DE3400195C2 - Process for dewaxing microtome sections embedded in wax - Google Patents

Process for dewaxing microtome sections embedded in wax

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Description

Die Erfindung betrifft ein Verfahren zum Entwachsen von in Wachs eingebetteten Mikrotomschnitten.The invention relates to a method for dewaxing microtome sections embedded in wax.

In der Mikroskopiertechnik ist es üblich, Objekte zur Herstellung dünner Schnitte erst in Wachs einzubetten und danach zu schneiden. Aus den so erhaltenen Schnit­ ten muß dann das Wachs wieder entfernt werden, da sie erst dann genau unter dem Mikroskop betrachtet werden können. Dazu werden bisher Xylol oder Toluol als Lösungsmittel angewendet. Die Verwendung dieser beiden Lösungsmittel - Xylol und Toluol - bringt jedoch erhebliche Nachteile mit sich. Insbesondere sind in letzter Zeit beide Stoffe in den Verdacht geraten, kanzerogen zu sein (MAK-Werte Liste 1983, gelber Anhang). Durch den hohen Dampfdruck der beiden Lösungs­ mittel Xylol und Toluol ist es nicht zu vermeiden, daß beim Bearbeiten der Schnitte und beim Mikroskopieren Xylol- oder Toluoldämpfe eingeatmet werden. Nebenbei ist der Geruch dieser beiden Lösungsmittel nicht sehr angenehm. Wegen ihrer Giftigkeit werden für Xylol und Toluol maximale Arbeitsplatzkonzentrationen festgelegt. Sie haben außerdem einen niedrigen Flammpunkt und sind unter die entzündlichen Chemikalien einzureihen. Wegen ihrer Giftigkeit können sie nicht unbedenklich in das Abwasser gegeben werden und liefern so auch bei der Vernichtung Probleme. Xylol und Toluol haben die Wassergefährdungsklasse 2 "Wassergefährdende Stoffe" siehe Roth "Wassergefährdende Stoffe", Ecomed 1982.In microscopy technology, it is common to use objects Production of thin cuts should first be embedded in wax and cut afterwards. From the cut thus obtained The wax must then be removed again as it only then can be viewed under the microscope can. So far, xylene or toluene are used as Solvent applied. The use of these two Solvent - xylene and toluene - brings however significant disadvantages. In particular, in both substances have recently been suspected, to be carcinogenic (MAK values list 1983, yellow Attachment). Due to the high vapor pressure of the two solutions medium xylene and toluene, it is unavoidable that when editing the cuts and when microscoping Xylene or toluene vapors are inhaled. By the way the smell of these two solvents is not very enjoyable. Because of their toxicity, xylene and Toluene set maximum workplace concentrations. They also have a low flash point and are to be classified among the flammable chemicals. Because of their toxicity they can not safely in the Waste water are given and thus also deliver to the Annihilation problems. Xylene and toluene have that Water hazard class 2 "Water hazardous substances" see Roth "Water Hazardous Substances", Ecomed 1982.

Aufgabe der Erfindung war es nun, ein Verfahren zu finden, um in Wachs eingebettete Mikrotomschnitte zu entwachsen, ohne giftige und gefährliche Substanzen verwenden zu müssen und ohne die Qualität der Mikro­ tomschnitte bei der Mikroskopie zu beeinträchtigen. The object of the invention was to provide a method to find microtome sections embedded in wax outgrown, without toxic and dangerous substances to use and without the quality of the micro interfering with tomography in microscopy.  

Diese Aufgabe wird erfindungsgemäß gelöst durch ein Verfahren zum Entwachsen von in Wachs eingebetteten Mikrotomschnitten, welches dadurch gekennzeichnet ist, daß man als Lösungsmittel ein Terpen oder eine Mischung von Terpenen verwendet.According to the invention, this object is achieved by a Process for waxing embedded in wax Microtome sections, which is characterized by that a solvent is a terpene or a mixture used by terpenes.

