DE2927309A1

DE2927309A1 - METHOD AND DEVICE FOR DETERMINING THE SENSITIVITY OF BACTERIA AND MUSHROOMS FOR ANTIBIOTIC PRODUCTS

Info

Publication number: DE2927309A1
Application number: DE19792927309
Authority: DE
Inventors: Yves Achille Chabbert; Lionel Drugeault
Original assignee: Institut Pasteur de Lille
Current assignee: Institut Pasteur de Lille
Priority date: 1978-07-07
Filing date: 1979-07-06
Publication date: 1980-01-31
Also published as: JPS5529993A; IT7924173A0; ES482287A1; FR2430610B1; CH633110A5; IT1193191B; FR2430610A1

Description

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Verfahren und Vorrichtung zur Bestimmung der Empfindlichkeit von Bakterien und Pilzen für antibiotische ProdukteMethod and device for determining the susceptibility of bacteria and fungi to antibiotic products

Die Erfindung betrifft ein Verfahren und eine Vorrich-^ tung zur Bestimmung der Empfindlichkeit von Bakterien und Pilzen für antibiotische Produkte.The invention relates to a method and a device for determining the sensitivity of bacteria and mushrooms for antibiotic products.

Es ist seit langem bekannt, die Empfindlichkeit von Bakterien oder Pilzen gegenüber Antibiotika nach der ! Methode der Kultur auf Nährböden in Petrischalen zu bestimmen. Bei dieser Methode wird ein "Antibiotikum-Blättchen", das eine bestimmte Menge des zu testenden Antibiotikums enthält, auf eine Schicht des Nährbodens gelegt, der vorher mit den Bakterien oder Pilzen geimpft worden ist. Das Antibiotikum diffundiert in den Nährboden, wo sich ein Konzentrationsgradient ausbildet, und nach einer gewissen Zeit unter geeigneten Bedingungen ist das Antibiotiküm-Blättchen von einem kreisrunden Hemmhof umgeben, der um so größer ist, je empfindlicher die Bakterien oder Pilze gegenüber dem getesteten Antibiotikum sind. In dieser Zone erscheint der Nährboden intakt, während außerhalb dieser Zone seine op- '^] tischen Eigenschaften verändert sind und der Nährboden ein mattiertes Aussehen hat. Es ist bekannt, den Durchmesser des Hemmhofes mit sehr einfachen, in Millimeter eingeteilten Maßen gegebenenfalls mit Hilfe eines Profilvergrößerungsapparats zu messen. Diese Methode ist jedoch manuell und zeitraubend. ' ~ It has long been known the sensitivity of bacteria or fungi to antibiotics after! Method of determining culture on nutrient media in Petri dishes. In this method, an "antibiotic sheet", which contains a certain amount of the antibiotic to be tested, is placed on a layer of the culture medium that has previously been inoculated with the bacteria or fungi. The antibiotic diffuses into the nutrient medium, where a concentration gradient develops, and after a certain time under suitable conditions, the antibiotic leaflet is surrounded by a circular inhibition zone, which is larger, the more sensitive the bacteria or fungi are to the antibiotic being tested. In this zone, the soil appears intact while outside this zone its op- ^']-Nazi characteristics are changed and the soil has a frosted appearance. It is known to measure the diameter of the inhibition zone with very simple dimensions, divided into millimeters, if necessary with the aid of a profile enlarger. However, this method is manual and time consuming. '~

Es sind automatische Methoden zur Bestimmung der Emp- ' findlichkeit von Bakterien und Pilzen für Antibiotika ■ - - _ entwickelt worden, jedoch wird bei diesen Methoden eine J andere Technik angewendet, bei der man in einem flüssigen Medium arbeitet und die Lichtdurchlässigkeit von Proben mißt, in die außer den Bakterien oder Pilzen eine Lösung des Antibiotikums eingeführt worden ist. Um das Äquivalent .-ines Konzentrationsgradienten zuThere are automatic methods for determining the susceptibility of bacteria and fungi to antibiotics ■ - - _ has been developed, but with these methods a different technique is used, in which one in a liquid Medium works and measures the transmittance of light from samples in which, besides the bacteria or fungi a solution of the antibiotic has been introduced. To the equivalent.-Ines concentration gradient too

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erhalten, ist eine Reihe von Proben erforderlich, die das Antibiotikum in verschiedenen Konzentrationen enthalten. Diese Methoden sind somit kostspielig.Obtain a number of samples containing the antibiotic in various concentrations contain. These methods are therefore costly.

