DE2802396A1 - Animal feed mixt. contg. proteolytic enzyme - and antibiotic of tetracycline type (NL 24.7.79) - Google Patents

Animal feed mixt. contg. proteolytic enzyme - and antibiotic of tetracycline type (NL 24.7.79)

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DE2802396A1 DE19782802396 DE2802396A DE2802396A1 DE 2802396 A1 DE2802396 A1 DE 2802396A1 DE 19782802396 DE19782802396 DE 19782802396 DE 2802396 A DE2802396 A DE 2802396A DE 2802396 A1 DE2802396 A1 DE 2802396A1
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Abstract

Animal feed based on carbohydrates, protein, fats and opt. other additives additionally contains 1-250 ppm tetracycline, chlorotetracycline or oxytetracycline, and enough proteolytic enzyme (I) to provide an activity of 0.05-2.5 m TU/g. (I) is esp. an acid protease active within the pH range 2.5 - 6.5. Used for feeding poultry, pigs, calves etc.. This combination of additives further improves the growth rate.

Description

TierfuttermischungAnimal feed mix

Gegenstand des Hautpatentes (Patentanmeldung P.. .. .... . (D 5724) ist eine Tierfuttermischung auf der Basis von Kohlenhydraten, Eiweiß, Fetten und gegebenenfalls üblichen Zusatzstoffen, gekennzeichnet durch einen Gehalt an 1 - 250 ppm eines der Antibiotika Lincomycin, Oleandomycin und einer solchen Menge an proteolytischen Enzymen, daß eine enzymatische Aktivität von o,o5 - 2,5 n.TU/g vorliegt.Subject of the main patent (patent application P .. .. ..... (D 5724) is an animal feed mixture based on carbohydrates, protein, fats and possibly customary additives, characterized by a content of 1 - 250 ppm of one of the antibiotics lincomycin, oleandomycin and such an amount proteolytic enzymes that an enzymatic activity of o, o5 - 2.5 n.TU / g is present.

Es wurde gefunden, daß man auch dann hochwertige Tierfuttermischungen mit entsprechender wachstumsverbessernder Wirksamkeit erhält, wenn man die Antibiotika des Efauptpatentes durch eines der Antibiotika Tetracyclin, Chlortetracyclin oder Oxytetracyclin ersetzt.It has been found that high-quality animal feed mixtures can then also be used with a corresponding growth-improving effectiveness, if one obtains the antibiotics of the Efauptpatent through one of the antibiotics tetracycline, chlortetracycline or Oxytetracycline replaced.

Gegenstand der Erfindung ist dementsprechend eine Tierfuttermischung auf der Basis von Kohlenhydraten, Eiweiß, Fetten und gegebenenfalls üblichen Zusatzstoffen gemäß Hauptpatent (Patentanmeldung P .. .. .... . (D 5724), gekennzeichnet durch einen Gehalt an 1 - 250 pprn eines der Antibiotika Tetracyclin, Chlortetracyclin oder Oxytetracyclin und einer solchen ringe an proteolytischen Enzyren, daß eine enzymatische Aktivität von 0,05 - 2,5 mTU/g vorliegt.The invention accordingly relates to an animal feed mixture on the basis of carbohydrates, protein, fats and, if necessary, the usual additives according to the main patent (patent application P .. .. ..... (D 5724), characterized by a content of 1 - 250 pprn of one of the antibiotics tetracycline, chlortetracycline or oxytetracycline and such a ring of proteolytic enzymes that one enzymatic activity of 0.05 - 2.5 mTU / g is present.

Die genannten Antibiotika gehören zur Gruppe der Quinone-Antibiotika und werden in bekannter Weise durch Fermentation aus folgenden Streptomyces-Stämmen eonnen: Tetracyclin aus Streptotryces viridifaciens Chlortetracyclin aus Streptomyces aureofaci*ns Oxytetracyclin aus Streptomyces rimosus. Die empirischen Sumrenformeln der Antibiotika lauten: Tetracyclin: C22H24N2O8 , Chlortetracyclin C22H23@@@2O8, Oxytetracyclin: C22H24N2O9.The antibiotics mentioned belong to the group of quinone antibiotics and are obtained in a known manner by fermentation from the following Streptomyces strains Convenient: Tetracycline from Streptotryces viridifaciens Chlortetracycline from Streptomyces aureofaci * ns Oxytetracycline from Streptomyces rimosus. The empirical sum formulas the antibiotics are: Tetracycline: C22H24N2O8, Chlortetracycline C22H23 @@@ 2O8, Oxytetracycline: C22H24N2O9.

