DE3002996A1 - Direct plasma injection with automatic enrichment and washing - using distribution system and alternating pre-column switching arrangement - Google Patents

Direct plasma injection with automatic enrichment and washing - using distribution system and alternating pre-column switching arrangement

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DE3002996A1 DE19803002996 DE3002996A DE3002996A1 DE 3002996 A1 DE3002996 A1 DE 3002996A1 DE 19803002996 DE19803002996 DE 19803002996 DE 3002996 A DE3002996 A DE 3002996A DE 3002996 A1 DE3002996 A1 DE 3002996A1
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Abstract

An arrangement for plasma direct injection has automatic enrichment and washing phases and is applicable to quantitative high efficienty liquid chromatography in pharmaceutical and biological analysis. The arrangement contains a distribution system connected to a sample extraction or application system. The distribution system has a pressure tight connection to a pump supplying the scavenging fluid and a pressure tight connection to a multiple-way valve. The multiple-way valve is connected to pre-columns which are, in turn, connected to a pump via a further multiple-way valve. The analytical chromatography column is connected to the first multiple-way valve, when a sampling loop has been filled the material is passed to the first multiple-way valve. The pre-columns and pump are arranged in an alternating pre-rolumn circuit.

Description

Vorrichtung zur Plasmadirektinjektion mit automatischerDevice for direct plasma injection with automatic

Anreicherungs- ind Waschpase für kr dz qiin i ti j v Hochleistungsflüssigkeitschromatographie Die Erfindung betrifft eine Vorrichtung zur Plasmadirektinjektion- mit automatischer Anreicherungs-, Wasch- und Chromatographiephase für die quantitative Hochleistungsflüssigkeitschromatographie, z. B. bei der Bestimmung von Pharmaka oder deren Metaboliten im Plasma.Enrichment and wash phase for kr dz qiin i ti j v high-performance liquid chromatography The invention relates to a device for direct plasma injection with automatic Enrichment, washing and chromatography phase for quantitative high-performance liquid chromatography, z. B. in the determination of pharmaceuticals or their metabolites in plasma.

Mit der raschen Entwicklung der Hochleistungsflüssigkeitschromatographie in den letzten Jahren und der damit verbundenen universellen Detektionsmöglichkeiten zur Erfassung kleinster Substanzmengen eröffncten sich für die pharmazeutische und biochemische AnaLytik neue Möglichkeiten, z. B. bei der Bestimmung von Wirkstoffzusammensetzungen in galenischen Formen, bei der Ermittlung von Inhaltsstoffen in Drogen, bei der Auffindung von Pharmaka und deren Metaboliten in Körperflüssigkeiten im Rahmen pharmakokinetischer Studien.With the rapid development of high performance liquid chromatography in recent years and the associated universal detection options for the detection of the smallest amounts of substances opened up for the pharmaceutical and biochemical analysis new possibilities, e.g. B. in the determination of active ingredient compositions in galenic forms, in the determination of ingredients in drugs, in the Detection of pharmaceuticals and their metabolites in body fluids in the context of pharmacokinetic Studies.

Bisher begnügte man sich bei der Probenvorbereitung und Probenaufarbeitung vor der Durchführung einer Hochleistungsflüssigkeitschromatographie mit klassischen und damit arbeitsintensiven und zeitraubenden, aber auch mit ein.er Vielzahl von mit Fehlermöglichkeiten behafteten Aufarbeitungsmethoden. Die Probenaufarbeitung ist in ihren Verfahrensschritten auf die zu bestimmenden Substanzen abgestimmt. Im folgenden sollen die Schritte bei einer gängigen Probenvorbereitung für die Hochlelstungsflüssigkeitschromatographie, dargestellt an der Isolierung einer Substanz aus Humanplasma, aufgezählt werden: Gewinnung des Plasmas, Abpuffern des selben mit einer Säure oder Base, Auswahl und Hinzufügen des internen Standards, Vorsetzen des Plasmas mit-einem Extraktionsmittel, mechanische Extraktion, Durchführung einer Phasentrennung, Filtration bzw. Evaporation, Wiederauflösen des gewonnenen Rückstands und Injektion in den Hochleistungsflüssigkeitscbromatographen.So far, sample preparation and sample processing have been content before performing high performance liquid chromatography with classical and thus labor-intensive and time-consuming, but also with a large number of with the possibility of error-prone processing methods. The sample preparation is matched in its process steps to the substances to be determined. The following are the steps for a common sample preparation for high-performance liquid chromatography, represented by the isolation of a substance from human plasma, can be enumerated: Extraction of the plasma, buffering of the same with an acid or base, selection and Adding the internal standard, introducing the plasma with an extractant, mechanical extraction, phase separation, filtration or evaporation, Redissolve the recovered residue and inject it into the high-performance liquid chromatograph.