Gegenstand der Erfindung sind ein Verfahren und eine automatische Vorrichtung, die es ermöglichen, sehr schnell und mit verringerten Kosten eine zahlenmäßige Angabe der Empfindlichkeit zu erhalten.The invention relates to a method and an automatic device that allow very get a numerical indication of sensitivity quickly and at a reduced cost.

Beim Verfahren gemäß der Erfindung zur Bestimmung der Empfindlichkeit von Bakterien und Hefen für Antibiotika mißt man den Durchmesser der Hemmhöfe, die bei der Methode der Kultivierung auf Nährböden in Petrischalen oder beliebigen analogen Methoden gebildet werden, bei denen die Empfindlichkeitsunterschiede in Unterschieden des Durchmessers einer kreisrunden Zone mit optischen Eigenschaften, die von denen der Umgebung verschieden sind, zum Ausdruck kommt. Beim Verfahren gemäß der Erfindung bewegt man die Hemmhöfe oder analogen kreisrunden Zonen zwischen einer Quelle einer Strahlung, für die der Durchlässigkeitsfaktor in der Hemmzone und außerhalb dieser Zone verschieden ist, und einem für die Intensität der durchgelassenen Strahlung empfindlichen Empfänger, wobei die Bewegung längs eines geradlinigen Weges so erfolgt, daß der Bereich, durch den die Strahlung fällt, durch den Mittelpunkt der Hemmzone geht. Die Signale, die den Intensitäten der vom Empfänger aufgenommenen Strahlung entsprechen, werden durch eine geeignete Elektronik verarbeitet, die daraus die Durchmesserwerte ermittelt.In the method according to the invention for determining the susceptibility of bacteria and yeasts to antibiotics one measures the diameter of the zones of inhibition, which in the method of cultivation on nutrient media in Petri dishes or any analogous method in which the differences in sensitivity are in differences the diameter of a circular zone with optical properties different from those of the surroundings are expressed. In the method according to the invention, the zones of inhibition or analogous circles are moved Zones between a source of radiation for which the transmittance factor is in the zone of inhibition and outside this zone is different, and one sensitive to the intensity of the transmitted radiation Receiver, the movement being along a rectilinear path so that the area through which the radiation falls, passes through the center of the inhibition zone. The signals corresponding to the intensities of the Receiver received radiation, are processed by suitable electronics, which from it the diameter values are determined.

Die Apparatur entfaltet ihre volle Wirksamkeit nur, !The apparatus only unfolds its full effectiveness!

wenn die Antibiotikum-Scheiben oder -Blättchen oder andere Mittel, die den Mittelpunkt des runden Hemmhofes festlegen, durch eine automatische Vorrichtung aufgelegt werden, die mit Genauigkeit ihre Lage bestimmt, da hierbei die Bewi gurig leicht automatisch erfolgen kann.if the antibiotic disks or leaves or other means that are the center of the round inhibition zone set up by an automatic device that determines their position with accuracy, because the Bewi gurig are easy to do automatically can.

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Es gibt beispielsweise einfache Apparaturen, die das Auflegen von 16 Antibiotikum-Blättchen auf eine quadratische Petrischale gemäß einem Quadratgitternetz ' gewährleisten. In diesem Fall führt man die Petrischale ; vorteilhaft in der Richtung einer Diagonale des Quadrats vor einer Reihe von 7 Empfängern mit zugehörigen Strahlungsquellen vorbei. Die Führung in diagonaler , Richtung gewährleistet eine bessere Bestimmung des ; Wertes der außerhalb der Hemmzonen (Bezugspegel) auf-- ' genommenen Strahlung.There are, for example, simple apparatus, the 'ensuring the laying of 16 antibiotic leaflets on a square petri dish according to a square grid. In this case the Petri dish is used; advantageously in the direction of a diagonal of the square in front of a row of 7 receivers with associated radiation sources. The guidance in diagonal, direction ensures a better determination of the; The value of the radiation absorbed outside the inhibition zones (reference level).

Bei einer vorteilhaften Arbeitsweise läßt man zur Er— 1 zielung einer noch genaueren Bestimmung dieses Wertes eine "Leerstelle" auf dem Nährboden, d.h. auf eine der Stellen des Gitternetzes wird kein Antibiotikum aufgebracht. In an advantageous mode of operation, one allows for the 1 aiming for an even more precise determination of this value, an "empty space" on the nutrient medium, i.e. on one of the No antibiotic is applied to the grid.

