DE3129580A1

DE3129580A1 - "SPECTROPHOTOMETER"

Info

Publication number: DE3129580A1
Application number: DE19813129580
Authority: DE
Inventors: Ahmad Los Altos Calif. Abu-Shumays
Original assignee: Varian Associates Inc
Current assignee: Varian Medical Systems Inc
Priority date: 1980-07-28
Filing date: 1981-07-28
Publication date: 1982-06-24
Also published as: GB2080947A; JPS5750624A; FR2487511A1

Description

312 9 5 ο Ο312 9 5 ο Ο

Patentanwälte ■ European Patent Attorneys f Patent Attorneys ■ European Patent Attorneys f

MÖNCHENMONKS

Vl P537 DVl P537 D

Varian Associates, Inc.
Palo Alto, CaI., USAVarian Associates, Inc.
Palo Alto, CaI., USA

Spektrophotometerspectrophotometer

Priorität 28. Juli 1980 -USA-Serial No. 172 891Priority July 28, 1980 - USA Serial No. 172 891

Technisches GebietTechnical area

Die vorliegende Erfindung bezieht sich auf ein Spektrophotometer und insbesondere auf Analysatoren für mehrfache diskrete Spektralbe reiche.The present invention relates to a spectrophotometer and in particular to analyzers for multiple discrete spectra rich.

Stand der TechnikState of the art

Viele analytische Verfahren erfordern eine photometrische Messung bei einer Anzahl von Wellenlängenintervallen. Wenn kontinuierliche Echtzeit-Absorptionsmessungen beispielsweise an einer strömenden Flüssigkeit durchgeführt werden, so ist die Datenerfassungszeit notwendigerweise sehr kurz. Ein spezifisches Beispiel solcher Anforderungen ist die Messung der Absorption im Eluat eines Fllissigkeits-Chromatographen. Many analytical methods require a photometric measurement at a number of wavelength intervals. If, for example, continuous real-time absorption measurements are carried out on a flowing Liquid, the data acquisition time is necessarily very short. A specific example of such The requirement is the measurement of the absorption in the eluate of a liquid chromatograph.

Generell können die bekannten Ir Strumen te in zwei Hauptgruppen eingeteilt werden. Die erste Gruppe enthält diejenigen Instrumente, die auf einem schnell durchsteuernden Monochromator mit Sweep durch den interessierenden Spektral bereich basieren. Die durchgesteuerte, d.h. wellenlängenvariable monochromatische Strahlung, die durch die Probe hindurchtritt, trifft auf einen geeigneten Detektor auf. Bei einem solchen Instrument erfolgen die bei einer kleinen Anzahl von vorbestimmten Wellenlängenintervallen geforderten Messungen mit einer zeitlichen Verzögerung, die durch die Sweeprate des Monochromator zwischen diesen gewünschten WeIlenlängenintervallen bestimmt ist.In general, the known Ir Strumen te can be divided into two main groups will. The first group contains those instruments on a fast moving monochromator with sweep based on the spectral range of interest. The controlled, i.e. wavelength-variable monochromatic radiation, which passes through the sample impinges on a suitable detector. With such an instrument, the small number of predetermined wavelength intervals required Measurements with a time delay caused by the sweep rate of the monochromator between these desired wavelength intervals is determined.

Die zweite Instrumentengruppe verwendet eine polychromatische Quelle mit Analysator(en), die. eine Anzahl von diskreten Wellenlängenintervallen liefert, die.an entsprechenden Ausgangsöff_nunq_en verfügbar sind. Ein Feld von optischen Detektoren, die jeweilsThe second group of instruments uses a polychromatic source with analyzer (s) that. supplies a number of discrete wavelength intervals that are _now q _en available at corresponding output openings. An array of optical detectors, each

den entsprechenden Wellenlängenintervallen zugehörig sind, liefert die benötigten photometrischen Daten. Ein derartiges System weist eine gute relative und absolute Empfindlichkeit auf, und zwar aufgrund der parallelen Datenerfassung in den verschiedenen Wellenlängenintervallen. Allerdings ist ein derartiges Instrument komplex und teuer, insbesondere wegen Redundanz der Komponenten. Separate Detektoren für nahe beieinander liegende interessierende Wellenlängen sind auch eine Ursache für konstruktive Schwierigkeiten.are associated with the corresponding wavelength intervals the required photometric data. Such a system has good relative and absolute sensitivity due to the parallel data acquisition in the different wavelength intervals. However, such an instrument is complex and expensive, in particular because of the redundancy of the components. Separate detectors for close proximity lying wavelengths of interest are also a cause of design difficulties.