Die genannten Antibiotike innen auch als Hydrochloride vorliegen.The antibiotics mentioned are also present inside as hydrochlorides.

Geeignete proteolytische Enzyme werden vor allem durch Züchten von Mikroorganismen und Abtrennen aus den Nahrlösu;.(-en erhalten.Suitable proteolytic enzymes are mainly obtained by growing Microorganisms and separation from the nutrient solution;. (- s obtained.

Die Verfahren hierzu sind bekannt. Beispielsweise werden proteolytische Enzyme aus Bacillus licheniformis, Bacillus natta, Bacillus subtilis usw. verwendet. Besonders bevorzugt werden saure Proteasen, z. B. aus Pspergillus niger oder aus Rhizopus rhizopodiformis entsprechend Patentanmeldung P 25 28 490.6. Derartige Proteasen haben ein besonders breites Wirkungsspektrum in schwach sauren Bereich zwischen pH 2.5 - 6.5.The procedures for this are known. For example, be proteolytic Enzymes from Bacillus licheniformis, Bacillus natta, Bacillus subtilis, etc. are used. Acid proteases, e.g. B. from Pspergillus niger or from Rhizopus rhizopodiformis according to patent application P 25 28 490.6. Such proteases have a particularly broad spectrum of activity in the weakly acidic range between pH 2.5 - 6.5.

handelsübliche Futtermischungen sind für die speziellen Bedürfnisse der einzelnen Tierarten reöglichst optimal zusammengestellt. Die Grundlage bilden Kohlenhvdrate vor allem aus Getreidekomponenten, Mais oder dgl.. Als Eiweißträger dienen in erster Linie Sojaschrot, Fischmehl, Tierkörpermehl, Kleie und dergl.. Fehlende Aminosäuren, z. B. Methionin oder Lysin, können zusätzlich zugegeben werden. Fette werden in Form von pflanzlichen oder tierischen Fetten oder Abfallfetten beigefügt. Zum Körperaufbau werden ferner Salze, wie nikalziumphosphat, Kalziumkarbonat, Kochsalz zugesetzt. Gegebenenfalls wird die Futter.ischungfi durch Zugabe von Spurenelementen, Vitaminen, Ballaststoffen usw. abgerundet. Auch fermentativ hergestellte Substanzen wie Einzellerproteine aus Erdölfraktionen oder Alkoholen, diverse Ilefen, Algeneiweiß oder sonstige, eventuell auch aus Abfallstoffen gewonnene Substanzen können z. T. in erheblicher Maße Eestandteil der Futterrezeptur sein.Commercially available feed mixes are for special needs of the individual animal species as optimally compiled as possible. Form the basis Charcoal mainly from cereal components, maize or the like. As a protein carrier serve primarily soy meal, fish meal, carcass meal, bran and the like. Missing amino acids, e.g. B. methionine or lysine can also be added. Fats are added in the form of vegetable or animal fats or waste fats. Salts such as calcium phosphate, calcium carbonate and table salt are also used to build up the body added. If necessary, the feed mixture is refined by adding trace elements, Vitamins, fiber, etc. rounded off. Also substances produced by fermentation such as single-cell proteins from petroleum fractions or alcohols, various ileves, algae protein or other substances, possibly also obtained from waste materials, can e.g. T. be part of the feed formulation to a considerable extent.

Die erfindungsgemaßen 5'ierfuttermischungeIl enthalten neben den üblichen jeweils für eine bestimmte Tierart abgestimmten Bestanateilen zusätzlich 1 - 250 ppm, vorzugsweise 1o - loo ppm eines der genannten Antibiotika, je nach Alter des Tieres und der Art der Futtermischung, und proteolytische Enzyme in einer solchen Menge, daß die enzymatische Aktivität 0,05 -2,5 n.TU/g, vorzugsweise o,2 - 0,5 mTU/g beträgt.The 5'ierfuttermischungeIl according to the invention contain in addition to the usual An additional 1 - 250 components for each specific animal species ppm, preferably 1o - loo ppm of one of the antibiotics mentioned, depending on the age of the Animal and the type of feed mix, and proteolytic enzymes in such an amount that the enzymatic activity is 0.05-2.5 n.TU / g, preferably 0.2-0.5 mTU / g.