Es gibt ferner automatische Apparaturen, beispielsweise ; die in der FR-PS 2 027 365 beschriebene Apparatur, bei _: denen eine Hemmzone mit Hilfe einer Reihe von mehreren lichtelektrischen Detektoren analysiert wird, indem die Petrischale mit konstanter Geschwindigkeit in einer ■ Richtung senkrecht zur Achse der Reihe von Detektoren | bewegt wird.-Die Abmessungen einer Hemmzone werden bei diesem Apparatetyp durch elektrische Messung der Zeit bestimmt, während: der wenigstens einer der Detektoren unter dem Einfluß des durch die Hemmzone fallenden- . ',-Lichts anspricht. Man sieht, daß in diesem Fall der Durchmesser der Zone in Abhängigkeit von der als kon— 'There are also automatic apparatuses, for example; The apparatus described in FR-PS 2,027,365, _wherein: where an inhibition zone with the aid of a series of a plurality of photoelectric detectors is analyzed by the petri dish with constant speed in a direction perpendicular to the axis ■ the number of detectors | is moved.-The dimensions of an inhibition zone are determined in this type of apparatus by electrical measurement of the time, during: the at least one of the detectors under the influence of the falling through the inhibition zone. '- Lichts appeals. It can be seen that in this case the diameter of the zone depends on the

stant angenommenen Bewegungsgeschwindigkeit der Petrischale gemessen wird. Bei dieser Meßmethode wird ferner berücksichtigt, daß die Hemmzone, die gegenüber den benachbarten Zonen, d.h. dem Antibiotikum-Blättchen und der entsprechenden Wachstumszone der Bakterien, transparent ist, zwischen diesen Zonen vollkommen abgegrenzt ist.constant assumed speed of movement of the Petri dish is measured. In this measurement method, it is also taken into account that the zone of inhibition that is opposite to the adjacent zones, i.e. the antibiotic leaflet and the corresponding growth zone for the bacteria, is transparent, is completely delimited between these zones.

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Das Antibiotikum-Blättchen, die Hemmzone und die Wachstumszone können örtliche Unregelmäßigkeiten aufweisen, die Schwankungen der Lichtabsorption und somit ^: häufig nicht unbeachtliche Fehler in den mit Apparaturen dieses Typs vorgenommenen Messungen zur Folge haben. Außerdem können mechanische Fehler Schwankungen der Bewegungsgeschwindigkeit der untersuchten Petrischale , hervorrufen. Diese Schwankungen sind bei den durchgeführten Messungen nicht berücksichtigt, da die Bewegungsgeschwindigkeit als konstant angenommen wird.The antibiotic leaflet, the zone of inhibition and the growth zone can have local irregularities that result in fluctuations in light absorption and thus ^: frequently significant errors in measurements made with apparatus of this type. In addition, mechanical errors can cause fluctuations in the speed of movement of the Petri dish being examined. These fluctuations are not taken into account in the measurements carried out, since the speed of movement is assumed to be constant.

Gegenstand der Erfindung sind ein Verfahren und eine Vorrichtung zur automatischen Messung des Durchmessers eines Hemmhofes durch direkte Erfassung des Hemmhofes und der entsprechenden Antibiotikumscheibe.The invention relates to a method and a device for automatically measuring the diameter of a zone of inhibition by direct recording of the zone of inhibition and the corresponding antibiotic disc.

In dem Bemühen, eine Antibiotikumscheibe und die sie umgebende Hemmzone zu erfassen, wurde festgestellt, daß die besten Ergebnisse erhalten werden, wenn ein Empfängertyp, der nicht für sichtbares Licht, sondern für Infrarotstrahlung im Bereich von 950 nm empfindlich ist, verwendet wird.In an effort to capture an antibiotic disc and the zone of inhibition surrounding it, it was found that the best results are obtained when a receiver type that is not for visible light, but rather is sensitive to infrared radiation in the region of 950 nm.

^ie Vorrichtung gemäß der Erfindung umfaßt^ he device according to the invention comprises

a) ein Leseorgan mit einer Quelle für Infrarotstrahlung i einer Wellenlänge von 950 nm, einem auf die gleiche Wellenlänge ansprechenden Empfänger, einem Mecha- nismus zur linearen Bewegung der Petrischalen zwischen Empfänger und Strahlungsquelle mit einem mit der Elektronik gekuppelten Schrittschaltmotor und Steuerorganen.a) a reading member with a source of infrared radiation i a wavelength of 950 nm, a receiver that responds to the same wavelength, a mechanism for the linear movement of the Petri dishes between the receiver and the radiation source with a Stepper motor and control elements coupled to the electronics.

b) Mittel zur Festlegung des Bezugspegels entweder im voraus oder aus Messungen, die auf der Petrischale selbst, insbesondere in der Nähe der Auflagestelle einer fehlenden Scheibe vorgenommen werden, undb) Means of establishing the reference level either in advance or from measurements taken on the Petri dish themselves, especially in the vicinity of the support point of a missing disc, and

