DE3023791A1

DE3023791A1 - Prepn. of 11-beta:hydroxy;steroid derivs. - by fermenting an 11-desoxy steroid with Curvularia spp.

Info

Publication number: DE3023791A1
Application number: DE19803023791
Authority: DE
Inventors: Klaus Dr. Annen; Henry Dr. 1000 Berlin Laurent; Karl Dr. Petzoldt; Rudolf Prof. Wiechert
Original assignee: Schering AG
Current assignee: Bayer Pharma AG
Priority date: 1980-06-23
Filing date: 1980-06-23
Publication date: 1982-01-21

Abstract

The prepn. of 11beta-hydroxy steroids of formula (I) comprises fermenting a 11-desoxy steroid of formula (II) with a fungal culture of the species Curvularia, pref. Curvularia lunata (where the dashed lines represent single or double bonds; X is F, Cl or Me; R1 is H or 1-6C alkyl; R2 is 1-6C aalkyl). (I) are antiinflammatories. The process is much simpler than previous processes which involved many steps and great expenditure and gives high yields (85-90%).

Description

Verfahren zur Herstellung vonProcess for the production of

11ß-Hydroxysteroiden Die Erfindung betrifft das in den Patentansprüchen gekennzeichnete Verfahren.11β-hydroxysteroids The invention relates to in The method characterized in the claims.

Bekanntlich werden antiinflammatorisch wirksame 11ß-Hydroxy-D-homo-steroide mittels einer sehr aufwendigen vielstufigen Synthese hergestellt. (Deutsche Offenlegungsschrift 23 14 592) Innerhalb der vielstufigen Synthese dieser Verbindungen ist die mikrobiologische Einführung der 11B-Hydroxygruppe in das Steroidgerüst in der Regel der aufwendigste und wegen der dabei gebildeten Nebenprodukte, verlustreichste Syntheseschritt.It is known that 11ß-hydroxy-D-homosteroids are anti-inflammatory produced by means of a very complex multi-stage synthesis. (German Offenlegungsschrift 23 14 592) Within the multi-step synthesis of these compounds is the microbiological Introduction of the 11B-hydroxy group into the steroid structure is usually the most complex and because of the by-products formed, the most lossy synthesis step.

Im Vergleich zu diesem vorbekannten Verfahren hat das erfindungsgemäße Verfahren den Vorzug, daß man mit seiner Hilfe höhere Ausbeuten an Verfahrensprodukt erzielt. Das erfindungsgemäße Verfahren hat darüberhinaus auch den Vorteil, daß es überraschenderweise oft mit wesentlich höheren Substratkonzentrationen und mit kürzerer Reaktionszeit durchgeführt werden kann als das bekannte Verfahren.In comparison to this previously known method, the inventive method Process has the advantage that with its help higher yields of process product achieved. The inventive method also has the advantage that surprisingly often with significantly higher substrate concentrations and with A shorter reaction time can be carried out than the known method.

Ferner ist bemerkenswert, daß man nach dem erfindungsgemäßen Verfahren auch sehr -gut 11ß-Hydroxy-delta1,4-steroide der allgemeinen Formel I aus den entsprechenden 11-Des-1 4 oxy-delta -steroiden der allgemeinen Formel II herstellen kann, während es nach dem bekannten Stand der Technik nicht möglich ist 11-Desoxy-delta1t4-steroide in guten Ausbeuten in der 11B-Position zu hydroxylieren.It is also noteworthy that after the process according to the invention also very good 11ß-hydroxy-delta1,4-steroids of the general formula I from the corresponding 11-Des-1 4 oxy-delta steroids of the general formula II can produce, while it is not possible according to the known prior art 11-deoxy-delta1t4-steroids to hydroxylate in good yields in the 11B position.

Letztlich ist erwähnenswert, daß es für die Durchführung des erfindungsgemäßen Verfahrens nicht erforderlich ist als Ausgangsverbindungen Reinprodukte der 11-Desoxysteroide der allgemeinen Formel II zu verwenden.Finally, it is worth mentioning that it is necessary for the implementation of the invention The process does not require pure products of 11-deoxysteroids as starting compounds of the general formula II to be used.

Die 11-Desoxysteroide der allgemeinen Formel II können als Alkylgruppen R1 und R2 verzweigtkettige oder vorzugsweise geradkettige Gruppen mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen besitzen.The 11-deoxysteroids of the general formula II can be used as alkyl groups R1 and R2 are branched-chain or, preferably, straight-chain groups having 1 to 6 carbon atoms own.

