acid derivatives (4) with Saccharomyces cerevisiae is known (FB Colton, WJ Marsheeck, M. Miano "Process for the preparation of 2-substituted- 3- α- hydroxy-5-oxo-1-cyclopentene-1-heptanoic acid derivatives (5) by stereospecific microbiological hydrolysis "DE 2 31 859).
R = Alkyl C₁-C₇
R′ = Styryl o. a.
R′′ = Acyl C₁-C₇R = alkyl C₁-C₇
R ′ = styryl or the like
R ′ ′ = acyl C₁-C₇
Es wurde nun gefunden, daß racemisches 1-Acyloxy-2-cyclopenten-4-on[2,2-dimethylpropandiol]ketal mit Hilfe von Lipasen aus Pseudomonas fluorescens und/oder aus Mucor miehei bzw. Rhizomucor miehei in hoher Ausbeute und Enantiomerenreinheit aufgetrennt werden kann. Dies war insbesondere überraschend, da die sterischen Bedingungen einer derart veränderten Substratstruktur nicht bekannt sind, und aufgrund mangelnder Kenntnis über die "active site" selbst einfacher Hydrolasen nicht vorausgesagt werden kann, ob eine stereoselektive Hydrolyse tatsächlich möglich ist.It has now been found that racemic 1-acyloxy-2-cyclopenten-4-one [2,2-dimethylpropanediol] ketal with help of lipases from Pseudomonas fluorescens and / or from Mucor miehei or Rhizomucor miehei in high yield and Enantiomeric purity can be separated. This was particularly surprising given the steric conditions such a changed substrate structure is not known and due to a lack of knowledge about the "active site "even simple hydrolases cannot be predicted may whether stereoselective hydrolysis is actually possible is.
Die Erfindung betrifft somit ein Verfahren zur Racematspaltung von 1-Acyloxy-2-cyclopenten-4-on[2,2-dimethylpropandiol]ketal der allgemeinen Formel I,The invention thus relates to a method for Racemate resolution of 1-acyloxy-2-cyclopenten-4-one [2,2-dimethylpropanediol] ketal of the general formula I,
in der R eine Acylgruppe mit einer Kettenlänge von C₁ bis C₁₆ ist, das dadurch gekennzeichnet ist, daß das genannte Substrat mit einer Lipase erhältlich aus Pseudomonas fluorescens und/oder aus Mucor miehei bzw. Rhizomucor miehei inkubiert wird.in the R an acyl group with a chain length of C₁ to C₁₆, which is characterized in that the said Substrate with a lipase available from Pseudomonas fluorescens and / or from Mucor miehei or Rhizomucor miehei is incubated.
Im folgenden wird die Erfindung detailliert beschrieben, insbesondere in ihrer bevorzugten Ausführungsform. Ferner wird die Erfindung in den Patentansprüchen definiert.The invention is described in detail below. especially in its preferred embodiment. Further the invention is defined in the claims.
Als Substrat für die Lipasen eignet sich 1-Acyloxy-2-cyclopenten-4-on[2,2-dimethylpropandiol]ketal, wobei die Acylgruppe eine Kettenlänge von C₁ bis C₁₆, bevorzugt C₁ bis C₈, besitzt. Insbesondere bevorzugt wird racemisches 1-Acetoxy-2-cyclopenten-4-on[2,2-dimethylpropandiol]ketal als Substrat eingesetzt. Die Lipasen können dem Substrat sowohl einzeln als auch im Gemisch zugesetzt werden. Es wird zweckmäßig in wäßrigem Medium gearbeitet, wobei ein organisches Lösungsmittel, beispielsweise Ethanol oder DMSO, als Lösungsvermittler eingesetzt werden kann. Das Substrat kann der Reaktion portionsweise oder die Gesamtmenge einmalig zugeführt werden. Suitable substrate for the lipases is 1-acyloxy-2-cyclopenten-4-one [2,2-dimethylpropanediol] ketal, being the Acyl group has a chain length of C₁ to C₁₆, preferably C₁ to C₈. Racemic is particularly preferred 1-acetoxy-2-cyclopenten-4-one [2,2-dimethylpropanediol] ketal used as a substrate. The lipases can be the substrate can be added both individually and in a mixture. It will expediently worked in an aqueous medium, a organic solvent, for example ethanol or DMSO, can be used as a solubilizer. The substrate may be the reaction in portions or the total be fed once.