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c) einen Mikroprozessor, der den Schrittmotor steuert, die durch den Empfänger übertragenen Messungen ordnet und die Ergebnisse in Form einer Tabelle ausdruckt, die die Durehmesserwerte und/oder vereinfachte Angaben wie empfindlich-resistentzwischenliegend zeigt. "c) a microprocessor that controls the stepper motor, the measurements transmitted by the receiver and prints out the results in the form of a table that simplifies and / or simplifies the diameter values Information on how sensitive-resistant intermediate shows. "

Die vom Mikroprozessor vorgenommenen statischen Berechnungen umfassen insbesondere die Bestimmung des Wertes des Bezugspegels und seiner Standardabweichung und die gleichen Bestimmungen im Innern der Hemmhöfe. Es ist anschließend leicht, hieraus die Durchmesserwerte entweder in Zahlen oder in vereinfachter Form, wie vorstehend angedeutet, zu gewinnen.The static calculations made by the microprocessor include in particular the determination of the value of the reference level and its standard deviation and the same provisions in the interior of the inhibition courts. It is then easy to determine the diameter values either in numbers or in a simplified form, as indicated above to win.

Die Erfindung umfaßt ferner ein Verfahren und eine Vorrichtung zur genauen Messung des Durchmessers einer Hemmzone unter Berücksichtigung von Mangeln und Fehlern der Apparatur und von Unregelmäßigkeiten der ; Zonen.The invention also includes a method and apparatus for accurately measuring diameter an inhibition zone, taking into account deficiencies and Faults in the apparatus and irregularities in the; Zones.

Die Erfindung ist außerdem auf eine Vorrichtung gerichtet, die mit Bauteilen zur automatischen Messung versehen ist und eine schnelle Analyse einer Reihe von Petrischalen mit verringerten Kosten ermöglicht.The invention is also directed to a device which is provided with components for automatic measurement and a quick analysis of a series of Petri dishes at a reduced cost.

Die Vorrichtung gemäß der Erfindung zur Bestimmung : der Empfindlichkeit von Bakterien und Pilzen gegenüber' antibiotischen Produkten durch Messung des Durch- ■ messers von Hemmhöfen, die nach der Methode der KuI- ■ tivierung auf Nährböden in einer Petrischale erhaI- j ten worden sind, die mehrere Reihen von Antibiotikum-Blättchen enthält, um die Hemmhöfe gebildet werden, J mit einem Mechanismus zur linearen Bewegung einer Petrischale, einer Strahlungsquelle und einem Empfänger der durch einen Hemmhof durchgelassenen Strahlung umfaßt außerdem einen Mechanismus zur schrittweisen Bewegung der Petrischale in einer Richtung parallelThe device according to the invention for determining: the sensitivity of bacteria and fungi to antibiotic products by measuring the through ■ knife of inhibition zones, which after the method of KuI- ■ activation on culture media in a Petri dish containing several rows of antibiotic leaflets around the zones of inhibition, J with a mechanism for linear movement of a petri dish, a radiation source and a receiver The radiation transmitted through an inhibition zone also includes a mechanism for incremental Movement of the Petri dish in a parallel direction

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zu jeder Reihe von Blättchen, eine der Zahl der Blättchenreihen entsprechende Zahl von paarweise angeordneten Lichtquellen und Lichtempfängern, wobei die Empfänger jeweils so ausgebildet sind, daß sie die Strahlen, die jeweils durch ein Blättchen und den entsprechenden Hemmhof gefallen sind, und die Strahlen erfassen, die nacheinander durch verschiedene Blättchen und entsprechende Hemmhöfe einer bestimmten Reihe gefallen sind, Organe zur aufeinanderfolgenden Registrierung der Meßwerte, die durch jeden Empfänger bei jedem Eewegungsschritt der Petrischale übertragen werden, und Organe zur Berechnung der durchschnittlichen Minimum- und Maximumwerte der Meßwerte derart, daß jedes Blättchen und der entsprechende Hemmhof durch diese durchschnittlichen Minimum- und Maximumwerte bestimmt werden. for each row of leaflets, a number corresponding to the number of rows of leaflets in pairs arranged light sources and light receivers, wherein the receivers are each designed so that they receive the rays, each through a leaf and the corresponding inhibition zones have fallen, and the rays capture successively through different ones Leaflets and corresponding zones of inhibition of a certain series have fallen, organs to successive ones Registration of the measured values transmitted by each receiver with each step of the movement of the Petri dish and organs for calculating the average minimum and maximum values of the measured values in such a way, that each leaflet and the corresponding zone of inhibition are determined by these average minimum and maximum values.

