DE2805003A1

DE2805003A1 - DIAGNOSTIC TEST CONTAINER FOR PERFORMING PREGNANCY DIAGNOSIS

Info

Publication number: DE2805003A1
Application number: DE19782805003
Authority: DE
Inventors: Ennio Jaccheri
Original assignee: Boehringer Biochemia Robin SpA
Current assignee: Boehringer Ingelheim Italia SpA
Priority date: 1977-10-31
Filing date: 1978-02-06
Publication date: 1979-05-03
Also published as: FR2406989A1; IT1088628B

Description

DIPL-CHEM. DR. RER NAT₄WALTER NiELSCHDIPL-CHEM. DR. RER NAT ₄ WALTER NiELSCH

Boehringer Biochemia S.r.l. Mailand(Italien)Boehringer Biochemia S.r.l. Milan (Italy)

Diagnostischer Prüfbehälter zur Ausführung von SchwangerschaftsdiagnosenDiagnostic test container for carrying out pregnancy diagnoses

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Die Erfindung betrifft einen diagnostischen Prüfbehälter zur Ausführung von Schwangerschaftsdiagnosen vermittels der immunchemischen Bestimmung des Human-Chorion-Gonadotropins (HCG) im Urin.The invention relates to a diagnostic test container for carrying out pregnancy diagnoses the immunochemical determination of human chorionic gonadotropin (HCG) in the urine.

Schwangerschaftsdiagnosen beruhen auf der Nachweismöglichkeit eines luteinisierenden gonadotropen Hormons, das von der Langhans-Zelle des Choriongewebes der Placenta erzeugt wird, d.h. des menschlichen Chörion-Gonadotropins, welches im. Urin der schwangeren Frau vorhanden ist.Pregnancy diagnoses are based on the possibility of a luteinizing gonadotropic hormone produced by the Langhans cell of the chorionic tissue of the placenta, i.e. the human chorionic gonadotropin, which in the. Pregnant woman's urine is present.

Es gibt bereits biologische Verfahren zur Schwangerschaftsdiagnose, welche auf der in Tieren bei Verabreichung von Urin der schwangeren Frau induzierten biologischen Aktivität beruhen. Für diese biologischen Untersuchungen werden bestimmte Tiere benötigt. Von den auf diesem Gebiet liegenden Tests wurden die nachgenannten insbesondere entwickelt: Der Test von Ascheim-Zondek, welcher auf der Erscheinung beruht, daß das menschliche Chorion-Gonadotropin (HCG) die Ausbildung von Blutungsfollikeln und Farbkörperchen in den Eierstöcken vorpubertärer Mäuse hervorruft. Der Friedman-Test, welcher darauf beruht, daß in pubertäre Kaninchen injizierter Urin der schwangeren Frau zur Ausbildung von Blutungsfollikeln in den Eierstöcken der Kaninchen führt. Weiterhin ist zu nennen der Test nach Galli-Mainini, der darauf beruht, daß die Verabreichung von Urin der schwangeren Frau im Urin des Frosches die Emission von Sperma zur Folge hat.There are already biological methods for diagnosing pregnancy, which is based on the biological activity induced in animals upon administration of the urine of the pregnant woman are based. Certain animals are required for these biological studies. Of those in this field Tests the following were developed in particular: The Ascheim-Zondek test, which is based on the appearance, that the human chorionic gonadotropin (HCG) the formation of bleeding follicles and color cells in the ovaries of prepubescent mice. The Friedman test, which is based on injecting into pubertal rabbits The pregnant woman's urine causes bleeding follicles to form in the rabbits' ovaries. Farther the test according to Galli-Mainini, which is based on that the administration of urine of the pregnant woman in the urine of the frog results in the emission of sperm.

