DE3513897A1 - Apparatus for the electroelution of electrically charged macromolecules - Google Patents
Apparatus for the electroelution of electrically charged macromoleculesInfo
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Abstract
Description
Gerät zur Elektroelution elektrisch geladener MakromoleküleDevice for the electroelution of electrically charged macromolecules
Beschreibung Die Erfindung betrifft ein Gerät der im Oberbegriff des Anspruchs 1 genannten Art nach Patent DBP 33 37 669. Description The invention relates to a device as described in the preamble of claim 1 mentioned type according to patent DBP 33 37 669.
Das genannte Hauptpatent ist auch Gegenstand der vorliegenden Offenbarung.The main patent mentioned is also the subject of the present disclosure.
Bei der Vorrichtung gemäß Hauptpatent hat sich das dichte Einspannen und Einsetzen der Membranen sowie die Ausbildung der inneren Membranen mit einem quellenden Dichtrand als problematisch erwiesen.In the device according to the main patent, the tight clamping has proven and inserting the membranes and forming the inner membranes with one swelling sealing edge proved to be problematic.
Der Erfindung liegt demgemäß die Aufgabe zugrunde, die Vorrichtung nach dem Hauptpatent dahingehend zu verbessern, daß eine leichtere und zuverlässiger dichte Vorkehrung zum Einspannen der Membranen geschaffen wird.The invention is accordingly based on the object of the device according to the main patent to the effect that a lighter and more reliable tight provision for clamping the membranes is created.
Zur Lösung dieser Aufgabe schafft die Erfindung ein Gerät der eingangs genannten Art, das erfindungsgemäß die im kennzeichnenden Teil des Anspruchs 1 der vorliegenden Anmeldung genannten Merkmale aufweist.In order to achieve this object, the invention creates a device as described in the introduction mentioned type, according to the invention in the characterizing part of claim 1 of the present application has mentioned features.
Als problematisch bei dem Elutionsgerät nach Hauptpatent hat sich weiterhin die unterschiedliche Sohlenhöhe in der Elutionskammer und in den Fallen erwiesen. Nach einer weiteren Ausgestaltung der vorliegenden Erfindung weisen daher die Elutionskammer und die öffnungen in den Trennwänden deckungsgleiche lichte Querschnitte auf, die auch deckungsgleich und fluchtend miteinander angeordnet sind.The elution device according to the main patent has proven to be problematic furthermore the different sole heights in the elution chamber and in the traps proven. According to a further embodiment of the present invention, therefore, have the elution chamber and the openings in the dividing walls have congruent clear cross-sections which are also arranged congruently and in alignment with one another.
Durch diese Anordnung ist gewährleistet, daß die eingespannten Membranen auf ihren jeweils beiden einander gegenüberliegenden Oberflächen identisch benetzt sind. Dabei ist die Größe des Fallenvolumens in einfacher Weise dadurch variabel, daß gegebenenfalls mehrere einzeln einsetzbare Trennwände ohne Zwischenfügung einer Membran hintereinanderliegend in die Ausnehmung im Körper eingesetzt und durch die Spannschraube dichtend an ihren planen Oberflächen aufeinandergezwungen werden. Bei besonders schmaler Ausbildung der Trennwände lassen sich auf diese Weise trotz eines mit dem Querschnitt der Elutionskammer deckungsgleichem Querschnitt der Falle minimale Fallenvolumen realisieren. Gegebenenfalls können die Trennwände auch unterschiedlich dick ausgebildet werden und je nach der zu lösenden Trennaufgabe in die Ausnehmung im Körper des Elutionsgerätes eingesetzt werden, so daß auf diese Weise problemlos Fallen mit unterschiedlichem Volumen verfügbar sind, ohne daß ein auch noch so geringes Risiko der Undichtheit der Elutionskammer in Kauf genommen zu werden braucht.This arrangement ensures that the clamped membranes wetted identically on their two opposing surfaces are. The size of the trap volume can easily be varied by that, if necessary, several individually usable partitions without the interposition of a Membrane inserted one behind the other into the recess in the body and through the Clamping screw are forced onto one another to form a seal on their flat surfaces. With a particularly narrow design of the partition walls can be in this way despite a cross-section of the trap that is congruent with the cross-section of the elution chamber Realize minimal trap volumes. If necessary, the partitions can also be different be made thick and depending on the separation task to be solved in the recess be used in the body of the elution device so that in this way problem-free Traps with different volumes are available without even the smallest amount Risk of leakage in the elution chamber needs to be accepted.