Es wurde nun ebr. W2g gefunAen,~ der routinemäßig eine Aufarbeitung der zu untersuchenden Substrate, z. B. Humanplasma oder Urin, unter Ausschaltung der oben beschriebenen klassischen Methoden zur Probenvorbereitung, gestattet. Dieser neue Weg wird durch eine Vorrichtung ermöglicht, die eine Plasma- bzw.It was now ebr. W2g found, a routine work-up the substrates to be examined, e.g. B. human plasma or urine, with elimination the classical methods for sample preparation described above. This a new way is made possible by a device that generates a plasma or

Urindirektinjektion in zwei oder mehreren alternierend geschalteten Anreicherungssäulen vorsieht, wobei diese Anreicherungssäulen (im folgenden auch Vor säulen genannt) über automatisch und/oder manuell steuerbare Mehrwegventile mit der eigentlichen chromatographischen Trennsäule verbunden sind. Das gesamte Anreicherungssystem, d. h. zwei oder mehrere Vorsäulen, steht mit dem eigentlichen Trennsystem in Verbindung, wobei durch eine entsprechende Steuerung im Wechsel jeweils die Anreicherungssäulen mit der Probe beschichtet werden und gleichzeitig die im Plasma bzw. im Urin befindlichen Begleitstoffe, wie z. B. Proteine, Salze (polare wasserlösliche Metaboliten) , Harnstoff usw. der Vorsäule mit einem Spülmechanismus eluiert werden. Die erfindungsgemäße Vorrichtung besteht aus einem kontinuierlich arbeitenden Probenaufgabe-, Anreicherungs- und einem direkt damit verkoppelten Chromatographiesystem; sie gestattet die Durchführung einer Applikations-, Anreicherungs- und Waschphase und einer damit verkoppelten Chromatographiephase. Die Gesamtvorrichtung besteht im einzelnen aus einer Injektionsstelle für die Probenaufgabe in Verbindung mit einem Verteilungssystem, z. B. einem Mehrwegventil, einem 6-Weghahn, der einerseits mit einem Dosierungssystem, z. B. einer das Applikationsvolumen dosierenden Probeschleife, andererseits mit einer die Spülflüssigkeit unter Druck setzenden Pumpe in Verbindung steht und der die Entnahme der in dem Dosiersystem anstehenden Probemenge durch die Spülflüssigkeit gestattet. Dieses Mehrwegventil, das die Probenaufgabe regelt, kann auch durch andere, vollautomatisierte Probennahme - oder Applikationssysteme ergänzt oder gegebenenfalls trsetzt werden; im allgemeinen werden 10 bis 2000 ul Probenflüssigkeit programmiert appliziert.Direct urine injection in two or more alternating circuits Provides enrichment columns, these enrichment columns (hereinafter also Before columns called) via automatically and / or manually controllable multi-way valves are connected to the actual chromatographic separation column. The entire Enrichment system, d. H. two or more guard columns, stands with the actual Separation system in connection, with a corresponding control in each case the enrichment columns are coated with the sample and at the same time the im Plasma or accompanying substances in the urine, such as. B. proteins, salts (polar water-soluble metabolites), urea, etc. of the guard column with a rinsing mechanism be eluted. The device according to the invention consists of a continuous working sample application, enrichment and a chromatography system directly coupled to it; it allows an application, enrichment and washing phase to be carried out and a chromatography phase coupled therewith. The overall device consists in detail from an injection site for sample application in connection with a distribution system, e.g. B. a multi-way valve, a 6-way valve, on the one hand with a dosing system, e.g. B. a sample loop dosing the application volume, on the other hand with a pump which pressurizes the flushing liquid stands and the removal of the sample amount pending in the dosing system the rinsing liquid allowed. This multi-way valve, which regulates the sample application, can also be done by other, fully automated sampling or application systems supplemented or replaced if necessary; generally 10 to 2000 ul Programmed sample liquid applied.