Alle diese bekannten Tests weisen insbesondere den Nachteil auf, daß sie von besonders geschultem Laborpersonal durchgeführt werden müssen, mehrere Tage zu ihrer Durchführung benötigt werden und Tieropfer erforderlich sind. Außerdem weisen viele Krankenhäuser nicht die zur Haltung der entsprechenden Versuchstiere benötigten Einrichtungen auf. EinAll of these known tests have the particular disadvantage that they are carried out by specially trained laboratory personnel need several days to carry them out, and animal sacrifices are required. aside from that many hospitals do not have the facilities required to keep the corresponding laboratory animals. A

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weiterer, sehr erheblicher Nachteil ergibt sich daraus, daß die für diese Tests benötigten Tiere bestimmten Bedingungen genügen müssen. Die Mäuse müssen weiblichen Geschlechts und von genau vorbestimmtem, vorpubertärem Alter sein. Die Kaninchen können dagegen bereits im pubertären Alter sein, dürfen jedoch noch keinen Kontakt mit männlichen Kaninchen gehabt haben. Der auf dem Einsatz von Fröschen beruhende Test liefert schließlich jahreszeitlich bedingt zweifelhafte Ergebnisse.Another very significant disadvantage results from the fact that the animals required for these tests have certain conditions have to suffice. The mice must be female and pre-pubescent To be older. The rabbits, on the other hand, may already be at puberty, but must not yet have contact with them male rabbits. The test based on the use of frogs finally delivers seasonal results conditionally dubious results.

Zur Vermeidung der mit den vorgenannten biologischen Tests verbundenen zahlreichen Nachteile sind in letzter Zeit Tests entwickelt worden, welche auf der immunologischen Eigenschaft des HCG beruhen. Diese biologischen Verfahren zum Entdecken des im Urin ggf. vorhandenen Chorion-Gonadotropin-Hormons beruhen darauf, daß Bakterien, kolloidale Teilchen oder Erythrozyten (rote Blutkörperchen), an denen das lösliche HCG-Antigen adsorbiert oder gebunden ist, bei Vermischung mit dem speziellen Antiserum,HCG-Antiserum, in einem bestimmten Verhältnis zu einer sogenannten "passiven Agglutinationsreaktion" führen, welche in dem Fall, daß die Körperchen aus Erythozyten bestehen, als Hämoagglutination bezeichnet wird. Wenn in ein Reagenzglas mit halbkugeliger Bodenfläche, das die mit HCG sensibilisierten und mit dem Anti-HCG-Antiserum vermischten Erythrozyten enthält, Urin der schwangeren Frau zugesetzt wird, reagiert das im Urin enthaltene freie HCG im Wettbewerb mit dem Antiserum und inhibiert dabei die Hämoagglutinationsreaktion. Folglich setzen sich die nicht agglutinierten Erythrozyten des Antiserums frei ab und bilden am Boden des Reagenzglases einen charakteristischen Ring (positive Reaktion). Die Zugabe von Urin einer nicht schwangeren Frau, welcher folglich kein freies HCG enthält, hat andererseits keinen Einfluß auf die Hämoagglutxnationsreaktion, und die agglutinierten Erythrozyten setzen sich in einerIn order to avoid the numerous disadvantages associated with the aforementioned biological tests, there have been tests recently which are based on the immunological properties of HCG. These biological methods to discover of the chorionic gonadotropin hormone possibly present in the urine are based on the fact that bacteria, colloidal particles or erythrocytes (red blood cells) to which the soluble HCG antigen is adsorbed or bound when mixed with the special antiserum, HCG antiserum, in a certain ratio lead to a so-called "passive agglutination reaction", which in the event that the corpuscles are made up of erythocytes known as hemoagglutination. If in a test tube with a hemispherical bottom surface, which the with HCG sensitized and mixed with the anti-HCG antiserum contains erythrocytes, added to the urine of the pregnant woman the free HCG contained in the urine reacts in competition with the antiserum and thereby inhibits the hemoagglutination reaction. As a result, the non-agglutinated erythrocytes of the antiserum settle freely and form am The bottom of the test tube has a characteristic ring (positive reaction). The addition of urine to a non-pregnant woman On the other hand, women who consequently do not contain free HCG have no influence on the hemoagglutination reaction, and the agglutinated erythrocytes settle in one

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homogenen Schicht (ohne Ausbildung des charakteristischen Rings) auf dem Boden des Reagenzglases ab (negative Reaktion) . Das Erscheinen der typischen ringförmigen Ablagerung läßt sich daher zur Bestimmung eines ggf. vorhandenen Schwangerschaftszustands verwenden.homogeneous layer (without formation of the characteristic ring) on the bottom of the test tube (negative reaction) . The appearance of the typical annular deposit can therefore be used to determine if any Use pregnancy state.

