DE3702637A1 - Dry analytical element for the measurement of amylase activity - Google Patents

Dry analytical element for the measurement of amylase activity

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DE3702637A1
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Yoshikazu Amano
Harumi Katsuyama
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Abstract

The invention relates to a multilayer dry analytical element for the analysis of a liquid with at least two water-permeable layers which are provided on a transparent support, where at least one of the water-permeable layers comprises a self-colouring oligosaccharide substrate which is able to dissociate into a trisaccharide, disaccharide or monosaccharide and to which p-nitrophenol is bound in the presence of amylase. The other water-permeable layer, which is provided between the water-permeable layer which contains the self-colouring oligosaccharide substrate and the support, comprises a glucosidase. The invention furthermore relates an analytical element in which one layer which contains light-reflecting or light-absorbing particles in an amount such that the optical density is at least 1.0 and not more than 2.3 is provided between the layer which contains the oligosaccharide substrate and the layer which contains the glucosidase. An alpha -glucosidase or beta -glucosidase can be used as glucosidase. The layer which contains the oligosaccharide substrate is preferably essentially glucosidase-free.

Description

Die Erfindung betrifft ein trockenes mehrschichtiges ana­ lytisches Element für die Messung der Enzymaktivität, ins­ besondere der Amylaseaktivität.The invention relates to a dry multilayer ana lytic element for measuring enzyme activity, ins particular amylase activity.

Es sind Analyseverfahren für Amylase bekannt, bei denen ein Oligosaccharidsubstrat verwendet wird, welches sich selbst entwickelt (vgl. Nature, Bd. 182, S. 525 bis 526, 1958, und die japanische Patentanmeldung (OPI) Nr. 11092/78; der Ausdruck "OPI", wie er hierin verwendet wird, bedeu­ tet eine nichtgeprüfte veröffentlichte Anmeldung). Insbe­ sondere ist ein Amylase-Analyseverfahren, bei dem ein Oligosaccharidderivat verwendet wird (beispielsweise PNP-G 5 oder PNP-G 7), welches durch Einführung von p-Nitro­ phenol-Farbstoff (PNP) in verschiedene Oligosaccharide (beispielsweise G 5 oder G 7) erhalten wird, und bei dem ein Glucosidaseenzym verwendet wird, hinsichtlich der genauen quantitativen Bestimmung und Genauigkeit ausgezeichnet, verglichen mit den bekannten "Farbstoffstärkeverfahren" (vgl. H.U. Bergmeyer, "Methods of Enzymatic Analysis", S. 894), bei dem eine Präzipitation erfolgt, und die Be­ stimmung mit einem Farbstoffstärkesubstrat erfolgt, das man erhält, indem man Stärke mit einem Reaktivfarbstoff färbt, beispielsweise blaue Stärke oder Amylopectinazul, und wobei der Unterschied in der Molekulargewichtsvertei­ lung ausgenutzt wird. Das Amylaseanalyseverfahren besitzt den weiteren Vorteil, daß eine kontinuierliche Analyse der enzymatischen Reaktion (Geschwindigkeitsanalyse in engem Sinn) möglich ist. Analysis methods for amylase are known which use an oligosaccharide substrate which develops itself (see Nature, Vol. 182, pp. 525 to 526, 1958) and Japanese Patent Application (OPI) No. 11092/78; the expression "OPI" as used herein means an unexamined published application). In particular, there is an amylase analysis method in which an oligosaccharide derivative is used (for example PNP- G 5 or PNP- G 7 ), which is introduced into various oligosaccharides (for example G 5 or G 7 ) by introducing p-nitro phenol dye (PNP) ) is obtained, and in which a glucosidase enzyme is used, excellent in terms of precise quantitative determination and accuracy, compared with the known "dye starch methods" (cf. HU Bergmeyer, "Methods of Enzymatic Analysis", p. 894), in which a precipitation and the determination is carried out with a dye starch substrate which is obtained by dyeing starch with a reactive dye, for example blue starch or amylopectinazul, and the difference in the molecular weight distribution is exploited. The amylase analysis method has the further advantage that a continuous analysis of the enzymatic reaction (speed analysis in a narrow sense) is possible.

Dieses Verfahren kann ebenfalls mittels eines trockenen mehrschichtigen analytischen Elements, wie es in der japa­ nischen Patentanmeldung (OPI) Nr. 66359/82 beschrieben wird, durchgeführt werden. Sind jedoch ein sich selbst färbendes Substrat, wie PNP-G 5 und PNP-G 7, und ein Gluco­ sidaseenzym in der gleichen Schicht vorhanden, erleidet das sich selbst färbende Substrat eine Dissoziierung, wel­ che durch das Glucosidaseenzym verursacht wird, unabhängig von der Anwesenheit von Amylase, welche nachgewiesen wer­ den soll. Dies bewirkt, daß sich das sich selbst färbende Substrat durch PNP verfärbt und eine Hintergrunddichte bzw. einen Hintergrund bildet.This method can also be carried out using a dry multilayer analytical element as described in Japanese Patent Application (OPI) No. 66359/82. However, if a self-coloring substrate such as PNP- G 5 and PNP- G 7 and a glucosidase enzyme are present in the same layer, the self-coloring substrate suffers from dissociation caused by the glucosidase enzyme regardless of the presence of amylase, which should be detected. This causes the self-coloring substrate to discolour through PNP and form a background density or background.

PNP besitzt eine maximale Absorptionswellenlänge im Be­ reich von 410 nm (400 nm im Falle eines Lösungsverfahrens), welche den spektralen Absorptionsbereich von Haemoglobin (maximale Absorptionswellenlänge: 414 nm) oder Biliru (maximale Absorptionswellenlänge: 430 nm und 450 nm), die in der flüssigen Probe vorhanden sein können, überlappt. Daher wird die Messung, bedingt durch die Anwesenheit von Haemoglobin oder Bilirubin, gestört. Bei einem Reaktions­ geschwindigkeitsverfahren, welches normalerweise zur Mes­ sung der Enzymaktivität verwendet wird, führt die Störung durch Haemoglobin oder Bilirubin zu einem negativen Fehler bei den Messungen der Amylaseaktivität. Insbesondere tritt, wenn eine Haemolyse durch Krankheit oder während der Her­ stellung des Serums aus der Blutprobe erfolgt, eine Störung durch Haemoglobin auf.PNP has a maximum absorption wavelength in the loading range of 410 nm (400 nm in the case of a solution process), which is the spectral absorption range of hemoglobin (maximum absorption wavelength: 414 nm) or Biliru (maximum absorption wavelength: 430 nm and 450 nm), the overlap in the liquid sample. Therefore, the measurement is due to the presence of Hemoglobin or bilirubin, disrupted. With a reaction speed method, which is normally used for measuring Enzyme activity is used leads to the disorder caused by hemoglobin or bilirubin to a negative error in the measurements of amylase activity. In particular, if haemolysis due to illness or during the fro position of the serum from the blood sample occurs, a disruption due to hemoglobin.

Der vorliegenden Erfindung liegt die Aufgabe zugrunde, ein trockenes mehrschichtiges analytisches Element für die Messung der Amylaseaktivität zur Verfügung zu stellen, wel­ ches keine Hintergrunddichte, bedingt durch PNP, bildet, wobei die Hintergrunddichte durch Dissoziation eines sich selbst färbenden Substrats, die durch ein Glucosidaseenzym verursacht wird, auftritt, unabhängig davon, ob Amylase, welche nachgewiesen werden soll, vorhanden ist.The present invention is based on the object dry multilayer analytical element for the To provide measurement of amylase activity, wel ches no background density due to PNP, where the background density by dissociation of a self-coloring substrate produced by a glucosidase enzyme occurs, regardless of whether amylase, which is to be proven.

Erfindungsgemäß soll ein trockenes mehrschichtiges Analyse­ element für die Messung der Amylaseaktivität zur Verfügung gestellt werden, bei dem eine Störung durch Haemoglobin oder Bilirubin bei dem Reaktionsgeschwindigkeitsverfahren (Reaktionsrateverfahren) wirksam verhindert werden kann.According to the invention, a dry multi-layer analysis is intended element for measuring amylase activity be put in which a disturbance by hemoglobin or bilirubin in the reaction rate method (Response rate method) can be effectively prevented.

Gegenstand der Erfindung ist ein mehrschichtiges trocke­ nes analytisches Element für die Verwendung bei der Ana­ lyse einer Flüssigkeit mit mindestens zwei wasserpermeab­ len Schichten, die auf einem transparenten Träger vorge­ sehen sind, wobei mindestens eine der wasserpermeablen Schichten ein sich selbst färbendes Oligosaccharidsubstrat umfaßt, welches in ein Trisaccharid, Disaccharid oder Mono­ saccharid dissoziieren kann, und an welches p-Nitrophenol in Anwesenheit von Amylase gebunden ist und wobei die an­ dere wasserdurchlässige Schicht zwischen der wasserdurch­ lässigen Schicht, welche ein sich selbst färbendes Oligo­ saccharidsubstrat enthält, und dem Träger vorgesehen ist, eine Glucosidase enthält. Gemäß einer anderen Ausführungs­ form ist eine weitere Schicht vorgesehen, welche lichtre­ flektierende oder lichtabsorbierende Teilchen in solcher Menge enthält, daß die optische Dichte mindestens 1,0 und nicht mehr als 2,3 beträgt, und wobei diese weitere Schicht zwischen der Schicht, welche ein Oligosaccharidsubstrat, und der Schicht, die eine Glucosidase enthält, vorgesehen ist.The invention relates to a multilayer dry analytical element for use in the Ana lysis of a liquid with at least two water permeab len layers, which are featured on a transparent support are seen, with at least one of the water permeable Layers a self-coloring oligosaccharide substrate which comprises a trisaccharide, disaccharide or mono saccharide can dissociate, and to which p-nitrophenol is bound in the presence of amylase and wherein the to their water-permeable layer between the water-permeable casual layer, which is a self-coloring oligo contains saccharide substrate, and the carrier is provided, contains a glucosidase. According to another embodiment Another layer is provided in the form of light reflective or light absorbing particles in such Quantity contains that the optical density is at least 1.0 and is not more than 2.3, and this additional layer between the layer, which is an oligosaccharide substrate, and the layer containing a glucosidase is.