Terpene zeichnen sich aus durch einen niedrigen Dampf­ druck und einen hohen Flammpunkt, wodurch das Problem der leichten Entflammbarkeit nicht mehr auftritt. Darüberhinaus haben sie einen weitaus angenehmeren Geruch, der gegebenenfalls noch durch die Zugabe von Aromastoffen wie Methylsalicylat oder Thymol verbessert werden kann. Die Anwendung von Terpenen ist nicht gesundheitsschädlich. Da es sich um natürliche Substan­ zen handelt, bieten sie auch kein Abwasserproblem. Sie sind biologisch voll abbaubar und können bedenkenlos dem Abwasser zugegeben werden, da sie trotz der verhältnismäßig hohen BSB (Biologischer Sauerstoff Bedarf)-Zahl 2600 problemlos von den Bakterien der Abwasseraufbereitungsanlagen bewältigt werden.Terpenes are characterized by a low vapor pressure and a high flash point, which eliminates the problem easy flammability no longer occurs. In addition, they have a much more pleasant one Odor, which may be caused by the addition of Flavors such as methyl salicylate or thymol improved can be. The use of terpenes is not harmful to health. Since it is a natural substance zen, they also offer no waste water problem. she are fully biodegradable and can be used without hesitation be added to the wastewater, because despite the relatively high BOD (biological oxygen Need) number 2600 easily from the bacteria of Wastewater treatment plants can be managed.

Sicherheitsdaten im Vergleich:Safety data in comparison:

Es wurde gefunden, daß die Terpene bis zu 40 Gew.-% an Mikrotomschnittwachsen aufnehmen können und damit dieselbe Wirksamkeit beim Entwachsen haben wie Xylol und Toluol. The terpenes were found to be up to 40% by weight Microtome cut waxes can absorb and thus have the same effectiveness in dewaxing as xylene and toluene.  

Bevorzugt werden als Lösungsmittel Orangenterpene verwendet. Bei der Herstellung von Orangensaft werden die Orangenterpene in großer Menge aus der Schalenober­ fläche gewonnen. Da die Orangenschalen als Abfall anfallen, stehen die Orangenterpene relativ billig zur Verfügung. Gesundheitliche Bedenken bestehen gegen diese Substanzen nicht.Orange terpenes are preferred as solvents used. When making orange juice the orange terpenes in large quantities from the upper shell area won. Because the orange peel as waste the orange terpenes are relatively cheap Available. There are health concerns against these substances are not.

Weiterhin bevorzugt zur Verwendung als Lösungsmittel sind die Terpene Limonen, Terpinen und Pinen. Auch Mischungen dieser drei Komponenten eignen sich sehr gut für das Verfahren der Erfindung.Also preferred for use as a solvent are the terpenes limonene, terpinene and pinene. Also Mixtures of these three components work very well for the method of the invention.

Die vorliegende Erfindung bietet die Möglichkeit, auf einfache und billige Weise Mikrotomschnitte zu entwach­ sen, ohne gesundheitlich bedenkliche oder gefährliche Lösungsmittel anwenden zu müssen. Der Vorteil der erfindungsgemäß verwendeten Lösungsmittel besteht in ihrem niederen Dampfdruck und ihrer völligen gesund­ heitlichen Unbedenklichkeit, die bei ihrer Verarbeitung keinerlei Probleme bietet, daß sie jedoch genauso wirk­ sam sind, wie die bisher bekannten Lösungsmittel.The present invention offers the possibility of simple and cheap way to dewax microtome sections without harmful or dangerous health Having to use solvents. The advantage of Solvent used according to the invention consists in their low vapor pressure and their complete health harmlessness in processing offers no problems, but it works just as well are like the previously known solvents.

Claims (4)

1. Verfahren zum Entwachsen von in Wachs eingebetteten Mikrotomschnitten, dadurch gekennzeichnet, daß man als Lösungsmittel ein Terpen oder eine Mischung von Terpenen verwendet.1. A method for dewaxing microtome sections embedded in wax, characterized in that a terpene or a mixture of terpenes is used as solvent. 2. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß man als Terpen die aus der Schale der Orange erhältlichen Terpene verwendet.2. The method according to claim 1, characterized characterized that one as Terpenes available from the peel of the orange Terpenes used. 3. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß man als Terpen Limonen, Terpinen und/oder Pinen verwendet.3. The method according to claim 1, characterized characterized that one as Terpene limes, terpins and / or pinene used. 4. Verfahren nach einem der vorhergehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, daß man zur Geruchsänderung Methylsalicylat oder Thymol der Mischung der Lösungsmittel beigibt.4. The method according to any one of the preceding claims, characterized, that to change the smell methyl salicylate or Thymol is added to the mixture of solvents.
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