In neuerer Zeit wurden Reagenzien für immunologische Untersuchungen in Form fester Tabletten auf den Markt gebracht, welche eine genau definierte Konzentration an Reagenz enthalten· und so lange vollkommen reaktionsfrei bleiben, bis sie gelöst und in Berührung mit der zu bestimmenden Flüssigkeit gebracht werden.More recently, reagents have been used for immunological studies brought onto the market in the form of solid tablets containing a precisely defined concentration of reagent and remain completely free of reaction until they are released and come into contact with the liquid to be determined to be brought.

Ausgehend von der Verfügbarkeit derartiger Reagenzien wurden schließlich sogenannte "selbständige" diagnostische Prüfbehälter zur Ausführung der Schwangerschaftsdiagnose vermittels der immunchemischen Dosierung des HCG auf den Markt gebracht, wobei durch den Ausdruck "selbständig" zum Ausdruck gebracht werden soll, daß der Prüfbehälter sämtliche zur Ausführung des Tests benötigten Vorrichtungen und Reagenzien enthält, um einem auch keinerlei medizinische Kenntnisse besitzenden Benutzer zu gestatten, den Versuch mit zu erwartenden Ergebnissen auszuführen.On the basis of the availability of such reagents, so-called "independent" diagnostic test containers were finally created to carry out the pregnancy diagnosis by means of the immunochemical dosage of HCG on the market brought, whereby the expression "independently" is intended to express that the test container is all for Execution of the test contains the devices and reagents required for a person with no medical knowledge whatsoever Allow users to attempt the experiment with expected results.

So ist beispielsweise in der U S -PS 3 579 306 ein selbständiger Prüfbehälter zur Bestimmung des Vorhandenseins des Schwangerschaftshormons beschrieben, der aus einem transparenten Behälter mit einem gleichfalls transparenten Deckel besteht, dessen Seitenwände eine ausreichende Höhe aufweisen, damit er im abgenommenen und gestülpten Zμstand eine Urinprobe aufnehmen kann. Ein an der Bodenwand des Behälters befestigter Spiegel stützt sich mit einem Rand gegen den benachbarten Boden der Behältervorderwand ab und erstreckt sich diametral quer durch den Behälter, wobei sein vom BodenFor example, U S -PS 3 579 306 is self-employed Test container for determining the presence of the pregnancy hormone described from a transparent Containers with a likewise transparent lid, the side walls of which are of sufficient height, so that he can take a urine sample in the removed and turned inside out can accommodate. A mirror attached to the bottom wall of the container is supported with one edge against the adjacent bottom of the container front wall and extends diametrically across the container, being from the bottom

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entfernter oberer Rand gegen die Behälterrückwand anliegt. Fin Prüfglas mit Schraubverschlußhals dient zur Aufnahme eines Stopfens mit einem entsprechenden Innengewinde. Dieses transparente Prüfglas enthält eine feste Tablette aus mit menschlichem Chorion-Gonadotropin sensibilisierten Erythrozyten, eine feste Tablette aus menschlichem Chorion-Gonadotropin-Antiserum und eine feste Tablette eines Puffers. Außerdem enthält der Prüfbehälter einen Tropfenzähler mit zwei Strichmarkierungen, von denen die untere die zu entnehmende, vorbestimmte Urinmenge, und die obere die als Lösungsmittel für die vorgenannten Reagenzien vorbestimmte Entnahmemenge an Wasser angibt. Weiterhin weist der transparente Behälter innenseitig eine transparente Halterung zur Aufnahme des Prüfglases auf, vermittels welcher das untere Ende desselben in einem Abstand oberhalb des Spiegels gehalten ist, so daß das Ergebnis der nach Zugabe von Urin zu den im Prüfglas enthaltenen Reagenzien innerhalb des Behälters erfolgenden Reaktion aufgrund der Reflexion am Spiegel von der Behältervorderseite aus sichtbar ist.the distant upper edge rests against the rear wall of the container. Fin test glass with screw cap is used for recording a plug with a corresponding internal thread. This transparent test glass contains a solid tablet erythrocytes sensitized with human chorionic gonadotropin, a solid tablet of human chorionic gonadotropin antiserum and a solid tablet of a buffer. The test container also contains a drop counter two line markings, of which the lower the predetermined amount of urine to be taken, and the upper the as Solvent for the aforementioned reagents indicates predetermined withdrawal amount of water. Furthermore, the transparent Container has a transparent holder on the inside for receiving the test glass, by means of which the lower The end of the same is kept at a distance above the mirror, so that the result of adding urine to it The reaction of the reagents contained in the test tube takes place inside the container due to the reflection on the mirror is visible from the front of the container.