Darstellung der ErfindungPresentation of the invention

Aufgabe der Erfindung ist es, ein billiges Gerät für eine schnelle photometrische Analyse einer Probe für eine kleiine Anzahl von diskreten Wellen!ängenintervallen zu schaffen.The object of the invention is to provide a cheap device for a quick photometric analysis of a sample for a small number of discrete To create waves!

Nach einem Merkmal der vorliegenden Erfindung beleuchtet ein Gitter-PoIychromator einen Satz von Schlitzen zum Selektieren der entsprechenden gewünschten Wellenlängenintervalle.In accordance with one feature of the present invention, a grating polychromator illuminates a set of slots for selecting the corresponding desired wavelength intervals.

Nach einer Weiterbildung der Erfindung legt ein rotierender Zerhacker oder Chopper nacheinander die Austrittsschlitze zum Durchtritt zur Beleuchtung eines einzigen Photodetektors frei.According to a further development of the invention, a rotating chopper sets or chopper successively the exit slots for passage to illuminate a single photodetector.

Nach einer anderen Weiterbildung der Erfindung ist ein anderer sich drehender Zerhacker oder Chopper vorgesehen, der abwechselnd die einfallende polychromatische Strahlung auf eine Probenzelle und eine Referenzzelle richtet, wobei anschließend die von der Probenzelle und der Referenzzelle durchgelassene Strahlung so gerichtet wird, daß sie einem gemeinsamen optischen Weg für eine darauffolgende Analyse folgen.According to another development of the invention is another rotating chopper or chopper is provided, which alternates the incident polychromatic radiation on a sample cell and directs a reference cell, after which the Sample cell and the reference cell transmitted radiation so directed to follow a common optical path for subsequent analysis.

Nach noch einer anderen Weiterbildung der Erfindung sind rückstrahlende Einrichtungen vorgesehen, die die sequentiell durchgelassenen WeI lenlängenintervalle zurück über den optischen Weg zu einem Teiler leiten, der die so reflektierte Strahlung auf einen einzigen Photodetektor richtet.According to yet another development of the invention are retroreflective Means are provided that the sequentially passed wavelength intervals back over the optical path lead to a splitter that divides the reflected radiation on sets up a single photodetector.

Im folgenden wird die Erfindung anhand von Ausführungsbeispielen im Zusammenhang mit der Zeichnung beschrieben.In the following, the invention is described by means of exemplary embodiments in connection with the drawing.

Es zeigt:It shows:

Fig. 1 eine schematische Darstellung eines bevorzugten optischen Systems aer vorliegenden Erfindung;Fig. 1 is a schematic representation of a preferred optical system aer present invention;

Fig. 2 einen Unterbrecher bzw. Chopper der Fig. 1;FIG. 2 shows a breaker or chopper from FIG. 1; FIG.

Fig. 3 eine Darstellung des mit dem System der Fig. 1 und 2 erhal ■ tenen Signal Verlaufs (Photostrom über Zeit);3 is an illustration of the obtained with the system of FIGS. 1 and 2 ten signal progression (photocurrent over time);

Fig. 4 ein Doppel strahl system;4 shows a double jet system;

Fig. 5 den mit dem System der Fig. 4 erhaltenen Signalverlauf (Photostrom über Zeit);FIG. 5 shows the signal profile obtained with the system of FIG (Photocurrent over time);

Fig. 6 eine Lochplatte für das Ausführungsbeispiel der Fig, I und 4;6 shows a perforated plate for the embodiment of FIG and 4;

Fig. 7 ein weiteres AusfUhrungsbeispiel;7 shows a further exemplary embodiment;

Fig. 8 ein AusfUhrungsbeispiel mit Dispersion Null.8 shows an exemplary embodiment with zero dispersion.