Die Vorsäulen stehen über ein weiteres druckfestes Verteilerelement, z. B. bei Vorliegen von 2 Vorsäulen, über einen 6-Weghahn, miteinander in der Weise in Verbindung, daß bei der Beschickung der einen Vor säule mit dem Probengut und der Spülflüssigkeit, die Spülflüssigkeit mit etwaigen störenden Begleitstoffen ausgeschleust wird, während gleichzeitig.das durch eine Pumpe unter Druck gesetzte Eluens durch die andere Vorsäule fließt, wo es die dort adsorbierten Substanzen aufnimmt und über das vostéhend~~bes^chrïebene Mehrwegverteilersystem in die Chromatographiesäule einbringt. Durch entsprechendes Umschalten des die beiden Vor säulen und die Eluens-zuführende Pumpe verbindenden Mehrwegventils bzw. -hahnen erfolgen die Spülphasen der Vorsäulen im Wechsel (alternierende Vorsäulenschaltung").The guard columns stand over another pressure-resistant distributor element, z. B. in the presence of 2 guard columns, via a 6-way valve, with each other in the way in connection that when charging a pre-column with the sample and the rinsing liquid, the rinsing liquid with any disturbing accompanying substances are discharged while at the same time the eluent pressurized by a pump through the other guard column flows, where it picks up the substances adsorbed there and via the vostéhend ~~ described reusable distribution system into the chromatography column brings in. By switching the two pre-columns and the eluent-feeding one accordingly The multi-way valve or taps connecting the pump are used for the rinsing phases of the guard columns alternating (alternating guard column switching ").

Zum besseren Verständnis sei auf die Zeichnung verwiesen, die eine beispielhafte Ausführungsform der erfindungsgemäße-n Vorrichtung schematisch aufzeigt. In dieser Zeichnung-ist (1) das Probenahme- oder Applikationssystem in Form eines 6-Weghahns, (12) ist die Injektionsstelle, (13) ist der Auslaß in eine, die Probenmenge volumenmäßig bestimmende Doserschleife (14), die über den Einlaß (1.5) mit dem 6-Weghahn (1) verbunde-n ist. Nach Füllen der Prohenchieife (14) wird das Ventil umgeschaltet und das in (14) befindliche Probengut iiber (18) auf (21) weiter geleitet. Der Weitertransport geschieht mit der durch die Pumpe (19)', die über den Einlaß (17) mit dem 6-Weghahn (1) in Verbindung steht, unter Druck eingeführten Waschflüssigkeit; letztere drückt, nach der Herstellung einer Verbindung zwischen Einlaß (17) und Auslaß (13), die Probe aus der Dosierschleife (14) über den Einlaß (15) in den Auslaß (18).For a better understanding, reference is made to the drawing, the one shows an exemplary embodiment of the device according to the invention. In this drawing, (1) the sampling or application system is in the form of a 6-way tap, (12) is the injection site, (13) is the outlet into one, the sample amount Volume-determining dosing loop (14), which is connected to the 6-way valve via the inlet (1.5) (1) connected-n is. After the Prohenchieife (14) has been filled, the valve is switched over and the sample material located in (14) is passed on via (18) to (21). The onward transport happens with the through the pump (19) ', which over the inlet (17) with the 6-way cock (1) communicating, washing liquid introduced under pressure; the latter presses, after establishing a connection between inlet (17) and outlet (13), the Sample from the metering loop (14) via the inlet (15) into the outlet (18).

Das die Verteilung auf die Vor säulen regelnde 6-Wegventil (2) ist mit dem 6-Wegventil (1) über den Einlaß (21 verbunden, die Aus- bzw. Einläße (22) und (26) sind an die Vorsäulen (5) und (4) angeschlossen, der Auslaß (23) bedient die Chromatographiesäule (6),, die noch mit einem Detektor (7) verbunden ist. Die Ein- bzw. Ausläße (24) und (25) dienen zur Verbindung des Einlaßes (26) mit dem Auslaß (23). In der Zeichnung sind, durch ausgezogene Linien, die Verbindungen so eingestellt, daß die das Probengut.mitführende Waschflüssigkeit durch die Vorsäule (5) fließt und gleichzeitig das die Vorsäule (4) durchströmende Eluenz in Richtung auf die Chromatographiesäule (6).The 6-way valve (2) regulating the distribution to the pre-columns is connected to the 6-way valve (1) via the inlet (21), the outlets and inlets (22) and (26) are connected to the guard columns (5) and (4), the outlet (23) serves the chromatography column (6), which is still connected to a detector (7). the Inlets and outlets (24) and (25) serve to connect the inlet (26) to the Outlet (23). In the drawing, by solid lines, the connections are like this set that the washing liquid entrained with the sample material passes through the guard column (5) flows and at the same time the eluent flowing through the precolumn (4) in the direction of on the chromatography column (6).