Die Schicht, welche das Oligosaccharidsubstrat enthält, ist bevorzugt im wesentlichen glucosidasefrei. The layer containing the oligosaccharide substrate is preferably essentially glucosidase free.

Als solche Glucosidase kann man eine α-Glucosidase oder β-Glucosidase verwenden.An α- glucosidase or β- glucosidase can be used as such a glucosidase.

Die vorliegende Erfindung kann mit den verschiedensten be­ kannten trockenen Analyseelementen durchgeführt werden. Insbesondere kann die vorliegende Erfindung mit einem Ele­ ment durchgeführt werden, welches einen festen Träger um­ faßt, der sowohl für das sich selbst färbende Substrat als auch für die zu prüfende Flüssigkeit durchlässig ist. Ein solches Element kann ein mehrschichtiges Element sein, wel­ ches eine reflektierende Schicht, eine poröse Flüssigkeits­ entwicklungsschicht, eine Klebstoffschicht, eine Filter­ schicht, eine Wasserabsorptionsschicht, eine Unterschicht und andere an sich bekannte Schichten, wie auch einen Träger, eine Reaktionsreagensschicht und eine Nachweis­ schicht, umfaßt. Beispiele für ein solches Analyselement werden in den US-Patentschriften 39 92 158 und 40 42 335 und in der japanischen Patentanmeldung (OPI) Nr. 164356/80 beschrieben.The present invention can be with various known dry analysis elements. In particular, the present invention with an Ele ment to be carried out, which is a solid support summarizes that for both the self-coloring substrate is also permeable to the liquid to be tested. A such element can be a multi-layer element, wel ches a reflective layer, a porous liquid development layer, an adhesive layer, a filter layer, a water absorption layer, an underlayer and other layers known per se, as well as one Carrier, a reaction reagent layer and detection layer, includes. Examples of such an analysis element are disclosed in U.S. Patent Nos. 39 92 158 and 40 42 335 and in Japanese Patent Application (OPI) No. 164356/80 described.

Wenn ein solches Element verwendet wird, wird das erfin­ dungsgemäße trockene analytische Element bevorzugt entspre­ chend einer der folgenden Bauarten bzw. Konfigurationen bzw. Ausführungsformen verwendet:If such an element is used, it will be invented dry analytical element according to the invention preferably corresponds according to one of the following types or configurations or embodiments used:

  • 1. Eine Ausführungsform umfaßt einen Träger mit einer Reagensschicht und einer Entwicklungsschicht für eine Flüssigkeit, die in der angegebenen Reihenfolge vorgesehen sind. Bei dieser Ausführungsform enthält die Reagens­ schicht eine Glucosidase, und die Entwicklungsschicht für die Flüssigkeit enthält ein Oligosaccharidsubstrat.1. An embodiment comprises a carrier with a Reagent layer and a development layer for one Liquid provided in the order listed are. In this embodiment, the reagent contains layer a glucosidase, and the development layer for the liquid contains an oligosaccharide substrate.
  • 2. Eine Ausführungsform, welche einen Träger und darauf eine Nachweisschicht, eine Reagensschicht und eine Flüssigkeitsentwicklungsschicht, die in dieser Reihenfol­ ge vorgesehen sind, umfaßt. Bei dieser Ausführungsform enthält die Reagensschicht eine Glucosidase, und die Flüssigkeitsentwicklungsschicht enthält ein Oligosaccharidsubstrat.2. An embodiment which a carrier and thereon a detection layer, a reagent layer and a Liquid development layer, which in this order ge are provided. In this embodiment the reagent layer contains a glucosidase, and the Liquid development layer contains an oligosaccharide substrate.
  • 3. Eine Ausführungsform, welche einen Träger mit einer zweiten Reagensschicht, einer ersten Reagensschicht und einer Flüssigkeitsentwicklungsschicht, die in der an­ gegebenen Reihenfolge darauf vorgesehen sind, umfaßt. Bei dieser Ausführungsform enthält die zweite Reagensschicht eine Glucosidase, und die erste Reagensschicht enthält ein Oligosaccharidsubstrat.3. An embodiment which has a carrier a second reagent layer, a first reagent layer and a liquid development layer in the an given order are included. At in this embodiment contains the second reagent layer a glucosidase and contains the first reagent layer an oligosaccharide substrate.
  • 4. Eine Ausführungsform, welche einen Träger mit einer Nachweisschicht, eine zweite Reagensschicht, eine erste Reagensschicht und eine Flüssigkeitsentwicklungs­ schicht, die in der angegebenen Reihenfolge vorgesehen sind, umfaßt. Bei dieser Ausführungsform enthält die zwei­ te Reagensschicht eine Glucosidase, und die erste Reagens­ schicht enthält ein Oligosaccharidsubstrat.4. An embodiment which has a carrier a detection layer, a second reagent layer, a first reagent layer and a liquid development layer provided in the order listed are included. In this embodiment, it contains two reagent layer, a glucosidase, and the first reagent layer contains an oligosaccharide substrate.

Bei der vorliegenden Erfindung wird bevorzugt die Ausfüh­ rungsform (2) verwendet. Bei den Ausführungsformen (1) bis (4) können eine Lichtabschirmschicht und/oder Filter­ schicht zwischen der Nachweisschicht und der Reagensschicht, zwischen der Reagensschicht und der Flüssigkeitsentwick­ lungsschicht oder zwischen der zweiten Reagensschicht und der ersten Reagensschicht vorgesehen sein.In the present invention, the embodiment ( 2 ) is preferably used. In embodiments ( 1 ) to ( 4 ), a light shielding layer and / or filter layer may be provided between the detection layer and the reagent layer, between the reagent layer and the liquid development layer, or between the second reagent layer and the first reagent layer.

Wenn solch eine Lichtabschirmungsschicht vorgesehen ist, wird das erfindungsgemäße trockene analytische Element normalerweise entsprechend einer der folgenden Ausfüh­ rungsformen verwendet: If such a light shielding layer is provided, becomes the dry analytical element according to the invention usually according to one of the following forms used:

  • 5. Eine Ausführungsform, welche einen Träger mit einer Reagensschicht, einer Lichtabschirmungsschicht und einer Flüssigkeitsentwicklungsschicht, die in der angege­ benen Reihenfolge vorgesehen sind, umfaßt. Bei einer sol­ chen Ausführungsform enthält die Reagensschicht eine Glu­ cosidase, und die Flüssigkeitsentwicklungsschicht enthält ein Oligosaccharidsubstrat.5. An embodiment which has a carrier a reagent layer, a light shielding layer and a liquid development layer, which in the specified ben order are provided. With a sol Chen embodiment, the reagent layer contains a glu cosidase, and contains the liquid development layer an oligosaccharide substrate.
  • 6. Eine Ausführungsform, die einen Träger mit einer Nachweisschicht, einer Reagensschicht, einer Lichtabschir­ mungsschicht und einer Flüssigkeitsentwicklungsschicht, die in der angegebenen Reihenfolge vorgesehen sind, umfaßt. Bei einer solchen Ausführungsform enthält die Reagensschicht eine Glucosidase, und die Flüssigkeitsentwicklungsschicht enthält ein Oligosaccharidsubstrat.6. An embodiment that a carrier with a Detection layer, a reagent layer, a light shield mung layer and a liquid development layer, provided in the order given. In such an embodiment, the reagent layer contains a glucosidase, and the liquid development layer contains an oligosaccharide substrate.
  • 7. Eine Ausführungsform, welche einen Träger mit einer zweiten Reagensschicht, einer Lichtabschirmungs­ schicht, einer ersten Reagensschicht und einer Flüssig­ keitsentwicklungsschicht, die in der angegebenen Reihen­ folge vorgesehen sind, umfaßt. Bei einer solchen Ausführungs­ form enthält die zweite Reagensschicht bevorzugt eine Glu­ cosidase. Die erste Reagensschicht enthält bevorzugt ein Oligosaccharidsubstrat.7. An embodiment which has a carrier a second reagent layer, a light shield layer, a first reagent layer and a liquid development layer in the given series follow are provided. With such an execution form, the second reagent layer preferably contains a Glu cosidase. The first reagent layer preferably contains a Oligosaccharide substrate.
  • 8. Eine Ausführungsform, welche einen Träger mit einer Nachweisschicht, einer zweiten Reagensschicht, einer Lichtabschirmungsschicht, einer ersten Reagensschicht und einer Flüssigkeitsentwicklungsschicht, die in der angege­ benen Reihenfolge vorgesehen sind, umfaßt. Bei einer sol­ chen Ausführungsform enthält die zweite Reagensschicht be­ vorzugt eine Glucosidase. Die erste Reagensschicht enthält bevorzugt ein Oligosaccharidsubstrat. 8. An embodiment which has a carrier a detection layer, a second reagent layer, one Light shielding layer, a first reagent layer and a liquid development layer, which in the specified ben order are provided. With a sol Chen embodiment contains the second reagent layer prefers a glucosidase. The first reagent layer contains preferably an oligosaccharide substrate.
  • 9. Eine Ausführungsform, welche einen Träger mit einer zweiten Reagensschicht, einer ersten Reagensschicht, einer Lichtabschirmungsschicht und einer Flüssigkeitsent­ wicklungsschicht, die in der angegebenen Reihenfolge vor­ gesehen sind, umfaßt. Bei einer solchen Ausführungsform enthält die erste Reagensschicht bevorzugt eine Glucosi­ dase. Die Flüssigkeitsentwicklungsschicht enthält bevor­ zugt ein Oligosaccharidsubstrat.9. An embodiment which has a carrier a second reagent layer, a first reagent layer, a light shielding layer and a liquid ent winding layer, in the order given are seen included. In such an embodiment the first reagent layer preferably contains a glucosi that. The liquid development layer contains before adds an oligosaccharide substrate.