Derartige diagnostische Prüfbehälter unter Verwendung der in mit Stopfen versehenen Reagenzgläsern oder Fläschchen enthaltenen vorgenannten Reagenzien sind jedoch wenig zufriedenstel-lend, da der nicht hermetische Verschluß dieser Reagenzgläser oder Fläschchen ggf. den Zutritt von Feuchtigkeit gestattet, wodurch die Haltbarkeit des Prüfbehälters nachteilig beeinflußt wird. Dieser Nachteil zeigt sich insbesondere dann, wenn die in den Reagenzgläsern oder Fläschchen enthaltenen Reagenzien stark hygroskopisch sind, was im Falle lyophilisierter Reagenzien der Fall ist.Such diagnostic test containers using those contained in test tubes or vials provided with stoppers However, the aforementioned reagents are not very satisfactory, since the non-hermetic closure of these test tubes or bottles allows moisture to enter, whereby the durability of the test container is adversely affected. This disadvantage is particularly evident when the reagents contained in the test tubes or vials are highly hygroscopic, which is the case in the case of lyophilized Reagents is the case.

Ein anderer Nachteil der derzeit bekannten diagnostischen Prüfbehälter zur Ausführung von Schwangerschaftsdiagnosen ist die unzureichende Spezifität der Reagenzien, welche nicht in der gewünschten Weise einzig und allein auf dasAnother disadvantage of the currently known diagnostic test containers for making pregnancy diagnoses is the insufficient specificity of the reagents which not solely on that in the desired way

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Vorhandensein des menschlichen Chorion-Gonadotropins, sondern auch auf andere, im Urin vorhandene Hormone (wie z.B. das LH-Hormon) unter physiologischen Bedingungen ansprechen, die bei einem Test mit zu hoher Empfindlichkeit zu mehrdeutigen oder fälschlicherweise positiven Ergebnissen führen können. Andererseits ist eine sehr hoch gesteigerte Spezifität der Reagenzien eine absolute Vorbedingung für einen hoch empfindlichen Test, d.h. einen Test, durch den ein sicheres Ergebnis in möglichst kurzer Zeit zwischen der Befruchtung und dem Testzeitpunkt erhalten wird.Presence of human chorionic gonadotropin, rather also respond to other hormones present in the urine (such as the LH hormone) under physiological conditions, which, if tested with too high a sensitivity, produce ambiguous or falsely positive results can. On the other hand, a very high level of specificity of the reagents is an absolute prerequisite for one highly sensitive test, i.e. a test that gives a reliable result in the shortest possible time between the Fertilization and the test time is obtained.

Ein weiterer Nachteil der derzeit bekannten diagnostischen Prüfbehälter zur Ausführung von Schwangerschaftsdiagnosen besteht darin, daß der im allgemeinen nicht unter zwei Stunden betragende Zeitraum zwischen der Vermischung der Reagenzien mit der zu untersuchenden Urinprobe und der Ausbildung der Ablagerung verhältnismäßig, lang ist. Da der die Reagenzien und die Urinprobe enthaltende Behälter während dieser Zeit in absoluter Ruhe belassen werden muß und keinen Stoßen, Schwingungen oder dgl. ausgesetzt sein darf, durch welche die Zuverlässigkeit des Tests beeinträchtigt werden könnte, ist ohne weiteres ersichtlich, daß es äußerst wünschenswert wäre, über einen entsprechenden Prüfbehälter zu verfügen, mit dem das Versuchsergebnis in einem wesentlich kürzerem als dem vorgenannten Zeitraum erhalten werden kann.Another disadvantage of the currently known diagnostic test containers for carrying out pregnancy diagnoses is that the period of time, generally not less than two hours, between the mixing of the reagents with the urine sample to be examined and the formation of the deposit is relatively long. Since the the Reagents and the container containing the urine sample must be left at absolute rest during this time and none May be exposed to impacts, vibrations or the like, which impair the reliability of the test could, it is readily apparent that it would be extremely desirable to have a corresponding test container with which the test result in an essential shorter than the aforementioned period can be obtained.