Das die beiden Vorsäulen (4) und (5) verbindende druckfeste Verteilerelement, in der Zeichnung als 6-Weghahn (3) dargestellt, steht über den Einlaß (31) mit der Vorsäule (5) und dem Einlaß (35) mit der Vorsäule (4) in druckfester Verbindung.The pressure-resistant distributor element connecting the two guard columns (4) and (5), Shown in the drawing as a 6-way valve (3), is above the inlet (31) with the Pre-column (5) and the inlet (35) with the pre-column (4) in a pressure-tight connection.

Der Auslaß (32)-dient ur: Austeaung der Waschflüssigkeit, die gegebenenfalls noch einem Detektor (8) zugeführt werden kann oder ansonctcn' vcl:worrcn wird. Der linla,3 (36) steht mit der Pumpe (37) in Verbindung, während die Ein- bzw. Ausläße (33) und (3,4) einerseits sowie 24 und 25 andrerseits über kurze Kapillarschleifen miteinander verbunden werden. Der 6-Weghahn (3) ist, in der Zeichnung durch durchgezogene Linien angedeutet, so geschaltet, daß die aus der Vorsäule (5) austretende Waschflüßigkeit zum Detektor (8) geleitet und anschließend verworfen wird, während gleichzeitig das von der Pumpe (35) gelieferte Eluens über die Ein- bzw. Ausläße (36) und (35) in die Vorsäule (4) fließt, wo es die adsorbierten Substanzen aufnimmt und über den 6-Weghahn (2) der Chromatographiesäule (6) zuführt.The outlet (32) serves to de-aerate the washing liquid, which if necessary can still be fed to a detector (8) or ansonctcn 'vcl: is worrcn. Of the linla, 3 (36) is connected to the pump (37), while the inlets and outlets (33) and (3, 4) on the one hand and 24 and 25 on the other hand via short capillary loops be connected to each other. The 6-way valve (3) is solid in the drawing Lines indicated, switched so that the washing liquid emerging from the guard column (5) to the detector (8) and then discarded while at the same time the eluent delivered by the pump (35) via the inlets and outlets (36) and (35) flows into the pre-column (4), where it picks up the adsorbed substances and transfers them over feeds the 6-way valve (2) to the chromatography column (6).

Es ergibt sich folgendes Arbeitsprinzip: nach der Injektion einer Probe (z. B. einer Plasmaprobe) steht eine Flüssigkeit mit einem bei der Verwendung einer Vorrichtung gemäß der Zeichnung, beispielsweise durch die Dosierschleife (14) definierten Applikationsvolumen für die anschließende Chromatographie zur Verfügung. Durch Umschalten des 6Weghahns (1) wird die Plasmaprobe auf die Vorsäule (5) gespült, wobei die zu detektierende Substanz an dieser Vorsäule angereichert und die Plasmabegleitstoffe (z. B. Salze, Proteine) durch die Spülung durch die Pumpe (19) aus dieser Vorsäule entfernt werden, indem der Einlaß (31) mit dem Auslaß (32) des 6-Weghahns (3) gekoppelt ist.The following working principle results: after the injection of a Sample (such as a plasma sample) is a liquid with one in use a device according to the drawing, for example through the metering loop (14) defined application volume is available for subsequent chromatography. By switching the 6-way valve (1), the plasma sample is flushed onto the guard column (5), the substance to be detected being enriched in this guard column and the plasma accompanying substances (e.g. salts, proteins) by rinsing with the pump (19) from this guard column can be removed by coupling the inlet (31) to the outlet (32) of the 6-way valve (3) is.