Weitere Ausgestaltungen der Erfindung sind Gegenstand der Unteransprüche.Further refinements of the invention are the subject of the subclaims.
Die Erfindung ist im folgenden anhand eines Ausführungsbeispiels in Verbindung mit den Figuren näher erläutert.The invention is illustrated in the following on the basis of an exemplary embodiment Connection with the figures explained in more detail.
Es zeigen: Fig. 1 im Längsschnitt und in axialer Draufsicht ein Ausführungsbeispiel des Elutionsgerätes; Fig. 2 das in Fig. 1 gezeigte Gerät, ebenfalls im Axialschnitt, jedoch in Seitensicht; und Fig. 3 in Seitensicht ein Ausführungsbeispiel der in den Fig. 1 und 2 verwendeten einsetzbaren Trennwand.1 shows an exemplary embodiment in longitudinal section and in an axial plan view of the elution device; Fig. 2 shows the device shown in Fig. 1, also in axial section, but in side view; and FIG. 3 is a side view of an embodiment of the in 1 and 2 used insertable partition.
In der Fig. 1 ist in Draufsicht ein Ausführungsbeispiel des Elektroelutionsgerätes gemäß der Erfindung, genauer gesagt der Körper 1 eines solchen Gerätes, dargestellt. Die Fig. 2 zeigt dieses Ausführungsbeispiel im Axialschnitt, wobei in der Darstellung der Fig. 2 auf der linken Seite die äußere Membran M1 und die innere Membran M2 eingesetzt sind. Der Körper 1 besteht aus durchsichtigem Polycarbonat.In Fig. 1 is a plan view of an embodiment of the electroelution device according to the invention, more precisely the body 1 of such a device. Fig. 2 shows this embodiment in axial section, in the representation 2, on the left-hand side, the outer membrane M1 and the inner membrane M2 are used. The body 1 is made of transparent polycarbonate.
Die Membran M1 ist eine Celluloseacetatmembran, die für Moleküle mit einem Molekulargewicht von größer als 1000 undurchlässig ist, und zwar auch in Gegenwart eines elektrischen Feldes. Die innere Membran M2 ist eine einfache Cellulosemembran mit einer Porengröße von 0,2 ßm. Der zwischen den Membranen M1 und M2 definierte und durch die eingespannten Membranen M1 und M2 hermetisch abgedichtete und abgegrenzte Raum dient als Falle 2 für die zu eluierenden Makromoleküle. Axial nach außen ist die Falle 2 durch die Membran M1 begrenzt, die zwischen einem Spannrahmen 8, der von einer hohlen Gewindespannschraube 7 beaufschlagt ist, und einer Trennwand 3 eingespannt ist, die gleichzeitig die Seitenwände der Falle 2 bildet. Die Trennwand 3 ist paßgenau in eine nach oben offene Ausnehmung 5 des Körpers 1 eingesetzt. In der Trennwand 3 ist weiterhin eine relativ große, nach oben offene U-förmige öffnung 4 ausgebildet, deren Querschnitt deckungsgleich mit dem Querschnitt der Elutionskammer 18 ausgebildet ist und deren Sohle mit der Sohle 20 der Elutionskammer 18 fluchtet, wenn die Trennwand 3 bestimmungsgemäß auf der Bodenfläche der Ausnehmung 5 im Körper 1 aufsteht. Die axialen Seitenflächen der Trennwand 3 sind dabei präziiplan ausgebildet, und zwar ebenso wie die zum Inneren des Gerätes weisende Oberfläche des Rahmens 8, so daß die Membran M1 absolut dicht zwischen den Rahmen 8 und die Trennwand 3 eingespannt werden kann.The membrane M1 is a cellulose acetate membrane designed for molecules with a molecular weight greater than 1000 is impermeable, even in the presence an electric field. The inner membrane M2 is a simple cellulose membrane with a pore size of 0.2 µm. The one defined between the membranes M1 and M2 and hermetically sealed and delimited by the constrained membranes M1 and M2 Space serves as trap 2 for the macromolecules to be eluted. Is axially outward the trap 2 limited by the membrane M1, which is between a clamping frame 8, the is acted upon by a hollow threaded clamping screw 7, and a partition 3 is clamped, which forms the side walls of the trap 2 at the same time. The partition 3 is inserted into an upwardly open recess 5 of the body 1 with a precise fit. In the partition 3 is also a relatively large, upwardly open U-shaped opening 4, the cross section of which is congruent with the cross section of the elution chamber 18 is formed and the sole of which is aligned with the sole 20 of the elution chamber 18, when the partition 3 is intended on the bottom surface of the recess 5 in the body 1 stands up. The axial side surfaces of the partition 3 are precisely designed, just like the surface of the frame facing the inside of the device 8, so that the membrane M1 is absolutely tight between the frame 8 and the partition 3 can be clamped.
