DE2920033A1

DE2920033A1 - FORTIMICIN B DERIVATIVES AND THEIR USE IN FIGHTING BACTERIAL INFECTIONS

Info

Publication number: DE2920033A1
Application number: DE19792920033
Authority: DE
Inventors: Paulette Collum; Jerry Roy Martin; John Soloman Tadanier
Original assignee: Kyowa Hakko Kogyo Co Ltd
Current assignee: KH Neochem Co Ltd
Priority date: 1979-05-17
Filing date: 1979-05-17
Publication date: 1980-11-27

Description

Bekanntlich lassen sich die antibiotischen und pharmakologi-As is well known, the antibiotic and pharmacological

schen Eigenschaften zahlreicher natürlich hergestellter Aminoglykosid-Antibiotika durch strukturelle Modifikationen ändern. Beispielsweise werden bestimmte chemische Modifikationen in der Gentamicin- und Kanamycingruppe der Aminoglykosid-Antibiotika Verbindungen erhalten, deren Toxizität niedriger ist als die der nicht modifizierten Antibistika.properties of numerous naturally produced aminoglycoside antibiotics change through structural modifications. For example, certain chemical Modifications in the gentamicin and kanamycin groups of the aminoglycoside antibiotics Compounds obtained whose toxicity is lower than that of the unmodified Antibiotics.

Ferner wird in der yleichen Gruppe der Aminoglykosid-Antibiotika das antibakterielle Spektrum durch bestimmte Modifikationen vorteilhaft verändert. Entweder wird die antibiotische Aktivität allgemein erhöht oder es wird die antibiotische Aktivität gegenüber resistenten Stämmen erhöht.Furthermore, in the same group of aminoglycoside antibiotics, the antibacterial spectrum advantageously changed by certain modifications. Either the antibiotic activity generally increases or it becomes the antibiotic Activity against resistant strains increased.

Bei längerem Gebrauch der Aminoglykosid-Antibiotika entwickeln sich resistente Stämme. In zahlreichen Fällen wird die Resistenz durch R-Faktoren übertragen. Sie beruht auf der Fähigkeit der Bakterien zur enzymatischen Modifizierung der Amino- oder Hydroxylgruppen der Aminoglykosid-Antibiotika. Bekanntlich wird durch Blockierung der Hydroxylgruppe in der 2-Stellung der natürlich vorkommenden Fortimicin-Aminoglykosid-Antibiotika das Antibiotikum inaktiviert.With prolonged use of the aminoglycoside antibiotics develop resistant strains. In many cases, resistance is transmitted through R-factors. It is based on the ability of bacteria to enzymatically modify the amino or hydroxyl groups of the aminoglycoside antibiotics. As is well known, by blocking the hydroxyl group at the 2-position of the naturally occurring fortimicin aminoglycoside antibiotics inactivates the antibiotic.

Der Erfindung liegt die Aufgabe zugrunde, neue Fortimicin B-Derivate zu schaffen, die gegen verschiedene gram-negative und gram-positive Bakterien Wirkung zeigen und oral oder parenteral verabfolgt werden können. Diese Aufgabe wird durch die Erfindung gelöst. Die Erfindung betrifft somit den in den Patentansprüchen gekennzeichneten Gegenstand.The invention is based on the object of new Fortimicin B derivatives to create that effect against various gram-negative and gram-positive bacteria and can be administered orally or parenterally. This task is carried out by solved the invention. The invention thus relates to what is characterized in the claims Object.

Die Verbindungen der Erfindung können auch zur Konservierung verschiedener, in der Industrie verwendeter Lösungen sowie als antibakterielle Reinigungslösungen zur Reinigung von Laboratorien und Laborgeräten eingesetzt werden. Ferner sind die Verbindungen wertvolle Zwischenprodukte zur Herstellung anderer Fortimicin B-Derivate mit antibakterieller Aktivität.The compounds of the invention can also be used to preserve various, solutions used in industry as well as antibacterial cleaning solutions for cleaning Laboratories and laboratory equipment are used. The compounds are also valuable intermediates for the preparation of others Fortimicin B derivatives with antibacterial activity.

Die Ausgangsfortimicin-Derivate der Erfindung sind Amine. Sie bilden Salze mit Fluorkieselsäure. Diese Salze können zum Schutz gegen Mottenfraß eingesetzt werden; vgl.The starting fortimicin derivatives of the invention are amines. they form Salts with fluorosilicic acid. These salts can be used to protect against moth damage will; see.

US-PSen 1 915 334 und 2 075 359. Ferner bilden diese Verbindungen Salze mit Thiocyanwasserstoffsäure, die mit Formaldehyd unter Bildung harzartiger Produkte reagieren, die als Beizinhibitoren verwendet werden können; vgl.U.S. Patents 1,915,334 and 2,075,359. Furthermore, these form compounds Salts with thiocyanic acid, those with formaldehyde to form resinous ones React products that can be used as pickling inhibitors; see.

US-PSen 2 425 320 und 2 606 155.U.S. Patents 2,425,320 and 2,606,155.

Die Salze der Verbindungen der allgemeinen Formel I können sich von anorganischen und organischen Säuren ableiten.The salts of the compounds of general formula I can be derived from derive inorganic and organic acids.

Spezielle Beispiele für die zur Salzbildung verwendbaren Säuren sind Salzsäure, Bromwasserstoffsäure, Schwefelsäure, Essigsäure, Oxalsäure, Valeriansäure, Ölsäure, Palmitinsäure, Stearinsäure, Laurinsäure, Borsäure, Benzoesäure, Milchsäure, Phosphorsäure, p-Toluolsulfonsäure, Citronensäure, Maleinsäure, Fumarsäure, Bernsteinsäure, Weinsäure und Naphthylsäure.Specific examples of the acids which can be used for salt formation are Hydrochloric acid, hydrobromic acid, sulfuric acid, acetic acid, oxalic acid, valeric acid, Oleic acid, palmitic acid, stearic acid, lauric acid, boric acid, benzoic acid, lactic acid, Phosphoric acid, p-toluenesulfonic acid, citric acid, maleic acid, fumaric acid, succinic acid, Tartaric acid and naphthylic acid.

Der Ausdruck "Acylrest" bedeutet einen Rest der allgemeinen Formel in der R2 einen niederen Alkylrest mit 1 bis 6, vorzugsweise 1 bis 4 Kohlenstoffatomen bedeutet, wie die Acetyl-, Propionyl- oder Butyrylgruppe.The term "acyl radical" means a radical of the general formula in which R2 is a lower alkyl radical having 1 to 6, preferably 1 to 4 carbon atoms, such as the acetyl, propionyl or butyryl group.

Der Ausdruck "niederer Alkylrest" bedeutet unverzweigte oder verzweigte Reste mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen, wie die Methyl-, Äthyl-, Propyl-, Isopropyl-, Butyl-, sek.-Butyl-, tert.-Butyl-, n-Pentyl-, 2-Methylbutyl-, n-Hexyl-, 2-Methylpentyl-, 3-Methylpentyl- und 2, 2-Dimethylbutylgruppe.The term "lower alkyl" means unbranched or branched Residues with 1 to 6 carbon atoms, such as the methyl, ethyl, propyl, isopropyl, Butyl, sec-butyl, tert-butyl, n-pentyl, 2-methylbutyl, n-hexyl, 2-methylpentyl, 3-methylpentyl and 2,2-dimethylbutyl groups.

Sämtliche Aminosäurereste liegen in der D-, L- oder DL-Form vor, sofern nichts anderes angegeben ist Spezielle Beispiele für die Aminosäurereste sind die Glycyl-, Alanyl-, Sarcosyl-, Tyrosyl-, Phenylalanyl-, Methionyl-, Seryl-, Lysyl-, Asparaginyl-, Isoleucyl-, Leucyl-, Histidyl-, Theonyl-, Aspartyl-, Asparaginyl-, Valyl-, Prolyl-, Glutaminyl-, Tryptophanyl- und Glutamylgruppe.All amino acid residues are in the D, L, or DL form, if so unless otherwise indicated. Specific examples of the amino acid residues are Glycyl, alanyl, sarcosyl, tyrosyl, phenylalanyl, methionyl, seryl, lysyl, Asparaginyl, isoleucyl, leucyl, histidyl, theonyl, aspartyl, asparaginyl, Valyl, prolyl, glutaminyl, tryptophanyl and glutamyl groups.

Die 2'-N-Acylfortimicin B-Derivate der allgemeinen Formel I können durch Umlagerung der entsprechenden 4-N-substituierten Fortimicin B-Verbindungen der allgemeinen Formel II in der R1 die in Anspruch 1 angegebene Bedeutung hat, einschließlich Fortimicin A der Formel III hergestellt werden.The 2'-N-acylfortimicin B derivatives of the general formula I can be prepared by rearrangement of the corresponding 4-N-substituted fortimicin B compounds of the general formula II in which R1 has the meaning given in claim 1, including fortimicin A of the formula III getting produced.