31295303129530

Fig 1. zeigt eine schematische Darstellung eines bevorzugten optischen Systems. Eine geeignete Lichtquelle 10, beispielsweise eine D2-Lampe wird durch ein Linsenpaar 12 kollimiert und durch eine Probenzelle 14 hindurch auf. einen Eingangsschlitz 16 fokussiert. Das durchgelassene Licht fällt auf einen Analysator 18, der vorzugsweise ein konkaves Gitter ist. Licht mit verschiedenen Wellenlängen, das unter entsprechenden Winkeln zerlegt (gebeugt) ist, wird durch die Austrittsebene einer Schlitze definierenden Platte 20 an Schlitzpositionen 22a, 22b, 22 c ... durchgelassen. Zu einem gegebenen Zeitpunkt ist nur einer dieser Schlitze durch öffnungen freigegeben, die in einem Zerhacker bzw. Chopper 24, der von einem Motor 26 angetrieben wird, vorhanden sind. Der Chopper 24 ist deutlicher in Fig.2 gezeigt, woraus zu erkennen ist, daß er in eine Anzahl von Winkel Intervallen oder Sektoren eingeteilt ist, von denen jeder eine öffnung bildet, die einen entsprechenden Schlitz 22a, 22b ... beleuchtet, wenn die entsprechende öffnung 28a, 28b ... hiermit ausgefluchtet ist. Ein Sektor, an dem keine öffnung vorgesehen ist, liefert eine Dunkelstromhintergrund-Probe. Der Motor 26 wird so mit Energie versorgt, daß der Chopper 24 mit gleichförmiger Winkelgeschwindigkeit dreht. Das aus den entsprechenden Schlitzen 22 austretende Licht wird durch eine Linse 30 auf die Photokathode eines Detektors 32 fokussiert, der beispielsweise ein Photomulti plier ist.Fig. 1 shows a schematic representation of a preferred optical system. A suitable light source 10, for example a D2 lamp, is collimated by a pair of lenses 12 and through a sample cell 14. an entrance slot 16 is focused. The light that has passed through is noticeable an analyzer 18, which is preferably a concave grating. Light with different wavelengths, which is broken down (diffracted) at appropriate angles, is transmitted through the Exit plane of a slot defining plate 20 at slot positions 22a, 22b, 22c ... let through. to At a given point in time, only one of these slots is released through openings in a chopper or chopper 24, which is driven by a motor 26 are present. The chopper 24 is shown more clearly in FIG. 2, from which it can be seen is that it is divided into a number of angular intervals or sectors, each of which forms an opening, which illuminates a corresponding slot 22a, 22b ... when the corresponding opening 28a, 28b ... is aligned with it. A sector in which no opening is provided provides a dark current background sample. The motor 26 is supplied with energy that the chopper 24 with uniform angular velocity rotates. The light emerging from the corresponding slots 22 is through a Lens 30 focused on the photocathode of a detector 32, which is, for example, a photomultiplier.

Der zeitliche Verlauf des von dem Detektor 22 abgeleiteten Photostromes besteht aus einer Serie von nicht-überlappenden Rechteckimpulsen, von denen jeder mit einer vorgegebenen Wellenlänge korrespondiert und in einer festen Phasenbeziehung zu Impulsmustern steht, die mit anderen Wellenlängen korrespondieren. Ein Dekodieren oder Separieren dieser ImpulszUge wird durch ein Indexsignal unterstützt, das von einem Schlüssel-The time course of the photocurrent derived from the detector 22 consists of a series of non-overlapping Square pulses, each with a predetermined Wavelength corresponds and has a fixed phase relationship to pulse patterns that correspond to other wavelengths. A decoding or separation of these pulse trains is supported by an index signal that is generated by a key

AOAO

generator
inipul s/abgeleitet wird, der mit einer rotierenden Chopper-Scheibe gekoppelt ist. Fig. 3 zeigt einen repräsentativen Signal verlauf, der aus der oben beschriebenen Anordnung stammt. Ein vom Indexgenerator 34 abgeleitetes Indexsignal ist zur Synchronisierung der aufeinanderfolgenden Signal verlaufproben in geeigneten Schaltungen verfügbar. Die Verarbeitung derartiger Daten liegt nicht im Bereich der vorliegenden Erfindung und wird daher nicht näher erläutert.generator
inipul s /, which is coupled to a rotating chopper disk. Fig. 3 shows a representative signal curve that originates from the arrangement described above. An index signal derived from the index generator 34 is available in suitable circuits for synchronizing the successive signal profile samples. The processing of such data does not fall within the scope of the present invention and is therefore not explained in more detail.