Die Reaktion läuft bei 10 bis 50°C, bevorzugt 20 bis 35°C ab. Bei höheren Temperaturen werden die Enzyme zunehmend desaktiviert. Bei niedrigeren Temperaturen läuft die Reaktion zu langsam ab. Der pH-Wert liegt zwischen 6 und 8, bevorzugt zwischen 6,5 und 7,5. Die Enzymkonzentration kann in weiten Bereichen schwanken. Zweckmäßig wählt man bei einer Substratkonzentration von 1 bis 100 mMol/l, bevorzugt 5 bis 50 mMol/l eine Enzymkonzentration von 1000 bis 100 000 U/mMol Substrat, vorzugsweise 10 000 bis 50 000 U/mMol Substrat. Ein Unit (U) der Enzymaktivität bezeichnet die Menge, die pro Minute bei pH 7,0 und einer Temperatur von 37°C, aus einem Triglycerid 1,0 Mikroäquivalent Fettsäure hydrolytisch abspalten.The reaction runs at 10 to 50 ° C, preferably 20 to 35 ° C from. At higher temperatures, the enzymes increase deactivated. It runs at lower temperatures Response too slow. The pH is between 6 and 8, preferably between 6.5 and 7.5. The enzyme concentration can fluctuate in wide ranges. Appropriately choose one at a substrate concentration of 1 to 100 mmol / l, preferably 5 to 50 mmol / l an enzyme concentration of 1000 to 100,000 U / mmol substrate, preferably 10,000 to 50,000 U / mmol substrate. One unit (U) of enzyme activity is called the amount per minute at pH 7.0 and a temperature of 37 ° C, from a triglyceride 1.0 microequivalents Split off the fatty acid hydrolytically.
Die Enzyme können in freier Form oder immobilisiert eingesetzt werden. Die Immobilisierung geschieht nach herkömmlichen Methoden, wie beispielsweise in Laumen et al. Tetrahedron Letters 26, 407 (1985) ausgeführt. Wegen ausreichender Standzeiten des immobilisierten Systems ist auch eine Nutzung in kontinuierlichen Verfahren möglich. Es ist ebenfalls möglich, ganze Zellen der Mikroorganismen einzusetzen, aus denen die Enzyme gewonnen werden können, insbesondere Pseudomonas fluorescens und Mucor bzw. Rhizomucor miehei.The enzymes can be in free form or immobilized be used. The immobilization happens after conventional methods, such as, for example, in Laum et al. Tetrahedron Letters 26, 407 (1985). Because of is sufficient lifespan of the immobilized system use in continuous processes is also possible. It is also possible to remove whole cells of the microorganisms from which the enzymes can be obtained, in particular Pseudomonas fluorescens and Mucor or Rhizomucor miehei.
In den Beispielen wird die Erfindung im einzelnen weiter erläutert. Die Prozentangaben beziehen sich auf das Gewicht, wenn nicht anders angegeben.The invention will be further detailed in the examples explained. The percentages refer to the Weight unless otherwise stated.
In zwei 2-l-Erlenmeyerkolben werden jeweils 500 ml 0,2 molarer Kaliumphosphatpuffer (pH 7,0), 0,5 g racemisches 1-Acetoxy-2-cyclopenten-4-on[2,2-dimethylpropandiol]ketal (6) und 2,5 g Lipase (1 g 32 700 U) aus Pseudomonas fluorescens Typ P (Fa. Amano, Nagoya, Japan, Chargen-Nr. LPJ 12517) gegeben.In two 2 l Erlenmeyer flasks 500 ml of 0.2 molar potassium phosphate buffer (pH 7.0), 0.5 g racemic 1-acetoxy-2-cyclopenten-4-one [2,2-dimethylpropanediol] ketal (6) and 2.5 g lipase (1 g 32 700 U) from Pseudomonas fluorescens Type P (Amano, Nagoya, Japan, batch number LPJ 12517) given.
Die Kolben werden 16 h bei 27°C mit 120 Upm geschüttelt.The flasks are shaken at 120 rpm for 16 h at 27 ° C.
Anschließend werden die Inhalte beider Kolben vereinigt und dreimal mit 500 ml Dichlormethan extrahiert. Die organische Phase wird abgetrennt, über Na₂SO₄ getrocknet und auf ein Volumen von etwa 3 ml eingeengt. Der Extrakt wird auf einer Si-60-Säule (Typ "Lobar B"; Fa. Merck, Darmstadt) aufgetrennt (Elutionsmittel n-Hexan/Essigester-Gradient von 0-20% Essigester) und zur quantitativen Bestimmung ausgewogen. Die Enantiomerenreinheit (ee) wird nach Herstellung der Esterderivate mit Moshersäurechlorid durch NMR bestimmt.Then the contents of both pistons are combined and extracted three times with 500 ml dichloromethane. The organic Phase is separated, dried over Na₂SO₄ and on Volume of about 3 ml concentrated. The extract is on a Si-60 column (type "Lobar B"; from Merck, Darmstadt) separated (eluent n-hexane / ethyl acetate gradient from 0-20% ethyl acetate) and for quantitative determination balanced. The enantiomeric purity (ee) becomes Production of the ester derivatives with mosheric acid chloride by NMR determined.