Die Erfindung wird nachstehend unter Bezugnahme auf die Abbildungen ausführlich beschrieben.The invention is described in detail below with reference to the drawings.

Fig.l zeigt eine schematische Darstellung einer Vorrichtung gemäß der Erfindung.Fig.l shows a schematic representation of a device according to the invention.

Fig.2 ist eine graphische Darstellung der Änderung der Lichtabsorption auf den verschiedenen Zonen einer Reihe von Blättchen.Figure 2 is a graphical representation of the change in light absorption on the various zones of a number of leaflets.

Fig.3 zeigt schematisch ein Ausführungsbeispiel einer Vorrichtung gemäß der Erfindung. !3 shows schematically an embodiment of a Device according to the invention. !

Die in Fiq.l schematisch dargestellte Vorrichtung gemäß der Erfindung umfaßt ein Leseorgan 1 mit einer j Quelle für Infrarotstrahlen einer Wellenlänge von 950 nm, einen für die emittierten Strahlen empfindliehen Empfänger 2 und einen (nicht dargestellten) Mechanismus zur linearen Bewegung jeder zu analysierenden Petrischale, beispielsweise der Petrischale 3 in Fig.l, zwisch-n der Strahlungsquelle und demThe device according to the invention shown schematically in Fiq.l comprises a reading member 1 with a j Source of infrared rays with a wavelength of 950 nm, one sensitive to the emitted rays Receiver 2 and a mechanism (not shown) for linear movement of each to be analyzed Petri dish, for example the Petri dish 3 in Fig.l, between the radiation source and the

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Empfänger 2 mit Hilfe eines Schrittschaltmotors, der mit klassischen Steuerorganen verbunden ist, die mit einem Mikroprozessor 5 verbunden sind. Der Mikroprozessor 5 ist seinerseits mit dem Empfänger 2 verbunden, um fortlaufend die vom Empfänger übertragenen Meßwerte zu registrieren und die Werte der Durchmesser der verschiedenen analysierten Hemmzonen zu berechnen. Ein Drucker 6 ermöglicht das Ausdrucken der Ergebnisse beispielsweise auf Abrißkarten.Receiver 2 with the help of a stepper motor, which is connected to classic control organs with a microprocessor 5 are connected. The microprocessor 5 is in turn connected to the receiver 2, in order to continuously register the measured values transmitted by the receiver and the values of the diameter of the different analyzed zones of inhibition. A printer 6 enables printing of the results, for example, on tear-off maps.

Die Kurve der Änderung der Absorption des Lichts, das von einem Strahler, beispielsweise dem in Fig.l dargestellten Strahler, längs einer Reihe von Blättchen emittiert wird, ist in Fig.2 dargestellt. Es ist offensichtlich, daß diese Kurve die theoretischen Änderungen der Lichtabsorption darstellt und somit nicht die möglichen Unregelmäßigkeiten der betreffenden Zonen berücksichtigt, jedoch ermöglicht sie ein besseres Verständnis der Ausbildung und der Arbeitsweise der in Fig.3 dargestellten Vorrichtung. Geht man von einem Rand der Petrischale aus, so bezeichnen die Bezugsziffern Di die Abszissen der Ränder der Blättchen der Reihe und die Bezugsziffern Ci die Abszissen der Übergangspunkte zwischen den Wachstums— zonen und den Hemmzonen oder -höfen. Die Blättchen stellen die Zonen mit stärkerer Lichtabsorption dar, während die Hemmhöfe Zonen mit schwächerer Lichtab- . sorption und die Wachstumszonen zwischenliegende Absorptionszonen darstellen. Im Falle von Fig.2 haben die vier Blättchen der betreffenden Reihe jeweils Durchmesser von D2-D1, D4-D3, D6-D5, D8-D7, und die entsprechenden Höfe haben jeweils Durchmesser von C2 - Cl, C4 - C3, C6 - C5, C8 - C-7.The curve of the change in the absorption of light emitted by a radiator, for example that shown in Fig.l. Emitter, emitted along a series of leaflets, is shown in Fig.2. It is obvious that this curve is the theoretical Represents changes in light absorption and thus does not take into account the possible irregularities of the zones concerned, but it enables a better understanding of the design and operation of the device shown in Figure 3. Goes one from one edge of the Petri dish, so designate the reference numerals Di are the abscissas of the edges of the Leaflets of the series and the reference numerals Ci the abscissas of the transition points between the growth— zones and the zones or zones of inhibition. The leaflets represent the zones with stronger light absorption, while the zones of inhibition with weaker light decrease. sorption and the growth zones intermediate Represent absorption zones. In the case of Fig.2, the four leaflets of the row in question each have Diameters of D2-D1, D4-D3, D6-D5, D8-D7, and the corresponding yards each have a diameter of C2 - Cl, C4 - C3, C6 - C5, C8 - C-7.