Bei der vorliegenden Erfindung wird die Ausführungsform (6) bevorzugt verwendet. Bei den Ausführungsformen (5) bis (9) kann eine Filterschicht weiter zwischen der Nachweis­ schicht und der Reagensschicht, zwischen der Reagens­ schicht und der Flüssigkeitsentwicklungsschicht oder zwi­ schen der zweiten Reagensschicht und der ersten Reagens­ schicht vorgesehen sein.In the present invention, the embodiment ( 6 ) is preferably used. In embodiments ( 5 ) to ( 9 ), a filter layer may be further provided between the detection layer and the reagent layer, between the reagent layer and the liquid development layer, or between the second reagent layer and the first reagent layer.

In einem bevorzugten erfindungsgemäßen Analyseelement ist eine Lichtabschirmungsschicht zwischen der Schicht, welche ein sich selbst färbendes Oligosaccharidsubstrat enthält, und der Schicht, welche eine Glucosidase enthält, vorgesehen. Die Lichtabschirmungsschicht enthält lichtre­ flektierende feinverteilte Teilchen, so daß die optische Dichte im Bereich von 1,0 bis 2,3 liegt, so daß die nor­ male Durchlässigkeit 0,5% oder mehr und nicht mehr als 10% beträgt.In a preferred analysis element according to the invention is a light shielding layer between the layer, which is a self-coloring oligosaccharide substrate contains, and the layer containing a glucosidase, intended. The light shielding layer contains light reflective finely divided particles, so that the optical Density is in the range of 1.0 to 2.3, so that the nor male permeability 0.5% or more and not more than 10% is.

Bei der vorliegenden Erfindung kann das sich selbst fär­ bende Substrat in zwei oder mehreren Schichten (beispiels­ weise in der ersten Reagensschicht und in der Flüssigkeits­ entwicklungsschicht) vorhanden sein. In diesem Fall kann das sich selbst färbende Substrat in größerer Menge in einer Schicht, die vom Träger weiter entfernt ist als in einer Schicht, die näher am Träger ist, oder in einer Schicht, die näher am Träger ist als in einer Schicht, die vom Träger ferner ist, verteilt sein.In the present invention, this can self-color practicing substrate in two or more layers (example wise in the first reagent layer and in the liquid development layer). In this case the self-coloring substrate in larger quantities a layer farther away from the support than in a layer closer to the support or in one Layer closer to the support than in a layer, which is further from the carrier.

Bei der vorliegenden Erfindung kann die Glucosidase eben­ falls in zwei oder mehreren Schichten (beispielsweise der Nachweisschicht und einer Reagensschicht oder einer zwei­ ten Reagensschicht und einer ersten Reagensschicht) vor­ handen sein. In diesem Fall kann die Glucosidase eben­ falls in größerer Menge in einer Schicht, die ferner vom Träger ist als in einer Schicht, die näher am Träger ist, oder in einer Schicht, die näher am Träger ist als in einer Schicht, die ferner vom Träger ist, vorhanden sein.In the present invention, the glucosidase can if in two or more layers (e.g. the Detection layer and a reagent layer or one or two th reagent layer and a first reagent layer) be there. In this case the glucosidase can if in larger quantities in a layer further from Carrier than in a layer closer to the carrier, or in a layer closer to the support than in a layer further from the support.

Das sich selbst färbende Oligosaccharidsubstrat wird in dem erfindungsgemäßen trockenen Analyseelement in einer Menge von 0,1 bis 40 g/m2, bevorzugt von 1 bis 10 g/m2, bezogen auf das gesamte Analyseelement, verwendet. Die Glucosidase wird in einer Menge von 5000 bis 1000000 Einheiten/m2, bevorzugt von 5 bis 300000 Einheiten/m2, bezogen auf das gesamte Analyseelement, verwendet.The self-coloring oligosaccharide substrate is used in the dry analysis element according to the invention in an amount of 0.1 to 40 g / m 2 , preferably 1 to 10 g / m 2 , based on the entire analysis element. The glucosidase is used in an amount of 5,000 to 1,000,000 units / m 2 , preferably 5 to 300,000 units / m 2 , based on the entire analysis element.

Die Dicke der Schicht, welche das sich selbst färbende Oligosaccharidsubstrat enthält, liegt im Bereich von 1 bis 30 µm, bevorzugt von 3 bis 15 µm, im Falle einer Schicht, die ein hydrophiles polymeres Bindemittel enthält, oder im Bereich von 50 bis 600 µm, bevorzugt von 100 bis 400 µm, im Falle einer Schicht, welche faserförmiges Material ent­ hält.The thickness of the layer, which is the self-coloring Contains oligosaccharide substrate is in the range of 1 to 30 µm, preferably from 3 to 15 µm, in the case of a layer, which contains a hydrophilic polymeric binder, or in the range from 50 to 600 μm, preferably from 100 to 400 μm, in the case of a layer which contains fibrous material holds.

Die Dicke der Schicht, welche Glucosidase enthält, liegt im Bereich von 1 bis 30 µm, bevorzugt von 3 bis 15 µm.The thickness of the layer containing glucosidase is in the range from 1 to 30 μm, preferably from 3 to 15 μm.

Als transparenten und wasserundurchlässigen Träger kann man in dem erfindungsgemäßen trockenen analytischen Ele­ ment einen filmartigen transparenten Träger verwenden, der von etwa 50 µm bis etwa 1 mm, und bevorzugt von etwa 80 µm bis etwa 300 µm, dick ist und aus einem Polymeren, wie aus Polyethylenterephthalat, Polycarbonat von Bis­ phenol A, Polystyrol und Celluloseester (beispielsweise Cellulosediacetat, Cellulosetriacetat und Celluloseacetat- Propionat) besteht.Can be used as a transparent and impermeable support one in the dry analytical Ele use a film-like transparent support that from about 50 µm to about 1 mm, and preferably from about 80 µm to about 300 µm, is thick and made of a polymer, such as from polyethylene terephthalate, polycarbonate from Bis phenol A, polystyrene and cellulose esters (e.g. Cellulose diacetate, cellulose triacetate and cellulose acetate Propionate).

Die Oberfläche des Trägers kann mit einer Unterschicht für die Verstärkung der Adhäsion der Nachweisschicht oder an­ deren Schichten, die auf dem Träger vorgesehen sind, aus­ gerüstet sein. Alternativ kann man anstatt einer Unter­ schicht die Oberfläche des Trägers physikalischen oder chemischen Aktivierungsbehandlungen (beispielsweise einer Glimmentladung und Koronaentladung) für die Verbesserung der Adhäsion unterwerfen.The surface of the carrier can be covered with an underlayer the strengthening of the adhesion of the detection layer or to whose layers, which are provided on the carrier, from be prepared. Alternatively, instead of a sub layer the surface of the carrier physical or chemical activation treatments (e.g. one Glow discharge and corona discharge) for improvement subject to adhesion.

Bei dem erfindungsgemäßen integrierten mehrschichtigen Analyseelement kann eine Nachweisschicht auf dem transpa­ renten und wasserundurchlässigen Träger, gegebenenfalls mit einer Unterschicht oder mit anderen dazwischen vorge­ sehenen Schichten, vorhanden sein. Die Nachweisschicht ent­ hält bevorzugt ein hydrophiles Bindemittel, welches mit Wasser quillt, wie ein hydrophiles Polymeres. Ein solches hydrophiles Polymeres, welches in der Nachweisschicht ver­ wendet werden kann, ist ein natürliches oder synthetisches hydrophiles Polymeres, welches im allgemeinen um das etwa 1,5- bis 20fache, und bevorzugt etwa 2,5 bis 15fache, quillt, wenn Wasser bei einer Temperatur von 30°C absorbiert wird. Beispiele für solche hydrophilen Polymeren sind Gelatine, wie mit Säure behandelte Gelatine und entionisierte Gela­ tine, etc., Gelatinederivate, wie mit Phthalsäure oder Phthalsäurederivat umgesetzte Gelatine, etc., Agarose, Polyacrylamid, Polyvinylalkohol und Polyvinylpyrrolidon. In the integrated multi-layer according to the invention Analysis element can be a detection layer on the transpa annuities and impermeable carriers, if necessary featured with an underlayer or with others in between seen layers. The detection layer ent preferably holds a hydrophilic binder, which with Water swells like a hydrophilic polymer. Such one hydrophilic polymer, which ver in the detection layer can be used is a natural or synthetic hydrophilic polymer, which is generally about 1.5 to 20 times, and preferably about 2.5 to 15 times, swells, when water is absorbed at a temperature of 30 ° C. Examples of such hydrophilic polymers are gelatin, such as acid-treated gelatin and deionized gela tine, etc., gelatin derivatives, such as with phthalic acid or Phthalic acid derivative converted gelatin, etc., agarose, Polyacrylamide, polyvinyl alcohol and polyvinyl pyrrolidone.