Bei dem oben beschriebenen Gerät kann eines der Wellenlängenintervalle dazu ausgewählt werden, als Bezugsgröße zu dienen. In Fig. ist ein Doppel strahl system für abwechselndes Durchlassen des einfallenden polychromatischen Lichtes durch eine Proben- und eine Referenzzelle hindurch gezeigt. Die Substitution dieses GerätesIn the device described above, one of the wavelength intervals can be selected to serve as a reference. In Fig. is a double-beam system for alternate letting through of the incident polychromatic light shown through a sample and a reference cell. The substitution of this device

-für .die Jco.rrespqndie.nenjderi Komponenten des Gerätes , tier Fig. I ist unkompliziert. BePi cfiesem TToppeTsxrähl system fällt das Licht von der Lampe 10 auf einen Spiegel 40, der das Licht auf einen Teil 42a eines rotierenden Choppers 42 richtet. Das von diesem Chopperteil durchgelassene Licht wird von einem ringförmigen Spiegel 46, der die Chopperwelle 47 umgibt, reflektiert. Das von dem Spiegel 46 reflektierte Licht wird von einer Referenzzelle 48 durchgelassen und dann von Teil 42 b des Choppers 42 zu einem weiteren fokussierenden Spiegel 50 reflektiert und zu einer Oberkreuzung am Eintrittsschlitz 16 gerichtet. Das von dem Chopperteil 42a reflektierte Licht wird zu einem Spiegel 52 gerichtet, der hinsichtlich des Spiegels 46 und der Ebene des Choppers 42 symmetrisch angeordnet ist. Das von dem Spiegel 52 reflektierte Licht wird innerhalb einer Probenzelle 49 fokussiert und von dieser durchgelassen. Das von der Probenzelle 49 auf den Chopperteil 42b einfallende Licht wird abwechselnd mit dem von der Referenzzelle 48 durchgelassenen Licht von diesem Chopperteil weitergeleitet. Das von der Probenzelle durchgelassene Licht trifft, nachdem es vom Chopperteil 42b durchgelassen wurde, auf einem gemeinsamen Weg mit dem von der Referenzzelle durchgelassenen Licht auf den fo'kussierenden Spiegel 50. Folglich überträgt das System nach Fig. 1 vom Eintritts--for .the Jco.rrespqndie.nenjderi components of the device, animal Fig. I is straightforward. In this TToppeTsxrähl system, the light from the lamp 10 falls on a mirror 40, which directs the light onto a part 42a of a rotating chopper 42. The light transmitted by this chopper part is reflected by an annular mirror 46 which surrounds the chopper shaft 47. The light reflected by the mirror 46 is transmitted by a reference cell 48 and then reflected by part 42 b of the chopper 42 to a further focusing mirror 50 and directed to a crossover at the entrance slit 16. The light reflected by the chopper part 42a is directed to a mirror 52 which is arranged symmetrically with respect to the mirror 46 and the plane of the chopper 42. The light reflected by the mirror 52 is focused within a sample cell 49 and allowed to pass through it. The light incident on the chopper part 42b from the sample cell 49 is passed on alternately with the light transmitted by the reference cell 48 from this chopper part. The light transmitted by the sample cell hits, after it has been transmitted by the chopper part 42b, on a common path with the light transmitted by the reference cell on the focusing mirror 50. Consequently, the system according to FIG. 1 transmits from the entrance

schlitz 16 an längs des optischen Weges, abwechselnd den Lichtstrom von der Probenzelle und der Referenzzelle, was zu einem Signal verlauf führt, wie er in Fig. f dargestellt ist. Ein derartiges System verwendet vorzugsweise kleine kreisförmige öffnungen, wie in Fig. 6 gezeigt, wobei die mehrere Schlitze definierende Platte 20 durch eine Platte 20' ersetzt ist und wobei jeder der Schlitze 22a, 22b ... durch ein Paar von öffnungen 22Sa und 22Ra; 22SB und 22Rb; ... 22Se und 22Re ersetzt ist. Die entsprechenden öffnungen mit den Bezugszeichen S (Probe; Sample) und R (Referenz) sind ausreichend klein und winkelmäßig ausreichend versetzt, so daß sie zu irgendeinem gegebenen Zeitpunkt nur das Licht von der Probenzelle oder der Referenzzelle durchlassen. Es ist zu erkennen, daß der den Chopper 42 antreibende Motor 44 mit dem Motor 26 sychronisiert sein muß, entsprechend der für jede Wellenlänge gewünschten Anzahl von Wiederholungen von Proben- und Referenzsignal. Folg!ich arbeitet bei einem Probe-Referenz-Paar pro Wellenlänge und bei einem Chopper mit sechs Sektoren der Motor 44 mit einer Drehfrequenz von ff (wobei f die Frequenz des Choppers 24 ist). Für η Probe-Referenz-Paare muß der Chopper 44 bei 6nf arbeiten.slot 16 along the optical path, alternating the luminous flux from the sample cell and the reference cell, resulting in a signal leads, as shown in Fig. f. Such a system preferably uses small circular openings, as in FIG. 6 shown, the multiple slot defining plate 20 by a Plate 20 'is replaced and each of the slots 22a, 22b ... by a pair of ports 22Sa and 22Ra; 22SB and 22Rb; ... 22Se and 22Re is replaced. The corresponding openings with the reference symbols S (sample) and R (reference) are sufficiently small and angular offset enough so that at any given time they will only transmit light from the sample cell or the reference cell. It can be seen that the motor 44 driving the chopper 42 must be synchronized with the motor 26 as for each Desired number of repetitions of sample and wavelength Reference signal. Follow! I work for a sample-reference pair pro Wavelength and, in the case of a chopper with six sectors, the motor 44 with a rotational frequency of ff (where f is the frequency of the chopper 24 is). For η sample-reference pairs, the chopper 44 must operate at 6nf.