Die Werte der Durchmesser eines Blättchens und desThe values of the diameter of a leaflet and the

entsprechenden Hemmhofes ermöglichen die Abgrenzung dieser Zone.corresponding inhibition zones enable the delimitation of this zone.

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Wie die vorstehenden Erläuterungen zeigen, haben die Abszissenpunkte Di und Ci zwar vollkommen definierte Lagen, jedoch unterliegen diese häufig starken Streuungen (in der Größenordnung von 2 mm), bedingt durch das mechanische Spiel während der Bewegung einer Petrischale sowie die Veränderlichkeit des Oberflächenzustandes des Nährbodens.As the above explanations show, the abscissa points Di and Ci have completely defined ones Layers, however, are often subject to strong scattering (of the order of 2 mm) to a limited extent through the mechanical play during the movement of a Petri dish and the variability the surface condition of the nutrient medium.

Um diese Fehlerquellen zu berücksichtigen, werden beim Verfahren und der Vorrichtung gemäß der Erfindung Mittel verwendet, die das Licht auffangen, das an sehr dicht beieinanderliegenden Punkten längs einer Reihe von Blättchen durchgelassen wird. Wenn beispielsweise die Petrischale eine Länge von 120 mm hat, wird bei einer bevorzugten Ausführungsform der Erfindung ein Bewegungsschritt der Petrischale von 0,2 mm gewählt. Eine Reihe von Blättchen umfaßt somit 600 Meßpunkte, und eine Petrischale mit vier Reihen von Blättchen weist 2400 Meßpunkte auf.In order to take these sources of error into account in the method and the device according to the invention used means that collect the light that is let through at very closely spaced points along a series of leaflets. if for example the Petri dish has a length of 120 mm, in a preferred embodiment the Invention, a step of movement of the Petri dish of 0.2 mm was chosen. A series of leaflets thus comprises 600 measuring points, and a Petri dish with four rows of leaflets has 2400 measuring points.

Eine Vorrichtung gemäß der Erfindung, z.B. die in Fig.3 dargestellte Vorrichtung, ermöglicht die Erfassung einer Gesamtheit von Absorptions- oder Intensitätswerten des an einem Punkt durchgelassenen Lichts (umgekehrt proportional) an Stelle der Erfassung eines Wertes, der von einem Ende der Zone bis zum anderen als konstant angenommen wird, wie es bei J den bekannten Apparaturen der Fall ist. Der konstante ' theoretische Wert ist durch einen Durchschnittswert ^; gegeben, der aus den Werten berechnet wird, die an _; einer Gesamtheit von aufeinanderfolgenden Punkten durch die in Fig.3 dargestellte Vorrichtung gemessen werden.A device according to the invention, for example the device shown in FIG other is assumed to be constant, as is the case with J in the known apparatus. The constant 'theoretical value is by an average value ^; which is calculated from the values given to _; a set of successive points can be measured by the device shown in FIG.

Beim Verfahren gemäß der Erfindung werden außerdem die Veränderlichkeiten des Oberflächenzustandes der Zonen berücksichtigt, indem ein Bewertungskoeffizient bestimmt ^wir _a ^d _f| Q^'ö^f n^bif£^»^{:hneten mitt}l^eren WerteIn the method according to the invention, the variability of the surface condition of the zones is also taken into account by determining an evaluation ^coefficient _a ^d _f | Q ^ ö ^ fn ^b if £ ^ ^{»: hneten mitt} l ^ng values

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abzuwägen. Die Übergangspunkte Ci werden somit aus dem Minimumwert und dem Maximumwert dieser Durchschnittswerte bestimmt. Die Wachstumszone ist die , Zone, bei der alle Punkte über dem Durchschnitt des Minimumwertes und dem gewogenen Maximurnwert des Bewertungskoeffizienten liegen. Die Hemmzone ist die Zone, bei der alle Punkte unter diesem gewogenen J-Durchschnitt des gleichen Koeffizienten liegen. jto weigh up. The transition points Ci are thus determined from the minimum value and the maximum value of these average values. The growth zone is the zone in which all points are above the average of the minimum value and the weighted maximum value of the evaluation coefficient. The zone of inhibition is the zone where all points are below this weighted J- average of the same coefficient. j