Die Dicke der trockenen Nachweisschicht liegt bevorzugt im Bereich von etwa 1 µm bis etwa 100 µm, besonders bevor­ zugt im Bereich von etwa 3 µm bis etwa 30 µm. Die Nachweis­ schicht kann weiter ein oberflächenaktives Mittel (katio­ nisch, amphoter oder nichtionisch) oder einen Puffer ent­ halten.The thickness of the dry detection layer is preferred in the range of about 1 µm to about 100 µm, especially before pulls in the range of about 3 microns to about 30 microns. The proof layer can also be a surface-active agent (catio African, amphoteric or non-ionic) or a buffer hold.

die Reaktionsreagensschicht kann in dem erfindungsgemäßen trockenen Analyseelement gegebenenfalls ein hydrophiles Polymeres, einen Puffer oder lichtabschirmende (reflektie­ rende oder absorbierende) feinverteilte Teilchen enthalten.the reaction reagent layer can in the invention dry analysis element, if necessary, a hydrophilic Polymer, a buffer or light shielding (reflective containing or absorbing) finely divided particles.

Beispiele für hydrophile Polymere, welche in der Reaktions­ reagensschicht in dem erfindungsgemäßen trockenen analyti­ schen Element enthalten sein können, sind Stärke, Cellulose, Agarose, Gelatine und ihre Derivate (beispielsweise hydro­ xymethylierte und hydroxypropylierte Derivate, etc.), Acryl­ amid-Polymere, Copolymere von Acrylamid und verschiedenen Vinyl-Monomeren, Polyvinylalkohol, Copolymere von Vinyl­ pyrrolidon und verschiedenen Vinyl-Monomeren, Acrylat-Poly­ mere und Copolymere von Acrylat und verschiedenen Vinyl- Monomeren. Bevorzugt unter diesen hydrophilen Polymeren sind Polyvinylalkohol, Vinylpyrrolidon-Polymeres, Acryl­ amid-Polymeres und Cellulosederivate.Examples of hydrophilic polymers used in the reaction reagent layer in the dry analyti according to the invention starch, cellulose, Agarose, gelatin and their derivatives (e.g. hydro xymethylated and hydroxypropylated derivatives, etc.), acrylic amide polymers, copolymers of acrylamide and various Vinyl monomers, polyvinyl alcohol, copolymers of vinyl pyrrolidone and various vinyl monomers, acrylate poly mers and copolymers of acrylate and various vinyl Monomers. Preferred among these hydrophilic polymers are polyvinyl alcohol, vinyl pyrrolidone polymer, acrylic amide polymer and cellulose derivatives.

Beispiele für einen Puffer, welcher in der Reaktionsrea­ gensschicht in dem erfindungsgemäßen trockenen Analyseele­ ment enthalten sein kann, sind Carbonat, Borat, Phosphat, Good′s-Puffer, wie in Biochemistry, Bd. 5, Nr. 2, S. 467 bis 477 (1966) beschrieben, insbesondere in der Tabelle auf Seite 472, und die anderen bekannten Puffer. Diese Puffer können auf geeignete Weise ausgewählt werden und in Übereinstimmung mit der bekannten Literatur, wie "TANPAKUSHITSU KOSO NO KISOJIKKENHO (Basic Experiment On Proteins And Enzymes; herausgegeben von Buichi Horio et al., publiziert von Nankodo, 1981, verwendet werden.Examples of a buffer used in the reaction rea layer in the dry analysis element according to the invention can be included are carbonate, borate, phosphate, Good's buffer, as in Biochemistry, Vol. 5, No. 2, p. 467 to 477 (1966), especially in the table on page 472, and the other known buffers. These Buffers can be appropriately selected and in accordance with the known literature, such as "TANPAKUSHITSU KOSO NO KISOJIKKENHO (Basic Experiment On Proteins And Enzymes; edited by Buichi Horio et al., published by Nankodo, 1981, can be used.

Die Reaktionsreagensschicht kann in dem erfindungsgemäßen trockenen Analyseelement die im folgenden beschriebenen lichtreflektierenden Teilchen enthalten.The reaction reagent layer can in the invention dry analysis element described below contain light reflecting particles.

Die Lichtabschirmungsschicht ist bevorzugt eine wasser­ durchlässige Schicht, welche lichtreflektierende Teilchen, dispergiert in einem hydrophilen Polymeren, mit einer film­ bildenden Fähigkeit als Bindemittel aufweist. Die Lichtab­ schirmungsschicht, welche lichtreflektierende Teilchen ent­ hält, schirmt die Farbe einer wäßrigen Flüssigkeit ab, wel­ che in Punkten bzw. Flecken auf die Entwicklungsschicht gegeben wird, wobei die Entwicklungsschicht ein Nachweis­ reagenssystem und eine Carbonsäure enthält, insbesondere wird Rot oder eine ähnliche Farbe von Haemoglobin, das in der Probe enthalten ist, wenn diese aus Blut besteht, ab­ geschirmt, wenn eine nachweisbare Änderung (Farbänderung, Farbentwicklung oder ähnliche) in der Nachweisschicht ent­ steht und durch Reflexion von der Seite des Trägers, der transparent ist, gemessen wird. Die Lichtabschirmungs­ schicht dient ebenfalls als Lichtreflexionsschicht oder Hintergrundschicht.The light shielding layer is preferably a water permeable layer, which light-reflecting particles, dispersed in a hydrophilic polymer, with a film has forming ability as a binder. The lightab shielding layer, which ent light-reflecting particles holds, shields the color of an aqueous liquid, wel dots or spots on the development layer is given, the development layer being evidence reagent system and contains a carboxylic acid, in particular becomes red or a similar color from hemoglobin, which in if the sample consists of blood shielded if there is a detectable change (color change, Color development or similar) ent in the detection layer stands and by reflection from the side of the wearer who is transparent, is measured. The light shield layer also serves as a light reflection layer or Background layer.

Beispiele für feinverteilte Teilchen mit Lichtreflexions­ vermögen sind ein feinverteiltes Pigment, wie feinverteil­ tes Titandioxid (beispielsweise teilchenförmige Mikro­ kristalle des Rutiltyps, Anatastyps oder Brukittyps mit einem Teilchendurchmesser von etwa 0,1 µm bis etwa 1,2 µm), feinverteiltes Bariumsulfat und feinverteiltes Aluminium. Bevorzugt unter diesen feinverteilten Teilchen sind fein­ verteiltes Titandioxid und feinverteiltes Bariumsulfat. Feines teilchenförmiges Titandioxid des Anatastyps ist be­ sonders bevorzugt. Examples of finely divided particles with light reflections assets are a finely divided pigment like finely divided titanium dioxide (e.g. particulate micro crystals of the rutile type, anatase type or brukite type a particle diameter of about 0.1 µm to about 1.2 µm), finely divided barium sulfate and finely divided aluminum. Preferred among these finely divided particles are fine distributed titanium dioxide and finely divided barium sulfate. Fine particulate titanium dioxide of the anatase type is be particularly preferred.

Als solche hydrophilen polymeren Bindemittel mit filmbil­ dender Eigenschaft kann man etwas hydrophile regenerier­ te Cellulose oder Celluloseacetat neben den oben erwähn­ ten hydrophilen Polymeren, die bei der Herstellung der Nachweisschicht verwendet werden, verwenden. Bevorzugt un­ ter diesen polymeren Bindemitteln sind Gelatine, Gelatine­ derivate und Polyacrylamid. Bekannte Härter (Vernetzungs­ mittel) können zu dieser Gelatine oder den Gelatinederi­ vaten zugegeben werden.As such hydrophilic polymeric binders with filmbil The property can be regenerated somewhat hydrophilic te cellulose or cellulose acetate in addition to those mentioned above ten hydrophilic polymers which are used in the production of the Detection layer used, use. Preferred un These polymeric binders are gelatin, gelatin derivatives and polyacrylamide. Known hardeners (crosslinking medium) can add to this gelatin or gelatinederi vaten be added.

Die Lichtabschirmungsschicht kann hergestellt werden, in­ dem man eine wäßrige Dispersion, welche lichtreflektieren­ de feinverteilte Teilchen und ein hydrophiles Polymeres enthält, auf eine andere Schicht nach an sich bekannten Verfahren aufträgt und sie trocknet.The light shielding layer can be made in which is an aqueous dispersion which reflect light de finely divided particles and a hydrophilic polymer contains, on another layer according to known Applying process and it dries.

Eine bevorzugte Ausführungsform des erfindungsgemäßen Analyseelements umfaßt eine Lichtabschirmungsschicht, die zwischen der Schicht, welche ein sich selbst färbendes Oligosaccharidsubstrat enthält, und der Schicht, welche Glucosidase enthält, vorgesehen ist, wobei die Lichtab­ schirmungsschicht feinverteilte lichtreflektierende Teil­ chen umfaßt, die im wesentlichen einheitlich darin disper­ giert sind, so daß die optische Dichte im Bereich von 1,0 bis 2,3 liegt, d.h., daß die normale Durchlässigkeit 0,5% oder mehr und nicht mehr als 10% beträgt.A preferred embodiment of the invention Analysis element comprises a light shielding layer, the between the layer, which is a self-coloring Contains oligosaccharide substrate, and the layer which Contains glucosidase is provided, the light from shielding layer finely divided light-reflecting part Chen includes, which are substantially uniformly disper are so that the optical density in the range of 1.0 to 2.3, i.e. the normal permeability is 0.5% or more and not more than 10%.