Dabei wirkt die Membran zwischen den Dichtflächen als Dichtmittel, während sie, die öffnung 4 dicht überspannend, gleichzeitig Trennfunktion erfüllt.The membrane acts as a sealant between the sealing surfaces, while it, tightly spanning the opening 4, simultaneously fulfills the separating function.
Axial außerhalb vor dem Rahmen 8 ist die Ausnehmung 5 axial zur Stirnseite des Körpers 1 über eine Bohrung geöffnet, die ein Innengewinde 6 aufweist, in das die hohle Spannhülse 7 wasserdicht einschraubbar ist. In die Spannhülse 7.ist axial innen der Rahmen 8 eingesteckt oder aufgesteckt, der seinerseits paßgenau in der Ausnehmung 5 geführt und dadurch vor allem gegen ein Verdrehen beim Spannen der Spannschraube gesichert ist.Axially outside in front of the frame 8, the recess 5 is axial to the end face of the body 1 is opened via a bore which has an internal thread 6 into which the hollow clamping sleeve 7 can be screwed in watertight. In the adapter sleeve 7. is axially inserted or attached to the inside of the frame 8, which in turn fits perfectly guided in the recess 5 and thereby above all against twisting during tensioning the clamping screw is secured.
An der axial äußeren Stirnseite der Elutionskammer 18 ist ein Falz oder eine Stufe 21 ausgebildet, die eine absolut plane nach axial auswärts weisende Anschlag- und Dichtfläche aufweist. Gegen diese Dichtfläche wird durch die Spannhülse 7 die oder eine Trennwand 3 gespannt.There is a fold on the axially outer end face of the elution chamber 18 or a step 21 is formed which has an absolutely plane axially outwardly pointing Has stop and sealing surface. The clamping sleeve acts against this sealing surface 7 or a partition 3 stretched.
Dabei kann zwischen die aufeinandergezwungenen planen Anschlagflächen eine Membran, in dem hier gezeigten Ausführungsbeispiel die Membran M2.3, eingespannt sein.Here, between the planar stop surfaces that are forced onto one another a membrane, in the embodiment shown here, the membrane M2.3, clamped be.
Alternativ können die beiden Dichtflächen jedoch auch ohne Zwischenfügung einer Membran dicht aufeinandergezwungen sein, so daß dann die Elutionskammer 18 effektiv in den Bereichen der zusätzlichen Trennwände 3.1, 3.2 und 3.3 (des hier gezeigten Ausführungsbeispiels) axial verlängert ist. In dem hier gezeigten Ausführungsbeispiel ist die innere Membran M2 zwischen den beiden axial äußersten Trennwänden 3 und 3.1 eingespannt. Das Zwischenfügen weiterer innerer Trennmembranen M2.1, M2.2.,.....Alternatively, however, the two sealing surfaces can also be used without interposing them a membrane must be forced close together, so that the elution chamber 18 effective in the areas of the additional partition walls 3.1, 3.2 and 3.3 (here shown embodiment) is axially extended. In the embodiment shown here is the inner membrane M2 between the two axially outermost partition walls 3 and 3.1 clamped. The interposition of further inner separating membranes M2.1, M2.2., .....