Fig. 7 zeigt ein Ausführung^bei spiel ähnlich dem der Fig.l. Ein Probe-Referenz-Chopper 60 enthält eine Lichtquelle 62, optische Elemente 64 und einen Probe-Referenz-Folgesteuer-Wähler 66. Letzterer kann in Form von Fig. 4 aufgebaut sein oder gemäß irgend einer bekannten Konstruktion, die fur die Zwecke der Beleuchtung von Abtast- und Referenzzellen mit bekannter relativer Intensität bei irgend einer gegebenen Wellenlänge geeignet ist. Der Einfachheit der Darstellung halber ist jedoch nur eine einzige Zelle dargestellt. Ein sphärischer Spiegel 68 richtet das durchgelassene Licht auf ein Dispersions-Element 70 und von dort auf einen sphärischen Spiegel 72. Das Dispersions-Element 70 kann entweder ein ebenes Gitter oder ein Prisma sein. Wählt man ein Prisma für das Dispersions-Element 70, so er möglicht dies eine bessere Wirksamkeit für einen Betrieb im ultravioletten Bereich. Die Wahl eines Prismas verringert auch die spektralen Komplexitäten, die durch Gitterspektren höherer Ordnung eingeführt werden können. Das vonFig. 7 shows an embodiment ^ in game similar to that of Fig.l. A Sample-reference chopper 60 includes a light source 62, optical elements 64 and a sample-reference sequence control selector 66. The latter may be constructed in the form of Fig. 4 or according to any known one Construction used for the purposes of illuminating scan and reference cells of known relative intensity at any a given wavelength is suitable. The simplicity of the For the sake of illustration, however, only a single cell is shown. A spherical mirror 68 erects the transmitted light a dispersion element 70 and from there onto a spherical mirror 72. The dispersion element 70 can either be a flat mirror Be a grid or a prism. If a prism is chosen for the dispersion element 70, this enables a better effectiveness for operation in the ultraviolet range. Choosing a prism also reduces the spectral complexities brought about by Higher order grating spectra can be introduced. That from

dem sphärischen Spiegel 72 reflektierte Licht wird dann auf ein Subsystem 74 gerichtet, das Wellen!ängen-Chopper-Optiken und einen Detektor,ähnlich wie in Verbindung mit Fig. 1 beschrieben, enthält. Dieses Subsystem 74 ist im wesentlichen so aufgebaut, wie oben beschrieben.Light reflected from spherical mirror 72 is then sent onto a subsystem 74, the wave length chopper optics and a detector, similar to that described in connection with FIG. 1, contains. This Subsystem 74 is constructed essentially as described above.