Fortimicin A und Fortimicin B werden nach den in den US-PSen 3 976 768 und 3 931 400 beschriebenen Methoden hergestellt. Die Herstellung typischer 4-N-Acylfortimicin B-Derivate ist in den Beispielen beschrieben.Fortimicin A and Fortimicin B are manufactured according to the procedures disclosed in U.S. Patents 3,976 768 and 3,931,400 methods described. Making typical 4-N-acylfortimicin B derivatives are described in the examples.

Die Zwischenprodukte der Erfindung haben die allgemeine Formel IV in der R die in Anspruch 1 angegebene Bedeutung hat oder den Rest R-Z darstellt, wobei Z eine Benzyloxycarbonylgruppe bedeutet, R1 die in Anspruch 1 angegebene Bedeutung hat, oder den Rest R-Z bedeutet, wobei Z eine Benzyloxycarbonylgruppe darstellt, R2 ein Wasserstoffatom oder eine Benzyloxycarbonylgruppe und R3 ein Wasserstoffatom oder eine Benzyloxycarbonylgruppe bedeutet, mit der Maßgabe, daß R1, R2 und R3 nicht gleichzeitig Wasserstoffatome darstellen.The intermediates of the invention have the general formula IV in which R has the meaning given in claim 1 or represents the radical RZ, where Z represents a benzyloxycarbonyl group, R1 has the meaning given in claim 1, or the radical RZ, where Z represents a benzyloxycarbonyl group, R2 represents a hydrogen atom or a benzyloxycarbonyl group and R3 denotes a hydrogen atom or a benzyloxycarbonyl group, with the proviso that R1, R2 and R3 do not simultaneously represent hydrogen atoms.

Die 2'-N-Acetyl-, 2'-N-Glycyl- und ähnliche 2'-N-Acyl- oder substituierte Acylfortimicin B-Verbindungen können durch Umlagerung der entsprechenden 4-N-substituierten Fortimicine hergestellt werden. Bei einer Ausführungsform werden stabile Salze der 4-N-substituierten Fortimine mit Säuren in die freien Basen überführt, beispielsweise mittels eines Anionenaustauscherharzes. Sodann werden die 2'-N-substituierten Fortimicin B-Verbindungen dadurch hergestellt, daß man die instabilen freien Basen der in 4-N-SteHung substituierten Fortimicine in-Wasser löst, wobei der C4-Methylamino-Substituent unter Bildung der entsprechenden 2'-N-substituierten Fortimicin-B-Verbindungen sich umlayert. Die Behandlung der 2'-N-substituierten Fortimicin B-Verbindungen mit geeigneten N-Acylierungsmitteln, wie N- (Benzyloxycarbonyl) -oxysuccinimid, in einem Lösungsmittelsystem, wie Dimethylformamid oder einem Gemisch von Methanol und Wasser, liefert die entsprechenden 1,2,6'-N-geschützten Zwischenprodukte mit einer freien C4-Methylaminogruppe, die sich mit aktivierten Carbonsäurederivaten acylieren läßt, beispielsweise mit Carbonsäureanhydriden, Carbonsäurechloriden, aktiven Carbonsäureestern oder Carbonsäureaziden.The 2'-N-acetyl, 2'-N-glycyl and like 2'-N-acyl or substituted Acylfortimicin B compounds can be obtained by rearrangement of the corresponding 4-N-substituted Fortimicine are manufactured. In one embodiment, stable salts are the 4-N-substituted fortimines converted into the free bases with acids, for example by means of an anion exchange resin. Then the 2'-N-substituted fortimicin B compounds produced by removing the unstable free bases in the 4-N position substituted fortimicine dissolves in water, with the C4-methylamino substituent under Formation of the corresponding 2'-N-substituted fortimicin-B compounds is rearranged. Treatment of the 2'-N-substituted fortimicin B compounds with appropriate N-acylating agents, such as N- (benzyloxycarbonyl) oxysuccinimide, in a solvent system, such as dimethylformamide or a mixture of methanol and water, provides the corresponding 1,2,6'-N-protected intermediates with a free C4-methylamino group, the can be acylated with activated carboxylic acid derivatives, for example with carboxylic acid anhydrides, Carboxylic acid chlorides, active carboxylic acid esters or carboxylic acid azides.

Die aktiven Ester können durch Umsetzung der entsprechenden Carbonsäure R1-COOH mit beispielsweise 1-Hydroxybenzotriazol, N-Hydroxysuccinimid oder N-Hydroxy-5-norbornen-2,3-dicarboximid nach dem von M. Fujino u. Mitarb., Chem. Pharm. Bull., Japan, Bd. 22 (1974),S. 1857 beschriebenen Methode hergestellt werden. R1 bedeutet einen Acylrest der in Anspruch 1 angegebenen Art.The active esters can be obtained by reacting the corresponding carboxylic acid R1-COOH with, for example, 1-hydroxybenzotriazole, N-hydroxysuccinimide or N-hydroxy-5-norbornene-2,3-dicarboximide according to that of M. Fujino et al., Chem. Pharm. Bull., Japan, Vol. 22 (1974), p. 1857 described method. R1 denotes an acyl radical of the claim 1 specified Art.

Nach der N-Acylierung der C4-N-Methylaminogruppe müssen die Benzyloxycarbonyl-Sahutzgruppen abgespalten werden. Dies erfolgt zweckmäßig durch Hydrogenolyse in Gegenwart von Palladium-auf-Kohlenstoff als Katalysator Die auf diese Weise hergestellten Fortimicin-Analoge werden zweckmäßig in Form der Hydrochloride oder anderer Salze mit Säuren isoliert, wenn die Hydrogenolyse in Gegenwart eines geringen Uberschusses von Salzsäure oder einer anderen geeigneten Säure durchgeführt wird.After the N-acylation of the C4-N-methylamino group, the benzyloxycarbonyl-Sahutz groups must be split off. This is expediently done by hydrogenolysis in the presence of Palladium-on-carbon as a catalyst The fortimicin analogs prepared in this way are expediently isolated in the form of hydrochlorides or other salts with acids, if the hydrogenolysis in the presence of a slight excess of hydrochloric acid or another suitable acid is carried out.

Die 2'-N-Alkylfortimicin B-Verbindungen werden zweckmäßig durch Behandlung der 2'-N-Acylfortimicin B-Verbindungen mit einem Reduktionsmittel, beispielsweise einem Borhydrid, wie Diboran, oder einem komplexen Metallhydrid, wie Lithiumaluminiumhydrid, hergestellt. Das erhaltene 2'-N-Alkylfortimicin B-Derivat kann sodann mit einem geeigneten N-Acylierungsmittel der vorstehend beschriebenen Art umgesetzt werden. Die Abspaltung der Schutzgruppen erfolgt durch Hydrogenolyse in Gegenwart eines Sprozentigen Palladium-auf-Kohlenstoff-Katalysators. Es werden die entsprechenden 2'-Alkyl-oder 2'-Acylderivate erhalten.The 2'-N-alkylfortimicin B compounds are rendered useful by treatment the 2'-N-acylfortimicin B compounds with a reducing agent, for example a borohydride, such as diborane, or a complex metal hydride, such as lithium aluminum hydride, manufactured. The obtained 2'-N-alkylfortimicin B derivative can then with a suitable N-acylating agents of the type described above implemented. The protective groups are split off by hydrogenolysis in Presence of a 1% palladium on carbon catalyst. It will be the corresponding 2'-alkyl or 2'-acyl derivatives.

Die 4,2' -Di-N-alkylfortimicin B-Verbindungen werden zweckmäßig durch Behandlung der entsprechenden N-geschützten 4,2'-Di-N-acylfortimicin-B-Verbindungen mit einem Reduktionsmittel, wie einem Borhydrid, hergestellt. Nach Abspaltung der Schutzgruppen durch Hydrogenolyse auf die vorstehend beschriebene Weise werden die entsprechenden 2'-N-Alkyl-4-N-alkylfortimicin B-Verbindungen erhalten.The 4,2 '-Di-N-alkylfortimicin B compounds are expediently through Treatment of the corresponding N-protected 4,2'-di-N-acylfortimicin-B compounds with a reducing agent such as a borohydride. After the Protecting groups by hydrogenolysis in the manner described above are the corresponding 2'-N-alkyl-4-N-alkylfortimicin B compounds.