Die Entwicklungsschicht ist bevorzugt eine Entwicklungs­ schicht mit einer Flüssigkeitsmeßfunktion. Die Flüssig­ keitsmeßfunktion besteht darin, daß eine Flüssigkeit, die darauf in Flecken oder Punkten aufgetragen wird, sich in horizontaler Richtung mit im wesentlichen konstanter Ge­ schwindigkeit pro Einheitsfläche verteilt, ohne daß im we­ sentlichen Komponenten, die darin enthalten sind, sich an einer Stelle ansammeln. The development layer is preferably a development layer with a liquid measuring function. The liquid keitsmeßfunktion is that a liquid, the it is applied in spots or dots, in horizontal direction with a substantially constant Ge speed distributed per unit area, without in the we essential components that are contained therein accumulate in one place.

Als Materialien, die die Matrix der Entwicklungsschicht ausmachen, können Filterpapier, nichtgewebtes Textilma­ terial, gewebtes Textilmaterial (beispielsweise glatt ge­ webte Flächengebilde, wie Kammgarntuch und Popelin), ge­ strickete bzw. gewirkte Textilmaterialien (beispielsweise Tricot), Glasfaserfilterpapier, Membranfilter, hergestellt aus trüben Polymeren, und dreidimensionale Gitterstruktu­ ren, hergestellt aus polymeren Mikrokügelchen, verwendet werden. Die trüben Polymeren bzw. Polymeren für die Lack­ herstellung (blush polymer) können hergestellt werden, in­ dem man ein Polymeres in einem Gemisch aus zwei Flüssigkei­ ten löst, wovon eines einen niedrigeren Siedepunkt hat und für das Polymere ein gutes Lösungsmittel ist und das ande­ re einen höheren Siedepunkt hat und für das Polymere ein Nichtlösungsmittel oder ein schlechtes Lösungsmittel ist. Die so erhaltene Lösung wird auf den Träger aufgetragen, und die Flüssigkeiten werden bei geeigneten Bedingungen verdampft, wobei eine isotrope poröse Schicht entsteht. Im Hinblick auf die Retention eines Reagenses sind faser­ artige Schichten, wie gewebtes bzw. gewirktes Textilma­ terial und gestricktes Textilmaterial, bevorzugt. Für Ein­ zelheiten wird auf die japanischen Patentanmeldungen (OPI) Nrn. 164356/80, 66359/82 und 222769/85 verwiesen.As materials that form the matrix of the development layer filter paper, non-woven textile material material, woven textile material (e.g. smooth ge woven fabrics, such as worsted and poplin), ge knitted or knitted textile materials (e.g. Tricot), glass fiber filter paper, membrane filter from cloudy polymers, and three-dimensional lattice structure ren, made of polymeric microspheres used will. The cloudy polymers or polymers for the paint manufacturing (blush polymer) can be made in which is a polymer in a mixture of two liquids ten dissolves, one of which has a lower boiling point and for which polymer is a good solvent and the other re has a higher boiling point and for the polymer Is nonsolvent or a poor solvent. The solution thus obtained is applied to the support, and the liquids are made under suitable conditions evaporates, forming an isotropic porous layer. With regard to the retention of a reagent are fiber like layers, such as woven or knitted textile material material and knitted textile material, preferred. For one Details are based on the Japanese patent applications (OPI) 164356/80, 66359/82 and 222769/85.

Das gewebte Tuch bzw. Textilmaterial oder das gestrickte bzw. gewirkte Tuch bzw. Textilmaterial, welches in dem erfindungsgemäßen trockenen analytischen Element verwendet wird, wird bevorzugt einer Entfettungsbehandlung unterwor­ fen, wie einer Spülung, so daß mindestens die Fette und Öle, die daran während der Herstellung des Fadens des ge­ webten bzw. gewirkten Tuches oder der gestrickten Materia­ lien haften, im wesentlichen entfernt werden. The woven cloth or textile material or the knitted or knitted cloth or textile material, which in the dry analytical element according to the invention used is preferably subjected to degreasing treatment fen, like a conditioner, so that at least the fats and Oils attached to it during the manufacture of the thread of the ge woven or knitted cloth or the knitted materia lien are essentially removed.

Wenn die oben erwähnten gewebten bzw. gewirkten bzw. ge­ strickten Materialien oder gewebten bzw. gewirkten bzw. gestrickten Textilmaterialien als Entwicklungsschicht in dem erfindungsgemäßen Analyseelement verwendet werden, können die gewebten bzw. gewirkten bzw. gestrickten Materia­ lien oder die gewebten bzw. gewirkten bzw. gestrickten Textilmaterialien einer physikalischen Aktivierungsbehand­ lung (bevorzugt einer Glimmentladung oder Koronaentladung), wie es in der japanischen Patentanmeldung (OPI) Nr. 66359/82 beschrieben wird, auf mindestens einer Seite der Imprägnierung mit einem hydrophilen Polymeren, wie in den japanischen Patentanmeldungen (OPI) Nrn. 164356/80 und 66359/82 beschrieben, oder einer Behandlung für die Ver­ leihung von Hydrophilizität, wie es in der japanischen Patentanmeldung (OPI) Nr. 222770/85 beschrieben wird, so daß sie hydrophil werden, oder ihre Adhäsionsfestigkeit gegenüber unterliegenden Schichten (näher am Träger) ver­ bessern, unterworfen werden.If the above-mentioned woven or knitted or ge knitted materials or woven or knitted or knitted textile materials as a development layer in the analysis element according to the invention are used, can the woven or knitted or knitted Materia lien or the woven or knitted or knitted Textile materials of a physical activation treatment lung (preferably a glow discharge or corona discharge), as described in Japanese Patent Application (OPI) No. 66359/82 is described on at least one side of the Impregnation with a hydrophilic polymer, as in the Japanese Patent Application (OPI) Nos. 164356/80 and 66359/82, or a treatment for Ver borrowing from hydrophilicity, as in Japanese Patent application (OPI) No. 222770/85 is described so that they become hydrophilic, or their adhesive strength against underlying layers (closer to the support) improve, be subjected.

Zur Erleichterung der Adhäsion und Laminierung der Flüssig­ keitsentwicklungsschicht kann zwischen der Flüssigkeits­ entwicklungsschicht und der Reaktionsreagensschicht, der Lichtabschirmungsschicht, der Filterschicht oder ähnlichen Schichten eine Adhäsionsschicht vorgesehen werden. Eine solche Adhäsionsschicht besteht bevorzugt aus einem hydrophilen Polymeren, welches die Adhäsion der Entwick­ lungsschicht erlaubt, wenn sie mit Wasser quillt. Beispiele für hydrophile Polymere, welche in der Adhäsionsschicht verwendet werden können, sind ähnliche Polymere, wie sie in der Nachweisschicht verwendet werden. Bevorzugt unter diesen Polymeren sind Gelatine, Gelatinederivate und Poly­ acrylamid. Die Dicke der Adhäsionsschicht in getrocknetem Zustand liegt im allgemeinen im Bereich von etwa 0,5 bis etwa 20 µm, und bevorzugt im Bereich von etwa 1 µm bis 10 µm. Die Adhäsionsschicht kann auf Schichten, ausgenommen der Wasserabsorptionsschicht, vorgesehen werden, so daß die Adhäsion zwischen den anderen Schichten verbessert wird. Die Adhäsionsschicht kann beispielsweise vorgesehen werden, indem man gemäß einem an sich bekannten Verfahren eine Nachweisschicht oder die Reaktionsreagensschicht mit einer wäßrigen Lösung beschichtet, die ein hydrophiles Polymeres und gegebenenfalls ein oberflächenaktives Mittel enthält.To facilitate the adhesion and lamination of the liquid development layer can be between the liquid development layer and the reaction reagent layer, the Light shielding layer, the filter layer or the like Layers of an adhesive layer can be provided. A such an adhesive layer preferably consists of a hydrophilic polymers, which improves the adhesion of the developer layer if allowed to swell with water. Examples for hydrophilic polymers, which are in the adhesive layer Polymers similar to those used can be used be used in the detection layer. Preferred under These polymers are gelatin, gelatin derivatives and poly acrylamide. The thickness of the adhesive layer in dried State is generally in the range of about 0.5 to about 20 µm, and preferably in the range of about 1 µm to 10 µm. The adhesive layer can be on layers, except the water absorption layer can be provided so that improves adhesion between the other layers becomes. The adhesive layer can be provided, for example by using a method known per se a detection layer or the reaction reagent layer with coated with an aqueous solution containing a hydrophilic Polymer and optionally a surfactant contains.

Die Adhäsion und Laminierung der Entwicklungsschicht, wel­ che gewebte bzw. gewirkte bzw. gestrickte Materialien oder Textilmaterialien enthält, auf die Reaktionsreagensschicht, Lichtabschirmungsschicht, Adhäsionsschicht oder ähnliche Schichten kann nach irgendeinem an sich bekannten Verfah­ ren erfolgen, wie es beispielsweise in den japanischen Patentanmeldungen (OPI) Nrn. 164356/80 und 66359/82 be­ schrieben wird. Man kann Wasser (oder Wasser, welches eine geringe Menge an oberflächenaktivem Mittel enthält) auf die Reagensschicht oder die Adhäsionsschicht im wesent­ lichen einheitlich verteilen, während diese Schichten noch nicht getrocknet sind oder nachdem diese Schichten getrock­ net sind, so daß sie quellen. Die gewebten bzw. gewirkten bzw. gestrickten Materialien oder Textilmaterialien werden dann auf die so gequollene Schicht mit einem im wesentli­ chen einheitlichen geringen Druck aufgebracht, so daß sie unter Bildung eines integrierten Körpers verklebt und la­ miniert werden.The adhesion and lamination of the development layer, wel che woven or knitted or knitted materials or Contains textile materials, on the reaction reagent layer, Light shielding layer, adhesive layer or the like Stratification can be carried out by any method known per se ren done, as it is for example in the Japanese Patent applications (OPI) Nos. 164356/80 and 66359/82 be is written. You can use water (or water, which is a contains a small amount of surfactant) the reagent layer or the adhesion layer essentially distribute uniformly while these layers are still have not dried or after these layers have dried are net so that they swell. The woven or knitted or knitted materials or textile materials then on the so swollen layer with an essentially Chen applied uniform low pressure so that it glued to form an integrated body and la be mined.