M2.n kann wahlweise nach Bedarf erfolgen. Dabei können die einzelnen Membranen beispielsweise unterschiedliche Porengrößen aufweisen, so daß eine selektive Trennung der zu eluierenden Makromoleküle erfolgen kann.M2.n can optionally be made as required. The individual For example, membranes have different pore sizes, so that a selective Separation of the macromolecules to be eluted can take place.
Sowohl axial einwärts als auch axial auswärts sind vor dem paßgenau und zumindest weitgehend dicht an den Innenwänden der Ausnehmung 5 geführten Rahmen 8 in der Ausnehmung 5 je eine nach oben offene Luftkammer 22 bzw. 23 ausgebildet, die eine ständige Uberprüfung und Kontrolle der Dichtheit einerseits zwischen dem Rahmen 8 und der Spannschraube 7, andererseits im Bereich der Membranen M1 und M2 bzw. der Trennwand oder Trennwände 3 dadurch ermöglichen, daß an undichten Stellen in die Lufträume austretende Pufferlösung ohne weiteres durch Einblick von oben erkennbar ist.Both axially inward and axially outward are precisely fitting in front of the and frame guided at least largely close to the inner walls of the recess 5 8 an upwardly open air chamber 22 or 23 is formed in the recess 5, which a constant review and Control of the tightness on the one hand between the frame 8 and the clamping screw 7, on the other hand in the area of the membranes M1 and M2 or the partition wall or partitions 3 thereby allow that to leak Provide in the air spaces escaping buffer solution easily by looking at can be seen above.
Die Ausgestaltung und die Bemessung der Ausnehmung 5 zur Aufnahme in der auf der linken Seite der Figuren 1 und 2 gezeigten Art können wahlweise wie in den in den Figuren 1 und 2 gezeigten Ausführungsbeispielen auf nur einer Seite des Körpers 1 oder aber auch auf beiden Seiten des Körpers 1 des Elutionsgerätes vorgesehen sein.The design and dimensioning of the recess 5 for receiving in the manner shown on the left side of Figures 1 and 2 can optionally such as in the exemplary embodiments shown in FIGS. 1 and 2 on only one side of the body 1 or on both sides of the body 1 of the elution device be provided.
In jedem Fall jedoch, ob nun in der in den Figuren 1 und 2 auf der linken Seite gezeigten Weise die Falle mit einem variabel einstellbaren Volumen oder in der in den Figuren 1 und 2 auf der rechten Seite gezeigten Weise mit nur einem konstanten Volumen ausgestaltet ist, ist zum Zwecke einer gleichmäßigen Benetzung der Membranen auf ihren beiden einander gegenüberliegenden Hauptflächen der Querschnitt der öffnung 4 (Fig. 3) der in die Ausnehmung 5 von oben her einsetzbaren Trennwand 3 deckungsgleich mit dem Querschnitt des Kanals bzw. der Elutionskammer 18 bei bestimmungsgemäßem anschlagbegrenzten Einsatz der Trennwand 3 in der seitlich an die Elutionskammer 18 anschließenden Ausnehmung 5.In any case, however, whether in the in Figures 1 and 2 on the The trap shown on the left has a variable volume or in the manner shown in Figures 1 and 2 on the right with only a constant volume is designed for the purpose of uniform wetting of the membranes on their two opposite main surfaces is the cross section the opening 4 (FIG. 3) of the partition which can be inserted into the recess 5 from above 3 congruent with the cross section of the channel or the elution chamber 18 when used as intended Stop-limited use of the partition 3 in the side of the elution chamber 18 subsequent recess 5.
Vorzugsweise sind weiterhin die Oberkanten der Trennwände 3 mit einer Fase 24 ausgebildet, um ein Trennen der Trennwände 3 und eine Entnahme der Trennwände 3 aus den Ausnehmungen 5 heraus zu erleichtern.Preferably, the upper edges of the partition walls 3 are also with a Chamfer 24 designed to separate the partition walls 3 and remove the partition walls 3 out of the recesses 5 to facilitate.