Alternativ können die 4,2' -Di-N-alkylfortimicin-Verbindungen durch Reduktion geeigneter 4'-N-Acyl-2'-N-alkylfortimicin B-Verbindungen hergestellt werden. Beispielsweise kann ein 4-N-Acyl-2'-N-alkylfortimicin B oder ein N-geschütztes 4-N-Acyl-2'-N-alkylfortimicin B mit einem Reduktionsmittel, wie einem Borhydrid, behandelt werden. Sofern N-geschützte 4,2-Di-N-alkylfortimicin B-Verbindungen anfallen, werden die N-Schutzgruppen durch Hydrogenolyse abgespalten. Es werden die 4,21 -Di-N-alkylfortimicin B-Verbindungen erhalten.Alternatively, the 4,2'-di-N-alkylfortimicin compounds can through Reduction of suitable 4'-N-acyl-2'-N-alkylfortimicin B compounds. For example, a 4-N-acyl-2'-N-alkylfortimicin B or an N-protected 4-N-acyl-2'-N-alkylfortimicin B treated with a reducing agent such as a borohydride. Unless N-protected 4,2-Di-N-alkylfortimicin B compounds are incurred, the N-protecting groups are through Hydrogenolysis split off. It becomes the 4,21 -Di-N-alkylfortimicin B compounds obtain.

Alternativ können die 2'-N-Acylderivate der Erfindung durch Umsetzung von Fortimicin B mit tert.-Butyl-S-(4,6-dimethylpyrimidin-2-yl)-thiolcarbonat hergestellt werden. Als Zwischenprodukt wird das 2'-tert.-Butyloxycarbonyl (Boc)-fortimicin B erhalten.Alternatively, the 2'-N-acyl derivatives of the invention can be prepared by reaction made by Fortimicin B with tert-butyl S- (4,6-dimethylpyrimidin-2-yl) thiol carbonate will. 2'-tert-Butyloxycarbonyl (Boc) fortimicin is used as an intermediate product B received.

Das 2' -Boc-Zwischenprodukt wird sodann mit einem geeigneten Acylierungsmittel umgesetzt, vorzugsweise N- (Benzyloxycarbonyloxy) -succinimid. Es wird das 1,6'-Di-N-benzyloxycarbonyl-2'-Boc-Fortimicin B-Zwischenprodukt erhalten. Die Umsetzung dieses Zwischenproduktes mit einem aktiven Ester eines N-geschützten Glycins, beispielsweise dem Hydroxysuccinimid- ester von N-Benzyloxycarbonylglycin, in Gegenwart eines geeigneten Lösungsmittelsystems, wie einem Gemisch von Dimethylformamid, Methanol und Wasser, liefert das 2'-Boc-tri-N-benzyloxycarbonylfortimicin B-Zwischenprodukt.The 2 '-Boc intermediate is then treated with a suitable acylating agent implemented, preferably N- (benzyloxycarbonyloxy) succinimide. It becomes 1,6'-di-N-benzyloxycarbonyl-2'-Boc-Fortimicin B intermediate obtained. The implementation of this intermediate with an active Ester of an N-protected glycine, for example the hydroxysuccinimide ester of N-benzyloxycarbonylglycine, in the presence of a suitable solvent system, such as a mixture of dimethylformamide, methanol and water, provides the 2'-Boc-tri-N-benzyloxycarbonylfortimicin B intermediate.

Die 2-N-Alkylierung oder -Acylierung erfolgt durch Umsetzung des in der 2'-Stellung keine Schutzgruppe mehr tragenden Zwischenproduktes mit einem geeigneten Aldehyd (R1CHO) in Gegenwart von Natriumborhydrid oder durch Umsetzung mit einem Carbonsäureester der vorstehend beschriebenen Art. Die Abspaltung der Schutzgruppe erfolgt durch Hydrogenolyse in Gegenwart eines 5prozentigen Palladium-auf-Kohlenstoff-Katalysators. Es werden die entsprechenden 2'-Alkyl- oder 2'-Acylderivate erhalten.The 2-N-alkylation or acylation is carried out by reacting the in the 2'-position no longer carrying a protective group with a suitable intermediate Aldehyde (R1CHO) in the presence of sodium borohydride or by reaction with a Carboxylic acid esters of the type described above. Cleavage of the protective group takes place by hydrogenolysis in the presence of a 5 percent palladium-on-carbon catalyst. The corresponding 2'-alkyl or 2'-acyl derivatives are obtained.

Die Beispiele erläutern die Erfindung. Die Zahlen in Klammern beziehen sich auf die Verbindungszahl im Reaktionsschema von Tabelle I.The examples illustrate the invention. The numbers in brackets relate refer to the compound number in the reaction scheme of Table I.

Beispiel 1 Herstellung von 21-N-Glycyfortimicin B (2) Eine wäßrige Lösung von 10,0 g Fortimicin A-disulfat (1) wird auf eine mit einem Anionenaustauscherharz des quartären Ammoniumtyps (beispielsweise einem AG 2-X8-Harz, Korngröße aerclllte saure 150 bis 75 Mikron) in der OH-Form/geleitet. Auf diese Weise werden die Sulfationen gebunden. Das basische Eluat wird aufgefangen und mit Wasser zu einer 1prozentigen Lösung, bezogen auf eingesetztes Fortimicin A-disulfat, verdünnt. Nach 20tägigem Stehen bei 37 0C wird das Wasser unter vermindertem Druck abdestilliert. Es hinterbleibt ein Öl. 2,07 g des erhaltenen Öls werden an einer mit einem Kationenaustauscherharz des Carbonsäuretyps (z.B. Bio-Rex 70, Korngröße 150 bis aatuIlte auie 75 Mikron) in der Ammoniumform/geleitet. Die Säule hat die Abmessungen 2,2 x 52 cm. Es wird mit 0,1 n wäßriger Ammoniaklösung eluiert. Die 2'-N-Glycylfortimicin B enthaltenden Eluate werden unter vermindertem Druck stark eingeengt und ge- friergetrocknet. Es werden 1,349 g eines weißen Feststoffs mit folgenden Kenndaten erhalten: [al D25 + 41,6 (c = 1,09 in CH30H) IR-Absorptionsspektrum: 3370, 1660 una 1540 cm . Example 1 Preparation of 21-N-Glycyfortimicin B (2) An aqueous Solution of 10.0 g of Fortimicin A disulfate (1) is applied to an anion exchange resin of the quaternary ammonium type (for example an AG 2-X8 resin, grain size aerclllte acidic 150 to 75 microns) in the OH form /. This way the sulfate ions bound. The basic eluate is collected and mixed with water to a 1% strength Solution, based on the Fortimicin A disulfate used, diluted. After 20 days Standing at 37 ° C., the water is distilled off under reduced pressure. It remains behind an oil. 2.07 g of the oil obtained are applied to one with a cation exchange resin of the carboxylic acid type (e.g. Bio-Rex 70, grain size 150 to aatuIlte auie 75 microns) in the ammonium form / passed. The column has the dimensions 2.2 x 52 cm. It will eluted with 0.1 N aqueous ammonia solution. The 2'-N-glycylfortimicin B containing Eluates are strongly concentrated under reduced pressure and freeze-dried. 1.349 g of a white solid are obtained with the following characteristics: [al D25 + 41.6 (c = 1.09 in CH30H) IR absorption spectrum: 3370, 1660 and 1540 cm.

NMR-Spektrum in D20: 8 1,52 (C61-CH3, J=7,0 Hzb, 2,85 (C4-NCH3), 3,75 (CO-CH2-N-), 3,93 (OCH3), 5,60 (i, J= 4,0 Hz).Nuclear Magnetic Resonance Spectrum in D20: 8 1.52 (C61-CH3, J = 7.0 Hzb, 2.85 (C4-NCH3), 3.75 (CO-CH2-N-), 3.93 (OCH3), 5.60 (i, J = 4.0 Hz).

C17H35N506; C H N ber.: 50,36 8,70 17,27 gef.: 49,07 8,70 17,30 Beispiel 2 Herstellung von 2'-N-(N-Benzyloxycarbonylglycyl)-1,6'-di-N-benzyloxycarbonylfortimicin B (3) -Eine Lösung von 0,333 g 2'-N-Glycylfortimicin B in 4,5 ml Wasser und 9,0 ml Methanol wird unter Rühren auf 40C in einem Eisbad abgekühlt und mit 0,666 g N-(Benzyloxycarbonyloxy)-succinimid versetzt. Das Gemisch wird weitere 3 Stunden bei 4 0C und 20 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Sodann wird die erhaltene Lösung unter vermindertem Druck eingedampft. Das als Rückstand erhaltene Öl wird mit einem Gemisch von 150 ml Chloroform und 75 ml Wasser ausgeschüttelt.C17H35N506; C H N calc .: 50.36 8.70 17.27 found: 49.07 8.70 17.30 Example 2 Preparation of 2'-N- (N-benzyloxycarbonylglycyl) -1,6'-di-N-benzyloxycarbonylfortimicin B (3) -A solution of 0.333 g of 2'-N-glycylfortimicin B in 4.5 ml of water and 9.0 ml of methanol is cooled to 40 ° C. in an ice bath while stirring, and 0.666 g N- (Benzyloxycarbonyloxy) succinimide added. The mixture is another 3 hours stirred at 4 ° C. and at room temperature for 20 hours. Then the resulting solution evaporated under reduced pressure. The oil obtained as a residue is with a Mixture of 150 ml of chloroform and 75 ml of water extracted by shaking.