Die genannten Additiv-Konzentrationen beziehen sich auf den Gehalt im Gesamt futter. Bei Konzentraten oder Ergänzungsfuttern liegen die Konzentrationen entsprechend höher. Insbesondere wird eine Kombination aus einem der genannten Antibiotika und einer sauren Pilz-Protease bzw. Proteasenmischung eingesetzt. Der damit erzielte Zuwachs bzw. die Verbesserung der Futterverwertung beträgt zusätzlich mehrere Prozent im Vergleich zu entsprechenden, lediglich Antibiotikum enthaltenden Kontrollmis chungen.The additive concentrations mentioned refer to the content in total feed. Concentrates are the same for concentrates or supplementary feeds correspondingly higher. In particular, a combination of one of the antibiotics mentioned is used and an acidic fungal protease or protease mixture is used. The one achieved with it The increase or improvement in feed conversion is also several percent in comparison to corresponding control mis containing only antibiotics chungen.

Die beanspruchte Kombination aus einem der genannten Antibiotika und Enzymen bewährt sich vor allem in Geflügel-, Schweine- und Kälberfuttermitteln. Sie kann jedoch auch in Futtermischungen für andere Tierarten verwendet werden, in denen eins der Antibiotika selbst mit Vorteil eingesetzt wird.The claimed combination of one of the antibiotics mentioned and Enzymes are particularly useful in poultry, pig and calf feed. However, it can also be used in feed mixes for other animal species, in which one of the antibiotics itself is used to advantage.

Das Antibiotikum wird zweckmäßig in Form einer Vormischung dem Futter zugesetzt, z. B. gebunden an Sojaextrationsschrot.The antibiotic is expediently added to the feed in the form of a premix added, e.g. B. bound to soybean meal.

Bei Verwendung von mehlförmigen Futterzusammensetzungen wird auch die Enzymkomponente als Vormischung appliziert. Äls Trägersubstanz fungiert eine beliebige Futterkomponente, z. B. ebenfalls Sojaschrot oder auch ein inerter Träger.When using farinaceous feed compositions is also the enzyme component is applied as a premix. A acts as a carrier substance any feed component, e.g. B. also soy meal or an inert carrier.

Bei Verwendung dampfpelletierten Futters muß die Zuinischung der Enzyme in geeignet stabilisierter Porn erfolgen, um eine Desaktivierung durch Feuchtigkeit und Hitze während des Pelletierens zu verhindern. Ein derartiges Verfahren ist z. B. Gegenstand des Patentes .. .. ... . . (Patentanmeldung P 26 o2 260.6).When using steam pelleted feed, the addition of enzymes must be added made in suitable stabilized porn in order to deactivate it through moisture and prevent heat during pelleting. Such a method is e.g. B. Subject of the patent .. .. .... . (Patent application P 26 O2 260.6).

Zur Bestimmung der Enzymeinheit (TU) wird die proteolytische Aktivität der Protease nach dem bekannten Prinzip von Anson ermittelt: eine geeignet verdünnte Menge Enzymlösung wird bei 40° C 20 Minuten mit einem gleichen Volumen einer 1,2 %igen Caseinlösung inkubiert, wobei diese o,6 % Milchsäure, 6 Mol Harnstoff und o,l Mol Zitronen- oder Essigsäure enthält. Der pH-Wert der Caseinlösung wird durch Zusatz von 2 N Natronlauge auf 4,5 eingestellt. Nach der Inkubation wird im Volumenverhältnis 1 : l mit o,4 N Trichloressigsäure versetzt, der sich bildende Niederschlag von unverdautem Casein abfiltriert und im Filtrat die beim Abbau entstandenen Protein-Spaltstücke nach einer beliebigen Eiweißbestimmungsmethode ermittelt. Geeignet hierfür ist z. B. das von Läyne in Methode of Enzymologie 3 (1957) Seite 448 gg. beschriebene Verfahren.The proteolytic activity is used to determine the enzyme unit (TU) the protease is determined according to the well-known principle of Anson: a suitably diluted one Amount of enzyme solution is at 40 ° C for 20 minutes with an equal volume of a 1.2 % casein solution incubated, this o, 6% lactic acid, 6 mol urea and Contains 0.1 mole of citric or acetic acid. The pH of the casein solution is determined by Addition of 2 N sodium hydroxide solution adjusted to 4.5. After the incubation is done in volume ratio 1: 1 mixed with 0.4 N trichloroacetic acid, the precipitate formed of The undigested casein is filtered off and the protein fragments resulting from the breakdown are in the filtrate determined by any protein determination method. Suitable for this is z. B. the method described by Läyne in Method of Enzymology 3 (1957) page 448 gg.