Geeignete Alkylgruppen R1 und R2 sind beispielsweise die Methylgruppe, die Äthylgruppe, die Propylgruppe, die Isopropylgruppe, die Butylgruppe, die Pentylgruppe und die Hexylgruppe. Eine besonders bevorzugte Alkylgruppe R1 ist die Methylgruppe. Besonders bevorzugte Alkylgruppen R2 sind die Methylgruppe und die Äthylgruppe.Suitable alkyl groups R1 and R2 are, for example, the methyl group, the ethyl group, the propyl group, the isopropyl group, the butyl group, the pentyl group and the hexyl group. A particularly preferred alkyl group R1 is the methyl group. Particularly preferred alkyl groups R2 are the methyl group and the ethyl group.

Bei den in der 6,7-Position gesättigt?n 11-Desoxysteroiden der allgemeinen Formel I ist der Substituent X vorzugsweise alpha-ständig.In the case of those saturated in the 6,7 position, 11-deoxysteroids are the most common In formula I, the substituent X is preferably in the alpha position.

Daß sich die 11-Desoxysteroide der allgemeinen Formel II hydroxylieren lassen und zu den entsprechenden 11ß-Hydroxysteroiden der allgemeinen Formel I gespalten werden, ist für den Fachmann überraschend. Noch weniger war vorhersehbar, daß bei dem erfindungsgemäßen Verfahren die erwünschten Verfahrensprodukte in sehr hohen Ausbeuten (von etwa 85-90 % der Theorie) erhalten werden.That the 11-deoxysteroids of the general formula II are hydroxylated let and cleaved to the corresponding 11ß-hydroxysteroids of the general formula I. is surprising to the person skilled in the art. Even less was predictable that at the process according to the invention, the desired process products in very high Yields (of about 85-90% of theory) can be obtained.

Abgesehen von der Verwendung anderer Ausgangsverbindungen wird das erfindungsgemäße Verfahren unter den Bedingungen durchgeführt, die man üblicherweise zur 11B-Hydroxylierung von Steroiden mit Pilzen der Gattung Curvularia anwendet.Aside from using other output compounds, the Process according to the invention carried out under the conditions which are usually for 11B-hydroxylation of steroids with fungi of the genus Curvularia.

Zur Hydroxylierung geeignete Pilze der Gattung Curvularia sind beispielsweise Curvularia falcuta QM-102 H, Curvularia genticulata IFO (6284), Curvularia lunata NRRL 2380, NRRL 2434, NRRL 2178, ATCC 12Q17 oder IFO (6286) oder Curvularia maculans IFO (6292).Fungi of the genus Curvularia suitable for hydroxylation are, for example Curvularia falcuta QM-102 H, Curvularia genticulata IFO (6284), Curvularia lunata NRRL 2380, NRRL 2434, NRRL 2178, ATCC 12Q17 or IFO (6286) or Curvularia maculans IFO (6292).

Unter den für diese Mikroorganismen üblicherweise verwendeten Kulturbedingungen werden in einem geeigneten Nährmedium unter Belüften Submerskulturen angezüchtet.Among those commonly used for these microorganisms Culture conditions Submerged cultures are grown in a suitable nutrient medium with aeration.

Dann setzt man den Kulturen das Substrat (in einem geeigenten Lösungsmittel gelöst oder vorzugsweise in emulgierter Form) zu und fermentiert, bis eine maximale Substratumwandlung erreicht ist.The substrate is then added to the cultures (in a suitable solvent dissolved or preferably in emulsified form) and fermented until a maximum Substrate conversion is achieved.

Geeignete Substratlösungsmittel sind beispielsweise Methanol, Äthanol, Glykolmonomethyläther, Dimethylformamid oder Dimethylsulfoxyd. Die Emulgierung des Substrats kann beispielsweise bewirkt werden, in dem man dieses in mikronisierter Form oder in einem mit Wasser Iriischbaren Lösungsmittel (wie Methanol, Äthanol, Aceton, Glykolmonomethyläther, Dimethylformamid oder Dimethylsulfoxyd) gelöst unter starker Turbulenz in (vorzugsweise entkalktem) Wasser, welches die üblichen Emulgationshilfen enthält, eindüst.Suitable substrate solvents are, for example, methanol, ethanol, Glycol monomethyl ether, dimethylformamide or dimethyl sulfoxide. The emulsification of the Substrate can be effected, for example, in which this is micronized Form or in a water-soluble solvent (such as methanol, ethanol, Acetone, glycol monomethyl ether, dimethylformamide or dimethyl sulfoxide) dissolved under strong turbulence in (preferably decalcified) water, which the usual emulsification aids contains, inject.