Die Chloroformphase wird abgetrennt und mit 75 ml Wasser gewaschen. Die wäßrigen Phasen werden nacheinander zweimal mit jeweils 75 ml Chloroform gewaschen. Die Chloroformlösungen werden vereinigt und über Magnesiumsulfat getrocknet. Danach wird der Chloroformextrakt unter vermindertem Druck eingedampft. Es hinterbleiben 0,596 g Produkt. Das Produkt wird an einer mit Kieselgel gefüllten Säule in den Abmessungen 1,8 x 48 cm chromatographiert und mit einem Gemisch von Chloroform, Methanol und konzentrierter wäßriger Ammoniaklösung (23,4 : 1,4 : 0,1 Volumteile) eluiert. Das Eluat wird eingedampft. Es werden 0,254 g der Titelverbindung mit folgenden Kenndaten erhalten: land + 15,8 (c = 1,04 in CH30H) IR-Absorptionsspektrum 3410, 3330, t705 und 1515 cm?.The chloroform phase is separated off and washed with 75 ml of water. The aqueous phases are washed twice in succession with 75 ml of chloroform each time. The chloroform solutions are combined and dried over magnesium sulfate. Thereafter the chloroform extract is evaporated under reduced pressure. It left behind 0.596 g of product. The product is poured onto a column filled with silica gel Dimensions 1.8 x 48 cm and chromatographed with a mixture of chloroform, Methanol and concentrated aqueous ammonia solution (23.4: 1.4: 0.1 parts by volume) eluted. The eluate is evaporated. There are 0.254 g of the title compound with the following Characteristic data obtained: land + 15.8 (c = 1.04 in CH30H) IR absorption spectrum 3410, 3330, t705 and 1515 cm ?.

Beispiel 3 Tetra-N-benzyloxycarbonyl-2 ' -N-qlycylfortimicin A (4) Eine Lösung von 0,234 g 2'-N-(N-Benzyloxycarbonylglycyl)-1,6'-di-N-benzyloxycarbonylfortimicin B und 0,939 g 1-Hydroxybenzotriazol-monohydrat in 2,0 ml Tetrahydrofuran wird unter Rühren mit 0,087 g N,N-Dicyclohexylcarbodiimid in 2,0 ml Tetrahydrofuran versetzt. Das Gemisch wird weitere 20 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Danach wird der auskristallisierte Dicyclohexylharnstoff abfiltriert und das Filtrat unter vermindertem Druck zur Trockene eingedampft. Es hinterbleiben 0,408 g eines zitronengelben Feststoffs Der erhaltene Feststoff wird an einer mit Kieselgel gefüllten Säule mit den Abmessungen 1,8 x 42 cm chromatographiert und mit einem Gemisch von Benzol, Methanol, 95prozentigem Äthanol und konzentrierter wäßriger Ammoniaklösung (23,5 : 1,4 : 2,0 : 0,2 Volumverhältnis) eluiert. Das Eluat wird eingedampft. Example 3 Tetra-N-benzyloxycarbonyl-2 '-N-qlycylfortimicin A (4) A solution of 0.234 g of 2'-N- (N-benzyloxycarbonylglycyl) -1,6'-di-N-benzyloxycarbonylfortimicin B and 0.939 g of 1-hydroxybenzotriazole monohydrate in 2.0 ml of tetrahydrofuran is under Stirring mixed with 0.087 g of N, N-dicyclohexylcarbodiimide in 2.0 ml of tetrahydrofuran. The mixture is stirred for a further 20 hours at room temperature. After that, the Dicyclohexylurea which crystallized out was filtered off and the filtrate under reduced pressure Pressure evaporated to dryness. 0.408 g of a lemon yellow solid remains The solid obtained is placed on a column filled with silica gel with the dimensions 1.8 x 42 cm and chromatographed with a mixture of benzene, methanol, 95 percent Ethanol and concentrated aqueous ammonia solution (23.5: 1.4: 2.0: 0.2 volume ratio) eluted. The eluate is evaporated.

Es werden 0,235 g der Titelverbindung mit folgenden Kenndaten erhalten: (aJ24 + 48,9° (c =1,0 in CH30H). -1 IR-Absorptionsspektrum, 3410, 3350, 1703, 1636 und 1497 cm NMR-Spektrum (CDCl3)6 1,05 (C6,-CH3, J=7,0 Hz), 2,93 (C4-NCH3), 3,29 (OCH3), 5,02 (Cbz-CH2), 7,27 (Cbz. aromatisch).0.235 g of the title compound is obtained with the following characteristics: (aJ24 + 48.9 ° (c = 1.0 in CH30H). -1 IR absorption spectrum, 3410, 3350, 1703, 1636 and 1497 cm NMR Spectrum (CDCl3) 6 1.05 (C6, -CH3, J = 7.0 Hz), 2.93 (C4-NCH3), 3.29 (OCH3), 5.02 (Cbz-CH2), 7.27 (Cbz. Aromatic).

C51H62NO15; C H N ber.: 61,31 6,26 8,41 gef.: 61,28 6,42 8,30 Beispiel 4 Herstellung von 2'-N-Glycylfortimicin A-tetrahydrochlorid (5) Eine Lösung von 0,235 g Tetra-N-benzyloxycarbonyl-2'-N-glycylfortimicin A in 40 ml 0,2 n Salzsäure in Methanol wird 4 Stunden bei einem Wasserstoffdruck von 3 at in Gegenwart von 0,235 g Sprozentigem Palladium-auf-Kohlenstoff als Katalysator hydriert. Danach wird der Katalysator abfiltriert.C51H62NO15; C H N calc .: 61.31 6.26 8.41 found: 61.28 6.42 8.30 Example 4 Preparation of 2'-N-glycylfortimicin A-tetrahydrochloride (5) A solution of 0.235 g of tetra-N-benzyloxycarbonyl-2'-N-glycylfortimicin A in 40 ml of 0.2N hydrochloric acid in methanol is 4 hours at a hydrogen pressure of 3 at in the presence of 0.235 g of 100% palladium-on-carbon hydrogenated as a catalyst. Thereafter the catalyst is filtered off.

Das Filtrat wird zur Trockene eingedampft und überschüssige Salzsäure durch wiederholte gemeinsame Destillation mit Methanol unter vermindertem Druck abgetrennt. Es hinterbleiben 0,153 g der Titelverbindung mit folgenden Kenndaten: 25 + 84,6 (c = 1,0 in Ea]D + -1 IR-Absorptionsspektrum: 1640, 1620, 1563 und 1480 cm NMR-Spektrum (D20): 6 1,80 (C6,-CH3, J=7,0 Hz), 3,58 (C4-NCH3), 3,94 (OCH3), 5,54 (H1,, J=3,O).The filtrate is evaporated to dryness and excess hydrochloric acid by repeated joint distillation with methanol under reduced pressure severed. It left behind 0.153 g of the title compound with the following Characteristic data: 25 + 84.6 (c = 1.0 in Ea] D + -1 IR absorption spectrum: 1640, 1620, 1563 and 1480 cm NMR spectrum (D20): 6 1.80 (C6, -CH3, J = 7.0 Hz), 3.58 (C4-NCH3), 3.94 (OCH3), 5.54 (H1 ,, J = 3, O).

Massenspektrum: M+ ber.: 444,2696; gef.: 444,2699: Bei spiel 5 Herstellung von 1 ,2',6'-Tri-N-benzyloxycarbonylfortimicin B (7) Eine Lösung von 2,0 g Fortimicin B (6) in 30 ml Wasser und 60 ml Methanol wird unter Rühren in einem Eisbad abgekühlt und mit 4,44 g N-(Benzyloxycarbonyloxy)-succinimid versetzt.Mass spectrum: M + calc .: 444.2696; found: 444.2699: Example 5 production of 1, 2 ', 6'-tri-N-benzyloxycarbonylfortimicin B (7) A solution of 2.0 g of fortimicin B (6) in 30 ml of water and 60 ml of methanol is cooled in an ice bath while stirring and 4.44 g of N- (benzyloxycarbonyloxy) succinimide were added.