Für jede meßprobe muß ein Blindwert angefertigt werden, bei dem zuerst Trichloressigsäure und dann Caseinlösung zugesetzt wird. Dieser Blindwert gibt neben dem Reagenzien-Leerwert den Anteil an niedermolekularen Peptiden an, der bereits vor der Verdauung in der Enzymlösung vorhanden ist. Die Differenz zwischen Haupt- und Blindwert wird bei der angegebenen Methode dann mit der Extinktion verglichen, die eine bestimmte Menge Tyrosin bei dieser Bestimmung liefert. Diese Menge Tyrosin ist dann ein Maß für die proteolytische Aktivität des vorliegenden Enzyms: eine Enzymeinheit (TU) ist diejenige Menge Enzym, die aus einer Caseinlösung in einer Minute Spaltprodukte freisetzt, die die gleiche Extinktion besitzen, wie eine 1 M Tyrosinlösung. Üblich ist die Angabe in mTU = lo 5 TU.A blank value must be prepared for each test sample, first of all Trichloroacetic acid and then casein solution is added. This blank value gives besides the reagent blank value shows the proportion of low molecular weight peptides that has already been is present in the enzyme solution prior to digestion. The difference between main and blank value is then compared with the extinction using the specified method, which supplies a certain amount of tyrosine in this determination. That amount of tyrosine is then a measure of the proteolytic activity of the enzyme present: a Enzyme unit (TU) is the amount of enzyme that a casein solution in a Minute releases cleavage products that have the same extinction as a 1 M tyrosine solution. The specification in mTU = lo 5 TU is usual.

Beispiel 1 672 ?Masteintagsküken der Herkunft Lohmann wurden 4 Wochen lang unter den Bedingungen der Batteriehaltung rit jeweils identischen Futtermischungen gefüttert, jedoch a) ohne Zusatz von Antibiotikum oder Enzym b) mit Zusatz von 30 ppm Tetracyclin c) mit Zusatz von 30 ppm Tetracyclin und 0,3 mTU/g Futter saure Proteasen aus Aspergillus niger d) mit Zusatz von 50 ppm Chlortetracyclin e) mit Zusatz von 50 ppm Chlortetracyclin und o,45 mTU/g Futter saure Proteasen aus Rhizopus rhizopodiformis f) mit Zusatz von 20 ppm Oxytetracyclin g) mit Zusatz von 20 ppm Oxytetracyclin und o,27 mTU/g Futter saure Proteasen aus Rhizopus rhizopodiformis und Aspergillus niger. Nach Abschluß des Versuches wurden das Endgewicht der Tiere und die Futterverwertung bestimmt.Example 1 672 day-old broiler chicks of the Lohmann origin were 4 weeks old For a long time under the conditions of the battery husbandry, identical feed mixtures were ridden in each case fed, but a) without the addition of antibiotics or enzyme b) with the addition of 30 ppm tetracycline c) with the addition of 30 ppm tetracycline and 0.3 mTU / g feed acid Proteases from Aspergillus niger d) with the addition of 50 ppm chlorotetracycline e) with Addition of 50 ppm chlorotetracycline and 0.45 mTU / g feed acidic proteases from Rhizopus rhizopodiformis f) with the addition of 20 ppm oxytetracycline g) with the addition of 20 ppm Oxytetracycline and 0.27 mTU / g feed acidic proteases from Rhizopus rhizopodiformis and Aspergillus niger. At the end of the experiment, the final weight of the animals and determines the feed conversion rate.