Wenn die Entwicklungsschicht aus einem trüben Polymeren oder einem Membranfilter besteht, kann sie nach irgendei­ nem geeigneten Verfahren, wie es beispielsweise in der japanischen publizierten Patentanmeldung Nr. 21677/78 be­ schrieben wird, hergestellt werden. Wenn die Entwicklungs­ schicht aus einer dreidimensionalen Gitterstruktur aus polymeren Mikroperlen besteht, kann sie gemäß einem geeig­ neten Verfahren hergestellt werden, beispielsweise wie es in der japanischen Patentanmeldung (OPI) Nr. 90859/80 beschrieben wird. Wenn die Entwicklungsschicht ein Filter­ papier oder ein nichtgewebtes Tuch ist, kann sie nach ir­ gendeinem geeigneten Verfahren hergestellt werden, wie es in der japanischen Patentanmeldung Nr. 148250/82 beschrie­ ben wird.If the development layer is made of a cloudy polymer or a membrane filter, it can be any nem suitable method, as for example in the Japanese published patent application No. 21677/78 be is being written. If the development layer from a three-dimensional lattice structure polymeric microbeads, it can be used according to a Neten procedures are prepared, such as how it in Japanese Patent Application (OPI) No. 90859/80 is described. If the development layer is a filter paper or a non-woven cloth, according to ir by an appropriate method, such as that in Japanese Patent Application No. 148250/82 will.

Wenn das hydrophile polymere Bindemittel, welches in der Reagensschicht, der Lichtabschirmungsschicht oder der Kleb­ stoffschicht verwendet wird, Gelatine oder ein Gelatine­ derivat ist, kann die Adhäsion und Laminierung der Ma­ terialien, die die oben erwähnte Entwicklungsschicht erge­ ben, durchgeführt werden, während die Gelatine (oder das Gelatinederivat) als nichtgetrocknetes Gel vorliegt, d.h., nachdem die Schicht aufgetragen wurde.If the hydrophilic polymeric binder, which in the Reagent layer, light shielding layer or adhesive material layer is used, gelatin or a gelatin is derivative, the adhesion and lamination of the Ma materials that achieve the development layer mentioned above ben, be carried out while the gelatin (or that Gelatin derivative) is an undried gel, i.e., after the layer was applied.

Die Entwicklungsschicht kann gegebenenfalls die oben er­ wähnten feinverteilten Lichtabschirmungsteilchen enthalten.The development layer may optionally be the one above mentioned finely divided light shielding particles.

Die Einarbeitung von Reaktionsreagenzien des sich selbst färbenden Substrats und gegebenenfalls hydrophiler Polyme­ rer, Puffermittel, feinverteilter Lichtabschirmungsteil­ chen, usw. in die Flüssigkeitsentwicklungsschicht kann er­ folgen, indem man eine Beschichtungslösung, die diese Kom­ ponenten enthält, auf die Flüssigkeitsentwicklungsschicht aufträgt oder aufsprüht und die aufgetragene Schicht trock­ net.The incorporation of reaction reagents of yourself coloring substrate and optionally hydrophilic polymers rer, buffering agent, finely divided light shielding part Chen, etc. in the liquid development layer, he can follow by using a coating solution that this com contains components on the liquid development layer applied or sprayed on and the applied layer dry net.

Wenn die Flüssigkeitsentwicklungsschicht aus gewebtem bzw. gewirktem bzw. gestricktem Textilmaterial, gestrickten Ma­ terialien, gewirkten Materialien, Filterpapier oder nicht­ gewebten Textilmaterialien besteht, kann die Einarbeitung dieser Komponenten erfolgen indem man die Entwicklungs­ schicht in eine Lösung, die diese Komponenten enthält, ein­ taucht und sie dann trocknet. Wird die oben erwähnte Ent­ wicklungsschicht unter Bildung eines integrierten mehr­ schichtigen Analyseelements laminiert, kann die so impräg­ nierte Entwicklungsschicht auf eine andere Schicht lami­ niert werden, während sie halb oder vollständig getrocknet wird, wobei man einen integrierten Körper erhält.If the liquid development layer is made of woven or knitted or knitted textile material, knitted Ma materials, knitted materials, filter paper or not woven textile materials can be incorporated of these components are done by looking at the development layer in a solution containing these components dives and then dries. If the Ent development layer forming an integrated more laminated analysis element laminated, so can impregnate development layer onto another layer of lami be dried while half or fully dried which gives you an integrated body.

Wenn die Entwicklungsschicht eine Schicht ist, welche durch Beschichten hergestellt wurde, beispielsweise eine Schicht, welche ein trübes Polymeres bzw. Lackpolymeres enthält, kann die Einarbeitung dieser Komponenten erfolgen, indem man die Beschichtungslösung mit diesen Komponenten vor der Beschichtung vermischt.If the development layer is a layer through which Coating was produced, for example a layer, which contains a cloudy polymer or lacquer polymer, these components can be incorporated by the coating solution with these components before Coating mixed.

Wenn diese Reagenzien in die Entwicklungsschicht eingear­ beitet werden, kann man für jedes Reagens unterschiedliche Verfahren verwenden. Alternativ kann die Einarbeitung ge­ trennt mit jedem einzelnen Reagens oder zusammen für alle Reagenzien erfolgen.When these reagents are incorporated into the development layer can be prepared for each reagent differently Use the procedure. Alternatively, the familiarization can separates with each individual reagent or together for all Reagents are done.

Die folgenden Beispiele erläutern die Erfindung.The following examples illustrate the invention.

Beispiel 1example 1

Ein farbloser transparenter 180 µm dicker glatter Polyethylen­ terephthalatfilm, welcher mit Gelatine unterbeschichtet war, wird mit einer wäßrigen Lösung der folgenden Zusammen­ setzung (a) in solcher Menge beschichtet, daß die Dicke des trockenen Films 10 µm erreicht. Der Überzug wird dann getrocknet. A colorless transparent 180 µm thick smooth polyethylene terephthalate film, which was undercoated with gelatin, is coated with an aqueous solution of the following composition (a) in such an amount that the thickness of the dry film reaches 10 µm. The coating is then dried.

(a) Gelatine 300 g Oberflächenaktives Mittel (Olion's Surfactant 10G)   5 g 15%ige Latexlösung aus Poly-co(styrol-N-methylmorpholiniummethylstyrol-
divinylbenzol (Polymerisationsverhältnis: 55/43/2) 280 g Wasser2150 g(a) Gelatin 300 g surfactant (Olion's Surfactant 10G) 5 g 15% latex solution made of poly-co (styrene-N-methylmorpholiniummethylstyrene-
divinylbenzene (polymerization ratio: 55/43/2) 280 g water2150 g

Der pH-Wert der obigen Zusammensetzung wird mit verdünnter NaOH-Lösung auf 7,0 eingestellt.The pH of the above composition is diluted with NaOH solution adjusted to 7.0.

Eine wäßrige Lösung der folgenden Zusammensetzung (b) wird auf die obige Gelatineschicht in einer solchen Menge aufgetragen, daß die Dicke des getrockneten Films 5 µm erreicht. Der Überzug wird dann getrocknet.An aqueous solution of the following composition (b) is applied to the above gelatin layer in such an amount that the thickness of the dried film reaches 5 microns. The coating is then dried.

(b) Gelatine 200 g Oberflächenaktives Mittel (Olion's Surfactant 10G)   5 g α-Glucosidase7 Millionen IU Wasser2600 g(b) Gelatin 200 g surfactant (Olion's Surfactant 10G) 5 g α- glucosidase 7 million IU water 2600 g

Der pH-Wert der obigen Zusammensetzung wird mit verdünnter NaOH-Lösung auf 7,0 eingestellt.The pH of the above composition is diluted with NaOH solution adjusted to 7.0.

Wasser wird einheitlich auf die gesamte Oberfläche der oben erwähnten Gelatineschicht in einer Bedeckung von etwa 30 g/m2 aufgebracht, so daß diese befeuchtet ist. Ein Blatt aus Tricot (Polyester; 40 gauge) wird auf die Gelatine­ schicht mit gelindem Druck aufgebracht, so daß es darauf laminiert wird. Das so erhaltene laminierte Produkt wird getrocknet. Water is uniformly applied to the entire surface of the above-mentioned gelatin layer in a coverage of about 30 g / m 2 so that it is moistened. A sheet of tricot (polyester; 40 gauge) is applied to the gelatin layer with gentle pressure so that it is laminated thereon. The laminated product thus obtained is dried.

Eine wäßrige Lösung der folgenden Zusammensetzung (c) wird auf das so erhaltene Flächenmaterial in einer im wesent­ lichen gleichmäßigen Menge von 200 cc/m2 aufgetragen. Der Überzug wird dann getrocknet, wobei man ein integriertes mehrschichtiges Analyseelement für die Messung der Amylase erhält.An aqueous solution of the following composition (c) is applied to the sheet material thus obtained in a substantially uniform amount of 200 cc / m 2 . The coating is then dried to obtain an integrated multilayer analysis element for measuring the amylase.

(c) p-Nitrophenyl-( α-D-maltopentaocid  60 g NaCl   9 g Wasser1700 g Polyvinylpyrrolidon (durchschnittliches Molekulargewicht: 700 000  90 g Kaliumphosphat  60 g(c) p-Nitrophenyl- ( α -D-maltopentaocid 60 g NaCl 9 g water 1700 g polyvinylpyrrolidone (average molecular weight: 700,000 90 g potassium phosphate 60 g

Der pH-Wert der obigen Zusammensetzung wird mit verdünnter NaOH-Lösung auf 7,0 eingestellt.The pH of the above composition is diluted with NaOH solution adjusted to 7.0.