Geeignete Emulgationshilfen sind nichtionogene Emulgatoren, wie zum Beispiel Äthylenoxydaddukte oder Fettsäureester von Polyglykolen. Als geeignete Emulgatoren seien die handelsüblichen Netzmittel Tegin(R), Tagat (R), Tween(R) und Span(R) beispielsmäßig genannt.Suitable emulsification aids are non-ionic emulsifiers, such as Example ethylene oxide adducts or fatty acid esters of polyglycols. As suitable Emulsifiers are the commercially available wetting agents Tegin (R), Tagat (R), Tween (R) and Span (R) named as an example.

Oft ermöglicht die Emulgierung der Substrate einen erhöhten Substratdurchsatz und somit eine Steigerung der Substratkonzentration. Es ist aber selbstverständlich auch möglich, bei dem erfindungsgemäßen Verfahren andere Methoden zur Steigerung des Substratdurchsatzes, wie sie dem Fermentationsfachmann wohl bekannt sind, anzuwenden.The emulsification of the substrates often enables an increased substrate throughput and thus an increase in the substrate concentration. But it goes without saying other methods of enhancement are also possible in the method according to the invention of the substrate throughput as they are well known to the fermentation expert.

Die optimale Substratkonzentration, Substratzugabezeit und Fermentationsdauer ist von der Struktur des verwendeten Substrates und der Art des verwendeten Mikroorganismus abhängig. Diese Größen müssen, wie dies bei mikrobiologischen Steroidumwandlungen allgemein erforderlich ist, im Einzelfall durch Vorversuche, wie sie dem Fachmann geläufig sind, ermittel werden.The optimal substrate concentration, substrate addition time and fermentation time depends on the structure of the substrate used and the type of microorganism used addicted. These sizes must, as is the case with microbiological steroid conversions is generally required, in individual cases by preliminary tests, as they are the expert are familiar, be determined.

Die nachfolgenden Ausführungsbeispiele dienen zur Erläuterung des erfindungsgemäßen Verfahrens: Beispiel 1 a) 0,62 g Pyridiniumtosylat und 6,2 g D-Homo-Reichstein S werden in 43,4 ml Dimethylformamid gelöst und mit 270 ml Benzol verdünnt. Danach destilliert man bei einer Badtemperatur von 1200 C über einen Wasserabscheider 116 ml Benzol ab. In die heiße Reaktionslösung läßt man langsam 14,9 ml Orthoessigsäuretrimethylester zulaufen und destilliert anschließend 1 Stunde lang Benzol und andere leicht flüchtige Reaktionskomponenten ab. Man fügt nun 7,5 ml Pyridin hinzu und engt bei einer Badtemperatur von 600 C im Hochvakuum im Verlauf von 2 Stunden vollständig zur Trockne ein. Der ölige Rückstand wird aus Ether kristallisiert. Man erhält 7,3 g 17,21-(1-Methoxy-ethylidendioxy)--D-homo-4-pregnen-3,20-dion in Form gelber Kristalle vom Schmelzpunkt 167-1690 C.The following exemplary embodiments serve to explain the method according to the invention: Example 1 a) 0.62 g of pyridinium tosylate and 6.2 g of D-Homo-Reichstein S are dissolved in 43.4 ml of dimethylformamide and mixed with 270 ml of benzene diluted. It is then distilled at a bath temperature of 1200 C from 116 ml of benzene via a water separator. Lets into the hot reaction solution 14.9 ml of trimethyl orthoacetate are slowly run in and then distilled Benzene and other volatile reaction components are removed for 1 hour. One adds now 7.5 ml of pyridine are added and the mixture is concentrated at a bath temperature of 600 ° C. in a high vacuum completely dry in the course of 2 hours. The oily residue turns off Ether crystallizes. 7.3 g of 17,21- (1-methoxy-ethylidenedioxy) - D-homo-4-pregnen-3,20-dione are obtained in the form of yellow crystals with a melting point of 167-1690 C.