Der Erfindung liegt daher die Aufgabe zugrunde, einen diagnostischen Prüfbehälter zur Ausführung von Schwangerschaftsdiagnosen vermittels der immunchemischen Bestimmung desThe invention is therefore based on the object of a diagnostic Test container for carrying out pregnancy diagnoses by means of the immunochemical determination of the

Human-Chorion-Gonadotropins im Urin zu schaffen, bei dem unter Vermeidung der vorgenannten Nachteile keine Gefahr dafür besteht, daß die Reagenzien auch über längere Zeiträume hinweg mit Feuchtigkeit in Berührung kommen können, so daß der Prüfbehälter eine lange Haltbarkeit aufweist, zudemHuman chorionic gonadotropins in the urine where while avoiding the aforementioned disadvantages, there is no risk that the reagents will also be used over long periods of time can come into contact with moisture away, so that the test container has a long shelf life, moreover

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gegenüber HCG hochempfindlich und diesem Hormon gegenüber auch äußerst spezifisch, d.h. nicht durch andere ggf. im Urin vorhandene Hormone gestört ist, und für den der Zeitraum zwischen dem Vermischen der verschiedenen Reagenzien mit der Urinprobe und der Ausbildung der Ablagerung in bezug auf den mit Prüfbehältern bekannter Ausführungen benötigten Zeitraum wesentlich verkürzt ist und nur eine Stunde etwa beträgt.highly sensitive to HCG and also extremely specific to this hormone, i.e. not by others possibly im Urinary hormones are disturbed and the amount of time between the mixing of the various reagents with the urine sample and the formation of the deposit required in relation to the designs known with test containers Period is significantly shortened and is only about an hour.

Entsprechend der Erfindung wird nunmehr ein diagnostischer Prüfbehälter zur Ausführung von Schwangerschaftsdiagnosen vermittels der immunchemischen Bestimmung des HuKian-Chorion-Gonadotropins im Urin vorgeschlagen, welcher besteht ausAccording to the invention there is now a diagnostic test container for carrying out pregnancy diagnoses by means of the immunochemical determination of the HuKian chorionic gonadotropin suggested in urine, which consists of

a) einem schachtelartigen Behälter mit mehreren Halterungen für wenigstens einen Tropfenzähler und wenigstens zwei Ampullen, einer Halterung für eine in bezug auf den Boden des Behälters senkrecht stehende Ampulle und einem unterhalb der Ampullenhalterung am Boden des Behälters angeordneten Spiegel, durch den das Ergebnis eines in der Ampulle ausgeführten Versuchs reflektierbar und von der Behälteraußenseite sichtbar darstellbar ist,a) a box-like container with several holders for at least one dropper and at least two Ampoules, one holder for an ampoule that is perpendicular to the bottom of the container and one below the ampoule holder at the bottom of the container arranged mirror through which the result of a in the The experiment carried out in the ampoule is reflective and visible from the outside of the container,

b) wenigstens einer transparenten Ampulle, welche eine feste Probe aus mit HCG sensibilisierten Erythrozyten und eine feste Probe von Antiserum für HCG enthält und ausreichend großes Fassungsvermögen zur Aufnahme einer zu analysierenden Urinprobe und des Lösungsmittels für die Erythrozytproben und das Antiserum aufweist, und welcher erfindungsgemäß dadurch gekennzeichnet ist, daßb) at least one transparent ampoule, which contains a solid sample of erythrocytes sensitized with HCG and a Contains a solid sample of antiserum for HCG and has a sufficiently large capacity to hold a sample to be analyzed Has urine sample and the solvent for the erythrocyte samples and the antiserum, and which according to the invention is characterized in that

1) die transparente Ampulle in einwandfreier Schichtung, ausgehend von dem Ampullenboden, eine Schicht aus lyophilisiertem Antiserum in Pufferlösung mit Saccharoseträger und eine Schicht aus mit HCG sensibilisierten, auf Saccharose gehaltenen und lyophiliserten menschlichen1) the transparent ampoule in perfect layering, starting out from the bottom of the ampoule, a layer of lyophilized antiserum in buffer solution with sucrose carrier and a layer of HCG sensitized, sucrose maintained and lyophilized human

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Erythrozyten aufweist undHas erythrocytes and

2) außerdem wenigstens eine Ampulle enthält, in welcher das zur Wiederherstellung des Lyophilisats benötigte Lösungsmittel in bereits dosierter Form, insbesondere 0,4 ml destilliertes Wasser, enthalten ist.2) also contains at least one ampoule in which the solvent required to restore the lyophilizate is contained in already dosed form, in particular 0.4 ml of distilled water.