In der gleichen Zeit wird durch die Pumpe (37) das Eluens in die Vorsäule (4) gepumpt, wo es diese zu bestimmende Substanz, die zuvor am Trägermaterial dieser Vorsäule spezifisch adsorbiert wurde, ablöst und von dort in die Chromatographiesäule (6) transportiert. Damit das wechselseitige Be- und Entladen der beiden Vorsäulen (4) und (5) zum richtigen Zeitpunkt erfolgt, wird parallel zu der erfolgten Applikation des Probegutes über den Probegeber (in der Zeichnung nicht gesondert dargestellt) ein an sich bekanntes, elektrisches Zeitelement in Gang gesetzt, das die Dauer der Waschphase (z. B. 5 Minuten) auf der Vorsäule kontrolliert und, nach deren Beendigung die Schalthähne (2) und (3) z. B. pneumatisch oder elektrisch ansteuert; hierbei wird gleichzeitig beispielsweise ein Integrator-Schreiber in Gang gesetzt.At the same time, the pump (37) pumps the eluent into the guard column (4) pumped where there is this substance to be determined, which was previously on the carrier material of this Pre-column was specifically adsorbed, detached and from there into the chromatography column (6) transported. This means that the two guard pillars can be loaded and unloaded alternately (4) and (5) takes place at the right time, is carried out in parallel with the application that has taken place of the sample via the sample dispenser (not shown separately in the drawing) a known, electrical time element is set in motion, which the duration of the Wash phase (e.g. 5 minutes) checked on the guard column and, after its completion the switch cocks (2) and (3) z. B. controls pneumatically or electrically; here For example, an integrator-recorder is started at the same time.

Der Schaltvors er -z. o: pneuPati.schen Hähne (2 und 3 in der Zeichnung) bedingt nun zwei Folgereaktionen: Einmal wird die auf der Vorsäule (5) angereicherte Substanz in den Eluentenstrom der Pumpe (37) geschaltet. Pumpe (37) fördert mit einem für die eigentliche Chromatographie zusammengestellten Eluens (z. B. Methanol/Wasser bzw. Puffer), die zuvor auf der Vorsäule (5) angereicherte und von Begleitstoffen geklärte Substanz im "Backflush" auf die chroma.tographische Säule (6) (z. B.The switch pres. o: pneumatic cocks (2 and 3 in the drawing) now requires two subsequent reactions: One is that which is enriched on the guard column (5) Substance switched into the eluent flow of the pump (37). Pump (37) also delivers an eluent composed for the actual chromatography (e.g. methanol / water or buffer), which was previously enriched on the guard column (5) and of accompanying substances Clarified substance in the "backflush" on the chroma.tographic column (6) (e.g.

Länge = 120 mm x 4,6 mm innerer Durchmesser), die mit Reversed Phase Material gepackt ist. Gleichzeitg wird bei dem eben eingeleiteten Schaltvorgang die zweite Vorsäule (4) in den von Pumpe (19) -geförderten Wasserstrom geschaltet. Hierdurch wird die Vorsäule (4) vom Eluens der Pumpe (37) befreit und somit wieder für den neuen Anreicherungsschritt regeneriert und äquilibriert. Durch diesen Schalttrick wird sichergestellt, daß kein organisches Lösungsmittel mehr auf der Vorsäule (4) vorhanden ist, das einmal zur Denaturierung von Eiweiß führen könnte, und zum anderen einer Anreicherung auf dieser Vorsäule entgegenwirken könnte.Length = 120 mm x 4.6 mm inner diameter), the one with reversed phase Material is packed. At the same time, the switching process that has just been initiated the second precolumn (4) switched into the water flow conveyed by the pump (19). As a result, the precolumn (4) is freed from the eluent from the pump (37) and thus again regenerated and equilibrated for the new enrichment step. With this shift trick ensures that no more organic solvent is left on the guard column (4) is present, which on the one hand could lead to the denaturation of protein, and on the other hand could counteract an accumulation on this guard column.

Der gesamte Zeittakt besteht somit aus einer Anreicherungs- und Waschphase auf der Vorsäule (4) bzw. (5) und einer chromatographischen Trennphase auf der Hauptsäule (6). Der Autosampler ist auf diese Gesamtzeit programmiert und stoppt über ein eingebautes "0quilibrierungsdelay" den Integrator/Schreiber. Die "Äquilibrierungsdauer" ist zeitlich so bemessen, daß während dieser Zeit der Schreiber/Integrator seinen Ausdruck durchführen, und auf "Ready" zurückgehen kann. Nach erneuter Applikation des Probengebers wird wieder, wie bereits zuvor beschrieben, die elektronische Schaltuhr in Gang gesetzt, die dann wieder nach Ablauf der Waschphase (Vorsäule 5) die pneumatischen Ventile und den Integrator/Schreiber startet, etc.The entire time cycle thus consists of an enrichment and washing phase on the guard column (4) or (5) and a chromatographic separation phase on the main column (6). The autosampler is programmed for this total time and stops via a built-in "Equilibration Delay" the integrator / recorder. The "Equilibration Time" is timed so that during this time the writer / integrator can print out and go back to "Ready". After reapplication of the autosampler the electronic time switch is activated again, as already described above set, which then again after the end of the washing phase (pre-column 5) the pneumatic Valves and the integrator / recorder starts, etc.