Danach wird das Gemisch weitere 3 Stunden bei 0°C und 22 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Hierauf wird der Hauptanteil des Methanols unter vermindertem Druck abdestilliert und der Rückstand mit einem Gemisch von Chloroform und Wasser ausgeschüttelt. Der Chloroformextrakt wird mit Wasser gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet und eingedampft. Der Rückstand wird an Kieselgel chromatographiert und mit einem Gemisch von Chloroform, Methanol und konzentrierter wäßriger Ammoniaklösung (23,4 : 1,4 : 0,1 Volumverhältnis) eluiert. Es werden 1,05 g der Titelverbindung mit folgenden Kenndaten erhalten: [α]D25 + 16,5° (c = 1,0 in CH3OH); IR-Absorptionsspektrum: 1712 und 1507 cm-1; NMR-Spektrum (CDCl3): 6 1,03 (C6,-CH3, J=6,0 Hz), 2,32 (C4NCH3), 3,41 (OCH3).Thereafter, the mixture is a further 3 hours at 0 ° C and 22 hours at Room temperature stirred. The main proportion of the methanol is then reduced Pressure distilled off and the residue with a mixture of chloroform and water shaken out. The chloroform extract is washed with water over magnesium sulfate dried and evaporated. The residue is chromatographed on silica gel and with a mixture of chloroform, methanol and concentrated aqueous ammonia solution (23.4: 1.4: 0.1 volume ratio) eluted. There are 1.05 g of the title compound obtained with the following characteristics: [α] D25 + 16.5 ° (c = 1.0 in CH3OH); IR absorption spectrum: 1712 and 1507 cm-1; Nuclear Magnetic Resonance Spectrum (CDCl3): 6 1.03 (C6, -CH3, J = 6.0 Hz), 2.32 (C4NCH3), 3.41 (OCH3).

C39H50N4O11; C H N ber.: 62,39 6,71 7,46 gef.: 62,16 6,76 7,43.C39H50N4O11; C H N calc .: 62.39 6.71 7.46 found: 62.16 6.76 7.43.

Beispiel 6 Herstellung von 1 2' 6' -Tri-N-benzyloxycarbonyl-4-N-acetylfortimicin B (8) Eine Lösung von 3,22 g 1,2',6'-Tri-N-benzyloxycarbonylforti- micin B in 225 ml Methanol wird in einem Eisbad abgekühlt und unter Rühren innerhalb 15 Minuten mit 16 ml Essigsäureanhydrid versetzt. Danach wird das Gemisch weitere 2 Stunden bei OOC und 2 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Hierauf wird das Methanol unter vermindertem Druck abdestilliert. Example 6 Preparation of 1 2 '6' -Tri-N -benzyloxycarbonyl-4-N-acetylfortimicin B (8) A solution of 3.22 g of 1,2 ', 6'-tri-N-benzyloxycarbonylforti- micin B in 225 ml of methanol is cooled in an ice bath and stirred for 15 Minutes with 16 ml acetic anhydride. Then the mixture is another 2 Stirred for hours at OOC and for 2 hours at room temperature. Then the methanol distilled off under reduced pressure.

Reste an Essigsäureanhydrid und Essigsäure werden durch gemeinsame Destillation mit Benzol und Methanol abdestilliert.Residues of acetic anhydride and acetic acid are common through Distilled off with benzene and methanol.

Es hinterbleiben 3,63 g der Titelverbindung mit folgenden Kenndaten: [α]D25 + 58,4° (c = 1,03 in CH3OH); IR-Absorptionsspektrum: 1710, 1620 und 1500 cm-1 NMR-Spektrum (CDCl3): 6 1,16 (C6,-CH3, J = 6,0), 2,07 (COCH3), 2,83 (C4-NCH3), 3,34 (OCH3), 4,81 (H1,, J = 3,0).3.63 g of the title compound remain with the following characteristics: [α] 25 D + 58.4 ° (c 1.03 in CH3OH); IR absorption spectrum: 1710, 1620 and 1500 cm-1 NMR spectrum (CDCl3): 6 1.16 (C6, -CH3, J = 6.0), 2.07 (COCH3), 2.83 (C4-NCH3), 3.34 (OCH3), 4.81 (H1 ,, J = 3.0).

C41H52N4O12; C H N ber. : 62,11 6,61 7,07 gef.: 62,37 6,74 7,00.C41H52N4O12; C H N calc .: 62.11 6.61 7.07 Found: 62.37 6.74 7.00.

Beispiel 7 Herstellung von 4-N-Acetylfortimicin B-trihydrochlorid (9) Eine Lösung von 1,0274 g Tri-N-benzyloxycarbonyl-4-N-acetylfortimicin B in 180 ml 0,2 n Salzsäure in Methanol wird in Gegenwart von 1,2 g 5prozentigem Palladium-auf-Kohlenstoff als Katalysator 4 Stunden hydriert. Danach wird der Katalysator abfiltriert. Das Filtrat wird unter vermindertem Druck zur Trockene eingedampft. Überschüssige Salzsäure wird durch wiederholte gemeinsame Destillation mit Methanol unter vermindertem Druck abgetrennt. Es hinterbleiben 0,6595 g der Titelverbindung mit folgenden Kenndaten: [α]D25 + 87,2° (c = 1,04 in CH3OH) IR-Absorptionsspektrum (KBr): 1600 und 1485 cm-1 NMR-Spektrum (D2O): # 1,80 (C6'-CH3, J=6,9 Hz), 2,62 (COCH3), 3,61 (C4-NCH3), 3,94 (OCH3), 5,77 (H1,, J= 3,2 Hz); Massenspektrum M+, ber.: 391,2556; gef.: 391,2553. Example 7 Preparation of 4-N-acetylfortimicin B trihydrochloride (9) A solution of 1.0274 g of tri-N-benzyloxycarbonyl-4-N-acetylfortimicin B in 180 ml of 0.2 N hydrochloric acid in methanol is added in the presence of 1.2 g of 5 percent palladium-on-carbon hydrogenated as a catalyst for 4 hours. The catalyst is then filtered off. That The filtrate is evaporated to dryness under reduced pressure. Excess hydrochloric acid is obtained by repeated joint distillation with methanol under reduced pressure severed. This leaves 0.6595 g of the title compound with the following characteristics: [α] D25 + 87.2 ° (c = 1.04 in CH3OH) IR absorption spectrum (KBr): 1600 and 1485 cm-1 NMR Spectrum (D2O): # 1.80 (C6'-CH3, J = 6.9 Hz), 2.62 (COCH3), 3.61 (C4-NCH3), 3.94 (OCH3), 5.77 (H1 ,, J = 3.2 Hz); Mass spectrum M +, calc .: 391.2556; found: 391.2553.

Beispiea. 8 Herstellung von 2-N-Acetylfortimicin B (10) Eine wäßrige Lösung von 0,840 g 4-N-Acetylfortimicin B-trihydrochlorid wird durch eine mit einem Anionenaustauscherharz des quartären Ammoniumtyps (z.B, AG 2-X8, Korngröße 300 bis gefüllte Säule 150 Mikron) in der OH-Form/geleitet. Die Säule hat die Abmessungen 1,1 x 19 cm. Durch diese Behandlung werden die Chloridionen abgetrennt. Das basische Eluat wird mit 84 ml Wasser verdünnt. Nach 20tägigem Stehen bei Raumtemperatur wird die erhaltene Lösung unter vermindertem Druck stark eingeengt und an einer mit einem Kationenaustauscherharz des Carbonsäuretyps (z.B. Bio-Rex 70, Korngröße 150 bis gefühllte Säule 75 Mikron) in der Ammoniumform/chromatographiert. Durch Eluierung mit einem Gradienten von Wasser bis 1 n wäßriger Ammoniaklösung werden Fraktionen erhalten, die lediglich 2'-N-Acetylfortimicin B enthalten. Diese Fraktionen werden unter vermindertem Druck zur Trockene eingedampft. Es werden 0,390g der Titelverbindung mit folgenden Kenndaten erhalten: [α]D24 + 37,6° (c = 0,95 in CH3OH); IR-Absorptionsspektrum: 3350, 1642 und 1557 cm-1. Examples 8 Preparation of 2-N-Acetylfortimicin B (10) An aqueous Solution of 0.840 g of 4-N-acetylfortimicin B-trihydrochloride is through a with a Anion exchange resin of the quaternary ammonium type (e.g. AG 2-X8, grain size 300 to filled column 150 microns) in the OH form /. The column has the dimensions 1.1 x 19 cm. This treatment separates the chloride ions. The basic one Eluate is diluted with 84 ml of water. After standing at room temperature for 20 days the resulting solution was strongly concentrated under reduced pressure and one with a Cation exchange resin of the carboxylic acid type (e.g. Bio-Rex 70, grain size 150 to felt column 75 microns) in the ammonium form / chromatographed. By elution with a gradient from water to 1N aqueous ammonia solution, fractions obtained containing only 2'-N-acetylfortimicin B. These factions will evaporated to dryness under reduced pressure. There are 0.390 g of the title compound obtained with the following characteristics: [α] D24 + 37.6 ° (c = 0.95 in CH3OH); IR absorption spectrum: 3350, 1642 and 1557 cm-1.