Entsprechend Biner bevorzugten Ausgestaltung kann das volumetrische Verhältnis zwischen der Schicht aus lyophilisiertem Antiserum und der Schicht aus mit HCG sensibilisierten, lyophilisierten Erythrozyten in der transparenten Ampulle etwa 3:1 betragen. So beträgt beispielsweise das Volumen der Schicht aus lyophilisiertem Antiserum etwa 0,3 ml, während das Volumen der Schicht aus mit HCG sensibilisiertem, lyophilisierten menschlichen Erythrozyten 0,1 ml beträgt. Vorzugsweise entspricht der zur Ausführung dieses Tests verwendete schachteiförmige Behälter dem Behälter, welcher in der italienischen Gebrauchsmusteranmeldung Nr. 21431 B/77 vom 30. 5. 1977 der Anmelderin beschrieben ist.According to Biner's preferred embodiment, the volumetric Ratio between the layer of lyophilized antiserum and the layer of HCG sensitized, lyophilized erythrocytes in the transparent ampoule are about 3: 1. For example, the volume is the layer of lyophilized antiserum about 0.3 ml, while the volume of the layer of HCG sensitized, lyophilized human erythrocytes is 0.1 ml. Preferably corresponds to the one used to perform this test box-shaped container the container which is in the Italian utility model application No. 21431 B / 77 of May 30, 1977 by the applicant is described.

Das Reagenz aus den mit HCG sensibilisierten menschlichen Erythrozyten wird nach einem bekannten Verfahren hergestellt (wozu beispielsweise auf die ü S PS 3 548 051 verwiesen sei), Die Herstellung des anderen Reagenz, nämlich des Anti-HCG-Antiserums erfolgt vorzugsweise nach dem Verfahren, das in einer gleichzeitig eingereichten weiteren Patentanmeldung der Anmelderin mit dem Titel "Verfahren zur Herstellung eines Antikörpers Anti-HCG, insbesondere zur Sehwangerschaftsdiagnose" (DT-OS ) beschrieben ist, und auf die hierThe reagent from the human erythrocytes sensitized with HCG is produced by a known method (For which, for example, reference is made to US PS 3 548 051), The production of the other reagent, namely the anti-HCG antiserum is preferably carried out according to the method described in a further patent application filed at the same time of the applicant with the title "Process for the production of an anti-HCG antibody, in particular for the diagnosis of visual pregnancy" (DT-OS), and here

ausdrücklich bezug genommen wird.is expressly referred to.

Wie bereits erwähnt, werden sowohl die mit HCG sensibilisierten menschlichen Erythrozyten als auch das Anti-HCG-Antiserum lyophilisiert. Diese Lyophilisierung kann in folgender Weise erfolgen: In eine Ampulle, welche anschließendAs mentioned earlier, both the HCG sensitized human erythrocytes and the anti-HCG antiserum will be lyophilized. This lyophilization can be done in the following way: In an ampoule, which then

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hermetisch abgeschlossen wird, so daß ihr Inhalt keinen Kontakt mit der Atmosphäre hat und Feuchtigkeit bis zum Zeitpunkt der Benutzung nicht angreifen kann, wird zunächst das gewünschte Volumen an Antiserum in Pufferlösung mit Saccharose als Träger eingefüllt. Diese Lösung wird dann eingefroren. Auf diese eingefrorene Schicht wird anschliessend das gewünschte Volumen der Suspension aus mit HCG sensibilisierten menschlichen Erythrozyten auf Saccharoseträger aufgebracht. Auchdiese Suspension wird eingefroren, wodurch eine zweite Schicht erhalten wird. Abschließend erfolgt die Lyophilisierung des Inhalts der Ampulle, wonach diese auf bekannte Weise hermetisch verschlossen wird.Is hermetically sealed so that its contents have no contact with the atmosphere and moisture up to At the time of use cannot attack, the desired volume of antiserum in buffer solution is first added Sucrose filled in as a carrier. This solution is then frozen. This frozen layer is then applied the desired volume of the suspension of human erythrocytes sensitized with HCG on a sucrose carrier upset. This suspension is also frozen, whereby a second layer is obtained. Finally, the Lyophilization of the contents of the ampoule, after which it is hermetically sealed in a known manner.