Ausbeuten:
a) Acetat (8): 433,4 mg eeR: 96%
b) Alkohol (7): 170 mg eeS: 95%Exploit:
a) Acetate (8): 433.4 mg ee R : 96%
b) Alcohol (7): 170 mg ee S : 95%
In einen 2-l-Erlenmeyerkolben werden jeweils 500 ml 0,2 molarer Kaliumphosphatpuffer (pH 7,0), 600 mg racemisches 1-Acetoxy-2-cyclopenten-4-on[2,2-dimethylpropandiol]ketal und 2,5 g Amano-Lipase Typ P (Chargen-Nr. LPJ 12517) gegeben.500 ml of 0.2 in each case are placed in a 2 l Erlenmeyer flask molar potassium phosphate buffer (pH 7.0), 600 mg racemic 1-acetoxy-2-cyclopenten-4-one [2,2-dimethylpropanediol] ketal and 2.5 g Amano lipase type P (batch no.LPJ 12517) given.
Der Kolben wird bei 27°C mit 120 Upm 5 h geschüttelt.The flask is shaken at 27 ° C at 120 rpm for 5 h.
Der Kolbeninhalt wird dreimal mit 500 ml Dichlormethan
extrahiert. Die organische Phase wird abgetrennt, über
Na₂SO₄ getrocknet und auf ein Volumen von ca. 1,5 ml
eingeengt. Der Alkohol wird durch Auftrennung des Extraktes
mit einer Si-60-Säule (Typ "Lobar B", Fa. Merck) erhalten
(Elutionsmittel n-Hexan/Essigester-Gradient von 0-20%
Essigester).
Ausbeute: 124 mg S-Alkohol (7) eeS: 97%The flask contents are extracted three times with 500 ml dichloromethane. The organic phase is separated, dried over Na₂SO₄ and concentrated to a volume of about 1.5 ml. The alcohol is obtained by separating the extract with a Si-60 column (type "Lobar B", Merck) (eluent n-hexane / ethyl acetate gradient from 0-20% ethyl acetate).
Yield: 124 mg S-alcohol (7) ee S : 97%
In einen 1-l-Erlenmeyerkolben werden 200 ml 0,2 molarer Kaliumphosphatpuffer (pH 7,0), 200 mg racemisches 1-Acetoxy-2-cyclopenten-4-on[2,2-dimethylpropandiol]-ketal und 1 g Lipase/Esterase aus Mucor miehei (Fa. Gist-Brocades, Delft, Niederlande, Chargen-Nr. 055-6-LRE) gegeben.In a 1 liter Erlenmeyer flask, 200 ml becomes 0.2 molar Potassium phosphate buffer (pH 7.0), 200 mg racemic 1-acetoxy-2-cyclopenten-4-one [2,2-dimethylpropanediol] ketal and 1 g of lipase / esterase from Mucor miehei (Gist-Brocades, Delft, Netherlands, batch no. 055-6-LRE).
Der Kolben wird bei 27°C mit 120 Upm 22 h geschüttelt.The flask is shaken at 27 ° C at 120 rpm for 22 h.
Der Kolbeninhalt wird dreimal mit 100 ml Dichlormethan
extrahiert. Die organischen Phasen werden abgetrennt,
vereinigt und über Natriumsulfat getrocknet. Nach dem
Einengen wird der Extrakt mit einer Si-60-Säule (Typ "Lobar
A", Fa. Merck) aufgetrennt (Elutionsmittel n-Hexan/Essigester-Gradient
von 0-10% Essigester).
Ausbeute: 31,4 mg S-Alkohol ee(S): 95%The flask contents are extracted three times with 100 ml dichloromethane. The organic phases are separated, combined and dried over sodium sulfate. After concentration, the extract is separated using a Si-60 column (type "Lobar A", Merck) (eluent n-hexane / ethyl acetate gradient of 0-10% ethyl acetate).
Yield: 31.4 mg of S-alcohol ee (S) : 95%
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ID=6332381
Family Applications (1)
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