Die Vorsäulen weisen beispielsweise eine Länge von 20 mm und einen inneren Durchmesser von 4,6 mm auf. Die Flußrate in den Vorsäulen beträgt vorzugsweise ca. 1 ml/min. Die Vorsäulen sind mit einem für die Anreicherung geeigneten Füllmaterial (z. B.The guard columns have, for example, a length of 20 mm and a inner diameter of 4.6 mm. The flow rate in the guard columns is preferably approx. 1 ml / min. The guard columns are filled with a suitable filling material for enrichment (e.g.

Reversed Phase- oder Ionenaustauschermaterial, Teilchengröße 20-50 um) gepackt.Reversed phase or ion exchange material, particle size 20-50 um) packed.

Das erfindungsgemäße V-rfa}.ren hic-tet gegenüber den herkömmlichen anal.ytischen Methoden zul- Probenvorbereitung für die fiochleistungsflüßigkeitschromatographie folgende Vorteile: es entfallen zeitaufwendige, teure und kapazitätsbelastende Probenaufarbeitungsstraßen oder Aufarbeitungstechniken, es genügt nur ein Pipettierschritt, es entfällt die flüssig-flüssig Extraktion, desweiteren das Finengen von Lösungsmitteln, die Frstellung eines internen Standards, desweiteren wird die Probenverwechslungsgefahr verringert und die zu untersuchende Probenmengen, z. B. Plasmamengen, sind mengenmäßig sehr variabel. Hinzu kommt, daß die erfindungsgemäße Vorrichtung voll automatisierbar ist und sogar einen Nachtbetrieb erlaubt.The inventive V-rfa} .ren differs from the conventional ones analytical methods for sample preparation for high-performance liquid chromatography the following advantages: there are no time-consuming, expensive and capacity-consuming sample preparation lines or work-up techniques, only one pipetting step is sufficient, there is no need liquid-liquid extraction, furthermore the fine-tuning of solvents, the creation an internal standard, furthermore the risk of sample mix-ups is reduced and the amount of sample to be examined, e.g. B. Plasma amounts are very quantitative variable. In addition, the device according to the invention can be fully automated is and even allows night operation.

Claims (6)