b) Ein 2 I-Erlenmeyerkolben, der 500 ml einer 30 Min. bei 1200 C im Autoklaven sterilisierten Nährlösung aus 3 % Glukose, 1 % Corn steep, 0-,02 96 NaN03, 0,1 % KH2P04, 0,2 96 K2HPO4, 0,05 % MgSO4.7H20, 0,002 96 FeSO4.7H20 und 0,05 96 KCl enthält, wird mit einer Lyophilkultur von Curvularia lunata (NRRL 2380) beimpft und 60 Stunden bei 300 C auf einem Rotationsschüttler bewegt. Diese Anzuchtskultur (250 ml) dient zur Beimpfung eines 20 l-Vorfermenters, der mit 15 1 eines bei 121° C und 1,1 atü sterilisierten Nährmediums, bestehend aus 2 % Glukose und 2 96 Corn steep, eingestellt auf pH 6,5, beschickt ist. Unter Zugabe von Silicon SH als Antischaummittel wird nun bei 290 C und 0,7 atü Druck unter Belüftung (10 1/Min.) und Rühren (220 U/Min.) 24 Stunden germiniert. Danach werden 1,5 1 dieser Kultur unter sterilen Bedingungen entnommen und damit ein 20 l-Hauptfermenter beimpft, der mit 14 1 eines wie oben sterilisierten Nährmediums aus 3 96 Corn steep und 0,7 26 Glukose, eingestellt auf pH 6,5, gefüllt ist. Nach einer Anwachsphase von 12 Stunden unter Vorfermenterbedingungen werden 7,3 g 17,21-(1-Methoxy-ethylidendioxy)-D-homo-4-pregnen-3,20-dion, gelöst in 100 ml Dimethylformamid, unter sterilen Bedingungen hinzugegeben und weiter gerührt und belüftet. Der Verlauf der Fermentation wird durch Entnahme von Proben kontrolliert, die mittels Methylisobutylketon extrahiert und dünnschichtchromatographiert analysiert werden. Nach 48 Stunden Kontaktzeit ist die Umsetzung des Substrates beendet.b) A 2 l Erlenmeyer flask that holds 500 ml of a 30 min. at 1200 C im Autoclave sterilized nutrient solution from 3% glucose, 1% corn steep, 0-, 02 96 NaN03, 0.1% KH2P04, 0.2 96 K2HPO4, 0.05% MgSO4.7H20, 0.002 96 FeSO4.7H20 and 0.05 96 Contains KCl is inoculated with a lyophil culture of Curvularia lunata (NRRL 2380) and agitated for 60 hours at 300 C on a rotary shaker. This cultivation culture (250 ml) is used to inoculate a 20 l pre-fermenter, the one with 15 l at 121 ° C and 1.1 atmospheres sterilized nutrient medium, consisting of 2% glucose and 2 96 corn steep, adjusted to pH 6.5, is charged. With the addition of Silicon SH as an antifoam agent is now at 290 C and 0.7 atmospheric pressure with aeration (10 l / min.) and stirring (220 Rpm) germinated for 24 hours. After that, 1.5 l of this culture are under sterile Conditions removed and thus inoculated a 20 l main fermenter, which with 14 l of one Nutrient medium sterilized as above and composed of 396 corn steep and 0.726 glucose is filled to pH 6.5. To a growth phase of 12 hours 7.3 g of 17,21- (1-methoxy-ethylidendioxy) -D-homo-4-pregnen-3,20-dione, dissolved in 100 ml of dimethylformamide, added under sterile conditions and continued stirred and aerated. The course of fermentation is monitored by taking samples controlled, extracted using methyl isobutyl ketone and thin-layer chromatographed to be analyzed. After 48 hours of contact time, the substrate has reacted completed.