NMR-Spektrum (D2O): # 1,51 (C6'-CH3, J=6,0 Hz), 2,42 (COCH3), 2,84 (C4-NCH3), 3,92 (OCH3), 5,66 (H1,, J=4,0 Hz).NMR Spectrum (D2O): # 1.51 (C6'-CH3, J = 6.0 Hz), 2.42 (COCH3), 2.84 (C4-NCH3), 3.92 (OCH3), 5.66 (H1 ,, J = 4.0 Hz).

Massenspektrum (M+H): C17H35N4O6; ber.: 391,2557; gef.: 391,2549.Mass spectrum (M + H): C17H35N4O6; calc .: 391.2557; found: 391.2549.

C17H34N406. 2H20; C H N ber.: 47,76 9,19 13,10 gef.: 47,74 9,28 13,13 Beispiel 9 Herstellung von 1,6'-Di-N-dibenzyloxycarbonyl-2'-N-acetylfor timicin B (11) Eine Lösung von 0,290 g 2'-N-Acetylfortimicin B in 4,5 ml Wasser und 9,0 ml Methanol wird in einem Eisbad auf 0°C abgekühlt und unter Rühren mit 0,388 g N-Benzyloxycarbonyloxy)-succinimid versetzt Das Gemisch wird weitere 3 Stunden bei O°C und 22 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Danach wird die Lösung unter vermindertem Druck eingedampft. Der ölige Rückstand wird mit einem Gemisch von 100 ml Chloroform und 75 ml Wasser ausgeschüttelt. Die Chloroformphase wird abgetrennt und die wäßrige Lösung mit weiteren 100 ml Chloroform ausgeschüttelt. Die Chloroformextrakte werden vereinigt, zweimal mit Wasser gewaschen und über Magnesiumsulfat getrocknet. Nach dem Abdestillieren des Chloroforms unter vermindertem Druck hinterbleiben 0,480 g eines farblosen Feststoffs. Dieser Feststoff wird an einer mit Kieselgel gefüllten Säule mit den Abmessungen 2,0 x 43 cm chromatographiert und mit einem Gemisch von Chloroform, Methanol und konzentrierter wäßriger Ammoniaklösung (23,4 : 1,4 : 0,1 Voluurerhältn )eluiert. Das Eluat wird eingedampft. Es hinterbleiben 0,152 g der Titelverbindung als farbloser Feststoff mit folgenden Kenndaten: NMR-Spektrum (CDC13): 8 0,99 (C6,-CH3, J5,,7,= 7,0 Hz), 1,92 (COCH3), 2,43 (NCH3), 3,46 (OCH3), 5,08 (CbzCH2), 7,32 (Cbz Ar).C17H34N406. 2H20; C H N calc .: 47.76 9.19 13.10 found: 47.74 9.28 13.13 Example 9 Preparation of 1,6'-Di-N-dibenzyloxycarbonyl-2'-N-acetylforimicin B (11) A solution of 0.290 g of 2'-N-acetylfortimicin B in 4.5 ml of water and 9.0 ml of methanol is cooled to 0 ° C. in an ice bath and, with stirring, with 0.388 g N-Benzyloxycarbonyloxy) succinimide is added. The mixture is heated for a further 3 hours O ° C and stirred for 22 hours at room temperature. Thereafter will the Solution evaporated under reduced pressure. The oily residue is with a Mixture of 100 ml of chloroform and 75 ml of water extracted. The chloroform phase is separated off and the aqueous solution is extracted by shaking with a further 100 ml of chloroform. The chloroform extracts are combined, washed twice with water and over magnesium sulfate dried. Left behind after the chloroform has been distilled off under reduced pressure 0.480 g of a colorless solid. This solid is on a silica gel filled column with the dimensions 2.0 x 43 cm and chromatographed with a Mixture of chloroform, methanol and concentrated aqueous ammonia solution (23.4 : 1.4: 0.1 volume ratio) eluted. The eluate is evaporated. It left behind 0.152 g of the title compound as a colorless solid with the following characteristics: NMR spectrum (CDC13): 8 0.99 (C6, -CH3, J5,, 7, = 7.0 Hz), 1.92 (COCH3), 2.43 (NCH3), 3.46 (OCH3), 5.08 (Cbz CH2), 7.32 (Cbz Ar).

B e i s p i e 1 10 Herstellung von Tri-N-benzyloxycarbonyl-2 -N-acetylfortimicin A (12) Eine Lösung von 0,150 g 1,6'-Di-N-benzyloxycarbonyl-2'-N-acetylfortimicin B, 0,06 5g N-Benzyloxycarbonylglycin und 0,074 g 1-Hydroxybenzotriazol-monohydrat in 2,0 ml Tetrahydrofuran wird unter Rühren mit einer Lösung von 0,069 g N,N'-Dicyclohexylcarbodiimid in 2,0 ml Tetrahydrofuran versetzt. Das Gemisch wird weitere 23 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Sodann wird der auskristallisierte Dicyclohexylharnstoff abfiltriert. Das Filtrat wird unter vermindertem Druck eingedampft. Es hinterbleiben 0,299 g eines Produkts, das an einer mit Kieselgel gefüllten Säule chromatographiert wird. Die Säule wird mit einem Gemisch von Benzol, Methanol, 95prozentigem Äthanol und konzentrierter wäßriger Ammoniaklösung (23,5 : 1,04 : 2,0 : 0,2 Volumvernältnis) eluiert. Die produkthaltigen Fraktionen werden vereinigt und unter ver- mindertem Druck zur Trockene eingedampft. Es hinterbleiben 0,178 g der Titelverbindung als weißer Feststoff mit folgenden Kenndaten: IR-Absorptionsspektrum (CHCl3): 3415, 1697, 1633 und 1495 cm ; NMR-Spektrum (CDCl3): 6 1,18 (C6,-CH3), 1,94 (COCH3), 3,03 (C4-NCH3), 3,38 (OCH3), 5,08 (CH,2Cbz), 7,31 (Cbz Ar). B e i s p i e 1 10 Preparation of tri-N-benzyloxycarbonyl-2-N-acetylfortimicin A (12) A solution of 0.150 g of 1,6'-di-N -benzyloxycarbonyl-2'-N-acetylfortimicin B, 0.06 g of N-benzyloxycarbonylglycine and 0.074 g of 1-hydroxybenzotriazole monohydrate in 2.0 ml of tetrahydrofuran is stirred with a solution of 0.069 g of N, N'-dicyclohexylcarbodiimide added in 2.0 ml of tetrahydrofuran. The mixture is left for an additional 23 hours at room temperature touched. The dicyclohexylurea which has crystallized out is then filtered off. That The filtrate is evaporated under reduced pressure. There remains 0.299 g of one Product which is chromatographed on a column filled with silica gel. the Column is concentrated with a mixture of benzene, methanol, 95 percent ethanol and aqueous ammonia solution (23.5: 1.04: 2.0: 0.2 volume ratio) eluted. The product-containing Fractions are united and under reduced pressure for Evaporated dry. 0.178 g of the title compound remains as a white solid with the following characteristics: IR absorption spectrum (CHCl3): 3415, 1697, 1633 and 1495 cm; Nuclear Magnetic Resonance Spectrum (CDCl3): 6 1.18 (C6, -CH3), 1.94 (COCH3), 3.03 (C4-NCH3), 3.38 (OCH3), 5.08 (CH, 2Cbz), 7.31 (Cbz Ar).

B e i s p i e 1 11 Herstellunq von 2'-N-Acetylfortimicin A-trihydrochlorid (13) Eine Lösung von 0,178 g Tri-N-benzyloxycarbonyl-2'-N-acetylfortimicin A in 30 ml 0,2 n Salzsäure in Methanol wird bei einem Wasserstoffdruck von 3 at 4 Stunden in Gegenwart von 0,178 g Sprozentigem Palladium-auf-Kohlenstoff als Katalysator hydriert. Danach wird der Katalysator abfiltriert, das Filtrat stark eingedampft und mit Aktivkohle behandelt Hierauf wird die Aktivkohle abfiltriert und das Filtrat unter vermindertem Druck eingedampft. Überschüssige Salzsäure wird durch wiederholte gemeinsame Destillation mit Methanol unter vermindertem Druck abgetrennt. Es hinterbleiben 0,118 g der Titelverbindung. B e i s p i e 1 11 Production of 2'-N-acetylfortimicin A-trihydrochloride (13) A solution of 0.178 g of tri-N-benzyloxycarbonyl-2'-N-acetylfortimicin A in 30 ml of 0.2 N hydrochloric acid in methanol is at a hydrogen pressure of 3 at 4 hours in the presence of 0.178 g percent palladium-on-carbon as a catalyst hydrogenated. The catalyst is then filtered off and the filtrate is vigorously evaporated and treated with activated charcoal. The activated charcoal is then filtered off and the filtrate evaporated under reduced pressure. Excess hydrochloric acid is repeated by Separated joint distillation with methanol under reduced pressure. It left behind 0.118 g of the title compound.