In Fig. 1 ist eine Gesamtansicht des diagnostischen Prüfbehälters dargestellt. Der schachtelartige Behälter 1 enthält Halterungen 6 und 14 für Ampullen und Tropfenzähler. Die Ampullenhalterung 10 ist zur Aufnahme einer senkrecht stehenden Ampulle 7 mit einem unterhalb der Ampullenhalterung 10 am Boden des Behälters 1 angeordneten Spiegel 12 versehen. Fig. 2 zeigt einen Schnitt längs der Schnittachsenrichtung H-II, die in Fig. 1 angedeutet ist. In Fig.2 ist die noch nicht geöffnete transparente Ampulle dargestellt, die in einwandfreier Schichtung, ausgehend von dem Ampullenboden, eine Schicht A aus lyophilisiertem Antiserum in Pufferlösung mit Saccharoseträger und darüber eine Schicht E aus' auf Saccharose gehaltenen und lyophilisierten menschlichen Erythrocyten angeordnet enthält. Fig. 3 zeigt einen Schnitt längs der Schnittachge HI-III, die in Fig. 1 angedeutet ist.In Fig. 1 an overall view of the diagnostic test container is shown. The box-like container 1 contains holders 6 and 14 for ampoules and droppers. The ampoule holder 10 is for receiving a vertical ampoule 7 with one below the ampoule holder 10 on the floor of the container 1 arranged mirror 12 is provided. Fig. 2 shows a section along the cutting axis direction H-II, which is indicated in FIG. 1. In Figure 2 is the not yet opened transparent ampoule shown, in perfect layering, starting from the ampoule bottom, a layer A of lyophilized antiserum in buffer solution with sucrose carrier and above a layer E of 'kept on sucrose and lyophilized Contains human erythrocytes arranged. Fig. 3 shows a section along the sectional axis HI-III, which is indicated in FIG. 1.

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Claims

1. ) Diagnostic test container for carrying out pregnancy diagnoses by means of the immunochemical determination of the human chorionic gonadotropin (HCG) in the urine, consisting of

a) a box-like container with several holders for at least one dropper and at least two Ampoules, a holder for an ampoule that is perpendicular to the bottom of the container and one located below the ampoule holder at the bottom of the container through which the result of the in the The experiment carried out in the ampoule is reflective and visible from the outside of the container,

b) at least one transparent ampoule, which contains a solid sample of erythrocytes sensitized with HCG and a Contains a solid sample of antiserum for HCG and has a sufficiently large capacity to hold a sample to be analyzed The urine sample and the solvent for the erythrocyte samples and the antiserum,

characterized in that

1) the transparent ampoule in perfect layering, starting out from the bottom of the ampoule, a layer of lyophilized antiserum in buffer solution with sucrose carrier and a layer of human erythrocytes sensitized with HCG, maintained on sucrose and lyophilized has and

2) also contains at least one ampoule in which the solvent required to restore the lyophilizate is contained in an already dosed amount, in particular 0.4 ml of distilled water.

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2. Test container according to claim 1, characterized in that the volumetric ratio between the layer of lyophilized antiserum and the layer of HCG-sensitized, lyophilized erythrocytes in the transparent ampoule is about 3: 1.

3. Process for the production of the transparent ampoule according to Claim 1, characterized in that in an ampoule a predetermined volume of in buffer solution with sucrose The anti-HCG antiserum used as a carrier is filled in and the solution is frozen in the form of a first layer on top of it first layer a predetermined volume of one sensitized with HCG Erythrozytsuspension applied on a.Sucrose carrier and this suspension in the form of a second Layer is frozen, the frozen layers are lyophilized and the vial is hermetically sealed.

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