- ^~ ~*Pa.sntarsptüche 1. Vorrichtung zur Probendirektinjektion mit automatischer Anreicherungs- und Waschphase für die quantitative Hochleistungsflüssigkeits-chromatographie, dadurch gekennzeichnet, daß diese aus einem mit einem Probennahme- oder Applikationssystem zusammenschaltbaren Verteilungssystem (1), das in druckfester Ver.bindung mit einer die Spülflüssigkeit zuführenden Pumpe (19) verbunden ist, aus einem mit dem Verteilungssystem (1) druckfest verbundenen Mehrwegventil (2), aus daran angeschlossenen Vorsäulen (4) .bzw. (5), die an ihrem anderen Ende mit einem Mehrwegventil (3) mit daran angeschlossener Pumpe (37) druckfest ,verbunden sind, und aus einer an das Mehrwegventil (2) angeschlossenen Chromatographiesäule (6) besteht. - ^ ~ ~ * Pa.sntarsptasche 1. Device for direct sample injection with automatic enrichment and washing phase for quantitative high-performance liquid chromatography, characterized in that it consists of one with a sampling or application system Interconnectable distribution system (1), which is in pressure-tight connection with a the flushing liquid supplying pump (19) is connected to the distribution system (1) pressure-tight connected multi-way valve (2), from guard columns connected to it (4) .or. (5), the other end with a multi-way valve (3) with attached Pump (37) pressure-tight, connected, and from one connected to the multi-way valve (2) Chromatography column (6) consists. 2. Vorrichtung gemäß Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß das Verteilungssystem (1) eine Injektionsstelle (12) aufweist, desweiteren eine mit dieser Stelle (12) verbindbare Außlaßstelle (13), die ihrerseits mit einer Dosierschleife (14) Sest: verstanden ist, die an ihrem anderen Ende an einen Einlaß (15) anschließt, der wechselseitig mit einem offenen Auslaß (16) bzw. mit einem, mit der Pumpe (19) in Verbindung stehenden Einlaß (17) verbunden sein kann und deren Einlaß (17) wiederum mit einem Auslaß (18) zum Weitertransport der Flüssigkeit in Verbindung gebracht werden kann.2. Apparatus according to claim 1, characterized in that the distribution system (1) has an injection site (12), furthermore one with this site (12) connectable outlet point (13), which in turn Sest with a metering loop (14): is understood, which connects at its other end to an inlet (15) which is reciprocal with an open outlet (16) or with one connected to the pump (19) Inlet (17) can be connected and its inlet (17) in turn with an outlet (18) can be associated with the further transport of the liquid. 3. Vorrichtunt gemäß Anspruch 1 und 2, dadurch gekennzeichnet, daß das Mehrwegventil (2) mit dem Verteilungssystem (1) über den Einlaß (21) druckfest in Verbindung steht, andererseits aber druckfest mit zwei oder mehreren Vorsaulen, z. B. (4) und (5) über entsprechende Auslässe bzw.3. Vorrichtunt according to claim 1 and 2, characterized in that the multi-way valve (2) with the distribution system (1) via the inlet (21) pressure-tight connected, but on the other hand pressure-resistant with two or more guard columns, z. B. (4) and (5) via corresponding outlets or Einläße, z. B. (22) und (26) gekoppelt ist, einen mit den Aus- und Einläßen (22) und (26) verbindbaren Auslaß (23) aufweist, der seinerseits mit einer Chromatographiesäule (6) verbunden ist. Inlets, e.g. B. (22) and (26) is coupled, one with the output and Inlets (22) and (26) connectable outlet (23), which in turn with a Chromatography column (6) is connected. 4. Vorrichtung-en.äß Anspruch 1, 2 und 3, dadurch gekennzeichnet, daß das Mehrwegventil (3) über Ein- bzw. AusgÄngo (31) bzw. (35) mit den Vorsäulen (5) hzw. (4) druckdicht verbunden ist, der Ausgang (32) nach außen führt und der Eingang (36) mit einer Pumpe (37) in Verbindung steht, wobei Aus- bzw. Eingänge (33) und (34) mit den Aus- bzw.4. Device-en.äß claim 1, 2 and 3, characterized in that that the multi-way valve (3) via input or output (31) or (35) with the guard columns (5) hzw. (4) is connected in a pressure-tight manner, the outlet (32) leads to the outside and the Input (36) is connected to a pump (37), with outputs and inputs (33) and (34) with the starting resp. Eingängen (32) und (35) schaltbar sind, und die Vorsäule (4) mit dem Einlaß (26) des Mehrwegventils (2) im Eingriff steht. Inputs (32) and (35) are switchable, and the guard column (4) with the inlet (26) of the multiway valve (2) is engaged. 5. Vorrichtung gemäß den Ansprüchen 1 bis 4, dadurch gekenn- -zeichnet, daß die Chromatographiekolonne mit einem Detektor (7) und der Auslaß (32) des Mehrwegventils (3) mit einem Detektor (8) in Verbindung stehen.5. Device according to claims 1 to 4, characterized in that that the chromatography column with a detector (7) and the outlet (32) of the multiway valve (3) are in communication with a detector (8). 6. Vorrichtung gemäß den Ansprüchen 1 bis 5, dadurch gekennzeichnet, daß ein elektrisches Zeitelement die Schalthähnen bzw. Mehrwegventile (1), (2) und (3) und den Integrator elektrisch oder pneumatisch ansteuert, und ein Autosampler, auf den gesamten Zeittakt programmiert, einen Äquilibrierungsverzögerer elektrisch beeinflußt und damit auch den Integrator mit Schreiber.6. Device according to claims 1 to 5, characterized in that that an electrical time element, the switching cocks or multiway valves (1), (2) and (3) and controls the integrator electrically or pneumatically, and an autosampler, Programmed for the entire timing, an equilibration delay electrical influences and thus also the integrator with the recorder.
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