B e i s p i e 1 12 Herstellung von 2' -N- (ß-Aminoäthyl) -fortimicin B (14) Eine Lösung von 2,0 g 2'-N-Glycylfortimicin B in 80 ml Tetrahydrofuran wird unter Rühren mit 1,22 g Lithiumaluminiumhydrid versetzt. Das Gemisch wird 20 Stunden unter Rückfluß erhitzt und gerührt. Danach wird überschüssiges Lithiumaluminiumhydrid durch vorsichtige Zugabe von Wasser zersetzt. B e i s p i e 1 12 Production of 2 '-N- (ß-aminoethyl) fortimicin B (14) A solution of 2.0 g of 2'-N-glycylfortimicin B in 80 ml of tetrahydrofuran becomes 1.22 g of lithium aluminum hydride are added while stirring. The mixture is 20 hours heated under reflux and stirred. Thereafter, excess lithium aluminum hydride is used decomposed by careful addition of water.

Unlösliche Substanzen werden abgeschleudert. Das Sediment wird in 50 ml Wasser suspendiert und erneut abgeschleudert.Insoluble substances are thrown off. The sediment is in Suspended 50 ml of water and spun off again.

Die Uberstände werden vereinigt und unter vermindertem Druck zur Trockene eingedampft. Es werden 1,44 g eines braunen Feststoffs erhalten, der an einer mit einem Kationenaustauscherharz des Carbonsäuretyps (z.B. Bio-Rex 70, Korngröße - getüliten uie 150 bis 75 Mikron)7chromatographiert. Die Säule hat die Abmessungen 2,0 x 40 cm. Der Austauscher liegt in der Ammo- niumform vor. Es wird mit einem Gradient von Wasser bis 1 n wäßriger Ammoniaklösung eluiert. Die produkthaltigen Fraktionen werden vereinigt, stark eingedampft und gefriergetrocknet. Es werden 0,825 g der Titelverbindung erhalten.The supernatants are combined and brought to dryness under reduced pressure evaporated. There are 1.44 g of a brown solid obtained on a with a cation exchange resin of the carboxylic acid type (e.g. Bio-Rex 70, grain size - tulled to 150 to 75 microns) 7chromatographed. The column has the dimensions 2.0 x 40 cm. The exchanger is located in the ammo niumform. It is eluted with a gradient from water to 1N aqueous ammonia solution. the Product-containing fractions are combined, evaporated vigorously and freeze-dried. 0.825 g of the title compound are obtained.

B e i s p i e 1 13 Herstellung von 1,6'-Di-N-benzyloxycarbonyl-2'-N-lN-benzyloxycarbonyl-(B-aminoäthyl)]-fortimicin B (15) Eine Lösung von 0,824 g 2'-N-(B-Aminoäthyl)-fortimicin 5 in 12,4 ml Wasser und 24,8 ml Methanol wird unter Rühren auf 40C in einem Eisbad abgekühlt und mit 1,83 g N-(Benzyloxycarbonyloxy)-succinimid versetzt. Sodann wird das Gemisch 3 Stunden bei 4 0C und weitere 22 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Danach wird das Reaktionsgemisch unter vermindertem Druck eingedampft und der erhaltene ölige Rückstand mit einem Gemisch von 150 ml Chloroform und 75 ml Wasser ausgeschüttelt. Die Chloroformphase wird abgetrennt und mit 75 ml Wasser gewaschen. Die wäßrigen Phasen werden nacheinander zweimal mit jeweils 80 ml Chloroform ausgeschüttelt. B e i s p i e 1 13 Preparation of 1,6'-di-N-benzyloxycarbonyl-2'-N-1N-benzyloxycarbonyl- (B-aminoethyl)] fortimicin B (15) A solution of 0.824 g of 2'-N- (B-aminoethyl) fortimicin 5 in 12.4 ml of water and 24.8 ml of methanol is cooled to 40C in an ice bath while stirring and with 1.83 g of N- (benzyloxycarbonyloxy) succinimide were added. Then the mixture is 3 hours stirred at 4 ° C. and for a further 22 hours at room temperature. Thereafter, the reaction mixture evaporated under reduced pressure and the oily residue obtained with a Mixture of 150 ml of chloroform and 75 ml of water extracted by shaking. The chloroform phase is separated off and washed with 75 ml of water. The aqueous phases are sequential shaken twice with 80 ml of chloroform each time.

Die Chloroformextrakte werden vereinigt, über Magnesiumsulfat getrocknet und unter vermindertem Druck zur Trockene eingedampt. Es hinterbleiben 1,584 g eines farblosen Feststoffs. Dieser Feststoff wird an einer mit Kieselgel gefüllten Säule mit den Abmessungen 2,2 x 65 cm chromatographiert und mit einem Gemisch von Benzol, Methanol, 95prozentigem Äthanol und konzentrierter wäßriger Ammoniaklösung (23,5:1,4: 2,0 : 0,2 Volumverhältnis) eluiert. Das Eluat wird eingedampft. Es werden 0,589gder Titelverbindung mit folgenden Kenndaten erhalten: lag 25 - 9,5° (c = 1,0 in CH30H) -1 D IR-Absorptionsspektrum: 3440, 1710 und 1510 cm NMR-Spektrum (CDCl3): 6 0,86 (C61-CH3, J=7"0 Hz), 2,36 (C4-NCH3), 3,46 (OCH3), 5,11 (Cbz-CH2), 7,35 (Cbz-aromatisch).The chloroform extracts are combined, dried over magnesium sulfate and evaporated to dryness under reduced pressure. There remains 1.584 g of one colorless solid. This solid is deposited on a column filled with silica gel with the dimensions 2.2 x 65 cm chromatographed and with a mixture of benzene, Methanol, 95 percent ethanol and concentrated aqueous ammonia solution (23.5: 1.4: 2.0: 0.2 volume ratio) eluted. The eluate is evaporated. It will be 0.589gder Title compound obtained with the following characteristics: lay 25 - 9.5 ° (c = 1.0 in CH30H) -1 D IR absorption spectrum: 3440, 1710 and 1510 cm NMR spectrum (CDCl3): 6 0.86 (C61-CH3, J = 7 "0 Hz), 2.36 (C4-NCH3), 3.46 (OCH3), 5.11 (Cbz-CH2), 7.35 (Cbz-aromatic).

C41H55N5011, C H N ber.: 62,03 6,98 8,82 gef.: 61,23 6,98 8,59 3 e i s p i e 1 14 Herstellung von 1,6'-Di-N-benzyloxycarbonyl-4-N-(n-benzyloxyCarbonylqlyCyl)-2|-N-[N-benzyloxycarbonyldB-aminoäthyl)] fortimicin B (16) Eine Lösung von 0,503 g Tri-N-benzyloxycarbonyl-2'-N-[N-benzyloxycarbonyl-(B-aminoäthyl)]-fortimicin B in 3,4 ml Tetrahydrofuran wird unter Rühren mit 0,223 g des N-Hydroxysuccinimidesters von N-Benzyloxycarbonylglycin versetzt. Nach 20stündigem Rühren bei Raumtemperatur wird das Tetrahydrofuran unter vermindertem Druck abdestilliert. Es hinterbleiben 0,714 g eines farblosen Feststoffs. Dieser Feststoff wird an einer mit Kieselgel gefüllten Säule mit den Abmessungen 1,5 x 74 cm chromatographiert und mit einem Gemisch von Benzol, Methanol, 95prozentigem Äthanol und konzentrierter wäßriger Ammoniaklösung (23,5 : 1,4 : 2,0 : 0,2 Volumteile) eluiert. Das Eluat wird eingedampft. Es werden 0,405 g der Titelverbindung mit folgenden Kenndaten erhalten: [α]D24 + 32,7° (c = 1,03 in CH3OH); IR-Absorptionsspektrum; 3410, 1705, 1635 und 1500 cm NMR-Spektrum (CDCl3): ö 1,17 (C6-CH3), 2,91 (C4-NCH3), 3,33 (OCH3), 5,05 (Cbz-CH2), 7,29 (Cbz aromatisch).C41H55N5011, C H N calc .: 62.03 6.98 8.82 found: 61.23 6.98 8.59 3 e i s p i e 1 14 Production of 1,6'-Di-N-benzyloxycarbonyl-4-N- (n-benzyloxyCarbonylqlyCyl) -2 | -N- [N-benzyloxycarbonyldB-aminoethyl)] fortimicin B (16) A solution of 0.503 g of tri-N-benzyloxycarbonyl-2'-N- [N-benzyloxycarbonyl- (B-aminoethyl)] fortimicin B in 3.4 ml of tetrahydrofuran is stirred with 0.223 g of the N-hydroxysuccinimide ester added by N-benzyloxycarbonylglycine. After stirring for 20 hours at room temperature the tetrahydrofuran is distilled off under reduced pressure. It left behind 0.714 g of a colorless solid. This solid is on a silica gel filled column with the dimensions 1.5 x 74 cm and chromatographed with a Mixture of benzene, methanol, 95 percent ethanol and concentrated aqueous Ammonia solution (23.5: 1.4: 2.0: 0.2 parts by volume) eluted. The eluate is evaporated. 0.405 g of the title compound with the following characteristics are obtained: [α] D24 + 32.7 ° (c = 1.03 in CH3OH); IR absorption spectrum; 3410, 1705, 1635 and 1500 cm Nuclear Magnetic Resonance Spectrum (CDCl3): ö 1.17 (C6-CH3), 2.91 (C4-NCH3), 3.33 (OCH3), 5.05 (Cbz-CH2), 7.29 (Cbz aromatic).