In Fig. 8 ist noch ein weiteres AusfUhrungsbeispiel der Erfindung dargestellt. Es enthält ein System mit Dispersion Null, wobei die verschiedenen Wellenlängen durch einen Satz von entsprechenden Rückstrahlen an einer Zwischenposition selektiert werden, und zwar in ähnlicher Weise, wie bei den vorhergehenden Ausflihrungs bei spielen beschrieben. Die selektierten Wellenlängen werden nacheinander durch den Monochromator hindurch rückgestrahlt und treten durch einen einzigen festen Austrittsschlitz aus, der ein relativ kleines Bild auf der Detektorphotokathode liefert. Hiermit kann man ein System wie das nach Fig. 4 kombinieren, um eine Doppelzellenanordnung am Eintrittsoder Austrittsschlitz des Monochromators zu erhalten. 8 is yet another exemplary embodiment of the invention shown. It contains a system with zero dispersion, the different wavelengths can be selected by a set of corresponding return rays at an intermediate position, namely in in a similar way to that described in the previous games. The selected wavelengths are reflected back one after the other through the monochromator and pass through a single one solid exit slit that provides a relatively small image on the detector photocathode. This can be used to create a system like that after Combine Fig. 4 to obtain a double cell arrangement at the entry or exit slit of the monochromator.

Claims

Vl P537 D

PATENT CLAIMS

/ _ 1. / Spectrophotometer for substantially simultaneous measurement of a plurality of absorbance or extinction values of a sample at a corresponding plurality of wavelengths, characterized by a transmission sample cell, a polychromatic light source device with which a portion of light from a source at a plurality is passed of wavelengths through the sample cell, dispersing devices enlängenkompanenten for the separation of polychromatic light which is transmitted through the sample cell in a variety of We ^-1 I, facilities for the sequential transmission of selected wavelength components through openings; a single detector responsive to the selected wavelength components transmitted through the apertures and producing a time dependent signal containing the absorbance information for each wavelength component transmitted by the sample cell; Means for extracting the absorption or extinction information for each wavelength component from the time-dependent signal; and facilities for registering the data.

2. Spectrophotometer according to claim 1, characterized in that further devices are provided which one direct further light part from the light source device through a further sample cell, and that devices are provided which feed the first-mentioned light part and the further light part one after the other to the dispersion device.

3. Spectrophotometer according to claim 2, characterized in that devices are provided which are part of the time-dependent Signal corresponding to that transmitted by the sample cell Part of the light that corresponds to the selected wavelength component, compare with another part of the time-dependent signal that is a selected wavelength component of the other Part of the light that is transmitted by the further sample cell is. .

4. Spectrophotometer according to claim 3, characterized in that Comparison devices are provided which share the part of the time-dependent signal with another part of the time-dependent signal Compare signals, creating a sample-reference comparison is obtained.

Rotating chopper for sequential passage of selected parts of incident light, characterized by: a rotating Mask and means for generating the rotation; a variety of sectors in the rotating mask, each of which is one has an arcuate opening segment that has a radial position has a radial width and an arc length, and a solid mask with a narrow slot extending radially and light from any of the openings in the rotating one Mask lets through; a single detector which generates a signal as a function of the light transmitted by the openings; and optical focusing devices which focus the light from the plurality of radial locations onto the detector.

6. Spectrophotometer for essentially gel single-line measurements a large number of absorption or extinction values from a sample at a corresponding large number of wavelengths, marked by:

a transmission sample cell, a polychromatic light source device, with which a part of light from one source at a multi-

the
number of wavelengths passed through / sample cell; Dispersion devices for the separation of the polychromatic light that is transmitted through the sample cell into a

Variety of shaft length components; Facilities for sequential Transmission of the wavelength components through openings; - retroreflective devices that the selected Wavelength components return through the openings sequentially passing devices and the dispersion devices pass through, so that the selected wavelength component doubles is dispersed;

Devices that disperse the selected wavelength twice

from
separate gene components / non-reflected radiation; a single detector, responsive to the doubly dispersed selected wavelength components reflected from the retroreflective devices, for generating a time dependent signal containing the absorbance information for each wavelength component; Means which derive the absorption or extinction information for each wavelength component from the time dependence of the signal; and
Institutions that register the information.

7. spectrophotometer according to claim 6, characterized in that further devices are provided, which a further light part from the light source device by a further Direct sample cell through, and that devices are provided which the first-mentioned light part and the further light part successively feed the dispersion device.

8. Spectrophotometer according to claim 7, characterized by devices which part of the time-dependent signal that with the one selected wavelength component of the portion of the light transmitted through the scan line was, corresponding, with the other part of the time

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compare the dependent signal that corresponds to the one selected wavelength component of the other part of the light, transmitted through the other scan line.

9. Spectrophotometer according to claim 7, characterized by comparison means which form the part of the time-dependent signal compare with the other part of the time-dependent signal, whereby a sample-reference comparison is obtained.