Unter "Futterverwertung" wird das Verhältnis Futterverbrauch : Zuwachs verstanden. "Feed conversion" shows the ratio of feed consumption: increase Understood.

Futterzusammensetzung (%): Mais 55,27 Soj as chrot 25,oo Maiskleber 12,oo Sojaöl 4,00 Dicalciumphosphat 2,00 Kohlensaurer Futterkalk o,84 Viehsalz 0,20 Natriumsulfat 0,20 Dl-Methionin 0,15 Vitamin-Mineralprämix 0, 311 loo,oo Ergebnis: a) b) c) o.Zusatz m.Tetracyclin m.Tetracyclin + Enzym Endgewicht 754 g 782 g 798 g Futterverwertung 1,59 1,60 1,55 a) d) e) o.Zusatz m.Chlortetra- m.Chlortetracyclin cyclin + Enzym Endgewicht 754 g 786 g 803 g Futterverwertung 1,59 1,61 1,58 a) f) g) o.Zusatz m.Oxytetra- m.Oxytetracyclin cyclin + Enzym Endgewicht 754 g 787 g 801 g Futterverwertung 1,59 1,58 1,57 Beispiel 2 672 o-MasteintagskAken der Herkunft Lohmann wurden 8 Wochen lang unter den Bedingungen der Batteriehaltung mit einer jeweils identischen Futtermischung gefüttert, jedoch a) ohne Zusatz von Antibiotikum oder Enzym b) mit Zusatz von 15 ppm Tetracyclin c) mit Zusatz von 15 ppm Tetracyclin und o,2 mTU/g Futter saure Proteasen aus Rhizopus rhizopodiformis d) mit Zusatz von 1o ppm Chlortetracyclin e) mit Zusatz von lo ppm Chlortetracyclin und o,38 mTU/g Futter saure Proteasen aus Aspergillus neuer und Rhizopus rhizopodiformis f) mit Zusatz von 115 ppm Oxytetracyclin g) mit Zusatz von 45 ppm Oxytetracyclin und 0,5 mTU/g Futter saure Proteasen aus Aspergillus niger.Feed composition (%): corn 55.27 soy as chrot 25, oo corn gluten 12, oo soybean oil 4.00 dicalcium phosphate 2.00 carbonated fodder lime o.84 cattle salt 0.20 Sodium sulfate 0.20 Dl-methionine 0.15 Vitamin-mineral premix 0.311 loo, oo Result: a) b) c) without addition with tetracycline with tetracycline + enzyme final weight 754 g 782 g 798 g Feed conversion 1.59 1.60 1.55 a) d) e) without addition with chlorotetramine or chlorotetracycline cyclin + enzyme final weight 754 g 786 g 803 g feed conversion 1.59 1.61 1.58 a) f) g) without addition of oxytetra- m. oxytetracycline cyclin + enzyme final weight 754 g 787 g 801 g Feed conversion 1.59 1.58 1.57 Example 2 672 day-old o-masters of origin Lohmann were kept under battery conditions with a for 8 weeks each fed an identical feed mixture, but a) without the addition of antibiotics or enzyme b) with the addition of 15 ppm tetracycline c) with the addition of 15 ppm tetracycline and 0.2 mTU / g feed acidic proteases from Rhizopus rhizopodiformis d) with additive of 10 ppm chlorotetracycline e) with the addition of 10 ppm chlorotetracycline and 0.38 mTU / g feed acidic proteases from Aspergillus newer and Rhizopus rhizopodiformis f) with the addition of 115 ppm oxytetracycline g) with the addition of 45 ppm oxytetracycline and 0.5 mTU / g feed acidic proteases from Aspergillus niger.

Die Futterzusammensetzung und die Methodik entsprach Beispiel 1.The feed composition and the methodology corresponded to Example 1.