Zum Vergleich wird ein anderes Analyseelement für die Messung der Amylase auf gleiche Weise, wie oben beschrieben, hergestellt, ausgenommen, daß die Zusammensetzungen (b) und (c) durch die folgenden Zusammensetzungen (b′) bzw. (c′) ersetzt wurden:For comparison, another analysis element for the Measurement of the amylase in the same way as described above, prepared, except that the compositions (b) and (c) by the following compositions (b ′) and (c ′) were replaced:

(b′) Gelatine 200 g Oberflächenaktives Mittel (Olion′s Surfactant 10G)   5 g Wasser2600 g(b ′) gelatin 200 g Surfactant (Olion’s Surfactant 10G) 5 g Water 2600 g

Der pH-Wert der obigen Zusammensetzung wird mit verdünnter NaOH-Lösung auf 7,0 eingestellt.
(c′) p-Nitrophenyl ( α-D-maltopentaocid)  60 g a-Glucosidase2,15 Millionen IU NaCl   9 g Wasser1700 g Polyvinylpyrrolidon (durchschnittliches Molekulargewicht: 700 000  90 g Kaliumphosphat  60 gThe pH of the above composition is adjusted to 7.0 with dilute NaOH solution.
(c ′) p-nitrophenyl ( α -D-maltopentaocid) 60 g a -glucosidase 2.15 million IU NaCl 9 g water 1700 g polyvinylpyrrolidone (average molecular weight: 700 000 90 g potassium phosphate 60 g

Der pH-Wert der obigen Zusammensetzung wird mit verdünnter NaOH-Lösung auf 7,0 eingestellt.The pH of the above composition is diluted with NaOH solution adjusted to 7.0.

Meßbeispiel 1 Die Hintergrunddichte gemäß dem im vorigen Beispiel hergestell­ ten erfindungsgemäßen Analyseelement und dem Vergleichs­ element werden mittels eines Reflexionsdensitometers (Wellenlänge: 400 mµ) gemessen. Die Ergebnisse sind in Tabelle I angegeben. Tabelle I Aus Tabelle I folgt, daß das erfindungsgemäße Analyseele­ ment eine sehr niedrige Hintergrunddichte aufweist, ver­ glichen mit dem Vergleichs-Analyseelement. Beispiel 2 Ein 180 µm dicker farbloser transparenter glatter Film aus Polyethylenterephthalat, welcher eine Gelatineunter­ schicht aufweist, wird mit einer wäßrigen Lösung der fol­ genden Zusammensetzung (a) in einer solchen Menge beschich­ tet, daß die Dicke davon nach dem Trocknen 7 µm beträgt. Der Überzug wird dann getrocknet. Zusammensetzung (a): Gelatine 300 g Oberflächenaktives Mittel (Olion's Surfactant 10G; Phenylpolyglycidolether, n = etwa 10)   5 g 15%ige Latexlösung aus Poly-co(styrol-N-methylmorpholiniummethylstyrol- divinylbenzol) (Polymerisationsverhältnis: 55/43/2) 280 g Wasser2150 g Der pH-Wert der obigen Lösung wird mit verdünnter NaOH- Lösung auf 7,0 eingestellt. Eine wäßrige Lösung der folgenden Zusammensetzung (b) wird auf die obige Gelatineschicht in solcher Menge aufgetragen, daß die Dicke davon 5 µm nach dem Trocknen erreicht. Der Überzug wird getrocknet. Zusammensetzung (b): Gelatine 200 g Oberflächenaktives Mittel (Olion's Surfactant 10G)   5 g α-Glucosidase3,5 Millionen Wasser2600 g Der pH-Wert der obigen Zusammensetzung wird mit verdünnter NaOH-Lösung auf 7,0 eingestellt. Eine wäßrige Lösung der folgenden Zusammensetzung (c) wird dann auf die obige Gelatineschicht in einer solchen Menge aufgetragen, daß ihre Dicke 3 µm nach dem Trocknen erreicht. Der Überzug wird getrocknet. Zusammensetzung (c) Gelatine 30 g Oberflächenaktives Mittel (Olion's Surfactant 10G)  4 g Titanoxid (Anatastyp) 20 g Wasser950 g Der pH-Wert der obigen Zusammensetzung wird mit verdünnter NaOH-Lösung auf 7,0 eingestellt. Die optische Dichte der obigen aufgetragenen Schicht, wel­ che Titanoxid enthält, beträgt etwa 1,3. Wasser wird dann einheitlich über der gesamten Oberfläche der obigen Titanoxid-Gelatine-Schicht in einer Bedeckung von etwa 30 g/m2 aufgetragen, so daß diese befeuchtet wird. Eine Schicht aus Tricot (Polyester; 40 gauge) wird auf die Titanoxid-Gelatine-Schicht mit gelindem Druck aufgebracht, so daß diese darauf laminiert wird. Das so erhaltene Lami­ nat wird getrocknet. Eine wäßrige Lösung der folgenden Zusammensetzung (d) wird auf das so erhaltene Flächengebilde im wesentlichen ein­ heitlich in einer Bedeckung von 150 cc/m2 aufgetragen. Der Überzug wird getrocknet, wobei man ein integriertes mehr­ schichtiges Analyseelement für die Messung der Amylase er­ hält. Zusammensetzung (d): p-Nitrophenyl α-D-maltopentaocid)  34 g Wasser1600 g Kaliumphosphat  60 g Polyvinylpyrrolidon (durchschnittliches Molekulargewicht: 100 000) 140 g Der pH-Wert der obigen Zusammensetzung wird mit verdünnter NaOH-Lösung auf 7,3 eingestellt. Zum Vergleich wird ein anderes analytisches Element für die Messung der Amylase auf gleiche Weise, wie oben beschrieben, hergestellt, ausgenommen, daß die Zusammensetzung (c) durch die Zusammensetzung (c′) ersetzt wurde: Zusammensetzung (c′): Gelatine 50 g Oberflächenaktives Mittel (Olion's Surfactant 10G)  4 g Wasser950 g Der pH-Wert der obigen Zusammensetzung wird mit verdünnter NaOH-Lösung auf 7,0 eingestellt. Die optische Dichte der oben aufgetragenen Schicht beträgt etwa 0,1. Meßbeispiel 2 10 µl eines Gemisches aus Kontrollsera mit unterschiedli­ chen Amylaseaktivitäten (im Handel erhältliche Kontroll­ sera, die gegebenenfalls mit humaner Speichelamylase ver­ mischt sind) I und II mit humanem Haemoglobin mit Konzen­ trationen, wie in Tabelle II angegeben, werden in Flecken auf die erfindungsgemäße Probe, hergestellt gemäß dem obi­ gen Beispiel, und die Vergleichsprobe gegeben. Nachdem diese Proben bei einer Temperatur von 37°C während 3 bis 6 min gehalten wurden, wurde die Änderung der Reflexions­ dichte pro 1 Minute bei einer Wellenlänge von 400 mµ ge­ messen. Die Amylasekonzentration wird dann aus einer Eich­ kurve, welche zuvor aus einem Kontrollserum, welches haemo­ globinfrei war, erhalten wurde, berechnet. Die Ergebnisse sind in Tabelle II angegeben. Tabelle II Aus Tabelle II folgt, daß die erfindungsgemäße Probe durch Haemoglobin weniger beeinflußt wird als die Vergleichsprobe. Meßbeispiel 3: 10 µl aus Gemischen von 7%igen humanen Amylaselösungen mit unterschiedlichen Amylaseaktivitäten (gegebenenfalls ge­ mischt mit humaner Speichelamylase) III und IV mit Biliru­ binen (Rindergallenstein) mit den in Tabelle III angegebenen Konzentrationen werden in Flecken auf das erfindungsgemäße Element und das Vergleichselement, hergestellt gemäß Bei­ spiel 2, gegeben. Nachdem diese Proben bei einer Tempera­ tur von 37°C 3 bis 6 min gehalten wurden, wurde die Ände­ rung der Reflexionsdichte pro 1 Minute bei einer Wellen­ länge von 400 mµ gemessen. Die Amylaseaktivität wird dann aus einer Eichkurve berechnet, welche zuvor aus 7%iger humaner Albuminlösung, welche amylasefreies Bilirubin mit verschiedenen Aktivitäten enthielt, bestimmt wurde. Die Ergebnisse sind in Tabelle III angegeben. Tabelle III Aus Tabelle III folgt, daß die erfindungsgemäße Probe gegenüber der Einwirkung von Bilirubin weniger empfindlich ist als die Vergleichsprobe. Measurement example 1 The background density according to that produced in the previous example th analysis element according to the invention and the comparison element using a reflection densitometer (Wavelength: 400 mµ) measured. The results are in Table I given. Table I From Table I it follows that the analysis element according to the invention ment has a very low background density, ver compared with the comparison analysis element. Example 2 A 180 µm thick colorless transparent smooth film made of polyethylene terephthalate, which contains a gelatin has layer, with an aqueous solution of fol coating composition (a) in such an amount tet that the thickness thereof after drying is 7 microns. The coating is then dried. Composition (a): Gelatin 300 g Surface active agent (Olion's surfactant 10G; phenyl polyglycidol ether,n = about 10) 5 g 15% latex solution made of poly-co (styrene-N-methylmorpholiniummethylstyrene- divinylbenzene) (polymerization ratio: 55/43/2) 280 g Water 2150 g The pH of the above solution is diluted with NaOH Solution set to 7.0. An aqueous solution of the following composition (b) is applied to the above gelatin layer in such an amount that the thickness thereof reaches 5 µm after drying. The The coating is dried. Composition (b): Gelatin 200 g Surfactant (Olion's Surfactant 10G) 5 g α-Glucosidase3.5 million Water 2600 g The pH of the above composition is diluted with NaOH solution adjusted to 7.0. An aqueous solution of the following composition (c) is then on the above gelatin layer in such an amount applied that their thickness reaches 3 microns after drying. The coating is dried. Composition (c) Gelatin 30 g Surfactant (Olion's Surfactant 10G) 4 g Titanium oxide (anatase type) 20 g Water950 g The pH of the above composition is diluted with NaOH solution adjusted to 7.0. The optical density of the above coated layer, wel contains titanium oxide is about 1.3. Water then becomes uniform over the entire surface the above titanium oxide gelatin layer in one covering of about 30 g / m2nd applied so that it is moistened. A layer of tricot (polyester; 40 gauge) is placed on the Titanium oxide gelatin layer applied with gentle pressure, so that it is laminated to it. The lami thus obtained nat is dried. An aqueous solution of the following composition (d) is essentially on the fabric thus obtained uniformly with a coverage of 150 cc / m2nd applied. The The coating is dried, leaving one more integrated layered analysis element for the measurement of amylase holds. Composition (d): p-nitrophenyl α-D-maltopentaocid) 34 g Water 1600 g Potassium phosphate 60 g Polyvinyl pyrrolidone (average molecular weight: 100,000) 140 g The pH of the above composition is diluted with NaOH solution adjusted to 7.3. Another analytical element for measurement of the amylase in the same way as described above, produced, except that the composition (c) has been replaced by the composition (c ′): Composition (c ′): Gelatin 50 g Surface active agent (Olion's Surfactant 10G) 4 g Water950 g The pH of the above composition is diluted with NaOH solution adjusted to 7.0. The optical density of the layer applied above is about 0.1. Measurement example 2 10 µl of a mixture from control sera with different Chen amylase activities (commercially available control sera, which ver if necessary with human salivary amylase are mixed) I and II with human hemoglobin with conc trations as indicated in Table II are in spots on the sample according to the invention, produced according to the obi gen example, and given the comparative sample. After this these samples at a temperature of 37 ° C for 3 to 6 min were held, the change in reflection density per 1 minute at a wavelength of 400 mµ ge measure up. The amylase concentration is then from a calibration curve, which previously from a control serum, which haemo was globin-free, was obtained, calculated. The results are given in Table II. Table II From Table II it follows that the sample according to the invention passes through Hemoglobin is less affected than the comparison sample. Measurement example 3: 10 µl from mixtures of 7% human amylase solutions with different amylase activities (ge mixes with human salivary amylase) III and IV with Biliru binen (beef gall stone) with those specified in Table III Concentrations are in spots on the invention Element and the comparative element, manufactured according to Bei game 2, given. After these samples at a tempera were held at 37 ° C for 3 to 6 min, the change reflection density per 1 minute for a wave length of 400 mµ measured. The amylase activity then calculated from a calibration curve, which previously consists of 7% human albumin solution, which amylase-free bilirubin with various activities. The results are shown in Table III. Table III From Table III it follows that the sample according to the invention is opposite less sensitive to bilirubin exposure is than the comparative sample.