Ein wesentlicher Vorteil der Ausrüstung des Elutionsgerätes mit einzeln einsetzbaren und zwischen planen Dicht- und Anschlagflächen einspannbaren Trennwänden 3 liegt darin, daß als Membranen aus großen Bogen oder Bahnen gestanzte trägerlose und rahmenlose Membranen zum Betrieb des Elutionsgerätes eingesetzt werden können. Dadurch werden nicht nur die Betriebssicherheit im Hinblick auf die Dichtheit und die Handhabung des Gerätes verbessert, sondern auch die mit Herstellung und Betrieb des Gerätes verbundenen Kosten gesenkt.A major advantage of equipping the elution device with individually usable partition walls that can be clamped between flat sealing and stop surfaces 3 is that as membranes from large sheets or webs punched strapless and frameless membranes can be used to operate the elution device. This not only increases operational safety in terms of tightness and the handling of the device is improved, but also that of manufacture and operation costs associated with the device.
Bei der Verwendung asymmetrischer Membranen, insbesondere für die Membranen M1 und M4, werden diese vorzugsweise so ausgerichtet, daß deren glatte dichte aktive Oberflächen gleichsinnig ausgerichtet sind., vorzugsweise in Richtung auf den Minuspol des angelegten äußeren elektrischen Feldes zu ausgerichtet sind. Um eine solche planmäßige Ausrichtung asymmetrischer Membranen zu gewährleisten, sind diese an ihrer Oberkante vorzugsweise so zugeschnitten, daß sie im Bereich eines ihrer Seitenränder nach oben vorspringende angeformte Laschen oder Zungen oder Fahnen aufweisen, während im Körper auf der zugeordneten Seite eine Hinweismarkierung angebracht ist. Die seitenrichtige Koordination der an der einzuspannenden Membran vorgesehenen Markierungsfahne und der am Gerät angebrachten Markierung, vorzugsweise einer Prägung, gewährleistet dann den seitenrichtigen Einsatz der asymmetrischen Membran.When using asymmetric membranes, especially for the Membranes M1 and M4, these are preferably aligned so that their smooth Dense active surfaces are aligned in the same direction, preferably in the direction are aligned with the negative pole of the applied external electric field. To ensure such a planned alignment of asymmetrical membranes, these are preferably cut at their upper edge so that they are in the area one of its side edges upwardly projecting molded tabs or tongues or have flags, while in the body on the associated side a marker is appropriate. The laterally correct coordination of the membrane to be clamped provided flag and the marking attached to the device, preferably an embossing, then ensures the right-sided use of the asymmetrical Membrane.
Die beigefügte Zusammenfassung ist Bestandteil der vorliegenden Offenbarung.The attached summary forms part of the present disclosure.
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Claims (8)
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
DE19853513897 DE3513897A1 (en) | 1983-10-17 | 1985-04-17 | Apparatus for the electroelution of electrically charged macromolecules |
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
DE3337669A DE3337669C2 (en) | 1983-10-17 | 1983-10-17 | Device for the electroelution of electrically charged macromolecules |
DE19853513897 DE3513897A1 (en) | 1983-10-17 | 1985-04-17 | Apparatus for the electroelution of electrically charged macromolecules |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
DE3513897A1 true DE3513897A1 (en) | 1986-10-30 |
Family
ID=25814918
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
DE19853513897 Granted DE3513897A1 (en) | 1983-10-17 | 1985-04-17 | Apparatus for the electroelution of electrically charged macromolecules |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
DE (1) | DE3513897A1 (en) |
Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
DE3337669C2 (en) * | 1983-10-17 | 1989-09-21 | Carl Schleicher & Schuell Gmbh & Co Kg, 3352 Einbeck | Device for the electroelution of electrically charged macromolecules |
-
1985
- 1985-04-17 DE DE19853513897 patent/DE3513897A1/en active Granted
Patent Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
DE3337669C2 (en) * | 1983-10-17 | 1989-09-21 | Carl Schleicher & Schuell Gmbh & Co Kg, 3352 Einbeck | Device for the electroelution of electrically charged macromolecules |
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