Ergebnis: a) b) c) o.Zusatz m.Tetracyclin m.Tetracyclin + Enzym Endgewicht 2213 g 2256 g 2289 g Futterverwertung 2,33 2,31 2,27 a) d) e) o.Zusatz - m.Chlortetra- m.Chlortetracyclin cyclin + Enzym Endgewicht 2213 g 2249 g 2278 g Futterverwertung 2,33 2,3o 2,25 a) f) g) o.Zusatz m.Oxytetra- m.Oxytetracgclin cyclin + Enzym Endgewicht 2213 g 2262 g 2293 E Futterverwertung 2,33 2,35 2,28 Beispiel 3 Im Gewichtsabschnitt 30 - 60 kg wurde an 105 Schweine ein jeweils identisches Mastfutter verfüttert, jedoch a) ohne Zusatz von Antibiotikum oder Enzym b) mit Zusatz von loo ppm Oxytetracyclin c) mit Zusatz von loo ppm Oxytetracyclin und o,4 mTU/g Futter saure Proteasen aus Aspergillus niger und Rhizopus rhizopodiformis Die Tiere wurden in Gruppen zu 5 auf Strohböden gehalten und nach der DLG-Rationsliste 2x täglich gefüttert.Result: a) b) c) without addition with tetracycline with tetracycline + enzyme final weight 2213 g 2256 g 2289 g Feed conversion 2.33 2.31 2.27 a) d) e) without addition - with chlorotetra- m.Chlortetracycline cyclin + enzyme final weight 2213 g 2249 g 2278 g feed conversion 2.33 2.3o 2.25 a) f) g) without addition with oxytetra- m.oxytetracgcline cyclin + enzyme final weight 2213 g 2262 g 2293 E Feed conversion 2.33 2.35 2.28 Example 3 An identical fattening feed was given to 105 pigs in the 30-60 kg weight segment fed, but a) without the addition of antibiotic or enzyme b) with the addition of loo ppm oxytetracycline c) with addition of loo ppm oxytetracycline and 0.4 mTU / g feed acidic proteases from Aspergillus niger and Rhizopus rhizopodiformis The animals were Maintained in groups of 5 on straw floors and according to the DLG ration list twice a day fed.

Futterzusammensetzung (ß): Mais 15 Weizen 20 Gerste 20 Hafer 1o Weizenkleie 8 Sojaschrot 24 Mineral futter 3 loo Ergebnis: a) b) c) o.Zusatz r-.Oxytetracyclin m.Oxytetracyclin + Enzym tägl. Zunahme 708 g 735 g 752 g Futterverwertung 2,49 2,42 2,34Feed composition (ß): maize 15 wheat 20 barley 20 oats 1o wheat bran 8 soy meal 24 mineral feed 3 loo result: a) b) c) without addition of r-oxytetracycline m.oxytetracycline + enzyme daily increase 708 g 735 g 752 g feed conversion 2.49 2.42 2.34

Claims (2)

Tierfuttermischung (Zusatz zum Patent (Patentanmeldung P .. .. .... . Animal feed mixture (addendum to patent (patent application P .. .. .... . (D 5724)) Patentansprüche 1. Tierfuttermischung auf der Basis von Kohlenhydraten, Eiweiß, Fetten und gegebenenfalls üblichen Zusatzstoffen gemäß Patent (Patentanmeldung .. .. ... .. (D 5724)), gekennzeichnet durch einen Gehalt an 1 - 250 ppm eines der Antibiotika Tetracyclin, Chlortetracyclin oder Oxytetracyclin und einer solchen enge an proteolytischen Enzymen, daß eine enzymatische Aktivität von 0,05 - 2,5 irTUig vorliegt.(D 5724)) Claims 1. Animal feed mixture based on Carbohydrates, protein, fats and, if necessary, customary additives according to the patent (Patent application .. .. ... .. (D 5724)), characterized by a content of 1 - 250 ppm of one of the antibiotics tetracycline, chlortetracycline or oxytetracycline and such a close proximity to proteolytic enzymes that an enzymatic activity 0.05 - 2.5 is irTUig available. 2. Tierfuttermischung nach Ansrruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß die proteolytischen Enzyme saure Proteasen mit einem Wirkungsspektrum. zwischen pF 2,5 - 6,5 sind.2. animal feed mixture according to claim 1, characterized in that the proteolytic enzymes acidic proteases with a spectrum of activity. between pF are 2.5 - 6.5.
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