Der Fermenterinhalt wird filtriert, das Kulturfiltrat clS auch das abfiltrierte Mycel mit Methylisobutylketon extrahiert, die Extrakte vereinigt und zunächst im Umlaufverdampfer konzentriert, anschließend bei 500 C Badtemperatur im Vakuum im Rotationsverdampfer zur Trockne eingeengt. Den Rückstand löst man in warmen Methanol, filtriert vom ungelöst gebliebenen Siliconöl ab und dampft wieder zur Trockne ein. Der verbliebene Rückstand wird über eine Kieselgelsäule (Gradient 4,5 1 Methylenchlorid/0,5 1 Aceton - 4 1 Methylenchlorid/ 1 1 Aceton) chromatographiert und aus Aceton kristallisiert. Man erhält 5,7 g D-Homo-Hydrocortison (11ß,17alpha,21-Trihydroxy-D-homo-4-pregnen-3,20-dion)vom Schmelzpunkt 2122I5o C (Zers.).The fermenter contents are filtered, as is the culture filtrate CLS filtered off mycelium extracted with methyl isobutyl ketone, the extracts combined and initially concentrated in a circulation evaporator, then at 500 C bath temperature concentrated to dryness in vacuo in a rotary evaporator. The residue is dissolved in warm methanol, filtered from the undissolved silicone oil and evaporated again dry up. The remaining residue is passed over a silica gel column (gradient 4.5 1 methylene chloride / 0.5 1 acetone - 4 1 methylene chloride / 1 1 acetone) and crystallized from acetone. 5.7 g of D-homohydrocortisone (11β, 17alpha, 21-trihydroxy-D-homo-4-pregnen-3,20-dione) are obtained from Melting point 212215 ° C (dec.).

Beispiel 2 a) 1,5 g Pyridiniumtosylat und 15 g l7alpha,21-Dihydroxy-D-homo-1,4-pregnadien-3,20-dion werden in 120 ml Dimethylformamid gelöst und mit 800 ml Benzol verdünnt. Danach destilliert man bei einer Badtemperatur von 1200 C über einen Wasserabscheider 250 ml Benzol ab. In die heiße Reaktionslösung läßt man 40 ml Orthoessigsäuretrimethylester langsam zulaufen und destilliert anschließend weiter Benzol und andere leicht flüchtige Reaktionskomponenten ab. Man fügt nun 20 ml Pyridin hinzu engt bei einer Badtemperatur von 600 C im Hochvakuum im Verlauf von 2 Stunden vollständig zur Trockne ein. Es hinterbleiben 18,8 g öligkristallines Rohprodukt. Eine Probe kristallisiert man nach Behandlung mit A-Kohle aus Isopropylether um und erhält reines 1 7alpha,21 - (1 -Methoxy-ethylidendioxy) -D-homo-1 ,4-pregnadien-3,20-dion vom Schmelzpunkt 142-1440 C.Example 2 a) 1.5 g of pyridinium tosylate and 15 g of 17alpha, 21-dihydroxy-D-homo-1,4-pregnadiene-3,20-dione are dissolved in 120 ml of dimethylformamide and diluted with 800 ml of benzene. Thereafter it is distilled at a bath temperature of 1200 ° C. through a water separator 250 ml of benzene. 40 ml of trimethyl orthoacetate are added to the hot reaction solution run in slowly and then continue to distill benzene and other volatile substances Reaction components from. 20 ml of pyridine are then added, concentrated at a bath temperature of 600 C in a high vacuum in the course of 2 hours completely to dryness. It 18.8 g of oily crystalline crude product remain. A sample is crystallized after treatment with activated charcoal from isopropyl ether to obtain pure 1 7alpha, 21 - (1 -Methoxy-ethylidenedioxy) -D-homo-1,4-pregnadiene-3,20-dione of melting point 142-1440 C.