Claims (8)

1. Vielschichtiges trockenes analytisches Element für die Verwendung bei der Analyse einer Flüssigkeit, dadurch gekennzeichnet, daß es mindestens zwei wasserdurchlässige Schichten, die auf einem transparenten Träger vorgesehen sind, umfaßt, wobei mindestens eine der wasserdurchlässigen Schichten ein sich selbst färbendes Oligosaccharidsubstrat enthält, welches in ein Trisaccha­ rid, Disaccharid oder Monosaccharid dissoziieren kann, und an welches p-Nitrophenol in Anwesenheit von Amylase gebun­ den ist, und wobei die andere wasserdurchlässige Schicht, die zwischen der wasserdurchlässigen Schicht, welche das sich selbst färbende Oligosaccharidsubstrat enthält, und dem Träger vorgesehen ist, eine Glucosidase enthält.1. Multilayer dry analytical element for use in the analysis of a liquid, characterized in that it comprises at least two water-permeable layers which are provided on a transparent support, at least one of the water-permeable layers containing a self-coloring oligosaccharide substrate which in a trisaccharide, disaccharide or monosaccharide can dissociate, and to which p-nitrophenol is bound in the presence of amylase, and the other water-permeable layer being provided between the water-permeable layer containing the self-coloring oligosaccharide substrate and the support , contains a glucosidase. 2. Vielschichtiges trockenes analytisches Element für die Verwendung bei der Analyse einer Flüssigkeit mit min­ destens zwei wasserdurchlässigen Schichten und einer Schicht, die lichtreflektierende oder lichtabsorbierende Teilchen auf einem transparenten Träger umfaßt, dadurch gekennzeichnet, daß mindestens eine der wasserdurchlässigen Schichten ein sich selbst färbendes Oligosaccharidsubstrat enthält, welches in ein Trisaccharid, Disaccharid oder Monosaccharid dissoziieren kann, und an welches p-Nitrophenol in Anwesenheit von Amylase gebunden ist, und daß die andere wasserdurchlässige Schicht, die zwischen der permeablen Schicht, welche das sich selbst färbende Oligosaccharidsubstrat enthält, und dem Träger vorgesehen ist, eine Glucosidase enthält und daß die ge­ nannte Schicht, welche die lichtreflektierenden oder licht­ absorbierenden Teilchen diese in solcher Menge enthält, daß die optische Dichte mindestens 1,0 und nicht mehr als 2,3 beträgt und daß sie zwischen der Schicht, welche ein Oligosaccharidsubstrat enthält, und der Schicht, welche eine Glucosidase enthält, vorgesehen ist.2. Multi-layered dry analytical element for the use in the analysis of a liquid with min at least two water-permeable layers and one Layer that is light reflecting or light absorbing Particles on a transparent support, thereby characterized in that at least one of the water-permeable layers a self-coloring Contains oligosaccharide substrate which is converted into a trisaccharide, Disaccharide or monosaccharide can dissociate, and at which p-nitrophenol is bound in the presence of amylase and that the other water permeable layer, the between the permeable layer, which the self contains coloring oligosaccharide substrate, and the carrier is provided, contains a glucosidase and that the ge called layer, which is the light reflecting or light absorbent particles contains them in such an amount that the optical density is at least 1.0 and not more than 2.3 and that it is between the layer, which is a Contains oligosaccharide substrate, and the layer which contains a glucosidase is provided. 3. Vielschichtiges trockenes analytisches Element für die Verwendung bei der Analyse einer Flüssigkeit nach An­ spruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß die Glucosidase eine α-Glucosidase oder b-Glucosidase ist.3. Multi-layered dry analytical element for use in the analysis of a liquid according to claim 1, characterized in that the glucosidase is an α- glucosidase or b- glucosidase. 4. Vielschichtiges trockenes analytisches Element für die Verwendung bei der Analyse einer Flüssigkeit nach An­ spruch 2, dadurch gekennzeichnet, daß die Glucosidase eine α-Glucosidase oder β-Glucosidase ist.4. Multi-layer dry analytical element for use in the analysis of a liquid according to claim 2, characterized in that the glucosidase is an α- glucosidase or β- glucosidase. 5. Vielschichtiges trockenes analytisches Element für die Verwendung bei der Analyse einer Flüssigkeit nach An­ spruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß das Element einen Träger mit einer Nachweisschicht, einer Rea­ gensschicht und einer Flüssigkeitsentwicklungsschicht, die in der angegebenen Reihenfolge vorhanden sind, umfaßt. 5. Multi-layered dry analytical element for use in the analysis of a liquid according to An saying 1, characterized in that the Element a support with a detection layer, a rea layer and a liquid development layer which exist in the order given. 6. Vielschichtiges trockenes analytisches Element für die Verwendung bei der Analyse einer Flüssigkeit nach An­ spruch 2, dadurch gekennzeichnet, daß das Element einen Träger mit einer Nachweisschicht, einer Rea­ gensschicht und einer Flüssigkeitsentwicklungsschicht, die in der angegebenen Reihenfolge vorhanden sind, umfaßt.6. Multi-layered dry analytical element for use in the analysis of a liquid according to An saying 2, characterized in that the Element a support with a detection layer, a rea layer and a liquid development layer which exist in the order given. 7. Vielschichtiges trockenes analytisches Element für die Verwendung bei der Analyse einer Flüssigkeit nach An­ spruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß das Element einen Träger mit einer Nachweisschicht, einer Rea­ gensschicht, einer Lichtabschirmungsschicht und einer Flüssigkeitsentwicklungsschicht, die in dieser Reihenfolge vorhanden sind, umfaßt.7. Multi-layered dry analytical element for use in the analysis of a liquid according to An saying 1, characterized in that the Element a support with a detection layer, a rea layer, a light shielding layer and one Liquid development layer in that order are present. 8. Vielschichtiges trockenes analytisches Element für die Verwendung bei der Analyse einer Flüssigkeit nach An­ spruch 2, dadurch gekennzeichnet, daß das Element einen Träger mit einer Nachweisschicht, einer Rea­ gensschicht, einer Lichtabschirmungsschicht und einer Flüssigkeitsentwicklungsschicht, die in dieser Reihenfolge vorhanden sind, umfaßt.8. Multi-layered dry analytical element for use in the analysis of a liquid according to An saying 2, characterized in that the Element a support with a detection layer, a rea layer, a light shielding layer and one Liquid development layer in that order are present.
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