Die in Fig.l und in Fig,3 dargestellten Vorrichtungen¹ weisen einen (nicht dargestellten) Mechanismus auf, der aus einer Meßbank besteht,: auf der eine Petri- : schale in Längsrichtung bewegt werden kann. Ein Zahnriemensystem, das von einem Schrittschaltmotor 4 (Fig.l) bewegt wird, nimmt die Petrischale am Eintritt des Systems auf, bewegt sie schnell bis zum Leseorgan und trägt sie nach Vornahme der Messungen aus. ^{The devices 1} shown in Fig.l and in Fig. 3 have a mechanism (not shown) which consists of a measuring bench: on which a Petri dish can be moved in the longitudinal direction. A toothed belt system, which is moved by a stepping motor 4 (Fig.l), picks up the Petri dish at the entry of the system, moves it quickly to the reading element and carries it out after the measurements have been taken.

Dieses Prinzip der Bewegung in Längsrichtung ermöglicht es, die Petrischalen einzeln hintereinander aufzulegen, um eine Reihe von aufeinanderfolgenden Messungen vorzunehmen.This principle enables movement in the longitudinal direction it is to lay out the Petri dishes one after the other in order to create a series of successive ones Make measurements.

Die in Fig.3 dargestellten Strahler 11, 12, 13 und 14 sind an kleinen Platten befestigt, die in zwei Richtungen verschoben werden können, um die optische ' Achse von Strahler zu Empfänger für sämtliche Strahler 11, 12, 13 und 14 und sämtliche Empfänger 21, 22, 23 . und 24, die in einer Ebene senkrecht zur Bewegungsrichtung der Petrischalen angeordnet sind, wobei ihre jeweiligen optischen Achsen die vier Reihen von | Blättchen schneiden, richtig auszurichten. Bei dem in Fig.3 dargestellten Ausführungsbeispiel einer Vorrichtung wird die Meßbank von einem feststehenden Drucker überragt. Dieser Zahlendrucker dient dazu, auf die endgültige Abrißkarte die Ergebnisse zu drucken, die aus der Nummer cies Antibiotikum-Blättchens und demThe emitters 11, 12, 13 and 14 shown in Fig. 3 are attached to small plates that can be moved in two directions to optimize the optical ' Axis from emitter to receiver for all emitters 11, 12, 13 and 14 and all receivers 21, 22, 23. and 24, which are arranged in a plane perpendicular to the direction of movement of the Petri dishes, wherein their respective optical axes the four rows of | Cut leaflets, align properly. The in Fig. 3 illustrated embodiment of a device the measuring bench is surmounted by a fixed printer. This number printer is used to print on the final map to print the results obtained from the number cies antibiotic rolling paper and the

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ORiGlNA¹-ORiGlNA ¹ -

Wert des Durchmessers des Hemmhofes bestehen.Value of the diameter of the inhibition zone.

Die in Fig.3 dargestellte Vorrichtung enthält außerdem einen elektronischen Teil aus mehreren Untergruppen für die SteuerungThe device shown in Figure 3 also includes an electronic part from several subgroups for the control

a) des Schrittschaltmotors mit einem Kompensationssystem 4o, damit das Moment maximal ist, wodurch es möglich ist, einen sehr schwach dimensionierten Motor zu verwenden,a) the stepper motor with a compensation system 4o so that the torque is maximum, making it it is possible to use a very weakly dimensioned motor,

b) der Speisung 10 der Strahler in pulsierender Betriebsweise, wodurch der Lichtfluß maximal ist und die Messungen synchron vorgenommen werden können, um den Einfluß von Nebenlicht auszuschalten,b) the supply 10 of the radiators in a pulsating mode, whereby the light flux is maximum and the measurements can be carried out synchronously in order to switch off the influence of secondary light,

c) des Multiplex der von den Empfängern durch den Block 20 kommenden Signale, damit nur ein einziges Verstärkungssystem 30 vorhanden ist und Mehrfachregelungen der analog-numerischen Umsetzung auf 8 Bits für den Verkehr mit dem Mikroprozessor 5 in Fig.l zu vermeiden,c) the multiplexing of the signals coming from the receivers through block 20, so only one Amplification system 30 is present and multiple controls for analog-numerical conversion 8 bits for the traffic with the microprocessor 5 in Fig.l to avoid,

d) des Druckers 6 vom Mikroprozessor aus undd) the printer 6 from the microprocessor and

e) der Speisung mit dem für die verschiedenen elektronischen Schaltungen notwendigen Gleichstrom.e) the supply with the direct current necessary for the various electronic circuits.