b) Ein 2 l-Erlenmeyerkolben, der 500 ml einer 30 Min. bei 1200 C im Autoklaven sterilisierten Nährlösung aus 3 26 Glukose, 1 96 Corn steep, 0,2 % NaN03, 0,1 96 KH2PO4, 0,2 % K2HPO4, 0,05 % MgSO4.7H2O, 0,002 96 FeSO4 .7H20 und 0,05 26 KCl enthält, wird mit einer Lyophilkultur von Curvularia lunata (NRRL 2380) beimpft und 60 Stunden bei 300 C auf einem Rotationsschüttler bewegt, Diese Anzuchtskultur (250 ml) dient zur Beimpfung eines 20 l-Vorfermenters, der mit 15 1 eines bei 1210 C und 1,1 atü sterilisierten Nährmediums, bestehend aus 2 %Glukose und 2 % Corn steep, eingestellt auf pH 6,5, beschickt ist. Unter Zugabe von Silicon SH als Antischaummittel wird bei 290 C und 0,7 atü Druck unter Belüftung (10 1/Min.) und Rühren (220 U/Min.) 24 Stunden germiniert. Danach werden 1,5 1 dieser Kultur unter sterilen Bedingungen entnommen und damit ein 20 l-Hauptfermenter beimpft, der mit 14 1 eines wie oben sterilisierten Nährmediums aus 3 96 Corn steep und 0,7 % Glukose, eingestellt auf pH 5,5, gefüllt ist.b) A 2 l Erlenmeyer flask that holds 500 ml of a 30 min. at 1200 C im Autoclave-sterilized nutrient solution from 3 26 glucose, 1 96 corn steep, 0.2% NaN03, 0.1 96 KH2PO4, 0.2% K2HPO4, 0.05% MgSO4.7H2O, 0.002 96 FeSO4 .7H20 and 0.05 26 Contains KCl is inoculated with a lyophil culture of Curvularia lunata (NRRL 2380) and moved for 60 hours at 300 C on a rotary shaker, this seed culture (250 ml) is used to inoculate a 20 l pre-fermenter, the one at 1210 with 15 l C and 1.1 atmospheres sterilized nutrient medium, consisting of 2% glucose and 2% corn steep, adjusted to pH 6.5, is charged. With the addition of Silicon SH as an antifoam agent is at 290 C and 0.7 atmospheric pressure with aeration (10 1 / min.) and stirring (220 rpm.) Germinated for 24 hours. Then 1.5 l of this culture are made under sterile conditions removed and thus inoculated a 20 l main fermenter, the 14 l one as above sterilized nutrient medium from 3 96 corn steep and 0.7% glucose, adjusted to pH 5.5, is filled.

Nach einer Anwachsphase von 12 Stunden unter Vorfermenterbedingungen werden 7,5 g 17alpha,21 -(1-Methoxy-ethylidendioxy)-D-homo-1,4-pregnadien-3,20-dion, gelöst in 100 ml Dimethylformamid, unter sterilen Bedingungen hinzugegeben und weiter gerührt und belüftet. Der Verlauf der Fermentation wird durch Entnahme von Proben kontrolliert, die mittels Methylisobutylketon extrahiert und dünnschichtchromatographisch analysiert werden. Nach 52 Stunden Kontaktzeit ist die Umsetzung des Substrates beeendet. Der Fermenterinhalt wird filtriert, das Kulturfiitrat als auch das abfiltrierte Mycel mit Methylisobutylketon extrahiert, die Extrakte vereinigt und zunächst im Umlaufverdampfer konzentriert, anschließend bei 50C C Badtemperatur im Vakuum im Rotationsverdampfer auf 100 ml eingeengt und bei Raumtemperatur kristallisieren lassen. Das Produkt wird abgesaugt und im Vakuum getrocknet. Man erhält 6,1 g D-Homo-Prednisolon (11ß,17alpha,21-Trihydroxy-D-homo-1,4-pregnadien-3,20-dion) vom Schmelzpunkt 226-2280 C.After a growth phase of 12 hours under pre-fermenter conditions 7.5 g of 17alpha, 21 - (1-methoxy-ethylidendioxy) -D-homo-1,4-pregnadiene-3,20-dione, dissolved in 100 ml of dimethylformamide, added under sterile conditions and continued stirred and aerated. The course of fermentation is monitored by taking samples controlled, extracted using methyl isobutyl ketone and thin-layer chromatography to be analyzed. The substrate has reacted after 52 hours of contact ended. The fermenter contents are filtered, the culture filtrate as well as the filtered off Mycelium extracted with methyl isobutyl ketone, the extracts combined and first im Concentrated circulation evaporator, then at 50C C bath temperature in a vacuum Rotary evaporator concentrated to 100 ml and crystallize at room temperature permit. The product is filtered off with suction and dried in vacuo. 6.1 g of D-homo-prednisolone are obtained (11β, 17alpha, 21-trihydroxy-D-homo-1,4-pregnadiene-3,20-dione) of melting point 226-2280 C.

Claims

A process for the preparation of 11β-hydroxysteroids of the general formula I is patent claims in which the bonds ..... single bonds or double bonds and X denotes a hydrogen atom, a fluorine atom, a chlorine atom or a methyl group, characterized in that a II-deoxysteroid of the general formula II wherein, and X are as defined above, R1 is a hydrogen atom or an alkyl group containing 1 to 6 carbon atoms and R2 is an alkyl group containing 1 to 6 carbon atoms, fermented with a mushroom culture of the genus Curvularia.

2. Process for the preparation of IIβ-hydroxysteroids of the general Formula I according to claim 1, characterized in that the fermentation is carried out with Using a mushroom culture of the species Curvularia lunata.