C51H64N6014; C H N ber.: 62,18 6,55 8,53 gef.: 62rO4 6,56 8,42 3 e i s p i e 1 15 Herstellung von 2' -N- (ß-Aminoäthyl) -fortimicin A-pentahydrochlorid (17) Eine Lösung von 0,426 g 1,6'-Di-N-benzyloxycarbonyl-4-N-(N-benzyloxyCarbonylglycyl)-2'-N-[N-benzyloxyearbonyl-(B-aminoäthyl)]-fortimicin B in 70 ml einer 0;2 n Lösung von Salzsäure in Methanol wird 4 Stunden in Gegenwart von 0,40 g Sprozentigem Palladium-auf-Kohlenstoff als Katalysator hydriert. Da--nach wird der Katalysator abfiltriert und mehrmals mit wenig Methanol ausgewaschen. Das Filtrat wird unter vermindertem Druck zur Trockene eingedampft. Überschüssige Salzsäure wird durch wiederholte gemeinsame Destillation mit Methanol unter vermindertem Druck abgetrennt. Es hinterbleiben 0,268 g der Titelverbindung mit folgenden Kenndaten: 24 70 (c o [a]D + 67,7° (c = 1,0 in CH30H) IR-Absorptionsspektrum: 3420, 2940, 1643, 1600 und 1485 cm .C51H64N6014; C H N calc .: 62.18 6.55 8.53 found: 62rO4 6.56 8.42 3 e i s p i e 1 15 Preparation of 2 '-N- (ß-aminoethyl) fortimicin A-pentahydrochloride (17) A solution of 0.426 g of 1,6'-di-N-benzyloxycarbonyl-4-N- (N-benzyloxy carbonylglycyl) -2'-N- [N-benzyloxy carbonyl- (B-aminoethyl)] fortimicin B in 70 ml of a 0.2N solution of hydrochloric acid in methanol is in the presence for 4 hours hydrogenated by 0.40 g percent palladium-on-carbon as a catalyst. Thereafter the catalyst is filtered off and washed several times with a little methanol. That The filtrate is evaporated to dryness under reduced pressure. Excess hydrochloric acid will by repeated joint distillation with methanol under separated under reduced pressure. There remain behind 0.268 g of the title compound following characteristics: 24 70 (c o [a] D + 67.7 ° (c = 1.0 in CH30H) IR absorption spectrum: 3420, 2940, 1643, 1600 and 1485 cm.

NMR-Spektrum (D20) 6 2,78 (C6,-CH3, J= 7,0 Hz), 3,57 (C4-NCH3), 3,93 (OCH3), 5,88 (H1,, J=4,0 Hz).NMR Spectrum (D20) 6 2.78 (C6, -CH3, J = 7.0 Hz), 3.57 (C4-NCH3), 3.93 (OCH3), 5.88 (H1 ,, J = 4.0 Hz).

Massenspektrum M , ber.: 448,3009; gef.: 448,2291.Mass spectrum M, calc .: 448.3009; Found: 448.2291.

Die Verbindungen der Erfindung sind Antibiotika, die parenteral,z.B. intramuskulär, intravenös, intraperitoneal oSer subcutan, oder oral gegeben werden können. Ferner können sie lokal oder rektal gegeben werden. Zur Herstellung von Arzneimitteln werden die Arzneistoffe zu üblichen Darreichungsformen verarbeitet. Beispiele für orale Darreichungsformen sind Kapseln, Tabletten, Pillen, Pulver und Granulate. Tabletten und Pillen können dragiert sein. Flüssige Darreichungsformen zur oralen Gabe sind Emulsionen, Lösungen, Suspensionen, Sirupe und Elixiere.The compounds of the invention are antibiotics which can be administered parenterally, e.g. intramuscularly, intravenously, intraperitoneally or subcutaneously, or orally can. They can also be given locally or rectally. For production of Medicines, the medicinal substances are processed into the usual dosage forms. Examples of oral dosage forms are capsules, tablets, pills, powders and Granules. Tablets and pills can be coated with sugar. Liquid dosage forms for oral administration are emulsions, solutions, suspensions, syrups and elixirs.

Präparate zur parenteralen Gabe sind sterile, wäßrige oder nicht-wäßrige Lösungen, Suspensionen oder Emulsionen.Preparations for parenteral administration are sterile, aqueous or non-aqueous Solutions, suspensions or emulsions.

Präparate zur rektalen Gabe sind vorzugsweise Suppositorien, die außer dem Arzneistoff noch Excipientien, wie Kakaobutter oder ein Wachs enthalten. Die Arzneipräparate können übliche Verdünnungsmittel, Zusatzstoffe und/oder Hilfsstoffe enthalten.Preparations for rectal administration are preferably suppositories that except the medicinal substance still contain excipients such as cocoa butter or a wax. the Medicinal preparations can include customary diluents, additives and / or auxiliaries contain.

Tabelle I Reaktionsschema zur Herstellung typischer Verbindungen der Erfindung Table I Reaction Scheme for Preparing Typical Compounds of the Invention

Claims

Fortimicin B derivatives and their use in combating bacterial infections Patent claims 1. Fortimicin B derivatives of the general formula I in which R is an acyl, aminoacyl, N-mono-lower-alkylaminoacyl, N, N-di-lower-alkylaminoacyl, hydroxy-substituted aminoacyl, hydroxyacyl or an amino acid radical, a lower alkyl, amino-lower -alkyl-, hydroxy-lower-alkyl-, N-lower-alkylamino-lower-alkyl-, N, N-di-lower-alkylaminon, lower-a ikyl-, aminohydroxy-lower-alkyl-, N-lower-alkylaminohydroxy- lower-alkyl or N, N-di-lower-alkylamino-hydroxy-lower-a, alkyl radical and R1 is an acyl, aminoacyl, N-mono-lower-alkylaminoacyl, N, N-di-lower-alkylaminoacyl , hydroxy-substituted aminoacyl, hydroxyacyl or an amino acid residue, a lower alkyl, amino-lower-alkyl-, hydroxy-lower-alkyl-, N-lower-alkylamino-lower-alkyl-, N, N-di-lower-alkylamino -lower-alkyl-, aminohydroxy-lower-alkyl-, N-lower-alkylaminohydroxy-lower-alkyl- or N, N-di-lower-alkylaminohydroxy-lower-alkyl radical or a hydrogen atom, and their salts with acids.

2. Compounds according to claim 1 of the general formula I, in which R1 means a hydrogen atom.

3. 2'-N-Glycylfortimicin B and its salts with acids.

4. 2'-N-acetylfortimicin B and its salts with acids.

5. 2'-N- (ß-aminoethyl) fortimicin B and its salts with acids.

6. Compounds according to claim 1 of the general formula I, in which R and R1 represent amino acid residues.

7. 2'-N-Glycylfortimicin A and its salts with acids.

8. Compounds according to claim 1 of the general formula I, in which R means an amino-lower-alkyl radical.

9. Compounds according to claim 1 of the general formula I, in which R means an amino acid residue.

10. Compounds according to claim 1 of general formula I in which R is an acyl radical.

11. Compounds according to claim 1 of general formula I in which R denotes a lower alkyl radical.

12. 2'-N-Glycylfortimicin B.

13. 2'-N-Glycylfortimicin B-trihydrochloride.

14. 2'-N-Glycylfortimicin A.

15. 2'-N-Glycylfortimicin A trihydrochloride.

16. 2'-N-acetylfortimicin B.

17. 2'-N-acetylfortimicin B trihydrochloride.

18. 2'-N-acetylfortimicin A.

19. 2 '-N-acetylfortimicin A trihydrochloride.

20. 2'-N- (B-aminoethyl) fortimicin B.

21. 2'-N- (B-aminoethyl) fortimicin A.

22. 2'-N- (B-aminoethyl) fortimicin A-pentahydrochloride.

23. Use of the compounds according to Claims 1 to 22 in combating bacterial infections.