Bei einer bevorzugten Ausführungsform der Erfindung wird ein Mikroprozessor 5 vom Typ "ZILOG 80" (Hersteller Zilog) verwendet. Unter Verwendung geeigneter klassischer Programmierungsmittel kann die Berechnung der Durchmesser der Zonen einer Petrischale auf eine j Bearbeitungszeit von 3 Sekunden verkürzt werden. Dies ! zeigt, daß unter diesen Bedingungen der Bearbeitung ^! der Messungen die Ausführungszeit nur an die Ge- I schwindigkeit des Schrittschaltmotors gebunden ist. _; Diese Geschwindigkeit kann im Falle der großtech- : nischen Verwendung gesteigert werden.In a preferred embodiment of the invention, a microprocessor 5 of the type “ZILOG 80” (manufacturer Zilog) is used. Using suitable classical programming means, the calculation of the diameter of the zones of a Petri dish can be reduced to a processing time of 3 seconds. This ! shows that under these conditions the processing ^! of the measurements, the execution time is only linked to the speed of the stepping motor. _; This speed can be increased in the case of large-scale use.

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Claims

Godfather tan sayings

1) Method of determining the susceptibility of bacteria and fungi to antibiotic products using the method of cultivation on nutrient media in Petri dishes by measuring the diameter of the zones of inhibition, which appear around an antibiotic leaflet, with the zones of inhibition along a straight path between a source of radiation for which the permeability factor in the inhibition zone and outside this zone is different, and a receiver sensitive to the intensity of the transmitted radiation moved and the radiation picked up by the receiver processed in suitable electronics, which determines the diameter values therefrom, characterized in that the intensity of the radiation, which is picked up by the receiver when the area through which the radiation falls passes through the center of the inhibition zone, determined and by the value of the radiation intensity derives the diameter of the hernia.

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2) Method according to claim 1, characterized in that the antibiotic leaflets by an automatic The device hangs up, which determines its position with accuracy, and the movement of the inhibition areas automatically.

3) Method according to claim 1 and 2, characterized by d-a, that one uses a device, the 16 leaflets according to a square grid in a square Petri dish, and that you put the leaflets on a path parallel to a diagonal this square leads.

4) Method according to claim 1 to 3, characterized in that infrared radiation is used as the radiation preferably has a wavelength of 950 nm is used.

5) Method according to claim 3 or 4, characterized in that there is a leaflet from the series one omits the same Petri dish and thereby forms a comparison surface for the reference level.

6) Method according to claim 1 to 5, characterized in that one of the movement of the inhibition areas the electronic controlled stepper motor is used.

7) Device for determining the sensitivity of Bacteria and fungi for antibiotic products by 'measuring the diameter of the zones of inhibition, which after the Method of cultivation on nutrient media formed in a Petri dish that has several rows Contains of antibiotic leaflets around the zones of inhibition are formed, with a linear mechanism Movement of a petri dish, a radiation source and a receiver of those let through an inhibition zone Radiation, characterized by a

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Mechanism for gradually moving the Petri dish in a direction parallel to each row of the
Papers, one of the number of rows of papers! corresponding number of arranged in pairs
Light sources (11-14) and light receivers (21-24) ^,! wherein the light receivers are each designed ■ and are operated that they the beams, which each-; j wells through a washer and the corresponding inhibitor! hof have fallen, and the rays that successive "j following by the different leaves and _corresponds; speaking zones of inhibition of a particular row like
are, record, organs for the successive registration of the measured values, which are transmitted by each receiver ■ with each stepwise movement of the Petri dish, and organs for calculating the minimum and maximum average values of the measured values in such a way that each leaflet and the corresponding zone of inhibition through them Minimum and maximum average ,. values are determined.

8) Device according to claim 7, characterized in that. ^ that the movement step of the Petri dish is chosen in such a way

is that each receiver (21-24) several measurements i

from one end of a leaflet to the other and from ^;

one end of the corresponding inhibition zone to the other;

undertakes. ;

9) Device according to claim 7 and 8, marked ^thereby: characterized in that the light emitted from each radiation source (11-14) I radiation is infrared radiation, the forward | preferably has a wavelength of 9 50 nm.

10) Device according to claim 7 to 9, characterized in that the means for successive
Registration of the transmitted by each recipient
Measured values are multiplex circuits.

-— "■ —-- - 9439885 / 0S82

-A--A-

2S27309

11) Device according to claim 7 to 10, characterized in that as an organ for calculating the minimum and there is a microprocessor (5) for maximum averages.

12) Device according to claim 7 to 11, characterized in that the accounting body also has means for weighing the calculated mean values of a weighting coefficient (coefficient de ponderation), the irregularities of the surface of the concerned Zones are considered, provided.

909885/0682909885/0682

ORIGINAL INSPECTED